[go: up one dir, main page]

RS61795B1 - Konjugati pirolobenzodiazepin antitela - Google Patents

Konjugati pirolobenzodiazepin antitela

Info

Publication number
RS61795B1
RS61795B1 RS20210560A RSP20210560A RS61795B1 RS 61795 B1 RS61795 B1 RS 61795B1 RS 20210560 A RS20210560 A RS 20210560A RS P20210560 A RSP20210560 A RS P20210560A RS 61795 B1 RS61795 B1 RS 61795B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
group
antibody
seq
methyl
conjugate
Prior art date
Application number
RS20210560A
Other languages
English (en)
Inventor
Berkel Patricius Hendrikus Cornelis Van
Original Assignee
Adc Therapeutics Sa
Medimmune Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GBGB1702031.4A external-priority patent/GB201702031D0/en
Priority claimed from GBGB1702029.8A external-priority patent/GB201702029D0/en
Priority claimed from GBGB1719906.8A external-priority patent/GB201719906D0/en
Application filed by Adc Therapeutics Sa, Medimmune Ltd filed Critical Adc Therapeutics Sa
Publication of RS61795B1 publication Critical patent/RS61795B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6889—Conjugates wherein the antibody being the modifying agent and wherein the linker, binder or spacer confers particular properties to the conjugates, e.g. peptidic enzyme-labile linkers or acid-labile linkers, providing for an acid-labile immuno conjugate wherein the drug may be released from its antibody conjugated part in an acidic, e.g. tumoural or environment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/551—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having two nitrogen atoms, e.g. dilazep
    • A61K31/5513—1,4-Benzodiazepines, e.g. diazepam or clozapine
    • A61K31/5517—1,4-Benzodiazepines, e.g. diazepam or clozapine condensed with five-membered rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. imidazobenzodiazepines, triazolam
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/68035—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a pyrrolobenzodiazepine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2863—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for growth factors, growth regulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/51—Complete heavy chain or Fd fragment, i.e. VH + CH1
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/515—Complete light chain, i.e. VL + CL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

Opis
Upućivanje na povezane patentne prijave
[0001] Ova patentna prijava zahteva korist od GB1702029.8 i GB1702031.4, podnetih 8. februara 2017. i GB1719906.8, podnete 30. novembra 2017. godine.
Oblast pronalaska
[0002] Predmetni pronalazak se odnosi na pirolobenzodiazepin (PBDs) koji ima labilnu protektivnu grupu, u formi linkera antitela.
Pozadina pronalaska
Pirolopirolobenzodiazepini
[0003] Neki pirolobenzodiazepini (PBD) imaju sposobnost da prepoznaju i vežu specifične sekvence DNK; poželjna sekvenca je PuGPu. Prvi antitumorski PBD antibiotik, antramicin, otkriven je 1965 (Leimgruber, i sar., J. Am. Chem. Soc., 87, 5793-5795 (1965); Leimgruber, i sar., J. Am. Chem. Soc., 87, 5791-5793 (1965)). Od tada su prijavljeni brojni PBD-evi koji se nalaze u prirodi, i preko 10 sintetskih puteva je razvijeno za dobijanje brojnih analoga (Thurston, i sar., Chem. Rev. 1994, 433-465 (1994)). Članovi familije uključuju abeimicin (Hochlowski, i sar., J. Antibiotics, 40, 145-148 (1987)), kikamicin (Konishi, i sar., J. Antibiotics, 37, 200-206 (1984)), DC-81 (japanski patent 58-180487; Thurston, i sar., Chem. Brit., 26, 767-772 (1990); Bose, i sar., Tetrahedron, 48, 751-758 (1992)), mazetramicin (Kuminoto, i sar., J. Antibiotics, 33, 665-667 (1980)), neotramycins A i B (Takeuchi, i sar., J. Antibiotics, 29, 93-96 (1976)), porotramycin (Tsunakawa, i sar., J. Antibiotics, 41, 1366-1373 (1988)), protrakarcin (Shimizu, i sar., J. Antibiotics, 29, 2492-2503 (1982); Langley i Thurston, J. Org. Chem., 52, 91-97 (1987)), sibanomicin (DC-102) (Hara, i sar., J. Antibiotics, 41, 702-704 (1988); Itoh, i sar., J. Antibiotics, 41, 1281-1284 (1988)), sibiromicin (Leber, i sar., J. Am. Chem. Soc., 110, 2992-2993 (1988)) i tomamicin (Arima, i sar., J. Antibiotics, 25, 437-444 (1972)). PBD poseduju generalnu strukturu:
[0004] Oni se razlikuju po broju, tipu i poziciji supstituenata, i u njihovim aromatičnim A prstenovima i u pirolo C prstenovina, i u stepenu saturacije C prstena. U B prstenu imaju ilimin (N=C), karbinolamin (NH-CH(OH)), ili karbinolamin metil etar (NH-CH(OMe)) na N10-C11 poziciji koja je elektrofilni centar odgovoran za alkilaciju DNK. Svi poznati prirodni produktimaju (S)-konfiguraciju na hiralnom C11, poziciji koja im dopušta desni zaokret kada su posmatrani sa C prstena prema A prstenu. Ovo im daje odgovarajući trodimenzionalni oblik za izoheličnost sa manjim žlebom B-forme DNK, koji vodi podesnom sklopu za vezujuće mesto (Kohn, In Antibiotics III. Springer-Verlag, New York, pp. 3-11 (1975); Hurley i Needham-VanDevanter, Acc. Chem. Res., 19, 230-237 (1986)). Njihova sposobnost da formiraju adukte u manjem žlebu im dopušta da učestvuju u DNK procesovanju, i otuda njihovo korišćenje kao antitumorskih agenasa.
[0005] Jedno pirolobenzodiazepinsko jedinjenje opisano od strane Gregson i sar. (Chem. Commun.1999, 797-798) ka ojedinjenje 1, i od strane Gregson i sar. (J. Med. Chem.2001, 44, 1161-1174) kao jedinjenje 4a. Ovo jedinjenje, takođe poznato i kao SJG-136, je prikazano ispod:
[0006] WO 2007/085930 opisuje pripremu dimera PBD jedinjenja sa linker grupama za vezu sa agensom ćelijskom vezivanja, kao što je antitelo. Linker je prisutan u mostu koji povezuje monomer PBD jedinica dimera.
[0007] Dimer PBD jedinjenja koja imaju linker grupe za vezu sa agensom za ćelijsko vezivanje, kao što je antitelo, opisana su u WO 2011/130613 i WO 2011/130616. Linker u ovim jedinjenjima je vezan za jezgro PBD preko položaja C2 i generalno se cepa dejstvom enzima na linker grupu. U WO 2011/130598, linker u ovim jedinjenjima je vezan za jedan od dostupnih N10 položaja na jezgru PBD, i generalno se cepa dejstvom enzima na linker grupu.
Antitelo-lek konjugati
[0008] Terapija antitelom je ustanovljena kao ciljna terapija pacijenata sa kancerom, imunološkim I angiogenim poremećajima (Carter, P. (2006) Nature Reviews Immunology 6:343-357). Korišćenje antitelo-lek konjugata (ADC), tj. imunokonjugata, za lokalno dostavljanje citotoksičnih ili citostatičkih agenasa, tj. lekova koji bi ubililinhibirali tumorske ćelije u tretmanu kancera, ciljano dostavlja lek do tumora, intraćelijski ga akumulira, dok sistemska administracija ovakvih nekonjugovanih lekova može rezultirati nepredvidljivim nivoima toksičnosti ka normalnim ćelijama (Xie i sar. (2006) Expert. Opin. Biol. Ther.6(3):281-291; Kovtun i sar. (2006) Cancer Res. 66(6):3214-3121; Law i sar. (2006) Cancer Res.66(4):2328-2337; Wu i sar. (2005) Nature Biotech. 23(9):1137-1145; Lambert J. (2005) Current Opin. in Pharmacol. 5:543-549; Hamann P. (2005) Expert Opin. Ther. Patents 15(9):1087-1103; Payne, G. (2003) Cancer Cell 3:207-212; Trail i sar. (2003) Cancer Immunol. Immunother.52:328-337; Syrigos i Epenetos (1999) Antikancer Research 19:605-614).
[0009] Maksimalna efikasnost sa minimumom toksičnosti je stoga neophodna. Napori uloženi da se dizajnira i preurede ADC su usmereni ka selektivnošću monoklonskih antitela (mAbs) kao I prema mehanizmu delovanja leka, vezivanju leka, odnosu lek/antitelo (punjenje), i svojstvima otpuštanja leka (Junutula, i sar., 2008b Nature Biotech., 26(8):925-932; Dornan i sar. (2009) Blood 114(13):2721-2729; SAD 7521541; SAD 7723485; W02009/052249; McDonagh (2006) Protein Eng. Design & Sel. 19(7): 299-307; Doronina i sar. (2006) Bioconj. Chem.17:114-124; Erickson i sar. (2006) Cancer Res.66(8):1-8; Sanderson i sar. (2005) Clin. Cancer Res.11:843-852; Jeffrey i sar. (2005) J. Med. Chem.48:1344-1358; Hamblett i sar. (2004) Clin. Cancer Res.10:7063-7070). Lekovi mogu ostvariti svoje citotoksično ili citostatsko dejstvo mehanizmima koji obuhvataju vezivanje tubulina, vezivanje DNK, proteazoma i/ili inhibiciju topoizomeraze. Neki citotoksični lekovi mogu postati neaktivnili manje aktivni kada su konjugovani sa velikim antitelima ili ligandima proteinskih receptora.
[0010] WO 2016/166302 A1 obelodanjuje humanizovana anti-AXL antitela i njihove konjugate. Konkretno, opisani su konjugati koji sadrže PBD koji imaju labilnu protektivnu grupu u obliku određenih tipova linkera za antitelo.
[0011] Pronalazači predmetnog pronalaska su razvili naročit PBD dimer antitela konjugata.
Sadržina pronalaska
[0012] Prvi aspekt predmetnog pronalaska daje konjugat formule (I):
Ab - (DL)p(I)
gde je:
Ab antitelo koje se vezuje za AXL;
DL je
gde je:
X izabran iz grupe koja se sastoji iz: jednostruke veze, -CH2- i -C2H4-;
n od 1 do 8;
m 0 ili 1;
R<7>ili metil ili fenil;
kada postoji dvostruka veza između C2 i C3, R<2>je izabrana grupa koju čine:
(ia) C5-10aril grupa, opciono supstituisana jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koju čine: halo, nitro, cijano, etar, karboksi, estar, C1-7alkil, C3-7heterociklil i bis-oksi-C1-3alkilen;
(ib) C1-5zasićeni alifatski alkil;
(ic) C3-6zasićeni cikloalkil;
(id)
gde je svaki R<21>, R<22>i R<23>nezavisno izabran iz H, C1-3zasićenog alkila, C2-3alkenila, C2-3alkinila i ciklopropila, gde ukupan broj atoma ugljenika u grupi R<12>nije veći od 5;
(ie)
gde je jedan od R<25a>i R<25b>H a drugi je izabran iz: fenila, gde je fenil opciono supstituisan sa grupom odabranom iz halo, metila, metoksi; piridila; i tiofenila; i
(if)
gde je R<24>izabran iz: H; C1-3zasićenog alkila; C2-3alkenila; C2-3alkinila; ciklopropila; fenila, gde je fenil opciono supstituisan sa grupom odabranom iz halo, metila, metoksi; piridila; i tiofenila; kada postoji jednostruka veza između
gde su R<26a>i R<26b>nezavisno izabrani između H, F, C1-4zasićenog alkila, C2-3alkenila, gde su alkil i alkenil grupe opciono supstituisane grupom odabranom iz C1-4alkil amido i C1-4alkil estara; ili, kada je jedan od R<26a>i R<26b>H, drugi je odabran iz nitrila i C1-4alkil estra;
kada postoji dvostruka veza između C2' i C3', R<12>je izabrana grupa koju čine:
(iia) C5-10aril grupa, opciono supstituisana jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koju čine: halo, nitro, cijano, etar, karboksi, estar, C1-7alkil, C3-7heterociklil i bis-oksi-C1-3alkilen; (iib) C1-5zasićeni alifatski alkil;
(iic) C3-6zasićeni cikloalkil;
(iid)
pri čemu su svaki od R<31>, R<32>i R<33>nezavisno izabrani iz H, C1-3zasićenog alkila, C2-3alkenila, C2-3alkinila i ciklopropila, gde ukupan broj atoma ugljenika u grupi R<12>nije veći od 5;
(iie)
pri čemu je jedan od R<35a>i R<35b>H, a drugi je odabran iz grupe koju čine: fenil, gde je fenil opciono supstituisan sa grupom odabranom iz halo, metil, metoksi; piridil; i tiofenil; i
(iif)
gde je R<34>izabran iz grupe koju čine: H; C1-3zasićeni alkil; C2-3alkenil; C2-3alkinil; ciklopropil; fenil, koji je fenil opciono supstituisan sa grupom odabranom od halo, metil, metoksi; piridil; i tiofenil;
kada postoji jednostruka veza između
gde su R<36a>i R<36b>nezavisno izabrani između H, F, C1-4zasićenog alkila, C2-3alkenila, koje su alkil i alkenil grupe po izboru supstituisane grupom odabranom između C1-4alkil amido i C1-4alkil estar; ili, kada je jedan od R<36a>i R<36b>H, drugi je odabran od nitrila i C1-4alkil estra;
pri čemu se u (ia) i (ii) C1-7alkil odnosi na monovalentni deo dobijen uklanjanjem atoma vodonika iz atoma ugljenika ugljovodoničnog jedinjenja koje ima od 1 do 7 atoma ugljenika, koji može biti alifatski ili aliciklični, i koji može biti zasićen ili nezasićen; i u (ako) i (iif), C1-4alkil se odnosi na monovalentni deo dobijen uklanjanjem atoma vodonika iz atoma ugljenika ugljovodoničnog jedinjenja koje ima od 1 do 4 atoma ugljenika, koje može biti alifatično ili aliciklično, i koje može biti zasićeno ili nezasićeno; a p je od 1 do 8.
[0013] Utvrđeno je da ovi konjugati pokazuju dobru aktivnost i iznenađujuću podnošljivost u poređenju sa analognim konjugatima koji ne sadrže sulfonamido ostatak.
Kratak opis Slika
[0014]
Sl. 1 prikazuje vezivanje konjugata za AXL;
Sl. 2 prikazuje in vivo efikasnost konjugata;
Sl. 3 prikazuje in vivo efikasnost konjugata;
Sl. 4 prikazuje in vivo efikasnost konjugata;
Sl. 5 prikazuje in vivo efikasnost konjugata na ksenograftu dobijenom od pacijenta; i
Sl. 6 prikazuje in vivo efikasnost konjugata na drugom ksenograftu dobijenom od pacijenta. Detaljan opis pronalaska
[0015] Predmetni pronalazak obezbeđuje PBD dimer sa linkerom povezanim kroz položaj N10 na jednom od PBD ostataka konjugovanih sa antitelom kako je definisano ispod.
[0016] Predmetni pronalazak je pogodan za korišćenje prilikom proizvodnje PBD jedinjenja za željeno mesto subjekta. Konjugat dopušta otpuštanje aktivnog PBD jedinjenja koje ne sadrži nijedan deo linkera. U tom slučaju nema ostataka koji bi mogli da utiču na reaktivnost PBD jedinjenja. Stoga će konjugat formule (I) osloboditi jedinjenje ReIA:
[0017] Navedena veza između PBD dimera i antitela u ovom pronalasku je poželjno stabilna vanćelijski. Pre transporta ili dostave u ćeliju, konjugat antitelo-lek (ADC) je poželjno stabilan i ostaje intaktan, tj. antitelo ostaje vezano za deo leka. Linkeri su stabilni van ćelije i mogu biti efikasno uklonjeni u ćeliji. Efektni linkeri će (i) održati specifična vezujuća svojstva antitela; (ii) dopustiti unutarćelijsko dopremanje konjugata ili dela leka; (iii) ostati stabilni intaktni, tj. neće biti uklonjeni, dok se konjugat ne dopremili transportuje to željenog mesta; i (iv) održavaće citotoksične efekte, ili citostatske efekte PBD dela leka. Stabilnost ADC može biti izmerena standardnim analitičkim tehnikama kao što je masena spektroskopija, HPLC, i tehnika separacione analize LC/MC.
[0018] Isporuka jedinjenja sa formulama RelA postiže se na željenom mestu aktivacije konjugata formule (I) dejstvom enzima, kao što je katepsin, na vezujuću grupu, a posebno na ostatak valin-alanin dipeptida.
Definicija
Supstituenti
[0019] Fraza "opciono zamenjen” kako se ovde koristi, odnosi se na matičnu grupu koja može biti nezamenjena ili zamenjena.
[0020] Ukoliko drugačije nije napomenuto, termin “zamenjen” kako se ovde koristi, odnosi se na matičnu grupu koja nosi jedan ili više supstituenata. Termin “supstituent" je ovde korišćen u konvencionalnom smislu i odnosi se na različite hemijske delove koji su kovalentno vezani za, ili ukoliko je pogodno, fuzionisani sa, matičnom grupom. Široka raznolikost supstituenata je dobro poznata, kao i metode njihovog dobijanja introdukcije u različite matične grupe.
[0021] Primeri supstituenata su detaljnije opisani ispod.
[0022] C1-12alkil: Termin “C1-12alkil" kako se ovde koristi, se odnosi na monovalentni deo dobijen uklanjanjem atoma vodonika za atoma ugljenika ugljovodoničnog jedinjenja koje ima 1 do 12 ugljenikovih atoma, koji mogu biti alifatični ili aliciklični, i koji mogu biti zasićeni ili nezasićeni (npr. delimično zasićeni, potpuno nezasićeni). Termin "C1-4alkil", kako je ovde korišćen, odnosi se na monovalentni deo dobijen uklanjanjem atoma vodonika iz atoma ugljenika ugljovodoničnog jedinjenja koje ima od 1 do 4 atoma ugljenika, koji može biti alifatski ili aliciklični, a koji može biti zasićeni ili nezasićeni (npr. delimično nezasićeni, potpuno nezasićeni). Prema tome, termin "alkil" uključuje potklase alkenil, alkinil, cikloalkil, itd., o kojima se govori u daljem tekstu.
[0023] Primeri zasićenih alkil grupa obuhvataju, ali nisu ograničeni na, metil (C1), etil (C2), propil (C3), butil (C4), pentil (C5), heksil (C6) i heptil (C7).
[0024] Primeri zasićenih linearnih alkil grupa obuhvataju, ali nisu ograničeni na, metil (C1), etil (C2), n-propil (C3), n-butil (C4), n-pentil (amil) (C5), n-heksil (C6) i n-heptil (C7).
[0025] Primeri zasićenih granatih alkil grupa obuhvataju izo-propil (C3), izo-butil (C4), sek-butil (C4), tertbutil (C4), izo-pentil (C5), i neo-pentil (C5).
[0026] C2-12Alkenil: Termin "C2-12alkenil" kao što se ovde koristi, se odnosi na alkil grupu koja ima jednu ili više dvostrukih veza ugljenik-ugljenik.
[0027] Primeri nezasićenih alkenil grupa obuhvataju, ali nisu ograničeni na, etenil (vinil, -CH=CH2), 1propenil (-CH=CH-CH3), 2-propenil (alil, -CH-CH=CH2), izopropenil (1-metilvinil, -CH3)=CH2), butenil (C4), pentenil (C5), i heksenil (C6).
[0028] C2-12alkinil: Termin “ C2-12alkini“ kako se ovde koristi, se odnosi na alkil grupu koja ima jednu ili više ugljenik-ugljenik trostrukih veza.
[0029] Primeri nezasićenih alkinil grupa obuhvataju, ali nisu ograničeni na, etinil (-C≡CH) i 2-propinil (propargil,, -CH2-C≡CH).
[0030] C3-12cikloalkil: Termin "C3-12cikloalkil " kako se ovde koristi, se odnosi na alkil grupu koja je takođe ciklil grupa; to jest, monovalentan deo dobijen uklanjanjem vodonikovog atoma sa atoma alicikličnog prstena cikličnog ugljenik vodoničnog (karbociklila) jedinjenja, čiji deo ima od 3 do 12 ugljenikovih atoma, uključujući 3 do 12 atoma prstena.
[0031] Primeri ciklo alkil grupa obuhvataju, ali nisu ograničeni na, one izvedene od:
Zasićenih monocikličnih ugljovodoničnih jedinjenja: ciklopropana (C3), ciklobutana (C4), ciklopentana (C5), cikloheksan (C6), cikloheptana (C7), metilciklopropana (C4),
dimetilciklopropana (C5), metilciklobutana (C5), dimetilciklobutana (C6), metilciklopentana (C6), dimetilciklopentana (C7) i metilcikloheksan (C7); nezasićenih monocikličnih ugljivodoničnih jedinjenja: ciklopropena (C3), ciklobutena (C4), ciklopentena (C5), cikloheksena (C6),
metilciklopropena (C4), dimetilciklopropena (C5), metilciklobutena (C5), dimetilciklobutena (C6), metilciklopentena (C6), dimetilciklopentena (C7) i metilcikloheksena (C7); i zasićenih policikličnih ugljivodoničnih jedinjenja: norkarana (C7), norpinana (C7), norbornana (C7).
[0032] C3-20heterociklil: Termin “C3-20heterociklil“ kako se ovde koristi, se odnosi na monovalentan deo dobijen uklanjanjem vodonikovog atoma sa atoma prstena heterocikličnog jedinjenja, čiji deo ima od 3 do 20 ugljenikovih atoma, od čega su od 1 do 10 heteroatomi prstena. Poželjno, svaki prsten ima 3 do 7 atoma prstena, od koji su od 1 do 4 heteroatomi prstena.
[0033] U ovom kontekstu, prefiksi (npr. C3-20, C3-7, C5-6, itd.) ukazuju na broj atoma prstena, ili raspon brojeva atoma prstena, bilo ugljenikovih atoma ili heteroatoma. Na primer, termin “C5-6heterociklil“, kako se ovde koristi, se odnosi na heterociklil, grupu sa 5 ili 6 atoma prstena.
[0034] Primeri monocikličnih heterociklil grupa obuhvataju, ali nisu ograničeni na, one izvedene od:
N1: aziridina (C3), azetidina (C4), pirolidina (tetrahidropirol) (C5), pirolina (npr., 3-pirolina, 2,5-dihidropirol) (C5), 2H-pirola ili 3H-pirola (izopirol, izoazola) (C5), piperidina (C6), dihidropiridina (C6), tetrahidropiridina (C6), azepina (C7);
O1:oxirana (C3), oxetana (C4), oksolana (tetrahidrofuran) (C5), oksola (dihidrofuran) (C5), oksana (tetrahidropiran) (C6), dihidropiran (C6), piran (C6), oxepin (C7);
S1:tiirana (C3), tietana (C4), tiolana (tetrahidrotiofene) (C5), tiana (tetrahidrotiopiran) (C6), tiepana (C7); O2: dioksolana (C5), dioksana (C6), i dioksepana (C7);
O3: trioksana (C6);
N2:imidazolidina (C5), pyrazolidina (diazolidina) (C5), imidazolinaa (C5), pyrazolinaa (dihidropyrazola) (C5), piperazina (C6);
N1O1:tetrahidrooksazola (C5), dihidrooksazola (C5), tetrahidroizoksazola (C5), dihidroizoksazola (C5), morfolinaa (C6), tetrahidrooksazina (C6), dihidrooksazina (C6), oksazina (C6);
N1S1tiazolinaa (C5), tiazolidina (C5), tiomorfolinaa (C6);
N2O1:oksadiazina (C6);
O1S1:oksatiola (C5 C5i oksatiana (tioksana) (C6); i,
N1O1S1:oksatiazina (C6).
[0035] Primeri supstituisanih monocikličnih heterociklil grupa obuhvataju one izvedene od saharida, u cikličnoj formi, na primer, furanoza (C5), kao što je arabinofuranoza, liksofuranoza, ribofuranoza, i ksilofuranoza, i piranoza (C6), kao što je alopiranoza, altropiranoza, glukopiranoza, manopiranoza, gulopiranoza, idopiranoza, galaktopiranoza, i talopiranoza.
[0036] C5-20Termin “C5-20aril“, kako se ovde koristi, se odnosi na monovalentan deo dobijen uklanjanjem vodonikovog atoma sa atoma prstena aromatičnog jedinjenja, čiji deo ima od 3 do 20 atoma prstena. Termin "C5-7aril", kako se ovde koristi, odnosi se na monovalentni deo dobijen uklanjanjem atoma vodonika iz aromatičnog atoma prstena aromatičnog jedinjenja, koji deo ima od 5 do 7 atoma u prstenu, i izraz "C5-10aril ", kako se ovde koristi, odnosi se na monovalentni deo dobijen uklanjanjem atoma vodonika iz aromatičnog atoma prstena aromatičnog jedinjenja, koji deo ima od 5 do 10 atoma u prstenu. Poželjno je da svaki prsten ima od 5 do 7 atoma u prstenu.
[0037] U ovom kontekstu, prefiksi (npr. C3-20, C5-7, C5-6, C5-10, itd.) ukazuju na broj atoma prstena, ili raspon brojeva atoma prstena, bilo ugljenikovih atoma ili heteroatoma. Na primer, termin “C5-6aril“ kako se ovde koristi, se odnosi na arilnu grupu koja ima 5 ili 6 atoma prstena.
[0038] Atomi prstena mogu svi biti ugljenični, kao u „ugljenik aril grupama“.
Primeri ugljenik aril grupa obuhvataju, ali nisu ograničeni na, one izvedene od benzena (tj. fenila) (C6), naftalena (C10), azulena (C10), antracena (C4), fenantrena (C14), naftacena (C18), i pirena (C16).
[0039] Primeri aril grupa koje sadrže fuzionisani prsten, od kojih je najmanje jedan aromatični prsten, obuhvataju, ali nisu ograničeni na, grupe izvedene od indena (npr.2, 3-dihidro- 1 H-indena) (C9), indena (C9), izoindena (C9), tetralina (1,2,3, 4-tetrahidronaftalena (C10), acenaftena (C12), fluorena (C13), fenalena (C13), acefenantrena (C15), i aceantrena (C16).
[0040] Alternativno, the atoma prstena mogu obuhvatiti jedan ili više heteroatoma, kao u „hetero aril grupama“ Primeri monocikličnih hetero aril grupa obuhvataju, ali nisu ograničeni na, one izvedena od:
N1: pirola (azola) (C5), piridina (azina) (C6);
O1: furana (oksola) (C5);
S1: tiofena (tiola) (C5);
N1O1: oksazola (C5), izoksazola (C5), izoksazina (C6);
N2O1: oksadiazola (furazana) (C5);
N3O1: oksatriazola (C5);
N1S1: tiazola (C5), izotiazola (C5);
N2: imidazola (1,3-diazola) (C5), pirazola (1, 2-diazola) (C5), piridazina (1, 2-diazina) (C6), pirimidina (1, 3-diazina) (C6) (npr., citosina, timina, uracil), pirazina (1, 4-diazina) (C6);
N3: triazola (C5), triazina (C6); i,
N4: tetrazola (C5).
[0041] Primeri hetero arila koje sadrže fuzionisani prsten, obuhvataju, ali nisu ograničeni na:
C9(sa dva fuzionisana prstena) izveden od benzofurana (O1), izobenzofurana (O1), indola (N1), izoindola (N1), indolizina (N1), indolina (N1), izoindolina (N1), purina (N4) (npr., adenina,guanina), benzimidazola (N2), indazola (N2), benzoksazola (N1O1), benzizoksazola (N1O1),benzodioksola (O2), benzofurazana (N2O1) benzotriazola (N3), benzotiofurana (S1), benzotiazola (N1S1), benzotiadiazola (N2S);
C10(sa dva fuzionisana prstena) izveden od chromena (O1), izochromena (O1), chroman (O1), izohromana (O1), benzodioksana (O2), kvinolina (N1), izokvinolina (N1), kvinolizina (N1), benzoksazina (N1O1), benzodiazina (N2), piridopiridina (N2), kvinoksalina (N2), kvinazolina (N2), cinolina (N2), ftalazina (N2), naftiridina (N2), pteridina (N4);
C11(sa dva fuzionisana prstena) izveden od benzodiazepina (N2);
C13(sa tri fuzionisana prstena) izveden od karbazola (N1), dibenzofurana (O1), dibenzotiofena (S1), karbolina (N2), perimidina (N2), piridoindola (N2); i,
C14(sa tri fuzionisana prstena) izveden od acridina (N1), xantena (O1), tioksantena (S1), oksantrena (O2), fenoksathiin (O1S1), fenazina (N2), fenoksazina (N1O1), fenotiazina (N1S1), tiantrena (S2), fenantridina (N1), fenantrolina (N2), fenazina (N2).
[0042] Grupe iznad, bilo samostalno bilo kao deo drugog supstituenta, mogu biti opciono zamenjene sa jednom ili dve grupe odabrane među njima i dodatnim supstituentima izlistanim ispod.
[0043] Halo: -F, -CI, -Br, i -I.
[0044] Hidroksi: -OH.
[0045] Etar: -OR, gde je R etarski supstituent, na primer, C1-7alkil grupa (takođe označena i kao C1-7alkoksi grupa, diskutovana ispod), C3-20heterociklil grupa (takođe označena i kao C3-20heterocikliloksi grupa), ili C5-20arilna grupa (takođe označena i kao C5-20ariloksi grupa), poželjno C1-7alkil grupa.
[0046] Alkoksi: -OR, gde je R alkil grupa, na primer, C1-7alkil grupa. Primeri C1-7alkoksi grupa obuhvataju, ali nisu ograničeni na, -OMe (metoksi), -OEt (etoksi), -O(nPr) (n-propoksi), -O(iPr) (izopropoksi), -O(nBu) (nbutoksi), -O(sBu) (sek-butoksi), -O(iBu) (izobutoksi), i -O(tBu) (tert-butoksi).
[0047] Karboksi (karboksilna kiselina): -C(=O)OH.
[0048] Ester (karboksilat, estar karboksilne kiseline, oksikarbonil): -C(=O)OR, gde je R estarska zamena, na primer, C1-7alkil grupa, C3-20heterociklil grupa, ili C5-20arilna grupa, poželjno C1-7alkil grupa. Primeri estarskih grupa obuhvataju, ali nisu ograničeni na, -C(=O)OCH3, -C(=O)OCH2CH3, -C(=O)OC(CH3)3, i -C(=O)OPh.
[0049] Amino: -NR<1>R<2>, gde je R<1>i R<2>nezavisno amino supstituenti, na primer, hidrogen, C1-7alkil grupa (takođe označene kao C1-7alkilamino ili di-C1-7alkilamino), C3-20heterociklil grupa, ili C5-20arilna grupa, poželjno H ili C1-7alkil grupa, ili, u slučaju „ciklična“ amino grupa, R<1>i R<2>, uzete zajedno sa azotovim atomom za koji je zakačena, formiraju heterociklični prsten sa 4 do 8 atoma prstena. Amino grupe mogu biti primarne (-NH2), sekundarne (-NHR1), ili tercijarne (-NHR<1>R<2>), i u katjonskoj formi, mogu biti kvaternarne (-+NR<1>R<2>R<3>). Primeri amino grupa obuhvataju, ali nisu ograničeni na, - NH2, -NHCH3, -NHC(CH3)2, -N(CH3)2, -N(CH2CH3)2,, i -NHPh. Primeri cikličnih amino grupa obuhvataju, ali nisu ograničeni na, aziridino, azetidino, pirolidino, piperidino, piperazino, morfolino, i tiomorfolino.
[0050] Amido (karbamoil, karbamil, aminokarbonil, karboksamid): - C(=O)NR<1>R<2>, gde je R<1>i R<2>nezavisno amino supstituenti, kao što je definisano za amino grupe. Primeri amido grupa obuhvataju, ali nisu ograničeni na, -C(=O)NH2, -C(=O)NHCH3, -C(=O)N(CH3)2, C(=O)NHCH2CH3, and -C(=O)N(CH2CH3)2, kao i amidne grupe u kojima R<1>i R<2>zajedno sa azotovim atomom za koji je zakačena, formiraju heterocikličnu strukturu kao u, na primer, piperidinokarbonil, morfolinokarbonil, tiomorfolinokarbonil, i piperazinokarbonil..
[0051] Nitro: -NO2.
[0052] Azido: -N3.
[0053] Cijano (nitril, karbonitril): -CN.
Antitelo
[0054] U jednom aspektu antitelo je antitelo koje se vezuje za AXL.
1H12
[0055] U nekim otelotvorenjima antitelo sadrži VH domen koji ima VH CDR3 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.7. U nekim otelotvorenjima VH domen dalje sadrži VH CDR2 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.6 i / ili VH CDR1 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.5. U nekim otelotvorenjima antitelo sadrži VH domen koji ima VH CDR1 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.5, VH CDR2 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.6 i VH CDR3 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.7. U poželjnim otelotvorenjima antitelo sadrži VH domen koji ima sekvencu prema SEQ ID NO.1.
[0056] Antitelo može dalje da sadrži VL domen. U nekim otelotvorenjima antitelo sadrži VL domen koji ima VL CDR3 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.10. U nekim otelotvorenjima VL domen dalje sadrži VL CDR2 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.9 i / ili VL CDR1 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.8. U nekim otelotvorenjima antitelo sadrži VL domen koji ima VL CDR1 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.8, VL CDR2 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.9 i VL CDR3 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.10. U poželjnim otelotvorenjima antitelo sadrži VL domen koji ima sekvencu prema SEQ ID NO.2.
[0057] U poželjnim otelotvorenjima antitelo sadrži VH domen i VL domen. Poželjno je da VH sadrži sekvencu SEQ ID NO.1, a VL domen sekvencu SEQ ID NO.2.
[0058] VH i VL domeni (domeni) mogu se upariti tako da formiraju mesto vezivanja za antigen antitela koje vezuje AXL.
[0059] U nekim otelotvorenjima antitelo je netaknuto antitelo koje sadrži VH domen uparen sa VL domenom, VH i VL domeni koji imaju sekvence SEQ ID NO.1 uparene sa SEQ ID NO.2.
[0060] U nekim otelotvorenjima antitelo sadrži teški lanac koji ima sekvencu SEQ ID NO.3 uparen sa lakim lancem koji ima sekvencu SEQ ID NO.4. U nekim otelotvorenjima antitelo je netaknuto antitelo koje se sastoji od dva teška lanca koja imaju sekvencu SEQ ID NO.3, svaki uparen sa lakim lancem koji ima sekvencu SEQ ID NO.4.
[0061] U nekim otelotvorenjima antitelo sadrži teški lanac koji ima sekvencu SEQ ID NO.24 uparen sa lakim lancem koji ima sekvencu SEQ ID NO.4. U nekim otelotvorenjima antitelo je netaknuto antitelo koje se sastoji od dva teška lanca koja imaju sekvencu SEQ ID NO.24, svaki uparen sa lakim lancem koji ima sekvencu SEQ ID NO.4.
[0062] U jednom aspektu, antitelo je antitelo kako je ovde opisano, koje je modifikovano (ili dalje modifikovano) kako je opisano u nastavku. U nekim otelotvorenjima antitelo je ovde opisana humanizovana, deimunizovana ili obnovljena verzija antitela.
5F11
[0063] U nekim otelotvorenjima antitelo sadrži VH domen koji ima VH CDR3 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.15. U nekim otelotvorenjima VH domen dalje sadrži VH CDR2 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.14 i / ili VH CDR1 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.13. U nekim otelotvorenjima antitelo sadrži VH domen koji ima VH CDR1 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.13, VH CDR2 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.14 i VH CDR3 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.15.
[0064] U nekim otelotvorenjima antitelo sadrži VH domen koji ima sekvencu prema SEQ ID NO.11. U nekim otelotvorenjima antitelo sadrži VH domen koji ima sekvencu prema SEQ ID NO.19. U nekim otelotvorenjima antitelo sadrži VH domen koji ima sekvencu prema SEQ ID NO.20. U nekim otelotvorenjima antitelo sadrži VH domen koji ima sekvencu prema SEQ ID NO.21.
[0065] Antitelo može dalje da sadrži VL domen. U nekim otelotvorenjima antitelo sadrži VL domen koji ima VL CDR3 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.18. U nekim otelotvorenjima VL domen dalje sadrži VL CDR2 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.17 i / ili VL CDR1 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.16. U nekim otelotvorenjima antitelo sadrži VL domen koji ima VL CDR1 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.16, VL CDR2 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.17 i VL CDR3 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.18.
[0066] U nekim otelotvorenjima antitelo sadrži VL domen koji ima sekvencu prema SEQ ID NO.22.
[0067] U poželjnim otelotvorenjima antitelo sadrži VH domen i VL domen. U nekim otelotvorenjima VH sadrži VH CDR1 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.13, VH CDR2 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.14 i VH CDR3 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.15; a VL domen sadrži VL CDR1 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.16, VL CDR2 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.17 i VL CDR3 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.18.
[0068] U nekim otelotvorenjima antitelo sadrži VH domen koji ima sekvencu SEQ ID NO.19 i VL domen koji ima sekvencu SEQ ID NO.22. U nekim otelotvorenjima antitelo sadrži VH domen koji ima sekvencu SEK ID NO.20 i VL domen koji ima sekvencu SEQ ID NO.22. U nekim otelotvorenjima antitelo sadrži VH domen koji ima sekvencu SEQ ID NO.21 i VL domen koji ima sekvencu SEQ ID NO.22.
[0069] VH i VL domen(i) mogu se upariti tako da formiraju mesto vezivanja za antigen antitela koje vezuje AXL.
[0070] U nekim otelotvorenjima antitelo je netaknuto antitelo koje sadrži VH domen uparen sa VL domenom.
[0071] U jednom aspektu, antitelo je antitelo kako je ovde opisano, koje je modifikovano (ili dalje modifikovano) kako je opisano u nastavku. U nekim otelotvorenjima antitelo je ovde opisana humanizovana, deimunizovana ili obnovljena verzija antitela.
Terminologija
[0072] Termin "antitelo" ovde se koristi u najširem smislu i posebno obuhvata monoklonska antitela, poliklonska antitela, dimere, multimere, multispecifična antitela (npr. Bispecifična antitela), netaknuta antitela
1
i fragmente antitela, sve dok pokazuju željenu biološku aktivnost, na primer, sposobnost vezivanja AXL. Antitela mogu biti mišja, humana, humanizovana, himerna ili izvedena iz drugih vrsta. Antitelo je protein koji generiše imuni sistem i koji je sposoban da prepozna i veže se za određeni antigen. (Janeway, C., Travers, P., Walport, M., Shlomchik (2001) Immuno Biology, 5th Ed., Garland Publishing, New York). Ciljni antigen generalno ima brojna mesta vezivanja, koja se takođe nazivaju epitopi, prepoznata od CDR na više antitela. Svako antitelo koje se specifično vezuje za drugi epitop ima drugačiju strukturu. Dakle, jedan antigen može imati više odgovarajućih antitela. Antitelo uključuje molekul imunoglobulina pune dužine ili imunološki aktivan deo molekula imunoglobulina pune dužine, tj. Molekul koji sadrži mesto vezivanja antigena koje imunospecifično vezuje antigen ciljanog cilja ili njegov deo, kao što su ciljevi nije ograničeno na ćelije raka ili ćelije koje proizvode autoimunska antitela povezana sa autoimunom bolešću. Imunoglobulin može biti bilo koje vrste (npr. IgG, IgE, IgM, IgD, i IgA), klase (npr. IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 i IgA2) ili podklase, ili alotipa (npr. Humani G1 m1, G1m2, G1m3, non-G1m1 [to je bilo koji alotip osim G1m1], G1m17, G2m23, G3m21, G3m28, G3m11, G3m5, G3m13, G3m14, G3m10, G3m15, G3m16, G3m6, G3m24, G3m26, G3m27, A2m1, A2m2, Km1, Km2 i Km3) molekula imunoglobulina. Imunoglobulini mogu biti izvedeni iz bilo koje vrste, uključujući ljudsko, mišje ili zečje poreklo.
[0073] Kako se ovde koristi, „vezuje AXL“ se koristi da znači da antitelo veže AXL sa većim afinitetom od nespecifičnog partnera kao što je goveđi serumski albumin (BSA, pristupni broj GenBank CAA76847, verzija br. CAA76847.1 GI: 3336842, datum ažuriranja zapisa: 7. januar 2011.14:30). U nekim otelotvorenjima antitelo vezuje AXL najmanje sa konstantom asocijacije (Ka) 2, 3, 4, 5, 10, 20, 50, 100, 200, 500, 1000, 2000, 5000, 10<4>, 10<5>ili 10<6>-puta veća od konstante asocijacije antitela za BSA, mereno u fiziološkim uslovima. Antitela prema pronalasku mogu da vezuju CD22 sa visokim afinitetom. Na primer, u nekim otelotvorenjima antitelo može da veže CD22 sa KDjednakim ili manjim od približno 10<-6>M, kao što je 1 x 10<-6>, 10<-7>, 10<-8>, 10<-9>, 10<-10>, 10<-11>, 10<-12>, 10<-13>ili 10<-14>.
[0074] AXL je član humane porodice TAM receptorskih tirozin kinaza. U nekim otelotvorenjima, AXL polipeptid odgovara GenBank pristupu br. AAH32229, verzija br. AAH32229.1 GI:21619004, datum ažuriranja zapisa: 6. marta 2012. 13:18 (SEQ ID NO.9). U jednom otelotvorenju, nukleinska kiselina koja kodira AXL polipeptid odgovara GenBank pristupu br. M76125, verzija br. M76125.1 GI:292869, datum ažuriranja zapisa: 23. jun 2010. 08:53. U nekim otelotvorenjima, AXL polipeptid ima sekvencu SEQ ID NO.23.
[0075] "Fragmenti antitela" sadrže deo antitela pune dužine, generalno vezujući antigen ili njegov promenljivi region. Primeri fragmenata antitela uključuju Fab, Fab', F(ab')2i scFv fragmente; dijatela; linearna antitela; fragmenti proizvedeni iz Fab biblioteke ekspresije, anti-idiotipska (anti-Id) antitela, CDR (komplementarni određujući region) i fragmenti koji vezuju epitope bilo kog od iznad navedenih, koji se imunospecifično vezuju za antigene ćelija karcinoma, virusne antigene ili mikrobne antigene, pojedinačno -lančani molekuli antitela; i multispecifična antitela nastala od fragmenata antitela.
[0076] Termin "monoklonsko antitelo", kako se ovde koristi, odnosi se na antitelo dobijeno iz populacije suštinski homogenih antitela, tj. Pojedinačna antitela koja čine populaciju su identična, osim mogućih prirodnih mutacija koje mogu biti prisutne u manjim količinama. Monoklonska antitela su visoko specifična i usmerena su prema jednom antigenom mestu. Dalje, za razliku od preparata za poliklonalna antitela koja uključuju različita antitela usmerena na različite determinante (epitope), svako monoklonsko antitelo je usmereno protiv jedne odrednice na antigenu. Pored svoje specifičnosti, monoklonska antitela imaju prednost u tome što se mogu sintetizovati ne kontaminirana drugim antitelima. Modifikator "monoklonalni" ukazuje na karakter antitela koji je dobijen iz suštinski homogene populacije antitela i ne sme se tumačiti kao da zahteva proizvodnju antitela bilo kojim određenim postupkom. Na primer, monoklonska antitela koja će se koristiti u skladu sa ovim pronalaskom mogu se dobiti metodom hibridoma koju su prvi opisali Kohler i saradnici (1975) Nature 256: 495, ili mogu dobiti metodom rekombinantne DNK (videti US 4816567).. Monoklonska antitela se takođe mogu izolovati iz biblioteka antitela faga koristeći tehnike opisane u Clackson i dr. (1991) Nature, 352: 624-628; Marks i sar. (1991) J. Mol. Biol., 222: 581-597 ili od transgenih miševa koji nose potpuno humani sistem imunoglobulina (Lonberg (2008) Curr. Opinion 20 (4): 450-459).
[0077] Monoklonska antitela ovde posebno uključuju „himerna“ antitela u kojima je deo teškog i / ili lakog lanca identičan ili homologan odgovarajućim sekvencama u antitelima koja potiču od određene vrste ili pripadaju određenoj klasi ili podklasi antitela, dok je ostatak lanca (i) je identičan ili homologan odgovarajućim sekvencama u antitelima koja potiču od druge vrste ili pripadaju drugoj klasi ili podklasi antitela, kao i fragmentima takvih antitela, sve dok pokazuju željenu biološku aktivnost (US 4816567; i Morrison i sar. (1984) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81:6851-6855). Himerna antitela uključuju "primitizovana" antitela koja sadrže sekvence vezivanja antigena promenljivog domena izvedene od ne-humanih primata (npr. Majmuni Starog sveta ili majmuna) i sekvence konstantnog regiona čoveka.
[0078] Ovde se podrazumeva „netaknuto antitelo“ koje sadrži VL i VH domene, kao i konstantni domen lakog lanca (CL) i konstantni domen teškog lanca, CH1, CH2 i CH3. Konstantni domeni mogu biti konstantni domeni nativne sekvence (npr. Konstantni domeni ljudske nativne sekvence) ili njihova varijanta aminokiselinske sekvence. Intaktno antitelo može imati jednu ili više "efektorskih funkcija" koje se odnose na one biološke aktivnosti koje se mogu pripisati Fc regionu (Fc region nativne sekvence ili varijanti Fc regiona aminokiselinske sekvence) antitela. Primeri efektorskih funkcija antitela uključuju vezivanje za C1q; citotoksičnost zavisna od komplementa; Vezivanje za Fc receptor; citotoksičnost posredovana ćelijama zavisna od antitela (ADCC); fagocitoza; i donja regulacija receptora ćelijske površine kao što su receptor B ćelije i BCR.
[0079] U zavisnosti od aminokiselinske sekvence konstantnog domena njihovih teških lanaca, netaknuta antitela mogu se dodeliti različitim „klasama“. Postoji pet glavnih klasa netaknutih antitela: IgA, IgD, IgE, IgG i IgM, a nekoliko njih se može dalje podeliti u „podklase“ (izotipe), npr. IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA i IgA2 . Konstantni domeni teškog lanca koji odgovaraju različitim klasama antitela nazivaju se a, d, e, g i µ, respektivno. Strukture podjedinica i trodimenzionalne konfiguracije različitih klasa imunoglobulina su dobro poznate.
Modifikacija antitela
[0080] Ovde otkrivena antitela mogu se modifikovati. Na primer, da bi bili manje imunogeni za ljudskog subjekta. To se može postići korišćenjem bilo koje od brojnih tehnika poznatih stručnjaku u ovoj oblasti. Neke od ovih tehnika su detaljnije opisane u nastavku.
Humanizacija
[0081] Tehnike za smanjenje in vivo imunogenosti ne-humanog antitela ili njegovog fragmenta uključuju one koje se nazivaju "humanizacija".
[0082] "Humanizovano antitelo" odnosi se na polipeptid koji sadrži najmanje deo modifikovanog promenljivog regiona humanog antitela, pri čemu je deo promenljivog regiona, poželjno deo znatno manji od netaknutog humanog promenljivog domena, supstituisan odgovarajućom sekvencom iz nehumane vrste i gde je modifikovani promenljivi region povezan sa najmanje drugim delom drugog proteina, poželjno konstantnim regionom humanog antitela. Termin "humanizovana antitela" uključuje humana antitela u kojima su jedan ili više aminokiselinskih ostataka regiona koji određuje komplementarnost ("CDR") i / ili jednog ili više aminokiselinskih ostataka okvirnog regiona ("FV" ili "FR") zamenjeni aminokiselinama ostaci sa analognih mesta na glodarima ili drugim ne-humanim antitelima. Termin "humanizovano antitelo" takođe uključuje varijantu imunoglobulinske aminokiselinske sekvence ili njen fragment koji sadrži FR koji ima u osnovi aminokiselinsku sekvencu humanog imunoglobulina i CDR koji u osnovi ima aminokiselinsku sekvencu nehumanih imunoglobulina.
[0083] "Humanizovani" oblici ne-humanih (npr., mišjih) antitela su himerna antitela koja sadrže minimalnu sekvencu izvedenu iz ne-humanog imunoglobulina. Ili, gledano na drugi način, humanizovano antitelo je humano antitelo koje takođe sadrži odabrane sekvence od ne-humanih (npr., mišjih) antitela umesto ljudskih sekvenci. Humanizovano antitelo može da uključuje konzervativne supstitucije aminokiselina ili neprirodne ostatke iste ili različitih vrsta koji ne menjaju značajno njegovo vezivanje i / ili biološku aktivnost. Takva antitela su himerna antitela koja sadrže minimalnu sekvencu izvedenu iz ne-humanih imunoglobulina.
[0084] Postoji čitav niz tehnika humanizacije, uključujući „CDR graftovanje“, „vođeni odabir“, „deimunizacija“, „obnavljanje površine“ (takođe poznato kao „oblaganje furnirom“), „kompozitna antitela“, „Optimizacija sadržaja humane sekvence“ i mešanje okvira.
CDR graftovanje
[0085] U ovoj tehnici, humanizovana antitela su humani imunoglobulini (antitelo primalac) u kojima su ostaci iz komplementarno određujućeg regiona (CDR) antitela primaoca zamenjeni ostacima CDR-a ne-humane vrste (antitelo davalac) kao što su miš, pacov, kamila, goveda, koza ili zec koji imaju željena svojstva (u stvari, nehumani CDR se „graftuju“ na humani okvir). U nekim slučajevima, ostaci okvirnog regiona (FR) humanog imunoglobulina zamenjuju se odgovarajućim ne-humanim ostacima (to se može dogoditi kada, na primer, određeni FR ostatak značajno utiče na vezivanje antigena).
[0086] Dalje, humanizovana antitela mogu sadržati ostatke koji se ne nalaze ni u antitelu primaocu ni u ubačenim CDR ili okvirnim sekvencama. Ove modifikacije su napravljene da bi se dalje usavršile i maksimizovale performanse antitela. Tako će, generalno, humanizovano antitelo sadržati sve od najmanje jednog, a u jednom aspektu i dva promenljiva domena, u kojima sve ili sve hipervarijabilne petlje odgovaraju onima ne-humanog imunoglobulina i sve ili suštinski sve FR regioni su oni sa sekvencom humanog imunoglobulina. Humanizovano antitelo opciono će takođe sadržati najmanje deo konstantnog dela imunoglobulina (Fc) ili čovekovog imunoglobulina.
Vođeni odabir
[0087] Postupak se sastoji od kombinovanja VH ili VL domena datog ne-humanog antitela specifičnog za određeni epitop sa humanom VH ili VL bibliotekom i specifični humani V domeni su izabrani prema antigenu od interesa. Ovaj izabrani humani VH se zatim kombinuje sa VL bibliotekom da bi se generisala potpuno ljudska VHxVL kombinacija. Metoda je opisana u Nature Biotechnology (N.Y.) 12, (1994) 899-903.
Kompozitna antitela
[0088] U ovom postupku, dva ili više segmenata aminokiselinskih sekvenci iz humanog antitela se kombinuju unutar konačnog molekula antitela. Oni su konstruisani kombinovanjem višestrukih segmenata humane VH i VL sekvence u kombinacijama koje ograničavaju ili izbegavaju epitope humanih T ćelija u završnim kompozitnim V regionima antitela. Tamo gde je potrebno, epitopi T ćelija su ograničeni ili izbegavani razmenom segmenata V regiona koji doprinose ili kodiraju epitop T ćelija sa alternativnim segmentima koji izbegavaju epitope T ćelija. Ovaj postupak je opisan u US 2008/0206239 A1.
Deimunizacija
[0089] Ovaj postupak uključuje uklanjanje humanih (ili drugih vrsta) epitopa T-ćelija iz V regiona terapijskog antitela (ili drugog molekula). Sekvenca V-regiona terapijskih antitela analizira se na prisustvo motiva koji vezuju MHC klasu, na primer, poređenjem sa bazama podataka motiva koji vezuju MHC (kao što je baza podataka „motivi“ hostovana na vvv.vehi.edu.au) . Alternativno, motivi koji vezuju MHC klase II mogu se identifikovati pomoću računarskih postupaka navoja poput onih koje su osmislili Altuvia i dr. (J. Mol. Biol.
249 244-250 (1995)); u ovim postupcima, uzastopni peptidi koji se preklapaju iz sekvenci V-regiona testiraju svoje energije vezivanja za MHC proteine klase II. Ovi podaci se zatim mogu kombinovati sa informacijama o drugim karakteristikama sekvence koje se odnose na uspešno predstavljene peptide, kao što su amfipatičnost, Rothbardovi motivi i mesta cepanja katepsina B i drugih enzima za preradu.
[0090] Jednom kada se identifikuju potencijalne druge vrste (npr. Humani) epitopi T-ćelija, eliminišu se promenom jedne ili više aminokiselina. Modifikovane aminokiseline se obično nalaze u samom epitopu T-ćelije, ali takođe mogu biti susedne epitopu u smislu primarne ili sekundarne strukture proteina (i zbog toga možda neće biti susedne u primarnoj strukturi). Najčešće, promena je putem supstitucije, ali u nekim okolnostima dodavanje ili brisanje aminokiselina će biti prikladnije.
[0091] Sve promene mogu se izvršiti tehnologijom rekombinantne DNK, tako da se konačni molekul može pripremiti ekspresijom od rekombinantnog domaćina primenom dobro uspostavljenih metoda kao što je Site Directed Mutagenesis. Međutim, moguća je i upotreba proteinske hemije ili bilo kog drugog načina molekularne promene.
Ponovno pojavljivanje
[0092] Ovaj postupak uključuje:
(a) određivanje konformacione strukture promenljivog regiona ne-humanog (npr. glodara) antitela (ili njegovog fragmenta) konstruisanjem trodimenzionalnog modela promenljivog regiona ne-humanog antitela;
(b) generisanje poravnanja sekvenci korišćenjem relativne raspodele pristupačnosti iz rendgenskih kristalografskih struktura dovoljnog broja teških i lakih lanaca promenljive regije nehumanih i humanih antitela da bi se dobio skup okvira teških i lakih lanaca u kojima su položaji poravnanja identični u 98% dovoljnog broja teških i lakih lanaca ne-humana antitela;
(c) definisanje za ne-humana antitela koja treba humanizovati, skup teških i lakih lanaca izloženih površinskih aminokiselinskih ostataka, koristeći skup okvirnih položaja generisanih u koraku (b); (d) identifikovanje iz aminokiselinskih sekvenci humanog antitela skupa aminokiselinskih ostataka
1
izloženih površini teškog i lakog lanca koji je najbliži identičnom skupu površinski izloženih aminokiselinskih ostataka definisanih u koraku (c), pri čemu teški i laki lanac ljudskog antitela jesu ili nisu prirodno upareni;
(e) zamena, u aminokiselinskoj sekvenci ne-humanog antitela koje treba humanizovati, skupom aminokiselinskih ostataka izloženih površini teškog i lakog lanca definisanim u koraku (c) skupom aminokiselina izloženih površini teškog i lakog lanca ostaci identifikovani u koraku (d);
(f) konstruisanje trodimenzionalnog modela promenljivog regiona ne-humanog antitela koji je rezultat zamenjivanja navedenog u koraku (e);
(g) identifikovanjem, upoređivanjem trodimenzionalnih modela konstruisanih u koracima (a) i (f), bilo kojih aminokiselinskih ostataka iz skupova identifikovanih u koracima (c) ili (d), koji su unutar 5 Angstrema od bilo kog atoma bilo kog ostatka regioni koji određuju komplementarnost nehumanih antitela koji će se humanizovati; i
(h) promena bilo kog ostatka identifikovanog u koraku (g) sa ljudskog na originalni nehumani aminokiselinski ostatak da bi se na taj način definisao nehumani antitelo koji humanizuje površinski izložene aminokiselinske ostatke; s tim da korak (a) ne treba prvo izvoditi, već mora biti sproveden pre koraka (g).
Superhumanizacija
[0093] Metoda upoređuje nehumane sekvence sa funkcionalnim ljudskim genskim repertoarom. Odabrani su oni ljudski geni koji kodiraju kanonske strukture identične ili usko povezane sa ne-humanim sekvencama. Oni odabrani humani geni sa najvišom homologijom unutar CDR-a izabrani su kao donatori FR. Konačno, nehumani CDR se graftuju na ove humane FR. Ovaj postupak je opisan u patentu VO 2005/079479 A2. Optimizacija sadržaja ljudskog niza
[0094] Ovom metodom se upoređuje nehumana (npr. Mišja) sekvenca sa repertoarom gena humanih germinalnih linija, a razlike se ocenjuju kao Sadržaj ljudskog niza (HSC) koji kvantifikuje sekvencu na nivou potencijalnih MHC / T-ćelijskih epitopa. Ciljna sekvenca se zatim humanizuje maksimiziranjem svog HSC, umesto da se koristi mera globalnog identiteta za generisanje višestrukih različitih humanizovanih varijanti (opisano u Molecular Immunologi, 44, (2007) 1986-1998).
Framework Shuffling
[0095] CDR-ovi ne-humanih antitela su spojeni u okviru sa cDNA-skupovima koji obuhvataju sve poznate okvire gena humanih klica teškog i lakog lanca. Humanizovana antitela se zatim biraju npr. panorama faga prikazane biblioteke antitela. Ovo je opisano u Metodama 36, 43-60 (2005).
Modifikacija antitela sa azidom
[0096] Antitelo se može pripremiti za konjugaciju sa veznikom leka kroz postupak u tri koraka:
(1) Ekspresija antitela (Ab) koje nosi jezgro N-glikan u pogodnom ekspresijskom sistemu (npr. CHO ćelijska linija). Jezgro N-glikan je tipično konjugovano sa Asn-297 teškog lanca prema sistemu numerisanja Kabat;
(2) obrezivanje svih izoformi glikana (složenih, hibridnih, visoko-manoznih) sa endoglikozidazom da napusti jezgro GlcNAc; i
(3) enzimski prenos u jezgro GlcNAc ostatka N-acetilgalaktoze koji sadrži azidnu grupu za konjugaciju sa veznikom leka.
[0097] Pregled gornjeg postupka dat je u van Geel, R., i sar., Bioconjugate Chemistry, 2015, 26, 2233-2242; DOI: 10.1021 / acs.bioconjchem.5b00224. Alternativno, može se koristiti postupak sa jednim loncem -pogledajte primere.
Otelotvorenja
X
[0098] U nekim otelotvorenjima, X je jednostruka veza.
U nekim otelotvorenjima, X je -CH2-.
U daljim otelotvorenjima, X je -C2H4-.
[0099] U nekim otelotvorenjima, n je 1 do 4.
[0100] U nekim od ovih otelotvorenja, n je 1.
U drugim od ovih otelotvorenja,, n je 2.
U daljim od ovih otelotvorenja,, n je 4.
R<7>
[0101] U jednom otelotvorenju, R<7>je metil.
[0102] U drugom otelotvorenju, R<7>je fenil.
R<2>
[0103] Kada postoji dvostruka veza između C2 i C3, R<2>se bira između:
(a) C5-10aril grupe, opciono supstituisane sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koju čine: halo, nitro, cijano, etar, C1-7alkil, C3-7heterociklil i bis-oksi-C1-3alkilen;
(b) C1-5zasićenog alifatskog alkila;
(c) C3-6zasićenog cikloalkila;
(d)
pri čemu su svaki od R<21>, R<22>i R<23>nezavisno izabrani između H, C1-3zasićenog alkila, C2-3alkenila, C2-3alkinila i ciklopropila, gde ukupan broj atoma ugljenika u R<2>grupi nije veći od 5;
(e)
pri čemu je jedan od R<25a>i R<25b>H, a drugi je odabran između: fenila, koji je fenil opciono supstituisan sa grupom odabranom od halo metil, metoksi; piridil; i tiofenil; i (f)
gde je R<24>izabran iz: H; C<1-3>zasićeni alkil; C<2-3>alkenil; C2-3alkinil; ciklopropil; fenil, koji je fenil opciono supstituisan sa grupom odabranom iz halo metil, metoksi; piridil; i tiofenil.
[0104] Kada je R<2>C5-10aril grupa, to može biti C5-7aril grupa. C5-7aril grupa može biti fenil grupa ili C5-7heteroaril grupa, na primer furanil, tiofenil i piridil. U nekim otelotvorenjima, R<2>je poželjno fenil. U drugim otelotvorenjima, R<12>je poželjno tiofenil, na primer, tiofen-2-il i tiofen-3-il.
[0105] Kada je R<2>C5-10aril grupa, to može biti C8-10aril, na primer hinolinil ili izohinolinil grupa. Hinolinil ili izohinolinil grupa mogu biti vezane za jezgro PBD bilo kojim raspoloživim položajem prstena. Na primer, hinolinil može biti hinolin-2-il, hinolin-3-il, hinolin-4il, hinolin-5-il, hinolin-6-il, hinolin-7-il i hinolin-8-il. Od ovih hinolin-3-il i hinolin-6-il mogu biti poželjni. Izohinolinil može biti izohinolin-1-il, izohinolin-3-il, izohinolin-4il, izohinolin-5-il, izohinolin-6-il, izohinolin-7-il i izohinolin-8-il. Od ovih mogu biti poželjni izohinolin-3-il i izohinolin-6-il.
[0106] Kada je R<2>C5-10aril grupa, može da sadrži bilo koji broj supstituent grupa. Poželjno nosi od 1 do 3 supstituentne grupe, pri čemu su 1 i 2 poželjnije, a pojedinačno supstituisane grupe su najpoželjnije. Supstituenti mogu biti na bilo kojoj poziciji.
[0107] Gde je R<2>C5-7aril grupa, jedan supstituent je poželjno na atomu prstena koji nije susedan vezi sa
1
ostatkom jedinjenja, tj. Poželjno je b ili g sa vezom do ostatka jedinjenja. Prema tome, tamo gde je C5-7aril grupa fenil, supstituent je poželjno u meta- ili para-položaju, a poželjnije je u para-položaju.
[0108] Tamo gde je R<2>C8-10aril grupa, na primer kinolinil ili izokinolinil, može da sadrži bilo koji broj supstituenata na bilo kom položaju hinolinskih ili izohinolinskih prstenova. U nekim realizacijama, on ima jedan, dva ili tri supstituenta, a oni mogu biti na proksimalnom i distalnom prstenu ili na oba (ako je više od jednog supstituenta).
R<2>supstituenti, gde je R<2>C5-10aril grupa
[0109] Ako je supstituent na R<2>kada je R<2>C5-10aril grupa halo, poželjno je F ili Cl, još poželjnije Cl.
[0110] Ako je supstituent na R<2>, kada je R<2>C5-10aril grupa, etar, on u nekim realizacijama može biti alkoksi grupa, na primer, C1-7alkoksi grupa (npr. Metoksi, etoksi) ili u nekim realizacije su C5-7ariloksi grupa (npr. fenoksi, piridiloksi, furaniloksi). Alkoksi grupa može i sama dalje biti supstituisana, na primer amino grupom (npr. dimetilamino).
[0111] Ako je supstituent na R<2>kada je R<2>C5-10aril grupa C1-7alkil, poželjno može biti C1-4alkil grupa (npr. metil, etil, propil, butil).
[0112] Ako je supstituent na R<2>, kada je R<2>C5-10aril grupa, C3-7heterociklil, to može u nekim otelotvorenjima biti heterociklil grupa koja sadrži C6azot, npr. morfolino, tiomorfolino, piperidinil, piperazinil. Ove grupe mogu biti vezane za ostatak PBD ostatka preko atoma azota. Ove grupe mogu biti dalje supstituisane, na primer, sa C1-4alkil grupama. Ako je heterociklil grupa koja sadrži C6azot piperazinil, pomenuti dalji supstituent može biti na drugom atomu prstena azota.
[0113] Ako je supstituent na R<2>kada je R<2>C5-10aril grupa bis-oksi-C1-3alkilen, to je poželjno bis-oksi-metilen ili bis-oksi-etilen.
[0114] Ako je supstituent na R<2>kada je R<2>C5-10aril grupa estar, to je poželjno metil estar ili etil estar.
[0115] Naročito poželjni supstituenti kada je R<2>C5-10aril grupa uključuju metoksi, etoksi, fluoro, hloro, cijano, bis-oksi-metilen, metil-piperazinil, morfolino i metiltiofenil. Drugi naročito poželjni supstituenti za R<2>su dimetilaminopropiloksi i karboksi.
[0116] Naročito poželjne supstituisane R<2>grupe kada je R<2>C5-10aril grupa uključuju, ali nisu ograničene na, 4-metoksi-fenil, 3-metoksifenil, 4-etoksi-fenil, 3-etoksi-fenil, 4-fluorofenil, 4-hloro-fenil, 3,4-bisoksimetilenfenil, 4-metiltiofenil, 4-cijanofenil, 4-fenoksifenil, kinolin-3-il i hinolin-6-il, izokinolin-3-il i izokinolin-6-il, 2-tienil, 2-furanil, metoksinaftil i naftil. Druga moguća supstituisana R<2>grupa je 4-nitrofenil. R<2>grupe od posebnog interesa uključuju 4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil i 3,4-bisoksimetilen e-fenil.
[0117] Kada je R<2>C1-5zasićeni alifatski alkil, to može biti metil, etil, propil, butil ili pentil. U nekim otelotvorenjima, to može biti metil, etil ili propil (n-pentil ili izopropil). U nekim od ovih otelotvorenja, on može biti metil. U drugim otelotvorenjima, to može biti butil ili pentil, koji može biti ravan ili razgranat.
[0118] Kad je R<2>zasićeni C3-6cikloalkil, to može biti ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil ili cikloheksil. U nekim otelotvorenjima, to može biti ciklopropil.
[0119] Gde je R<2>
svaki od R<21>, R<22>i R<23>se nezavisno bira između H, C1-3zasićenog alkila, C2-3alkenila, C2-3alkinila i ciklopropila, gde ukupan broj atoma ugljenika u R<2>grupi nije veći od 5. U nekim otelotvorenjima, ukupan broj atoma ugljenika u R<2>grupi nije veći od 4 ili ne veći od 3.
[0120] U nekim otelotvorenjima, jedan od R<21>, R<22>i R<23>je H, a druge dve grupe su odabrane između H, C1-3zasićenog alkila, C2-3alkenila, C2-3alkinila i ciklopropila.
[0121] U drugim otelotvorenjima, dva od R<21>, R<22>i R<23>su H, s tim što je druga grupa izabrana iz grupe koju čine H, C1-3zasićeni alkil, C2-3alkenil, C2-3alkinil i ciklopropil.
[0122] U nekim otelotvorenjima, grupe koje nisu H se biraju između metila i etila. U nekim od ovih otelotvorenja, grupe koje nisu H su metil.
1
[0123] U nekim otelotvorenjima, R<21>je H.
[0124] U nekim otelotvorenjima, R<22>je H.
[0125] U nekim otelotvorenjima, R<23>je H.
[0126] U nekim otelotvorenjima, R<21>i R<22>su H.
[0127] U nekim otelotvorenjima, R<21>i R<23>su H.
[0128] U nekim otelotvorenjima, R<22>i R<23>su H.
[0129] R<2>grupa od posebnog interesa je:
[0130] Gde je R<2>
jedan od R<25a>i R<25b>je H, a drugi je odabran između: fenila, koji je fenil opciono supstituisan sa grupom odabranom od halo, metil, metoksi; piridil; i tiofenil. U nekim otelotvorenjima, grupa koja nije H je opciono supstituisani fenil. Ako je fenil po izboru supstituent halo, poželjno je fluoro. U nekom otelotvorenju, fenilna grupa je nesupstituisana.
[0131] Gde je R<2>
jedan od R<25a>i R<25b>je H, a drugi je odabran između: fenila, koji je fenil opciono supstituisan sa grupom odabranom od halo, metil, metoksi; piridil; i tiofenil. U nekim otelotvorenjima, grupa koja nije H je opciono supstituisani fenil. Ako je fenil po izboru supstituent halo, poželjno je fluoro. U nekom otelotvorenju, fenilna grupa je nesupstituisana.
[0132] Kada postoji jednostruka veza između
gde su R<26a>i R<26b>nezavisno izabrani između H, F, C1-4zasićenog alkila, C2-3alkenila, koje su alkilne i alkenilne grupe opciono supstituisane grupom odabranom između C1-4alkil amido i C1-4alkil estara; ili, kada je jedan od R<26a>i R<26b>H, drugi je odabran od nitrila i C1-4alkil estra.
[0133] U nekim otelotvorenjima, poželjno je da R<26a>i R<26b>budu H.
[0134] U drugim otelotvorenjima, poželjno je da su R<26a>i R<26b>metil.
[0135] U daljim otelotvorenjima, poželjno je da je jedan od R<26a>i R<26b>H, a drugi je izabran od C1-4zasićenog alkila, C2-3alkenila, koje su alkil i alkenil grupe po izboru supstituisane. U ovim daljim otelotvorenjima, može biti dalje poželjno da se grupa koja nije H bira između metila i etila.
R<12>
[0136] Gornje preferencije za R<2>se podjednako odnose na R<12>.
[0137] U jednom otelotvorenju pronalaska, DL je
1
Punjenje leka
[0138] Punjenje leka je prosečan broj PBD lekova po antitelo, npr. antitelo.
[0139] Prosečan broj lekova po antitelu u preparatima ADC iz reakcija konjugacije može se okarakterisati konvencionalnim sredstvima kao što su UV, reverzna fazna HPLC, HIC, masena spektroskopija, ELISA test i elektroforeza. Kvantitativna raspodela ADC u smislu p takođe se može odrediti. ELISA-om može se odrediti prosečna vrednost p u određenom preparatu ADC (Hamblett i dr. (2004) Clin. Cancer Res. 10:7063-7070; Sanderson i dr. (2005) Clin. Cancer Res. 11:843-). 852). Međutim, raspodela vrednosti p (leka) nije uočljiva zbog vezivanja antitela i antigena i ograničavanja detekcije ELISA. Takođe, ELISA test za otkrivanje konjugata antitelo-lek ne određuje gde su delovi leka vezani za antitelo, kao što su fragmenti teškog lanca ili lakog lanca, ili određeni aminokiselinski ostaci. U nekim slučajevima, razdvajanje, prečišćavanje i karakterizacija homogenog ADC gde je p određena vrednost od ADC sa drugim opterećenjima lekovima može se postići sredstvima kao što su HPLC reverzne faze ili elektroforeza. Takve tehnike su takođe primenljive na druge vrste konjugata.
[0140] Za prisutne konjugate antitelo-lek, p je ograničen brojem mesta vezivanja na antitelu, tj. Brojem azidnih grupa. Na primer, antitelo može imati samo jednu ili dve azidne grupe za koje može biti vezan lekoviti linker [0141] Tipično, manje od teorijskog maksimuma ostataka leka je konjugovano sa antitelom tokom reakcije konjugacije. Opterećenje (odnos leka / antitela) ADC-a može se kontrolisati na nekoliko različitih načina, uključujući: (i) ograničavanje molarnog viška intermedijera veznik leka (DL) ili reagensa veznika u odnosu na antitelo, i (ii) ograničavanje konjugacije vreme reakcije ili temperatura.
[0142] Gde više od jedne nukleofilne ili elektrofilne grupe antitela reaguje sa lek-linker međujedinjenjem, ili linker reagensom praćeno reagensom dela leka, rezultujući produkt je smeša ADC jedinjenja sa distribucijom delova leka zakačenih za antitelo, npr.1, 2, 3, itd. Metode tečne hromatografije kao što je polimerazna reverzna faza (PLRP) i hidrofobna interakcija (HIC) mogu odvojiti jedinjenja u smeši punjenjem vrednosti leka. Preparacije ADC sa jednom vrednošću punjenja leka (p) mogu biti izolovane, pa ipak, ove vrednosti ADC mogu biti heterogene smeše zbog delova leka koji se preko linkera mogu zakačiti na različitim mestima antitela.
[0143] Stoga kompozicije antitelo-lek konjugata pronalaska uključuju smeše jedinjenja antitelo-lek konjugata gde antitelo ima jednu ili više PBD delova leka i gde delovi leka mogu biti zakačeni za antitelo na različitim aminokiselinskim ostacima.
[0144] U jednom otelotvorenju, prosečan broj dimera pirolobenzodiazepinskih grupa po antitelu je u opsegu 1 do 8. U nekim otelotvorenjima opseg je odabran od 1 do 4, 1 do 4, 2 do 4 i 1 do 3.
[0145] U nekim otelotvorenjima postoje jedna ili dve dimerne pirolobenzodiazepinske grupe po antitelu. Ostale uključene forme
[0146] Ukoliko drugačije nije napomenuto, obuhvaćeni prethodnim su dobro poznate joni, soli, rastvori zaštićene forme ovih supstituenata. Na primer, referenca ka karboksilnoj kiselini (-COOH) takođe obuhvata anjonsku (karboksilatnu) formu (-COO-), so ili rastvor, kao i konvencionalno zaštićene forme. Slično,
1
referenca ka amino grupama obuhvata protonovanu formu (-N+HR<1>R<2>), solili rastvora amino grupa, na primer, hidrohlornu so, kao i konvencionalno zaštićene forme amino grupa. Slično, referenca ka hidroksilnim grupama obuhvata anjonsku formu (-O-), soli ili rastvora, kao i konvencionalno zaštićene forme.
Soli
[0147] Može biti pogodno ili poželjno da se pripremi, prečisti, i/ili rukuje sa odgovarajućom soli aktivnog jedinjenja, na primer, farmaceutski prihvatljivom soli. Primeri farmaceutski prihvatljivih soli su diskutovani u Berge, i sar., J. Pharm. Sci., 66, 1-19 (1977).
[0148] Na primer, ako jedinjenje anjonsko, ili ima funkcionalnu grupu koja može biti anjonska (npr., -COOH može biti -COO-), onda se so može formirati sa odgovarajućim katjonom. Primeri pogodnih neorganskih katjona uključuju, ali nisu ograničeni na, jone alkalnih metala kao što su Na+ i K+, alkalne zemljane katjone kao što su Ca2+ i Mg2+, ili druge katjone kao što je Al3+. Primeri odgovarajućih organskih katjona uključuju, ali nisu ograničeni na, amonijum jon (tj., NH4+) i supstituisane amonijum jone (npr., NH3R+, NH2R<2>+, NHR<3>+, NR<4>+). Primeri nekih odgovarajućih supstituisanih amonijum jona su oni izvedeni iz: etilamina, dietilamina, dicikloheksilamina, trietilamina, butilamina, etilendiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina, benzilamina, fenilbenzilamina, holina, meglumina, i trometamina, kao i aminokiselina, kao što su lizin i arginin. Primer čestog kvaternog amonijum jona je N(CH3)4<+>.
[0149 Ukoliko jedinjenje katjon, ili ima funkcionalnu grupu koja može biti katjonska (npr., -NH2može biti -NH3+), onda se so može formirati sa odgovarajućim anjonom. Primeri pogodnih neorganskih anjona uključuju, ali nisu ograničeni, na one izvedene iz sledećih neorganskih kiselina: hidrohlorne, hidrobromne, hidrojodne, sumporne, sumporaste, azotne, azotaste, fosforne, i fosforaste.
[0150] Primeri odgovarajućih organskih anjona uključuju, ali nisu ograničeni na, one izvedene iz sledećih organskih kiselina: 2-acetiokibenzoeve, sirćetne, askorbinske, asparaginske, benzoeve, kamfosulfonske, cinamične, limunske, edetične, etandisulfonske, etansulfonske, fumarne, glukheptonske, glukonske, glutaminke, glikolne, hidroksimaleinske, hidroksinaftalen karboksilne, izotonične, mlečne, laktobionska, laurične, maleinske, malične, metansulfonske, maleinske, oleinske, oksalne, palmitinske, pamoične, pantotenske, fenilacetatne, fenilsulfonske, propionske, piruvatne, salicilne, stearinske, sukcinske, sulfanilne, vinske, toluensulfonske, i valerijanska. Primeri odgovarajućih polimernih organskih anjona uključuju, , ali nisu ograničeni na, one izvedene iz sledećih polimernih kiselina: taninske kiseline, karboksimetil celuloze.
Rastvori
[0151] Može biti pogodno ili poželjno da se pripremi, prečisti, i/ili rukuje sa odgovarajući rastvor aktivnog jedinjenja. Termin „rastvor“ se ovde koristi u konvencionalnom smislu i odnosi se na kompleks rastvora (npr., aktivno jedinjenje, so aktivnog jedinjenja) i rastvarača. Ako je rastvarač voda, rastvora se može nazivati hidratom, na primer, mono-hidrat, di-hidrat, tri-hidrat, itd.
[0152] Pronalazak obuhvata jedinjenja gde rastvarač dodaje preko imina vezu sa PBD delom, koji je prikazan niže gde je rastvarač voda ili alkohol (R<A>OH, gde je R<A>je C1-4alkil):
Ove forme se mogu nazvati karbinolaminskim i etrom karbinolaminskim formama PBD (kao što je opisano u sekciji koja se odnosi na R<10>iznad). Ravnoteža ovih formi zavisi od uslova u kojima se jedinjenja nalaze kao i od prirode njihovih delova.
[0153] Konkretno ova jedinjenja mogu biti izolovana u vidu čvrste forme, na primer, liofilizacijom.
Izomeri
[0154] Neka jedinjenja pronalaska mogu postojati u jednom ili više određenih geometrijskih, optičkih, enantiomernih, diasteromernih, epidermnih, atropinih, stereoizomernih, tautomernih i konformacionih, ili anomernih oblika, uključujući ali ne ograničavajući se na, cis-i trans- forme, E- i Z- forme, c -, t-, i r- forme; endo- i egzo- forme; R-, S-, i mezo- forme; D- i L- forme; d- i l- forme; (+) i (-) forme; keto-, enol-, i enolatforme; sin- i anti- forme; sinhlinalne i antihlinalne forme; α- i β- forme; aksijalne i ekvatorijalne forme; brod,
1
stolica, uvijene, koverat-, polu-stolica forme, i njihove kombinacije, u daljem tekstu kolektivno naznačeni kao „izomeri“ (ili „izomerni oblici“
[0155] Termin „hiralno“ se odnosi na molekule koji imaju osobine u da se ne mogu preklopiti sa svojim likom u ogledalu, dok se termin “ahiralan” odnosi na molekule koji se mogu preklopiti sa svojim likom u ogledalu.
[0156] Termin „stereoizomeri“ se odnosi na jedinjenja koja imaju istu hemijsku građu, ali se razlikuju s obzirom na aranžman atoma ili grupa u prostoru.
[0157] „Diastereomeri“; se odnose na stereoizomere sa dva ili više hiralnih centara i čiji molekuli nosi slike u ogledalu jedni drugima. Diastereomeri imaju različite fizičke karakteristike, npr. tačke topljenja, ključanja, spektralne karakteristike, i reaktivnosti. Smeše diasteromera se mogu razdvojiti korišćenjem analitičkih procedura sa visokom rezolucijom kao što su elektroforeza i hromatografija.
[0158] „Enantiomeri“; se odnosi na dva stereoizomera jedinjenja koji nisu preklopljive slike jedan drugog u ogledalu.
[0159] Stereohemijske definicije i konvencije korišćene ovde generalno prate S. P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, New York; i Eliel, E. i Wilen, S., "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994. Jedinjenja pronalaska mogu sadržati asimetrične ili hiralne centre, i stoga postojati u različitim stereoizomernim formama. Sve stereoizomerne forme jedinjenja pronalaska, uključujući ali se ne ograničavajući na, diastereomere, enantiomere i atropizomere, kao i njihove smeše kao što su racemske smeše, su deo predmetnog pronalaska. Mnoga organska jedinjenja postoje u optički aktivnim formama, tj., imaju sposobnost da rotiraju ravan polarizujuće svetlosti. U opisu optički aktivnih jedinjenja, prefiksi D i L, ili R i S, se koriste kako bi se označila apsolutna konfiguracija molekula oko njegovog hiralnog centra/centara. Prefiksi d i l ili (+) i (-) se koriste u obeležavanju znaka rotacije oko ravni polarizujuće svetlosti od strane jedinjenja, sa (-) ili 1 što znači da je jedinjenje levorotatorno. Jedinjenje sa prefiksom (+) ili d je dekstrorotatorno. Za datu hemijsku strukturu, ovi stereoizomeri su identični sem što su slike u ogledalu jedan drugom. Specifični stereoizomer se može nazvati enantiomerom, i smeša takvih izomera se često zove enantiomerna smeša.50:50 smeša enantiomera se naziva racemska smeša ili racemat, i može se naći kada nije bilo stereoselekcije ili stereospecifičnosti u hemijskoj reakciji ili procesu. Termini “racemska smeša” i “racemat” se odnose na ekvimolarne smeše dve enantiomerne vrste, lišene optičke aktivnosti.
[0160] Primetite da su, sa izuzetkom tautomernih formi kao što je diskutovano u daljem tekstu, koje su specifično izuzete iz termina “izomeri”, kako se ovde koristi, forme strukturni (ili konstitucioni)izomeri (tj., izomeri koje se razlikuju u vezi između dva atoma pre nego u poziciji atoma u prostoru). Na primer, referencu za metoksi grupu, -OCH3, ne treba tumačiti kao referencu za njegov strukturni izomer, hidroksimetil grupu, -CH2OH. Slično, referencu za ortohlorofenil ne treba tumačiti kao referencu za njegov strukturni izomer, metahlorofenil. Ipak, referenca za klasu struktura može uključivati strukturno izomerne forme koje spadaju u tu klasu (npr., C1-7alkil obuhvata n-propil izo-propil; butil obuhvata n-, izo-, sek-, i tert-butil; metoksifenil obuhvata orto-, meta-, i para-metoksi-fenil).
[0161] Izuzeci iz teksta iznad se ne odnose na tautomerne forme, na primer, keto-, enol-, i enolat- forme, kao kod, na primer, sledećih tautomernih parova: keto/enol (ilustrovano ispod), imin/enamin, amid/imino alkohol, amidin/amidin, nitrozo/oksime, tioketon/enetiol, N-nitrozo/hiroksiazo, i nitro/aci-nitro.
[0162] Termin „tautomer“ ili „ tautomerska forma“ se odnosi na strukturne izomera različitih energija koje su razmenljivi preko niske energetske barijere. Na primer, proton tautomer ( takođe poznat kao prototropski tautomer) obuhvata međukonverziju putem migracije protona, kao što je keto - ENOL i imin - enamin izomerizacija. Valence tautomera uključuju inter konverziju putem reorganizacije nekih od vezivnih elektrona.
[0163] Primetite da su u terminom “izomer” specifično obuhvaćena jedinjenja sa jednom ili više izotopnih zamena. Na primer, H može biti u bilo kojoj izotopnoj formi, uključujući<1>H,<2>H(D), i<3>H(T); C može biti u bilo kojoj izotopnoj formi, uključujući<12>C;<13>C, i<14>C; O može biti u bilo kojoj izotopnoj formi, uključujući<16>O i<18>O; i slično.
2
[0164] Primeri izotopa koji mogu biti inkorporirani u jedinjenje pronalaska obuhvataju vodonik, ugljenik, azot, kiseonik, fosfor, fluor, i hlor, kao što su, ali nisu ograničeni na 2H (deuterijum, D), 3H (tricijum), 11C, 13C, 14C, 15N, 18F, 31P, 32P, 35S, 36Cl, i 125I. Različita izotopski obeležena jedinjenja predmetnog pronalaska, na primer ona koja imaju radioaktivne izotope kao što su 3H, 13C, i 14C su inkorporirana. Takva izotopski obeležja jedinjenja mogu biti korisna u metaboličkim studijama, studijama reakcionih kinetika, detekciji tehnikama slikanja, kao što su pozitron emisiona tomografija (PET) ili jednofotonska emisiona kompjuterizovana tomografija (SPECT) uključujući eseje distribucije leka ili supstrata u tkivu, ili radioaktivne tretmane pacijenata. Deuterijumski obeležena ili supstituisana terapeutska jedinjenja pronalaska mogu imati poboljšane DMPK (farmakokinetika i metabolizam leka) osobine, vezano za distribuciju, metabolizam, i ekskreciju (ADME). Zamena sa težim izotopima kao što je deuterijum može dati izvesne terapeutske prednosti kao rezultat veće metaboličke stabilnosti, na primer povećanog in vivo polu-života ili smanjenih doznih zahteva. 18F obeleženo jedinjenje može biti korisno u PET ili SPECT studijama. Izotopski obeležena jedinjenja pronalaska i prolekovi mogu generalno biti pripremljeni praćenjem procedura koje su date šemama ili kroz pripreme i preparacije opisane ispod zamenama brzo dostupnog izotopski obeleženog reagensa sa neizotopski obeleženim reagensom. Dalje, zamene sa težim izotopima posebno sa deuterijumom (tj., 2H ili D) mogu dati izvesne terapeutske prednosti kao rezultat veće metaboličke stabilnosti, na primer povećanog in vivo polu-života ili smanjene potrebne doze ili poboljšanja terapeutskog indeksa. Smatra se da je deuterijum u ovom kontekstu supstituent. Koncentracije takvog težeg izotopa, posebno deuterijuma, mogu biti definisane izotopski obogaćenim faktorom. U jedinjenjima ovog pronalaska bilo koji atom koji nije specifično dizajniran kao poseban izotop se smatra reprezentativnim stabilnim izotopom predmetnog atoma.
[0165] Ukoliko drugačije nije napomenuto, referenca ka posebnom jedinjenju obuhvata sve takve izomerne forme, uključujući (u potpunost ili delimično) racemske i druge smeše. Metode pripreme (npr. asimetrična sinteza) i separacije (npr. frakciona kristalizacija i hromatografija) takvih izomera je ili poznata u oblasti ili se brzo dobija adaptiranjem metoda datih ovde, ili poznatih metoda, ili poznatog načina.
Biološka aktivnost
Eseji ćelijske proliferacije in vitro
[0166] Generalno, citotoksična ili citostatska aktivnost antitelo-lek konjugata (ADC) je određena: izlaganjem sisarskih ćelija sa receptorskim proteinima, antitelu ADC u medijumu ćelijske kulture; održavanje ćelija u kulturi tokom perioda od oko 6 sati do oko 5 dana; merenjem ćelijske vijabilnosti (proliferacije), citotoksičnosti, indukcijom apoptoze (aktivacija kaspaza), ADC pronalaska.
[0167] In vitro potentnost antitelo-lek konjugata je određivana esejima ćelijske proliferacije . CellTiterGlo® Luminescent Cell Viability Assay je komercijalno dostupan (Promega Corp., Madizon, WI), metod homogenog eseja, baziran na rekombinantnoj ekspresiji Coleoptera luciferaze (SAD 5583024; SAD 5674713; SAD 5700670). Ovaj esej ćelijske proliferacije određuje broj vijabilnih ćelija u kulturi na osnovu kvantifikacije prisutnog ATP-a, koji je indikator metabolički aktivnih ćelija (Crouch i sar, J. Immunol. Metho., 160: 81-88 (1993); SAD 6602677). The CellTiter-Glo® Assay je urađen u 96 bunarića formatu, što je dopustilo automatsko snimanje (HTS) (Cree i sar, AntiCancer Drugs, 6:398-404 (1995)). Procedura homogenog eseja obuhvata dodavanje jednog reagensa (The CellTiter-Glo® Reagent) direktno u ćelijsku kulturu u medijumu sa serumom. Ispiranje ćelija, uklanjanje medijuma i višestruki koraci u pipetiranju nisu neophodni. Sistem detektuje i 15 ćelija/bunariću u 384-bunarića ploči tokom 10 minuta nakon dodavanja reagensa i mešanja. Ćelije mogu biti tretirane u kontinuitetu sa ADC, ili mogu biti tretirane i odvojene od ADC. Generalno, ćelije tretirane kratko, tj. tokom 3 sata, su pokazale iste efekte kao i kontinuirano tretirane ćelije.
[0168] Homogeni „dodaj-mešaj-meri“ format je rezultirao u ćelijskoj lizi generisanju luminiscentnog signala proporcionalnog količini prisutnog ATP. Količina ATP je direktno proporcionalna broju ćelija prisutnih u kulturi. CellTiter-Glo®Assay daje luminiscentni signal tipa „glow“, koji je proizvod reakcije luciferaze, koja ima polu-život generalno veći od 5 sati, i zavisnosti od tipa ćelija i korišćenog medijuma. Vijabilne ćelije se ogledaju relativnim luminiscentnim jedinicama (RLU). Supstrat, Beetle Luciferin, je oksidativno dekarboksilisan rekombinantnom luciferazom svica sa pratećom konverzijom ATP do AMP i generisanjem fotona.
[0169] In vitro snaga konjugata antitelo-lek takođe se može meriti analizom citotoksičnosti. Gajene adherirane ćelije se isperu sa PBS, odvoje se tripsinom, razblaže se u potpunom medijumu, koji sadrži 10% FCS, centrifugiraju, ponovo suspenduju u svežem medijumu i broje hemocitometrom. Suspenzijske kulture se računaju direktno. Suspenzije monodisperznih ćelija pogodne za brojanje mogu zahtevati mešanje suspenzije ponovljenom težnjom da se razbiju grupice ćelija.
[0170] Ćelijska suspenzija se razblaži do željene gustine setve i dozira (100 µl po udubljenju) u crne ploče sa 96 udubljenja. Ploče prilepljenih ćelijskih linija inkubiraju se preko noći kako bi se omogućilo prijanjanje. Suspenzijske ćelijske kulture mogu se koristiti na dan setve.
[0171] Osnovni rastvor (1 ml) ADC (20 µg / ml) napravljen je u odgovarajućem medijumu ćelijske kulture. Serijska desetostruka razblaženja osnovnog ADC se prave u epruvetama za centrifugiranje od 15 ml serijskim prenošenjem 100 µl do 900 µl medijuma ćelijske kulture.
[0172] Četiri ponovljena udubljenja svakog razblaženja ADC (100 ul) se izdaju u crne ploče sa 96 udubljenja, prethodno obložene ćelijskom suspenzijom (100 ul), što rezultira konačnom zapreminom od 200 µl. Kontrolna udubljenja dobijaju medijum ćelijske kulture (100 µl).
[0173] Ako je vreme udvostručavanja ćelijske linije veće od 30 sati, ADC inkubacija traje 5 dana, u suprotnom se vrši četvorodnevna inkubacija.
[0174] Na kraju perioda inkubacije, procena održivosti ćelija se procenjuje testom Alamar blue. AlamarBlue (Invitrogen) se nanosi na celu ploču (20 µl po udubljenju) i inkubira 4 sata. Alamarno plava fluorescencija se meri pri pobuđivanju 570nm, emisija 585nm na čitaču Varioskan fleš ploča. Procenat preživljavanja ćelija izračunava se iz srednje fluorescencije u udubljenjima tretiranim ADC-om u poređenju sa srednjom fluorescencijom u kontrolnim udubljenjima.
Korišćenje
[0175] Konjugati pronalaska se mogu koristiti kako bi se dobilo PBD jedinjenje na ciljnoj poziciji.
[0176] Konjugati pronalaska se mogu koristiti kako bi se dobilo PBD jedinjenje na ciljnoj poziciji.
[0177] U jednom aspektu antigen je odsutan ili prisutan pri smanjenom nivou u ne-proliferišućoj ćelijskoj populaciji u poređenju sa količinom antigena prisutnog u proliferišućoj ćelijskoj populaciji, na primer populaciji tumorskih ćelija.
[0178] Na ciljnoj poziciji linker može biti uklonjen tako da otpusti jedinjenje formule (D). Stoga, konjugat se može koristiti selektivno kako bi se dobilo jedinjenje formule (D) na ciljnoj lokaciji.
[0179] Linker može biti uklonjen enzimom prisutnim na ciljnoj lokaciji.
[0180] Ciljna pozicija može biti in vitro, in vivo ili ex vivo.
[0181] Antitelo-lek (ADC) jedinjenja pronalaska obuhvataju ona sa antikancerogenom aktivnošću. Posebno, jedinjenja obuhvataju antitelo konjugovano sa, tj. kovalentno vezano za linker, PBD delom leka, tj. toksinom. Kada lek nije konjugovan sa antitelom, PBD lek ima citotoksični efekat. Biološka aktivnost PBD dela leka je stoga modulirana konjugacijom sa antitelom. Antitelo-lek konjugati (ADC) pronalaska selektivno dostavljaju efektivne doze citotoksičnog agensa tumorskom tkivu sa većom selektivnošću, tj. pri nižim efikasnim dozama.
[0182] Stoga, u jednom aspektu, predmetni pronalazak pruža konjugat jedinjenje kao što je ovde opisano za korišćenje prilikom terapije.
[0183] U daljem aspektu takođe je dato konjugat jedinjenje kako je opisano ovde za korišćenje u tretmanima proliferativnih bolesti. Takođe je ovde obelodanjeno korišćenje konjugat jedinjenja u proizvodnji medikamenata za tretman proliferativnih bolesti.
[0184] Uobičajene veštine u oblasti omogućavaju da se brzo odredi da ili ne kandidat konjugat tretira proliferativno stanje bilo kog ćelijskog tipa. Na primer, eseji koji se mogu konvencionalno koristiti kako bi se ocenila aktivnost određenog jedinjenja su opisani u primerima ispod.
[0185] Termin “proliferativno oboljenje" se odnosi na neželjenu i nekontrolisanu ćelijsku proliferaciju abnormalnih ili prekomeran broj ćelija u višku koje su neželjene, kao što su, neoplastični hiper plastični rast. Bilo in vitro ili in vivo.
[0186] Primeri proliferativnih stanja obuhvataju, ali nisu ograničeni na, benigna, pre-maligna, i maligna stanja ćelijske proliferacije, uključujući ali se ne ograničavajući na, neoplazme i tumore (npr. histocitoma, glioma, astrocitoma, osteoma), kancere (npr. kancer pluća, sitno-ćelijski kancer pluća, gastrointestinalni kancer, kancer creva, kancer kolona, karcinom dojki, karcinom jajnika, kancer jednjaka, kancer prostate, testikularni kancer, kancer jetre, kancer bubrega, kancer bešike, kancer pankreasa, kancer mozga, sarkom, osteosarkom, Kaposijev sarkom, melanom), limfome, leukemije, psorijaze, bolesti kostiju, fibroproliferativne poremećaje (npr. vezivnog tkiva), i ateroskleroza. Kanceri od posebnog interesa obuhvataju, ali nisu ograničeni na, leukemije i kancere jajnika.
[0187] Ma koji tip ćelija može biti tretiran, uključujući ali se ne ograničavajući na, pluća, gastrointestinalne (uključujući, npr. creva, kolon), dojke (mlečne), jajnika, prostate, jetre (hepatične), bubrega (renalne), bešike, pankreasa, mozga, i kože.
[0188] Poremećaji od posebnog interesa uključuju, ali nisu ograničeni na rak, uključujući metastatske karcinome i metastatske ćelije karcinoma, kao što su ćelije tumora u cirkulaciji, za koje se može utvrditi da cirkulišu u telesnim tečnostima poput krvi ili limfe. Rak od posebnog interesa uključuje rak dojke, pluća, želuca, glave i vrata, kolorektalni, bubrežni, rak pankreasa, materice, jetre, bešike, endometrijuma i prostate, kao i limfomi (npr. ne-Hodgkinov limfom, NHL) i leukemija (posebno akutna mijeloidna leukemija, AML).
[0189] Ostali poremećaji od interesa uključuju bilo koje stanje u kojem je Axl prekomerno izražen ili u kome će antagonizam Axl pružiti kliničku korist. Tu spadaju imunološki poremećaji, kardiovaskularni poremećaji, tromboza, dijabetes, poremećaji imunološkog punkta, fibrotični poremećaji (fibroza) ili proliferativne bolesti poput karcinoma, posebno metastatskog karcinoma. Dalje, poznato je da Axl igra ulogu u mnogim karcinomima epitelnog porekla.
[0190] Fibrotični poremećaji od interesa uključuju strabmisus, sklerodermu, keloid, nefrogenu sistemsku fibrozu, plućnu fibrozu, idiopatsku plućnu fibrozu (IPF), cističnu fibrozu (CF), sistemsku sklerozu, srčanu fibrozu, bezalkoholni steatohepatitis (NASH), druge vrste jetrene fibroze , primarna bilijarna ciroza, bubrežna fibroza, rak i ateroskleroza. Kod ovih bolesti, hronični razvoj fibroze u tkivu dovodi do značajnih promena u arhitekturi pogođenih organa i posledično uzrokuje oštećenje funkcije organa. Kao rezultat ovog procesa kontinuiranog odbacivanja organa, mnoge bolesti koje uključuju fibrozu su često progresivna i imaju lošu dugoročnu prognozu (videti Rockey, D.C., Bell, P.D. i Hill, J.A. (2015), N. Engl. Med., Vol. 372, str. 1138-1149).
[0191] Smatra se da se antitelo-lek konjugat (ADC) predmetnog pronalaska može koristiti u tretmanu različitih bolesti ili poremećaja, npr. onih koji se karakterišu prekomernom ekspresijom tumorskog antigena. Primer stanja ili hiperproliferativnih poremećaja uključuju benigne ili maligne tumore; leukemiju, hematološke i limfoidne malignitete. Druge uključuju neuronalne, glijske, astrocitne, hipotalamusne, žlezdane, makrofagne, epitelne, stromalne, blastocelične, inflamatorne, angiogene, imunološke, uključujući autoimuno, poremećaje.
[0192] Generalno, bolest ili poremećaj koji se tretira je hiperproliferativna bolest kao što je kancer. Primeri kancera koji se ovde tretiraju obuhvataju, ali nisu ograničeni na, karcinom, limfom, blastom, sarkoma, i leukemiju ili limfoidne malignitete. Specifičniji primeri kancera obuhvataju kancer skvamoznih ćelija (npr. kancer epitelnih skvamoznih ćelija), kancer pluća uključujući sitno-ćelijski kancer pluća, nesitno-ćelijski kancer pluća, adenokarcinom pluća i skvamozni karcinom pluća, kancer peritoneuma, hepatocelularni kancer, gastričnili stomačni kancer uključujući gastrointestinalni kancer, pankreasni kancer, glioblastom, cervikalni kancer, kancer jajnika, kancer jetre, kancer bešike, hepatom, kancer dojki, kancer kolona, kancer rektuma, kolorektalni kancer, endometrijalnili karcinom materice, karcinom pljuvačnih žlezda, kancer bubrega ili renalni kancer, kancer prostate, vulvalni kancer, tireoidni kancer, hepatični karcinom, analni karcinom, penilni karcinom, kao i kancer glave i vrata.
[0193] Autoimune bolesti za čiji tretman ADC jedinjenja mogu da se koriste obuhvataju reumatološka oboljenja (kao što je, na primer, reumatoidni artritis, Sjögrenov sindrom, sklerodermu, lupus kao što je SLE i lupus nephritis, polymyositis/dermatomyositis, krioglobulinemiju, sindrom anti-fosfolipidnog antitela, i psorijazni artritis), osteoartritis, autoimuna gastrointestinalne i poremećajetre (kao što je, na primer, inflamatorna bolest creva (npr. ulcerativni kolitis i Kronova bolest), autoimuni gastritis i perniciozna anemia, autoimuni hepatitis, primarna bilijarna ciroza, primarni sklerotični holangitis, i celijakija), vasculitis (kao što je, na primer, ANCA-asocirani vasculitis, uključujući Churg-Strauss vasculitis, Wegenerovu granulomatozu, i poliarteritis), autoimune neurološke poremećaje (kao što je, na primer, multipla skleroza, opsoclonus myoclonus sindrom, myasthenia gravis, neuromyelitis optica, Parkinsonova bolest, Alchajmerova bolest, i autoimune polineuropatije), renalni poremećaji (kao što je, na primer, glomerulonephritis, Goodpasture-ov sindrom, i Bergerova bolest), autoimuna dermatološka oboljenja (kao što je, na primer, psorijaza, urticaria, koprivnjača, pemphigus vulgaris, bulozni pemfigoid, i kožni lupus erythematosus), hematološke poremećaje (kao što je, na primer, trombocitopenija purpura, trombotska trombocitopenija purpura, post-transfuziona purpura, i autoimuna hemolitička anemija), ateroskleroza, uveitis, autoimune bolesti sluha (kao što je, na primer, bolest unutrašnjeg uva i gubitak sluha), Behčetova bolest, Raynaudov sindrom, transplantacija organa, i autoimuna endokrina oboljenja (kao što je, na primer, autoimune bolesti povezane sa dijabetesom kao što je insulin-zavisni diabetes mellitus (IDDM), Addison-ova bolest, i autoimuna tireoidna bolest (npr. Graves-ova
2
bolest i tireoiditis)). Poželjnije za tretman bolesti obuhvataju, na primer, reumatoidni artritis, ulcerativni kolitis, ANCA-asociran vasculitis, lupus, multiplu sklerozu, Sjögren-ov sindrom, Graves-ovi bolest, IDDM, pernicioznu anemiju, tireoiditis, i glomerulonephritis.
Metode tretmana
[0194] Konjugati predmetnog pronalaska mogu biti korišćeni kao terapijski metod. Ovde je takođe obelodanjen metod tretmana koji se sastoji od davanju terapeutski-efikasne količine konjugata jedinjenja pronalaska subjektu sa potrebom za tretmanom. Termin “terapeutski efikasna količina" je količina dovoljna da iskaže pozitivan efekat kod pacijenta. Takav efekat može biti najmanje ublažavanje najmanje jednog simptoma. Količina koja se daje, i mera i vreme davanja, će zavisiti od prirode i težine bolesti koja se leči. Recept tretmana, npr. odluka o dozi, je u odgovornost lekara.
[0195] Jedinjenje pronalaska se može dati samo ili u kombinaciji sa drugim tretmanima, ili simultano ili u sekvencama u zavisnosti od stanja koje se tretira. Primeri tretmana i terapija obuhvataju, ali nisu ograničeni na, hemoterapiju (davanje aktivnih agenasa, uključujući, npr. lekove, kao što hemoterapeutici); operaciju; i terapiju radijacijom.
[0196] “Hemoterapeutski agens” je hemijsko jedinjenje korisno u tretmanu kancera, bez obzira na mehanizam dejstva. Klase hemoterapeutskih agenasa uključuju, ali nisu ograničen na: alkilujuće agense, antimetabolite, alkaloide biljaka otrove vretena, citotoksične/antitumorske antibiotike, inhibitore topoizomeraze, antitela, fotosenzitizora, i kinazne inhibitore. Hemoterapeutski agensi obuhvataju jedinjenja koja se koriste u “ciljanoj terapiji” i konvencionalnoj hemoterapiji.
[0197] Primeri hemoterapeutskih agenasa uključuju: erlotinib (TARCEVA®), Genentech/OSI Pharm.), docetaksel (TAXOTERE®, Sanofi-Aventis), 5-FU (fluorouracil, 5-fluorouracil, CAS Br.51-21-8), gemcitabin (GEMZAR®, Lilly). PD-0325901 (CAS Br. 391210-10-9, Pfizer), cisplatin (cis-diamin,dihloroplatinum(II), CAS Br. 15663-27-1), karboplatin (CAS Br. 41575-94-4), paclitaksel (TAXOL®, Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, N.J.), trastuzumab (HERCEPTIN®, Genentech), temozolomid (4-metil-5-okso-2,3,4,6,8-pentazabiciklo [4.3.0] nona-2,7,9-trien-9 karboksamid, CAS Br. 85622-93-1, TEMODAR®, TEMODAL®, Schering Plough), tamoxifen ((Z)-2-[4-(1,2-diphenilbut-1-enil)fenoksi]-N, N-dimetilethanamin, NOLVADEX®, ISTUBAL®, VALODEX®, i doksombicin (ADRIAMYCIN®), Akti-1/2, HPPD, i rapamicin. Dalji primeri hemoterapeutskih agenasa uključuju: oksaliplatin (ELOXATIN®, Sanofi), Bortezomib (VELCADE®, Millennium Farm.), Sutent (SU11248, Pfizer), Letrozol (FE-MARA®, Novartis), Imatinib mezilat (GLEEVEC®, Novartis), XL-518 (Mek inhibitor, Exelixis, WO 2007/044515), ARRY-886 (Mek inhibitor, AZD6244, Array BioPharma, Astra Zeneca), SF-1126 (PI3K inhibitor, Semafore Pharmaceuticals), BEZ-235 (PI3K inhibitor, Novartis), XL-147 (PI3K inhibitor, Exelixis), PTK787/ZK 222584 (Novartis), fulvestrant (FASLODEX®, AstraZeneca), 5-FU (5-fluorouracil), Leukovorin (folna kiselina), Rapamicin (Sirolimus, RAPAMUNE®, Wyeth), Lapatinib (TYKERB®, GSK572016, Glaxo Smith Kline), Lonafamib (SCH 66336), Sorafenib (BAY43-9006, Bayer Labs), Irinotekan (CAMP-TOSAR®, Pfizer) i Gefitinib (IRESSA®, AstraZeneca), AG1478, AG1571 (SU 5271; Sugen), tipifarnib (ZARNESTRA™, Johnson & Johnson), ABRAXANE™ (bez kremofora), albumin-projektovane nanopartikule paklitaksela (American Pharmaceutical Partners, Schaumberg, II), vandetanib (rINN, ZD6474, ZACTIMA®, AstraZeneca), hloranmbucil, AG1478, AG1571 (SU 5271; Sugen), temsirolimus (TORISEL®, Wyeth), pazopanib (GlaxoSmithKline), canfosfamid (TELCYTA®, Telik), tiotepa i ciklosfosfamid (CYTOXAN®, NEOSAR®); alkil sulfonati kao što su busulfan, improsulfan i piposulfan; aziridini kao što su benzodopa, karbokuon, meturedopa, i uredopa; etilenimini metilamelamini uključujući altretamin, trietilenmelamin, trietilenfosforamid, trietilentiofosforamid i trimetilomelamin; acetogenini (posebno bulatacin i bulatacinon); a kamptotekin (uključujući sintetički analog topotekan); briostatin; kalistatin; CC-1065 (uključujući njegove adozelesin, karzelesin i bizelesin sintetičke analoge); kriptoficins (posebno kriptoficin 1 i kriptoficin 8); dolastatin; duokarmicin (uključujući sintetičke analoge, KW-2189 i CB1-TM1); eleuterobin; pankratistatin; a sarkodiktin; spongistatin; azotniperit kao što su hlorambucil, hlornafazin, hlorofosfamid, estramustin, ifosfamid, mehlorethamin, mehlorethamin oxide hidrohlorid, melfalan, novembikin, fenestarin, prednimustin, trofosfamid, uracil iperit; nitrozouree kao što su karmustin, hlorozotocin, fotemustin, lomustin, nimustin, i ranimnustin; antibiotiki kao što su the enedin antibiotiki (npr., kaliheamicin, posebno uključujući kaliheamicin gamalI i kaliheamicin omegaI1 (Angew Chem. Intl. Ed. Engl. (1994) 33: 183-186); dinemicin, uključujući dinemicin A; bisfosfonat, kao što su klodronati; esperamicin; kao i neokarzinostatin hromofor i srodni hromoprotein enedin antibiotik hromofori), aklacinomizini, aktinomicin, autramicin, azaserin, bleomicini, caktinomicin, karabicin, karminomicin, karzinofilin, hromomicin, daktinomicin, daunorubicin, detorubicin, 6-diazo-5-okso-L-norleukin, morfolin-doksorubicin, cijanomorfolin-doksorubicin, 2-pirolino-doksorubicin i deoksidoksorubicin), epirubicin, esorubicin, idarubicin, marselomicin, mitomicini kao što su mitomicin C, mikofenolna kiselina, nogalamicin, olivomicini, peplomicin, porfiromicin, puromicin, kvelamicin, rodorubicin, streptonigrin, streptozocin, tubercidin, ubenimeks, zinostatin, zorubicin; anti-metaboliti kao što su metotreksat i 5-fluorouracil (5-FU); folic kiselina analogs kao što su denopterin, metotreksat, pteropterin, trimetreksat; purin analogs kao što su fludarabin, 6-merkaptopurin, tiamipirin, tioguanin; pirimidin analozi kao što su ancitabin, azacitidin, 6-azauridin, karmofur, citarabin, dideoksiuridin, doksifluridin, enocitabin, floksiuridin; androgeni kao što su kalusteron, dromostanolon propionat, epitiostanol, mepitiostan, testolakton; anti-adrenalni kao što su aminoglutetimid, mitotan, trilostan; obnavljači folne kiseline kao što su frolinična kiselina; aceglaton; aldofosfamid glikozid; aminolevulinična kiselina; eniluracil; amsakrin; bestrabucil; bisantren; edatraksat; defofamin; demekolcin; diazikuon; elfornitin; eliptinium acetat; epotilon; etoglucid; galijum nitrat; hidroksiurea; lentinan; lonidainin; maitanzinoidi kao što su maitanzin i ansamitocin; mitoguazon; mitoksantron; mopidanmol; nitraerin; pentostatin; fenamet; pirarubicin; losoksantron; podofillinična kiselina; 2-etilhidrazid; prokarbazin; PSK®polisaharid kompleks (JHS Natural Products, Eugene, OR); razoksan; rizoksin; sizofiran; spirogermanium; tenuazonična kiselina; triazikuon; 2, 2’, 2"-trihlorotrietilamin; trihotekene (posebno T-2 toksin, verakurin A, roridin A i anguidin); uretan; vindezin; dakarbazin; manomustin; mitobronitol; mitolaktol; pipobroman; gacitoz; arabinozid ("Ara-C"); ciklofosfamid; tiotepa, 6-tioguanin; merkaptopurin; metotreksat; analozi platine kao što su cisplatin i karboplatin; vinblastin; etopozid (VP-16); ifosfamid; mitoksantron; vinkristin; NAVELBINE® (vinorelbin); novantron; tenipozid; edatreksat; daunomicin; aminopterin; kapecitabin (XELODA®); ibironat; CPT-11; topoizomerazninhibitor RFS 2000; difluorometilomitin (DMFO); retinoidi kao što su retinoična kiselina; i farmaceutski prihvatljive soli, kiseline i derivativi bilo čega pomenutog iznad.
[0198] Takođe obuhvaćeni definicijom "hemoterapeutski agensi" su: (i) anti-hormonalni agensi koji deluju tako da regulišu ilinhibiraju fromonsko delovanje na tumore, kao što su anti-estrogeni selektivni estrogen receptor-modulatori (SERMs), uključujući, na primer, tamoksifen (uključujući NOLVADEX®; tamoksifen citrate), raloksifen, droloksifen, 4-hidroksitamoksifen, trioksifen, keoksifen, LY117018, onapriston, i FARESTON® (toremifin citrat); (ii) aromatazne inhibitore koji inhibiraju enzim aromatazu, koji reguliše produkciju estrogena u adrenalnim žlezdama, kao što su, na primer, 4(5)-imidazoli, aminoglutetimid, MEGASE® (megestrol acetat), AROMASIN® (egzemestan; Pfizer), formestan, fadrozol, RIVISOR® (vorozol), FEMARA® (letrozol; Novartis), i ARIMIDEX® (anastrozol; AstraZeneca); (iii) anti-androgeni kao što su flutamid, nilutamid, bikalutamid, leuprolid, i goserelin; kao i troksacitabin ( 1, 3-dioksolan nukleozid citozin analog); (iv) protein kinazninhibitori kao što su MEK inhibitors (WO 2007/044515); (v) lipid kinazninhibitori; (vi) antisense oligonukleotidi, posebno oni koji inhibiraju ekspresiju gena u signalnim putevima koji su uključeni u nenormalnu ćelijsku proliferaciju, kao što su, na primer, PKC-alfa, Raf i H-Ras, kao što je oblimersen (GENASENSE®, Genta Inc.); (vii) ribozimi kao što su inhibitori VEGF ekspresije (npr., ANGIOZYME®) inhibitori HER2 ekspresije; (viii) vakcine kao što su vakcine genske terapije, na primer, ALLOVECTIN®, LEUVECTIN®, i VAXID®; PROLEUKIN® rIL-2; inhibitor topoizomeraze I kao što su LURTOTEKAN®; ABARELIX® rmRH; (ix) antiangiogenski agensi kao što su bevacizumab (AVASTIN®, Genentech); i (x) farmaceutski prihvatljive soli, kiseline i derivativi ma čega gore navedenog. Takođe obuhvaćeni definicijom "hemoterapeutski agens" su terapeutska antitela kao što su alemtuzumab (Campath), bevacizumab (AVASTIN®, Genentech); ketuksimab (ERBITUX®, Imclone); panitumumab (VECTIBIX®, Amgen), rituximab (RITUXAN®, Genentech/Biogen Idec), ofatumumab (ARZERRA®, GSK), pertuzumab (PERJETA™, OMNITARG™, 2C4, Genentech), trastuzumab (HERCEPTIN®, Genentech), tositumomab (Bexxar, Corixia), i konjugat antitela, gemtuzumab ozogamicin (MYLOTARG®, Wyeth).
[0199] Humanizovana monoklonska antitela sa terapeutskim potencijalom u vidu hemoterapeutskog agensa u kombinaciji sa konjugatima ovog pronalaska uključuju: alemtuzumab, apolizumab, aselizumab, atlizumab, bapineuzumab, bevacizumab, bivatuzumab mertansin, cantuzumab mertansin, cedelizumab, certolizumab pegol, cidfusituzumab, cidtuzumab, daklizumab, ekulizumab, efalizumab, epratuzumab, erlizumab, felvizumab, fontolizumab, gemtuzumab ozogamicin, inotuzumab ozogamicin, ipilimumab, labetuzumab, lintuzumab, matuzumab, mepolizumab, motavizumab, motovizumab, natalizumab, nimotuzumab, nolovizumab, numavizumab, ocrelizumab, omalizumab, palivizumab, pascolizumab, pecfusituzumab, pectuzumab, pertuzumab, pekelizumab, ralivizumab, ranibizumab, reslivizumab, reslizumab, resivizumab, rovelizumab, ruplizumab, sibrotuzumab, siplizumab, sontuzumab, tacatuzumab tetraketan, tadocizumab, talizumab, tefibazumab, tocilizumab, toralizumab, trastuzumab, tucotuzumab celmoleukin, tucusituzumab, umavizumab, urtoksazumab, i visilizumab.
[0200] Farmaceutski preparat shodno datom pronalasku, i za korišćenje u skladu sa predmetnim pronalaskom, može sadržati, kao dodatak aktivnom sastojku, tj. konjugatnom jedinjenju, farmaceutski prihvatljivu
2
supstancu, nosač, pufer, stabilizator, ili druge materijale dobro poznate stručnjacima u oblasti. Takvi materijali bi trebalo da budu ne-toksični, i ne bi trebali da interaguju sa efikasnošću aktivnog gradijenta. Precizna priroda nosača ili drugih materijala će zavisiti od načina davanja leka, koji može biti oralni, ili injekcijom, npr. kožna, potkožna, ili intravenozna.
[0201] Farmaceutski preparat za oralnu administraciju može biti tableta, kapsula, puder ili tečnost. Tableta može da sadrži nosač u čvrstom stanju ili katalizator. Tečni farmaceutski preparati generalno sadrže tečni nosač kao što je voda, petroleum, životinjsko ili biljno ulje, mineralno ulje, sintetičko ulje. Soni fiziološki rastvori, dekstroza ili drugi saharidni rastvorili glikoli kao što su etilen glikol, propilen glikol ili polietilen glikol mogu biti uključeni. Kapsule mogu sadržati čvrst nosač kao što je želatin.
[0202] Za intravenoznu, kožnu, ili potkožnu injekciju ili injekciju na bolešću pogođenom mestu, aktivni sastojak će biti u formi parenteralno odgovarajućeg vodenog rastvora koji je bez pirogena ima pogodan pH, izotoničnost i stabilnost. Oni koji su stručni u oblasti mogu pripremiti pogodne rastvore koristeći, na primer, izotonične nosače kao što su natrijum-hlorid injekcija, Ringerova injekcija, Ringerova injekcija sa laktatom. Prezervativi, stabilizatori, puferi, antioksidansi, i/ili drugi aditivi mogu se uključiti po potrebi.
Formulacije
[0203] Iako je moguće da jedinjenje konjugata bude korišćeno (npr. dato) samostalno, često je poželjnije da se da kao kompozicija ili formulacija.
[0204] U jednom otelotvorenju, formulacija je farmaceutski preparat (npr., formulacija, preparat, medikament) koji se sastoji od jedinjenja konjugata, kao što je ovde opisano, i farmaceutski prihvatljivog nosača, rastvarača ili ekscipijensa.
[0205] U jednom otelotvorenju, formulacija je farmaceutski preparat koji sadrži najmanje jedno jedinjenje konjugata, kao što je ovde opisano, zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivim sastojcima dobro poznatim stručnim u oblasti, uključujući, ali nisu ograničeni na, farmaceutski prihvatljive nosače, rastvarače, ekscipijente, adjuvanse, filere, pufere, prezervative, anti-oksidanse, lubrikante, stabilizatore, rastvarače, surfaktante (npr. agense vlažnosti), maskirajuće agense, boje, agense ukusa, i zaslađivače.
[0206] U jednom otelotvorenju, preparat dalje obuhvata aktivne agense, na primer, druge terapeutske ili profilaktičke agense.
[0207] Pogodni nosači, rastvarači, ekscipijensi, itd. se mogu naći u standardnim farmaceutskim tekstovima. Videti, na primer, Handbook of Pharmaceutical Additives, 2nd Edition (eds. M. Ash i I. Ash), 2001 (Synapse Information Resources, Inc., Endicott, New York, USA), Remington’s Pharmaceutical Sciences, 20th edition, pub. Lippincott, Williams & Wilkins, 2000; i Handbook of Pharmaceutical Excipients, 2nd edition, 1994.
[0208] Takođe su obelodanjeni postupci Moguće je da se izvede metod pravljenja farmaceutskog preparata koji se sastoji od mešanja najmanje jednog [11C]-radio obeleženog konjugata ili jedinjenja sličnog konjugatu, kao što je definisano ovde, zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih sastojaka dobro poznatim stručnjacima u oblasti, npr., nosačima, rastvaračima, ekscipijentima, itd. Ako su formulisane kao diskretne jedinice (npr., tablete, itd.), svaka jedinica sadrži predodređenu količinu (dozu) aktivnog jedinjenja.
[0209] Termin "farmaceutski prihvatljiv" kako se ovde koristi odnosi se na jedinjenja, sastojke, materijale, preparati, dozne forme, itd., koje su, u okviru zdravorazumskog medicinskog rasuđivanja, pogodne za korišćenje sa tkivima subjekta u pitanju (npr., čoveka) bez preterane neželjene toksičnosti, iritacije, alergijskog odgovora, ili drugih problema ili komplikacija, srazmerno razumnom odnosu benefit/rizik. Svaki nosač, rastvarač, ekscipijent, itd. takođe mora biti "prihvatljiv" u smislu kompatibilnosti sa drugim sastojcima preparata.
[0210] Formulacije mogu biti pripremljene ma kojom metodom poznatom u polju farmacije. Takve metode obuhvataju korak dovođenja u vezu aktivnog jedinjenja sa nosačem koji se sastoji od jednog ili više dodatnih sastojaka. Generalno, formulacija se priprema uniformno i dovodi u vezu aktivno jedinjenje i nosače (npr., tečne nosače, fino podvojene čvrste nosače itd.), i potom se produkt oblikuje ukoliko je potrebno.
[0211] Formulacija se može pripremiti kako bi se dobilo brže ili sporije oslobađanje; neposredno, blagovremeno, ili odloženo; ili kombinacija navedenih.
[0212] Formulacije pogodne za parenteralno davanje (npr., injekcijom), obuhvataju vodene ili ne vodene, izotonične, bez pirogena, sterilne tečnosti (npr., rastvore, suspenzije), u kojima je aktivni sastojak rastvoren, suspendovan, ili drugačije dat (npr., lipozomom ili drugim mikro partikulama). Takve tečnosti mogu dodatno
2
sadržati druge farmaceutski prihvatljive sastoje, kao što su anti-oksidansi, puferi, prezervativi, stabilizatori, bakteriostati, suspendujući agensi, agensi zgušnjavanja, i rastvori koji čine formulaciju izotoničnom sa krvlju (ili drugom telesnom tečnošću) recipijenta. Primeri ekscipijenata obuhvataju, na primer, vodu, alkohole, poliole, glicerol, biljna ulja, i slično. Primeri pogodnih izotoničnih nosača za korišćenje u takvoj formulaciji obuhvataju natrijum-hlorid injekciju, Ringerovu injekciju, Ringerovu injekciju sa laktatom. Tipično, koncentracija aktivnog sastojka u tečnosti je od oko 1 ng/ml do oko 10 μg/ml, na primer od oko 10 ng/ml do oko 1 μg/ml. Formulacija može biti data u jedinicama doze ili višedoznim zatvorenim kontejnerima, na primer, ampulama ili bočicama, i može se čuvati u smrznutom i osušenom (liofilizovanom) stanju koje zahteva samo dodatak sterilnog tečnog nosača, na primer vode za injekciju, neposredno pre upotrebe. Nespremne rastvore za injekcije i suspenzije se mogu pripremiti od sterilnih pudera, granula i tableta.
Doziranje
[0213] Biće cenjeno od strane stručnjaka da odgovarajuće doze jedinjenja konjugata, i preparata koji sadrže jedinjenje konjugata, mogu da variraju od subjekta do subjekta. Determinisanje optimalne doze će generalno uključivati balansiranje nivoa terapeutskog benefita naspram ma kakvog rizika ili štetnih neželjenih efekata. Odabrani nivoi doza će zavisiti od raznih faktora uključujući, ali se ne ograničavajući na, aktivnost datog jedinjenja, načina davanja, vremena davanja, brzine izlučivanja jedinjenja, trajanja tretmana, drugih lekova, jedinjenja i/ili materijala korišćenih u kombinaciji sa HDACi, težine stanja, i vrste, pola, godina, težine, stanja, opšteg zdravlja, i prethodne medicinske istorije subjekta. Količina jedinjenja i način davanja će konačno biti odluka lekara, veterinara, ili kliničara, iako će generalna doza biti odabrana kako bi se postigle lokalne koncentracije na mestu akcije koje mogu postići željene efekte bez izazivanja bitno štetnih neželjenih posledica.
[0214] Administracija se može postići jednom dozom, u kontinuitetu ili naizmenično (npr., u podeljenim dozama na odgovarajućim intervalima) tokom trajanja tretmana. Metode određivanja najefektnijeg načina i doze administracije su dobro poznate stručnjacima u oblasti variraće u odnosu na formulaciju koja se koristi pri terapiji, svrhu terapije, ciljne ćelije koje se tretiraju, i subjekta koji se tretira. Jedna ili više administracija se mogu izvesti sa nivoom doze i šablonom koji je odabran od strane lekara, veterinara ili kliničara.
[0215] Generalno, pogodna doza aktivnog jedinjenja je u rangu od oko 100 μg do oko 25 mg (najčešće oko 1 mg do oko 10 mg) po kilogramu telesne težine po subjektu po danu. Kada je aktivno jedinjenje so, estar, amid, prolek, ili slično, količina leka se računa na bazi matičnog jedinjenja i koristi se stvarna težina kako bi se povećala proporcionalnost.
[0216] U jednom otelotvorenju, aktivno jedinjenje se daje humanom pacijentu prema sledećem doznom režimu: oko 100 mg, 3 puta dnevno.
[0217] U jednom otelotvorenju, aktivno jedinjenje se daje humanom pacijentu prema sledećem doznom režimu: oko 100 mg, 3 puta dnevno.
[0218] U jednom otelotvorenju, aktivno jedinjenje se daje humanom pacijentu prema sledećem doznom režimu: oko 100 mg, 3 puta dnevno.
[0219] Ipak u jednom otelotvorenju, konjugat jedinjenje se daje humanom pacijentu prema sledećem doznom režimu: oko 50 ili oko 75 mg, 3 ili 4 puta dnevno.
[0220] Ipak u jednom otelotvorenju, konjugat jedinjenje se daje humanom pacijentu prema sledećem doznom režimu: oko 50 ili oko 75 mg, 3 ili 4 puta dnevno.
[0221] Količine doza opisane iznad se mogu odnositi na konjugat (uključujući PBD deo i linker prema antitelu) ili na efektivnu količinu datog PBD jedinjenja, na primer količini jedinjenja koje se oslobađa nakon isecanja linkera.
[0222] Za prevenciju ili tretman bolesti, odgovarajuća doza ADC će zavisiti od tipa bolesti koja se tretira, kao što je definisano iznad, težine i toka bolesti, da li se antitelo daje u preventivne ili terapeutske svrhe, prethodne terapije, kliničke istorije pacijenta i odgovora na antitelo, i odluke odgovornog lekara. Molekul se može davati pacijentu jednom ili serijom tretmana. U zavisnosti od tipa i težine bolesti, otprilike 1 μg /kg do 15 mg/kg (npr.
0.1mg/kg-20mg/kg) molekula je inicijalna kandidat-doza za davanje pacijentu, bilo, na primer, jednom ili više odvojenih primena, ili kontinualnom infuzijom. Jedna tipična dnevna doza može se kretati od otprilike 1 μg /kg do 100 mg/kg ili duže, u zavisnosti od faktora pomenutih iznad. Primer režima doziranja ADC koji će se davati pacijentu je u rangu od otprilike 0,1 mg/kg do otprilike 10 mg/kg težine pacijenta. Za ponovljene primene tokom nekoliko dana ili duže, u zavisnosti od stanja, tretman se održava sve do javljanja očekivane
2
supresije simptoma bolesti. Dobar dozni režim obuhvata primenu početne doze od oko 4 mg/kg, a zatim održavanje dozom ADC na nedelju dana, dve nedelje ili tri nedelje. Ostali dozni režimi mogu biti korisni. Napredak ove terapije se lako prati konvencionalnim tehnikama i esejima.
Tretman
[0223] Termin “tretman", kako se ovde koristi u kontekstu tretiranja stanja, odnosi se generalno na tretman i terapiju, bilo čoveka bilo životinje (npr., u veterinarskoj praksi), pri kom se postižu neki željeni terapeutski efekti, na primer, inhibicija progresije stanja, i uključuje smanjenje stope progresa, zastoj u stopi progresa, regresiju stanja, ublažavanje stanja, izlečenje stanja. Tretman kao profilaktička mera (tj., profilaksa, preventiva) je takođe obuhvaćena.
[0224] Termin “terapeutski efikasna količina," kako se ovde koristi, odnosi se na količinu aktivnog jedinjenja, ili materijala, kompozicije ili doze koja sadrži aktivno jedinjenje, koje efikasno u stvaranju nekih željenih terapeutskih efekata, srazmerno benefit/rizik odnosu, kada se daje u skladu za željenim režimom tretmana.
[0225] Slično, termin “profilaktički efikasna količina" kako se ovde koristi, odnosi se na količinu aktivnog jedinjenja, ili materijala, kompozicije ili doze koja sadrži aktivno jedinjenje, koje efikasno u stvaranju nekih željenih profilaktičkih efekata, srazmerno benefit/rizik odnosu, kada se daje u skladu za željenim režimom tretmana.
Pripremanje konjugata leka
[0226] Konjugati lekova antitela iz predmetnog pronalaska mogu se dobiti konjugacijom sledećeg veznika leka:
na antitelo koje sadrži azid postupcima opisanim u, na primer, van Geel, R., i dr., Bioconjugate Chemistry, 2015, 26, 2233-2242; DOI:10.1021 / acs.bioconjchem.5b00224. Pogodne metode uključuju, ali nisu ograničene na, konjugaciju bez bakra, na primer, vodene uslove sa opcionim rastvaračem izabranim od DMF, DMSO i DMA.
[0227] Veznik leka može se sintetizovati u skladu sa primerima, uz odgovarajuće modifikacije, na primer, pozivajući se na WO 2016/053107 za sintezu veznika i sledeće dokumente za PBD dimer, na primer: WO 2011/130598, WO2013/055987, WO2014/057074.
Subjekat/Pacijent
[0228] Subjekat/pacijent može biti životinja, sisar, placentalni sisar, torbar (npr., kengur, vombat), monotremata (npr., kljunar), glodar (npr., zamorac, hrčak, pacov, miš), lagomorfa (npr., zec), ptica, pas, mačka, svinja, ovca, krava, primat, simian (npr., majmun ili čovekoliki majmun), majmun (npr., marmozet, babun), čovekoliki majmun (npr., gorila, šimpanza, orangutan, gibon), ili čovek.
[0229] Dalje, subjekat/pacijent može biti u ma kojoj fazi razvića, na primer, fetus. U jednom poželjnom aspektu, subjekat/pacijent je čovek.
Primeri
Sinteza međujedinjenja 3
[0230]
2
[0231] Rastvor BCN alkohola (0,384 g, 2,55 mmola) u MeCN (25 mL) pod N2atmosferom je ohlađen do 0 °C, i dodat je kap po kap hlorosulfonil izocijanat (CSI) (0,255 mL, 415 mg, 2,93 mmola, 1,15 ekviv.). Nakon 15 minuta mešanja, Et3N je dodat u kapima (1,42 mL, 1,03 g, 10,2 mmola, 4 ekviv.) i mešanje je nastavljeno još 10 minuta. Zatim, rastvor 2-(2-(2-aminoetoksi)etoksi)sirćetne kiseline (1,0 g, 6,1 mmola, 2,4 ekviv.) u H2O (5 mL) je dodat i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Posle ovog vremena, CHCl3(50 mL) i H2O (100 mL) su dodati i slojevi su odvojeni. Vodenom sloju u levak za odvajanje je dodat CH2Cl2(100 mL) i pH je podešen na 4 sa 1 N HCI, pre razdvajanja slojeva. Vodeni sloj je dva puta ekstrahovan sa CH2Cl2(2 × 100 mL), organski slojevi su kombinovani i osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni tikvice na silicijum dioksidu, eluiranjem CH2Cl2do 20% MeOH u CH2Cl2Prinos 0,42 g (1,0 mmola, 39%) od 3 kao bezbojni lepljivi vosak.
Sinteza linkera leka
[0232]
2
[0233] Jedinjenje 1 se može sintetizovati kako je opisano u WO2014/057074 - videti jedinjenje 22.
(a) Paladijev tetrakistrifenilfosfin (Pd(PPh3)4, 4,8 mg, 4,15 µmol) se izmeri i stavi u inertnu atmosferu. Rastvor pirolidina (5,0 µL, 4,3 mg, 60 µmol) u DCM (1 mL) se gasi mešanjem N2kroz rastvor. Rastvor od 1 (27 mg, 24 µmol) u DCM (6 mL) se gasi mešanjem N2kroz rastvor. Dok se kroz rastvor još uvek mehuri N2, dodaje se degasirani rastvor pirolidina. Odmereni Pd(PPh3)4se rastvara u DCM (1 mL) i dodaje se 0,9 mL ovog rastvora. Posle 50 minuta mehurića N2, dodat je DCM (25 mL) i smeša je isprana zasićenim vodenim rastvorom NH4CI (25 ml). Posle razdvajanja, vodeni sloj se ekstrahuje sa DCM (2 x 25 ml). Kombinovani organski slojevi se osuše (Na2SO4) i koncentruju. Ostatak se prečišćava RP-HPLC (30-90% MeCN (0,1% mravlja kiselina) u H2O (0,1% mravlja kiselina). Kombinovane frakcije se propuštaju kroz SPE (HCO3-) kolone i koncentruju. Nakon dodavanja MeCN (50 mL) smeša je ponovo koncentrovana. Nastali ostatak 2 je upotrebljen u sledećem koraku.
Konverzija reakcije može se pratiti pomoću LCMS analize. Kolona: Kolona XBridge BEH C18 Inteligentna brzina (IS), 130A, 3,5 µm (4,6 mm x 20 mm). Mobilna faza A: Voda (0,1% mravlja kiselina), mobilna faza B (0,1% mravlja kiselina). Otkrivanje pomoću PDA i ESI+. Uzorci se mogu pripremiti razblaživanjem reakcione smeše sa MeCN.
(b) Rastvoru gornjeg ostatka 2 u CHCI3(5 mL) dodaje se rastvor 3 (15 mg, 36 µmol, mv 418 g/mol) u CHCI3(0,8 ml). Dobijena smeša je dodata u čvrsti EDC.HCI (4.7 mg, 25 umol), dodat je CHCI3 (5 mL) i smeša je mešana 30 minuta. Doda se DCM (30 ml) i rezultujuća smeša se opere vodom (30 ml). Posle razdvajanja, vodena faza se ekstrahuje sa DCM (30 ml). Kombinovani organski slojevi se osuše (Na2SO4) i koncentruju. Ostatak se prečišćava RP-HPLC (30-90% MeCN (bez kiseline) u H2O (0,01% mravlja kiselina). HPLC epruvete za sakupljanje se pre sakupljanja napune sa 5% vodenim (NH4) HCO3. Kombinovane HPLC frakcije se ekstrahuju). sa DCM (3 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi se osuše (Na2SO4) i koncentrišu. Proizvod 4 se dobija u obliku blago žuto / belog ulja (21 mg, 16 µmol, mw 1323 g / mol, 67% u dva koraka).
[0234] Konverzija reakcije može se pratiti pomoću LCMS analize. Kolona: Kolona XBridge BEH C18 Inteligentna brzina (IS), 130Å, 3,5 µm (4,6 mm x 20 mm). Mobilna faza A: Voda (0,1% mravlja kiselina), mobilna faza B (0,1% mravlja kiselina). Otkrivanje pomoću PDA i ESI+.
Modifikacija antitela
Uslovi reakcije
[0235] Uslovi reakcije za preuređivanje glikana u jednom loncu su:
15 mg/ml Antitelo (-0.1 mM)
0.15 mg/mL EndoSH (1% w/w) iz Streptococcus pyogenes
1.13 mg/mL His-TnGalNAcT (7.5% w/w) Galaktoza N-acetil Transferaza (GalNAcT) enzim
2.5 mM 6-N3GalNAc-UDP (25 ekv. U poređenju sa IgG)
10mM MnCl2
25 mM TrisHCl ph 8.0
150 mM NaCl
Inkubirati 16 sati na 30°C
[0236] Ovo je izvedeno na AXL i B12.
Procedura
[0237] Ovaj primer je na skali od 25 mg, koja se po potrebi može izmeniti. Pojedinačne komponente se dodaju redom i mešaju:
106,5 µL 25 mM Tris pH 8.0, 150 mM NaCl (kako bi se dobila konačna zapremina 1667 µL)
1 mL 25 mg/mL Antitelo u 25 mM Tris pH 8,0, 150 mM NaCl
71,4 µL 3,5 mg/mL EndoSH in 25 mM Tris pH 8.0
389 µL 4,82 mg/mL His-TnGalNAcT u 25 mM Tris pH 8,0
16,7 µL 1M MnCl2in MQ
83,4 µL 0,1 M 6-N3GalNAc-UDP u MQ
[0238] Ova smeša je približno 16 sati na 30°C. Kompletiranje modifikovanog ostatka galaktoze može se proceniti podvrgavanjem uzorka MS analizi. Posle prečišćavanja afiniteta proteina A, mali uzorak proizvoda može se redukovati DTT i potom podvrgnuti MS analizi. Tipični maseni spektar uspešne reakcije prenosa pokazuje stvaranje jednog od glavnih proizvoda (90% ukupnog teškog lanca), koji je rezultat modifikovanog prenosa galaktoze u jezgro GlcNAc (Fuc) supstituisanog Ab, i sporednog proizvoda (±10% od ukupni teški lanac), nastao modifikovanim prenosom galaktoze u jezgro GlcNAc (bez fukoze) supstituisanog Ab.
Procedura prečišćavanje
Puferi
[0239] Pufer za vezivanje / pranje (TBS pH 7,5):
20 mM TrisHCl ph 7,5
150 mM NaCl
[0240] Pufer za pranje za uklanjanje endotoksina (TBS pH 7.5 Triton-X100):
20 mM TrisHCl pH 7.5
150 mM NaCl
0.2% Triton X-100
[0241] Pufer za eluaciju:
0.1 M Glicin pH 2.7
[0242] CIP pufer:
0.5 M NaOH
Procedura
[0243]
1. Isprati kolonu MabSelectSure 5 mL (5 mL / min) sa sledećim puferima kako bi se kolona očistila pre nanošenja uzorka:
Isprati kolonu sa najmanje 5 zapremina kolone (CV) TBS pH 7.5
Isprati kolonu sa 15 CV 0,5 M NaOH
Isprati kolonu sa 5 CV TBS pH 7,5
Isprati kolonu sa CV Glicinom pH 2,7
Isprati kolonu sa pH 7,5 dok nije postignuta prirodna pH vrednost.
2. Ukloniti talog iz reakcione smeše centrifugiranjem (5 min na 4000g) ili filtracijom (filter od 0,22 ili
1
0,45 µm)
3. Uzorak stavite na 2 mL / min i izvršite sledeće korake sa 5 mL/min:
Isprati sa barem 20 CV TBS = 0,2% Triton X-100
Isprati sa barem 20 CV TBS
Eluirati sa 0,1 M Glicinom ph 2,7
4. Odmah se neutrališu frakcije dodavanjem 1/5 zapremine 1 M Tric-HCI ph 8,0 i mešanjem
5. Uzorak dijalize protiv 3 x ≥ 50 zapremina PBS pH 7,4 na 4°C (3 x ≥1 sati)
6. Koncentrišite uzorak pomoću spinfilterskih uređaja na -20 mg/mL
Konjugacija 4 sa modifikovanim antitelom dajući KonjA i KonjB
Uslovi reakcije
[0244] 15 mg / ml azido-modifikovanog antitela (0,1 M IgG)
0,5 mM 4 (5 ekv. u poređenju sa IgG = 2,5 ekv. po azidu)
10% DMF ili 25% propilenglikol PBS pH 7,4
Procedura
[0245]
1. Dodati 9 volumena 16,67 mg / ml azido-modifikovanog antitela u PBS pH7
2. Dodajte 1 vol 5 mM 4 u DMF i odmah mešajte.
3. Inkubirati preko noći.
4. Izmerite konverziju RP-HPLC i MS..
Prečišćavanje ADC
Pripremanje uzorka
[0246] Pre ubacivanja na kolonu treba ispuniti sledeće zahteve:
Organski rastvarač ≤5%
Ukupna zapremina uzorka ≤3% CV (≤720 µL za Superdex 20010/300 GL i ≤10 ml za Superdex 200 HiLoad 26/600)
Bez taloga
[0247] Iznad navedeni zahtevi mogu se postići sledećim postupkom:
1. Razblažiti uzorak sa PBS pH 7,4 do konačne koncentracije organskog rastvarača od ≤5%
2. Ako zapremina prelazi 3% CV, uzorak je koncentrovan pomoću centrifugalnih filtera Amicon Ultra (MWCO 10 kDa)
3. Potencijalne padavine uklanjaju se centrifugiranjem (10 minuta pri 13000 o / min u centrifugi na stolu)
Prečišćavanje
[0248] Prečišćavanje je izvedeno korišćenjem Superdex 20010/300 GL kolone (CV = 23 mL, GE zdravstvo) na Akta prečistaču-10. Sledeći koraci pranja se izvode brzinom protoka od 0,5 mL / min:
Isprati kolonu sa 1 CV vodom
Isprati kolonu sa 1 CV 0,5 M NaOH.
Izjednačiti kolonu sa PBS pH 7,4 (Sigma, D8537) dok se ne dobije neutralni pH.
2
Uzorak se injektira sa 0,5 ml / min PBS pH 7,4 i sakupljaju se frakcije od 1 mL (ukupan protok = 1,5 CV). Monomerne frakcije se objedinjuju i dijalizuju na 4°C protiv 3x1L pufera za formulaciju (30 mM histidina, 200 mM sorbitola, 0,02% (w / v) tween-20, pH 6,0). Uzorci su sterilisani filterom koristeći filter od 0,22 µm, zamrznuti pomoću tečnog azota i čuvani na -80°C.
[0249] Masena spektralna analiza uzorka digestiranog izvođačem pokazala je jedan glavni proizvod (primećena masa 25691 Da, približno 90% ukupnog Fc / 2 fragmenta), koji odgovara konjugovanom Fc / 2 fragmentu. RP-HPLC analiza smanjenog uzorka pokazala je prosečni DAR od 1,98.
In vitro citotoksičnost
[0250] H1299 ćelije su dobijene od ATCC (ATCC broj CRL-5803). Medijum H1299 je Dulbekov modifikovani medijum orla (DMEM), dopunjen sa 10% Gibco FBS. Ćelije su gajene na 37°C, 5% CO2u vlažnom inkubatoru. Suspenzije ćelija su davane u ploče sa 96 dna sa ravnim dnom (10<4>ćelije po udubljenju). Set od 8 x 10 puta razblaženja osnovnog ADC pripremljen je u medijumu ćelijske kulture. Svako razblaženje ADC (50 µl po udubljenju) je dodato u 4 ponovljena udubljenja ploče sa 96 udubljenja koje sadrže ćelijsku suspenziju. Kontrolna udubljenja su pripremljena dodavanjem iste zapremine samo medijuma za kulturu. Nakon inkubacije tokom 96 sati, održivost ćelija je merena testom 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-5-(3-karboksimetoksi-fenil)-2-(4-sulfofenil)-2H-tetrazolijuma (MTS) (Promega, kataloški broj G5421) sledeći uputstva proizvođača. Apsorbancija je izmerena na 490 nm. Preživljavanje ćelija (%) izračunato je iz srednje apsorbancije u 4 udubljenja tretirane ADC u poređenju sa srednjom apsorbancijom u 4 kontrolna udubljenja (100%). Krive odgovora na dozu su generisane iz srednjih podataka 3 ponovljena eksperimenta, a vrednosti EC50utvrđene su uklapanjem podataka u sigmoidnu krivu doza-odgovor sa promenljivim nagibom koristeći Prism (GraphPad, San Diego, CA). Trake grešaka označavaju standardnu devijaciju (SD).
[0251] Utvrđeno je da je EC50KonjA 0,0554 µg/mL.
Ispitivanje vezivanja antigena
[0252] Makisorp ploče su presvučene na 4°C preko noći sa humanim Axl antigenom (50 ng / udubljenju; serija u PBS. Ne reaktivna mesta su blokirana SuperBlock puferom (preko noći na 4°C ili sobnoj temperaturi). Set 8 puta trostrukog ili petostrukog razblaženja osnovnog ADC pripremljeno je u puferu za uzorak / PBS / Tween20. Svako ADC razblaženje (60 µL / udubljenju) je dodato u 4 ponovljena udubljenja obložene ploče. Kontrolna udubljenja su pripremljene dodavanjem ista zapremina uzorka pufera / PBS / Tween 20. Kao sekundarno antitelo (1:5000, 1 sat na sobnoj temperaturi) korišćen je konjugat IgG protiv humane kapa IgG-hrenove peroksidaze (HRP). HRP je otkriven pomoću 1-Step Ultra TMB- ELISA rastvor supstrata (75 µL / udubljenju; 5 minuta na sobnoj temperaturi). Reakcija supstrata zaustavljena je sa 0,6 M HCI (75 µL / jamici). Optička gustina je izmerena na 450 nm na Envisionu pomoću 450 nm programa peroksidaze. generisani iz srednjih podataka 3 ponovljena eksperimenta koristeći Prism (GraphPad, San Diego, CA). Slika 1 prikazuje rezultate dobijeno, gde je ▲ KonjA. Trake grešaka označavaju standardnu grešku srednje vrednosti (SEM). ConjA vezan velikim afinitetom za vanćelijski domen AXL presvučen na pločama.
In vivo ispitivanje efikasnosti - MDA-MB-231
[0253] 5 x 10<6>MDA-MB-231 tumorske ćelije su subkutano implantirane ženskim atimnim golim miševima. Doziranje ADC vozilom ili testnim predmetom započeto je kada je zapremina tumora dostigla 88-172 mm<3>. KonjA se daje intravenozno (i.v.) injekcijom u repnu venu jednom u dozi od 1 mg / kg. Zapremina doziranja je bila 10 mL / kg telesne težine i eskalirala je do telesne težine svake pojedinačne životinje. Životinje su eutanazirane ako je njihova zapremina tumora dostigla krajnju zapreminu od 1500 mm<3>ili na kraju studije, šta god se prvo desilo. Težina životinja, znaci bilo kakvih neželjenih efekata, povezani sa lečenjem i klinički znaci praćeni su tokom perioda ispitivanja. Za izračunavanje srednje zapremine tumora u grupi primenjeno je sledeće pravilo: kada je životinja izašla iz studije zbog veličine tumora, konačna zapremina tumora zabeležena za životinju bila je uključena u podatke koji se koriste za izračunavanje srednje zapremine u narednom vremenu bodova. Vrednosti zapremine tumora i telesne težine nisu korišćene za izračunavanje srednje zapremine tumora / telesne težine u grupi kada je u studiji ostalo manje od 50% životinja u grupi. Prizma (GraphPad, San Diego, CA) je korišćena za grafičke prezentacije i statističke analize. Slika 2 prikazuje dobijene rezultate, gde je ▲ KonjA, a ○ samo vozilo. Trake grešaka označavaju SEM.
[0254] Jedna doza od 1 mg / kg KonjA snažno je inhibirala rast tumora sa 10/10 miševa koji su bili bez tumora 60 dana nakon doziranja.
Studija toksikologije pacova
Postupak
[0255] KonjA je ispitivan u studiji podnošljivosti pojedinačne intravenske doze na pacovima. Muškim pacovima Sprague-Dawley (n=3 / grupa) dozirani su 3 i 6 mg / kg za KonjA 1. dana, sa obdukcijom 21. dana nakon doziranja. Telesne težine i konzumacija hrane praćeni su često uzimanjem uzoraka za kliničku patologiju (krv 8. i 21. dana) i ponovljenim uzorkovanjem za farmakokinetiku. Nekropsijom su obavljena makroskopska posmatranja sa odabranim organima izvaganim i zadržanim radi moguće histopatologije.
[0256] KonjA se klinički dobro podnosi sa 3 i 6 mg / kg. Prirast telesne težine smanjen je za 11, odnosno 21% u grupama od 3 mg i kg, u skladu sa smanjenom konzumacijom hrane. Nekoliko hematoloških parametara smanjeno je 8. dana, uglavnom u grupi sa dozom od 6 mg / kg (retikulociti (-76%), hemoglobin (-29%) bela krvna zrnca (-66%) i trombociti (-37%)), sa neki dokazi o oporavku do 21. dana. Pri obdukciji je primećena smanjena težina timusa kod svih životinja. Stoga je maksimalna tolerisana doza (MTD) za KonjA bila 6 mg / kg.
In vivo ispitivanje efikasnosti - SN12C
[0257] Ženski teški kombinovani imunodeficijentni miševi (Fox Chase SCID®, CB17 / lcr-Prkdcscid / lcrlcoCrl, Charles River) bili su stari deset nedelja sa rasponom telesne težine (BV) od 18,0 do 21,6 g prvog dana ispitivanja. Na dan implantacije tumora, svaki testirani miš primio je 5 x 10<6>SN12C ćelija (0,1 mL ćelijske suspenzije u 50% Matrigel® Matrix (Corning®) u fosfatnom puferu fiziološkom rastvoru) implantiranih subkutano u desni bok. SN12C je model ksenografta izveden iz karcinoma bubrežne ćelije sa visokim nivoom ekspresije AXL (-88.000 kopija po ćeliji).
[0258] Rast tumora praćen je kako se prosečna veličina približavala ciljnom opsegu od 100 do 150 mm<3>. Tumori su mereni u dve dimenzije pomoću čeljusti, a zapremina je izračunata po formuli:
gde je w = širina i I = dužina, u mm, tumora. Težina tumora može se proceniti uz pretpostavku da je 1 mg ekvivalentno 1 mm<3>zapremine tumora.
[0259] Dvadeset pet dana nakon implantacije tumora, naznačenog kao 1. dana ispitivanja, životinje su sortirane u pet grupa (n=8) sa pojedinačnim volumenom tumora od 108 do 172 mm<3>i srednjim grupnim volumenom tumora od 120 do 123 mm<3>. Svi tretmani su primenjeni i.v. u bočnoj repnoj veni jednom injekcijom 1. dana ispitivanja. Zapremina doziranja bila je 0,2 mL na 20 grama telesne težine (10 mL / kg) i prilagođena je telesnoj težini svake pojedinačne životinje. Tumori su mereni čeljustima dva puta nedeljno i svaka životinja je eutanazirana kada je njen tumor dostigao zapreminu krajnje tačke od 2000 mm<3>ili na kraju ispitivanja, u zavisnosti od toga šta se prvo desilo. Ispitivanje je završeno 60. dana. U dozi od 1 mg / kg, KonjA je rezultirala 7/8 kompletnih respondera (CR) i 6/8 preživelih bez tumora (TFS) na kraju ispitivanja 60. dana..
[0260] Slika 3 prikazuje dobijene rezultate, gde:
○ je samo nosač;
◇ je KonjB doziran na 1 mg/kg;
□ je KonjA doziran na 0,3 mg/kg;
Δ je KonjA doziran na 0,6 mg/kg;
∇ je KonjA doziran na 1 mg/kg.
Trake grešaka pokazuju SEM.
In vivo ispitivanje efikasnosti - Karpas299 (AXL-negativno)
[0261] Ženski teški kombinovani imunodeficijentni miševi (Fok Chase SCID®, CB17 / lcr-Prkdcscid / lcrlcoCrl, Charles River) bili su stari devet nedelja sa rasponom telesne težine (BW) od 17,0 do 22,5 g prvog dana ispitivanja. Na dan implantacije tumora, svaki test miš je primio 1 x 10<7>ćelija Karpas-299 (0,1 mL ćelijske suspenzije u PBS) ugrađenih subkutano u desni bok.
[0262] Rast tumora je praćen kako se prosečna veličina približava ciljnom opsegu od 100 do 150 mm<3>. Tumori su mereni u dve dimenzije pomoću čeljusti, a zapremina je izračunata po formuli:
4
gde je w = širina i I = dužina, u mm, tumora. Težina tumora može se proceniti uz pretpostavku da je 1 mg ekvivalentno 1 mm<3>zapremine tumora.
[0263] Deset dana nakon implantacije tumora, naznačenog kao 1. dan ispitivanja, životinje su sortirane u četiri grupe sa pojedinačnim zapreminama tumora od 108 do 126 mm<3>i srednjim zapreminama tumora od 113 do 117 mm<3>. Svi tretmani su primenjeni i.v. u bočnoj repnoj veni jednom injekcijom 1. dana ispitivanja. Zapremina doziranja bila je 0,2 mL na 20 grama telesne težine (10 mL / kg) i prilagođena je telesnoj težini svake pojedinačne životinje. Tumori su mereni čeljustima dva puta nedeljno i svaka životinja je eutanazirana kada je njen tumor dostigao zapreminu krajnje tačke od 2000 mm<3>ili na kraju ispitivanja, u zavisnosti od toga šta se prvo desilo. Ispitivanje je završeno 29. dana.
[0264] Slika 4 prikazuje dobijene rezultate, gde:
○ je samo nosač;
□ je KonjA dozirana u dozi od 1 mg / kg.
Trake grešaka označavaju SEM.
In vivo ispitivanje efikasnosti - Ksenograft (PDX) dobijen od pacijenta sa rakom pankreasa [0265] Ženski nu / nu miševi (NU-Foxn1nu) iz reke Charles imali su najmanje 8 nedelja sa telesnom težinom (BW) u rasponu od 22,0 do 30,0 g na dan 0. Na dan implantacije, fragmenti tumora su dobijeni iz ksenografti u golih miševa. Nakon uklanjanja sa donatorskih miševa, tumori su isečeni na fragmente (dužina ivice 3-4 mm) i stavljeni u PBS koji sadrži 10% penicilina / streptomicina. Životinje primaoci su anestezirane inhalacijom izoflurana i primljene su jednostrane ili obostrane tumorske implantate subkutano u bok.
[0266] Životinje i tumorski implantati su nadgledani kako se njihova količina implantata približava ciljnom opsegu od 50 do 250 mm<3>kod dovoljnog broja životinja. Tumori su mereni u dve dimenzije pomoću čeljusti, a zapremina je izračunata po formuli:
gde je w = širina i I = dužina, u mm, tumora.
[0267] Dan randomizacije označen je kao Dan 0 eksperimenta. Prvog dana eksperimenta, ženski nu / nu miševi koji su nosili potkožne ksenografte PAXF 1657 (grupne srednje vrednosti zapremine tumora 109,0-110,1 mm<3>) su sortirani u grupe (n=8 po grupi) i započeto je doziranje. Zapremina doziranja je bila 0,1 mL na 20 grama telesne težine (5 mL / kg) i prilagođena je telesnoj težini svake pojedinačne životinje. Svi tretmani su primenjeni intravenozno (i.v.) u jednoj injekciji 1. dana (qd x 1). Tumori su mereni čeljustima dva puta nedeljno i svaka životinja je eutanazirana kada je njen tumor dostigao zapreminu krajnje tačke od 2000 mm<3>ili na kraju studije, u zavisnosti od toga šta se prvo desilo. Ispitivanje je završeno 42. dana. Svaka pojedinačna doza KonjA (0,3, 0,6 i 1 mg / kg) rezultirala je potpunim iskorenjivanjem tumora na kraju ispitivanja.
[0268] Slika 5 prikazuje dobijene rezultate, gde:
○ je samo nosač;
◇ je KonjB dozirano na 1 mg/kg;
□ je KonjA dozirano na 0.3 mg/kg;
Δ je KonjA dozirano na 0.6 mg/kg;
∇ je KonjA dozirano na 1 mg/kg.
Trake grešaka označavaju SEM. Okomita isprekidana linija označava početak doziranja (1. dan). In vivo ispitivanje efikasnosti - model ksenografta (PDX) izveden od pacijenta sa karcinomom jednjaka ES0195
[0269] Ženski goli miševi Balb / c iz Pekinga AniKeeper Bio-Technology Co. Ltd. bili su stari 5-6 nedelja sa rasponom telesne težine od 20,2-24,6 g na početku ispitivanja. Fragmenti tumora (prečnika 2-3 mm, u ledeno hladnom RPMI1640 medijumu bez seruma) inokulirani su subkutano u desni bok 24 ženska gola miša Balb / c.
[0270] Sve životinje su nasumično raspoređene u 3 različite studijske grupe. Randomizacija je izvršena postupkom više zadataka u softveru Study Log na dan 0. Prosečna zapremina tumora (mm3) za svaku grupu + SD pri randomizacija bila je sledeća, ~ 141 mm3 ± 47 mm<3>.
[0271] Svi tretmani su primenjeni intravenozno (i.v.) u jednoj injekciji 1. dana (qd x 1). Telesne težine su se merile dva puta nedeljno tokom trajanja ispitivanja. Zapremine tumora merene su dva puta nedeljno. Ispitivanje je prekinuto 51. dana nakon početka doziranja.
[0272] Slika 6 prikazuje dobijene rezultate, gde:
○ je samo nosač;
□ je KonjA doziran na 1 mg/kg;
Δ je KonjB doziran na 1 mg/kg;
Trake grešaka označavaju SEM. Vertikalna isprekidana linija označava početak doziranja (1. dana). Studija aktivnosti in vitro posmatrača
[0273] In vitro citotoksičnost KonjA i izotipski ADC, KonjB, upoređivani su u ćelijskim linijama SN12C i Karpas-299 - Karpas299 su AXL-negativni. SN12C su AXL-pozitivni. Prilepljene ćelije SN12C su tripsinisane, ponovo suspendovane u rastvoru od 1 mL i lagano pomešane pre brojanja da bi se utvrdila gustina ćelija. Suspenzija Karpas299 ćelija je brojena bez ikakvog prethodnog tretmana. Gustina ćelija je određena u duplikatu testom izuzeća Tripan blue pomoću LUNA-II ™ automatizovanog brojača ćelija. SN12C ćelijska suspenzija je razblažena na 1 x 10<4>ćelije / ml u medijumu za rast specifičan za ćeliju i 100 µl / udubljenju je dodato u sterilne bele mikro pločice sa 96 udubljenja ravnog dna i inkubirano preko noći kako bi se ćelije slepile. Ćelije Karpas299 posejane su istog dana kada je primenjena ADC.
[0274] Napravljena su serijska razblaženja filter-sterilisanih ADC u razmeri 1:10 i ponovljena da bi se dobilo osam serijskih razblaženja, koristeći početnu koncentraciju ADC od 20 µg / mL i razređujući u medijumu za rast specifičnog za ćelije u sterilnim polipropilenskim pločama sa 96 udubljenja. ADC razblaženja (uključujući matični rastvor) su raspodeljena u 2 ponovljena udubljenja, 100 µl / udubljenju, obeležene bele ploče sa 96 dna sa ravnim dnom, koje sadrže 100 µL suspenzije zasejanih ćelija. Za kontrolna udubljenja medijuma 100 mL medijuma za rast ćelija je dodato u 2 replicirane jamice, a za kontrolne udubljenja ćelijskih linija 100 ml medijuma za rast je dodato u 100 mL ćelijske suspenzije, prethodno dodato, u 2 replicirana udubljenja. Sve ploče su inkubirane 5 dana u inkubatoru sa gasom CO2od 37°C (5%). Testovi su izvedeni primenom iste gustine setve ćelija i vremena inkubacije za obe ćelijske linije; 1 x 10<3>ćelije / udubljenju inkubirana po 5 dana svaka (ovi uslovi su prethodno optimizovani za ovo ispitivanje).
[0275] Posle perioda inkubacije od 5 dana, ploče su 5 minuta centrifugirane na 600 G (20°C), pre nego što je 100 µl / udubljenju pažljivo prebačeno na sveže pripremljene bele ploče sa 96 udubljenju sa ravnim dnom, koje sadrže 100 µl zasejanih ćelija Karpas-299 (prethodno izdato). Sve ploče su inkubirane 5 dana u inkubatoru sa gasom CO2od 37°C (5%). Nakon perioda inkubacije, ploče su centrifugirane na 600 G (20°C) tokom 5 minuta, pre nego što je 100 µl / udubljenju pažljivo uklonjeno i bačeno, a vitalnost ćelija je merena na preostalom medijumu u jamicama pomoću CellTiter-Glo® test. Ploče su pročitane na Envisionu pomoću protokola Luminescence, a podaci su analizirani pomoću softvera Graphpad Prism.
SEKVENCE
[0276]
SEQ ID NO.1 [1H12 VH, CDR podvučenol
S
4
4
4
4
4
4
4
�
2
�

Claims (26)

  1. Patentni zahtevi 1. Konjugat prema formuli (I): Ab - (DL)p(I) gde: Ab je antitelo koje vezuje AXL;
    gde: X je odabran iz grupe koju čine: jednostruka veza, -CH2- i -C2H4-; n je od 1 do 8; m je 0 ili 1; R7 je ili metil ili fenil; kada postoji dvostruka veza između C2i C3, R<2>je izabrana grupa koju čine: (ia) C5-10aril grupa, opciono supstituisana jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koju čine: halo, nitro, cijano, etar, karboksi, estar, C1-7alkil, C3-7heterociklil i bis-oksi-C1-3alkilen; (ib) C1-5zasićeni alifatski alkil; (ic) C3-6zasićeni cikloalkil; (id)
    pri čemu su svaki od R<21>, R<22>i R<23>nezavisno izabrani između H, C1-3zasićenog alkila, C2-3alkenila, C2-3alkinila i ciklopropila, gde ukupan broj atoma ugljenika u R<2>grupi nije veći od 5; (ie)
    pri čemu je jedan od R<25a>i R<25b>H, a drugi je odabran između: fenila, koji je fenil opciono supstituisan sa grupom odabranom od halo, metil, metoksi; piridil; i tiofenil; i (if)
    gde je R<24>izabran iz: H; C1-3zasićeni alkil; C2-3alkenil; C2-3alkinil; ciklopropil; fenil, koji je fenil opciono supstituisan sa grupom odabranom od halo, metil, metoksi; piridil; i tiofenil;
    kada postoji jednostruka veza između C2 i C3,R<2>je gde su R<26a>i R<26b>nezavisno izabrani između H, F, C1-4zasićenog alkila, C2-3alkenila, koje su alkil i alkenil grupe po izboru supstituisane grupom odabranom između C1-4alkil amido i C1-4alkil estar; ili, kada je jedan od R<26a>i R<26b>H, drugi je odabran od nitrila i C1-4alkil estra; kada postoji dvostruka veza između C2' i C3', R<12>je izabrana grupa koju čine: (ii) C5-10aril grupa, opciono supstituisana jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koju čine: halo, nitro, cijano, etar, karboksi, estar, C1-7alkil, C3-7heterociklil i bis-oksi-C1-3 alkilen; (iib) C1-5zasićeni alifatski alkil; (ii) C3-6zasićeni cikloalkil; (iid)
    pri čemu su svaki od R<31>, R<32>i R<33>nezavisno izabrani između H, C1-3zasićenog alkila, C2-3alkenila, C2-3alkinila i ciklopropila, gde ukupan broj atoma ugljenika u grupi R<12>nije veći od 5; (iie)
    pri čemu je jedan od R<35a>i R<35b>H, a drugi je odabran između: fenila, koji je fenil opciono supstituisan sa grupom odabranom od halo, metil, metoksi; piridil; i tiofenil; i (iif)
    gde je R<34>izabran iz: H; C1-3zasićeni alkil; C2-3alkenil; C2-3alkinil; ciklopropil; fenil, koji je fenil opciono supstituisan sa grupom odabranom od halo, metil, metoksi; piridil; i tiofenil; kada postoji jednostruka veza između
    gde su R<36a>i R<36b>nezavisno izabrani između H, F, C1-4zasićenog alkila, C2-3alkenila, koje su alkil i alkenil grupe po izboru supstituisane grupom odabranom između C1-4alkil amido i C1-4alkil estar; ili, kada je jedan od R<36a>i R<36b>H, drugi je odabran od nitrila i C1-4alkil estra; pri čemu se u (ia) i (ii) C1-7alkil odnosi na monovalentni deo dobijen uklanjanjem atoma vodonika iz atoma ugljenika ugljovodoničnog jedinjenja koje ima od 1 do 7 atoma ugljenika, koji može biti alifatski ili aliciklični, i koji mogu biti zasićeni ili nezasićeni; i u (if) i (iif), C1-4alkil se odnosi na monovalentni deo dobijen uklanjanjem atoma vodonika iz atoma ugljenika ugljovodoničnog jedinjenja koje ima od 1 do 4 atoma ugljenika, koji mogu biti alifatski ili aliciklični i koji mogu biti zasićen ili nezasićen; i p je od 1 do 8.
  2. 2. Konjugat prema patentnom zahtevu 1, gde je X -CH2-.
  3. 3. Konjugat prema patentnim zahtevima 1 ili 2, gde je n 1 do 4.
  4. 4. Konjugat prema patentnom zahtevu 3, gde je n 2.
  5. 5. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 4, gde postoji dvostruka veza između C2 i C3, a R<2>je C1-5zasićena alifatska alkil grupa.
  6. 6. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 5, gde je R<2>metil, etil ili propil.
  7. 7. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 4, gde postoji dvostruka veza između C2 i C3, a R<2>je: (a) fenil, koji nosi jednu do tri supstituentske grupe, pri čemu supstituenti mogu biti izabrani između metoksi, etoksi, fluoro, hloro, cijano, bis-oksi-metilen, metil-piperazinil, morfolino i metil-tiofenil; ili (b) ciklopropil; ili (c) grupa formule:
    pri čemu ukupan broj atoma ugljenika u R<2>grupi nije veći od 3; ili (d) grupa:
    ili (e) grupa formule:
    pri čemu je R<24>odabran između H i metila.
  8. 8. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 4, gde postoji jednostruka veza između C2 i C3, R<2>je
    i (a) R<26a>i R<26b>su oba H; ili (b) R<26a>i R<26b>su oba metil; ili (c) jedan od R<26a>i R<26b>je H, a drugi je izabran od C1-4zasićenog alkila, C2-3alkenila, koji su alkil i alkenil grupe opciono supstituisani.
  9. 9. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 8, gde postoji dvostruka veza između C2' i C3', a R<12>je C1-5zasićena alifatska alkil grupa.
  10. 10. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 9, gde je R<12>metil, etil ili propil.
  11. 11. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 8, gde postoji dvostruka veza između C2' i C3', a R<12>je: (a) fenil, koji nosi jednu do tri supstituentske grupe, pri čemu supstituenti mogu biti izabrani između metoksi, etoksi, fluoro, hloro, cijano, bis-oksi-metilen, metil-piperazinil, morfolino i metil-tiofenil; ili (b) ciklopropil; ili (c) grupa formule:
    pri čemu ukupan broj atoma ugljenika u grupi R<12>nije veći od 3; ili (d) grupa:
    ili (e) grupa formule
    gde je R<34>odabran između H i metila.
  12. 12. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 8, gde što postoji jednostruka veza između C2 'i C3', R<12>je
    i, (a) R<36a>i R<36b>su oba H; ili (b) R<36a>i R<36b>su oba metil; ili (c) jedan od R<36a>i R<36b>je H, a drugi je izabran od C1-4zasićenog alkila, C2-3alkenila, koji su alkil i alkenil grupe opciono supstituisani.
  13. 13. Konjugat prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 12, gde, što antitelo sadrži VH domen koji sadrži VH CDR3 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.7., VH CDR2 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO .6, i VH CDR1 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.5.
  14. 14. Konjugat prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 13, gde antitelo sadrži VH domen koji ima sekvencu SEQ ID NO.1.
  15. 15. Konjugat prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 14, gde, što antitelo sadrži VL domen koji sadrži VL CDR3 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.10., VL CDR2 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO .9, i VL CDR1 sa aminokiselinskom sekvencom SEQ ID NO.8.
  16. 16. Konjugat prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 15, gde antitelo sadrži VL domen koji ima sekvencu SEQ ID NO.2
  17. 17. Konjugat prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 16, gde, što antitelo sadrži teški lanac koji ima sekvencu SEQ ID NO.3 ili SEQ ID NO.24.
  18. 18. Konjugat prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 17, gde, što antitelo sadrži teški lanac koji ima sekvencu SEQ ID NO.3 upareni sa lakim lancem koji ima sekvencu SEQ ID NO.4.
  19. 19. Sastav, koji sadrži smešu jedinjenja konjugata antitelo-lek, kako je definisano u bilo kom od patentnih zahteva 1 do 18, gde je prosečno punjenje leka po antitelu u smeši jedinjenja konjugata antitelo-lek 1 do 4.
  20. 20. Konjugat prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 18, za upotrebu u terapiji.
  21. 21. Konjugat prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 18, za upotrebu u lečenju proliferativne bolesti kod subjekta.
  22. 22. Konjugat za upotrebu prema patentnom zahtevu 21, gde je bolest rak.
  23. 23. Konjugat za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 21 ili 22, gde se bolest ili rak karakteriše prisustvom neoplazme koja sadrži i AXL+ve i AXL-ve ćelije.
  24. 24. Konjugat prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 18, gde se koristi za postupak za lečenje proliferativne bolesti, gde navedeni postupak sadrži: (i) identifikovanje prisustva u subjektu neoplazme koja sadrži i AXL+ve i AXL-ve ćelije; (ii) davanje subjektu konjugata antitelo-lek.
  25. 25. Farmaceutski sastav koja sadrži konjugat iz bilo kog od patentnih zahteva 1 do 18 i farmaceutski prihvatljiv razblaživač, nosač ili ekscipijens.
  26. 26. Farmaceutski sastav prema patentnom zahtevu 25, koji dalje sadrži terapeutski efikasnu količinu hemoterapeutskog sredstva.
RS20210560A 2017-02-08 2018-02-08 Konjugati pirolobenzodiazepin antitela RS61795B1 (sr)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB1702031.4A GB201702031D0 (en) 2017-02-08 2017-02-08 Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
GBGB1702029.8A GB201702029D0 (en) 2017-02-08 2017-02-08 Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
GBGB1719906.8A GB201719906D0 (en) 2017-11-30 2017-11-30 Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
EP18704956.4A EP3544636B1 (en) 2017-02-08 2018-02-08 Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
PCT/EP2018/053163 WO2018146189A1 (en) 2017-02-08 2018-02-08 Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS61795B1 true RS61795B1 (sr) 2021-06-30

Family

ID=61198845

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20210560A RS61795B1 (sr) 2017-02-08 2018-02-08 Konjugati pirolobenzodiazepin antitela

Country Status (23)

Country Link
US (2) US11160872B2 (sr)
EP (1) EP3544636B1 (sr)
JP (1) JP6671555B2 (sr)
KR (2) KR102181375B1 (sr)
CN (1) CN110267686B (sr)
AU (1) AU2018217926B2 (sr)
BR (1) BR112019016373B1 (sr)
CA (1) CA3047683C (sr)
CY (1) CY1124402T1 (sr)
DK (1) DK3544636T3 (sr)
ES (1) ES2871001T3 (sr)
HR (1) HRP20210979T1 (sr)
HU (1) HUE054689T2 (sr)
LT (1) LT3544636T (sr)
MX (1) MX375569B (sr)
NZ (1) NZ754810A (sr)
PL (1) PL3544636T3 (sr)
PT (1) PT3544636T (sr)
RS (1) RS61795B1 (sr)
SI (1) SI3544636T1 (sr)
SM (1) SMT202100543T1 (sr)
UA (1) UA125198C2 (sr)
WO (1) WO2018146189A1 (sr)

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB201506411D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Bergenbio As Humanized anti-axl antibodies
GB201702031D0 (en) * 2017-02-08 2017-03-22 Medlmmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
JP7408396B2 (ja) * 2017-04-20 2024-01-05 アーデーセー セラピューティクス ソシエテ アノニム 併用療法
EP3899048A1 (en) 2018-12-19 2021-10-27 ADC Therapeutics SA Pyrrolobenzodiazepine resistance
GB201820725D0 (en) 2018-12-19 2019-01-30 Adc Therapeutics Sarl Pyrrolobenzodiazepine resistance
GB201908128D0 (en) 2019-06-07 2019-07-24 Adc Therapeutics Sa Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
CN115210247A (zh) 2019-12-31 2022-10-18 乐高化学生物科学股份有限公司 吡咯并苯二氮卓类衍生物及其配体-接头偶联物
EP4172141A1 (en) 2020-06-26 2023-05-03 Synaffix B.V. Methods for the preparation of linker payload constructs
GB202011993D0 (en) 2020-07-31 2020-09-16 Adc Therapeutics Sa ANTI-IL 13Ra2 antibodies
NL2026400B1 (en) 2020-09-02 2022-05-04 Synaffix Bv Methods for the preparation of bioconjugates
WO2022079211A1 (en) 2020-10-16 2022-04-21 Adc Therapeutics Sa Glycoconjugates
US20240042053A1 (en) 2020-10-16 2024-02-08 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Glycoconjugates
CN113189089B (zh) * 2021-03-19 2022-05-17 四川轻化工大学 一种臭氧检测试剂及其制备装置和制备方法
EP4230222A1 (en) 2022-02-17 2023-08-23 Oxsonics Limited Combination therapy with an anti-axl antibody-pbd conjugate and nanocups
EP4279090A1 (en) 2022-05-20 2023-11-22 ADC Therapeutics SA Composition comprising a pyrrolobenzodiazepine-based antibody drug conjugate
CN119486758A (zh) 2022-06-30 2025-02-18 东丽株式会社 癌的治疗和/或预防用药物组合物
EP4389152A1 (en) * 2022-12-23 2024-06-26 Synaffix B.V. Conjugates of pbd prodrugs

Family Cites Families (422)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3361742A (en) 1964-12-07 1968-01-02 Hoffmann La Roche 5-oxo-1h-pyrrolo-[2, 1-c][1, 4]-benzodiazepin-2-crylamides
US3523941A (en) 1967-03-06 1970-08-11 Hoffmann La Roche Benzodiazepine compounds and process for their preparation
US3524849A (en) 1967-10-27 1970-08-18 Hoffmann La Roche Process for the preparation of pyrrolo-benzodiazepine acrylamides and intermediates useful therein
IL33558A (en) 1968-12-30 1973-10-25 Fujisawa Pharmaceutical Co Antibiotic pyrrolo-benzodiazepine compound,its derivatives and processes for their production
FR2027356A1 (en) 1968-12-30 1970-09-25 Fujisawa Pharmaceutical Co Benzodiazepinone antibiotics
JPS4843755B1 (sr) 1969-06-26 1973-12-20
JPS5382792U (sr) 1976-12-10 1978-07-08
JPS6053033B2 (ja) 1976-12-28 1985-11-22 財団法人微生物化学研究会 新制癌抗生物質マゼスラマイシン及びその製造方法
JPS585916B2 (ja) 1977-12-27 1983-02-02 株式会社ミドリ十字 新規ベンゾジアゼピン系化合物
JPS5615289A (en) 1979-07-17 1981-02-14 Green Cross Corp:The Novel benzodiazepinnbased compound 3
JPS57131791A (en) 1980-12-31 1982-08-14 Fujisawa Pharmaceut Co Ltd Benzodiazepine derivative and its preparation
CA1185602A (en) 1981-02-27 1985-04-16 Emilio Kyburz Imidazodiazepines
CA1173441A (en) 1981-02-27 1984-08-28 Hoffmann-La Roche Limited Imidazodiazepines
CA1184175A (en) 1981-02-27 1985-03-19 Walter Hunkeler Imidazodiazepines
JPS58180487A (ja) 1982-04-16 1983-10-21 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd 抗生物質ｄｃ−８１およびその製造法
US4427588A (en) 1982-11-08 1984-01-24 Bristol-Myers Company Process for conversion of oxotomaymycin to tomaymycin
US4427587A (en) 1982-11-10 1984-01-24 Bristol-Myers Company Total synthesis of antitumor antibiotics BBM-2040A and BBM-2040B
JPS59152329A (ja) 1983-02-17 1984-08-31 Green Cross Corp:The 局所障害抑制剤
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
FR2586683B1 (fr) 1985-08-29 1988-07-01 Centre Nat Rech Scient Nouveaux derives de neothramycine, leur procede de preparation et leur application en tant que medicaments
US5583024A (en) 1985-12-02 1996-12-10 The Regents Of The University Of California Recombinant expression of Coleoptera luciferase
JP2660201B2 (ja) 1988-08-05 1997-10-08 塩野義製薬株式会社 新規ピロロ［１，４］ベンゾジアゼピン誘導体および老人性痴呆薬
AU6355090A (en) 1989-08-23 1991-04-03 Scripps Clinic And Research Foundation Compositions and methods for detection and treatment of epstein-barr virus infection and immune disorders
JPH053790A (ja) 1990-04-19 1993-01-14 Fujisawa Pharmaceut Co Ltd デヒドロペプチダーゼ−ｉ
US5256643A (en) 1990-05-29 1993-10-26 The Government Of The United States Human cripto protein
WO1992007574A1 (en) 1990-10-25 1992-05-14 Tanox Biosystems, Inc. Glycoproteins associated with membrane-bound immunoglobulins as antibody targets on b cells
US5543503A (en) 1991-03-29 1996-08-06 Genentech Inc. Antibodies to human IL-8 type A receptor
EP0577752B2 (en) 1991-03-29 2007-07-11 Genentech, Inc. Human pf4a receptors and their use
US5440021A (en) 1991-03-29 1995-08-08 Chuntharapai; Anan Antibodies to human IL-8 type B receptor
FR2676058B1 (fr) 1991-04-30 1994-02-25 Hoechst Lab Prodrogues glycosylees, leur procede de preparation et leur utilisation dans le traitement des cancers.
FR2676230B1 (fr) 1991-05-07 1993-08-27 Centre Nat Rech Scient Nouveaux derives de pyrrolo [1,4]-benzodiazepines, leur procede de preparation et medicaments les contenant.
JP3050424B2 (ja) 1991-07-12 2000-06-12 塩野義製薬株式会社 ヒトエンドセリンリセプター
US5264557A (en) 1991-08-23 1993-11-23 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Polypeptide of a human cripto-related gene, CR-3
US5362852A (en) 1991-09-27 1994-11-08 Pfizer Inc. Modified peptide derivatives conjugated at 2-hydroxyethylamine moieties
US6153408A (en) 1991-11-15 2000-11-28 Institut Pasteur And Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale Altered major histocompatibility complex (MHC) determinant and methods of using the determinant
US6011146A (en) 1991-11-15 2000-01-04 Institut Pasteur Altered major histocompatibility complex (MHC) determinant and methods of using the determinant
GB9205051D0 (en) 1992-03-09 1992-04-22 Cancer Res Campaign Tech Pyrrolobenzodiazepine derivatives,their preparation,and compositions containing them
FR2696176B1 (fr) 1992-09-28 1994-11-10 Synthelabo Dérivés de pipéridine, leur préparation et leur application en thérapeutique.
IL107366A (en) 1992-10-23 2003-03-12 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Genes coding for megakaryocyte potentiator
US5644033A (en) 1992-12-22 1997-07-01 Health Research, Inc. Monoclonal antibodies that define a unique antigen of human B cell antigen receptor complex and methods of using same for diagnosis and treatment
US5801005A (en) 1993-03-17 1998-09-01 University Of Washington Immune reactivity to HER-2/neu protein for diagnosis of malignancies in which the HER-2/neu oncogene is associated
US5869445A (en) 1993-03-17 1999-02-09 University Of Washington Methods for eliciting or enhancing reactivity to HER-2/neu protein
US6214345B1 (en) 1993-05-14 2001-04-10 Bristol-Myers Squibb Co. Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates
GB9316162D0 (en) 1993-08-04 1993-09-22 Zeneca Ltd Fungicides
US5773223A (en) 1993-09-02 1998-06-30 Chiron Corporation Endothelin B1, (ETB1) receptor polypeptide and its encoding nucleic acid methods, and uses thereof
EP0647450A1 (en) 1993-09-09 1995-04-12 BEHRINGWERKE Aktiengesellschaft Improved prodrugs for enzyme mediated activation
WO2001016318A2 (en) 1999-09-01 2001-03-08 Genentech, Inc. Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same
US5750370A (en) 1995-06-06 1998-05-12 Human Genome Sciences, Inc. Nucleic acid encoding human endothlein-bombesin receptor and method of producing the receptor
JPH08336393A (ja) 1995-04-13 1996-12-24 Mitsubishi Chem Corp 光学活性なγ−置換−β−ヒドロキシ酪酸エステルの製造法
US5707829A (en) 1995-08-11 1998-01-13 Genetics Institute, Inc. DNA sequences and secreted proteins encoded thereby
US20020193567A1 (en) 1995-08-11 2002-12-19 Genetics Institute, Inc. Secreted proteins and polynucleotides encoding them
JP3646191B2 (ja) 1996-03-19 2005-05-11 大塚製薬株式会社 ヒト遺伝子
US6218519B1 (en) 1996-04-12 2001-04-17 Pro-Neuron, Inc. Compounds and methods for the selective treatment of cancer and bacterial infections
BR9710968A (pt) 1996-05-17 2001-09-04 Schering Corp Antìgenos de célula b humana; reagentes correlatos
CA2264227A1 (en) 1996-09-27 1998-04-02 Raymond A. Firestone Hydrolyzable prodrugs for delivery of anticancer drugs to metastatic cells
US6759509B1 (en) 1996-11-05 2004-07-06 Bristol-Myers Squibb Company Branched peptide linkers
US5945511A (en) 1997-02-20 1999-08-31 Zymogenetics, Inc. Class II cytokine receptor
US20030185830A1 (en) 1997-02-25 2003-10-02 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer
US7033827B2 (en) 1997-02-25 2006-04-25 Corixa Corporation Prostate-specific polynucleotide compositions
EP0981541B1 (en) 1997-03-10 2004-06-02 The Regents Of The University Of California Psca: prostate stem cell antigen
US6541212B2 (en) 1997-03-10 2003-04-01 The Regents Of The University Of California Methods for detecting prostate stem cell antigen protein
US6261791B1 (en) 1997-03-10 2001-07-17 The Regents Of The University Of California Method for diagnosing cancer using specific PSCA antibodies
US6555339B1 (en) 1997-04-14 2003-04-29 Arena Pharmaceuticals, Inc. Non-endogenous, constitutively activated human protein-coupled receptors
US6319688B1 (en) 1997-04-28 2001-11-20 Smithkline Beecham Corporation Polynucleotide encoding human sodium dependent phosphate transporter (IPT-1)
WO1998051824A1 (en) 1997-05-15 1998-11-19 Abbott Laboratories Reagents and methods useful for detecting disease of the urinary tract
WO1998051805A1 (en) 1997-05-15 1998-11-19 Abbott Laboratories Reagents and methods useful for detecting diseases of the prostate
US6602677B1 (en) 1997-09-19 2003-08-05 Promega Corporation Thermostable luciferases and methods of production
US20030060612A1 (en) 1997-10-28 2003-03-27 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
US20020034749A1 (en) 1997-11-18 2002-03-21 Billing-Medel Patricia A. Reagents and methods useful for detecting diseases of the breast
US6110695A (en) 1997-12-02 2000-08-29 The Regents Of The University Of California Modulating the interaction of the chemokine, B Lymphocyte Hemoattractant, and its Receptor, BLR1
JP4603157B2 (ja) 1998-03-13 2010-12-22 ザ バーナム インスティチュート 種々の選択された器官または組織にホーミングする分子
US6534482B1 (en) 1998-05-13 2003-03-18 Epimmune, Inc. Expression vectors for stimulating an immune response and methods of using the same
US20030064397A1 (en) 1998-05-22 2003-04-03 Incyte Genomics, Inc. Transmembrane protein differentially expressed in prostate and lung tumors
US20020187472A1 (en) 2001-03-09 2002-12-12 Preeti Lal Steap-related protein
EA003398B1 (ru) 1998-05-22 2003-04-24 Дайити Фармасьютикал Ко., Лтд. Лекарственный комплекс c полимерным носителем
EP1093600B1 (en) 1998-07-08 2004-09-15 E Ink Corporation Methods for achieving improved color in microencapsulated electrophoretic devices
WO2000012130A1 (en) 1998-08-27 2000-03-09 Smithkline Beecham Corporation Rp105 agonists and antagonists
GB9818731D0 (en) 1998-08-27 1998-10-21 Univ Portsmouth Compounds
GB9818730D0 (en) 1998-08-27 1998-10-21 Univ Portsmouth Collections of compounds
ATE240334T1 (de) 1998-08-27 2003-05-15 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepine
GB9818732D0 (en) 1998-08-27 1998-10-21 Univ Portsmouth Collection of compounds
JP4689781B2 (ja) 1998-09-03 2011-05-25 独立行政法人科学技術振興機構 アミノ酸輸送蛋白及びその遺伝子
WO2000020579A1 (en) 1998-10-02 2000-04-13 Mcmaster University Spliced form of erbb-2/neu oncogene
US20030091580A1 (en) 2001-06-18 2003-05-15 Mitcham Jennifer L. Compositions and methods for the therapy and diagnosis of ovarian cancer
US6962980B2 (en) 1999-09-24 2005-11-08 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of ovarian cancer
US6858710B2 (en) 1998-12-17 2005-02-22 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of ovarian cancer
US20020119158A1 (en) 1998-12-17 2002-08-29 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of ovarian cancer
US6468546B1 (en) 1998-12-17 2002-10-22 Corixa Corporation Compositions and methods for therapy and diagnosis of ovarian cancer
US20030190669A1 (en) 1998-12-30 2003-10-09 Genentech, Inc. Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same
JP2002536966A (ja) 1998-12-30 2002-11-05 ベス・イスラエル・ディーコニス・メディカル・センター・インコーポレーテッド カルシウムチャネルファミリーの特徴付け
MXPA01007721A (es) 1999-01-29 2003-07-14 Corixa Corp Proteinas de fusion her-2/neu.
GB9905124D0 (en) 1999-03-05 1999-04-28 Smithkline Beecham Biolog Novel compounds
AU3395900A (en) 1999-03-12 2000-10-04 Human Genome Sciences, Inc. Human lung cancer associated gene sequences and polypeptides
US7304126B2 (en) 1999-05-11 2007-12-04 Genentech, Inc. Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same
US6268488B1 (en) 1999-05-25 2001-07-31 Barbas, Iii Carlos F. Prodrug activation using catalytic antibodies
WO2000075655A1 (fr) 1999-06-03 2000-12-14 Takeda Chemical Industries, Ltd. Procede de criblage avec cd100
KR20020012292A (ko) 1999-06-25 2002-02-15 제넨테크, 인크. 항-ＥｒｂＢ 항체-메이탄시노이드 결합체를 사용한 치료방법
US6302318B1 (en) 1999-06-29 2001-10-16 General Electric Company Method of providing wear-resistant coatings, and related articles
US20030119113A1 (en) 1999-07-20 2003-06-26 Genentech, Inc. Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same
US7297770B2 (en) 1999-08-10 2007-11-20 Genentech, Inc. PRO6496 polypeptides
US7294696B2 (en) 1999-08-17 2007-11-13 Genentech Inc. PRO7168 polypeptides
US6909006B1 (en) 1999-08-27 2005-06-21 Spirogen Limited Cyclopropylindole derivatives
US20030129192A1 (en) 1999-09-10 2003-07-10 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of ovarian cancer
US20030206918A1 (en) 1999-09-10 2003-11-06 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of ovarian cancer
US20030232056A1 (en) 1999-09-10 2003-12-18 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of ovarian cancer
CA2387108A1 (en) 1999-10-29 2001-06-07 Genentech, Inc. Anti-prostate stem cell antigen (psca) antibody compositions and methods of use
EP1235847B1 (en) 1999-11-29 2016-01-20 The Trustees of Columbia University in the City of New York ISOLATION OF FIVE NOVEL GENES CODING FOR NEW Fc RECEPTORS-TYPE MELANOMA INVOLVED IN THE PATHOGENESIS OF LYMPHOMA/MELANOMA
EP1248800A2 (en) 1999-11-30 2002-10-16 Corixa Corporation Compositions and methods for therapy and diagnosis of breast cancer
JP2003530083A (ja) 1999-12-10 2003-10-14 エピミューン インコーポレイテッド ペプチドおよび核酸組成物を使用する、ＨＥＲ２／ｎｅｕに対する細胞性免疫応答の誘導
EP1244708B8 (en) 1999-12-23 2007-03-07 ZymoGenetics, Inc. Method for treating inflammation
US6610286B2 (en) 1999-12-23 2003-08-26 Zymogenetics, Inc. Method for treating inflammation using soluble receptors to interleukin-20
NZ502058A (en) 1999-12-23 2003-11-28 Ovita Ltd Isolated mutated nucleic acid molecule for regulation of ovulation rate
AU783473B2 (en) 1999-12-23 2005-10-27 Zymogenetics Inc. Soluble interleukin-20 receptor
DE60041564D1 (de) 1999-12-24 2009-03-26 Genentech Inc Verfahren und Zusammensetzungen zur Verlängerung der Entsorgungshalbwertszeit von biowirksamen Verbindungen
US20040001827A1 (en) 2002-06-28 2004-01-01 Dennis Mark S. Serum albumin binding peptides for tumor targeting
US7297333B2 (en) 2000-01-20 2007-11-20 Genentech, Inc. Anti-PRO10268 antibodies
US20030224379A1 (en) 2000-01-21 2003-12-04 Tang Y. Tom Novel nucleic acids and polypeptides
US20020039573A1 (en) 2000-01-21 2002-04-04 Cheever Martin A. Compounds and methods for prevention and treatment of HER-2/neu associated malignancies
AU2001243142A1 (en) 2000-02-03 2001-08-14 Hyseq, Inc. Novel nucleic acids and polypeptides
US20030104562A1 (en) 2000-02-11 2003-06-05 Genentech, Inc. Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same
US20030219806A1 (en) 2000-02-22 2003-11-27 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Novel 18607, 15603, 69318, 12303, 48000, 52920, 5433, 38554, 57301, 58324, 55063, 52991, 59914, 59921 and 33751 molecules and uses therefor
WO2001062794A2 (en) 2000-02-22 2001-08-30 Millennium Pharmaceuticals, Inc. 18607, a human calcium channel
US20040052793A1 (en) 2001-02-22 2004-03-18 Carter Paul J. Caspase activivated prodrugs therapy
US20040002068A1 (en) 2000-03-01 2004-01-01 Corixa Corporation Compositions and methods for the detection, diagnosis and therapy of hematological malignancies
US20040005561A1 (en) 2000-03-01 2004-01-08 Corixa Corporation Compositions and methods for the detection, diagnosis and therapy of hematological malignancies
AU2001245280A1 (en) 2000-03-07 2001-09-17 Hyseq, Inc. Novel nucleic acids and polypeptides
WO2002088170A2 (en) 2001-04-26 2002-11-07 Biogen, Inc. Cripto blocking antibodies and uses thereof
AU4941101A (en) 2000-03-24 2001-10-08 Fahri Saatcioglu Novel prostate-specific or testis-specific nucleic acid molecules, polypeptides,and diagnostic and therapeutic methods
JP2003530325A (ja) 2000-03-31 2003-10-14 イーペーエフ ファルマシューティカルス ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 好ましくは特異的ケモカインレセプター分析、及びケモカインレセプター／リガンド相互作用の助けによる、腫瘍及び炎症細胞の細胞表面プロテオームの調査、並びに腫瘍疾患及び炎症性疾患の治療のための診断薬及び薬剤
US7279294B2 (en) 2000-04-03 2007-10-09 The United States Of America As Represented By The Secretary, Dept. Of Health And Human Services, Nih Tumor markers in ovarian cancer
MXPA02009902A (es) 2000-04-07 2003-06-17 Arena Pharm Inc Receptores acoplados a proteina g, conocidos, activados constitutivamente, no endogenos.
WO2001088133A2 (en) 2000-05-18 2001-11-22 Lexicon Genetics Incorporated Human semaphorin homologs and polynucleotides encoding the same
WO2001090304A2 (en) 2000-05-19 2001-11-29 Human Genome Sciences, Inc. Nucleic acids, proteins, and antibodies
US20020051990A1 (en) 2000-06-09 2002-05-02 Eric Ople Novel gene targets and ligands that bind thereto for treatment and diagnosis of ovarian carcinomas
CA2409776A1 (en) 2000-06-16 2001-12-27 Incyte Genomics, Inc. G-protein coupled receptors
JP2004502417A (ja) 2000-06-30 2004-01-29 アムジェン　インコーポレーテッド Ｂ７様分子およびその使用
JP2004502414A (ja) 2000-06-30 2004-01-29 ヒューマン　ジノーム　サイエンシーズ，　インコーポレイテッド Ｂ７様ポリヌクレオチド、ポリペプチドおよび抗体
AU2001273151A1 (en) 2000-06-30 2002-01-14 Incyte Genomics, Inc. Human extracellular matrix and cell adhesion polypeptides
AU2002214531A1 (en) 2000-07-03 2002-01-30 Curagen Corporation Proteins and nucleic acids encoding same
US20040044179A1 (en) 2000-07-25 2004-03-04 Genentech, Inc. Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same
WO2002010187A1 (en) 2000-07-27 2002-02-07 Mayo Foundation For Medical Education And Research B7-h3 and b7-h4, novel immunoregulatory molecules
ATE396266T1 (de) 2000-07-28 2008-06-15 Ulrich Wissenbach Trp8 krebsmarker
US7229623B1 (en) 2000-08-03 2007-06-12 Corixa Corporation Her-2/neu fusion proteins
AU2001283360A1 (en) 2000-08-14 2002-02-25 Corixa Corporation Methods for diagnosis and therapy of hematological and virus-associated malignancies
BR0113235A (pt) 2000-08-14 2004-06-08 Corixa Corp Composições e métodos para a terapia e a diagnose de malignidades associadas com her-2/neu
GB0020953D0 (en) 2000-08-24 2000-10-11 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
JP2004520806A (ja) 2000-08-24 2004-07-15 ジェネンテック・インコーポレーテッド 腫瘍の診断と治療のための組成物と方法
AU2001290548A1 (en) 2000-09-11 2002-03-26 Hyseq, Inc. Novel nucleic acids and polypeptides
DE60121808T2 (de) 2000-09-15 2007-03-29 Zymogenetics, Inc., Seattle Verwendung eines polypeptids, welches die extrazelluläre domäne von il-20ra und il-20rb enthält, zur behandlung von entzündungen
US6613567B1 (en) 2000-09-15 2003-09-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense inhibition of Her-2 expression
US20030119121A1 (en) 2000-09-15 2003-06-26 Genentech, Inc. Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same
AU2001292724B2 (en) 2000-09-18 2005-05-26 Biogen Idec Ma Inc. CRIPTO mutant and uses thereof
UA83458C2 (uk) 2000-09-18 2008-07-25 Байоджен Айдек Ма Інк. Виділений поліпептид baff-r (рецептор фактора активації в-клітин сімейства tnf)
ATE310724T1 (de) 2000-09-19 2005-12-15 Taiho Pharmaceutical Co Ltd Zusammensetzungen und verfahren zur verwendung achirale analoge von cc1065 und den duocarmycinen
JP2005506033A (ja) 2000-10-13 2005-03-03 イーオーエス バイオテクノロジー インコーポレイテッド 前立腺癌の診断法、前立腺癌モジュレータースクリーニングの組成物及び方法
ES2329012T3 (es) 2000-11-07 2009-11-20 Zymogenetics, Inc. Receptor del factor de necrosis tumoral humano.
US20020150573A1 (en) 2000-11-10 2002-10-17 The Rockefeller University Anti-Igalpha-Igbeta antibody for lymphoma therapy
US20040018194A1 (en) 2000-11-28 2004-01-29 Francisco Joseph A. Recombinant anti-CD30 antibodies and uses thereof
WO2002061087A2 (en) 2000-12-19 2002-08-08 Lifespan Biosciences, Inc. Antigenic peptides, such as for g protein-coupled receptors (gpcrs), antibodies thereto, and systems for identifying such antigenic peptides
EP1357828A2 (en) 2001-01-12 2003-11-05 University of Medicine and Dentistry of New Jersey Bone morphogenetic protein-2 in the treatment and diagnosis of cancer
US20030119125A1 (en) 2001-01-16 2003-06-26 Genentech, Inc. Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same
US20030119126A1 (en) 2001-01-16 2003-06-26 Genentech, Inc. Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same
US7754208B2 (en) 2001-01-17 2010-07-13 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
MXPA03006617A (es) 2001-01-24 2004-12-02 Protein Design Labs Inc Metodos de diagnostico de cancer de pecho, composiciones y metodos de rastreo de moduladores de cancer de pecho.
AU2002251841A1 (en) 2001-01-30 2002-08-12 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of pancreatic cancer
US20040170994A1 (en) 2001-02-12 2004-09-02 Callen David Frederick DNA sequences for human tumour suppressor genes
US20030087250A1 (en) 2001-03-14 2003-05-08 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Nucleic acid molecules and proteins for the identification, assessment, prevention, and therapy of ovarian cancer
EP1243276A1 (en) 2001-03-23 2002-09-25 Franciscus Marinus Hendrikus De Groot Elongated and multiple spacers containing activatible prodrugs
WO2002078524A2 (en) 2001-03-28 2002-10-10 Zycos Inc. Translational profiling
US6362331B1 (en) 2001-03-30 2002-03-26 Council Of Scientific And Industrial Research Process for the preparation of antitumor agents
WO2003008537A2 (en) 2001-04-06 2003-01-30 Mannkind Corporation Epitope sequences
US6820011B2 (en) 2001-04-11 2004-11-16 The Regents Of The University Of Colorado Three-dimensional structure of complement receptor type 2 and uses thereof
AU2002254615A1 (en) 2001-04-17 2002-10-28 The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas Repeat sequences of the ca125 gene and their use for diagnostic and therapeutic interventions
CA2444691A1 (en) 2001-04-18 2002-10-31 Protein Design Labs, Inc. Methods of diagnosis of lung cancer, compositions and methods of screening for modulators of lung cancer
US6884869B2 (en) 2001-04-30 2005-04-26 Seattle Genetics, Inc. Pentapeptide compounds and uses related thereto
JP2005504513A (ja) 2001-05-09 2005-02-17 コリクサ コーポレイション 前立腺癌の治療及び診断のための組成物及び方法
WO2002092836A2 (en) 2001-05-11 2002-11-21 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Nucleic acid sequence encoding ovarian antigen, ca125, and uses thereof
PL403488A1 (pl) 2001-05-24 2013-07-08 Zymogenetics, Inc. Zastosowanie bialka fuzyjnego TACI-immunoglobulina, bialko fuzyjne, czasteczka kwasu nukleinowego kodujaca bialko fuzyjne, kompozycja farmaceutyczna i sposób wytwarzania bialka fuzyjnego TACI-immunoglobulina
AU2002314901A1 (en) 2001-06-04 2002-12-16 Eos Biotechnology, Inc. Methods of diagnosis and treatment of androgen-dependent prostate cancer, prostate cancer undergoing androgen-withdrawal, and androgen-independent prostate cancer
WO2003000842A2 (en) 2001-06-04 2003-01-03 Curagen Corporation Novel proteins and nucleic acids encoding same
CA2449289A1 (en) 2001-06-05 2002-12-12 Exelixis, Inc. Gfats as modifiers of the p53 pathway and methods of use
CA2449482A1 (en) 2001-06-05 2002-12-12 Exelixis, Inc. Chds as modifiers of the p53 pathway and methods of use
US7235358B2 (en) 2001-06-08 2007-06-26 Expression Diagnostics, Inc. Methods and compositions for diagnosing and monitoring transplant rejection
US7125663B2 (en) 2001-06-13 2006-10-24 Millenium Pharmaceuticals, Inc. Genes, compositions, kits and methods for identification, assessment, prevention, and therapy of cervical cancer
US7189507B2 (en) 2001-06-18 2007-03-13 Pdl Biopharma, Inc. Methods of diagnosis of ovarian cancer, compositions and methods of screening for modulators of ovarian cancer
MXPA03011979A (es) 2001-06-18 2005-04-08 Eos Biotechnology Inc Metodos de diagnostico de cancer de ovario composiciones y metodos para rastrear moduladores de cancer de ovario.
AU2002322280A1 (en) 2001-06-21 2003-01-21 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Compositions, kits, and methods for identification, assessment, prevention, and therapy of breast cancer
WO2003002717A2 (en) 2001-06-28 2003-01-09 Schering Corporation Biological activity of ak155
US20030120040A1 (en) 2001-06-29 2003-06-26 Genentech, Inc. Secreted and Transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same
AU2002314433A1 (en) 2001-07-02 2003-01-21 Licentia Ltd. Ephrin-tie receptor materials and methods
US20040076955A1 (en) 2001-07-03 2004-04-22 Eos Biotechnology, Inc. Methods of diagnosis of bladder cancer, compositions and methods of screening for modulators of bladder cancer
WO2003003984A2 (en) 2001-07-05 2003-01-16 Curagen Corporation Novel proteins and nucleic acids encoding same
WO2003055439A2 (en) 2001-07-18 2003-07-10 The Regents Of The University Of California Her2/neu target antigen and use of same to stimulate an immune response
US20030108963A1 (en) 2001-07-25 2003-06-12 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Novel genes, compositions, kit, and methods for identification, assessment, prevention and therapy of prostate cancer
PL377119A1 (pl) 2001-08-03 2006-01-23 Genentech, Inc. Peptydy TACIs i BR3 i ich zastosowanie
WO2003016475A2 (en) 2001-08-14 2003-02-27 The General Hospital Corporation Nucleic acid and amino acid sequences involved in pain
US20030092013A1 (en) 2001-08-16 2003-05-15 Vitivity, Inc. Diagnosis and treatment of vascular disease
AU2002313559A1 (en) 2001-08-23 2003-03-10 Oxford Biomedica (Uk) Limited Genes
US6902930B2 (en) 2001-08-29 2005-06-07 Vanderbilt University Human Mob-5 (IL-24) receptors and uses thereof
US20030124579A1 (en) 2001-09-05 2003-07-03 Eos Biotechnology, Inc. Methods of diagnosis of ovarian cancer, compositions and methods of screening for modulators of ovarian cancer
AU2002336446B2 (en) 2001-09-06 2008-03-06 Agensys, Inc. Nucleic acid and corresponding protein entitled STEAP-1 useful in treatment and detection of cancer
AU2002330039A1 (en) 2001-09-17 2003-04-01 Eos Biotechnology, Inc. Methods of diagnosis of cancer compositions and methods of screening for modulators of cancer
MXPA04002593A (es) 2001-09-18 2004-05-31 Genentech Inc Composiciones y metodos para el diagnostico y tratamiento de tumor.
WO2003025228A1 (en) 2001-09-18 2003-03-27 Proteologics, Inc. Methods and compositions for treating hcap associated diseases
WO2003025148A2 (en) 2001-09-19 2003-03-27 Nuvelo, Inc. Novel nucleic acids and polypeptides
WO2003026577A2 (en) 2001-09-24 2003-04-03 Seattle Genetics, Inc. P-amidobenzylethers in drug delivery agents
US7091186B2 (en) 2001-09-24 2006-08-15 Seattle Genetics, Inc. p-Amidobenzylethers in drug delivery agents
WO2003026493A2 (en) 2001-09-28 2003-04-03 Bing Yang Diagnosis and treatment of diseases caused by mutations in cd72
AU2002362436A1 (en) 2001-10-03 2003-04-14 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Modulators of lymphocyte activation and migration
US20040249144A1 (en) 2001-10-03 2004-12-09 Zairen Sun Regulated breast cancer genes
US20050123925A1 (en) 2002-11-15 2005-06-09 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
CA2842429A1 (en) 2001-10-19 2003-05-01 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of inflammatory bowel disorders
US7825089B2 (en) 2001-10-24 2010-11-02 National Jewish Health Three-dimensional structures of TALL-1 and its cognate receptors and modified proteins and methods related thereto
KR100996226B1 (ko) 2001-10-31 2010-11-24 유니버시티 오브 노스 텍사스 헬스 사이언스 센터 뼈 형태발생 단백질(ｂｍｐ), ｂｍｐ 수용체 및 ｂｍｐ결합 단백질 및 녹내장 진단 및 치료에서 그의 용도
US20030232350A1 (en) 2001-11-13 2003-12-18 Eos Biotechnology, Inc. Methods of diagnosis of cancer, compositions and methods of screening for modulators of cancer
WO2003042661A2 (en) 2001-11-13 2003-05-22 Protein Design Labs, Inc. Methods of diagnosis of cancer, compositions and methods of screening for modulators of cancer
US20050123536A1 (en) 2001-11-20 2005-06-09 Che-Leung Law Treatment of immunological disorders using anti-dc30 antibodies
US7344843B2 (en) 2001-11-29 2008-03-18 Serono Genetics Institute S.A. Agonists and antagonists of prolixin for the treatment of metabolic disorders
EP2298817A1 (en) 2001-12-03 2011-03-23 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Hybrid antibodies
AU2002349784A1 (en) 2001-12-03 2003-06-17 Asahi Kasei Pharma Corporation Nf-kappab activating genes
WO2003054152A2 (en) 2001-12-10 2003-07-03 Nuvelo, Inc. Novel nucleic acids and polypeptides
CA2471504C (en) 2002-01-07 2014-05-20 Euroscreen S.A. Ligand for g-protein coupled receptor gpr43 and uses thereof
US20030134790A1 (en) 2002-01-11 2003-07-17 University Of Medicine And Dentistry Of New Jersey Bone Morphogenetic Protein-2 And Bone Morphogenetic Protein-4 In The Treatment And Diagnosis Of Cancer
CA2473549C (en) 2002-01-16 2011-02-15 Japan Science And Technology Agency Moving-image holographic reproducing device and color moving-image holographic reproducing device
US7452675B2 (en) 2002-01-25 2008-11-18 The Queen's Medical Center Methods of screening for TRPM4b modulators
JP2005526501A (ja) 2002-02-21 2005-09-08 デューク・ユニヴァーシティ 自己免疫疾患用の試薬および治療方法
EP1575480A4 (en) 2002-02-22 2008-08-06 Genentech Inc COMPOSITIONS AND METHODS FOR TREATING DISEASES RELATED TO THE IMMUNE SYSTEM
US20030165966A1 (en) 2002-03-01 2003-09-04 Marcia Belvin MSRAs as modifiers of the p53 pathway and methods of use
US20050287147A1 (en) 2002-05-15 2005-12-29 Reinhard Ebner Cancer-linked gene as target for chemotherapy
US20050220798A1 (en) 2002-06-04 2005-10-06 Reinhard Ebner Cancer-linked gene as target for chemotherapy
US6660856B2 (en) 2002-03-08 2003-12-09 Kaohsiung Medical University Synthesis of pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepine analogues
EP2258712A3 (en) 2002-03-15 2011-05-04 Multicell Immunotherapeutics, Inc. Compositions and Methods to Initiate or Enhance Antibody and Major-histocompatibility Class I or Class II-restricted T Cell Responses by Using Immunomodulatory, Non-coding RNA Motifs
WO2004000997A2 (en) 2002-03-19 2003-12-31 Curagen Corporation Therapeutic polypeptides, nucleic acids encoding same, and methods of use
CA2478981A1 (en) 2002-03-21 2003-10-02 Sunesis Pharmaceuticals, Inc. Identification of kinase inhibitors
EP1494693B1 (en) 2002-03-22 2010-12-08 Biogen Idec MA Inc. Cripto-specific antibodies
US7193069B2 (en) 2002-03-22 2007-03-20 Research Association For Biotechnology Full-length cDNA
WO2003089624A2 (en) 2002-03-25 2003-10-30 Uab Research Foundation Fc receptor homolog, reagents, and uses thereof
WO2003083074A2 (en) 2002-03-28 2003-10-09 Idec Pharmaceuticals Corporation Novel gene targets and ligands that bind thereto for treatment and diagnosis of colon carcinomas
US20030194704A1 (en) 2002-04-03 2003-10-16 Penn Sharron Gaynor Human genome-derived single exon nucleic acid probes useful for gene expression analysis two
EP1572916A4 (en) 2002-04-05 2007-05-30 Agensys Inc NUCLEIC ACID AND CORRESPONDING PROTEIN WITH THE NAME 98P4B6, SUITABLE FOR THE TREATMENT AND DETECTION OF CANCER
AU2003223520A1 (en) 2002-04-12 2003-10-27 Mitokor Targets for therapeutic intervention identified in the mitochondrial proteome
KR20040101502A (ko) 2002-04-16 2004-12-02 제넨테크, 인크. 종양의 진단 및 치료 방법 및 이를 위한 조성물
US20030224467A1 (en) 2002-04-17 2003-12-04 Osborne C. Kent AIB1 as a prognostic marker and predictor of resistance to endocrine therapy
AU2003228869A1 (en) 2002-05-03 2003-11-17 Incyte Corporation Transporters and ion channels
WO2003101388A2 (en) 2002-05-30 2003-12-11 Bristol-Myers Squibb Company Human solute carrier family 7 member 11 (hslc7a11)
WO2003101283A2 (en) 2002-06-04 2003-12-11 Incyte Corporation Diagnostics markers for lung cancer
DE60336227D1 (de) 2002-06-06 2011-04-14 Oncotherapy Science Inc Gene und proteine mit bezug zu menschlichem kolonkrebs
AU2003242633A1 (en) 2002-06-06 2003-12-22 Molecular Engines Laboratories Dudulin genes, non-human animal model: uses in human hematological disease
EP1576111A4 (en) 2002-06-07 2006-10-18 Avalon Pharmaceuticals CANCER-ASSOCIATED GENE AS A TARGET FOR CHEMOTHERAPY
WO2003105758A2 (en) 2002-06-12 2003-12-24 Avalon Pharmaceuticals, Inc. Cancer-linked gene as target for chemotherapy
US20040249130A1 (en) 2002-06-18 2004-12-09 Martin Stanton Aptamer-toxin molecules and methods for using same
JP2005533794A (ja) 2002-06-18 2005-11-10 アーケミックス コーポレイション アプタマー−毒素分子およびこれを使用する方法
AU2003245615A1 (en) 2002-06-20 2004-01-06 The Regents Of The University Of California Compositions and methods for modulating lymphocyte activity
WO2004001004A2 (en) 2002-06-21 2003-12-31 Johns Hopkins University School Of Medicine Membrane associated tumor endothelium markers
DE10229834A1 (de) 2002-07-03 2004-01-29 Zinser Textilmaschinen Gmbh Streckwerk für Spinnmaschinen mit nachgeordneter Verdichtungsvorrichtung
AU2003281515A1 (en) 2002-07-19 2004-02-09 Cellzome Ag Protein complexes of cellular networks underlying the development of cancer and other diseases
WO2004011611A2 (en) 2002-07-25 2004-02-05 Genentech, Inc. Taci antibodies and uses thereof
JP4741838B2 (ja) 2002-07-31 2011-08-10 シアトル ジェネティクス，インコーポレーテッド 癌、自己免疫疾患または感染症を治療するための薬物結合体およびその使用
US20050180972A1 (en) 2002-07-31 2005-08-18 Wahl Alan F. Anti-CD20 antibody-drug conjugates for the treatment of cancer and immune disorders
JP2004121218A (ja) 2002-08-06 2004-04-22 Jenokkusu Soyaku Kenkyusho:Kk 気管支喘息または慢性閉塞性肺疾患の検査方法
AU2003251471A1 (en) 2002-08-06 2004-02-25 Bayer Healthcare Ag Diagnostics and therapeutics for diseases associated with human cxc chemokine receptor 5(cxcr5)
EP1578371A4 (en) 2002-08-19 2009-05-20 Genentech Inc COMPOSITIONS AND METHODS FOR DIAGNOSING AND TREATING TUMORS
US7504211B2 (en) 2002-08-27 2009-03-17 Bristol-Myers Squibb Company Methods of using EPHA2 for predicting activity of compounds that interact with and/or modulate protein tyrosine kinases and/or protein tyrosine kinase pathways in breast cells
WO2004020595A2 (en) 2002-08-29 2004-03-11 Five Prime Therapeutics, Inc. Novel human polypeptides encoded by polynucleotides
AU2003256038A1 (en) 2002-08-30 2004-03-19 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Self-immolative dendrimers releasing many active moieties upon a single activating event
AU2002951346A0 (en) 2002-09-05 2002-09-26 Garvan Institute Of Medical Research Diagnosis of ovarian cancer
CN1691964A (zh) 2002-09-06 2005-11-02 曼康公司 表位序列
CA2498264A1 (en) 2002-09-09 2004-05-13 Nura, Inc. G protein coupled receptors and uses thereof
JP2004113151A (ja) 2002-09-27 2004-04-15 Sankyo Co Ltd 癌遺伝子及びその用途
CA2500978A1 (en) 2002-10-03 2004-04-15 Mcgill University Antibodies and cyclic peptides which bind cea (carcinoembryonic antigen) and their use as cancer therapeutics
CA2501131A1 (en) 2002-10-04 2004-04-22 Van Andel Research Institute Molecular sub-classification of kidney tumors and the discovery of new diagnostic markers
US20040138269A1 (en) 2002-10-11 2004-07-15 Sugen, Inc. Substituted pyrroles as kinase inhibitors
EP2364716A3 (en) 2002-11-08 2012-01-11 Genentech, Inc. Compositions and methods for the treatment of natural killer cell related diseases
US20040146907A1 (en) 2002-11-13 2004-07-29 Genentech, Inc. Methods and compositions for detecting dysplasia
GB0226593D0 (en) 2002-11-14 2002-12-24 Consultants Ltd Compounds
JP2006507322A (ja) 2002-11-14 2006-03-02 シンタルガ・ビーブイ 多重自己脱離放出スペーサーとして構築されたプロドラッグ
DK1569685T3 (da) 2002-11-15 2012-11-12 Univ Colorado Regents Komplementmodulatorer rettet mod komplementreceptor-2
MXPA05005237A (es) 2002-11-15 2005-08-16 Univ Arkansas Gen ca125 y su uso para diagnostico e intervenciones terapeuticas.
US20080213166A1 (en) 2002-11-20 2008-09-04 Biogen Idec Inc. Novel Gene Targets and Ligands that Bind Thereto for Treatment and Diagnosis of Colon Carcinomas
AU2003294462C1 (en) 2002-11-21 2011-06-30 University Of Utah Research Foundation Purinergic modulation of smell
US20040253606A1 (en) 2002-11-26 2004-12-16 Protein Design Labs, Inc. Methods of detecting soft tissue sarcoma, compositions and methods of screening for soft tissue sarcoma modulators
WO2004053079A2 (en) 2002-12-06 2004-06-24 Diadexus, Inc. Compositions, splice variants and methods relating to ovarian specific genes and proteins
JP2004198419A (ja) 2002-12-13 2004-07-15 Bayer Healthcare Llc Ｔｉｍｐ１を用いた検出方法
US7276372B2 (en) 2002-12-20 2007-10-02 Pdl Biopharma, Inc. Antibodies against GPR64 and uses thereof
AU2003299819A1 (en) 2002-12-23 2004-07-22 Human Genome Sciences, Inc. Neutrokine-alpha conjugate, neutrokine-alpha complex, and uses thereof
CA2512536A1 (en) 2003-01-08 2004-07-29 Bristol-Myers Squibb Company Biomarkers and methods for determining sensitivity to epidermal growth factor receptor modulators
US20050227301A1 (en) 2003-01-10 2005-10-13 Polgen Cell cycle progression proteins
WO2004063355A2 (en) 2003-01-10 2004-07-29 Protein Design Labs, Inc. Novel methods of diagnosis of metastatic cancer, compositions and methods of screening for modulators of matastatic cancer
EP1583820A4 (en) 2003-01-14 2007-07-18 Bristol Myers Squibb Co ASSOCIATED POLYNUCLEOTIDES AND POLYPEPTIDES ASSOCIATED WITH THE NF-KB WAY
US7258971B2 (en) 2003-01-15 2007-08-21 Bayer Healthcare Ag Methods and compositions for treating urological disorders using carboxypeptidase Z identified as 8263
EP1594893A2 (en) 2003-02-14 2005-11-16 Sagres Discovery, Inc. Therapeutic targets in cancer
US20030224411A1 (en) 2003-03-13 2003-12-04 Stanton Lawrence W. Genes that are up- or down-regulated during differentiation of human embryonic stem cells
DE60326060D1 (de) 2003-03-31 2009-03-19 Council Scient Ind Res Nichtvernetzende pyrroloä2,1-cüä1,4übenzodiazepine als potentielle antitumor-agentien und ihre herstellung
GB0321295D0 (en) 2003-09-11 2003-10-15 Spirogen Ltd Synthesis of protected pyrrolobenzodiazepines
GB0416511D0 (en) 2003-10-22 2004-08-25 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
US7511032B2 (en) 2003-10-22 2009-03-31 The United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Pyrrolobenzodiazepine derivatives, compositions comprising the same and methods related thereto
CN104998273A (zh) 2003-11-06 2015-10-28 西雅图基因公司 能够与配体偶联的单甲基缬氨酸化合物
WO2005079479A2 (en) 2004-02-17 2005-09-01 Absalus, Inc. Super-humanized antibodies against respiratory syncytial virus
AU2005216251B2 (en) 2004-02-23 2011-03-10 Genentech, Inc. Heterocyclic self-immolative linkers and conjugates
GB0404578D0 (en) 2004-03-01 2004-04-07 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
AU2005219626B2 (en) 2004-03-01 2010-11-18 Medimmune Limited 11-hydroxy-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-one derivatives as key intermediates for the preparation of C2 substituted pyrrolobenzodiazepines
GB0404577D0 (en) 2004-03-01 2004-04-07 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
GB0404574D0 (en) 2004-03-01 2004-04-07 Spirogen Ltd Amino acids
DE102004010943A1 (de) 2004-03-03 2005-09-29 Degussa Ag Verfahren zur Herstellung von N-geschützten 4-Ketprolinderivaten
JP5166861B2 (ja) 2004-03-09 2013-03-21 スピロゲン リミティッド ピロロベンゾジアゼピン
FR2869231B1 (fr) 2004-04-27 2008-03-14 Sod Conseils Rech Applic Composition therapeutique contenant au moins un derive de la pyrrolobenzodiazepine et la fludarabine
US7833452B2 (en) 2004-05-11 2010-11-16 The General Hospital Corporation Method for making oxidation resistant polymeric material
GB0410725D0 (en) 2004-05-13 2004-06-16 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepine therapeutic agents
EP3088004B1 (en) 2004-09-23 2018-03-28 Genentech, Inc. Cysteine engineered antibodies and conjugates
CA2587589A1 (en) 2004-11-29 2006-06-22 Seattle Genetics, Inc. Engineered antibodies and immunoconjugates
US7849909B2 (en) 2004-12-24 2010-12-14 Showa Denko K.K. Production method of thermoelectric semiconductor alloy, thermoelectric conversion module and thermoelectric power generating device
KR101385886B1 (ko) 2005-02-03 2014-04-24 안티토페 리미티드 인간 항체들과 단백질들
CA2605507C (en) 2005-04-19 2016-06-28 Seattle Genetics, Inc. Humanized anti-cd70 binding agents and uses thereof
GB0508084D0 (en) 2005-04-21 2005-06-01 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
DE602006011300D1 (de) 2005-04-21 2010-02-04 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepine
US20070154906A1 (en) 2005-10-05 2007-07-05 Spirogen Ltd. Methods to identify therapeutic candidates
WO2007039752A1 (en) 2005-10-05 2007-04-12 Spirogen Limited Alkyl 4- [4- (5-oxo-2, 3, 5, 11a-tetrahyd0-5h-pyrr0l0 [2, 1-c] [1, 4] benzodiazepine-8-yloxy) -butyrylamino]-1h-pyrrole-2-carboxylate derivatives and related compounds for the treatment of a proliferative disease
CA3052368A1 (en) 2005-10-07 2007-04-19 Exelixis, Inc. Azetidines as mek inhibitors
PT1813614E (pt) 2006-01-25 2012-01-09 Sanofi Sa Agentes citotóxicos compreendendo novos derivados de tomaimicina
EA020324B1 (ru) 2006-07-18 2014-10-30 Санофи-Авентис АНТИТЕЛА К РЕЦЕПТОРУ ЭФРИНА EphA2 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
HRP20140331T1 (hr) 2006-08-14 2014-05-09 Xencor, Inc. Optimizirana antitijela usmjerena na cd19
US20080112961A1 (en) 2006-10-09 2008-05-15 Macrogenics, Inc. Identification and Engineering of Antibodies with Variant Fc Regions and Methods of Using Same
EP1914242A1 (en) 2006-10-19 2008-04-23 Sanofi-Aventis Novel anti-CD38 antibodies for the treatment of cancer
WO2008050140A2 (en) 2006-10-27 2008-05-02 Spirogen Limited Compounds for treatment of parasitic infection
PT2099823E (pt) 2006-12-01 2014-12-22 Seattle Genetics Inc Agentes de ligação ao alvo variantes e suas utilizações
AU2008251608B2 (en) 2007-05-08 2014-03-27 Genentech, Inc. Cysteine engineered anti-MUC16 antibodies and antibody drug conjugates
DK2019104T3 (da) 2007-07-19 2013-12-16 Sanofi Sa Cytotoksiske midler, der omfatter nye tomaymycinderivater, og terapeutisk anvendelse deraf
JP5606916B2 (ja) 2007-10-19 2014-10-15 ジェネンテック， インコーポレイテッド システイン操作抗ｔｅｎｂ２抗体および抗体薬物結合体
GB0722087D0 (en) 2007-11-09 2007-12-19 Spirogen Ltd Polyamides
GB0722088D0 (en) 2007-11-09 2007-12-19 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
EP2842575B1 (en) 2008-03-18 2017-09-27 Seattle Genetics, Inc. Auristatin drug linker conjugates
EP2109244A1 (de) 2008-04-09 2009-10-14 Siemens Aktiengesellschaft Verfahren zur sicherheitsgerichteten Übertragung Sicherheitsschaltgerät und Kontrolleinheit
CN104524592B (zh) 2008-04-30 2018-06-05 伊缪诺金公司 交联剂和它们的用途
EP2300052A4 (en) 2008-06-16 2012-11-14 Immunogen Inc NEW SYNERGISTIC EFFECTS
GB0813432D0 (en) 2008-07-22 2008-08-27 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
GB0819095D0 (en) 2008-10-17 2008-11-26 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
GB0819097D0 (en) 2008-10-17 2008-11-26 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
CN102365021B (zh) 2009-02-05 2015-07-15 伊缪诺金公司 新型苯并二氮杂*衍生物
EP2398829A2 (en) 2009-02-23 2011-12-28 Glenmark Pharmaceuticals S.A. Humanized antibodies that bind to cd19 and their uses
JP5382792B2 (ja) 2009-08-14 2014-01-08 独立行政法人理化学研究所 光２次非線形薄膜における１次及び２次光感受率異方性同時測定方法、当該方法を実行する装置及び当該方法をコンピュータに実行させるプログラム
FR2949469A1 (fr) 2009-08-25 2011-03-04 Sanofi Aventis Derives anticancereux, leur preparation et leur application en therapeutique
RU2012112550A (ru) 2009-09-01 2013-10-10 Эбботт Лэборетриз Иммуноглобулины с двумя вариабельными доменами и их применение
US20110070227A1 (en) 2009-09-18 2011-03-24 Anna-Marie Novotney-Barry Treatment of Autoimmune and Inflammatory Diseases
CA2775350A1 (en) 2009-09-24 2011-03-31 Seattle Genetics, Inc. Dr5 ligand drug conjugates
WO2011100227A1 (en) 2010-02-09 2011-08-18 Bristol-Myers Squibb Company Benzylpyrrolidinone derivatives as modulators of chemokine receptor activity
EP2533810B1 (en) 2010-02-10 2016-10-12 ImmunoGen, Inc. Cd20 antibodies and uses thereof
WO2011100398A1 (en) 2010-02-10 2011-08-18 Immunogen, Inc. Cd20 antibodies and uses thereof
WO2011130615A2 (en) 2010-04-15 2011-10-20 Dr. Reddy's Laboratories Ltd. Preparation of lacosamide
MX2012011900A (es) 2010-04-15 2013-03-21 Seattle Genetics Inc Conjugados de pirrolobenzodiazepina diana.
US8697688B2 (en) 2010-04-15 2014-04-15 Seattle Genetics Inc. Pyrrolobenzodiazepines used to treat proliferative diseases
HRP20130953T1 (hr) 2010-04-15 2013-11-22 Spirogen Sàrl Pirolobenzodiazepini i njihovi konjugati
GB201006340D0 (en) 2010-04-15 2010-06-02 Spirogen Ltd Synthesis method and intermediates
NO3056203T3 (sr) 2010-04-21 2018-05-12
FR2963007B1 (fr) 2010-07-26 2013-04-05 Sanofi Aventis Derives anticancereux, leur preparation et leur application therapeutique
EP2638066A4 (en) 2010-11-09 2015-06-03 Medimmune Llc ANTIBODY EQUIPMENT FOR HOMOGENEOUS CONJUGATION
SMT201900181T1 (it) 2011-02-15 2019-05-10 Immunogen Inc Metodi di preparazione di coniugati
US9135118B2 (en) 2011-03-07 2015-09-15 Aptare, Inc. System to catalog and search point-in-time instances of a file system
EP2751120B1 (en) 2011-09-20 2018-08-22 MedImmune Limited Pyrrolobenzodiazepines as unsymmetrical dimeric pbd compounds for inclusion in targeted conjugates
CA2850373C (en) 2011-10-14 2019-07-16 Seattle Genetics, Inc. Pyrrolobenzodiazepines and targeted conjugates
CN103998450B (zh) 2011-10-14 2017-03-08 麦迪穆有限责任公司 吡咯并苯并二氮杂卓
US9387259B2 (en) 2011-10-14 2016-07-12 Seattle Genetics, Inc. Pyrrolobenzodiazepines and targeted conjugates
CN110183470A (zh) 2011-10-14 2019-08-30 麦迪穆有限责任公司 吡咯并苯并二氮杂卓
BR112014009070B1 (pt) 2011-10-14 2021-11-23 Medimmune Limited Método de síntese e intermediários úteis na preparação de pirrolobenzo-diazepinas
PL2750713T3 (pl) 2011-10-14 2016-03-31 Medimmune Ltd Pirolobenzodiazepiny i ich koniugaty
JP2013194140A (ja) 2012-03-19 2013-09-30 Fuji Xerox Co Ltd トナー用ポリエステル樹脂、静電荷像現像用トナー、静電荷像現像剤、トナーカートリッジ、プロセスカートリッジ、画像形成装置及び画像形成方法
JP6125614B2 (ja) 2012-04-30 2017-05-10 ユーシーエル ビジネス ピーエルシー ピロロベンゾジアゼピン
NZ701290A (en) 2012-04-30 2016-08-26 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines
US9062577B2 (en) 2012-05-14 2015-06-23 Southwest Research Institute Diesel engine operation for fast transient response and low emissions
WO2013177481A1 (en) 2012-05-25 2013-11-28 Immunogen, Inc. Benzodiazepines and conjugates thereof
US20140030280A1 (en) 2012-07-09 2014-01-30 Genentech, Inc. Anti-cd79b antibodies and immunoconjugates
HK1209043A1 (en) 2012-07-09 2016-03-24 基因泰克公司 Immunoconjugates comprising anti-cd22 antibodies
CN104717979A (zh) 2012-08-02 2015-06-17 基因泰克公司 抗etbr抗体和免疫偶联物
WO2014031566A1 (en) 2012-08-22 2014-02-27 Immunogen, Inc. Cytotoxic benzodiazepine derivatives
PL2906251T3 (pl) 2012-10-12 2018-02-28 Adc Therapeutics Sa Koniugaty pirolobenzodiazepina-przeciwciało anty-CD22
CN110256469B (zh) 2012-10-12 2022-05-17 麦迪穆有限责任公司 吡咯并苯并二氮杂卓及其结合物
WO2014057119A1 (en) 2012-10-12 2014-04-17 Adc Therapeutics Sàrl Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
ES2680153T3 (es) 2012-10-12 2018-09-04 Adc Therapeutics Sa Conjugados de anticuerpos anti-PSMA-pirrolobenzodiazepinas
DK2839860T3 (da) 2012-10-12 2019-06-17 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepiner og konjugater deraf
KR20150083856A (ko) 2012-10-12 2015-07-20 에이디씨 테라퓨틱스 에스에이알엘 피롤로벤조디아제핀-항-her2 항체 컨주게이트
EP2906249B1 (en) 2012-10-12 2018-06-27 MedImmune Limited Synthesis and intermediates of pyrrolobenzodiazepine derivatives for conjugation
WO2014057120A1 (en) 2012-10-12 2014-04-17 Adc Therapeutics Sàrl Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
DK2906253T3 (en) 2012-10-12 2018-10-22 Adc Therapeutics Sa Pyrrolobenzodiazepine anti-PSMA antibody conjugates
MX364329B (es) 2012-10-12 2019-04-23 Medimmune Ltd Conjugados del anticuerpo pirrolobenzodiazepina.
WO2014057118A1 (en) 2012-10-12 2014-04-17 Adc Therapeutics Sarl Pyrrolobenzodiazepine-anti-cd22 antibody conjugates
US20140121126A1 (en) 2012-10-25 2014-05-01 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Methods of detecting axl and gas6 in cancer patients
JP6133431B2 (ja) 2012-11-24 2017-05-24 ハンジョウ ディーエーシー バイオテック シーオー．，エルティディ．Ｈａｎｇｚｈｏｕ Ｄａｃ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｃｏ．，Ｌｔｄ． 親水性連結体及び薬物分子と細胞結合分子との共役反応における親水性連結体の使用
CN105246894A (zh) 2012-12-21 2016-01-13 斯皮罗根有限公司 用于治疗增殖性和自身免疫疾病的非对称吡咯并苯并二氮杂卓二聚物
EA031585B1 (ru) 2012-12-21 2019-01-31 Медимьюн Лимитед Пирролобензодиазепины и их конъюгаты
TR201908761T4 (tr) 2013-02-22 2019-07-22 Abbvie Stemcentrx Llc Antidll3-antikor-pbd konjugatları ve kullanımları.
ES2687439T3 (es) 2013-03-13 2018-10-25 Medimmune Limited Pirrolobenzodiazepinas y conjugados de las mismas
CN105142674B (zh) 2013-03-13 2018-11-13 麦迪穆有限责任公司 吡咯并苯并二氮杂卓和其结合物
NZ710745A (en) 2013-03-13 2019-03-29 Genentech Inc Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
JP2016518382A (ja) 2013-04-26 2016-06-23 ピエール、ファーブル、メディカマン Ａｘｌ抗体薬物複合体および癌の治療のためのその使用
JPWO2015016253A1 (ja) 2013-07-30 2017-03-02 東レ株式会社 分離膜エレメント
CA2922544A1 (en) 2013-08-28 2015-03-05 Stemcentrx, Inc. Engineered anti-dll3 conjugates and methods of use
NL2011583C2 (en) 2013-10-10 2015-04-13 Wwinn B V Module, system and method for detecting acoustical failure of a sound source.
US10010624B2 (en) 2013-10-11 2018-07-03 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
WO2015052533A1 (en) 2013-10-11 2015-04-16 Spirogen Sàrl Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
US9956299B2 (en) 2013-10-11 2018-05-01 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine—antibody conjugates
US9950078B2 (en) 2013-10-11 2018-04-24 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
GB201317981D0 (en) 2013-10-11 2013-11-27 Spirogen Sarl Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
EP3055423B1 (en) 2013-10-11 2019-12-25 Cellectis Method for detecting nucleic acid sequences of interest using talen protein
GB201318069D0 (en) 2013-10-11 2013-11-27 Maersk Olie & Gas Seismic data processing method and apparatus
GB201317982D0 (en) 2013-10-11 2013-11-27 Spirogen Sarl Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
DE102013220528B4 (de) 2013-10-11 2015-05-07 Continental Automotive Gmbh Einspritzventil und Verfahren zum Betreiben eines Einspritzventils
CN105848685B (zh) 2013-12-16 2020-09-22 健泰科生物技术公司 拟肽化合物及其抗体药物偶联物
WO2015112822A1 (en) 2014-01-24 2015-07-30 Kolltan Pharmaceuticals, Inc. Antibody-drug conjugates targeting kit receptor and uses thereof
GB201406767D0 (en) 2014-04-15 2014-05-28 Cancer Rec Tech Ltd Humanized anti-Tn-MUC1 antibodies anf their conjugates
GB201410826D0 (en) * 2014-06-18 2014-07-30 Bergenbio As Anti-axl antibodies
CN106687141A (zh) 2014-09-10 2017-05-17 麦迪穆有限责任公司 吡咯并苯并二氮杂卓及其缀合物
US9751946B2 (en) 2014-09-12 2017-09-05 Genentech, Inc. Anti-CLL-1 antibodies and immunoconjugates
GB201416112D0 (en) 2014-09-12 2014-10-29 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
KR20170067771A (ko) 2014-09-17 2017-06-16 제넨테크, 인크. 피롤로벤조디아제핀 및 이의 항체 디설파이드 컨주게이트
CN107106701B (zh) 2014-10-03 2020-11-06 西纳福克斯股份有限公司 磺酰胺接头、其缀合物及制备方法
GB201506388D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Berkel Patricius H C Van And Cancer Res Technology Ltd And Howard Philip W Site-specific antibody-drug conjugates
GB201506393D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Berkel Patricius H C Van And Howard Philip W Site-specific antibody-drug conjugates
GB201506399D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Berkel Patricius H C Van And Howard Philip W Site-specific antibody-drug conjugates
GB201506409D0 (en) * 2015-04-15 2015-05-27 Williams David G And Berkel Patricius H C Van And Howard Philip W Humanized anti-axl antibodies and their conjugates
GB201506407D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Berkel Patricius H C Van And Howard Philip W Site-specific antibody-drug conjugates
GB201506402D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Berkel Patricius H C Van And Howard Philip W Site-specific antibody-drug conjugates
TW201709932A (zh) 2015-06-12 2017-03-16 西雅圖遺傳學公司 Ｃｄ１２３抗體及其共軛物
WO2017137456A1 (en) * 2016-02-08 2017-08-17 Synaffix B.V. Bioconjugates containing sulfamide linkers for use in treatment

Also Published As

Publication number Publication date
ES2871001T3 (es) 2021-10-28
BR112019016373A2 (pt) 2020-04-07
US11813335B2 (en) 2023-11-14
DK3544636T3 (da) 2021-05-10
EP3544636B1 (en) 2021-03-31
CN110267686A (zh) 2019-09-20
KR102181375B1 (ko) 2020-11-25
SI3544636T1 (sl) 2021-08-31
JP6671555B2 (ja) 2020-03-25
MX2019009428A (es) 2019-10-07
MX375569B (es) 2025-03-04
BR112019016373B1 (pt) 2022-01-25
US20220008552A1 (en) 2022-01-13
CY1124402T1 (el) 2022-07-22
US20210093731A1 (en) 2021-04-01
PL3544636T3 (pl) 2021-12-06
KR20200032243A (ko) 2020-03-25
CA3047683A1 (en) 2018-08-16
US11160872B2 (en) 2021-11-02
AU2018217926B2 (en) 2019-10-03
NZ754810A (en) 2023-04-28
CN110267686B (zh) 2023-06-09
EP3544636A1 (en) 2019-10-02
CA3047683C (en) 2020-03-10
JP2020506949A (ja) 2020-03-05
WO2018146189A1 (en) 2018-08-16
HUE054689T2 (hu) 2021-09-28
SMT202100543T1 (it) 2021-11-12
LT3544636T (lt) 2021-06-25
UA125198C2 (uk) 2022-01-26
HRP20210979T1 (hr) 2021-09-17
KR20190100412A (ko) 2019-08-28
PT3544636T (pt) 2021-05-04
AU2018217926A1 (en) 2019-07-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11813335B2 (en) Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
US20230053603A1 (en) Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
HK40056993A (en) Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
HK40012528B (en) Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
HK40012528A (en) Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
EA039826B1 (ru) Конъюгаты пирролобензодиазепин-антитело
EA040749B1 (ru) Конъюгаты пирролобензодиазепин-антитело
HK40012498B (en) Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
HK40012498A (en) Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
HK40023757A (en) Combination therapy with an anti-axl antibody-drug conjugate