RU2112543C1

RU2112543C1 - Immunomodulating drug

Info

Publication number: RU2112543C1
Application number: RU96119399A
Authority: RU
Inventors: Александр Григорьевич Хоменко; Рэм Викторович Петров; Рахим Мусаевич Хаитов; Виталий Ильич Литвинов; Аркадий Максович Мороз; Римма Юрьевна Романова; Аркадий Васильевич Некрасов; Любовь Алексеевна Горелова; Наталья Григорьевна Пучкова
Original assignee: Александр Григорьевич Хоменко; Рэм Викторович Петров; Рахим Мусаевич Хаитов; Виталий Ильич Литвинов; Аркадий Максович Мороз; Римма Юрьевна Романова; Аркадий Васильевич Некрасов; Любовь Алексеевна Горелова; Наталья Григорьевна Пучкова
Priority date: 1996-09-26
Filing date: 1996-09-26
Publication date: 1998-06-10

Abstract

FIELD: medicine, immunology. SUBSTANCE: invention proposes a preparation that is a modified BCG. Preparation is a specific immunomodulating agent containing extract from tuberculosis mycobacteria of vaccine strain BCG complexed with polyoxydonium - synthetic immunostimulating agent taken at ratio (1:30)-(1:120). Combination of this preparation with conventional antituberculosis chemotherapy enhances effectiveness of the latter due to recovery of impaired indices of immunity T-link: amount of T-lymphocyte-killers, ratio of T-helpers/T-suppressors, proliferative activity of T-lymphocytes in vitro, phagocyte activity of macrophages and mean span of life of treated mice as compared with nontreated ones or treated with antituberculosis chemotherapy only. EFFECT: enhanced effectiveness of drug. 2 tbl

Description

Изобретение относится к медицине, в частности иммунотерапии, особенно для лечения больных туберкулезом. The invention relates to medicine, in particular immunotherapy, especially for the treatment of tuberculosis patients.

В настоящее время для лечения больных туберкулезом легких, особенно с выраженным вторичным иммунодефицитом, для повышения эффективности стандартной противотуберкулезной химиотерапии, применяются иммуностимулирующие средства, которые частично нормализуют некоторые сниженные иммунологические показатели и повышают эффективность лечения. Currently, for the treatment of patients with pulmonary tuberculosis, especially with severe secondary immunodeficiency, to increase the effectiveness of standard anti-tuberculosis chemotherapy, immunostimulating agents are used that partially normalize some reduced immunological parameters and increase the effectiveness of treatment.

В этих случаях применяются следующие иммуностимуляторы:
1) синтетические - диуцифон, левомизол, нуклеонат натрия и др. [3, 6, 7] ;
2) вещества, выделенные из тимуса - тимолин, T-активин, тимактин и др. [1, 2];
3) вещества, выделенные из бактерий - рибомунил [3, 4, 5].In these cases, the following immunostimulants are used:
1) synthetic - diutsifon, levomizole, sodium nucleonate, etc. [3, 6, 7];
2) substances isolated from thymus - thymoline, T-activin, thymactin, etc. [1, 2];
3) substances isolated from bacteria - ribomunyl [3, 4, 5].

Кроме того, для повышения эффективности химиотерапии туберкулеза легких используются также методы специфической патогенетической терапии путем применения туберкулина или вакцины БЦЖ, также основанные на учете состояния специфической реактивности организма больных туберкулезом легких. In addition, to increase the effectiveness of chemotherapy for pulmonary tuberculosis, methods of specific pathogenetic therapy are also used by using tuberculin or BCG vaccine, also based on taking into account the specific reactivity of the organism of patients with pulmonary tuberculosis.

Однако индивидуальная туберкулино- и БЦЖ-терапия легче переносятся больными на раннем этапе заболевания. Тогда как при прогрессирующем туберкулезе легких, а также при наличии тяжелых форм сопутствующих заболеваний с нарушением функции сердечно-сосудистой системы, печени, почек применение данной специфической терапии противопоказано. However, individual tuberculin and BCG therapy are more easily tolerated by patients at an early stage of the disease. Whereas with progressive pulmonary tuberculosis, as well as in the presence of severe forms of concomitant diseases with impaired function of the cardiovascular system, liver, and kidneys, the use of this specific therapy is contraindicated.

Применение вышеперечисленных препаратов как у впервые выявленных больных, так и у больных с хроническим течением туберкулеза легких, повышало эффективность комплексного лечения по сравнению с группой больных, получавших только химиотерапию. Частично нормализовались показатели иммунологического статуса больных. Однако такие показатели, как процентное выражение Т-лимфоцитов (СД3), пролиферативная активность Т-лимфоцитов на фитогемагглютинин (ФГА), в реакции бластной трансформации (РБТ) и соотношение субпопуляций лимфоцитов Т-хелперы: T-супрессоры (СД4 : СД8), имеющие важное значение в противотуберкулезном иммунитете, остались на исходно низких уровнях. Все это обусловило необходимость поиска новых иммуностимуляторов, полученных из туберкулезных микобактерий. The use of the above drugs in both newly diagnosed patients and patients with chronic pulmonary tuberculosis increased the effectiveness of complex treatment compared with the group of patients who received only chemotherapy. Partially normalized indicators of the immunological status of patients. However, indicators such as the percentage of T-lymphocytes (T3DM), proliferative activity of T-lymphocytes to phytohemagglutinin (PHA), in the blast transformation reaction (RBT) and the ratio of lymphocyte subpopulations to T-helper cells: T-suppressors (T4: T8), having important in anti-tuberculosis immunity, remained at initially low levels. All this necessitated the search for new immunostimulants derived from tuberculous mycobacteria.

В более ранние годы показана роль рибосомального материала [3], а также клеточных стенок туберкулезных микобактерий в защите мышей от туберкулеза [10, 11]. In earlier years, the role of ribosomal material [3], as well as the cell walls of tuberculous mycobacteria in protecting mice from tuberculosis was shown [10, 11].

В последние годы из микобактерий вакцинного штамма БЦЖ получены антигенные препараты, обладающие выраженным защитным действием на течение туберкулезного процесса у мышей [4, 5]. In recent years, antigenic preparations having a pronounced protective effect on the course of the tuberculosis process in mice have been obtained from mycobacteria of the BCG vaccine strain [4, 5].

В связи с этим предлагается иммуномодулирующий препарат, который состоит из цитоплазмы и рибосом микобактерий вакцинного штамма БЦЖ, комплексированных с синтетическим полимером адьювантного действия - полиоксидонием (ЦП - БЦЖ). In this regard, an immunomodulating preparation is proposed, which consists of the cytoplasm and ribosomes of mycobacteria of the BCG vaccine strain, complexed with a synthetic polymer of adjuvant action - polyoxidonium (CP - BCG).

За прототип принят препарат рибомунил, являющийся суммарным рибосомальным препаратом, полученным из бактерий, вызывающих патологию верхних дыхательных путей, таких, как klebsiella pneumania, Diplococcus pneumonia, streptococcus pyogenes, Haemophilus influenzac и мембранного протяоглипана klebsiella pneumonia [9]. The drug Ribomunil, which is a total ribosomal preparation obtained from bacteria that cause pathology of the upper respiratory tract, such as klebsiella pneumania, Diplococcus pneumonia, streptococcus pyogenes, Haemophilus influenzac and membrane protogooglypan klebsiella pneumonia [9], was taken as a prototype.

Данный препарат с успехом применялся при лечении как больных хроническими заболеваниями верхних дыхательных путей, так и в последние годы в эксперименте и в клинике у больных туберкулезом легких в комбинированной терапии с противотуберкулезными препаратами [11]. This drug has been successfully used in the treatment of patients with chronic diseases of the upper respiratory tract, and in recent years in the experiment and in the clinic for patients with pulmonary tuberculosis in combination therapy with anti-TB drugs [11].

Однако прототип не содержит соединений, выделенных из туберкулезных микобактерий, вследствие чего он не может в полной мере помочь в нормализации измененных показателей противотуберкулезного иммунитета. However, the prototype does not contain compounds isolated from tuberculous mycobacteria, as a result of which it cannot fully help in normalizing the altered indicators of anti-tuberculosis immunity.

Предлагаемый препарат ЦП-БЦЖ, кроме иммуностимулирующего общего действия, обладает специфически направленным стимулирующим действием на основные параметры иммунной системы больного туберкулезом и резко повышает эффективность противотуберкулезной терапии. The proposed drug CP-BCG, in addition to the general immunostimulating effect, has a specifically directed stimulating effect on the main parameters of the immune system of a patient with tuberculosis and dramatically increases the effectiveness of anti-tuberculosis therapy.

Специфическая часть препарата - цитоплазменный и рибосомольный материалы получены в результате дифференциального ультрацентрифуцирования разрушенной культуры микобактерий вакцинного штамма БЦЖ и стандартеризованы по содержанию в них белка. A specific part of the preparation, cytoplasmic and ribosomal materials, was obtained as a result of differential ultracentrifugation of the destroyed culture of mycobacteria of the BCG vaccine strain and was standardized by their protein content.

Иммуностимулирующий носитель - полиоксидоний детально изучен и разрешен для применения в количестве 3 мг и 6 мг для 1-й инъекции (В.Ф.С 42-27-27-96). Обе субстанции, составляющие препарат, соединены между собой донорно-акцепторными связями в единый комплекс. The immunostimulating carrier, polyoxidonium, has been studied in detail and approved for use in the amount of 3 mg and 6 mg for the 1st injection (V.F.S. 42-27-27-96). Both substances that make up the drug are interconnected by donor-acceptor bonds in a single complex.

Результаты проведенного экспериментально-клинического испытания препарата позволяют рекомендовать препарат ЦП-БЦЖ для лечения больных туберкулезом легких. The results of an experimental clinical trial of the drug allow us to recommend the drug CP-BCG for the treatment of patients with pulmonary tuberculosis.

Проведено 2 эксперимента на мышах линии СВА самцах весом 20 г по 15-20 животных в группе. 2 experiments were carried out on mice of the CBA line of males weighing 20 g of 15-20 animals per group.

Исследовали 7 групп мышей, зараженных вирулентной культурой туберкулезных микобактерий H37Rv в дозе 0,025 мкг на мышь, и 2 группы здоровых не зараженных мышей. We studied 7 groups of mice infected with a virulent culture of tuberculous mycobacteria H37Rv at a dose of 0.025 μg per mouse, and 2 groups of healthy non-infected mice.

Токсическое действие препарата ЦП-БЦЖ изучено на здоровых мышах. Одноразовое внутривенное введение как исследуемых доз: 0,01; 0,05; 0,5; 5; 50 мкг белка, так и больших доз вплоть до максимальной 100, 200, 500, 1000 и 2000 мкг белка, не вызывало гибели ни одного животного. Мыши оставались живы в течение всего времени наблюдения - до месяца. The toxic effect of CP-BCG has been studied in healthy mice. Single intravenous administration as test doses: 0.01; 0.05; 0.5; 5; 50 μg of protein, as well as large doses up to a maximum of 100, 200, 500, 1000 and 2000 μg of protein, did not cause the death of any animal. The mice remained alive during the entire observation time - up to a month.

Препарат вводили мышам подкожно в заднюю ногу через 2 недели после заражения на фоне уже сформировавшегося туберкулеза 2 раза в неделю в течение 2-х недель (схема 2х2), как самостоятельно (см. табл. 1), так и в комплексе с противотуберкулезной химиотерапией (см. табл. 2). The drug was administered to mice subcutaneously in the hind leg 2 weeks after infection against the background of already formed tuberculosis 2 times a week for 2 weeks (2x2 scheme), both independently (see Table 1), and in combination with anti-tuberculosis chemotherapy ( see table 2).

Здоровые животные получали аналогичное лечение, и на следующий день после прекращения терапии было проведено патоморфологическое исследование печени, легких, селезенки и лимфатических узлов на предмет токсического и иммуностимулирующего действия на клеточном уровне. Healthy animals received a similar treatment, and the day after the cessation of therapy, a pathomorphological study of the liver, lungs, spleen and lymph nodes was performed for toxic and immunostimulating effects at the cellular level.

В результате, из всех доз препарата, взятых на исследование, только дозы, содержащие 0,5 мкг, 0,05 мкг и 0,01 мкг белка не вызывали дистрофических изменений цитоплазмы клеток печени. Тогда как более высокие дозы препарата вызывали дозозависимое токсическое действие: белковую дистрофию цитоплазмы гепатоцитов, периваскулярный отек и повышенную проницаемость сосудов. As a result, of all the doses of the drug taken for the study, only doses containing 0.5 μg, 0.05 μg and 0.01 μg of protein did not cause dystrophic changes in the cytoplasm of liver cells. Whereas higher doses of the drug caused a dose-dependent toxic effect: protein dystrophy of the hepatocyte cytoplasm, perivascular edema and increased vascular permeability.

Аллергизирующего действия препарата ЦП-БЦЖ не выявлено. 4-разовое подкожное введение здоровым мышам препарата в дозах 0,5; 0,05 и 0,01 мкг белка по схеме (2х2) не вызывало ни в одном случае реакций анафилактического типа как немедленных, так и через 12, 24 и 48 ч. Аутоантитела к ДНК коллагену, соединительной ткани, общему белку мизлина, тканям легких, печени, почек (коммерческие иммуноферментные тест-системы) не выявлены. The allergenic effect of the drug CP-BCG was not detected. 4-times subcutaneous administration to a healthy mouse in doses of 0.5; 0.05 and 0.01 μg of the protein according to the scheme (2x2) did not cause anaphylactic type reactions in either case, either immediately or after 12, 24 and 48 hours. Autoantibodies to DNA collagen, connective tissue, total mislin protein, lung tissues , liver, kidneys (commercial enzyme immunoassay test systems) were not identified.

Анафилактические и туберкулиновые свойства препарата ЦП-БЦЖ, как антигена, индуцирующего данное действие в вышеуказанных дозах при в/венном введении сенсибилизированным вакциной БЦЖ морским свинкам, не выявлены. Anaphylactic and tuberculin properties of the drug CP-BCG, as an antigen inducing this action in the above doses with iv administration to the guinea pigs with a sensitized BCG vaccine, were not detected.

Канцерогенным действием препарат не обладает, так как известно, что микобактерии БЦЖ, из которых он приготовлен, используются для лечения злокачественных опухолей. The drug does not have a carcinogenic effect, since it is known that the BCG mycobacteria from which it is prepared are used to treat malignant tumors.

Тератогенные свойства у препарата ЦП-БЦЖ также отсутствуют, так как вакцина БЦЖ многие годы используется для вакцинации детей и взрослых. The teratogenic properties of the drug CP-BCG are also absent, since the BCG vaccine has been used for many years to vaccinate children and adults.

Иммуномодулирующее действие препарата ЦП-БЦЖ в дозе 0,05 и 0,01 мкг белка при подкожном введении 2 раза в неделю в течение 2-х недель заключается в следующем. The immunomodulatory effect of the drug CP-BCG at a dose of 0.05 and 0.01 μg of protein with subcutaneous administration 2 times a week for 2 weeks is as follows.

1. Увеличивает фагоцитарную активность макрофагов. 1. Increases the phagocytic activity of macrophages.

2. Восстанавливает нарушенные показатели Т-звена иммунной системы. 2. Restores impaired T-link of the immune system.

3. Восстанавливает количество Т-лимфоцитов-киллеров и нормализует соотношение Т-хлеперы / Т-суппрессоры. 3. Restores the number of killer T-lymphocytes and normalizes the ratio of T-bakers / T-suppressors.

4. Восстанавливает пролиферативную активность Т-лимфоцитов in vitro (РБТ). 4. Restores the proliferative activity of T-lymphocytes in vitro (RBT).

5. Значительно, статистически достоверно увеличивает среднюю выживаемость больных туберкулезом мышей, леченных как самостоятельно, так и особенно в сочетании со стандартной противотуберкулезной химиотерапией по сравнению с контрольными, нелеченных животных. 5. Significantly, statistically significantly increases the average survival of tuberculosis patients in mice treated both independently and especially in combination with standard anti-tuberculosis chemotherapy compared to control, untreated animals.

1. Фагоцитирующая активность макрофагов через 4 недели после заражения у мышей контрольной группы (без лечения) была резко снижена. Процент фагоцитирующих клеток (ПФК) составил 52%, а фагоцитарное число (ФГ) 1-2 клетки. 1. The phagocytic activity of macrophages 4 weeks after infection in mice of the control group (without treatment) was sharply reduced. The percentage of phagocytic cells (PFC) was 52%, and the phagocytic number (FG) was 1-2 cells.

В группе мышей, получавших препарат в дозе 0,01 мкг, вызвавшей наибольшие иммуностимулирующее действие, эти показатели приближались к норме: ПФК = 64% (N = 70%), ФЧ =2,5-3 клетки (N = 3-4 клетки). In the group of mice that received the drug at a dose of 0.01 μg, which caused the greatest immunostimulating effect, these indicators were close to normal: PFC = 64% (N = 70%), PS = 2.5-3 cells (N = 3-4 cells )

В терминальном периоде у контрольных мышей ПФК стал еще ниже - 35%, а ФЧ составило 0,3 клетки. In the terminal period, control PFCs became even lower - 35%, and the PS was 0.3 cells.

В этот же период у мышей, леченных препаратом, данные показатели были намного выше: соответственно 57% и 2 клетки. In the same period, in mice treated with the drug, these indicators were much higher: 57% and 2 cells, respectively.

Таким образом, введение больным туберкулезом мышам ЦП-БЦЖ в дозе 0,01 мкг белка в инъекции по схеме 2х2 значительно повышало функциональную активность макрофагов перитонеального эксудата по сравнению с контролем - больные животные без лечения. Thus, the introduction of CP-BCG mice with tuberculosis mice at a dose of 0.01 μg of protein per 2x2 injection significantly increased the functional activity of macrophages of peritoneal exudate compared with the control - sick animals without treatment.

2-3. При изучении содержания Т и B-лимфоцитов и их субпопуляции в селезенке мышей было выявлено, что процентное содержание их у больных мышей в контроле изменено: СД3 = 33%, при норме у здоровых мышей N = 35%, из них СД4 = 26% (при N - 24%), СД8 - 7% (при N = 12%) и за счет этого был резко завышен индекс СД4 / СД8 и равнялся 4,5:1 (при N = 2:1). 2-3. When studying the content of T and B lymphocytes and their subpopulation in the spleen of mice, it was revealed that their percentage in sick mice in the control was changed: CD3 = 33%, with the norm in healthy mice N = 35%, of which CD4 = 26% ( at N - 24%), SD8 - 7% (at N = 12%) and due to this, the SD4 / SD8 index was sharply overestimated and amounted to 4.5: 1 (at N = 2: 1).

Количество B-лимфоцитов (TJg) было повышено и составило 65% при N = 60%. Так что на пике туберкулезной инфекции основные параметры противотуберкулезного иммунитета были разбалансированы. The number of B-lymphocytes (TJg) was increased and amounted to 65% at N = 60%. So at the peak of tuberculosis infection, the main parameters of tuberculosis immunity were unbalanced.

Введение мышам препарата ЦП-БЦЖ в дозе 0,01 мкг белка по схеме (2х2) оказало положительное действие на данные показатели, которые мало отличались от нормы и были равны: СД3 = 34%, СД4 = 23%, СД8 = 11%, СД4/СД8 = 2:1, TJg = 59%. У мышей отмечалось увеличение СД8 - Т-лимфоцитов киллеров с цитотоксическим действием и соответственно снижение и нормализация индекса СД4/СД8, снижение Т-лимфоцитов, хелперов, продуцирующих антитела и соответственно B-лимфоцитов, количество которых нормализовалось. The administration to mice of the drug CP-BCG at a dose of 0.01 μg of protein according to the (2x2) scheme had a positive effect on these indicators, which did not differ much from the norm and were equal: CD3 = 34%, CD4 = 23%, CD8 = 11%, CD4 / SD8 = 2: 1, TJg = 59%. In mice, there was an increase in CD8 - killer T-lymphocytes with a cytotoxic effect and, accordingly, a decrease and normalization of the CD4 / CD8 index, a decrease in T-lymphocytes, helper-producing antibodies and, accordingly, B-lymphocytes, the number of which was normalized.

Таким образом, препарат ЦП-БЦЖ в оптимальной дозе 0,01 мкг является активным противотуберкулезным модулятором: он стимулирует и восстанавливает число Т-лимфоцитов цитотоксического действия, не увеличивая популяции лимфоцитов - продуцентов антител, восстанавливая тем самым нарушенные показатели Т-звена иммунной системы. Thus, the preparation of CP-BCG in the optimal dose of 0.01 μg is an active anti-tuberculosis modulator: it stimulates and restores the number of T-lymphocytes of the cytotoxic effect, without increasing the population of lymphocytes - antibody producers, thereby restoring the impaired T-link of the immune system.

4. Индексы пролиферации Т-лимфоцитов на ФГА в РБТ во всех группах зараженных мышей, получавших препарат ЦП-БЦЖ, были статистически достоверно выше, чем в контроле в период гибели животных в этой группе (табл. 1). 4. The proliferation indices of T-lymphocytes for PHA in RBT in all groups of infected mice treated with CP-BCG were statistically significantly higher than in the control during the death of animals in this group (Table 1).

Необходимо отметить, что кожные пробы у контрольных мышей в этот период отсутствовали. У мышей, получавших препарат, туберкулиновые пробы выявлялись достаточно отчетливо, что свидетельствует о высоком ответе Т-звена противотуберкулезного иммунитета. It should be noted that skin samples from control mice were absent during this period. In mice treated with the drug, tuberculin tests were detected quite clearly, which indicates a high response of the T-link of tuberculosis immunity.

Средняя продолжительность жизни в группах с ЦП-БЦЖ была статистически достоверно выше, чем в контроле (p < 0,05) (табл. 1). Причем разница в 4, 5, 6 и 7 группах по сравнению с контролем была в пределах 20 дней. Процент выживаемости мышей в этих группах также был высоким 65-78%. The average life expectancy in groups with CP-BCG was statistically significantly higher than in the control (p <0.05) (Table 1). Moreover, the difference in the 4, 5, 6 and 7 groups compared with the control was within 20 days. The survival rate of mice in these groups was also high 65-78%.

Таким образом, результаты, полученные при оценке иммуномодулирующего действия препарата ЦП-БЦЖ, позволили отобрать две дозы: 0,01 мкг и 0,05 мкг белка, обладающие наиболее выраженным иммуностимулирующим действием и не оказывающие токсико-аллергического воздействия на организм мышей. Thus, the results obtained in assessing the immunomodulating effect of the CP-BCG preparation made it possible to select two doses: 0.01 μg and 0.05 μg of protein, which have the most pronounced immunostimulating effect and do not have a toxic-allergic effect on the body of mice.

Во втором эксперименте на зараженных туберкулезом мышах изучена эффективность действия выбранной дозы 0.01 мкг белка препарата ЦП-БЦЖ в сочетании с общепринятой в клинике противотуберкулезной химиотерапией: стрептомицин - 125 мг на 1 кг веса и изониазид - 10 мг на 1 кг веса, а также 2 схемы лечения. In a second experiment on mice infected with tuberculosis, the effectiveness of the selected dose of 0.01 μg of the protein of the drug CP-BCG was studied in combination with conventional anti-tuberculosis chemotherapy in the clinic: streptomycin - 125 mg per 1 kg of body weight and isoniazid - 10 mg per 1 kg of body weight, as well as 2 regimens treatment.

Имелись 4 группы мышей:
1 группа - мыши получали ЦП-БЦЖ 2 раза в неделю в течение 2-х недель (по схеме 2х2) в комплексе с химиотерапией;
2 группа - мыши получали ЦП-БЦЖ 1 раз в неделю в течение 3-х недель (по схеме 1х3) совместно с химиотерапией;
3 группа - мышей лечили 3 недели химиотерапией;
4 группа - контроль - больные мыши без лечения.There were 4 groups of mice:
Group 1 - mice received CP-BCG 2 times a week for 2 weeks (according to the 2x2 scheme) in combination with chemotherapy;
Group 2 - mice received CP-BCG 1 time per week for 3 weeks (according to the 1x3 scheme) together with chemotherapy;
Group 3 - mice were treated with chemotherapy for 3 weeks;
4 group - control - sick mice without treatment.

После прекращения лечения через день у мышей обследовали иммунологические показатели и оставляли на выживаемость. Как видно из табл. 2, препарат ЦП-БЦЖ в дозе 0,01 мкг белка совместно со стандартной химиотерапией в режиме 1 раз в течение 3-х недель имел как наибольший терапевтический успех (мыши прожили на 38 дней дольше контрольных и на 14 дней дольше мышей, получавших только противотуберкулезную терапию), так и более высокую стимуляцию параметров Т-иммунитета. After discontinuation of treatment, immunological parameters were examined in mice one day later and left for survival. As can be seen from the table. 2, the preparation of CP-BCG at a dose of 0.01 μg of protein together with standard chemotherapy in the regimen of 1 time for 3 weeks was the greatest therapeutic success (the mice lived 38 days longer than the control and 14 days longer than the mice receiving only anti-tuberculosis therapy), as well as higher stimulation of T-immunity parameters.

Исходя из экспериментально-клинических исследований, предложен препарат, полученный из микобактерий туберкулеза вакцинного штамма БЦЖ в комплексе с синтетическим иммуностимулятором - полиоксидонием, введение которого в дозе 0,01-0,05 мкг белка нормализует в организме больных мышей основные параметры противотуберкулезного иммунитета, при этом не вызывая никаких токсико-аллергических и других негативных реакций. Этот препарат может быть с успехом использован в клинике для лечения больных туберкулезом легких. Based on experimental and clinical studies, a preparation was proposed that was obtained from mycobacterium tuberculosis of the BCG vaccine strain in combination with a synthetic immunostimulant - polyoxidonium, the introduction of which at a dose of 0.01-0.05 μg protein normalizes the main parameters of anti-tuberculosis immunity in the body of sick mice, while without causing any toxic-allergic and other negative reactions. This drug can be successfully used in a clinic for the treatment of patients with pulmonary tuberculosis.

Доза препарата в пересчете 1 кг веса - 0,500-2,5 мкг для взрослого человека весом 70 кг должна составить 35-175 мкг на 1 инъекцию. The dose of the drug in terms of 1 kg of weight - 0.500-2.5 μg for an adult weighing 70 kg should be 35-175 μg per 1 injection.

Рекомендация по введению: подкожно в область плеча 1 раз в неделю в течение 4-х недель. Recommendation for administration: subcutaneously in the shoulder area 1 time per week for 4 weeks.

Препарат рекомендуется для назначения:
1. Впервые выявленным и ранее леченым больным с активным туберкулезом легких, у которых при иммунологическом обследовании обнаружено резкое снижение количества и функциональной активности Т-лимфоцитов, а также при дисбалансе субпопуляций лимфоцитов Т-хелперов и Т-супрессоров.The drug is recommended for the appointment:
1. For the first time identified and previously treated patients with active pulmonary tuberculosis, in whom an immunological examination revealed a sharp decrease in the number and functional activity of T-lymphocytes, as well as in an imbalance of subpopulations of lymphocytes of T-helper cells and T-suppressors.

2. При замедленной клинико-рентгенологической регрессии туберкулезных изменений в легких и одновременном наличии снижения вышеперечисленных признаков Т-звена иммунитета. 2. With a delayed clinical and radiological regression of tuberculous changes in the lungs and the simultaneous presence of a decrease in the above signs of the T-link of immunity.

Способ применения и дозировка с целью лечения. Method of application and dosage for the purpose of treatment.

Препарат ЦП-БЦЖ назначается больным в виде подкожных инъекций в наружную поверхность плеча в дозе 35 мкг белка в объеме 1 мл. При отсутствии через сутки аллергической реакции после 1-го введения проводится весь курс лечения. The drug CP-BCG is prescribed to patients in the form of subcutaneous injections into the outer surface of the shoulder at a dose of 35 μg of protein in a volume of 1 ml. In the absence of an allergic reaction after 1 day, the entire course of treatment is carried out.

Препарат ЦП-БЦЖ вводят больным 1 раз в неделю в течение 4-х недель. Затем необходимо провести иммунологическое обследование. В случае сохранения низкого уровня вышеописанных показателей или их дальнейшего нарушения необходимо повторить курс лечения препаратом. Повторный курс необходимо провести полностью, как описано, но не раньше, чем через 2 недели. Препарат предварительно разводится в 1 мл физиологического раствора шприцом с соблюдением правил асептики и антисептики. The drug CP-BCG is administered to patients 1 time per week for 4 weeks. Then it is necessary to conduct an immunological examination. In case of maintaining a low level of the above indicators or their further violation, it is necessary to repeat the course of treatment with the drug. The second course must be carried out in full, as described, but not earlier than 2 weeks later. The drug is pre-diluted in 1 ml of saline with a syringe in compliance with the rules of asepsis and antiseptics.

Реакция на введение: возможна небольшая кожная аллергическая реакция. Reaction to the introduction: a slight skin allergic reaction is possible.

Противопоказания: противопоказан беременным и гемотологическим больным. Contraindications: contraindicated for pregnant and hemotological patients.

Форма выпуска: флаконы овальцованные с сухим препаратом. 1 флакон содержит 1 рабочую дозу (0,035-0,175 мг белка в цитоплазме и 3-6 мг полиоксидония). Флаконы упакованы в картонные коробки. Release form: bottles folded with a dry preparation. 1 vial contains 1 working dose (0.035-0.175 mg of protein in the cytoplasm and 3-6 mg of polyoxidonium). Bottles are packed in cardboard boxes.

Срок годности 1 год, хранить при 4^oC.Shelf life 1 year, store at 4 ^o C.

Клинический пример. Больная Е., 28 лет, поступила в клинику ЦНИИТ 1995 г. с диагнозом: инфильтративный туберкулез легких с распадом, микобактерии туберкулеза присутствовали в материале содержимого бронхов в большом количестве. Рентгенологически слева в верхней доле определялся инфильтрат типа перицисеурита с нечеткой верхней границей. На фоне инфильтрации определялись множественные полости распада. Иммунологическое исследование крови выявило иммунодефицит, проявляющийся в снижении индекса СД4 / СД8 1,08, снижении СД3 клеток 50%, показателя РБТ с ФГА 53%, резкое повышение TJg 36%. Clinical example. Patient E., 28 years old, was admitted to the 1995 Central Research Institute of Physics with a diagnosis of infiltrative pulmonary tuberculosis with decay, mycobacterium tuberculosis were present in large quantities in the contents of the bronchi. X-ray in the left in the upper lobe was determined periciseuritis type infiltrate with a fuzzy upper border. Against the background of infiltration, multiple decay cavities were determined. An immunological blood test revealed immunodeficiency, manifested in a decrease in the SD4 / SD8 index of 1.08, a decrease in CD3 of cells of 50%, an RBT with PHA of 53%, a sharp increase in TJg of 36%.

На фоне проведенной химиотерапии в течение 4-х месяцев пиразинамидом 1,5 г, рифампицином 0,45 г, этамбутолом 1,2 г в сутки получено медленное обратное развитие процесса; исчезли симптомы интоксикации, прекратилось бактериовыделение, однако рассасывание очаговых и инфильтративных изменений шло медленно. Against the background of chemotherapy for 4 months, pyrazinamide 1.5 g, rifampicin 0.45 g, ethambutol 1.2 g per day, a slow reverse development of the process was obtained; symptoms of intoxication disappeared, bacterial excretion ceased, however, resorption of focal and infiltrative changes was slow.

Иммунологические показатели остались практически без изменения, лишь несколько снизились количество TJg 29%. Immunological parameters remained almost unchanged, the amount of TJg 29% decreased only slightly.

Было добровольно проведено лечение ЦП-БЦЖ в дозе 0,035 мг и 1 мг по 4 раза в течение 5-го месяца болезни (1 инъекция подкожно в область плеча) совместно с химиотерапией. Через 5,5 месяцев рентгенологически отмечалось активное рассасывание очаговых и инфильтративных изменений, закрытие полостей распада и нормализация иммунологических показателей: СД3 60%; TJg 20%; СД4/СД8 1,7; РБТ с ФГА 63%. CP-BCG was administered voluntarily at a dose of 0.035 mg and 1 mg 4 times during the 5th month of the disease (1 injection subcutaneously in the shoulder area) together with chemotherapy. After 5.5 months, active resorption of focal and infiltrative changes, closure of decay cavities, and normalization of immunological parameters were observed radiographically: CD3 60%; TJg 20%; SD4 / SD8 1.7; RBT with PHA 63%.

Больная была выписана на амбулаторное лечение. The patient was discharged for outpatient treatment.

Источники информации
1. Арион В.Я. кн.: Итоги науки и техники. Серия: Иммунология. 1982. Т.Ю. с. 45-53.Sources of information
1. Arion V.Ya. book: Results of science and technology. Series: Immunology. 1982. T.Yu. from. 45-53.

2. Арион В. Я. , Иванушкин Е.Ф. Принципы иммунокорригирующей терапии препаратом тимуса Т-активин. Хирургия, 1984, N 11, с. 23-26. 2. Arion V. Ya., Ivanushkin E.F. Principles of immunocorrective therapy with thymus drug T-activin. Surgery, 1984, N 11, p. 23-26.

3. Баранова Т.В. Роль нуклеината Na в комплексном лечении больных туберкулезом легких: Автореферат дисс. канд. мед. наук.- М.: 1986. 3. Baranova T.V. The role of Na nucleinate in the complex treatment of patients with pulmonary tuberculosis: Abstract diss. Cand. honey. Sciences.- M .: 1986.

4. Романова Р.Ю. Иммунологический анализ и антигенные свойства поверхностных белков микобактерий БЦЖ. Сб. трудов "Актуальные вопросы лабораторной диагностики туберкулеза в эксперименте и клинике".- М.: 1989, т. III, с. 122-126. 4. Romanova R.Yu. Immunological analysis and antigenic properties of surface proteins of BCG mycobacteria. Sat Proceedings "Actual issues of laboratory diagnosis of tuberculosis in an experiment and clinic." - M .: 1989, v. III, p. 122-126.

5. Романова Р. Ю. Иммуногенные свойства и диагностическая ценность антигенов микобактерий БЦЖ: Автореферат дисс. доктора биологических наук. М.: 1991. 5. Romanova R. Yu. Immunogenic properties and diagnostic value of BCG mycobacterial antigens: Abstract of diss. Doctors of biological sciences. M .: 1991.

6. Хоменко А.Г., Инсанов А.Б. Иммунохимиотерапия левамизолом и диуцифоном в комплексном лечении больных хроническим деструктивным туберкулезом легких. Пробл. туб. 1984. N 9, с. 15-18. 6. Khomenko A.G., Insanov A.B. Immunochemotherapy with levamisole and ducifon in the complex treatment of patients with chronic destructive pulmonary tuberculosis. Prob. tub. 1984. N 9, p. 15-18.

7. Хоменко А.Г., Инсанов А.Б. Эффективность терапии антибактериальными препаратами в сочетании с левамизолом и диуцифоном деструктивного туберкулеза легких в эксперименте. Пробл. туб. 1984. N 4, с. 55-59. 7. Khomenko A.G., Insanov A.B. The effectiveness of antibiotic therapy in combination with levamisole and diutsifon destructive pulmonary tuberculosis in the experiment. Prob. tub. 1984. N 4, p. 55-59.

8. Хоменко И. С. Течение деструктивного туберкулеза легких у больных с иммунодефицитом. Автореферат дисс. докт. мед. наук. М.: 1983. 8. Khomenko I. S. The course of destructive pulmonary tuberculosis in patients with immunodeficiency. Abstract of diss. Doct. honey. sciences. M .: 1983.

9. Dussourd D'Hinterland U., Serre H. Preparation de vaccins a base de fractions ribosomales antigenigues. Brevet Pierre Fabre S.A. 1973, N 73, p. 439-457. 9. Dussourd D'Hinterland U., Serre H. Preparation de vaccins a base de fractions ribosomales antigenigues. Brevet Pierre Fabre S.A. 1973, N 73, p. 439-457.

10. Youmans A. S. , Youmans G.P. Immunogenic activity of a ribosomal fraction obtained from M. tuberculosis. Journ Bacteriol. 1965. 1989, p. 1291-1298. 10. Youmans A. S., Youmans G.P. Immunogenic activity of a ribosomal fraction obtained from M. tuberculosis. Journ Bacteriol. 1965. 1989, p. 1291-1298.

11. Youmans A.S., Youmans G.P. Immunogenic Mycjbacterial ribosomal and ribonucleic acid preparation. Chemical and physical characteristics. Infect. and Immunity. 1970. N 2, p. 659-668. 11. Youmans A.S., Youmans G.P. Immunogenic Mycjbacterial ribosomal and ribonucleic acid preparation. Chemical and physical characteristics. Infect. and Immunity. 1970. N 2, p. 659-668.

Claims

A drug is a specific immunomodulator, which is a compound consisting of a specific antigenic complex and a synthetic immunostimulant, characterized in that the material of the cytoplasm and ribosomes of the mycobacteria of the BCG vaccine strain is used as a specific antigenic complex, and Polyoxidonium in the ratio Mycobacterial protein is used as an immunostimulant from 1:30 to 1: 120.