RU2163722C2 - Способ определения моносахаридов в сыворотке крови - Google Patents
Способ определения моносахаридов в сыворотке крови Download PDFInfo
- Publication number
- RU2163722C2 RU2163722C2 RU99110120A RU99110120A RU2163722C2 RU 2163722 C2 RU2163722 C2 RU 2163722C2 RU 99110120 A RU99110120 A RU 99110120A RU 99110120 A RU99110120 A RU 99110120A RU 2163722 C2 RU2163722 C2 RU 2163722C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- blood serum
- temperature
- monosaccharides
- washed
- serum
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 title claims abstract description 8
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 title claims abstract description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 3
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 claims description 2
- 238000001030 gas--liquid chromatography Methods 0.000 claims description 2
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 claims description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 abstract description 2
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IJOOHPMOJXWVHK-UHFFFAOYSA-N chlorotrimethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)Cl IJOOHPMOJXWVHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 229910052602 gypsum Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010440 gypsum Substances 0.000 description 2
- FFUAGWLWBBFQJT-UHFFFAOYSA-N hexamethyldisilazane Chemical compound C[Si](C)(C)N[Si](C)(C)C FFUAGWLWBBFQJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine Chemical compound ON AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 239000004809 Teflon Substances 0.000 description 1
- 229920006362 Teflon® Polymers 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011651 chromium Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- UQEAIHBTYFGYIE-UHFFFAOYSA-N hexamethyldisiloxane Chemical class C[Si](C)(C)O[Si](C)(C)C UQEAIHBTYFGYIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000010414 supernatant solution Substances 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000005051 trimethylchlorosilane Substances 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Способ может быть использован в медицине, биологии для лабораторной диагностики. Для проведения газохроматографического анализа используют ацетилированные альдононитрилы моносахаридов сыворотки крови, анализ проводят на двухметровой колонке диаметром 3 мм, заполненной 3% Selicone ХЕ-60 на отмытом кислотой хроматоне при температуре 220°С в изотермическом режиме или режиме программирования температур от 210 до 245°С со скоростью 12°С в минуту. Способ увеличивает сроки хранения препаратов и упрощает условия их хранения.
Description
Изобретение относится к медицине, биологии, в частности к лабораторной диагностике.
Известны методы определения моносахаридов о-тулоидиновым способом, методом тонкослойной хроматографии [1] на слоях кизельгурт-гипс, силикогель-гипс, с использованием ядерно-магнитного резонанса [2], с помощью масс-спектрометрии [3], методом хроматографии на бумаге [4]; однако перечисленные методы не обладают достаточной специфичностью для близких сахаров (например, глюкозы, сахарозы, манозы). Единственным рутинным методом идентификации и количественного анализа родственных моносахаридов в биологических объектах считается газожидкостная хроматография. Наиболее удобным для этого считается способ приготовления производных простого триметилсилилового эфира [5,6], осуществляющийся следующим образом: 0,1 мл сыворотки с помощью пипетки вводят в центрифужную пробирку; для осаждения сопутствующих компонентов добавляют 0,5 мл 2% ZnSO4·7H2O и 0,5 мл 1,8% Ba(ОН)2, 0,9 мл дистиллированной H2O; раствор перемешивают в смесителе Vortex, отстаивают в течение 5 минут; раствор надосадочной жидкости лиофилизируют; сухой материал переносят в пробирку с крышкой, добавляют 1 мл пиридина, 0,2 мл гексаметилдисилазана, 0,1 мл триметилхлорсилана, все это тщательно перемешивают, приблизительно через 20 минут смесь центрифугируют и хранят в пробирке с тефлоновым покрытием. Препарат стабилен в течение недели при температуре 4oC. Для газохроматографического анализа пробу объемом 1-5 мкл с помощью микрошприца вводят в стеклянную или металлическую колонку длиной 1,7 м и сечением 3 мм, наполненную 15% EGS или 3% SE-52 на промытом кислотой силализированном газ-хроме P. Температура колонки при этом должна составлять около 140oC при изотермическом режиме или программироваться от 110 до 195oC со скоростью 5oC в минуту.
Цель изобретения - увеличение сроков хранения препаратов, упрощение условий их хранения.
Предлагаемый метод отличается тем, что для проведения газохроматографического анализа используется приготовление ацетилированных альдононитрилов моносахаридов сыворотки крови следующим образом: 1 мл сыворотки крови с помощью пипетки вносится в центрифужную пробирку; для осаждения сопутствующих компонентов добавляют 2 мл 1,8% раствора Ba(ОН)2 и 2 мл Zn SO4 ·7H2O, перемешивают стеклянной палочкой в течение 1 минуты и 10 минут отстаивают при комнатной температуре; затем смесь центрифугируют при 3000 об/мин в течение 10 минут, 2 мл надосадочной жидкости переносят в чистую сухую пробирку, использующуюся в дальнейшем как реакционный сосуд, и выпаривают на водяной бане досуха; к полученному остатку добавляют 2 мл пиридина, 100 мг гидроксиламина, запаивают в ампулу и нагревают на водяной бане в течение 1 часа; ампулу вскрывают, добавляют 2 мл уксусного ангидрида, вновь запаивают и нагревают на водяной бане 1 час; затем содержимое ампулы с помощью разделительной воронки дважды промывают хлороформом по 2 мл, хлороформы объединяют и выпаривают досуха в сухожаровом шкафу при температуре 60oC.
Подготовленный данным способом препарат стабилен в течение 1 года при комнатной температуре, что позволяет создавать банки проб сыворотки крови, проводить повторные анализы в динамике лечебного процесса.
Для газохроматографического анализа полученный после выпаривания хлороформа осадок разводят 20 микролитрами хлороформа, пробу объемом 0,5-1 микролитр вводят в металлическую колонку хроматографа длиной 2 м, сечением 3 мм, заполненную 3% Silicone XE-60 на отмытом кислотой хроматоне. Температура колонки составляет 220oC при изотермическом анализе или программируется от 210 до 245oC со скоростью 12oC в минуту.
Claims (1)
- Способ определения моносахаридов в сыворотке крови путем осаждения сопутствующих компонентов исследуемой пробы, лиофилизирования надосадочной жидкости и газожидкостной хроматографии на металлической колонке сечением 3 мм, отличающийся тем, что при проведении анализа используют приготовление ацетилированных альдононитрилов моносахаридов сыворотки крови путем прибавления к исследуемой пробе уксусного ангидрида, перемешивания и выпаривания досуха при температуре 60oC, после чего полученный осадок разводят в хлороформе, пробу вводят в колонку хроматографа длиной 2 м, заполненную 3% Silicone XE-60 на отмытом кислотой хроматоне при температуре 220oC в изотермическом режиме или режиме программирования температур от 210 до 245oC со скоростью 12oC в минуту.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU99110120A RU2163722C2 (ru) | 1999-05-12 | 1999-05-12 | Способ определения моносахаридов в сыворотке крови |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU99110120A RU2163722C2 (ru) | 1999-05-12 | 1999-05-12 | Способ определения моносахаридов в сыворотке крови |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2163722C2 true RU2163722C2 (ru) | 2001-02-27 |
Family
ID=20219819
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU99110120A RU2163722C2 (ru) | 1999-05-12 | 1999-05-12 | Способ определения моносахаридов в сыворотке крови |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2163722C2 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2604140C2 (ru) * | 2014-09-01 | 2016-12-10 | Светлана Васильевна Стулова | Способ определения моносахаридов в вагинальной жидкости |
| RU2636528C2 (ru) * | 2014-09-02 | 2017-11-23 | Светлана Васильевна Стулова | Способ ранней диагностики дисбиоза влагалища |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2050545C1 (ru) * | 1989-04-25 | 1995-12-20 | Миграта Юк Лтд. | Способ определения содержания глюкозы в цельной крови, фотометр для его реализации |
| RU2050546C1 (ru) * | 1989-04-25 | 1995-12-20 | Миграта Юк Лтд. | Способ определения общего содержания глюкозы в цельной крови и композиция для его осуществления |
-
1999
- 1999-05-12 RU RU99110120A patent/RU2163722C2/ru active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2050545C1 (ru) * | 1989-04-25 | 1995-12-20 | Миграта Юк Лтд. | Способ определения содержания глюкозы в цельной крови, фотометр для его реализации |
| RU2050546C1 (ru) * | 1989-04-25 | 1995-12-20 | Миграта Юк Лтд. | Способ определения общего содержания глюкозы в цельной крови и композиция для его осуществления |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| МИТРУКА Б.М. Применение газовой хроматографии в микробиологии и медицине. - М.: Медицина, 1982, с.209,210. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2604140C2 (ru) * | 2014-09-01 | 2016-12-10 | Светлана Васильевна Стулова | Способ определения моносахаридов в вагинальной жидкости |
| RU2636528C2 (ru) * | 2014-09-02 | 2017-11-23 | Светлана Васильевна Стулова | Способ ранней диагностики дисбиоза влагалища |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| MURPHY | ‘Sephadex’column chromatography as an adjunct to competitive protein binding assays of steroids | |
| Hackenbrock | Ultrastructural bases for metabolically linked mechanical activity in mitochondria: I. Reversible ultrastructural changes with change in metabolic steady state in isolated liver mitochondria | |
| Kataoka | Current developments and future trends in solid-phase microextraction techniques for pharmaceutical and biomedical analyses | |
| Neeld Jr et al. | Macro-and micromethods for the determination of serum vitamin A using trifluoroacetic acid | |
| Seligson et al. | Alpha-keto acids in blood and urine studied by paper chromatography | |
| Jasiewicz et al. | Selective retrieval of biotin-labeled cells using immobilized avidin | |
| Kasama et al. | Quantitative analysis of sterols in serum by high-performance liquid chromatography: application to the biochemical diagnosis of cerebrotendinous xanthomatosis | |
| CN111537757A (zh) | 一种生化分析仪 | |
| CN112138428B (zh) | 一种平板膜式液相微萃取方法及其在药物萃取中的应用 | |
| CN104297377A (zh) | 一种植物甾醇的检测分析方法 | |
| Kocúrová et al. | A glance at achievements in the coupling of headspace and direct immersion single‐drop microextraction with chromatographic techniques | |
| CA1326661C (en) | Diagnostic immunoassay by solid phase separation for digoxin | |
| RU2163722C2 (ru) | Способ определения моносахаридов в сыворотке крови | |
| US4021535A (en) | Reagents used in the radioimmunoassay of digoxin | |
| Kaiser et al. | Electron‐capture glc determination of ibuprofen in serum | |
| Pearson et al. | The estimation of 3, 4-dihydroxyphenylacetic acid, homovanillic acid and homo-isovanillic acid in nervous tissue by gas-liquid chromatography and electron capture detection | |
| Huggett et al. | Rapid micro-method for the measurement of paracetamol in blood plasma or serum using gas-liquid chromatography with flame-ionisation detection | |
| RU2696010C1 (ru) | Способ определения бацитрацина в мясе и мясных продуктах с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии | |
| Schwertner | Analysis for underivatized theophylline by gas-chromatography on a silicone stationary phase, SP-2510-DA. | |
| CN116858646B (zh) | 一种用于非靶代谢检测中的质控品配制及应用方法 | |
| RU2188416C1 (ru) | Способ количественного определения фенола в крови | |
| JPS5961777A (ja) | 胆汁酸の分析システム | |
| Aripovsky et al. | Preparation of samples for gas-chromatographic determination of fatty acids: direct transesterification of lipids of dry biological sample is preferred in comparison with the methods employing preliminary lipid extraction | |
| Wadsö | Isothermal biocalorimetry. A status report. | |
| RU2018113C1 (ru) | Способ определения новокаинамида в объектах биологического происхождения |