RU2120288C1 - Method of preparing biologically active substances showing hepatoprotective effect - Google Patents
Method of preparing biologically active substances showing hepatoprotective effect Download PDFInfo
- Publication number
- RU2120288C1 RU2120288C1 RU96101271A RU96101271A RU2120288C1 RU 2120288 C1 RU2120288 C1 RU 2120288C1 RU 96101271 A RU96101271 A RU 96101271A RU 96101271 A RU96101271 A RU 96101271A RU 2120288 C1 RU2120288 C1 RU 2120288C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- extract
- chloroform
- biologically active
- active substances
- ratio
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 13
- 230000002443 hepatoprotective effect Effects 0.000 title claims description 12
- 239000013543 active substance Substances 0.000 title claims description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 239000013049 sediment Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000002026 chloroform extract Substances 0.000 claims abstract 2
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 6
- 239000010802 sludge Substances 0.000 claims description 5
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 4
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 abstract 1
- 108010029660 Intrinsically Disordered Proteins Proteins 0.000 description 15
- 102100037845 Isocitrate dehydrogenase [NADP], mitochondrial Human genes 0.000 description 15
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 15
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 9
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 8
- MBDOYVRWFFCFHM-SNAWJCMRSA-N (2E)-hexenal Chemical compound CCC\C=C\C=O MBDOYVRWFFCFHM-SNAWJCMRSA-N 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 102100036475 Alanine aminotransferase 1 Human genes 0.000 description 5
- 108010082126 Alanine transaminase Proteins 0.000 description 5
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 5
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 5
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 5
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 5
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 5
- ZIIUUSVHCHPIQD-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-trimethyl-N-[3-(trifluoromethyl)phenyl]benzenesulfonamide Chemical compound CC1=CC(C)=CC(C)=C1S(=O)(=O)NC1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 ZIIUUSVHCHPIQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010003415 Aspartate Aminotransferases Proteins 0.000 description 4
- 102000004625 Aspartate Aminotransferases Human genes 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 102000015439 Phospholipases Human genes 0.000 description 4
- 108010064785 Phospholipases Proteins 0.000 description 4
- GHAFORRTMVIXHS-UHFFFAOYSA-L bromosulfophthalein sodium Chemical compound [Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C(O)=CC=C1C1(C=2C=C(C(O)=CC=2)S([O-])(=O)=O)C(C(Br)=C(Br)C(Br)=C2Br)=C2C(=O)O1 GHAFORRTMVIXHS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 4
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 3
- GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 1-prop-2-ynoxypropan-2-ol Chemical compound CC(O)COCC#C GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N Bilirubin Chemical compound N1C(=O)C(C)=C(C=C)\C1=C\C1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(\C=C/3C(=C(C=C)C(=O)N\3)C)N2)CCC(O)=O)N1 BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N 0.000 description 2
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 2
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 2
- 238000008050 Total Bilirubin Reagent Methods 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 2
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 2
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 102000013563 Acid Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108010051457 Acid Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 208000008964 Chemical and Drug Induced Liver Injury Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010062049 Lymphocytic infiltration Diseases 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 208000005374 Poisoning Diseases 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 231100000354 acute hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000001147 anti-toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 150000001746 carotenes Chemical class 0.000 description 1
- 235000005473 carotenes Nutrition 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- UXTMROKLAAOEQO-UHFFFAOYSA-N chloroform;ethanol Chemical compound CCO.ClC(Cl)Cl UXTMROKLAAOEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019804 chlorophyll Nutrition 0.000 description 1
- 229930002875 chlorophyll Natural products 0.000 description 1
- 239000001752 chlorophylls and chlorophyllins Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 210000003989 endothelium vascular Anatomy 0.000 description 1
- 230000023611 glucuronidation Effects 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 1
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 230000003908 liver function Effects 0.000 description 1
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 231100000572 poisoning Toxicity 0.000 description 1
- 230000000607 poisoning effect Effects 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- WQGWDDDVZFFDIG-UHFFFAOYSA-N pyrogallol Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1O WQGWDDDVZFFDIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- SEBFKMXJBCUCAI-HKTJVKLFSA-N silibinin Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2[C@H](OC3=CC=C(C=C3O2)[C@@H]2[C@H](C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)CO)=C1 SEBFKMXJBCUCAI-HKTJVKLFSA-N 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 230000007863 steatosis Effects 0.000 description 1
- 231100000240 steatosis hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- -1 thiol compounds Chemical class 0.000 description 1
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 150000003735 xanthophylls Chemical class 0.000 description 1
- 235000008210 xanthophylls Nutrition 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине и касается способа получения средства, обладающего гепатозащитным действием. The invention relates to medicine and relates to a method for producing a hepatoprotective agent.
Известны способы получения веществ, обладающих гепатозащитным действием, - "Эссенциале" [М. Д. Машковский "Лекарственные средства", т.2, стр.46, изд-во "Медицина", 1987], "Карсил" и другие ["Лекарственные препараты зарубежных фирм в России", Справочник, М., изд-во "Астрафармсервис", 1993, стр. 660] . Однако известные способы получения гепатопротекторов липидной природы позволяют получить продукты, обладающие недостаточно высокой гепатозащитной активностью. Known methods for producing substances with hepatoprotective action, - "Essential" [M. D. Mashkovsky "Medicines", t.2, p. 46, publishing house "Medicine", 1987], "Karsil" and others ["Medicines of foreign firms in Russia", Reference, M., publishing house " Astrafarmservis ", 1993, p. 660]. However, the known methods for producing hepatoprotectors of lipid nature make it possible to obtain products with insufficiently high hepatoprotective activity.
Наиболее близким способом является "Способ получения биологически активных веществ, обладающих гепатозащитным действием", путем экстракции иловых и сапропелевых грязей смесью этанола и хлороформа, в котором с целью усиления специфического действия концентрат биологически активных веществ дополнительно обрабатывают гексаном. [А.С. N 1260005, Б.И. N 36, 1986 г.]. Однако указанный способ позволяет получить продукт, обладающий также недостаточно высокой гепатозащитной активностью. The closest method is the "Method for the production of biologically active substances with hepatoprotective action" by extraction of silt and sapropelic mud with a mixture of ethanol and chloroform, in which, in order to enhance the specific action, the concentrate of biologically active substances is additionally treated with hexane. [A.S. N 1260005, B.I. N 36, 1986]. However, this method allows to obtain a product with also not high hepatoprotective activity.
Задача настоящего изобретения - повышение биологической (гепатозащитной) активности целевого продукта липидной природы. The objective of the present invention is to increase the biological (hepatoprotective) activity of the target product of lipid nature.
Способ осуществляют путем предварительной обработки нативной лечебной грязи спиртовым раствором щелочи до pH 8,5-9,0, экстракции обработанного сырья водой при соотношении сырье : экстрагент 1:(10-12) с интенсивным перемешиванием (1500 об/мин) в течение 15 мин при температуре 50-60oC с последующим отделением экстракта от осадка, его упариванием в вакууме, обработкой сухого солевого концентрата хлороформом в соотношении концентрат : хлороформ 1:(3,5-5,0) и упариванием полученного хлороформного раствора в вакууме.The method is carried out by pretreating the native healing mud with an alkaline alcohol solution to a pH of 8.5-9.0, extracting the treated raw material with water at a ratio of raw material: extractant 1: (10-12) with vigorous stirring (1500 rpm) for 15 minutes at a temperature of 50-60 o C, followed by separation of the extract from the precipitate, its evaporation in vacuum, the treatment of dry salt concentrate with chloroform in the ratio concentrate: chloroform 1: (3.5-5.0) and evaporation of the resulting chloroform solution in vacuum.
Предварительная обработка лечебной грязи спиртовым раствором щелочи до pH 8,5-9,0 позволяет повысить биологическую активность целевого продукта за счет разрушения белково-липидо-гуминового комплекса и последующего перехода органических веществ в водный экстракт. Pretreatment of therapeutic mud with an alkaline alcohol solution to pH 8.5-9.0 allows you to increase the biological activity of the target product due to the destruction of the protein-lipid-humic complex and the subsequent transition of organic substances into an aqueous extract.
Пример 1 (прототип). Процесс осуществляют в 3 стадии. 1 кг осадка, содержащего 50-60% воды, экстрагируют 2 л смеси этанолхлороформ (1:1) по объему в течение 5 мин при скорости перемешивания 1500 об/мин. Снижение скорости перемешивания от 1500 об/мин до 500 об/мин требует увеличения продолжительности процесса от 5 до 15 мин. Последующее разделение фаз осуществляют центрифугированием. Полученную трехкомпонентную систему - осадок:экстракт: вода - разделяют, сливая жидкую фазу в делительную воронку, а плотный осадок подвергают экстракции свежей порцией растворителя. Операция повторяется трижды. Экстракт липидов, отделенный от водного слоя в делительной воронке, концентрируют в вакууме до небольшого объема. Полученный липидный концентрат содержит значительное количество соэкстрагированных примесей в виде свободной серы и водорастворимых соединений, и следующая операция заключается в их удалении. Example 1 (prototype). The process is carried out in 3 stages. 1 kg of sediment containing 50-60% water is extracted with 2 L of a mixture of ethanol chloroform (1: 1) by volume for 5 minutes at a stirring speed of 1500 rpm. A decrease in the stirring speed from 1500 rpm to 500 rpm requires an increase in the duration of the process from 5 to 15 minutes. Subsequent phase separation is carried out by centrifugation. The obtained three-component system - precipitate: extract: water - is separated by draining the liquid phase into a separatory funnel, and the dense precipitate is subjected to extraction with a fresh portion of the solvent. The operation is repeated three times. The lipid extract, separated from the aqueous layer in a separatory funnel, is concentrated in vacuo to a small volume. The resulting lipid concentrate contains a significant amount of coextracted impurities in the form of free sulfur and water-soluble compounds, and the next step is to remove them.
Экстракт липидов разбавляют 50 мл хлороформа, переносят в делительную воронку и промывают дистиллированной водой до отрицательной реакции на ионы Cl- и SO-- 4 . Хлороформный раствор липидов сушат безводным сульфатом натрия, фильтруют и упаривают в вакууме до объема 25-30 мл.The lipid extract is diluted with 50 ml of chloroform, transferred to a separatory funnel and washed with distilled water until a negative reaction for Cl - and SO - 4 ions. The chloroform solution of lipids is dried with anhydrous sodium sulfate, filtered and evaporated in vacuo to a volume of 25-30 ml.
Остаточное количество хлороформа из экстракта липидов удаляют в вакууме. Выход липидов 2-3 г/кг влажного осадка. The residual chloroform from the lipid extract is removed in vacuo. The output of lipids is 2-3 g / kg of wet sediment.
Пример 2 (заявляемый). 1 кг илового осадка натуральной влажности 60% обрабатывают при перемешивании 0,5 N спиртовым раствором щелочи до pH 8,5, а затем подвергают экстракции дистиллированной водой при соотношении сырье : экстрагент 1 : 10 при интенсивном перемешивании (1500 об/мин) в течение 15 мин при температуре 50oC. Водный раствор отделяют от твердой фазы центрифугированием в течение 10 мин, упаривают в вакууме. Выход продукта составляет 75 г/кг влажного илового осадка. Затем полученный продукт обрабатывают хлороформом в количестве 225 мл и полученный экстракт, представляющий собой фракцию высокополярных липидов, упаривают в вакууме. Выход высокополярной фракции липидов (ВПЛ) составляет 16 мг/кг влажного илового осадка (табл. 1).Example 2 (claimed). 1 kg of sludge sediment of
Примеры получения ВПЛ с различными вариантами используемых параметров приведены в табл. 1 (gримеры 3-10). Количественные характеристики приведены в табл. 1. Examples of obtaining IDPs with various options for the parameters used are given in table. 1 (examples 3-10). Quantitative characteristics are given in table. one.
Целевой продукт (ВПЛ), полученный по заявляемому способу, представляет собой органические вещества высокополярных липидов, обладающие весьма высокой гепатозащитной активностью. The target product (IDP) obtained by the present method, is an organic substance of highly polar lipids with a very high hepatoprotective activity.
Биологические испытания заявляемого средства в качестве гепатопротектора проводили на 200 белых мышах обоего пола массой 20-22 г и 100 белых крысах-самцах массой 200-220 г, у которых вызывали острый гепатит отравлением CCl4. Препаратом сравнения служил ЭПЛИР (прототип) (фракция полярных липидов озерного илового осадка, содержащая в качестве биологически активных веществ фосфатидилхолин, фосфатидилэтаноламин, сульфолипиды, тиоловые соединения, ксантофиллы, каротины и хлорофиллы) [Г.Ф. Большаков и др. А.C. N 1260005, БИ 36, 1986; А. C. Саратиков и др. Фармакология и токсикология, 1990, N 5, с. 42-45] . Мышам вводили внутрижелудочно в течение 6 дней ежедневно высокополярную фракцию липидов (ВПЛ) в дозах 0,0004; 0,004; 0,04; 0,4 мг/кг или ЭПЛИР в дозе 10 мг/кг и одновременно 1 мл/кг CCl4 (все вещества применяли в масляном растворе). Крысы получали внутрижелудочно на протяжении 4 дней ежедневно ВПЛ в оптимальной дозе (0,4 мг/кг) или ЭПЛИР (30 мг/кг) и 1,25 мл/кг CCl4. Контрольным животным вводили CCl4 и эквиобъемное количество оливкового масла. Оценивали выживаемость животных, длительность сна, наступающего после внутрибрюшинной инъекции гексенала (60 мг/кг), гистологическое строение печени; подсчитывали количество некротизированных гепатоцитов, определяли с помощью методов количественной и полуколичественной гистохимии содержание липидов (по пятибалльной шкале), РНК, сульфгидрильных групп, гликогена, активность кислой фосфатазы (КФ) и щелочной фосфатазы (ЩФ) [Э. Пиро. Гистохимия теоретическая и прикладная. М., 1962]; исследовали в сыворотке крови ретенцию бромсульфалеина (БСФ) через 45 мин после внутривенного вливания красителя, активность аланинаминотрансферазы (АЛАТ), аспартатаминотрансферазы (АСАТ) [В.Г. Колб, В.С. Камышников. Справочник по клинической химии. Минск, 1982], ЩФ [O. Bessey et al. Biol. Chem., 1946, vol. 164, N. 1, p. 321-329], фосфолипазы A [С.А. Тужилин, А.И. Салуэнья. Лабор. дело, 1975, N. 5, c. 334-336].Biological tests of the claimed agent as a hepatoprotector were performed on 200 white mice of both sexes weighing 20-22 g and 100 white male rats weighing 200-220 g, which caused acute hepatitis by CCl 4 poisoning. EPLIR (prototype) (the fraction of polar lipids of the lake silt sediment containing phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, sulfolipids, thiol compounds, xanthophylls, carotenes and chlorophylls) served as a comparison preparation [G.F. Bolshakov et al. A.C. N 1260005, BI 36, 1986; A. C. Saratikov et al. Pharmacology and Toxicology, 1990,
В экспериментах на машинах и крысах CCl4 снижал выживаемость до 67-70%, удлинял гексеналовый сон в 2,5-2,6 раза, приводил к накоплению нейтрального жира в центролобулярных и перипортальных гепатоцитах (4,8 балла). У мышей ВПЛ в дозах 0,004-4,0 мг/кг сохраняли жизнь всем отравленным животным, сокращали длительность гексеналового сна до нормальной продолжительности (в 2,1-2,6 раза по сравнению с величиной при нелеченном CCl4-гепатите), уменьшали степень ожирения печени до 2,1-3,2 баллов. В дозе 0,0004 мг/кг ВПЛ проявили меньшую гепатозащитную эффективность: укорачивали течение гексеналового сна лишь умеренно (в 1,5 раза), хотя и в достаточной мере сдерживали формирование стеатоза паренхимы печени (3,7 балла). ЭПЛИР (10 мг/кг) в аналогичном эксперименте нормализовал длительность гексеналового сна и уменьшал степень ожирения до 2,4 балла (табл. 2).In experiments on cars and rats, CCl 4 reduced survival to 67-70%, lengthened hexenal sleep by 2.5-2.6 times, and led to the accumulation of neutral fat in centrolobular and periportal hepatocytes (4.8 points). In mice, IDPs in doses of 0.004–4.0 mg / kg saved the lives of all poisoned animals, reduced the duration of hexenal sleep to normal duration (2.1–2.6 times as compared to untreated CCl 4 hepatitis), and reduced the degree liver obesity up to 2.1-3.2 points. At a dose of 0.0004 mg / kg, IDPs showed less hepatoprotective effectiveness: they reduced the course of hexenal sleep only moderately (1.5 times), although they sufficiently restrained the formation of liver parenchyma steatosis (3.7 points). EPLIR (10 mg / kg) in a similar experiment normalized the duration of hexenal sleep and reduced the degree of obesity to 2.4 points (Table 2).
У крыс с CCl4-гепатитом ВПЛ в дозе 0,4 мг/кг и ЭПЛИР в дозе 30 мг/кг предотвращали гибель всех экспериментальных животных и уменьшали жировую дистрофию печени до 2,6-2,8 балла. ВПЛ нормализовали продолжительность гексеналового сна (23,5 мин), ЭПЛИР сокращал гексеналовый сон в 2,1 раза по сравнению с показателем при нелеченном токсическом гепатите, хотя он протекал длительнее, чем у интактных животных (табл. 3).In rats with CCl 4 hepatitis, IDPs at a dose of 0.4 mg / kg and EPLIR at a dose of 30 mg / kg prevented the death of all experimental animals and reduced fatty degeneration of the liver to 2.6-2.8 points. IDPs normalized the duration of hexenal sleep (23.5 min), EPLIR reduced hexenal sleep by 2.1 times compared to that in untreated toxic hepatitis, although it was longer than in intact animals (Table 3).
При остром CCl4-гепатите у крыс возникали глубокие нарушения морфогистохимических показателей печени в виде дискомплексации печеночных балок, расширения вокругсинусоидных пространство, макрофагально-лимфоцитарной инфильтрации, жировой, белковой дистрофии и колликвационного некроза гепатоцитов (6,2% всех клеток дольки), снижения содержания РНК, сульфгидрильных групп, исчезновения гликогена, роста активности маркера лизосом КФ и локализованной в эндотелии сосудов ЩФ. ВПЛ и ЭПЛИР проводили в этих условиях к нормализации гистоархитектоники печени, уменьшению количества гепатоцитов, подвергнутых дистрофии и некрозу (до 2,7-2,9%), увеличению количества РНК, сульфгидрильных групп, сохранения активности фосфатаз.In acute CCl 4 hepatitis, rats experienced profound disturbances in the morphohistochemical parameters of the liver in the form of discomplexation of hepatic beams, enlargement of the around sinusoid space, macrophage-lymphocytic infiltration, fatty, protein dystrophy and hepatocyte collicative necrosis (6.2% of all lobular cells), decrease in RNA content , sulfhydryl groups, the disappearance of glycogen, increased activity of the marker of CF lysosomes and alkaline localized in the vascular endothelium. IDPs and EPLIR were performed under these conditions to normalize the histoarchitectonics of the liver, reduce the number of hepatocytes subjected to dystrophy and necrosis (up to 2.7-2.9%), increase the number of RNA, sulfhydryl groups, and maintain phosphatase activity.
CCl4 вызывал у крыс гиперферментемию с повышением в сыворотке крови активности АЛАТ в 10,7 раза, АСАТ в 3,2 раза, ЩФ в 2,1 раза, фосфолипазы А в 1,9 раза; ухудшал экскреторную функцию печени с ростом ретенции БСФ в 4,6 раза, содержание общего билирубина в 3,3 раза. Коэффициент глюкуронирования билирубина, вычисленный в процентах, как отношение концентрации связанного и общего пигмента, уменьшался при интоксикации CCl до 33,7% (в норме - 81,5%). ВПЛ противодействовали развитию гиперферментемии, снижая активность АЛАТ в 1,7 раза, АСАТ на 19%, ЩФ на 21%, фосфолипазы А в 1,6 раза, ЭПЛИР уменьшал активность ферментов печеночного происхождения в сыворотке крови примерно в такой же степени, как и ВПЛ: АЛАТ - в 1,6 раза, АСАТ - на 18%, ЩФ - на 20%, фосфолипазы А - в 1,7 раза (табл. 4).CCl 4 caused hyperenzymemia in rats with an increase in serum ALAT activity of 10.7 times, ACAT of 3.2 times, ALP 2.1 times, phospholipase A 1.9 times; worsened excretory function of the liver with an increase in retention of BSF by 4.6 times, the content of total bilirubin by 3.3 times. The glucuronidation coefficient of bilirubin, calculated as a percentage, as the ratio of the concentration of bound and total pigment, decreased with CCl intoxication to 33.7% (normal - 81.5%). IDPs counteracted the development of hyperfermentemia, reducing ALAT activity by 1.7 times, ASAT by 19%, alkaline phosphatase by 21%, phospholipase A by 1.6 times, EPLIR reduced the activity of liver enzymes in the blood serum to about the same extent as IDPs ALAT - 1.6 times, ASAT - 18%, alkaline phosphatase - 20%, phospholipase A - 1.7 times (Table 4).
Оба препарата липидов являются эффективными корректорами нарушения экскреторной функции печени. Они ослабляли ретенцию БСФ в 2,8-2,9 раза. ВПЛ снижали содержание общего билирубина до 64%, ЭПЛИР - до 77% (табл. 4). Both lipid preparations are effective correctors of impaired liver excretory function. They weakened the retention of BSF in 2.8-2.9 times. IDPs reduced the content of total bilirubin to 64%, EPLIR - to 77% (Table 4).
Таким образом, при тяжелом CCl4- гепатите ВПЛ в дозах 0,004-4,0 мг/кг у мышей и дозе 0,04 мг/кг у крыс оказывает выраженное гепатозащитное действие (устраняет жировую дистрофию гепатоцитов и нарушения антитоксической функции печени), не уступающее терапевтическому эффекту ЭПЛИРа в дозах 10-30 мг/кг. Следовательно, ВПЛ, получаемые по заявляемому способу, превосходят по гепатопротекторной активности ЭПЛИР (прототип) в опытах на мышах в 25-2500 раз, на крысах в 750 раз.Thus, in severe CCl 4 hepatitis, IDPs in doses of 0.004-4.0 mg / kg in mice and a dose of 0.04 mg / kg in rats have a pronounced hepatoprotective effect (eliminates fatty degeneration of hepatocytes and impaired antitoxic liver function), not inferior therapeutic effect of EPLIR in doses of 10-30 mg / kg. Therefore, the IDPs obtained by the present method are superior in hepatoprotective activity to EPLIR (prototype) in experiments on mice 25-2500 times, on rats 750 times.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU96101271A RU2120288C1 (en) | 1996-01-18 | 1996-01-18 | Method of preparing biologically active substances showing hepatoprotective effect |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU96101271A RU2120288C1 (en) | 1996-01-18 | 1996-01-18 | Method of preparing biologically active substances showing hepatoprotective effect |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU96101271A RU96101271A (en) | 1998-03-27 |
| RU2120288C1 true RU2120288C1 (en) | 1998-10-20 |
Family
ID=20176020
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU96101271A RU2120288C1 (en) | 1996-01-18 | 1996-01-18 | Method of preparing biologically active substances showing hepatoprotective effect |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2120288C1 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002024609A3 (en) * | 2000-09-19 | 2002-08-15 | Nobel Ltd Liability Company | Method for producing a radioprotector |
| RU2227298C2 (en) * | 2002-06-24 | 2004-04-20 | Казанский государственный медицинский университет | Method for producing semi-quantitative estimates of changes in chronic viral hepatitis-injured liver bioptates |
| RU2449801C1 (en) * | 2011-01-21 | 2012-05-10 | Общество с ограниченной ответственностью "Биолит" | Method for preparing biologically active substances of therapeutic mud |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2020944C1 (en) * | 1991-05-05 | 1994-10-15 | Игорь Федорович Щербак | Method for preparing lipoid-containing fractions |
| RU2066187C1 (en) * | 1992-04-16 | 1996-09-10 | Анатолий Васильевич Толчеев | Method of curative extract preparing |
-
1996
- 1996-01-18 RU RU96101271A patent/RU2120288C1/en active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2020944C1 (en) * | 1991-05-05 | 1994-10-15 | Игорь Федорович Щербак | Method for preparing lipoid-containing fractions |
| RU2066187C1 (en) * | 1992-04-16 | 1996-09-10 | Анатолий Васильевич Толчеев | Method of curative extract preparing |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Машковский М.Д. Лекарственные средства. - М.: Медицина, 1987, ч.2, с.46. * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002024609A3 (en) * | 2000-09-19 | 2002-08-15 | Nobel Ltd Liability Company | Method for producing a radioprotector |
| RU2227298C2 (en) * | 2002-06-24 | 2004-04-20 | Казанский государственный медицинский университет | Method for producing semi-quantitative estimates of changes in chronic viral hepatitis-injured liver bioptates |
| RU2449801C1 (en) * | 2011-01-21 | 2012-05-10 | Общество с ограниченной ответственностью "Биолит" | Method for preparing biologically active substances of therapeutic mud |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5453523A (en) | Process for obtaining highly purified phosphatidylcholine | |
| RU2120288C1 (en) | Method of preparing biologically active substances showing hepatoprotective effect | |
| SU1396958A3 (en) | Versions of method of producing derivatives of glicolipids stimulating regeneration of cells and tissue | |
| EP0456023B1 (en) | Process for preparation of catechol complexes | |
| WO1997034929A1 (en) | Process for extraction of a growth factor complex | |
| JPS5951253B2 (en) | Method for producing phosphatidylcholine containing almost no oil | |
| RU2005478C1 (en) | Method for production of concentrated sapropel | |
| Lees et al. | CARBOXYMETHYLATION OF SULPHYDRYL GROUPS IN PROTEOLIPIDS 1 | |
| US3869482A (en) | Method of producing highly purified phosphatides | |
| CN100336818C (en) | Simultaneous prepn process of high-purity egg yolk lecithin and cephalin | |
| SU624562A3 (en) | Method of producing substance exhibiting hormonal action | |
| CN107208124A (en) | For the method for the component for being classified the biomass rich in protein microalgae | |
| RU2199879C1 (en) | Fat-and-oil phospholipid product with membranoprotective properties | |
| CN115558014B (en) | Separation and purification method of flaxseed cyclic peptide based on aqueous two-phase system | |
| RU2098111C1 (en) | Method of antiviral preparation preparing | |
| SU267815A1 (en) | METHOD FOR ISOLATING ACETYL CHOLYNESTERASE FROM TISSUE | |
| SU1260005A1 (en) | Method of producing biologically active substances possessing hepatoprotective action | |
| RU2843468C9 (en) | Method of producing echinochrome a | |
| RU2697197C1 (en) | Method of producing water-soluble salt form of echinochrome a, suitable for use in pharmacological and food industry | |
| RU2078345C1 (en) | Method of preparing serum protein preparations influencing activity of oxidative energetic exchange | |
| RU2280040C1 (en) | Method for production of arabinogalactan | |
| RU2796948C1 (en) | Method for producing egg lecithin from lipid-protein yellow residue | |
| JPH10306032A (en) | Potency-enhancing agent | |
| RU2026074C1 (en) | Method for production of biologically active substance from animal starting material | |
| RU2139710C1 (en) | Method of preparing vitamin e from hexane fraction of natural sapropel |