RU2177006C2 - Циклические пептидные аналоги соматостатина - Google Patents
Циклические пептидные аналоги соматостатина Download PDFInfo
- Publication number
- RU2177006C2 RU2177006C2 RU98108419A RU98108419A RU2177006C2 RU 2177006 C2 RU2177006 C2 RU 2177006C2 RU 98108419 A RU98108419 A RU 98108419A RU 98108419 A RU98108419 A RU 98108419A RU 2177006 C2 RU2177006 C2 RU 2177006C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- fen
- cis
- trp
- tre
- liz
- Prior art date
Links
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 title abstract description 15
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 title abstract description 12
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 title abstract description 12
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 title abstract description 7
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 title 1
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 title 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 53
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 14
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 26
- -1 aliphatic amino acid Chemical class 0.000 claims description 20
- 229960003887 dichlorophen Drugs 0.000 claims description 8
- YNPNZTXNASCQKK-UHFFFAOYSA-N Phenanthrene Natural products C1=CC=C2C3=CC=CC=C3C=CC2=C1 YNPNZTXNASCQKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- DGEZNRSVGBDHLK-UHFFFAOYSA-N [1,10]phenanthroline Chemical compound C1=CN=C2C3=NC=CC=C3C=CC2=C1 DGEZNRSVGBDHLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 5
- 125000002768 hydroxyalkyl group Chemical group 0.000 claims description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 5
- 125000001326 naphthylalkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000003884 phenylalkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000006297 carbonyl amino group Chemical group [H]N([*:2])C([*:1])=O 0.000 claims description 2
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims 14
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 abstract description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 abstract description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 abstract description 2
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 abstract 1
- 125000000729 N-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 abstract 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 abstract 1
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 18
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 description 12
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 11
- 108050001286 Somatostatin Receptor Proteins 0.000 description 9
- 102000011096 Somatostatin receptor Human genes 0.000 description 9
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 9
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 8
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 8
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 8
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 102000004052 somatostatin receptor 2 Human genes 0.000 description 7
- 108090000586 somatostatin receptor 2 Proteins 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 5
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 5
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 4
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 4
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 4
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 2-aminopentanoic acid Chemical compound CCCC(N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 3
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 3
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 3
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N 2-Aminobutanoic acid Natural products CCC(N)C(O)=O QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoisobutyric acid Chemical compound CC(C)(N)C(O)=O FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010001478 Bacitracin Proteins 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical group [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- QWCKQJZIFLGMSD-GSVOUGTGSA-N D-alpha-aminobutyric acid Chemical compound CC[C@@H](N)C(O)=O QWCKQJZIFLGMSD-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 2
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 description 2
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 2
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 2
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 2
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 2
- 102100029563 Somatostatin Human genes 0.000 description 2
- 101800004701 Somatostatin-28 Proteins 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 150000001370 alpha-amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003071 bacitracin Drugs 0.000 description 2
- 229930184125 bacitracin Natural products 0.000 description 2
- CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N bacitracin A Chemical compound C1SC([C@@H](N)[C@@H](C)CC)=N[C@@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]1C(=O)N[C@H](CCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2N=CNC=2)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCCCC1 CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001906 matrix-assisted laser desorption--ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- 229920005990 polystyrene resin Polymers 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 229940075620 somatostatin analogue Drugs 0.000 description 2
- GGYTXJNZMFRSLX-DFTNLTQTSA-N somatostatin-28 Chemical compound N([C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]1C(N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC1)C(O)=O)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)=O)C(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CO GGYTXJNZMFRSLX-DFTNLTQTSA-N 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 2
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 2
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- FQRURPFZTFUXEZ-MRVPVSSYSA-N (2s)-2,3,3,3-tetrafluoro-2-(n-fluoroanilino)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@](F)(C(F)(F)F)N(F)C1=CC=CC=C1 FQRURPFZTFUXEZ-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 1
- PDRJLZDUOULRHE-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-amino-3-pyridin-2-ylpropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=N1 PDRJLZDUOULRHE-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- HMTCBXPQKWFOMG-QWXJMLLVSA-N (2s)-6-amino-n-[(2s,3r)-1-[[(2s)-1-[[(2s,3r)-1-amino-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl]-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropano Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 HMTCBXPQKWFOMG-QWXJMLLVSA-N 0.000 description 1
- TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 1-O-galloyl-3,6-(R)-HHDP-beta-D-glucose Natural products OC1C(O2)COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC1C(O)C2OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GWHQTNKPTXDNRM-UHFFFAOYSA-N 2-azaniumyl-3-(2,4-dichlorophenyl)propanoate Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=C(Cl)C=C1Cl GWHQTNKPTXDNRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMNLUUOXGOOLSP-UHFFFAOYSA-N 2-mercaptopropanoic acid Chemical compound CC(S)C(O)=O PMNLUUOXGOOLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010000599 Acromegaly Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 108010039627 Aprotinin Proteins 0.000 description 1
- 108700003245 BIM 23052 Proteins 0.000 description 1
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001263 FEMA 3042 Substances 0.000 description 1
- NIGWMJHCCYYCSF-UHFFFAOYSA-N Fenclonine Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=C(Cl)C=C1 NIGWMJHCCYYCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102400000321 Glucagon Human genes 0.000 description 1
- 108060003199 Glucagon Proteins 0.000 description 1
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Natural products OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000036770 Islet Amyloid Polypeptide Human genes 0.000 description 1
- 108010041872 Islet Amyloid Polypeptide Proteins 0.000 description 1
- SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N L-2-aminopentanoic acid Chemical compound CCC[C@H](N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000016979 Other receptors Human genes 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N Penta-digallate-beta-D-glucose Natural products OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 125000006615 aromatic heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid group Chemical group C(C1=CC=CC=C1)(=O)O WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003181 biological factor Substances 0.000 description 1
- 230000008512 biological response Effects 0.000 description 1
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N chloramine T Chemical compound [Na+].CC1=CC=C(S(=O)(=O)[N-]Cl)C=C1 VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical group 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 102000038379 digestive enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108091007734 digestive enzymes Proteins 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 description 1
- MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N glucagon Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N 0.000 description 1
- 229960004666 glucagon Drugs 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000003862 health status Effects 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 125000001041 indolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003914 insulin secretion Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L magnesium carbonate Chemical compound [Mg+2].[O-]C([O-])=O ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001095 magnesium carbonate Substances 0.000 description 1
- 229910000021 magnesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000001525 receptor binding assay Methods 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 102000004115 somatostatin receptor 5 Human genes 0.000 description 1
- 108090000680 somatostatin receptor 5 Proteins 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 235000015523 tannic acid Nutrition 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-NRMVVENXSA-N tannic acid Chemical compound OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-NRMVVENXSA-N 0.000 description 1
- 229940033123 tannic acid Drugs 0.000 description 1
- 229920002258 tannic acid Polymers 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001479 tosylchloramide sodium Drugs 0.000 description 1
- 229940108519 trasylol Drugs 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
В настоящем изобретении описывается пептид формулы
где заместители охарактеризованы в описании, являющийся циклическим аналогом соматостатина, в котором дисульфидная связь соединяет N-концевой остаток с C-концевым остатком. 20 з.п. ф-лы, 1 табл.
где заместители охарактеризованы в описании, являющийся циклическим аналогом соматостатина, в котором дисульфидная связь соединяет N-концевой остаток с C-концевым остатком. 20 з.п. ф-лы, 1 табл.
Description
Предпосылки создания изобретения
Нативный соматостатин включает в свой состав как изоформу из 14-аминокислот (соматостатин-28), так и изоформу из 18 аминокислот (соматостатин-18) (Heiman. et al., Neuroendocrinology, 45: 429-436 (1987)). В связи с коротким периодом полувыведения нативного соматостатина были разработаны различные его аналоги, например, для лечения акромегалии (Raynor, et al., Molecular Pharmacol. 43: 838 (1993)). Были идентифицированы и описаны пять различных рецепторов соматостатина. (Hoyer, et al., Naunyn-Schmiedeberg's Arch. Pharmacol., 350:441 (1994)). Соматостатин вызывает многочисленные реакции, включая модулирование высвобождения гормона, например гормона роста, глюкагона, инсулина, амилина, и высвобождение нейротрансмиттера. Некоторые из таких воздействий соматостатина сопровождаются его связыванием со специфическим рецептором соматостатина. Так, например, ингибирование ростового гормона относят к рецептору соматостатина типа-2 ("SSTR-2") (Raynor, et al., Molecular Pharmacol. 43: 838 (1993); Lloyd, et al., Am. J. Physiol. 262:0102 (1995)), тогда как в ингибировании инсулина отводят соответствующую роль рецептору соматостатина типа 5 ("SSTR-5") (Coy, et al., 197:366-371 (1993)). Предпочтительно иметь аналог, обладающий селективностью действия относительно данного подтипа специфического рецептора соматостатина, ответственного за нужный биологический ответ, что позволит, таким образом, снизить взаимодействие с другими подтипами рецепторов, которое могло бы привести к развитию побочных действий.
Нативный соматостатин включает в свой состав как изоформу из 14-аминокислот (соматостатин-28), так и изоформу из 18 аминокислот (соматостатин-18) (Heiman. et al., Neuroendocrinology, 45: 429-436 (1987)). В связи с коротким периодом полувыведения нативного соматостатина были разработаны различные его аналоги, например, для лечения акромегалии (Raynor, et al., Molecular Pharmacol. 43: 838 (1993)). Были идентифицированы и описаны пять различных рецепторов соматостатина. (Hoyer, et al., Naunyn-Schmiedeberg's Arch. Pharmacol., 350:441 (1994)). Соматостатин вызывает многочисленные реакции, включая модулирование высвобождения гормона, например гормона роста, глюкагона, инсулина, амилина, и высвобождение нейротрансмиттера. Некоторые из таких воздействий соматостатина сопровождаются его связыванием со специфическим рецептором соматостатина. Так, например, ингибирование ростового гормона относят к рецептору соматостатина типа-2 ("SSTR-2") (Raynor, et al., Molecular Pharmacol. 43: 838 (1993); Lloyd, et al., Am. J. Physiol. 262:0102 (1995)), тогда как в ингибировании инсулина отводят соответствующую роль рецептору соматостатина типа 5 ("SSTR-5") (Coy, et al., 197:366-371 (1993)). Предпочтительно иметь аналог, обладающий селективностью действия относительно данного подтипа специфического рецептора соматостатина, ответственного за нужный биологический ответ, что позволит, таким образом, снизить взаимодействие с другими подтипами рецепторов, которое могло бы привести к развитию побочных действий.
Краткое описание сущности изобретения
Изобретение относится к пептиду, описываемому следующей общей формулой:
где A1 обозначает D- или L-изомер Цис или Мпк;
A2 обозначает Асн, Глн или алифатическую аминокислоту, ароматическую аминокислоту или отсутствует;
A3 обозначает ароматическую аминокислоту;
A4 обозначает Гис или ароматическую аминокислоту;
A7 обозначает Тре, Сер или алифатическую аминокислоту;
A8 обозначает ароматическую аминокислоту;
A9 обозначает D- или L-изомер Цис;
каждый из R1 и R2 представляет собой, независимо друг от друга, H C1-12 алкил, C7-20 фенилалкил, C11-20 нафтилалкил, C1-12 гидроксиалкил, C7-20 гидроксифенилалкил, C11-20 гидроксинафтилалкил или COE1, где E1 обозначает C1-12 алкил, C7-20 фенилалкил, C11-20 нафтилалкил, C1-12 гидроксиалкил, C7-20 гидроксифенилалкил или C11-20 гидроксинафтилалкил; и
R3 обозначает NH2 или NHYCH2Z, где Y обозначает C1-12 углеводородную группировку (двухвалентную, например, линейную или разветвленную алкильную группу) и Z обозначает H, OH, CO2H или CONH2; и
дисульфидная связь соединяет боковые цепи остатков A1 и A9; или их фармацевтически приемлемую соль.
Изобретение относится к пептиду, описываемому следующей общей формулой:
где A1 обозначает D- или L-изомер Цис или Мпк;
A2 обозначает Асн, Глн или алифатическую аминокислоту, ароматическую аминокислоту или отсутствует;
A3 обозначает ароматическую аминокислоту;
A4 обозначает Гис или ароматическую аминокислоту;
A7 обозначает Тре, Сер или алифатическую аминокислоту;
A8 обозначает ароматическую аминокислоту;
A9 обозначает D- или L-изомер Цис;
каждый из R1 и R2 представляет собой, независимо друг от друга, H C1-12 алкил, C7-20 фенилалкил, C11-20 нафтилалкил, C1-12 гидроксиалкил, C7-20 гидроксифенилалкил, C11-20 гидроксинафтилалкил или COE1, где E1 обозначает C1-12 алкил, C7-20 фенилалкил, C11-20 нафтилалкил, C1-12 гидроксиалкил, C7-20 гидроксифенилалкил или C11-20 гидроксинафтилалкил; и
R3 обозначает NH2 или NHYCH2Z, где Y обозначает C1-12 углеводородную группировку (двухвалентную, например, линейную или разветвленную алкильную группу) и Z обозначает H, OH, CO2H или CONH2; и
дисульфидная связь соединяет боковые цепи остатков A1 и A9; или их фармацевтически приемлемую соль.
В одном из вариантов реализации настоящего изобретения каждая группировка из A3 и A8 представляет собой, независимо друг от друга, Фен, п-X-Фен (где X представляет собой галоген, OH, OCH3, CH3 или NO2), о-X-Фен (где X представляет собой галоген, OH, OCH3, CH3 или NO2), пиридил-Ала, Трп, β-Нал, 2,4-дихлор-Фен, Тир (I) или F5-Фен, A4 представляет собой Гис, Фен, п-X-Фен (где X представляет собой галоген, OH, OCH3, CH3 или NO2), о-X-Фен (где X представляет собой галоген, OH, OCH3, CH3 или NO2), пиридил-Ала, Трп, β-Нал, 2,4-дихлор-Фен, Тир (I) или F5-Фен, A2 - обозначает Асн, Глн, Ала, Аим, Вал, Лей, Иле, Нле, Нва, Амк, Фен, п-X-Фен (где X представляет собой галоген, OH, OCH3, CH3 или NO2), о-X-Фен (где X представляет собой галоген, OH, OCH3, CH3 или NO2), пиридил-Ала, Трп, β-Нал, 2,4-дихлор-Фен, Тир (I) F5-Фен или отсутствует и A7 обозначает Тре, Сер, Ала, Аим, Вал, Лей, Иле, Нле, Нва или Амк.
В другом варианте реализации изобретения Ар обозначает Цис, каждый из A3 и A8, независимо друг от друга, представляет собой Фен, п-X-Фен (где X обозначает галоген, OH или CH3), Тир (I) или Трп; A4 обозначает Гис, Фен, п-X-Фен (где X представляет собой галоген, OH или CH3), Тир (I) или Трп, A2 обозначает Асн, Глн или отсутствует и A7 обозначает Тре или Сер.
В еще одном варианте реализации настоящего изобретения A2 обозначает Асн или отсутствует, A3 обозначает Фен, A4 обозначает Фен, Гис, п-X-Фен (где X представляет собой галоген, OH или CH3), Тир (I) или Трп, A8 обозначает Фен или п-X-Фен (где X представляет собой галоген, OH или CH3) и каждая из группировок R1 и R2, независимо друт от друга, представляет собой H и R3 обозначает NH2.
Ниже приведены примеры пептидов по настоящему изобретению, которые соответствуют приведенной выше формуле:
H2-c[D-Цис-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2 (Аналог II)
H2-c[Цис-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис)-NH2,
H2-c[D-Цис-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[D-Цис-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2 (Аналог IV),
H2-c[D-Цис-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-с[Цис-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2 (Аналог III),
H2-с(D-Цис-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[D-Цис-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2 (Аналог VIII),
H2-c[D-Цис-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[D-Цис-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Асн-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2 (Аналог V),
H2-c[D-Цис-Асн-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Асн-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[D-Цис-Асн-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
H2-с(Цис-Асн-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[D-Цис-Асн-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Асн-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[D-Цис-Асн-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Асн-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[D-Цис-Асн-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-НH2,
H2-c[Цис-Асн-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[D-Цис-Асн-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Асн-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[D-Цис-Асн-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Асн-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[D-Цис-Асн-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Фен-Тир-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2 (Аналог VI),
H2-с[Цис-Фен-β-Нал-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2 (Аналог VII),
H2-c[Цис-Фен-Хфа-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2 (Аналог IX),
H2-c[Мра-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2 (Аналог X),
H2-c[Цис-Фен-Тир-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-D-Цис]-NH2 (Аналог XI),
H2-c[Цис-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Тир-Цис]-NH2 (Аналог XII),
H2-c[Цис-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2 (Аналог XIII).
H2-c[D-Цис-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2 (Аналог II)
H2-c[Цис-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис)-NH2,
H2-c[D-Цис-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[D-Цис-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2 (Аналог IV),
H2-c[D-Цис-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-с[Цис-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2 (Аналог III),
H2-с(D-Цис-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[D-Цис-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2 (Аналог VIII),
H2-c[D-Цис-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[D-Цис-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Асн-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2 (Аналог V),
H2-c[D-Цис-Асн-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Асн-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[D-Цис-Асн-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
H2-с(Цис-Асн-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[D-Цис-Асн-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Асн-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[D-Цис-Асн-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Асн-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[D-Цис-Асн-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-НH2,
H2-c[Цис-Асн-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[D-Цис-Асн-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Асн-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[D-Цис-Асн-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Асн-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[D-Цис-Асн-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
H2-c[Цис-Фен-Тир-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2 (Аналог VI),
H2-с[Цис-Фен-β-Нал-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2 (Аналог VII),
H2-c[Цис-Фен-Хфа-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2 (Аналог IX),
H2-c[Мра-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2 (Аналог X),
H2-c[Цис-Фен-Тир-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-D-Цис]-NH2 (Аналог XI),
H2-c[Цис-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Тир-Цис]-NH2 (Аналог XII),
H2-c[Цис-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2 (Аналог XIII).
За исключением N-концевой аминокислоты все сокращения (например, Ала или A2) аминокислот в настоящем описании соответствуют структуре -NH-CH(R)-CO-, где R является боковой цепью аминокислоты (например, представляет собой CH3 в Ала). В случае N-концевой аминокислоты сокращение соответствует структуре = N-CH(CH2SH)-CO-, если это D- или L-изомер Цис, или C=(-CH2SH)-CO, если это D- или L-изомер Мпк, при этом R представляет собой боковую цепь аминокислоты. Нле, Нва, пиридил-Ала, F5-Фен, 2,4-дихлор-Фен, β-Нал, Амк, Мпк, Хфа и Аим представляют собой сокращенные обозначения соответственно: норлейцина, норвалина, β-пиридил-аланина, пентафтор-фенилаланина, 2,4-дихлорфенилаланина, β-нафтилаланина, α-аминомасляной кислоты, меркаптопропионовой кислоты, п-хлорфенилаланина и α-аминоизомасляной кислоты. Обозначение Тир (I) относится к йодсодержащему остатку тирозина (например, к 3-I-Тир, 5-I-Тир, 3,5-I-Тир), в котором йод может представлять собой радиоактивный изотоп, например, I125, I127 или I131. Алифатическая кислота представляет собой α-аминокислоту, включающую одну или две боковых цепи, которые, независимо друг от друга, являются углеводородами, например представляют собой линейную или разветвленную цепочку, содержащую от 1 до 6 атомов углерода. Примеры алифатических аминокислот включают Ала, Аим, Вал, Лей, Иле, Нле, Нва или Амк. Ароматическая аминокислота представляет собой α-аминокислоту, боковая цепочка которой несет нейтральный (т.е. не кислый или не щелочной) ароматический заместитель, например, замещенный или не замещенный фенил, нафтил или ароматическую гетероциклическую группу (например, пиридил или индолил). Примеры ароматических аминокислот включают Фен, п-X-Фен (где X обозначает галоген (например, F, Cl или I), OH, OCH3, CH3 или NO2), о-X-Фен (где X обозначает галоген, OH, OCH3, CH3 или NO2), пиридил-Ала, Трп, β-Нал, 2,4-дихлор-Фен, Тир (I), F5-Фен. Если аминокислотный остаток представлен оптически активным изомером, это L-изомер, если особо не оговорено иное. Кроме того, в вышеуказанной общей формуле гидроксиалкил, гидроксифенилалкил и гидроксинафтилалкил могут содержать от 1 до 4 гидроксильных заместителей и COE1-C= OE1. Примеры -C=OE1 включают, не ограничиваясь ими, п-гидроксифенилпропионил (т. е. -C=OCH2-CH2-C6H4-OH) и фенилпропионил. В приведенной выше формуле не показана дисульфидная связь, соединяющая тиоловую группу на боковой цепи остатка A1 (например, Мпк, D-Мпк, Цис или D-Цис) и тиоловую группу на боковой цепи остатка A9 (например, Мпк, D-Мпк, Цис или D-Цис). Пептид по настоящему изобретению обозначается также в другой форме, например в виде H2-c[Цис-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис] -NH2, в этом случае два связанных дисульфидной связью остатка (т.е. Цис) помещены в скобках после "c".
Пептиды по настоящему изобретению могут применяться для ингибирования высвобождения инсулина у субъекта (у млекопитающего, такого как больной человек). Так, пептиды могут использоваться при лечении физиологических состояний, при которых желательно достичь ингибирования высвобождения инсулина, например, при диабете типа II. Кроме того, пептиды по настоящему изобретению, несущие остаток Тир (I), могут использоваться для сканирования клеток, содержащих рецепторы соматостатина (например, SSTR-5). Такие пептиды по настоящему изобретению могут использоваться либо in vivo для обнаружения клеток, несущих рецепторы соматостатина (например, раковых клеток), или in vitro как радиоактивный лиганд в тесте на связывание с рецептором соматостатина.
Пептиды по настоящему изобретению могут быть представлены фармацевтически приемлемыми солями. Примеры таких солей включают, не ограничиваясь ими, соли, образованные на основе органических кислот (например, уксусной, молочной, малеиновой, лимонной, яблочной, аскорбиновой, янтарной, бензойной, метансульфоновой, толуолсульфоновой или памовой кислот), неорганических кислот (т.е. соляной кислоты, серной кислоты или фосфорной кислоты), полимерных кислот (например, дубильной кислоты, карбоксиметилцеллюлозы, полимера молочной кислоты, полигликолевой или сополимеров полимолочной кислоты - гликолевой кислоты).
Терапевтически эффективное количество пептида по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемое вещество носителя (например, карбоната магния, лактозы или фосфолипида, с которыми лекарственное соединение образует мицеллу) вместе образуют лекарственную композицию (например, в виде пилюлей, таблеток, капсул или жидкости) для введения (например, перорального, внутривенного, чрескожного, внутрилегочного, вагинального, подкожного, назального, методом ионофореза, внутритрахеального) субъекту, нуждающемуся в пептиде. Пилюля, таблетка или капсула могут быть покрыты веществом, способным защищать композицию от действия желудочного сока или пищеварительных ферментов в желудке субъекта в течение периода времени, достаточного для того, чтобы композиция прошла нерасщепленной в тонкий кишечник субъекта. Лекарственная композиция может также иметь вид формы пролонгированного действия, которая может как подлежать биологическому разложению, так и не подвергаться деградации под действием биологических факторов и которая используется для подкожного или внутримышечного введения. См., в частности, патенты США 3773919 и 4767628 и заявки PCT N WO 94/00148.
Возможно также осуществлять непрерывное введение с помощью имплантируемого или наружного насоса (например, насоса INFUSAIDTM), пригодного для введения лекарственной композиции. Пептид может быть введен пациенту перед сном.
Доза пептида по настоящему изобретению, применяемая при лечении вышеуказанных заболеваний, варьирует в зависимости от способа введения препарата, возраста и веса тела субъекта, состояния здоровья субъекта, подлежащего лечению, и, наконец, будет определяться в каждом конкретном случае лечащим врачом или ветеринаром. Такое количество пептида, определяемое лечащим врачом или ветеринаром, в настоящем описании будет соответствовать термину "терапевтически эффективное количество".
В рамках настоящего изобретения рассматривается также пептид, охватываемый приведенной выше общей формулой, который используется как для лечения заболеваний или расстройств, связанных с потребностью ингибировать высвобождение инсулина, например, при диабете типа II, так и для применения с целью обнаружения рецепторов соматостатина, например, при сканировании с использованием радиоактивных изотопов.
Другие характеристики и преимущества настоящего изобретения будут очевидны из приведенного ниже подробного описания, а также из формулы изобретения.
Подробное описание изобретения
Синтез и использование аналогов соматостатина по настоящему изобретению не вызовут затруднений у специалистов со средним уровнем знаний в данной области. Если особо не оговорено иное, все технические и научные термины, применяемые в контексте настоящего описания, соответствуют тем их значениям, которые специалисты традиционно им присваивают. Кроме того, все публикации, патентные заявки, патенты и другие упомянутые в описании ссылки приведены в нем в качестве вспомогательных материалов.
Синтез и использование аналогов соматостатина по настоящему изобретению не вызовут затруднений у специалистов со средним уровнем знаний в данной области. Если особо не оговорено иное, все технические и научные термины, применяемые в контексте настоящего описания, соответствуют тем их значениям, которые специалисты традиционно им присваивают. Кроме того, все публикации, патентные заявки, патенты и другие упомянутые в описании ссылки приведены в нем в качестве вспомогательных материалов.
Мы считаем, что каждый специалист со средним уровнем знаний в данной области на основании приведенного в заявке описания может в полной мере использовать настоящее изобретение. Приведенные ниже конкретные варианты реализации настоящего изобретения следует, в этой связи, понимать просто как иллюстративные, никоим образом не ограничивающие изобретение.
Синтез аналогов соматостатина
Синтез коротких пептидов хорошо изучен в области химии пептидов. (См., в частности, Stewart et al., Solid Phase Peptide Synthesis (Pierce Chemical Co., 2d ed., 1984)). Ниже описан способ синтеза Аналога I. Другие пептиды по настоящему изобретению могут быть получены аналогичным способом любым специалистом со средним уровнем знаний в данной области.
Синтез коротких пептидов хорошо изучен в области химии пептидов. (См., в частности, Stewart et al., Solid Phase Peptide Synthesis (Pierce Chemical Co., 2d ed., 1984)). Ниже описан способ синтеза Аналога I. Другие пептиды по настоящему изобретению могут быть получены аналогичным способом любым специалистом со средним уровнем знаний в данной области.
Бензилгидриламин-полистироловую смолу (Advanced ChemTech, Inc., Louisville, KY) (1,1 г, 0,5 ммоль) в форме, содержащей хлоридный ион, помещают в реакционный сосуд в системе программируемого синтеза пептидов (Advanced ChemTech ACT 200) для внесения следующих реагентов/растворителей: (а) метиленхлорида; (б) 33% трифторуксусной кислоты в метиленхлориде (2 раза по 1 и 25 минут каждого); (в) метиленхлорида; (г) этанола: (д) метиленхлорида; и (е) 10% триэтиламина в хлороформе.
Нейтрализованную смолу перемешивают с Бок-S-4-метилбензил-Цис и диизопропилкарбодиимидом (каждого по 1.5 ммоль) в метиленхлориде в течение 1 часа и полученную аминокислотную смолу подвергают циклической обработке, включающей стадии от (а) до (е) вышеописанной программы. Затем с применением той же самой процедуры проводят последовательное связывание следующих аминокислот (1,5 ммоль): Бок-Фен, Бок-O-бензил-Тре, Бок-N-бензилоксикарбонил-Лиз; Бок-D-Трп, Бок-Фен, Бок-Фен и Бок-S-метилбензил-Цис. После промывания и высушивания вес готовой смолы составляет 1,6 г.
Затем смолу (1,6 г, 0,5 ммоль) смешивают с анизолом (5 мл), дитиотрейтолом (100 мг) и безводным фтороводородом (35 мл) при 0oC и перемешивают в течение 45 минут. Избыток фтороводорода быстро выпаривают в потоке сухого азота и осажденный при этом свободный пептид промывают диэтиловым эфиром. После этого неочищенный пептид растворяют в 500 мл 90% уксусной кислоты, к которой добавляют концентрированный раствор I2/MeOH до получения стойкого коричневого цвета. Удаляют избыток I2 добавлением аскорбиновой кислоты и выпаривают раствор до небольшого объема и наносят на колонку (2,5 х 90 см) с Сефадексом G-25, которую промывают 50% AcOH. Затем объединяют фракции, содержащие основной компонент, на основании данных об ультрафиолетовом (УФ) поглощении и результатов тонкослойной хроматографии, выпаривают до небольшого объема и наносят на колонку (1,5 х 70 см) с октадецилсилан-силикагелем VYDACTM (10-15 мкм). Проводят элюцию с колонки с применением линейного градиента от 80 процентов А и 20 процентов Б до 40 процентов А и 60 процентов Б, где А является 0,1% трифторуксусной кислотой (ТФУ) в воде и Б представляет собой 79,9% ацетонитрила, 20% воды и 0,1% ТФУ. Фракции исследуют с помощью тонкослойной хроматографии (ТСХ) и аналитической высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) и после этого объединяют так, чтобы добиться максимальной чистоты. Применяя повторную лиофилизацию раствора из воды, получают 95 мг продукта в виде белого пушистого порошка.
Анализы методом ТСХ и ВЭЖХ указывают на гомогенность продукта. Аминокислотный анализ кислотного гидролизата и масс-спектрометрия методом лазерной десорбции матрицы (MALDI MS) подтверждают состав циклического октапептида (расчетный MB - 1077, получен MB - 1080).
Ниже приведен метод синтеза Аналога V. Бензилгидриламинполистироловую смолу (Advanced ChemTech, Inc., Louisville, KY) (0,7 r, 0,25 ммоль) в форме, содержащей хлоридный ион, помещают в реакционный сосуд в системе программируемого синтеза пептидов (Advanced ChemTech ACT 200) для внесения следующих реагентов/растворителей: (а) метиленхлорида; (б) 33% трифторуксусной кислоты в метиленхлориде (2 раза по 1 и 25 минут каждого); (в) метиленхлорида; (г) этанола; (д) метиленхлорида; и (е) 10% триэтиламина в хлороформе.
Нейтрализованную смолу перемешивают с Бок-S-4-метилбензил-Цис и диизопропилкарбодиимидом (каждого по 1,5 ммоль) в метиленхлориде в течение 1 часа и полученную аминокислотную смолу подвергают циклической обработке, включающей стадии от (а) до (е) вышеописанной программы. Затем с применением той же самой процедуры проводят последовательное связывание следующих аминокислот (1,5 ммоль): Бок-Фен, Бок-O-бензил-Тре, Бок-N-бензилокосикарбонил-Лиз, Бок-D-Трп, Бок-Фен, Бок-Фен. Бок-Асн и Бок-S-метилбензил-Цис. После промывания и высушивания вес готовой смолы составляет 1,2 г. Далее пептидную смолу подвергают циклической обработке, включающей расщепление фтороводородом и обработку I2, как описано выше. Очистка с использованием колоночной хроматографии, как описано выше, приводит к получению 21 мг циклического нанопептида, который, как показывают анализы с применением ВЭЖХ и ТСХ, является гомогенным. Аминокислотный анализ кислотного гидролизата и анализ методом MALDI MS подтверждают состав циклического нанопептида (расчетное значение MB - 1192; полученное значение MB - 1192).
Синтез йодсодержащих аналогов соматостатина на основе тирозинового остатка (например, с помощью хлорамин-T метода) хорошо описан в литературе и доступен для реализации каждому специалисту со средним уровнем знаний в данной области. (См. , например, Czemick, et al., J. Biol Chem. 258:5525 (1993) и Европейский патент N 389180 B1).
Тест на связывание с рецептором соматостатина
(1) Тест на связывание с человеческим SSTR-2
Клетки CHO-K1 (клетки яичника китайского хомячка), полученные из Американской Коллекции культур (ATCC, Rockville, MD) (ATCC N CCL61), подвергают трансфекции кДНК из человеческого SSTR-2, которая описана в работе Ямада с соавт. (Yamada, et al. , Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 89:251-255 (1992)) и доступна из ATCC (ATCC N 79046) с использованием стандартной методики, известной в молекулярной биологии. (См., в частности, Patel, et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 198:605 (1994)). Неочищенные мембраны получают гомогенизацией CHO-K1 клеток после трансфекции человеческим SSTR-2 в 20 мл охлажденного на льду 50 мМ Трис-HCl (буфер А) с помощью гомогенизатора POLYTRONTM (Brinkmann Instruments, Westbury, NY) при установке в положении 6, в течение 15 секунд. Добавляют еще некоторое количество буфера А до получения конечного объема 40 мл и центрифугируют гомогенат с использованием ротора SS-34 (DuPont, Newton, CT) в SORVALTM при 39000 g в течение 10 минут при температуре 0-4oC. Полученный после центрифугирования супернатант декантриуют и отбрасывают. Осадок гомогенизируют в охлажденном на льду буфере А, разбавляют и центрифугируют, как и раньше. Полученный в конце процедур осадок ресуспендируют в 10 мМ Трис HCl и выдерживают на льду для проведения теста на связывание с рецептором.
(1) Тест на связывание с человеческим SSTR-2
Клетки CHO-K1 (клетки яичника китайского хомячка), полученные из Американской Коллекции культур (ATCC, Rockville, MD) (ATCC N CCL61), подвергают трансфекции кДНК из человеческого SSTR-2, которая описана в работе Ямада с соавт. (Yamada, et al. , Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 89:251-255 (1992)) и доступна из ATCC (ATCC N 79046) с использованием стандартной методики, известной в молекулярной биологии. (См., в частности, Patel, et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 198:605 (1994)). Неочищенные мембраны получают гомогенизацией CHO-K1 клеток после трансфекции человеческим SSTR-2 в 20 мл охлажденного на льду 50 мМ Трис-HCl (буфер А) с помощью гомогенизатора POLYTRONTM (Brinkmann Instruments, Westbury, NY) при установке в положении 6, в течение 15 секунд. Добавляют еще некоторое количество буфера А до получения конечного объема 40 мл и центрифугируют гомогенат с использованием ротора SS-34 (DuPont, Newton, CT) в SORVALTM при 39000 g в течение 10 минут при температуре 0-4oC. Полученный после центрифугирования супернатант декантриуют и отбрасывают. Осадок гомогенизируют в охлажденном на льду буфере А, разбавляют и центрифугируют, как и раньше. Полученный в конце процедур осадок ресуспендируют в 10 мМ Трис HCl и выдерживают на льду для проведения теста на связывание с рецептором.
Аликвоты мембранного препарата инкубируют в течение 90 минут при 25oC с 0,05 нМ [125I-Тир]МК-678 (2000 Кюри/ммоль; c[N-метил-Ала-Тир(I125)-D-Трп-Лиз-Вал-Фен] ) в 50 мМ HEPES (pH 7,4), содержащем исследуемый пептид в различных концентрациях (т.е. от 10-11 до 10-6 М), 10 мг/мл бычьего сывороточного альбумина фракция V (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO), MgCl2 (5 мМ), тразилол (200 КИЕ/мл), бацитрацин (0,02 мг/мл) и фенилметил-сульфонилфторид (0,02 мг/мл). Конечный объем составляет 0,3 мл. Инкубации заканчивают проведением быстрой фильтрации через фильтры GF/C (предварительно вымоченные в 0,3% полиэтиленимине в течение 30 минут) с использованием фильтровального коллектора (Brandel, Gaithersburg, MD). Каждую трубку и каждый фильтр затем промывают по три раза аликвотами охлажденного на льду буфера А по 5 мл. Специфическое связывание определяют по уровню общей радиоактивности [125I-Тир] МК-678 минус значение радиоактивности, связанной в присутствии 200 нМ соматостатина-14.
С применением указанного теста исследуют следующие пептиды: соматостатин-14, соматостатин-28, Аналог I, Аналог II, Аналог III, Аналог IV и Аналог V. Выше приведена структура Аналогов I-V. Значения величины Ki вычисляют с помощью следующей формулы:
Ki = IC50/[1+(LC/LEC)],
где IC50 (ИК50) обозначает концентрацию исследуемого пептида, которая приводит к ингибированию на 50 процентов специфического связывания радиоактивного лиганда [125I-Тир]МК-678, LC обозначает концентрацию радиоактивного лиганда (0,05 нМ) и LEC представляет собой значение константы равновесия диссоциации радиоактивного лиганда (0,155 нМ). Значения Ki, вычисленные для исследуемых пептидов, приведены в таблице в колонке, обозначенной "SSTR-2".
Ki = IC50/[1+(LC/LEC)],
где IC50 (ИК50) обозначает концентрацию исследуемого пептида, которая приводит к ингибированию на 50 процентов специфического связывания радиоактивного лиганда [125I-Тир]МК-678, LC обозначает концентрацию радиоактивного лиганда (0,05 нМ) и LEC представляет собой значение константы равновесия диссоциации радиоактивного лиганда (0,155 нМ). Значения Ki, вычисленные для исследуемых пептидов, приведены в таблице в колонке, обозначенной "SSTR-2".
(2) Тест на связывание с человеческим SSTR-5
Клетки CHO-K1 подвергают трансфекции кДНК из человеческого SSTR-5 по методу, описанному в работе Ямада с соавт. (Yamada, et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. , 195-844 (1993)) с использованием стандартной методики, известной в молекулярной биологии. (См., в частности, Patel et al., Biochem. Biophys. Res. Comm. 198:605 (1994)). Неочищенные мембраны получают гомогенизацией CHO-K1 клеток после трансфекции человеческим SSTR-5 в 20 мл охлажденного на льду 50 мМ Трис-HCI в гомогенизаторе POLYTRONTM (установка в положении 6, 15 с). Добавляют еще некоторое количество буфера до конечного объема 40 мл и центрифугируют гомогенат с использованием ротора SS-34 в SORVALTM при 39000 g в течение 10 минут при температуре 0-4oC. Полученный после центрифугирования супернатант декантируют и отбрасывают. Осадок гомогенизируют в охлажденном на льду буфере, разбавляют и центрифугируют, как и раньше. Полученный в конце осадок ресуспендируют в 10 мМ Трис HCl и выдерживают на льду для проведения теста на связывание с рецептором.
Клетки CHO-K1 подвергают трансфекции кДНК из человеческого SSTR-5 по методу, описанному в работе Ямада с соавт. (Yamada, et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. , 195-844 (1993)) с использованием стандартной методики, известной в молекулярной биологии. (См., в частности, Patel et al., Biochem. Biophys. Res. Comm. 198:605 (1994)). Неочищенные мембраны получают гомогенизацией CHO-K1 клеток после трансфекции человеческим SSTR-5 в 20 мл охлажденного на льду 50 мМ Трис-HCI в гомогенизаторе POLYTRONTM (установка в положении 6, 15 с). Добавляют еще некоторое количество буфера до конечного объема 40 мл и центрифугируют гомогенат с использованием ротора SS-34 в SORVALTM при 39000 g в течение 10 минут при температуре 0-4oC. Полученный после центрифугирования супернатант декантируют и отбрасывают. Осадок гомогенизируют в охлажденном на льду буфере, разбавляют и центрифугируют, как и раньше. Полученный в конце осадок ресуспендируют в 10 мМ Трис HCl и выдерживают на льду для проведения теста на связывание с рецептором.
Аликвоты мембранного препарата инкубируют в течение 30 минут при 30oC с 0,05 нМ [125I-Тир11]соматостатина-14 [2000 Кюри/ммоль (Amersham Corp., Arlington Heights, IL) в 50 мМ HEPES (pH 7,4), содержащем исследуемый пептид в различных концентрациях (например, от 10-11 до 10-6 М), 10 мг/мл бычьего сывороточного альбумина (фракция V), MgCl2 (5 мМ), тразилол (200 КИЕ/мл), бацитрацин (0,02 мг/мл) и фенилметил-сульфонилфторид (0,02 мг/мл). Конечный объем составляет 0,3 мл. Инкубации заканчивают проведением быстрой фильтрации через фильтры GF/C (предварительно вымоченные в 0,3% полиэтиленимине в течение 30 минут) с использованием фильтровального коллектора фирмы Брандель. Каждую трубку и каждый фильтр затем промывают по три раза аликвотами охлажденного на льду буфера по 5 мл. Специфическое связывание определяют по уровню общей радиоактивности [125I-Тир11]соматостатина-14 минус значение радиоактивности, связанной в присутствии 1000 нМ лиганда BIM-23052 рецептора соматостатина типа 5. (H2-D-Фен-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Трп-NH2). Значения величины Ki вычисляют с помощью следующей формулы: IC50/[1+(LC/LEC)], где IC50 (ИК50) обозначает концентрацию исследуемого пептида, которая приводит к ингибированию на 50 процентов специфического связывания радиоактивного лиганда [125I-Тир11] соматостатина-14, LC обозначает концентрацию радиоактивного лиганда (0,05 нМ) и LEC представляет собой значение константы равновесия диссоциации радиоактивного лиганда (0,16 нМ). Значения Ki, вычисленные для исследуемых пептидов, приведены в таблице в колонке, обозначенной "SSTR-5".
В таблице приведены также соответствующие значения коэффициентов Ki для человеческого SSTR-2 и Ki для человеческого SSTR-5. Пептиды по настоящему изобретению (т. е. Аналоги I-V) имеют гораздо более высокие значения указанных коэффициентов и характеризуются большей селективностью для SSTR-5, чем для SSTR-2.
Другие варианты реализации изобретения
Следует иметь в виду, что приведенное выше описание изобретения имеет своей целью иллюстрацию изобретения, но не ограничение его никоим образом, которое полностью определяется прилагаемой формулой изобретения. Все другие аспекты, преимущества и модификации также охватываются формулой изобретения.
Следует иметь в виду, что приведенное выше описание изобретения имеет своей целью иллюстрацию изобретения, но не ограничение его никоим образом, которое полностью определяется прилагаемой формулой изобретения. Все другие аспекты, преимущества и модификации также охватываются формулой изобретения.
Claims (18)
1. Пептид формулы:
где А1 - обозначает D- или L-изомер Цис или Мпк;
А2 обозначает Асн, Глн или алифатическую аминокислоту, ароматическую аминокислоту или отсутствует;
А3 обозначает ароматическую аминокислоту;
А4 обозначает Гис или ароматическую аминокислоту;
А7 обозначает Тре, Сер или алифатическую аминокислоту;
А8 обозначает ароматическую аминокислоту;
А9 обозначает D- или L-изомер Цис;
каждый из R1 и R2 представляет собой, независимо друг от друга, Н, С1-12 алкил, С7-20 фенилалкил, С11-20 нафтилалкил, С1-12 гидроксиалкил, С7-20 гидроксифенилалкил, С11-20 гидроксинафтилалкил или СОЕ1, где Е1 обозначает С1-12 алкил, С7-20 фенилалкил, С11-20нафтилалкил, С1-12 гидроксиалкил, С7-20 гидроксифенилалкил или С11-20 гидроксинафтилалкил;
R3 обозначает NH2 или NH•Y•СН2•Z, где Y обозначает С1-12 углеводородную группировку и Z обозначает Н, ОН, СО2Н или СОNH2;
дисульфидная связь соединяет боковые цепи остатков А1 и А9;
или их фармацевтически приемлемую соль.
где А1 - обозначает D- или L-изомер Цис или Мпк;
А2 обозначает Асн, Глн или алифатическую аминокислоту, ароматическую аминокислоту или отсутствует;
А3 обозначает ароматическую аминокислоту;
А4 обозначает Гис или ароматическую аминокислоту;
А7 обозначает Тре, Сер или алифатическую аминокислоту;
А8 обозначает ароматическую аминокислоту;
А9 обозначает D- или L-изомер Цис;
каждый из R1 и R2 представляет собой, независимо друг от друга, Н, С1-12 алкил, С7-20 фенилалкил, С11-20 нафтилалкил, С1-12 гидроксиалкил, С7-20 гидроксифенилалкил, С11-20 гидроксинафтилалкил или СОЕ1, где Е1 обозначает С1-12 алкил, С7-20 фенилалкил, С11-20нафтилалкил, С1-12 гидроксиалкил, С7-20 гидроксифенилалкил или С11-20 гидроксинафтилалкил;
R3 обозначает NH2 или NH•Y•СН2•Z, где Y обозначает С1-12 углеводородную группировку и Z обозначает Н, ОН, СО2Н или СОNH2;
дисульфидная связь соединяет боковые цепи остатков А1 и А9;
или их фармацевтически приемлемую соль.
2. Пептид по п.1, отличающийся тем, что каждый из А3 и А8 представляет собой, независимо друг от друга, Фен, п-Х-Фен (где Х представляет собой галоген, ОН, ОСН3, СН3 или NO2), о-Х-Фен (где Х представляет собой галоген, ОН, ОСН3, СН3 или NO2), пиридил-Ала, Трп, β-Нал, 2,4-дихлор-Фен, Тир (I) или F5-Фен, и А4 представляет собой Гис, Фен, п-Х-Фен (где Х представляет собой галоген, ОН, ОСН3, СН3 или NO2), о-Х-Фен (где Х представляет собой галоген, ОН, ОСН3, СН3 или NO2), пиридил-Ала, Трп, β-Нал, 2,4-дихлор-Фен, Тир (I) или F5-Фен.
3. Пептид по п.2, отличающийся тем, что А2 отсутствует и А7 представляет собой Тре, Сер, Ала, Аим, Вал, Лей, Иле, Нле, Нва или Амк.
4. Пептид по п.3, отличающийся тем, что А9 обозначает Цис.
5. Пептид по п.4, отличающийся тем, что каждый из А3 и А8 представляет собой, независимо друг от друга, Фен, п-Х-Фен (где Х обозначает галоген, ОН или СН3), Тир (I) или Трп и А4 обозначает Гис, Фен, п-Х-Фен (где Х представляет собой галоген, ОН или СН3), Тир (I) или Трп.
6. Пептид по п.5, отличающийся тем, что А7 представляет собой Тре или Сер.
7. Пептид по п.6, отличающийся тем, что А3 представляет собой Фен, А4 представляет собой Фен, п-Х-Фен (где Х обозначает галоген, ОН, ОСН3, СН3 или NO2), Гис, Тир (I) или Трп и А8 представляет собой Фен или п-Х-Фен (где Х обозначает галоген, ОН, ОСН3, СН3 или NO2).
8. Пептид по п.6, отличающийся тем, что А3 представляет собой Фен, А4 представляет собой Фен, Тир, Тир (I) Трп и А8 представляет собой
9. Пептид по п.8, отличающийся тем, что каждый из R1 и R2 обозначает, независимо друг от друга, Н и R3 представляет собой NH2.
9. Пептид по п.8, отличающийся тем, что каждый из R1 и R2 обозначает, независимо друг от друга, Н и R3 представляет собой NH2.
10. Пептид по п.9 формулы:
Н2-с[Цис-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2 или
Н2-с[Цис-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
11. Пептид по п.7 формулы:
Н2-с[Цис-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2 или
Н2-с[D-Цис-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2.
Н2-с[Цис-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2 или
Н2-с[Цис-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
11. Пептид по п.7 формулы:
Н2-с[Цис-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2 или
Н2-с[D-Цис-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2.
12. Пептид по п.2, отличающийся тем, что А2 обозначает Асн, Глн, Ала, Аим, Вал, Лей, Иле, Нле, Нва, Амк, Фен, п-Х-Фен (где Х представляет собой галоген, ОН, ОСН3, СН3 или NO2), о-Х-Фен (где Х представляет собой галоген, ОН, ОСН3, СН3 или NO2), пиридил-Ала, Трп, β-Нал, 2,4-дихлор-Фен, Тир (I) или F5-Фен и А7 обозначает Тре, Сер, Ала, Аим, Вал, Лей, Иле, Нле, Нва или Амк.
13. Пептид по п.12, отличающийся тем, что А9 обозначает Цис.
14. Пептид по п.13, отличающийся тем, что каждый из А3, А4 и А8 обозначает, независимо друг от друга, Фен, п-Х-Фен (где Х представляет собой галоген, ОН, или СН3), Тир(I) или Трп и А4 обозначает Гис, Фен, п-Х-Фен (где Х представляет собой галоген, ОН, или СН3), Тир (I) или Трп.
15. Пептид по п.14, отличающийся тем, что А2 обозначает Асн или Глн и А7 обозначает Тре или Сер.
16. Пептид по п.15, отличающийся тем, что А3 обозначает Фен, А4 обозначает Фен, п-Х-Фен (где Х представляет собой галоген, ОН, ОСН3, СН3 или NO2), Гис, Тир (I) или Трп и А8 обозначает Фен или п-Х-Фен (где Х представляет собой галоген, ОН, ОСН3, СН3 или NO2).
17. Пептид по п.16, отличающийся тем, что А3 обозначает Фен, А4 обозначает Фен, Тир, Тир (I) или Трп и А8 обозначает Фен.
18. Пептид по п.17, отличающийся тем, что А2 обозначает Асн, каждый из R1 и R2, независимо друг от друга обозначает Н и R3 обозначает NH2.
19. Пептиды по п.18 формулы:
Н2-с[D-Цис-Асн-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
20. Пептид по п.16 формулы:
Н2-с[D-Цис-Асн-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Асн-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Асн-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Асн-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Асн-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Асн-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Асн-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Асн-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Асн-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Асн-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Асн-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Асн-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Асн-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Асн-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2 или
Н2-с[D-Цис-Асн-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2.
Н2-с[D-Цис-Асн-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
20. Пептид по п.16 формулы:
Н2-с[D-Цис-Асн-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Асн-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Асн-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Асн-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Асн-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Асн-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Асн-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Асн-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Асн-Фен-Трп-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Асн-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Асн-Фен-Гис-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Асн-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[D-Цис-Асн-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2,
Н2-с[Цис-Асн-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2 или
Н2-с[D-Цис-Асн-Фен-Тир(I)-D-Трп-Лиз-Сер-Фен-Цис]-NH2.
21. Пептид по п.1 формулы:
Н2-с[Цис-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2.
Н2-с[Цис-Фен-Фен-D-Трп-Лиз-Тре-Фен-Цис]-NH2.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US463395P | 1995-09-29 | 1995-09-29 | |
| US60/004,633 | 1995-09-29 | ||
| US08/578,037 | 1995-12-26 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU98108419A RU98108419A (ru) | 2000-04-10 |
| RU2177006C2 true RU2177006C2 (ru) | 2001-12-20 |
Family
ID=21711715
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU98108419A RU2177006C2 (ru) | 1995-09-29 | 1996-09-04 | Циклические пептидные аналоги соматостатина |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2177006C2 (ru) |
| ZA (1) | ZA967972B (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2329273C2 (ru) * | 2003-04-11 | 2008-07-20 | Сосьете Де Консей Де Решерш Э Д`Аппликасьон Сьентифик С.А.С. | Химерные аналоги лигандов соматостатиновых и допаминовых рецепторов, фармацевтические композиции на их основе и способы воздействия на рецепторы соматостатина и/или допамина |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PL368941A1 (en) * | 2001-04-09 | 2005-04-04 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Somatostatin agonists |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4191754A (en) * | 1979-02-28 | 1980-03-04 | Merck & Co., Inc. | Bicyclic somatostatin analogs |
| US4238481A (en) * | 1977-09-28 | 1980-12-09 | Ciba-Geigy Corporation | Novel cyclopeptides |
| EP0214872A2 (en) * | 1985-09-12 | 1987-03-18 | The Administrators of The Tulane Educational Fund | Somatostatin analoge |
| US4837303A (en) * | 1985-06-25 | 1989-06-06 | Diamalt Aktiengesellschaft | Novel somatostatin derivatives |
-
1996
- 1996-09-04 RU RU98108419A patent/RU2177006C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1996-09-29 ZA ZA967972A patent/ZA967972B/xx unknown
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4238481A (en) * | 1977-09-28 | 1980-12-09 | Ciba-Geigy Corporation | Novel cyclopeptides |
| US4191754A (en) * | 1979-02-28 | 1980-03-04 | Merck & Co., Inc. | Bicyclic somatostatin analogs |
| US4837303A (en) * | 1985-06-25 | 1989-06-06 | Diamalt Aktiengesellschaft | Novel somatostatin derivatives |
| EP0214872A2 (en) * | 1985-09-12 | 1987-03-18 | The Administrators of The Tulane Educational Fund | Somatostatin analoge |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2329273C2 (ru) * | 2003-04-11 | 2008-07-20 | Сосьете Де Консей Де Решерш Э Д`Аппликасьон Сьентифик С.А.С. | Химерные аналоги лигандов соматостатиновых и допаминовых рецепторов, фармацевтические композиции на их основе и способы воздействия на рецепторы соматостатина и/или допамина |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ZA967972B (en) | 1997-05-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3983806B2 (ja) | ソマトスタチンの環状ペプチド類似体 | |
| JP4044140B2 (ja) | インスリン誘導体類とその使用 | |
| FI83660C (fi) | Foerfarande foer framstaellning bukspottskoertelns grf hos maenniskan. | |
| DK172760B1 (da) | Lineære og cycliske analoge til alfa-MSH-fragmenter med ekstraordinær styrke, lægemiddel eller kosmetisk præparat indeholde | |
| US9133262B2 (en) | Somatostatin antagonists | |
| EP2413955A2 (en) | N-terminus conformationally constrained glp-1 receptor agonist compounds | |
| JP4264762B2 (ja) | ソマトスタチン類似体 | |
| JPH0674279B2 (ja) | 成長ホルモン放出性因子類似体及びその製造方法 | |
| JPH11503454A (ja) | 成長ホルモン放出因子の類似体 | |
| CZ281507B6 (cs) | Syntetické peptidy, biologický aktivní fragment a jejich netoxické soli | |
| JP2001527507A (ja) | 改良された環状ｃｒｆ拮抗剤 | |
| RU2177006C2 (ru) | Циклические пептидные аналоги соматостатина | |
| FI79716B (fi) | Daeggdjur-pgrf. | |
| US4820804A (en) | Analogs of [1,7-di-alanine, des-19-leucine]calcitonin | |
| AU739557B2 (en) | Cyclic peptide analogs of somatostatin | |
| Brandenburg | Relations Between the Structure and Biological Activity of Insulin | |
| CZ196399A3 (cs) | Antagonisté somatostatinu | |
| CZ289370B6 (cs) | Peptid, jeho pouľití a farmaceutický prostředek | |
| CS260641B1 (cs) | Lidský modifikovaný C-peptid a způsob jeho přípravy |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20060905 |