RS66733B1 - Inhibitori alfa v beta6 integrina - Google Patents

Description

Opis

Povezane prijave

[0001] Ova prijava zahteva prvenstvo u odnosu na privremenu patentnu prijavu SAD br.62/724,397, podnetu 29. avgusta 2018.

Oblast tehnike

[0002] Ovo otkriće se odnosi na nova hemijska jedinjenja i metode korisne za inhibiciju αvβ6 integrina.

Stanje tehnike

[0003] Familija receptora heterodimernih integrina modulira ćelijski oblik i ćelijsku adheziju na ekstracelularni matriks kao odgovor na spoljašnje i unutrašnje znakove.

[0004] Signalizacija integrina kontroliše preživljavanje ćelija, progresiju ćelijskog ciklusa, diferencijaciju ćelija i migraciju ćelija.

[0005] Receptor integrina isključivo može signalizirati ćeliju dvosmerno, i "iznutra prema spolja" i "spolja prema iznutra". Dakle, oni posreduju u migraciji ćelija prenoseći sile sa ekstracelularnog matriksa na citoskelet i regulišu organizaciju citoskeleta da bi se postigle promene oblika potrebne tokom migracije ćelije. Integrini koji se vezuju za RGD mogu da se vežu i aktiviraju TGF-β, a nedavno su uključeni u fibroznu bolest.

[0006] Integrini se eksprimiraju na površini većine ljudskih ćelija. Njihova patologija doprinosi raznovrsnom skupu ljudskih bolesti, uključujući poremećaje trombocita, aterosklerozu, rak/karcinom, osteoporozu, fibrozu, dijabetičku neuropatiju bubrega, makularnu degeneraciju i razne autoimune i hronične inflamatorne bolesti.

[0007] Uloga integrina kao meta lekova je odavno prepoznata, a ukupno šest inhibitora integrina za injekcije je odobreno od strane Uprave za hranu i lekove za lečenje različitih terapijskih indikacija: inflamatorne bolesti creva (Entyvio<®>, Tysabri<®>), multiple skleroze ((Tysabri<®>), i psoriasa (Raptiva<®>), i akutni koronarni sindrom (Reopro<®>, Aggrastat<®>, Integrilin<®>). Međutim, primetno je odsustvo terapijskog uspeha kod oralnih biodostupnih inhibitora integrina.

[0008] Od 24 poznata heterodimera integrina, najmanje polovina je relevantna za upalu, fibrozu, onkologiju i vaskularnu bolest. Postoji potreba za novim klasama inhibitora integrina.

[0009] Na primer, ostaje potreba za malim molekulskim inhibitorom integrina avb6 pogodnim za oralnu administracija. Oralni put administracije je poželjniji za isporuku malih molekula jer omogućava davanje širokog spektra doza, omogućava pogodnu samo administraciju pacijentu, prilagodljiv je različitim režimima doziranja i ne zahteva posebnu opremu. Zbog toga je važno identifikovati jedinjenja inhibitora αvβ6 integrina koja ne samo da su potentna na predviđeni biološki cilj, već takođe pokazuju druge karakteristike koje se odnose na sposobnost jedinjenja da se apsorbuje u telu (npr., nakon oralne isporuke) na terapeutski efikasan način. Na primer, jedinjenja inhibitora αvβ6 integrina mogu da se izaberu i na osnovu potencije i na osnovu performansi u in vitro testu permeabilnosti (npr. procena sposobnosti jedinjenja da pređu sloj ćelija Madin-Darby Canine Kidney (MDCK) sa apikalne na bazolateralnu stranu (A->B)).

[0010] WO 2017/162572 A1 otkriva jedinjenja pirolidina kao antagoniste integrina αvβ6 za upotrebu u terapiji, posebno u lečenju idiopatske plućne fibroze.

[0011] WO 2016/046225 A1 i WO 2016/046226 A1 otkrivaju jedinjenja pirolidina kao antagoniste αvβ6 integrina za upotrebu u terapiji, posebno u lečenju stanja za koja je indikovan antagonist αvβ6 integrina.

[0012] WO 2018/119087 A1 otkriva jedinjenja aminokiselina kao inhibitore integrina αvβ6 za upotrebu u lečenju tkivno specifične fibroze kao što je idiopatska plućna fibroza i nespecifična intersticijska pneumonija.

[0013] WO 2018/160521 A2 otkriva inhibitore malih molekula αvβ6 integrina za upotrebu u lečenju stanja uključujući idiopatsku plućnu fibrozu i dijabetičku nefropatiju.

Kratak opis

[0014] Podnosioci prijava su otkrili nova jedinjenja inhibitora αvβ6 integrina i procenili posedovanje, performanse i korisnost reprezentativnih primera takvih jedinjenja, kako za biohemijsku potenciju (npr., korišćenjem testa iz Primera ispod za procenu testova polarizacije fluorescencije jedinjenja, korišćenjem osobina avb6 in perabilnosti avtro.g. MDCK test permeabilnosti u ovde datim Primerima).

[0015] Generalno, ovo otkriće se odnosi na jedinjenje formule I:

A-B-C (I)

pri čemu:

B je -alkilen-C*H(F)-, -alkilen-C*(F)2-, -alkilen-CH(F)C*H2-, -alkilen-C(F)2C*H2-, -alkilen-O-alkilen-C*H(F)-, ili -alkilen-O-alkilen-C*(F)2-;

R1je nezavisno H, alkil, halogenid, alkoksi, CF3, OH, alkilen-OH, NO2, ili - N(H)Ra;

R2je H, alkil, supstitusan ili nesupstitusan aril, supstitusan ili nesupstitusan heteroaril, cikloalkil, -alkilen-alkoksi, alkilen-aril, ili heterocikloalkil;

R3je nezavisno odabran od H, halogenid, CF3, alkil, alkilen-alkoksi, aril, hidroksil, i alkoksi;

Raje H, (C1-C6)alkil, -(C1-C6)alkilen-O-(C1-C6)alkil, ili -(C1-C6)alkilen-O-C(O)O(C1-C6)alkil;

n je 0, 1, 2, 3, ili 4;

*označava tačku vezivanja B za C; i

apsolutna konfiguracija u bilo kom stereocentru je R, S, ili njihova smesa;

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0016] Ovaj pronalazak je usmeren ka specifičnim, pojedinačnim jedinjenjima definisanim u zahtevima.

[0017] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje kao što je ovde opisano za upotrebu u postupku lečenja bolesti ili stanja odabranog iz grupe koju čine idiopatska plućna fibroza, dijabetička nefropatija, fokalna segmentna glomeruloskleroza, hronična bolest bubrega, primarni nealkoholni steatohitis, primarni bilijarni holangitis, primarni sklerozni holangiritis, čvrsti/solidni tumori, hematološki tumori, transplantacija organa, Alportov sindrom, intersticijalna bolest pluća, fibroza izazvana zračenjem, fibroza izazvana bleomicinom, fibroza izazvana azbestom, fibroza izazvana gripom, fibroza izazvana koagulacijom, fibroza izazvana vaskularnom povrednom, aortna stenoza i srčana fibroza, koji obuhvata korak: administriranja subjektu kome je to potrebno terapeutski efikasne količine bilo kog od ovde opisanih jedinjenja.

KRATAK OPIS SLIKA

[0018]

Slika 1 prikazuje tabelu koja sumira inhibiciju αvβ6 integrina pomoću jedinjenja datih kao primeri izmerenih u testu fluorescentne polarizacije.

Slika 2 prikazuje tabelu koja sumira inhibiciju αvβ6 integrina dodatnim jedinjenja datim kao primeri izmerenih u testu fluorescentne polarizacije.

Slika 3A prikazuje tabelu koja sumira svojstva permeabilnosti jedinjenja sa Slike 1 datih kao primeri izmerena u MDCK in vitro testu iz Primera 20.

Slika 3B prikazuje tabelu koja sumira svojstva permeabilnosti jedinjenja sa Slike 2 datih kao primeri, merena u MDCK in vitro testu iz Primera 20.

DETALJAN OPIS

[0019] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenja koja inhibiraju αvβ6integrin. U određenim realizacijama, jedinjenja su selektivna za αvβ6 integrin.

[0020] Jedinjenja će biti korisna za lečenje idiopatske plućne fibroze, dijabetičke nefropatije, fokalne segmentne glomeruloskleroze, hronične bolesti bubrega, nealkoholnog steatohepatitisa, primarnog bilijarnog holangitisa, primarnog skleroznog holangitisa, čvrstih/solidnih tumora, hematoloških tumora, transplantacije organa, Alportovog sindroma, intersticijalne bolesti pluća, fibroze izazvane zračenjem, fibroze izazvane bleomicinom, fibroze izazvane azbestom, fibroze izazvane gripom, fibroze izazvane koagulacijom, fibroze izazvane vaskularnim povredama, aortne stenozea, ili srčane fibroze.

DEFINICIJE

[0021] Radi pogodnosti, pre daljeg opisa ovog pronalaska, ovde su sakupljeni određeni termini koji se koriste u specifikaciji, primerima i priloženim zahtevima. Ove definicije treba da se shvatiti u svetlu ostatka otkrića i da ih razume prosečnog stručnjaka u ovoj oblasti tehnike. Osim ako nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni termini korišćeni ovde imaju isto značenje koje obično razume prosečna stručnjak iz oblasti thenike.

[0022] Da bi se ovaj pronalazak lakše razumeo, određeni termini i fraze su definisani ispod i u celom tekstu opisa.

[0023] Članovi (u originalnom tekstu) "a" i "an" se ovde koriste da upućuju na jedan ili na više od jednog (tj., na najmanje jedan) gramatičkog objekta članka. Na primer, "element" označava jedan element ili više od jednog elementa.

[0024] Izraz "i/ili", kako se ovde koristi u specifikaciji i zahtevima, treba shvatiti da znači "svaki ili oba" od tako spojenih elemenata, tj. elemenata koji su konjunktivno prisutni u nekim slučajevima i disjunktivno prisutni u drugim slučajevima. Više elemenata navedenih sa "i/ili" treba tumačiti na isti način, tj. "jedan ili više" tako spojenih elemenata. Drugi elementi mogu opciono biti prisutni osim elemenata koji su posebno identifikovani klauzulom „i/ili“, bez obzira da li su povezani ili nepovezani sa onim elementima koji su posebno identifikovani. Tako, kao neograničavajući primer, referenca na „A i/ili B“, kada se koristi u sprezi sa fleksibilnim jezikom kao što je „sadrži“, može se odnositi, u jednom aspektu, samo na A (opciono uključuje elemente koji nisu B); u drugoj varijanti, samo za B (opciono uključujući elemente koji nisu A); u još jednoj realizaciji, i za A i za B (opciono uključujući druge elemente); itd.

[0025] Kako se ovde koristi u specifikaciji i zahtevima, "ili" treba razumeti da ima isto značenje kao "i/ili" kao što je gore definisano. Na primer, kada se elementi odvajaju na listi, „ili“ ili „i/ili“tumačiće se inkluzivno, tj. uključivanje najmanje jednog, ali i više od jednog, od broja ili liste elemenata, i, opciono, dodatnih nenavedenih elemenata. Samo izrazi koji su jasno naznačavaju suprotno, kao što su „samo jedan od“ ili „tačno jedan od“ ili, kada se koriste u zahtevima, „sastoji se od“, odnosiće se na uključivanje tačno jednog elementa od nabrojanih ili liste elemenata. Uopšteno govoreći, termin „ili“ kako se ovde koristi će se tumačiti samo kao označavanje isključivih alternativa (tj. „jedna ili druga, ali ne obe“) kada mu prethode termini ekskluzivnosti, kao što su „bilo“, „jedan od“, „samo jedan od“ ili „tačno jedan od“. "Sastoji se u suštini od", kada se koristi u patentnim zahtevima, imaće svoje uobičajeno značenje kao što se koristi u oblasti patentnog prava.

[0026] Kako se ovde koristi u specifikaciji i u zahtevima, fraza "najmanje jedan", u odnosu na listu jednog ili više elemenata, treba shvatiti da znači najmanje jedan element odabran od bilo kog ili više elemenata na listi elemenata, ali ne mora da uključuje najmanje jedan od svakog elementa posebno naveden u listi elemenata i ne isključujući bilo koju kombinaciju elemenata liste. Ova definicija takođe dozvoljava da elementi mogu opciono biti prisutni osim elemenata koji su posebno identifikovani u okviru liste elemenata na koje se odnosi izraz „najmanje jedan“, bilo da su povezani ili nepovezani sa onim elementima koji su posebno identifikovani. Dakle, kao neograničavajući primer, „najmanje jedan od A i B“ (ili, ekvivalentno, „najmanje jedan od A ili B,“ ili, ekvivalentno, „najmanje jedan od A i/ili B“) može da se odnosi, u jednoj realizaciji, na najmanje jedan, opciono uključujući više od jednog, A, bez prisustva B (i opciono uključujući elemente koji nisu B); u sledećoj varijanti, do najmanje jednog, opciono uključujući više od jednog, B, bez prisutnog A (i opciono uključujući elemente koji nisu A); u još jednoj realizaciji, do najmanje jednog, opciono uključujući više od jednog, A, i najmanje jednog, opciono uključujući više od jednog, B (i opciono uključujući druge elemente); itd.

[0027] Takođe treba shvatiti da, osim ako nije jasno naznačeno suprotno, u bilo kojoj metodi koja je ovde otkrivena koja uključuje više od jednog koraka ili radnje, redosled koraka ili radnji metode nije nužno ograničen na redosled kojim se navode koraci ili radnje metode.

[0028] U zahtevima, kao iu gore navedenoj specifikaciji, sve prelazne fraze kao što su „sadrži“, „uključujući“, „nosi“, „ima“, „obuhvata“, „uključuje“, „drži“, „sastoji se od“, treba shvatiti kao fleksibilne, tj. samo prelazne fraze „sastoje se od“ i „sastoje se u suštini od“ biće zatvorene ili poluzatvorene prelazne fraze, respektivno, kao što je navedeno u Priručniku United States Patent Office Manual of Patent Examining Procedures, Section 2111.03.

[0029] Određena jedinjenja sadržana u kompozicijama ovog pronalaska mogu postojati u određenim geometrijskim ili stereoizomernim oblicima. Pored toga, polimeri ovog pronalaska mogu takođe biti optički aktivni. Predmetni pronalazak razmatra sva takva jedinjenja, uključujući cis- i trans-izomere, R-i S-enantiomere, dijastereomere, (D)-izomere, (L)-izomere, njihove racemske smeše i druge njihove smeše, tako da su obuhvaćeni obimom pronalaska. U supstituentu mogu da budu prisutni i dodatni asimetrični atomi ugljenika kao što je alkil grupa. Svi takvi izomeri, kao i njihove smeše, treba da budu obuhvaćeni ovim pronalaskom.

[0030] Ako se, na primer, tražiodređeni enantiomer jedinjenja iz ovog pronalaska, on se može pripremiti asimetričnom sintezom, ili derivacijom sa hiralnom pomoćnom supstancom, gde je rezultujuća dijastereomerna smeša odvojena, a pomoćna grupa odcepljena da bi se dobili čisti željeni enantiomeri. Alternativno, gde molekul sadrži baznu funkcionalnu grupu, kao što je amino, ili kiselu funkcionalnu grupu, kao što je karboksil, dijastereomerne soli se formiraju sa odgovarajućom optički aktivnom kiselinom ili bazom, nakon čega sledi razdvajanje tako formiranih dijastereomera frakcionom kristalizacijom ili hromatografskim sredstvima dobro poznatim u tehnici, i naknadnom regeneracijom čistih enantiomera.

[0031] Strukture prikazane ovde takođe podrazumevaju jedinjenja koja se razlikuju samo u prisustvu jednog ili više izotopski obogaćenih atoma. Na primer, jedinjenja proizvedena zamenom vodonika deuterijumom ili tricijumom, ili ugljenika sa<13>C- ili<14>C obogaćenim ugljenikom su u okviru ovog pronalaska.

[0032] Termin "prolek" kako se ovde koristi obuhvata jedinjenja koja se, pod fiziološkim uslovima, pretvaraju u terapeutski aktivne agense. Uobičajeni metod za pravljenje proleka uključuje odabrane delove koji su hidrolizovani u fiziološkim uslovima da bi se otkrio željeni molekul. U drugim realizacijama, prolek je konvertovan enzimskom aktivnošću životinje domaćina.

[0033] Izraz "farmaceutski prihvatljiv ekscipijent" ili "farmaceutski prihvatljiv nosač" kako se ovde koristi označava farmaceutski prihvatljiv materijal, kompoziciju ili vehikulum, kao što je tečno ili čvrsto punilo, razblaživač, ekscipijent, rastvarač ili materijal za kapsuliranje, koji je uključen u prenos ili transport predmetnog jedinjenja do drugog organa ili dela tela, do drugog organa ili dela tela. Svaki nosač mora biti "prihvatljiv" u smislu da je kompatibilan sa ostalim sastojcima formulacije, da nije štetan za pacijenta i suštinski nepirogen. Neki primeri materijala koji mogu poslužiti kao farmaceutski prihvatljivi nosači uključuju: (1) šećere, kao što su laktoza, glukoza i saharoza; (2) skrobovi, kao što su kukuruzni skrob i krompirov skrob; (3) celuloza i njeni derivati, kao što su natrijum karboksimetil celuloza, etil celuloza i celuloza acetat; (4) tragakant u prahu; (5) slad; (6) želatin; (7) talk; (8) ekscipijensi, kao što su kakao puter i voskovi za supozitorije; (9) ulja, kao što su ulje od kikirikija, ulje semena pamuka, ulje šafranike, susamovo ulje, maslinovo ulje, kukuruzno ulje i sojino ulje; (10) glikoli, kao što je propilen glikol; (11) polioli, kao što su glicerin, sorbitol, manitol i polietilen glikol; (12) estri, kao što su etil oleat i etil laurat; (13) agar; (14) puferski agensi, kao što su magnezijum hidroksid i aluminijum hidroksid; (15) alginska kiselina; (16) voda bez pirogena; (17) izotonični fiziološki rastvor; (18) Ringerov rastvor; (19) etil alkohol; (20) rastvori fosfatnog pufera; i (21) druge netoksične kompatibilne supstance koje se koriste u farmaceutskim formulacijama. U određenim realizacijama, farmaceutske kompozicije ovog pronalaska su nepirogene, tj. ne izazivaju značajno povišenje temperature kada se administriraju pacijentu.

[0034] Termin "farmaceutski prihvatljive soli" odnosi se na relativno netoksične, neorganske i organske kisele adicione soli jedinjenja(a). Ove soli se mogu pripremiti in situ tokom konačnog izolovanja i prečišćavanja jedinjenja, ili odvojenom reakcijom prečišćenog(prečišćenih) jedinjenja u njegovom//njihovom obliku slobodne baze sa odgovarajućom organskom ili neorganskom kiselinom, i izolovanjem tako formirane soli. Reprezentativne soli uključuju hidrobromid, hidrohlorid, sulfat, bisulfat, fosfat, nitrat, acetat, valerat, oleat, palmitat, stearat, laurat, benzoat, laktat, fosfat, tozilat, citrat, maleat, fumarat, sukcinat, tartarat, natraflat, mezilat, glukoheptonat, laktobionat i laurilsulfonat soli. (Videti, na primer, Berge et al. (1977) "Pharmaceutical so s", J. Pharm. Sci.66: 1-19.)

[0035] U drugim slučajevima, jedinjenja korisna u ovom pronalasku mogu da sadrže jednu ili više kiselih funkcionalnih grupa i, prema tome, mogu da formiraju farmaceutski prihvatljive soli sa farmaceutski prihvatljivim bazama. Izraz "farmaceutski prihvatljive soli" u ovim slučajevima se odnosi na relativno netoksične neorganske i organske bazne adicione soli jedinjenja. Ove soli se takođe mogu pripremiti in situ tokom finalne izolacije i prečišćavanja jedinjenja, ili odvojenom reakcijom prečišćenog(prečišćenih) jedinjenja u njegovom obliku slobodne kiseline sa odgovarajućom bazom, kao što je hidroksid, karbonat, ili bikarbonat farmaceutski prihvatljivog metalnog katjona, sa amonijakom, ili sa farmaceutski prihvatljivim primarnim, sekundarnim ili tercijarnim aminom. Reprezentativne alkalne ili zemnoalkalne soli uključuju soli litijuma, natrijuma, kalijuma, kalcijuma, magnezijuma i aluminijuma. Reprezentativni organski amini korisni za formiranje baznih adicionih soli uključuju etilamin, dietilamin, etilendiamin, etanolamin, dietanolamin i piperazin, (videti, na primer, Berge et al., supra).

[0036] "Terapeutski efikasna količina" (ili "efikasna količina") jedinjenja u odnosu na upotrebu u lečenju, odnosi se na količinu jedinjenja u preparatu koja, kada se administrira kao deo željenog režima doziranja (sisarima, poželjno ljudima) olakšava simptom, ublažava stanje, ili usporava nastanak stanja bolesti u skladu sa klinički prihvatljivim standardima za poremećaj ili stanje koje treba lečiti ili kozmetičku svrhu, na primer, uz razuman odnos koristi/rizika koji se primenjuje na bilo koji medicinski tretman.

[0037] Termin "profilaktički ili terapeutski" tretman je priznat u tehnici i uključuje administriranje domaćinu jedne ili više predmetnih kompozicija. Ako je primenjen pre kliničke manifestacije neželjenog stanja (npr. bolesti ili drugog neželjenog stanja životinje domaćina), tada je tretman profilaktički, (tj. štiti domaćina od razvoja neželjenog stanja), dok ako se primenjuje nakon ispoljavanja neželjenog stanja, tretman je terapijski, (tj. namenjen je smanjenju, poboljšanju, ili stabilizaciji postojećeg neželjenog stanja ili njegovih neželjenih efekata).

[0038] Termin "pacijent" se odnosi na sisara kome je potreban poseban tretman. U određenim rešenjima, pacijent je primat, pas, mačka, ili konj. U određenim realizacijama, pacijent je čovek.

[0039] Alifatski lanac obuhvata klase alkila, alkenila i alkinila definisane u nastavku. Prav/ravan alifatski lanac je ograničen na nerazgranate delove ugljeničnog lanca. Kako se ovde koristi, izraz "alifatična grupa" se odnosi na ravan lanac, razgranat lanac, ili cikličnu alifatičnu ugljovodoničnu grupu i uključuje zasićene i nezasićene alifatične grupe, kao što je alkil grupa, alkenil grupa, ili alkinil grupa.

[0040] "Alkil" se odnosi na potpuno zasićeni cikličan ili acikličan, razgranati ili nerazgranati ugljenični lanac koji ima određeni broj atoma ugljenika, ili do 30 atoma ugljenika ako nije data specifikacija. Na primer, alkil sa 1 do 8 atoma ugljenika se odnosi na delove kao što su metil, etil, propil, butil, pentil, heksil, heptil i oktil, i one delove koji su pozicioni izomeri ovih grupa. Alkil sa 10 do 30 atoma ugljenika uključuje decil, undecil, dodecil, tridecil, tetradecil, pentadecil, heksadecil, heptadecil, oktadecil, nonadecil, eikozil, heneikozil, dokozil, trikozil i tetrakozil. U određenim realizacijama, alkil sa ravnim ili razgranatim lancem ima 30 ili manje atoma ugljenika u svojoj skeletu (npr. C1-C30za prave lance, C3-C30za razgranate lance), a poželjnije 20 ili manje. Alkilne grupe mogu biti supstituisane ili nesupstituisane.

[0041] Kako se ovde koristi, termin "alkilen" se odnosi na alkil grupu koja ima određeni broj ugljenika, na primer od 2 do 12 atoma ugljenika, koja sadrži dve tačke vezivanja za ostatak jedinjenja na svom najdužem lancu ugljenika. Neograničavajući primeri alkilen grupa uključuju -(CH2)-, etilen -(CH2CH2)-, n-propilen - (CH2CH2CH2)- i izopropilen -(CH2CH(CH3))-. Alkilen grupe mogu biti ciklične ili aciklične, razgranati ili nerazgranati ugljenični lanac, i mogu opciono biti supstituisane sa jednim ili više supstituenata.

[0042] "Cikloalkil" označava mono- ili biciklične ili premoštene ili spirociklične, ili policiklične zasićene karbociklične prstenove, gde svaki ima od 3 do 12 atoma ugljenika. Slično, poželjni cikloalkili imaju od 3-10 atoma ugljenika u svojoj prstenastoj strukturi, a poželjnije imaju 3-6 ugljenika u strukturi prstena. Cikloalkil grupe mogu biti supstituisane ili nesupstituisane.

[0043] Osim ako broj ugljenika nije drugačije naznačen, "niži alkil", kako se ovde koristi, označava alkil grupu, kao što je gore definisano, ali koja ima od jednog do deset ugljenika, poželjnije jedan do šest atoma ugljenika u svojoj strukturi, kao što su metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, izobutil, sek-butil, i terc-butil. Slično, "niži alkenil" i "niži alkinil" imaju slične dužine lanca. U celoj primeni, poželjne alkil grupe su niži alkili. U određenim realizacijama, supstituent koji je ovde označen kao alkil je niži alkil.

[0044] "Alkenil" se odnosi na bilo koji cikličan ili acikličan, razgranat ili nerazgranat deo nezasićenog ugljeničnog lanca koji ima određeni broj atoma ugljenika, ili do 26 atoma ugljenika ako nije navedeno ograničenje na broj atoma ugljenika; i imaju jednu ili više dvostrukih veza u ostatku. Alkenil od 6 do 26 atoma ugljenika je ilustrovan heksenil, heptenil, oktenil, nonenil, decenil, undecenil, dodenil, tridecenil, tetradecenil, pentadecenil, heksadecenil, heptadecenil, oktadecenil, nonadecenil, eikozoenil, heneikozoenil, dokozenil, trikozenil, i tetrakozenil, u njihovim različitim izomernim oblicima, gde nezasićene veze mogu biti locirane bilo gde u ostatku i mogu imati ili (Z) ili (E) konfiguraciju oko dvostruke veze (dvostrukih veza).

[0045] "Alkinil" se odnosi na hidrokarbil grupe u okviru alkenila, ali koji imaju jednu ili više trostrukih veza u ostatku.

[0046] Termin "alkiltio" se odnosi na alkil grupu, kao što je gore definisano, sa ostatakom koji sadrži sumpor vezanim za nju. U određenim realizacijama, "alkiltio" deo je predstavljen jednim od -(S)-alkil, -(S)-alkenil, -(S)-alkinil, i -(S)-(CH2)m-R<1>, gde su m i R<1>definisani u nastavku. Reprezentativne alkiltio grupe uključuju metiltio i etiltio. Izrazi "alkoksil" ili "alkoksi" kako se ovde koriste odnose se na alkil grupu, kao što je definisano u nastavku, koja ima kiseoničnu grupu vezanu za nju. Reprezentativne alkoksil grupe uključuju metoksi, etoksi, propoksi i terc-butoksi. "Etar" predstavlja dva ugljovodonika kovalentno povezana kiseonikom. Shodno tome, alkil supstituent koji čini da alkil je etar ili podseća na alkoksil, kao što se može predstaviti jednim od -O-alkil, -O-alkenil, -O-alkinil, -O-(CH2)m-R10, gde su m i R10, opisani u nastavku.

[0047] Termini "amin" i "amino" su poznati u struci i odnose se i na nesupstitusan i na supstitusan amin, npr., deo koji se može predstaviti formulama:

pri čemu svaki od R11, R12i R13nezavisno predstavljaju vodonik, alkil, alkenil, , -(CH2)m-R10, ili R11i R12uzeti zajedno sa N atomom za koji su vezani čine heterocikl koji ima od 4 do 8 atoma u strukturi prstena; R10predstavlja alkenil, aril, cikloalkil, a cikloalkenil, heterociklil, ili policiklil; i m je nula ili ceo broj u opsegu od 1 do 8. U određenim realizacijama, samo jedan od R11ili R12može da bude karbonil, npr. R11, R12, i azot zajedno ne formira imid. U još izvesnijim realizacijama, R11, R12(i opciono R13) svaki nezavisno predstavljaju vodonik, alkil, alkenil, ili -(CH2)m- R10. Tako, izraz "alkilamin" kako se ovde koristi označava amin grupu, kao što je gore definisano, koja ima supstitusan ili nesupstitusan alkil vezan za nju, tj., najmanje jedan od R11i R12je alkil grupa. U određenim realizacijama, amino grupa ili alkilamin je bazna, što znači da ima konjugovanu kiselinu sa pKa> 7.00, tj. protonovani oblici ovih funkcionalnih grupa imaju pKas u odnosu na vodu iznad oko 7,00.

[0048] Termin "amid", kako se ovde koristi, odnosi se na grupu

pri čemu svaki R14nezavisno predstavlja vodonik ili hidrokarbil grupu, ili su dva R14uzeta zajedno sa atomom N za koji su vezani, čine heterocikl koji ima od 4 do 8 atoma u strukturi prstena.

[0049] Termin "aril" kako se ovde koristi obuhvata 3- do 12-člane supstituisane ili nesupstituisane aromatične grupe sa jednim prstenom (monocikličan) u kojima svaki atom prstena je ugljenik (tj. karbociklički aril) ili gde jedan ili više atoma su heteroatomi (tj. heteroaril). Poželjno, aril grupe obuhvataju 5- do 12-člane prstenove, poželjnije 6- do 10-člane prstenove. Termin "aril" takođe uključuje sisteme policikličnih prstenova koji imaju dva ili više cikličnih prstena u kojima su dva ili više ugljenika zajednička za dva susedna prstena pri čemu najmanje jedan od prstenova može biti aromatičan, npr. Drugiciklični prstenovi mogu da budu cikloalkili, cikloalkenili, cikloalkinili, arili, heteroarili, i/ili heterociklili. Karbociklične aril grupe uključuju benzen, naftalen, fenantren, fenol i anilin. Heteroaril grupe obuhvataju supstituisane ili nesupstituisane 3- do 12-člane aromatične prstenaste strukture, poželjnije 5- do 12-člane prstenove, poželjnije 5- do 10-člane prstenove, čije strukture prstena uključuju jedan do četiri heteroatoma. Heteroarilne grupe uključuju, na primer, pirol, furan, tiofen, imidazol, oksazol, tiazol, triazol, pirazol, piridin, pirazin, piridazin i pirimidin. Aril i heteroaril mogu biti monociklični, biciklistički, ili policiklični. Svaki primer aril grupe može biti nezavisno opciono supstituisan, tj. nesupstitusan ("nesupstitusan aril") ili supstituisan ("supstitusan aril") sa jednim ili više supstituenata; npr., na primer, od 1 do 5 supstituenata, 1 do 4 supstituenta, 1 do 3 supstituenta, 1 do 2 supstituenta ili samo 1 supstituent. Aromatični prsten može biti supstituisan na jednoj ili više pozicija u prstenu sa jednim ili više supstituenata, kao što su halogen, azid, alkil, aralkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, hidroksil, alkoksil, amino, nitro, sulfhidril, imino, amido, fosfonat, fosfinar, karbonil, karboksil, silil, etar, alkiltio, sulfonil, sulfonamido, keton, aldehid, estar, heterociklil, aromatične ili heteroaromatične grupe, fluoralkil (kao što je trifluormetil), cijano, ili slično. Na primer, u određenim realizacijama, aril grupa može biti nesupstitusan C5-C12aril, a u određenim realizacijama, aril grupa može biti supstituisan C5-C10aril.

[0050] Termin "halo", "halogenid", ili "halogen" kako se ovde koristi označava halogen i uključuje, na primer, i bez ograničenja fluor, hlor, brom i jod, u radioaktivnom i neradioaktivnom obliku. U poželjnom izvođenju, halo je odabran iz grupe koju čine fluor, hlor i brom.

[0051] Izrazi "heterociklil" ili "heterociklična grupa" odnose se na 3- do 12-člane prstenaste strukture, poželjnije 5- do 12-člane prstenove, poželjnije 5- do 10-člane prstenove, čije strukture prstena uključuju jedan do četiri heteroatoma. Heterocikli mogu biti monociklični, biciklistički, spirociklični, ili policiklični. Heterociklčne grupe uključuju, na primer, tiofen, tiantren, furan, piran, izobenzofuran, hromen, ksanten, fenoksatiin, pirol, imidazol, pirazol, izotiazol, izoksazol, piridin , pirazin, pirimidin, piridazin, indolizin, izoindol, indol, indazol, purin, hinolizin, izohinolin, hinolin, ftalazin, naftiridin, hinoksalin, hinazolin, kinolin, pteridin, karbazol, karbolin, fenantridin, akridin, pirimidin, fenantrolin, fenazin, fenarsazin, fenotiazin, furazan, fenoksazin, pirolidin, oksolan, tiolan, oksazol, piperidin, piperazin, morfolin, laktoni, laktami kao [to su azetidinoni i pirolidinoni, sultami i sultoni. Heterociklični prsten može da bude supstitusan na jednom ili više položaja sa supstituentima, kao na primer, halogen, alkil, aralkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, hidroksil, amino, nitro, sulfhidril, imino, amido, fosfat, fosfonat, fosfinat, karbonil, karboksil, silil, sulfamoil, sulfinil, etar, alkiltio, sulfonil, keton, aldehid, estar, heterociklil, aromatična ili heteroaromatična grupa, -CF3, i -CN.

[0052] Izraz "karbonil" je art-recognized and includes such moieties as can be represented by the formula:

gde X' je veza ili predstavlja kiselinik ili sumpor, i R15predstavlja vodonik, alkil, alkenil, -(CH2)m-R10ili farmaceutski prihvatljivu so , R16predstavlja vodonik, alkil, alkenil ili -(CH2)m-R10, gde m i R10su kao što je prethodno definisano. Pri čemu X' je kiseonik i R15ili R16nije vodonik, formula predstavlja "estar." Kada X' je kiseonik, i R15je kao što je prethodno definisanogrupa na koju se ovde poziva je karboksil grupa, a posebno kada R15je vodonik, formula predstavlja "karboksilnu kiselinu ". Kada X' je kiseonik, i R16je vodonik, formula predstavlja "format." Generalno, kada atom kiseonika u prethodno datoj formuli je zamenjena sumporom, formula predstavlja "tiokarbonil" grupu. Kada X' je sumpor i R15ili R16nije vodonik, formula predstavlja "tioestar" grupu. Kada X' je sumpor i R15je vodonik, formula predstavlja grupu "tiokarboksilne kiseline". Kada X' je sumpor i R16je vodonik, formula predstavlja "tioformat" grupu. Sa druge strane, kada X' je veza, i R15nije vodonik, prethodno data formula predstavlja "keto" grupu. Kada X' je veza, i R15je vodonik, prethodno data formula predstavlja "aldehidnu" grupu.

[0053] Kako se ovde koristi, termin "supstitusan" podrazumeva se da uključuje sve dozvoljene supstituente organskih jedinjenja. U širem aspektu, dozvoljeni supstituenti uključuju acikličke i ciklične, razgranate i nerazgranate, karbociklične i heterociklične, aromatične i nearomatične supstituente organskih jedinjenja. Primeri supstituenata uključuju, na primer, one koji su gore opisani. Dozvoljeni supstituenti mogu biti jedan ili više i isti ili različiti za odgovarajuća organska jedinjenja. Za potrebe ovog pronalaska, heteroatomi kao što je azot mogu imati supstituente vodonika i/ili bilo koje dozvoljene supstituente organskih jedinjenja koja su ovde opisana koji zadovoljavaju valence heteroatoma. Ovaj pronalazak nema nameru da bude ograničen na bilo koji način dozvoljenim supstituentima organskih jedinjenja. Podrazumeva se da "supstitucija" ili "supstituisana sa" uključuje implicitnu uslov da je takva supstitucija u skladu sa dozvoljenom valentnošću supstituisanog atoma i supstituenta, i da supstitucija rezultira stabilnim jedinjenjem, npr., koje ne prolazi spontano kroz transformaciju kao što je preraspodela, ciklizacija, itd.

[0054] Kako se ovde koristi, izraz "nitro" označava -NO2; izraz "halogen" označava -F, -Cl, -Br, ili -I; izraz "sulfhidril" označava -SH; izraz "hidroksil" označava -OH; izraz "sulfonil" označava -SO2-; izraz "azido" označava -N3; izraz "cijano" označava -CN; izraz "izocijanato" označava -NCO; izraz "tiocijanato" označava -SCN; izraz "izotiocijanato" označava -NCS; a izraz "cijanato" znači -OCN.

[0055] Termin "sulfamoil" je poznat u tehnici i uključuje ostatak koji može da se predstavi formulom:

u kojoj R11i R12su kao što je prethodno definisano.

[0056] Termin "sulfat" je poznat u tehnici i uključuje deo koji se može predstaviti formulom:

u kojoj R15je kao što je prethodno definisano.

[0057] Termin "sulfonamid" je poznat u nauci i uključuje deo koji se može predstaviti formulom:

u kojoj R11i R16su kao što je prethodno definisano.

[0058] Termin "sulfonat" je u tehnici prepoznat i uključuje deo koji se može predstaviti formulom:

u kojoj R54je elektronski par, vodonik, alkil, cikloalkil, ili aril.

[0059] Izrazi "sulfoksido" ili "sulfinil", kao što je ovde koriščeno, odnosi se na grupu koja s emože predstaviti formulom:

u kojoj R17je odabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, heterociklil, aralkil, ili aril.

[0060] Termin "urea" je priznat u tehnici i može se predstaviti opštom formulom:

pri čemu svaki R18nezavisno predstavlja vodonik ili hidrocarbil,, kao što je alkil, ili bilo koje pojavljivanje R18uzeto zajedno sa drugim povezanim atom(atomima) formira heterocikl koji ima od 4 do 8 atoma u strukturi prstena.

[0061] Kao što je ovde koriščeno, definicija svakog izraza, npr., alkil, m, n, itd., kada se pojavljuje više puta u bilo kojoj strukturi, namerava da bude nezavisna od njegove definicije negde drugde u istoj strukturi.

[0062] Termin "supstituisan" se odnosi na delove koji imaju supstituente koji zamenjuju vodonik na jednom ili više ugljenika u strukturi. Podrazumeva se da „supstitucija“ ili „supstituisana sa“ uključuje podrazumevani uslov da je takva supstitucija u skladu sa dozvoljenom valentnošću supstituisanog atoma i supstituenta, i da supstitucija rezultira stabilnim jedinjenjem, na primer, koji ne podleže spontano kroz transformaciju kao što je preraspodela, ciklizacija, eliminacija itd. Kao što je ovde koriščeno, termin „supstitusan“ podrazumeva da obuhvata sve dozvoljene supstituente organskih jedinjenja. U širem aspektu, dozvoljeni supstituenti uključuju acikličke i ciklične, razgranate i nerazgranate, karbociklične i heterociklične, aromatične i nearomatične supstituente organskih jedinjenja. Dozvoljeni supstituenti mogu biti jedan ili više i isti ili različiti za odgovarajuća organska jedinjenja. Za potrebe ovog pronalaska, heteroatomi kao što je azot mogu imati kao supstituente vodonik i/ili bilo koje dozvoljene supstituente organskih jedinjenja koja su ovde opisana koji zadovoljavaju valentnost heteroatoma. Supstituenti mogu uključivati bilo koje supstituente koji su ovde opisani, na primer, halogen, hidroksil, karbonil (kao što je karboksil, alkoksikarbonil, formil, ili acil), tiokarbonil (kao što je tioestar, tioacetat, ili tioformat), alkoksi, fosforil, fosfat, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, alkiltio, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamid, sulfonil,a heterociklil, aralkil, ili aromatični ili heteroaromatični ostatak. U poželjnim realizacijama, supstituenti na supstituisan alkilima su odabrani od od C1-6alkil, C3-6cikloalkil, halogen, karbonil, cijano, ili hidroksil. U poželjnijim realizacijama, supstituenti na supstitusan alkilima su odabrani od fluora, karbonila, cijano, ili hidroksila. Stručnjaci će razumeti da supstituenti sami po sebi mogu biti supstituisani, po potrebi. Osim ako nije posebno navedeno kao "nesupstitusan", podrazumeva se da reference na hemijske delove ovde uključuju varijante supstituisana. Na primer, referenca na "aril" grupu ili deo implicitno uključuje i supstitusane i nesupstitusane varijante.

[0063] Za potrebe ovog pronalaska, hemijski elementi su identifikovani u skladu sa Periodic Table of the Elements, CAS version, Handbook of Chemistry and Physics, 67th Ed., 1986-87, unutrašnja korica.

PRIMERI JEDINJENJA PRONALASKA

[0064] Opisano, ali nije deo pronalaska čija se zaštita traži, je jedinjenje formule I:

A-B-C (I)

gde:

R1je nezavisno H, alkil, halogenid, alkoksi, CF3, OH, alkilen-OH, NO2, ili - N(H)Ra;

R2je H, alkil, supstitusan ili nesupstitusan aril, supstitusan ili nesupstitusan heteroaril, cikloalkil, -alkilen-alkoksi, alkilen-aril, ili heterocikloalkil;

R3je nezavisno odabran od H, halogenida, CF3, alkila, alkilen-alkoksi, aril, hidroksila, and alkoksi; Raje H, (C1-C6)alkil, -(C1-C6)alkilen-O-(C1-C6)alkil, ili -(C1-C6)alkilen-O-C(O)O(C1-C6)alkil;

n je 0, 1, 2, 3, ili 4;

* označava tačku vezivanja B za C; i

apsolutna konfiguracija u bilo kom stereocentru je R, S, ili njihova smeša; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so.

[0065] Jedinjenja formule I nisu deo pronalaska čija se zaštita traži, koji je usmeren na specifična, pojedinačna jedinjenja definisana u zahtevima.

[0066] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

[0067] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

[0068] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

[0069] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

[0070] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

[0071] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

[0072] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje formule:

[0073] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

[0074] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

[0075] U pojedinim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

[0076] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

29

[0077] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

[0078] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

[0079] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

[0080] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje formule:

[0081] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje formule:

[0082] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje formule:

[0083] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje formule:

[0084] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje formule:

[0085] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje formule:

[0086] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje formule:

[0087] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje formule:

[0088] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje formule:

[0089] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje formule:

[0090] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

[0091] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

[0092] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

Ċ

[0093] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

[0094] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

[0095] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

41

[0096] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje formule:

[0097] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

45

[0098] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

[0099] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

[0100] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

[0101] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

[0102] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

51

ili je odabrano iz grupe koju čine: Ċ

[0103] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

[0104] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na bilo koje od gore navedenih jedinjenja, pri čemu je jedinjenje farmaceutski prihvatljivo.

PRIMERI FARMACEUTSKIH KOMPOZICIJA

[0105] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži bilo koje od gore navedenih jedinjenja i farmaceutski prihvatljivi nosač.

[0106] Pacijenti, uključujući, ali ne ograničavajući se na ljude, mogu se lečiti administriranjem pacijentu efektivne količine aktivnog jedinjenja ili farmaceutski prihvatljivog proleka ili tako u prisustvu farmaceutski prihvatljivog nosača ili razblaživača. Aktivni materijali se mogu davati bilo kojim odgovarajućim putem, na primer, oralno, parenteralno, intravenozno, intradermalno, subkutano, ili lokalno, u tečnom ili čvrstom obliku.

[0107] Koncentracija aktivnog jedinjenja u kompoziciji leka zavisiće od brzine apsorpcije, inaktivacije i izlučivanja leka kao i drugih faktora poznatih stručnjacima u ovoj oblasti. Treba napomenuti da će vrednosti doze takođe varirati u zavisnosti od težine stanja koje treba ublažiti. Dalje treba razumeti da za bilo kog određenog subjekta, specifični režimi doziranja treba da se prilagođavaju tokom vremena u skladu sa individualnim potrebama i profesionalnom procenom osobe koja primenjuje ili nadgleda administraciju kompozicija, i da je opseg koncentracija naveden ovde samo kao primeri i nisu namenjeni da ograniče obim ili praksu zatražene kompozicije. Aktivni sastojak se može administrirati odjednom, ili se može podeliti u niz manjih doza koje se administrirati u različitim vremenskim intervalima.

[0108] U određenim realizacijama, način primene aktivnog jedinjenja je oralni. Oralne kompozicije će generalno uključivati inertni razblaživač ili jestivi nosač. Mogu se staviti u želatinske kapsule ili komprimovati u tablete. U svrhu oralne terapijske administracije, aktivno jedinjenje se može inkorporirati sa ekscipijensima i koristiti u obliku tableta, vrećice ili kapsula. Farmaceutski kompatibilni vezivni agensi i/ili adjuvansni materijali mogu biti uključeni kao deo kompozicije.

[0109] Tablete, pilule, kapsule i pastile mogu da sadrže bilo koji od sledećih sastojaka, ili jedinjenja slične prirode: vezivo kao što je mikrokristalna celuloza, guma tragakant ili želatin; ekscipijens kao što je skrob ili laktoza, sredstvo za raspadanje kao što je alginska kiselina, Primogel ili kukuruzni skrob; lubrikans kao što je magnezijum stearat ili Sterotes; sredstvo za klizanje kao što je koloidni silicijum dioksid; zaslađivač kao što je saharoza ili saharin; ili aroma kao što je pepermint, metil salicilat, ili aroma pomorandže. Kada je jedinična doza u obliku kapsule, ona može da sadrži, pored materijala vrste kao što je prethodno navedeno, tečni nosač kao što je biljno ulje. Pored toga, jedinični dozni oblici mogu da sadrže razne druge materijale koji modifikuju fizički oblik jedinice doze, na primer, obloge od šećera, šelak ili drugi enterički agenasi.

[0110] Jedinjenje se može primeniti kao komponenta eliksira, suspenzije, sirupa, obloga, žvakaće gume ili slično. Sirup, pored aktivnog jedinjenja/aktivnih jedinjenja, može da sadrži saharozu ili zaslađivač kao sredstva za zaslađivanje i određene konzervanse, boje i bojila i arome.

[0111] Jedinjenje ili farmaceutski prihvatljivi prolekovi ili tako dalje mogu se mešati sa drugim aktivnim materijalima koji ne narušavaju željeno dejstvo, ili sa materijalima koji dopunjuju željeno dejstvo, kao što su antibiotici, antimikotici, antiinflamatorni ili drugi antivirusni lekovi, uključujući, ali ne ograničavajući se na nukleozidna jedinjenja. Rastvori ili suspenzije koje se koriste za parenteralnu, intradermalnu, subkutanu ili topikalnu primenu mogu uključivati sledeće komponente: sterilni razblaživač kao što je voda za injekcije, fiziološki rastvor, fiksna ulja, polietilen glikoli, glicerin, propilen glikol ili drugi sintetički rastvarači; antibakterijska sredstva kao što su benzil alkohol ili metil parabeni; antioksidansi kao što su askorbinska kiselina ili natrijum bisulfit; helatirajući agensi, kao što je etilendiamintetrasirćetna kiselina; puferi, kao što su acetati, citrati ili fosfati, i agensi za podešavanje toničnosti, kao što su natrijum hlorid ili dekstroza. Parenteralni preparat se može staviti u ampule, špriceve za jednokratnu upotrebu ili bočice za više doza od stakla ili plastike.

[0112] Ako se daju intravenozno, nosači uključuju fiziološki rastvor soli i fiziološki rastvor puferovan fosfatom (PBS).

[0113] U određenim realizacijama, aktivna jedinjenja se pripremaju sa nosačima koji će zaštititi jedinjenje od brze eliminacije iz tela, kao što je formulacija sa kontrolisanim oslobađanjem, uključujući ali bez ograničenja na implantate i mikrokapsulirane sisteme za isporuku. Mogu se koristiti biorazgradivi, biokompatibilni polimeri, kao što su etilen vinil acetat, polianhidridi, poliglikolna kiselina, kolagen, poliortoestri i polimlečna kiselina. Na primer, enterički obložena jedinjenja mogu se koristiti za zaštitu od cepanja želudačnom kiselinom. Postupci za pripremu takvih formulacija biće očigledni stručnjacima u ovoj oblasti. Odgovarajući materijali se takođe mogu nabaviti komercijalno.

[0114] Lipozomske suspenzije (uključujući ali ne ograničavajući se na lipozome ciljane na ćelije inficirane monoklonskim antitelima na virusne antigene) su takođe poželjne kao farmaceutski prihvatljivi nosači. Oni se mogu pripremiti prema postupcima poznatim stručnjacima, na primer, kao što je opisano u U.S. Pat. br.4,522,811.

[0115] Na primer, formulacije liposoma se mogu pripremiti rastvaranjem odgovarajućih lipida (kao što su stearoil fosfatidil etanolamin, stearoil fosfatidil holin, arahadoil fosfatidil holin i holestarol) u neorganskom rastvaraču koji je zatim uparen, ostavljajući za sobom film od osušenih lipida na površini. Vodeni rastvor aktivnog jedinjenja se zatim uvodi u posudu. Kontejner se zatim ručno promešan kako bi se oslobodio lipidni materijal sa strana posude i raspršio agregate lipida, formirajući tako liposomalnu suspenziju.

PRIMERI METODA PRONALASKA

[0116] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje koje je ovde opisano za upotrebu u postupku lečenja bolesti ili stanja odabranog od idiopatske plućne fibroze, dijabetičke nefropatije, fokalne segmentne glomeruloskleroze, hronične bolesti bubrega, nealkoholnog steatohepatitisa, primarnog bilijarnog holangitisa, primarnog skleroznog holangitisa, čvrstih tumora, hematoloških tumora, transplantacije organa, Alportovog sindroma, intersticijalne bolesti pluća, fibroza indukovana zračenjem, fibroza indukovana bleomicinom, fibroza indukovana azbestom, fibroza indukovana gripom, fibroza indukovana koagulacijom, fibroza indukovana vaskularnom povredom, aortna stenoza karijačna fibroza koja obuhvata korak administriranja terapeutski efikasne količine bilo kog od gore navedenih jedinjenja subjektu kome je to potrebno,.

[0117] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje koje je ovde opisano za upotrebu u bilo kojoj od gore navedenih metoda, pri čemu bolest ili stanje je čvrst tumor (sarkomi, karcinomi i limfomi). Primeri tumora koji se mogu lečiti u skladu sa pronalaskom uključuju, na primer, Juingov sarkom, rabdomiosarkom, osteosarkom, mijelosarkom, hondrosarkom, liposarkom, lejomiosarkom, sarkom mekog tkiva, rak ne-malih ćelija pluća, sitnoćelijski karcinom pluća, karcinom bronija, rak prostate, rak dojke, rak pankreasa, gastrointestinalni kardinom, rak debelog creva, rak rektuma, karcinom debelog creva, kolorektalni adenom, karcinom štitne žlezde, rak jetre, rak intrahepatičnog žučnog kanala, hepatocelularni karcinom, rak nadbubrežne žlezde, rak želuca, rak želuca, gliom (npr. odrasle osobe, moždanog stabla u detinjstvu, cerebralni astrocitom u detinjstvu, optičkog nerva u detinjstvu i hipotalamus), glioblastom, karcinom endometrijuma, melanom, karcinom bubrega, karcinom bubrežne karlice, karcinom mokraćne bešike, korpus materice, karcinom grlića materice, karcinom vagine, rak jajnika, multipli mijelom, karcinom jednjaka, karcinom mozga (npr. Gliom moždanog stabla , cerebelarni astrocitom, cerebralni astrocitom/maligni gliom, ependimom, meduloblastom, supratentorijalni primitivni neuroektodermalni tumori, gliom vizuelnog puta i hipotalamski gliom), usana i usne duplje i ždrela, larinksa, tankog creva, melanom, adenom viloznog debelog creva, neoplazija, neoplazija epitelnog karaktera, limfomi (npr., povezani sa AIDS-om, Burkitovi, T-ćelija kože, Hodžkinovi, ne-Hodžkinovi i primarnog centralnog nervnog sistema), karcinom dojke, karcinom bazalnih ćelija, karcinom skvamoznih ćelija, aktinična keratoza, tumorske bolesti, uključujući čvrste tumore, tumor vrata ili glave, policitemija vera, esencijalna trombocitemija, mijelofibroza sa mijeloidnom metaplazijom, Valdenstromova makroglobulinemija, adrenokortikalni karcinom,karcinom povezan sa AIDS-om, cerebralni astrocitom u detinjstvu, karcinom bazalnih ćelija, kancer ekstrahepatičnog žučnog kanala, maligni karcinom fibrozni histiocitom kostiju, bronhijalni adenom/karcinoidi, karcinoidni tumor, gastrointestinalni karcinoidni tumor, primarni centralni nervni sistem, cerebelarni astrocitom, karcinomi u detinjstvu, ependimoma, tumor ekstrakranijalnih gemintivnih ćelija, karcinom ekstrahepatičnog žučnog kanala, karcinom intraokularni melanom oka, retinoblastom, rak oka, rak žučne kese, gastrointestinalni karcinoidni tumor, tumori germitivnih ćelija (npr. ekstrakranijalni, ekstragonadalni i jajnika), gestacijski trofoblastični tumor, hepatocelularni karcinom, hipofaringealni karcinom, gliom hipotalamusa i vidnog puta, karcinom ćelija ostrvaca (endokrini pankreas), kancer larinksa, maligni fibroušistiocitom kostiju/osteosarkom, meduloblastoma, mezoteliom, metastatski skvamozni karcinom vrata sa okultnim primarnim, sindromom višestruke endokrine neoplazije, multipli mijelom/neoplazma plazma ćelija, gljivične mikoze, karcinoma nosne šupljine i paranazalnog sinusa, karcinom nazofarinksa, neuroblastom, oralni karcinom, kancer orofarinksa, kancer epitela jajnika, tumor germitivnih ćelija jajnika, tumor jajnika sa niskim malignim potencijalom, kancer ćelija ostrvaca pankreasa, karcinom paratiroidne žlezde, feohromocitom, pineoblastom, tumor hipofize, pleuropulmonalni blastom, kancer prelaznih ćelija uretera, retinoblastom, rabdomiosarkom, rak pljuvačne žlezde, Sezarijev sindrom, nemelanomski rak kože, karcinom Merkelovih ćelija, karcinom skvamoznih ćelija, rak testisa, timom, gestacijski trofoblastični tumor i Vilmsov tumor.

[0118] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje opisano ovde za upotrebu u bilo kom od gore navedenih metoda, pri čemu je bolest bolest ili stanje hematološki tumor. Primeri homatoloških tumora koji se mogu lečiti u skladu sa pronalaskom uključuju, na primer, akutnu limfocitnu leukemiju, akutnu mijelogenu leukemiju, hroničnu limfocitnu leukemiju, hroničnu mijelogenu leukemiju, Hodžkinov limfom, ne-Hodžkinovu multiplu leukemiju i multipli mijelom.

[0119] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje koje je ovde opisano za upotrebu u bilo kojoj od gore navedenih metoda, pri čemu je bolest ili stanje odabrano iz grupe koju čine idiopatska plućna fibroza, intersticijalna bolest pluća povezana sa sistemskom sklerozom, intersticijalna bolest pluća povezana sa miozitisom, intersticijalna bolest pluća udružena sa miozitisom, sistemski eritematozni lupus povezan sa intersticijalnim bolesti plućateumatoidni artritis i povezana intersticijalna bolest pluća.

[0120] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje opisano ovde za upotrebu u bilo kojoj od gore navedenih metoda, pri čemu je bolest ili stanje odabrano iz grupe koju čine dijabetička nefropatija, fokalna segmentna glomeruloskleroza i hronična bolest bubrega.

[0121] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje opisano ovde za upotrebu u bilo kom od gore navedenih metoda, pri čemu je bolest ili stanje odabrano iz grupe koju čine nealkoholni steatohepatitis, primarni bilijarni holangitis i primarni skleroznii holangitis.

[0122] U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje opisano ovde za upotrebu u bilo kom od gore navedenih metoda, pri čemu subjekt je sisar. U određenim realizacijama, pronalazak se odnosi na jedinjenje opisano ovde za upotrebu u bilo kom od gore navedenih metoda, pri čemu subjekat je čovek.

Primeri

[0123] Pronalazak koji je sada uopšteno opisan, će biti lakše razumljiv pozivanjem na sledeće primere, koji su uključeni samo u svrhu ilustracije određenih aspekata i realizacija ovog pronalaska, i nisu namenjeni da ograniče pronalazak.

Opšte šeme i procedure za dobijanje jedinjenja pronalaska

[0124] Ostaci R1i R2predstavljaju odgovarajuće supstituente; L predstavlja odgovarajući linker, a X predstavlja odgovarajući halogen, kao što su Br, Cl ili I, ili drugu odlazeću grupu kao što je mezilat ili tozilat.

predstavlja odgovarajući opciono supstitusan pirolidin.

predstavlja odgovarajući opciono supstitusan tetrahidronaftiridin.

predstavlja odgovarajući opciono supstitusan naftiridin.

Opšta šema sinteze αvβ6 inhibitora

Opšte Procedure

9-BBN i Suzuki reakcije

[0127] Alken intermedijeri mogu da budu unakrsno kuplovani sa 2-halo naftiridinima ili tetrahidronaftiridinima prema sledećoj proceduri. U rastvor alkena (1 ekviv.) u suvom THF (2-10 mL/mmol) pod Ar dodat je 9-BBN (0.5M rastvor u THF, 1-2 ekviv.). Reakcioni rastvor je mešan na 40-80 °C tokom 1-4 sata, zatim ohlađen na sobnu temperaturu. Ovaj rastvor je dodat u smešu 2-halonaftiridina ili Boc-zaštićenim 2-halotetrahidronaftiridin (1-1.5 ekviv.), cezijum karbonat (2-5 ekviv.) i Pd(PPh3)4 ili druga pogodnakombinacija Pd/ligand (0.05 do 0.1 ekviv.) u 1,4-dioksanu (2-10 mL/mmol). Reakcioni rastvor je mešan na 80-100 °C tokom 12-24 sata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, i ostatak je prečišćen na silika gel koloni dajući alkilom povezan naftiridin proizvod.

Anulacije prstena

[0129] Naftiridini se takođe mogu dobiti od metil ketona prema sledećoj proceduri. Smeša metil ketona (1 ekviv.), 2-aminonikotinaldehida(1-2 ekviv.) i sekundarnog amina kao što je pirolidin ili L-prolin (1-2 ekviv.) u DMF ili EtOH (1-10 mL/mmol) je mešana na 70-100 °C u trajanju od 2- 10 sati. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, a ostatak je prečišćen na silika gel koloni dajući željeni proizvod naftiridina.

Redukcija Naftiridina

[0131] Naftiridini mogu da budu redukovani do tetrahidronaftiridina prema sledećoj proceduri. Smeša odgovarajućeg naftiridina (1 ekviv.) i Pd/C (5-20 težinskih procenata Pd, 0.05 do 0.2 ekviv.) u etil acetatu ili u drugom odgovarajućem rastvaraču (2-10 mL/mmol) je mešana pod balonom H2na sobnoj temperaturi do 50 °C tokom 2-20 sati. Reakcioni rastvor je profiltriran i koncentrovan u vakuumu dajući željeni tetrahidronaftiridin proizvod.

Uklanjanje Boc zaštite

[0133] Boc—om zaštićen amin (1 ekviv.) je tretiran sa HCl (4-100 ekviv.) u 1,4-dioksanu (1-50 mL/mmol amin) na sobnoj temperaturi na 50 °C tokom 1-4 sata. Reakcioni rastvor je koncentrovan u vakuumu, i proizvod amina je upotrebljen kao sirov ili nakon prečišćavanja na silika gel koloni. Amin se može koristiti sirov kao dihidrohlorid so ili kovncertovan u slobodnu bazu rastvaranjem u odgovaraućem rastvaraču i ispiranjem sa vodenim rastvorom NaHCO3.

Alkilacija amina:

[0135] Smeša amina (1 ekviv.), alkilujućeg agensa (1-1.5 ekviv.) i K2CO3ili N,N-diizopropiletilamina (2-10 ekviv.) u MeCN ili DMF (3-10 mL/mmol amina) je mešana na sobnoj temperaturi na 80 °C tokom 4-16 sati. Reakcioni rastvor je koncentrovan u vakuumu, i ostatak je prečišćen na silika gel koloni dajući željeni estar amino acetatne kiseline. Upotrebljeni amin može biti u obliku slobodne baze ili u obliku soku poput hidrohlorida ili dihidrohlorida. Ukoliko je reakcija izvršena sa soli amina, moguće je će biti potrebno dodati dodatne ekvivalente baze.

Saponifikacija:

[0137] Za određene estre kao što je Ri = Me ili etil, estar može da bude saponifikovan pod baznim uslovima. Estar (1 ekviv.) je tretiran sa LiOH-H2O (3-5 ekviv.) u MeOH (3-10 mL/mmol estra) i vodi (3-10 mL/mmol estra) na sobnoj temperaturi do 50 °C tokom 1-16 sati. Reakcioni rastvor je koncentrovan u vakuumu, a ostatak je prečišćen sa prep HPLC dajući kao proizvod željenu karboksilnu kiselinu.

[0138] za određene estre kao što je Ri = terc-butil, estar može da bude saponifikovan pod kiselim uslovima. Estar (1 ekviv.) je tretiran sa 4 N HCl (4-100 ekviv.) u 1,4-dioksanu (1-25 mL/mmol estra) na sobnoj temperaturi do 50 °C tokom 1-16 sati. Reakcioni rastvor je koncentrovan u vakuumu, a ostatak je prečišćen sa prep HPLC dajući kao proizvod željenu karboksilnu kiselinu.

Petasisova reakcija:

[0140] Kao alternativa reakciji alkilacije amina /saponifikaciji, može se primeniti Petasisova reakcija za dobijanje određenih aril analoga: smeša amina (1 ekviv.) aril boronske kiseline ili estra aril boronaa (1-1.5 ekviv.) i 2-oksoacetatne kiseline (1.5-2 ekviv.) u MeCN ili DMF (2-10 mL/mmol amin) je mešana na 50-80 °C tokom 2-16 sati. Reakcioni rastvor je koncentrovan u vakuumu, i ostatak je prečišćen sa prep HPLC dajući željenu amino acetatnu kiselinu.

Analitičke metode

Metode Prep-HPLC

[0141] Sirovi uzorci su rastvoreni u MeOH i prečišćeni sa prep HPLC koristeći Gilson 215 instrument, talasna dužina za detekciju 214 nm:

Prep HPLC A: kolona: XBridge C18, 21.2 * 250 mm, 10 µm; mobilna faza: A voda (10 mM amonijum bikarbonat), B CH3CN; eluiranje gradijentom kao u tekstu; brzina protoka: 20 mL/min.

Prep HPLC B: kolona: XBridge C18, 21.2 * 250 mm, 10 µm; mobilna faza: A voda (10 mM mravlja kiselina), B CH3CN; eluiranje gradijentom kao u tekstu; brzina protoka: 20 mL/min.

Prep HPLC C: kolona: XBridge OBD C18, 19 * 100 mm, 5 µm; mobilna faza: A voda, B CH3CN; eluiranje gradijentom kao u tekstu; brzina protoka: 20 mL/min.

Metode Prep Chiral SFC

[0142] Racemski proizvodi su razdvojeni u pojedinačne enantiomere pomoću hiralne Prep SFC korsiteći SFC-80 (Thar, Waters) instrument, talasna dužina za detekciju 214 nm:

Prep chiral SFC A: kolona: (R,R)-Whelk-O1, 20*250mm, 5 µm (Decial), temperatura kolone: 35 °C, mobilna faza: CO2/metanol (0.2% metanol amonijak)= 60/40, brzina protoka: 80 g/min povratni pritisak: 100 bar.

Prep chiral SFC B: kolona: AD 20*250mm, 10 µm (Daicel), temperatura kolone: 35 °C,

mobilna faza: CO2/metanol (0.2% metanol amonijak)= 60/40, brzina protoka: 80 g/min povratni pritisak: 100 bar.

Prep chiral SFC C: kolona: AS 20*250mm, 10 µm (Daicel), temperatura kolone: 35 °C,

mobilna faza: CO2/metanol (0.2% metanol amonijak)= 60/40, brzina protoka: 80 g/min, povratni pritisak: 100 bar.

Prep chiral SFC D: kolona: OD 20*250mm, 10 µm (Daicel), temperatura kolone: 35 °C,

mobilna faza: CO2/metanol (0.2% metanol amonijak)= 60/40, brzina protoka: 80 g/min, povratni pritisak: 100 bar.

Prep chiral SFC E: kolona: Cellulose-SC 20*250mm, 10 µm (Daicel), temperatura kolone: 35 °C, mobilna faza: CO2/metanol (0.2% metanol amonijak)= 60/40, brzina protoka: 80 g/min, povratni pritisak: 100 bar.

Prep chiral SFC F: kolona: OZ 20*250mm, 10 µm (Daicel), temperatura kolone: 35 °C, mobilna faza: CO2/metanol (0.2% metanol amonijak)= 60/40, brzina protoka: 80 g/min, povratni pritisak: 100 bar. Prep chiral SFC G: kolona: IC 20*250mm, 10 µm (Daicel), temperatura kolone: 35 °C, mobilna faza: CO2/metanol (0.2% metanol amonijak)= 60/40, brzina protoka: 80 g/min, povratni pritisak: 100 bar. Prep chiral SFC H: kolona: (S,S)-Whelk-O1, 20*250mm, 5 µm (Decial), temperatura kolone: 35 °C, mobilna faza: CO2/metanol (0.2% metanol amonijak)= 60/40, brzina protoka: 80 g/min, povratni pritisak: 100 bar.

Analitičke metode Chiral SFC

[0143] Hiralni proizvodi su analizirani pomoću SFC koristeći SFC-80 (Thar, Waters) instrument, dužina za detekciju 214 nm:

Chiral SFC A: kolona: (R,R)-Whelk-O1, 4.6* 100mm, 5 µm (Decial), temperatura kolone: 40 °C, mobilna faza: CO2/metanol (0.2% metanol amonijak), izokratsko eluiranje kao u tekstu, brzina protoka: 4 g/min, povratni pritisak: 120 bar.

Chiral SFC B: kolona: AD 4.6*100mm, 5 µm (Daicel), temperatura kolone: 40 °C,

mobilna faza: CO2/metanol (0.2% metanol amonijak), izokratsko eluiranje kao u tekstu, brzina protoka: 4 g/min, povratni pritisak: 120 bar.

Chiral SFC C: kolona: AS 4.6*100mm, 5 µm (Daicel), temperatura kolone: 40 °C,

mobilna faza: CO2/metanol (0.2% metanol amonijak ), izokratsko eluiranje kao u tekstu, brzina protoka: 4 g/min, povratni pritisak: 120 bar.

Chiral SFC D: kolona: OD 4.6* 100mm, 5 µm (Daicel), temperatura kolone: 40 °C, mobilna faza: CO2/metanol (0.2% metanol amonijak), izokratsko eluiranje kao u tekstu, brzina protoka: 4 g/min, povratni pritisak: 120 bar.

Chiral SFC E: kolona: Cellulose-SC 4.6*100mm, 5 µm (Daicel), temperatura kolone: 40 °C, mobilna faza: CO2/metanol (0.2% metanol amonijak ), izokratsko eluiranje kao u tekstu, brzina protoka: 4 g/min, povratni pritisak: 120 bar.

Chiral SFC F: kolona: OZ 4.6*100mm, 5 µm (Daicel), temperatura kolone: 40 °C,

mobilna faza: CO2/metanol (0.2% metanol amonijak ), izokratsko eluiranje kao u tekstu, brzina protoka: 4 g/min, povratni pritisak: 120 bar.

Chiral SFC G: kolona: IC 4.6* 100mm, 5 µm (Daicel), temperatura kolone: 40 °C,

mobilna faza: CO2/metanol (0.2% metanol amonijak ), izokratsko eluiranje kao u tekstu, brzina protoka: 4 g/min, povratni pritisak: 120 bar.

Chiral SFC H: kolona: (S,S)-Whelk-O1, 4.6*100mm, 5 µm (Decial), temperatura kolone: 40 °C, mobilna faza: CO2/metanol (0.2% metanol amonijak ), izokratsko eluiranje kao u tekstu, brzina protoka: 4 g/min, povratni pritisak: 120 bar.

Chiral SFC I: kolona: IC 4.6*250mm, 5 µm (SHIMADZU), temperatura kolone: 40 °C,

mobilna faza: n-Heksan (0.1%DEA):EtOH(0.1%DEA), izokratsko eluiranje kao u tekstu, brzina protoka: 1 mL/min.

Chiral SFC J: kolona: (S,S)-Whelk-O1 4.6*250mm, 5 µm (SHIMADZU), temperatura kolone: 40 °C, mobilna faza: n-Heksan (0.1%DEA):EtOH(0.1%DEA), izokratsko eluiranje kao u tekstu, brzina protoka: 1 mL/min.

Chiral SFC K: kolona: OZ-H 4.6*250mm, 5 µm (SHIMADZU), temperatura kolone: 40 °C, mobilna faza: n-Heksane(0.1%DEA):EtOH(0.1%DEA), izokratsko eluiranje kao u tekstu, brzina protoka: 1 mL/min. Chiral SFC L: kolona: chiral PAK IG 4.6*250mm, 5 µm (SHIMADZU), temperatura kolone: 35 °C, mobilna faza: n-Heksan (0.1%DEA):EtOH(0.1%DEA), izokratsko eluiranje kao u tekstu, brzina protoka: 1 mL/min. Chiral SFC M: kolona: EnanthioPak OJ 4.6*250mm, 5 µm (Decial), temperatura kolone: 40 °C, mobilna faza: n-Heksan(0.1%DEA):EtOH(0.1%DEA), izokratsko eluiranje kao u tekstu, brzina protoka: 1 mL/min.

Sinteza intermedijera

[0144] Sledeći intermedijeri su pripremljeni prema dole navedenim procedurama za upotrebu u sintezi jedinjenja 1-55:

Dobijanje (R)-7-(5,5-difluor-5-(pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin dihidrohlorida Korak 1: (R)-terc-butil 3-(metoksi(metil)karbamoil)pirolidin-1-karboksilat

[0145]

[0146] Smeša (R)-1-(terc-butoksikarbonil)pirolidin-3-karboksilne kiseline (10.0 g, 46.5 mmol), N,O-dimetilhidroksilamin hidrohlorida (6.8 g, 69.8 mmol), EDCI (17.8g, 93.0 mmol), HOBt (12.6g, 93.0mmol) i diizopropiletilamina (18.1g, 139.5 mmol) u dihlormetanu (120 mL) je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, i ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar : EtOAc 2:1) pri čemu se dobija željeni proizvod (R)-terc-butil 3-(metoksi(metil)karbamoil) pirolidin-1-karboksilat kao bezbojno ulje (7.5 g). Prinos 63%. (ESI 259.0 (M+H) ).

Korak 2: (R)-terc-butil 3-pent-4-enoilpirolidin-1-karboksilat

[0148] U rastvor (R)-terc-butil 3-(metoksi(metil)karbamoil) pirolidin-1-karboksilata (7g, 27.1 mmol) u THF (40 mL) na 0 °C, dodat je 0.5 M rastvor 3-butenilmagnezijum bromid u THF (108 mL, 54 mmol) u kapima. Reakcioni rastvor je mešan na 0° C tokom 1 sata, zatim mešan na sobnoj temperaturi preko noći, dodat je zas. NH4Cl (10 mL) i ekstrahovano sa EtOAc (3x 40mL). Kombinovane organske faze su isprane rastvorom soli, osušene iznad Na2SO4, profiltrirane i koncentrovane u vakuumu. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar: EtOAc 5:1) pri čemu se dobija željeni proizvod (R)-terc-butil 3-pent-4-enoilpirolidin-1-karboksilat kao žuto ulje ( 4.4g). Prinos 64%.(ESI 254.0 (M+H) ).

Korak 3: (R)-terc-butil 3-(1,1-difluorpent-4-enil)pirolidin-1-karboksilat

[0150] Smeša (R)-terc-butil 3-pent-4-enoilpirolidin-1-karboksilata (4.4g, 17.4 mmol) i BAST (19.2 g, 87mmol) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 40 sati. Reakcionom rastvoru je dodat MeOH (2 mL), razblažen sa H2O (10 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (50 mL). Organska faza je isprana rastvorom soli, osušena iznad Na2SO4, profiltrirana i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar : EtOAc 10:1) pri čemu se dobija željeni proizvod (R)-terc-butil 3-(1,1-difluorpent-4-enil) pirolidin -1-karboksilat kao žuto ulje (1.7g). Prinos 36% (ESI 276 (M+H) ).

Korak 4: (R)-terc-butil 3-(1,1-difluorpent-4-enil)pirolidin-1-karboksilat

[0152] U rastvor (S)-terc-butil 3-(1,1-difluorpent-4-enil)pirolidin-1-karboksilata (1.4g, 5.1 mmol) u THF (suv, 5 mL) pod Ar, dodat je 9-BBN (0.5M rastvor u THF, 20.4 mL, 10.2 mmol). Reakcioni rastvor je mešan na 50 °C tokom 2 sata, zatim ohlađen na sobnu temperaturu. Ovaj rastvor je dodat u smešu 2-brom-1,8-naftiridina (1.07g, 5.1 mmol), cezijum karbonata (4.98g, 15.3 mmol) i Pd(PPh3)4( 295mg, 0.255 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL). Reakcioni rastvor je mešan na 90 °C tokom 1.5 sat, zatim konncentrovan u vakuumu, i ostatak je prečišćen na silika gel koloni (DCM:MeOH 30:1) pri čemu se dobija željeni proizvod (R)-terc-butil 3-(1,1-difluor-5-(1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-karboksilat kao žuto ulje (1g). Prinos 48% (ESI 406 (M+H) ).

Korak 5: (R)-terc-butil 3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-karboksilat

[0154] Smeša (R)-terc-butil 3-(1,1-difluor-5-(1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-karboksilata (1g, 2.47 mmol), Pd/C (200 mg, 20 težć %) u etil acetatu (20 mL) je mešana pod balonom H2na 40 °C tokom 16 sati. Reakcioni rastvor je profiltriran i koncentrovan u vakuumu pri čemu se dobija željeni proizvod (R)-terc-butil 3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-karboksilat kao žuto ulje (1g). Prinos 98% (ESI 410 (M+H) ).

Korak 6: (R)-7-(5,5-difluor-5-(pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin

[0156] (R)-terc-butil 3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-karboksilat (1g, 2.44 mmol) je tretiran sa HCl u 1,4-dioksanu (4M, 10 mL) na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu pri čemu se dobija željeni proizvod (R)-7-(5,5-difluor-5-(pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin kao HCl so (930 mg). Prinos 99% (ESI 310 (M+H) ).

Dobijanje (R)-7-(5,5-difluor-5-(pirolidin-3-il)pentil)-5-metoksi-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin dihidrohlorida

Korak 1: (R)-terc-butil 3-(1,1-difluorpent-4-enil)pirolidin-1-karboksilat

[0158] U rastvor (S)-terc-butil 3-(1,1-difluorpent-4-enil)pirolidin-1-karboksilata (1.4g, 5.1 mmol) u THF (suv, 5 mL) pod Ar, dodat je 9-BBN (0.5M rastvor u THF, 20.4 mL, 10.2 mmol). Reakcioni rastvor je mešan na 50 °C tokom 2 sata, zatim ohlađen na sobnu temperaturu i dodat u smešu 2,4-dihlor-1,8-naftiridina (1.01g, 5.1 mmol), cezijum karbonata (4.98g, 15.3 mmol) i Pd(PPh3)4(295mg, 0.255 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL). Reakcioni rastvor je mešan na 90 °C tokom 2 sata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, i ostatak je prečišćen na silika gel koloni (DCM:MeOH 30:1) pri čemu se dobija željeni proizvod kao žuto ulje (0.95 g). Prinos 42% (ESI 440 (M+H) ).

Korak 2: (R)-terc-butil 3-(1,1-difluor-5-(4-metoksi-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-karboksilat

[0160] U rastvor (R)-terc-butil 3-(5-(4-hlor-1,8-naftiridin-2-il)-1,1-difluorpentil)pirolidin-1-karboksilat (0.95 g, 2.16 mmol) u MeOH (30 mL)dodat je natrijum metoksid (233 mg, 4.32 mmol). Reakcioni rastvor je refluksovan 15 sati, zatim koncentrovan u vakuumu. Ostatak je rastvorn u etil acetatu (20 mL), ispran vodom (2 x 20 mL), osušen iznad MgSO4, profiltriran i koncentrovan u vakuumu pri čemu se dobija željeni proizvod kao bezbojno ulje (750 mg). Prinos 80% (ESI 436 (M+H) ).

Korak 3: (R)-7-(5,5-difluor-5-(pirolidin-3-il)pentil)-5-metoksi-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin dihidrohlorid

[0162] Smeša (R)-terc-butil 3-(1,1-difluor-5-(4-metoksi-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-karboksilata (750 mg, 1.72 mmol) i Pd/C (10%, 75 mg) u EtOAc (50 mL) je mešan pod balonom vodonika na sobnoj temperaturi tokom 16 sati. Smeša je profiltrirana i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je tretiran sa HCl u 1,4-dioksanu (4M, 10 mL) na 25 °C u trajanju od 2 sata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu dajući (R)-7-(5,5-difluor-5-(pirolidin-3-il)pentil)-5-metoksi-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin dihidrohlorid kao bezbojno ulje (620 mg). Prinos 88% (ESI 340 (M+H) ).

Dobijanje 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin dihidrohlorid

Korak 1: (3R)-terc-butil 3-(1-hydroksipent-4-enil)pirolidin-1-karboksilat

[0164] U rastvor (R)-terc-butil 3-pent-4-enoilpirolidin-1-karboksilata (253 mg, 1 mmol) u MeOH (10 mL) na 0 °C, dodat je NaBH4 (46 mg, 1.2 mmol). Reakcioni rastvor je mešan na 0 °C tokom 1 sata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, i ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar : EtOAc 2:1) pri čemu se dobija željeni proizvod (3R)-terc-butil 3-(1-hidroksipent-4-enil)pirolidin-1-karboksilat kao bezbojno ulje (210 mg). Prinos 82% (ESI 256 (M+H) ).

Korak 2: (3R)-terc-butil 3-(1-fluorpent-4-enil)pirolidin-1-karboksilat

[0166] Smeša (3R)-terc-butil 3-(1-hidroksipent-4-enil)pirolidin-1-karboksilata (210 mg, 0.82mmol), PyFluor (199mg, 1.23mmol) i DBU (187mg, 1.23mmol) u toluenu (2 mL) u zatopljenoj epruveti je mešana na 50 °C preko noći. Reakciona smeša je particionisana između 0.5 M vod. HCl (10 mL) i EtOAc (10 mL). Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2x 10 mL). Kombinovani organski sloj je koncentrovan u vakuumu, i ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar : EtOAc=2: 1) pri čemu se dobija željeni proizvod (3R)-terc-butil 3-(1-fluorpent-4-enil)pirolidin-1-karboksilat kao bezbojno ulje (85 mg). Prinos 40 % (ESI 258 (M+H) ). Racemski proizvod je razdvojen na Prep chiral SFC (IG kolona) dajući (3R)-terc-butil 3-(1-fluorpent-4-enil)pirolidin-1-karboksilat stereoizomer A (Rt = 1.88 min, 30 mg) i (3R)-terc-butil 3-(1-fluorpent-4-enil)pirolidin-1-karboksilat stereoizomer B (Rt = 2.96 min, 25 mg) kao bezbojno ulje.

Korak 3: terc-butil 7-(5-((R)-1-(terc-butoksikarbonil)pirolidin-3-il)-5-fluorpentil)-3,4-dihidro-1,8-naftiridin -1(2H)-karboksilat stereoizomer A

[0168] U rastvor (3R)-terc-butil 3-(1-fluorpent-4-enil)pirolidin-1-karboksilata stereoizomer A (1 g, 3.89 mmol) u THF (suv, 10 mL) pod Ar, dodat je 9-BBN (0.5M rastvor u THF, 15.6 mL, 7.78 mmol). Reakcioni rastvor je mešan na 50 °C tokom 2 sata, zatim ohlađen na sobnu temperaturu. Ovaj rastvor je dodat u smešu terc-butil 7-hlor-3,4-dihidro-1,8-naftiridin -1(2H)-karboksilata (1.05 g, 3.89 mmol), cezijum karbonata (3.81 g, 11.7 mmol) i Pd(PPh3)4 (225 mg, 0.19 mmol) u 1,4-dioksanu (15 mL). Reakcioni rastvor je mešan na 90 °C tokom 17 sati. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, i ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar : EtOAc=1:1 to 1:10) pri čemu se dobija željeni proizvod terc-butil 7-(5-((R)-1-(terc-butoksikarbonil)pirolidin-3-il)-5-fluorpentil)-3,4-dihidro-1,8-naftiridin -1(2H)-karboksilat stereoizomer A kao žuto ulje (1.1 g). Prinos 57% (ESI 492 (M+H) ).

Korak 4: 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin stereoizomer A dihidrohlorid

terc-butil 7-(5-((R)-1-(terc-butoksikarbonil)pirolidin-3-il)-5-fluorpentil)-3,4-dihidro-1,8-naftiridin -1(2H)-karboksilat stereoizomer A (1.1 g, 2.24 mmol) je tretiran sa HCl u 1,4-dioksanu (4M, 20 mL) na 25 °C tokom 2 sata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu pri čemu se dobija željeni proizvod 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin stereoizomer A dihidrohlorid kao bezbojno ulje (783 mg). Prinos 96% (ESI 292 (M+H) ).

[0170] 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin dihidrohlorid stereoizomer B je pripremljen na isti način polazeći od (3R)-terc-butil 3-(1-fluorpent-4-enil)pirolidin-1-karboksilata stereoizomer B.

[0171] 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin dihidrohlorid je takođe pripreljen kao smeša stereoizomera A i stereoizomera B prema istom postupku polazeći od smeše stereoizomer A and stereoizomer B(3R)-terc-butil 3-(1-fluorpent-4-enil)pirolidin-1-karboksilata.

Dobijanje 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-5-metoksi-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin dihidrohlorid

Korak 1: terc-butil (3R)-3-(5-(4-hlor-1,8-naftiridin-2-il)-1-fluorpentil)pirolidin-1-karboksilat stereoizomer A

[0172]

[0173] U rastvor (3R)-terc-butil 3-(1-fluorpent-4-enil)pirolidin-1-karboksilata stereoizomer A (1.3 g, 5.0 mmol) u THF (suv, 5 mL) pod Ar, dodat je 9-BBN (0.5M rastvor u THF, 20 mL, 10.0 mmol). Reakcioni rastvor je mešan na 50 °C tokom 2 sata, zatim ohlađen na sobnu temperaturu. Ovaj rastvor je dodat u smešu 2,4-dihlor-1,8-naftiridina (1.01 g, 5.1 mmol), cezijum karbonata (4.98 g, 15.3 mmol) i Pd(PPh3)4 (295 mg, 0.255 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL). Reakcioni rastvor je mešan na 90 °C tokom 2 sata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, i ostatak je prečišćen na silika gel koloni (DCM:MeOH 30:1) pri čemu se dobija željeni proizvod terc-butil (3R)-3-(5-(4-hlor-1,8-naftiridin-2-il)-1-fluorpentil)pirolidin-1-karboksilat stereoizomer A kao žuto ulje (0.95 g). Prinos 45% (ESI 422 (M+H) ).

Korak 2: terc-butil (3R)-3-(1-fluor-5-(4-metoksi-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-karboksilat stereoizomer A

[0175] U rastvor (3R)-3-(5-(4-hlor-1,8-naftiridin-2-il)-1-fluorpentil)pirolidin-1-karboksilata stereoizomer A (0.95 g, 2.25 mmol) u MeOH (30 mL) dodat je NaOMe (243 mg, 4.50 mmol). Reakcioni rastvo je refluksovan 15 sati, potom koncentrovan u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (20 mL), ispran vodom (2 x 20 mL), osušen iznad MgSO4, profiltriran, i koncentrovan u vakuumu pri čemu se dobija željeni proizvod terc-butil (3R)-3-(1-fluor-5-(4-metoksi-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-karboksilat stereoizomer A kao bezbojno ulje (780 mg). Prinos 83% (ESI 418 (M+H) ).

Korak 3: 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-5-metoksi-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin stereoizomer A dihidrohlorid

[0177] Smeša terc-butil (3R)-3-(1-fluor-5-(4-metoksi-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-karboksilata stereoizomer A (780 mg, 1.87 mmol) i Pd/C (10%, 78 mg) u EtOAc (50 mL) je me[ana pod balonom vodonika na sobnoj temperaturi tokom 16 sati. Smeša je profiltrirana i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je tretiran sa HCl u 1,4-dioksanu (4M, 10 mL) na 25 °C tokom 2 sati. Rastvarač je uklonjen u vakuumu dajući 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-5-metoksi-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin stereoizomer A dihidrohlorid kao bezbojno ulje (690 mg). Prinos 94% (ESI 322 (M+H)+).

[0178] 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-5-metoksi-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin stereoizomer B dihidrohlorid je dobijen prema istom postupku polazeći od (3R)-terc-butil 3-(1-fluorpent-4-enil)pirolidin-1-karboksilata stereoizomer B.

[0179] 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-5-metoksi-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin dihidrohlorid je takođe pripremljen kao smeša stereoizomera A i stereoizomera B po istom postupku polazeći od (3R)-terc-butil 3-(1-fluorpent-4-enil)pirolidin-1-karboksilat smeše stereoizomera A i stereoizomera B.

Dobijanje (S)-7-(4,4-difluor-5-(pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin dihidrohlorid

Korak 1: terc-butil (S)-3-(2-(metoksi(metil)amino)-2-oksoetil)pirolidin-1-karboksilat

[0180]

[0181] U rastvor (S)-2-(1-(terc-butoksikarbonil)pirolidin-3-il)acetatne kiseline (3 g, 13.08 mmol) u dihlormetanu (75 mL) dodat je CDI (2.122 g, 13.08 mmol), i smeša je mešana 1.5 sati na sobnoj temperaturi. Sledeće, dodat je N,O-dimetilhidroksilamin hidrohlorid (1.276 g, 13.08 mmol) i posle mešanja dodatna 3 sata, smeši je dodata hlorovodonična kiselina (1M rastvor u vodu). Organska faza je odvojena, i vodena faza je ekstrahovana dva puta diclormetanom. Kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata, osušeni iznad natrijum sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni (80 g silicijum dioksid; heptan, 10%-80% etil actat) pri čemu se dobija željeni proizvod terc-butil (S)-3-(2-(metoksi(metil)amino)-2-oksoetil)pirolidin-1-karboksilat (2.95 g). Prinos 83% (ESI 217 (M-tBu+H)<+>).

Korak 2: terc-butil (S)-3-(2-oksopent-4-en-1-il)pirolidin-1-karboksilat

[0183] U ledu ohlađen rastvor terc-butil (S)-3-(2-(metoksi(metil)amino)-2-oksoetil)pirolidin-1-karboksilata (4.77 g, 17.51 mmol) u THF (90 mL) dodat je alilmagnezijum hlorid (12.36 mL, 21.02 mmol, 1.7 M rastvor u THF) u kapima tokom perioda od 10 minuta. Posle 10 minuta prekinuto je sa hlađenjem, i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 90 minuta, zatim sipan u zasićen vodeni rastvor amonijum hlorida, razblažena vodom i ekstrahovana tri puta sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi su isprani rastvorom soli, osušeni iznad natrijum sulfata, i koncentrovani. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni (80 g silicijum dioksid; heptan, 10%-40% etil actat) pri čemu se dobija željeni proizvod terc-butil (S)-3-(2-oksopent-4-en-1-il)pirolidin-1-karboksilat (4.05 g). Prinos 91% (ESI 198 (M-tBu+H)<+>).

Korak 3: terc-butil (S)-3-(2,2-difluorpent-4-en-1-il)pirolidin-1-karboksilat

[0184]

[0185] U bočicu od 24 mL, DAST (21.79 mL, 178 mmol) je dodat u terc-butil (S)-3-(2-oksopent-4-en-1-il)pirolidin-1-karboksilatu (3.69 g, 14.57 mmol). Bočica je zatvorena i mešana 20 sati na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena dihlormetanom (500 mL) i u kapima dodata u zasien vodeni rastvor natrijum bikarbonata. Slojevi su razdvojeni, i vodeni sloj je dva puta ekstrahovan sa dihlormetanom. Kombinovani organski slojevi su isprani rastvorom soli, osušeni iznad natrijum sulfata, koncentrovani i ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni (220 g silicijum dioksid; heptan, 2%-20% etil actat) pri čemu se dobija željeni proizvod terc-butil (S)-3-(2,2-difluorpent-4-en-1-il)pirolidin-1-karboksilat (1.01 g). Prinos 25% (ESI 220 (M-tBu+H)<+>).

Korak 4: terc-butil 7-hlor-3,4-dihidro-1,8-naftiridin -1(2H)-karboksilat

[0187] U rastvor TMEDA (4.36 mL, 28.9 mmol) u THF (30 mL) na -20 °C dodat je n-butillitijum (12.03 mL, 28.9 mmol, 2.4 M rastvor u heksanu) u toku deset minuta. Smeša je mešana na 10 °C tokom 30 minuta, zatim ohlađena na -78 °C, i dodat je rastvor terc-butil (6-hlorpiridin-2-il)karbamata (3 g, 13.12 mmol) u THF (15 mL) tokom perioda od 5 minuta. Posle 40 minut, dodat je bakar(I) jodid (2.499 g, 13.12 mmol) i smeša je mešana na -10 °C tokom 1 sata. Dodat je 1-Hlor-3-jodpropan (2.113 mL, 19.68 mmol) u tokom perioda od 1 minute, i smeša je ostavljena da dostigne sobnu temperaturu. Posle 2.5 sata smeša je dodata u zasićen vodeni rastvor natrijum bikarbonata i ekstrahovana tri puta etil acetatom. Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad natrijum sulfata, profiltrirani i koncentrovani. Ostatak je mešan u dihlormetanu (30 mL), profiltriran kroz levak od sinterovanog stakla i koncentrovan na pola zapremine i zatim nanet na fleš kolonu (120 g silica), eluiranjem sa 2-20% etil acetatom u heptanu. Eluent koji silazi sa kolone je propušten kroz kolonu kalijum karbonata. Ovak oje dobijen ćeljeni proizvod terc-butil 7-hlor-3,4-dihidro-1,8-naftiridin -1(2H)-karboksilat (2.637 g). Prinos 74%<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.32 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.94 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.81 - 3.69 (m, 2H), 2.73 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 1.93 (p, J = 6.5 Hz, 2H), 1.54 (s, 9H).

Korak 5: Terc-butil (S)-7-(5-(1-(terc-butoksikarbonil)pirolidin-3-il)-4,4-difluorpentil)-3,4-dihidro-1,8-naftiridin -1(2H)-karboksilat

[0188]

[0189] Kroz rastvor terc-butil (S)-3-(2,2-difluorpent-4-en-1-il)pirolidin-1-karboksilata (205 mg, 0.745 mmol) u THF (2 mL) barbotiran je argon tokom 10 minuta. Zatim, je dodat 9-BBN (1.638 mL, 0.819 mmol, 0.5 M rastvor u THF). Posle 1 sata, dodata je dodatna količina 9-BBN, 0.5 M rastvor u THF (0.893 mL, 0.447 mmol). Nakon 30 minuta, ovaj rastvor je dodat u smešu terc-butil 7-hlor-3,4-dihidro-1,8-naftiridin -1(2H)-karboksilata (200 mg, 0.745 mmol), cezijum karbonata (364 mg, 1.117 mmol) i tetrakis(trifenilfosfin)paladiuma (0) (43.0 mg, 0.037 mmol) u 1,4-dioksanu (3 mL), kroz koji je barbotiran argon tokom 10 minuta. The Dobijen asmeša je zagrevana na 70 °C tokom 16 sati, zatim ohlađena na sobnu temperaturu, razblažena vodom i ekstrahovana etil acetatom. Organska faza je isprana rastvorom soli, osušena iznad natrijum sulfata i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni (12 g; heptan, 10%-33% etil actat) pri čemu se dobija željeni proizvod tercbutil (S)-7-(5-(1-(terc-butoksikarbonil)pirolidin-3-il)-4,4-difluorpentil)-3,4-dihidro-1,8-naftiridin -1(2H)-karboksilat (216 mg). Prinos 51% (ESI 510 (M+H)<+>).

Korak 6: (S)-7-(4,4-difluor-5-(pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin dihidrohlorid

[0191] U rastvor terc-butil (S)-7-(5-(1-(terc-butoksikarbonil)pirolidin-3-il)-4,4-difluorpentil)-3,4-dihidro-1,8-naftiridin -1(2H)-karboksilata (827 mg, 1.623 mmol) u metanolu (16 mL) dodata je hlorovodonična kiselina (16.23 mL, 64.9 mmol, 4N rastvor u dioksanu). Nakon 22 sata, dodata je dodatna količina hjlorovodonične kiseline (8.11 mL, 32.5 mmol, 4N rastvor u dioksane). Smeša je mešana 23 sata, zatim koncentrovana, i ostatak je uparen dva puta sa acetonitrilom pri čemu se dobija željeni proizvod (S)-7-(4,4-difluor-5-(pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin dihidrohlorid (674 mg). Prinos 100% (ESI 310 (M-2HCl+H)<+>).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 14.40 (s, 1H), 9.40 (d, J = 26.3 Hz, 2H), 8.13 (s, 1H), 7.61 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 3.53 - 3.26 (m, 4H), 3.26 -3.14 (m, 1H), 3.14 - 2.98 (m, 1H), 2.82 - 2.65 (m, 4H), 2.47 - 2.29 (m, 1H), 2.21 - 2.02 (m, 4H), 2.02 -1.72 (m, 5H), 1.63 - 1.48 (m, 1H).

[0192] Sledeće metode su korišćene za pripremu jedinjenja 1-12:

Primer 1: Dobijanje 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (jedinjenja 1-E1 i 1-E2)

Korak 1: 3-brom-2-ciklopropilpiridin

[0194] U rastvor 2,3-dibrompiridin (3g,12.8mmol) i ciklopropilcink (II) bromida (76 mL, 0.5 M u THF) u THF (30mL) dodat je Pd(PPh3)4 (740 mg, 0.64mmol). Smeša je mešana na 70 °C pod N2tokom 4 sata, zatim razblažena vodom (50ml) i ekstrahovana sa EtOAc (3x 50mL). Kombinovani organski slojevi su osušen iznad Na2SO4, profiltrirani, i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar : EtOAc 10:1) pri čemu se dobija željeni proizvod 3-brom-2-ciklopropilpiridin kao žuto ulje (1.2g). Prinos 48% (ESI 198(M+H) ).

Korak 2: etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-hidroksiacetat

pod N2, dodat je n-BuLi (2.9mL,

7.3mmol). Rastvor je mešan na 0 °C tokom 30 min, potom je dodat rastvor 3-brom-2-ciklopropilpiridina (1.2g, 6.1mmol) u THF (5 mL) na -10 °C. Smeša je mešana na toj temperaturi u trajanju od 30 min, i dodat je etil 2-oksoacetat (50% u toluenu, 5g, 24.4mmol). Reakcioni rastvor je mešan na 0 °C tokom 2 sata, zatim je dodat zasićen vodeni rastvor K2CO3(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (3x 50mL). Kombinovani organski slojevi su osušen iznad Na2SO4, profiltrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografiji na silika gelu (petrol etar : EtOAc 2:1) pri čemu se dobija željeni proizvod etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-hidroksiacetat kao žuto ulje (700 mg). Prinos 52% (ESI 222 (M+H) ).

Korak 3: etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-(metilsulfoniloksi)acetat

[0196]

[0197] U rastvor etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-hidroksiacetata (300 mg, 1.36mmol) i trietilamina (411mg, 4.1mmol) u DCM (5mL) na 0°C dodat je MsCl(232mg, 2mmol). Reakcioni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 sata, potom koncentrovan u vakuumu i prečišćen na silika gel koloni (petrol etar : EtOAc 4:1) da bi se dobio željeni proizvod etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-(metilsulfoniloksi)acetat kao žuto ulje (190 mg). Prinos 47% (ESI 300 (M+H) ).

Korak 4: etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat

[0199] Smeša (R)-7-(5,5-difluor-5-(pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin hidrohlorida (200 mg, 0.52mmol), etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-(metilsulfoniloksi)acetata (172 mg, 0.58mmol) i diizopropiletilamina (201 mg, 1.56mmol) u acetonitrilu (10 mL) je mešana na 50 °C preko noći. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, i ostatak je prečišćen na silika gel koloni (DCM: MeOH = 0%-20%) pri čemu se dobija željeni proizvod kao žuto ulje (130 mg). Prinos 49% (ESI 513 (M+H) ).

Korak 5: 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (jedinjenja 1-E1 i 1-E2)

[0200]

[0201] Etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat (130 mg, 0.25 mmol) je tretiran sa LiOH-H2O (126 mg, 3.0 mmol) u MeOH (4 mL) i H2O (1 mL) na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, i ostatak je prečišćen sa Prep-HPLC A (30-60% MeCN) pri čemu se dobija željeni proizvod kao beli čvrsti ostatak (60 mg, 50% prinos). Racemski proizvod je razdvojen pomoću Prep chiral SFC E pri čemu su dobijeni diastereomerni proizvodi jedinjenje 1-E1 (18 mg) i jedinjenje 1-E2 (18 mg) kao bele čvrste supstance.

[0202] Jedinjenje 1-E1 LC/MS ESI 485 (M+H)<+ 1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.36 (m, 1H), 8.00 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.26-7.17 (m, 2H), 6.42 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.80 (s, 1H), 3.42-2.57 (m, 12H), 2.15-1.45 (m, 10H), 1.30-1.25 (m, 1H), 1.10-0.85 (m, 3H). Chiral SFC E (45% MeOH): ee 86%, Rt = 2.78 min

0203] Jedinjenje 1-E2 LC/MS ESI 485 (M+H)<+ 1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.36 (m, 1H), 8.00 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.27-7.17 (m, 2H), 6.42 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.80 (s, 1H), 3.50-2.55 (m, 12H), 2.15-1.50 (m, 10H), 1.30-1.25 (m, 1H), 1.10-0.85 (m, 3H). Chiral SFC E (45% MeOH): ee 63%, Rt = 6.01 min

Primer 2: Dobijanje 2-(1-benzil-1H-pirazol-4-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatne kiseline (jedinjenja 2-E1 i 2-E2)

Korak 1: 2-(1-benzil-1H-pirazol-4-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (jedinjenja 2-E1 i 2-E2)

[0205] Smeša ((R)-7-(5,5-difluor-5-(pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridina (60 mg, 0.19 mmol), 1-benzil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola (108 mg, 0.38 mmol) i 2-oksoacetatne kiseline (50% u vodi, 29 mg, 0.38 mmol) u MeCN (5 mL) je mešana na 70 °C u trajanju od 16 sati. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, a ostatak je prečišćen sa Prep-HPLC B (30-65% MeCN) pri čemu su dobijeni diastereomerni proizvodi jedinjenje 2-E1 (33 mg) i jedinjenje 2-E2 (21 mg) kao HCOOH soli.

[0206] Jedinjenje 2-E1 LC/MS ESI 524 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.48 (s, 1H), 7.92 (d, J=6.8 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.48 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.36 - 7.24 (m, 5H), 6.52 (d, J = 7.6 Hz , 1H), 5.35 (s, 2H), 4.71-4.68 (m, 1H), 3.74 - 2.67 (m, 11H), 2.19-1.50 (m, 10H).

[0207] Jedinjenje 2-E2 LC/MS ESI 524 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.40 (s, 1H), 7.92 (d, J=6.8 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.50 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.36 - 7.24 (m, 5H), 6.54 (d, J = 7.6 Hz , 1H), 5.35 (s, 2H), 4.71-4.68 (m, 1H), 3.74 - 2.67 (m, 11H), 2.19-1.50 (m, 10H).

Primer 3: Dobijanje 2-(4-ciklopropilpirimidin-5-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatne kiseline (Jedinjenje 3)

Korak 1: terc-butil 2-(4-ciklopropilpirimidin-5-il)acetat

[0208]

[0209] Smeša rastvora 5-brom-4-ciklopropilpirimidina (700 mg, 3.52 mmol), (2-terc-butoksi-2-oksoetil)cink(II) bromida 0.5 M u THF (28.2 mL, 14.1 mmol), Pd2(dba)3(162mg, 0.18 mmol) i Q-phos (128mg, 0.18 mmol) u THF (12 mL) je mešana na 65 °C tokom 2 sata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, i ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar : EtOAc 5:1) pri čemu se dobija željeni proizvod terc-butil 2-(4-ciklopropilpirimidin-5-il)acetat kao žuto ulje (650 mg). Prinos 79% (ESI 235.0 (M+H) ).

Korak 2: 1-(2-bromfenil)-3-metilbutan-2-ol

[0211] U rastvor terc-butil 2-(4-ciklopropilpirimidin-5-il)acetata (300 mg, 1.28 mmol) u THF (10 mL) na -78 °C dodat je 2.0 M rastvor litijum diizopropilamida u THF/heksanu (1.6ml, 3.2mmol) u kapima. Reakcioni rastvor je mešan na -78°C tokom 30 min, i zatim je dodat rastvor hlortrimetilsilana (346mg, 3.20 mmol) u THF (5mL). Reakcioni rastvor je mešan na -78 °C dodatnih 30 min., i dodat je rastvor NBS (378mg, 3.20 mmol) u THF (5 mL) . Reakcioni rastvor je mešan na -78 °C tokom 1 sata, zatim je dodat MeOH (2 mL) i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar : EtOAc 4:1) pri čemu se dobija željeni proizvod terc-butil 2-brom-2-(4-ciklopropilpirimidin-5-il)acetat kao žuto ulje (160 mg). Prinos 40% (ESI 314 (M+H) ).

Korak 3: terc-butil 2-(4-ciklopropilpirimidin-5-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat

[0213] Smeša terc-butil 2-brom-2-(4-ciklopropilpirimidin-5-il)acetata (160 mg, 0.51mmol), (R)-7-(5,5-difluor-5-(pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridina (158mg, 0.51 mmol) i diizopropiletilamina (198mg, 1.53 mmol) u acetonitrilu (8 mL) je mešana na 60 °C tokom 16 sati. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, a ostatak je prečišćen na silika gel koloni (DCM: MeOH 20:1) pri čemu se dobija željeni proizvod terc-butil 2-(4-ciklopropilpirimidin-5-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat kao žuto ulje (120 mg). Prinos 43% (ESI 542 (M+H) ).

Korak 4: 2-(4-ciklopropilpirimidin-5-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (jedinjenje 3 )

[0215] 2-(4-ciklopropilpirimidin-5-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat (120 mg, 0.22mmol) je reagovao sa HCl u 1,4-dioksanu (4M, 4mL) na 25 °C tokom 2 sata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, i ostatak je prečišćen sa Prep-HPLC A (33-65% MeCN) pri čemu se dobija željeni proizvod 2-(4-ciklopropilpirimidin-5-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (Jedinjenje 3) kao bela čvrsta supstanca(6mg, 5% prinos).

[0216] Jedinjenje 3 LC/MS ESI 486.6 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.9 (s, 1H), δ 8.38 (s, 1H), 7.18 - 7.09 (m, 1H), 6.35 - 6.22 (d, J = 7.3Hz, 1H), 5.50 (s, 1H) 4.80 - 4.61 (m, 2H), 3.50 - 2.96 (m, 5H), 2.96 - 2.67 (m, 3H), 2.56-2.54 (m, 4H), 2.06 - 1.68 (m, 6H), 1.56 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 1.49 - 1.21 (m, 4H).

Primer 4: Dobijanje 2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4 -iloksi)metil)fenil) acetatna kiselina (jedinjenja 4-E1 i 4-E2)

Korak 1: 4-(2-brom-4-fluorobenziloksi)tetrahidro-2H-piran

[0218] U rastvor 2-brom-1-(brom-metil)-4-fluorbenzena (3.0 g, 11 mmol) u n-heptanu (15 mL) dodat je natrijum hidroksid 50% rastvor u vodi (10.8mL, 132 mmol), tetrabutilamonijum bromid (182 mg, 0.055 mmol) i tetrahidro-2H-piran-4-ol (1.3 g, 22 mmol). Smeša je mešana na 80 °C tokom 2 sata, potom ohlađena na sobnu temperaturu i razblažena sa etil acetatom (50 mL) i vodom (50 mL). Organska faza je odvojena, i vodena faza je ekstrahovana dva puta etil acetatom (30 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad Na2SO4, profiltrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar : EtOAc =10:1) pri čemu se dobija željeni proizvod kao bezbojno ulje (2.5 g). Prinos 77%. (ESI 313 (M+Na) ).

Korak 2: terc-butil 2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil)fenil)acetat

[0219]

[0220] Smeša 0.5 M rastvora 4-(2-brom-4-fluorobenziloksi)tetrahidro-2H-pirana (1.0 g, 3.5 mmol), (2-terc-butoksi-2-oksoetil)cink(II) bromida u THF (35 mL, 17.5 mmol), Pd2(dba)3 (180 mg, 0.175 mmol) i Qphos ( 125mg, 0.175 mmol) u THF (10 mL) je mešana na 80 °C u trajanju od 2 sata. Dodati su etil acetat (50 mL) i vodeni rastvor NaHCO3(50 mL). Čvrsti ostatak je uklonjen filtracijom i organska faza je odvojena i isprana rastvorom soli. Organska faza je osušena iznad Na2SO4, profiltrirana i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar : EtOAc =10:1) pri čemu se dobija željeni proizvod kao bezbojno ulje (500 mg). Prinos 44%. (ESI 167).

Korak 3: terc-butil 2-brom-2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil)fenil)acetat

[0222] U rastvor terc-butil 2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil)fenil)acetata (600 mg, 2 mmol) u THF (10 mL) na -78 °C pod Ar, dodat je LDA (2M u THF, 2.5 mL, 5 mmol) u kapima. Reakcioni rastvor je mešan na -78 °C for 30 min, i zatim je dodat rastvor TMSCl (540 mg, 5 mmol) u THF (1 mL).

[0223] Reakcioni rastvor je mešan na -78 °C u trajanju od 30 min, i dodat je rastvor NBS (890 mg, 5 mmol) u THF (5 mL). Smeša je mešana na -78 °C tokom 30 min., zati mje dodat MeOH (3 mL), razblažena sa H2O (10 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (20 mL). Organska faza je isprana sa zasićenim NaCl (aq.), osušena iznad Na2SO4, profiltrirana i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar : EtOAc =10:1) pri čemu se dobija željeni proizvod kao bezbojno ulje (470 mg). Prinos 58% (ESI 245).

Korak 4: terc-butil 2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil)fenil)acetat

[0225] Smeša (R)-7-(5,5-difluor-5-(pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridina (300 mg, 0.79mmol), terc-butil 2-brom-2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil)fenil)acetata (351mg, 0.87mmol) i diizopropiletilamina (306 mg, 2.37 mmol) u acetonitrilu (10 mL) je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen u vakuumu, a ostatak je prečišćen na silika gel koloni (DCM: MeOH = 0%~20%) pri čemu se dobija željeni proizvod terc-butil 2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil)fenil)acetat kao žuto ulje (450 mg). Prinos 90% (ESI 632.0 (M+H) ).

Korak 5: 2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil)fenil)acetatna kiselina (jedinjenja 4-E1 i 4-E2)

[0226]

[0227] Terc-butil 2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil)fenil)acetat (450 mg, 0.71 mmol) je reagovao sa HCl u 1,4-dioksanu (4M, 4mL) na 25 °C tokom 2 sata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, i ostatak je prečišćen sa Prep-HPLC A (30-65% MeCN) pri čemu se dobija jedinjenje 4 kao bela čvrsta supstanca(250 mg, 61% prinos). Racemski proizvod je razdvojen sa Prep chiral SFC H pri čemu se dobijaju diastereomerini proizvodi jedinjenje 4-E1 (61 mg) i jedinjenje 4-E2 (75 mg) kao bela čvrsta supstanca.

[0228] Jedinjenje 4-E1 LC/MS ESI 576 (M+H)<+ 1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.10 (s, 1H), 7.50-7.40 (m, 3H), 7.16-7.12 (m, 1H), 6.50 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 4.99-4.97 (m, 1H), 4.90-4.84 (m, 1H), 4.57-4.55 (m, 1H), 3.96-2.64 (m, 16H), 2.23-1.95 (m, 14H). Chiral SFC H (40% MeOH): ee 100%, Rt = 2.82 min

[0229] Jedinjenje 4-E2 LC/MS ESI 576 (M+H)<+ 1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.48 (s, 1H), 7.50-7.44 (m, 3H), 7.16-7.12 (m, 1H), 6.53-6.52 (m, 1H), 4.99-4.97 (m, 1H), 4.90-4.86 (m, 1H), 4.57-4.55 (m, 1H), 3.96-2.68 (m, 16H), 2.23-1.58 (m, 14H). Chiral SFC H (40% MeOH): ee 98%, Rt = 4.03 min

Primer 5: Dobijanje 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (jedinjenje 5)

Korak 1: etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat

[0231] Smeša (R)-7-(5,5-difluor-5-(pirolidin-3-il)pentil)-5-metoksi-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridina (150 mg, 0.39 mmol), etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-(metilsulfoniloksi)acetata (128 mg, 0.43 mmol) i diizopropiletilamina (151 mg, 1.17 mmol) u MeCN (5 mL) je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen u vakuumu, a ostatak je prečišćen na silika gel koloni (MeOH:DCM = 0%-20%) pri čemu se dobija željeni proizvod etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat kao žuto ulje (40 mg). Prinos 19% (ESI 543.3 (M+H)<+>).

Korak 2: 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (jedinjenje 5)

[0232]

[0233] Etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat (40 mg, 0.074 mmol) je reagovao sa LiOH-H2O (126 mg, 3.0 mmol) u MeOH (4 mL) i H2O (1 mL) na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, a ostatak je prečišćen sa Prep-HPLC A (30-65% MeCN) pri čemu se dobija jedinjenje MRT-5 kao bela čvrsta supstanca(24.0 mg, 63% prinos).

[0234] Jedinjenje 5 LC/MS ESI 515 (M+H)+ 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.53-8.51 (m, 1H), 7.96-7.92 (m, 1H), 7.35-7.31(m, 1H), 6.60(s, 1H), 5.60(d, 1H), 4.0(s, 3H), 3.82-3.00 (m, 6H), 2.76-2.47 (m, 5H), 2.30-1.55 (m, 10H), 1.30-0.95 (m, 4H).

Primer 6: 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (jedinjenja 6-A-E1, 6-A-E2, 6-B-E1 i 6-B-E2)

Korak 1: etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat stereoizomer A

[0235]

[0236] Smeša 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridina stereoizomer A (125mg, 0.43 mmol), etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-(metilsulfoniloksi)acetata (128mg, 0.43 mmol) i diizopropiletilamina (1030 mg, 7.50 mmol) u acetonitrilu (8 mL) je mešana na 50 °C tokom 16 sati. Rastvarač je uparen u vakuumu, i ostatak je prečišćen na silika gel koloni (DCM: MeOH 20:1) pri čemu se dobija željeni proizvod etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat stereoizomer A kao bezbojno ulje (150 mg). Prinos 71 % (ESI 495 (M+H) ).

Korak 2: 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina stereoizomer A (jedinjenja 6-A-E1 i 6-A-E2)

[0238] Etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat stereoizomer A (150 mg, 0.30 mmol) je reagovao sa LiOH-H2O (52 mg, 1.24 mmol) u MeOH (4 mL) i H2O (1 mL) na 40 °C u trajajnju od 4 sata. Rastvarač je uparen u vakuumu, a ostatak je prečišćen sa Prep-HPLC A (30-65% MeCN) pri čemu se dobija jedinjenje 6-A kao bela čvrsta supstanca(100 mg, 70% prinos). Racemski proizvod je razdvojen sa Prep chiral SFC A dajući tako jedinjenje 6-A-E1 (25mg) i jedinjenje 6-A-E2 (40 mg) kao bele čvrste supstance.

[0239] Jedinjenje 6-A-E1 LC/MS ESI 467 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.40 (d, J = 4.4Hz, 1H), 8.01 (d, J=8.0Hz,1H), 7.21 (m, 2H), 6.39 (d, J=7.2Hz,1H), 5.10(s,1H), 4.55(m, 1H), 3.70-3.35 (m, 3H), 3.28-2.95 (m, 3H), 2.75-2.48 (m, 6H), 2.18-1.70 (m,4H), 1.65-1.40 (m, 6H), 1.35-0.80 (m.4H). Chiral SFC A (45% MeOH) ee 100%, Rt = 1.86min.

[0240] Jedinjenje 6-A-E2 LC/MS ESI 467 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.35 (d, J = 4.4Hz, 1H), 8.01 (d, J=8.4Hz,1H), 7.20-7.13 (m, 2H), 6.36 (d, J=6.8Hz,1H), 4.91 (s,1H), 4.48(m, 1H), 3.40-3.35 (m, 3H), 3.05-2.85 (m, 3H), 2.70-2.45 (m, 6H), 2.18-1.70 (m,4H), 1.65-1.40 (m, 6H), 1.35-0.80 (m.4H). Chiral SFC A (45% MeOH) ee 100%, Rt = 3.46min.

Korak 3: 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina stereoizomer B (jedinjenja 6-B-E1 i 6-B-E2)

[0242] 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina stereoizomer B (jedinjenje 6-B) je sintetisana od 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridina stereoizomer B prema istim procedurama kao za stereoizomer A. Racemski proizvod je razdvojen sa Prep chiral SFC A dajući tako jedinjenje 6-B-E1 i jedinjenje 6-B-E2

[0243] Jedinjenje 6-B-E1 LC/MS ESI 467 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.42 (d, J = 4.4Hz, 1H), 8.01 (d, J=8.0Hz,1H), 7.21 (m, 2H), 6.39 (d, J=7.2Hz,1H), 5.10 (s,1H), 4.55(m, 1H), 3.70-3.35 (m, 3H), 3.28-2.95 (m, 3H), 2.75-2.48 (m, 6H), 2.18-1.70 (m,4H), 1.65-1.40 (m, 6H), 1.35-0.80 (m.4H). Chiral SFC A (45% MeOH) ee 100%, Rt = 1.90min.

[0244] Jedinjenje 6-B-E2 LC/MS ESI 467 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.40 (d, J = 4.4Hz, 1H), 8.01 (d, J=8Hz,1H), 7.24-7.17 (m, 2H), 6.38 (d, J=7.2Hz,1H), 5.11 (s,1H), 4.50 (m, 1H), 3.70-3.35 (m, 3H), 3.28-3.05 (m, 3H), 2.75-2.50 (m, 6H), 2.18-1.70 (m,4H), 1.65-1.40 (m, 6H), 1.35-0.80 (m.4H). Chiral SFC A (45% MeOH) ee 100%, Rt = 3.44min.

Primer 7: Dobijanje 2-(5-fluor-2-((((S)-tetrahidrofuran-3-il)oksi)metil)fenil)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (jedinjenja 7-A-E1, 7-A-E2, 7-B-E1 i 7-B-E2)

Korak 1: (S)-3-(2-brom-4-fluorobenziloksi)tetrahidrofuran

[0246] U rastvor 2-brom-1-(brom-metil)-4-fluorbenzena (3.0 g, 11 mmol) u n-Heptanu (15 mL) dodati su natrijum hidroksid 50% rastvor u vodi (10.8mL, 132 mmol), tetrabutilamonijum bromid (182 mg, 0.055 mmol) i (S)-tetrahidrofuran-3-ol (1.94 g, 22 mmol). Smeša je mešana na 80 °C tokom 2 sata, zatim ohlađena na sobnu temperautru, razblažena sa vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x 30 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad Na2SO4, profiltrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar : EtOAc =10:1) pri čemu se dobija željeni proizvod kao bezbojno ulje (2.6 g). Prinos 86%. (ESI 297 (M+Na) ).

Korak 2: (S)-terc-butil 2-(5-fluor-2-((tetrahidrofuran-3-iloksi)metil)fenil)acetat

[0248] Smeša (S)-3-(2-brom-4-fluorobenziloksi)tetrahidrofurana (0.96 g, 3.5 mmol), 0.5 M rastvora (2-terc-butoksi-2-oksoetil)cink(II) bromida u THF (35 mL, 17.5 mmol), Pd2(dba)3(180 mg, 0.175 mmol) i Q-phos ( 125mg, 0.175 mmol) u THF (10 mL) j emešana na 80°C tokom 2sata. Dodati su EtOAc (50 mL) i vod.NaHCO3(50 mL). Čvrsti ostatak je uklonjen filtracijom i organska faza je odvojena, isprana rastvorom soli, osušena iznad Na2SO4, profiltrirana i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar : EtOAc =10:1) pri čemu se dobija željeni proizvod kao bezbojno ulje (550 mg). Prinos 51%. (ESI 167).

Korak 3: terc-butil 2-brom-2-(5-fluor-2-(((S)-tetrahidrofuran-3-iloksi)metil)fenil)acetat

[0250] U rastvor (S)-terc-butil 2-(5-fluor-2-((tetrahidrofuran-3-iloksi)metil)fenil)acetata (620 mg, 2 mmol) u THF (10 mL) na -78 °C pod Ar dodat je LDA (2M in THF, 2.5 mL, 5 mmol) u kapima. Reakcioni rastvor je mešan na -78 °C tokom 30 min. Zatim je dodat rastvor TMSCl (540 mg, 5 mmol) u THF (1 mL) i reakcioni rastvor je mešan na -78 °C u trajanju od 30 min. Potom je dodat rastvor NBS (890 mg, 5 mmol) u THF (5 mL) i smeša je mešana na -78 °C tokom 30 min., zatim je dodat MeOH (3 mL), razblažena je vodom (10 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (20 mL). Organska faza je ispran rastvorom soli, osušena iznad Na2SO4, profiltrirana i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar : EtOAc =10:1) pri čemu se dobija željeni proizvod kao bezbojno ulje (450 mg). Prinos 58% (ESI 245).

Korak 4: terc-butil 2-(5-fluor-2-((((S)-tetrahidrofuran-3-il)oksi)metil)fenil)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat stereoizomer A

[0251]

[0252] Smeša 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin stereoizomer A dihidrohlorida (100 mg, 0.28mmol), terc-butil 2-brom-2-(5-fluor-2-(((S)-tetrahidrofuran-3-iloksi)metil)fenil)acetata (107mg, 0.28mmol) i diizopropiletilamina (213 mg, 1.65 mmol) u acetonitrilu (10 mL) je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, i ostatak je prečišćen na silika gel koloni (DCM: MeOH = 0%-20%) pri čemu se dobija željeni proizvod terc-butil 2-(5-fluor-2-((((S)-tetrahidrofuran-3-il)oksi)metil)fenil)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat stereoizomer A kao žuto ulje (110 mg). Prinos 67% (ESI 600 (M+H) ).

Korak 5: 2-(5-fluor-2-((((S)-tetrahidrofuran-3-il)oksi)metil)fenil)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina stereoizomer A (jedinjenja 7-A-E1 i 7-A-E2)

[0254] Terc-butil 2-(5-fluor-2-((((S)-tetrahidrofuran-3-il)oksi)metil)fenil)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6, 7,8-tetrahidro-1 ,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat stereoizomer A (110 mg, 0.18 mmol) je reagovao sa HCl u 1,4-dioksanu (4M, 4mL) na 25 °C tokom 4 sata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, id ostatak je prečišćen sa Prep-HPLC A (30-65% MeCN) pri čemu je dobijeno jedinjenje 7-A kao bela čvrsta supstanca(75 mg, 77% prinos). Racemski proizvod je razdvojen sa Prep chiral SFC A dajući diastereomerne proizvode jedinjenje 7-A-E1 (8 mg) i jedinjenje 7-A-E2 (9 mg) kao bele čvrste supstance.

[0255] Jedinjenje 7-A-E1 LC/MS ESI 544 (M+H)<+ 1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 7.50-7.47 (m, 2H), 7.26-7.12 (m, 2H), 6.35 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 4.99-4.97 (m, 1H), 4.70 (s, 1H), 4.55-4.38 (m, 3H), 3.96-3.40 (m, 8H), 2.98-2.50 (m, 7H), 2.23-1.40 (m, 12H). Chiral SFC A (35% MeOH): ee 100%, Rt = 3.50 min

[0256] Jedinjenje 7-A-E2 LC/MS ESI 544 (M+H)<+ 1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 7.50-7.43 (m, 2H), 7.20-7.15 (m, 2H), 6.38 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 4.99-4.97 (m, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.58-4.36 (m, 3H), 3.96-3.40 (m, 8H), 3.25-3.05 (m, 3H), 2.74-2.50 (m, 5H), 2.20-1.40 (m, 12H). Chiral SFC A (35% MeOH): ee 100%, Rt = 5.26 min

Korak 6: 2-(5-fluor-2-((((S)-tetrahidrofuran-3-il)oksi)metil)fenil)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina stereoizomer B (jedinjenja 7-B-E1 i 7-B-E2)

[0258] 2-(5-fluor-2-((((S)-tetrahidrofuran-3-il)oksi)metil)fenil)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina stereoizomer B (jedinjenje 7-B) je sintetisana od 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridina stereoizomer B prema istim procedurama kao stereoizomer A. Racemski proizvod je razdvojen sa Prep chiral SFC A pri čemu se dobija jedinjenje 7-B-E1 i jedinjenje 7-B-E2.

[0259] Jedinjenje 7-B-E1 LC/MS ESI 544 (M+H)<+ 1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 7.55-7.45 (m, 2H), 7.21-7.15 (m, 2H), 6.40 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 4.99-4.97 (m, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.55-4.38 (m, 3H), 3.96-3.40 (m, 8H), 3.05-2.50 (m, 7H), 2.23-1.40 (m, 12H). Chiral SFC A (35% MeOH): ee 100%, Rt = 3.76 min

[0260] Jedinjenje 7-B-E2 LC/MS ESI 544 (M+H)<+ 1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 7.50-7.43 (m, 2H), 7.20-7.15 (m, 2H), 6.38 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 4.99-4.97 (m, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.58-4.36 (m, 3H), 4.12-3.40 (m, 8H), 3.25-3.05 (m, 3H), 2.74-2.50 (m, 5H), 2.20-1.40 (m, 12H). Chiral SFC A (35% MeOH): ee 100%, Rt = 5.14 min

Primer 8: Dobijanje 2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil)fenil)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (jedinjenje 8)

Korak 1: terc-butil 2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil)fenil)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat

[0261]

[0262] Smeša terc-butil 2-brom-2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil)fenil)acetata (552 mg, 1.38 mmol), 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridina (400 mg, 1.38 mmol) i diizopropiletilamina (532 mg, 4.12 mmol) u acetonitrilu (10 mL) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Smeša je razblažena vodom (8mL) i ekstrahovana sa EtOAc (25mL). Organska faza je isprana rastvorom soli, osušena iznad Na2SO4, profiltrirana i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (DCM:MeOH 20:1) pri čemu se dobija željeni proizvod terc-butil 2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil)fenil)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat kao bezbojno ulje (510 mg). Prinos 60% (ESI 614 (M+H)+.

Korak 2: 2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil)fenil)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (jedinjenje 8)

[0264] Rastvor terc-butil 2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil)fenil)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5, 6,7, 8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetata (200 mg, 0.32 mmol) u 4N HCl/dioksanu (3 mL, 12 mmol) je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 17 sati. Smeša je koncentrovana, podešeno sa NH3/MeOH na pH=7 i prečišćena na prep-HPLC A (40-70% MeCN) pri čemu se dobija željeni proizvod jedinjenje 8 kao bela čvrsta supstanca(90 mg, 49 % prinos).

[0265] Jedinjenje 8 LC/MS ESI 558(M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.47-7.45 (m, 2H), 7.16 - 7.13 (m, 2H), 6.38- 6.35 (m, 1H), 4.98 - 4.97 (m, 1H), 4.82 - 4.80 (m, 1H), 4.56-4.40 (m, 4H), 3.95-3.32 (m, 9H), 3.20 - 2.50 (m, 6H), 2.20-1.25 (m, 14H).

Primer 9: Dobijanje 2-(2-(3,3-difluorociklobutil)piridin-3-il)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (jedinjenje 9)

Korak 1: terc-butil 3,3-difluorciklobutan-1-karboksilat

[0267] U rastvor 3,3-difluorciklobutan -1-karboksilne kiseline (3.0 g, 22.2 mmol) u DCM (25 mL) na 0 °C dodat je DMAP (270 mg, 2.22 mmol) u porcijama i 2-metilpropan-2-ol (3.3 g, 44.4 mmol) u jednoj porciji. 1M solution N,N'-dicikloheksilkarbodiimid u DCM (25 mL, 25 mmol) dodat je u kapima održavajući temperaturu ispod 10 °C. Dobijena suspenzia je zagrejana na sobnu temperaturu i mešana 18 sati. Čvrsti ostatak je uklonjen filtracijom, i filtrat je ispran 2N vodenim rastvorom HCl (2x 15 mL), vodom (2x 15 mL), i zasičenim vodenim rastvorom NaHCO3(2x 15 mL), osušen iznad MgSO4, profiltriran, i koncentrovan u vakuumu dajući terc-butil 3,3-difluorciklobutan-1-karboksilat (2.4 g) kao bezbojno ulje. Prinos 63%.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ:1.47 (s, 9H), 2.81 (m, 5H).

Korak 2: terc-butil 1-(3-brom-piridin-2-il)-3,3-difluorociklobutan-1-karboksilat

[0268]

[0269] U rastvor terc-butil 3,3-difluorociklobutan-1-karboksilaata (2.4 g, 12.5 mmol) i 3-brom-2-fluorpiridina (1.83 g, 10.4 mmol) u toluenu (30 mL) dodat je NaHMDS (13.5 mL, 13.5 mmol) na 0 °C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 sata, zatim je dodat rastvor NH4Cl i ekstrahovana je sa EtOAc (3x 20 mL). Kombinovana organska faze je koncentrovaan u vakuumu, i ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar : EtOAc 5:1) dajući željeni jedinjenje terc-butil 1-(3-brompiridin-2-il)-3,3-difluorociklobutan-1-karboksilat kao bezbojno ulje ( 1.6 g) . Prinos 46% (ESI 348.0 (M+H) ).

Korak 3: 1-(3-brompiridin-2-il)-3,3-difluorociklobutan-1-karboksilna kiselina

[0271] U rastvor terc-butil 1-(3-brompiridin-2-il)-3,3-difluorociklobutan-1-karboksilat (1.6 g, 4.6 mmol) in DCM (20 mL) na sobnoj temperaturi dodat je TFA (8 mL). Smeša je mešana na 40 °C u trajanju od 4 sata, zatim koncentrovana u vakuumu pri čemu se dobija željeni proizvod 1-(3-brompiridin-2-il)-3,3-difluorciklobutan-1-karboksilna kiselina kao žuto ulje (1.1 g). Prinos 82% (ESI 292.0 (M+H) ).

Korak 4: 3-brom-2-(3,3-difluorciklobutil)piridin

[0273] Rastvor 1-(3-brom-piridin-2-il)-3,3-difluorciklobutan-1-karboksilne kiseline (1.1 g, 3.8 mmol) u toluenu (20 mL) je mešan na 90°C u trajanju od 18 sati. Reakcioni rastvor je koncentrovan u vakuumu, i ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar : EtOAc 5:1) pri čemu se dobija željeni proizvod 3-brom-2-(3,3-difluorociklobutil)piridin kao bezbojno ulje (800 mg). Prinos 85% (ESI 248.0 (M+H) ).

Korak 5: terc-butil 2-(2-(3,3-difluorciklobutil)piridin-3-il)acetat

[0274]

[0275] U smešu 3-brom-2-(3,3-difluorciklobutil)piridina (800 mg, 3.2 mmol), Pd2(dba)3(82 mg, 0.09 mmol) i Q-phos (64 mg, 0.09 mmol) u THF (15 mL) pod Ar na sobnoj temperaturi dodat je 1M rastvor (2-terc-butoksi-2-oksoetil)cink(II) bromida u THF (16 mL, 16 mmol). Reakcioni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 sata, zatim je dodat rastvor NaHCO3, profiltriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar : EtOAc 5:1) pri čemu se dobija željeni proizvod terc-butil 2-(2-(3,3-difluorociklobutil)piridin-3-il)acetat kao bezbojno ulje (600 mg). Prinos 66% (ESI 284.0 (M+H) ).

Korak 6: terc-butil 2-brom-2-(2-(3,3-difluorciklobutil)piridin-3-il)acetat

[0277] U rastvor terc-butil 2-(2-(3,3-difluorociklobutil)piridin-3-il)acetata (240 mg, 0.84 mmol) u THF (6 mL) na -78 °C dodat je 2.0 M rastvor litijum diizopropilamid u THF/heksanu (1.7 mL, 1.7 mmol) u kapima. Reakcioni rastvor je mešan na -78 °C for 30 min, zatim je dodat hlortrimetilsilan (182 mg, 1.68 mmol) i reakcioni rastvor je mešan na -78 °C dodatnih 30 min. Potom je dodat rastvor NBS (300 mg, 1.68 mmol) u THF (3 mL) i reakcioni rastvor je mešan na -78 °C tokom 1 sata, zatim je dodat MeOH (2 mL) i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar : EtOAc 5:1) pri čemu se dobija željeni proizvod terc-butil 2-brom-2-(2-(3,3-difluorociklobutil)piridin-3-il)acetat kao žuto ulje (80 mg). Prinos: 26% ( ESI 362.0 (M+H) ).

Korak 7: terc-butil 2-(2-(3,3-difluorciklobutil)piridin-3-il)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat

[0279] Smeša terc-butil 2-brom-2-(2-(3,3-difluorociklobutil)piridin-3-il)acetata (80 mg, 0.22 mmol), 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridina (64 mg, 0.22 mmol) i diizopropiletilamina (57 mg, 0.44 mmol) u acetonitrilu (8 mL) je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 3 sata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, i ostatak je prečišćen na silika gel koloni (DCM: MeOH 10:1) pri čemu se dobija željeni proizvod terc-butil 2-(2-(3,3-difluorociklobutil)piridin-3-il)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat kao žuto ulje (35 mg). Prinos 28% (ESI 573.0 (M+H) ).

Korak 8: 2-(2-(3,3-difluorciklobutil)piridin-3-il)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (jedinjenje 9)

[0281] U rastvor terc-butil 2-(2-(3,3-difluorociklobutil)piridin-3-il)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetata (35 mg, 0.06 mmol) u DCM (5 mL) dodat je TFA (0.4 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 18 sati, zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen sa Prep-HPLC A (30-65% MeCN) pri čemu se dobija jedinjenje 9 kao bela čvrsta supstanca(10 mg, 33% prinos).

[0282] Jedinjenje 9 LC/MS ESI 517.3 (M+H) .<1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.56 - 8.45 (m, 2H), 8.08 -7.95 (m, 1H), 7.40 - 7.35 (m, 2H), 6.45 - 6.40 (m, 1H), 4.55 - 4.40 (m, 1H), 4.10 - 4.00 (m, 1H), 3.48 -2.55 (m, 15H), 2.18 - 1.35 (m, 11H).

Primer 10: Dobijanje 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatne kiseline (jedinjenja 10-A-E1, 10-A-E2, 10-B-E1 i 10-B-E2)

Korak 1: etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat stereoizomer A

[0284] Smeša 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-5-metoksi-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridina stereoizomer A dihidrohlorid (200 mg, 0.51 mmol), etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-(metilsulfoniloksi)acetata (193 mg, 0.63 mmol) i diizopropiletilamina (513 mg, 3.72 mmol) u acetonitrilu (8 mL) je mešana na 50 °C u trajanju od 16 sati. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, i ostatak je prečišćen na silika gel koloni (DCM: MeOH 20:1) pri čemu se dobija željeni proizvod etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat stereoizomer A kao žuto ulje (170 mg). Prinos 64% (ESI 525 (M+H) ).

Korak 2: 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina stereoizomer A (jedinjenja 10-A-E1 i 10-A-E2)

[0286] Etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat stereoizomer A (170 mg, 0.32 mmol) je tretiran sa LiOH-H2O (200 mg, 4.76 mmol) u MeOH (4 mL) i H2O (1 mL) na 40 °C tokom 2 sata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, i ostatak je prečišćen sa Prep-HPLC A (30-65% MeCN) pri čemu se dobija jedinjenje 10-A kao bela čvrsta supstanca(60 mg, 38% prinos). Racemski proizvod je razdvojen sa Prep chiral SFC H dajući jedinjenje 10-A-E1 (11mg) i jedinjenje 10-A-E2 (12mg) kao bele čvrste supstance.

[0287] Jedinjenje 10-A-E1 LC/MS ESI 497 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.31 (d, J=3.6 Hz, 1H), 8.02 (d, J=7.2 Hz,1H), 7.18-7.14 (m, 1H), 6.29 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.49-4.35 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.36-3.30 (m, 2H), 3.15-3.10 (m, 1H), 2.95-2.70 (m, 3H), 2.65-2.42 (m, 6H), 2.20-1.45 (m,10H), 1.35-0.80 (m, 4H), Chiral SFC H (45% MeOH), ee 100%, Rt = 2.36min.

[0288] Jedinjenje 10-A-E2 LC/MS ESI 497 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.29 (d, J=4.0 Hz, 1H), 8.01 (d, J=7.6 Hz,1H), 7.16-7.13 (m, 1H), 6.31 (s, 1H), 4.67 (s, 1H), 4.51-4.38 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.36-3.20 (m, 3H), 2.85-2.70 (m, 2H), 2.65-2.45 (m, 7H), 2.02-1.45 (m,10H), 1.35-0.80 (m, 4H), Chiral SFC H (45% MeOH), ee 100%, Rt = 3.46min.

Korak 3: 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina stereoizomer B (jedinjenja 10-B-E1 i 10-B-E2)

[0289]

[0290] 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina stereoizomer B (jedinjenje 10-B) je sintetisan od 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-5-metoksi-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridina stereoizomer B prema istim procedurama kao za stereoizomer A. Racemski proizvod je razdvojen sa Prep chiral SFC A to give jedinjenje 10-B-E1 i jedinjenje 10-B-E2.

[0291] Jedinjenje 10-B-E1 LC/MS ESI 497 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.31-8.29 (m, 1H), 8.04 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.19-7.15 (m, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.67 (s, 1H), 4.49-4.35 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.30-3.18 (m, 3H), 2.95-2.85 (m, 1H), 2.80-2.44 (m, 8H), 2.65-2.42 (m, 6H), 2.02-1.45 (m,10H), 1.35-0.80 (m, 4H), Chiral SFC A (45% MeOH), ee 100%, Rt = 2.05 min.

[0292] Jedinjenje 10-B-E2 LC/MS ESI 497 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.29-8.27 (m, 1H), 8.05 (d, J=6.4 Hz, 1H), 7.17-7.14 (m, 1H), 6.23 (s, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.56-4.35 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.34-3.30 (m, 2H), 3.08-2.98 (m, 1H), 2.82-2.40 (m, 9H), 2.02-1.45 (m,10H), 1.35-0.80 (m, 4H), Chiral SFC A (45% MeOH), ee 100%, Rt = 3.53 min.

Primer 11: Dobijanje 2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil)fenil)-2-((R)-3-((S)-1-fluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (jedinjenje 11)

Korak 1: terc-butil 2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil)fenil)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat

[0294] Smeša 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-5-metoksi-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridina (120 mg, 0.30 mmol), terc-butil 2-brom-2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil)fenil)acetata (121 mg, 0.30 mmol) i diizopropiletilamina (116 mg, 0.90 mmol) in MeCN (10 mL) je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, a ostatak je prečišćen na silika gel koloni (DCM: MeOH = 0%-20%) pri čemu se dobija željeni proizvod kao žuto ulje (120 mg). Prinos 62% (ESI 644 (M+H)<+>).

Korak 2: 2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil)fenil)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (jedinjenje 11)

[0296] Terc-butil 2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil)fenil)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat (120 mg, 0.19 mmol) je reagovao sa HCl u 1,4-dioksanu (4M, 4mL) na 25 °C tokom 2 sata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, a ostatak je prečišćen sa Prep-HPLC A (30-65% MeCN) dajući jedinjenje 11 kao belu čvrstu supstancu (29.0 mg, 26% prinos).

[0297] Jedinjenje 11 LC/MS ESI 588 (M+H)<+ 1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.50-7.49 (m, 2H), 7.47 (s, 1H),6.30 (d, 1H), 5.00 (d, 1H), 4.70-4.56 (m, 3H), 3.96- 2.85 (m, 12H), 2.70 - 2.55 (m, 5H), 2.10-1.50 (m, 15H).

Primer 12: Dobijanje 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((S)-3-(2,2-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatne kiseline (jedinjenje 12)

Korak1: etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((S)-3-(2,2-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat

[0299] Smeša (S)-7-(4,4-difluor-5-(pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin (200 mg, 0.52 mmol), etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-(metilsulfoniloksi)acetat (172mg, 0.57 mmol) i diizopropiletilamina (201mg, 1.56 mmol) uacetonitrilu (8 mL) je mešana na 50 °C u trajanju od 16 sati. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, i ostatak je prečišćen na silika gel koloni (DCM: MeOH 20:1) pri čemu se dobija željeni proizvod etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((S)-3-(2,2-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat kao žuto ulje (210 mg). Prinos 79% (ESI 513 (M+H) ).

Korak 6: 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((S)-3-(2,2-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (jedinjenje 12)

[0301] Etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((S)-3-(2,2-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat (210 mg, 0.41 mmol) je reagovao sa LiOH-H2O (69 mg, 1.64 mmol) u MeOH (4 mL) i H2O (1 mL) na 60 °C tokom 2 sata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, a ostatak je prečišćen sa Prep-HPLC A (30-65% MeCN) pri čemu je dovijeno jedinjenje 12 kao bela čvrsta supstanca (55 mg, 28% prinos).

[0302] Jedinjenje 12 LC/MS ESI 485.6 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.33 - 8.16 (m, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.33 - 6.98 (m, 2H), 6.37-6.34 (m, 1H), 4.67-4.59 (m, 1H), 3.47 - 3.34 (m, 2H),3.31- 3.15 (m, 1H), 2.99 - 2.57 (m, 5H), 2.48-2.35 (m, 4H), 2.30 - 1.60 (m, 9H), 1.58-1.56 (m, 1H), 1.29 - 0.75 (m, 4H).

Primer 13: Dobijanje 2-(2-ciklobutil-5-fluorpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatne kiseline F-stereoizomer B (jedinjenja 57-E1 i 57-E2)

Korak 1: 3-brom-2-ciklobutil-5-fluorpiridin

[0304] U rastvor 2,3-dibrom-5-fluorpiridina (2.5 g, 9.8 mmol) i ciklobutilcink(II) bromida (0.5 M u THF, 19.6 mL, 9.80 mmol) u THF (30mL) dodat je Pd(PPh3)4 (566 mg, 0.49 mmol). Smeša je mešana na 70 °C pod N2tokom 4 sata. Reakcioni rastvor je razblažen vodom (30 mL) i eksrahovan sa EtOAc (3 x 50mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad Na2SO4, profiltrirani, i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar : EtOAc 10:1) pri čemu se dobija željeni proizvod 3-brom-2-ciklobutil-5-fluorpiridin kao žuto ulje (1.1 g). Prinos 49% (ESI 230 (M+H) ).

Korak 2: terc-butil 2-(2-ciklobutil-5-fluorpiridin-3-il)acetat

[0306] Smeša 3-brom-2-ciklobutil-5-fluorpiridina (500 mg, 2.17 mmol), (2-terc-butoksi-2-oksoetil)cink(II) bromidnog rastvora (0.5M in THF, 13 mL, 6.5 mmol), Pd2(dba)3(101 mg, 0.11 mmol) i Q-phos (78 mg, 0.11 mmol) u THF (15 mL) je mešana na 80 °C tokom 2 sata. Zatim je reakciona smeša dipana u zas. NaHCO3vod. rastvor (50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi su osušen iznad Na2SO4, profiltriran i koncentrovan pod vakuukom. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar : EtOAc 5:1) pri čemu se dobija željeni proizvod terc-butil 2-(2-ciklobutil-5-fluorpiridin-3-il)acetat crveno ulje (260 mg). Prinos 45% (ESI 266 [M+H]+).

Korak 3: terc-butil 2-brom-2-(2-ciklobutil-5-fluorpiridin-3-il)acetat

[0308] U rastvor terc-butil 2-(2-ciklobutil-5-fluorpiridin-3-il)acetata (300 mg, 1.13 mmol) u THF (10 mL) na -78 °C dodat je rastvor litijum diizopropilamida (2.0 M u THF/Heksanu, 1.13 mL, 2.26 mmol) u kapima. Reakcioni rastvor je mešan na -78 °C u trajanju od 30 min, i dodat je rastvor hlortrimetilsilana (246 mg, 2.26 mmol) u THF (1 mL). Reakcioni rastvor je mešan na -78 °C dodatnih 30 min. Zatim je dodat rastvor N-brom-suksinimida (402 mg, 2.26 mmol) u THF (5 mL), i reakcioni rastvor je mešan na -78 °C tokom 1 sata. Reakcionom rastvoru je dodat MeOH (2 mL) i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar : EtOAc 5:1) pri čemu se dobija željeni proizvod terc-butil 2-brom-2-(2-ciklobutil-5-fluorpiridin-3-il)acetat kao bezbojno ulje (180 mg). Prinos 46% (ESI 344 [M+H]+).

Korak 4: terc-butil 2-(2-ciklobutil-5-fluorpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat F-stereoizomer B

[0309]

[0310] Smeša terc-butil 2-brom-2-(2-ciklobutil-5-fluorpiridin-3-il)acetata (180 mg, 0.52 mmol), 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin hidrohlorida stereoizomer B (189 mg, 0.52 mmol) i DIPEA (201 mg, 1.56 mmol) u acetonitrilu (10 mL) je mešan na 40 °C tokom 4 sata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, and ostatak je prečišćen na silika gel koloni (DCM: MeOH 10:1) pri čemu se dobija željeni proizvod terc-butil 2-(2-ciklobutil-5-fluorpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat F-stereoizomer B kao žuto ulje (190 mg). Prinos 66% (ESI 555 (M+H) ).

Korak 5: 2-(2-ciklobutil-5-fluorpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina F-stereoizomer B (jedinjenja 57-E1 i 57-E2)

[0312] Terc-butil 2-(2-ciklobutil-5-fluorpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat F-stereoizomer B (190 mg, 0.34 mmol) je reagovao sa HCl u 1,4-dioksanu (4M, 10 mL) na 25 °C tokom 2 sata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, i ostatak je prečišćen sa Prep-HPLC A (33-65% MeCN) pri čemu se dobija jedinjenje 57 F-stereoizomer B kao bela čvrsta supstanca(110 mg, 65% prinos). Racemski proizvod je razdvojen sa Prep chiral SFC E djaući diastereomerni proizvod jedinjenje 57-E1 (34 mg) i jedinjenje 57-E2 (41 mg) kao bele čvrste supstance.

[0313] Jedinjenje 57-E1 LC/MS ESI 499 (M+H) .1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.42 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.87 (dd, J = 9.5 Hz, 3.0 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.42 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.55-4.40 (m, 2H), 4.30-4.25 (m, 1H), 3.42 - 3.36 (m, 2H), 3.18 - 2.25 (m, 13H), 2.13-1.82 (m, 5H), 1.78 - 1.42 (m, 8H). Chiral SFC E (45% MeOH): ee 90%, Rt = 3.11min

[0314] Jedinjenje 57-E2 LC/MS ESI 499 (M+H) .1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.42 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.87 (dd, J = 9.5 Hz, 3.0 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.45 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.55-4.38 (m, 2H), 4.25-4.18 (m, 1H), 3.42 - 3.39 (m, 2H), 3.26-3.22 (m, 1H), 2.98 - 2.22 (m, 12H), 2.18-1.82 (m, 5H), 1.78 - 1.40 (m, 8H). Chiral SFC E (45% MeOH): ee 93%, Rt = 3.96min

Primer 14: Dobijanje 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(4-izopropoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina F-stereoizomer A (jedinjenja 58-E1 i 58-E2)

Korak 1: 2-hlor-1,8-naftiridin-4-ol

[0316] U rastvor 2-hlor-4-metoksi-1,8-naftiridina (500 mg, 2.57 mmol) u DCM (30mL) na 0°C dodat je tribromoboran (1M in DCM, 10.3mL, 10.28 mmol) u kapima. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod N2 preko noći. Reakcioni rastvor je razblažen vodom (30 mL), ipsran zasićenim NaHCO3do pH=7 i ekstrahovan sa DCM (3 x 50mL). Kombinovani organski sloj je osušen iznad Na2SO4, profiltriran, i koncentrovan u vakuumu pri čemu se dobija željeni proizvod 2-hlor-1,8-naftiridin-4-ol kao bela čvrsta supstanca(240 mg). Prinos 52% (ESI 181 (M+H) ).

Korak 2: 2-hlor-4-izopropoksi-1,8-naftiridin

[0318] U smešu 2-hlor-1,8-naftiridin-4-ola (500 mg, 2.77 mmol) i K2CO3(765 mg, 5.54 mmol) u DMF (30mL) dodat je 2-iodopropan (706 mg, 4.16 mmol). Smeša je mešana na 60 °C preko noći, profiltrirana i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (50:1 DCM: MeOH) pri čemu se dobija željeni proizvod 2-hlor-4-izopropoksi-1,8-naftiridin kao bela čvrsta supstanca(290 mg). Prinos 47% (ESI 223 (M+H) ).

Korak 3: (R)-terc-butil 3-(1-fluor-5-(4-izopropoksi-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-karboksilat stereoizomer A

[0320] U rastvor (R)-terc-butil 3-(1-fluorpent-4-enil)pirolidin-1-karboksilata stereoizomer A (578 mg, 2.25 mmol) u THF (suv, 5 mL) pod Ar dodat je 9-BBN (0.5M rastvor u THF, 9 mL, 4.50 mmol). Reakcioni rastvor je mešan na 50 °C tokom 2 sata, zatim ohlađen na sobnu temperaturu. Ovaj rastvor je dodat u smešu 2-hlor-4-izopropoksi-1,8-naftiridina (500 mg, 2.25 mmol), cezijum karbonata (2.20 g, 6.75 mmol) z Pd(PPh3)4(130 mg, 0.113 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL). Reakcioni rastvor je mešan na 90 °C tokom 4 sata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, and ostatak je prečišćen na silika gel koloni (DCM:MeOH 30:1) pri čemu se dobija željeni proizvod (R)-terc-butil 3-(1-fluor-5-(4-izopropoksi-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-karboksilat stereoizomer A kao žuto ulje (610 mg). Prinos 61% (ESI 446 (M+H) ).

Korak 4: (R)-terc-butil 3-(1-fluor-5-(4-izopropoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-karboksilat stereoizomer A

[0322] Smeša (R)-terc-butil 3-(1-fluor-5-(4-izopropoksi-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-karboksilata stereoizomer A (610 mg, 1.37 mmol) i Pd/C (120mg, 20 tež%) u etil acetatu (20 mL) je mešana pod H2balonom na 40 °C tokom 16 sati. Čvrsti deo je uklonjen filtracijom, filtrat je koncentrovan u vakuumu, i ostatak je prečišćen na silika gel koloni (30:1 DCM:MeOH) pri čemu se dobija željeni proizvod (R)-terc-butil 3-(1-fluor-5-(4-izopropoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-karboksilat stereoizomer A kao žuto ulje (430 mg). Prinos 70% (ESI 450 (M+H) ).

Korak 5: 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-5-izopropoksi-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin stereoizomer A

[0324] (R)-terc-butil 3-(1-fluor-5-(4-izopropoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-karboksilat stereoizomer A (430 mg, 0.96 mmol) je reagovao sa HCl u 1,4-dioksanu (4M, 10 mL) na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu pri čemu se dobija željeni proizvod 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-5-izopropoksi-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin stereoizomer A kao HCl so (360 mg). Prinos 89% (ESI 350 (M+H) ).

Korak 6: etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(4-izopropoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat F-stereoizomer A

[0326] Smeša 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-5-izopropoksi-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin hidrohlorida stereoizomer A (180 mg, 0.43 mmol), etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-(metilsulfoniloksi)acetata (128 mg, 0.43 mmol) i DIEA (166 mg, 1.29 mmol) u acetonitrilu (10 mL) je mešana na 50 °C preko noći. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, i ostatak je prečišćen na silika gel koloni (DCM: MeOH = 0% → 20%) pri čemu se dobija željeni proizvod kao žuto ulje (190 mg). Prinos 80% (ESI 553 (M+H)+).

Korak 7: 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(4-izopropoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina F-stereoizomer A (jedinjenja 58-E1 i 58-E2)

[0328] Etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(4-izopropoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat F-stereoizomer A (190 mg, 0.34 mmol) je reagovao sa LiOH-H2O (210 mg, 5.0 mmol) u MeOH (4 mL) and H2O (1 mL) na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, a ostatak je prečišćen sa Prep-HPLC A (30-60% MeCN) pri čemu se dobija željeni proizvod kao bela čvrsta supstanca(110 mg, 62% prinos). Racemski proizvod je razdvojen sa Prep chiral SFC A dajući diastereomerne proizvode jedinjenje 58-E1 (12 mg) i jedinjenje 58-E2 (12 mg) kao bele čvrste supstance.

[0329] Jedinjenje 58-E1 LC/MS ESI 525 (M+H) .1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.30- 8.28 (m, 1H), 8.03 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 7.17-7.15 (m, 1H), 6.34 (s, 1H), 4.80-4.38 (m, 3H), 3.39-3.35 (m, 2H), 3.22 - 3.18 (m, 1H), 2.82 - 2.40 (m, 8H), 2.08-1.82 (m, 3H), 1.78 - 1.25 (m, 14H), 1.20 - 0.85 (m, 4H). Chiral SFC A (45% MeOH): ee 100%, Rt = 1.79min Jedinjenje 58-E2 LC/MS ESI 525 (M+H) .1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.28- 8.26 (m, 1H), 8.07 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 7.17-7.15 (m, 1H), 6.25 (s, 1H), 4.72-4.33 (m, 3H), 3.34-3.31 (m, 2H), 3.04 - 3.01 (m, 1H), 2.75 - 2.40 (m, 8H), 2.04-1.75 (m, 3H), 1.70 - 1.25 (m, 14H), 1.20 -0.85 (m, 4H). Chiral SFC A (45% MeOH): ee 100%, Rt = 3.08min

Primer 15: Dobijanje 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(7-metil-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina F-stereoizomer A (jedinjenja59-A-E1, 59-A-E2, 59-B-E1 i 59-B-E2)

Korak 1: 4-(2,6-dihlorpiridin-3-il)but-3-en-2-on

[0330]

[0331] Smeša 2,6-dihlornikotinaldehida (10.0 g, 57.14 mmol) i 1-(trifenilfosforaniliden)propan-2-ona (22.7 g, 71.43 mmol) u toluenu (100 mL) je mešana na 110 °C preko noći. Smeša je razblažena sa H2O (100 mL), zatim ekstrahovana sa EtOAc (3 × 100 mL). kombinovani organski sloj je ispran rastvorom soli, osušen iznad amhidrovanog natrijum sulfata, profiltriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar /EtOAc = 0% → 20%) pri čemu se dobija željeni proizvod 4-(2,6-dihlorpiridin-3-il)but-3-en-2-on kao uta čvrsta supstanca (6.5 g). Prinos 53% (ESI 216 (M+H) ).

Korak 2: 4-(2,6-dihlorpiridin-3-il)butan-2-amin

[0333] U smešu 4-(2,6-dihlorpiridin-3-il)but-3-en-2-ona (4 g, 18.6 mmol) i amonijum acetata (7.2 g, 93 mmol) u MeOH (100 mL) dodat je NaCNBH3(3.5 g, 55.8 mmol) u porcijama. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen u vakuumu, i ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar /EtOAc = 0% → 100%) pri čemu se dobija željeni proizvod 4-(2,6-dihlorpiridin-3-il)butan-2-amin kao žuto ulje (2.4 g). Prinos 59% (ESI 219 (M+H) ).

Korak 3: 7-hlor-2-metil-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin

[0335] Smeša 4-(2,6-dihlorpiridin-3-il)butan-2-amina (2.4 g, 11 mmol) iCs2CO3(18 g, 55 mmol) u DMF (100 mL) je mešan na 140 °C preko noći. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, razblažena sa H2O (100 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3×100 mL). Kombinovani odganski sloj je ispran rastvorom soli, osušen iznad anhidrovanog natrijum sulfata, profiltriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar /EtOAc = 0% → 20%) pri čemu se dobija željeni proizvod 7-hlor-2-metil-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin kao bela čvrsta supstanca(500 mg). Prinos 25% (ESI 183 (M+H) ).

[0336] 7-Hlor-2-metil-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin (900 mg) je odvojen sa Prep chiral SFC B to pri čemu se dobijaju stereoizomer A (410 mg) i stereoizomer B (400 mg) kao bele čvrste susptance.

Korak 4: terc-butil 7-hlor-2-metil-3,4-dihidro-1,8-naftiridin -1(2H)-karboksilat stereoizomer A

[0338] Smeša 7-hlor-2-metil-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridina stereoizomer A (320 mg, 1.76 mmol), (Boc)2O (1.15 g, 5.28 mmol) i DMAP (644 mg, 5.28 mmol) u THF (40 mL) je mmešana na 60 °C preko noći. Smeša je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar /EtOAc = 0% → 20%) pri čemu se dobija željeni proizvod terc-butil 7-hlor-2-metil-3,4-dihidro-1,8-naftiridin -1(2H)-karboksilat stereoizomer A kao bela čvrsta supstanca(400 mg). Prinos 80% (ESI 283.0 (M+H) ).

Korak 5: terc-butil 7-(5-((R)-1-(terc-butoksikarbonil)pirolidin-3-il)-5-fluorpentil)-2-metil-3,4-dihidro-1,8-naftiridin -1(2H)-karboksilat Me-stereoizomer A, F-stereoizomer A

[0340] U rastvor (R)-terc-butil 3-(1-fluorpent-4-enil)-3-metilpirolidin-1-karboksilata stereoizomer A (437mg,1.70 mmol) u THF (suv, 5 mL) pod Ar, dodat je 9-BBN (0.5M rastvor u THF, 5.7 mL, 2.84 rastvot dodat je u smešu terc-butil 7-hlor-2-metil-3,4-dihidro-1,8-naftiridin -1(2H)-karboksilata stereoizomer A (400 mg, 1.42 mmol), Pd(PPh3)4(82 mg, 0.071 mmol) i Cs2CO3(1.39 g, 4.26 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL). Reakcioni rastvor je mešan na 90 °C preko noći. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, a ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar /EtOAc = 0% → 30%) pri čemu se dobija željeni proizvod tercbutil 7-(5-((R)-1-(terc-butoksikarbonil)pirolidin-3-il)-5-fluorpentil)-2-metil-3,4-dihidro-1,8-naftiridin -1(2H)-karboksilat Me-stereoizomer A, F-stereoizomer A kao žuto ulje (800 mg). Prinos 90% (ESI 506.0 (M+H) ).

Korak 6: 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-2-metil-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin Mestereoizomer A, F-stereoizomer A

[0342] terc-butil 7-(5-((R)-1-(terc-butoksikarbonil)pirolidin-3-il)-5-fluorpentil)-2-metil-3,4-dihidro-1,8-naftiridin -1(2H)-karboksilat Me-stereoizomer A, F-stereoizomer A (800 mg, 1.58 mmol) je reagovao sa HCl u 1,4-dioksanu (4M, 20 mL) na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uklonjen u vakuumu pri čemu se dobija željeni proizvod 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-2-metil-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin Me-stereoizomer A, F-stereoizomer A as HCl so (600 mg). Prinos 90% (ESI 306.0 (M+H)+).

Korak 7: etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(7-metil-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat Me-stereoizomer A, F-stereoizomer A

[0344] Smeša 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-2-metil-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridina (200 mg, 0.66 mmol), etil 2-hlor-2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)acetata (206 mg, 0.66 mmol), DIPEA (255 mg, 1.98 mmol) i NaI (50 mg) u acetonitrilu (20 mL) je mešana na 50 °C preko noći. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i ostatak je prečišćen na silika gel koloni (DCM/MeOH = 0% → 10%) pri čemu se dobija proizvod etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(7-metil-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat Me-stereoizomer A, F-stereoizomer A kao žuto ulje (200 mg). Prinos 60% (ESI 509.0 (M+H) ).

Korak 8: 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(7-metil-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina Me-stereoizomer A, F-stereoizomer A (jedinjenja 59-A-E1 i 59-A-E2)

[0346] Etil 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(7-metil-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat Me-stereoizomer A, F-stereoizomer A (200 mg, 0.39 mmol) je reagovao sa LiOH-H2O (252 mg, 6.0 mmol) u MeOH (5 mL) i H2O (1 mL) na 50 °C preko noći. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, i ostatak je prečišćen sa Prep-HPLC A (40-75% MeCN) pri čemu se dobija jedinjenje 59-A kao bela čvrsta supstanca(90 mg). Racemski proizvod je razdvojen sa Prep chiral SFC H dajući tako diastereomerne proizvode jedinjenje 59-A-E1 (32 mg) i jedinjenje 59-A-E2 (26 mg) kao bele čvrste supstance.

[0347] Jedinjenje 59-A-E1 LC/MS ESI 481.2 (M+H) .<1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.45-8.35 (m, 1H), 8.05-7.96 (m, 1H), 7.25-7.10 (m, 2H), 6.42-6.38 (m, 1H), 5.05 (s, 1H), 4.55-4.38 (m, 1H), 3.60-3.36 (m, 2H), 3.20-2.95 (m, 3H), 2.80-2.70 (m, 2H), 2.65-2.44 (m, 4H), 2.20-1.85 (m, 3H), 1.78-1.35 (m, 7H), 1.25-1.18 (m, 4H), 1.05-0.88 (m, 3H). Chiral SFC H (40% MeOH): ee 96%, Rt = 2.34min

[0348] Jedinjenje 59-A-E2 LC/MS ESI 481.2 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.39-8.37 (m, 1H), 7.98-7.95 (m, 1H), 7.24-7.16 (m, 2H), 6.42-6.40 (m, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.60-4.42 (m, 1H), 3.60-3.48 (m, 2H), 3.20-2.92 (m, 3H), 2.76-2.70 (m, 2H), 2.64-2.46 (m, 4H), 2.15-1.90 (m, 3H), 1.72-1.39 (m, 7H), 1.22-1.18 (m, 4H), 1.05-0.88 (m, 3H). Chiral SFC H (40% MeOH): ee 100%, Rt = 3.66min

Korak 9: 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(7-metil-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina Me-stereoizomer B, F-stereoizomer A (jedinjenja 59-B-E1 i 59-B-E2)

[0350] 2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-((1-fluor-5-(7-metil-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina Me-stereoizomer B, F-stereoizomer A (diastereometna jedinjenja 59-B-E1 i 59-B-E2) su sinteitsana od terc-butil 7-hlor-2-metil-3,4-dihidro-1,8-naftiridin -1(2H)-karboksilata stereoizomer B prema istim procedurama kao za stereoizomer A.

[0351] Jedinjenje 59-B-E1 LC/MS ESI 481.2 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.25-8.20 (m, 1H), 7.85-7.80 (m, 1H), 7.12-7.00 (m, 2H), 6.25-6.21 (m, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.41-4.24 (m, 1H), 3.44-3.22 (m, 2H), 3.02-2.85 (m, 3H), 2.60-2.38 (m, 6H), 2.00-1.78 (m, 3H), 1.58-1.20 (m, 7H), 1.15-1.08 (m, 4H), 0.95-0.78 (m, 3H). Chiral SFC H (40% MeOH): ee 100%, Rt = 2.53min

[0352] Jedinjenje 59-B-E2 LC/MS ESI 481.2 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.40-8.38 (m, 1H), 7.98-7.95 (m, 1H), 7.24-7.18 (m, 2H), 6.22-6.18 (m, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.60-4.42 (m, 1H), 3.60-3.45 (m, 2H), 3.18-2.85 (m, 3H), 2.75-2.45 (m, 6H), 2.16-1.88 (m, 3H), 1.75-1.40 (m, 7H), 1.24-1.20 (m, 4H), 1.05-0.88 (m, 3H). Chiral SFC H (40% MeOH): ee 100%, Rt = 3.52min

Primer 16: Dobijanje 2-(5-fluor-2-((S)-tetrahidro-2H-piran-2-il)piridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina F-stereoizomer A (jedinjenja 60-E1 i 60-E2)

Korak 1: 3-brom-2-(3,4-dihidro-2H-piran-6-il)-5-fluorpiridin

[0354] Pod N2, u rastvor 2,3-dibrom-5-fluorpiridina (3g, 11.77mmol) u MeOH (10 mL) dodati su 2-(3,4-dihidro-2H-piran-6-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (1.98g, 9.42 mmol), paladijum(II) acetat (915 mg, 1 mmol), PPh3 (476 mg, 1 mmol) i kalijum karbonat (3.5g, 25 mmol). Smeša je mešana na 50 °C tokom 5 sati pod N2, zatim ohlađena na sobnu temperaturu, i razblažena dodatkom etil acetata (60 mL) i vode (60 mL). Organska faza je odvojena, i vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom (20 mL x 2). Kombinovani organski sloj je ispran rastvorom soli i osušen iznad anhidrovanog Na2SO4. Nakon filtracije i koncentrovanja, ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar /EtOAc = 0% → 20%) pri čemu se dobija željeni proizvod kao bezbojno ulje (1.0 g, 33% prinos). ESI 258.7 (M+H)+.

Korak 2: terc-butil 2-(2-(3,4-dihidro-2H-piran-6-il)-5-fluorpiridin-3-il)acetat

[0356] Smeša 3-brom-2-(3,4-dihidro-2H-piran-6-il)-5-fluorpiridin (1 g, 3.87 mmol), (2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)cink(II) bromida (0.5M in THF, 15 mL, 11.1 mmol), Pd2(dba)3 (201 mg, 0.22 mmol) i Q-phos (156 mg, 0.22 mmol) u THF (suv, 10 mL) je mešana na 60°C tokom 2 sata u atmosferi N2. Zatim je reakciona smeša je sipana u zas. vod. rastvor NaHCO3(50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 × 40 mL). Kombinovani organski slojevi su osušen iznad anhidrovanog Na2SO4, profiltrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar /EtOAc 4:1) pri čemu se dobija željeni proizvod terc-butil 2-(2-(3,4-dihidro-2H-piran-6-il)-5-fluorpiridin-3-il)acetat (710 mg, 63 % prinos ). ESI 294.7 [M+H]<+>.

Korak 3: terc-butil 2-(5-fluor-2-(tetrahidro-2H-piran-2-il)piridin-3-il)acetat

[0358] U rastvor terc-butil 2-(2-(3,4-dihidro-2H-piran-6-il)-5-fluorpiridin-3-il)acetata (710 mg, 2.4 mmol) u MeOH (10 mL) dodat je Pd/C (20%, 80 mg). Smeša je mešana for 5 sati na 35 °C u atmosferi H2(sa balonom sa H2). Zatim,katalizator je uklonjen filtrafijom, i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar /EtOAc = 5% → 20%) pri čemu se dobija željeni proizvod as a svetlo žuto ulje (630 mg, 88% prinos). ESI 296.1 (M+H)+. Racemsko jedinjenje je razdvojeno Prep chiral SFC G pri čemu se dobijaju stereoizomer A (195 mg) i stereoizomer B (180 mg) kao svetlo žuta ulja.

Korak 4: terc-butil 2-brom-2-(5-fluor-2-(tetrahidro-2H-piran-2-il)piridin-3-il)acetat

[0359]

[0360] U rastvor terc-butil 2-(5-fluor-2-(tetrahidro-2H-piran-2-il)piridin-3-il)acetata stereoizomer A (180 mg, 0.61 mmol) u THF (5 mL dry) u atmosferi N2na -78 °C dodat je LDA (2 M u THF, 0.8 mL, 1.52 mmol) u kapima. Nakon toga, reakcioni rastvor je mešan na -78 °C tokom 0.5 sata, i dodat je TMSCl (198 mg, 1.83 mmol). Reakcija je mešana konstantno 15 minuta, i dodat je rastvor N-bromsukcinimida (325 mg, 1.83 mmol) u THF (5 mL, suv). Reakcioni rastvor je mešan 0.5 sata na -78 °C, zatim je dodata H2O (10 mL) i ekstrahovan etil acetatom (20 mL × 3). Kombinovnai organski sloj je ispran rastvorom soli i osušen iznad anhidrovanog Na2SO4. Nakon filtracije i koncentrovanja, ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar /EtOAc = 5% → 20%) pri čemu se dobija željeni proizvod kao žuto ulje (110 mg, 48.2 % prinos). ESI 374.0 (M+H)+.

Korak 5: 2-(5-fluor-2-(tetrahidro-2H-piran-2-il)piridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina F-stereoizomer A, THP-stereoizomer A (jedinjenja 60-E1 i 60-E2)

[0362] Smeša 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridina stereoizomer A (132 mg, 0.40 mmol), terc-butil 2-brom-2-(5-fluor-2-(tetrahidro-2H-piran-2-il)piridin-3-il)acetata stereoizomer A (150 mg, 0.40 mmol), NaI (50 mg, 0.33 mmol) i DIEA (156 mg, 1.21 mmol) u acetonitrilu (20 mL) je mešana na 40 °C tokom 16 sati. Rastvarač je uklonjen u vakuumu pri čemu je dobijen sirov proizvod terc-butil 2-(5-fluor-2-(tetrahidro-2H-piran-2-il)piridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat F-stereoizomer A, THP-stereoizomer A (300 mg). Sirov proizvod je tretriran sa TFA (4 mL) u DCM (4 mL) na sobnoj temperaturi tokom 16 sati. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, a ostatak je prečišćen sa Prep-HPLC A (30-60% MeCN) dajući jedinjenje 60 kao belu čvrstu supstancu (80 mg, 38% prinos iz dva koraja). Racemski proizvod je razdvojen sa Prep chiral SFC B dajući jedinjenje 60-E1 (29mg) i jedinjenje 60-E2 (20mg) kao bele čvrste supstance.

[0363] Jedinjenje 60-E1 LC/MS ESI 529.0 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.42 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.94 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.95 - 4.87 (m, 1H), 4.66 (s, 1H), 4.54 - 4.42 (m, 1H), 4.08 - 4.04 (m, 1H), 3.78 - 3.74 (m, 1H), 3.44 - 3.36 (m, 3H), 3.09 - 2.48 (m, 7H), 2.05 - 1.45 (m, 17H). Chiral SFC B (20% MeOH), ee 97%, Rt = 3.36 min.

Primer 17: Dobijanje 2-(5-fluor-2-(tetrahidro-2H-piran-2-il)piridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina F-stereoizomer A, THP-stereoizomer A (jedinjenje 61-E1)

[0365] Smeša 7-(5-fluor-5-((R)-pirolidin-3-il)pentil)-5-metoksi-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridina stereoizomer A (143 mg, 0.40 mmol), terc-butil 2-brom-2-(5-fluor-2-(tetrahidro-2H-piran-2-il)piridin-3-il)acetata stereoizomer A (150 mg, 0.40 mmol), NaI (50 mg, 0.33 mmol) and DIEA (156 mg, 1.21 mmol) u acetonitrilu (20 mL) mešana je na 40 °C tokom 16 sati. Rastvarač je uklonjen u vakuumu pri čemu je dobijen sirov proizvod terc-butil 2-(5-fluor-2-(tetrahidro-2H-piran-2-il)piridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetat F-stereoizomer A, THP-stereoizomer A (250 mg). Sirov proizvod je tretiran sa TFA (4 mL) u DCM (4 mL) na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 sati. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, i ostatak je prečišćen sa Prep-HPLC A (30-60% MeCN) pri čemu se dobija jedinjenje 61-E1 kao bela čvrsta supstanca(95 mg, 43% prinos iz dva koraka).

[0366] Jedinjenje 61-E1 LC/MS ESI 559.0 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.39 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.95 (dd, J = 9.8, 2.8 Hz, 1H), 6.43 (s, 1H), 5.13 - 4.99 (m, 1H), 4.54-4.45 (m, 2H), 4.11 - 4.02 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.87 - 3.80 (m, 1H), 3.40 - 3.35 (m, 2H), 3.31 - 3.24 (m, 1H), 2.97 - 2.87 (m, 1H), 2.86 - 2.43 (m, 7H), 2.13 - 1.41 (m, 17H).

Primer 18: Dobijanje jedinjenje 2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(5-fluor-2-(tetrahidro-2H-piran-2-il)piridin-3-il)acetatna kiselina THP-stereoizomer A (jedinjenja 62-E1 i 62-E2)

Korak 1: terc-butil 2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(5-fluor-2-(tetrahidro-2H-piran-2-il)piridin-3-il)acetat THP-stereoizomer A

[0368] U rastvor (R)-7-(5,5-difluor-5-(pirolidin-3-il)pentil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridina (65 mg, 0.24 mmol) u MeCN (5 mL) dodat je terc-butil 2-brom-2-(5-fluor-2-(tetrahidro-2H-piran-2-il)piridin-3-il)acetat stereoizomer A (30 mg, 0.08 mmol) i DIPEA (20 mg, 0.16 mmol). Reakcioni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 4 sata, razblažen vodom (10 mL) i ekstrahovan etil acetatom (3 × 15 mL). Kombinovani organski sloj je ispran rastvorom soli i osušen iznad anhidrovanog s Na2SO4. Nakon filtracije i koncentrovanja, ostatak je prečišćen na silika gel koloni (petrol etar /EtOAc 20% → 80%) pri čemu se dobija željeni proizvod kao beli čvrsti ostatak (15 mg, 31% prinos). ESI 603.3 (M+H)+.

Korak 2: 2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(5-fluor-2-(tetrahidro-2H-piran-2-il)piridin-3-il)acetatna kiselina THP-stereoizomer A (jedinjenja 62-E1 i 62-E2)

[0370] U rastvor terc-butil 2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(5-fluor-2-(tetrahidro-2H-piran-2-il)piridin-3-il)acetata THP-stereoizomer A (40 mg, 0.06 mmol) u DCM (5 mL) dodat je TFA (1 mL, 1.6 mmol). Reakcioni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 8 sati, zatim koncentrovan, i ostatak je prečišćen sa prep-HPLC dajući diastereomerno jedinjenje 62-E1 (10 mg) i jedinjenje 62-E2 (15 mg) kao bele čvrste supstance.

[0371] Jedinjenje 62-E1 LC/MS ESI 547.2 (M+H)+ , 1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.44 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.93 (dd, J = 9.6, 2.8 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 6.54 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 5.02 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.06 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 3.88 - 3.76 (m, 1H), 3.56 (s, 1H), 3.50- 3.41 (m, 2H), 3.18- 2.86 (m, 4H), 2.79 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.68 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.14 - 1.53 (m, 16H).

[0372] Jedinjenje 62-E2 LC/MS ESI 547.2 (M+H)+ , 1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.40 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.03 - 7.85 (m, 1H), 7.34 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 5.01 (d, J = 11.1 Hz, 2H), 4.12 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 3.69 (s, 1H), 3.46 - 3.38 (m, 2H), 3.23 (s, 1H), 3.10 (s, 1H), 2.95- 2.70 (m, 5H), 2.65 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.15 - 1.55 (m, 16H).

Dodatni primeri

[0373] Jedinjenja 13-55 i 63-81 su pripremljena prema opstim procedurama baziranim na postupcima koji su upotrebljeni za dobijanje jedinjenja 1-12 i 57-62.

2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-fenilacetatna kiselina (diastereomerna jedinjenja 13-E1 i 13-E2)

[0374] Jedinjenje 13-E1 LC/MS ESI 444.3 (M+H)<+>.<1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 7.62 - 7.36 (m, 5H), 7.21-7.16 (m, 1H), 6.41 - 6.37 (m, 1H), 4.25 - 4.18 (m, 1H), 3.44-3.18 (m, 3H), 3.02 - 2.48 (m, 8H), 2.22 - 1.42 (m, 10H). Chiral SFC A (35% MeOH): ee 22%, Rt = 2.44 min.

[0375] Jedinjenje 13-E2<1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 7.62 - 7.36 (m, 5H), 7.21 - 7.16 (m, 1H), 6.41 -6.37 (m, 1H), 4.25 - 4.18 (m, 1H), 3.44 - 3.18 (m, 3H), 3.02 - 2.48 (m, 8H), 2.22 - 1.42 (m, 10H). Chiral SFC A (35% MeOH): ee 95%, Rt = 4.52 min.

2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(2-(izopropoksimetil)fenil)acetatna kiselina (jedinjenje 14)

[0377] Jedinjenje 14 LC/MS ESI 516.4 (M+H)+ 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.49 (s, 1H), 7.75-7.67 (m, 1H), 7.42-7.34 (m, 4H), 6.47-6.43 (m, 1H), 4.98-4.91 (m, 2H), 4.51-4.45 (m, 1H), 3.95-3.65 (m, 2H), 3.52-3.25 (m, 3H), 3.20-2.56 (m, 7H), 2.23-1.42 (m, 10H), 1.35-0.18 (m, 6H).

2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(4-((4-metil-1H-pirazol-1-il)metil)fenil)acetatna kiselina (jedinjenje 15)

[0381] Jedinjenje 16-E1 LC/MS ESI 544 (M+H)+.1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 7.69(d, J = 7.0Hz, 1H), 7.45-7.39(m, 3H), 7.16(d, J = 7.0Hz, 1H), 6.39(d, J = 7.0Hz, 1H), 5.05-4.97(m, 1H), 4.79(s, 1H), 4.49-4.38(m, 2H), 3.94-3.91(m, 2H), 3.81-3.73(m,3H), 3.41-3.38(m, 3H), 3.01-2.97(m, 3H), 2.73-2.71(m, 2H), 2.57-2.54(m, 2H), 2.18-2.06(m, 4H), 1.92-1.87(m, 4H), 1.71-1.68(m, 2H), 1.54-1.51(m,2H). Chiral SFC A (40% MeOH): ee 98%, Rt = 2.53 min.

[0382] Jedinjenje 16-E2 LC/MS ESI 544 (M+H)+.1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 7.69(d, J = 7.0Hz, 1H), 7.45-7.39(m, 3H), 7.15(d, J = 7.0Hz, 1H), 6.37(d, J = 7.0Hz, 1H), 5.05-4.97(m, 1H), 4.78(s, 1H), 4.51-4.37(m, 2H), 4.11-3.91(m, 2H), 3.75-3.69(m, 2H), 3.57-3.38(m, 3H), 3.11-2.90(m, 4H), 2.73-2.70(m, 2H), 2.55-2.52(m, 2H), 2.15-2.06(m, 4H), 1.91-1.87(m, 4H), 1.69-1.66(m, 2H), 1.52-1.50(m, 2H). Chiral SFC A (40% MeOH): ee 98%, Rt = 3.69 min.

2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(2-(((R)-tetrahidrofuran-3-iloksi)metil)fenil)acetatna kiselina (jedinjenje 17)

[0383]

[0384] Jedinjenje 17 LC/MS ESI 544 (M+H)+. 1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 7.70-7.68(m, 1H),7.44-7.39(m, 3H), 7.17-7.15(m, 1H), 6.39-6.36(m, 1H), 5.04-4.95(m, 1H), 4.80(s, 1H), 4.54-4.37(m, 2H), 4.073.91(m, 2H), 3.80-3.72(m, 3H), 3.40-3.38(m, 2H), 3.33-3.22(m, 3H), 2.72-2.70(m, 2H), 2.57-2.52(m, 2H), 2.19-2.12(m, 4H), 2.06-1.89(m, 4H), 1.69-1.66(m, 2H), 1.55-1.49(m, 2H).

2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(2-((oksetan-3-iloksi)metil)fenil)acetatna kiselina (jedinjenje 18)

[0388] Jedinjenje 19-E1 LC/MS ESI 450 (M+H)<+ 1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.37-8.36 (m, 1H), 8.27-8.25 (m, 1H), 7.38-7.34 (m, 1H), 7.14-7.12 (m, 1H), 6.38-6.36 (m, 1H), 5.19-5.17 (m, 1H), 4.53-4.51 (m, 1H), 4.28-4.26 (m, 1H), 3.82-3.80 (m, 1H), 3.35-3.32 (m, 2H), 2.63 - 2.50 (m, 8H), 2.00-1.48 (m, 10H), 1.30 - 1.20 (m, 6H). Chiral SFC F (45% MeOH): ee 100%, Rt = 2.11 min.

[0389] Jedinjenje 19-E2 LC/MS ESI 450 (M+H)<+ 1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.42-8.41 (m, 1H), 8.24-8.22 (m, 1H), 7.40-7.39 (m, 1H), 7.18-7.16 (m, 1H), 6.38-6.36 (m, 1H), 5.18-5.15 (m, 1H), 4.54-4.52 (m, 1H), 4.46-4.44 (m, 1H), 3.84-3.82 (m, 1H), 3.35-3.32 (m, 2H), 2.63 - 2.50 (m, 8H), 2.00-1.48 (m, 10H), 1.30 - 1.20 (m, 6H). Chiral SFC F (45% MeOH): ee 100%, Rt = 5.67 min.

2-(2,4-diciklopropilpirimidin-5-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (jedinjenje 20)

[0391] Jedinjenje 20 LC/MS ESI 526 (M+H)<+ 1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.59-8.58 (m, 1H), 8.35 (bs, 2H), 7.51 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.55 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 5.01-5.00 (m, 1H), 3.50-2.50 (m, 12H), 2.50-1.55 (m, 11H), 1.50-1.00 (m, 8H).

2-(4-ciklopropilpiridin-3-il)-2-[(3R)-3-[1, 1-difluor-5-(5, 6, 7, 8-tetrahidro-1, 8-naftiridin-2-il)pentil]pirolidin-1-il]acetatna kiselina (jedinjenje 21)

[0397] Jedinjenje 23 LC/MS ESI 539.4 (M+H) .<1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.80 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 7.64-7.62 (m, 1H), 7.45-7.42 (m, 1H), 7.12-7.10 (m, 1H), 6.35-6.33 (m, 1H), 4.71- 4.69 (m, 2H), 3.81 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 3.57 - 3.33 (m, 2H), 3.14- 2.97 (m, 2H), 2.71- 2.67 (m, 4H), 2.59 - 2.25 (m, 4H), 1.94-1.87 (m, 6H), 1.64- 1.51 (m, 2H), 1.48-1.46 (m, 2H), 0.92- 0.90 (m, 4H).

2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(2-izopropil-1-oksoizoindolin-4-il)acetatna kiselina (jedinjenje 24)

[0401] Jedinjenje 25 LC/MS ESI 524.3 (M+H)<+ 1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 7.73 - 7.72 (m, 1H), 7.34 -7.24 (m, 5H), 7.18 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 6.48 - 6.47 (m, 1H), 6.39 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 5.36 (s, 1H), 4.93 -4.60 (m, 3H), 3.63 - 3.41 (m, 1H), 3.40 - 3.39 (m, 2H), 3.30 - 3.17 (m, 2H), 2.94 - 2.79 (m, 1H), 2.73 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.56 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.18 - 1.92 (m, 2H), 1.91-1.79 (m, 3H), 1.72 - 1.60 (m, 2H), 1.50 -1.40 (m, 2H).

2-(2-(ciklobutoksimetil)piridin-3-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (diastereomerna jedinjenja 26-E1 i 26-E2)

[0403] Jedinjenje 26-E1 LC/MS ESI 529.4 (M+H)+ 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.45-8.41 (m, 1H), 8.22-8.19 (m, 1H), 7.43-7.40 (m, 1H), 7.23-7.21 (m, 1H), 6.41-6.39 (m, 1H), 5.09-5.08 (m, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.48-4.45 (m, 1H), 4.17-4.10 (m, 1H), 3.41-3.31 (m, 3H), 3.05-2.49 (m, 8H), 2.34-1.81 (m, 10H), 1.79-1.40 (m, 6H).

[0404] Jedinjenje 26-E2 LC/MS ESI 529.4 (M+H)+ 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.47-8.45 (m, 1H), 8.21-8.19 (m, 1H), 7.45-7.41 (m, 1H), 7.27-7.24 (m, 1H), 6.44-6.40 (m, 1H), 5.09-5.07 (m, 1H), 4.61 (s, 1H), 4.48-4.45 (m, 1H), 4.16-4.10 (m, 1H), 3.51-3.31 (m, 3H), 3.05-2.52 (m, 8H), 2.31-1.81 (m, 10H), 1.79-1.44 (m, 6H).

2-(4-(ciklobutoksimetil)piridin-3-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (jedinjenje 27)

[0410] Jedinjenje 29-E1 LC/MS ESI 562.3 (M+H)<+ 1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.50 - 7.43 (m, 2H), 7.23 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.11 - 7.09 (m, 1H), 6.42 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.99-4.96 (m, 1H), 4.87 (s,1H), 4.44 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.34 (s, 1H), 3.95 - 3.75 (m, 4H), 3.50 - 3.22 (m, 4H), 3.17 - 2.80 (m, 3H), 2.74 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.59 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.21 - 2.02 (m, 4H), 1.92 - 1.86 (m, 4H), 1.70 - 1.62 (m, 2H), 1.58 - 1.48 (m, 2H). Chiral SFC J (40% MeOH): ee 100 %, Rt = 1.74 min

[0411] Jedinjenje 29-E2 LC/MS ESI 562.3 (M+H)<+ 1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.48 - 7.43 (m, 2H), 7.28 (d, J = 7.6 Hz, 1H),7.15 - 7.10 (m, 1H), 6.45 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.99-4.96 (m, 1H), 4.77 (s, 1H), 4.52-4.49 (m, 1H), 4.38 (s, 1H), 4.04 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 3.92 - 3.90 (m, 1H), 3.79 - 3.74 (m, 3H), 3.41 - 3.39 (m, 2H), 3.07 - 2.97 (m, 3H), 2.73 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.61 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.15 - 2.02 (m, 4H), 2.01 - 1.86 (m, 4H), 1.72 - 1.62 (m, 2H), 1.58 - 1.48 (m, 2H). Chiral SFC J (40% MeOH): ee 100 %, Rt = 3.63 min

2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(3-fluor-2-(((R)-tetrahidrofuran-3-iloksi)metil)fenil)acetatna kiselina (diastereomerna jedinjenja 30-E1 i 30-E2)

[0413] Jedinjenje 30-E1 LC/MS ESI 562.3 (M+H)<+ 1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.54 - 7.45 (m, 2H), 7.36 (d, J = 7.6 Hz, 1H),7.19 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.87 (s,1H), 4.83 - 4.80 (m,2H), 4.44 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 3.79 - 3.68 (m, 4H), 3.44 - 3.39 (m,3H), 3.17 - 3.00 (m,3H), 2.77 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.64 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.18 - 2.02 (m,4H), 2.08 - 1.86 (m, 4H), 1.76 - 1.62 (m, 2H), 1.58 - 1.50 (m, 2H). Chiral SFC A (35% MeOH): ee 100%, Rt = 3.35 min.

[0414] Jedinjenje 30-E2 LC/MS ESI 562.3 (M+H)<+ 1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.58 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.43 - 7.39 (m, 1H), 7.19 - 7.13 (m, 2H), 6.36 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.90 (s,1H), 4.74 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 4.36 - 4.35 (m,1H), 3.88 - 3.73 (m, 4H), 3.44 - 3.36 (m,3H), 3.17 - 2.80 (m,4H), 2.71 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.54 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.17 - 1.94 (m,4H), 1.89 - 1.79 (m, 4H), 1.76 - 1.62 (m, 2H), 1.55 - 1.41 (m, 2H). Chiral SFC A (35% MeOH): ee 94.1%, Rt = 3.74 min.

2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(4-izobutoksipirimidin-5-il)acetatna kiselina (jedinjenje 31)

[0416] Jedinjenje 31 LC/MS ESI 518.3 (M+H)<+ 1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.72 (s, 1H), 8.67-8.65 (m, 2H), 7.45 - 7.42 (m, 1H), 6.53 - 6.50 (m, 1H), 4.73 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.39 - 4.31 (m, 1H), 4.24 - 4.19 (m, 1H), 3.51 - 3.41 (m, 3H), 3.22 - 2.80 (m, 4H), 2.73- 2.61 (m, 4H), 2.18 - 1.86 (m, 7H), 1.79 - 1.62 (m, 2H), 1.59 - 1.50 (m, 2H).

2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(5-fluor-2-((3-metiloksetan-3-iloksi)metil)fenil)acetatna kiselina (jedinjenje 32)

[0420] Jedinjenje 33-E1 LC/MS ESI 500 (M+H) .1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.40 (s, 1H), 7.56-7.32 (m, 5H), 6.56-6.52 (m, 1H), 5.18-5.12 (m, 1H), 4.96 (s, 1H), 4.26-3.98 (m, 2H), 3.88-3.27 (m, 9H), 2.79-2.65 (m, 4H), 2.48-2.25 (m, 2H), 2.05-1.88 (m, 4H), 1.78-1.52 (m, 4H).

[0421] Jedinjenje 33-E2 LC/MS ESI 500 (M+H) .1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.40 (s, 1H), 7.53-7.50 (m, 2H), 7.45-7.41 (m, 2H), 7.39-7.31 (m, 1H), 6.51 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.16-5.11(m, 1H), 4.97 (s, 1H), 4.11-3.94 (m, 3H), 3.84-3.73 (m, 3H), 3.35-3.32 (m, 3H), 3.31-3.27(m, 2H), 2.79-2.77(m, 2H), 2.68-2.65(m, 2H), 2.55-2.37(m, 2H), 1.97-1.91(m, 4H), 1.73-1.54(m, 4H).

2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(5-fluor-2-(((S)-tetrahidrofuran-3-iloksi)metil)fenil)acetatna kiselina (jedinjenje 34)

[0423] Jedinjenje 34 LC/MS ESI 562.3 (M+H)<+ 1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.50 - 7.43 (m, 2H), 7.21 -7.18 (m, 1H), 7.15 - 7.11 (m, 1H), 6.41 - 6.38 (m, 1H), 5.01- 4.96 (m, 1H), 4.69-4.67 (m, 1H), 4.50 - 4.41 (m, 1H), 4.34 (s, 1H), 4.10 - 3.85 (m, 2H), 3.83 - 3.69 (m, 3H), 3.50 - 3.39 (m, 2H), 3.32 - 2.84 (m, 4H), 2.73 - 2.71 (m, 2H), 2.58 - 2.55 (m, 2H), 2.21 - 2.02 (m, 4H), 1.98 - 1.86 (m, 4H), 1.76 - 1.62 (m, 2H), 1.58 - 1.48 (m, 2H).

2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(3-fluor-2-(((S)-tetrahidrofuran-3-iloksi)metil)fenil)acetatna kiselina (jedinjenje 35)

[0429] Jedinjenje 37 LC/MS ESI 546.3 (M+H)<+ 1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.78 (s, 1H), 8.63 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.55 - 6.53 (m, 1H), 4.75 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.59 - 4.50 (m, 1H), 4.39 -4.35 (m, 1H), 4.18 - 3.61 (m, 5H), 3.45 - 3.42 (m, 2H), 3.30 - 2.86 (m, 3H), 2.83- 2.78 (m, 3H), 2.67 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.21 - 1.80 (m, 8H), 1.76 - 1.65 (m, 3H), 1.60 - 1.55 (m, 2H).

2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(3-fluor-2-((3-metiloksetan-3-iloksi)metil)fenil)acetatna kiselina (jedinjenje 38)

[0435] Jedinjenje 40 LC/MS ESI 544.2 (M+H)<+ 1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.59 - 7.48 (m, 2H), 7.19 -7.14 (m, 2H), 6.39 - 6.36 (m, 1H), 4.93 - 4.90 (m, 1H), 4.83 - 4.80 (m, 1H), 4.79 - 4.77 (m, 1H), 4.73 -4.70 (m, 2H), 4.51 - 4.47 (m, 4H), 3.80 - 3.60 (m, 1H), 3.59 - 3.38 (m, 3H), 3.18 - 3.02 (m, 2H), 2.73 -2.70 (m, 2H), 2.56 - 2.51 (m, 2H), 2.18 - 2.02 (m, 1H), 1.92 - 1.82 (m, 3H), 1.70 - 1.62 (m, 6H), 1.58 -1.55 (m, 4H).

2-(5-fluor-2-((oksetan-3-iloksi)metil)fenil)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (jedinjenje 41)

[0441] Jedinjenje 43 LC/MS ESI 544.3 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.70 - 7.52 (m, 2H), 7.50 -7.45 (m, 1H), 7.30-7.23 (m, 1H), 6.70-6.60 (m, 1H), 5.30-5.20 (m, 1H), 4.70-4.30 (m, 3H), 4.10- 3.60 (m, 5H), 3.51-3.49 (m, 2H), 3.33 - 3.31 (m, 3H), 2.84 - 2.70 (m, 5H), 2.25-1.30 (m, 13H).

2-(5-fluor-2-(((S)-tetrahidrofuran-3-iloksi)metil)fenil)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (jedinjenje 44)

[0445] Jedinjenje 45 LC/MS ESI 511.2 (M+H)<+ 1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.50 - 8.48 (m, 1H), 8.10 -8.07 (m, 1H), 7.28 - 7.26 (m, 2H), 6.43 - 6.42 (m, 1H), 4.80 - 4.73 (m, 1H), 4.60 - 4.38 (m, 1H), 4.08 -4.00 (m, 2H), 3.95 - 3.58 (m, 3H), 3.39 - 3.30 (m, 2H), 3.22 - 2.82 (m, 3H), 2.73 - 2.70 (m, 2H), 2.58- 2.55 (m, 3H), 2.20 - 1.92 (m, 4H), 1.89 - 1.80 (m, 3H), 1.72 - 1.60 (m, 4H), 1.58 - 1.24 (m, 4H).

2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(4-izopropoksipiridin-3-il)acetatna kiselina (jedinjenje 46)

[0447] Jedinjenje 46 LC/MS ESI 503.3 (M+H)+.<1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.72 - 8.11 (m, 2H), 7.27 - 6.94 (m, 2H), 6.37 - 6.23 (m, 1H), 4.81 - 4.64 (m, 2H), 3.53 - 3.05 (m, 4H), 3.01 - 2.68 (m, 3H), 2.71-2.56 (m, 4H), 2.10 - 1.68 (m, 6H), 1.56 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 1.50 - 1.19 (m, 8H).

2-(5-fluor-2-(((R)-tetrahidrofuran-3-iloksi)metil)fenil)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (diastereomerna jedinjenja 47-E1 i 47-E2)

[0449] Jedinjenje 47-E1 (smesa 2 diastereomera) LC/MS ESI 544.3 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.46-7.44 (m, 2H), 7.14 - 7.11 (m, 2H), 6.37-6.34 (m, 1H), 4.93-4.75 (m, 1H), 4.42-4.35 (m, 3H), 3.90-3.70 (m, 5H), 3.37 - 2.70 (m, 5H), 2.60- 2.20 (m, 5H), 2.10-1.20 (m, 13H)

[0450] Jedinjenje 47-E2 (smesa 2 diastereomera) LC/MS ESI 544.3 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.47-7.42 (m, 2H), 7.15-7.09 (m, 2H), 6.35 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 4.87-4.74 (m, 1H), 4.52-4.32 (m, 3H), 4.20-3.56 (m, 5H), 3.36 - 2.80 (m, 5H), 2.70 - 2.50 (m, 5H), 2.20 - 1.30 (m, 13H)

2-(2-ciklobutilpiridin-3-il)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (diastereomerna jedinjenjea 48-E1 i 48-E2)

[0452] Jedinjenje 48-E1 (smesa 2 diastereomera) LC/MS ESI 481 (M+H)+ 1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.55-8.54 (m, 1H), 8.03-8.02 (m, 1H), 7.29-7.19 (m, 2H), 6.41-6.39 (m, 1H), 4.74-4.22 (m, 3H), 3.41-3.32 (m, 2H), 3.04-2.29 (m, 12H), 2.14-1.85 (m, 6H), 1.72-1.40 (m, 7H). Chiral SFC F (45% MeOH): ee 100%, Rt = 4.05 min.

[0453] Jedinjenje 48-E2 (smesa 2 diastereomera) LC/MS ESI 481 (M+H)+ 1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.48-8.44 (m, 1H), 7.93-7.91 (m, 1H), 7.17-7.12 (m, 2H), 6.31-6.29 (m, 1H), 4.70-4.12 (m, 3H), 3.41-3.32 (m, 2H), 3.04-2.20 (m, 12H), 2.02-1.75 (m, 6H), 1.58-1.30 (m, 7H). Chiral SFC F (45% MeOH): ee 100%, Rt = 8.21 min.

(R)-2-(4-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-6-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)heksil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (diastereomerna jedinjenja 49-E1 i 49-E2)

[0455] Jedinjenje 49-E1: LC/MS ESI 499.3 (M+H)<+>,<1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.71 (s, 1H), 8.31 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.74 (s, 1H), 3.45 -3.37 (m, 3H), 2.87 - 2.72 (m, 6H), 2.70 - 2.56 (m, 2H), 2.54 - 2.44 (m, 1H), 2.08 - 1.82 (m, 7H), 1.76 -1.65 (m, 2H), 1.58 (m, 2H), 1.51 - 1.40 (m, 2H), 1.22 - 1.13 (m, 2H), 1.03 - 0.95 (m, 1H), 0.74 (m, 1H). Chiral SFC : MeOH(0.2% metanol amonijak ) (R,R)-Whelk-O14.6* 100mm 5um, ee 80 %, Rt = 1.84 min.

[0456] Jedinjenje 49-E2: LC/MS ESI 499.3 (M+H)+, 1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.68 (s, 1H), 8.25 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 6.42 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.33 (s, 1H), 3.42 - 3.35 (m, 2H), 2.99 (s, 1H), 2.80 - 2.59 (m, 6H), 2.59 - 2.44 (m, 3H), 1.95-2.01 (m, 1H), 1.93 - 1.62 (m, 7H), 1.60 - 1.49 (m, 3H), 1.46 - 1.36 (m, 1H), 1.07-1.10 (m, 2H), 1.01 - 0.93 (m, 1H), 0.68 (m, 1H). Chiral SFC A (40% MeOH): ee 99 %, Rt = 3.05 min.

2-(4-ciklopropilpirimidin-5-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-6-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)heksil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (Jedinjenje 50)

[0460] Jedinjenje 51: LC/MS ESI 488.3 (M+H)<+>,<1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 9.03 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 8.65 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.33 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 6.44 (dd, J = 7.3, 2.5 Hz, 1H), 4.22 (dq, J = 86.3, 6.5 Hz, 1H), 3.77 (s, 1H), 3.70 (s, 1H), 3.47 - 3.36 (m, 2H), 3.27 - 3.03 (m, 1H), 2.98 - 2.64 (m, 6H), 2.61 - 2.54 (m, 2H), 2.10 - 1.99 (m, 1H), 1.98 - 1.73 (m, 5H), 1.70 - 1.58 (m, 2H), 1.54 - 1.41 (m, 5H), 1.40 - 1.29 (m, 2H).

2-(4-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentiloksi)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (Jedinjenje 52)

[0462] Jedinjenje 52 LC/MS ESI 548.3 (M+H)<+>.<1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 7.58 (d,J = 4.1 Hz, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.27 - 7.11 (m, 2H), 6.45 - 6.35 (m, 1H), 5.37 (s, 1H), 4.83 - 4.75 (m, 2H), 4.73 - 4.60 (m, 2H), 4.55 (s, 1H), 3.40 (m, 2H), 3.00 (m, 2H), 2.73 (m, 2H), 2.56 (m, 2H), 2.25 - 2.17 (m, 1H), 2.06 (s, 2H), 1.90 (s, 3H), 1.69 (m, 2H), 1.53 (m, 2H), 1.34 (m, 6H), 0.92 (m, 1H).

2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(5-fluor-2-((oksetan-3-iloksi)metil)fenil)acetatna kiselina (Jedinjenje 53)

[0466] Jedinjenje 54 LC/MS ESI 562.3 (M+H)<+>,<1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 7.59 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.28 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 7.19 (m, 1H), 6.62 (m, 1H), 5.41 (d, J = 43.0 Hz, 1H), 4.28 - 4.17 (m, 1H), 4.10 (m, 1H), 4.06 - 3.87 (m, 2H), 3.84 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 3.80 - 3.65 (m, 2H), 3.50 (m, 3H), 3.34 (s, 2H), 3.09 (s, 1H), 2.83 (t, J= 6.2 Hz, 3H), 2.74 (m, 2H), 2.20 (m, 3H), 1.97 (m, 4H), 1.90 - 1.71 (m, 3H), 1.61 (m, 2H).

2-(2-ciklopropoksi-5-fluorpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (jedinjenje 55)

[0468] Jedinjenje 55 LC/MS A: 96% purity, UV=214 nm, Rt = 1.57 min, ESI 519.7(M+H) .<1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.07 (dd, J = 11.2, 2.9 Hz, 1H), 7.82 (dd, J = 8.1, 3.6 Hz, 1H), 7.28-7.18 (m, 1H), 6.44-6.39 (m, 1H), 4.51 (m, 2H), 4.32 (s, 1H), 3.45 - 3.37 (m, 3H), 3.11 (d, J = 79.5 Hz, 2H), 2.86 (s, 3H), 2.66 (m, 5H), 1.96-1.89 (m, 4H), 1.70 (m, 2H), 1.54 (m, 2H), 0.80 (m, 4H).

2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina F-stereoizomer B (diastereomerna jedinjenja 63-E1 i 63-E2)

[0470] Jedinjenje 63-E1 LC/MS ESI 467.2 (M+H) .1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.43-8.42 (m, 1H), 8.00-7.98 (m, 1H), 7.24-7.19 (m, 2H), 6.40 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 5.09 (s, 1H), 4.56 - 4.45 (m, 1H), 3.65 -3.38 (m, 3H), 3.25 - 3.02 (m, 3H), 2.75 - 2.50 (m, 6H), 2.15 - 1.41 (m, 10H), 1.28 - 0.92 (m, 4H). Chiral SFC A (45% MeOH), ee 100%, Rt = 1.86 min.

[0471] Jedinjenje 63-E2 LC/MS ESI 467.2 (M+H) .1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.43-8.42 (m, 1H), 8.00-7.98 (m, 1H), 7.24-7.17 (m, 2H), 6.38 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 5.12 (s, 1H), 4.56 - 4.45 (m, 1H), 3.55 -3.35 (m, 3H), 3.20 - 3.05 (m, 3H), 2.74 - 2.53 (m, 6H), 2.16 - 1.41 (m, 10H), 1.28 - 0.92 (m, 4H). Chiral SFC A (45% MeOH), ee 90%, Rt = 3.16 min.

2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina F-stereoizomer B (diastereomerna jedinjenja 64-E1 i 64-E2)

[0473] Jedinjenje 64-E1 LC/MS ESI 497 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.31-3.29 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.05-8.03 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.18-7.15 (m, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.67 (s, 1H), 4.50-4.36 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.39-3.32 (m, 1H), 3.21-3.19 (m, 1H), 2.97-2.91 (m, 1H), 2.79-2.70 (m, 2H), 2.65-2.40 (m, 6H), 2.25 (s, 1H), 2.05-1.97 (m, 1H), 1.87-1.81 (m, 2H), 1.70-1.24 (m, 7H), 1.21-1.18 (m, 1H), 1.07-1.01 (m, 2H), 0.91-0.82 (m, 1H). Chiral SFC A (45% MeOH), ee 100%, Rt = 2.05 min.

[0474] Jedinjenje 64-E2 LC/MS ESI 497 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.29-3.27 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.07-8.05 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.17-7.14 (m, 1H), 6.23 (s, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.50-4.36 (m, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.30-3.24 (m, 1H), 3.11-3.02 (m, 1H), 2.81-2.78 (m, 2H), 2.72-2.60 (m, 2H), 2.59-2.50 (m, 4H), 2.49-2.40 (m, 1H), 2.20 (s, 1H), 2.02-1.97 (m, 1H), 1.87-1.81 (m, 2H), 1.70-1.24 (m, 7H), 1.21-1.18 (m, 1H), 1.07-1.01 (m, 2H), 0.91-0.82 (m, 1H). Chiral SFC A (45% MeOH), ee 100%, Rt = 3.53 min.

2-(2-ciklopropilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (diastereomerna jedinjenja 65-E1 i 65-E2)

[0476] Jedinjenje 65-E1 LC/MS ESI 515 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.31-8.29 (m, 1H), 8.04-8.02 (m, 1H), 7.18-7.15 (m, 1H), 6.42 (s, 1H), 4.61 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.39-3.34 (m, 2H), 3.02-2.55 (m, 10H), 2.18-1.48 (m, 10H), 1.21-1.18 (m, 1H), 1.07-0.85 (m, 3H). Chiral SFC B (20% EtOH), ee 100%, Rt = 1.63 min.

[0477] Jedinjenje 65-E2 LC/MS ESI 515 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.29-8.27 (m, 1H), 8.05-8.03 (m, 1H), 7.17-7.14 (m, 1H), 6.41 (s, 1H), 4.57 (s, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.39-3.25 (m, 3H), 3.95-2.55 (m, 9H), 2.08-1.44 (m, 10H), 1.21-1.18 (m, 1H), 1.07-0.85 (m, 3H). Chiral SFC B (20% EtOH), ee 96%, Rt = 2.21 min.

(R)-2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil)fenil)-2-(3-((R)-1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (diastereomerna jedinjenja 66-A-E1, 66-A-E2, 66-B-E1 i 66-B-E2)

[0479] Jedinjenje 66-A-E1 LC/MS ESI 558.2 (M+H)+, 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.56 - 7.24 (m, 2H), 7.10 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.09 - 6.98 (m, 1H), 6.28 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.98 - 4.95 (m, 1H), 4.65 (s, 1H),4.57 - 4.43 (m, 2H), 3.87 - 3.74 (m, 2H), 3.69 - 3.18 (m, 7H), 2.93 - 2.70 (m, 2H), 2.68 - 2.59 (m, 2H), 2.53 -2.45 m, 2H), 2.06 - 1.80 (m, 4H), 1.79 - 1.75 (m, 2H), 1.61 - 1.41 (m, 6H), 1.42 - 1.06 (m, 3H). Chiral SFC A (40% MeOH): ee 100 %, Rt = 2.26 min.

[0480] Jedinjenje 66-A-E2 LC/MS ESI 558.2 (M+H)+, 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.56 - 7.24 (m, 2H), 7.10 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.09 - 6.98 (m, 1H), 6.28 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.98 - 4.95 (m, 1H), 4.76 (s, 1H),4.57 - 4.43 (m, 2H), 3.87 - 3.74 (m, 2H), 3.69 - 3.18 (m, 7H), 2.93 - 2.70 (m, 2H), 2.68 - 2.59 (m, 2H), 2.53 -2.45 m, 2H), 2.06 - 1.80 (m, 4H), 1.79 - 1.75 (m, 2H), 1.61 - 1.41 (m, 6H), 1.42 - 1.06 (m, 3H). Chiral SFC A (40% MeOH): ee 93.8 %, Rt = 3.16 min.

[0481] Jedinjenje 66-B-E1 LC/MS ESI 558.0 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.60-7.40 (m, 2H), 7.20-7.10 (m, 2H), 6.40-6.30 (m, 1H), 5.10-4.90 (m, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.56 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 4.00-3.90 (m, 2H), 3.80-3.70 (m, 2H), 3.60-3.30 (m, 5H), 3.10-2.90 (m, 2H), 2.75-2.50 (m, 5H), 2.20-1.80 (m, 6H), 1.75-1.30 (m, 8H).

[0482] Jedinjenje 66-B-E2 LC/MS ESI 558.0 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.60-7.40 (m, 2H), 7.20-7.10 (m, 2H), 6.40-6.30 (m, 1H), 5.10-4.90 (m, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.56 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 4.00-3.90 (m, 2H), 3.80-3.70 (m, 1H), 3.68-3.62 (m, 1H), 3.60-3.30 (m, 5H), 3.10-3.00 (m, 2H), 2.75-2.50 (m, 5H), 2.20-1.80 (m, 6H), 1.75-1.30 (m, 8H).

2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil)fenil)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (diastereomerna jedinjenja 67-A-E1, 67-A-E2, 67-B-E1 i 67-B-E2)

[0484] Jedinjenje 67-A-E1 LC/MS ESI 588.3 (M+H)+, 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.55 (s, 1H), 7.55-7.40 (m, 2H), 7.20-7.10 (m, 1H), 6.43 (s, 1H), 4.97 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.81 (s, 1H), 4.70-4.40 (m, 2H), 3.95-3.85 (m, 5H), 3.80-3.72 (m, 2H), 3.60-3.45 (m, 2H), 3.40-3.35 (m, 3H), 3.10-2.90 (m, 2H), 2.70-2.50 (m, 5H), 2.20-1.95 (m, 4H), 1.90-1.80 (m, 2H), 1.70-1.40 (m, 8H). Chiral SFC A (45% EtOH): ee 93.8 %, Rt = 2.24 min.

[0485] Jedinjenje 67-A-E2 LC/MS ESI 588.3 (M+H)+, 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.65-7.45 (m, 2H), 7.20-7.12 (m, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.98 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.70 (s, 1H), 4.58-4.40 (m, 2H), 3.98-3.85 (m, 2H), 3.80-3.70 (m, 4H), 3.60-3.45 (m, 2H), 3.40-3.30 (m, 3H), 3.20-2.90 (m, 2H), 2.60-2.40 (m, 5H), 2.20-1.95 (m, 5H), 1.90-1.80 (m, 2H), 1.75-1.40 (m, 7H). Chiral SFC A (45% EtOH): ee 96.5 %, Rt = 3.20 min.

[0486] Jedinjenje 67-B-E1 LC/MS ESI 588.2 (M+H)+, 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.53 - 7.37 (m, 2H), 7.8 - 6.95 (m, 1H), 6.18 (s, 1H), 4.97 - 4.88 (m, 1H), 4.54 - 4.23 (m, 3H), 3.92 - 3.73 (m, 5H), 3.69 - 3.54 (m, 1H), 3.43 - 3.20 (m, 5H), 3.07 - 2.68 (m, 3H), 2.54 - 2.33 (m, 5H), 2.07 - 1.82 (m, 3H), 1.81 - 1.61 (m, 3H), 1.71 - 1.46 (m, 8H). Chiral SFC H (40% EtOH): ee 100 %, Rt = 3.91 min.

[0487] Jedinjenje 67-B-E2 LC/MS ESI 588.2 (M+H)+, 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.53 - 7.37 (m, 2H), 7.8 - 6.95 (m, 1H), 6.18 (s, 1H), 4.99 - 4.97 (m, 1H), 4.54 - 4.23 (m, 3H), 3.92 - 3.73 (m, 5H), 3.69 - 3.54 (m, 1H), 3.43 - 3.20 (m, 5H), 3.07 - 2.68 (m, 3H), 2.54 - 2.33 (m, 5H), 2.07 - 1.82 (m, 3H), 1.81 - 1.61 (m, 2H), 1.71 - 1.46 (m, 9H). Chiral SFC H (40% EtOH): ee 92.6 %, Rt = 5.01 min.

2-(2-ciklobutilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (diastereomerna jedinjenja 68-A-E1, 68-A-E2, 68-B-E1 i 68-B-E2)

[0489] Jedinjenje 68-A-E1 LC/MS ESI 481 (M+H)+, 1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.52 - 8.51 (m, 1H), 8.07 - 8.05 (m, 1H), 7.27-7.22 (m, 2H), 6.39 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.45 - 4.32 (m, 2H), 3.35 -3.24 (m, 3H), 3.02 - 2.25 (m, 12H), 2.20 - 1.85 (m, 6H), 1.70 - 1.35 (m, 6H). Chiral SFC F (45% MeOH): ee 100 %, Rt = 3.77 min.

[0490] Jedinjenje 68-A-E2 LC/MS ESI 481 (M+H)+, 1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.52 - 8.51 (m, 1H), 8.07 - 8.05 (m, 1H), 7.36-7.25 (m, 2H), 6.45 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.70 (s, 1H), 4.55 - 4.35 (m, 2H), 3.35 -3.24 (m, 3H), 3.02 - 2.25 (m, 12H), 2.20 - 1.85 (m, 6H), 1.70 - 1.35 (m, 6H). Chiral SFC F (45% MeOH): ee 100 %, Rt = 7.81 min.

[0491] Jedinjenje 68-B-E1 LC/MS ESI 481 (M+H)+, 1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.62 - 8.61 (m, 1H), 8.03 - 8.01 (m, 1H), 7.48-7.46 (m, 1H), 7.34-7.31 (m, 1H), 6.53 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.57 4.46 (m, 1H), 4.26 - 4.23 (m, 1H), 3.50 - 3.05 (m, 6H), 2.75 - 2.35 (m, 9H), 2.20 - 1.85 (m, 6H), 1.70 -1.45 (m, 6H). Chiral SFC B (25% IPA): ee 92 %, Rt = 2.52 min.

[0492] Jedinjenje 68-B-E2 LC/MS ESI 481 (M+H)+, 1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.62 - 8.61 (m, 1H), 8.03 - 8.01 (m, 1H), 7.48-7.46 (m, 1H), 7.34-7.31 (m, 1H), 6.54 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.59 -4.47 (m, 1H), 4.24 - 4.21 (m, 1H), 3.65 - 3.42 (m, 3H), 3.25 - 3.02 (m, 3H), 2.82 - 2.35 (m, 9H), 2.20 -1.85 (m, 6H), 1.80 - 1.45 (m, 6H). Chiral SFC B (25% IPA): ee 100 %, Rt = 4.00 min.

2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)metil)fenil)acetatna kiselina (diastereomerna jedinjenja 69-E1 i 69-E2)

[0494] Jedinjenje 69-E1 LC/MS ESI 606 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.52-7.46 (m, 2H), 7.13-7.09 (m, 1H), 6.48 (s, 1H), 5.01-4.91 (m, 1H), 4.68-4.56 (m, 2H), 3.97-3.74 (m, 6H), 3.52-3.22 (m, 6H), 3.05-2.61 (m, 7H), 2.23-1.52 (m, 14H).

[0495] Jedinjenje 69-E2 LC/MS ESI 606 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.52-7.46 (m, 2H), 7.12-7.08 (m, 1H), 6.50 (s, 1H), 5.01-4.91 (m, 1H), 4.68-4.56 (m, 2H), 3.97-3.74 (m, 6H), 3.52-3.22 (m, 6H), 3.05-2.61 (m, 7H), 2.23-1.52 (m, 14H).

2-(2-ciklobutilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina (diastereomerna jedinjenja 70-A-E1, 70-A-E2, 70-B-E1 i 70-B-E2)

[0497] Jedinjenje 70-A-E1 LC/MS ESI 511 (M+H)<1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.52 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.28 (dd, J = 7.9, 4.8 Hz, 1H), 6.37 (s, 1H), 4.51 (d, J = 63.1 Hz, 2H), 4.34 - 4.27 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.37 - 3.34 (m, 2H), 3.06-2.99 (m, 4H), 2.66 - 2.57 (m, 5H), 2.54 - 2.32 (m, 4H), 2.14 - 1.84 (m, 6H), 1.75 - 1.56 (m, 6H).

[0498] Jedinjenje 70-A-E2 LC/MS ESI 511 (M+H) .<1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.50 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 8.01 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.26 (dd, J = 7.9, 4.8 Hz, 1H), 6.39 (s, 1H), 4.58-4.49 (m, 2H), 4.30 - 4.23 (m, 1H), 3.36 - 3.33 (m, 2H), 3.24 - 3.19 (m, 1H), 2.88 - 2.81 (m, 3H), 2.69 - 2.58 (m, 5H), 2.51 - 2.33 (m, 4H), 2.15 - 1.86 (m, 6H), 1.76 - 1.54 (m, 6H).

[0499] Jedinjenje 70-B-E1 LC/MS ESI 511 (M+H)<1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.52-8.51 (m, 1H), 8.06 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.28 (dd, J = 7.5, 4.5 Hz, 1H), 6.37 (s, 1H), 4.54-4.28 (m, 3H), 3.91 (s, 3H), 3.35 - 3.30 (m, 3H), 3.01-2.75 (m, 3H), 2.62 - 2.34 (m, 9H), 2.14 - 1.46 (m, 12H). Chiral SFC B (30% IPA): ee 91 %, Rt = 2.52 min.

[0500] Jedinjenje 70-B-E2 LC/MS ESI 511 (M+H)<1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.52-8.51 (m, 1H), 8.06 (dd, J = 7.5, 1.5 Hz, 1H), 7.29-7.26 (m, 1H), 6.37 (s, 1H), 4.53-4.30 (m, 3H), 3.90 (s, 3H), 3.35 - 3.32 (m, 2H), 3.05-2.75 (m, 4H), 2.65 - 2.32 (m, 9H), 2.14 - 1.45 (m, 12H). Chiral SFC B (30% IPA): ee 90 %, Rt = 4.61 min.

2-(5-fluor-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)fenil)-2-((3R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina F-stereoizomer A (diastereomerna jedinjenja 71-E1 i 71-E2)

[0502] Jedinjenje 71-E1 LC/MS ESI 528 (M+H)+,<1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 7.48 - 7.42 (m, 2H), 7.20 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.13 (td, J = 8.5, 2.8 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.57 - 4.52 (m, 1H), 4.11 - 3.99 (m, 2H), 3.70 - 3.62 (m, 3H), 3.46 - 3.34 (m, 3H), 3.12 - 3.07 (m, 3H), 2.77 - 2.54 (m, 5H), 2.13 - 1.88 (m, 6H), 1.78 - 1.40 (m, 9H). Chiral SFC H (40% EtOH): ee 96 %, Rt = 1.95 min.

[0503] Jedinjenje 71-E2 LC/MS ESI 528 (M+H)+,<1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 7.35 (dd, J= 10.3, 2.5 Hz, 1H), 7.33 - 7.29 (m, 1H), 7.06 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 6.98 (t, J = 8.5, 2.6 Hz, 1H), 6.26 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.34 -4.29 (m, 1H),3.93 - 3.89 (m, 2H), 3.59-3.50 (m, 2H), 3.29 - 3.25 (m, 3H), 3.01 - 2.76 (m, 3H), 2.59 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.42 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 1.97 - 1.7483 (m, 6H), 1.64 - 1.29 (m, 9H). Chiral SFC H (40% EtOH): ee 96 %, Rt = 2.75 min.

2-(5-fluor-2-((3-metiloksetan-3-il)metoksi)fenil)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina F-stereoizomer A (diastereomerna jedinjenja 72-E1 i 72-E2)

[0505] Jedinjenje 72-E1 LC/MS ESI 544 (M+H)+,<1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 7.22 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.04 (dd, J= 10.4, 6.1 Hz, 3H), 6.26 (d, J= 7.3 Hz, 1H), 4.77 - 4.74 (m, 1H), 4.59 - 4.33 (m, 4H), 4.00 (s, 2H), 3.30 - 3.25 (m, 2H), 3.07 - 2.93 (m, 2H), 2.61 - 2.40 (m, 5H), 2.04 - 1.94 (m, 2H), 1.81 - 1.75 (m, 2H), 1.61 - 1.12 (m, 12H). Chiral SFC A (45% MeOH): ee 98 %, Rt = 2.00 min.

[0506] Jedinjenje 72-E2 LC/MS ESI 544 (M+H)+,<1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 7.35 (d, J= 6.5 Hz, 1H), 7.15 (dd, J= 14.7, 6.0 Hz, 3H), 6.37 (d, J= 7.3 Hz, 1H), 4.88 - 4.83 (m, 1H), 4.71 - 4.41 (m, 4H), 4.12 (s, 2H), 3.43 - 3.36 (m, 2H), 3.21 - 3.17 (m, 2H), 2.72 - 2.51 (m, 5H), 2.17 - 1.87 (m, 4H), 1.70 - 1.30 (m, 12H). Chiral SFC A (45% MeOH): ee 97 %, Rt = 3.00 min.

2-(2-etilpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina F-stereoizomer A (diastereomerna jedinjenja 73-E1 i 73-E2)

[0508] Jedinjenje 73-E1 LC/MS ESI 485.2 (M+H)+, 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.39 - 8.37 (m, 1H), 8.14 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.28 - 7.25 (m, 1H), 6.37 (s, 1H), 4.61 - 4.29 (m, 2H), 4.05 - 3.77 (m, 3H), 3.37 -3.29 (m, 2H), 3.15 - 2.96 (m, 3H), 2.94 - 2.34 (m, 8H), 2.02 - 2.01(m, 1H), 1.95 - 1.78 (m, 3H), 1.76 - 1.39 (m, 6H), 1.32 (t, J = 7.6 Hz, 3H). Chiral SFC F (45% MeOH): ee 100 %, Rt = 2.99 min.

[0509] Jedinjenje 73-E2 LC/MS ESI 485.2 (M+H)+, 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.39 - 8.37 (m, 1H), 8.14 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.28 - 7.25 (m, 1H), 6.37 (s, 1H), 4.61 - 4.29 (m, 2H), 4.05 - 3.77 (m, 3H), 3.37 -3.29 (m, 2H), 3.15 - 2.96 (m, 3H), 2.94 - 2.34 (m, 8H), 2.02 - 1.78 (m, 4H), 1.76 - 1.39 (m, 6H), 1.32 (t, J = 7.6 Hz, 3H). Chiral SFC F (45% MeOH): ee 95.2 %, Rt = 7.99 min.

2-(5-fluor-2-(tetrahidrofuran-2-il)fenil)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina F-stereoizomer A (diastereomerna jedinjenja 74-A-E1, 74-A-E2, 74-B-E1 i 74-B-E2)

[0511] Jedinjenje 74-A-E1 LC/MS ESI 514 (M+H) .1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 7.59-7.56 (m, 1H), 7.49-7.45 (m, 1H), 7.18-7.14 (m, 2H), 6.38 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 5.29-5.27 (m, 1H), 4.90 (s, 1H), 4.55-4.45 (m, 1H), 4.10-4.08 (m, 1H), 3.97-3.95 (m, 1H), 3.52-3.30 (m, 4H), 3.06-2.94 (m, 2H), 2.73-2.45 (m, 6H), 2.12-1.89 (m, 7H), 1.68-1.42 (m, 6H).

[0512] Jedinjenje 74-A-E2 LC/MS ESI 514 (M+H) .1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 7.49-7.44 (m, 2H), 7.18-7.12 (m, 2H), 6.38 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 5.29-5.27 (m, 1H), 4.90 (s, 1H), 4.55-4.45 (m, 1H), 4.17-4.15 (m, 1H), 3.92-3.90 (m, 1H), 3.50-2.95 (m, 6H), 2.73-2.40 (m, 6H), 2.16-1.88 (m, 7H), 1.68-1.42 (m, 6H).

[0513] Jedinjenje 74-B-E1 LC/MS ESI 514 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.59-7.56 (m, 1H), 7.45-7.44 (m, 1H), 7.17-7.14 (m, 2H), 6.36 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.28 (t, J = 16.0 Hz, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.52-4.38 (m, 1H), 4.10-4.04 (m, 1H), 3.96-3.86 (m, 1H), 3.49-3.34 (m, 3H), 3.21-3.07 (m, 3H), 2.72-2.69 (m, 2H), 2.54-2.47 (m, 4H), 2.15-1.88 (m, 7H), 1.78-1.32 (m, 6H).

[0514] Jedinjenje 74-B-E2 LC/MS ESI 514 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.47-7.42 (m, 2H), 7.17-7.10 (m, 2H), 6.39-6.37 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.12 (t, J = 12.0 Hz, 1H), 4.97-4.94 (m, 1H), 4.62-4.42 (m, 1H), 4.19-4.12 (m, 1H), 3.92-3.82 (m, 1H), 3.59-3.34 (m, 3H), 3.27-3.21 (m, 1H), 3.01-2.81 (m, 2H), 2.72-2.69 (m, 2H), 2.56-2.52 (m, 3H), 2.39-2.37 (m, 1H), 2.20-1.97 (m, 5H), 1.90-1.82 (m, 2H), 1.70-1.40 (m, 6H).

2-(2-ciklopropil-5-fluorpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina F stereoizomer B (jedinjenja 75-E1 i 75-E2)

[0516] Jedinjenje 75-E1 LC/MS ESI 515.2 (M+H)+, 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.15 (s, 1H), 7.80-7.65 (m, 1H), 6.30 (s, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.50-4.20 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.00-2.60 (m, 3H), 2.55-2.30 (m, 6H), 2.00-1.70 (m, 3H), 1.65-1.25 (m, 7H), 1.20-1.00 (m, 1H), 0.95-0.70 (m, 3H). Chiral SFC H (40% EtOH): ee 100 %, Rt =1.92 min.

[0517] Jedinjenje 75-E2 LC/MS ESI 515.2 (M+H)+, 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.15 (s, 1H), 7.80-7.65 (m, 1H), 6.30 (s, 1H), 4.50 (s, 1H), 4.42-4.20 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.15-3.00 (m, 1H), 2.80-2.30 (m, 8H), 2.00-1.70 (m, 3H), 1.65-1.25 (m, 7H), 0.95-0.65 (m, 4H). Chiral SFC H (40% EtOH): ee 100 %, Rt = 3.06 min.

2-(2-ciklobutil-5-fluorpiridin-3-il)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina F-stereoizomer B (jedinjenja 76-E1 i 76-E2)

[0519] Jedinjenje 76-E1 LC/MS ESI 529.2 (M+H)+, 1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.37-8.36 (m, 1H), 7.91-7.88 (m, 1H), 6.42 (s, 1H), 4.50-4.25 (m, 3H), 3.93 (s, 3H), 3.37-3.30 (m, 2H), 2.89-2.29 (m, 13H), 2.12-1.45 (m, 12H). Chiral SFC H (35% MeOH): ee 97 %, Rt =3.37 min.

[0520] Jedinjenje 76-E2 LC/MS ESI 529.2 (M+H)+, 1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.36-8.35 (m, 1H), 7.91-7.88 (m, 1H), 6.43 (s, 1H), 4.50-4.22 (m, 3H), 3.94 (s, 3H), 3.37-3.30 (m, 2H), 3.06-3.03 (m, 1H), 2.79-2.25 (m, 12H), 2.15-1.40 (m, 12H). Chiral SFC H (35% MeOH): ee 99 %, Rt = 4.77 min.

2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)metoksi)fenil)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina F-stereoizomer A (jedinjenje 77)

[0522] Jedinjenje 77 LC/MS ESI 558 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.37-7.32 (m, 1H), 7.17-7.10 (m, 3H), 6.39-6.37 (m, 1H), 5.01-4.97 (m, 1H), 4.62-4.42 (m, 1H), 4.01-3.87 (m, 4H), 3.52-3.34 (m, 4H), 3.27-3.01 (m, 3H), 2.72-2.69 (m, 2H), 2.56-2.52 (m, 2H), 2.18-1.97 (m, 3H), 1.90-1.82 (m, 4H), 1.70-1.55 (m, 3H), 1.50-1.35 (m, 6H).

2-(5-fluor-2-((4-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)metoksi)fenil)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina F-stereoizomer A (diastereomerna jedinjenja 78-E1 i 78-E2)

[0524] Jedinjenje 78-E1 LC/MS ESI 576 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.37-7.34 (m, 1H), 7.20-7.14 (m, 3H), 6.38 (d, J = 7.2Hz, 1H), 5.05 (s, 1H), 4.60-4.48 (m, 1H), 4.19-4.13 (m, 2H), 3.88-3.85 (m, 2H), 3.79-3.72(m, 3H), 3.41-3.38 (m, 3H), 3.14-3.07 (m, 2H), 2.73-2.53 (m, 5H), 2.11-1.86(m, 8H), 1.71-1.43 (m, 6H). Chiral SFC B (25% IPA): ee 100 %, Rt = 2.90 min.

[0525] Comound 78-E2 LC/MS ESI 576 (M+H) .1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.38-7.35 (m, 1H), 7.19-7.14 (m, 3H), 6.37 (d, J = 7.2Hz, 1H), 4.99 (s, 1H), 4.54-4.41 (m, 1H), 4.19-4.14 (m, 2H), 3.88-3.73 (m, 4H), 3.53 (m, 1H), 3.40-3.38 (m, 2H), 3.26-3.16 (m, 3H), 2.73-2.70 (m, 2H), 2.55-2.51 (m, 3H), 2.16-1.86(m, 8H), 1.71-1.48 (m, 6H). Chiral SFC B (25% IPA): ee 95 %, Rt = 5.07 min.

2-(5-fluor-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)metoksi)fenil)-2-((R)-3-(1-fluor-5-(4-metoksi-5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)acetatna kiselina F-stereoizomer A (jedinjenje 79)

[0529] Jedinjenje 80 LC/MS ESI 563.2(M+H) .<1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 7.93 (dd, J = 5.3, 3.0 Hz, 1H), 7.67 (td, J= 8.9, 3.0 Hz, 1H), 7.19 - 7.07 (m, 1H), 6.32 (dd, J= 7.3, 5.1 Hz, 1H), 4.81 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 4.63 (s, 1H), 3.59 (m, 1H), 3.34 - 3.26 (m, 2H), 3.15 (d, J = 6.7 Hz, 4H), 3.07 (s, 1H), 2.91 (s, 2H), 2.78 (dt, J = 12.7, 6.5 Hz, 3H), 2.62 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 2.48 (t, J= 7.4 Hz, 2H), 2.12 - 1.84 (m, 6H), 1.83 -1.73 (m, 3H), 1.59 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 1.44 (m, 2H).

2-((R)-3-(1,1-difluor-5-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)pentil)pirolidin-1-il)-2-(5-fluor-2-(trans-3-metoksiciklobutoksi)piridin-3-il)acetatna kiselina (jedinjenje 81)

[0531] Jedinjenje 81 LC/MS ESI 563.2(M+H) .<1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.04 (dd, J = 7.0, 3.0 Hz, 1H), 7.79 (td, J = 8.9, 2.9 Hz, 1H), 7.27 (t, J = 6.7 Hz, 1H), 6.49 - 6.40 (m, 1H), 5.41 - 5.30 (m, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.25 - 4.09 (m, 1H), 3.58 - 3.36 (m, 3H), 3.28 (s, 3H), 2.98 (d, J = 49.0 Hz, 3H), 2.75 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 2.61 (td, J = 7.8, 3.2 Hz, 2H), 2.54 - 2.34 (m, 4H), 2.23 - 1.78 (m, 7H), 1.78 - 1.65 (m, 2H), 1.56 (m, 2H).

Primer 19: Fluorescentni testovi polarizacije jedinjenja za αvβ6 vezivanje

[0532] Testovi fluorescentne polarizacije (FP) su korišćeni za merenje aktivnosti jedinjenja kroz kompetitivno vezivanje sa peptidom GRGDLGRL obeleženim fluoresceinom. U ispitivanju, 10 nM integrina αvβ6 je inkubirano sa test jedinjenjem u 2 mM rastvoru mangan hlorida, 0,1 mM kalcijum hlorida, 20 mM HEPES pufera na pH 7,3, 150 mM natrijum hlorida , 0.01% Triton X-100, 2% DMSO i 3 nM peptida obeleženog fluoresceinom. Testovi su izvedeni na pločama sa 384 ležišta. Za obe verzije testa, protein integrin je preinkubiran sa test jedinjenjima 15 minuta na 22 °C pre nego što je dodat peptid obeležen fluoresceinom. Nakon što je dodat peptid obeležen fluoresceinom, test je inkubiran na 22 °C tokom 1 sata i izmerena je polarizacija fluorescencije. Vrednosti IC50su određene nelinearnom regresijom, fitovanjem krive sa 4 parametra (podaci u tabelama na slici 1 i slici 2).

Primer 20: MDCK in vitro testovi permeabilnosti jedinjenja

[0533] Jedinjenje je testirano na permeabilnost u MDCK testu permeabilnosti. Ovaj test meri sposobnost jedinjenja da pređe sloj ćelija Madin-Darby Canine Kidney (MDCK) sa apikalne na bazolateralnu stranu (A->B). Ovo merenje je predviđanje sposobnosti jedinjenja da se apsorbuje u crevima nakon oralnog doziranja, što je suštinska karakteristika oralno administriranog leka inhibitora integrina malih molekula.

[0534] Test se izvodi u dva formata. Jedan koristi MDCK ćelije divljeg tipa bez inhibitora. Ova metoda dobro funkcioniše u određivanju pasivne permeabilnosti jedinjenja sa niskim efluksom P-glikoproteinom (Pgp), a korišćena je za procenu permeabilnosti referentnog jedinjenja koje ima hemijsku formulu prikazanu u nastavku. MDCK vrednost manja od 1 (tj. manja od oko 0,23) dobijena je za Referentno Jedinjenje korišćenjem ove metode; IC50vrednost od oko 96,5 nM dobijena je za Referentno Jedinjenje korišćenjem testa polarizacije fluorescencije iz Primera 19.

[0536] Međutim, za jedinjenje sa efluksom Pgp, neophodno je uključiti Pgp inhibitor red kako bi se odredila pasivna permeabilnost za A->B prenos. U ovom slučaju, korišćena je ćelijska linija MDCK-MDR1 koja prekomerno eksprimira Pgp, a PGP inhibitor GF120918 je sadržavao dovoljnu koncentraciju (10 µM) da blokira aktivnost Pgp. Ova procedura (MDCK-MDR1 sa PGP inh (A->B) [10^6 cm/s]) je korišćena za dobijanje podataka predstavljenih u tabelama prikazanim na slikama 3A i 3B. Vrednosti MDCK permeabilnosti manje od 510^6 cm/s predviđaju nisku apsorpciju u crevima, dok vrednosti permeabilnosti veće od 510^6 cm/s predviđaju dovoljnu apsorpciju u crevima za oralno doziranje leka sa malim molekulima.

[0537] Detaljan eksperimentalni postupak je kako sledi:

Aparati REAGENSI

• 24-well Cell Culture Plate (PET • GF 120918 (Pgp inhibitor)

membrane): Millipore # PSHT 010 R5

• ploča sa 24-ležišta : Millipore • Lucifer Yellow / Lucifer žuta

#PSMW 010 R5

• Referentna jedinjenja: Hinidine, Metoprolol, Atenolol

• Millicell ERS System - Millipore #

MERS 00001

• Ćelijska linija: MDCK (ATCC) ili MDCK

• ploče U-oblika sa 96-ležišta (BH MDR1 (NKI)

Bio# BH-04ML-96U)

• mikroploče sa 96- ležišta • Medijum za rast ćelijske kulture (MEM 10% FBS 1% NEAA): (Greiner#655209)

• 37 □ CO2Inkubator • Trypsin-EDTA (Invitrogen, Cat# 25200-072)

Aparati REAGENSI

• Infinite F2000pro (TECAN)

• Pufer za ispitivanje i rastvor za doziranje: Hanks Balanced so Solution (HBSS, Invitrogen, Cat# 14025-092) sa 25 mM HEPES, pH 7.4

• matični rastvori proizvod za ispitivanje i referentno jedinjenje pripremljeni su u DMSO, osnovni rastvor.Lucifer Yellow (LY) / Lucifer žuto je pripremljen u puferu za ispitivanje

Ćelijska kultura i održavanje:

[0538]

• kulture sa matičnin ćelijam (MDCK ili MDCK MDR1) se održavaju u MEM 10% FBS 1% NEAA, uzgajaju u posudama tretiranim kulturom tkiva od 75 cm<2>i dele (propuštaju) 2 puta nedeljno da bi se održala željena konfluentost.

• Za održavanja propuštanja (pasažiranja): tripsinizovane ćelije se rutinski raspoređuju u nove boce u standardnom odnosu propuštanja od 1:20.

[0539] Zasejavanje ploča za test: MDCK test ploče su zasejane MDCK ili MDCK MCR1 ćelijama 3-4 dana pre izvođenja testa. Ploče sa 24 ležišta su zasejane pri ćelijskoj gustini od 0,88×10<5>/bunariću u zapremini apikalne komore od 400 µL (2,2×10<5>/mL) sa zapreminom medijuma za rast od 25 mL u bazalnu komoru sa 24 ležišta. Ploče za analizu su generalno opremljene sa promenom medijuma za rast 24 sata pre testa.

Priprema ploča za analizu i trans-epitelne električne otpornosti (TEER)

[0540] Merenje: MDCK ploče za test su isprane sa HBSS+ pre izvođenja testa. Posle ispiranja, svež HBSS+ je dodat na ploču za ispitivanje u zapremini apikalne komore od 400 µL i zapremini bazalne komore od 0,8 mL HBSS+. Izmeren je električni otpor preko monosloja koristeći om metar Millicell ERS sistema. (Ćelije će se koristiti ako je TEER veći od 100 ohm*cm<2>).

[0541] Priprema rastvora za doziranje. Donorski rastvor su pripremljeni u HBSS+ sa 0,4% DMSO i 5 µM test jedinjenja. Donorski rastvor sadrži 5 µM lucifer žute za apikalno doziranje, ali ne sadrži lucifer žutu za bazolateralno doziranje. Donorski rastvor takođe može da sadrži 10 µM GF 120918 za inhibiciju Pgp. Prijemni rastvori su pripremljeni sa HBSS+ sa 0,4% DMSO. Donorski i prijemni rastvori su centrifugirani na 4000 rpm, 5 min, a supernatanti su korišćeni za doziranje jedinjenja.

Priprema ploča sa ćelijama:

[0542]

• Ukloniti pufer sa apikalne i bazolateralne strane. Dodati 600 µL donorskog rastvora (za A- u-B) ili 500 µL prijemnog rastvora (za B-u-A) u apikalna ležišta na osnovu mape ploče.

• Sveža bazolateralna ploča je pripremljena dodavanjem 800 µL prijemnog rastvora (za A-do-B) ili 900 µL donorskog rastvora (B-u-A) u ležište nove ploče sa 24 ležišta.

• Postaviti apikalnu i bazolateralnu ploču u inkubator na 37 □ CO2.

Priprema analitičke ploče:

[0543]

• Posle 5 minuta, prebaciti 100 µL uzoraka od svih donatora (i za A-u-B i B-u-A) u odgovarajuća ležišta ploče za uzorke za D0. I prebaciti 100 µL uzoraka iz svih apikalnih komora (donator A-u-B i prijemnik B-u-A) u odgovarajuće ležišta mikroploče za Lucifer Yelow/ Lucifer žuto D0 (D0 LY) • Položiti apikalnu ploču na bazolateralnu ploču da bi proces transporta započeo.

• 90-og minuta, odvojiti apikalne i bazolateralne ploče i preneti 100 µL uzoraka od svih donora (i za A-u-B i B-u-A) u odgovarajuće bunarčiće nove ploče za uzorke za D90, i preneti 200 µL uzoraka iz svih prijemnika u odgovarajuća ležišta ploče za uzorke za R90. Preneti 100 µL uzoraka iz svih bazolateralnih komora (primalac A-u-B i donor B-u-A) u odgovarajuća ležišta nove mikroploče za Lucifer Yelow/ Lucifer žuto R90 (R90 LY).

• Odrediti LY permeabilnost očitavanjem D0 LY i R90 LY na talasnu dužinu ekscitacije od 485 nm i talasnu dužinu emisije od 535 nm koristeći čitač fluorescentnih ploča.

• LC/MS/MS Priprema uzorka:

➢ Za rastvor prijemnika: 60 µL uzorka 60 µL ACN sa je (200 ng/mL Osalmida)

➢ Za donorski rastvor: 6 µL uzorka 54 µL 0,4% DMSO/HBSS 60 µL ACN sa (200 ng/mL Osalmida) ➢ Jedinjenje standardne krive 20X rastvori (0,1 - 60 µM opseg) pripremaju se u MeOH:H2O (1:1).1X koncentrovani rastvori (0,005 - 3 µM opseg) se pripremaju mešanjem 3 µL 20X rastvora sa 57 µL 0,4% DMSO HBSS i 60 µL ACN sa (200 ng/mL Osalmida).

Izračunavanja

[0544]

Transepitelni električni otpor (TEER) = (otpornostUzorak– otpornostslepa proba) × Efektivna površina membrane

[0545] Permeabilnost Lucifer Yellow/Lucifer žute:

Papp = (VA/ (Oblast × vreme)) x ([RFU]primalac- [RFU]slepa proba)/(([RFU]početno, donor- [RFU]slepa proba) x Faktor razblaženja) × 100

[0546] Testovi transporta leka na ploči koristeći sledeću jednačinu:

Transepitelni električni otpor (TEER) = (otpornostUzorak– otpornostslepa proba) × Efektivna površina membrane

[0547] Permeabilnost leka:

Papp= (VR/(površinax vreme)) x ([lek]primalac/(([lek, ]početno, donor) x Faktor razblaženja

[0548] Gde VRje zapremina u ležištu prijemnika (0,8 mL za A-u-B i 0,4 mL za B-u-A), površina je površina membrane (0,7 cm<2>za ploče sa kulturom ćelija Millipore-24 Cell Culture Plates), a vreme je ukupno vreme transporta u sekundama.

Procenat oporavka = 100 × (Ukupno jedinjenje u donoru na 90 min × Faktor razblaženja Ukupno jedinjenje u prijemniku na 90 min) / (Ukupno jedinjenje u donoru na 0 min × Faktor razblaženja)

Claims (15)

1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:

   Ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili odabrano iz iz grupe koju čine:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili odabrano iz iz grupe koju čine:

   Ċ

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili odabrano iz iz grupe koju čine:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili odabrano iz iz grupe koju čine:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili odabrano iz iz grupe koju čine:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili sa strukturom:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili odabran iz grupe koju čine: Ċ

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili odabrano iz grupe koju čine:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili odabrano iz grupe koju čine:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili odabrano iz grupe koju čine:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili odabrano iz grupe koju čine:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili odabrano iz grupe koju čine:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili odabrano iz grupe koju čine:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili sa strukturom:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili sa strukturom:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili sa strukturom:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili sa strukturom:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili sa strukturom:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili sa strukturom:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili sa strukturom:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili sa strukturom:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili sa strukturom:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili sa strukturom:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
2. 2. Jedinjenje iz zahteva 1 odabrano iz grupe koju čine:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
3. 3. Jedinjenje iz zhateva 1, odabrano iz grupe koju čine:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
4. 4. Jedinjenje iz zahteva 1, odabrano iz grupe koju čine:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
5. 5. Jedinjenje iz zahteva 1 odabrano iz grupe koju čine:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so
6. 6. Jedinjenje prema zahtevu 1 odabrano iz grupe koju čine:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
7. 7. Jedinjenje prema zahtevu 1 odabrano iz grupe koju čine:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
8. 8. Jedinjenje prema zahtevu 1 sa strukturom:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
9. 9. Jedinjenje prema zahtevu 1 odabrano iz grupe koju čine:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
10. 10. Jedinjenje prema zahtevu 1 odabrano iz grupe koju čine:

    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
11. 11. Jedinjenje prema zahtevu 1 odabrano iz grupe koju čine:

    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
12. 12. Jedinjenje prema zahtevu 1 odabrano iz grupe koju čine:

    i

    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
13. 13. Jedinjenje prema zahtevu 1 odabrano iz grupe koju čine:

    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
14. 14. Jedinjenje prema zahtevu 1 odabrano iz grupe koju čine:

    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; ili odabrano iz grupe koju čine: Ċ

    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
15. 15. Jedinjenje prema zahtevu 1 odabrano iz grupe koju čine:

    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.