RU2038600C1 - Membrane for separating components of immunologic reaction - Google Patents
Membrane for separating components of immunologic reaction Download PDFInfo
- Publication number
- RU2038600C1 RU2038600C1 SU5033495A RU2038600C1 RU 2038600 C1 RU2038600 C1 RU 2038600C1 SU 5033495 A SU5033495 A SU 5033495A RU 2038600 C1 RU2038600 C1 RU 2038600C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- membrane
- enzyme
- antigen
- solution
- antibodies
- Prior art date
Links
- 239000012528 membrane Substances 0.000 title claims abstract description 13
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 title description 4
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 title 1
- 230000036647 reaction Effects 0.000 title 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 claims abstract description 8
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 claims abstract description 8
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 6
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 3
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 claims abstract 3
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 claims abstract 3
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 claims description 3
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 abstract description 3
- KFDVPJUYSDEJTH-UHFFFAOYSA-N 4-ethenylpyridine Chemical compound C=CC1=CC=NC=C1 KFDVPJUYSDEJTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 21
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 21
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 21
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 15
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 13
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 description 11
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 6
- 229920002845 Poly(methacrylic acid) Polymers 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 4
- 239000008057 potassium phosphate buffer Substances 0.000 description 4
- JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M sodium periodate Chemical compound [Na+].[O-]I(=O)(=O)=O JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 229920000447 polyanionic polymer Polymers 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- HSTOKWSFWGCZMH-UHFFFAOYSA-N 3,3'-diaminobenzidine Chemical compound C1=C(N)C(N)=CC=C1C1=CC=C(N)C(N)=C1 HSTOKWSFWGCZMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFDVPJUYSDEJTH-UHFFFAOYSA-O 4-ethenylpyridine;hydron Chemical compound C=CC1=CC=[NH+]C=C1 KFDVPJUYSDEJTH-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 2
- 150000001868 cobalt Chemical class 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 2
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Substances CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 208000004554 Leishmaniasis Diseases 0.000 description 1
- JCXJVPUVTGWSNB-UHFFFAOYSA-N Nitrogen dioxide Chemical class O=[N]=O JCXJVPUVTGWSNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 1
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N toluene Substances CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009278 visceral effect Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к иммуноферментному анализу, и представляет собой мембрану для разделения компонентов иммунологической реакции. The invention relates to biotechnology, namely to enzyme-linked immunosorbent assay, and is a membrane for the separation of components of the immunological reaction.
Известны различные способы, проведения твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА), основанные на иммобилизации антител на твердых носителях, образовании специфических иммунокомплексов на носителе с определяемым антигеном и их выявлении с помощью ферментной метки. There are various methods for conducting enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), based on the immobilization of antibodies on solid carriers, the formation of specific immunocomplexes on a carrier with a detectable antigen and their detection using an enzyme tag.
Важным пунктом при проведении процедуры ИФА является стадия отделения меченых антител (антигена), не связанных в иммунокомплекс, от меченых антител (антигенов), связанных в иммунокомплекс. В процедурах ИФА гетерогенного типа для этого проводят иммобилизацию антител (антигена) на твердых нерастворимых носителях. Это, однако, приводит к значительному увеличению времени анализа. An important point during the ELISA procedure is the stage of separation of labeled antibodies (antigen) not bound to the immunocomplex from labeled antibodies (antigens) bound to the immunocomplex. In ELISA procedures of a heterogeneous type, antibodies (antigen) are immobilized on solid insoluble carriers. This, however, leads to a significant increase in analysis time.
Также известны способы разделения компонентов иммунохимической реакции с использованием фильтрации на пористых нитроцеллюлозных мембранах, что упрощает процедуру и исключает необходимость иммобилизации одного из компонентов в том случае, когда размер анализируемого соединения превышает диаметр пор. Also known are methods for separating components of an immunochemical reaction using filtration on porous nitrocellulose membranes, which simplifies the procedure and eliminates the need to immobilize one of the components when the size of the analyzed compound exceeds the pore diameter.
В качестве прототипа предлагается микропланшет с фильтрующим дном, изготовленным из нитроцеллюлозной мембраны (диаметр пор 0,54 мкм), используемый в методе определения висцерального лейшманиоза человека [1] Образец паразитов инкубировали с формалином, наносили на микропланшеты, далее инкубировали с анализируемой пробой. Разделение в данном случае осуществлялось вследствие большого размера антигена. As a prototype, a microplate with a filter bottom made of a nitrocellulose membrane (pore diameter 0.54 μm) used in the method for determining visceral human leishmaniasis is proposed [1] A parasite sample was incubated with formalin, applied to microplates, then incubated with the analyzed sample. Separation in this case was carried out due to the large size of the antigen.
Данная мембрана не позволяет осуществлять разделения компонентов в нижеописанном методе. This membrane does not allow separation of components in the method described below.
Известен способ проведения иммуноферментного анализа биологически активных веществ, осуществляемый следующим образом. К исследуемому образцу добавляют антитела, ковалентно иммобилизованные на водорастворимом поликатионе или полианионе, например полиметакриловой кислоте (ПМАК), и конъюгат антител (антигенов), меченых ферментом, при этом в растворе одновременно протекают реакции: связывания иммобилизованных антител с антигеном и мечеными антигенами (антителами). После образования растворимых иммунокомплексов раствор приводят в контакт с нерастворимым положительно заряженным носителем (полимером), вследствие чего компоненты, связанные с иммобилизованными антителами, адсорбируются на носителе в результате кооперативных ионных взаимодействий между молекулами отрицательно заряженного полианиона, содержащего иммунокомплекс антигена с мечеными ферментом антителами, и положительно заряженным носителем. После промывания носителя с целью удаления неспецифически связавшегося конъюгата антител с ферментом на него наносят раствор субстрата фермента и количественно измеряют концентрацию продукта, которая пропорциональна концентрации определяемого антигена и служит характеристикой его содержания в исследуемом растворе. Концентрацию антигена в исследуемом образце определяют с помощью калибровочного графика, полученного при использовании стандартных препаратов. A known method of conducting an enzyme immunoassay of biologically active substances, as follows. Antibodies covalently immobilized on a water-soluble polycation or polyanion, for example polymethacrylic acid (PMAA), and a conjugate of antibodies (antigens) labeled with an enzyme are added to the test sample, while the reaction simultaneously proceeds: the immobilized antibodies bind to the antigen and labeled antigens (antibodies) . After the formation of soluble immunocomplexes, the solution is brought into contact with an insoluble positively charged carrier (polymer), as a result of which the components associated with immobilized antibodies are adsorbed on the carrier as a result of cooperative ionic interactions between molecules of a negatively charged polyanion containing the antigen immunocomplex with enzyme labeled antibodies, and positively charged carrier. After washing the carrier in order to remove the non-specifically bound antibody conjugate with the enzyme, an enzyme substrate solution is applied to it and the product concentration is quantitatively measured, which is proportional to the concentration of the antigen being determined and serves as a characteristic of its content in the test solution. The antigen concentration in the test sample is determined using a calibration graph obtained using standard preparations.
Для разделения компонентов иммунологической реакции, в результате которой образуется отрицательно заряженный комплекс полианиона и антигена, связанного с антителом, меченым ферментом, предлагается использовать мембрану, которая представляет собой подложку из ацетат- или нитроцеллюлозы, на которой адсорбирован поликатион. В качестве поликатиона можно использовать поли-4-винил-пиридинийбромид (ПВП), хитозан, полиэтиленимин и др. To separate the components of the immunological reaction, as a result of which a negatively charged complex of the polyanion and antigen bound to the antibody labeled with the enzyme is formed, it is proposed to use a membrane that is a substrate of acetate or nitrocellulose on which the polycation is adsorbed. As the polycation, poly-4-vinyl-pyridinium bromide (PVP), chitosan, polyethyleneimine, etc. can be used.
Если в качестве носителя используют положительно заряженную мембрану, а продукт ферментативной реакции является нерастворимым и удерживается на мембране, то детекцию можно проводить визуально. If a positively charged membrane is used as a carrier, and the product of the enzymatic reaction is insoluble and is retained on the membrane, detection can be carried out visually.
Заряженные мембраны получают следующим образом. Нитро- или ацетатцеллюлозные фильтры помещают в раствор поликатиона и инкубируют в нем в течение 1-2 ч при комнатной температуре. Charged membranes are prepared as follows. Nitro or cellulose acetate filters are placed in a polycation solution and incubated in it for 1-2 hours at room temperature.
П р и м е р 1. Анализ иммуноглобулинов G (IgG) человека. PRI me R 1. Analysis of human immunoglobulins G (IgG).
В качестве антител использовали γ -глобулиновую фракцию кроличьей антисыворотки против IgG человека, дополнительно очищенную ионообменной хроматографией на ДЕАЕ-Sephacel. As antibodies, the γ-globulin fraction of the rabbit antiserum against human IgG was used, additionally purified by ion exchange chromatography on DEAE-Sephacel.
Иммуносорбенты на основе ПМАК по- лучали ковалентным связыванием антигенов или антител с ПМАК, используя в качестве сшивающих агентов водорастворимые карбодиимиды (1-этил-3(3-диметил-аминопропил)-карбодиимид гидрохлорид или 1-циклогексил-3-(2-морфолино-4-этил)-карбо- диимид n-толуол-фосфат) совместно с N-оксисукцинимидом. PMAA-based immunosorbents were obtained by covalent binding of antigens or antibodies to PMAA using water-soluble carbodiimides (1-ethyl-3 (3-dimethyl-aminopropyl) -carbodiimide hydrochloride or 1-cyclohexyl-3- (2-morpholino- 4-ethyl) -carbodiimide n-toluene phosphate) together with N-oxysuccinimide.
В качестве антигена использовали коммерческий препарат IgG человека. A commercial human IgG preparation was used as antigen.
В качестве фермента использовали пероксидазу хрена с RZ=3,0 (ПХ). Horseradish peroxidase with RZ = 3.0 (HRP) was used as an enzyme.
Конъюгат IgG человека с пероксидазой (ПХ/ЕС1.11.1.7) получали методом окисления углеводного компонента фермента периодатом натрия. A human IgG conjugate with peroxidase (HRP / EC1.11.1.7) was obtained by oxidizing the carbohydrate component of the enzyme with sodium periodate.
Нерастворимый заряженный полимер готовили следующим образом. An insoluble charged polymer was prepared as follows.
Нитроцеллюлозные фильтры производства фирмы "Синпор" инкубировали в растворе 1˙10-7 М поли-4-винил-пиридинийбромида с молекулярной массой 80000 в калий-фосфатном буфере рН 7,2 (КФБ) в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем фильтры блокировали в 3%-ном растворе бычьего сывороточного альбумина в КФБ в течение 1 ч при комнатной температуре.Sinpore nitrocellulose filters were incubated in a solution of 1˙10 -7 M poly-4-vinyl-pyridinium bromide with a molecular weight of 80,000 in potassium phosphate buffer pH 7.2 (KFB) for 1 h at room temperature. Then the filters were blocked in a 3% solution of bovine serum albumin in KPB for 1 h at room temperature.
В серию инкубационных пробирок, содержащих IgG человека в концентрациях 1˙10-9, 5˙10-10, 2˙10-10, 1˙10-10, 5˙10-11, 2˙10-11 М в 0,01 калий-фосфатном буфере рН 7,2, 0,05% Твин-20, 0,15М NaCl, добавляли 0,1 мл раствора конъюгата IgG-пероксидаза (1˙10-11 М). Затем в пробирку добавляли 0,1 мл раствора иммуносорбента (1˙10-10 М), инкубировали 5 мин при комнатной температуре.In a series of incubation tubes containing human IgG in concentrations of 1˙10 -9 , 5˙10 -10 , 2˙10 -10 , 1˙10 -10 , 5˙10 -11 , 2˙10 -11 M in 0.01 potassium phosphate buffer pH 7.2, 0.05% Tween-20, 0.15 M NaCl, 0.1 ml of IgG-peroxidase conjugate solution (1-10 -11 M) was added. Then 0.1 ml of an immunosorbent solution (1 × 10 -10 M) was added to the test tube, incubated for 5 min at room temperature.
Разделяли компоненты раствора пропуская его через нитроцеллюлозный фильтр с иммобилизованным ПВП. Детекцию ферментной метки на фильтре вели инкубацией его в растворе субстратов, содержащем 3,3'-диаминобензидин (0,5 мг/мл), перекись водорода 1˙10-3 М и добавки солей кобальта (0,2%).The components of the solution were separated by passing it through a nitrocellulose filter with immobilized PVP. The enzyme label was detected on the filter by incubating it in a substrate solution containing 3,3'-diaminobenzidine (0.5 mg / ml), hydrogen peroxide 1-10 -3 M and cobalt salts (0.2%).
Пересчет интенсивности окрашивания фильтра в концентрацию измеряемого IgG производили по калибровочному графику, полученному со стандартными препаратами IgG. Чувствительность метода составила 5˙10-11 М.Recalculation of the staining intensity of the filter into the concentration of the measured IgG was performed according to the calibration graph obtained with standard IgG preparations. The sensitivity of the method was 5˙10 -11 M.
П р и м е р 2. Анализ HBS-антигена. PRI me R 2. Analysis of HBS antigen.
В качестве антител использовали γ -глобулиновую фракцию кроличьей антисыворотки против НBS-антигена. As antibodies, the γ-globulin fraction of the rabbit antiserum against the HBS antigen was used.
Иммуносорбенты на основе ПМАК по- лучали как в примере 1. PMAA-based immunosorbents were obtained as in Example 1.
В качестве антигена использовали коммерческий препарат HBS-антигена. A commercial HBS antigen preparation was used as an antigen.
В качестве фермента использовали пероксидазу хрена с RZ=3,0 (ПХ). Horseradish peroxidase with RZ = 3.0 (HRP) was used as an enzyme.
Конъюгат IgG, специфичных к HBS-антигену, с пероксидазой (ПХ/ЕС1.11.1.7) получали методом окисления углеводного компонента фермента периодатом натрия. A conjugate of IgG specific for the HBS antigen with peroxidase (HRP / EC1.11.1.7) was obtained by oxidizing the carbohydrate component of the enzyme with sodium periodate.
Нерастворимый заряженный полимер готовили следующим образом. An insoluble charged polymer was prepared as follows.
Ацетатцеллюлозные мембраны производства фирмы "Полимерсинтез" (Владимир) инкубировали в 1˙10-7 М растворе полиэтиленимина с молекулярной массой 50000 в калий-фосфатном буфере рН 7,2 (КФБ) в течение 2 ч при комнатной температуре. Затем фильтры блокировали в 3%-ном растворе бычьего сывороточного альбумина в КФБ в течение 1 ч при комнатной температуре.Cellulose acetate membranes manufactured by Polymersynthesis (Vladimir) were incubated in a 1–10 -7 M solution of polyethyleneimine with a molecular weight of 50,000 in potassium phosphate buffer pH 7.2 (KFB) for 2 h at room temperature. Then the filters were blocked in a 3% solution of bovine serum albumin in KPB for 1 h at room temperature.
В серию инкубационных пробирок, содержащих HBS-антиген в концентрациях 320, 160, 80, 40, 20, 10, 5, 2,5 и 1,25 нг/мл в 0,01 калий-фосфатном буфере рН 7,2, 0,05% Твин-20, 0,15М NaCl, добавляли 0,1 мл раствора конъюгата IgG-пероксидаза (1˙10-11 М). Затем в пробирку добавляли 0,1 мл раствора иммуносорбента (1˙10-10 М) и инкубировали 5 мин при комнатной температуре.In a series of incubation tubes containing HBS antigen at concentrations of 320, 160, 80, 40, 20, 10, 5, 2.5 and 1.25 ng / ml in 0.01 potassium phosphate buffer pH 7.2, 0, 05% Tween-20, 0.15 M NaCl, 0.1 ml of IgG-peroxidase conjugate solution (1 × 10 -11 M) was added. The test tube is added 0.1 ml immunosorbent solution (1˙10 -10 M) and incubated for 5 min at room temperature.
Разделение компонентов раствора проводили пропуская его через нитроцеллюлозный фильтр с иммобилизованным поликатионом. Детекцию ферментной метки на фильтре вели инкубацией его в растворе субстратов, содержащем 3,3'-диаминобензидин (0,5 мг/мл), перекись водорода 1˙10-3 М и добавки солей кобальта (0,2%).The solution components were separated by passing it through a nitrocellulose filter with an immobilized polycation. The enzyme label was detected on the filter by incubating it in a substrate solution containing 3,3'-diaminobenzidine (0.5 mg / ml), hydrogen peroxide 1-10 -3 M and cobalt salts (0.2%).
Пересчет интенсивности окрашивания фильтра в концентрацию измеряемого НBS-антигена производили по калибровочному графику, полученному со стандартными препаратами HBS. Чувствительность метода составляет 2,5 нг/мл. The conversion of the filter staining intensity to the concentration of the measured HBS antigen was recalculated according to the calibration graph obtained with standard HBS preparations. The sensitivity of the method is 2.5 ng / ml.
Таким образом, предлагаемая мембрана позволяет значительно упростить и ускорить процесс иммуноферментного анализа. Thus, the proposed membrane can significantly simplify and accelerate the process of enzyme-linked immunosorbent assay.
Claims (1)
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU4855423/14 | 1990-07-31 | ||
| SU5542314 | 1990-07-31 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2038600C1 true RU2038600C1 (en) | 1995-06-27 |
Family
ID=21616246
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU5033495 RU2038600C1 (en) | 1990-07-31 | 1992-03-23 | Membrane for separating components of immunologic reaction |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2038600C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000004385A1 (en) * | 1998-07-17 | 2000-01-27 | Igor Jurievich Malyshev | Method for detecting proteins |
-
1992
- 1992-03-23 RU SU5033495 patent/RU2038600C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Pappas M.G. et al. Trans Roy. Soc. Med. Hyg, v.79, p.136, 1985. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000004385A1 (en) * | 1998-07-17 | 2000-01-27 | Igor Jurievich Malyshev | Method for detecting proteins |
| RU2167425C2 (en) * | 1998-07-17 | 2001-05-20 | Малышев Игорь Юрьевич | Method for identifying proteins |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4960692A (en) | Assay employing binding pair members on particles and on a filter or membrane | |
| US4407943A (en) | Immobilized antibody or antigen for immunoassay | |
| CA1336884C (en) | Visual discrimination qualitative enzyme assay | |
| US4870007A (en) | Immobilized biotinylated receptor in test device, kit and method for determining a ligand | |
| JPH0312705B2 (en) | ||
| US4474878A (en) | Sandwich EIA for antigen associated with hepatitis | |
| US6203706B1 (en) | Synthetic particles as agglutination reagents | |
| US5256543A (en) | HLA typing | |
| US5122452A (en) | Enzyme immunoassay with a macroporous hydrophobic synthetic polymer cloth containing an immobilized antibody or antigen | |
| US5641624A (en) | Method for measuring anti-HIV-1 p24 antibody and use thereof | |
| JP3327488B2 (en) | Method of immunochemical measurement of the subject | |
| CA1104927A (en) | Diagnostic immunochemical test material and procedure | |
| EP0350233A2 (en) | An article for performing immunological assays utilizing organic dyes and methods for producing and utilizing same | |
| EP0217845B1 (en) | Method for the immunological determination of a biological substance in a sample | |
| US7919331B2 (en) | Chromatographic test strips for one or more analytes | |
| US5866350A (en) | Method for the immunological determination of a biological material in a sample | |
| RU2038600C1 (en) | Membrane for separating components of immunologic reaction | |
| EP0456309A1 (en) | Use of heme-containing proteins as stabilizers for enzyme-labeled immunoreactants | |
| US5589344A (en) | Test kit and method for competitive specific binding assay | |
| RU2059972C1 (en) | Membrane for separating components of immuno-chemical reaction | |
| EP0152254A2 (en) | Chromogenic support immunoassay utilizing labeled complement components | |
| AU628293B2 (en) | Self-contained multi-immunoassay diagnostic system | |
| RU1801214C (en) | Method of biologically active substances immunoassay | |
| CA2019048C (en) | Cloth enzyme immunoassay | |
| US5916757A (en) | Specific binding assay using enzyme inhibitor and anti-inhibitor antibodies |