RS66128B1 - Farmaceutski preparat ili preparat suplementa za ishranu na bazi alfa-laktalbumina - Google Patents

Description

Opis

Oblast primene

[0001] Ovaj pronalazak se odnosi na tehničku oblast farmaceutske industrije ili industrije suplemenata za ishranu.

[0002] Konkretno, pronalazak se odnosi na farmaceutski preparat ili preparat suplementa za ishranu koji sadrži alfa-laktalbumin i najmanje jednu kratkolančanu masnu kiselinu.

Prethodno stanje tehnike

[0003] Nedavno je alfa-laktalbumin predložen kao suplement za ishranu uglavnom zbog njegovog serotonergičkog dejstva na mozak.

[0004] Italijanska patentna prijava N. GE2006A000013 u ime podnosioca prijave se zaista odnosi na upotrebu alfa-laktalbumina u lečenju neuroloških i neuropsihijatrijskih poremećaja, kao što su Parkinsonova bolest, depresivni poremećaji i epilepsija i evropski patent N. EP 2218 462 B1 se odnosi na farmaceutski preparat koji sadrži SSRI ili SSNRI i alfa-laktalbumin za lečenje depresivnih poremećaja.

ULOGA SEROTONINA

[0005] Serotonin je triptamin, sintetisan iz esencijalne aminokiseline triptofana, uglavnom se proizvodi u enterohromafinskim ćelijama u gastrointestinalnom traktu, gde učestvuje u nekoliko bioloških funkcija, i serotonergičkim neuronima centralnog nervnog sistema.

[0006] Na perifernom nivou, on igra nekoliko kontrolnih funkcija. U gastrointestinalnom traktu kontroliše peristaltiku, lučenje tečnosti, kontroliše mučninu i povraćanje. Ima vazokonstriktivno dejstvo na krvne sudove, čak i na intrakranijalne, čije proširenje doprinosi migreni. Kontroliše agregaciju trombocita, procese reparacije i homeostaze [1, 2], procese regeneracije jetre [3], srca [4] i kontroliše termogenezu.

[0007] I u centralnom nervnom sistemu, serotonin igra nekoliko funkcija, koje obuhvataju regulaciju raspoloženja, sna, telesne temperature, seksualnosti, empatije, kognitivnih funkcija, kreativnosti i apetita.

[0008] Smatra se da su patološke promene u funkcionalnosti serotoninskih kola uključene u nekoliko neuroloških i neuropsihijatrijskih poremećaja kao što su migrena, opsesivnokompulzivni poremećaj, depresija, šizofrenija, anksioznost, poremećaji raspoloženja bilo koje vrste, poremećaji u ishrani (emocionalna ishrana i bulimija), muška preuranjena ejakulacija i fibromijalgija.

[0009] Serotonin je stoga centralni u mehanizmu delovanja nekoliko psihotropnih lekova, posebno antidepresiva (kao što su na primer antidepresivi SSRI kao što su dropaksin, prozak i zoloft, triciklični antidepresivi i inhibitori monoamin-oksidaze) i antipsihotici.

[0010] Nedavne studije su ponovo razmotrile ulogu serotonina u epilepsiji [5, 6], pretvarajući ga iz prokonvulzanta u antikonvulzant [7, 8, 9]. Čini se da je serotonergički i noradrenergički sistem povezujući element između fiziopatogenetskih mehanizama depresije i epilepsije [10, 11], kao i mehanizama delovanja antidepresiva i antiepileptika [12], čime se ponovo potvrđuje uloga ova dva neurotransmitera u patogenezi depresije, kako su to sugerisale prve studije o koncentraciji njihovih katabolita u urinu i/ili cerebrospinalnoj tečnosti. Potenciranje serotonina bi tako olakšalo, na nivou mozga, kontrolu epileptičkih napada [13] i drugih funkcija koje su kontrolisane serotoninom, kao i za one koje se kontrolišu na perifernom nivou.

TRIPTOFAN KAO PREKURSOR SEROTONINA

[0011] I na perifernom nivou i u centralnom nervnom sistemu, serotonin se sintetiše iz esencijalne aminokiseline triptofan, pošto serotonin u plazmi nije u stanju da prevaziđe krvnomoždanu barijeru, dok triptofan može da prođe kroz krvno-moždanu barijeru zahvaljujući aktivnom transporteru koji se deli sa svim "Velikim neutralnim aminokiselinama" (LNAAs) kojima pripada triptofan. Ova kompeticija za cerebralni unos rezultira brzinom sinteze serotonina u mozgu, koja zavisi od količine triptofana, na koju utiče odnos u plazmi između ove aminokiseline i zbira svih njenih konkurenata. (Trp/LNAA) [14] Na ovoj osnovi, redukcija za jednu trećinu stope sinteze serotonina u mozgu u poređenju sa zdravim kontrolama procenjena je iz merenja odnosa Trp/LNAAs u plazmi u grupi epileptičkih pacijenata. (15).

KAKO POVEĆATI TRP I STOGA SEROTONIN

[0012] Oralna primena triptofana ne dovodi do povećanja plazmatskog odnosa Trp/LNAAs, s obzirom na nisku bioraspoloživost pojedinačnih aminokiselina. Plazmatske esencijalne aminokiseline nastaju samo uništavanjem proteina u ishrani [16].

[0013] Od svih proteina, proteini surutke su oni koji mogu da obezbede veći porast nivoa aminokiselina u plazmi jer se, pošto se ne talože u kiseloj sredini želuca, razgrađuju u peptide, koji lako prolaze kroz crevnu membranu. Zatim se razgradnja na pojedinačne aminokiseline nastavlja u krvi. Zbog velike brzine njihovog procesa varenja, oni se nazivaju "brzi proteini". Drugi proteini se, umesto toga, talože u želucu, a enzimi uzimaju iz taloga pre svega pojedinačne, jedva biodostupne aminokiseline, [17]. Bioraspoloživost alfa-laktalbumina je maksimalna (=1). Konkretno, alfa-laktalbumin se razgrađuje u srednje-male peptide u želucu nakon samo 15 minuta od oralne primene, a takvi peptidi zatim ulaze u tanko crevo.

[0014] Čini se da je najbolji način da se poveća odnos Trp/LNAA u plazmi da se uzme protein surutke koji je bogat Trp i siromašan u njegovim konkurentskim LNAA.

[0015] Na ovim osnovama alfa-laktalbumin je izabran kao serotonergičko sredstvo, pošto je „bogat“ triptofanom i siromašan u njegovim konkurentima za cerebralni unos, LNAA, (18).

NEOČEKIVANI NALAZ: PROFIL TRP/LNNA U PLAZMI

[0016] Suprotno očekivanjima (koja proizilaze iz hipoteze o povećanju TRP usled njegovog oslobađanja iz alfa-laktalbumina), rezultati dobijeni u eksperimentalnim i kliničkim studijama pokazuju da povećanje odnosa triptofan/LNAAs u plazmi nije posledica triptofana koji potiče od uništavanja alfa-laktalbumina. U stvari, s obzirom na brzu apsorpciju, treba primetiti brzi plazmatski maksimum aminokiselina koje grade alfa-laktalbumin, sa brzim povratkom na bazalne vrednosti u roku od oko 20-30 minuta od primene.

[0017] Umesto toga, studije u kojima su primene alfa-laktalbumina ponavljane nekoliko dana pokazuju da odnos Trp/LNAAs u plazmi nastavlja da raste tokom vremena, težeći asimptotičkoj vrednosti između 0.22-0.23. [19]

[0018] Slične rezultate podnosilac zahteva dobija na eksperimentalnim modelima epilepsije [20]. Slika 1, u prilogu, prikazuje u dijagramu vremenski tok odnosa Trp/LNAAs u plazmi nakon nekoliko uzastopnih dana oralne primene alfa-laktalbumina; N=7 u svakoj grupi, podaci izraženi kao srednja vrednost±SEM.

[0019] Vremenski tok posmatranog odnosa Trp/LNAAs u plazmi je reprezentativan za specifično delovanje alfa-laktalbumina u celom digestivnom sistemu, pogodno za smanjenje crevne disbioze, koja je odgovorna za prekomernu dekarboksilaciju triptofana u indol i skatol, a samim tim i za povećanje sposobnosti dobijanja triptofana iz dijetetskih proteina.

[0020] Takođe, rezultati dobijeni kako na eksperimentalnim modelima tako i u kliničkim ispitivanjima potvrđuju potrebu za ponovljenim primenama tokom nekoliko dana. U različitim eksperimentalnim modelima epilepsije primećeno je da se zaštitno dejstvo protiv napada javlja nakon najmanje 6 dana ponovljenih primena, a da se ne povećava kada se nastavlja (do 12 dana). Pored toga, čini se da ne zavisi od primenjene doze. Slika 2 zaista pokazuje vremenske tokove zaštite od audiogenih napada kod 9 pacova koji su genetski skloni epilepsiji (GEPRs: n=5 životinja za grupu doze i vremena); (A) rezultati nakon 5 uzastopnih dana lečenja; (B) rezultati nakon 12 uzastopnih dana lečenja. Dijagram prikazuje medijane ± interkvartilni opseg za svaku grupu.

[0021] Pored toga, nakon tri nedelje lečenja, zaštitni efekat protiv napada, koji se indukuje akustičnom stimulacijom kod audiogenih miševa, nastavlja se najmanje mesec dana od prekida lečenja, potvrđujući da specifične aktivosti proizvode modifikacije koje su stabilne tokom vremena i nezavisne od primene. (21)

[0022] I kod ljudi je primećeno da su potrebne uzastopne primene da bi se postigao klinički efekat, što sugeriše da su klinički rezultati posledica intestinalnog delovanja alfa-laktalbumina koji je pogodan za smanjenje disbioze i inflamacije, a ne samo za oslobađanje triptofana.

INTESTINALNO DELOVANJE ALFA-LAKTALBUMINA

[0023] S druge strane, alfa-laktalbumin je dosta eksprimiran u kolostrumu kod ljudi, i samo kod ljudi, gde ima specifična dejstva na digestivni sistem, pogodan je da ga aktivira već pri prvom dojenju.

[0024] U literaturi se navodi da alfa-laktalbumin pospešuje sve gastrične procese: povećava sekreciju prostaglandina, sluzi i mucina, pražnjenje želuca [22] i lučenje bikarbonata i kiseline iz protonskih pumpi, čime se uspostavlja ispravan pH creva, od koga zavisi pravilna simbioza mikrobiote.

[0025] Intestinalna prebiotička dejstva su naglašena sposobnošću da zaštite digestivni sistem od čireva izazvanog stresom ili alkoholom: nakon primene doze alfa-laktalbumina, ista količina unesenog alkohola više ne izaziva čir na želucu [23].

[0026] Alfa-laktalbumin takođe uspostavlja ispravan inflamatorni odgovor [24], smanjuje permeabilnost crevne membrane i ima crevno antibakterijsko dejstvo [25].

[0027] U celini, sva ova dejstva doprinose smanjenju crevne disbioze, odgovorne za prekomernu razgradnju (dekarboksilaciju) triptofana u indol i skatol. U stvari, primena proteina bogatih triptofanom, kao što su Griffonia ili Hypericum perforatum, kod osoba pogođenih crevnom disbiozom, dovodi do povećanja nivoa indola i skatola u urinu, a ne triptofana u plazmi. (26)

[0028] Prijavilac je umesto toga iznenađujuće otkrio, merenjem nivoa indola i skatola u urinu, progresivno smanjenje navedenih nivoa tokom hroničnog tretmana alfa-laktalbuminom.

DOKAZ O ULOZI PEPTIDA POREKLOM IZ VARENJA ALFA-LAKTALBUMINA

[0029] Iz ovih zapažanja je jasno da specifično delovanje alfa-laktalbumina na ceo digestivni trakt ne proizvodi protein surutke kao takav, već njegove peptidne frakcije koje potiču od njegovog brzog uništavanja u želucu. Kao dodatni dokaz za to, treba napomenuti da, kada se alfa-laktalbumin unese sa kolostrumom, novorođenče proizvodi specifične enzime pljuvačke da ga svari, pošto njegov/njen stomak to još uvek nije u stanju da uradi. Digestivni sistem se zaista formirao tokom intrauterinog života, ali nikada nije radio pre prvog dojenja. Varenje alfalaktalbumina pljuvačkom stvara specifične peptide koji imaju zadatak da aktiviraju digestivni sistem čoveka, i to samo čoveka, stimulišući proizvodnju svega što je neophodno za preradu hrane i zaštitu tkiva digestivnog trakta. Jednom kada se digestvini sistem aktivira, novorođenče prestaje da proizvodi enzime specifične za pljuvačku i digestivna funkcija se prenosi na stomak, koji postepeno uči kako da prerađuje drugu, složeniju hranu tokom odvikavanja od sisanja.

[0030] Iz ovoga proizilazi da oralna primena alfa-laktalbumina u slabom digestivnom sistemu, sa smanjenom sposobnošću uništavanja, može izazvati stvaranje peptidnih frakcija koje nisu funkcionalne, i da tačne peptidne frakcije možda neće proizvesti odgovarajuće odgovore ako ćelije digestivnog sistema slabo reaguju, pošto su pothranjeni. Takođe, inflamacija creva, posebno hronična inflamacija niskog stepena, takođe zbog slabosti digestivnog sistema u ophođenju sa složenom hranom, smanjuje mogućnost da se pravilno razgradi alfa-laktalbumin i da se iz njega dobiju odgovarajući peptidi sa specifičnim dejstvima na digestvni sistem ljudi. Pored toga, inflamacija je povezana i/ili dovodi do crevne disbioze, jer su upala i disbioza dve strane istog novčića.

UOČENA OGRANIČENJA: ALFA-LAKTALBUMIN NE DELUJE U SLABOM DIGESTIVNOM SISTEMU

[0031] Iskustvo prijavioca o upotrebi alfa-laktalbumina kao suplementa za ishranu pokazalo je da on iznenađujuće ima poteškoća da deluje kod subjekata sa zaista slabim digestivnim sistemom, na primer zato što su njegove ćelije pothranjene. Navedeno zapažanje je bilo evidentno posebno kod subjekata koji su tokom dugog perioda iskusili dijetu sa deprivacijom, često tačno izazvanu nemogućnošću prerade složene hrane. Ovakva dijeta slabi digestivni sistem, koji postaje sve slabiji u preradi hrane i na taj način rezultira progresivnim povećanjem količine netolerisane hrane.

[0032] Kontinuirani porast incidence poremećaja poput alergija, intolerancije na hranu i autoimunih poremećaja pokazuje scenario digestivnog sistema koji su sve slabiji u odnosu na hranu koja je sve agresivnija i zbog tretmana jonizujućim zračenjem. Istovremeno, pogrešne preporuke u ishrani, koje nisu potkrepljene naučnim dokazima, doprinele su slabljenju digestivnog sistema ljudi.

[0033] Jedini način da se zaključi koja je ispravna ishrana za ljude jeste da se poznaje fiziologija digestivnog sistema, da se uporedi sa onima drugih sisara i da se uzmu u obzir velike modifikacije koje je doživeo tokom evolucionog procesa.

[0034] Zahvaljujući nedavnim otkrićima o mikrobnom svetu, koji koegzistira u ljudskom telu, shvatili smo da je primarni zadatak digestivnog sistema da održava ugodno okruženje za anaerobne bakterije koje žive u debelom crevu, a ne da nas hrani. Očigledno je da se njegove ćelije moraju hraniti, da bi pravilno funkcionisale. Jedina hrana za ćelije svih digestivnih sistema su masne kiseline kratkog lanca (SCFA), koje se dobijaju na drugačiji način, u skladu sa različitim preferencijama u hrani, iz različitih digestivnih mašina kod različitih sisara.

[0035] Pošto ljudi potiču od majmuna, njihov digestivni sistem je bio sličan onom kod životinja koje se hrane voćem, koji se sastojao od malog želuca koji čini 15% sistema i dugog debelog creva, koje čini 60% sistema. U stvari, životinje koje se hrane voćem jedu vlakna i, među njima, neprobavljiva vlakna dospevaju do debelog creva, gde ih bakterije koje žive u njima fermentišu i transformišu u SCFA. Glodari dobijaju dragocene SCFA fermentacijom celuloze u cekumu, koji je veoma razvijen u njihovom digestivnom sistemu, dok je kod ljudi atrofiran (slepo crevo). Predatorski mesožderi, koji po mogućstvu jedu utrobu ubijene životinje koja sadrži 60% zasićenih masti, direktno dobijaju SCFA sečenjem masti pomoću jake lipaze i velikog želuca, koji čini 70% njihovog digestivnog sistema, dok njihovo debelo crevo je samo 10% digestivnog sistema. Nekrofagni mesožderi jedu meso sa niskim sadržajem masti, ali tek nakon što ga bakterije iz životne sredine snažno razgrade/svare. Ljudi, koji su se u početku hranili voćem, naučili su tokom svoje evolucije da dobijaju SCFA i iz zasićenih masti, posebno iz zasićenih masti u mesu, osim iz vlakana. Uvođenje agresivnije hrane (ne samo mesa) u odnosu na onu za koju je dizajniran digestivni sistem čoveka, prouzrokovalo je smanjenje creva kako bi se smanjilo vreme kontakta navedene hrane sa samim crevom. Više energije je stoga dostupno za mozak, koji je tako narastao u veličini, razvijajući se od neandertalca do sapiensa. Debelo crevo je smanjeno na 15% digestivnog sistema u poređenju sa početnih 60%. Želudac je ostao 15% digestivnog sistema i nakon uvođenja mesa, dok se tanko crevo proširilo da bi lipazi slabijoj od one mesoždera dalo vreme da seče zasićene masne kiseline. Zbog toga, sa postojećim sistemom za varenje, čak i ako ljudi unose istu količinu vlakana kao i voće, ne bi mogli da dobiju dovoljno specifičnih hranljivih materija digestivnog sistema (SCFA), s obzirom na mali broj bakterija koje žive u debelom crevu.

[0036] Ovo je verovatno razlog što su dosadašnja klinička iskustva prijavioca, usmerena na poboljšanje delovanja alfa-laktalbumina kod pacijenata sa slabim digestivnim sistemom, uz istovremenu primenu oligofruktosaharida, inulina ili drugih prebiotičkih vlakana, pokazala ne u potpunosti zadovoljavajuće rezultate.

[0037] Ljudi bi mogli da prežive jer su naučili da dobijaju kratkolančane masne kiseline iz zasićenih masti osim iz vlakana; skraćivanje debelog creva sa 60% na 15% dokazuje da su oni preferirali ovaj drugi način.

[0038] Međutim, osuda zasićenih masti, nepravedno optuženih da su odgovorne za opasno povećanje nivoa holesterola u plazmi, koji nije mast već alkohol i koji za 80% ne potiče iz ishrane, smanjila je sposobnost proizvodnje SCFA, a samim tim i za ishranu ćelija digestivnog sistema. Pored toga, postoji mnogo literature koja naglašava rizik od smanjenja ne samo ukupnog holesterola, već i samo LDL.

[0039] Kratkolančane masne kiseline (SCFA) su, od najviše do najmanje hranljive: buterna kiselina, sirćetna kiselina, propionska kiselina i valerijanska kiselina.

[0040] SCFA, osim što su specifične hranljive materije, povećavaju pokretljivost creva stimulišući sintezu serotonina [27], prolaze kroz crevni epitel i idu u krv gde sprovode mehanizme ćelijske signalizacije: inhibiciju histon deacetilaze (HDAC) [28] i aktivaciju receptora spojenih za G-protein (GPCRs).

[0041] HDACs reguliše ekspresiju gena, njegova inhibicija rezultira širokim spektrom posledica koje još uvek treba da se razumeju. GPCR su identifikovani kao receptori za SCFA i oni su uključeni u regulaciju metabolizma i inflamacije [29] SCFA menjaju hemotaksu, fagocitozu, indukuju ROS, modifikuju ćelijsku proliferaciju, imaju antiinflamatorna, antitumorska i antimikrobna dejstva. Oni igraju važnu ulogu u održavanju crevne i imunološke homeostaze [30].

[0042] Dejstvo SCFA na inflamatorne procese potvrđuje činjenica da se klasa NSAIL sastoji od sintetičkih derivata sirćetne i propionske kiseline, naglašavajući da inhibitorno dejstvo na HDAS može doprineti njihovom antiinflamatornom delovanju. Utvrđeno je da je inhibitorno dejstvo buterne kiseline veće od sirćetne i propionske kiseline.

[0043] Predložena je upotreba buterne kiseline kod autoimunih i inflamatornih poremećaja [31], protiv bakterijskih infekcija [32], za smanjenje ćelijske proliferacije kod kancera debelog creva [33] i za smanjenje glikemije, insulinske rezistencije, dislipidemije i glukoneogeneze u poređenju sa metforminom. [34, 35, 36]. Buterna kiselina pokazuje zaštitno dejstvo na eksperimentalnim modelima spinalne mišićne atrofije [37], kao i smanjuje atrofiju mišića tokom starenja [38], ima terapeutsko dejstvo na alergijski rinitis [39], poboljšava funkcije srca [40], smanjuje unos alkohola kod zavisnih životinje [41] i štiti od teških daljinskih akutnih povreda pluća izazvanih opekotinama [42].

[0044] U svetlu novije literature, stoga se smatra da su mnoga dejstva posledica jednog efekta na crevnu mikrobiotu, što dovodi do smanjenja inflamacije [43, 44].

[0045] Danas nije više iznenađujuće da cerebralna delovanja mogu odgovarati ovom intestinalnom delovanju, kao što su poboljšanja ponašanja kod depresivnih anksioznih stanja [45, 46], kognitivnih funkcija [47, 48], odgovora na stres [49], slabljenja autističnog ponašanja [50], manične psihoze [51]. Budući da je cerebralna apsorpcija izmerena od 0.006% [52], jasno je da bi uticao na moždane procese ne mora da uđe u mozak, ali može delovati na periferni nervni sistem i na imuni sistem.

[0046] SCFAs receptori su važni regulatori imunoloških funkcija, uključujući neuroinflamaciju, energetski metabolizam, endokrinu regulaciju fiziologije i ponašanja. Reakcije uočene kod psihijatrijskih poremećaja, uključujući depresiju, na hiperacetilaciju histona izazvanu butiratom, kao što je slabljenje depresivnog ponašanja u eksperimentalnim modelima [53], mogu zavisiti od povećanja nivoa BDNF u specifičnim regionima mozga, kao što je prefrontalni korteks [54], što je verovatno posledica povećane acetilacije u BDNF genu [55].

[0047] WO 2008/138348 opisuje kompleks koji sadrži alfa-laktalbumin i masnu kiselinu ili lipid pogodan za upotrebu u proizvodnji lekova za lečenje infekcija respiratornog trakta, kancera i bradavica i za inhibiciju angiogeneze.

[0048] US 6096 870 otkriva postupak za odvajanje proteina surutke upotrebom hromatografije i pominje eluiranje alfa-laktalbumina iz kolone jonske izmene sa rastvorom natrijum acetata.

[0049] CN 105746 711 otkriva proizvod na bazi mleka za poboljšanje sna, koji sadrži, između ostalih sastojaka, gama-amino-buternu kiselinu.

[0050] Iskustvo podnosioca prijave u upotrebi alfa-laktalbumina kao dodatka ishrani pokazalo je da je moguće povratiti klinički odgovor uz pomoć kompleksnog dijetetskog protokola koji može poboljšati digestivni sistem ljudi i na taj način ga učiniti osetljivijim na stimulacije alfalaktalbumina i posledično povećanje apsorpcije triptofana i sinteze serotonina, sa posledičnim prednostima u prevenciji i lečenju gore navedenih poremećaja i uopšte svih poremećaja kod kojih se navodi da je inflamacija tkiva fiziopatogeni uzrok, jer ova upala potiče od intestinalne hronične inflamacije niskog stepena [56].

[0051] Ova intestinalna prebiotička dejstva su danas od velikog interesa za lečenje poremećaja, posebno neuroloških, zbog sve jačih dokaza o ulozi ose crevo-mozak [30], ali i zbog sve većeg broja dokaza o ulozi mikrobiote u preokretanju vage ka zdravom ili bolesnom stanju [57].

[0052] Stoga se prijavilac pozabavio problemom povećanja efikasnosti alfa-laktalbumina u lečenju gore navedenih poremećaja i pretpostavio je, kao rešenje za pomenuti problem, da se poboljša stanje digestivnog sistema, dajući mu pravilnu ishranu i redukciju inflamacije u njemu.

[0053] Problem je rešen, u skladu sa ovim pronalaskom, obezbeđivanjem farmaceutskog preparata ili preparata suplementa za ishranu koji uključuje alfa-laktalbumin i najmanje jednu masnu kiselinu kratkog lanca izabranu iz grupe koja se sastoji od sirćetne kiseline, propionske kiseline, buterne kiseline, β-hidroksi-β-metilbuterne kiseline, valerijanske kiseline i njihovih soli, estara i mono-, di- i triglicerida, za upotrebu u lečenju poremećaja centralnog nervnog sistema (CNS) povezanih sa deficijencijom serotonina.

[0054] Takvi poremećaji CNS-a povezani sa deficijencijom serotonina poželjno su izabrani iz grupe koja sadrži epilepsiju, neuropsihijatrijske poremećaje Parkinsonove bolesti i Hantingtonove horeje, depresiju, anksioznost, dopamin-mimetičku psihozu, emocionalnu nestabilnost, kompulzivno-opsesivne poremećaje, nesanicu i cefalgiju.

[0055] U stvari, eksperimentalno je utvrđeno da se istovremenom primenom alfa-laktalbumina i pomenute kratkolančane masne kiseline ili njenog prekursora ili derivata postiže sinergistički efekat.

[0056] U jednom aspektu ovog pronalaska, gore pomenuta najmanje jedna kratkolančana masna kiselina je sadržana u najmanje jednoj prvoj jedinici doze zajedno sa nosačem prihvatljivim sa farmaceutskog ili prehrambenog stanovišta, a alfa-laktalbumin je sadržan u najmanje jednoj drugoj jedinici doze zajedno sa nosačem prihvatljivim sa farmaceutskog ili prehrambenog stanovišta, pri čemu su navedene jedinice doze različite jedinice namenjene za istovremenu ili odvojenu primenu.

[0057] U sledećem aspektu, farmaceutski preparat ili preparat suplementa za ishranu za upotrebu prema pronalasku se sastoji od farmaceutske kompozicije ili kompozicije suplementa za ishranu koja sadrži gore pomenutu najmanje jednu masnu kiselinu kratkog lanca i alfalaktalbumin zajedno sa nosačem prihvatljivim iz farmaceutskog ili prehrambenog stanovišta.

[0058] Poželjno, u farmaceutskom preparatu ili preparatu suplementa za ishranu prema oba gore pomenuta aspekta ovog pronalaska, alfa-laktalbumin je sadržan u količini u opsegu od 0.1 do 2.0 g, poželjnije od 0.3 do 1.0 g za svaku dozu. Moguće je primenjivati od 1 do 2 doze dnevno.

[0059] Poželjno, farmaceutski preparat ili preparat suplementa za ishranu za upotrebu u skladu sa ovim pronalaskom dalje sadrži magnezijum i/ili vitamine grupe B za stimulaciju konverzije triptofana u serotonin.

[0060] Poželjno se koristi alfa-laktalbumin goveđeg porekla, ne samo zbog činjenice da je njegov aminokiselinski sastav najsličniji ljudskom.

[0061] Kompozicija ili jedinice doze prema pronalasku mogu se primenjivati na različite načine, iako je oralna primena poželjna.

[0062] Poželjno, farmaceutski preparat ili preparat suplementa za ishranu prema ovom pronalasku je pogodan za oralnu primenu i na primer je u obliku tableta, sirupa, kapsula, filmom obloženih tableta ili kesica praha ili granula.

[0063] Gore pomenuta najmanje jedna kratkolančana masna kiselina sadržana u farmaceutskom preparatu ili preparatu suplementa za ishranu prema ovom pronalasku je poželjno izabrana iz grupe koja sadrži buternu kiselinu i β-hidroksi-β-metilbuternu kiselinu i njihove alkalne ili zemnoalkalne soli i njihove estre.

[0064] Među estrima buterne kiseline posebno su poželjni estri sa glicerolom, posebno gliceril tributirat (tributirin), gliceril monobutirat, etil butiril laktat, pivaloiloksimetil butirat, 1-oktil butirat, butirat estri ugljenih hidrata i polioli ugljenih hidrata.

[0065] Tributirin može povoljno da se koristi u obliku kompleksa sa ciklodekstrinom, poželjno kao 1:3 (težinski odnos) kompleks tributirin:gama-ciklodekstrin, da bi se smanjio gorak ukus i neprijatan miris tributirina.

[0066] Poželjno, gore pomenuta najmanje jedna kratkolančana masna kiselina je sadržana u farmaceutskom preparatu ili preparatu suplementa za ishranu prema ovom pronalasku u količini u opsegu od 0.1 do 5.0 g, poželjno od 0.2 do 1.0 g za svaku dozu.

[0067] Ovaj pronalazak se takođe odnosi na alfa-laktalbumin za upotrebu, zajedno sa najmanje jednom masnom kiselinom kratkog lanca izabranom iz grupe koja se sastoji od sirćetne kiseline, propionske kiseline, buterne kiseline, β-hidroksi-β-metilbuterne kiseline, valerijanske kiseline i njihovih soli, estara i mono-, di- i triglicerida, u lečenju poremećaja CNS-a povezanih sa deficijencijom serotonina.

[0068] Takvi poremećaji CNS-a povezani sa deficijencijom serotonina poželjno su izabrani iz grupe koja sadrži epilepsiju, neuropsihijatrijske poremećaje Parkinsonove bolesti i Hantingtonove horeje, depresiju, anksioznost, dopamin-mimetičku psihozu, emocionalnu nestabilnost, kompulzivno-opsesivne poremećaje, nesanicu i cefalgiju.

[0069] Konačno, ovaj pronalazak se odnosi na komplet za upotrebu u lečenju poremećaja CNS-a povezanih sa deficijencijom serotonina, uključujući najmanje jednu prvu jedinicu doze koja sadrži najmanje jednu masnu kiselinu kratkog lanca izabranu iz grupe koja se sastoji od sirćetne kiseline, propionske kiseline, buterne kiseline, β-hidroksi-β-metilbuterne kiseline, valerijanske kiseline i njihovih soli, estara i mono-, di- i triglicerida, sa nosačem prihvatljivim sa farmaceutskog ili prehrambenog stanovišta, i najmanje jednom drugom jedinicom doze koja sadrži α-laktalbumin, zajedno sa nosačem prihvatljivim sa farmaceutskog ili prehrambenog stanovišta, kao i uputstva za istovremenu upotrebu pomenute najmanje jedne prve i najmanje jedne druge jedinice doze u lečenju gore navedenih poremećaja.

[0070] Takvi poremećaji CNS-a povezani sa deficijencijom serotonina poželjno su izabrani iz grupe koja sadrži epilepsiju, neuropsihijatrijske poremećaje Parkinsonove bolesti i Hantingtonove horeje, depresiju, anksioznost, dopamin-mimetičku psihozu, emocionalnu nestabilnost, kompulzivno-opsesivne poremećaje, nesanicu i cefalgiju.

[0071] Alfa-laktalbumin se može primenjivati istovremeno sa masnom kiselinom kratkog lanca, na primer upotrebom farmaceutskih oblika koji sadrži oba aktivna sastojka ili istovremenom primenom dva farmaceutska oblika ili oblika suplementa za ishranu od kojih jedan sadrži alfa-laktalbumin, a drugi jednu kratkolančanu masnu kiselinu. Dva aktivna sastojka se takođe mogu primenjivati u različito vreme tokom dana na osnovu režima doziranja koji odredi lekar.

[0072] Ovaj pronalazak će dalje biti opisan uz pozivanje na neke primere koji su dati.

Primer 1

[0073]

Prečišćeni goveđi alfa-laktalbumin 500 mg

β-hidroksi-β-metilbuterna kiselina 500 mg

Manitol 50 mg

Sredstvo za poboljšanje ukusa 10 mg

[0074] Gore navedeni sastojci u obliku praha su pomešani do homogenosti i kesice za oralnu primenu su napunjene dobijenom smešom.

Primer 2

[0075]

Prečišćeni goveđi alfa-laktalbumin 800 mg

Tributirin 300 mg

Anhidrovani puter 800 mg

Maltodekstrini 90 mg

Sredstvo za poboljšanje ukusa 10 mg

[0076] Alfa-laktalbumin je dispergovan u destilovanoj vodi (8% tež./tež.) i držan uz mešanje 60' na sobnoj temperaturi, zatim zagrevan na 80°C tokom 30' uz mešanje. Rastvor je zatim ohlađen i čuvan na 4°C 12 sati pre nego što je zagrejan na 25°C. Ovom rastvoru se dodaju rastopljeni bezvodni puter i tributirin, formirajući emulziju uz pomoć disperzatora (brzina 15000 rpm). Tako dobijena emulzija je homogenizovana pomoću dvostepenog homogenizatora (1. stepen 7 MPa; 2. stepen 55 MPa) i na kraju sipana u raspršivač (Buchi Mini Spray Dryer B-290), čija je ulazna temperatura održavana na 160°C, dok je izlazna temperatura bila 90°C, sa pritiskom kompresovanog vazduha jednakim 552 kPa.

[0077] Na izlazu iz raspršivača dobijaju se sferoidne mikrokapsule, prosečnog prečnika od oko 4 µm. Aroma i maltodekstrini su dodati ovim mikrokapsulama, unutar miksera, da bi se dobila uniformna disperzija, koja je zatim dozirana u kesice sa jednom dozom.

Primer 3

Kesice granula natrijum butirata

[0078]

Natrijum butirat 300.0 mg

Hidrogenovano palmino ulje 1500 mg

Kalcijum karbonat 200 mg

Maltodekstrini 90 mg

Sredstvo za poboljšanje ukusa 10 mg

[0079] Dobijene su granule natrijum-butirata mikrokapsuliranog u hidrogenizovanom palminom ulju, dodavanjem natrijum-butirata u hidrogenizovano palmino ulje i kalcijum karbonat sadržan u mešalici zagrejanoj na 70°C i držana uz mešanje oko 15 minuta. Tako dobijena homogena smeša je raspršena odgovarajućom mlaznicom unutar rashladne komore na oko -10°C, čime se dobijaju granule sa unutrašnjim jezgrom na bazi natrijum-butirata i oblogom na bazi lipida i kalcijum karbonata. Tako dobijene granule su ravnomerno pomešane sa preostalim sastojcima.

Kesice laktalbumina:

[0080]

Prečišćeni goveđi alfa-laktalbumin 500 mg

Fruktoza 200 mg

Sredstvo za poboljšanje ukusa 10 mg

[0081] Kesice alfa-laktalbumina i kesice granula natrijum butirata bile su upakovane u kartonsku kutiju, u koju je uneto i informativno uputstvo u kome su opisane terapijske indikacije, način uzimanja dve kesice i doziranje.

[0082] Efekti farmaceutskog preparata prema predmetnom pronalasku mogu biti verifikovani korišćenjem životinjskih modela intestinalne inflamacije, koji pokazuju veće dejstvo formulacije u smanjenju inflamacije na inflamaciju izazvanu inflamatornim agensima kao što su na primer Croton tiglium ili dekstran. Takođe, markeri inflamacije creva, uključujući PCR, kalprotektin i specifičniji odnos NFkB p65/Beta aktina, pokazuju veći efekat smanjenja inflamacije formulacije prema ovom pronalasku u poređenju sa zbirom efekata pojedinačnih komponenti. Isti markeri se takođe mogu koristiti u kliničkim studijama za merenje delovanja smanjenja inflamacije. Merenja inflamacije creva se trenutno sprovode i u studijama o neurološkim poremećajima i poremećajima ponašanja, s obzirom na nedavne dokaze o njegovoj zajedničkoj ulozi u patogenetskim mehanizmima različitih neuroloških poremećaja i poremećaja ponašanja. Zanimljivi rezultati dobijeni transplantacijom fecesa su zabeleženi u vezi sa ovim poslednjim, koji pokazuju da crevna disbioza, izazvana inflamacijom, igra fundamentalnu ulogu u ovim poremećajima. Naši klinički podaci pokazuju čvrstu korelaciju između smanjenja inflamacije creva, pri čemu se kao najosetljiviji marker pokazao Bristol Stool Chart test, i smanjenja cefalalgičnih napada kod adolescentnih cefalalgičnih subjekata.

[0083] Pored toga, efekti farmaceutskog preparata u skladu sa ovim pronalaskom mogu biti verifikovani upotrebom životinjskih modela koji se obično koriste za procenu antidepresiva, kao što je na primer test prisilnog plivanja na pacovima prema Cristiano M.S. et al. ("Neonatal treatment with fluoxetine reduces depressive behaviour induced by forced swim in adult rats." Arq Neuropsiquiatr 2002; 60 (4): 928-932) ili test prisilnog plivanja na miševima prema Takahiro N. et al. ("Antidepressant-like effect of apignein and 2,4,5-trimethoxycinnamic acids from Perilla frutescens in the forced swimming test" Biol. Pharm. Bull.2002; 26(4): 474-480) ili na kraju mišji model hroničnog stresa prema D'Aquila P.S. et al. ("Effects of chronic mild stress on performance in behavioral tests relevant to anxiety and depression". Physiol. Behav.

1994; 56 (5): 861-867).

[0084] Konačno, efekti farmaceutskog preparata prema ovom pronalasku mogu biti verifikovani upotrebom životinjskih modela koji se obično koriste za procenu antiepileptičkih sredstava, kao što je na primer onaj koji je otkriven u Russo E. et al., koristeći sredstvo protiv konvulzija pentilentetrazol [ 21].

[0085] Takvi efekti su eksperimentalno verifikovani i rezultati su prikazani u sledećem primeru 4.

Primer 4

[0086] Antikonvulzivno dejstvo preparata prema pronalasku, koji se sastoji od alfalaktalbumina i natrijum butirata, procenjeno je u poređenju sa dejstvom pojedinačnih komponenti alfa-laktalbumina i natrijum butirata u gore pomenutom životinjskom modelu, korišćenjem konvulzivnog sredstva pentilentetrazola.

[0087] Eksperiment je izveden na grupama od 10 C57BL/6 mužjaka miševa (Charles River Italy) za svaku testiranu dozu (takođe su korišćene kontrolne grupe od 10 C57BL/6 mužjaka).

[0088] Životinjama svih grupa je subkutano primenjen pentilentetrazol (65 mg/kg) na kraju 15-dnevnog prethodnog tretmana sa natrijum butiratom, alfa-laktalbuminom, alfa-laktalbuminom natrijum-butiratom ili vehikulumom, odnosno vodom (kontrola).

[0089] Ovaj predtretman je izveden oralnom primenom rastvora bilo kog od natrijum butirata, alfa-laktalbumina, alfa-laktalbumina natrijum butirata u nosaču, koji se sastoji od vode, i samog nosača (vode).

[0090] Prvo, na tri grupe od po 10 miševa je oralno primenjivano 30 mg/dan, 100 mg/dan i 250 mg/dan natrijum butirata, respektivno, u obliku vodenog rastvora koji se nalazi u boci kaveza, tokom 15 dana. Boca kaveza kontrolne grupe (10 miševa) sadržala je samo vodu.

[0091] Na dan 16, na životinje iz četiri grupe subkutano je primenjivano 65 mg/kg pentilentetrazola. Nije primećena značajna razlika između četiri grupe, jer je 100% životinja svake grupe doživelo napade izazvane pentilentetrazolom.

[0092] Zatim je na tri grupe od po 10 miševa oralno primenjivano 125 mg/dan, 250 mg/dan i 375 mg/dan alfa-laktalbumina, respektivno, u obliku vodenog rastvora koji se nalazi u boci kaveza, tokom 15 dana. Boca kaveza kontrolne grupe (10 miševa) sadržala je samo vodu.

[0093] Dana 16 dana, na životinje iz četiri grupe subkutano je primenjivano 65 mg/kg pentilentetrazola (PTZ).

[0094] Kao što se može proceniti na slici 1, leva strana, procenat životinja sa napadima izazvanim PTZ pokazao je smanjenje na način koji zavisi od doze, a najveće smanjenje je postignuto sa dozom od 375 mg/dan alfa-laktalbumina (manje od 40% životinja koje pokazuju napade).

[0095] Konačno, na prvu grupu od 10 miševa oralno je primenjivano 125 mg alfa-laktalbumina 100 mg natrijum butirata dnevno, na drugu grupu od 10 miševa oralno je primenjivano 250 mg alfa-laktalbumina 100 mg natrijum butirata dnevno, na treću grupu od 10 miševa je oralno primenjivano 375 mg alfa-laktalbumina 100 mg natrijum butirata dnevno, u obliku vodenog rastvora koji se nalazio u boci kaveza, tokom 15 dana. Boca kaveza kontrolne grupe (10 miševa) sadržala je samo vodu.

[0096] Na dan 16, na životinje iz četiri grupe subkutano je primenjivano 65 mg/kg pentilentetrazola (PTZ).

[0097] Sl. 1, desna strana, pokazuje značajno smanjenje procenta miševa sa napadima izazvanim PTZ, a najveći pad je postignut sa dozom od 375 mg/dan alfa-laktalbumina 100 mg/dan natrijum butirata (manje od 20% životinja koje pokazuju napade). Pored toga, može se primetiti, s obzirom na vrednosti navedene na levoj strani slike 1, da dodavanje 100 mg/dan natrijum butirata dovodi do snažnog smanjenja procenta životinja sa napadima izazvanim PTZ pri svakoj dozi alfa-laktalbumina. Posebno je vredno napomenuti da doza od 125 mg/dan alfalaktalbumina, koja ne smanjuje značajno procenat miševa sa napadima izazvanim PTZ, kada se primenjuje zajedno sa dozom od 100 mg/dan natrijum butirata, značajno smanjuje takav procenat.

[0098] Ovo je potpuno neočekivano, s obzirom da je utvrđeno da natrijum butirat nema nikakvo delovanje na napade izazvane pentilentetrazolom.

Reference:

[0099]

1) Derek A. Mann e Fiona Oakley, Serotonin paracrine signaling in tissue fibrosis, in Biochimica et Biophysica Acta, vol.1832, n° 7, 2013-7, pp.905-910);

2) Clifford J Rosen, "Breaking into bone biology: serotonin's secrets", in Nature Medicine, vol.

15, n° 2, pp.145-146;

3) Ramadhan B. Matondo, Carine Punt e Judith Homberg, "Deletion of the serotonin transporter in rats disturbs serotonin homeostasis without impairing liver regeneration", in American Journal of Physiology - Gastrointestinal and Liver Physiology, vol. 296, n° 4, 1° aprile 2009, pp. G963-G968,

4) Marieb, Elaine Nicpon, 1936-, "Essentials of human anatomy & physiology", 9th ed, Pearson/Benjamin Cummings, 2009.

5) Jobe PC. Affective disorder and epilepsy comorbidity: implications for development of treatments, preventions and diagnostic approaches. Clin EEG Neurosci.2004 Jan;35(1):53-68 6) Statnick MA, Maring-Smith ML, Clough RW, Wang C, Dailey JW, Jobe PC, Browning RA. Effect of 5,7-dihydroxytryptamine on audiogenic seizures in genetically epilepsy-prone rats. Life Sci.1996;59(21):1763-71.

7) Jobe PC, Browning RA. The serotonergic and noradrenergic effects of antidepressant drugs are anticonvulsant, not proconvulsant. Epilepsy Behav.2005 Dec;7(4):602-19

8) Favale E, Rubino V, Mainardi P, Lunardi G, Albano C. Anticonvulsant effect of fluoxetine in humans. Neurology.1995 Oct;45(10):1926-7.

9) Albano C, Cupello A, Mainardi P, Scarrone S, Favale E. Successful treatment of epilepsy with serotonin reuptake inhibitors: proposed mechanism. Neurochem Res.2006 Apr;31(4):509-14

10) Jobe PC. Common pathogenic mechanisms between depression and epilepsy: an experimental perspective. Epilepsy Behav.2003 Oct;4 Suppl 3:S14-24.

11) Jobe PC, Dailey JW, Wernicke JF. A noradrenergic and serotonergic hypothesis of the linkage between epilepsy and affective disorders. Crit Rev Neurobiol.1999;13(4):317-56

12) Jobe PC. Shared mechanisms of antidepressant and antiepileptic treatments: drugs and devices. Clin EEG Neurosci. 2004 Jan;35(1):25-37.

13) Mainardi P, Leonardi A, Albano C. Potentiation of brain serotonin activity may inhibit seizures, especially in drug-resistant epilepsy. Med Hypotheses. 2008;70(4):876-9.

14) Fernstrom JD, Wurtman RJ. Brain serotonin content: physiological regulation by plasma neutral amino acids. Science.1972 Oct 27;178(4059):414-6.

15) Lunardi G, Mainardi P, Rubino V, Fracassi M, Pioli F, Cultrera S, Albano C. Tryptophan and epilepsy. Adv Exp Med Biol.1996;398:101-2

16) Heuther G, Hajak G, Reimer A, Poeggeler B, Biamer M, Rodenbeck A, Rather E. The metabolic fate of infused L-tryptophan in men: possible clinical implications of the accumulation of circulating tryptophan and tryptophan metabolites. Psychopharmacology (Berl). 1992;109(4):422-32.

17) Frenhani PB, Burini RC. Mechanism of action and control in the digestion of proteins and peptides in humans. Arq Gastroenterol.1999 Jul-Sep;36(3):139-47

18) Markus CR, Klöpping-Ketelaars WI, Pasman W, Klarenbeek B, van den Berg H.Dose-Dependent Effect of α-Lactalbumin in Combination with Two Different Doses of Glucose on the Plasma Trp/LNAA Ratio. Nutr Neurosci.2000;3 (5):345-55.

19) Feurté, Sébastien & Gerozissis, Kyriaki & Regnault, Alain & M. Paul, François. (2001). Plasma Trp/LNAA Ratio Increases During Chronic Ingestion of An alpha-lactalbumin Diet in Rats. Nutritional neuroscience. 4. 413-8.

20) Citraro R, Scicchitano F, De Fazio S, Raggio R, Mainardi P, Perucca E, De Sarro G, Russo E. Preclinical activity profile of α-lactoalbumin, a whey protein rich in tryptophan, in rodent models of seizures and epilepsy. Epilepsy Res. 2011Jun;95(1-2):60-9.

21) Russo E, Scicchitano F, Citraro R, Aiello R, Camastra C, Mainardi P, Chimirri S, Perucca E, Donato G, De Sarro G. Protective activity of α-lactoalbumin (ALAC), a whey protein rich in tryptophan, in rodent models of epileptogenesis. Neuroscience.2012 Dec 13;226:282-8 22) Ushida Y, Shimokawa Y, Matsumoto H, Toida T, Hayasawa H. Effects of bovine alphalactalbumin on gastric defense mechanisms in naive rats. Biosci Biotechnol Biochem. 2003 Mar;67(3):577-83

23) Matsumoto H, Shimokawa Y, Ushida Y, Toida T, Hayasawa H. New biological function of bovine alpha-lactalbumin: protective effect against ethanol- and stress-induced gastric mucosal injury in rats. Biosci Biotechnol Biochem. 2001 May;65(5):1104-11

24) Rusu D, Drouin R, Pouliot Y, Gauthier S, Poubelle PE. A bovine whey protein extract stimulates human neutrophils to generate bioactive IL-1Ra through a NF-kappaB- and MAPK-dependent mechanism. J Nutr.2010 Feb;140(2):382-91

25) Pellegrini A, Thomas U, Bramaz N, Hunziker P, von Fellenberg R. Isolation and identification of three bactericidal domains in the bovine alpha-lactalbumin molecule. Biochim Biophys Acta.1999 Feb 2;1426(3):439-48

26) Marja-Leena Koskiniemi, Journal of the Neurological Sciences, Volume 47, Issue 1, July 1980, Pages 1-6)

27) Fukumoto, S., Tatewaki, M., Yamada, T., Fujimiya, M., Mantyh, C., Voss, M., Eubanks, S., Harris, M., Pappas, T.N., Takahashi, T., 2003. Short-chain fatty acids stimulate colonic transit via intraluminal 5-HT release in rats. Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 284, R1269eR1276

28) Davie JR. Inhibition of histone deacetylase activity by butyrate. J Nutr. 2003 Jul;133(7 Suppl):2485S-2493S

29) Vinolo MA, Rodrigues HG, Nachbar RT, Curi R. Regulation of inflammation by short chain fatty acids. Nutrients. 2011 Oct;3(10):858-76

30) Sekirov I, Russell SL, Antunes LC, Finlay BB. Gut microbiota in health and disease. Physiol Rev.2010 Jul;90(3):859-904

31) Richards JL, Yap YA, McLeod KH, Mackay CR, Mariño E. Dietary metabolites and the gut microbiota: an alternative approach to control inflammatory and autoimmune diseases. Clin Transl Immunology. 2016 May 13;5(5):e82.

32) Corrêa RO, Vieira A, Sernaglia EM, Lancellotti M, Vieira AT, Avila-Campos MJ, Rodrigues HG, Vinolo MA. Bacterial short-chain fatty acid metabolites modulate the inflammatory response against infectious bacteria. Cell Microbiol.2017 Jul; 19(7)

33) Han R, Sun Q, Wu J, Zheng P, Zhao G. Sodium Butyrate Upregulates miR-203 Expression to Exert Anti-Proliferation Effect on Colorectal Cancer Cells. Cell Physiol Biochem.

2016;39(5):1919-1929.

34) Khan S, Jena G. Sodium butyrate reduces insulin-resistance, fat accumulation and dyslipidemia in type-2 diabetic rat: A comparative study with metformin. Chem Biol Interact.

2016 Jul 25;254:124-34

35) Khan S, Jena G. The role of butyrate, a histone deacetylase inhibitor in diabetes mellitus: experimental evidence for therapeutic intervention. Epigenomics.2015;7(4):669-80.

36) Newman JC, Verdin E. β-hydroxybutyrate: much more than a metabolite. Diabetes Res Clin Pract. 2014 Nov;106(2):173-81

37) Butchbach ME, Lumpkin CJ, Harris AW, Saieva L, Edwards JD, Workman E, Simard LR, Pellizzoni L, Burghes AH. Protective effects of butyrate-based compounds on a mouse model for spinal muscular atrophy. Exp Neurol.2016 May;279:13-26.

38) Walsh ME, Bhattacharya A, Sataranatarajan K, Qaisar R, Sloane L, Rahman MM, Kinter M, Van Remmen H. The histone deacetylase inhibitor butyrate improves metabolism and reduces muscle atrophy during aging. Aging Cell.2015 Dec;14(6):957-70.

39) Wang J, Wen L, Wang Y, Chen F. Therapeutic Effect of Histone Deacetylase Inhibitor, Sodium Butyrate, on Allergic Rhinitis In Vivo. DNA Cell Biol.2016 Apr;35(4):203-8 40) Chen Y, Du J, Zhao YT, Zhang L, Lv G, Zhuang S, Qin G, Zhao TC. Histone deacetylase (HDAC) inhibition improves myocardial function and prevents cardiac remodeling in diabetic mice. Cardiovasc Diabetol.2015 Aug 7;14:99

41) Simon-O'Brien E, Alaux-Cantin S, Warnault V, Buttolo R, Naassila M, Vilpoux C. The histone deacetylase inhibitor sodium butyrate decreases excessive ethanol intake in dependent animals. Addict Biol.2015 Jul;20(4):676-89.

42) Liang X, Wang RS, Wang F, Liu S, Guo F, Sun L, Wang YJ, Sun YX, Chen XL. Sodium butyrate protects against severe burn-induced remote acute lung injury in rats. PLoS One.2013 Jul 11;8(7):e68786

43) Mishiro T, Kusunoki R, Otani A, Ansary MM, Tongu M, Harashima N, Yamada T, Sato S, Amano Y, Itoh K, Ishihara S, Kinoshita Y. Butyric acid attenuates intestinal inflammation in murine DSS-induced colitis model via milk fat globule-EGF factor 8. Lab Invest. 2013 Jul;93(7):834-43.

44) Arpaia N, Rudensky AY. Microbial metabolites control gut inflammatory responses. Proc Natl Acad Sci U S A.2014 Feb 11;111(6):2058-9.

45) Resende WR, Valvassori SS, Réus GZ, Varela RB, Arent CO, Ribeiro KF, Bavaresco DV, Andersen ML, Zugno AI, Quevedo J. Effects of sodium butyrate in animal models of mania and depression: implications as a new mood stabilizer. Behav Pharmacol.2013 Oct;24(7):569-79

46) Pandey K, Sharma KP, Sharma SK. Histone deacetylase inhibition facilitatesmassed pattern-induced synaptic plasticity and memory. Learn Mem.2015 Sep15;22(10):514-8.

47) Valvassori SS, Varela RB, Arent CO, Dal-Pont GC, Bobsin TS, Budni J, Reus GZ, Quevedo J. Sodium butyrate functions as an antidepressant and improves cognition with enhanced neurotrophic expression in models of maternal deprivation and chronic mild stress. Curr Neurovasc Res. 2014;11(4):359-66.

48) Blank M, Werenicz A, Velho LA, Pinto DF, Fedi AC, Lopes MW, Peres TV, Leal RB, Domelles AS, Roesler R. Enhancement of memory consolidation by the histone deacetylase inhibitor sodium butyrate in aged rats. Neurosci Lett.2015 May 6;594:76-81

49) Gagliano H, Delgado-Morales R, Sanz-Garcia A, Armario A. High doses of the histone deacetylase inhibitor sodium butyrate trigger a stress-like response. Neuropharmacology. 2014 Apr;79:75-82

50) Kratsman N, Getselter D, Elliott E. Sodium butyrate attenuates social behavior deficits and modifies the transcription of inhibitory/ excitatory genes in the frontal cortex of an autism model. Neuropharmacology. 2016 Mar;102:136-45.

51) Valvassori SS, Dal-Pont GC, Steckert AV, Varela RB, Lopes-Borges J, Mariot E, Resende WR, Arent CO, Carvalho AF, Quevedo J. Sodium butyrate has an antimanic effect and protects the brain against oxidative stress in an animal model of mania induced by ouabain. Psychiatry Res. 2016 Jan 30;235:154-9.

52) Kim, S.W., Hooker, J.M., Otto, N., Win, K., Muench, L., Shea, C., Carter, P., King, P., Reid, A.E., Volkow, N.D., Fowler, J.S., 2013. Whole-body pharmacokinetics of HDAC inhibitor drugs, butyric acid, valproic acid and 4-phenylbutyric acid measured with carbon-11 labeled analogs by PET. Nucl. Med. Biol.40, 912e918

53) Schroeder, F.A., Lin, C.L., Crusio, W.E., Akbarian, S., 2007. Antidepressant-like effects of the histone deacetylase inhibitor, sodium butyrate, in the mouse. Biol. Psychiatry 62, 55e64

54) Wei, Y., Melas, P.A., Wegener, G., Mathe, A.A., Lavebratt, C., 2015. Antidepressant-like effect of sodium butyrate is associated with an increase in TET1 and in 5- hydroxymethylation levels in the Bdnf gene. Int. J. Neuropsychopharmacol. Off. Sci. J. Coll. Int. Neuropsychopharmacol. CINP 18.

55) Intlekofer, K.A., Berchtold, N.C., Malvaez, M., Carlos, A.J., McQuown, S.C., Cunningham, M.J., Wood, M.A., Cotman, C.W., 2013. Exercise and sodium butyrate transform a subthreshold learning event into long-term memory via a brain-derived neurotrophic factor-dependent mechanism. Neuropsychopharmacol. Off. Publ. Am. Coll. Neuropsychopharmacol. 38, 2027e2034.

56) Riazi K, Galic MA, Pittman QJ. Contributions of peripheral inflammation to seizure susceptibility: cytokines and brain excitability. Epilepsy Res.2010 Mar;89(1):34-42.9

57) Chow J, Lee SM, Shen Y, Khosravi A, Mazmanian SK. Host-bacterial symbiosis in health and diseases. Adv.Immunol. 2010; 107:243-74

Claims (15)

Patentni zahtevi

1. Farmaceutski preparat ili preparat suplementa za ishranu koji uključuje α-laktalbumin i najmanje jednu masnu kiselinu kratkog lanca izabranu iz grupe koja se sastoji od propionske kiseline, buterne kiseline, β-hidroksi-β-metilbuterne kiseline, valerijanske kiseline i njihovih soli, estara i mono-, di - i njihovi triglicerida, za upotrebu u lečenju poremećaja centralnog nervnog sistema (CNS) povezanih sa deficijencijom serotonina.

2. Farmaceutski preparat ili preparat suplementa za ishranu za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, naznačen time što su navedeni poremećaji CNS-a povezani sa deficijencijama serotonina izabrani iz grupe koja sadrži epilepsiju, neuropsihijatrijske poremećaje Parkinsonove bolesti i Hantingtonove horeje, depresiju, anksioznost, dopamin-mimetičku psihozu, emocionalnu nestabilnost, kompulzivno-opsesivne poremećaje, nesanicu i cefalalgiju.

3. Farmaceutski preparat ili preparat suplementa za ishranu za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1 i 2, naznačen time što je navedena najmanje jedna kratkolančana masna kiselina sadržana u najmanje jednoj prvoj jedinici doze zajedno sa nosačem prihvatljivim sa farmaceutskog ili prehrambenog stanovišta i α-laktalbumin je sadržan u najmanje jednoj drugoj jedinici doze, izborno koji dalje sadrži magnezijum i/ili vitamine grupe B, zajedno sa nosačem prihvatljivim sa farmaceutskog ili prehrambenog stanovišta, pri čemu su navedene jedinice doze različite jedinice namenjene za istovremenu ili odvojenu primenu.

4. Farmaceutski preparat ili preparat suplementa za ishranu za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1 i 2, koji se sastoji od farmaceutske kompozicije ili kompozicije suplementa za ishranu koja sadrži navedenu najmanje jednu kratkolančanu masnu kiselinu i navedeni αlaktalbumin zajedno sa nosačem prihvatljivim sa farmaceutskog ili prehrambenog stanovišta.

5. Preparat prema patentnom zahtevu 3, naznačen time što je α-laktalbumin sadržan u količini u opsegu od 0.1 do 2.0 g, poželjno od 0.3 do 1.0 g.

6. Preparat prema patentnom zahtevu 4, naznačen time što je α-laktalbumin sadržan u količini u opsegu od 0.1 do 2.0 g, poželjno od 0.3 do 1.0 g.

7. Preparat prema patentnom zahtevu 4 ili 6, naznačen time što pomenuta farmaceutska kompozicija ili kompozicija suplementa za ishranu dalje sadrži magnezijum i/ili vitamine grupe B.

8. Preparat prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, naznačen time što je pogodan za oralnu primenu.

9. Preparat prema patentnom zahtevu 4 ili 6, naznačen time što je pomenuta farmaceutska kompozicija ili kompozicija suplementa za ishranu u obliku tableta, sirupa, kapsula, filmom obloženih tableta ili kesica praha ili granula.

10. Preparat prema patentnom zahtevu 3, 5 ili 7, naznačen time što su navedene najmanje jedna prva i najmanje jedna druga jedinica doze nezavisno u obliku tableta, kapsula, filmom obloženih tableta ili kesica praha ili granula.

11. Preparat prema bilo kom od prethodnih zahteva, naznačen time što je navedena najmanje jedna kratkolančana masna kiselina izabrana iz grupe koja se sastoji od buterne kiseline i βhidroksi-β-metilbuterne kiseline i njene alkalne ili zemnoalkalne soli i njihovih estara sa glicerolom, poželjno od natrijum butirata, gliceril tributirata, gliceril monobutirata, butirat estara ugljenih hidrata i poliola ugljenih hidrata, pri čemu je navedena najmanje jedna kratkolančana masna kiselina poželjno sadržana u količini u opsegu od 0.1 do 5.0 g, poželjnije od 0.2 do 1.0 g.

12. α-Laktalbumin za upotrebu, zajedno sa najmanje jednom kratkolančanom masnom kiselinom izabranom iz grupe koja se sastoji od propionske kiseline, buterne kiseline, βhidroksi-β-metilbuterne kiseline, valerijanske kiseline i njihovih soli, estara i mono-, di- i triglicerida, u lečenju poremećaja CNS-a povezanih sa deficijencijom serotonina.

13. α-Laktalbumin za upotrebu prema patentnom zahtevu 12, naznačen time što su navedeni poremećaji CNS-a povezani sa deficijencijom serotonina izabrani iz grupe koja se sastoji od epilepsije, neuropsihijatrijskih poremećaja Parkinsonove bolesti i Hantingtonove horeje, depresije, anksioznosti, dopamin-mimetičke psihoze, emocionalne nestabilnosti, kompulzivnoopsesivnih poremećaja, nesanice i cefalalgije.

14. Komplet za upotrebu u lečenju poremećaja CNS-a povezanih sa deficijencijom serotonina, koji uključuje najmanje jednu prvu jedinicu doze koja sadrži najmanje jednu kratkolančanu masnu kiselinu izabranu iz grupe koja se sastoji od propionske kiseline, buterne kiseline, βhidroksi-β-metilbuterne kiseline, valerijanske kiseline i njihovih soli, estara i mono-, di- i triglicerida, sa nosačem prihvatljivim sa farmaceutskog ili prehrambenog stanovišta, i najmanje jednom drugom jedinicom doze koja sadrži α-laktalbumin, zajedno sa nosačem prihvatljivim sa farmaceutskog ili prehrambenom stanovišta, kao i uputstva za istovremenu upotrebu pomenute najmanje jedne prve i najmanje jedne druge jedinice doze u lečenju gore navedenih poremećaja.

15. Komplet za upotrebu prema patentnom zahtevu 14, naznačen time što su navedeni poremećaji CNS-a povezani sa deficijencijom serotonina izabrani iz grupe koja se sastoji od epilepsije, neuropsihijatrijskih poremećaja Parkinsonove bolesti i Hantingtonove horeje, depresije, anksioznosti, dopamin-mimetičke psihoze, emocionalne nestabilnosti, kompulzivnoopsesivnih poremećaja, nesanice i cefalalgije.