RU2015156509A - Экспрессионный плазмидный лентивирусный вектор для гетерологической экспрессии рекомбинантного человеческого белка cd44 - Google Patents
Экспрессионный плазмидный лентивирусный вектор для гетерологической экспрессии рекомбинантного человеческого белка cd44 Download PDFInfo
- Publication number
- RU2015156509A RU2015156509A RU2015156509A RU2015156509A RU2015156509A RU 2015156509 A RU2015156509 A RU 2015156509A RU 2015156509 A RU2015156509 A RU 2015156509A RU 2015156509 A RU2015156509 A RU 2015156509A RU 2015156509 A RU2015156509 A RU 2015156509A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- expression
- sequence
- cells
- protein
- recombinant human
- Prior art date
Links
- 101000868273 Homo sapiens CD44 antigen Proteins 0.000 title claims 5
- 102100032912 CD44 antigen Human genes 0.000 title claims 3
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 title 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims 4
- 241000723792 Tobacco etch virus Species 0.000 claims 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims 2
- 108010076818 TEV protease Proteins 0.000 claims 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims 2
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 claims 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 claims 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 claims 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims 2
- 108010054624 red fluorescent protein Proteins 0.000 claims 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims 2
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 claims 1
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 claims 1
- 102000010292 Peptide Elongation Factor 1 Human genes 0.000 claims 1
- 108010077524 Peptide Elongation Factor 1 Proteins 0.000 claims 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims 1
- 108091093126 WHP Posttrascriptional Response Element Proteins 0.000 claims 1
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 claims 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 claims 1
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 claims 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims 1
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 claims 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 claims 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 claims 1
- 102000048851 human CD44 Human genes 0.000 claims 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 claims 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 claims 1
- 230000001124 posttranscriptional effect Effects 0.000 claims 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims 1
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 claims 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70585—CD44
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/86—Viral vectors
- C12N15/867—Retroviral vectors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
- C12N5/12—Fused cells, e.g. hybridomas
- C12N5/16—Animal cells
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Virology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Claims (11)
1. Экспрессионный плазмидный лентивирусный вектор для гетерологичной экспрессии рекомбинантного человеческого белка CD44 в клетках млекопитающих, характеризующийся тем, что он включает промоторный регион фактора элонгациии трансляции 1 человека, обеспечивающий высокий уровень продукции мРНК, последовательность внеклеточного домена рецептора CD44, участок распознавания и расщепления протеазой TEV (tobacco etch virus), последовательность гена tagRFP - красного флуоресцентного белка, позволяющего отсортировать только клетки содержащие вставки целевой последовательности.
2. Плазмидный лентивирусный ДНК вектор по п. 1, характеризующийся тем, что полная последовательность встраиваемого в хромосому клетки фрагмента включает в себя следующие элементы:
5' и 3' LTR - длинные концевые повторы, последовательности используемые вирусом для встраивания собственного генома в геном хозяина, путем гомологичной рекомбинации;
центральный полипуриновый тракт (сРРТ) обеспечивает проникновение целевой последовательности в ядра митотически неактивных клеток;
посттранскрипционный регуляторый элемент (WPRE) - регуляторная область усиливающая экспрессию целевой последовательности;
Козак - консенсусная последовательность, необходимая для посадки рибосом и инициации трансляции мРНК;
CD44 - последовательность внеклеточного домена CD44;
TEV - сайт расщепления протеазой TEV (tobacco etch virus);
tagRFP - красный флуоресцентный белок, выступает в качестве селективного маркера;
НТ - последовательность, включающая 10 остатков гистидина, необходимая для хроматографической очистки полученного белка.
3. Плазмидный лентивирусный ДНК вектор по п. 1 или 2, характеризующийся тем, что клетки млекопитающего представляют собой клетки HEK293.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015156509A RU2646111C2 (ru) | 2015-12-29 | 2015-12-29 | Экспрессионный плазмидный лентивирусный вектор для гетерологической экспрессии рекомбинантного человеческого белка cd44 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015156509A RU2646111C2 (ru) | 2015-12-29 | 2015-12-29 | Экспрессионный плазмидный лентивирусный вектор для гетерологической экспрессии рекомбинантного человеческого белка cd44 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2015156509A true RU2015156509A (ru) | 2017-07-05 |
| RU2646111C2 RU2646111C2 (ru) | 2018-03-01 |
Family
ID=59309568
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015156509A RU2646111C2 (ru) | 2015-12-29 | 2015-12-29 | Экспрессионный плазмидный лентивирусный вектор для гетерологической экспрессии рекомбинантного человеческого белка cd44 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2646111C2 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2707535C2 (ru) * | 2017-12-28 | 2019-11-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук (ИБХ РАН) | Генетическая конструкция, кодирующая структуру т-клеточного химерного рецептора на основе одноцепочечных vhh-антител, специфичных опухолевому рецептору cd47, для нацеленной иммунотерапии злокачественных новообразований |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6051427A (en) * | 1993-06-11 | 2000-04-18 | Cell Genesys, Inc. | Method for production of high titer virus and high efficiency retroviral mediated transduction of mammalian cells |
| JPH07313187A (ja) * | 1994-05-24 | 1995-12-05 | Sagami Chem Res Center | 抗体作製法 |
| US6071743A (en) * | 1997-06-02 | 2000-06-06 | Subsidiary No. 3, Inc. | Compositions and methods for inhibiting human immunodeficiency virus infection by down-regulating human cellular genes |
| KR20040054699A (ko) * | 2001-10-02 | 2004-06-25 | 엥스띠뛰 끌레이톤 드 라 러쉐르쉬 | 제한된 발현의 렌티바이러스 벡터 및 이의 적용과 관련된방법 및 조성물 |
| US20130029346A1 (en) * | 2011-07-30 | 2013-01-31 | Rutgers, The State University Of New Jersey | Vector and screening assay for cd44 expressing carcinomas |
| RU2488633C1 (ru) * | 2011-11-16 | 2013-07-27 | Общество с ограниченной ответственностью "Лаборатория медицинской биотехнологии" (ООО "ЛМБТ") | ЭКСПРЕССИОННЫЙ ПЛАЗМИДНЫЙ ВЕКТОР ДЛЯ ГЕТЕРОЛОГИЧНОЙ ЭКСПРЕССИИ РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ, ВЫСОКОЧАСТОТНОЙ ИНТЕГРАЦИИ И УСИЛЕННОЙ АМПЛИФИКАЦИИ ЭКСПРЕССИОННОЙ КАССЕТЫ В КЛЕТКАХ МЛЕКОПИТАЮЩИХ, БИЦИСТРОННАЯ мРНК, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СТАБИЛЬНЫХ ЛИНИЙ ПРОДУЦЕНТОВ РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ УКАЗАННОГО ВЕКТОРА, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ |
-
2015
- 2015-12-29 RU RU2015156509A patent/RU2646111C2/ru active
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2707535C2 (ru) * | 2017-12-28 | 2019-11-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук (ИБХ РАН) | Генетическая конструкция, кодирующая структуру т-клеточного химерного рецептора на основе одноцепочечных vhh-антител, специфичных опухолевому рецептору cd47, для нацеленной иммунотерапии злокачественных новообразований |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2646111C2 (ru) | 2018-03-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107513531B (zh) | 用于内源性过表达lncRNA-XIST的gRNA靶点序列及其应用 | |
| AU2015286820A8 (en) | Stabilization of poly(A) sequence encoding DNA sequences | |
| WO2013151670A3 (en) | Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins | |
| MX2020005282A (es) | Vector para la produccion de particulas aav. | |
| EA201791343A1 (ru) | Композиции и способы для конструирования вирусного генома in vitro | |
| WO2015155686A3 (en) | Methods and compositions for rna-directed repression of transcription using crispr-associated genes | |
| WO2013163263A3 (en) | Methods for sorting nucleic acids and multiplexed preparative in vitro cloning | |
| CN108004270B (zh) | 利用双荧光素酶报告基因检测鸭IFN-β启动子活性的方法 | |
| EP3041940B1 (en) | Rna based method to obtain stably integrated retroviral vectors | |
| RU2018118204A (ru) | Улучшенные эукариотические клетки для получения белка и способы их получения | |
| RU2017121232A (ru) | Плазмиды и способ получения вирусных частиц | |
| Chu et al. | Characterisation and function of TRIM23 in grass carp (Ctenopharyngodon idella) | |
| RU2015156509A (ru) | Экспрессионный плазмидный лентивирусный вектор для гетерологической экспрессии рекомбинантного человеческого белка cd44 | |
| RU2015156511A (ru) | Экспрессионный плазмидный лентивирусный вектор для гетерологической экспрессии рекомбинантного человеческого белка cd47 | |
| CN106995821B (zh) | Jurkat-KI-R5细胞系及其构建方法和应用 | |
| Ueda | Retrotransposon-derived transcripts and their functions in immunity and disease | |
| Schouest et al. | Maintenance of AP-2-dependent functional activities of Nef restricts pathways of immune escape from CD8 T lymphocyte responses | |
| EA201791156A1 (ru) | Последовательности олигонуклеотидов для применения в конструировании путей | |
| RU2015114487A (ru) | Композиции и способы придания маису устойчивости к кукурузному жуку i | |
| RU2014106295A (ru) | Рекомбинантная вакцина вируса лейкемии кошек, содержащая оптимизированный ген оболочки вируса лейкемии кошек | |
| RU2015150381A (ru) | Генетическая (рекомбинантная) ДНК-конструкция, кодирующая кодон-оптимизированный ген гликопротеина (белка G) вируса бешенства с консенсусной аминокислотной последовательностью, которая составлена с учетом аминокислотных последовательностей белка G, выделяемого из штаммов вируса бешенства, циркулирующих на территории РФ | |
| Pecori et al. | Employing RNA editing to engineer personalized tumor-specific neoantigens (editopes) | |
| Li et al. | RBM39 shapes innate immunity through transcriptional and splicing control of key factors of the interferon response | |
| Karpova et al. | Capsid protein of potato virus S can suppress systemic RNA-silencing | |
| RU2012100085A (ru) | РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДА pAd-SN, КОДИРУЮЩАЯ БЕЛКИ SOX2 И NANOG ЧЕЛОВЕКА, ЯВЛЯЮЩАЯСЯ ОСНОВОЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ВИРУЛЕНТНЫХ АДЕНОВИРУСОВ, ПРЕДНАЗНАЧЕННЫХ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ИНДУЦИРОВАННЫХ ПЛЮРИПОТЕНТНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| QB4A | Licence on use of patent |
Free format text: LICENCE FORMERLY AGREED ON 20210628 Effective date: 20210628 |