RU2180962C1 - Method of determining individual sensitivity for alcohol in saliva - Google Patents
Method of determining individual sensitivity for alcohol in saliva Download PDFInfo
- Publication number
- RU2180962C1 RU2180962C1 RU2000116974/14A RU2000116974A RU2180962C1 RU 2180962 C1 RU2180962 C1 RU 2180962C1 RU 2000116974/14 A RU2000116974/14 A RU 2000116974/14A RU 2000116974 A RU2000116974 A RU 2000116974A RU 2180962 C1 RU2180962 C1 RU 2180962C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- saliva
- ethanol
- alcohol
- activity
- gas
- Prior art date
Links
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 113
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 title claims abstract description 30
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 title claims description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 15
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 12
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 12
- 238000001030 gas--liquid chromatography Methods 0.000 claims abstract description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 17
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 9
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 8
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 239000013068 control sample Substances 0.000 claims description 4
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims description 2
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 claims description 2
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 abstract description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 abstract description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 abstract description 4
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 abstract description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 abstract description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 2
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 abstract description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 2
- 231100000663 medical toxicology Toxicity 0.000 abstract 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 abstract 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 47
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 9
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- -1 isopropyl alcohols Chemical class 0.000 description 4
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 3
- 239000012159 carrier gas Substances 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- QQZWEECEMNQSTG-UHFFFAOYSA-N Ethyl nitrite Chemical compound CCON=O QQZWEECEMNQSTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000007799 cork Substances 0.000 description 2
- DOIRQSBPFJWKBE-UHFFFAOYSA-N dibutyl phthalate Chemical compound CCCCOC(=O)C1=CC=CC=C1C(=O)OCCCC DOIRQSBPFJWKBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 2
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 2
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010001605 Alcohol poisoning Diseases 0.000 description 1
- 235000013334 alcoholic beverage Nutrition 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 231100000775 forensic toxicology Toxicity 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- KAOQVXHBVNKNHA-UHFFFAOYSA-N propyl nitrite Chemical compound CCCON=O KAOQVXHBVNKNHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 238000004800 variational method Methods 0.000 description 1
- 235000013522 vodka Nutrition 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины, а именно к судебно-медицинской токсикологии. The invention relates to medicine, namely to forensic toxicology.
При медицинском освидетельствовании основным доказательством установления факта употребления алкоголя и состояния опьянения является обнаружение в организме этанола. Степень алкогольного опьянения определяется с учетом концентрации этанола в крови на момент обследования. Однако данных о наличии и концентрации этанола в организме не достаточно для суждения о реальной выраженности алкогольной интоксикации. Для этого необходимо учитывать индивидуальную чувствительность к этанолу, которая зависит от активности метаболизирующих этанол ферментов [1]. During a medical examination, the main evidence of establishing the fact of alcohol consumption and intoxication is the detection of ethanol in the body. The degree of intoxication is determined taking into account the concentration of ethanol in the blood at the time of the examination. However, data on the presence and concentration of ethanol in the body are not enough to judge the real severity of alcohol intoxication. For this, it is necessary to take into account individual sensitivity to ethanol, which depends on the activity of enzymes metabolizing ethanol [1].
Лабораторное определение концентрации этанола в биологических средах производится методом газожидкостной хроматографии прибором ППС-1, индикаторными трубками трезвости, трубками Мохова-Шинкаренко, реакцией Рапопорта. Метод газожидкостной хроматографии обладает высокой разрешающей способностью и репрезентативностью. Остальные перечисленные методы индикации этанола являются ориентировочными и уступают методу газожидкостной хроматографии по многим параметрам, прежде всего по возможностям качественного анализа и точности измерения [2]. Laboratory determination of ethanol concentration in biological media is carried out by gas-liquid chromatography with PPS-1 instrument, sobriety indicator tubes, Mokhov-Shinkarenko tubes, Rapoport reaction. The method of gas-liquid chromatography has a high resolution and representativeness. The remaining listed methods for indicating ethanol are indicative and inferior to the method of gas-liquid chromatography in many parameters, primarily in terms of the possibilities of qualitative analysis and measurement accuracy [2].
Наиболее близким по технической сущности и предлагаемому способу является метод газожидкостной хроматографии [3]. Метод газожидкостной хроматографии позволяет производить газохроматографическое разделение смеси метилового, этилового, пропилового и изопропилового спиртов и определение этилового алкоголя с использованием азота в качестве газа-носителя. Сущность метода заключается в превращении спиртов в алкилнитриты, которые затем подвергаются хроматографическому разделению. Разделенные на хроматографической колонке компоненты смеси поочередно поступают в детектор по теплопроводности - катарометр, сигналы которого регистрируются в виде ряда хроматографических пиков. В основе детектирования лежит измерение различий в теплопроводности чистого газа-носителя, поступающего в сравнительную камеру детектора, и смеси анализируемого вещества с газом-носителем, выходящей из хроматографической колонки в измерительную камеру детектора. Катарометр реагирует на присутствие в анализируемой смеси практически любого вещества. Установление подлинности веществ производится по времени их удерживания, которое исчисляется от момента введения анализируемого вещества в колонку до появления максимума пика. Чувствительность для метилового, этилового и пропилового спиртов составляет 0,01%. Расчет концентрации этилового спирта производят после калибровки по внутреннему стандарту. Внутренним стандартом служит изопропиловый спирт. Затрата времени на анализ составляет не более 15 минут. Из жидких биологических сред для определения алкоголя наиболее часто используются моча и слюна. Кровь для определения алкоголя может забираться только при наличии соответствующих медицинских показаний. The closest in technical essence and the proposed method is the method of gas-liquid chromatography [3]. The method of gas-liquid chromatography allows gas chromatographic separation of a mixture of methyl, ethyl, propyl and isopropyl alcohols and the determination of ethyl alcohol using nitrogen as a carrier gas. The essence of the method is the conversion of alcohols to alkyl nitrites, which are then subjected to chromatographic separation. The components of the mixture separated on the chromatographic column are fed to the thermal conductivity detector, a katharometer, whose signals are recorded as a series of chromatographic peaks. The basis of detection is the measurement of differences in thermal conductivity of a pure carrier gas entering the comparative chamber of the detector and a mixture of the analyte with the carrier gas exiting the chromatographic column into the measuring chamber of the detector. The katharometer reacts to the presence of almost any substance in the analyzed mixture. The authentication of substances is carried out according to their retention time, which is calculated from the moment the analyte is introduced into the column until the peak peak appears. The sensitivity for methyl, ethyl and propyl alcohols is 0.01%. The calculation of the concentration of ethyl alcohol is carried out after calibration according to the internal standard. Isopropyl alcohol is the internal standard. Analysis time is no more than 15 minutes. Of the liquid biological media, urine and saliva are most commonly used to determine alcohol. Blood for determination of alcohol can be taken only with the availability of appropriate medical indications.
Однако газожидкостная хроматография не позволяет определять активность этанолметаболизирующих ферментов, характеризующих индивидуальную чувствительность к этанолу. However, gas-liquid chromatography does not allow the determination of the activity of ethanol-metabolizing enzymes characterizing individual sensitivity to ethanol.
Поставлена задача определения индивидуальной чувствительности к этанолу. The task is to determine individual sensitivity to ethanol.
Сущность способа состоит в определении активности этанолметаболизирующих ферментов слюны. Ферментативная активность слюны определяется по величине редукции субстрата в процессе его каталитического окисления в стандартных (рН, температура, инкубационный раствор, продолжительность реакции) условиях протекания ферментативной реакции in vitro. Точное измерение исходной и итоговой концентрации субстрата, т.е. этанола, необходимое для оценки индивидуальной скорости каталитического процесса, производится с использованием метода газожидкостной хроматографии. The essence of the method consists in determining the activity of ethanol-metabolizing saliva enzymes. The enzymatic activity of saliva is determined by the amount of reduction of the substrate during its catalytic oxidation under standard (pH, temperature, incubation solution, duration of the reaction) in vitro enzymatic reaction. Accurate measurement of the initial and final substrate concentration, i.e. ethanol, necessary for assessing the individual rate of the catalytic process, is performed using gas-liquid chromatography.
Описание способа. Description of the method.
Приготовление стандартных растворов этанола
При комнатной температуре в стерильной посуде готовили стандартные 2%о, 4%о, и 8%о, растворы этанола. Использовали химически чистый 96% этиловый спирт. Сначала готовили рабочий 2% раствор этанола с учетом его удельной плотности: 2,6 мл 96% этилового спирта растворяли в 100 мл дистиллированной воды. Для приготовления стандартного 2%о раствора 5,0 мл 2% этилового спирта растворяли в дистиллированной воде, доводя общий объем до 50 мл. Стандартные 4%о и 8%о растворы этанола получали растворяя соответственно 10,0 и 20,0 мл 2% этилового спирта в дистиллированной воде, доводя общий объем растворов до 50 мл.Preparation of standard ethanol solutions
At room temperature the dishes were prepared in sterile standard of 2%, 4% o and 8% o ethanol solutions. Chemically pure 96% ethanol was used. First, a working 2% ethanol solution was prepared taking into account its specific gravity: 2.6 ml of 96% ethanol was dissolved in 100 ml of distilled water. To prepare a standard 2% solution of 5.0 ml of 2% ethanol dissolved in distilled water to bring the total volume to 50 ml. Standard 4% o and 8% o ethanol solutions were prepared by dissolving 10.0 and 20.0 ml of 2% ethanol in distilled water, respectively, bringing the total volume of solutions to 50 ml.
Отбор проб слюны
В стерильные пробирки отбирали пробы слюны от трезвых лиц и лиц, находившихся в состоянии алкогольного опьянения. У трезвых лиц период воздержания от употребления алкоголя превышал 3 суток. Количество, вид и время приема спиртных напитков уточнялись из анамнеза и обстоятельств случая. Степень алкогольного опьянения устанавливалась в процессе врачебного обследования и газожидкостной хроматографии крови и мочи на наличие и концентрацию этанола. У 19 здоровых мужчин в возрасте 20-21 год с массой тела 70-73 кг параллельно со взятием проб слюны проведено выборочное газохроматографическое определение этанола в слюне, крови и моче как до, так и через 0,5; 1; 2; 4; 6; 12 и 24 часа после однократного употребления 200 граммов 40% водки.Saliva sampling
In sterile tubes, samples of saliva were taken from sober persons and persons who were intoxicated. For sober persons, the period of abstinence from drinking alcohol exceeded 3 days. The quantity, type and time of drinking alcohol were specified from the anamnesis and the circumstances of the case. The degree of intoxication was established during medical examination and gas-liquid chromatography of blood and urine for the presence and concentration of ethanol. In 19 healthy men aged 20-21 years old with a body weight of 70-73 kg, along with sampling of saliva, a selective gas chromatographic determination of ethanol in saliva, blood and urine was performed both before and after 0.5; 1; 2; 4; 6; 12 and 24 hours after a single use of 200 grams of 40% vodka.
Перед взятием проб слюны полость рта ополаскивалась водопроводной водой. Пробы слюны получали в количестве 4 мл, после чего тотчас приступали к их исследованию. Before taking saliva samples, the mouth was rinsed with tap water. Samples of saliva were obtained in an amount of 4 ml, after which they immediately began to study them.
Инкубация проб слюны со стандартными растворами этанола
При инкубации в пробе слюны происходило ферментативное окисление и редукция этилового спирта. Для оценки активности этанолметаболизирующих ферментов слюны в каждом случае параллельно с опытной пробой проводилась контрольная. Контрольную пробу слюны до инкубации помещали в сухожаровой шкаф при 98oС, где в течение 15 минут происходила дезактивация ферментов. Затем в опытную и контрольную пробы добавлялся инкубационный раствор: 2,0 мл 0,2 М фосфатного буфера, рН 7,4, 1,0 мл 0,1 М НАД (C21H27N7O14P2, Мм 600-800, 66 мг/мл); 0,5 мл 0,1 М хлористого магния (MgCl2, безводный, 9,5 мг/мл), 2,0 мл стандартного раствора этанола и 2,0 мл слюны. Флаконы помещали в термостат при 37oС на 40 минут для инкубации проб. По окончании инкубации опытную пробу слюны нагревали в сухожаровом шкафу в течение 15 минут при 98oС для коагуляционной дезактивации ферментов. После этого в опытной и контрольной пробах слюны определяли конечную концентрацию этилового спирта.Incubation of saliva samples with standard ethanol solutions
During incubation in a saliva sample, enzymatic oxidation and reduction of ethyl alcohol occurred. To assess the activity of ethanol-metabolizing saliva enzymes in each case, a control was carried out in parallel with the experimental sample. A control sample of saliva prior to incubation was placed in a dry oven at 98 o C, where enzymes were deactivated for 15 minutes. Then, an incubation solution was added to the experimental and control samples: 2.0 ml of 0.2 M phosphate buffer, pH 7.4, 1.0 ml of 0.1 M NAD (C 21 H 27 N 7 O 14 P 2 , Mm 600- 800, 66 mg / ml); 0.5 ml of 0.1 M magnesium chloride (MgCl 2 , anhydrous, 9.5 mg / ml), 2.0 ml of a standard solution of ethanol and 2.0 ml of saliva. Vials were placed in a thermostat at 37 ° C. for 40 minutes to incubate samples. At the end of the incubation, the experimental sample of saliva was heated in a dry oven for 15 minutes at 98 o C for coagulation deactivation of enzymes. After that, in the experimental and control samples of saliva, the final concentration of ethyl alcohol was determined.
Определение концентрации этанола в опытной и контрольной пробах методом газожидкостной хроматографии. Determination of ethanol concentration in experimental and control samples by gas-liquid chromatography.
Методика исследования. Условия хроматографического разделения: хроматограф модель 3700 (made in USSA), завод г. Дзержинск, 1987 года выпуска; Колонка 100•0,2 см, насадка - хроматон NAW (Чехословакия), плюс 10 % дибутилфталат (РФ). Температура колонки 50oС, инжектора 70oС. Расход газоносителя - азота 1,0 л/ч. Детектор катарометр, ток детектора 70 мА, масштаб записи 1:1. Скорость диаграммной ленты 600 мм/ч.Research Methodology. Chromatographic separation conditions: Model 3700 chromatograph (made in USSA), Dzerzhinsk plant, 1987; Column 100 • 0.2 cm, nozzle - chromaton NAW (Czechoslovakia), plus 10% dibutyl phthalate (RF). The temperature of the column is 50 o С, of the injector 70 o С. The gas carrier flow rate is nitrogen 1.0 l / h. Detector katharometer, detector current 70 mA, recording scale 1: 1. The speed of the chart tape is 600 mm / h.
Качественное определение этанола. В стерильные флаконы из-под пенициллина наливали 0,5 мл 50% раствора трихлоруксусной кислоты и 0,5 мл пробы слюны. После фиксации пробки к горловине флакона, содержимое его тщательно взбалтывали, затем во флакон шприцем вводили 0,3 мл 30% раствора нитрита натрия и смесь вновь тщательно взбалтывали. Шприцем отбирали из флакона 0,2 мл парообразной пробы и вводили в хроматограф. На хроматограмме идентифицировали соответствующий пик этилнитрита при отсутствии пиков других алкилнитритов. Qualitative determination of ethanol. 0.5 ml of a 50% trichloroacetic acid solution and 0.5 ml of a saliva sample were poured into sterile penicillin vials. After fixing the cork to the neck of the vial, its contents were thoroughly shaken, then 0.3 ml of a 30% sodium nitrite solution was injected into the vial with a syringe and the mixture was again thoroughly shaken. 0.2 ml of a vapor sample was taken from a vial with a syringe and introduced into a chromatograph. The chromatogram identified the corresponding peak of ethyl nitrite in the absence of peaks of other alkyl nitrites.
Количественное определение этанола. Смешивали 2 мл 4% раствора н-пропилового спирта (внутренний стандарт) с 2 мл пробы слюны. Вводили 1 мл смеси в стерильный флакон из-под пенициллина, содержащий 0,5 мл 50% раствора трихлоруксусной кислоты. После фиксации пробки к горловине флакона содержимое его тщательно перемешивали. Шприцем вводили 0,3 мл 30% раствора нитрита натрия. Смесь взбалтывали. Через минуту из флакона отбирали 0,2 мл парообразной пробы, которую вводили в хроматограф. На хроматограмме отмечали высоту пиков этилнитрита и пропилнитрита. По аналогичной методике проводили исследование контрольной пробы. Quantification of ethanol. 2 ml of a 4% solution of n-propyl alcohol (internal standard) were mixed with 2 ml of a saliva sample. 1 ml of the mixture was injected into a sterile penicillin vial containing 0.5 ml of a 50% trichloroacetic acid solution. After fixing the cork to the neck of the vial, its contents were thoroughly mixed. 0.3 ml of a 30% sodium nitrite solution was injected with a syringe. The mixture was agitated. After a minute, 0.2 ml of a vapor sample was taken from the vial, which was introduced into the chromatograph. The peak chromatography of ethyl nitrite and propyl nitrite was noted on the chromatogram. By a similar method, a control sample was studied.
Одновременно строили калибровочный график, используя вышеописанную методику. При построении графика применяли 1%о, 2%о и 4%о растворы этанола, приготовленные на дистиллированной воде. Перерасчетный коэффициент для слюны по количеству определения этанола по водоспиртовой смеси составлял 1,05.At the same time, we built a calibration graph using the method described above. When plotting applied about 1%, 2% and about 4% of ethanol solutions prepared in distilled water. The conversion factor for saliva by the amount of determination of ethanol from the water-alcohol mixture was 1.05.
Расчет полученных результатов. Calculation of the results.
Величина этанолметаболизирующей активности ферментов слюны (ЭМФ) выражалась в процентах, соответствующих отношению: ЭМФ = величина конечной концентрации этанола в опытной пробе (в %о) / величина конечной концентрации этанола в контрольной пробе (в %о) • 100. Полученные результаты обработаны методом вариационной статистики с вычислением критериев достоверности.The value of the ethanol-metabolizing activity of saliva enzymes (EMF) was expressed as a percentage corresponding to the ratio: EMF = the value of the final concentration of ethanol in the experimental sample (in% o ) / value of the final concentration of ethanol in the control sample (in% o ) • 100. The results were processed by the variational method statistics with the calculation of reliability criteria.
е) Полученные результаты
В пробах слюны, взятых от лиц, находившихся в трезвом состоянии, активность ЭМФ колебалась от 67,0 до 88,0%. Через 0,5 часа после приема спиртных напитков отмечался скачкообразный рост активности в пределах 80-270% с последующим (через 1, 2 и 4 часа) его падением до 22-117%. В фазе резорбции (через 6, 12, 24 часов после приема алкоголя) при наличии значительных индивидуальных различий отмечалась тенденция к восстановлению первоначальной активности ферментов - 33-107%. При сильной степени алкогольного опьянения, характеризующейся более высокими концентрациями Эт в крови, зафиксированы более резкие изменения активности ЭМФ. Такая же тенденция отмечена при использовании концентрированных стандартных растворов Эт в трезвом состоянии и легкой степени опьянения. В группе мужчин в возрасте 20-21 год с одинаковой массой тела, употребивших одноразово равное количество алкоголя при общей одинаковой тенденции изменения активности ЭМФ, наблюдались существенные индивидуальные особенности в динамике энзиматической активности слюны. Следует отметить, что клиническая картина опьянения у данных лиц протекала с индивидуальными особенностями. Выявлены статистически значимые различия (Р<0,05).f) Results obtained
In samples of saliva taken from individuals in a sober state, the activity of EMF ranged from 67.0 to 88.0%. 0.5 hours after taking alcoholic beverages, an abrupt increase in activity was observed within 80-270%, followed by (after 1, 2 and 4 hours) its drop to 22-117%. In the resorption phase (6, 12, 24 hours after alcohol intake), in the presence of significant individual differences, a tendency toward restoration of the initial enzyme activity was noted - 33-107%. With a strong degree of intoxication, characterized by higher concentrations of Et in the blood, more dramatic changes in the activity of EMF are recorded. The same tendency was observed when concentrated standard Et solutions were used in a sober state and a slight degree of intoxication. In the group of men aged 20-21 with the same body weight who used a one-time equal amount of alcohol with a common identical tendency to change the activity of EMF, significant individual characteristics were observed in the dynamics of the enzymatic activity of saliva. It should be noted that the clinical picture of intoxication in these individuals proceeded with individual characteristics. Statistically significant differences were revealed (P <0.05).
ж) Оценка полученных результатов
Активность этанолметаболизирующих ферментов менее 60% является низкой, в промежутке от 60 до 100% - средней и более 120% - высокой.g) Evaluation of the results
The activity of ethanol-metabolizing enzymes of less than 60% is low, in the range from 60 to 100% - medium and more than 120% - high.
Величина активности этанолметаболизирующих ферментов слюны отражает индивидуальную чувствительность к алкоголю и в совокупности с показателями алкоголемии позволяет более точно оценить степень алкогольного опьянения и интоксикации. Слюна как объект исследования при определении индивидуальной чувствительности к алкоголю не требует обязательного наличия медицинских показаний для ее взятия и обладает видимыми преимуществами в сравнении с кровью: доступность, простота получения и обработки пробы, отсутствие опасности для здоровья. The value of the activity of ethanol-metabolizing saliva enzymes reflects individual sensitivity to alcohol and, together with indicators of alcoholemia, allows a more accurate assessment of the degree of intoxication and intoxication. Saliva as an object of research in determining individual sensitivity to alcohol does not require the presence of medical indications for its collection and has visible advantages in comparison with blood: accessibility, ease of obtaining and processing samples, and no danger to health.
Источники информации
1. Медицинское освидетельствование для установления факта употребления алкоголя и состояния опьянения. Методические указания Минздрава СССР от 2 сент. 1988 г. 06-04/33-14.Sources of information
1. A medical examination to establish the fact of alcohol consumption and intoxication. Guidelines of the USSR Ministry of Health from 2 September. 1988 06-04 / 33-14.
2. Григорьев И.В., Чиркин А.А. Роль биохимических исследований слюны в диагностике заболеваний // Клин. Лаб. Диагн. - 1998. - 6. - С. 18-20. 2. Grigoriev I.V., Chirkin A.A. The role of biochemical studies of saliva in the diagnosis of diseases // Klin. Lab Diagn. - 1998. - 6. - S. 18-20.
3. Обнаружение и определение этилового алкоголя в крови и моче методом газожидкостной хроматографии. Методическое письмо Министерства здравоохранения СССР. - М. - 1968. - 12 с. 3. Detection and determination of ethyl alcohol in blood and urine by gas-liquid chromatography. Methodical letter of the Ministry of Health of the USSR. - M. - 1968. - 12 p.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000116974/14A RU2180962C1 (en) | 2000-06-26 | 2000-06-26 | Method of determining individual sensitivity for alcohol in saliva |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000116974/14A RU2180962C1 (en) | 2000-06-26 | 2000-06-26 | Method of determining individual sensitivity for alcohol in saliva |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2180962C1 true RU2180962C1 (en) | 2002-03-27 |
Family
ID=20236989
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2000116974/14A RU2180962C1 (en) | 2000-06-26 | 2000-06-26 | Method of determining individual sensitivity for alcohol in saliva |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2180962C1 (en) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2077324C1 (en) * | 1979-10-26 | 1997-04-20 | Московский научно-исследовательский институт психиатрии | Method of treatment of alcoholism and nicotine addiction |
| RU2089898C1 (en) * | 1993-04-13 | 1997-09-10 | Ростовский научно-исследовательский институт акушерства и педиатрии | Method of determination of toxicity of physical-chemical effect of organism |
| RU2140637C1 (en) * | 1999-04-12 | 1999-10-27 | Логинов Анатолий Сергеевич | Method of diagnosis of poisoning with narcotics |
-
2000
- 2000-06-26 RU RU2000116974/14A patent/RU2180962C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2077324C1 (en) * | 1979-10-26 | 1997-04-20 | Московский научно-исследовательский институт психиатрии | Method of treatment of alcoholism and nicotine addiction |
| RU2089898C1 (en) * | 1993-04-13 | 1997-09-10 | Ростовский научно-исследовательский институт акушерства и педиатрии | Method of determination of toxicity of physical-chemical effect of organism |
| RU2140637C1 (en) * | 1999-04-12 | 1999-10-27 | Логинов Анатолий Сергеевич | Method of diagnosis of poisoning with narcotics |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Обнаружение и определение этилового алкоголя в крови и моче методом газожидкостной хроматографии. - Методическое письмо Министерства здравоохранения СССР, М., 1968, с.1-12. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Foster et al. | A single-reagent manual method for directly determining urea nitrogen in serum | |
| Rosenberg et al. | An enzymatic-spectrophotometric determination of pyruvic and lactic acid in blood: methodologic aspects | |
| Lundquist | The determination of ethyl alcohol in blood and tissues | |
| Mascini et al. | Urease coupled ammonia electrode for urea determination in blood serum | |
| Fogt et al. | Development and evaluation of a glucose analyzer for a glucose controlled insulin infusion system ((Biostator). | |
| Chua et al. | Plasma glucose measurement with the Yellow Springs Glucose Analyzer. | |
| Caddy et al. | Alcohol breath tests: Criterion times for avoiding contamination by “mouth alcohol” | |
| Wincey et al. | A micro-method for measuring glucose using the autoanalyzer and glucose-oxidase | |
| EP0041089B1 (en) | Improved chromogenic method of detecting endotoxins in blood | |
| Watson | Enzymic determination of glucose and easily hydrolyzable glucose esters in blood | |
| Van Hee et al. | Analysis of γ-hydroxybutyric acid, DL-lactic acid, glycolic acid, ethylene glycol and other glycols in body fluids by a direct injection gas chromatography-mass spectrometry assay for wide use | |
| Jabs et al. | Microdetermination of plasma ATP and creatine phosphate concentrations with a luminescence biometer. | |
| US9410179B2 (en) | Diagnostic method for the determination of Helicobacter pylori | |
| RU2180962C1 (en) | Method of determining individual sensitivity for alcohol in saliva | |
| Murphy et al. | Gas chromatographic measurement of blood and urine glucose and other monosaccharides | |
| Raggam et al. | Evaluation of a novel standardized system for collection and quantification of oral fluid. | |
| Gavella | A simple automated method for determination of citric acid levels in semen | |
| Hjemdahl-Monsen et al. | Automated adenosine deaminase enzyme determination with an ammonia-sensing membrane electrode | |
| Guilbault et al. | Enzymatic, fluorometric assay of alpha-amylase in serum. | |
| Jung et al. | Improved determination of D-glucaric acid in urine. | |
| RU2063035C1 (en) | Method of ethanol content determination in biological material | |
| Yamaguchi et al. | Simple determination of high urinary excretion of 5-hydroxyindole-3-acetic acid with ferric chloride. | |
| JPH05260993A (en) | Method for quick determination of histamine | |
| Peterson et al. | Blood phenylalanine estimation for the patient with phenylketonuria using a portable device | |
| Taylor et al. | Blood alcohol analysis: a comparison of the gas-chromatographic assay with an enzymatic assay |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20060627 |