RU2196589C2 - Method of resorption induction of scar or fibrous formation formed in blood vessel or vascular network in mammals - Google Patents
Method of resorption induction of scar or fibrous formation formed in blood vessel or vascular network in mammals Download PDFInfo
- Publication number
- RU2196589C2 RU2196589C2 RU97116166A RU97116166A RU2196589C2 RU 2196589 C2 RU2196589 C2 RU 2196589C2 RU 97116166 A RU97116166 A RU 97116166A RU 97116166 A RU97116166 A RU 97116166A RU 2196589 C2 RU2196589 C2 RU 2196589C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- pps
- administered
- treatment
- collagen
- dosage form
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 41
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 title claims abstract description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 title claims abstract description 9
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 title claims abstract description 9
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 title claims abstract description 6
- 230000002792 vascular Effects 0.000 title abstract description 6
- 230000006698 induction Effects 0.000 title abstract 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 26
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 claims abstract description 13
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 10
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 10
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 claims abstract description 7
- 208000037821 progressive disease Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 208000032544 Cicatrix Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 230000037387 scars Effects 0.000 claims abstract description 5
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 claims abstract description 3
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 claims abstract description 3
- 229940043138 pentosan polysulfate Drugs 0.000 claims description 48
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 11
- 206010061989 glomerulosclerosis Diseases 0.000 claims description 11
- 230000037390 scarring Effects 0.000 claims description 11
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 claims description 10
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 claims description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 7
- 239000003826 tablet Substances 0.000 claims description 6
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 5
- 159000000000 sodium salts Chemical group 0.000 claims description 5
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 4
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims description 4
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims description 4
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 claims description 4
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 claims description 3
- 206010012689 Diabetic retinopathy Diseases 0.000 claims description 3
- 208000031481 Pathologic Constriction Diseases 0.000 claims description 3
- 208000020832 chronic kidney disease Diseases 0.000 claims description 3
- 210000004351 coronary vessel Anatomy 0.000 claims description 3
- 208000028208 end stage renal disease Diseases 0.000 claims description 3
- 201000000523 end stage renal failure Diseases 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- 230000036262 stenosis Effects 0.000 claims description 3
- 208000037804 stenosis Diseases 0.000 claims description 3
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 claims description 3
- 210000005166 vasculature Anatomy 0.000 claims description 3
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 claims description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 claims description 2
- -1 droplets Substances 0.000 claims description 2
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 claims description 2
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 claims description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 claims description 2
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 claims description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 2
- 239000007950 delayed release tablet Substances 0.000 claims 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 claims 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims 1
- 229940057948 magnesium stearate Drugs 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 13
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- JCSJTDYCNQHPRJ-MMDFAQQLSA-N beta-D-Xylp-(1->4)-beta-D-Xylp-(1->4)-beta-D-Xylp Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)CO[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)OC2)O)OC1 JCSJTDYCNQHPRJ-MMDFAQQLSA-N 0.000 abstract 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 30
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 30
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 29
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 28
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 16
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 13
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 12
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 11
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 11
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 11
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 10
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 10
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 10
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 9
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 9
- 238000011161 development Methods 0.000 description 9
- 210000003584 mesangial cell Anatomy 0.000 description 8
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 7
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 7
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 7
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 7
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 7
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 6
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 6
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 6
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 6
- 208000034189 Sclerosis Diseases 0.000 description 5
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 5
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 206010007558 Cardiac failure chronic Diseases 0.000 description 4
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 4
- 102000007547 Laminin Human genes 0.000 description 4
- 108010085895 Laminin Proteins 0.000 description 4
- 238000002944 PCR assay Methods 0.000 description 4
- 238000003089 Pariser Parr Pople method Methods 0.000 description 4
- 229920000265 Polyparaphenylene Polymers 0.000 description 4
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 4
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 4
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 4
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 201000008350 membranous glomerulonephritis Diseases 0.000 description 4
- 238000013059 nephrectomy Methods 0.000 description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 210000000329 smooth muscle myocyte Anatomy 0.000 description 4
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 102000004266 Collagen Type IV Human genes 0.000 description 3
- 108010042086 Collagen Type IV Proteins 0.000 description 3
- 102000005741 Metalloproteases Human genes 0.000 description 3
- 108010006035 Metalloproteases Proteins 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 230000001434 glomerular Effects 0.000 description 3
- 210000003904 glomerular cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000006186 oral dosage form Substances 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 3
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 1-monostearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 description 2
- 208000007342 Diabetic Nephropathies Diseases 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 2
- 208000022461 Glomerular disease Diseases 0.000 description 2
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 2
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 description 2
- 239000012807 PCR reagent Substances 0.000 description 2
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 2
- 238000012197 amplification kit Methods 0.000 description 2
- 239000007640 basal medium Substances 0.000 description 2
- 210000002469 basement membrane Anatomy 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 108010006025 bovine growth hormone Proteins 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 208000033679 diabetic kidney disease Diseases 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 2
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 2
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 2
- 231100000852 glomerular disease Toxicity 0.000 description 2
- 238000001631 haemodialysis Methods 0.000 description 2
- 230000000322 hemodialysis Effects 0.000 description 2
- 238000010820 immunofluorescence microscopy Methods 0.000 description 2
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 2
- 239000003161 ribonuclease inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 230000002784 sclerotic effect Effects 0.000 description 2
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 2
- PGOHTUIFYSHAQG-LJSDBVFPSA-N (2S)-6-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-1-[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-sulfanylpropanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-4-carboxybutanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]hexanoic acid Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O PGOHTUIFYSHAQG-LJSDBVFPSA-N 0.000 description 1
- LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N (2r,3r,4s,5r,6s)-4,5-dimethoxy-2-(methoxymethyl)-3-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trimethoxy-6-(methoxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4,5,6-trimethoxy-2-(methoxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxane Chemical compound CO[C@@H]1[C@@H](OC)[C@H](OC)[C@@H](COC)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](OC)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OC)[C@H](OC)O[C@@H]2COC)OC)O[C@@H]1COC LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N 0.000 description 1
- WCOXQTXVACYMLM-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(12-hydroxyoctadecanoyloxy)propyl 12-hydroxyoctadecanoate Chemical compound CCCCCCC(O)CCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCC(O)CCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCC(O)CCCCCC WCOXQTXVACYMLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DBCAQXHNJOFNGC-UHFFFAOYSA-N 4-bromo-1,1,1-trifluorobutane Chemical compound FC(F)(F)CCCBr DBCAQXHNJOFNGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000004569 Blindness Diseases 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229920000623 Cellulose acetate phthalate Polymers 0.000 description 1
- 206010008111 Cerebral haemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 206010051055 Deep vein thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001856 Ethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N Ethyl cellulose Chemical compound CCOCC1OC(OC)C(OCC)C(OCC)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000000731 Fagus sylvatica Species 0.000 description 1
- 235000010099 Fagus sylvatica Nutrition 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 229920001499 Heparinoid Polymers 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- 208000005615 Interstitial Cystitis Diseases 0.000 description 1
- 102000012750 Membrane Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010090054 Membrane Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M Methacrylate Chemical compound CC(=C)C([O-])=O CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- VVQNEPGJFQJSBK-UHFFFAOYSA-N Methyl methacrylate Chemical compound COC(=O)C(C)=C VVQNEPGJFQJSBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000010780 Platelet-Derived Growth Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010038512 Platelet-Derived Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 208000026149 Primary peritoneal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 102000007000 Tenascin Human genes 0.000 description 1
- 108010008125 Tenascin Proteins 0.000 description 1
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 1
- 102100030859 Tissue factor Human genes 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 206010047249 Venous thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 239000012445 acidic reagent Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N aldehydo-D-glucuronic acid Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N 0.000 description 1
- 229930094280 aldehydo-D-xylose Natural products 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-VPENINKCSA-N aldehydo-D-xylose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-VPENINKCSA-N 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 230000000964 angiostatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003143 atherosclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013871 bee wax Nutrition 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 239000012166 beeswax Substances 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000004203 carnauba wax Substances 0.000 description 1
- 235000013869 carnauba wax Nutrition 0.000 description 1
- 229940081734 cellulose acetate phthalate Drugs 0.000 description 1
- 238000011281 clinical therapy Methods 0.000 description 1
- 239000012050 conventional carrier Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 210000005257 cortical tissue Anatomy 0.000 description 1
- NGDNCZPCIZNCQS-UHFFFAOYSA-N ctk3j8699 Chemical compound Cl=S NGDNCZPCIZNCQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MSJQCBORNZDNDU-UHFFFAOYSA-D decasodium 3-methoxy-6-[2-(6-methoxy-4,5-disulfonatooxyoxan-3-yl)oxy-5-[5-(5-methoxy-3,4-disulfonatooxyoxan-2-yl)oxy-3,4-disulfonatooxyoxan-2-yl]oxy-4-sulfonatooxyoxan-3-yl]oxy-4,5-disulfonatooxyoxane-2-carboxylate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].COC1COC(OC2COC(OC3COC(OC4COC(OC)C(OS([O-])(=O)=O)C4OS([O-])(=O)=O)C(OC4OC(C(OC)C(OS([O-])(=O)=O)C4OS([O-])(=O)=O)C([O-])=O)C3OS([O-])(=O)=O)C(OS([O-])(=O)=O)C2OS([O-])(=O)=O)C(OS([O-])(=O)=O)C1OS([O-])(=O)=O MSJQCBORNZDNDU-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 1
- 238000000326 densiometry Methods 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229940043249 elmiron Drugs 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019325 ethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001249 ethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- STVZJERGLQHEKB-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol dimethacrylate Substances CC(=C)C(=O)OCCOC(=O)C(C)=C STVZJERGLQHEKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000834 fixative Substances 0.000 description 1
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 1
- YQEMORVAKMFKLG-UHFFFAOYSA-N glycerine monostearate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC(CO)CO YQEMORVAKMFKLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SVUQHVRAGMNPLW-UHFFFAOYSA-N glycerol monostearate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO SVUQHVRAGMNPLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 239000002554 heparinoid Substances 0.000 description 1
- 229940025770 heparinoids Drugs 0.000 description 1
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 229940060367 inert ingredients Drugs 0.000 description 1
- 239000012442 inert solvent Substances 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 150000002734 metacrylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000014508 negative regulation of coagulation Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000035778 pathophysiological process Effects 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N periodic acid Chemical compound OI(=O)(=O)=O KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000193 polymethacrylate Polymers 0.000 description 1
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002250 progressing effect Effects 0.000 description 1
- 150000003214 pyranose derivatives Chemical group 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 230000001180 sulfating effect Effects 0.000 description 1
- 230000019635 sulfation Effects 0.000 description 1
- 238000005670 sulfation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000008364 tissue synthesis Effects 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 1
- 210000005239 tubule Anatomy 0.000 description 1
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 1
- 208000019206 urinary tract infection Diseases 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001221 xylan Polymers 0.000 description 1
- 150000004823 xylans Chemical class 0.000 description 1
- 238000007805 zymography Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
Description
1. Область изобретения
Изобретение относится к способам и фармацевтическим композициям, применяемым для лечения хронических прогрессирующих сосудистых заболеваний.1. Field of invention
The invention relates to methods and pharmaceutical compositions used for the treatment of chronic progressive vascular diseases.
2. Описание предшествующего уровня знаний
Хроническое прогрессирующее сосудистое заболевание (ХПСЗ) является осложнением некоторых наиболее обычных болезней, поражающих развитое общество, в том числе сахарного диабета, гипертензии, различных гиперлипидемий и т.п. Современные терапевтические способы воздействия, решающие проблемы ХПСЗ, нацелены на лежащие в их основе причины. К сожалению, для большей части ХПСЗ не существует способов лечения или их контроль является очень трудно осуществимым в общей массе населения. Кроме того, ХПСЗ часто является не только хорошо развившимся, но и далеко зашедшим (прогрессирующим) ко времени, когда лежащая в его основе причина становится объектом внимания медиков. Таким образом, остается лишь пытаться лечить вторичные осложнения, среди которых ХПСЗ является наиболее серьезным, поскольку оно ведет к почечной недостаточности, мозговым кровоизлияниям, сердечным болезням и слепоте.2. Description of prior knowledge
Chronic progressive vascular disease (CHD) is a complication of some of the most common diseases that affect a developed society, including diabetes mellitus, hypertension, various hyperlipidemia, etc. Modern therapeutic methods of treatment that solve the problems of chronic heart failure, are aimed at the underlying causes. Unfortunately, for the majority of HPSZ there are no treatment methods or their control is very difficult to implement in the general population. In addition, KHPSZ is often not only well developed, but also far advanced (progressing) by the time the underlying cause becomes the object of medical attention. Thus, it remains only to try to treat secondary complications, among which HPS is the most serious, since it leads to renal failure, cerebral hemorrhage, heart disease and blindness.
Как правило, ХПСЗ характеризуется изменением в клетках гладких мышц сосудов. Одним из основных изменений является увеличение количества и изменение типов соединительной ткани, которую они синтезируют. Это приводит к рубцеванию и заметным изменениям функции. В кровеносных сосудах это приводит к потере эластичности, что ведет к тому, что сосуды не растягиваются и не сокращаются и имеют утолщенные стенки и суженные просветы. Конечным результатом является уменьшенный кровоток или полная его блокада. Примерами сосудистых заболеваний, характеризующихся этими патофизиологическими процессами, являются хроническое прогрессирующее гломерулярное заболевание, например вызываемый диабетом гломерулосклероз (рубцевание); прогрессирующая почечная недостаточность после трансплантации почек; окклюзия шунтов, применяемых для обеспечения доступа к сосудам у больных с конечной стадией почечной недостаточности, подвергаемых лечению посредством гемодиализа; другие хронические заболевания малых кровеносных сосудов (например, у некоторых больных с гипертензией); рецидив стеноза у больных, подвергнутых коронарному шунтированию и диабетическая ретинопатия. As a rule, HPSZ is characterized by a change in the cells of the smooth muscles of blood vessels. One of the main changes is the increase in the number and change in the types of connective tissue that they synthesize. This leads to scarring and noticeable changes in function. In blood vessels, this leads to a loss of elasticity, which leads to the fact that the vessels do not stretch and contract, and have thickened walls and narrowed lumens. The end result is reduced blood flow or complete blockage. Examples of vascular diseases characterized by these pathophysiological processes are chronic progressive glomerular disease, for example, diabetes-caused glomerulosclerosis (scarring); progressive renal failure after kidney transplantation; occlusion of shunts used to provide access to vessels in patients with end-stage renal failure, treated by hemodialysis; other chronic diseases of small blood vessels (for example, in some patients with hypertension); relapse of stenosis in patients undergoing coronary artery bypass grafting and diabetic retinopathy.
Терапевтической целью любого способа лечения для ХПСЗ должно быть уменьшение уже образованного избытка экстрацеллюлярного матрикса (рубцевания) для восстановления нормальной проходимости сосудов и функции. Однако в настоящее время нет прямого способа противодействия нарушениям в метаболизме ткани гладких мышц или модулирования синтеза соединительной ткани, несмотря на их важность в хроническом прогрессирующем заболевании. Прогрессирование подобных заболеваний считается как неизбежным, так и необратимым. The therapeutic goal of any treatment for HPS should be to reduce the already formed excess of extracellular matrix (scarring) to restore normal vascular patency and function. However, there is currently no direct way to counteract disturbances in smooth muscle tissue metabolism or modulate connective tissue synthesis, despite their importance in a chronic progressive disease. The progression of such diseases is considered both inevitable and irreversible.
Было обнаружено, что гепарин и некоторые его аналоги ингибируют пролиферацию клеток гладких мышц (см., например, Castellot et al., J.Cell Biol., 102: 1979-1984, 1986). Однако эти открытия применялись только для предотвращения сосудистых заболеваний, как правило, с использованием парентерального введения, но не для лечения и обратного развития установленных повреждений. Поскольку менее 50% больных подвержены опасности развития ХПСЗ и невозможно предсказать, кто из них действительно подвергнется этим заболеваниям и как быстро эти заболевания будут прогрессировать, профилактическая терапевтическая стратегия является непригодной. Кроме того, ежедневные инъекции для доставки лекарственных средств, кроме жизненно необходимых лекарственных средств (таких как инсулин), являются неприемлемыми для большинства больных. Поэтому особенно важно разработать режим лечения для ХПСЗ, предпочтительно с применением перорального введения фармацевтического средства низкой токсичности, которое эффективно в лечении и обратном развитии ХПСЗ посредством обратного развития и деградации развившихся повреждений. It was found that heparin and some of its analogues inhibit the proliferation of smooth muscle cells (see, for example, Castellot et al., J. Cell Biol., 102: 1979-1984, 1986). However, these findings were used only to prevent vascular diseases, usually using parenteral administration, but not for the treatment and reverse development of established lesions. Since less than 50% of patients are at risk of developing CHD and it is impossible to predict which of them will actually suffer from these diseases and how quickly these diseases will progress, a preventive therapeutic strategy is unsuitable. In addition, daily injections for drug delivery, other than essential medicines (such as insulin), are unacceptable to most patients. Therefore, it is especially important to develop a treatment regimen for CPVD, preferably using an oral administration of a low toxicity pharmaceutical agent that is effective in treating and reversing the development of CPVD through the reverse development and degradation of developed lesions.
Пентозанполисульфат (ППС) представляет собой высокосульфатированный полусинтетический полисахарид с молекулярной массой в диапазоне от приблизительно 1500 до 6000 дальтон в зависимости от способа выделения. ППС может находиться в том же самом общем классе, что и гепарины и гепариноиды, но имеется ряд различий в химической структуре, способах образования производных и физико-химических свойствах между ППС и гепарином. В то время как гепарин обычно выделяют из тканей млекопитающих, таких как говяжьи и свиные мышцы, печень и кишечник, ППС является полусинтетическим соединением, полисахаридный каркас которого - ксилан экстрагируют из коры бука или других растительных источников и затем обрабатывают сульфатирующими агентами, такими как хлорсуль-фоновая кислота или сульфурилтрихлорид и кислота. После сульфатирования ППС обычно обрабатывают гидроксидом натрия с получением соли натрия. Pentosan polysulfate (PPS) is a highly sulfated semi-synthetic polysaccharide with a molecular weight in the range of about 1500 to 6000 daltons, depending on the isolation method. PPS can be in the same general class as heparins and heparinoids, but there are a number of differences in the chemical structure, methods of derivatization, and physicochemical properties between PPS and heparin. While heparin is usually isolated from mammalian tissues such as beef and pork muscles, liver and intestines, PPS is a semisynthetic compound whose polysaccharide framework, xylan, is extracted from beech bark or other plant sources and then treated with sulfating agents such as chlorosulphur background acid or sulfuryl trichloride and acid. After sulfation, PPPs are usually treated with sodium hydroxide to give a sodium salt.
Как иллюстрируется следующими формулами,
гепарин представляет собой сульфатированный полимер повторяющихся двойных сахарных мономеров, (D)-глюкозамина и (D)-глюкуроновой кислоты (оба являются 6-углеродными гексозными сахарами) с аминогруппой на глюкозамине; ППС представляет собой сульфатированный линейный полимер повторяющихся одиночных мономеров (D)-ксилозы, 5-углеродного пентозного сахара в форме его пиранозного кольца. В то время как гепарин вращает плоскополяризованный свет в направлении правого вращения, ППС вращает свет в направлении левого вращения.As illustrated by the following formulas,
heparin is a sulfated polymer of repeating double sugar monomers, (D) -glucosamine and (D) -glucuronic acid (both are 6-carbon hexose sugars) with an amino group on glucosamine; PPS is a sulfated linear polymer of repeating single monomers of (D) xylose, 5-carbon pentose sugar in the form of its pyranose ring. While heparin rotates plane-polarized light in the direction of right rotation, PPP rotates light in the direction of left rotation.
Что касается биологических свойств, ППС пролонгирует парциальное тромбопластиновое время и он был использован для предотвращения глубокого венозного тромбоза, однако он имеет только приблизительно одну пятнадцатую антикоагулянтной активности гепарина (см. для общего сведения Wardle, J.Int. Med.Res., 20:361-370, 1992). Было обнаружено, что ППС применим в лечении инфекций мочевых путей и интерстициального цистита (U.S. Pat. N 5180715) и в сочетании с ангиостатическим стероидом - в задержке развития кровеносных сосудов и капилляров, подтекания клеток или мембран (U.S. Pat. N 4820693). In terms of biological properties, PPS prolongs partial thromboplastin time and has been used to prevent deep venous thrombosis, however, it has only about one-fifteenth of the anticoagulant activity of heparin (see Wardle, J. Int. Med. Res., 20: 361 for general information) -370, 1992). It was found that PPS is applicable in the treatment of urinary tract infections and interstitial cystitis (U.S. Pat. N 5180715) and in combination with an angiostatic steroid - in the delay in the development of blood vessels and capillaries, leakage of cells or membranes (U.S. Pat. N 4820693).
Некоторые исследования показали, что ППС ингибирует пролиферацию клеток гладких мышц и уменьшает гиперлипидемию, и на этом основании предположили, что ППС может быть профилактически применим в ограничении атеросклеротического образования тромбоцитов, ингибировании пролиферации мезангиальных клеток и предотвращении образования коллагена и гломерулосклероза (Paul et al., Thromb.Res. 16:793-801, 1987; Wardle, ibid). Однако никто ранее не считал, что он пригоден для обращения развития рубцевания сосудов, т. е. ППС не рассматривался в этом контексте. Some studies have shown that PPS inhibits smooth muscle cell proliferation and reduces hyperlipidemia, and on this basis it was suggested that PPS could be prophylactically used to limit atherosclerotic platelet formation, inhibit mesangial cell proliferation and prevent collagen formation and glomerulosclerosis (Paul et al., Thromb. .Res. 16: 793-801, 1987; Wardle, ibid.) However, no one previously believed that it was suitable for reversing the development of vascular scarring, i.e., PPP was not considered in this context.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Цели изобретения
Целью данного изобретения является обеспечение способа лечения ХПСЗ не только для задержки развития болезни, но и для фактического обратного хода заболевания и обеспечения регресса существующего рубцевания или повреждений. Следующей целью данного изобретения является обеспечение способа лечения с использованием коммерчески доступного фармацевтического средства, которое можно вводить общепринятыми способами, которое является нетоксичным и не индуцирует серьезных побочных эффектов и является высокоэффективным в лечении ХПСЗ.SUMMARY OF THE INVENTION
1. Objectives of the invention
The aim of this invention is the provision of a method for the treatment of HPSZ not only to delay the development of the disease, but also to actually reverse the disease and to ensure the regression of existing scarring or damage. A further object of the present invention is to provide a treatment method using a commercially available pharmaceutical agent that can be administered by conventional methods, which is non-toxic and does not induce serious side effects and is highly effective in the treatment of chronic heart failure.
2. Краткое описание изобретения
В соответствии с этими целями и другими целями, которые станут очевидными в дальнейшем, данное изобретение заключается, вкратце, в способе лечения больного-млекопитающего, страдающего от ХПСЗ, для остановки прогрессирования заболевания и индуцирования рассасывания уже образованных рубцов или фиброзных образований в пораженном органе или сосудистой сети, причем этот способ состоит во введении больному фармацевтической композиции, содержащей эффективное для лечения сосудистого заболевания количество пентозанполисульфата или его фармацевтически приемлемой соли. Пероральное введение ППС, например, в форме таблеток, капсул или жидкостей является предпочтительным способом введения.2. Summary of invention
In accordance with these goals and other objectives that will become apparent in the future, this invention consists, briefly, in a method of treating a sick mammal suffering from HPS, to stop the progression of the disease and induce resorption of already formed scars or fibrous formations in the affected organ or vascular network, and this method consists in introducing to the patient a pharmaceutical composition containing an effective amount of pentosan polysulfate or its headlights for the treatment of vascular disease atsevticheski acceptable salt thereof. Oral administration of PPP, for example, in the form of tablets, capsules or liquids, is the preferred route of administration.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ РИСУНКОВ
Фиг. 1 показывает количественное определение мРНК коллагена α1IV при помощи конкурентной ПЦР на 1/10 клубочка из нормальной пятинедельной мыши (как описано в Примере 1 ниже) с изображением:
а) в верхней части - схемы реакции и соответствующего окрашенного этидийбромидом геля после ПЦР-амплификации;
и
b) в нижней части графического построения - отношения мутантной кДНК коллагена на клубочек в зависимости от количества мутантной кДНК, помещенного в каждую из девяти пробирок, содержащих все реагенты ПЦР.BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS
FIG. 1 shows a quantitative determination of collagen mRNA α 1 IV using competitive PCR for 1/10 glomerulus from a normal five-week-old mouse (as described in Example 1 below) with the image:
a) in the upper part - reaction schemes and the corresponding gel stained with ethidium bromide after PCR amplification;
and
b) at the bottom of the graphical plot, the ratios of the mutant collagen cDNA to the glomerulus depending on the amount of mutant cDNA placed in each of nine tubes containing all PCR reagents.
Фиг.2 изображает:
a) в ее верхней части - окрашенные РАS срезы почки из двух образцов нефрэктомии с раком почки (А - гистология нормального клубочка; В - выраженный склероз);
b) в средней части (C-D) - иммунофлуоресцентную микроскопию, антитела к коллагену типа IV в тех же самых почках; и
с) в нижней части (Е) - диаграмму в виде столбцов, показывающую индекс склероза в тех же самых почках; кДНК коллагена α2IV определяли количественно при помощи конкурентной ПЦР в пулах из 50 микропрепарированных клубочков (величины: 145±22 против 1046±74•10-4 attomoles/ клубочек).Figure 2 depicts:
a) in its upper part - PAS-stained sections of the kidney from two nephrectomy specimens with kidney cancer (A - normal glomerulus histology; B - severe sclerosis);
b) in the middle part (CD) - immunofluorescence microscopy, antibodies to type IV collagen in the same kidneys; and
c) in the lower part (E) is a column chart showing the sclerosis index in the same kidneys; Collagen cDNA α 2 IV was quantified by competitive PCR in pools of 50 microprepaired glomeruli (values: 145 ± 22 versus 1046 ± 74 • 10-4 attomoles / glomeruli).
Фиг. 3 является диаграммой в виде столбцов, изображающей индекс склероза в почках пяти больных людей без гломерулосклероза по сравнению с пятью больными со склерозом, выраженный в виде относительных количеств гломерулярных клеток и в виде уровней кДНК коллагена α2IV.
Фиг. 4 является диаграммой в виде столбцов, изображающей отношения мРНК коллагенов α2α3IV из больных людей с мембранозным гломерулонефритом (MN) и диабетической нефропатией (DM) и из нефрэктомий с гломерулосклерозом(NX GS) и без гломерулосклероза (NX N 1).FIG. 3 is a bar chart showing the sclerosis index in the kidneys of five sick people without glomerulosclerosis compared to five patients with sclerosis, expressed as relative amounts of glomerular cells and as collagen cDNA levels α 2 IV.
FIG. 4 is a bar chart depicting the ratios of collagen mRNA α 2 α 3 IV from sick people with membranous glomerulonephritis (MN) and diabetic nephropathy (DM) and from nephrectomy with glomerulosclerosis (NX GS) and without glomerulosclerosis (NX N 1).
Фиг. 5 является диаграммой в виде столбцов, изображающей действие ППС на синтез ДНК в нормальных мезангиальных клетках, определенный по включению меченного тритием тимидина (24 часа инкубации) и представленный в виде количества импульсов в минуту на 103 клеток против концентрации ППС в мкг/мл.FIG. 5 is a bar chart depicting the effect of PPS on DNA synthesis in normal mesangial cells, determined by the inclusion of tritium-labeled thymidine (24 hours incubation) and presented as pulses per minute per 10 3 cells versus the concentration of PPS in μg / ml.
Фиг. 6 является диаграммой в виде столбцов, изображающей действие ППС на клеточный рост в нормальных мезангиальных клетках, построенной в виде числа клеток после трех дней инкубации против добавленной концентрации ППС в мкг/мл. FIG. 6 is a bar chart depicting the effect of PPS on cell growth in normal mesangial cells, plotted as the number of cells after three days of incubation against the added concentration of PPS in μg / ml.
Фиг. 7 является диаграммой в виде столбцов, изображающей сравнение действий ППС и гепарина (с необработанной контрольной группой) на клеточный рост в нормальных мезангиальных клетках после трех и пяти дней инкубации. FIG. 7 is a bar chart depicting a comparison of the effects of PPS and heparin (with an untreated control group) on cell growth in normal mesangial cells after three and five days of incubation.
Фиг. 8 является диаграммой в виде столбцов, изображающей пролиферацию нормальных мезангиальных клеток во времени в клетках, инкубированных с сывороткой и ППС, в сравнении с контрольными клетками, инкубированными только с сывороткой. FIG. 8 is a bar chart depicting the proliferation of normal mesangial cells over time in cells incubated with serum and PPS, compared to control cells incubated with serum only.
Фиг. 9 является таблицей величин мРНК из слоев нормальных мезангиальных клеток, экспонированных с ППС (100 мкг/мл) в течение различных периодов времени и обратнотранскрибированных, отражающих увеличение, уменьшение или отсутствие изменения в уровнях мРНК коллагенов α1IV и α1I, мРНК коллагеназ (металлопротеиназ) 72 кДа и 92 кДа мРНК фактора роста TGF-β и мРНК клеточного белка β-актина.FIG. 9 is a table of mRNA values from layers of normal mesangial cells exposed with PPS (100 μg / ml) for various periods of time and reverse transcribed, reflecting an increase, decrease or absence of changes in the mRNA levels of collagen α 1 IV and α 1 I, mRNA collagenases ( metalloproteinases) 72 kDa and 92 kDa mRNA of growth factor TGF-β and mRNA of cell protein β-actin.
Фиг. 10 является диаграммой в виде столбцов, изображающей индекс гломерулярного мечения (в процентах меченых клеток) в почечных клубочках GH-трансгенных мышей, которым вводили ППС с водой для питья, по сравнению с клубочками из контрольных мышей, получавших необработанную воду. FIG. 10 is a bar chart depicting the glomerular labeling index (percent of labeled cells) in the renal glomeruli of GH transgenic mice injected with drinking water PPP compared to glomeruli from control mice receiving untreated water.
Фиг.11 изображает результаты конкурентных ПЦР-анализов с различными типами коллагена, коллагеназами и гликопротеинами базальной мембраны в клубочках получавших ППС GH-трансгенных мышей, полученные с использованием лазерного денситометра. 11 depicts the results of competitive PCR analyzes with various types of collagen, collagenases and glycoproteins of the basement membrane in glomeruli treated with PPS GH transgenic mice obtained using a laser densitometer.
Фиг. 12 изображает результаты конкурентных ПЦР-анализов с различными факторами роста и белками актина в клубочках получавших ППС GH-трансгенных мышей, полученные с использованием лазерного денситометра. FIG. 12 depicts the results of competitive PCR assays with various growth factors and actin proteins in glomeruli treated with PPS GH transgenic mice obtained using a laser densitometer.
Фиг. 13 является диаграммой в виде столбцов, изображающей сравнение относительных количеств мРНК коллагена α1IV, выделяемых клубочками GH-трансгенных мышей, которым вводили ППС в воде для питья, с контрольной группой необработанных (не получавших ППС) мышей.FIG. 13 is a bar chart depicting a comparison of the relative amounts of collagen α 1 IV mRNA secreted by glomeruli of GH transgenic mice that were administered PPS in drinking water with a control group of untreated (non-PPS) mice.
Фиг.14 является диаграммой в виде столбцов, изображающей сравнение относительных количеств мРНК ламинина В1,выделяемых клубочками (а) четырех GH-трансгенных мышей, получавших ППС в воде для питья (2 в течение двух недель и 2 в течение 4 недель), b) контрольной группы необработанных мышей и с) двух мышей, получавших ППС в течение 4 недель.Fig. 14 is a bar chart depicting a comparison of the relative amounts of laminin B 1 mRNA secreted by the glomeruli (a) of four GH transgenic mice treated with PPS in drinking water (2 for two weeks and 2 for 4 weeks), b a) a control group of untreated mice; and c) two mice treated with PPP for 4 weeks.
Фиг.15 является диаграммой в виде столбцов, изображающей сравнение относительных количеств мРНК тромбоцитарного фактора роста PDGF-B, выделяемых клубочками GH-трансгенных мышей, которым вводили ППС в воде для питья, с группой необработанных (не получавших ППС) мышей. Fig. 15 is a bar chart depicting a comparison of the relative amounts of platelet-derived growth factor PDGF-B mRNA secreted by glomeruli of GH transgenic mice injected with PPS in drinking water to a group of untreated (non-PPS) mice.
Фиг.16 является диаграммой в виде столбцов, изображающей сравнение относительных количеств мРНК фактора роста TGF-β, выделяемых клубочками GH-трансгенных мышей, которым вводили ППС в воде для питья, с группой необработанных мышей. Fig. 16 is a bar chart depicting a comparison of the relative amounts of TGF-β growth factor mRNA secreted by glomeruli of GH transgenic mice injected with PPS in drinking water to a group of untreated mice.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Данное изобретение относится к способу лечения пациента-млекопитающего, страдающего от хронического прогрессирующего сосудистого заболевания (ХПСЗ), характеризующегося рубцеванием и/или фиброзом пораженного органа или сосудистой сети, для остановки прогрессирования этого заболевания и индукции рассасывания уже образованных рубцов и фиброзных образований. Рассматриваемый способ состоит во введении больному фармацевтической композиции, содержащей эффективное для лечения сосудистого заболевания количество пентозанполисульфата (ППС) или его фармацевтически приемлемой соли.DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
This invention relates to a method for treating a mammalian patient suffering from chronic progressive vascular disease (CHD), characterized by scarring and / or fibrosis of an affected organ or vasculature, to stop the progression of this disease and to induce resorption of already formed scars and fibrous formations. The method under consideration consists in administering to the patient a pharmaceutical composition containing an effective amount of pentosan polysulfate (PPS) or a pharmaceutically acceptable salt thereof for the treatment of vascular disease.
К заболеваниям, которые можно лечить в соответствии с новым способом, относятся, но не ограничены ими, хроническое прогрессирующее заболевание почечных крубочков, в том числе индуцируемый диабетом гломерулосклероз (рубцевание); прогрессирующая почечная недостаточность после трансплантации почек; окклюзия шунтов, применяемых для обеспечения доступа к сосудам, у больных с конечной стадией болезни почек, подвергаемых лечению посредством гемодиализа; другие хронические заболевания малых кровеносных сосудов (например, у некоторых больных с гипертензией); рецидив стеноза у больных, подвергнутых коронарному шунтированию и диабетическая ретинопатия. Diseases that can be treated in accordance with the new method include, but are not limited to, a chronic progressive disease of the renal tubules, including diabetes-induced glomerulosclerosis (scarring); progressive renal failure after kidney transplantation; occlusion of shunts used to provide access to vessels in patients with end-stage kidney disease treated by hemodialysis; other chronic diseases of small blood vessels (for example, in some patients with hypertension); relapse of stenosis in patients undergoing coronary artery bypass grafting and diabetic retinopathy.
Фраза "эффективное для лечения сосудистого заболевания количество" в применении здесь относится к количеству ППС или его соли, включенному в фармацевтическую композицию, которое эффективно при введении один или несколько раз в день в течение предписанного периода времени в остановке и обратном развитии прогрессирующих симптомов ХПСЗ, характеризующегося рубцеванием. В случае больных людей общая суточная доза от около 50 до около 1200 мг и более предпочтительно от около 100 до около 600 мг, ППС, вводимая в виде 1-4 поровну разделенных доз, является эффективной в достижении терапевтической цели лечения и обратного развития ХПСЗ. В более мелких млекопитающих диапазон доз может быть снижен в соответствии с весом тела, видом животного и характером патологического состояния. Однако данное изобретение не ограничено в отношении какого-либо специфического диапазона доз ППС, а вместо этого включает в себя в общем введение ППС в качестве активного фармацевтического агента для лечения ХПСЗ у млекопитающих. The phrase “effective amount for the treatment of a vascular disease” as used herein refers to the amount of PPS or its salt included in a pharmaceutical composition that is effective when administered once or several times a day for a prescribed period of time in stopping and reversing the development of progressive symptoms of chronic heart failure, characterized by scarring. In the case of sick people, the total daily dose of from about 50 to about 1200 mg, and more preferably from about 100 to about 600 mg, PPS, administered in the form of 1-4 equally divided doses, is effective in achieving the therapeutic goal of treatment and reverse development of ChPS. In smaller mammals, the dose range can be reduced in accordance with body weight, type of animal and the nature of the pathological condition. However, the present invention is not limited with respect to any specific dose range of PPPs, but instead generally includes the administration of PPP as an active pharmaceutical agent for the treatment of CPHD in mammals.
Предпочтительным вариантом нового способа лечения является введение больному фармацевтической композиции, содержащей эффективное количество ППС и по меньшей мере одного фармацевтически приемлемого инертного ингредиента. Композиция может быть в любой стандартной фармацевтической дозированной форме, но предпочтительно в перорально вводимой дозированной форме. A preferred embodiment of the new treatment method is to administer to a patient a pharmaceutical composition comprising an effective amount of PPP and at least one pharmaceutically acceptable inert ingredient. The composition may be in any standard pharmaceutical dosage form, but preferably in an orally administered dosage form.
Дозированные формы для пероральной доставки могут представлять собой обычные таблетки, таблетки с оболочкой, капсулы или миникапсулы, таблетки, капсулы или миникапсулы с замедленным высвобождением активного начала, лепешки, жидкости, эликсиры или любая другая дозированная форма для перорального введения, известная в фармацевтике. Dosage forms for oral delivery can be conventional tablets, coated tablets, capsules or minicapsules, tablets, capsules or minicapsules with sustained release of the active principle, lozenges, liquid, elixirs, or any other oral dosage form known in the pharmaceutical art.
В качестве фармацевтически приемлемых инертных ингредиентов рассматриваются наполнители, связующие вещества, растворители и т.д., которые не препятствуют активности ППС в лечении ХПСЗ. Могут быть также использованы, если желательно, такие наполнители, как глины и кремнийсодержащая земля (кремнезем), для придания требуемого размера дозированной форме. As pharmaceutically acceptable inert ingredients, excipients, binders, solvents, etc. are considered that do not interfere with the activity of PPS in the treatment of ChPS. Excipients such as clays and siliceous earth (silica) may also be used, if desired, to give the desired size to the dosage form.
Дальнейшие ингредиенты, такие как заполнители и носители, могут быть необходимыми для придания желательных физических свойств дозированной форме. Такими физическими свойствами являются, например, скорость высвобождения, структура и размер. Примерами заполнителей и носителей, применимых в пероральных дозированных формах, являются воски, такие как пчелиный воск, касторовый воск, гликовоск и воск карнаубы, целлюлозные соединения, такие как метилцеллюлоза, этилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза, ацетатфталат целлюлозы, гидроксипропилцеллюлоза и гидроксипропилметилцеллюлоза, поливинилхлорид, поливинилпирролидон, стеариловый спирт, моностеарат глицерина, соединения метакрилата, такие как полиметакрилат, метилметакрилат и этиленгликольдиметакрилат, полиэтиленгликоль и гидрофильные камеди. Further ingredients, such as fillers and carriers, may be necessary to impart the desired physical properties to the dosage form. Such physical properties are, for example, release rate, structure and size. Examples of excipients and carriers useful in oral dosage forms are waxes such as beeswax, castor wax, glyca wax and carnauba wax, cellulosic compounds such as methyl cellulose, ethyl cellulose, carboxymethyl cellulose, cellulose acetate phthalate, hydroxypropyl cellulylpropylpropylmethylpropylmethylphenylpropylmethylpropylmethylpropylmethyl alcohol, glycerol monostearate, methacrylate compounds such as polymethacrylate, methyl methacrylate and ethylene glycol dimethacrylate, polyethylene glycol and a guide mild gums.
Желательно, чтобы в композициях данного изобретения активный ингредиент ППС присутствовал в количестве между приблизительно 50 и приблизительно 300 мг на стандартную дозу. Точная доза, вводимая каждому пациенту, будет зависеть от состояния, которое подвергается лечению, и физических характеристик пациента, таких как возраст и вес тела. Preferably, in the compositions of this invention, the active ingredient of the PPP is present in an amount between about 50 and about 300 mg per unit dose. The exact dose administered to each patient will depend on the condition being treated and the physical characteristics of the patient, such as age and body weight.
Активным фармацевтическим ингредиентом может быть ППС или его фармацевтически приемлемая соль, например натриевая соль. Одной из предпочтительных пероральных дозированных форм для использования в способе данного изобретения являются желатиновые капсулы ElmironR (Baker Norton Pharmaceuticals, Inc., Miami, Florida), которые содержат 100 мг натриевой соли ППС и в качестве наполнителей - микрокристаллическую целлюлозу и стеарат магния.The active pharmaceutical ingredient may be PPP or a pharmaceutically acceptable salt thereof, for example a sodium salt. One of the preferred oral dosage forms for use in the method of this invention are Elmiron R gelatin capsules (Baker Norton Pharmaceuticals, Inc., Miami, Florida), which contain 100 mg of PPS sodium salt and microcrystalline cellulose and magnesium stearate as fillers.
Хотя пероральный путь введения является предпочтительным, данный способ лечения включает также введение ППС или его соли парентеральным, трансдермальным способами, через слизистую оболочку или другими способами введения, известными и обычно применяемыми в области медицины и фармацевтики. Подобным образом композиции данного изобретения могут включать ППС в фармацевтически приемлемых парентеральных, трансдермальных, трансмукозных или других общепринятых носителях и дозированных формах вместе с пригодными инертными растворителями, наполнителями и добавками. Много примеров таких фармацевтически приемлемых носителей можно найти в Remington's Pharmaceutical Sciences (17th edition (1985)) и других стандартных руководствах. Какой бы путь введения или тип фармацевтической дозированной формы не использовали, диапазон доз для ППС в качестве активного ингредиента равен от приблизительно 50 до приблизительно 1200 мг/день и предпочтительно от приблизительно 100 до приблизительно 600 мг/день, хотя при парентеральном введении, возможно, приемлемыми были бы дозовые количества, приближающиеся к нижней границе этого диапазона. Although an oral route of administration is preferred, this method of treatment also includes the administration of PPS or its salt by parenteral, transdermal methods, through the mucous membrane, or other methods of administration known and commonly used in the field of medicine and pharmaceuticals. Similarly, the compositions of this invention may include PPPs in pharmaceutically acceptable parenteral, transdermal, transmucosal or other conventional carriers and dosage forms together with suitable inert solvents, excipients and additives. Many examples of such pharmaceutically acceptable carriers can be found in Remington's Pharmaceutical Sciences (17th edition (1985)) and other standard manuals. Whatever route of administration or type of pharmaceutical dosage form is used, the dose range for PPPs as active ingredient is from about 50 to about 1200 mg / day, and preferably from about 100 to about 600 mg / day, although parenteral administration may be acceptable there would be dose amounts approaching the lower limit of this range.
Фармацевтические композиции, применяемые в способе данного изобретения, могут включать активные ингредиенты, иные, чем ППС или соль ППС, например другие агенты, которые могут быть ценными в лечении ХПСЗ. The pharmaceutical compositions used in the method of this invention may include active ingredients other than PPS or a salt of PPS, for example, other agents that may be valuable in the treatment of CPVD.
Новый способ делает возможным удобное, безопасное и эффективное лечение пациентов, страдающих от различных форм ХПСЗ, которые во многих случаях могут быть угрожающими для жизни или для органа. При помощи обсуждаемого способа фармацевтический агент, имеющий доказанную низкую токсичность и низкую частоту побочных эффектов, может быть использован не только для остановки неумолимого, как считали ранее, прогрессирования хронического сосудистого заболевания, но и для фактической деградации уже образованных рубцов и повреждений для восстановления нормального раскрытого состояния сосудов и функции. The new method makes it possible to conveniently, safely and effectively treat patients suffering from various forms of chronic heart failure, which in many cases can be life threatening or organ. Using the method under discussion, a pharmaceutical agent having a proven low toxicity and low incidence of side effects can be used not only to stop the inexorable, as previously thought, progression of chronic vascular disease, but also to actually degrade already formed scars and injuries to restore the normal open state blood vessels and function.
Следующие далее примеры включают (а) описания экспериментов, уже опубликованных в медицинской литературе, которые подтверждают возможность использования некоторых способов конкурентной ПЦР (полимеразной цепной реакции) для определения количества мРНК коллагена рубцового типа и родственных факторов в клубочках и которые демонстрируют, что относительные количества гломерулярных клеток не коррелируют с уровнями коллагена рубцового типа, и (b) эксперименты, проведенные заявителями или под руководством заявителей, которые демонстрируют in vitro u in vivo эффективность ППС в отрицательной регуляции образования коллагена рубцового типа и факторов роста клеток и положительной регуляции активности коллагеназы в отношении деградации существующих отложений коллагена рубцов. Однако эти примеры не предназначены для изложения материалов, способов или диапазонов доз, которые должны быть использованы в практике данного изобретения или для какого-либо ограничения изобретения. The following examples include (a) descriptions of experiments already published in the medical literature that confirm the possibility of using some competitive PCR (polymerase chain reaction) methods to determine the amount of scar type collagen mRNA and related factors in glomeruli and which demonstrate that the relative numbers of glomerular cells do not correlate with cicatricial collagen levels, and (b) experiments conducted by applicants or under the supervision of applicants who demonstrate in vitro and in vivo, the effectiveness of PPS in the negative regulation of the formation of cicatricial collagen and cell growth factors and the positive regulation of collagenase activity in relation to the degradation of existing scar collagen deposits. However, these examples are not intended to describe the materials, methods, or dose ranges that should be used in the practice of the present invention or for any limitation of the invention.
ПРИМЕР 1
Определение количества коллагена
Как описано в Peten et al., Am.J.Physiol., 32: F951-957 (1992), коллаген α1IV и α2IV в мышиных почечных клубочках может быть определен количественно следующим способом: определенное количество кДНК, представляющее мРНК в 1/10 клубочка из нормальной пятинедельной мыши, и стандартное количество праймеров коллагена α1IV и α2IV добавляли к каждой из нескольких пробирок, содержащих все реагенты ПЦР из набора для амплификации ДНК GeneAmp (Реrkin-Elmer Cetus, Norwalk, Connecticut). Серийные разведения мутированной кДНК, содержащей либо новый сайт расщепления рестриктазой, либо делецию, добавляли к этой смеси перед амплификацией (схема, показанная в верхней части Фиг.1). Концентрации мутанта определяли в предварительном эксперименте, спланированном для включения в него зоны эквивалентности (y=1).EXAMPLE 1
Collagen Determination
As described in Peten et al., Am. J. Physiol. 32: F951-957 (1992), collagen α 1 IV and α 2 IV in murine renal glomeruli can be quantified by the following method: a certain amount of cDNA representing mRNA in 1/10 glomerulus from a normal five-week-old mouse, and a standard number of α 1 IV and α 2 IV collagen primers were added to each of several tubes containing all PCR reagents from the GeneAmp DNA amplification kit (Perkin-Elmer Cetus, Norwalk, Connecticut). Serial dilutions of a mutated cDNA containing either a new restriction enzyme cleavage site or a deletion were added to this mixture before amplification (diagram shown at the top of FIG. 1). Mutant concentrations were determined in a preliminary experiment planned to include an equivalence zone (y = 1).
После ПЦР-амплификации всю реакционную смесь наносили непосредственно на 4% агарозный гель (NuSieve:Seakem (3:1) (FMS Bioproducts, Rockland, ME) в приборе для гелей Н5 Horizon (Life Technologies) и подвергали электрофорезу. Полосы ДНК визуализировали окрашиванием этидийбромидом и трансосвещением ультрафиолетовым светом. Были сделаны фотографии с позитивной/негативной пленками 55 Поляроида (Polaroid, Cambridge, МА) (см. среднюю часть Фиг.1). Негативы гелей сканировали при помощи одномерной лазерной денситометрии для конкурентных ПЦР-анализов (Shimadzu; Scientific Instruments, Columbia, MD). After PCR amplification, the entire reaction mixture was applied directly to a 4% agarose gel (NuSieve: Seakem (3: 1) (FMS Bioproducts, Rockland, ME) in a Horizon H5 gel device (Life Technologies) and subjected to electrophoresis. DNA bands were visualized by staining with ethidium bromide and trans-illumination with ultraviolet light. Photos were taken with positive / negative films of 55 Polaroid (Polaroid, Cambridge, MA) (see the middle part of Figure 1). Negatives of the gels were scanned using one-dimensional laser densitometry for competitive PCR analyzes (Shimadzu; Scientific Instruments Columbia, MD).
Рассчитывали денситометрические величины тест-полосы и мутантной полосы (полос), и их отношение для каждой реакционной пробирки строили в виде графика в зависимости от количества добавленной мутантной матрицы (нижняя часть Фиг. 1). Для мутанта коллагена α2IV измеренную интенсивность денситометрической полосы корректировали при помощи фактора 562/479 перед построением отношения мутант/тест-полоса. Для полос мутанта α1IV их денситометрические величины прибавляли перед делением на величину полосы дикого типа (тест-полосы). Была начерчена прямая линия с применением линейного регрессионного анализа. Было рассчитано, что количество кДНК в тест-пробе равнялось количеству, при котором отношение плотность полосы мутанта/плотность тест-полосы было равно 1. Конкуретные ПЦР-анализы проводили в двух или трех повторностях.The densitometric values of the test strip and the mutant band (s) were calculated, and their ratio for each reaction tube was plotted as a function of the amount of added mutant matrix (lower part of Fig. 1). For collagen mutant α 2 IV, the measured intensity of the densitometric band was corrected using factor 562/479 before constructing the mutant / test strip ratio. For mutant bands of α 1 IV, their densitometric values were added before dividing by the size of the wild-type band (test strip). A straight line was drawn using linear regression analysis. It was calculated that the amount of cDNA in the test sample was equal to the number at which the ratio of the mutant band density / test strip density was 1. Competitive PCR analyzes were performed in two or three replicates.
ПРИМЕР 2
Изменения в склеротических клубочках
Как описано в Peten et al., Exp.Med., 176:1571-1576 (1992), пациенты-люди получали образцы односторонней нефрэктомии с раком почек. Пациенты не имели в анамнезе диабета, гипертензии или других системных заболеваний, связанных с гломерулярным заболеванием. Пробы кортикальной ткани, удаленной от явной опухоли, помещали в фиксатор Карноя, заливали в метакрилат или парафин и срезы окрашивали периодной кислотой-реактивом Шиффа (РАS). Присутствие гломерулосклероза, определяемое как расширение мезангиального матрикса, оценивали независимо гистологическим исследованием окрашенного РАS материала (верхняя часть Фиг.2) и иммунофлуоресцентной микроскопией замороженных срезов после экспонирования с антителами к коллагену типа IV (РНМ-12, Silenus, Westbury, NY) (средняя часть Фиг.2).EXAMPLE 2
Sclerotic glomerular changes
As described in Peten et al., Exp. Med., 176: 1571-1576 (1992), human patients received unilateral nephrectomy specimens with kidney cancer. Patients did not have a history of diabetes, hypertension, or other systemic diseases associated with glomerular disease. Samples of cortical tissue removed from a clear tumor were placed in Carnoy's fixative, poured into methacrylate or paraffin, and sections were stained with Schiff's periodic acid reagent (PAS). The presence of glomerulosclerosis, defined as an expansion of the mesangial matrix, was evaluated independently by histological examination of the stained PAS material (upper part of Figure 2) and immunofluorescence microscopy of frozen sections after exposure to type IV collagen antibodies (PHM-12, Silenus, Westbury, NY) (middle part Figure 2).
Конкурентный ПЦР-анализ проводили, как описано в Примере 1, для определения количества коллагена экстрацеллюлярного матрикса α2IV (рубцового типа). Определяли относительные концентрации коллагена этого типа в клубочках, для которых предварительно было определено, являются ли они нормальными или склеротическими, как показано в нижней части Фиг.2.Competitive PCR analysis was performed as described in Example 1 to determine the amount of collagen extracellular matrix α 2 IV (scar type). The relative concentrations of collagen of this type in the glomeruli were determined, for which it was previously determined whether they are normal or sclerotic, as shown in the lower part of FIG. 2.
Относительные количества клеток в клубочках пяти пациентов без гломерулосклероза (нормальных) сравнивали с пятью пациентами, имеющими склероз. Как изображено в Фиг.3, различие между группами в относительном количестве гломерулярных клеток не было значимым (Р>0,8), тогда как для уровней кДНК коллагена α2IV различие было статистически значимым (0,01<Р<0,025).The relative number of cells in the glomeruli of five patients without glomerulosclerosis (normal) was compared with five patients with sclerosis. As shown in FIG. 3, the difference between the groups in the relative number of glomerular cells was not significant (P> 0.8), while for the collagen cDNA levels α 2 IV the difference was statistically significant (0.01 <P <0.025).
ПРИМЕР 3
Сравнительные отношения мРНК коллагена в клубочках из нормальных и больных почек
С использованием методологии, описанной в Примерах 1 и 2, определяли количественно сравнительные отношения мРНК коллагенов α2/α3IV в клубочках, взятых из диагностических биопсий пациентов с мембранозным гломерулонефритом (MN) и диабетической нефропатией (DM) и из нефрэктомий с гломерулосклерозом (NX GS) и без гломерулосклероза (NX N1). Как изображено в Фиг.4, отношения мРНК коллагенов α2/α3IV были значимо выше в DM и в NS GS, чем в NX N1(**P= 0,0002, *Р=0,02).EXAMPLE 3
Comparative ratios of collagen mRNA in glomeruli from normal and diseased kidneys
Using the methodology described in Examples 1 and 2, quantitatively determined comparative ratios of collagen mRNA α 2 / α 3 IV in glomeruli taken from diagnostic biopsies of patients with membranous glomerulonephritis (MN) and diabetic nephropathy (DM) and from nephrectomy with glomerulosclerosis (NX GS) and without glomerulosclerosis (NX N1). As depicted in FIG. 4, the collagen mRNA ratios α 2 / α 3 IV were significantly higher in DM and in NS GS than in NX N1 (** P = 0.0002, * P = 0.02).
ПРИМЕР 4
Исследование А
Построение эксперимента:
Нормальные мезангиальные клетки (8) высевали в базальную среду плюс 20% плодная телячья сыворотка (Gibco, Grand Island, NY) в 24-луночных планшетах (Nunc, PGC Scientific Corp. , Gaithersburg, MD) при плотности 2-2,5•104 клеток на лунку. При 24 часах среду выбрасывали, клетки промывали дважды при помощи РВS и инкубировали в течение 24-72 ч в бессывороточной среде с 0,1% бычьим сывороточным альбумином (RIA grade, Sigma). Среду заменяли свежей базальной средой плюс 20% плодная телячья сыворотка с или без 5-100 мкг/мл ППС или для сравнения со стандартным гепарином (100 мкг/мл). Клетки в лунках с двумя повторностями трипсинизировали и считали в цитометре ElzoneR (Particle Data Inc. , Elmhurst, IL) в дни +3 и +5. В параллельных лунках определяли включение тимидина путем добавления 1 мкКи на лунку [3H]-тимидина ([метил-3H] -тимидина); 2,0 Ки/мМ; DuPont NEN, Boston, МА). Количество определяли в день 1 или в день 3.EXAMPLE 4
Study A
Building an experiment:
Normal mesangial cells (8) were plated in basal medium plus 20% fetal calf serum (Gibco, Grand Island, NY) in 24-well plates (Nunc, PGC Scientific Corp., Gaithersburg, MD) at a density of 2-2.5 • 10 4 cells per well. At 24 hours, the medium was discarded, the cells were washed twice with PBS and incubated for 24-72 hours in serum-free medium with 0.1% bovine serum albumin (RIA grade, Sigma). The medium was replaced with fresh basal medium plus 20% fetal calf serum with or without 5-100 μg / ml PPS or for comparison with standard heparin (100 μg / ml). Cells in duplicate wells were trypsinized and counted on an Elzone R cytometer (Particle Data Inc., Elmhurst, IL) on days +3 and +5. In parallel wells, thymidine incorporation was determined by adding 1 μCi per well of [ 3 H] -thymidine ([methyl- 3 H] -thymidine); 2.0 Ci / mM; DuPont NEN, Boston, MA). The amount was determined on
Результаты:
В первый день (24 часа) максимум эффекта в зависимости от дозы выходил на плато при 50 мкг/мл (Фиг.5), тогда как на третий день максимальную ингибиторную реакцию отмечали при 25 мкг/мл (Фиг.6).Results:
On the first day (24 hours), the maximum effect, depending on the dose, reached a plateau at 50 μg / ml (Figure 5), while on the third day the maximum inhibitory reaction was noted at 25 μg / ml (Figure 6).
Сравнение между вариантом без добавления (контроль) и вариантом с гепарином (100 мкг/мл) и ППС (100 мкг/мл) обнаруживает, что на молярной основе ППС примерно вдвое сильнее, чем нативный гепарин (Фиг.7). Ответные реакции являются вполне воспроизводимыми (столбики ошибок очень близки). A comparison between the variant without addition (control) and the variant with heparin (100 μg / ml) and PPP (100 μg / ml) reveals that on a molar basis, the PPP is approximately twice as strong as native heparin (Fig. 7). The responses are reproducible (the error bars are very close).
Суммирующий график (Фиг.8) сравнивает действие ППС, добавленного к сыворотке, с контрольными клетками, которые экспонировались только с сывороткой. A summarizing graph (Fig. 8) compares the effect of PPP added to serum with control cells that were exposed only to serum.
Исследование В
Слои нормальных мезангиальных клеток экспонировали с ППС (100 мкг/мл) в течение различных периодов времени и проводили обратную транскрипцию. Уровни мРНК измеряли для выбранных молекул в первый день и сравнивали с уровнями на 3-ий день и на 5-ый день (см. Фиг.9). Не было изменений в мРНК коллагена типа IV, мРНК коллагена типа Т существенно уменьшалась в количестве, мРНК TGF-β уменьшалась на 50% и активность фермента 92 кДа увеличивалась больше чем на 50%. Контролем был β-актин, который был неизмененным, что согласовалось с отсутствимем пролиферации в обработанных клетках.Study B
Layers of normal mesangial cells were exposed with PPS (100 μg / ml) for various periods of time and reverse transcribed. MRNA levels were measured for selected molecules on the first day and compared with levels on the 3rd day and on the 5th day (see Figure 9). There were no changes in type IV collagen mRNA, type T collagen mRNA decreased significantly, TGF-β mRNA decreased by 50% and 92 kDa enzyme activity increased by more than 50%. The control was β-actin, which was unchanged, which was consistent with the lack of proliferation in the treated cells.
ПРИМЕР 5
Исследования с ППС на животных
Построение эксперимента
12-20-недельные GH-трансгенные животные были идентифицированы ПЦР-анализом экстрагируемого с детергентом материала из хвостовых биопсий с использованием специфических праймеров для кДНК бычьего гормона роста, которые не реагируют перекрестно с последовательностью мыши GН. 4 мыши GH получали перорально ППС в воде для питья (2 в течение двух недель и 2 в течение 4 недель) и четыре мыши GH того же возраста получали водопроводную воду в течение таких же периодов времени. Количество ППС в воде для питья (500 мг/мл) рассчитывали таким образом, чтобы каждая мышь получала эквивалент 50 мк ППС в день.EXAMPLE 5
Studies with PPP in animals
Experiment building
12-20-week-old GH-transgenic animals were identified by PCR analysis of extractable detergent material from tail biopsies using specific bovine growth hormone cDNA primers that do not cross-react with the GH mouse sequence. 4 GH mice received oral PPP in drinking water (2 for two weeks and 2 for 4 weeks) and four GH mice of the same age received tap water for the same time periods. The amount of PPP in drinking water (500 mg / ml) was calculated so that each mouse received the equivalent of 50 μp PPP per day.
Выделение клубочков и обратная транскрипция in situ
Клубочки выделяли микропрепарированием в присутствии ингибиторов РНКазы. Левую почку перфузировали солевым раствором, а затем раствором коллагеназы, содержащим растворимые ингибиторы РНКазы. Нижний полюс удаляли перед перфузией коллагеназы и моментально замораживали на сухом льду для зимографии. После коллагеназного расщепления 40-60 клубочков выделяли при 4oС в присутствии ванадилрибонуклеозидного комплекса для обратной транскрипции (RT). Обратную транскрипцию in situ выполняли, как описано выше, за исключением того, что клубочки подвергали замораживанию-оттаиванию один раз в смеси ацетона с сухим льдом и обрабатывали ультразвуком при 2oС в течение 5 минут в присутствии 2% Тритона и 4 единиц/мкл ингибитора РНКаз из плаценты человека (Boehringer Mannheim, Indianapolis, IN) перед добавлением компонентов для обратной транскрипции (RT). Ультразвуковой микродезинтегратор клеток (Kontes, Vineland, NJ) использовали для охлаждения проб во время обработки ультразвуком.Glomerulation and in situ reverse transcription
The glomeruli were isolated by micropreparation in the presence of RNase inhibitors. The left kidney was perfused with saline and then with a collagenase solution containing soluble RNase inhibitors. The lower pole was removed before collagenase perfusion and instantly frozen on dry ice for zymography. After collagenase cleavage, 40-60 glomeruli were isolated at 4 ° C in the presence of a vanadylribonucleoside complex for reverse transcription (RT). In situ reverse transcription was performed as described above, except that the glomeruli were frozen-thawed once in a mixture of acetone and dry ice and sonicated at 2 ° C. for 5 minutes in the presence of 2% Triton and 4 units / μl of inhibitor RNase from human placenta (Boehringer Mannheim, Indianapolis, IN) before adding components for reverse transcription (RT). An ultrasonic cell microdisintegrator (Kontes, Vineland, NJ) was used to cool the samples during sonication.
Стандартный и конкурентный ПЦР-анализы
Праймеры для мРНК мышиного коллагена α1IV и коллагена α1I, актина клеток гладких мышц, β-актина, ламинина В1, тенасцина, мРНК металлопротеиназ 92 кДа и 72 кДа и для геномной ДНК бычьего гормона роста синтезировали на PCR-Mate (Applied Biosystems, Foster City, CA).Standard and competitive PCR assays
Primers for mRNA of mouse collagen α 1 IV and collagen α 1 I, actin of smooth muscle cells, β-actin, laminin B1, tenascin, mRNA metalloproteinases 92 kDa and 72 kDa and for bovine growth hormone genomic DNA were synthesized on PCR-Mate (Applied Biosystems , Foster City, CA).
Идентичность каждого амплифицированного продукта подтверждали анализом размера и рестрикционным ферментативным анализом. Специфичность праймера для мРНК определяли путем исключения фермента обратной транскриптазы. ПЦР проводили с использованием набора для амплификации ДНК GeneAmp (Perkin Elmer Cetus, Norfolk, CT). кДНК, полученные из пула 40-60 клубочков на мышь, первоначально анализировали при помощи стандартной ПЦР с применением логарифмической-линейной части ПЦР-амплификации. Это делало возможной быструю, неколичественную оценку уровней мРНК. После этого использовали конкурентные ПЦР-анализы для измерения кДНК коллагена
Статистический анализ
Для сравнений между группами использовали односторонний t-критерий Стъюдента с методом аппроксимации Уэлча и величину Р<0,05 считали значимой. Все данные выражали в виде среднего ±SEM (стандартная ошибка среднего).Statistical analysis
For comparisons between groups, the one-sided Student t-test with the Welch approximation method was used and a value of P <0.05 was considered significant. All data were expressed as mean ± SEM (standard error of the mean).
Результаты
Фиг. 10 изображает уменьшение индекса мечения клубочков в получавших ППС мышах (Контроль 0,97±0,17%, ППС 0,64±0,05%, р<0,05).results
FIG. 10 depicts a decrease in glomerular tagging index in mice treated with PPS (Control 0.97 ± 0.17%, PPS 0.64 ± 0.05%, p <0.05).
Гели, показывающие результаты конкурентных ПЦР-анализов с различными типами коллагена, металлопротеиназами, гликопротеинами базальных мембран, факторами роста и белками актина представлены на Фиг.11 и 12. Gels showing the results of competitive PCR assays with various types of collagen, metalloproteinases, basement membrane glycoproteins, growth factors, and actin proteins are shown in FIGS. 11 and 12.
Фиг. 13 показывает, что мРНК коллагена α1IV уменьшалась в результате лечения ППС (Контроль 982±106, ППС 738±75, р<0,01) (attomoles на клубочек).FIG. 13 shows that collagen mRNA α 1 IV decreased as a result of treatment with PPP (Control 982 ± 106, PPP 738 ± 75, p <0.01) (attomoles per glomerulus).
Фиг.14 показывает, что мРНК ламинина В1 уменьшалась в результате лечения ППС (Контроль 1403±453, ППС 861,5±18,3, р=0,05) (attomoles на клубочек).Fig. 14 shows that laminin B 1 mRNA decreased as a result of treatment with PPP (Control 1403 ± 453, PPP 861.5 ± 18.3, p = 0.05) (attomoles per glomerulus).
Фиг. 15 показывает, что мРНК PDGF-B уменьшалась в результате лечения ППС (Контроль 53,97±17,21, ППС 28,9±9,4, р<0,04). FIG. 15 shows that PDGF-B mRNA decreased as a result of treatment with PPP (Control 53.97 ± 17.21, PPP 28.9 ± 9.4, p <0.04).
Фиг. 16 показывает, что мРНК TGF-β снижалась в результате лечения РРС (Контроль 181±35,7, ППС 102,85±21,61, р<0,05) (attomoles на клубочек). FIG. 16 shows that TGF-β mRNA decreased as a result of PPC treatment (Control 181 ± 35.7, PPS 102.85 ± 21.61, p <0.05) (attomoles per glomerulus).
Уровни β-актина были по существу стабильны в получавших ППС мышах, подтверждая, что уменьшение в других факторах не было результатом сниженной пролиферации клеток. Β-actin levels were essentially stable in PPS treated mice, confirming that the decrease in other factors was not the result of reduced cell proliferation.
Предшествующие данные, полученные при помощи научно-надежных экспериментальных способов, демонстрируют эффективность ППС в снижении синтеза избыточного коллагена экстрацеллюлярного матрикса и некоторых клеточных факторов роста и в одновременном увеличении активности разрушающих коллаген ферментов. Эти эффекты указывают на то, что ППС должен быть высокоэффективным в клинической терапии и обратном развитии ХПСЗ, характеризующегося рубцеванием. Previous data obtained using scientifically reliable experimental methods demonstrate the effectiveness of PPS in reducing the synthesis of excess collagen of extracellular matrix and certain cellular growth factors and at the same time increasing the activity of collagen-degrading enzymes. These effects indicate that PPS should be highly effective in clinical therapy and the reverse development of scarring characterized by chronic scarring.
Таким образом, показано, что обеспечены способы и композиции, которые позволяют достичь различных целей данного изобретения и которые хорошо приспособлены для удовлетворения условий практического применения. Thus, it has been shown that methods and compositions are provided that can achieve the various objectives of the present invention and which are well suited to meet practical application conditions.
Поскольку различные возможные варианты воплощения могут быть созданы на основании описанного изобретения и поскольку различные изменения могут быть введены в варианты, представленные выше, должно быть понятно, что все вопросы, описанные здесь, должны интерпретироваться как иллюстративные, а не в ограничивающем смысле. Since various possible embodiments can be created on the basis of the described invention and since various changes can be made to the options presented above, it should be understood that all of the issues described herein should be interpreted as illustrative and not in a limiting sense.
То, что заявлено как новое и должно быть защищено патентной грамотой, изложено в следующей далее формуле изобретения. What is claimed to be new and must be protected by a patent letter is set forth in the following claims.
Claims (13)
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/478,347 | 1994-06-07 | ||
| US08/478,347 US5643892A (en) | 1995-06-07 | 1995-06-07 | Method of treating chronic progressive vascular diseases |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU97116166A RU97116166A (en) | 1999-06-20 |
| RU2196589C2 true RU2196589C2 (en) | 2003-01-20 |
Family
ID=23899571
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU97116166A RU2196589C2 (en) | 1995-06-07 | 1996-06-03 | Method of resorption induction of scar or fibrous formation formed in blood vessel or vascular network in mammals |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| AR (1) | AR003957A1 (en) |
| AT (1) | ATE235908T1 (en) |
| DE (1) | DE69627137T2 (en) |
| DK (1) | DK0809505T3 (en) |
| PT (1) | PT809505E (en) |
| RU (1) | RU2196589C2 (en) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1992014460A1 (en) * | 1991-02-13 | 1992-09-03 | Glaxo Spa | Use of lacidipine for the treatment of arteriosclerosis |
-
1996
- 1996-06-03 DE DE69627137T patent/DE69627137T2/en not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-03 AT AT96917917T patent/ATE235908T1/en not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 PT PT96917917T patent/PT809505E/en unknown
- 1996-06-03 DK DK96917917T patent/DK0809505T3/en active
- 1996-06-03 RU RU97116166A patent/RU2196589C2/en not_active IP Right Cessation
- 1996-06-06 AR ARP960102973A patent/AR003957A1/en not_active Application Discontinuation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1992014460A1 (en) * | 1991-02-13 | 1992-09-03 | Glaxo Spa | Use of lacidipine for the treatment of arteriosclerosis |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Реферат из АБД Medline: Klein-Soyer С et al. Sulfated polysaccharides modulate effects of acidic and basic fibroblast growth factors on repair of injured confluent human vascular endothelium. Arteriosclerosis. 1989 Mar-Apr; 9(2):147-53. Справочник практического врача/ Под ред. А.И. Воробьева. - М.: Медицина, 1990 т.1, c.85-97, 185. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PT809505E (en) | 2003-08-29 |
| ATE235908T1 (en) | 2003-04-15 |
| DK0809505T3 (en) | 2003-07-07 |
| DE69627137T2 (en) | 2003-12-04 |
| DE69627137D1 (en) | 2003-05-08 |
| HK1005497A1 (en) | 1999-01-15 |
| AR003957A1 (en) | 1998-09-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Bywaters et al. | Crush injuries with impairment of renal function | |
| Garciamartinez et al. | Ubiquitin gene expression in skeletal muscle is increased during sepsis: involvement of TNF-α but not IL-1 | |
| EP0809505B1 (en) | Use of pentosan polysulfate for the resolution of scars in chronic progressive vascular diseases | |
| JP2016147065A (en) | Extracorporeal devices and methods for treating pregnancy complications | |
| AU750182B2 (en) | Method of treating chronic progressive vascular scarring diseases | |
| Albright Jr et al. | Patient survival and renal recovery in acute renal failure: randomized comparison of cellulose acetate and polysulfone membrane dialyzers | |
| KR20070008519A (en) | Tissue protective cytokines for the treatment and prevention of sepsis and adhesion formation | |
| Chen et al. | The effects of continuous renal replacement therapy with different anticoagulation methods on the expression of cytokines in severe acute pancreatitis | |
| WO2021073249A1 (en) | USE OF β-NMN IN PREPARATION OF DRUG FOR TREATING AND PREVENTING SEPSIS-INDUCED ORGAN DAMAGE | |
| Yadav et al. | Effect of Early Continuous Veno‐Venous Haemofiltration in Severe Acute Pancreatitis for the Prevention of Local Pancreatic Complications | |
| RU2196589C2 (en) | Method of resorption induction of scar or fibrous formation formed in blood vessel or vascular network in mammals | |
| Mbachu et al. | A monoclonal antibody against cytokine-induced neutrophil chemoattractant attenuates injury in the small intestine in a model of ruptured abdominal aortic aneurysm | |
| Lv et al. | Hydroxyethyl starch inhibits intestinal production of cytokines and activation of transcription factors in endotoxaemic rats | |
| HK1005497B (en) | Use of pentosan polysulfate for the resolution of scars in chronic progressive vascular diseases | |
| CN1218405A (en) | Treatment of Cyst Disease with Tumor Necrosis Factor-α | |
| Seraji et al. | Low molecular weight heparin reduces acute phase response and multiple organ dysfunction following ovine experimental endotoxemia model | |
| CN115279402A (en) | Inhibition of VE-PTP phosphatase protecting kidneys from ischemia-reperfusion injury | |
| MXPA99009415A (en) | Method of treating chronic progressive vascular scarring diseases | |
| Tao et al. | Amputation Triggered by Gefitinib: An Unusual Clinical Presentation | |
| HK1027970A (en) | Method of treating chronic progressive vascular scarring diseases | |
| AU1335599A (en) | Use of glycosaminoglycans for producing pharmaceutical preparations for treating diabetes-associated diseases of the eye | |
| Dobrowolski et al. | Vasoprotective Effect of Sulodexide in Diabetic Retinopathy | |
| Uzganboyevich et al. | Differentiated approach to the treatment of patients with acute cholangitis | |
| Veitch | Late Interventions in SNXRats Reveal a Disconnect between GFR and Proteinuria | |
| CN119235848A (en) | Application of a compound as a urea channel inhibitor |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20070604 |