RU2116793C1 - Способ получения комплекса веществ, обладающих противовоспалительным, ранозаживляющим действием, ингибирующим перекисное окисление липидов, оптимизирующих функциональное состояние тимуса у старых животных - Google Patents
Способ получения комплекса веществ, обладающих противовоспалительным, ранозаживляющим действием, ингибирующим перекисное окисление липидов, оптимизирующих функциональное состояние тимуса у старых животных Download PDFInfo
- Publication number
- RU2116793C1 RU2116793C1 RU95107496A RU95107496A RU2116793C1 RU 2116793 C1 RU2116793 C1 RU 2116793C1 RU 95107496 A RU95107496 A RU 95107496A RU 95107496 A RU95107496 A RU 95107496A RU 2116793 C1 RU2116793 C1 RU 2116793C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- wound
- thymus
- effect
- functional state
- old animals
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 239000000126 substance Substances 0.000 title claims abstract description 10
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 title claims abstract description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title claims description 9
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 title claims description 7
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 title claims description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 title claims 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 title abstract description 16
- 238000005502 peroxidation Methods 0.000 title description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 title 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims abstract description 7
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 claims abstract description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 3
- 230000007542 postnatal development Effects 0.000 claims abstract description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 6
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 3
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 claims description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 claims 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000032683 aging Effects 0.000 abstract description 2
- 230000001729 effect on metabolism Effects 0.000 abstract description 2
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 abstract description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 11
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 10
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 9
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 8
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 8
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 8
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 7
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 6
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 3
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 3
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 238000003307 slaughter Methods 0.000 description 3
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 2
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 239000004809 Teflon Substances 0.000 description 2
- 229920006362 Teflon® Polymers 0.000 description 2
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 2
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 2
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 description 2
- 239000008344 egg yolk phospholipid Substances 0.000 description 2
- 238000005469 granulation Methods 0.000 description 2
- 230000003179 granulation Effects 0.000 description 2
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 2
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 2
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 2
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000008533 pain sensitivity Effects 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 2
- RVBUGGBMJDPOST-UHFFFAOYSA-N 2-thiobarbituric acid Chemical compound O=C1CC(=O)NC(=S)N1 RVBUGGBMJDPOST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QRYRORQUOLYVBU-VBKZILBWSA-N Carnosic acid Natural products CC([C@@H]1CC2)(C)CCC[C@]1(C(O)=O)C1=C2C=C(C(C)C)C(O)=C1O QRYRORQUOLYVBU-VBKZILBWSA-N 0.000 description 1
- 108010087806 Carnosine Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010024769 Local reaction Diseases 0.000 description 1
- CQOVPNPJLQNMDC-UHFFFAOYSA-N N-beta-alanyl-L-histidine Natural products NCCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CN=CN1 CQOVPNPJLQNMDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 206010039509 Scab Diseases 0.000 description 1
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 description 1
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 229940044199 carnosine Drugs 0.000 description 1
- CQOVPNPJLQNMDC-ZETCQYMHSA-N carnosine Chemical compound [NH3+]CCC(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CNC=N1 CQOVPNPJLQNMDC-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- ZXJXZNDDNMQXFV-UHFFFAOYSA-M crystal violet Chemical compound [Cl-].C1=CC(N(C)C)=CC=C1[C+](C=1C=CC(=CC=1)N(C)C)C1=CC=C(N(C)C)C=C1 ZXJXZNDDNMQXFV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 229960001235 gentian violet Drugs 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 210000002414 leg Anatomy 0.000 description 1
- 230000008752 local inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005375 photometry Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 1
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003954 umbilical cord Anatomy 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 230000010388 wound contraction Effects 0.000 description 1
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 description 1
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Способ заключается в том, что органы и ткани организма, находящегося на стадиях эмбрионального или раннего постнатального развития, измельчают, гомогенизируют, проводят водную и кислотную экстракцию, балластные вещества отделяют центрифугированием и супернатант лиофилизируют. Способ позволяет получить комплекс веществ, который обладает более высокой ранозаживляющей активностью в сочетании с нормализующим действием на метаболизм при развитии патологических процессов и старении. 4 табл.
Description
Изобретение относится к способу получения биологически активных веществ, которые могут найти применение в медицине, косметологии, сельском хозяйстве в качестве средства, способного обеспечить профилактику и патогенетическую коррекцию процессов, вызванных нарушениями пролиферации, роста, дифференцировки, функциональной активности и апоптоза клеток.
Известно использование в качестве средства стимуляции регенерации тканей и оптимизации тканевого обмена солкосерила [1] и экстракта плаценты [2].
Недостатком этих известных средств является их сравнительно невысокая эффективность.
Технической задачей изобретения является способ получения веществ, обладающих более высокой ранозаживляющей активностью в сочетании с нормализующим действием на метаболизм при развитии патологических процессов и старении.
Эта задача решается способом, заключающимся в том, что органы и ткани организма, находящегося на стадиях эмбрионального или раннего постнатального развития, измельчают, гомогенизируют, проводят водную и кислотную экстракцию, балластные вещества осаждают центрифугированием, супернатант лиофилизируют.
Пример 1. Хранящиеся при -70oC печень, желудок, тонкий кишечник, головной мозг новорожденных поросят (возраст до 1 сут) гомогенизировали в ножевом гомогенизаторе Virtis в пятикратном объеме 10 мМ цитратного буфера pH 7,0 и центрифугировали в течение 1 ч при 100000 g. Супернатант стерилизовали с использованием ультрафильтров Millipore 0,22 мкм.
Пример 2. Хранящийся при -70oC фетальный головной мозг человека (стадия развития эмбриона - 18 нед) измельчали, помещали в десятикратный объем кипящей 0,25 М уксусной кислоты и гомогенизировали в системе стекло-тефлон. Гомогенат подвергали прогреванию в кипящей водяной бане в течение 10 мин, нейтрализовали ацетатом аммония и центрифугировали (100000 g 60 мин). Супернатант лиофилизировали.
Пример 3. Хранящиеся при -70oC печень, желудок, тонкий кишечник, головной мозг новорожденных поросят (возраст до 1 сут) измельчали, помещали в десятикратный объем кипящей 0,25 М уксусной кислоты и гомогенизировали в гомогенизаторе Virtis. Гомогенат подвергали прогреванию в кипящей водяной бане в течение 10 мин, нейтрализовали ацетатом аммония и центрифугировали (100000 g 60 мин). Супернатант стерилизовали с использованием ультрафильтров Millipore 0,22 мкм.
Пример 4. Хранящиеся при -70oC печень, желудок, тонкий кишечник, головной мозг новорожденных поросят (возраст до 1 сут), пуповину и плаценту человека гомогенизировали в забуференном физиологическом растворе (pH 7,0) и центрифугировали в течение 1 ч при 100000 g. Супернатант лиофилизировали.
Пример 5. Изучены противовоспалительный, ранозаживляющий и обезболивающий эффекты комплекса веществ, полученного в соответствии с методами, приведенными в примерах 1 и 3 (КВ). В качестве препаратов сравнения использовали аптечный препарат солкосерил ("Алкалоид-Скопье", Хорватия) - 1 и 4 ампулы на 75 кг массы, а также экстракт плаценты (аптечный препарат) - 1 ампула на 75 кг массы, что в пересчете на кг массы соответствует дозировкам, используемым в клинике (Машковский М.Д., 1986).
В исследовании использовано 140 беспородных крыс-самок массой 180 - 220 г, полученных из питомника РАМН "Столбовая" и содержавшихся в стандартных условиях вивария. Период акклиматизации, предшествовавший началу экспериментов, составлял не менее двух недель.
Противовоспалительный эффект КВ изучали на модели местного воспалительного процесса, вызванного подкожным введением 0,1 мл полного адъюванта Фрейнда в подушечку правой задней лапки. Адъювант вводили под легким эфирным наркозом.
КВ вводили в очаг воспаления в 0,1 мл физиологического раствора (ФР) через трое суток после инъекции адъюванта однократно в дозах 1, 25 и 100 мкг/кг. Контрольным животным вводили ФР.
Порог болевой чувствительности у животных определяли, измеряя длительность латентного периода реакции облизывания задних лап (ЛП РОЛ) через 45 мин после инъекции препаратов. Температура "горячей пластинки" 56oC.
Онкометрию осуществляли непосредственно перед введением исследуемых препаратов и через 1, 3, 6, 8, 10, 13, 16, 23 и 34 сут после введения.
При изучении эффекта КВ на заживление ран у крыс под легким эфирным наркозом вырезали на спине кожный лоскут диаметром 20 мм. Для устранения возможности взаимного вылизывания раневой поверхности крыс содержали в отдельных клетках.
В данной серии экспериментов произведено 7 инъекций препаратов: одновременно с нанесением раны и на 2, 4, 7, 9, 11 и 14 сут по окончании операции. КВ использовали в дозах 0,5, 10,0 и 50 мкг/кг и вводили внутримышечно в 0,1 мл ФР (внутренняя сторона бедра правой задней лапы). Контрольным животным вводили ФР.
Измерение площади раневой поверхности проводили по "весовому" методу (Стручков В. И. и др., 1975) на 11, 14, 18 и 22 сут после операции. Замеры производили не ранее, чем на 11 сут после операции, поскольку к этому дню практически у всех крыс произошло отторжение струпа. Это позволило измерять площадь ран с относительной высокой степенью точности. Скорость заживления раны (величину относительного заживления - Y) определяли по формуле Y = 
, где S0 - начальная площадь раны, S1 - ее площадь в день t (Кузин М. И. и др., 1990).
Местный эффект КВ на воспалительный процесс.
В результате онкометрии очага воспаления показано, что КВ обладает противовоспалительным эффектом. Действие КВ наиболее выражено при использовании его в дозах 1 и 25 мкг/кг массы, когда эффект наблюдается уже через сутки после однократной инъекции и остается достоверным на протяжении всего периода исследования. При использовании данной экспериментальной модели и режима введения КВ его противовоспалительный эффект более выражен, чем действие солкосерила и препарата плаценты (табл. 1), применяемых в клинической практике в качестве противовоспалительных средств.
Дополнительным подтверждением противовоспалительного эффекта КВ служат результаты, полученные при определении порога болевой чувствительности методом "горячей пластинки". Показано, что введение КВ в дозах 1 и 25 мкг/кг массы приводит к увеличению продолжительности ЛП РОЛ в 1,7 раза (P < 0,001). Эффект КВ отмечен на воспаленной, но не на интактной лапке. КВ в дозе 100 мкг/кг, солкосерил в обеих использованных дозах и препарат плаценты не изменяли величину ЛП РОЛ.
Эффект КВ заживление раны.
На 11 сут после операции у всех экспериментальных и контрольных животных грануляции разрослись и выполнили всю полость раны. Поверхность грануляций блестящая, розово-красного цвета, что свидетельствует о течении раневого процесса без осложнений. О нормальном ходе заживления свидетельствовала и ведущая роль механизма контракции в изучаемом раневом процессе (Кузин, 1990).
В результате введения КВ в дозах 0,5 и 10,0 мкг/кг отмечено ускорение процесса раневой контракции. Этот эффект отмечен также при введении солкосерила и препарата плаценты. Однако действие препаратов сравнения наблюдалось не на всех сроках исследования. Кроме того, эффект КВ был более выраженным и стабильным (табл. 2).
Во всех использованных моделях при введении КВ не отмечено местных реакций иммунной системы.
Пример 6. Антиоксидантную активность КВ, полученного в соответствии с описанием, приведенным в примерах 1 и 3, оценивали по его способности ингибировать Fe-аскорбат-индуцированное окисление липосом из яичного лецитина. Для получения суспензии липосом к 20 мл среды (PBS, pH 7,4) при постоянном перемешивании добавляли 500 мкл 9%-ого спиртового раствора лецитина (Харьков), раствор инкубировали 2 ч при комнатной температуре и постоянном перемешивании. Окисление липосом инициировали добавлением 50 мкл раствора PBS, содержащего FeSO4 и аскорбиновую кислоту, конечная концентрация которых в инкубационной среде составила 10-5 М и 2 • 10-4 М соответственно. Раствор исследуемого препарата также добавляли в объеме 50 мкл. Окисление липосом проводили в тефлоновых пробирках, помещенных в термостатируемую ячейку, при постоянном и равномерном перемешивании. Объем инкубационной среды 1 мл, продолжительность окисления 9 - 40 мин при 37oC. Процесс останавливали, перенося 200 мкл суспензии окисленных липосом в пробирку с 1,5 мл 30%-ной трихлоруксусной кислотой, затем туда же добавляли 1,5 мл 0,5% раствора 2-тиобарбитуровой кислоты и помещали на кипящую водяную баню на 30 мин с последующим фотометрированием окрашенного продукта при 532 нм. Результаты измерений выражали в процентах, принимая за 100% оптическую плотность раствора, соответствующего суспензии лецитина, в которой окисление липосом протекало в тех же условиях, но в отсутствие исследуемого вещества.
Эффект КВ на перекисное окисление липидов.
Изучено действие КВ in vitro на Fe-аскорбатиндуцированное окисление липосом из яичного лецитина. Препарат в концентрациях от 10 до 160 мкг-эквивалент белка/мл обладает выраженным антиоксидантным эффектом, вызывая заметное торможение процесса перекисного окисления липосом. Максимальный уровень торможения наблюдается при концентрациях КВ от 50 мкг-эквивалент белка/мл и составляет 35%. Необходимо отметить, что в аналогичных экспериментальных условиях - α -токоферол (Serva) в конечной концентрации 10-5 М тормозил окисление липосом на 48%. Для доказательства "специфичности" эффекта КВ в используемую систему in vitro вводили препарат плаценты в концентрациях 20 - 60 мкг-эквивалент белка/мл. При использовании препарата плаценты в данном диапазоне концентраций антиоксидантный эффект не отмечен.
Пример 7. Изучены эффекты комплекса веществ, полученного из фетальных тканей и органов в соответствии с описанием, приведенным в примерах 1 и 3 на состояние тимуса старых животных при адаптации к стрессорным воздействия.
В исследовании использовали 31 крысу-самку популяции Wistar массой 350 - 400 г (возраст 16 мес), полученных из питомника РАМН "Столбовая" и содержавшихся в стандартных условиях вивария. Период акклиматизации, предшествовавший началу экспериментов, составлял не менее двух недель.
КВ и карнозин (препарат сравнения) вводили внутрибрюшинно 5 раз с интервалом в одну неделю (последний раз за сутки до забоя). Однократная доза обоих препаратов - 20 мкг/кг. Контрольным животным вводили ФР в соответствующие сроки и в объеме 0,1 мл.
В качестве "стрессора" использовали раздражение конечностей животных электрическим током (I = 1 мА; продолжительность сеанса 300 с; четырежды через день по одному разу в сутки; последний раз за 24 ч до забоя) в специальных аппаратах производства НТК "Диагностика".
Две последние инъекции препаратов провели за 1 ч до начала двух последних сеансов foot-shock.
Непосредственно перед забоем крыс взвешивали. Кровь (3 мл) собирали в пробирки с 3%-ным раствором натриевой соли ЭДТА (в соотношении 1:10). Извлеченные органы (тимус и селезенку) взвешивали.
Затем тимус гомогенизировали вручную на слабо притертом гомогенизаторе (стекло/стекло) в 5 мл физиологического раствора, после чего гомогенат пропускали через нейлоновую сетку (Falkon, Германия) для отделения тимоцитов от стромы. Селезенку разрушали продавливанием между двумя предметными стеклами.
Количество клеток подсчитывали при окрашивании генцианвиолетом в 3%-ной уксусной кислоте. Жизнеспособность полученных клеток, определяемая по включению трипанового синего, составляла не менее 95%.
Математическую обработку полученных результатов проводили по критерию Стьюдента.
В результате проведенного исследования доказано, что введение КВ в значительной степени увеличивает содержание клеточных элементов в тимусе (табл. 3 и 4).
Источники информации:
1. Машковский М.Д. Лекарственные средства, часть 2 с. 185.
1. Машковский М.Д. Лекарственные средства, часть 2 с. 185.
2. Машковский М.Д. Лекарственные средства, часть 2 с. 177.
Claims (1)
- Способ получения комплекса веществ, обладающих противовоспалительным, ранозаживляющим, оптимизирующим функциональное состояние тимуса у старых животных, ингибирующим процессы перекисного окисления липидов действием, заключающийся в том, что органы и ткани организма, находящегося на стадиях эмбрионального или раннего постнатального развития, измельчают, гомогенизируют, проводят водную или кислотную экстракцию, балластные вещества отделяют центрифугированием и супернатант лиофилизируют.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU95107496A RU2116793C1 (ru) | 1995-05-17 | 1995-05-17 | Способ получения комплекса веществ, обладающих противовоспалительным, ранозаживляющим действием, ингибирующим перекисное окисление липидов, оптимизирующих функциональное состояние тимуса у старых животных |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU95107496A RU2116793C1 (ru) | 1995-05-17 | 1995-05-17 | Способ получения комплекса веществ, обладающих противовоспалительным, ранозаживляющим действием, ингибирующим перекисное окисление липидов, оптимизирующих функциональное состояние тимуса у старых животных |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU95107496A RU95107496A (ru) | 1997-02-27 |
| RU2116793C1 true RU2116793C1 (ru) | 1998-08-10 |
Family
ID=20167605
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU95107496A RU2116793C1 (ru) | 1995-05-17 | 1995-05-17 | Способ получения комплекса веществ, обладающих противовоспалительным, ранозаживляющим действием, ингибирующим перекисное окисление липидов, оптимизирующих функциональное состояние тимуса у старых животных |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2116793C1 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EA003301B1 (ru) * | 2000-04-28 | 2003-04-24 | Научно-Производственное Республиканское Унитарное Предприятие "Диалек" | Способ получения лекарственного средства из ткани мозга эмбрионов животного и фармакологическая композиция на его основе |
| WO2012154016A1 (ru) * | 2011-05-11 | 2012-11-15 | Акционерное Общество "Национальный Научный Медицинский Центр" | Способ получения лиофилизата из гепатоцитов человека |
-
1995
- 1995-05-17 RU RU95107496A patent/RU2116793C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Прототип не обнаружен. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EA003301B1 (ru) * | 2000-04-28 | 2003-04-24 | Научно-Производственное Республиканское Унитарное Предприятие "Диалек" | Способ получения лекарственного средства из ткани мозга эмбрионов животного и фармакологическая композиция на его основе |
| WO2012154016A1 (ru) * | 2011-05-11 | 2012-11-15 | Акционерное Общество "Национальный Научный Медицинский Центр" | Способ получения лиофилизата из гепатоцитов человека |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU95107496A (ru) | 1997-02-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU584914B2 (en) | Angiogenic factor and method for producing angiogenesis | |
| Hodgman et al. | Phototherapy and hyperbilirubinemia of the premature | |
| Li et al. | Protective effect of resveratrol against nigrostriatal pathway injury in striatum via JNK pathway | |
| Ren et al. | Low-dose S-ketamine exerts antidepressant-like effects via enhanced hippocampal synaptic plasticity in postpartum depression rats | |
| Nordlund et al. | Vitiligo and depigmentation | |
| BR112020020318A2 (pt) | Composições para tratamento de pele | |
| RU2116793C1 (ru) | Способ получения комплекса веществ, обладающих противовоспалительным, ранозаживляющим действием, ингибирующим перекисное окисление липидов, оптимизирующих функциональное состояние тимуса у старых животных | |
| PETROVIC et al. | Promotion of bone calcification by sodium fluoride: short-term experiments on newborn rats using tetracycline labeling | |
| Tausk | The emergence of endocrinology | |
| TW202444690A (zh) | 萘環類小分子化合物的用途 | |
| Hosseini et al. | Photothrombotically induced unilateral selective hippocampal ischemia in rat | |
| RU2185835C2 (ru) | Способ стимуляции регенерации печеночной ткани | |
| Kristal | Effects of lateral hypothalamic lesions on placentophagia in virgin, primiparous, and multiparous rats. | |
| RU2642957C2 (ru) | Липосома, фармацевтическая композиция и лекарственное средство для лечения местных радиационных поражений кожи, применение липосом и способ для лечения местных радиационных поражений кожи | |
| Kelly et al. | In vivo induction of ovarian development in decapitated Aedes atropalpus by physiological levels of 20‐hydroxyecdysone | |
| Vogel et al. | The action of miracil in Schistosoma japonicum infections in laboratory animals | |
| RU2136303C1 (ru) | Способ получения средства для лечения ларвального и стробилярного эхинококкозов "чеблин ск-1" | |
| Somoza | Effects of reserpine on cholesterol levels in cholesterol-fed rabbits. | |
| RU2744919C1 (ru) | Средство для лечения эндометрита у коров | |
| CN108938631B (zh) | Sag在制备治疗发育期缺氧缺血脑损伤疾病的药物中的应用 | |
| Koh et al. | A comparison of coumarin and levamisole on parameters of the inflammatory response | |
| Strus et al. | Study of Anti–Inflammatory Activity of Creams with Sapropel Extract | |
| CN119857089B (zh) | 金丝桃素在制备用于病理性瘢痕的药物中的应用 | |
| EP4424317A1 (en) | Medicine for preventing or treating enteritis and intestinal cancer | |
| RU2133615C1 (ru) | Средство для лечения неврологических заболеваний |