Claims (54)
1. Полипептидная конструкция, содержащая полипептид клеточной поверхности, который содержит:1. A polypeptide construct containing a cell surface polypeptide that contains:
усеченный неиммуногенный полипептид HER1;truncated non-immunogenic HER1 polypeptide;
усеченный неиммуногенный полипептид CD20;truncated non-immunogenic CD20 polypeptide;
усеченный неиммуногенный полипептид CD52; илиtruncated non-immunogenic CD52 polypeptide; or
усеченный неиммуногенный полипептид LNGFR.truncated non-immunogenic LNGFR polypeptide.
2. Полипептидная конструкция по п. 1, содержащая:2. Polypeptide construct according to claim 1, containing:
домен III HER1 или его функциональный фрагмент; и усеченный домен IV HER1.domain III of HER1 or a functional fragment thereof; and truncated domain IV of HER1.
3. Полипептидная конструкция по п. 2, содержащая усечение по меньшей мере 10% домена IV HER1.3. The polypeptide construct according to claim 2, comprising a truncation of at least 10% of domain IV of HER1.
4. Полипептидная конструкция по п. 2, отличающаяся тем, что домен III HER1 содержит аминокислотную последовательность, которая имеет по меньшей мере 80% идентичности с последовательностью SEQ ID NO: 200; и усеченный домен IV HER1 содержит аминокислотную последовательность, которая имеет по меньшей мере 80% идентичности последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO: 203, 204, 205, 206, 207, 208 и 209.4. The polypeptide construct according to claim 2, characterized in that domain III of HER1 contains an amino acid sequence that has at least 80% identity with the sequence SEQ ID NO: 200; and truncated domain IV of HER1 contains an amino acid sequence that has at least 80% identity to the sequence presented in any of SEQ ID NOs: 203, 204, 205, 206, 207, 208 and 209.
5. Полипептидная конструкция по по п. 1, содержащая аминокислотную последовательность, которая имеет по меньшей мере 80% идентичности с последовательностью SEQ ID NO: 57.5. The polypeptide construct according to claim 1, containing an amino acid sequence that has at least 80% identity with the sequence of SEQ ID NO: 57.
6. Полипептидная конструкция по по п. 1, отличающаяся тем, что указанный усеченный неиммуногенный полипептид CD20 содержит аминокислотную последовательность, которая имеет по меньшей мере 80%, идентичности последовательности SEQ ID NO: 109.6. The polypeptide construct according to claim 1, characterized in that said truncated non-immunogenic CD20 polypeptide contains an amino acid sequence that has at least 80% sequence identity to SEQ ID NO: 109.
7. Полипептидная конструкция по по п. 1, отличающаяся тем, что указанный усеченный неиммуногенный полипептид CD52 содержит аминокислотную последовательность, которая имеет по меньшей мере 80% идентичности с последовательностью SEQ ID NO: 143.7. The polypeptide construct according to claim 1, characterized in that said truncated non-immunogenic CD52 polypeptide contains an amino acid sequence that has at least 80% identity with the sequence of SEQ ID NO: 143.
8. Полипептидная конструкция по п. 1, дополнительно содержащая трансмембранный домен.8. Polypeptide construct according to claim 1, additionally containing a transmembrane domain.
9. Полипептидная конструкция по п. 8, отличающаяся тем, что указанный трансмембранный домен не является трансмембранным доменом HER1.9. The polypeptide construct according to claim 8, characterized in that said transmembrane domain is not the transmembrane domain of HER1.
10. Полипептидная конструкция по п. 8, содержащая пептидный линкер для связывания полипептида клеточной поверхности с указанным трансмембранным доменом.10. The polypeptide construct according to claim 8, containing a peptide linker for binding a cell surface polypeptide to the specified transmembrane domain.
11. Полипептидная конструкция, по п. 8, отличающаяся тем, что указанный трансмембранный домен способен индуцировать димеризацию полипептида клеточной поверхности.11. The polypeptide construct according to claim 8, characterized in that said transmembrane domain is capable of inducing dimerization of a cell surface polypeptide.
12. Полипептидная конструкция по п. 11, отличающаяся тем, что полипептид клеточной поверхности содержит усеченный неиммуногенный полипептид HER1, который имеет по меньшей мере 80% идентичности аминокислотной последовательности согласно любой из SEQ ID NO: 211-217.12. The polypeptide construct of claim 11, wherein the cell surface polypeptide comprises a truncated non-immunogenic HER1 polypeptide that has at least 80% amino acid sequence identity to any of SEQ ID NOs: 211-217.
13. Полипептидная конструкция по п. 11, отличающаяся тем, что полипептид клеточной поверхности содержит усеченный неиммуногенный полипептид CD20, который имеет по меньшей мере 80% идентичности аминокислотной последовательности согласно любой из SEQ ID NO: 218-220.13. The polypeptide construct of claim 11, wherein the cell surface polypeptide comprises a truncated non-immunogenic CD20 polypeptide that has at least 80% amino acid sequence identity to any of SEQ ID NOs: 218-220.
14. Полипептидная конструкция по п. 11, отличающаяся тем, что полипептид клеточной поверхности содержит усеченный неиммуногенный полипептид LNGFR, который имеет по меньшей мере 80% идентичности аминокислотной последовательности согласно любой из SEQ ID NO: 156, 158 и 160.14. The polypeptide construct of claim 11, wherein the cell surface polypeptide comprises a truncated non-immunogenic LNGFR polypeptide that has at least 80% amino acid sequence identity to any of SEQ ID NOs: 156, 158 and 160.
15. Полипептидная конструкция по п. 8, отличающаяся тем, что трансмембранный домен может образовывать либо гомодимер, либо гетеродимер с комплементарным доменом димеризации.15. The polypeptide construct according to claim 8, characterized in that the transmembrane domain can form either a homodimer or a heterodimer with a complementary dimerization domain.
16. Полипептидная конструкция по п. 8, отличающаяся тем, что трансмембранный домен содержит по меньшей мере один остаток цистеина.16. Polypeptide construct according to claim 8, characterized in that the transmembrane domain contains at least one cysteine residue.
17. Полипептидная конструкция по п. 8, отличающаяся тем, что трансмембранный домен содержит: трансмембранный домен гликофорина А или его функциональный фрагмент или вариант; химерный трансмембранный домен гликофорина А-интегрина β3 или его функциональный фрагмент или вариант; или трансмембранный домен CD3-дзета.17. The polypeptide construct according to claim 8, characterized in that the transmembrane domain contains: a transmembrane domain of glycophorin A or a functional fragment or variant thereof; a chimeric transmembrane domain of glycophorin A-integrin β3 or a functional fragment or variant thereof; or CD3-zeta transmembrane domain.
18. Полипептидная конструкция по п. 1, содержащая:18. Polypeptide construct according to claim 1, containing:
усеченный неиммуногенный полипептид HER1, состоящий из домена III HER1 и усеченного домена IV HER1;a truncated non-immunogenic HER1 polypeptide consisting of HER1 domain III and truncated HER1 domain IV;
трансмембранный домен CD28; иCD28 transmembrane domain; And
пептидный линкер для связывания усеченного неиммуногенного полипептида HER1 с трансмембранным доменом CD28.peptide linker for binding a truncated non-immunogenic HER1 polypeptide to the transmembrane domain of CD28.
19. Полинуклеотид, кодирующий полипептидную конструкцию по любому из пп. 1-18.19. A polynucleotide encoding a polypeptide construct according to any one of claims. 1-18.
20. Полинуклеотид по п. 19, дополнительно кодирующий химерный антигенный рецептор (CAR) или Т-клеточный рецептор (TCR).20. The polynucleotide of claim 19, further encoding a chimeric antigen receptor (CAR) or a T-cell receptor (TCR).
21. Полинуклеотид по п. 20, отличающийся тем, что CAR связывает по меньшей мере одно из: CD19, CD33, ВСМА, CD44, α-фолатного рецептора, CAIX, CD30, ROR1, СЕА, EGP-2, EGP-40, HER2, HER3, связывающего фолат белка, GD2, GD3, IL-13R-a2, KDR, EDB-F, мезотелина, CD22, EGFR, MUC-1, MUC-16, MAGE-A1, h5T4, PSMA, TAG-72, EGFRvIII, CD123 и VEGF-R2.21. The polynucleotide according to claim 20, characterized in that the CAR binds at least one of: CD19, CD33, BCMA, CD44, α-folate receptor, CAIX, CD30, ROR1, CEA, EGP-2, EGP-40, HER2 , HER3, folate binding protein, GD2, GD3, IL-13R-a2, KDR, EDB-F, mesothelin, CD22, EGFR, MUC-1, MUC-16, MAGE-A1, h5T4, PSMA, TAG-72, EGFRvIII , CD123 and VEGF-R2.
22. Полинуклеотид по п. 21, отличающийся тем, что указанный CAR связывает по меньшей мере одно из CD19, CD33, ROR1, мезотелина и MUC-16.22. The polynucleotide of claim 21, wherein said CAR binds at least one of CD19, CD33, ROR1, mesothelin and MUC-16.
23. Полинуклеотид по п. 19, дополнительно кодирующий цитокин.23. The polynucleotide according to claim 19, additionally encoding a cytokine.
24. Полинуклеотид по п. 23, отличающийся тем, что цитокин представляет собой ИЛ-15, ИЛ-2, ИЛ-12 или ИЛ-21.24. The polynucleotide according to claim 23, characterized in that the cytokine is IL-15, IL-2, IL-12 or IL-21.
25. Полинуклеотид по п. 23, отличающийся тем, что цитокин находится в связанной с мембраной форме.25. The polynucleotide according to claim 23, characterized in that the cytokine is in membrane-bound form.
26. Полинуклеотид по п. 19, дополнительно кодирующий слитый белок, содержащий: (а) ИЛ-15 или его функциональный фрагмент или вариант; и (b) ИЛ-15Rα или его функциональный фрагмент или вариант.26. The polynucleotide according to claim 19, further encoding a fusion protein containing: (a) IL-15 or a functional fragment or variant thereof; and (b) IL-15Rα or a functional fragment or variant thereof.
27. Полинуклеотид по п. 26, отличающийся тем, что указанный слитый белок содержит аминокислотную последовательность, которая имеет по меньшей мере 80% идентичности SEQ ID NO: 178.27. The polynucleotide of claim 26, wherein said fusion protein contains an amino acid sequence that is at least 80% identical to SEQ ID NO: 178.
28. Полинуклеотид по п. 26, отличающийся тем, что указанный слитый белок содержит аминокислотную последовательность, которая имеет по меньшей мере 85% идентичности SEQ ID NO: 178.28. The polynucleotide of claim 26, wherein said fusion protein contains an amino acid sequence that is at least 85% identical to SEQ ID NO: 178.
29. Полинуклеотид по п. 19, дополнительно содержащий последовательность сайта рекомбинации AttP или AttB.29. The polynucleotide of claim 19, further comprising the AttP or AttB recombination site sequence.
30. Полинуклеотид по п. 19, дополнительно содержащий последовательность сайта рекомбинации AttP.30. The polynucleotide according to claim 19, additionally containing the sequence of the AttP recombination site.
31. Полинуклеотид по п. 19, дополнительно содержащий последовательность сайта рекомбинации AttB.31. The polynucleotide according to claim 19, additionally containing the sequence of the AttB recombination site.
32. Вектор, содержащий полинуклеотид по п. 19.32. A vector containing a polynucleotide according to claim 19.
33. Вектор по п. 32, отличающийся тем, что вектор представляет собой лентивирусный вектор, ретровирусный вектор или невирусный вектор.33. The vector according to claim 32, characterized in that the vector is a lentiviral vector, a retroviral vector or a non-viral vector.
34. Вектор по п. 32, отличающийся тем, что указанный невирусный вектор представляет собой транспозон Sleeping Beauty.34. The vector according to claim 32, characterized in that said non-viral vector is a Sleeping Beauty transposon.
35. Модифицированная клетка, содержащая полинуклеотид по п. 19.35. A modified cell containing a polynucleotide according to claim 19.
36. Модифицированная клетка по п. 35, дополнительно содержащая слитый белок, содержащий (а) ИЛ-15 или его функциональный фрагмент или вариант; и (b) ИЛ-15Rα или его функциональный фрагмент или вариант.36. The modified cell according to claim 35, further comprising a fusion protein containing (a) IL-15 or a functional fragment or variant thereof; and (b) IL-15Rα or a functional fragment or variant thereof.
37. Способ истощения модифицированной клетки, экспрессирующей полипептидную конструкцию по п. 1, указанный способ включает введение субъекту агента, который связывает указанную полипептидную конструкцию, что приводит тем самым к истощению указанной модифицированной клетки.37. A method for depleting a modified cell expressing a polypeptide construct according to claim 1, said method comprising administering to a subject an agent that binds said polypeptide construct, thereby depleting said modified cell.
38. Способ по п. 37, отличающийся тем, что указанный агент представляет собой ритуксимаб, цетуксимаб, футуксимаб, депатуксизумаб, имгатузумаб, лапритуксимаб, матузумаб, нецитумумаб, нимотузумаб, панитумумаб, залутумумаб, тозитумомаб, вельтузумаб, афутузумаб, блонтуветмаб или обинутузумаб.38. The method according to claim 37, characterized in that said agent is rituximab, cetuximab, futuximab, depatuxizumab, imgatuzumab, laprituximab, matuzumab, necitumumab, nimotuzumab, panitumumab, zalutumumab, tositumomab, veltuzumab, afutuzumab, blontuvetmab or obin uzumab.
39. Способ лечения рака, включающий введение модифицированной клетки по п. 35 нуждающемуся в этом субъекту.39. A method of treating cancer, comprising administering the modified cell of claim 35 to a subject in need thereof.
40. Способ по п. 39, отличающийся тем, что указанный рак ассоциирован со сверхэкспрессией по меньшей мере одного из CD19, CD33, ВСМА, CD44, α-фолатного рецептора, CAIX, CD30, ROR1, СЕА, EGP-2, EGP-40, HER2, HER3, фолат-связывающего белка, GD2, GD3, IL-13R-a2, KDR, EDB-F, мезотелина, CD22, EGFR, MUC-1, MUC-16, MAGE-A1, h5T4, PSMA, TAG-72, EGFRvIII, CD123 и VEGF-R2.40. The method according to claim 39, characterized in that said cancer is associated with overexpression of at least one of CD19, CD33, BCMA, CD44, α-folate receptor, CAIX, CD30, ROR1, CEA, EGP-2, EGP-40 , HER2, HER3, folate binding protein, GD2, GD3, IL-13R-a2, KDR, EDB-F, mesothelin, CD22, EGFR, MUC-1, MUC-16, MAGE-A1, h5T4, PSMA, TAG- 72, EGFRvIII, CD123 and VEGF-R2.
41. Способ по п. 39, отличающийся тем, что указанный рак ассоциирован со свехрхэкспрессией по меньшей мере одного из CD19, CD33, ROR1, мезотелина и MUC-16.41. The method of claim 39, wherein said cancer is associated with overexpression of at least one of CD19, CD33, ROR1, mesothelin and MUC-16.
42. Способ по п. 39, отличающийся тем, что указанный рак представляет собой гематологическое злокачественное новообразование, рак молочной железы, рак маточной трубы, рак печени, рак легкого, рак яичника, рак поджелудочной железы или рак простаты.42. The method of claim 39, wherein said cancer is a hematological malignancy, breast cancer, fallopian tube cancer, liver cancer, lung cancer, ovarian cancer, pancreatic cancer or prostate cancer.
43. Способ по п. 39, отличающийся тем, что указанную модифицированную клетку вводят указанному субъекту в количестве от приблизительно 104 до приблизительно 109 модифицированных клеток/кг массы тела указанного субъекта.43. The method of claim 39, wherein said modified cell is administered to said subject in an amount of from about 10 4 to about 10 9 modified cells/kg body weight of said subject.
44. Способ по п. 39, отличающийся тем, что указанную модифицированную клетку вводят указанному субъекту в количестве от приблизительно 104 до приблизительно 107 модифицированных клеток/кг массы тела указанного субъекта.44. The method of claim 39, wherein said modified cell is administered to said subject in an amount of from about 10 4 to about 10 7 modified cells/kg body weight of said subject.
45. Способ по п. 39, отличающийся тем, что указанную модифицированную клетку получают путем введения вектора в клетку и введения полученной модифицированной клетки субъекту в течение одного дня после такого введения вектора.45. The method of claim 39, wherein said modified cell is produced by introducing the vector into the cell and administering the resulting modified cell to the subject within one day of such administration of the vector.
46. Способ по п. 39, отличающийся тем, что указанную модифицированную клетку вводят после осуществления лимфоистощения у указанного субъекта.46. The method according to claim 39, characterized in that said modified cell is administered after lymphatic depletion has occurred in said subject.