RU2018121657A - ПРОТИВОПОЛОЖНЫЕ ГРАДИЕНТЫ pH-СОЛЬ ДЛЯ УЛУЧШЕННОГО РАЗДЕЛЕНИЯ БЕЛКОВ - Google Patents
ПРОТИВОПОЛОЖНЫЕ ГРАДИЕНТЫ pH-СОЛЬ ДЛЯ УЛУЧШЕННОГО РАЗДЕЛЕНИЯ БЕЛКОВ Download PDFInfo
- Publication number
- RU2018121657A RU2018121657A RU2018121657A RU2018121657A RU2018121657A RU 2018121657 A RU2018121657 A RU 2018121657A RU 2018121657 A RU2018121657 A RU 2018121657A RU 2018121657 A RU2018121657 A RU 2018121657A RU 2018121657 A RU2018121657 A RU 2018121657A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- proteins
- mixture
- paragraphs
- salt
- gradient
- Prior art date
Links
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims 23
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims 23
- 238000000926 separation method Methods 0.000 title claims 8
- 238000000034 method Methods 0.000 claims 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims 11
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims 10
- 239000000463 material Substances 0.000 claims 9
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims 9
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims 5
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 claims 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 2
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 claims 2
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 claims 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 claims 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 claims 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims 2
- UMCMPZBLKLEWAF-BCTGSCMUSA-N 3-[(3-cholamidopropyl)dimethylammonio]propane-1-sulfonate Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCCC[N+](C)(C)CCCS([O-])(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 UMCMPZBLKLEWAF-BCTGSCMUSA-N 0.000 claims 1
- 239000007993 MOPS buffer Substances 0.000 claims 1
- 239000012615 aggregate Substances 0.000 claims 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 claims 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 claims 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 claims 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims 1
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
- B01D15/36—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving ionic interaction, e.g. ion-exchange, ion-pair, ion-suppression or ion-exclusion
- B01D15/361—Ion-exchange
- B01D15/362—Cation-exchange
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
- B01D15/36—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving ionic interaction, e.g. ion-exchange, ion-pair, ion-suppression or ion-exclusion
- B01D15/361—Ion-exchange
- B01D15/363—Anion-exchange
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
- B01D15/38—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving specific interaction not covered by one or more of groups B01D15/265 and B01D15/30 - B01D15/36, e.g. affinity, ligand exchange or chiral chromatography
- B01D15/3804—Affinity chromatography
- B01D15/3809—Affinity chromatography of the antigen-antibody type, e.g. protein A, G or L chromatography
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
- B01D15/38—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving specific interaction not covered by one or more of groups B01D15/265 and B01D15/30 - B01D15/36, e.g. affinity, ligand exchange or chiral chromatography
- B01D15/3847—Multimodal interactions
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
- B01D15/38—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving specific interaction not covered by one or more of groups B01D15/265 and B01D15/30 - B01D15/36, e.g. affinity, ligand exchange or chiral chromatography
- B01D15/3861—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving specific interaction not covered by one or more of groups B01D15/265 and B01D15/30 - B01D15/36, e.g. affinity, ligand exchange or chiral chromatography using an external stimulus
- B01D15/388—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving specific interaction not covered by one or more of groups B01D15/265 and B01D15/30 - B01D15/36, e.g. affinity, ligand exchange or chiral chromatography using an external stimulus modifying the pH
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/42—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the development mode, e.g. by displacement or by elution
- B01D15/424—Elution mode
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
- C07K1/165—Extraction; Separation; Purification by chromatography mixed-mode chromatography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
- C07K1/18—Ion-exchange chromatography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/55—Fab or Fab'
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Claims (27)
1. Способ разделения и очистки белка из смеси белков, с помощью этапов:
а) обеспечение образца, содержащего по меньшей мере два различных белка,
б) нанесение этой смеси на ионообменный материал с общим содержание белка ≥5 мг/мл, в особенности ≥30 мг/мл, в частности ≥60 мг/мл,
в) разделение белков путем элюирования, которое характеризуется одновременным изменением рН и электропроводимости.
2. Способ по п. 1 разделения и очистки белка из смеси белков, с помощью этапов:
а) обеспечение образца, содержащего по меньшей мере два различных белка,
б) нанесение этой смеси на ионообменный материал,
в) прогон противоположного градиента рН-соль путем повышения рН и снижения концентрации соли для разделения белков, или наоборот, прогон снижающегося рН и повышающейся концентрации соли, и необязательно
г) использование данных разделения из в) для определения и прогона профиля стадии элюирования для разделения белков.
3. Способ по п. 1 или 2 разделения и очистки белка из смеси белков с помощью этапов:
а) обеспечение образца, содержащего по меньшей мере два различных белка,
б) нанесение этой смеси на ионообменный материал,
в) прогон противоположного градиента рН-соль путем повышения рН и снижения концентрации соли для разделения белков, или наоборот, прогон снижающегося рН и повышающейся концентрации соли, и
г) разделение белков путем градиентного элюирования.
4. Способ в соответствии с одним из пп. 1, 2 или 3, в котором общее содержание белка составляет ≥5 мг/мл, в особенности ≥30 мг/мл, в частности ≥60 мг/мл.
5. Способ в соответствии с одним или несколькими пп. 1-4, в котором смесь белков адсорбирована или связана с и элюируется из ионообменного материала.
6. Способ в соответствии с одним или несколькими пп. 1-4, в котором смесь белков адсорбирована на и элюируется из анионообменного или катионообменного материала.
7. Способ по п. 1, 2 или 3, в котором смесь белков адсорбирована или связана с и элюируется из хроматографического материала смешанного режима.
8. Способ по п. 1, 2 или 3, в котором в в) рН изменяют в диапазоне от 4,5-10,5 и концентрацию соли в диапазоне 0 - 1М соли.
9. Способ по п. 1, 2 или 3, в котором градиент рН индуцирован путем применения буферной системы, доведенной до рН 5 и 9,5.
10. Способ по одному или нескольким пп. 1-9, в котором солевой градиент индуцирован в интервале концентрации в диапазоне 0 - 0,25 М.
11. Способ по одному или нескольким пп. 1-10, в котором градиент рН индуцирован путем применения буферной системы по крайней мере двух буферных растворов, таким образом адсорбция или связывание белков осуществляется в присутствии одного буферного раствора, а элюирование осуществляется в присутствии возрастающих концентраций другого буферного раствора, при этом значение рН возрастает, а концентрация соли снижается одновременно.
12. Способ по одному или нескольким пп. 1-10, в котором градиент рН индуцирован путем применения буферной системы по крайней мере двух буферных растворов, таким образом адсорбция или связывание белков осуществляется в присутствии одного буферного раствора, а элюирование осуществляется в присутствии возрастающих концентраций другого буферного раствора, при этом рН снижается и концентрация соли возрастает одновременно.
13. Способ по одному или нескольким пп. 1-12, в котором градиент рН индуцирован буферной системой, использующей MES, MOPS, CHAPS, и др. и системы изменения электропроводимости с применением хлорида натрия.
14. Способ по одному или нескольким пп. 1-13, в котором смесь белков адсорбирована или связана с катионообменном материалом.
15. Способ по одному или нескольким пп. 1-13, в котором смесь белков адсорбирована или связана с анионообменным материалом или хроматографическим материалом смешанного режима.
16. Способ по одному или нескольким пп. 1-15, где белки, в частности моноклональные антитела (mAB), разделяют и очищают от их ассоциированных заряженных вариантов, вариантов гликозилирования, и/или вариантов растворимых размеров, димеров и агрегатов, мономеров, 2/3 фрагментов, 
фрагментов, фрагментов в общем, антигенсвязывающих фрагментов (Fab) и кристаллизующихся фрагментов (Fc).
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP15195243.9 | 2015-11-18 | ||
| EP15195243 | 2015-11-18 | ||
| PCT/EP2016/001804 WO2017084738A1 (en) | 2015-11-18 | 2016-10-28 | Opposite ph-salt gradients for improved protein separations |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2018121657A true RU2018121657A (ru) | 2019-12-19 |
| RU2018121657A3 RU2018121657A3 (ru) | 2020-01-31 |
Family
ID=54608367
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018121657A RU2018121657A (ru) | 2015-11-18 | 2016-10-28 | ПРОТИВОПОЛОЖНЫЕ ГРАДИЕНТЫ pH-СОЛЬ ДЛЯ УЛУЧШЕННОГО РАЗДЕЛЕНИЯ БЕЛКОВ |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20180346510A1 (ru) |
| EP (1) | EP3377514A1 (ru) |
| JP (1) | JP2018537458A (ru) |
| KR (1) | KR20180081605A (ru) |
| CN (1) | CN108350027A (ru) |
| AU (1) | AU2016356482A1 (ru) |
| BR (1) | BR112018009882A2 (ru) |
| CA (1) | CA3005484A1 (ru) |
| IL (1) | IL259181A (ru) |
| MX (1) | MX2018005831A (ru) |
| RU (1) | RU2018121657A (ru) |
| SG (1) | SG11201804083QA (ru) |
| WO (1) | WO2017084738A1 (ru) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20180083409A (ko) * | 2015-11-18 | 2018-07-20 | 메르크 파텐트 게엠베하 | 이온 교환 크로마토그래피에서의 개선된 단백질 분리 |
| CN109293734A (zh) * | 2018-09-29 | 2019-02-01 | 上海药明生物技术有限公司 | 一种消除层析中洗脱肩峰的方法 |
| US20220135619A1 (en) * | 2019-02-24 | 2022-05-05 | Bristol-Myers Squibb Company | Methods of isolating a protein |
| US11022585B2 (en) * | 2019-06-09 | 2021-06-01 | Dionex Corporation | Methods and systems for optimizing buffer conditions with liquid chromatography |
| CN114014906B (zh) * | 2020-06-24 | 2024-01-12 | 夏尔巴生物技术(苏州)有限公司 | 一种利用阳离子交换层析纯化疏水性蛋白的方法 |
| CN114544839B (zh) * | 2022-01-20 | 2024-08-20 | 未名生物医药有限公司 | 一种抗人神经生长因子抗体的电荷变异体检测方法 |
| WO2024261724A1 (en) * | 2023-06-23 | 2024-12-26 | Lupin Limited | Ion-exchange chromatography for separation and analysis of charge variants |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DK1308456T3 (da) * | 1998-05-06 | 2007-12-27 | Genentech Inc | Antistofoprensning ved ionbytterkromatografi |
| CN1234725C (zh) * | 2004-04-07 | 2006-01-04 | 陈志南 | 一种高效快速纯化制备片段抗体的方法 |
| TWI391399B (zh) * | 2005-05-25 | 2013-04-01 | Hoffmann La Roche | 測定溶離多肽之鹽濃度之方法 |
| ES2596727T3 (es) * | 2010-03-30 | 2017-01-11 | Octapharma Ag | Procedimiento de purificación de un factor proteico de crecimiento G-CSF |
| WO2012173876A1 (en) * | 2011-06-13 | 2012-12-20 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Methods of purification of native or mutant forms of diphtheria toxin |
| US9334319B2 (en) * | 2012-04-20 | 2016-05-10 | Abbvie Inc. | Low acidic species compositions |
| MX360044B (es) * | 2012-09-11 | 2018-10-19 | Coherus Biosciences Inc | Etanercept plegado correctamente con alta pureza y un rendimiento excelente. |
| CA2890979A1 (en) * | 2012-11-15 | 2014-05-22 | Genentech, Inc. | Ionic strength-mediated ph gradient ion exchange chromatography |
| CN104628846B (zh) * | 2013-11-06 | 2019-12-06 | 三生国健药业（上海）股份有限公司 | 重组蛋白质的纯化方法 |
| DK2905289T3 (en) * | 2014-02-11 | 2017-01-30 | Richter-Helm Bio Tec Gmbh & Co Kg | Method of Purifying Teriparatide (PTH1-34) |
-
2016
- 2016-10-28 KR KR1020187017146A patent/KR20180081605A/ko not_active Withdrawn
- 2016-10-28 BR BR112018009882A patent/BR112018009882A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2016-10-28 CN CN201680067518.4A patent/CN108350027A/zh active Pending
- 2016-10-28 WO PCT/EP2016/001804 patent/WO2017084738A1/en not_active Ceased
- 2016-10-28 CA CA3005484A patent/CA3005484A1/en not_active Abandoned
- 2016-10-28 US US15/777,525 patent/US20180346510A1/en not_active Abandoned
- 2016-10-28 SG SG11201804083QA patent/SG11201804083QA/en unknown
- 2016-10-28 AU AU2016356482A patent/AU2016356482A1/en not_active Abandoned
- 2016-10-28 MX MX2018005831A patent/MX2018005831A/es unknown
- 2016-10-28 RU RU2018121657A patent/RU2018121657A/ru not_active Application Discontinuation
- 2016-10-28 JP JP2018525780A patent/JP2018537458A/ja active Pending
- 2016-10-28 EP EP16788430.3A patent/EP3377514A1/en not_active Withdrawn
-
2018
- 2018-05-07 IL IL259181A patent/IL259181A/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA3005484A1 (en) | 2017-05-26 |
| US20180346510A1 (en) | 2018-12-06 |
| EP3377514A1 (en) | 2018-09-26 |
| CN108350027A (zh) | 2018-07-31 |
| BR112018009882A2 (pt) | 2018-11-13 |
| RU2018121657A3 (ru) | 2020-01-31 |
| SG11201804083QA (en) | 2018-06-28 |
| IL259181A (en) | 2018-07-31 |
| KR20180081605A (ko) | 2018-07-16 |
| WO2017084738A1 (en) | 2017-05-26 |
| MX2018005831A (es) | 2018-08-01 |
| JP2018537458A (ja) | 2018-12-20 |
| AU2016356482A1 (en) | 2018-06-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2018121657A (ru) | ПРОТИВОПОЛОЖНЫЕ ГРАДИЕНТЫ pH-СОЛЬ ДЛЯ УЛУЧШЕННОГО РАЗДЕЛЕНИЯ БЕЛКОВ | |
| RU2018121653A (ru) | Улучшенное разделение белков при ионообменной хроматографии | |
| DK2791176T3 (en) | PROCEDURE FOR CLEANING ANTIBODIES | |
| US10053489B2 (en) | Method for purifying antibody | |
| US10246484B2 (en) | Method for purifying recombinant protein | |
| Jungbauer et al. | Ion-exchange chromatography | |
| AU2006329963B2 (en) | Polishing steps used in multi-step protein purification processes | |
| JP2015537212A5 (ru) | ||
| JP2018510867A5 (ru) | ||
| US20110166332A1 (en) | Enhanced antibody aggregate removal with capto adhere in the presence of protein-excluded zwitterions | |
| SI2895188T1 (en) | CORRECTED QUALITY ETHANERCEPT WITH HIGH QUALITY AND EXCELLENT EXPERIENCE | |
| HRP20192217T1 (hr) | ULTRA-PROČIŠĆENI DsbA I DsbC TE POSTUPCI NJIHOVE IZRADE I UPORABE | |
| JP2018516229A5 (ru) | ||
| US20190330269A1 (en) | Method for purifying antibodies using pbs | |
| Walch et al. | Continuous desalting of refolded protein solution improves capturing in ion exchange chromatography: a seamless process | |
| US20190366236A1 (en) | Process for desalting of a protein solution | |
| Ralla et al. | Application of conjoint liquid chromatography with monolithic disks for the simultaneous determination of immunoglobulin G and other proteins present in a cell culture medium | |
| CN113166200A (zh) | 一种提高蛋白a层析法去除聚集体的方法 | |
| US8993334B2 (en) | Protein separation via ion-exchange chromatography and associated methods, systems, and devices | |
| Yoshimoto et al. | Connected flow-through chromatography processes as continuous downstream processing of proteins | |
| Mönster et al. | Isolation and purification of blood group antigens using immuno-affinity chromatography on short monolithic columns | |
| JP2022091184A (ja) | 抗体を含む被験試料の精製方法 | |
| JP5089924B2 (ja) | ＩｇＭ型抗体の精製方法、ＩｇＭ型抗体認識抗原の吸着材 | |
| JP2014529330A (ja) | 単一ユニットクロマトグラフィー抗体精製 | |
| Shehzad et al. | A comprehensive review on preparation of pure immunoglobulins |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FA92 | Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted) |
Effective date: 20200918 |