RU2020138535A - Модифицированные митохондрии и их применение - Google Patents
Модифицированные митохондрии и их применение Download PDFInfo
- Publication number
- RU2020138535A RU2020138535A RU2020138535A RU2020138535A RU2020138535A RU 2020138535 A RU2020138535 A RU 2020138535A RU 2020138535 A RU2020138535 A RU 2020138535A RU 2020138535 A RU2020138535 A RU 2020138535A RU 2020138535 A RU2020138535 A RU 2020138535A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- protein
- modified
- mitochondrion
- fusion protein
- outer membrane
- Prior art date
Links
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 title claims 41
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims 50
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims 49
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 claims 24
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 claims 24
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims 24
- 238000004873 anchoring Methods 0.000 claims 21
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims 20
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 claims 20
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims 13
- 102100021569 Apoptosis regulator Bcl-2 Human genes 0.000 claims 8
- 101150075109 FIS1 gene Proteins 0.000 claims 8
- 101000971171 Homo sapiens Apoptosis regulator Bcl-2 Proteins 0.000 claims 8
- 101000801530 Homo sapiens Mitochondrial import receptor subunit TOM22 homolog Proteins 0.000 claims 8
- 101000764239 Homo sapiens Mitochondrial import receptor subunit TOM5 homolog Proteins 0.000 claims 8
- 101000648387 Homo sapiens Mitochondrial import receptor subunit TOM6 homolog Proteins 0.000 claims 8
- 101000648421 Homo sapiens Mitochondrial import receptor subunit TOM7 homolog Proteins 0.000 claims 8
- 102100033590 Mitochondrial import receptor subunit TOM22 homolog Human genes 0.000 claims 8
- 102100026902 Mitochondrial import receptor subunit TOM5 homolog Human genes 0.000 claims 8
- 102100028812 Mitochondrial import receptor subunit TOM6 homolog Human genes 0.000 claims 8
- 102100028764 Mitochondrial import receptor subunit TOM7 homolog Human genes 0.000 claims 8
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims 8
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims 8
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims 8
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims 7
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 claims 7
- 101000798951 Homo sapiens Mitochondrial import receptor subunit TOM20 homolog Proteins 0.000 claims 6
- 101000648395 Homo sapiens Mitochondrial import receptor subunit TOM70 Proteins 0.000 claims 6
- 102100034007 Mitochondrial import receptor subunit TOM20 homolog Human genes 0.000 claims 6
- 102100028811 Mitochondrial import receptor subunit TOM70 Human genes 0.000 claims 6
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims 6
- 101100406396 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) OM45 gene Proteins 0.000 claims 5
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 claims 5
- 102000044159 Ubiquitin Human genes 0.000 claims 5
- -1 E2F Proteins 0.000 claims 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 4
- 101000987493 Homo sapiens Phosphatidylethanolamine-binding protein 1 Proteins 0.000 claims 4
- 108010085839 Neurofibromin 2 Proteins 0.000 claims 4
- 102000007517 Neurofibromin 2 Human genes 0.000 claims 4
- 102100028489 Phosphatidylethanolamine-binding protein 1 Human genes 0.000 claims 4
- 108050002653 Retinoblastoma protein Proteins 0.000 claims 4
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 claims 4
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 claims 4
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 claims 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims 4
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims 4
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims 4
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims 4
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 claims 3
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 claims 3
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 claims 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims 3
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 claims 3
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims 3
- 102100035703 Prostatic acid phosphatase Human genes 0.000 claims 3
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 claims 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 3
- 210000001700 mitochondrial membrane Anatomy 0.000 claims 3
- 230000008685 targeting Effects 0.000 claims 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 claims 2
- XUHRVZXFBWDCFB-QRTDKPMLSA-N (3R)-4-[[(3S,6S,9S,12R,15S,18R,21R,24R,27R,28R)-12-(3-amino-3-oxopropyl)-6-[(2S)-butan-2-yl]-3-(2-carboxyethyl)-18-(hydroxymethyl)-28-methyl-9,15,21,24-tetrakis(2-methylpropyl)-2,5,8,11,14,17,20,23,26-nonaoxo-1-oxa-4,7,10,13,16,19,22,25-octazacyclooctacos-27-yl]amino]-3-[[(2R)-2-[[(3S)-3-hydroxydecanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound CCCCCCC[C@H](O)CC(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]1[C@@H](C)OC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CO)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC1=O)[C@@H](C)CC XUHRVZXFBWDCFB-QRTDKPMLSA-N 0.000 claims 2
- 102100030310 5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid oxidase Human genes 0.000 claims 2
- 102000000905 Cadherin Human genes 0.000 claims 2
- 108050007957 Cadherin Proteins 0.000 claims 2
- 108010022366 Carcinoembryonic Antigen Proteins 0.000 claims 2
- 102100025475 Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 5 Human genes 0.000 claims 2
- 102100025064 Cellular tumor antigen p53 Human genes 0.000 claims 2
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 claims 2
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 claims 2
- 108010051542 Early Growth Response Protein 1 Proteins 0.000 claims 2
- 102100023226 Early growth response protein 1 Human genes 0.000 claims 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims 2
- 102000001398 Granzyme Human genes 0.000 claims 2
- 108060005986 Granzyme Proteins 0.000 claims 2
- 101000721661 Homo sapiens Cellular tumor antigen p53 Proteins 0.000 claims 2
- 101000619910 Homo sapiens LIM/homeobox protein Lhx6 Proteins 0.000 claims 2
- 101000734643 Homo sapiens Programmed cell death protein 5 Proteins 0.000 claims 2
- 108700021430 Kruppel-Like Factor 4 Proteins 0.000 claims 2
- 102100022098 LIM/homeobox protein Lhx6 Human genes 0.000 claims 2
- 108050008953 Melanoma-associated antigen Proteins 0.000 claims 2
- 108010008707 Mucin-1 Proteins 0.000 claims 2
- 102000007298 Mucin-1 Human genes 0.000 claims 2
- 101100325747 Mus musculus Bak1 gene Proteins 0.000 claims 2
- 101710135898 Myc proto-oncogene protein Proteins 0.000 claims 2
- 102100038895 Myc proto-oncogene protein Human genes 0.000 claims 2
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 claims 2
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 claims 2
- 108010064218 Poly (ADP-Ribose) Polymerase-1 Proteins 0.000 claims 2
- 102100023712 Poly [ADP-ribose] polymerase 1 Human genes 0.000 claims 2
- 102000012338 Poly(ADP-ribose) Polymerases Human genes 0.000 claims 2
- 108010061844 Poly(ADP-ribose) Polymerases Proteins 0.000 claims 2
- 102100024216 Programmed cell death 1 ligand 1 Human genes 0.000 claims 2
- 102100034807 Programmed cell death protein 5 Human genes 0.000 claims 2
- 108010072866 Prostate-Specific Antigen Proteins 0.000 claims 2
- 102100038358 Prostate-specific antigen Human genes 0.000 claims 2
- 101100247004 Rattus norvegicus Qsox1 gene Proteins 0.000 claims 2
- 101150086694 SLC22A3 gene Proteins 0.000 claims 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 102100026715 Serine/threonine-protein kinase STK11 Human genes 0.000 claims 2
- 101710181599 Serine/threonine-protein kinase STK11 Proteins 0.000 claims 2
- 102100024547 Tensin-1 Human genes 0.000 claims 2
- 108010088950 Tensins Proteins 0.000 claims 2
- 101710150448 Transcriptional regulator Myc Proteins 0.000 claims 2
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 claims 2
- 102100022748 Wilms tumor protein Human genes 0.000 claims 2
- 101710127857 Wilms tumor protein Proteins 0.000 claims 2
- 102000055574 bcl-2 Homologous Antagonist-Killer Human genes 0.000 claims 2
- 108700039689 bcl-2 Homologous Antagonist-Killer Proteins 0.000 claims 2
- 102000055102 bcl-2-Associated X Human genes 0.000 claims 2
- 108700000707 bcl-2-Associated X Proteins 0.000 claims 2
- JTSLALYXYSRPGW-UHFFFAOYSA-N n-[5-(4-cyanophenyl)-1h-pyrrolo[2,3-b]pyridin-3-yl]pyridine-3-carboxamide Chemical compound C=1C=CN=CC=1C(=O)NC(C1=C2)=CNC1=NC=C2C1=CC=C(C#N)C=C1 JTSLALYXYSRPGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 208000015768 polyposis Diseases 0.000 claims 2
- 108010043671 prostatic acid phosphatase Proteins 0.000 claims 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims 2
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 claims 2
- 108010014402 tyrosinase-related protein-1 Proteins 0.000 claims 2
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 claims 1
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 claims 1
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 claims 1
- 108010074708 B7-H1 Antigen Proteins 0.000 claims 1
- 102100021663 Baculoviral IAP repeat-containing protein 5 Human genes 0.000 claims 1
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 claims 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims 1
- 102100025570 Cancer/testis antigen 1 Human genes 0.000 claims 1
- 102100027943 Carnitine O-palmitoyltransferase 1, liver isoform Human genes 0.000 claims 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 claims 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 claims 1
- 102000012804 EPCAM Human genes 0.000 claims 1
- 101150084967 EPCAM gene Proteins 0.000 claims 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims 1
- 108010066687 Epithelial Cell Adhesion Molecule Proteins 0.000 claims 1
- 102000018651 Epithelial Cell Adhesion Molecule Human genes 0.000 claims 1
- 102100035139 Folate receptor alpha Human genes 0.000 claims 1
- 101710088083 Glomulin Proteins 0.000 claims 1
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 claims 1
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 claims 1
- 101000856237 Homo sapiens Cancer/testis antigen 1 Proteins 0.000 claims 1
- 101000859570 Homo sapiens Carnitine O-palmitoyltransferase 1, liver isoform Proteins 0.000 claims 1
- 101001023230 Homo sapiens Folate receptor alpha Proteins 0.000 claims 1
- 101000599858 Homo sapiens Intercellular adhesion molecule 2 Proteins 0.000 claims 1
- 101001017833 Homo sapiens Leucine-rich repeat-containing protein 4 Proteins 0.000 claims 1
- 101000984189 Homo sapiens Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 2 Proteins 0.000 claims 1
- 101000672316 Homo sapiens Netrin receptor UNC5B Proteins 0.000 claims 1
- 101000581981 Homo sapiens Neural cell adhesion molecule 1 Proteins 0.000 claims 1
- 101001117317 Homo sapiens Programmed cell death 1 ligand 1 Proteins 0.000 claims 1
- 101001001272 Homo sapiens Prostatic acid phosphatase Proteins 0.000 claims 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 claims 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 claims 1
- 102100037872 Intercellular adhesion molecule 2 Human genes 0.000 claims 1
- 206010023825 Laryngeal cancer Diseases 0.000 claims 1
- 102100033304 Leucine-rich repeat-containing protein 4 Human genes 0.000 claims 1
- 102100025583 Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 2 Human genes 0.000 claims 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 claims 1
- 102000000440 Melanoma-associated antigen Human genes 0.000 claims 1
- 108090000015 Mesothelin Proteins 0.000 claims 1
- 102000003735 Mesothelin Human genes 0.000 claims 1
- 101100262328 Mus musculus Dct gene Proteins 0.000 claims 1
- 101100154912 Mus musculus Tyrp1 gene Proteins 0.000 claims 1
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 claims 1
- 102000002356 Nectin Human genes 0.000 claims 1
- 108060005251 Nectin Proteins 0.000 claims 1
- 102100040289 Netrin receptor UNC5B Human genes 0.000 claims 1
- 102100027347 Neural cell adhesion molecule 1 Human genes 0.000 claims 1
- 206010029260 Neuroblastoma Diseases 0.000 claims 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 claims 1
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims 1
- 102100023832 Prolyl endopeptidase FAP Human genes 0.000 claims 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims 1
- 201000000582 Retinoblastoma Diseases 0.000 claims 1
- 208000004337 Salivary Gland Neoplasms Diseases 0.000 claims 1
- 206010061934 Salivary gland cancer Diseases 0.000 claims 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 claims 1
- 108010002687 Survivin Proteins 0.000 claims 1
- 101150057140 TACSTD1 gene Proteins 0.000 claims 1
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 claims 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 claims 1
- 102100026497 Zinc finger protein 654 Human genes 0.000 claims 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 claims 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 claims 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 claims 1
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 claims 1
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 claims 1
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 claims 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 claims 1
- 206010023841 laryngeal neoplasm Diseases 0.000 claims 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 claims 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 claims 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims 1
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims 1
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 claims 1
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 claims 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 claims 1
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 claims 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 claims 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 claims 1
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 claims 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 claims 1
Claims (57)
1. Модифицированная митохондрия, в которой чужеродный белок связан с внешней мембраной митохондрий.
2. Модифицированная митохондрия по п.1, где митохондрия выделена из клеток или тканей.
3. Модифицированная митохондрия по п.2, где клетка является любой клеткой, выбранной из группы, состоящей из соматических клеток, половых клеток, стволовых клеток и их комбинации.
4. Модифицированная митохондрия по п.1, где чужеродный белок содержит желаемый белок, способный функционировать внутри и вне клетки.
5. Модифицированная митохондрия по п.1, где чужеродный белок содержит пептид, заякоривающий в митохондриях.
6. Модифицированная митохондрия по п.5, где чужеродный белок связан с внешней мембраной митохондрии с помощью пептида, заякоривающего в митохондриях.
7. Модифицированная митохондрия по п.6, где пептид, заякоривающий в митохондриях, содержит N-концевую область или C-концевую область белка, присутствующего в белке митохондриальной мембраны.
8. Модифицированная митохондрия по п.7, отличающаяся тем, что N-концевая область или C-концевая область белка, присутствующего в белке митохондриальной мембраны, находится на внешней мембране митохондрий.
9. Модифицированная митохондрия по п.7, отличающаяся тем, что белок, присутствующий в белке митохондриальной мембраны, является любым белком, выбранным из группы, состоящей из TOM20, TOM70, OM45, TOM5, TOM6, TOM7, TOM22, Fis1, Bcl-2, Bcl-x и VAMP1B.
10. Модифицированная митохондрия по п.7, отличающаяся тем, что заякоривающий пептид содержит N-концевую область любого белка, выбранного из группы, состоящей из TOM20, TOM70 и OM45.
11. Модифицированная митохондрия по п.7, отличающаяся тем, что пептид, заякоривающий в митохондриях, содержит C-концевую область любого белка, выбранного из группы, состоящей из TOM5, TOM6, TOM7, TOM22, Fis1, Bcl-2, Bcl-x и VAMP1B.
12. Модифицированная митохондрия по п.1, где чужеродный белок является слитым белком, содержащим пептид, заякоривающий в митохондриях, и желаемый белок, способный функционировать внутри и вне клетки.
13. Модифицированная митохондрия по п.12, где желаемый белок является любым белком, выбранным из группы, состоящей из активного белка, проявляющего активность в клетке, белка, присутствующего в клетке, и белка, имеющего способность связываться с лигандом или рецептором, присутствующим в мембране клетки.
14. Модифицированная митохондрия по п.13, где желаемый белок является любым белком, выбранным из группы, состоящей из p53, гранзима B, Bax, Bak, PDCD5, E2F, AP-1 (Jun/Fos), EGR-1, белка ретинобластомы (RB), гомолога фосфатазы и тензина (PTEN), E-кадгерина, нейрофибромина-2(NF-2), поли-АДФ-рибоза-синтазы 1 (PARP-1), BRCA-1, BRCA-2, белка аденоматозного полипоза толстой кишки (APC), фактора, ассоциированного с рецептором фактора некроза опухоли (TRAF), ингибиторного белка RAF-киназы (RKIP), p16, KLF-10, LKB1, LHX6, C-RASSF, DKK-3PD1, Oct3/4, Sox2, Klf4 и c-Myc.
15. Модифицированная митохондрия по п.12, где чужеродный белок является желаемым белком, связанным с N-концевой областью TOM20, TOM70 или OM45.
16. Модифицированная митохондрия по п.15, где чужеродный белок связан в следующем порядке:
N-конец-N-концевая область TOM20, TOM70 или OM45-желаемый белок-C-конец.
17. Модифицированная митохондрия по п.16, где чужеродный белок дополнительно содержит аминокислотную последовательность, распознаваемую протеолитическим ферментом в эукариотических клетках, или убиквитин или его фрагмент между заякоривающим пептидом и желаемым белком.
18. Модифицированная митохондрия по п.17, где фрагмент убиквитина содержит C-концевые Gly-Gly аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 71 и содержит от 3 до 75 последовательных аминокислот с C-конца.
19. Модифицированная митохондрия по п.17, где чужеродный белок дополнительно содержит линкер между желаемым белком и убиквитином или его фрагментом.
20. Модифицированная митохондрия по п.19, где линкер состоит из от 1 до 150 аминокислот.
21. Модифицированная митохондрия по п.20, где линкер состоит из от 5 до 50 аминокислот, состоящих из глицина и серина.
22. Модифицированная митохондрия по п.21, где линкер представляет собой (G4S)n, в котором n является целым числом от 1 до 10.
23. Модифицированная митохондрия по п.13, где белок, имеющий способность связываться с лигандом или рецептором, присутствующим в мембране клетки, является лигандом или рецептором, присутствующим на поверхности опухолевой клетки.
24. Модифицированная митохондрия по п.23, где лиганд или рецептор, присутствующий на поверхности опухолевой клетки, является любым лигандом или рецептором, выбранным из группы, состоящей из CD19, CD20, меланома-ассоциированного антигена E (MAGE), NY-ESO-1, карциноэмбрионального антигена (CEA), муцина 1, ассоциированного с поверхностью клетки (MUC-1), простатической кислой фосфатазы (PAP), простат-специфического антигена (PSA), сурвивина, тирозиназа-связанного белка 1 (tyrp1), тирозиназа-связанного белка 1 (tyrp2), гена брахиурии, мезотелина, рецептора эпидермального фактора роста (EGFR), рецептора эпидермального фактора роста 2 человека (HER-2), ERBB2, белка опухоли Вильмса (WT1), FAP, EpCAM, PD-L1, ACPP, CPT1A, ИФНγ, CD274, FOLR1, EPCAM, ICAM2, NCAM1, LRRC4, UNC5H2 LILRB2, CEACAM, нектина-3 или их комбинации.
25. Модифицированная митохондрия по п.12, где чужеродный белок связан с C-концевой областью любого белка, выбранного из группы, состоящей из TOM5, TOM6, TOM7, TOM22, Fis1, Bcl-2, Bcl-x и VAMP1B.
26. Модифицированная митохондрия по п.25, где чужеродный белок связан в следующем порядке:
N-конец-желаемый белок-C-концевая область любого белка, выбранного из группы, состоящей из TOM5, TOM6, TOM7, TOM22, Fis1, Bcl-2, Bcl-x и VAMP1B-C-конец.
27. Модифицированная митохондрия по п.26, где чужеродный белок дополнительно содержит линкер между желаемым белком и C-концевой областью любого белка, выбранного из группы, состоящей из TOM5, TOM6, TOM7, TOM22, Fis1, Bcl-2, Bcl-x и VAMP1B.
28. Модифицированная митохондрия по п.27, где линкер состоит из от 1 до 150 аминокислот.
29. Модифицированная митохондрия по п.28, где линкер состоит из от 5 до 50 аминокислот, состоящих из глицина и серина.
30. Модифицированная митохондрия по п.21, где линкер представляет собой (G4S)n, в котором n является целым числом от 1 до 10.
31. Фармацевтическая композиция, содержащая модифицированную митохондрию по любому из пп.1-30 в качестве активного ингредиента.
32. Фармацевтическая композиция по п.31, где фармацевтическая композиция предназначена для профилактики или лечения злокачественного новообразования.
33. Фармацевтическая композиция по п.32, где злокачественное новообразование является любым злокачественным новообразованием, выбранным из группы, состоящей из рака желудка, рака печени, рака легких, колоректального рака, рака молочной железы, рака предстательной железы, рака яичников, рака поджелудочной железы, рака шейки матки, рака щитовидной железы, рака гортани, острого миелолейкоза, опухоли головного мозга, нейробластомы, ретинобластомы, рака головы и шеи, рака слюнных желез и лимфомы.
34. Применение модифицированных митохондрий в качестве средств внутриклеточной и внеклеточной доставки чужеродного белка, содержащего желаемый белок, способный функционировать вне и внутри клетки.
35. Применение модифицированных митохондрий по п.34, где чужеродный белок содержит пептид, заякоривающий в митохондриальной внешней мембране, и связан с внешней мембраной митохондрий посредством пептида, заякоривающего во внешней мембране, и его доставляют внутрь и вне клетки.
36. Слитый белок, содержащий пептид, заякоривающий в митохондриальной внешней мембране, и желаемый белок, способный функционировать внутри и вне клетки.
37. Слитый белок по п.36, где пептид, заякоривающий в митохондриальной внешней мембране, содержит N-концевую или C-концевую последовательность белка, присутствующего во внешней мембране митохондрий.
38. Слитый белок по п.36, где пептид, заякоривающий в митохондриальной внешней мембране, является любым пептидом, выбранным из группы, состоящей из TOM20, TOM70, OM45, TOM5, TOM6, TOM7, TOM22, Fis1, Bcl-2, Bcl-x и VAMP1B.
39. Слитый белок по п.36,где желаемый белок является любым белком, выбранным из группы, состоящей из p53, гранзима B, Bax, Bak, PDCD5, E2F, AP-1 (Jun/Fos), EGR-1, белка ретинобластомы (RB), гомолога фосфатазы и тензина (PTEN), E-кадгерина, нейрофибромина-2 (NF-2), поли-АДФ-рибоза-синтазы 1 (PARP-1), BRCA-1, BRCA-2, белка аденоматозного полипоза толстой кишки (APC), фактора, ассоциированного с рецептором фактора некроза опухоли (TRAF), ингибиторного белка RAF-киназы (RKIP), p16, KLF-10, LKB1, LHX6, C-RASSF, DKK-3PD1, Oct3/4, Sox2, Klf4 и c-Myc.
40. Слитый белок по п.36, где, если пептид, заякоривающий в митохондриальной внешней мембране, является TOM20, TOM70 или OM45, пептид, заякоривающий в митохондриальной внешней мембране и желаемый белок связаны от N-конца к C-концу.
41. Слитый белок по п.36, где, если пептид, заякоривающий в митохондриальной внешней мембране, является любым пептидом, выбранным из группы, состоящей из TOM5, TOM6, TOM7, TOM22, Fis1, Bcl-2, Bcl-x и VAMP1B, желаемый белок и пептид, заякоривающий в митохондриальной внешней мембране, связаны от N-конца к C-концу.
42. Слитый белок по п.36, где слитый белок дополнительно содержит убиквитин или его фрагмент между пептидом, заякоривающим в митохондриальной внешней мембране, и желаемым белком.
43. Слитый белок по п.36, где слитый белок дополнительно содержит аминокислотную последовательность, распознаваемую протеолитическим ферментом в эукариотических клетках, между пептидом, заякоривающим в митохондриальной внешней мембране и желаемым белком.
44. Полинуклеотид, кодирующий слитый белок по любому из пп.36-43.
45. Способ получения слитого белка по любому из пп.36-43, включающий
стадию трансформации прокариотических клеток или эукариотических клеток без фермента деградации убиквитина или протеолитического фермента с использованием полинуклеотида по п.44; и
стадию получения слитого белка.
46. Слитый белок, содержащий белок для таргетинга мишени, имеющий способность связываться с лигандом или рецептором, присутствующим в мембране клетки, и пептид, заякоривающий в митохондриальной внешней мембране.
47. Слитый белок по п.46, где пептид, заякоривающий в митохондриальной внешней мембране, является любым пептидом, выбранным из группы, состоящей из TOM5, TOM6, TOM7, TOM22, Fis1, Bcl-2, Bcl-x и VAMP1B.
48. Слитый белок по п.46, где белок для таргетинга мишени, имеющий способность связываться с лигандом или рецептором, присутствующим в мембране клетки, и пептид, заякоривающий в митохондриальной внешней мембране, связаны от N-конца к C-концу.
49. Слитый белок по п.48, где белок для таргетинга мишени, имеющий способность связываться с лигандом или рецептором, присутствующим в мембране клетки, является антителом или его фрагментом.
50. Слитый белок по п.49, где фрагмент антитела является любым фрагментом, выбранным из группы, состоящей из Fab, Fab', scFv и F(ab)2.
51. Полинуклеотид, кодирующий слитый белок по любому из пп.46-50.
52. Способ получения модифицированных митохондрий, включающий стадию смешивания выделенных митохондрий со слитым белком по любому из пп.36-43 и/или слитым белком по любому из пп.46-50.
53. Способ получения модифицированных митохондрий из трансформированных клеток посредством инъецирования полинуклеотида, кодирующего слитый белок по любому из пп.36-41 и/или слитый белок по любому из пп.46-50, в эукариотические клетки.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR10-2018-0048486 | 2018-04-26 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2020138535A true RU2020138535A (ru) | 2022-05-26 |
| RU2811467C2 RU2811467C2 (ru) | 2024-01-12 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Bae et al. | Engineering tunable dual functional protein cage nanoparticles using bacterial superglue | |
| JP2021036867A5 (ru) | ||
| Belnoue et al. | Enhancing antitumor immune responses by optimized combinations of cell-penetrating peptide-based vaccines and adjuvants | |
| JP2017518037A5 (ru) | ||
| Clifton et al. | The development and use of the E75 (HER2 369–377) peptide vaccine | |
| MX2011009810A (es) | Composiciones y metodos para usar proteinas de union multiespecificas que comprenden una combinacion anticuerporeceptor. | |
| EP1549663A2 (en) | Multifunctional polypeptides | |
| HRP20200491T1 (hr) | Novi kompleks koji sadrži peptid koji prodire u stanicu, teretni i tlr peptidni agonist za liječenje kolorektalnog karcinoma | |
| MX2022010664A (es) | Materiales y métodos para modular una respuesta inmunitaria. | |
| ATE427354T1 (de) | Mage-a3 polypeptide die durch hla-klasse ii molekule prasentiert werden | |
| ATE422536T1 (de) | Zusammensetzungen und methoden zur diagnose von tumoren | |
| MX2023010640A (es) | Péptidos neoantigénicos transmembranales. | |
| Schreiner et al. | Expression of inhibitory receptors on intratumoral T cells modulates the activity of a T cell-bispecific antibody targeting folate receptor | |
| Oberoi et al. | Arming NK cells with enhanced antitumor activity: CARs and beyond | |
| Aguilar-Gurrieri et al. | Alanine-based spacers promote an efficient antigen processing and presentation in neoantigen polypeptide vaccines | |
| Suk Kim et al. | Both antigen optimization and lysosomal targeting are required for enhanced anti‐tumour protective immunity in a human papillomavirus E7‐expressing animal tumour model | |
| Ibáñez-Pérez et al. | Anti-tumoral potential of a human granulysin-based, CEA-targeted cytolytic immunotoxin | |
| ATE320484T1 (de) | Histone-deacetylase-8 proteine, nukleinsäuren und methoden zur verwendung | |
| RU2020138535A (ru) | Модифицированные митохондрии и их применение | |
| Lin et al. | Muc16CD is a novel CAR T cell target antigen for the treatment of pancreatic cancer | |
| Isticato et al. | Amino terminal fusion of heterologous proteins to CotC increases display efficiencies in the Bacillus subtilis spore system | |
| CN115916839A (zh) | 抗pdl1×egfr的双特异性抗体 | |
| TW200607524A (en) | A fusion protein for inhibiting cervical cancer | |
| CN115052897B (zh) | PLAP-CD3ε双特异性抗体 | |
| Vu et al. | A Mutated Prostatic Acid Phosphatase (PAP) peptide-based vaccine induces pap-specific CD8+ t cells with ex vivo cytotoxic capacities in HHDII/DR1 Transgenic Mice |