RU2027754C1 - Nutrient medium for microorganism growing and a method of preparing of casein pancreatic hydrolysate - Google Patents
Nutrient medium for microorganism growing and a method of preparing of casein pancreatic hydrolysate Download PDFInfo
- Publication number
- RU2027754C1 RU2027754C1 SU5014859A RU2027754C1 RU 2027754 C1 RU2027754 C1 RU 2027754C1 SU 5014859 A SU5014859 A SU 5014859A RU 2027754 C1 RU2027754 C1 RU 2027754C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- casein
- hydrolyzate
- pancreatic
- nutrient medium
- lactose
- Prior art date
Links
- 239000005018 casein Substances 0.000 title claims abstract description 32
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 32
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 title claims abstract description 32
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 title claims abstract description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims description 6
- 239000000413 hydrolysate Substances 0.000 title abstract 4
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims abstract description 16
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims abstract description 12
- LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N D-cystine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CSSC[C@@H](N)C(O)=O LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 claims abstract description 11
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- 239000008399 tap water Substances 0.000 claims abstract description 9
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims abstract description 8
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims abstract description 8
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims abstract description 7
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 7
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims abstract description 7
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims abstract description 6
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims abstract description 6
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 claims abstract description 6
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims abstract description 5
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims abstract description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 claims abstract description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 3
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical class [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract 2
- 229940099596 manganese sulfate Drugs 0.000 claims abstract 2
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 claims abstract 2
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 claims abstract 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 8
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims description 4
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims description 4
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims description 4
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 claims 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 claims 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 8
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 abstract description 2
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 abstract description 2
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 abstract 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 229910052564 epsomite Inorganic materials 0.000 abstract 1
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 abstract 1
- 229910000357 manganese(II) sulfate Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 32
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 3
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 2
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241000186016 Bifidobacterium bifidum Species 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- 241000194031 Enterococcus faecium Species 0.000 description 1
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 description 1
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 description 1
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 description 1
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 description 1
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 239000006402 liver broth Substances 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к микробиологической, медицинской, ветеринарной промышленности и может быть использовано при производстве лечебных бакпрепаратов, а также ветеринарных пробиотиков. The invention relates to the microbiological, medical, veterinary industry and can be used in the manufacture of therapeutic drugs, as well as veterinary probiotics.
Известна производственная печеночная питательная среда Блаурокка, содержащая печоночный бульон, пептон, лактозу и цистин. Known industrial hepatic nutrient medium Blaurock containing liver broth, peptone, lactose and cystine.
Однако эта среда дорога, состоит из дефицитных компонентов и нестабильна по ростовым свойствам. However, this environment is expensive, consists of scarce components and is unstable in growth properties.
Питательная среда на основе панкреатического гидролизата казеина с добавлением витаминов, аминокислот и гидролизата РНК, с источником углерода - лактозой содержит ряд дорогих и дефицитных компонентов, технология ее приготовления довольно трудоемка и длительна, что затрудняет ее промышленное использование. A nutrient medium based on pancreatic casein hydrolyzate with the addition of vitamins, amino acids and an RNA hydrolyzate, with a carbon source, lactose, contains a number of expensive and scarce components, the technology for its preparation is rather laborious and time-consuming, which complicates its industrial use.
Наиболее близкой к предлагаемой является среда на основе гидролизата казеина и автолизата дрожжей. Closest to the proposed is a medium based on casein hydrolyzate and yeast autolysate.
Однако отмечается нестабильность ее ростовых характеристик, выход клеток при выращивании на этой среде не превышает 2-3 млрд/мл. Указанная среда применима только для выращивания бифидумбактерий. However, instability of its growth characteristics is noted, the yield of cells when grown on this medium does not exceed 2-3 billion / ml. This medium is applicable only for the cultivation of bifidumbacteria.
Цель изобретения - расширение технологических возможностей среды и повышение выхода биомассы микроорганизмов. The purpose of the invention is the expansion of technological capabilities of the environment and increase the yield of biomass of microorganisms.
Для этого питательная среда для выращивания микроорганизмов содержит источник углерода - лактозу, источник витаминов - экстракт пекарских дрожжей, в качестве источника азота - панкреатический гидролизат казеина, цистин и дополнительно соли марганца и магния, аскорбиновую кислоту при следующем соотношении компонентов, г/л: Панкреатический гидролизат казеи- на (Nам) 0,14-0,16 Экстракт пекарских дрожжей 4,5-5,5 Лактоза 19,0-21,0 Цистин 0,15-0,25 MgSO4 ˙7H2O 0,15-0,25 MnSO4 ˙4H2O 0,04-0,06 Аскорбиновая кис- лота 0,4-0,6 Водопроводная вода до 1 л
Содержание гидролизата казеина, как общепринято, приведено в пересчете на аминный азот.For this, the nutrient medium for growing microorganisms contains a carbon source - lactose, a source of vitamins - baker's yeast extract, as a nitrogen source - pancreatic hydrolyzate of casein, cystine and additionally manganese and magnesium salts, ascorbic acid in the following ratio of components, g / l: Pancreatic hydrolyzate casein (N am ) 0.14-0.16 Baker's yeast extract 4.5-5.5 Lactose 19.0-21.0 Cystine 0.15-0.25 MgSO 4 ˙ 7H 2 O 0.15- 0.25 MnSO 4 ˙ 4H 2 O 0.04-0.06 Ascorbic acid 0.4-0.6 Tap water up to 1 l
The content of casein hydrolyzate, as is customary, is given in terms of amine nitrogen.
Известна технология приготовления панкреатического гидролизата казеина. Known technology for the preparation of pancreatic hydrolyzate of casein.
Однако она довольно трудоемка и длительна - до 2 недель. Отмечается также вариабельность характеристик получаемых гидролизатов. В этой связи актуальным представляется совершенствование технологического процесса приготовления панкреатического гидролизата казеина с высокой воспроизводимостью его основных характеристик и существенным сокращением продолжительности приготовления гидролизата. However, it is quite laborious and lengthy - up to 2 weeks. The variability of the characteristics of the resulting hydrolysates is also noted. In this regard, it seems relevant to improve the technological process of preparing pancreatic hydrolyzate of casein with high reproducibility of its basic characteristics and a significant reduction in the duration of preparation of the hydrolyzate.
Приготовление гидролизата казеина проводят с его предварительным прогревом при 79-81оС в течение 2 ч. Казеин гидролизуют панкреатином (соотношение казеина и панкреатина 20:1) при 49-51оС в течение 2 ч при рН 8,0-8,2. Затем подкисленный до рН 4,0-4,5 гидролизат прогревают до 100оС в течение 5-10 мин и охлажденный до 75-85оС подвергают ультрафильтрации на мембране с размерами пор 50 мкм. Осветленный фильтрат повторно прогревают до 100оС, выдерживают 5-10 мин, охлаждают до 85-95оС и фильтруют, затем вносят хлороформ. Содержание аминного азота должно быть не менее 450 мг.%, а общего - не менее 1500 мг.%, сухой остаток - не менее 18%.Preparation of the casein hydrolyzate it is carried out with preliminary heating at 79-81 ° C for 2 hours, hydrolized casein pancreatin (pancreatin and casein ratio 20: 1). At 49-51 ° C for 2 hours at a pH of 8.0-8.2 . Then acidified to pH 4.0-4.5 hydrolyzate is heated to 100 ° C for 5-10 minutes and cooled to 75-85 C was subjected to ultrafiltration on a membrane with a pore size of 50 microns. The clarified filtrate was re-heated to 100 ° C, held for 5-10 minutes, cooled to 85-95 ° C and filtered, then introduced chloroform. The content of amino nitrogen should be at least 450 mg.%, And the total - at least 1500 mg.%, Dry residue - at least 18%.
Отличием предлагаемой питательной среды является использование панкреатического гидролизата казеина, приготовленного по оригинальному способу. The difference of the proposed nutrient medium is the use of pancreatic hydrolyzate of casein, prepared according to the original method.
П р и м е р 1. Приготовление панкреатического гидролизата казеина (ПГК). Берут 15 кг навески казеина и растворяют в 75 кг питьевой воды. Нагревают до 79оС и доводят рН до 8,0 40%-ным раствором NaOH при постоянном перемешивании. Смесь выдерживают в течение 2 ч. (постоянно перемешивать) при 79оС, затем охлаждают до 49оС. Вносят навеску панкреатина (0,75 кг), разведенную в 2,0 дм воды с температурой 40оС. Гидролиз ведут в течение 2 ч при температуре 49оС и рН 8,0 при постоянном перемешивании. После окончания процесса гидролизат подкисляют до рН 4,0 (концентрированной HCl), подогревают до 100оС, выдерживают 5 мин, охлаждают до 75оС и фильтруют на ультрафильтрационной установке с размером пор 50 мкм. Осветленный в кислой зоне фильтрат доводят до 100оС, выдерживают 5 мин, охлаждают до 75оС и фильтруют через картон. Для хранения ПГК вносят 10 мл/л хлороформа. Хранят при 2оС до 1 г. Содержание аминного азота должно быть > 450 мг.%, а общего > 1500 мг.% -, сухой остаток - не менее 18%.PRI me R 1. Preparation of pancreatic hydrolyzate of casein (PGA). Take 15 kg of casein and dissolve in 75 kg of drinking water. Heated to 79 about C and adjusted to pH 8.0 with 40% NaOH solution with constant stirring. The mixture was allowed to stand for 2 hours. (Constantly stirred) at 79 ° C, then cooled to 49 ° C Contribute pancreatin weighed (0.75 kg) dissolved in 2.0 dm of water at 40 C. The hydrolysis is carried out for 2 hours at a temperature of 49 about C and a pH of 8.0 with constant stirring. After completing the hydrolyzate is acidified to pH 4.0 (with concentrated HCl), heated to 100 ° C, held for 5 minutes, cooled to 75 ° C and filtered on an ultrafiltration unit with a pore size of 50 microns. The filtrate clarified in the acidic zone was adjusted to 100 ° C, held for 5 minutes, cooled to 75 ° C and filtered through cardboard. For storage of PGC make 10 ml / l of chloroform. Stored at 2 ° C to 1 g of amine nitrogen content should be> 450 mg%, and the total> 1500 mg% -.., Dry residue - at least 18%.
Приготовление ростовой питательной среды на основе ПГК. Preparation of growth nutrient medium based on Freight One.
Готовят среду следующего состава, г/л: Панкреатический гидролизат казеи- на (Nам) 0,14 Экстракт пекарских дрожжей 4,5 Лактоза 19,0 Цистин 0,15 MgSO4 ˙7H2O 0,15 MnSO4 ˙4H2O 0,04 Аскорбиновая кис- лота 0,4 Водопроводная вода до 1 л причем каждый компонент стерилизуют раздельно при 110оС 30 мин, а аскорбиновую кислоту - при 100оС 5 мин.Prepare a medium of the following composition, g / l: Casein pancreatic hydrolyzate (N am ) 0.14 Bakery yeast extract 4.5 Lactose 19.0 Cystine 0.15 MgSO 4 ˙ 7H 2 O 0.15 MnSO 4 ˙ 4H 2 O 0.04 ascorbic kis- lot 0.4 Tap water to 1 liter each component is sterilized separately at 110 ° C for 30 minutes, and ascorbic acid - at 100 ° C for 5 minutes.
Полученную питательную среду используют для выращивания бифидумбактерий (штаммы N 1 ГИСК и БФ - 4 ВГНКИ ВП). Процесс ведут в ферментере. Температура культивирования 37оС, при рН = 6,8 в течение 15 ч. Посевную дозу дают из расчета 5% от объема среды. Выход клеток обоих изученных штаммов выше, чем на контрольной среде прототипа. Результаты представлены в таблице.The resulting nutrient medium is used for growing bifidumbacteria (strains N 1 GISK and BF - 4 VGNKI VP). The process is carried out in a fermenter. The culture temperature of 37 C, at pH = 6.8 for 15 hours. The seed dose given at the rate of 5% by volume of the medium. The cell yield of both studied strains is higher than on the control medium of the prototype. The results are presented in the table.
П р и м е р 2. Берут 15 кг навески казеина и растворяют в 75 кг питьевой воды, нагревают до 81оС и доводят рН до 8,5 40%-ным раствором NaOH при постоянном перемешивании. Смесь выдерживают в течение 2 ч (постоянно перемешивать) при 81оС, а затем охлаждают до 51оС. Вносят навеску панкреатина (0,75 кг), разведенную в 2,0 дм воды с температурой 55оС. Гидролиз ведут в течение 2 ч при температуре 51оС и рН 8,2 при постоянном перемешивании. После окончания процесса гидролизат подкисляют до рН 4,5 (концентрированной HCl), подогревают до 100оС, выдерживают 10 мин, охлаждают до 85оС и фильтруют на ультрафильтрационной установке с размером пор 50 мкм. Осветленный в кислой зоне фильтрат доводят до 100оС, выдерживают 10 мин, охлаждают до 95оС и фильтруют через картон. Для хранения ПГК вносят 10 мл/л хлороформ и хранят при 8оС до 1 г. Содержание аминного азота должно быть > 450 мг.%, а общего > 1500 мг.%, сухой остаток - не менее 18%.PRI me R 2. Take 15 kg of a portion of casein and dissolved in 75 kg of drinking water, heated to 81 about C and adjust the pH to 8.5 with 40% NaOH with constant stirring. The mixture was incubated for 2 hours (constant stirring) at 81 ° C and then cooled to 51 ° C. Contribute pancreatin weighed (0.75 kg) dissolved in 2.0 dm of water at 55 C. The hydrolysis is carried out for 2 hours at a temperature of 51 about C and a pH of 8.2 with constant stirring. After completing the hydrolyzate is acidified to pH 4.5 (with concentrated HCl), warmed to 100 C. After 10 min, cooled to 85 ° C and filtered on an ultrafiltration unit with a pore size of 50 microns. The filtrate clarified in the acidic zone was brought to 100 ° C, held for 10 minutes, cooled to 95 ° C and filtered through cardboard. For storage of NGL make 10 ml / l of chloroform and stored at 8 ° C to 1 g of amine nitrogen content should be> 450 mg%, and the total> 1500 mg% dry residue -.. At least 18%.
Питательную среду готовят как в примере 1. Полученную среду следующего состава, г/л: Панкреатический гидролизат казеи- на (Nам) 0,16 Экстракт пекарс- ких дрожжей 5,5 Лактоза 21,0 Цистин 0,25 MgSO4 ˙7H2O 0,25 MnSO4 ˙4H2O 0,06 Аскорбиновая кислота 0,6 Водопроводная вода до 1 л используют для выращивания Lactobacillus plantarum штамма 8-РА-3 в ферментере при рН = 6,8 и температуре 37оС в течение 15 ч при аэрации 0,2 объема воздуха на объем среды в минуту и скорости вращения мешалки 200-500 об/мин. Посевную дозу дают из расчета 5% от объема среды. Выход клеток выше, чем на контрольной среде прототипа. Результаты представлены в таблице.The nutrient medium is prepared as in example 1. The resulting medium of the following composition, g / l: Pancreatic casein hydrolyzate (N am ) 0.16 Extract of baker's yeast 5.5 Lactose 21.0 Cystine 0.25 MgSO 4 ˙ 7H 2 O 0,25 MnSO 4 ˙4H 2 O 0,06 Ascorbic acid 0.6 Tap water to 1 liter is used for growing Lactobacillus plantarum strain-8 PA-3 in a fermenter at pH 6.8 and 37 ° C for 15 h with aeration of 0.2 volume of air per volume of medium per minute and speed of rotation of the mixer 200-500 rpm The inoculum dose is given at the rate of 5% of the medium volume. The cell yield is higher than on the control medium of the prototype. The results are presented in the table.
П р и м е р 3. Питательную среду готовят как в примере 1. Полученную среду следующего состава, г/л: Панкреатический гидролизат казеи- на (Nам) 0,15 Экстракт пекарс- ких дрожжей 5,5 Лактоза 21,0 Цистин 0,25 MgSO4 ˙7H2O 0,25 MnSO4 ˙4H2O 0,06 рН среды 7,2 Водопроводная вода до 1 л используют для выращивания глубинной культуры Streptocоccus faecium штамм С-74 в ферментере при рН = 6,8 и температуре 37оС в течение 15 ч при аэрации 0,2 объема воздуха на объем среды в минуту и оборотах мешалки 200-500 об/мин. Посевную дозу вносят из расчета 5% от объема среды. Результаты представлены в таблице.PRI me R 3. The nutrient medium is prepared as in example 1. The resulting medium of the following composition, g / l: Pancreatic hydrolyzate of casein (N am ) 0.15 Extract of baker's yeast 5.5 Lactose 21.0 Cystine 0.25 MgSO 4 ˙ 7H 2 O 0.25 MnSO 4 ˙ 4H 2 O 0.06 pH of the medium 7.2 Tap water up to 1 L is used to grow a deep culture of Streptococcus faecium strain C-74 in a fermenter at pH = 6.8 and 37 ° C for 15 hours under aeration of 0.2 volume of air per volume of medium per minute and the agitator speed of 200-500 rev / min. The seed dose is applied at the rate of 5% of the medium volume. The results are presented in the table.
П р и м е р 4. Питательную среду готовят как в примере 1. Полученную среду следующего состава, г/л: Панкреатический гидролизат казеи- на (Nам) 0,15 Экстракт пекарс- ких дрожжей 5,5 Лактоза 21,0 Цистин 0,25 MgSO4 ˙7H2O 0,25 MnSO4 ˙4H2O 0,06 рН среды 7,2 Водопроводная вода до 1 л используют для выращивания глубинной культуры Lactobacillus acidophilus штамм 2585 ВГНКИ ВП в ферментере при рН = 6,6 и температуре 39оС в течение 1 ч при аэрации 0,2 объема воздуха на объем среды в минуту и оборотах мешалки 200-400 об/мин. Посевную дозу вносят из расчета 5% от объема среды. Результаты представлены в таблице.Example 4. The nutrient medium is prepared as in example 1. The resulting medium of the following composition, g / l: Pancreatic hydrolyzate of casein (N am ) 0.15 Extract of baker's yeast 5.5 Lactose 21.0 Cystine 0.25 MgSO 4 ˙ 7H 2 O 0.25 MnSO 4 ˙ 4H 2 O 0.06 pH of the medium 7.2 Tap water up to 1 L is used to grow a deep culture of Lactobacillus acidophilus strain 2585 VGNKI VP in the fermenter at pH = 6.6 and a temperature of 39 ° C for 1 hour under aeration of 0.2 volume of air per volume of medium per minute and the agitator speed of 200-400 rev / min. The seed dose is applied at the rate of 5% of the medium volume. The results are presented in the table.
Результаты примеров 1- свидетельствуют о том, что предлагаемая питательная среда позволяет повысить выход клеток в 2-3 раза. The results of examples 1- indicate that the proposed nutrient medium allows to increase the yield of cells by 2-3 times.
П р и м е р 5. Получают питательную среду, в которой в качестве источника азота используют гидролизат казеина, полученный по прототипу. Готовят среду по прописи как в примере 1. Проводят культивирование B. bifidum шт. 1. Выход клеток на среде с использованием гидролизата казеина, приготовленного как в прототипе, составляет 5 млрд/мл, что значительно ниже, чем на предлагаемой питательной среде. Следовательно, для ростовых характеристик среды существенную роль играет гидролизат казеина, полученный по предлагаемому способу. PRI me
Таким образом, предлагаемая среда и способ приготовления панкреатического гидролизата казеина позволяют унифицировать технологию получения ряда лечебно-профилактических препаратов, содержащих несколько видов микроорганизмов. Кроме того, предлагаемая среда позволяет повысить выход клеток, а также исключить использование ряда дорогостоящих и дефицитных компонентов - печени, витаминов, аминокислот. Thus, the proposed environment and method of preparing pancreatic hydrolyzate of casein allows to unify the technology for a number of therapeutic and prophylactic preparations containing several types of microorganisms. In addition, the proposed environment allows to increase the yield of cells, as well as to exclude the use of a number of expensive and deficient components - liver, vitamins, amino acids.
Claims (2)
Панкреатический гидролизат казеина - 0,14 - 0,16
Экстракт пекарских дрожжей - 4,5 - 5,5
Лактоза - 19 - 21
Цистин - 0,15 - 0,25
MgSO4·7H2O - 0,15 - 0,25
MnSO4·4H2O - 0,04 - 0,06
Аскорбиновая кислота - 0,4 - 0,6
Водопроводная вода, л - До 1
2. Способ получения панкреатического гидролизата казеина, предусматривающий растворение казеина в воде, термическую обработку полученного раствора, охлаждение до температуры гидролиза, внесение панкреатина и гидролиз при заданных температуре и величине pH с последующей его фильтрацией, отличающийся тем, что термическую обработку раствора казеина ведут при 79 - 81oС и pH 8,0 - 8,2 в течение 2 ч, гидролиз проводят при 49 - 51oС в течение 2 ч при pH 8,0 - 8,2, полученный гидролизат подкисляют до pH 4,0 -4,5, прогревают до 100oС в течение 5 - 10 мин, охлаждают до 75 - 85 oС и подвергают ультрафильтрации на мембране с размерами пор 50 мкм.1. Nutrient medium for growing microorganisms, containing a nitrogen source - pancreatic casein hydrolyzate, carbon source - lactose, a vitamin source - baker's yeast extract, cystine and tap water, characterized in that it additionally contains manganese and magnesium sulfate salts and ascorbic acid in the following ratio of components, g / l:
Casein Pancreatic Hydrolyzate - 0.14 - 0.16
Baker's Yeast Extract - 4.5 - 5.5
Lactose - 19 - 21
Cystine - 0.15 - 0.25
MgSO 4 · 7H 2 O - 0.15 - 0.25
MnSO 4 · 4H 2 O - 0.04 - 0.06
Ascorbic acid - 0.4 - 0.6
Tap water, l - Up to 1
2. A method of producing a pancreatic hydrolyzate of casein, comprising dissolving casein in water, heat treating the resulting solution, cooling to a hydrolysis temperature, introducing pancreatin and hydrolyzing at a given temperature and pH, followed by filtration, characterized in that the heat treatment of the casein solution is carried out at 79 - 81 o C and a pH of 8.0 - 8.2 for 2 hours, hydrolysis is carried out at 49 - 51 o C for 2 hours at a pH of 8.0 - 8.2, the resulting hydrolyzate is acidified to pH 4.0 -4 , 5, heated to 100 o C for 5 to 10 minutes, cooled to 75 - 85 o C and subjected to ultrafiltration on a membrane with a pore size of 50 μm.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU5014859 RU2027754C1 (en) | 1991-08-30 | 1991-08-30 | Nutrient medium for microorganism growing and a method of preparing of casein pancreatic hydrolysate |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU5014859 RU2027754C1 (en) | 1991-08-30 | 1991-08-30 | Nutrient medium for microorganism growing and a method of preparing of casein pancreatic hydrolysate |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2027754C1 true RU2027754C1 (en) | 1995-01-27 |
Family
ID=21590706
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU5014859 RU2027754C1 (en) | 1991-08-30 | 1991-08-30 | Nutrient medium for microorganism growing and a method of preparing of casein pancreatic hydrolysate |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2027754C1 (en) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2154822C1 (en) * | 1999-04-29 | 2000-08-20 | Новокузнецкий государственный институт усовершенствования врачей | Method of isolation of bacterium of genus lactobacillus from clinical material |
| RU2213779C2 (en) * | 2001-08-27 | 2003-10-10 | Научно-производственное объединение "Питательные среды" | Nutrient medium for isolation of lactobacilli |
| RU2216587C2 (en) * | 2001-07-25 | 2003-11-20 | Нижегородское государственное предприятие по производству бактерийных препаратов - фирма "ИмБио" | Nutrient medium for culturing lactobacillus |
| RU2253673C2 (en) * | 2002-12-02 | 2005-06-10 | Государственное унитарное предприятие "Иммунопрепарат" | Method for production of pancreatic protein hydrolyzate and broth for bifidus bacteria cultivation using the same |
| RU2360962C2 (en) * | 2007-06-15 | 2009-07-10 | Федеральное государственное учреждение здравоохранения "Российский научно-исследовательский противочумный институт "Микроб" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека ("РосНИПЧИ "Микроб") | Nutrient base production method and nutrient base for yersinia and vibrio microorganisms fermentation |
-
1991
- 1991-08-30 RU SU5014859 patent/RU2027754C1/en active
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| Авторское свидетельство СССР N 1112055, кл. C 12N 1/20, 1984. * |
| Авторское свидетельство СССР N 957909, кл. A 61K 35/74, 1982. * |
| Банникова Л.А. и др. Микробиологические основы молочного производства. -М.: Агропромиздат, 1987, с.297. * |
| Гончарова Г.И. и Вильшанская Ф.Л. ЖМЭИ, 1968, N 7, с.55-58. * |
| Регламент производства Бифидумбактерина сухого N 214-81. * |
| Регламент производства Лактобактерина сухого N 23-75. * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2154822C1 (en) * | 1999-04-29 | 2000-08-20 | Новокузнецкий государственный институт усовершенствования врачей | Method of isolation of bacterium of genus lactobacillus from clinical material |
| RU2216587C2 (en) * | 2001-07-25 | 2003-11-20 | Нижегородское государственное предприятие по производству бактерийных препаратов - фирма "ИмБио" | Nutrient medium for culturing lactobacillus |
| RU2213779C2 (en) * | 2001-08-27 | 2003-10-10 | Научно-производственное объединение "Питательные среды" | Nutrient medium for isolation of lactobacilli |
| RU2253673C2 (en) * | 2002-12-02 | 2005-06-10 | Государственное унитарное предприятие "Иммунопрепарат" | Method for production of pancreatic protein hydrolyzate and broth for bifidus bacteria cultivation using the same |
| RU2360962C2 (en) * | 2007-06-15 | 2009-07-10 | Федеральное государственное учреждение здравоохранения "Российский научно-исследовательский противочумный институт "Микроб" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека ("РосНИПЧИ "Микроб") | Nutrient base production method and nutrient base for yersinia and vibrio microorganisms fermentation |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US3932671A (en) | Process for producing protein hydrolyzate | |
| JPS61209590A (en) | Novel immobilized cell and method for fermentative production utilizing same | |
| Tsugawa et al. | Production of l-Glutamic Acid from dl-Hydantoin-5-propionic Acid by Microoganisms: Part I. Screening of l-Glutamic Acid-Producing Microorganisms and Some Optimal Conditions for Production of l-Glutamic Acid | |
| JPS61202694A (en) | Production of l-glutamine by fermentation method | |
| RU2027754C1 (en) | Nutrient medium for microorganism growing and a method of preparing of casein pancreatic hydrolysate | |
| JPH0549489A (en) | Method for producing l-phenylalanine by fermentation method | |
| JP3008565B2 (en) | Method for producing L-glutamic acid by fermentation method | |
| JPS6115695A (en) | Preparation of l-isoleucine by fermentation method | |
| JP3717970B2 (en) | Method for producing L-isoleucine by fermentation | |
| RU2280464C2 (en) | Method for preparing dry probiotic preparation "batsell" | |
| CA2215605C (en) | Osmotically controlled fermentation process for the preparation of acarbose | |
| JP2817185B2 (en) | Method for producing L-ornithine by fermentation | |
| BG99311A (en) | Ferments for bulgarian yoghourt and method for their preparation | |
| US3282794A (en) | Method of producing citrulline by bacterial fermentation | |
| SU952111A3 (en) | Process for producing beta-galactozeidaze | |
| RU95110170A (en) | Method of preparing bacterial ferment and a method of production of bacterial concentrate and its use for lactic acid foodstuffs | |
| RU2169472C2 (en) | Method of preparing bacterial ferment for fermented-milk product | |
| RU2084520C1 (en) | Strain of bacterium brevibacterium flavum - a producer of l-glutamine (variants) | |
| RU2207019C1 (en) | Biologically active food additive and a method of preparation thereof | |
| RU2287572C2 (en) | Nutrient medium for culturing bifidobacteria or lactobacteria | |
| JPH02138965A (en) | Culture product of klebsiella strain and method for producing monosaccharide mixture containing much rhamnose with use of the culture product | |
| RU1549227C (en) | Method for producing a complex of lytic enzymes | |
| CN1184308C (en) | A new method for preparing live bacteria products of lactic acid spores and butyric acid bacillus | |
| RU94018305A (en) | Method of preparing curd hydrolyzate for nutrient media producing | |
| SU1479076A1 (en) | Method of producing biological preparations for correction of intestinal microflora |