RU2093570C1 - Способ получения биомассы микроорганизмов - Google Patents
Способ получения биомассы микроорганизмов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2093570C1 RU2093570C1 SU5036550A RU2093570C1 RU 2093570 C1 RU2093570 C1 RU 2093570C1 SU 5036550 A SU5036550 A SU 5036550A RU 2093570 C1 RU2093570 C1 RU 2093570C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- biomass
- hydroxyethyl
- tris
- ammonium salt
- stimulants
- Prior art date
Links
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 title claims abstract description 110
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims description 11
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims abstract description 17
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 10
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 239000000021 stimulant Substances 0.000 claims description 48
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims description 38
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 12
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims description 7
- 239000003324 growth hormone secretagogue Substances 0.000 claims description 5
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 238000005273 aeration Methods 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 239000002131 composite material Substances 0.000 claims description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 2
- -1 parachlorophenyl thioacetic acid Chemical compound 0.000 claims description 2
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical class NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 abstract description 17
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 241000223218 Fusarium Species 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 abstract description 3
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 abstract 2
- 239000002269 analeptic agent Substances 0.000 abstract 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 abstract 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 abstract 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 abstract 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 47
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 37
- GAWIXWVDTYZWAW-UHFFFAOYSA-N C[CH]O Chemical group C[CH]O GAWIXWVDTYZWAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 22
- 125000000954 2-hydroxyethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])O[H] 0.000 description 13
- 241000222128 Candida maltosa Species 0.000 description 13
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 13
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 13
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 12
- YPKLXLYGMAWXDO-UHFFFAOYSA-N 2-(4-chlorophenyl)sulfanylacetic acid Chemical compound OC(=O)CSC1=CC=C(Cl)C=C1 YPKLXLYGMAWXDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 10
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 6
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 6
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 239000007952 growth promoter Substances 0.000 description 5
- GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N (D)-(+)-Pantothenic acid Chemical compound OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(O)=O GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 4
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 4
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 239000007003 mineral medium Substances 0.000 description 4
- LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N pyridoxine Chemical compound CC1=NC=C(CO)C(CO)=C1O LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 4
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 4
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 4
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 4
- 229930191978 Gibberellin Natural products 0.000 description 3
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 3
- 239000003448 gibberellin Substances 0.000 description 3
- IXORZMNAPKEEDV-OBDJNFEBSA-N gibberellin A3 Chemical class C([C@@]1(O)C(=C)C[C@@]2(C1)[C@H]1C(O)=O)C[C@H]2[C@]2(C=C[C@@H]3O)[C@H]1[C@]3(C)C(=O)O2 IXORZMNAPKEEDV-OBDJNFEBSA-N 0.000 description 3
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 3
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 3
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 3
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 241000222178 Candida tropicalis Species 0.000 description 2
- GHOKWGTUZJEAQD-UHFFFAOYSA-N Chick antidermatitis factor Natural products OCC(C)(C)C(O)C(=O)NCCC(O)=O GHOKWGTUZJEAQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 2
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- IXORZMNAPKEEDV-UHFFFAOYSA-N gibberellic acid GA3 Natural products OC(=O)C1C2(C3)CC(=C)C3(O)CCC2C2(C=CC3O)C1C3(C)C(=O)O2 IXORZMNAPKEEDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 2
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 2
- 229910000358 iron sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940099596 manganese sulfate Drugs 0.000 description 2
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 description 2
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 description 2
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229940055726 pantothenic acid Drugs 0.000 description 2
- 235000019161 pantothenic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000011713 pantothenic acid Substances 0.000 description 2
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 235000008160 pyridoxine Nutrition 0.000 description 2
- 239000011677 pyridoxine Substances 0.000 description 2
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 2
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 229940011671 vitamin b6 Drugs 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 229960001763 zinc sulfate Drugs 0.000 description 2
- IXOFPUCWZCAFJX-UHFFFAOYSA-N 2-phenylethanethioic s-acid Chemical compound SC(=O)CC1=CC=CC=C1 IXOFPUCWZCAFJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 5,8-dihydroxy-2-methoxy-6-methyl-7-(2-oxopropyl)naphthalene-1,4-dione Chemical compound CC1=C(CC(C)=O)C(O)=C2C(=O)C(OC)=CC(=O)C2=C1O UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004254 Ammonium phosphate Substances 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- 239000005980 Gibberellic acid Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 229910000148 ammonium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019289 ammonium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000004945 aromatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- YYRMJZQKEFZXMX-UHFFFAOYSA-N calcium;phosphoric acid Chemical compound [Ca+2].OP(O)(O)=O.OP(O)(O)=O YYRMJZQKEFZXMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003841 chloride salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N diammonium hydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].[NH4+].OP([O-])([O-])=O MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 1
- 229910052564 epsomite Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011790 ferrous sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000003891 ferrous sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229910052738 indium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000014413 iron hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- NCNCGGDMXMBVIA-UHFFFAOYSA-L iron(ii) hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Fe+2] NCNCGGDMXMBVIA-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L magnesium sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Mg+2].[O-]S([O-])(=O)=O WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 230000010494 opalescence Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000003209 petroleum derivative Substances 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000002426 superphosphate Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 1
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Использование: биотехнология, микробиологическая промышленность. Сущность изобретения: способ заключается в том, что биомассу выращивают в питательной среде, содержащей источники углерода, азота, необходимые минеральные соли и стимулятор роста клеток, при этом в качестве стимулятора роста клеток используют N-трис/гидроксиэтил/аммониевую соль парахлорфенилтиоуксусной кислоты, а в качестве дополнительного стимулятора роста клеток используют комплексный препарат гибберсиб, получаемый на основе культуральной жидкости, образующейся при выращивании гриба Fusarium moniliforma, в количестве 1•10-12 - 1•10-6%. Использование предлагаемого способа обеспечивает повышение выхода биомассы от заданного источника углерода на 10 -15% при одновременном увеличении в биомассе содержания белка; при этом в 103 - 106 раз снижается расход N-трис/гидроксиэтил/аммониевой соли хлорфенилтиоуксусной кислоты.
Description
Изобретение относится к области микробиологической промышленности и может быть использовано в процессе выращивания биомассы, например, при получении биомассы кормовых дрожжей, в частности при производстве биомассы дрожжей на очищенных парафинах нефти.
Интенсификация роста микроорганизмов является одной из наиболее актуальных проблем технологии получения биомассы микроорганизмов.
Известны способы выращивания биомассы с использованием стимуляторов для интенсификации роста клеток.
В качестве стимуляторов могут быть использованы как индивидуальные вещества, такие как витамины, аминокислоты, микроэлементы, поверхностно-активные вещества, пуриновые или пиримидиновые основания, так и смеси сложного состава, главным образом, отходы соответствующих производств.
Стимуляторы роста дрожжей в процессе получения биомассы на средах с парафинами используют как при периодическом, так и при непрерывном культивировании. Использование стимуляторов приводит к более полной утилизации субстрата, однако их применение экономически не всегда целесообразно.
Известен способ выращивания дрожжей в условиях аэрации на минеральных питательных средах, содержащих источник углерода, азота, фосфора, и микроэлементов с использованием в качестве стимуляторов роста дрожжей одной или нескольких α-аминокарбоновых кислот, входящих в состав натуральных полипептидов, особенно аргинина, лейцина и лизина, а также одного или нескольких витаминов группы В, особенно пантотеновой кислоты и ее солей и пиридоксина /см. патент Франции N 1538957, кл. C 12 C/. Одновременное добавление 0,2 вес. к объему среды комплекса из аминокислот и витаминов /аргинина, пиридоксина и пантотеновой кислоты/ или 0,25% аминокислот и 0,10% витаминов к объему среды приводит к интенсификации процесса получения биомассы дрожжей. Однако широкое применение известного способа в крупнотоннажном производстве биомассы микроорганизмов невозможно, поскольку как индивидуальные аминокислоты, так и отдельные витамины достаточно дороги, кроме того, они имеют самостоятельную пищевую ценность, а производство их сравнительно ограничено.
Описан также способ выращивания дрожжей с использованием в качестве стимулятора роста вещества, выделенного из отработанной культуральной жидкости с помощью полярного растворителя, в качестве которого используют этиловый спирт /авт. св. СССР N 258225, кл. C 12 N 1/26, бюл. изобр. 1987 N 40, c. 184/.
По этому способу дрожжи выращивают на питательной среде, содержащей парафин, минеральные соли, стимулятор роста дрожжевой автолизат и дополнительно вводят стимулятор роста, выделенный из отработанной культуральной жидкости с помощью этилового спирта. Дрожжи выращивают в колбе на качалке в течение 24 ч на водно-минеральной среде с использованием в качестве источника углерода углеводородов и в качестве стимулятора роста - дрожжевого автолизата и кубового остатка, получаемого обработкой культуральной жидкости и равным объемом этилового спирта и последующей отгонкой растворителя. Применение описанного комплекса стимуляторов позволяет повысить выход биомассы. Существенным недостатком известного способа является значительный расход автолизата дрожжей, а также использование значительных количеств спирта, который имеет самостоятельную пищевую ценность, и при этом незначительное увеличение выхода биомассы.
Ближайшим решением к предлагаемому способу получения биомассы по технической сущности и достигаемому эффекту является способ выращивания дрожжей /ж. Прикл. биохимия и микробиология, 1974, т. Х, вып. 1, с. 161 - 165/. Согласно известному способу предусматривается выращивание микроорганизмов, например дрожжей Saccharomyces cerevisae с использованием в качестве питательной среды источника углерода и энергии и компонентов минерального питания пивного сусла. В начале выращивания м/о в культуральную среду в качестве стимулятора роста добавляют препарат гиббереллин /производства Курганского завода/ в количестве 1,2•10-3 M /2•10-2% 100 мг/л/. При этом дрожжи наиболее интенсивно размножались в первые трое суток.
Увеличение концентрации биомассы в среднем составило 20 25% Недостатком известного способа является недостаточно высокий выход биомассы, значительная длительность выращивания биомассы /до нескольких суток/, высокий удельный расход стимулятора, который является индивидуальным гиббериллином, для выделения которого используется дорогостоящая очистка, в связи с чем он является достаточно дорогим препаратом, что снижает эффективность процесса в целом.
Технический результат предлагаемого изобретения заключается в увеличении выхода биомассы от заданного источника углеродного питания и снижении расхода стимуляторов.
Данный технический результат достигается тем, что при выращивании микроорганизмов в условиях аэрации в питательной среде, содержащей источники углерода и азота, необходимые минеральные соли и стимулятор роста клеток в виде композиции из продукта жизнедеятельности гриба Moniliforma гибберсиба у синтетического препарата N-трис/гидроксилэтил/аммониевой соли n-хлорфенилтиоуксусной кислоты.
Предлагаемый способ заключается в следующем: микроорганизмы, например дрожжи рода Candida, выращивают в условиях аэрации на водной питательной среде, содержащей в качестве источника углерода углеводороды, например очищенные жидкие парафины или нефтяные дистилляты, или глюкозу, или этанол, а также источник азота в виде сернокислого аммония, фосфора в виде фосфорной кислоты или суперфосфата, минеральные источники калия, магния, железа и марганца в виде соответствующих сернокислых или хлористых солей этих металлов. Выращивание дрожжей проводят периодически или непрерывно при pH 3,5 6,0, при температуре 32 38oC и скорости разбавления среды 0,1 0,3 ч-1.
На стадии выращивания в питательную среду вводят композиционную смесь стимуляторов, состоящую из продукта жизнедеятельности гриба Fusarium moniliforma гибберсиба и синтетического препарата N-трис /гидроксиэтил/-аммониевой соли n-хлорфенилтиоуксусной кислоты, в количестве 1•10-6 1•10-12 мас. и соотношении компонентов /1: 1/ - /2:1/, при этом оба стимулятора вводят в процесс выращивания микроорганизмов одновременно или поочередно.
Препарат Гибберсиб /ТУ-59.05.01 81/ представляет природный комплекс гиббереллинов и состоит из 60 с лишним гиббереллинподобных веществ, вырабатываемых грибами рода Fusarium.
Для получения гибберсиба сумму гиббереллинов из культуральной жидкости грибов рода Fusarium осаждают гидроксидом железа, затем осадок обрабатывают раствором обычной питьевой соды, т.е. кислого углекислого натрия, в результате чего из осадка органические кислоты переходят в водорастворимую форму. Раствор гиббереллиновых кислот осторожно выпаривают в вакууме. Получающаяся в виде буроватого кристаллического осадка смесь натриевых солей гиббереллиновых кислот и кислого углекислого натрия и представляет собой гибберсиб. Гибберсиб легко растворим в воде, достаточно устойчив при хранении, совершенно безвреден для человека.
Препарат /ТУ 15-87/ N-трис /гидроксиэтил/аммониевую соль n-хлорфенилтиоуксусной кислоты получают взаимодействием n-хлорфенилтиоуксусной кислоты с триэтаноламином в среде абсолютного этилового спирта. Структурная формула
Брутто-формула C14H22Cl NO5, М. В. 351,70, белый с кремовым оттенком кристаллический порошок. Легко растворим в 90% спирте и воде /допускается легкая опалесценция в водных и спиртовых растворах/. Температура плавления 76 80oC.
Брутто-формула C14H22Cl NO5, М. В. 351,70, белый с кремовым оттенком кристаллический порошок. Легко растворим в 90% спирте и воде /допускается легкая опалесценция в водных и спиртовых растворах/. Температура плавления 76 80oC.
Пример 1.
Дрожжи Candida maltosa ВСБ-899 /ЦМПМ-У-262/ выращивают в колбах на качалке с объемом питательной среды 100 мл на минеральной среде следующего состава, г/л:
NH4H2PO4 10
K2HPO4 10
MgSO4•7H2O 0,7
FeSO4•7H2O 0,093
ZnSO4•7H2O 0,042
MnSO4•5H2O 0,0105
В питательную среду добавляют 1 об. очищенных жидких парафинов и стимуляторы роста: гибберсиб 10-11% и N-трис/гидроксиэтил/аммониевую соль парахлорфенилтиоуксусной кислоты в количестве 1•10-11% Выращивание дрожжей проводят при температуре 32 34oC, pH среды 5,5 в течение 20 ч. В результате получают дрожжи с концентрацией биомассы 5,8 г/л. В контрольном опыте, т.е. без добавок стимуляторов, концентрация биомассы составила 4,1 г/л, при добавлении лишь 1•10-11% N-трис/гидроксиэтил/аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты концентрация биомассы составила 4,3 г/л, при добавлении лишь 1•10-11% гибберсиба концентрация биомассы составляет 5,3 г/л. Прирост биомассы при подаче лишь N-трис/гидроксиэтил/аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты составил 4,8% при подаче лишь гибберсиба - 29,2% при совместной подаче стимуляторов прирост биомассы составляет 41,4% а сумма приростов биомассы при раздельной подаче стимуляторов составляет 34%
Пример 2.
NH4H2PO4 10
K2HPO4 10
MgSO4•7H2O 0,7
FeSO4•7H2O 0,093
ZnSO4•7H2O 0,042
MnSO4•5H2O 0,0105
В питательную среду добавляют 1 об. очищенных жидких парафинов и стимуляторы роста: гибберсиб 10-11% и N-трис/гидроксиэтил/аммониевую соль парахлорфенилтиоуксусной кислоты в количестве 1•10-11% Выращивание дрожжей проводят при температуре 32 34oC, pH среды 5,5 в течение 20 ч. В результате получают дрожжи с концентрацией биомассы 5,8 г/л. В контрольном опыте, т.е. без добавок стимуляторов, концентрация биомассы составила 4,1 г/л, при добавлении лишь 1•10-11% N-трис/гидроксиэтил/аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты концентрация биомассы составила 4,3 г/л, при добавлении лишь 1•10-11% гибберсиба концентрация биомассы составляет 5,3 г/л. Прирост биомассы при подаче лишь N-трис/гидроксиэтил/аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты составил 4,8% при подаче лишь гибберсиба - 29,2% при совместной подаче стимуляторов прирост биомассы составляет 41,4% а сумма приростов биомассы при раздельной подаче стимуляторов составляет 34%
Пример 2.
Дрожжи Candida maltosa ВСБ-899 /ЦМПМ-У-262/ выращивают по примеру 1 в течение 17 ч. В питательную среду добавляют 1 об. очищенных жидких парафинов, 1•10-10% N-трис/гидроксиэтил/аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты и 1•10-10% гибберсиба. В результате получают дрожжи с концентрацией биомассы 4,3 г/л. При добавлении лишь 1•10-10% N-трис/гидроксиэтил/аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты концентрация биомассы 3,1 г/л, лишь 1•10-10% гибберсиба 3,3 г/л. В контрольном опыте, т.е. без добавок стимуляторов концентрация биомассы составляет 3,1 г/л. Прирост биомассы при совместной подаче стимуляторов составил 39% сумма приростов при раздельной подаче стимуляторов 6%
Пример 3.
Пример 3.
Дрожжи Candida maltosa ВСБ-899 /ЦМПМ-У-262/ выращивают по примеру 1 в течение 20 ч. В питательную среду добавляют 1 об. очищенных жидких парафинов, 1•10-10% N-трис/гидроксиэтил/аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты и 1•10-10% гибберсиба. Концентрация биомассы составила 5,8 г/л, при подаче лишь N-трис/гидроксиэтил/аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты /контроль по прототипу/ 5,2 г/л, при подаче лишь гибберсиба 5,0 г/л. В контрольном опыте /без добавок стимуляторов/ 4,4 г/л. Прирост биомассы при совместной подаче стимуляторов составил 32% сумма приростов при раздельной подаче составила 28%
Пример 4.
Пример 4.
Дрожжи Candida maltosa ВСБ-569/ЦМПМ-У-262/ выращивают по примеру 1 в течение 17 ч. В питательную среду добавляют 1 об. очищенных жидких парафинов, 1•10-9% N-трис/гидроксиэтил/аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты и 1•10-9% гибберсиба. В результате получают дрожжи с концентрацией биомассы 5,0 г/л; при добавлении лишь N-трис/гидроксиэтил/аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты /контроль по прототипу/ 2,9 г/л, лишь гибберсиба 4,0 г/л. Прирост биомассы при совместной подаче стимуляторов составил 61,2% сумма приростов биомассы при раздельной подаче составила 54,8% по сравнению с контрольным опытом, в котором концентрация биомассы составляет 3,1 г/л.
Пример 5.
Дрожжи Candida maltosa ВСБ-777/ЦМПМ-У-194/ выращивают по примеру 1 в течение 20 ч. В питательную среду добавляют 1 об. очищенных жидких парафинов, 1•10-9% N-трис/гидроксиэтил/аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты и 1•10-9% гибберсиба. В результате получают дрожжи с концентрацией 6,0 г/л. Концентрация биомассы составила: при добавлении лишь N-трис/гидроксиэтил/аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты 5,2 г/л; лишь гибберсиба 5,1 г/л; в контрольном опыте /без добавок стимуляторов/ 4,4 г/л. Прирост биомассы при совместной подаче стимуляторов составил 36% сумма приростов биомассы при раздельной подаче 30%
Пример 6.
Пример 6.
Дрожжи Candida tropicalis ВСБ-928 /ЦМПМ-У-503/ выращивают по примеру 1 в течение 20 ч. В питательную среду добавляют 1 об. очищенных жидких парафинов, в качестве стимулятора роста композицию веществ гибберсиба в количестве 1•107% и N-трис/гидроксиэтил/аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты в количестве 1•10-7% Концентрация биомассы составила 5,8% г/л; при подаче лишь 1•10-7% N-трис/гидроксиэтил/аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты /контроль по прототипу/ 5,0 г/л, при подаче лишь 1•10-7% гибберсиба 4,4 г/л, в контрольном опыте 4,1 г/л. Прирост биомассы при совместной подаче стимуляторов составил 41,4% сумма приростов биомассы при раздельной подаче стимуляторов 29,3% /21,0 и 7,3% соответственно/.
Пример 7.
Дрожжи Candida tropicalis ВСБ 928/ЦМПМ-У-503/ выращивают в колбах на качалке на минеральной питательной среде следующего состава, г/л:
сульфат аммония 3,5
ортофосфорная кислота 0,72
хлористый калий 0,48
сернокислый магний 0,29
сернокислое железо 0,055
сернокислый цинк 0,012
сернокислый марганец 0,006
В питательную среду добавляют 1 об. очищенных жидких парафинов, 1•10-8% гибберсиба и 1•10-8% трис/2-гидроксиэтил/ аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты. Выращивание дрожжей проводят в течение 36 ч при температуре 40 42oC. В результате получают дрожжи с концентрацией биомассы 4,4 г/л. В контрольном опыте, т.е. без добавок стимуляторов концентрация биомассы составила 3,3 г/л, при добавлении лишь 1•10-8% гибберсиба 3,6 г/л, при добавлении лишь 1•10-8% трис/2-гидроксиэтил/аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты 3,4 г/л. Суммарный прирост биомассы составляет 33% Сумма прироста биомассы при раздельной подаче стимуляторов составляет 12%
Пример 8.
сульфат аммония 3,5
ортофосфорная кислота 0,72
хлористый калий 0,48
сернокислый магний 0,29
сернокислое железо 0,055
сернокислый цинк 0,012
сернокислый марганец 0,006
В питательную среду добавляют 1 об. очищенных жидких парафинов, 1•10-8% гибберсиба и 1•10-8% трис/2-гидроксиэтил/ аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты. Выращивание дрожжей проводят в течение 36 ч при температуре 40 42oC. В результате получают дрожжи с концентрацией биомассы 4,4 г/л. В контрольном опыте, т.е. без добавок стимуляторов концентрация биомассы составила 3,3 г/л, при добавлении лишь 1•10-8% гибберсиба 3,6 г/л, при добавлении лишь 1•10-8% трис/2-гидроксиэтил/аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты 3,4 г/л. Суммарный прирост биомассы составляет 33% Сумма прироста биомассы при раздельной подаче стимуляторов составляет 12%
Пример 8.
Дрожжи Candida maltosa ВСБ-744 /ЦМПМ-У-808/ выращивают по примеру 1 в течение 22 ч. В питательную среду добавляют в качестве стимулятора роста гибберсиб в количестве 1•10-10% и N-трис/2-гидроксиэтил/аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты в количестве 1•10-10% В результате получают дрожжи с концентрацией биомассы 5,87% г/л. При подаче лишь гибберсиба в количестве 1•10-10% получают дрожжи с концентрацией биомассы 5,18 г/л; при подаче лишь N-трис/2-гидроксиэтил/ аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты в количестве 1•10-10% концентрация биомассы составляет 5,07 г/л. В контрольном опыте /без подачи стимуляторов/ концентрация биомассы составляет 4,81 г/л. Прирост биомассы при совместной подаче стимуляторов составляет 22,03% Арифметическая сумма приростов биомассы при раздельной подаче стимуляторов составляет 9,97%
Пример 9.
Пример 9.
Дрожжи Candida maltosa ВСБ-744 /ЦМПМ-У-808/ выращивают по примеру 1 в течение 22 ч. В питательную среду добавляют в качестве стимулятора роста: гибберсиб в количестве 1•10-12% и N-трис/2-гидроксиэтил/аммониевую соль в количестве 1•10-12 мас. В результате получают дрожжи с концентрацией биомассы 5,23 г/л. В контрольном опыте, т.е. без подачи стимуляторов концентрация биомассы составляет 4,81 г/л. При подаче лишь 1•10-12% гибберсиба концентрация биомассы составляет 4,97% г/л, а при подаче лишь 1•10-12% N-трис/2-гидроксиэтил/аммониевой соли в количестве 1•10-12% концентрация биомассы составляет 4,95 г/л. Прирост биомассы при совместной подаче стимуляторов составляет 8,73% при подаче лишь 1•10-12% гибберсиба 3,32% а лишь 1•10-12% N-трис/2-гидроксиэтил/аммониевой соли 2,91%
Пример 10.
Пример 10.
Дрожжи Candida maltosa ВСБ-744 /ЦМПМ-У-808/ выращивают по примеру 1 в течение 22 ч. В питательную среду добавляют в качестве стимулятора роста гибберсиб в количестве 1•10-13 мас. и N-трис/2-гидроксиэтил/аммониевую соль в количестве 1•10-13% Концентрация биомассы составляет 4,87 г/л; при подаче лишь 1•10-13% гибберсиба 4,84 г/л, при подаче лишь 1•10-13% N-трис/2-гидроксиэтил/аммониевой соли 4,83 г/л; без подачи стимуляторов - 4,81 г/л; т.е. во всех случаях подачи стимуляторов концентрация биомассы примерно на уровне контроля.
Пример 11.
Дрожжи Candida maltosa ВСБ-899 выращивают при периодическом режиме в аппарате, снабженном эжекционной мешалкой, работающей со скоростью 1200 об/мин, рабочим объемом 5 л, при pH 4,0, температуре 32oC.
Питательная среда имеет следующий состав, г/л: H3PO4 /70% / 2,6; /NH4/2SO4 /20%/ 8,0; KCl 1,27; MgSO4•7H2O 0,91, FeSO4•7H2O 0,174; ZnSO4•7H2O
0,038; MnSO4•7H2O 0,038; парафин 20 г/л. В питательную среду с начальной концентрацией биомассы 2 г/л добавляют 130 мл парафина и в качестве стимулятора добавляют гибберсиб и N-трис/гидроксиэтил/аммониевую соль парахлорфенилтиоуксусной кислоты в количестве 1•10-9 мас. При этом получают биомассу с концентрацией 19,15 г/л, выход биомассы 96,91% удельная скорость роста составляет 0,155 ч-1, содержание белка 45,5% В контрольном опыте /без добавления стимуляторов/ концентрация биомассы составляет 18,05 г/л; выход биомассы 91,34% удельная скорость роста составляет 0,092 ч-1, содержание белка в биомассе 37,0% при добавлении лишь N-трис/гидроксиэтил/ аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты в количестве 1•10-9% концентрация биомассы составляет 18,25 г/л, выход биомассы составляет 92,35% удельная скорость роста 0,12 ч-1, содержание белка 42,0% при добавлении гибберсиба в количестве 1•10-9% концентрация биомассы составляет 18,67 г/л, выход биомассы 94,48% удельная скорость роста составляет 0,138 ч-1, содержание белка в биомассе 43,0%
Пример 12.
0,038; MnSO4•7H2O 0,038; парафин 20 г/л. В питательную среду с начальной концентрацией биомассы 2 г/л добавляют 130 мл парафина и в качестве стимулятора добавляют гибберсиб и N-трис/гидроксиэтил/аммониевую соль парахлорфенилтиоуксусной кислоты в количестве 1•10-9 мас. При этом получают биомассу с концентрацией 19,15 г/л, выход биомассы 96,91% удельная скорость роста составляет 0,155 ч-1, содержание белка 45,5% В контрольном опыте /без добавления стимуляторов/ концентрация биомассы составляет 18,05 г/л; выход биомассы 91,34% удельная скорость роста составляет 0,092 ч-1, содержание белка в биомассе 37,0% при добавлении лишь N-трис/гидроксиэтил/ аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты в количестве 1•10-9% концентрация биомассы составляет 18,25 г/л, выход биомассы составляет 92,35% удельная скорость роста 0,12 ч-1, содержание белка 42,0% при добавлении гибберсиба в количестве 1•10-9% концентрация биомассы составляет 18,67 г/л, выход биомассы 94,48% удельная скорость роста составляет 0,138 ч-1, содержание белка в биомассе 43,0%
Пример 12.
Дрожжи Candida maltosa ВСБ-899 /ЦМПМ-У-262/ выращивают при непрерывном режиме в аппарате, снабженном эжекционной мешалкой, работающей со скоростью 1200 об/мин, рабочим объемом 5 л, при pH 4,0, температуре 32oC, на питательной среде по примеру 11. В питательную среду добавляют непрерывно 2,59% парафина и в качестве стимулятора гибберсиб и N-трис/гидроксиэтил/аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты в количестве 1•10-8 мас. При этом получают биомассу с концентрацией 20,2 г/л. Выход биомассы по парафину составляет 102,6% Содержание белка в биомассе 50,9% В контрольном опыте /без добавок стимуляторов/ концентрация биомассы составляет 18,01 г/л; выход биомассы составляет 91,51% содержание белка составляет 44,4% При подаче лишь 1•10-8% гибберсиба концентрация биомассы составляет 18,51 г/л /выход биомассы 94,05%/, содержание белка 45,1% При подаче лишь 1•10-8% N-трис/гидроксиэтил/аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты в количестве 1•10-8% концентрация биомассы составляет 19,02 г/л /выход биомассы 96,64% /, содержание белка составляет 45,9% Прирост биомассы при совместной подаче стимуляторов составил 12,16% сумма приростов биомассы при раздельной подаче стимуляторов составляет 8,39%
Пример 13.
Пример 13.
Дрожжи C. maltosa ВСБ-899 выращивают на минеральной среде по примеру 11. В питательную среду добавляют непрерывно 2,5 об. парафина; в качестве стимулятора роста добавляют гибберсиб и N-трис/2-гидроксиэтил/ аммониевую соль парахлорфенилтиоуксусной кислоты в количестве 1•10-6 мас. Выращивание дрожжей ведут при температуре 32 34oC, рН 4,0 4,2, со скоростью разбавления среды 0,25 ч-1. Концентрация биомассы составляет 18,7 г/л, выход биомассы по парафину составляет 98,4% В контрольном опыте /без добавок стимуляторов/ концентрация биомассы составляет 18,2 г/л; выход 95,8% при добавлении лишь 1•10-6% гибберсиба концентрация биомассы составляет 18,4 г/л, выход биомассы составляет 96,84% при добавлении лишь 1•10-6% N-трис/2-гидроксиэтил/аммониевой соли /контроль по прототипу/ концентрация биомассы составляет 18,6 г/л, выход биомассы составляет 97,90%
Пример 14.
Пример 14.
Дрожжи С. maltosa ВСБ-899 выращивают на минеральной среде по примеру 11. В питательную среду добавляют 2,5% парафина; в качестве стимулятора роста добавляют гибберсиб и N-трис/2-гидроксиэтил/аммониевую соль парахлорфенилтиоуксусной кислоты в количестве по 1•10-5 мас. Концентрация биомассы составляет 18,0 г/л, выход биомассы составляет 94,73% В контрольном опыте /без добавок стимуляторов/ концентрация биомассы составляет 18,2% г/л; выход биомассы составляет 95,8% При добавлении лишь 1•10-5% гибберсиба концентрация биомассы составляет 17,5 г/л, выход биомассы составляет 92,1% При добавлении лишь 1•10-5% N-трис/2-гидроксиэтил/аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты концентраций биомассы составляет 18,7 г/л, выход биомассы составляет 98,42%
Пример 15.
Пример 15.
Дрожжи Candida maltosa ВСБ-899 выращивают непрерывно в промышленном ферментере с рабочим объемом 450 м3 при pH 4,0 4,2, при 32 - 34oC, расходе воздуха 106 м3/м3•ч на среде с очищенным жидким парафином при расходе на 1 т дрожжей следующих компонентов, кг: аммофос 119, калий хлористый 54, магний сернокислый /эпсомит/ 26, железный купорос 7, цинковый купорос 4,5; марганец сернокислый 2,5.
В качестве стимулятора подают гибберсиб в течение одних суток в количестве 2,5 г/ферментер /1•10-7%/, а в течение следующих суток подают 1,3 г N-трис/гидроксиэтил/аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты.
Расход парафина на 1 т дрожжей составляет 917 кг, выход биомассы 109,05% Производительность ферментера составляет 41,0 т/сут. Без подачи стимуляторов расход парафина на 1 т дрожжей составляет 1133 кг, выход биомассы 88,25% производительность ферментера составляет 34,4 т/сут. При подаче лишь 1,3 г/ферментер через сутки N-трис/гидроксиэтил/аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты расход парафина на 1 т дрожжей составляет 1096 кг, производительность ферментера составляет 36,75 т/сутки.
Пример 16.
Бактерии Pseudomonas desmolyticum ВСБ-578 /ЦМПМ-513/ выращивают в колбах при встряхивании на качалке на питательной среде, содержащей фосфорнокислый калий двузамещенный и фосфорнокислый аммоний однозамещенный в концентрации 3 г/л, сернокислый магний и хлористый натрий 0,2 г/л и микроэлементы: сернокислое железо, марганец, цинк в концентрации 0,006 г/л. В качестве источника углерода используют неочищенные жидкие парафины с содержанием н-алканов C13-C26 /94% / и ароматических углеводородов /1,5%/. В 100 мл питательной среды добавляют 0,5 мл парафина, 1•10-10 мас. гибберсиба и 1•10-10 мас. N-трис/гидроксиэтил/ аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты. Бактерии выращивают при температуре 32 - 36oC, pH 6,6 7,2 в течение 24 ч. Концентрация биомассы достигла 3,9 г/л. Выход биомассы от источника углерода составляет 100% При выращивании этих бактерий в контрольных условиях /без введения стимуляторов/ концентрация биомассы составила 3,41 г/л /выход 87,43%/, при введении лишь 1•10-10% гибберсиба концентрация биомассы составила 3,48 г/л /выход биомассы 89,23%/, при введении лишь 1•10-10 мас. N-трис/гидроксиэтил/аммониевой соли парахлорфенилтиоуксусной кислоты 3,57 г/л /выход 91,53%/. Увеличение выхода биомассы при совместной подаче стимуляторов составляет 12,5% сумма увеличения выходов биомассы при раздельной подаче стимуляторов составляет 5,9%
Таким образом, как видно из приведенных выше примеров, введение в среду ферментации микроорганизмов в качестве биостимуляторов композиционной смеси препаратов, состоящей из гибберсиба и N-транс/гидроксиэтил/ аммониевой соли n-хлорфенилтиоуксусной кислоты в количестве 1•10-12 - 1•10-6 мас. позволит в среднем увеличить на 10 30% выход биомассы, при этом на 4 5% увеличивается содержание белка в биомассе, а удельный расход стимуляторов снижается в 103 106 раз, т.е. при использовании композиционной смеси стимуляторов имеет место синергический эффект (отмечается сверхсуммарный прирост биомассы при резком снижении удельного расхода стимуляторов).
Таким образом, как видно из приведенных выше примеров, введение в среду ферментации микроорганизмов в качестве биостимуляторов композиционной смеси препаратов, состоящей из гибберсиба и N-транс/гидроксиэтил/ аммониевой соли n-хлорфенилтиоуксусной кислоты в количестве 1•10-12 - 1•10-6 мас. позволит в среднем увеличить на 10 30% выход биомассы, при этом на 4 5% увеличивается содержание белка в биомассе, а удельный расход стимуляторов снижается в 103 106 раз, т.е. при использовании композиционной смеси стимуляторов имеет место синергический эффект (отмечается сверхсуммарный прирост биомассы при резком снижении удельного расхода стимуляторов).
При подаче стимуляторов в количестве меньше 1•10-12% эффект стимуляции незначителен, подача стимуляторов в количестве, большем чем 1•10-6% нецелесообразна, т.к. эффект стимуляции существенно не возрастает, но увеличивается удельный расход стимуляторов.
Claims (1)
- Способ получения биомассы микроорганизмов в условиях перемешивания и аэрации в питательной среде, содержащей источники азота и углерода, необходимые минеральные соли и стимулятор роста, отличающийся тем, что в ферментационную среду вводят в качестве стимулятора роста клток композиционную смесь, состоящую из гибберсиба и N-трис(гидроксиэтил)аммониевой соли парахлорфенил тиоуксусной кислоты, в количестве 1•10-6 - 1•10-12 мас. и при соотношении соответственно (1 1) (2 1), при этом оба стимулятора вводят в процессе выращивания микроорганизмов одновременной или поочередно.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU5036550 RU2093570C1 (ru) | 1992-04-08 | 1992-04-08 | Способ получения биомассы микроорганизмов |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU5036550 RU2093570C1 (ru) | 1992-04-08 | 1992-04-08 | Способ получения биомассы микроорганизмов |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2093570C1 true RU2093570C1 (ru) | 1997-10-20 |
Family
ID=21601472
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU5036550 RU2093570C1 (ru) | 1992-04-08 | 1992-04-08 | Способ получения биомассы микроорганизмов |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2093570C1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001080647A1 (en) * | 2000-04-21 | 2001-11-01 | Alexandr Vinarov | Plant growth activator |
-
1992
- 1992-04-08 RU SU5036550 patent/RU2093570C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 1. Патент Франции N 1538957, кл. C 12 C, 1970. 2. Авторское свидетельство СССР N 258225, кл. C 12 N 1/26, 1972. 3. Прикладная биохимия и микробиология. 1974, т.Х, вып.1, с. 161 - 165. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001080647A1 (en) * | 2000-04-21 | 2001-11-01 | Alexandr Vinarov | Plant growth activator |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Obradors et al. | Effects of different fatty acids in lipase production by Candida rugosa | |
| CN101346470A (zh) | 制备长链二羧酸的方法 | |
| RU2115657C1 (ru) | Аквахелат, способ получения аквахелата, способ модулирования характеристики культуры клеток, культуры ткани, одноклеточного организма или многоклеточного организма и транспортная система | |
| RU2093570C1 (ru) | Способ получения биомассы микроорганизмов | |
| US3474001A (en) | Growing microorganisms on hydrocarbons | |
| RU2092560C1 (ru) | Способ получения биомассы | |
| JPH10127274A (ja) | パン酵母組成物及びその製造方法 | |
| US2776926A (en) | Preparation of alpha-ketoglutaric acid by serratia marcescens | |
| JPS583678B2 (ja) | Ｌ−トリプトフアンの連続醗酵製造法 | |
| RU2096461C1 (ru) | Штамм дрожжей yarrowia lipolytica - продуцент лимонной кислоты и способ получения лимонной кислоты | |
| Seidel et al. | Process engineering aspects of the production of cephalosporin C by Acremonium chrysogenum. Part I. Application of complex media | |
| Joslyn | Nutrient requirements of yeast | |
| JPS6111590B2 (ru) | ||
| RU2103351C1 (ru) | Штамм дрожжей rhodosporidium diabovatum - продуцент каротиноидов | |
| RU2099423C1 (ru) | Способ получения лимонной кислоты | |
| US3109779A (en) | Process for the production of 6-amino-penicillanic acid | |
| DE69228788T2 (de) | Verfahren zur Herstellung von Flavin-Nukleotiden | |
| SU1470760A1 (ru) | Способ получени пищевого уксуса | |
| JP2833037B2 (ja) | グルタチオン高含有酵母の製造方法 | |
| RU2399659C1 (ru) | Штамм дрожжей rhodosporidium diobovatum - продуцент каротиноидов | |
| RU2148643C1 (ru) | Способ управления биохимическим процессом | |
| SU1631085A1 (ru) | Штамм дрожжей DеваRYомYсеS GLовоSUS - продуцент липидов на этанолсодержащей среде | |
| SU1239146A1 (ru) | Способ получени бактериальных амилаз | |
| SU553283A1 (ru) | Способ получени алкогольдегидрогеназы | |
| US3156627A (en) | Caramelized glucose in glutamic acid production |