RS63484B1

RS63484B1 - Derivati polimiksina i njihova upotreba u kombinovanoj terapiji zajedno sa različitim antibioticima

Info

Publication number: RS63484B1
Application number: RS20220760A
Authority: RS
Inventors: Pamela Brown; Michael Dawson; Mona Simonovic; Steven Boakes; Esther Duperchy
Original assignee: Spero Therapeutics Inc
Priority date: 2013-05-22
Filing date: 2014-05-21
Publication date: 2022-09-30
Also published as: TW201444876A; EP2999711B1; PT2999711T; ES2923762T3; HUE059544T2; HK1221474A1; EP2999711A1; CN105308065B; JP6643758B2; US20160222061A1; KR102354902B1; US10407467B2; DK2999711T3; BR112015029309A2; HRP20220898T1; TWI665218B; CA2939061A1; CA2939061C; LT2999711T; RU2015148032A

Description

Opis

Oblast pronalaska

[0001] Ovaj pronalazak se odnosi na nova jedinjenja, kombinacije jedinjenja, farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenja i upotrebu jedinjenja, farmaceutske kompozicije i kombinacije za lečenje, na primer lečenje mikrobnih infekcija, posebno sa Gram-negativnim bakterijama.

Osnova

[0002] Kod osetljivih osoba, određene Gram-negativne bakterije kao npr Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa i Acinetobacter baumannii mogu izazvati ozbiljne infekcije, kao što su pneumonija, infekcije urinarnog trakta, infekcije kože i strukture kože kao što su infekcije rana, infekcije uha, infekcije oka, intraabdominalne infekcije, prekomerni rast bakterija u gastrointestinalnom traktu i bakteriemija/sepsa. Lečenje ozbiljnih bakterijskih infekcija u kliničkoj praksi može biti komplikovano rezistencijom na antibiotike. Poslednjih godina došlo je do porasta infekcija Gram-negativnim bakterijama koje su otporne na mnoge vrste antimikrobnih sredstava, uključujući antibiotike širokog spektra kao što su aminoglikozidi, cefalosporini, pa čak i karbapenemi. Stoga postoji potreba da se identifikuju novi antimikrobni lekovi koji su efikasni protiv Gram-negativnih bakterija, posebno protiv Gram-negativnih bakterija otpornih na više lekova.

[0003] Polimiksini su klasa antibiotika koje proizvodi Gram-pozitivna bakterija Bacillus polimyxa. Prvi put identifikovani kasnih 1940-ih, polimiksini, posebno polimiksin B i polimiksin E (kolistin, obično kao njegov prolek kolistin metan sulfonat) korišćeni su u lečenju Gram-negativnih infekcija. Međutim, ovi antibiotici su ispoljili neželjene efekte kao što su neurotoksičnost i nefrotoksičnost. Ipak, polimiksini sada igraju važnu ulogu u terapiji MDR Gram-negativnih infekcija zbog nedostatka održivih alternativa. Međutim, njihova upotreba u terapiji je ograničena na lečenje u krajnjem slučaju.

[0004] WO 2008/017734 pokušava da reši ovaj problem toksičnosti obezbeđivanjem derivata polimiksina koji nose najmanje dva, ali ne više od tri pozitivna naelektrisanja. Za ova jedinjenja se kaže da su efikasni antibakterijski agensi sa smanjenom renalnom toksičnošću. U otkriću se pretpostavlja da smanjeni broj pozitivnih naelektrisanja smanjuje afinitet jedinjenja za izolovano tkivo bubrega pacova, što zauzvrat može dovesti do smanjenja nefrotoksičnosti.

[0005] Određeni derivati des-masnog acil polimiksina takođe su otkriveni sa smanjenom akutnom toksičnošću kod miševa, dok su zadržali dobru aktivnost protiv pseudomonada (Katsuma et al. Chem. Pharm. Bik. 2009; 57, 332-336; Sato et al. Chem. Pharm. Bik. 2011; 59, 597-602). Jedinjenja su bila značajno manje aktivna od polimiksina B protiv E. coli i K. pneumoniae.

[0006] WO 2010/075416 obezbeđuje ureom povezane aril polimiksin dekapeptide uključujući CB182,804, za koji se navodi da ima sličnu aktivnost, ali smanjenu renalnu toksičnost u poređenju sa polimiksinom B. Derivati fenil ciklopropan polimiksina su takođe opisani u US 8,415,307. Pokazalo se da ova jedinjenja imaju sličnu ili smanjenu aktivnost u poređenju sa polimiksinom B.

[0007] WO 2012/168820 obezbeđuje dalju seriju derivata polimiksina za koje je prijavljeno da imaju smanjenu toksičnost, a ponekad i pojačanu aktivnost u poređenju sa polimiksinom B, u kome je diaminobutiratna grupa na poziciji 3 u bočnom lancu tripeptida zamenjena diaminopropionatnom ostatkom.

[0008] Antibiotici se često koriste u kombinaciji za lečenje infekcija iz više razloga:

● Proširiti pokrivenost patogena za empirijsku terapiju ili za lečenje mešovitih infekcija ● Za poboljšanje efikasnosti kada je kombinacija aktivnija od bilo kojeg antibiotika samog (aditiv) ili aktivnija nego što bi se očekivalo jednostavnim sumiranjem aktivnosti dva antibiotika (sinergistički)

● Za suzbijanje razvoja otpornosti

[0009] Zaista, polimiksini se ponekad koriste u kombinaciji sa drugim antibioticima (kao što su rifampicin, karbapenemi, aminoglikozidi ili kinoloni) za lečenje ozbiljnih infekcija u klinici iz svih ovih razloga. Brojne mikrobiološke i studije efikasnosti na životinjama sprovedene su na kombinacijama polimiksina i antibiotika (Petrosillo et al. Clin. Microbiol. Infect. 2008; 14, 816-827). Kombinacije polimiksina npr. sa neomicinom i bacitracinom su takođe dostupne za lokalnu upotrebu. Polimiksini deluju na spoljašnju membranu Gramnegativnih bakterija i veruje se da olakšavaju uzimanje antibiotika koji su manje sposobni da pređu spoljnu membransku barijeru i time pojačavaju njihovu aktivnost.

[0010] Kao i upotreba polimiksina per se u kombinaciji, objavljeno je da su derivati masnih acil polimiksina, kao što je polimiksin B nonapeptid (PMBN), iako nemaju veoma moćnu antibakterijsku aktivnost, ipak u stanju da pojačaju aktivnost antibiotika čije usvajanje ometa spoljašnja membrana (Vaara et al. Microbiol. Rev.1992; 56, 395-411). PMBN ima smanjenu akutnu toksičnost u poređenju sa samim polimiksinom, iako je nejasno da li je smanjena renalna toksičnost.

[0011] Čini se da upotreba manje toksičnih 'permeabilizatora' u kombinaciji sa drugim antibiotikom nudi potencijal za terapeutske preparate sa snažnom aktivnošću i smanjenom toksičnošću.

[0012] Uprkos tome što se ovaj pristup razmatra već nekoliko godina, takvi preparati nisu uvedeni u medicinsku upotrebu jer ne nude dovoljna poboljšanja u odnosu na dostupne terapije. Primetno je da je njihova aktivnost često manja od one analogne kombinacije polimiksin-antibiotik.

[0013] Jedinjenja iz WO 2008/017734 su testirana u kombinaciji sa rifampicinom, klaritromicinom i drugim antibioticima i pokazuju izvesnu sinergističku aktivnost.

[0014] WO 2009/098357 obezbeđuje derivate polimiksina koji nemaju više od tri pozitivna naelektrisanja, kao što je opisano u WO2008/017734, ali sa kratkim acil lancima. Ovi derivati imaju slabu intrinzičku antimikrobnu aktivnost, ali su sposobni da pojačaju aktivnost drugih agenasa.

[0015] CB-182,804 u prisustvu rifampicina pokazuje MIC90vrednosti ekvivalentne ili bolje nego za polimiksin B plus rifampicin protiv E. coli i K. pneumoniae sojeva, ali ovo jedinjenje nije baš tako dobro protiv A. baumannii ili P. aeruginosa sojeva (Kuale et al. Microb. Drug Resist 2012; 18, 132-136).

[0016] Aktivnost des-masnih acil derivata Katsume et al. i Sato et al. nije prijavljena u prisustvu drugih antibiotika, kao ni jedinjenja iz WO 2012/168820 ili US 8,415,307.

[0017] Ostaje potreba za manje toksičnim derivatima polimiksina sa jakim potencirajućim delovanjem za druge antibiotike, i za kombinacijama takvih agenasa sa partnerskim antibioticima koji nude terapeutske preparate sa dosledno snažnom aktivnošću na ciljne patogene. Takva jedinjenja takođe treba da imaju prihvatljivu toksičnost.

[0018] Pronalazači prefmetnog pronalaska su prethodno opisali u PCT/GB2012/052844, TW 101142961 i GCC 2012/22819, od kojih je sadržaj svakog od njih inkorporisan u celini, polimiksinska jedinjenja za upotrebu u lečenju mikrobnih infekcija.

[0019] Iznenađujuće, pronalazači predmetnog pronalaska su pronašli određene derivate polimiksina, koji imaju smanjenu toksičnost u poređenju sa polimiksinom ili kolistinom, a posebno su efikasni u potenciranju aktivnosti antibiotika kao što je rifampicin, a u nekim slučajevima i postizanju poboljšane in vitro potencije u poređenju sa kombinacijom polimiksin:antibiotik. Kombinacije koje sadrže ove agense stoga nude terapijske opcije konzistentno snažnog delovanja, ali niže toksičnosti od trenutno dostupnih terapija.

Rezime pronalaska

[0020] U opštem aspektu, ovaj pronalazak obezbeđuje polimiksinsko jedinjenje formule (I) kako je ovde opisano, za upotrebu u postupku lečenja ili profilakse, u kombinaciji sa drugim agensom (koji se može nazvati aktivnim agensom). Jedinjenja formule (I) se mogu koristiti za lečenje mikrobne infekcije, kao što je Gram-negativna bakterijska infekcija.

[0021] U prvom aspektu pronalaska obezbeđeno je polimiksinsko jedinjenje formule (I) za upotrebu u postupku lečenja ili profilakse, u kombinaciji sa aktivnim agensom, pri čemu je aktivni agens izabran iz grupe koju čine:

rifampicin, rifabutin, rifalazil, rifapentin i rifaksimin;

oksacilin, meticilin, ampicilin, kloksacilin, karbenicilin, piperacilin, trikarcilin, flukloksacilin i nafcilin;

azitromicin, klaritromicin, eritromicin, telitromicin, cetromicin i solitromicin;

aztreonam i BAL30072;

meropenem, doripenem, imipenem, ertapenem, biapenem, tomopenem i panipenem;

tigeciklin, omadaciklin, eravaciklin, doksiciklin i minociklin;

ciprofloksacin, levofloksacin, moksifloksacin i delafloksacin;

Fusidinska kiselina;

Novobiocin;

teihoplanin, telavancin, dalbavancin i oritavancin,

i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati;

[0022] U drugom aspektu obezbeđeno je aktivno sredstvo, kao što je definisano u prvom aspektu, za upotrebu u postupku lečenja ili profilakse, u kombinaciji sa polimiksinskim jedinjenjem formule (I).

[0023] U trećem aspektu obezbeđena je kombinacija jedinjenja polimiksina formule (I) i aktivnog agensa kao što je definisano u prvom aspektu, za upotrebu u postupku lečenja ili profilakse.

[0024] U gore opisanim postupakma lečenja, metod lečenja može biti metod lečenja ili profilakse mikrobne infekcije.

[0025] Ovde je opisana farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje formule (I) zajedno sa drugim aktivnim agensom, kao što je definisano u prvom aspektu, i biološki prihvatljivim ekscipijensom. Dalje, takođe je obezbeđen komplet koji sadrži jedinjenje formule (I) i koji sadrži drugi aktivni agens, kao što je definisano u prvom aspektu. Jedinjenje formule (I) i drugi aktivni agens se mogu obezbediti odvojeno u okviru kompleta.

[0026] U daljem aspektu pronalaska obezbeđeno je jedinjenje formule (II) kako je ovde opisano. Jedinjenja formule (II) su izbor jedinjenja polimiksina formule (I). Jedinjenja formule (II) su stoga obezbeđena u takvim aspektima kao što je gore opisano za jedinjenja formule (I).

[0027] Pronalazak takođe obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje formule (II) i biološki prihvatljiv ekscipijent, opciono zajedno sa drugim aktivnim agensom.

[0028] U daljem aspektu dato je jedinjenje formule (II) ili farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje formule (II) za upotrebu u postupku lečenja ili profilakse. Pronalazak dodatno obezbeđuje jedinjenje formule (II) ili farmaceutsku kompoziciju koji sadrži jedinjenje formule (II) za upotrebu u postupku lečenja ili profilakse mikrobne infekcije, kao što je Gram-negativna bakterijska infekcija. Ovde je opisan postupak identifikacije korisnih kombinacija za terapiju, pri čemu postupak obuhvata testiranje kombinacije jedinjenja formule (I) ili (II) sa biološki aktivnim jedinjenjem i određivanje biološke efikasnosti kombinacije, na primer sa poređenjme sa samim biološki aktivnim jedinjenjem i/ili jedinjenjem formule (I) ili (II). Jedinjenja formule (I) i (II) su pogodna za upotrebu u lečenju gljivičnih infekcija, na primer u kombinaciji sa antifungalnim agensom.

Opis slika

[0029]

Slika 1 prikazuje koncentraciju NAG (ng/24 h) u danima 0, 4 i 7 za jedinjenja 1, 4 i 10 i kolistin. Levi grafikon prikazuje s leva na desno kolistin (2 mg/kg BID), kolistin (8 mg/kg BID), jedinjenje 1 (8 mg/kg BID) i 4 (8 mg/kg BID). Desni grafikon prikazuje kolistin (2 mg/kg BID), kolistin (8 mg/kg BID) i jedinjenje 10 (8 mg/kg BID).

Slika 2 prikazuje koncentraciju albumina (ng/24 h) u danima 0, 4 i 7 za jedinjenja 1, 4 i 10 i kolistin. Levi grafikon prikazuje s leva na desno kolistin (2 mg/kg BID), kolistin (8 mg/kg BID), jedinjenje 1 (8 mg/kg BID) i 4 (8 mg/kg BID). Desni grafikon prikazuje kolistin (2 mg/kg BID), kolistin (8 mg/kg BID) i jedinjenje 10 (8 mg/kg BID).

Slika 3 prikazuje koncentraciju cistatina C (ng/24 h) u danima 0, 4 i 7 za jedinjenja 1, 4 i 10 i kolistin. Levi grafikon prikazuje s leva na desno kolistin (2 mg/kg BID), kolistin (8 mg/kg BID), jedinjenje 1 (8 mg/kg BID) i 4 (8 mg/kg BID). Desni grafikon prikazuje kolistin (2 mg/kg BID), kolistin (8 mg/kg BID) i jedinjenje 10 (8 mg/kg BID).

Detaljan opis pronalaska

[0030] Ovaj pronalazak obezbeđuje jedinjenja formule (I) i (II) za upotrebu u medicinskom lečenju, posebno u kombinaciji sa drugim agensom. Ovaj pronalazak obezbeđuje jedinjenja formule (II) i takva jedinjenja su podskup jedinjenja formule (I).

[0031] Jedinjenja formule (I) i (II) su detaljnije opisana u nastavku.

[0032] Uopšteno govoreći, jedinjenja formule (I) i (II) su polimiksinska jedinjenja koja imaju N terminalnu grupu koja sadrži jednu, dve ili tri hidroksilne grupe i/ili jednu, dve ili tri amino grupe. Pored toga, ili kao alternativa, N terminalna grupa ima heterociklil (ili heterociklilen) grupu koja sadrži azot i/ili heteroalkilensku grupu koja sadrži azot. N terminalna grupa može biti alkil grupa ili može biti ili uključiti aril, cikloalkil ili heterociklil grupu. Prisustvo hidroksilne grupe ili bazne amino grupe unutar terminalne grupe je povezano sa posebnim prednostima, kao što je diskutovano u nastavku.

[0033] Jedinjenja formule (I) i (II) imaju odgovarajuću antibakterijsku aktivnost, dok takođe očigledno pokazuju manju toksičnost, posebno nefrotoksičnost. Jedinjenja mogu imati uporedivu ili poboljšanu biološku aktivnost u poređenju sa polimiksinom B ili kolistinom protiv jednog ili više E. coli, P. aeruginosa, K. pneumonia, ili A. baumannii bakterijski sojevi. Takva jedinjenja su korisne alternative jedinjenjima tipa polimiksina koja su prethodno opisana u tehnici.

[0034] Za neka od polimiksinskih jedinjenja ili derivata polimiksina u struci je poznato ili se sumnja da imaju loš profil toksičnosti. Na primer, upotreba jedinjenja koja imaju masni acil lanac na N terminalu, kao što su Polimiksin B i Kolistin, povezana je sa nefrotoksičnošću.

[0035] Vaara et al. (Antimicrob. Agents Chemother. 2008, 52, 3229) su sugerisali da farmakološke i toksične osobine polimiksinskog jedinjenja mogu biti izmenjene sa promenama polipeptidne sekvence polimiksina. Konkretno, Vaara et al. su pripremili polimiksinsko jedinjenje koje ima samo tri pozitivna naelektrisanja, dok nonapeptid polimiksina B nosi pet pozitivnih naelektrisanja.

[0036] Nasuprot tome, ovi pronalazači su pokazali da adaptacije na N terminusu polimiksinskog jedinjenja mogu smanjiti nefrotoksičnost. Kao što je ovde opisano, N terminus ima supstituent koji sadrži hidroksil grupu ili amino grupu (koja može biti u obliku heterocikla koji sadrži azot).

[0037] Dodatno, jedinjenja formule (I) i (II) su sposobna da povećaju antimikrobnu aktivnost drugog antimikrobnog sredstva, kao što je rifampicin. Takve kombinacije imaju uporedivu ili poboljšanu biološku aktivnost u poređenju sa kombinacijom drugog agensa sa polimiksinom B ili kolistinom, na primer protiv jednog ili više od E. coli, P. aeruginosa, K. pneumonia, ili A. baumannii sojeva. Zaista, pronalazači su otkrili da kombinacija jedinjenja formule (I) ili (II) sa drugim aktivnim agensom, kao što je antimikrobno sredstvo, obezbeđuje neočekivano povećanje biološke aktivnosti. Na primer, jedinjenja formule (I) ili (II) mogu imati uporedivu biološku aktivnost u poređenju sa polimiksinom B ili kolistinom protiv jednog ili više od E. coli, P. aeruginosa, K. pneumonia, ili A. baumannii sojeva. Međutim, kada se takva jedinjenja koriste u kombinaciji sa drugim aktivnim agensom, kombinacija ima neočekivano superiornu aktivnost u poređenju sa kombinacijom polimiksina B ili kolistina sa istim aktivnim agensom. Kao što je gore navedeno, jedinjenja formule (I) i (II) takođe mogu imati inherentnu antimikrobnu aktivnost.

[0038] Dodatno, pronalazači predmetnog pronalaska su otkrili da je svako jedinjenje formule (I) i (II) aktivno protiv širokog spektra bakterija i da je svako jedinjenje sposobno da pojača aktivnost drugog aktivnog agensa, na primer protiv E. coli, P. aeruginosa, K. pneumonia, ili A. baumannii sojeva. Nasuprot tome, jedinjenja i kombinacije koje su prethodno opisane u tehnici imaju različit profil biološke aktivnosti, i teško je predvideti stepen do kojeg će određeno polimiksinsko jedinjenje potencirati aktivnost drugog agensa. Posebno mnogi poznati derivati polimiksina, kada se koriste u kombinaciji sa drugim agensom, imaju biološku aktivnost koja je inferiorna u odnosu na kombinaciju polimiksina B ili kolistina sa istim aktivnim agensom.

[0039] Na primer, WO 2008/017734 opisuje kombinacije derivata polimiksina sa rifampicinom, klaritromicinom i drugim antibioticima. Smatra se da kombinacije NAB7061 i NAB739 sa rifampicinom imaju slabu aktivnost protiv P. aeruginosa u poređenju sa kombinacijom nonapeptida polimiksina B sa rifampicinom. Protiv A. baumannii kombinacija NAB739 sa rifampicinom ima veću aktivnost od kombinacije nonapeptida polimiksina B sa rifampicinom. Međutim, kombinacija NAB7061 sa rifampicinom ima inferiornu aktivnost. Takođe se vidi da kombinacije NAB7061 i NAB739 sa rifampicinom imaju superiornu aktivnost protiv E. coli u poređenju sa kombinacijom polimiksina B nonapeptida. Međutim, ova poboljšana aktivnost nije predvidljiva i poboljšana aktivnost generalno nije konzistentna među testiranim derivatima i različitim pregledanim mikroorganizmima.

[0040] Kombinacije pronalaska takođe očigledno pokazuju manju toksičnost u poređenju sa kombinacijom drugog agensa sa polimiksinom B ili kolistinom, na primer mereno u odnosu na ćelije HK-2. Posebno jedinjenja imaju nisku nefrotoksičnost.

Aktivni agens

[0041] Jedinjenja formule (I) i (II) se mogu koristiti zajedno sa drugim agensom. Pronalazači su otkrili da takve kombinacije imaju veću biološku aktivnost nego što bi se očekivalo na osnovu individualne aktivnosti oba jedinjenja. Jedinjenja formule (I) i (II) se mogu koristiti za pojačavanje aktivnosti drugog agensa. Posebno, jedinjenja formule (I) i (II) se mogu koristiti zajedno sa drugim agensom za poboljšanje antimikrobne aktivnosti tog agensa, na primer protiv Gram-negativnih bakterija.

[0042] Bez želje da se vezujemo za teoriju, veruje se da jedinjenja formule (I) i (II) deluju na spoljašnju membranu ćelije, npr. Gram-negativne bakterijske ćelija, da bi se olakšalo uzimanje drugog agensa u tu ćeliju. Prema tome, agensi koji su inače nesposobni ili loši u prelasku spoljašnje membrane mogu biti uneti u ciljnu ćeliju dejstvom jedinjenja formule (I) i (II).

[0043] U jednom aspektu, kombinacija jedinjenja formule (I) ili (II) sa drugim agensom je aktivna protiv Gram-negativnih bakterija. Ovde nije bitno da pojedinačno bilo koje od jedinjenja formule (I) ili (II) ili drugo sredstvo ima aktivnost protiv Gram-negativnih bakterija.

[0044] U jednom aspektu, drugi agens je agens koji ima izmerenu vrednost MIC u odnosu na određeni mikroorganizam, kao što je bakterija, koja je manja od 10, manja od 5 ili manja od 1 mikrograma/mL. Mikroorganizam može biti Gram-negativna bakterija, kao što je Gramnegativna bakterija izabrana iz grupe koju čine E. coli, S. enterica, K. pneumoniae, K. oxytoca; E. cloacae, E. aerogenes, E. agglomerans, A. calcoaceticus, A. baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Stenotrophomonas maltophilia, Providencia stuartii, P. mirabilis, i P. vulgaris.

[0045] Primeri drugih agenasa koji imaju aktivnost protiv Gram-negativnih bakterija uključuju beta-laktame, tetracikline, aminoglikozide i hinolone.

[0046] U jednom aspektu, drugi agens je agens koji ima izmerenu vrednost MIC protiv određenog mikroorganizma, kao što je Gram-negativna bakterija, koja je više od 4, više od 8, više od 16 ili više od 32 mikrograma/mL. U ovoj realizaciji, drugi agens može biti aktivan protiv Gram-pozitivnih bakterija. Na primer, drugi agens je agens koji ima izmerenu vrednost MIC u odnosu na određenu Gram-pozitivnu bakteriju koja je manja od 10, manja od 5 ili manja od 1 mikrograma/mL. Ovde, jedinjenje formule (I) ili (II) deluje tako da olakšava uzimanje drugog agensa u Gram-negativne bakterijske ćelije. Drugi agens je stoga u stanju da deluje na metu unutar Gram-negativne bakterijske ćelije, koja meta može biti ista kao meta drugog agensa u Gram-pozitivnoj bakterijskoj ćeliji.

[0047] Gram-pozitivne bakterije mogu biti izabrane iz grupe koju čine Staphilococcus i Streptococcus bakterije, kao npr S. aureus (uključujući MRSA), S. epidermis, E. faecalis, i E. faecium.

[0048] Primeri drugih agenasa koji imaju aktivnost protiv Gram-pozitivnih bakterija (na MIC vrednostima datim iznad, na primer), i umerenu aktivnost protiv Gram-negativnih bakterija, uključuju rifampicin, novobiocin, makrolide, pleuromutiline. U jednom aspektu, jedinjenje koje ima umerenu aktivnost protiv Gram-negativnih bakterija može imati izmerenu vrednost MIC u odnosu na Gram-negativne bakterije koja je manja od 32, manja od 64 ili manja od 128 mikrograma/mL.

[0049] Takođe pogodna za upotrebu su sredstva koja imaju aktivnost protiv Gram-pozitivnih bakterija i koja su u suštini neaktivna protiv Gram-negativnih bakterija. Primeri uključuju fusidinsku kiselinu, oksazolidinine (npr. linezolid), glikopeptide (npr. vankomicin), daptomicin i lantibiotike.

[0050] U jednom aspektu, jedinjenje koje u suštini nema nikakvu aktivnost protiv Gramnegativnih bakterija može imati izmerenu vrednost MIC u odnosu na Gram-negativne bakterije koja je veća od 32, više od 64, više od 128, više od 256 mikrograma/mL.

[0051] MIC vrednosti za određeni agens se mogu odrediti korišćenjem tehnika koje su prikazane kao primer u ovoj prijavi.

[0052] U normalnim okolnostima takvi agensi nisu nužno pogodni za upotrebu protiv Gramnegativnih bakterija zbog njihove relativno slabe sposobnosti da pređu spoljašnju membranu Gram-negativnih bakterijskih ćelija. Kao što je prethodno objašnjeno, kada se koriste zajedno sa jedinjenjem formule (I) ili (II), takvi agensi su pogodni za upotrebu.

[0053] U jednom aspektu, aktivni agens može da se izabere iz grupe koju čine rifampicin (rifampin), rifabutin, rifalazil, rifapentin, rifaksimin, aztreonam, oksacilin, novobiocin, fusidinska kiselina, azitromicin, ciprofloksacin, meropenem, tigepiricicicin i klappericicin. i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i oblici prolekova.

[0054] U jednom aspektu, aktivni agens može biti izabran iz grupe koju čine rifampicin,

1

fusidinska kiselina, novobiocin, oksacilin, azitromicin, aztreonam, meropenem, tigeciklin, ciprofloksacin i vankomicin.

[0055] U jednom aspektu, aktivni agens može biti izabran iz grupe koju čine rifampicin, fusidna kiselina, novobiocin, oksacilin, azitromicin, aztreonam, meropenem, tigeciklin i ciprofloksacin.

[0056] U jednom aspektu, drugi agens se bira iz sledećih klasa agensa:

Porodica rifampicina, uključujući rifampicin, rifabutin, rifalazil, rifapentin i rifaksimin;

Porodica oksacilina, uključujući oksacilin, meticilin, ampicilin, kloksacilin, karbenicilin, piperacilin, trikarcilin, flukloksacilin i nafcilin;

Porodica azitromicina, uključujući azitromicin, klaritromicin, eritromicin, telitromicin, cetromicin i solitromicin;

Porodica Aztreonam, uključujući aztreonam i BAL30072

Porodica meropenema, uključujući meropenem, doripenem, imipenem, ertapenem, biapenem, tomopenem i panipenem;

Familija tigeciklina, uključujući tigeciklin, omadaciklin, eravaciklin, doksiciklin i minociklin; Porodica ciprofloksacina, uključujući ciprofloksacin, levofloksacin, moksifloksacin i deiafioksacin;

Fusidinska kiselina;

Novobiocin;

Porodica vankomicina, uključujući vankomicin, teihoplanin, telavancin, dalbavancin, oritavancin, na primer uključujući teihoplanin, telavancin, dalbavancin i oritavancin, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati.

[0057] Kao dodatak ili kao alternativa gore navedenim drugim agensima, drugi agens se može izabrati iz sledećih klasa agenasa:

hloramfenikol;

klindamicin;

Porodica oksazolidinona uključujući linezolid, torezolid i radezolid;

Porodica aminoglikozida uključujući amikacin, arbekacin, gentamicin, kanamicin, neomicin, netilmicin, paromomicin, streptomicin, tobramicin, apramicin, etimicin i plazomicin;

Daptomicin;

Sinercid;

Porodica pleuromutilina, uključujući retapamulin i BC-3781;

Porodica lantibiotika, uključujući nizin, mersacidin, aktagardin, deoksiaktagardin B, NVB302, NVB333, Mu1140 i mikrobisporicin;

Porodica cefalosporina, uključujući ceftarolin, ceftobiprol, ceftriakson, ceftolozon, cefepim, cefuroksim, cefpodoksim, cefdinir, cefiksim, cefotaksim i ceftazidim;

Sulbactam; i

sulopenem,

i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati

[0058] Pronalazači predmetnog pronalaska su otkrili da se polimiksinska jedinjenja formule (I) i (II) mogu koristiti zajedno sa određenim jedinjenjima iz porodice rifamicina za lečenje mikrobnih infekcija. Porodica rifamicina uključuje izolate rifamicina A, B, C, D, E, S i SV, i sintetički derivatizovane verzije ovih jedinjenja, kao što su rifampicin (rifampin), rifabutin, rifalazil, rifapentin i rifaksimin, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvate.

[0059] U jednom aspektu, aktivni agens je rifampicin (rifampin) i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i oblici prolekova.

[0060] Ovi pronalazači su otkrili da se polimiksinska jedinjenja formule (I) i (II) mogu koristiti zajedno sa određenim jedinjenjima iz porodice meropenema za lečenje mikrobnih infekcija.

[0061] U jednom aspektu, porodica meropenema uključuje meropenem, doripenem, imipenem, ertapenem, biapenem, tomopenem i panipenem, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvate.

[0062] Jedinjenja formule (II) se takođe mogu koristiti zajedno sa drugim gore navedenim agensima. Jedinjenja formule (II) mogu se dodatno koristiti zajedno sa drugim agensima kao što su vankomicin, fosfomicin, rifamicin, beta-laktam (kao što je cefalosporin ili karbapenem), aminoglikozid, makrolid, tetracilin, lipopeptid i /ili oksazolidinon.

[0063] U jednom aspektu, jedinjenja formule (II) mogu se dodatno koristiti zajedno sa vankomicinom ili fosfomicinom.

[0064] Alternativno, drugi agens nije vankomicin, fosfomicin, rifamicin, beta-laktam (kao što je cefalosporin ili karbapenem), aminoglikozid, makrolid, tetracilin, lipopeptid, oksazolidinon i/ili antiinflamatorno sredstvo kao što je npr. steroid.

[0065] Drugi agens se može koristiti zajedno sa drugim agensom, na primer sredstvom koje ograničava ili sprečava razgradnju drugog agensa in vivo. Na primer, gde drugi agens ima βlaktamsku funkcionalnost, inhibitor enzima se može koristiti sa drugim agensom da inhibira dejstvo β-laktamaze. U drugom primeru, β-laktamski antibiotik kao što je imipenem može se koristiti zajedno sa inhibitorom dehidropeptidaze, kao što je cilastatin, da bi se sprečila degradacija β-laktamskog antibiotika u bubrezima.

[0066] Drugo sredstvo se opciono može koristiti zajedno sa antiinflamatornim sredstvom kao što je steroid.

Polimiksinska jedinjenja formule (I) i (II)

[0067] Jedinjenja pronalaska formule (I) i (II) su N terminalni derivati polimiksinske serije jedinjenja. Jezgro jedinjenja pronalaska je deacilirana verzija polimiksinskog jedinjenja ili nonapeptidna verzija polimiksinskog jedinjenja, kao što je deacilovani polimiksin B nonapeptid (PMBN) ili deacilovani kolistin.

[0068] Jedinjenje formule (I) je stoga predstavljeno:

gde:

-X-predstavlja -C(O)-, -NHC(O)-, -OC(O)-, -CH2- ili SO2-; i

-R<1>

zajedno sa karbonil grupom i azotom alfa za ugljenik za koji je vezan, je ostatak fenilalanina, leucina ili valina;

-R<2>

zajedno sa karbonil grupom i azotom alfa za ugljenik za koji je vezan, je leucin, izo-leucin, fenilalanin, treonin, valin ili nor-valinski ostatak;

-R<3>

zajedno sa karbonil grupom i azotom alfa za ugljenik za koji je vezan, je ostatak treonina ili leucina;

-R<4>

je C1-6alkil supstituisan sa jednom hidroksil grupom ili jednom amino grupom;

1

-A-je kovalentna veza ili amino kiselina, kao što je a-amino kiselina;

-R<5>

je G-L<2>-L<1>-,

- G se bira između:

C3-10cikloalkil,

C2-12alkil,

C5-12aril,

- L<1>- je kovalentna veza, C1-12alkilen ili C2-12heteroalkilen,

- L<2>- je kovalentna veza ili C4-10heterociklilen,

s tim što je -L<1>- nije C1-12alkilen kada je -G C2-12alkil,

i G-L<2>-L<1>- zamenjuje se sa:

(i) jednom, dve ili tri hidroksilne grupe, ili

(ii) jednom, dve ili tri grupe -NR<6>R<7>, ili

(iii) jednom ili dve grupe -NR<6>R<7>i jedna, dve ili tri hidroksilne grupe,

s tim da su (i), (ii) i (iii) opcioni supstituenti kada -L<1>- je C2-12heteroalkilen koji sadrži azot i/ili -L<2>- je C koji sadrži azot4-10heterociklilen,

ili -R<5>je D-L<1>-, gde je -D C4-10heterociklil i -L<1>- je kao što je gore definisano, i D-L<1>-zamenjuje se sa:

(i) jednom, dve ili tri hidroksilne grupe, ili

(ii) jednom, dve ili tri grupe -NR<6>R<7>, ili

(iii) jednom ili dve grupe -NR<6>R<7>i jedna, dve ili tri hidroksilne grupe,

s tim da su (i), (ii) i (iii) opcioni supstituenti kada -L<1>- je C2-12heteroalkilen koji sadrži azot i/ili -D je C4-10heterociklil koji sadrži azot,

svaki -R<6>je nezavisno vodonik ili C1-4alkil;

svaki -R<7>je nezavisno vodonik ili C1-4alkil;

ili -NR<6>R<7>je guanidin grupa; ili

kada je -G C3-10cikloalkil ili C5-12aril, -R<6>i -R<7>zajedno sa atomom azota formiraju C4-10heterocikl; i sa

i gde je aril grupa prisutna u -R<5>to je nezavisno opciono supstituisan jedan ili više supstituenata izabranih od -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, halo, -CN, -NO2, -CF3,opciono -C(O)R<10>, -NR<10>C(O)R<10>, -OCF3, -CON(R<10>)2, -COOR<9>, -OCOR<10>, -NR<10>COOR<10>, -OCON(R<10>)2, -NR<10>CON(R<10>)2, -OR<9>, -SR<9>, -NR<10>SO2R<10>, -SO2N(R<10>)2i SO2R<10>gde je svaki -R<9>je nezavisno -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil i svaki -R<10>je nezavisno -H ili -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil;

i gde je alkil, cikloalkil ili heterociklil grupa prisutna u -R<5>on je nezavisno opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih od -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, halo, -CN, -NO2, -CF3, -C(O)R<10>, -NR<10>C(O)R<10>, -OCF3, -CON(R<10>)2, -COOR<9>, -OCOR<10>, -NR<10>COOR<10>, -OCON(R<10>)2, -NR<10>CON(R<10>)2, -OR<9>, -SR<9>, -NR<10>SO2R<10>, -SO2N(R<10>)2i SO2R<10>gde je svaki -R<9>je nezavisno -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil i svaki -R<10>je nezavisno -H ili -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, osim što alkil nije supstituisan sa alkilom; -R<8>je vodonik ili metil.

[0069] Kao što je ovde opisano, u jednom aspektu, jedinjenja formule (I) ne obuhvataju deacilovana jedinjenja polimiksina, i ne obuhvataju derivate polimiksina opisane u Katsuma et al. (Chem. Pharm. Bull.2009, 57, 332).

[0070] Jedinjenja formule (II) su jedinjenja uključujući jedinjenja formule (IIa), (IIb), (IIc) (IId), jedinjenje (IIe) i (IIg). U jednom aspektu, jedinjenja formule (II) su jedinjenja formule (IIa).

[0071] Jedinjenja formule (IIa) su jedinjenja gde -R<5>je G-L<2>-L<1>-, i

- G je C5-12aril,

- L<1>- je kovalentna veza, C1-12alkilen ili C2-12heteroalkilen,

- L<2>- je kovalentna veza ili C4-10heterociklilen,

- R<5>se zamenjuje sa:

(i) jednom, dve ili tri hidroksilne grupe, ili

(ii) jednom, dve ili tri grupe -NR<6>R<7>, ili

(iii) jednomili dve grupe -NR<6>R<7>i jedna, dve ili tri hidroksilne grupe, s tim da su (i), (ii) i (iii) opcioni supstituenti kada -L<1>- je C2-12heteroalkilen koji sadrži azot i/ili -L<2>- je C4-10heterociklilen koji sadrži azot,

a aril grupa je nezavisno opciono supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih od -C1-4alkil, halo, -CN, -NO2, -CF3, -NR<10>C(O)R<10>, -OCF3, -CON(R<10>)2, -COOR<9>,-OCOR<10>, -NR<10>COOR<10>, -OCON(R<10>)2, -NR<10>CON(R<10>)2, -OR<9>, -SR<9>, -NR<10>SO2R<10>, -SO2N(R<10>)2i SO2R<10>gde je svaki -R<9>je nezavisno -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil i svaki -R<10>je nezavisno -H ili -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil;

i R<1>, R<2>, R<3>, R<4>, R<6>, R<7>, R<8>imaju ista značenja kao jedinjenja formule (I) iznad. Dodatno -A- i -X- imaju ista značenja kao jedinjenja formule (I) iznad. Opciono, -R<5>-X- zajedno nisu Phe, His, Trp ili Tir, kao što su L-Phe, L-His, L-Trp i L-Tir, na primer kada je -A- kovalentna veza. Opciono, -R<5>-X- zajedno nisu Phe i Trp, kao što su L-Phe i L-Trp, na primer kada je -

1

A- kovalentna veza.

[0072] Jedinjenja formule (IIb) su jedinjenja gde -R<5>je G-L<2>-L<1>-, i -G je C3-10cikloalkil, - L<1>- je kovalentna veza, C1-12alkilen ili C2-10heteroalkilen,

- L<2>- je kovalentna veza ili C4-12heterociklilen,

s tim što je -L<2>- je kovalentna veza samo kada -L<1>- je C2-10heteroalkilen,

- R<5>se zamenjuje sa:

(i) jednom, dve ili tri hidroksilne grupe, ili

(ii) jednom, dve ili tri grupe -NR<6>R<7>, ili

(iii) jednomili dve grupe -NR<6>R<7>i jedna, dve ili tri hidroksilne grupe, s tim da su (i), (ii) i (iii) opcioni supstituenti kada -L<1>- je C2-12heteroalkilen koji sadrži azot i/ili -L<2>- je C4-10heterociklilen koji sadrži azot, i cikloalkil grupa je nezavisno opciono supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih od -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, halo, -CN, -NO2, -CF3, -C(O)R<10>, -NR<10>C(O)R<10>, -OCF3, -CON(R<10>)2, -COOR<9>, -OCOR<10>, -NR<10>COOR<10>, -OCON(R<10>)2, -NR<10>CON(R<10>)2, -OR<9>, -SR<9>, -NR<10>SO2R<10>, -SO2N(R<10>)2i SO2R<10>gde je svaki -R<9>je nezavisno -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil i svaki -R<10>je nezavisno -H ili -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, osim što alkil nije supstituisan sa alkilom,

i R<1>, R<2>, R<3>, R<4>, R<6>, R<7>, R<8>imaju ista značenja kao jedinjenja formule (I) iznad. Dodatno -A- i -X- imaju ista značenja kao jedinjenja formule (I) iznad.

[0073] Jedinjenja formule (IIc) su jedinjenja gde -R<5>je G-L<2>-L<1>-, gde je -G C3-10cikloalkil ili C2-12alkil,

- L<1>- je kovalentna veza ili C1-12alkilen,

- L<2>- je kovalentna veza,

s tim što je -L<1>- nije C1-12alkilen kada je -G C2-12alkil,

- R<5>se zamenjuje sa:

(i) dve ili tri grupe -NR<6>R<7>, ili

(ii) dve grupe -NR<6>R<7>i jednu, dve ili tri hidroksilne grupe;

a alkil ili cikloalkil grupa je nezavisno opciono supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih od -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, halo, -CN, -NO2, -CF3, -C(O)R<10>, -NR<10>C(O)R<10>, -OCF3, -CON(R<10>)2, -COOR<9>, -OCOR<10>, -NR<10>COOR<10>, -OCON(R<10>)2, -NR<10>CON(R<10>)2, -OR<9>, -SR<9>, -NR<10>SO2R<10>, -SO2N(R<10>)2i SO2R<10>gde je svaki -R<9>je nezavisno -C1-10alkil, kao što je -C1-4

1

alkil i svaki -R<10>je nezavisno -H ili -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, osim što alkil nije supstituisan sa alkilom,

i R<1>, R<2>, R<3>, R<4>, R<6>, R<7>, R<8>imaju ista značenja kao jedinjenja formule (I) iznad. Dodatno -A- i -X- imaju ista značenja kao jedinjenja formule (I) iznad. Opciono, -R<5>-X- zajedno nisu Lis, Dap, Arg, Dab i Drg, kao što su L-Lis, L-Dap, L-Arg, L-Dab i L-Drg, na primer gde je -A- kovalentna veza .

[0074] Jedinjenja formule (IId) su jedinjenja gde -R<5>je D-L<1>-, gde je D-L<1>- zamenjuje se sa:

(i) jednom, dve ili tri hidroksilne grupe, ili

(ii) jednom, dve ili tri grupe -NR<6>R<7>, ili

(iii) jednom ili dve grupe -NR<6>R<7>i jednu, dve ili tri hidroksilne grupe;

- L<1>- je kovalentna veza, C1-12alkilen ili C2-12heteroalkilen,

s tim da su (i), (ii) i (iii) opcioni supstituenti kada -L<1>- je C koji sadrži azot2-12heteroalkilen,

i heterociklil grupa je nezavisno opciono supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih od -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, halo, -CN, -NO2, -CF3, -C(O)R<10>, -NR<10>C(O)R<10>, -OCF3, -CON(R<10>)2, -COOR<9>, -OCOR<10>, -NR<10>COOR<10>, -OCON(R<10>)2, -NR<10>CON(R<10>)2, -OR<9>, -SR<9>, -NR<10>SO2R<10>, -SO2N(R<10>)2i SO2R<10>gde je svaki -R<9>je nezavisno -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil i svaki -R<10>je nezavisno -H ili -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, osim što alkil nije supstituisan sa alkilom,

i R<1>, R<2>, R<3>, R<4>, R<6>, R<7>, R<8>imaju ista značenja kao jedinjenja formule (I) iznad. Dodatno -A-, -D i -X- imaju ista značenja kao jedinjenja formule (I) iznad.

[0075] Jedinjenja formule (IIe) su jedinjenja gde je -A- amino kiselina, kao što je α-amino kiselina, a R<1>, R<2>, R<3>, R<4>, R<5>, R<6>, R<7>, R<8>i -X- imaju ista značenja kao jedinjenja formule (I) iznad. Primećeno je da su jedinjenja opisana od Katsuma et al. (Chem. Pharm. Bull.2009, 57, 332) dekapeptidi polimiksina B. Međutim, ova jedinjenja nemaju modifikacije N terminusa koje su prisutne u jedinjenjima formule (IIe).

[0076] Jedinjenja formule (IIg) su jedinjenja gde -R<4>je C1alkil ili C3-6alkil supstituisan sa hidroksil jednom amino grupom. Dakle, -R<4>nije -CH2CH2NH2u (S)-konfiguraciji oko ugljenika za koji je vezan. U ovoj realizaciji, -A-, R<1>, R<2>, R<3>, R<5>, R<6>, R<7>, R<8>i -X- imaju ista značenja kao jedinjenja formule (I) iznad.

[0077] U jednom aspektu, -R<4>je C1alkil supstituisan sa jednom hidroksil grupom ili jednom amino grupom. U jednom aspektu, -R<4>, zajedno sa karbonil grupom i azotom alfa za ugljenik

1

za koji je vezan, je Dap (α,β-diaminopropionska kiselina), kao što je (S)-Dap.

[0078] Jedinjenja formule (IIg) su jedinjenja koja sa polimiksinom B ne dele aminokiselinski ostatak na poziciji 3. Rad Sato et al. i Katsuma et al., na primer, ograničen je na opis jedinjenja polimiksina B i kolistina, koja poseduju (S)-Dab ostatak na poziciji 3.

[0079] WO 2012/168820 opisuje polimiksinska jedinjenja gde amino kiselina na poziciji 3 ima izmenjen bočni lanac u poređenju sa polimiksinom B. WO 2012/168820 ne opisuje jedinjenja koja imaju N terminalne grupe (tj. grupu -X-R<5>) koji su opisani u ovom slučaju.

[0080] Gde je A kovalentna veza, R<1>(zajedno sa povezanim grupama) je D-fenilalanin, R<2>(zajedno sa povezanim grupama) je L-leucin, R<3>(zajedno sa povezanim grupama) je L-treonin, R<4>(zajedno sa povezanim grupama) je L-α,γ-diaminobuterna kiselina; i R<8>je metil (i zajedno sa povezanim grupama je L-treonin), jedinjenje je derivat polimiksin nonapeptida koji ima aminokiseline 2-10 polimiksina B (polimiksin B nonapeptid). Dalje, gde je A L-α,γdiaminobuterna kiselina, jedinjenje je derivat polimiksina koji ima aminokiseline 1-10 polimiksina B.

[0081] Slično, gde je A kovalentna veza, R<1>(zajedno sa povezanim grupama) je D-leucin, R<2>(zajedno sa povezanim grupama) je L-leucin, R<3>(zajedno sa povezanim grupama) je L-treonin, R<4>(zajedno sa povezanim grupama) je L-α,γ-diaminobuterna kiselina; i R<8>je metil (i zajedno sa povezanim grupama je L-treonin), jedinjenje je polimiksin nonapeptid koji ima aminokiseline 2-10 polimiksina E (kolistin nonapetid). Dalje, gde je A L-α,γ-diaminobuterna kiselina, jedinjenje je derivat polimiksina koji ima aminokiseline 1-10 polimiksina E (kolistin).

Polimiksin B

[0082] Polimiksin B nonapeptid ima strukturu prikazanu u nastavku:

gde su pozicije 2, 4 i 10 naznačene (sa referencom na sistem numerisanja koji se koristi za polimiksin B dekapeptid), a aminokiselinski ostaci su u L-konfiguraciji, osim ako nije naznačeno.

[0083] Jedinjenja pronalaska su derivati polimiksina B nonapeptida, gde (i) N terminalna amino grupa, -NH2, je zamenjen grupom -NH-A-X-R<5>ili -NH-X-R<15>kao što je ovde opisano i opciono (ii) aminokiselinski ostaci na 2, 3, 6, 7 i 10 pozicijama su supstituisani sa drugim amino kiselinskim ostatkom.

1

[0084] Radi pogodnosti, jedinjenja pronalaska su predstavljena formulom (I) ili (II) gde su aminokiseline na pozicijama 2, 3, 6, 7 ili 10 određene prirodom grupa R<8>, R<4>, R<1>, R<2>i R<3>redom. Jedinjenja pronalaska, koja uključuju varijante opisane gore, su biološki aktivna.

[0085] Varijanta jedinjenja je jedinjenje u kome je jedna ili više, na primer, od 1 do 5, kao što su 1, 2, 3 ili 4 amino kiseline, supstituisane drugom amino kiselinom. Aminokiselina može biti na poziciji izabranoj između pozicija 2, 3, 6, 7 ili 10 (odnosi se na numerisanje ostataka koji se koriste u polimiksinu B). Zamena može biti za drugu aminokiselinu ili za stereoizomer.

-R<1>

[0086] -R<1>pozicija odgovara aminokiselinskoj poziciji 6 u jedinjenjima polimiksina.

[0087] U jednom aspektu -R<1>zajedno sa karbonil grupom i azotom alfa za ugljenik za koji je vezan je ostatak fenilalanina, na primer D-fenilalanin, ili leucinski ostatak, kao što je ostatak D-ieucina.

-R<2>

[0088] -R<2>pozicija odgovara aminokiselinskoj poziciji 7 u jedinjenjima polimiksina.

[0089] U jednom aspektu -R<2>zajedno sa karbonil grupom i azotom alfa za ugljenik za koji je vezan je leucin ili treonin ostatak, kao što je L-leucin ili L-treonin.

-R<3>

[0090] -R<3>pozicija odgovara aminokiselinskoj poziciji 10 u jedinjenjima polimiksina.

[0091] U jednom aspektu -R<3>zajedno sa karbonil grupom i azotom alfa za ugljenik za koji je vezan je ostatak treonina, kao što je L-treonin.

-R<4>

[0092] -R<4>pozicija odgovara bočnom lancu aminokiselinske pozicije 3 u polimiksinskim jedinjenjima.

[0093] U jedinjenjima formule (IIg) -R<4>je C1alkil supstituisan sa jednom amino grupom ili C3-5alkil supstituisan sa jednom amino grupom.

1

[0094] Grupa -R<4>zajedno sa karbonil grupom i azotom alfa u odnosu na ugljenik za koji je vezan, je aminokiselinski ostatak koji ima bočni lanac koji sadrži amino- ili hidroksil.

[0095] U jednom aspektu, -R<4>je C1-4alkil, koji ima jedan amino ili jedan hidroksil supstituent.

[0096] U jednom aspektu, -R<4>ima jedan amino supstituent.

[0097] U jednom aspektu, -R<4>ima jedan hidroksilni supstituent.

[0098] Amino grupa može biti -NH2, -NHMe ili -NHEt. U jednom aspektu, amino grupa je -NH2.

[0099] U jednom aspektu, -R<4>zajedno sa karbonilnom grupom i azotom alfa u odnosu na ugljenik za koji je vezan, je α,γ-diaminobuterna kiselina (Dab), ostatak serina, ostatak treonina, ostatak lizina, ornitinski ostatak ili α,β-diaminopropionska kiselina kiselina (Dap).

[0100] U jednom aspektu, -R<4>zajedno sa karbonilnom grupom i azotom alfa u odnosu na ugljenik za koji je vezan, je α,γ-diaminobuterna kiselina (Dab), ostatak serina, lizinski ostatak ili α,β-diaminopropionska kiselina (Dap).

[0101] U jednom aspektu, -R<4>zajedno sa karbonilnom grupom i azotom alfa u odnosu na ugljenik za koji je vezan, je α,γ-diaminobuterna kiselina (Dab) ili α,β-diaminopropionska kiselina (Dap), kao što je L-Dab ili L-Dap.

[0102] U jednom aspektu, -R<4>zajedno sa karbonilnom grupom i azotom alfa u odnosu na ugljenik za koji je vezan, je α,γ-diaminobuterna kiselina (Dab) ili α,β-diaminopropionska kiselina (Dap), kao što je L-Dab ili L-Dap.

[0103] U jednom aspektu, -R<4>zajedno sa karbonil grupom i azotom alfa u odnosu na ugljenik za koji je vezan, je lizinski ostatak, kao što je L-Lis.

[0104] U jednom aspektu, -R<4>zajedno sa karbonil grupom i azotom alfa u odnosu na ugljenik za koji je vezan, je Dab, kao što je L-Dab.

[0105] Jedinjenja pronalaska gde -R<4>je Dab bočni lanac se mogu dobiti iz jedinjenja kao što je polimiksin B. Jedinjenja gde -R<4>je Dap bočni lanac može biti pripremljen korišćenjem postupaka opisanih u WO 2012/168820. Jedinjenja gde je -R<4>je bočni lanac serina može biti pripremljen korišćenjem postupaka koje je opisao Vaara et al. (vidi, na primer, Antimicrob. Agents Chemother. 2008, 52, 3229).

-R<8>

[0106] Ostatak amino kiseline uključujući grupu -R<8>odgovara poziciji 2 u polimiksinima.

[0107] U jednom aspektu, -R<8>je metil. Dobijena amino kiselina je stoga Thr.

2

[0108] U jednom aspektu, -R<8>je H. Dobijena amino kiselina je prema tome Ser.

-X-

[0109] Grupa -X- može biti izabrana između -C(O)-, -NHC(O)-, -OC(O)-, -CH2- i SO2-.

[0110] U jednom aspektu -X- je izabran između -C(O)-, -SO2- i -CH2-.

[0111] U jednom aspektu -X- je -C(O)-.

[0112] U jednom aspektu -X- je -SO2-.

[0113] U jednom aspektu -X- je -CH2-.

[0114] Desna strana grupe -X- je tačka vezivanja za NH, amino terminus amino kiseline na poziciji 2 ili -A-, gde je prisutan. Leva strana grupe -X- je tačka vezivanja za -R<5>.

[0115] U jedinjenjima formule (IIe), -A- je amino kiselina. Za druga jedinjenja od -A-formula (I) ili (II) -A- je kovalentna veza ili amino kiselina.

[0116] U jednom aspektu, -A- je kovalentna veza. Takva jedinjenja se nazivaju nonapeptidi i zasnovana su na, na primer, nonapeptidnim oblicima polimiksina B, E i M (na primer, koji imaju strukturu prikazanu gore u odnosu na polimiksin B). Nonapeptidni oblici polimiksina B i E su dobro poznati u tehnici. Jedinjenja pronalaska gde je -A- kovalentna veza mogu se dobiti iz nonapeptidnih oblika odgovarajućom derivatizacijom N terminala.

[0117] U jednom aspektu, -A- je amino kiselina. Amino kiselina može biti α-amino kiselina. Takva jedinjenja se nazivaju dekapeptidima i zasnivaju se na, na primer, deaciliranim dekapeptidnim oblicima polimiksina B, E i M. Deacilovani oblici polimiksina B, E i M su dobro poznati u tehnici. Alternativni dekapeptidi se mogu pripremiti iz nonapeptida ili heptapeptida odgovarajućim kuplovanjem amino kiseline/kiselina na N terminus nonapeptida ili heptapeptida. Primećeno je da bi deacilovani oblik Polimiksin M izgledao identičan onom koji je Cubist prijavio za Polimiksin A (vidi WO 2010/075416 i US 8,415,307).

[0118] U jednom aspektu, -A- je α-amino kiselina.

[0119] α-amino kiselina uključuje proteinogene („prirodne”) α-amino kiseline, opciono zajedno sa drugim α-amino kiselinama.

[0120] U jednom aspektu, -A- je amino kiselina izabrana iz grupe koju čine Lis, Arg, Dap, Ser, Thr, Ile, Tir, His, Phe, Pro, Trp, Leu, Ala, Dab (α,γ-diaminobutirna kiselina kiselina), Dap (α,β-diaminopropionska kiselina), Dgp (α,β-diguanidinopropanoil), ornitin i nor-valin, uključujući njihove L- i D-oblike.

[0121] U jednom aspektu, -A- je amino kiselina izabrana iz grupe koju čine Dab, Pro, Dap, Gli, Ser, His, Phe, Arg, Tir i Leu, uključujući njihove L- i D-oblike.

[0122] U jednom aspektu, -A- je Dα-amino kiselina.

[0123] U jednom aspektu, -A- je L a-amino kiselina.

[0124] Primeri α-aminokiselina koje nisu proteinogene su one aminokiseline nastale posttranslacionom modifikacijom ili na drugi način. Primeri uključuju Dab, Dap, Dgp (α,βdiguanidinopropanoil), ornitin i nor-valin. Takođe su uključene aminokiseline kao što je amino kiselina prisutna u primeru jedinjenja A28. Amino kiselina ima bočni lanac piperidina koji je a dragulj di-supstituent za α-ugljenik. Tako je α-ugljenik atom prstena u piperidinskom prstenu. Ovo je ciklični analog Dab-a.

[0125] U jednom aspektu, -A- je β-amino kiselina.

[0126] Jedinjenja pronalaska gde je -A- amino kiselina mogu se dobiti od deacilovanog nonapeptida, kao što je PMBN. Grupa amino kiselina se može dodati jednostavnim tehnikama spajanja amino kiselina. N terminus rezultujućeg jedinjenja može biti derivatizovan (nakon uklanjanja bilo koje N terminalne zaštitne grupe, gde je prikladno) da bi se obezbedio potreban R<5>-X- terminal. Alternativno, N terminus aminokiselinske grupe može biti prethodno derivisan pre koraka kuplovanja amino kiselina. Tako dodavanje derivatizovane amino kiseline deacilovanom nonapeptidu direktno daje potrebnu N terminalnu grupu.

[0127] U jednom aspektu, -A- je izabran između Lis, Arg, Dap, Ser, Phe, Trp, Leu, Ala, Dab, Dap, ornitina ili nor-valina, uključujući njihove L- i D-oblike.

[0128] U jednom aspektu, -A- je izabran između Thr, Ser, Lis, Dab ili Dap, na primer L-Thr, L-Ser, L-Lis, L-Dab ili L-Dap.

[0129] U jednom aspektu, -A- je Dab, kao što je L-Dab.

[0130] U alternativnom izvođenju, gde je -A- amino kiselina, to nije Dab, na primer nije L-Dab.

-X- i -R<5>

[0131] Jedinjenja formule (I) ne obuhvataju deacilirane verzije polimiksina B (deacilpolimiksina B - DAPB), D, E (deacilkolistina - DAC) ili M, ili cirkulina A. Jedinjenja formule (I) ne obuhvataju nonapeptid verzije Polimiksina B (PMBN), D, E ili M, ili Cirkulina A.

[0132] U jednom aspektu, -X- i -R<5>zajedno nisu α-aminokiselinski ostatak, na primer kada je -A- kovalentna veza. Ostatak a-amino kiseline je grupa u kojoj je -X- -C(O)- i -R<5>ima grupu -NR<6>R<7>(kao što je -NH2) kao supstituent za atom ugljenika koji je α za grupu -X-.

[0133] U jednom aspektu, -X- i -R<5>zajedno nisu ostaci Thr, Ser, α,γ-diaminobuterne kiseline (Dab) ili α,β-diaminopropionske kiseline (Dap).

[0134] U jednom aspektu, na primer gde je jezgro jedinjenja formule (I) polimiksin B, X i R<5>zajedno nisu Lis, Arg, Dap, Ser, Phe, Trp, Leu ili Ala ostaci.

[0135] U jednom aspektu, -X- i -R<5>zajedno nisu ostaci Lis, Arg, Dap, Ser, Phe, Trp, Leu, Ala α,γ-diaminobuterne kiseline (Dab) ili α,β-diaminopropionske kiseline (Dap).

[0136] U jednom aspektu, -X- i -R<5>zajedno nisu Ala, Ser, Thr, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tir, Trp, His, Lis ili Arg ostaci.

[0137] U jednom aspektu, -X- i -R<5>zajedno nisu ostaci Ala, Ser, Thr, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Tir, Trp, His, Lis, Arg,α,γ-diaminobuterna kiselina (Dab) ili α,β-diaminopropionska kiselina (Dap).

[0138] U jednom aspektu, -X- i -R<5>zajedno nisu α-amino kiselina, na primer D ili Lα-amino kiselina, na primer Lα-amino kiselina.

[0139] U jednom aspektu, -R<5>nije diaminofenil, kao što je 3,5-diaminofenil, na primer kada je -X- -C(O)-.

-R<5>

[0140] U jednom aspektu, -R<5>je G-L<2>-L<1>-.

- R<5>može biti G-L<1>-, na primer gde je -L<2>- je kovalentna veza.

- R<5>može biti G-L<2>-, na primer gde je -L<1>- je kovalentna veza.

- R<5>može biti -G, na primer gde je -L1- i L<2>- su kovalentne veze.

[0141] U jednom aspektu, -R<5>je D-L<1>-.

- R<5>može biti -D, na primer gde je -L<1>- je kovalentna veza.

[0142] U jednom aspektu, -R<5>ima jedan, dva ili tri hidroksil i/ili -NR<6>R<7>grupe. Ove grupe mogu biti obezbeđene na bilo kojoj grupi unutar -R<5>, uključujući -G, -D, -L1- i L<2>-. U jednom aspektu, ove grupe su obezbeđene kao supstituenti za -G, -D i -L<1>-.

[0143] Primećeno je da hidroksil i -NR<6>R<7>grupe su opciono supstituenti za grupu D-L<1>-. Gde su hidroksil i -NR<6>R<7>supstituenti diskutovani u nastavku, oni se mogu nazvati supstituentima za -R<5>.

[0144] U jednom aspektu, jedan, dva ili tri hidroksil i/ili -NR<6>R<7>grupe su opcioni supstituenti za -R<5>. Ovo može biti slučaj kada -L<1>- je C koji sadrži azot2-12heteroalkilen, i/ili -L<2>- je C

2

koji sadrži azot4-10heterociklilen, i/ili -D je C koji sadrži azot4-10heterociklil.

[0145] U jednom aspektu, -R<5>ima najmanje 5, najmanje 6, najmanje 7 ili najmanje 8 prisutnih atoma ugljenika. U jednom aspektu, -R<5>ima 1, 2 ili 3 prisutna atoma azota. U jednom aspektu, atom azota je osnovni atom azota. Atom azota može biti prisutan kao NH.

[0146] U jednom aspektu, -R<5>ima 1, 2 ili 3 prisutna atoma kiseonika.

[0147] U jednom aspektu, -R<5>nije aminocikloheksil, na primer kada je -A- kovalentna veza, -X-je -C(O)- i -R<1>, -R<2>i -R<3>su aminokiselinski ostaci polimiksina B.

[0148] Okimura et al. opisuju polimiksin B nonapeptidna jedinjenja koja imaju aminocikloheksil grupe na N terminalu. Ova jedinjenja nisu opisana za upotrebu u kombinaciji sa aktivnim agensom,

[0149] U jednom aspektu, -R<5>nije aminocikloheksil grupa izabrana iz grupa koje se sastoje od cis-2-aminocikloheksil, trans-2-aminocikloheksil, cis-3-aminocikloheksil, cis-4-aminocilkoheksil, i trans-4-aminocilkoheksil. Dodatno ili alternativno, -R<5>nije trans-3-aminocikloheksil.

Linker: -L<2>-L<1>- i L<1>-

[0150] U okviru grupa G-L<2>-L<1>- i D-L<1>-, -L<2>-L<1>- i L<1>- mogu se smatrati linkerima koji povezuju grupu -X- sa -G ili -D. Linker može biti odsutan, na primer gde je -L<1>- i L<2>-su kovalentne veze.

-L<2>-L<1>- u G-L<2>-L<1>-

[0151] U jednom aspektu, -L<1>- i L<2>- su obe kovalentne veze. Dakle, grupa -G je direktno povezana sa -X-. Ovde, hidroksilne ili amino grupe (kao što su jedan, dva ili tri hidroksil i/ili -NR<6>R<7>grupe) moraju biti prisutni na -G.

[0152] Gde -L<1>- je C2-12heteroalkilen koji sadrži azot i/ili -L<2>- je C4-10heterociklilen koji sadrži azot, opciono je za G-L<2>-L<1>- da bude supstituisan sa jednim, dva ili tri hidroksil i/ili -NR<6>R<7>grupe.

-L<1>- u D-L<1>-

[0153] U jednom aspektu, -L<1>- je kovalentna veza. Dakle, grupa -D je direktno povezana sa -X-. Gde je grupa D-L<1>- je supstituisan sa hidroksil grupom ili amino grupom (kao što je jedan, dva ili tri hidroksil i/ili -NR<6>R<7>grupe), grupe moraju biti prisutne na -D.

[0154] Gde -L<1>- je C2-12heteroalkilen koji sadrži azot i/ili -D je C4-10heterociklil koji sadrži azot je opciono za D-L<1>- da bude supstituisan sa jednim, dva ili tri hidroksil i/ili -NR<6>R<7>grupe.

-L<1>--L<1>-

[0155] U jednom aspektu, -L<1>- je kovalentna veza ili C1-12alkilenska grupa.

[0156] U jednom aspektu, -L<1>- je kovalentna veza.

[0157] U jednom aspektu, -L<1>- je C1-12alkilenska grupa ili C2-12heteroalkilenska grupa.

[0158] U jednom aspektu, -L<1>- je C1-12alkilenska grupa.

[0159] U jednom aspektu, -L<1>- je C1-12alkilen, na primer C1-6, C1-4ili C1-2alkilen.

[0160] U jednom aspektu, -L<1>- je -CH2- ili -CH2CH2-.

[0161] U jednom aspektu, -L<1>- je C2-12alkilen, na primer C2-6ili C2-4alkilen.

[0162] U jednom aspektu, -L<1>- je C3-12alkilen, na primer C3-6, C4-12, C5-12ili C6-12alkilen.

[0163] Alkilenska grupa je zasićena, alifatična alkilenska grupa.

[0164] Alkilenska grupa može biti linearna ili razgranata alkilenska grupa. U jednom aspektu, alkilenska grupa je linearna.

[0165] Gde -L<1>- je alkilenska grupa i R<5>je supstituisan sa jednim, dva ili tri hidroksil i/ili -NR<6>R<7>grupe, jedan ili više supstituenata mogu biti supstituenti alkilen grupe.

[0166] U jednom aspektu, alkilen grupa ima jedan, dva ili tri supstituenta.

[0167] U jednom aspektu, alkilen grupa ima jedan ili dva supstituenta, kao što je jedan supstituent. U jednom aspektu, broj supstituenata na alkilen grupi nije veći od broja atoma ugljenika u alkilen grupi. Dakle, gde je -L<1>- je C2alkilenska grupa može biti supstituisana sa najviše dva supstituenta.

[0168] Dodatni supstituenti, gde su prisutni, mogu biti locirani na -G ili -D, gde je prikladno.

[0169] U jednom aspektu, alkilenska grupa je nesupstituisana.

[0170] Gde -L<1>- je alkilen grupa i može biti supstituisana sa cikloalkil grupom. Atom ugljenika u alkilen grupi može da formira kovalentnu vezu za atom ugljenika u prstenu grupe -G cikloalkil. Ovaj raspored je prikazan u primerima jedinjenja 10 i A28. Alternativno, cikloalkil grupa može biti gem di-supstituent za alkilensku grupu. Dakle, atom ugljenika u alkilenskoj grupi je takođe atom ugljenika u prstenu cikloalkil grupe. Ovaj raspored je prikazan u primerima jedinjenja A30 i A34.

[0171] Alternativno, ovaj poslednji raspored u jedinjenjima kao što su A30 i A34 može se

2

posmatrati kao cikloalkil grupa koja ima opcioni alkil supstituent, gde su jedan, dva ili tri hidroksila i/ili -NR<6>R<7>grupe se nalaze na opcionom alkil supstituentu.

[0172] U jednom aspektu, -L<1>- je C2-12heteroalkilen. Heteroalkilenska grupa je alkilenska grupa gde je jedan ili više, kao što su dva ili tri, ili više, atoma ugljenika zamenjeno heteroatomom odabranim od N, O i S. Subskript npr. 4 u C4odnosi se na ukupan broj atoma ugljenika i heteroatoma. Podrazumeva se da heteroatom heteroalkilenske grupe nije prikačena amino, hidroksilna ili tiol grupa.

[0173] U jednom aspektu, heteroalkilenska grupa sadrži jedan ili dva heteroatoma, na primer jedan ili dva atoma azota, kao što su jedan ili dva -NH-.

[0174] U jednom aspektu, heteroalkilenska grupa je heteroalkilenska grupa koja sadrži azot. Heteroatom može biti obezbeđen kao prekid alkilenskog lanca, npr. -CH2-NH-CH2-. Heteroatom može biti obezbeđen kao terminalna grupa za vezu sa -X-, -L<2>-, -G ili -D, na primer -CH2-CH2-NH- ili -NH-CH2-CH2-. U ovim realizacijama, heteroatom je vezan za atom ugljenika u -X-, -L<2>-, -G ili -D.

[0175] U jednom aspektu, heteroatom heteroalkilenske grupe nije kovalentno vezan za grupu -X-.

[0176] U jednom aspektu, heteroatom heteroalkilenske grupe nije kovalentno vezan za grupu -L<2>-, -G ili -D, gde su prisutni. U alternativnoj realizaciji, heteroatom heteroalkilenske grupe, kao što je -NH-, je kovalentno vezan za grupu -L<2>-, -G ili -D, gde su prisutni.

[0177] U jednom aspektu, -L<1>- je C2-12heteroalkilen, na primer C2-6, C2-4, C3-6, C3-12, C4-6ili C4-12heteroalkilen.

[0178] Heteroalkilenska grupa je zasićena, alifatična heteroalkilenska grupa.

[0179] Heteroalkilenska grupa može biti linearna ili razgranata heteroalkilenska grupa. U jednom aspektu, heteroalkilenska grupa je linearna.

[0180] U jednom aspektu, -L<1>- je -NH-CH2CH2-NH-CH2-.

[0181] U jednom aspektu, -L<1>- je -CH2-NH-CH2CH2-.

[0182] U jednom aspektu, heteroalkilenska grupa je nesupstituisana.

[0183] U jednom aspektu, heteroalkilenska grupa je supstituisana, na primer sa jednim ili dva hidroksil i/ili-NR<6>R<7>grupe, kao što je jedan hidroksil ili -NR<6>R<7>grupa. Supstituenti su obezbeđeni na atomima ugljenika unutar heteroalkilenske grupe

[0184] U jednom aspektu, broj supstituenata na heteroalkilenskoj grupi nije veći od broja atoma ugljenika u heteroalkilenskoj grupi.

[0185] Tamo gde je heteroalkilenska grupa supstituisana, supstituenti poželjno nisu obezbeđeni na atomu ugljenika koji je kovalentno vezan za heteroatom heteroalkilenske

2

grupe. Tamo gde je heteroalkilenska grupa supstituisana, supstituenti mogu biti obezbeđeni na atomu ugljenika koji nije vezan za heteroatom.

-L<2>-

[0186] U jednom aspektu, -L<2>- je kovalentna veza.

[0187] U jednom aspektu, -L<2>- je C4-10heterociklilen grupu, na primer kada -L<1>- je C1-12alkilenska grupa.

[0188] U jednom aspektu, -L<2>- je C4-7heterociklilen grupa, na primer C5-7ili C5-6heterociklilen grupa.

[0189] U jednoj realizaciji, C4-10heterociklilen sadrži jedan ili dva heteroatoma izabrana između N, S i O. Tamo gde je prisutan atom S, može biti u obliku S, S(O) ili S(O)2. Tamo gde je prisutan atom N, on može biti u obliku NH ili NR, gde je -R C1-4alkil, kao što je metil ili etil. U jednom aspektu, heterociklilen grupa je heterociklilen koji sadrži azot. Heterociklilen grupa može da sadrži jedan ili dva atoma azota. Svaki atom azota može biti opciono supstituisan sa C1-4alkil, gde je prikladno. U jednom aspektu heterociklilen grupa sadrži samo heteroatome azota.

[0190] Termin "heterociklilen" u odnosu na grupu -L<2>- odnosi se na grupu (1) koja ima jedan ili više heteroatoma (npr. N, O, S) koji čine deo sistema prstenova, pri čemu sistem prstenova sadrži jedan prsten ili dva ili više spojenih prstena, pri čemu je najmanje jedan prsten od sistem prstenova je nearomatski prsten, i (2) koji je vezan za ostatak molekula (uključujući grupe -G i -L<1>- po potrebi) preko nearomatičnih atoma u prstenu (tj. gde je svaki atom u prstenu deo nearomatičnog prstena koji je deo sistema prstena). Najmanje jedan heteroatom je obezbeđen u nearomatičnom prstenu.

[0191] Dakle, heterociklilen može biti biciklični sistem prstenova gde je jedan prsten aromatični prsten. Aromatični prsten nije prsten koji je povezan sa ostatkom molekula, kao što je gore navedeno. Primeri kondenzovanih heterociklil sistema su diskutovani u nastavku u vezi sa grupom D.

[0192] U jednom aspektu, gde heterociklilen grupa sadrži dva ili više kondenzovanih prstenova, svaki prsten je nearomatičan.

[0193] U jednom aspektu, heterociklilen grupa sadrži jedan prsten.

[0194] U jednom aspektu, heterociklilen grupa je nesupstituisana. Dakle, hidroksil i/ili -NR<6>R<7>grupe su obezbeđene na drugom mestu, po potrebi, na primer na -L<1>-, gde postoji, ili na -G ili -D. Alternativno, gde je heterociklilen grupa obezbeđena sa baznom azotnom

2

grupom, kao što je NH, hidroksil i/ili -NR<6>R<7>grupe su opcione. U odsustvu bazne azotne grupe, kao što je NH, heterociklilen grupa može biti obezbeđena sa hidroksilom i/ili -NR<6>R<7>grupa.

[0195] U jednom aspektu, heterociklilen je povezan sa -L<1>- ili -X- preko atoma ugljenika ili atoma azota, gde je prisutan, heterociklilenskog prstena.

[0196] U jednom aspektu, heterociklilen je povezan sa -G preko atoma ugljenika ili atoma azota, gde je prisutan, heterociklilenskog prstena.

[0197] U jednom aspektu, -L<2>- se bira između piperidinilena, piperazinilena i piroldinilena.

[0198] U jednom aspektu, -L<2>- se bira između piperidinil-1,4-ena, piperazinil-1,4-ena i piroldinil-1,3-ena.

[0199] Primećeno je da heterociklilen grupa ne obuhvata piridonski diradikal, kao što je 2-piridon diradikal. Takva jedinjenja se smatraju aromatičnim, s obzirom na laktim tautomerni oblik. Da ne bi bilo sumnje, dakle, -L<2>- može biti heterociklilen grupa, pod uslovom da -L<2>-nije piridon diradikal. Dakle, jedinjenje 5x od Magee at al, J. Med. Chem., 2013, 56, 5079 nije obuhvaćen formulom (I) ovog slučaja.

Lokacija hidroksila i -NR<6>R<7>supstituenata

[0200] U jednom aspektu, grupa -R<5>, kao što je G-L<2>-L<1->ili D-L<1>-, može biti supstituisan sa jednom, dve ili tri hidroksilne grupe.

[0201] U jednom aspektu, -R<5>je supstituisan sa jednom hidroksilnom grupom.

[0202] U jednom aspektu, grupa -R<5>može biti supstituisan sa jednom, dve ili tri grupe -NR<6>R<7>.

[0203] U jednom aspektu, -R<5>je zamenjen sa jednim -NR<6>R<7>grupa.

[0204] U jednom aspektu, -R<5>je supstituisan sa dve ili tri grupe -NR<6>R<7>.

[0205] U jednom aspektu, grupa -R<5>može biti supstituisan sa jednom ili dve grupe -NR<6>R<7>i jednom, dve ili tri hidroksilne grupe.

[0206] U jednom aspektu, -R<5>je zamenjen sa jednim -NR<6>R<7>grupu i jednu hidroksilnu grupu.

[0207] U jednom aspektu, hidroksilna grupa, kao što je jedna, dve ili tri hidroksilne grupe, su supstituenti za -G.

[0208] U jednom aspektu, hidroksilna grupa, kao što je jedna, dve ili tri hidroksilne grupe, su supstituenti za -D.

[0209] U jednom aspektu, hidroksilna grupa, kao što je jedna, dve ili tri hidroksilne grupe, su

2

supstituenti za -L<1>-, gde je prikladno, na primer gde -L<1>- je alkilen ili heteroalkilen.

[0210] U jednom aspektu, hidroksilna grupa, kao što je jedna, dve ili tri hidroksilne grupe, su supstituenti za -L<2>-, gde je prikladno, na primer gde -L<2>- je heterociklilen.

[0211] U jednom aspektu, -NR<6>R<7>grupa, kao što su jedan, dva ili tri -NR<6>R<7>grupe, su supstituenti za -G.

[0212] U jednom aspektu, -NR<6>R<7>grupa, kao što su jedan, dva ili tri -NR<6>R<7>grupe, su supstituenti za -D.

[0213] U jednom aspektu, -NR<6>R<7>grupa, kao što su jedan, dva ili tri -NR<6>R<7>grupe, su supstituenti za -L<1>-, gde je prikladno, na primer gde -L<1>- je alkilen ili heteroalkilen.

[0214] U jednom aspektu, -NR<6>R<7>grupa, kao što su jedan, dva ili tri -NR<6>R<7>grupe, su supstituenti za -L<2>-, gde je prikladno, na primer gde -L<2>- je heterociklilen.

[0215] U jednom aspektu, G-L<2>-L<1>- zamenjuje se sa:

(i) jednom ili dve hidroksilne grupe, ili

(ii) jednom ili dve grupe -NR<6>R<7>, ili

(iii) jednom grupa -NR<6>R<7>i jednu hidroksilnu grupu,

s tim da su (i), (ii) i (iii) opcioni supstituenti kada -L<1>- je C2-12heteroalkilen koji sadrži azot i/ili -L<2>- je C4-10heterociklilen koji sadrži azot.

[0216] U jednom aspektu, G-L<2>-L<1>- je opciono zamenjen sa (i), (ii) i (iii), na primer gde je L<1>- je C2-12heteroalkilen koji sadrži azot i/ili -L<2>- je C4-10heterociklilen koji sadrži azot. U jednom aspektu, uslov se ne primenjuje, stoga (i), (ii) i (iii) nisu opcioni supstituenti.

[0217] Da ne bi bilo sumnje, gde je grupa -R<5>kaže se da je supstituisan sa jednom hidroksilnom grupom (-OH), u -R<5>nema daljih hidroksilnih grupa. Isto tako, gde je grupa -R<5>kaže se da je supstituisan sa jednom grupom -NR<6>R<7>, nema daljih grupa -NR<6>R<7>prisutnih u okviru -R<5>. Slično, gde je -R<5>ima dva ili tri hidroksila ili -NR<6>R<7>grupe, ukupan broj hidroksila ili -NR<6>R<7>grupe su dve ili tri.

[0218] Kao što je detaljnije opisano u nastavku, gde je prisutna hidroksilna grupa, ona može biti supstituent na atomu ugljenika α za grupu -X-.

[0219] U jednom aspektu, gde je -R<5>ima više od jednog supstituenta, supstituenti se ne nalaze na istom atomu ugljenika.

[0220] Karboksilna grupa (-COOH) se u ovom slučaju ne može tumačiti kao hidroksilna grupa.

[0221] Gde -L<1>- ima dva ili više prisutnih atoma ugljenika (npr. C2-12alkilen ili C3-12heteroalkilen) supstituent, gde je prisutan, može da se obezbedi na atomu ugljenika koji je α prema grupi -X-.

2

[0222] Slično, gde je -L<1>- i L<2>- su obe kovalentne veze, a -G je C2-12alkil, grupa C2-12alkil može imati supstituent na atomu ugljenika koji je α za grupu -X-.

[0223] U jednom aspektu, -L<1>- je supstituisan sa hidroksil grupom (na primer, jedna, dve ili tri hidroksilne grupe) i hidroksilna grupa je obezbeđena na atomu ugljenika koji je α u odnosu na grupu -X-. Pronalazači predmetnog pronalaska su otkrili da jedinjenja koja imaju hidroksilnu grupu na α ugljeniku imaju posebno poboljšanu potencirajuću aktivnost u poređenju sa onim jedinjenjima gde je hidroksilna grupa povezana, na primer, sa atomom ugljenika koji nije α grupa -X-, za primer β ili γ u grupu -X-, kao što je Primer jedinjenja 25.

[0224] Slično, gde je -L1- i L<2>- su obe kovalentne veze, a -G je C2-12alkil, grupa C2-12alkil može imati hidroksil grupu obezbeđenu na atomu ugljenika koji je α prema grupi -X-.

[0225] Gde -L<1>- ima više od dva prisutna atoma ugljenika (npr. C2-12alkilen ili C3-12heteroalkilen) supstituent, gde je prisutan, može biti obezbeđen na atomu ugljenika koji nije α za grupu X. Na primer, supstituent se može obezbediti na atomu ugljenika koji je β ili γ u grupi -X-. U jednom aspektu, nijedan supstituent nije obezbeđen na atomu ugljenika a u grupi -X-.

[0226] Slično, gde je -L<1>- i L<2>- su obe kovalentne veze, a -G je C2-12alkil, grupa C2-12alkil može imati supstituent koji nije obezbeđen na atomu ugljenika koji je α za grupu -X-. Na primer, supstituent može biti obezbeđen na atomu ugljenika koji je β ili i u grupi -X-.

[0227] U jednom aspektu, -L<1>- je supstituisan sa amino grupom (na primer jednom ili dve amino grupe) i amino grupom (tj. -NR<6>R<7>) je obezbeđen na atomu ugljenika koji nije α za grupu X. Primeri jedinjenja koja imaju takvu supstituciju uključuju Primer jedinjenja 10 u ovom slučaju. Pronalazači predmetnog pronalaska su otkrili da jedinjenja koja imaju amino grupu na α ugljeniku, kao što je jedinjenje iz Primera 40, mogu imati smanjenu potencirajuću aktivnost u poređenju sa onim jedinjenjima gde je amino grupa povezana, na primer, sa atomom ugljenika koji je β ili γ grupi -X-.

[0228] Nakon toga, pronalazači su ustanovili da je promena u potencirajućoj aktivnosti povezana sa stereohemijom α ugljenika kada je supstituisan sa amino grupom. Primeri jedinjenja A25 i A26 su dijastereoizomeri koji se razlikuju samo po svojoj stereohemiji na α ugljeniku. Jedinjenje A26 ima superiornu aktivnost od jedinjenja A25 kada se testira protiv različitih E. coli, K. pneumoniae, P. aeruginosa, i A. baumannii sojevi (videti tabelu 6A).

[0229] Prema tome, u jednom aspektu, amino grupa je obezbeđena na atomu ugljenika koji je α u odnosu na grupu X.

[0230] Slično, gde je -L<1>- i L<2>- su obe kovalentne veze, a -G je C2-12alkil, grupa C2-12alkil može imati amino grupu obezbeđenu na atomu ugljenika koja nije α prema grupi -X-, na primer β ili i grupi -X-.

[0231] U jednom aspektu, amino ili hidroksil supstituent je obezbeđen na terminalnom ugljeniku grupe -L<1>- (npr. C2-12alkilen ili C2-12heteroalkilen) ili terminalni ugljenik -C2-12alkil, gde je prisutan.

[0232] U jednom aspektu, grupa -L<1>- u D-L<1>- je kovalentna veza. Dakle -D, koji je C4-10heterociklil, direktno je povezan sa grupom -X-.

[0233] U jednom aspektu, grupa -L<2>- je C4-10heterociklil. Gde -L<1>- je kovalentna veza, -L<2>-je direktno povezan sa grupom -X-.

[0234] Veza ovih heterociklil grupa sa -X- je diskutovana u nastavku.

[0235] U jednom aspektu, atom koji je α za grupu -X- može biti atom ugljenika u prstenu heterociklil grupe. Heteroatom u prstenu heterociklil grupe može biti kovalentno vezan za atom ugljenika u prstenu koji je α za grupu -X-, tj. heteroatom u prstenu je β za grupu -X-. U jednom aspektu, heteroatom β u prstenu grupe X je O ili S, kao što je O. U jednom aspektu, heteroatom β u prstenu grupe -X- nije N.

[0236] U jednom aspektu, heteroatom u prstenu γ u grupi X je O, S ili N.

[0237] U jednom aspektu, gde je -L<1>- i L<2>- su obe kovalentne veze, a -G je C5-12heteroaril, heteroaril može biti povezan sa grupom -X- preko atoma ugljenika u prstenu, koji je α sa grupom -X-). U jednom aspektu, heteroatom u prstenu, kao što je N, nije povezan sa atomom ugljenika koji je a sa grupom -X-. Alternativno, heteroatom u prstenu, kao što je O ili S, je vezan za atom ugljenika koji je α za grupu -X-.

[0238] U jednom aspektu, grupa G-L<2>-L<1>- ima jednu, dve ili tri hidroksilne grupe i/ili -NR<6>R<7>supstituenti. Ovi supstituenti mogu biti obezbeđeni na jednoj ili više grupa -G-, -L<2>- ili -L<1>-, gde je potrebno. U jednom aspektu, supstituenti su obezbeđeni na -G- i/ili -L<1>-.

[0239] Gde -L<1>- je C2-12heteroalkilen, jedna, dve ili tri hidroksilne grupe i/ili -NR<6>R<7>supstituenti su opcioni.

[0240] Grupa D-L<1>- opciono ima jednu, dve ili tri hidroksilne grupe i/ili -NR<6>R<7>supstituenti.

[0241] Tamo gde su prisutni supstituenti oni mogu biti obezbeđeni na -D ili -L<1>-, gde je potrebno.

[0242] U jednom aspektu, -R<5>je G-L<2>-L<1>-, gde je -G C5-12aril.

[0243] U jednom aspektu, -R<5>je G-L<2>-L<1>-, gde je -G C3-10cikloalkil ili -C2-12alkil, ili -R<5>je D-L<1>-, gde je D C4-10heterociklil.

[0244] U jednom aspektu, G-L<2>-L<1>- je supstituisan sa (i) jednom, dve ili tri hidroksilne grupe, (ii) jednom, dve ili tri grupe -NR<6>R<7>ili (iii) jednu ili dve grupe -NR<6>R<7>i jednu, dve ili tri hidroksilne grupe. Gde je aril grupa prisutna u G-L<2>-L<1>- nezavisno je opciono supstituisan sa

1

jednim ili više supstituenata izabranih od -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, halo, -CN, -NO2, -CF3, -NR<10>C(O)R<10>,-CON(R<10>)2, -COOR<9>, -OCOR<10>, -NR<10>COOR<10>, -OCON(R<10>)2, -OCF3, -NR<10>CON(R<10>)2, -OR<9>, -SR<9>, -NR<10>SO2R<10>, -SO2N(R<10>)2i SO2R<10>gde je svaki -R<9>je nezavisno -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, i svaki -R<10>je nezavisno -H ili -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil.

[0245] U jednom aspektu, D-L<1>- je opciono supstituisan sa (i) jednom, dve ili tri hidroksilne grupe, (ii) jednom, dve ili tri grupe -NR<6>R<7>, ili (iii) jedna, dve ili tri grupe -NR<6>R<7>i jednu, dve ili tri hidroksilne grupe.

[0246] U jednom aspektu, D-L<1>- je supstituisan sa (i) jednom, dve ili tri hidroksilne grupe, (ii) jednom, dve ili tri grupe -NR<6>R<7>, ili (iii) jedna, dve ili tri grupe -NR<6>R<7>i jednu, dve ili tri hidroksilne grupe.

[0247] Grupe C3-10cikloalkil C2-12alkil i C4-10heterociklil može biti supstituisan sa hidroksilom i/ili -NR<6>R<7>grupe. Kada cikloalkil ili heterociklil grupe uključuju fuzionisani aromatični prsten, taj aromatični prsten može biti opciono supstituisan sa opcionim supstituentima opisanim ovde. Opcioni dalji supstituenti ne uključuju hidroksil i/ili -NR<6>R<7>grupe.

[0248] Grupa C5-12aril je supstituisan sa hidroksilom i/ili -NR<6>R<7>grupe i C5-12aril grupa je opciono dalje supstituisana. Opcioni dalji supstituenti ne uključuju hidroksil i/ili -NR<6>R<7>grupe.

[0249] Nije neophodno za C3-10cikloalkil, C2-12alkil, C5-12aril i C4-10heterociklil grupe -G i -D koje treba supstituisati sa hidroksil i/ili -NR<6>R<7>grupe. U jednom aspektu, hidroksil i/ili -NR<6>R<7>grupe mogu biti obezbeđene na linker elementima -R<5>na primer. -L<1>- i/ili -L<2>-, gde je prisutan.

[0250] Gde -R<5>sadrži heterociklil koji sadrži azot (ili heterociklilen koji sadrži azot) ili heteroalkilen grupu koja sadrži azot, na primer kao deo -L<1>-, -L<2>- ili -D, hidroksil i/ili -NR<6>R<7>grupe mogu biti opcione.

[0251] Konkretno, hidroksil i/ili -NR<6>R<7>grupe su opcione samo tamo gde heterociklil, heterociklilen ili heteroalkilen grupe sadrže baznu azotnu grupu, kao što je NH.

[0252] Dakle, u jednom aspektu, G-L<2>-L<1>- zamenjuje se sa:

(i) jednu, dve ili tri hidroksilne grupe, ili

(ii) jedna, dve ili tri grupe -NR<6>R<7>, ili

(iii) jedna ili dve grupe -NR<6>R<7>i jedna, dve ili tri hidroksilne grupe,

ili C2-12heteroalkilen koji sadrži azot i/ili C4-10heterociklilen koji sadrži azot, gde je prisutan, sadrži baznu azotnu grupu, kao što je NH.

2

[0253] U jednom aspektu, G-L<2>-L<1>- zamenjuje se sa:

(i) jednom, dve ili tri hidroksilne grupe, ili

(ii) jednom, dve ili tri grupe -NR<6>R<7>, ili

(iii) jednom ili dve grupe -NR<6>R<7>i jedna, dve ili tri hidroksilne grupe,

s tim da su (i), (ii) i (iii) opcioni supstituenti kada -L<1>- je C2-12heteroalkilen koji sadrži azot i/ili -L<2>- je C4-10heterociklil koji sadrži azot.

[0254] U jednom aspektu, G-L<2>-L<1>- zamenjuje se sa:

(i) jednom, dve ili tri hidroksilne grupe, ili

(ii) jednom, dve ili tri grupe -NR<6>R<7>, ili

(iii) jednom ili dve grupe -NR<6>R<7>i jednu, dve ili tri hidroksilne grupe.

[0255] U jednom aspektu, D-L<1>- zamenjuje se sa:

(i) jednom, dve ili tri hidroksilne grupe, ili

(ii) jednom, dve ili tri grupe -NR<6>R<7>, ili

(iii) jednom ili dve grupe -NR<6>R<7>i jednu, dve ili tri hidroksilne grupe

ili C2-12heteroalkilen koji sadrži azot, gde je prisutan, i/ili -D sadrži baznu azotnu grupu, kao što je NH.

-D

[0256] N terminalni supstituent jedinjenja polimiksina može uključivati C4-10heterociklil grupa ("heterociklil grupa"). Dakle, u jednom aspektu, -R<5>uključuje grupu -D, koja je C4-10heterociklil.

[0257] U jednom aspektu, -D je heterociklil grupa koja sadrži azot. U takvim realizacijama hidroksil i -NR<6>R<7>grupe su opcione.

[0258] Kada heterociklil grupa ne sadrži atom azota u prstenu, bilo koju ili obe od heterociklil grupe i -L<1>- mora biti zamenjen sa jednim, dva ili tri hidroksil i/ili -NR<6>R<7>grupe ili -L<1>- mora biti C koji sadrži azot2-12heteroalkilen.

[0259] Heterociklil grupa može biti opciono supstituisana, kao što je ovde opisano.

[0260] U jednom aspektu, C4-10heterociklil je C4-6ili C5-6heterociklil, kao što je C5heterociklil ili C6heterociklil.

[0261] U jednoj realizaciji, C4-10heterociklil sadrži jedan ili dva heteroatoma izabrana između N, S i O. Tamo gde je prisutan atom S, može biti u obliku S, S(O) ili S(O)2. Tamo gde je prisutan atom N, on može biti u obliku NH ili NR, gde je R C1-4alkil, kao što je metil ili etil.

[0262] U jednom aspektu, heterociklil grupa je heterociklil grupa koja sadrži azot.

[0263] U jednoj realizaciji, C4-10heterociklil je piperidinil, piperazinil, morfolinil, dioksanil, tiomorfolinil (uključujući oksidovani tiomorfolinil) ili piroldinil.

[0264] U jednoj realizaciji, C4-10heterociklil je piperidinil, piperazinil, tiomorfolinil (uključujući oksidovani tiomorfolinil), piroldinil ili morfolinil.

[0265] U jednoj realizaciji, C4-10heterociklil je piperidinil, piperazinil ili piroldinil.

[0266] Tamo gde je prisutan heterociklil, on je povezan sa -L<1>- ili -X- preko atoma ugljenika u prstenu ili atoma N u prstenu, gde je prisutan. U jednom aspektu, heterociklil je povezan preko atoma ugljenika u prstenu. U drugom izvođenju, heterociklil je povezan preko atoma azota u prstenu, gde je prisutan.

[0267] Gde je heterociklil supstituisan sa jednim, dva ili tri hidroksila i/ili -NR<6>R<7>grupe, ove grupe su supstituenti za atome ugljenika heterociklil prstena.

[0268] U jednom aspektu, hidroksil ili -NR<6>R<7>grupa, gde je prisutna, je supstituent za atom ugljenika u prstenu koji je β za heteroatom u prstenu.

[0269] U jednom aspektu, heterociklil, ako je supstituisan, ima najviše jedan ili dva supstituenta, koji mogu biti isti ili različiti.

[0270] U jednom aspektu, ukupan broj atoma ugljenika u heterociklil grupi, zajedno sa ukupnim brojem atoma ugljenika prisutnih u -R<6>i -R<7>(gde je prisutan) je najmanje 5, najmanje 6, najmanje 7 ili najmanje 8.

[0271] Da ne bi bilo sumnje, indeks „Ck-i“ u terminima kao što su „C4-7heterociklil" i slično, odnosi se na broj atoma u prstenu, koji mogu biti atomi ugljenika ili heteroatomi (npr. N, O, S). Na primer, piperidinil je primer heterociklil grupe.

[0272] Termin "heterociklil" u odnosu na grupu -D odnosi se na grupu (1) koja ima jedan ili više heteroatoma (npr. N, O, S) koji čine deo sistema prstenova, pri čemu sistem prstenova sadrži jedan ili dva prstena ili više fuzionisanih prstenova, pri čemu je najmanje jedan prsten prstenastog sistema ne-aromatični prsten, i (2) koji je vezan za ostatak molekula nearomatičnim atomom u prstenu (tj. atomom u prstenu koji je deo nearomatičnog prstena koji je deo sistema prstenova).

[0273] Na primer: piperidin (piperidin-1-il) i piperidin-4-il su oba primera C6heterociklil grupa; 2,3-dihidro-1H-indol-1-il (indolin-1-il) je primer C9heterociklil grupa; i dekahidrohinolin-5-il i 1,2,3,4-tetrahidrokinolin-4-il su primeri C10heterociklil grupa.

4

[0274] Heterociklil grupa može biti opciono supstituisana. Opcioni supstituenti su oni opisani u nastavku.

[0275] U jednom aspektu, gde heterociklil grupa sadrži dva ili više kondenzovanih prstena, svaki prsten je nearomatičan.

[0276] U jednom aspektu, heterociklil grupa sadrži jedan prsten.

[0277] Najmanje jedan heteroatom je obezbeđen u nearomatičnom prstenu.

-G

[0278] Grupa -G je izabrana od C3-10cikloalkil, C2-12alkil i C5-12aril. Opis svakog od njih je dat u nastavku. Grupe o kojima se govori u nastavku mogu se koristiti zajedno sa bilo kojim -L<1>- i L<2>-, po potrebi.

C3-10 cikloalkil

[0279] N terminalni supstituent jedinjenja polimiksina može uključivati C3-10cikloalkil grupu ("cikloalkil grupa"). Dakle, -G može biti C3-10cikloalkil.

[0280] Kada je -G C3-10cikloalkil, -L<1>- može biti kovalentna veza, C1-12alkilen ili C2-10heteroalkilen, na primer kovalentna veza ili C1-12alkilen.

[0281] Kada je -G C3-10cikloalkil, -L<2>- može biti kovalentna veza ili C4-12heterociklil, na primer kovalentna veza.

[0282] U jednom aspektu, C3-10cikloalkil je C3-8ili C3-6cikloalkil.

[0283] U jednom aspektu, C3-10cikloalkil je ciklopentil ili cikloheksil.

[0284] U jednom aspektu, cikloalkil, ako je supstituisan, ima najviše jedan ili dva supstituenta, koji mogu biti isti ili različiti.

[0285] U jednom aspektu, broj supstituenata na cikloalkil grupi nije veći od broja atoma ugljenika u cikloalkil grupi. Dakle, gde je alkil grupa C6alkil grupa može biti supstituisana sa najviše šest supstituenata.

[0286] U jednom aspektu, ukupan broj atoma ugljenika u cikloalkil grupi, zajedno sa ukupnim brojem atoma ugljenika prisutnih u -R<6>i -R<7>(gde je prisutan) je najmanje 5, najmanje 6, najmanje 7 ili najmanje 8.

[0287] U jednom aspektu, cikloalkil je cikloheksil koji ima jedan hidroksil ili -NR<6>R<7>grupa, kao što je 4-supstituisana cikloheksil grupa. U jednom aspektu, cikloalkil je ciklopentil koji ima jedan hidroksil ili -NR<6>R<7>grupa, kao što je 2- ili 3-supstituisana ciklopentil grupa.

[0288] U jednom aspektu, cikloalkil je nesupstituisan. U ovoj varijanti, supstituenti se nalaze na linkeru -L<2>-L<1>-, što shodno tome ne može biti kovalentna veza.

[0289] U jednom aspektu, na primer, gde je jezgro jedinjenja formule (I) polimiksin B nonapeptid, grupa G-L<2>-L<1>- nije 2-aminocikloheksil, 3-aminocikloheksil ili 4-aminocikloheksil.

[0290] Radi izbegavanja sumnje, "cikloalkil" se odnosi na grupu (1) koja ima sistem prstenova koji se sastoji od jednog prstena ili dva ili više spojenih prstena, pri čemu jedan prsten kondenzovanog sistema prstenova može biti aromatični prsten, i (2) koji je vezan za ostatak molekula nearomatičnim atomom u prstenu (tj. atomom u prstenu koji je deo nearomatičnog prstena koji je deo sistema prstena). Na primer: cikloalkil je primer C6cikloalkil grupa; a tetralin-2-il je primer C10cikloralkil grupa. cikloheksil

[0291] Tamo gde je prisutan aromatični prsten, on može biti opciono zamenjen. Opcioni supstituenti su oni opisani kao opcioni supstituenti za C5-12aril grupa.

[0292] U jednom aspektu, gde cikloalkil sadrži dva ili više kondenzovanih prstena, svaki prsten je nearomatičan.

[0293] U jednom aspektu, cikloalkil grupa sadrži jedan prsten.

C2-12 alkil

[0294] N terminalni supstituent jedinjenja polimiksina može biti C2-12alkil grupa ("alkil grupa"). Dakle, -G može biti C2-12alkil.

[0295] Kada je -G C2-12alkil, -L<1>- može biti kovalentna veza ili C2-10heteroalkilen, kao što je kovalentna veza.

[0296] Kada je -G C2-12alkil, -L<2>- može biti kovalentna veza ili C4-12heterociklil, na primer kovalentna veza.

[0297] U jednom aspektu, gde je -G C2-12alkil, oba -L<2>- i ja<1>- su kovalentne veze. Dakle, -G je direktno povezan sa -X-.

[0298] U jednom aspektu, C2-12alkil je C3-12alkil, na primer C4-12ili C5-12alkil.

[0299] U jednom aspektu, C2-12alkil je C2-5alkil, na primer C2-4alkil.

[0300] Alkil grupa je zasićena, alifatična alkil grupa. Alkil grupa može biti linearna ili račvasta alkil grupa.

[0301] U jednom aspektu, alkil grupa je račvasta i grana nije na atomu ugljenika koji je α u odnosu na grupu -L<2>-, -L<1>-, ili -X-.

[0302] U jednom aspektu, broj supstituenata na alkil grupi nije veći od broja atoma ugljenika u alkil grupi. Dakle, gde je alkil grupa C2alkil grupa može biti supstituisana sa najviše dva supstituenta.

[0303] U jednom aspektu, ukupan broj atoma ugljenika u alkil grupi, zajedno sa ukupnim brojem atoma ugljenika prisutnih u -R<6>i -R<7>(gde je prisutan) je najmanje 5, najmanje 6, najmanje 7 ili najmanje 8.

[0304] U jednom aspektu, alkil grupa ima supstituent na terminalnom ugljeniku. Terminalni ugljenik se odnosi na atom ugljenika koji bi bio -CH3ako nije sadržao supstituente. U razgranatoj alkil grupi ovaj ugljenik može biti atom ugljenika koji se nalazi na kraju najdužeg linearnog dela alkil grupe.

[0305] U jednom aspektu, alkil grupa ima supstituent koji se nalazi na atomu ugljenika koji je β ili γ terminalni atom ugljenika.

[0306] Kao što je gore navedeno, u jednom aspektu, -NR<6>R<7>grupa, gde je prisutna kao supstituent za alkil grupu, je supstituent za atom ugljenika koji nije α za grupu -L<2>-, -L<1>-, ili -X-.

[0307] Kao što je prethodno navedeno, u jednom aspektu, hidroksilna grupa, gde je prisutna kao supstituent za alkil grupu, je supstituent za atom ugljenika α za grupu -L<2>-, -L<1>-, ili -X-.

[0308] U jednom aspektu, alkil grupa nema supstituent na atomu ugljenika α do grupe -L<2>-, -L<1>-, ili -X-.

[0309] U jednom aspektu, alkil, ako je supstituisan, ima najviše jedan ili dva supstituenta, koji mogu biti isti ili različiti.

[0310] U alternativnim aspektima ovog pronalaska, grupa -G je C1-12alkil grupa, a ne C2-12alkil grupa, a ova alkil grupa je supstituisana sa hidroksil grupama i/ili -NR<5>R<7>po potrebi. U jednom aspektu, -R<5>je C1-12alkil grupa, kao što je C1alkil. Gde -R<5>je C1alkil, prisutan je jedan supstituent, kao što je jedan -NR<6>R<7>grupa.

[0311] Alkil grupa može biti opciono dalje supstituisana, kao što je detaljnije opisano u nastavku. U jednom aspektu, alkil grupa, ako je supstituisana, je supstituisana samo sa hidroksil grupama ili -NR<6>R<7>po potrebi.

C5-12 aril

[0312] N terminalni supstituent jedinjenja polimiksina može uključivati ili biti C5-12aril grupa („grupa“). Dakle, -G može biti C5-12aril.

[0313] Kada je -G C5-12aril, -L<1>- može biti kovalentna veza, C1-12alkilen ili C2-10heteroalkilen, na primer kovalentna veza ili C1-12alkilen.

[0314] Kada je -G C5-12aril, -L<2>- može biti kovalentna veza ili C4-12heterociklil, na primer kovalentna veza.

[0315] Aril grupa je opciono supstituisana, pri čemu su ovi supstituenti pored bilo kog hidroksila ili -NR<6>R<7>grupe.

[0316] U jednom aspektu, C5-12aril je C5-7aril

[0317] U jednom aspektu, C5-12aril je C6-10karboaril ili C5-12heteroaril.

[0318] U jednom aspektu, C5-12aril je C6-10karboaril.

[0319] U jednom aspektu, C6-10karboaril je fenil ili naftil.

[0320] U jednom aspektu, C6-10karboaril je fenil.

[0321] U jednom aspektu, C5-12aril je C5-12heteroaril, na primer C5-10, C5-6, C5ili C6heteroaril. Heteroaril može da sadrži jedan ili dva atoma azota i dodatno ili alternativno, gde je heteroaril C5heteroaril, može da sadrži atom kiseonika ili sumpora. U jednom aspektu, C5-

12heteroaril je nezavisno furanil, tienil, pirolil, imidazolil, pirazolil, oksazolil, izoksazolil, tiazolil, izotiazolil, piridil, pirimidinil, pirazinil, piridazinil, hinolinil, izohinolinil ili in. Dodatno ili alternativno, C5-12heteroaril je nezavisno piridon.

[0322] Tamo gde je heteroaril prisutan u grupi -G, on je povezan sa -L<1>-, -L<2>- ili -X- preko atoma ugljenika u prstenu ili atoma N u prstenu, gde je prisutan. U jednom aspektu, heteroaril je povezan preko atoma ugljenika u prstenu. U drugom izvođenju, heteroaril je povezan preko atoma azota u prstenu, gde je prisutan.

[0323] U jednom aspektu, C5-12aril je fenil ili piridin.

[0324] Da bi se izbegla sumnja, "heteroaril" se odnosi na grupu (1) koja ima jedan ili više heteroatoma (npr. N, O, S) koji čine deo sistema prstenova, pri čemu sistem prstenova sadrži jedan ili dva ili više spojenih prstena prstenovi, pri čemu je najmanje jedan prsten sistema prstenova aromatični prsten, i (2) koji je vezan za ostatak molekula pomoću aromatičnog atoma u prstenu (tj. atoma u prstenu koji je deo aromatičnog prstena koji je deo prstenastog sistema). Na primer: piridil je primer C6heteroaril grupa; izohinolil je primer C10heteroaril grupa; i 1,2,3,4-tetrahidro-izohinolin-7-il je primer C10heteroaril grupa.

[0325] U jednom aspektu, aromatični atom u prstenu sadrži heteroatom u prstenu.

[0326] U jednom aspektu, gde je obezbeđen nearomatski prsten, on nema opcionih supstituenata (iako može biti obezbeđen sa jednim ili više hidroksil ili -NR<6>R<7>grupe).

[0327] U drugom izvođenju, gde je obezbeđen nearomatični prsten, on je opciono supstituisan. Pogodni opcioni supstituenti za ne-aromatične prstenove su diskutovani u nastavku u vezi sa cikloalkil grupama (gde ne-aromatični prsten sadrži samo atome ugljenika u prstenu) i heterociklil grupama (gde nearomatični prsten sadrži jedan ili više atoma heteroatoma u prstenu).

[0328] U jednom aspektu, gde heteroaril sadrži dva ili više spojenih prstena, svaki prsten je aromatični prsten.

[0329] U jednom aspektu, heteroaril grupa sadrži jedan aromatični prsten.

[0330] Slično, "karboaril" se odnosi na grupu (1) koja ima sistem prstenova koji se sastoji od jednog prstena ili dva ili više spojenih prstena, pri čemu je najmanje jedan prsten sistema prstenova aromatični prsten, i (2) koji je vezan za ostatak molekula aromatičnim atomom u prstenu (tj. atomom u prstenu koji je deo aromatičnog prstena koji je deo sistema prstena). Na primer: fenil je primer C6karboaril grupa; a tetralin-6-il je primer C10karboaril grupa.

[0331] U jednom aspektu, gde karboaril sadrži dva ili više spojenih prstena, svaki prsten je aromatični prsten.

[0332] U jednom aspektu, C5-12aril nije diaminofenil, kao što je 3,5-diaminofenil, na primer kada je -X- -C(O)- i kada je -L1- i L<2>- i obe su kovalentne veze.

[0333] U jednom aspektu, C5-12aril nije trihidroksifenil, kao što je 3,4,5-trihidroksifenil, na primer kada je -X- -C(O)-.

[0334] Primećuje se da Sandow et al. (US 5,565,423) opisuju polimiksin oktapeptide koji imaju modifikovani N terminus. N terminalna grupa sadrži fenil grupu koja je opciono supstituisana sa 1, 2 ili 3 identične ili različite grupe izabrane između hidroksila, alkoksi, amino, karboksila, alkilamino i halogena. Fenil grupa može biti vezana za N terminus preko alkilenskog razmaka i/ili imino oksim grupe. Alternativno, N terminalna grupa sadrži 2-aminotiazol-4-il grupu.

[0335] Obrađeni primeri u Sandou et al. su ograničeni na oktapeptide koji imaju 2-aminotiazol-4-il grupu, benzil grupu ili 3,4,5-trihidroksifenil grupu. Nema primera gde se koriste nonapeptidi ili dekapeptidi, i nema primera gde N terminalna grupa sadrži amino funkcionalnost.

[0336] Primećuje se da WO 2012/168820 opisuje dekapeptide polimiksina koji imaju modifikovani N terminal. Publikacija sugeriše da bi N terminalna grupa mogla da uključuje aril, aralkil, heteroaril i heteroaralkil funkcionalnost, između ostalih opcija. Aril i heteroaril grupe mogu biti vezane za drugu aril ili heteroaril grupu, između ostalih opcija. Linker može biti veza, -(CH2)n-, -(CH2)n-O-(CH2)str-, -(CH2)n-S-(CH2)str-, ili -(CH2)n-NR<3>-(CH2)str-, gde je n 0, 1, 2 ili 3; i p je 0, 1, 2 ili 3; i R<3>je H ili CH3.

[0337] Obrađeni primeri u WO 2012/168820 su ograničeni na jedinjenja gde je jedna aril ili heteroaril grupa direktno vezana za drugu aril ili heteroaril grupu. Nema primera gde je linker prisutan.

[0338] Jedinjenja u ovom slučaju razlikuju se od jedinjenja u WO 2012/168820 barem iz razloga što jedinjenja u ovom slučaju ne uključuju derivate gde je aril grupa vezana za N terminus derivata polimiksina nonapeptida preko druge aril grupe. U ovom slučaju, aril grupa -G je vezana za N terminus direktno ili preko linker grupe -L<2>-L<1>-. Linkera grupa -L<2>-L<1>- ne uključuje arilen.

[0339] Dodatno, jedinjenja u ovom slučaju zahtevaju N terminalnu grupu -R<5>da poseduje hidroksil i/ili -NR<6>R<7>supstituente, ili da poseduju heteroalkilen, heterociklilen ili heterociklil grupe koje sadrže azot. Takve grupe su odsutne u prikazanim jedinjenjima u WO 2012/168820. Obrađeni i uporedni primeri u ovom slučaju pokazuju da jedinjenja koja ne poseduju ovu potrebnu funkcionalnost imaju inferiornu biološku aktivnost. Primer jedinjenja 37, koje sadrži piperidin N terminalnu grupu, može se uporediti sa uporednim primerom

4

jedinjenja C5, koje sadrži piridin unutar N terminalne grupe. Jedinjenje 37 ima superiornu aktivnost protiv raznih K. pneumoniae i P. aeruginosa sojeva u poređenju sa C5 (videti tabelu 5A).

[0340] Primećeno je da se heterociklil i heterociklilen kako se ovde pominju, odnose na grupe koje imaju najmanje jedan nearomatski prsten. Primećeno je da se heteroaril ovde koristi da se odnosi na grupu koja ima najmanje jedan prsten koji sadrži heteroatom, kao što je najmanje jedan aromatični prsten koji sadrži heteroatom.

[0341] Jedinjenja koja imaju aril grupe na N terminusu su takođe opisana sa Magee i dr, J. Med. Chem., 2013, 56, 5079. Primer je jedinjenje 5x gde je aril grupa vezana za N terminus derivata polimiksin nonapeptida preko piridonske grupe. Takvo jedinjenje nije obuhvaćeno definicijama ovog slučaja. Kao što je gore objašnjeno, piridonska grupa se ne smatra heterociklenskom grupom u smislu tog termina koji se koristi u vezi sa linkerom -L<2>-. Primećeno je da je jedinjenje 5x manje aktivno u poređenju sa PMB u mišjem neutropenijskom modelu mišje butine protiv P. aeruginosa sojeva.

Supstituenti aril grupe

[0342] Grupa -R<5>može uključiti aril grupu, na primer gde je -G C5-12aril ili C3-10cikloalkil sadrži fuzionisani aromatični prsten, ili gde je -D C4-10heterociklil koji sadrži fuzionisani aromatični prsten.

[0343] Svaka aril grupa je opciono supstituisana sa jednim ili više supstituenata.

[0344] Tamo gde je aril grupa opciono supstituisana, mogu postojati jedan, dva ili tri opciona supstituenta.

[0345] Kada je heteroaril grupa supstituisana, supstituenti se mogu obezbediti na atomu ugljenika u prstenu, na primer na atomu ugljenika aromatičnog prstena.

[0346] Svaki opcioni supstituent je izabran sa liste koja se sastoji od -C1-4alkil, halo, -CN, -NO2, -CF3, -NR<10>C(O)R<10>. -CON(R<10>)2, -COOR<9>, -OCOR<10>, -NR<10>COOR<10>, -OCON(R<10>)2, -OCF3, -NR<10>CON(R<10>)2. -ILI<9>, -SR<9>, -NR<10>SO2R<10>, -SO2N(R<10>)2i SO2R<10>gde je svaki -R<9>je nezavisno -C1-4alkil i svaki -R<10>je nezavisno -H ili -C1-4alkil.

[0347] U alternativnoj varijanti, svaki opcioni supstituent je izabran sa liste koja se sastoji od -C1-8alkil, kao što je -C1-4alkil, halo, -CN, -NO2, -CF3, -C(O)R<10>, -NR<10>C(O)R<10>, -CON(R<10>)2, -COOR<9>, -OCOR<10>, -NR<10>COOR<10>, -OCON(R<10>)2, -OCF3, -NR<10>CON(R<10>)2, -OR<9>, -SR<9>, -NR<10>SO2R<10>, -SO2N(R<10>)2i SO2R<10>gde je svaki -R<9>je nezavisno -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, i svaki -R<10>je nezavisno -H ili -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil.

[0348] U jednom aspektu, svaki opcioni supstituent je nezavisno izabran od -C1-8alkil, kao što je -C1-4alkil, halo, -NR<10>C(O)R<10>, -CON(R<10>)2, -COOR<9>, -OCOR<10>, -NR<10>COOR<10>, -OCON(R<10>)2, -OCF3, -NR<10>CON(R<10>)2, -OR<9>, i -SR<9>, gde je svaki -R<9>je nezavisno -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil i svaki -R<10>je nezavisno -H ili -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil.

[0349] U jednom aspektu, svaki opcioni supstituent je nezavisno izabran od -C1-8alkil, kao što je -C1-4alkil i halo.

[0350] U jednom aspektu, halo grupa je -F, -Cl ili -Br.

[0351] U jednom aspektu, supstituent je -C1-8alkil, kao što je -C1-4alkil.

[0352] U jednom aspektu, gde je atom azota obezbeđen u aromatičnom prstenu, on može biti opciono supstituisan sa -R<9>ili -R<10>, gde je potrebno. Tipično, aromatični atom azota u prstenu je nesupstituisan ili je opciono supstituisan sa -C1-8alkil, kao što je -C1-4alkil, -C(O)R<10>, -CON(R<10>)2, -COOR<9>, SO2N(R<10>)2i SO2R<10>. Upućivanje na supstituciju aromatičnog atoma azota u prstenu odnosi se na zamenu radikala vodonika u grupi NH sa supstituentnom grupom, na primer gde se NH javlja u aromatičnim grupama kao što su pirol, pirazol i imidazol. U jednom aspektu, supstitucija se ne odnosi na kvaternizovane atome azota u prstenu.

[0353] Opcioni supstituenti mogu uključivati -C1-8alkil grupa, kao što je C1-4alkil grupa, npr. -R<9>ili -R<10>, bilo samostalno ili kao deo veće grupe supstituenata. Primećuje se da svaki C1-8prisutna alkil grupa, kao što je svaki C1-4alkil grupa, može biti supstituisana sa jednim, dva ili tri hidroksil i/ili -NR<6>R<7>grupe.

[0354] U jednom aspektu, -R<9>ili -R<10>nisu supstituisani sa hidroksilom ili -NR<6>R<7>grupa.

Supstituenti alkil, cikloalkil i heterociklil grupe

[0355] U jednom aspektu, gde je alkil, cikloalkil ili heterociklil grupa prisutna u -R<5>, ta grupa je nezavisno opciono supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih od -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, halo, -CN, -NO2, -CF3, -C(O)R<10>, -NR<10>C(O)R<10>, -OCF3, -CON(R<10>)2, -COOR<9>, -OCOR<10>, -NR<10>COOR<10>, -OCON(R<10>)2, -NR<10>CON(R<10>)2, -OR<9>, -SR<9>, -NR<10>SO2R<10>, -SO2N(R<10>)2i SO2R<10>gde je svaki -R<9>je nezavisno -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, i svaki -R<10>je nezavisno -H ili -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, osim što alkil nije supstituisan sa alkilom.

[0356] U jednom aspektu, opcioni supstituenti su izabrani od -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, -CN, -NO2, -C(O)R<10>, -NR<10>C(O)R<10>, -CON(R<10>)2, -COOR<9>, -OCOR<10>, -NR<10>COOR<10>, -OCON(R<10>)2, -NR<10>CON(R<10>)2, -OR<9>, -SR<9>, -NR<10>SO2R<10>, -SO2N(R<10>)2i SO2R<10>gde je svaki -R<9>i -R<10>je kao što je gore definisano.

[0357] U jednom aspektu, opcioni supstituenti su izabrani od -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, -C(O)R<10>, -NR<10>C(O)R<10>, -CON(R<10>)2, -COOR<9>, -OCOR<10>, -NR<10>COOR<10>, -OCON(R<10>)2, -NR<10>CON(R<10>)2, -OR<9>, -SR<9>, -NR<10>SO2R<10>, -SO2N(R<10>)2i SO2R<10>gde je svaki -R<9>i -R<10>je kao što je gore definisano.

[0358] U jednom aspektu alkil, cikloalkil ili heterociklil grupa nije obezbeđena sa opcionim supstituentima.

[0359] U jednom aspektu, svaki opcioni supstituent je nezavisno izabran od -C1-8alkil, kao što je -C1-4alkil.

[0360] U jednom aspektu, svaki opcioni supstituent je nezavisno izabran od -C1-8alkil, kao što je -C(O)R<10>.

[0361] Heterociklična grupa može biti supstituisana na atomu ugljenika u prstenu ili atomu azota u prstenu. Kada je heterociklična grupa supstituisana na azotu, supstituenti se biraju na odgovarajući način za taj atom. Na primer, atom azota u prstenu može biti supstituisan sa grupom izabranom od -C1-4alkil, -CF3, -C(O)R<10>, -CON(R<10>)2, -COOR<9>, -SO2N(R<10>)2i SO2R<10>. U daljem primeru, atom azota u prstenu može biti supstituisan sa -C1-4alkil, -C(O)R<10>, i -COOR<9>.

[0362] Opcioni supstituenti mogu uključivati -C1-8alkil grupa, kao što je C1-4alkil grupa, npr. -R<9>ili -R<10>, bilo samostalno ili kao deo veće grupe supstituenata. Primećuje se da svaki C1-8prisutna alkil grupa, kao što je svaki C1-4alkil grupa, može biti supstituisana sa jednim, dva ili tri hidroksil i/ili -NR<6>R<7>grupe.

[0363] U jednom aspektu, -R<9>ili -R<10>nisu supstituisani sa hidroksilom ili -NR<6>R<7>grupa.

-R<6>i -R<7>

[0364] U jednom aspektu, svaki -R<6>i -R<7>, gde je prisutan, je H.

[0365] U jednom aspektu, -R<6>je H i -R<7>R3 je alkil, kao što je metil ili etil, kao što je metil.

[0366] U jednom aspektu, -R<6>R3 je metil ili etil, kao što je metil.

[0367] Gde je -G aril ili cikloalkil grupa, -R<6>i -R<7>može zajedno sa atomom azota formirati heterocikl, na primer C4-10heterociklil.

[0368] U jednoj realizaciji, C4-10heterociklil sadrži jedan ili dva heteroatoma izabrana između N, S i O. Tamo gde je prisutan atom S, može biti u obliku S, S(O) ili S(O)2. Tamo gde je prisutan atom N, on može biti u obliku NH ili NR, gde je R C1-4alkil, kao što je metil ili etil.

4

[0369] U jednoj realizaciji, C4-10heterociklil je piperidinil, piperazinil, morfolinil, dioksanil, tiomorfolinil (uključujući oksidovani tiomorfolinil) ili piroldinil.

[0370] U jednoj realizaciji, C4-10heterociklil je piperidinil, piperazinil, tiomorfolinil (uključujući oksidovani tiomorfolinil), piroldinil ili morfolinil.

[0371] U jednoj realizaciji, C4-10heterociklil je piperidinil, piperazinil ili piroldinil.

[0372] U jednom aspektu, jedna grupa -NR<7>R<8>gde je prisutan, je guanidin grupa, kao što je -NHC(NH)NH2.

-R<9>

[0373] U jednom aspektu, -R<9>je metil ili etil.

[0374] U jednom aspektu, -R<9>je metil.

R<10>

[0375] U jednom aspektu, -R<10>je -H.

[0376] U jednom aspektu, -R<10>je metil ili etil.

[0377] U jednom aspektu, -R<10>je metil.

Soli, solvati i drugi oblici

[0378] Primeri soli jedinjenja formule (I) i (II) obuhvataju sve farmaceutski prihvatljive soli, kao što su, bez ograničenja, kisele adicione soli jakih mineralnih kiselina kao što su HCl i HBr soli i adicione soli jakih organskih kiselina kao što je metansulfonska kisela so. Dalji primeri soli uključuju sulfate i acetate kao što su trifluoracetat ili trihloracetat.

[0379] U jednom aspektu jedinjenja ovog pronalaska su obezbeđena kao sulfatna so ili so trifluorosirćetne kiseline (TFA). U jednom aspektu jedinjenja ovog pronalaska su obezbeđena kao acetatne soli.

[0380] Jedinjenje formule (I) ili (II) takođe može biti formulisano kao prolek. Prolekovi mogu uključivati antibakterijska jedinjenja koja su ovde opisana u kojima su jedna ili više amino grupa zaštićene grupom koja se može odcepiti in vivo, da se oslobodi biološki aktivno jedinjenje. U jednom aspektu, prolek je "aminski prolek". Primeri prolekova amina uključuju sulfometil, kao što je opisano u npr. Bergen et al, Antimicrob. Agents and Chemotherapy, 2006, 50, 1953 ili HSO3-FMOC, kao što je opisano u npr. Schechter et al, J.Med Chem 2002, 45(19) 4264 i njihove soli. Dalji primeri aminskih prolekova su dati Krise and Oliyai in Biotechnology: Pharmaceutical Aspects, 2007, 5(2), 101-131.

[0381] U jednom aspektu jedinjenje formule (I) ili (II) je obezbeđeno kao prolek.

[0382] Referenca na jedinjenje formule (I) ili (II) je takođe referenca na solvat tog jedinjenja. Primeri solvata uključuju hidrate.

[0383] Jedinjenje formule (I) ili (II) uključuje jedinjenje gde je atom zamenjen prirodnim ili ne-prirodnim izotopom. U jednom aspektu izotop je stabilan izotop. Dakle, ovde opisano jedinjenje uključuje, na primer, jedinjenja koja sadrže deuterijum i slično. Na primer, H može biti u bilo kom izotopskom obliku, uključujući<1>H,<2>H (D), i<3>H (T); C može biti u bilo kom izotopskom obliku, uključujući<12>C,<13>C, i<14>C; O može biti u bilo kom izotopskom obliku, uključujući<16>O i<18>O; i slično.

[0384] Određena jedinjenja formule (I) ili (II) mogu postojati u jednom ili više određenih geometrijskih, optičkih, enantiomernih, dijasteriomernih, epimernih, atropnih, stereoizomernih, tautomernih, konformacionih ili anomernih oblika, uključujući, ali ne ograničavajući se na, cis- i trans -forme; E- i Z-oblici; c-, t- i r-oblici; endo- i egzo-forme; R-, S- i mezo-oblici; D- i L-oblici; d- i l-oblici; (+) i (-) forme; keto-, enol- i enolat-oblici; sin- i anti-forme; sinklinalni i antiklinalni oblici; α- i β-oblici; aksijalni i ekvatorijalni oblici; forme za čamce, stolice, tvist, koverte i polustolice; i njihove kombinacije, u daljem tekstu zajednički nazvani "izomeri" (ili "izomerni oblici").

[0385] Treba shvatiti da su, osim kao što je objašnjeno u nastavku za tautomerne oblike, posebno isključeni iz termina "izomeri", kako se ovde koristi, strukturni (ili konstitutivni) izomeri (tj., izomeri koji se razlikuju u vezama između atoma, a ne samo po položaju atoma u prostoru). Na primer, referencu na metoksi grupu, -OCH3, ne treba tumačiti kao referencu na njegov strukturni izomer, hidroksimetil grupu, -CH2OH. Slično tome, referencu na ortohlorofenil ne treba tumačiti kao referencu na njegov strukturni izomer, meta-hlorofenil. Međutim, upućivanje na klasu struktura može dobro uključiti strukturno izomerne oblike koji spadaju u tu klasu (npr. C1-6alkil uključuje n-propil i izo-propil; butil uključuje n-, izo-, sek- i terc-butil; metoksifenil uključuje orto-, meta- i para-metoksifenil).

[0386] Osim ako nije drugačije naznačeno, referenca na određeno jedinjenje uključuje sve takve izomerne oblike, uključujući njihove smeše (npr., racemske smeše). Postupci za pripremu (npr. asimetrična sinteza) i odvajanje (npr. frakciona kristalizacija i hromatografski načini) takvih izomernih oblika su ili poznati u tehnici ili se lako dobijaju prilagođavanjem postupaka koje se ovde daju, ili poznatih postupaka, na poznat način .

[0387] Jedan aspekt sadašnjeg pronalaska se odnosi na jedinjenja u suštinski prečišćenom

4

obliku i/ili u obliku koji je suštinski slobodan od zagađivača.

[0388] U jednom aspektu, suštinski prečišćeni oblik je najmanje 50% po težini, npr., najmanje 60% po težini, npr., najmanje 70% po težini, npr., najmanje 80% po težini, npr., najmanje 90% po težini, npr. težinski, npr., najmanje 95% po težini, npr., najmanje 97% po težini, npr., najmanje 98% po težini, npr., najmanje 99% po težini.

[0389] Osim ako nije specificirano, suštinski prečišćeni oblik se odnosi na jedinjenje u bilo kom stereoizomernom ili enantiomernom obliku. Na primer, u jednom aspektu, suštinski prečišćeni oblik se odnosi na smešu stereoizomera, tj., prečišćen u odnosu na druga jedinjenja. U jednom aspektu, suštinski prečišćeni oblik se odnosi na jedan stereoizomer, npr., optički čist stereoizomer. U jednom aspektu, suštinski prečišćeni oblik se odnosi na smešu enantiomera. U jednom aspektu, suštinski prečišćeni oblik se odnosi na ekvimolarnu smešu enantiomera (tj., racemska smeša, racemat). U jednom aspektu, suštinski prečišćeni oblik se odnosi na jedan enantiomer, npr., optički čist enantiomer.

[0390] U jednom aspektu, zagađivači predstavljaju ne više od 50% po težini, npr., ne više od 40% po težini, npr., ne više od 30% po težini, npr., ne više od 20% po težini, npr., ne više od 10% po težini, na primer, ne više od 5% po težini, na primer, ne više od 3% po težini, na primer, ne više od 2% po težini, na primer, ne više od 1% po težini.

[0391] Osim ako nije navedeno, zagađivači se odnose na druga jedinjenja, to jest, osim stereoizomera ili enantiomera. U jednom aspektu, zagađivači se odnose na druga jedinjenja i druge stereoizomere. U jednom aspektu, zagađivači se odnose na druga jedinjenja i drugi enantiomer.

[0392] U jednom aspektu, suštinski prečišćeni oblik je najmanje 60% optički čist (tj., 60% jedinjenja, na molarnoj osnovi, je željeni stereoizomer ili enantiomer, a 40% je neželjeni stereoizomer ili enantiomer), npr. najmanje 70% optički čist, npr. najmanje 80% optički čist, npr. najmanje 90% optički čist, npr. najmanje 95% optički čist, npr. najmanje 97% optički čist, npr., najmanje 98% optički čist , na primer, najmanje 99% optički čist.

Poželjna jedinjenja

[0393] U jednom aspektu, jedinjenje formule (I) ili (II) je izabrano iz grupa koje se sastoje od ovde opisanih jedinjenja.

[0394] U jednom aspektu pronalaska obezbeđeno je jedinjenje formule (I).

[0395] U jednom aspektu, jedinjenje je jedinjenje formule (I) pod uslovom da R<5>-X-zajedno nije grupa izabrana sa liste koja se sastoji od Lis, Arg, Dap, Ser, Dab, Dgp (α,β-

4

diguanidinopropanoil), Thr i Abu. Uslov se može primeniti kada je -A- kovalentna veza. Svaka od aminokiselina može biti L-amino kiselina.

[0396] U jednom aspektu, jedinjenje je jedinjenje formule (I) pod uslovom da R<5>-X-zajedno nije grupa izabrana sa liste koju čine 2-aminocikloheksil, 3-aminocikloheksil i 4-aminocikloheksil. Uslov se može primeniti kada je -A- kovalentna veza.

[0397] Svaki od gore navedenih uslova može se primeniti samo kada je jezgro jedinjenja nonapeptid polimiksina B, tj. gde je -R<1>do -R<4>i -R<8>imaju supstituente prisutne u polimiksin B nonapeptidu.

Postupci lečenja

[0398] Jedinjenja formule (I) i (II), ili farmaceutske formulacije koje sadrže ova jedinjenja, pogodne su za upotrebu u postupcima lečenja i profilakse. Jedinjenja se mogu davati subjektu kome je to potrebno. Jedinjenja su pogodna za upotrebu zajedno sa aktivnim agensom ("drugi aktivni agens"), na primer drugim aktivnim agensom koji je antimikrobni agens.

[0399] Jedinjenja formule (I) i (II) su za upotrebu u postupku lečenja ljudskog ili životinjskog tela terapijom. U nekim aspektima pronalaska, jedinjenje formule (I) i (II) se može primeniti kod sisara, kao što je čovek, u cilju lečenja mikrobne infekcije.

[0400] Termin "mikrobna infekcija" odnosi se na invaziju patogenih mikroba na životinju domaćina. Ovo uključuje prekomerni rast mikroba koji su normalno prisutni u ili na telu životinje. Uopšteno govoreći, mikrobna infekcija može biti svaka situacija u kojoj prisustvo mikrobne populacije(a) šteti životinji domaćinu. Dakle, životinja "pati" od mikrobne infekcije kada je prevelik broj mikrobne populacije prisutan u ili na telu životinje, ili kada prisustvo mikrobne populacije(a) oštećuje ćelije ili drugo tkivo životinje.

[0401] Jedinjenja se mogu koristiti za lečenje subjekta koji ima mikrobnu infekciju ili rizik od infekcije od mikroorganizma, kao što je bakterija.

[0402] Mikrobna infekcija može biti bakterijska infekcija kao što je Gram-negativna bakterijska infekcija.

[0403] Primeri Gram-negativnih bakterija uključuju, ali nisu ograničeni na, Escherichia spp., Klebsiella spp., Enterobacter spp., Salmonella spp., Shigella spp., Citrobacter spp., Morganella morganii, Yersinia pseudotuberculosis i druge Enterobacteriaceae, Pseudomonas spp., Acinetobacter spp., Moraxella, Helicobacter, Stenotrophomonas, Bdellovibrio, bakterije sirćetne kiseline, Legionella i alfa-proteobakterije kao npr Wolbachia i brojni drugi.

[0404] Medicinski relevantne Gram-negativne koke uključuju tri organizma, koji izazivaju

4

polno prenosive bolesti (Neisseria gonorrhoeae), meningitis (Neisseria meningitidis), i respiratorne simptome (Moraxella catarrhalis).

[0405] Medicinski relevantni Gram-negativni bacili uključuju mnoštvo vrsta. Neki od njih prvenstveno izazivaju respiratorne probleme (Hemophilus influenzae, Klebsiella pneumoniae, Legionella pneumophila, Pseudomonas aeruginosa), pre svega probleme sa uriniranjem (Escherichia coli, Enterobacter cloacae), a prvenstveno gastrointestinalne probleme (Helicobacter pilori, Salmonella enterica).

[0406] Gram-negativne bakterije povezane sa bolničkim infekcijama uključuju Acinetobacter baumannii, koji izaziva bakteriemiju, sekundarni meningitis i upalu pluća povezanu sa respiratorom u jedinicama intenzivne nege bolničkih ustanova.

[0407] U jednom aspektu, Gram-negativne bakterijske vrste se biraju iz grupe koju čine E. coli, S. enterica, K. pneumoniae, K. okitoca; E. cloacae, E. aerogenes, E. agglomerans, A. calcoaceticus, A. baumannii; Pseudomonas aeruginosa, Stenotrophomonas maltophilia, Providencia stuartii, P. mirabilis, i P. vulgaris.

[0408] U jednom aspektu, Gram-negativne bakterijske vrste se biraju iz grupe koju čine E. coli, K. pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, i A. baumannii.

[0409] Jedinjenja formule (I) ili (II) ili kompozicije koje ih sadrže su korisne za lečenje infekcija kože i mekih tkiva, gastrointestinalne infekcije, infekcije urinarnog trakta, pneumonije, sepse, intraabdominalne infekcije i akušerskih/ginekoloških infekcija. Infekcije mogu biti Gram-pozitivne ili Gram-negativne bakterijske infekcije.

[0410] Jedinjenja formule (I) ili (II) ili kompozicije koje ih sadrže su korisne za lečenje Pseudomonas infekcije uključujući P. aeruginosa infekcije, na primer infekcije kože i mekih tkiva, gastrointestinalne infekcije, infekcije urinarnog trakta, pneumonije i sepse.

[0411] Jedinjenja formule (I) ili (II) ili kompozicije koje ih sadrže su korisne za lečenje Acinetobacter infekcije uključujući A. baumannii infekciju, pneumoniju, infekciju urinarnog trakta i sepsu.

[0412] Jedinjenja formule (I) ili (II) ili kompozicije koje ih sadrže su korisne za lečenje Klebsiella infekcije uključujući K. pneumoniae infekciju, za pneumoniju, infekciju urinarnog trakta, meningitis i sepsu.

[0413] Jedinjenja formule (I) ili (II) ili kompozicije koje ih sadrže su korisne za lečenje E. coli infekcija uključujući E. coli infekcije, za bakteriemiju, holecistitis, holangitis, infekciju urinarnog trakta, neonatalni meningitis i pneumoniju.

[0414] Aktivni agens može biti agens koji deluje protiv mikroorganizma. Aktivni agens može biti aktivan protiv Gram-negativnih bakterija. Aktivni agens može biti aktivan protiv

4

mikroorganizma izabranog sa gore date liste.

[0415] U jednom aspektu, drugi aktivni agens ima MIC vrednost od 10 mikrograma/mL ili manje protiv mikroorganizma kao što je E. coli, u odsustvu jedinjenja formule (I) ili (II). Mikroorganizam može biti mikroorganizam izabran iz prethodno navedene grupe.

[0416] Specifična jedinjenja koja se koriste kao drugi aktivni agensi su ovde opisana i uključuju:

rifampicin, rifabutin, rifalazil, rifapentin i rifaksimin;

aztreonam i BAL30072;

meropenem, doripenem, imipenem, ertapenem, biapenem, tomopenem i panipenem; tigeciklin, omadaciklin, eravaciklin, doksiciklin i minociklin;

ciprofloksacin, levofloksacin, moksifloksacin i delafloksacin;

Fusidinska kiselina;

Novobiocin;

teihoplanin, telavancin, dalbavancin i oritavancin,

i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati;

[0417] U jednom aspektu, specifična jedinjenja za upotrebu kao drugi aktivni agensi su ovde opisana i obuhvataju rifampicin (rifampin), rifabutin, rifalazil, rifapentin, rifaksimin, aztreonam, oksacilin, novobiocin, fuzidinsku kiselinu, azitromicin, ciprofloksacin, tigetromicin, ciklehromicin, i mupirocin, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati.

[0418] U alternativnom aspektu, jedinjenja formule (I) i (II) su pogodna za upotrebu u lečenju gljivičnih infekcija, na primer u kombinaciji sa antifungalnim agensom. Antifungalni agens može biti izabran od polienskog antigljivičnog sredstva, na primer amfotericina B, imidazola, triazola ili tiazola protiv gljivica, na primer mikaonazola, flukonazola ili abafungina, alilamina, ehinokandina ili drugog agensa, na primer ciklopiroksa.

Tretman

[0419] Termin "tretman", kako se ovde koristi u kontekstu lečenja stanja, odnosi se generalno na lečenje i terapiju, bilo da se radi o čoveku ili životinji (npr. u veterinarskim primenama), u kojoj se postiže neki željeni terapeutski efekat, npr., inhibicija napredovanja stanja, i uključuje smanjenje stope napretka, zaustavljanje stope napretka, ublažavanje simptoma

4

stanja, poboljšanje stanja i izlečenje stanja. Lečenje kao profilaktička mera (tj. profilaksa) je takođe uključeno.

[0420] Na primer, upotreba kod pacijenata koji još nisu razvili stanje, ali koji su u riziku od razvoja ovog stanja, obuhvaćena je terminom „lečenje“.

[0421] Termin "terapeutski efikasna količina", kako se ovde koristi, odnosi se na tu količinu jedinjenja, ili materijala, kompozicije ili doznog oblika koji sadrži jedinjenje, koji je efikasan za proizvodnju nekog željenog terapeutskog efekta, srazmernog razumnom odnosu korist/rizik, kada se primenjuje u skladu sa željenim režimom lečenja.

[0422] Termin "tretman" uključuje kombinovane tretmane i terapije, kao što je ovde opisano, u kojima se kombinuju dva ili više tretmana ili terapija, na primer, uzastopno ili istovremeno.

Kombinovana terapija

[0423] Jedinjenje formule (I) ili (II) se može primeniti zajedno sa aktivnim agensom. Primena može biti istovremena, odvojena ili sekvencijalna.

[0424] Postupka i način primene zavisiće od farmakokinetike jedinjenja formule (I) ili (II) i drugog agensa.

[0425] Pod "istovremenom" primenom, podrazumeva se da se jedinjenje formule (I) ili (II) i drugo sredstvo daju subjektu u jednoj dozi na isti način primene.

[0426] Pod "odvojenom" primenom, podrazumeva se da se jedinjenje formule (I) ili (II) i drugi agens daju subjektu na dva različita načina primene koji se javljaju u isto vreme. Ovo se može desiti na primer kada se jedan agens primenjuje infuzijom, a drugi se daje oralno tokom infuzije.

[0427] Pod "sekvencionalnim" se podrazumeva da se dva agensa primenjuju u različitim vremenskim trenucima, pod uslovom da je aktivnost prvog primenjenog agensa prisutna i u toku u subjektu u vreme kada se drugi agens primenjuje.

[0428] Generalno, sekvencijalna doza će se desiti tako da se drugo od dva agensa primeni u roku od 48 sati, poželjno u roku od 24 sata, kao što je u roku od 12, 6, 4, 2 ili 1 sat(a) od prvog agensa. Alternativno, prvo se može primeniti aktivni agens, a zatim jedinjenje formule (I) ili (II).

[0429] Na kraju, redosled i vreme primene jedinjenja i drugog agensa u kombinovanom tretmanu zavisiće od farmakokinetičkih svojstava svakog od njih.

[0430] Količina jedinjenja formule (I) ili (II) koja se daje subjektu će na kraju zavisiti od prirode subjekta i bolesti koja se leči. Slično tome, količina aktivnog agensa koja će biti primenjena subjektu će na kraju zavisiti od prirode subjekta i bolesti koja se leči.

Formulacije

[0431] U jednom aspektu, ovaj pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje formule (I) ili (II) zajedno sa farmaceutski prihvatljivim nosačem. Farmaceutska kompozicija može dodatno da sadrži drugi aktivni agens. U alternativnoj varijanti, gde je drugi agens obezbeđen za upotrebu u terapiji, drugi agens može biti formulisan odvojeno od jedinjenja formule (I) ili (II). Komentari u nastavku dati u vezi sa jedinjenjem formule (I) ili (II) se stoga mogu odnositi i na drugo sredstvo, kako je posebno formulisano.

[0432] Iako je moguće da se jedinjenje formule (I) ili (II) daje samostalno ili zajedno sa drugim agensom, poželjno je da se predstavi kao farmaceutska formulacija (npr. kompozicija, preparat, lek) koja sadrži najmanje jedno jedinjenje formule (I) ili (II), kao što je ovde opisano, zajedno sa jednim ili više drugih farmaceutski prihvatljivih sastojaka dobro poznatih stručnjacima, uključujući, ali ne ograničavajući se na, farmaceutski prihvatljive nosače, razblaživače, ekscipijente, adjuvanse, punioce, pufere, konzervanse, antioksidante, maziva, stabilizatore, solubilizatore, surfaktante (npr. sredstva za vlaženje), sredstva za maskiranje, sredstva za bojenje, arome i zaslađivače. Formulacija može dalje da sadrži druge aktivne agense, na primer, druga terapeutska ili profilaktička sredstva.

[0433] Dakle, ovaj pronalazak dalje obezbeđuje farmaceutske kompozicije, kao što je gore definisano, i metode za pravljenje farmaceutske kompozicije koje se sastoje od mešanja najmanje jednog jedinjenja formule (I) ili (II), kako je ovde opisano, zajedno sa jednim ili više drugih farmaceutski prihvatljivih sastojaka dobro poznatih stručnjacima, npr. nosači, razblaživači, ekscipijenti, itd. Ako je formulisana kao diskretne jedinice (npr. tablete, itd.), svaka jedinica sadrži unapred određenu količinu (doziranje) jedinjenja. Kompozicija opciono dalje sadrži drugi aktivni agens u unapred određenoj količini.

[0434] Termin "farmaceutski prihvatljiv", kako se ovde koristi, odnosi se na jedinjenja, sastojke, materijale, kompozicije, dozne oblike, itd., koji su, u okviru zdrave medicinske procene, pogodni za upotrebu u kontaktu sa tkivima subjekta o kom se radi (npr. ljudsko) bez prekomerne toksičnosti, iritacije, alergijskog odgovora ili drugih problema ili komplikacija, srazmerno razumnom odnosu korist/rizik. Svaki nosač, razblaživač, ekscipijens, itd. takođe mora biti "prihvatljiv" u smislu da je kompatibilan sa drugim sastojcima formulacije.

[0435] Odgovarajući nosači, razblaživači, ekscipijenti itd. mogu se naći u standardnim farmaceutskim tekstovima, npr. Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th edition, Mack

1

Publishing Company, Easton, Pa., 1990; i Handbook of Pharmaceutical Excipients, 5th edition, 2005.

[0436] Formulacije se mogu pripremiti bilo kojim postupcima dobro poznatim u farmaciji. Takvi postupci uključuju korak dovođenja u vezu jedinjenja formule (I) ili (II) sa nosačem koji čini jedan ili više pomoćnih sastojaka. Generalno, formulacije se pripremaju uniformnim i intimnim dovođenjem jedinjenja u vezu sa nosačima (npr. tečni nosači, fino usitnjeni čvrsti nosači, itd.), a zatim oblikovanjem proizvoda, ako je potrebno.

[0437] Formulacija se može pripremiti da obezbedi brzo ili sporo oslobađanje; trenutno, odloženo, vremenski ili produženo oslobađanje; ili njihovu kombinaciju.

[0438] Formulacije mogu prikladno biti u obliku tečnosti, rastvora (npr. vodeni, nevodeni), suspenzija (npr. vodeni, nevodeni), emulzija (npr. ulje u vodi, voda u ulju), eliksira , sirupi, elektuari, vodice za ispiranje usta, kapi, tablete (uključujući, npr. obložene tablete), granule, praškovi, pastile, pastile, kapsule (uključujući, npr., tvrde i meke želatinske kapsule), kašete, pilule, ampule, bolusi, supozitoriji, pesari, tinkture, gelovi, paste, masti, kreme, losioni, ulja, pene, sprejevi, magle ili aerosoli.

[0439] Formulacije se mogu prikladno obezbediti kao flaster, lepljivi flaster, zavoj, obloga ili slično koji je impregniran sa jednim ili više jedinjenja i opciono jednim ili više drugih farmaceutski prihvatljivih sastojaka, uključujući, na primer, pojačivače penetracije, permeacije i apsorpcije. Formulacije se takođe mogu prikladno obezbediti u obliku depoa ili rezervoara.

[0440] Jedinjenje može biti rastvoreno, suspendovano ili pomešano sa jednim ili više drugih farmaceutski prihvatljivih sastojaka. Jedinjenje može biti predstavljeno u lipozomu ili drugim mikročesticama koje su dizajnirane da ciljaju jedinjenje, na primer, na komponente krvi ili jedan ili više organa. Kada se koristi lipozom, primećuje se da lipozom može da sadrži i jedinjenje formule (I) ili (II) i drugo sredstvo.

[0441] Formulacije pogodne za oralnu primenu (npr. gutanjem) uključuju tečnosti, rastvore (npr. vodene, nevodene), suspenzije (npr. vodene, nevodene), emulzije (npr. ulje u vodi, voda u- ulje), eliksire, sirupe, elektuare, tablete, granule, praškove, kapsule, kašete, pilule, ampule, boluse.

[0442] Formulacije pogodne za bukalnu primenu uključuju vodice za ispiranje usta, pastile, kao i flastere, lepljive flastere, depoe i rezervoare. Lozenge obično sadrže jedinjenje na aromatizovanoj bazi, obično saharozu i bagrem ili tragant. Pastile obično sadrže jedinjenje u inertnom matriksu, kao što su želatin i glicerin, ili saharoza i bagrem. Vode za ispiranje usta obično sadrže jedinjenje u odgovarajućem tečnom nosaču.

2

[0443] Formulacije pogodne za sublingvalnu primenu uključuju tablete, pastile, kapsule i pilule.

[0444] Formulacije pogodne za oralnu transmukoznu primenu uključuju tečnosti, rastvore (npr. vodene, nevodene), suspenzije (npr. vodene, nevodene), emulzije (npr. ulje u vodi, voda u ulju), vodice za ispiranje usta, lozenge, pastile, kao i flastere, lepljive flastere, depoe i rezervoare.

[0445] Formulacije pogodne za neoralnu transmukoznu primenu uključuju tečnosti, rastvore (npr. vodene, nevodene), suspenzije (npr. vodene, nevodene), emulzije (npr. ulje u vodi, voda u ulju), supozitorije, pesare, gelove, paste, masti, kreme, losione, ulja, kao i flastere, lepljivi flastere, depoe i rezervoare.

[0446] Formulacije pogodne za transdermalnu primenu uključuju gelove, paste, masti, kreme, losione i ulja, kao i flastere, lepljive flastere, zavoje, obloge, depoe i rezervoare.

[0447] Tablete se mogu napraviti konvencionalnim sredstvima, na primer, kompresijom ili oblikovanjem, opciono sa jednim ili više pomoćnih sastojaka. Kompresovane tablete se mogu pripremiti komprimovanjem u odgovarajućoj mašini jedinjenja u slobodnom toku kao što je prah ili granule, opciono pomešane sa jednim ili više veziva (npr. povidon, želatin, bagrem, sorbitol, tragant, hidroksipropilmetil celuloza); punioci ili razblaživači (npr. laktoza, mikrokristalna celuloza, kalcijum hidrogen fosfat); maziva (npr. magnezijum stearat, talk, silicijum dioksid); dezintegranti (npr., natrijum skrob glikolat, unakrsno vezani povidon, unakrsno vezani natrijum karboksimetil celuloza); površinski aktivna sredstva ili sredstva za dispergovanje ili vlaženje (npr. natrijum lauril sulfat); konzervansi (npr. metil phidroksibenzoat, propil p-hidroksibenzoat, sorbinska kiselina); arome, agensi za poboljšanje ukusa i zaslađivači. Oblikovane tablete se mogu napraviti oblikovanjem u odgovarajućoj mašini mešavine praškastog jedinjenja navlaženog inertnim tečnim razblaživačem. Tablete mogu opciono biti obložene ili urezane i mogu biti formulisane tako da obezbede sporo ili kontrolisano oslobađanje jedinjenja u sebi koristeći, na primer, hidroksipropilmetil celulozu u različitim proporcijama da bi se obezbedio željeni profil oslobađanja. Tablete mogu opciono da budu sa oblogom, na primer, da utiče na oslobađanje, na primer enteričkom oblogom, da bi se obezbedilo oslobađanje u delovima creva koji nisu u stomaku.

[0448] Masti se obično pripremaju od jedinjenja i parafinske baze ili baze masti koja se meša sa vodom.

[0449] Kreme se obično pripremaju od jedinjenja i baze za kremu ulje u vodi. Po želji, vodena faza baze kreme može da sadrži, na primer, najmanje oko 30% tež./tež. polihidroksilnog alkohola, tj. alkohola koji ima dve ili više hidroksilnih grupa kao što je propilen glikol, butan-1,3- diol, manitol, sorbitol, glicerol i polietilen glikol i njihove smeše. Lokalne formulacije mogu poželjno uključiti jedinjenje koje poboljšava apsorpciju ili prodiranje jedinjenja kroz kožu ili druga zahvaćena područja. Primeri takvih pojačivača penetracije kroz kožu uključuju dimetilsulfoksid i srodne analoge.

[0450] Emulzije se tipično pripremaju od jedinjenja i uljane faze, koja opciono može da sadrži samo emulgator (inače poznat kao emulgent), ili može da sadrži mešavinu najmanje jednog emulgatora sa masti ili uljem ili sa mastima i ulje. Poželjno, hidrofilni emulgator je uključen zajedno sa lipofilnim emulgatorom koji deluje kao stabilizator. Takođe je poželjno uključiti i ulje i mast. Zajedno, emulgatori sa ili bez stabilizatora sačinjavaju takozvani emulgujući vosak, a vosak zajedno sa uljem i/ili masti čine takozvanu bazu za emulzifikaciju masti koja formira uljanu dispergovanu fazu formulacije kreme.

[0451] Pogodni emulgensi i stabilizatori emulzije uključuju Tween 60, Span 80, cetostearil alkohol, miristil alkohol, gliceril monostearat i natrijum lauril sulfat. Izbor odgovarajućih ulja ili masti za formulaciju zasniva se na postizanju željenih kozmetičkih svojstava, pošto rastvorljivost jedinjenja u većini ulja koja će se verovatno koristiti u formulacijama farmaceutskih emulzija može biti veoma niska. Prema tome, poželjno je da krema bude nemasni proizvod koji ne ostavlja mrlje i koji se može prati, odgovarajuće konzistencije kako bi se izbeglo curenje iz tuba ili drugih kontejnera. Mogu se koristiti estri pravog ili razgranatog lanca, mono- ili dvobazni alkil estri kao što su di-izoadipat, izocetil stearat, propilen glikol diestar kokosovih masnih kiselina, izopropil miristat, decil oleat, izopropil palmitat, butil stearat, 2-etilheksila palmitat, mešavina razgranatih estara poznatih kao Crodamol CAP, pri čemu su poželjna poslednja tri estra. Oni se mogu koristiti sami ili u kombinaciji u zavisnosti od potrebnih svojstava. Alternativno, mogu se koristiti lipidi visoke tačke topljenja kao što su beli meki parafin i/ili tečni parafin ili druga mineralna ulja.

[0452] Formulacije pogodne za intranazalnu primenu, gde je nosač tečnost, uključuju, na primer, sprej za nos, kapi za nos, ili primenu aerosola pomoću nebulizatora, uključuju vodene ili uljane rastvore jedinjenja. Kao alternativni postupak primene, isporuka suvog praha se može koristiti kao alternativa nebulizovanim aerosolima.

[0453] Formulacije pogodne za intranazalnu primenu, gde je nosač čvrsta supstanca, uključuju, na primer, one predstavljene kao grubi prah koji ima veličinu čestica, na primer, u opsegu od oko 20 do oko 500 mikrona koji se primenjuje na način na koji se uzima burmut, odnosno brzim udisanjem kroz nosni prolaz iz posude sa prahom koja se drži blizu nosa.

[0454] Formulacije pogodne za plućnu primenu (npr. inhalacijom ili insuflacionom terapijom) uključuju one predstavljene u obliku aerosolnog spreja iz pakovanja pod

4

pritiskom, uz upotrebu odgovarajućeg potisnog gasa, kao što je dihlorodifluorometan, trihlorofluorometan, dihlorotetrafluoroetan, ugljen-dioksid ili drugi pogodni gasovi. Dodatno ili alternativno, formulacija za plućnu primenu može biti formulisana za primenu iz nebulizatora ili inhalatora suvog praha. Na primer, formulacija se može obezbediti sa nosačima ili lipozomima kako bi se obezbedila odgovarajuća veličina čestica za dostizanje odgovarajućih delova pluća, da bi se pomoglo davanje odgovarajuće doze i/ili da bi se poboljšalo zadržavanje u plućnom tkivu.

[0455] Formulacije pogodne za očnu primenu uključuju kapi za oči gde je jedinjenje rastvoreno ili suspendovano u pogodnom nosaču, posebno u vodenom rastvaraču za jedinjenje.

[0456] Formulacije pogodne za rektalnu primenu mogu biti predstavljene kao supozitorije sa odgovarajućom bazom koja sadrži, na primer, prirodna ili stvrdnuta ulja, voskove, masti, polutečne ili tečne poliole, na primer, kakao puter ili salicilat; ili kao rastvor ili suspenzija za lečenje klistirom.

[0457] Formulacije pogodne za vaginalnu primenu mogu biti predstavljene kao pesarije, tamponi, kreme, gelovi, paste, pene ili formulacije u spreju koje sadrže pored jedinjenja, takve nosače za koje je poznato da su odgovarajući.

[0458] Formulacije pogodne za parenteralnu primenu (npr. injekcijom), uključuju vodene ili nevodene, izotonične, sterilne tečnosti bez pirogena (npr. rastvore, suspenzije), u kojima je jedinjenje rastvoreno, suspendovano ili na drugi način obezbeđeno (npr. u lipozomu ili drugoj mikročestici). Takve tečnosti mogu dodatno da sadrže i druge farmaceutski prihvatljive sastojke, kao što su antioksidansi, puferi, konzervansi, stabilizatori, bakteriostati, sredstva za suspendovanje, sredstva za zgušnjavanje i rastvorene supstance koje čine formulaciju izotoničnom sa krvlju (ili drugom relevantnom telesnom tečnošću) predviđenog primaoca. Primeri ekscipijenata uključuju, na primer, vodu, alkohole, poliole, glicerol, biljna ulja i slično. Primeri pogodnih izotoničnih nosača za upotrebu u takvim formulacijama uključuju injekciju natrijum hlorida, Ringerov rastvor ili Ringerovu injekciju laktata. Tipično, koncentracija jedinjenja u tečnosti je od oko 1 ng/mL do oko 100 µg/mL, na primer od oko 10 µg/mL do oko 10 µg/mL, na primer od oko 10 µg/mL do oko 1 µg /mL. Formulacije mogu biti predstavljene u zatvorenim kontejnerima sa jediničnim dozama ili višestrukim dozama, na primer, u ampulama i bočicama, i mogu se čuvati u zamrznutom sušenom (liofilizovanom) stanju koje zahteva samo dodavanje sterilnog tečnog nosača, na primer vode za injekcije, neposredno pre upotrebe. Rastvori i suspenzije za ekstemporalnu injekciju mogu se pripremiti od sterilnih prahova, granula i tableta.

Doziranje

[0459] Generalno, postupci pronalaska mogu da obuhvataju davanje subjektu efikasne količine jedinjenja formule (I) ili (II) tako da se obezbedi antimikrobni efekat. Jedinjenje formule (I) ili (II) se može primeniti u količini koja je dovoljna da pojača aktivnost drugog aktivnog sredstva. Drugi aktivni agens se daje subjektu u efikasnoj količini tako da se obezbedi antimikrobni efekat.

[0460] Stručnjak će ceniti da odgovarajuće doze jedinjenja formule (I) ili (II) ili aktivnog agensa, i kompozicije koje sadrže jedinjenje formule (I) ili (II) ili aktivni agens, može varirati od pacijenta do pacijenta. Određivanje optimalne doze će generalno uključivati balansiranje nivoa terapeutske koristi u odnosu na bilo koji rizik ili štetne sporedne efekte. Odabrani nivo doze zavisiće od niza faktora, uključujući, ali ne ograničavajući se na, aktivnost određenog jedinjenja formule (I) ili (II) ili aktivnog agensa, put primene, vreme primene, brzinu izlučivanja jedinjenja, trajanja lečenja, drugih lekova, jedinjenja i/ili materijala koji se koriste u kombinaciji, ozbiljnosti stanja i vrste, pola, starosti, težine, stanja, opšteg zdravlja i prethodne medicinske istorije pacijenta. Količina jedinjenja formule (I) ili (II) ili aktivnog agensa i način primene će na kraju biti po diskreciji lekara, veterinara ili kliničara, iako će generalno doza biti odabrana tako da se postižu lokalne koncentracije na mestu akcije koje postižu željeni efekat bez izazivanja značajnih štetnih ili nepovoljnih nuspojava.

[0461] Primena se može izvršiti u jednoj dozi, kontinuirano ili povremeno (npr. u podeljenim dozama u odgovarajućim intervalima) tokom celog toka lečenja. Postupci za određivanje najefikasnijih načina i doze davanja su dobro poznati stručnjacima u ovoj oblasti i variraće u zavisnosti od formulacije koja se koristi za terapiju, svrhe terapije, ciljne ćelije(a) koja se tretira i subjekata koji su tretirani. Pojedinačna ili višestruka primena se može sprovesti sa nivoom doze i šemom koju bira lekar koji leči, veterinar ili kliničar.

[0462] Generalno, pogodna doza jedinjenja formule (I) ili (II) ili aktivnog agensa je u opsegu od oko 10 µg do oko 250 mg (tipičnije oko 100 µg do oko 25 mg) po kilogramu telesne težine predmet po danu. Kada je jedinjenje formule (I) ili (II) ili aktivni agens so, estar, amid, prolek ili slično, primenjena količina se izračunava na osnovu matičnog jedinjenja i tako da se stvarna težina koji se koristi proporcionalno povećava.

Kompleti

[0463] Jedan aspekt pronalaska se odnosi na komplet koji sadrži (a) jedinjenje formule (I) ili (II), ili kompoziciju koja sadrži jedinjenje kao što je definisano u bilo kojoj od formula (I) ili (II), npr. u odgovarajućoj posudi i/ili u odgovarajućem pakovanju; i (b) uputstva za upotrebu, npr. pisana uputstva o tome kako da se primeni jedinjenje ili kompozicija.

[0464] Pisana uputstva mogu takođe uključiti listu indikacija za koje je jedinjenje formule (I) ili (II) pogodan tretman.

[0465] U jednom aspektu, komplet dalje sadrži (c) drugi aktivni agens, ili kompoziciju koja sadrži drugi aktivni agens. Ovde pisana uputstva mogu takođe uključiti listu indikacija za koje je drugo aktivno sredstvo, zajedno sa jedinjenjem formule (I) ili (II), pogodno za lečenje.

Putevi primene

[0466] Jedinjenje formule (I) ili (II), drugo sredstvo, ili farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje formule (I) ili (II), ili drugo sredstvo može se davati subjektu na bilo koji pogodan način davanja, bilo sistemski/periferno ili lokalno (tj. na mestu željene akcije).

[0467] Putevi primene uključuju, ali nisu ograničeni na, oralni (npr. gutanjem); bukalni; sublingvalno; transdermalno (uključujući, npr., flaster, flaster, itd.); transmukozni (uključujući, na primer, flaster, flaster, itd.); intranazalno (npr. sprejom za nos); očne (npr. kapi za oči); plućne (npr. inhalacijom ili insuflacionom terapijom korišćenjem, npr., putem aerosola, npr. kroz usta ili nos); rektalno (npr. supozitorijom ili klistirom); vaginalni (npr. pesarom); parenteralno, na primer, injekcijom, uključujući subkutanu, intradermalnu, intramuskularnu, intravensku, intraarterijsku, intrakardijalnu, intratekalnu, intraspinalnu, intrakapsularnu, subkapsularnu, intraorbitalnu, intraperitonealnu, intratrahealnu, subkutikularnu, intraartikularnu, intraartikularnu; implantacijom depoa ili rezervoara, na primer, subkutano ili intramuskularno.

Predmet/Pacijent

[0468] Subjekt/pacijent može biti hordat, kičmenjak, sisar, placentni sisar, torbar (npr. kengur, vombat), glodar (npr. zamorac, hrčak, pacov, miš), miš ( na primer, miš), lagomorf (npr. zec), ptica (npr. ptica), pas (npr. pas), mačka (npr. mačka), konj (npr. konj), svinja (npr., svinja), ovca (npr. ovca), goveda (npr. krava), primat, simia (npr. majmun ili bezrepi majmun), majmun (npr. marmozet, pavijan), majmun (npr. gorila, šimpanza, orangutan, gibon) ili čovek. Dodatno, subjekt/pacijent može biti bilo koji od njegovih razvojnih stadijuma, na primer, fetus.

[0469] U jednom poželjnom izvođenju, subjekt/pacijent je čovek.

[0470] Takođe je predviđeno da se ovaj pronalazak može primeniti na neljudskoj životinji koja ima mikrobnu infekciju. Sisar koji nije čovek može biti glodar. Glodari uključuju pacove, miševe, zamorce, činčile i druge male glodare slične veličine koji se koriste u laboratorijskim istraživanjima.

Postupci pripreme

[0471] Jedinjenja formule (I) i (II) mogu se dobiti konvencionalnom sintezom peptida, korišćenjem postupaka poznatih stručnjacima. Pogodni postupci uključuju sintezu u fazi rastvora, kao što je opisano u Iamada et al, J. Peptide Res. 64, 2004, 43-50 ili sintezom u čvrstoj fazi kao što je opisano od de Visser et al, J. Peptide Res, 61, 2003, 298-306, i Vaara et al, Antimicrob. Agents and chemotherapy, 52, 2008. 3229-3236. Ovi postupci uključuju odgovarajuću strategiju zaštite i postupke za korak ciklizacije. Alternativno, jedinjenja se mogu pripremiti od lako dostupnih polimiksina, na primer uklanjanjem N-terminalne amino kiseline polimiksina (ostatak 1). Ovakav postupak je ovde opisan za pripremu jedinjenja na bazi ostataka 2-10 polimiksina B i E.

[0472] Kao što je ovde prikazano, moguće je derivatizovati N terminalnu grupu jedinjenja deacilovanog polimiksina, kao što je deacilovani polimiksin B i deacilovani polimiksin B nonapeptid, bez derivatizacije amino grupa koje su prisutne u bočnim lancima polimiksinskog jedinjenja. Kao što je ovde opisano, bočni lanci polimiksinskog jedinjenja mogu biti selektivno zaštićeni bez zaštite N terminalne grupe. N terminalna grupa može zatim reagovati da bi se obezbedio odgovarajući N terminalni supstituent. Zaštita bočnog lanca može se naknadno ukloniti.

[0473] Zaštićeni polimiksin takođe može da se odcepi na odgovarajući heptapeptid cepanjem aminokiselina 1-3. Postupci za ovo cepanje su opisani u WO 2012/168820, i WO 1988/00950. Kao što je ovde prikazano, ovo se može derivatizovati kuplovanjem na odgovarajuće supstituisane dipeptide ili tripeptide da bi se dobili novi derivati polimiksina.

Druge preference

[0474] Svaka kompatibilna kombinacija gore opisanih izvođenja je eksplicitno otkrivena ovde, kao da je svaka kombinacija pojedinačno i eksplicitno navedena.

[0475] Različiti dalji aspekti i realizacije sadašnjeg pronalaska biće očigledni stručnjacima u ovoj oblasti u pogledu ovog otkrića.

"i/ili" gde se ovde koristi treba uzeti kao specifično otkrivanje svake od dve specificirane karakteristike ili komponente sa ili bez druge. Na primer, „A i/ili B“ treba uzeti kao specifično otkrivanje svakog od (i) A, (ii) B i (iii) A i B, baš kao da je svako pojedinačno ovde izloženo.

[0476] Osim ako kontekst ne nalaže drugačije, opisi i definicije karakteristika koje su gore navedene nisu ograničene ni na jedan poseban aspekt ili realizaciju pronalaska i podjednako se primenjuju na sve aspekte i realizacije koje su opisane. Tamo gde je tehnički odgovarajuće realizacije se mogu kombinovati i tako se otkriće proširuje na sve permutacije i kombinacije ovde datih realizacija.

[0477] Određeni aspekti i realizacije pronalaska će sada biti ilustrovani primerom i pozivanjem na gore opisane slike.

Skraćenice

Primeri

[0478] Sledeći primeri su dati samo da ilustruju ovaj pronalazak i nisu namenjeni da ograniče obim pronalaska, kao što je ovde opisano.

[0479] Nomenklatura - Jedinjenja su imenovana na osnovu prirodnog polimiksinskog jezgra iz kojeg su sintetički izvedena.

Primeri sinteze

Intermedijer1 - Polimiksin B nonapeptid

[0480] Smeša EDTA (1,4 g), kalijum hlorida (1,1 g) i L-cisteina (0,12 g) rastvorena je u vodi (475 mL) i puferu kalijum fosfata (pH 7, 25 mL). Reakcija je mešana na 37°C tokom 10 min, a zatim je dodat polimiksin B (10,3 g). Posle mešanja tokom 2 h na 37 °C papain (3,36 U/mg) je dodat i mešan još 18 h na 37 °C. Napredovanje reakcije je praćeno pomoću LC-MS koristeći uslove navedene u Tabeli 1. Sirovi materijal je odvojen na frakcije od 87 mL i prečišćen korišćenjem 10 g SCX kertridža (x6), eluiranjem prvo metanolom (100 mL), a zatim 20% amonijaka (vod, sp.g.880) u metanolu (100 mL). Frakcije amonijaka su izolovane i uparene da bi se dobio proizvod kao bež čvrsta supstanca, prinos 4,95 g, 60% m/z 482, [M+2H]<2+>.

Tabela 1 - LC-MS uslovi

Intermedijer2 - Tetra-(Boc) polimiksin B nonapeptid

[0481] Selektivna BOC zaštita slobodnih γ-amino grupa na Dab ostacima nonapeptida polimiksina B sprovedena je postupkom od H. O'Dovd et al, Tetrahedron Lett., 2007, 48, 2003-2005. Polimiksin B nonapeptid (Intermedijer 1 1.00 g, 1,0 mmol) je rastvoreno u vodi (4,4 mL), dioksanu (4,4 mL), trietilaminu (4,4 mL) i smeša je mešana 10 minuta pre dodavanja 2-(terc-butoksikarboniloksiimino)-2-fenilacetonitrila ( Boc-ON) (0,77 g; 3,11

1

mmol). Posle mešanja tokom 18 h, dodato je još Boc-ON (0,1 g, 0,4 mmol) i smeša je mešana još 3 h. Napredak reakcije je praćen LC-MS, kada je završena smeša je ugašena dodatkom 20% metanolnog amonijaka (50 mL). Smeša je zatim uparena do suva i ponovo rastvorena u metanolu koji je zatim stavljen na silicijum dioksid. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom (eluent 0-20% metanol u dihlorometanu) na silika gelu (40 g) da bi se dobio tetra-(Boc) polimiksin B nonapeptid kao bela čvrsta supstanca (0,5 g, 36 %). TLC, Rf0.2 (10% metanol u dihlorometanu). m/z 1362.8[MH]<+>.

Intermedijer3 - Kolistin (polimiksin E) nonapeptid

[0482] Kolistin (polimiksin E, 5 g) je tretiran imobilisanim papainom (185 ELU/g), puferom kalijum fosfata (25 mM; pH 7, 1,25 L), kalijum hloridom (30 mM), EDTA (10 mM) i cisteinom (1 mM) na 37°C tokom 32 h uz lagano mešanje da bi se proizveo kolistin (polimiksin E) nonapeptid. Napredak reakcije je praćen pomoću LC-MS koristeći uslove navedene za Intermedijer 1, Tabela 1. Imobilisani papain je uklonjen filtracijom i filtrat je koncentrovan in vacuo da bi se ostavio čvrsti ostatak koji je ponovo suspendovan u 10% vodenom rastvoru metanola i ostavljen na sobnoj temperaturi preko noći. Supernatant je dekantovan i koncentrovan in vacuo. Kolistin (polimiksin E) nonapeptid je prečišćen iz ostatka pomoću SPE na C18 silicijum dioksidu (10 g), eluiranjem sa 0-25% vodenim metanolom. Uparavanje odgovarajućih frakcija dalo je proizvod u vidu bele čvrste supstance. m/z 465.32 [M+2H]<2+>.

Intermedijer4 - Tetra-(Boc) kolistin (polimiksin E) nonapeptid

[0483] Kolistin (polimiksin E) nonapeptid (2,5 g, 2,69 mmol) je suspendovan u vodi (35 mL) uz pomoć ultrazvuka. Dodati su dioksan (35 mL) i trietilamin (35 mL) i smeša je hlađena u ledu 10 minuta pre dodavanja 2-(terc-butoksikarboniloksiimino)-2-fenilacetonitrila (Boc-ON) (2,65 g; 10,76 mmol). Napredak reakcije je praćen LC-MS i dostigao je završetak nakon 10 minuta, nakon čega je smeša ugašena dodavanjem 20% metanolnog amonijaka (25 mL). Tečna faza je dekantovana, a zaostala čvrsta supstanca je ponovo rastvorena u vodi i ekstrahovana uzastopno sa dihlorometanom i izo-butanolom. Na osnovu LC-MS analize, dekantovana tečnost i ekstrakti dihlormetana i izo-butanola su spojeni zajedno, a zatim je izvršena koncentracija in vacuo da bi se dobila žuta guma koja je stavljena na fleš hromatografiju (Si 60A-35-70). Kolona je eluirana sa 0-20% metanola (koji sadrži 2%

2

amonijaka) u dihlorometanu. Frakcije kolone eluirane sa 7-10% metanola (koji sadrži 2% amonijaka) u dihlorometanu daju tetra-(Boc) kolistin (polimiksin E) nonapeptid kao belu čvrstu supstancu (1,18 g, 33 %). m/z 1329.7 [M+H]<+>.

Intermedijer 5 - Tri-(Boc) polimiksin B heptapeptid

[0484] PMB sulfat (2 g) je rastvoren u vodi (20 mL), a zatim je dodat 1,4 dioksan (40 mL) i ostavljeno da se meša 10 minuta na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu je dodat Boc anhidrid (4,42 g) kao čvrsta supstanca i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi i praćena HPLC. Reakciona smeša je zatim podešena na pH 6 korišćenjem 1 M HCl, formirani talog je filtriran i ispran vodom (50 mL) i heptanom (50 mL), da bi se ostavio Boc5PMB kao bela čvrsta supstanca (2,4 g, 85 %). Ovaj materijal (1 g) je rastvoren u 1,4-butandiolu (112,5 mL) i smeša je mešana na 40°C preko noći. U rastvor je dodat kalijum fosfat (75 mL, 0,125M pH 8,0) tokom jednog minuta, izazivajući formiranje bele suspenzije. Reakcija je razblažena dodavanjem 112,5 mL butandiola i 75 mL kalijum fosfata (0,125 M pH 8,0), ali je bela emulzija ostala. Temperatura reakcije je smanjena na 37°C i zatim je dodata Savinase 16L (250 uL) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Kako je reakcija napredovala, bela emulzija se razbistrila i formirala prozirni rastvor usled formiranja rastvorljivijeg PMBH-Boc3. Reakciona smeša je razblažena vodom (50 ml) i zatim ekstrahovana sa DCM (100 mL). DCM sloj je sakupljen i uparen in vacuo da bi se dobilo bezbojno ulje. Dobijeno ulje je razblaženo u 50% metanola (vod.) i napunjeno u četiri unapred kondicionisana 10 g Varian Bond Elut SCX kertridža i protok je sakupljen. Kertridži su isprani sa dve zapremine kolone 50% metanola (ak.), a zatim PMBH-Boc3je eluiran iz kolone korišćenjem dve zapremine kolone od 20% amonijaka u metanolu. Dobijeni eluent je uparen do suva in vacuo da se dobije prečišćeni PMBH-Boc3(610 mg). m/z 1062.6 [M+H]<+>.

Intermedijer 6 - Penta-(Boc) polimiksin B dekapeptid

[0485] PMB sulfat (2 g) je rastvoren u 100 mM kalijum fosfata pH 8.0 (500 mL približno). U rastvor, sirova polimiksin acilaza (ekstrahovana iz Pseudomonas sp. M-6-3V) je dodat u odnosu od 0,0125 g enzima: 1 g PMB. Reakcija je mešana na 37°C tokom 16 sati. Reakciona smeša je zatim stavljena na Varian Bond Elut SCX smolu (patrone prethodno kondicionirane prema uputstvima proizvođača), a zatim su kertridži isprani vodom. Deacilovani polimiksin dekapeptid (PMB) je eluiran iz SCX kolone korišćenjem 20% amonijaka u metanolu i rezultujuće frakcije su uparene do suva. (b) PMBD (2,2 g) je rastvoren u vodi (10 mL) nakon čega je usledilo dodavanje 1,4-dioksana (10 mL) i trietilamina (10 mL) uz mešanje na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu je dodat Boc-ON (5 ekviv.) kao čvrsta supstanca i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi i praćena HPLC. PMBD-BoC5je prečišćen fleš hromatografijom unošenjem u DCM i zatim razvijanjem kolone korišćenjem stepenastog gradijenta DCM:MeOH:NH3od 100:0:0, 91:7:2, 88:10:2, 83:15:2 i 78:20:2. Frakcije koje sadrže PMBD-Boc5su uparene do suva da bi se dobio beli prah (0,48 g, 15 %). m/z 1563.8 [M+H]<+>.

Intermedijer 7 - Thr(O-<t>Bu) Tetra-(N-Boc) polimiksin B nonapeptid

Korak 1 - metil estar (S)-2-((S)-2-benziloksikarbonilamino-3-terc-butoksi-butirilamino)-4-terc-butoksikarbonilamino-buterna kiselina

[0486] U mešanu suspenziju DHCA soli (S)-2-benziloksikarbonilamino-3-terc-butoksibuterne kiseline (3,65 g, 7,4 mmol) i metil estra (S)-2-amino-4-terc-butoksikarbonilaminobuterne kiseline HCl so (2,0 g, 7,4 mmol) u smeši DCM (60 mL) i DMF (120 mL) je dodat N,N-diizopropiletilamin (3,85 mL, 22,1 mmol). Ovoj mešanoj smeši je dodat 1-hidroksi-7-azabenzotriazol (1,0 g, 7,3 mmol), a zatim N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid HCl so (1,42 g, 7,4 mmol). Smeša je mešana 17 h na sobnoj temperaturi, a zatim filtrirana pod usisavanjem da bi se uklonio nerastvorljivi nusproizvod, koji je odbačen. Filtrat je koncentrovan do žutog ulja koje je podeljeno između smeše rastvarača EtOAc/Et2O (1:1) (250 mL) i 0,5 M hlorovodonična kiselina (200 mL). Vodena faza je ponovo ekstrahovana svežom smešom rastvarača (100 mL) i kombinovani organski ekstrakti su sukcesivno isprani vodom (150 mL) i zas. NaHCO3rastvorom (150 mL), osušeni (Na2SO4) i koncentrovani do bezbojnog ulja (3,72 g). Ovo ulje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu na 100 g SepPak kertridžu, eluiranjem sa gradijentom rastvarača EtOAc/i-heksan (0-70%). Frakcije koje sadrže proizvod (Rf0.26 u EtOAc/i-heksan 3:7, vizuelizovano sa KMnO4sprej) su sakupljene i koncentrovane da bi se dobila jedinjenja iz naslova kao bezbojna pena (3,58 g, 6,8 mmol, 92% prinos). m/z 524 (MH<+>, 100%).

Korak 2 - (S)-2-((S)-2-benziloksikarbonilamino-3-terc-butoksi-butirilamino)-4-tercbutoksikarbonilamino-buterna kiselina

4

[0487] Rastvor litijum hidroksida monohidrata (0,861 g, 20,5 mmol) u vodi (16 mL) je dodat u mešani rastvor (S)-2-((S)-2-benziloksikarbonilamino-3-terc-butoksi-butirilamino)- metil estar 4-terc-butoksikarbonilamino-buterne kiseline (3,58 g, 6,8 mmol) u metanolu (64 mL) na sobnoj temperaturi i mešano 19 h. Ovom rastvoru je dodat 1M HCl (24 mL) što je rezultovalo mlečnom smešom (pH 1) koja je brzo ekstrahovana sa DCM (3 × 135 mL). Kombinovani organski ekstrakt je osušen (Na2SO4) i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojna pena (3,27 g, 6,4 mmol, 94% prinos). M/z 532 [MNa]+, 1041 [2M+Na]+.

Korak 3 – CbzHNPMBN(OBu)(Boc)4

[0488] (S)-2-((S)-2-benziloksikarbonilamino-3-terc-butoksi-butirilamino)-4-tercbutoksikarbonilamino-buterna kiselina (1,73 g, 3,39 mmol) i Intermedijer 5 (3.0 g, 2.8 mmol) se sipa u balon u koji su uz mešanje dodavani suvi DCM (85 ml) i suvi DMF (17 mL). U mešani rastvor je dodat N,N-diizopropiletilamin (1,46 ml, 8,4 mmol) i posle mešanja tokom 5 minuta, O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N'N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfat ( 1,29 g, 3,39 mmol) je dodat u jednoj porciji. Smeša je sonikovana 2 minuta, a zatim ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 18 h. Reakciona smeša je zatim uparena, a ostatak je ponovo uparen iz toluena (3 × 100 mL). Ostatak je sušen pod vakuumom 3 h da bi se obezbedilo uklanjanje toluena. Voda (50 ml) je dodata ovom materijalu i smeša je brzo mešana tokom 3 h uz povremenu obradu sonikacijom. Naslovljeno jedinjenje je sakupljeno vakuumskom filtracijom kao fina, bela čvrsta supstanca i isprano vodom (2 × 25 mL), a zatim sušeno pod vakuumom 15 h (4,6 g, 3,0 mmol, 100% prinos). m/z 1554 [MH+].

Korak 4 – Jedinjenje iz naslova

[0489] Proizvod iz koraka 3 (5,41 g, 3,48 mmol), amonijum format (6,6 g, 104,4 mmol) i 10% Pd-C (2,0 g) su stavljeni u balon pod N.2. Dodat je MeOH (270 mL) i smeša je mešana pod N2za 4.5h. LCMS je pokazao MH<+>za proizvod i gubitak polaznog materijala. Smeša je filtrirana pod usisavanjem kroz jastučić od celita i isprana sa MeOH (50 mL). Filtrat i ispiranje su upareni do bezbojnog ulja koje je podeljeno između smeše rastvarača EtOAc/MeOH (4:1) (250 mL) i vode (250 mL). Vodena faza je dalje ekstrahovana sa istom, svežom smešom rastvarača (2 k 100 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni (Na2SO4) i upareni do bezbojnog ulja (~ 6g). Ovaj materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (100 g SepPak kolona) eluiranjem sa gradijentom MeOH/EtOAc (0-4%). Frakcije koje sadrže proizvod (Rf0.30 u EtOAc/MeOH/NH4OH88095:5:1, vizuelizovan sa KMnO4sprej) su spojene i uparene da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao hrskava pena (4,0 g, 2,8 mmol, prinos 81%). m/z 1420 [MH+].

Intermedijer 8 - Thr(O-<t>Bu) Penta-(N-Boc) polimiksin B dekapeptid

[0490] Pripremljeno od Intermedijara 7 i N-a-Z-N-i-BOC-L-Dab korišćenjem Postupka 2B, nakon čega sledi CBZ-deprotekcija prema postupku za Intermedijer 7, korak 4, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova u vidu bele pene u prinosu od 83%. m/z 1620 [MH+].

Postupak 1 - Opšti način dobijanja derivata nonapeptidnog amida

[0491] Korak 1. Odgovarajuća karboksilna kiselina (5 ekviv. u odnosu na supstrat polimiksina) je rastvorena u dihlorometanu (2 mL/mmol). N,N-diizopropiletialmin (5,0 ekv.) i 2-(1H-7-Azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronijum heksafluorofosfat (HATU) (5,0 ekviv.) su zatim dodati u reakcionu smešu. Posle 30 min mešanja na sobnoj temperaturi jedinjenje od Intermedijera 2 ili Intermedijera 4 (1.0 ekviv.) je dodato. Posle 16 h, završetak reakcije je potvrđen pomoću LC-MS i reakciona smeša je uparena do suva i prečišćena hromatografijom na koloni na silika gelu (eluent 0-10% metanol u dihlorometanu). Odgovarajuće frakcije su koncentrovane da bi se dobio proizvod kao bezbojno ulje (tipičan prinos 58 %).

[0492] Korak 2. Proizvod iz Koraka 1 je rastvoren u dihlorometanu (20 mL/mmol). Dodata je trifluorosirćetna kiselina (60 ekviv.) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h, nakon čega je LC-MS potvrdio završetak reakcije. Reakciona smeša je koncentrovana in vacuo da se dobije trifluoracetatna so kao bezbojno ulje. Ovome je dodata voda (10 mL/mmol) i smeša je sonikovana 5 min. U rezultujuću suspenziju je dodat 1 M NaHCO3dok smeša nije dostigla pH 9. Smeša je zatim propuštena kroz 10 g C18 SPE kolonu, uz eluiranje uzastopno sa 0, 40, 50, 60, 70, 80 i 100 % vodenim metanolom. Frakcije koje sadrže proizvod su sakupljene i uparene. Ostatak je suspendovan u vodi i 0,1 M H2SO4dodavan dok se ne postigne pH 7. Rastvor je liofilizovan preko noći da bi se dobila sulfatna so kao bela čvrsta supstanca. Čistoća jedinjenja je procenjena pomoću HPLC koristeći uslove navedene u Tabeli 2.

Tabela 2 – Analitički HPLC uslovi

Postupak 2 - Opšti postupak pripreme nonapeptidnih amida

[0493] Korak 1 - BOC zaštićeni nonapeptid je pripremljen korišćenjem uslova iz Postupka 1. Nakon završetka reakcije, sirova reakciona smeša je adsorbovana na silicijum dioksidu i hromatografisana na kertridžu od silicijum dioksida, eluiranjem sa 0-20% metanola u dihlorometanu. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i uparene do bele pene. Tako dobijeni proizvod je ponovo prečišćen hromatografijom na silika gelu da bi se dobio proizvod u vidu bele pene.

[0494] Korak 2 - Prečišćeni proizvod iz Koraka 2 je rastvoren u dihlorometanu (2 mL), tretiran sa TFA (1 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Rastvarač je uparen, a ostatak je azeotropovan sa toluenom, da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Ovo je rastvoreno u vodi (10 mL) i isprano dihlorometanom (5 mL). Vodena faza je uparena do male zapremine i liofilizovana preko noći da bi se dobila TFA so proizvoda kao bela čvrsta supstanca.

Postupak 2A - Daljnji opšti postupak pripreme nonapeptidnih amida

[0495] Korak 1 - Zaštićeni polimiksinski supstrat (0,07 mmol) rastvoren je u dihlorometanu (4 mL) i tretiran odgovarajućom karboksilnom kiselinom (1,5 ekviv. u odnosu na supstrat polimiksina), N,N-diizopropiletialminom (3,0 ekv.), zatim HATU (2,0 ekvivalent). Posle 16 h, završetak reakcije je potvrđen pomoću LC-MS i reakciona smeša je uparena do suva.

Dodata je voda (-10 mL) i smeša je triturisana, a zatim snažno mešana 1 h. Dobijeni precipitat je sakupljen filtracijom i osušen in vacuo preko noći.

[0496] Korak 2 - Boc-zaštićeni derivat iz Koraka 1 je rastvoren u dihlorometanu (3 mL) i tretiran sa TFA (1 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi sve dok LCMS nije potvrdila potpuno uklanjanje zaštite. Rastvarač je uparen, a ostatak je hromatografisan preparativnom HPLC korišćenjem uslova Postupka 3, korak 6. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane, uparene do male zapremine i liofilizovane da bi se dobio proizvod kao TFA so.

Postupak 3 - Opšti postupak za dobijanje derivata dipeptid amida heptapeptida polimiksina B

Korak 1 – spajanje karboksilnih kiselina sa metil estrima aminokiseline 1

[0497] Odgovarajuća karboksilna kiselina (1,1 ekviv.), odgovarajuća (N-Boc ili OBu<t>) aminokiselina metil estar hidrohlorid (1 ekviv.), EDC hidrohlorid (1.1 ekv.) i HOAt (1.1 ekviv.) su stavljeni u balon. DCM (8 mL/mmol u odnosu na metil estar amino kiseline) je dodat i u mešanu smešu pod azotom je dodat DIPEA (3 ekviv.) da bi se dobio žuti rastvor. Rastvor je mešan 18 h, razblažen sa jednakom zapreminom DCM i rastvor je uzastopno ispran vodom (16 mL/mmol u odnosu na amino kiselinu) i rastvorom natrijum hidrogen karbonata (16 mL/mmol). Rastvor je osušen (Na2SO4) i uparen do ostatka. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (gradijent eluiranja sa EtOAc/izo-heksanom). Relevantne frakcije su sakupljene i uparene da bi se dobio željeni proizvod metil estra (m/z [M+H]<+>detektovan u LCMS spektru). Kada se koristi racemska kiselina, proizvod se dobija kao mešavina dijastereoizomera.

Korak 2 - Hidroliza proizvoda metil estra iz koraka 1

[0498] U mešani rastvor proizvoda iz koraka 1 (1 ekviv.) u metanolu (5 mL/mmol u odnosu na metil estar) dodat je rastvor litijum hidroksida monohidrata (3 ekviv.) u vodi (0,5 mL/mmol od reagens). Dobijeni rastvor je mešan na temperaturi okoline 24 h, a zatim sipan u vodu (25 mL/mmol u odnosu na metil estar). Ovaj rastvor je podešen na pH 1 dodatkom 1 M hlorovodonične kiseline (3 ekviv.) i smeša je ekstrahovana sa DCM (3 x). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni (Na2SO4) i upareni da se dobije željena karboksilna kiselina (m/z [M+H]<+>koji se detektuje u LCMS spektru). Kada se racemska kiselina koristi u koraku 1, proizvod se dobija kao smeša dijastereoizomera.

Korak 3 - Kuplovanje proizvoda karboksilne kiseline iz koraka 2 sa metil estrom amino kiseline 2

[0499] Ovaj korak je izveden na isti način kao što je opisano u koraku 1, koristeći karboksilnu kiselinu iz koraka 2 i odgovarajući metil estar hidrohlorid (N-Boc ili OBu<t>) aminokiseline. Proizvod metil estra (m/z [M+H]<+>detektovan u LCMS spektru) je izolovan kao što je opisano u koraku 1. Kada je u koraku 1 korišćena racemska kiselina, proizvod se dobija kao smeša dijastereoizomera.

Korak 4 - Hidroliza proizvoda metil estra iz koraka 3

[0500] Ovaj korak je izveden na isti način kao što je opisano u koraku 2, koristeći metil estar iz koraka 3. Proizvod karboksilne kiseline (m/z [M+H]<+>detektabilan u LCMS spektru) je izolovan kao smeša dijastereoizomera.

Korak 5 - Kuplovanje proizvoda karboksilne kiseline iz koraka 4 sa tri-(Boc) polimiksin B heptapeptidom (intermedijer 5)

[0501] PiBoP (2 ekviv.) je dodat u mešani rastvor karboksilne kiseline iz koraka 4 (2 ekviv.) u suvom DCM (15 mL/mmol u odnosu na kiselinu). Zatim je dodat DIPEA (2 ekviv.) i rastvor je mešan 30 min. Ovom rastvoru je zatim dodat rastvor Intermedijera 5 (1 ekviv.) u suvom DCM (12 mL/mmol u odnosu na kiselinu) i suvom DMF (1,5 mL/mmol u odnosu na kiselinu) i cela smeša je mešana 16 h. Smeša je zatim uparena do gustog ulja koje je podeljeno između EtOAc i vode. Organska faza je isprana zasićenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata, zatim slanim rastvorom, osušena (Na2SO4) i uparena do pene. Materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (gradijent eluiranja sa MeOH/EtOAc) da bi se dobio polipeptidni proizvod (m/z [M+H]<+>detektovan u LCMS spektru). Kada je u koraku 1 korišćena racemska kiselina, proizvod se dobija kao smeša dijastereoizomera.

Korak 6 – Uklanjanje zaštite sa heptapeptidnog proizvoda polimiksina B iz koraka 5

[0502] TFA (30 mL/mmol u odnosu na polipeptid) je dodat u mešani rastvor polipeptida iz koraka 5 u DCM (60 mL/mmol). Rastvor je mešan 3,5 h, zatim uparen i sušen pod vakuumom 1 h. Ostatak je prečišćen pomoću HPLC (uslovi u nastavku) i liofilizovan da bi se dobila TFA so proizvoda kao bela čvrsta supstanca. Kada je u koraku 1 korišćena racemska kiselina, proizvod se dobija kao smeša dijastereoizomera. (Pogledati tabelu 4 za primere).

Tabela 3 - Pripremni HPLC uslovi

Postupak 3A

[0503] Kuplovanje je izvedeno kao što je opisano u Postupku 3, korišćenjem aminokiseline zaštićene CBZ u koraku 3. Dodatni korak deprotekcije CBZ (korak 5A) je uključen pre koraka 6.

Korak 5A – Ukidanje CBZ zaštite:

[0504] Mešavina zaštićenog intermedijera iz Koraka 5 (0,0573 mmol) i 10% Pd/C paste (10 mg) u etanolu (4 mL) je mešana u atmosferi vodonika tokom 18 h. Dodato je još 10% Pd/C paste (10 mg) i mešanje je nastavljeno još 24 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz jastučić od celita i filter kolač je ispran etanolom (2 x). Kombinovani organski slojevi su upareni da bi se dobilo sirovo ulje. Ovo je prečišćeno preparativnom HPLC reverzne faze korišćenjem uslova Postupak 3 korak 6 da bi se dobio željeni proizvod u obliku bezbojnog stakla (20%). (m/z [M+H]<+>detektovan u LCMS spektru).

Postupak 3B

[0505] Postupak 3B se sastoji od koraka 1-2 Postupka 3A nakon čega sledi spajanje na PMBN zaštićenim BOC (Intermedijer 2) da daju zaštićeni dekapeptid. Uklanjanje zaštite prema Postupku 3A, Korak 5A za CBZ deprotekciju i Korak 6 za uklanjanje zaštite Boc daje željeno jedinjenje, detalji su dati u Tabeli 4.

[0506] Jedinjenja su izolovana kao sulfatne soli, osim ako nije drugačije naznačeno.

Opšta priprema acetatnih soli

[0507] Acetatne soli se mogu pripremiti ako je potrebno, prema sledećem protokolu.

[0508] TFA so (50 mg) se može rastvoriti u vodi i dovesti do pH 9 sa 1 M NaHCO3. Smeša se zatim može propustiti kroz 1 g C18 SPE kolonu, eluiranjem sa vodom (20 mL), a zatim sa 80% metanol/voda. Frakcije koje sadrže proizvod mogu se tretirati sa 0,1 M sirćetnom kiselinom (10 ekviv.). Rastvor se može koncentrovati pod sniženim pritiskom, zatim liofilizovati preko noći da bi se dobila acetatna so, tipično kao bela čvrsta supstanca. Čistoća jedinjenja se može proceniti pomoću HPLC koristeći uslove navedene u Tabeli 2.

Sinteza karboksilnih kiselina

[0509] Karboksilne kiseline koje se koriste za sklapanje derivata polimiksina su obezbeđene ili preko komercijalnih izvora, ili pripremljene korišćenjem postupaka poznatih stručnjacima u ovoj oblasti. Piperidin karboksilne kiseline supstituisane alkilom, kao što je cis-4-oktil piperidin 2-karboksilna kiselina koja se koristi na primer A43, pripremljene su prema opštem postupku u nastavku:

Opšti postupak sinteze alkil supstituisanih piridin karboksilnih kiselina:

Korak 1. U rastvor odgovarajućeg etil estra bromo piridin karboksilne kiseline 5,0 (mmol) u etil acetatu (20 mL) pod azotom je dodat trietilamin (1,1 mL, 7,5 mmol), 1-oktin (1,1 mL, 7,5 mmol), bis(trifenilfosfin)paladijum (II) dihlorid (176 mg, 0,25 mmol) i bakar jodid (10 mg, 0,05 mmol). Reakciona smeša je mešana na 50°C 16 sati, zatim filtrirana uz odsisavanje kroz celit i isprana etil acetatom. Filtrat je uparen pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0 - 50% etil acetata u izoheksanu da bi se dobio odgovarajući etil estar okt-1-inilpiridin karboksilne kiseline.

Korak 2. U rastvor etil estra okt-1-inilpiridin karboksilne kiseline (4,60 mmol) u sirćetnoj

1

kiselini (100 mL) dodat je oksid platine (100 mg). Reakciona smeša je hidrogenizovana 16 h, zatim filtrirana pod usisavanjem kroz celit i isprana etil acetatom. Filtrat je uparen pod sniženim pritiskom, a zatim je ostatak podeljen između etil acetata i vode. pH vodenog sloja je podešen na pH 10 dodavanjem .880 amonijaka. Posle razdvajanja slojeva, vodena faza je ponovo ekstrahovana etil acetatom, a zatim su kombinovani organski slojevi propušteni kroz hidrofobnu fritu. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0 - 100% (80:20:2 etil acetat:metanol:.880 amonijak) u etil acetatu da bi se dobio redukovani proizvod.

Korak 3. U rastvor etil estra oktilpiperidin karboksilne kiseline (3,20 mmol) u dihlorometanu (50 mL) dodat je trietilamin (680 uL, 4,8 mmol), a zatim di-terc-butil dikarbonat (1,06 g, 4,8 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u dietil etru i ispran rastvorom amonijum hlorida. Posle razdvajanja slojeva, vodena faza je ponovo ekstrahovana dietil etrom. Kombinovane organske faze su osušene (MgSO4), filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Proizvodi su prečišćeni hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0-30% dietil etrom u izoheksanu. Stereohemija je dodeljena poređenjem sa jedinjenjima u literaturi, npr. Sin. Comm., 2008, 38, 2799.

Korak 4. U rastvor BOC zaštićenog materijala (0,89 mmol) u dioksanu (5 mL) i vodi (2 mL) dodat je litijum hidroksid monohidrat (76 mg, 1,80 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati i zatim tretirana sa dodatnom količinom litijum hidroksida monohidrata (100 mg) tokom 2 dana. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je podeljen između etil acetata i vode. Vodena faza je zakiseljena dodavanjem 1M hlorovodonične kiseline i proizvod je ekstrahovan u etil acetatu. Organska faza je propuštena kroz hidrofobnu fritu i rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom da bi se dobila odgovarajuća oktil piperidin karboksilna kiselina.

2

M

M m

m

B n k m po

on op p

Primer 49 - N-[2-(1-aminocikloheksil)etil] polimiksin B nonapeptid

[0510]

[0511] Korak 1 - Rastvoru Intermedijera 2 (100 mg, 0,073 mmol) u metanolu (1,5 mL) i DCM (1,5 mL) dodat je N-Boc-1-aminocikloheksil acetaldehid (Squarix GmbH) (21 mg, 1,2 ekviv.) i glacijalna sirćetna kiselina (0,15 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. (Polistirilmetil)trimetilamonijum cijanoborhidrid (4.0 mmol/g, 100 mg, Novabiochem) je dodat i smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smola je uklonjena filtracijom i filtrat je uparen do suva. Ostatak je hromatografisan na silicijum dioksidu eluiranjem sa 0-20% (10% 880 amonijaka u metanolu) u DCM. Najmanja polarna komponenta iz kolone odgovara BOC-zaštićenoj bis-alkilovani proizvod, koji se dobija kao bela čvrsta supstanca (30 mg, 23%). m/z 1814 (MH<+>). Najpolarnija komponenta je odgovarala jedinjenju iz naslova zaštićenom BOC (85 mg, 74%). m/z 1589 (MH+).

[0512] Korak 2 - Najpolarnija komponenta iz koraka 1 (31 mg, 0,019 mmol) je rastvorena u DCM (2 mL) i tretirana sa TFA (1 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Rastvarač je uparen i ostatak je azeotropovan sa toluenom da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Ovo je rastvoreno u vodi (5 mL) i mešano sa DCM (3 mL) 5 min. Faze su razdvojene i vodena faza je filtrirana kroz filter od 0,22 um, a zatim uparena do male zapremine. Rastvor je liofilizovan preko noći da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao pahuljasta bela čvrsta supstanca kao TFA so (20 mg, 62%). Vreme zadržavanja (HPLC), m/z 1088.6, MH+).

Primer 50 - 3-Amino-3-cikloheksilpropanoil-Thr-Dab-(ciklo)Dab*-Dab-DLeu-Thr-Dab-Dab-Thr*

[0513] [gde * označava ciklizaciju]

[0514] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno korišćenjem konvencionalne hemije čvrste faze korišćenjem standardne strategije zaštite FMOC, počevši od Fmoc-Thr(tBu)-PEG-PS smole, i korišćenjem odgovarajuće zaštićenih amino kiselina. Konačni peptid se delimično uklanja zaštitom na mestu ciklizacije i odvaja od smole korišćenjem TFA/TIS/H2O (96/2/2zapr/zapr) tokom 2 sata. Ovaj materijal je ciklizovan korišćenjem PiBop/HoBt/NMM u DCM. Benzilne grupe koje su još uvek na mestu da bi se sprečila ciklizacija na više mesta se zatim uklanjaju korišćenjem Pd/C u sirćetnoj kiselini/MeOH/vodi (5/4/1 zapr/zapr). Konačni ciljni peptid je prečišćen korišćenjem kolone C-18 reverzne faze (10 k 250 mm), da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao trifluoracetatna so, kao liofilizovana čvrsta supstanca. Retenciono vreme (HPLC) 4,52 min. m/z 1070.7 (MH<+>).

Komparativna jedinjenja

[0515] Komparativna jedinjenja su bili kolistin (Polimiksin E), Polimiksin B (PMB), C1 (NAB-739) i C2 (CB-182,804).

[0516] CB-182,804 (C2) je derivat dekapeptida polimiksina sa supstituentom aril uree na N-kraju, za koji se tvrdi da ima manju toksičnost od polimiksina B (prikazano kao jedinjenje 5 u WO 2010/075416), a pripremili su je pronalazači predmetnog pronalaska. C1 je takođe pripremljen u kompaniji i odgovara NAB-739 (kao što je opisao Vaara u, npr. WO 2008/01773.

[0517] Dalja jedinjenja pronalaska su pripremljena. Sva jedinjenja su izolovana kao TFA soli osim ako nije drugačije navedeno. A1 i A3 su takođe pripremljeni kao sulfatne soli prema

4

opštem postupku koji je ovde opisan. Komparativno jedinjenje C6 je pripremljeno korišćenjem opštih tehnika opisanih ovde. Strukture u tabeli prikazuju N-terminalnu grupu (-R) i bočni lanac na polimiksin B heptapeptidnoj skeli (PMBH, dole). Relativna stereohemija je prikazana teškim ili isprekidanim linijama. Apsolutna stereohemija je prikazana teškim ili heširanim klinastim vezama.

M

N

M

m m

A A A A

d p p n no B

7

O

N

Biološka aktivnost

[0518] Da bi se procenila potentnost i spektar jedinjenja, kako samih tako i u kombinaciji sa drugim agensom, izvršeno je testiranje osetljivosti na do četiri soja svakog od četiri Gramnegativna patogena, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae i Acinetobacter baumannii.

[0519] Odnosi komponenti u kombinaciji, kao što je 1:1, odnose se na odnos težine i težine.

[0520] Minimalna inhibitorna koncentracija (MIC) se odnosi na ukupnu koncentraciju leka (npr. test jedinjenje plus drugi agens, kao što je Rifampicin).

Kombinovana aktivnost

[0521] Inokulum je pripremljen pravljenjem direktne suspenzije izolovanih kolonija (odabranih sa 18-24-časovne Mueller-Hinton agar ploče) podešene na 0,5 McFarland standard.

[0522] MIC testiranje je izvedeno dvostrukim serijskim razblaženjima antibiotika u Mueller-Hinton bujonu prilagođenom katjonu u sterilnim mikrotitarskim pločama sa 96 bunarčića u ukupnoj zapremini od 170 µL (150 µL bujona koji sadrži antimikrobni agens, 20 µL inokuluma). Testovi su izvedeni u duplikatu. Ploče su inkubirane aerobno bez mućkanja 18-20 sati na 35°C sa MIC definisanom kao najniža koncentracija leka koja je sprečila vidljiv rast.

[0523] U slučajevima kada su duplirane vrednosti varirale manje od 2 puta, prijavljuje se niža od dve vrednosti. Ako je primećena varijacija veća od 2 puta, test se smatra nevažećim. Nekoliko jedinjenja je podvrgnuto višestrukim testovima, a gde je to slučaj, MIC odražava dobijenu modalnu vrednost.

[0524] Tabela 5 prikazuje vrednosti MIC (mikrogrami/mL) zabeležene za jedinjenja iz Primera 1 do 55 u kombinaciji 1:1 (tež.:tež) sa rifampicinom. Komparativna jedinjenja, sva testirana kao mešavina 1:1 sa rifampicinom su: kolistin (polimiksin E), polimiksin B (PMB), polimiksin B nonapeptid (PMBN), C2 (CB-182,804) i C1 (NAB-739).

[0525] CB-182,804 je derivat dekapeptida polimiksina sa supstituentom aril uree na N-kraju, za koji se tvrdi da ima nižu toksičnost od polimiksina B (prikazano kao jedinjenje 5 u WO 2010/075416), a pripremili su je pronalazači predmetnog pronalaska. C1 je takođe pripremljen u kompaniji i odgovara NAB-739 (kao što je opisao Vaara u, npr. WO

1

[0526] Tabela 5A daje vrednosti MIC (mikrogrami/mL) za određena jedinjenja primera u poređenju sa referentnim primerima jedinjenja C3 do C5, u kombinaciji 1:1 (tež.:tež) sa rifampicinom. Rezultati pokazuju da jedinjenja koja sadrže hidroksil i/ili amino grupe (kao što je -NR<6>R<7>) pružaju veće potencirajuće efekte u odnosu na ona jedinjenja koja ne sadrže hidroksilne i/ili amino grupe.

[0527] Poređenje referentnog primera C3 (benzoil bočni lanac) sa odgovarajućim anilinskim parom (primer jedinjenja 5) pokazuje poboljšanje MIC u odnosu na sojeve Klebsiella i Pseudomonas za jedinjenje anilina preko C3 kada su oba kombinovana sa rifampicinom. Slično, uvođenje piperidina na benzoil grupu (Primer 55) na sličan način poboljšava aktivnost protiv ovih organizama.

[0528] Zamena cikloheksilnog prstena u Primeru C4 piperidinom, kao u Primeru 33, takođe pokazuje značajno poboljšanje aktivnosti protiv sojeva svih testiranih organizama. Drugi analozi piperidina takođe pokazuju dobre nivoe aktivnosti (primer jedinjenja 29 i 37). Baznost na ovoj poziciji je važna, međutim, pošto analogni piridil derivat (Referentni primer C5) ne pokazuje povećan nivo aktivnosti u kombinaciji sa rifampicinom.

[0529] Tabela 5B pokazuje efekat promene odnosa jedinjenja prema rifampicinu u kombinaciji.

[0530] Minimalna inhibitorna koncentracija se odnosi na ukupnu koncentraciju leka (npr. test jedinjenje plus rifampicin). Jedinjenja se koriste u jednakoj masi unutar kombinacije. Težina se odnosi na masu korišćenog jedinjenja, na primer jedinjenja iz primera se koriste u obliku TFA ili sulfatne soli.

[0531] Verovalo se da je stehiometrija jedinjenja iz primera u obliku soli približno 1:5 jedinjenje:kiselina za TFA i 1:2,5 za sulfat, na primer gde je pet amino grupa prisutno u jedinjenju iz primera.

[0532] Drugi korišćeni agensi su bili: vankomicin hidrohlorid, meropenem trihidrat, tigeciklin hidrat, slobodna kiselina ciprofloksacin, natrijumova so fuzidinske kiseline, azitromicin dihidrat, slobodna kiselina aztreonama, oksacilin, natrijumova so i natrijumova so novobiocina.

1

�

11

[0533] Tabela 5B pokazuje efekat promene odnosa jedinjenja prema rifampicinu u kombinaciji. Kombinacije sa rifampicinom, kolistinom, polimiksinom B nonapeptidom i primerom jedinjenja 10 ispitane su u odnosu 1:3, 1:1 i 3:1. Vrednosti MIC (mikrogram/mL)

11

odnose se na ukupnu koncentraciju leka (tj. test agens plus rifampicin). Dobijene vrednosti su bile u okviru 2-struke varijacije uočene u MIC testu.

Tabela 5B – MIC vrednosti (mikrogrami/mL) za primer jedinjenja sa izmenjenim odnosima rifampicina

Samostalna aktivnost

[0534] Tabela 6 u nastavku prikazuje aktivnost, prikazanu putem MIC vrednosti, primera jedinjenja u odsustvu rifampicina.

11

Kombinovana aktivnost

[0535] Tabele 7A do 7I prikazuju odabrane primere jedinjenja u odnosu 1:1 sa drugim

11

antibakterijskim agensima. MIC se odnose na ukupnu koncentraciju leka. Dakle, kada se koristi kombinacija 1:1, ovo je količina test jedinjenja plus drugi agens. Za poređenje, takođe su date vrednosti MIC za samo drugo sredstvo.

11

��

[0536] MIC vrednosti za jedinjenja iz drugih primera su dobijene i upoređene sa uporednim jedinjenjima PMB i oksacilinom.

Tabela 7G – MIC vrednosti (mikrogrami/mL) za primerna jedinjenja u kombinaciji 1:1 sa oksacilinom

Tabela 7I – MIC vrednosti (mikrogrami/mL) za primerna jedinjenja u kombinaciji 1:1 sa fusidinskom kiselinom

In vitro test toksičnosti bubrežnih ćelija

[0537] Toksičnost jedinjenja za bubrežne ćelije je procenjena u in vitro testu koristeći ćelijsku liniju HK-2, besmrtnu ćelijsku liniju proksimalnih tubula izvedenu iz normalnog ljudskog bubrega. Krajnja tačka za opisivanje toksičnosti jedinjenja je smanjenje resazurina u korelaciji sa metaboličkom aktivnošću ćelija. Ćelije su kultivisane u 150 cm<2>bočice u 25 mL dodatog KSF (sa 5 ng/mL EGF i 50 µg/mL BPE). Ćelije su održavane na 70% konfluence sa maksimalno 25 pasaža.

[0538] Dan 1: Medijum je uklonjen i ćelije su isprane sa 10 ml DPBS. Šest ml 0,25% rastvora tripsina sa EDTA je zatim dodato u balon i ćelije su vraćene u inkubator. Posle 1 do 2 minuta inkubacije, 14 mL medijuma je dodato u bocu da se inaktivira tripsin. Suspenzija ćelija je prebačena u epruvetu za centrifugiranje i ćelije su peletirane na 1000 rpm tokom 6 minuta. Ćelijski pelet je zatim resuspendovan u svežem medijumu sa dodatkom EGF i BPE. Broj ćelija je izbrojan i ćelije su razblažene do 46875 ćelija/mL u svežem medijumu sa dodatkom EGF i BPE. 7500 ćelija je podeljeno u svaki bunarčić u zapremini od 160 ul i inkubirano na 37°C tokom 24 h.

[0539] Dan 2: Testirana jedinjenja su pripremljena direktno u medijumu, ili iz matičnih rastvora da se dobije ne više od 0,5% DMSO, ili 5% vode u finalnom testu. Koncentracije u devet tačaka pripremljene su od 1000 µg/mL do 1,95 µg/mL u dvostrukim razblaženjima u svežem medijumu. Mikrotitarske ploče su uklonjene iz inkubatora i medijum je zamenjen sa 100 uL razblaženog rastvora jedinjenja. Svaki set koncentracija je urađen u tri primerka, a pozitivne i negativne kontrole su dodate na svaku ploču. Ploče su zatim inkubirane 24 sata na 37°C sa 5% CO2u vlažnoj atmosferi.

[0540] Dan 3: Reagens koji sadrži resazurin (CellTiter-Blue, Promega) je razblažen u PBS-u (1:4) i dodat 20% (zapr/zapr) u svaki bunarčić. Ploče su zatim inkubirane na 37°C tokom 2 sata pre nego što je detektovan fluorescentni redukcioni proizvod.

[0541] Pozadinske vrednosti samo za medijume su oduzete pre nego što su podaci analizirani korišćenjem GraphPad Prism. Vrednosti koncentracije jedinjenja su ucrtane kao log vrednosti da bi se omogućilo postavljanje krive doza-odgovor i IC50utvrđene vrednosti (tabele 8A i 8B).

Tabela 8A - IC50Podaci za primer jedinjenja

12

Tabela 8B - IC ćelije HK-250Podaci za primerna jedinjenja u prisustvu rifampicina

-2

Samostalna aktivnost - Dodatni podaci

[0542] Tabela 6A u nastavku prikazuje aktivnost, prikazanu putem vrednosti MIC, primera jedinjenja u odsustvu drugog agensa zajedno sa toksičnošću protiv ćelijske linije HK-2 (mereno u odnosu na IC50vrednosti i izražene u odnosu na vrednost za polimiksin B)

[0543] MIC su određene kao što je ovde opisano, osim što je korišćen drugačiji dobavljač MHB prilagođenog katjonima. Primeri 37 i 39 su ponovo testirani radi direktnog poređenja. HK-2 ćelija IC50vrednosti su određene kako je ovde opisano. Vrednosti su navedene u odnosu na polimiksin B.

Tabela 6A – MIC vrednosti (mikrogrami/mL) za primerna jedinjenja u odsustvu rifampicina i toksičnosti za ćelije HK-2 za primerna jedinjenja izražena kao IC50vrednosti u odnosu na vrednost za polimiksin B

12

[0544] Vrednosti MIC su upoređene sa jedinjenjima poznatim iz literature. Podaci su u tabeli 6B. C2 (CB-182,804) je derivat dekapeptida polimiksina koji je opisao Cubist (prikazano kao jedinjenje 5 u WO 2010/075416), C1 je NAB-739 (kao što je opisao Vaara u npr. WO 2008/01773).

In vivo efikasnost protiv infekcije butine sa E. coli kod miševa - Kombinacija sa rifampicinom

12

[0545] In vivo Efikasnost dva primera jedinjenja (primer jedinjenja 10 i A1) u kombinaciji 1:1 sa rifampicinom je procenjena na modelu infekcije butine miša sa E. coli. Rezultati su sumirani u tabeli 9.

[0546] Korišćene su grupe od 4 mužjaka CD-1 miša bez specifičnih patogena. Miševi su privremeno postali neutropenični imunosupresijom sa ciklofosfamidom u dozi od 150 mg/kg 4 dana pre infekcije i 100 mg/kg 1 dan pre infekcije intraperitonealnom injekcijom. 24 sata nakon drugog kruga imunosupresije, miševi su zaraženi E. coli ATCC25922 intramuskularno u oba boka mišića butine pod inhalacionom anestezijom koristeći ~ 6,5 × 10<5>CFU / butina miša.

[0547] Test jedinjenja i polimiksin B su davani u dozama od 0,0625, 0,25 i 2,5 mg/kg u kombinaciji sa rifampicinom u ekvivalentnoj dozi. Ovo je dalo kombinovane nivoe doze od 0,125, 0,5 i 5 mg/kg za svaku kombinaciju (Tabela 9). Pored toga, polimiksin B je davan u monoterapiji u dozama od 0,125, 0,5 i 5 mg/kg. Jedinjenja su davana u rastvoru intravenskom (IV) injekcijom u bočnu repnu venu. Ovo je izvedeno tri puta 1, 3,5 i 6 sati nakon infekcije pri zapremini doze od 10 mL/kg (0,25 mL/25 g miša). Kontrolna grupa vehikuluma je tretirana vehikulumom (0,9% fiziološki rastvor za injekcije) takođe u dozi od 10 mL/kg IV tri puta na 1, 3,5 i 6 sati nakon infekcije.

[0548] 1 sat nakon infekcije, 4 životinje su humano eutanazirane korišćenjem predoziranja pentabarbitonom da bi se dobila kontrolna grupa pre tretmana. 9 sati nakon infekcije, kliničko stanje svih životinja je procenjeno pre nego što su bile humano eutanazirane predoziranjem pentabarbitonom. Težina životinje je određena pre nego što su obe butine uklonjene i izmerene pojedinačno. Pojedinačni uzorci tkiva butine su homogenizovani u ledeno hladnom sterilnom fosfatnom puferisanom fiziološkom rastvoru. Homogenati butina su zatim kvantitativno kultivisani na CLED agaru i inkubirani na 37°C tokom 24 sata pre nego što su kolonije prebrojane.

[0549] Primer jedinjenja 10 i A1 u kombinaciji 1:1 sa rifampicinom u ukupnoj koncentraciji od 5 mg/kg/dozi pokazao je efikasnost bolju od samog polimiksina B i uporedivu sa onom polimiksina B 1:1 sa rifampicinom, sa preko 4 log10smanjenje broja bakterija.

12

Tabela 9 - In vivo efikasnost naspram E. coli ATCC25922 infekcija butine kod neutropeničnih miševa

In vivo nefrotoksičnost

[0550] Model nefrotoksičnosti polimiksina (prilagođeno iz Yousef et al. Antimicrob. Agents Chemother. 2011, 55, 4044-4049) ustanovljen je kod pacova. Primeri jedinjenja 1, 4 i 10 su ispitani u modelu i upoređeni sa kolistinom (u njegovom sulfatnom obliku). Posle jednonedeljne aklimatizacije, mužjaci Sprague-Dawley pacova su hirurški pripremljeni sa jugularnom kanilom i smešteni su pojedinačno, prema potrebi, ili u unapred dodeljenim kavezima za smeštaj ili metaboličkim kavezima. Kolistin i primerna jedinjenja su pripremljena u fiziološkom rastvoru.

[0551] Uvedena su jedinjenja preko jugularne kanile dva puta dnevno u razmaku od 7 sati tokom sedam dana. Svaka doza je progresivno povećavana tokom tri dana do najveće doze koja je zatim primenjena do završetka studije. Dvadesetčetvoročasovno sakupljanje urina (na ledu) obavljeno je pre doze i 4. i 7. dana. Režim doziranja je dat u tabeli 10 u nastavku.

12

Tabela 10 – Režim doziranja koji se koristi u in vivo studiji nefrotoksičnosti

[0552] Doze u tabeli su naznačene u mg baza leka/kg (slobodna baza).

[0553] Aktivnost N-acetil-beta-D-glukozaminidaze (NAG) u urinu određena je spektrofotometrijski korišćenjem kompleta za analizu NAG kompanije Roche Applied Science. Biomarkeri povrede bubrega određeni su korišćenjem panela za povrede bubrega II iz Multi-Spot<®>sistema za analizu (Mezo Scale Discovery).

[0554] Primeri Jedinjenja 1, 4 i 10 dozirana po režimu od 8 mg/kg pokazala su značajno smanjene nivoe renalnih biomarkera NAG, albumina i cistatina C u poređenju sa kolistinom u istom režimu doze (videti slike 1 do 3). Odgovor je bio sličan onom koji je izazvao kolistin pri maksimalnoj koncentraciji od 2 mg/kg.

In vivo efikasnost protiv infekcije butine sa E. coli kod miševa - Primeri jedinjenja

[0555] In vivo efikasnost 6 jedinjenja pronalaska (primeri 1, 2, 3, 4, 7 i 10) je procenjena na modelu infekcije butine miša sa E. coli. Rezultati su sumirani u tabeli 11 i 11A.

[0556] Korišćene su grupe od 5 ženki CD-1 miševa bez specifičnih patogena, težine 22 ± 2 g. Životinje su postale neutropenične intraperitonealnom primenom ciklofosfamida u danima -4 (150 mg/kg) i -1 (100 mg/kg). Dana 0, životinje su intramuskularno inokulirane sa 10<5>CFU/miš Escherichia coli izolata ATCC25922 u desnu butinu. U 1 h, broj CFU je određen kod 5 miševa, a preostali miševi (pet po grupi) su tretirani potkožnom injekcijom leka na 1 i 6 sati nakon infekcije. U svakoj studiji, postojale su dve grupe doza po ispitivanom jedinjenju, 1,5 i 5 mg/kg BID, respektivno.

[0557] Primerna jedinjenja i polimiksin B su pripremljeni u normalnom fiziološkom rastvoru na 2 mg/mL i rastvor je podešen na pH 6-7 dodavanjem 0,1 M H.2SO4ili 4,2 % NaHCO3po potrebi. Dvadeset četiri sata nakon infekcije, miševi su humano eutanazirani. Mišić desne

1

butine svake životinje je sakupljen, homogenizovan, serijski razblažen i postavljen na Brain Heart Infusion agar 0,5% uglja (zapr/zapr) za određivanje CFU. Utvrđeno je smanjenje ukupne CFU desne butine u poređenju sa kontrolnim brojem 24 h nakon infekcije za svaku doznu grupu.

[0558] Jedinjenja 1 i 4 u dozi od 10 mg/kg/dan pokazala su efikasnost uporedivu sa polimiksinom B sa preko 3 log10smanjenje broja bakterija.

Tabela 11 - In vivo Efikasnost u odnosu na E. coli ATCC25922 Infekcije butine kod neutropeničnih miševa

[0559] In vivo Efikasnost jedinjenja iz Primera 10 je procenjena odvojeno u modelu infekcije butine miša sa E. coli. koristeći postupke opisane u gornjim primerima. Rezultat je sažet u tabeli 11A u poređenju sa polimiksinom B.

1 1

Tabela 11A - In vivo Efikasnost u odnosu na E. coli ATCC25922 infekcije butine kod neutropeničnih miševa

[0560] Jedinjenje 10 u dozi od 10 mg/kg/dan pokazalo je efikasnost uporedivu sa polimiksinom B sa preko 3 log10smanjenje broja bakterija.

[0561] Koristeći isti postupak kao što je gore opisano, in vivo efikasnost tri jedinjenja pronalaska (primeri 1, 4 i 10) je procenjena na modelu infekcije butine miša sa Klebsiella pneumoniae ATCC10031, koristeći kolistin (Polimiksin E) kao komparator. Rezultati su sumirani u tabeli 11B. Jedinjenja 1, 4 i 10 u dozi od 10 mg/kg/dan pokazala su efikasnost uporedivu sa onim kolistina sa približno.2 log10smanjenje broja bakterija.

Tabela 11B - In vivo efikasnost naspram K. pneumoniae ATCC10031 infekcije butine kod neutropeničnih miševa.

[0562] Doze u tabeli su naznačene u mg sulfatne soli/kg.

Dodatna biološka aktivnost

[0563] Efikasnost in vivo naspram E. coli ATCC25922 infekcija butine kod neutropeničnih miševa - Kombinacija

[0564] In vivo efikasnost A1 je procenjena samostalno iu kombinaciji 1:1 (zapr:zapr) sa

1 2

rifampicinom kod infekcije butine miša sa E. coli 25922, koristeći isti protokol kao što je opisano za jedinjenja 10 i 27 (Tabela 9) i koristeći nivoe doze naznačene u Tabeli 12. Rezultati su sumirani u Tabeli 12

Tabela 12 – Efikasnost in vivo naspram E. coli ATCC25922 infekcija butine kod neutropeničnih miševa

[0565] Doze u tabeli su naznačene u mg sulfatne soli/kg.

[0566] A1 u kombinaciji 1:1 sa rifampicinom u ukupnoj dozi od 4 mg/kg dao je log smanjenje broja bakterija od 4,09 u poređenju sa netretiranom kontrolom. Polimiksin B u kombinaciji 1:1 sa rifampicinom u istoj dozi dao je smanjenje broja bakterija za 4,8 log.

In vivo efikasnost protiv P. aeruginosa ATCC 27853 infekcija butine kod miševa -Kombinacija

1

[0567] In vivo Studija efikasnosti koja je upoređivala Polimiksin B, Primer 37 i Primer 41 u kombinaciji 1:1 sa Rifampicinom sprovedena je na 9-satnom modelu opterećenja butina sa P. aeruginosa ATCC27853 infekcija kod muških CD1 miševa. Rezultati su sumirani u tabeli 13.

[0568] U ovoj studiji, 4 mužjaka miša su korišćena u svakoj grupi tretmana jedinjenjem i 6 za kontrolu nosača. Miševi su privremeno postali neutropenični imunosupresijom sa ciklofosfamidom u dozi od 150 mg/kg 4 dana pre infekcije i 100 mg/kg 1 dan pre infekcije intraperitonealnom injekcijom. 24 sata nakon drugog kruga imunosupresije, miševi su zaraženi sa P. aeruginosa ATCC27853 intramuskularno u oba bočna mišića butine pod inhalacionom anestezijom koristeći ~ 2,5 do 5 x 10<5>CFU/miš butina. Polimiksin B, Primer 37 i Primer 41 davani su u dozama od 0,25, 1 i 2,5 mg/kg u kombinaciji sa rifampicinom u ekvivalentnoj dozi. Ovo je dalo ukupne antibakterijske nivoe od 0,5, 2 i 5 mg/kg za svaku kombinaciju (Tabela 1). Jedinjenja su davana u rastvoru intravenskom (IV) bolus injekcijom u lateralnu repnu venu. Ovo je izvedeno tri puta 1, 3,5 i 6 sati nakon infekcije pri zapremini doze od 10 mL/kg (0,25 mL/25g miša). Kontrolna grupa vehikuluma je tretirana sa 0,9% fiziološkim rastvorom za injekcije takođe u dozi od 10 mL/kg IV tri puta na 1, 3,5 i 6 sati nakon infekcije.

[0569] 1 sat nakon infekcije, 4 životinje su humano eutanazirane korišćenjem predoziranja pentabarbitonom da bi se dobila kontrolna grupa pre tretmana.9 sati nakon infekcije, kliničko stanje svih životinja je procenjeno pre nego što su bile humano eutanazirane predoziranjem pentabarbitonom. Težina životinje je određena pre nego što su obe butine uklonjene i izmerene pojedinačno. Pojedinačni uzorci tkiva butine su homogenizovani u ledeno hladnom sterilnom fosfatnom puferisanom fiziološkom rastvoru. Homogenati butina su zatim kvantitativno kultivisani na CLED agaru i inkubirani na 37°C tokom 24 sata pre nego što su kolonije prebrojane.

Tabela 13 - In vivo efikasnost jedinjenja Primera 37, Primera 41 i Polimiksina u odnosu na P. aeruginosa ATCC27853 infekcija butine kod neutropeničnih miševa.

1 4

[0570] Doze u tabeli su naznačene u mg sulfatne soli/kg.

[0571] Primer 37 testiran 1:1 sa rifampicinom u ukupnoj dozi od 5 mg/kg dao je smanjenje broja bakterija za 1,75 log u poređenju sa netretiranom kontrolom, dok je Primer 41: rifampicin dao smanjenje od 2,73 log, a polimiksin B: rifampicin je dao 5,37 log smanjenja na istom nivou doze.

In vivo efikasnost protiv infekcije butine P. aeruginosa kod miševa - Mono terapija

[0572] In vivo studija efikasnosti koja upoređuje dva nivoa doze Primera 27, Primera 38, Primera 42, Primera 47, Primera 52 sa polimiksinom B u tri nivoa doze izvedena je u 9-satnom modelu opterećenja butine P. aeruginosa ATCC 27853 infekcija kod neutropeničnih muških ICR miševa, koristeći protokol opisan za Primere 37 i 41. Rezultati su dati u Tabeli 14.

[0573] Primer 27, Primer 38, Primer 42, Primer 47 i Primer 52 su davani u dve doze (2 i 4 mg/kg). Kao komparator korišćene su tri doze polimiksina B (1, 2 i 4 mg/kg). Jedinjenja su davana u rastvoru intravenskom (IV) bolus injekcijom u lateralnu repnu venu. Tretman je primenjen tri puta 1, 3,5 i 6 sati nakon infekcije u zapremini doze od 10 mL/kg (0,25 mL/25 g miša). Kontrolna grupa vehikuluma je tretirana sa 0,9% fiziološkim rastvorom za injekcije takođe u dozi od 10 mL/kg IV tri puta na 1, 3,5 i 6 sati nakon infekcije.

1

Tabela 14

[0574] Doze u tabeli su naznačene u mg sulfatne soli/kg.

[0575] Primer 27, Primer 42 i Primer 52 pri 2 ili 4 mg/kg nisu značajno smanjili opterećenje butina. Primer 38, Primer 47 nije značajno uticao na opterećenje butina kada se primenjuje u dozi od 2 mg/kg, ali je smanjio opterećenje za 4,9 i 1,1 Log10CFU/g, respektivno, kada se daje u dozi od 4 mg/kg.

[0576] Dalja in vivo studija efikasnosti koja je upoređivala dva nivoa doze korišćenjem Primera 28, Primera 39 i A3, i Polimiksina B na tri nivoa doze sprovedena je u 9-satnom modelu opterećenja butine P. aeruginosa ATCC 27853 infekcija kod neutropeničnih muških ICR miševa, koristeći protokol opisan za Primere 37 i 41. Rezultati su dati u Tabeli 15.

Tabela 15

1

[0577] Doze u tabeli su naznačene u mg sulfatne soli/kg.

[0578] In vivo studija efikasnosti koja je upoređivala A33 pri 1,7 mg/kg i 3,4 mg/kg slobodne baze ekvivalenta sa polimiksin sulfatom u 0,85, 1,7 i 3,4 mg/kg slobodne baze ekvivalenta je izvedena u 9-satnom modelu opterećenja butine P. aeruginosa ATCC 27853. Protokol je bio kao što je opisano za Primere 37 i 41, osim što je nivo infekcije bio ~ 1 x 10<4>CFU / butina miša. Rezultati su dati u tabeli 16.

Tabela 16

[0579] Doza u gornjoj tabeli odnosi se na ekvivalent slobodne baze.

[0580] Primer A33 je dao >3 log smanjenja broja bakterija u poređenju sa netretiranom kontrolom, na oba nivoa doze.

Efekat supstituenata hidroksilne i amino grupe na toksičnost ćelija HK-2

[0581] Primeri jedinjenja su upoređeni sa uporednim primerom jedinjenja, C6, da bi se pokazale prednosti hidroksilne i amino funkcionalnosti u smanjenju toksičnosti HK-2. Primeri jedinjenja 1, 13 i A33 su značajno povećali zabeleženi IC50vrednosti u odnosu na

1

HK-2 u poređenju sa PMB. Dok uporedno jedinjenje C6 ima smanjenu toksičnost protiv HK-2 u poređenju sa PMB, smanjenje nije toliko značajno kao ono zabeleženo za jedinjenja 1, 13 i A33.

Tabela 17 – Poređenje uticaja hidroksil i amino supstituenata na toksičnost HK-2

Dodatna kombinovana aktivnost

[0582] Dalji MIC testovi su obavljeni na primerima jedinjenja 40 i 41 u prisustvu rifampicina protiv panela sojeva obogaćenih za otpornost na kolistin ili polimiksin B. MIC su određeni u skladu sa standardima za ispitivanje osetljivosti CLSI, u Mueller-Hinton bujonu prilagođenom katjonu. II (Becton Dickinson). Podaci su navedeni u tabeli 18.

[0583] MIC (µg/mL) su prikazane kao ukupna koncentracija leka za kombinaciju primera jedinjenja sa rifampicinom 1:1 tež. prema težini. Na primer, bunarčić sa 2 µg/mL sastojao se od 1 µg/mL test jedinjenja i 1 µg/mL rifampicina.

Tabela 18 – MIC vrednosti (mikrogrami/mL) za sam polimiksin B, sam rifampicin i za polimiksin B i primerna jedinjenja u kombinaciji 1:1 sa rifampicinom

1

gde n označava broj sojeva unutar panela za određeni organizam.

[0584] U kombinaciji sa rifampicinom primerna jedinjenja imaju poboljšanu aktivnost u poređenju sa polimiksinom B protiv sojeva E. coli, P. aeruginosa, K. pneumoniae i A. baumannii. Panel organizama uključivao je otporne sojeve.

Reference

[0585]

de Visser et al, J. Peptide Res, 61, 2003, 298-306

Diaz et al. Syn Comm, 2008, 38, 2799

GCC 2012/22819

Handbook of Pharmaceutical Excipients, 5th edition, 2005

Katsuma et al. Chem. Pharm. Bull.2009; 57, 332-336

Magee at al, J. Med. Chem., 2013, 56, 5079

PCT/GB2012/052844

Petrosillo et al. Clin. Microbiol. Infect.2008; 14, 816-827

Quale et al. Microb. Drug Resist. 2012; 18, 132-136

Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18th edition, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1990

Sato et al. Chem. Pharm. Bull. 2011; 59, 597-602

TW 101142961

1

US 5,565,423

US 8,415,307

Vaara et al, Antimicrob. Agents and Chemotherapy, 52, 2008.3229-3236 Vaara et al. Microbiol. Rev.1992; 56, 395-411

WO 1988/00950

WO 2008/017734

WO 2010/075416

WO 2012/168820

Yamada et al, J. Peptide Res.64, 2004, 43-50

Yousef et al., Antimicrob. Agents Chemother. 2011, 55, 4044-4049

14

Claims

Patentni zahtevi 1. Jedinjenje polimiksina za upotrebu u postupku lečenja ili profilakse, u kombinaciji sa aktivnim agensom, ili jedinjenje polimiksina i aktivni agens za upotrebu u postupku lečenja ili profilakse, ili aktivno sredstvo za upotrebu u postupku lečenja ili profilakse, u kombinaciji sa polimiksinskim jedinjenjem, kao što je za upotrebu u postupku lečenja mikrobne infekcije, naznačeno time da je aktivni agens izabran iz grupe koju čine: rifampicin, rifabutin, rifalazil, rifapentin i rifaksimin; oksacilin, meticilin, ampicilin, kloksacilin, karbenicilin, piperacilin, trikarcilin, flukloksacilin i nafcilin; azitromicin, klaritromicin, eritromicin, telitromicin, cetromicin i solitromicin; aztreonam i BAL30072; meropenem, doripenem, imipenem, ertapenem, biapenem, tomopenem i panipenem; tigeciklin, omadaciklin, eravaciklin, doksiciklin i minociklin; ciprofloksacin, levofloksacin, moksifloksacin i delafloksacin; Fusidinska kiselina; Novobiocin; teihoplanin, telavancin, dalbavancin i oritavancin, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati; a polimiksinsko jedinjenje je jedinjenje formule (I):

i njegove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, gde: -X- je -C(O)-, -NHC(O)-, -OC(O)-, -CH2- ili SO2-, kao što je gde -X- je -C(O)-; i -R<1>zajedno sa karbonil grupom i azotom alfa u odnosu na ugljenik za koji je vezan, je ostatak fenilalanina, leucina ili valina, kao što je ostatak fenilalanina ili leucina, kao što je D-fenilalanin ili D-leucin; -R<2>zajedno sa karbonil grupom i azotom alfa u odnosu na ugljenik za koji je vezan, je leucin, treonin, izo-leucin, fenilalanin, valin ili nor-valinski ostatak, kao što je leucin ili ostatak treonina, kao što je L-leucin ili L-treonin; -R<3>zajedno sa karbonil grupom i azotom alfa u odnosu na ugljenik za koji je vezan, je ostatak treonina ili leucina, kao što je ostatak treonina, kao što je L-treonin; -R<4>je C1-6alkil supstituisan sa jednom hidroksil grupom ili jednom amino grupom, kao što je -R<4>zajedno sa karbonilnom grupom i azotom alfa za ugljenik za koji je vezan, je α,γdiaminobuterna kiselina (Dab), ostatak serina, ostatak treonina, ostatak lizina, ornitinski ostatak ili α,β-diaminopropionska kiselina kiselina (Dap), kao što je Dab, kao što je L-Dab; -A- je kovalentna veza ili amino kiselina, kao što je a-amino kiselina; -R<5>je G-L<2>-L<1>-, - G se bira između: C2-12alkil, C5-12aril, C3-10cikloalkil, - L<1>- je kovalentna veza, C1-12alkilen ili C2-12heteroalkilen, - L<2>- je kovalentna veza ili C4-10heterociklilen, s tim što -L<1>- nije C1-12alkilen kada je -G C2-12alkil, i G-L<2>-L<1>- zamenjuje se sa: (i) jednom, dve ili tri hidroksilne grupe, ili (ii) jednom, dve ili tri grupe -NR<6>R<7>, ili (iii) jednom ili dve grupe -NR<6>R<7>i jednom, dve ili tri hidroksilne grupe, s tim da su (i), (ii) i (iii) opcioni supstituenti kada -L<1>- je C koji sadrži azot2-12heteroalkilen i/ili -L<2>- je C4-10 heterociklilen koji sadrži azot, ili -R<5>je D-L<1>-, gde je -D C4-10heterociklil i -L<1>- je kao što je prethodno definisano, i O-L<1>-zamenjuje se sa: (i) jednom, dve ili tri hidroksilne grupe, ili (ii) jednom, dve ili tri grupe -NR<6>R<7>, ili (iii) jednom ili dve grupe -NR<6>R<7>i jednom, dve ili tri hidroksilne grupe, s tim da su (i), (ii) i (iii) opcioni supstituenti kada -L<1>- je C2-12heteroalkilen koji sadrži azot i/ili -D je C4-10heterociklil koji sadrži azot, svaki -R<6>je nezavisno vodonik ili C1-4alkil; svaki -R<7>je nezavisno vodonik ili C1-4alkil; ili -NR<6>R<7>je guanidin grupa; ili kada je -G C3-10cikloalkil ili C5-12aril, -R<6>i -R<7>zajedno sa atomom azota iz C4-10heterocikl; i i gde je aril grupa prisutna u -R<5>on je nezavisno opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih od -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, halo, -CN, -NO2, -CF3, -NR<10>C(O)R<10>, -OCF3, -CON(R<10>)2, -COOR<9>, -OCOR<10>, -NR<10>COOR<10>, -OCON(R<10>)2, -NR<10>CON(R<10>)2, -OR<9>, -SR<9>, -NR<10>SO2R<10>, -SO2N(R<10>)2i SO2R<10>gde je svaki -R<9>je nezavisno -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil i svaki -R<10>je nezavisno -H ili -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil; i gde je alkil, cikloalkil ili heterociklil grupa prisutna u -R<5>nezavisno je opciono supstituisan jednim ili više supstituenata izabranih od -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, halo, -CN, -NO2, -CF3, -C(O)R<10>, -NR<10>C(O)R<10>, -OCF3, -CON(R<10>)2, -COOR<9>, -OCOR<10>, -NR<10>COOR<10>, -OCON(R<10>)2, -NR<10>CON(R<10>)2, -OR<9>, -SR<9>, -NR<10>SO2R<10>, -SO2N(R<10>)2i SO2R<10>gde je svaki -R<9>je nezavisno -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil i svaki -R<10>je nezavisno -H ili -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, osim što alkil nije supstituisan sa alkilom; -R<8>je metil ili vodonik, kao što je metil; pod uslovom da jedinjenje formule (I) nije jedinjenje gde -X- i -R<5>zajedno su L-α-amino kiselina, kao što su Lis, Arg, Dap, Ser, Phe, Trp, Leu, Ala, α,γ-diaminobuterna kiselina (Dab) ili α,β-diaminopropionska kiselina (Dap), opciono zajedno sa Dgp i Abu.
2. Jedinjenje polimiksina formule (II) predstavljeno sa:

i njegove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, gde je -X-, -R<1>, -R<2>, -R<3>, -R<4>, -R<6>, -R<7>, -R<8>imaju ista značenja kao -X-, -R<1>, -R<2>, -R<3>, -R<4>, -R<6>, -R<7>, -R<8>u zahtevu 1, osim kako je dalje definisano u nastavku; - A- je kovalentna veza ili amino kiselina, kao što je α -amino kiselina; 14 a jedinjenje je izabrano između (IIa) do (IIe) i (IIg) ispod: (IIg) koje je jedinjenje formule (II) gde: - R<4>je C1alkil supstituisan sa jednom amino grupom, ili C3-5alkil supstituisan sa jednom amino grupom; i - R<5>ima isto značenje kao -R<5>u patentnom zahtevu 1; (IIa) koje je jedinjenje formule (II) gde: - R<5>je G-L<2>-L<1>-, i -G je C5-12aril, - L<1>- je kovalentna veza, C1-12alkilen ili C2-12heteroalkilen, - L<2>- je kovalentna veza ili C4-10heterociklilen, - R<5>se zamenjuje sa: (i) jednom, dve ili tri hidroksilne grupe, ili (ii) jednom, dve ili tri grupe -NR<6>R<7>, ili (iii) jednom ili dve grupe -NR<6>R<7>i jednom, dve ili tri hidroksilne grupe, s tim da su (i), (ii) i (iii) opcioni supstituenti kada -L<1>- je C2-12heteroalkilen koji sadrži azot i/ili -L<2>- je C4-10heterociklilen koji sadrži azot, a aril grupa je opciono supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih od C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, halo, -CN, -NO2, -CF3, -NR<10>C(O)R<10>, -OCF3, -CON(R<10>)2, -COOR<9>, -OCOR<10>, -NR<10>COOR<10>, -OCON(R<10>)2, -NR<10>CON(R<10>)2, -OR<9>, -SR<9>, -NR<10>SO2R<10>, -SO2N(R<10>)2i SO2R<10>gde je svaki -R<9>je nezavisno C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil i svaki -R<10>je nezavisno -H ili C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil; (IIe) koje je jedinjenje formule (II) gde: - A- je amino kiselina, kao što je α-amino kiselina, kao što je izabrana iz grupe koju čine Dab, Dap, Lis, Arg, Dap, Ser, Phe, Trp, Leu, Ala, ornitin ili nor-valin , kao što su Dab, Dap, Thr, Ser, ili Lis, kao što je Dab, kao što je L-Dab; i - R<5>ima isto značenje kao -R<5>u zahtevu 1; (IIc) koje je jedinjenje formule (II) gde: - R<5>je G-L<2>-L<1>-, gde je -G C3-10cikloalkil ili C2-12alkil, - L<1>- je kovalentna veza ili C1-12alkilen, - L<2>- je kovalentna veza, s tim što je -L<1>- nije C1-12alkilen kada je -G C2-12alkil, -R<5>se zamenjuje sa: (i) dve ili tri grupe -NR<6>R<7>, ili (ii) dve grupe -NR<6>R<7>i jednom, dve ili tri hidroksilne grupe; a alkil ili cikloalkil grupa je nezavisno opciono supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih od -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, halo, -CN, -NO2, -CF3, -C(O)R<10>, NR<10>C(O)R<10>, -OCF3, -CON(R<10>)2, -COOR<9>, -OCOR<10>, -NR<10>COOR<10>, -OCON(R<10>)2, -NR<10>CON(R<10>)2, -OR<9>, -SR<9>, -NR<10>SO2R<10>, -SO2N(R<10>)2i SO2R<10>gde je svaki -R<9>je nezavisno -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil i svaki -R<10>je nezavisno -H ili -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, osim što alkil nije supstituisan sa alkilom; (IIb) koje je jedinjenje formule (II) gde: - R<5>je G-L<2>-L<1>-, i -G je C3-10cikloalkil, - L<1>- je kovalentna veza, C1-12alkilen ili C2-10heteroalkilen, - L<2>- je kovalentna veza ili C4-12heterociklilen, s tim što je -L<2>- je kovalentna veza samo kada -L<1>- je C2-10heteroalkilen, -R<5>se zamenjuje sa: (i) jednom, dve ili tri hidroksilne grupe, ili (ii) jednom, dve ili tri grupe -NR<6>R<7>, ili (iii) jednom ili dve grupe -NR<6>R<7>i jednom, dve ili tri hidroksilne grupe, s tim da su (i), (ii) i (iii) opcioni supstituenti kada -L<1>- je C2-12heteroalkilen koji sadrži azot i/ili -L<2>- je C4-10heterociklilen koji sadrži azot, i cikloalkil grupa je nezavisno opciono supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih od -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, halo, -CN, -NO2, -CF3, -C(O)R<10>, -NR<10>C(O)R<10>, -OCF3, -CON(R<10>)2, -COOR<9>, -OCOR<10>, -NR<10>COOR<10>, -OCON(R<10>)2, -NR<10>CON(R<10>)2, -OR<9>, -SR<9>, -NR<10>SO2R<10>, -SO2N(R<10>)2i SO2R<10>gde je svaki -R<9>je nezavisno -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil i svaki -R<10>je nezavisno -H ili -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, osim što alkil nije supstituisan sa alkilom; i (IId) koje je jedinjenje formule (II) gde: - R<5>je D-L<1>-, gde je D-L<1>- zamenjuje se sa: (i) jednom, dve ili tri hidroksilne grupe, ili (ii) jednom, dve ili tri grupe -NR<6>R<7>, ili (iii) jednom ili dve grupe -NR<6>R<7>i jednom, dve ili tri hidroksilne grupe; - D je C4-10heterociklil; - L<1>- je kovalentna veza, C1-12alkilen ili C2-12heteroalkilen, s tim da su (i), (ii) i (iii) opcioni supstituenti kada -L<1>- je C2-12heteroalkilen koji sadrži azot, i heterociklil grupa je nezavisno opciono supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih od -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, halo, -CN, -NO2, -CF3, -C(O)R<10>, -NR<10>C(O)R<10>, -OCF3, -CON(R<10>)2, -COOR<9>, -OCOR<10>, -NR<10>COOR<10>, -OCON(R<10>)2, -NR<10>CON(R<10>)2, -OR<9>, -SR<9>, -NR<10>SO2R<10>, -SO2N(R<10>)2i SO2R<10>gde je svaki -R<9>je nezavisno -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil i svaki -R<10>je nezavisno -H ili -C1-10alkil, kao što je -C1-4alkil, osim što alkil nije supstituisan sa alkilom, 14 pod uslovom da jedinjenje formule (II) nije jedinjenje gde su -X- i R5 zajedno L-α-amino kiselina, kao što su Lis, Arg, Dap, Ser, Phe, Trp, Leu, Ala, α ,γ-diaminobuterna kiselina (Dab) ili α,β-diaminopropionska kiselina (Dap), opciono zajedno sa Dgp i Abu.
3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 2, naznačeno time da jedinjenje je jedinjenje formule (IIg).
4. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 3, naznačeno time da -R<4>, zajedno sa karbonil grupom i azotom alfa u odnosu na ugljenik za koji je vezan, je Dap, kao što je L-Dap.
5. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 2, naznačeno time da jedinjenje je jedinjenje formule (IIa).
6. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 5, naznačeno time da -R<5>je supstituisan sa jednom, dve ili tri grupe -NR<6>R<7>, kao što je jedna -NR<6>R<7>grupa.
7. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 5 ili zahtevu 6, naznačeno time da -L<1>- je C1-12alkilen ili C2-12heteroalkilen, kao što je gde -L<1>- je C2-12heteroalkilen, kao što je gde -L<1>- je C2-6heteroalkilen
8. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 2, naznačeno time da jedinjenje je jedinjenje formule (IIe).
9. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 8, naznačeno time da -R<5>je supstituisan sa: (ii) jednom, dve ili tri grupe -NR<6>R<7>, ili (iii) jednom ili dve grupe -NR<6>R<7>i jednom, dve ili tri hidroksilne grupe.
10. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 8 ili patentnom zahtevu 9, naznačeno time da -R<5>je G-L<2>-L<1>- i -G je C2-12alkil.
11. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 2, naznačeno time da jedinjenje je jedinjenje formule (IIc). 14
12. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 11, naznačeno time da: (i) -G je C2-12alkil; i/ili (ii) -R<5>je supstituisan sa dve ili tri grupe -NR<6>R<7>.
13. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 2 do 12 i biološki prihvatljiv ekscipijent, opciono zajedno sa drugim aktivnim agensom, kao što je jedan ili više aktivnih agenasa definisanih u patentnom zahtevu 1.
14. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 2 do 12 ili farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 13 za upotrebu u postupku lečenja ili profilakse.
15. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 2 do 12 ili farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 13 za upotrebu u postupku lečenja ili profilakse mikrobne infekcije, pri čemu postupak opciono dalje obuhvata lečenje infekcije u kombinaciji sa aktivnim agensom izabranim iz grupe koji se sastoji od rifampicina, fusidne kiseline, novobiocina, oksacilina, azitromicina, aztreonama, meropenema, tigeciklina i ciprofloksacina, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i solvata. 14