RS66620B1 - Heterociklična jedinjenja za upotrebu u lečenju kancera - Google Patents

Description

Opis

OBLAST PRONALASKA

[0001] Pronalazak se odnosi na heterociklične derivate i njihovu upotrebu u lečenju i profilaksi kancera i na kompozicije koje sadrže navedene derivate i postupke za njihovu pripremu.

OSNOVA PRONALASKA

[0002] Robusna popravka dvolančanih prekida DNK (DSB) je neophodna za održavanje stabilnosti genoma i održivosti ćelija. DSB se mogu popraviti jednim od tri glavna puta: homolognom rekombinacijom (HR), nehomolognim spajanjem kraja (NHEJ) i alternativnim NHEJ (alt-NHEJ). Mikrohomologijom-posredovano spajanje kraja (MMEJ) je najbolje okarakterisani alt-NHEJ mehanizam. Popravka posredovana preko HR je mehanizam visoke vernosti neophodan za preciznu popravku bez grešaka, sprečavajući genomsku stabilnost koja predisponira kancer. Nasuprot tome, NHEJ i MMEJ su putevi skloni greškama koji mogu ostaviti mutacijske ožiljke na mestu popravke. MMEJ može da funkcioniše paralelno sa HR i NHEJ putevima (Truong et al. PNAS 2013, 110 (19), 7720-7725).

[0003] Opstanak ćelija kancera, za razliku od normalnih ćelija, često zavisi od pogrešne regulacije puteva odgovora na oštećenje DNK (DDR). Na primer, povećana zavisnost od jednog puta (često mutagenog) da bi se nosila sa inaktivacijom drugog, ili sa pojačanim stresom replikacije koji je rezultat povećane proliferacije. Aberantni DDR takođe može da senzibilizira ćelije kancera na specifične vrste oštećenja DNK, tako da se defektni DDR može iskoristiti za razvoj ciljanih terapija kancera. Najvažnije je da ćelije kancera sa oštećenjem ili inaktivacijom HR i NHEJ postaju hiper-zavisne od popravke DNK posredovane preko MMEJ. Genetski, ćelijski biološki i biohemijski podaci su identifikovali Pοlθ (UniProtKB - 075417 (DPOLK_HUMAN) kao ključni protein u MMEJ (Kent et al. Nature Structural & Molecular Biology (2015), 22(3), 230-237, Mateos-Gomez et al. Nature (2015), 518(7538), 254-257). Polθ je multifunkcionalni enzim, koji sadrži N-terminalni helikazni domen (SF2 HEL308-tip) i C-terminalni domen DNK polimeraze niske vernosti (A-tip) (Wood & Doublié DNA Repair (2016), 44, 22-32). Pokazalo se da oba domena imaju usklađene mehaničke funkcije u MMEJ.

Domen helikaze posreduje u uklanjanju RPA proteina sa krajeva ssDNK i stimuliše spajanje. Domen polimeraze proširuje krajeve ssDNK i popunjava preostale praznine.

[0004] Terapeutska inaktivacija Polθ bi tako onemogućila sposobnost ćelija da izvode MMEJ i obezbedila novu ciljanu strategiju u nizu definisanih konteksta tumora. Prvo, pokazalo se da je Pοlθ od suštinskog značaja za preživljavanje ćelija sa HR-defektom (HRD) (npr. sintetičkih smrtonosnih sa deficijencijom FA/BRCA) i da je pojačano regulisan u ćelijskim linijama HRD tumora (Ceccaldi et al. Nature (2015), 518(7538), 258-262). In vivo studije takođe pokazuju da je Pοlθ značajno prekomerno eksprimiran u podskupovima kancera jajnika, materice i dojke sa lošom prognozom (Higgins et al. Oncotarget (2010), 1, 175-184, Lemée et al. PNAS (2010), 107(30), 13390-13395, Ceccaldi et al. (2015), supra). Važno je da je Pοlθ u velikoj meri potisnut u normalnim tkivima, ali se pokazalo da se pojačano reguliše u odgovarajućim uzorcima kancera, čime je povećana ekspresija u korelaciji sa bolešću (Kawamura et al. International Journal of Cancer (2004), 109(1), 9-16). Drugo, njegova supresija ili inhibicija daje radio-osetljivost u tumorskim ćelijama. Konačno, inhibicija Polθ bi mogla da spreči funkcionalnu reverziju BRCA2 mutacija zavisnu od MMEJ koja leži u osnovi pojave rezistencije na cisplatin i PARPi u tumorima.

[0005] Stoga postoji potreba da se obezbede efikasni inhibitori Polθ za lečenje kancera.

KRATAK OPIS PRONALASKA

[0006] Prema prvom aspektu pronalaska, obezbeđeno je jedinjenje formule (I):

ili njegov tautomerni ili stereohemijski izomerni oblik, farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.

DETALJAN OPIS PRONALASKA

[0007] U jednom primeru izvođenja, pronalazak obezbeđuje jedinjenje formule (I) koje je slobodna baza jedinjenja formule (I) i (3aR,11aS)-6,10-dimetil-1-(6-metil-4-(trifluorometil)piridin-2-il)-5-(2-(4-metilpiperazin-1-il)etil)-1,3a,4,5,10,11a-heksahidro-2H-benzo[b]pirolo[2,3-f][1,4]diazocin-2,11(3H)-dion (E1).

[0008] Referenca na jedinjenje formule (I) i njegove podgrupe takođe uključuje jonske oblike, soli, solvate, stereohemijske izomere i tautomere, na primer, kao što je diskutovano u nastavku; poželjno, njihove soli ili tautomere ili stereoizomere ili solvate; i poželjnije, njihove soli ili tautomere ili solvate. U daljem tekstu, jedinjenja i njihovi jonski oblici, soli, solvati, stereohemijski izomeri ili njihovi solvati kao što su definisani u bilo kom aspektu pronalaska (osim intermedijernih jedinjenja u hemijskim procesima) se nazivaju "jedinjenja pronalaska".

Soli

[0009] Određena jedinjenja formule (I) mogu postojati u obliku soli, na primer kiselinske adicione soli ili, u određenim slučajevima, soli organskih i neorganskih baza kao što su karboksilatne, sulfonatne i fosfatne soli. Sve takve soli su u okviru ovog pronalaska, a reference na jedinjenja formule (I) uključuju oblike soli jedinjenja.

[0010] Soli ovog pronalaska se mogu sintetisati iz matičnog jedinjenja koje sadrži bazni ili kiseli deo konvencionalnim hemijskim postupcima kao što su postupci opisani u Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, P. Heinrich Stahl (Editor), Camille G. Wermuth (Editor), ISBN: 3-90639-026-8, Hardcover, 388 pages, August 2002. Generalno, takve soli se mogu dobiti reakcijom slobodnih kiselinskih ili baznih oblika ovih jedinjenja sa odgovarajućom bazom ili kiselinom u vodi ili u organskom rastvaraču, ili u smeši ova dva; generalno se koriste nevodeni medijumi kao što su etar, etil acetat, etanol, izopropanol ili acetonitril.

[0011] Adicione soli kiselina (mono- ili di-soli) mogu se formirati sa širokim spektrom kiselina, kako neorganskih tako i organskih. Primeri kiselinskih adicionih soli uključuju mono- ili disoli formirane kiselinom izabranom iz grupe koja se sastoji od sirćetne, 2,2-dihlorosirćetne, adipinske, alginske, askorbinske (npr. L-askorbinske), L-asparaginske, benzensulfonske, benzojeve, 4-acetamidobenzojeve, butanske, (+) kamforne, kamfor-sulfonske, (+)-(1S)-kamfor-10-sulfonske, kaprinske, kapronske, kaprilne, dimetne, limunske, ciklamične, dodecil sumporne, etan-1,2-disulfonske, etansulfonske, 2-hidroksietansulfonske, mravlje, fumarne, galaktarne, gentizične, glukoheptonske, D-glukonske, glukuronske (npr. D-glukuronske), glutaminnske (npr. L-glutaminske), α-oksoglutarne, glikolne, hipurinske, halogenovodonične kiseline (npr. bromovodonične, hlorovodonične, jodovodonične), izetionske, mlečne (npr. (+)-L-mlečne, (±)-DL-mlečne), laktobionske, maleinske, jabučne, (-)-L-jabučne, malonske, (±)-DL-bademove, metansulfonske, naftalen-2-sulfonske, naftalen-1,5-disulfonske, 1-hidroksi-2-naftoične, nikotinske, azotne, oleinske, orotične, oksalne, palmitinske, pamoinske, fosforne, propionske, piruvinske, L-piroglutaminske, salicilne, 4-amino-salicilne, sebacinske, stearinske, ćilibarne, sumporne, taninske, (+)-L-tartarne, tiocijansulfonske, p-toluensulfonske, undecilenske i valerijske kiseline, kao kao i acilovane aminokiseline i katjonske izmenjivačke smole.

[0012] Jedna posebna grupa soli se sastoji od soli koje se formiraju od sirćetne, hlorovodonične, hidrojodne, fosforne, azotne, sumporne, limunske, mlečne, ćilibarne, maleinske, jabučne, izetionske, fumarne, benzensulfonske, toluensulfonske, metansulfonske (mezilat), etansulfonske, naftalensulfonske, valerijanske, sirćetne, propanske, butanoične, malonske, glukuronske i laktobionske kiseline. Jedna posebna so je hidrohloridna so.

[0013] Tamo gde jedinjenja formule (I) sadrže funkcionalnu grupu amina, ona mogu da formiraju kvaternarne amonijum soli, na primer reakcijom sa sredstvom za alkilovanje prema postupcima koji su dobro poznati stručnjaku. Takva jedinjenja kvaternarnog amonijuma su u okviru formule (I).

[0014] Jedinjenja pronalaska mogu postojati kao mono- ili di- soli u zavisnosti od pKakiseline od koje se formira so.

[0015] Biće jasno da za upotrebu u medicini soli jedinjenja formule (I) treba da budu farmaceutski prihvatljive. Stručnjacima će biti očigledne pogodne farmaceutski prihvatljive soli. Farmaceutski prihvatljive soli uključuju one opisane od strane Berge, Bighley and Monkhouse, J. Pharm. Sci. 1977, 66, pp. 1-19. Takve farmaceutski prihvatljive soli uključuju kisele adicione soli formirane sa neorganskim kiselinama npr. hlorovodoničnom, bromovodoničnom, sumpornom, azotnom ili fosfornom kiselinom i organskim kiselinama npr. ćilibarnom, maleinskom, sirćetnom, fumarnom, limunskom, vinskom, benzojevom, ptoluensulfonskom, metansulfonskom ili naftalensulfonskom kiselinom. Druge soli npr. oksalati ili formati se mogu koristiti, na primer, u izolaciji jedinjenja formule (I) i uključeni su u obim ovog pronalaska. Međutim, soli koje nisu farmaceutski prihvatljive mogu se takođe pripremiti kao intermedijerni oblici koji se zatim mogu konvertovati u farmaceutski prihvatljive soli. Takvi nefarmaceutski prihvatljivi oblici soli, koji mogu biti korisni, na primer, u prečišćavanju ili razdvajanju jedinjenja pronalaska, takođe čine deo pronalaska.

[0016] Određena jedinjenja formule (I) mogu da formiraju kisele adicione soli sa jednim ili više ekvivalenata kiseline. Ovaj pronalazak obuhvata u okviru svog obima sve moguće stehiometrijske i nestehiometrijske oblike.

Solvati

[0017] Stručnjacima u oblasti organske hemije će biti jasno da mnoga organska jedinjenja mogu da formiraju komplekse sa rastvaračima u kojima reaguju ili iz kojih su istaložena ili kristalizovana. Ovi kompleksi su poznati kao "solvati". Na primer, kompleks sa vodom je poznat kao "hidrat". Farmaceutski prihvatljivi solvati jedinjenja pronalaska su unutar obima pronalaska. U jednom primeru izvođenja, farmaceutski prihvatljivi solvati jedinjenja pronalaska uključuju njihov hidrat.

[0018] U jednom primeru izvođenja, pomenuti kristalni oblik jedinjenja formule (I) je kokristal ili koformer. Takav kokristal ili koformer se može pripremiti upotrebom molekula rastvorljivih u vodi kao što su saharin, kofein, nikotinamid ili karboksilne kiseline. Koformeri se mogu pripremiti kako je opisano u Emami S et al (2018) Biolmpacts 8(4), 305-320.

[0019] Podrazumeva se da otkriće uključuje farmaceutski prihvatljive derivate jedinjenja formule (I), ali oni nisu obuhvaćeni obimom pronalaska.

[0020] Kako se ovde koristi, "farmaceutski prihvatljiv derivat" uključuje bilo koji farmaceutski prihvatljiv estar ili so takvog estra jedinjenja formule (I) koji je, posle primene na primaoca, sposoban da obezbedi (direktno ili indirektno) jedinjenje formule (I) ili aktivni metabolit ili njegov ostatak.

Enantiomeri

[0021] Kada su hiralni centri prisutni u jedinjenjima formule (I), ovaj pronalazak uključuje u okviru svog obima sve moguće enantiomere i diastereoizomere, uključujući njihove smeše. Različiti izomerni oblici mogu biti razdvojeni ili razdvojeni jedan od drugog konvencionalnim postupcima, ili bilo koji dati izomer može biti dobijen konvencionalnim sintetičkim postupcima ili stereospecifičnim ili asimetričnim sintezama. Pronalazak se takođe proširuje na sve tautomerne oblike ili njihove smeše.

Čistoća

[0022] Pošto su jedinjenja formule (I) namenjena za upotrebu u farmaceutskim kompozicijama, lako će se razumeti da je svako poželjno obezbeđeno u suštinski čistom obliku, na primer najmanje 60% čistoće, pogodnije najmanje 75% čistoće i poželjno najmanje 85%, posebno najmanje 98% čistoće (% su dati na osnovu težine). Nečisti preparati jedinjenja mogu se koristiti za dobijanje čistijih oblika koji se koriste u farmaceutskim kompozicijama.

Postupci

[0023] U skladu sa dodatnim aspektom ovog pronalaska, obezbeđen je postupak za pripremu jedinjenja formule (I) i njihovih derivata. Sledeće šeme su primeri sintetičkih šema koje se mogu koristiti za sintezu jedinjenja pronalaska. U sledećim šemama reaktivne grupe mogu biti zaštićene zaštitnim grupama i zaštitne grupe mogu biti uklonjene sa njih prema dobro utvrđenim tehnikama.

[0024] Prema dodatnom aspektu pronalaska obezbeđen je postupak za pripremu jedinjenja formule (I) kako je ovde definisan koji sadrži:

(a) interkonverziju jedinjenja formule (II):

do jedinjenja formule (I); i

(b) izborno formiranje farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja formule (I).

[0025] Postupak (a) tipično sadrži reakciju interkonverzije za dobijanje jedinjenja formule (I). Na primer, kao što je opisano u koraku (xvii) Primera 1.

[0026] Jedinjenja formule (II) se mogu pripremiti u skladu sa ovde opisanim postupcima. Na primer, jedinjenja formule (II) mogu da se pripreme u skladu sa eksperimentalnim postupkom opisanim u Primeru 1, posebno u Koraku (xvi) Primera 1.

[0027] Ako je prikladno, reakcijama opisanim ovde sledi ili im prethodi jedna ili više reakcija poznatih stručnjacima i izvode se u odgovarajućem redosledu da bi se postigle potrebne supstitucije na svakoj od ovde definisanih promenljivih da bi se dobila druga jedinjenja formule (I). Neograničavajući primeri takvih reakcija čiji se uslovi mogu naći u literaturi uključuju:

zaštitu reaktivnih funkcionalnih grupa,

uklanjanje zaštitnih reaktivnih funkcionalnih grupa,

halogenaciju,

dehalogenaciju,

dealkilaciju,

alkilaciju amina, anilina, alkohola i fenola,

Mitsunobu reakciju na hidroksilnim grupama,

reakcije cikloadicije na odgovarajućim grupama,

redukciju nitro, estara, cijano, aldehida,

reakcije kuplovanja katalizovane prelaznim metalima,

acilaciju,

sulfonilaciju/uvođenje sulfonil grupa,

saponifikaciju/hidrolizu estarskih grupa,

amidifikaciju ili transesterifikaciju estarskih grupa,

esterifikaciju ili amidifikaciju karboksilnih grupa,

razmenu halogena,

nukleofilnu supstituciju sa aminom, tiolom ili alkoholom,

reduktivnu aminaciju,

formiranje oksima na karbonil i hidroksilamin grupama,

S-oksidaciju,

N-oksidaciju,

salifikaciju.

[0028] Poznato je da redosled reakcija koje uključuju aril kuplovanje i redukciju može da varira. Takođe je poznato da je širok spektar katalizatora na bazi paladijuma pogodan za izvođenje reakcija aril kuplovanja.

[0029] Takođe se može prepoznati da se razdvajanje izomera može desiti u bilo kojoj pogodnoj fazi u sintetičkoj sekvenci. Treba naglasiti da takvo hiralno razdvajanje čini ključni aspekt pronalaska i da se takvo razdvajanje može izvesti u skladu sa ovde opisanom metodologijom ili može biti sprovedeno u skladu sa poznatom metodologijom. Takođe je poznato da može biti korisno privremeno formiranje zaštićenog derivata intermedijera u sintezi, na primer, Boczaštićenog amina, ili SEM-zaštićenog amida, kako bi se olakšalo hromatografsko razdvajanje, hiralno razdvajanje ili da bi se dobila poboljšana rastvorljivosti ili prinosi u određenim koracima.

[0030] U mnogim gore opisanim reakcijama, može biti neophodno zaštititi jednu ili više grupa da bi se sprečilo odvijanje reakcije na nepoželjnoj lokaciji na molekulu. Primeri zaštitnih grupa i postupci zaštite i uklanjanja zaštitne grupe funkcionalnih grupa mogu se naći u Protective Groups in Organic Synthesis (T. Green and P. Wuts; 4th Edition; John Wiley and Sons, 2007).

[0031] Hidroksi grupa može biti zaštićena, na primer, kao etar (-OR) ili estar (-OC(=O)R), na primer, kao: terc-butil etar; tetrahidropiranil (THP) etar; benzil, benzhidril (difenilmetil) ili tritil (trifenilmetil) etar; trimetilsilil ili terc-butildimetilsilil etar; ili acetil estar (-OC(=O)CH3).

[0032] Amin grupa može biti zaštićena, na primer, kao amid (-NRCO-R) ili karbamat (-NRCO-OR), na primer, kao: metil amid (-NHCO-CH3); benzil karbamat (-NHCO-OCH2C6H5, -NH-Cbz ili NH-Z); kao terc-butil karbamat (-NHCOOC(CH3)3, NH-Boc); 2-bifenil-2-propil karbamat (-NHCO-OC(CH3)2C6H4C6H5, NH-Boc), kao 9-fluorenilmetil karbamat (-NH-Fmoc), kao 6-nitroveratril karbamat (-NH-Nvoc), kao 2-trimetilsililetil karbamat (-NH-Teoc), kao 2,2,2-trihloretil karbamat (-NH-Troc), kao alil karbamat (-NH-Alloc), ili kao 2(-fenilsulfonil)etil karbamat (-NH-Psec).

[0033] Druge zaštitne grupe za amine, kao što su ciklični amini i heterociklične N-H grupe, uključuju toluensulfonil (tozil) i metansulfonil (mezil) grupe, benzil grupe kao što je parametoksibenzil (PMB) grupa i tetrahidropiranil (THP) grupe.

[0034] Grupa karboksilne kiseline može biti zaštićena kao estar, na primer, kao: C1-7alkil estar (npr. metil estar; terc-butil estar); C1-7haloalkil estar (npr. C1-7trihaloalkil estar); triC1-7alkilsilil-C1-7alkil estar; ili C5-20aril-C1-7alkil estar (npr. benzil estar; nitrobenzil estar; parmetoksibenzil estar.

[0035] Stručnjacima će biti jasno da se određena jedinjenja pronalaska mogu konvertovati u druga jedinjenja pronalaska prema standardnim hemijskim postupcima.

[0036] Farmaceutski prihvatljive soli se mogu dobiti konvencionalno reakcijom sa odgovarajućom kiselinom ili derivatom kiseline.

Terapeutska upotreba

[0037] Jedinjenja pronalaska, njihove podgrupe i primeri su inhibitori aktivnosti Polθ polimeraze i koja mogu biti korisna u prevenciji ili lečenju bolesnih stanja ili stanja opisanih ovde. Pored toga, jedinjenja pronalaska, i njihove podgrupe, biće korisna u prevenciji ili lečenju bolesti ili stanja posredovanih preko Polθ. Reference na prevenciju ili profilaksu ili lečenje bolesnog stanja ili stanja kao što je kancer uključuju u svom obimu ublažavanje ili smanjenje incidencije kancera.

[0038] Tako, na primer, predviđa se da će jedinjenja pronalaska biti korisna u ublažavanju ili smanjenju incidencije kancera.

[0039] Jedinjenja ovog pronalaska mogu biti korisna za lečenje odrasle populacije. Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu biti korisna za lečenje pedijatrijske populacije.

[0040] Kao posledica njihove inhibicije Polθ, jedinjenja će biti korisna u obezbeđivanju sredstava za onemogućavanje sposobnosti ćelija da izvode MMEJ. Stoga se očekuje da se jedinjenja mogu pokazati korisnim u lečenju ili prevenciji proliferativnih poremećaja kao što su kanceri. Pored toga, jedinjenja pronalaska mogu biti korisna u lečenju bolesti kod kojih postoji poremećaj povezan sa akumulacijom ćelija.

[0041] Bez vezivanja za teoriju, očekuje se da će inhibitori Polθ ovog pronalaska pokazati određena svojstva da budu od posebne koristi u terapijskom tretmanu određenih kancera. Na primer, u jednom primeru izvođenja, inhibitori Polθ ovog pronalaska su pogodno smrtonosni kod primarnih i sekundarnih solidnih tumora sa nedostatkom BRCA1 i BRCA2, uključujući dojke, jajnike, prostatu i pankreas.

[0042] U sledećem primeru izvođenja, inhibitori Polθ ovog pronalaska su pogodno smrtonosni u različitim primarnim i sekundarnim solidnim tumorima koji su HRD drugim mehanizmima osim BRCA deficijencije, kao što su oni sa hipermetilacijom promotora. Kod ovih tumora gde nijedan put popravke DSB ne može biti potpuno regulisan, Polθi se može dati zajedno sa drugim modulatorom DDR kao što je inhibitor PARP, inhibitor DNK-PK, inhibitor ATR, inhibitor ATM, inhibitor wee1 ili inhibitor CHK1.

[0043] U sledećem primeru izvođenja, inhibitori Polθ ovog pronalaska su pogodno smrtonosni u primarnim i sekundarnim tumorima dojke, jajnika, prostate i pankreasa koji zadržavaju deficijenciju BRCA1, ali koji su, nakon ili ne nakon izlaganja PARPi lekovima, otporni na PARPi tretman.

[0044] U sledećem primeru izvođenja, inhibitori Polθ ovog pronalaska na odgovarajući način povećavaju ORR uključujući CRR, odložiće početak otpornosti na PARPi, povećavaće vreme do relapsa i DFS, i povećavaće OS HRD (deficijencija BRCA1/2 i drugi HRD mehanizmi) primarnih i sekundarnih tumora (dojki, jajnika, prostate i pankreasa) kada se daju uz PARPi programe lečenja.

[0045] U sledećem primeru izvođenja, inhibitori Polθ ovog pronalaska prikladno pokazuju sintetičku bolest i/ili sintetičku letalnost u različitim tumorima sa gubitkom ATM aktivnosti (ATM<-/->) posebno u kontekstu WT p53. Tipovi tumora će uključivati oko 10% svih solidnih tumora uključujući želudca, pluća, dojke i CRC, zajedno sa CLL. Zajedničko lečenje sa drugim DDR modifikatorom, kao što je inhibitor DNK-PK, inhibitor PARP ili inhibitor ATR, može dodatno poboljšati takvu aktivnost. Inhibitori Polθ će resenzibilisati CLL na klasičnu hemoterapiju i hemoimunoterapiju gde se pojavila rezistencija na lekove. Prema tome, prema sledećem primeru izvođenja, farmaceutska kompozicija ovog pronalaska dodatno sadrži inhibitor DNK-PK, inhibitor PARP ili inhibitor ATR.

[0046] U dodatnom primeru izvođenja, inhibitori Polθ ovog pronalaska na odgovarajući način pokazuju sintetičku bolest i/ili sintetičku letalnost kod različitih tumora deficijentnih u procesu popravke prekida dvostrukog lanca DNK nehomolognog spajanja krajeva (NHEJ-D). Tipovi tumora će uključivati otprilike 2-10% svih solidnih tumora uključujući prostatu, pankreas, grlić materice, dojke, pluća, bešiku i jednjak. Zajedničko lečenje sa drugim DDR modifikatorom, kao što je inhibitor PARP, inhibitor ATM, inhibitor wee1, inhibitor CHK ili inhibitor ATR, može dodatno poboljšati takvu aktivnost. Inhibitori Polθ će dalje senzibilisati ćelije kancera NHEJD na hemoterapije koje indukuju DNK DSB i na terapije zasnovane na jonizujućem zračenju. Prema tome, prema sledećem primeru izvođenja, farmaceutska kompozicija ovog pronalaska dodatno sadrži inhibitor PARP, inhibitor ATM, inhibitor wee1, inhibitor CHK ili inhibitor ATR.

[0047] U dodatnom primeru izvođenja, inhibitor Polθ ovog pronalaska na odgovarajući način smanjuju odgovor na stres replikacije DNK tokom hemoterapije tumora sa HR, kao što su tumori jajnika, NSCL i dojke, preko ekspresije Polθ. Ovo će povećati ORR za lečenje i povećati OS. Takvi efekti su naročito verovatni kod citarabina (Ara-C) i hidroksiuree koji se koriste u širokom spektru leukemija uključujući CML i lečenje karcinoma skvamoznih ćelija.

[0048] U sledećem primeru izvođenja, inhibitori Polθ ovog pronalaska prikladno selektivno senzibiliziraju solidne tumore na radioterapiju, uključujući EBRT i brahiterapiju, sa malo ili nimalo senzibilizacije normalnih tkiva. U postavci frakcionisane kurativne namere ovo će povećati loko-regionalnu kontrolu, što će dovesti do povećanja preživljavanja. Ovo će biti posebno evidentno u lečenju NSCLC, SCCH&N, kancera rektuma, kancera prostate i kancera pankreasa.

[0049] U sledećem primeru izvođenja, inhibitori Polθ ovog pronalaska pogodno pokazuju sintetičku bolest i/ili sintetičku letalnost kod PTEN deletiranih tumora kao što je CaP, sa ili bez komedikacije sa PARPi. Pored toga, takvi tumori će pokazati izuzetnu osetljivost na radioterapiju, kako zbog delecije PTEN, tako i zbog radiosenzitivnosti izazvane inhibitorom Polθ.

[0050] U sledećem primeru izvođenja, inhibitori Polθ ovog pronalaska na odgovarajući način suzbijaju aktivnost TLS polimeraze, senzibilizirajući primarne i sekundarne solidne tumore (npr. dojke, pluća, jajnika, CRC) na lekove (npr. cisplatin, mitomicin i ciklofosfamid) kao i smanjujući sticanje mutacija izazvanih lekovima koje su umešane u rezistenciju tumora što dovodi do produženja remisije i povećanja TTR.

[0051] U dodatnom primeru izvođenja, inhibitori Polθ ovog pronalaska na odgovarajući način resenzibilizuju BCR-ABL-pozitivnu CML koja je razvila rezistenciju na imatinib, kao i druge solidne tumore sa povišenim nivoima ligaze IIIα, smanjenim nivoima ligaze IV i povećanom zavisnošću od popravke altEJ DSB.

[0052] U sledećem primeru izvođenja, inhibitori Polθ ovog pronalaska prikladno pokazuju sintetičku bolest i/ili sintetičku letalnost kod primarnih i sekundarnih kancera dojke ER-otpornih na inhibitor aromataze, ponovo pokazujući povišene nivoe ligaze IIIα, smanjene nivoe ligaze IV i povećanu zavisnost od altEJ DSB popravke.

[0053] Prema dodatnom aspektu pronalaska, obezbeđeno je jedinjenje formule (I) kako je ovde definisano za upotrebu u lečenju tumora koje karakteriše nedostatak homologne rekombinacije (HRD).

[0054] Biće jasno da se ovde reference na "deficijenciju u homolognoj rekombinaciji (HRD)" odnose na bilo koju genetsku varijaciju koja rezultira nedostatkom ili gubitkom funkcije rezultirajućeg gena za homolognu rekombinaciju. Primeri pomenute genetske varijacije uključuju mutacije (npr. tačkaste mutacije), supstitucije, delecije, polimorfizme pojedinačnih nukleotida (SNP), haplotipove, abnormalnosti hromozoma, varijaciju broja kopija (CNV), epigenetiku, inverzije DNK, smanjenje ekspresije i pogrešnu lokalizaciju.

[0055] U jednom primeru izvođenja, pomenuti homologni rekombinacioni geni se biraju od bilo kog od: ATM, ATR, BRCA1, BRCA2, BARD1, RAD51C, RAD50, CHEK1, CHEK2, FANCA, FANCB, FANCC, FANCD2, FANCE, FANCF, FANCG, FANCI, FANCL, FANCM, PALB2 (FANCN), FANCP (BTBD12), ERCC4 (FANCQ), PTEN, CDK12, MRE11, NBS1, NBN, CLASPIN, BLM, WRN, SMARCA2, SMARCA4, LIG1, RPA1, RPA2, BRIP1 i PTEN.

[0056] Biće jasno da se reference u ovom tekstu na "deficijenciju nehomolognog spajanja kraja (NHEJD)" odnose na bilo koju genetsku varijaciju koja rezultira nedostatkom ili gubitkom funkcije rezultujućeg gena za homolognu rekombinaciju. Primeri pomenute genetske varijacije uključuju mutacije (npr. tačkaste mutacije), supstitucije, delecije, polimorfizme pojedinačnih nukleotida (SNP), haplotipove, abnormalnosti hromozoma, varijaciju broja kopija (CNV), epigenetiku, inverzije DNK, smanjenje ekspresije i pogrešnu lokalizaciju.

[0057] U jednom primeru izvođenja, pomenuti nehomologni geni za spajanje kraja su izabrani od bilo kog ili više od: LIG4, NHEJ1, POLL, POLM, PRKDC, XRCC4, XRCC5, XRCC6 i DCLRE1C.

[0058] Prema dodatnom aspektu pronalaska, obezbeđeno je jedinjenje formule (I) kako je ovde definisano za upotrebu u lečenju tumora koji prekomerno eksprimiraju Polθ.

[0059] Prema dodatnom aspektu pronalaska, obezbeđeno je jedinjenje formule (I) kako je ovde definisano za upotrebu u lečenju tumora koji imaju povišene nivoe ligaze IIIa, smanjene nivoe ligaze IV i povećanu zavisnost od popravke altEJ DSB.

[0060] Primeri kancera (i njihovih benignih parnjaka) koji se mogu lečiti (ili inhibirati) uključuju, ali nisu ograničeni na tumore epitelnog porekla (adenome i karcinome različitih tipova uključujući adenokarcinome, skvamozne karcinome, karcinome prelaznih ćelija i druge karcinome) kao što su karcinomi bešike i urinarnog trakta, dojke, gastrointestinalnog trakta (uključujući jednjak, želudac (gastrični), tanko crevo, debelo crevo, rektum i anus), jetre (hepatocelularni karcinom), žučne kese i bilijarnog sistema, egzokrinog pankreasa, bubrega, pluća (na primer adenokarcinoma, sitnoćelijskih karcinoma pluća, nesitnoćelijskih karcinoma pluća, bronhioalveolarnih karcinoma i mezotelioma), glave i vrata (na primer karcinome jezika, bukalne šupljine, larinksa, ždrela, nazofarinksa, krajnika, pljuvačnih žlezda, nosne duplje i paranazalnih sinusa), jajnika, jajovoda, peritoneuma, vagine, vulve, penisa, cerviksa, miometrijuma, endometrijuma, štitne žlezde (na primer folikularni karcinom štitne žlezde), nadbubrežne žlezde, prostate, kože i adneksa (na primer melanom, karcinom bazalnih ćelija, karcinom skvamoznih ćelija, keratoakantom, displastični nevus); hematološke malignitete (tj. leukemije, limfome) i premaligne hematološke poremećaje i poremećaje graničnog maligniteta uključujući hematološke malignitete i srodna stanja limfoidne loze (na primer akutna limfocitna leukemija [ALL], hronična limfocitna leukemija [CLL], B-ćelijski limfomi kao što je difuzni krupnoćelijski B-ćelijski limfom [DLBCL], folikularni limfom, Burkitt-ov limfom, limfom ćelija omotača, MALT limfom, T-ćelijski limfomi i leukemije, limfomi prirodnih ćelija ubica [NK], Hodgkin-ovi limfomi, leukemije dlakavih ćelija, monoklonska gamopatija neizvesnog značaja, plazmacitom, multipli mijelom i limfoproliferativni poremećaji nakon transplantacije), i hematološke malignitete i srodna stanja mijeloidne loze (na primer akutna mijelogena leukemija [AML], hronična mijelogena leukemija [CMM], hronična mijelomonocitna leukemija [CMML], hipereozinofilni sindrom, mijeloproliferativni poremećaji kao što je policitemija vera, esencijalna trombocitemija i primarna mijelofibroza, mijeloproliferativni sindrom, mijelodisplastični sindrom i promijelocitna leukemija); tumore mezenhimalnog porekla, na primer sarkome mekog tkiva, kosti ili hrskavice kao što su osteosarkomi, fibrosarkomi, hondrosarkomi, rabdomiosarkomi, leiomiosarkomi, liposarkomi, angiosarkomi, Kaposi-jev sarkom, Ewing-ov sarkom, sinovijalni sarkomi, epiteloidni sarkomi, gastrointestinalni stomalni tumori, benigni i maligni histiocitomi i dermatofibrosarkom protuberans; tumore centralnog ili perifernog nervnog sistema (na primer astrocitomi, gliomi i glioblastomi, meningiomi, ependimomi, tumori epifize i švanomi); endokrine tumore (na primer tumori hipofize, tumori nadbubrežne žlezde, tumori ćelija ostrvaca, tumori paratiroidnih žlezda, karcinoidni tumori i medularni karcinom štitne žlezde); tumori oka i adneksa (na primer retinoblastom); tumore germinativnih ćelija i trofoblastične tumore (na primer teratomi, seminomi, disgerminomi, hidatidiformni mladeži i horiokarcinomi); i pedijatrijske i embrionalne tumore (na primer meduloblastom, neuroblastom, Wilms-ov tumor i primitivni neuroektodermalni tumori); ili sindrome, urođene ili druge, koji čine pacijenta podložnim malignitetu (na primer kseroderma pigmentozum).

[0061] Mnoge bolesti karakteriše uporna i neregulisana angiogeneza. Hronične proliferativne bolesti su često praćene dubokom angiogenezom, koja može doprineti ili održati inflamatorno i/ili proliferativno stanje, ili koja dovodi do destrukcije tkiva kroz invazivnu proliferaciju krvnih sudova. Utvrđeno je da rast tumora i metastaze zavise od angiogeneze. Jedinjenja pronalaska mogu stoga biti korisna u sprečavanju i ometanju inicijacije tumorske angiogeneze. Posebno, jedinjenja pronalaska mogu biti korisna u lečenju metastaza i metastatskih karcinoma.

[0062] Metastaza ili metastatska bolest je širenje bolesti sa jednog organa ili dela na drugi organ ili deo koji nije susedan. Kanceri koji se mogu lečiti jedinjenjima pronalaska uključuju primarne tumore (tj. ćelije kancera na mestu nastanka), lokalnu invaziju (ćelije kancera koje prodiru i infiltriraju okolna normalna tkiva u lokalnom području) i metastatske (ili sekundarne) tumore tj. tumore koji su nastali iz malignih ćelija koje su cirkulisale kroz krvotok (hematogeno širenje) ili preko limfnih puteva ili preko telesnih šupljina (transcelomski) do drugih mesta i tkiva u telu.

[0063] Posebni kanceri uključuju hepatocelularni karcinom, melanom, jednjak, bubreg, debelo crevo, kolorektalni, pluća, npr. mezoteliom ili adenokarcinom pluća, kancer dojke, bešike, gastrointestinalnog trakta, jajnika i prostate.

[0064] Dodatni aspekt obezbeđuje upotrebu jedinjenja za proizvodnju leka za lečenje bolesti ili stanja kao što je ovde opisano, posebno kancera.

[0065] Jedinjenja mogu takođe biti korisna u lečenju rasta tumora, patogeneze, otpornosti na hemo- i radioterapiju senzibilizacijom ćelija na hemoterapiju i kao anti-metastatsko sredstvo.

[0066] Potentnost jedinjenja pronalaska kao inhibitora Polθ se može meriti upotrebom bioloških i biofizičkih testova navedenih u primerima ovde, a nivo afiniteta koji pokazuje dato jedinjenje može se definisati prema IC50vrednosti. Posebna jedinjenja ovog pronalaska su jedinjenja koja imaju IC50vrednost manju od 1 µM, tačnije manju od 0.1 µM.

[0067] Uloga za gubitak Polθ povećavajući efikasnost uređivanja gena posredovanog preko CRISPR opisana je u WO 2017/062754. Prema tome, jedinjenja koja inhibiraju Polθ će verovatno biti korisna u poboljšanju efikasnosti metodologija za uređivanje zasnovanih na CRISPR i/ili terapeutika za uređivanje zasnovanih na CRISPR. Pored toga, inhibicija Polθ posredovana jedinjenjem verovatno će smanjiti učestalost slučajnih događaja integracije i na taj način obezbediti put za ublažavanje bilo kakvih bezbednosnih problema CRISPR posredovane tehnologije. Prema tome, prema dodatnom aspektu pronalaska, obezbeđena je upotreba jedinjenja formule (I) kako je ovde definisano u metodologiji uređivanja zasnovanoj na CRISPR i/ili terapeutici za uređivanje zasnovani na CRISPR, kao što je poboljšanje efikasnosti zasnovane na CRISPR metodologiji uređivanja i/ili terapeuticima za uređivanje zasnovanim na CRISPR.

Farmaceutske kompozicije

[0068] Iako je moguće da se aktivno jedinjenje primenjuje samostalno, poželjno je da se predstavi kao farmaceutska kompozicija (npr. formulacija). U jednom primeru izvođenja ovo je sterilna farmaceutska kompozicija.

[0069] Dakle, ovaj pronalazak dalje obezbeđuje farmaceutske kompozicije, kao što su gore definisane, i postupke za pripremu farmaceutske kompozicije koja sadrži (npr. mešanje) najmanje jednog jedinjenja formule (I) (i njihovih podgrupa kako su ovde definisane), zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenasa i izborno drugih terapeutskih ili profilaktičkih sredstava, kao što su ovde opisani.

[0070] Farmaceutski prihvatljivi ekscipijensi mogu biti izabrani od, na primer, nosača (npr. čvrsti, tečni ili polučvrsti nosač), ađuvanasa, razblaživača, punilaca ili sredstava za povećanje zapremine, sredstava za granulaciju, sredstava za oblaganje, sredstava za kontrolu oslobađanja, vezujućih sredstava, sredstava za raspadanje, lubrikacionih sredstava, konzervanasa, antioksidanata, puferskih sredstava, suspendujućih sredstava, sredstava za zgušnjavanje, sredstava za poboljšanje ukusa, zaslađivača, sredstava za maskiranje ukusa, stabilizatora ili bilo kojih drugih ekscipijenasa koji se uobičajeno koriste u farmaceutskim kompozicijama. Primeri ekscipijenasa za različite tipove farmaceutskih kompozicija su detaljnije navedeni u nastavku.

[0071] Termin "farmaceutski prihvatljiv" kako se ovde koristi odnosi se na jedinjenja, materijale, kompozicije i/ili dozne oblike koji su, u okviru racionalne medicinske procene, pogodni za upotrebu u kontaktu sa tkivima subjekta (npr. čoveka) bez prekomerne toksičnosti, iritacije, alergijskog odgovora ili drugog problema ili komplikacije, srazmerno razumnom odnosu koristi/rizik. Svaki nosač, ekscipijens, itd. takođe mora biti "prihvatljiv" u smislu da je kompatibilan sa drugim sastojcima formulacije.

[0072] Farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenja formule (I) mogu se formulisati u skladu sa poznatim tehnikama, videti na primer, Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA, USA.

[0073] Farmaceutske kompozicije mogu biti u bilo kom obliku pogodnom za oralnu, parenteralnu, topikalnu, intranazalnu, intrabronhijalnu, sublingvalnu, oftalmičku, otičku, rektalnu, intravaginalnu ili transdermalnu primenu. Tamo gde su kompozicije namenjene za parenteralnu primenu, mogu se formulisati za intravensku, intramuskularnu, intraperitonealnu, subkutanu primenu ili za direktnu isporuku u ciljni organ ili tkivo injekcijom, infuzijom ili drugim načinom isporuke. Isporuka može biti bolusnom injekcijom, kratkotrajnom infuzijom ili dugotrajnom infuzijom i može biti pasivnom primenom ili upotrebom odgovarajuće infuzione pumpe ili pokretača špriceva.

[0074] Farmaceutske formulacije prilagođene za parenteralnu primenu uključuju vodene i nevodene sterilne rastvore za injekcije koji mogu sadržati antioksidante, pufere, bakteriostate, ko-rastvarače, površinski aktivna sredstva, smeše organskih rastvarača, sredstva za kompleksiranje ciklodekstrina, emulgatore (za formiranje i stabilizaciju emulzionih formulacija), komponente lipozoma za formiranje lipozoma, gelirajuće polimere za formiranje polimernih gelova, liofilizaciona sredstva za zaštitu i kombinacije sredstava za, između ostalog, stabilizaciju aktivnog sastojka u rastvorljivom obliku i pretvaranje formulacije izotoničnom sa krvlju nameravanog primaoca. Farmaceutske formulacije za parenteralnu primenu mogu takođe biti u obliku vodenih i nevodenih sterilnih suspenzija koje mogu uključivati sredstva za suspendovanje i sredstva za zgušnjavanje (R. G. Strickly, Solubilizing Excipients in oral and injectable formulations, Pharmaceutical Research, Vol 21(2) 2004, p 201-230).

[0075] Formulacije mogu biti predstavljene u jediničnim ili višedoznim kontejnerima, na primer u zapečaćenim ampulama, bočicama i napunjenim špricevima, i mogu se čuvati u zamrznutom sušenjem (liofilizovanom) stanju koje zahteva samo dodavanje sterilnog tečnog nosača, npr. vode za injekciju, neposredno pre upotrebe. U jednom primeru izvođenja, formulacija je obezbeđena kao aktivni farmaceutski sastojak u boci za naknadnu rekonstituciju upotrebom odgovarajućeg razblaživača.

[0076] Farmaceutska formulacija se može pripremiti liofilizacijom jedinjenja formule (I), ili njegovih podgrupa. Liofilizacija se odnosi na postupak sušenja smrzavanjem kompozicije. Sušenje zamrzavanjem i liofilizacija se stoga ovde koriste kao sinonimi.

[0077] Rastvori i suspenzije za ex tempore injekciju mogu se pripremiti od sterilnih praškova, granula i tableta.

[0078] Farmaceutske kompozicije ovog pronalaska za parenteralne injekcije mogu takođe sadržati farmaceutski prihvatljive sterilne vodene ili nevodene rastvore, disperzije, suspenzije ili emulzije, kao i sterilne praškove za rekonstituciju u sterilne injekcione rastvore ili disperzije neposredno pre upotrebe.

[0079] Primeri odgovarajućih vodenih i nevodenih nosača, razblaživača, rastvarača ili vehikuluma uključuju vodu, etanol, poliole (kao što su glicerol, propilen glikol, polietilen glikol i slično), karboksimetilcelulozu i njihove pogodne smeše, biljna ulja (kao što je suncokretovo ulje, suncokretovo ulje, ulje šafranike, kukuruzno ulje ili maslinovo ulje) i injektabilne organske estre kao što je etil oleat. Odgovarajuća tečnost se može održati, na primer, upotrebom materijala za zgušnjavanje ili oblaganje kao što je lecitin, održavanjem potrebne veličine čestica u slučaju disperzija i upotrebom surfaktanata.

[0080] Kompozicije ovog pronalaska mogu takođe da sadrže ađuvanse kao što su konzervansi, sredstva za vlaženje, emulgatori i sredstva za dispergovanje. Prevencija delovanja mikroorganizama može se obezbediti uključivanjem različitih antibakterijskih i antigljivičnih sredstava, na primer, parabena, hlorobutanola, fenola, sorbinske kiseline i slično. Takođe može biti poželjno uključiti sredstva za podešavanje toničnosti kao što su šećeri, natrijum hlorid i slično. Produžena apsorpcija injektabilnog farmaceutskog oblika može biti izazvana uključivanjem sredstava koji odlažu apsorpciju kao što su aluminijum monostearat i želatin.

[0081] U jednom posebnom primeru izvođenja pronalaska, farmaceutska kompozicija je u obliku pogodnom za i.v. primenu, na primer injekcijom ili infuzijom. Za intravensku primenu, rastvor se može dozirati kakav jeste ili se može ubrizgati u kesu za infuziju (koja sadrži farmaceutski prihvatljiv ekscipijens, kao što je 0.9% fiziološki rastvor ili 5% dekstroza), pre primene.

[0082] U sledećem posebnom primeru izvođenja, farmaceutska kompozicija je u obliku pogodnom za subkutanu (s.c.) primenu.

[0083] Farmaceutski dozni oblici pogodni za oralnu primenu uključuju tablete (obložene ili neobložene), kapsule (tvrda ili meka ljuska), kapsule, pilule, pastile, sirupe, rastvore, praškove, granule, eliksire i suspenzije, sublingvalne tablete, vafere ili flastere kao što su bukalni flasteri.

[0084] Prema tome, kompozicije tableta mogu da sadrže jediničnu dozu aktivnog jedinjenja zajedno sa inertnim razblaživačem ili nosačem kao što je šećer ili šećerni alkohol, npr. laktoza, saharoza, sorbitol ili manitol; i/ili razblaživač koji nije izveden od šećera kao što je natrijum karbonat, kalcijum fosfat, kalcijum karbonat ili celuloza ili njihov derivat kao što je mikrokristalna celuloza (MCC), metil celuloza, etil celuloza, hidroksipropil metil celuloza i skrobovi kao što je kukuruzni skrob. Tablete takođe mogu da sadrže takve standardne sastojke kao što su vezujuća i granulaciona sredstva kao što je polivinilpirolidon, sredstva za raspadanje (npr. unakrsno vezani polimeri koji mogu da bubre, kao što je unakrsno vezana karboksimetilceluloza), lubrikaciona sredstva (npr. stearati), konzervansi (npr. parabeni), antioksidanti (na primer fosfatni ili citratni puferi) i šumeća sredstva kao što su smeše citrata/bikarbonata. Takvi ekscipijensi su dobro poznati i ne treba ih ovde detaljno razmatrati.

[0085] Tablete mogu biti dizajnirane da oslobađaju lek posle kontakta sa stomačnim tečnostima (tablete sa trenutnim oslobađanjem) ili da se oslobađaju na kontrolisan način (tablete sa kontrolisanim oslobađanjem) tokom dužeg vremenskog perioda ili sa određenim regionom GI trakta. Formulacije kapsula mogu biti od tvrdog želatina ili mekog želatina i mogu sadržati aktivnu komponentu u čvrstom, polučvrstom ili tečnom obliku. Želatinske kapsule se mogu formirati od životinjskog želatina ili njegovih sintetičkih ili biljnih ekvivalenata.

[0086] Čvrsti dozni oblici (npr. tablete, kapsule itd.) mogu biti obloženi ili neobloženi. Omotači mogu delovati ili kao zaštitni film (npr. polimer, vosak ili lak) ili kao mehanizam za kontrolu oslobađanja leka ili u estetske ili identifikacione svrhe. Omotač (npr. Eudragit<™>tip polimera) može biti dizajniran da oslobodi aktivnu komponentu na željenoj lokaciji u gastrointestinalnom traktu. Prema tome, omotač može biti izabran tako da se razlaže pod određenim pH uslovima unutar gastrointestinalnog trakta, čime se selektivno oslobađa jedinjenje u želucu ili u ileumu, dvanaestopalačnom crevu, jejenumu ili debelom crevu.

[0087] Umesto, ili kao dodatak, omotača, lek može biti predstavljen u čvrstoj matrici koji sadrži sredstvo za kontrolu oslobađanja, na primer sredstvo za odlaganje oslobađanja koji se može prilagoditi da oslobađa jedinjenje na kontrolisan način u gastrointestinalnom traktu. Alternativno, lek može biti predstavljen u polimernom omotaču, npr. polimetakrilatnom polimernom omotaču, koji se može prilagoditi da selektivno oslobađa jedinjenje u uslovima različite kiselosti ili alkalnosti u gastrointestinalnom traktu. Alternativno, materijal matrice ili omotač koji usporava oslobađanje može imati oblik erodibilnog polimera (npr. polimera anhidrida maleinske kiseline) koji se u suštini kontinuirano erodira kako dozni oblik prolazi kroz gastrointestinalni trakt. U drugoj alternativi, omotač može biti dizajniran da se raspadne pod dejstvom mikroba u crevima. Kao dalja alternativa, aktivno jedinjenje se može formulisati u sistemu za oslobađanje koji obezbeđuje osmotsku kontrolu oslobađanja jedinjenja. Osmotsko oslobađanje i druge formulacije sa odloženim ili produženim oslobađanjem (na primer formulacije na bazi jonoizmenjivačkih smola) mogu biti pripremljene u skladu sa postupcima koji su dobro poznati stručnjacima u ovoj oblasti.

[0088] Jedinjenje formule (I) može biti formulisano sa nosačem i primenjeno u obliku nanočestica, pri čemu povećana površina nanočestica pomaže njihovoj apsorpciji. Pored toga, nanočestice nude mogućnost direktnog prodora u ćeliju. Sistemi za isporuku lekova nanočestica su opisani u " Nanoparticle Technology for Drug Delivery", edited by Ram B Gupta and Uday B. Kompella, Informa Healthcare, ISBN 9781574448573, published 13th March 2006. Nanočestice za isporuku lekova su takođe opisane u J. Control. Release, 2003, 91 (1-2), 167-172, i u Sinha et al., Mol. Cancer Ther. August 1, (2006) 5, 1909.

[0089] Farmaceutske kompozicije obično sadrže od približno 1% (tež./tež.) do približno 95% (tež./tež.) aktivnog sastojka i od 99% (tež./tež.) do 5% (tež./tež.) farmaceutski prihvatljivog ekscipijensa ili kombinacije ekscipijenasa. Posebno, kompozicije sadrže od približno 20% (tež./tež.) do približno 90% (tež./tež.) aktivnog sastojka i od 80% (tež./tež.) do 10% farmaceutski prihvatljivog ekscipijensa ili kombinacije ekscipijenasa. Farmaceutske kompozicije sadrže od približno 1% do približno 95%, posebno od približno 20% do približno 90%, aktivnog sastojka. Farmaceutske kompozicije prema pronalasku mogu biti, na primer, u obliku jedinične doze, kao što je u obliku ampula, bočica, supozitorija, prethodno napunjenih špriceva, dražeja, tableta ili kapsula.

[0090] Farmaceutski prihvatljivi ekscipijensi mogu biti odabrani prema željenom fizičkom obliku formulacije i mogu se, na primer, izabrati od razblaživača (npr. čvrstih razblaživača kao što su punioci ili sredstva za povećanje zapremine; i tečnih razblaživača kao što su rastvarači i ko-rastvarači), sredstava za rasapadanje, puferskih sredstava, lubrikanata, sredstava za protok, sredstava za kontrolu oslobađanja (npr. polimeri ili voskovi za usporavanje ili odlaganje oslobađanja), vezujućih sredstava, sredstava za granulaciju, pigmenata, plastifikatora, antioksidanata, konzervanasa, sredstava za poboljšanje ukusa, sredstava za maskiranje ukusa, sredstava za podešavanje toničnosti i sredstava za oblaganje.

[0091] Stručnjak će imati ekspertizu da izabere odgovarajuće količine sastojaka za upotrebu u formulacijama. Na primer, tablete i kapsule obično sadrže 0-20% sredstava za rasapadanje, 0-5% lubrikanata, 0-5% pomoćnih sredstava za protok i/ili 0-99% (tež./tež.) punilaca /ili sredstava za povećanje zapremine (u zavisnosti od doze leka). Takođe mogu sadržati 0-10% (tež./tež.) polimernih vezujućih sredstava, 0-5% (tež./tež.) antioksidanata, 0-5% (tež./tež.) pigmenata. Tablete sa sporim oslobađanjem bi dodatno sadržale 0-99% (tež./tež.) polimera koji kontrolišu oslobađanje (npr. odlažu) (u zavisnosti od doze). Film omotači tablete ili kapsule obično sadrže 0-10% (tež./tež.) polimera, 0-3% (tež./tež.) pigmenata i/ili 0-2% (tež./tež.) plastifikatora.

[0092] Parenteralne formulacije obično sadrže 0-20% (tež./tež.) pufera, 0-50% (tež./tež.) korastvarača i/ili 0-99% (tež./tež.) vode za injekcije (WFI) (u zavisnosti od doze i ako je sušeno zamrzavanjem). Formulacije za intramuskularne depoe mogu takođe da sadrže 0-99% (tež./tež.) ulja.

[0093] Farmaceutske kompozicije za oralnu primenu mogu se dobiti kombinovanjem aktivnog sastojka sa čvrstim nosačima, po želji granulacijom dobijene smeše, i obradom smeše, ako je poželjno ili neophodno, posle dodavanja odgovarajućih ekscipijenasa, u tablete, jezgra dražeja ili kapsule. Takođe je moguće da se ugrade u polimernu ili voštanu matricu koja omogućava difuziju aktivnih sastojaka ili oslobađanje u izmerenim količinama.

[0094] Jedinjenja pronalaska se takođe mogu formulisati kao čvrste disperzije. Čvrste disperzije su homogene izuzetno fine disperzne faze dve ili više čvrstih supstanci. Čvrsti rastvori (molekularno disperzni sistemi), jedna vrsta čvrste disperzije, dobro su poznati za upotrebu u farmaceutskoj tehnologiji (videti (Chiou and Riegelman, J. Pharm. Sci., 60, 1281-1300 (1971)) i korisni su u povećanju brzine rastvaranja i povećanju biodostupnosti lekova koji su slabo rastvorljivi u vodi.

[0095] Ovaj pronalazak takođe obezbeđuje čvrste dozne oblike koji sadrže gore opisani čvrsti rastvor. Čvrsti dozni oblici uključuju tablete, kapsule, tablete za žvakanje i disperzibilne ili šumeće tablete. Poznati ekscipijensi se mogu mešati sa čvrstim rastvorom da bi se dobio željeni dozni oblik. Na primer, kapsula može da sadrži čvrsti rastvor pomešan sa (a) sredstvom za rasapadanje i lubrikantom, ili (b) sredstvom za raspadanje, lubrikantom i surfaktantom. Pored toga, kapsula može da sadrži sredstvo za povećanje zapremine, kao što je laktoza ili mikrokristalna celuloza. Tableta može da sadrži čvrsti rastvor pomešan sa najmanje jednim sredstvom za raspadanje, lubrikantom, surfaktantom, sredstvom za povećanje zapremine i klizajućim sredstvom. Tableta za žvakanje može da sadrži čvrsti rastvor pomešan sa sredstvom za povećanje zapremine, lubrikantom i po želji dodatnim zaslađivačem (kao što je veštački zaslađivač) i pogodnim sredstvima za poboljšanje ukusa. Čvrsti rastvori se takođe mogu formirati prskanjem rastvora leka i odgovarajućeg polimera na površinu inertnih nosača kao što su šećerne kuglice („non-pareils“). Ove perlice se mogu naknadno puniti u kapsule ili presovati u tablete.

[0096] Farmaceutske formulacije mogu biti predstavljene pacijentu u "pakovanjima za pacijente" koja sadrže ceo tok lečenja u jednom pakovanju, obično u blister pakovanju. Pakovanja za pacijente imaju prednost u odnosu na tradicionalne recepte, gde farmaceut deli zalihe leka za pacijente od masovnih zaliha, u tome što pacijent uvek ima pristup uputstvu za pakovanje koje se nalazi u pakovanju za pacijente, što obično nedostaje u receptima za pacijente. Pokazalo se da uključivanje uputstava za pakovanje poboljšava komplajans pacijenata sa uputstvima lekara.

[0097] Kompozicije za lokalnu upotrebu i nazalnu upotrebu uključuju masti, kreme, sprejeve, flastere, gelove, tečne kapi i umetke (na primer intraokularne umetke). Takve kompozicije se mogu formulisati u skladu sa poznatim postupcima.

[0098] Primeri formulacija za rektalnu ili intravaginalnu primenu uključuju pesare i supozitorije koje mogu biti, na primer, napravljene od oblikovanog materijala koji se može oblikovati ili voštanog materijala koji sadrži aktivno jedinjenje. Rastvori aktivnog jedinjenja se takođe mogu koristiti za rektalnu primenu.

[0099] Kompozicije za primenu inhalacijom mogu biti u obliku inhalacionih praškastih kompozicija ili tečnih ili praškastih sprejeva, i mogu se primenjivati u standardnom obliku upotrebom uređaja za inhalaciju praška ili uređaja za raspršivanje aerosola. Takvi uređaji su dobro poznati. Za primenu inhalacijom, praškaste formulacije tipično sadrže aktivno jedinjenje zajedno sa inertnim čvrstim praškastim razblaživačem kao što je laktoza.

[0100] Jedinjenja formule (I) će generalno biti predstavljeno u obliku jedinične doze i, kao takva, tipično će sadržati dovoljno jedinjenja da obezbede željeni nivo biološke aktivnosti. Na primer, formulacija može da sadrži od 1 nanograma do 2 grama aktivnog sastojka, npr. od 1 nanograma do 2 miligrama aktivnog sastojka. Unutar ovih opsega, određeni podopsezi jedinjenja su 0.1 miligrama do 2 grama aktivnog sastojka (uobičajenije od 10 miligrama do 1 grama, npr. 50 miligrama do 500 miligrama), ili 1 mikrogram do 20 miligrama (na primer 1 mikrogram do 10 miligrama, npr.0.1 miligram do 2 miligrama aktivnog sastojka).

[0101] Za oralne kompozicije, jedinični dozni oblik može da sadrži od 1 miligrama do 2 grama, tipičnije 10 miligrama do 1 grama, na primer 50 miligrama do 1 grama, npr.100 miligrama do 1 gram aktivnog jedinjenja.

[0102] Aktivno jedinjenje će se primenjivati na pacijenta kome je to potrebno (na primer pacijenta čoveka ili životinje) u količini dovoljnoj da se postigne željeni terapeutski efekat.

Postupci lečenja

[0103] Jedinjenja formule (I) i podgrupe kako su ovde definisane mogu biti korisni u profilaksi ili lečenju niza bolesnih stanja ili stanja posredovanih preko Polθ. Prema tome, prema dodatnom aspektu pronalaska, obezbeđen je postupak lečenja bolesnog stanja ili stanja posredovanog preko Polθ (npr. kancera) koji sadrži primenu na subjekta kome je to potrebno jedinjenja formule (I) kako je ovde opisano. Primeri takvih bolesnih stanja i stanja su navedeni gore, a posebno uključuju kancer.

[0104] Jedinjenja se generalno primenjuju na subjekta kome je takva primena potrebna, na primer humanog ili životinjskog pacijenta, posebno čoveka.

[0105] Jedinjenja će se tipično primenjivati u količinama koje su terapeutski ili profilaktički korisne i koje su generalno netoksične. Međutim, u određenim situacijama (na primer u slučaju bolesti opasnih po život), koristi od primene jedinjenja formule (I) mogu biti veće od nedostataka bilo kakvih toksičnih efekata ili neželjenih efekata, u kom slučaju se može smatrati poželjnim primenjivati jedinjenja u količinama koje su povezane sa stepenom toksičnosti.

[0106] Jedinjenja se mogu primenjivati tokom produženog perioda da bi se održali korisni terapeutski efekti ili se mogu primenjivati samo u kratkom periodu. Alternativno, oni se mogu primenjivati na kontinuiran način ili na način koji obezbeđuje povremeno doziranje (npr. pulsirajući način).

[0107] Tipična dnevna doza jedinjenja formule (I) može biti u rasponu od 100 pikograma do 100 miligrama po kilogramu telesne težine, tipičnije od 5 nanograma do 25 miligrama po kilogramu telesne težine, a uobičajenije od 10 nanograma do 15 miligrama po kilogramu telesne težine. kilogram (npr.10 nanograma do 10 miligrama, a tipičnije 1 mikrogram po kilogramu do 20 miligrama po kilogramu, na primer 1 mikrogram do 10 miligrama po kilogramu) po kilogramu telesne težine, mada se mogu primeniti više ili niže doze gde je potrebno. Jedinjenje formule (I) se može primenjivati na dnevnoj bazi ili na bazi ponavljanja svakih 2, ili 3, ili 4, ili 5, ili 6, ili 7, ili 10 ili 14, ili 21, ili 28 dana na primer.

[0108] Jedinjenja pronalaska se mogu primenjivati oralno u rasponu doza, na primer 1 do 1500 mg, 2 do 800 mg, ili 5 do 500 mg, npr.2 do 200 mg ili 10 do 1000 mg, konkretni primeri doza uključujući 10, 20, 50 i 80 mg. Jedinjenje se može primenjivati jednom ili više puta dnevno. Jedinjenje se može primenjivati kontinuirano (tj. uzimati svaki dan bez pauze tokom trajanja režima lečenja). Alternativno, jedinjenje se može primenjivati isprekidano (tj. uzimati kontinuirano tokom određenog perioda kao što je nedelju dana, zatim diskontinuirano tokom perioda kao što je nedelju dana, a zatim kontinuirano uzimati u drugom periodu kao što je nedelju dana i tako dalje tokom trajanja režima lečenja). Primeri režima lečenja koji uključuju isprekidanu primenu uključuju režime u kojima je primena u ciklusima od jedne nedelje, pa pauza od jedne nedelje; ili dve nedelje primena, jedna nedelja pauza; ili tri nedelje primena, jedna nedelja pauza; ili dve nedelje primena, dve nedelje pauza; ili četiri nedelje primena, dve nedelje pauza; ili jedna nedelja primena, tri nedelje pauza – tokom jednog ili više ciklusa, npr.

2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ili 10 ili više ciklusa.

[0109] U jednom određenom režimu doziranja, pacijentu će se dati infuzija jedinjenja formule (I) u periodu od jednog sata dnevno do deset dana, posebno do pet dana tokom jedne nedelje, a tretman će se ponavljati u željenom intervalu od dve do četiri nedelje, posebno svake tri nedelje.

[0110] Tačnije, pacijentu se može dati infuzija jedinjenja formule (I) u periodu od jednog sata dnevno tokom 5 dana i tretman se ponavlja svake tri nedelje.

[0111] U sledećem posebnom režimu doziranja, pacijentu se daje infuzija u trajanju od 30 minuta do 1 sat posle čega slede infuzije održavanja varijabilnog trajanja, na primer 1 do 5 sati, npr. 3 sata.

[0112] U daljem posebnom režimu doziranja, pacijentu se daje kontinuirana infuzija tokom perioda od 12 sati do 5 dana, posebno kontinuirana infuzija od 24 sata do 72 sata.

[0113] U sledećem posebnom režimu doziranja, pacijentu se daje jedinjenje oralno jednom nedeljno.

[0114] U sledećem posebnom režimu doziranja, pacijentu se daje jedinjenje oralno jednom dnevno između 7 i 28 dana, kao što je 7, 14 ili 28 dana.

[0115] U sledećem posebnom režimu doziranja, pacijentu se daje jedinjenje oralno jednom dnevno tokom 1 dana, 2 dana, 3 dana, 5 dana ili 1 nedelje, posle čega sledi potrebna količina dana bez terapije da bi se završio ciklus od jedne ili dve nedelje.

[0116] U sledećem posebnom režimu doziranja, pacijentu se daje jedinjenje oralno jednom dnevno tokom 2 nedelje nakon čega slede 2 nedelje pauze.

[0117] U sledećem posebnom režimu doziranja, pacijentu se daje jedinjenje oralno jednom dnevno tokom 2 nedelje nakon čega sledi 1 nedelja pauze.

[0118] U sledećem posebnom režimu doziranja, pacijentu se daje jedinjenje oralno jednom dnevno tokom 1 nedelje nakon čega sledi 1 nedelja pauze.

[0119] Na kraju, međutim, količina primenjenog jedinjenja i tip korišćene kompozicije biće srazmerni prirodi bolesti ili fiziološkog stanja koje se leči i biće po diskreciji lekara.

[0120] Biće jasno da se inhibitori Polθmogu koristiti kao pojedinačno sredstvo ili u kombinaciji sa drugim sredstvima protiv kancera. Kombinovani eksperimenti se mogu izvoditi, na primer, kao što je opisano u Chou TC, Talalay P. Quantitative analysis of dose-effect relationships: the combined effects of multiple drugs or enzyme inhibitors. Adv Enzyme Regulat 1984;22: 27-55.

[0121] Jedinjenja kao što su ovde definisana mogu se primenjivati kao jedino terapeutsko sredstvo ili se mogu primeniti u kombinovanoj terapiji sa jednim od više drugih jedinjenja (ili terapija) za lečenje određenog bolesnog stanja, na primer neoplastične bolesti kao što je kancer kao što je ranije ovde definisano. Za lečenje gore navedenih stanja, jedinjenja pronalaska se mogu povoljno koristiti u kombinaciji sa jednim ili više drugih medicinskih sredstava, tačnije, sa drugim sredstvima protiv kancera ili ađuvansima (potpornim sredstvima u terapiji) u terapiji kancera. Primeri drugih terapeutskih sredstava ili tretmana koji se mogu primenjivati zajedno (bilo istovremeno ili u različitim vremenskim intervalima) sa jedinjenjima formule (I) uključuju, ali nisu ograničeni na:

● inhibitore topoizomeraze I;

● Antimetabolite;

● sredstva za ciljanje tubulina;

● DNK veziva i inhibitore topoizomeraze II;

● Alkilaciona sredstva;

● Monoklonska antitela;

● Anti-Hormone;

● Inhibitore prenosa signala;

● Inhibitore proteazoma;

● Inhibitore DNK metil transferaze;

● Citokine i retinoide;

● Hromatin ciljane terapije;

● Radioterapiju; i

● Druga terapeutska ili profilaktička sredstva.

[0122] Posebni primeri sredstava protiv kancera ili ađuvanasa (ili njihovih soli) uključuju, ali nisu ograničeni na, bilo koje od sredstava izabranih iz grupa (i)-(xlvi), i izborno grupa (xlvii), ispod:

(i) jedinjenja platine, na primer cisplatin (izborno kombinovan sa amifostinom), karboplatin ili oksaliplatin;

(ii) Jedinjenja taksana, na primer paklitaksel, čestice vezane za protein paklitaksela (Abraxane<™>), docetaksel, kabazitaksel ili larotaksel;

(iii) inhibitori topoizomeraze I, na primer jedinjenja kamptotecina, na primer kamptotecin, irinotekan (CPT11), SN-38 ili topotekan;

(iv) inhibitori topoizomeraze II, na primer antitumorski epipodofilotoksini ili derivati podofilotoksina, na primer etopozid ili tenipozid;

(v) alkaloidi vinke, na primer vinblastin, vinkristin, lipozomalni vinkristin (Onco-TCS), vinorelbin, vindezin, vinflunin ili vinvesir;

(vi) Derivati nukleozida, na primer 5-fluorouracil (5-FU, izborno u kombinaciji sa leukovorinom), gemcitabin, kapecitabin, tegafur, UFT, S1, kladribin, citarabin (Ara-C, citozin arabinozid), fludarabin, klofarabin, nelarabin;

(vii) antimetaboliti, na primer klofarabin, aminopterin ili metotreksat, azacitidin, citarabin, floksuridin, pentostatin, tioguanin, tiopurin, 6-merkaptopurin ili hidroksiurea (hidroksikarbamid);

(viii) Alkilaciona sredstva, kao što su azotni iperiti ili nitrozourea, na primer ciklofosfamid, hlorambucil, karmustin (BCNU), bendamustin, tiotepa, melfalan, treosulfan, lomustin (CCNU), altretamin, busulfan, dakarbazin, estramustin, fotemustin, ifosfamid (izborno u kombinaciji sa mesna), pipobroman, prokarbazin, streptozocin, temozolomid, uracil, mehloretamin, metilcikloheksilhloroetilnitrozurea ili nimustin (ACNU);

(ix) antraciklini, antracendioni i srodni lekovi, na primer daunorubicin, doksorubicin (izborno u kombinaciji sa deksrazoksanom), lipozomalne formulacije doksorubicina (npr. Caelyx<™>, Myocet<™>, Doxil<™>), idarubicin, mitoksantron, epirubicin, amsakrin ili valrubicin;

(k) Epotiloni, na primer iksabepilon, patupilon, BMS-310705, KOS-862 i ZK-EPO, epotilon A, epotilon B, dezoksiepotilon B (takođe poznat kao epotilon D ili KOS-862), aza-epotilon (poznato kao BMS-247550), aulimalid, izolaulimalid ili lueterobin;

(xi) inhibitore DNK metil transferaze, na primer temozolomid, azacitidin ili decitabin, ili SGI-110;

(xii) antifolati, na primer metotreksat, pemetreksed dinatrijum ili raltitreksed;

(xiii) citotoksični antibiotici, na primer antinomicin D, bleomicin, mitomicin C, daktinomicin, karminomicin, daunomicin, levamisol, plikamicin ili mitramicin;

(xiv) sredstva koja vezuju tubulin, na primer kombrestatin, kolhicini ili nokodazol;

(xv) Inhibitori prenosa signala kao što su inhibitori kinaze (npr. inhibitori EGFR (receptora epitelnog faktora rasta), inhibitori VEGFR (receptora faktora rasta vaskularnog endotela), inhibitori PDGFR (receptora faktora rasta izvedenog iz trombocita), MTKI (inhibitori višeciljne kinaze), inhibitori Raf, inhibitori mTOR, na primer imatinib mezilat, erlotinib, gefitinib, dasatinib, lapatinib, dovotinib, aksitinib, nilotinib, vandetanib, vatalinib, pazopanib, sorafenib, sunitinib, temsirolimus, everolimus (RAD 001), vemurafenib (PLX4032/RG7204), dabrafenib, enkorafenib ili inhibitor IκB kinaze kao što je SAR-113945, bardoksolon, BMS-066, BMS-345541, IMD-0354, IMD-2560 ili IMD-1041, ili inhibitori MEK kao što su Selumetinib (AZD6244) i Trametinib (GSK11212);

(xvi) Inhibitori aurora kinaze, na primer AT9283, barasertib (AZD1152), TAK-901, MK0457 (VX680), cenisertib (R-763), danusertib (PHA-739358), alisertib (MLN-8470) ili MP-8270; (xvii) inhibitori CDK, na primer AT7519, roskovitin, seliciklib, alvocidib (flavopiridol), dinaciklib (SCH-727965), 7-hidroksi-staurosporin (UCN-01), JNJ-7706621, BMS-387032 (takođe poznat kao SNS-032), PHA533533, PD332991, ZK-304709 ili AZD-5438;

(xviii) inhibitori PKA/B i inhibitori PKB (akt) puta, na primer inhibitori AKT kao što su KRX-0401 (perifozin/NSC 639966), ipatasertib (GDC-0068; RG-7440), afuresertib (GSK-21101183; 21101183); MK-2206, MK-8156, AT13148, AZD-5363, triciribin fosfat (VQD-002; triciribin fosfat monohidrat (API-2; TCN-P; TCN-PM; VD-0002), RX-0201, NL-71-101, SR-13668, PX-316, AT13148, AZ-5363, semafor, SF1126 ili enzastaurin HCI (LY317615) ili inhibitori MTOR kao što su analozi rapamicina kao što su RAD 001 (everolimus), CCI 779 (temsirolemus), AP23573 i ridaforolimus, sirolimus (originalno poznat kao rapamicin) AP23841 i AP23573, inhibitori kalmodulina, npr. CBP-501 (inhibitori translokacije viljuške), enzastaurin HCI (LY317615) ili inhibitori PI3K kao što su daktolisib (BEZ235), buparlisib (BKM-120, NVP-BKM-120), BYL719, kopanlisib (BAY-80-6946), ZSTK-474, CUDC-907, apitolisib (GDC-0980; RG-7422), piktilisib (pictrelisib, GDC-0941, RG-7321), GDC-0032, GDC-0068, GSK-2636771, idelalisib (ranije CAL-101, GS 1101, GS-1101), MLN1117 (INK1117), MLN0128 (INK128), IPI-145 (INK1197), LY-3023414, ipatasertib, afuresertib, MK-2206, MK-8156, LY-3023414, LY294002, SF1126 ili PI-103, ili sonolisib (PX-866); (xix) inhibitori Hsp90, na primer AT13387, herbimicin, geldanamicin (GA), 17-alilamino-17-desmetoksigeldanamicin (17-AAG), npr. NSC-330507, Kos-953 i CNF-1010, 17-dimetilaminoetilamino-17-demetoksigeldanamicin hidrohlorid (17-DMAG) npr. NSC-707545 i Kos-1022, NVP-AUY922 (VER-52296), NVP-BEP800, CNF-2024 (BIIB-021 oralni purin), ganetespib (STA-9090), SNX-5422 (SC-102112) ili IPI-504;

(xx) Monoklonska antitela (nekonjugovana ili konjugovana sa radioizotopima, toksinima ili drugim sredstvima), derivati antitela i srodna sredstva, kao što su anti-CD, anti-VEGFR, anti-HER2, anti-CTLA4, anti-PD-1 ili anti-EGFR antitela, na primer rituksimab (CD20), ofatumumab (CD20), ibritumomab tiuksetan (CD20), GA101 (CD20), tositumomab (CD20), epratuzumab (CD22), lintuzumab (CD33), gemtuzumab ozogamicin (CD33), alemtuzumab (CD52), galiksimab (CD80), trastuzumab (HER2 antitelo), pertuzumab (HER2), trastuzumabDM1 (HER2), ertumaksomab (HER2 i CD3), cetuksimab (EGFR), panitumumab (EGFR), necitumumab (EGFR), nimotuzumab (EGFR), bevacizumab (VEGF), katumaksumab (EpCAM i CD3), abagovomab (CA125) , farletuzumab (folatni receptor), elotuzumab (CS1), denosumab (RANK ligand), figitumumab (IGF1R), CP751,871 (IGF1R), mapatumumab (TRAIL receptor), metMAB (met), mitumomab (GD3 gangliozid), naptumomab estafenatoks (5T4), siltuksimab (IL6) ili imunomodulaciona sredstva kao što su CTLA-4 blokirajuća antitela i/ili antitela protiv PD-1 i PD-L1 i/ili PD-L2, na primer ipilimumab (CTLA4), MK-3475 (pembrolizumab, ranije lambrolizumab, anti-PD-1), nivolumab (anti-PD-1), BMS-936559 (anti-PD-L1), MPDL320A, AMP-514 ili MEDI4736 (anti-PD-L1) ili tremelimumab (ranije ticilimumab, CP-675,206, anti-CTLA-4);

(xxi) Antagonisti receptora estrogena ili selektivni modulatori receptora estrogena (SERM) ili inhibitori sinteze estrogena, na primer tamoksifen, fulvestrant, toremifen, droloksifen, faslodeks ili raloksifen;

(xxii) inhibitori aromataze i srodni lekovi, kao što su eksemestan, anastrozol, letrazol, testolakton aminoglutetimid, mitotan ili vorozol;

(xxiii) antiandrogeni (tj. antagonisti receptora za androgen) i srodna sredstva, na primer bikalutamid, nilutamid, flutamid, ciproteron ili ketokonazol;

(xxiv) Hormoni i njihovi analozi kao što su medroksiprogesteron, dietilstilbestrol (takođe poznat kao dietilstilboestrol) ili oktreotid;

(xxv) Steroidi na primer dromostanolon propionat, megestrol acetat, nandrolon (dekanoat, fenpropionat), fluoksimestron ili gosipol,

(xxvi) Steroidni inhibitor citohroma P450 17alfa-hidroksilaze-17,20-liaze (CIP17), npr. abirateron;

(xxvii) agonisti ili antagonisti hormona oslobađanja gonadotropina (GnRA) na primer abareliks, goserelin acetat, histrelin acetat, leuprolid acetat, triptorelin, buserelin ili deslorelin; (xxviii) Glukokortikoidi, na primer prednizon, prednizolon, deksametazon;

(xxix) Diferenciaciona sredstva, kao što su retinoidi, reksinoidi, vitamin D ili retinoična kiselina i sredstva za blokiranje metabolizma retinoične kiseline (RAMBA) na primer akutan, alitretinoin, beksaroten ili tretinoin;

(xxx) inhibitori farneziltransferaze, na primer tipifarnib;

(xxxi) Terapije ciljane na hromatin kao što su inhibitori histon deacetilaze (HDAC), na primer panobinostat, resminostat, abeksinostat, vorinostat, romidepsin, belinostat, entinostat, kvizinostat, pracinostat, tefinostat, mocetinostat, givinostat, CUDC-907, CUDC-101, ACY-1215, MGCD-290, EVP-0334, RG-2833, 4SC-202, romidepsin, AR-42 (Ohio State University), CG-200745, valproična kiselina, CKD-581, natrijum butirat, suberoilanidioksid hidroksamidna kiselina (SAHA), depsipeptid (FR 901228), dacinostat (NVP-LAQ824), R306465/ JNJ-16241199, JNJ-26481585, trihostatin A, hlamidocin, A-173, JNJ-MGCD-0103, PXD-101 ili apicidin;

(xxxii) Inhibitori proteazoma, na primer bortezomib, karfilzomib, delanzomib (CEP-18770), iksazomib (MLN-9708), oprozomib (ONX-0912) ili marizomib;

(xxxiii) fotodinamički lekovi, na primer porfimer natrijum ili temoporfin;

(xxxiv) sredstva protiv kancera dobijena iz morskih organizama kao što je trabektidin;

(xxxv) Radioaktivno-obeleženi lekovi za radioimunoterapiju, na primer sa izotopom koji emituje beta čestice (npr. jod -131, itrijum-90) ili izotopom koji emituje alfa čestice (npr. bizmut-213 ili aktinijum-225) na primer ibriotudin i tositumomab;

(xxxvi) inhibitori telomeraze, na primer telomestatin;

(xxxvii) inhibitori matriks metaloproteinaze, na primer batimastat, marimastat, prinostat ili metastat;

(xxxviii) Rekombinantni interferoni (kao što su interferon-γ i interferon α) i interleukini (npr. interleukin 2), na primer aldesleukin, denileukin diftitoks, interferon alfa 2a, interferon alfa 2b ili peginterferon alfa 2b;

(xxxix) Selektivni modulatori imunoreakcije, na primer talidomid ili lenalidomid;

(xl) Terapijske vakcine kao što su sipuleucel-T (Provenge) ili OncoVex;

(xli) Sredstva koja aktiviraju citokine uključuju picibanil, romurtid, sizofiran, virulizin ili timozin;

(xlii) Arsen trioksid;

(xliii) Inhibitori receptora vezanih za G-protein (GPCR), na primer atrasentan;

(xliv) Enzimi kao što su L-asparaginaza, pegaspargaza, rasburikaza ili pegademaza;

(xlv) inhibitori popravke DNK kao što su inhibitori PARP, na primer, olaparib, velaparib, iniparib, rukaparib (AG-014699 ili PF-01367338), talazoparib ili AG-014699;

(xlvi) inhibitori odgovora na oštećenje DNK kao što su inhibitori ATM, AZD0156 MS3541, inhibitori ATR, AZD6738, M4344, inhibitor M6620 wee1, AZD1775;

(xlvii) Agonisti receptora smrti (npr. receptor liganda koji indukuje apoptozu (TRAIL) povezan sa TNF), kao što je mapatumumab (ranije HGS-ETR1), konatumumab (ranije AMG 655), PRO95780, leksatumumab, dulanermin, CS-1008, apomab ili rekombinantni TRAIL ligandi kao što su kao rekombinantni humani TRAIL/Apo2 ligand;

(xlviii) Profilaktička sredstva (dodatna sredstva); sredstva koja smanjuju ili ublažavaju neke od neželjenih efekata povezanih sa hemoterapeutskim sredstvima, na primer

- antiemetici,

- sredstva koja sprečavaju ili smanjuju trajanje neutropenije povezane sa hemoterapijom i sprečavaju komplikacije koje nastaju usled smanjenog nivoa trombocita, crvenih krvnih zrnaca ili belih krvnih zrnaca, na primer interleukin-11 (npr. oprelvekin), eritropoetin (EPO) i njihovi analozi (npr. darbepoetin alfa), analozi faktora koji stimulišu kolonije kao što je faktor stimulacije kolonija granulocita makrofaga (GM-CSF) (npr. sargramostim), i faktor stimulacije kolonija granulocita (G-CSF) i njihovi analozi (npr. filgrastim, pegfilgrastim),

- sredstva koja inhibiraju resorpciju kostiju kao što su denosumab ili bisfosfonati, npr.

zoledronat, zoledronska kiselina, pamidronat i ibandronat,

- sredstva koja suprimiraju inflamatorne odgovore kao što su deksametazon, prednizon i prednizolon,

- sredstva koja se koriste za smanjenje nivoa hormona rasta i IGF-I (i drugih hormona) u krvi kod pacijenata sa akromegalijom ili drugim retkim tumorima koji proizvode hormone, kao što su sintetički oblici hormona somatostatina, npr. oktreotid acetat, - antidot za lekove koji smanjuju nivoe folne kiseline kao što je leukovorin ili folinska kiselina,

- sredstva protiv bolova npr. opijati kao što su morfijum, diamorfin i fentanil,

- nesteroidni antiinflamatorni lekovi (NSAID) kao što su inhibitori COX-2, na primer celekoksib, etorikoksib i lumirakoksib,

- sredstva za upalu sluzokože npr. palifermin,

- sredstva za lečenje neželjenih efekata uključujući anoreksiju, kaheksiju, edem ili tromboembolijske epizode, kao što je megestrol acetat.

[0123] U jednom primeru izvođenja, sredstva protiv kancera je izabran od rekombinantnih interferona (kao što su interferon-i i interferon α) i interleukina (npr. interleukin 2), na primer aldesleukin, denileukin diftitoks, interferon alfa 2a, interferon alfa 2b, ili peginterferon alfa; interferon-α2 (500 µ/ml), posebno interferon-β; i inhibitora prenosa signala kao što su inhibitori kinaze (npr. inhibitori EGFR (receptora epitelnog faktora rasta), inhibitori VEGFR (receptor faktora rasta vaskularnog endotela), inhibitori PDGFR (receptora faktora rasta izveden iz trombocita), MTKI (inhibitori više ciljnih kinaza), inhibitori Raf, inhibitori mTOR, na primer imatinib mezilat, erlotinib, gefitinib, dasatinib, lapatinib, dovotinib, aksitinib, nilotinib, vandetanib, vatalinib, pazopanib, sorafenib, sunitinib, temsirolimus, everolimus (RAD 001), vemurafenib (PLX4032/RG7204), dabrafenib, enkorafenib ili inhibitor IκB kinaze kao što su SAR-113945, bardoksolon, BMS-066, BMS-345541, IMD-0354, IMD-2560 ili IMD-1041, ili inhibitori MEK kao što su Selumetinib (AZD6244) i Trametinib (GSK12112021), posebno inhibitori Raf ili inhibitori MEK (npr. trametinib).

[0124] Svako od jedinjenja prisutnih u kombinacijama pronalaska može se davati u individualno promenljivim dozama i različitim putevima. Kao takvo, doziranje svakog od dva ili više sredstava može da se razlikuje: svako se može primeniti u isto vreme ili u različito vreme. Osoba koja je vešta u ovoj oblasti znala bi kroz svoje opšte opšte znanje o režimima doziranja i kombinovanim terapijama koje treba koristiti. Na primer, jedinjenje pronalaska se može koristiti u kombinaciji sa jednim ili više drugih sredstava koja se primenjuju u skladu sa njihovim postojećim kombinovanim režimom. Primeri standardnih kombinovanih režima su dati u nastavku.

[0125] Jedinjenje taksana se povoljno primenjuje u dozi od 50 do 400 mg po kvadratnom metru (mg/m<2>) površine tela, na primer 75 do 250 mg/m<2>, posebno za paklitaksel u dozi od oko 175 do 250 mg/m<2>i za docetaksel u oko 75 do 150 mg/m<2>po kuri lečenja.

[0126] Jedinjenje kamptotecina se poželjno primenjuje u dozi od 0.1 do 400 mg po kvadratnom metru (mg/m<2>) površine tela, na primer 1 do 300 mg/m<2>, posebno za irinotekan u dozi od oko 100 do 350 mg/m<2>i za topotekan u oko 1 do 2 mg/m<2>po kuri lečenja.

[0127] Derivat podofilotoksina protiv tumora se poželjno primenjuje u dozi od 30 do 300 mg po kvadratnom metru (mg/m<2>) površine tela, na primer 50 do 250 mg/m<2>, posebno za etopozid u dozi od oko 35 do 100 mg/m<2>i za tenipozid u oko 50 do 250 mg/m<2>po kuri lečenja.

[0128] Antitumorski alkaloid vinke se povoljno primenjuje u dozi od 2 do 30 mg po kvadratnom metru (mg/m<2>) površine tela, posebno za vinblastin u dozi od oko 3 do 12 mg/m<2>, za vinkristin u dozi od oko 1 do 2 mg/m<2>, i za vinorelbin u dozi od oko 10 do 30 mg/m<2>po kuri lečenja.

[0129] Antitumorski derivat nukleozida se poželjno primenjuje u dozama od 200 do 2500 mg po kvadratnom metru (mg/m<2>) površine tela, na primer 700 do 1500 mg/m<2>, posebno za 5-FU u dozi od 200 do 500 mg/m<2>, za gemcitabin u dozi od oko 800 do 1200 mg/m<2>i za kapecitabin od oko 1000 do 2500 mg/m<2>po kuri lečenja.

[0130] Alkilaciona sredstva kao što su azotni iperit ili nitrozourea se poželjno primenjuju u dozama od 100 do 500 mg po kvadratnom metru (mg/m<2>) površine tela, na primer 120 do 200 mg/m<2>, posebno za ciklofosfamid u dozi od oko 100 do 500 mg/m<2>, za hlorambucil u dozi od oko 0.1 do 0.2 mg/kg, za karmustin u dozi od oko 150 do 200 mg/m<2>, i za lomustin u dozi od oko 100 do 150 mg/m<2>po kuri lečenja.

[0131] Antitumorski derivat antraciklina se poželjno primenjuje u dozi od 10 do 75 mg po kvadratnom metru (mg/m<2>) površine tela, na primer 15 do 60 mg/m<2>, posebno za doksorubicin u dozi od oko 40 do 75 mg/m<2>, za daunorubicin u dozi od oko 25 do 45 mg/m<2>i za idarubicin u dozi od oko 10 do 15 mg/m<2>po kuri lečenja.

[0132] Antiestrogensko sredstvo se poželjno primenjuje u dozi od oko 1 do 100 mg dnevno u zavisnosti od određenog sredstva i stanja koje se leči. Tamoksifen se poželjno primenjuje oralno u dozi od 5 do 50 mg, posebno 10 do 20 mg dva puta dnevno, nastavljajući terapiju dovoljno vremena da se postigne i održi terapeutski efekat. Povoljno je da se toremifen primenjuje oralno u dozi od oko 60 mg jednom dnevno, nastavljajući terapiju dovoljno vremena da se postigne i održi terapeutski efekat. Anastrozol se poželjno primenjuje oralno u dozi od oko 1 mg jednom dnevno. Droloksifen se poželjno primenjuje oralno u dozi od oko 20-100 mg jednom dnevno. Raloksifen se poželjno primenjuje oralno u dozi od oko 60 mg jednom dnevno. Eksemestan se poželjno primenjuje oralno u dozi od oko 25 mg jednom dnevno.

[0133] Antitela se poželjno daju u dozi od oko 1 do 5 mg po kvadratnom metru (mg/m<2>) površine tela, ili kao što je poznato u tehnici, ako je drugačije. Trastuzumab se povoljno primenjuje u dozi od 1 do 5 mg po kvadratnom metru (mg/m<2>) površine tela, posebno 2 do 4 mg/m<2>po kuri lečenja.

[0134] Kada se jedinjenje formule (I) primenjuje u kombinovanoj terapiji sa jednim, dva, tri, četiri ili više drugih terapeutskih sredstava (posebno jednim ili dva, tačnije jednim), jedinjenja se mogu primenjivati istovremeno ili uzastopno. U poslednjem slučaju, dva ili više jedinjenja će se primenjivati u periodu i u količini i na način koji su dovoljni da osiguraju da se postigne povoljan ili sinergistički efekat. Kada se primenjuju uzastopno, mogu se primenjivati u blisko raspoređenim intervalima (na primer u periodu od 5-10 minuta) ili u dužim intervalima (na primer 1, 2, 3, 4 ili više sati, ili čak i u dužim periodima, gde je potrebno), precizan režim doziranja je srazmeran svojstvima terapeutskog sredstva (sredstava). Ove doze se mogu primeniti na primer jednom, dva puta ili više po kuri tretmana, koji se može ponoviti na primer svakih 7, 14, 21 ili 28 dana.

[0135] U jednom primeru izvođenja obezbeđeno je jedinjenje formule (I) za proizvodnju leka za upotrebu u terapiji gde se pomenuto jedinjenje koristi u kombinaciji sa jednim, dva, tri ili četiri druga terapeutska sredstva. U sledećem primeru izvođenja obezbeđen je lek za lečenje kancera koji sadrži jedinjenje formule (I) gde se navedeni lek koristi u kombinaciji sa jednim, dva, tri ili četiri druga terapeutska sredstva. Pronalazak dalje obezbeđuje upotrebu jedinjenja formule (I) za proizvodnju leka za povećanje ili potenciranje stope odgovora kod pacijenta koji boluje od kancera gde se pacijent leči sa jednim, dva, tri ili četiri druga terapeutska sredstva.

[0136] Biće jasno da će određeni postupak i redosled primene i odgovarajuće količine doziranja i režimi za svaku komponentu kombinacije zavisiti od određenog drugog medicinskog sredstva i jedinjenja iz ovog pronalaska koji se primenjuju, njihovog načina primene, određenog tumora koji se leči i određenog domaćina koji se leči. Optimalni postupak i redosled primene i količine i režim doziranja mogu lako da odrede stručnjaci iz ove oblasti tehnike upotrebom konvencionalnih postupaka i s obzirom na informacije date ovde.

[0137] Odnos težine jedinjenja prema sadašnjem pronalasku i jednog ili više drugih sredstava protiv kancera kada se primenjuju u kombinaciji može odrediti stručnjak. Navedeni odnos i tačna doza i učestalost primene zavise od određenog jedinjenja prema pronalasku i drugih korišćenih sredstava protiv kancera, određenog stanja koje se leči, težine stanja koje se leči, starosti, telesne težine, pola, ishrane, vremena primene i opšteg fizičkog stanja određenog pacijenta, režima primene kao i drugih lekova koje pojedinac može da uzima, kao što je dobro poznato stručnjacima u ovoj oblasti. Dalje, očigledno je da efikasna dnevna količina može biti smanjena ili povećana u zavisnosti od odgovora lečenog subjekta i/ili u zavisnosti od procene lekara koji propisuje jedinjenja ovog pronalaska. Određeni težinski odnos za predmetno jedinjenje formule (I) i drugo sredstvo protiv kancera može se kretati od 1/10 do 10/1, tačnije od 1/5 do 5/1, naročito od 1/3 do 3 /1.

[0138] Jedinjenja pronalaska se takođe mogu primenjivati zajedno sa ne-hemoterapeutskim tretmanima kao što su radioterapija, fotodinamička terapija, genska terapija; operacija i kontrolisane dijete.

[0139] Jedinjenja ovog pronalaska takođe imaju terapeutsku primenu u senzibilizaciji tumorskih ćelija za radioterapiju i hemoterapiju. Stoga se jedinjenja iz ovog pronalaska mogu koristiti kao "radiosenzibilizator" i/ili "hemosenzibilizator" ili se mogu davati u kombinaciji sa drugim "radiosenzibilizatorom" i/ili "hemosenzibilizatorom". U jednom primeru izvođenja jedinjenje pronalaska je za upotrebu kao hemosenzibilizator.

[0140] Termin "radiosenzibilizator" je definisan kao molekul koji se primenjuje na pacijente u terapeutski efikasnim količinama da bi se povećala osetljivost ćelija na jonizujuće zračenje i/ili da bi se stimulisao tretman bolesti koje se mogu lečiti jonizujućim zračenjem.

[0141] Termin "hemosenzibilizator" je definisan kao molekul koji se primenjuje na pacijente u terapeutski efikasnim količinama da bi se povećala osetljivost ćelija na hemoterapiju i/ili stimulisalo lečenje bolesti koje se mogu lečiti hemoterapeuticima.

[0142] U jednom primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska se primenjuje sa "radiosenzibilizatorom" i/ili "hemosenzibilizatorom". U jednom primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska se primenjuje sa "imunosenzibilizatorom".

[0143] Termin "imunološki senzibilizator" je definisan kao molekul koji se primenjuje na pacijente u terapeutski efikasnim količinama da bi se povećala osetljivost ćelija na inhibitor Polθ.

[0144] Mnogi protokoli za lečenje kancera trenutno koriste radiosenzibilizatore u kombinaciji sa rendgenskim zračenjem. Primeri radiosenzibilizatora aktiviranih rendgenskim zracima uključuju, ali nisu ograničeni na, sledeće: metronidazol, mizonidazol, demetilmizonidazol, pimonidazol, etanidazol, nimorazol, mitomicin C, RSU 1069, SR 4233, EO9, RB 6145, nikotinamid, 5-bromodeoksiuridin (BUdR), 5-jododeoksiuridin (IUdR), bromodeoksicitidin, fluorodeoksiuridin (FudR), hidroksiurea, cisplatin i terapeutski efikasni analozi i derivati istih.

[0145] Fotodinamička terapija (PDT) kancera koristi vidljivu svetlost kao radijacioni aktivator sredstva za senzibilizaciju. Primeri fotodinamičkih radiosenzibilizatora uključuje sledeće, ali nisu ograničeni na: derivate hematoporfirina, fotofrin, derivate benzoporfirina, kalaj etioporfirin, feoborbid, bakteriohlorofil, naftalocijanine, ftalocijanine, cink ftalocijanin i terapetski efikasne analoge i derivate istih.

[0146] Radiosenzibilizatori se mogu primenjivati zajedno sa terapeutski efikasnom količinom jednog ili više drugih jedinjenja, uključujući, ali ne ograničavajući se na: jedinjenja pronalaska; jedinjenja koja stimulišu ugradnju radiosenzibilizatora u ciljne ćelije; jedinjenja koja kontrolišu protok terapeutika, hranljivih materija i/ili kiseonika do ciljnih ćelija; hemoterapeutska sredstva koja deluju na tumor sa ili bez dodatnog zračenja; ili druga terapeutski efikasna jedinjenja za lečenje kancera ili drugih bolesti.

[0147] Hemosenzibilizatori se mogu primenjivati zajedno sa terapeutski efikasnom količinom jednog ili više drugih jedinjenja, uključujući, ali ne ograničavajući se na: jedinjenja pronalaska; jedinjenja koja stimulišu ugradnju hemosenzibilizatora u ciljne ćelije; jedinjenja koja kontrolišu protok terapeutika, hranljivih materija i/ili kiseonika do ciljnih ćelija; hemoterapeutska sredstva koja deluju na tumor ili druga terapeutski efikasna jedinjenja za lečenje kancera ili druge bolesti. Antagonisti kalcijuma, na primer verapamil, su korisni u kombinaciji sa antineoplastičnim sredstvima za uspostavljanje hemoosetljivosti u tumorskim ćelijama otpornim na prihvaćena hemoterapeutska sredstva i za pojačavanje efikasnosti takvih jedinjenja kod maligniteta osetljivih na lekove.

[0148] Primeri imunih senzibilizatora uključuju sledeće, ali nisu ograničeni na: imunomodulaciona sredstva, na primer monoklonska antitela kao što su antitela imunološke kontrolne tačke [npr. CTLA-4 blokirajuća antitela i/ili antitela protiv PD-1 i PD-L1 i/ili PD-L2, na primer ipilimumab (CTLA4), MK-3475 (pembrolizumab, ranije lambrolizumab, anti-PD-1), nivolumab (anti- PD-1), BMS-936559 (anti-PD-L1), MPDL320A, AMP-514 ili MEDI4736 (anti-PD-L1), ili tremelimumab (ranije ticilimumab, CP-675,206, anti-CTLA-4)]; ili inhibitori prenosa signala; ili citokini (kao što su rekombinantni interferoni); ili onkolitički virusi; ili imuni ađuvansi (npr. BCG).

[0149] Imuni senzibilizatori se mogu primenjivati zajedno sa terapeutski efikasnom količinom jednog ili više drugih jedinjenja, uključujući, ali ne ograničavajući se na: jedinjenja pronalaska; jedinjenja koja stimulišu ugradnju imunih senzibilizatora u ciljne ćelije; jedinjenja koja kontrolišu protok terapeutika, hranljivih materija i/ili kiseonika do ciljnih ćelija; terapeutska sredstva koja deluju na tumor ili druga terapeutski efikasna jedinjenja za lečenje kancera ili druge bolesti.

[0150] Za upotrebu u kombinovanoj terapiji sa drugim hemoterapeutskim sredstvom, jedinjenje formule (I) i jedno, dva, tri, četiri ili više drugih terapeutskih sredstava mogu se, na primer, formulisati zajedno u obliku doze koji sadrži dva, tri, četiri ili više terapeutskih sredstava, tj. u jedinstvenoj farmaceutskoj kompoziciji koja sadrži sva sredstva. U alternativnom primeru izvođenja, pojedinačna terapeutska sredstva mogu biti formulisana odvojeno i predstavljena zajedno u obliku kompleta, izborno sa uputstvima za njihovu upotrebu.

[0151] U jednom primeru izvođenja obezbeđena je kombinacija jedinjenja formule (I) sa jednim ili više (npr.1 ili 2) drugih terapeutskih sredstava (npr. sredstava protiv kancera kao što je gore opisano). U dodatnom primeru izvođenja obezbeđena je kombinacija inhibitora Polθ kao što je ovde opisan i inhibitora PI3K/AKT puta izabranog od: apitolisiba, buparlisiba, copanlisiba, piktilisiba, ZSTK-474, CUDC-907, GSK-2636771, LY-3023414, ipatasertiba, afuresertiba, MK-2206, MK-8156, Idelalisiba, BEZ235 (daktolisiba), BYL719, GDC-0980, GDC-0941, GDC-0032 i GDC-0068.

[0152] U sledećem primeru izvođenja obezbeđeno je jedinjenje formule (I) u kombinaciji sa jednim ili više (npr. 1 ili 2) drugih terapeutskih sredstava (npr. sredstava protiv kancera) za upotrebu u terapiji, kao što je profilaksa ili lečenje kancera.

[0153] U jednom primeru izvođenja, farmaceutska kompozicija sadrži jedinjenje formule (I) zajedno sa farmaceutski prihvatljivim nosačem i izborno jednim ili više terapeutskih sredstava.

[0154] U sledećem primeru izvođenja pronalazak se odnosi na upotrebu kombinacije prema pronalasku u proizvodnji farmaceutske kompozicije za inhibiciju rasta tumorskih ćelija.

[0155] U sledećem primeru izvođenja pronalazak se odnosi na proizvod koji sadrži jedinjenje formule (I) i jedno ili više sredstava protiv kancera, kao kombinovani preparat za istovremenu, odvojenu ili sekvencijalnu upotrebu u lečenju pacijenata koji pate od kancera.

PRIMERI

[0156] Pronalazak će sada biti ilustrovan, ali ne i ograničen, pozivanjem na specifične primere izvođenja opisane u sledećim primerima.

Skraćenice

[0157]

aq. Vodeni

dba Diibenzilidenaceton

DCM dihlorometan

DMF Dimetilformamid

DMSO Dimetilsulfoksid

EtOAc Etil acetat

h sat(i)

HPLC Tečna hromatografija visokog učinka

MeCN Acetonitril

MeOH Metanol

min minuti

NMR Nuklearna magnetna rezonanca

Pd/C Paladijum na ugljeniku

PE Petrol etar

Rt Sobna temperatura ili temperatura sredine

zas. Zasićeni rastvor

TBAB Tetrabutilamonijum bromid

TBS terc-Butildimetilsilil

TFA Trifluorosirćetna kiselina

THF Tetrahidrofuran

Tipičan preparativni HPLC postupak

[0158] Za prečišćavanje intermedijera pomoću HPLC tipično su korišćene sledeće kolone; SunFire C18, Xtimate C18, Phenomenex Gemini, Phenomenex Synergi C18, Phenomenex Luna, Waters Xbridge C18, Boston Prime C18 i Shim-pack C18. Tipične korišćene mobilne faze su voda i MeCN, sa kiselim ili baznim aditivima, kao što je mravlja kiselina (0.1% v/v) ili amonijum hidroksid (0.05% v/v). Tipičan postupak je počeo sa 95% vode:5% MeCN i opadajućim polarnim odnosima vode i MeCN tokom perioda od 5 do 12 minuta, sa tipičnim protokom od 25 mL/min. Za HPLC usmerenu masu tipičan maseni spektrometar koji je korišćen bio je Waters 3100 koji je detektovao mase između 100 i 700 g/mol.

Primer 1

(3aR,11aS)-6,10-dimetil-1-(6-metil-4-(trifluorometil)piridin-2-il)-5-(2-(4-metilpiperazin-1-il)etil)-1,3a,4, 5,10,11a-heksahidro-2H-benzo[b]pirolo[2,3-f][1,4]diazocin-2,11(3H)-dion

[0159]

[0160] Korak i. U smešu 2-hloro-6-nitroanilina (20.0 g, 116 mmol), trietilamina (23.4 g, 231 mmol) i 4-dimetilaminopiridina (1.42 g, 11.5 mmol) u DCM (200 mL) dodat je di-terc-butil dikarbonat (55.6 g, 254 mmol). Reakciona smeša je mešana na 25 °C tokom 16 h. Po završetku, smeša je razblažena vodom (300 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom limunske kiseline (100 mL), fiziološkim rastvorom (3 x 300 mL), osušeni preko Na2SO4i isparavani da bi se dobio tercbutil (terc-butoksikarbonil)(2-hloro-6-nitrofenil)karbamat (43.0 g, 99% prinos) kao žuta čvrsta supstanca, koja je korišćena bez prečišćavanja.

[0161]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.95 (dd, J = 1.6, 8.4 Hz, 1H), 7.73 (dd, J = 1.6, 8.0 Hz, 1H), 7.45 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 1.40 (s, 18H).

[0162] Korak ii. U rastvor terc-butil (terc-butoksikarbonil)(2-hloro-6-nitrofenil)karbamata (53.0 g, 142 mmol) u THF (500 mL) je dodat 5% Pt-V/C (5 g). Reakciona smeša je mešana na 20 °C tokom 20 h pod H2atmosferom (15 psi). Po završetku, reakcija je filtrirana i filtrat je isparavan da bi se dobio terc-butil (2-amino-6-hlorofenil)(terc-butoksikarbonil)karbamat (48.3 g, 99% prinos) kao bela čvrsta supstanca, koja je korišćena bez daljeg prečišćavanja.

[0163]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.04 - 6.99 (m, 1H), 6.78 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.62 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 3.84 (br s, 2H), 1.42 (s, 18H).

[0164] Korak iii. Smeša terc-butil (2-amino-6-hlorofenil)(terc-butoksikarbonil)karbamata (46.5 g, 135 mmol) i K2CO3(37.4 g, 271 mmol) u MeOH (500 mL) je mešana na 60 °C tokom 3 h. Po završetku, smeša je isparavana da bi se uklonio MeOH, razblažena vodom (300 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 200 mL). Kombinovani organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom (2 x 200 mL), osušen preko Na2SO4i isparavan da bi se dobio terc-butil (2-amino-6-hlorofenil)karbamat (32.3 g, 98% prinos) kao žuta čvrsta supstanca, koja je korišćena bez daljeg prečišćavanja.

[0165]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.00 - 6.95 (m, 1H), 6.81 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.66 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.21 (br s, 1H), 3.96 (br s, 2H), 1.48 (s, 9H).

[0166] Korak iv. U rastvor natrijum metoksida (33.3 g, 618 mmol) u MeOH (150 mL) je dodat terc-butil (2-amino-6-hlorofenil)karbamat (15.0 g, 61.8 mmol) i paraformaldehid (2.78 g, 92.7 mmol). Smeša je mešana na 0 °C tokom 12 h, nakon čega je dodat NaBH4(11.6 g, 309 mmol) i reakciona smeša je mešana na 20 °C tokom dodatna 2 h. Po završetku, smeša je ugašena vodom (20 mL) i isparavana da bi se uklonio MeOH. Vodena smeša je razblažena vodom (200 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 200 mL), osušeni preko Na2SO4, prečišćeni hromatografijom na koloni (PE/EtOAc = 5/1) da bi se dobio terc-butil (2-hloro-6-(metilamino)fenil)karbamat (7.8 g, 49% prinos) kao bela čvrsta supstanca.

[0167]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.10 (br s, 1H), 7.06 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 6.62 (dd, J = 8.0, 1.2 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.30 (br s, 1H), 2.70 (d, J = 5.2 Hz, 3H), 1.44 (s, 9H).

[0168] Korak v. U rastvor terc-butil 2-((difenilmetilen)amino)acetata (CAS: 81477-94-3; 100 g, 339 mmol) i dimetil fumarata (CAS: 624-49-7; 73.2 g, 508 mmol) u EtOAc (1 L) dodat je (S)-2-((2,3-bis(dicikloheksilamino)cikloprop-2-en-1-iliden)amino)propan-1-ol (CAS: 1808186-23-3, pripremljen kako je opisano u J. S. Bander et. al. Chem. Sci.2015, 6, 1537; 18.5 g, 33.9 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 48 h. Po završetku, reakciona smeša je isparavana i sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (heksan/EtOAc = 4/1) da bi se dobio 1-(terc-butil) 2,3-dimetil (1S,2S)-1-((difenilmetilen)amino)propan-1,2,3-trikarboksilat kao bezbojno ulje (140 g, 94% prinos).

[0169] Korak vi. U rastvor 1-(terc-butil) 2,3-dimetil (1S,2S)-1-((difenilmetilen)amino)-propan-1,2,3-trikarboksilata (140 g, 318.5 mmol) u THF (1.4 L) je dodat 15% tež./tež. vodeni rastvor limunske kiseline (1.4 L). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 48 h. Po završetku, reakcija je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NaHCOs i ekstrahovana sa EtOAc (3 × 1 L). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko Na2SO4i isparavana. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (heksan/EtOAc = 3/7) da bi se dobio 2-(terc-butil) 3-metil (2S,3S)-5-oksopirolidin-2,3-dikarboksilat kao bela čvrsta supstanca (70 g, 90% prinos).

[0170]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 6.63 (br s, 1H), 4.46 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.37 (dt, J = 6.0, 8.0, 9.2 Hz, 1H), 2.76 - 2.55 (m, 2H), 1.47 (s, 9H).

[0171] Korak VII. Smeša 2-(terc-butil) 3-metil (2S,3S)-5-oksopirolidin-2,3-dikarboksilata (40.0 g, 164 mmol) i TFA (250 mL) je mešana na 25 °C tokom 12 h pod atmosferom N2. Po završetku, reakciona smeša je isparavana. Ostatak je triturisan (PE/EtOAc = 10/1) tokom 60 min. Suspenzija je filtrirana da bi se dobila (2S,3S)-3-(metoksikarbonil)-5-oksopirolidin-2-karboksilna kiselina (27.0 g, 87% prinos) kao bela čvrsta supstanca.

[0172]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13.13 (br s, 1H), 8.15 (s, 1H), 4.26 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.37 - 3.33 (m, 1H), 2.56 - 2.52 (m, 1H), 2.36 - 2.32 (m, 1H).

[0173] Korak VIII. U rastvor (2S,3S)-3-(metoksikarbonil)-5-oksopirolidin-2-karboksilne kiseline (3.64 g, 19.4 mmol) u MeCN (40 mL) dodat je Ghosez-ov reagens (CAS: 26189-59-3; 3.12 g, 23.3 mmol) na 0 °C. Smeša je mešana na 20 °C tokom 1 h, nakon čega je smeša dodavana ukapavanjem u smešu terc-butil (2-hloro-6-(metilamino)fenil)karbamata (pripremljen kako je opisano u koraku iv; 5 g, 19.4 mmol) i N,N-dimetilpiridin-2-amina (4.76 g, 38.9 mmol) u MeCN (40 mL) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na 0 °C 30 min. Po završetku, smeša je razblažena vodom (20 mL) i isparavana da bi se uklonio MeCN. Ostatak je dalje razblažen vodom (60 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (3 x 80 mL). Kombinovani slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (200 mL), osušeni preko Na2SO4, isparavani i prečišćeni hromatografijom na koloni (EtOAc) da bi se dobio metil (2S,3S)-2-((2-((tercbutoksikarbonil)amino)-3-hlorofenil)(metil)karbamoil)-5-oksopirolidin-3-karboksilat (6.5 g, 71% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.

[0174] m/z ES+ [M+H]<+>425.9.

[0175] Korak ix. Smeša metil (2S,3S)-2-((2-((terc-butoksikarbonil)amino)-3-hlorofenil)(metil)karbamoil)-5-oksopirolidin-3-karboksilata (11.4 g, 26.8 mmol), 2-bromo-6-metil-4-(trifluorometil)piridina (CAS: 451459- 17-9; 8.35 g, 34.8 mmol), Pd2(dba)3(2.45 g, 2.7 mmol), Xantphos (3.10 g, 5.4 mmol) i K2CO3(11.1 g, 80.3 mmol) u 1,4-dioksanu (120 mL) je degaziran i pročišćen sa N2tri puta. Reakciona smeša je mešana na 100 °C tokom 3 h pod atmosferom N2. Po završetku, smeša je isparavana, razblažena vodom (300 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 350 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (600 mL), osušeni preko Na2SO4, isparavani i prečišćeni hromatografijom na koloni (PE/EtOAc = 3/1) da bi se dobio metil (2S,3S)-2-((2-((terc-butoksikarbonil)amino)-3-hlorofenil)(metil)karbamoil)-1-(6-metil-4-(trifluorometil)piridin-2-il)-5-oksopirolidin-3-karboksilat (11.0 g, prinos 66%) kao žuta čvrsta supstanca.

[0176] m/z ES+ [M+H]<+>585.2;<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.69 - 8.55 (m, 1H), 7.59 -7.54 (m, 1H), 7.39 - 7.33 (m, 1H), 7.16 - 7.10 (m, 2H), 5.30 - 5.06 (m, 1H), 3.83 - 3.70 (m, 2H), 3.59 - 3.53 (m, 3H), 3.31 - 3.22 (m, 3H), 3.15 - 3.10 (m, 1H), 2.92 - 2.76 (m, 1H), 2.74 - 2.58 (m, 3H), 1.52 - 1.44 (m, 9H).

[0177] Korak x. U rastvor metil (2S,3S)-2-((2-((terc-butoksikarbonil)amino)-3-hlorofenil)(metil)karbamoil)-1-(6-metil-4-(trifluorometil)piridin-2-il)-5-oksopirolidin-3-karboksilata (19.3 g, 32.9 mmol) u THF (200 mL) i MeOH (20 mL) su polako dodavani NaBH4(2.50 g, 65.9 mmol) u porcijama na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na 25 °C 1 h. Po završetku, smeša je polako ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (150 mL) i vodena smeša je mešana 30 min. Smeša je isparavana, razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 250 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (600 mL), osušeni preko Na2SO4i isparavani da bi se dobio terc-butil (2-hloro-6-((2S,3S)-3-(hidroksimetil)-N-metil-1-(6-metil-4-(trifluorometil)piridin-2-il)-5-oksopirolidin-2-karboksamido)fenil)karbamat (18.3 g, sirov) kao braon čvrsta supstanca, koja je korišćena bez daljeg prečišćavanja.

[0178] m/z ES+ [M+H]<+>557.1.

[0179] Korak xi. U rastvor terc-butil (2-hloro-6-((2S,3S)-3-(hidroksimetil)-N-metil-1-(6-metil-4-(trifluorometil)piridin-2-il)-5-oksopirolidin-2-karboksamido)fenil)karbamata (18.3 g, 32.8 mmol) u DCM (200 mL) je dodat trietilamin (13.3 g, 131 mmol), posle čega metansulfonil hlorid (6.02 g, 52.5 mmol) je dodat ukapavanjem na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 1 h. Po završetku, smeša je ugašena vodom (200 mL). Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je kasnije ekstrahovan sa EtOAc (2 x 300 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (800 mL), osušeni preko Na2SO4i isparavani da se dobije ((2S,3S)-2-((2-((terc-butoksikarbonil)amino)-3-hlorofenil)(metil)karbamoil)-1-(6-metil-4-(trifluorometil)piridin-2-il)-5-oksopirolidin-3-il)metil metansulfonat (20.5 g, sirov) kao braon čvrsta supstanca, koja je korišćena bez daljeg prečišćavanja.

[0180] m/z ES+ [M+H]<+>635.2.

[0181] Korak xii. U rastvor ((2S,3S)-2-((2-((terc-butoksikarbonil)amino)-3-hlorofenil)(metil)karbamoil)-1-(6-metil-4-(trifluorometil)piridin-2-il)-5-oksopirolidin-3-il)metil metansulfonata (20.5 g, 32.2 mmol) u N-metil-2-pirolidonu (250 mL) je dodat K3PO4(20.5 g, 96.8 mmol). Reakciona smeša je mešana na 60 °C tokom 12 h. Po završetku, smeša je razblažena vodom (1200 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 800 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 x 1000 mL), fiziološkim rastvorom (2 x 1000 mL), osušeni preko Na2SO4, isparavni i prečišćeni hromatografijom na koloni (PE/EtOAc = 3/1) da bi se dobio terc-butil (3aR,11aS)-6-hloro-10-metil-1-(6-metil-4-(trifluorometil)piridin-2-il)-2,11-diokso-1,2,3,3a,4,10,11,11a-oktahidro-5H-benzo[b]pirolo[2,3-f][1,4]diazocin-5-karboksilat (14.0 g, 76% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.

[0182] m/z ES+ [M+H]<+>539.1;<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.37 - 8.27 (m, 1H), 7.54 -7.48 (m, 1H), 7.46 - 7.36 (m, 2H), 7.05 (s, 1H), 4.74 - 4.64 (m, 2H), 3.34 - 3.30 (m, 3H), 3.01 - 2.91 (m, 1H), 2.83 - 2.62 (m, 2H), 2.49 (s, 3H), 2.30 - 2.20 (m, 1H), 1.50 - 1.32 (m, 9H).

[0183] Korak xiii. U rastvor terc-butil (3aR,11aS)-6-hloro-10-metil-1-(6-metil-4-(trifluorometil)piridin-2-il)-2,11-diokso-1,2,3,3a,4,10,11,11a-oktahidro-5H-benzo[b]pirolo[2,3-f][1,4]diazocin-5-karboksilata (13.5 g, 25.0 mmol) u DCM (120 mL) je dodat TFA (36.9 g, 324 mmol). Reakciona smeša je mešana na 20 °C tokom 5 h. Po završetku, smeša je isparavana, ostatak je razblažen sa DCM (100 mL) i bazifikovana do pH 8 zasićenim vodenim rastvorom NaHCOs. Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je dalje ekstrahovan sa EtOAc (2 x 150 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (300 mL), osušeni preko Na2SO4i isparavani da se dobije (3aR,11aS)-6-hloro-10-metil-1-(6-metil-4-(trifluorometil)piridin-2-il)-1,3a,4,5,10,11a-heksahidro-2H-benzo[b]pirolo[2,3-f][1,4]diazocin-2,11(3H)-dion (10.9 g, sirov) kao žuta čvrsta supstanca, koja je korišćena bez daljeg prečišćavanja.

[0184] m/z ES+ [M+H]<+>439.1;<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm δ 8.37 (s, 1H), 7.53 - 7.50 (m, 1H), 7.37 - 7.36 (m, 1H), 7.31 - 7.29 (m, 1H), 7.09 (m, 1H), 4.78 (d, J =8.8 Hz, 1H), 3.78 -3.74 (m, 1H), 3.45 (br s, 1H), 3.38 (s, 3H), 2.86 - 2.78 (m, 3H) 2.53 (s, 3H), 2.32 - 2.26 (m, 1H).

[0185] Korak xiv. U smešu (3aR,11aS)-6-hloro-10-metil-1-(6-metil-4-(trifluorometil)piridin-2-il)-1,3a,4,5,10,11a-heksahidro-2H-benzo[b]pirolo[2,3-f][1,4]diazocin-2,11(3H)-diona (11.3 g, 25.7 mmol), Na2CO3(8.19 g, 77.2 mmol) i TBAB (830 mg, 2.58 mmol) u DMF (110 mL) je dodat alil bromid (15.5 g, 128 mmol). Reakciona smeša je mešana na 100 °C tokom 12 h. Po završetku, smeša je razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 x 150 mL), fiziološkim rastvorom (2 x 100 mL), osušeni preko Na2SO4, isparavani i prečišćeni hromatografijom na koloni (PE/EtOAc = 3/1) da se dobije (3aR,11aS)-5-alil-6-hloro-10-metil-1-(6-metil-4-(trifluorometil)piridin-2-il)-1,3a,4,5,10,11a-heksahidro-2H-benzo[b]pirolo[2,3-f][1,4]diazocin-2,11(3H)-dion (12.0 g, 97% prinos) kao sivobela čvrsta supstanca. m/z ES+ [M+H]<+>479.3;<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.33 (s, 1H), 7.51 (dd, J = 8.0, 1.6 Hz, 1H), 7.32 - 7.27 (m, 2H), 7.05 (s, 1H), 5.79 - 5.70 (m, 1H), 5.23 - 5.18 (m, 1H), 5.10 - 5.07 (m, 1H), 4.61 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 3.70 - 3.25 (m, 3H), 3.37 (s, 3H), 2.99 - 2.89 (m, 2H), 2.75 - 2.68 (m, 1H), 2.49 (s, 3H), 2.44 - 2.36 (m, 1H).

[0186] Korak xv. U smešu (3aR,11aS)-5-alil-6-hloro-10-metil-1-(6-metil-4-(trifluorometil)piridin-2-il)-1,3a,4,5,10,11a-heksahidro-2H-benzo[b]pirolo[2,3-f][1,4]diazocin-2,11(3H)-diona (4.45 g, 9.29 mmol) i NalO4(5.96 g, 27,8 mmol) u THF (50 mL) i vodi (10 mL) je dodat OsO4(236 mg, 0.93 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 2 h. Po završetku, reakciona smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom Na2S2O3(50 mL) i mešana na 25 °C tokom dodatnih 30 min. Smeša je razblažena vodom (200 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 100 mL). Organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom Na2S2O3(2 x 100 mL), zasićenim vodenim rastvorom NaHCOs (2 x 100 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL). Organski sloj je osušen preko Na2SO4i isparavan da se dobije 2-((3aR,11aS)-6-hloro-10-metil-1-(6-metil-4-(trifluorometil)piridin-2-il)-2,11-diokso-1,2,3,3a,4,10,11,11a -oktahidro-5H-benzo[b]pirolo[2,3-f][1,4]diazocin-5-il)acetaldehid (4.4 g, 98% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.

[0187] m/z ES+ [M+H]<+>481.0;<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 9.66 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.51 - 7.45 (m, 1H), 7.37 - 7.33 (m, 2H), 7.06 (s, 1H), 4.67 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 3.87 - 3.71 (m, 2H), 3.61 - 3.51 (m, 1H), 3.37 (s, 3H), 3.19 - 3.10 (m, 1H), 3.04 - 2.93 (m, 1H), 2.78 - 2.70 (m, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.28 - 2.19 (m, 1H).

[0188] Korak xvi. U smešu 2-((3aR,11aS)-6-hloro-10-metil-1-(6-metil-4-(trifluorometil)piridin-2-il)-2,11-diokso-1,2,3,3a,4,10,11,11a-oktahidro-5H-benzo[b]pirolo[2,3-f][1,4]diazocin-5-il)acetaldehida (50 mg, 0.10 mmol), 1-metilpiperazina (11 mg, 0.11 mmol) i 4 Å molekulskih sita (10 mg) u MeOH (2 mL) dodata je sirćetna kiselina (31 mg, 0.52 mmol). Smeša je mešana na 20 °C tokom 30 min, nakon čega je dodat NaBH3CN (13 mg, 0.21 mmol). Reakciona smeša je mešana na 20 °C tokom dodatnih 30 min. Po završetku, reakciona smeša je ugašena vodom (0.1 mL) i filtrirana. Filtrat je isparavan i prečišćen preparativnom HPLC da bi se dobilo (3aR,11aS)-6-hloro-10-metil-1-(6-metil-4-(trifluorometil)piridin-2-il)-5-(2-(4-metilpiperazin-1-il)etil)-1,3a,4,5,10,11a-heksahidro-2H-benzo[b]pirolo[2,3-f][1,4]diazocin-2,11(3H)-dion (29 mg, 46% prinos) kao sivobela čvrsta supstanca.

[0189] m/z ES+ [M+H]<+>565.2;<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.33 (s, 1H), 7.47 - 7.42 (m, 1H), 7.35 - 7.28 (m, 2H), 7.05 (s, 1H), 4.61 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 3.63 - 3.51 (m, 1H), 3.37 (s, 3H), 3.24 - 3.08 (m, 2H), 3.03 - 2.94 (m, 2H), 2.83 - 2.54 (m, 8H), 2.49 (s, 3H), 2.48 - 2.39 (m, 6H), 2.26 - 2.17 (m, 1H).

[0190] Korak xvii. Smeša (3aR,11aS)-6-hloro-10-metil-1-(6-metil-4-(trifluorometil)piridin-2-il)-5-(2-(4-metilpiperazin-1-il)etil)-1,3a,4,5,10,11a-heksahidro-2H-benzo[b]pirolo[2,3-f][1,4]diazocin-2,11(3H)-diona (3.5 g, 6.19 mmol), metilborne kiseline (11.1 g, 185 mmol), XPhos-Pd-G2 (974 mg, 1.24 mmol) i Cs2CO3(6.05 g, 18.5 mmol) u toluenu (55 mL) je degazirana i pročišćena sa N23 puta. Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 12 h pod atmosferom N2. Smeša je filtrirana i filtrat je isparavan. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (Al2O3, EtOAc/MeOH=15/1) nakon čega je izvršena fleš hromatografija reverzne faze (voda (0.1% NH4OH)/MeCN) dajući (3aR,11aS)-6,10-dimetil-1-(6-metil-4-(trifluorometil)piridin-2-il)-5-(2-(4-metilpiperazin-1-il)etil)-1,3a,4,5,10,11a-heksahidro-2H-benzo[b]pirolo[2,3-f][1,4]diazocin-2,11(3H)-dion (5.0 g, 74% prinos) kao belu čvrstu supstancu.

[0191] m/z ES+ [M+H]<+>545.3;<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.33 (s, 1H), 7.27 - 7.18 (m, 3H), 7.04 (s, 1H), 4.73 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.71 - 4.68 (m, 1H), 3.65 - 3.59 (m, 1H), 3.37 (s, 3H), 3.20 - 2.95 (m, 3H), 2.78 - 2.70 (m, 2H), 2.48 - 2.30 (m, 18H), 2.25 - 2.15 (m, 1H).

BIOLOŠKI PODACI

WT KIanaliza Polθ domen polimeraze

[0192] PicoGreen analiza je korišćena za merenje KIvrednosti reverzibilnih jedinjenja koja inhibiraju aktivnost Polθ in vitro.

[0193] Domen humane Polθ polimeraze (aa1820-2590) je eksprimiran u E. Coli, prečišćen, podeljen na alikvote i uskladišten na -80 °C dok ne bude potreban. Polθ supstrat je generisan iz 1.2:1 mešavine kratke DNK II prema dugoj DNK II da bi se dobila konačna koncentracija od 20 mM supstrata u puferu za spajanje (20 mM Tris pH 7.5, 50 mM NaCl). Supstrat je zagrevan u alikvotima od 50 mL do 95 °C u grejnom bloku 5 minuta pre nego što se grejni blok isključio, reakcija je ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu i čuvana na -20 °C sok ne bude potreban.

[0194] Merenja analize su obavljena sa 1X puferom koji sadrži 25 mM Tris pH 7.5, 12.5 mM NaCl, 0.5 mM NaCl, 5% (v/v) glicerol, 0.01 % v/v Triton x-100, 0.1 mg/ml BSA, 1 mL DTT. Test jedinjenja su pripremljena razblaženjem u 100% DMSO da bi se dobilo 12 µM intermedijerne zalihe od svakog (100x konačna gornja koncentracija).100 nL 23x 1:1.5-strukih serijskih razblaženja i samo DMSO kontrola je dozirana upotrebom Tecan dozatora u Greiner crnim pločama male zapremine sa 384 bunarčića (šifra proizvoda 784076). Koncentracija DMSO je održavana na 1% finalne zapremine testa ponovnim punjenjem DMSO.

[0195] 2x radna zaliha supstrata (200 nM DNK supstrata i 100 µM dNTP) i enzim (0.312 nM PolΘ) su pripremljeni u puferu za analizu. 5 µL / bunarčiću 2x rastvora kako enzima tako i supstrata je dozirano upotrebom Tempest dispenzera (Formulatrix) u ploče za analizu koje su prethodno dozirane sa jedinjenjem da bi se dobila konačna koncentracija analize od 100 nM DNK supstrata, 50 µM dNTP i 0.156 nM Polθ6. Da bi se reakcija zaustavila, dodato je 5 µL rastvora koji sadrži 25 mM Tris-HCl pH 7.5 i 20 mM EDTA u 6 vremenskih tačaka (t=0, 15, 30, 60, 90, 120, 150, 180 min) upotrebom Tempest-ove funkcije vremenskog kašnjenja. Ploče su bile pokrivene tokom vremena da bi se sprečilo isparavanje. Nakon završetka testa, 5 µL reagensa za detekciju (25 mM Tris-HCl pH 7.5 i 2.5% (v/v) PicoGreen) je stavljeno u bunarčiće upotrebom Tempest tečnosti za rukovanje (Formulatrix) i ploče su naknadno očitane na CLARIOstar Plus (BMG Labtech) upotrebom podrazumevanih optičkih podešavanja za fluorescein i podešavanja automatskog pojačanja/fokusa.

[0196] Sve analize podataka su obavljene upotrebom GraphPad Prism V.8 (GraphPad Software Inc, San Diego, CA). Podaci o vremenskom toku za svaku koncentraciju inhibitora su prilagođeni modelu linearne regresije u GraphPad Prism. Sve vremenske tačke u kojima kontrolna (samo DMSO) reakcija više nije bila linearna su isključene iz analize. Početne stope (nagibi) dobijene iz linearne regresije su zatim nacrtane u odnosu na koncentraciju inhibitora i prilagođene modelu promenljivog nagiba inhibitora naspram odgovora (četiri parametra) na GraphPad Prism da bi se odredile KIvrednosti.

[0197] Jedinjenje Primera 1 je testirano u gore pomenutoj WT KIanalizi domena Polθ i rezultati su prikazani u sledećoj tabeli:

Claims (7)

1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule (I):

   ili tautomerni ili stereohemijski izomerni oblik, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.
2. 2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, koje je slobodna baza jedinjenja formule (I) i to je (3aR,11aS)-6,10-dimetil-1-(6-metil-4-(trifluorometil)piridin-2-il)-5-(2-(4-metilpiperazin-1-il)etil)-1,3a,4,5,10,11a-heksahidro-2H-benzo[b]pirolo[2,3-f][1,4]diazocin-2,11(3H)-dion (E1).
3. 3. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje formule (I) prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2.
4. 4. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje formule (I) prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2, u kombinaciji sa jednim ili više terapeutskih sredstava.
5. 5. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2 za upotrebu u terapiji.
6. 6. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2 za upotrebu u profilaksi ili lečenju kancera.
7. 7. Postupak za dobijanje jedinjenja formule (I) kako je definisano u patentnom zahtevu 1, koji sadrži: (a) interkonverziju jedinjenja formule (II):

   u jedinjenje formule (I); i (b) izborno formiranje farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja formule (I). Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Kneginje Ljubice 5, 11000 Beograd 47