RU2167196C1 - Способ стимуляции пролиферативной активности лимфоцитов - Google Patents
Способ стимуляции пролиферативной активности лимфоцитов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2167196C1 RU2167196C1 RU2000101503A RU2000101503A RU2167196C1 RU 2167196 C1 RU2167196 C1 RU 2167196C1 RU 2000101503 A RU2000101503 A RU 2000101503A RU 2000101503 A RU2000101503 A RU 2000101503A RU 2167196 C1 RU2167196 C1 RU 2167196C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- lymphocytes
- effect
- cells
- rpmi
- proliferative activity
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 title claims description 33
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 title claims description 17
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 title description 6
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 26
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 claims abstract description 18
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 claims abstract description 13
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 claims abstract description 13
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 13
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 13
- 239000007789 gas Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims abstract description 4
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 claims description 12
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 abstract description 3
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 abstract 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 abstract 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 abstract 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 abstract 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 abstract 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000002900 effect on cell Effects 0.000 abstract 1
- 230000000212 effect on lymphocytes Effects 0.000 abstract 1
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 abstract 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 abstract 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 21
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 18
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 9
- 239000003226 mitogen Substances 0.000 description 7
- 230000004044 response Effects 0.000 description 7
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 6
- 108010062580 Concanavalin A Proteins 0.000 description 5
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 5
- 230000000961 alloantigen Effects 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 4
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 3
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 3
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 3
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 2
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethyl mercaptane Natural products CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 210000005210 lymphoid organ Anatomy 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 229920006051 Capron® Polymers 0.000 description 1
- QDHHCQZDFGDHMP-UHFFFAOYSA-N Chloramine Chemical compound ClN QDHHCQZDFGDHMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000000297 Erysipelas Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000002269 analeptic agent Substances 0.000 description 1
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 1
- 229940064004 antiseptic throat preparations Drugs 0.000 description 1
- 238000004500 asepsis Methods 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- JBKVHLHDHHXQEQ-UHFFFAOYSA-N epsilon-caprolactam Chemical compound O=C1CCCCCN1 JBKVHLHDHHXQEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 1
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 1
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002607 hemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 238000004157 plasmatron Methods 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000003307 slaughter Methods 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине. Может быть использовано в клинической практике. Клетки селезенки помещают в среду RPMI-1640, дополнительно содержащую 5% инактивированную человеческую сыворотку 4 группы, 2 мМ 1-глютамина, 10 мМ буфера Hepes, 5•10-5 М 2-меркаптоэтанола, 50 мкг/мл гентамицина. Подвергают их воздействию аргоновой плазмы, полученной при силе тока 30 А, напряжении 20 В и расходе газа 1 л/мин. Воздействие осуществляют в течение 30 с с расстояния 20 см от сопла плазмотрона. Способ обеспечивает сокращение времени воздействия физического фактора на клетки и позволяет локально действовать на функции лимфоцитов как в культуре клеток, так и в пределах организма. 1 табл.
Description
Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано в клинической практике как метод стимулирующего воздействия на биологические процессы, протекающие в клетках и тканях.
Способность лимфоцитов участвовать в осуществлении иммунных реакций в организме определяется уровнем их пролиферативной активности.
Известен способ стимуляции пролиферативной активности лимфоцитов мышей in vitro переменным магнитным полем с частотой 100 Гц и плотностью 50 мТл, действующим в течение 60 минут на клетки селезенки (Н.Е. Щебникова, Е.Н. Антипова, А. С. Соловьев - Тезисы доклада. Материалы сборника "Проблемы укрепления здоровья, профилактики и лечения заболеваний", Смоленск, 1995, с. 220).
В последние годы в клинической практике начали широко использовать плазменные потоки. В качестве плазмообразующего газа используется гелий или аргон. Поток низкотемпературной плазмы используется при лечении трофических язв, рожистого воспаления, поверхностных гнойных и ожоговых ран. Положительный эффект плазмы связывают с усилением восстановительных процессов в ранах. Важную роль в восстановительных процессах играют иммунокомпетентные клетки (Бабаева А.Г. Кроветворные и лимфоидные органы. // Структурные основы адаптации и компенсации нарушенных функций. / Под редакцией Саркисова Д.С. - М.: Медицина, 1987, с. 328-342).
Сущность способа стимуляции пролиферативной активности лимфоцитов заключается в том, что клетки селезенки помещают в среду RFMI-1640, дополнительно содержащую 5% инактивированную человеческую сыворотку 4 группы, 2мМ 1-глютамина, 10 мМ буфера Hepes, 5•10-5 М 2-меркаптоэтанола, 50 мкг/мл гентамицина, и подвергают воздействию аргоновой плазмы, полученной при силе тока 30 А, напряжении 20 В и расходе газа 1 л/мин. Воздействие осуществляют в течение 30 секунд с расстояния 20 см от сопла плазмотрона.
Такие оптимальные параметры были нами установлены в предварительных опытах. Другие параметры расхода газа, силы тока и напряжения, а также расстояния от сопла плазмотрона до объекта либо не изменяло пролиферативной активности лимфоцитов, либо оказывало супрессирующее действие. Добавки к среде RPMI-1640 обеспечивали жизнеспособность лимфоцитов. Соотношение компонентов являлось оптимальным.
Способ осуществляется следующим образом.
В качестве источника лимфоцитов используют клетки селезенки мышей-гибридов (СВА • C57B1/6)F1, полученных из питомника АМН "Столбовая". Забор лимфоидных органов производят с соблюдением правил асептики и антисептики. Мышей забивают путем цервикальной дислокации. Доноров лимфоидных клеток после забоя обрабатывают 2% раствором хлорамина, а затем 96o этиловым спиртом. Стерильно извлекают селезенку, очищают от жировой и соединительной ткани, помещают в охлажденную среду 199 и тщательно раздавливают в стеклянном гомогенизаторе. Взвесь лимфоцитов фильтруют через мелкоячеистый капрон, центрифугируют в течение 7 мин при 1000 об/мин, сливают супернатант, осадок ресуспендируют в необходимом объеме среды RPMI-1640, дополненной 5% инактивированной человеческой сывороткой 4 группы, 2 мМ 1-глютамина, 10 мМ буфера Hepes, 5•10-5 М 2-меркаптоэтанола, 50 мкг/мл гентамицина. Жизнеспособность лимфоцитов определяют в камере Горяева в смеси 0,1% растворов трипанового синего и эозина.
Под световым микроскопом МБИ-3 подсчитывают число живых лимфоцитов. Мертвых клеток должно быть не более 8-10%.
В опытах используют плазменную установку СУПР-М и физиотерапевтический плазмотрон. 20•106 исследуемых клеток селезенки вносят в пластиковые флаконы в объеме 1 мл среды RPMI-1640, дополнительно содержащей 5% инактивированной человеческой сыворотки 4 группы, 2 мМ 1-глютамина, 10 мМ буфера Hepes, 5•10-5 М 2-меркаптоэтанола, 50 мкг/мл гентамицина. Облучение лимфоцитов проводят аргоновой плазмой при силе тока 30 A, напряжении 20 B с расстояния 20 см от сопла плазмотрона.
Расход аргона составляет 1 л/мин. Клетки селезенки подвергают воздействию плазменного потока в течение 30 секунд. Все манипуляции проводят на льду для исключения теплового эффекта.
Пролиферативную активность клеток селезенки в ответ на стимуляцию Т-клеточным митогеном конканавалином-A (Кон-A) и аллоантигенами изучают в реакции бласттрансформации и в смешанной культуре лимфоцитов.
Реакцию бласттрансформации выполняют в микромодификации (Хоробрых В.В. и др. , 1983). Разведение митогена Кон-A (Serva) готовят в среде RPMI-1640. Оптимальную концентрацию митогена определяют в предварительных опытах. Она составила 12,5 мкг/мл среды культивирования, 5•105 исследуемых клеток селезенки вносят в лунки микропластин (Linbro) в объеме 100 мкл и добавляют к ним 100 мкл митогена или среды RPMI-1640. Микропластины инкубируют в термостате при 37oC в течение 72 часов в атмосфере с содержанием 5% CO2.
За 16 часов до окончания инкубации в лунки вносят 1 мк Ku 3H-тимидина в объеме 50 мкл среды RPMI-1640. Затем с помощью 12-канального устройства пробы переносят на фильтры (Сынпор-3, Чехия), последовательно промывают лунки физиологическим раствором, 5%-ной трихлоруксусной кислотой и 96o спиртом.
Фильтры высушивают, помещают в сцинтилляционную жидкость ЖС-8 и регистрируют число импульсов в минуту на бета-спектрометре.
Постановку реакции смешанной культуры лимфоцитов осуществляют по методу Glick et аl. (1974) в модификации Брондз Б.Д. и др. (1977). Реагирующими клетками служат 5•106 клеток селезенки/мл, подвергшиеся воздействию плазменного потока. В качестве стимулирующих используют облученные клетки селезенки мышей линии BAlB/c, которые в концентрации 10•106 клеток/мл суспендируют в среде RPMI-1640, дополненной 5% инактивированной человеческой сывороткой 4 группы, 2 мМ 1-глютамина, 10 мМ буфера Hepes, 5•10-5 М 2-меркаптоэтанола, 50 мкг/мл гентамицина. Клетки помещают во флаконы на лед и облучают на аппарате РУМ-17. Условия облучения: фильтр Cu - 0,5 мм, размер поля 6 х 6 см, фокусное расстояние - 15 см, очаговая доза на глубине 1,5 см - 1,5 Гр/мин, время облучения - 15 мин, суммарная доза - 22,5 Гр.
Отвечающие клетки в объеме 300 мкл смешивают со стимулирующими в объеме 500 мкл и добавляют 200 мкл среды RPMI-1640, дополненной 5% инактивированной человеческой сывороткой 4 группы, 2 мМ 1-глютамина, 10 мМ буфера Hepes, 5•10-5 M 2-меркаптоэтанола, 50 мкг/мл гентамицина. Смеси клеток тщательно ресуспендируют и разливают в плоскодонные 96-луночные пластинки N 3040 (Falcon Hastics, США) в объеме 200 мкл. Микропластины помещают в термостат в атмосферу с содержанием 5% CO2 на 5 суток. За 16 часов до окончания инкубирования в лунки добавляют 1 мк Ku 3H-тимидина в объеме 50 мкл среды RPMI-1640. Регистрацию клеточного ответа осуществляют по включению 3H-тимидина в ДНК пролиферирующих клеток.
Для статистической обработки полученных результатов применяли параметрический метод определения достоверности с вычислением t-критерия Стьюдента.
Пример 1.
В опыт были взяты 3 самца-гибрида (СВА х C 57 B 1/6) F1. Мыши забиты путем цервикальной дислокации, стерильно извлечены селезенки. Взвесь лимфоцитов профильтровали через мелкоячеистый капрон, центрифугировали при 1000 об/мин в течение 7 минут. Затем слили супернатант и осадок ресуспендировали в 2 мл среды RPMI-1640, дополненной 5% инактивированной человеческой сывороткой 4 группы, 2 мМ 1-глютамина, 10 мМ буфера Hepes, 5•10-5 M 2-меркаптоэтанола, 50 мкг/мл гентамицина. Жизнеспособность лимфоцитов определяли в камере Горяева в смеси 0,1% растворов трипанового синего и эозина 20•106 клеток селезенки вносили в пластиковые флаконы в объеме 1 мл среды RPMI-1640, дополненной 5% инактивированной человеческой сывороткой 4 группы, 2 мМ 1-глютамина, 10 мМ буфера Hepes, 5•10-5 М 2- меркаптоэтанола, 50 мкг/мл гентамицина. Лимфоциты подвергали воздействию аргоновой плазмы, полученной при силе тока 30 A, напряжении 20 B и расходе газа 1 л/мин. Воздействие на лимфоциты осуществляли в течение 30 секунд с расстояния 20 см от сопла плазмотрона. Контролем явились клетки селезенки, не подвергавшиеся воздействию аргоновой плазмы. Все манипуляции проводили на льду для исключения теплового эффекта. 5•105 исследуемых клеток селезенки внесли в лунки микропластин (Linbro) в объеме 100 мкл и добавили к ним 100 мкл митогена Кон-A или среды RPMI-1640. Регистрацию клеточного ответа осуществляли по включению 3H-тимидина в ДНК пролиферирующих клеток.
Эксперименты показали, что облучение клеток селезенки аргоновой плазмой в течение 30 секунд приводило к повышению пролиферативной активности лимфоцитов в ответ на стимуляцию митогеном Кон-A (таблица).
Пример 2.
В опыт были взяты 4 самца-гибрида (CBA x C 57 B 1/6) F1. Мыши были забиты путем цервикальной дислокации, стерильно извлечены селезенки. Взвесь лимфоидных клеток получили по общепринятой методике, 20•106 клеток селезенки внесли в пластиковые флаконы в объеме 1 мл среды RPMI-1640, дополненной 5% инактивированной человеческой сывороткой 4 группы, 2 мМ 1-глютамина, 10 мМ буфера Hepes, 5•10-5 М 2-меркаптоэтанола, 50 мкг/мл гентамицина. Лимфоциты подвергали воздействию аргоновой плазмы, полученной при силе тока 30 А, напряжении 20 В и расходе газа 1 л/мин. Воздействие на лимфоциты осуществляли в течение 30 секунд с расстояния 20 см от сопла плазмотрона. Контролем явились клетки селезенки, находившиеся в тех же условиях, но без воздействия плазмы. Все манипуляции проводили на льду для исключения теплового эффекта. Пролиферативную активность лимфоцитов оценивали в ответ на стимуляцию аллоантигенами в смешанной культуре лимфоцитов.
Реагирующими клетками служили 5•106 клеток селезенки/мл, подвергшиеся воздействию плазменного потока. В качестве стимулирующих использовали облученные клетки селезенки мышей линии BAlB/c, которые в концентрации 10•106 помещали в среду RPMI-1640, дополненную 5% инактивированной человеческой сывороткой 4 группы, 2 мМ 1-глютамина, 10 мМ буфере Hepes, 5•10-5 М 2-меркаптоэтанола, 50 мкг/мл гентамицина, и облучали на аппарате РУМ-17. Отвечающие клетки в объеме 300 мкл смешивали со стимулирующими в объеме 300 мкл и добавляли 200 мкл среды RPMI-1640, дополненной 5% инактивированной человеческой сывороткой 4 группы, 2 мМ 1-глютамина, 10 мМ буфера Hepes, 5•10-5 М 2-меркаптоэтанола, 50 мкг/мл гентамицина. Смеси клеток тщательно ресуспендировали и разливали в плоскодонные 96-луночные пластинки. Регистрацию клеточного ответа осуществляли по включению 3H-тимидина в ДНК пролиферирующих клеток.
Эксперименты показали, что облучение клеток селезенки в течение 30 секунд сопровождалось усилением пролиферетивной активности лимфоцитов в ответ на стимуляцию аллоантигенами (таблица).
Испытание способа проводили на 36 самцах-гибридах (CBAxC57B1/6)F1. В каждой серии опытов клетки селезенки пулировали от 3-4 животных, 20•10-5 клеток селезенки вносили в пластиковые флаконы в объеме 1 мл среды RPMI-1640, дополненной 5% инактивированной человеческой сывороткой 4 группы, 2 мМ 1-глютамина, 10 мМ буфера Hepes, 5•10-5 М 2-меркаптоэтанола, 50 мкг/мл гентамицина.
Выделяли следующие группы:
1. Контрольная группа - клетки селезенки, не подвергавшиеся воздействию аргоновой плазмы.
1. Контрольная группа - клетки селезенки, не подвергавшиеся воздействию аргоновой плазмы.
2. Подопытная группа - клетки селезенки, подвергавшиеся воздействию аргоновой плазмы в течение 30 секунд.
После облучения изучали пролиферативную активность лимфоцитов в реакции бласттрансформации и в смешанной культуре лимфоцитов. Проведенные исследования показали, что воздействие аргоновой плазмы на лимфоциты усиливает их пролиферативную активность в ответ на стимуляцию Т-клеточным митогеном Кон-A и аллоантигенами. Результаты опытов представлены в таблице.
Использование предлагаемого способа стимуляции пролиферативной активности лимфоцитов обеспечивает следующие преимущества:
1. По сравнению с другими способами стимуляции пролиферативной активности лимфоцитов эффект достигается в результате очень короткого времени действия фактора (30 с).
1. По сравнению с другими способами стимуляции пролиферативной активности лимфоцитов эффект достигается в результате очень короткого времени действия фактора (30 с).
2. Способ позволяет локально воздействовать на функции лимфоцитов как в культуре клеток, так и в пределах целостного организма.
Claims (1)
- Способ стимуляции пролиферативной активности лимфоцитов, находящихся в среде RPMI - 1640, физическим фактором, отличающийся тем, что среда дополнительно содержит 5% инактивированной человеческой сыворотки 4 группы, 2 мМ 1-глютамина, 10 мМ буфера Hepes, 5 • 10-5 M 2-меркаптоэтанола, 50 мкг гентамицина, а в качестве физического фактора используют аргоновую плазму, полученную при силе тока 30 А, напряжении 20 В и расходе газа 1 л/мин и осуществляют воздействие на лимфоциты в течение 30 с с расстояния 20 см от сопла плазмотрона.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000101503A RU2167196C1 (ru) | 2000-01-18 | 2000-01-18 | Способ стимуляции пролиферативной активности лимфоцитов |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000101503A RU2167196C1 (ru) | 2000-01-18 | 2000-01-18 | Способ стимуляции пролиферативной активности лимфоцитов |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2167196C1 true RU2167196C1 (ru) | 2001-05-20 |
Family
ID=20229631
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2000101503A RU2167196C1 (ru) | 2000-01-18 | 2000-01-18 | Способ стимуляции пролиферативной активности лимфоцитов |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2167196C1 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2205873C1 (ru) * | 2002-04-04 | 2003-06-10 | Институт биологии моря ДВО РАН | Способ увеличения пролиферативной активности клеток морских беспозвоночных |
| RU2418066C1 (ru) * | 2010-04-26 | 2011-05-10 | Учреждение Российской академии наук Государственный научный центр Российской Федерации-Институт медико-биологических проблем Российской академии наук (ГНЦ РФ-ИМБП РАН) | Способ модификации пролиферативной активности и дифференцировочной потенции мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2115428C1 (ru) * | 1995-03-28 | 1998-07-20 | Товарищество с ограниченной ответственностью "Биотех" | Способ лечения иммуносупрессии при сепсисе у человека |
| RU2136668C1 (ru) * | 1997-10-07 | 1999-09-10 | Голощапов Николай Михайлович | N,n'-(сульфонилди-1,4-фенилен)бис(n'',n''- диметилформамидин)1,2,3,4-тетрагидро-6-метил-2,4- диоксо-5-пиримидинсульфонат, стимулирующий клеточный метаболизм и обладающий иммунотропной и антимикобактериальной активностью |
-
2000
- 2000-01-18 RU RU2000101503A patent/RU2167196C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2115428C1 (ru) * | 1995-03-28 | 1998-07-20 | Товарищество с ограниченной ответственностью "Биотех" | Способ лечения иммуносупрессии при сепсисе у человека |
| RU2136668C1 (ru) * | 1997-10-07 | 1999-09-10 | Голощапов Николай Михайлович | N,n'-(сульфонилди-1,4-фенилен)бис(n'',n''- диметилформамидин)1,2,3,4-тетрагидро-6-метил-2,4- диоксо-5-пиримидинсульфонат, стимулирующий клеточный метаболизм и обладающий иммунотропной и антимикобактериальной активностью |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ЩЕБНИКОВА Н.Е. и др. Проблемы укрепления здоровья, профилактики и лечения заболеваний. - Смоленск, 1995, с.220. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2205873C1 (ru) * | 2002-04-04 | 2003-06-10 | Институт биологии моря ДВО РАН | Способ увеличения пролиферативной активности клеток морских беспозвоночных |
| RU2418066C1 (ru) * | 2010-04-26 | 2011-05-10 | Учреждение Российской академии наук Государственный научный центр Российской Федерации-Институт медико-биологических проблем Российской академии наук (ГНЦ РФ-ИМБП РАН) | Способ модификации пролиферативной активности и дифференцировочной потенции мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Tisman et al. | Evidence that lithium induces human granulocyte proliferation: elevated serum vitamin B12 binding capacity in vivo and granulocyte colony proliferation in vitro | |
| KR870001149B1 (ko) | 인체 콜로니 자극인자의 제조방법 | |
| Scaggiante et al. | Successful therapy of Niemann-Pick disease by implantation of human amniotic membrane | |
| Wu et al. | Ultraviolet blood irradiation: Is it time to remember “the cure that time forgot”? | |
| Yu et al. | Improvement of host response to sepsis by photobiomodulation | |
| JP2003521939A (ja) | 生物由来の組成物を広帯域パルス光で処理する際の分子の保護 | |
| Niederkorn | Enucleation in consort with immunologic impairment promotes metastasis of intraocular melanomas in mice. | |
| JPH0547222B2 (ru) | ||
| Jeejeebhoy | Stimulation of tumor growth by the immune response | |
| Merluzzi et al. | In vitro stimulation of murine lymphoid cell cultures by levamisole | |
| RU2167196C1 (ru) | Способ стимуляции пролиферативной активности лимфоцитов | |
| EA024733B1 (ru) | Биологически активный белково-полипептидный комплекс, стимулирующий регенерацию нервной ткани, и способ его получения | |
| RU2182597C1 (ru) | Способ повышения функциональной активности лимфоцитов | |
| DeLustro et al. | Mechanism of mastocytoma-mediated suppression of lymphocyte reactivity | |
| Abolhassani et al. | Characterization of the release of DNA by a human leukemia-cell line hl-60 | |
| Youdim | Enhancing and suppressive effects of macrophages on T-lymphocyte stimulation in vitro | |
| GB2083824A (en) | Process for the production of human growth hormone | |
| Choyce et al. | A System of Surgery | |
| RU2179578C2 (ru) | Регулятор роста клеток in vitro и способ регуляции роста клеток in vitro | |
| Roizin-towle et al. | The effect of bleomycin on aerated and hypoxic cells in vitro, in combination with irradiation | |
| RU2128513C1 (ru) | Способ получения лечебного средства, регулирующего дифференциацию клетки | |
| RU2265050C1 (ru) | Способ стимуляции фагоцитарной активности макрофагов | |
| Tedeschi et al. | Cocci and diphtheroids in blood cultures from patients in various pathological situations | |
| Chakraborty et al. | Dichotomy of lymphocyte population and cell-mediated immune responses in a fruit bat, Pteropus giganteus | |
| RU2157269C2 (ru) | Способ лечения ожоговых ран |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20060119 |