RS62634B1 - Čvrsti kristalni oblici 6-karboksi-2-(3,5-dihlorofenil)-benzoksazola - Google Patents

Description

Opis

OSNOVA PRONALASKA

[0001] Ovaj pronalazak se odnosi na kristalne oblike 6-karboksi-2-(3,5-dihlorfenil)-benzoksazola i postupke za njihovu izradu i upotrebu.

[0002] Načini sinteze za 6-karboksi-2-(3,5-dihlorfenil)-benzoksazol (u daljem tekstu "jedinjenje Formule I") su opisani u U.S. Patentu broj 7,214,695 a čvrsti oblici meglumin soli jedinjenja Formule I su opisani u U.S. Patentnoj prijavi serijski broj 14/345,111, koja je U.S. nacionalna faza Međunarodne Prijave broj PCT/IB2012/054748 i ima niže pokazanu strukturu.

[0003] Jedinjenje Formule I stabilizuje protein transtiretin (TTR), čija je disocijacija uključena u TTR amiloidozama (to jest, jedinjenje Formule I sprečava disocijaciju nativnog TTR tetramera u monomere, što za rezultat ima inhibiciju formiranja TTR amiloidnog fibrila) i razvija se za upotrebu u tretmanu transtirenin amiloidnih bolesti.

[0004] Čvrsti oblici su od interesa za farmaceutsku industriju a posebno za onaj deo koji je uključen u razvoj odgovarajućih doznih oblika. Ukoliko čvrsti oblik ne ostaje konstantan u toku kliničkih studija ili studija stabilnosti, egzaktan dozni oblik koji se koristi ili ispituje ne može da bude uporediv od jedne do druge serije. Takođe je poželjno da se obezbede procesi za produkciju jedinjenja velike čistoće u izabranom čvrstom obliku kada se jedinjenje koristi u kliničkim studijama ili kao komercijalni produkt, jer prisutne nečistoće mogu da dovedu do neželjenih toksikoloških efekata. Neki čvrsti oblici mogu takođe da ispolje povećanu stabilnost ili mogu mnogo lakše da se proizvedu u velikim količinama visoke čistoće i zbog toga su mnogo pogodniji za uključivanje u farmaceutske formulacije. Neki čvrsti oblici mogu da ispolje fizičke osobine sa drugim prednostima, kao što su smanjenje tendencije ka higroskopnosti, lakša filtracija, poboljšana rastvorljivost i povećana brzina rastvaranja zbog različitih energija rešetke.

[0005] Ovde razmatrana osnova pronalaska je uključena da objasni kontekst ovog pronalaska. Ovo ne treba tretirati kao priznanje da je bilo koji od materijala na koji se ovo odnosi publikovan, poznat ili je deo opšte prihvaćenog znanja u bilo kojoj zemlji kao datum prioriteta bilo kog od patentnih zahteva.

KRATAK SADRŽAJ PRONALASKA

[0006] Ovde su otkriveni čvrsti oblici jedinjenja Formule I, pri čemu svaki čvrsti oblik može jedinstveno da se identifikuje preko nekoliko različitih analitičkih parametara, samih ili u kombinaciji, kao što su, ali bez ograničenja na: modeli pikova difrakcije X-zraka praška ili kombinacije dva ili više pikova; NMR 13C hemijske promene čvrstog stanja ili kombinacije dve ili više hemijskih promena; i pikovi Raman promena ili kombinacije dva ili više pikova Raman promena.

[0007] Na osnovu ovde datog otkrića, stručnjak sa uobičajenim iskustvom u praksi će razumeti da prvi kristalni oblik jedinjenja Formule I (ovde označen kao "Oblik 1") može da bude jedinstveno identifikovan pomoću nekoliko različitih pikova ili modela spektra u različitim kombinacijama. Niže su opisane primerne kombinacije vrednosti karakterističnog pika koje mogu da se koriste za identifikaciju Oblika 1 i ove primerne kombinacije ne treba ni na koji način posmatrati kao ograničenje za druge kombinacije vrednosti pikova koji su ovde otkriveni.

[0008] Jedan aspekt ovog pronalaska obezbeđuje Oblik 1, pri čemu ovaj oblik ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 15.4 ± 0.2 i 20.2 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 1 ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 15.4 ± 0.2, 20.2 ± 0.2 i 28.6 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 1 ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 15.4 ± 0.2, 20.2 ± 0.2, 28.6 ± 0.2 i 29.0 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 1 ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 15.4 ± 0.2, 20.2 ± 0.2, 23.5 ± 0.2, 28.6 ± 0.2 i 29.0 ± 0.2.

[0009] Jedan aspekt ovog pronalaska obezbeđuje Oblik 1, pri čemu ovaj oblik ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 16.5 ± 0.2, 26.7 ± 0.2 i 28.6 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 1 ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 16.5 ± 0.2, 26.7 ± 0.2, 28.6 ± 0.2 i 29.0 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 1 ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 15.4 ± 0.2, 16.5 ± 0.2, 26.7 ± 0.2, 28.6 ± 0.2 i 29.0 ± 0.2.

[0010] Naredni aspekt ovog pronalaska obezbeđuje Oblik 1, pri čemu ovaj oblik ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) u osnovi iste kao što je pokazano na Slici 1.

[0011] Naredni aspekt ovog pronalaska obezbeđuje Oblik 1, pri čemu ovaj oblik ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) u osnovi iste kao što je pokazano na Slici 21.

[0012] Naredni aspekt ovog pronalaska obezbeđuje Oblik 1, pri čemu ovaj oblik ima Ramanov spektar koji uključuje pikove Raman promene (cm<-1>) pri 287 ± 2, 869 ± 2 i 1292 ± 2. U narednom ostvarenju, Oblik 1 ima Ramanov spektar koji uključuje pikove Raman promene (cm<-1>) pri 213 ± 2, 287 ± 2, 869 ± 2 i 1292 ± 2.

[0013] Naredni aspekt ovog pronalaska obezbeđuje Oblik 1, pri čemu ovaj oblik ima Ramanov spektar koji uključuje pikove Raman promene (cm<-1>) pri 994 ± 2, 1273 ± 2, 1292 ± 2 i 1615 ± 2. U narednom ostvarenju, Oblik 1 ima Ramanov spektar koji uključuje pikove Raman promene (cm<-1>) pri 213 ± 2, 994 ± 2, 1273 ± 2, 1292 ± 2 i 1615 ± 2.

[0014] Naredni aspekt ovog pronalaska obezbeđuje Oblik 1, pri čemu ovaj oblik ima Ramanov spektar koji uključuje pikove Raman promene (cm<-1>) na pozicijama u osnovi iste kao što je pokazano na Slici 5.

[0015] Naredni aspekt ovog pronalaska obezbeđuje Oblik 1, pri čemu ovaj oblik ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 120.8 ± 0.2, 127.7 ± 0.2 i 139.6 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 1 ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 127.7 ± 0.2 i 139.6 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 1 ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 120.8 ± 0.2 i 139.6 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 1 ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 120.8 ± 0.2 i 127.7 ± 0.2.

[0016] Naredni aspekt ovog pronalaska obezbeđuje Oblik 1, pri čemu ovaj oblik ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 120.8 ± 0.2, 127.7 ± 0.2 i 144.7 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 1 ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 127.7 ± 0.2 i 144.7 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 1 ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 120.8 ± 0.2 i 144.7 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 1 ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 120.8 ± 0.2 i 127.7 ± 0.2.

[0017] Naredni aspekt ovog pronalaska obezbeđuje Oblik 1, pri čemu ovaj oblik ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) na pozicijama u osnovi istim kao što je pokazano na Slici 9.

[0018] Naredni aspekt ovog pronalaska obezbeđuje Oblik 1, pri čemu ovaj oblik (i) ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 15.4 ± 0.2, 20.2 ± 0.2 i 28.6 ± 0.2; i (ii) Raman spektar koji uključuje pikove Raman promene (cm<-1>) pri 287 ± 2, 869 ± 2 i 1292 ± 2.

[0019] Naredni aspekt ovog pronalaska obezbeđuje Oblik 1, pri čemu ovaj oblik (i) ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 28.6 ± 0.2; i (ii) ima Ramanov spektar koji uključuje pikove Raman promene (cm<-1>) pri 287 ± 2, 869 ± 2 i 1292 ± 2.

[0020] Naredni aspekt ovog pronalaska obezbeđuje Oblik 1, pri čemu ovaj oblik (i) ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 15.4 ± 0.2, 20.2 ± 0.2 i 28.6 ± 0.2; i (ii) ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 120.8 ± 0.2 i 139.6 ± 0.2.

[0021] Naredni aspekt ovog pronalaska obezbeđuje Oblik 1, pri čemu ovaj oblik (i) ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 28.6 ± 0.2; i (ii) ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 120.8 ± 0.2 i 139.6 ± 0.2.

[0022] Naredni aspekt ovog pronalaska obezbeđuje Oblik 1, pri čemu ovaj oblik (i) ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 26.7 ± 0.2 i 28.6 ± 0.2; i (ii) ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 127.7 ± 0.2.

[0023] Naredni aspekt ovog pronalaska obezbeđuje Oblik 1, pri čemu ovaj oblik (i) ima Ramanov spektar koji uključuje pikove Raman promene (cm<-1>) pri 287 ± 2, 86962 i 1292 ± 2; i (ii) ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 120.8 ± 0.2 i 139.6 ± 0.2.

[0024] Naredni aspekt ovog pronalaska obezbeđuje Oblik 1, pri čemu ovaj oblik (i) ima Ramanov spektar koji uključuje pikove Raman promene (cm<-1>) pri 994 ± 2, 1273 ± 2 i 1292 ± 2; i (ii) ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 120.8 ± 0.2 i 127.7 ± 0.2.

[0025] Naredni aspekt ovog pronalaska obezbeđuje Oblik 1, pri čemu ovaj oblik (i) ima Ramanov spektar koji uključuje pikove Raman promene (cm<-1>) pri 1292 ± 2 i 1615 ± 2; i (ii) ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 127.7 ± 0.2.

[0026] U nekim ostvarenjima, ovaj pronalazak se odnosi na Oblik 1, pri čemu je ovaj oblik ne-higroskopan i anhidrovan.

[0027] U nekim ostvarenjima, ovaj pronalazak se odnosi na Oblik 1, pri čemu ovaj oblik uključuje mnoštvo kristalnih iglica jedinjenja Formule I.

[0028] U još jednom aspektu, ovaj pronalazak razmatra mogućnost da Oblik 1 može da egzistira u prisustvu bilo kojih drugih oblika (na primer Oblici 2, 4 i 6) ili njihovih smeša. U skladu sa tim, u jednom ostvarenju, ovaj pronalazak obezbeđuje Oblik 1, pri čemu je Oblik 1 prisutan u čvrstom obliku koji uključuje manje od 95%, manje od 90%, manje od 80%, manje od 70%, manje od 60%, manje od 50%, manje od 40%, manje od 30%, manje od 20%, manje od 10%, manje od 5%, manje od 3%, ili manje od 1 % težine bilo kojih drugih fizičkih oblika jedinjenja Formule I. Na primer, jedno ostvarenje je čvrsti oblik jedinjenja Formule I koje uključuje Oblik 1 koji ima bilo koji od profila difrakcije X-zraka praška, Ramanov spektar, IR spektar i/ili NMR spektar kako je prethodno opisano, pri čemu navedeni čvrsti oblik uključuje manje od 95%, manje od 90%, manje od 80%, manje od 70%, manje od 60%, manje od 50%, manje od 40%, manje od 30%, manje od 20%, manje od 10%, manje od 5%, manje od 3%, ili manje od 1% težine bilo kojih drugih fizičkih oblika jedinjenja Formule I.

[0029] U nekim ostvarenjima, ovaj pronalazak se odnosi na Oblik 1, pri čemu je navedeni oblik skoro u potpunosti čist kristalni oblik.

[0030] Dalje, na osnovu ovde datog otkrića, stručnjak sa uobičajenim iskustvom u praksi će razumeti da drugi kristalni oblik jedinjenja Formule I (ovde označen kao "Oblik 4") može da bude jedinstveno identifikovan preko više različitih pikova ili modela spektra u različitim kombinacijama. Niže su opisani primeri kombinacija vrednosti karakterističnog pika koje mogu da se koriste za identifikaciju Oblika 4 i ni na koji način ove primerne kombinacije ne treba sagledavati kao ograničenje za druge kombinacije vrednosti pika koje su ovde opisane.

[0031] Otkriće takođe daje Oblik 4, pri čemu ovaj oblik ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 15.9 ± 0.2 i 16.9 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 4 ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 15.9 ± 0.2, 16.9 ± 0.2 i 18.0 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 4 ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 16.9 ± 0.2, 24,1 ± 0.2 i 27.3 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 4 ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 15.9 ± 0.2, 16.9 ± 0.2, 18.0 ± 0.2 i 27.3 ± 0.2.

[0032] Otkriće takođe daje Oblik 4, pri čemu navedeni kristalni oblik ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) u osnovi iste kao što je pokazano na Slici 3.

[0033] Otkriće takođe daje Oblik 4, pri čemu ovaj oblik ima Ramanov spektar koji uključuje pikove Raman promene (cm<-1>) pri 266 ± 2, 283 ± 2 i 1297 ± 2. U narednom ostvarenju, Oblik 4 ima Ramanov spektar koji uključuje pikove Raman promene (cm<-1>) pri 201 ± 2, 266 ± 2, 283 ± 2 i 1297 ± 2. U narednom ostvarenju, Oblik 4 ima Ramanov spektar koji uključuje pikove Raman promene (cm<-1>) pri 283 ± 2, 994 ± 2, 1273 ± 2 i 1547 ± 2.

[0034] Otkriće takođe daje Oblik 4, pri čemu ovaj oblik ima Ramanov spektar koji uključuje pikove Raman promene (cm<-1>) na pozicijama u osnovi istim kao što je pokazano na Slici 7.

[0035] Otkriće takođe daje Oblik 4, pri čemu ovaj oblik ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 122.1 ± 0.2, 130.7 ± 0.2 i 140.1 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 4 ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 122.1 ± 0.2, 124.4 ± 0.2 i 130.7 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 4 ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 130.7 ± 0.2 i 140.1 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 4 ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 122.1 ± 0.2 i 140.1 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 4 ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 122.1 ± 0.2 i 130.7 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 4 ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 124.4 ± 0.2 i 130.7 ± 0.2.

[0036] Otkriće takođe daje Oblik 4, pri čemu ovaj oblik ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) na pozicijama u osnovi istim kao što je pokazano na Slici 11.

[0037] Otkriće takođe daje Oblik 4, pri čemu ovaj oblik (i) ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 15.9 ± 0.2 i 16.9 ± 0.2; i (ii) ima Ramanov spektar koji uključuje pikove Raman promene (cm<-1>) pri 266 ± 2, 283 ± 2 i 1297 ± 2. Otkriće takođe daje Oblik 4, pri čemu ovaj oblik (i) ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 15.9 ± 0.2 i 16.9 ± 0.2; i (ii) ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 122.1 ± 0.2, 130.7 ± 0.2 i 140.1 ± 0.2.

[0038] Otkriće takođe daje Oblik 4, pri čemu ovaj oblik (i) ima Ramanov spektar koji uključuje pikove Raman promene (cm<-1>) pri 266 ± 2, 283 ± 2 i 1297 ± 2; i (ii) ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 122.1 ± 0.2, 130.7 ± 0.2 i 140.1 ± 0.2.

[0039] U nekim ostvarenjima, ovo otkriće se odnosi na Oblik 4, pri čemu je ovaj oblik nehigroskopan i anhidrovan.

[0040] U nekim ostvarenjima, ovo otkriće se odnosi na Oblik 4, pri čemu ovaj oblik uključuje mnoštvo kristalnih iglica jedinjenja Formule I.

[0041] Otkriće takođe razmatra mogućnost da Oblik 4 može da egzistira u prisustvu bilo kojih drugih čvrstih oblika (na primer Oblik 1, 2 i 6) ili njihovih smeša. U skladu sa tim, u jednom ostvarenju, ovo otkriće obezbeđuje Oblik 4, pri čemu je Oblik 4 prisutan u čvrstom obliku koji uključuje manje od 95%, manje od 90%, manje od 80%, manje od 70%, manje od 60%, manje od 50%, manje od 40%, manje od 30%, manje od 20%, manje od 10%, manje od 5%, manje od 3%, ili manje od 1 % težine bilo kojih drugih fizičkih oblika jedinjenja Formule I. Na primer, jedno ostvarenje je čvrsti oblik jedinjenja Formule I koje uključuje Oblik 1 koji ima bilo koji od modela difrakcije X-zraka praška, Ramanovog spektra, IR spektra i/ili NMR spektra kako je prethodno opisano, pri čemu navedeni čvrsti oblik uključuje manje od 95%, manje od 90%, manje od 80%, manje od 70%, manje od 60%, manje od 50%, manje od 40%, manje od 30%, manje od 20%, manje od 10%, manje od 5%, manje od 3%, ili manje od 1% težine bilo kojih drugih fizičkih oblika jedinjenja Formule I.

[0042] U nekim ostvarenjima, ovo otkriće se odnosi na Oblik 4, pri čemu je navedeni oblik skoro u potpunosti čist kristalni oblik.

[0043] Dalje, na osnovu ovde datog otkrića, stručnjak sa uobičajenim iskustvom u praksi će da razume da treći kristalni oblik jedinjenja Formule I (ovde označen kao "Oblik 6") može jedinstveno da se identifikuje pomoću nekoliko različitih pikova ili modela spektra u različitim kombinacijama. Niže su opisane primerne kombinacije vrednosti karakterističnih pikova koje mogu da se koriste za identifikaciju Oblika 6 i ni na koji način ove primerne kombinacije ne treba sagledavati kao ograničenje za druge kombinacije vrednosti pika koje su ovde opisane.

[0044] Otkriće takođe daje Oblik 6, pri čemu ovaj oblik ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 23.8 ± 0.2 i 27.5 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 6 ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 13.6 ± 0.2, 23.8 ± 0.2 i 27.5 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 6 ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 13.6 ± 0.2, 23.5 ± 0.2, 23.8 ± 0.2 i 27.5 ± 0.2.

[0045] Otkriće takođe daje Oblik 6, pri čemu navedeni kristalni oblik ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) u osnovi iste kao što je pokazano na Slici 14.

[0046] Otkriće takođe daje Oblik 6, pri čemu ovaj oblik ima Ramanov spektar koji uključuje pikove Raman promene (cm<-1>) pri 223 ± 2, 1274 ± 2 i 1434 ± 2. U narednom ostvarenju, Oblik 6 ima Ramanov spektar koji uključuje pikove Raman promene (cm<-1>) pri 223 ± 2, 1274 ± 2, 1434 ± 2 i 1547 ± 2.

[0047] Otkriće takođe daje Oblik 6, pri čemu ovaj oblik ima Ramanov spektar koji uključuje pikove Raman promene (cm<-1>) na pozicijama u osnovi istim kao što je pokazano na Slici 16.

[0048] Otkriće takođe daje Oblik 6, pri čemu ovaj oblik ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 109.7 ± 0.2, 126.4 ± 0.2 i 131.5 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 6 ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 109.7 ± 0.2 i 126.4 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 6 ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 126.4 ± 0.2 i 131.5 ± 0.2. U narednom ostvarenju, Oblik 6 ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 109.7 ± 0.2 i 131.5 ± 0.2.

[0049] Otkriće takođe daje Oblik 6, pri čemu ovaj oblik ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) na pozicijama u osnovi istim kao što je pokazano na Slici 18.

[0050] Otkriće takođe daje Oblik 6, pri čemu ovaj oblik (i) ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 23.8 ± 0.2 i 27.5 ± 0.2; i (ii) ima Ramanov spektar koji uključuje pikove Raman promene (cm<-1>) pri 223 ± 2, 1274 ± 2 i 1547 ± 2.

[0051] Otkriće takođe daje Oblik 6, pri čemu ovaj oblik (i) ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 23.8 ± 0.2 i 27.5 ± 0.2; i (ii) ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 109.7 ± 0.2, 126.4 ± 0.2 i 131.5 ± 0.2.

[0052] Otkriće takođe daje Oblik 6, pri čemu ovaj oblik (i) ima Ramanov spektar koji uključuje pikove Raman promene (cm<-1>) pri 223 ± 2, 1274 ± 2 i 1547 ± 2; i (ii) ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 109.7 ± 0.2, 126.4 ± 0.2 i 131.5 ± 0.2.

[0053] U nekim ostvarenjima, ovo otkriće se odnosi na Oblik 6, pri čemu je ovaj oblik nehigroskopan i anhidrovan.

[0054] U još jednom aspektu, u ovom otkriću se razmatra mogućnost da Oblik 6 može da egzistira u prisustvu bilo kojih drugih čvrstih oblika (na primer Oblik 1, 2 i 4) ili njihovih smeša. U skladu sa tim, u jednom ostvarenju, ovo otkriće obezbeđuje Oblik 6, pri čemu je Oblik 6 prisutan u čvrstom obliku koji uključuje manje od 95%, manje od 90%, manje od 80%, manje od 70%, manje od 60%, manje od 50%, manje od 40%, manje od 30%, manje od 20%, manje od 10%, manje od 5%, manje od 3%, ili manje od 1 % težine bilo kojih drugih fizičkih oblika jedinjenja Formule I. Na primer, jedno ostvarenje je čvrsti oblik jedinjenja Formule I koje uključuje Oblik 6 koji ima bilo koji od modela difrakcije X-zraka praška, Ramanov spektar, IR spektar i/ili NMR spektar kako je prethodno opisano, pri čemu navedeni čvrsti oblik uključuje manje od 95%, manje od 90%, manje od 80%, manje od 70%, manje od 60%, manje od 50%, manje od 40%, manje od 30%, manje od 20%, manje od 10%, manje od 5%, manje od 3%, ili manje od 1% težine bilo kojih drugih fizičkih oblika jedinjenja Formule I.

[0055] U nekim ostvarenjima, ovo otkriće se odnosi na Oblik 6, pri čemu je navedeni oblik skoro u potpunosti čist kristalni oblik.

[0056] Naredni aspekt ovog pronalaska obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja uključuje ovde opisani Oblik 1. U još jednom aspektu, pronalazak obezbeđuje oralni dozni oblik koji ukjučuje Oblik 1 ili bilo koju od ovde opisanih farmaceutskih kompozicija. Na primer, u jednom ostvarenju oralni dozni oblik je tableta, pilula ili kapsula. Na primer, u jednom ostvarenju, oralni dozni oblik je tableta ili kapsula.

[0057] U jednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje tabletu koja uključuje Oblik 1 ili bilo koju od ovde opisanih farmaceutskih kompozicija. Na primer, u jednom ostvarenju tableta sadrži od približno 1 do približno 100 mg Oblika 1. Dalje, na primer, tableta sadrži približno 10 mg Oblika 1. Još dalje, na primer, tableta sadrži približno 20 mg Oblika 1. Još dalje, na primer, tableta sadrži približno 30 mg Oblika 1. Još dalje, na primer, tableta sadrži približno 40 mg Oblika 1. Još dalje, na primer, tableta sadrži približno 50 mg Oblika 1. Još dalje, na

1

primer, tableta sadrži približno 60 mg Oblika 1. Još dalje, na primer, tableta sadrži približno 70 mg Oblika 1. Još dalje, na primer, tableta sadrži približno 80 mg Oblika 1. Još dalje, na primer, tableta sadrži približno 90 mg Oblika 1. Još dalje, na primer, tableta sadrži približno 100 mg Oblika 1.

[0058] U jednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje meku želatinsku kapsulu koja uključuje Oblik 1, ili bilo koju od ovde opisanih farmaceutskih kompozicija. Na primer, u jednom ostvarenju meka želatinska kapsula sadrži od približno 1 do približno 100 mg Oblika 1. Dalje, na primer, meka želatinska kapsula sadrži približno 10 mg Oblika 1. Još dalje, na primer, meka želatinska kapsula sadrži približno 20 mg Oblika 1. Još dalje, na primer, meka želatinska kapsula sadrži približno 30 mg Oblika 1. Još dalje, na primer, meka želatinska kapsula sadrži približno 40 mg Oblika 1. Još dalje, na primer, meka želatinska kapsula sadrži približno 50 mg Oblika 1. Još dalje, na primer, meka želatinska kapsula sadrži približno 60 mg Oblika 1. Još dalje, na primer, meka želatinska kapsula sadrži približno 70 mg Oblika 1. Još dalje, na primer, meka želatinska kapsula sadrži približno 80 mg Oblika 1. Još dalje, na primer, meka želatinska kapsula sadrži približno 90 mg Oblika 1. Još dalje, na primer, meka želatinska kapsula sadrži približno 100 mg Oblika 1.

[0059] Naredni aspekt ovog pronalaska obezbeđuje postupak za izradu Oblika 1, kako je opisano u Primeru 1. Otkriće takođe daje postupak za izradu Oblika 4, pri čemu navedeni postupak uključuje zagrevanje Oblika 1 kako je opisano u Primeru 2. Otkriće takođe daje postupak za izradu Oblika 2, pri čemu navedeni postupak uključuje rastvaranje Oblika 1 u THF i evaporaciju dobijenog rastvora kako je opisano u Primeru 3. Otkriće takođe daje postupak za izradu Oblika 6, pri čemu navedeni postupak uključuje zagrevanje Oblika 1 kako je opisano u Primeru 4.

[0060] Otkriće takođe obezbeđuje postupak za lečenje transtiretin amiloidnih bolesti, kao što su senilna sistemska amiloidoza (SSA), porodična amiloidna polineuropatija (FAP) i porodična amiloidna kardiomiopatija (FAC), kod sisara, pri čemu postupak uključuje primenu na sisaru terapeutski efektivne količine Oblika 1, ili bilo koje od ovde opisanih farmaceutskih kompozicija.

KRATAK OPIS SLIKA

[0061]

Slika 1 opisuje karakteristični PXRD model Oblika 1 dobijen na PANalytical X’Pert PRO MPD difraktometru.

Slika 2 opisuje odgovarajuću listu pikova za PXRD model pokazan na Slici 1.

Slika 3 opisuje odgovarajuću listu pikova za PXRD model za Oblik 4 dobijen na PANalytical X’Pert PRO MPD difraktometru.

Slika 4 opisuje odgovarajuću listu pikova za PXRD model pokazan na Slici 3.

Slika 5 opisuje karakteristični Ramanov spektar Oblika 1 dobijen na NXR FT-Raman modulu povezanom sa Nexus 670 FT-IR spektrofotometrom (Thermo Nicolet), opremljenim sa InGaAs detektorom.

Slika 6 opisuje odgovarajuću listu pikova za Ramanov spektar pokazan na Slici 5.

Slika 7 opisuje karakteristični Ramanov spektar Oblika 4 dobijen na NXR FT-Raman modulu povezanom sa Nexus 670 FT-IR spektrofotometrom (Thermo Nicolet), opremljenim sa InGaAs detektorom.

Slika 8 opisuje odgovarajuću listu pikova za Ramanov spektar pokazan na Slici 7.

Slika 9 opisuje karakteristični 13C NMR spektar čvrstog stanja Oblika 1 dobijen na Bruker-Biospin 4 mm CPMAS sondi smeštenoj u Bruker-Biospin Avance III 500 MHz NMR spektrometru.

Slika 10 opisuje odgovarajuću listu pikova za 13C NMR spektar čvrstog stanja pokazan na Slici 9. Hemijske promene se pozivaju na spoljašnji uzorak čvrste faze adamantana, podešavajući njegovu gornju rezonancu na 29.5 ppm.

Slika 11 opisuje karakteristični 13C NMR spektar čvrstog stanja Oblika 4 dobijen na Bruker-Biospin 4 mm CPMAS sondi smeštenoj u Bruker-Biospin Avance III 500 MHz NMR spektrometru sakupljenim pod 15.0 kHz upredanja pod magičnim uglom. Pikovi označeni zvezdicama su bočne trake upredanja.

Slika 12 opisuje odgovarajuću listu pikova za 13C NMR spektar čvrstog stanja pokazan na Slici 11. Hemijske promene se pozivaju na spoljašnji uzorak čvrste faze adamantana, podešavajući njegovu gornju rezonancu na 29.5 ppm.

Slika 13 opisuje izračunati model X-zraka praška Oblika 2.

Slika 14 opisuje karakteristični PXRD model Oblika 6 dobijen na PANalytical X’Pert PRO MPD difraktometru.

Slika 15 opisuje odgovarajuću listu pikova za PXRD model pokazan na Slici 14.

Slika 16 opisuje karakterističan Ramanov spektar Oblika 6 dobijen na NXR FT-Raman modulu povezanom sa Nexus 670 FT-IR spektrofotometrom (Thermo Nicolet), opremljenim sa InGaAs detektorom.

Slika 17 opisuje odgovarajuću listu pikova za Ramanov spektar pokazan na Slici 16.

Slika 18 opisuje karakteristični 13C NMR spektar čvrstog stanja Oblika 6 dobijen na Bruker-Biospin 4 mm CPMAS sondi smeštenoj u Bruker-Biospin Avance III 500 MHz NMR spektrometru sakupljenim pod 15.0 kHz upredanja pod magičnim uglom. Pikovi označeni tarabama su bočne trake upredanja.

Slika 19 opisuje odgovarajuću listu pikova za 13C NMR spektar čvrstog stanja pokazan na Slici 18. Hemijske promene se pozivaju na spoljašnji uzorak čvrste faze adamantana, podešavajući njegovu gornju rezonancu na 29.5 ppm.

Slika 20 opisuje karakteristični model PXRD amorfnog oblika 6-karboksi-2-(3,5-dihlorfenil)-benzoksazola dobijen na PANalytical X’Pert PRO MPD difraktometru.

Slika 21 opisuje karakteristični model PXRD Oblika 1 dobijen na Bruker AXS D8 ADVANCE difraktometru.

1

DETALJAN OPIS PRONALASKA

[0062] Na osnovu hemijske strukture, ne može se sa izvesnim stepenom izvesnosti predvideti da li će jedinjenje da kristališe, pod kojim uslovima će da kristališe, u koliko kristalnih čvrstih oblika jedinjenje može da egzistira, ni kakva je struktura čvrstog stanja bilo kog od ovih oblika. Ključna karakteristika bilo kog kristalnog leka je polimorfno ponašanje takvog materijala. Generalno, kristalni oblici lekova imaju prednost u odnosu na nekristalne oblike lekova, delimično zbog svoje superiorne stabilnosti. Na primer, u brojnim situacijama, nekristalni lek nakon stajanja prelazi u kristalni oblik leka. Zbog činjenice da nekristalni i kristalni oblici leka obično imaju različite fizičke osobine i hemijske osobine, u farmaceutskoj upotrebi ovakva interkonverzija može da bude nepoželjna iz razloga bezbednosti. Različite fizičke osobine ispoljene u različitim čvrstim oblicima farmaceutskog jedinjenja mogu da utiču na važne faramceutske parametre kao što su čuvanje, stabilnost, kompresibilnost, gustina (važno u formulaciji i proizvodnji produkta) i brzina rastvaranja (važno u određivanju bioraspoloživosti). Razlike u stabilnosti mogu da budu rezultat promena u hemijskoj reaktivnosti (na primer, diferencijalna hidroliza ili oksidacija, tako da dozni oblik koji uključuje određeni polimorf može da se obezboji mnogo brže nego dozni oblik koji uključuje drugi polimorf), mehaničkim promenama (na primer, tablete mogu da se raspadnu prilikom stajanja zbog toga što se kinetički favorizovan kristalni oblik konvertuje u termodinamički mnogo stabilniji kristalni oblik), ili oba (na primer, tablete sa jednim polimorfom mogu da budu mnogo podložnije raspadanju pri visokoj vlažnosti). Razlike u rastvorljivosti između polimorfa mogu, u ekstremnim situacijama, da dovedu do prelaska u kristalne oblike koji nemaju potenciju i/ili koji su toksični. Pored toga, fizičke osobine kristalnog oblika mogu takođe da budu važne u procesu izrade farmaceutskog preparata. Na primer, određeni kristalni oblik može mnogo lakše da formira solvate ili može da bude mnogo teži za filtriranje i ispiranje nečistoća nego drugi kristalni oblici (to jest, oblik čestica i distribucija veličine može da bude različita između jednog kristalnog oblika u odnosu na druge oblike).

[0063] Ne postoji idealan fizički oblik leka zato što različiti fizički oblici obezbeđuju različite prednosti. Istraživanja za najstabilniji oblik i druge takve oblike je naporno a rezultat je nepredvidiv. Prema tome, važno je pronaći različite jedinstvene oblike leka, na primer soli, polimorfi, nekristalni oblici, koji mogu da se koriste u različitim formulacijama. Izbor oblika leka za specifičnu formulaciju ili terapeutsku primenu zahteva razmatranje različitih osobina a najbolji oblik za određenu primenu može da bude onaj koji ima jednu specifično važnu dobru osobinu dok druge osobine mogu da budu prihvatljive ili marginalno prihvatljive.

[0064] Uspešan razvoj leka zahteva da se ispune određeni opšti zahtevi kako bi se zadovoljio terapeutski efektivan tretman za pacijenta. Ovi zahtevi su podeljeni u dve kategorije: (1) zahtevi za uspešnu proizvodnju doznih oblika i (2) zahtevi za uspešno oslobađanje i dispoziciju leka nakon što se formulacija leka primeni na pacijentu.

[0065] Različiti kristalni čvrsti oblici istog jedinjenja često poseduju različite osobine čvrstog stanja kao što su tačka topljenja, rastvorljivost, brzina rastvaranja, higroskopnost, protok praška, mehaničke osobine, hemijska stabilnost i fizička stabilnost. Ove osobine čvrstog stanja mogu da omoguće prednosti pri filtraciji, sušenju i pojedinim operacijama proizvodnje doznog oblika. Prema tome, kada su jednom identifikovani različiti čvrsti kristalni oblici istog jedinjenja, mogu da se odrede optimalni čvrsti kristalni oblik pod bilo kojim datim uslovima procesa i proizvodnje kao i različita svojstva čvrstog stanja svakog kristalnog čvrstog oblika.

[0066] Polimorfi molekule mogu da se dobiju brojnim postupcima poznatim u tehnici. U ovakve postupke spadaju, ali bez ograničenja na, rekristalizacija topljenjem, topljenje hlađenjem, rekristalizacija rastvarača, desolvacija, brza evaporacija, brzo hlađenje, sporo hlađenje, difuzija parom i sublimacija. Polimorfi mogu da se detektuju, identifikuju, klasifikuju i karakterizuju primenom dobro poznatih tehnika kao što su, ali bez ograničenja na, diferencijalna skenirajuća kalorimetrija (DSC), termogravimetrija (TGA), difraktometrija X-zraka praška (PXRD), difraktometrija X-zraka pojedinačnog kristala, nuklearna magnetna rezonanca čvrstog stanja (NMR), infracrvena (IR) spektroskopija, Ramanova spektroskopija i termooptička mikroskopija. Za razvoj leka, važno je da se obezbedi oblik jedinjenja (uobičajeno poznato kao lekovita supstanca) koji nije samo pouzdano pripremljen i prečišćen u velikoj količini, već je takođe stabilan i ne razgrađuje se stajanjem. Osim toga, lekovita supstanca mora da bude pogodna za formulisanje u izabrani dozni oblik u skladu sa nameravanim načinom primene.

[0067] Nađeno je da jedinjenje Formule I može da egzistira u jedinstvenim kristalnim oblicima, ovde označenim kao Oblik 1, Oblik 2, Oblik 4 i Oblik 6. Ovi oblici mogu da se koriste u formulisanju produkta za tretman transtiretin amiloidnih bolesti. Kako je prethodno navedeno, svaki oblik može da ima prednosti u odnosu na druge u pogledu osobina kao što su bioraspoloživost, stabilnost i mogućnost proizvodnje. U jednom aspektu pronalaska, za kristalni oblik jedinjenja Formule I, to jest Oblik 1, je otkriveno da će verovatno biti mnogo pogodniji za izradu i manipulaciju nego amorfni oblik. Ovde su opisani procesi za izradu

1

Oblika 1, Oblika 2, Oblika 4 i Oblika 6. Naredni zadatak ovog pronalaska je da obezbedi proces za izradu Oblika 1 jedinjenja Formule I, suštinski bez drugih čvrstih oblika. Pored toga, jedan od zadataka ovog pronalaska je da obezbedi farmaceutske formulacije koje uključuju jedinjenje Formule I u kristalnom Obliku 1 i postupke za lečenje transtiretin amiloidnih bolesti primenom ovih farmaceutskih formulacija.

Definicije

[0068] Kako se ovde koristi, naziv "lečenje", ukoliko nije drugačije navedeno, označava preokretanje, ublažavanje, zaustavljanje progresa, ili prevenciju poremećaja ili stanja za koje se primenjuje ovaj naziv, ili jedan ili više simptoma takvog poremećaja ili stanja. Kako se ovde koristi, naziv "tretman", ukoliko nije drugačije navedeno, se odnosi na čin "lečenja" kako je neposredno prethodno definisano.

[0069] Kako se ovde koristi, transtiretin ili TTR je 55 kDa homotetramer koji karakteriše 2,2,2 simetrija i koji ima dva identična mesta vezivanja u obliku levka na dimer-dimer međufazi, gde tiroid hormon (T4) može da se veže u krvnoj plazmi i CSF. TTR je obično vezan za manje od 1 ekvivalent holo retinol vezujućeg proteina. TTR je 127-rezidualni protein koji tetramerizuje pod fiziološkim uslovima. TTR služi kao tercijerni transporter tiroksina u serumu i primarni nosač u cerebrospinalnoj tečnosti. TTR takođe transportuje retinol tako što je povezan sa retinol vezujućim proteinom. TTR formira amiloid pri niskom pH.

[0070] Kako se ovde koristi, naziv "suštinski čist" u odnosu na određeni kristalni oblik označava da kristalni ili amorfni oblik uključuje manje od 10%, preferirano manje od 5%, preferirano manje od 3%, preferirano manje od 1% težine bilo koji drugi fizički oblik jedinjenja.

[0071] Kako se ovde koristi, naziv "u osnovi isti" u odnosu na pozicije pika difrakcije X-zraka označava da su pozicija tipičnog pika i intenzitet promene uzeti u obzir. Na primer, stručnjak sa uobičajenim iskustvom u praksi će da razume da će pozicije pika (2θ) pokazati izvesne promene, obično u opsegu od 0.1 do 0.2 stepena, kao i na aparaturi koja se koristi za merenje difrakcije. Osim toga, stručnjak sa iskustvom u praksi će da razume da će relativni intenziteti pika pokazati razlike između aparata, kao i razlike zbog stepena kristaliniteta, preferirane orijentacije, površine pripremljenog uzorka i drugih faktora poznatih stručnjaku sa iskustvom u praksi i mogu da se uzmu samo kao kvalitativna merenja. Slično tako, kako se

1

ovde koristi, "u osnovi isto" u odnosu na NMR spektar čvrstog stanja i Ramanov spektar treba takođe da obuhvati razlike povezane sa ovim analitičkim tehnikama, koje su poznate stručnjaku sa iskustvom u praksi. Na primer, merenja 13C hemijskih promena u NMR čvrstog stanja će obično imati razlike do 0.2 ppm za jasno definisane pikove a čak veće za široke linije, dok će Ramanove promene obično imati razlike od približno 2 cm<-1>.

[0072] Naziv "polimorf" se odnosi na različite kristalne oblike istog jedinjenja i uključuje, ali bez ograničenja na, druge molekularne oblike čvrstog stanja uključujući hidrate (na primer, vezana voda prisutna u kristalnoj strukturi) i solvate (na primer, vezani rastvarači različiti od vode) istog jedinjenja.

[0073] Naziv "amorfni" se odnosi na bilo koju čvrstu supstancu čija molekula nema nema trodimenzionalni raspored. U nekim slučajevima, amorfni čvrsti oblici mogu da se karakterišu poznatim tehnikama, uključujući kristalografiju difrakcije X-zraka praška (PXRD), nuklearnu magnetnu rezonantnu spektroskopiju (ssNMR) čvrstog stanja, diferencijalnu skenirajuću kalorimetriju (DSC), ili neku kombinaciju ovih tehnika.

[0074] Naziv "kristal" se odnosi na bilo koju čvrstu supstancu koja ispoljava trodimenzionalnu strukturu, koja nasuprot amorfnoj čvrstoj supstanci daje karakterističan PXRD model sa jasno definisanim pikovima.

[0075] Naziv "solvat" opisuje molekularni kompleks koji uključuje lekovitu supstancu i stehiometrijsku ili ne-stehiometrijsku količinu jedne ili više molekula rastvarača (na primer, etanol). Kada je rastvarač čvrsto vezan za lek, nastali kompleks će da ima dobro definisanu stehiometriju koja je nezavisna od vlaženosti. Međutim, kada je rastvarač slabo vezan, kao u kanalnim rastvaračima i higroskopnim jedinjenjima, sadržaj rastvarača će da zavisi od vlažnosti i uslova sušenja. U ovakvim slučajevima, kompleks će često da bude nestehiometrijski.

[0076] Naziv "hidrat" opisuje solvat koji uključuje lekovitu supstancu i stehiometrijsku ili nestehiometrijsku količinu vode.

[0077] Naziv "model difrakcije X-zraka praška" ili "PXRD model" se odnosi na eksperimentalno uočen difraktogram ili na parametre dobijene iz njega. Modeli difrakcije X-zraka praška se karakterišu pozicijom pika (apscisa) i intenzitetom pika (ordinata).

[0078] Naziv "2 teta vrednost" ili "2θ" se odnosi na poziciju pika u stepenima na bazi eksperimentalne postavke difrakcije X-zraka i obično je jedinica na apscisi u modelu difrakcije. Eksperimentalna postavka zahteva da ukoliko je refleksija difraktovana kada ulazni zrak formira ugao teta (θ) sa određenom ravnom rešetkom, reflektovani zrak se beleži pri uglu

1

2 teta (2θ). Treba da se razume da ovde pozivanje na specifične 2θ vrednosti za specifični čvrsti oblik treba da znači da su 2θ vrednosti (u stepenima) izmerene difrakcijom X-zraka pod eksperimentalnim uslovima kako je ovde opisano.

Čvrsti oblici jedinjenja Formule I

[0079] Ovde otkriveni čvrsti oblici jedinjenja Formule I mogu da se karakterišu jednim ili više od sledećih: modelom difrakcije X-zraka praška (to jest, pikovi difrakcije X-zraka pri različitim uglovima difrakcije (2θ)), spektralnim modelom nuklearne magnetne rezonance (NMR) čvrstog stanja, modelom Ramanovog spektralnog dijagrama, modelom infracrvenog spektra, rastvorljivošću u vodi, stabilnošću pod svetlom po Međunarodnoj konferenciji o harmonizaciji (ICH) u uslovima visokog intenziteta svetla i fizičkoj i hemijskoj stabilnosti pri stajanju. Na primer, čvrsti oblici jedinjenja Formule I se svaki karakteriše položajima i relativnim intenzitetima pikova u njihovim modelima difrakcije X-zraka praška.

[0080] Modeli difrakcije X-zraka praška čvrstih oblika jedinjenja Formule I su dobijeni koristeći PANalytical X’Pert PRO MPD difraktometar koristeći upadni snop Cu zračenja dobijen upotrebom Optix dugačkog, fino fokusiranog izvora. Eliptički stepenovano višeslojno ogledalo je korišćeno za fokus Cu Kα X-zraka kroz uzorak i na detektor. Pre analize, silikonski uzorak (NIST SRM 640d) se analizira da se verifikuje da je uočeni položaj Si 111 pika konzistentan sa NIST-sertifikovanim položajem. Primerak uzorka se stavi između filmova debljine 3-µm i analizira u transmisionoj geometriji. Zaustavljanje snopa, kratka antiskater ekstenzija, antiskater sečivo noža, su korišćeni za minimiziranje pozadine generisane vazduhom. Soller prorezi za ulazne i difraktovane zrake se koriste za minimiziranje proširenja od aksijalne divergence. Modeli difrakcije su dobijeni korišćenjem skenirajućeg poziciono-senzitivnog detektora (X’Celerator) smeštenog 240 mm od primerka i Data Collector verzije softvera 2.2b. Rezultati akvizicije parametara su kako je pokazano u niže datoj Tabeli 1.

1

Tabela 1. Rezultati akvizicije parametara za PXRD.

[0081] Uopštenije, za izvođenje merenja difrakcije X-zraka na transmisionom instrumentu kao što je PANalytical sistem korišćen za merenja koja su ovde objavljena, primerak uzorka se stavi između filmova debljine 3 µm i analizira transmisionom geometrijom. Ulazni X-zrak se usmeri na uzorak, u početku pod malim uglom u odnosu na ravan nosača a nakon toga pomera lučno tako da se konstantno povećava ugao između ulaznog zraka i ravni nosača. Razlike u merenju nastale ovakvim analizama X-zraka praška su posledica različitih faktora uključujući: (a) greške u pripremi uzorka; (b) greške instrumenta; (c) greške kalibracije; (d) greške operatora (uključujući one greške pri određivanju položaja pika); i (e) prirodu materijala (na primer, greške preferirane orijentacije i transparentnosti. Kalibracione greške i greške u debljini uzorka često dovode do promena svih pikova u istom usmerenju. Ove promene mogu da se identifikuju iz difraktograma X-zraka i mogu da se eliminišu kompenzacijom za promene (nanošenjem sistemskog faktora korekcije za vrednosti položaja svih pikova) ili rekalibracijom instrumenta. Generalno, ovaj faktor korekcije će uskladiti izmerene pozicije pikova sa očekivanim pozicijama pika i može da bude u rasponu od ± 0.2° 2θ

[0082] Stručnjak sa iskustvom u tehnici će da razume da će pozicije pika (2θ) pokazati razlike među aparatima, obično ± 0.2° 2θ. U skladu sa tim, kada su zabeležene pozicije pika (2θ), stručnjak sa iskustvom u praksi će da prepozna da ovi brojevi treba da obuhvate ovakve razlike između aparata. Pored toga, kada su kristalni oblik iz ovog pronalaska i oni drugi

1

oblici koji su ovde otkriveni opisani tako da imaju poziciju pika difrakcije X-zraka praška skoro u potpunosti istu kao što je dato na slici, naziv "skoro u potpunosti isti" takođe treba da obuhvati ovakve razlike između aparata za pozicije pika difrakcije. Osim toga, stručnjak sa iskustvom u praksi će da razume da će relativni intenzitet pika pokazati razlike između aparata kao i razlike zbog stepena kristalnosti, preferirane orijentacije, površine pripremljenog uzorka i drugih faktora poznatih stručnjaku sa iskustvom u praksi i treba da se uzmu samo kao kvalitativna merenja.

[0083] PXRD pik indentifikacije se sprovodi na sledeći način. PXRD model se analizira za Oblik 1 i Oblik 4; preferirana orijentacija i statistički efekti čestica se ne procenjuju. Pod najčešćim okolnostima, uzimaju se pikovi u rasponu sve do priblikžno 30° 2θ. Pikovi sa intenzitetom većim od ili jednaki sa 2% od najintenzivnijeg pika se koriste za selekciju pika. Pozicije pika se okreću za najbliže 0.1° 2θ. Položaji pikova duž x-ose (° 2θ) se određuju pomoću TRIADS™ v2.0 softvera; TRIADS™ algoritam je opisan u US Patentu 8,576,985. Kako je prethodno navedeno, razlike pozicije pika su date u okviru ± 0.2° 2θ na osnovu preporuka datih u USP raspravi različitosti u difrakciji X-zraka praška (videti United States Pharmacopeia, USP 37, NF 32, od S1<941>, 503, 5/1/2014).

[0084] Čvrsti oblici jedinjenja Formule I mogu takođe da se karakterišu Ramanovom spektroskopijom. Ramanov spektar se dobija pomoću NXR FT-Raman modula povezanog sa Nexus 670 FT-IR spektrofotometrom (Thermo Nicolet), opremljenim sa InGaAs detektorom. Verifikacija talasne dužine se vrši pomoću sumpora i cikloheksana. Svaki uzorak za analizu se pripremi pakovanjem uzorkovanog materijala u nosač pelete. Koristi se laser približno 0.5 W Nd:YVO4 snage (1064 nm talasna dužina ekscitacije) za ozračavanje svakog uzorka. Svaki spektar predstavlja 256 pridodatih snimaka sakupljenih pri spektralnoj rezoluciji od 2 cm<-1>, dobijenih na temperaturi sredine. Pozicije pika su odabrane po maksimumu pika. Relativne vrednosti intenziteta su klasifikovane kao jake (S), srednje (M) i slabe (W) koristeći sledeći kriterijum: jake (1.00-0.75); srednje (0.74-0.30) i slabe (0.29 i niže).

[0085] Čvrsti oblici jedinjenja Formule I mogu takođe da se karakterišu korišćenjem NMR spektroskopije čvrstog stanja.13C spektar čvrstog stanja za čvrste oblike Formule I se dobija na sledeći način. Analiza NMR čvrstog stanja (ssNMR) se izvodi na temperaturi i pritisku sredine na Bruker-Biospin CPMAS sondi pozicioniranoj u Bruker-Biospin Avance III 500 MHz (1H frekvencija) NMR spektrometru. Rotor za pakovanje je usmeren pod magičnim uglom i rotira pri 15.0 kHz. Ugljenik ssNMR spektar se dobija na sobnoj temperaturi koristeći eksperiment unakrsne polarizacije odvojenog protona rotacijom pod magičnim uglom

2

(CPMAS). Tokom spektralne akvizicije primenjeno je fazno modulisano polje razdvajanja protona pri 80-100 kHz. Vreme kontakta unakrsne polarizacije je podešeno na 2.0 ms.

Kašnjenje recikliranja je podešeno na 180 sekundi za Oblik 1, 50 sekundi za Oblik 4 i 5 sekundi za Oblik 6. Broj snimaka je podešen tako da se dobije adekvatan odnos signala i šuma. Spektar ugljenika se uzima kao referentan koristeći spoljašnji standard kristalnog adamantana, podešavajući njegovu uzlaznu rezonancu na 29.5 ppm (kako je određeno za čist tetrametilsilan). Automatsko sakupljanje pikova se vrši pomoću Bruker-BioSpin TopSpin verzije 3.1 softvera. Generalno, granična vrednost od 5% relativnog intenziteta se koristi za preliminarnu selekciju pikova. Rezultat automatski odabranog pika se vizuelno proveri da se osigura validnost i manuelno podesi ukoliko je potrebno. Mada su specifične vrednosti pika 13C NMR čvrstog stanja ovde zabeležene, za ove vrednosti pika postoji niz razlika zbog instrumenata, uzoraka i pripreme uzoraka. Ovo je uobičajena praksa u tehnici NMR čvrstog stanja zbog inherentne varijacije u vrednostima pika. Uobičajena razlika vrednosti 13C hemijske promene X-ose je po redu za plus ili minus 0.2 ppm za čvrsti kristal. Najveći pikovi NMR čvrstog stanja zabeleženi ovde su relativnog intenziteta. Intenziteti NMR čvrstog stanja mogu da variraju u zavisnosti od stvarnog podešavanja za CPMAS sksperimentalne parametre i termičke istorije uzorka.

[0086] Stručnjak sa iskustvom u praksi će takođe prepoznati da kristalni oblici datog jedinjenja mogu da egzistiraju u skoro potpuno čistim oblicima pojedinačnog polimorfa, ali takođe mogu da egzistiraju u kristalnom obliku koji uključuje dva ili više polimorfa ili amorfna oblika. Kada čvrsti oblik uključuje dva ili više polimorfa, model difrakcije X-zraka će da ima pikove karakteristične za svaki pojedinačni polimorf. Na primer, čvrsti oblik koji uključuje dva polimorfa će da ima model difrakcije X-zraka praška koji je skup dva modela difrakcije X-zraka koji odgovaraju skoro potpuno čistim čvrstim oblicima. Na primer, čvrsti oblik jedinjenja Formule I može da sadrži prvi i drugi čvrsti oblik pri čemu čvrsti oblik sadrži najmanje 10% težine prvi oblik. U narednom primeru čvrsti oblik sadrži najmanje 20% težine prvi oblik. Čak u daljim primerima sadrži najmanje 30%, najmanje 40%, ili najmanje 50% težine prvi oblik. Stručnjak sa iskustvom u tehnici će da razume da su moguće brojne ovakve kombinacije više pojedinačnih oblika u različitim količinama.

Oblik 1

[0087] Oblik 1 je kristalni, ne-higroskopni, anhidrovani, oblik jedinjenja Formule I koji može da se izradi kako je opisano u Primeru 1.

[0088] Oblik 1 se karakteriše modelom PXRD pokazanim na Slici 1, koji je meren na PANalytical X’Pert PRO MPD koristeći ulazni zrak Cu zračenja dobijen upotrebom Optix dugačkog, fino fokusiranog izvora. PXRD model Oblika 1, izražen u stepenima (2θ) i relativnim intenzitetom sa relativnim intenzitetom od ≥ 2.0%, je pokazan na Slici 2. Relativni intenziteti mogu da se menjaju u zavisnosti od veličine i morfologije kristala.

[0089] Oblik 1 je ovde okarakterisan kao čista supstanca za identifikaciju karakterističnih pikova Oblika 1 koristeći odgovarajuće analitičke postupke. Ovim analitičkim postupcima se dobijaju vrednosti pika koje su karakteristične za Oblik 1 i imaju definisan opseg u okviru prihvatljivih razlika. Međutim, očekuje se da se relativni intenzitet ovih karakterističnih pikova promeni kada se Oblik 1 izmeša sa bilo kojim dodatnim komponentama, kao što su komponente koje se koriste u formulaciji. Zbog toga je stručnjaku sa iskustvom u praksi instrumentalnih analiza jasno da analitički parametri specifičnog postupka mogu da zahtevaju dodatnu optimizaciju da bi se omogućila detekcija ovih karakterističnih pikova kada se izmeša i razblaži sa dodatnim komponentama u formulaciji lekovitog produkta. Na primer, kako je opisano u narednom pasusu, PXRD može dalje da se optimizuje da omogući detekciju karakterističnih pikova Oblika 1 ukoliko je Oblik 1 izmešan sa dodatnim komponentama. Stručnjak sa iskustvom u tehnici PXRD analiza će da razume da kao rezultat ovih postupaka optimizacije vrednosti pika zajedno sa karakterističnim pikovima Oblika 1 ne bi bile izmenjene.

[0090] Analiza difrakcije X-zraka praška za Oblik 1 se takođe izvodi na Bruker AXS D8 ADVANCE difraktometru opremljenim sa izvorom Cu zračenja (K-α prosek). Sistem je opremljen sa 2.5 aksijalnim Soller prorezima na primarnoj strani. Sekundarna strana koristi 2.5 aksijalne Soller proreze i motorizovane proreze. Difrakciono zračenje se detektuje Lynx Eye XE detektorom. Napon i snaga rentgentske cevi su podešeni na 40 kV i 40 mA, tim redom. Rezultati su sakupljeni u Teta-Teta goniometru na talasnoj dužini Cu od 3.0 do 40.0 stepeni 2-Teta koristeći veličinu faze od 0.037 stepeni i vreme faze od 10 sekundi. Uzorci se pripreme stavljanjem u plitak nosač i rotiranjem u toku sakupljanja. Dobijeni model praška Oblika 1 je dat na Slici 21.

[0091] Oblik 1 se takođe karakteriše modelom Ramanovog spektra pokazanim na Slici 5, koji se izvodi na NXR FT-Raman modulu povezanim sa Nexus 670 FT-IR spektrofotometrom (Thermo Nicolet), opremljenim sa InGaAs detektorom. Pikovi Ramanovog spektra Oblika 1 su pokazani na Slici 6.

[0092] Oblik 1 se takođe karakteriše modelom NMR spektra čvrstog stanja pokazanim na Slici 9, koji se izvodi na Bruker-Biospin 4 mm CPMAS sondi smeštenoj u Bruker-Biospin Avance III 500 MHz NMR spektrometru.13C hemijske promene Oblika 1 su pokazane na Slici 10.

[0093] Oblik 1 je analiziran putem izotermne analize sorpcije pare, što je gravimetrijska tehnika kojom se meri koliko brzo i koju količinu rastvarača apsorbuje uzorak: kao što suvi prašak apsorbuje vodu. Ovo se postiže promenom koncentracije pare koja okružuje uzorak i merenjem promene u masi koja zbog ovoga nastaje. Izotermna analiza sorpcije pare za Oblik 1 pokazuje da je Oblik 1 anhidrovan sa manje od 0.25% reverzibilnog porasta težine pri do 90% relativne vlažnosti na temperaturi sredine.

Oblik 4

[0094] Oblik 4 je kristalni, ne-higroskopni, anhidrovani, oblik jedinjenja Formule I koji može da se izradi kako je opisano u Primeru 2.

[0095] Oblik 4 se karakteriše modelom PXRD pokazanim na Slici 3, koji je meren na PANalytical X’Pert PRO MPD koristeći ulazni zrak Cu zračenja dobijen upotrebom Optix dugačkog, fino fokusiranog izvora. PXRD model Oblika 4, izražen u stepenima (2θ) i relativnim intenzitetom sa relativnim intenzitetom od ≥ 2.0%, je pokazan na Slici 4. Relativni intenziteti mogu da se menjaju u zavisnosti od veličine i morfologije kristala.

[0096] Oblik 4 se takođe karakteriše modelom Ramanovog spektra pokazanim na Slici 7, koji se izvodi na NXR FT-Raman modulu povezanim sa Nexus 670 FT-IR spektrofotometrom (Thermo Nicolet), opremljenim sa InGaAs detektorom. Pikovi Ramanovog spektra Oblika 4 su pokazani na Slici 8.

[0097] Oblik 4 se takođe karakteriše modelom NMR spektra čvrstog stanja pokazanim na Slici 11, koji se izvodi na Bruker-Biospin 4 mm CPMAS sondi smeštenoj u Bruker-Biospin Avance III 500 MHz NMR spektrometru.13C hemijske promene Oblika 4 su pokazane na Slici 12.

Oblik 2

[0098] Oblik 2 je kristalni THF solvat jedinjenja Formule I koji može da se izradi kako je opisano u Primeru 3.

2

[0099] Izračunati model praška Oblika 2 pokazan na Slici 13 se izrađuje koristeći Mercury v.

3.1 (ht- tp://www.ccdc.cam.ac.uk/mercury/).

Oblik 6

[0100] Oblik 6 je kristalni, ne-higroskopni, anhidrovani, oblik jedinjenja Formule I koji može da se izradi kako je opisano u Primeru 4.

[0101] Oblik 6 se karakteriše modelom PXRD pokazanim na Slici 14, koji je meren na PANalytical X’Pert PRO MPD koristeći ulazni zrak Cu zračenja dobijen upotrebom Optix dugačkog, fino fokusiranog izvora. PXRD model Oblika 6, izražen u stepenima (2θ) i relativnim intenzitetom sa relativnim intenzitetom od ≥ 2.0%, je pokazan na Slici 15.

Relativni intenziteti mogu da se menjaju u zavisnosti od veličine i morfologije kristala.

[0102] Oblik 6 se takođe karakteriše modelom Ramanovog spektra pokazanim na Slici 16, koji se izvodi na NXR FT-Raman modulu povezanim sa Nexus 670 FT-IR spektrofotometrom (Thermo Nicolet), opremljenim sa InGaAs detektorom. Pikovi Ramanovog spektra Oblika 6 su pokazani na Slici 17.

[0103] Oblik 6 se takođe karakteriše modelom NMR spektra čvrstog stanja pokazanim na Slici 18, koji se izvodi na Bruker-Biospin 4 mm CPMAS sondi smeštenoj u Bruker-Biospin Avance III 500 MHz NMR spektrometru.13C hemijske promene Oblika 6 su pokazane na Slici 19.

Farmaceutske kompozicije

[0104] Aktivni sastojci (to jest, čvrsti oblici jedinjenja Formule I koji su ovde opisani) uključujući Oblik 1 pronalaska mogu da budu formulisani u farmaceutske kompozicije pogodne za upotrebu kao lekovi za sisare. Može da se koristi bilo koji pogodan način primene da se pacijentu obezbedi efektivna doza bilo kog čvrstog oblika ovde opisanog jedinjenja Formule I. Na primer, mogu da se koriste peroralne ili parenteralne formulacije ili slično. Dozni oblici uključuju kapsule, tablete, disperzije, suspenzije i slično, na primer enteričnoobložene kapsule i/ili tablete, kapsule i/ili tablete koje sadrže enterično obložene pelete čvrstih oblika ovde opisanog jedinjenja Formule I. U svim doznim oblicima, čvrsti oblici ovde opisanog jedinjenja Formule I mogu da se mešaju sa drugim pogodnim sastojcima.

Kompozicije mogu odgovarajuće da budu prisutne u jediničnim doznim oblicima i izrađene bilo kojim postupcima poznatim u farmaceutskoj tehnici. Farmaceutske kompozicije iz pronalaska uključuju terapeutski efektivnu količinu aktivnog sastojka i jedan ili više inertnih farmaceutski prihvatljivih nosača i opciono, bilo koji drugi terapeutski sastojak, stabilizator ili slično. Nosač(i) mora da bude farmaceutski prihvatljiv u smislu da je kompatibilan sa drugim sastojcima formulacije i da ne utiče negativno na primaoce. Kompozicije mogu dalje da uključe razblaživače, pufere, veziva, dezintegratore, učvršćivače, lubrikanse, konzervanse (uključujući anti-oksidanse), sredstva za korekciju ukusa, sredstva za maskiranje ukusa, neorganske soli (na primer, natrijum hlorid), antimikrobna sredstva (na primer, benzalkonijum hlorid), zaslađivače, antistatička sredstva, surfaktante (na primer, polisorbate kao što su "TWEEN 20™" i "TWEEN 80™" i Pluronic® F68 i F88, proizvođača BASF), sorbitan estre, lipide (na primer, fosfolipide kao što su licetin i drugi fosfatidilholini, fosfatidiletanolamini, masne kiseline i estri masnih kiselina, steroide (na primer, holesterol)), helatna sredstva (na primer, EDTA, cink i drugi takvi pogodni katjoni). Druge farmaceutske podloge i/ili aditivi pogodni za upotrebu u kompozicijama u skladu sa pronalaskom su navedeni u Remington: The Science & Practice of Pharmacy, 19th ed., Williams & Williams, (1995) i u "Physician’s Desk Reference", 52nd ed., Medical Economics, Montvale, NJ (1998) i u "Handbook of Pharmaceutical Excipients", 3rd. Ed., Ed. A.H. Kibbe, Pharmaceutical Press, 2000. Aktivni sastojci pronalaska mogu da se formulišu u kompozicije uključujući kompozicije pogodne za oralnu, rektalnu, topičnu, nazalnu, oftalmičku ili parenteralnu (uključujući intraperitonealne, intravenozne, subkutane ili intramuskularne injekcije) primenu.

[0105] Količina aktivnog sastojka u formulaciji će da varira u zavisnosti od različitih faktora, uključujući dozni oblik, stanje koje se tretira, ciljanu populaciju pacijenta i druge okolnosti i stručnjak sa iskustvom u praksi će generalno lako da je odredi. Terapeutski efektivna količina će da bude količina potrebna da inhibira disocijaciju transtiretina (TTR) (to jest da spreči disocijaciju nativnog TTR tetramera u monomere). Kompozicije će svakom slučaju generalno da sadrže od približno 0.001 % težine do približno 99% težine aktivni sastojak, poželjno je od približno 0.01% do približno 5% težine aktivni sastojak i još poželjnije od približno 0.01 % do 2% težine aktivni sastojak i takođe će da zavisi od relativnih količina podloga/aditiva koji se nalaze u kompoziciji.

[0106] Farmaceutska kompozicija iz pronalaska se primenjuje u uobičajenom doznom obliku izrađenom kombinacijom terapeutski efektivne količine aktivnog sastojka kao aktivnog sredstva sa jednim ili više odgovarajućih farmaceutskih nosača u skladu sa uobičajenim procedurama. Ove procedure mogu da uključe mešanje, granulaciju i kompresiju ili

2

rastvaranje sastojaka u skladu sa traženim preparatom.

[0107] Upotrebljeni farmaceutski nosač(i) mogu da budu ili čvrsti ili tečni. U primere čvrstih nosača spadaju laktoza, saharoza, talk, želatin, agar, pektin, akacija, magnezijum stearat, stearinska kiselina i slično. U primere tečnih nosača spadaju sirup, kikirikijevo ulje, maslinovo ulje, voda i slično. Slično tome, u nosač(e) mogu da spadaju materijali poznati u tehnici za vremenski odloženo ili vremenski određeno oslobađanje kao što su glicerol monostearat ili glicerol distearat sami ili sa voskom, etilceluloza, hidroksipropilmetilceluloza, metilmetakrilat i slično.

[0108] Mogu da se koriste različiti farmaceutski oblici. Prema tome, ukoliko se koristi čvrsti nosač, preparat može da se tabletira, smesti u čvrstu želatinsku kapsulu u obliku praška ili peleta ili u obliku troheja ili lozengi. Količina čvrstog nosača može da varira ali je generalno od približno 25 mg do približno 1 g. Ukoliko se koristi tečni nosač, preparat može da bude u obliku sirupa, emulzije, meke želatinske kapsule, sterilnog injektabilnog rastvora ili suspenzije u ampulama ili bočicama ili u obliku nevodenih tečnih suspenzija.

[0109] Razumljivo je da će stvarne doze čvrstih oblika ovde opisanog jedinjenja Formule I, uključujući Oblik 1 korišćen u kompozicijama ovog pronalaska, varirati u skladu sa određenim čvrstim oblikom koji se koristi, određene formulisane kompozicije, načina primene i određenog mesta, domaćina i bolesti koja se tretira. Stručnjak sa iskustvom u praki koji koristi uobičajene testove za određivanje doze u skladu sa eksperimentalnim rezultatima za sredstvo može da proceni optimalne doze za dati skup stanja. Za oralnu primenu, primer generalno primenjene dnevne doze je od približno 0.001 do približno 1000 mg/kg telesne težine, još poželjnije od približno 0.001 do približno 50 mg/kg telesne težine, sa ciklusom tretmana koji se ponavljaju u odgovarajućim intervalima. Prolekovi se obično primenjuju u dozama na nivou težine koja je hemijski ekvivalent nivou težine čistog aktivnog oblika. U primeni pronalaska, najpogodniji način primene kao i veličina terapeutske doze će da zavisi od prirode i ozbiljnosti bolesti koja se leči. Doza i učestalost doze može takođe da varira u skladu sa godinama starosti, telesnom težinom i odgovorom pojedinačnog pacijenta.

Generalno, odgovarajući oralni dozni oblik može da pokrije opseg doze od 0.5 mg do 100 mg aktivnog sastojka u ukupnoj dnevnoj dozi primenjenoj u jednoj pojedinačnoj dozi ili u jednakim podeljenim dozama. Preferirana količina čvrstih oblika ovde opisanog jedinjenja Formule I u ovakvim formulacijama je od približno 0.5 mg do približno 20 mg, kao i od približno 1 mg do približno 10 mg ili od približno 1 mg do približno 5 mg.

[0110] Kompozicije iz pronalaska mogu da se proizvedu na način koji je generalno poznat za

2

izradu farmaceutskih kompozicija, na primer, upotrebom uobičajenih tehnika kao što su mešanje, rastvaranje, granulacija, emulgovanje, enkapsuliranje, utiskivanje ili liofilizacija. Farmaceutske kompozicije mogu da se formulišu na uobičajeni način koristeći jedan ili više fiziološki prihvatljivih nosača koji mogu da se izaberu od podloga i pomoćnih sredstava koja odgovaraju postupku za procesuiranje aktivnih jedinjenja u preparate koji mogu da se koriste kao farmaceutski preparati.

[0111] Za oralnu primenu, čvrsti oblici ovde opisanog jedinjenja Formule I mogu da se formulišu kombinacijom aktivnog sredstva sa farmaceutski prihvatljivim nosačima poznatim u tehnici. Ovakvi nosači omogućavaju da se jedinjenja iz pronalaska formulišu kao tablete, pilule, kapsule, geli, sirupi, smese, suspenzije i slično, za oralno uzimanje od strane pacijenta koji se tretira. Farmaceutski preparati za oralnu upotrebu mogu da se dobiju upotrebom čvrstih podloga u smeši sa aktivnim sastojkom, opciono mlevenjem dobijene smeše i preradom smeše granula nakon dodavanja pogodnih pomoćnih sredstava. U pogodne podloge spadaju punioci kao što su šećeri, uključujući laktozu, saharozu, manitol ili sorbitol; i preparati celuloze, na primer kukuruzni skrob, pšenični skrob, pirinčani skrob, krompirov skrob; želatin, guma, metil celuloza, hidroksipropilmetil celuloza, natrijum karboksimetil celuloza ili polivinilpirolidon (PVP). Ukoliko je potrebno, mogu da se dodaju sredstva za raspadanje kao što su unakrsno vezani polivinil pirolidon, agar ili alginatna kiselina ili njena so kao što je natrijum alginat.

[0112] Farmaceutski preparati koji mogu oralno da se koriste uključuju dvodelne kapsule izrađene od želatina, kao i meke zatvorene kapsule izrađene od želatina i plastifikatora, kao što su glicerol ili sorbitol. Dvodelne kapsule mogu da sadrže aktivne sastojke u smeši sa puniocima kao što je laktoza, vezivnim sredstvima kao što su skrobovi i lubrikansima kao što su talk ili magnezijum stearat i opciono stabilizatorima. U mekim kapsulama, aktivni sastojci mogu da budu rastvoreni ili suspendovani u pogodnim tečnostima kao što su masna ulja, tečni parafin ili tečni polietilen glikoli. Pored toga, mogu da se dodaju stabilizatori. Sve formulacije za oralnu primenu treba da budu u dozama pogodnim za ovakvu primenu. Za bukalnu primenu, kompozicije mogu da budu u obliku tableta ili lozengi formulisanih na uobičajeni način.

[0113] Za primenu u oči, čvrsti Oblik 1 ovde opisanog jedinjenja Formule I može da bude unet u farmaceutski prihvatljiv oftalmički vehikulum tako da jedinjenje ostaje u kontaktu sa okularnom površinom dovoljan vremenski period da se omogući penetracija jedinjenja u kornealni i internalni region oka, uključujući, na primer, prednju komoru, zadnju komoru,

2

staklasto telo, očnu vodicu, staklasti fluid, rožnjaču, iris/cilijarno telo, sočivo, horoid/mrežnjaču i beonjaču. Farmaceutski prihvatljiv oftalmički vehikulum može da bude, na primer, mast, biljno ulje ili materijal za enkapsulaciju. Aktivni sastojak iz pronalaska može takođe da bude injektovan direktno u staklasti fluid i očnu vodicu ili suptenon.

[0114] Alternativno, aktivni sastojak može da bude u obliku praška za konstituciju sa odgovarajućim vehikulumom, na primer, sterilnom apirogenom vodom, pre upotrebe. Čvrsti oblici ovde opisanog jedinjenja Formule I mogu takođe da budu formulisani u rektalne ili vaginalne kompozicije kao što su supozitorije ili retencioni klistiri, na primer koji sadrže uobičajene podloge za supozitorije kao što su kakao buter ili drugi gliceridi.

[0115] Kao dodatak prethodno opisanim formulacijama, čvrsti oblici mogu takođe da budu formulisani kao depo preparati. Ovakve dugo delujuće formulacije mogu da se primene implantacijom (na primer, subkutano ili intramuskularno) ili intramuskularnom injekcijom. Prema tome, na primer, čvrsti oblici mogu da budu formulisani sa odgovarajućim polimernim ili hidrofobnim materijalima (na primer, kao emulzija u prihvatljivom ulju) ili sa smolama jonskih izmenjivača ili kao umereno rastvorljivi derivati, na primer kao umereno rastvorljiva so.

[0116] Pored toga, čvrsti oblici ovde opisanog jedinjenja Formule I mogu da se oslobode upotrebom sistema za kontinuirano oslobađanje, kao što su semi-permeabilni matriksi čvrstih hidrofobnih polimera koji sadrže teraputsko sredstvo. Postoje različiti materijali za kontinuirano oslobađanje i poznati su stručnjaku sa iskustvom u tehnici.

[0117] Farmaceutske kompozicije mogu takođe da sadrže odgovarajuće nosače ili podloge za čvrstu- ili gel-fazu. U primere ovakvih nosača ili podloga spadaju kalcijum karbonat, kalcijum fosfat, šećeri, skrobovi derivati celuloze, želatin i polimeri kao što su polietilen glikoli.

[0118] Pronalazak se odnosi na bilo koju od prethodno pomenutih farmaceutskih kompozicija, pri čemu je dati čvrsti oblik Oblik 1. Otkriće se takođe odnosi na bilo koju od prethodno pomenutih farmaceutskih kompozicija, pri čemu je navedeni čvrsti oblik Oblik 4.

Proizvedeni proizvod

[0119] Čvrsti oblici ovde opisanog jedinjenja Formule I mogu da se pakuju kao proizvodi proizvodnje koji sadrže materijal za pakovanje, čvrsti oblik ovde datog jedinjenja Formule I koji je efikasan za moduliranje savijanja TTR ili za tretman, prevenciju ili poboljšanje jednog ili više simptoma TTR posredovanih bolesti ili stanja ili bolesti ili stanja u kojima je

2

uključeno TTR savijanje.

[0120] Ovde naveden proizvod proizvodnje sadrži materijale za pakovanje. Materijali za pakovanje za upotrebu u pakovanju farmaceutskih produkata su dobro poznati stručnjaku sa iskustvom u praksi. Videti, na primer, U.S. Patente broj 5,323,907, 5,052,558 i 5,033,252. U primere materijala za pakovanje spadaju, ali se ne ograničavaju samo na, blister pakovanja, boce, tube, inhaleri, pumpe, kesice, bočice, kontejneri, špricevi, boce i bilo koji drugi materijal za pakovanje pogodan za izabranu formulaciju i namenjeni način primene i tretmana, uključujući različite tretmane za bilo koju bolest i poremećaj u kojima je izostalo savijanje TTR kao medijatora ili kontributora za simptome ili uzročnike.

[0121] U nekim ostvarenjima, pronalazk se odnosi na bilo koji od prethodno pomenutih proizvoda proizvodnje, pri čemu je navedeni čvrsti oblik Oblik 1. Otkriće se takođe odnosi na bilo koji od prethodno pomenutih proizvoda proizvodnje, pri čemu je navedeni čvrsti oblik Oblik 2. Otkriće se takođe odnosi na bilo koji od prethodno pomenutih proizvoda proizvodnje, pri čemu je navedeni čvrsti oblik Oblik 4. Otkriće se takođe odnosi na bilo koji od prethodno pomenutih proizvoda proizvodnje, pri čemu je navedeni čvrsti oblik Oblik 6.

In Vitro biološka testiranja

[0122] Brojni in vitro testovi mogu da se koriste za procenu čvrstih oblika na njihovu sposobnost da stabilizuju transtiretin tetramere ili prevenciju formiranja fibrila. Testovi mogu da uključe ispitivanje formiranja fibrila, ispitivanje selektivnosti plazme, određivanje trodimenzionalne strukture kompleksa transtiretin jedinjenja (na primer, kristalografijom X-zracima), kinetiku disocijacije transtiretin tetramera ili fibril formacija i određivanje stehiometrije ili energetike interakcija transtiretin jedinjenja, na primer, centrifugiranjem ili kalorimetrijom. Detalji primera in vitro analiza su dati u U.S. Patentu broj 7,214,695.

Postupci za upotrebu čvrstih oblika pronalaska

[0123] Ovde opisano jedinjenje Formule I je korisno za stabilizaciju protein transtiretina (TTR), disocijacije koja je implicirana u TTR amiloidozi (to jest, prevenciji disocijacije nativnog TTr tetramera u monomere, što dovodi do inhibicije formiranja TTR amiloid fibrila), čime se obezbeđuju tretmani za transtiretin amiloidne bolesti kod sisara, uključujući ljude.

[0124] Smatra se da su bar neke od amiloidnih bolesti izazvane taloženjem bilo kog ili više od

2

20 nehomolognih proteina ili protein fragmenata, koji na kraju dovode do unakrsnih fibrilarnih β-pločica kvaternarne strukture. Formiranje amiloidnih fibrila od normalno savijenog proteina sličnog transtiretinu zahteva protein bez savijanja da dođe do sklapanja komptentnog međuproizvoda. Smatra se da proces transtiretin (TTR) amiloidogeneze izaziva senilnu sistemsku amiloidozu (SSA), porodičnu amiloidnu polineuropatiju (FAP) i porodičnu amiloidnu kardiomiopatiju (FAC). SSA je povezan sa taloženjem izvornog tipa TTR, dok su FAP i FAC izazvani amiloidogenezom jednog od preko 80 TTR varijanti. Videti, na primer, Colon, W.; Kelly, J. W. Biochemistry 1992, 31, 8654-60; Kelly, J. W. Curr. Opin. Struct. Biol. 1996, 6, 11-7; Liu, K.; et al. Nat. Struct. Biol.2000, 7, 754-7; Westermark, P.; et al. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A.1990, 87, 2843-5; Saraiva, M. J.; et al. J. Clin. Invest.1985, 76, 2171-7; Jacobson, D. R.; et al. N. Engl. J. Med.1997, 336, 466-73; Buxbaum, J. N.;

Tagoe, C. E. Ann. Rev. Med.2000, 51, 543-569; i Saraiva, M. J. Hum. Mutat. 1995, 5, 191-6. Druge TTR amiloidne bolesti uključuju srčanu amiloidozu nakon transplantacije jetre, perifernu nervnu amiloidozu nakon transplantacije jetre, leptomeningealnu amiloidozu, sindrom karpalnog tunela povezan sa transtiretin mutantom, taloženje u staklastom telu i amiloidoze kože povezane sa transtiretin mutantom.

[0125] Terapeutski efektivne količine jedinjenja Formule I mogu da se primene obično u obliku farmaceutske kompozicije, za lečenje bolesti posredovanih modulacijom ili regulacijom TTR disocijacije. "Efektivna količina" treba da označi da je količina sredstva, kada se primeni na sisaru kome je potreban ovakav tretman, dovoljna da utiče na lečenje bolesti posredovane TTR disocijacijom. Prema tome, terapeutski efektivna količina jedinjenja 1 je količina dovoljna da modulira, reguliše ili inhibira disocijaciju TTR tako da je stanje bolesti posredovano tom aktivnošću smanjeno ili poboljšano. "Lečenje" označava bar ublažavanje stanja bolesti kod sisara, kao što su ljudi i uključuje: sprečavanje nastanka bolesti kod sisara, posebno kada sisar ima predispoziciju za bolesno stanje ali bolest još uvek nije dijagnostifikovana; moduliranje i/ili inhibiciju bolesnog stanja; i/ili poboljšanje bolesnog stanja. Primeri bolesnih stanja uključuju senilnu sistemsku amiloidozu (SSA), porodičnu amiloidnu polineuropatiju (FAP), porodičnu amiloidnu kardiomiopatiju (FAC), srčanu amiloidozu nakon transplantacije jetre, perifernu nervnu amiloidozu nakon transplantacije jetre, leptomeningealnu amiloidozu, sindrom karpalnog tunela povezan sa transtiretin mutantom, taloženje u staklastom telu i amiloidoze kože povezane sa transtiretin mutantom.

PRIMERI

[0126] Primeri koji slede će da ilustruju izradu različitih oblika pronalaska, to jest Oblik 1.

Primer 1 – Izrada Oblika 1

[0127] 4-amino-3-hidroksibenzoeva kiselina (1.0 eq, LR) se na 20 °C rastvori u smeši tetrahidrofurana (19 L/kg) i vode (1.9 L/Kg). Doda se 3,5-dihlorbenzoilhlorid (1.3 equiv) kao rastvor u tetrahidrofuranu (1.9 L/kg) i smeša se meša najmanje 30 minuta na 20 °C. Kada se pomoću HPLC proceni da je reakcija završena (<5% preostale 4-amino-3-hidroksibenzoeve kiseline), doda se trietilamin (1.2 equiv) i smeša se zagreje na 35 °C i meša najmanje 90 minuta. Rastvarač se delimično zameni sa etanolom destilacijom do konstantnog nivoa etanola sve dok ne preostane 5-15% THF. Žitka masa se ohladi na 20 °C i meša najmanje 60 minuta a nakon toga filtrira. Čvrsti ostatak se ispere sa etanolom (3 x 4 L/kg) a nakon toga suši pod vakuumom na 65 °C u toku najmanje 16 sati da se dobije čista 4-[(3,5-dihlorbenzoil)amino]-3-hidroksibenzoeva kiselina u prinosu od 88-92%.

[0128] U žitku masu 4-[(3,5-dihlorbenzoil)amino]-3-hidroksibenzoeve kiseline (1.0 equiv) u tetrahidrofuranu (10 L/kg) se doda trietilamin (1.1 equiv), a nakon toga voda (4 equiv). Smeša se ostavi 1 sat na 20-25 °C a nakon toga se smeša filtrira da se ukloni bilo koji preostali nerastvorni materijal. Doda se metansulfonska kiselina (1.6 equiv) i formira se žitka masa. Kontinuirana zamena THF/voda sa toluenom se vrši sve dok je temperatura reaskcije najmanje 107 °C, na kojoj tački se zamena prekida i reakcija se nakon toga refluksuje najmanje 15 sati. Kada se pomoću UPLC proceni da je reakcija kompletna, to jest >95% čistoće, ohladi se na 20 °C i doda se 2-propanol (5 L/kg). Žitka masa se granulira najmanje 60 minuta, nakon toga filtrira i dva puta ispere sa 2-propanolom (4 L/kg svako ispiranje) i suši pod vakuumom minimum 18 sati na 60-70 °C da se dobije Oblik 1 u prinosu od 82-89%.

Referentni Primer 2 – Izrada Oblika 4

[0129] Oblik 1 (187 mg) se suspenduje u tetrahidrofuranu (7.5 mL) i suspenzija se zagreva na 75 °C. Bistar rastvor se vruć filtrira kroz prethodno zagrejani 0.2 µm najlon filter u kontejner sa toluenom (25 mL) ohlađenim u kupatilu led/voda. Uzorak se čuva u zamrzivaču (-10 do -25 °C) u toku noći. Oblik 4 se dok je hladan sakupi vakuum filtracijom.

1

Referentni Primer 3 – Izrada Oblika 2

[0130] 3 mg/mL THF rastvora Oblika 1 se ostavi da upari pod uslovima sredine u prostoriji za isparavanje i dobijaju se kristali. Analiza pojedinačnog kristala pokazuje sledeće rezultate:

Empirijska formula C14H7NO3Cl2

Molekulska težina 308.12

Temperatura Ambient

Talasna dužina 1.54178 Å

Sistem kristala triklinički

Prostorna grupa P-1

Dimenzija jedinične ćelije a = 3.7740(2) Å α= 80.668(3)° b = 13.6536(8) Å β= 89.381 (4)° c = 15.5098(9) Å γ = 89.520(3)° Zapremina 788.56(8) Å<3>

Z 4

Gustina (izračunata) 1.365 Mg/m<3>

Pogodnost uklapanja statističkog modela na F<2>1.112

Konačni R indeksi [I>2sigma(I)] R1 = 0.0776, wR2 = 0.2360

R indeksi (svi rezultati) R1 = 0.1026, wR2 = 0.2561

Referentni Primer 4 – Izrada Oblika 6

[0131] Oblik 1 (4168 mg) se suspenduje u tetrahidrofuranu (100 mL), zagreva i meša na 60 °C. Doda se dimetilacetamid (5 mL). Dobijeni rastvor se vruć filtrira kroz prethodno zagrejani 0.2 µm najlon filter u kontejner sa dihlormetanom ohlađenim u kupatilu led/voda. Dobijena čvrsta supstanca se izdvoji vakuum filtracijom i suši na vazduhu na temperaturi sredine.

Referentni Primer 5 – Izrada amorfnog 6-karboksi-2-(3,5-dihlorfenil)-benzoksazola

[0132] Oblik 1 (79.7 mg) se suspenduje u 5 mL smeše dioksan/voda 80/20 i zagreva na -80 °C. Dobijeni bistar rastvor se vruć filtrira kroz prethodno zagrejani 0.2µm najlon filter u prethodno zagrejanu prijemnu bocu. Uzorak se nakon toga zamrzne u kupatilu suvi led/IPA i prenese na sušenje zamrzavanjem u toku 2 dana. Čvrste supstance se sakupe.

2

Claims (13)

Patentni zahtevi

1. Kristalni oblik (Oblik 1) 6-karboksi-2-(3,5-dihlorfenil)-benzoksazola, naznačen time što kristalni oblik ima model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pik pri uglu difrakcije (2θ) od 28.6 ± 0.2.

2. Kristalni oblik 6-karboksi-2-(3,5-dihlorfenil)-benzoksazola u skladu sa patentnim zahtevom 1, naznačen time što navedeni model difrakcije X-zraka praška dalje uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 16.5 ± 0.2 i 26.7 ± 0.2.

3. Kristalni oblik 6-karboksi-2-(3,5-dihlorfenil)-benzoksazola u skladu sa patentnim zahtevom 1, naznačen time što navedeni model difrakcije X-zraka praška dalje uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 15.4 ± 0.2 i 20.2 ± 0.2.

4. Kristalni oblik 6-karboksi-2-(3,5-dihlorfenil)-benzoksazola u skladu sa patentnim zahtevom 3 naznačen time što navedeni model difrakcije X-zraka praška dalje uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 29.0 ± 0.2.

5. Kristalni oblik 6-karboksi-2-(3,5-dihlorfenil)-benzoksazola u skladu sa patentnim zahtevom 4, naznačen time što navedeni model difrakcije X-zraka praška dalje uključuje pikove pri uglovima difrakcije (2θ) od 23.5 ± 0.2.

6. Kristalni oblik 6-karboksi-2-(3,5-dihlorfenil)-benzoksazola u skladu sa bilo kojim od prethodnih patentnih zahteva, naznačen time što navedeni kristalni oblik ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 120.8 ± 0.2 i 127.7 ± 0.2.

7. Kristalni oblik 6-karboksi-2-(3,5-dihlorfenil)-benzoksazola u skladu sa patentnim zahtevom 6, naznačen time što navedeni NMR spektar čvrstog stanja dalje uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 139.6 ± 0.2.

8. Kristalni oblik 6-karboksi-2-(3,5-dihlorfenil)-benzoksazola u skladu sa patentnim zahtevom 6, naznačen time što navedeni NMR spektar čvrstog stanja dalje uključuje 13C hemijske promene (ppm) pri 144.7 ± 0.2.

9. Kristalni oblik 6-karboksi-2-(3,5-dihlorfenil)-benzoksazola u skladu sa bilo kojim od prethodnih patentnih zahteva, naznačen time što navedeni kristalni oblik ima Ramanov spektar koji uključuje pik Raman promene (cm<-1>) pri 1292 ± 2.

10. Kristalni oblik 6-karboksi-2-(3,5-dihlorfenil)-benzoksazola u skladu sa patentnim zahtevom 9, naznačen time što navedeni kristalni oblik ima Ramanov spektar koji dalje uključuje pikove Raman promene (cm<-1>) pri 994 ± 2, 1273 ± 2 i 1615 ± 2.

11. Kristalni oblik u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1-10, naznačen time što je navedeni oblik ne-higroskopan i anhidrovan.

12. Farmaceutska kompozicija, naznačena time što uključuje kristalni oblik u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1-11 u terapeutski efektivnoj količini u smeši sa najmanje jednom farmaceutski prihvatljivom podlogom.

13. Kristalni oblik u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1-10 ili farmaceutska kompozicija u skladu sa patentnim zahtevom 12, naznačen time što su za upotrebu u lečenju transtiretin amiloidnih bolesti kod sisara.

4