RU1809765C - Способ получени противовирусного средства - Google Patents

Abstract

Область использовани : изобретение относитс  к способу получени  лекарственного препарата дл  профилактики и лечени , вирусных заболеваний. Сущность изобретени : смешивают морскую воду с белым уксусом , полученную смесь стерилизуют холодным фильтрованием.

Description

Изобретение относитс  к способу получени  препарата дл  профилактики, лечени  вирусных заболеваний.

Известен способ получени  противовирусного средства путем растворени  нитрата кали  в воде дл  получени  2 %-ного раствора.

Изобретение заключаетс  в том, что получают продукт, обладающий противовирусной активностью, путем смешени  морской воды и белого уксуса с последующей стерилизацией фильтрованием в холодных услови х на пористом фильтрующем элементе . Белый уксус представл ет собой водный раствор уксусной кислоты, содержащий 6-8 вес. % уксусной кислоты, Этот раствор не содержит никакой неорганической кислоты и может быть получен из белого вина крепости 11° спирта минимально, типа муската Banyuis, Frentignan или Lunel.

Раствор согласно изобретению может быть введен парентеральным путем, в частности , путем внутреннего или внутримышечного вли ни , в этом случае он должен быть должным образом пробуферирован и/или разведен дл  того, чтобы стать изотоническим по отношению к плазме крови.

Раствор может быть введен клизмы в виде клизмы кишечника.

Изобретение иллюстрируетс  следующим примером: ..

Смешивают при перемешивании и при комнатной температуре 1 л морской воды и 1 л белого уксуса. Получают гомогенный раствор . Ниже представлены данные испытаний полученного средства:

Материал и методы.

Мышиные клетки L, культивированные в монослое, использованы дл  испытани  вируса HSV-1. штамм S/HD Е 16/84 013084.

1 ампулу HSV-1 используют дл  инфекции слившихс  L клеток. После клеточного лизиса, надосадочную жидкость культур отдел ют центрифугированием и вирус затем осаждают полиэтиленгликолем (ПЭГ) в присутствии NlaCI (4 М). Вирусный осадок затем суспендируют в 4 мл Трис-NaCI (50 моль, рН 7,4).

Аликвоты по 1 мл вирусной суспензии инкубируют в течение 60 минут при 20° С в присутствии 2 мл A (PBS, Б) раствора нитрата кали  с концентрацией 1 часть на 500, В (смеси морской воды и белого уксуса (50 : 50), 0 белого уксуса.

По окончании инкубации, каждую алик- воту разбавл ют 30 мл PBS и вирус снова осаждают с помощью ПЭГ в присутствии NaCt. Каждый из таким образом полученных

со

С

1 ссо о ю

XI О

ел

IGO

осадков клеток снова суспендируют в 1 мл Трис-NaC (50 моль, рН 7,4). 0,2 мл этих вирусных суспензий добавл ют к моносло м клеток L, культивируемых на пластинках COSTAR. (Экспериментирование осуществл ют в тройном экземпл ре). После инкуба ции в течение 60 минут при 37° С добавл ют 2 мл RPMI, содержащего 10 % зародышевой тел чьей сывооотки. Культуры затем инкубируют  ри 37° С в атмосфере, содержащей 5 % ,:СО, в течение 5 дней.

По.окончании этого периода, клеточные монослои на пластинках COSTAR промывают с помощью PBS и фиксируют с помощью 10 %-ного раствора формалина в течение 10 минут, при комнатной температуре. После дополнительной промывки с помощью PBS пластинки COSTAR окрашивают с помощью

0

5

Giesma в течение 12 часов и затем промывают дистиллированной водой.

Бл шки клеточного лизиса, полученные за счет вируса, подсчитывают с помощью лупы. Вирусный титр выражают в единицах лизиса на мл (pfu: plaque - forming units).

Таким образом, предложенный способ позвол ет получить более активный продукт , чем согласно известному способу.

Claims (1)

1. Формулаизобретени  Способ получени  противовирусного средства обработки активного начала, о т г личающийс  тем, что, с целью повышени  активности конечного продукта, морскую воду смешивают с 6-8 %-ным водным раствором уксусной кислоты и стерилизуют полученную смесь холодной фильтрацией.

   20 Результаты