[go: up one dir, main page]

RS64597B1 - Prolekovi glutaminskih analoga - Google Patents

Prolekovi glutaminskih analoga

Info

Publication number
RS64597B1
RS64597B1 RS20230850A RSP20230850A RS64597B1 RS 64597 B1 RS64597 B1 RS 64597B1 RS 20230850 A RS20230850 A RS 20230850A RS P20230850 A RSP20230850 A RS P20230850A RS 64597 B1 RS64597 B1 RS 64597B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
cancer
mmol
compound
group
don
Prior art date
Application number
RS20230850A
Other languages
English (en)
Inventor
Barbara Slusher
Rana Rais
Lukas Tenora
Pavel Majer
Andrej Jancarik
Original Assignee
Univ Johns Hopkins
Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry As Cr V V I
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Univ Johns Hopkins, Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry As Cr V V I filed Critical Univ Johns Hopkins
Publication of RS64597B1 publication Critical patent/RS64597B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C281/00—Derivatives of carbonic acid containing functional groups covered by groups C07C269/00 - C07C279/00 in which at least one nitrogen atom of these functional groups is further bound to another nitrogen atom not being part of a nitro or nitroso group
    • C07C281/20—Derivatives of carbonic acid containing functional groups covered by groups C07C269/00 - C07C279/00 in which at least one nitrogen atom of these functional groups is further bound to another nitrogen atom not being part of a nitro or nitroso group the two nitrogen atoms of the functional groups being doubly-bound to each other, e.g. azoformamide
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/10—Indoles; Hydrogenated indoles with substituted hydrocarbon radicals attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
    • C07F9/22—Amides of acids of phosphorus
    • C07F9/24—Esteramides
    • C07F9/2454—Esteramides the amide moiety containing a substituent or a structure which is considered as characteristic
    • C07F9/2458—Esteramides the amide moiety containing a substituent or a structure which is considered as characteristic of aliphatic amines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C227/00—Preparation of compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C227/14—Preparation of compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton from compounds containing already amino and carboxyl groups or derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C245/00—Compounds containing chains of at least two nitrogen atoms with at least one nitrogen-to-nitrogen multiple bond
    • C07C245/12—Diazo compounds, i.e. compounds having the free valencies of >N2 groups attached to the same carbon atom
    • C07C245/14—Diazo compounds, i.e. compounds having the free valencies of >N2 groups attached to the same carbon atom having diazo groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton
    • C07C245/18—Diazo compounds, i.e. compounds having the free valencies of >N2 groups attached to the same carbon atom having diazo groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/06—Esters of carbamic acids
    • C07C271/08—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C271/10—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C271/22—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/10—Indoles; Hydrogenated indoles with substituted hydrocarbon radicals attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/18—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/10—Indoles; Hydrogenated indoles with substituted hydrocarbon radicals attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/18—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D209/20—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals substituted additionally by nitrogen atoms, e.g. tryptophane
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/80—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/84—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/90—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D263/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings
    • C07D263/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings
    • C07D263/04—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D263/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings
    • C07D263/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings
    • C07D263/08—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D263/16—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D263/18—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D309/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings
    • C07D309/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D309/08—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D309/10—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
    • C07D317/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 not condensed with other rings
    • C07D317/32—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 not condensed with other rings with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D317/34—Oxygen atoms
    • C07D317/36—Alkylene carbonates; Substituted alkylene carbonates
    • C07D317/38—Ethylene carbonate
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
    • C07D317/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 not condensed with other rings
    • C07D317/32—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 not condensed with other rings with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D317/34—Oxygen atoms
    • C07D317/40—Vinylene carbonate; Substituted vinylene carbonates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
    • C07D473/26—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with an oxygen, sulphur, or nitrogen atom directly attached in position 2 or 6, but not in both
    • C07D473/32—Nitrogen atom
    • C07D473/34—Nitrogen atom attached in position 6, e.g. adenine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6561—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings
    • C07F9/65616—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings containing the ring system having three or more than three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members, e.g. purine or analogs
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/20—Carbocyclic rings
    • C07H15/203—Monocyclic carbocyclic rings other than cyclohexane rings; Bicyclic carbocyclic ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/16—Purine radicals
    • C07H19/20—Purine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
    • C07H19/207—Purine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids the phosphoric or polyphosphoric acids being esterified by a further hydroxylic compound, e.g. flavine adenine dinucleotide or nicotinamide-adenine dinucleotide
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
    • C07K5/06156—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic and Trp-amino acid; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)

Description

Opis
OSNOV PRONALASKA
[0001] Pristup koji uključuje upotrebu prolekova je dobro ustanovljena strategija za poboljšavanje fizičko-hemijskih, biofarmaceutskih i farmakokinetičkih svojstava molekula potencijalnih lekova. Približno 5-7% lekova čija se upotreba odobri širom sveta, predstavljaju prolekove sa godišnjom zaradom od 11.2 milijarde dolara u 2013. godini. Najveći broj prolekova su jednostavni hemijski derivati originalnog molekula. Estarski prolekovi, koji su najčešći prolekovi, predstavljaju 49% svih prolekova na tržištu. Razlozi za popularnost estarskih prolekova uključuju njihovu u principu jednostavnu sintezu, njihovu poboljšanu lipofilnost i membransku permeabilnost, kao i sveprisutnost esteraza. Jedan primer pristupa kada se pravi estarski prolek je da se kisela grupa(e) blokira lipofilnim alkil ili alkoksimetil estrima (tj., pivaloiloksimetilom (POM) ili propiloksi-karboniloksimetilom (POC); npr., enalapril, adefovir). Drugi pristup je da se kisela grupa(e) blokiraju amino kiselinama kako bi se napravili amidi koje mogu da prepoznaju amidaze/peptidaze u plazmi da bi ih hidrolizovale ili napravile od njih supstrate za transportera, kao što je peptidni transporter 1 (PEPT1) (npr., pomaglumetad metionil, valaciklovir).
[0002] U brojnim objavljenim pretkliničkim studijama i u nekoliko kliničkih studija, pokazano je da antagonisti glutamina, kao što su 6-diazo-5-okso-L-norleucin (DON) i azaserin imaju široku antivirusnu (Antiviral Res. 1997; 33(3): 165-75; Antiviral Res. 1994; 25(3-4):269-79), antiinfektivnu (J. Bacteriol. 1965; 89:1348-53), anti kancersku (videti, npr., Yoshioka et al., 1992; Tokushima J. Exp. Med.39(1-2):69-76), anti-inflamatornu i imunosupresivnu aktivnost (Kulcsar et al., 2014; 111:16053-58; Maciolek et al., 2014; Curr Opin Immunol. 27:60-74; Carr et al., 2010; J Immunol. 185:1037-1044; Colombo et al., 2010; Proc Natl Acad Sci USA. 107: 18868-73), kao i da inhibiraju konvulzije (Proc R Soc Lond B Biol Sci. 1984 Apr 24; 221(1223):145 68), multiplu sklerozu (Tohoku, J. Exp. Med.2009; 217(2):87-92), epilepsiju i virusni encefalitis (J. Neurovirol. 2015 Apr; 21(2):159-73. doi: 10.1007/s13365-015-0314-6). Međutim, klinički razvoj ovih glutaminskih antagonista ometa pojava ozbiljne toksičnosti (npr., dozno ograničavajuće gastrointestinalne toksičnosti, kao što su oralni mukozitis, želudačno krvarenje, mučnina i povraćanje, bol u abdomenu, leukopenija, trombocitopenija, i slično) prilikom njihove primene u nivoima terapeutskih doza.
[0003] Prethodni pokušaji da se ublaži ozbiljna toksičnost povezana sa antagonistima glutamina, kao što je DON, bili su neuspešni. Na primer, podela dnevne doze i primena DON jedinjenja na svakih četiri do šest sati očigledno je udvostručila potencijal za toksičnost DON jedinjenja (MgGill, et al., 1957). U drugom primeru, razvoj tretmana koji uključuje doziranje DON jedinjenja sa glutaminazom, kako bi se redukovao glutamin u plazmi tako da doza DON jedinjenja može da se smanji, zaustavljen je nakon objavljivanja kliničkog ispitivanja.
[0004] WO2014/138391 A1 opisuje DON za upotrebu u lečenju kancera.
KRATAK OPIS PRONALASKA
[0005] Predmet koji je ovde otkriven obezbeđuje prolekove antagonista glutamina, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i estre. Ovde otkriveni predmet obuhvata, ali ne zahteva specifično zaštitu za prolek antagonista glutamina, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili estar, pri čemu prolek ima strukturu formule (I):
pri čemu: X je odabran iz grupe koja se sastoji od veze, -O- i -(CH2)n- , pri čemu je n ceo broj odabran iz grupe koja se sastoji od 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 i 8; R1je odabran iz grupe koja se sastoji od H i prve grupe koja formira prolek, koja može da formira so ili estar; i R2je H ili druga grupa koja formira prolek, koja može da formira amidnu vezu, karbamatnu vezu, fosforamidatnu vezu ili fosforodiamidatnu vezu sa azotom koji je pored R2; R2' je odabran iz grupe koja se sastoji od H, C1-C6alkila, supstituisanog C1-C6alkila, ili R2i R2' zajedno formiraju strukturu prstena koja sadrži -C(=O)-G-C(=O)-, gde je G je odabran iz grupe koja se sastoji od C1-C8alkilena, C1-C8heteroalkilena, C5-C8cikloalkilena, C6-C12arilena, C5-C14heteroarilena, bivalentnog C4-C10heterocikla, od kojih svaki može da bude opciono supstituisan; ili R1i R2' zajedno formiraju 4-do 6-člani heterociklični prsten koji sadrži atom kiseonika pored R1i atom azota pored R2'; pod uslovom da jedinjenje ima najmanje jednu grupu koja formira prolek, odabranu iz grupe koja se sastoji od prve i druge hemijske grupe koja formira prolek.
[0006] U skladu sa pronalaskom za koji se traži zaštita, obezbeđeno je jedinjenje koje je:
[0007] Takođe je obezbeđeno, u skladu sa pronalaskom, jedinjenje koje je izopropil 2-(2-acetamido-3-(1H-indol-3-il)propanamido )-6-diazo-5-oksoheksanoat, ili njegov stereoizomer.
[0008] U drugim aspektima, predmetni pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje pronalaska, i farmaceutski prihvatljiv nosač, razblaživač ili ekscipijens.
[0009] Ovde otkriveni predmet obuhvata, ali ne zahteva, metod za lečenje bolesti ili stanja, metod koji obuhvata davanje subjektu kome je potrebno lečenje, jedinjenje formule (I), ili njegovog farmaceutskog sastava, u količini efikasnoj za lečenje bolesti ili stanja. Bolest ili stanje može biti izabrano iz grupe koju čine infekcija, kancer, autoimuna bolest, inflamatorna bolest, i neurodegenerativna ili neurološka bolest.
[0010] U još jednom aspektu, predmet za koji se traži zahtev obezbeđuje jedinjenje pronalaska, ili njegovu farmaceutsku kompoziciju, za upotrebu u lečenju kancera u predmetu.
[0011] Ovde otkriveni predmet takođe uključuje, ali ne zahteva posebno, jedinjenje formule (I), ili njen farmaceutski sastav, za upotrebu u lečenju bolesti ili stanja, poželjno bolesti ili stanja koje je odabrana iz grupe koja se sastoji od infekcije, raka, autoimune bolesti, inflamatorne bolesti, neurodegenerativne ili neurološke bolesti.
[0012] Ovde otkriven predmet takođe uključuje, ali ne zahteva zaštitu za, jedinjenje formule (I) ili njegovu farmaceutsku kompoziciju, za upotrebu u lečenju prekomerne i/ili aberantne aktivnosti glutamina.
[0013] Budući da su neki aspekti ovde otkrivenog predmeta prethodno navedeni, a kojima se u celosti ili delimično bavi ovde otkriveni predmet, drugi aspekti će postati očigledni kada se opis nastavi kada se uzme u vezi sa pratećim primerima i slikama kako je najbolje opisano u nastavku teksta.
KRATAK OPIS SLIKA
[0014] Pošto je, dakle, ovde otkriven predmet opisan uopšteno, sada će, kao referenca, biti opisane prateće slike, koje nisu nužno nacrtane u razmeri, i pri čemu:
SL. 1 prikazuje primere amino (R) i karboksi (R') modifikacija napravljenih na DON jedinjenju u pokušaju da se sintetišu različiti DON prolekovi sa sporim oslobađanjem, prema ovde otkrivenom predmetu;
SL. 2A i SL. 2B pokazuju probleme sa hemijskom stabilnošću koje se susreću prilikom pokušaja da se sintetišu DON prolekovi, uključujući probleme sa stabilnošću koje prezentuju DON estri (SL. 2A) i DON jedinjenja koja poseduju slobodni terminalni karboksilat (SL.2B);
SL. 3A, SL. 3B, SL. 3C i SL. 3D demonstriraju neuspelu hemiju i lošu farmakokinetiku nekih pokušaja dizajniranja DON prolekova. SL.3A, SL. 3B, SL. 3C i SL. 3D pokazuju da je većina DON prolekova koji imaju slobodnu karboksilatnu grupu pokazala zanemarljivo izlaganje u poređenju sa DON jedinjenjem (osim 26, koji je pokazalo izvesno oslobađanje; SL. 3A) kada se primene oralno kod miševa, uključujući 29 (SL.3B), 23 (SL.3C) i 30 (SL.
3D), koji su pokazali malo oslobađanja DON jedinjenja u plazmi miševa posle oralne primene. Treba napomenuti da je oslobađanje DON proleka LTP073 bilo ispod granice kvantifikacije u svim uzorcima plazme miševa, 30 minuta i 5 sati nakon doziranja (nije prikazano);
SL. 4A, SL. 4B, SL. 4C i SL. 4D prikazuju procente DON jedinjenja koje se oslobađa u plazmu posle 0,5 h i 5 h nakon primene primera prolekova koji otpuštaju DON, prema ovde otkrivenom predmetu, u poređenju sa DON jedinjenjem. SL.4A i SL. 4B prikazuju rezultate farmakokinetičke studije na miševima koji pokazuju koncentracije DON u plazmi nakon primene DON (1,6 mg/kg p.o.) i DON prolekova doziranih sa 1,6 mg/kg ekvivalenta DON, kao što je 22 (SL.4A; 2,5 mg/kg p.o.) i 25 (SL.4B; 2,9 mg/kg p.o.). Zanimljivo je da je 22 pokazalo manje oslobađanje na 0.5 h (65% DON jedinjenja), međutim, nivoi su bili slični na 5 h (skoro 100%) kao kod DON jedinjenja. SL. 4C i SL. 4D pokazuju rezultate farmakokinetičke studije na miševima koji pokazuju koncentracije DON u plazmi nakon primene DON jedinjenja (1,6 mg/kg i.p.) i DON prolekova 17 (SL. 4C; 3,5 mg/kg peroralno) i 6 (SL.4D; 3,7 mg/ kg p.o.);
SL. 5 prikazuje stabilnost DON proleka 25 u fiziološkom rastvoru puferovanom fosfatom (PBS) i simuliranoj želudačnoj tečnosti (SGF) posle 30 min i 60 min;
SL. 6 prikazuje rezultate in vitro skrininga metaboličke stabilnosti DON proleka 25 u plazmi miševa, majmuna, svinja i ljudi posle 30 min i 60 min. Utvrđeno je da je 25 nestabilan u plazmi kod svih testiranih vrsta jer su i etil estar i leucin estar hidrolizovani plazma esterazama;
SL. 7 prikazuje generičku strukturu nekih DON prolekova koji ciljano deluju na ćelije i koji sadrže karboksi modifikaciju izopropil estra;
SL. 8 prikazuje rezultate in vitro skrininga metaboličke stabilnosti ćelijski ciljanog fosfamida DON proleka 4 u plazmi miševa, majmuna, svinja i ljudi posle 30 min i 60 min. Utvrđeno je da je 4 nestabilan u plazmi miševa, ali stabilan u plazmi svih ostalih testiranih vrsta;
SL. 9 prikazuje rezultate in vitro skrininga metaboličke stabilnosti DON proleka 7 u plazmi miševa, majmuna, svinja i ljudi posle 30 min i 60 min. Utvrđeno je da je 7 nestabilan u plazmi miševa, ali stabilan u plazmi svih ostalih testiranih vrsta;
SL. 10 prikazuje rezultate in vitro skrininga metaboličke stabilnosti DON proleka 9 u plazmi pasa, miševa, majmuna, svinja i ljudi posle 30 min i 60 min. Utvrđeno je da je 9 nestabilan u plazmi svih testiranih vrsta. Metabolička identifikacija je sugerisala hidrolizu leucina, ali i stabilnost izopropil estra za specifično oslobađanje unutar limfoidnih ćelija;
SL. 11A, SL. 11B, SL.11C, SL. 11D, SL.11E i SL.11F pokazuju rezultate ex vivo studije koja poredi akumulaciju DON jedinjenja i DON prolekova u plazmi, krvnim zrncima, crvenim krvnim zrncima (RBC) i mononuklearnim ćelijama periferne krvi (PBMC) nakon 30 minuta inkubacije sa 20 µM DON (SL. 11A) i DON prolekovima 4 (SL. 11B), 7 (SL.
11C), 9 (SL.11D), 13 (SL.11E) i 14 (SL.11F) u punoj ljudskoj krvi;
SL. 12A, SL. 12B, SL. 12C i SL. 12D pokazuju rezultate ex vivo studija koje upoređuju akumulaciju DON i DON prolekova u plazmi Cinomolgous majmuna, krvnim ćelijama, RBC i PBMC nakon 30 minuta inkubacije sa 20 µM DON (SL. 12A) i DON prolekovima, uključujući 20 µM 4 ( SL.12B), 7 (SL.12C) i 9 (SL.12C), u uzorcima pune krvi majmuna; SL. 13A, SL. 13B i SL. 13C pokazuju rezultate ex vivo studija koje upoređuju akumulaciju DON i DON prolekova u plazmi svinja, krvnim ćelijama, RBC i PBMC nakon 30 minuta inkubacije sa 20 µM DON (SL.13A) i DON prolekova, uključujući 20 µM 7 (SL.13B) i 9 (SL. 13C), u uzorcima pune krvi svinja;
SL. 14 pokazuje da svakodnevni tretman visokim dozama dovodi do gubitka težine kod miševa tretiranih DON jedinjenjem. Nije primećen gubitak težine kod miševa tretiranih sa 25;
SL. 15 pokazuje da svakodnevni tretman visokim dozama dovodi do DON-tretiranih miševa sa pan-citopenijom. Miševi tretirani sa 25 su pokazali izvesnu leukopeniju;
SL. 16 pokazuje da funkcija bubrega i jetre kod miševa tretiranih, bilo sa visokom dozom DON jedinjenja, bilo sa 25, nije bila pogođena;
SL. 17A i SL. 17B pokazuju da tretman sa 25 i sa DON jedinjenjem leče limfom; DON miševi umiru od tretmana dok se 25 dobro podnosi;
SL. 18A, SL. 18B i SL.18C pokazuju da jedinjenje 25 (SL. 18A) smanjuje Cmax; (SL.18B) povećava odnos tumora i creva; i (SL. 18C) izaziva manju GI toksičnost kod miševa u odnosu na DON pri ekvimolarnim dozama kod miševa. Ova infekcija vakcinijom virusom je data nakon čega je sledio dnevni tretman sa vehikulumom (Veh), DON jedinjenjem (0.8 mg/kg) i 25 (0.8 mg/kg ekviv.) tokom 5 dana. 1 sat nakon poslednje doze, životinje su žrtvovane, uklonjena tanka creva, perfundovana sa DPBS pH 7,4 i uzdužno urolana koristeći tehniku "švajcarske rolne" i fiksativ u cilju kalupljenja u parafinski vosak. Gornji paneli pokazuju hematoksilinom i eozinom (H&E) obojene preseke jejunum-ileuma pri uveličanju od 4X; donji panel prikazuje iste preseke pri uveličanju od 10X. DON je izazvao značajnu inflamaciju, koja se sastojala od multifokalne distorzije kripte (levi krug na donjoj levoj slici) i dilatacije sa gubitkom morfologije stubastog epitela (desni krug na donjoj levoj slici). DON prolek je izgledao sličnije kao kod miševa tretiranih vehikulumom, sa blago hiperćelijskim kriptama, ali bez distorzije (levi krug na donjoj desnoj slici) i normalnom stubastom morfologijom (desni krug na donjoj desnoj slici);
SL. 19A i SL. 19B pokazuju da nije primećena supresija koštane srži (SL.19A) posle 25 pri dve 14-dnevne efektivne šeme doziranja; (SL.19B) korišćenjem dugotrajnih šema doziranja 25 (48 dana);
SL. 20 prikazuje tipične strukture DON jedinjenja i prolekova na bazi DON jedinjenja;
SL. 21A i SL. 21B pokazuju da DON (1) inhibira metabolizam glutamina i rast tumora multiformnog glioblastoma (GBM) in vivo. SL.21A prikazuje da je jedinjenje DON (1) (0.8 mg/kg, i.p.) inhibiralo metabolizam glutamina, što je dokazano povećanim koncentracijama endogenog glutamina u GBM tumorima bokova, 2 sata nakon primene, u odnosu na kontrole tretirane vehikulumom; *p < 0.05. SL.21B pokazuje u studijama efikasnosti, u poređenju sa osnovnom vrednošću na dan 0, da su miševi tretirani vehikulumom prikazali značajan rast GBM tumora na bokovima tokom eksperimenta. Nasuprot tome, sistemska primena 1 (0.8 mg/kg, i.p, q.d. na dane 1-6) izazvala je dramatično smanjenje veličine tumora; ***p < 0.001, ****p < 0.0001;
SL. 22A, SL. 22B i SL. 22C prikazuje vivo farmakokinetiku u mozgu i plazmi jedinjenja DON (1) posle oralne primene DON (1) i 14 kod miševa. 1 i 14 su dozirani kod miševa u ekvivalentu od 0.8 mg/kg, preko oralne sonde, a koncentracije jedinjenja 1 u plazmi i mozgu su procenjene pomoću LC/MS. Oralna primena jedinjenja 1 i 14 je pokazala slične farmakokinetičke profile u plazmi i mozgu zbog potpunog i brzog metabolizma 14 u 1 u plazmi miša;
SL. 23A, SL. 23B i SL. 23C pokazuje in vivo farmakokinetiku DON jedinjenja nakon intravenske (i.v.) primene DON jedinjenja (1) i 14 u plazmi i cerebrospinalnoj tečnosti (CSF) majmuna. 1 i 14 su dozirani kod dva berok majmuna u ekvivalentu od 1,6 mg/kg 1 putem i.v. primene i koncentracije DON u plazmi (0.25-6h) i CSF (30 min) su procenjene putem LC/MS. U odnosu na 1, 14 je isporučilo znatno nižu koncentraciju DON u plazmi. Obrnuto je primećeno u CSF, gde je 14 isporučilo značajno veće CSF koncentracije DON jedinjenja, postižući 10 puta veći odnos CSF prema plazmi 30 minuta nakon doze;
SL. 24 prikazuje stabilnost u plazmi za 14 koja je specifična za vrstu; 14 je stabilno u plazmi ljudi, svinja, pasa i majmuna, ali se rapidno metaboliše kod miševa;
SL. 25 prikazuje tipične strukture DON jedinjenja i prolekova na bazi DON jedinjenja 25, 9, 38 i 60; različita svojstva prethodničkih grupa N-amino kiselina (npr. leucin, triptofan) obezbeđuju diferencijalnu stabilnost za plazmu i mikrozome;
SL. 26A, SL. 26B, SL.26C i SL.26D prikazuje in vitro stabilnost DON prolekova 9, 25, 38 i 60 u plazmi. Metabolizam se odvija uklanjanjem N-zaštitne grupe; i etil i izopropil estri su stabilni u plazmi svinja i ljudi;
SL. 27A, SL. 27B, SL.27C i SL.27D prikazuje in vitro stabilnost DON prolekova 9, 25, 38 i 60 u mikrozomima jetre; svi prolekovi su pokazali umereno visoku stabilnost u mikrozomima ljudi i svinja;
SL. 28A, SL. 28B, SL. 28C, SL. 28D, SL. 28E, SL. 28F, SL. 28G, SL. 28H, SL. 28I i SL.
28J pokazuju ex-vivo studije u punoj krvi ljudi i svinja za 9, 25, 38 i 60; DON prolekovi selektivno isporučuju DON u PBMC ćelije i kod ljudi i kod svinja u odnosu na plazmu; u poređenju sa DON jedinjenjem, odnos PBMC/plazma je povećan 10-100+ puta;
SL. 29A SL. 29B, SL. 29C, SL. 29D i SL. 29E pokazuju in vivo studije na svinjama sa DON prolekovima za 9, 25, 38 i 60; DON prolekovi selektivno isporučuju DON u PBMC ćelije u odnosu na plazmu; u poređenju sa DON jedinjenjem, odnos PBMC/plazma je povećan 6 do 10 puta;
SL. 30A, SL. 30B i SL. 30C pokazuju stabilnost u plazmi za jedinjenje metil-POM 14 i njegove derivate;
SL. 31 prikazuje tipične strukture analoga prolekova na bazi N-acilalkiloksi DON za ciljano delovanje na unutrašnjost ćelija i penetraciju u mozak; dodavanje sterne mase na "most" može da dovede do sporije hidrolize;
SL. 32A, SL. 32B i SL.32C prikazuju i.v. studije sa DON prolekovima na svinjama: in vivo kod svinja DON prolekovi selektivno isporučuju DON u PBMC ćelije u odnosu na DON; SL. 33 pokazuje poređenje odnosa PBMC i AUC(0-t) u plazmi. DON prolekovi postižu >6 puta bolji odnos (na osnovu AUC0-t) u odnosu na DON;
SL. 34A i SL. 34B pokazuju da IV studije na majmunima sa DON prolekom 14 pokazuju niže koncentracije u plazmi, ali veće koncentracije u CSF, postižući ~6-7 puta >odnos CSF/plazma u odnosu na DON;
SL. 35 prikazuje odnos CSF prema plazmi 1 h posle i.v. infuzija sa jedinjenjima 1, 9, 14a, 25 i 60;
SL. 36 pokazuju kliničke nalaze za DON (1) i 38 tokom perioda posmatranja od 5 dana gde su svinje tretirane DON jedinjenjem pokazale više neželjenih kliničkih znakova u odnosu na 38; doze DON (1,6 mg/kg) i 38 (1,5 mg/kg) su odabrane tako da obezbede ekvivalentnu izloženost PBMC ćelija; lekovi su dozirani i.v., 2h/dan tokom 5 dana (n=2 svinje); sprovedeno je pažljivo kliničko praćenje kako bi se procenila toksičnost leka (npr. letargija, anoreksija, dijareja, GI-krvarenje, itd.); nakon 5 dana doziranja, svinje su eutanazirane i tkiva su sakupljena za PK i histopatologiju;
SL. 37A, SL. 37B, SL. 37C i SL. 37D pokazuje da su makroskopski svinje tretirane DON jedinjenjem pokazale veću toksičnost za želudac u odnosu na 38; u toku je određivanje histopatološkog skora za toksičnosti za gastrointestinalna i druga tkiva; i
SL. 38 pokazuje da pri ekvivalentnom izlaganju PBMC ćelija, primena 38 isporučuje manje DON jedinjenja u GI tkiva u odnosu na primenu DON jedinjenja; izgleda da primena DON jedinjenja izaziva više štetnih kliničkih efekata u odnosu na 38.
[0015] Patent ili patentna prijava sadrže najmanje jednu sliku izvedenu u boji. Kopije objave ovog patenta ili patentne prijave obezbediće Patentni zavod na zahtev i po uplati potrebne naknade.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
[0016] Ovde otkriveni predmet biće potpunije opisan u daljem tekstu sa pozivanjem na priložene slike, na kojima su prikazane neki, ali ne svi primeri izvođenja prema pronalasku. Slični brojevi se svuda odnose na slične elemente. Predmet koji je trenutno otkriven može biti otelotvoren u mnogo različitih oblika i ne bi trebalo da se tumači kao ograničen na ovde izložene primere izvođenja; umesto toga, ovi primeri izvođenja su obezbeđeni tako da ovo otkriće zadovolji primenljive zakonske zahteve. Zaista, stručnjaku iz oblasti tehnike kojoj ovde otkriveni predmet pripada, imajući u vidu učenja predstavljena u prethodnim opisima i pridruženim slikama, mogu pasti na pamet brojne modifikacije i drugi načini izvođenja ovde otkrivenog predmeta koji je u ovom tekstu izložen. Prema tome, treba razumeti da ovde otkriveni predmet ne treba da bude ograničen na specifične primere izvođenja koji su otkriveni i da je namera da modifikacije i drugi primeri izvođenja budu uključeni u obim priloženih patentnih zahteva. Pronalazak je definisan prema priloženim patentnim zahtevima. Ostali delovi ovog otkrivanja imaju za cilj da pomognu u razumevanju pronalaska za koji se traži patent.
I. Prolekovi glutaminskih antagonista
[0017] DON je antibiotik koji je izolovan iz Streptomyces 1953. godine. DON je diazo analog L-glutamina, koji ometa različite reakcije u sintezi nukleinskih kiselina i proteina u kojima L-glutamin donira azot, blokira razno prepoznavanje glutamina. enzimi, kao što je glutaminaza, moduliraju nivoe glutamata u mozgu, uključen sam u energetski metabolizam, između ostalog.
[0018] Jedna strategija za poboljšanje terapeutskog indeksa DON jedinjenja za različite režime lečenja, uključujući GBM terapiju, bila bi da se poveća izloženost mozga uz ograničavanje sistemske izloženosti, a time i toksičnosti (Upadhyay, 2014). Pristup koji uključuje upotrebu prolekova je dobro uspostavljena strategija za promenu farmakokinetičke i tkivne distribucije molekula leka, međutim sintetički ovaj pristup predstavlja izazov sa DON jedinjenjem. S obzirom na to da DON ima labilnu diazo grupu kritičnu za njegovu antagonističku aktivnost prema glutaminu, dodavanje hemijskih progrupa mora biti izvedeno pod blagim uslovima da bi se sačuvala grupa diazo ketona.
[0019] Ovde otkriveni predmet obezbeđuje nove kompozicije materije u kojima su pro-delovi dodati antagonistima glutamina, kao što su 6-diazo-5-okso-norleucin (DON), i aza-serin.
[0020] Ovde otkriveni prolekovi antagonista glutamina su pripremljeni maskiranjem funkcionalnosti amina i/ili karboksilata da bi se promenila farmakokinetika DON jedinjenja obezbeđujući kinetiku sporijeg oslobađanja i ćelijsko ciljanje radi poboljšanja podnošljivosti. Dalje, sada otkriveni prolekovi, u nekim primerima izvođenja, selektivno ciljaju aktivne antagoniste glutamina na specifične ćelije ili obezbeđuju sporije oslobađanje DON i na taj način smanjuju toksičnost molekula leka.
[0021] Ovde otkriveni predmet pokazuje da maskiranje, kako α-amino grupe tako i karboksifunkcionalnosti koja se derivatizuje povećava stabilnost proleka i oralnu bioraspoloživost. Ovde otkriveni prolekovi takođe pokazuju stabilnost koja je uporediva sa slobodnim DON jedinjenjem.
[0022] Strukture reprezentativnih DON prolekova su date u Tabeli 1.
1
�
�
�
�
�
�
�
[0023] Stručnjaci u oblasti će ceniti da su reprezentativne strukture DON prolekova prikazane u tabeli 1 u kombinaciji sa uputstvima koja su ovde otkrivena omogućiti stručnjacima iz ove oblasti da sintetišu prolekove drugih analoga glutamina, kao što su L-DONV, aza-serin, kao što je prikazano u generičkim strukturama formule (I). Drugim rečima, treba razumeti da se prolekovi drugih antagonista glutamina, kao što su L-DONV, aza-serin, mogu sintetizovati sa istim supstituentima R1, R2i R2' kao i DON prolekovi prikazani u tabeli.1.
[0024] Shodno tome, ovde prikazani predmet uključuje prolek glutaminskog antagonista, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili estar, pri čemu prolek ima strukturu formule (I):
pri čemu: X je odabran iz grupe koja se sastoji od veze, -O- i -(CH2)n- , pri čemu je n ceo broj odabran iz grupe koja se sastoji od 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 i 8; R1je odabran iz grupe koja se sastoji od H i prve grupe koja formira prolek, koja može da formira so ili estar; i R2je H ili druga grupa koja formira prolek, koja može da formira amidnu vezu, karbamatnu vezu, fosforamidatnu vezu ili fosforodiamidatnu vezu sa azotom koji je pored R2; R2' je odabran iz grupe koja se sastoji od H, C1-C6alkila, supstituisanog C1-C6alkila, ili R2i R2' zajedno formiraju strukturu prstena koja sadrži -C(=O)-G-C(=O)-, gde je G je odabran iz grupe koja se sastoji od C1-C8alkilena, C1-C8heteroalkilena, C5-C8cikloalkilena, C6-C12arilena, C5-C14heteroarilena, bivalentnog C4-C10heterocikla, od kojih svaki može da bude opciono supstituisan; ili R1i R2' zajedno formiraju 4-do 6-člani heterociklični prsten koji sadrži atom kiseonika pored R1i atom azota pored R2'; pod uslovom da jedinjenje ima najmanje jednu grupu koja formira prolek, odabranu iz grupe koja se sastoji od prve i druge hemijske grupe koja formira prolek.
[0025] Kako se ovde koristi, termin "amidna veza" obuhvata strukturu predstavljenu formulom:
pri čemu je Rv izabran iz grupe koju čine alkil, supstituisani alkil, cikloalkil, supstituisani cikloalkil, aril, supstituisani aril, aralkil, supstituisani aralkil, heterociklil, supstituisani heterociklil, alkenil, supstituisani alkenil, cikloalkenil, supstituisani cikloalkenil, alkilamin, supstituisani alkilamin, heteroaril i supstituisani heteroaril
[0026] Kako se ovde koristi, termin "karbamatna veza" obuhvata strukturu predstavljenu formulom:
2
gde je Rwizabran iz grupe koja se sastoji od alkila, supstituisanog alkila, cikloalkila, supstituisanog cikloalkila, arila, supstituisanog arila, aralkila, supstituisanog aralkila, heterociklila, supstituisanog heterociklila, alkenila, supstituisanog alkenila, cikloalkenila, supstituisanog cikloalkenila, alkilamina, supstituisanog alkilamina, heteroarila i supstituisanog heteroarila.
[0027] Kako se ovde koristi, termin "fosforamidatna veza" obuhvata strukturu predstavljenu formulom:
gde su Rxi Rx' svaki nezavisno izabrani iz grupe koju čine alkil, supstituisani alkil, cikloalkil, supstituisani cikloalkil, aril, supstituisani aril, aralkil, supstituisani aralkil, heterociklil, supstituisani heterociklil, alkenil, supstituisani alkenil, cikloalkenil, supstituisani cikloalkenil, alkilamin, supstituisani alkilamin, heteroaril i supstituisani heteroaril.
[0028] Kako se ovde koristi, termin "fosforodiamidatna veza" obuhvata strukturu predstavljenu formulom:
gde su Ryi Rzsvaki nezavisno izabrani iz grupe koju čine H, alkil, supstituisani alkil, cikloalkil, supstituisani cikloalkil, heterociklil, supstituisani heterociklil , alkenil, supstituisani alkenil, cikloalkenil, supstituisani cikloalkenil, -(CR3R4)m-Z, -(CR3R4)m-Q-Z, aril, supstituisani aril, alkilamin, supstituisani alkilamin, heteroaril, supstituisani heteroaril i
[0029] Opciono, X je -CH2-, a n je 1.
[0030] Opciono, X je -O-. Opciono, jedinjenje proleka ima i prvi deo koji formira prolek i drugi deo koji formira prolek. Opciono, analog glutamina je antagonist glutamina, tj. prolek je prolek analoga glutamina koji antagonizuje put glutamina. Primeri antagonista glutamina uključuju, bez ograničenja, 6-diazo-5-okso-norleucin (DON), i azaserin, i 5-diazo-4-okso-L-norvalin (L-DONV).
[0031] Prema pronalasku, ovde otkriveni predmet, obezbeđuje prolek DON kao što je definisano u priloženim zahtevima. Generalno, prolek DON ima strukturu formule (I).
[0032] U nekim primerima izvođenja za koje se ne traži zaštita, R1formule (I) sadrži ostatak PRO1ostatka koji formira prolek, koji zajedno sa baznom grupom i terminalnom hidroksilnom grupom formira so.
[0033] U nekim primerima izvođenja za koje se ne traži zaštita, R1formule (I) sadrži ostatak PRO1dela koji formira prolek, koji zajedno sa alkil grupom i kiseonikom susedne hidroksilne grupe formira estar.
[0034] U nekim primerima izvođenja za koje se ne traži zaštita, R1formule (I) sadrži ostatak PRO1dela koji formira prolekove, koji, zajedno sa alkil grupom i azotom koji se nalazi u blizini R2’ grupe, formira azlakton ili oksazolidon.
[0035] U nekim primerima izvođenja koje se ne traže, R1formule (I) se bira iz grupe koju čine H, alkil, supstituisani alkil, cikloalkil, supstituisani cikloalkil, alkenil, supstituisani alkenil, alkinil, supstituisani alkinil, cikloalkenil, supstituisani cikloalkenil hidrokarbil)amonijum i tetra(hidrokarbil)amonijum. Poželjna alkil grupa, cikloalkil grupa, alkenil grupa, alkinil grupa i supstituenti cikloalkenil grupe obuhvataju alkil, supstituisani alkil, halo, arilamino, acil, hidroksil, ariloksi, alkoksil, alkiltio, ariltio, araralkiloksil, ariltio, araralkiloksil, alkoksil, alksil, cikloalkil.
[0036] Opciono, R1formule (I) nije H. Opciono, R1formule (I) nije H kada su R2i R2' H. Opciono, R2i R2' formule (I) su svaki H kada i R1nije H.
[0037] Opciono, R1formule (I) se bira iz grupe koju čine C1-6ravnolančani alkil, supstituisani C1-6ravnolančani alkil, C1-6razgranati alkil, supstituisani C1-6razgranati alkil, tri(C1-C8-alkil)amonijum, tetra(C1-C8-alkil)amonijum, trifenilamonijum, tri(hidroksi-C1-C8-alkil)amonijum i tetra(hidroksi-C1-C8alkil)amonijum.
[0038] Opciono, R1formule (I) je izabran iz grupe koju čine metil, etil, izopropil, ciklopentil, cikloheksil, trimetilamonijum, trietilamonijum, tri(hidroksietil)amonijum, tripropilamonijum i tri(hidroksipropil) amonijum. Opciono, R1formule (I) je metil. U nekim primerima izvođenja, R1formule (I) je etil. Opciono, R1formule (I) je izopropil.
2
[0039] U nekim primerima izvođenja za koje se ne traži zaštita, R2formule (I) sadrži ostatak PRO2drugog dela koji formira prolekove, koji zajedno sa karbonil, oksi karbonil ili fosfonil grupom i azotom susednog NH, formira amidna, karbamatna, fosforamidatna ili fosforodiamidatna veza.
[0040] U nekim primerima izvođenja koje se ne traži specifično zaštita, R2formule (I) sadrži deo izabran iz grupe koju čine amino kiselina, N-supstituisana amino kiselina, peptid, supstituisani peptid, monociklični prsten, supstituisani monociklični prsten, biciklični prsten, supstituisani biciklični prsten, purinski nukleozid, supstituisani purinski nukleozid, pirimidin nukleozid i supstituisani pirimidin nukleozid.
[0041] Kako se ovde koristi, termin "amino kiselina" uključuje delove koji imaju grupu karboksilne kiseline i amino grupu. Termin aminokiselina stoga uključuje i prirodne aminokiseline (uključujući proteinogene aminokiseline) i neprirodne aminokiseline. Termin "prirodna aminokiselina" takođe uključuje druge aminokiseline koje se mogu ugraditi u proteine tokom translacije (uključujući pirolizin i selenocistein). Dodatno, termin "prirodna aminokiselina" takođe uključuje druge aminokiseline, koje se formiraju tokom intermedijarnog metabolizma, na primer, ornitin koji se generiše iz arginina u ciklusu uree. Prirodne aminokiseline su sumirane u tabeli 2:
2
[0042] Prirodna ili ne-prirodna amino kiselina može biti opciono supstituisana. U jednom primeru izvođenja, amino kiselina je odabrana od proteinogenih amino kiselina. Proteinogene amino kiseline uključuju glicin, alanin, valin, leucin, izoleucin, asparaginsku kiselinu, glutaminsku kiselinu, serin, treonin, glutamin, asparagin, arginin, lizin, prolin, fenilalanin, tirozin, triptofan, cistein, metionin i histidin. Termin amino kiselina uključuje alfa amino kiseline i beta aminokiseline, kao što su, ali ne i ograničeno na, beta alanin i 2-metil beta alanin. Termin amino kiselina takođe uključuje određene laktamske analoge prirodnih amino kiselina, kao što je, ali nije ograničeno na, piroglutamin. Termin amino kiselina takođe uključuje homologe aminokiselina uključujući homocitrulin, homoarginin, homoserin, homotirozin, homoprolin i homofenilalanin.
[0043] Terminalni deo aminokiselinskog ostatka ili peptida može biti u obliku slobodne kiseline, tj. završava se u -COOH grupom ili može biti u maskiranom (zaštićenom) obliku, kao što je u obliku karboksilatnog estra ili karboksamida. Opciono, aminokiselinski ili peptidni ostatak završava se amino grupom. U jednom aspektu, ostatak se završava grupom karboksilne kiseline -COOH ili amino grupom -NH2. Opciono, ostatak završava grupom karboksamida. Opciono, ostatak se završava karboksilatnim estrom.
[0044] Kao što je gore otkriveno, termin "amino kiselina" uključuje jedinjenja koja imaju -COOH grupu i -NH2grupu. Supstituisana amino kiselina uključuje amino kiselinu koja ima amino grupu koja je mono- ili di-supstituisana. Opciono, amino grupa može biti monosupstituisana. (Proteinogena amino kiselina može biti supstituisana na drugom mestu iz svoje amino grupe da bi se formirala amino kiselina koja je supstituisana proteinogena amino kiselina). Termin supstituisana aminokiselina stoga uključuje N-supstituisane metabolite prirodnih amino kiselina uključujući, ali ne ograničavajući se na, N-acetil cistein, N-acetil serin i N-acetil treonin.
[0045] Na primer, termin "N-supstituisana amino kiselina" uključuje N-alkil amino kiseline (npr. C1-6N-alkil amino kiseline, kao što su sarkozin, N-metil-alanin, N-metil-glutaminska kiselina i N -terc-butilglicin), koji može uključivati C1-6N supstituisane alkil amino kiseline (npr. N-(karboksi
2
alkil) amino kiseline (npr. N-(karboksimetil)amino kiseline) i N-metilcikloalkil amino kiseline (npr. N-metilciklopropil amino kiseline)); N,N-di-alkil aminokiseline (npr. N,N-di-C1-6alkil amino kiseline (npr. N,N-dimetil amino kiselina)); N,N,N-tri-alkil amino kiseline (npr. N,N,N-tri-C1-6alkil amino kiseline (npr. N,N,N-trimetil amino kiselina)); N-acil amino kiseline (npr. C1-
6N-acil amino kiselina); N-aril amino kiseline (npr. N fenil amino kiseline, kao što je N-fenilglicin); N-amidinil aminokiseline (npr. N-amidin amino kiselina, tj. amino kiselina u kojoj je aminska grupa zamenjena guanidino grupom).
[0046] Termin "amino kiselina" takođe uključuje aminokiseline alkil estre (npr. C1-6alkil estre aminokiselina); i aril estri aminokiselina (npr. fenil estri aminokiselina).
[0047] Za amino kiseline koje imaju hidroksi grupu prisutnu na bočnom lancu, termin "amino kiselina" takođe uključuje O-alkil aminokiseline (npr. C1-6O-alkil amino kiselinske etre); O-aril amino kiseline (npr. O-fenil amino kiselinski etri); estri O-acil amino kiselina; i O-karbamoil amino kiseline.
[0048] Za amino kiseline koje imaju tiol grupu prisutnu na bočnom lancu, termin "amino kiselina" takođe uključuje S-alkil amino kiseline (npr. C1-6S-alkil amino kiseline, kao što je S-metil metionin, koji može uključuju C1-6S-supstituisane alkil amino kiseline i S-metilcikloalkil amino kiseline (npr. S-metilciklopropil amino kiseline)); S-acil aminokiseline (npr. C1-6S-acil amino kiselina); S-aril amino kiselina (npr. S-fenil amino kiselina); sulfoksidni analog aminokiseline koja sadrži sumpor (npr. metionin sulfoksid) ili sulfoksidni analog S-alkil amino kiseline (npr. S-metil cistein sulfoksid) ili S-aril amino kiseline.
[0049] Drugim rečima, ovde otkriveni predmet takođe predviđa derivate prirodnih amino kiselina, kao što su oni gore pomenuti koji su funkcionalizovani jednostavnim sintetičkim transformacijama poznatim u stanju tehnike (npr., kao što je opisano u publikaciji "Protective Groups in Organic Synthesis" od T W Greene and P G M Wuts, John Wiley & Sons Inc. (1999)) i reference u njima.
[0050] Primeri neproteinogenih amino kiselina uključuju, ali nisu ograničeni na: citrulin, hidroksiprolin, 4-hidroksiprolin, β-hidroksivalin, ornitin, β-amino alanin, albizin, 4-aminofenilalanin, bifenilalanin-4-fenilalanin, 4-fluoro-fenilalanin, 2,3,4,5,6-pentafluoro-fenilalanin, norleucin, cikloheksilalanin, α-aminoizobuterna kiselina, α-aminobuterna kiselina, αaminoizobuterna kiselina, 2-aminoizobuterna kiselina, 2-aminoizobuterna kiselina, amino-2-karboksilna kiselina, selenometionin, lantionin, dehidroalanin, γ-amino buterna kiselina, naftilalanin, aminoheksanska kiselina, pipekolna kiselina, 2,3-diaminoproprionska kiselina, tetrahidroizohinolin-3-karboksilna kiselina, terc-leuicilan-ciklociklin, terc-leuicilan-ciklociklin
2
ne, 4-aminopiperidin-4-karboksilna kiselina, dietilglicin, dipropilglicin i njihovi derivati u kojima je amin azot mono- ili di-alkilovan.
[0051] Termin "peptid" se odnosi na lanac aminokiselina koji se sastoji od 2 do 9 aminokiselina, osim ako nije drugačije naznačeno. Opciono, peptid koji se koristi u ovom pronalasku ima dužinu od 2 ili 3 aminokiseline. Opciono, peptid može biti razgranati peptid, a najmanje jedan bočni lanac amino kiseline u peptidu je vezan za drugu amino kiselinu (bilo preko jednog od završetaka ili bočnog lanca).
[0052] Termin "N-supstituisani peptid" se odnosi na lanac aminokiselina koji se sastoji od 2 do 9 aminokiselina u kojima je jedna ili više NH grupa supstituisana, npr., supstituentom opisanim na drugom mestu u vezi sa supstituisanim amino grupama. Opciono, N-supstituisani peptid ima svoju N-terminalnu amino grupu supstituisanu i, u jednom aspektu, amidne veze su nesupstituisane.
[0053] Opciono, bočni lanac amino kiseline je vezan za drugu amino kiselinu. Opciono, bočni lanac je vezan za amino kiselinu preko N-kraja, C-kraja ili bočnog lanca amino kiseline.
[0054] Primeri bočnih lanaca prirodnih amino kiselina uključuju vodonik (glicin), metil (alanin), izopropil (valin), sek-butil (izoleucin), -CH2CH(CH3)2(leucin), benzil (fenilalanin), phidroksibenzil (tirozin), -CH2OH (serin), -CH(OH)CH3(treonin), -CH2-3-indoil (triptofan), -CH2COOH (asparaginska kiselina), -CH2CH2COOH (glutaminska kiselina), -CH2C(O)NH2(asparagin), -CH2CH2C(O)NH2(glutamin), -CH2SH, (cistein), -CH2CH2SCH3(metionin), -(CH2)4NH2(lizin), -(CH2)3NHC(=NH)NH2(arginin) i -CH2-3-imidazoil (histidin).
[0055] Primeri monocikličnih prstenova i bicikličnih prstenova uključuju, bez ograničenja, benzen, pirimidine i purine, i uopštenije aril i heteroaril prstenove. Primeri heteroarila uključuju, ali nisu ograničeni na, piridil, pirimidinil, pirazinil, furanil, tienil, pirazolil, oksazolil, tiazolil, izotiazolil, izoksazolil, pirolil, imidazolil, indolil, indolilizolinolirid i imdolil. Arili uključuju fenil (C6), benzil, naftil (C10) i bifenil (C12). Primeri pirimidina uključuju, bez ograničenja, citozin, timin i uracil. Primeri purina uključuju, bez ograničenja, purin, adenin, N-supstituisani adenin, guanin, hipoksantin, ksantin, teobromin, kofein, mokraćnu kiselinu i izoguanin. Primeri purinskih nukleozida uključuju, bez ograničenja, adenin i guanin.
[0056] U nekim primerima izvođenja za koje se ne traži zaštita, R2iz formule (I) se bira iz grupe koja se sastoji od H, alkila, -C(=O)-Ar, -C(=O)-Y-(CR3R4)m-Ar, -C(=O)-Y-(CR3R4)m-NR5R6, -P(=O)(OR7)n(NHR9)o, -C(=O)-Y-(CR3R4)m-Ar-O-C(=O)-R10, -C(=O)-Y-(CR3R4)m-Ar-O-R10, -C(=O)-O-(CR3R4)m-O-C(=O)-R10,-C(=O)-O-R9, -C(=O)-Y-(CR3R4)m-Ar-O-C(=O)-Ar i -C(=O)-Y-(CR3R4)m-Ar-NR5R6; pri čemu: Y je -O- ili veza; m je ceo broj odabran iz grupe koja se sastoji od 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 i 8; svaki n i o je ceo broj od 0 do 2 pod uslovom da zbir n i o
2
iznosi 2; R3i R4su nezavisno H, C1-C6alkil ili supstituisani C1-C6alkil, aril ili supstituisani aril, -(CR3R4)m-NR5R6, ili
svaki R5i R6je nezavisno H, alkil, -C(=O)-(CR3R4)m, -C(=O)-(NR5R6) ili -C(=O)-(CR3R4)m-NR5R6; svaki R7je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od H, alkila, supstituisanog alkila, cikloalkila, supstituisanog cikloalkila, heterociklila, supstituisanog heterociklila, alkenila, supstituisanog alkenila, cikloalkenila, supstituisanog cikloalkenila, -(CR3R4)m-Z, -(CR3R4)m-Q-Z, gde Q predstavlja monosaharid, aril, supstituisani aril, heteroaril, supstituisani heteroaril, i gde je Z
ili gde R7zajedno sa atomom kiseonika za koji je vezan formira purinski ili pirimidinski nukleozid; svaki R9je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od H, alkila, supstituisanog alkila, cikloalkila, supstituisanog cikloalkila, heterociklila, supstituisanog heterociklila, alkenila, supstituisanog alkenila, cikloalkenila, supstituisanog cikloalkenila, - (CR3R4)m-Z, arila, supstituisanog arila, heteroarila, supstituisanog heteroarila, i
pri čemu, R1i X su kao što je definisano prethodno u tekstu, pod uslovom da R1nije H;
svaki R8je nezavisno alkil, supstituisani alkil, cikloalkil, supstituisani cikloalkil, monosaharid, acilovani monosaharid, aril, supstituisani aril, heteroaril, supstituisani heteroaril; svaki R10je nezavisno alkil, supstituisani alkil, cikloalkil, supstituisani cikloalkil, monosaharid, acylated monosaharid, aril, supstituisani aril, heteroaril, supstituisani heteroaril; i Ar je aril, supstituisani aril, heteroaril ili supstituisani heteroaril. Potrebno je imati u vidu da pored supstitucija na amino grupi u Z, može da postoji i jedna ili više supstitucija R3, R4, R5i/ili R6u prstenovima sa 5 ili 6 članova u Z.
[0057] U konkretnim slučajevima, Ar je
[0058] U drugim konkretnim slučajevima, Ar je i
[0059] U još nekim konkretnim slučajevima. Ar je benzil.
[0060] U konkretnim slučajevima, jedinjenje proleka formule (I) je
[0061] U nekim primerima izvođenja za koje se ne traži zaštita, R2iz formule (I) je -C(=O)-Y-(CR3R4)m-NR5R6; pri čemu: (i) Y je veza; m je 1; R5i R6su svaki H; (ii) Y je veza; m je 1; R5je H; R6je -C(=O)-(CR3R4)m.
[0062] Prema pronalasku, jedinjenje proleka formule (I) je
1
[0063] U ovima primerima izvođenja, trebalo bi razumeti da terminalne karboksi groupe jedinjenja formule (I) koja je prikazana prethodno u tekstu, može da se koristi za formiranje soli. U tipičnom primeru izvođenja, so bilo kog od jedinjenja formule (I) koja je prikazana prethodno u tekstu, može da se formira kada se H zameni sa NEt3, kao što će to razumeti lica stručna u oblasti.
II. Farmaceutske kompozicije i primena
[0064] U drugom aspektu, predmetno otkriće obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja uključuje jedno jedinjenje proleka prema pronalasku, samo ili u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih terapeutskih agenasa u smeši sa farmaceutski prihvatljivim ekscipijensom. Shodno tome, u nekim primerima izvođenja, ovde otkriveni predmet obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje prema pronalasku, i farmaceutski prihvatljiv nosač, razblaživač ili ekscipijens. Stručnjak u ovoj oblasti će prepoznati da farmaceutske kompozicije uključuju farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja opisanih prethodno u tekstu.
[0065] Farmaceutski prihvatljive soli su u principu dobro poznate prosečnom stručnjaku u oblasti i uključuju soli aktivnih jedinjenja koja se pripremaju sa relativno netoksičnim kiselinama ili bazama, u zavisnosti od konkretnih hemijskih grupa supstituenata koje se nalaze na ovde opisanim jedinjenjima. Kada jedinjenja prema predmetnom otkriću sadrže relativno kisele funkcionalne grupe, bazne adicione soli mogu da se dobiju dovođenjem u kontakt neutralnog oblika ovih jedinjenja sa dovoljnom količinom željene baze, bilo čiste ili u odgovarajućem inertnom rastvaraču, ili jonskom izmenom, pri čemu se jedan bazni kontra jon (baza) u jonskom kompleksu zameni drugim. Primeri farmaceutski prihvatljivih baznih adicionih soli uključuju natrijum, kalijum, kalcijum, amonijum, organsku amino ili magnezijumovu so, ili sličnu so.
[0066] Kada jedinjenja prema ovom otkriću obuhvataju relativno bazne funkcije, kisele adicione soli mogu se dobiti kontaktiranjem neutralnog oblika takvih jedinjenja sa dovoljnom količinom
2
željene kiseline, bilo čiste ili u pogodnom inertnom rastvaraču ili jonskom izmenom, pri čemu je jedna kisela kontrajon (kiselina) u jonskom kompleksu zamenjena drugom. Primeri farmaceutski prihvatljivih kiselih adicionih soli uključuju soli dobijene od neorganskih kiselina kao što su hlorovodonična, bromovodonična, azotna, ugljenična, monohidrogenkarbonatna, fosforna, monohidrogenfosforna, dihidrogenfosforna, sumporna, monohidrogensulfurna, hidrovodonična ili fosforna kiselina i slično, kao i soli dobijene od relativno netoksičnih organskih kiselina kao što su sirćetna, propionska, izobuterna, maleinska, malonska, benzojeva, sukcinska, suberinska, fumarna, mlečna, mandelinska, ftalna, benzensulfonska, p-toluensulfonska, limunska, vinska, metansulfonska i slično. Takođe su uključene soli aminokiselina kao što su arginat i slično, i soli organskih kiselina kao što su glukuronska ili galakturonska kiselina i slično (videti, na primer, Berge et al, "Pharmaceutical Salts," Journal of Pharmaceutical Science, 1977, 66, 1-19). Određena specifična jedinjenja prema ovom otkriću obuhvataju i bazne i kisele funkcionalnosti koje omogućavaju da se jedinjenja pretvore u bazne ili kisele adicione soli.
[0067] Shodno tome, farmaceutski prihvatljive soli pogodne za upotrebu sa ovde otkrivenim predmetom uključuju, kao primer, a ne kao ograničenje, acetat, benzensulfonat, benzoat, bikarbonat, bitartrat, bromid, kalcijum edetat, karnsilat, karbonat, citrat, edetat, edizilat, estolat , esilat, fumarat, gluceptat, glukonat, glutamat, glikolilarsanilat, heksilrezorcinat, hidrabamin, hidrobromid, hidrohlorid, hidroksinaftoat, jodid, izetionat, laktat, laktobionat, malat, maleat, mandelat, mezilat, mukat, napsilat, nitrat, pamoat (embonat), pantotenat, fosfat/difosfat, poligalakturonat, salicilat, stearat, subacetat, sukcinat, sulfat, tanat, tartrat ili teoklat. Druge farmaceutski prihvatljive soli mogu se naći u, na primer, publikaciji Remington: The Science and Practice of Pharmacy (20th ed.) Lippincott, Williams & Wilkins (2000).
[0068] U konkretnim primerima izvođenja, so je tri(hidrokarbil)amonijum ili tetra(hidrokarbil) amonijum so. U nekim drugim konkretnim primerima izvođenja, so je odabrana iz grupe koja se sastoji od tri(C1-C8-alkil)amonijum, tetra(C1-C8-alkil)amonijum, trifenilamonijum, tri(hidroksi-C1-C8-alkil)amonijum i tetra(hidroksi-C1-C8-alkil)amonijum soli. U još konkretnijim primerima izvođenja, so je odabrana iz grupe koja se sastoji od trimetilamonijum, trietilamonijum, tri(hidroksietil)amonijum, tripropilamonijum i tri(hidroksipropil)amonijum soli.
[0069] U terapeutskim i/ili dijagnostičkim primenama, jedinjenja prema ovom otkriću mogu biti formulisana za različite načine primene, uključujući oralnu (subligvalnu, bukalnu), peroralnu, sublingvalnu, sistemsku i topikalnu ili lokalnu primenu. Tehnike i formulacije se generalno mogu naći u publikaciji Remington: The Science and Practice of Pharmacy (20th ed.) Lippincott, Williams & Wilkins (2000).
[0070] U zavisnosti od specifičnih stanja koja se leče, takva sredstva se mogu formulisati u tečnim (npr. rastvori, suspenzije ili emulzije) ili čvrstim oblicima doziranja (kapsule ili tablete) i primenjivati sistemski ili lokalno. Sredstva se mogu isporučiti, na primer, u obliku sa odloženim, kontrolisanim ili usporenim oslobađanjem koji je poznat stručnjacima u tehnici. Tehnike za formulaciju i primenu mogu se naći u publikaciji Remington: The Science and Practice of Pharmacy (20th ed.) Lippincott, Williams & Wilkins (2000). Pogodni načini mogu uključivati oralnu, bukalnu, pomoću spreja za inhalaciju, sublingvalnu, rektalnu, transdermalnu, vaginalnu, transmukoznu, nazalnu ili crevnu primenu; parenteralnu primenu, uključujući intramuskularno, potkožno, intramedularno ubrizgavanje, kao i intratekalno, direktno intraventrikularno, intravensko, intra-artikularno, intra-sternalno, intra-sinovijalno, intra-hepatično, intralesionalno, intrakranijalno, intraperitonealno, intranazalno ili intraokularno ubrizgavanje ili druge načine isporuke. U nekim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija se primenjuje oralno. U nekim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija se primenjuje intravenski. U nekim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija se primenjuje intramuskularno. U nekim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija se primenjuje intratekalno. U nekim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija se primenjuje potkožno.
[0071] Za ubrizgavanje, sredstva prema ovom otkriću mogu biti formulisana i razblažena u vodenim rastvorima, kao što su u fiziološki kompatibilni puferi kao što su Hankov rastvor, Ringerov rastvor ili puferovani fiziološki rastvor. Za takvu transmukoznu primenu, u formulaciji se upotrebljavaju penetranti koji odgovaraju barijeri koju treba probiti. Takvi penetranti su opšte poznati u stanju tehnike.
[0072] U obimu ovog otkrića je upotreba farmaceutski prihvatljivih inertnih nosača da bi se formulisala jedinjenja koja su ovde otkrivena za praktičnu primenu prema otkriću u dozama pogodnim za sistemsku primenu. Sa pravilnim izborom nosača i odgovarajućom praksom proizvodnje, kompozicije prema ovom otkriću, posebno one formulisane kao rastvori, mogu se primenjivati parenteralno, na primer intravenskim ubrizgavanjem. Jedinjenja se mogu lako formulisati upotrebom farmaceutski prihvatljivih nosača dobro poznatih u tehnici u dozama pogodnim za oralnu primenu. Takvi nosači omogućavaju da se jedinjenja prema ovom otkriću formulišu kao tablete, pilule, kapsule, tečnosti, gelovi, sirupi, kaše, suspenzije i slično, za oralno unošenje od strane subjekta (npr. pacijenta) koji se leči.
[0073] Za nazalnu ili inhalacionu primenu, sredstva prema ovom otkriću takođe mogu biti formulisana postupcima poznatim stručnjacima u tehnici, i mogu uključivati, na primer, ali ne ograničavajući se na, primere rastvaranja, razblaživanja ili dispergovanja supstanci, kao što su
4
fiziološki rastvor; konzervanasi, kao što je benzil alkohol; promotori apsorpcije; i fluorougljenici.
[0074] Farmaceutske kompozicije pogodne za upotrebu u ovom otkriću uključuju kompozicije u kojima su aktivni sastojci sadržani u efikasnoj količini za postizanje predviđene svrhe. Određivanje efektivnih količina je unutar mogućnosti stručnjaka u oblasti, posebno u svetlu detaljnog otkrića obezbeđenog ovde. Uopšteno, jedinjenja prema otkriću su efikasna u širokom opsegu doziranja. Na primer, u lečenju odraslih ljudi, doze od 0.01 do 1000 mg, od 0.5 do 100 mg, od 1 do 50 mg dnevno i od 5 do 40 mg dnevno su primeri doza koje se mogu upotrebiti. Neograničavajuća doza je 10 do 30 mg dnevno. Tačna doza zavisiće od načina primene, oblika u kome se jedinjenje primenjuje, subjekta koji se leči, telesne težine subjekta koji se leči, bioraspoloživosti jedinjenja, adsorpcije, distribucije, metabolizma i toksičnosti izlučivanja jedinjenja (ADME), i sklonosti i iskustva lekara koji je prisutan.
[0075] Pored aktivnih sastojaka, ove farmaceutske kompozicije mogu obuhvatati pogodne farmaceutski prihvatljive nosače koji sadrže ekscipijente i pomoćne supstance koje olakšavaju preradu aktivnih jedinjenja u preparate koji se mogu farmaceutski upotrebiti. Preparati formulisani za oralnu primenu mogu biti u obliku tableta, dražeja, kapsula ili rastvora.
[0076] Farmaceutski preparati za oralnu primenu mogu se dobiti kombinovanjem aktivnih jedinjenja sa čvrstim ekscipijentima, izborno mlevenjem dobijene smeše i obradom smeše granula, nakon dodavanja odgovarajućih pomoćnih supstanci, po želji, za dobijanje tableta ili jezgara dražeja. Pogodni ekscipijenti su, naročito, punioci kao što su šećeri, uključujući laktozu, saharozu, manitol ili sorbitol; preparati celuloze, na primer, kukuruzni skrob, pšenični skrob, pirinčani skrob, krompirov skrob, želatin, tragakant guma, metil celuloza, hidroksipropilmetilceluloza, natrijum karboksimetil-celuloza (CMC) i/ili polivinilpirolidon (PVP: povidon). Po želji, mogu se dodati dezintegraciona sredstva, kao što je umreženi polivinilpirolidon, agar ili algininska kiselina ili njihova so, kao što je natrijum alginat.
[0077] Jezgra dražeja su obezbeđena odgovarajućim oblogama. U tu svrhu se mogu upotrebiti koncentrovani rastvori šećera, koji izborno mogu obuhvatati arapsku gumu, talk, polivinilpirolidon, karbopol gel, polietilen glikol (PEG) i/ili titanijum dioksid, rastvore laka i odgovarajuće organske rastvarače ili smeše rastvarača. Boje ili pigmenti se mogu dodati u tablete ili premaze za dražeje da bi se identifikovale ili okarakterisale različite kombinacije doza aktivnih jedinjenja.
[0078] Farmaceutski preparati koji se mogu upotrebiti oralno uključuju uklopljene kapsule napravljene od želatina, kao i meke, zapečaćene kapsule napravljene od želatina i plastifikator, kao što je glicerol ili sorbitol. Uklopljene kapsule mogu obuhvatati aktivne sastojke u mešavini sa puniocem kao što je laktoza, sredstva za vezivanje kao što su skrobovi i/ili lubrikanti kao što su talk ili magnezijum stearat i, izborno, stabilizatori. U mekim kapsulama, aktivna jedinjenja se mogu rastvoriti ili suspendovati u odgovarajućim tečnostima, kao što su masna ulja, tečni parafin ili tečni polietilen glikoli (PEG). Osim toga, mogu se dodati stabilizatori.
III. Upotreba jedinjenja za lečenje bolesti ili poremećaja
[0079] Ovde otkrivena jedinjenja su, koja su oralno biodostupna, manje toksični prolekovi analoga glutamina koji su antagonisti glutamina, omogućavaju klinički prihvatljivu paradigmu doziranja za bolesti ili stanja u koje je uključena prekomernai/ili aberantna aktivnost glutamina. Kako se ovde koristi, termin "antagonist glutamina" se odnosi na analog glutamina koji ometa metabolički put glutamina, na primer, inhibicijom ili blokiranjem metaboličkog puta nizvodno od glutamina u kome glutamin deluje kao prekursor jednog ili više neglutaminskih jedinjenja. Primeri takvih metaboličkih puteva su dobro poznati (videti, npr., Hensley et al., "Glutamine and cancer: cell biology, physiology, and clinical opportunities" J Clin Invest. 2013; 123(9):3678-3684; DeBerardinis et al., "Q’s next: the diverse functions of glutamine in metabolism, cell biology and cancer" Oncogene. 2009; 29(3):313-324; and Medina et al., "Relevance of glutamine metabolism to tumor cell growth" Mol Cell Biochem. 1992; 113(1):1-15). U nekim kontekstima, termin antagonist glutamina takođe uključuje analoge glutamina koji inhibiraju uzimanje glutamina u ćelijama, smanjujući na taj način njegovu biološku aktivnost. Bolesti ili stanja u koje je uključen višak i/ili aberantne aktivnosti glutamina uključuju, ali nisu ograničeni na, infekcije, rak, autoimune bolesti, neurodegenerativne ili neurološke bolesti i druge poremećaje centralnog nervnog sistema.
[0080] Uopšteno, ovde otkrivene upotrebe rezultiraju smanjenjem ozbiljnosti bolesti ili stanja kod subjekta. Pot terminom "smanjenje" misli se na inhibiciju, potiskivanje, ublažavanje, umanjivanje, zaustavljanje ili stabilizaciju simptom bolesti ili stanja.
[0081] Kako se ovde koristi, termini "lečiti", "lečenje", "tretman" i slično, odnose se na smanjenje ili ublažavanje bolesti ili stanja, i/ili simptoma povezanih sa tim. Biće cenjeno da, iako nije isključeno, lečenje bolesti ili stanja ne zahteva da se poremećaj, stanje ili simptomi povezani sa tim potpuno eliminišu.
[0082] Shodno tome, jedinjenje pronalaska, ili farmaceutska kompozicija bilo kog od njih, može se koristiti u količini koja je efikasna za lečenje bolesti ili stanja.
[0083] Predmet koji je ovde otkriven i za koji se ne traži zaštita, razmatra upotrebu proleka formule (I), ili farmaceutska kompozicija koja sadrži prolek formule (I), opciono zajedno sa najmanje jednim antimikrobnim agensom (npr., antibiotikom, antivirotikom, i slično), za lečenje infekcije.
[0084] Kao što se ovde koristi, „infekcija“ se odnosi na invaziju organizama koji izazivaju bolest u telesna tkiva organizma domaćina, njihovo razmnožavanje, i reakciju tkiva domaćina na ove organizme i toksine koje oni proizvode. Infektivna bolest, kao što je infekcija bilo kojom bakterijom ili virusom, se razmatra za lečenje korišćenjem jedinjenje formule (I), ili farmaceutske kompozicije bilo koje od njih.
[0085] U nekim primerima izvođenja, infekcija obuhvata bakterijsku infekciju. Antibakterijski efekti DON jedinjenja su demonstrirani kod E. coli (videti Coggin et al., "6-Diazo-5-Oxo-L-Norleucine Inhibition of Escherichia coli, "Journal of Bacteriology. 1965; 86). U nekim primerima izvođenja, jedinjenje formule (I), ili farmaceutska kompozicija bilo koje od njih, inhibira rast bakterija i/ili preživljavanje.
[0086] U nekim primerima izvođenja, infekcija obuhvata virusnu infekciju. Antivirusni efekti analoga glutamina, kao što je DON, su demonstrirani (videti, npr., Cinatl et al., "Antiviral effects of 6-diazo-5-oxo-L-norleucine on replication of herpes simplex virus type 1" Antiviral Research.
1997; 33:165-175; Nishio et al., "Antiviral effect of 6-diazo-5-oxo-L norleucine, antagonist of γ-glutamyl transpeptidase, on replication of human parainfluenza virus type 2," Journal of General Virology. 1990; 71:61-67). Primeri virusnih infekcija predviđenih za lečenje korišćenjem jedinjenja formule (I) ili farmaceutske kompozicije bilo kog od njih uključuju, bez ograničenja, herpes simpleks virus tipa 1 (HSV-1), herpes simpleks virus tipa 2 (HSV-2), humani citomegalovirus (HCMV), humani virus parainfluence tipa 2 (HPIV-2), virus Maloni leukemije (MLV), zauške, paramiksovirus, poliovirus, reovirus tipa 3, respiratorni sincicijalni virus (RSV), virus Sendai i virus vezikularnog stomatitisa (VSV ).
[0087] Opciono, jedinjenje, ili farmaceutska kompozicija bilo kog od njih, inhibira replikaciju virusa. , jedinjenje, ili farmaceutska kompozicija bilo kog od njih, inhibira replikaciju herpes simpleks virusa tipa 1 (HSV-1 Opciono, jedinjenje ili farmaceutska kompozicija bilo kog od njih, inhibira replikaciju herpes simpleks virusa tipa 2 (HSV-2). Opciono, jedinjenje, ili farmaceutska kompozicija bilo kog od njih, inhibira replikaciju humanog citomegalovirusa (HCMV). Opciono, jedinjenje, ili farmaceutska kompozicija bilo kog od njih, inhibira replikaciju humanog parainfluenca virusa tipa 2 (HPIV-2). Opciono, jedinjenje, ili farmaceutska kompozicija bilo kog od njih, inhibira replikaciju Maloni virusa leukemije (MLV). Opciono, jedinjenje, ili farmaceutska kompozicija bilo kog od njih, inhibira replikaciju zauški. Opciono, jedinjenje, ili farmaceutska kompozicija bilo kog od njih, inhibira replikaciju paramiksovirusa. Opciono, jedinjenje, ili farmaceutska kompozicija bilo kog od njih, inhibira replikaciju poliovirusa. Opciono, jedinjenje, ili farmaceutska kompozicija bilo kog od njih, inhibira replikaciju reovirusa tipa 3. Opciono, jedinjenje, ili farmaceutska kompozicija bilo kog od njih, inhibira replikaciju respiratornog sincicijalnog virusa (RSV). Opciono, jedinjenje, ili farmaceutska kompozicija bilo kog od njih, inhibira replikaciju Sendai virusa. Opciono, jedinjenje, ili farmaceutska kompozicija bilo kog od njih, inhibira replikaciju virusa vezikularnog stomatitisa (VSV).
[0088] Opciono, virusna infekcija je grip. Kako se ovde koristi, "influenca" se odnosi na viruse gripa A, B ili C, viruse parainfluence i bilo koji drugi virus sličan gripu (videti, npr., SAD objavu br. 2006/0276438, uključenu ovde referencom u celosti, koja otkriva upotrebu DON jedinjenja i azazerina za lečenje gripa).
[0089] Kao što je ovde otkriveno, ali nije zahtevano, predmet koji je sada otkriven obuhvata upotrebu jedinjenja formule (I), ili njegove farmaceutske kompozicije, opciono zajedno sa antivirusnim agensom, za proizvodnju leka za lečenje virusa infekcija i/ili inhibiranje replikacije.
[0090] Kako se ovde koristi, "antivirusni agens" uključuje jedinjenje koje inhibira replikaciju virusa u ćelijama, tkivima ili organizmima. Primeri antivirusnih agenasa predviđenih za upotrebu u kombinaciji sa prolekom formule (I), ili farmaceutskom kompozicijom koja sadrži prolek formule (I) uključuju, ali nisu ograničeni na, aciklovir (2-amino-1,9-dihidro- 9-[(2-hidroksietoksi)metil]-6H-purin-6-on), valaciklovir (L-valin, 2-[(2-amino-1,6-dihidro-6-okso-9H-purin-9-il)metoksi]etil estar, penciklovir (9-[4-hidroksi-3-(hidroksimetilbutil)]guanin), famciklovir (2-[2-(amino-9H-purin-9-il)]etil-1, 3-propandiol diacetat), ribavirin (1-beta-D-ribofuanozil-1-H-1,2,4-triazol-3-karboksamid), lamivudin ((2R,cis)-4-amino-1-(2- hidroksimetil-1,3-oksatiolan-5-il)-(1H)-pirimidin-2-on), amantadin (1-amantanamin hidrohlorid) i rimantadin (α-metiltriciklo (3.3.1.1/3.7 dekan-1-metilamin hidrohlorid).
[0091] Ovde otkriveni predmet razmatra korišćenje proleka formule (I), ili farmaceutske kompozicije koja sadrži prolek formule (I), opciono zajedno sa najmanje jednim hemioterapeutskim agensom, najmanje jednim radioterapijskim agensom i/ili najmanje jednim imunoterapeutskim sredstvom za lečenje raka. U nekim primerima izvođenja, ovo lečenje uključuje tretman bilo kojom kombinacijom radioterapije, imunoterapije, fotodinamičke terapije, protonske terapije i/ili hirurgije.
[0092] "Hemioterapeutski agens" se koristi da označi jedinjenje ili kompoziciju koja se primenjuje u lečenju raka. Hemioterapeutski agensi predviđeni za upotrebu u kombinaciji sa prolekom formule (I) ili farmaceutskom kompozicijom koja sadrži prolek formule (I) obuhvataju, ali nisu ograničeni na, agense za alkilovanje, kao što su tiotepa i ciklofosfamid; alkil sulfonate, kao što su busulfan, improsulfan i piposulfan; aziridine, kao što su benzodopa, karbokuon, meturedopa i uredopa; etilenimine i metilamelamine uključujući altretamin, trietilenmelamin, trietilenfosforamid, trietilentiofosfaoramid i trimetilolomelamin; azotne iperite, kao što su hlorambucil, hlonafazin, holofosfamid, estramustin, ifosfamid, mehloretamin, mehloretamin oksid hidrohlorid, melfalan, novembihin, fenesterin, prednimustin, trofosfamid, uracil iperit; nitrozuree, kao što su karmustin, hlorozotocin, fotemustin, lomustin, nimustin, ranimustin; antibiotike, kao što su aklacinomizini, aktinomicin, autramicin, azaserin, bleomicini, kaktinomicin, kaliheamicin, karabicin, kaminomicin, karzinofilin, hromomicini, daktinomicin, daunorubicin, detorubicin, 6-diazo-5-okso-L-norleucin, doksorubicin, epirubicin, ezorubicin, idarbucin, marcelomicin, mitomicini, mikofenolna kiselina, nogalamicin, olivomicini, peplomicin, potfiromicin, puromicin, kvelamicin, rodorubicin, streptonigrin, streptozocin, tubercidin, ubenimeks, zinostatin, zorubicin; antimetabolite, kao što su metotreksat i 5-fluorouracil (5-FU); analoge folne kiseline, kao što su denopterin, metotreksat, pteropterin, trimetreksat; analoge purina, kao što su fludarabin, 6-merkaptopurin, tiamiprin, tioguanin; analoge pirimidina, kao što su ancitabin, azacitidin, 6-azauridin, karmofur, citozin arabinozid, dideoksiuridin, doksifluridin, enocitabin, floksuridin, 5-FU; androgene, kao što su kalusteron, dromostanolon propionat, epitiostanol, mepitiostan, testolakton; antiadrenaline, kao što su aminoglutetimid, mitotan, trilostan; sredstva za dopunjavanje folne kiseline, kao što je folinska kiselina; aceglaton; aldofosfamid glikozid; aminolevulinska kiselina; amsakrin; bestrabucil; bisantren; edatraksat; defofamin; demekolcin; diazokinon; elformitin; eliptinijum acetat; etoglucid; galijum nitrat; hidroksiurea; lentinan; lonidamin; mitoguazon; mitoksantron; mopidamol; nitrakrin; pentostatin; fenamet; pirarubicin; podofilinska kiselina; 2-etilhidrazid; prokarbazin; PSK; razoksan; sizofuran; spirogermanijum; tenuazonska kiselina; triazikuon; 2,2’,2"-trihlorotrietilamin; uretan; vindezin; dakarbazin; manomustin; mitobronitol; mitolaktol; pipobroman; gacitozin; arabinozid (Ara-C); taksoide, npr. paklitaksel i docetaksel; hlorambucil; gemcitabin; 6-tioguanin; merkaptopurin; analoge platine, kao što su cisplatin i karboplatin; vinblastin; platina; etopozid; ifosfamid; mitomicin C; mitoksantron; vinkristin; vinorelbin; navelbin; novantron; tenipozid; daunomicin; aminopterin; kseloda; ibandronat; CPT11; inhibitor topoizomeraze RFS 2000; difluorometilornitin; retinoinska kiselina; esperamicini; kapecitabin; i farmaceutski prihvatljive soli, kiseline ili derivati bilo kog od gore navedenih. Hemioterapeutski agensi takođe uključuju anti-hormonske agense koji deluju tako što regulišu ili inhibiraju delovanja hormona na tumore, kao što su antiestrogeni uključujući na primer tamoksifen, raloksifen, aromataza-inhibirajući 4(5)-imidazoli, 4-hidroksitamoksifen, trioksifen, keoksifen, LY117018, onapriston i toremifen (Fareston); i antiandrogeni, kao što su flutamid, nilutamid, bikalutamid, leuprolid, i goserelin; i farmaceutski prihvatljive soli, kiseline ili derivati bilo kog od prethodno navedenih jedinjenja.
[0093] U nekim primerima izvođenja, hemioterapeutski agens je inhibitor topoizomeraze. Inhibitori topoizomeraze su hemioterapijski agensi koji ometaju delovanje enzima topoizomeraza (npr. topoizomeraze I ili II). Inhibitori topoizomeraza uključuju, ali nisu ograničeni na, doksorubicin HCl, daunorubicin citrat, mitoksantron HCl, aktinomicin D, etopozid, topotekan HCl, tenipozid i irinotekan, kao i farmaceutski prihvatljive soli, kiseline ili derivate bilo kog od ovih jedinjenja.
[0094] U nekim primerima izvođenja, hemoterapeutski agens je anti-metabolit. Antimetabolit je hemikalija sa strukturom koja je slična metabolitu potrebnom za normalne biohemijske reakcije, ali dovoljno različita da ometa jednu ili više normalnih funkcija ćelija, kao što je deljenje ćelija. Anti-metaboliti uključuju, ali nisu ograničeni na, gemcitabin, fluorouracil, kapecitabin, metotreksat natrijum, ralitreksed, pemetreksed, tegafur, citozin arabinozid, tioguanin, 5-azacitidin, 6-merkaptopuprin azatioprin, 6-tioguanin, pentostatin, fludarabin fosfat i kladribin, kao i farmaceutski prihvatljive soli, kiseline ili derivate bilo kog od ovih jedinjenja.
[0095] U određenim primerima izvođenja, hemoterapeutski agens je antimitotički agens, uključujući, ali ne ograničavajući se na, agense koji vezuju tubulin. U nekim primerima izvođenja, agens je taksan. U određenim primerima izvođenja, agens je paklitaksel ili docetaksel, ili farmaceutski prihvatljiva so, kiselina ili derivat paklitaksela ili docetaksela. U određenim alternativnim primerima izvođenja, antimitotički agens sadrži vinka alkaloid, kao što je vinkristin, binblastin, vinorelbin ili vindezin, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, kiseline ili derivate.
[0096] Kako se ovde koristi, izraz "imunoterapeutski agens" se odnosi na molekul koji može pomoći u lečenju bolesti indukcijom, pojačavanjem ili supresijom imunološkog odgovora u ćeliji, tkivu, organu ili subjektu. Primeri imunoterapeutskih agenasa predviđenih za upotrebu u kombinaciji sa prolekom formule (I), ili farmaceutskom kompozicijom koja sadrži prolek formule (I) uključuju, ali nisu ograničeni na, molekule imunološke kontrolne tačke (npr. antitela na proteine kontrolne tačke imunog sistema) , interleukini (npr. IL-2, IL-7, IL-12, IL-15), citokini (npr. interferoni, G-CSF, imikvimod), hemokini (npr. CCL3, CCL26, CXCL7), vakcine (npr. peptidne vakcine , vakcine dendritskih ćelija (DC), EGFRvIII vakcine, mezotilin vakcina, G-VAX, listerija vakcine) i adoptivna terapija T ćelijama, uključujući T ćelije sa himernim antigenim receptorom (CAR T ćelije).
[0097] Kako se ovde koristi, "radioterapeutski agens" označava agens koji se može koristiti u radioterapiji i koji deluje kroz oštećujuće ćelije (npr. maligne ćelije) kao meta kroz zračenje.
4
Primer radioterapeutskog sredstva predviđenog za upotrebu u kombinaciji sa prolekom formule (I), ili farmaceutskom kompozicijom koja sadrži prolek formule (I) je titanijum peroksid sadržan u čestici supstrata koji generiše hidroksil radijal kroz zračenje, i hidroksil radijalni vrši akciju napada na metu, kao što je opisano u SAD objavi br. 2013/0017266, koja je ovde uključena referencom u celosti.
[0098] Kako se ovde koristi, "kancer" kod pacijenta se odnosi na prisustvo ćelija koje poseduju karakteristike tipične za ćelije koje izazivaju kancer, na primer, nekontrolisanu proliferaciju, gubitak specijalizovanih funkcija, besmrtnost, značajan metastatski potencijal, značajno povećanje anti-apoptotičke aktivnosti, brzi rast i proliferaciju, i određene karakteristične morfologije i ćelijske markere. U nekim okolnostima, ćelije raka će biti u obliku tumora; takve ćelije mogu postojati lokalno unutar životinje ili cirkulisati u krvotoku kao nezavisne ćelije, na primer, leukemijske ćelije. "Tumor", kako se ovde koristi, odnosi se na rast i proliferaciju svih neoplastičnih ćelija, bilo malignih ili benignih, i na sve prekancerozne i kancerogene ćelije i tkiva. "Čvrsti tumor", kako se ovde koristi, je abnormalna masa tkiva koja generalno ne sadrži ciste ili tečne oblasti. Čvrsti tumor može biti u mozgu, debelom crevu, dojkama, prostati, jetri, bubrezima, plućima, jednjaku, glavi i vratu, jajnicima, grliću materice, želucu, debelom crevu, rektumu, bešici, materici, testisima i pankreasu, kao neograničavajući primeri. U nekim primerima izvođenja, čvrsti tumor regresira ili je njegov rast usporen ili zaustavljen nakon što se čvrsti tumor tretira metodama koje su sada otkrivene. U drugim primerima izvođenja, čvrsti tumor je maligni. U nekim primerima izvođenja, kancer obuhvata kancer stadijuma 0. U nekim primerima izvođenja, kancer obuhvata kancer stadijuma I. U nekim primerima izvođenja, kancer obuhvata kancer stadijuma II. U nekim primerima izvođenja, kancer obuhvata kancer stadijuma III. U nekim primerima izvođenja, kancer obuhvata kancer stadijuma IV. U nekim primerima izvođenja, kancer je refraktoran i/ili metastatski. Na primer, kancer može biti otporan na lečenje radioterapijom, hemoterapijom ili monoterapiju sa imunoterapijom. Kancer kako se ovde koristi uključuje novodijagnostikovane ili rekurentne karcinome, uključujući, bez ograničenja, akutnu limfoblastnu leukemiju, akutnu mijelogenu leukemiju, uznapredovali sarkom mekog tkiva, rak mozga, metastatski ili agresivni rak dojke, karcinom dojke, bronhogeni karcinom, horiokarcinom, hroničnu mijelocitnu leukemiju, karcinom kolona, kolorektalni karcinom, Juingov sarkom, karcinom gastrointestinalnog trakta, gliom, multiformni glioblastom, planocelularni karcinom glave i vrata, hepatocelularni karcinom, Hočkinovu bolest, intrakranijalni ependimoblastom, kancer debelog creva, leukemiju, rak jetre, rak pluća, Luisov karcinom pluća, limfom, maligni fibrozni histiocitom, tumor dojke, melanom, mezoteliom, neuroblastom, osteosarkom, rak jajnika, rak pankreasa, tumor Varolijevog mosta, rak dojke u premenopauzi, rak prostate, rabdomiosarkom, sarkom retikularnih ćelija, sarkom, sitnoćelijski rak pluća, čvrsti tumor, rak želuca, rak testisa i karcinom materice.
[0099] U nekim primerima izvođenja, kancer je akutna leukemija. U nekim primerima izvođenja, kancer je akutna limfoblastna leukemija. U nekim primerima izvođenja, kancer je akutna mijelogena leukemija. U nekim primerima izvođenja, kancer je uznapredovali sarkom mekog tkiva. U nekim primerima izvođenja, kancer je rak mozga. U nekim primerima izvođenja, kancer je rak dojke (npr. metastatski ili agresivni rak dojke). U nekim primerima izvođenja, kancer je karcinom dojke. U nekim primerima izvođenja, kancer je bronhogeni karcinom. U nekim primerima izvođenja, kancer je horiokarcinom. U nekim primerima izvođenja, kancer je hronična mijelocitna leukemija. U nekim primerima izvođenja, kancer je karcinom kolona (npr. adenokarcinom). U nekim primerima izvođenja, kancer je kolorektalni karcinom (npr. kolorektalni karcinom). U nekim primerima izvođenja, kancer je Juingov sarkom. U nekim primerima izvođenja, kancer je karcinom gastrointestinalnog trakta. U nekim primerima izvođenja, kancer je gliom. U nekim primerima izvođenja, kancer je multifomni glioblastom. U nekim primerima izvođenja, kancer je planocelularni karcinom glave i vrata. U nekim primerima izvođenja, kancer je hepatocelularni karcinom. U nekim primerima izvođenja, kancer je Hočkinova bolest. U nekim primerima izvođenja, kancer je intrakranijalni ependimoblastom. U nekim primerima izvođenja, kancer je rak debelog creva. U nekim primerima izvođenja, kancer je leukemija. U nekim primerima izvođenja, kancer je rak jetre. U nekim primerima izvođenja, kancer je rak pluća (npr., karcinom pluća). U nekim primerima izvođenja, kancer je Luisov karcinom pluća. U nekim primerima izvođenja, kancer je limfom. U nekim primerima izvođenja, kancer je maligni fibrozni histiocitom. U nekim primerima izvođenja, kancer obuhvata tumor dojke. U nekim primerima izvođenja, kancer je melanom. U nekim primerima izvođenja, kancer je mezoteliom. U nekim primerima izvođenja, kancer je neuroblastom. U nekim primerima izvođenja, kancer je osteosarkom. U nekim primerima izvođenja, kancer je rak jajnika. U nekim primerima izvođenja, kancer je rak pankreasa. U nekim primerima izvođenja, kancer obuhvata tumor Varolijevog mosta. U nekim primerima izvođenja, kancer je rak dojke u premenopauzi. U nekim primerima izvođenja, kancer je rak prostate. U nekim primerima izvođenja, kancer je rabdomiosarkom. U nekim primerima izvođenja, kancer je sarkom retikularnih ćelija. U nekim primerima izvođenja, kancer je sarkom. U nekim primerima izvođenja, kancer je sitnoćelijski rak pluća. U nekim primerima izvođenja, kancer obuhvata čvrst tumor. U nekim primerima izvođenja, kancer je rak želuca. U nekim primerima izvođenja, kancer je rak testisa. U nekim primerima izvođenja, kancer je karcinom materice.
[0100] U nekim primerima izvođenja, kancer obuhvata kancer zavisan od glutamina u kome je glutamin važan izvor za ćelijsku energiju kod kancera (npr. hematopoezni tumori, hepatomi, Erilihov karcinom (videti Huber et al., "Uptake of glutamine antimetabolites 6-diazo-5-oxo-L-norleucine (DON) in sensitive and resistant tumor cell lines," Int. J. Cancer.1988; 41:752-755)).
[0101] U nekim primerima izvođenja, kancer je kancer zavisan od Myc. Kako se ovde koristi, "kancer zavisan od Myc" se odnosi na kancer koji pokazuje aktivaciju, prekomernu ekspresiju i/ili amplifikaciju c-Myc. U nekim kontekstima, "kancer zavisan od Myc" je kancer u kome c-Myc igra ulogu u povećanom metabolizmu glutamina u ćelijama raka. Primeri Myc zavisnih kancera uključuju, bez ograničenja, limfom, neuroblastom i sitnoćelijski rak pluća.
[0102] U nekim primerima izvođenja, kancer je rak zavisan od mTORC1. Kako se ovde koristi, "kancer zavisan od mTORC1" se odnosi na kancer u kome se mTORC1 aktivira na način zavisan od glutamina, tj. mTORC1 igra ulogu u povećanom metabolizmu glutamina u ćelijama raka.
[0103] Predmet koji je ovde otkriven razmatra, ali ne zahteva, korišćenje proleka formule (I), ili farmaceutske kompozicije koja sadrži prolek formule (I), opciono zajedno sa najmanje jednim imunosupresivom i/ili antiinflamatornim agensom, za lečenje autoimune bolesti, imunološkog poremećaja ili inflamatornog poremećaja.
[0104] Kako se ovde koristi, "imunosupresivni agens" označava agens koji se može koristiti u imunoterapiji za smanjenje ili sprečavanje imunog odgovora u ćeliji, organu, tkivu ili subjektu. Primeri imunosupresivnih agenasa predviđenih za upotrebu u kombinaciji sa prolekom formule (I) ili farmaceutskom kompozicijom koja sadrži prolek formule (I) uključuju kortikosteroide, inhibitore kalcineurina, antiproliferativne agense, agoniste SIP receptora, inhibitore kinaze, monoklonska antilimfocitna antitela i poliklonska antilimfocitna antitela. Neograničavajući primeri kortikosteroida uključuju prednizon (Deltasone<®>i Orasone<®>) i metilprednizolon (SoluMedrol<®>). Neograničavajući primeri inhibitora kalcineurina uključuju ciklosporin (Ciklosporin A, SangCya, Sandimmune<®>, Neoral<®>, Gengraf<®>), ISA, Tx247, ABT-281, ASM 981 i takrolimus (Prograf<®>, FK506). Neograničavajući primeri antiproliferativnih agenasa uključuju mikofenolat mofetil (CellCept<®>), azatiopren (Imuran<®>) i sirolimus (Rapamune<®>). Neograničavajući primeri agonista SIP receptora uključuju FTY 720 ili njegove analoge. Neograničavajući primeri inhibitora kinaze uključuju inhibitore mTOR kinaze, koji su jedinjenja, proteini ili antitela koja ciljaju, smanjuju ili inhibiraju aktivnost i/ili funkciju članova porodice serin/treonin mTOR. Ovo uključuje, bez ograničenja, CCI-779, ABT578, SAR543, rapamicin i njegove derivate ili analoge, uključujući 40-O-(2-hidroksietil)-rapamicin, rapaloge, uključujući AP23573, AP23464, AP23675 i AP23675 i AP23841 od firme Ariad, everolimus (CERTICAN RAD001), biolimus 7, biolimus 9 i sirolimus (RAPAMUNE). Inhibitori kinaze takođe uključuju
4
inhibitore protein kinaze C, koji uključuju jedinjenja opisana u PCT publikacijama WO 2005/097108 i WO 2005/068455, koje su ovde uključene kao referenca u celini. Neograničavajući primeri monoklonskih antilimfocitnih antitela uključuju Muromonab-CD3 (Orthoclon OKT3<®>), antagonist receptora interleukina-2 (baziliksimab, Simulect<®>) i daklizumab (Zenapax<®>). Neograničavajući primeri poliklonskih antilimfocitnih antitela uključuju antitimocitni globulin-konjski (Atgam<®>) i antitimocitni globulin-zečiji (RATG, Thymoglobulin<®>). Ostali imunosupresivi uključuju, bez ograničenja, SERP-1, inhibitor serinske proteaze koji proizvodi maligni virus fibroma zeca (MRV) i virus miksoma (MYX), opisan u objavi SAD patenta br.2004/0029801, koja je ovde uključena kao referenca.
[0105] Kako se ovde koristi, "anti-inflamatorni agens" se odnosi na agens koji se može koristiti da spreči ili smanji inflamatorni odgovor ili zapaljenje u ćeliji, tkivu, organu ili subjektu. Primeri antiinflamatornih agenasa predviđenih za upotrebu u kombinaciji sa prolekom formule (I), ili farmaceutskom kompozicijom koja sadrži prolek formule (I) uključuju, bez ograničenja, steroidne anti-inflamatorne agense, nesteroidne anti-inflamatorne agense, ili njihovu kombinaciju. U nekim primerima izvođenja, anti-inflamatorni agensi obuhvataju klobetasol, alklofenak, alklometazon dipropionat, algeston acetonid, alfa amilazu, amcinafal, amcinafid, amfenak natrijum, amiprilozu hidrohlorid, anakinru, anirolak, anitrazafen, apazon, balzalasid dinatrijum, bendazak, benoksaprofen, benzidamin hidrohlorid, bromelaine, broperamol, budezonid, karprofen, cikloprofen, cintazon, kliprofen, klobetazol propionat, klobetazon butirat, klopirak, klotikazon propionat, kormetazon acetat, kortodokson, deflazakort, dezonid, dezoksimetazon, deksametazon, deksametazon acetat, dieksometazon dipropionat, diklofenak kalijum, diklofenak natrijum, diflorazon diacetat, diflumidon natrijum, diflunisal, difluprednat, diftalon, dimetil sulfoksid, drocinonid, endrisone, enlimomab, enolikam natrijum, epirizol, etodolak, etofenamat, felbinak, fenamol, fenbufen, fenklofenak, fenklorak, fendosal, fenpipalon, fentiazak, flazalon, fluazakort, flufenaminska kiselina, flumizol, flunisolid acetat, fluniksin, fluniksin meglumin, fluokortin butil, fluorometolon acetat, flukazon, flurbiprofen, fluretofen, flutikazon propionat, furaprofen, furoprofen, furobufen, halocinonid, halobetazol propionat, halopredon acetat, ibufenac, ibuprofen, ibuprofen aluminijum, ibuprofen pikonol, ilonidap, indometacin, indometacin natrijum, indoprofen, indoksol, intrazol, izoflupredon acetat, izoksepak, izoksikam, ketoprofen, lofemizol hidrohlorid, lomoksikam, loteprednol etabonat, meklofenamat natrijum, meklofenaminska kiselina, meklorizon dibutirat, mefenaminska kiselina, mezalamin, mezeklazon, olsalazin natrijum, orgotein, orpanoksin, oksaprozin, oksifenbutazon, paranilin hidrohlorid, pentozan polisulfat natrijum, fenbutazon natrijum glicerat, pirfenidon, piroksikam, piroksikam cinamat, piroksikam olamin, pirprofen, prednazat, prifelon, prodolna kiselina, prokvazon, proksazol, proksazol citrat, rimeksolon, romazarit, salkoleks, salnacedin, salsalat, sangvinarijum hlorid, seklazon, sermetacin, sudoksikam, sulindak, suprofen, talmetacin, talniflumat, talniflumat, talosalat, tebufelon, tenidap natrijum, tenoksikam, tesikam, tesimid, tetridamin, tiopinak, tiksokortol pivalat, tolmetin, tolmetin natrijum, triklonid, triflumidat, zidometacin, zomepirak natrijum, aspirin (acetilsalicilna kiselina), salicilna kiselina, kortikosteroidi, glukokortikoidi, takrolimus, pimekorlimus, njihove prolekove, ko-lekove, i njihove kombinacije. Anti-inflamatorni agens može takođe biti biološki inhibitor proinflamatornih signalnih molekula uključujući antitela na te biološke inflamatorne signalne molekule.
[0106] Autoimunost je neuspeh organizma da prepozna svoje sastavne delove (sve do submolekularnih nivoa) kao „ja“, što rezultira imunim odgovorom protiv sopstvenih ćelija i tkiva. Bilo koja bolest koja je posledica ovakvog aberantnog imunog odgovor naziva se autoimuna bolest. Neželjeni imuni odgovor mogu biti, na primer, imuni odgovori povezani sa autoimunim poremećajem, alergijama ili inflamatornim poremećajima. Termin "imunološki poremećaji" su bolesti koje uključuju imuni sistem i koje mogu da uključuju, ali nisu i ograničene na, alergije, autoimune bolesti, bolesti imunskog kompleksa, bolesti imunodeficijencije i karcinome imunog sistema. U nekim primerima izvođenja, autoimuna bolest, imuni poremećaj ili inflamatorni poremećaj je multipla skleroza.
[0107] Predmet koji je sada otkriven razmatra, ali ne zahteva zaštitu za upotrebu proleka formule (I), ili farmaceutske kompozicije koja sadrži prolek formule (I), opciono zajedno sa najmanje jednim neuroprotektivnim agensom i/ili najmanje jednim neurotrofnim faktorom, i/ili najmanje jednim neuroregenerativnim agensom, za lečenje neurodegenerativnog ili neurološkog poremećaja ili bolesti.
[0108] "Neurodegenerativni poremećaj" je bolest, poremećaj ili stanje koje se karakteriše progresivnim gubitkom strukture ili funkcije neurona (npr. degeneracija ili disfunkcija neurona ili drugih nervnih ćelija). Glutaminazom katalizovana hidroliza glutamina do glutamata je dominantan izvor glutamata u mozgu. Normalna sinaptička transmisija u centralnom nervnom sistemu (CNS) koristi glutamat kao glavni ekscitatorni amino kiselinski neurotransmiter. Veruje se da prekomerna glutamatergična signalizacija, poznata kao ekscitotoksičnost, uzrokuje CNS oštećenje kod različitih neurodegenerativnih bolesti, kao što su moždani udar, amiotrofična lateralna skleroza (ALS), Hantingtonova bolest, Alchajmerova bolest i HIV-povezana demencija. Shodno tome, bez želje da budemo vezani teorijom, veruje se da se ovde otkriveni prolekovi mogu koristiti za lečenje takvih neurodegenerativnih bolesti, na primer, inhibiranjem
4
glutaminaze da bi se poboljšalo oštećenje CNS koje je rezultat ekscitotoksičnosti usled prekomerne glutamatergične signalizacije.
[0109] Opciono, neurodegenerativni poremećaj je multipla skleroza (MS). DON se pokazao efikasan za ublažavanje eksperimentalnog autoimunog enhafalomijelitisa (EAE), životinjski model multiple skleroze (MS) (videti, npr., Shijie, et al., "Blockade of glutamate release from microglia attenuates experimental autoimmune encephalomyelitis in mice," Tohoku J. Exp. Med.
2009; 217:87-92). Opciono, neurodegenerativni poremećaj je demencija povezana sa HIV virusom (HAD). Opciono, neurodegenerativni poremećaj je ishemija (npr. prolazna ishemijska povreda mozga). Opciono, neurodegenerativni poremećaj je moždani udar. Opciono, neurodegenerativni poremećaj je amiotrofična lateralna skleroza (ALS). Opciono, neurodegenerativni poremećaj je Hantingtonova bolest. Opciono, neurodegenerativni poremećaj je Alchajmerova bolest.
[0110] Kao što je takođe otkriveno, mada se ne traži zaštita, predmet koji je ovde otkriven daje metode za inhibiciju prekomerne i/ili aberantne aktivnosti glutamina koja se nalazi kod subjekta sa bolešću ili stanjem. Kako se ovde koristi, izraz "inhibirati" znači smanjiti ili umanjiti prekomernu i/ili aberantnu aktivnost glutamina pronađenu kod subjekta. Termin "inhibirati" takođe može značiti smanjenje, potiskivanje, slabljenje, smanjenje, zaustavljanje ili stabilizaciju razvoja ili progresije bolesti ili stanja. Može doći do inhibicije, na primer, za najmanje 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 98%, 99% ili čak 100% u poređenju sa netretiranim kontrolnim subjektom ili subjektom bez bolesti ili poremećaja. Kako se ovde koristi, izraz "višak aktivnosti glutamina" označava povećanje aktivnosti glutamina kod subjekta sa bolešću ili stanjem u poređenju sa aktivnošću glutamina kod subjekta bez slične bolesti ili stanja, kao što je povećanje od približno 100%, 100%, 200%, 300%, 400%, 500%, 600%, 700%, 800%, 900%, 1000% ili više. Kako se ovde koristi, izraz "aberantna aktivnost glutamina" označava promenu u biološkoj aktivnosti glutamina kod subjekta sa bolešću ili stanjem u poređenju sa aktivnošću glutamina kod subjekta bez slične bolesti ili stanja, kao što je upotreba glutamina u rast i/ili proliferaciju malignih, neoplastičnih ili drugih patoloških ćelijskih procesa.
[0111] Opciono, bolest ili stanje uključuje prekomernu i/ili aberantnu aktivnost glutamina. Postupak može dalje da obuhvata inhibiciju prekomerne i/ili aberantne aktivnosti glutamina kada se primenjuju jedinjenja formule (I), ili farmaceutska kompozicija bilo kog od njih.
[0112] Uopšteno, predmet koji je sada otkriven obuhvata upotrebu jedinjenja prema pronalasku, ili farmaceutske kompozicije bilo kog od njih, za lečenje bolesti ili stanja. Prema pronalasku, jedinjenje je za upotrebu u lečenju kancera kod subjekta. Kao što je takođe otkriveno, ali se ne traži zaštita, jedinjenje formule (I) ili farmaceutska kompozicija bilo kog od njih se koristi za
4
lečenje bolesti ili stanja izabranog iz grupe koju čine infekcija, autoimuna bolest, inflamatorna bolest i neurodegenerativna ili neurološka bolest. Opciono, jedinjenje formule (I), ili farmaceutska kompozicija bilo kog od njih, se koristi za lečenje bolesti ili stanja izabranog iz grupe koju čine multipla skleroza, konvulzije, epilepsija i virusni encefalitis. Opciono, jedinjenje formule (I), ili farmaceutska kompozicija bilo kog od njih, se koristi za lečenje bolesti ili stanja koje uključuje višak i/ili aberantnu aktivnost glutamina. Upotreba može uključivati inhibiciju prekomerne i/ili aberantne aktivnosti glutamina kada se jedinjenje formule (I), ili farmaceutska kompozicija bilo kog od njih, koristi za lečenje bolesti ili stanja.
IV. Opšte definicije
[0113] Iako su ovde upotrebljeni posebni termini, oni se upotrebljavaju samo u opštem i opisnom smislu, a ne u svrhu ograničenja. Osim ako nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni termini upotrebljeni ovde imaju isto značenje koje uobičajeno razume stručnjak u tehnici kojoj pripada ovaj trenutno opisan predmet.
[0114] Iako se veruje da su sledeći termini u vezi sa jedinjenjima formule (I) dobro razumljivi stručnjaku u tehnici, sledeće definicije su prikazane da bi se olakšalo objašnjenje ovde otkrivenog predmeta. Ove definicije imaju za cilj da dopune i ilustruju, a ne isključe, definicije koje bi stručnjaku u tehnici bile jasne nakon pregleda ovog otkrića.
[0115] Termini supstituisano, bilo da im prethodi termin "izborno" ili ne, i supstituent, kako su upotrebljeni ovde, odnose se na sposobnost, prema proceni stručnjaka u tehnici, da promeni jednu funkcionalnu grupu za drugu funkcionalnu grupu na molekulu, pod uslovom da se održava valencija svih atoma. Kada se više pozicija u bilo kojoj datoj strukturi može supstituisati sa više od jednog supstituenta odabranog iz određene grupe, supstituent može biti isti ili različit na svakoj poziciji. Supstituenti takođe mogu biti dodatno supstituisani (na primer, supstituent aril grupe može imati drugi supstituent, kao što je druga aril grupa, koja je dalje supstituisana na jednom ili više pozicija).
[0116] Tamo gde su supstituisane grupe ili povezujuće grupe specificirane njihovim konvencionalnim hemijskim formulama, ispisanim sleva nadesno, one podjednako obuhvataju hemijski identične supstituente koji bi nastali pisanjem strukture s desna na levo, npr. -CH2O- je ekvivalentno -OCH2- ; -C (= O) O- je ekvivalentno -OC (= O)-; -OC (= O) NR- je ekvivalentno -NRC (= O) O- i slično
[0117] Kada se upotrebljava termin "nezavisno odabran", supstituenti na koje se poziva (npr. R grupe, kao što su grupe R1, R2i slično, ili promenljive, kao što su "m" i "n"), mogu biti identične
4
ili različit. Na primer, i R1i R2mogu biti supstituisani alkili, ili R1može biti vodonik, a R2može biti supstituisani alkil, i slično.
[0118] Termini "a", "an" ili "a (n)", kada se upotrebljavaju u odnosu na grupu supstituenata ovde, znače najmanje jedan. Na primer, gde je jedinjenje supstituisano sa "an" alkil ili aril, jedinjenje je izborno supstituisano sa najmanje jednim alkilom i/ili najmanje jednim arilom. Štaviše, gde je deo supstituisan sa R supstituentom, grupa se može nazvati "R-supstituisana". Tamo gde je deo R-supstituisan, deo je supstituisan sa najmanje jednim R supstituentom i svaki R supstituent je izborno različit.
[0119] Imenovani "R" ili grupa će generalno imati strukturu koja je u tehnici prepoznata kao odgovarajuća grupi sa tim imenom, osim ako nije drugačije naznačeno ovde. U cilju ilustracije, u nastavku su definisane određene reprezentativne "R" grupe kako su prethodno navedene.
[0120] Opisi jedinjenja prema ovom otkriću ograničeni su principima hemijskog vezivanja koji su poznati stručnjacima u tehnici. Shodno tome, tamo gde se grupa može supstituisati sa jednim ili više supstituenata, takve supstitucije se biraju tako da budu u skladu sa principima hemijskog vezivanja i da daju jedinjenja koja nisu inherentno nestabilna i/ili bi bila poznata nekom od običnih stručnjaka u tehnici verovatno će biti nestabilna u uslovima okoline, kao što su vodeni, neutralni i nekoliko poznatih fizioloških uslova. Na primer, heterocikloalkil ili heteroaril je vezan za ostatak molekula preko heteroatoma u prstenu u skladu sa principima hemijskog vezivanja koji su poznati stručnjacima u tehnici, čime se izbegavaju inherentno nestabilna jedinjenja.
[0121] Osim ako nije drugačije eksplicitno definisano, "supstituentna grupa", kako je upotrebljena ovde, uključuje funkcionalnu grupu izabranu od jednog ili više sledećih grupa, koji su ovde definisani:
Termin ugljovodonik, kako je upotrebljen ovde, odnosi se na bilo koju hemijsku grupu koja sadrži vodonik i ugljenik. Ugljovodonik može biti supstituisan ili nesupstituisan. Kao što bi bilo poznato stručnjaku u tehnici, sve valencije moraju biti zadovoljene prilikom bilo kakve supstitucije. Ugljovodonik može biti nezasićen, zasićen, razgranat, nerazgranat, cikličan, policikličan ili heterocikličan. Ilustrativni ugljovodonici su dalje ovde definisani u nastavku i uključuju, na primer, metil, etil, n-propil, izopropil, ciklopropil, alil, vinil, n-butil, terc-butil, etinil, cikloheksil i slično.
[0122] Dalje, upoštenije, "karbil" se odnosi na atom ugljenika ili grupu koja sadrži jedna ili više atoma ugljenika koji funkcionišu kao bivalentni radikal.
[0123] Termin "alkil", sam po sebi ili kao deo drugog supstituenta, znači, osim ako nije drugačije naznačeno, ravni (tj. nerazgranati) ili razgranati lanac, acikličnu ili cikličnu ugljovodoničnu grupu ili njihovu kombinaciju, koja može da bude potpuno zasićena, mono- ili polinezasićena, i
4
može da uključuje di- i multivalentne grupe, koje imaju naznačeni broj atoma ugljenika (tj. C1-C10označava jedan do deset ugljenika, uključujući 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 i 10 ugljenika). U posebnim primerima izvođenja, termin "alkil" se odnosi i na C1-20, uključujući 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 i 20 ugljenika, linearnih (tj. "ravnih lanaca"), razgranatih ili cikličnih, zasićenih ili najmanje delimično, a u nekim slučajevima i potpuno nezasićenih (tj. alkenil i alkinil) ugljovodoničnih radikala izvedenih iz ugljovodonične grupe koja sadrži između jednog i dvadeset atoma ugljenika uklanjanjem jednog atoma vodonika.
[0124] Reprezentativne zasićene ugljovodonične grupe uključuju, ali se ne ograničavaju na, metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, izobutil, sek-butil, terc-butil, n-pentil, sek-pentil, izopentil, neopentil, n- heksil, sek-heksil, n-heptil, n-oktil, ndecil, n-undecil, dodecil, cikloheksil, (cikloheksil) metil, ciklopropilmetil i njihove homologe i izomere.
[0125] "Razgranati" se odnosi na alkil grupu u kojoj je niža alkil grupa, kao što je metil, etil ili propil, vezana za linearni alkil lanac. "Niži alkil" se odnosi na alkil grupu koja ima 1 do oko 8 atoma ugljenika (tj. C1-8alkil), na primer, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 ili 8 atoma ugljenika. "Viši alkil" se odnosi na alkil grupu koja ima oko 10 do oko 20 atoma ugljenika, na primer, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 ili 20 atoma ugljenika. U određenim primerima izvođenja, "alkil" se odnosi naročito na C1-8alkile sa ravnim lancima. U drugim primerima izvođenja, "alkil" se posebno odnosi na C1-8alkile razgranatog lanca.
[0126] Alkil grupe mogu izborno biti supstituisane ("supstituisani alkil") sa jednim ili više supstituenata alkilnih grupa, koji mogu biti isti ili različiti. Termin "supstituent alkilne grupe" uključuje, ali se ne ograničava na alkil, supstituisani alkil, halo, arilamino, acil, hidroksil, ariloksil, alkoksil, alkiltio, ariltio, aralkiloksil, aralkiltio, karboksil, alkoksikarbonil, okso i cikloalkil. Izborno, duž alkilnog lanca može biti ubačen jedan ili više atoma kiseonika, sumpora ili supstituisanih ili nesupstituisanih azota, pri čemu je azotni supstituent vodonik, niži alkil (ovde takođe označen kao "alkilaminoalkil") ili aril.
[0127] Tako, kako je upotrebljen ovde, termin "supstituisani alkil" uključuje alkilne grupe, kako je definisano ovde, u kojima su jedan ili više atoma ili funkcionalnih grupa alkilne grupe zamenjeni drugim atomom ili funkcionalnom grupom, uključujući, na primer, alkil, supstituisani alkil , halogen, aril, supstituisani aril, alkoksil, hidroksil, nitro, amino, alkilamino, dialkilamino, sulfat i merkapto.
[0128] Termin "heteroalkil", sam po sebi ili u kombinaciji sa drugim terminom, znači, osim ako nije drugačije naznačeno, stabilan ravni ili razgranati lanac, ili cikličnu ugljovodoničnu grupu, ili njihove kombinacije, koji se sastoji od najmanje jednog atoma ugljenika i najmanje jednog heteroatoma odabranog iz grupe koja se sastoji od O, N, P, Si i S, i pri čemu atomi azota, fosfora
4
i sumpora mogu izborno da se oksidišu, a heteroatom azota može izborno da se kvaternizuje. Heteroatom(i) O, N, P i S i Si mogu biti postavljeni na bilo koju unutrašnju poziciju heteroalkilne grupe ili na poziciju na kojoj je alkil grupa vezana za ostatak molekula. Primeri uključuju, ali se ne ograničavaju na, -CH2-CH2-O-CH3, -CH2-CH2-NH-CH3, -CH2-CH2-N(CH3)-CH3, -CH2-S-CH2-CH3, -CH2-CH25-S(O)-CH3, -CH2-CH2-S(O)2-CH3, -CH=CHO-CH3, -Si(CH3)3, -CH2-CH=N-OCH3, -CH=CH-N(CH3)- CH3, O-CH3, -O-CH2-CH3, i -CN. Do dva ili tri heteroatoma mogu biti uzastopna, kao što je, na primer, -CH2-NH-OCH3i -CH2-O-Si(CH3)3.
[0129] Kao što je prethodno opisano, heteroalkil grupe, kako su upotrebljene ovde, uključuju one grupe koje su vezane za ostatak molekula putem heteroatoma, kao što su -C (O) NR ', -NR'R'', -OR', -SR, -S(O)R, i/ili -S(O2)R'. Kada se izgovara "heteroalkil", nakon čega sledi navođenje specifičnih heteroalkil grupa, kao što je -NR'R ili slično, podrazumeva se da termini heteroalkil i -NR'R" nisu suvišni ili međusobno isključivi. Umesto toga, specifične heteroalkil grupe se citiraju zbog veće jasnoće.Tako, termin "heteroalkil" ne treba ovde tumačiti kao isključivanje specifičnih heteroalkil grupa, kao što je -NR'R"ili slično.
[0130] "Ciklični" i "cikloalkil" se odnose na ne-aromatični mono- ili multiciklični sistem prstenova sa oko 3 do oko 10 atoma ugljenika, na primer, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ili 10 atoma ugljenika. Cikloalkil grupa može izborno biti delimično nezasićena. Cikloalkil grupa takođe može biti izborno supstituisana sa supstituentom alkil grupe kako je definisano ovde, okso i/ili alkilenom. Izborno, duž cikličnog alkilnog lanca može biti umetnut jedan ili više atoma kiseonika, sumpora ili supstituisanih ili nesupstituisanih azota, pri čemu je azotni supstituent vodonik, nesupstituisani alkil, supstituisani alkil, aril ili supstituisani aril, čime se obezbeđuje heterociklična grupa. Reprezentativni monociklični cikloalkilni prstenovi uključuju ciklopentil, cikloheksil i cikloheptil. Višeciklični cikloalkilni prstenovi uključuju adamantil, oktahidronaftil, dekalin, kamfor, kamfan i noradamantil i spojene sisteme prstena, kao što su dihidro- i tetrahidronaftalen, i slično.
[0131] Termin "cikloalkilalkil", kako je upotrebljen ovde, odnosi se na cikloalkil grupu kako je prethodno definisano, koja je vezana za osnovni molekularni deo preko alkil grupe, takođe kako je prethodno definisano. Primeri cikloalkilalkil grupa uključuju ciklopropilmetil i ciklopentiletil.
[0132] Termini "cikloheteroalkil" ili "heterocikloalkil" odnose se na ne-aromatični sistem prstena, nezasićen ili delimično nezasićen sistem prstena, kao što je 3- do 10-člani supstituisani ili nesupstituisani cikloalkilni sistem prstena, uključujući jedan ili više heteroatoma, koji mogu biti isti ili različiti, i odabrani su iz grupe koja se sastoji od azota (N), kiseonika (O), sumpora (S), fosfora (P) i silicijuma (Si), i izborno mogu uključivati jednu ili više dvostrukih veza.
[0133] Cikloheteroalkilni prsten može biti izborno spojen sa ili na drugi način vezan za druge cikloheteroalkilne prstenove i/ili ne-aromatične ugljovodonične prstenove. Heterociklični prstenovi uključuju one koji imaju od jednog do tri heteroatoma nezavisno odabrana od kiseonika, sumpora i azota, u kojima azot i heteroatomi sumpora mogu izborno da se oksidišu, a azotni heteroatom može izborno biti kvaternizovan. U određenim primerima izvođenja, termin heterociklički se odnosi na ne-aromatični 5-, 6- ili 7-člani prsten ili policikličnu grupu pri čemu je najmanje jedan atom prstena heteroatom odabran od O, S i N (pri čemu heteroatomi azota i sumpora mogu biti izborno oksidovani), uključujući, ali se ne ograničavajući na, dvo- ili tricikličnu grupu, koja sadrži spojene šestočlane prstenove koji imaju između jednog i tri heteroatoma nezavisno odabrana od kiseonika, sumpora i azota, pri čemu (i) svaki 5- članski prsten ima 0 do 2 dvostruke veze, svaki 6-člani prsten ima 0 do 2 dvostruke veze, a svaki 7-člani prsten ima 0 do 3 dvostruke veze, (ii) heteroatomi azota i sumpora mogu biti izborno oksidovani, (iii) azotni heteroatom može izborno biti kvaternizovan, i (iv) bilo koji od prethodno navedenih heterocikličnih prstenova može biti spojen sa arilnim ili heteroarilnim prstenom. Reprezentativni sistemi cikloheteroalkil prstenova uključuju, ali se ne ograničavajući na, pirolidinil, pirolinil, imidazolidinil, imidazolinil, pirazolidinil, pirazolinil, piperidil, piperazinil, indolinil, hinuklidinil, morfolinil, tiomorfolinil, tiadiazinanil, tetrahidrofuranil i slično.
[0134] Termini "cikloalkil" i "heterocikloalkil", sami po sebi ili u kombinaciji sa drugim terminima, predstavljaju, osim ako nije drugačije navedeno, ciklične verzije "alkila" i "heteroalkila", respektivno. Dodatno, za heterocikloalkil, heteroatom može zauzeti poziciju na kojoj je heterocikl vezan za ostatak molekula. Primeri cikloalkila uključuju, ali se ne ograničavaju na, ciklopentil, cikloheksil, 1-cikloheksenil, 3-cikloheksenil, cikloheptil i slično. Primeri heterocikloalkila uključuju, ali se ne ograničavaju na, 1- (1,2,5,6-tetrahidropiridil), 1-piperidinil, 2-piperidinil, 3-piperidinil, 4-morfolinil, 3-morfolinil, tetrahidrofuran-2-il , tetrahidrofuran-3-il, tetrahidrotien-2-il, tetrahidrotien-3-il, 1-piperazinil, 2-piperazinil i slično. Termini "cikloalkilen" i "heterocikloalkilen" odnose se na dvovalentne derivate cikloalkila i heterocikloalkila, respektivno.
[0135] Nezasićena alkil grupa je grupa koja ima jednu ili više dvostrukih veza ili trostrukih veza. Primeri nezasićenih alkil grupa uključuju, ali se ne ograničavaju na, vinil, 2-propenil, krotil, 2-izopentenil, 2- (butadienil), 2,4-pentadienil, 3- (1,4-pentadienil), etinil, 1- i 3-propinil, 3-butinil, i više homologe i izomere. Alkilne grupe koje su ograničene na ugljovodonične grupe nazivaju se "homoalkil".
[0136] Preciznije, termin "alkenil" kako je upotrebljen ovde odnosi se na monovalentnu grupu izvedenu iz inkluzivnog C1-20ravnog ili razgranatog ugljovodoničnog dela koja ima najmanje
1
jednu dvostruku vezu ugljenik-ugljenik uklanjanjem jednog molekula vodonika. Alkenilne grupe uključuju, na primer, etenil (tj. vinil), propenil, butenil, 1-metil-2-buten-1-il, pentenil, heksenil, oktenil, alenil i butadienil.
[0137] Termin "cikloalkenil", kako je upotrebljen ovde, odnosi se na ciklični ugljovodonik koji obuhvata najmanje jednu dvostruku vezu ugljenik-ugljenik. Primeri cikloalkenil grupa uključuju ciklopropenil, ciklobutenil, ciklopentenil, ciklopentadien, cikloheksenil, 1,3-cikloheksadien, cikloheptenil, cikloheptatrienil i ciklooktenil.
[0138] Termin "alkinil" kako je upotrebljen ovde odnosi se na monovalentnu grupu izvedenu iz ravnog ili razgranatog C1-20ugljovodonika sa označenim brojem ugljenikovih atoma koji obuhvata najmanje jednu trostruku vezu ugljenik-ugljenik. Primeri "alkinil" uključuju etinil, 2-propinil (propargil), 1-propinil, pentinil, heksinil i heptinil grupe i slično.
[0139] Termin "alkilen" sam po sebi ili kao deo drugog supstituenta odnosi se na ravnu ili razgranatu dvovalentnu alifatičnu ugljovodoničnu grupu izvedenu iz alkil grupe koja ima od 1 do oko 20 atoma ugljenika, npr. 1, 2, 3, 4, 5, 6 , 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 ili 20 atoma ugljenika. Alkilen grupa može biti ravna, razgranata ili ciklična. Alkilen grupa takođe može da bude opciono nezasićena i/ili supstituisana sa jednim ili više "supstituenta alkil grupe." Opciono, duž alkilen grupe može da bude ubačen jedan ili više kiseonika, sumpora ili supstituisanih ili nesupstituisanih atoma azota (koji se ovde takođe označavaju kao "alkilaminoalkil"), pri čemu je supstituent na azotu alkil kao što je prethodno opisan. Tipične alkilen grupe uključuju metilen (-CH2-); etilen (-CH2-CH2-); propilen (-(CH2)3-); cikloheksilen (-C6H10-); -CH=CH-CH=CH-; -CH=CH-CH2-; -CH2CH2CH2CH2-, -CH2CH=CHCH2-, -CH2CsCCH2-, -CH2CH2CH(CH2CH2CH3)CH2-, -(CH2)q-N(R)-(CH2)r-, pri čemu svaki od q i r je nezavisno ceo broj od 0 do oko 20, npr., 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 ili 20, i R je vodonik ili niži alkil; metilendioksil (-O-CH2-O-); i etilendioksil (-O-(CH2)2-O-). Alkilen grupa može imati oko 2 do oko 3 atoma ugljenika i dalje može imati 6-20 ugljenika. Tipično, alkil (ili alkilen) grupa će imati od 1 do 24 atoma ugljenika, pri čemu su one grupe koje imaju 10 ili manje atoma ugljenika neki primeri izvođenja prema ovom otkriću. "Niži alkil" ili "niži alkilen" je alkil ili alkilen grupa kraćeg lanca, koja generalno ima osam ili manje atoma ugljenika.
[0140] Termin "heteroalkilen" sam po sebi ili kao deo drugog supstituenta označava dvovalentnu grupu izvedenu iz heteroalkila, kao primer, ali ne ograničavajući se na -CH2-CH2-S-CH2-CH2- i -CH2-S-CH2-CH2- NH-CH2-. Za heteroalkilenske grupe, heteroatomi takođe mogu zauzeti jedan ili oba kraja lanca (na primer, alkilenokso, alkilendiokso, alkilenamino, alkilendiamino i slično). Nadalje, za alkilen i heteroalkilen povezujuće grupe, nijedna orijentacija povezujuće grupe nije
2
implicirana smerom u kojem je ispisana formula povezujuće grupe. Na primer, formula -C(O)OR'- predstavlja i -C(O)OR'- i –R'OC(O)-.
[0141] Termin "aril" označava, osim ako nije drugačije naznačeno, aromatični ugljovodonični supstituent koji može biti jedan prsten ili više prstenova (kao što je od 1 do 3 prstena), koji su spojeni zajedno ili povezani kovalentno. Arili uključuju fenil (C6), naftil (C10) i bifenil (C12).
[0142] Termin "heteroaril" se odnosi na aril grupe (ili prstenove) koje obuhvataju od jednog do četiri heteroatoma (u svakom odvojenom prstenu u slučaju više prstenova) odabranih od N, O i S, pri čemu su atomi azota i sumpora izborno oksidovani , i atom(i) azota su izborno kvaternizovani. Heteroarilna grupa može biti vezana za ostatak molekula preko ugljenika ili heteroatoma. Neograničavajući primeri arilnih i heteroarilnih grupa uključuju fenil, 1-naftil, 2-naftil, 4-bifenil, 1-pirolil, 2-pirolil, 3-pirolil, 3-pirazolil, 2-imidazolil, 4-imidazolil, pirazinil, 2-oksazolil, 4-oksazolil, 2-fenil-4- oksazolil, 5-oksazolil, 3-izoksazolil, 4-izoksazolil, 5-izoksazolil, 2-tiazolil, 4-tiazolil, 5-tiazolil, 2-furil, 3- furil, 2-tienil, 3-tienil, 2-piridil, 3-piridil, 4-piridil, 2-pirimidil, 4-pirimidil, 5-benzotiazolil, purinil, 2-benzimidazolil, 5-indolil, 1-izohinolil, 5-izohinolil, 2-hinoksalinil, 5-hinoksalinil, 3-hinolil i 6-hinolil. Supstituenti za svaki od prethodno navedenih arilnih i heteroarilnih sistema prstenova odabrani su iz grupe prihvatljivih supstituenata opisanih u nastavku. Termini "arilen" i "heteroarilen" odnose se na dvovalentne oblike arila i heteroarila, respektivno.
[0143] U daljim primerima izvođenja, termin "heteroaril" se odnosi na C5-C20aromatični prsten u kome je najmanje jedan atom ugljenika zamenjen heteroatomom izabranim od O, S, N, opciono supstituisan sa najmanje jednim supstituentom odabranim iz grupe koji se sastoji od C1-C6alkila, hidroksi, C1-C4alkoksi, merkapto, C1-C4alkiltio, amino, -NH(C1-C6alkil), -N(C1-C6alkil)2, -O(C6-C12aril) , -N(C6-C12aril)2, -NH(C6-C12aril), -S(C6-C12aril), halogen, -CF3, -SO3H, -COOH, -COO(C1-C8alkil), - SO2NH2, -SO2NH(C1-C6alkil ili C6-C12aril), -CN, -NO3, -C(O)(C1-C8alkil), -C(O)(C6-C12aril), -N(C1-C6alkil ili H)C(O)(C1-C6alkil ili H), -C(O)N(C1-C6alkil ili H)2.
[0144] Primeri heteroarila obuhvataju, ali nisu ograničeni na, piridil, pirimidinil, pirazinil, furanil, tienil, pirazolil, oksazolil, tiazolil, izotiazolil, izoksazolil, pirolil, imidazolil, indolil, inodolinoil, imidazopiridazinil.
[0145] U daljim primerima izvođenja, termin "aril" takođe može da se odnosi na C6-C14aril, opciono supstituisan sa najmanje jednim supstituentom odabranim iz grupe koja se sastoji od C1-C6alkila, hidroksi, C1-C4alkoksi, merkapto, C1- C4alkiltio, amino, -NH(C1-C6alkil), -N(C1-C6alkil)2, -O(C6-C12aril), -N(C6-C12aril)2, -NH(C6-C12aril) ), -S(C6-C12aril), halogen, -CF3, -SO3H, -COOH, -COO(C1-C8alkil), -SO2NH2, -SO2NH(C1-C6alkil ili C6-C12aril), -CN , -NO3, C(O)(C1-C8alkil), -C(O)(C6-C12aril), -N(C1-C6alkil ili H)C(O)(C1-C6alkil ili H), -C(O)N(C1-C6alkil ili H)2.
[0146] U cilju kraćeg objašnjenja, termin "aril" kada se upotrebljava u kombinaciji sa drugim terminima (npr. ariloksi, ariltioksi, arilalkil) uključuje i arilne i heteroarilne prstenove kako je prethodno definisano. Prema tome, termini "arilalkil" i "heteroarilalkil" obuhvataju one grupe u kojima je aril ili heteroaril grupa vezana za alkil grupu (npr. benzil, fenetil, piridilmetil, furilmetil i slično) uključujući one alkil grupe u kojima je atom ugljenika (npr. metilenska grupa) zamenjen, na primer, atomom kiseonika (npr. fenoksimetil, 2-piridiloksimetil, 3- (1-naftiloksi) propil, i slično). Međutim, termin "haloaril", kako je upotrebljen ovde, odnosi se samo na arile supstituisane sa jednim ili više halogena.
[0147] Kada heteroalkil, heterocikloalkil ili heteroaril uključuje određeni broj članova (npr. "3 do 7 članova"), termin "član" se odnosi na ugljenik ili heteroatom.
[0148] Dalje, struktura je predstavljena generalno formulom:
kako je upotrebljena ovde, odnosi se na strukturu prstena, na primer, ali ne ograničavajući se na 3-ugljenik, 4-ugljenik, 5-ugljenik, 6-ugljenik, 7-ugljenik i slično, alifatičnoi i/ili aromatično ciklično jedinjenje, uključujući zasićenu strukturu prstena, delimično zasićenu strukturu prstena i nezasićenu strukturu prstena, koja sadrži supstituentnu R grupu, pri čemu R grupa može biti prisutna ili odsutna, a kada je prisutna, jedna ili više R grupa mogu biti supstituisane na jednom ili više dostupnih atoma ugljenika strukture prstena. Prisustvo ili odsustvo R grupe i broj R grupa određeno je vrednošću promenljive "n", koja je ceo broj koji generalno ima vrednost u rasponu od 0 do broja atoma ugljenika u prstenu koji je dostupan za supstituciju. Svaka R grupa, ako ih ima više, supstituisana je na raspoloživom ugljeniku strukture prstena, a ne na drugoj R grupi. Na primer, prethodna struktura gde je n od 0 do 2 sadržala bi grupe jedinjenja uključujući, ali ne ograničavajući se na:
4
i slično.
[0149] Isprekidana linija koja predstavlja vezu u cikličnoj strukturi prstena ukazuje da veza može biti prisutna ili odsutna u prstenu. To jest, isprekidana linija koja predstavlja vezu u cikličnoj strukturi prstena označava da je struktura prstena odabrana iz grupe koja se sastoji od zasićene struktura prstena, delimično zasićene struktura prstena i nezasićene struktura prstena.
[0150] Simbol ( ) označava tačku vezivanja hemijske grupe za ostatak molekula.
[0151] Kada se imenovani atom aromatičnog prstena ili heterocikličnog aromatičnog prstena definiše kao "odsutan", imenovani atom se zamenjuje direktnom vezom.
[0152] Svaki od prethodno navedenih termina (npr. "alkil", "heteroalkil", "cikloalkil" i "heterocikloalkil", "aril", "heteroaril", "fosfonat" i "sulfonat", kao i njihovi dvovalentni derivati) uključuje i supstituisane i nesupstituisane oblike navedene grupe. Izborni supstituenti za svaku vrstu grupe su obezbeđeni u nastavku teksta.
[0153] Supstituenti za alkil, heteroalkil, cikloalkil, heterocikloalkil monovalentne i dvovalentne izvedene grupe (uključujući i grupe koje se često označavaju kao alkilen, alkenil, heteroalkilen, heteroalkenil, alkinil, cikloalkil, heterocikloalkil, cikloalkenil i heterocikloalkenil) mogu biti jedna ili više različitih grupa odabranih od, ali ne i ograničenih na: -OR', =O, =NR', =N-OR', -NR'R'', -SR', -halogen, -SiR'R''R''' , -OC(O)R', -C(O)R', -CO2R', -C(O)NR'R'', -OC(O)NR'R'', -NR''C(O)R', -NR'C(O)NW''R''', -NR''C(O)OR', -NR-C(NR'R'')=NR''', -S(O)R'- S(O)2R', -S(O)2NR'R'', -NRSO2R', -CN i -NO2u broju u rasponu od nule do (2m'+1), gde je m' ukupan broj atoma ugljenika u takvim grupama. R', R", R'" i R'''' svaki može nezavisno da se odnosi na vodonik, supstituisani ili nesupstituisani heteroalkil, supstituisani ili nesupstituisani cikloalkil, supstituisani ili nesupstituisani heterocikloalkil, supstituisani ili nesupstituisani aril (npr. aril supstituisan sa 1-3 halogena), supstituisane ili nesupstituisane alkil, alkoksi ili tioalkoksi grupe ili arilalkil grupe. Kako se ovde koristi, "alkoksi" grupa je alkil vezan za ostatak molekula putem dvovalentnog kiseonika. Kada jedinjenje prema ovom otkriću uključuje više od jedne R grupe, na primer, svaka od R grupa je nezavisno odabrana kao što su svaka R', R'', R''' i R'''' grupa kada je više od jedne od ove grupe prisutno. Kada su R 'i R''vezani za isti atom azota, oni se mogu kombinovati sa atomom azota kako bi formirali 4-, 5-, 6- ili 7- člani prsten. Na primer, -NR'R" treba da uključi, ali ne ograničavajući se na, 1-pirolidinil i 4-morfolinil. Iz prethodne diskusije o supstituentima, stručnjak u oblasti će razumeti da je predviđeno da termin "alkil" uključuje grupe koje uključuju atome ugljenika vezane za grupe koje nisu vodonične grupe, kao što su haloalkil (npr. -CF3i -CH2CF3) i acil (npr. -C(O)CH3, -C(O)CF3, -C(O)CH2OCH3i slično).
[0154] Slično kao supstituenti opisani za prethodne alkil grupe, ogledni supstituenti za aril i heteroaril grupe (kao i njihovi dvovalentni derivati) variraju i odabrani su iz, na primer: halogen, -OR', -NR'R'', -SR', -SiR'R''R''', -OC(O)R', -C(O)R', -CO2R', -C(O)NR'R'', -OC(O)NR'R'', -NR''C(O)R', -NR'-C(O)NR''R''', -NR''C(O)OR', -NR-C(NR'R''R''') = NR'''', -NR-C(NR'R'') = NR'''-S(O)R', -S(O)2R', -S(O)2NR'R'', -NRSO2R', -CN i -NO2, -R', -N3, -CH(Ph)2, fluoro (C1-C4) alkokso i fluoro (C1-C4) alkil, u broj u rasponu od nule do ukupnog broja otvorenih valencija u aromatičnom sistemu prstena; i gde R', R'', R''' i R'''' mogu biti nezavisno odabrani od vodonika, supstituisanog ili nesupstituisanog alkila, supstituisanog ili nesupstituisanog heteroalkila, supstituisanog ili nesupstituisanog cikloalkila, supstituisanog ili nesupstituisanog heterocikloalkila, supstituisanog ili nesupstituisanog arila i supstituisanog ili nesupstituisanog heteroarila. Kada jedinjenje prema ovom otkriću uključuje više od jedne R grupe, na primer, svaka od R grupa je nezavisno odabrana kao što su svaka R', R'', R''' i R'''' grupa kada je više od jedne od ove grupe prisutno.
[0155] Dva supstituenta na susednim atomima arilnog ili heteroarilnog prstena mogu izborno formirati prsten formule -T-C(O)-(CRR')q-U-, pri čemu su T i U nezavisno -NR-, -O-, -CRR'- ili pojedinačna veza, a q je ceo broj od 0 do 3. Alternativno, dva supstituenta na susednim atomima arilnog ili heteroarilnog prstena mogu se izborno zameniti supstituentom formule -A- (CH2)r-B-, pri čemu su A i B nezavisno -CRR'-, -O-, -NR-, -S-, -S(O) -, -S(O)2-, -S(O)2NR'- ili pojedinačna veza , a r je ceo broj od 1 do 4.
[0156] Jedna od jednostrukih veza tako formiranog novog prstena može se izborno zameniti dvostrukom vezom. Alternativno, dva supstituenta na susednim atomima arilnog ili heteroarilnog prstena mogu se izborno zameniti supstituentom formule-(CRR')s-X'- (C''R''')d-, gde su s i d nezavisno celi brojevi od 0 do 3, a X 'je -O-, -NR'-, -S-, -S(O)-, -S(O)2- ili -S(O)2NR'-. Supstituenti R, R', R'' i R'" mogu biti nezavisno odabrani od vodonika, supstituisanog ili nesupstituisanog alkila, supstituisanog ili nesupstituisanog cikloalkila, supstituisanog ili nesupstituisanog heterocikloalkila, supstituisanog ili nesupstituisanog arila, i supstituisanog ili nesupstituisanog heteroarila.
[0157] Kako je upotrebljen ovde, termin "acil" se odnosi na grupu organskih kiselina pri čemu je -OH karboksilna grupa zamenjena drugim supstituentom i ima opštu formulu RC(=O)-, pri čemu je R alkil, alkenil, alkinil , aril, karbociklična, heterociklična ili aromatična heterociklična grupa kako je definisano ovde). Kao takav, termin "acil" posebno uključuje arilacil grupe, kao što je 2-(furan-2-il) acetil)-i 2-fenilacetil grupa. Specifični primeri acilnih grupa uključuju acetil i benzoil. Acil grupe takođe uključuju amide, -RC(=O)NR', estre, -RC(=O)OR', ketone, -RC(=O)R 'i aldehide, -RC(=O)H.
[0158] Termini "alkoksil" ili "alkoksi" se ovde naizmenično upotrebljavaju i odnose se na zasićene (tj. alkil-O-) ili nezasićene (tj. alkenil-O- i alkinil-O-) grupe vezane za osnovni molekularni deo preko atoma kiseonika, pri čemu su termini "alkil", "alkenil" i "alkinil" kao što je prethodno opisano i mogu uključivati inkluzivne C1-20, linearne, razgranate ili ciklične, zasićene ili nezasićene lance okso-ugljovodonika, uključujući, na primer, metoksil, etoksil, propoksil, izopropoksil, n-butoksil, sek-butoksil, terc-butoksil i n-pentoksil, neopentoksil, nheksoksil i slično.
[0159] Termin "alkoksialkil" kako je upotrebljen ovde odnosi se na alkil-O-alkil etar, na primer, metoksietil ili etoksimetil grupu.
[0160] "Ariloksil" se odnosi na aril-O- grupu pri čemu je aril grupa kao što je prethodno opisano, uključujući supstituisani aril. Termin "ariloksil", kako je upotrebljen ovde, može se odnositi na feniloksil ili heksiloksil i alkil, supstituisani alkil, halo ili alkoksil supstituisan feniloksil ili heksiloksil.
[0161] "Aralkil" se odnosi na aril-alkil-grupu pri čemu su aril i alkil kao što je prethodno opisano, i uključuju supstituisani aril i supstituisani alkil. Primeri aralkilnih grupa uključuju benzil, feniletil i naftilmetil.
[0162] "Aralkiloksil" se odnosi na aralkil-O- grupu pri čemu je aralkil grupa kao što je prethodno opisano. Ogledna aralkiloksilna grupa je benziloksil, tj. C6H5-CH2-O-. Aralkiloksilna grupa može izborno biti supstituisana.
[0163] "Alkoksikarbonil" se odnosi na alkil-O-C(=O)-grupu. Ogledne alkoksikarbonilne grupe uključuju metoksikarbonil, etoksikarbonil, butiloksikarbonil i terc-butiloksikarbonil.
[0164] "Ariloksikarbonil" se odnosi na aril-O-C(=O)-grupu. Ogledne ariloksikarbonilne grupe uključuju fenoksi- i naftoksi-karbonil.
[0165] "Aralkoksikarbonil" se odnosi na aralkil-O-C(=O)-grupu. Ogledna aralkoksikarbonil grupa je benziloksikarbonil.
[0166] "Karbamoil" se odnosi na amidnu grupu formule -C(=O)NH2. "Alkilkarbamoil" se odnosi na R'RN-C(=O)- grupu pri čemu je jedan od R i R' vodonik, a drugi od R i R' je alkil i/ili supstituisani alkil kao što je prethodno opisano. "Dialkilkarbamoil" se odnosi na R'RN-C(=O)grupu pri čemu je svaki od R i R' nezavisno alkil i/ili supstituisani alkil kao što je prethodno opisano.
[0167] Termin karbonildioksil, kako je upotrebljen ovde, odnosi se na karbonatnu grupu formule -O-C(=O)-OR.
[0168] "Aciloksil" odnosi se na acil-O- grupu pri čemu je acil kako je prethodno opisano.
[0169] Termin "amino" se odnosi na -NH2grupu i takođe se odnosi na grupu koja obuhvata azot, kao što je poznato u tehnici izvedenu iz amonijaka zamenom jednog ili više vodikovih radikala organskim radikalima. Na primer, termini "acilamino" i "alkilamino" se odnose na specifične N-supstituisane organske radikale sa acil i alkil supstituentnim grupama, respektivno.
[0170] "Aminoalkil" kako je upotrebljen ovde odnosi se na amino grupu kovalentno vezanu za alkilenski povezivač. Preciznije, termini alkilamino, dialkilamino i trialkilamino kako su upotrebljeni ovde odnose se na jednu, dve, ili tri alkilne grupe, respektivno, kako je prethodno definisano, vezane za osnovni molekularni deo preko atoma azota. Termin alkilamino se odnosi na grupu koja ima strukturu -NHR' pri čemu je R' alkil grupa, kako je prethodno definisano; dok se termin dialkilamino odnosi na grupu koja ima strukturu -NR'R", pri čemu su svaki R' i R'' nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od alkilnih grupa. Termin trialkilamino se odnosi na grupu koja ima strukturu -NR'R"R"', pri čemu su R', R'' i R''' svaki nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od alkilnih grupa. Dodatno, R', R" i/ili R'" zajedno mogu izborno biti - (CH2)k-gde je k ceo broj od 2 do 6. Primeri uključuju, ali se ne ograničavaju na, metilamino, dimetilamino, etilamino, dietilamino, dietilaminokarbonil, metiletilamino, izopropilamino, piperidino, trimetilamino i propilamino.
[0171] Amino grupa je -NR'R", pri čemu su R' i R'' tipično odabrani od vodonika, supstituisanog ili nesupstituisanog alkila, supstituisanog ili nesupstituisanog heteroalkila, supstituisanog ili nesupstituisanog cikloalkila, supstituisanog ili nesupstituisanog heterocikloalkila, supstituisanog ili nesupstituisanog arila, ili supstituisanog ili nesupstituisanog heteroarila.
[0172] Termini alkiltioetar i tioalkoksil odnose se na zasićene (tj. alkil-S-) ili nezasićene (tj. alkenil-S- i alkinil-S-) grupe vezane za osnovni molekularni deo preko atoma sumpora. Primeri tioalkoksilnih grupa uključuju, ali se ne ograničavaju na, metiltio, etiltio, propiltio, izopropiltio, n-butiltio i slično.
[0173] "Acilamino" se odnosi na acil-NH- grupu pri čemu je acil kao što je prethodno opisano. "Aroilamino" se odnosi na aroil-NH- grupu pri čemu je aroil kao što je prethodno opisano.
[0174] Termin "karbonil" se odnosi na -C(=O)-grupu, i može uključivati aldehidnu grupu predstavljenu opštom formulom R-C(=O)H.
[0175] Termin "karboksil" se odnosi na -COOH grupu. Takve grupe se takođe ovde označavaju kao deo "karboksilne kiseline".
[0176] Termini "halo", "halogenid" ili "halogen" kako su upotrebljeni ovde odnose se na fluoro, hloro, bromo i jodo grupe. Dodatno, termini kao što je "haloalkil" uključuju monohaloalkil i polihaloalkil. Na primer, termin "halo (C1-C4) alkil" uključuje, ali se ne ograničava na, trifluorometil, 2,2,2-trifluoroetil, 4-hlorobutil, 3-bromopropil i slično.
[0177] Termin "hidroksil" se odnosi na -OH grupu.
[0178] Termin "hidroksialkil" se odnosi na alkil grupu supstituisanu sa -OH grupom.
[0179] Termin "merkapto" se odnosi na -SH grupu.
[0180] Termin "okso" kako je upotrebljen ovde označava atom kiseonika koji je dvostrukom vezom povezan sa atomom ugljenika ili sa drugim elementom.
[0181] Termin "nitro" odnosi se na -NO2grupu.
[0182] Termin "tio" odnosi se na jedinjenje koje je ovde prethodno opisano pri čemu je atom ugljenika ili kiseonika zamenjen atomom sumpora.
[0183] Termin "sulfat" odnosi se na -SO4grupu.
[0184] Termin tiohidroksil ili tiol, kako je upotrebljen ovde, odnosi se na grupu formule -SH.
[0185] Preciznije, termin "sulfid" odnosi se na jedinjenje koje ima grupu formule -SR.
[0186] Termin "sulfon" odnosi se na jedinjenje koje ima sulfonil grupu -S(O2)R.
[0187] Termin "sulfoksid" odnosi se na jedinjenje koje ima sulfinil grupu -S(O)R
[0188] Termin ureido odnosi se na urea grupu formule -NH-CO-NH2.
[0189] U svim specifikacijama i patentnim zahtevima, data hemijska formula ili naziv će obuhvatiti sve tautomere, kongenere i optičke- i stereoizomere, kao i racemske smeše gde takvi izomeri i smeše postoje.
[0190] Određena jedinjenja prema ovom otkriću mogu imati asimetrične atome ugljenika (optički ili hiralni centri) ili dvostruke veze; enantiomeri, racemati, dijastereomeri, tautomeri, geometrijski izomeri, stereoizometrijski oblici koji se, u smislu apsolutne stereohemije, mogu definisati kao (R)- ili (S)- ili, kao D- ili L- za aminokiseline, i pojedinačni izomeri su obuhvaćeni unutar obima ovog otkrića. Jedinjenja prema ovom otkriću ne uključuju ona za koja je poznato u tehnici da su previše nestabilna za sintezu i/ili izolaciju. Smatra se da ovo otkriće uključuje jedinjenja u racemskim, ne-racemskim i optički čistim oblicima. Optički aktivni (R)- i (S)-, ili D-i L- izomeri mogu se pripremiti korišćenjem hiralnih sintona ili hiralnih reagenasa, ili razgraditi konvencionalnim tehnikama. Kada ovde opisana jedinjenja obuhvataju olefinske veze ili druge centre geometrijske asimetrije, i ako nije drugačije naznačeno, namerava se da jedinjenja sadrže i E i Z geometrijske izomere.
[0191] Osim ako nije drugačije naznačeno, strukture prikazane ovde takođe podrazumevaju uključivanje svih stereohemijskih oblika strukture; tj. R i S konfiguracije za svaki asimetrični centar. Prema tome, pojedinačni stereohemijski izomeri, kao i enantiomerne i dijastereomerne smeše ovih jedinjenja su u obimu otkrića.
[0192] Stručnjaku u tehnici biće očigledno da određena jedinjenja prema ovom otkriću mogu postojati u tautomernim oblicima, pri čemu su svi takvi tautomerni oblici jedinjenja unutar obima otkrića. Termin "tautomer", kako je upotrebljen ovde, odnosi se na jedan od dva ili više strukturnih izomera koji postoje u ravnoteži i koji se lako pretvaraju iz jednog izomernog oblika u drugi.
[0193] Osim ako nije drugačije naznačeno, ovde prikazane strukture takođe podrazumevaju jedinjenja koja se razlikuju samo u prisustvu jednog ili više izotopski obogaćenih atoma. Na primer, jedinjenja koja imaju ove strukture sa zamenom vodonika deuterijumom ili tricijumom, ili zamenom ugljenika sa<13>C- ili<14>C- obogaćenim ugljenikom su unutar obima ovog otkrića.
[0194] Jedinjenja prema ovom otkriću mogu takođe obuhvatati neprirodne proporcije atomskih izotopa na jednom ili više atoma koji čine takva jedinjenja. Na primer, jedinjenja mogu biti radioaktivno obeležena sa radioaktivnim izotopima, kao što su na primer tricijum (<3>H), jod-125 (<125>I) ili ugljenik-14 (<14>C). Sve izotopske varijacije jedinjenja prema ovom otkriću, bile one radioaktivne ili ne, obuhvaćene su unutar obima ovog otkrića.
[0195] Jedinjenja prema ovom otkriću mogu postojati kao soli. Ovo otkriće uključuje takve soli. Primeri primenljivih oblika soli uključuju hidrokloride, hidrobromide, sulfate, metansulfonate, nitrate, maleate, acetat, citrate, fumarate, tartarate (npr. (+)-tartarate, (-)-tartarate ili njihove smeše, uključujući racemske smeše, sukcinate, benzoate i soli sa aminokiselinama kao što je glutaminska kiselina. Ove soli se mogu dobiti postupcima poznatim stručnjacima u tehnici. Takođe su uključene i baze adicionih soli kao što su natrijum, kalijum, kalcijum, amonijum, organska amino ili magnezijumova so, ili slična so. Kada jedinjenja prema ovom otkriću obuhvataju relativno osnovne funkcije, kiseline adicionih soli mogu se dobiti kontaktiranjem neutralnog oblika takvih jedinjenja sa dovoljnom količinom željene kiseline, bilo čiste ili u pogodnom inertnom rastvaraču ili jonskom razmenom. Primeri prihvatjivih kiselina adicionih soli uključuju one dobijene od neorganskih kiselina kao što su hlorovodonična, bromovodonična, azotna, ugljena, monohidrogenkarbonatna, fosforna, monohidrogenfosforna, dihidrogenfosforna, sumporna, monohidrogensumporna, hidrovodnična ili fosforna kiselina i slično, kao i soli dobijene iz organskih kiselina kao što su sirćetna, propionska, izobuterna, maleinska, malonska, benzojeva, sukcinska, suberinska, fumarna, mlečna, mandelinska, ftalna, benzensulfonska, ptolilsulfonska, limunska, vinska, metansulfonska i slično. Takođe su uključene soli aminokiselina kao što su arginat i slično, i soli organskih kiselina kao što su glukuronska ili galakturonska kiselina i slično. Određena specifična jedinjenja prema ovom otkriću obuhvataju i bazne i kisele funkcije koje omogućavaju da se jedinjenja pretvore u bazne ili kisele adicione soli.
[0196] Neutralni oblici jedinjenja mogu se regenerisati kontaktiranjem soli sa bazom ili kiselinom i izolovanjem matičnog jedinjenja na uobičajen način. Osnovni oblik jedinjenja razlikuje se od različitih oblika soli po određenim fizičkim svojstvima, kao što je rastvorljivost u polarnim rastvaračima.
[0197] Određena jedinjenja prema ovom otkriću mogu postojati u nesolvatizovanim oblicima kao i u solvatizovanim oblicima, uključujući hidratisane oblike. Uopšteno, solvatizovani oblici su ekvivalentni nesolvatizovanim oblicima i obuhvaćeni su unutar obima ovog otkrića. Određena jedinjenja prema ovom otkriću mogu postojati u više kristalnih ili amorfnih oblika. Uopšteno, svi fizički oblici su ekvivalentni za upotrebe predviđene ovim otkrićem i nameravaju da budu uutar obima ovog otkrića.
[0198] Pored oblika soli, ovo otkriće obezbeđuje jedinjenja koja su u obliku proleka. Prolekovi ovde opisanih jedinjenja su ona jedinjenja koja lako prolaze kroz hemijske promene u fiziološkim uslovima da bi se obezbedila jedinjenja prema ovom otkriću. Dodatno, prolekovi se mogu pretvoriti u jedinjenja prema ovom otkriću hemijskim ili biohemijskim postupcima u ex vivo okruženju. Na primer, prolekovi se mogu polako pretvoriti u jedinjenja prema ovom otkriću kada se stave u transdermalni flaster tipa rezervoara sa odgovarajućim enzimom ili hemijskim reagensom.
[0199] Prema dugogodišnjoj konvenciji o patentnom pravu, izrazi "a", "an" i "the" odnose se na "jedan ili više" kada se koriste u ovoj prijavi, uključujući i patentne zahteve. Tako, na primer, pozivanje na "subjekt" uključuje više subjekata, osim ako je kontekst očigledno suprotan (na primer, više subjekata) itd.
[0200] U ovoj specifikaciji i patentnim zahtevima, termini "sadrže", "sadrži" i "koji sadrži" koriste se u neisključivom smislu, osim ako kontekst zahteva drugačije. Slično, termin "uključuje" i njegove gramatičke varijante su neograničavajući, tako da navođenje stavki na listi ne isključuje druge slične stavke koje se mogu zameniti ili dodati navedenim stavkama.
[0201] Za potrebe ove specifikacije i priložene patentne zahteve, osim ako nije drugačije naznačeno, svi brojevi koji izražavaju količine, veličine, mere, proporcije, oblike, formulacije, parametre, procente, kvantitete, karakteristike i druge numeričke vrednosti koji se koriste u specifikaciji i patentnim zahtevima se shvataju kao izmenjene u svim slučajevima terminom "oko", iako se termin "oko" možda ne pojavljuje izričito sa vrednošću, količinom ili opsegom.
1
Shodno tome, osim ako nije drugačije naznačeno, numerički parametri navedeni u sledećoj specifikaciji i priloženim paentnim zahtevima nisu i ne moraju biti tačni, ali mogu biti približni i/ili veći ili manji po želji, odražavajući tolerancije, faktore konverzije, zaokruživanje, grešku merenja i slično, i drugi faktori poznati stručnjacima u tehnici, u zavisnosti od željenih svojstava koja se žele dobiti pomoću ovog otkrivenog predmeta. Na primer, termin "oko", kada se odnosi na vrednost, može se podrazumevati da obuhvata varijacije, u nekim primerima izvođenja, ± 100% u nekim primerima izvođenja ± 50%, u nekim primerima izvođenja ± 20%, u nekim primerima izvođenja ± 10%, u nekim primerima izvođenja ± 5%, u nekim primerima izvođenja ±1%, u nekim primerima izvođenja ± 0.5%, a u nekim primerima izvođenja ± 0.1% od navedene količine, jer su takve varijacije prikladne za izvođenje otkrivenih postupaka ili upotrebu otkrivenih kompozicija.
[0202] Dalje, termin "oko" kada se koristi u vezi sa jednim ili više brojeva ili numeričkim opsezima, treba shvatiti da se odnosi na sve takve brojeve, uključujući sve brojeve u opsegu i menja taj opseg proširivanjem granica iznad i ispod prikazanih numeričkih vrednosti. Navođenje numeričkih opsega pomoću krajnjih tačaka uključuje sve brojeve, npr. cele brojeve, uključujući njihove delove, pobrojane unutar tog opsega (na primer, navođenje 1 do 5 uključuje 1, 2, 3, 4 i 5, kao i njihove delove, npr.1.5, 2.25, 3.75, 4.1 i slično) i bilo koji opseg unutar tog opsega.
PRIMERI
[0203] Primeri koji slede su uključeni kako bi obezbedili smernice prosečnom stručnjaku u oblasti za praktične reprezentativne primere izvođenja ovde otkrivenog predmeta. U svetlu ovog otkrića i opšteg nivoa stručnjaka u tehnici, stručnjaci mogu da cene da su sledeći primeri namenjeni samo za ogledne i da se brojne izmene, modifikacije i alteracije mogu primeniti bez odstupanja od obima ovog otkrivenog predmeta. Sintetički opisi i posebni primeri koji slede namenjeni su samo za ilustraciju i ne treba ih tumačiti kao da na bilo koji način ograničavaju stvaranje jedinjenja prema otkriću drugim postupcima.
PRIMER 1
Metode
[0204] Opšte procedure: Komercijalno dostupni metanol HPLC kvaliteta, katalizatori i materijali uobičajen čistoće za reagense, korišćeni su u stanju u kome su primljeni. TLC je izvedena na aluminijumskim listovima obloženim silika gelom 60 F254 (Merck) i tačke su detektovane rastvorom Ce(SO4)2. 4H2O (1%) i H3P(Mo3O10)4(2%) u sumpornoj kiselini (10%). Fleš
2
hromatografija je izvedena na silika gelu 60 (0.040-0.063 mm, Fluka) ili na Biotage<®>KP-C18-HS ili KP-Sil<®>SNAP kertridžima korišćenjem Isoler One HPFC sistema (Biotage, Inc.). Sve hemikalije su kupljene od firme Sigma Aldrich i korišćene su bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR spektri su mereni na 400.1 MHz, 500.1 MHz ili 600.1 MHz,<13>C NMR spektri na 100.8 MHz, 125.7 MHz ili 150.9 MHz. Za standardizaciju<1>H NMR spektra korišćen je interni signal TMS (δ 0.0, CDCl3) ili rezidualni signali rastvarača (δ 7.26 za CDCl3, δ 2,05 za CD3COCD3i δ 3.31 za CD3OD). U slučaju<13>C spektra korišćeni su rezidualni signali rastvarača (δ 77,00 za CDCl3, δ 29.84 i δ 206.26 za CD3COCD3i δ 49.00 za CD3OD). Hemijski pomaci su dati u δ-skali, konstante kuplovanja J su date u Hz. ESI maseni spektri su snimljeni korišćenjem masenog spektrometra ZQ micromass (Waters) opremljenog ESCi multimodalnim jonskim izvorom i kontrolisanim MassLynx softverom. Alternativno, ESI maseni spektri niske rezolucije su snimljeni korišćenjem kvadrupolnog ortogonalnog tandemskog masenog spektrometra ubrzanja vremena leta (Q-Tof micro, W) i ESI masenih spektra visoke rezolucije korišćenjem hibridnog FT masenog spektrometra koji kombinuje MS sa linearnom zamkom za jone i analizator mase Orbitrap (LTQ Orbitrap XL, Thermo Fisher Scientific). Uslovi su optimizovani za odgovarajuću jonizaciju u izvoru ESI Orbitrap (brzina protoka toplotnog gasa 35 a.u., protok pomoćnog gasa 10 a.u. azota, napon izvora 4.3 kV, napon kapilare 40 V, temperatura kapilare 275 °C, napon cevnog sočiva 155 V). Uzorci su rastvoreni u metanolu i naneti direktnim ubrizgavanjem. Optičke rotacije su merene u CHCl3ili DMF pomoću Autopol IV instrumenta (Rudolph Research Analitical). IR spektri su mereni u CHCl3ili KBr.
[0205] Studije efikasnosti na miševima. Sve studije efikasnosti na miševima su sprovedene u skladu sa protokolom #MO13M69 koji je odobrio Komitet za negu i upotrebu životinja sa Univerziteta Džon Hopkins. Dobijene su ženke atimičnih (RH-Foxn1nu miševa) miševa između 25 i 30 g (Harlan Sprague Dawley Inc, Indijanapolis, Indiana) i držane u uslovima ciklusa od 12 sati svetlo-mrak sa ad libitum pristupom hrani i vodi. U87 ćelije humanog glioma su injecirane s.c. (5 × 10<6>ćelija u 100 ml PBS) na četiri odvojene lokacije na bokovima svakog miša. Kada su tumori narasli do srednje zapremine od oko 200 mm<3>, miševi su nasumično raspoređeni u vehikulum (fiziološki rastvor puferovan sa HEPES puferom, i.p.) ili DON (1; 0.8 mg/kg, i.p.) grupe. U jednoj kohorti, miševima je data jedna doza odgovarajućeg rastvora dva sata nakon čega su nivoi glutamina kvantifikovani u tumoru kao što je prethodno opisano (Le et al., 2012). Ukratko, tumori su sakupljeni, brzo zamrznuti i homogenizovani u tečnom N2, a zatim podvrgnuti ekstrakciji metabolita korišćenjem metanola i DI vode. Kvantifikacija je izvršena korišćenjem masenog spektrometra Agilent 6520 Quadrupole-Time-of-Flight (Q-TOF) sa Agilent 1290 HPLC i korišćenjem softverskih paketa Agilent Mass Hunter i Agilent Qualitative and Quantitative Analysis Software. Određena je prosečna vrednost za sadržaj glutamina po grupi, za svaki pojedinačni tumor (n=3-4/grupi), prikazana kao relativni intenzitet i analiziran jednostranim t testom. U drugoj kohorti, sprovedeni su eksperimenti efikasnosti. Miševima su davane injekcije jednom dnevno tokom šest dana; zapremine tumora merene su korišćenjem digitalnih kalipera i izračunate prema formuli: [zapremina= (najveća dimenzija tumora) × (najmanja dimenzija tumora)<2>× 0.52] 2, 4 i 6 dana nakon početka lečenja. Svaki pojedinačni tumor (n=8-10/grupa) je normalizovan na svoju zapreminu pre tretmana, određena je srednja vresnost i analizirana dvosmernom analizom varijanse (ANOVA) za ponovljena merenja. Ako je bio značajan, Bonferoni post hoc test je primenjen u nastavku analize. Značajnost je definisana kao p < .05.
[0206] In vitro studije stabilnosti: Stok rastvor za najveći broj prolekova je pripremljen u vidu 10 mM rastvora u DMSO kako bi se izvele in vitro studije.
[0207] Hemijska stabilnost prolekova je evaluirana korišćenjem simulirane želudačne tečnosti (SGF; pH 1.2) i fosfatom puferovanog fiziološkog rastvora (PBS; pH 7.4). Ukratko, prolekovi su dodavani (10 µM) u odgovarajuće rastvore i inkubirani na 37 °C tokom 1 sata. U unapred određenim vremenskim tačkama (0, 30 i 60 min), alikvoti od 100 µL su uklonjani i razblaživani sa 100 µL vode. Nestanak prolekova je praćen korišćenjem razvijene tečne hromatografije i tandem masene spektrometrije (LC/MS/MS) koje su opisane u nastavku teksta.
[0208] Za metaboličku stabilnost korišćena je plazma (psa, čoveka, majmuna, miša i svinje i čoveka). Za stabilnost, prolekovi (10 µM) su dodati u svaki nosač i inkubirani u orbitalnom šejkeru na 37 °C. U unapred određenim vremenima (0, 30 i 60 min), uklanjani su alikvoti smeše od 100 µL u triplikatu, i reakcija je ugašena dodavanjem trostruke zapremine ledenog acetonitrila sa dodatkom unutrašnjeg standarda (losartan 0.5 µM). Uzorci su promešani vorteksom 30 s i centrifugirani na 12000 g tokom 10 min.50 µL supernatanta razblaženog sa 50 µL vode prebačeno je u polipropilensku bočicu od 250 µL hermetički zatvoreno teflonskim poklopcem. Nestanak proleka je praćen tokom vremena pomoću tečne hromatografije i tandem masene spektrometrije (LC/MS/MS) kao što je opisano u nastavku teksta.
[0209] Za LC/MS/MS, prolekovi su razdvojeni sistemom Thermo Scientific Accela UPLC sistemom spojenim sa Accela otvorenim autosamplerom na Agilent C18 (100x 2.1 mm id) UPLC koloni. Temperatura autosemplera je kontrolisana i on je radio na 10°C. Mobilna faza korišćena za hromatografsko razdvajanje je bila sastavljena od acetonitrila/vode sa 0.1% mravlje kiseline i radila je pri brzini protoka od 0.5 mL/minutu tokom 4.5 minuta korišćenjem gradijenta eluacije. Efluent kolone je praćen korišćenjem TSQ Vantage triple-kvadrupolnog masenog
4
spektrometarskog detektora, opremljenog elektrosprej sondom podešenom na režim pozitivne jonizacije. Uzorci su uvedeni u izvor jonizacije kao zagrejana nebulizovana proba (350 °C).
[0210] Za kvantifikaciju preostalog jedinjenja, nestanak prolekova je meren iz odnosa površina pika analita prema IS. Procenat preostalog izračunava se na sledeći način:
pri čemu
odgovor = [(površina analita/ (površina unutrašnjeg standarda)]
*Prosečan odgovor je prosek dva uzorka u svakoj vremenskoj tački.
[0211] Farmakoninetičke studije na miševima. Sve farmakokinetičke studije na miševima su sprovedene prema protokolu (#MO13M113) koji je odobren od strane Komiteta za negu i upotrebu životinja sa Univerziteta Džon Hopkins. C57BL/6 miševi između 25 i 30 g su dobijeni od firme Harlan i držani u ciklusu od 12 sati svetlo-mrak sa ad libitum pristupom hrani i vodi. Da bi se procenila farmakokinetika DON jedinjenja i njegovog proleka 5c u mozgu i plazmi, kod C57BL/6 miševa starih 8-12 nedelja primenjen je DON (1; 0.8 mg/kg, p.o. u fiziološkom rastvoru puferovanom fosfatom) i njegov prolek 5c (na 0.8 mg/kg ekvivalent DON (1), p.o. u fiziološkom rastvoru puferovanom fosfatom sa 5% EtOH i 5% Tween-80). Miševi su žrtvovani injekcijom pentobarbitala 10, 30 i 90 minuta nakon primene leka, a krv je sakupljena srčanom punkcijom i stavljena u ledene BD mikro kontejnere obložene sa EDTA. Uzorci krvi su centrifugirani na 2000 g tokom 15 minuta, a plazma je uklonjena i čuvana na -80°C. Tkiva mozga su sakupljena nakon uzimanja krvi i odmah zamrznuta u tečnom azotu i čuvana na -80°C do LC/MS analize.
[0212] Farmakokinetičke studije na primatima koji nisu ljudi. Sve studije na majmunima su sprovedene u skladu sa protokolom (#PR15M298) koji je odobrio Komitet za negu i upotrebu životinja sa Univerziteta Džon Hopkins. Dve ženke berok majmuna (približno 3.5 kg, koje su prethodno izlagane lekovima) bile su smeštene u susedstvu u kavezima od nerđajućeg čelika na stalku za društvene interakcije (sadrži 4 kaveza, svaki širine 32.5" × dubine 28" × visine 32") uz održavanje temperature na 64-84 °F, vlažnost na 30 - 70% sa naizmeničnim ciklusom svetlosti/mraka od 14-10 sati u skladu sa Zakonom o dobrobiti životinja USDA (9 CFR, delovi 1, 2 i 3). Hrana je obezbeđivana svakodnevno u količinama odgovarajućim za veličinu i starost životinja i RO prečišćena voda davana je ad libitum kroz liksit slavinu unutar kaveza.
Obogaćivanje hrane je obezbeđivano od ponedeljka do petka. Pre davanja leka, majmuni su sedirani ketaminom koji je primenjen u vidu intramuskularne injekcije pre primene test artikla. Sedacija je održavana tokom prikupljanja uzoraka krvi i cerebrospinalne tečnosti (likvora) sa ketaminom u početnoj količini od 15 mg/kg sa dodatnim dozama od 20-30 mg tokom prvog sata. U narednim vremenskim tačkama ketamin je davan u dozi od 10-15 mg/kg. DON (50 mM HEPES puferovani fiziološki rastvor) i 5c (dijastereoizomer 1), (50 mM HEPES puferisan fiziološki rastvor koji sadrži 5% etanola i 5% tvina) primenjeni su (1.6 mg/kg ekvivalenta) kod životinja intravenski, u zapremini za doziranja od 1mL/kg. Uzorak CSF (cilj od 50 µL) je dobijen perkutanom punkcijom cisterne magna 30 minuta nakon doziranja. Uzorci krvi (1 mL) su sakupljeni 15, 30, 1, 2, 4 i 6 h nakon doziranja perkutanom punkcijom periferne vene. Uzorci su obrađeni da bi se dobila plazma (centrifugirani na temperaturi od 4°C, na 3000xg, 10 minuta). Svi uzorci su održavani ohlađeni na ledu tokom obrade. Uzorci su sakupljeni u epruvete za mikrocentrifugu, brzo zamrznuti i stavljeni u zamrzivač podešen da održava -80°C do LC/MS analize.
[0213] Bioanaliza DON jedinjenja. Visoko osetljiva metoda za analizu DON jedinjenja u biološkim matricama (Alt, et al., 2015) je ranije objavljena. Međutim, zbog hemijske labilnosti DON jedinjenja i njegovih prolekova, razvijena je i validirana blaža metoda derivatizacije koja koristi dabsil hlorid. Ukratko, DON je ekstrahovan iz uzoraka (50 mg) sa 250 µL metanola koji sadrži glutamat-d5 (10 µM ISTD) mešanjem u epruvetama niske retencije. Uzorci su centrifugirani na 16,000 X g tokom 5 minuta da bi se istaložili proteini. Supernatanti (200 µL) su premešteni u novu epruvetu i sušeni na 45°C pod vakuumom 1 zas. U svaku epruvetu je dodato 50 µL 0.2 M natrijum bikarbonatnog pufera (pH 9.0) i 100 µL 10 mM dabsil hlorida u acetonu. Posle mešanja vorteksom, uzorci su inkubirani na 60°C tokom 15 minuta kako bi se derivatizovali. Uzorci (2 µL) su ubrizgani i razdvojeni na instrumentu Agilent 1290 opremljenom sa kolonom Agilent Eclipse plus C18 RRHD 2.1 X100 mm gradijentom od 2.5 minuta, od 20-95% acetonitrila 0.1% mravlje kiseline i kvantifikovani na masenom spektrometru Agilent 6520 QTOF. Kalibracione krive u opsegu od .005-17.1 µg/mL u plazmi i CSF za DON su konstruisane iz odnosa površine pika analita i unutrašnjeg standarda, korišćenjem linearne regresije sa faktorom ponderisanja od 1/(nominalna koncentracija). Koeficijent korelacije veći od 0.99 dobijen je u svim analitičkim serijama. Srednja predviđena relativna standardna devijacija za unazad obračunate koncentracije standarda i QC za sve analite bila je u opsegu od 85 do 115%, osim za najnižu koncentraciju koja je bila u opsegu od 80 do 120% sa ukupnom tačnošću i preciznošću od 6.7% i 6.6%, redom.
[0214] Farmakokinetička analiza. Za farmakokinetičku analizu korišćeni su podaci o srednjoj koncentraciji i vremenu. Modul za nekompartmentalizovanu analizu u WinNonlin<®>(verzija 5.3) je korišćen za procenu farmakokinetičkih parametara. Maksimalne koncentracije u plazmi (Cmax) i vreme do Cmax(Tmax) su bile posmatrane vrednosti. Površina ispod krive (AUC) je izračunata po log-linearnom trapezoidnom pravilu do kraja prikupljanja uzorka (AUClast).
[0215] Procedura za farmakokinetičku analizu oslobađanja DON jedinjenja iz njegovih prolekova: DON se ekstrahuje iz uzoraka (50 µL) sa 250 µL metanola koji sadrži glutamat-d5 (10 µM ISTD) mešanjem u epruvetama niske retencije. Uzorci se centrifugiraju na 16,000 X g tokom 5 minuta da bi se istaložili proteini. Supernatanti (200 µL) se premeštaju u novu epruvetu i suše na 45°C pod vakuumom (približno 1 sat). U svaku epruvetu se dodaje 50 µL 0.2 M natrijum bikarbonatnog pufera (pH 9.0) i 100 µL stok rastvora dabsil hlorida. Nakon mešanja vorteksom, uzorci se inkubiraju na 60°C tokom 15 minuta kako bi se derivatizovali. Uzorci (2-10 µL) se ubrizgavaju i razdvajaju na instrumentu Agilent 1290 koji je opremljen kolonom SB-AQ kolonom tokom gradijenta od 4 minuta od 20-95% acetonitrila 0.1% mravlje kiseline, i kvantifikuju se na masenom spektrometru Agilent 6520 QTOF.
PRIMER 2
Strategija prolekova - Maskiranje karboksilatne funkcionalnosti
[0216] U jednom aspektu, DON prolekovi su dizajnirani maskiranjem samo karboksilatnih funkcionalnosti korišćenjem alkil estara DON jedinjenja sa nezaštićenim α-amino grupama. Međutim, otkriveno je da neki od alkil estara DON jedinjenja sa nezaštićenom α-amino funkcionalnošću podležu ciklizaciji formirajući 5-članu cikličnu Šifovu bazu. Uočena ciklizacija je bila pH zavisna i rapidna na pH 5-7. Na nižem pH, koji bi normalno sprečio ili doveo do reverzije ciklizacije, diazo funkcionalnost je postala nestabilna. Kao rezultat, ciklizacija je bila praktično ireverzibilna, što je dovelo do toga da neki od N-α-slobodnih alkil estara budu nepoželjni kao DON prolekovi (SL.1A).
PRIMER 3
Strategija prolekova - Maskiranje amino funkcionalnosti
[0217] U drugom primeru izvođenja, DON prolekovi su dizajnirani maskiranjem samo amino funkcionalnosti korišćenjem N-zaštićenih derivata Don jedinjenja sa nezaštićenom karboksi funkcionalnošću. N-zaštićeni derivati DON jedinjenja sa nezaštićenom karboksi funkcionalnošću (SL. 1B i SL. 1C) takođe nisu bili tako stabilni. Tačnije, kisela karboksi funkcionalnost je izazvala postepeno sporo raspadanje diazo-grupe. U određenim oblicima soli, karboksilatni anjon destabilizuje N- α - zaštitnu grupu. Čak i dalje, kao što je prikazano na SL.1D, SL. 1E, SL. 1F, SL. 1G i SL. 1H, mnogi prolekovi testirani sa slobodnim karboksilatom (sa izuzetkom 26) pokazali su zanemarljivu izloženost u poređenju sa DON jedinjenjem kada se primenjuje oralno, što dalje ukazuje na prednosti derivatizacije kako karboksilatnih, tako i aminskih funkcionalnosti, u cilju oralne raspoloživosti.
PRIMER 4
Sinteza
[0218] Šeme za sintezu reprezentativnih jedinjenja prolekova su prikazane u nastavku teksta (Šema 1, Šema 2, Šema 3, Šema 4, Šema 5, Šema 6, Šema 7 i Šema 8).
Sinteza izopropil 6-diazo-2-((difenoksifosforil)amino)-5-oksoheksanoat (4) 1-metiletil 5-oksoprolinat JAM0256. Ovo jedinjenje je pripremljeno na osnovu poznate literature.<1>H NMR i<13>C NMR spektri su bili u skladu sa objavljenim podacima.
[0219] 1-(9H-fluoren-9-ilmetil) 2-(1-metiletil) 5-oksopirolidin-1,2-dikarboksilat (1) .
Uzimajući u obzir Šemu 1, prethodno jedinjenje JAM0256 (US2008/107623 A1) (2.94 g, 17.16 mmol) rastvoreno je u apsolutnom THF (90 mL) pod argonom i ohlađeno do -78 °C.
Rastvor LiHMDS (1M u heksanima, 16.3 mL, 16.302 mmol, 0.95 ekviv.) dodat je u kapima, i rastvor je mešan na istoj temperaturi tokom 15 min. Dobijena žuta smeša je prebačena pomoću kanile u rastvor Fmoc hlorida (22.2 g, 85.8 mmol, 5 ekviv.) u apsolutnom THF (90 mL) na -78 °C. Reakciona smeša je mešana na -78°C tokom 2 h. Nakon ovog perioda, reakcija je ugašena zasićenim NH4Cl (100 mL). Zatim je ekstrahovana etil acetatom (3 × 50 mL), kombinovani organski slojevi su oprani vodom (40 mL), fiziološkim rastvorom (40 mL) i osušeni preko anhidrovanog MgSO4. Organski rastvarač je uparen in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (heksan - etil acetat 2 : 1) kako bi dao željeni proizvod 1 (6.2 g, 92 %) u vidu bezbojne čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.23 (3H, d, J = 6.2), 1.26 (3H, d, J = 6.3), 2.06 - 2.13 (1H, m), 2.34 - 2.45 (1H, m), 2.53 - 2.61 (1H, m), 2.67 - 7.76 (1H, m), 4.31 (1H, t, J = 7.5), 4.40 - 4.44 (1H, m), 4.53 - 4.57 (1H, m), 4.65 (1H, dd, J = 9.4, 2.6), 5.07 (1H, hept, J = 6.3), 7.31 - 7.35 (2H, m), 7.39 - 7.43 (2H, m), 7.71 - 7.78 (4H, m).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 21.69, 21.78, 22.01, 31.31, 46.64, 58.99, 69.20, 69.78, 120.06, 120.08, 125.43, 125.57, 127.32 (2C), 127.98 (2C), 141.31, 141.33, 143.39, 143.43, 151.56, 170.58, 172.92. Optička rotacija: [α]<22>D - 24.1° (c 0.332, CHCl3). IR (CHCl3): 3068 w, 3029 m, 2985 m, 2939 w, 2883 vw, 1797 s, 1758 s, sh, 1739 vs, 1724 vs, sh, 1609 vw, 1580 vw, 1479 w, 1463 m, 1452 s, 1421 w, 1386 s, 1377 m, 1305 vs, 1194 m, 1105 s, 1045 m, 1033 m, 621 w, 425 w cm<-1>. ESI MS: 416 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C23H23O5NNa 416.14684; nađeno 416.14694.
[0220] Izopropil 2-((((9H-fluoren-9-il)metoksi)karbonil)amino)-6-diazo-5-oksoheksanoat (2). Uzimajući u obzir Šemu 1, rastvor trimetilsilil diazometana (2M u dietil etru, 6 mL, 11.93 mmol, 1.2 ekviv.) je rastvoren u apsolutnom THF (55
mL) pod argonom i ohlađen do -98 °C. Rastvor n-butillitijuma (2.5 M u heksanima, 4.9 mL, 12.23 mmol, 1.23 ekviv.) dodat je u kapima i rastvor je mešan na -98 °C tokom 30 min. Dobijena smeša je prebačena putem kanile u rastvor prethodnog jedinjenja 1 (3.91 g, 9.94 mmol, 1 ekviv.) u apsolutnom THF (100 mL) na -116 °C. Reakciona smeša je polako zagrejana do -78 °C i zatim ugašena zasićenim NH4Cl. Zatim je ekstrahovana etil acetatom (3 × 50 mL), kombinovani organski slojevi su oprani vodom (40 mL), fiziološkim rastvorom (40 mL) i osušeni preko anhidrovanog MgSO4. Organski rastvarač je uparen in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (hloroform - aceton 20:1) kako bi dao željeni proizvod 2 (3.68 g, 85 %) u vidu žućkaste čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.25 - 1.28 (6H, m), 1.95 -2.04 (1H, m), 2.17-2.26 (1H, m), 2.31 - 2.52 (2H, m), 4.22 (1H, t, J= 7.1), 4.29 - 4.43 (3H, m), 5.06 (1H, hept, J = 6.1), 5.27 (1H, s), 5.59 (1H, d, J = 8.2), 7.30 - 7.34 (2H, m), 7.38 - 7.42 (2H, m), 7.59- 7.62 (2H, m), 7.75 - 7.77 (2H, m).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 21.81, 21.84, 27.69, 36.56, 47.21, 53.67, 67.10, 69.62, 120.08, 120.09, 125.18, 125.21, 127.16 (2C), 127.81 (2C), 141.35, 141.37, 143.75, 143.96, 156.16, 171.50, 193.67. Optička rotacija: [α]<22>D 15.1° (c 0.674, CHCl3). IR (CHCl3): 3428 m, 3116 w, 3068 w, 2985 m, 2940 w, 2882 w, 2110 vs, 1731 vs, sh, 1719 vs, 1641 s, 1608 w, sh, 1580 vw, 1509 s, 1478 m, 1466 m, 1451 s, 1418 w, sh, 1386 s, sh, 1377 s, 1349 s, 1232 s, 1105 s, 1052 s, 1033 m, 622 w, 539 m, 488 m, 426 w cm<-1>. ESI MS: 458 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C24H25O5NaN 458.16864; nađeno 458.16873.
[0221] Izopropil 2-amino-6-diazo-5-oksoheksanoat (3). Uzimajući u obzir Šemu 1, prethodno jedinjenje 2 (900 mg, 2.07 mmol) je rastvoreno u dihlormetanu (10 mL). Piperidin (514 µL 5,17 mmol, 2.5 ekviv.) je dodat i reakciona smeša
je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Organski rastvarač je uparen in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (hloroform - metanol 30:1) kako bi dao željeni proizvod (290 mg, 66 %) u vidu žutog ulja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.21 (3H, d, J= 1.8), 1.23 (3H, d, J= 1.8), 1.52 (2H, bs), 1.74 - 1.85 (1H, m), 2.02 - 2.10 (1H, m), 2.36 - 2.53 (2H, bm), 3.37 (1H, dd, J= 8.4, 5.0), 5.00 (1H, hept, J = 6.3), 5.27 (1H, s).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 21.87, 21.89, 29.65, 36.99, 53.94, 68.64, 175.21, 194.25.Optička rotacija: [α]<22>D 6.5° (c 0.444, CHCl3). IR (CHCl3): 3390 w, 3323 vw, 3116 w, 2984 s, 2939 m, 2877 w, 2109 vs, 1725 vs, 1640 s, 1467 m, 1454 m, 1439 w, sh, 1388 s, sh, 1376 vs, 1349 s, 1199 s, 1106 vs cm<-1>. ESI MS:
236 ([M Na]<+>); HR ESI MS: izr. za C9H15O3N3Na 236.1006; nađeno 236.1007.
[0222] Izopropil 6-diazo-2-((difenoksifosforil)amino)-5-oksoheksanoat (4). Uzimajući u obzir Šemu 1, izopropil DON 3 (80 mg, 0.38 mmol) je rastvoren u apsolutnom dihlormetanu (4 mL) i dodat je trietilamin (210 µL, 1.5 mmol, 4 ekviv.). Ovaj rastvor je ohlađen do 0 °C i difenil
hlorofosfat (156 µL, 0.75 mmol, 2 ekviv.) je dodat u kapima. Reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 30 min i zatim je ledeno kupatilo uklonjeno. Reakciona smeša je zatim mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Organski rastvarač je uparen in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (hloroform - aceton 30:1) kako bi dao željeni proizvod (131 mg, 78 %) u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.19 (3H, d, J= 1.0), 1.21 (3H, d, J= 1.0), 1.84 - 1.93 (1H, m), 2.07 - 2.16 (1H, m), 2.19 - 2.41 (2H, m), 3.79 - 3.84 (1H, m), 4.97 (1H, hept, J = 6.2), 5.07 (1H, s).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 21.75, 21.81, 29.34, 35.88, 54.29, 69.80, 80.90, 120.32 (2C, d, JC,P = 5.0), 120.39 (2C, d, JC,P = 4.9), 125.23 (2C, d, JC,P = 1.0), 125.28 (2C, d, JC,P = 1.0), 130.00 (2C), 150.68 (d, JC,P = 5.8), 150.75 (d, JC,P = 6.2), 171.93 (d, JC,P = 5.9), 193.51.<31>P NMR (101 MHz, CDCl3): 0.32 Optička rotacija: [α]<22>D 15.1° (c 0.337, CHCl3). IR (CHCl3): 3383 w, 3115 w, 3101 vw, 3063 vw, 2985 m, 2938 w, 2878 vw, 2110 vs, 1731 s, 1642 s, 1600 m, sh, 1591 m, 1490 s, 1467 w, 1456 m, 1448 vw, sh, 1426 m, 1385 s, sh, 1377 s, 1350 m, 1191 vs, 1163 s, 1071 w, 1026 m, 941 vs, 904 m, 821 w, 690 m, 617 w, 487 m cm<-1>. ESI MS: 468 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C21H24O6N3NaP 468.12949; nađeno 468.12952.
Sinteza etil 2-((((4-acetoksibenzil)oksi)karbonil)amino)-6-diazo-5-oksoheksanoata (6)
[0223] 1-[4-(acetiloksi)benzil] 2-etil 5-oksopirolidin-1,2-dikarboksilat (5). U rastvor fozgena (15% tež. u toluenu, 10 mL, 14 mmol, 2.5 ekviv.) ohlađen na 0 °C dodat je rastvor 4-acetoksibenzil alkohola (934 mg, 5.6 mmol) u
1
toluenu (6.7 mL). Reakciona smeša je mešana na istoj temperaturi preko noći. Isparljive materije su uklonjene in vacuo i proizvod 4-(acetoksi)benzil hloroformat je rastvoren u THF (5 mL) i korišćen bez bilo kakvog prečišćavanja. Etil piroglutamat (800 mg, 5.1 mmol) je rastvoren u apsolutnom THF (13 mL) pod argonom i ohlađen do -78 °C. Rastvor LiHMDS (1M u heksanima, 6.12 mL, 6,12 mmol, 1.2 ekviv.) je dodat u kapima i rastvor je mešan na istoj temperaturi tokom 15 min. Dobijena žuta smeša je prebačena pomoću kanile u rastvor 4-(acetoksi) benzil hloroformata (5.6 mmol, 1 ekviv.) na -78 °C. Reakciona smeša je mešana na -78 °C tokom 2 h. Nakon ovog perioda, reakcija je ugašena zasićenim NH4Cl (100 mL). Zatim je ekstrahovana etil acetatom (3 × 50 mL), kombinovani organski slojevi su oprani vodom(40 mL), fiziološkim rastvorom (40 mL) i osušeni preko anhidrovanog MgSO4. Organski rastvarač je uparen in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (heksan - etil acetat 1:1) kako bi dao željeni proizvod 5 (1.16 g, 65 %) u vidu bezbojne čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.16 (3H, t, J = 7.2), 1.99 - 2.06 (1H, m), 2.25 (3H, s), 2.28 - 2.36 (1H, m), 2.42 - 2.50 (1H, m), 2.55 - 2.64 (1H, m), 4.11 (1H, qd, J = 7.1, 2.6), 4.62 (1H, dd, J = 9.4, 2.7), 5.16 (1H, d, J = 12.4), 4.25 (1H, d, J = 12.4), 7.02 - 7.05 (2H, m), 7.35 - 7.39 (2H, m).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 14.02, 21.08, 21.79, 30.99, 58.74, 61.82, 67.58, 121.75, 129.46, 132.62, 150.70, 150.83, 169.28, 170.97, 172.93. Optička rotacija: [α]<22>D - 30.7° (c 0.298, CHCl3). IR (CHCl3): 2968 w, 2942 vw, 2876 vw, 1797 s, 1753 vs, 1717 s, sh, 1609 w, 1597 vw, 1510 m, 1476 vw, 1463 w, 1450 w, 1447 w, 1421 w, 1402 w, sh, 1380 m, 1372 m, 1303 s, 1288 s, 1259 m, 1198 vs, 1166 s, 1107 vw, 1045 m, 1019 m, 1012 m, sh, 913 w, 846 w, 596 w, cm<-1>. ESI MS: 372 ([M Na]<+>).
HR ESI MS: izr. za C17H19O7NNa 372.10537; nađeno 372.10541.
Etil 2-((((4-acetoksibenzil)oksi)karbonil)amino)-6-diazo-5-oksoheksanoat (6).
[0224] Rastvor trimetilsilil diazometana (2M u dietil etru, 1.7 mL, 3.43 mmol, 1.2 ekviv.) je rastvoren u apsolutnom THF (17 mL) pod argonom i ohlađen do -98 °C.
2
Rastvor n-butillitijuma (2.5 M u heksanima, 1.4 mL, 3.52 mmol, 1.23 ekviv.) je dodat u kapima i rastvor je mešan na -98 °C tokom 30 min. Dobijena smeša je prebačena putem kanile u rastvor prethodnog jedinjenja 5 (1.0 g, 2.86 mmol, 1 ekviv.) u apsolutnom THF (27 mL) na -116 °C. Reakciona smeša je polako zagrejana do -78 °C i zatim ugašena zasićenim NH4Cl. Zatim je ekstrahovana etil acetatom (3 × 50 mL), kombinovani organski slojevi su oprani vodom (40 mL), fiziološkim rastvorom (40 mL) i osušeni preko anhidrovanog MgSO4. Organski rastvarač je uparen in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (hloroform - aceton 20:1) kako bi dao željeni proizvod 6 (460 mg, 41 %) u vidu žućkaste čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.25 (3H, t, J = 7.1), 1.92 - 2.03 (1H, m), 2.13 - 2.23 (1H, m), 2.28 (3H, s), 2.32 -2.43 (1H, m), 4.18 (1H, q, J= 7.1), 4.29 - 4.34 (1H, m), 5.04 (1H, d, J = 12.4), 5.10 (1H, d, J = 12.1) 5.22 (1H, s), 7.31 (1H, d, J = 8.2), 7.04 - 7.07 (2H, m), 7.34 - 7.37 (2H, m).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 14.22, 21.19, 27.53, 36.45, 53.62, 61.78, 66.38, 121.78, 129.52, 134.01, 150.59, 156.01, 169.51, 171.90, 193.60. Optička rotacija: [α]<22>D 15.5° (c 0.129, CHCl3). IR (CHCl3): 3428 w, 3116 w, 2966 w, 2110 s, 1721 vs, 1742 s, sh, 1641 m, 1609 w, sh, 1595 vw, sh, 1509 s, 1418 vw, 1381 s, sh, 1371 s, 1344 m, 1197 vs, 1166 m,1106 vw, 1053 m, br, 1019 m, 1012 m, sh, 913 w, 848 w, 595 w, 492 w cm<-1>. ESI MS: 414 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C18H21O7N3Na 414.12717; nađeno 414.12713.
Sinteza 1-metiletil 2, 6-bis[4-(1λ<5>-diaziniliden)-3-oksobutil]-9-metil-7-okso-4-fenoksi-8 oksa-3,5-diaza-4-fosfodekan-1-oat 4-oksida (7)
[0225] 1-metiletil 2,6-bis[4-(1λ<5>-diaziniliden)-3-oksobutil]-9-metil-7-okso-4-fenoksi-8 oksa-3,5-diaza-4-fosfodekan-1-oat 4-oksid (7). Uzimajući u obzir Šemu 1, izopropil DON 3 (100 mg, 0.38 mmol) je
rastvoren u apsolutnom dihlormetanu (3 mL) i diizopropiletil amin (327 µL, 1.88 mmol, 4 ekviv.) je dodat. Ovaj rastvor je ohlađen do 0 °C i fenil dihlorofosfat (31.6 µL, 0.21 mmol, 0.45 ekviv.) je dodat u kapima. Reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 30 min i zatim je ledeno kupatilo uklonjeno. Reakciona smeša je zatim mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Organski rastvarač je uparen in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (etil acetat - methanol 40:1) kako bi dao željeni proizvod (78 mg, 66 %) u vidu žutog ulja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.21 - 1.24 (12H, m), 1.81 - 1.93 (2H, m), 2.09 - 2.19 (2H, m), 2.24 - 2.52 (4H, m), 3.61 - 3.70 (2H, m), 3.90 - 3.98 (2H, m), 4.99 (1H, hept, J= 6.3) 4.99 (1H, hept, J = 6.2), 5.24 (1H, s), 5.33 (1H, s), 7.10 - 7.14 (1H, m), 7.17 - 7.20 (2H, m), 7.28 - 7.31 (2H, m).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 21.81 (4C), 29.26, 29.43, 36.21 (2C), 53.78 (d, JC,P = 1.7), 53.97, 69.54, 69.66, 120.43 (d, JC,P = 4.8), 124.76, 129.76 (2C), 151.03 (2C, d, JC,P = 6.8), 172.47 (d, JC,P = 5.5), 172.64 (d, JC,P = 5.2), 194.07 (2C).<31>P NMR (101 MHz, CDCl3): 11.08. Optička rotacija: [α]<22>D 6.4° (c 0.313, CHCl3). IR (CHCl3): 3099 w, 3303 w, 2104 vs, 1732 s, 1639 s, 1592 w, 1492 m, 1385 sh, m, 1376 s, 1240 sh, m, 1211 s, 1183 sh, m, 1167 m, 1144 m, 1132 sh, m, 1106 s, 1072 w, 1025 w, 1006 m, 923 m, 832 sh, w, 771 w, m, 692 w cm<-1>.
[0226] ESI MS: 587 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C24H33N6O8PNa 587.19897; nađeno 587.19899.
Sinteza izopropil 2-(2-amino-4-metilpentanamido)-6-diazo-5-oksoheksanoata (9)
[0227] Izopropil 2-(2-((((9H-fluoren-9-il)metoksi)karbonil)amino)-4-metilpentanamido)-6 diazo-5-oksoheksanoata (8). Uzimajući u obzir Šemu 1, Fmoc-NH-(L)-Leu-COOH (874 mg, 2.47 mmol, 1.1 eq.) i HBTU (1023 mg, 2.70 mmol, 1.2 ekv.) su suspendovani u suvom DCM (15 mL). DIEA (872 mg, 1.18 mL, 6.75 mmol, 3 ekv.) i zatim je rastvor NH2-DON-COOiPr (448 mg, 2.25 mmol, 1 ekv.) u
suvom DCM (5 mL) dodat špricem. Reakciona smeša je mešan tokom 2 h na sobnoj temperaturi pod inertnom atmosferom. DCM (20 mL) je dodat i organska faza je je oprana sa zas. NaHCO3(40 mL), 1M HCl (40 mL), vodom (2x40 mL) i zas. NaCl (40 mL), osušena preko MgSO4. DCM je uparen. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (DCM/EtOAc 4: 1, Rf0.27) i
4
svetlo žuta čvrsta supstanca (949 mg) je dobijena sa prinosom od 79 %.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 0.91 - 0.96 (6H, m), 1.23 - 1.25 (6H, m), 1.51 - 1.73 (3H, m), 1.93 - 2.02 (1H, m), 2.14 -2.24 (1H, m), 2.26 - 2.44 (2H, m), 4.16 - 4.24 (2H, m), 4.33 - 4.37 (1H, m), 4.39 - 4.44 (1H, m), 4.47 - 4.52 (1H, m), 4.96 - 5.08 (1H, m), 5.18 (1H, s), 5.36 (1H, d, J = 8.2), 6.84 (1H, d, J = 7.8), 7.30 (2H, tt, J = 7.4, 1.2), 7.37 - 7.42 (2H, m), 7.58 (2H, d, J = 7.4), 7.75 (2H, d, J = 7.5).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 21.70, 21.72, 22.04, 22.92, 24.66, 27.04, 36.37, 41.75, 47.14, 52.05, 53.56, 67.08, 69.47, 119.98, 120.01, 125.06, 125.13, 127.10, 127.11, 127.74, 127.75, 141.28 (2C), 143.76, 143.81, 156.14, 170.95, 172.29, 193.80. Optička rotacija: [α]<22>D - 6.1° (c 0.472, CHCl3). IR (CHCl3): 3304 m, sh, 3067 w, 3018 w, 2105 s, 1730 s, 1704 s, 1659 vs, 1639 sh, m, 1612 sh, w, 1580 sh, w, 1539 s, 1478 m, 1451 m, 1467 m, 1386 sh, s, 1375 s, 1244 s, 1172 sh, m, 1145 m, 1106 s, 834 sh, w,759 m, 740 s, 621 m, 427 cm<-1>. ESI MS: 571 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C24H33O4N4Na 571.25271; nađeno 571.25271. Izopropil 2-(2-amino-4-metilpentanamido)-6-diazo-5-oksoheksanoat (9). Korišćen je isti metod pripreme kao i za prethodno jedinjenje 3. Uzimajući u obzir Šemu 1, jedinjenje 8 (90 mg, 0.164 mmol), dihlorometan (1 mL), piperidin (41 µL 0.41 mmol, 2.5 ekviv.). Hromatografija na silika gelu (hloroform - metanol 20:1). Proizvod (31 mg, 66 %) u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 0.94 (3H, d, J = 6.3), 0.98 (3H, d, J = 6.4), 1.25 (3H, d, J = 2.8), 1.26 (3H, d, J = 2.8), 1.35 –
1.42 (1H, m), 1.76 - 1.79 (2H, m), 1.95 - 2.04 (1H, m), 2.17 - 2.25 (1H, m), 2.33 - 2.49 (2H, m), 3.48 (1H, dd, J = 9.7, 4.1), 4.52 (1H, td, J = 8.5, 4.7), 5.04 (1H, hept, J = 6.3), 5.35 (1H, s), 7.87 (1H, d, J = 8.3).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 27.59, 28.19, 33.40, 66.39, 80.90, 124.87, 128.33, 128.35, 128.66, 136.10, 140.58, 166.01, 172.75. Optička rotacija: [α]<22>D ° (c 0.33, CH2Cl2). IR (CHCl3): 3412 w, 3343 w, 2110 vs, 1731 s, 1663 s, 1643 sh, s, 1603 sh, w, 1510 s, 1413 w, 1386 sh, s, 1376 sh, s, 1370 sh, s, 1349 m, 1145 m, 1105 s cm<-1>. ESI MS: 327 ([M H]<+>). HR ESI MS: izr. za C15H27O4N4Na 327.20268; nađeno 327.20280.
Sinteza 1-metiletil L-leucil-L-leucil-6-(1l<5>-diaziniliden)-5-okso-L-norleucinata (11)
[0228] 1-metiletil N-[(9H-fluoren-9-ilmetoksi)karbonil]-L-leucil-L-leucil-6-(1l<5>-diaziniliden)-5-okso-L-norleucinat (10). Fmoc-NH-(L)-Leu-COOH (224 mg, 0.634 mmol,
1.1 ekviv.) i 2.benzotriazol-1-il-tetrametiluronijum tetrafluoroborat (TBTU) (222 mg, 0.69 mmol, 1.2 ekviv.) suspendovani su u apsolutnom dihlorometanu (5 mL) i dodat je diizopropiletil amin (301 µL, 1.73 mmol, 3 ekviv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min. i zatim je dodat rastvor 9 (188 mg, 0.58 mmol) u suvom dihlorometanu (3 mL). Reakciona smeša je mešan tokom 2 h na sobnoj temperaturi pod inertnom atmosferom. Organski rastvarač je uparen in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (heksan:etil acetat, 1:1) kako bi dao željeni proizvod 10 (188 mg, 49 %) u vidu žućkaste amorfne čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 0.86 - 0.98 (12H, m), 1.24 (3H, d, J= 5.0), 1.25 (3H, d, J= 5.0), 1.47 - 1.56 (2H, m), 1.57 - 1.72 (4H, m), 1.91 - 2.04 (1H, m), 2.14 - 2.24 (1H, m), 2.26 -2.48 (2H, m), 4.14 - 4.22 (1H, m), 4.21 (1H, t, J= 6.8), 4.36 - 4.49 (4H, m), 5.03 (1H, hept, J = 6.3), 5.14 (1H, d, J= 7.5), 5.32 (1H, s), 6.41 (1H, d, J = 7.7), 6.83 (1H, d, J = 6.8), 7.32 (2H, tt, J = 7.4, 1.3), 7.41 (2H, tt, J= 7.5, 1.5), 7.58 (2H, d, J= 7.5), 7.77 (2H, tt, J= 7.6, 1.1).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 21.82, 21.84, 21.96, 22.22, 22.91, 23.14, 24.83 (2C), 27.22, 36.46, 41.29, 41.39, 47.26, 51.94, 52.12, 53.74, 55.00, 67.22, 69.54, 120.12, 120.14, 125.11, 125.15, 127.22 (2C), 127.88, 127.89, 141.42 (2C), 143.77, 143.89, 156.42, 171.03, 171.81, 172.39, 193.97.
Optička rotacija: [α]<22>D -25.2° (c 0.385, CHCl3). IR (CHCl3): 3426 m, 3332 w, sh, 3116 w, 3068 w, 2961 s, 2873 m, 2110 s, 1726 vs, 1672 vs, 1640 sh, m, 1610 sh, w, 1579 sh, w, 1541 m, 1506 vs, 1479 m, 1468 m, 1387 s, 1371 sh, s, 1377 s, 1349 m, 1286 m, 1234 s, 1171 sh, m, 1146 m, 1105 s, 1046 m, 1023 sh, w, 824 w, 585 w, 488 w, sh, 426 w cm<-1>. ESI MS: 684 ([M Na]<+>).
HR ESI MS: izr. za C36H47O7N5Na 684.33677; nađeno 684.33607.
[0229] 1-metiletil L-leucil-L-leucil-6-(1l5-diaziniliden)-5-okso-L-norleucinat (11). Jedinjenje 10 (180 mg, 0.272 mmol), je rastvoreno u dihlormetanu (4 mL). Piperidin (67 µL 0.68 mmol, 2.5 ekviv.) je dodat i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Organski rastvarač je uparen in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji
na silika gelu (hloroform:metanol, 30:1) kako bi dao željeni proizvod 11 (80 mg, 67 %) u vidu žute amorfne čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3):): 0.88 - 0.98 (12H, m), 1.24 (3H, d, J= 5.2), 1.26 (3H, d, J= 5.3), 1.37 - 1.47 (1H, m), 1.50 - 1.79 (5H, m), 1.91 - 2.07 (1H, m), 2.08 - 2.28 (3H, m), 2.31 - 2.50 (2H, m), 3.52 (1H, dd J = 9.5, 3.8), 4.39 (1H, td, J = 8.7, 5.3), 4.46 (1H, td, J = 8.0, 4.6), 5.03 (1H, hept, J = 6.2), 5.37 (1H, s), 7.02 (1H, d, J= 7.4), 7.77 (1H, d, J= 8.1).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 21.46, 21.83, 21.86, 22.05, 23.09, 23.53, 24.95, 25.01, 27.13, 36.52, 40.89, 43.94, 51.55, 52.16, 53.61, 55.01, 69.49, 171.09, 172.36, 175.91, 194.21.
Optička rotacija: [α]<22>D -31.7° (c 0.439, CHCl3). IR (CHCl3): 3415 w, 3343 w, br, 3117 w, 2984 m, 2961 s, 2936 m, 2873 m, 2855 w, 2110 vs, 1731 s, 1665 vs, br, 1653 vs, br, 1630 s, sh, 1509 s, 1468 m, 1454 w, 1450 w, 1440 w, 1386 s, 1377 s, 1370 s, 1349 m, 1201 m, 1183 w, 1146 m, 1105 s cm<-1>. ESI MS: 440 ([M H]<+>). HR ESI MS: izr. za C21H38O5N5440.28675; nađeno 440.28674.
Sinteza 1-metiletil 6-(1λ<5>-diaziniliden)-N-{[(5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metoksi}karbonil}-5-okso-L-norleucinata (13)
[0230] 2,5-dioksopirolidin-1-il-((5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil karbonat (12). 4-(hidroksimetil)-5-metil-1,3-dioksol-2-on (1.00 g, 7.89 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u suvom Et2O (30 ml) i rastvor je ohlađen do 0°C. Na ovoj temperaturi je dodat piridin (608 mg, 619 µL, 7.69 mmol, 1 ekv.)
i na kraju je rastvor S-etil karbonohloridotionata (1.04 g, 874 µL, 8.38 mmol, 1.09 ekv.) u suvom Et2O (8 mL) dodat u kapima. Smeša je mešana tokom 1 h na 0 °C i preko noći na rt (18 h). Et2O je uklonjen vakuumom i DCM (70 mL) je dodat. Reakciona smeša je je oprana sa zas. NaHCO3(40 mL) i vodom (3x40 mL), osušena sa MgSO4i DCM je uklonjena rotavap aparatom. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (heksan/EtOAc 5:1, Rf0.24). Svetlo žuta tečnost (1.29 g) je dobijena sa prinosom od 77 %. S-etil O-((5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil) karbonotioat (800 mg, 3.67 mmol, 1 ekv.) i N-hidroksisukcinimid (844 mg, 7.33 mmol, 2 ekv.) su suspendovani u suvom DCM (8 mL). Rastvor je ohlađen do 0 °C i persirćetna kiselina (836 mg (100 %), 2.32 g (36 %), 11.00 mmol, 3 ekv., 36 % rastvor u sirćetnoj kiselini) je dodat u kapima tokom 10 minuta. Finalna smeša je mešana tokom 30 minuta na 0 °C i 2 h na rt. DCM (20 mL) je dodat i organska faza je oprana vodom (2x35 mL) sa zas. NaCl (35 mL). DCM je uparen i proizvod 12 je dobijen u vidu bezbojne čvrste supstance jedinjenje (750 mg) sa prinosom od 76 %.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 2.20 (3H, s), 2.86 (4H, s), 5.05 (2H, s).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 9.67, 25.58, 59.89, 131.61, 142.20, 151.65, 168.39. IR (CHCl3): 1842 m, 1824 s, 1819 s, 1792 s, 1749 vs, 1431 w, 1386 w, 1309 m, 1195 s, 935 w, 900 w, 811 vw cm<-1>. ESI MS: 294 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C10H9O8NNa 294.02204; nađeno 294.02213.
[0231] 1-metiletil 6-(1λ<5>-diaziniliden)-N-{[(5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metoksi]karbonil}-5-okso-L-norleucinat (13). Imajući u vidu šemu 2, jedinjenje 12 (70 mg, 0.258 mmol, 1.1 ekviv.) je rastvoreno u apsolutnom dihlorometanu (2 mL). Ovaj rastvor je ohlađen do 0 °C i rastvor 3 (50 mg, 0.235 mmol) u dihlorometanu (1 mL) je dodat u kapima.
[0232] Reakciona smeša je mešana 15 min na 0 °C ledeno kupatilo
je uklonjeno. Reakciona smeša je zatim mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Organski rastvarač je uparen in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (hloroform:aceton, 10:1) kako bi dao željeni proizvod 13 (72 mg, 83 %) u vidu žutog ulja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.24 (3H, d, J = 3.4), 1.26 (3H, d, J = 5.6), 1.94 - 2.04 (1H, m), 2.13 -2.24 (1H, m), 2.16 (3H, s), 2.32 - 2.49 (2H, m), 4.23 - 4.28 (1H, m), 4.77 - 4.87 (2H, m), 5.04 (1H, hept, J = 6.3), 5.28 (3H, s), 5.66 (1H, d, J = 7.9).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 9.51, 21.82, 21.85, 27.32, 36.33, 53.86, 54.57, 69.79, 133.93, 140.07, 152.31, 155.25, 171.12, 193.50.
Optička rotacija: [α]<22>D 15.1° (c 0.417, CHCl3). IR (CHCl3): 3424 w, 3012 w, 2984 w, 2935 w, 2111 s, 1836 sh, s, 1821 vs, 1736 sh, vs, 1725 vs, 1641 m, 1603 sh, w, 1509 s, 1391 sh, m, 1383 s, 1366 sh, m, 1105 s cm<-1>. ESI MS: 392 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C15H19O8N3Na 392.10644; nađeno 392.10650.
Sinteza 1-metiletil 6-(1λ<5>-diaziniliden)-N-({1-[(2,2-dimetilpropanoyl)oksi]etoksi} karbonil)-5-okso-L-norleucinata (14a) i (14b)
[0233] 1-((((2,5-dioksopirolidin-1-il)oksi)karbonil)oksi)etil pivalat (LTP 174). Ovo jedinjenje je pripremljeno prema proceduri iz literature (WO 2008033572 A1).
[0234] 1-metiletil 6-(1λ<5>-diaziniliden)-N-({1-[(2,2-dimetilpropanoil)oksi]etoksi} karbonil)-5-okso-L-norleucinat (14a) i (14b). Imajući u vidu šemu 2,
jedinjenje 14a i 14b su pripremljena od 3 (200 mg, 0.938 mmol) kao što je opisano za pripremu 13 pomoću dihlorometana (8 mL) i 1-((((2,5-dioksopirolidin-1-il)oksi)karbonil)oksi)etil pivalata (297 mg, 1.032 mmol, 1.1 ekviv.), nakon čega sledi hromatografija na silika gelu (hloroform:aceton, 20:1) koja daje dva dijastereoizomera, 14a (90 mg, Rf= 0.25) i 14b (50 mg, Rf= 0.2) u vidu žutog ulja (39 %).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.18 (9H, s), 1.25 (3H, d, J= 3.0), 1.26 (3H, d, J = 3.1), 1.46 (3H, d, J = 5.4), 1.94 - 2.04 (1H, m), 2.15 - 2.24 (1H, m), 2.31 -2.49 (2H, m), 4.24 - 4.30 (1H, m), 5.04 (1H, hept, J = 6.2), 5.28 (1H, s), 5.50 (1H, d, J = 7.9), 6.77 (1H, q, J = 5.4).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 19.78, 21.83, 21.85, 27.00 (3C), 27.79, 36.56, 38.79, 53.58, 69.76, 89.70, 153.90, 171.16, 176.61, 193.59. IR (CHCl3): 3427 w, 3116 w, 2984 m, 2960 sh, m, 2937 w, 2875 w, 2857 sh, w, 2110 s, 1745 sh, vs, 1730 sh, vs, 1641 m, 1508 s, 1480 m, 1467 sh, w, 1461 w, 1455 sh, w, 1392 sh, s, 1383 sh, s, 1377 s, 1371 sh, s, 1365 sh, s, 1350 m, 1027 m cm<-1>. Optička rotacija (14a): [α]<22>D 22.0° (c 0.191, CHCl3). Optička rotacija (14b): [α]<22>D 7.6° (c 0.158, CHCl3). ESI MS (14a): 408 ([M Na]<+>). ESI MS (14b):
408 ([M Na]<+>). HR ESI MS (14a): izr. za C17H27O7N3Na 408.17412; nađeno 408.17425. HR ESI MS (14b): izr. za C17H27O7N3Na 408.17412; nađeno 408.17421. Dijastereoizomer 14a je korišćen za sve biološke studije.
Sinteza izopropil 6-diazo-2-(((1-((3-metilbutanoil)oksi)etoksi)karbonil)amino)-5 oksoheksanoata (JAM0335)
1-((((2,5-dioksopirolidin-1-il)oksi)karbonil)oksi)etil izobutirat (LTP 150)
[0235] Ovo jedinjenje je pripremljeno prema proceduri iz literature (Magill et al., 1957.
[0236] Izopropil 6-diazo-2-(((1-((3-metilbutanoil)oksi)etoksi)karbonil)amino) -5-oksoheksanoat (JAM0335). Korišćen je isti metod pripreme kao i za prethodno jedinjenje 13. Imajući u vidu šemu 2, LTP150 (74 mg, 0.258 mmol, 1.1 ekviv.),
dihlorometan (2 mL). Jedinjenje 3 (50 mg, 0.235 mmol), dihlorometan (1 mL), Hromatografija na silika gelu (hloroform - aceton 20:1). Proizvod (31 mg, 66 %) je izolovan u vidu žutog ulja.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.48 (9H, s), 2.54 - 2.64 (4H, m), 5.11 (2H, s), 5.48 (1H, m), 6.07 (1H, d, J = 1.2), 7.30 - 7.40 (5H, m).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 27.59, 28.19, 33.40, 66.39, 80.90, 124.87, 128.33, 128.35, 128.66, 136.10, 140.58, 166.01, 172.75. ESI MS: 313 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C17H22O4Na 313.14103; nađeno 313.14103.
Sinteza 1-metiletil 6-(1λ<5>-diaziniliden)-N-({1-[(2-metilpropanoil)oksi]etoksi} karbonil)-5 okso-L-norleucinata (15)
[0237] 1-metiletil 6-(1λ<5>-diaziniliden)-N-({1-[(2-metilpropanoil)oksi]etoksil karbonil)-5-okso-L-norleucinat (15). Jedinjenje 15 je pripremljeno od 3 (300 mg, 1.4 mmol) kao što je opisano za pripremu 13 koristeći 1-[[[(2,5-dioksopirolidin-1-il)oksi]karbonil]oksi]etil 2-metilpropanoat (pripremljen prema WO 2005066122, 423 mg, 1.55 mmol, 1.1 ekviv.) i dihlorometan (4 mL),
i nakon toga hromatografijom na silika gelu (hloroform:aceton, 20:1). Žuto ulje (426 mg, 82 %).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.13 - 1.17 (6H, m), 1.24 - 1.26 (6H, m), 1.46 (3H, d, J = 5.4), 1.89 - 2.03 (1H, m), 2.15 - 2.26 (1H, m), 2.31 - 2.58 (3H, m), 4.25 - 4.31 (1H, m), 5.03 (1H, hept, J = 6.3), 5.29 i 5.34 (1H, 2 x s), 5.48 i 5.52 (1H, 2x d, J = 8.2 i 7.9), 6.75 - 6.81 (1H, m).
1
<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 18.78 (2C), 19.83, 21.81, 21.84, 27.81, 33.98, 36.40, 53.47, 54.92, 69.75, 89.53, 153.87, 171.12, 175.19, 193.60. IR (CHCl3): 3427 w, 3116 w, 2983 m, 2940 w, 2879 w, 2110 s, 1746 vs, 1733 vs, 1641 m, 1509 s, 1449 m, 1387 s, 1349 s, 1341 m, 1321 m, 1030 s cm<-1>. ESI MS: 394 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C16H25O7N3Na 394.15847; nađeno 394.15859.
Sinteza 4-acetoksibenzil 4-(4-diazo-3-oksobutil)-5-oksooksazolidin-3-karboksilata (17)
[0238] 3-(3-(((4-acetoksibenzil)oksi)karbonil)-5-oksooksazolidin-4-il)propanska kiselina (16). Imajući u vidu šemu 3, rastvor fozgena (15 % zap.) (2.12 g, 2.25 mL, 21.43 mmol, 2.21 ekv.) u PhCH3(15 mL) je ohlađen do 0 °C. 4-(hidroksimetil)fenil acetat (1.61 g, 9.70 mmol, 1 ekv.) u PhCH3(15 mL) je
dodavan u kapima tokom 15 min. Reakciona smeša je mešana tokom 1 h na 0 °C i zatim na sobnoj temperaturi preko noći (20 h). Rastvarač je uparen i sirovi proizvod 4-{[(hlorokarbonil)oksi]metil}fenil acetat (LTP 086) je korišćen za sledeći korak bez prečišćavanja. L-glutaminska kiselina (951 mg, 6.46 mmol, 1 ekv.) je suspendovana u vodi (8 mL) i NaHCO3(1.37 g, 16.30 mmol, 2.52 ekv.) je dodat u nekoliko porcija. Nakon 15 min
2
mešanja, sirovi LTP 086 (2.2 g, 9.70 mmol, 1 ekv.) je dodavan pomoću šprica tokom 2 minuta na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći (20 h). 1 M HCl je dodavan dok smeša nije dostigla pH vrednost od 1 i vodena faza je zatim ekstrahovana sa EtOAc (10x15 mL). Kombinovane organske frakcije su oprane sa zas. NaCl (150 mL), osušene preko MgSO4i rastvarač je uparen. Sirovi proizvod N-[[[4-(acetiloksi)fenil]metoksi]karbonil]-L gluamaminska kiselina (LTP 087) (2.2 g, 6.48 mmol, 1 ekv.) je korišćen u sledećem koraku bez prečišćavanja. LTP 087 (2.2 g, 6.48 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u PhCH3(45 mL). Paraformaldehid (389 mg, 12.97 mmol, 2 ekv.) i p-toluensulfonska kiselina (PTSA) (123 mg, 0.648 mmol, 0.1 ekv.) su dodate i smeša je refluksovana tokom 1 h. Toluen je uparen i sirovi proizvod je prečišćen putem hromatohrafije na koloni (CHCl3/MeOH 20:1). Željeni proizvod 16 je dobijen u vidu bezbojnog viskoznog ulja (280 mg) sa prinosom od 12 %, u tri koraka.
[0239] 4-acetoksibenzil 4-(4-diazo-3-oksobutil)-5-oksooksazolidin-3-karboksilat (17).
Jedinjenje LTP088 (257 mg, 0.732 mmol) je rastvoreno u apsolutnom THF (3 mL), ohlađeno do -15 °C i trietilamin (153 µL, 1.097 mmol, 1.5 ekviv.) je dodat u kapima. Dodat je etilhloroformat i reakciona smeša je mešana na -15 °C tokom 1.5 h. Zatim je dodat rastvor diazometana
i reakciona smeša je mešana tokom dodatnih 30 min na -15 °C, a zatim je ledeno kupatilo uklonjeno. Reakciona smeša je zatim mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Organski rastvarač je uparen in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (heksan - etil acetat 1:1) kako bi dao željeni proizvod (220 mg, 66 %) u vidu žute amorfne čvrste supstance.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 2.14 (2H, m), 2.29 (3H, s), 2.32 - 2.56 (2H, m), 4.34 (1H, t, J= 6.2), 5.11 - 5.25 (4H, m), 5.51 (1H, s), 7.07 - 7.10 (2H, m), 7.37 - 7.40 (2H, m).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 21.19, 25.80, 35.36, 54.12, 67.49, 77.89, 122.06 (2C), 129.96 (2C), 130.02, 150.97, 152.98, 169.49, 171.81, 192.64. IR (CHCl3): 3116 w, 2964 vw, 2922 w, 2111 s, 1802 s, 1768 m, sh, 1756 s, 1716 vs, 1642 m, 1610 w, 1597 vw, sh, 1510 m, 1423 m, 1410 s, 1383 m, 1371 s, 1355 s, 1197 vs, 1167 s, 1128 m, 1106 w, 1019 m, 1013 m, 914 m, 850 w, 596 w, 492 w, cm<-1>. ESI MS: 398 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C17H17O7N3Na 398.09587; nađeno 398.09596.
Šema 4
Sinteza etil 2-(2-aminopropanamido)-6-diazo-5-oksoheksanoata (22)
[0240] 1-(9H fluoren-9-ilmetil)-2-etil-5-oksopirolidin-1,2-dikarboksilat (18). Imajući u vidu šemu 4, 5-okso-L-prolin etil estar (4.00 g, 25.45 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u apsolutnom THF (120 mL) u inertnoj atmosferi i ohlađen do -78°C. Rastvor LiHMDS (1M u THF, 24.2 mL, 24.18 mmol, 0.95 ekv.) je dodat u kapima i rastvor
4
je mešan na istoj temperaturi 20 min. Dobijena žuta smeša je prebačena pomoću kanile u rastvor Fmoc hlorida (32.9 g, 127.3 mmol, 5 ekv.) u apsolutnom THF (90 mL) na -78 °C. Reakciona smeša je mešana na -78°C 2 h i na rt preko noći (18 h). Nakon ovog perioda reakcija je ugašena zasićenim NH4Cl (34 mL) i vodom (18 mL). Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (60 mL) i kombinovani organski delovi su oprani fiziološkim rastvorom (2×100 mL) i osušeni preko anhidrovanog MgSO4. Organski rastvarač je uparen pod vakuumom. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (heksan:EtOAc 3:1 do 1:1) i na kraju reverznoj LC (MeOH:H2O, 2:1 do 100 % MeOH) kako bi dao željeni proizvod 18 (8.40 g, 87 %) u vidu bezbojne čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.26 (3H, d, J= 7.1), 2.12 (1H, ddt, J= 13.4, 9.4, 2.9), 2.40 (1H, ddt, J = 13.4, 10.8, 9.3), 2.57 (1H, ddd, J = 17.5, 9.2, 3.1), 2.72 (1H, ddd, J= 17.5, 10.7, 9.4), 4.20 (2H, q, J= 7.1), 4.30 (1H, t, J= 7.3), 4.44 (1H, dd, J= 10.5, 7.4), 4.57 (1H, dd, J= 10.6, 7.3), 4.65 (1H, dd, J = 9.4, 2.5), 7.33 (2H, tt, J = 7.4, 1.1), 7.41 (2H, tdd, J = 6.9, 1.3, 0.6), 7.71 (1H, dd, J = 7.5, 1.0), 7.75 (1H, dd, J= 7.5, 1.0), 7.77 (2H, dd, J = 7.8, 1.0).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 14.14, 21.96, 31.21, 46.62, 58.76, 61.92, 69.03, 119.99, 120.01, 125.30, 125.44, 127.26 (2C), 127.91 (2C), 141.27, 141.29, 143.35, 143.40, 151.44, 170.80, 172.99.
Optička rotacija: [α]<22>D - 17.2° (c 0.285, CHCl3). IR (CHCl3): 3068 m, 2985 m, 2941 w, 2898 w, 2875 w, 1797 vs, 1745 vs, br, 1723 vs, 1609 w, 1580 vw, 1478 m, 1463 m, 1452 s, 1400 m, sh, 1385 s, 1197 vs, 1116 vw, sh, 1104 m, 1097 w, sh, 1033 s, 621 m, 426 w, cm<-1>. ESI MS: 402 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C22H21O5NNa 402.1312; nađeno 402.1313.
[0241] Etil 2-((((9H-fluoren-9-il)metoksi)karbonil)amino)-6-diazo-5-oksoheksanoat (19).
Rastvor trimetilsilil diazometana (2M u dietil etru, 7.9 mL, 15.81 mmol, 1.2 ekv.) je rastvoren u apsolutnom THF (70 mL) pod argonom i ohlađen do -98 °C. Rastvor n-butillitijum (2.5 M u heksanima, 6.5 mL, 16.21 mmol, 1.23 ekv.) je dodat u kapima i rastvor je mešan na -98 °C tokom 30 min. Dobijena smeša je prebačena putem kanile u rastvor 18 (5.00 g,
13.18 mmol, 1 ekv.) u apsolutnom THF (120 mL) na -116 °C. Reakciona smeša je mešana tokom 30 min na ovoj temperature i zatim polako zagrejana do -78 °C i ugašena zasićenim NH4Cl (150 mL). Vodena faza je ekstrahovana etil acetatom (3×50 mL), kombinovani organski slojevi su oprani fiziološkim rastvorom (200 mL) i osušeni preko anhidrovanog MgSO4. Organski rastvarač je uparen in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (CHCl3:aceton, 20:) kako bi dao željeni proizvod 19 (4.42 g, 80 %) u vidu žućkaste čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.29 (3H, t, J= 7.1), 1.93 - 2.10 (1H, m), 2.17 - 2.29 (1H, m), 2.33 - 2.53 (2H, m), 4.22 (3H, t, J= 7.1), 4.32 - 4.43 (3H, m), 5.27 (1H, bs), 5.56 (1H, d, J = 8.1), 7.32 (2H, tt, J = 7.4, 1.3), 7.41 (2H, t, J = 7.5), 7.60 (2H, t, J = 6.6), 7.77 (2H, dd, J = 7.6, 1.0).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 14.30, 27.63, 36.56, 47.26, 53.63, 54.96, 61.89, 67.17, 120.11, 120.14, 125.22, 125.24, 127.20 (2C), 127.86 (2C), 141.40, 141.43, 143.78, 143.99, 156.18, 172.03, 193.65. Optička rotacija: [α]<22>D 10.6° (c 0.265, CHCl3). IR (CHCl3): 3428 w, 3116 w, 3068 w, 2985 w, 2942 w, 2907 vw, 2110 s, 1740 s, sh, 1721 vs, 1642 m, 1510 s, 1478 w, 1465 w, 1451 m, 1381 s, 1105 w, 1052 m, 1033 m, 622 w, 426 w cm<-1>. ESI MS: 444 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C23H23O5N3Na 444.15299; nađeno 444.15292.
[0242] Etil 2-amino-6-diazo-5-oksoheksanoat (20). Jedinjenje 20 je pripremljeno od 19 (100 mg, 0.237 mmol) kao što je opisano za pripremu 3 koristeći dihlorometan (10 mL) i piperidin (58 µL 0.59 mmol, 2.5 ekviv.), i nakon toga hromatografiju na silika gelu (hloroform:metanol, 30 : 1). Žuto ulje (31 mg, 66 %).<1>H NMR
(400 MHz, CDCl3): 1.27 (3H, t, J= 7.1), 1.55 (2H, bs), 1.78 - 1.88 (1H, m), 2.06 - 2.17 (1H, m), 2.40-2.54 (2H, bm), 3.44 (1H, dd, J = 8.3, 5.1), 4.17 (2H, q, J= 7.1), 5.27 (1H, s).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 14.24, 29.56, 36.86, 53.77, 54.56, 61.05, 175.58, 194.15. Optička rotacija:
[α]<22>D<+>° (c 0.33, CH2Cl2). IR (CHCl3): 3410 w, vbr, 3327, vw, vbr, 2986 m, 2941 w, 2910 w, 2874 w, 2110 s, 1739 vs, 1641 m, 1605 m, sh, 1586 m, 1552 w, 1513 w, br, 1476 w, 1463 m, 1446 m, 1395 m ,sh, 1377 s, 1200 s, 1115 m, 1096 m cm<-1>. ESI MS: 182 ([M - H2O H]<+>). HR ESI MS: izr. za C12H12N3O2182.0930; nađeno 182.0931.
[0243] Etil 2-(2-((((9H-fluoren-9-il)metoksi)karbonil)amino)propanamido)-6-diazo-5 oksoheksanoat (21). Fmoc-NH-(L)-Ala-COOH (483 mg, 1.55 mmol, 1.1 ekv.) i HBTU (642 mg, 1.69 mmol, 1.2 ekv.) su suspendovani u suvom DCM (10 mL). DIEA (547 mg, 737 µL, 4.32 mmol, 3 ekv.), a zatim i rastvor 20 (281 mg, 1.41 mmol, 1 ekv.) u suvom DCM (3mL) su dodati pomoću šprica. Reakciona smeša je mešana tokom 2 h na rt pod inertnom
atmosferom. DCM (15 mL) je dodat i organska faza je oprana sa zas. NaHCO3(25 mL), 1M HCl (25 mL), vodom (2x25 mL) i zas. NaCl (25 mL), osušena preko MgSO4. DCM je uparen. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (DCM : EtOAc, 1 : 1, Rf0.40) kako bi dao 21 u vidu svetlo žute čvrste supstance (452 mg, 65 %).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.28 (3H, t, J= 7.5), 1.42 (3H, d, J= 7.1), 1.98 - 2.08 (1H, m), 2.16 - 2.28 (1H, m), 2.30 - 2.48 (2H, m), 4.15-4.30 (4H, m), 4.39 (2H, d, J = 7.3), 4.53 (1H, td, J = 8.0, 4.5), 5.21 (1H, s), 5.38 (1H, d, J = 7.4), 6.81 (1H, d, J= 7.8), 7.32 (2H, t, J= 7.5), 7.41 (2H, t, J= 7.5), 7.60 (2H, d, J= 7.5), 7.77 (2H, d, J= 7.5).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 14.25, 18.86, 27.00, 36.48, 38.74, 47.22, 50.65, 55.11, 61.84, 67.24, 120.11, 120.13, 125.20, 125.24, 127.22 (2C), 127.87 (2C), 141.40 (2C), 143.92 (2C), 156.01, 171.58, 172.47, 193.99. Optička rotacija: [α]<22>D 0.4° (c 0.225, CHCl3). IR (CHCl3): 3424 m, 3330 w, br, 3116 vw, 3068 vw, 2986 m, 2941 w, 2908 w, 2875 vw, 2110 s, 1731 vs, 1720 vs, sh, 1682 vs, 1639 m, 1585 vw, 1503 vs, 1478 m, 1451 s, 1377 s, 1233 s, 1116 m, 1105 m, sh, 1095 w, 1032 m, 622 w, 424 w, cm<-1>. ESI MS: 515 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C26H28O6N4Na 515.19011; nađeno 515.19044.
[0244] Etil 2-(2-aminopropanamido)-6-diazo-5-oksoheksanoat (22). Jedinjenje 21 (225 mg, 0.457 mmol, 1 ekv.) je rastvoreno u suvom DCM (4 mL). Dietilamin (167 mg, 236 µL, 2.28 mmol, 5 ekv.) je dodat pomoću šprica. Reakciona smeša je mešana tokom 6 h na rt pod inertnom atmosferom. DCM je uparen. Sirovi
proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (CHCl3:MeOH, 15: 1, Rf0.07) kako bi dao 22 u vidu svetlo žute čvrste supstance (101 mg, 82 %).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.22 (3H, t, J = 7.1), 1.28 (3H, d, J = 7.0), 1.89 - 1.94 (2H, m), 1.94 - 2.01 (1H, m), 2.10-2.21 (1H, m), 2.27 -2.43 (2H, m), 3.47 (1H, q, J = 7.0), 4.13 (2H, q, J = 7.1), 4.47 (1H, td, J = 8.4, 4.9), 5.32 (1H, s), 7.81 (1H, d, J = 8.4).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 14.28, 18.56, 27.44, 36.80, 51.63, 55.05, 58.55, 61.74, 171.90, 175.25, 193.93. Optička rotacija: [α]<22>D - 31.1° (c 0.260, CHCl3+ DMF).
IR (CHCl3): 3393 w, 3336 vw, br, 3211 vw, br, 3116 vw, 2958 m, 2927 s, 2871 m, 2856 m, 2110 s, 1736 m, 1684 vs, 1639 m, 1517 w, 1379 s, 1115 vw, sh, 1097 w, cm<-1>. ESI MS: 271 ([M H]<+>). HR ESI MS: izr. za C11H19O4N4271.14008; nađeno 271.14024.
Sinteza 2-(2-aminopropanamido)-6-diazo-5-oksoheksanska kiseline (23)
[0245] 2-(2-aminopropanamido)-6-diazo-5-oksoheksanska kiselina (23). Imajući u vidu šemu 4, jedinjenje 22 (225 mg, 0.457 mmol, 1 ekv.) je suspendovano u EtOH (3 mL) i THF (3 mL).
1M rastvor NaOH (16 mg, 397 µL, 0.95 ekv.) je dodat i smeša je mešana tokom 15 minuta. Reakcija je ugašena 1
M mravljom kiselinom (397 µL, 0.95 ekv.) i nakon 10 minuta mešanja, smeša je uparena do suva. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC sa Et3N/CH3COOH puferom. Željeni proizvod 23 je dobijen u vidu svetlo narandžaste čvrste supstance (50 mg) sa prinosom od 52 %.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.45 (3H, d, J = 7.0), 2.06 - 2.22 (2H, m), 2.45 - 2.56 (2H, m), 4.01 - 4.13 (2H, m), 5.86 (1H, brs).
Sinteza etil 2-(2-amino-4-metilpentanamido)-6-diazo-5-oksoheksanoata (25)
[0246] Etil 2-(2-((((9H-fluoren-9-il)metoksi)karbonil)amino)-4-metilpentanamido)-6-diazo-5-oksoheksanoat (24). Imajući u vidu šemu 4, Fmoc-NH-(L)-Leu-COOH (874 mg, 2.47 mmol, 1.1 ekv.) i HBTU (1023 mg, 2.70 mmol, 1.2 ekv.) su suspendovani u suvom DCM (15 mL). DIEA (872 mg, 1.18 mL, 6.75 mmol, 3 ekv.), a zatim i rastvor 20 (448 mg, 2.25 mmol, 1 ekv.) u suvom DCM (5 mL) su dodati pomoću šprica. Reakciona smeša je
mešana tokom 2 h na rt pod inertnom atmosferom. DCM (20 mL) je dodat i organska faza je je oprana sa zas. NaHCO3(40 mL), 1M HCl (40 mL), vodom (2x40 mL) i zas. NaCl (40 mL), osušena preko MgSO4. DCM je uparen. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (DCM : EtOAc, 4 : 1, Rf0.27) kako bi dao 24 u vidu svetlo žute čvrste supstance (949 mg, 79 %).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 0.95 (6H, d, J = 5.9), 1.26 (3H, t, J= 7.5), 1.50 - 1.59 (1H, m), 1.62 - 1.75 (2H, m), 1.95 - 2.05 (1H, m), 2.17 - 2.27 (1H, m), 2.29 - 2.45 (2H, m), 4.14 - 4.25 (4H, m), 4.34 - 4.45 (2H, m), 4.49 - 4.58 (1H, m), 5.19 (1H, s), 5.27 (1H, d, J= 8.4), 6.80 (1H, d, J= 7.6), 7.31 (2H, t, J= 7.4), 7.40 (2H, t, J= 7.8), 7.59 (2H, d, J= 7.5), 7.76 (2H, d, J= 7.6).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 14.12, 22.03, 22.92, 24.66, 26.96, 36.33, 41.65, 47.14, 51.94, 53.56, 55.00, 61.73, 67.09, 120.00, 120.03, 125.05, 125.13, 127.12 (2C), 127.76, 127.77, 141.29, 143.64, 143.75, 143.79, 156.15, 171.46, 172.26, 193.81. Optička rotacija: [α]<22>D - 9.7° (c 0.109, DMF). IR (CHCl3): 3304 m, sh, 3067 w, 3018 w, 2105s, 1730 s, 1704 s, 1659 vs, 1639 sh, m, 1612 sh, w, 1580 sh, w, 1539 s, 1478 m, 1451 m, 1467 m, 1386 sh, s, 1375 s, 1244 s, 1172 sh, m, 1145 m, 1106 s, 834 sh, w,759 m, 740 s, 621 m, 427 cm<-1>. ESI MS: 557 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C29H34O6N4Na 557.23706; nađeno 557.23707.
[0247] Etil 2-(2-amino-4-metilpentanamido)-6-diazo-5-oksoheksanoat (25). Imajući u vidu šemu 4, jedinjenje 24 (945 mg, 1.77 mmol, 1 ekv.) je rastvoreno u suvom DCM (9 mL). Dietilamin (646 mg, 914 µL, 8.84 mmol, 5 ekv.) je dodat pomoću šprica. Reakciona smeša je mešana tokom 4 h na rt pod inertnom atmosferom. DCM je uparen. Sirovi proizvod je prečišćen
hromatografijom na koloni (CHCl3: MeOH, 15 : 1, Rf0.38) kako bi dao 25 u vidu bezbojne čvrste supstance (500 mg, 91%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 0.94 (6H, dd, J = 14.0, 6.3), 1.27 (3H, t, J = 7.1), 1.28 - 1.37 (1H, m), 1.45 (2H, s), 1.57 - 1.83 (2H, m), 1.92 - 2.08 (1H, m), 2.16-2.26 (1H, m), 2.26-2.49 (2H, m), 3.39 (1H, dd, J = 10.0, 3.9), 4.19 (2H, dq, J = 7.1, 1.4), 4.54 (1H, dt, J = 8.5, 4.8), 5.30 (1H, s), 7.85 (1H, d, J = 8.3).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 14.25, 21.40, 23.54, 24.97, 27.71, 36.82, 44.29, 51.48, 53.60, 54.86, 61.65, 171.99, 175.99, 193.67.
Optička rotacija: [α]<22>D - 54.8° (c 0.323, CHCl3). IR (CHCl3): 3412 w, 3343 w, 2110 vs, 1731 s, 1663 s, 1643 sh, s, 1603 sh, w, 1510 s, 1413 w, 1386 sh, s, 1376 sh, s, 1370 sh, s, 1349 m, 1145 m, 1105 s cm<-1>. ESI MS: 335 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C14H25O4N4313.18703; nađeno 313.18712.
Sinteza soli 2-(2-amino-4-metilpentanamido)-6-diazo-5-oksoheksanske kiseline (26)
[0248] Trietilamonijum so 2-(2-amino-4-metilpentanamido)-6-diazo-5-oksoheksanske kiseline (26). Jedinjenje 25 (134 mg, 0.429 mmol, 1 ekv.) je suspendovano u EtOH (3 mL) i THF (3 mL).1M rastvor NaOH (16 mg, 408 µL, 0.95 ekv.) je dodat i smeša je mešana tokom 15 minuta. Reakcija je ugašena 1 M mravljom kiselinom (408 µL, 0.95 ekv.) i nakon 10 minuta mešanja, smeša je
uparena do suva. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC sa Et3N/CH3COOH/CH3COOH puferom. Željeni proizvod 26 je dobijen u vidu svetlo narandžaste čvrste supstance (46 mg) sa prinosom od 40 %.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.10 (6H, d, J= 6.4), 1.50 - 1.61 (1H, m), 1.63 - 1.83 (2H, m), 1.96 - 2.06 (1H, m), 2.11 - 2.23 (1H, m), 2.33 -2.48 (1H, m), 3.67 (1H, dd, J = 8.6, 5.6), 4.27 (1H, dd, J = 7.0, 5.1), 5.51 (1H, brs).
Sinteza etil 2-(2-(2-amino-4-metilpentanamido)-4-metilpentanamido)-6-diazo-5-oksoheksanoata (28).
[0249] Etil 11-(4-diazo-3-oksobutil)-1-(9H fluoren-9-il)-5,8-diizobutil-3,6,9-triokso-2-oksa-4,7,10-triazadodekan-12-oat (27). Imajući u vidu šemu 4, Fmoc-NH-(L)-Leu-COOH (125 mg, 0.352 mmol, 1.1 ekv.) i HBTU (146 mg, 0.384 mmol, 1.2 ekv.) su suspendovani u suvom DCM (3 mL). DIEA (124 mg, 167 µL, 0.960 mmol, 3 ekv.) i zatim rastvor 25 (100 mg, 0.320 mmol, 1 ekv.) u suvom DCM (3 mL) dodati su
špricem. Reakciona smeša je mešana tokom 3 h na rt pod inertnom atmosferom. DCM (10 mL) je dodat i organska faza je je oprana sa zas. NaHCO3(20 mL), 1M HCl (20 mL), vodom (2x20 mL) i zas. NaCl (20 mL), osušena preko MgSO4. DCM je uparen. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (DCM : EtOAc, 2 : 1, Rf0.35) kako bi dao 27 u vidu bezbojne čvrste supstance (145 mg, 79 %).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 0.92 (6H, d, J= 6.5), 0.95 (6H, d, J= 6.1), 1.28 (3H, t, J= 7.1), 1.49 - 1.59 (2H, m), 1.60 - 1.74 (4H, m), 1.95 - 2.06 (1H, m), 2.18 -2.28 (1H, m), 2.30 - 2.50 (2H, m), 4.17 - 4.27 (4H, m), 4.32 - 4.64 (4H, m), 5.29 (1H, d, J = 8.0), 5.35 (1H, s), 6.54 (1H, d, J= 8.0), 7.00 (1H, d, J= 7.7), 7.31 (2H, t, J= 7.5, 2.6), 7.40 (2H, td, J= 7.3, 2.2), 7.57 (2H, d, J = 7.5), 7.76 (2H, d, J = 7.5).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3):14.26, 21.96, 22.17, 22.94, 23.15, 24.85, 27.12, 29.84, 36.48, 38.28, 41.17, 41.33, 47.27, 51.94, 52.03, 61.79, 67.22, 120.14, 120.16, 125.10, 125.14, 127.23 (2C), 127.90, 127.91, 141.43, 143.75, 143.89, 156.43, 171.54, 171.81, 172.39, 194.00. Optička rotacija: [α]<22>D - 34.5° (c 0.109, DMF). IR (CHCl3): 3426 m, 3317 w, br, 3116 w, 3068 w, 2961 s, 2873 m, 2109 s, 1795 w, 1731 vs, 1719 vs, 1667 vs, br, 1635 s, sh, 1508 vs, 1478 m, 1468 m, 1451 s, 1385 s, 1375 s, 1371 s, 1233 s, 1045 m, 1033 m, 622 w, 426 w, cm<-1>. ESI MS: 670 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C35H45O7N5Na 670.32112; nađeno 670.32122.
[0250] Etil 2-(2-(2-amino-4-metilpentanamido)-4-metilpentanamido)-6-diazo-5-oksoheksanoat (28). Jedinjenje 27 (136 mg, 0.210 mmol, 1 ekv.) je rastvoreno u suvom DCM (3 mL). Dietilamin (77 mg, 109 µL, 1.05 mmol, 5 ekv.) je dodat pomoću šprica. Reakciona smeša je mešana tokom 8 h na rt pod inertnom atmosferom. DCM je uparen. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni
(CHCl3/MeOH 20: 1, Rf0.30) kako bi dao 28 u vidu svetlo žutog ulja (77 mg, 87 %).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 0.92 (6H, t, J= 6.0), 0.95 (6H, t, J= 5.9), 1.26 (3H, t, J= 7.1), 1.34 - 1.41 (1H, m), 1.52 - 1.61 (1H, m), 1.60 - 1.79 (4H, m), 1.95 - 2.03 (1H, m), 2.15 - 2.25 (1H, m), 2.30 - 2.52 (2H, m), 3.48 (1H, dd, J= 9.5, 4.1), 3.96 (2H, s), 4.18 (2H, q, J= 7.1), 4.41 (1H, td, J= 8.8, 5.4), 4.49 (1H, td, J= 8.0, 4.6), 5.36 (1H, s), 7.08 - 7.17 (1H, m), 7.74 (1H, d, J = 8.2).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 14.25, 21.51, 22.02, 23.06, 23.45, 24.91, 24.97, 27.03, 36.49, 40.77, 43.77, 51.63, 52.04, 53.54, 55.13, 61.76, 171.60, 172.44, 175.74, 194.29. Optička rotacija:
[α]<22>D- 25.8° (c 0.124, DMF). IR (KBr): 3413 s, vbr, 3314 s, vbr, 3072 m, br, 2105 s, 1739 s, 1655 vs, br, 1539 s, br, 1468 s, 1386 s, 1370 s, 1208 s, br, 1029 s, cm<-1>. ESI MS: 426 ([M H]<+>). HR ESI MS: izr. za C20H36O5N5426.27110; nađeno 426.27124.
1
Šema 5
Sinteza trietilamonijum soli 6-diazo-2-(((1-(izobutiriloksi)etoksi)karbonil)amino)-5-oksoheksanske kiseline (29)
[0251] Trietilamonijum so 6-diazo-2-(((1-(izobutiriloksi)etoksi)karbonil)amino)-5-oksoheksanske kiseline (29). Imajući u vidu šemu 5, jedinjenje 20 (121 mg, 0.607 mmol, 1 ekv.) je rastvoreno u THF (5 mL).1M rastvor NaOH (24 mg, 607 µL, 1 ekv.) je dodat i
smeša je mešana tokom 1 h. Voda (2 mL) i 1-[[[(2,5-dioksopirolidin-1-il)oksi]karbonil]oksi]etil 2-metilpropanoat (LTP 150) (183 mg, 0.668 mmol, 1.1 ekv.) u THF (3 mL) su dodati. Rastvor je mešan tokom sledeća 2 h na rt. Reakcija je ugašena 1 M mravljom kiselinom (607 µL, 1 ekv.) i nakon 5 minuta mešanja smeša je uparena do suva. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC sa Et3N/CH3COOH/CH3COOH puferom kako bi dao 29 u vidu svetlo narandžaste čvrste supstance (106 mg, 53 %).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.11 (6H, d, J = 6.4), 1.35 - 1.46 (3H,
2
m), 1.84 - 2.32 (2H, m), 2.36 - 2.75 (2H, m), 4.15 - 4.48 (1H, m), 4.60 - 4.97 (1H, m), 5.70 - 6.12 (1H, m), 6.67 - 6.82 (1H, m), 8.40 (1H, bs).
Sinteza trietilamonijum soli 6-diazo-2-(((1-(pivaloiloksi)etoksi)karbonil)amino)-5-oksoheksanske kiseline (30)
[0252] Trietilamonijum so 6-diazo-2-(((1-(pivaloiloksi)etoksi)karbonil)amino)-5-oksoheksanske kiseline (30). Imajući u vidu šemu 5, jedinjenje 20 (89 mg, 0.446 mmol, 1 ekv.) je rastvoreno u THF (3 mL). 1M rastvor NaOH (18 mg, 446 µL, 1 ekv.) je dodat i smeša je mešana tokom 1 h. Voda (1 mL) i 1-((((2,5-dioksopirolidin-1-il)oksi)karbonil)oksi)etil pivalat
(LTP174) (141 mg, 0.490 mmol, 1.1 ekv.) u THF (1.5 mL) su dodati. Rastvor je mešan tokom sledeća 2 h na rt. Reakcija je ugašena 1 M mravljom kiselinom (446 µL, 1 ekv.) i posle 5 minuta mešanja smeša je uparena do suva. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC sa Et3N/CH3COOH/CH3COOH puferom kako bi dao 30 u vidu svetlo narandžaste čvrste supstance (64 mg) sa prinosom od 42 %.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.18 (9H, s), 1.36 - 1.59 (3H, m), 1.94 - 2.36 (2H, m), 2.40 - 2.77 (2H, m), 4.18 - 4.48 (1H, m), 4.53 - 4.97 (1H, m), 5.45 - 6.07 (1H, m), 6.68 - 6.84 (1H, m), 8.87 (1H, bs).
Sinteza etil 6-diazo-2-(((1-(izobutiriloksi)etoksi)karbonil)amino)-5-oksoheksanoata (31)
[0253] Etil 6-diazo-2-(((1-(izobutiriloksi)etoksi)karbonil)amino)-5-oksoheksanoat (31). 1-[[[(2,5-dioksopirolidin-1-il)oksi]karbonil]oksi]etil 2-metilpropanoat (226 mg, 0.828 mmol, 1.1 ekv.) je suspendovan u suvom DCM (6 mL). Reakciona smeša je ohlađena do 0 °C i jedinjenje 20 (150 mg, 0.753 mmol, 1 ekv.) u suvom DCM (3 mL) je dodato u kapima. Smeša je mešana tokom
15 minuta na 0 °C i zatim 1 h na rt. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (EtOAc/heksan 1:10 do 1:2) i željeno jedinjenje 31 je dobijeno sa prinosom od 56 % (150 mg) u vidu žutog ulja (smeša dva stereoizomera 1:1).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3, stereoizomer 1): 1.14 (6H, d, J = 6.7), 1.27 (3H, t, J = 7.1), 1.46 (3H, d, J= 5.4), 1.88 - 2.09 (1H, m), 2.16 - 2.29 (1H, m), 2.34 - 2.47 (2H, m), 2.51 (1H, sep, J= 7.1), 4.19 (2H, q, J= 7.1), 4.27 - 4.36 (1H, m), 5.29 (1H, brs), 5.49 (1H, d, J= 8.3), 6.78 (1H, q, J= 7.7).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3, stereoizomer 1): 14.26, 18.78, 18.80, 19.84, 27.73, 33.99, 36.35, 53.39, 54.92, 61.92, 89.54, 153.87, 171.62, 175.18, 193.54.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3, stereoizomer 2): 1.16 (6H, d, J= 6.7), 1.27 (3H, t, J= 7.1), 1.46 (3H, d, J= 5.4), 1.88 - 2.09 (1H, m), 2.16 - 2.29 (1H, m), 2.34 -2.47 (2H, m), 2.51 (1H, sep, J = 7.1), 4.20 (2H, q, J = 7.1), 4.27 - 4.36 (1H, m), 5.29 (1H, brs), 5.53 (1H, d, J= 8.1), 6.80 (1H, q, J= 7.7).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3, stereoizomer 2): 14.26, 18.80, 18.85, 19.87, 27.84, 33.99, 36.47, 53.50, 54.97, 61.92, 89.72, 153.95, 171.79, 175.30, 193.77. Optička rotacija: [α]22D+ 19.8° (c 0.177, CHCl3). IR (CHCl3): 3428 w, 3116 w, 2981 m, 2940 w, 2877 w, 2856 w, 2110 vs, 1741 vs, br, 1641 m, 1510 s, 1469 m, 1388 s, 1377 s, 1232 m, 1199 m, cm<-1>. ESI MS: 380 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C15H24O7N3358.16088; nađeno 358.16118.
Šema 6
[0254] Reagensi i uslovi: (a) POM-NHS, DCM, 40% (b) Me-POM-NHS, DCM, 68%
Sinteza etil 6-diazo-2-(((1-(pivaloiloksi)etoksi)karbonil)amino)-5-oksoheksanoata (32)
[0255] Etil 6-diazo-2-(((1-(pivaloiloksi)etoksi)karbonil)amino)-5-oksoheksanoat (32).
Imajući u vidu šemu 6, 1-((((2,5-dioksopirolidin-1-il)oksi)karbonil)oksi)etil pivalat (238 mg, 0.828 mmol, 1.1 ekv.) je suspendovan u suvom DCM (6 mL). Reakciona smeša je ohlađena do 0 °C i jedinjenje 20 (150 mg,
4
0.753 mmol, 1 ekv.) u suvom DCM (3 mL) je dodato u kapima. Smeša je mešana tokom 15 minuta na 0 °C i zatim 1 h na rt. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (EtOAc/heksan 1:10 do 1:2) i željeno jedinjenje 32 je dobijeno sa prinosom od 68 % (190 mg) u vidu žutog ulja (smeša dva stereoizomera 1:1).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3, stereoizomer 1): 1.16 (9H, s), 1.26 (3H, t, J= 7.1), 1.43 (3H, s), 1.88 - 2.05 (1H, m), 2.14 - 2.26 (1H, m), 2.30 -2.50 (2H, m), 4.18 (2H, q, J= 7.1), 4.24 - 4.34 (1H, m), 5.31 (1H, brs), 5.51 (1H, d, J= 7.7), 6.74 (1H, q, J= 7.3).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3, stereoizomer 1): 14.23, 19.72, 26.95, 27.57, 36.31, 38.74, 53.33, 54.89, 61.85, 89.66, 153.87, 171.61, 176.56, 193.56.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3, stereoizomer 2): 1.18 (9H, s), 1.26 (3H, t, J= 7.1), 1.45 (3H, s), 1.88 - 2.05 (1H, m), 2.14 - 2.26 (1H, m), 2.30 - 2.50 (2H, m), 4.18 (2H, q, J = 7.1), 4.24 - 4.34 (1H, m), 5.33 (1H, brs), 5.55 (1H, d, J = 7.9), 6.76 (1H, q, J = 7.3).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3, stereoizomer 2): 14.24, 19.74, 26.97, 27.80, 36.46, 38.75, 53.48, 54.89, 61.87, 89.81, 153.95, 171.77, 176.68, 193.75. Optička rotacija: [α]<22>D+ 16.2° (c 0.259, CHCl3). IR (CHCl3): 3428 m, 3358 w, 3116 w, 2982 s, 2874 m, 2110 s, 1740 vs, 1640 s, 1510 s, 1480 m, 1393 s (sh), 1377 s, 1349 s, 1284 s, 1232 s, 1025 s, cm<-1>. ESI MS: 394 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C16H25O7N3Na 394.15847; nađeno 394.15886.
Šema 7
20 (R1= Et) 33 (R1= Et, R2= 3-CH2-indolil) 34 (R1= Et, R2= 3-CH2-indolil) 3 (R1= iPr) 37 (R1= iPr, R2= 3-CH2-indolil) 38 (R1= iPr, R2= 3-CH2-indolil) Reagensi i uslovi (a) Fmoc-NH-(L)-Trp-COOH, HBTU, DIEA, DCM za 33 (66%) i 37 (46%); (b) piperidin, DCM, rt, 50% za 34, 53% za 38.
Sinteza etil 2-(2-amino-3-(1H-indol-3il)propanamido)-6-diazo-5-oksoheksanoata (34)
[0256] Etil 2-(2-((((9H-fluoren-9-il)metoksi)karbonil)amino)-3-(1H-indol-3-il)propanamido)-6-diazo-5-oksoheksanoat (33). Imajući u vidu šemu 7, Fmoc-NH-(L)-Trp-COOH (353 mg, 0.828 mmol, 1.1 ekv.) i HBTU (343 mg, 0.904 mmol, 1.2 ekv.) su suspendovani u suvom DCM (5 mL). DIEA (292 mg, 394 µL, 2.26 mmol, 3 ekv.), a zatim i rastvor 20 (150 mg, 0.753 mmol, 1 ekv.) u suvom DCM (3 mL) su dodati pomoću šprica. Reakciona smeša je mešana tokom 2 h na rt pod inertnom atmosferom. DCM (20 mL) je dodat i organska faza je je oprana sa zas. NaHCO3(20 mL), 1M HCl (20 mL), voda (30 mL) i zas. NaCl (30 mL), osušena preko MgSO4. DCM je uparen. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću LC (DCM/EtOAc 2: 1, Rf0.21) kako bi
dao 33 u vidu svetlo žute čvrste supstance (303 mg) sa prinosom od 66 %.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.22 (3H, t, J = 7.2), 1.82 - 1.93 (1H, m), 2.00 - 2.26 (3H, m), 3.18 (1H, dd, J= 14.5, 7.1), 3.38 (1H, dd, J= 14.0, 5.3), 4.09 (2H, q, J= 8.2), 4.20 (1H, t, J= 7.1), 4.32 - 4.48 (3H, m), 4.50- 4.59 (1H, m), 5.05 (1H, bs), 5.51 (1H, d, J = 7.9), 6.61 (1H, d, J = 7.5), 7.07 (1H, bs), 7.13 (1H, t, J= 7.4), 7.20 (1H, t, J= 7.2), 7.30 (2H, t, J= 7.5), 7.35 (1H, d, J= 8.0), 7.40 (2H, t, J= 7.5), 7.57 (2H, t, J= 6.6), 7.67 (1H, d, J= 7.9), 7.76 (2H, d, J= 7.6), 8.28 (1H, bs).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 14.20, 27.09, 28.51, 36.20, 47.25, 52.13, 54.86, 55.76, 61.77, 67.25, 110.29, 111.39, 118.88, 120.00, 120.10, 120.11, 122.41, 123.66, 125.25, 125.29, 126.92, 127.22 (2C), 127.62, 127.86 (2C), 136.38, 141.40, 143.87, 143.96, 156.09, 171.28, 171.48, 193.84. Optička rotacija: [α]<22>D- 28.6° (c 0.178, DMF). IR (KBr): 3424 s, 3308 m, sh, 2978 w, 2106 m, 1728 s, 1697 m, sh, 1654 m, 1519 m, 1478 w, 1450 m, 1382 m, sh, 1376 m, 1343 m, 1289 m, 1224 m, 1104 m-w, 1081 m-w, 1040 m, 1032 m, 877 w, 855 w, 760 m, 742 m, 621 m, 427 w, cm<-1>. ESI MS: 630 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C34H33O6N5Na 630.23230; nađeno 630.23236.
[0257] Etil 2-(2-amino-3-(1H-indol-3-il)propanamido)-6-diazo-5-oksoheksanoat (34).
Imajući u vidu šemu 7, jedinjenje 33 (303 mg, 0.499 mmol, 1 ekv.) je rastvoreno u suvom DCM (5 mL). Piperidin (212 mg, 244 µL, 2.49 mmol, 5 ekv.) je dodat pomoću šprica. Reakciona smeša je mešana tokom 4.5 h na rt pod inertnom atmosferom. DCM je uparen. Sirovi proizvod je prečišćen putem LC na koloni (CHCl3/MeOH 20:1 do 10:1, Rf0.29) i bezbojna čvrsta supstanca 34 (96 mg) je dobijena sa prinosom od 50 %.<1>H NMR (400
MHz, CDCl3): 1.27 (3H, t, J = 7.0), 1.57 (2H, bs), 1.91 - 2.01 (1H, m), 2.06 - 2.27 (3H, m), 3.05 (1H, dd, J= 14.4, 8.1), 3.30 (1H, dd, J = 14.4, 4.0), 3.75 (1H, dd, J = 8.1, 4.2), 4.18 (1H, qd, J = 7.1, 2.0), 4.55 (1H, td, J = 8.3, 4.1), 5.11 (1H, bs), 7.09 (1H, d, J= 2.4), 7.12 (1H, ddd, J= 8.1, 7.0, 1.1), 7.20 (1H, ddd, J= 8.1, 7.0, 1.2), 7.37 (1H, dt, J= 8.2, 1.0), 7.68 (1H, dd, J= 7.9, 1.1), 7.88 (1H, d, J = 8.3), 8.31 (1H, bs).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 14.29, 27.60, 30.82, 36.58, 51.56, 54.77, 55.50, 61.71, 111.36, 111.49, 119.23, 119.79, 122.39, 123.45, 127.69, 136.52, 171.92, 175.02, 193.81. Optička rotacija: [α]<22>D - 57.6° (c 0.210, DMF). IR (CHCl3): 3479 m, 3355 w, 3215 vw, 3116 w, 2982 m, 2930 m, 2872 w, 2855 w, 2110 vs, 1737 s, 1687 s, 1641 m, 1511 m, 1373 m, 1353 m, 1336 m, sh, 1191 m, 1115 w, 1092 m, 1009 w, cm<-1>. ESI MS: 408 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C19H23O4N5Na 408.16423; nađeno 408.16435.
Sinteza trietilamonijum soli 6-diazo-2-((((5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metoksi)karbonil)amino)-5-oksoheksanske kiseline (35)
[0258] Trietilamonijum so 6-diazo-2-((((5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metoksi)karbonil)amino)-5-oksoheksanske kiseline (35). Imajući u vidu šemu 5, jedinjenje 20 (238 mg, 1.19 mmol, 1 ekv.) je rastvoreno u THF (10 mL). 1M rastvor NaOH (48 mg, 1.18 mL, 1 ekv.) je dodat i smeša je mešana tokom 1 h. Voda (4 mL) i 12 (389 mg, 1.43 mmol, 1.2 ekv.) u THF (10 mL) su dodati. Rastvor je mešan tokom sledeća 2 h na rt.
Reakcija je ugašena 1 M mravljom kiselinom (1.15 mL, 0.95 ekv.) i posle 5 minuta mešanja smeša je uparena do suva. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC sa Et3N/CH3COOH/CH3COOH puferom. Željeni proizvod 35 je dobijen u vidu svetlo narandžaste čvrste supstance (50 mg) sa prinosom od 13 %.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.96 - 2.28 (2H, m), 2.15 (3H, s), 2.37 - 2.70 (2H, m), 4.40 - 4.76 (1H, m), 4.98 (2H, s).
Šema 8
Reagensi i uslovi: (a) S-etil karbonohloridotionat, piridin, Et2O; NHS, persirćetna kiselina, DCM 58%; (b) DCM, 0 °C-rt, 65%
Sinteza etil 6-diazo-2-((((5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metoksi)karbonil)amino)-5-oksoheksanoata (36)
[0259] Etil 6-diazo-2-((((5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metoksi)karbonil)amino)-5-oksoheksanoat (36). Imajući u vidu šemu 8, jedinjenje 12 (180 mg, 0.663 mmol, 1.1 ekv.) je suspendovano u suvom DCM (5 mL). Reakciona smeša je ohlađena do 0 °C i jedinjenje 20 (120 mg, 0.602 mmol, 1 ekv.) u suvom DCM (3 mL) je dodato u kapima. Smeša je mešana tokom 15 minuta na 0 °C i zatim 1 h na rt. Sirovi proizvod je prečišćen
hromatografijom na koloni (EtOAc : heksan, 1:1) i željeno jedinjenje 36 je dobijeno sa prinosom od 65 % (139 mg) u vidu žutog ulja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.27 (3H, t, J= 7.1), 1.95-2.06 (1H, m), 2.10-2.27 (1H, m), 2.16 (3H, s), 2.31-2.50 (2H, m), 4.19 (2H, q, J= 7.1), 4.29 (1H, td, J= 8.1, 4.8), 4.82 (2H, dd, J= 13.9), 5.29 (1H, brs), 5.72 (1H, d, J = 7.7).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 9.48, 14.24, 27.18, 36.32, 53.76, 54.58, 55.00, 61.92, 133.90, 140.08, 152.30, 155.26, 171.63, 193.52. Optička rotacija: [α]<22>D 12.2° (c 0.229, CHCl3). IR (CHCl3): 3425 m, 3345 w, vbr, 3116 w, 2111 vs, 1838 s, sh, 1820 vs, 1736 vs, 1722 vs, sh, 1640 s, 1511 s, 1229 s, 1200 s, 1114 m, 1097 m, 1045 s, cm<-1>. ESI MS: 378 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C14H17O8N3Na 378.09079; nađeno 378.09102.
Sinteza izopropil 2-(2-amino-3-(1H-indol-3il)propanamido)-6-diazo-S-oksoheksanoata (38)
[0260] Izopropil 2-(2-((((9H-fluoren-9-il)metoksi)karbonil)amino)-3-(1H-indol-3-il)propanamido)-6-diazo-5-oksoheksanoat (37). Imajući u vidu šemu 7, Fmoc-NH-(L)-Trp COOH (880 mg, 2.06 mmol, 1.1 ekv.) i HBTU (854 mg, 2.25 mmol, 1.2 ekv.) su suspendovani u suvom DMF (14 mL). DIEA (727 mg, 980 µL, 5.63 mmol, 3 ekv.), a zatim i rastvor 3 (400 mg, 1.88 mmol, 1 ekv.) u suvom DMF (5 mL) su dodati pomoću šprica. Reakciona smeša je mešana
tokom 4 h na rt pod inertnom atmosferom. DMF je uparen, DCM (100 mL) je dodat i organska faza je oprana sa zas. NaHCO3(100 mL), vodom (100 mL), 1M HCl (100 mL), vodom (100 mL) i zas. NaCl (100 mL), osušena preko MgSO4. DCM je uparen. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (DCM:EtOAc, 5:1, Rf0.15) kako bi dao 37 u vidu svetlo žute čvrste supstance (540 mg) sa prinosom od 46 %.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.19 (3H, d, J= 6.3), 1.23 (3H, t, J= 6.3), 1.81 - 1.92 (1H, m), 2.01 - 2.28 (3H, m), 3.18 (1H, dd, J = 14.5, 7.1), 3.39 (1H, dd,J= 14.2, 5.2), 4.20 (1H, t, J= 7.1), 4.30 - 4.48 (3H, m), 4.54 (1H, q, J= 6.9), 4.88- 4.99 (1H, m), 5.07 (1H, bs), 5.50 (1H, d, J= 7.9), 6.59 (1H, d, J= 7.4), 7.07 (1H, bs), 7.14 (1H, t, J = 7.0), 7.20 (1H, t, J = 7.2), 7.30 (2H, tdd, J = 7.5, 2.5, 1.1), 7.36 (1H, d, J = 8.0), 7.40 (2H, t, J = 7.5), 7.56 (2H, t, J = 6.6), 7.67 (1H, d, J = 7.9), 7.77 (2H, d, J = 7.6), 8.23 (1H, bs).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 21.78, 21.83, 27.20, 28.47, 36.20, 47.23, 52.19, 54.91, 55.75, 67.23, 69.22, 110.28, 111.40, 118.88, 120.03, 120.10, 120.12 (2C), 122.45, 123.66, 125.25, 125.30, 127.23 (2C), 127.61, 127.86 (2C), 136.35, 141.40 (2C), 143.85, 143.96, 156.09, 170.80, 171.42, 193.92.
Optička rotacija: [α]<22>D- 32.0° (c 0.193, DMF). IR (KBr): 3424 s, 3300 m, 3130 vw, 2980 w, 2932 s, 2110 m, 1722 s, 1695 s, 1654 s, 1625 m, 1547 m, sh, 1532 m, 1520 m, sh, 1478 w, 1385 m, 1375 m, 1353 m, 1343 m, 1288 m, 1236 m, 1182 w, 11145 m, 1105 m, 1031 m-w, 1010 w, 852 w, 798 w, 758 m, 741 m, 621 w, 427 w-m, cm<-1>. ESI MS: 644 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C35H35O6N5Na 644.24795; nađeno 644.24811.
Izopropil 2-(2-amino-3-(1H-indol-3-il)propanamido)-6-diazo-5-oksoheksanoat (38). Imajući u vidu šemu 7, , jedinjenje 37 (500 mg, 0.804 mmol, 1 ekv.) je rastvoreno u suvom DCM (15 mL). Piperidin (342 mg, 393 µL, 4.02 mmol, 5 ekv.) je dodat pomoću šprica. Reakciona smeša je mešana tokom 4 h na rt pod inertnom atmosferom. DCM je uparen. Sirovi proizvod je prečišćen putem LC na koloni (CHCl3/MeOH 30: 1, Rf0.14) kako bi dao 38 u vidu žute amorfne čvrste supstance (170 mg) sa prinosom od 53 %.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.24
(3H, d, J = 6.0), 1.25 (3H, d, J = 6.0), 1.50 (2H, bs), 1.88 - 2.00 (1H, m), 2.04 - 2.27 (3H, m), 3.04 (1H, dd, J = 14.4, 8.2), 3.30 (1H, ddd, J = 14.2, 4.2, 0.9), 3.74 (1H, dd, J= 8.1, 4.2), 4.51 (1H, td, J = 8.3, 4.0), 5.02 (1H, hept, J = 6.0), 5.11 (1H, bs), 7.08 (1H, d, J = 2.3), 7.11 (1H, ddd, J = 8.0, 7.1, 1.0), 7.19 (1H, ddd, J = 8.1, 7.1, 1.1), 7.36 (1H, d, J = 8.1), 7.67 (1H, d, J = 7.9), 7.88 (1H, d, J = 8.2), 8.45 (1H, bs).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 21.83, 27.65, 30.81, 36.55, 51.64, 54.80, 55.51, 69.49, 111.37 (2C), 119.17, 119.72, 122.31, 123.48, 127.67, 136.53, 171.42, 175.09, 193.92. Optička rotacija: [α]<22>D - 1.2° (c 0.012, CHCl3). IR (CHCl3): 3311 m, vbr, 2980 w, 2924 w, 2874 w, vs, 2853 w, 2104 vs, 1731 s, 1650 s, br, 1618 m, sh, 1512 m, 1388 m, sh, 1375 s, 1253 m, 1232 m, 1183 m, 1145 m, 1105 s, 1010 w, 972 vw, 933 vw, 744 m, cm<-1>.
ESI MS: 422 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C20H25O4N5Na 422.17988; nađeno 422.17992.
Sinteza izopropil 6-diazo-2-(((2-metil-1-(pivaloiloksi)propoksi)karbonil)amino)-5-oksoheksanoata (40)
[0261] 1-((((2,5-dioksopirolidin-1-il)oksi)karbonil)oksi)-2-metilpropil pivalat (39). 1 Hloro-2-metilpropil karbonohloridat (2.00 g, 1.71 mL, 11.69 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u suvom Et2O (20 mL). Reakciona smeša je ohlađena do 0 °C i smeša Et3N/CH3COOH (1.18
g, 1.63 mL, 11.69 mmol, 1 ekv.) i EtSH (727 mg, 866 µL, 11.69 mmol, 1 ekv.) rastvorena u suvom Et2O (10 mL) je dodavana postupkom kap po kap tokom 10 minuta. Reakciona smeša je
1
mešana preko noći (23 h) na rt, precipitat je filtriran kroz sloj celita i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod O-(1-hloro-2-metilpropil) S-etil karbonotioat (bezbojna tečnost, 2.20 g, 96%) korišćena je za dalji korak bez prečišćavanja. O-(1-hloro-2-metilpropil) S-etil karbonotioat (1.20 g, 6.10 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u pivalinskoj kiselini (3.74 g, 4.20 mL, 36.61 mmol, 6 ekv.) i sveže pripremljena so pivalinske kiseline (1.87 g, 2.10 mL, 18.31 mmol, 3 ekv.) i DIEA (2.37 g, 3.19 mL, 18.31 mmol, 3 ekv.) su dodate u nekoliko porcija. Reakciona smeša je zagrejana do 60 °C tokom 70 h. EtOAc (100 mL) je dodat i organska faza je ekstrahovana vodom (50 mL), zas. NaHCO3(3350 mL), zas. NaCl (50 mL), osušena preko MgSO4i rastvarač je uparen. Sirovi proizvod 1-(((etiltio)karbonil)oksi)-2-metilpropil pivalat (svetlo žuta tečnost, 1.32 g, 83 %) korišćana je za dalji korak bez prečišćavanja. 1-(((etiltio)karbonil)oksi)-2-metilpropil pivalat (1.28 g, 4.88 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u suvom DCM (13 mL), N-hidroksisukcinimid (1.12 g, 9.76 mmol, 2 ekv.) je dodat i suspenzija je ohlađena do 0 °C. Persirćetna kiselina (1.11 g (100 %), 3.09 g (36 %), 14.64 mmol, 3 ekv., 36 % rastvor u sirćetnoj kiselini) je dodat u kapima za 10 minuta. Finalna smeša je mešana tokom 60 minuta na 0 °C i 2 h na rt. DCM (40 mL) je dodat i organska faza je oprana vodom (20 mL) i zas. NaCl (20 mL) i osušena preko MgSO4. DCM je uparen i proizvod je prečišćen pomoću LC (heksan/EtOAc 5:3, Rf0.26). Proizvod 39 je dobijen u vidu svetlo žutog ulja (863 mg) sa prinosom od 56 % (u 3 koraka).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.00 (6H, d, J= 6.9), 1.21 (9H, s), 2.08-2.19 (1H, m), 2.81 (4H, s), 6.55 (1H, d, J= 5.0).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 16.06, 16.38, 25.55, 26.89, 31.84, 39.05, 98.19, 150.37, 168.48, 176.14. Optička rotacija: [α]<22>D- 3.0° (c 0.230, CHCl3). IR (CHCl3): 2978 m, 2938 w, 2878 w, 1821 s, 1795 s, 1748 vs, br, 1481 m, 1463 w, 1432 m, 1396 w, 1373 m, 1366 m, sh, 1279 m, 1199 s, 1046 m, 998 m, sh, 987 m, 932 s cm<-1>. ESI MS: 338 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C14H21O7NNa 338.12102; nađeno 338.12115.
[0262] Izopropil 6-diazo-2-(((2-metil-1-(pivaloiloksi)propoksi)karbonil)amino)-5-oksoheksanoat (40). Jedinjenje 39 (399 mg, 1.27 mmol, 0.9 ekv.) je suspendovano u suvom DCM (7 mL). Reakciona smeša je ohlađena do 0 °C i jedinjenje 3 (300 mg, 1.41 mmol, 1 ekv.) u suvom DCM (3 mL) je dodato u kapima. Smeša je mešana tokom 15 minuta na 0 °C i zatim 2 h na rt.
1 1
Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (EtOAc/heksan 1:2, Rf0.29 i 0.31) i željeno jedinjenje 40 je dobijeno sa prinosom od 54 % (285 mg) u vidu žutog ulja (smeša dva stereoizomera 1:1).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3, stereoizomer 1): 0.94 (6H, d, J= 6.8), 1.16 (9H, s), 1.23 (6H, t, J= 6.3), 1.83 - 2.50 (4H, m), 4.22 - 4.31 (1H, m), 5.02 (1H, hept, J = 6.8), 5.29 (1H, bs), 5.48 (1H, d, J= 8.3), 6.52 (1H, d, J = 4.9).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3, stereoizomer 1): 16.40, 16.54, 27.00, 28.05, 31.87, 36.29, 38.96, 53.38, 54.82, 69.64, 94.21, 154.28, 171.31, 176.56, 193.87.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3, stereoizomer 2): 0.93 (6H, d, J= 6.8), 1.18 (9H, s), 1.22 (6H, t, J = 6.3), 1.83 - 2.50 (4H, m), 4.22 - 4.31 (1H, m), 5.00 (1H, sept, J = 6.8), 5.37 (1H, bs), 5.45 (1H, d, J = 8.3), 6.48 (1H, d, J = 4.9).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3, stereoizomer 2): 16.37, 16.54, 26.98, 27.74, 31.91, 36.55, 38.92, 53.54, 54.82, 69.66, 93.87, 154.22, 171.17, 176.81, 193.58. Optička rotacija: [α]<22>D 11.5° (c 0.261, CHCl3). IR (CHCl3): 3428 m, 3116 w, 2982 s, 2936 m, 2878 m, 2110 vs, 1741 vs, br, 1731 vs, sh, 1641 s, 1508 s, 1480 m, 1463 m,1400 m, sh, 1385 s, sh, 1377 s, 1365 s, sh, 1281 s, 1231 s, 1183 m, 1146 s, 1105 s, 990 s, 941 m cm<-1>. ESI MS: 436 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C19H31O7N3Na 436.20542; nađeno 436.20553.
Sinteza izopropil 6-diazo-5-okso-2-((((pivaloiloksi)metoksi)karbonil)amino)heksanoata (42)
[0263] ((((2,5-dioksopirolidin-1-il)oksi)karbonil)oksi)metil pivalat (41). Hlorometil karbonohloridat (2.00 g, 1.38 mL, 15.51 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u suvom Et2O (20 mL). Reakciona smeša je ohlađena do 0 °C i smeša Et3N/CH3COOH (1.57 g, 2.16 mL, 15.51 mmol, 1 ekv.) i EtSH (964 mg, 1.15 mL, 15.51 mmol, 1 ekv.) rastvorena u Et2O (5
mL) je dodavana postupkom kap po kap tokom 5 minuta. Reakciona smeša je mešana preko noći (25 h) na rt, precipitat je filtriran kroz sloj celita i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod O-(hlorometil) S-etil karbonotioat (bezbojna tečnost) korišćana je za dalji korak bez prečišćavanja. O-(hlorometil) S-etil karbonotioat (2.40 g, 15.51 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u pivalinskoj kiselini (9.51 g, 93.14 mmol, 6 ekv.) i sveže pripremljena so pivalinske kiseline (4.76 g, 46.57 mmol, 3 ekv.) i DIEA (6.02 g, 8.1 mL, 46.57 mmol, 3 ekv.) su dodati u nekoliko porcija. Reakciona smeša je zagrevana do 60 °C tokom 22 h. EtOAc (100 mL) je dodat i organska faza je ekstrahovana vodom (100 mL), zas. NaHCO3(33100 mL), zas. NaCl (100 mL), osušena preko MgSO4i rastvarač je uparen. Sirovi proizvod (((etiltio)karbonil)oksi)metil pivalat
1 2
(svetlo žuta tečnost, 3.30 g, 97 %) korišćana je za dalji korak bez prečišćavanja. (((Etiltio)karbonil)oksi)metil pivalat (3.20 g, 14.53 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u suvom DCM (40 mL), N-hidroksisukcinimid (3.34 g, 29.05 mmol, 2 ekv.) je dodat i suspenzija je ohlađena do 0 °C. Persirćetna kiselina (3.31 g (100 %), 9.21 g (36 %), 43.58 mmol, 3 ekv., 36 % rastvor u sirćetnoj kiselini) je dodat u kapima tokom 15 minuta. Finalna smeša je mešana tokom 60 minuta na 0 °C i 2 h na rt. DCM (50 mL) je dodat i organska faza je oprana vodom (30 mL) i zas. NaCl (30 mL) i osušena preko MgSO4. DCM je uparen i proizvod je prečišćen pomoću LC (heksan : EtOAc, 2 : 1, Rf0.27). Proizvod 41 je dobijeno u vidu bezbojne čvrste supstance (2.54 g) sa prinosom od 64 % (u 3 koraka).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.24 (9H, s), 2.84 (4H, s), 5.86 (2H, s).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 25.56 (2C), 26.86 (3C), 38.96, 83.67, 150.90, 168.34 (2C), 176.54. IR (CHCl3): 2979 m, 2939 w, 2876 w, 1823 s, 1796 vs, 1649 vs, 1481 m, 1463 m, 1456 w, 1431 m, 1398 w, 1371 m, 1367 m, 1280 m, 1199 vs, 1110 vs, 1047 m, 998 s, 986 s, 942 m, sh, 924 s, 853 w, cm<-1>. ESI MS: 296 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C11H15O7NNa 296.07407; nađeno 296.07410.
[0264] Izopropil 6-diazo-5-okso-2-((((pivaloiloksi)metoksi)karbonil)amino)heksanoat (42).
Imajući u vidu šemu 6, jedinjenje 41 (320 mg, 1.17 mmol, 1.0 ekv.) je suspendovan u suvom DCM (6 mL). Reakciona smeša je ohlađena do 0 °C i NH2-DON-COOEt (250 mg, 1.17 mmol, 1 ekv.) u suvom DCM (3 mL) je dodat u kapima. Smeša je mešana tokom 15 minuta na 0 °C i zatim 2 h
na rt. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (EtOAc:heksan, 1:2, Rf0.21) i željeno jedinjenje 42 je dobijeno sa prinosom od 40 % (175 mg) u vidu žutog ulja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.19 (9H, s), 1.23 (3H, d, J = 6.2), 1.24 (3H, d, J = 6.2), 1.90 - 2.05 (1H, m), 2.14 - 2.25 (1H, m), 2.31 - 2.51 (2H, m), 4.28 (1H, td, J = 8.2, 4.7), 5.03 (1H, hept, J = 6.2), 5.27 (1H, bs), 5.65 (1H, d, J = 8.1), 5.69 (1H, d, J = 5.7), 5.73 (1H, d, J = 5.7).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 21.79, 21.81, 26.97, 36.34, 38.86, 53.63, 54.90, 69.75, 80.33, 154.40, 171.01, 177.51, 193.43. Optička rotacija: [α]22 D 13.0° (c 0.184, CHCl3). IR (CHCl3): 3424 m, 3354 w, br, 3116 w, 2984 s, 2937 m, 2875 s, 2110 vs, 1747 vs, 1730 vs, sh, 1642 s, 1512 s, 1481 m, 1466 m, 1453 m, 1377 s, 1282 s, 1182 m, 1145 s, 1105 s, 994 s, 942 m, cm<-1>. ESI MS: 394 ([M Na]<+>).
HR ESI MS: izr. za C16H25O7N3Na 394.15847; nađeno 394.15855.
1
Sinteza izopropil 6-diazo-5-okso-2-((((2-(pivaloiloksi)propan-2-il)oksi)karbonil)amino) heksanoata (44)
[0265] 2-(((4-nitrofeniloksi)karbonil)oksi)propan-2-il pivalat (43). 2-hloropropan-2-il (4-nitrofenil) karbonat (pripremljen metodom objavljenom u US 2006/229361 A1, 300 mg, 1.16 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u suvom DCM (15 mL). Živa pivalat (559 mg, 1.39 mmol, 1.2 ekv.) je dodat i reakciona smeša je mešana preko noći (19 h) na rt pod inertnom atmosferom. Čvrsti precipitat (HgCl2) je uklonjen filtracijom, DCM (15 mL) je dodat i RM ekstrahovan sa zas. NaHCO3(15 mL), zas. fiziološkim rastvorom
(15 mL), osušen preko MgSO4i rastvarač je uparen. Proizvod 43 je dobijen u vidu svetlo žutog ulja (301 mg) sa prinosom od 80%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.20 (9H, s), 1.91 (6H, s), 7.34-7.40 (2H, m), 8.24-8.30 (2H, m).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 25.28 (2C), 27.02 (3C), 39.59, 107.71, 121.98 (2C), 125.40 (2C), 145.50, 149.07, 155.41, 175.97. IR (CHCl3): 3031 w, 2976 w, 2875 w, 1777 m, 1736 m, 1618 w, 1595 w, 1528 m-s, 1493 m, 1481 w, 1439 w, 1396 w, 1376 w, 1349 m, 1322 w, 1264 m, 1191 m, 1112 vs, 1094 s, sh, 1030 w, 980 w, 859 m, 682 vw, 491 vw cm<-1>. ESI MS: 348 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C15H19O7NNa 348.10537; nađeno 348.10543.
[0266] Izopropil 6-diazo-5-okso-2-((((2-(pivaloiloksi)propan-2-il)oksi)karbonil)amino) heksanoat (44). Jedinjenje 43 (48 mg, 0.148 mmol, 1 ekv.) je rastvoreno u suvom DMF (2 mL) i reakciona smeša je ohlađena do 0 °C. Jedinjenje 3
(79 mg, 0.369 mmol, 2.5 ekv.) rastvoreno u suvom DMF (1 mL) je dodato pomoću šprica. Reakciona smeša je mešana na 0 °C pod inertnom atmosferom preko noći 3 h. DMF je uparen i sirova smeša je prečišćena pomoću LC (heksan : EtOAc, 2 : 1). Proizvod 44 je dobijen u vidu svetlo žutog ulja (49 mg) sa prinosom od 83 %.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.19 (9H, s), 1.23 (3H, d, J = 6.3), 1.24 (3H, d, J = 6.3), 1.80 (3H, s), 1.83 (3H, s), 1.90 - 2.01 (1H, m), 2.14 - 2.27 (1H, m), 2.29 - 2.51 (2H, m), 4.24 (1H, dt, J = 8.3, 4.7), 5.05 (1H, hept, J = 6.3), 5.31 (1H, bs), 5.44 (1H, d, J = 8.2).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 21.80, 21.82, 25.76, 25.91, 27.07 (3C),
1 4
27.79, 36.46, 39.48, 53.26, 54.87, 69.59, 105.44, 153.16, 171.31, 176.21, 193.63. Optička rotacija: [α]22D+ 12.8° (c 0.133, CHCl3). IR (CHCl3): 3430 w, 3116 w, 2984 m, 2936 m, 2874 m, 2110 s, 1732 vs, br, 1641 m, 1502 s, 1481 m, 1466 m, 1462 m, 1455 m, 1452 m, 1397 m, sh, 1384 s, 1374 s, 1365 s, sh, 1198 s, 1184 s, 1147 m, sh, 1128 s, 1112 s, 1105 s, 1045 m, 942 w cm<-1>.
Sinteza izopropil 6-diazo-5-okso-2-(((fenil(pivaloiloksi)metoksi)karbonil)amino) heksanoata (47)
[0267] Hloro(fenil)metil (4-nitrofenil) karbonat (45). Hloro(fenil)metil karbonohloridat (pripremljen prema US20110319422, 900 mg, 4.39 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u suvom DCM (20 mL). 4-nitrofenol (611 mg, 4.39 mmol, 1 ekv.) je dodat i smeša je ohlađena do 0 °C. Piridin (347 mg, 355 µL, 4.39 mmol, 1 ekv.) rastvoren u suvom DCM (5 mL) je dodavan postupkom kap po kap tokom 5 minuta. Reakciona smeša je
mešana 2 h na rt. DCM je uparen i sirovi proizvod je prečišćen putem LC (DCM:heksan, 1:1). Proizvod 45 je dobijen u vidu bezbojne čvrste supstance (520 mg) sa prinosom od 39 %.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 7.33 (1H, s), 7.41-7.50 (5H, m), 7.587.63 (2H, m), 8.28-8.34 (2H, m).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 87.37, 121.83 (2C), 125.59 (2C), 126.41 (2C), 129.07 (2C), 130.56, 136.35, 145.91, 150.50, 155.07.
[0268] Optička rotacija: [α]<22>D- 0.9° (c 0.318, CHCl3). IR (CHCl3): 3119 w, 3088 w, 3071 vw, 3032 w, 1788 vs, 1772 s, sh, 1619 m, 1595 m, 1530 vs, 1492 s, 1456 m, 1349 vs, 1317 m, 1296 m, 1232 vs, sh, 1178 m, sh, 1165 m, 1111 m, 1105 w, sh, 1078 m, 1054 s, 1029 m, 1014 m, 1002 w, 978 s, 920 w, 872 s, 854 s, 830 vw, 708 s, 695 m, sh, 680 w, 626 vw, 618 vw, 530 vw, 495 w, 403 w cm<-1>. ESI MS: 329 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C14H10O5NclNa 330.01397; nađeno 330.01367.
[0269] (((4-nitrofeniloksi)karbonil)oksi)(fenil)metil pivalat (46). Jedinjenje 45 (100 mg, 0.325 mmol, 1 ekv.) i živa pivalat (157 mg, 0.390 mmol, 1.2 ekv.) su rastvoreni u suvom DCM (6 mL). Reakciona smeša je mešana na rt pod inertnom atmosferom preko noći (16 h).
1
DCM (10 mL) je dodat i reakciona smeša je oprana sa zas. NaHCO3(10 mL) i fiziološkim rastvorom (10 mL), organska faza je osušena preko MgSO4i DCM je uparen. Proizvod 46 (115 mg) je dobijen sa prinosom od 95 % i korišćen je za dalji korak bez bilo kakvog prečišćavanja.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.28 (9H, s), 7.38-7.43 (2H, m), 7.44-7.50 (3H, m), 7.57-7.60 (1H, m), 7.61 (1H, s), 8.23-8.33 (2H, m).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 27.02 (3C), 39.11, 93.80, 121.86 (2C), 125.47 (2C), 126.84 (2C), 128.97 (2C), 130.48, 134.39, 145.69, 150.73, 155.32, 176.44. Optička rotacija: [α]<22>D- 6.0° (c 0.201, CHCl3). IR (CHCl3): 3118 w, 3087 w, 3072 w, 3031 m, 2980 m, 2875 w, 1775 vs, 1747 s, 1618 m, 1595 m, 1529 vs, 1493 s, 1480 m, 1459 m, 1399 m, 1365 m, 1349 vs, 1279 vs, 1248 vs, 1165 s, 1123 vs, 1112 s, sh, 1030 s, 1014 m, 1003 m, 970 s, br, 943 s, 918 m, 865 s, 860 s, 832 w, 697 s, 682 w, 633 w, 619 vw, 530 vw, 495 w, 403 vw cm<-1>. ESI MS: 396 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C19H19O7NNa 396.10537; nađeno 396.10546.
[0270] Izopropil 6-diazo-5-okso-2-(((fenil(pivaloiloksi)metoksi)karbonil)amino) heksanoat (47). Jedinjenje 46 (115 mg, 0.308 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u suvom DCM (3 mL). DON iPr estar (72 mg, 0.339 mmol, 1.1 ekv.) rastvoren u suvom DCM (2 mL) je dodat pomoću šprica. Reakciona smeša je mešana na rt pod inertnom atmosferom preko noći (24 h). Dodatni DONiPr estar (72 mg, 0.339 mmol, 1.1 ekv.) rastvoren u suvom DCM (2 mL) je dodat i mešanje je nastavljeno
sledeća 24 h. DCM je uparen i sirova smeša je prečišćena preparativnom HPLC (AcN/H2O, HCOOH). Proizvod 47 je dobijen u vidu svetlo smeđeg ulja (66 mg) sa prinosom od 48 %.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.17 - 1.31 (15H, m), 1.90 - 2.06 (1H, m), 2.12 - 2.31 (1H, m), 2.31 -2.54 (2H, m), 4.27 - 4.36 (1H, m), 5.03 (1H, hept, J = 6.3), 5.29 (1H, bs), 5.59 (1H, d, J = 8.1), 7.36 - 7.42 (3H, m), 7.46 - 7.51 (2H, m), 7.61 (s, 1H).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 21.82 (2C), 26.99 (3C), 27.70, 36.35, 38.99, 53.55, 54.90, 69.79, 90.93, 126.57 (2C), 128.66 (2C), 129.64, 135.95, 153.82, 171.10, 176.33, 193.51. Optička rotacija: [α]<22>D+ 12.5° (c 0.246, CHCl3). IR (CHCl3): 3425 w, 3116 w, 3098 vw, 3070 vw, 3029 m, 2984 m, 2937 m, 2875 w, 2110 s, 1735 vs, br, 1641 s, 1590 w, 1507 s, 1480 m, 1457 m, 1398 m, 1377 s, 1367 s, sh, 1366 s, sh, 1280 s, 1182 m, 1146 s, sh, 1133 s, 1105 s, 1085 m, 1057 s, 1027 s, 1003 m, 942 m, 918 w, 697 m, 619 vw cm<-1>. ESI MS: 470 ([M Na]<+>).
1
Sinteza izopropil 6-diazo-2-((((izobutiriloksi)metoksi)karbonil)amino)-5-oksoheksanoata (49)
[0271] ((((2,5-dioksopirolidin-1-il)oksi)karbonil)oksi)metil izobutirat (48).
Hlorometil karbonohloridat (1.00 g, 690 µL, 7.76 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u suvom Et2O (10 mL). Reakciona smeša je ohlađena do 0 °C i smeša Et3N/CH3COOH (785 mg, 1081 µL, 7.76 mmol, 1 ekv.) i EtSH (482 mg, 574 µL, 7.76 mmol, 1 ekv.) rastvorena u suvom Et2O (3 mL) je dodavana postupkom kap po kap tokom 5 minuta. Reakciona smeša je mešana preko noći (18 h) na rt, precipitat je filtriran kroz sloj celita i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod -(hlorometil) S-etil karbonotioat (bezbojna tečnost) korišćana je za dalji korak bez prečišćavanja. O-(hlorometil) S-etil karbonotioat (1.10 g, 7.11 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u izobuternoj kiselini (1.88 g, 1. 94 mL, 21.35 mmol, 3 ekv.) i sveže pripremljena so izobuterne kiseline (1.88 g, 1.94 mL, 21.35 mmol, 3 ekv.) i DIEA (2.76 g, 3.81 mL, 21.35 mmol, 3 ekv.) su dodati u nekoliko porcija. Reakciona smeša je zagrevana do 60 °C tokom 20 h. EtOAc (50 mL) je dodat i organska faza je ekstrahovana vodom (50 mL), zas. NaHCO3(3350 mL), zas. NaCl (50 mL), osušena preko MgSO4i rastvarač je uparen. Sirovi proizvod (((etiltio)karbonil)oksi)metil izobutirat (svetlo žuta tečnost, 1.14 g, 72 %) korišćana je za dalji korak bez prečišćavanja. (((etiltio)karbonil)oksi)metil izobutirat (1.12 g, 5.04 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u suvom DCM (15 mL), A-hidroksisukcinimid (1.16 g, 10.08 mmol, 2 ekv.) je dodat i suspenzija je ohlađena do 0 °C. Persirćetna kiselina (1.15 g (100 %), 3.19 g (36 %), 15.12 mmol, 3 ekv., 36 % rastvor u sirćetnoj kiselini) je dodavana u kapima tokom 10 minuta. Finalna smeša je mešana tokom 60 minuta na 0 °C i 2 h na rt. DCM (20 mL) je dodat i organska faza je oprana vodom (15 mL) i zas. NaCl (15 mL) i osušena preko MgSO4. DCM je uparen i proizvod je prečišćen pomoću LC (heksan:EtOAc, 2:1, Rf0.24). Proizvod 48 je dobijeno u vidu bezbojnog ulja (842 mg) sa prinosom od 64 % (u 3 koraka).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.19 (6H, d, J = 7.0), 2.63 (1H, hept, J = 7.0), 2.83 (4H, s), 5.85 (2H, s).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 18.60, 25.54, 33.77, 83.50, 150.92, 168.39, 175.08. IR (CHCl3): 2981 m, 2945 w, 2880 w, 1823 s, 1795 vs, 1748 vs, br, 1720 m, sh, 1471 m, 1431 m, 1389 w, 1370 m, 1231 vs, 1199 vs, 1113 s, 1045 m, 925 s, cm<-1>.
ESI MS: 282 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C10H13O7Nna 282.05842; nađeno 282.05848.
[0272] Izopropil 6-diazo-2-((((izobutiriloksi)metoksi)karbonil)amino)-5-oksoheksanoat (49). Jedinjenje 48 (268 mg, 1.03 mmol, 1.1 ekviv.) je rastvoreno u apsolutnom dihlormetanu (8 mL). Ovaj rastvor je ohlađen do 0 °C i rastvor
1
jedinjenja 3 (200 mg, 0.94 mmol), u dihlorometanu (1 mL) je dodat u kapima. Reakciona smeša je mešana 15 min na 0 °C u ledenom kupatilu. Reakciona smeša je zatim mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Organski rastvarač je uparen in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (hloroform:aceton, 10:1) da bi se dobio željeni proizvod 49 (180 mg, 54 %) u vidu žute amorfne čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.17 - 1.19 (6H, m), 1.25 - 1.27 (6H, m), 1.94 - 2.04 (1H, m), 2.18 - 2.26 (1H, m), 2.32 - 2.49 (2H, m), 2.59 (1H, hept, J = 6.9), 4.31 (1H, td, J = 8.1, 4.7), 5.05 (1H, hept, J = 6.3), 5.28 (1H, s), 5.62 (1H, d, J = 8.0), 5.71 (1H, d, J = 5.8), 5.75 (1H, d, J = 5.8).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 18.82 (2C), 21.84, 21.86, 27.67, 33.91, 36.37, 53.66, 54.99, 69.84, 80.14, 154.45, 171.03, 176.19. IR (CHCl3):3424 w, 2111 s, vs, 1750 sh, vs, 1732 vs, 1641 m, s, 1512s, 1387 sh, s, 1377 s, 1370 sh, s cm<-1>. Optička rotacija: [α]<22>D+ 5.4° (c 0.202, CH2Cl2). ESI MS: 380 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C15H23O7N3Na 380.14282; nađeno 380.14286.
Sinteza izopropil 2-((((4-(2-(2-amino-3-metilbutanamido)-5-ureidopentanamido) benzil)oksi)karbonil)amino)-6-diazo-5-oksoheksanoata (51)
[0273] Izopropil 2-((((4-(2-(2-((((9H-fluoren-9-il)metoksi)karbonil)amino)-3-metilbutanamido)-5-ureidopentanamido)benzil)oksi)karbonil)amino)-6-diazo-5-oksoheksanoat (50). 9-fluorenilmetiloksikarbonil-valil-citrulil-(4-aminobenzil)-(4-nitrofenil)karbonat (191 mg, 0.249 mmol, 1.2 ekviv.) je rastvoren u suvom DMF (2.0 mL) i rastvor jedinjenja 3 (44 mg, 0.208 mmol) u suvom DMF (1.0 mL) je dodat u kapima. U ovu reakcionu smešu je
dodat diizopropiletil amin (130 µL, 0.747 mmol, 3 ekviv.) u kapima. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Organski rastvarač je uparen in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (hloroform:metanol, 15:1) kako bi dao željeni proizvod 50 (110 mg, 53 %) u vidu bele amorfne čvrste supstance.<1>H NMR (400
1
MHz, DMSO): 0.85 (3H, d, J = 6.8), 0.88 (3H, d, J = 6.9), 1.16 (3H, d, J = 6.6), 1.18 (3H, d, J = 6.6), 1.31 - 1.49 (2H, m), 1.54 - 1.81 (3H, m), 1.89 - 2.03 (2H, m), 2.35 - 2.44 (2H, m), 2.89 -3.05 (2H, m), 3.91 - 3.98 (2H, m), 4.20 - 4.34 (3H, m), 4.39 - 4.44 (1H, m), 4.86 - 5.00 (3H, m), 5.40 (2H, s), 5.97 (1H, t, J = 5.9), 6.05 (1H, s), 7.28 (2H, d, J = 8.7), 7.32 (2H, td, J = 7.5, 1.2), 7.39 - 7.44 (3H, m), 7.59 (2H, d, J = 8.3), 7.66 (1H, d, J = 7.7), 7.74 (2H, t, J = 7.8), 7.89 (2H, d, J = 7.6), 8.12 (1H, d, J = 7.5), 10.06 (1H, s).<13>C NMR (101 MHz, DMSO): 18.28, 19.23, 21.45, 21.52, 25.78, 26.80, 29.48, 30.46, 36.32, 38.58, 46.69, 53.10, 53.42, 60.08, 65.29, 65.69, 68.04, 118.91 (2C), 120.10 (2C), 125.37 (2C), 127.07 (2C), 127.65 (2C), 128.61 (2C), 131.65, 138.64, 140.71 (2C), 143.77, 143.90, 156.13 (2C), 158.90, 170.60, 171.28, 171.55, 194.03. IR (KBr): 3400 s, br, sh, 3327 s, br, 3066 w, 2964 m, 2937 m, 2106 s, 1705 vs, br, 1651 vs, 1609 s, 1533 vs, 1517 vs, sh, 1479 m, 1466 m, 1450 s, 1415 m, 1386 s, sh, 1376 s, 1334 s, 1320 s, sh, 1248 s, 1183 m, 1145 m, 1106 s, 1047 m, 1020 m, sh, 826 w, 777 w, sh, 621 w, 427 w cm<-1>. Optička rotacija: [α]<22>D- 15.6° (c 0.631, DMSO). ESI MS: 863 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C43H52N8O10Na 863.36986; nađeno 863.36997.
[0274] Izopropil 2-((((4-(2-(2-amino-3-metilbutanamido)-5-ureidopentanamido)benzil)oksi)karbonil)amino)-6-diazo-5-oksoheksanoat (51). Jedinjenje 50 (110 mg, 0.131 mmol) je rastvoreno u suvom DMF (0.5 mL).
Piperidin (32 µL 0.327 mmol, 2.5 ekviv.) je dodat i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Organski rastvarač je uparen in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (hloroform:metanol, 2: 1) kako bi dao željeni proizvod 51 (70 mg, 87 %) u vidu bele amorfne čvrste supstance.
Sinteza izopropil 2-((((4-(2-(2-acetamido-3-metilbutanamido)-5-ureidopentanamido) benzil)oksi)karbonil)amino)-6-diazo-5-oksoheksanoata (52)
[0275] Izopropil 2-((((4-(2-(2-acetamido-3-metilbutanamido)-5-ureidopentanamido) benzil)oksi)karbonil)amino)-6-diazo-5-oksoheksanoat (52). Jedinjenje 51 (100 mg, 0.162 mmol), je rastvoreno u suvom DMF (2 mL) i u ovaj rastvor je dodat diizopropiletil amin (144
1
µL, 0.842 mmol, 5.1 ekviv.) u kapima, a nakon njega i acetanhidrid (76.5 µL, 0.81 mmol, 5.0 ekviv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj
temperaturi tokom 2 h. Organski rastvarač je uparen in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (hloroform:metanol, 7:1) kako bi dao željeni proizvod 52 (97 mg, 91 %) u vidu žute amorfne čvrste supstance.
Sinteza izopropil 2-(2-(2-amino-3-metilbutanamido)-5-ureidopentanamido)-6-diazo-5-oksoheksanoata (56)
[0276] Izopropil 2-(2-((((9H-fluoren-9-il)metoksi)karbonil)amino)-5-ureidopentanamido)-6-diazo-5-oksoheksanoat (53). Fmoc-Cit-COOH (2.05 g, 5.16 mmol, 1.1 ekviv.) i TBTU (1.81 g, 5.63 mmol, 1.2 ekviv.) su rastvoreni u apsolutnom DMF (40 mL) i diizopropiletil amin (2.51 mL, 14.07 mmol, 3 ekviv.) je dodat. Reakciona smeša je mešana na sobnoj
temperaturi tokom 30 min., a zatim je rastvor 3 (1.0 g, 4.69 mmol) u apsolutnom DMF (20 mL) dodat pomoću šprica. Reakciona smeša je mešana tokom 2 h na sobnoj temperaturi pod inertnom atmosferom. Organski rastvarač je uparen in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (hloroform:metanol, 15:1) kako bi dao željeni proizvod 53 (1.84 g, 66 %) u vidu žute amorfne čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, DMSO): 1.16 (3H, d, J = 4.6), 1.17 (3H, d, J = 4.4), 1.37 - 1.57 (3H, m), 1.61 - 1.70 (1H, m), 1.76 - 1.86 (1H, m), 1.94 - 2.03 (1H, m), 2.33 -2.46 (2H, m), 2.94 - 3.03 (2H, m), 4.03 - 4.08 (1H, m), 4.15 - 4.31 (4H, m), 4.88 (1H, hept, J = 6.3), 5.42 (2H, s), 5.96 (1H, t, J = 5.8), 6.01 (1H, s), 7.31 -7.34 (2H, m), 7.39 - 7.43 (2H, m), 7.53 (1H, d, J = 8.1), 7.73 - 7.74 (2H, m), 7.88 (2H, d, J = 7.5), 8.28 (1H, d, J = 7.5).<13>C NMR (101 MHz, DMSO): 21.45, 21.49, 25.91, 26.72, 29.39, 36.22, 38.77, 46.68, 51.48, 54.06, 65.67, 68.02, 120.10 (2C), 125.36 (2C), 127.09 (2C), 127.65 (2C), 140.72 (2C), 143.80, 143.91, 155.96, 158.87, 171.05, 172.29, 194.04. IR (KBr): 3435 vs, br, 3348 vs, br, sh, 3068 m, 2979 m, 2936 m,
11
2871 w, 2105 s, 1723 s, 1678 vs, br, 1610 s, sh, 1540 s, br, 1478 s, 1466 m, sh, 1450 m, 1386 s, sh, 1376 s, 1252 s, 1220 m, sh, 1184 m, sh, 1146 m, 1105 s, 1052 m, 1032 m, 760 m, 741 m, 621 m, 427 s cm<-1>. ESI MS: 615 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C30H36O7N6Na 615.25377; nađeno 615.25383.
[0277] Izopropil 2-(2-amino-5-ureidopentanamido)-6-diazo-5-oksoheksanoat (54).
Jedinjenje 53 (1.84 g, 3.11 mmol), je rastvoren u suvom DMF (24 mL). Piperidin (767 µL 7,76 mmol, 2.5 ekviv.) je dodat i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Organski rastvarač je uparen in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu
(hloroform:metanol, 2:1) kako bi dao željeni proizvod 54 (874 mg, 76 %) u vidu bele amorfne čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, DMSO): 1.17 (3H, d, J = 4.4), 1.18 (3H, d, J = 4.3), 1.27 - 1.47 (3H, m), 1.48 - 1.58 (1H, m), 1.76 - 1.85 (1H, m), 1.93 - 2.01 (1H, m), 2.31 - 2.43 (2H, m), 2.93 (2H, q, J = 6.4), 3.14 (1H, dd, J = 7.3, 5.3), 4.88 (1H, hept, J = 6.3), 5.36 (2H, s), 5.90 (1H, t, J = 5.7), 6.07 (1H, s), 8.13 (1H, d, J = 7.7).<13>C NMR (101 MHz, DMSO): 21.45, 21.50, 26.08, 26.48, 32.69, 36.25, 51.22, 54.21, 68.03, 158.72, 171.18, 175.56, 194.05. IR (CHCl3): 3509 w, 3414 w, sh, 3446 w, 3357 m, br, sh, 3116 w, 2939 w, 2110s, 1731 s, 1664 vs, br, 1598 m, 1467 w, 1450 m, 1387 m, sh, 1377 s, 1349 m, 1183 w, 1145 m cm<-1>. Optička rotacija: [α]<22>D- 3.2° (c 0.218, CH2Cl2). ESI MS: 371 ([M H]<+>). HR ESI MS: izr. za C31H40O15N3Na 393.18569; nađeno 393.18575.
[0278] Izopropil 11-(4-diazo-3-oksobutil)-1-(9H-fluoren-9-il)-5-izopropil-3,6,9-triokso-8-(3-ureidopropil)-2-oksa-4,7,10-triazadodekan-12-oat (55). Fmoc-Val-COOH (484 mg, 1.43 mmol, 1.1 ekviv.) i TBTU (499 mg, 1.55 mmol, 1.2 ekviv.) su rastvoreni u apsolutnom DMF (10 mL) i diizopropiletil amin (677 µL, 3.89 mmol, 3 ekviv.) je dodat. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min., zatim je rastvor jedinjenja 54 (480 mg,
1.30 mmol) u apsolutnom DMF (5 mL) dodat pomoću šprica. Reakciona smeša je mešana tokom 3 h na sobnoj temperaturi pod inertnom atmosferom. Organski rastvarač je uparen in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (hloroform:metanol, 15 : 1) kako bi dao željeni proizvod 55 (750 mg, 84 %) u vidu bele amorfne čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, DMSO): 0.84 (3H, d, J = 6.7), 0.86 (3H, d, J = 6.8), 1.16 (3H, d, J = 4.5), 1.17 (3H, d, J = 4.5), 1.32 - 1.54 (3H, m), 1.60 - 1.68 (1H, m), 1.73 - 1.82 (1H, m), 1.91 - 2.04 (2H, m), 2.30 - 2.46 (2H, m), 2.90 - 3.02 (2H, m), 3.90 (1H, dd, J = 9.1, 7.0), 4.13-4.18 (1H, m), 4.20-4.34 (4H, m), 4.87 (1H, hept, J = 6.2), 5.41 (2H, s), 5.94 (1H, t, J = 5.8), 6.04 (1H, s), 7.30 - 7.34 (2H, m), 7.39 - 7.45 (3H, m), 7.72 - 7.76 (2H, m), 7.89 (2H, d, J = 7.5), 8.01 (1H, d, J = 7.6), 8.31 (1H, d, J = 7.4).<13>C NMR (101 MHz, DMSO): 18.26, 19.26, 21.48, 21.52, 25.99, 26.57, 29.54, 30.51, 36.09, 38.79, 46.71, 51.37, 52.15, 60.05, 65.68, 68.04, 120.15 (2C), 125.41 (2C), 127.12 (2C), 127.68 (2C), 140.72, 140.75, 143.79, 143.93, 156.12, 158.84, 171.03, 171.11, 171.76, 194.15. IR (KBr): 3415 m, vbr, sh, 3360 m, br, 3283 m, 3068 w, 2964 w, 2937 w, 2873 w, 2106 m, 1727 m, 1686 s, 1655 vs, sh, 1645 vs, 1540 s, br, 1478 w, 1465 m, 1451 m, 1386 m, sh, 1376 m, 1293 m, 1249 m, 1226 m, 1183 w, sh, 1146 m, 1106 m, 1033 w, 1009 vw, 760 w, 741 w, 621 vw, 427 vw cm<-1>. Optička rotacija: [α]<22>D- 19.3° (c 0.114, DMSO). ESI MS: 714 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C35H45N7O8Na 714.32218; nađeno 714.32218.
[0279] Izopropil 2-(2-(2-amino-3-metilbutanamido)-5-ureidopentanamido)-6-diazo-5-oksoheksanoat (56). Jedinjenje 55 (200 mg, 0.289 mmol), je rastvoren u suvom DMF (3 mL). Piperidin (71 µL 0.723 mmol, 2.5 ekviv.) je dodat i Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Organski rastvarač je uparen in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (hloroform:metanol, 2:1) kako bi dao željeni proizvod 56 (110 mg, 81 %) u vidu bele amorfne čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, DMSO): 0.77 (3H, d, J =
6.8), 0.87 (3H, d, J = 6.9), 1.16 (3H, d, J = 5.3), 1.18 (3H, d, J = 5.2), 1.30 - 1.52 (3H, m), 1.57 -1.68 (1H, m), 1.73 - 1.83 (1H, m), 1.86 - 2.01 (2H, m), 2.34 - 2.44 (2H, m), 2.89 - 3.00 (2H, m), 4.06 - 4.18 (2H, m), 4.29 - 4.37 (1H, m), 4.88 (1H, hept, J = 6.3), 5.37 (2H, s), 5.91 (1H, t, J = 5.8), 6.05 (1H, s), 8.04 (1H, d, J = 7.8), 8.34 (1H, d, J = 7.4).<13>C NMR (101 MHz, DMSO): 17.49, 18.76, 21.46, 21.50, 25.86, 26.44, 29.61, 30.44, 36.08, 38.64, 51.45, 51.93, 57.96, 68.04, 158.99, 169.93, 170.95, 171.58, 194.03. IR (KBr): 3500 w, br, sh, 3338 m, vbr, 3116 w, 2984 s 2965 s, 2936 m, 2874 m, 2109 s, 1731 s, 1653 vs, br, 1602 s, br, sh, 1552 s, br, 1517 s, 1466 m, 1452 m, 1387 s, sh, 1376 s, 1234 s, 1183 m, 1145 s, 1106 s cm<-1>. Optička rotacija: [α]22D-13.0° (c 0.270, DMSO). ESI MS: 470 ([M H]<+>). HR ESI MS: izr. za C20H36O6N7470.27216; nađeno 470.27208.
Sinteza izopropil 2-(2-(2-acetamido-3-metilbutanamido)-5-ureidopentanamido)-6-diazo-5-oksoheksanoata (57)
[0280] Izopropil 2-(2-(2-acetamido-3-metilbutanamido)-5-ureidopentanamido)-6-diazo-5-oksoheksanoat (57). Jedinjenje 56 (50 mg, 0.107 mmol), je rastvoreno u suvom DMF (1 mL) i u ovaj rastvor je dodat diizopropiletil amin (95 µL, 0.543 mmol, 5.1 ekviv.) je dodat u kapima, a nakon njega i acetanhidrid (50 µL, 0.532 mmol, 5.0 ekviv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Organski rastvarač je uparen in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu
(hloroform:metanol, 7:1) kako bi dao željeni proizvod 57 (50 mg, 92 %) u vidu žute amorfne čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 0.82 (3H, d, J = 6.9), 0.84 (3H, d, J = 7.1), 1.16 (3H, d, J = 4.8), 1.17 (3H, d, J = 4.9), 1.31 - 1.53 (3H, m), 1.60 - 1.68 (1H, m), 1.73 - 1.82 (1H, m), 1.86 (3H, s), 1.89 - 2.00 (2H, m), 2.31 - 2.44 (2H, m), 2.93 - 2.97 (2H, m), 4.12 - 4.17 (2H, m), 4.21 - 4.26 (1H, m), 4.87 (1H, hept, J = 6.3), 5.39 (2H, s), 5.92 (1H, t, J = 5.8), 6.02 (1H, s), 7.86 (1H, d, J = 8.7), 7.97 (1H, d, J = 7.6), 8.20 (1H, d, J = 7.5).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 18.20, 19.21, 21.45, 21.49, 22.51, 25.95, 26.56, 29.36, 30.40, 36.10, 38.77, 51.33, 52.11, 57.67, 68.01, 158.80, 169.37, 170.97, 171.05, 171.70, 194.05. Optička rotacija: [α]<22>D- 22.6° (c 0.257, DMSO). ESI MS: 534 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C22H37O7N7Na 534.26467; nađeno 513.26456.
Sinteza (S)-6-diazo-5-okso-2-((((4-(((2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihidroksi-6-(hidroksimetil)tetrahidro-2H-piran-2-il)oksi)benzil)oksi)karbonil)amino) heksanoata (59)
[0281] 2-(acetoksimetil)-6-(4-((((6-diazo-1-etoksi-1,5-dioksoheksan-2-il)karbamoil)oksi)metil)fenoksi)tetrahidro-2H-piran-3,4,5-triil triacetat (58). 4-[[[(4-
11
nitrofenoksi)karbonil]oksi]metil]fenil-β-D-glukopiranozid, 2,3,4,6-tetraacetat (pripremljen upotrebom metode analogne sa metodom koja je objavljena u publikaciji Angew. Chem. Int. Ed.
2006, 45, 5345-5348, 800 mg, 1.3 mmol) je rastvoren u suvom DMF (6 mL) i
rastvor jedinjenja 20 (330 mg, 1.66 mmol, 1.3 ekviv.), u suvom DMF (3 mL) je dodat u kapima. U ovu reakcionu smešu je dodat diizopropiletil amin (0.91 mL, 5.2 mmol, 4 ekviv.) u kapima. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Organski rastvarač je uparen in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (hloroform:aceton, 7:1) kako bi dao željeni proizvod 58 (596 mg, 68 %) u vidu žute amorfne čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.25 (3H, m), 1.93 - 2.04 (1H, m), 2.02 (3H, s), 2.03 (3H, s), 2.04 (3H, s), 2.06 (3H, s), 2.15 - 2.23 (1H, m), 2.28-2.51 (2H, m), 3.85 (1H, ddd, J = 10.0, 5.3, 2.5), 4.13 - 4.20 (3H, m), 4.25 - 4.34 (2H, m), 5.03 - 5.07 (3H, m), 5.13 - 5.17 (1H, m), 5.21 - 5.31 (3H, m), 5.49 (1H, d, J = 7.9), 6.94 - 6.97 (2H, m), 7.27 - 7.31 (2H, m).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 14.24, 20.71, 20.72, 20.80, 21.82, 27.59, 36.50, 53.61, 54.87, 61.80, 62.01, 66.56, 68.34, 71.23, 72.16, 72.78, 99.13, 117.05 (2C), 129.95 (2C), 131.38, 156.06, 156.86, 169.39, 169.50, 170.32, 170.66, 171.91, 193.55. IR (CHCl3): 3429 w, 2110 s, 1757 vs, 1744 sh, vs, 1720 sh, s, 1641 m, 1613 m, 1592 w, 1512 s, 1377 m, 1368 s, 1178 m, 1070 sh, s, 651 w cm<-1>. Optička rotacija: [α]<22>D- 3.3° (c 0.631, CH2Cl2). ESI MS: 680 ([M H]<+>). HR ESI MS: izra; C30H38O15N3680.22974; nađeno 680.22998.
[0282] Etil (S)-6-diazo-5-okso-2-((((4-(((2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihidroksi-6-(hidroksimetil)tetrahidro-2H-piran-2-il)oksi)benzil)oksi)karbonil)amino) heksanoat (59).
Jedinjenje 58 (833 mg, 1.3 mmol), je rastvoreno u metanolu (20 mL) i rastvor hidrazine hidrata, 50-60 % u voda (417 µL, 7.36 mmol, 6.0 ekviv.) je dodat u kapima. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Organski rastvarač je uparen in vacuo. Ostatak je
podvrgnut hromatografiji na silika gelu (hloroform - metanol 7:1) kako bi dao željeni proizvod 59 (240 mg, 37 %) u vidu žute amorfne čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, DMSO): 1.18 (3H, t, J = 7.1), 1.72 - 1.81 (1H, m), 1.91 - 2.00 (1H, m), 2.34 - 2.45 (2H, m), 3.12 - 3.19 (1H, m), 3.20 - 3.28 (2H, m), 3.29 - 3.34 (1H, m), 3.42 - 3.48 (1H, m), 3.66 - 3.71 (1H, m), 3.97 - 4.03 (1H, m), 4.05 - 4.12 (2H, m), 4.54 (1H, t, J = 5.8), 4.86 (1H, d, J = 7.3) 4.96 (2H, s), 5.01 (1H, d, J = 5.3), 5.08 (1H, d, J = 4.6), 5.30 (1H, d, J = 4.8), 6.05 (1H, s), 7.01 (2H, d, J = 8.6), 7.28 (2H, d, J = 8.6), 7.67 (1H, d, J = 7.8).<13>C NMR (101 MHz, DMSO): 14.07, 25.82, 36.30, 53.27, 60.59, 60.70, 65.30, 69.72, 73.23, 76.63, 77.04, 100.28, 116.11 (2C), 129.49 (2C), 130.09, 156.16, 157.14, 172.06, 201.32. IR (KBr): 3413 m, 2979 w, 2935 w, 2108 m, 1718m, 1649 m, 1614 m, 1592 w, 1513 m, 1392 m, sh, 1383 m, 1346 m, 1233 s, 1179 m, sh, 1074 s, 1046 s, sh, 1018 m, 948 w, sh, 832 w, 511 w cm<-1>. Optička rotacija: [α]<22>D- 18.9° (c 0.254, DMSO). ESI MS: 534 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C22H29O11N3Na 534.16943; nađeno 534.16951.
Sinteza izopropil 2-(2-acetamido-3-(1H-indol-3-il)propanamido)-6-diazo-5-oksoheksanoata (60)
[0283] Izopropil 2-(2-acetamido-3-(1H-indol-3-il)propanamido)-6-diazo-5-oksoheksanoat (60). Jedinjenje 38 (425 mg, 1.06 mmol, 1 ekv.) je rastvoreno u suvom DMF (8 mL). Piridin (168 mg, 171 µL, 2.13 mmol, 2 ekv.), a posle njega i acetanhidrid (130 mg, 121 µL, 1.28 mmol, 1.2 ekv.) su dodati pomoću šprica. Reakciona smeša je mešana tokom 2 h na rt pod inertnom atmosferom. DMF je uparen. Sirovi proizvod je prečišćen putem LC na koloni (CHCl3:MeOH,
20: 1) kako bi dao 423 mg proizvoda 60 u vidu žute amorfne čvrste supstance (90 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.20 (3H, d, J = 6.3), 1.24 (3H, d, J = 6.3), 1.81 - 1.94 (1H, m), 1.98 (3H, s), 2.04 - 2.33 (3H, m), 3.17 (1H, dd, J = 14.6, 7.2), 3.33 (1H, dd, J = 14.7, 5.4), 4.37 (1H, td, J = 7.7, 4.4), 4.75 (1H, td, J = 7.4, 5.4), 4.95 (1H, hept, J = 6.3), 5.16 (1H, bs), 6.22 (d, J = 7.6), 6.64 (1H, d, J = 7.3), 7.09 - 7.14 (2H, m), 7.18 (1H, ddd, J = 8.2, 7.0, 1.3), 7.32 - 7.38 (1H, m), 7.66 (1H, dd, J = 7.9, 1.1), 8.31 (1H, bs).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 21.77, 21.82, 23.38, 26.97, 28.29, 36.25, 52.28, 54.07, 54.95, 69.54, 110.38, 111.42, 118.78, 119.79, 122.27, 123.57, 127.74, 136.35, 170.25, 170.85, 171.58, 194.04. Optička rotacija: [α]<22>D- 11.6° (c 0.284, CHCl3). IR (CHCl3):3478 m, 3417 m, 3329 w, vbr, 3117 w, 2986 m, 2934 w, 2874 vw, 2855 w, 2110 s, 1732 s, 1660 vs, br, 1635 s, sh, 1600 w, sh, 1554 m, br, sh, 1505 s, br, 1467 w, 1457 m,
11
1385 s, sh, 1377 w, vbr, 1350 m, 1183 m, 1146 m, 1105 s, 1093 m, sh, 1012 w. ESI MS: 464 ([M Na]<+>). HR ESI MS: izr. za C22H27O5N5Na 464.19044; nađeno 464.19050.
Šema 9
Reagensi i uslovi: (a) LiHMDS, FMOC-Cl, THF, -78°C, 87% za 7a, 92% za 7b; (b) n-BuLi, TMS diazometan, THF, -116 do -78 °C, 80% za 8a, 85% za 8b; (c) piperidin, DCM, rt, 66% za 2a i 66% za 2b; (d) CH3CN, 60 °C, 50% za 9a; CDCl3, rt, preko noći, 41% za 9b.
[0284] Etil 5-(diazometil)-3,4-dihidro-2H-pirol-2-karboksilat (9a) Imajući u vidu šemu 9, jedinjenje 20 (117 mg, 0.588 mmol, 1 ekv.) je rastvoreno u CH3CN (1 mL). Reakciona smeša je zagrevana tokom 2 h na 60 °C pod inertnom atmosferom. CH3CN
je uparen i sirovi proizvod je prečišćen putem HPLC (CH3CN/H2O, HCOOH) dajući svetlo narandžasto ulje (53 mg) sa prinosom od 50%.<1>H NMR (CDCl3): 1.27 (3H, t, J = 7.1), 2.83 -2.93 (1H, m), 2.93 - 3.07 (2H, m), 3.09 - 3.20 (1H, m), 4.24 (2H, dq, J = 7.1, 2.4), 5.17 (1H, dd, J= 9.2, 3.5), 7.43 (1H, s);<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 14.11, 19.98, 34.19, 59.06, 62.53, 126.82, 142.77, 168.70; IR (CHCl3): 2942 w, 2910 w, 2875 vw, 2103 vw, 1747 vs, 1475 w, 1676 m, 1605 vw, 1552 w, 1462 w, 1446 w, 1396 w, 1377 m, 1202 vs, 1177 m, 1116 w, 1095 m, cm<-1>; ESI MS: 182 ([M H]<+>); HR ESI MS: izr. za C8H12O2N3182.0930; nađeno 182.0931.
[0285] Izopropil 5-(diazometil)-3,4-dihidro-2H-pirol-2-karboksilat (9b). Imajući u vidu
11
šemu 9, jedinjenje 3 (100 mg, 0.469 mmol, 1 ekv.) je rastvoreno u CDCl3(2 mL). Reakciona smeša je mešana na rt preko noći. CDCl3je uparen i sirovi proizvod je prečišćen putem HPLC (CH3CN/H2O, HCOOH) i svetlo narandžasto ulje (41 mg) je dobijeno sa prinosom od 45%.<1>H NMR (CDCl3): 1.25 (3H, d, J = 6.1), 1.27 (3H, d, J = 6.1), 2.81 - 2.95 (2H, m), 2.96 - 3.06 (1H, m), 3.08 - 3.18 (1H, m), 5.09 (1H, hept, J = 6.1), 5.13 (1H, dd, J = 9.1, 3.4), 7.43 (1H, s);<13>C NMR (101 MHz, CDCl3): 20.00, 21.69 (2C), 21.75, 34.24, 59.20, 70.48, 126.84, 142.71, 168.25;
Optička rotacija: [α]<22>D- 31.8° (c 0.110, CHCl3); IR (CHCl3): 2104 w, 1741 vs, 1675 w, 1644 w, 1551 w, 1465 m, 1388 m, sh, 1376 m, 1209 s, 1182 m, 1147 m, 1106 s, cm<-1>; ESI MS: 196 ([M H]<+>); HR ESI MS: izr. za C9H14O2N3196.10805; nađeno 196.10808.
PRIMER 5
Evaluacija DON prolekova
[0286] Pregled. Predmet koji je ovde otkriven pokazuje duboku efikasnost DON jedinjenja u mišjem modelu GBM, iako su uočene i očigledne toksičnosti. U pokušaju da se poveća terapeutski indeks DON jedinjenja, nekoliko DON prolekova je sistematski sintetizovano. Početna strategija je uključivala maskiranje karboksilne kiseline DON jedinjenja jednostavnim alkil estrima, kao što su etil estar 20 i izopropil estar 3 (SL. 20). Međutim, 3 i 20 su pokazali hemijsku nestabilnost koja ciklizira da bi se formirao jedinstveni diazo-imin. S obzirom na ovu nestabilnost, i primarni amin i karboksilat DON jedinjenja su zatim maskirani delovima proleka. Korišćena su tri tipa aminskih promocija, uključujući (oksodioksolenil)metil karbamat estre (13 i 36), dipeptide (9 i 25) i estre na bazi pivaloil-oksi-metil (POM) (14, 32 i 42). Dvostruki prolekovi koji sadrže prolekove rezultirali su dovoljnom hemijskom stabilnošću koja je dozvoljavala dalju evaluaciju u in vitro testovima metaboličke stabilnosti. Dok su svi prolekovi pokazali brz metabolizam u plazmi miševa, neki su obezbedili odličnu stabilnost plazme kod majmuna i ljudi. Kada je procenjen in vivo, najstabilniji DON prolek (5c, metil-POM-DON-izopropil-estar) postigao je 10 puta poboljšan odnos mozak: plazma u odnosu na DON kod majmuna, čime je obezbeđen mogući klinički put do korišćenja DON jedinjenja kod pacijenata sa GBM.
[0287] Hemija. Šema 9 prikazuje sintezu i karakterizaciju prolekova 20 i 3 DON jedinjenja na bazi estra i njihovu kasniju ciklizaciju u nove diazo-imine 9a-b. Piroglutamatni estri 6a-b (D’Andrea, et al., 2008) zaštićeni su sa FMOC da bi se dobila jedinjenja 18 i 1. Formiranje
11
diazoketona 19 i 2 je postignuto korišćenjem TMS diazometana sa dobrim prinosom. Brzo uklanjanje zaštite pomoću piperidina dalo je prolekove 20 i 3 na bazi estra. Neočekivano spora ciklizacija je primećena čak i pod blagim uslovima (npr. mešanje u hloroformu na sobnoj temperaturi) dajući nove diazo-imine 9a i 9b. Veruje se da je ovo prvi primer da je ova funkcionalna grupa opisana u hemijskoj literaturi. Pokušaji da se izbegne ciklizacija 20 i 3 formiranjem soli da bi se protonovao amin doveli su do nestabilnosti diazo grupe. Štaviše, za razliku od većine imina, utvrđeno je da su 5-člani ciklični diazoimini 9a-b stabilni, čak i pri kiselom pH, i da se nisu konvertovali nazad u DON estre (rezultati nisu prikazani).
[0288] Imajući u vidu njihovu dovoljnu hemijsku stabilnost, jedinjenja 20 i 3 su korišćena kao sintetički intermedijeri za dobijanje prolekova sa dvostrukom promenom (šeme 8 i 2). Adukti (oksodioksolenil) metil karbamata 36 i 13 su sintetizovani kao što je prikazano u Šemama 8 i 2.
4-(hidroksimetil)-5-metil-1,3-dioksol-2-on je reagovao sa S-etil karbonohloridotionatom, (Keicher , et al., 2009) praćen N-hidroksisukcinimidom da bi se dobio 12. Reakcija 20 i 3 sa 12 dala je (oksodioksolenil) metil karbamat estre 36 i 13 u odličnim prinosima.
[0289] Šeme 1, 4 i 7 prikazuju sintezu DON dipeptidnih estara. DON estri 20 i 3 su kuplovani sa Fmoc-L-leucinom ili Fmoc-L-triptofanom korišćenjem HBTU u velikom prinosu da bi se formirali zaštićeni dipeptidi 33 i 37 (šema 7). Deprotekcija dietil aminom ili piperidinom dala je željene leucin-DON 25 (šema 4) i 9 (šema 1) i triptofan-DON prolekove 34 i 38 (šema 7).
[0290] Kao što je prikazano na šemi 6, derivat POM 42 je sintetizovan iz 20 korišćenjem POM-N-hidroksisukcinimat estra (Gallop, et al., 2008) u prinosu od 40%. Uvođenje metil grupe u POM estar dovelo je do formiranja derivata metil-POM 32 (šema 6) i 14 (šema 2), sa dodatkom hiralnog centra. I 32 i 14 su sintetizovani iz 20 i 3 korišćenjem 1-((((2,5-dioksopirolidin-1-il)oksi)karbonil)oksi)etil pivalata (Gallop, et al., 2008). 32 je dobijen kao smeša dva
11
dijastereomera (odnos 1:1) u prinosu od 68%.14 je takođe dobijen odnos dijastereomerne smeše (1:1), ali je dalje prečišćen u odgovarajuće dijastereoizomere 1 i 2, od kojih je dijastereoizomer 1 korišćen za naknadna biološka ispitivanja kao što je opisano u nastavku.
[0291] Rezultati i diskusija.
[0292] DON je pokazao snažnu inhibiciju metabolizma glutamina i antitumorsku efikasnost u mišjem GBM modelu. Uprkos nekoliko tipova dokaza koji ukazuju na potencijalnu terapijsku efikasnost ciljanog delovanja na metabolizam glutamina u GBM, efekat DON jedinjenja na rast GBM tumora još nije zabeležen in vivo. Koristeći U87 mišji model ksenotransplantata GBM na boku, (Eshleman, et al., 2002) prvo je potvrđeno da sistemska primena DON jedinjenja (0.8 mg/kg, i.p) inhibira metabolizam glutamina, što se ogleda u akumulaciji endogenog glutamina u tumoru (SL. 21A; p <0.05) što je slično kao kod drugih model sistema. (Willis, et al., 1977; Windmueller, et al., 1974) Zatim je procenjena njegova antitumorska efikasnost i uočeno da DON ne samo da zaustavlja rast tumora, već efikasno indukuje i regresiju tumora. Konkretno, miševi tretirani vehikulumom su pokazali značajan rast tumora tokom eksperimenta, dok su miševi tretirani DON jedinjenjem (0.8 mg/kg, i.p, q.d.) pokazali >50% smanjenja zapremine tumora (SL. 21B; glavni efekat vremena [F( 3,48) = 6.049, p = 0.0014]; tretman [F(1,16) = 33.42, p < 0.0001]; interakcija [F(3,48) = 21.70, p < 0.0001]). Iako je DON pokazao odličnu efikasnost protiv tumora, svi miševi koji su primali DON pokazali su značajne znake toksičnosti uključujući gubitak težine (12 ± 4.1 %), pogrbljenost, ptozu i letargiju. Ovi nalazi su u skladu sa drugim izveštajima o efikasnosti i toksičnosti DON jedinjenja i in vitro i in vivo. (Fogal, et al., 2015; Cervantes-Madrid, et al., 2015; Potter, et al., 2015)
[0293] Za neke jednostavne DON alkil estarske prolekove je utvrđeno da su nestabilni. Maskiranje i karboksilatnih i aminskih funkcija kod DON jedinjenja poboljšalo je stabilnost određenih prolekova. Strategija prolekova se često koristi da bi se poboljšala penetracija u tkivo i promenili farmakokinetički parametri efikasnih lekova. Zaista, strategije prolekova su uobičajene u razvoju lekova jer 5-7% odobrenih lekova širom sveta su prolekovi (Rautio, et al., 2008). Početna strategija proleka za DON uključivala je maskiranje karboksilne kiseline jednostavnim alkil estrima kao što su etil 20 i izopropil 3. Sinteza ova dva derivata je bila jednostavna dajući jedinjenja 20 i 3 sa dobrim prinosom. Iznenađujuće je da ovi jednostavni DON alkil estri ranije nisu bili prijavljeni u hemijskoj literaturi, s obzirom na to da su hemiju i korisnost DON jedinjenjaa opisivale brojne grupe više od 60 godina (Magill, et al., 1957; Dion, et al., 1956; Magill, et al., 1956; Coffey, et al., 1956). Jedan potencijalni razlog je taj što je otkriveno da su 20 i 3 bili nestabilni, usporavajući ciklizaciju da bi se formirali jedinstveni diazoimini 9a i 9b.
11
Utvrđeno je da su ova dva jedinstvena derivata hemijski stabilna čak i pri kiselom pH, što isključuje njihovu upotrebu kao DON prolekova.
[0294] S obzirom na nestabilnost određenih prostih estarskih prolekova, i primarni amin i karboksilat DON jedinjenja su maskirani delovima prolekova. Ova strategija dvostruke hemijske progrupe je racionalizovana da bi se eliminisao potencijal za ciklizaciju i potencijalno dalje poboljšala lipofilnost. Korišćena su tri aminske progrupe uključujući (oksodioksolenil)metil karbamat estre (SL. 20, jedinjenja 36, 13), dipeptide (25 i 38) i estre na bazi pivaloil-oksi-metil (POM) (42, 32, 14). Ove progrupe su odabrane jer ciljaju na različite metaboličke enzime uključujući paraoksonazu, aminopeptidaze i karboksilesteraze, redom. Da bi se obezbedila dalja metabolička stabilnost derivata POM (tabela 3, 42), pripremljeni su odgovarajući metil-POM analozi (32, 14). Svi prolekovi koji sadrže dvostruku hemijsku progrupu su pokazali dovoljnu hemijsku stabilnost da omoguće dalju evaluaciju.
[0295] Svi DON prolekovi su se brzo metabolisali u plazmi miša, međutim za 32 i 14 je utvrđeno da su stabilni u plazmi ljudi i majmuna. Tabela 3 prikazuje stabilnost plazme DON prolekova 36, 13, 25, 9, 34, 38, 42, 32 i 14. Svi prolekovi su u potpunosti metabolisani u plazmi miša tokom vremena inkubacije od 60 minuta. Međutim, u plazmi majmuna i čoveka, prolekovi 32 i 14, sa metil-POM na aminu i etil ili izopropil estrom na karboksilatu, redom, pokazali su umerenu/visoku stabilnost gde je 60-75% proleka ostajalou plazmi majmuna, i 80 -90% u ljudskoj plazmi tokom vremena inkubacije od 60 minuta. S obzirom da je 14 imalo najbolji profil stabilnosti u plazmi čoveka, odabrano je za dalju evaluaciju u farmakokinetičkim studijama i upoređivano sa DON jedinjenjem zbog njegove sposobnosti da prodire u mozak i oslobađa DON.
12
[0296] Prolek 14 je poboljšao isporuku DON jedinjenja u mozak kod majmuna, ali ne i kod miševa.
[0297] Kao što se i očekivalo od DON proleka koji se potpuno metaboliše u plazmi miša, nađeno je da oralna primena DON (1) (0.8 mg/kg) i 14 (0.8 mg/kg ekvivalenta) pokazuje sličan nivo DON jedinjenja u plazmu (SL.22A) i profile koncentracije u mozgu (SL.22B) kada se doziraju kod miševa. AUC0-tDON jedinjenja nakon primene DON i 14 u plazmi bio je 1.25 nmol*h/mL odnosno 1.22 nmol*h/mL, što ukazuje na brzo i potpuno oslobađanje DON jedinjenja iz 14 in vivo. Slično u mozgu miša, AUC0-tDON nakon primene DON ili 14 bila je 0.57 nmol*h/g i 0.69 nmol*h/g, redom, gde je odnos mozak/plazma približno 0.46 za DON naspram 0.56 za prolek 14. Ovi farmakokinetički rezultati su potvrdili in vitro studije metabolizma koje sugerišu da se 14 u potpunosti konvertuje u DON u plazmi miša.
[0298] Nakon studija na miševima, farmakokinetika DON jedinjenja i 14a je procenjena kod majmuna, pošto su majmuni bolje oponašali profil stabilnosti ljudske plazme. Kod berok majmuna, i.v. primena DON i 14 (1.6 mg/kg DON ekvivalenta) pokazala je značajno različite profile DON plazme SL. 23A). Primena DON jedinjenja je obezbedila visoku izloženost u plazmi sa AUC0-tod 42.7 nmol*h/mL. Nasuprot tome, primena 14 je donela oko 7 puta manju izloženost DON jedinjenju u plazmi sa AUC0-tod 5.71 nmol*h/mL. Suprotno zapažanje je primećeno u CSF gde su povećani nivoi DON jedinjenja primećeni nakon primene 14.30 minuta nakon doziranja, primena DON jedinjenja je rezultirala sa 0.33 nmol/g DON jedinjenja u CSF, dok je 14 isporučilo 1.43 nmol/g DON jedinjenja. Kada se uporedi odnos plazme i CSF na 30 min, 14 je pokazalo 10 puta poboljšanu isporuku DON u CSF, u odnosu na DON (SL.23B).
[0299] Antagonist glutamina 6-diazo-5-okso-L-norleucin (DON, 1) pokazao je snažnu efikasnost protiv raka u pretkliničkim i kliničkim studijama, ali je njegov razvoj zaustavljen zbog izražene sistemske toksičnosti. Ovde je pokazano da DON inhibira metabolizam glutamina i obezbeđuje antitumorsku efikasnost u mišjem modelu glioblastoma, iako je primećena toksičnost. Da bi se poboljšao terapijski indeks DON jedinjenja, korišćena je strategija prolekova da bi se povećala njegova isporuka u mozak i ograničila sistemska izloženost. Neočekivano, jednostavni prolekovi na bazi alkil estara bili su neefikasni zbog hemijske nestabilnosti i ciklizacije kojom se formira jedinstveni diazoimin. Međutim, maskiranje i aminskih i karboksilatnih funkcionalnosti u DON dalo je dovoljnu hemijsku stabilnost za biološko testiranje. Dok su ovi prolekovi sa dvojakim hemijskim grupama pokazivali brz metabolizam u plazmi miševa, nekoliko njih je obezbedilo odličnu stabilnost u plazmi majmuna i čoveka. Najstabilnije jedinjenje (14, metil-POM-DONizopropil-estar) je visoko stabilno u plazmi majmuna, čoveka, svinja i pasa, ali se brzo metaboliše kod miševa. Kada se procenjuje kod majmuna pri ekvimolarnim dozama, 14 je isporučivalo niže nivoe DON u plazmi, ali viši nivoi u CSF, postignut je 10 puta veći odnos mozak:plazma u odnosu na DON. Ova strategija može da obezbedi put ka korišćenju DON jedinjenja kod pacijenata sa GBM.
REFERENCE
[0300] Sve objave, patentne prijave, patenti i druge reference pomenute u specifikaciji su indikativne za nivo stručnjaka u oblasti na koju se odnosi ovde otkriveni predmet. Smatraće se da, iako se ovde upućuje na izvestan broj patentnih prijava, patenata i drugih referenci, te reference ne predstavljaju priznanje da bilo koji od ovih dokumenata čini deo opšteg opšteg znanja u oblasti. U slučaju sukoba između specifikacije i bilo koje od referenci, specifikacija (uključujući sve njene izmene i dopune, koje se mogu zasnivati na referenci) je odlučujuća. Ovde se koriste standardna značenja termina prihvaćena u oblasti, osim ako nije drugačije naznačeno. Ovde se koriste standardne skraćenice za različite termine.
Ahluwalia, G. S.; Grem, J. L.; Hao, Z.; Cooney, D. A. Metabolism and action of amino kiselina analog anti-cancer agents. Pharmacol Ther 1990, 46, 243-271.
Alt, J.; Potter, M. C.; Rojas, C.; Slusher, B. S. Bioanalysis of 6-diazo-5-oxo-l-norleucine in plasma and brain by ultraperformance liquid chromatography mass spectrometry. Anal Biochem 2015, 474, 28-34.
Barclay, R. K.; Phillipps, M. A. Effects of 6-diazo-5-oxol-norleucine and other tumor inhibitors on the biosynthesis of nicotinamide adenine dinucleotide in mice. Cancer Res 1966, 26, 282-286.
Cervantes-Madrid, D.; Romero, Y.; Duenas-Gonzalez, A. Reviving Lonidamine and 6-Diazo-5-oxo-L-norleucine to Be Used in Combination for Metabolic Cancer Therapy. Biomed Res Int 2015, 2015, 690492.
Coffey, G. L.; Ehrlich, J.; Fisher, M. W.; Hillegas, A. B.; Kohberger, D. L.; Machamer, H. E.; Rightsel, W. A.; Roegner, F. R. 6-Diazo-5-oxo-L-norleucine, a new tumor-inhibitory substance. I. Biologic studies. Antibiot Chemother (Northfield) 1956, 6, 487-497.
D’Andrea, S.; Zheng, Z.; Scola, P. Inhibitors of Hepatitis C Virus. In Google Patents: 2008. Dion, H. W.; Fusari, S. A.; Jakubowski, Z. L.; Zora, J. G.; Bartz, Q. R. 6-Diazo-5-oxo-L-norleucine, A New Tumor inhibitory Substance. II.1 Isolation and Characterization. J. Am. Chem. Soc., 1956, 78, 3075-3077.
Dranoff, G.; Elion, G. B.; Friedman, H. S.; Bigner, D. D. Combination chemotherapy in vitro exploiting glutamine metabolism of human glioma and medulloblastoma. Cancer Res 1985, 45, 4082-4086.
Dranoff, G.; Elion, G. B.; Friedman, H. S.; Campbell, G. L.; Bigner, D. D. Influence of glutamine on the growth of human glioma and medulloblastoma in culture. Cancer Res 1985, 45, 4077-4081.
Eagan, R. T.; Frytak, S.; Nichols, W. C.; Creagan, E. T.; Ingle, J. N. Phase II study on DON in patients with previously treated advanced lung cancer. Cancer Treat Rep 1982, 66, 1665-1666.
Earhart, R. H.; Amato, D. J.; Chang, A. Y.; Borden, E. C.; Shiraki, M.; Dowd, M. E.; Comis, R. L.; Davis, T. E.; Smith, T. J. Phase II trial of 6-diazo-5-oxo-L-norleucine versus aclacinomycin-A in advanced sarcomas and mesotheliomas. Invest New Drugs 1990, 8, 113-119.
Earhart, R. H.; Koeller, J. M.; Davis, H. L. Phase I trial of 6-diazo-5-oxo-L-norleucine (DON) administered by 5-day
courses. Cancer Treat Rep 1982, 66, 1215-1217.
Erickson, J. W.; Cerione, R. A. Glutaminase: a hot spot for regulation of cancer cell metabolism? Oncotarget 2010,
1, 734-740.
Eshleman, J. S.; Carlson, B. L.; Mladek, A. C.; Kastner, B. D.; Shide, K. L.; Sarkaria, J. N. Inhibition of the mammalian target of rapamycin sensitizes U87 xenografts to fractionated radiation therapy. Cancer Res 2002, 62, 7291-7297.
Fogal, V.; Babic, I.; Chao, Y.; Pastorino, S.; Mukthavaram, R.; Jiang, P.; Cho, Y. J.; Pingle, S. C.; Crawford, J. R.; Piccioni, D. E.; Kesari, S. Mitochondrial p32 is upregulated in Myc expressing brain cancers and mediates glutamine addiction. Oncotarget 2015, 6, 1157-1170. Gallop, M. A.; Xu, F.; Phan, T.; Dilip, U.; Peng, G. Acyloxyalkyl carbamate prodrugs, methods of synthesis and use.In Google Patents: 2008.
Grayzel, A. I.; Seegmiller, J. E.; Love, E. Suppression of uric kiselina synthesis in the gouty human by the use of 6-diazo-5-oxo-L-norleucine. J Clin Invest 1960, 39, 447-454.
Gross, M. I.; Demo, S. D.; Dennison, J. B.; Chen, L.; Chemov-Rogan, T.; Goyal, B.; Janes, J. R.; Laidig, G. J.; Lewis, E. R.; Li, J.; MacKinnon, A. L.; Parlati, F.; Rodriguez, M. L. M.; Shwonek, P. J.; Sjogren, E. B.; Stanton, T. F.; Wang, T.; Yang, J.; Zhao, F. Y.; Bennett, M. K. Antitumor Activity of the Glutaminase Inhibitor CB-839 in Triple-Negative Breast Cancer. Mol Cancer Ther 2014.
12
Harding, J. J. T., M.L.; Munster, P.N.; Le, M.H.; Molineaux, C.; Bennett, M.K.; Mittra, E.; Burris,H.A.; Clark, A.S.; Dunphy, M.; Meric-Bemstam, F.; Patel, M.R.; DeMichele, A.; Infante, J.R. Safety and tolerability of increasing doses of CB-839, a first-in-class, orally administered small molecule inhibitor of glutaminase, in solid tumors. J Clin Oncol 2015. Hensley, C. T.; Wasti, A. T.; DeBerardinis, R. J. Glutamine and cancer: cell biology, physiology, and clinical opportunities. J Clin Invest 2013, 123, 3678-3684.
Hofer, A.; Steverding, D.; Chabes, A.; Brun, R.; Thelander, L. Trypanosoma brucei CTP synthetase: a target for the treatment of African sleeping sickness. Proc Natl Acad Sci U S A 2001, 98, 6412-6416.
Hu, X.; Stem, H. M.; Ge, L.; O’Brien, C.; Haydu, L.; Honchell, C. D.; Haverty, P. M.; Peters, B. A.; Wu, T. D.; Amler, L. C.; Chant, J.; Stokoe, D.; Lackner, M. R.; Cavet, G. Genetic alterations and oncogenic pathways associated with breast cancer subtypes. Mol Cancer Res 2009, 7, 511-522.
Keicher, J. D.; Roberts, C. D.; Rajwanshi, V. K.; Griffith, R. C.; Zheng, X.; Liehr, S. J. R.; Prhavc, M.; Kim, C. U.; Ray, A. S. Amino tricyclic-nucleoside compounds, compositions, and methods of use. In Google Patents: 2009.
Konopleva, M. Y.; Flinn, I. W.; Wang, E.; DiNardo, C. D.; Bennett, M.; Molineaux, C.; Le, M.; Maris, M.; Frankfurt, O. In Phase 1 study: Safety and tolerability of increasing doses of cb-839, an orally-administered small molecule inhibitor of glutaminase, in acute leukemia, Haematologica, 2015; Ferrata Storti Foundation Via Giuseppe Belli 4, 27100 Pavia, Italy: 2015; pp 378-379.
Le, A.; Lane, A. N.; Hamaker, M.; Bose, S.; Gouw, A.; Barbi, J.; Tsukamoto, T.; Rojas, C. J.; Slusher, B. S.; Zhang, H.; Zimmerman, L. J.; Liebler, D. C.; Slebos, R. J.; Lorkiewicz, P. K.; Higashi, R. M.; Fan, T. W.; Dang, C. V. Glucoseindependent glutamine metabolism via TCA cycling for proliferation and survival in B cells. Cell Metab 2012, 15, 110-121.
Lee, Y. Z.; Yang, C. W.; Chang, H. Y.; Hsu, H. Y.; Chen, I. S.; Chang, H. S.; Lee, C. H.; Lee, J. C.; Kumar, C. R.; Qiu, Y. Q.; Chao, Y. S.; Lee, S. J. Discovery of selective inhibitors of Glutaminase-2, which inhibit mTORC1, activate autophagy and inhibit proliferation in cancer cells. Oncotarget 2014, 5, 6087-6101.
Lynch, G.; Kemeny, N.; Casper, E. Phase II evaluation of DON (6-diazo-5-oxo-L-norleucine) in patients with advanced colorectal carcinoma. Am J Clin Oncol 1982, 5, 541-543.Magill, G. B.; Myers, W. P. Alterations in calcium metabolism in cancer patients treated with 6-diazo-5-oxo-L-norleucine. Proc Soc Exp Biol Med 1956, 93, 314-318.
Magill, G. B.; Myers, W. P.; Reilly, H. C.; Putnam, R. C.; Magill, J. W.; Sykes, M. P.; Escher, G. C.; Karnofsky, D. A.; Burchenal, J. H. Pharmacological and initial therapeutic observations on 6-diazo-5-oxo-1-norleucine (DON) in human neoplastic disease. Cancer 1957, 10, 1138-1150.
McDermott, L. A.; Iyer, P.; Vernetti, L.; Rimer, S.; Sun, J.; Boby, M.; Yang, T.; Fioravanti, M.; O’Neill, J.; Wang, L.; Drakes, D.; Katt, W.; Huang, Q.; Cerione, R. Design and evaluation of novel glutaminase inhibitors. Bioorg Med Chem 2016, 24, 1819-1839.
Ostrom, Q. T.; Gittleman, H.; Fulop, J.; Liu, M.; Blanda, R.; Kromer, C.; Wolinsky, Y.; Kruchko, C.; Barnholtz-Sloan, J. S. CBTRUS Statistical Report: Primary Brain and Central Nervous System Tumors Diagnosed in the United States in 2008-2012. Neuro Oncol 2015, 17 Suppl 4, iv1-iv62.
Potter, M. C.; Baxter, V. K.; Mathey, R. W.; Alt, J.; Rojas, C.; Griffin, D. E.; Slusher, B. S. Neurological sequelae induced by alphavirus infection of the CNS are attenuated by treatment with the glutamine antagonist 6-diazo-5-oxo-1-norleucine. J Neurovirol 2015, 21, 159-173.
Rahman, A.; Smith, F. P.; Luc, P. T.; Woolley, P. V. Phase I study and clinical pharmacology of 6-diazo-5-oxo L-norleucine (DON). Invest New Drugs 1985, 3, 369-374. Rautio, J.; Kumpulainen, H.; Heimbach, T.; Oliyai, R.; Oh, D.; Jarvinen, T.; Savolainen, J. Prodrugs: design and clinical applications. Nat Rev Drug Discov 2008, 7, 255-270.
Ru, P.; Williams, T. M.; Chakravarti, A.; Guo, D. Tumor metabolism of malignant gliomas. Cancers (Basel) 2013, 5, 1469-1484.
Schulze, A.; Harris, A. L. How cancer metabolism is tuned for proliferation and vulnerable to disruption. Nature 2012, 491, 364-373.
Shukla, K.; Ferraris, D. V.; Thomas, A. G.; Stathis, M.; Duvall, B.; Delahanty, G.; Alt, J.; Rais, R.; Rojas, C.; Gao, P.; Xiang, Y.; Dang, C. V.; Slusher, B. S.; Tsukamoto, T. Design, synthesis, and pharmacological evaluation of bis-2-(5-phenylacetamido-1,2,4-thiadiazol-2-yl)ethyl sulfide 3 (BPTES) analogs as glutaminase inhibitors. J Med Chem 2012, 55, 10551-10563.
Sklaroff, R. B.; Casper, E. S.; Magill, G. B.; Young, C. W. Phase I study of 6-diazo-5-oxo-L-norleucine (DON). Cancer Treat Rep 1980, 64, 1247-1251. Stupp, R.; Hegi, M. E.; Mason, W. P.; van den Bent, M. J.; Taphoorn, M. J.; Janzer, R. C.;
Ludwin, S. K.; Allgeier, A.; Fisher, B.; Belanger, K.; Hau, P.; Brandes, A. A.; Gijtenbeek, J.; Marosi, C.; Vecht, C. J.; Mokhtari, K.; Wesseling, P.; Villa, S.; Eisenhauer, E.; Gorlia, T.; Weller, M.; Lacombe, D.; Caimcross, J. G.; Mirimanoff, R. O. Effects of radiotherapy
12
with concomitant and adjuvant temozolomide versus radiotherapy alone on survival in glioblastoma in a randomised phase III study: 5-year analysis of the EORTC-NCIC trial. Lancet Oncol 2009, 10, 459-466.
Stupp, R.; Mason, W. P.; van den Bent, M. J.; Weller, M.; Fisher, B.; Taphoorn, M. J.; Belanger, K.; Brandes, A. A.; Marosi, C.; Bogdahn, U.; Curschmann, J.; Janzer, R. C.; Ludwin, S. K.; Gorlia, T.; Allgeier, A.; Lacombe, D.; Cairncross, J. G.; Eisenhauer, E.; Mirimanoff, R. O. Radiotherapy plus concomitant and adjuvant temozolomide for glioblastoma. N Engl J Med 2005, 352, 987-996.
Sullivan, M. P.; Beatty, E. C., Jr.; Hyman, C. B.; Murphy, M. L.; Pierce, M. I.; Severe, N. C. A comparison of the effectiveness of standard dose 6-mercaptopurine, combination 6-mercaptopurine and DON, and high-loading 6-mercaptopurine therapies in treatment of the acute leukemias of childhood: results of a coperative study. Cancer Chemother Rep 1962, 18, 83-95.
Sullivan, M. P.; Nelson, J. A.; Feldman, S.; Van Nguyen, B. Pharmacokinetic and phase I study of intravenous DON (6-diazo-5-oxo-L-norleucine) in children. Cancer Chemother Pharmacol 1988, 21, 78-84.
Tanaka, K.; Sasayama, T.; Irino, Y.; Takata, K.; Nagashima, H.; Satoh, N.; Kyotani, K.; Mizowaki, T.; Imahori, T.; Ejima, Y.; Masui, K.; Gini, B.; Yang, H.; Hosoda, K.; Sasaki, R.; Mischel, P. S.; Kohmura, E. Compensatory glutamine metabolism promotes glioblastoma resistance to mTOR inhibitor treatment. J Clin Invest 2015, 125, 1591-1602.
Thangavelu, K.; Chong, Q. Y.; Low, B. C.; Sivaraman, J. Structural basis for the active site inhibition mechanism of human kidney-type glutaminase (KGA). Sci Rep 2014, 4,3827. Upadhyay, R. K. Drug delivery systems, CNS protection, and the blood brain barrier. Biomed Res Int 2014, 2014, 869269.
Weller, M.; van den Bent, M.; Hopkins, K.; Tonn, J. C.; Stupp, R.; Falini, A.; Cohen-Jonathan-Moyal, E.; Frappaz, D.; Henriksson, R.; Balana, C.; Chinot, O.; Ram, Z.; Reifenberger, G.; Soffietti, R.; Wick, W. EANO guideline for the diagnosis and treatment of anaplastic gliomas and glioblastoma. Lancet Oncol 2014, 15, e395-403.
Willis, R. C.; Seegmiller, J. E. The inhibition by 6-diazo-5-oxo-1-norleucine of glutamine catabolism of the cultured human lymphoblast. J Cell Physiol 1977, 93, 375-382.
Windmueller, H. G.; Spaeth, A. E. Uptake and metabolism of plasma glutamine by the small intestine. J Biol Chem 1974, 249, 5070-5079.
Wise, D. R.; Thompson, C. B. Glutamine addiction: a new therapeutic target in cancer. Trends Biochem Sci 2010, 35, 427-433.
12
[0301] Iako je prethodno navedeni predmet detaljno opisan kao ilustracija i primer radi jasnoće razumevanja, stručnjacima u ovoj oblasti će biti jasno da se određene promene i modifikacije mogu primeniti u okviru obima priloženih zahteva.
12

Claims (6)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje koje je:
  2. 2. Jedinjenje koje je izopropil 2-(2-acetamido-3-(1H-indol-3-il)propanamido )-6-diazo-5-oksoheksanoat, ili njegov stereoizomer.
  3. 3. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema patentnim zahtevima 1 ili 2, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv nosač, razblaživač ili ekscipijens.
  4. 4. Jedinjenje prema patentnim zahtevima 1 ili 2, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za uporebu u lečenju raka kod subjekta.
  5. 5. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 4, naznačeno time što je kancer akutna limfoblastna leukemija, akutna mijelogena leukemija, uznapredovali sarkom mekog tkiva, rak mozga, metastatski ili agresivni rak dojke, karcinom dojke, bronhogeni karcinom, horiokarcinom, hronična mijelocitna leukemija, karcinom kolona, kolorektalni karcinom, Juingov sarkom, karcinom gastrointestinalnog trakta, gliom, multiformni glioblastom, planocelularni karcinom glave i vrata, hepatocelularni karcinom, Hočkinova bolest, intrakranijalni ependimoblastom, rak debelog creva, leukemija, rak jetre, karcinom pluća, Luisov karcinom pluća, limfom, maligni fibrozni histiocitom, melanom, mezoteliom, neuroblastom, osteosarkom, rak jajnika, rak pankreasa, tumor Varolijevog mosta, rak prostate, rabdomiosarkom, sarkom retikularnih ćelija, sarkom, sitnoćelijski rak pluća, rak želuca, rak testisa ili karcinom materice.
  6. 6. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 5, naznačeno time što je kancer kolorektalni karcinom, planocelularni karcinom glave i vrata, hepatocelularni karcinom, karcinom pluća, melanom ili rak prostate.
RS20230850A 2015-07-31 2016-07-29 Prolekovi glutaminskih analoga RS64597B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201562199566P 2015-07-31 2015-07-31
EP16833623.8A EP3328827B1 (en) 2015-07-31 2016-07-29 Prodrugs of glutamine analogs
PCT/US2016/044767 WO2017023774A1 (en) 2015-07-31 2016-07-29 Prodrugs of glutamine analogs

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS64597B1 true RS64597B1 (sr) 2023-10-31

Family

ID=57943518

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20230850A RS64597B1 (sr) 2015-07-31 2016-07-29 Prolekovi glutaminskih analoga

Country Status (22)

Country Link
US (4) US10336778B2 (sr)
EP (1) EP3328827B1 (sr)
JP (1) JP6863981B2 (sr)
KR (1) KR102666477B1 (sr)
CN (2) CN108290827B (sr)
AU (1) AU2016302940B2 (sr)
CA (1) CA2994258C (sr)
DK (1) DK3328827T3 (sr)
EA (1) EA034571B1 (sr)
ES (1) ES2957583T3 (sr)
FI (1) FI3328827T3 (sr)
HR (1) HRP20231163T1 (sr)
HU (1) HUE063399T2 (sr)
IL (1) IL257219B (sr)
LT (1) LT3328827T (sr)
MX (1) MX384906B (sr)
PL (1) PL3328827T3 (sr)
PT (1) PT3328827T (sr)
RS (1) RS64597B1 (sr)
SI (1) SI3328827T1 (sr)
SM (1) SMT202300320T1 (sr)
WO (1) WO2017023774A1 (sr)

Families Citing this family (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2994165A1 (en) 2015-07-31 2017-02-09 The Johns Hopkins University Methods for cancer and immunotherapy using glutamine analogues, including don
US10842763B2 (en) 2015-07-31 2020-11-24 The Johns Hopkins University Methods for cancer and immunotherapy using prodrugs of glutamine analogs
CN108290827B (zh) 2015-07-31 2021-01-01 约翰霍普金斯大学 谷氨酰胺类似物的前药
CN108135872A (zh) * 2015-07-31 2018-06-08 约翰霍普金斯大学 用于治疗认知缺陷的谷氨酰胺拮抗剂
CN110520118A (zh) 2017-02-01 2019-11-29 约翰斯霍普金斯大学 谷氨酰胺类似物的前药
EP3692015B1 (en) * 2017-10-06 2022-08-24 The John Hopkins University Novel glutamine antagonists and uses thereof
EA202191992A1 (ru) * 2019-01-18 2021-12-17 Дрейсен Фармасьютикалз, Инк. Комбинированная терапия пролекарством don и ингибитором иммунных контрольных точек
US12240797B2 (en) 2019-02-11 2025-03-04 Dracen Pharmaceuticals, Inc. Method of preparing a DON prodrug from L-glutamic acid
EP3923934A4 (en) * 2019-02-11 2022-11-16 Dracen Pharmaceuticals, Inc. PROCESS FOR THE PRODUCTION OF DON-PRODRUGS FROM L-PYROGLUTAMIC ACID
CN115461053A (zh) * 2019-10-03 2022-12-09 羿尊生物医药股份有限公司 用于静脉内施用的包含(s)-2-((s)-2-乙酰氨基-3-(1h-吲哚-3-基)丙酰氨基)-6-重氮基-5-氧代己酸异丙酯的冻干组合物及其用途
CN110763792A (zh) * 2019-10-24 2020-02-07 湖北省宏源药业科技股份有限公司 一种鸟嘌呤有关物质检测方法
WO2021239049A1 (en) * 2020-05-27 2021-12-02 Jacobio Pharmaceuticals Co., Ltd. Novel glutamine analogs
WO2022022612A1 (en) * 2020-07-29 2022-02-03 Jacobio Pharmaceuticals Co., Ltd. Novel glutamine analogs
WO2022072820A1 (en) * 2020-10-02 2022-04-07 Dracen Pharmaceuticals, Inc. Lyophilized composition comprising (s)-isopropyl 2-((s)-2- acetamido-3-(1h-indol-3-yl)propanamido)-6-diazo-5- oxohexanoate for subcutaneous administration and the use thereof
WO2022078462A1 (en) * 2020-10-15 2022-04-21 Jacobio Pharmaceuticals Co., Ltd. Novel glutamine analogs
CN116802175B (zh) * 2020-10-15 2025-09-30 北京加科思新药研发有限公司 谷氨酰胺类似物
CN114621120B (zh) * 2020-12-10 2023-11-03 深圳先进技术研究院 一种don前药分子、前药激活化合物和前药激活体系
WO2022232565A1 (en) * 2021-04-29 2022-11-03 The Johns Hopkins University Prodrugs of 6-diazo-5-oxo-l-norleucine
WO2022261117A1 (en) * 2021-06-07 2022-12-15 Dracen Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy with a don prodrug and a tigit inhibitor
CN113461563B (zh) * 2021-07-27 2022-05-10 中国药科大学 Nqo1激活型6-重氮基-5-氧代-l-正亮氨酸前药及其制备方法和应用
CN114306620A (zh) * 2021-12-07 2022-04-12 深圳先进技术研究院 基于代谢检查点的人血清白蛋白纳米药物及其制备方法和应用
JP2025078888A (ja) * 2022-01-28 2025-05-21 国立大学法人富山大学 グルタミナーゼ阻害剤
CN114917230B (zh) * 2022-03-09 2023-03-24 山东第一医科大学附属眼科研究所(山东省眼科研究所、山东第一医科大学附属青岛眼科医院) Cb-839在制备抑制角膜新生血管生成的药物中的应用
WO2023202651A1 (en) * 2022-04-21 2023-10-26 Jacobio Pharmaceuticals Co., Ltd. Polymorphic forms of glutamine antagonist and uses thereof
TW202406539A (zh) * 2022-04-21 2024-02-16 大陸商北京加科思新藥研發有限公司 藥物組合及其用途
CN114805138B (zh) * 2022-05-12 2023-10-10 中国科学院长春应用化学研究所 6-重氮-5-氧代-l-正亮氨酸的前药、其制备方法及应用
WO2024094526A1 (en) 2022-11-02 2024-05-10 Ecole Polytechnique Federale De Lausanne (Epfl) 6-diazo-5-oxo-l-norleucine prodrugs

Family Cites Families (47)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US121179A (en) * 1871-11-21 Improvement in brick-kilns
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
IE52535B1 (en) 1981-02-16 1987-12-09 Ici Plc Continuous release pharmaceutical compositions
US4485045A (en) 1981-07-06 1984-11-27 Research Corporation Synthetic phosphatidyl cholines useful in forming liposomes
EP0102324A3 (de) 1982-07-29 1984-11-07 Ciba-Geigy Ag Lipide und Tenside in wässriger Phase
US4503044A (en) * 1983-04-25 1985-03-05 American Cyanamid Company Antibiotic LL-D05139 β
US4568646A (en) * 1983-04-25 1986-02-04 American Cyanamid Company Preparation of antibiotic LL-D05139β from cultures of Glycomyces harbinensis, gen. nov., sp. nov.
US4544545A (en) 1983-06-20 1985-10-01 Trustees University Of Massachusetts Liposomes containing modified cholesterol for organ targeting
HUT35524A (en) 1983-08-02 1985-07-29 Hoechst Ag Process for preparing pharmaceutical compositions containing regulatory /regulative/ peptides providing for the retarded release of the active substance
US5328470A (en) 1989-03-31 1994-07-12 The Regents Of The University Of Michigan Treatment of diseases by site-specific instillation of cells or site-specific transformation of cells and kits therefor
PT892791E (pt) * 1996-04-12 2003-06-30 Searle & Co N-¬¬4-(5-metil-3-fenilisoxazol-4-il|fenil|sulfonil-propilamida e seu sal de sodio como pro-farmacos de inibidores de cox-2
WO2001041707A2 (en) 1999-12-08 2001-06-14 Vanderbilt University Modulation of in vivo glutamine and glycine levels in the treatment of autism
WO2002026245A2 (en) 2000-09-29 2002-04-04 Zhong Z Robert Use of serp-1 in combination with an immunosuppressant for influencing inflammatory and immune reactions
US8048917B2 (en) 2005-04-06 2011-11-01 Xenoport, Inc. Prodrugs of GABA analogs, compositions and uses thereof
AU2003234597A1 (en) 2002-05-14 2003-12-02 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Drug therapy for celiac sprue
WO2004028448A2 (en) * 2002-09-13 2004-04-08 Miller Kenneth E Method of alleviating pain via inhibition of neurotransmitter synthesis
GB0314262D0 (en) * 2003-06-19 2003-07-23 Univ Nottingham Trent Novel compounds and methods of using the same
KR20110097942A (ko) 2003-08-20 2011-08-31 제노포트 인코포레이티드 아실옥시알킬 카르바메이트 프로드러그, 합성 및 사용 방법
US7579313B2 (en) 2003-11-18 2009-08-25 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Transglutaminase inhibitors and methods of use thereof
DE602005005787T2 (de) 2004-01-19 2009-04-30 Novartis Ag Indolylmaleimidderivate
CA2560311A1 (en) 2004-04-08 2005-10-20 Novartis Ag Protein kinase c inhibitors for the treatment of autoimmune diseases and of transplant rejection
WO2007001395A2 (en) * 2004-10-04 2007-01-04 University Of South Carolina Prevention and treatment of influenza with glutamine antagonist agents
CN101355928B (zh) 2005-04-26 2013-05-22 卫材R&D管理株式会社 用于癌症免疫疗法的组合物和方法
JP2009529047A (ja) 2006-03-07 2009-08-13 アレイ バイオファーマ、インコーポレイテッド ヘテロ二環系ピラゾール化合物およびその使用
EP2015743B1 (de) 2006-05-10 2016-08-17 New Medical Enzymes AG Glutadon
US7585996B2 (en) 2006-09-15 2009-09-08 Xenoport, Inc. Acyloxyalkyl carbamate prodrugs, methods of synthesis and use
US8343477B2 (en) 2006-11-01 2013-01-01 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of hepatitis C virus
US20080107623A1 (en) 2006-11-01 2008-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of Hepatitis C Virus
US20080160024A1 (en) 2006-12-07 2008-07-03 Board Of Trustees Of The University Of Arkansas Inhibition of cancer metastasis
WO2009029729A1 (en) 2007-08-31 2009-03-05 Genelabs Technologies, Inc. Amino tricyclic-nucleoside compounds, compositions, and methods of use
CN102781472B (zh) 2010-02-17 2014-07-02 国立大学法人神户大学 放射线治疗剂
CA2802733C (en) 2010-06-24 2017-11-21 Alkermes Pharma Ireland Limited Prodrugs of nh-acidic compounds: ester, carbonate, carbamate and phosphonate derivatives
JP6130307B2 (ja) 2011-03-17 2017-05-17 ザ ユニバーシティ オブ バーミンガム 再指向性免疫療法
KR101900478B1 (ko) 2011-08-04 2018-09-20 한올바이오파마주식회사 암의 재발 또는 전이의 억제용 약제학적 조성물
WO2014138391A1 (en) * 2013-03-06 2014-09-12 The Johns Hopkins University Targeting glutamine metabolism in brain tumors
WO2014160071A1 (en) 2013-03-14 2014-10-02 St. Jude Children's Research Hospital Methods and compositions for the treatment of glutamine-addicted cancers
WO2015035112A1 (en) 2013-09-05 2015-03-12 The Johns Hopkins University Cancer therapy via a combination of epigenetic modulation and immune modulation
IL292510A (en) 2013-11-05 2022-06-01 Cognate Bioservices Inc Combinations of checkpoint inhibitors and therapeutics to treat cancer
US20170035864A1 (en) * 2013-12-09 2017-02-09 Bullet Biotechnology, Inc. SPECIFIC VIRUS-LIKE PARTICLE-CpG OLIGONUCLEOTIDE VACCINES AND USES THEREOF
CN105960405B (zh) 2014-01-06 2021-02-19 理森制药股份公司 谷氨酰胺酶抑制剂
EP3116872A4 (en) 2014-03-14 2017-08-30 Calithera Biosciences, Inc. Combination therapy with glutaminase inhibitors
KR20170012562A (ko) 2014-06-13 2017-02-02 칼리테라 바이오사이언시즈 인코포레이티드 글루타미나제 억제제를 사용하는 병용 요법
WO2016172494A2 (en) 2015-04-23 2016-10-27 The Johns Hopkins University Combination of immunotherapy with local chemotherapy for the treatment of malignancies
US10842763B2 (en) 2015-07-31 2020-11-24 The Johns Hopkins University Methods for cancer and immunotherapy using prodrugs of glutamine analogs
CA2994165A1 (en) * 2015-07-31 2017-02-09 The Johns Hopkins University Methods for cancer and immunotherapy using glutamine analogues, including don
CN108290827B (zh) 2015-07-31 2021-01-01 约翰霍普金斯大学 谷氨酰胺类似物的前药
CN108135872A (zh) 2015-07-31 2018-06-08 约翰霍普金斯大学 用于治疗认知缺陷的谷氨酰胺拮抗剂

Also Published As

Publication number Publication date
CN112920092B (zh) 2024-04-26
US20190315784A1 (en) 2019-10-17
EA034571B1 (ru) 2020-02-21
BR112018002087A2 (pt) 2018-09-18
US10336778B2 (en) 2019-07-02
CN108290827A (zh) 2018-07-17
EA201890395A1 (ru) 2018-08-31
US20190315783A1 (en) 2019-10-17
SMT202300320T1 (it) 2023-11-13
WO2017023774A1 (en) 2017-02-09
SI3328827T1 (sl) 2023-11-30
HRP20231163T1 (hr) 2024-03-15
PT3328827T (pt) 2023-10-13
DK3328827T3 (da) 2023-10-02
KR102666477B1 (ko) 2024-05-17
KR20180071247A (ko) 2018-06-27
JP6863981B2 (ja) 2021-04-21
MX2018001300A (es) 2019-03-14
EP3328827A1 (en) 2018-06-06
CA2994258C (en) 2024-09-10
AU2016302940B2 (en) 2021-02-04
CA2994258A1 (en) 2017-02-09
HUE063399T2 (hu) 2024-01-28
EP3328827B1 (en) 2023-07-05
US10738066B2 (en) 2020-08-11
IL257219A (en) 2018-03-29
EP3328827A4 (en) 2019-03-13
AU2016302940A1 (en) 2018-02-22
JP2018528261A (ja) 2018-09-27
ES2957583T3 (es) 2024-01-22
US11926640B2 (en) 2024-03-12
FI3328827T3 (fi) 2023-09-26
US20210206787A1 (en) 2021-07-08
IL257219B (en) 2021-05-31
US10954257B2 (en) 2021-03-23
PL3328827T3 (pl) 2023-11-27
MX384906B (es) 2025-03-14
US20180222930A1 (en) 2018-08-09
HK1256284A1 (en) 2019-09-20
CN112920092A (zh) 2021-06-08
LT3328827T (lt) 2023-10-10
CN108290827B (zh) 2021-01-01
WO2017023774A9 (en) 2017-11-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11926640B2 (en) Prodrugs of glutamine analogs
EP3692015B1 (en) Novel glutamine antagonists and uses thereof
US11712435B2 (en) Mebendazole prodrugs with enhanced solubility and oral bioavailability
US11185534B2 (en) Prodrugs of glutamine analogs
HK1256284B (en) Prodrugs of glutamine analogs
OA19640A (en) Prodrugs of glutamine analogs.
BR112018002087B1 (pt) Compostos análogos de glutamina, composição farmacêutica compreendendo os mesmos e seu uso no tratamento de câncer