[go: up one dir, main page]

RU2013113407A - Способы улавливания и секвенирования нуклеиновых кислот - Google Patents

Способы улавливания и секвенирования нуклеиновых кислот Download PDF

Info

Publication number
RU2013113407A
RU2013113407A RU2013113407/10A RU2013113407A RU2013113407A RU 2013113407 A RU2013113407 A RU 2013113407A RU 2013113407/10 A RU2013113407/10 A RU 2013113407/10A RU 2013113407 A RU2013113407 A RU 2013113407A RU 2013113407 A RU2013113407 A RU 2013113407A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
nucleic acid
polymerase
genomic dna
solid support
primer
Prior art date
Application number
RU2013113407/10A
Other languages
English (en)
Inventor
Сомасекар СЕШАГИРИ
Original Assignee
Дженентек, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Дженентек, Инк. filed Critical Дженентек, Инк.
Publication of RU2013113407A publication Critical patent/RU2013113407A/ru

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6869Methods for sequencing
    • C12Q1/6874Methods for sequencing involving nucleic acid arrays, e.g. sequencing by hybridisation
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
    • C12N15/1034Isolating an individual clone by screening libraries
    • C12N15/1072Differential gene expression library synthesis, e.g. subtracted libraries, differential screening
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6813Hybridisation assays
    • C12Q1/6834Enzymatic or biochemical coupling of nucleic acids to a solid phase

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Computational Biology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

1. Способ улавливания и секвенирования молекулы искомой нуклеиновой кислоты, включающий в себя:(a) приведение твердой подложки в контакт со смесью нуклеиновых кислот, содержащей молекулу искомой нуклеиновой кислоты, в условиях гибридизации, при которых указанная молекула искомой нуклеиновой кислоты образует специфический гибридизационный комплекс с праймером, иммобилизованным на указанной твердой подложке в конфигурации, совместимой с его активностью в качестве праймера;(b) отделение несвязанных нуклеиновых кислот и нуклеиновых кислот, связанных неспецифически, от твердой подложки;(c) приведение твердой подложки в контакт с полимеразой и нуклеотидами в условиях полимеризации; и(d) определение последовательности нуклеиновой кислоты молекулы искомой нуклеиновой кислоты посредством детектирования полимеризации нуклеиновой кислоты от иммобилизованного праймера, осуществляемой указанной полимеразой с использованием молекулы искомой нуклеиновой кислоты в качестве матрицы.2. Способ по п.1, где молекула искомой нуклеиновой кислоты происходит из участка геномной ДНК.3. Способ по п.2, где искомая нуклеиновая кислота содержит весь экзон или его часть.4. Способ по п.1, где молекула искомой нуклеиновой кислоты представляет собой РНК, полимераза представляет собой обратную транскриптазу, а праймер содержит 3'-поли-T-последовательность.5. Способ по п.1, где молекула искомой нуклеиновой кислоты представляет собой ДНК, а полимераза представляет собой ДНК-полимеразу.6. Способ по п.1, где нуклеотиды являются мечеными по их концевым фосфатам.7. Способ по п.6, где полимераза является меченой донором FRET, а нуклеотиды являются ме

Claims (16)

1. Способ улавливания и секвенирования молекулы искомой нуклеиновой кислоты, включающий в себя:
(a) приведение твердой подложки в контакт со смесью нуклеиновых кислот, содержащей молекулу искомой нуклеиновой кислоты, в условиях гибридизации, при которых указанная молекула искомой нуклеиновой кислоты образует специфический гибридизационный комплекс с праймером, иммобилизованным на указанной твердой подложке в конфигурации, совместимой с его активностью в качестве праймера;
(b) отделение несвязанных нуклеиновых кислот и нуклеиновых кислот, связанных неспецифически, от твердой подложки;
(c) приведение твердой подложки в контакт с полимеразой и нуклеотидами в условиях полимеризации; и
(d) определение последовательности нуклеиновой кислоты молекулы искомой нуклеиновой кислоты посредством детектирования полимеризации нуклеиновой кислоты от иммобилизованного праймера, осуществляемой указанной полимеразой с использованием молекулы искомой нуклеиновой кислоты в качестве матрицы.
2. Способ по п.1, где молекула искомой нуклеиновой кислоты происходит из участка геномной ДНК.
3. Способ по п.2, где искомая нуклеиновая кислота содержит весь экзон или его часть.
4. Способ по п.1, где молекула искомой нуклеиновой кислоты представляет собой РНК, полимераза представляет собой обратную транскриптазу, а праймер содержит 3'-поли-T-последовательность.
5. Способ по п.1, где молекула искомой нуклеиновой кислоты представляет собой ДНК, а полимераза представляет собой ДНК-полимеразу.
6. Способ по п.1, где нуклеотиды являются мечеными по их концевым фосфатам.
7. Способ по п.6, где полимераза является меченой донором FRET, а нуклеотиды являются мечеными акцептором FRET.
8. Способ по п.7, где донор FRET представляет собой флуоресцентную наночастицу.
9. Способ определения статуса метилирования фрагмента геномной ДНК, причем указанный способ включает:
(a) иммобилизацию фрагмента геномной ДНК на твердой подложке;
(b) определение последовательности нуклеиновой кислоты иммобилизованного фрагмента геномной ДНК на твердой подложке посредством детектирования полимеризации нуклеиновой кислоты, осуществляемой полимеразой с использованием иммобилизованного фрагмента геномной ДНК в качестве матрицы;
(c) обработку иммобилизованного фрагмента геномной ДНК бисульфитом;
(d) определение последовательности нуклеиновой кислоты иммобилизованного, обработанного бисульфитом, фрагмента геномной ДНК на твердой подложке посредством детектирования полимеризации нуклеиновой кислоты, осуществляемой полимеразой с использованием иммобилизованного, обработанного бисульфитом, фрагмента геномной ДНК в качестве матрицы;
(e) сравнение последовательности нуклеиновой кислоты, определенной на стадии (b), с последовательностью, определенной на стадии (d), где преобразование остатка цитозина в фрагменте геномной ДНК свидетельствует о том, что в фрагменте геномной ДНК до его обработки бисульфитом указанный остаток был неметилированным, а отсутствие преобразования остатка цитозина в фрагменте геномной ДНК свидетельствует о том, что в фрагменте геномной ДНК до его обработки бисульфитом указанный остаток был метилированным.
10. Способ по п.9, где фрагмент геномной ДНК иммобилизован на твердой подложке посредством адаптера.
11. Способ по п.10, где адаптер содержит сайт связывания праймера и где цитозины в сайте связывания праймера являются защищенными.
12. Способ по п.11, где полимераза стадии (b) и/или (d) полимеризует цепь нуклеиновой кислоты от праймера, подвергнутого отжигу с сайтом связывания праймера.
13. Способ по п.9, где полимеризацию нуклеиновой кислоты стадии (b) и/или (d) детектируют посредством детектирования включения меченых нуклеотидов.
14. Способ по п.13, где меченые нуклеотиды являются мечеными по их концевым фосфатам.
15. Способ по п.14, где полимераза стадии (b) и/или (d) является меченой донором FRET, а нуклеотиды являются мечеными акцептором FRET.
16. Способ по п.15, где донор FRET представляет собой флуоресцентную наночастицу.
RU2013113407/10A 2010-08-27 2011-08-25 Способы улавливания и секвенирования нуклеиновых кислот RU2013113407A (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US40235010P 2010-08-27 2010-08-27
US61/402,350 2010-08-27
PCT/US2011/049151 WO2012027572A2 (en) 2010-08-27 2011-08-25 Methods for nucleic acid capture and sequencing

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2013113407A true RU2013113407A (ru) 2014-10-10

Family

ID=44545975

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2013113407/10A RU2013113407A (ru) 2010-08-27 2011-08-25 Способы улавливания и секвенирования нуклеиновых кислот

Country Status (10)

Country Link
US (1) US20130324419A1 (ru)
EP (1) EP2609214A2 (ru)
JP (1) JP2013535986A (ru)
KR (1) KR20130101031A (ru)
CN (1) CN103080338A (ru)
BR (1) BR112013002299A2 (ru)
CA (1) CA2803693A1 (ru)
MX (1) MX2013001799A (ru)
RU (1) RU2013113407A (ru)
WO (1) WO2012027572A2 (ru)

Families Citing this family (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9074251B2 (en) 2011-02-10 2015-07-07 Illumina, Inc. Linking sequence reads using paired code tags
EP2670894B1 (en) 2011-02-02 2017-11-29 University Of Washington Through Its Center For Commercialization Massively parallel continguity mapping
NO2694769T3 (ru) 2012-03-06 2018-03-03
EP3243937A1 (en) * 2012-07-17 2017-11-15 Counsyl, Inc. System and methods for detecting genetic variation
US9683230B2 (en) 2013-01-09 2017-06-20 Illumina Cambridge Limited Sample preparation on a solid support
EP3919617A1 (en) 2013-03-13 2021-12-08 Illumina, Inc. Methods and compositions for nucleic acid sequencing
CN106414765A (zh) 2013-12-20 2017-02-15 Illumina公司 在片段化的基因组dna样品中保留基因组连接信息
LT3207134T (lt) * 2014-10-17 2019-09-10 Illumina Cambridge Limited Sukibimą išsauganti transpozicija
JP6808617B2 (ja) * 2014-10-17 2021-01-06 イルミナ ケンブリッジ リミテッド 連続性を維持した転位
WO2016100049A1 (en) 2014-12-18 2016-06-23 Edico Genome Corporation Chemically-sensitive field effect transistor
US9857328B2 (en) 2014-12-18 2018-01-02 Agilome, Inc. Chemically-sensitive field effect transistors, systems and methods for manufacturing and using the same
US9618474B2 (en) 2014-12-18 2017-04-11 Edico Genome, Inc. Graphene FET devices, systems, and methods of using the same for sequencing nucleic acids
US10006910B2 (en) 2014-12-18 2018-06-26 Agilome, Inc. Chemically-sensitive field effect transistors, systems, and methods for manufacturing and using the same
US9859394B2 (en) 2014-12-18 2018-01-02 Agilome, Inc. Graphene FET devices, systems, and methods of using the same for sequencing nucleic acids
US10020300B2 (en) 2014-12-18 2018-07-10 Agilome, Inc. Graphene FET devices, systems, and methods of using the same for sequencing nucleic acids
US10395759B2 (en) * 2015-05-18 2019-08-27 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods and systems for copy number variant detection
US10811539B2 (en) 2016-05-16 2020-10-20 Nanomedical Diagnostics, Inc. Graphene FET devices, systems, and methods of using the same for sequencing nucleic acids
EP3650553B1 (en) * 2018-11-07 2023-07-12 Siemens Healthcare GmbH Method for detection of specific nucleic acids

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NO165894C (no) * 1988-05-24 1991-04-24 Gunnar Paulsen Analysemetode for gener.
US6982146B1 (en) * 1999-08-30 2006-01-03 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services High speed parallel molecular nucleic acid sequencing
US20080194413A1 (en) 2006-04-24 2008-08-14 Albert Thomas J Use of microarrays for genomic representation selection
WO2008096146A1 (en) * 2007-02-07 2008-08-14 Solexa Limited Preparation of templates for methylation analysis
WO2008103848A1 (en) * 2007-02-21 2008-08-28 Invitrogen Corporation Materials and methods for single molecule nucleic acid sequencing
CN101802223A (zh) * 2007-08-15 2010-08-11 香港大学 用于高通量亚硫酸氢盐dna-测序的方法和组合物及其用途
WO2010002939A2 (en) 2008-06-30 2010-01-07 Life Technologies Corporation Methods for real time single molecule sequencing
US8795961B2 (en) * 2008-09-05 2014-08-05 Pacific Biosciences Of California, Inc. Preparations, compositions, and methods for nucleic acid sequencing
WO2010085343A1 (en) 2009-01-23 2010-07-29 Cold Spring Harbor Laboratory Methods and arrays for profiling dna methylation

Also Published As

Publication number Publication date
CA2803693A1 (en) 2012-03-01
JP2013535986A (ja) 2013-09-19
KR20130101031A (ko) 2013-09-12
WO2012027572A3 (en) 2012-06-07
US20130324419A1 (en) 2013-12-05
MX2013001799A (es) 2013-05-20
BR112013002299A2 (pt) 2016-05-24
WO2012027572A2 (en) 2012-03-01
EP2609214A2 (en) 2013-07-03
CN103080338A (zh) 2013-05-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2013113407A (ru) Способы улавливания и секвенирования нуклеиновых кислот
JP5986572B2 (ja) 固定化プライマーを使用した標的dnaの直接的な捕捉、増幅、および配列決定
US8329394B2 (en) Methods and substances for isolation and detection of small polynucleotides
US20140296094A1 (en) Systems and methods for detection of genomic copy number changes
CN103806111A (zh) 高通量测序文库的构建方法及其应用
CN101067156A (zh) 一种基于选择性探针的多重pcr方法及其应用
JP2016537990A (ja) 核酸プローブ及びゲノム断片検出方法
US20100273164A1 (en) Targeted and Whole-Genome Technologies to Profile DNA Cytosine Methylation
JP2016539624A5 (ru)
JP2016512437A (ja) 多重メチル化特異的増幅システムおよび方法
RU2018122965A (ru) Улучшенный способ и набор для определения тяжести и прогрессирования периодонтального заболевания
JP2015533281A (ja) 複数の異なる核酸標的配列を同時に増幅する方法
RU2014126423A (ru) Высокопроизводительный анализ однонуклеотидных полиморфизмов
GB2612412A (en) Systems and methods for targeted nucleic acid capture
WO2012083481A1 (zh) 用于hpa基因分型的方法及所用引物
JPWO2021087275A5 (ru)
CN107109478B (zh) 获得配对末端测序信息的方法
WO2008093336A3 (en) Genome determination assay
ES2421459B1 (es) Cebadores especiales para la reacción en cadena de la polimerasa
Qiu et al. Mitochondrial single nucleotide polymorphism genotyping by matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry using cleavable biotinylated dideoxynucleotides
CN111073958A (zh) 引物探针组合、试剂盒及其用于检测actn3基因突变的应用
RU2014107505A (ru) Генетический маркер для диагностики деменции с тельцами леви
RU2006134100A (ru) Способ проведения аллель-специфичной пцр для генотипирования крупного рогатого скота по аллелям а и в гена каппа-казеина
RU2014113962A (ru) Набор олигонуклеотидных праймеров и зондов для генотипирования полиморфных локусов днк, ассоциированных с риском развития спорадической формы болезни альцгеймера в российских популяциях
RU2015151954A (ru) Способ предсказания рецидива рака желудка

Legal Events

Date Code Title Description
FA92 Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted)

Effective date: 20160608