[go: up one dir, main page]

RU2007137972A - Измерение активности тромбина в цельной крови - Google Patents

Измерение активности тромбина в цельной крови Download PDF

Info

Publication number
RU2007137972A
RU2007137972A RU2007137972/15A RU2007137972A RU2007137972A RU 2007137972 A RU2007137972 A RU 2007137972A RU 2007137972/15 A RU2007137972/15 A RU 2007137972/15A RU 2007137972 A RU2007137972 A RU 2007137972A RU 2007137972 A RU2007137972 A RU 2007137972A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
thrombin
sample
blood
specified
blood sample
Prior art date
Application number
RU2007137972/15A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2422835C2 (ru
Inventor
Хендрик Коенрад ХЕМКЕР (NL)
Хендрик Коенрад ХЕМКЕР
Сьюзет БЕГУИН (NL)
Сьюзет БЕГУИН
Раед АЛЬ-ДИЕРИ (NL)
Раед АЛЬ-ДИЕРИ
Роберт ВАГЕНВУРД (NL)
Роберт ВАГЕНВУРД
Сабастиан НИЖУИС (NL)
Сабастиан НИЖУИС
Питер ГИСЕН (NL)
Питер ГИСЕН
Original Assignee
Синапс Б.В. (Nl)
Синапс Б.В.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Синапс Б.В. (Nl), Синапс Б.В. filed Critical Синапс Б.В. (Nl)
Publication of RU2007137972A publication Critical patent/RU2007137972A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2422835C2 publication Critical patent/RU2422835C2/ru

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/86Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood coagulating time or factors, or their receptors
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/56Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving blood clotting factors, e.g. involving thrombin, thromboplastin, fibrinogen
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/90Enzymes; Proenzymes
    • G01N2333/914Hydrolases (3)
    • G01N2333/948Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • G01N2333/974Thrombin

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)

Abstract

1. Способ in vitro определения активности тромбина в образце, причем образец представляет собой образец крови, а измерение выработки тромбина включает следующие стадии: ! приведение слоя указанного образца в контакт с флюорогенным субстратом тромбина, при этом толщина указанного слоя составляет от 0,05 до 5 мм, а площадь поверхности составляет от 10 до 500 мм2; ! обеспечение условий для выработки тромбина в указанном образце; ! измерение флюоресценции, испускаемой с поверхности указанного слоя флюоресцентной группой, которую высвобождает флюорогенный субстрат в результате ферментативного воздействия вырабатываемого тромбина на указанный флюорогенный субстрат. ! 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что концентрацию тромбина, выработанного в ходе анализа, определяют как функцию измеренной флюоресценции от высвобождаемой флуоресцентной группы. ! 3. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что указанный образец цельной крови разбавляют в пределах до максимум 10 раз. ! 4. Способ по п.3, отличающийся тем, что толщина слоя указанного образца составляет примерно 2 мм или меньше. ! 5. Способ по п.4, отличающийся тем, что при проведении анализа указанный образец крови помещают в лунку планшета, которая также содержит решетку с размером отверстий от 50 до 500 мкм. ! 6. Способ по п.5, отличающийся тем, что при проведении анализа указанный образец крови помещают в лунку планшета, которая также содержит микрогранулы. ! 7. Способ по п.6, отличающийся тем, что при определении активности тромбина лунку, содержащую образец крови, накрывают сверху. ! 8. Способ по п.7, отличающийся тем, что к флюорогенному субстрату тромбина добавляют флуорофор, причем относитель�

Claims (29)

1. Способ in vitro определения активности тромбина в образце, причем образец представляет собой образец крови, а измерение выработки тромбина включает следующие стадии:
приведение слоя указанного образца в контакт с флюорогенным субстратом тромбина, при этом толщина указанного слоя составляет от 0,05 до 5 мм, а площадь поверхности составляет от 10 до 500 мм2;
обеспечение условий для выработки тромбина в указанном образце;
измерение флюоресценции, испускаемой с поверхности указанного слоя флюоресцентной группой, которую высвобождает флюорогенный субстрат в результате ферментативного воздействия вырабатываемого тромбина на указанный флюорогенный субстрат.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что концентрацию тромбина, выработанного в ходе анализа, определяют как функцию измеренной флюоресценции от высвобождаемой флуоресцентной группы.
3. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что указанный образец цельной крови разбавляют в пределах до максимум 10 раз.
4. Способ по п.3, отличающийся тем, что толщина слоя указанного образца составляет примерно 2 мм или меньше.
5. Способ по п.4, отличающийся тем, что при проведении анализа указанный образец крови помещают в лунку планшета, которая также содержит решетку с размером отверстий от 50 до 500 мкм.
6. Способ по п.5, отличающийся тем, что при проведении анализа указанный образец крови помещают в лунку планшета, которая также содержит микрогранулы.
7. Способ по п.6, отличающийся тем, что при определении активности тромбина лунку, содержащую образец крови, накрывают сверху.
8. Способ по п.7, отличающийся тем, что к флюорогенному субстрату тромбина добавляют флуорофор, причем относительная доля добавленного флюорофора составляет от 1 до 10% количества флуоресцентной молекулы, связанной с субстратом тромбина.
9. Способ по п.8, отличающийся тем, что количество субстрата тромбина, добавляемого к образцу, составляет от 50 до 1000 мкМ.
10. Способ по п.8, отличающийся тем, что флюорогенный субстрат представляет собой синтетический субстрат тромбина, соединенный с флуоресцентной молекулой.
11. Способ по п.10, отличающийся тем, что указанный субстрат тромбина селективно гидролизуется тромбином и обладает умеренной аффинностью связывания с тромбином и низкой кинетической константой.
12. Способ по п.11, отличающийся тем, что флюорогенный субстрат представляет собой олигопептид, последовательность которого содержит 2-30 остатков аминокислот и который соединен с флуоресцентной молекулой.
13. Способ по п.12, отличающийся тем, что указанный олигопептид на своем конце содержит лизин или аргинин для соединения с флуоресцентной молекулой.
14. Способ по п.13, отличающийся тем, что указанная флуоресцентная молекула представляет собой АМС (7-амино-4-метилкумарин).
15. Способ согласно любому из пп.1 2, 4-14, отличающийся тем, что указанная лунка дополнительно содержит гель, возможно, содержащий ионы кальция, причем указанный гель не вызывает разбавления крови образца.
16. Способ по п.15, отличающийся тем, что тканевой фактор и ионы кальция добавляют к образцу крови в количествах, обеспечивающих возможность выработки тромбина.
17. Способ по п.15, отличающийся тем, что указанный образец крови представляет собой образец цельной крови.
18. Способ по п.15, отличающийся тем, что указанный образец крови представляет собой образец плазмы, в частности, богатой тромбоцитами плазмы (PRP).
19. Способ согласно п.17, отличающийся тем, что указанный образец цельной крови представляет собой кровь, обработанную цитратом.
20. Способ согласно любому из пп.1-2, 4-14, 16-19, который применяют для обнаружения или мониторинга гомеостатического или тромботического заболевания.
21. Способ согласно п.20, который применяют для обнаружения или мониторинга воздействия определенного вещества (веществ) на активность тромбина в образце цельной крови, причем указанное определенное вещество (вещества) добавляют в образец, который предстоит анализировать, или добавляют во время выработки тромбина.
22. Способ по п.20, который применяют для мониторинга воздействия факторов свертывания крови или препаратов-коагулянтов.
23. Способ по п.20, который применяют для скрининга веществ с целью определить их способность воздействовать на выработку тромбина.
24. Способ по п.20, который применяют для измерения Потенциала Эндогенного Тромбина (ПЭТ) в образце цельной крови.
25. Способ по п.21, который применяют для измерения времени достижения пиковой концентрации тромбина.
26. Способ по п.22, который применяют для измерения времени образования сгустка крови.
27. Способ по п.23, который применяют для измерения уровня пиковой концентрации выработанного тромбина.
28. Способ по п.24, который включает стадию калибровки.
29. Набор для осуществления способа согласно любому из пп.1-21, который содержит флуорогенный субстрат тромбина, тканевой фактор и ионы кальция для обеспечения выработки тромбина, возможно, решетку или микрогранулы, которые предотвращают уплотнение сгустка крови и способствуют диспергированию цельной крови, возможно, гель, возможно, содержащий ионы кальция.
RU2007137972/15A 2005-04-29 2006-04-26 Измерение активности тромбина в цельной крови RU2422835C2 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP05290952.0 2005-04-29
EP05290952A EP1717588A1 (en) 2005-04-29 2005-04-29 Measuring thrombin activity in whole blood

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2007137972A true RU2007137972A (ru) 2009-06-10
RU2422835C2 RU2422835C2 (ru) 2011-06-27

Family

ID=34978991

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2007137972/15A RU2422835C2 (ru) 2005-04-29 2006-04-26 Измерение активности тромбина в цельной крови

Country Status (16)

Country Link
US (1) US8916356B2 (ru)
EP (2) EP1717588A1 (ru)
JP (1) JP4897794B2 (ru)
KR (1) KR20080025043A (ru)
CN (1) CN101171519A (ru)
AR (1) AR053371A1 (ru)
AT (1) ATE483984T1 (ru)
AU (1) AU2006243283B2 (ru)
BR (1) BRPI0612967B8 (ru)
CA (1) CA2606906C (ru)
DE (1) DE602006017350D1 (ru)
ES (1) ES2354086T3 (ru)
MX (1) MX2007013497A (ru)
RU (1) RU2422835C2 (ru)
TW (1) TW200716982A (ru)
WO (1) WO2006117246A1 (ru)

Families Citing this family (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2029768B1 (en) * 2006-06-06 2013-02-13 Thrombinoscope B.V. Method of determining thrombin activity in plasma
ATE493505T1 (de) * 2006-11-02 2011-01-15 Thrombinoscope B V Verfahren zur messung der konzentration transienter proteolytischer aktivität in zellen enthaltenden zusammengesetzten biologischen medien
ATE516504T1 (de) 2008-02-07 2011-07-15 Synapse Bv Um den einfluss von störfaktoren korrigierte messung des zeitlichen verlaufs einer enzymatischen aktivität bei der reaktion eines enzyms mit einem substrat
FR2933496B1 (fr) * 2008-07-02 2012-10-05 Lfb Biotechnologies Procede de mesure du taux de facteur vii active dans un echantillon
EP2316035A2 (en) * 2008-07-16 2011-05-04 Radiometer Medical ApS Thrombin substrate and assay for determining the level of bioactive thrombin in a sample
US8828730B2 (en) 2008-08-05 2014-09-09 Synapse B.V. Method and assembly for measuring thrombin generation in plasma
JP5582745B2 (ja) * 2009-09-09 2014-09-03 メタウォーター株式会社 化学発光反応の時間計測による被検出物質の濃度を測定する方法およびそれに使用するキット
US8293493B2 (en) * 2010-01-27 2012-10-23 Adventist Health System/Sunbelt, Inc. Thrombin generation determination method
CN102798598A (zh) * 2011-05-25 2012-11-28 兆科药业(合肥)有限公司 一种检测磷脂依赖性凝血因子x激活物酶活性的方法
RU2518247C2 (ru) * 2011-07-26 2014-06-10 Общество с ограниченной ответственностью "ГемаКор Лабс" (ООО "ГемаКор Лабс") Способ определения пространственно-временного распределения активности протеолитического фермента в гетерогенной системе, устройство для реализации указанного способа и способ диагностики нарушений системы гемостаза по изменению пространственно-временного распределения активности протеолитического фермента в гетерогенной системе
EP2748616B1 (en) 2011-08-23 2018-08-08 Synapse B.V. Thermostable inhibitors of activation of the blood clotting system through contact with foreign surfaces.
CA2878568A1 (en) * 2011-12-31 2013-04-07 The University Of Vermont And State Agriculture College Methods for dynamic visualization of clinical parameters over time
KR101383333B1 (ko) * 2012-01-13 2014-04-10 연세대학교 산학협력단 트롬빈 생성 측정 방법
EP2677037B1 (en) 2012-06-21 2016-04-13 Synapse B.V. Simultaneous measurement of thrombin generation and clot strength in plasma and whole blood
US10266871B2 (en) 2012-12-18 2019-04-23 Daiichi Sankyo Company, Limited Measurement method for thrombin production
CN103185710B (zh) * 2013-02-04 2015-01-07 中国医学科学院输血研究所 人静脉注射免疫球蛋白中活化凝血因子ⅺ检测方法
CN104977259A (zh) * 2014-04-04 2015-10-14 天津药物研究院 一种基于高通量检测的血小板聚集测定方法及在药物筛选中的应用
US9986941B2 (en) 2014-06-26 2018-06-05 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and apparatus for rapid monitoring of hemostatic state
CN104459165B (zh) * 2014-12-10 2016-07-06 中国医学科学院输血研究所 一种检测人凝血酶原复合物抗凝能力的方法
US10633645B2 (en) * 2015-12-30 2020-04-28 General Electric Company Calcium controlled activation of platelets via electrical stimulation
EP3388838B1 (en) 2016-01-29 2022-02-16 Sony Group Corporation Blood coagulation analysis
EP3363912B1 (en) 2017-02-17 2020-10-28 Synapse B.V. Self-calibrated assay for determining proteolytic enzyme generation, dedicated means and uses thereof
CN107102125B (zh) * 2017-04-17 2019-07-09 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 血栓弹力图仪的校准方法
RU2709341C1 (ru) * 2019-04-19 2019-12-17 федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр профилактической медицины" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ПМ" Минздрава России) Определение циркулирующего тромбина в тесте активации системы комплемента
US20220298539A1 (en) * 2019-07-31 2022-09-22 Tel Hashomer Medical Research Infrastructure And Services Ltd. Methods and kits for identifying thrombus origin and optimizing post-ischemic event treatment
CN110412001B (zh) * 2019-08-01 2022-02-11 武汉塞力斯生物技术有限公司 一种动态监测凝血酶生成能力的试剂盒
JP7218878B2 (ja) * 2019-08-07 2023-02-07 学校法人東京歯科大学 判別方法、蛍光測定装置および検査薬
CN110568117B (zh) * 2019-09-19 2022-03-22 青岛海洋生物医药研究院股份有限公司 一种多靶点抗血栓活性物质的液相色谱-质谱筛选方法
EP4262884A1 (en) 2020-12-21 2023-10-25 Ethicon, Inc Bleeding detection method

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS55164356A (en) * 1979-06-08 1980-12-22 Fuji Photo Film Co Ltd Multi-layer analysis sheet for liquid sample analysis
US5318899A (en) * 1989-06-16 1994-06-07 Cor Therapeutics, Inc. Platelet aggregation inhibitors
JP3368279B2 (ja) 1992-04-27 2003-01-20 ベックマン コールター,インコーポレイティド 血液凝固検定を行うためのテスト物品及び方法
EP1504269B1 (en) * 2002-05-01 2007-07-25 Synapse B.V. Diagnostic test for determining the concentration of transient proteolytic activity in composite biological media

Also Published As

Publication number Publication date
AU2006243283B2 (en) 2011-06-30
BRPI0612967B8 (pt) 2021-07-27
JP4897794B2 (ja) 2012-03-14
AU2006243283A1 (en) 2006-11-09
TW200716982A (en) 2007-05-01
BRPI0612967A2 (pt) 2010-12-14
DE602006017350D1 (de) 2010-11-18
US20090311730A1 (en) 2009-12-17
ATE483984T1 (de) 2010-10-15
RU2422835C2 (ru) 2011-06-27
KR20080025043A (ko) 2008-03-19
EP1875249A1 (en) 2008-01-09
CA2606906A1 (en) 2006-11-09
US8916356B2 (en) 2014-12-23
MX2007013497A (es) 2008-04-04
CA2606906C (en) 2013-03-19
ES2354086T3 (es) 2011-03-09
EP1875249B1 (en) 2010-10-06
EP1717588A1 (en) 2006-11-02
WO2006117246A1 (en) 2006-11-09
JP2008539400A (ja) 2008-11-13
CN101171519A (zh) 2008-04-30
AR053371A1 (es) 2007-05-02
BRPI0612967B1 (pt) 2021-02-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2007137972A (ru) Измерение активности тромбина в цельной крови
Thompson et al. Fluorescence microscopy of stimulated Zn (II) release from organotypic cultures of mammalian hippocampus using a carbonic anhydrase-based biosensor system
JP2015521738A5 (ru)
CA2347275A1 (en) Method for monitoring proteasome inhibitor drug action
JP2008536475A5 (ru)
Olkowicz et al. Perspectives for angiotensin profiling with liquid chromatography/mass spectrometry to evaluate ACE/ACE2 balance in endothelial dysfunction and vascular pathologies
DE60315151D1 (de) Diagnostischer test zur bestimmung der konzentration einer transienten proteolytischen aktivität in zusammengesetzten biologischen medien
ATE421595T1 (de) Zusammensetzungen und verfahren zum nachweis und zur quantifizierung von cox-2-aktivität und 2- arachidonylglycerin-metaboliten
EA199800493A1 (ru) Анализ крови на соотношение активности фактора v для оценки вероятности заболевания тромбоэмболией
CN115032389A (zh) 一种检测凝血酶及其抑制剂的纸基传感方法
CN104395750B (zh) 测量血液样品中蛋白水解级联的肽降解产物的方法
Hu et al. Bioluminescence imaging of exogenous & endogenous cysteine in vivo with a highly selective probe
Hung et al. Electrochemical impedance spectroscopy for monitoring caspase-3 activity
CN112552289B (zh) Comt的近红外荧光探针底物及其应用
JP2006284389A5 (ru)
CN104807995B (zh) 一种灵敏度高的连续检测法gldh检测试剂
US20210317505A1 (en) Improved detection of anticoagulants in body fluids
Schlagenhauf et al. Non-enzymatic quantification of polyphosphate levels in platelet lysates and releasates
US20080274476A1 (en) Assay Method
Zhu et al. Polyethylene glycol (PEG) gel arrays for differentiating oligopeptide fragments and on-chip protease assays
CN110412001B (zh) 一种动态监测凝血酶生成能力的试剂盒
JP2010508503A (ja) 質量分光によるタンパク質分解処理の分析
Min et al. A peptide microarray-based fluorescent and resonance light scattering assay for screening thrombin inhibitor
Baechle et al. Towards stable diagnostic setups in clinical proteomics: Absolute quantitation of peptide biomarkers using MALDI‐TOF‐MS
JPH09266798A (ja) トロンビン活性の測定法および凝集試薬

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20140427