RU2027190C1 - Conjugate of polysaccharide antigen with polyethyleneimine as an immunosorbent for detection of streptococcus and pneumococcus infections - Google Patents
Conjugate of polysaccharide antigen with polyethyleneimine as an immunosorbent for detection of streptococcus and pneumococcus infections Download PDFInfo
- Publication number
- RU2027190C1 RU2027190C1 SU4859936A RU2027190C1 RU 2027190 C1 RU2027190 C1 RU 2027190C1 SU 4859936 A SU4859936 A SU 4859936A RU 2027190 C1 RU2027190 C1 RU 2027190C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- immunosorbent
- conjugate
- polyethyleneimine
- streptococcus
- pneumococcus
- Prior art date
Links
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 title claims abstract description 17
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 title claims abstract description 17
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 title claims abstract description 17
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 title claims abstract description 15
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims abstract description 14
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims abstract description 14
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims abstract description 12
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 title claims abstract description 10
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 title claims abstract description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract 3
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 title abstract description 5
- 206010061372 Streptococcal infection Diseases 0.000 claims description 2
- 208000035109 Pneumococcal Infections Diseases 0.000 claims 1
- JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M sodium periodate Chemical compound [Na+].[O-]I(=O)(=O)=O JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract description 10
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 description 4
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 4
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 4
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 4
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 3
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 3
- 241001505901 Streptococcus sp. 'group A' Species 0.000 description 3
- 230000004523 agglutinating effect Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 3
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 3
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 3
- 239000010755 BS 2869 Class G Substances 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- -1 for example Substances 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 101100257624 Arabidopsis thaliana SPS4 gene Proteins 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 206010006458 Bronchitis chronic Diseases 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 208000004232 Enteritis Diseases 0.000 description 1
- 241000305071 Enterobacterales Species 0.000 description 1
- 101710088235 Envelope glycoprotein C homolog Proteins 0.000 description 1
- BRLQWZUYTZBJKN-UHFFFAOYSA-N Epichlorohydrin Chemical compound ClCC1CO1 BRLQWZUYTZBJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004593 Epoxy Substances 0.000 description 1
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 241000872931 Myoporum sandwicense Species 0.000 description 1
- 208000029082 Pelvic Inflammatory Disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 206010037596 Pyelonephritis Diseases 0.000 description 1
- 206010049677 Salpingo-oophoritis Diseases 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 102000034755 Sex Hormone-Binding Globulin Human genes 0.000 description 1
- 108010089417 Sex Hormone-Binding Globulin Proteins 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N Sulfurous acid Chemical compound OS(O)=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000014034 Transcortin Human genes 0.000 description 1
- 108010011095 Transcortin Proteins 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002152 alkylating effect Effects 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 208000007451 chronic bronchitis Diseases 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 208000030603 inherited susceptibility to asthma Diseases 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 208000008128 pulmonary tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 206010044008 tonsillitis Diseases 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к иммунобиотехнологии, а именно к конъюгатам и иммуносорбентам. The invention relates to immunobiotechnology, namely to conjugates and immunosorbents.
Иммуносорбент может найти применение для диагностики инфекционно-воспалительных заболеваний. Immunosorbent can be used to diagnose infectious and inflammatory diseases.
Известна активированная матрица для иммобилизации белков (Зенюк А.А. и соавторы. Активированная матрица для иммобилизации белков, авт.св. СССР N 1280834, кл. G 01 N 33/50) формулы
П-O-CH2-
P-O-CH 2 -
Используют полисахаридные матрицы, которые получают в три стадии. Polysaccharide matrices are used, which are obtained in three stages.
1. Активация полисахаридного носителя эпихлоргидрином. 1. Activation of the polysaccharide carrier by epichlorohydrin.
2. Раскрытие эпоксидного цикла аминокислотой. 2. Opening the epoxy cycle with an amino acid.
3. Этерификация N-оксисукцинимидом карбоксильной группы. 3. N-oxysuccinimide esterification of a carboxyl group.
На матрице иммобилизуют белки, содержащие первичную аминогруппу, например, транскортин, сексстероидсвязывающий глобулин, иммуноглобулины. Proteins containing a primary amino group are immobilized on the matrix, for example, transcortin, sexsteroid-binding globulin, immunoglobulins.
Однако матрица непригодна для иммобилизации полисахаридных антигенов, так как последний не может связываться с используемым связывающим элементом. However, the matrix is not suitable for immobilization of polysaccharide antigens, since the latter cannot bind to the binding element used.
Известен конъюгат, в котором активную группу белкового антигена связывают сульфонирующим или алкилирующим, или ацилирующим агентами (реагент агглютинации и способ его получения, заявка ЕПВ N 280561, кл. G 01 N 33/546). A conjugate is known in which the active group of a protein antigen is bound by sulfonating or alkylating or acylating agents (agglutination reagent and method for its preparation, EPO application N 280561, class G 01 N 33/546).
Однако связывающие агенты пригодны лишь для белковых антигенов, которые зачастую недостаточно специфичны и, следовательно, не позволяют выявить заболевание, что снижает точность диагностики. However, binding agents are suitable only for protein antigens, which are often not specific enough and, therefore, do not allow to identify the disease, which reduces the accuracy of diagnosis.
Известен также иммуносорбент [1], который выбран в качестве прототипа. Представляет собой конъюгат антиген-полисахарид-протеин. Полисахарид и протеин ковалентно связаны через
-CH2-
-CH 2 -
Решаемой задачей является создание конъюгата, обладающего хорошими агглютинирующими свойствами, что позволит использовать его в растворе, и достаточными адгезионными свойствами, что позволит использовать его с неактивированной твердой фазой. Это значительно расширяет область использования конъюгата. The problem to be solved is the creation of a conjugate with good agglutinating properties, which will allow it to be used in solution, and sufficient adhesive properties, which will allow it to be used with an inactive solid phase. This greatly expands the scope of use of the conjugate.
Техническим результатом является то, что альдегидную группировку полисахарида связывают полиэтиленимином. The technical result is that the aldehyde group of the polysaccharide is bound with polyethyleneimine.
Сущность изобретения состоит в том, что конъюгат имеет формулу
где n = 103-106
Из работ, описанных во вводной части описания, известно, что полисахарид используется в качестве антигена и активированного носителя. Использование полиэтиленимина в качестве связывающего звена не известно. Известно лишь использование его в качестве поликатиона для связывания сульфо-, карбокси- и других кислых групп (Haars A., Zonnez S. Hutterma A. Quantitative determination of lignosulfomates from sulfite spend liguors using presipitation with polyethyleneimine. Holzforsch 35(2); 59-65. 81).The essence of the invention lies in the fact that the conjugate has the formula
where n = 10 3 -10 6
From the works described in the introductory part of the description, it is known that the polysaccharide is used as an antigen and an activated carrier. The use of polyethyleneimine as a link is not known. It is only known to use it as a polycation to bind sulfo, carboxy, and other acidic groups (Haars A., Zonnez S. Hutterma A. Quantitative determination of lignosulfomates from sulfite spend liguors using presipitation with polyethyleneimine. Holzforsch 35 (2); 59- 65.81).
Следовательно, налицо изобретательский уровень. Therefore, there is an inventive step.
Конъюгат получают следующим образом. The conjugate is prepared as follows.
Полисахаридный антиген, например С-полисахарид пневмококка (СПСХ) или А-полисахарид стрептококка гр. А( АПСХ) обрабатывают периодатом натрия, затем добавляют раствор полиэтиленимина. Полная реакционная схема следующая:
1.(C6H10O5)n+ 2 NaIO4__→(C6H6O3(HO)2)n+I2+4O2+2Na++2H+
2.(C6H6O3(HO)2)n+ (C4H9N)n(NH2)
Продукт реакции соответствует формуле
П р и м е р. Дозировка ингредиентов приведена в расчете на 1 мг полисахарида. 1.1 мг СПСХ - антигена пневмококка растворяют в 0,1 мл 0,1 М бикарбонатного буфера рН 8. Добавляют 0,1 мл раствора периодата натрия (2 мг/мл). Инкубируют 1 ч в темноте. Затем добавляют каплю глицерина (для удаления свободного пеиродата натрия) и при энергичном встряхивании вливают 0,45 мл раствора полиэтиленимина, 2 мг/мл (мол.м. 30-40 кДа) на 0,1 М бикарбонатном буфере рН 8. Инкубируют 2 ч.Polysaccharide antigen, for example, pneumococcus C-polysaccharide (SPSC) or streptococcus A-polysaccharide gr. A (APSX) is treated with sodium periodate, then a solution of polyethyleneimine is added. The complete reaction scheme is as follows:
1. (C 6 H 10 O 5 ) n + 2 NaIO 4 __ → (C 6 H 6 O 3 (HO) 2 ) n + I 2 + 4O 2 + 2Na + + 2H +
2. (C 6 H 6 O 3 (HO) 2 ) n + (C 4 H 9 N) n (NH 2 )
The reaction product corresponds to the formula
PRI me R. The dosage of the ingredients is based on 1 mg of polysaccharide. 1.1 mg SCLC - pneumococcal antigen is dissolved in 0.1 ml of 0.1 M bicarbonate buffer pH 8. Add 0.1 ml of sodium periodate solution (2 mg / ml). Incubated for 1 h in the dark. Then, a drop of glycerol is added (to remove free sodium peirodate) and, with vigorous shaking, 0.45 ml of a solution of polyethyleneimine, 2 mg / ml (mol.m. 30-40 kDa) are poured into 0.1 M bicarbonate buffer pH 8. Incubated for 2 hours .
2. 1 мг группоспецифического полисахарида стрептококка группы А-антигена стрептококка растворяют в 0,1 мл 0,1 М бикарбонатного буфера рН 8. Добавляют 0,1 мл раствора периодата натрия (2 мг/мл) на бикарбонатном буфере и выдерживают 1 ч в темноте. Для удаления свободного периодата натрия вливают каплю глицерина. Затем добавляют 0,45 мл раствора полиэтиленимина (2 мг/мл) и инкубируют в темноте 2 ч. 2. 1 mg of the group-specific streptococcus streptococcus polysaccharide of group A streptococcus antigen is dissolved in 0.1 ml of 0.1 M bicarbonate buffer pH 8. Add 0.1 ml of sodium periodate solution (2 mg / ml) in bicarbonate buffer and incubated for 1 h in the dark . To remove the free sodium periodate, a drop of glycerol is poured. Then, 0.45 ml of a solution of polyethyleneimine (2 mg / ml) was added and incubated in the dark for 2 hours.
Приготовленные таким образом конъюгаты доводят фосфатным буфером до 40 мл и заливают в лунки планшета для иммуноферментного анализа по 100 мкл в каждую. Выдерживают 12 ч при 4оС, отмывают дистиллированной водой 4 раза и высушивают при 37оС. После этого материал готов для проведения иммуноферментного анализа.Conjugates prepared in this way were brought up to 40 ml with phosphate buffer and poured into 100 μl of each plate for enzyme-linked immunosorbent assay. Kept 12 h at 4 ° C, washed with distilled
Поскольку полисахаридный антиген является специфичным для острых инфекционно-воспалительных заболеваний, иммуносорбент пригоден для диагностики этого класса болезней. При этом сорбент с СПСХ - антигеном пневмококка пригоден для диагностики заболеваний, вызванных пневмококком (например острых пневмоний), с АПСХ - антигеном стрептококка группы А - для диагностики заболеваний, вызванных стрептококком группы А (ревматизм, тонзиллит, гломерулонефрит)), с Re- гликолипидом А-антигеном грамотрицательных микроорганизмов - для диагностики заболеваний, вызванных грамотрицательными микроорганизмами - энтеробактериями (пиелонефрит, энтерит, аднексит и т.п.). Для диагностических целей в лунки планшета с конъюгатом вносят по 100 мл 0,5% раствор бычьего сывороточного альбумина на фосфатном буфере, инкубируют 1 ч при 37оС, после чего удаляют содержимое из лунок и вносят в них по 100 мкл испытуемой сыворотки в разведениях от 1:5 до 1:640. Инкубируют 1 ч при 37оС, отмывают 4 раза, добавляют в лунки по 100 мкл антител к иммуноглобулинам человека, конъюгированных с пероксидазой хрена в разведении 1:200, выдерживают 1 ч при 37оС, отмывают 5 раз, вносят по 100 мкл субстрата - ортофенилендиамина (1 мг/мл), рН 4,7, содержащего 0,05% перекись водорода. Выдерживают в темноте 40 мин. Оптическую плотность измеряют при λ =492 нм. В качестве примера приводятся результаты исследования с иммуносорбентом СПСХ пяти больных.Since the polysaccharide antigen is specific for acute infectious and inflammatory diseases, the immunosorbent is suitable for the diagnosis of this class of diseases. At the same time, the sorbent with SCSX - pneumococcal antigen is suitable for diagnosing diseases caused by pneumococcus (for example, acute pneumonia), with APSX - group A streptococcus antigen for diagnosing diseases caused by group A streptococcus (rheumatism, tonsillitis, glomerulonephritis)), with Re-glycolipid A-antigen of gram-negative microorganisms - for the diagnosis of diseases caused by gram-negative microorganisms - enterobacteria (pyelonephritis, enteritis, adnexitis, etc.). For diagnostic purposes in the wells with the conjugate made by 100 ml of 0.5% solution of bovine serum albumin in phosphate buffered saline, incubated for 1 h at 37 ° C after which the contents were removed from the wells, and introduced into them at 100 ul test serum dilutions of 1: 5 to 1: 640. Incubate 1 hour at 37 ° C, washed 4 times, is added to the wells at 100 l antibodies to human immunoglobulins conjugated to horseradish peroxidase at 1: 200 dilution, incubated 1 h at 37 ° C, washed 5 times Pipette 100 ul of substrate - orthophenylenediamine (1 mg / ml), pH 4.7, containing 0.05% hydrogen peroxide. Stand in the dark for 40 minutes. The optical density is measured at λ = 492 nm. As an example, the results of a study with the immunosorbent SPSX of five patients are given.
1. Больной С-д, острая пневмония. Из мокроты высеян пневмококк. Титр антител к СПСХ, выявленный с использованием разработанного конъюгата в качестве иммуносорбента, 1:320. 1. Patient Cd, acute pneumonia. Pneumococcus is sown from sputum. The titer of antibodies to SCLC, identified using the developed conjugate as an immunosorbent, 1: 320.
2. Больной Ю-с, острая пневмония, бронхиальная астма. Из мокроты высеян пневмококк. Титр антител к конъюгату с СПСХ, выявленный с использованием предложенного иммуносорбента, 1:640. 2. Patient Yu-s, acute pneumonia, bronchial asthma. Pneumococcus is sown from sputum. The titer of antibodies to conjugate with SCLC, identified using the proposed immunosorbent, 1: 640.
3. Больная С-а, туберкулез легких. Титр антител 1:40. 3. Patient S. a, pulmonary tuberculosis. The titer of antibodies is 1:40.
4. Больной Н-о, саркоидоз. Титр антител 1:10. 4. Patient N., sarcoidosis. The titer of antibodies is 1:10.
5. Больной Г-о, хронический бронхит, высеян из мокроты стафилококк. Титр антител к конъюгату с СПСХ, выявленный с использованием разработанного иммуносорбента, 1:20. 5. Patient Mr., chronic bronchitis, sown from sputum staphylococcus aureus. The titer of antibodies to conjugate with SCLC, detected using the developed immunosorbent, 1:20.
Эти примеры показывают, что высокие титры антител наблюдаются у больных в острой фазе заболевания, вызванного пневмококком. These examples show that high titers of antibodies are observed in patients in the acute phase of the disease caused by pneumococcus.
В случае использования сорбента в растворе к 50 мкл суспензии гранул сорбента с носителем добавляют 50 мкл исследуемой сыворотки, разведенной физиологическим раствором от 1:1 до 1:1024, инкубируют не менее 15 мин, реакцию учитывают по образованию цветного осадка. In the case of using the sorbent in solution, 50 μl of the studied serum diluted with physiological saline from 1: 1 to 1: 1024 are added to 50 μl of a suspension of granules of the sorbent with a carrier, incubated for at least 15 minutes, the reaction is taken into account by the formation of a color precipitate.
В качестве примера работоспособности конъюгата приводятся результаты исследований, при которых определяли титр антител известным способом (стандарт) и с использованием предложенного иммуносорбента у пациентов со стрептококковой инфекцией. Результаты приведены в табл. 1. As an example of the health of the conjugate, the results of studies are given in which the antibody titer was determined in a known manner (standard) and using the proposed immunosorbent in patients with streptococcal infection. The results are shown in table. 1.
Из табл. 1 видно, что при использовании стандарта невозможно установить степень достоверности при различной активности процесса, так как данные, полученные с его помощью, не соответствуют состоянию процесса. При использовании предложенного иммуносорбента отмечено высокодостоверное различие по группам больных. From the table. Figure 1 shows that when using the standard it is impossible to establish the degree of reliability for various activity of the process, since the data obtained with its help do not correspond to the state of the process. When using the proposed immunosorbent, a highly significant difference in the groups of patients was noted.
Параллельно проводились исследования титра антител по предложенному изобретению и прототипу. Исследованы сыворотки больных, приведенных в описанных выше примерах. Результаты приведены в табл. 2. In parallel, studies were conducted titer of antibodies according to the proposed invention and the prototype. The sera of patients described in the examples described above were studied. The results are shown in table. 2.
Анализ данных табл. 2 показывает, что сорбент-прототип не пригоден в силу малой молекулярной массы для работы, так как не обладает агглютинирующими свойствами. Предложенный конъюгат можно использовать в качестве иммуносорбента в реакции агглютинации. Data analysis table. 2 shows that the sorbent prototype is not suitable due to the low molecular weight for work, as it does not have agglutinating properties. The proposed conjugate can be used as an immunosorbent in the agglutination reaction.
Claims (1)
где n = 103 - 106,
в качестве иммуносорбента для выявления стрептококковых и пневмококковых инфекций.Polysaccharide antigen conjugate with polyethyleneimine of general formula
where n = 10 3 - 10 6 ,
as an immunosorbent for the detection of streptococcal and pneumococcal infections.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU4859936 RU2027190C1 (en) | 1990-08-22 | 1990-08-22 | Conjugate of polysaccharide antigen with polyethyleneimine as an immunosorbent for detection of streptococcus and pneumococcus infections |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU4859936 RU2027190C1 (en) | 1990-08-22 | 1990-08-22 | Conjugate of polysaccharide antigen with polyethyleneimine as an immunosorbent for detection of streptococcus and pneumococcus infections |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2027190C1 true RU2027190C1 (en) | 1995-01-20 |
Family
ID=21532532
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU4859936 RU2027190C1 (en) | 1990-08-22 | 1990-08-22 | Conjugate of polysaccharide antigen with polyethyleneimine as an immunosorbent for detection of streptococcus and pneumococcus infections |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2027190C1 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001007486A1 (en) * | 1999-07-23 | 2001-02-01 | Polygene Ltd. | A biodegradable polycation composition for delivery of an anionic macromolecule |
| EP1222926A1 (en) * | 2001-01-10 | 2002-07-17 | Polygene Ltd. | Cationic polysaccharide compositions |
| RU2380709C1 (en) * | 2008-05-14 | 2010-01-27 | Общество с ограниченной ответственностью "Биотехнология 08" | Method for tray sensitisation for polysaccharide antigen enzyme immunoassay |
-
1990
- 1990-08-22 RU SU4859936 patent/RU2027190C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 1. Патент США N 4356170, кл. A 61K 39/385, 1982. * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001007486A1 (en) * | 1999-07-23 | 2001-02-01 | Polygene Ltd. | A biodegradable polycation composition for delivery of an anionic macromolecule |
| US7001891B1 (en) * | 1999-07-23 | 2006-02-21 | Efrat Biopolymers Limited | Biodegradable polycation composition for delivery of an anionic macromolecule |
| EP1222926A1 (en) * | 2001-01-10 | 2002-07-17 | Polygene Ltd. | Cationic polysaccharide compositions |
| RU2380709C1 (en) * | 2008-05-14 | 2010-01-27 | Общество с ограниченной ответственностью "Биотехнология 08" | Method for tray sensitisation for polysaccharide antigen enzyme immunoassay |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4298685A (en) | Diagnostic reagent | |
| US3951748A (en) | Sensitized matrix for detection of disease | |
| US4642284A (en) | Method and system for detection of complement pathway activation | |
| US5169757A (en) | Antibodies or antigens bound to a macroporous hydrophobic synthetic polymer cloth for immunological techniques | |
| DK159176B (en) | DIAGNOSTIC PARTICLE FOR IMMUNOAGGLUTINATION, DIAGNOSTIC AGENT AND PROCEDURE FOR MANUFACTURING THE PARTICLE | |
| JPS6262289B2 (en) | ||
| EP0406473A1 (en) | Ion capture reagents and methods for performing binding assays | |
| JPH05505198A (en) | Method for detecting Borrelia burgdorferi, its purified antigen and antibodies capable of binding to the antigen | |
| JP2636331B2 (en) | One-step assay for antigen-specific antibodies and suitable reagents | |
| EP0064318B1 (en) | A method and a kit for the assay of antibodies to soluble antigens | |
| WO1980001515A1 (en) | Improvements in or relating to processes and materials for detecting and determining proteinaceous specific binding agents and materials bindable thereto | |
| JP3032290B2 (en) | Diagnostic tools for demyelinating neuropathy, especially multiple sclerosis | |
| JPH04301570A (en) | Use of peptide pair having very high specific mutual affinityin in-vitro diagnosis field | |
| US4454226A (en) | Enzymatic immunoassay | |
| WO1987004794A1 (en) | Latex agglutination using avidin/biotin system | |
| US5122452A (en) | Enzyme immunoassay with a macroporous hydrophobic synthetic polymer cloth containing an immobilized antibody or antigen | |
| RU2027190C1 (en) | Conjugate of polysaccharide antigen with polyethyleneimine as an immunosorbent for detection of streptococcus and pneumococcus infections | |
| EP0949508A1 (en) | Method, antigen complex and kit for diagnosing Lyme borreliosis | |
| JPH11500226A (en) | Detection of antibody production | |
| JPH06502723A (en) | Method for determining the sensitivity and/or specificity of an analytical system for detecting antibodies | |
| EP0338045B1 (en) | Solid-phase non-separation enzyme assay | |
| CA2092637A1 (en) | Glycolipids for serodiagnosis of tuberculosis and leprosy | |
| Petchclai et al. | A passive hemagglutination test for leprosy using a synthetic disaccharide antigen | |
| EP0718627B1 (en) | A process for preparing diagnostic reagent for syphilis | |
| Inzana et al. | Serotype specificity of immunological assays for the capsular polymer of Actinobacillus pleuropneumoniae serotypes 1 and 9 |