RU2155030C1

RU2155030C1 - Vaccine against "egg yield decrease syndrome-76" and method of vaccination

Info

Publication number: RU2155030C1
Application number: RU99117769A
Authority: RU
Inventors: А.А. Сухинин; А.И. Кобатов; С.С. Автушенко; В.О. Виноходов; С.Ф. Антонов; Ю.А. Морозова
Original assignee: Виноходов Владимир Олегович
Priority date: 1999-08-17
Filing date: 1999-08-17
Publication date: 2000-08-27

Abstract

FIELD: veterinary science, poultry farming. SUBSTANCE: invention relates to vaccine preparations against infectious diseases, namely, against virus causing "Egg yield decrease syndrome-76" and methods of vaccination. Invention proposes the vaccine preparation against viruses causing "Egg yield decrease syndrome-76" where inactivated virus is enclosed into liposomal vesicle covered by envelope that consists of a mixture of sugars and water-soluble polymers taken in the ratio = (5-15):1. Vaccination is carried out by administration of vaccine in poultry body (age is 110-140 days) by oral watering route in the dose 512-2048 hemagglutination units/05. Preparation is harmless for poultry and shows expressed antigenic and immunogenic activity. EFFECT: decreased cost, increased rate of vaccination as compared with conventional method of disease prophylaxis. 6 cl, 2 tbl, 2 ex

Description

Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к птицеводству, а именно к вакцинным препаратам против инфекционных заболеваний, а именно против вирусов "Синдрома снижения яйценоскости-76 (ССЯ-76)" и способам вакцинации. The invention relates to the field of veterinary medicine, in particular to poultry farming, and in particular to vaccines against infectious diseases, namely against the viruses "Syndrome of egg production-76 (SSY-76)" and methods of vaccination.

ССЯ-76 - вирусное заболевание кур, характеризующееся резким снижением яичной продуктивности, изменением пигментации и истончением скорлупы яиц, снижением полноценности яичного белка. Возбудитель заболевания относится к семейству аденовирусов и по морфологическим и физико-химическим свойствам идентифицирован, как утиный аденовирус. SSJ-76 is a viral disease of chickens, characterized by a sharp decrease in egg productivity, a change in pigmentation and thinning of the eggshell, and a decrease in the usefulness of egg white. The causative agent of the disease belongs to the adenovirus family and is identified by morphological and physico-chemical properties as duck adenovirus.

Для борьбы с вирусом целесообразно использование 1% раствора формальдегида, однако дезинфекция не обеспечивает надежную защиту птиц, т.к. вирус передается трансвариальным и иными каналами передачи. (Рекомендации по диагностике и профилактике болезни птиц "Синдром снижения яйценоскости-76 (ССЯ-76)", СПб, 1992, с. 3-5). To combat the virus, it is advisable to use a 1% formaldehyde solution, but disinfection does not provide reliable protection for birds, because the virus is transmitted by transvarial and other transmission channels. (Recommendations for the diagnosis and prevention of bird disease "Syndrome of egg production-76 (SSY-76)", St. Petersburg, 1992, S. 3-5).

Наиболее эффективным способом борьбы с инфекцией является вакцинация поголовья зараженного стада. В качестве вакцинного препарата, являющегося прототипом заявляемого технического решения, является инактивированная вакцина, разработанная специалистами ВНИИВИП и представляющая собой мелкодисперсную суспензию белого цвета, содержащую микрочастицы инактивированного вируса ССЯ-76 в смеси с масляным адъювантом. The most effective way to fight the infection is to vaccinate the livestock of the infected herd. As a vaccine preparation, which is the prototype of the claimed technical solution, is an inactivated vaccine developed by VNIIVIP specialists and representing a fine white suspension containing microparticles of inactivated SSN-76 virus mixed with an oil adjuvant.

Показанием к применению служит неблагополучие хозяйства по ССЯ-76, выявленное в результате комплексных исследований. Вакцинацию проводят методом однократной инъекции в грудную или бедренную мышцу в объеме 0.5 мл всем здоровым птицам в возрасте 110-140 дней. Применение вакцины позволяет получить дополнительно от каждой куры-несушки до 30 штук яиц по сравнению с невакцинированными курами. Indication for use is the disadvantage of the economy according to SSN-76, revealed as a result of comprehensive studies. Vaccination is carried out by a single injection into the pectoral or femoral muscle in a volume of 0.5 ml to all healthy birds aged 110-140 days. The use of the vaccine allows you to get additionally from each laying hen up to 30 pieces of eggs compared with unvaccinated chickens.

Недостатком данной вакцины и способа ее применения является большая трудоемкость процесса вакцинации на крупных стадах птиц. The disadvantage of this vaccine and the method of its use is the great complexity of the vaccination process in large herds of birds.

Задачей, решаемой в рамках заявляемой группы изобретений, является создание вакцинного препарата для перорального применения и способа его применения. The problem to be solved within the framework of the claimed group of inventions is the creation of a vaccine preparation for oral administration and its use.

Указанная задача решается путем создания вакцины, содержащей инактивированный вирус ССЯ-76 (антиген), заключенный в липосомальную везикулу, которая в свою очередь помещена в оболочку из смеси сахаров и водорастворимых полимеров (ВРП) в соотношении 5-15:1, при следующем соотношении ингредиентов в конечной форме, мас.%:
сахар - 8-15
водорастворимый полимер - 0,5-3
антиген в липосомальной везикуле - остальное
В качестве сахаров используют моно- и дисахариды, такие как сахароза, лактоза или сорбит, в качестве водорастворимых полимеров (ВРП) - желатину, полиглюкин, поливинилпиролидон.This problem is solved by creating a vaccine containing inactivated SSN-76 virus (antigen), enclosed in a liposomal vesicle, which in turn is placed in a shell of a mixture of sugars and water-soluble polymers (GRP) in a ratio of 5-15: 1, with the following ratio of ingredients in final form, wt.%:
sugar - 8-15
water soluble polymer - 0.5-3
antigen in liposomal vesicle - rest
Mono- and disaccharides, such as sucrose, lactose, or sorbitol, are used as sugars, and gelatin, polyglucin, polyvinylpyrrolidone are used as water-soluble polymers (GRP).

Использование большего количества сахаров снижает сыпучесть готовой формы, меньшее количество - не обеспечивает стабильности при хранении. The use of more sugars reduces the flowability of the finished form, less - does not provide stability during storage.

Использование меньшего количества ВРП нетехнологично, т.к. ведет к необходимости снижения температуры при сушке готовой формы, введение большего количества снижает прочностные характеристики микрогранулы. Using less GRP is not technologically advanced because leads to the need to lower the temperature during drying of the finished form, the introduction of a larger amount reduces the strength characteristics of the microgranules.

Заявляемый способ вакцинации птиц заключается во введении вышеупомянутой липосомальной вакцины в организм птицы перорально в ходе выпаивания в дозе 512-2048 ГАЕ/05. The inventive method of vaccination of birds is the introduction of the aforementioned liposomal vaccine into the body of the bird orally during drinking at a dose of 512-2048 GAE / 05.

Введение меньших количеств не обеспечивает надежной вакцинации, введение больших количеств неэффективно из экономических соображений. The introduction of smaller quantities does not provide reliable vaccination, the introduction of large quantities is ineffective for economic reasons.

Как правило, показанием к применению вакцины служит неблагополучие хозяйства по ССЯ-76. Вакцинируют всю клинически здоровую птицу в возрасте 110-140 дней. Препарат растворяют в воде и вводят методом выпаивания из расчета 10 мл на 1 голову. As a rule, the indication for the use of the vaccine is the disadvantage of the economy according to SSN-76. All clinically healthy birds are vaccinated at the age of 110-140 days. The drug is dissolved in water and administered by evaporation at the rate of 10 ml per 1 head.

По сравнению с общепринятым методом профилактики заболевания (однократная инъекция жидкой инактивированной вакцины в грудную или бедренную мышцу) применение новой лекарственной формы более технологично. Так, один человек может за 2 часа провакцинировать 25,0 - 30,0 тыс. голов птицы, в то время как для внутримышечной инъекции такого стада требуется работа в течение 2 дней бригады вакцинаторов из 6 человек (Хохлачев О.Ф. Конструирование вакцин и разработка технологии получения и методики вакцинации против ССЯ-76 кур. Автореф. дисс. к.в.н.- С.- Петербург, 1993). Compared with the generally accepted method of disease prevention (a single injection of a liquid inactivated vaccine into the pectoral or femoral muscle), the use of the new dosage form is more technologically advanced. So, one person can vaccinate 25.0-30.0 thousand heads of poultry in 2 hours, while intramuscular injection of such a herd requires work within 2 days of a team of vaccinators of 6 people (Khokhlachev O.F. Construction of vaccines and development of a technology for the production and methods of vaccination against SSN-76 chickens. Author's abstract. Diss.

Сущность и практическая применимость заявляемых изобретений иллюстрируются следующими примерами. The essence and practical applicability of the claimed invention are illustrated by the following examples.

ПРИМЕР 1. Приготовление новой формы вакцины на поддонах. EXAMPLE 1. Preparation of a new form of vaccine on pallets.

Липосомальную форму, содержащую антиген ССЯ-76, готовят по стандартной методике получения липосомальных препаратов, в частности изложенной в патенте РФ N 2130771, 1998, кл. A 61 K 9/127. The liposomal form containing the SSN-76 antigen is prepared according to the standard method for preparing liposomal preparations, in particular, as set forth in RF patent N 2130771, 1998, cl. A 61 K 9/127.

К 100 объемам концентрата липосомальных везикул антигена добавляют 5 объемов 20% водного раствора желатины и 50 объемов 20% раствора сахарозы. To 100 volumes of a concentrate of liposome antigen vesicles add 5 volumes of a 20% aqueous gelatin solution and 50 volumes of a 20% sucrose solution.

Полученная смесь тщательно перемешивается и разливается в поддоны из нержавеющей стали слоем толщиной 3.0 - 10.0 мм, закрывают крышками и переносят на полки сублимационной камеры. Материал замораживают до температуры (-30)-(-40)^oC и выдерживают при этой температуре 2-3 часа, после чего камеру вакуумируют. Во время высушивания поддерживают рабочее давление в установке 120-130 мм рт. ст. В дальнейшем полки нагревают до +24^oC со скоростью 4 град/час. Общее время высушивания составляет 42-46 часов.The resulting mixture is thoroughly mixed and poured into stainless steel trays with a layer thickness of 3.0 - 10.0 mm, covered with lids and transferred to the shelves of the sublimation chamber. The material is frozen to a temperature of (-30) - (- 40) ^o C and maintained at this temperature for 2-3 hours, after which the chamber is evacuated. During drying, the operating pressure in the installation is maintained at 120-130 mm Hg. Art. Subsequently, the shelves are heated to +24 ^o C at a speed of 4 degrees / hour. The total drying time is 42-46 hours.

Вакцину использовали для профилактики ССЯ-76 в условиях опытной базы ВНИИ ветеринарного института птицеводства, растворяя в воде из расчета 10 мл на 1 голову. Раствор выливают в поилки и выпаивают птице. Иммуногенную активность контролируют путем выявления антигемагглютининов к вирусу ССЯ-76 в реакции задержки гемагглютинации (РЗГА) по общепринятой методике (Рекомендации по диагностике и профилактике болезни птиц "Синдром снижения яйценоскости-76 (ССЯ-76)", СПб, 1992, с. 7-25). Полученные результаты испытаний представлены в таблице 1. The vaccine was used to prevent SSN-76 in the experimental base of the All-Russian Research Institute of Veterinary Institute of Poultry, dissolving in water at the rate of 10 ml per 1 head. The solution is poured into drinking bowls and evaporated to the bird. Immunogenic activity is monitored by detecting antihemagglutinins to the SSJA-76 virus in the hemagglutination inhibition reaction (HHCA) according to the generally accepted methodology (Recommendations for the diagnosis and prevention of bird disease "Egg-laying syndrome-76 (SSJ-76)", St. Petersburg, 1992, S. 7- 25). The obtained test results are presented in table 1.

Как следует из приведенных результатов, оптимальная иммунизирующая доза -1024 ГАЕ/05. As follows from the above results, the optimal immunizing dose is -1024 GAE / 05.

ПРИМЕР 2. Приготовление новой формы вакцины в рожках. EXAMPLE 2. Preparation of a new form of vaccine in the horns.

Концентрат липосомальных везикул антигена в асептических условиях разливают в рожки емкостью 500 мл по 100 мл. В каждый рожок вводят дополнительно по 20 мл раствора, содержащего 50% сорбита и 5% полиглюкина и перемешивают. Рожки закрывают пробками, парафинируют и замораживают в горизонтальном положении в раскатывающем устройстве, погруженном в ванну с рассолом, имеющем температуру -55-65^oC. После замораживания рожки переносят на предварительно охлажденные полки сублимационной камеры и проводят сушку, как описано в примере 1.Aseptic liposome vesicle concentrate is poured under aseptic conditions into 500 ml 100 ml horns. An additional 20 ml of a solution containing 50% sorbitol and 5% polyglucin is added to each horn and mixed. The horns are closed with stoppers, waxed and frozen in a horizontal position in a rolling device immersed in a bath with a brine at a temperature of -55-65 ^o C. After freezing, the horns are transferred to pre-cooled shelves of the sublimation chamber and drying is carried out as described in example 1.

После высушивання рожки с материалом герметично закрывают стерильными пробками и обкатывают металлическими колпачками. After drying, the horns with the material are hermetically sealed with sterile plugs and rolled around with metal caps.

Аналогичным образом готовились вакцинные препараты с иными аналогичными компонентами защитной среды. Сравнительная характеристика препаратов приведена в таблице 2. Vaccine preparations with other similar components of the protective environment were prepared in a similar manner. Comparative characteristics of the drugs are shown in table 2.

Проведенные испытания показали, что препарат безвреден для птицы, обладает выраженной антигенной и иммуногенной активностью, позволяет во много раз снизить объем трудозатрат при вакцинации. Tests have shown that the drug is harmless to poultry, has a pronounced antigenic and immunogenic activity, allows many times to reduce the amount of labor during vaccination.

Claims

1. Vaccine preparation against viruses "Syndrome of egg production - 76" containing an inactivated virus, characterized in that the inactivated virus is enclosed in a liposomal vesicle, and the drug additionally contains a mixture of sugar and a water-soluble polymer in the following ratio of ingredients in the final form, wt.%:
Sugar - 8 - 15
Water soluble polymer - 0.5 - 3
Virus in a Liposomal Vesicle - Else
2. The vaccine preparation according to claim 1, characterized in that the liposomal vesicle is coated with a mixture of sugar and a water-soluble polymer in a ratio of 5 to 15: 1.

3. The vaccine preparation according to claim 1 or 2, characterized in that it contains a mono- or polysaccharide as sugar.

4. The vaccine preparation according to any one of claims 1 to 3, characterized in that it contains sucrose, lactose or sorbitol as sugar.

5. The vaccine preparation according to claim 1 or 2, characterized in that as a water-soluble polymer it contains gelatin, polyglucin or polyvinylpyrrolidone.

6. A method of vaccinating birds against "egg-laying syndrome - 76" by introducing a vaccine into the body of a bird aged 110-140 days, characterized in that a liposomal vaccine is used as a vaccine, and the drug is administered orally during the course of a vaping at a dose of 512-2048 GAE / 05.