RU2022269C1

RU2022269C1 - Method of acute pyelonephritis diagnosis

Info

Publication number: RU2022269C1
Authority: RU
Inventors: В.И. Шепотиновский; З.И. Микашинович; М.И. Коган; Т.Я. Кравцова; Е.Р. Папикян
Original assignee: Кравцова Татьяна Ярославна
Priority date: 1992-06-26
Filing date: 1992-06-26
Publication date: 1994-10-30

Abstract

FIELD: medicine, urology. SUBSTANCE: method involves determination of enzyme activity glucose-6-phosphate dehydrogenase and myeloperoxidase in leucocytes of venous blood. Acute suppurative pyelonephritis is diagnosed at activity values of enzymes indicated above more than 17.0 and more than 137.0 mcmole/min/mg protein, respectively. EFFECT: improved method of diagnosis. 1 tbl

Description

Изобретение относится к медицине и найдет применение в диагностике заболеваний мочевой системы. The invention relates to medicine and will find application in the diagnosis of diseases of the urinary system.

Известен способ диагностики активного деструктивного процесса в тканях мочевыводящих путей. Предлагается определять активность эндогенных фосфолипаз А и С в крови или моче больного и при наличии их диагностировать деструктивный процесс в мочевых путях. Недостатком метода является то, что он не позволяет судить о тяжести деструкции, кроме того, постановка метода требует длительного времени (более 20 ч) и сложных диагностикумов. A known method for the diagnosis of active destructive process in the tissues of the urinary tract. It is proposed to determine the activity of endogenous phospholipases A and C in the patient’s blood or urine and, if present, to diagnose the destructive process in the urinary tract. The disadvantage of this method is that it does not allow to judge the severity of destruction, in addition, the formulation of the method requires a long time (more than 20 hours) and complex diagnostics.

Известен способ ранней диагностики пиелонефрита методом радиоизотопной ренографии. Способ включает гидратацию организма, последующее внутривенное введение фильтруемого в клубочках и секретируемого в канальцах почки радиофармпрепаратов, раздельную регистрацию - излучения над областями сердца и обеих почек от каждого радиофармпрепарата и определение из зарегистрированных данных характеристики исследуемого процесса. После гидратации форсируют диурез, из зарегистрированных данных определяют время Т_с прохода молекул секретируемого и время Т_ф прохода молекул фильтруемого радиофармпрепаратов через почку и при соотношении

≥ 0.25устанавливают наличие пиелонефрита. Данный метод не дает информации о тяжести воспалительного процесса в мочевых путях и прогнозе его течения, кроме того, метод недоступен для медицинских учреждений, не имеющих радиоизотопной лаборатории, вычисление параметров Т_с и Т_ф осуществляется с помощью сложного и дорогостоящего электронно-вычислительного оборудования.A known method for the early diagnosis of pyelonephritis by radioisotope renography. The method includes hydration of the body, subsequent intravenous administration of radiopharmaceuticals filtered in the glomeruli and secreted in the tubules of the kidney, separate recording of radiation over the heart and both kidneys from each radiopharmaceutical and determining the characteristics of the process under study from the recorded data. After hydration, diuresis is forced, the time T _{from the} passage of the secreted molecules and the time T _{f from the} passage of molecules of the filtered radiopharmaceuticals through the kidney are determined from the recorded data and at a ratio

≥ 0.25 determine the presence of pyelonephritis. This method does not provide information about the severity of the inflammatory process in the urinary tract and the prognosis of its course, in addition, the method is not available for medical institutions that do not have a radioisotope laboratory, the calculation of the parameters T _c and T _{f is} carried out using complex and expensive electronic computing equipment.

Известен способ диагностики острого пиелонефрита, основанный на определении лейкоцитоза в правой и левой поясничных областях. Для дифференциальной диагностики серозного и гнойного пиелонефрита авторы определяют локализацию точек минимальной и максимальной температур в каждой из поясничных областей с помощью жидкокристаллического термоиндикатора, определяют диагностический показатель по формуле
Д=10^-18(Л_1п-Л_2п)-(Л_1л-Л_2л), где Д - диагностический показатель;
Л_1п - лейкоцитоз в точке минимальной температуры справа;
Л_2п - лейкоцитоз в точке максимальной температуры справа;
Л_1п - лейкоцитоз в точке минимальной температуры слева;
Л_2л - лейкоцитоз в точке максимальной температуры слева и при значениях диагностического показателя Д=1,5 диагностируют острый серозный пиелонефрит, а при значениях Д ≥ 3 - острый гнойный пиелонефрит. Недостатками метода являются необходимость дополнительной травматизации больных для повторных заборов крови из поясничных областей и трудности его воспроизведения, зависящие от индивидуальных анатомических особенностей пациентов.A known method for the diagnosis of acute pyelonephritis, based on the determination of leukocytosis in the right and left lumbar regions. For the differential diagnosis of serous and purulent pyelonephritis, the authors determine the localization of the minimum and maximum temperature points in each of the lumbar regions using a liquid crystal thermal indicator, determine the diagnostic indicator by the formula
D = 10 ^-18 (L _1p -L _2p ) - (L _1l -L _2l ), where D is a diagnostic indicator;
L _1p - leukocytosis at the minimum temperature point on the right;
L _2p - leukocytosis at the maximum temperature point on the right;
L _1p - leukocytosis at the minimum temperature point on the left;
L _2l - leukocytosis at the maximum temperature point on the left and with values of the diagnostic parameter D = 1.5, acute serous pyelonephritis is diagnosed, and with values of D ≥ 3 - acute purulent pyelonephritis. The disadvantages of the method are the need for additional trauma to patients for repeated blood sampling from the lumbar regions and the difficulty of reproducing it, depending on the individual anatomical features of the patients.

В качестве прототипа взят способ диагностики острого пиелонефрита путем определения активности щелочной фосфатазы в лейкоцитах крови больного до и после 2-часовой инкубации с почечным антигеном, вычисления среднего гистохимического коэффициента уровня фермента. При значении разницы полученного показателя в сравнении с исходным от 0,2 до 3,0 устанавливают диагноз острого пиелонефрита. As a prototype, a method for diagnosing acute pyelonephritis was taken by determining the activity of alkaline phosphatase in the patient’s blood leukocytes before and after a 2-hour incubation with renal antigen, and calculating the average histochemical coefficient of the enzyme level. When the value of the difference of the obtained indicator in comparison with the original from 0.2 to 3.0 is diagnosed with acute pyelonephritis.

Метод обладает низкой информативностью, так как авторы рекомендуют его использовать только у лиц пожилого и старческого возраста, не дает возможности судить о тяжести воспалительного процесса, является технически трудоемким, так как для его осуществления необходимо приготовление почечного антигена, а для получения диагностической информации надо произвести вычисление коэффициента, что усложняет процесс диагностики и удлиняет время установления диагноза. The method has low informational content, as the authors recommend using it only in elderly people, it does not make it possible to judge the severity of the inflammatory process, it is technically time-consuming, since for its implementation it is necessary to prepare the renal antigen, and to obtain diagnostic information, it is necessary to calculate coefficient, which complicates the diagnostic process and lengthens the time of diagnosis.

Целью изобретения является повышение точности, упрощение способа, а также сокращение длительности диагностики острого пиелонефрита. The aim of the invention is to improve the accuracy, simplification of the method, as well as reducing the duration of the diagnosis of acute pyelonephritis.

Эта цель достигается биохимическим определением в лейкоцитах венозной крови активности миелопероксидазы (МЕП) и глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г-6Ф-ДГ), играющих ключевую роль в осуществлении антибактериальной функции лейкоцитов. This goal is achieved by the biochemical determination of the activity of myeloperoxidase (MEP) and glucose-6-phosphate dehydrogenase (G-6F-DG) in the venous blood leukocytes, which play a key role in the implementation of the antibacterial function of leukocytes.

При значениях Г-6Ф-ДГ от 17,0 и выше, а МЕП от 137,0 и выше судят о развитии гнойной формы острого пиелонефрита, а при изменениях удельной активности Г-6Ф-ДГ ниже 17,0 и МЕП - ниже 137,0 судят о развитии серозной формы воспалительного процесса. With values of G-6F-DG from 17.0 and higher, and MEP from 137.0 and higher, the development of a purulent form of acute pyelonephritis is judged, and with changes in the specific activity of G-6F-DG below 17.0 and MEP - below 137, 0 judge the development of the serous form of the inflammatory process.

Для осуществления метода у больных из локтевой вены берут 5 мл крови, стабилизированной гепарином. To implement the method in patients from the ulnar vein, 5 ml of heparin-stabilized blood is taken.

Центрифугированием (300g 15 мин) и осмотическим лизисом в 0,879% хлориде аммония выделяют лейкоциты. Leukocytes are isolated by centrifugation (300g for 15 minutes) and osmotic lysis in 0.879% ammonium chloride.

Активность МЕП определяют по методу Кebanoff спектрофотометрически в среде, содержащей 0,1 моль фосфатного буфера рН 6,0, 0,01 моль Н₂О₂, 0,02 моль ортодианизидина в метаноле. Активность фермента определяют в первую минуту реакции.MEP activity is determined according to the Kebanoff method spectrophotometrically in a medium containing 0.1 mol of phosphate buffer pH 6.0, 0.01 mol of H ₂ O ₂ , 0.02 mol of orthodianisidine in methanol. The enzyme activity is determined in the first minute of the reaction.

Активность Г-6Ф-ДГ определяют по методу Корнберга в модификации Ю.Л. Захарьина спектрофотометрически в среде ТРИС-буфера (1 мл рН 7,5) по степени восстановления 0,2 мл 0,15% раствора НАДФ в ферментативной реакции с 0,2 мл 0,24% Г-6ФОСФАТА в присутствии 0,2 мл 12% раствора МgSО₄. Активность фермента выражают в мкмоль/г белка в минуту.The activity of G-6F-DG is determined according to the Kornberg method in the modification of Yu.L. Zakharyin spectrophotometrically in TRIS-buffer medium (1 ml of pH 7.5) according to the degree of recovery of 0.2 ml of 0.15% NADP solution in an enzymatic reaction with 0.2 ml of 0.24% G-6PHOSPHATE in the presence of 0.2 ml 12 % MgSO ₄ solution. Enzyme activity is expressed in μmol / g protein per minute.

В процессе разработки способа проведено обследование 30 пациентов с острым пиелонефритом и 20 практически здоровых лиц. Полученные результаты, обработанные статистически по методу Р.Б.Стрелкова (1966), приводятся в таблице. In the process of developing the method, a survey was conducted of 30 patients with acute pyelonephritis and 20 healthy individuals. The results obtained, statistically processed according to the method of RB Strelkov (1966), are given in the table.

Таким образом, различия исследуемых показателей в обследованных группах были достоверны. Thus, the differences in the studied parameters in the examined groups were significant.

Специфичность способа была рассчитана по методу, предложенному Тиец (1978) по формуле
истинные отрицательные результаты
/число небольных/которые были правильно классифицированы
с помощью данной пробы/ - 18 человек
________________________________________________________ x 100%
истинные + ложные положительные результаты
отрицательные /число небольных/которые были ошибочно
результаты отнесены к числу больных по результатам
/18 человек/ данной пробы / 2 человека /
В соответствии с этой формулой специфичность предлагаемого способа составила 90%.The specificity of the method was calculated by the method proposed by Thiez (1978) by the formula
true negative results
/ number of patients / who were correctly classified
with the help of this test / - 18 people
________________________________________________________ x 100%
true + false positives
negative / number of patients / who were mistaken
the results are assigned to the number of patients according to the results
/ 18 people / this sample / 2 people /
In accordance with this formula, the specificity of the proposed method was 90%.

П р и м е р 1. Больная П., 24 года, поступила в урологическое отделение с диагнозом острый левосторонний пиелонефрит с типичной клинической картиной заболевания. PRI me R 1. Patient P., 24 years old, was admitted to the urology department with a diagnosis of acute left-sided pyelonephritis with a typical clinical picture of the disease.

При экскреторной урографии функция обеих почек своевременна, пассаж мочи по мочеточникам не нарушен. В общем анализе крови при поступлении лейкоцитоз 12 тыс., палочкоядерных 36. В общем анализе мочи - пиурия. Через 12 ч после поступления в общем анализе крови на фоне проводимой терапии отмечалась положительная динамика. With excretory urography, the function of both kidneys is timely, the passage of urine through the ureters is not impaired. In the general analysis of blood at admission leukocytosis 12 thousand, stab 36. In the general analysis of urine - pyuria. 12 hours after admission to the general blood test against the background of the therapy, a positive dynamics was noted.

При биохимическом исследовании крови удельная активность Г-6Ф-ДГ - 17,0, МЕП - 137,0, что указывает на развитие гнойного пиелонефрита. In a biochemical blood test, the specific activity of G-6F-DG is 17.0, MEP - 137.0, which indicates the development of purulent pyelonephritis.

Действительно, несмотря на проводимую интенсивную терапию состояние больной не улучшалось, нарастали клинические признаки интоксикации. На 2-е сутки больная была оперирована - обнаружены карбункулы в левой почке, т.е. диагноз гнойного пиелонефрита в ходе операции подтвердился. Indeed, despite the ongoing intensive care, the patient's condition did not improve, the clinical signs of intoxication increased. On the 2nd day, the patient was operated on - carbuncles were found in the left kidney, i.e. The diagnosis of purulent pyelonephritis during the operation was confirmed.

При этом активность щелочной фосфатазы в крови больной до взаимодействия с почечным антигеном равнялась 1,35 СКГ, а после 2-часовой инкубации с почечным антигеном - 5,4 СКГ. Разница полученных показателей равнялась 4,05 СКГ, т. е. не попадала в указанный в формуле прототипа интервал, что свидетельствует о неточности способа прототипа у лиц молодого возраста. The activity of alkaline phosphatase in the blood of the patient before interaction with the renal antigen was 1.35 SKG, and after 2-hour incubation with the renal antigen - 5.4 SKG. The difference between the obtained indices was 4.05 SKG, i.e., did not fall into the interval indicated in the prototype formula, which indicates the inaccuracy of the prototype method in young people.

П р и м е р 2. Больная Б., 50 лет, поступила в урологическое отделение с диагнозом острый левосторонний пиелонефрит. PRI me R 2. Patient B., 50 years old, was admitted to the urology department with a diagnosis of acute left-sided pyelonephritis.

На экскреторных урограммах функция обеих почек сохранена, обструкции мочевых путей нет. В общем анализе крови - лейкоцитоз 15 тыс., палочкоядерных - 25. В общем анализе мочи - пиурия. Активность Г-6Ф-ЛГ - 8,2, МЕП - 9,2, что свидетельствует о серозной форме заболевания с благоприятным прогнозом. On excretory urograms, the function of both kidneys is preserved, there is no obstruction of the urinary tract. In the general analysis of blood - leukocytosis of 15 thousand, stab - 25. In the general analysis of urine - pyuria. The activity of G-6F-LH is 8.2, MEP is 9.2, which indicates a serous form of the disease with a favorable prognosis.

Действительно, после курса традиционной консервативной терапии состояние больной улучшилось, температура и лабораторные показатели нормализовались. В удовлетворительном состоянии больная выписана на амбулаторное лечение. Indeed, after a course of traditional conservative therapy, the patient's condition improved, the temperature and laboratory parameters returned to normal. In satisfactory condition, the patient was discharged for outpatient treatment.

Активность щелочной фосфатазы лейкоцитов периферической крови при поступлении больной в стационар до взаимодействия с почечным антигеном - 2,35 СГК, после 2-часовой инкубации - 2,4 СГК, разница полученных результатов - 0,05, т.е. также не укладывается в интервал формулы прототипа и подтверждает неточность способа прототипа у лиц среднего возраста. The activity of alkaline phosphatase in peripheral blood leukocytes upon admission to the hospital before interaction with the renal antigen is 2.35 SGK, after 2-hour incubation - 2.4 SGK, the difference in the results is 0.05, i.e. also does not fit into the interval of the prototype formula and confirms the inaccuracy of the prototype method in middle-aged people.

Способ апробирован в урологическом отделении БСМП-2. The method was tested in the urological department of BSMP-2.

По сравнению с прототипом заявляемый способ обладает следующими преимуществами. Compared with the prototype of the proposed method has the following advantages.

По изменению в лейкоцитах периферической крови активности Г-6ФДГ и МЕП можно диагностировать развитие гнойной формы острого пиелонефрита. By the change in the activity of G-6FDH and MEP in peripheral blood leukocytes, the development of a purulent form of acute pyelonephritis can be diagnosed.

Заявляемый способ осуществим в 4 раза быстрее, чем прототип, т.к. для его осуществления необходимо 30-60 мин, а для осуществления прототипа - 3,5-4 ч. The inventive method is feasible 4 times faster than the prototype, because for its implementation requires 30-60 minutes, and for the implementation of the prototype - 3.5-4 hours

Заявляемый способ технически более прост, не требует предварительной подготовки диагностикумов и сложных реактивов. The inventive method is technically simpler, does not require preliminary preparation of diagnostic kits and complex reagents.

Заявляемый способ применим у взрослых больных всех возрастных групп в отличие от прототипа, осуществимого у больных пожилого с старческого возраста. The inventive method is applicable in adult patients of all age groups, in contrast to the prototype, feasible in elderly patients with senile age.

Заявляемый способ применим у взрослых больных всех возрастных групп в отличие от прототипа, осуществимого у больных пожилого и старческого возраста. The inventive method is applicable in adult patients of all age groups, in contrast to the prototype, feasible in elderly patients.

Claims

METHOD FOR DETERMINING ACUTE PYELONEPHRITIS, including determining the enzymatic activity of blood leukocytes, characterized in that the activity of glucose-6-phosphate dehydrogenase (G-6F-DG) and myeloperoxidase (MEP) is determined and with a specific activity of G-6F-DG more than 17.0 units and MEP greater than 137.0 units determine acute pyelonephritis.