Claims (52)
1. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула, содержащая первый антигенсвязывающий домен, который специфически связывает APLP2 человека, и второй антигенсвязывающий домен, который специфически связывает HER2 человека. 1. A bispecific antigen-binding molecule comprising a first antigen-binding domain that specifically binds human APLP2 and a second antigen-binding domain that specifically binds human HER2.
2. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по п. 1, отличающаяся тем, что второй антигенсвязывающий домен связывает клетки человека, экспрессирующие HER2 человека.2. The bispecific antigen-binding molecule according to claim 1, wherein the second antigen-binding domain binds human cells expressing human HER2.
3. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по пп. 1 или 2, отличающаяся тем, что первый антигенсвязывающий домен связывается с APLP2 с низкой аффинностью. 3. Bispecific antigen-binding molecule according to claims. 1 or 2, characterized in that the first antigen-binding domain binds to APLP2 with low affinity.
4. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-3, отличающаяся тем, что каждый из первого антигенсвязывающего домена и второго антигенсвязывающего домена является полностью человеческим.4. Bispecific antigennegative molecule according to any one of paragraphs. 1-3, characterized in that each of the first antigen-binding domain and the second antigen-binding domain is fully human.
5. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-4, отличающаяся тем, что антигенсвязывающая молекула связывает как APLP2 человека, так и HER2 человека, экспрессируемые на клетке, а также индуцирует интернализацию APLP2 и/или деградацию HER2 в этой клетке. 5. Bispecific antigennegative molecule according to any one of paragraphs. 1-4, characterized in that the antigen-binding molecule binds both human APLP2 and human HER2 expressed on the cell, and also induces internalization of APLP2 and/or degradation of HER2 in this cell.
6. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-5, отличающаяся тем, что антитело не интернализуется клетками, которые экспрессируют APLP2 человека, но не экспрессируют HER2 человека.6. Bispecific antigennegative molecule according to any one of paragraphs. 1-5, characterized in that the antibody is not internalized by cells that express human APLP2 but do not express human HER2.
7. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-6, отличающаяся тем, что антитело является полностью человеческим.7. Bispecific antigen-binding molecule according to any one of paragraphs. 1-6, characterized in that the antibody is fully human.
8. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-7, отличающаяся тем, что первый антигенсвязывающий домен связывается с низкой аффинностью с APLP2, а второй антигенсвязывающий домен связывается с высокой аффинностью с HER2, благодаря чему аффинность второго антигенсвязывающего домена к HER2 повышает авидность первого антигенсвязывающего домена к APLP2.8. Bispecific antigennegative molecule according to any one of paragraphs. 1-7, characterized in that the first antigen-binding domain binds with low affinity to APLP2, and the second antigen-binding domain binds with high affinity to HER2, due to which the affinity of the second antigen-binding domain to HER2 increases the avidity of the first antigen-binding domain to APLP2.
9. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-8, отличающаяся тем, что первый антигенсвязывающий домен связывает APLP2 человека с KD от около 100 нМ до около 1 мкМ, как измерено с помощью поверхностного плазмонного резонанса или эквивалентного анализа.9. Bispecific antigennegative molecule according to any one of paragraphs. 1-8, characterized in that the first antigen-binding domain binds human APLP2 with a KD of about 100 nM to about 1 μM, as measured by surface plasmon resonance or an equivalent assay.
10. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-9, отличающаяся тем, что первый антигенсвязывающий домен связывает APLP2 человека с KD от около 100 нМ до около 200 нМ, как измерено с помощью поверхностного плазмонного резонанса или эквивалентного анализа.10. Bispecific antigen-binding molecule according to any one of paragraphs. 1-9, characterized in that the first antigen-binding domain binds human APLP2 with a KD of about 100 nM to about 200 nM, as measured by surface plasmon resonance or an equivalent assay.
11. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-10, отличающаяся тем, что первый антигенсвязывающий домен связывает APLP2 человека с KD от около 200 нМ до около 800 нМ, как измерено с помощью поверхностного плазмонного резонанса или эквивалентного анализа.11. Bispecific antigennegative molecule according to any one of paragraphs. 1-10, characterized in that the first antigen-binding domain binds human APLP2 with a KD of about 200 nM to about 800 nM as measured by surface plasmon resonance or an equivalent assay.
12. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-11, отличающаяся тем, что первый антигенсвязывающий домен связывает APLP2 человека с KD от около 800 нМ до около 1 мкМ, как измерено с помощью поверхностного плазмонного резонанса или эквивалентного анализа.12. Bispecific antigennegative molecule according to any one of paragraphs. 1-11, characterized in that the first antigen-binding domain binds human APLP2 with a KD of about 800 nM to about 1 μM, as measured by surface plasmon resonance or an equivalent assay.
13. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-12, отличающаяся тем, что второй антигенсвязывающий домен связывает HER2 человека с KD менее 10 нМ, как измерено с помощью поверхностного плазмонного резонанса или эквивалентного анализа. 13. Bispecific antigen-binding molecule according to any one of paragraphs. 1-12, characterized in that the second antigen-binding domain binds human HER2 with a KD of less than 10 nM as measured by surface plasmon resonance or an equivalent assay.
14. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-13, отличающаяся тем, что второй антигенсвязывающий домен связывает HER2 человека с KD от около 3 нМ до около 5 нМ, как измерено с помощью поверхностного плазмонного резонанса или эквивалентного анализа. 14. Bispecific antigennegative molecule according to any one of paragraphs. 1-13, characterized in that the second antigen-binding domain binds human HER2 with a KD of about 3 nM to about 5 nM, as measured by surface plasmon resonance or an equivalent assay.
15. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-14, отличающаяся тем, что первый антигенсвязывающий домен связывает APLP2 человека с KD от около 100 нМ до около 1 мкМ, а второй антигенсвязывающий домен связывает HER2 человека с KD менее 10 нМ, где KD измеряют с помощью поверхностного плазмонного резонанса или эквивалентного анализа. 15. Bispecific antigennegative molecule according to any one of paragraphs. 1-14, characterized in that the first antigen-binding domain binds human APLP2 with KD from about 100 nM to about 1 μM, and the second antigen-binding domain binds human HER2 with KD less than 10 nM, where KD is measured using surface plasmon resonance or equivalent analysis.
16. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-15, отличающаяся тем, что первый антигенсвязывающий домен получен из антитела или антигенсвязывающего фрагмента, содержащего пару аминокислотных последовательностей HCVR/LCVR, как указано в таблице 2, а второй антигенсвязывающий домен получен из антитела или антигенсвязывающего фрагмента, содержащего пару аминокислотных последовательностей HCVR/LCVR, как указано в таблице 1.16. Bispecific antigennegative molecule according to any one of paragraphs. 1-15, characterized in that the first antigen-binding domain is obtained from an antibody or antigen-binding fragment containing a pair of amino acid sequences HCVR/LCVR, as indicated in table 2, and the second antigen-binding domain is obtained from an antibody or antigen-binding fragment containing a pair of amino acid sequences HCVR/LCVR , as indicated in table 1.
17. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп. 1-16, отличающийся тем, что антитело или его антигенсвязывающий фрагмент конкурирует за связывание с APLP2 человека с эталонным антителом, содержащим пару аминокислотных последовательностей HCVR/LCVR, как указано в таблице 2. 17. An antibody or antigen-binding fragment according to any one of paragraphs. 1-16, characterized in that the antibody or its antigen-binding fragment competes for binding to human APLP2 with a reference antibody containing a pair of amino acid sequences HCVR/LCVR, as indicated in table 2.
18. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-17, отличающаяся тем, что эталонное антитело содержит пару аминокислотных последовательностей HCVR/LCVR, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:26/10, 34/10 и 42/10.18. Bispecific antigen-binding molecule according to any one of paragraphs. 1-17, characterized in that the reference antibody contains a pair of HCVR/LCVR amino acid sequences selected from the group consisting of SEQ ID NO:26/10, 34/10 and 42/10.
19. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-18, отличающаяся тем, что антитело или его антигенсвязывающий фрагмент связывается с тем же эпитопом на APLP2 человека, что и эталонное антитело, содержащее пару аминокислотных последовательностей HCVR/LCVR, как указано в таблице 2. 19. Bispecific antigennegative molecule according to any one of paragraphs. 1-18, characterized in that the antibody or its antigen-binding fragment binds to the same epitope on human APLP2 as a reference antibody containing a pair of amino acid sequences HCVR/LCVR, as indicated in table 2.
20. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-19, отличающаяся тем, что антитело или его антигенсвязывающий фрагмент связывается с тем же эпитопом на APLP2 человека, что и эталонное антитело, содержащее пару аминокислотных последовательностей HCVR/LCVR, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 26/10, 34/10 и 42/10. 20. Bispecific antigen-binding molecule according to any one of paragraphs. 1-19, characterized in that the antibody or its antigen-binding fragment binds to the same epitope on human APLP2 as a reference antibody containing a pair of HCVR/LCVR amino acid sequences selected from the group consisting of SEQ ID NO: 26/10, 34 /10 and 42/10.
21. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-20, отличающаяся тем, что антигенсвязывающая молекула ингибирует рост опухоли у мышей с ослабленным иммунитетом, несущих ксенотрансплантаты рака молочной железы человека. 21. Bispecific antigen-binding molecule according to any one of paragraphs. 1-20, characterized in that the antigen-binding molecule inhibits tumor growth in immunocompromised mice bearing human breast cancer xenografts.
22. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-21, которая представляет собой биспецифическое антитело или его биспецифический антигенсвязывающий фрагмент.22. Bispecific antigennegative molecule according to any one of paragraphs. 1-21, which is a bispecific antibody or a bispecific antigen-binding fragment thereof.
23. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-22, отличающаяся тем, что второй антигенсвязывающий домен, который специфически связывается с HER2 человека, содержит определяющие комплементарность области тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3) из вариабельной области тяжелой цепи (HCVR), выбранные из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2 и 18, 23. Bispecific antigen-binding molecule according to any one of paragraphs. 1-22, characterized in that the second antigen-binding domain that specifically binds to human HER2 contains complementarity-determining regions of the heavy chain (HCDR1, HCDR2 and HCDR3) from the heavy chain variable region (HCVR) selected from the group consisting of SEQ ID NO : 2 and 18,
второй антигенсвязывающий домен, который специфически связывается с HER2 человека, содержит определяющие комплементарность области тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3) из вариабельной области тяжелой цепи (HCVR), выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2 и 18; и определяющие комплементарность области легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3) из вариабельной области легкой цепи (LCVR), содержащие аминокислотную последовательность, состоящую из SEQ ID NO: 10.a second antigen-binding domain that specifically binds to human HER2 comprises heavy chain complementarity determining regions (HCDR1, HCDR2 and HCDR3) from a heavy chain variable region (HCVR) selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 2 and 18; and light chain complementarity determining regions (LCDR1, LCDR2 and LCDR3) from the light chain variable region (LCVR) containing the amino acid sequence consisting of SEQ ID NO: 10.
24. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-23, отличающаяся тем, что второй антигенсвязывающий домен, который специфически связывает HER2 человека, содержит три определяющие комплементарность области тяжелой цепи (A2-HCDR1, A2-HCDR2 и A2-HCDR3) и три определяющие комплементарность области легкой цепи (A2-LCDR1, A2-LCDR2 и A2-LCDR3), где A2-HCDR1 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 4 и 20; A2-HCDR2 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 6 и 22; A2-HCDR3 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 8 и 24; A2-LCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12; A2-LCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14; и A2-LCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16.24. Bispecific antigennegative molecule according to any one of paragraphs. 1-23, characterized in that the second antigen-binding domain that specifically binds human HER2 contains three heavy chain complementarity-determining regions (A2-HCDR1, A2-HCDR2 and A2-HCDR3) and three light chain complementarity-determining regions (A2-LCDR1, A2-LCDR2 and A2-LCDR3), where A2-HCDR1 contains an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 4 and 20; A2-HCDR2 contains an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 6 and 22; A2-HCDR3 contains an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 8 and 24; A2-LCDR1 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 12; A2-LCDR2 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 14; and A2-LCDR3 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 16.
25. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-24, отличающаяся тем, что второй антигенсвязывающий домен, который специфически связывает HER2 человека, содержит CDR тяжелой и легкой цепей пары аминокислотных последовательностей HCVR/LCVR: SEQ ID NO: 18/10. 25. Bispecific antigennegative molecule according to any one of paragraphs. 1-24, characterized in that the second antigen-binding domain that specifically binds human HER2 contains the heavy and light chain CDRs of the HCVR/LCVR amino acid sequence pair: SEQ ID NO: 18/10.
26. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-25, отличающаяся тем, что первый антигенсвязывающий домен, который специфически связывает APLP2 человека, содержит определяющие комплементарность области тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3) из вариабельной области тяжелой цепи (HCVR), содержащей аминокислотную последовательность, как указано в таблице 2, и определяющие комплементарность области легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3) из вариабельной области легкой цепи (LCVR), содержащие аминокислотную последовательность, как указано в таблице 2.26. Bispecific antigennegative molecule according to any one of paragraphs. 1-25, characterized in that the first antigen-binding domain that specifically binds human APLP2 contains the heavy chain complementarity determining regions (HCDR1, HCDR2 and HCDR3) from the heavy chain variable region (HCVR) containing the amino acid sequence as indicated in table 2, and light chain complementarity determining regions (LCDR1, LCDR2 and LCDR3) from the light chain variable region (LCVR) containing the amino acid sequence as indicated in Table 2.
27. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-26, отличающаяся тем, что первый антигенсвязывающий домен, который специфически связывает APLP2 человека, содержит определяющие комплементарность области тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3) из вариабельной области тяжелой цепи (HCVR), выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 26, 34 и 42, и определяющие комплементарность области легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3) из вариабельной области легкой цепи (LCVR), содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10.27. Bispecific antigennegative molecule according to any one of paragraphs. 1-26, characterized in that the first antigen-binding domain that specifically binds human APLP2 contains complementarity-determining regions of the heavy chain (HCDR1, HCDR2 and HCDR3) from the heavy chain variable region (HCVR) selected from the group consisting of SEQ ID NO: 26, 34 and 42 and the light chain complementarity determining regions (LCDR1, LCDR2 and LCDR3) from the light chain variable region (LCVR) containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 10.
28. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-27, отличающаяся тем, что первый антигенсвязывающий домен, который специфически связывает APLP2 человека, содержит три определяющих комплементарность области тяжелой цепи (A1-HCDR1, A1-HCDR2 и A1-HCDR3) и три определяющие комплементарность области легкой цепи (A1-LCDR1, A1-LCDR2 и A1-LCDR3), где A1-HCDR1 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 28, 36 и 44; A1-HCDR2 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 30, 38 и 46; A1-HCDR3 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 32, 40 и 48; A1-LCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12; A1-LCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14; и A1-LCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16.28. Bispecific antigennegative molecule according to any one of paragraphs. 1-27, characterized in that the first antigen-binding domain that specifically binds human APLP2 contains three heavy chain complementarity-determining regions (A1-HCDR1, A1-HCDR2, and A1-HCDR3) and three light chain complementarity-determining regions (A1-LCDR1, A1-LCDR2 and A1-LCDR3), where A1-HCDR1 contains an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 28, 36 and 44; A1-HCDR2 contains an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 30, 38 and 46; A1-HCDR3 contains an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 32, 40 and 48; A1-LCDR1 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 12; A1-LCDR2 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 14; and A1-LCDR3 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 16.
29. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-28, отличающаяся тем, что первый антигенсвязывающий домен, который специфически связывает APLP2 человека, содержит CDR тяжелой и легкой цепей пары аминокислотных последовательностей HCVR/LCVR, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 26/10, 34/10, и 42/10. 29. Bispecific antigennegative molecule according to any one of paragraphs. 1-28, characterized in that the first antigen-binding domain that specifically binds human APLP2 contains the heavy and light chain CDRs of the HCVR/LCVR amino acid sequence pair selected from the group consisting of SEQ ID NO: 26/10, 34/10, and 42/10.
30. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-29, отличающаяся тем, что первый антигенсвязывающий домен, который специфически связывает APLP2 человека, содержит три определяющие комплементарность области тяжелой цепи (A1-HCDR1, A1-HCDR2 и A1-HCDR3) и три определяющие комплементарность области легкой цепи (A1-LCDR1, A1-LCDR2 и A1-LCDR3), и где второй антигенсвязывающий домен, который специфически связывает HER2 человека, содержит три определяющие комплементарность области тяжелой цепи (A2-HCDR1, A2-HCDR2 и A2-HCDR3) и три определяющие комплементарность области легкой цепи (A2-LCDR1, A2-LCDR2 и A2-LCDR3); 30. Bispecific antigen-binding molecule according to any one of paragraphs. 1-29, characterized in that the first antigen-binding domain that specifically binds human APLP2 contains three heavy chain complementarity-determining regions (A1-HCDR1, A1-HCDR2 and A1-HCDR3) and three light chain complementarity-determining regions (A1-LCDR1, A1-LCDR2 and A1-LCDR3), and wherein the second antigen-binding domain that specifically binds human HER2 contains three heavy chain complementarity-determining regions (A2-HCDR1, A2-HCDR2, and A2-HCDR3) and three light chain complementarity-determining regions (A2 -LCDR1, A2-LCDR2 and A2-LCDR3);
где A1-HCDR1 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 28, 36 и 44; A1-HCDR2 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 30, 38 и 46; A1-HCDR3 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 32, 40 и 48; A1-LCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12; A1-LCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14; и A1-LCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16; и where A1-HCDR1 contains an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NO: 28, 36 and 44; A1-HCDR2 contains an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 30, 38 and 46; A1-HCDR3 contains an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 32, 40 and 48; A1-LCDR1 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 12; A1-LCDR2 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 14; and A1-LCDR3 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 16; and
где A2-HCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20; A2-HCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22; A2-HCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24; A2-LCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12; A2-LCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14; и A2-LCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16.where A2-HCDR1 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 20; A2-HCDR2 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 22; A2-HCDR3 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 24; A2-LCDR1 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 12; A2-LCDR2 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 14; and A2-LCDR3 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 16.
31. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-30, отличающаяся тем, что первый антигенсвязывающий домен, который специфически связывает APLP2 человека, содержит HCVR, содержащую HCDR1-HCDR2-HCDR3, имеющую аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 36-38-30.31. Bispecific antigennegative molecule according to any one of paragraphs. 1-30, characterized in that the first antigen-binding domain that specifically binds human APLP2 contains HCVR containing HCDR1-HCDR2-HCDR3 having the amino acid sequences of SEQ ID NO: 36-38-30.
32. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-31, отличающаяся тем, что второй антигенсвязывающий домен конкурирует за связывание с HER2 человека с эталонным антигенсвязывающим белком, содержащим три определяющие комплементарность области тяжелой цепи (A2-HCDR1, A2-HCDR2 и A2-HCDR3) и три определяющие комплементарность области легкой цепи (A2-LCDR1, A2-LCDR2 и A2-LCDR3), где A2-HCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20; A2-HCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22; A2-HCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24; A2-LCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12; A2-LCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14; и A2-LCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16. 32. Bispecific antigen-binding molecule according to any one of paragraphs. 1-31, characterized in that the second antigen-binding domain competes for binding to human HER2 with a reference antigen-binding protein containing three heavy chain complementarity-determining regions (A2-HCDR1, A2-HCDR2, and A2-HCDR3) and three light chain complementarity-determining regions ( A2-LCDR1, A2-LCDR2 and A2-LCDR3), where A2-HCDR1 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 20; A2-HCDR2 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 22; A2-HCDR3 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 24; A2-LCDR1 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 12; A2-LCDR2 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 14; and A2-LCDR3 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 16.
33. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-32, отличающаяся тем, что второй антигенсвязывающий домен конкурирует за связывание с HER2 человека с эталонным антигенсвязывающим белком, содержащим вариабельную область тяжелой цепи (HCVR), содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, и вариабельную область легкой цепи (LCVR), содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10.33. Bispecific antigennegative molecule according to any one of paragraphs. 1-32, characterized in that the second antigen-binding domain competes for binding to human HER2 with a reference antigen-binding protein containing a heavy chain variable region (HCVR) containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 18, and a light chain variable region (LCVR) containing amino acid sequence of SEQ ID NO: 10.
34. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-33, отличающаяся тем, что первый антигенсвязывающий домен конкурирует за связывание с APLP2 человека с эталонным антигенсвязывающим белком, содержащим три определяющие комплементарность области тяжелой цепи (A1-HCDR1, A1-HCDR2 и A1-HCDR3) и три определяющие комплементарность области легкой цепи (A1-LCDR1, A1-LCDR2 и A1-LCDR3), где A1-HCDR1 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 28, 36 и 44; A1-HCDR2 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 30, 38 и 46; A1-HCDR3 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 32, 40 и 48; A1-LCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12; A1-LCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14; и A1-LCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16.34. Bispecific antigennegative molecule according to any one of paragraphs. 1-33, characterized in that the first antigen-binding domain competes for binding to human APLP2 with a reference antigen-binding protein containing three heavy chain complementarity-determining regions (A1-HCDR1, A1-HCDR2, and A1-HCDR3) and three light chain complementarity-determining regions ( A1-LCDR1, A1-LCDR2 and A1-LCDR3), where A1-HCDR1 contains an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 28, 36 and 44; A1-HCDR2 contains an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 30, 38 and 46; A1-HCDR3 contains an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 32, 40 and 48; A1-LCDR1 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 12; A1-LCDR2 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 14; and A1-LCDR3 contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 16.
35. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-34, отличающаяся тем, что первый антигенсвязывающий домен конкурирует за связывание с APLP2 человека с эталонным антигенсвязывающим белком, содержащим вариабельную область тяжелой цепи (HCVR), содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 26, 34 и 42, и вариабельную область легкой цепи (LCVR), содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10.35. Bispecific antigennegative molecule according to any one of paragraphs. 1-34, characterized in that the first antigen-binding domain competes for binding to human APLP2 with a reference antigen-binding protein containing a heavy chain variable region (HCVR) containing an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 26, 34 and 42 , and a light chain variable region (LCVR) containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 10.
36. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-35, отличающаяся тем, что первый антигенсвязывающий домен конкурирует за связывание с APLP2 человека с эталонным антигенсвязывающим белком, содержащим вариабельную область тяжелой цепи (HCVR), содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 34, и вариабельную область легкой цепи (LCVR), содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10; и при этом второй антигенсвязывающий домен конкурирует за связывание с HER2 человека с эталонным антигенсвязывающим белком, содержащим вариабельную область тяжелой цепи (HCVR), содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, и вариабельную область легкой цепи (LCVR), содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10. 36. Bispecific antigen-binding molecule according to any one of paragraphs. 1-35, characterized in that the first antigen-binding domain competes for binding to human APLP2 with a reference antigen-binding protein containing a heavy chain variable region (HCVR) containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 34, and a light chain variable region (LCVR) containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 10; and wherein the second antigen-binding domain competes for binding to human HER2 with a reference antigen-binding protein containing a heavy chain variable region (HCVR) containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 18 and a light chain variable region (LCVR) containing the amino acid sequence of SEQ ID NO : ten.
37. Конъюгат антитело-лекарственное средство (ADC), содержащий биспецифическую антигенсвязывающую молекулу по любому из пп. 1-36 и цитотоксический агент, необязательно где биспецифическая антигенсвязывающая молекула и цитотоксический агент ковалентно присоединены через линкер, необязательно, где цитотоксический агент представляет собой майтанзиноид, необязательно где майтанзиноид представляет собой DM1 или DM4, необязательно, где линкер представляет собой SMCC, и необязательно, где цитотоксический агент представляет собой DM1, а линкер представляет собой SMCC.37. An antibody-drug conjugate (ADC) containing a bispecific antigen-binding molecule according to any one of paragraphs. 1-36 and a cytotoxic agent, optionally where the bispecific antigen binding molecule and the cytotoxic agent are covalently attached via a linker, optionally where the cytotoxic agent is a maytansinoid, optionally where the maytansinoid is DM1 or DM4, optionally where the linker is SMCC, and optionally where the cytotoxic agent is DM1 and the linker is SMCC.
38. Выделенное антитело против APLP2 или его антигенсвязывающий фрагмент, причем антитело или его антигенсвязывающий фрагмент конкурирует за связывание с APLP2 человека с эталонным антителом, содержащим пару аминокислотных последовательностей HCVR/LCVR, как указано в таблице 2. 38. An isolated anti-APLP2 antibody or antigen-binding fragment thereof, wherein the antibody or antigen-binding fragment competes for binding to human APLP2 with a reference antibody containing the HCVR/LCVR amino acid sequence pair as indicated in Table 2.
39. Антитело против APLP2 или его антигенсвязывающий фрагмент по п. 38, отличающееся тем, что первый антигенсвязывающий домен связывает APLP2 человека с KD от около 100 нМ до около 1 мкМ, причем первый антигенсвязывающий домен необязательно связывает APLP2 человека с KD от около 100 нМ до около 200 нМ, необязательно, причем первый антигенсвязывающий домен связывает APLP2 человека с KD от около 200 до около 800 нМ, как измерено с помощью поверхностного плазмонного резонанса или эквивалентного анализа, необязательно, причем первый антигенсвязывающий домен связывает APLP2 человека с KD от около 800 нМ до около 1 мкМ, как измерено с помощью поверхностного плазмонного резонанса или эквивалентного анализа.39. An anti-APLP2 antibody or antigen-binding fragment thereof according to claim 38, wherein the first antigen-binding domain binds human APLP2 with a KD of about 100 nM to about 1 μM, wherein the first antigen-binding domain optionally binds human APLP2 with a KD of about 100 nM to about 200 nM, optional, wherein the first antigen-binding domain binds human APLP2 with a KD of about 200 to about 800 nM, as measured by surface plasmon resonance or equivalent assay, optional, wherein the first antigen-binding domain binds human APLP2 with a KD of about 800 nM to about 1 μM as measured by surface plasmon resonance or equivalent analysis.
40. Антитело против APLP2 или антигенсвязывающий фрагмент по п. 38 или 39, отличающееся тем, что эталонное антитело содержит пару аминокислотных последовательностей HCVR/LCVR, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 26/10, 34/10 и 42/10.40. Anti-APLP2 antibody or antigen-binding fragment according to claim 38 or 39, characterized in that the reference antibody contains a pair of amino acid sequences HCVR/LCVR selected from the group consisting of SEQ ID NO: 26/10, 34/10 and 42/10 .
41. Антитело против APLP2 или антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп. 38-40, отличающееся тем, что антитело или его антигенсвязывающий фрагмент связывается с тем же эпитопом на APLP2 человека, что и эталонное антитело, содержащее пару аминокислотных последовательностей HCVR/LCVR, как указано в таблице 2. 41. Antibody against APLP2 or antigennegative fragment according to any one of paragraphs. 38-40, characterized in that the antibody or its antigen-binding fragment binds to the same epitope on human APLP2 as a reference antibody containing a pair of amino acid sequences HCVR/LCVR, as indicated in table 2.
42. Конъюгат антитело-лекарственное средство (ADC), содержащий антитело против APLP2 или антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп. 38-41 и цитотоксический агент, отличающийся тем, что биспецифическая антигенсвязывающая молекула и цитотоксический агент ковалентно присоединены через линкер.42. An antibody-drug conjugate (ADC) containing an anti-APLP2 antibody or an antigen-binding fragment according to any one of paragraphs. 38-41 and a cytotoxic agent, characterized in that the bispecific antigen-binding molecule and the cytotoxic agent are covalently attached via a linker.
43. Фармацевтическая композиция, содержащая биспецифическую антигенсвязывающую молекулу по пп. 1-36, выделенное антитело против APLP2 или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп. 38-42 или ADC по п. 37 или 42 и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.43. A pharmaceutical composition containing a bispecific antigen-binding molecule according to paragraphs. 1-36, isolated anti-APLP2 antibody or antigen-binding fragment according to any one of paragraphs. 38-42 or ADC according to claim 37 or 42 and a pharmaceutically acceptable carrier or diluent.
44. Способ лечения рака у субъекта, включающий введение субъекту фармацевтической композиции по п. 43.44. A method of treating cancer in a subject, comprising administering to the subject the pharmaceutical composition of claim 43.
45. Способ по п. 44, отличающийся тем, что рак выбран из группы, состоящей из рака предстательной железы, рака мочевого пузыря, рака шейки матки, рака легких, рака толстой кишки, рака почки, рака молочной железы, рака поджелудочной железы, рака желудка, рака матки и рака яичников. 45. The method of claim. 44, wherein the cancer is selected from the group consisting of prostate cancer, bladder cancer, cervical cancer, lung cancer, colon cancer, kidney cancer, breast cancer, pancreatic cancer, cancer stomach, uterine cancer and ovarian cancer.
46. Способ по п. 45, отличающийся тем, что рак представляет собой рак молочной железы, необязательно рак молочной железы IHC2+.46. The method of claim 45 wherein the cancer is breast cancer, optionally IHC2+ breast cancer.
47. Применение фармацевтической композиции по п. 43 для лечения заболевания или расстройства, связанного с экспрессией HER2.47. The use of a pharmaceutical composition according to claim 43 for the treatment of a disease or disorder associated with the expression of HER2.
48. Применение по п. 47, отличающееся тем, что заболевание или расстройство представляет собой рак.48. Use according to claim 47, wherein the disease or disorder is cancer.
49. Применение биспецифической антигенсвязывающей молекулы по пп. 1-36, выделенного антитела против APLP2 или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп. 38-42 или ADC по п. 37 или 42 для производства лекарственного средства для применения при лечении рака, необязательно, причем рак представляет собой рак молочной железы.49. The use of a bispecific antigen-binding molecule according to claims. 1-36, an isolated anti-APLP2 antibody or antigen-binding fragment thereof according to any one of paragraphs. 38-42 or the ADC of claim 37 or 42 for the manufacture of a medicament for use in the treatment of cancer, optionally, wherein the cancer is breast cancer.