[go: up one dir, main page]

RS55961B1 - Jedinjenja i njihova upotreba kao bace inhibitori - Google Patents

Jedinjenja i njihova upotreba kao bace inhibitori

Info

Publication number
RS55961B1
RS55961B1 RS20170483A RSP20170483A RS55961B1 RS 55961 B1 RS55961 B1 RS 55961B1 RS 20170483 A RS20170483 A RS 20170483A RS P20170483 A RSP20170483 A RS P20170483A RS 55961 B1 RS55961 B1 RS 55961B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
mmol
mixture
compound
added
bromo
Prior art date
Application number
RS20170483A
Other languages
English (en)
Inventor
Gabor Csjernyik
Sofia Karlström
Annika Kers
Karin Kolmodin
Martin Nylöf
Liselotte Öhberg
Laszlo Rakos
Lars Sandberg
Fernando Sehgelmeble
Peter Söderman
Britt-Marie Swahn
Berg Stefan Von
Original Assignee
Astrazeneca Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=46314249&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS55961(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Astrazeneca Ab filed Critical Astrazeneca Ab
Publication of RS55961B1 publication Critical patent/RS55961B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A61K31/497—Non-condensed pyrazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4184—1,3-Diazoles condensed with carbocyclic rings, e.g. benzimidazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4188—1,3-Diazoles condensed with other heterocyclic ring systems, e.g. biotin, sorbinil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
    • C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/10—Spiro-condensed systems
    • C07D491/107—Spiro-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D491/20—Spiro-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/05—Isotopically modified compounds, e.g. labelled
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/07—Optical isomers

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
  • Heterocyclic Compounds That Contain Two Or More Ring Oxygen Atoms (AREA)
  • Furan Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Description

[0001] Predmetni pronalazak se odnosi na jedinjenja i njihove farmaceutski prihvatljive soli, njihove farmaceutske sastave i njihovu upotrebu kao lekova za lečenje i/ili prevenciju različitih bolesti. Naročito, neka otelotvorenja pronalaska odnose se na jedinjenja ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, koji su inhibitori β-sekretaza i stoga inhibiraju formiranje amiloidnih β (Aβ) peptida i biće upotrebljeni za lečenje i/ili prevenciju Aβ-povezanih patologija kao što su Alchajmerova bolest, Daunov sindrom i β-amiloidna angiopatija, kao što je, ali se ne ograničavajući se na cerebralnu amiloidnu angiopatiju, nasledno cerebralno krvarenje, poremećaje povezane sa kognitivnim oštećenjem kao što je, ali se ne ograničavajući se na, MCI ("blago kognitivno oštećenje"), Alchajmerovu bolest, gubitak pamćenja, simptome nedostatka pažnje povezanih sa Alchajmerovom bolešću, neurodegeneraciju povezanu sa bolestima kao što je Alchajmerova bolest ili demenciju uključujući demenciju mešovitog vaskularnog i degenerativnog porekla, presenilnu demenciju, senilnu demenciju i demenciju povezanu sa Parkinsonovom bolešću, progresivnu supranuklearnu paralizu ili kortikobazalnu degeneraciju.
POZADINA
[0002] Primarni neuropatološki događaj koji određuje Alchajmerovu bolest (AD) je taloženje 40-42 ostatka amiloidnog β-peptida (Aβ) u moždanom parenhimu ili cerebralnim krvnim sudovima. Veliki deo genetskih, biohemijskih ili in vivo podataka podržavaju ključnu ulogu Aβ u patološkim kaskadama koje na kraju dovode do AD. Pacijenti obično pokazuju rane simptome (najčešće gubitak pamćenja) u svojim šezdesetim ili sedamdesetim godinama života. Bolest napreduje sa povećanom demencijom i povišenim Aβ taloženjem. Paralelno sa time, hiperfosforilovan oblik tau proteina povezanog sa mikrotubulama se akumulira unutar neurona dovodeći do dosta negativnih efekata na funkciju neurona. Preovladavajuća radna hipoteza koja se odnosi na privremeni odnos između Aβ i tau patologija navodi da Aβ taloženje prethodi tau agregaciji u ljudskim i životinjskim modelima bolesti. U ovom kontekstu važno je napomenuti da tačna molekularna Aβ priroda koju posreduje ova patološka funkcija je trenutno problem koji se intenzivno proučava. Najverovatnije postoji kontinuum toksičnih vrsta, u rasponu od nižeg reda Aβ oligomera do supramolekularnih sklopova kao što su Aβ vlakna.
[0003] Aβ peptid je sastavni fragment proteina APP Tipa I (Aβ preduslovni amiloidni protein), protein koji je veoma izražen u ljudskim tkivima. Pošto se rastvorljiv Aβ može naći i u plazmi i u cerebralnoj tečnosti (CSF) i u medijumu iz kultivisanih ćelija, APP mora proći proteolizu. Postoje tri glavna APP razlaganja koji su relevantna AD patologiji, takozvani α-, β-, i γ-razlaganja. α-razlaganje koje se javlja otprilike u Aβ domenu u APP-u vrši se od strane metaloproteaza ADAM10 ili ADAM17 (kasnije poznato i kao TACE). β- razlaganje se javlja na N kraju Aβ, generiše se preko transmembrana aspartil proteaze na mestu Beta APP Razlaganja Enzima (BACE1). γ-razlaganje, generišući Aβ C krajeve i naredno oslobađanje peptida, se odvija od strane više pojedinačnih aspartil proteaza koje se zovu γ-sekretaze. ADAM10/17 razlaganje koje prati razdvajanje γ-sekretaze dovodi do oslobađanja rastvorljivog p3 peptida, N-terminalno skraćenog Aβ fragmenta koji ne uspeva da formira amiloidni talog u ljudima. Proteolitička ruta se obično odnosi na ne-amiloidogenu putanju. Uzastopna razlaganja preko BACE1 i γ-sekretaze generiše netaknuti Aβ peptid, stoga je ova procesna šema nazvana amiloidogenom putanjom. Sa ovim znanjem moguće je zamisliti dva moguća načina za smanjenje Aβ proizvodnje: stimulisanjem ne-amiloidogene prerade ili inhibiranjem ili moduliranjem amiloidogene prerade. Primena se fokusira na drugu strategiju, inhibiranje ili moduliranje amiloidogene prerade.
[0004] Amiloidogeni plakovi i vaskularna amiloidna angiopatija takođe karakterišu mozak pacijenata sa trizomijom 21 (Daunov Sindrom), Naslednim Cerebralnim Krvarenjem sa Amiloidozom holandskog tipa (HCHWA-D) i drugim neurodegenerativnim poremećajima. Neurofibrilarni čvorovi se takođe javljaju i kod drugih neurodegenerativnih poremećaja uključujući poremećaje izazvane demencijom (Varghese, J., et al, Journal of Medicinal Chemistry, 2003, 46, 4625-4630). ß-amiloidni talozi su prevashodno agregati Aß peptida, koji zauzvrat predstavljaju proizvod proteolize amiloidnog prekursorskog proteina (APP). Preciznije, Aß peptid je rezultat razlaganja APP-a na C-kraju pomoću jedne ili više γsekretaze i na N-kraju pomoću enzima ß-sekretaze (BACE), takođe poznatim kao aspartil proteaza ili Asp2 ili Beta mesto APP razlaganja enzima (BACE), kao deo ß-amiloidogene putanje.
[0005] BACE aktivnost je direktno povezana sa stvaranjem Aß peptida iz APP-a (Sinha, et al, Nature, 1999, 402, 537-540), i studije sve više ukazuju da se inhibiranjem BACE-a inhibira stvaranje Aß peptida (Roberds, S. L., et al, Human Molecular Genetics, 2001, 10, 1317-1324). BACE je vezana membrana proteina tipa 1 koji se sintetizuje kao delimično aktivan proenzim i veoma je prisutan u moždanom tkivu. Smatra se da predstavlja glavnu aktivnost β-sekretaze i smatra se da je to korak koji ograničava brzinu proizvodnje amiloidnog-βpeptida (Aβ).
[0006] Lekovi koji smanjuju ili blokiraju BACE aktivnost mogu stoga smanjiti Aβ nivoe i nivoe Aβ fragmenata u mozgu ili negde drugde gde se Aβ ili fragmenti istih talože i stoga usporavaju formiranje amiloidnih plakova i napredovanje AD-a ili drugih bolesti uključujući i taloženje Aβ ili fragmenata istih. BACE je zbog toga važan kandidat za razvijanje lekova kao tretman i/ili profilaksnu Aβ-povezanih patologija kao što su Daunov sindrom, βamilodina angiopatija kao što je, ali ne ograničavajući se na cerebralnu amiloidnu angiopatiju ili nasledno cerebralno krvarenje, poremećaje povezane sa kognitivnim oštećenjem kao što je ali ne ograničavajući se na MCI ("blago kognitivno oštećenje"), Alchajmerovu bolest, gubitak pamćenja, simptome nedostatka pažnje kao što je Alchajmerova bolest ili demencija uključujući i demenciju mešovitih krvnih sudova i degenerativnog porekla, presenilnu demenciju, senilnu demenciju i demenciju povezanu sa Parkinosovom bolešću, progresivnu supranuklearnu paralizu ili kortikobazalnu degeneraciju. Stoga bi bilo korisno da inhibira taloženje Aβ-a i njihovih delova inhibiranje BACE-a kroz inhibitore kao što su ovde obezbeđena jedinjenja.
[0007] Terapeutski potencijal inhibiranja Aβ taloga je motivisao mnoge grupe da izoluju i okarakterišu sekretazu enzima i da identifikuju njihove potencijalne inhibitore, kao što je obelodanjeno u WO2010/105179 A2 i WO2008/076043 A1.
SUŠTINA PRONALASKA
[0008] Prema jednom aspektu pronalaska dato je jedinjenje koje je (1r,1'R,4R)-4-metoksi-5"-metil-6'-[5-(prop-1-in-1-il)piridin-3-il]-3'H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2"-imidazol]-4"-amin:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0009] Ovaj pristup može takođe obezbediti farmaceutski sastav koji sadrži kao aktivne sastojke terapeutski efikasnu količinu pomenutog jedinjenja ili njenu farmaceutski prihvatljivu so, u sprezi sa najmanje jednim farmaceutski prihvatljivim ekscipijentom, nosiocem ili razblaživačem.
[0010] Jedinjenje ili njena farmaceutski prihvatljiva so se može upotrebiti kao lek.
[0011] Jedinjenje ili njena farmaceutski prihvatljiva so se mogu upotrebiti u metodi tretiranja ili prevencije Aβ-povezanih patologija, gde su pomenute Aβ-povezane patologije Daunov sindrom, β-amiloidna angiopatija, cerebralna amiloidna angiopatija, nasledno cerebralno krvarenje, poremećaji povezani sa kognitivnim oštećenjem, MCI ("blago kognitivno oštećenje"), Alchajmerova bolest, gubitak pamćenja, simptomi smanjenja pažnje povezani sa Alchajmerovom bolešću, neurodegeneracija povezana sa Alchajmerovom bolešću, demencija mešovitih krvnih sudova i vaskularnog porekla, demencija degenerativnog porekla, presenilna demencija, senilna demencija, demencija povezana sa Parkinsovom bolešću, progresivna supranuklearna paraliza ili kortikobazalna degeneracija. Pomenuta upotreba može biti u kombinaciji sa barem jednim kognitivnim poboljšavajućim agensom, agensom za poboljšavanje memorije ili inhibitorom holinesteraze.
[0012] Predmetni pronalazak odnosi se na upotrebu ovim patentom zahtevanih jedinjenja kao i njihovih soli. Soli za upotrebu u farmaceutskim sastavima biće farmaceutski prihvatljive soli ali i druge soli mogu biti korisne za proizvodnju ovim patentom zahtevanih jedinjenja.
[0013] Definicije navedene u ovoj prijavi patenta imaju za cilj da pojasne termine upotrebljene u ovoj prijavi patenta. Termin "ovde" označava celu prijavu patenta.
[0014] Kako se ovde koristi, fraza "zaštitna grupa" označava privremene supstituente koji štite potencijalno reaktivnu funkcionalnu grupu od neželjenih hemijskih transformacija.
Primeri takvih zaštitnih grupa uključuju estre karboksilnih kiselina, silil etre alkohola, i acetale i ketale aldehida i ketona respektivno. Oblast hemije zaštitne grupe je opisana (Greene, T.W.; Wuts, P.G.M. Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd ed.; Wiley: New York, 1999).
[0015] Kako se ovde koristi, "farmaceutski prihvatljivo" korišćeno je da označi ona jedinjenja, materijale, sastave i/ili dozne oblike koji su u okviru medicinske procene podobni za upotrebu u kontaktu sa tkivima ljudi i životinja bez preteranog toksičnog, iritacionog, alergijskog odgovora ili drugih problema ili komplikacija, srazmerno razumnom odnosu korist/rizik.
[0016] Kako se ovde koristi, "farmaceutski prihvatljive soli" se odnosi na derivate obelodanjenih jedinjenja gde je izvorno jedinjenje modifikovano stvaranjem kiselina ili njihovih baznih soli. Primeri farmaceutski prihvatljivih soli uključuju, ali ne ograničavaju se na, mineralne ili organske soli kiselina osnovnih ostataka kao što su amini; alkali ili organske soli kiselih ostataka poput karboksilnih kiselina i sličnog. Farmaceutski prihvatljive soli uključuju netoksične soli ili kvartenerne amonijum soli izvornog jedinjenja formiranog iz npr. netoksične neorganske ili organske kiseline. Na primer, takve netoksične soli uključuju one dobijene iz neorganskih kiselina kao što je hlorovodonična kiselina.
[0017] Farmaceutski prihvatljive soli datog pronalaska mogu biti sintetizovane iz izvornog jedinjenja koje sadrži bazne ili kisele ostatke pomoću konvencionalnih hemijskih metoda. Generalno, takve soli mogu biti pripremljene reagovanjem slobodnih kiselih ili baznih formi ovih jedinjenja sa stehiometrijskom količinom odgovarajuće baze ili kiseline u vodi ili u organskom rastvaraču, ili u smeši oba; generalno se koristi nevodeni medijum kao što je dietil etar, etil acetat, etanol, izopropanol ili acetonitril.
[0018] Gore navedeni aspekt dalje uključuje sve tautomerne forme ovim patentom zahtevanog jedinjenja. Kako se ovde koristi "tautomer" označava drugi strukturalni izomer koji postoji u ravnoteži koja proizilazi iz migracije atoma vodonika. Na primer, keto-enol tautomerizam gde dobijeno jedinjenje ima svojstva i ketona i nezasićenih alkohola. Drugi primeri tautomerizma uključuju 2H-imidazol-4-amin i njihove tautomere 1,2-dihidroimidazol-5-imin, i 2H-imidazol-4-tiol i njihove tautomere 1,2-dihidroimidazol-5-tion.
Podrazumeva se da u složenim primerima kroz ovaj opis samo jedan od tautomera jedinjenja je ucrtan ili imenovan.
[0019] Kako se ovde koristi "stabilno jedinjenje" i "stabilna struktura" imaju za cilj da ukažu na jedinjenje koje je dovoljno robusno da preživi izolaciju do korisnog stepena čistoće iz reakcione smeše i formulacije u efikasno terapeutsko sredstvo.
[0020] Sastavi pronalaska dalje uključuju hidrate i rastvore.
[0021] Dati pronalazak dalje uključuje izotopski obeležena jedinjenja prema pronalasku. "Izotopsko" ili "radioaktivno obeleženo" jedinjenje je jedinjenje prema pronalasku gde jedan ili više atoma bivaju zamenjeni ili supstituisani atomom koji ima atomsku masu ili maseni broj različit od atomske mase ili masenog broja koji se obično nalaze u prirodi (tj. koji se prirodno pojavljuju). Pogodni izotopi koji mogu biti inkorporisani u jedinjenjima datog pronalaska uključuju, ali ne ograničavaju se na,<2>H (takođe se piše D kao deuterijum),<3>H (takođe se piše T kao tricijum),<11>C,<13>C,<14>C,<13>N,<15>N,<15>O,<17>O,<18>O,<18>F,<35>S,<36>Cl,<82>Br,<75>Br,<76>Br,<77>Br,<123>I,<124>I,<125>I i<131>I. Radionukleotid koji je inkorporisan u trenutno radioaktivno obeležena jedinjenja će zavisiti od specifične primene tog radioaktivno obeleženog jedinjenja. Na primer, za in vitro označavanje receptora i oglede nadmetanja, jedinjenja koja inkorporiraju<3>H,<14>C,<82>Br,<125>I,<131>I ili<35>S će biti najkorisnija. Za primenu kod radio-obrade slika<11>C,<18>F,<125>I,<123>I,<124>I,<131>I,<75>Br,<76>Br ili<77>Br će generalno biti najkorisniji.
[0022] Podrazumeva se da "radioaktivno obeleženo jedinjenje" jeste jedinjenje koje je inkorporiralo barem jedan radionukleotid. U nekim primerima radionukleotid je odabran iz grupe koja se sastoji od<3>H,<14>C,<125>I,<35>S i<82>Br.
[0023] Jedinjenje datog pronalaska se može davati kao lek oralno, parenteralno, bukalno, vaginalno, rektalno, inhalacijom, uduvavanjem, sublingvalno, intramuskularno, subkutano, površinski, intranazalno, intraperitonealno, intratorakalno, intravenozno, epiduralno, intratekalno, intracerebroventrikularno i injekcijom u zglobove.
[0024] Doza će zavisiti od načina davanja leka, ozbiljnosti bolesti, godina i težine pacijenta i drugih faktora koji se normalno uzimaju u obzir od strane nadležnog lekara kada određuje individualni režim i nivo doze kao najprikladnije za određenog pacijenta.
[0025] Količina jedinjenja koje će se davati kao lek može varirati za tretiranog pacijenta i variraće od 100 ng/kg težine tela do 100 mg/kg težine tela po danu. Na primer, doze se mogu lako utvrditi od strane iskusnih u oblasti ovog obelodanjivanja i znanja ove oblasti. Stoga stručnjaci mogu lako utvrditi količinu jedinjenja i opcionih aditiva, prenosioca i/ili nosioca u sastavima koji će se primenjivati.
[0026] Pronalazak se takođe odnosi na sledeće aspekte. Farmaceutski sastav koji sadrži kao aktivni sastojak terapeutski efektivnu količinu jedinjenja pronalaska ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u vezi sa barem jednim farmaceutski prihvatljivim ekscipijentom, nosiocem ili razblaživačem. Jedinjenje prema pronalasku ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu kao lek. Jedinjenje prema pronalasku ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u metodi tretiranja ili prevencije patologija povezanih sa Aß-om, gde pomenuta patologija povezana sa Aß jeste Daunov sindrom, (3-amiloidna angiopatija, cerebralna amiloidna angiopatija, nasledno cerebralno krvarenje, poremećaji povezani sa kognitivnim oštećenjima, MCI ("blago kognitivno oštećenje"), Alchajmerova bolest, gubitak pamćenja, simptomi nedostatka pažnje povezani sa Alchajmerovom bolešću, neurodegeneracija povezana sa Alchajmerovom bolešću, demencija mešovitog vaskularnog porekla, demencija degenerativnog porekla, presenilna demencija, senilna demencija, demencija povezana sa Parkinsovom bolešću, progresivna supranuklearna paraliza ili kortikobazalna degeneracija. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u metodi tretiranja patologija povezanih sa Aß-om, gde pomenuta patologija povezana sa Aß-om jeste Alchajmerova bolest. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu gde pomenuta upotreba jeste u kombinaciji sa barem jednim kognitivnim poboljšavajućim agensom, agensom za poboljšavanje memorije ili inhibitorom holinesteraze.
[0027] Tretman Aβ-povezanih patologija Aβ-povezanih patologija izdvojenih iz Alchajmerove bolesti, Daunovog sindroma, β-amiloidne angiopatije, cerebralne amiloidne angiopatije, naslednog cerebralnog krvarenja, poremećaja povezanog sa kognitivnim oštećenjem, MCI ("blago kognitivno oštećenje"), gubitak pamćenja, simptoma nedostatka pažnje povezanog sa Alchajmerovom bolešću, neurodegeneracija povezana sa Alchajmerovom bolešću, demencijom mešanog vaskularnog porekla, demencijom degenerativnog porekla, presenilnom demencijom, demencijom povezanom sa Parkinsovom bolešću, pregresivnom supranuklearnom paralizom, traumatičnom povredom mozga i kortikobazalnom degeneracijom može biti upotrebljen kao monoterapija ili može uključiti, kao dodatak jedinjenju prema pronalasku, kombinovani tretman sa konvencionalnom vrednosnom terapijom u tretiranju jedne ili više bolesti koje su ovde pomenute. Takva konvencionalna terapija može uključiti jednu ili više sledećih kategorija agensa: inhibitori acetil holinesteraze, anti-inflamatorna sredstva, kognitivne i/ili memorijske poboljšivače ili atipične antipsihotične agense. Kognitivni poboljšavajući agensi, agensi za poboljšavanje memorije i inhibitori acetil holinesteraze uključuju, ali ne ograničavaju se na donepezil (ARICEPT), galantamin (REMINYL ili RAZADYNE), rivastigmin (EXELON), takrin (COGNEX) i memantin (NAMENDA, AXURA ili EBIXA). Atipični antipsihotični agensi uključuju, ali ne ograničavaju se na, olanzapin (obeležen kao ZYPREXA), aripiprazol (obeležen kao ABILIFY), risperidon (obeležen kao RISPERDAL), kvetijapin (obeležen kao SEROQUEL), klozapin (obeležen kao CLOZARIL), ziprasidon (obeležen kao GEODON) i olanzipin/fluoksetin (obeležen kao SYMBYAX).
[0028] Takav objedinjen tretman može biti postignut istovremenim, sekvencijalnim ili odvojenim doziranjem individualnih komponenata tretmana. Takva kombinacija proizvoda uključuje jedinjenja prema pronalasku .
[0029] Dodatna konvencionalna terapija može uključiti jednu ili više od sledećih kategorija agensa:
(i) antidepresivi kao što su agomelatin, amitriptilin, amoksiapin, bupropion, citalopram, klomipram, desipramin, doksiepin duloksietin, elazasonan, escitalopram, fluvoksiamin, fluoksietin, gepiron, imipramin, ipsapiron, maprotilin, nortriprilin, nefazodon, paraksoetin, fennelzin, protriptilin, ramelteon, reboksietin, robalzotan, sertralin, sibutramin, tionisoksetin, tranilcipromain, trazodon, trimipramin, venlafaksin, i i ekvivalenti i farmaceutski aktivan izomer(i) i njihovi metabolit(i).
(ii) atipični antipsihotici uključujući na primer kuetiapin i farmaceutski aktivan izomer(e) i njihov metabolit(e).
(iii) antipsihotike uključujući na primer amisulpride, aripoprazol, asenapin, benzisoksidil, bifeprunoks, carbamezapin, klizapin, hlorpomazin, demenzapin, divalproeks, duoksietin, eszopiclone, haloperidol, iliperidon, lamotrigin, lokapin, mesoridazin, olanzapon, paliperidon, perlapin, perpehanzin, fenotiazin, fenilbutilpoperdin, pimozid, prohlorperazin, risperidon, sertindol, sulpirid, suproclon, suriklon, tioridazin, trifluoperazin, trimetozin, valoproat, valoproična kiselina, zopiklon, zotepin, ziprasidon i ekvivalenti i farmaceutski aktivan izomer(e) i njihov metabolit(e).
(iv) anksiolitici uključujući na primer alnespiron, azapiron,benzodiazepin, barbiturat što je adinazolam, alprazolam, balezepam, bentazepam, bromazepam, brotizolam, buspiron, klonazepam, klorazepat, klordiazepoksid, ciprazepam, diazepam, difenhidramin, estazolam, fenobam, flunitrazepam, flurazepam, fosazepam, lorazepam, lormetazepam, meprobamat, midazolam, nitrazepam, oksazepam, prazepam, kuazepam, reklazepam, trakazolat, trepipam, temazepam, triazolam, uldazepam, zolazepam i ekvivalentni i farmaceutski aktivan izomer(e) i njihov metabolit(e).
(v) antikonvulzanti uključuju na primer carbamazepin, klonazepam, etosuksimid, felbamat, fosfenitoin, gabapentin, lakosamid, lamotrogin, levetiracetam, okscarbazepin, fenobarbital, fenitoin, pregabalin, rufinamid, topiramat, valproat, vigabatrin, zonisamid i ekvivalentni i farmaceutski aktivan izomer(e) i njihov metabolit(e).
(vi) Alchajmerove terapije uključuju na primer donepezil, rivastigmin, galantamin, memantin i ekvivalentni i farmaceutski aktivan izomer(e) i njihov metabolit(e).
(vii) Parkinsove terapije uključuju na primer deprenil, L-dop, Rekuip, Mirapeks, MAOB inhibitori kao što su selegin i rasagilin, comP inhibitori kao što je Tasmar, A-2 inhibitori, dopamin inhibitori resorpcije NMDA antagonisti, Nikotin agonisti, Dopamin agonisti i inhibitori neuronske sintaze azot oksida i ekvivalentni i farmaceutski aktivni aktivan izomer(e) i njihov metabolit(e).
(viii) Migrenske terapije uključuju na primer almotriptan, amantadin, bromokriptin, butalbital, cabergoline, dihloralfenazon, dihidroergotamin, eletriptan, frovatriptan, lisurid, naratriptan, pergolide, pizotifen, pramipeksol, rizatriptan, ropinirol, sumatriptan, zolmitriptan, zomitriptan i ekvivalentni i farmaceutski aktivan izomer(e) i njihov metabolit(e).
(ix) Terapije infarkta uključuju na primer trombolitsku terapiju sa npr. aktivazom i desmoteplasom, abciksimab, kitikolin, klopidogrel, eptifibatid, minociklin i ekvivalentni i farmaceutski aktivan izomer(i) i njihovi metabolit(i).
(x) Terapija urinarne inkontinencije uključuje na primer darafenacin, falvoksate, oksibutinin, propiverin, robalzotan, solifenacin, tolterodin i ekvivalentni i farmaceutski aktivan izomer(e) i njihov metabolit(e).
(xi) Terapije neuropatskog bola uključuju na primer lidokain, kapsaicin i antikonvulsante kao šti su gabapentin, pregabalin i antidepresante kao što su duloksetin, venlafaksin, amitriptilin, klomipramin i ekvivalentni i farmaceutski aktivan izomer(e) i njihov metabolit(e).
(xii) Terapije nociceptivnog bola kao što je paracetamol, NSAIDS i coksibs, kao što su celecoksib, etoricoksib, lumiracoksib, valdecoksib, parecoksib, diklofenak, loksoprofen, naproksen, ketoprofen, ibuprofen, nabumeton, meloksikam, piroksikam i opijati kao što su morfin, oksikodon, buprenorfin, tramadol i ekvivalentni i farmaceutski aktivan izomer(e) i njihov metabolit(e).
(xiii) Terapija insomnije uključuje na primer agomelatin, alobarbital, alonimid, amobarbital, benzoktamin, butabarbital, capurid, hloral, kloperidon, koretat, deksoklamol, ethlorvinol, etomidat, glutetimid, halazepam, hidroksizin, meclokualon, melatonin, mefobarbital, metakualon, midaflur, nisobamate, pentobarbital, fenobarbital, propofol, ramelteon, roletamid, triclofos, sekobarbital, zaleplon, zolpidem i ekvivalentni i farmaceutski aktivan izomer(e) i njihov metabolit(e).
(xiv) Stabilizatori raspoloženja uključuju na primer carbamazepin, divalproeks, gabapentin, lamotrigin, litijum, olanzapin, kuetiapin, valproat, valproičnu kiselinu, verapamil ekvivalentni i farmaceutski aktivan izomer(e) i njihov metabolit(e).
[0030] Takvi kombinovani proizvodi uključuju jedinjenje prema ovom pronalasku u okviru doze opisane ovde i drugo farmaceutski aktivno jedinjenje ili jedinjenja u okviru dozvoljene doze i/ili doze opisane u objavljenim referencama.
PRIPREM JEDINJENJA
[0031] Jedinjenje prema datom pronalasku može biti pripremljeno kao slobodna baza ili njena farmaceutski prihvatljiva so pomoću procesa opisanih ispod.
[0032] Kroz sledeći opis takvih procesa podrazumeva se da, gde je prikladno, odgovarajuća zaštitna grupa će biti dodata i kasnije otklonjena iz različitih reaktanata i intermedijera na takav način da će onaj koji se razume u organsku sintezu odmah shvatiti. Konvencionalne procedure za upotrebu takvih zaštitnih grupa kao i primera odgovarajućih zaštitnih grupa su na primer opisane u Protective Groups in Organic Synthesis by T.W. Greene, P.G.M Wutz, 3rd Edition, Wiley-Interscience, New York, 1999. Podrazumeva se da se mikro talasi (MW) mogu alternativno upotrebiti za zagrevanje reakcije smeša. Ovde je obelodanjen proces za pripremanje jedinjenja formule (I) ili njene farmaceutski prihvatljive soli, gde osim ako nije naglašeno drugačije, R<1>-R<9>, n i A su definisani za formulu (I) iznad ili su grupe koje mogu biti konvertovane u R<1>-R<9>ili A u kasnijim transformacijama. Jedinjenje formule (XI) može ekvivalent jedinjenju formule (I). LG predstavlja odlazeću grupu kao što je halogen (kao što su hlorin, bromin ili jod) ili alkil-, aril- ili haloalkil-sulfonat (kao što je triflat), a PG predstavlja zaštitnu grupu. Pomenuti proces se sastoji iz:
Metod (i): Formiranje odgovarajućeg jedinjenja formule (IIIa):
[0034] Keton formule (II) se tretira sa odgovarajućim bazom kao što je natrijum hidrid, KOtBu ili LDA u prisustvu (bis-supstituisanog) alkil halogenida, triflata ili mezilata kako bi dali jedinjenje formule (IIIa) (Šema 1). Pomenuta reakcija može biti izvedena na temperaturi u opsegu između -78 °C i 50 °C u odgovarajućem rastvaraču, kao što je tetrahidrofuran ili dimetilformamid. Alkilacija se može sprovesti na sekvencijalan način sa intermedijerima izolovanim i prečišćenim ili u jednom sudu korak po korak. Ako reakcije zahtevaju proizvod supstituisan sa olefinom, cijanom, sulfonom ili sličnim, može opciono dalje reagovati sa Dieckman-ovom ciklizacijom, RCM-om, nukleofilnom supstitucijom ili cikloadicijom dajući visoko supstituisane spirociklične intermedijere.
Metod (ii): Formiranje odgovarajućeg jedinjenja formule (IIIa):
[0035]
[0036] Keton u formuli (II) reaguje sa aldehidom ili ketonom kao što je formaldehid na temperaturi u opsegu između sobne temperature i 100 °C u prisustvu bilo koje protičke kiseline kao što je borna kiselina (kao što je PhB(OH)2) ili u prisutsvu N-Metilanilinijum trifluoroacetat, u odgovarajućem rastvaraču kao što je benzen ili tuluen (Šema 2).
Intermedijer (IV) gde su Z i Y definisani kao primer hidrogena ili alkila, može reagovati sa različitim dienima koristeći Dile-Alderovu reakciju na temperaturi u opsegu između sobne temperature i 220 °C opciono u zatvorenoj epruveti. Rekacija može biti sprovedena čisto ili u odgovarajućem rastvaraču kao što je benzen, tuluen ili THF. Levis-ovom kiselinom ili bilo kojim drugim agensom koji može pomoći reakciji može biti dodata kako bi se dobili obogaćeni enantiomeri ili diastiomeri. Rezultujući spirociklični prsten može opciono sadržati jedan ili više supstituenata koji dalje mogu biti konvertovani pomoću bilo koje poznate transformacije funksionalne grupe.
Metod (iii): Formiranje odgovarajućeg jedinjenja formule (IIIa):
[0038] Alkil ili cikloalkil ili heterocikloalkil derivat (V) koji sadrži elektron povlači grupe X kao što su cijano, karboksilna kiselina ili alkilestri mogu biti alkilovani sa opcioni supstituisanim orto-halo benzil bromidima ili hloridima (VI) (Y = halogen kao što je brom ili hlor) (Šema 3). Pomenuta reakcija je potpomognuta bazom kao što je LDA, NaH ili LiHMDS u rastvaraču kao što su benzen, THF ili tuluen na temperaturi u opsegu između -78 °C and 80 °C. Alkilovani intermedijer (VII) može biti izolovan i dalje podvrgnut bazi kao što je BuLi ili LDA u rastvaraču kao što je THF kako bi se izvršila ciklizacija prstena. Alternativno se može koristiti hemija prelaska metala kao što su Pd, Cu ili Rh koji sadrže helatirajuće agense kao što su derivati fosfina ili amini u rastvorima kao što su DMF, THF ili tuluen u prisustvu baze kao što je trietilamin ili natrijum karbonat na temperaturi u opsegu između sobne temperature i 100 °C. U slučaju gde proizvod (VII) iz reakcije sadrži supstituent kao što je olefin, sulfan, cijan i slično, oni mogu dalje biti manipulisani (Šema 3) pomoću RCM-a, cikloadicije, nukleofilne supstitucije ili bilo koje druge poznate reakcije dajući visoko obogaćena supstituisana spirociklična jedinjenja (IIIa).
Metod (iv:) Formiranje odgovarajućeg jedinjenja formule (XIa):
[0040] Keton u formuli (III) reaguje sa amonijakom kako bi se formirao intermedijer (VIII) (Šema 4). Jedinjenje formule (VIII) je opciono nije izolovano i može biti podvrgnuto sledećem koraku odmah u sistemu jedne posude. Jedinjenje (VIII) dalje reaguje sa etil 2-oksopropanatom kako bi se formiralo jedinjenje imidazol formule (IX). Pomenuta reakcija može biti izvedena na temperaturi u opsegu između sobne temperature i 160 °C u odgovarajućem rastvaraču kao što je metanol, etanol ili izopropil alkohol.
[0041] Jedinjenje amino imidazol (XIa) može zatim biti dobijeno formiranjem intermedijera (Xa) reagovanjem alkohola iz formule (IX) sa sumpornim reagensom kao što je fosforni pentasulfid u prisustvu baze kao što je piridin (Šema 4). Transformacija do jedinjenja formule (XIa) može biti izvedena reagovanjem intermedijera iz formule (Xa) sa amonijakom, opciono u prisustvu oksidacionog agensa kao što je tert-butil hidroperoksid.
Metod (v): Formiranje odgovarajućeg jedinjenja formule (XI):
[0042]
[0043] Keton iz formule (III) reaguje sa etanebisom(tioamidom) u prisustvu amonijaka kako bi se formiralo jedinjenje iz formule (XIII) (Šema 5). Pomenuta reakcija se može izvesti na temperaturi u opsegu između sobne temperature i 180 °C u odgovarajućem rastvaraču kao što je metanol, etanol ili izopropil alkohol.
[0044] Agens za alkilovanje kao što je metil jodid i tiomidazol iz formule (XIII) reaguju kako bi se formiralo jedinjenje iz formule (XIV) (Šema 5). Pomenuto jedinjenje (XIV) može dalje biti transformisano u jedinjenje iz formule (XI) gde R<1>jeste alkil grupa kao što je metil ili etil, reagovanjem sa organometalnim reagensom kao što je metilmagnezijum bromid ili etilmagnezijum bromid u prisustvu odgovarajućeg katalizatora kao što je [1,3-bis(difenilfosfin)propan]nikl(II) hlorid. Alternativno, jedinjenje iz formule (XI) (R<1>kao što je metil ili etil) može takođe biti dobijeno reagovanjem jedinjenja iz formule (XIV) sa smešom cink jodida i Grignardovog reagensa kao što je metilmagnezijum bromid ili etilmagnezijum bromid u prisustvu odgovarajućeg katalizatora kao što je bis(trifenilfosfin)paladijum(II) hlorid u odgovarajućem rastvaraču kao što je THF, 2-metil-tetrahidrofuran ili tuluen.
Metod (vi) Formiranje odgovarajućeg jedinjenja formule (XI):
[0045]
[0046] Imin iz formule (VIII) reaguje sa etanbisom(tioamidom) kako bi se formiralo jedinjenje iz formule (XIII) (Šema 6). Pomenuta reakcija može biti izvedena na temperaturi u opsegu između 120 °C i 180 °C u odgovarajućem rastvaraču kao što je metanol, etanol ili izopropil alkohol.
[0047] Agens za alkilovanje kao što je metil jodid i tiomidazol formule (XIII) reaguju kako bi se formiralo jedinjenje iz formule (XIV) (Šema 6). Pomenuto jedinjenje iz formule (XIV) može dalje biti transformisano u jedninjenje iz formule (XI), gde je R<1>alkilna grupa kao što je metil ili etil, reagovanjem sa organometalnim reagensom kao što je metilmagnezijum bromid ili etilmagnezijum bromid u prisustvu odgovarajučeg katalizatora kao što je [1,3-bis(difenilfosfin)propan]nikl(II) hlorid. Alternativno, jedinjenje iz formule (XI) (R<1>je alkil kao što je metil ili etil) se takođe može dobiti reagovanjem jedinjenja iz formule (XIV) sa smešom cink jodida i Grignardovog reagensa kao što je metilmagnezijum bromid ili etilmagnezijum bromid u prisustvu odgovarajućeg katalizatora kao što je bis(trifenilfosfin)paladijum(II) hlorid u odgovarajućem rastvaraču kao što je THF, 2-metiltetrahidrofuran ili tuluen.
Metod (vii) Formiranje odgovarajućeg jedinjenja formule (XV):
[0048]
[0049] Jedinjenje iz formule (XV) može biti dobijeno reagovanjem jedinjenja iz formule (III) sa jedinjenjem iz formule (XVI) (Šema 7), gde je R<11>alkil (kao što je na primer tert-butil). Reakcija je izvedena sa prisustvu odgovarajuće Lewis-ove kiseline kao što je jedinjenje iz formule (XVII), gde je R<12>alkil (kao što je etil ili izopropil). Reakcija je izvedena u odgovarajućem rastvaraču (kao što je dihlormetan, 2-metil-tetrahidrofuran ili tetrahidrofuran) na temperaturi u opsegu između sobne temperature i temperature refluksa, opciono sa azeotropnom destilacijom kako bi se uklonio alkohol koji se stvorio tokom reakcije.
Metod (viii) Formiranje odgovarajućeg jedinjenja formule (XVIII):
[0051] Jedinjenje iz formule (XIX) može biti dobijeno reagovanjem jedinjenja iz formule (III) sa hidroksilamin hidrohloridom i bazom kao što je kalijum acetat u odgovarajućem rastvaraču kao što je smeša vode i odgovarajućeg alkohola kao što je etanol na temperaturi refluksa (Šema 8). Pomenuto jedinjenje (XIX) može dalje biti transformisano u jedinjenje iz formule (XVIII) reagovanjem sa jedinjenjem iz formule (XX) gde je R<13>alkil ili aril.
Reakcija se izvodi u odgovarajućem rastvaraču kao što je dihlormetan u prisustvu trietilamina na temperaturi između -78 °C i sobne temperature.
Metod (ix) Formiranje odgovarajućeg jedinjenja formule (XXI):
[0052]
[0053] Jedinjenje iz formule (XXI) gde R<14>je alkil kao što je metil može biti dobijen reagovanjem jedinjenja iz formule (III) sa silikonskim jedinjenjem kao što je LiHMDS u odgovarajućem rastvaraču kao što je dihlormetan, 2-metil-tetrahidrofuran ili tetrahidrofuran (Šema 9).
Metod (x) Formiranje odgovarajućeg jedinjenja formule (XIa):
[0055] Jedinjenje iz formule (VIII) može biti dobijeno reagovanjem jedinjenja (XXIII) (gde PG predstavlja zaštitnu grupu kao što je na primer S(O)R<11>(Metod (vii), formula XV), SiR<14>(kao što je SiMe3) (Metod (ix), formula XXI), P(O)(R<13>)2) (Metod (viii), formula XVIII), S(O)2alkil, C(O)Oalkil, OH ili Oalkil koristeći odgovarajuću metodu uklanjanja zaštitne grupe PG kako bi se formirao imin (VIII) (Šema 10). Odgovarajuća metoda može biti, ali nije ograničena na pomenuto tretirano jedinjenje XXIII sa kiselinom kao što je hlorovodonična kiselina u suvim uslovima u odgovarajućem rastvaraču (kao što je dioksan ili tetrahidrofuran), ili tretman u jonskom rastvaraču kao što je metanol (kada je PG = SiMe3).
Jedinjenje (VIII) može biti izolovano ili može reagovati dalje bez izolovanja. Jedinjenje iz formule (VIII) dalje reaguje sa 2-oksopropan tioamidom (opisan u Asinger et al. Justus Liebigs Annalen der Chemie 1971, vol 744, p.51-64) opciono u prisustvu trietil ortoformata, u rastvaraču kao što je metanol na temperaturi između sobne temperature i temperature refluksa, opciono u Din-Starkovim uslovima, kako bi se dobilo jedinjenje iz formule (Xa). Transformacija jedinjenja formule (XIa) može biti izvedena reagovanjem intermedijera iz formule (Xa) sa amonijakom, opciono u prisustvu oksidacionog agensa, kao što je tert-butil hidroperoksid. Ako je 2-oksobutanetioamid zamenjen u procesu opisanom Šemom 10, jedinjenja iz formule (Xb) i (XIb) će biti dobijena umesto (Xa) i (XIa).
Metod (xi) Formiranje odgovarajućeg jedinjenja formule (XIa):
[0057] Jedinjenje iz formule (Xa) može biti dobijeno iz jedinjenja formule (VIII) (Šema 11). Imin formule (VIII) je reagovao sa 2-oksopropan tioamidom (opisan u Asinger et al. Justus Liebigs Annalen der Chemie 1971, vol 744, p.51-64) u rastvaraču kao što je metanol na temperaturi između sobne temperature i temperature refluksa kako bi se dobilo jedinjenje iz formule (Xa). Jedinjenje (VIII) može biti dobijeno iz ketona iz formule (III) (Šema 4) ili pripremljeni pomoću metoda poznatih osobi koja je iskusna u ovoj oblasti. Jedinjenje iz formule (Xa) je zatim tretirano sa amonijakom kako bi se dobilo jedinjenje iz formule (XIa). Ako je 2-oksopropan tioamid zamenjen za 2-oksobutantioamid u procesu opisanom pomoću Šeme 11, jedinjenja iz formula (Xb) i (XIb) će biti dobijena umesto (Xa) i (XIa). (videti iznad).
Metod (xii) Formiranje odgovarajućeg jedinjenja formule (XIa):
[0058]
[0059] Jedinjenje iz formule (XXII) (gde PG predstavlja zaštitnu grupu kao što je na primer (O)R<11>(Metod (vii), formula XV), SiR<14>(kao što je SiMe3, Metod (ix), formula XXI), P(O)(R<13>)2) (Metod (viii), formula XVIII), S(O)2alkil, C(O)Oalkil, OH ili oalkil reaguje sa 2-oksopropan tioamid (opisan u Asinger et al. Justus Liebigs Annalen der Chemie 1971, vol 744, p.51-64) u rastvaraču kao što je acetonitril na temperaturi u opsegu između 100 °C i 160 °C kako bi se dobilo jedinjenje formule (Xa) (Šema 12). Jedinjenje formule (Xa) je zatim tretirano sa amonijakom, u odgovarajućem rastvaraču kao što je metanol, THF ili 2-metil-tetrahidrofuran opciono u prisustvu oksidacionog agensa kao što je tert-butil hidroperoksid na temperaturi između sobne temperature i 150 °C, opciono u zatvorenom sistemu kako bi se dobilo jedinjenje formule (XIa). Ako je 2-oksopropan tioamid zamenjen za 2-oksobutantioamid u procesu opisanom pomoću Šeme 12, jedinjenja formula (Xb) i (XIb) (videti iznad) dobiće se umesto (Xa) i (XIa).
Metod (xiii) Formiranje odgovarajućeg jedinjenja formule (XI):
[0060]
[0061] Jedinjenje formule (XXIII) gde je PG zaštitna grupa kao što je na primer S(O)R<11>(Metod (vii), formula XV), SiR<14>(kao što je SiMe3) (Metod (ix), formula XXI), P(O)(R<13>)2) (Metod (viii), formula XVIII), S(O)2alkil, C(O)Oalkil, OH ili Oalkil, reaguje sa etanebisom (tioamidom) kako bi se formiralo jedinjenje formule (XIII) (Šema 13). Pomenuta reakcija može biti izvedena na temperaturi u opsegu između temperature refluksa i 180 °C, u odgovarajućem rastvaraču kao što je metanol, etanol ili izopropul alkohol, opciono u prisustvu amonijaka. Alkilovani agens kao što je metil jodid i tioimidazol formule (XIII) reaguju kako bi se formiralo jedinjenje formule (XIV) (Šema 13). Pomenuto jedinjenje (XIV) može dalje biti transformisano u jedinjenje formule (XI) gde R<1>jeste alkilna grupa kao što je metili ili etil, reagovanjem sa organometalnim reagensom kao što je metilmagnezijum bromid ili etilmagnezijum bromid u prisustvu odgovarajućeg katalizatora kao što je [1,3-bis(difenilfosfin)propan]nikl(II) hlorid. Opciono jedinjenje formule (XI) (R<1>je alkil kao što je metil ili etil) može se takođe dobiti reagovanjem jedinjenja formule (XIV) sa smešom cink jodida i Grignardovog reagensa kao što je metilmagnezijum bromid ili etilmagnezijum bromid u prisustvu odgovarajućeg katalizatora kao što je bis(trifenilfosfin)paladijum(II) hlorid u odgovarajućem rastvaraču kao što je THF 2-metil-tetrahidrofuran ili tuluen.
Metod (xiv) Formiranje odgovarajućeg jedinjenja formule (I):
[0062]
[0063] Jedinjenje formule (I) gde je R<2>opciono supstituisan aril ili heteroaril može biti dobijeno (Šema 14) počevši od, na primer, jedinjenja formule (XXIV) i reagovanjem pomenutog jedinjenja formule (XXIV) sa bornom kiselinom ili bornim estrom ili stananom formule T-R<2>, gde T predstavlja na primer B(OH)2, B(Oalkil)2, ili SnR3, i R<2>je opciono supstituisan aril ili heteroaril u prisustvu katalizatora od prelaznog materijala kao što je katalizator paladijum, kao što je [1,1'-bis(difenilfosfin)ferocen]paladijum(II) hlorid, tetrakis(trifenilfosfin)-paladijum(0), paladijum difenilfosfinferocen dihlorid, paladijum(II) acetat ili bis(dibenzilideneaceton) paladijum (0), ili sodijum tetrahloropaladat (II). Opciono, odgovarajući ligand kao što je trifenilfosfin, tri-tert-butilfosfin ili 2-(dicikloheksifosfin)bifenil, 3-(di-tert-butilfosfonijum)propan sulfonat, ili cink i natrijum trifenilfosfininetrimetasulfonat se koristi. Odgovarajuća baza kao što je cezijum fluorid, alkil amin, kao što je trietil amin ili alkalni metal ili zemnoalkalni metal karbonat ili hidroksid kao što je kalijum karbonat, natrijum karbonat, cezijum karbonat ili natrijum hidroksid mogu biti upotrebljeni u reakciji. Pomenuta reakcija može biti izvedena u odgovarajućem rastvaraču kao što je tuluen, tetrahidrofuran, 2-metil-tetrahidrofuran, dioksan, dimetoksietan, voda, etanol, N,N-dimetilacetamid, acetonitril ili N,N-dimetilformamid ili njihova smeša. Opciono jedinjenje formule (I) gde R<2>je opciono supstituisan arilom ili heteroarilom može biti pripremljen iz jedinjenja (XXIV) transformacijom u jedinjenje (Ia) gde je T opisano iznad (B(OH)2ili B(Oalkil)2) (Šema 14a). Jedinjenje (Ia) zatim reaguje sa jedinjenjem R<2>-LG gde R<2>je opciono supstituisan arilom ili heteroarilom i LG predstavlja odlazeću grupu kao što je halogen kako bi se dobilo jedinjenje (I).
Metod (xv) Formiranje odgovarajućeg jedinjenja formule (I):
[0064] Jedinjenje formule (I), gde je R<2>cijan, može biti dobijeno (Šema 14) počevši od, na primer, jedinjenja formule (XXIV) gde LG predstavlja odlazeću grupu kao što je halogen (kao što je jodid, bromid ili hlorin) i reagujuće pomenuto jedinjenje formule (XXIV) sa metal cijanim reagensom kao što je bakar (I) cijanid.
Metod (xvi) Formiranje odgovarajućeg jedinjenja formule (I):
[0065] Jedinjenje formule (I), gde je R<2>alkilna grupa kao što je metil može biti dobijena iz jedinjenja formule (XXIV) (Šema 14), gde LG predstavlja odlazeću grupu kao što je halogen (kao što je jodid, bromid ili hlorin), reagovanjem sa organometalnim reagensom dobijenim iz cink jodida i metilmagnezijum bromida pod uticajem katalizatora od prelaznog metala kao što je na primer bis(trifenilfosfin)paladijum(II) hlorid.
Metod (xvii) Formiranje odgovarajućeg jedinjenja formule (I):
[0066] Jedinjenje iz formule (I) gde je R<2>alkin može biti dobijeno iz jedinjenja formule (XXIV) (Šema 14), gde LG predstavlja odlazeću grupu kao što je halogen (kao što je jodid ili bromid) reagovanjem sa alkinom kao što je alkiletin ili cikloalkiletin pod uticajem katalizatora od prelaznog metala kao što je na primer tetrakis (trifenilfosfin)paladijum(0) u prisustvu baze kao što je trietilamin i bakar(I)jodid. Alkin je opciono sililovan. Pomenuta reakcija može biti izvedena na temperaturi u opsegu između sobne temperature i temperature refluksa, u odgovarajućem rastvaraču kao što je THF ili tuluen.
Metod (xviii) Formiranje odgovarajućeg jedinjenja formule (I):
[0067] Jedinjenje iz formule (I) gde R<2>je NHC(O)R<9>može biti pripremljeno prema Šemi 14 reagovanjem jedinjenja iz formule (XXIV) sa jedinjenjem R<9>C(O)NH2u prisustvu odgovarajućeg paladijumskog katalizatora kao što je paladijum(II) acetat, opciono u prisustvu odgovarajućeg liganda kao što je Ksantfos. Pomenuta reakcija se izvodi u prisustvu odgovarajuće baze kao što je cesijum karbonat u odgovarajućem rastvaraču kao što je THF ili 2-metil-tetrahidrofuran na temperaturi između temperature refluksa i 160 °C.
Metod (xix) Formiranje odgovarajućeg jedinjenja formule (I):
[0068] Jedinjenje iz formule (I) gde R<2>je NHC(O)R<9>može biti dobijeno iz jedinjenja formule (XXIV) kao što je prikazano na Šemi 15.
[0069] Jedinjenje iz formule (XXIV) reaguje sa amonijakom u prisustvu tran-4-hidroksi-L-prolina, kalijum karbonata i bakar(I)jodida u rastvaraču kao što je DMSO na temperaturi između sobne temperature i 150 °C kako bi se dobilo jedinjenje iz formule (XXV).
Pomenuto jedinjenje formule (XXV) dalje reaguje sa karboksilnom kiselinom formule (XXVI) gde je R<9>definisan iznad. Reakcija je izvedena u prisustvu odgovarajućeg amidnog vezujućeg agensa kao što je 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etil-karbodiimid u rastvaraču kao što je DMF, opciono u prisustvu hlorovodonične kiseline.
Metod (xx) Formiranje odgovarajućeg jedinjenja formule (IIIb):
[0071] Jedinjenje formule (IIIb) može biti dobijeno reagovanjem ketona iz formule (XII) sa aldehidom ili ketonom iz formule (XXII) u prisustvu baze kao što je pirolidin, piperidin, prolin, morfolin ili Boraks u odgovarajućem rastvaraču kao što je benzen, tuluen, metanol ili etanol ili smeši vode sa odgovarajućim alkoholom kao što je metanol ili etanol na temperaturi u opsegu između sobne temperature i 180 °C (Šema 16).
Metod (xxi) Formiranje jedinjenja formule (I)
[0073] Jedinjenje formule (I) gde R<2>je OR<8>može biti pripremljeno reagovanjem jedinjenja formule (XXIV) gde LG predstavlja odlazeću grupu kao što je halogen (kao što su jodid ili bromid) sa alkoholom iz formule (XXVII) u prisustvu odgovarajućeg paladijmskog katalizatora kao što je paladijum (II) acetat, opciono u prisustvu odgovarajućeg liganda kao što je 2-(di--tbutilfosfino)-1,1'-binaftil (Šema 17). Pomenuta reakcija je izvedena u prisustvu odgovarajuće baze kao što je cezijum karbonat u odgovarajućem rastvaraču THF, 2-metiltetrahidrofuran ili tuluen na temperaturi između 20 °C i 160 °C.
Metod (xxii) Formiranje jedinjenja formule (II)
[0075] Jedinjenje iz formule (II) gde R<2>jeste OR<8>može biti pripremljeno reagovanjem jedinjenja iz formule (XXVIII) sa jedinjenjem iz formule (XXIX), gde LG predstavlja odgovarajuću odlazeću grupu kao što je halogen (kao što je hlorid, bromid ili jodid) ili trifluorometilsulfonat u prisustvu odgovarajuće baze kao što je alkal karbonat kao što je Cs2CO3, K2CO3, Na2CO3, u odgovarajućem rastvaraču kao što je THF, 2-metil-THF, DMF ili DMSO ili njihovoj smeši na temperaturi između 0-150 °C (Šema 18).
Metod (xxiii) Formiranje jedinjenja formule (II)
[0076]
[0077] Jedinjenje iz formule (II) gde R<2>jeste OR<8>može biti pripremljeno reagovanjem jedinjenja iz formule (XXVIII) sa jedinjenjem iz formule (XXVII) u prisustvu odgovarajućeg izvora fosfina kao što je trifenil fosfin u prisustvu odgovarajućeg aktivacionog reagensa kao što je dietil azodikarboksilat u odgovarajućem rastvaraču kao što je THF, 2-metil-THF ili DMF ili u njihovoj smeši na temperaturi od 0-100 °C (Šema 19).
Metod (xxiv) Formiranje jedinjenja formule (XXX)
[0079] Jedinjenje formule (VIIIa) može biti dobijeno na primer metodom (vii) i metodom (x) kao što je prikazano na Šemi 20. Pomenuto jedinjenje formule (VIIIa) može biti dobijeno reagovanjem jedinjenja (XVa) sa kiselinom kao što je hlorovodonična kiselina u suvim uslovima u odgovarajućem rastvaraču (kao što je dioksan ili tetrahidrofuran). Jedinjenje (VIIIa) može biti izolovano ili može reagovati dalje bez izolacije. Jedinjenje formule (VIIIa) dalje reaguje sa 2-oksopropan tioamidom (opisan u Asinger et al. Justus Liebigs Annalen der Chemie 1971, vol 744, p.51-64) opciono u prisustvu trietil ortoformata u rastvaraču kao što je metanol na temperaturi između sobne temperature i temperature refluksa, opciono u azeotropskim uslovima za destilaciju kako bi se dobilo jedinjenje formule (Xc). Jedinjenje formule (Xd) može biti dobijeno reagovanjem jedinjenja formule (Xa) sa odgovarajućim agensom za fluorovanjem kao što je jedinjenje formule (XXXI) pod uticajem bakarnog jodida u odgovarajućem rastvaraču kao što je acetonitril na temperaturi između sobne temperature i temperature refluksa.
[0080] Transformacija do jedinjenja formule (XXX) se može izvesti reagovanjem jedinjenja formule (Xd) sa amonijakom, opciono u prisustvu oksidacionog agensa kao što je tert-butil hidroperoksid.
[0081] Jedinjenja formula (II), (III), (V), (VI), (XII), (XVI), (XVII), (XX), (XXII), (XXVI), i (XXVII) su komercijalno dostupna jedinjenja ili su poznata u literaturi ili se ona pripremanju pomoću standardnih procesa koji su poznati u ovoj oblasti.
Opšte metode
[0082] Svi ovde upotrebljeni rastvarači bili su analitičke vrste i komercijalno dostupni bezvodni rastvarači gde su bili rutinski upotrebljeni za reakcije. Početni upotrebljeni materijali su bili dostupni iz komercijalnih izvora ili pripremljeni prema procedurama iz literature. Sobna temperatura se odnosi na 20 - 25 °C. Sastav smeša rastvarača je dat u zapreminskim procentima ili zapreminskim odnosima.
[0083] Mikrotalasno grejanje je izvedeno u Biotage Creator, Initiator ili Smith Synthesizer Single-mode mikrotalasnoj šupljini koja proizvodi kontinuirano zračenje na 2450 MHz. Podrazumeva se da se mikrotalasi mogu upotrebiti za zagrevanje reakcionih smeša.
[0084] Tanak sloj hromatografije (TLC) se izvodi na Merck TLC-pločama (Silicijumski gel 60 F254) i mrlje su UV vizuelizovane. Heterofazna hromatografija fleš kolone ("fleš hromatografija") se ručno izvodi na Merch Silicijumskom gelu 60 (0.040-0.063mm) ili automatski upotrebom ISCO Combiflash® Companion™ sistem koristeći RediSep™ fleš kolone sa normalnom fazom koristeći naznačeni sistem rastvarača. Fazno razdvajanje se opciono izvodi na Isolute® faznom separatoru.
NMR
[0085] NMR spektrum je bio zabeležen na 400-600 MHz NPR spektrometar podešen sa sondom odgovarajuće konfiguracije. Spektrum je zabeležen na temperaturi okoline osim ako nije naznačeno drugačije. Hemijske promene su date u ppm iznad i ispod iz TMS-a (0.00 ppm). Sledeći referentni signali su upotrebljeni u<1>H-NMR: TMS δ 0.00, ili zaostali signali rastvarača DMSO-d6δ 2.49, CD3OD δ 3.30, aceton-d62.04 or CDCl3δ 7.25 (osim ako drugačije nije naznačeno). Višestruke rezonance su označene kao s, d, t, q, m, br i app za singlet, duplet, triplet, kvartet, multiplet i očigledne, redom. U nekim slučajevima se samo dijagnostički signali prijavljuju.
HPLC, HPLCMS, i LCMS analize:
[0086] Tečna hromatografija visokog pritiska (HLPC) je izvođena na reverzno faznoj koloni. Linearni gradijent je primenjen koristeći na primer mobilnu fazu A (10 mM NH4OAc u 5% CH3OH ili 5% CH3CN (vodeni),ili 0.1% NH3(vodeni) ili 0.1% mravlja kiselina (vodena)) i B (CH3OH or CH3CN). Analize masene spektrometrije (MS) su se izvodile u pozitivnom i/ili negativnom jonskom stanju koristeći se elektrosprejom jonizacije (ESI+/-) i/ili atmosfernim pritiskom hemijske jonizacije (APCI+/-).
GCFID i GCMS analize:
[0087] Gas hromatografija (GS) se izvodi na GC opremljenim sa masenim spektrometrom (MS) ili detektorom plamena jonizacije (FID). MS jonski izvor je bio pod uticajem elektrona (EI) ili hemijskom jonizacijom (CI, reakcioni gas metana). Za razdvajanje kapilarnih kolona upotrebljen je na primer DB-5MS, (J&W Scientific). Primenjen je linearni gradijent temperature.
Preparativna hromatografija
[0088] Preparativna Hromatografija je izvedena na sistemu Waters FractionLynx sa Autosampler kombinovanim Automated Fraction Collector (Waters 2767), Gradient Pump (Waters 2525), Column Switch (Waters CFO) i PDA (Waters 2996). Column; XBridge® Prep C810µm OBD™ 19 x 300mm, sa zaštitnom kolonom; XTerra® Prep MS C810µm 19 x 10mm Cartridge. Gradijent A (95 % 0.1 M NH4OAc u MilliQ voda i 5 % MeCN) u B (100 % MeCN) ili gradijent A (95 % 0.1 M NH4OAc u MilliQ voda i 5 % MeOH), A (0.2 % NH3u MilliQ voda) ili A (0.2 % mravlja kiselina u MilliQ vodi) u B (100 % MeOH) se primenjuje za LC-razdvajanje pri protoku od 20ml/min. Preparativna hiralna hromatografija za razdvajanje izomera je izvođena na primer na sistemu LaPrep® upotrebom zadate kolone i mobilne faze sistema.
SFC analize:
[0089] Superkritični fluid hromatografije (SFC) je izvođen na ravnoj faznoj koloni. Izokratski protok se nanosi na mobilnu fazu A (CO2) i na primer mobilnu fazu B (MeOH, EtOH ili IPA).
Normalne fazne HPLC analize:
[0090] Tečna hromatografija visokog pritiska (HLPC) je izvođena na ravnoj fazi hromatografije. A linearni gradijent ili izokratki protok na primer mobilne faze A (Heptan) i B (EtOH ili IPA).
[0091] Masena spektrometrija visoke rezolucije (HRMS) za tačna masena merenja je izvođena na Waters Synapt-G2 masenom spektrometru opremljenim sa LockSpray izvorom i povezan je sa sistemom Acquity UPLC sa PDA detektorom i Acquity UPLC BEH C18 kolonom. Izmerena masa je potvrdila elementarni sastav u 3 minuta.
Skraćenice
[0092]
ACN acetonitril
aq vodeni
Atm atmosferski pritisak
Boc t-butoksikarbonil
Borax dinatrijum tetraborat ili natrijum borat ili natrijum tetraborat
Cbz benziloksikarbonil
CDI 1,1'-karbonildiimidazol
dba dibenzilidenaceton
DCM dihlormetan
DEA dietilamin
DIBAL-H diizobutilaluminijum hidrid
DIPEA diizopropiletilamin
DME 1,2-dimetoksietan
DMF N,N-dimetil formamid
DMSO dimetil sulfoksid
dppf 1,1'-bis(difenilfosfin) ferocen
Et2O dietil etar
EtOAc etil acetat
EtOH etanol
eq. or equiv. ekvivalent
h sat(s)
HPLC hromatografija visokih preformansi
IPA izopropanol
LCMS tečna hromatografija masene spektrometrije LiHMDS litijum bis(trimetilsilil)amid
MeOH metanol
min minut(s)
MS masena spektrometrija
MW mikrotalasni(s)
NH4OAc amonijum acetat
NMR nuklearna magnetna rezonanca
Ox oksidacija
psi kilogrami po kvadratnom inču
quant. kvantitativan
RCM Metastaza zatvaranjem prstena
r.t. sobna temperatura
sat. zasićen
SFC superkritični fluid hromatografije
TFA trifluorosirćetna kiselina
THF tetrahidrofuran
TLC tanak sloj hromatografije
TMEDA tetrametiletilenamin
UPLC hromatografij tečnosti visokih performansi 2-Me THF 2-metil tetrahidrofuran
[0093] Jedinjenja su imenova upotrebom CambridgeSoft MedChem ELN v2.2 ili ACD/Name verzijom 10.0 ili 10.06 ili verzija 12.01, softver iz Advanced Chemistry Development, Inc. (ACD/Labs), Toronto ON, Canada, www.acdlabs.com ili Lexichem, verzija 1.9 softver iz OpenEye.
PRIMERI
[0094] Sledi niz neograničavajućih primera.
Indermedijer 1
N-(6-Bromohroman-4-iliden)-2-metilpropan-2-sulfinamin
[0095]
[0096] 6-bromohroman-4-jedan (5.0 g, 22 mmol) i 2-metilpropan-2-sulfinamid (2.6 g, 22 mmol) se rastvaraju u suvom THF-u (80mL). Dodaje se titanijum etoksid (10g, 44 mmol). Rezultujuća smeša se zagreva na 60 °C tokom 2 dana. Dodatna doza titanijum etoksida (1.0g, 8.4 mmol) se dodaje posle 12h. Smeša se meša sa heptanom i evaporira na silicijumski gel. Fleš hromatografija na silicijumu (0-50% EtOAc u heptanu) daje jedinjenje iz naslova (6.0 g, 83% prinos).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 1.34 (s, 9 H) 3.26 - 3.32 (m, 1 H) 3.47-3.54 (m, 1 H) 4.28 - 4.40 (m, 2 H) 6.83 (d, 1 H) 7.46 (dd, 1 H) 8.06 (d, 1 H); MS (ES+) mlz 330 [M+H]<+>.
Intermedijer 2
2- Oksopropanetioamid
[0097]
[0098] Rastvor acetil cijanida (140 mL, 1764.24 mmol) u 2-metil-tetrahidrofuran (850 mL) se meša na -10°C dok se vodonik sulfid unosi u vidu mehurova kroz rastvor. Dodavanje vodonik sulfida se zaustavlja posle 15 min i u mešanu smešu se dodaje trietilamin (1.230 mL, 8.82 mmol) u 2-metil-tetrahidrofuranu (13 mL) tokom 30 min (egzotermna reakcija).
Dodavanje vodonik sulfida nastavlja se još 3h na 5°C, 3 h na 10°C i preko noći na 15 °C.
Azot se unosi u vidu mehurova kroz smešu 30 min a zatim isparljive materije evaporiraju. Ostatak se dodaje smeši heptana (100 mL) i EtOAc (100 mL). Čvrsta materija se filtrira ((79 g, 43% prinos) i filtrat se prečišćava pomoću hromatografije silicijumskog gela sa kratkim umetkom, eluiranjem sa 50% etilacetata u heptanu kako bi se dobilo 79g (43% prinos) jedinjenja iz naslova. Obe kulture (ukupno 158g, 87% prinos) su sadržale proizvod iz naslova odgovarajuće čistoće prema GC-MS: MS (ES+) m/z 104 [M+H]<+>.
Intermedijer 3
6-Brom-4'-metilspiro[hroman-4,2'-imidazol]-5'(1'H)-tion
[0100] N-(6-Bromohroman-4-iliden)-2-metilpropan-2-sulfinamid (2.0 g, 6.0 mmol, Intermedijer 1) se rastvara u suvom dioksanu (2mL) i 4M HCl se dodaje u dioksan (15 mL, 60,00 mmol). Počinje da se stvara beli talog. Smeša se meša 12 h na sobnoj temperaturi. Smeša se razređuje sa suvim Et2O (50 mL) i vakuumski se filtrirana. Filter kolač se ispira sa suvim Et2O (50 mL) a odmah zatim rastvara mućkanjem u NaHCO3(vodeni) i CH2Cl2. Organska faza se suši (K2CO3) i evaporira kako bi dala 6-bromohroman-4-imin (1.3 g, 5.7 mmol). Čvrsta materija se rastvara zajedno sa 2-oksopropanetioamidom (Intermedijer 2, 1.7 g, 17 mmol, Intermedijer 2) u suvom metanolu (5 mL) i rezultujući rastvor se zagreva do 60 °C na 12 h. Evaporacija na silicijumu i prečišćavanjem pomoću fleš hromatografije (EtOAc u heptanu) se dobija jedinjenje iz naslova (0.39 g, 21% prinos).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2.18 (m, 1 H), 2.35 (m, 1 H), 2.42 (s, 3 H), 4.35 - 4.40 (m, 1 H), 4.60 (m, 1 H), 6.81 (d, 1 H), 6.88 (d, 1 H), 7.33 (dd, 1 H); MS (ES+) m/z 311 [M+H]<+>.
Intermedijer 4
6-Bromo-5'-metilspiro[hroman-4,2'-imidazol]-4'-amin
[0102] 6-Bromo-4'-metilspiro[hroman-4,2'-imidazol]-5'(1'H)-tion (0.10 g, 0.32 mmol, Intermedijer 3) se rastvara u MeOH (1 mL) i 7M amonijak se dodaje u MeOH (4mL, 28 mmol). Rastvor se zagreva do 60 °C na 12 h u zatvorenoj bočici. Rastvor evaporira u vakuumu. Tretman sa 7M amonijakom se ponavlja na isti način još jedanput. Evaporacija u vakuumu daje jedinjenje iz naslova (73 mg, 77% prinos) koje je upotrebljeno bez daljeg prečišćavanja u sledećem koraku.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2.11 (m, 2 H), 2.35 (s, 3 H), 4.53 (m, 2 H), 4.98 (br s, 2 H), 6.66 (m, 1 H), 6.78 (d, 1 H), 7.22 (m, 1 H); MS (ES+) mlz 294 [M+H]<+>.
Intermedijer 5
6'-Bromo-4-metoksi-spiro[cikloheksan-1,2'-indan]-1'-on
Metoda A
Korak 1: 6'-Bromospiro[cikloheksan-1,2'-indan]-1',4(3'H)-dion
[0104] Kalijum tert-butoksid (7.50 g, 66.81 mmol) se dodaje u dozama 6-bromo-2,3-dihidro-1H-inden-1-onu (11.75 g, 55.67 mmol) i metil akrilatu (11.05 mL, 122.5 mmol) u THF-u (55 mL) uz hlađenje u ledenom kupatilu. Smeša se meša 1.5h na sobnoj temperaturi. Voda (80 mL) i KOH (3.12 g, 55.7 mmol) se odaju i smeša se zagreva do 75 °C a onda do 60 °C preko noći. Smeša se ohladi do 0 ° i formirani talog se filtrira i suši u vakuumu kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (11.69 g, 72% prinos).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 1.83 - 1.92 (m, 2 H), 2.15 - 2.27 (m, 2 H), 2.40-2.50 (m, 2 H), 2.71 (dt, 2 H), 3.17 (s, 2 H), 7.39 (d, 1 H), 7.75 (dd, 1 H), 7.92 (d, 1 H); MS (ES+) mlz 293 [M+H]<+>.
Korak 2: 6'-Bromo-4-hidroksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on
[0106] 6'-Bromospiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1',4(3'H)-dion (Intermedijer 5 Korak 1, 6.1 g, 20.8 mmol) se rastvara u THF-u (220 mL) i ohladi do -65 °C. Natrijum borohidrid (0.354 g, 9.36 mmol) se dodaje i kupatilo za hlađenje se uklanja. Smeša je ostavljena da dostigne 0 °C (oko 30 min). Dodaje se voda (10 mL) i većina organskog rastvarača je uklonjena evaporacijom. Ostatak se razdvaja između EtOAc (100 mL) i vodenog rastvora NaCl (50 mL). Organska faza se suši (MgSO4) i evaporira kako bi se dobio proizvod koji je kombinovan sa dodatim proizvodom dobijenim na sličan način počevši od 14.6 g 6'-bromospiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1',4(3'H)-diona. Prečišćavanje se izvodi pomoću fleš hromatografije (120 g silicijum, eluiranje sa gradijentom: CH2Cl2to CH2Cl2/MeOH (90:10)) dajući 13.6 g (66% prinos) jedinjenja iz naslova. Dobijeni materijal se sastoji od 80:20 smeše izomera 1 i izomera 2. Analitički uzorci izomera su izolovani fleš hromatografijom (heptan/ErOAc gradijent) kako bi se dobio:
Izomer 1: (1r,4r)-6'-Bromo-4-hidroksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on:
[0108] Smeša izomera 6'-bromo-4-hidroksipsiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-ona (Intermedijer 5 Korak 2, 12.7 g, 43.0 mmol) se rastvara u THF-U (210 mL) pod N2i ohladi do 0 °C. Kalijum tert-butoksid (5.79 g, 51.6 mmol) se dodaje u dozama i smeša se meša na 0 °C tokom 25 min. Dodaje se metil jodid (4.30 mL, 68.8 mmol). Kupatilo za hlađenje se uklanja i smeša se meša na sobnoj temperaturi. Dodatni kalijum tert-butoksid (0.483 g, 4.30 mmol) se dodaje dva puta, nakon 2 h i 3 h respektivno a zatim se smeša meša 2 h. Dodaje se voda (100 mL) i rezultujući rastvor se razdvaja između vodenog NaCl rastvora (200 mL) i EtOAc (200 mL). Vodena faza je ekstrahovana sa još jednom dozom EtOAc (100 mL). Kombinovana organska faza se suši (MgSO4) i evaporira kako bi se dobilo 12.5 g (94% prinos) smeše (oko 80:20):
Izomer 1: (1r,4r)-6'-bromo-4-metoksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on:
0
- 1.48 (m, 2 H), 1.51 - 1.62 (m, 2 H), 1.97 - 2.07 (m, 2 H), 3.00 (s, 2 H), 3.15 - 3.23 (m, 1 H), 3.26 (s, 3 H), 7.56 (d, 1 H), 7.77 (d, 1 H), 7.86 (dd, 1 H); MS (ES+) m/z 309 [M+H]<+>.
Metoda B
Korak 1: 6'-Bromospiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1',4(3'H)-dion
[0110] 6-Bromo-2,3-dihidro-1H-inden-1-on (800 g, 3.79 mol) i metil akrilat (787 mL, 8.72 mol)u 2-metil-tetrahidrofuran (4 L) se mešaju na 28 °C. Kalijum tert-pentoksid rastvor u tuluenu (1.7 M, 2.68 L, 4.55 mol) se dodaje kap po kap održavajući temperaturu između 30 °C i 43 °C. Smeša se meša 0.5 h na 25 °C. Dodaje se voda (4L) i nakon 10 min dodaje se KOH (383 g, 6.82 mol). Smeša se zagreva do temperature refluksa i organski rastvor se destiliše tokom 4 h. Smeša se ohladi do 10 °C i formirani talog se filtrira i suši u vakuumu kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (837 g, 75% prinos).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.74 - 1.85 (m, 2 H), 1.94 (m, 2 H), 2.34 (m, 2 H), 2.52 - 2.60 (m, 2 H), 3.27 (s, 2 H), 7.60 (d, 1 H), 7.79 - 7.83 (m, 1 H), 7.89 (m, 1 H); MS (ES+) mlz 293 [M+H]<+>.
Korak 2: (1r,4r)-6'-Bromo-4-hidroksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on
[0112] 6'-bromospiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1',4(3'H)-dion (Intermedijer 5 Korak 1, 50.52 g, 172.3 mmol) u DCM-u (250 mL), borni tert-butilamin kompleks (5.70 g, 65.49 mmol) u DCM-u (50 mL) se polako puni na 0 °C. Nakon 40 min koncentrovani HCl (20 mL) praćen sa 20 % NaCl (70 mL) se napune. Smeša sa ostavlja da dostigne sobnu temperaturu i meša se 30 min. Faze se razdvajaju i vodenoj fazi se dodaju DCM (40 mL) i H2O (10 mL). Organske faze su kombinovane, koncentrovane i osušene u vakuumu preko noći kako bi dale proizvod iz naslova (52.4 g, 100% prinos) kao smeša proizvoda iz naslova (83% prinos) i drugi diastereomer (1s,4s)-6'-bromo-4-hidroksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on (17%):<1>H NMR (500 MHz, CDCl3, signali za oba izomera) δ ppm<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 1.39-1.50 (m, 3 H), 1.67-1.85 (m, 3 H) 2.05-2.12 (m, 2 H) 2.96 (s, 0.34 H), 2.98 (s, 1.68 H), 3.76 (m, 0.83 H), 4.04 (m, 0.17 H), 7.34 (m, 1 H) 7.70 (m, 1 H) 7.88 (d, 1 H); MS (ES+) mlz 295 [M+H]<+>.
Korak 3: (1r,4r)-6'-Bromo-4-metoksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on
[0114] (1r,4r)-6'-Bromo-4-hidroksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on (Intermedijer 5 Korak 2, 50.9 g, 172 mmol) (sadrži 17% (1s,4s)-6'-bromo-4-hidroksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on), metil jodid (18.33 mL, 293.1 mmol) i 2-Me THF-a (360 mL) se zagrevaju do 30 °C pod N2. Kalijum tert-pentoksid rastvor u tuluenu (1.7 M in toluene, 203 mL, 344 mmol) se dodaje kap po kap tokom 30 min. Smeša se ostavlja da dostigne sobnu temperaturu i meša se 1 h. Voda (250 mL) se dodaje i nakon 10 min mešanja, faze se razdvajaju.
Organska faza se ispire sa vodom (140 mL), koncentruje i suši u vakuumu kako bi se dobila čvrsta materija. Dodaje se 300 mL MeOH čvrstoj materiji i smeša se zagreva uz refluks. Dodaje se voda (30 mL) praćena refluksom 5 min. Smeša se ostavlja da dostigne sobnu temperaturu. Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Čvrsta materija se isfiltrira kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao jednog izomera (31 g, 58% prinos):<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 1.38 (m, 2 H) 1.52 (m, 2 H) 1.77 (td, 2 H) 2.16 (m, 2 H) 2.98 (s, 2 H) 3.28 (m, 1 H) 3.40 (s, 3 H) 7.35 (d, 1 H) 7.70 (dd, 1 H) 7.88 (d, 1 H); MS (ES+) mlz 309 [M+H]<+>.
Metoda C
Korak 1: 6'-Bromospiro[cikloheksan-1,2'-indene]-1',4(3'H)-dion
[0116] Metil akrilat (6.6 L, 73 mol) je dodat postepeno u tri jednake doze ( svaka 2.2 L, 24.6 mol) smeši 6-bromo-1-idanona (8.00 kg, 37.9 mol), THF-a (16 L) i kalijum tert-butoksida (210 g, 1.87 mol) na oko 20-30 °C. Dodatni kalijum tert-butoksid (86 g, 0.77 mol), rastvoren u THF-u (0.39 L), se dodaje nakon prve doze metil akrilata. Još kalijum tert-butoksida (86 g, 0.77 mol) rastvorenog u THF-u (0.39 L) se dodaje nakon druge doze metil akrilata. Dalje, kalijum tert-butoksid (4.64 gk, 41.3 mol) rastvoren u THF-u (21 L) se dodaje postepeno na oko 20-30 °C. Rastvor (21.5 L) se destiliše na oko 65 °C i zatim se smeša vode (49 L) i 50% vodenog KOH (2.3 L, 30 mol) dodaje tokom približno 10 minuta na ispod 60 °C. Reakcija se odvija na 60 °C. tokom približno 6 h, zatim se hladi na 20 °C tokom 1 h i filtrira nakon držanja na 20 °C približno oko 12 h. Čvrste materije se ispiraju sa smešom vode (8 L) i THF-a (4 L) i zatim osuše kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (7.47 kg, at 92% w/w NMR test, 23.4 mol, 62% prinos):<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.78 - 1.84 (m, 2 H), 1.95 (td, 2 H), 2.32 - 2.38 (m, 2 H), 2.51 - 2.59 (m, 2 H), 3.27 (s, 2 H), 7.60 (d, 1 H), 7.81 (m, 1 H), 7.89 (m, 1 H).
Korak 2: (1r,4r)-6'-Bromo-4-hidroksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on
[0118] 6'-bromospiro[cikloheksan-1,2'-indene]-1',4(3'H)-dion (Intermedijer 5 Korak 1, 750 g, 2.56 mol) i propan-2-ol (9.855 L) se zagrevaju uz refluks i usitnjeni NaOH (100 g, 2.50 mol) se dodaje u dve doze smeši. Smeša se zagreva uz refluks na 2 h.5 L rastvarača se uklanja vakuumskom destilacijom. Toulen (2 L) se dodaje i 2 L rastvarača se uklanja vakuumskom destilacijom. Toulen (3 L) praćen sa 2 M HCl (1.278 L, 2.56 mol) se dodaje smeši tokom mešanja. Faze se razdvajaju i organska faza se ispira sa vodom (2.0 L). Organska faza se koncentruje i tuluen (2 L) se dodaje i zatim se smeša koncentruje.2-metik-tetrahidrofuran (1L) se dodaje i zatim se 0.5 L rastvarača uklanja vakuumskom destilacijom, rezultujuća smeša se upotrebljena kao takva u sledećem koraku. Jedinjenje iz naslova je smeša sa diastereomer (1s, 4s)-6'-bromo-4-hidroksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-onom u odnosu 7:3 (osnovan od strane HPLC i NMR analize):<1>H NMR (500 MHz, CDCl3, signali za oba izomera) δ ppm 1.40 - 1.52 (m, 3 H), 1.70 - 1.84 (m, 3 H), 2.04-2.11 (m, 2 H), 2.97 (s, 0.62 H), 3.00 (s, 1.38 H), 3.73 - 3.81 (m, 0.7 H), 4.04 (m, 0.3 H), 7.31-7.38 (m, 1 H), 7.67 -7.73 (m, 1 H), 7.89 (m, 1 H).
Korak 3: (1r,4r)-6'-Bromo-4-metoksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on
[0120] Borni kompleks tert-butilamina (820 g, 9.4 mol rastvoren u DCM-u (3.6 L) se dodaje gustoj smeši 6'-bromospiro[cikloheksan-1,2'-indene]-1',4(3'H)-diona (Intermedijer 5 Korak 1, 7.46 kg, na 92% w/w NMR proba, 23.4 mol) u DCM-u (41 L) na približno 0-5 °C tokom 40 min. Nakon približno 1 h, rastvor NaCl (2.68 kg), voda (12.9 L) i 37% hlorovodonične kiseline (2.5 L, 31 mol) se dodaju. Smeša se greje na oko 15 °C i faze se razdvajaju nakon taloženja u slojeve. DCM faza koja sadrži (1r,4r)-6'-Bromo-4-hidroksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on (Intermedijer 5 Korak 2) se vraća u reaktor, zajedno sa metil metansulfonatom (2.59 L, 30.5 mol) i tetrabutilamonijum hloridom (130 g, 0.47 mol). Vodeni 50% NaOH (13 L, 229 mol) se zatim dodaje energično mešanoj reakcionoj smeši tokom približno 1 h na oko 20 °C. Nakon držanja oko 16 h voda (16 L) se dodaje i vodena faza se odbacuje nakon razdvajanja. Rastvor (34 L) se destiliše na atmosferskom pritisku i zatim se još rastvarača (20 L) destiliše dodavanjem EtOH (20 L) u 5 jednakih doza. EtOH (14 L) se dodaje i rastvor se ohladi na 25 °C. Uzorak (0.3 L) se uzima na 40 °C tokom hlađenja.
Uzorak se spontano kristalizuje i ponovo se dodaje reaktoru na 25 °C. Nakon ponovnog zagrevanja na oko 40 °C, voda (14 L) se dodaje tokom približno 20 min. Gusta smeša se ohladi na oko 20 °C i ostavlja se oko 16 h pre filtriranja. Čvrste materije se ispiraju sa smešom vode (4.8 L) i EtOH (6.4 L) i zatim se osuše kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (sadrži 4.6% Izomer 2: (1s,4s)-6'-bromo-4-metoksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on od HPLC-analize) (5.57 kg, na 91% NMR test, 16.4 mol, 70% prinos):<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.22-1.32 (m, 2 H), 1.41 - 1.48 (m, 2 H), 1.56 (td, 2 H), 1.99 - 2.07 (m, 2 H), 3.01 (s, 2 H), 3.16 - 3.23 (m, 1 H), 3.27 (s, 3 H), 7.56 (d, 1 H), 7.77 (d, 1 H), 7.86 (dd, 1 H).
Intermedijer 10
6-Bromo-2',3',5',6'-tetrahidrospiro[inden-2,4'-piran]-1(3H)-on
[0122] Rastvor kalijum tert-butoksida (3.94 g, 35.1 mmol) u t-BuOH (35 mL) se dodaje kap po kap tokom 15 min rastvoru 6-bromo-1-indanon (3.53 g, 16.73 mmol) u 2-metiltetrahidrofurana (350 mL) na sobnoj temperaturi u okruženju azota. Nakon 15 minuta bis (2-bromoetil) etar (2.102 mL, 16.73 mmol) se dodaje i dobijena smeša se meša na sobnoj temperaturi tokom 5 h. Kalijum tert-butoksid (0.938 g, 8.36 mmol) se dodaje i smeša se mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša se gasi sa zasićenim vodenim NH4Cl (150 mL) i organski sloj se razdvaja. Vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc (3 x 50 mL) i Et2O (50 mL). Kombinovani organski slojevi se ispiraju sa rasolom (100 mL) suše preko MgSO4filtriraju i koncentruju. Rezultujući ostatak dodaje u DCM, koncentruje na silicijumskom gelu i prečišćava u koloni silicijumskog gela eluiranog sa 0-40% EtOAc u heptanu kako bi se dobilo 1.14 g (24% prinos) jedinjenja iz naslova ; MS (ES+) mlz 281 [M+H]<+>.
Intermedijer 11
6'-Bromo-4,4-difluoro-spiro[cikloheksan-1,2'-indan]-1'-on
[0123]
[0124] Rastvor 6'-bromospiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1',4(3'H)-diona (Intermedijer 5 Metoda A Korak 1, 2 g, 6.82 mmol) u DCM-u (10 mL) se dodaje rastvoru 4-tert-butil-2,6-dimetilfenilsulfur trifluorida (FLUOLEAD™) (3.24 g, 13.0 mmol) i EtOH (0.159 mL, 2.73 mmol) u DCM-u (10 mL) na 0 °C. Reakciona smeša se ostavlja da dostigne sobnu temperaturu i meša se tokom noći. Reakciona smeša se sipa u ohlađeni vodeni 1 M NaOH rastvor (5 mL) i smeša se meša 60 min na sobnoj temperaturi. Vodena faza se ekstrahuje sa DCM-om dva puta. Kombinovane organske faze se koncentruju i sirovi proizvod se prečišćava u silicijumskoj koloni (gradijent EtOAc/n-heptana 0-20%). Sakupljaju se dve serije. Serija 1 daje 2.2 g (čistoća prema HPLC, uv detekcija 42%) a serija 2 daje 819 g (čistoća prema HPLC, uv detekcija 62%). Jedinjenje se upotrebljava kao takvo u sledećem koraku.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 1.57-1.66 (m, 2 H), 1.83 - 1.98 (m, 2 H), 2.00 -2.08 (m, 2 H), 2.26 - 2.38 (m, 2 H), 3.01 (s, 2 H), 7.35 (d, 1 H), 7.72 (dd, 1 H), 7.89 (d, 1 H).
Intermedijer 12
5-Bromo-4'-metoksi-3H-spiro[benzofuran-2,1'-cikloheksan]-3-on
Korak 1: 2-(5-Bromo-2-fluorofenil)-2-((trimethlsill)oksi)acetonitril
[0126] Rastvoru 5-bromo-2-fluoro-benzaldehid (30.45 g, 150 mmol) u THF (250 mL) se dodaje DMAP (0.203 g, 1.73 mmol) a potom trimetilsilil dijanid (18.24 g, 183.8 mmol). Reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi tokom 4 h i zatim se koncentruje u vakuumu kako bi se omogućilo 45.8 g (kvantitativni prinos) jedinjenja iz naslova koje se upotrebljava direktno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ ppm 1.71 (m, 6 H), 2.31 (m, 2 H), 3.32 (m, 1 H), 3.41 (s, 3 H), 7.03 (d, J=9.20 Hz, 1 H), 7.36 (t, J=8.80, 2.00 Hz, 1 H), 7.77 (d, J=2.00 Hz, 1 H).
Korak 2: (5-Bromo-2-fluorofenil)(1-hidroksi-4-metoksicikloheksil)metanon
[0128] LiHMDS (1.0 M, 165 mL, 165 mmol) se dodaje kap po kap rastvoru 2-(5-bromo-2-fluorophenil)-2-((trimethilsilil)oksi)acetonitrilna (Intermedijer 12 Korak 1, 45.80 g, 150 mmol) u acetonitrilu(250 mL) na -78 °C. Reakciona smeša je mešana 1.5 h i rastvor 4-metoksicikloheksanona (Lee, C. K.; Lee, I.-S. H.; Noland, W. E. Heterocycles, 2007, 71, 419-428) (20.3 g, 150 mmol) u THF-u (30 mL) se polako dodaje i meša se nastavlja na -78 °C tokom 3 h. 1M vodenog HCl (300 mL) se dodaje na -78 °C, i smeša se ostavlja da se zagreje polako do sobne temperature i meša se preko noći. Faze se razdvajaju i vodeni sloj se ekstrahuje pomoću EtOAc (2 x 500 mL). Kombinovani ekstrakti se osuše preko Na2O4, filtriraju i koncentruju u vakuumu kako bi se dobilo 57 g sirovog materijala. Doza sirovog proizvoda (30 g) se prečišćava fleš hromatografijom upotrebom gradijenta 0 do 50% EtOAc inEtOAc u heksanu da bi se dobilo 9.24 g jedinjenja iz naslova.
Korak 3: 5-Bromo-4'-metoksi-3H-spiro[benzofuran-2,1'-cikloheksan]-3-on
[0130] Smeša (5-bromo-2-fluorophenil)(1-hydroksi-4-metoksicikloheksil)metanona (Intermedijer 12 Korak 2, 1.05 g, 3.17 mmol) i kalijum tert-butoksida (0.445 g, 3.80 mmol) u THF-u (10 mL) se zagreva u mikrotalasnom reaktoru na 70 °C tokom 30 min. Rastvarač se uklanja u vakuumu i ostatak se prečišćava fleš hromatografijom upotrebom gradijenta 0 do 15% EtOAc u heksanu kako bi se dobilo 388 mg (39% prinos) jedinjenja iz naslova.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ ppm 1.71 (m, 6 H), 2.31 (m, 2 H), 3.32 (m, 1 H), 3.41 (s, 3 H), 7.03 (d, J=9.20 Hz, 1 H), 7.36 (t, J=8.80, 2.00 Hz, 1 H), 7.77 (d, J=2.00 Hz, 1 H); MS (ES+) mlz 312 [M+H]<+>.
Intermedijer 14
3-Bromo-5-(prop-1-inil)piridin
[0132] 3,5-Dibromopiridin (30 g, 127 mmol), bakar(I) jodid (7.24 g, 38.0 mmol) i tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (0) (4.39 g, 3.80 mmol) su pomešani u tuluenu (120 mL) u azotnom okruženju. 1-(Trimethilsilil)-1-propin (26.36 mL, 164.5 mmol), trietilenamin (53.0 mL, 380 mmol) i tetra-n-butilamonijum fluorid (12.66 mL, 12.66 mmol) se dodaju. Smeša se zagreva uz refluks i meša pod azotom preko noći. Dodaje se voda (100 mL) reakcionoj smeši koja se filtrira i čije faze se razdvajaju. Organska faza se ispira sa 1 M vodenog HCl (100 mL). Organska faza se koncentruje i rastvara u MeOH (200 mL), filtrira i koncentruje. Smeša se rastvara u DCM-u i evaporira na silicijumskim gelom dok ne bude suva a zatim se prenosi u kolonu silicijumskog gela (300 g). Frakcije koje sadrže čisti proizvod se mešaju i evaporiraju kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (16.39 g, 66% prinos):<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 2.08 (s, 3 H), 7.82 (t, 1 H), 8.52 (d, 1 H), 8.55 (d, 1 H); MS (APCI+) m/z 197.0 [M+H]<+>.
Intermedijer 15
5-(Prop-1-inil)piridin-3-ilboratna kiselina
[0134] 3-Bromo-5-(prop-1-inil)piridin (Intermedijer 14, 25 g, 117 mmol), 2-metiltetrahidrofuran (60 mL), tuluen (200 mL) i triizopropil borat (33.2 mL, 140.78 mmol) se pomešaju. Smeša se ohladi do -50 °C. Hladnoj smeši se dodaje n-BuLi (59.8 mL, 149.5 mmol) kap po kap tokom 30 min. Smeša se meša 60 min na -50 °C. Dodaje se 2M vodenog HCl (100 mL). Smeša se ostavlja da dostigne sobnu temperaturu i meša se 20 min. Organska i vodena faza se razdvajaju. Organska faza se ekstrahuje sa NaOH (2M vodenog) (2x100 mL). Vodene faze se pomešaju i pH se podesi na pH 5. Proizvod se ekstrahuje sa 2-metilTHF-a (2x100 mL). Organska faza se osuši sa Na2SO4, filtrira i koncentruje kako bi dala jedinjenje iz naslova (16.47 g, 87% prinos):<1>H NMR (500 MHz, CD3OD) δ ppm 2.11 (s, 3 H) 8.21 (br. s., 1 H) 8.53 (m, 2 H); MS (APCI+) m/z 162.2 [M+H]<+>.
Intermedijer 16
2-Bromo-4-(prop-1-inil)piridin
[0136] Rastvor 2-bromo-4-iodopiridina (2 g, 7.04 mmol), bakar(I) jodida (0.080 mL, 2.11 mmol) i tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0)-a (0.407 g, 0.35 mmol) se dodaje u tuluen (85 mL) 1-(trimetilsilin)-1-propin (1.054 mL, 7.04 mmol), trietilenamin (3.24 mL, 23.25 mmol) i tetrabutilamonijum fluorid (1 M in THF, 7.04 mL, 7.04 mmol) i rezultujuća smeša se meša u okruženju argona na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša se koncentruje i rezultujući ostatak se deli između vode (10 mL) i DCM-a (10 mL) i sipa u fazni separator. Organska faza se sakuplja i vodena faza se ekstrahuje jednom sa DCM-om (10 mL). Kombinovani organski ostatak se koncentruje i prečišćava pomoću fleš hromatografije upotrebom 0% do 30% EtOAc u heptanu kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.195 g, 87% prinos):<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.11 (s, 3 H), 7.42 (dd, 1 H), 7.65 (s, 1 H), 8.35 (dd, 1 H); MS (ES+) m/z 196 [M+H]<+>; MS (APCI+) m/z 196 [M+H]<+>.
Intermedijer 17
4-(Prop-1-inil)-2-(trimethilstanil)piridin
[0138] 2-Bromo-4-(prop-1-inil)piridin (Intermedijer 16, 1.077 g, 5.49 mmol) se rastvaraju u tuluenu (30 mL) i 1,1,1,2,2,2-heksametildistan (2.278 mL, 10.99 mmol) i tetrakis(trimetilfosfin)paladijum(0) (0.635 g, 0.55 mmol) se dodaju. Reakcija se mešana na 80 °C tokom noći u okruženju argona. Smeša se ohladi do sobne temperature i filtrira se kroz sloj dijatomejske zemlje i koncentruje u vakuumu. Tuluen (20 mL) se dodaje i smeša se koncentruje u vakuumu kako bi se dobilo jedinjenje koje je upotrebljeno u sledećem koraku: MS (APCI+) mlz 282 [M+H]<+>.
Intermedijer 18
Metil- 5-(but-2-iniloksi)pikolinat
[0140] Rastvor but-2-in-1-ol (0.635 mL, 8.49 mmol) u THF (30 mL) se dodaje metil 5-hidroksipikolinitu (1.3 g, 8.49 mmol), trifenilfosfinu (3.34 g, 12.73 mmol) i diizopropil azodikarboksilatu (2.507 mL, 12.73 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je ostavljena da dostigne sobnu temperaturu i meša se 2 dana. Reakciona smeša se koncentruje i proizvod se prečišćava fleš hromatografijom koristeći heptan/EtOAc gradijent kako bi se dobilo 1.42 g (82% prinos) jedinjenja iz naslova.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.87 (t, 3 H), 4.00 (s, 3 H), 4.79 (q, 2 H), 7.41 (dd, 1 H), 8.11 - 8.20 (m, 1 H), 8.49 (d, 1 H).
Intermedijer 19
5-(But-2-iniloksi)pikolinska kiselina
[0142] Rastvoru metil- 5-(but-2-iniloksi)pikolinske (Intermedijer 18, 1.42 g, 6.92 mmol) u THFu (15 mL) se dodaje litijum hidroksid (0.871 g, 20.76 mmol) rastvoren u vodi (5 mL) reakcionoj smeši na sobnoj temperaturi. Nakon 3 dana mešanja reakciona smeša se podeli između vode i EtOAc. Voda se napravi kiselom sa vodenim rastvorom HCl (2M) i ekstrahuje se sa EtOAc. Organska faza se osuši sa MgSO4i koncentruje kako bi se dobilo 0.60 g (45% prinos) jedinjenja iz naslova:<1>H NMR (500 MHz, CD3OD) δ ppm 1.84 (t, 3 H), 4.87 (q, 2 H), 7.57 (dd, 1 H), 8.14 (d, 1 H), 8.34 (d, 1 H); MS (ES+) mlz 192 [M+H]<+>.
Intermedijer 26
6-Bromo-5',6'-dihidro-4'H-spiro[hromen-2,3'-piran]-4(3H)-on
[0144] Rastvor 1-(5-bromo-2-hidroksifenil)etanona (8.2 g, 38.13 mmol), dihidro-piran-3-ona (4.96 g, 49.57 mmol) i pirolidina (4.12 mL, 49.57 mmol) u tuluenu (80 mL) se meša na 50 °C tokom 1 h. Temperatura se povećava uz refluks i reakcije se izlaže refluksu 22 h. Dodatni dihidro-piran-3-on (0.5 g 5 mmol) se dodaje i smeša se izlaže refluksu dodatnih 24 h. Smeša se ostavlja da dostigne r.t. a zatim se dodaje voda (50 mL) praćeno sa EtOAc (100 mL).
Organski sloj se koncentruje i ostatak se prečišćava pomoću fleš hromatografije upotrebom gradijenta heptana 40% EtOAc u heptanu kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (9 g, 79% prinos):<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 1.57 (m, 1 H), 1.72 (ddd, 1 H), 1.96 (m, 1 H), 2.12 (m, 1 H), 2.71 (m, 2 H), 3.51 (d, 1 H), 3.58 (m, 1 H), 3.86 (m, 2 H), 6.96 (d, 1 H), 7.57 (dd, 5 H), 7.97 (d, 4 H); MS (ES+) mlz 297 [M+H]<+>.
Intermedijer 27
6-Bromo-2-tetrtahidropirin-3-il-hroman-4-on
[0146] Rastvor 1-(5-bromo-2-hidroksifenil)etanona (18 g, 83.70 mmol), tetrahidro-2H-piran-3-karbaldehida (9.55 g, 83.70 mmol) i pirolidina (6.95 mL, 83.70 mmol) u MeOH (125 mL) se zagreva uz refluks na 4.5 h. Smeši se ostavljena da dostigne sobnu temperaturu i koncentruje se. Ostatak se rastvara u EtOAc (150 mL) i ispire sa 1M NaOH (80 mL), 1M HCl (80 mL), i fiziološkim rastvorom (80 mL) sukcesivno. Organska faza se koncentruje, ostatak se prečišćava pomoću fleš hromatografije sa gradijentom od 10% EtOAc u heptanu od 40% EtIAc u heptanu kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova 18 g, 69% prinos):<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.50 (m, 3 H), 1.79 (m, 0.5 H), 1.94 (m, 1.5 H), 2.67 (m, 1 H), 2.86 (m, 1 H), 3.30 (m, 2 H), 3.78 (m, 1 H), 3.84 (m, 0.5 H), 4.04 (dd, 0.5 H), 4.44 (m, 1 H), 7.05 (dd, 1 H), 7.71 (m, 1 H), 7.79 (d, 1 H); MS (ES+) m/z 311 [M+H]<+>.
Intermedijer 28
6-Bromo-2-(2,2-dimetilhidropropan-4-il)hroman-4-on
[0148] Rastvor 1-(5-bromo-2-hidroksifenil)ethanone (13.5 g, 62.78 mmol), 2,2-dimetiletrahidro-2H-piran-4-karbaldehida (9.40 g, 62.78 mmol) i pirolidina (5.22 mL, 62.78 mmol) u MeOH (125 mL) se zagreva uz refluks 3 h. Smeša se ostavlja da dostigne sobnu temperaturu i zatim se koncentruje. Ostatak se rastvara u EtOAc (100 mL) i ispira sa 1M NaOH (60 mL), 1M HCl (60 mL), i fiziološkim rastvorom (60 mL) sukcesivno. Organska faza se koncentruje i ostatak se prečišćava pomoću fleš hromatografije sa gradijentom od 10% EtOAc u heptanu od 40% EtOAc u heptanu kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (16.22 g, 76% prinos):<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.15 (m, 6 H), 1.26 (m, 2 H), 1.52 (m, 1 H), 1.76 (m, 1 H), 2.12 (ddd, 1 H), 2.65 (m, 1 H), 2.83 (m, 1 H), 3.57 (m, 1 H), 3.66 (m, 1 H), 4.32 (ddd, 1 H), 7.05 (dd, 1 H), 7.70 (dd, 1 H), 7.78 (d, 1 H); MS (ES-) mlz 337 [M-H]-.
Intermedijer 29
2-Oksobutanetioamid
[0150] Vodonik sulfid se unosi u vidu mehurova kroz rastvor propionil cijanida (25 g, 300.88 mmol) u 2-metil-tetrahidrofuranu (200 mL) na -10 °C 10 min. Dodavanje vodonik sulfida se zaustavlja i trietilamin (0.419 mL, 3.01 mmol, kao rastvor u 2-metil-tetrahidrofuranu (4 mL)) se dodaje kap po kap tokom 10 min. Dodavanje vodonik sulfida se nastavlja još 1.5 h na -10 °C pre nego što se dodavanje zaustavlja boca se ispira sa azotom 2.5 h, za to vreme reakciona smeša se ostavlja da dostigne sobnu temperaturu. Smeša se koncentruje i rezultujući ostatak se sipa u 1:1 EtOAc:heptan i propušta kroz kratak čep silicijumskog gela kako bi se dobilo 30.2 g (86% prinos) jedinjenje iz naslova<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.99 (t, 3 H), 2.93 (q, 2 H), 9.79 (br. s., 1 H), 10.20 (br. s., 1 H); MS (ES+) mlz 118 [M+H]<+>.
Intermedijer 30
5'-Metilspiro[hroman-4,2'-imidazol]-4',6-diamin
[0152] Smeša 6-bromo-5'-metilspiro[chroman-4,2'-imidazol]-4'-amina (Intermedijer 4, 115 mg, 0.39 mmol), trans-4-hidroksi-L-prolin (51 mg, 0.39 mmol), CuI (37 mg, 0.20 mmol), i K2CO3(162 mg, 1.17 mmol) u DMSO (0.9 mL) se meša na sobnoj temperaturi tokom 15 min. Amonijak (30-33% in H2O, 0.37 mL, 5.86 mmol) se dodaje i smeša se izlaže mikrotalasnom zračenju na 110 °C 3 h. Smeša se razblažuje sa DMSO i voda se filtrira kroz sloj dijatomejske zemlje. NaCl (s) se dodaje i vodena smeša se ekstrahuje pomoću EtOAc (5x35 mL). Kombinovane organske faze se osuše (Na2SO4) i evaporiraju kako bi se dobio sirovi proizvod koji se prečišćava pomoću fleš hromatografije (4 g silicijum, eluent:
CHCl3/(MeOH/NH3) gradient) obezbeđujući jedinjenje iz naslova (59 mg, 65% prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.76 - 1.92 (m, 2 H), 2.19 (s, 3 H), 4.18 - 4.34 (m, 2 H), 4.45 (br. s., 2 H), 5.69 (d, 1 H), 6.35 (dd, 1 H), 6.45 (br. s., 2 H), 6.50 (d, 1 H); MS (ES<+>) m/z 231 [M+H]<+>.
Intermedijer 31
1-Bromo-3-(prop-1-inil)benzen
[0154] Rastvoru 1-bromo-3-iodobenzen (3.0 g, 10.6 mmol), bakar(I) jodida (0.61 g, 3.2 mmol) i tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0)a (0.61 g, 0.53 mmol) u tuluenu (20 mL) se dodaje 1-(trimetilsilil)-1-propine (1.6 mL, 10.6 mmol), trietilamin (4.9 mL, 35.0 mmol) i 1M rastvarača tetrabutilamonijum fluorida u tetrahidrofuranu (10.6 mL, 10.6 mmol). Rezultujuća smeša se meša u okruženju azota na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša se deli između vode i Et2O i organska faza se suši preko magnezijum sulfata i koncentruje se u vakuumu. Ostatak se filtrira kroz čep silicijuma i ispira se sa heptanom (4x25 mL) dajući jedinjenje iz naslova (1.6 g, 80% prinos):<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.05 (s, 3H), 7.30 (t, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.52-7.56 (m, 1H), 7.56-7.58 (m, 1H); MS (CI) m/z 195 [M+H]<+>.
Intermedijer 32
2-Hloro-4-(prop-1-inil)piridin
[0156] 4-Bromo-2-hloropiridin (1.00 g, 5.20 mmol), 1-(trimetilsilil)-1-propin (0.846 mL, 5.72 mmol), bakar(I) jodid (99 mg, 0.52 mmol), i tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (90 mg, 0.08 mmol) su razmućeni u tuluenu (14 mL) u mikrotalasnoj bočici. Tetra-N-butilamonijum fluorid (1M u THF) (6 mL, 6.00 mmol) se dodaje i reakciona posuda se zatvara i zagreva na 100 °C 20 min. u mikrotalasnom reaktoru. Posle hlađenja smeša se filtrira kroz dijatomitsku zemlju i zatim koncentruje u vakuumu. Proizvod se prečišćava pomoću fleš hromatografije koristeći gradijent EtOAc u heptanu (0-50%) kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (530 mg, 67% prinos):<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.11 (s, 3 H), 7.38 (dd, 1 H), 7.51 (s, 1 H), 8.37 (d, 1 H).; MS (ES+) m/z 152 [M+H]<+>.
Intermedijer 33
4-Bromo-2-(prop-1-inil)piridin
[0158] Jedinjenje iz naslova (0.560 g, 57% prinos) se priprema kao što je opisano za Intermedijer 32 počevši od 4-bromo-2-jodopiridina (1.42 g, 5.00 mmol):<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.08 (s, 3 H), 7.63 (dd, 1 H), 7.73 (d, 1 H), 8.39 (d, 1 H); MS (MM-ES+APCI)+ m/z 196 [M+H]<+>.
Intermedijer 34
3-(Prop-1-inil)fenilboronska kiselina
[0160] n-Butil litijum (2.5 M u heksanu, 3.7 mL, 9.4 mmol) se dodaje kap po kap rastvoru 1-bromo-3-(prop-1-inil)benzen (Intermedijer 31, 1.66 g, 8.51 mmol) i triizopropil boratu (2.2 mL, 9.4 mmol) u tetrahidrofuranu (5 mL) i tuluenu (15 mL) na -78 °C u okruženju argona. Reakciona smeša se meša 30 min. i zatim se ostavlja da dostigne sobnu temperaturu i meša se 1 h. Smeša se ohladi na -78 °C i 3 M vodene hlorovodonične kiseline se dodaje i smeša je meša 15 min. Smeša se zaakališe dodavanjem čvrstog KOH.2-methil-tetrahidrofuran je dodat tokom mešanja i dobijena čvrsta materija se skuplja filtracijom dajući tako jedinjenje iz naslova 1.0 g (75% prinos).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.01 (s, 3 H), 6.92 - 7.03 (m, 1 H), 7.09 - 7.20 (m, 1 H), 7.55 - 7.79 (m, 2 H).
Intermedijer 35
3-Hloro-5-(4,4,5,5-tetramethil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzonitril
[0162] Iz suspenzije 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborlana) (665 mg, 2.62 mmol), 3-hloro-5-jodobenzonitrila (345 mg, 1.31 mmol), i kalijum acetata (386 mg, 3.93 mmol) u dioksanu (5 mL) se evakuiše gas sa parom argona tokom nekoliko minuta.
PdCl2(dppf) CH2Cl2(53.5 mg, 0.07 mmol) se dodaje i smeša se zagreva uz refluks pod N2na 4 h. Smeša se ostavlja da se ohladi i onda se filtrira. Filter kolač se ispire sa EtOAc. Filtrat se koncentruje u vakuumu. Ostatak se prečišćava pomoću fleš hromatografije (ispiranje:heptan/EtOAc gradijent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (69 mg, 20% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.30 (s, 12 H), 7.88 (dd, 1 H), 7.90 - 7.94 (m, 1 H), 8.19 (dd, 1 H); MS (CI) m/z 264 [M+H]<+>.
Napomena: proizvod nema UV-reagovanje ali je vizualizovan na TLC-u pomoću agensa vizuelizacije koji sadrži fosfomolibdensku kiselinu i Ce(SO4)2.
Intermedijer 36
5-(But-2-iniloksi)pirazin-2-karboksilna kiselina
[0164] Gustoj smeši 5-hloro-pirazin-2-karboksilna kiselina (0.79 g, 5.00 mmol) u DMF (35 mL) se dodaje 2-butin-1-ol (3.74 mL, 50.0 mmol) i kalijum tert-butoksid (2.24 g, 20.0 mmol). Rezultujuća smeša se zagreva na 65 °C preko noći. Reakciona smeša se neutralizuje sa 2 M HCl i zatim se koncentruje u vakuumu. Deo (400 mg) sirovog materijala se deli između 0.5 M NaOH i 1:1 smeše heptana i EtOAc. Vodena faza se pravi malo kiselijom (pH 3-4) dodavanjem 1 M HCl-a. Dobijenoj suspenziji se dodaje NaCl(s) i smeša se ekstrahuje dva puta sa EtOAc. Kombinovane organske faze se osuše (Na2SO4) i evaporiraju kako bi se dobilo 0.11 g jedinjenja iz naslova.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.84 (t, 3 H), 5.06 (q, 2 H), 8.42 (d, 1 H), 8.82 (d, 1 H), 13.38 (br. s., 1 H); MS (ES<+>) m/z 193 [M+H]<+>.
Intermedijer 37
1-(4-Bromo-2-jodobenzil)ciklobutankarbonitril
[0166] Litijum diizopropilamid (3.34 mL, 6.68 mmol) se dodaje kap po kap rastvoru ciklobutankarbonitirila (0.417 g, 5.14 mmol) u THF-u (20 mL) na -78 °C u okruženju argona. Reakciona smeša se meša na -78 °C 30 min, a zatim se rastvor 4-bromo-1-(bromomethil)-2-jodobenzen (videti Caruso, A.; Tovar, J., D. J. Org. Chem.2011, 76, 2227-2239., 2.51 g, 6.68 mmol) u THF (8 mL) polako dodaje kap po kap i reakcija se ostavlja da dostigne r.t. Smeša se meša naredna 3 h i onda se ugasi pomoću vode. Reakciona smeša se deli između vode i EtOAc, organski sloj se suši preko MgSO4i koncentruje kako bi se dobio sirovi proizvod koji se prečišćava pomoću fleš hromatografije (ispiranje: heptan/etilacetat 12:1) kako bi obezbedili jedinjenje iz naslova (1.71 g, 89% prinos):<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 2.08 - 2.34 (m, 4 H), 2.47 - 2.58 (m, 2 H), 3.18 - 3.23 (m, 2 H), 7.29 (s, 1 H), 7.49 (dd, 1 H), 8.03 (d, 1 H); GC MS (EI) m/z 375 M<+>.
Intermedijer 38
6'-Bromospiro[ciklobutan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on
[0168] Suva boca napunjena sa 1-(4-bromo-2-jodobenzil)ciklobutanekarbonitril (Intermedijer 37, 2.60 g, 6.91 mmol) se rastvara u suvom THF-u (100 mL) u okruženju argona. Rezultujuća smeša se ohladi do -78 °C a zatim se tert-butillitijum (1.7 M u pentan, 8.13 mL, 13.83 mmol) dodaje kap po kap. Reakcija se meša 1.5 h na -78 °C a zatim se reakcija ugasi sa MeOH (0.5 mL), praćeno sa vodenom hlorovodoničnom kiselinom (2M, 10 mL). Rezultujući rastvor se koncentruje kako bi se odstranio organski rastvor i zatim se deli između DCM i vode.
Organska faza se osuši preko MgSO4i koncentruje kako bi se dobio sirovi proizvod koji se prečišćava pomoću fleš hromatografije (ispiranje: heptan/EtOAc 20:1-15:1-10:1) obezbeđujući jedinjenje iz naslova (1.1 g, 63% prinos):<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 1.97 - 2.13 (m, 3 H), 2.13 - 2.24 (m, 1 H), 2.45 - 2.60 (m, 2 H), 3.24 (s, 2 H), 7.31 (d, 1 H), 7.67 (dd, 1 H), 7.88 (d, 1 H); GC MS (EI) m/z 250 M<+>.
Intermedijer 39
6'-(Ciklobutilmetoksi)spiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1',4(3'H)-dion
[0170] Rastvoru se dodaju 6-hidroksi-2,3-dihidro-1H-inden-1-ona (3 g, 20.3 mmol) u THF-u (140 mL) ciklobutilmetanol (2.10 mL, 22.3 mmol), trifenilfosfin (7.97 g, 30.4 mmol) i diizopropil azodikarboksilat (5.98 mL, 30.4 mmol). Smeša se zagrevana do 45 °C i ostavlja da se meša tokom vikenda. Sirovi proizvod se prečišćava pomoću fleš hromatografije upotrebom gradijenta 0-10% EtOAc u heptanu kako bi se dobilo 2.56 g (58% prinos) jedinjenja iz naslova:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 1.81 - 2.03 (m, 4 H), 2.11 - 2.20 (m, 2 H), 2.69 - 2.74 (m, 2 H), 2.78 (dt, 1 H), 3.04 - 3.12 (m, 2 H), 3.96 (d, 2 H), 7.17 - 7.22 (m, 2 H), 7.36 (d, 1 H); MS (ES+) m/z 217 [M+H]<+>.
Intermedijer 40
(1r,4r)-6'-(Ciklobutilmetoksi)-4-hidroksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on
[0172] 6'-(Ciklobutilmetoksi)spiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1',4(3'H)-dion (Intermedijer 39, 2.35 g, 7.88 mmol) se rastvara u tetrahidrofuranu (40 mL) i MeOH (3.19 mL, 78.76 mmol). Boran-trimetilamin kompleks (1.26 g, 17.3 mmol) se dodaje i smeša se mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Monohidrat limunske kiseline (23.2 g, 110 mmol) se dodaje sve odjednom, što je praćeno dodavanjem vode kap po kap (2.84 mL, 157 mmol). Smeša se meša 4 h pre razređivanja sa vodom i ekstrahovanja sa EtOAc dva puta. Kombinovane organske faze se ispiraju sa NaHCO3i fiziološkim rastvorom i potom su koncentrovane. Sirovi proizvod se prečišćava u koloni silicijumskog gela. (eluiranje sa gradijentom 0-50% EtOAc u n-heptanu) kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.84 g, 78% prinos, sadrži 29% od (1s,4s)-6'-(ciklobutilmetoksi)-4-hidroksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on).
Jedinjenje je upotrebljeno kao takvo u sledećem koraku:<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.10 (m, manji izomer), 1.2-1.4 (m, 4H), 1.57 (m, 2H), 1.71 (m, manji izomer), 1.75-1.95 (m, 6H), 2.07 (m, 2H), 2.71 (m, 1H), 2.92 (m, 2H), 3.44 (m, 1H), 3.84 (m, manji izomer), 3.98 (d, 2H), 4.42 (d, manji izomer), 4.66 (d, 1H), 7.07 (d, 1H), 7.26 (m, 1H), 7.44 (m, 1H); MS (ES+) m/z 301.1 [M+H]<+>.
Intermedijer 41
3-Bromo-5-hloro-2-metilpiridin
[0174] 2,3-Dibromo-5-hloropiridin (1.3 g, 4.70 mmol), metilboronična kiselina (0.30 g, 5.01 mmol), bis(trifenilfosfin)paladijum(II) hlorid (0.50 g, 0.70 mmol) i dioksan (10 mL) su dodati. K2CO3(2 M vodenog rastvora, 7.0 mL, 14.0 mmol) se dodaju i reakcija se izlaže okruženju N2(g). Reakcija se zagreva do refluka 5 h. Reakcija se meša na 50 °C preko noći i zatim zagrejava dodatnih 1 h. Metilboronična kiselina (0.14 g, 2.35 mmol) se dodaje i reakcija se izlaže refluksu 4 h i ostavlja se da se ohladi do sobne temperature. Smeša se filtrirana kroz silicijumski čep. EtOAc i voda se dodaju i faze se razdvajaju. Organska faza se ispira još dva puta sa vodom. Organska faza se osuši pomoću MgSO4, filtrira i koncentruje u vakuumu. Sirovi proizvod se prečišćava pomoću fleš hromatografije (12 g SiO2, 0-20% MeOH sadrži 0.1 M NH3u DCM). Frakcije koje sadrže čisti proizvod se grupišu i koncentruju, dajući tako jedinjenje iz naslova (123 mg, 13% prinos):<1>H NMR (DMSO-d6) δ ppm 2.56 (s, 3 H), 8.29 (d, 1 H), 8.52 (d, 1 H); MS (CI) m/z 206 [M+H]<+>.
Intermedijer 42
Dietil 2-(5-bromo-3-hloropiridin-2-il)malonat
[0176] Dietil malonat (0.87 mL, 5.7 mmol) se dodaje kap po kap suspenziji NaH (55% u mineralnom ulju, 0.27 g, 6.2 mmol) u DMF-u (6 mL) na 0 °C. Ledeno kupatilo se uklanja i smeša se meša pod N2na sobnoj temperaturi 20 min. 5-Bromo-2,3-dihloropiridin (1.0 g, 4.4 mmol) se dodaje i smeša se meša tokom noći na 120 °C. Smeša se ostavlja da se ohladi i zatim se deli između vode koja sadrži NaCl i EtOAc. Organska faza se osuši (MgSO4) i evaporira kako bi se dobio sirovi proizvod koji se prečišćava fleš hromatografijom (25 g SiO2, heptan/EtOAc gradijent) kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.8 g, 2 mmol, 52% prinos) koje sadrži ostatak neodreagovane malonske kiseline MS (ES+) m/z 350 [M+H]<+>. Deo ovog materijala se upotrebljava kao takav u sledećem koraku.
Intermedijer 43
5-Bromo-3-hloro-2-metilpiridin
[0178] Rastvor nečistog dietil 2-(5-bromo-3-hloropiridin-2-il)malonata (Intermedijer 42, 0.41 g, 1.2 mmol) i koncentrovana vodena HCl (3 mL) se zagreva uz refluks 3 h. Isparivi delovi se uklanjaju u vakuumu i ostatak isparava zajedno sa acetonitrilom. Čvrsti ostatak (monodekarboksilizovana kiselina) se rastvara u dioksanu (4.5 mL) i zagreva uz refluks preko noći. Isparivi delovi se uklanjaju u vakuumu. Ostatak se prečišćava pomoću fleš hromatografije (4 g SiO2, heptan/EtOAc gradijent) kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.12 g, 51% prinos):<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 2.60 (s, 3 H), 7.82 (d, 1 H), 8.46 (d, 1 H); MS (CI) m/z 206 [M+H]<+>.
Intermedijer 44
3-Hloro-2-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin
[0180] Suspenzija 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolana) (0.836 g, 3.29 mmol), 5-bromo-3-hloro-2-metilpiridina (Intermedijer 43, 0.34 g, 1.65 mmol), i kalijum acetata (0.485 g, 4.94 mmol) u dioksanu (5 mL) se ugasi sa parom N2(g) na nekoliko min. PdCl2(dppf) CH2Cl2(0.067 g, 0.08 mmol) se dodaje i smeša se zagreva uz refluks pod N2(g) na 1.5 h. Smeša se ostavljena da se ohladi do sobne temperature i zatim se filtrira. Filter kolač se ispira sa EtOAc. Filtrat se koncentruje u vakuumu. Ostatak se prečišćava pomoću fleš hromatografije (40 g SiO2eluirani gradijent od 0-80% EtOAc u heptanu kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.44 g, kvantitativni prinos):<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 1.35 (s, 12 H), 2.65 (s, 3 H), 7.95 - 8.03 (m, 1 H), 8.69 (d, 1 H); MS (ES+) m/z 172 [M+H]<+>
Intermedijer 45
3-Bromo-4-metill-5-(prop-1-inil)piridin
[0182] 3,5-Dibromo-4-metilpiridin (0.50 g, 2.0 mmol), 1-(trimetilsilil)-1-propin (0.35 mL, 2.4 mmol), bakar(I) jodid (0.11 g, 0.60 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (0.023 g, 0.02 mmol) se pomešaju u tuluenu (2 mL). Smeša se gasi pomoću pare argona na nekoliko min. Tetra-n-nbutilamonijum fluorid (1 M u THF) (2.4 mL, 2.4 mmol) se dodaje, i reakcija se zagreva pod N2na 70 °C preko noći. Smeša se deli između vode koja sadrži zasićeni vodeni NaHCO3and EtOAc. Organska faza se osuši (MgSO4) i evaporira kako bi se dobio sirovi proizvod koji se prečišćava pomoću fleš hromatografije (40 g SiO2, heptan/EtOAc gradijent) dajući jedinjenje iz naslova (0.067 g, 16% prinos):<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.15 (s, 3 H), 2.46 (s, 3 H), 8.48 (s, 1 H), 8.61 (s, 1 H); MS (ES<+>) m/z 210 [M+H]<+>.
Intermedijer 46
(1r,4r)-6'-(Ciklobutilmetoksi)-4-metoksipsiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on
[0184] (1r,4r)-6'-(Ciklobutilmetoksi)-4-hidroksipsiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on (Intermedijer 40, sadrži 29% izomera 1.84 g, 6.13 mmol) se rastvora u 2-Me THF (17 mL) pod inertnim okruženjem i rastvor se ohladi do 0 °C. Metil jodid (0.498 mL, 7.96 mmol) se dodaje što je praćeno sa dodavanjem u dozama kalijum tert-butoksida (0.962 g, 8.58 mmol). Rezultujuća smeša se meša na 35 °C tokom 1 h. Kalijum tert-butoksid (0.962 g, 8.58 mmol) se dodaje i meša kontinuirano. Nakon ukupno 4 h, potpuna konverzija se dobija. Dodaju se voda (6 mL) i fiziološki rastvor (3 mL). Faze se razdvojene i organski sloj se osuši i koncentruje. Sirovi proizvod se prečišćava u koloni silicijumskog gela (eluirani gradijent 0-50% EtOAc u n-heptanu) kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.480 g, 77 %). Proizvod koji sadrži 29 % (1s,4s)-6'-(ciklobutilmetoksi)-metoksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-ona upotrebljen je kao takav u sledećem koraku:<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.11 (m, manji izomer), 1.26 (m, 2H), 1.40 (d, 1H), 1.57 (m, 2H), 1.75-1.95 (m, 5H), 2.0-2.1 (m, 3H), 2.71 (m, 1H), 2.95 (s, 3H), 2.95 (s, manji izomer), 3.19 (m, 1H), 3.24 (s, manji izomer), 3.26 (s, 3H), 3.45 (m, manji izomer), 3.99 (d, 2H), 7.07 (d, 1H), 7.26 (m, 1H), 7.45 (m, 1H); MS (ES+) m/z 315.1 [M+H]<+>.
Intermedijer 47
6-(3,3,3-trifluoropropoksi)-2,3-dihidro-1H-inden-1-on
[0186] Rastvoru 6-hidroksi-2,3-dihidro-1H-inden-1-on (3.0 g, 20.3 mmol) u THF-u (140 mL) dodaje se trifenilfosfin (7.97 g, 30.4 mmol) i 3,3,3-trifluoropropan-1-ol (1.963 mL, 22.27 mmol). Diizopropil azodikarboksilat (5.98 mL, 30.4 mmol) se dodat kap po kap i smeša se ostavlja da se ohladi do sobne temperature preko noći. Zbog toga što je ostao početni materijal 3,3,3-trifluoro-1-propanol (0.892 mL, 10.1 mmol) se dodaje kap po kap i smeša se koncentruje. Sirovi proizvod se prečišćava pomoću fleš hromatografije (0-12% EtOAc u heptanu kao ispirač) kako bi se dobilo 1.08 g (22% prinos) jedinjenja iz naslova (koje sadrži malo diizopropil azodikarboksilata):<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 2.65 (qt, 2 H), 2.71 - 2.77 (m, 2 H), 3.05 - 3.13 (m, 2 H), 4.23 (t, 2 H), 7.17 - 7.23 (m, 2 H), 7.40 (d, 1 H); MS (ES+) m/z 245 [M+H]<+>.
Intermedijer 48
3-Bromo-5-(but-1-inil)-piridin
[0188] Kroz But-1-in (g) se tokom 5 min nežno propuštaju mehurovi anhidrovanog acetonitrila ohlađenog u ledenom kupatilu. Rezultujući rastvor sadrži 170 mg but-1-in po mL. Rastvori but-1-in (4.57 mL, 14.36 mmol) i diizopropilamina (3.72 mL, 26.11 mmol) su dodati redom smeši 3,5-dibromopiridina (3.09 g, 13.06 mmol), bis(trifenilfosfin)-paladijum(II) hlorida (0.458 g, 0.65 mmol) i CuI (0.249 g, 1.31 mmol) u acetonitrilu (15 mL) u okruženju argona. Rezultujuća smeša se meša na sobnoj temperaturi preko noći, razblažuje se sa EtOAc i prolazi kroz kratak silicijumski čep. Razblaživači evaporiraju i ostatak se prečišćava pomoću fleš hromatografije na silicijumu (eluiranje sa gradijentom od 0-20% EtOAc u heptanu) kako bi se dobilo 2.40 g jedinjenja iz naslova (87% prinos):<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.17 (t, 4 H), 2.47 (q, 3 H), 8.11 (t, 1 H), 8.57 (d, 1 H), 8.65 (d, 1 H); MS (ES+) mlz 210 [M+H]<+>.
Intermedijer 49
5-(But-1-inil)piridin-3-ilbornonična kiselina
[0190] n-BuLi (2.5 M u heksanima, 5.46 mL, 13.7 mmol) se dodaje kap po kap rastvoru 3-bromo-5-(but-1-inil)piridina (Intermedijer 48, 2.39 g, 11.4 mmol) i triizopropil borata (3.15 mL, 13.65 mmol) u 2-Me THF-u (20 mL) na -50 °C. Smeša se mešana 1.5 h dok se temperatura održava između -50 i -40 °C. Smeša se izvadi iz kupatila za hlađenje i 2 M vodenog HCl (12 mL, 24 mmol) se dodaje što je praćeno mešanjem tokom 20 min. Smeša se razblažuje sa EtOAc. Vodeni NaOH (2 M) se dodaje dok pH 12 ne bude dobijen u vodenoj fazi. Faze se razdvajaju. Organska faza se ekstrahuje sa vodenim razblaživačem NaOH i vodom. Kombinovane vodene faze se ispiraju sa EtOAc, poveća im se kiselost do pH oko 5 dodavanjem koncentrovanog HCl i ekstrahovanog sa DCM. Organska faza se osuši preko Na2SO4i koncentruje kako bi se dobilo 1.522 g (76% prinos) jedinjenja iz naslova:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 1.11 - 1.37 (m, 3 H), 2.26 - 2.58 (m, 2 H), 7.46 - 10.34 (m, 3 H); MS (ES+) m/z 176 [M+H]<+>.
Intermedijer 50
3-Bromo-5-metilbenzonitril
[0192] Smeša 1,3-dibromo-5-metilbenzena (1.0 g, 4.0 mmol), bakar cijanida (0.179 g, 2.00 mmol), piridina (0.323 mL, 4.00 mmol), i DMF-a (15 mL) se zagreva na 190 °C na 10 h u mikrotalasnom reaktoru. Reakciona smeša se ostavlja da se ohladi do sobne temperature i zatim se sipa u rastvor H2O (20 mL) i vodeni rastvor NH3(25-35% NH3, 10 mL) i vodena faza se ekstrahuje sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti se osuše (Mg2SO4), filtriraju i koncentruju u vakuumu. Ostatak se prečišćava pomoću hromatografije silicijumskog gela (heksan/EtOAc gradijent eluiranja) kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.58 g, 74% prinos):<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 2.39 (s, 3 H) 7.41 (s, 1 H) 7.58 (s, 1 H) 7.60 (s, 1 H); MS (EI) m/z 195 M<+>.
Intermedijer 51
1-(4-Bromo-2-jodobenzil)ciklopropankarbonitril
[0194] Jedinjenje iz naslova (2.1 g, 55% prinos) se priprema kao što je opisano za 1-(4-Bromo-2-jodobenzil)ciklobutankarbonitril (Intermedijer 37) počevši od ciklopropankarbonitrila (1.96 mL, 26.6 mmol) i 4-bromo-1-(bromometil)-2-jodobenzen (videti Caruso, A.; Tovar, J., D. J. Org. Chem.2011, 76, 2227-2239) (4.0 g, 10.6 mmol):<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.02 - 1.07 (m, 2 H), 1.33 - 1.37 (m, 2 H), 2.98 (s, 2 H), 7.35 (d, 1 H), 7.51 (dd, 1 H), 8.02 (d, 1 H); MS (CI) m/z 362 [M+H]<+>.
Intermedijer 52
6'-Bromospiro[ciklopropan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on
[0195]
[0196] Osušena boca se napuni sa 1-(4-bromo-2-jodobenzil)ciklopropankarbonitrilom (Intermedijer 51, 3.29 g, 9.09 mmol) i suvi THF-om (30 mL) se dodaje u okruženju argona. Rezultujuća smeša se ohladi do -78 °C i n-BuLi (2.5 M u heksanima, 7.27 mL, 18.2 mmol) se dodaje kap po kap. Rastvor se ostavlja da dostigne sobnu temperaturu. Reakcija se gasi sa MeOH (2 mL) i HCl (1M, 5 mL). Smeša se ekstrahuje sa EtOAc. Vodena faza se zaalkališe sa zasićemo, NaHCO3i ekstrahuje se sa EtOAc dva puta. Organske faze se kombinuju, osuše preko MgSO4, filtriraju i koncentruju u vakuumu. HCl (1 M, 4 mL) i DCM (5 mL) se dodaju i organske faze se prikupljaju. Ovo se ponovlja dva puta. Vodena faza se zaalkališe sa NaHCO3i ekstrahuje sa DCM. Kombinovane organske faze se osuše kroz fazni separator i evaporiraju dok ne budu suve kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.1 g, 51% prinos): MS (CI) m/z 237 [M+H]<+>.
Intermedijer 53
1-Bromo-3-fluoro-5-(metoksimetil)benzen
[0198] NaH (60% disperzija u mineralnom ulju, 245 mg, 6.12 mmol) se dodaje rastvoru (3-bromo-5-fluorofenil)metanola (1.195 g, 5.83 mmol) u 2-Me THF (20 mL). Nakon što razvoj gasa prestane, dodaje se MeI (0.455 mL, 7.29 mmol) i rezultujuća smeša se meša na sobnoj temperaturi 16 h. Još jedna doza NaH (50 mg, 2.1 mmol) i MeI (0.10 mL, 1.6 mmol) se dodaju i smeša se zagreva do 60 °C 2 h. Ohlađena smeša se razblažuje sa EtOAc, ispira sa vodom, osuši preko MgSO4i koncentruje u vakuumu. Ostatak se prečišćava pomoću fleš hromatografije na silicijumu (gradijent of 0-15% EtOAc u heptanu) kako bi se dobilo 0.810 g (63% prinos) jedinjenja iz naslova:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.30 (s, 3 H), 4.38 - 4.46 (m, 2 H), 7.18 (m, 1 H), 7.37 (s, 1 H), 7.44 - 7.50 (m, 1 H); MS (EI) mlz 218 M<+>.
Intermedijer 54
3-Bromo-5-((2,2,2-trifluoroetoksi)metil)piridine
[0200] 2,2,2-Trifluoroetanol (0.434 g, 4.34 mmol) se dodaje suspenziji NaH (0.198 g, 4.96 mmol) u THF-u (10 mL). Kada razvoj gas prestane rastvor (5-bromopiridin-3-il)metil metansulfonata (videti WO2007/076247; 1.10 g, 4.13 mmol) u DMF-u se dodaje.
Rezultujuća smeša se meša 2 h na sobnoj temperaturi i zatim isparljivi rastvarač evaporira. Preostali rastvor se razblažuje sa vodom i ekstrahuje sa EtOAc (3x30 mL). Kombinovani ekstrakti se osuše preko MgSO4i koncentruju. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom na silicijum-dioksidu eluiranjem gradijentom sa EtOAc u heptanu kako bi se dobilo 227 mg jedinjenja iz naslova (20% prinos).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 3.92 (q, 2 H), 4.70 (s, 2 H), 7.87 (m, 1 H), 8.50 (m, 1 H), 8.66 (d, 1 H); MS (EI) mlz 269 M<+>.
Intermedijer 55
3-(4,4,5,5-Tetrametil-1,3,2-dioksaborlan-2-yl)-5-(trifluorometil)benzonitril
[0202] 3-bromo-5-(trifluorometil)benzonitril (1.25 mL, 5.00 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborlan) (2.54 g, 10.0 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferrocene]-paladijum(II) hlorid (288 mg, 0.35 mmol) i kalijum acetat (1.47 g, 15.0 mmol) se pomešaju u dioksanu (15 mL) u boci sa kružnim dnom. Okruženje je zamenjeno sa argonom i smeša se zagreva do 110 °C 1 h. Reakciona smeša se ohladi do sobne temperature, filtrira kroz dijatomejsku zemlju i filtracioni kolač se ispira sa EtOAc. Filtracioni rastvor se ispira sa fiziološkim rastvorom, osuši preko MgSO4i koncentruje u vakuumu. Ostatak se prečišćava pomoću fleš hromatografije upotrebom heptana/EtOAc (70/30) kao ispirača kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (495 mg, 33% prinos):<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.37 (s, 12 H), 7.98 (m, 1 H), 8.26 (s, 2 H); MS (ES+) m/z 297 [M+H]<+>.
Intermedijer 56
3-(Difluorometil)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborlan-2-il)benzonitril
[0204] 4,4,4',4',5,5,5',5'-Oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborlan) (643 mg, 2.53 mmol), di-µmetoksibis(1,5-ciklooctadien)diiridijum(I) (50.4 mg, 0.08 mmol), i 4,4'-di-tert-butil-2,2'-dipiridil (82 mg, 0.30 mmol) se pomešaju. Okruženje se promeni sa argonskim. Heksan (5 mL) se dodaje dok se argonsko okruženje održava. Smeša se meša 5 min. na sobnoj temperaturi. Rastvor 3-(difluorometil)benzonitril (776 mg, 5.07 mmol) se dodaje u heksan (5 mL) i smeša se mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakciona smeša se razblažuje sa EtOAc i ispira sa fiziološkim rastvorom. Organski sloj se osuši preko MgSO4, filtrira i koncentruje u vakuumu i prečišćava pomoću fleš hromatografije upotrebom heptana/EtOAc (85/15) kao ispirača kako bi se dobilo 192 mg (13% prinos) jedinjenja iz naslova:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.37 (s, 12 H), 6.68 (s, 1 H) 7.86 - 7.91 (m, 1 H) 8.14 (s, 1 H) 8.18 - 8.22 (m, 1 H); MS (ES+) m/z 279 [M+H]<+>.
Intermedijer 57
3-Hloro-2-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborlan-2-il)benzonitril
[0206] Suspenzija 5-bromo-3-hloro-2-fluorobenzonitrila (0.959 g, 4.09 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborlan) (2.08 g, 8.18 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)-ferrocene]paladijum(II) hlorida (0.234 g, 0.29 mmol) i kalijum acetata (1.20 g, 12.3 mmol) u dioksanu (15 mL) se stavljaju u bočicu za mikrotalasnu obradu. Smeša se ugasi pomoću pare argona na nekoliko minuta, i reakciona smeša se zatim zagreva do 110 °C na 1 h u mikrotalasnom reaktoru. Reakciona smeša se ohladi do sobne temperature, filtrira kroz dijatomejsku zemlju i ekstrahuje sa EtOAc. Organska faza se ispira sa fiziološkim rastvorom, osuši preko MgSO4i koncentruje u vakuumu. Ostatak se prečišćava pomoću fleš hromatografije upotrebom heptana/EtOAc (70/30) kao ispirača kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.22 g, kvantitativni prinos): GC MS (EI) m/z 282 M<+>.
Intermedijer 58
3-Bromo-5-etilbenzonitril
[0208] Smeša 1,3-dibromo-5-etilbenzena (2.7 g, 10.2 mmol), bakar cijanida (0.916 g, 10.2 mmol), piridina (1.65 mL, 20.5 mmol) u DMF-a (15 mL) se zagreva do 150 °C na 3 h. Nakon hlađenja do sobne temperature, smeša se sipa u rastvor H2O (30 mL) i amonijaka (25% vod. rastvor, 20 mL) i ekstrahuje sa EtOAc. Kombinovani organski sloj se osuši (MgSO4), filtrira i koncentruje u vakuumu. Proizvod se prečišćava pomoću fleš hromatografije na silicijumskom gelu, gradijent eluiranja 0-60% EtOAc u n-heptanu. GCMS (CI) m/z 210 [M+1]<+>.
Intermedijer 59
3-Bromo-5-(metoksimetil)benzonitril
[0210] MeOH (0.088 mL, 2.18 mmol) se dodaje u gustu smešu NaH (45 mg, 1.13 mmol) u DMF-u (2 mL). Kada razvijanje gasa prestane, rastvor 3-bromo-5-(bromometil)benzonitril (videti WO2009/100169; 240 mg, 0.87 mmol) u DMF-u (1 mL) se dodaje. Reakcija se ugasi dodavanjem zasićenog vodenog NH4Cl rastvora. Smeša se razdvaja između tuluena (5 mL) i vode (3 mL). Sloj tuluena se sakuplja, ispira sa vodom, osuši preko Na2SO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi proizvod se osuši na redukovanom pritisku i upotrebljava u sledećem koraku: GCMS (CI) m/z 226 [M+H]<+>.
Intermedijer 60
6'-Bromo-4-hidroksi-4-metilspiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on
[0212] Metilmagnezijum hlorid (3 M u THF-u, 3.41 mL, 10.2 mmol) se dodaje, pri -15 °C, i pod Ar, rastvoru od 6'-bromospiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1',4(3'H)-diona (Intermedijer 5 Metoda A Korak 1, 3 g, 10.2 mmol) u THF-u (4 mL). Reakciji je omogućeno dostizanje sobne temperature. Smeša se hladi do -15 °C, metilmagnezijum hlorid (3 M u THF, 3.41 mL, 10.2 mmol) se dodaje i smeša se meša 1h pri sobnoj temperaturi. Reakcija se ugasi sa zasićenom vodenim NH4Cl rastvorom, i potom se ekstrahuje sa DCM-om. Organski sloj se osuši preko Na2SO4i koncentruje in vakuumu. Izomerni proizvodi se odvajaju pomoću SFC Berger Multigram II sistema sa Chiralpak AD-H koloni (20 k 250 mm, 5 um) i mobilna faza koja se sastoji od 40% MeOH (sa 0,1% DEA) i 60% CO2pri protoku od 50 mL/min pri čemu se dobija: Izomer 1: (1r,4r)-6'-Bromo-4-hidroksi-4-metilspiro[cikloheksan-1,2'-inden]-r(3'H)-on, (114 mg, 11% prinos) sa vremenom zadržavanja 3.9 min:
Hz, CDCl3) δ ppm 1.17 (s, 3 H), 1.48 (m, 4 H), 1.60 (m, 4 H), 2.98 .55 (d, 1 H), 7.75 (d, 1 H), 7.85 (dd, 1 H); MS (ES-) m/z 307 [M-H]-, i mo-4-hidroksi-4-metilsfiro[ciklohexan-1,2'-inden]-1'(3'H)-jedan,
vremenom zadržavanja 9.4 min:
[0214]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 1.10 (d, 2 H), 1.14 (s, 3 H), 1.43 (td, 2 H), 1.56 (d, 2 H), 1.95 (td, 2 H), 2.97 (s, 2 H), 4.11 (s, 1 H), 7.53 (d, 1 H), 7.76 (d, 1 H), 7.85 (dd, 1 H); MS (ES-) m/z 307 [M-H]-.
Intermedijer 61
(1r,4r)-6'-Bromo-4-metoksi-4-metilspiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on
[0216] (1r, 4r)-6'-bromo-4-hidroksi-4-metilspiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on (Intermedijer 60, Izomer 1, 0.114 g, 0.37 mmol ) i metil jodid (0.046 mL, 0.74 mmol) se rastvaraju u THF-u (5 mL). Kalijum tert-pentoksid (1.7 M u toluenu, 0.282 mL, 0.48 mmol) se dodaje u kapima i smeša se meša 30 min. Kalijum tert-pentoksid (1.7 M u toluenu, 0.217 mL, 0.37 mmol) se dodaje i smeša se meša 15 min. Smeša vode (10 mL) i EtOAc (10 mL) se dodaje i dobijena smeša se meša 10 min. Organska faza se izdvaja, osuši preko Na2SO4i koncentruje u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (119 mg, 87% prinos):<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 1.19 (s, 3 H), 1.48 (br. s., 4 H), 1.53 (m, 4 H), 1.66 (m, 2 H), 1.83 (m, 2 H), 2.86 (s, 2 H), 3.17 (s, 3 H), 7.23 (d, 1 H), 7.59 (m, 1 H), 7.77 (m, 1 H); MS (ES+) m/z 323 [M+H]<+>.
Intermedijer 62
6- (3-fluorpropoksi) -2,3-dihidro-1 H-inden-1-on
[0218] U rastvor 6-hidroksi-2,3-dihidro-1H-inden-1-on (3.0 g, 20 mmol) u THF-u (140 mL) se 3-fluoropropan-1-ol (1.67 mL, 22.3 mmol), trifenilfosfin (7.97 g, 30.4 mmol) i diizopropil azodikarboksilat (5.98 mL, 30.4 mmol) dodaju. Smeša se meša na sobnoj temperaturi dva dana. Još 3-fluoropropanola (0.5 mL) se dodaje i smeša se zagreva do 45 °C. Posle 2 h smeša se koncentruje i sirovi proizvod se prečišćava fleš hromatografijom korišćenjem 0-20% EtOAc u heptanu kao eluentu, čime se dobija 3,42 g (81% prinos) jedinjenja iz naslova:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 2.12 - 2.26 (m, 2 H), 2.68 - 2.76 (m, 2 H), 3.04 - 3.12 (m, 2 H), 4.14 (t, 2 H), 4.61 (t, 1 H), 4.70 (t, 1 H), 7.17 - 7.22 (m, 2 H), 7.38 (d, 1 H); MS (EI) m/z 208 M<+>.
Intermedijer 63
6'-(3-Fluoropropoxy)spiro[cyclohexane-1,2'-indene]-1',4(3'H)-dion
[0220] Smeša 6-(3-fluorpropoksi)-2,3-dihidro-1H-inden-1-on (Intermedijer 62, 3.42 g, 16.4 mmol) i metil akrilat (3.26 mL, 36.1 mmol) u 2-Me THF ( 15 mL) se hlade na 0 ° C. Kalijum tert-butoksid (2.21 g, 19,71 mmol) se dodaje u dozama. Posle mešanja od 1 h na sobnoj temperaturi, voda (22,5 mL), KOH (0,921 g, 16,4 mmol) i smeša se zagrevaju uz refluks 4.5 h. Smeša se ostavljena da se ohladi na sobnoj temperaturi i dodaje se slani rastvor. Slojevi se razdvajaju i vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi se osuše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju se u vakuumu kako bi se dobilo 3.14 g (66% prinos) jedinjenja iz naslova koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.82 - 1.91 (m, 2 H), 2.13 - 2.27 (m, 4 H), 2.41 - 2.52 (m, 2 H), 2.70 (dt, 2 H), 3.16 (s, 2 H), 4.11 - 4.17 (m, 2 H), 4.60 (t, 1 H), 4.72 (t, 1 H), 7.21 - 7.27 (m, 2 H), 7.39 (dd, 1 H); MS (ES+) m/z 291 [M+H]<+>.
Intermedijer 64
6'-(3-fluorpropoksi)-4-hidroksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on
[0222] 6'-(3-fluorpropoksi)spiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1',4(3'H)-dion (Intermedijer 63, 3.14 g, 10.8 mmol) su rastvoreni u tetrahidrofuranu (50 mL) i MeOH (4.38 mL, 108 mmol).
Boran-trimetilamin kompleks (1.74 g, 23.8 mmol) se dodaje i dobijena smeša se meša preko noći. Monohidrat limunske kiseline (31.8 g, 151 mmol) se dodaje odjednom čemu sledi kapanje vode (3.90 mL, 216 mmol). Smeša se meša 3 h pre nego što se razblaži vodom i ekstrahuje sa EtOAc (x 2). Kombinovane organske faze se osuše preko MgSO4i koncentruju u vakuumu. Proizvod se prečišćava upotrebom silika gel fleš hromatografijom eluiranjem sa gradijentom MeOH (0-10%) u DCM da bi se se dobilo 1,94 (61% prinos) jedinjenja iz naslova koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja: MS (ES+) m/z 307 [M+H]<+>.
Intermedijer 65
6'-(3-fluorpropoksi)-4-metoksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on
[0224] 6'-(3-fluorpropoksi)-4-hidroksispir[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on (Intermedijer 64, 1.94 g, 6.64 mmol) se rastvara u tetrahidrofuranu (35 mL) pod argonom i ohladi do 0 °C. Kalijum tert-butoksid (2.23 g, 19.9 mmol) se dodaje u dozama i smeša se meša na 0 °C tokom 15 min. Dodaje se metil jodid (0.83 mL, 13.3 mmol). Kupatilo za hlađenje se uklanja i smeša se mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Voda (200 mL) se dodaje i dobijeni rastvor se raspodeli između dodate količine vode (200 mL) i EtOAc (400 mL). Organske faze se suše preko MgSO4i koncentruju u vakuumu. Proizvod se izoluje korišćenjem fleš hromatografije korišćenjem gradijenta EtOAc (0-50%) u heptanu da bi se dobilo 0.611 g (30% prinos) jedinjenja iz naslova: MS (ES+) m/z 307 [M+H]<+>.
Intermedijer 66
6-izobutoksi-2,3-dihidro-1 H-inden-1-on
[0226] U smešu 6-hidroksi-2,3-dihidro-1H-inden-1-ona (5.0 g, 33.8 mmol) u DMF (170 mL) dodaje se K2CO3 (9.33 g, 67.5 mmol) i 1-bromo-2 -metilpropan (5.50 mL, 50.6 mmol).
Dobijena narandžasta smeša se meša na sobnoj temperaturi preko noći i zatim se zagreva do 60 °C tokom 2 dana. Smeša se ohladi do sobne temperature, dodaje se voda i smeša se ekstrahuje sa EtOAc (x 4). Kombinovani organski slojevi se osuše preko MgSO4i koncentruju u vakuumu. Prečišćavanje fleš hromatografijom korišćenjem 0-20% EtOAc u heptanu kao eluenta se vrši kako bi se dobilo 4,98 g (72% prinos) jedinjenja iz naslova:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 1.03 (d, 6 H), 2.10 (dt, 1 H), 2.69 - 2.75 (m, 2 H), 3.04 - 3.11 (m, 2 H), 3.75 (d, 2 H), 7.17 - 7.22 (m, 2 H), 7.37 (d, 1 H); MS (ES+) m/z 205 [M+H]<+>.
Intermedijer 67
6'-Isobutokispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1',4(3'H)-dion
[0228] Jedinjenje iz naslova (3.02 g, 72% prinos) se dobija koristeći postupak opisan za Intermedijer 63, polazeći od 6-izobutoksi-2,3-dihidro-1H-inden-1-ona (Intermedijer 66, 3.0 g, 14.7 mmol) i metil akrilata (2.92 mL, 32,3 mmol):<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.04 (m, 8 H) 1.86 (m, 2 H) 2.11 (dt, 1 H) 2.21 (m, 2 H) 2.47 (m, 3 H) 2.70 (m, 2 H) 3.15 (s, 2 H) 3.76 (m, 3 H) 7.20 (m, 1 H) 7.25 (m, 1 H) 7.38 (d, 1 H); MS (ES+) m/z 287 [M+H]<+>.
Intermedijer 68
(1r, 4r)-4-hidroksi-6'-isobutokispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on
[0230] Jedinjenje iz naslova (1,20 g, 40% prinos, koji sadrži 5% drugog izomera) dobija se praćenjem postupka opisanog za 6'-(3-fluorpropoksi)-4-hidroksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on (Intermedijer 64) polazeći od 6'-isobutokispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1', 4(3'H)-diona (Intermedijer 67, 3.02 g, 10.6 mmol) i boran-trimetilamin kompleksa (1.69 g, 23.2 mmol). Proizvod se prečišćava fleš hromatografijom korišćenjem 0-100% EtOAc u heptanu kao eluenta:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.03 (d, J = 6.82 Hz, 7 H), 1.38 - 1.52 (m, 5 H), 1.76 - 1.87 (m, 2 H), 2.02 - 2.16 (m, 4 H), 2.97 (s, 2 H), 3.70 - 3.82 (m, 4 H), 7.17 (d, J = 2.53 Hz, 1 H), 7.19 - 7.24 (m, 1 H), 7.34 (dd, J = 8.34, 0.51 Hz, 1 H); MS (ES+) m/z 289 [M+H]<+>.
Intermedijer 69
(1r, 4r)-6'-izobutoksi-4-metoksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on
[0232] (1r,4r)-4-hidroksi-6'-isobutokispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on (Intermedijer 68, 1,2 g, 4.16 mmol) se rastvara u 2-Me THF-a (12 mL) u intertnom okruženju i rastvor se ohladi do 0 °C. Metil jodid (0,338 mL, 5,41 mmol) se dodaje a zatim u dozama kalijum tertbutoksida (0.654 g, 5.83 mmol). Dobijena smeša se meša na 35 °C tokom 1 h. Kalijum tertbutoksid (0.233 g, 2.08 mmol) se dodaje i mešanje se nastavlja. Posle još 30 min, dodaje se nova doza kalijum tert-butoksida (0.070 g, 0.62 mmol) i mešanje se nastavlja. Posle ukupno 4 h, dobija se puna konverzija i dodaju se voda (6 mL) i slani rastvor (3 mL). Faze su razdvojene i organski sloj je osušen preko Na2SO4i koncentrovan da bi se dobilo 1,23 g (98% prinos) jedinjenja iz naslova:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.03 (d, 6 H) 1.38 (m, 2 H) 1.50 (dt, 2 H) 1.78 (m, 2 H) 2.09 (m, 1 H) 2.15 (m, 2 H) 2.96 (s, 2 H) 3.27 (m, 1 H) 3.41 (s, 3 H) 3.75 (d, 2 H) 7.17 (d, 1 H) 7.21 (m, 1 H) 7.34 (dd, 1 H). MS (ES+) m/z 303 [M+H]<+>.
Intermedijer 70
3-Bromo-5-[(2H3)prop-1-in-1-il]piridin
[0234] n-BuLi (2.5 M u heksanu, 0.44 mL, 1.10 mmol) dodaje se u kapima, pod Ar i na 0 °C, u rastvor 3-bromo-5-etinil-piridin (videti VO2005 / 094822, 200 mg, 1.10 mmol) u THF (2 mL). Smeša se meša 1 h. Jodometan-d3 (0.56 mL, 1.32 mmol) se dodaje na 0 ° C i reakcija se meša na sobnoj temperaturi 1 h. Reakcija se ugasi rastvorom amonijum hlorida (zasićeni vodeni, 2 mL) i ekstrahuje sa DCM-om (15 mL). Organski sloj se osuši preko Na2SO4i koncentruje u vakuumu. Proizvod se prečišćava fleš hromatografijom uz eluiranje gradijentom od 0-30% EtOAc u n-heptanu, dajući jedinjenje iz naslova (77 mg, 35% prinos):<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 7.84 (t, 1 H), 8.53 (d, 1 H), 8.56 (d, 1 H); MS (ES+) m/z 199 [M+H]<+>.
Intermedijer 71
6"-Bromodispiro[1,3-dioksolan-2,1'-cikloheksan-4',2"inden]-1"(3"H)-on
[0236] Etan-1,2-diol (0,968 mL, 17.4 mmol), 6'-bromospiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1',4 (3'H)-dion (Intermedijer 5 Postupak A Korak 1, 5.09 g, 17.4 mmol) i monohidrat ptoluensulfonske kiseline (0.165 g, 0.87 mmol) u toluenu (100 mL), se greju uz refluks preko noći. Smeša se hladi do sobne temperature pre nego što se prebaci u levak za odvajanje i ispere sa NaHCO3(zasićeni vodeni). Vodena faza se ekstrahuje sa EtOAc. Kombinovane organske faze se ispiraju fiziološkim rastvorom. Formirane čvrste materije se filtriraju i filtrat se koncentruje. Ostatak filtrata se rastvara u EtOAc i ispira vodom. Još čvrste faze se formira putem filtracije. Ovaj postupak se ponavlja još tri puta dok ne prestane da se formira čvrsta faza. Kombinovani čvrsti ostatak se suši preko noći u vakuumu da bi se dobilo 3.76 g jedinjenja iz naslova. Preostala organska faza se koncentruje da bi se dobilo 1.9 g jedinjenja iz naslova. Kombinacija čvrstih materija daje jedinjenje iz naslova (5.66 g, 97% prinos):<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 1.50 (dt, 2 H) 1.66 - 1.74 (m, 2 H) 1.92 (dt, 2 H) 2.06 (td, 2 H) 3.01 (s, 2 H) 3.97 - 4.03 (m, 4 H) 7.34 (d, 1 H) 7.70 (dd, 1 H) 7.89 (d, 1 H); MS (ES+) m/z 337 [M+H]<+>.
Intermedijer 72
6'-Bromo-4-[(2H3)metiloksi]spiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on
[0238] 6'-Bromo-4-hidroksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on (Intermedijer 5 Korak 2, 3 g, 10.2 mmol) (64:36 proporcija izomera (1r,4r) i (1s,4s)) se rastvara u 2-Me THF (30 mL) u inertnom okruženju i rastvor se hladi do 0 ° C. Jodometan-d3 (0.633 mL, 10.1 mmol) se dodaje a zatim u dozama kalijum tert-butoksida (1.60 g, 14.2 mmol). Dobijena smeša se meša na sobnoj temperaturi 1 h. Kalijum tert-butoksid (0.456 g, 4.07 mmol) se dodaje i mešanje se nastavlja. Nakon još 30 min, kalijum tert-butoksid (0.342 g, 3.05 mmol) se dodaje i mešanje se nastavlja. Posle ukupno 4 h, dodaju se voda i slani rastvor. Faze se razdvajaju i organski sloj se ekstrahuje sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi se osuše preko MgSO4i koncentruju. Prečišćavanje fleš hromatografijom koristeći 0-15% EtOAc u heptanu kao eluenta dobija se 1,66 g (52% prinos) jedinjenja iz naslova kao smešu izomera (1r, 4r) primarnog i (1s, 4s) sekundarnog. Primarni izomer:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 1.20 - 1.28 (m, 1 H), 1.32 - 1.43 (m, 1 H), 1.48 - 1.64 (m, 3 H), 1.77 (td, 1 H), 2.00 - 2.11 (m, 1 H), 2.12 - 2.20 (m, 1 H), 2.98 (s, 2 H), 3.23 - 3.32 (m, 1 H), 7.31 - 7.38 (m, 1 H), 7.66 - 7.73 (m, 1 H), 7.87 - 7.90 (m, 1 H); MS (ES+) m/z 312 [M+H]<+>.
Intermedijer 73
3-Bromo-5-(difluorometil)piridin
[0240] 5-bromonikotinaldehid (5.0 g, 26.9 mmol) se rastvara u DCM-u (25 mL). Okruženje je zamenjeno sa argonom i dodaje se dietilaminosumpor trifluorid (4,29 mL, 32,3 mmol). Reakciona smeša se meša na 21 °C 2 h. Reakcija se ugasi sa 15 mL zasićenog NaHCO3. Faze se razdvajaju i organski sloj se sakuplja, ispire sa slanim rastvorom, osuši preko MgSO4, filtrira, i koncentruje u vakuumu. Ostatak se prečišćava fleš hromatografijom korišćenjem heptan/EtOAc 90/10 kao eluent kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (3.66 g, 65% prinos):<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.15 (t, 1 H) 8.32 (s, 1 H) 8.80 (s, 1 H) 8.91 (s, 1 H); MS (EI) m/z 207 M<+>.
Intermedijer 74
3-(difluorometil)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin
[0241]
[0242] Suspenzija 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolan) (8,95 g, 35,2 mmol), 3-bromo-5-(difluorometil)piridina (Intermedijer 73, 3.67 g, 17.6 mmol), kalijum acetata (5.19 g, 52.9 mmol) i dioksana (70 mL) se degasira strujom argona tokom nekoliko minuta. PdCI2(dppf) CH2Cl2(0,179 g, 0,22 mmol) se dodaje i smeša se zagreva uz refluks pod N2tokom 4h. Smeša se ostavlja da se ohladi i filtrira. Filter kolač se ispira sa EtOAc i filtrat se koncentruje u vakuumu. Ostatak se prečišćava fleš hromatografijom na silika gelu, eluiranje gradijentom sa EtOAc i n-heptana. Jedinjenje iz naslova (2.0 g) koje je još uvek sadržalo neke nečistoće je korišćeno kao takvo u sledećem koraku: MS (EI) m/z 207 M<+>.
Intermedijer 75
1-Bromo-2-hlor-3-(prop-1-inil)benzen
[0244] U mikrotalasni sud dodati su 1,3-dibromo-2-hlorobenzen(780 mg, 2,89 mmol), trimetil (prop-1-inil)silan(0,645 mL, 4,33 mmol), bakar jodid (28 mg, 0.14 mmol), PdCI2(dppf) CH2Cl2(118 mg, 0.14 mmol), tetrabutilamonijum fluorid (1 M u THF, 8,66 mL, 8,66 mmol), diizopropilamin (1.23 mL, 8.66 mmol) i anhidrovani DMF (5 mL). Posuda se zatvora i pročisti argonom i onda se smeša izlaže zračenju na 100 °C 1h u mikrotalasnom reaktoru. Smeša se razblažuje sa vodom i ekstrahuje sa DCM tri puta, suši se kroz fazni separator i koncentruje u vakuumu. Proizvod se prečišćava fleš hromatografijom (100% heptan kao eluent) da bi se dobilo 146 mg (22% prinos) jedinjenja iz naslova.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.22 - 1.27 (m, 3 H) 1.29 - 1.43 (m, 4 H) 1.82 - 1.90 (m, 2 H) 1.82 - 1.90 (m, 3 H) 1.97 (br. s., 2 H) 2.28 - 2.36 (m, 3 H) 3.01 (s, 3 H) 4.18 (q, 3 H) 6.91 (m, 1 H) 7.38 (m, 1 H) 7.99 (m, 1 H); MS (ES+) m/z 520 [M+H]<+>.
Intermedijer 78
6'-Bromo-4-(trifluorometil)spiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on
[0250] Etil 1-(4-bromo-2-jodobenzil)-4-(trifluorometil)cikloheksankarboksilat (Intermedijer 77, 2.41 g, 4.64 mmol) je rastvoren u THF (40 mL). Okruženje se zamenjuje sa argonom i rastvor se hladi do -78 °C. Izopropilmagnezijum hlorid - litijum hlorid (1.3 M u THF-u) (2.86 mL, 3.71 mmol) dodaje se u kapima. Reakciona smeša se meša na -78 °C 15 min. Reakciona smeša se ostavlja da se zagreje do sobne temperature, dok se meša 30 min. Reakciona smeša se tretira sa zasićenim NH4CI. Dodaje se slani rastvor i faze se razdvajaju. Organski sloj se ispira fiziološkim rastvorom, suši preko MgSO4, filtrira, i koncentruje u vakuumu. Ostatak se prečišćava preparativnom hromatografijom XBridge C18 (10µm, 50 x 250mm) kolona sa gradijentom od 50-100% MeCN) u (95% 0.05M NH4OACu MilliQ vodu i 5% MeCN) tokom 15 min pri protoku od 100 ml / min). Prečišćavanjem dobija se jedinjenje iz naslova (0.849 g, 52% prinos):<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.51 - 1.61 (m, 3 H) 1.75 - 1.84 (m, 2 H) 1.97 (m, 2 H) 2.18 (m, 2 H) 2.90 (s, 2 H) 7.29 (dd, 1 H) 7.69 (dd, 1 H) 7.84 (d, 1 H); MS (ES+) 346 [M+H]<+>.
Intermedijer 79
2-Fluoro-3-metoksi-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzonitril
[0252] Boca sa 2-fluoro-3-metoksibenzonitrilom (302 mg, 2.00 mmol), 4,4'-di-tert-butil-2,2'-dipiridilom (8 mg, 0,03 mmol) i bis(pinakolato)diborom (254 mg, 1,0 mmol) prostrujava se sa argonom, i zatim se dodaje heksan (6 mL). Smeša se zatim preko noći meša na 25 °C. Reakciona smeša se razblažuje sa EtOAc i ispira fiziološkim rastvorom. Organska faza se koncentruje i sirovi produkt se prečišćava u koloni silika gela (0-50% EtOAc / n-heptan) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (362 mg sa 73% čistoće prema HPLC):<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.63 - 7.55 (m, 2 H), 3.93 (s, 3 H), 1.31 (s, 12 H); MS (EI) m/z 277 M<+>.
Intermedijer 80
6'-Bromo-4-ethokispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on
[0254] 6'-Bromo-4-hidroksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on kao smeša u odnosu 2:1 izomera (Intermedijer 5 Step 2, 10.4 g, 34.1 mmol) i etil jodid (3.6 mL, 44.3 mmol) se rastvara u 2-MeTHF (100 mL) u N2. KOt-Bu (7.65 g, 68.2 mmol) se dodaje u dozama u reakcionu smešu, uz održavanje interne temperature ispod 30 °C. Rastvor se meša na sobnoj temperaturi preko noći. Voda (40 mL) i slani rastvor (25 mL) se dodaju i smeša se dalje meša 5 min. Smeša se razblažuje sa slanim rastvorom i 2-Me-THF dok se dva sloja ne formiraju. Faze se razdvajaju. Aktivni ugalj se dodaje u organski sloj koji se zatim meša 10 min.
Dijatomejska zemlja se dodaje i smeša se dalje meša 5 min. Smeša se filtrira kroz čep od silika gela i dijatomejske zemlje, koja se ispira heptanom/EtOAc 7: 3. Filtrat se koncentruje. Filtracioni red se ponavlja, čime se dobija 4.0 g (36% prinos) jedinjenja iz naslova (kao 2:1 smeša izomera):<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) ppm 1.22 (t, 3 H), 1.32 - 1.45 (m, 2 H), 1.45 -1.52 (m, 2 H), 1.77 (dt, 2 H), 2.07 - 2.16 (m, 2 H), 2.98 (s, 2 H), 3.30 - 3.40 (m, 1 H), 3.57 (q, 2 H), 7.34 (d, 1 H), 7.69 (dd, 1 H), 7.87 (d, 1 H).
Intermedijer 81
6'-(3,3,3-trifluoropropoksi)spiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1',4(3'H)-dion
[0256] Jedinjenje iz naslova (854 mg, 58% prinos) se dobija koristeći postupak opisan za Intermedijer 63 polazeći od 6-(3,3,3-trifluoropropoksi)-2,3-dihidro-1H-inden-1-ona (Intermedijer 47 , 1,08 g, 4,42 mmol) i metil akrilat (878 uL, 9.73 mmol):<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 1.82 - 1.92 (m, 2 H), 2.17 - 2.27 (m, 2 H), 2.42 - 2.53 (m, 2 H), 2.60 -2.75 (m, 4 H), 3.14 - 3.20 (m, 2 H), 4.22 - 4.27 (m, 2 H), 7.19 - 7.22 (m, 1 H), 7.25 (dd,1 H), 7.41 (d, 1 H): MS (ES+) m/z 327 [M+H]<+>.
Intermedijer 82
(1r, 4r)-4-hidroksi-6'-(3,3,3-trifluoropropoksi)spiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on
[0258] Jedinjenje iz naslova (357 mg, 51% prinos, koji sadrži 16% drugog izomera) se dobija koristeći postupak opisan za Intermedijer 64, polazeći od 6'-(3,3,3-trifluoropropoksi)spiro-[cikloheksan-1,2'-indene]-1',4(3'H)-diona (Intermedijer 81, 689 mg, 2.11 mmol) i borantrimetilamin kompleksa (339 mg, 4.65 mmol). Proizvod se prečišćava fleš hromatografijom korišćenjem 0-100% EtOAc u heptanu kao eluenta:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 1.40 - 1.52 (m, 4 H), 1.82 (td, 2 H), 2.03 - 2.13 (m, 2 H), 2.65 (qt, 2 H), 2.99 (s, 2 H), 3.73 - 3.82 (m, 1 H), 4.23 (t, 2 H), 7.16 - 7.20 (m, 1 H), 7.22 (dd, 1 H), 7.38 (d, 1 H); MS (ES+) m/z 329 [M+H]<+>.
Intermedijer 83
((1r,4r)-4-metoksi-6'-(3,3,3-trifluoropropoksi)spiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on
[0260] (1r,4r)-4-hidroksi-6'-(3,3,3-trifluoropropoksi)spiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on (Intermedijer 82, 357 mg, 1,09 mmol) se rastvora u 2-Me THF-a (7 mL) u inertnom okruženju, i rastvor se hladi do 0 ° C. Metil jodid (88 uL, 1.41 mmol) se dodaje uzastopno u dozama dodavanjem kalijum tert-butoksida (171 mg, 1.52 mmol). Dobijena smeša se meša na sobnoj temperaturi 1 h. Postoji određeni ostatak alkohola pa se dodaje još kalijum tertbutoksida (61 mg, 0.54 mmol) i mešanje se nastavlja. Posle 30 min, dodaje se voda sa slanim rastvorom.
[0261] Faze se razdvajaju i organski sloj se osuši preko MgSO4i koncentruje. Prečišćavanje se vrši pomoću fleš hromatografije koristeći 0-25% EtOAc u heptanu kao eluentu čime se dobijja 201 mg (54% prinos) jedinjenja iz naslova (sadrži 11% drugog izomera):<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 1.32 - 1.44 (m, 2 H), 1.51 (d, 2 H), 1.78 (td, 2 H), 2.12 - 2.21 (m, 2 H), 2.59 - 2.70 (m, 2 H), 2.97 (s, 2 H), 3.24 - 3.32 (m, 1 H), 3.41 (s, 3 H), 4.23 (t, 2 H), 7.16 -7.23 (m, 2 H), 7.37 (d, 1 H); MS (ES+) m/z 343 [M+H]<+>.
Intermedijer 84
3-(bromometil)-2-fluorobenzonitril
[0262]
[0263] NBS (1.729 g, 9.71 mmol) se dodaje u rastvor 2-fluoro-3-metilbenzonitrila (1.25 g, 9.25 mmol) u acetonitrilu (25 mL). Dobijena smeša se izlaže refluksu, a zatim se dodaje benzoični perokianhidrid (0.045 g, 0.18 mmol). Reakciona smeša se izlaže refluksu preko noći, zatim se ohladi do sobne temperature i dodaje se u nju voda. Vodena faza se odbacuje i organska faza se osuši preko MgSO4i koncentruje. Sirovi proizvod se prečišćava fleš hromatografijom korišćenjem gradijenta od EtOAc u heptanu kao eluentu kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.39 g, 70% prinos):<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 4.75 (s, 2 H) 7.43 (t, 1 H) 7.93 (t, 2 H); MS (EI) m/z 213 M<+>.
Intermedijer 85
2-Fluoro-3-(metoksimetil)benzonitril
[0265] 3-(bromometil)-2-fluorobenzonitrila (Intermedijer 84, 1.39 g, 6.49 mmol) se rastvara u MeOH (10 mL) i natrijum metoksid (1.238 mL, 6.49 mmol) se dodaje. Smeša se meša na sobnoj temperaturi 2 h. Smeša se koncentruje i zatim razdvaja između vode i EtOAc.
Organski sloj se odvaja i zatim koncentruje u vakuumu. Dobijeni ostatak se prečišćava fleš hromatografijom korišćenjem EtOAc/heptana kao eluenta da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,900 g, 84% prinos):<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.32 (s, 3 H) 4.52 (br. s, 2 H) 7.42 (t, 1 H) 7.77 - 7.84 (m, 1 H) 7.86 - 7.92 (m, 1 H); MS (EI) m/z 166 M<+>.
Intermedijer 86
2-Fluoro-3-(metoksimetil)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzonitril
[0267] 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolan) (1.15 g, 4.53 mmol), di-µmetoksobis(1,5-ciklooktadien)diiridijum(I) (45 mg, 0.07 mmol) i 4,4'-di-tert-butil-2,2'-dipiridil (72,9 mg, 0,27 mmol) se dodaju u reakcionu posudu. Okruženje se zamenjuje sa argonom. Heksan (10 mL) se dodat, dok se okruženje argona održava. Smeša se meša 5 min na sobnoj temperaturi. Boja reakcione smeša se menja u crveno. Rastvor 2-fluoro-3-(metoksimetil)benzonitrila (intermedijera 85, 748 mg, 4.53 mmol) u heksanu (10 mL) se dodaje i smeša se izlaže refluksu 2 h. Reakciona smeša se razblažuje sa EtOAc i ispira fiziološkim rastvorom. Organski sloj se izdvaja, suši preko MgSO4, filtrira i koncentruje. Ostatak se prečišćava fleš hromatografijom primenom EtOAc/heptana kao eluenta kako bi se dobilo 254 mg (19% prinos) jedinjenja iz naslova: MS (EI) m/z 291 M<+>.
Intermedijer 87
Metil 4-(hidroksimetil)cikloheksankarboksilata
[0269] U rastvor 4-(metoksikarbonil)-cikloheksan-karbonske kiseline (5.44 g, 29.2 mmol) u suvom THF-u na -78 °C, dodaje se boran-metil sulfid kompleks (19.0 mL, 38.0 mmol) u kapima tokom 20 min. Smeša se meša 3 h, a zatim se ostavlja da se polako dostigne sobna temperatura. Reakcija se gasi vodom (20 mL) i smeša se ekstrahuje sa EtOAc. Organska faza se ispira jednom sa slanim rastvorom, osuši preko MgSO4i koncentruje u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (4.80 g, 95% prinos) kao smeša dva diastereomera: MS (EI) m/z 172 M<+>.
Intermedijer 88
Metil 4-formilciclohekanecarbokilat
[0271] U rastvor metil 4-(hidroksimetil)cikloheksankarboksilata (intermedijera 87, 4.08 g, 23.7 mmol) u DCM-u dodaje se NaHCO3(9.95 g, 118 mmol) a zatim Dess-Martin Periodinan (12.1 g, 28.4 mmol). Smeša se meša na sobnoj temperaturi 2.5 h. Et2O (60 mL) se dodaje praćeno sa dodavanjem vodenog rastvora NaHCO3(1 M, 60 mL) i 20% vodenog rastvora natrijum tiosulfata (40 mL). Dobijena smeša se meša preko noći. Faze se razdvoje i vodena faza se ekstrahuje sa Et2O. Organska faza se ispira sa slanim rastvorom i suši preko MgSO4, filtrira i koncentruje u vakuumu dajući jedinjenje iz naslova (4.0 g, 99% prinos): MS (EI) m/z 170 M<+>.
Intermedijer 89
Metil 4-(difluorometil)cikloheksankarboksilata
[0273] Metil 4-formilciclohekanecarbokilate (Intermedijer 88, 4.0 g, 23.5 mmol) se rastvara u suvom DCM-u (80 mL). Bis(2-metoksietil)amino-sumpor trifluorid (3,42 mL, 25,9 mmol) se dodaje u kapima tokom 20 min. Reakciona smeša se meša 1.5 h. Voda (40 mL) se dodaje u kapima i reakciona smeša se meša 2 min. Organska faza se odvaja od vodene faze sa separatorom faza i evaporira u vakuumu kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (4.28 g, 95% prinos): MS (CI) m/z 193 [M+H]<+>.
Intermediate 90
Metil 1-(4-bromo-2-jodobenzil)-4-(difluorometil)cikloheksankarboksilat
[0275] Metil 4-(difluorometil)cikloheksankarboksilat (Intermedijer 89, 2.46 g, 12.8 mmol) se rastvara u THF-u (25 mL). Okruženje se zameni sa N2(g), i rastvor se hladi do - 78 °C. Litijum diizopropilamid (1.8M u THF/heptan/etilbenzen) (8.51 mL, 15.3 mmol) se dodaje, dok se temperatura održava na -78 ° C. Rastvor se meša 60 min na -78 °C. Rastvor 4-bromo-1-(bromometil)-2-iodobenzen (vidi Caruso, A .; Tovar, J., DJ Org. Chem.2011, 76, 2227-2239., 4.8 g, 12.8 mmol) u THF-u (5.0 mL) dodaje se pomoću šprica. Reakcija se uklanja iz kupatila za hlađenje i ostavlja se da dostigne sobnu temperaturu uz mešanje u trajanju od 2.5 h. Voda (30 mL) se dodaje, a zatim DCM (30 mL). Organski sloj se skuplja i suši preko MgSO4, filtrira i isparava u vakuumu. Ostatak se prečišćava fleš hromatografijom (0-100% EtOAc u heptanu, 220 g SiO2), dajući jedinjenje iz naslova (3.29 g, 53% prinos):<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 1.11 - 1.20 (m, 2 H), 1.39 (td, 2 H), 1.67 - 1.80 (m, 3 H), 2.30 (d, 2 H), 3.01 (s, 2 H), 3.70 (s, 3 H), 5.49 (d, 1 H), 6.89 (d, 1 H), 7.38 (dd, 1 H), 7.99 (d, 1 H), MS (CI) m/z 487 [M+H]<+>.
Intermedijer 91
6'-Bromo-4-(difluorometil)spiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on
[0276]
[0277] Metil 1-(4-bromo-2-jodobenzil)-4-(difluorometil)cikloheksankarboksilata (Intermedijer 90, 2.3 g, 4.72 mmol) se rastvara u THF (30 mL). Okruženje se zamenjuje sa N2(g), i rastvor se hladi do -20 ° C. Izopropilmagnezijum hlorid - litijum hlorid (1.3M u THF, 4.00 mL, 5.19 mmol) dodaje se u kapima tokom jednog sata. Reakciona smeša se meša na - 20 °C tokom 40 min. Reakciona smeša se uklanja iz kupatila za hlađenje, i ostavlja se zagrevanju do sobne temperature, dok se meša 1.5 h. Reakcija se meša na sobnoj temperaturi tokom noći i zatim se greje na 40 °C tokom 3 h. Reakcija se ohladi na sobnoj temperaturi i tretira sa zasićenim NH4CI. Dobijena smeša se meša preko noći. Organski sloj se sakuplja i suši preko MgSO4, filtrira i koncentruje. Ostatak se prečišćava fleš hromatografijom (0-10% EtOAc u heptanu), a zatim preparativnom hromatografijom da bi se dobilo jedinjenje i naslova (0,562 g, 24% prinos):<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.46 - 1.65 (m, 4 H), 1.75 - 1.96 (m, 5 H), 2.93 (s, 2 H), 6.00 (dt, 1 H), 7.51 (d, 1 H), 7.73 (d, 1 H), 7.83 (dd, 1 H).
Primer 19
6'-Bromo-4-metoksi-5"-metil-3'Hdispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2"-imidazol-]-4"-amin
Metod A
Korak 1: (N- (5'-Bromo-4-metoksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-3'(1'H)-iliden)-2-metilpropan-2-sulfinamid)
[0279] 6'-Bromo-4-metoksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on (Intermedijer 5 Postupak Korak 3, smeša izomera, 1,14 g, 3,69 mmol), 2-metilpropan-2-sulfinamida (0,670 g, 5,53 mmol) i titanijum etoksid (1.519 mL, 7.37 mmol) se rastvaraju u 2-Me THF (8 mL) i zagrevaju uz refluks u toku 26 h. Reakcija se ostavlja da se ohladi do sobne temperature EtOAc (80 mL) i NaHCO3(zasićeni, 15 mL) se dodaju uz mešanje. Smeša se zatim ostavlja bez mešanja 15 min. Organska faza se sakuplja filtracijom, suši preko MgSO4i koncentruje.
Fleš hromatografija sa gradijentom od 0 - 20% EtOAc u n-heptanu, daje jedinjenje iz naslova (1,00 g, 66% prinos).<1>H NMR (500 MHz, CD3CN, signali za glavni izomer) δ ppm 0.85 -0.91 (m, 1 H), 1.27 (s, 9 H), 1.25-1.86 (multipleti, 5 H), 2.01 - 2.10 (m, 2 H), 3.02 (br. s, 2 H), 3.18 - 3.26 (m, 1 H), 3.31 (s, 3 H), 7.37 (d, 1 H), 7.67 (dd, 1 H), 8.59 (br. s., 1 H), MS (ES+) m/z 413 [M+H]<+>.
Korak 2: 6'-Bromo-4-metoksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-imin
[0281] U rastvor N-(5'-bromo-4-metoksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-3'(1'H) -iliden)-2-metilpropan-2-sulfinamid (Primer 19 korak 1, smeša izomera, 2 g, 4.85 mmol) u anhidrovanom 1,4-dioksanu (25 mL) dodaje se 4M HCI u 1,4-dioksanu (12.12 mL, 48.50 mmol). Odmah se formira beli talog i dobija se zamućena smeša mešana u okruženju azota na sobnoj temperaturi 90 min. Et2O (30 mL) se dodaje i čvrsta supstanca se filtrira i ispira se sa Et2O. Čvrsta supstanca se podeli između DCM-a (40 mL) i zasićenog vodenog NaHCO3(40 mL). Faze se razdvajaju i organski sloj se koncentruje. Sirovo jedinjenje iz naslova (1.41 g) se koristi direktno u sledećem koraku. MS (EI) m/z 307 M<+>.
Korak 3: 6'-Bromo-4-metoksi-5"-metil-3'H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2" imidazol]-4"(3"H)-tion
[0283] 6'-Bromo-4-metoksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-imin (Primer 19 Korak 2, 1.41 g, 4.57 mmol) i 2-okopropanethioamid (Intermedijer 2, 1.42 g , 13.7 mmol) se rastvaraju u suvom MeOH (30 mL) i dobijeni rastvor se zagreva na 60 °C u okruženju azota. Nakon 15 h, reakcija se ostavlja da se ohladi do sobne temperature. Dobijeni talog je formiran, filtriran i osušen u vakuumu, dajući jedinjenje iz naslova (1,16 g, 64% prinos) kao smešu izomera.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.18 (m, 4 H), 1.47 (m, 2 H), 1.87 (m, 2 H), 2.27 (m, 3 H), 3.03 (m, 3 H), 3.20 (s, 3 H), 6.98 (d, 1 H), 7.34 (d, 1 H), 7.51 (dd, 1 H); MS (APCI+) m/z 394 [M+H]<+>.
Korak 4: 6'-Bromo-4-metoksi-5"-metil-3'H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2"-imidazol]-4"-amin
[0285] 6'-Bromo-4-metoksi-5"-metil-3'H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2"imidazol]-4 "(3" H)-tion (Primer 19 Korak 3, 0,936 g, 2,38 mmol) se apsorbuje u amonijaku (7 M u MeOH, 10 mL, 70.00 mmol) i kroz dobijenu smešu se propuštaju mehurovi argona i potom se zagreva u mikrotalasnom reaktoru na 120 °C tokom 1 h. Rastvarač onda isparava.
Amonijak (7 M u MeOH, 6 mL, 42 mmol) se dodaje i kroz reakciju se propuštaju mehurovi argona i zagreva se ponovo koristeći MW tokom 60 min na 120 °C. Rastvarač se evaporira i amonijaka (7 M u MeOH, 10 mL, 70 mmol) se dodaje. Kroz reakciju se propuštaju mehurovi argona i zatim se zagreva upotrebom MW 2 h na 120 °C. Rastvarač onda isparava i amonijak (7 M u MeOH, 15 mL, 105 mmol) se dodaje i reakcija se ponovo zagreva 2 h na 120 °C. Rastvarač se evaporira i amonijak (7 M u MeOH, 15 mL, 105 mmol) se dodaje u reakciju i ponovo se zagreva 2 h na 120 °C. Rastvarač se evaporira i amonijak (7 M u MeOH, 20 mL, 140 mmol) se dodaje. Reakcija se ponovo zagreva korišćenjem MW tokom 1 h na 120 °C. Rastvarač se evaporira a dobijeni ostatak se razmuti u DCM (60 mL) sa slanim rastvorom (k2) i sipa se u separator faze. Organska faza se suši sa MgSO<4>, profiltrira i evaporira da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.736 g, 82% prinos) kao smeša izomera:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 1.09 (td, 1 H), 1.27 - 1.49 (m, 3 H), 1.62 - 1.74 (m, 2 H), 1.93 - 2.01 (m, 2 H), 2.37 (s, 3 H), 3.04 - 3.18 (m, 3 H), 3.34 (s, 3 H), 6.90 (d, 1 H), 7.20 (d, 1 H), 7.38 (dd, 1 H); MS (MM-ES+APCI)+ m/z 376 [M+H]<+>.
Razdvajanje izomera 6'-bromo-4-metoksi-5"-metil-3'H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2"-imidazol]-4"-amina
[0286] 6'-Bromo-4-metoksi-5"-metil-3'H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2"-imidazol]-4"-amin (Primer 19 Korak 4, 80 mg , 0.21 mmol) se prečišćava korišćenjem preparativne hromatografije (Waters FractionLynx sistem sa XBridge® Prep C810µm OBD™ 19 x 250mm kolonom i zaštitnom kolonom; XTerra® Prep MS C810µm 19 x 10mm Ketridž. Linearni gradijent od 35-70% MeOH u 0.2% NH3in MilliQ voda se dodaje pri protoku od 20mL/min) dajući:
Izomerskau smešu 1
(1s, 4s)-6'-Bromo-4-metoksi-5"-metil-3'H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2"-imidazol-]-4"-amin (prvi eluira, sekundarni izomer, 2,0 mg, 2,5% prinos):
ppm 1.15 - 1.25 (m, 2 H), 1.36 (td, 1 H), 1.45 - 1.59
(m, 2 H), 1.63 - 1.74 (m, 3 H), 2.19 (s, 3 H), 2.98 - 3.06 (dd, 2 H), 3.20 (s, 3 H), 3.32 (t, 1 H), 5.19 - 5.39 (m, 2 H), 6.75 (d, 1 H), 7.20 (d, 1 H), 7.34 (dd, 1 H); MS (ES+) m/z 378 [M+H]<+>.
i
Izomersku smešu 2
(1r, 4r) -6'-Bromo-4-metoksi-5"-metil-3'H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2"-imidazol]-4"-amin (drugi eluira, primarni izomer, čiji prinos nije određen):
<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 1.09 (td, 3.47 Hz, 1 H), 1.27 - 1.49 (m, 3 H), 1.62 - 1.74 (m, 2 H), 1.93 - 2.01 (m, 2 H), 2.37 (s, 3 H), 3.04 - 3.18 (m, 3 H), 3.34 (s, 3 H), 6.90 (d, 1 H), 7.20 (d1 H), 7.38 (dd, 1.73 Hz, 1 H), MS (MM-ES+APCI)+ m/z 378 [M+H]<+>.
Razdvajanje izomera (1r,4r)-6'-bromo-4-metoksi-5"-metil-3'H-dispiro-[cikloheksan-1,2'-inden-1',2"imidazol]-4"-amin
[0287] Izomeri izomerske Smeše 2 se razdvajaju korišćenjem SFC Berger Multigram II sa LukC4; 4.6 * 250 mm; 5µm kolonom, i mobilnom fazom koja se sastoji od 15% MeOH (koji sadrži 0.1% DEA) i 85% CO2 pri protoku od od 50 mL/min pri čemu se dobija:
Izomer 1: (1r,1'R,4R)-6'-Bromo-4-metoksi-5"-metil-3H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2"-imidazol]-4"-amin (9 mg, 11% prinos) sa vremenom zadržavanja 6.1 min:
<1>H NMR (500 MHz, CD3CN) δ ppm 1.05 (dd, 1 H), 1.23 (dt, 2 H), 1.39 (d, 1 H), 1.49 (ddd, 2 H), 1.81 - 1.89 (m, 2 H), 2.17 (s, 3 H), 2.94 - 3.10 (m, 3 H), 3.23 (s, 3 H), 5.32 (br. s., 2 H), 6.75 (d, 1 H), 7.19 (d, 1 H), 7.33 (dd, 1 H), MS (MM-ES+APCI)+ m/z 378 [M+H]<+>; i
Izomer 2: (1r,1'S,4S)- 6'-Bromo-4-metoksi-5"-metil-3'H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2"-imidazol]-4"-amina (15 mg, 19% prinos) sa vremenom zadržavanja 9.5 min:
ppm 1.00 - 1.09 (m, 1 H), 1.17 - 1.31 (m, 2 H), 1.39
(td, 1 H), 1.50 (ddd, 2 H), 1.86 (dt, 2 H), 2.18 (s, 3 H), 2.94 - 3.10 (m, 3 H), 3.24 (s, 3 H), 5.32 (br. s., 2 H), 6.76 (d, 1 H), 7.20 (d, 1 H), 7.34 (dd, 1 H), MS (MM-ES+APCI)+ m/z 378 [M+H]<+>.
Razdvajanje izomera (1s, 4s)-6'-bromo-4-metoksi-5"-metil-3'H-dispiro-[cikloheksan-1,2'-inden-1',2"imidazol]-4"-amin
[0288] 1.7 g jedinjenja koje sadrži (1r,4r)-6'-bromo-4-metoksi-5"-metil-3'H-dispiro [cikloheksan-1,2'-inden-1',2"-imidazol]-4"-amin (primarni) i (1s,4s)-6'-bromo-4-metoksi-5"-metil-3'H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2"-imidazol]-4"-amin (sekundarni) se prečišćava preparativnom hromatografijom koristeći sledeće uslove: XBridge C18; 50*300 mm; 10µm, mobilna faza: 20-60% MeCN in 0.1% vodeni NH3over 20 min, protok: 120 mL/min.
Dobijeni primarni izomer (ekvivalentna smeša izomera 1, gore) sa vremenom zadržavanja 15 min, zatim se odvaja u sopstvene izomere pomoću preparativne SFC koristeći sledeći sistem: Berger Multigram II SFC system, Kolona: Chiralcel OD-H; 20*250 mm; 5µm, Mobilna faza: 10% MeOH (sadrži 0.1% DEA) / 90% CO2, Protok: 50 mL/min što rezultira sa:
Izomerom 3 sa nepoznatom apsolutnom konfiguracijom (77 mg, 5% prinos) sa vremenom zadržavanja 6.5 min:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.05 - 1.17 (m, 2 H), 1.24 (td, 1 H), 1.36 - 1.54 (m, 2 H), 1.57 - 1.74 (m, 3 H), 2.16 (s, 3 H), 2.85 - 3.07 (m, 2 H), 3.12 (s, 3 H), 3.29 (br. s., 1 H), 6.58 (s, 2 H), 6.63 (d, 1 H), 7.24 (d, 1 H), 7.33 (dd, 1 H); MS (APCI<+>) m/z 376 [M+H]<+>, i
Izomerom 4 sa nepoznatom apsolutnom konfiguracijom (64 mg, 4% prinos) sa vremenom zadržavanja 12 min:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.05 - 1.17 (m, 2 H), 1.24 (td, 1 H), 1.36 - 1.55 (m, 2 H), 1.57 - 1.74 (m, 3 H), 2.16 (s, 3 H), 2.85 - 3.06 (m, 2 H), 3.12 (s, 3 H), 3.29 (br. s., 1 H), 6.58 (s, 2 H), 6.63 (d, 1 H), 7.24 (d, 1 H), 7.33 (dd, 1 H); MS (APCI<+>) m/z 376 [M+H]<+>.
Metod B
Korak 1: N-((1r,4r)-5'-Bromo-4-metoksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-3'(1'H)-iliden)-2-metilpropan-2-sulfinamid
[0290] (1r,4r)-6'-Bromo-4-metoksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on (Intermedijer 5 Postupak B Korak 3, 31 g, 100 mmol), 2-methilpropane-2-sulfinamida (15.8 g, 130 mmol), 2-metil-tetrahidrofurana (200 mL) i titanijum etoksid (41.3 mL, 200 mmol) se zagrevaju do 100 °C, dajući azeotropu na 74 ° C. Azeotropska destilacija se nastavlja tokom 8 h i zatim se smeša izlaže refluksu preko noći. Azeotropska destilacija se nastavlja dodatnih 8 h i zatim se smeša izlaže reflusku preko noći. Smeša se hladi do sobne temperature. Dodatni 2-Me THF se dodje da bi se dobila originalna koncentracija smeša. Rastvor sumporne kiseline (11.14 mL, 200.5 mmol) i Na2SO4 (35.6 g, 250 mmol) u vodi (150 mL) se pripremaju. Reakciona smeša se zatim dodaje preko 20 min do 4/5 zapremine kiselog rastvora. Faze se razdvajaju, a organska faza se ispira preostalim kiselim rastvora, a zatim amonijum acetatom (15.46 g, 200.5 mmol) u vodi (75 mL) i vodom (75 mL). Organska faza se koncentruje i suši u vakuumu preko noći da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (40,8 g, 99% prinos): MS (ES+) m/z 412 [M+H]<+>.
Step 2: (1r, 4r)-6'-Bromo-4-metoksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-imin hidrohlorid
[0292] HCl (2 M in Et2O, 99 mL, 197 mmol) se dodaje u kapima tokom 5 min u N-((1r,4r)-5'-bromo-4-metoksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-3'(1'H)-iliden)-2-methilpropane-2-sulfinamida (Primer 19 Korak 1, 40.8 g, 98.9 mmol) koji je rastvoren u Et2O (30 mL) i DCM-u (30 mL). Smeša se meša tokom 60 min pre nego što se filtrira. Filter kolač se ispira sa Et2O i osuši u vakuumom dajući jedinjenje iz naslova (31,3 g, 92% prinos):<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.28 (m, 2 H) 1.70 (d, 2 H) 2.04 (m, 4 H) 3.17 (s, 2 H) 3.23 (m, 1 H) 3.28 (s, 3 H) 7.61 (d, 1 H) 8.04 (dd, 1 H) 8.81 (s, 1 H); MS (EI) m/z 307 M<+>.
Korak 3: (1r,4r)-6'-Bromo-4-metoksi-5"-metil-3'H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2'-imidazol]-4"(3"H )-tion
[0294] (1r, 4r)-6'-Bromo-4-metoksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-imin hidrohlorid (Primer 19 Korak 2, 95 g, 200 mmol) (koji sadrži 30 % (1s, 4s)-6'-bromo-4-methokispiro-[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-imin hidrohlorid) se podeli između DCM (600 mL) i 2 M vodenog NaOH (400 mL). Organska faza se koncentruje i dodaje se 2-propanol (200 mL) i smeša se koncentruje. Dobijeni (1r,4r)-6'-bromo-4-methokispiro-[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-imin, trimetil ortoformat (66 mL, 602 mmol) i 2-propanol (300 mL) se zagrevaju do 80 °C.2-okopropanethioamid (51.5 g, 500 mmol) u 2-propanolu (250 mL) se dodaje tokom 40 min održavajući temperaturu iznad 65 °C. Reakcija se meša na 75 °C tokom 2 h. Smeša se koncentruje do ~ 1⁄2 zapremine i ostavlja se na 0 °C preko noći. Čvrsta materija se formirana, filtrira i suši u vakuumskom kabinetu na 40 °C tokom 3 h da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (61.24 g, prinos 78%, sadrži 14% (1s,4s)-6'-bromo-4-metoksi-5"-metil-3'H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2'-imidazol]-4"(3"H)-tion): MS (EI) m/z 392 M<+>.
Korak 4: (1r,4r -6'-Bromo-4-metoksi-5"-metil-3'H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2" -imidazol]-4"-amin
[0296] (1r,4r)-6'-Bromo-4-metoksi-5"-metil-3'H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2" imidazol]-4"(3"H)-tion (Primer 19 Korak 3, 22.7 g, 57.7 mmol) i amonijak (7 M u MeOH, 180 mL, 1.26 mol) se stavljaju u reaktor pod pritiskom i zagrevaju se do 74 °C preko noći. Talog se ostavlja da dostigne sobnu temperaturu i smeša se koncentruje. Talog se deli između 2 M limunske kiseline (400 mL) i EtOAc (400 mL). Svaki nerastvorni materijal se filtrira i određuje se da bude nereagovani početni materijal. Organska faza (org 1) se koncentruje u vakuumu dajući dodatni neodreagovani početni materijal. U vodenu fazu se dodaje EtOAc (300 mL) a zatim i 50% rastvor NaOH sve dok ne bude pH ~ 12, i smeša se meša 10 min. Dobijena organska faza (org 2) se sačuva. Talog iz org 1, i čvrsta materija odvojena filtriranjem se mešaju i suspenduju u amonijaku (7 M u MeOH, 180 mL, 1.26 mmol) i stavljaju u reaktor pod pritiskom i zagrevaju na 100 °C preko noći. Dobijeni rastvor se koncentruje u vakuumu. Ostatak se deli između 2 M limunske kiseline (300 mL) i EtOAc (300 mL). U vodenu fazu dodaje se EtOAc (300 mL) i zatim 50% rastvor NaOH sve dok ne bude pH ~ 12, i smeša se meša 10 min. Organska faza se kombinuje sa org 2 od gore. Aktivni ugalj se dodaje u organsku fazu i smeša se meša 30 min pre nego što se filtrira kroz diatomejsku zemlju. Organska faza se koncentruje i suši u vakuumu preko noći da bi se dobila čvrsta supstanca. Čvrstoj supstanci se dodaje diizopropil etar (125 mL) i smeša se izlaže refluksu preko noći. Smeša se ostavlja da dostigne sobnu temperaturu i čvrsta supstanca se filtrira da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (ekvivalentno Primeru 19. smeša izomera 2 gore) (15 g, 69% prinos):<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.93 (m, 1 H) 1.1-1.25 (m, 2 H) 1.35-1.45 (m, 3 H) 1.81 (br. d, 2 H) 2.16 (s, 3 H) 2.87-3.03 (m, 3 H) 3.18 (s, 3 H) 6.59 (br. s., 2 H), 6.64 (d, 1 H), 7.25 (d, 1 H), 7.34 (dd, 1 H); ES+) m/z 376 [M+H]<+>.
Korak 5: (1r,1'R,4R)-6'-Bromo-4-metoksi-5"metil-3'H-dispiro[cikloheksan-1',2"-indene-1',2"imidazol]-4"-amin
[0297]
[0298] U bocu od 1 L sa kružnim dnom se dodaje (1r,4r)-6'-bromo-4-metoksi-5"-metil-3'H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2"-imidazol]-4"-amin (Primer 19 Postupak B Korak 4, 61 g, 162 mmol), EtOH (99.5%, 600 mL) i voda (60 mL) da bi se dobila homogena smeša koja se zagreva do 70 °C. Smeša se meša tokom 30 min na povišenoj temperaturi, praćeno dodavanjem D(+)-10-kamforsulfonska kiselina (18.8 g, 81.0 mmol). Smeša se meša na 70 °C tokom 3 h i zatim se ostavlja da dostigne 20 °C preko 2 h nakon čega sledi mešanje na 20 °C tokom 12 h. Smeša se filtrira da bi se dobila čvrsta supstanca koja se suši u vakuumskoj pećnici na 50 °C 10 h da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao D(+)-10- kamfosulfonska so (37 g; 37% prinos). Enantiometarski odnos se određuje analizom na SFC SFC Berger Analytix sistemu sa Chiralpak AD-H kolonom (4.6*250 mm; 5µm i mobilnoj fazi koja se sastoji od 10% MeOH (sadrži 0.1% DEA) i 90% CO2pri protoku od 3 mL/min. Prvi pik sa vremenom zadržavanja 3.68 min (a rea 2.5%) odgovara (1r,1'S,4S)-6'-bromo-4-metoksi-5"-metil-3'H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2"imidazol]-4"aminu, ekvivalentnom izomeru 2. Drugi pik sa vremenom zadržavanja 4.58 min (površina 97,5%) odgovara jedinjenju navedenom u naslovu (1r,1'R,4R)-6'-bromo-4-metoksi-5"metil-3'H-dispiro[cikloheksan-1',2"-indene-1',2"imidazol]-4"amin, ekvivalentnom izomeru 1. Oslobađanje jedinjenja iz naslova iz soli se sprovodi mešanjem kamforsulfonske kiseline (0,32 g, 0,53 mmol) koja se suspenduje u dihlormetanu (4 mL) sa vodenim rastvorom (4 mL) KOH (0.32g, 5.7 mmol) na sobnoj temperaturi tokom 30 min. Organska faza se izdvaja i koncentruje u vakuumu dajući jedinjenje iz naslova kvantitativno sa enantiomernim viškom od 95% (određeno kao gore).
Metod C
(1r,4r)-6'-Bromo-4-metoksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-imin hidrohlorid
[0300] (1r,4r)-6'-Bromo-4-metoksispiro[cikloheksan-1,2'-inden]-1'(3'H)-on (Intermedijer 5 Korak 3 Metoda C, 19.20 g at 91% NMR test, 56.5 mmol) reaguje sa 2-metilpropan-2sulfinamidom (8.90 g, 73.5 mmol) zagrevanjem sa titanijum (IV) etoksidom (24 mL, 115 mmol) i 2-metil-tetrahidrofuranom (44 mL) na oko 82 °C .Tri doze rastvarača (oko 26 mL po dozi) se destiluju nakon 0.5 h, 7.5 h i 8 h perioda grejanja respektivno, i još 2-metiltetrahidrofurana (26 mL po dozi, tri doze) se dodaje nakon završetka svake destilacije. Dalji deo rastvarača (približno 26 mL) se destiliše nakon 17,5 h. Reakciona smeša se ohladi do sobne temperature, razblaži se sa DCM (52,5 mL), a zatim postepeno dodaje u rastvor (92 mL, 113 g) dobijen iz Na2SO4(17,9% w/w), vodom (72.2% w/w) i sumpornom kiselinom (9,9% w/w) tokom približno 4 min. DCM (52.5 mL) se koristi za ispiranje boce i levka za dodavanje i zatim se dodaje u radnu bocu. Posle razdvajanja slojeva, organska faza se ispira sa smešom vode (17.5 mL) i rastvora (18.5 mL, 23 g) dobijenog iz Na2SO4(17,9% w/w), vode (72.2% w/w) i sumporne kiseline (9,9% w/w). Smeša se meša sa Na2SO4(8.75 g) tokom približno 6 h. Suspenzija se filtrira i ostatak sa filtra se ispira sa DCM (17.5 mL). Kombinovani filtrati su koncentrovani destilacijom rastvarača (oko 108 mL). Dalje se DCM (52.5 mL) dodaje i ista zapremina rastvarača (52.5 mL) se destiliše. Suvi rastvor se ohladi do približno 20 °C i razblažuje sa DCM (17.5 mL) i EtOH (8.7 mL). HCl (2 M in Et2O) (34 mL, 68 mmol) se zatim dodaje postepeno tokom približno 20 min. Dobijena suspenzija se ostavlja na približno 20 ° C u toku oko 45 minuta pre filtriranja. Filter kolač se ispira sa rastvorom (17.5 mL po dozi, tri doze) koji je pripremljen od jednakih zapremina DCM i Et2O a zatim se suši u vakuumu, dajući jedinjenje iz naslova koje sadrži oko 4% drugog izomera (17.41 g na 88% w/w NMR testu, 44,4 mmol, 79% prinos) (rezidualna DCM je detektovana u 6,8% w/w i amonijum hlorid 2,9% w/w u NMR testu):<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.30 (m, 2 H), 1.70 (d, 2 H), 1.98 (m, 2 H), 2.10 (m, 2 H), 3.17 (s, 2 H), 3.23 (m, 1 H), 3.29 (s, 3 H), 7.61 (d, 1 H), 8.04 (dd, 1 H), 8.75 (d, 1 H), 12.90 (br s, 2 H).
Primer 20a
(1r,4r)-4-metoksi-5"-metil-6'-(5-prop-1-in-1-pindin-3-il)-3'H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2"-imidazol]-4"-amin
Metod A
[0302] 5-(Prop-1-inil)piridin-3-ilboronska kiselina (Intermedijer 15, 0.044 g, 0.27 mmol), (1r, 4r)-6'-bromo-4-metoksi-5"-metil-3'H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2"-imidazol]-4"-amin (Primer 19 Postupak Korak 4, 0.085 g, 0.23 mmol), [1,1'-bis (difenilfosfino) - ferocen] paladijum (II) hlorid (9.29 mg, 0.01 mmol), K2CO3 (2M ak., 1.355 mL, 0.68 mmol) i 2-metil-tetrahidrofurana (0.5 mL), se zagrevaju na 100 °C, koristeći MW 2x30 min. 2-metiltetrahidrofuran (5 mL) i H2O (5 mL) se dodaje i slojevi se razdvajaju. Organski sloj se suši sa MgSO4i zatim koncentruje. Sirovi proizvod se rastvara u DCM i ispira sa H2O. Organska faza se izdvaja kroz separator faze i suši u vakuumu. Sirovi proizvod se prečišćava preparativnom hromatografijom. Rastvarač isparava i H2O-faza se ekstrahuje sa DCM.
Organska faza se odvaja kroz separator faze i suši da bi se dobilo jedinjenje iz naslova ( 0.033 g, 36% prinos),<1>H NMR (500 MHz, CD3CN) δ ppm 1.04 - 1.13 (m, 1 H), 1.23 - 1.35 (m, 2 H), 1.44 (td, 1 H), 1.50 - 1.58 (m, 2 H), 1.84 - 1.91 (m, 2 H), 2.07 (s, 3 H), 2.20 (s, 3 H), 3.00 (ddd, 1 H), 3.08 (d, 1 H), 3.16 (d, 1 H), 3.25 (s, 3 H), 5.25 (br. s., 2 H), 6.88 (d, 1 H), 7.39 (d, 1 H), 7.49 (dd, 1 H), 7.85 (t, 1 H), 8.48 (d, 1 H), 8.64 (d, 1 H), MS (MM-ES+APCI)+m/z 413 [M+H]<+>.
Razdvajanje izomera (1r,4r)-4-metoksi-5"-metil-6'-(5-prop-1-in-1-pindin-3-IL)-3'H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2"-imidazol]-4"-amin
[0303] (1r,4r)-4-metoksi-5"-metil-6'-(5-prop-1-in-1-pindin-3-il)-3'H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2"-imidazol]-4"-amin (Primer 20a, 0.144 g, 0.35 mmol) se prečišćava korišćenjem preparativne hromatografije (SFC Berger Multigram II, Kolona: Chiralcel OD-H; 20 k 250 mm; 5µm, mobilna faza: 30% MeOH (koji sadrži 0.1% DEA) 70% CO2, protok: 50 mL/min, ukupan broj injekcija: 4). Frakcije koje su sadržale proizvod su kombinovane i MeOH se evaporira da bi se dobilo:
Izomer 1: (1r,1'R,4R)-4-metoksi-5"-metil-6'-(5-prop-1-in-1-pindin-3-il)-3'H-dispiro-[cikloheksan-1,2'-inden-1',2"-imidazol]-4"-amin (49 mg, 34% prinos) sa vremenom zadržavanja 2.5 min:
<1>H NMR (500 MHz, CD3CN) δ ppm 1.07 - 1.17 (m, 1 H), 1.23 - 1.39 (m, 2 H), 1.47 (td, 1 H), 1.57 (ddq, 2 H), 1.86 - 1.94 (m, 2 H), 2.09 (s, 3 H), 2.23 (s, 3 H), 2.98 - 3.07 (m, 1 H), 3.11 (d, 1 H), 3.20 (d, 1 H), 3.28 (s, 3 H), 5.30 (br. s., 2 H), 6.91 (d, 1 H), 7.42 (d, 1 H), 7.52 (dd, 1 H), 7.88 (t, 1 H), 8.51 (d, 1 H), 8.67 (d, 1 H), MS (MM-ES+APCI)+ m/z 413.2 [M+H]<+>; i
Izomer 2: (1r,1'S,4S)-4-metoksi-5"-metil-6'-(5-prop-1-in-1-pindin-3-il)-3'H-dispiro [cikloheksan-1,2'-inden-1',2"-imidazol]-4"-amin (50 mg, 35% prinos) sa vremenom zadržavanja 6.6 min:
<1>H NMR (500 MHz, CD3CN) δ ppm 1.02 - 1.13 (m, 1 H), 1.20 - 1.35 (m, 2 H), 1.44 (d, 1 H), 1.54 (ddd, 2 H), 1.84 - 1.91 (m, 2 H), 2.06 (s, 3 H), 2.20 (s, 3 H), 3.00 (tt, 1 H), 3.08 (d, 1 H), 3.16 (d, 1 H), 3.25 (s, 3 H), 5.26 (br. s., 2 H), 6.88 (d, 1 H), 7.39 (d, 1 H), 7.49 (dd, 1 H), 7.84 (t, 1 H), 8.48 (d, 1 H), 8.63 (d, 1 H), MS (MM-ES+APCI)+ m/z 413.2 [M+H]<+>.
Metod B
[0304] Posuda se puni sa (1r,4r)-6'-bromo-4-metoksi-5"-metil-3'H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2"imidazol]-4"aminom (Primer 19 Postupak B Korak 4, 7.5 g, 19.9 mmol), 5-(prop-1-inil)piridin-3-boronskeom kiselinom (Intermedijer 15, 3.37 g, 20.9 mmol), 2.0 M vodenim K2CO3(29.9 mL, 59.8 mmol), i 2-metil-tetrahidrofuranom (40 mL). Sud se pročisti u vakuumu i okruženje se zameni sa argonom. Natrijum tetrahloropaladat (II) (0.147 g, 0.50 mmol) i 3-(di-tert-butil fosfonijum)propan sulfonat (0.267 g, 1.00 mmol) se dodaju i sadržaj se zagreva uz refluks tokom perioda od 16 h. Sadržaj se hladi do 30 ° C i faze se razdvajaju. Vodena faza se ekstrahuje sa 2-metil-tetrahidrofuranom (2 x 10 mL), a zatim se organska faza objedinjuje, ispira sa slanim rastvorom, pa se tretira sa aktivnim ugljem (2.0 g). Smeša se filtrirana kroz dijatomejsku zemlju, a zatim ispira sa 2-metil-tetrahidrofuran (20 mL). Filtrat je koncentrovan do zapremine od približno 50 mL, zatim se dodaje voda (300 µL), sadržaj se energično meša dok se dodaje semenski materijal za podsticanje kristalizacije. Proizvod počinje da se kristališe i smeša se meša 2 h na sobnoj temperaturi, a zatim 30 min. na 0-5 °C u ledenom kupatilu pre filtracije. Filter kolač se ispira sa 10 mL hladnog 2-metiltetrahidrofurana i zatim se suši u vakuumskoj pećnici na 45 °C kako bi se dobilo racemsko jedinjenje iz naslova (5.2 g, 12.6 mmol, 63% prinos): MS (ES+) m/z 413 [M+H]<+>.
(1r,1'R,4R)-4-metoksi-5"-metil-6'-[5- (prop-1-in-1-il)piridin-3-il]-3'H-dispiro-[ cikloheksan-1,2'-inden-1',2"-imidazol]-4"-amin (izomer 1)
Metod C
[0306] Rastvor (1r,4r)-4-metoksi-5"-metil-6'-(5-prop-1-in-1-pindin-3-il)-3'H-dispiro-[cikloheksan-1,2'-inden-1',2"-imidazol]-4"-amina (Primer metoda 20A B, 4.85 g, 11.76 mmol) i EtOH (75 mL) se meša na 55 °C. Rastvor (+)-di-p-toluoil-D-vinska kiselina (2.271 g, 5.88 mmol) u EtOH (20 mL) se dodaje i mešanje se nastavlja. Nakon 2 min. počinje stvaranje taloga. Smeša se meša 2 h pre nego što se polako hladi do 30 °C a zatim se meša još 16 h. Toplota se uklanja i smeša se meša na sobnoj temperaturi 30 min. Smeša se filtrira i filter kolač se ispira ohlađenim EtOH (45 mL). Čvrsti ostatak se suši u vakuumskoj pećnici na 45 °C tokom 5 h, zatim se materijal sipa u posudu i DCM (50 mL) i 2.0 M vodenog rastvora NaOH (20 mL) se dodaju. Smeša se meša na 25 ° C tokom 15 min. Faze se razdvajaju i vodeni sloj se ekstrahuje sa 10 mL DCM. Organska faza se koncentruje u vakuumu do taloga i 20 mL EtOH se dodaje. Dobijeni rastvor se meša na sobnoj temperaturi as vodom (15 mL) i polako se dodaje u posudu. Talog polako počinje da se formira, i dobijena smeša se mešana 10 min. pre dodavanja vode (20 mL). Smeša se meša na sobnoj temperaturi u toku 1 h i zatim se filtrira. Ostatak sa filtera se ispere vodom (15 mL) i osuši u vakuumskoj pećnici na 45 °C tokom perioda od 16 h, dajući jedinjenje iz naslova (1,78 g, 36% prinos): 1.78 g, 36% prinos): MS (ES+) mlz 413 [M+H]<+>. Ovaj materijal je ekvivalentan izomeru 1 iz Primera 20a gore.
Metod D
[0307] U posudu sa kružnim dnom do 500 ml se dodaje (1r,1'R,4R)-6'-bromo-4-metoksi-5"-metil-3'H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2'-imidazol]-4"amin kao D(+)-10-kamforska so sulfonske kiseline (Primer 19 Postupak B korak 5, 25.4 g, 41.7 mmol), 2 M vodeni KOH (100 mL) i 2-metil-tetrahidrofuran (150 ml). Smeša se meša 30 min na sobnoj temperaturi nakon čega se smeša prebacuje u zaseban levak i ostavlja se da slegne. Faze se odvajaju i organska faza se ispira sa 2 M vodenog K2CO3(100 mL). Organska faza se prebacuje u bocu od 500 mL sa kružnim dnom što je praćeno dodavanjem 5-(prop-1-inil)piridin-3-boronske kiseline (Intermedijer 15, 6.72 g, 41.74 mmol), K2CO3(2.0 M, 62.6 mL , 125.21 mmol). Smeša se gasi puštanjem mehurova Ar kroz rastvor tokom 5 min. U smešu se zatim dodaje natrijum tetrahloropaladat (II) (0.307 g, 1.04 mmol) i 3-(di-tert-butilfosfonijum)propan sulfonat (0.560 g, 2.09 mmol), a zatim se smeša zagreva na refluksu (80 °C) preko noći. Reakciona smeša ostavlja se da se ohladi na sobnoj temperaturi i faze se se razdvajaju.
Vodena faza se ekstrahuje sa 2-Me-THF (2k100 mL). Organske materije se kombinuju, isprane rastvorom soli i tretirane aktivnim ugljem. Smeša se filtrira kroz dijatomejsku zemlju i filter kolač se ispira sa 2-Me-THF (2x20 mL), a filtrat se koncentruje da bi se dobilo 17,7 g koji je u kombinaciji sa 2,8 g iz drugih ogleda. Materijal se rastvara u 2-Me-THF zagrevanjem i stavlja se na silika gel (-500 g). Eluiranje sa 2-Me-THF / Et3N (100: 0-97.5: 2.5) daje proizvod. Rastvarač se evaporira, a onda zajedno evaporira sa EtOH (apsolutni, 250 mL) da bi se dobilo (9,1 g, 53% prinos). HCl-so se priprema za dalje prečišćavanje proizvoda: Proizvod se rastvara u CH2CI2(125 mL) pod blagim zagrevanjem, HCI u Et2O (-15 mL) u Et2O (100 mL) se dodaje, praćeno dodavanjem Et2O (- 300 mL) da bi se dobio talog koji se filtrira i ispira sa Et2O, dajući HCI-so, CH2C12i 2 M vodeni NaOH se dodaju i faze se razdvajaju. Organska faza se koncentruje i zatim zajedno evaporira sa MeOH.
Formirane čvrste materije se suše u vakuumskoj pećnici na 45 °C preko noći kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (7.4 g, 43% prinos):<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.97 (d, 1 H) 1.12 - 1.30 (m, 2 H) 1.37-1.51 (m, 3 H) 1.83 (d, 2 H) 2.09 (s, 3 H) 2.17 (s, 3 H) 2.89 - 3.12 (m, 3 H) 3.20 (s, 3 H) 6.54 (s, 2 H) 6.83 (s, 1 H) 7.40 (d, 1 H) 7.54 (d, 1 H) 7.90 (s, 1 H) 8.51 (d, 1 H) 8.67 (d, 1 H); HRMS-TOF (ES+) m/z 413.2338 [M+H]<+>(računsko 413.2341); enantiomerska čistoća >99.5%; NMR Snaga 97.8±0.6% (bez vode).
BIOLOŠKI OGLEDI
[0308] Stepen aktivnosti jedinjenja je testiran pomoću sledećih metoda:
TR-FRET Ogled
[0309] β-Sekretaza enzim korišćen u TR-FRET se priprema na sledeći način:
cDNK za rastvorljiv deo ljudske β -sekretaze (AA 1 - AA 460) se klonira korišćenjem ASP2-Fc10-1-IRES-GFP-neoK ekspresionog vektora za sisare. Gen se stapa sa Fc domenom IgGl (oznaka afiniteta) i stabilno klonira u HEK 293 ćelije. Prečišćeni sBACE-Fc se skladišti na -80 ° C u Tris ublaživaču, pH 9.2 i sa čistoćom od 40%.
[0310] Enzim (skraćeni oblik) se razblaži do 6 µg/mL (zaliha 1,3 mg / mL) i supstrat (Europium)CEVNLDAEFK(Qsy7) do 200 nM (zaliha 120 µM) u reakcionom ublaživaču (NaAcetate, chaps, triton x-100, EDTA pH4.5). Robotski sistemi Biomek FKS i Velocity 11 su korišćeni za sva rukovanja tečnostima i enzimi i supstrati rastvora držani su na ledu dok nisu postavljeni u robotski sistem. Enzimi (9 µl) se dodaju na ploču pa se dodaje 1 µl jedinjenja u dimetilsulfoksid, izmeša i prethodno inkubira 10 minuta. Substrat (10 µl) se zatim dodaje, meša i reakcija traje 15 minuta na sobnoj temperaturi. Reakcija se zaustavlja dodatkom Stop rastvora (7 µl, NaAcetate, pH 9). Fluorescentnost proizvoda se meri na Victor II čitaču ploča sa talasnom dužinom pobuđivanja od 340 nm i emisionoj talasnoj dužini od 615nm. Ovaj ogled se vrši u Costar 384 pločama sa kalupima sa okruglim dnom, malom zapreminom, nelepljivom površinom (Corning #3676). Konačna koncentracija enzima iznosi 2.7 µg/ml; krajnja koncentracija supstrata iznosi 100 nM (Km of 250 nM). Kontrola dimetilsulfoksida, umesto testiranog jedinjenja, definisala je nivo aktivnosti 100% i 0% aktivnosti je definisano kalupima u kojima nema enzim (zamenjen reakcionim ublaživačem). Kontrolni inhibitor je takođe korišćen u ogledima reakcije na dozu i ima IC50 od 150 nM
Razblaženi TR-FRET Ogled
[0311] Jedinjenja sa visokim afinitetom su dalje testirana u razblaženom TR-FRED ogledu, sa uslovima istim kao u gore opisanom TR-FRET ogledu, ali sa 50 puta manje enzima i vremenom trajanja reakcije 6.5 h pri sobnoj temperaturi u mraku.
Ogled sAPPβ oslobađanja
[0312] SH-SY5Y ćelije se gaje u DMEM /F-12 sa Glutamaksom, 10% FCS i 1% neesencijalnim amino kiselinama zaštićene su zamrzavanjem i postavljene na -140 °C pri koncentraciji od 7.5-9.5x10<6>ćelija po bočici. Odmrzavajuće ćelije i semena pri koncentraciji od oko 10000 ćelija/kalupu u DMEM/F-12 sa Glutamaksom, 10% FCS i 1% ne-esencijalnih amino kiselina vrši se u 384-kalupnoj ploči za tretiranje tkiva kultura, 100µL suspenzija ćelija/kalupu. Ploče sa ćelijama se onda inkubiraju 7-24 h pri 37 °C, 5% CO2. Medijum ćelije se otklanja, praćeno sa dodavanjem 30 µL jedinjenja razblaženog u DMEM /F-12 sa Glutamaksom, 10% FCS, 1% ne-esencijalnih amino kiselina i 1% PeSt do konačne koncentracije 1% DMSO. Jedinjenja se inkubiraju sa ćelijama 17 h (preko noći) pri 37 °C, 5% CO2. Meso Scale Discovery (MSD) ploče se koriste za određivanje oslobađanja sAPPβ. MSD sAPPβ ploče se blokiraju u 1% BSA u Tris ispirajućem ublaživaču (40µL/kalupu) 1h mućkanjem na sobnoj temperaturi i ispiranjem jednom u Tris ispirajućem ublaživaču (40µL/well). 20 µL medijuma se prenosi u prethodno blokirane i isprane MSD sAPPβ mikroploče, i ćelijske ploče su dalje korišćene u ATP ogledu kako bi se merila citotoksičnost. MSD ploče se inkubiraju mućkanjem na sobnoj temperaturi 2 h i medijum se odbacuje.10 µL antitela za detekciju se dodaje (1nM) po kalupu praćeno sa inkubacijom uz mućkanje na sobnoj temperaturi u toku od 2 h i potom se odbacuju.40 µL ublaživača za očitavanje se dodaje po kalupu i ploče se očitavaju u SECTOR Imager-u.
ATP ogled
[0313] Kao što je navedenou ogledu sAPPβ oslobađanja, nakon prebacivanja 20 µL medijuma iz ćelijskih ploča za sAPPβ detekciju, ploče su korišćene za analizu citotoksičnosti koristeći ViaLightTM Plus komplet za proliferaciju/citotoksičnost ćelija od Cambrex BioScience koji meri ukupni ćelijski ATP. Ogled se vrši u skladu sa uputstvom proizvođača. Kratko, 10 µL ćelijskog lizirajućeg reagensa se dodaje po kalupu. Ploče se inkubiraju na sobnoj temperaturi tokom 10 min. Dva minuta nakon dodavanja 25 µL rekonstruisanog ViaLightTM Plus ATM reagensa, merena je luminescencija u Wallac Victor21420 višeznačnom brojaču. Toksični prag je signal ispod 75% kontrole.
Rezultati
[0314] Tipične IC50vrednosti za primere jedinjenja koje uključuju otelotvorenja datog pronalaska su u opsegu od 0.1 do 100,000 nM. Biološki podaci na primeru krajnjeg jedinjenja su dati ispod u Tabeli 2.
Tabela 2.

Claims (6)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje koje je (1r,1'R,4R)-4-metoksi-5"-metil-6'-[5-(prop-1-in-1-il)piridin-3-il]-3'H-dispiro[cikloheksan-1,2'-inden-1',2"-imidazol]-4"-amin:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  2. 2. Farmaceutski sastav koji se sastoji od aktivnih sastojaka terapeutski efektivnih količina jedinjenja prema patentnom zahtevu 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, u vezi sa bar jednim farmaceutski prihvatljivim ekscipijentom, nosiocem ili razblaživačem.
  3. 3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu kao lek.
  4. 4. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so prema patentnom zahtevu 1 za upotrebu kao metod lečenja ili sprečavanja Aβ-povezanih patologija, gde je navedena Aβ-povezana patologija Daunov sindrom, β-amiloidna angiopatija, cerebralna amiloidna angiopatija, nasledno cerebralno krvarenje, poremećaji povezani sa kognitivnim oštećenjem, MCI ("blago kognitivno oštećenje"), Alchajmerova bolest, gubitak pamćenja, simptomi nedostatka pažnje povezani sa Alchajmerovom bolešću, neurodegeneracija povezana sa Alchajmerovom bolešću, demencija mešovitog vaskularnog porekla, demencija degenerativnog porekla, presenilna demencija, senilna demencija, demencije povezane sa Parkinsonovom bolešću, progresivna supranuklearna paraliza ili kortikalna bazalna degeneracija.
  5. 5. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu prema patentnom zahtevu 4, gde je navedena β-povezana patologija Alchajmerova bolest.
  6. 6. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva za upotrebu prema patentnim zahtevima 4 ili 5, gde je navedena upotreba u kombinaciji sa bar jednim kongitivnim poboljšavajućim agensom, agensom za poboljšavanje memorije ili inhibitorom holinesteraze. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5
RS20170483A 2010-12-22 2011-12-21 Jedinjenja i njihova upotreba kao bace inhibitori RS55961B1 (sr)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201061425852P 2010-12-22 2010-12-22
US201161529620P 2011-08-31 2011-08-31
EP11850232.7A EP2655378B1 (en) 2010-12-22 2011-12-21 Compounds and their use as bace inhibitors
PCT/SE2011/051555 WO2012087237A1 (en) 2010-12-22 2011-12-21 Compounds and their use as bace inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS55961B1 true RS55961B1 (sr) 2017-09-29

Family

ID=46314249

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20170483A RS55961B1 (sr) 2010-12-22 2011-12-21 Jedinjenja i njihova upotreba kao bace inhibitori

Country Status (40)

Country Link
US (6) US8415483B2 (sr)
EP (2) EP2655378B1 (sr)
JP (3) JP6180325B2 (sr)
KR (1) KR101916975B1 (sr)
CN (2) CN106008355B (sr)
AR (1) AR084553A1 (sr)
AU (3) AU2011345389B2 (sr)
BR (1) BR112013016030B1 (sr)
CA (1) CA2822378C (sr)
CL (1) CL2013001849A1 (sr)
CO (1) CO6781485A2 (sr)
CR (1) CR20130308A (sr)
CY (1) CY1119211T1 (sr)
DK (1) DK2655378T3 (sr)
DO (3) DOP2013000147A (sr)
EA (2) EA025746B9 (sr)
EC (1) ECSP13012708A (sr)
ES (2) ES2626727T3 (sr)
GT (1) GT201300165A (sr)
HR (1) HRP20170723T1 (sr)
HU (1) HUE033274T2 (sr)
LT (1) LT2655378T (sr)
ME (1) ME02728B (sr)
MX (1) MX342477B (sr)
MY (1) MY178156A (sr)
NI (1) NI201300055A (sr)
NZ (2) NZ709235A (sr)
PE (2) PE20171342A1 (sr)
PH (2) PH12017500851A1 (sr)
PL (1) PL2655378T3 (sr)
PT (1) PT2655378T (sr)
RS (1) RS55961B1 (sr)
SA (2) SA111330107B1 (sr)
SG (2) SG191127A1 (sr)
SI (1) SI2655378T1 (sr)
SM (1) SMT201700243T1 (sr)
TW (2) TWI618700B (sr)
UY (1) UY33829A (sr)
WO (1) WO2012087237A1 (sr)
ZA (1) ZA201305495B (sr)

Families Citing this family (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP5828848B2 (ja) 2010-02-24 2015-12-09 ヴァイティー ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド ベータセクレターゼインヒビター
US8415483B2 (en) 2010-12-22 2013-04-09 Astrazeneca Ab Compounds and their use as BACE inhibitors
US9650336B2 (en) 2011-10-10 2017-05-16 Astrazeneca Ab Mono-fluoro beta-secretase inhibitors
US8779355B2 (en) * 2011-12-28 2014-07-15 Quest Diagnostics Investments, Inc. Methods for detecting lacosamide by mass spectrometry
AU2013211646B2 (en) 2012-01-26 2017-09-14 F. Hoffmann-La Roche Ag Fluoromethyl-5,6-dihydro-4h-[1,3]oxazines
TWI557112B (zh) 2012-03-05 2016-11-11 百靈佳殷格翰國際股份有限公司 β－分泌酶抑制劑
AR091203A1 (es) 2012-05-30 2015-01-21 Astellas Pharma Inc Compuestos de cromano
US9000184B2 (en) * 2012-06-20 2015-04-07 Astrazeneca Ab Cyclohexane-1,2′-naphthalene-1′,2″-imidazol compounds and their use as BACE inhibitors
US9000183B2 (en) * 2012-06-20 2015-04-07 Astrazeneca Ab Cyclohexane-1,2′-indene-1′,2″-imidazol compounds and their use as BACE inhibitors
US9000185B2 (en) * 2012-06-20 2015-04-07 Astrazeneca Ab Cycloalkyl ether compounds and their use as BACE inhibitors
US9000182B2 (en) * 2012-06-20 2015-04-07 Astrazeneca Ab 2H-imidazol-4-amine compounds and their use as BACE inhibitors
US10548882B2 (en) * 2012-06-21 2020-02-04 Astrazeneca Ab Camsylate salt
TW201422592A (zh) 2012-08-27 2014-06-16 Boehringer Ingelheim Int β－分泌酶抑制劑
EP2900650A1 (en) * 2012-09-28 2015-08-05 Vitae Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of beta-secretase
CN104995176B (zh) 2013-02-12 2019-02-22 巴克老龄化研究所 调节bace所介导的app加工的乙内酰脲
AR102202A1 (es) 2014-10-07 2017-02-08 Astrazeneca Ab Compuestos de oxazol y su uso como inhibidores de bace de oxazol
AU2017232277A1 (en) 2016-03-15 2018-10-04 Astrazeneca Ab Combination of a BACE inhibitor and an antibody or antigen-binding fragment for the treatment of a disorder associated with the accumulation of amyloid beta
TW201740944A (zh) 2016-03-15 2017-12-01 美國禮來大藥廠 組合療法
JPWO2017169503A1 (ja) * 2016-04-01 2019-02-14 国立大学法人千葉大学 含窒素芳香族アミドの製造方法、ピロール・イミダゾールポリアミドの製造方法、及び化合物
CN107892697B (zh) 2016-12-26 2020-11-03 郑州泰基鸿诺医药股份有限公司 一种[1,3]噻嗪-2-胺类化合物及应用，药物组合物
CN107954927A (zh) * 2017-10-30 2018-04-24 广东莱佛士制药技术有限公司 一种3-溴-5-(丙炔-1-基)吡啶的制备方法
WO2019122268A1 (en) 2017-12-21 2019-06-27 Astrazeneca Ab Processes for the stereoselective preparation of bace inhibitors
WO2019122421A1 (en) 2017-12-22 2019-06-27 Astrazeneca Ab Stereoselective ketone reduction using a ketoreductase enzyme
WO2019129755A1 (en) 2017-12-29 2019-07-04 Astrazeneca Ab Ketal hydrogenation
WO2019129750A1 (en) 2017-12-29 2019-07-04 Astrazeneca Ab Processes for the racemization of dihydroimidazole ring systems
CN110615751B (zh) * 2018-06-19 2021-08-17 上海医药工业研究院 一种2-氧代硫代丙酰胺的制备方法
US20220175749A1 (en) * 2019-03-14 2022-06-09 Astrazeneca Ab Lanabecestat for weight loss
CN111253427A (zh) * 2020-03-13 2020-06-09 苏州大学 正丁基锂在催化醛和硅烷的氰硅化反应中的应用
CN114989103B (zh) * 2022-06-09 2024-07-09 杭州科巢生物科技有限公司 一种2-甲氧基-3-(1-甲基-1h-1,2,4-三唑-3-基)苯胺的制备方法

Family Cites Families (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100452491B1 (ko) 2001-03-29 2004-10-12 한미약품 주식회사 신규한 결정형 암로디핀 캠실레이트 염 및 그의 제조방법
WO2002098462A1 (en) * 2001-06-01 2002-12-12 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Remedies containing aldose reductase inhibitor as the active ingredient for demyelinating diseases or diseases associated with demyelination
US7592348B2 (en) * 2003-12-15 2009-09-22 Schering Corporation Heterocyclic aspartyl protease inhibitors
EP1729771B1 (en) 2004-03-22 2009-10-14 Eli Lilly &amp; Company Pyridyl derivatives and their use as mglu5 receptor antagonists
CA2609582A1 (en) 2005-06-14 2006-12-28 Schering Corporation Aspartyl protease inhibitors
WO2007058601A1 (en) 2005-11-21 2007-05-24 Astrazeneca Ab Novel 2-amino-imidazole-4-one compounds and their use in the manufacture of a medicament to be used in the treatment of cognitive impairment, alzheimer’s disease, neurodegeneration and dementia
WO2007076247A1 (en) 2005-12-21 2007-07-05 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pyrimidine derivatives useful as inhibitors of pkc-theta
WO2007100536A1 (en) 2006-02-24 2007-09-07 Wyeth DIHYDROSPIRO[DIBENZO[A,D][7]ANNULENE-5,4'-IMIDAZOL] COMPOUNDS FOR THE INHIBITION OF β-SECRETASE
CN101506162B (zh) * 2006-06-22 2012-06-27 阿斯利康(瑞典)有限公司 作为β位淀粉样前体蛋白裂解酶抑制剂的取代的异吲哚和它们的用途
WO2008076044A1 (en) * 2006-12-20 2008-06-26 Astrazeneca Ab Novel 2-amino-5, 5-diaryl-imidazol-4-ones
WO2008092877A2 (en) * 2007-02-01 2008-08-07 Glaxo Group Limited 8-oxa-1, 4-diazaspiro [4,5] dec-3-en-1-yl and 1,4, 8-triazaspiro [4,5] dec- 3-en-1-yl acetamides as glyti transporter inhibitors in treatment of neurological and neuropsychiatric disorders
MX2009012177A (es) * 2007-05-07 2009-11-23 Schering Corp Moduladores de gamma-secretasa.
EP2249646A4 (en) 2008-02-06 2013-09-25 Glaxo Group Ltd PDE4 muscarinic Antagonist-DOPPELPHARMACOPHOREN
FR2929943B1 (fr) 2008-04-15 2010-09-24 Inst Rech Developpement Ird Sels de quinoleines 2-substituees
KR20110048491A (ko) 2008-07-28 2011-05-11 에자이 알앤드디 매니지먼트 가부시키가이샤 스피로아미노디하이드로티아진 유도체들
US8450308B2 (en) 2008-08-19 2013-05-28 Vitae Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of beta-secretase
MX2011002705A (es) 2008-09-11 2011-09-09 Amgen Inc Compuestos con anillos espiro-triciclicos como moduladores de beta-secretasas y metodos de uso.
KR101908255B1 (ko) 2009-03-13 2018-10-15 비타이 파마슈티컬즈, 인코포레이티드 베타세크리타아제 저해제
TW201105650A (en) 2009-07-02 2011-02-16 Astrazeneca Ab New compounds
UY32750A (es) 2009-07-02 2011-01-31 Astrazeneca Ab Imidazoles sustituidos y uso de los mismos
JP5828848B2 (ja) 2010-02-24 2015-12-09 ヴァイティー ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド ベータセクレターゼインヒビター
US20120065195A1 (en) 2010-03-31 2012-03-15 Clark Christopher T Compounds for treating neurodegenerative diseases
WO2011130741A1 (en) 2010-04-16 2011-10-20 Array Biopharma Inc. Compounds for treating neurodegenerative diseases
US8921363B2 (en) 2010-08-05 2014-12-30 Amgen Inc. Derivatives of 1 H-isoindol-3-amine, 1 H-iso-aza-indol-3amine, 3,4-dihydroisoquinolin-1-amine, and 1,4-dihydroisoquinolin-3-amine as beta-secretase inhibitors
WO2012040641A2 (en) 2010-09-24 2012-03-29 Array Biopharma Inc. Compounds for treating neurodegenerative diseases
AR083953A1 (es) 2010-11-22 2013-04-10 Array Biopharma Inc Compuestos para tratar enfermedades neurodegenerativas
US8415483B2 (en) * 2010-12-22 2013-04-09 Astrazeneca Ab Compounds and their use as BACE inhibitors
US9650336B2 (en) 2011-10-10 2017-05-16 Astrazeneca Ab Mono-fluoro beta-secretase inhibitors
US9000183B2 (en) 2012-06-20 2015-04-07 Astrazeneca Ab Cyclohexane-1,2′-indene-1′,2″-imidazol compounds and their use as BACE inhibitors
US9000185B2 (en) 2012-06-20 2015-04-07 Astrazeneca Ab Cycloalkyl ether compounds and their use as BACE inhibitors
US9000184B2 (en) 2012-06-20 2015-04-07 Astrazeneca Ab Cyclohexane-1,2′-naphthalene-1′,2″-imidazol compounds and their use as BACE inhibitors
US9000182B2 (en) 2012-06-20 2015-04-07 Astrazeneca Ab 2H-imidazol-4-amine compounds and their use as BACE inhibitors
US10548882B2 (en) 2012-06-21 2020-02-04 Astrazeneca Ab Camsylate salt

Also Published As

Publication number Publication date
CA2822378A1 (en) 2012-06-28
ES2780928T3 (es) 2020-08-27
AR084553A1 (es) 2013-05-22
DOP2017000030A (es) 2017-02-28
AU2011345389B2 (en) 2015-10-29
JP6180325B2 (ja) 2017-08-16
SMT201700243T1 (it) 2017-07-18
HRP20170723T1 (hr) 2017-07-28
DOP2013000147A (es) 2013-10-15
US20130210837A1 (en) 2013-08-15
ES2626727T3 (es) 2017-07-25
MX342477B (es) 2016-09-30
DOP2016000191A (es) 2016-09-15
EA025746B1 (ru) 2017-01-30
US20150133471A1 (en) 2015-05-14
SG191127A1 (en) 2013-07-31
EP3176172B1 (en) 2020-01-29
PE20171342A1 (es) 2017-09-13
MY178156A (en) 2020-10-06
US9248129B2 (en) 2016-02-02
SA111330107B1 (ar) 2015-03-26
PH12017500851A1 (en) 2023-08-14
CN103380133B (zh) 2016-06-29
NI201300055A (es) 2014-03-07
EA201690787A1 (ru) 2017-02-28
DK2655378T3 (en) 2017-06-06
US9918985B2 (en) 2018-03-20
US20160184303A1 (en) 2016-06-30
ZA201305495B (en) 2016-07-27
GT201300165A (es) 2015-02-11
EP2655378A1 (en) 2013-10-30
CO6781485A2 (es) 2013-10-31
ECSP13012708A (es) 2013-08-30
PE20141191A1 (es) 2014-09-21
EA032687B1 (ru) 2019-07-31
EP2655378A4 (en) 2014-07-09
HUE033274T2 (en) 2017-11-28
JP6333317B2 (ja) 2018-05-30
MX2013007319A (es) 2013-07-22
SG10201602241SA (en) 2016-04-28
BR112013016030A2 (pt) 2018-07-24
CA2822378C (en) 2020-01-14
JP6527255B2 (ja) 2019-06-05
WO2012087237A1 (en) 2012-06-28
TW201716386A (zh) 2017-05-16
SA114360153B1 (ar) 2015-11-29
US8865911B2 (en) 2014-10-21
US8415483B2 (en) 2013-04-09
EA025746B9 (ru) 2017-06-30
CL2013001849A1 (es) 2013-12-20
EA201390830A1 (ru) 2013-12-30
US10231967B2 (en) 2019-03-19
CY1119211T1 (el) 2018-02-14
JP2017008072A (ja) 2017-01-12
AU2011345389A1 (en) 2013-08-01
EP3176172A1 (en) 2017-06-07
CN106008355B (zh) 2019-05-03
US20170319578A1 (en) 2017-11-09
ME02728B (me) 2017-10-20
JP2018083840A (ja) 2018-05-31
NZ709235A (en) 2016-11-25
US20180221367A1 (en) 2018-08-09
NZ612041A (en) 2015-07-31
TWI618700B (zh) 2018-03-21
LT2655378T (lt) 2017-06-12
PH12013501313A1 (en) 2022-03-30
AU2017261475A1 (en) 2017-11-30
PL2655378T3 (pl) 2017-09-29
CN103380133A (zh) 2013-10-30
PT2655378T (pt) 2017-05-29
JP2014504300A (ja) 2014-02-20
TWI633092B (zh) 2018-08-21
BR112013016030B1 (pt) 2022-03-29
SI2655378T1 (sl) 2017-06-30
CN106008355A (zh) 2016-10-12
EP2655378B1 (en) 2017-03-01
AU2016200538B2 (en) 2017-08-31
AU2016200538A1 (en) 2016-02-18
TW201302713A (zh) 2013-01-16
KR101916975B1 (ko) 2018-11-08
KR20130143629A (ko) 2013-12-31
UY33829A (es) 2012-07-31
US20120165347A1 (en) 2012-06-28
CR20130308A (es) 2014-02-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RS55961B1 (sr) Jedinjenja i njihova upotreba kao bace inhibitori
KR20200131845A (ko) Pd1/pd-l1 상호작용/활성화 억제제로서의 비사이클릭 화합물
WO2013054108A1 (en) Mono-fluoro beta-secretase inhibitors
EP4626892A1 (en) Adenosine a2a and a2b receptor antagonists, pharmaceutical compositions and use thereof
HK1190721B (en) Compounds and their use as bace inhibitors
HK1190721A (en) Compounds and their use as bace inhibitors
HK1237775A1 (en) Spiroimidazole compounds and their use as bace inhibitors