RU2114631C1 - Способ выделения дигидрокверцетина - Google Patents
Способ выделения дигидрокверцетина Download PDFInfo
- Publication number
- RU2114631C1 RU2114631C1 RU97111748A RU97111748A RU2114631C1 RU 2114631 C1 RU2114631 C1 RU 2114631C1 RU 97111748 A RU97111748 A RU 97111748A RU 97111748 A RU97111748 A RU 97111748A RU 2114631 C1 RU2114631 C1 RU 2114631C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- acetone
- dhq
- aqueous
- purity
- mobile phase
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 10
- 238000002955 isolation Methods 0.000 title claims description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 52
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 241000218652 Larix Species 0.000 claims abstract description 7
- 235000005590 Larix decidua Nutrition 0.000 claims abstract description 7
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000002023 wood Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 5
- CXQWRCVTCMQVQX-LSDHHAIUSA-N (+)-taxifolin Chemical compound C1([C@@H]2[C@H](C(C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)=O)O)=CC=C(O)C(O)=C1 CXQWRCVTCMQVQX-LSDHHAIUSA-N 0.000 claims description 3
- XCGZWJIXHMSSQC-UHFFFAOYSA-N dihydroquercetin Natural products OC1=CC2OC(=C(O)C(=O)C2C(O)=C1)c1ccc(O)c(O)c1 XCGZWJIXHMSSQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 abstract description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 abstract description 7
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 abstract 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 abstract 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 3
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 2
- -1 flavonoid compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- OVARTBFNCCXQKS-UHFFFAOYSA-N propan-2-one;hydrate Chemical compound O.CC(C)=O OVARTBFNCCXQKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- CXQWRCVTCMQVQX-UHFFFAOYSA-N taxifolin Chemical compound O1C2=CC(O)=CC(O)=C2C(=O)C(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1 CXQWRCVTCMQVQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FTVWIRXFELQLPI-ZDUSSCGKSA-N (S)-naringenin Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1[C@H]1OC2=CC(O)=CC(O)=C2C(=O)C1 FTVWIRXFELQLPI-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 1
- WGEYAGZBLYNDFV-UHFFFAOYSA-N naringenin Natural products C1(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2OC(C1)C1=CC=C(CC1)O WGEYAGZBLYNDFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940117954 naringenin Drugs 0.000 description 1
- 235000007625 naringenin Nutrition 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
- C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D311/04—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring
- C07D311/58—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4
- C07D311/60—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4 with aryl radicals attached in position 2
- C07D311/62—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4 with aryl radicals attached in position 2 with oxygen atoms directly attached in position 3, e.g. anthocyanidins
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к химико-фармацевтической промышленности и касается способа выделения дигидрокверцетина. Изобретение решает задачу получения продук-та со степенью чистоты не менее 99,5%. Способ осуществляется посредством предварительной обработки древесины лиственницы кипящей водой с последующей экстракцией водным раствором ацетона и очистки водно-ацетонового экстракта жидкостной хромато-графией на обращенно-фазных сорбентах типа сферисорб C2 - C18 с размером частиц 5 - 10 мкм с использованием в качестве подвижной фазы 30 - 50%-ного раствора ацетона в 0,1%-ном водном растворе трифторуксусной кислоты и удалении ацетона упариванием. Технический результат заключается в получении дигидрокверцетина высочайшей степени очистки, более 99,5%. 1 ил.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к химико-фармацевтической промышленности, и касается способа выделения дигидрокверцетина (3,3',4', 5,7-пентагидроксифлаванона)(ДКВ).
Природным источником ДКВ служит древесина лиственницы. Все известные способы получения его из древесины лиственницы позволяют достичь степени чистоты ДКВ от 90 до 97%. При этом примесями являются, как правило, родственные по структуре другие флавоноидные соединения. Освобождение от этих примесей затруднено тем, что эти соединения имеют близкие с ДКВ физико-химические свойства (растворимость, сорбционная способность и др.).
Известен ряд способов получения ДКВ со степенью чистоты, не превышающей 97%. Из измельченной древесины лиственницы путем экстрагирования органическим растворителем непосредственно после обработки сырья водой, упаривания экстракта и кристаллизации из горячей воды (Патент РФ N 2038094, А 61 К 35/78, 1995).
Наиболее близким к предлагаемому способу является способ выделения ДКВ путем экстракции опилок древесины лиственницы водой при нагревании, охлаждении, фильтровании и очистки на полиамидном сорбенте, элюировании целевого продукта этилацетатом и кристаллизации из горячей воды. Степень очистки ДКВ составляет 97% (Патент РФ N 2000797, А 61 К 35/78, 1993).
Основным недостатком прототипа является недостаточно высокая степень очистки: содержание ДКВ не более 97% и наличие примесных флавоноидных соединений.
Целью изобретения является выделение ДКВ со степенью чистоты не менее 99,5%, т. е. получение препарата высочайшей степени очистки, который может применяться в качестве стандартного образца при промышленном получении ДКВ, а также для стандартизации отечественного фитопрепарата "Диквертин" (ВФС 42-2397-96) и его разнообразных лекарственных форм. Стандартный образец ДКВ может широко использоваться для исследования состава и в целях стандартизации многих лекарственных флавоноидсодержащих препаратов растительного происхождения, а также в ряде областей биотехнологии.
Это достигается путем предварительной обработки сырья кипящей водой, последующей экстракции водным раствором ацетона и очистки высушенного водно-ацетонового экстракта препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографией на обращенно-фазных сорбентах типа Сферисорб С2-С18 с размером частиц 5-10 мкм с использованием в качестве подвижной фазы 30-50%-ного раствора ацетона в 0,1%-ном водном растворе трифторуксусной кислоты и удалении ацетона упариванием.
Предлагаемому способу выделения ДКВ присущи следующие достоинства: высочайшая степень очистки ДКВ, более 99,5%; мягкие условия разделения, не вызывающие превращение ДКВ в другие продукты и соответственно предотвращающие загрязнение конечного продукта; инертность обращенно-фазного сорбента, разделение на котором не приводит к образованию продуктов взаимодействия с сорбентом, загрязняющих конечный продукт.
Пример 1. К 100 г опилок древесины лиственницы (влажность 35%, содержание дигидрокверцетина 2,35 г, дигидрокемпферола 0,28 г, нарингенина 0,087 г), приливают 75 мл кипящей воды, перемешивают в течение 5 мин, приливают 390 мл ацетона, выдерживают в течение 20 мин при 40oС. Водно-ацетоновый экстракт отфильтровывают, опилки промывают 20 мл ацетона, ацетоновый слив объединяют с экстрактом и досуха упаривают на роторном испарителе. Сухой остаток растворяют в 40 мл ацетона.
Полученный раствор хроматографируют на жидкостном хроматографе Хром-5 с рефрактометрическим детектором. Колонка Сферисорб 5 С18, 20 х 250 мм. Подвижная фаза: 40%-ный раствор ацетона в 0,1%-ном водном растворе трифторуксусной кислоты. Скорость потока 7,5 мл/мин, объем вводимой пробы 1 мл.
1 мл ацетонового раствора, содержащего 50 мг ДКВ, вводят в хроматограф. После начала выхода пика ДКВ отбирают фракцию 40 мл. По завершении каждого хроматографического цикла колонку промывают ацетоном. Перед началом следующего цикла колонку уравновешивают 80 мл подвижной фазы.
Отобранную фракцию упаривают на роторном испарителе при 30oС до полного удаления ацетона. Полученную кристаллическую массу отфильтровывают, промывают дистиллированной водой, высушивают в вакууме при комнатной температуре над молекулярными ситами 4 ангстрема. Выход ДКВ составил 38 мг, т.е. 76% от введенного в хроматограф количества.
По данным аналитического метода ВЭЖХ степень чистоты полученного ДКВ составляет 99,75% (см. чертеж).
Пример 2. 1 мл ацетонового раствора (содержание ДКВ 50 мг), полученного в условиях примера 1, вводят в хроматограф Хром-5 с рефрактометрическим детектором. Колонка Сферисорб 5 С8, 20 х 250 мм. Подвижная фаза: 30%-ный раствор ацетона в 0,1%-ном водном растворе трифторуксусной кислоты.
После начала выхода пика ДКВ отбирают фракцию 40 мл, упаривают на роторном испарителе до полного удаления ацетона. После фильтрования, промывки дистиллированной водой выпавших кристаллов и высушивания получают 36 мг ДКВ, т. е. 72,0% от введенного в хроматограф количества. По данным аналитического метода ВЭЖХ степень чистоты полученного ДКВ составляет 99,5%.
Пример 3. 1 мл ацетонового раствора (содержание ДКВ 50 мг), полученного в условиях примера 2, вводят в хроматограф Хром-5 с рефрактометрическим детектором. Колонка Сферисорб 5 С2, 20 х 250 мм. Подвижная фаза: 50%-ный раствор ацетона в 0,1%-ном водном растворе трифторуксусной кислоты.
После начала выхода пика ДКВ отбирают фракцию 40 мл, упаривают на роторном испарителе до полного удаления ацетона. После фильтрования, промывки дистиллированной водой выпавших кристаллов и высушивания получают 37 мг ДКВ, т. е. 74,0% от введенного в хроматограф количества. По данным аналитического метода ВЭЖХ степень чистоты полученного ДКВ составляет 99,55%.
Пример 4. 1 мл ацетонового раствора (содержание ДКВ 50 мг), полученного в условиях примера 1, вводят в хроматограф Хром-5 с рефрактометрическим детектором. Колонка Сферисорб 10 С18, 20 х 250 мм. Подвижная фаза: 40%-ный раствор ацетона в 0,1%-ном водном растворе трифторуксусной кислоты.
После начала выхода пика ДКВ отбирают фракцию 40 мл, упаривают на роторном испарителе до полного удаления ацетона. После фильтрования, промывки дистиллированной водой выпавших кристаллов и высушивания получают 37,5 мг ДКВ, т. е. 75,0% от введенного в хроматограф количества. По данным аналитического метода ВЭЖХ степень чистоты полученного ДКВ составляет 99,6%.
Таким образом, предлагаемый способ выделения ДКВ позволяет получать конечный продукт высочайшей степени очистки.
Количественный анализ содержания ДКВ в конечном продукте проводился методом ВЭЖХ с использованием УФ-детектора. Колонка 250 х 4,6 мм, сорбент Lichrosorb 10 RP-2, подвижная фаза ацетонитрил-2%-ная уксусная кислота (3:7). Аналитическая длина волны 290 нм. Относительная ошибка единичного определения при уровне значимости 95% не превышала 3%.
Claims (1)
- Способ выделения дигидрокверцетина путем экстракции древесины лиственницы при нагревании, охлаждения, фильтрования, очистки отфильтрованного экстракта хроматографией и упаривания элюата, отличающийся тем, что пред экстракцией сырье обрабатывают кипящей водой, экстракцию проводят водным раствором ацетона, водно-ацетоновый экстракт высушивают и очищают его высокоэффективной жидкостной хроматографией на обращенно-фазных сорбентах типа Сферисорб С2-С18 с размером частиц 5-10 мкм с использованием в качестве подвижной фазы 30-50%-ного ацетона в 0,1%-ном водном растворе трифторуксусной кислоты.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU97111748A RU2114631C1 (ru) | 1997-07-22 | 1997-07-22 | Способ выделения дигидрокверцетина |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU97111748A RU2114631C1 (ru) | 1997-07-22 | 1997-07-22 | Способ выделения дигидрокверцетина |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2114631C1 true RU2114631C1 (ru) | 1998-07-10 |
| RU97111748A RU97111748A (ru) | 1998-12-27 |
Family
ID=20195184
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU97111748A RU2114631C1 (ru) | 1997-07-22 | 1997-07-22 | Способ выделения дигидрокверцетина |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2114631C1 (ru) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2180566C1 (ru) * | 2001-01-18 | 2002-03-20 | Нифантьев Эдуард Евгеньевич | Способ выделения дигидрокверцетина |
| RU2258525C1 (ru) * | 2004-02-05 | 2005-08-20 | Шилов Евгений Алексеевич | Способ очистки дигидрокверцетина и дигидрокемферола из экстрактов биофлаваноидов, полученных в процессе переработки древесины |
| RU2349330C1 (ru) * | 2007-10-15 | 2009-03-20 | Закрытое акционерное общество "БиоХимМак СТ" | Способ получения высокоочищенного дигидрокверцетина |
| RU2361871C1 (ru) * | 2007-12-28 | 2009-07-20 | Институт элементоорганических соединений им. А.Н. Несмеянова РАН (ИНЭОС РАН) | Способ комплексной переработки древесины лиственницы |
| WO2012064229A1 (ru) | 2010-11-11 | 2012-05-18 | Ostronkov Vladimir Sergeevich | Способ получения дигидрокверцетина |
| WO2013172693A1 (en) | 2012-05-18 | 2013-11-21 | Uab "Rokiškio Pragiedruliai" | Process for preparing of highly pure dihydroquercetin |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2000797C1 (ru) * | 1992-05-26 | 1993-10-15 | Отдел химии древесины Иркутского института органической химии СО РАН | Способ выделени дигидрокверцетина |
| RU2038094C1 (ru) * | 1994-02-08 | 1995-06-27 | Товарищество с ограниченной ответственностью "Инкор" | Способ получения дигидрокверцетина |
-
1997
- 1997-07-22 RU RU97111748A patent/RU2114631C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2000797C1 (ru) * | 1992-05-26 | 1993-10-15 | Отдел химии древесины Иркутского института органической химии СО РАН | Способ выделени дигидрокверцетина |
| RU2038094C1 (ru) * | 1994-02-08 | 1995-06-27 | Товарищество с ограниченной ответственностью "Инкор" | Способ получения дигидрокверцетина |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2180566C1 (ru) * | 2001-01-18 | 2002-03-20 | Нифантьев Эдуард Евгеньевич | Способ выделения дигидрокверцетина |
| RU2258525C1 (ru) * | 2004-02-05 | 2005-08-20 | Шилов Евгений Алексеевич | Способ очистки дигидрокверцетина и дигидрокемферола из экстрактов биофлаваноидов, полученных в процессе переработки древесины |
| RU2349330C1 (ru) * | 2007-10-15 | 2009-03-20 | Закрытое акционерное общество "БиоХимМак СТ" | Способ получения высокоочищенного дигидрокверцетина |
| RU2361871C1 (ru) * | 2007-12-28 | 2009-07-20 | Институт элементоорганических соединений им. А.Н. Несмеянова РАН (ИНЭОС РАН) | Способ комплексной переработки древесины лиственницы |
| WO2012064229A1 (ru) | 2010-11-11 | 2012-05-18 | Ostronkov Vladimir Sergeevich | Способ получения дигидрокверцетина |
| WO2013172693A1 (en) | 2012-05-18 | 2013-11-21 | Uab "Rokiškio Pragiedruliai" | Process for preparing of highly pure dihydroquercetin |
| LT6013B (lt) | 2012-05-18 | 2014-03-25 | Uab "Rokiå Kio Pragiedruliai" | Ypatingai gryno dihidrokvercetino gamybos būdas |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Li et al. | Preparative separation of dryofragin and aspidin BB from Dryopteris fragrans extracts by macroporous resin column chromatography | |
| JP2007137890A5 (ru) | ||
| JP2006511509A (ja) | 全フェノールに富む組成物を製造するための効果的方法 | |
| EP3225615B1 (en) | Preparation method for medicinal chlorogenic acid | |
| CN102584918A (zh) | 一种制备高纯度黄芩苷的方法 | |
| RU2038094C1 (ru) | Способ получения дигидрокверцетина | |
| RU2114631C1 (ru) | Способ выделения дигидрокверцетина | |
| CN104327127B (zh) | 一种利用高速逆流色谱分离纯化制备安哥拉苷c、桃叶珊瑚苷和哈巴苷的方法 | |
| RU2435766C1 (ru) | Способ получения дигидрокверцетина | |
| CN100344643C (zh) | 龙胆苦甙的制备方法 | |
| CN110194758B (zh) | 一种从关木通中分离纯化马兜铃酸类化合物的方法 | |
| CN108373474B (zh) | 一种从银杏叶中提取的银杏内酯化合物及其制备方法 | |
| RU2000797C1 (ru) | Способ выделени дигидрокверцетина | |
| RU2308267C1 (ru) | Способ выделения биологически активных изомеров дигидрокверцетина | |
| Hou et al. | Preparative purification of corilagin from Phyllanthus by combining ionic liquid extraction, prep-HPLC, and precipitation | |
| RU2091076C1 (ru) | Способ получения дигидрокверцетина | |
| JP2023542661A (ja) | ｐ－クマロイル化アントシアニンの分離精製方法 | |
| RU2402525C1 (ru) | Способ получения розмариновой кислоты | |
| RU2677284C1 (ru) | Способ получения вещества, обладающего диуретической и антидепрессантной активностью | |
| RU2349331C1 (ru) | Способ получения дигидрокверцетина | |
| CN114456168B (zh) | 一种高纯度咖啡因的制备方法 | |
| CN110240544B (zh) | 一种绿原酸提取纯化方法及应用 | |
| RU2317093C1 (ru) | Способ выделения биологически активных изомеров дигидрокверцетина | |
| CN108440612A (zh) | 一种玄参中三种环烯醚萜类成分的分离纯化方法 | |
| CN109970838B (zh) | 一种长梗冬青苷的制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20070723 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20081227 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20130723 |