[go: up one dir, main page]

RS34004A - Postupci i sastavi novih triazin jedinjenja - Google Patents

Postupci i sastavi novih triazin jedinjenja

Info

Publication number
RS34004A
RS34004A YU34004A YUP34004A RS34004A RS 34004 A RS34004 A RS 34004A YU 34004 A YU34004 A YU 34004A YU P34004 A YUP34004 A YU P34004A RS 34004 A RS34004 A RS 34004A
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
methyl
triazine
triamine
cycloheptyl
ethyl
Prior art date
Application number
YU34004A
Other languages
English (en)
Inventor
Richard Timmer
Christopher Alexander
Sivaram Pillarisetti
Uday Saxena
Karen Campbell
Original Assignee
Reddy Us Therapeutics Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Reddy Us Therapeutics Inc. filed Critical Reddy Us Therapeutics Inc.
Publication of RS34004A publication Critical patent/RS34004A/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D251/00—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings
    • C07D251/02—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings
    • C07D251/12—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D251/26—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hetero atoms directly attached to ring carbon atoms
    • C07D251/40—Nitrogen atoms
    • C07D251/42—One nitrogen atom
    • C07D251/44—One nitrogen atom with halogen atoms attached to the two other ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D251/00—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings
    • C07D251/02—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings
    • C07D251/12—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D251/26—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hetero atoms directly attached to ring carbon atoms
    • C07D251/40—Nitrogen atoms
    • C07D251/42—One nitrogen atom
    • C07D251/46—One nitrogen atom with oxygen or sulfur atoms attached to the two other ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D251/00—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings
    • C07D251/02—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings
    • C07D251/12—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D251/26—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hetero atoms directly attached to ring carbon atoms
    • C07D251/40—Nitrogen atoms
    • C07D251/48—Two nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D251/00—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings
    • C07D251/02—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings
    • C07D251/12—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D251/26—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hetero atoms directly attached to ring carbon atoms
    • C07D251/40—Nitrogen atoms
    • C07D251/48—Two nitrogen atoms
    • C07D251/50—Two nitrogen atoms with a halogen atom attached to the third ring carbon atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D251/00—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings
    • C07D251/02—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings
    • C07D251/12—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D251/26—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hetero atoms directly attached to ring carbon atoms
    • C07D251/40—Nitrogen atoms
    • C07D251/48—Two nitrogen atoms
    • C07D251/52—Two nitrogen atoms with an oxygen or sulfur atom attached to the third ring carbon atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D251/00—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings
    • C07D251/02—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings
    • C07D251/12—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D251/26—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hetero atoms directly attached to ring carbon atoms
    • C07D251/40—Nitrogen atoms
    • C07D251/54—Three nitrogen atoms
    • C07D251/70—Other substituted melamines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D453/00—Heterocyclic compounds containing quinuclidine or iso-quinuclidine ring systems, e.g. quinine alkaloids
    • C07D453/02—Heterocyclic compounds containing quinuclidine or iso-quinuclidine ring systems, e.g. quinine alkaloids containing not further condensed quinuclidine ring systems

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

Sadašnji pronalazak se odnosi na postupak i sastave koji sadrže jedinjenja koja tretiraju patofiziološka stanja proistekla iz inflamatornih odgovora. Posebno, sadašnji pronalazak je usmeren na jedinjenja koja inhibiraju ili blokiraju glikovani protein proizveden indukcijom sa signaliziranjem povezanog inflamatornog odgovora u endotelijalnim ćelijama. Sadašnji pronalazak se odnosi na jedinjenja koja inhibiraju proliferaciju glatkog mišića. Posebno, sadašnji pronalazak je usmeren na jedinjenja koja inhibiraju proliferaciju ćelije glatkog mišića moduliranjem HSPG-ova kao što je Perlekan. Sadašnji pronalazak se dalje odnosi na upotrebu jedinjenja za tretiranje vaskularno okluzivnih stanja koja se karakterišu proliferacijom glatkog mišića kao što je restenoza i atereskleroza.

Description

POSTUPCIISASTAVI NOVIH TRIAZIN JEDINJENJA
OBLAST PRONALASKA
Sadašnji pronalazak se odnosi na triazin jedinjenja. Tačnije, pronalazak se odnosi na postupke i sastave za spravljanje i upotrebu triazin jedinjenja.
STANJE TEHNIKE
Sinteza novih jedinjenja vodi novim mogućnostima za otkrivanje novih terapeutskih intervencija. Upotrebom istraživanja odnosa strukture i aktivnosti, jedinjenja mogu biti skrojena tako da jedinjenja imaju bar jednu aktivnost koja može biti predviđena iz njegove strukture.
Upotreba ogleda velike propusnosti dopušta brzo određivanje aktivnosti jedinjenja koja su sintetizovana u skorije vreme.
Nova jedinjenja za nove terapeutske intervencije su potrebna u mnogim oblastima medicine i tretmana bolesti. Na primer, hronična i akutna inflamatoma stanja čine bazu za bolesti koje utiču na sisteme organa uključujući, ali ne limitirajući na, astmu, akutne inflamatorne bolesti, vaskularnu inflamatornu bolest, hronično zapaljenje, aterosklerozu, angiopatiju, miokarditis, nefritis, Crohn-ovu bolest, artritis, tip I i tip II dijabetis i povezene vaskularne patologije. Incidenca ovih inflamatornih stanja je u porastu kod celokupne populacije, pri čemu samo dijabetis utiče na 16 miliona ljudi.
Dok je zapaljenje koda ima ili nema normalni imuni odgovor organizma, hronično zapaljenje vodi do komplikacija i trajnog sistemskog oštećenja zbog interakcija nepoznatih ćelijskih faktora. Posebno, hronično zapaljenje može da izazove endotelijalno oštećenje koje rezultira u vaskularnim komplikacijama. Bolest srčane arterije, cerebrovaskularna i periferna vaskularna bolest koje razultiraju iz aterosklerotični i tromboembolične makroangiopatije su primarni uzroci smrtnosti kod hronične inflamatorne bolesti.
Mnogi ljudi i životinje imaju limitirani životni vek i životne stilove zbog stanja koje se odnose na izbore načina života, kao što su dijeta ili fizičko vežbanje, ili zbog genetičkih predispozicija da bi se razvila bolest. Na primer, vaskularna proliferacija glatkih mišićnih ćelija je uobičajena konsekvenca endotelijalne povrede i veruje se da je rani patogenetički događaj u formiranju aterosklerotičnih kolutova ili komplikacija koje se odnose na vaskularnu povredu ili kao rezultat hirurških intervencija. Za abnormalnu proliferaciju vaskularne ćelije glatkog mišića (SMC) se smatra da doprinosi patogenezi vaskulamih okulzivnih organa, uključujući arteriosklerozu, aterosklerozu, restenozu, i aterosklerozu presada posle transplantacije organa.
Postupci intervencije na pokožnoj koronarnoj arteriji (PTCA) su najuobičajeniji u bolničkom postupku prema pacijentu u Sjedinjenim Državama. Prema American Heart Association, oko jedna trećina pacijenata koja se podvrgnu angioplasitji balonom imaju rastenozu proširenog segmenta krvnog suda u okviru otprilike 6 meseci. Može biti neophodno da se obavi još jedna angioplastija ili operacija bajpasa koronarne arterije na arterijama koje imaju restenozu. Ključna osobina restenoze je odgovor na povredu koji rezultira u aktivaciji inflamatorne kaskade i remodeliranja ćelija kako unutar tako i spolja po zidu karotidne arterije. Ovo uključuju povišen rast spojnog tkiva i glatkog mišića u lumenu arterije poznat kao neointimna hiperplazija. Trenutno ne postoje dostupni efikasni farmakološki tretmani koji kontrolišu patogenezu vaskulamih okluzivnih organa, kao što je, ali ne limitirajći na, arterioskleroza, ateroskleroza, restenoza, i ateroskleroza presada posle transplantacije organa. Identifikacija efikasnih terapetuskih sredstava sa minimalnim sporednim efektima će obnoviti kvalitete života bez zahtevanja dodatnih hirurških postupaka kao što je operacija bajpasa koronarne arterije.
Kontrola ili modulacija faktora koji su proizvedeni od strane tela u odgovoru na povredu, operaciju, metabolitičke faktore ili gubitak kontrole kod povratne veze mehanizama, vodi do previše ili premalo faktora je dugo bio cilj davanja farmakoloških sredstava. Jenda bolest koja je ubrzano u porastu u industrijalizovanim zemljama je pojavljivanje dijabetisa i svih njegovih prisutnih nastavaka. Jedan od faktora koji je važan u oštećenju povezanom sa dijabetisom je prisustvo glikovanih proteina.
Giikovani proteini i uznapredovala glikacija krajnih proizvoda (AGE) doprinosi celularnom oštećenju, posebno, dijabetskom oštećenju tkiva, putem bar dva glavna mehanizma: modulacije celularnih funkcija kroz interakcije sa specifičnim ćelijskim površinskim receptorima, i alternacijom ekstracelularne matrice koja vodi do formiranja proteinskih unakrsnih veza. Proučavanja sugerišu da glikani proteina i AGE interakcije sa ćelijama mogu promovisati inflamatorne postupke i oksidativnu celularnu povredu. AGE povećava sposobnost oksidacije i aterogeničnost lipoproteina. Njegovo vezivanje za matricu proteina izaziva sintezu citokina i aktivira celulame mesengere. Bolesti, gde je giikovani protein i AGE akumulacije etiološki faktor na koji se sumnja, uključuju vaskularne komplikacije dijabetisa, mikoangiopatije, renalnu insuficijenciju i Alzheimer-ovu bolest.
Tačni mehanizmi po kojima visoka glikoza plazme, koja je viđena kao dijabetis, izaziva mikrovaskularno oštećenje još uvek nisu u potpunosti shvaćeni. Jedan mogući mehanizam po kome hiperglikemija može biti povezana za mikroangiopatije je kroz postupak ne-enzimske glikacije kritičnih proteina. Ne-enzimska glikacija, odnosno povezivanje proteina sa glukozom, vodi do formiranja glikovanih proteina. Prvi korak u ovoj putanji glikacije uključuje ne-enzimsku kondenzaciju glukoze sa slobodnim amino grupama u proteinu, primarno ipsilon-amino grupe ostataka lizina, formirajući Amadori proizvode pripajanja. Rani proizvodi glikacije mogu proći kroz dalje reakcije kao što su preraspoređivanja, dehidratacija i kondenzacije da se formira nepovratna uznapredovala glikacija krajnjih proizvoda (AGE). Ovo je krajnje reaktivna grupa molekula čija se interakcija sa specifičnim receptorima na površini ćelije smatra da vodi do patogenih pojava.
Druga glavna oblast bolesi gde su potrebni tretmani i za koje ne postoje adekvatne i efikasne terapije su ćelijski proliferativni poremećaji, ili poremećaji izazvani naželjenim ili nenameravanim ćelijskim rastom. Kako je to već pomenuto, hiperplazija glatke mišićne ćelije (SMC) je glavni događaj u razvoju ateroskleroze i takođe je odgovorna za značajan broj stopa pogreške koji prate vaskularne postupke kao što su angioplastija, stent impiantacija i operacija bajpasa koronarne arterije. U normalnom krvnom sudu, SMC miruju, ali one proliferuju kada se pojavi oštećenje endotelijuma. Modulatori rasta koji prirodno nastaju, od koji su mnogi izvedeni iz endotelijuma, striktno kontrolišu SMC proliferacijuin vivo.Kada kontrola postane neregulisana, izaziva se u subjektu patološko stanje.
Sledeća glavna oblast neželjenog celularnog rasta, koja je neproverena od strane sistema regulacije tela, je kancer ili onkološka stanja. Upotrebljavaju se mnoge terapije i to tako što se pokušava da se obnovi zdravlje ili bar zaustavi neželjeni ćelijski rast. Mnogo puta, terapeutska sredstva mogu imati dejstvo individualno, ali često, terapeutski režimi zahtevaju kombinacije različitih farmakoloških sredstava sa tretmanima kao što su operacija ili ozračavanje.
Postoji u ovom trenutku potreba za tretmanima hroničnih ili akutnih bolesti, kao što je ateroskleroza, neželjeni ćelijski rast ili ćelijska proliferacija, dijabetis, inflamatorna stanja i vaskularno okluzivna patološka stanja, pošto je njihovo pojavljivanje često, trenutno dostupni tretmani su skupi i stanja su teško lečiva za mnoge farmakološke terapije. Mehanizmi koji su uključeni u kontrolu ili prevenciju takvih bolesti nisu jasni i postoji potreba za preventivnim i terapeutskim tretmanima ovih i drugih bolesti. Tako, ono što je u ovom trenutku potrebno su nova jedinjenja koja pronalaze korist u postupcima i sastavima za lečenje i prevenciju hroničnih i akutnih bolesti.
SUŠTINA PRONALASKA
Sadašnji pronalazak je usmeren na postupke i sastave koji se sastoje od novih jedinjenja, primarno zasnovanih na supstituisanom triazin jezgru. Ovde su otkriveni postupci za pravljenje novih jedinjenja, jedinjenja, sastavi koji sadrže ta jedinjenja, i postupci i sastavi za upotrebu tih jedinjenja. Jedinjenja i sastavi koji sadrže ta jedinjenja su korisni u lečenju različitih bolesti.
Sastav u skladu sa sadašnjim pronalaskom sadrži triazin jedinjenja, analoge, derivate, i njihove smeše. Takva triazin jedinjenja se sastoje od sledeće strukture, gde su N<A>, N<B>iN<c>tipično upotrebljeni da predstavljaju supstituisane amino grupe zakačene za 1,3,5-triazin na pozicijama 2, 4 i 6:
Primer takvih triazin jedinjenja uključuju jedinjenja koja imaju sledeću strukturu.
U ovom primeru, svaka pandan amino (NRR') grupa može da predstavlja prosto NH2 grupu ili sekundarnu i li tercijarnu amono grupu, uključujući ciklični sekundarni amid, i raspon drugih supstituenata koji su ovde opisani. Sastavi u skladu sa sadašnjim pronalaskom takođe obuhvataju analoge tris(amino) jedinjenja, koja uključuju intermedijarna jedinjenja u sintezi tris(amino) triazin jedinjenja koja su gore naznačena, na primer diamino hlorotriazin jedinjenja, ili amino dihlorotriazin jedinjenja koja su dole prikazana, gde su N<A>i N<B>pandan supstituisane amino grupe kako je to gore opisano.
Sastavi u skladu sa sadašnjim pronalaskom takođe obuhvataju analoge tris(amino) triazin jedinjenja koja su gore naznačena, uključujući jedinjenja koja su izolovana kao nuzprodukti u sintezi tris(amino) triazin jedinjenja, kao što stu bis(amino)alkoksi triazin jedinjenja kako je to dole prikazano, gde je E = O ili S i slično.
Sadašnji pronalazak takođe obuhvata sastave koji se upotrebjavaju u pravljenju novih jedinjenja i postupke pravljenja novih jedinjenja koja su ovde otkrivena.
Sadašnji pronalazak je usmeren na postupke i sastave koji se sastoje od jedinjenja koja su korisna u lečenju patoloških stanja. Jedan aspekt sadašnjeg pronalaska obuhvata jedinjenja i sastave koji se sastoje od takvih jedinjenja u postupcima za lečenje bolesti koja se odnosi na neželjenu ćelijsku proliferaciju. Mnoge vaskularne bolesti, kao što su kardiovaskularne bolesti, nastavci transplantovanog organa, vaskularno okluzivna stanja uključujući, ali ne limitirajući, neointimnu hiperplaziju, restenozu, vaskulopatiju transplanta, srčanu vaskulopatiju allografta, aterosklerozu, i arteriosklerozu, su izazvane sa ili imaju kolateralno oštećenje zbog neželjene ćelijske proliferacije, kao što je to hiperplazija glatke mišićne ćelije (SMC). Bar jedna aktivnost od jedne ili više ovih jedinjenja je da jedinjenje ima aktivnost uticanja na sintezu proteoglikana uključujući indukciju i sintezu proteoglikana i aktivnih fragmenata proteoglikana. Postupci obuhvataju davanje sastava koji sadrže jedinjenja koja imaju bar aktivnost uticanja na ćelijsku proliferaciju i uticanje an sintezu i aktivnost proteoglikana.
Sadašnji pronalazak takođe obuhvata postupke i sastave koji sadrže jedinjenja koja su ovde opisana i koja imaju aktivnost povezanu sa modulacijom enzima glikozidaze i tako, utičući na supstrate za takve enzime. Enzimi glikozidaze i njihova aktivnost sa njihovim supstratima, kao što su proteoklikani ili giikovani proteini, su aspekti različitih bolesti kao što su vaskularna stanje, bolesti povezane sa proteoglikanom, bolesti bubrega, autoimune bolesti i inflamatorne bolesti. Jedinjenja koja su ovde opisana i koja imaju aktivnost koja utiče na koncentracije supstrata enzima glikozidaze se upotrebljavaju u postupcima lečenja takvih vaskulamih, inflamatornih, metastatičnih i sistemskih bolesti.
Realizacija sadašnjeg pronalaska obuhvata postupke i sastave koji sadrže jedinjenja sadašnjeg pronalaska za lečenje i prevenciju od stanja ili bolesti koja imaju kao aspekt bolesti ili stanja inflamaciju. Aspekt sadašnjeg pronalaska je usmeren na postupke i sastave koji sadrže jedinjenja koja utiču na inhibiciju inflamacije, posebno inflamacije povezane sa akumulacijom ili prisustvom glikovanih proteina ili AGE. Postupci lečenja obuhvataju davanje sastava koji sadrže jedinjenja koja imaju bar aktivnost moduliranja inflamatornih reakcija koje su komponente bioloških stanja uključujući, ali ne limitirajući na, vaskularne komplikacije koje izazivaju vaskulopatije od strane tipa I i tipa II dijabetisa, druge vaskulopatije, mikroangiopatije, renalnu insuficijenciju, Alzheimer-ov sindrom, i bolesti izazvane inflamacijom kao stoje ateroskleroza. Aspekt sadašnjeg pronalaska obuhvata postupke i sastave za lečenje bolesti, prethodnih stanja ili patologija povezanih sa inflamatornim citokinima i drugim molekulima koji se odnose na inflamaciju.
Sledeća realizacija sadašnjeg pronalaska obuhvata postupke i sastave koji sadrže jedinjenja koja imaju bar aktivnost izazivanja ćelijske smrti ili prestanak ćelijske aktivnosti, a koja se ovde pominje kao citotoksična aktivnost. Ova aktivnost može biti upotrebljena u postupcima zain vitroiliin vivocitotoksičnost. Na primer, jedinjenja koja imaju ovu aktivnost mogu biti selektivno isporučena u oblast u okviru živog organizma da selektivno ubija ćelije u toj oblasti. Takvi postupci se upotrebljavajuu tretiranju hiperproliferativnih ćelija, kao što su kanceri, ili drugog neželjenog ćelijskog rasta ili ćelijskih aktivnosti. Jedan aspekt pronalaska obezbeđuje sastave koja sadrže jedinjenja koja neselektivno ubijaju ćelije. Sledeći aspekt pronalaska obezbeđuje jedinjenja koja selektivno ubijaju ćelije, na primer, ćelije koje imaju određeni ćelijski marker ili drugu identifikacionu karakteristiku kao što je pto brzina metabolizma ili resorbcija određenog jedinjenja.
Sadašnji pronalazak takođe obuhvata farmaceutski sastave koji sadrže jedinjenja koja su ovde otkrivena. Takođe su otkriveni putevi davanja i doze efektivnih količina jedinjenja i farmaceutskih sastava. Na primer, jedinjenja sadašnjeg pronalaska mogu biti data u kombinaciji sa drugim farmaceutskim sredstvima u različitim protokolima radi efikasnog lečenja bolesti.
U sledećem aspektu, sadašnji pronalazak se odnosi da isporuku leka ili elutujućih medicinskih uređaja koji sadrže ili su obloženi sa bar jednim jedinjenjem koje je ovde otkriveno. Medicinski uređaj pogodan za upotrebu sa ovim jedinjenjima sadašnjeg pronalaska, uključuje, stentovi i druge medicinske naprave koja obezbeđuju supstrat za isporuku bar jednog jedinjenja.
Drugi aspekti sadašnjeg pronalaska obuhvataju sastave i postupke za uređaj mikronizova. Takvi uređaji za mikro nizove i postupci obuhvataju različite mikronizove koji se mogu koristiti, na primer, radi proučavanja i praćenja ekspresije gena u odgovoru na tretman sa jedinjenjima sadašnjeg pronalaska. Mikronizovi mogu sadržati sekvence nukleinskih kiselina, ugljenehidrate ili proteine koji određujući za specifične ćelije, tkiva, vrste, stanja bolesti, prognoze, progresiju bolesti ili bilo koju drugu kombinaciju molekula koji se mogu upotrebiti da utvrdi dejstvo jednog ili više jedinjenja sadašnjeg pronalaska. Druge realizacije sadašnjeg pronalaska obuhvataju postupke upotreba baza podataka i kompjuterskih aplikacija.
KRATAK OPIS SLIKA
Slika 1.<1>H NMR N-(3-Hloro-4-metoksi-fenil)-N'-cikloheksilmetil-N"-metil-N"-(1-metil-piperidin-4-il)-| 1,3,5jtriazin-2,4,6-triamina.
Slika 2. 'H NMR N-Cikloheptil-N'-(1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-N"-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-|1,3,5]triazm-2,4,6-triamina.
Slika 3.<1>H NMR N-(3-Hloro-4-metoksi-fenil)-N'-metil-N'-(1-metilpiperidin-4-il)-N"-(1 propil-butil)-[ 1,3,5"|triazin-2,4,6-triamina. Slika 4.<1>H NMR N-(1-Aza-biciklo|2.2.2|okt-3-il)-N'-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N"-)1 eti!-pirolidin-2-ilmetil)-(_1,3,5]triazin-2,4,6-triamina.
Slika 5.<1>H NMR N2-(3-Hloro-4-metoksi-fenil)-N4-cikloheptil-N6-metil-N6-piperidin-4-il-[1,3,5-triazin-2,4,6-triamina.
Slika 6. 'H NMR N-Cikloheptil-N'-etil-N"-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-(1,3,5|triazin-2,4-diamina.
Slika 7.<1>H NMR N-Cikloheptil-N'-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-6-pirolidin-1-il-| 1,3,5]triazin-2,4-diamina.
Slika 8. 'H NMR N-Ciklohekslilmetil-N,-(1-etil-pirolidin-2-ilmelil)-N<M->
(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-| 1,3,5|triazin-2,4,6-tnamina. Slika 9.<1>H NMR 6-Hloro-N-Cikloheheptil-N'-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-[1,3,5]triazin-2,4-diamina.
Slika 10.<1>H NMR N-(3-Hloro-4-metoksi-fenil)-(4,6-dihloro-[1,3,5Jtriazin-2-il)amina.
Slika 11.<1>H NMR N-(3-Hloro-4-metoksi-fenil)-N'-izopropil-N"-metil-N',-(1-metil-piperidin-4-il)-[1,3,5]triazin-2,4,6-triarnina. Slika 12.<1>H NMR N2-(3-loro-4-metoksi-fenil)-N4-izopropil-N6-metil-N6-piperidin-4-il-1,3,5-triazin-2,4,6-triamina.
Slika 13.<1>H NMR 5-!4-(3-Hloro-4-metoksi-fenilamino)-6-|metil-(1-metil-piperidin-4-il)-aminoJ-| 1,3,5]triazin—2-ilaminoj-pentan-1-ola.
Slika 14<1>H NMR 5-|4-(3-hloro-4-metoksi-fenilamino)-6-(metil-pipendin-4-il-amino)-1,3,5-triazin-2-ilamino|-pentan-1-ola. Slika 15.<1>H NMR 6-Hloro-N!N"-bis-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-11,3,5 Jtriazin—2,4-diamma.
Slika 16.<1>H NMR N,N'-Bis-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N"-metil-N"-(4-metil-cikloheksil)-| 1,3,5"|triazin-2,4,6-triamina.
Slika 17.<1>H NMR N,N,-Bis-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N"-cikloheptil-11,3,5 [triazin—2,4,6-triamina.
Slika 18.<1>H NMR N-Butil-N,-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N"-(1-metilpiperidin-4-il)-N-propil-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamina.
Slika 19.<1>H NMR N2-Butil-N4-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N6-metil-N6-piperidin-4-il-N2-propil-1,3,5-triazin-2,4,6-triamina.
Slika 20.<1>H NMR 6-Cikloheksilmetoksi-N,N'-bis-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-1,3,5-triazin-2,4-diamina.
Slika 21.<1>H NMR (4-Hloro-6-cikloheksilmetoksi-[1,3,5|tnazin-2-il)-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-amina.
Slika 22.<1>H NMR N,N'-bis-((3-hloro-4-metoksi-fenil)-6-cikloheksilmetoksi-1,3,5-triazin-2,4-diamina.
Slika 23.<1>H NMR (4-Hloro-6-cikloheksilmetoksi-[1,3,5|triazin-2-il)-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-amina.
Slika 24.<1>H NMR 6-Cikloheksilmetoksi-N-(1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-N'-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-[ 1,3,5]triazin-2,4-diamina.
Slika 25.<1>H NMR N-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-6-cikloheksilmetoksi-N'-metil-N'-(1 -metil-piperidin-4-il)- [ 1,3,5|triazin-2,4-diamina. Slika 26.<1>H NMR N-Azepan-1-il-N'-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N"-(1-metil-piperidin-4-il)-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamina.
Slika 27.<1>H NMR N4-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N6-metil-N2-perhidro-azepin-1 -il-N6-piperidin-4-il-1 !3,5-triazin-2,4,6-triamtna. Slika 28.<1>H NMR N-Azepan-1-il-6-hloro-N'-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-[1,3,5 ]triazin-2,4-diamina.
Slika 29.<1>H NMR N"-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N,N'-bis-perhidro-azepin-1 ,3,5-triazin-2,4,6-triamina.
Slika 30.<1>H NMR N-(3-Bromo-4-metoksi-fenil)-N'-cikloheptil-N"-metil-N"-(1 -metil-piperidin-4-il)- 11,3,5|triazin-2,4,6-triamina. Slika 31.<1>H NMR N-(benzil-piperidin-4-il)-N'-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N"-cikloheptil-| 1,3,5|-2,4,6-triamina.
Slika 32.<1>H NMR 2-hloro-4-|4-cikloheptilamino-6-[metil-(1 -metilpiperidin-4-il-amino]-1,3,5-triazin-2-ilamino|-fenola.
Slika 33.<1>H NMR N2-cikloheptil-N4-((S)-1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-N6-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamina.
Slika 34.<1>H NMR N2-cikloheptil-N4-((R)-1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-N6-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamina.
Slika 35.<1>H NMR N2-cikloheksilmetil-N4-((S)-1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-N6-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamina.
Slika 36.<1>H NMR N2-cikloheksilmetil-N4-((R)-1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-N6-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamina.
Slika 37. 1H NMR (;4-cikioheptilamino-6-[((S)-1 -etif-pirolidin-2-ilmetil)-amino|-1,3,5-triazin-2-il j -fenil-amino)-acetonitrila. Slika 38.<1>H NMR (!4-cikloheptilamino-6-|((R)-1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-amino|-1,3,5-triazin-2-il j -fenil-amino)-acetonitrila.
Slika 39.<1>H NMR N2-[(1-etil-2-pirolidinil|-N4-((3-fluoro-4-metoksi-fenil)-6-|(S)-2-(metoksimetil)-1-pirolidinil]-1,3,5-triazin-2,4-diamina.
Slika 40.<1>H NMR 6-Hloro-N-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N'-cikloheptil-11,3,5'|triazin-2,4-diamina.
Slika 41.<1>H NMR N-(3-Hloro-4-metoksi-fenil)-N,-cikloheptil-N"-metil-N"-(1 -metil-piperidin-4-il)-11,3,5Jtriazin-2,4,6-triamina. Slika 42. 'H NMR 4-(3-Hloro-4-metoksi-fenilamino)-6-cikloheptilamino-1,3,5-triazin-2-ola.
Slika 43.<1>H NMR N2-(3-hloro-4-dietilamino-fenil)-N4-cikloheptil-N6-(1 -etil-pirolidin-2-ilmetil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamina.
Slika 44. 'H NMR N2-cikloheptil-N4-(2-dimetilamino-etil)-N6-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamina.
Slika 45.<1>H NMR (;4-cikloheptitamino-6-| 1 -etil-pirolidin-2-ilmetil)-amino|-1,3,5-triazin-2-il j-fenil-amino)-acetonitrila.
Slika 46.<1>H NMR N,N,-di-N-propil-N"-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamina.
Slika 47.<1>H NMR N,N'-diciklopropil-N"-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-tnamina.
Slika 48.<1>H NMR N2-Cikloheptil-N4-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-N6-metil-N6-(1-metil-piperidin-4-il)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamina. Slika 49.<1>H NMR N2-Cikloheptil-N4-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-N6-metil-N6-piperidin-4-il-1,3,5-triazin-2,4,6-triamina.
Slika 50.<1>H NMR N2-Cikloheptil-N4-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-N6-metil-N6-(1-metil-piperidin-4-il)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, soli hlorvodonika.
Slika 51.<1>H NMR N2-(3-hloro-4-dietilamino-fenil)-N4-cikloheptil-N6-(1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triarninS42-63
soli hlorvodonika.
Slika 52.<1>H NMR N2-Cikloheptil-N4-(1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-N6-(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamina, soli
hlorvodonika.
Slika 53. Karta pokazuje efekte jedinjenja u ogledu gde giikovani
humani serum albumin (G-HSA) izazivan proizvodnju IL-6. Slika 54. Karta pokazuje efekte jedinjenja u antiproliferativnom
ogledu.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
Treba da se shvati da ovaj pronalazak nije limitiran na određenu metodologiju, protokole, ćelijske linije, konstrukte i reagense koji su ovde opisani i kao takav može varirati. Takođe se treba shvatiti da je terminologija koja se ovde koristi samo u svrhu opisivanja određenih realizacija, i mena nameru da limitira sadašnji pronalazak koji će biti limitiran samo dodatim zahtevima.
Sve publikacije i patenti koji su ovde pomenuti su ovde inkorporisani putem referenci u svrhu opisivanja i otkrivanja, na primer, konstrukta i metodologija koji su opisani u publikacijama, koji mogu biti upotrebljeni u vezi sa ovde opisanim pronalaskom. Publikacije o kojima je diskutovano u gornjem i kroz celi tekst su date samo radi njihovog otkrivanja pre datuma podnošenja sadašnje prijave. Ništa ovde ne treba da bude smatra kao priznanje da pronalazači nemaju pravo da na takvo otkriće zbog prethodnog pronalaska.
I. OPIS JEDINJENJA
U jednom aspektu, sadašnji pronalazak obuhvata nova organska jedinjenja koja su uopšteno opisana kaoN2,N<4>,N<6->tris(amino)-1,3,5-triazini koji su predstavljeni imenima u Tabeli 1 a strukturalne formule u preostalim Tabelama 2 i dalje. Reprezentativna jedinjenja ovog pronalaska mogu biti opisana donjom opštom strukturalnom formulom, gde su N<A>, N<B>i N<c>pandan supstituisane amino grupe zakačene na 1,3,5-triazine na pozicijama 2, 4 i 6.
Tako, tipično jedinjenje obuhvaćeno sadašnjim pronalaskom uključuje triazin jedinjenja koja se sastoje od sledeće strukture:
U ovoj tipičnoj realizaciji, svaka pandan NRiR2NR3R4i NR5R6 amino grupa može da predstavlja primarni, sekundanri ili tercijarni amin kada je vezana za triazin jezgro, uključujući sekundarni amid supstituent (na primer pirolidin-N-il grupa), i raspon drugih supstituenata kako je to ovde opisano. Sastavi u skladu sa sadašnjim pronalaskom takođe sadrže analoge tris(amino) jedinjenja, na primer, jedinjenja koja su pripremljena kao intermedijarna jedinjenja u sintezi tris(amino) triazin jedinjenja koja su gore naznačena, ili jedinjenja koja predstavljaju delimično supstituisano triazin jezgro. Mnoge od sinteza triazin jedinjenja ovog pronalaska tipično upotrebljavaju hlorid cijanurske kiseline C3N3CI3kao početno jedinjenje, pa su prema tome intermedijarne vrste kao što su bis(amino) hlorotriazin jedinjenja, ili amino diklorotriazin gurpe kako su gore opisane, takođe obuhvaćene ovim pronalaskom.
Sastavi u skladu sa sadašnjim pronalaskom takođe sadrže analoge tris(amino) triazin jedinjenja koja su gore naznačena, uključujući jedinjenja koja su izolovana kao nuzproizvodi u sintezi tris(amino) triazin jedinjenja, opšte formule koja je dole prikazana, gde je E = O ili S. Primer takvog jedinjenja je bis(amino)alkoksi triazin jedinjenje. Uopšteno pojmovi, jedinjenja i sastavi u skladu sa sadašnjim pronalaskom sadrže analoge tris(amino) triazin jedinjenja sledeće opšte strukture:
Ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićeni derivat; njihov stereoizomer, ili njihovu so;
pri čemu:
R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; alkila, cikloalkila, alkenila, cikloalkenila, cikloalkadienila, alkinila, aralkila, aralkenila, aralkinila, heteroalkila, alkoksija, alkiltio, alkilamino, ili dialkilamino, od kojih svaki ima do 12 atoma ugljenika i uključujući njihove linearne ili račvaste derivate, njihove ciklične derivate, njihove supstituisane derivate, njihove heteroatom derivate, ili njihove heterociklične derivate; arila; heteroarila; ariloksija; ariltio; halogena; ili amino;
G jeodabranod NR<1>ili O;
E je odabran od CH ili N;
z je ceo broj od 0 do 3;
X<1>je odabran od R<1>, NR<1>3<+>, CN, N02, C02R<1>, C(0)NR<1>2, CH=CR12,OCR\ C(0)R<1>, S02R<1>, S02OR<1>, ili NC(0)R<1>, ili su X<1>iX<2>zajedno spojeni aril, piridin, dioksan, pirol, pirolidin, furan, tiofen prsten; pod uslovom da R<1>ostatak od C(0)R<1>supstituenta u X<1>poziciji isključuje amino ili dialkilamino kada je X<1>C(0)R<1>;
X<2>je odabran od R<1>; CXXH3.X, pri čemu je X halogen a x je ceo broj od 1 do 3; OR<1>; SR<1>; NR<1>2; CN; C(0)OR<1>; 4-morfolinil; 4-metil-1-piperizinil;OR<2>, pri čemu je R<2>odabran od CH2OCH3, CH2OCH2OCH3, CH2OCH2CH2OCH3, ili C(0)R<1>;SR<3>, pri čemu je R<3>odabran od CH2OCH3, CH2OCH2CH2OCH3, CH2OCH2CH(CH3)2,CH2NHC(0)CH3, ili SR<1>; OM ili SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg, ili Ca;
AY<1>je halogen, ili je A odabran od NR<1>ili O, i
Y<1>je odabran odR<1>;CR43;NR<4>2; OR<4>; ili SR<4>;
, pri čemu je n ceo broj od 0 do 8, m je ceo
broj od 1 do 8, Z<1>je nezavisno odabran od CR<1>ili N, Z2 je nezavisno
odabran od CR<1>2, NR<1>, O, ili S, pod uslovom da dva O ili S atoma nisu locirani susedno jedan prema drugom, i pod uslovom da su ne više od dva Z2 ostatka NR<1>;
R<4>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od u normalnom nizu ili račvastog alkila, cikloalkila, cikloalkenila, cikloalkadienila, alkenila, alkinila, aralkila, aralkenila, aralkinila, heteroalkila, alkoksi, akliltio, alkilamino, ili dialkilamino, od kojih svaki sadrži do 10 atoma ugljenika, -H, aril, heteroaril, ariloksi, ariltio, halogen, amino, njihove NR<1>2-supstituisane derivate, njihove OR<1->supstituisane derivate; njihove SR<1->supstituisane derivate; ili njihove halogen-supstituisane derivate; i
DY<2>je halogen, ili je D odabran od NR<1>ili O gde je R<1>definisan kao gore, i
Y<2>je odabran od R<1>,
ili
pri čemu jeZ<1>nezavisno odabran od N ili CR<4>a Z<2>je
nezavisno odabran kako je to gore definisano, pod uslovom da dva O ili S atoma nisu locirani susedno jedan drugom, i pod uslovom da su ne više od dva Z<2>ostatka NR<1>. Jedinjenja sadašnjeg pronalaska prema
ovom opštem opisu ne uključuju ona koja obuhvataju jedinstvenu kombinaciju supstituenata koja obezbeđuju sledeća jedinjenja: N-Cikloheptil-N'-metil-N,-(1-metil-piperidin-4-il)-N"-naftalen-2-il-11,3,5]triazin-2,4,6-triamin;
N-Cikloheptil-N'-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-N"-metil-N"-(1-metilpiperidin-4-il)-| 1,3,5]triazin-2,4,6-triamin;
|4-(4-Benzil-piperazin-1-il)-6-morfolin-4-il-[1,3,5]triazin-2-il]-(4-metoksi-fenil)-amin;
N-Cikloheptil-6-morfolin-4-ili-N'-naftalen-2-il-n,3,5|tnazin-2,4-diamin;
N-Cikloheptil-N'-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-6-morfolin-4-il-11,3,5]triazin-2,4-diamin;
N-Cikloheptil-6-morfolin-4-ili-N'-fenil-[1,3,5]triazin-2,4-diamin;
N-Cikloheptil-N'-(4-metoksi-fenil)-6-morfolin-4-il-[1,3,5'Jtriazin-2,4-diamin;
N-Benzil-N'-cikloheptil-N"-(4-metoksi-fenil)-N-metil-[1,3,5|triazin-2,4,6-triamin;
N-(2-|1,3]Dioksolan-2-il-etil)-N'-metil-N,-(1-metil-piperidin-4-il)-N"-naftalen-2-il-| 1,3,5jtriazin-2,4,6-triamin;
N-Ciklopropil-N'-metil-N'-(1-metil-piperidin-4-il)-N"-naftalen-2-il-j 1,3,5"|triazin-2,4,6-triamin.
Zbog toga što pronalazak obuhvata jedinjenja koja predstavljaju zasićene derivate gornje opšte strukture, i jedinjenja koja uključuju različita stanja nezasićenosti (na primer, -en, -dien, -trien, i -in derivate gornjih jedinjenja), onda prikazani prsten arila ili piridila u gornjoj opštoj formuli može biti delimično ili potpuno hidrogenovan u ovom pronalasku. Kao rezultat, C5E prsten u gornjoj strukturi može da predstavlja cikloheksil ili piperidinil prsten koji je X<1>ili X<2>supstiluisan. U opštim pojmovima, X<1>obično, ali ne uvek, predstavlja elektron grupu koja se povlači kao što je to halid ili nitro, dok X<2>obično, ali ne uvek, predstavlja elektron grupu koja donira kao što je to alkoksid ii amino.
Kao što je naznačeno u gornjoj opštoj strukturi, AY<1>i DY<2>tipično predstavljaju NR<1>ostatak (pri čemu je R<1>gore definisan), i u tom slučaju ovi supstituenti konstituišu deo amino ili suptituisane amino grupe ii prema tome, jedinjenje samo konstituiše triazin. U ovom slučaju, Y<1>i Y<2>mogu biti odabrani od supstituenata širokog raspona, uključujući, ali ne limitirajući na,
cikloalkil sa do 10 atoma ugljenika;
pri čemu je n od 1 ili 2; ; u normalnom nizu ili račvasti alkil sa do 10 atoma ugljenika; CH2R<1>; (CHR<1>)XNR<1>2pri čemu je x 1-6; CH2R<1>; CH2R<1>; (CHR<1>)xOR<1>2pri čemu je x od 1 do 6; pri čemu je x od 3 do 5; CH2CF3; (CHR<1>)XZ<1>pri čemu je x od 1 do 6 a Z<1>je odabran od NR<1>2, pri čemu je y od 3 do 5, ili U ovim primerima, R1 je nezavisno odabran kako je to gore definisano. Ovo su samo reprezentativni primeri definicija Y i Y supstituenata, i nemaju nameru da budu isključivi. Takođe je zabeleženo da AY<1>zajedno i DY<2>zajedno, mogu takođe da predstavljaju široki raspon hemijskih ostataka vezanih za triazin jezgro kao što su halid ili sekundarne amino grupe kao što su U kasnijim slučajevima, amino supstituisane grupe su pojmovne sekundarne amino grupe, pa ipak po vezivanju za triazin jezgro, amino azoti postaju tercijarni ostaci amina. Primeri AY<1>zajedno i DY<2>zajedno uključuju, ali nisu limitirani na: halid; gde je x od 3 do 5; gde je X od 0 do 6; gde jeZ<2>odabran od R<1>, C(0)R1, C(0)OR1, piridinila, arila,
gde je x od 0 do 6, i gde je R1 nezavisno odabran kako
je to gore definisano. Ovo su takođe samo reprezentativni primeri definicija ovih supstituenata, bez namere da budu isključivi.
Reprezentativna jedinjenja u skladu sa sadašnjim pronalaskom su prikazana u Tabeli 1. Ova tabela nema nameru da bude isključiva za jedinjenja sadašnjeg pronalaska, već da da primere triazin jedinjenja koja su obuhvaćena ovim pronalaskom.
Uopšteno pojmovno, sastavi u skladu sa sadašnjim pronalaskom takođe obuhvataju tris(amino) triazin jedinjenja sledeće strukture:
pri čemu Rido R6 predstavljaju H, alkil, aril, alkenil, alkinil, aralkil, aralkenil, aralkinil, cikloalkil, cikloalkenil, heteroalkil, heteroaril, halid, alkoksi, ariloksi, alkiltio, ariltio, silil, siloksi, amino, alkilamino, dialkilamino i slično, uključujući njihove u normalnom nizu ili račvaste derivate, njihove ciklične derivate, njihove supstituisane derivate, njihove heteroatom derivate, njihove heterociklične derivate, njihove funkcionalizovane derivate, njihove soli, njihove izomere, ili njihove kombinacije.
Na primer, tipični supstituent R:do R6je supstituisani alkil, u kome je supstituent heterociklični derivat. Primeri heterocikličnih ostataka koji zadrže azot uključuju, ali nisu limitirani na grupe kao što su piridinil (izveden iz piridina, vezanog preko prstena ugljenika), piperidinil (izveden ili piperidina i vezan preko prstena atoma azota ili prstena ugljenika), i pirolidinil (izveden iz pirolidina i vezan preko prstena atoma azota ili prstena ugljenika).
Primeri supstituisanih ili funkcionalizovanih derivata Rido R6uključuju, ali nisu limitirani na, ostatke koji sadrže supstituente kao što su acil, formil, hidroksi, acil halid, amid, amino, azido, kiselina, alkoksi, ariloksi, halid, karbonil, etar, estar, tioetar, tioestar, nitril, alkiltio, ariltio, sulfo kiselina i njene soli, tiol, alkenil, alkinil, nitro, imin, imid, alkil, aril, njihove kombinacije, i slično. Šta više, u slučaju alkilovanih derivata navedenih ostataka, alkil supstituent može biti pandan prema navedenom hemijskom ostatku, ili upotrebljen za vezivanje na amin azot preko alkil supstituenta.
Primeri hemijskih ostataka Rido R6sadašnjeg pronalaska dalje uključuju, ali nisu limitirani na: H; metil; etil; propil; butil; pentil; heksil; heptil; oktil; etenil; propenil; butenil; etinil; propinil; butinil; ciklobutil; ciklopentil; cikloheksil; ciklobutenil; ciklopentenil; cikloheksenil; fenil; tolil; ksilil; benzil; naftil; piridinil; furanil; tetrahidro-1-naftil; piperidinil; indolil; indolinil; pirolidinil; 2-(metoksimetil) pirolidinil; piperazinil; hinolinil; hinolil; alkilovani-1,3-dioksolan; triazinil; morfolinil; fenil pirazolil; indanil; indonil pirazolil; tiadiazolil; rodaninil; tiolaktonil; dibenzofuranil; benzotiazolil; homopiperidinil; tiazolil; ninonuklidinil; izoskazolidinonil; bilo koji njihovi izomeri, derivati, ili supstituisani analozi; ili bilo koje supstituisane ili nesupstituisane hemijske grupe kao što su alkohol, etar, tiol, tioetar, tercijarni amin, sekundarni amin, primaran amin, estar, tioestar, karbonska kiselina, diol, diestar, akrilna kiselina, akrilni estar, metionin etil estar, benzil-1-cistein etil estar, imin, aldehid, keton, amid, ili dien.
Dalji primeri hemijskih ostataka R-i do R6ovog pronalaska uključuju, ali nisu limitirani na, sledeće vrste ili supstituisane ili alkilovane derivate sledećih vrsta, kovalentno vezanih za amin azot: furan; tetrahidrofuran; indol; piperazin; pirolidin; pirolidinon; piridin; hinolin; antracen; tetrahidrohinolin; naftalen; pirazol; imidazol; tiofen; pirolidin; morfolin; i slično. Jedna karakteristika navedenih vrsta ili supstituisanih ili alkilovanih derivate ovih vrsta, je ta da mogu biti kovalentno vezani za amin azot na bilo koji način; uključujući preko pandan supstituenta ili alkil grupe, preko heteroatoma kao odgovarajuće, ili preko prstena atoma kao odgovarajuće, što se razume od strane običnog stručnjaka u ovoj oblasti nauke.
Hemijski ostatciR^do R6sadašnjeg pronalaska takođe uključuju, ali nisu limitirani na, ciklične alkane i alkene i uključuju premošćene i nepremošćene prstenove. Primeri premišćenih prstenova uključuju, ali nisu limitirani na, grupe kao što su norbornil; norbonadienil, adamantil; 6-azabiciklo [3,2,1 Joktanil; 3-azabiciklo[2,2,2]oktanil, i slično.
U jednoj realizaciji sadašnjeg pronalaska, NR-|R2, NR3R4, ili NR5R6su izvedeni iz cikličnog sekundarnog amina. Primeri cikličnog amino hemijskog ostatka sadašnjeg pronalaska uključuju, ali nisu limitirani na piperidin; 4-benzil-piperidin; 3-piperidinmetanol; morfolin; 4-piperidinopiperidin; 1 -(2-amino-metil)-piperazin; dekahidrohinolin; 1,2,3,4-tetrahidro-piridoindol (ili amino ostatak); 3-amino-5-fenil pirazol;
3-aminopirazol; histidinol; heksametileimin; 4-hidroksipiperidin; 2-piperidinmetanol; 1,3,3-trimetil-6-azabiciklo[3.2.1] oktan; 3-pirolidinol; 1-metilpiperazin; 2-etil-piperidin; 1,2,3,4-tetrahidroizohinolin; 1,2,3,4-tetrahidrohinolin; 1-(2-metoksifenil)piperazin; 2,6-dimetilpiperazin (ili amino ostatak); iminodibenzil; 5-metoksitriptamin; 4,4'-bipiperidin; 1-(2-hidroksietil)piperazin; 4-metilpiperidin; i slično.
Važno je da opšta struktura sadašnjeg pronalaska obuhvata sva stanja zasićenosti prikazanih supstituenata, kao što su svi en, dien, trien, i in derivati bilo kog supstituenta. Opšta struktura takođe obuhvata sve saglasne izomere, regioizomere, i stereoizomere koji mogu ispasti od određenog seta supstituenata. Opšta struktura takođe obuhvata sve enantiomere, diastereomere, i druge optičke izomere bilo u enantiomernim ili racemskim oblicima, ili smeše stereoizomera.
Pripremanje fokusirane biblioteke jedinjenja
Mnoga jedinjenja ovog pronalaska su pripremljena u paralelnoj proceduri sinteze prema dole opisanim postupcima. Primeri jedinjenja pripremljenih putem paralelnih tehnika sinteze su data u Tabeli 2. Ova pripremanja uključuju reagovanje individualnih jedinjenja amina (monomeri) sa hloridom cijurinske kiseline, koja su takođe prezentovana u Tabeli 2, zajedno sa hemijskim strukturama jedinjenja pripremljenih putem paralelnih postupaka sinteze.
Biblioteka jedinjenja je sintetizovana u skladu sa sadašnjim pronalaskom da se dobijuN<2>,N4,N<6->tris(amino)-1,3,5-triazini, kako dalje sledi. Dizajn biblioteke jedinjenja se primarno zasniva na strukturi 95 koja je dole prikazana. Tačnije, dizajnN2,N<4>,N<6->tris(amino)-1,3,5-triazina je fokusirana tako da se samo jedna od pandan amino grupa (N<A>, N<B>, ili N<c>u gornjoj strukturi) menja tokom svake sinteze, dok ostale dve grupe ostaju konstantne. Kombinacija specifičnih uposlenih amina proizvodi biblioteku jedinjenja novog sastava. Inicijalno, biblioteka je razvijena upotrebom metil-(1-metil-piperidin-4-il)amina, gde se cikloheptil i m-fluoroanisidil grupe drže konstantno (u donjoj strukturi 95). Sinteza triazina oko metil-(1-metil-piperidin-4-il)amina nije optimialna, i amin se potom zamenjuje sa (1 -etil-pirolidin-2-il)metilaminom koji obezbeđuje prilagodljiviju sintezu.
Biblioteka N<2>,N<4>,N<6->tris(amino)-1,3,5-triazina se priprema na osnovu strategije promene samo jedne pandan amino grupe po sintezi, i na osnovu matične strukture 95 koja je gore prikazana. Biblioteka je podeljena u tri podgrupe: Biblioteke I, II, i III (prikazane u Tabeli 2). Biblioteka I uključuje jedinjenja koja sadrže nepromenjene N<B>i N<c>grupe ali različite N<A>grupe (6). Pandan amino grupa N<A>se menja prema specifičnim primerima koji su dole navedeni. Biblioteka II uključuje jedinjenja koja sadrže nepromenjene N<a>i N<c>grupe ali različite N<B>grupe (7). Pandan amino grupa N<B>se menja prema specifičnim primerima koji su dole navedeni. Biblioteka III uključuje jedinjenja koja sadrže nepromenjene N<A>i N<B>grupe ali različite N<c>grupe (8). Pandan amino grupa N<c>se menja prema specifičnim primerima koji su dole navedeni.
Strukture N<2>,N<4>,N<6>-tris(amino)-1,3,5-triazina koje su prikazane u Tabelama 2 i dalje se generišu upotrebom ISIS-DrawTM verzije 2.4.0.20, i generišu se sa opcijom da prikažu nespecifične atome vodonika ako nisu prikazani, pa ipak, nisu svi atomi vodonika prikazani u datim strukturama. U svim prikazanim strukturama u bilo kom tekstu, tabeli, šemi ili slici koja ovde postoji, bilo koji atomi vodonika koji se zahtevaju za bilo koji atom da postigne svoju uobičajenu valencu, bilo da je to atom ugljenika ili heteroatom, treba da bude uključen ukoliko to nije specifično naznačeno u strukturi.
Jedan postupak pripremanja jedinjenja je prikazan u donjoj šemi. Jedinjenja se pripremaju reagovanjem hlorida cijurinske kiseline sekvencijalno sa monomerima primarnih ili sekundarnih amina da se dobiju željeni 1,3,5-triazin derivati [1,2,3,4]. Tako, početna jedinjenja amina koja se upotrebljavaju da reaguju sa hloridom cijurinske kiseline se nazivaju "monomeri". N<2>,N<4>,N<6>-tris(amino-supstituisani)-1,3,5-triazini se pripremaju bez potrebe za prečišćavanjem između svakog koraka sinteze, i krajnji proizvod se izoluje standardnij postupcima. Prečišćavanje se postiže upotrebom flast kolona hromatografije kako je to već potrebno. Na stručnjaku je iz oblasti organske sinteze da pripremi, izoluje i prečisti organska jedinjenja koja su ovde opisana, i da modifikuje prikazanu sintezu. Na primer, moguće je da se sintetišu jedinjenja sadašnjeg pronalaska upotrebom viška bilo kog monomera primarnih ili sekundarnih amina ukoliko bilo koji od tri koraka prikazanih u Šemi 1, kao što je višak monomera, služe i kao supstituent triazin jezgra, kao i baza, u kom slučaju i-Pr2NEt baza može biti isključena.
Pandan amino grupe mogu biti supstituisane funkcionalnim grupama označenim kao R-ido R6grupe u Šemi 1. Stepen funkcionalnosti pandan amino grupe je određena strukturom i kompleksnošću amin monomera, i uticaće na sveukupnu molekularnu diversitv N<2>,N<4>,N<6->tris(amino-suptituisanih)-1,3,5-triazina. Široki raspon amin monomera može se upotrebiti u ovom pronalasku. Jednom vezani za triazin jezgro, pandan amino grupe mogu biti opisane kao sekundarno ili tercijarno supstituisani, u zavisnosti od stepena supstitucije atoma azota.
Tabela 2 prikazuje chartsN<2>,N<4>,N<6>-tris(amino)-1,3,5-triazin jedinjenja Biblioteka l-lll ovog pronalaska, svake posebno, zajedno sa amin
prekursor monomerima koji se upotrebljavaju u pripremanju jedinjenja. Opšti postupci i sintetički postupci su detaljno opisani u Primerima 1-5. Sekvenca u kojoj svaki monomer dodat u Šemi 1 je takože prikazana u
Tabeli 2, pri čemu je Monomer 1 prvi dodat, Monomer 2 drugi dodat, a Monomer 3 je dodat treći, lako se nema namera da se bude vezan sledećom izjavom, veruje se da je ovaj red dodavanja značajan, zbog toga što svako sintetičko zaustavljanje neophodno uključuje reakciju monomera sa različitim triazin prekursorom. Tačnije, monomer 1 reaguje sa hloridom cijarinske kiseline, monomer 2 reaguje sa amino dihloro(triazin), a monomer 3 reaguje sa diamino hloro(triazin), kako je to prikazano u Šemi 1. Tako, red u kojem su monomeri uposleni se zasniva na opštem sintetičkom principu da relativna nukleofiličnost i/ili bazičnost monomera 1-3 koja se upotrebljava u sintetičkoj šemi treba da se generalno poveća od monomera 1 do monomera 3. Ova strategija dopušta da najviše nukleofilični i/ili bazni amin monomer reaguje sa više prostorno presićenim i pretpostavljeno manje reaktivnim diamino hloro(triazin)-om, pri čemu veća reaktivnost može pomoći da se reakcija nastavi do završetka. U nekim slučajevima, više od jednog poretka dodavanja monomera će obezbediti željeni proizvod,, ali reakcione sekvence date u Tabeli 2 predstavljaju optimalne sintetičke postupke koji su ovoga trenutka poznati.
Treba primetiti da samo u opštem smislu supstituenti naznačeni kao N<A>, N<B>, i N<c>u opštim strukturama gore odgovaraju stvarnoj N<2>,N<4>,N<6->nomenklaturiN<2>,N<4>,N<6>-tris(amino)-1,3,5-triazina. Zbog toga što je poredak u kome su N<2>,N<4>,i N<6>supstituenti postavljeni na 2-, 4-, ili 6-poziciji na triazin jezgru zavisan od imena svake amino grupe u molekulu, nije uvek tačno da se određena amino grupa pojavljuje kao N<2>,N<4>,ili N<6>supstituent, čak i kada je samo jedan supstituent permutovan na jednoj poziciji. Na primer, mnoga od jedinjenja iz Tabele 2 sadrže oba i cikloheptil amino i 3-fluor-4-metoksifenil amino grupe, pa ipak ove grupe zauzimaju različite 2-, 4-, ili 6-pozicije kao funkciju imena trećeg supstituenta na triazin jezgru. Kao rezultat, u gornjoj strukturi sinteza se razmatra u pojmovima permutovanja amino grupa na jednoj pandan N<A>, N<B>, ili N<c>poziciji (pre negoN<2>,N<4>,iliN<6>-pozicija), dok se druge amino grupe održavaju konstantnim. Dalje, treba primetiti da su imena jedinjenja upotrebljena u Tabeli, Zahtevima i opisu tipično određena upotrebom Beilstein-ove Atonom™ 4.01.188, kao ranije CD "stand-alone" verzije Beilstein-ove Autonom™, Autonom 2000. Tipično, upotrebljavaju se generisana imena na ovaj način, bez obzira da lije ime jedinjenja IUPAC, CAS, Beilstein, ili druga nomenklatura. Pa ipak u svakom slučaju, imena nedvosmisleno identifikuju specifikovano jedinjenje.
A. Amino grupe izvedene iz Monomera 1
Sekvenca reakcije monomera sa triazin jezgrom, prikazana u Šemi 1, je Monomer 1, Monomer 2, i Monomer 3, dodata u tom poretku. Tako, amino dihloro(triazin) se formira iz Monomera 1 i hlorida cijurinske kiseline. Za prvu pandan amino grupu izvedenu iz Monomera 1 i hlorida cijurinske kiseline, Monomer 1 amin koji se upotrebjava i predlaže uključuje primarno, ali ne uvek, aril amine, specifično fenil, naftil, naftilalkil, hinolinil, heteroaril derivate, i slično.
Specifični primrei Monomera 1 koji se upotrebljavaju da proizvedu prvu pandan amino grupu uN<2>,N4,N<6->tris(amino)-1,3,5-triazinima, i njihovi[ Chemical Abstract Registry brojevi]uključuju, ali nisu limitirani na, 4-hloroanilin [106-47-9], 3,4-etilenedioksanilin [22013-33-8], 4-47 bromoanilin [106-40-1], etil 4-aminobenzoat [94-09-7], 4-fluoro-anilin [371-40-4], 4-aminobifenil [92-67-1], 3-fluoroanilin [372-19-0], 2-aminonaftalen [91-59-8], 3-hloroanilin [108-42-9], 4-morfolinoanilin [2524-67-6], 3-bromoanilin [591-19-5], 4'-aminoacetanilid [122-80-5], etil 3-aminobenzoat [582-33-2], m-aminoacetanilid [102-28-3], 2-fluoroanilin [348-54-9], m-anisidin [536-90-3], 2-hloroanilin [95-51-2], p-fenetidin [156-43-4], 2-bromoanilin [615-36-1], 4-(metiltio)anilin [104-96-1], 3,4-(metilendioksi)anilin [14268-66-7], 2-aminopiridin [504-29-0], o-toluidin [95-53-4], 2,4-difluoro-N-metilanilin [138564-16-6], 4-fenoksianilin [139-59-3], /V-fenilglicinonitril [3009-97-0], m-toluidin [108-44-1], 3-hloro-N-metilanilin [7006-52-2], p-toluidin [106-49-0], 2-(metilamino)benzotrifluorid, 4-hloro-N-metilanilin [932-96-7], 4-aminobenzonitril [873-74-5], 3-anilinopropionitril, [1075-76-9], tetrakain [94-24-6], /V-metil-p-anisidin [5961-59-1], 3-hloro-p-anisidin [5345-54-0], sulfabenzamid [127-71-9], 3-aminohinolin [580117-6], 1-amino-4-bromonaftalen [2298-07-9], 6-aminohinolin [580-15-4] 1-amino-4-hloronaftalen, [4684-12-2] 8-aminohinolin [578-66-5], S-(-)-1-(2-naftil)-etilamin [3082-62-0], 3,4-dihloroanilin [95-76-1], 3,4-difluoroanilin [3863-11-4], A/-metil-4-(trifluorometoksi)anilin [41419-59-4], 4-(trifluorometoksi)anilin [461-82-5], 2-amino-4-metiltiofen-3-karboksamid [4651-97-2], A/,/V-dietil-A/'-fenetilenediamin [1665-59-4], 1-(4-amino-fenil)-4-metilpiperazin hidrohlorid [94520-33-9], 2-hloro-A/',A/'-dietil-1,3-fenilenediamin monohidrohlorid [196938-07-5] 2-(dimetilamino)etil 4-aminobenzoat [11012-47-2], A/,A/-dimetil-1,4-fenilenediamin [1665-95-4].
B. Amino grupe izvedene iz Monomera 2
Reakcija Monomera 2 sa prethodno formiranim amino dihloro(triazin) obezbeđuje intermedijani diamino gloro(triazin) u sinteziN<2>,N4,N<6->tris(amino)-1,3,5-triazina. Tako, za vezivanje druge pandan amino grupe za triazin jezgro, Monomer 2 amin koji se upotrebjava i predlaže uključuje amine, specifično alkil (CrC12, sa lancem u normalnom nizu ili račvasti), cikloalkil (C3-C10veličina prstena), azaciklo (C2-C10), i benzil amin derivate. Prsten cikloalkila i azacikloamina, i fenil prsten benzil derivata mogu biti opciono supstituisani sa jednim ili više ostataka, ili kombinacijom ostataka, kao što su, alkil, alkenil, alkinil, fenil, benzil, halo, cijano, nitro, hidroksi, tioksi, alkoksi, ariloksi, haloalkiloksi, alkiltio, ariltio, amino, alkil amino, aril amino, acil, karboksil, amido, sulfonamido, sulfonil, sulfat, sulfokiselina, morfolino, tiomorfolino, piperazinil, piridil, tienil, furanil, piroil, pirazoil, fosfat, fosfonska kiselina, fosfonat i slično. Ove grupe mogu biti predstavljene u zaštićenom ili nezaštićenom obliku koji se upotrebljava u standardnoj organskoj sintezi.
Dodatno, bilo koji opisani monomer koji ima stereocentar uključuje svoje enantiomere, diastereomere, i optičke izomere bilo u enantiomernim ili racemskim oblicima, ili smeše stereoizomera. Ovo uključuje sve 1,3,5-triazin derivate i njihove stereoizomere koji su ovde predstavljeni koji se formiraju kao rezultat upotrebe optički aktivnih, scalemskih ili racemskih monomera.
Specifični primeri Monomera 2 koji se upotrebjava da se zakači druga pandan amino grupa u sintezi N<2>,N<4>,N<6->tris(amino-supstituisanih)-1,3,5-triazina, i njihovi odgovarajući[ Chemical Abstract Registry brojevi]
uključuju, ali nisu limitirani na, etilamin [75-04-07], cikloheksanmetilamin [3128-02-8] terc-butilamin [75-64-9], furfurilamin [617-89-0], benzilamin [100-46-9], 2,2,2-trifluoroetilamin [753-90-2], ciklooktilamin [5452-37-9], A/,A/-dimetiletilenediamin cikloheksilamin [108-91-8], ciklopentilamin
[1003-03-8], 1-(2-aminoetil)-piperidin [26116-12-1], 1-acetilpiperazin [13096-96-3], pirolidin [123-75-1], 1-piperonilpiperazin [32231-06-4], heksametileneimin [111-49-9], 1-(2-piridil)piperazin [34803-66-2], dekahidrohinolin (cis/trans) [2051-28-7], 1-metilpiperazin [109-01-3], 1-(3-aminopropil)-imidazol [5036-48-6], etil 1-piperazin karboksilat [120-43-4], 4-metilcikloheksilamin (cis/trans) [6321-23-9], 1-(3-aminopropil)-2-pirolidin [7663-77-6], 2-(aminometil)-etil-pirolidin [26116-12-1], (+?-S-2-(metoksimetil) pirolidin [63126-47-6], 1 -(pirolidineo karbonilmetil) piperazin [33890-45-4].
C Amino grupe izvedene iz Monomera 3
Reakcija Monomera 3 sa prethodno formiranim diamino gholo(triazin) obezbeđuje krajnji korak u sinteziN<2>,N4,N<6->tris(amino-supstituisani)-1,3,5-triazina. Tako, za vezivanje treće pandan amino grupe za triazin jezgro, Monomer 3 koji se upotrebljava i predlaže sadrži od amina, specifično alkil (CrC12, sa lancem u normalnom nizu ili račvasti), cikloalkil (C3-C10veličina prstena), azaciklo (C2-C10), i benzil amin derivate. Prsten ovih cikloalkil- i azacikloamin, i fenil prsten benzil derivata mogu biti opciono supstituisani sa jednim ili više ostataka, ili kombinacijom ostataka, kao što su, alkil, alkenil, alkinil, fenil, benzil, halo, cijano, nitro, hidroksi, tioksi, alkoksi, ariloksi, haloalkiloksi, alkiltio, ariltio, amino, alkil amino, aril amino, acil, karboksil, amido, sulfonamido, sulfonil, sulfat, sulfokiselina, morfolino, tiomorfolino, piperazinil, piridil, tienil, furanil, piroil, pirazoil, fosfat, fosfonska kiselina, fosfonat i slično.
Dodatno, bilo koji opisani monomer koji ima stereocentar uključuje svoje enantiomere, diastereomere, i optičke izomere bilo u enantiomernim ili racemskim oblicima, ili smeše stereoizomera. Ovo uključuje sve 1,3,5-triazin derivate i njihove stereoizomere koji su ovde predstavljeni koji se formiraju kao rezultat upotrebe optički aktivnih, skalemskih ili racemskih monomera.
Specifični primeri Monomera 3 koji se upotrebjava da se zakači druga pandan amino grupa u sinteziN2,N<4>,N<6->tris(amino-supstituisanih)-1,3,5-triazina, i njihovi odgovarajući[ Chemical Abstract Registry brojevi]koji se upotrebljavaju u sinteziN2,N<4>,N<6->tris(amino-supstituisanih)-1,3,5-triazin derivata uključuju, ali nisu limitirani na, etilamin [75-04-07], cikloheksanmetilamin [3128-02-08], terc-butilamin [75-64-9], furfurilamin [617-89-0], benzilamin [100-46-9], 2,2,2-trifluoroetilamin [753-90-2], ciklooktilamin [5452-37-9], A/,A/-dimetiletilenediamin cikloheksilamin [108-91-8], ciklopentilamin [1003-03-8], 1-(2-aminoetil)-piperidin [26116-12-1], 1-acetilpiperazin [13096-96-3], pirolidin [123-75-1], 1-piperonilpiperazin [32231-06-4], heksametileneimin [111-49-9], 1-(2-piridil)piperazin [34803-66-2], dekahidrohinolin (cis/trans) [2051-28-7], 1-metilpiperazin [109-01-3], 1-(3-aminopropil)-imidazol [5036-48-6], etil 1-piperazin karboksilat [120-43-4], 4-metilcikloheksilamin (cis/trans)
[6321-23-9], 1-(3-aminopropil)-2-pirolidin [7663-77-6], 2-(aminometil)-
etil-pirolidin [26116-12-1], (+?-S-2-(metoksimetil) pirolidin [63126-47-6], 1-(pirolidineo karbonilmetil) piperazin [33890-45-4].
Dodatno paralelnim sintetičkom postupcima koji se upotrebljavaju da pripreme jedinjenja iz Tabele 2, Tabela 1 takođe daje druga egzemplarna triazin jedinjenja sadašnjeg pronalaska, koja se sintetišu pre individualno nego upotrebom paralelne sinteze. Potpuno pripremanje i osobine jedinjenja su predstavljeni u Primerima, gde su dati detalji sintetičkih postupaka. Sintetički postupci za ova jedinjenja uključuju i supstituciju hlorid grupa na hloridu cijurinske kiseline, kao i različite hemijske modifikacije ovih grupa kada se vežu za triazin jezgro. Posebno, ovaj pronalazak takođe obuhvata soli neutralnih triazin jedinjenja, kako su dati u primerima i tabelama.
U sledećem aspektu ovog pronalaska, jedinjenja sadašnjeg pronalaska uključuju, ali nisu limitirana na, ona koja imaju sledeću formulu:
ili njiegov en, dien, trien, ili in derivat, njegov zasićeni derivat, njegov stereoizomer; ili njegova so;
pri čemu:
R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvasti alkil sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkil sa do 10 atoma ugljenika; X<1>je odabran od m-F, m-CI, m-Br, m-CN, m-N02,m-S02R<1>, ilim- S02OR\ili su X<1>i X<2>zajedno spojeni benzen, piridin, ili dioksan prsten; X<2>je odabran od p-OR1, p-SR<1>, p-NR<1>2,<p->OM, ili p-SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg ili Ca; Y<1>je odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika; u normalnom nizu ili račvastog alkila sa do 10 atoma ugljenika; CH2R<2>, pri čemu je R<2>cikloalkil sa do 10 atoma ugljenika; ili pri čemu je n 1 ili 2; AY<2>je odabran od halogena ili OR<1>, ili A je NR1 i Y2 je odabran od R1,
Sastavi koji sadrže jedinjenja sa ovom formulom su takođe obuhvaćeni sadašnjim pronalaskom, kao i smeše i kombinacije jedinjenja ove formule.
U daljem aspektu ovog pronalaska, jedinjenja sadašnjeg pronalaska uključuju, ali nisu limitirana na, ona koja imaju sledeću formulu:
ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićeni derivat; njihov stereoizomer; ili njihovu so;
pri čemu:
R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvasti alkil sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkil sa do 10 atoma ugljenika;
E je CH ili N;
n je ceo broj od 0 do 3;
X<1>je odabran od -H,m- F,m-CI, m-Br, m-J, m-CN, m-N02, m-S02R<1>, ili m-S02OR<1>, ili su X<1>i X<2>zajedno spojeni benzen ili piridin prsten;
X2 je odabran od -H, o-CI, o-Br, p-OR<1>, p-SR<1>, p-NR<1>2, p-Cl p-Br, p-CF3, p-C(0)OR<1>, p-OM, ili p-SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg ili Ca;
A je odabran od NR<1>ili O, pri čemu je Y<1>odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika, s normalnim nizom ili račvastog alkila sa do 10 atoma ugljenika, ili
kada je A NR<1>, i pri čemu je Y<1>odabran od R<1>ili CH2R<1>kada je A O; ili je AY<1>odabran od halogena, DY<2>je halogen, ili je D NR<1>a Y<2>je odabran od
ili (CHR<1>)XNR<1>2, pri čemu je x ceo broj od 1 do 6.
Sastavi koji sadrže jedinjenja ove formule su takođe obuhvaćeni sadašnjim pronalaskom, kao i smeše i kombinacije jedinjenja ove formule.
U još jednom aspektu ovog pronalaska, jedinjenja sadašnjeg pronalaska uključuju, ali nisu limitirana na, ona koja imaju sledeću formulu:
ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićen derivat; njihov stereoizomer; ili njihovu so;
pri čemu:
R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvastog alkil sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika; arila; ili (CH2)XCN, pri čemu je x ceo broj od 0 do 6; Eje CH ili N; n je ceo broj od 0 do 3; X<1>je odabran od -H,m- F,m- C\, m-Br,m- J,m- CN, m-N02, m-S02R<1>, ili m-S02OR1, m-NC(0)R<1>, ili o-F, ili suX<1>i X<2>zajedno spojeni benzen, piridin, ili dioksan prsten; X2 je odabran od -H, o-CI, o-Br, o-CF3, o-R<1>, p-OR<1>, p-SR<1>, p-NR<1>2,<p->F, p-CI p-Br, p-CF3, p-CN, p-C(0)OR<1>, p-NC(0)R<1>, p-(4-morfolinil), ili p-(4-metil-1-piperizinil); AY<1>je halogen, ili je A NR<1>ili O a Y<1>je odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika, cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika supstituisan sa R<1>, u normalnom nizu ili račvastog alkila sa do 10 atoma ugljenika, CH2R<1>, (CHR<1>)yOR<1>, pri čemu je y ceo broj od 1 do 6, ili su AY<1>zajedno
pri čemu je x ceo broj
od 3 do 5; i
DY<2>je halogen, ili je D NR<1>a Y<2>je odabran od
cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika, cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika supstituisan sa R<1>, u normalnom nizu ili račvastog alikla sa do 10 atoma ugljenika, CH2R<1>, pri čemu je x ceo broj od 3 do5, CH2CF3, (CHR<1>)ZZ<1>, pri čemu je z ceo broj od 1 do 6, i Z1 je odabran od NR<1>2, pri čemu je x ceo broj od 3 do 5, ili je NY2R1 zajedno odabran od pri čemu jeZ2 odabran od R<1>, C(0)R<1>, C(0)OR<1>, piridinila, arila, ili
pri čemu je q ceo broj od 0 do 6.
Sastavi koji sadrže jedinjenja sa ovom formulom takođe su obuhvaćeni sadašnjim pronalaskom, kao i smeše i kombinacije jedinjenja sa ovom formulom.
Kao dodatni aspekt ovog pronalaska uključena su jedinjenja sadašnjeg pronalaska koja obuhvataju, ali nisu limitirana na, ona koja imaju sledeću formulu:
ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićen derivat; njihov stereoizomer; ili njihovu so;
pri čemu:
R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvastog alkil sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika; X<1>je odabran od H, m- F, m- C\, m- Br, m-J, m-CN, m-N02, m-S02R<1>, ili m-S02OR<1>; X<2>je odabran od o-R<1>, p-OR<1>, p-SR<1>, p-NR<1>2,<p>-OM, p-SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg, ili Ca; Y<1>je odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika ili Y2 je odabran od u normalnom nizu ili račvastog alkila sa do 10 atoma ugljenika; cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika, ili i R2 je -H; ili su NY2R2 zajedno odabrani od gde je x ceo broj od 3 do 5, pri čemu je q ceo broj od 0 do 6, ili pri čemu jeZ2 odabran od R<1>ili
Sastavi koji sadrže jedinjenja sa ovom formulom su takođe obuhvaćeni sadašnjim pronalaskom, kao i smeše i kombinacije jedinjenja ove formule.
U još jednom aspektu ovog pronalaska, jedinjenja sadašnjeg pronalaska uključuju, ali nisu limitirana na, ona koja imaju sledeću formulu:
ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićen derivat; njihov stereoizomer; ili njihovu so;
pri čemu:
R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvastog alkil sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika;
X<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H,m-F, m-CI, m-Br, m-J, m-CN, m-N02, m-S02R<1>, ili m-S02OR<1>;
X<2>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od o-CH3, p-OR<1>, p-SR<1>, p-NR<1>2, ili p-OM, p-SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg, ili Ca;
Y<1>ie odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ualienika:
pri čemu je n 1 ili 2; ili Y2 je odabran od
Sastavi koji sadrže jedinjenja sa ovom formulom su takođe obuhvaćeni sadašnjim pronalaskom, kao i smeše i kombinacije jedinjenja ove formule.
Ova jedinjenja i sastavi koji su gore predstavljeni nemaju nameru da budu limitirajući, već samo reprezentativni za hemijske strukture i formule koji su obuhvaćene sadašnjim pronalaskom.
Farmaceutski prihvatljive soli
Za predložene N<2>,N<4>,N<6->tris(amino-supstituisani)-1,3,5-triazine, termini "ne-toksični, farmaceutski prihvatljiva so" ili "farmaceutski prihvatljiva so" se odnosi na so ili kompleks 1,3,5-triazin jedinjenja koji zadržava ili pojačava biološku aktivnost jedinjenja koja su opisana u ovom pronalasku. Primeri soli su one koje su izvedene iz interakcije 1,3,5-triazin jedinjenja ili derivata i neorganskih (mineralnih) kiselina ili organske kiseline, kao i jedinjenja izvedena iz deprotonizovanja amin azota triamin derivata.
Primeri neorganskih kiselina ukjlučuju, ali nisu limitirani na, hlorovodoničnu kiselinu, bromvodoničnu kiselinu, jodvodoničnu kiselinu, fluorovodoničnu kiselinu, azotnu kiselinu, azotastu kiselinu, perhlornu kiselinu, hlornu kiselinu, hipohlorastu kiselinu, hlorastu kiselinu, fosfornu kiselinu, sumpornu kiselinu, sumporastu kiselinu, i ugljenu kiselinu. Primeri organsih kiselina uključuju, ali nisu limitirani na, sirćetnu kiselinu, benzen sulfokiselinu, benzojevu kiselinu, buternu kiselinu, kamforsulfokiselinu, limunovu kiselinu, etan sulfokiselinu, fumarnu kiselinu, glutarnu kiselinu, 2-hidroksi sirćetnu kiselinu (derivati gde je alkil grupa c=3-7 a hidroksi grupa je locirana u skladu sa tim), 2-hidroksi sulfokiseline (derivati gde je alkil grupa c=3-7 a hidroksi grupa je locirana u skladu sa tim), mlečnu kiselinu, maleinsku kiselinu, jabučnu kiselinu malonsku, metan sulfokiselinu, naftalen sulfokiselinu, oksalnu kiselinu, palmitinsku kiselinu, propijonsku kiselinu, ftalnu kiselinu, pirogrožđanu kiselinu, salicilnu kiselinu, stearinsku kiselinu, ćilibarnu kiselinu, tartarnu kiselinu, p-toluen sulfokiselinu, i amino kiseline (n.pr., alanin, N-acetilglicin, arganin , aspartinska kiselina, glutaminska kiselina, glicin, lizin, i fenilalanin).
Primeri soli koje su ovde opisane uključuju jedinjenja koja se izvode iz reakcije deprotonizacije amin azota triamin derivata sa jakom bazom, da bi se formirala amido so, jedinjenje ili kompleks. Na primer, ova jedinjenja uključuju ona koja su izvedena iz interakcije ili hemijske reakcije 1,3,5-triazin jedinjenja ili derivata koji se ponašaju kao Bronsted-ova ili Lewis-ova kiselina u neorganskoj ili organskoj bazi da se formira jonske i/ili kompleksne vrste. Primeri neorganskih baza, uključuju ali nisu limitirani na, metalne baze ili oraganometalne baze kao što su alkillitijumi ili metal hidridi, pri čemu je uključen metalni protiv jon, ali nije limitiran na, aluminijum, barijum, kalcijum, litijum, magnezijum, kalijum, natrijum, i cink.
Primeri organskih baza uključuju, ali nisu limitirani na, alki i aril amine kao i amonijak. Uključene su u ovaj opis soli formirane iz kombinacije ili interakcijereakcije neorganskih kiselina (n.pr., Lewis-ove kiseline) i metalnih protiv jona i 1,3,4-triazin jedinjenja ili derivata koji se ponašaju kao Bronsted-ova ili Lewis-ova baza rezultirajući u formiranju jonskih i/ili kompleksnih vrsta. Za sve soli i komplekse kako je to gore opisano, važi da treba da uključe hidratne ili solvatirane oblike jedinjenja.
Dodatno, ovaj pronalazak takođe obuhvata soli onih triazin derivata koji su ne-toksični i farmaceutski prihvatljivi, kao što su kvaternarne amonijum soli, na primer, [N<+>R2R']X~, pri čemu R i R' grupe predstavljaju vodonik ili organsku grupu (kao što je alkil, alkenil, alkinil, aril, i slično) a X grupa je protiv jon (halogen, hidroksid, alkoksid, tioalkoksid, ili konjugat baze organske ili neorganske soli). Za sve soli i komplekse kako je to gore opisano, važi da treba da uključe hidratne ili solvatirane oblike jedinjenja.
II. ANTIPROLIFERATIVNE AKTIVNOSTI
Jedna realizacija sadašnjeg pronalaska obuhvata postupke i sastave koji sadrže jedinjenja sadašnjeg pronalaska za lečenje i prevenciju stanja ili bolesti koja imaju kao aspekt bolesti ili stanja, neželjenu ćelijsku proliferaciju ili su rezultat ćelijske proliferacije. Na primer, mnoge vaskularne bolesti, kao što su kardiovaskularne bolesti, nastavci transplantiranog organa, vaskularna okluzivna stanja koja uključuju, ali nisu limitirana na, neointimnu hiperplaziju, restenozu, vaskulopatiju transplanta, srčanu alograft vaskulopatiju, aterosklerozu, arteriosklerozu, izazvani su ili imaju kolateralnu štetu zbog neželjene ćelijske proliferacije. Hiperplazija glatke mišićne ćelije (SMC) je glavni događaj u razvoju ateroskleroze i takođe je odgovorna za značajan broj promašaja koji prate vaskularne procedure kao što je angioplastija i operacija bajpasa koronarne arterije, posebno zbog restenoze. Proliferacija arterijskog zida SMC u odgovoru na lokalnu povredu je glavna karakteristika mnogih vaskulamih proliferativnih poremećaja. Neointimna hiperplazija se uobičajeno vidi posle različitih oblika vaskularne povrede i glavna je komponenta venskog odgovora na presad prema prinosu i hiruškoj implantaciji u arterijskoj cirkulaciji pod visokim pritiskom. Proliferacija SMC u odgovoru na lokalnu povredu je glavna karakteristika vaskulamih proliferativnih poremećaja kao što su ateroskleroza i restenoza posle angioplastije.
Jedan aspekt sadašnjeg pronalaska se odnosi na postupke i sastave za lečenje i prevenciju proliferacije glatke mišićne ćelije (SMC), pretpostavljeno sadrži sastave i jedinjenja koja imaju celularnu antiproliferativnu aktivnost. Ova jedinjenja i sastavi koji sadrže takva jedinjenja se smatraju ka antiproliferativna jedinjenja i sastavi. Bar jedna aktivnost jednog ili više ovih jedinjenja je da jedinjenje ima aktivnost obavljanja sinteze proteoglikana uključujući indukciju i sintezu proteoglikana i aktivnih fragmenata proteoglikana. Tako, jedan aspekt aktivnost jednog ili više jedinjenja i sastava sadašnjeg pronalaska sadrži molekule koji izazivaju HSPG proizvodnju i koja regulišu proliferaciju SMC (glatka mišićna ćelija).
Jedinjenja sadašnjeg pronalaska koja imaju bar aktivnost dejstva na ćelijsku proliferaciju su prikazana u TABELI 3. Jedinjenja koja su prikazana u ovoj Tabeli imaju aktivnost dejstvovanja na ćelijsku proliferaciju kako je to izmereno putem ogleda koji su ovde uključeni. Uključivanje jedinjenja u kategorije Tabela koje su ovde otkrivene ne treba da se posmatraju kao limitirajuće, u tome da jedinjenja koja su uključena u Tabele imaju bar aktivnost prikazanu za uključivanje u Tabelu a mogu imati više ili druge aktivnosti. Tabele ne treba ni da se posmatraju kao limitirajuće u tome da samo jedinjenja koja su u njima objavljena imaju tu aktivnost, već su prikazana reprezentativna jedinjenja u Tabelama koja imaju bar tu određenu aktivnost zbog koje se uključuje u Tabelu. Jedno ili više jedinjenja koja su ovde otkrivena imaju bar aktivnost da su korisna u lečenju stanja bolesti.
Primeri jedinjenja koja prikazuju bar ovu aktivnost i korisnost su prikazana u sledećoj strukturi:
ili njiegov en, dien, trien, ili in derivat, njegov zasićeni derivat, njegov stereoizomer; ili njegova so;
pri čemu:
R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvasti alkil sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkil sa do 10 atoma ugljenika; X<1>je odabran od m- F, m-CI, m-Br, m-CN, m-N02,m-S02R<1>, ili m-S02OR1, ili su X<1>i X<2>zajedno spojeni benzen, piridin, ili dioksan prsten; X<2>je odabran od p-OR<1>, p-SR<1>, p-NR<1>2,<p->OM, ili p-SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg ili Ca; Y<1>je odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika; u normalnom nizu ili račvastog alkila sa do 10 atoma ugljenika; CH2R<2>, pri čemu je R<2>cikloalkil sa do 10 atoma ugljenika; ili .pr'čemu je n 1 ili 2; AY2 je odabran od halogena ili OR1, ili A jeNR<1>i Y2 je odabran od R<1>,
Dalji primeri jedinjenja koja pokazuju bar ovu aktivnost i korisnost su prikazana u Tabeli 3, pri čemu je aktivnost jedinjenja takođe prikazana. Sala aktivnosti koja se upotrebljava u Tabeli 3 je sledeća (brojevi su uključeni):"+++" predstavlja IC50od manje nego oko 3 \ M;"++" predstavlja IC50između oko 3 i oko 7 jiM; a "<+>" predstavlja IC50od više od oko 7 uM. Dalje, bilo koji atomi vodonika koji se zahtevaju za bilo koji atom da bi postigao svoju uobičajenu valencu u strukturi prikazanoj u Tabeli 3, bilo da je to atom ugljenika ili heteroatom, treba da bude uključen ukoliko nije specifično naznačeno.
Dodatno gornjim jedinjenjima, sledeća jedinjenja i sastavi koji sadrže ta jedinjenja su aktivna u ogledu anti-proliferacije (Perlekan). Ova jedinjenja i sastavi koji sadrže ova jedinjenja su, između ostalih stvari, generalno korisna za lečenje kardiovaskularnih poremećaja povezanih sa proliferativnom aktivnošću. Specifično, ova jedinjenja uključuju N<2->cikloheptil-N<4->(3-fluor-4-metoksifeni)-N<6->metil-N<6->(1-metil-piperidin-4-il)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, i N<2->ciklohepitl-N<4->metil-N<4->(1-metil-piperidin-4-il)-N<6->naftalen-2-il-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin. Upotrebom iste skale aktivnosti koja se upotrebljava u Tabeli 3, i koja je gore razmatrana, prvo jedinjenje, N2-cikloheptil-N4-(3-fluor-4-metoksifeni)-N6-metil-N6-(1 - metil-piperidin-4-il)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, se karakteriše kao jedinjenje koje pokazuje srednju i blagu aktivnost, dok drugo jedinjenje, N<2->ciklohepitl-N<4->metil-N<4->(1-metil-piperidin-4-il)-N<6->naftalen-2-il-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, se karakteriše kao jedinjenje koje pokazuje visoku aktivnost.
Kako se to ovde koristi, kada se pozova na proteoglikan, ceo molekul ili fragmenti su tu uključeni. Različiti fragmenti perlekana mogu imati ista ili različita dejstva na ćelije i dejstva mogu biti ista kao ili različita od dejstava koja ceo perlekan molekul ima na ćelije. N<2->ciklohepitl-N<4->metil-N^CI-metil-piperidin^-iO-N^naftalen^-il-I.S.S-triazin^^^-triamin. Ovi fragmenti i aktivnosti se razmatraju u sadašnjem pronalasku i jedinjenja uključena u sadašnjem pronalasku mogu imati bar jednu aktivnost koja modulira ili utiče na aktivnosti fragmenata ili na aktivnosti celog molekula, lako se razmatranje u ovom tekstu odnosi specifično na perlekane važno je primetiti da su sastavi, postupci, i ogledi koji su ovde opisani jednako primenjljivi u konteksu drugih proteoglikana, uključujući HSPG-ove, i uključujući ali ne limitirajući na, hondroitan sulfate (n.pr., A, B, i C), dermatan sulfate, sindekane i glipikane.
Postupci za identifikovanje aktivnosti i pretraživanja za jedno ili više ovih jedinjenja ili molekula koji izazivaju sintezu proteoglikana kao što je HSPG (heparan sulfat proteoglikan) su proučena u U.S. Patentnoj prijavi br. 10/091,357, koji su ovde inkorporisani u svojoj celini. Ogledi dejstava jedinjenja in vivo su takođe proučeni u inkorporisanim referencama i pozanti su stručnjacima u ovoj oblasti nauke. Uopšteno, postupci obuhvataju dodavanje takvij jedinjenja ogledima i merenjima HSPG sinteze uključujući, ali ne limitirajuć na, proizvodnju sindekana, glipikana i perlekana, na primer, sindekani 1, 2 i 4; i glipikana-1. Drugi ogledi koji se upotrebljavaju da se utvrdi aktivnost jedinjenja sadašnjeg pronalaska uključuju druge postupke za merenje indukcije sinteze perlekana. Na primer, u jednom ogledu, perlekan je izazvan u ćelijama putem određenih induktora, a odgovor je meren. Jedinjenja sadašnjeg pronalaska se potom dodaju repliciranom ogledu i dejstvo na indukciju perlekana se utvrđuje. Upotrebom takvih postupaka, jedinjenja se određuju da mogu bilo da inhibiraju perlekan, pojačaju indukciju perlekana, ili da nemaju nikakvo dejstvo. Ova jedinjenja su efikasna kao terapeutska sredstva koja se mogu upotrebiti kod životinja, ljudi i pacijenata sa aspektima bolesti ćelijske proliferacije, kao što su vaskularno povezane bolesti ili SMC patologije proliferacije.
Sledeći ogled za utvrđivanje jedinjenja koja imaju SMC dejstva se sastoji od dodavanja sastava za koji se pretpostavlja da dejstvuje na SMC proliferaciju kod glatkih mišićnih ćelija u medijum rasta ili medijumu koji je oslobođen od seruma. Promean u proliferaciji može se meriti postupcima koji su poznati stručnjacima iz ove oblasti nauke, kao što je inkorporacija označenih nukleotida u deljenje ćelijskiog DNK, i poredi se proliferacijom ćelija koje nisu tretirane jedinjenjem. Druga merenja uključuju direktno utvrđivanje nivoa HSPG sinteze putem merenja količine ili promene količine HSPG kao što je sa ELISA-om za HSPG-ove, i upoređivanje za količinom HSPG sinteze u netretiranim ćelijama. Druga indirektna ili direktna merenja se razmatraju sadašnjim pronalaskom i poznata su stručnjacima u ovoj oblasti nauke. Na primer, takvi postupci uključuju, ali nisu limitirani na, merenja RNK nivoa, RT-PCR, Norther mrljanje, ogleda zasnovanih naVVesternmrljanju promotera da se identifikuju jedinjenja koja mogu da utiču na jedan ili više proteoglikana i ogledi za biološku aktivnost proteoglikana prikazni putem rekombinantnih proteina, delimično prečišćenih proteina, ili lizata iz ćelija koje ekspresuju proteoglikane u prisustvu ili odsustvu jeidnjenja koja su predmet interesovanja.
Ogled za identifikovanje i utvrđivanje aktivnosti jednog ili više jedinjenja sadašnjeg pronalaska se sastoji od identifikovanja jedinjenja koja međusobno reaguju sa regionima promotera gena, ili međusobno reaguju i dejstvuju na proteine koji međusobno reaguju sa regionom promotera, i koja su važna u transkripcionoj ragulaciji ekspresije proteina. Na primer, ukoliko je perlekan protein, generalno, postupak se sastoji od vektora koji sadrži regulatorne sekvence perlekan gena i indikator region koji se kontroliše putem regulatornih sekvenci, kao što su enzimi, u promoter-reporter konstruktu. Proizvod proteina indikator regiona se ovde odnosi na reporter enzim ili reporter protein. Regulatorni region sekvence perlekana sadrži raspon nukleotida od otprilike -4000 do +2000 pri čemu je inicijaln položaj transkripcije +1, poželjnije, od -25000 do +1200, najpoželjnije, od -1500 do +800 u zavisnosti od položaja inicijacije transkripcije.
Ćelije su izmenjene infekcijom sa vektorom koji sadrži promoter-reporter konstrukt i potom tretirane sa jednim ili više sastava koji sadrže bar jedno jedinjenja sadašnjeg pronalaska. Na primer, ćelije izmenjene infekcijom se tretiraju sa sastavom koji sadrži jedinjenje za koje se protpostavlja da utiče na transkripciju perlekana i nivo aktivnosti regulatornih sekvenci perlekana se upoređuju prema nivou aktivnosti u ćelijama koje nisu tretirane sa jedinjenjem. Nivo aktivnosti regulatornih sekvenci perlekana se određuju merenjem količine reporter proteina ili utvrđivanjem aktivnosti reporter enzima koji se kontroliše regulatornim sekvencama. Povećanje u količini reporter protein ili reporter enzim aktivnosti pokazuje stimulirajuće dejstvo na perlekan, putem pozitivnog dejstvovanja na promoter, pri čemu smanjenje u količini aktivnosti reporter proteina ili reporter enzima pikazuje negativno dejstvo na promoter i tako, na perlekan.
Dodatno, sadašnji pronalazak se sasstoji od postupaka i sastava koji se mogu upotrebiti u postupcima i sastavima genske terapije, kao što su oni postupci genske terapije koji se sastoje od davanja sastava koji
'R1CK- Kako se ovo može primeniti na ovaj pronalazak-jedinjenja koja tretiraju bolest? Ne postoji rasprava ili podrška da izmenjena infekcija gena utiče na HSPG sintezu. Da li da izbacimo ovaj pasus i to ostavi ma prijavi na koju sc pozivamo (1863 1-0141).
sadrži nukleinske kiseline koje dejstvuju na sintezu ili ekspresiju HSPG-ova, posebno perlekana. Takvi postupci i sastavi su proučeni u U.S.
Patentnoj prijavi br. 10/091,357, su ovde inkorporisani putem reference.<1>
Sadašnji pronalazak obuhvata postupke i sastava za posredovanje u sintezi i ekspresiji proteoglikana, i za održavanje SMC u stanju mirovanja. Postupci i sastavi sadašnjeg pronalaska obuhvataju lečenje i prevenciju od vaskulamih bolesti i patologija koje se odnose na ćelijsku proliferaciju, kao što je SMC proliferacija. Takvi postupci i sastavi se sastoje od postupaka za inhibiciju rasta glatke mišićne ćelije (SMC) i proliferaciju, i za indukciju mirovanja u glatkim mišićnim ćelijama. Realizacije sadašnjeg pronalaska se sastoje od postupaka i sastava za izazivanje sinteze proetoglikana, posebno HSPG sinteze i ekspresije uključujući, ali ne limitirajući na, indukciju HSPG-ova kao što su sindekani, glipikani i perlekani, i pretpostavljeno sintezu perlekana i ekspresiju gena. Perlekan je glavni ekstra ćelijski HSPG u matrici krvnog suda. On međusobno reaguje sa ekstracelularnom matricom proteina, faktorima rasta i receptorima. Perlekan je takođe prisutan u osnovi membrana koje nisu krvni sudovi i u drugim ekstracelularnim strukturama matrice.
Aktivnosti jedinjenja koja su uključena u sadašnji pronalazak dejstvuju na ćelije i tkiva da se poveća sinteza proteoglikana tih ćelija i tkiva ili mogu na jednom ili više proteoglikana da moduliraju biološku aktivnost ili da povećaju biološku stabilnost samog proteoglikana, na primer, protein perlekana. Aktivnosti koje su ovde takođe uključene su one koje povećavaju biosintezu jednog ili više proteoglikana putem povećavanja transkripcije proteoglikan gena, povećavanja biološke stabilnosti mRNK proteoglikana ili povećavanja prevođenja mRNK proteoglikana u protein. Dalje aktivnosti uključuju aktivnosti jedinjenja koja mogu da blokiraju ili umanje dejstva sredstava ili proteina koji inhibiraju aktivnost proteoglikana.
Sadašnji pronalazak obuhvata postupke i sastave za lečenje i prevenciju proliveracije glatke mišićne ćelije, uključujući vaskularno okluzivne patologije. Takvi postupci se sastoje od davanja sastava koji sadrži jedinjenja sposobna da inhibiraju SMC proliferaciju, kao što su sastavi koji sadrže jedinjenja koja su ovde otkrivena koja inhibiraju SMC proliferaciju. Davanje takvih jedinjenja koja su efikasna u inhibiciji SMC proliferacije su davanje ljudima i životinjama za koje se sumnja da imaju ili koje imaju, na primer, vaskulopatiju ili koji su prošli angioplastiju ili drugi postupke koji oštećuju endotelijum. Efikasne količine se daju takvim ljudima ili životinjama u dozama koje su sigurne i efikasne, uključujući, ali ne limitirajući na, raspone koji su ovde proučeni. Putevi davanja uključuju, ali nisu limitirani na, one koji su ovde otkriveni. Kako je to ovde otkriveno, sastavi koji sadrže takva jedinjenja mogu biti upotrebjeni zajedno sa drugim terapeutskim sredstvima ili u postupcima koji se sastoje od koraka kao što je promenjene aktivnosti pacijenta, uključujući, ali ne limitirajući na, promene u vežbanju ili dijetu.
Jedinjenja sadašnjeg pronalaska su korisna u lečenju ili profilaksi bar jedne kardiovaskularne bolesti u ćeliji, tkivu, organu, životinji ili pacijentu uključujući, ali ne limitirajući na, vaskularno okluzivne organe uključujući aterosklerozu, vaskulopatiju transplanta, srčanu allograft vaskulopatiju, restenozu, aterosklerozu presada posle srčane transplantacije, sindrom srčanog ošamućenja, infarkt miokarda, kongestivni prestanak rada srca, šlog, ishemični šlog, hemoragija, ateriosklerozu, aterosklerozu, restenozu, dijabetičku ateriosklerotičnu bolest, hipertenziju, arterijsku hipertenziju, renovaskulamu hipertenziju, sinkopa, šok, sifilis kardiovaskularnog sistema, prestanak rada srca, cor pulmonale, primarnu pulmonalnu hipertenziju, srčane aritimije, atrijalni ektopični otkucaji srca, atrialni odliv, atrijalna fibrilacija (odložena ili paroksimalna), post perfuzioni sindrom, kardiopulmonalni bajpas kao odgovor na inflamaciju, haotičnu ili multifokalnu atrijalnu tahikardiju, regularnu uska QRS tahikardija, specifične aritmije, ventikularnu fibrilacija, His isterane aritmije, atrioventikularni blok, bundle račvasti blok, miokardiački ishemični poremećaji, bolest srčane arterije, anginu pektoris, infarkt miokarda, kardiomiopatiju, valvularnu bolest srca, endokarditis, perikardijalnu bolest, srčane tumore, aortičke i periferne aneurizme, aortičku disekciju, zapaljenje aorte, okulzija abdominalne aorte i njenih grana, periferne vaskularne poremećaje, okulzivni arterijske poremećaje, periferne aterosklerotične poremećaje, tromboangitis obliterans, funkcionalne periferne arterijske poremećaje, Raynaud-ov fenomen i bolest, akrocijanozu, etirhomelalgiju, venske bolesti, vensku trombozu, proširene vene, arteriovensku fistulu, limfoderm, lipedem, nestabilnu anginu, reperfuzionu povredu, post sindrom pumpe, ishemija-reperfuzija povredu, i slično. Takvi postupci mogu opciono da se sastoje od davanje efektivne količine sastava ili farmaceustkog sastava koji sadrži bar jedno jedinjenje ćeliji, tkivu, organu, životinji ili pacijentu kome je neophodna takva modulacija, lečenje ili terapija.
Bolesti povezane sa proteoglikanima koje se mogu lečiti sa jedinjenjima sadašnjeg pronalaska uključuju, ali nisu limitirane na, naslednu multiplu eskostozu, mukopolisaharidozu tipovi l-lll i VII, uobičajeno poznati kao Hurler-ov sindrom, Hunter-ov sindrom, Sanfillipo-ov sindorm i Sly-ev sindrom svaka posebno, Alzheimer-ovu bolest, Simpson-Golabi-Gehmel sindrom, poremećaji povezani sa fibroblast faktorom rasta, virus herpes simplex, denga groznica, Parkinson-ova bolest, renalna bolest, muskularna distrofija, Scharts-Jampel sindrom, proteinuričke glomerulopatije, miotonija i skeletna displazija, kiposkolioza, disegmentalna displazija, Silverman-Handmaker tip, hondrodisplazija, periodontitis, reumatoidni i osteoartritis, Gerstmann-Straussler sindrom, Creutzfeldt-Jakob bolest, skrapije, karcinomi, Happle sindrom, makularna distrofija, bolesti kostiju, bolesti rožnjače, bolest posredovana leukocitom, poremećaj sakupljanja kolagen fibrila i koronarna srčana bolest i drugi vaskularni poremećaji.
IV. Aktivnost modulacije glikozidaze
Sadašnji pronalazak takođe se sastoji od postupaka i sastava koji sadrže ovde opisana jedinjenja koja imaju aktivnost povezanu sa modulacijom enzima glikoidaze i taoki, dejstvo na supstrate za takve enzime. Enzimi glikozidaze i njihova aktivnost sa njihovim supstratima, kao što su proteoglikani ili giikovani proteini, su aspekti različitih bolesti kao što su vaskularna stanja, uključujući stanja razmatrana supra, bolesti povezane sa proteoglikanom, supra, bolesti povezane sa vaskularnim komponentama, uključujući ali ne limitirajući na, bolest bubrega, ishemičnu bolest srca, kardiovaskularnu bolest, opštu vaskularnu bolest, proliferativnu retinopatiju, i makroangeopatiju, inflamatorne bolesti i bolesti metastaze kao što su kance, ćelijska proliferativna stanja, i čvrsti i u krvi rođeni tumori ili druga onkološka stanja. Jedinjenja koja su ovde opisana koja imaju aktivnost koja utiče na koncentracije supstrata enzima glikozidaze se upotrebljavaju u postupcima lečenja takvih vaskulamih, inflamatornih, metastatičkih i sistemskih bolesti.
Aspekt sadašnjeg pronalaska se sastoji od postupaka i sastava za modulaciju enzima, kao što su enzim koji degradiraju glikozaminoglikan, koji imaju dejstvo ili na koje se utiče nivoima, količinom i aktivnošću proteoglikana. Na primer, sadašnji pronalazak se sastoji od postupaka i sastava koji sadrže jedinjenja koja moduliraju enzima uključujući ali ne limitirajući na, heparanazu, hondroitanazu, heparan sulfat endoglikozidazu, heparan sulfat eksoglikozidazu, polisaharid liaze, keratinazu, hiauronidazu, glukanazu, amilazu, glikozidaze, ili druge enzime koji degradiraju proteoglikan i oni su korisni za lečenje stanja kao što su dijabetička vaskulopatija, kancer, inflamatorne bolesti, autoimune bolesti i kardiovaskularne bolesti. Na primer, sadašnji pronalazak se sastoji od postupaka i sastava jedinjenja koja inhibiraju, pogoršavaju ili regulišu naniže aktivnost enzima koji degradiraju proteoglikane.
Proteoglikani kao što su HSPG su važne komponente subendotelijalne ekstracelularne matrice koja je sastavljena od kolagenih i ne-kolagenih proteina i proteoglikana koji odvajaju parenhimalne ćelije od ispod postavljenog interstitialnog vezivnog tkiva. Oni imaju karakteristiku propustljivosti i igraju ulogu u održavanju arhitekture tkiva.
Dodatno HSPG-ovima, bazalna pločica se sastoji predominantno od kompleksne matrice adhezionih proteina, fibronektina, laminina, kolagena i vitronektina. VVight et al., 6 Curr. Opin. Lipidol. 326-334
(1995). Heparan sulfat (HS) je važna strukturalna komponenta bazalne pločice. Svaki od adhezionih proteina međusobno reaguje sa HS bočnim lancima HSPG-ova u okviru matrice. Tako, HSPG-ovi funkcionišu kao barijera prema izlivanju metastatičnih i inflamatornih ćelija. Cepanje HS sa endoglikozidaza heparanazom proizvdenom od strane ćelija metastatičnog tumora i inflamatornih ćelija uništava osobine filtriranja lamine. Dodatno, degradacija HS može da pomogne u rasturanju ekstracelularne matrice i prema tome da potpomogne time što dopušta u krvi rođenim ćelijama da pobegnu u krvotok. Vlodavskv et al., 12 Invasion Metastasis 112-127 (1992).
Aktivnost heparanaze je opisana u brojnim tipovima tkiva i ćelija
uključujući jetru, placentu, platelete, fibroblaste, neutrofile, aktivirane T i B-limfocite, monocite, i endotelijalne ćelije (6-16). Nakajima et al., (31) Cancer Lett. 277-283 (1986); Nakajima etal., 36 J. Cell. Biochem. 157-167 (1988); Ricoveri et al., 46 Cancer Res. 3855-3861 (1986); Gallagheretal., 250 Biochem. J. 719-726 (1988); Dempsey et al., 10 Glycobiology 467 (2000); Goshen et al., 2 Mol. Hum. Reprod. 679
(1996); Parish etal., 76 Immunol Cell Biol. 104-113 (1998); Gilat et al., 181 J. Exp. Med. 1929-1934 (1995); Graham, etal., 39 Biochem. Mol. Biol. Int. 56371 (1996); Pillahsetti etal., 270 J. Biol. Chem. 29760-29765 (1995). Važan postupak u invaziji tkiva od strane u krvi rođenih ćelija tumora i belih ćelija uključuje njihov prolaz kroz sloja vaskulamih endotelijalnih ćelija i potonja degradacija ispod postavljene bazalne lamine ili donjih membrana i ekstracelularne matrice sa baterijom sekretovanih proteaza i glikozidaza. Nakajinia et al., 220 Science 611-613 (1983); Vlodavsky et al., 12 Invasion Metastasis 112-127 (1992).
Za aktivnost hiperanaze je pokazano da je u korelaciji sa metastatičnim potencijalom životinjskih ili ljudskih ćelijskih linija tumora. Nakajima et al., (31) Cancer Lett. 277-283 (1986); Nakajima et al., 212 Prog Clin biol Res. 113-122 (1986); Freeman et al., 325 Biochem. J. 229-237 (1997); Vlodavsky et al., 5 Nat. Med. 793-802 (1999); Hulett et al., 5 Nat Med. 803-809 (1999). Takođe je poznato da reguliše aktivnost faktora rasta. Mnogi faktori rasta ostaju vezani za heparan sulfat u uskladištenom obliku i oni se odvajaju heparanazom tokom angiogeneze, poboljšavajući odnos preživljavanja ćelija kancera.
Nivoi seruma heparanaze kod pacova su mnogo više nego kada pojačavanje posle ubrizgavanja u pacove visoko metastatičnih sisarskih ćelija adenokarcinoma. Dodatno, aktivnost heparanaze u pacova koji nose MTLn3 tumore je u dobroj korelaciji sa veličinom metastaze. Šta više, serum/urin aktivnost heparanaze kod pacijenata sa kancerom pokazuje da je 2-4 puta povećana posebno gde su prisutne metastaze tkiva. Zbog toga što cepanje HS izgleda daje osnovno za prolaz metastatičnih ćelija tumora i leukocita kroz donje membrane, proučavanja heparanaze inhibitora obezbeđuje potencijal za razvoj nove i krajnje selektivne klase anti-metastatičkih i anti-inflamatornih lekova.
Sadašnji pronalazak se sastoji od postupaka i sastava koji sadrže jedinjenja koja moduliraju aktivnost heparanaze ili aktivnost drugih glikozidaza, uključujući, ali ne limitirajući na enzime sa glikozaminoglikan aktivnošću kao što su hondroitinaza, heparan sulfat endoglikozidaza, heparan sulfat eksoglikozidaza, polisaharid liaze, keratianaza, hialuranidaza, glukanaza, i amilaza. Jedinjenja sadašnjeg pronalaska koja imaju bar aktivnost moduliranja aktivnosti glikozidaza enzima su pirkazana u TABELI 6. Jedinjenja prikazana u ovoj Tabeli imaju aktivnost moduliranja aktivnosti glikozidaza enzima kako je to izmereno putem ogleda koji su ovde proučeni. Uključenje jedinjenja u kategorije Tabela koje su ovde otkrivene ne treba da se posmatra kao limitirajuće, u tome što jedinjenja uključena u takve Tabele imaju bar aktivnost prikazanu za uključenje u Tabelu i mogu imati više ili i druge aktivnosti. Tabele ne treba da budu posmatrane kao limitirajuće u tome što su ovo samo jedinjenja koja imaju aktivnost i ovde su data, i koja su reprezentativna jedinjenja prikazana u Tabelama koja imaju bar određenu aktivnost za uključenje u Tabelu. Jedno ili više jedinjenja koja su ovde otkrivena imaju bar aktivnost koja je korisna u lečenju stanja bolesti.
Primeri jedinjenja koja pokazuju bar ovu aktivnost i korisnost su prikazana sledećom formulom:
ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićen derivat; njihov stereoizomer; ili njihovu so;
pri čemu:
R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvastog alkil sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika;
X<1>je odabran od H, m-F, m- C\, m-Br, m-J, m-CN, m-N02, m-S02R1, ili m-S02OR1;
X<2>je odabran od o-R1, p-OR<1>, p-SR<1>, p-NR<1>2, p-OM, p-SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg, ili Ca;
Y<1>je odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika ili
Y<2>je odabran od u normalnom nizu ili račvastog alkila sa do 10 atoma ugljenika; cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika, ili
i R<2>je -H; ili su NY<2>R<2>zajedno odabrani od
gde je x ceo broj od 3 do 5, ori čemu je q ceo broj od 0 do 6, ili pri čemu jeZ2odabran od R<1>ili
Dalji primeri jedinjenja koja pokazuju bar jednu aktivnost i korisnost su prikazana u Tabeli 6, gde je aktivnost jedinjenja takođe prikazana. Skala aktivnosti koja se upotrebljava u Tabeli 6 je kako sledi (brojevi se mogu uključiti):"+++" predstavlja između oko 70 i oko 100% inhibicije; "++" predstavlja između oko 30 i oko 40% inhibicije; i"+" označava između 0 i oko 30% inhibicije, sva pri 5 jiM koncentracije jedinjenja. Takođe treba primetiti da bilo koji atomi vodonika koji se zahtevaju za bilo koji atom da bi postigao svoju uobičajenu valencu u strukturi prikazanoj u Tabeli 6, bilo da atom ugljenika ili heteroatom, treba da budu uključeni ukoliko to nije specifično naznačeno.
Jedinjenja ili sastavi koji sadrže takva jedinjenja koja su efikasna u moduliranju aktivnosti glikozidaza enzima su korisna u lečenju i/ili
prevenciji kancera i uključuju, ali nisu limitirana na, maligni i ne-maligni rast ćelije, leukemiju, akutnu leukemiju, akutonu limfoblastnu leukemiju (ALL), B-ćelije, T-ćelije ili FAB ALL, akutnu mijeloidnu leukemiju (AML),
hromičnu mijelocitnu leukemiju (CML), hroničnu limfocitnu leukomiju (CLL), leukemiju vlasaste ćelije, mijelodiplastični sindrom (MDS), limfomu, Hodgkin-ovu bolest, maligna limfoma, ne-hodgkin-ova limfoma, Burkitt-ova limfoma, multipla mijeloma, Karposi-jev sarkom, kolorektalni karcinom, pankreatični karcinom, nazofaringel karcinom, maligna histiocitoza, paraneoplasitični sindrom/hiperkalcemija malignosti, čvrsti tumori, adenokarcinomi, sarkomi, maligni melanom, hemangiom, metastatične bolesti, kancer poveza sa resorpcijom kosti, kancer povezan sa bolom u kostima, i slično.
U sledećem aspektu sadašnjeg pronalaska, jedinjenja koja su ovde otkrivena su korisna u moduliranju aktivnosti heparanaze ili aktivnosti drugih dlikozidaza kao sredstva za lečenje i prevenciju od autoimunih bolesti. Opšta autoimuna bolest rezultira kada (1) imuni sistem greškom identifikuje molekul na ćelijskoj površini normalnog tkiva kao strani molekul (2) sinteza i sekrecija hemokina, citokina i limfokina nije zatvorena pre iskorenjenja bolesti ili (3) imuni sistem preterano reaguje na očiglednu infekciju i uništava velike količine okružujućeg normalnog tkiva.
Da bi se dejstvovalo efikasno u imunom odgovoru, imune efektor ćelije moraju se vezati za luminalnu/apikalnu površinu zidova krvnih sudova. Ovo se postiže preko interakcije adhezije molekula na imunim efektor ćelijama sa njihovim lokalno regulisanim naviše kognitivnim receptorima na entotelijalne ćelije koje redaju vaskulaturu blizu položaja infekcije. Posle vezivanja apikalne površine i pre ulaska u zapaljeno tkivo, imune efektor ćelije moraju da prođu donju membranu (BM) i ekstracelularnu matricu (ECM) koja okružuje bazalni deo krvnih sudova i da sudovima njihov oblik i snagu. BM i ECM se sastoje od strukturalnih proteina embedded u vlaknastom meshvvork koji se sastoji uglavnom od kompleksa ugljenih hidrata koji sadrže strukture (glikozaminoglikane), od kojih je glavni konstituent heparin sulfat proteoglikan (HSPG). Da bi se prošla ova barijera imune efektor ćelije moraju da je oslabe ili unište, što se postiže preko lokalne sekrecije proteaza i haranaze(a).
Tako, ova inhibicija heparanaze ili kativnost drugih glikozidaza upotrebom jedinjenja sadašnjeg pronalaska pronalazi korisnost u lečenju artritisa i drugih autoimunih bolesti. Specifičnije, jedinjenja sadašnjeg pronalaska su korisna u lečenju ili profilaksi bar jedno autoimuno povezane bolesti u ćeliji, tkivu, organu, životinji, ili pacijentu uključujući, ali ne limitirajući na, reumatoidni artritis, jivenilni reumatoidni artritis, sistemski početni juvenilni reumatoidni artritis, psoriatički artritis, ankilozni spondilitis, gastrični čir, seronegativne artropatije, osteoartritis, inflamatornu bolest creva, ulcerativni kolitis, sistemska lupus eritematoza, antifosfolipidni sindrom, iridociklitis/uveitis/optički neuritis, idiopatska pulmonalna fibroza, sistemski vaskulitis/wegener-ova granulomatoza, sarkoidioza, orhitis/reverzni postupci vazektomije, alergijske/atopične bolesti, astma, alergijski rinitis, ekcem, alergijski kontaktni dermatitis, alergijski konjuktivitis, pneumonitis hipersenzitivnosti, transplanti, odbacivanje transplantiranog organa, presad-spram-domaćina bolest, sindrom sistemskog inflamatornog odgovora, sindrom sepse, gram pozitivna sepsa, gram negativna sepsa, sepsa negativne kulture, fungalna sepsa, neutropenična groznica, urosepsa, meningododemija, trauma/hemorage, opekotine, izlaganje jonizujućoj radijaciji, akutni pankreatitis, sindrom respiratornog poremećaja kod odraslih, reumatoidni artritis, alkoholom izazvani hepatitis, hronične inflamatorne patologije, Crohn-ova patologija, šekel ćelijska anemija, dijabetis, nefrozis, atopične bolesti, reakcije hipersenzitivnosti, alergijski rinitis, senska groznica, perenialni rinitis, konjuktivitis, endometrioza, astma, urtikaria, sistemska anafalaksa, dermatitis, ubistvena anemija, hemolitična bolest, trombocitopenija, odbacijvanje presada bilo kog organa ili tkiva, odbacivanje transplanta bubrega, odbacivanje transplanta srca, odbacivanje transplanta jetre, odbacivanje transplanta pankreasa, odbacivanje transplanta pluća, odbacivanje transplanta koštane srži (BMT), odbacivanje alografta kože, odbacivanje rskavice transplanta, odbacivanje presada kosti, odbacivanje transplanta malog creva, odbacivanje implanta fetalnog timusa, odbacivanje paratiroidnog transplanta, odbacivanje ksenografta bilo kog organa ili tkiva, odbacivanje alografta, reakcije anti-receptor hipersenzitivnosti, Graves bolest, Raynoud-ova bolest, tip B ana insulin otporan dijabetis, astma, mvasthenia gravis, posredovana citotoksičnost, tip III reakcije hipersenzitivnosti, POEMS sindrom (polineuropatija, organomegalija, endokrinopatija, monoklonalna gamopatija i sindrom promena na koži), polineuropatija, organomegalija, endokrinopatija, monoklonalna gamopatija, sindrom promena na koži, anti-fosfolipidni sindrom, pemphigus, skleroderma, pomešana konektivna bolest tkiva, idiopatska Addison-ova bolest, autoimuna hemolitička anemija, autoimuni hepatitis, idiopatska pulmonalna fibroza, skleroderma, dijabetis mellitus, hronični aktivni hepatitis, vitilig, vaskulitis, post-MI sindrom kardiotomije, tip IV hipersenzitivnost, kontaktni dermatitis, pneumonitis hipersenzitivnosti, odbacivanje alografta, granulome usled intracelularnih organizama, osetljivost na lek, metabolični/idiopatski, VVilson-ova bolest, hamahromatoza, alfa-1 -antitripsin nedostatak, dijabetička retinopatija, hashimoto-ov tiroiditis, ostoporoza, hiptalamična-hipofizna-adrenalna procena ose, primarna žučna ciroza, tiroiditis, encefalomijelitis, cachexia, cistična fibroza, neonatalna hronična bolest pluća, hronična opstruktivna pulmonalna bolest (COPD), porodična hematofagocitna limfohistiocitoza, dermatoliška stanja, psorijaza, alopecija, nefrotični sindom, nefritis, glomerularni nefritis, akutni renalni pad, hemodijaliza, uremija, toksičnost, preeclampsia, ankilozni spondilitis, Behcet-ova bolest, bulozni plik, kardiomiopatija, trbušna tropska groznica-dermatitis, hronični imuni disfunkcionalni sindrom malaksalosti (CFIDS), hronična inflamatorna demijelinaciona polineuropatija, Churg-Strauss sindrom, ožiljan plik, CREST sindrom, bolest hladnog aglutinina, diskoidni lupus, esencijalno pomešana crioglobulinemija, fibromijalgija-fibromiositis, Graves bolest, Guillian-Barre, Hashimot-ov tiroiditis, idiopatska trombocitopenija purpura (ITP), IgA nefropatija, dijabetis zavisan od insulina, juvenilni artritis, lišaj planus, meniere-ova bolest, skleroza multipleks, pemphigus vulgaris, poliarteritis nodosa, Cogan-ov sindrom, polihondritis, poliglandularni sindromi, polymyalgia rheumatica, polimiozitis i dermatomiozitis, primarna agamaglobulinemija, Ravnaud-ov fenomen, Reiter-ov sindrom, reumatska groznica, Sjogren-ov sindrom, sindrom ukočenosti, Takayasu arteritis, temporalni arteritis/gigantski ćelijski arteritis, Wegener-ova granulomatoza, okt3 terapija, anti-cd3 terapija, terapijja citokina, hemoterapija, radijaciona terapija (n.pr., uključujući ali ne limitirajući toasteniju, anemiju, cachexia-u, i slično), hronična salicilatna intoksikacija, i slično.
Jedinjenja koja imaju aktivnost inhibicije heparanaze, koja je efikasna na primer, u lečenju kancera i autoimune bolesti, mogu biti određena upotrebom ogleda kao što su oni objavljeni u U.S. Patentnoj prijavi br. 09/952,648, koja je ovde inkorporisana u celosti. Takvi ogledi, koji se upotrebljavaju za merenje ćelijskih i enzimskih aktivnosti, i kvalitativno i kvantitativno, i u postupcima za dijagnosticiranje metastaza, metastatičkog potencijala i inflamatornih stanja, se obavljaju sa i bez dodavanja bar jednog od jedinjenja sadašnjeg pronalaska da bi se utvrdila aktivnost jedinjenja. Postojeći ogledi hiperanaze su proučeni kod Goshen et al., 2 Mol. Hum. Reprod. 679-84 (1996); Nakajima et al., 31 Cancer Lett. 277-83 (1986); i Vlodaskv et al., 12 Invasion Metastatis 112-27 (1992); Freeman and Parish, 325 Biochem. J. 229-37 (1997); Kahn and Newman, 196 Anal. Biochem. 373-76 (1991). Ogledi hiperanaze čvrste faze su takođe razvijeni gde hemijski i biosintetički radiooznačeni heparin i HS lanci zakačeni za čvrsti nosač, sa oslobađanjem radioaktivne oznake sa čvrstog nosača koja je mera enzimske aktivnosti. Ogledi u kojima se upotrebljavaju takvi postupci su proučenu u U.S. Patentu br. 4,859,581, koji je u potpunosti izričito ovde inkorporisan putem reference.
Opšte govoreći, pretpostavljeni ogled obuhvata kačenje jednog od partnera za vezivanje na supstrat za enzim koji se ima izmeriti, formirajući suptrat-partner za vezivanje. Inkubacija sa uzorkom koji sadrži enzim koji se ima izmeriti dopušta aktivnost enzima aktinosti enzima da se izmeri u reakcionoj smeši. Deo ili cela reakciona smeša, u zavisnosti od količine koja je potrebna, se onda meša sa komplementarnim partnerom za vezivanje, tako da su partneri za vezivanje vezani zajedno. Ovo je prva reakcija vezivanja. Posle inkubacije da bi se dopustilo vezivanje, obavljaju se pranja. Dodaje se komplementarni partner za vezivanje, komplementaran prvom partneru za vezivanje zakačenom na supstrat. Komplementarni partner za vezivanje može ili ne mora biti isti kao prvi komplementarni partner za vezivanje. Ovo je druga reakcija vezivanja. Komplementarni partner za vezivanje u drugoj reakciji vezivanja je označen na način koji se može detektovati. Na primer, komplementarni partner za vezivanje je označen sa enzimom koji izaziva promenu boje koja se može detektovati kada postoje odgovarajući reakcioni uslovi. Razlika između aktivnosti enzima u prisustvu jedinjenja i odsustvu jedinjenja se upotrebljava da se odredi aktivnost jedinjenja.
Primer ogleda heparanaze se sastoji od sledećih koraka. Sastav koji sadrži biotin-HS (heparan sulfat) se meša sa biološkim uzorkom kao što je uzorak tumora, telesni fluid, ili drugi fluid za koji se sumnja da ima aktivnost heparanaze, da se formira reakciona smeša. Ovaj uzorak se može prethodno tretirati da se uklone kontaminirajuće ili reaktivne supstance kao što je endogeni biotin. Kontrolni deo za ovu reakcionu smešu ne sadrži jedinjenje sadašnjeg pronalaska, dok deo za testiranje sadrži jedno ili više jedinjenja koja su ovde otkrivena. Posle inkubacije, alikvotni deo ili deo delova reakcione smeše se uklanja i postavlja na biotin-vezujuću ploču. Biotin-vezujuća ploča sadrži bilo koja sredstva za vezivanje biotina, pretpostavljeno za čvrstu površinu. Videti WO 02/23197, koji je u celini izričito ovde inkorporisan putem reference. Posle pranja sa puferima, dodaje se streptavidin-enzim konjugat na biotin-vezujuću ploču. Dodaju se reagenski za enzim da formiraju bojeni proizvod koji se može detektovati. Na primer, smanjenje u formiranju boje, od poznatog standarda, naznačava da postoji aktivnost heparanaze u uzorku. Razlika između aktivnosti enzima u prisustvu jedinjenja i odsustvu jedinjenja se upotrebljava da se utvrdi aktivnost jedinjenja.
Upotrebom gornjih ogleda ili onih proučenih u Primerima, može se utvrditi količina aktivnosti enzima u uzorku i aktivnosti jedinjenja sadašnjeg pronalaska. Na primer, sastav koji sadrži jedinjenje sadašnjeg pronalaska se dodaje poznatoj količini heparanaze bilo pre ili tokom inkubacije heparanaze i njenog supstrat-vezujućeg partnera. Ukoliko jedinjenje zamenjuje aktivnost heparanaze, postupci ogleda sadašnjeg pronalaska će pokazati promenu u količini oznake koja se može detektovati. Videti WO 02/23197. koja je u potpunosti izričito ovde inkorporisana putem reference.
Aktivnosti jedinjenja koje je ukljjučeno u sadašnji pronalazak moduliraju aktivnost glikozidaza bilo direktno ili indirektno. Jedinjenja mogu modulirati sintezu glikozidaza po ćeliji ili tkivu ili dejstvovati direktno po jednoj ili više glikozidaza da se modulira biološka aktivnost ili biološka stabilnost samog enzima, na primer, heparanaze. Aktivnosti koje su takođe ovde uključene su one koje povećavaju biosintezu jedne ili više glikozidaze povećanjem transkripcije gena glikozidaze, povećanjem biološke stabilnosti mRNK glikozidaze ili povećanjem prevođenja mRNK glikozhidaze u protein. Dalje aktivnosti uključuju aktivnosti jedinjenja koja mogu blokirati ili umanjiti dejstva sredstava ili proteina koji inhibiraju aktivnost glikozidaze. Dodatno, uključene su aktivnosti koje utiču na supstrate glikozidaza, kao što su oni koji su razmatrani supra u vezi sa proteoglikanima, ili koje utiču na parametre vezivanja enzima sa njegovim supstratom, kofaktorima ili stimulatornim ili inhibirajućim faktorima.
Sadašnji pronalazak sa sastoji od postupaka i sastava za lečenje i prevenciju od bolesti ili stanja koja pokazuju ili su rezultat aktivnosti glikozidaze. Takvi postupci se sastoje od davanja sastava koji sadrže jedinjenja koja su ovde otkrivena koji inhibiraju aktivnost heparanaze. Davanje takvih jedinjenja koja su efikasna u moduliranju aktivnosti heparanaze se daju ljudima ili životinjama za koje se sumnja da imaju ili koje imaju, na primer, inflamatorna stanja, autoimune bolesti ili dijabetičku vaskulopatiju. Efektivne količine se daju takvim ljudima i životinjama u dozama koje su sigurne i esfikasne, uključujući, ali ne limitirajući na, raspone koji su ovde proučeni. Putevi davanja uključuju, ali nisu limitirani na, one koji su ovde otkriveni. Kako je to ovde otkriveno, sastavi koji sadrže takva jedinjenja mogu se upotrebiti zajedno sa drugim terapeutskim sredstvima ili u postupcima koji sa sastoje od koraka kao što su izmenjene aktivnosti pacijenta.
V. Modulacija inflamacije
Realizacija sadašnjeg pronalaska se sastoji od postupaka i sastava koji sadrže jedinjenja sadašnjeg pronalaska za lečenje i prevenciju stanja ili bolesti koja imaju kao aspekt bolesti ili stanja, inflamaciju. Aspekt sadašnjeg pronalaska je usmeren na postupke i sastave koji sadrže jedinjenja koja su efikasna u inhibiciji inflamacije, posebno inflamacije povezane sa akumulacijom ili prisustvom glikovanih proteina ili AGE. Aktivnost moduliranja inflamacije uključuje, ali nije limitiran na, inhibiranje inflamacije i/ili njene povezane ćelijske aktivacije putem glikovanih proteina ili AGE, blokiranjem glikacije proteina, blokiranjem interakcija AGE sa receptorima, blokiranjem sa AGE izazvanim signaliziranjem ili signaliziranjem povezanih inflamatornih odgovora, indukcije citokina, sinteze ili oslobađanja, AGE formiranja ili AGE ukrštenog povezivanja.
Sadašnji pronalazak takođe obezbeđuje sastave za i postupke lečenja bioloških stanja uključujući, ali ne limitirajući na, vaskularne komplikacije tipa I i tipa II dijabetisom izazvanih vaskulopatija, druge vaskulopatije, mikroangiopatije, renalnu insuficijenciju, Alzheimer-ov sindrom, i inflamacijom izazvane bolesti kao što je ateroskleroza. Druge sa inflamacijom povezane bolesti uključuju, ali nisu limitirane na, zajedničke inflamatorne bolesti kao što su reumatoidni artritis, osteoartritis, autoimune bolesti kao što su one koje su proučene supra, zidom od ćelija streptokoka izazvani artritis, adjuvantom izazvani artritis, bursitis; inflamatorne bolesti tiroide kao što su akutni, subakutni i hronični tiroiditis, karllična inflamatorna bolest, hepatitis; inflamtorna bolest creva kao što Crohn-ova bolest i kolitis; neuroinflamatorne bolesti kao što je skleroza multipleks, apces, meningitis, encefalitis, i vaskulitis; Inflamatorne bolesti srca kao što je miokarditis, hronična opstruktivna pulmonalna bolest, ateroskleroza, perikarditis; inflamatorne bolesti kože kao što su akutni inflamatorni dermatozis (urticaria (hives), spongiotički dermatitis, ervthemamultiforme (em minor), Sevens-Jonhson sindrom
(sjs, em major), toksični epidermalni nekrolizis (deset) i hronične inflamatorne dermatoze (psorijaza, lišaj planus, diskoidni lupus ervthematosus, acne vulgaris); inflamatorne bolesti oka kao što je uveitis, alergijski konjuktivitis, inflamacija rožnjače, intraokularna inflamacija, iritis; laringitis, i astma.
Jedinjenja sadašnjeg pronalaska imaju sposobnost da inhibiraju inflamaciju i/ili povezanu ćelijsku aktivaciju putem glikovanih proteina ili AGE. Farmakološka inhibicija sa AGE izazvanom ćelijskom aktivacijom obezbeđuje osnovu za terapeutsku intervenciju kod mnogih bolesti, treba primetiti kod dijabetičkih komplikacija i Alzheimer-ove bolesti. Terapeutski pristupi za inhibiciju sa AGE-izavanom inflamacije uključuju, ali nisu limitirani na, blokiranje glikacije proteina, blokiranje AGE interakcija sa receptorima i blokiranje sa AGE izazvanog signaliziranja ili sa signaliziranjem povezanih inflamatornih odgovora.
Bar jedna aktivnost nekih od jedinjenja sadašnjeg pronalaska je da blokira AGE dejstva putem inhibicije sa AGE izazvanog signaliziranja. Redosled ovih signalizirajućih događaja koja vodi do inflamacije nije jasan, ali inhibicija ovih signalizirajućih događaja vodi do smanjenih ili rezultata gde nema inflamacije. Jedinjenja koja blokiraju sa AGE izazvanu regulaciju naviše inflamatornih molekula se utvrđuje ogledom pretraživanja. Drugi aspekti sadašnjeg pronalaska sastoje se od postupaka i sastava koji sadrže jedinjenja koja blokiraju glikovanim proteinom izazvanu inflamaciju. Neka jedinjenja mogu imati uticaj na AGE formiranje ili AGE ukršteno povezivanja.
Bar jedna aktivnost nekih od jedinjenja sadašnjeg pronalaska je da blokira AGE dejstva putem inhibicionih reakcija sa receptorima AGE i takve aktivnosti su takođe razmatrane postupcima sadašnjeg pronalaska za lečenje odnosnih patologija. Na primer, RAGE, poznati receptor za AGE, je terapeutska meta. Blokiranje RAGE inhibira sa AGE izazvanu inflamaciju. Pre upotrebe jedinjenja sadašnjeg pronalaska, višestruke funkcije RAGE i mogući dugotrajni sporedni efekti akumulisanog AGE u plazmi, su sprečavali ovaj postupak za lečenje da bude implementiran. Pa ipak, upotrebom postupaka i sastava sadašnjeg pronalaska, specifičnija inhibitorna jedinjenja mogu biti upotrebljena za lečenja i prevazilaženje trenutnih problema sa tretmanima tih receptora kao meta.
Jedinjenja sadašnjeg pronalaska koja imaju bar aktivnost moduliranja inflamacione aktivnosti su prikazana u TABELI 5. Jedinjenja prikazana u ovoj Tabeli imaju aktivnost moduliranja inflamacione aktivnosti kako je to izmereno ogledima koji su ovde proučeni. Uključivanje jedinjenja u kategorije Tabela koje su ovde objavljene ne treba da se posmatra kao limitirajuće, na taj način što jedinjenja uključena u takve Tabele imaju bar aktivnost prikazanu za uključenje u Tabelu a mogu imati više ili druge aktivnosti. Takođe ne treba posmatrati Tabele kao limitirajuće u tome da su to jedino jedinjenja koja imaju tu aktivnost, prikazana su samo reprezentativna jedinjenja u Tabelama koja imaju bar određenu aktivnostu za uključenje u Tabelu. Jedno ili više jedinjenja koja su ovde otkrivena imaju bar aktivnost koja ima sposobnost u lečenju stanja bolesti.
Primeri jedinjenja koja pokazuju bar ovu aktivnost i sposobnost su prikazani u sledećoj formuli:
ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićen derivat; njihov stereoizomer; ili njihovu so;
pri čemu:
R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvastog alkil sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika; arila; ili (CH2)XCN, pri čemu je x ceo broj od 0 do 6;
Eje CH ili N;
n je ceo broj od 0 do 3;
X<1>je odabran od -H, m-F, m-CI, m-Br, m-J, m-CN, m-N02, m-S02R<1>, ili m-S02OR<1>, m-NC(0)R<1>, ili o-F, ili suX<1>i X<2>zajedno spojeni benzen, piridin, ili dioksan prsten;
X2 je odabran od -H, o-CI, o-Br, o-CF3, o-R<1>, p-OR<1>, p-SR1, p-NR<1>2, p-F, p-CI p-Br, p-CF3, p-CN, p-C(0)OR<1>, p-NC(0)R<1>, p-(4-morfolinil), ili p-(4-metil-1 -piperizinil);
AY<1>je halogen, ili je A NR<1>ili O a Y<1>je odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika, cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika supstituisan sa R<1>, u normalnom nizu ili račvastog alkila sa do 10 atoma ugljenika, CH2R<1>, (CHR<1>)yOR<1>, pri čemu je y ceo broj od 1 do 6,
ili su AY<1>zajedno pri čemu je x ceo broj od 3 do 5; i DY<2>je halogen, ili jeDNR<1>a Y<2>je odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika, cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika supstituisan sa R<1>, u normalnom nizu ili račvastog alikla sa do 10 atoma ugljenika, CH2R<1>, pri čemu je x ceo broj od 3 do5, , CH2CF3, (CHR<1>)ZZ<1>, pri čemu je z ceo broj od 1 do 6, i Z1 je odabran od NR<1>2,
, pri
čemu je x ceo broj od 3 do 5,
ili je NY2R1 zajedno odabran od pri čemu jeZ2 odabran od R<1>, C(0)R<1>, C(0)OR<1>, piridinila, arila, ili
pri čemu je ? ceo broj od 0 do 6.
Dalji primeri jedinjenaj koja pokazuju bar ovu aktivnost i sposobnost su prikazani u Tabeli 5, pri čemu je takođe prikazana aktivnost jedinjenja. Skala aktivnosti u Tabeli 5 je kako dalje sledi (brojevi su uključeni): "++++" predstavlja između 0 i oko 25% IL6 proizvodnje upoređeno sa ćelijama koje ne pirmeju jedinjenje I ili procenat kontrole IL6 proizvodnje);"+++" predstavlja između oko 25 i oko 50% kontrolne IL6 proizvodnje;"++" predastavlja između oko 50 i oko 75% kontrolne IL6 proizvodnje; i "+" predstavlja između oko 75 i 100% kontrolne IL6 proizvodnje. Primedba "n.d." naznačava da aktivnost jedinjenja nije utvrđena u datom ogledu. Dalje treba primetiti da su bilo koji atomi vodonika koji se zahtevaju za bilo koji atom da postigne svoju uobičajenu valencu u strukturi prezenotvani u Tabeli 5, bilo da atom ugljenika ili heteroatom, treba da bude uključen ukoliko to nije specifično naznačeno.
Dodatno gornjim jedinjenjima, jedinjenja pokazana u Tabeli 7, i sastavi koji sadrže ta jedinjenja, takođe prikazuju aktivnost oduliranja inflamacione aktivnosti kako se to.meri ogledima koji su ovde proučeni. Skala aktivnosti upotrebljena u Tabeli 7 je sledeća (brojevi su uključeni): "+++" predstavlja između oko 85 i 100 % inhibicije IL6 proizvodnje u prisustvu AGE ili TNF, upoređeno sa ćelijama koja nisu primila bilo kakvo jedinjenje;"++" predstavlja između 65 i oko 85% inhibicije IL6 proizvodnje u prisustvu AGE ili TNF; i"+" predstavlja između oko 50 i oko 65% inhibicije IL6 proizvodnje u prisustvu AGE ili TNF. Kao i ranije, uključivanje jedinjenja u katerogije Tablela koje su ovde pokazane ne treba da se vidi kao limitirajuće, već tamo jedinjenja koja su uključena u Tabele imaju bar aktivnost prikazanu za uključivanje u Tebele a mogu imati više ili i druge aktivnosti. Takođe ne treba posmatrati Tabele kao limitirajuće u tome da su to jedino jedinjenja koja imaju tu aktivnost, prikazana su samo reprezentativna jedinjenja u Tabelama koja imaju bar određenu aktivnostu za uključenje u Tabelu. Jedno ili više jedinjenja koja su ovde otkrivena imaju bar aktivnost koja ima sposobnost u lečenju stanja bolesti.
Za pojačanu formaciju i akumulaciju glikovanih proteina i AGE se smatra da igra glavnu ulogu u patogenezi dijabetičkih komplikacija, i aterosklerozi, što vodi do razvoja dijabetičkih komplikacija uključujući nefropatiju, retinopatiju i neuropatiju. Postoji obimna in vivo evidencija koja sugeriše da komplikacije povezane sa dijabetisom mogu da budu smanjene putem 1) prevencije glikacije proteina, 2) prekidanjem ukrštenog povezivanja glikovanih proteina i 3) putem blokiranja interakcije glikovanih proteina sa receptorima. Uprkos važnosti AGE u patogenezi dijabetičke mikroanigiopatija, trenutno ne postoje dostupni poznati medikamenti koji blokiraju AGE formaciju.
Endotelijum je ciljani organ za oštećenje kod dijabetisa. Videti Laight et al., 15 Diabetes Metab. Res. Rev. 274-82 (1999); Stehouvver et al., 34 Cardiovasc. 55-68 (1997). Regulacija naviše molkula koji su uključeni u endotelijalnu inflamaciju, kao što su IL-6 i monocit hemoatraktivni protein-1 (MCP-1) vode do endotelijalne nefunkcionalnosti i vaskulopatije. Videti Stehouvver et al., 34 Cardiovasc. 55-68 (1997); Libby, 247 J. Intern. Med. 349-58 (2000); Van Lente, 293 Clinica. Chimica. Acta. 31-52 (2000). IL-6 je pro-inflamatorni citokin za koji je poznato da igra glavnu ulogu u patogenezi dijabetisa i ateroskleroze. Videti Horii et al., 39 Kidney Int. Suppl. 71-5 (1993); Huber etal., 19 Arterioscler Thromb. Vasc. Biol. 2364-67 (1999); Shikano et al., 85 Nephron 81-5 (2000); Pickup et al., 8(67) Life Sci. 291-300 (2000). IL-6 takođe promoviše rast renalnih ćelija koje šalju poruku i tako doprinosi nefropatiji. Videti Kado et al., 36 Acta.Diabetol. 67-72 (1999). Nivo seruma IL-6 kod subjekta sa dijabetisom je značajno viši nego kod normalnih zdravih kontrola (3,48 +/- 3,29 pg/mL spram 0,784 +/- 0,90 pg/mL, srednja vrednost +/- SD). Dodatno, urinarni nivo IL-6 je dobar indikator dijabetičke nefropatije. Serum IL-6 je koristan u proceni ateroskleroze i nefropatije.
Za MCP-1, sledeći pro-inflamatorni citokin je pronađeno da krajnje ekspresuje humane aterosklerotične organe i zahteva se da ima centralno mesto u regrutovanju monocita na arterijski zid i razvoj organa. Videti Libby, 247 J. Intern. Med. 349-58 (2000). Skorašnji rezultati pokazuju da je MCP-1 takođe ključ patogenog molekula kod dijabetičke nefropatije. Videti Eitner et al., 51 Kidney Int. 69-78 (1997); Banba et al. 58 Kidney Int. 684-90 (2000). Giikovani albumin stimuliše endotelijalnu proizvodnju IL-6 i MCP-1. Efekti glikovanog albumina na IL-6 proizvodnju je uporedivo sa onim od TNFa, poznatog induktora IL-6. Za ove citokine je takođe poznato da su faktori kod vaskulamih bolesti.
Aktivnost jedinjenja sadašnjeg pronalaska u inhibiciji sa glikovanim proteinom- i sa AGE izazvanom inflamacijom može se utvrditi upotrebom ogleda koji su ovde otkriveni i u U.S. patentnoj prijavi br.
10/026,335, koja je ovde u celini inkorporisana. Takvi ogledi se sastoje od merenja specifične aktivnosti bioloških komponenti koje su uključene u poznati ćelijski odgovor. Ogledi obezbeđuju merljivi odgovor u kojem se utvrđuje aktivnost jedinjenja. Jedan ogled se sastoji od merenja efekata jedinjenja na inflamatorni odgovor od strane ćelija na prisustvo stimulirajućeg sredstva. Sledeći ogled se sastoji od endotelijalnih ćelija koje se stimulišu dodavanje glikovanog proteina, stimulirajućeg sredstva. Endotelijalne ćelije odgovaraju proizvodnjom specifičnih citokina. Količina citokina koji se proizvedu se utvrđuje protokolima merenja poznatim stručnjacima iz ove oblasti nauke. Jedinjenja sadašnjeg pronalaska se onda dodaju ogledu i meri se proizvodnja citokina. Iz upoređenja ogleda bez jedinjenja sa ogledom sa jedinjenjem, može se utvrditi biološki efekat jedinjenja. Jedinjenje može imati inhibitorno dejstvo, stimulišuće dejstvo, ili može da nema nikakvo dejstvo.
Količina i tip citokina koji je proizveden može se utvrditi upotrebom imunoloških postupaka, kao što je ELISA ogled. Postupci sadašnjeg pronalaska nisu limitirani na tip ogleda koji se upotrebljava da se izmeri količina proizvedenog citokina, i bilo koji postupci poznati stručnjacima iz ove oblasti nauke kao i oni koji se kasnije razviju mogu se upotrebiti da se izmeri količina citokina koja je proizvedena u odgovoru na stimulirajuće sredstvo i na jedinjenje koje ima nepoznatu aktivnost.
Aspekt sadašnjeg pronalaska se sastoji od postupaka i sastava za lečenje bolesti, prethodnih stanja ili patologija povezanih sa inflamatornim citokinima i drugim molekulima koji su povezani sa inflamacijom uključujući, ali ne limtirajući na IL-6, VCAM-1, sa AGE-izazvan MCP-1, (monocit hemoatraktivni protein 1), heme oksigenaza, insulinu sličan faktor rasta, selektini, IP-10, MIG i l-TAC, NF-kB, IL-1p (interleukin ip), IL-11 (interleukin 11), m-CSF (stimulišući faktor makrofaga kolonije), fibrinogen, TNF-a(nekrozni faktor tumora a), adhezioni molekuli, selektini, VCAM-1 (Molekul-1 vaskularne ćelijske adhezije) CRP (C-reaktivni protein), i PAI-1 (plazminogen aktivator inhibitor-1). Primeri takvih bolesti uključuju patogenezu ateroskleroze i razvoj dijabetičke vaskulopatije u tipu II dijabetisa. Na primer, uticanje na aktivnost ili nivo TNFa je ključni medijator oštećenja tkiva koje prate akutne ili hronične inflamatorne reakcije. Sadašnji pronalazak razmatra obezbeđivanje sastava i postupaka koji moduliraju efekte citokina i inflamatornih molekula kao što su TNFa, IL-6, VCAM-1, IP-10, MIG, I-TAC i sa AGE izazvani MCP-1, i lečenje povezanih bolesti, akutnih ili hroničnih stanja, prethodnih stanja i patologija.
Ogledi za utvrđivanje aktivnosti jedinjenja sposobnih da moduliraju inflamaciju uključuje ona razmatranja u U.S. patentnoj prijavi br. 10/026,335 i 09/969,013, koje su obe izričito inkorporisane putem referenci. Uopšteno, kada se utvrdi osnovni odgovor na stimulirajuće sredstvo za proizvodnju citokina putem endotelijalnih ćelija, koja sadrži kontrolne nivoe za ogled pretraživanja, postupci sadrže dodavanje jedinjenja sadašnjeg pronalaska. Dejstvo jedinjenja na osnovni odgovor je utvrđeno putem upoređivanja količine citokina proizvedenih u prisustvu stimulirajućeg sredstva i količine proizvedenog citkina u prisustvu stimulirajućeg sredstva i jedinjenja sadašnjeg pronalaska. U pretpostavljenom postupku, jedinjenja koja imaju inhibirajuća dejstva na inflamaciju ćelija u prisustvu glikovanog albumina se onda koriste kao terapeutska sredstva. Jedno ili više jedinjenja može biti dodano ogledu pretraživanja. Mogu se dodati kombinacije ili smeše jedinjenja. Različite količine i formulacije jedinjenja se dodaju da se utvrde dejstva na ogled pretraživanja. Ogled pretraživanja se takođe može upotrebiti da utvrdi stimulirajuća jedinjenja ili jedinjenja koja nemaju dejstva na ogled.
Sadašnji pronalazak se sastoji od postupaka i sastava za lečenje i prevenciju od bolesti, stanja i patologija povezanih sa inflamacijom. Takvi postupci se sastoji od davanja sastava koji sadrže jedinjenja sposobna za moduliranje aktivnosti molkula povezanih sa inflamacijom kao što su AGE ili citokini ili drugi ćelijski faktori, uključujući brzine oslobađanja ili aktivnost, i uključuje sastave koji sadrže jedinjenja koja su ovde otkrivena sa aktivnošću moduliranja inflamacije. Davanje takvih jedinjenja koja su efikasna u moduliranju inflamacije se daju ljućima ili životinjama za koje se pretpostavlja da imaju ili koji imaju inflamatorne bolesti, na primer, dijabetički izazvane vaskulopatije, autoimune bolesti, renalnu insuficijenciju, Alzheimer-ov sindrom, i inflamacijom izazvane bolesti kao što je ateroskleroza. Efikasne količine se daju takivm ljudima i životinjama u dozama koje su sigurne i efikasne, uključujući, ali ne limitirajući na, raspone koji su ovde proučeni. Putevi davanja uključuju, ali nisu limitirani na, one koji su ovde otkriveni. Kako je to ovde otkriveno, sastavi koji sadrže takva jedinjenja mogu biti upotrebljeni zajedno sa drugim terapeutskim sredstvima ili u postupcima koji se sastoje od koraka kao što su alternativne aktivnosti pacijenta, uključujući, ali ne limitirajući na, promene u vežbanju i dijeti.
VI. Citotoksična aktivnost
Realizacija sadašnjeg pronalaska se sastoji od postupaka i sastava koji sadrže jedinjenja koja imaju bar aktivnost izazivanja ćelijske smrti ili prestanka ćelijske aktivnosti, koja se ovde pominje kao citotoksična aktivnost. Ova aktivnost može biti upotrebljena u postupcimain vitroiliin vivocitotoksičnosti. Na primer, jedinjenja koja imaju tu aktivnost mogu biti selektivno isporučena u oblast u okviru živog organizma da selektivno ubiju ćelije u toj oblasti. Takvi postupci se upotrebljavaju u tretiranju hiperproliferativnih ćelija, kao što su kanceri, ili drugog neželjenog ćelijskog rasta ili ćelijske aktivnosti. Jedan aspekt pronalaska obezbeđuje sastave koji sadrže jedinjenja koja neselektivno ubijaju ćelije. Sledeći aspekt pronalaska obezbeđuje jedinjenja koja selektivno ubijaju ćelije, na primer, ćelije koje imaju određeni ćelijski marker ili drugu identifikujuću karakteristiku kao što je brzina metabolizma ili unos određenog jedinjenja, kao što je natrijum, kalcijum ili timidin.
Sadašnji pronalazak takođe obezbeđuje sastave za i postupke lečenja bioloških stanja uključujući, ali ne limitirajući na, stanja za koje je citotoksičnost lečenje. Na primer, sastavi i postupci za obezbeđivanje jedinjenja koja imaju bar aktovnost citotoksičnosti su korisna u lečenju profilakse bar jedne hiperproliferativne bolesti u ćeliji, tkivu, organu, životinji, ili pacijentu koja uključuje, ali nije limitirana na, maligni i ne-maligni ćelijski rast, leukemija, akutna leukemija, akutna limfoblastična leukemija (ALL), B-gelija, T-ćelija ili FAB ALL, akutna mijeloidna leukemija (AML), hromična mijelocitna leukemija (CML), hronična limfocitna leukemija (CLL), vlasasta ćelijska leukemija, mijelodiplastični sindrom (MDS), limfom, Hodgkin-ova bolest, maligni limfom, ne-hodgin-ov limfom, Burkitt-ov limfom, multipleks mijelom, Kaposi-jev sarkom, kolorektalni karcinom, pankreatični karcinom, nazofaringealni karcinom, maligna histiocitoza, paraneoplastični sindrom/hiperkalcemija malignosti, čvrsti tumori, adenokarcinomi, maligni melanom, hemangiom, matastatična bolest, kancer povezan sa resorbcijom kosti, kancer povezan sa bolom u kosti, i slično.
Jedinjenja sadašnjeg pronalaska koja imaju bar aktivnost citotoksičnosti su prikazana u TABELI 4A i B, Jedinjenja prikazana u ovoj Tabeli imaju aktivnost citotoksičnosti kako se to meri ogledima koji su ovde proučeni. Uključivanje jedinjenja u kategorije Tabela koje su ovde otkrivene ne treba da se posmatra kao limitirajuće, već tamo jedinjenja koja su uključena u Tabele imaju bar aktivnost prikazanu za uključivanje u Tebele a mogu imati više ili i druge aktivnosti. Takođe ne treba posmatrati Tabele kao limitirajuće u tome da su to jedino jedinjenja koja imaju tu aktivnost, prikazana su samo reprezentativna jedinjenja u Tabelama koja imaju bar određenu aktivnostu za uključenje u Tabelu. Jedno ili više jedinjenja koja su ovde otkrivena imaju bar aktivnost koja ima sposobnost u lečenju stanja bolesti.
Primeri jedinjenja koja pokazuju bar ovu aktivnost i sposobnost su prikazani u sledećoj formuli:
ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićeni derivat; njihov stereoizomer; ili njihovu so;
pri čemu:
R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvasti alkil sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkil sa do 10 atoma ugljenika; ili aril; Eje CH ili N; n je ceo broj od 0 do 3; X<1>je odabran od -H,m- F, m- C\,m-Br, m-J, m-CN, m-N02, m-S02R<1>, ili m-S02OR<1>, ili su X<1>i X<2>zajedno spojeni benzen ili piridin prsten; X2 je odabran od -H, o-CI, o-Br, p-OR<1>, p-SR<1>, p-NR<1>2, p-Cl p-Br, p-CF3, p-C(0)OR<1>, p-OM, ili p-SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg ili Ca; A je odabran od NR<1>ili O, pri čemu je Y<1>odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika, s normalnim nizom ili račvastog alkila sa do 10 atoma ugljenika, ili oda je A NR1, i pri čemu jeY1odabran od R<1>ili CH2R<1>kada je A O; ili je AY<1>odabran od halogena, DY<2>je halogen, ili je D NR<1>a Y<2>je odabran od
ili (CHR<1>)XNR<1>2, pri čemu je x ceo broj od 1 do 6.
Dodatni primer jedinjenja koja pokazuju bar ovu aktivnost i sposobnost su prikazana u sledećoj formuli:
ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićen derivat; njihov stereoizomer; ili njihovu so;
pri čemu:
R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvastog alkil sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika; X<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H,m-F, m-CI, m-Br, m-J, m-CN, m-N02, m-S02R<1>, ili m-S02OR<1>; X2 je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od o-CH3, p-OR<1>, p-SR<1>, p-NR<1>2, ili p-OM, p-SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg, ili Ca; Y<1>je odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika; pri čemu je n 1 ili 2; ili
Y2 je odabran od
Dalji primeri jedinjenja koja pokazuju bar ovu aktivnost i sposobnost su prikazani u Tabelama 4A i 4B. Nomenklatura jedinjenja u Tabelama 4A i 4B, kao i u drugim tabelama koje su ovde prikazane, se generiše upotrebom Autonom-a, gde dato ime može biti Beilstein ili CAS verzija hemijskog imena. Treba primetiti da bilo koji atomi vodonika koji se zahtevaju za bilo koji atom da postigne svoju uobičajenu valencu u strukturi prikazanoj u Tabelama 4A i 4B, bilo da atom ugljenika ili heteroatom, treba da budu uključeni ukoliko to nije specifično naznačeno.
Ogledi za utvrđivanje aktivnosti jedinjenja sposobnih za citotoksičnu aktivnost uklučuju ona ovde proučena i druga koja su dobro poznata u nauci. Uopšteno, da se utvrdi da li postoji citotoksična aktivnost povezana sa jedinjenjem , ćelije određenog tipa, u fazi rasta ili fazi mirovanja, se tretiraju sa jedinjenjem od interesa. Različiti parametri ćelijske smrti ili prestanka se upotreljavaju da se izmere dejstva jedinjenja. Na primer, može se izmeriti količina sinteze nukleinske kiseline ili proteina ili se može upotrebiti vizuelno posmatranje stanja ćelija, kao što je oslobađanje od supstrata,da se izmeri stanje ćelija.
Sadašnji pronalazak se sastoji od postupaka i sastava za lečenje i prevenciju od bolesti ili stanja koja pokazuju ili rezultiraju iz ćelijske proliferacije ili neželjenog ćelijskog rasta ili ćelijske aktivnosti. Takvi postupci se sastoje od davanja sastava koji sadrže jedinjenja sposobna da moduliraju ćelijsku aktivnost ili da izazovu ćelijsku smrt ili prestanak rasta kao što su sastavi koji sadrže jedinjenja koja imaju citotoksičnu aktivnost. Davanje takvih jedinjenja koja su efikasna u citotoksičnoj aktivnosti su daju ljudima i životinjama za koje se pretpostavlja da imaju ili koji imaju, na primer, kancer, preterano aktivna tkiva kao što su tiroid ili hipotalamus, ili ćelijska stanja gde se oslobađaju faktori u neželjenim količinama. Efikasne količine se daju takvim ljudima ili životinjama u dozama koje su sigurne i efiksane, uključujući, ali ne limitirajući na, raspone koji su ovde proučeni. Putevi davanja uključuju, ali nisu limitirani na, one koji su ovde otkriveni. Kako je to ovde otkriveno, sastavi koji sadrže takva jedinjenja mogu biti upotrebljeni zajedno sa drugim terapeutskim sredstvima ili u postupcima koji se sastoje od karaka kao što su izmenjene aktivnosti pacijenta.
Jedinjenje/ Sastav- Obložena medicinska sredstva
Jedinjenja sadašnjeg pronalaska moug biti upotrebljena sama ili u kombinaciji sa drugim sredstvima zajdno sa sredstvima za isporuku da se efikasno spreče i leče bolesti koje su ovde opisane, iako je posebna primena pronađena kod vaskularne bolesti, a posebno, vaskularne bolesti koja je izazvana povredom i/ili transplantacijom, lako se ovakav primer fokusira na vaskularnu bolest, snabdevanje jedinjenja sadašnjeg pronalaska sa medicinskim sredstvima za lečenje bolesti i stanja sposobna da budu lečena sa jedinjenjima se razmatraju sadašnjim pronalaskom.
Različita medicinska sredstva za lečenje koja se koriste u lečenju vaskularne bolesti mogu konačno izazvati dalje komplikacije. Na primer, balon angioplastika jhe postupak koji se koristi da se poveća protok krvi kroz arteriju i predominantni je tretman za stenozu koronarnog suda. Pa ipak, postupak tipično izaziva odrešeni stepen oštećenja zida suda, pri tome stvarajući nove probleme ili pogoršavaju originalni problem u nekoj kasnijoj tački u vremenu, lako drugi postupci bolesti mogu da izazovu sličnu povredu, primerne realizacije sadašnjeg pronalaska će biti opisane u pogledu lečenja restenoze i odnosnih komplikacija koje prate pokožnu transluminalnu koronarnu angioplastiku i drug eslične atrerijske/venske postupke, uključujući pridruživanje arterija, vena i drugih kanali koji nose fluid u druge organe i položaje tela, kao što su jetra, pluća, bešika, bubreg, mozak, prostata, vrat i noge.
Lokalna isporuka jedinjenja sadašnjeg pronalaska i, u nekim realizacijama, zajedno sa drugim terapeutskim sredstvima, od stenta sprečava odbijanje i remodeliranje suda kroz podizanje dejstva stenta. Aktivnost obezbeđenog jedinjenja, sa ili bez drugih terapeutskih sredstava, pomaže da se utvrdi za koji primenu, da se leči koja bolest, obloženo medicinsko sredstvo se daje. Na primer, jedinjenjem obloženi stentovi mogu da spreče višestruke komponente neointimne hiperplazije ili restenoze kao i umanjene inflamacije i tromboze. Lokalno davanje jedinjenja sadašnjeg pronalaska i drugih terapeutskih sredstava sa stentovanim koronarnim arterijama moće takođe da ima dodatnu terapeutsku korist. Na primer, više koncentracije u tkivu jedinjenja sadašnjeg pronalaska i drugih terapeutskih sredstava mogu biti postignute iskorišćavanjem lokalne isporuke pre nego sistemskim davanjem. Dodatno, smanjena sistemska toksičnost može biti postignuta iskorišćavanjem lokalne isporuke pre nego sistemskim davanjem a da se pritom održavaju više koncentracije u tkivu. Kod iskorišćavanje lokalne isporuke iz stenta pre nego sistemskim davanjem, jedan postupak može rezultirati sa boljim pristankom pacijenta na terapiju. Dodatna korist od kombinacije terapeutskog sredstva i/ili jedinjenja terapije može biti smanjena doza svakog od terapeutskih sredstava, pri tome limitirajući toksičnost, a pritom i dalje postizanjem smanjenje u restenozi, inflamaciji ili trombozi. Lokalna stent-zasnovana terapija je prema tome sredstvo za poboljšanje terapeutskog odnosa (efikasnost/toksičnost) anti-restenoza, anti-inflamatornih, i anti-trombotičnih terapeutskih sredstava.
lako će primerne realizacije pronalaska biti opisane u pogledu lečenja restenoze i drugih odnosnih komplikacija, važno je primetiti da lokalna isporuka jedinjenja sadašnjeg pronalaska, samog ili kao dela kombinacije terapeutskog sredstva, može biti iskorištena za lečenje širokog raspona različitih stanja iskorišćavanjem bilo kog broja medicinskih sredstava, ili da pojača funkciju i/ili životni vek sredstva. Na primer, intraokularna sočiva, postavljena da vrate vid posle operacije katarakte je često ugrožena formacijom sekundarne katarakte. Potonje je često rezultat ćelijskog preteranog rasta na površini sočiva, i može potencijalno biti minimizovano kombinovanjem jednog ili više jedinjenja sadašnjeg pronalaska koje ima aktivnost koja utiče u prevenciji neželjenog ćelijskog rasta sa sredstvom. Druga medicinska sredstva koja često propadaju zbog unutrašnjeg rasta tkiva ili akumulacije proteinskog materijala u, na i oko sredstva, kao što su odlivi za hidrocefalus, presadi dijalize, uređaji za kačenje kesa kod kolostomije, cevi za drenažu uha, vodiči za pejsmejkere i defibrilatore koji se mogu implantirati takođe mogu imati koristi od kombinacija jedinjenja
sadašnjeg pronalaska, moguće drugih farmaceutskih sredstava i naprava. Drugi hirurški uređaji, šavovi, drikeri, uređaji za spajanje, vertebralni diskovi, čiode za kosti, šav lengeri, hemostatičke barijere, štipaljke, šrafcigeri, ploče, klipovi, vaskularni implanti, adhezivi i zatvarači za tkivo, podizači tkiva, različiti tipovi zavoja, zamene za kosti, intraluminalni uređaji, i vaskularni nosači mogu takođe da obezbede povećanu korist za pacijenta upotrebom pristupa kombinacija jedinjenje-uređaj. U osnovi, bilo koji tip medicinskog sredstva može biti obložen na neki način sa bar jednim jedinjenjem sadašnjeg pronalaska, samim ili kao delom kombinacije terapeutskog sredstva, za pojačani tretman upotrebe sredstva ili terapeutskog agensa bez kombinacije sa jedinjenjem.
Kako je to otkriveno supra, jedinjenja sadašnjeg pronalaska mogu se davati u kombinacionim terapijama sa trugim terapeutskim sredstvima, i nisu ograničeni samo na druga terapeutskao sredstva koja su ovde otkrivena. Tako, sadašnji pronalazak takođe razmatra da, dodatno različitim medicinskim sredstvima, obloge na ovim sredstvima mogu biti upotrebljene da isporuče jedinjenja sadašnjeg pronalaska u kombinaciji sa drugim terapeutskom sredstvima. Ova ilustrativna lista terapeutskih sredstava može se davati preko farmacetuskih sredstava zajedno sa medicinskim sredstvimai takva terapeutska sredstva uključuju, ali nisu ograničena na, antiproliferativna/antimitotična sredstva uključujući prirodne proizvode kao što su vinca alkaloidi (n.pr. vinblastin, vinkristin, i vinorelbin), paklitaksel, epidipodofilotoksini (n.pr., etoposid, teniposid), antibiotici (daktionomicin (aktinomicin D) daunorubicin, doksorubicin i idarubicin), antraciklini, mitoksantron, bleomicini, plikamicin (mitramicin) i mitomicin, enzime (L-asparaginaza koja sistemski metaboliše L-asparagin i deprives ćelije koje nemaju kapacitet da sintetišu svoj sopstveni asparagin); atniplatelet sredstva kao što su G(GP) llb/llla inhibitori i antagonisti bitronektin receptora; antiproliferativna/antimitotična sredstva za alkilovanje kao što su azot senfovi (mekloretamin, ciklofosfamid i analozi, melfalan, klorambucill, etilenimini i metilmelamini (heksametilmelamin i tiotepa), alkil sulfonati-bisulfan, nirtosouri (karmustin (BCNU) i analozi, streptozocin), trazeni-dakarbazinin (DTIC); antiproliferativni/antimitotični antimetaboliti kao što su analozi folne kiseline (metotreksat), analozi pirimidina (fluorouracil, floksuridin, i citarabin), analozi purina i odnosni inhibitori (merkaptopurin, tioguanin, pentostatin i 2-hlorodeoksiadenozin (kladribin)); kompleksi koordinacije platine (cisplatin, karboplatin), prokarbazin, hidroksiurea, mitotan, aminoglutetimid; hormoni (n.pr., estrogen); antikoagulanti (heparin, sintetičke heparin soli i drugi inhibitori trombina); fibrinolitična sredstva (kao što su aktivator plazminogena tkiva, streptokinaza i urokinaza), aspirin, dipiridamol, tiklopidin, klopidogrel, abciksimab; antimigratorni; antisekrecioni (vreveldin); anti-inflamatorna sredstva kao što su adrenokortikalni steroidi (kortizol, kortizon, fludrokortizon, prednizon, prednizolon, 6a-metilprednizolon, triamkinolon, betametazon, i deksametazon), ne-steroidna sredstva (derivati salicilne kiseline, odnosno, aspirin; para-aminofenol derivati, odnosno, acetominofen; indol i inden sirćetne kiseline (tolmetin, diklofenak, i ketorolak), arilpropijonske kiseline (ibuprofen i derivati), antranilne kiseline (mefanamska kiselina, i meklofenamska kiselina), enolne kiseline (piroksikam, tenoksikam, fenilbutazon, i oksipentatrazon), nabumeton, jedinjenja zlata (aruanofin, aurotioglukoza, zlatni natrijum-tiomalat); imunosupresivi. (Ciklosporin, takrolimus (FK-506), sirolimus (rapamicin), azatioprin, mikofenolat mofetil); angiogenična sredstva; vaskularni endotelijalni faktor rasta (VEGF), fibroblast faktor rasta (FGF); blokatori angiotenzin receptora; donatori azotoksida; anti-sens oligonukleotidi i njihove kombinacije; inhibitori ćelijskog ciklusa, inhibitori mTOR, i inhibitori signalne transdukcione kinaze faktora rasta.
lako bilo koji broj stentova može biti iskorišten prema sadašnjem pronalasku, radi uprošćavanja, ograničeni broj stentova će biti opisan u primernim realizacijama sadašnjeg pronalaska. Stručnjak će prepoznati da bilo koji broj stentova može biti iskorišten u vezi sa sadašnjim pronalaskom. Dodatno, kako je to gore navedeno, druga medicinska sredstva mogu biti iskorištena. Na primer, iako su stentovi opisani, rukavci van sudova se takođe razmatraju, kao i druga medicinska sredstva koja mogu da obezbede supstrat za davanje bar jednog od jedinjenja sadašnjeg pronalaska.
Stent se uobičajeno upotrebljava kao cevasta struktura koja se ostavlja unutar lumena kanala da ublaži opstrukciju. Tipično, stentovi se umeću u lumen u ne-razvijenom obliku i onda se razvijaju autonomno, ili uz pomoć drugog sredstvain situ.Uobičajeni postupak ekspanzije se pojavljuje kroz upotrebu kateterom postavljenih, balona angioplastike koji se naduvava u okviju stenosed suda ili prolaznog puta u telo da bi se podelio ili prekinuo obstrukcije povezane sa komponentama zida suda i da bi se dobio uvećani lumen.
Stent može da podseća na cilindar koji se može širiti i može se sastojati od šupljikaste strukture za postavljanje u krvni sud, kanal ili lumen da bi držao sud, kanal ili lumen otvoren, još preciznije za zaštitu segmenta arterije od restenoze posle angioplastike. Stent može da se širi circumferentiallv i održava se u proširenoj konfiguraciji koja se circimferentiallv ili radijalno rigidna. Stent može biti aksialno fleksibilan i kada se previje, na primer, stent izbegava bilo koje eksterno isturene delove komponente.
Stent može biti izrađen korišćenjem brojnih postupaka. Na primer, stent može biti izrađen iz šupljine ili formirane cevi od nerđajućeg čelika koji se može izraditi mašinski upotrebom lasera. Stent se umeće u telo i postavlja na željeni položaj u neproširenoj formi. U jednoj realizaciji, proširenje se može izvesti u krvnom sudu putem balon katetera, pri čemu je konačni prečnik stenta u funkciji prečnika balon katetera koji se upotrebljava. Treba da se prihvati da stent prema sadašnjem pronalasku može biti realizovan u oblik-memorija materijalu uključujući, na primer, odgovarajuća legura nikla ili titanijuma ili nerđajući čelik.
Formirane strukture od nerđajućeg čelika mogu biti samo-proširive putem postavljanja konfiguracije nerđajućeg čelika na prethodno određeni način, na primer, putem uvtranja u upletenu konfiguraciju. U ovoj realizaciji, pošto je stent formiran može biti kompresovan tako da zauzme prostor dovoljno mali da dozvoli umetanje u krvni sud ili drugo tkivo sredstvima za umetanje, pri čemu sredstva umetanja uključuju pogodni kateter, ili fleksibilnu šipku. Po pojavljivanju iz katetera, stent može biti sa konfiguracijom da se proširi u željenu konfiguraciju pri čemu je proširenje automatsko ili se započinje promenom u pritisku, temperaturi ili električnoj stimulaciji.
Dalje, stent može biti modifikovan da se sastoji od jednog ili više rezervoara. Svaki od rezervoara može biti otvoren ili zatvoren već kako se to želi. Ovi rezervoari mogu biti specifično dizajnirani da drže jedinjenje ili jedinjenje/terapeutsko sredstvo kombinaciju koja se ima isporučiti. Bez obzira na dizajn stenta, pretpostavljeno je da se doza jedinjenja ili jedinjenje/terapeutsko sredstvo kombinacije primeni sa dovoljno specifičnosti i dovoljnom koncentracijom da se obezbedi efikasna doza u prostoru na koji se utiče. U ovom pogledu, veličina rezervoara u zavojima je pretpostavljeno veličine koja adekvatno odgovara dozi jedinjenja ili jedinjenje/terapeutsko sredstvo kombinacije na željenoj lokaciji i u željenoj količini.
U alternativnoj realizaciji, cela unutrašnja i spoljašnja površina stenta može biti obložena sa jedinjenjem ili jedinjenje/terapeutsko sredstvo kombinacijom u terapeutskim količinama doze. Tehnike oblaganja mogu da variraju u zavisnosti od materijala koji se sastoji od stenta ili drugog intraluminalnog medicinskog sredstva.
Jedno ili više jedinjenja sadašnjeg pronalaska i, u nekim instancama, druga terapeutsko sredstva kao kombinacija, mogu biti inkorporisani na ili pričvršćeni na stent na brojne načine. U jednoj realizaciji, jedinjenje se direktno inkorporiše u polimernu matricu i isprska na spoljašnju površinu stenta. Jedinjenje elutuje iz polimerne matrice tokom vremena i ulazi u okružujuće tkivo. Jedinjenje pretpostavljeno ostaje na stentu bar tri dana pa do otprilike šest meseci, a poželjnije između sedam i trideset dana.
Bilo koji broj ne-erodivnih polimera može se iskoristiti zajedno sa jedinjenjem, i takvi poliermični sastavi su dobro poznati u nauci. U jednoj realizaciji, polimerna matrica se sastoji od dva sloja. Osnovni sloj se sastoji od rastvora poli(etilen-kovinilacetata) i polibutilmetakrilata. Jedinjenje se inkorporiše na ovaj osnovni sloj. Spoljašnji sloj se sastoji samo od polibutilmetakrilata i ponaša se kao difuziona barijera da se spreči jedinjenje da prebrzo elutuje. Tankoća spoljašnjeg sloja ili površinske obloge određuje brzinu kojom se jedinjenje elutuje iz matrice. U osnovi, jedinjenje elutuje iz matrice difuzijom kroz matricu polimera.
Polimeri su propustljivi, pa prema tome dopuštaju čvrstim telima, tečnostima i gasovima da se odatle oslobode. Ukupna tankoća polimerne matrice je u rasponu od oko jednog mikrona do oko dvadeset mikrona ili više. Važno je primetiti da tretmani primarnih slojeva i metalne površine mogu biti iskorišteni pre nego što se polimerna matrica pričvrsti na medicinsko sredstvo. Na primer, kiselo čišćenje, alkalno (baza) čišćenje, salinizacija i depozicija parilena mogu biti upotrebljeni kao deo ukupnog postupka koji je gore opisan.
Poli(etilen-ko-vinilacetat), polibutilmetakrilat i rastvor jedinjenja može biti inkorporisan u ili na stent na brojne načine. Na primer, rastvor može biti naprskan na stent ili stent može biti uronjen u rastvor. Drugi postupci uključuju kružno oblaganje i plazma polimerizaciju. U sledećoj realizaciji, rastvor moće biti električno napunjen na jedan polaritet a stent električno napunjen na suprotni polaritet. Na ovaj način, rastvor i stent će privlačiti jedan drugog. U upotrebi ovog tipa postupka naprskavanja, gubitak se može smanjiti a može se postići preciznija kontrola tankoće obloge.
Stentovi obloženi lekom se proizvode od strane brojnih kompanija uključujući Johnson & Johnson, Inc. (New Brunsvvick, NJ), Guidant Corp. (Santa Clara, CA), Medtronic, Inc. (Minneapolis, MN), Cook Group Incorporated (Bloomington, IN), Abbott Labs., Inc. (Abbot Park, IL), i Boston Scientific Corp. (Natick, MA). Videti n.pr., U.S. Patent br. 6,273,913; U.S. Patentna prijava br. 20020051730; WO 02/26271; i WO 02/26139, svaka izričito i u celosti inkorporisana ovde putem reference.
Profili ekspresije i postupci mikroniza koji se koriste
Drugi aspekti sadašnjeg pronalaska se sastoje od sastava i postupaka za uređaje mikroniza. Takvi uređaji mikroniza i postupci se sastoje od različitih mikronizova koji se mogu koristiti, na primer, da se proučava i prati genska ekspresija u odgovoru na tretman sa jedinjenjima sadašnjeg pronalaska. Mikronizovi mogu da sadrže sekvence nukleinske kiseline, ugljene hidrate, ili proteine koji su određujući za specifične ćelije, tkiva, vrste, stanja bolesti, prognoze, progresiju bolesti, ili bilo koju drugu kombinaciju molekula koji mogu biti upotrebljeni da se utvrdi dejstvo jednog ili više jedinjenja sadašnjeg pronalaska.
Na primer, mikronizovi sadašnjeg pronalaska mogu biti izvedeni od, ili reprezentativni za, na primer, specifični organizam ili ćelijski tip, uključujući humane mikronizove, vaskularne mikronizove, mikronizove inflamacije, mikronizove kancera, mikronizove apoptoze, onkogene i tumor supresivne mikronizove, mikronizove ćelija-čelija interakcije, citokine i receptor citokina mikronizove, mikronizove krvi, ili njihovu kombinaciju. U daljim realizacijama, mikronizovi mogu predstavljati bolesti koji uključuju kardiovaskularne bolesti, valkulopatijska stanja, inflamatorne bolesti, autoimune bolesti, neurološke bolesti, imunološke bolesti, različite kancere, infektivne bolesti, endokrine poremećaje, i genetičke bolesti.
Alternativno, mikronizovi koji su korisni u proceni efikasnosti jedinjenja sadašnjeg pronalaska mogu predstavljati posbni tip tkiva uključujući, ali ne ograničavajući na, srce, jetru, prostatu, pluća, nerv, mišić, ili vezivno tkivo; pretpostavljeno endotelijum korinarne arterije, endotelijum umbilikalne arterije, entodelijum umbilikalne vene, aortni endotelijum, mikrovaskularni endotelijum miometrijuma, epitelijum kerationocita, bronhijalni epitelijum, epitelijum dojke, epitelijum prostate, renalni kortikalni epitelijum, renalni proksimalni tubule epitelijum, epitelijum malog vazdušnog puta, renalni epitelijum, glatki mišić umbilikalne arterije, neonatalni dermalni fibroblast, glatki mišić pulmonalne arterije, dermalni fibroblast, neuronske progenitor ćelije, skeletni mišić, bronhijalni glatki mišić, materični glatki mišić, fibroblast pluća, osteoblaste, stromalne ćelije prostate, ili njihove kombinacije. Sadašnji pronalazak dalje razmatra mikronizove koji se sastoje od profila genske ekspresije koja sadrži jednu ili više sekvenci polinukleotida uključujući komplementarne i homologe sekvence, pri čemu je pomenuti profil genske ekspresije generisan iz ćelijskog tipa tretiranog sa jedinjenjem sadašnjeg pronalaska i odabrano od grupe koja sadrži endotelijum korinarne arterije, endotelijum umbilikalne arterije, entodelijum umbilikalne vene, aortni endotelijum, mikrovaskularni endotelijum miometrijuma, epitelijum kerationocita, bronhijalni epitelijum, epitelijum dojke, epitelijum prostate, renalni kortikalni epitelijum, renalni proksimalni tubule epitelijum, epitelijum malog vazdušnog puta, renalni epitelijum, glatki mišič umbilikalne arterije, neonatalni dermalni fibroblast, glatki mišić pulmonalne arterije, dermalni fibroblast, neuronske progenitor ćelije, skeletni mišić, bronhijalni glatki mišić, materični glatki mišić, fibroblast pluća, osteoblaste, stromalne ćelije prostate.
Sadašnji pronalazak razmatra mikronizove koji se sastoje od jednog ili više sredstava za vezivanje proteina, pri čemu je profil ekspresije proteina generisan iz ćelijskog tipa koji je tretiran sa jedinjenjem sadašnjeg pronalaska i odabran od grupe koja sadrži endotelijum korinarne arterije, endotelijum umbilikalne arterije, entodelijum umbilikalne vene, aortni endotelijum, mikrovaskularni endotelijum miometrijuma, epitelijum kerationocita, bronhijalni epitelijum, epitelijum dojke, epitelijum prostate, renalni kortikalni epitelijum, renalni proksimalni tubule epitelijum, epitelijum malog vazdušnog puta, renalni epitelijum, glatki mišič umbilikalne arterije, neonatalni dermalni fibroblast, glatki mišić pulmonalne arterije, dermalni fibroblast, neuronske progenitor ćelije, skeletni mišić, bronhijalni glatki mišić, materični glatki mišić, fibroblast pluća, osteoblaste, stromalne ćelije prostate.
Još specifičnije, sadašnji pronalazak razmatra postupke za reproduktivno merenje i procenu ekspresije specifičnih mRNK ili proteina u, na primer, specifičnom steu ćelija. Jedan postupak kombinuje i koristi tehnike laserske mikrodisekcije zarobljavanjem, na T7-bazirano RNK pojačavanje, proizvodnju cDNK iz pojačane RNK, i DNK mikronizove koji sadrže imobilisane DNK molekule za različite specifične gene, uključujući HSPG-ove kao što je perlekan, da se proizvede profil analize genske ekspresije za vrlo male brojeve specifičnih ćelija. Željene ćelije se individualno identifikuju i kače za supstrat putem tehnike zarobljavanja laserom, i zarobljene ćelije se odna odvajaju od preostalih ćelija. RNK se onda ekstrakuje iz zarobljenih ćelija i pojačava oko milion puta upotrebom T7-bazirane tehnike pojačavanja, a cDNK se može pripremiti iz pojačane RNK. Različiti specifični DNK molekuli se pripremaju koji hibridizuju sa specifičnim polinukleotidima mikroniza, i DNK molekuli se imobilišu na odgovarajućem supstratu. cDNK sačinjenja iz zarobljenih ćelija se nanosi na mikroniz pod uslovima koji dopuštaju hibridizaciju cDNKI na imobilisanu DNK mikroniza. Profil ekspresije zarobljenih ćelija se dobija iz analize rezultata hibridizacije upotrebom pojačane RNK ili cDNK sačinjene od pojačane RNK zarobljenih ćelija, i specifičnih imobilisanih molekula DNK na mikronizu. Rezultati hibridizacije demonstriraju, na primer, koji geni od onih predstavljenih na mikronizu kao probama su hibridizovani na cDNK zarobljenih ćelija, i/ili količinu specifične ekspresije gena. Rezultati hibridizacije predstavljaju profil ekspresije gena zarobljenih ćelija. Profil ekspresije gena zarobljenih ćelija može se koristiti da se uporedi profil ekspresije gena različitog seta zarobljenih ćelija. Na primer, profili ekspresije gena moug biti generisani iz tretiranih ćelija (i netretiranih) sa jedinjenjem sadašnjeg pronalaska. Sličnosti i razlike obezbeđuju korisnu informaciju za utvrđivanje razlike izmežu istog ćelijskog tipa pod različitim uslovima, specifičnije, promene u ekspresiji gena u odgovoru na tretman sa jedinjenjem sadašnjeg pronalaska.
Tehnike koje se koriste za analizu ekspresije gena su na isti način primenjljive u kontekstu profila ekspresije proteina. Ukupan protein moće se izolovati iz ćelijskog uzorka i hibridizovati na mikroniz koji se sastoji od mnoštva sredstava sa vezivanje proteina, koji mogu da ukluče antitela, receptor proteina, male molekule i slično. Upotrebom nekoliko ogleda poznatih u nauci, hibridizacija moće biti otkrivena i analizirana kako je to gore opisano. U slučaju fluorescentne detekcije, algoritimi mogu biti upotrebljeni da ekstrakuju profil ekspresije proteina koji je reprezentativnan za određeni ćelijski tip. U ovom pogledu, može se proceniti promena u ekspresiji proteina u odgovoru na tretman ćelija sa jedinjenjem sadašnjeg pronalaska.
Tako, u jednom aspektu, sadašnji pronalazak se sastoji od bar jednog mikroniza koji odgovara populaciji gena izolovanih iz odrešenog tkiva ili ćelijskog tipa u postupcima koji se upotrebljavaju da otkriju promene u nivoima transkripcije gena koje rezultiraju iz izlaganja odabranog tkiva ili ćelija bar jednom jedinjenju sadašnjeg pronalaska. U ovoj realizaciji, biološki uzorak izvedan iz organizma, ili utvrđena ćelijska linija, može biti izložena bar jednom jedinjenju sadašnjeg pronalaskain vivoili exvivo.Potom, transkripti gena, primarno mRNK, tkiva ili ćelija se izoluju postupcima dobor poznatim u nauci. Sambrook et al., Molecular Cloning: A Lab. Manual (2001). Izolovani transkripti onda kontaktiraju sa mikronizom pod uslovima gde transkripti hibridizuju sa odgovarajućom probom da se formira par hibridizacije. Tako, mikroniz obezbeđuje model transkripcione sposobnosti odgovora posle izlaganja bar jednom jedinjenju sadašnjeg pronalaska. Takva informacija može se upotrebiti da se utvrde kandidati za terapiju. Signal hibridizacije može onda biti otkriven na svakom paru hibridizacije da se dobije profil ekspresije gena.
Profili ekspresije gena i/ili proteina i mikronizovi mogu takođe biti upotrebljeni da se identifikuju aktivaciona ili ne-aktivaciona jedinjenja određenog gena kao što je to perlekan ili drugi HSPG. Jedinjenja koja povećavaju brzine transkripcije ili stimulišu, održavaju, ili stabilizuju aktivnost proteina se smatraju aktivirajućim dok su jedinjenja koja smanjuju brzine ili inhibiraju aktivnost proteina ne-aktivirajuća. Šta više, biološki efekti jedinjenja mogu se reflektovati na biološko stanje ćelije. Ovo stanje karakterišu ćelijske konstituente. Jedan aspekt biološkog stanja ćelije je njeno transkripciono stanje. Transkripciono stanje ćelije uključuje identitete i količine vrsta RNK konstituente, posebno mRNK, u ćeliji pod datim setom uslova. Tako, profili ekspresije gena, mikronizovi, i algoritimi koji su ovde diskutovani mogu biti upotrebljeni da se analizira i karakteriše transkripciono stanje date ćelije ili tkiva posle izlaganja aktivirajućem ili ne-aktivirajućem jedinjenju, specifično, jedinjenju sadašnjeg pronalaska.
Tehnike mikroniza i postupci za analiziranje rezultata su dobro poznati u nauci. Videti U.S. Patent brojeve 6,263,287; 6,239,209; 6,218,122; 6,197,599; 6,156,501; 5,874,219; 5,837,832; 5,700,637; 5,445,934; U.S. Patentne prijave brojevi 2001/0014461 A1; 2001/0039016 A1; 2001/0034023 A1; WO 01/94946; i WO 01/77668. Videti takođe, Haab et al., 2 Genome Biology 1-12 (2001); Brown et al., 97 Proc. Natl. Acad. Sci. USA 262-7 (2000); Getz et al., 97 Proc. Natl. Acad. Sci. USA - 12079-84 (2000); Harrington et al., 3 Current Opinion Microbiol 285-91
(2000); Holter et al., 97 Proc. Natl. Acad. Sci. USA 8409-14 (2000); MacBeath et al., 289 Science 1760-63 (2000); Duggan et al., 21 Nature Genet 10-14 (1999); Lipshutz et al., 21 Nature Genet 5-9 (1999); Eisen et al., 95 Proc. Natl. Acad. Sci. USA 14863-68 (1998); Ermolaeva et al., 20 Nature Genet. 19-23 (1998); Hacia et al., 26 Nucleic Acids Res. 3865-66 (1998); Lockhartet al., Nucleic Acids Symp. Ser. 11-12 (1998); Schena et al., 16 Trends Biotechnol. 301-6 (1998); Shalon, 46 Pathol. Biol. 107-9 (1998); VVelford et al., 26 Nucleic Acid Res. 3059-65 (1998); Blanchard etal., 11 Biosensors Bioelectronics 687-90 (1996); Lockhart et al., 14 Nature Biotechnol. 1675-80 (1996); Schena et al., 93 Proc. Natl. Acad. Sci. USA 10614-19 (1996); Tomavo et al., 96 Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2907-12 (1996); Schena et al., 270 Science 467-70
(1995).
Kreiranje baze podataka, pristup bazi podataka i povezani postupci
upotrebe
Sledeća realizacija sadašnjeg pronalaska se sastoji od različitih postupaka upravljanja i upotrebe podataka povezanih sa jedinjenjima, postupaka spravljanja jedinjenja, postupaka upotrebe i davanja jedinjenja, i dijagnosticiranja, proznoze i posle izhoda sa bolestim u kojima su jedinjenja efikasna u lečenju. Na primer, postupci za obezbeđivanje dijagnostike i predskazivača povezani sa biomolekulima uključujući HSPG-ove, posebno, perlekan, se razmatraju sadašnjim pronalaskom. Takođe, u okviru ovog pronalaska su postupci za obezbeđivanje dijagnostike i predskazivača povezani sa efikasnošću jedinjenja sadašnjeg pronalaska. Sadašnji pronalazak dalje razmatra postupke obezbeđivanja banaka podataka profila ekspresije, i postupke proizvodnje takvih banaka podataka, za normalna i bolesna tkiva.
Baza podataka profila ekspresije može biti interna baza podataka kja uključuje komentar informacije o profilima ekspresije generisanih da se proceni dejstvo jedinjenja sadašnjeg pronalaska kroz druge izvore i postupke. Takve informacije mogu da uključuju, na primer, baze podataka u kojima je pronađen dati biomolekul, informacija o pacijentu povezana sa profilom ekspresije, uključujući starost, tip ili progresiju kancera ili tumora, informacije povezane sa jedinjenjem sadašnjeg pronalaska kao što su doza i informacije o davanju, opisne informacije o odnosnim cDNK povezanih sa sekvencom, tkivom ili ćelijskim izvorom, podaci o sekvenci dobijeni iz eksternih izvora, profili ekspresije za date gene i odnosna stanja bolesti ili tok bolesti, na primer da li se profil ekspresije odnosi na ili čini značajnijim određeno stanje bolesti, postupke pripremanja. Profili ekspresije mogu biti zasnovani na podacima o mikronizu proteina i/ili polinukleotida dobijenih iz javno dosputnih ili vlasničkih izvora. Baze podataka mogu biti podeljene u dve sekcije: jednu za skladištenje sekvenci i odnosnih profila ekspresije i drugu za skladištenje povezanih informacija. Ova baza podataka moće biti održavana kao privatna baza podataka sa fajervolom u okviru centralnog kompjuterskog prostora. Pa ipak, ovaj pronalazak ne postoji da bi bio ograničen i baza podataka o profilu ekspresije može biti učinjena dostupnom za javnost.
Baza podataka može biti umreženi sistem koji povezuje server mreže sa klijentima. Mreža može biti bilo koji od brojnih konvencionalnih sistema mreže, uključujući mrežu u lokalnom prostoru (LAN) ili mrežu širokog prostora (WAN), kao što je to poznato u nauci (n.pr., Eternet). Server može da uključuje softver za pristup informacijama baze podataka za procesuiranje korisničkih zahteva, i da obezbedi interfejs za davanje informacija na klijentovu mašinu. Server može da podržava VVorld Wide Web i da održava vebsajt i Web pretraživač za upotrebu od strane klijenata. Klijent/server okruženja, serveri banaka podataka, i mreža su vrlo dobro dokumentovani u tehničkoj, trgovinskoj i patentnoj literaturi.
Kroz Web pretraživač, klijenti mogu konstruisati zateve za traženje da bi se izvukli podaci iz, na primer, baze podataka mikroniza i baze podataka profila ekspresije. Na primer, korisnik može "uperiti i kliknuti" na elemente korisničkog interfejsa kao što su dugmad, meni za povlačenje i skrol barovi. Zahtevi klijenata mogu biti transmitovani na Web aplikaciju koja njima formatira da proizvedu upit koji može biti upotrebljen da bi se sakupile informacije sa sistema baze podataka, zasnovane, na primer, na podacima o mikronizu iili ekspresiji dobijenu od strane klijenta, i/ili druge fenotipske ili genotipske informacije. Specifično, klijent može podneti podatke o ekspresiji na osnovu profila ekspresije mikroniza dobijene od lečenog pacijenta sa jedinjenjem sadašnjeg pronalaska i upotrebiti sistem da dobije dijagnozu baziranu na toj informaciji koja je zasnovana na poređenju od strane sistema podataka o podacime ekspresije klijenata sa podacima ekspresije koji postoje u bazi podataka. Putem primera, sistem upoređuje profile ekspresije podnesene od strane klijenta sa profilima ekspresije koji postoje u bazi podataka i onda daje klijentu dijagnostičku informaciju baziranu na najboljem poklapanju profila ekspresije klijenta sa profilima baze podataka. Tako, u jednom aspektu, upoređenje profila ekspresije pomaže kliničarima u određivanju efikasnosti lečenja sa jedinjenjem sadašnjeg pronalaska. Na osnovu takvog poređenja, kliničar može promeniti ili podesiti režim lečenja.
Dodatno, vebsajt može obezbediti hipertekst linkove ka javnim bazama podataka kao što je GenBank i povezane baze podataka koje se održavaju od strane National Centerfor Biotechnologv Information (NCBI), delom National Librarv of Medicine kao i, bilo kojim linkovima koji obezbeđuju relevantnu informaciju za analizu ekspresije gena, genetičke poremećaje, naučnu literaturu, i slično. Razmatraju se informacije uključujući, ali ne ograničavajući na, identifikatore, tipove identifikatora, biomolekularne sekvence, uobičajene klaster identifikatore (GenBank, Unigene, lncyte template identifiers, i tako dalje) i vrste imena povezanih sa svakim genom.
Sadašnji pronalazak takođe obezbeđuje sistem za pristup i upoređivanje bioinformacija, specifično profila ekspresije i druge informacije koje su korisne u kontekstu sastava i postupaka sadašnjeg pronalaska. U jednoj realizaciji, kompjuterski sistem može se sastojati od kompjuterskog procesora, odgovarajuće memorije koja je operativno povezana za kompjuterski procesor, i komjuterski postupak koji je uskladišten u memoriju koji izvršava u kompjuterskom procesoru i koji se sastoji od sredstava za upoređivanje poklapanja profila ekspresije biomolekularne sekvence sa pacijenta sa profilom ekspresije i informacije o identifikaciji sekvence iz biomolekularnih sekvenci u bazi podataka. Još specifičnije, kompjuterski sistem se upotrebljava da uporedi poklapanje profila ekspresije generisanog iz biološkog uzorka tretiranog sa jedinjenjem sadašnjeg pronalaska sa profilom ekspresije i drugim informacijama u bazi podataka.
Dalje, sistem za pristup i upoređenje informacija koje sadrži biomolekularna baza podataka se sasstoji od kompjuterskog programa koji sadrži kompjuterski kod koji obezbeđuje algoritam za upoređenje poklapanja profila ekspresije generisanog od pacijenta, na primer, tretiranog sa jedinjenjem sadašnjeg pronalaska, sa profilom ekspresije i informacijama od identifikaciji sekvence biomolekularnih sekvenci u biomolekularnoj bazi podataka.
Sadašnji pronalazak razmatra, u jednoj realizaciji, upotrebu Graphical User Interface-a ("GUI") za pristup informacijama o profilu ekspresije uskladištenim u biomolekularnu bazu podataka. U specifičnoj realizaciji GUI može biti sastavljen od dva rama. Prvi ram može da sadrži odabirljivu listu biomolekularnih baza podataka kojima korisnik može da ima pristup. Kada se biomolekularna baza odabere u prvom ramu, drugi ram može da prikaže informaciju koja rezultira iz upoređivanja parova baze podataka profila ekspresije sa od strane klijenta snabdevenim profilom ekspresije kako je to gore opisano, zajedno sa bilo kojom drugom fenotipskom ili genotipskom informacijom.
Drugi ram GUI može da sadrži listing informacija o ekspresiji biomolekularne sekvence i profilima koji postoje u odabranoj bazi podataka. Dalje, drugi ram može da dopusti korisniku da odabere pod-set, uključujući sve biomolekularne sekvence, i da obavi operaciju na listi biomolekularnih sekvenci. U jednoj realizaciji, korisnik može da odabere pod-set biomolekularnih sekvenci odabijanjem prozora za odabiranje povezanog sa svakom biomolekularnom sekvencom. U sledećoj realizaciji, operacije koje se mogu obaviti uključuju, ali nisu ograničene na, skidanje svih biomolekularnih sekvenci na listi na poseban list baze podataka sa informacijama od klasifikaciji, a da se pri tom sačuva odabrani pod-set biomolekularnih sekvenci na korisnikov fajl, skidanje svih biomolekularnih sekvenci sa liste na poseban list bez klasifikovanja informacije, i prikazivanje informacije o klasifikaciji na odabranom pod-setu biomolekularnih sekvenci.
Ukoliko korisnik izabere da se prikaže informacija o klasifikaciji na odabranm pod-setu biomolekularnih sekvenci, drugi GUI može piti prikazan korisniku. U jednoj realizaciji, drugi GUI može da sadrži listu jedne ili više eksternih baza podataka koje se upotrebljavaju da se kreiraju baze podataka profila ekspresije kako je to gore opisano. Dalje, za svaku eksternu bazu podataka, GUI može da prikaže listu jednog ili više polja povezanih sa svakom eksternom bazom podataka. U još jednoj realizaciji, GUI može da dopusti korisniku da odabere ili poništi odabiranje svakog od jednog ili više polja koji su prikazani u drugom GUl-u. U još jednoj realizaciji, GUI može da dopusti korisniku da odaber ili poništi odabiranje svake od jedne ili više eksternih baza podataka.
Postupci sadašnjeg pronalaska dalje se odnose na komercijalne i druge upotrebe sastava i postupaka sadašnjeg pronalaska. U jednom aspektu, postupci uključuju marketing, prodaju, licenciranje sastava ili postupaka sadašnjeg pronalaska u kontekstu obezbeđivanja potrošača, odnosno, pacijenata, medicinskih radnika, provajdera medicinske usluge, istraživača, i farmaceutskih distributera i proizvođača, sa bazama podataka profila ekspresije uključujući, posebno, baze podataka proizvedene u skladu sa upotrebom jedinjenja sadašnjeg pronalaska.
U još jednoj realizaciji, postupci sadašnjeg pronalaska uključuju postavljanje ditribucionog sistema za distribuciju farmaceutskih sastava sadašnjeg pronalaska za prodaju, i mogu opciono da uključuju postavljenje prodajnih grupa za marketing farmaceutskog sastava. Još jedan aspekt sadašnjeg pronalaska obezbeđuje postupak za sprovođenje otkrivanja cilja koji se sastoji od identifikovanja, putem jednog ili više gornjih postupaka za otkrivanje leka, probnog jedinjenja, kako je to gore opisano, koji modulira nivo ekspresije gena ili aktivnost produkta gena kao što je perlekan; sprovođenje terapeutskog profiliranja identifikovanih sredstava, ili njihovih daljih analoga, za efikasnost i toksičnost kod životinja; i opciono formulisanja farmaceutskog sastava uključujući jedno ili više sredstava identifikovanih da imaju prihvaljivi terapeutski profil; i opciono licenciranje ili prodaju, prava za dalji razvoj leka od pomenutih identifikovanih sredstava.
Farmaceutski sastavi
Dodatno jedinjenjima koja su ovde otkrivena, farmaceutski sastav sadašnjeg pronalaska može dalje da sadrži bar jedan od bilo kog odgovarajućeg dopunskog sredstva kao što su, ali nisu ograničeni na, razređivač, vezivno sredstvo, stabilizator, puferi, soli, lipofilični rastvarači, zaštitna sredstva, adjuvant i slično. Pretpostavljena su farmaceutski prihvatljiva dopunska sredstva. Primeri i postupci pripremanja kao što su sterilni rastvori su dobro poznati u nauci i mogu biti pronađeni u vrlo poznatim tekstovima kao što su, ali ne ograničavajući na, Remingtons Pharmaceutical Sciences (Gennaro, Ed., 18th Edition, Mack Publishing Co. (1990). Farmaceutski prihvatljivi nosači mogu biti rutinski odabrani tako da odgovaraju načinu davanja, rastvorljivosti i/ili stabilnosti jedinjenja.
Farmaceutski inertni punioci i aditivi kojisni u sadašnjem pronalasku uključuju, alin nisu ograničeni na, proteine, peptide, amino kiseline, lipide, i ugljene hidrate (n.pr., šećere, uključujući monosaharide, di-, tri-, tetra-, i oligosaharide; derivatizovane šećere kao što su alditoli, aldonske kiseline, esterifikovani šećeri i slično; i polisaharidi ili polimeri šećera), koji mogu biti prisutni samostalno ili u kombinaciji, koji se sadrže samostalno ili u kombinaciji u rasponima od 1-99,99 % mase ili zapremine. Primerni protein inertni punilac uključuje serum albumin kao što je humani serum albumin (HSA), rekombinantni humani albumin (rHA), želatin, kazein, i slično. Reprezentativne komponente amino kiseline koje takođe mogu funkcionisati u kao puferi, uključuju alanin, glicin, arginin, betain, histidin, glutaminsku kiselinu, asparaginsku kiselinu, cistein, lizin, leucin, izoleucin, valin, metionin, fenilalanin, aspartam, i slično.
Inertni punioci ugljeni hidrati odgovarajući za upotrebuu sadašnjem pronalasku uključuju, na primer, monosaharide kao što je fruktoza, maltoza, galaktoza, glukoza, D-manoza, sorboza, i slično; disaharidi, kao što je laktoza, saharoza, trehaloza, celobioza, i slično; polisaharide, kao što je rafinoza, melezitoza, maltodekstrini, dekstrani, škrobovi, i slično; i alditole, kao što je manitol, ksilitol, maltitol, laktiotol, ksilitol, sorbitol (glucitol), mioinozitol i slično.
Farmaceutski sastavi koji se sastoje od jedinjenja sadašnjeg pronalaska mogu takođe da uključe pufer ili pH sredstvo za podešavanje. Tipično, pufer je so pripremljena od organske kiseline ili baze. Reprezentativni puferi uključuju soli organske kisele soli kao što su soli limunove kiseline, askorbinske kiseline, glukonske kiseline, ugljene kiseline, tartarne kiseline, ćilibarne kiseline, sirćetne kiseline, ili ftalne kiseline; Tris, tometamin hidrohlorid, ili fosfatni puferi.
Dodatno, farmaceutski sastavi pronalaska takođe mogu da uključe polimerne inertne punioce/aditive kao što su polivinilpirolidonui, fikoli (polimerni šećer), dekstrati (n.pr., ciklodekstrini, kao što su 2-hidroksipropil-p-ciklodekstrin), polietilen glikoli, sredstva za davanje ukusa, anti-mikrobska sredstva, zaslađivači, antioksidanti, anti-statična sredstva, površinska sredstva (n.pr., polisorbati kao što su "TVVEEN 20" i "TVVEEN 80"), lipidi (n.pr., fosfolipidi, masne kiseline), steroidi (n.pr., holesterol), i reagensi koji izazivaju stvaranje helatnih jedinjenja (n.pr., EDTA). Ovi i dodatni pozanit farmaceutski inertni punioci i/ili aditivi odgovarajući za upotrebu u sadašnjem pronalasku su poznati u nauci, n.pr., kako je to u listi Remington-a: The Science & Practice of Pharmacv (19th et., VVilliams & VVilliams (1995)) i Phvsician's Desk Reference (52nd el., Medical Economics (1998)), koji su ovde eksplicitno u celosti inkorporisani putem reference.
Farmaceutski sastavi za oralno davanje
Za oralno davanje u obliku tablete ili kapsule, jedinjenje može biti kombinovanosa oralnim, ne-toksičnim farmaceutski prihvatljivim inertnim nosačem kao što su etanol, glicerol, voda i slično. Šta više, kada se to želi ili je neophodno, odgovarajuća vezivna sredstva, lubrikanti, sredstva za dezintegraciju, i sredstva za bojenje mogu takođe biti inkorporisana u smešu. Odovarajuća vezivna sredstva uključuju, bez ograničavanja, škrob; želatin; prirodne šećere kao psto su glukoza ili beta-laktoza; kukuruzne zaslađivače; prirodne i sintetičke gume kao što su akacija, tragantova guma, ili natrijum alginat, karboksimetilceluloza; polietilen glikol; parafini i slično. Lubrikanti koji se koriste u ovim oblicima doze uključuju, bez ograničavanja, natrijum oleat, natrijum stearat, magnezijum stearat, natrijum benzoat, natrijum acetat, natrijum hlorid i slično. Sredstva za dezintegraciju uključuju, bez ograničavanja, škrob, metil celulozu, bentonit, ksantan gumu i slično.
Formulacije sadašnjeg pronalaska odgovarajuće za oralno davanje mogu biti predstavljene kao odvojene jedinice kao što su kapsule, žigovi ili tablete od kojih svaka sadrži prethodno određenu količinu aktivnog sastojka; kao puder ili granule; kao rastvor ili suspenzija u vodenoj tečnosti ili ne-vodenoj tečnosti; ili kao ulje-u-vodi tečnoj emulziji ili u voda-u-ulju emulziji i kao velike tablete, itd.
Tableta može biti sačinjena kompresijom ili topljenjem, opciono sa jednim ili više pomoćnih sastojaka. Kompresovane tablete mogu biti pripremljene kompresijom, u odgovarajućoj mašini, aktivni sastojak u obliku za slobodan protok kao što su puder ili granule, opciono pomešane sa vezivnim sredstvom, lubrikantom, inertnim razređivačem, zaštitnim sredstvom, površinski aktivnim ili sredstvom za raspršivanje. Topljene tablete mogu biti sačinjene topljenjem, u odgovarajućoj mašini, smeša puderastog jedinjenja ovlaženog sa inertnim tečnim razređivačem. Tablete mogu biti opciono obložene ili izbrazdane i mogu biti formulaisane tako da obezbede sporo i kontrolisano oslobađanje aktivnog sastojka u njima.
Dodatno, kombinacije mogu biti inkorporisane u biodegradativne polimere koji dopuštaju odloženo oslobađanje jedinjenja, polimere koji se implantuju u blizini ili gde se želi isporuka leka, na primer, na položaj restenoze. Biodegradativni polimeri i njihove upotrebe su opisani, na primer, dataljno u Brem etal., 74 J. Neurosurg. 441-46 (1991). Odgovarajući primeri sastava sa odloženim oslobađanjem uključuju polu propustljive matrice čvrstih hidrofobičnih polimera koji sadrže jedinjenje sadašnjeg pronalaska, čije su matrice u obliku oblikovanih proizvoda, n.pr., filmova, ili mikrokapsula. Pirmeri matrica sa odloženim oslobađanjem uključuju poliestre, hidrogelove (na primer, poli(2-hidroksietil-metakrilat), ili poli(vinilalkohol)), poliaktide (U.S. Patent br. 3,773,919), kopolimere L-glutaminske kiseline i y etil-L-glutamat, ne-degradirajući etilen-vinil acetat, detradirajuće mlečna kiselina-glikolna kiselina kopolimere kao što su LUPRON DEPOT® (Tap Pharmaceuticals, Inc., Chicago, IL) (mikrosfere koje se mogu ubrizgavati od mlečna kiselina glikolna kiselina kopolimera i leuprolid acetata), i poli-D-(-)-3-hidroksibuterna kiselina.
Farmaceutski sastavi za parenteralno davanje
Odgovarajuće formulacije za parenteralno davanje uključuju tečne i ne-tečne sterilne rastvore za ubrizgavanje koji mogu da sadrže anti-oksidanse, pufere, bakteriostatike i rastvorljiva sredstva koji daju formulaciju izotonički sa krvlju primaoca kome se ima dati; tečne i ne-tečne sterilne suspenzije koji mogu da uključuju suspenzivno sredstvo i sredstva za zgušnjavanje. Formulacije mogu biti prezentovane u kontejnerima jedinične doze ili multi doze, na primer, zapečaćene ampule i sudovi, i mogu biti uskladištene u zamrznutom-suvom (liofilisanim) stanju koji zahteva samo dodavanje sterilnog tečnog nosača, na primer, vode za ubrizgavanja, neposredno pre upotrebe. Extemporaneus rastvori za ubrizgavanje i suspenzije mogu biti pripremljene iz sterilnih pudera, granula i tableta ranije opisanih vrsta.
Za parenteralno davanje, poželjne su sterilne suspenzije i rastvori. Izotonični preparati koji generalno sadrže odgovarajuća zaštitna sredstva se upošljavaju kada se želi intravenozno davanje. Farmaceutski sastavi mogu biti dati parenteralno putem ubrizgavanja formulacije koja se sastoji od aktivnog sastojka rastvorenog u inertnom tečnom nosaču. Pojam "parenteralno", kako se ovde koristi, uključuje, ali ne ograničava na, podkožna ubrizgavanja, intravenozna, intramuskularna, intraperitonelna ubrizgavanja, ili tehnike infuzije. Prihvatljivi tečni nosači uključuju, na primer, biljna ulja kao što su ulje od kikirikija, ulje od semena pamuka, sezamovo ulje i slično, kao i organske rastvarače kao što su solketal, glicerol formal i slično. Formulacije mogu biti pripremljene rastvaranjem ili suspendovanjem aktivnog sastojka u tečnom nosaču tako da konačna formulacija sadrži oko 0,005 mas% do 30 mas% aktivnog sastojka, odnosno jedinjenja sadašnjeg pronalaska.
Farmaceutski sastavi za druge puteve davanja
Formulacije odgovarajuće za mesno davanje u usta uklučuju pastile koja se sastoji od sastojaka na ukusnoj osnovi, uobičajeno saharoze i akacije ili tragantove gume; pastile koje se sastoje od aktivnog sastojka na inertnoj bazi kao što su želatin ili glicerin, ili saharoza i akacija; i sredstvima za ispiranje usta koji se sastoje od jedinjenja koje sa ima dati u odgovarajućem tečnom nosaču. Tečni oblici mogu da uključuju odgovarajuća sa dodatim ukusom suspenzivna ili raspršavajuća sredstva kao što su sintetičke i prirodne gume, na primer, tragantova guma, akacija, metil-celuloza i slično.
Formulacije za rektalno davanje mogu biti prezentovane kao supozitorij sa odbovarajućom osnovom koja se sastoji od, na primer, kokosovog ulja ili salicilata.
Formulacije koje su odgovarajuće za vaginalno davanje mogu biti prezentovane kao materični čepovi, tamponi, kreme, gelovi, paste, pene ili sprej formulacije koje dodatno aktivnom sastojku sadrže takve nosače za koje je dobro poznato u nauci da su odgovarajući.
Jedinjenja mogu takođe biti smeštena u mikrokapsule koje su pripremljene, na primer, tehnikama coacervation ili putem interfacijalne polimerizacije, na primer, hidroksimetilceluloza ili želatin-mikrokapsule i poli(metilmetacilat) mikrokapsule, svaka posebno, u koloidnim sistemima isporuke leka (na primer, lipozomi, albumin mikrosfere, mikroemulzije, nanočestice, i nanokapsule) ili u makroemulzijama. Remington's Pharmaceutical Sciences (A. Osol ed., 16th ed. (1980)).
U specifičnoj realizaciji, jedinjenja koja su ovde otkrivena se formulišu kao lipozomi. Lipozomi koji sadrže jedinjenje sadašnjeg pronalaska su pripremljeni posutpcima koji su poznati u nauci. Videti, n.pr., U.S. Patent 5,013,556; 4,485,045; 4,544,545; WO 97/38731; Epsetin etal., 82 Proc. Natl. Acad. Sci. Usa 3688 (1985); i Hvvang et al., 77 Proc. Natl. Acad. Sci. USA 4030 (1980). Jedinjenja sadašnjeg pronalaska mogu takođe biti data u obliku sistema isporuke lipozoma kao što su mali unipločasti mehurići, veliki unipločasti mehurići, i multipločasti mehurići. Lipozomi se mogu formirati iz različitih fosfolipida, kao što su holesterol, stearilamin ili fofatidilholini.
Jedinjenja sadašnjeg pronalaska mogu takođe biti isporučeni putem upotrebe monoklonalnih antitela kao individualnih nosača za koje se molekuli jedinjenja sparuju. Jedinjenja sadašnjeg pronalaska mogu takođe biti sparena sa rastvorljivim polimerima kao ciljanim nosačima leka. Takvi polimeri mogu da uključe polivinilpirolidon, piran copolimer, polihidroksipropilmetakrilamidfenol, polihidroksietilaspartamidfenol, ili polietil-eneoksidepolilizin supstituisan sa palmitoil ostatkom.
Farmaceutski prihvatljiva zaštitna sredstva
Sadašnji pronalazak obezbeđuje stabilne formulacije kao i sačuvane rastvore i formulacije koji sadrže zaštino sredstvo kao i multi-upotrebljiv sačuvane formulacije odgovarajuće za farmaceutsku ili veterinarsku upotrebu, koje se sastoje od bar jednog jedinjenja koje je ovde otkriveno i farmaceutski prihvatljive formulacije. Formulacije prema sadašnjem pronalasku moug opciono sadržati bar jedno poznato zaštitno sredstvo. Zaštitna sredstva uključuju, ali nisu ograničena na, fenol, m-krezol, p-krezol, o-krezol, hlorokrezol, benzil alkohol, fenilmerkurit nitrit, fenoksietanol, formaldehid, hlorobutanol, magenzijum hlorid (n.pr., heksahidrat), alkilparaben (metil, etil, propil, butil i slično), benzalkonijum hlorid, benzetonijum hlorid, natrijum dehidroacetat i timerozal, ili njihove smeše u tečnom razređivaču. Bilo koja odgovarajuća koncentracija ili smeša može biti upotrebljena kako je poznata u nauci, kao što je 0,001-5% ili bilo koji raspn ili vrednost u okviru toga. Neograničavajući primeri uključuju, bez zaštitnog sredstva, 0,1-2% m-krezola, 0,1-35 benzil alkohola, 0,001-0,5% timerozala, 0,001-2,0% feno, 0,0005-1,0% alkilparaben(a), i slično.
Drugi inertni punioci, n.pr., izotonični agensi, puferi, antioksidanti, pojačivači zaštitnih sredstava, mogu opciono biti dodati razređivaču. Izotonični agens kao što je glicerin, se uobičajeno upotrebljavaju pri poznatim koncentracijama. Fiziološki tolerisani pufer se pretpostavljeno dodaje da obezbedi poboljšanu pH kontrolu. Formulacije mogu da pokriju široki raspon pH-ova, kao što je od oko pH 4 do oko pH 10, specifčno, raspon od oko pH 5 do oko pH9, i još specifičnije, raspon od oko 6,0 do oko 8,0. U jednom aspektu, formulacije sadašnjeg pronalaska imaju pH između oko 6,8 i oko 7,8. Odgovarajući puferi uključuju fosfat pufere, na primer, natrijum fosfat i fosfat puferovan slani rastvor (PBS).
Drugi aditivi, kao što su farmaceutski prihvatljjivi rastvarači kao što je Tvveen 20 (polioksietilen (20) srbitan monolaurat), Tween 40 (polioksietilen (20) sorbitan monopalimitat), Tvveen 80 (polioksietilen (20) sorbitan monooleat), Pluronik F68 (polioksietilen polioksipropilen blok kopolimeri), i PEG (polietilen glikol) ili ne-jonska površinska sredstva kao što je polisorbat 20 ili 80 ili poloksamer 184 ili 188, Pluronik® polili, drugi blok kopolimeri, i helatori kao što su EDTA i EGTA mogu opciono biti dodati farmaceutskim sastavima da se umanji agregacija. Ovi aditivi su posebno korisni ukoliko se upotrebljava plastični ili pumpa kontejner da se da farmaceutski sastav. Prisustvo farmaceutski prihvatljivog površinskog sredstva ublažava sklonost sastava da se skupi.
Tokom bilo kog od postupaka za pripremanje jedinjenja sadašnjeg pronalaska, može biti neophodno i/ili poželjno da se zaštite senzitivne i reaktivne grupe bilo kom molekula koji je od interesa. Ovo može biti postignuto sredstvima konvencionalnih zaštitnih grupa, kao što su one opisane u Protective Groups in Organic Chemistrv (1973); i Greene i Wuts, Protective Groups in Organic Chemistrv 81991). Zaštitne grupe mogu biti uklonjene u pogodnoj potonjoj fazi upotrebom postupaka poznatih iz nauke.
Putevi davanja
Pronalazak se dalje odnosi na davanje bar jednog jedinjenja koje je ovde otkriveno putem sledećih puteva, uključujući, ali ne ograničavajući na, oralni, parenteralni, potkožni, intramuskularni, intravenozni, intrartikularni, intrabronhijalni, intraabdominalni, intrakapsularni, intrarskavičav, intrakavitarni, intracelijalni, intracerebralni, intracerebroventikularni, intrakolični, intracervikalni, intragastrični, intrahepatični, intramiokardijalni, intraostealni, intrapulmonalni, intrarektalni, intrarenalni, intraretinalni, intraspinalni, intrasinovijalni, intrahorakični, intrauterinski, intravesikalni, velikim sudom, vaginalni, rektalni, bukalni, podjezični, intranazalni, jontoforetičnim sredstvima, ili prekokožnim sredstvima.
Pulmonalno/ nazalno davanje
Postoji nekoliko poželjnih karakteristika uređaja za inhalaciju za davanje jedinjenja sadašnjeg pronalaska. Na primer, isporuka putem inhalacionog uređaja je pouzdana, ponovljiva, i tačna. Za pulmonalno davanje, bar jedan farmaceutski sastava se isporučuje u efikasnoj veličini čestice, da bi se postigli niži vazdušni putevi od pluća i sinusa. Inhalacioni uređaj može opciono da isporuči male suve čestice, n.pr. manje od oko 10 um, pretpostavljeno oko 1-5 u.m, za ostvarivanje dobre respiratornosti.
Prema pronalasku, bar jedan farmaceutski sastav može biti isporučen biloo kojim od različitih inhalacionih ili nazalnih uređaja poznatih u nauci za davanje terepeutskog sredstva inhalacijom. U uređaje sposobne za deponovanje aerosolizovanih formulacija u šupljinu sinusa ili alveoli pacijenta uključeni su, inhalatori sa meračima doze, raspršivači, generatori suvih pudera, sprejovi, i slično. Drugi uređaji koji odgovaraju za usmeravanje pulmonalnog ili nazalnog davanja su takođe poznati u nauci.
Svi takvi uređaji mogu biti upotrebljeni za davanje farmaceutskog sastava u aerosolu. Takvi aerosoli mogu da se sastoje od bilo rastvora (oba i tečni i ne-tečni) ili čvrstih čestica. Inhalatori sa meračima doze kao što je Ventolin<®>inhalator sa meračem doze, tipično koriste reaktivni gas i zatevaju pokretanje tokom inspiracije. Videti, n.pr., WO 98/35888; WO 94/16970. Inhalatori suvog pudera kao što je Turbular<®>
(Astra), Rothaler<®>(Glaxo), Diskus<®>(Glaxo), Spiros<®>inhalator (Dura),
uređaji rekalmirani od strane Inhale Therapeutics, i Spinhaler<®>inhalator pudera (Fisons), koriste pokretanje disanjem mešanog pudera. Videti U.S. Paten brojevi 5,458,135; 4,668,218; WO 97/25086; WO 94/08552; WO 94706498; i EP 0 237 507, od kojih je svaki u celini eksplicitno ovde inkorporisan putem reference. Raspršivače kao što su AERx<®>, Aradigm, Ultravent® raspršivač (Mallinckrodt), i Acorn II® raspršivač
(Marquest Medical Products), gornje reference u potpunosti ovde inkorporišu putem reference, proizvode aerosolove iz rastvora, dok inhalatori sa meračem doze, inhalatori suvog pudera, itd. generišu aerosole malih čestica. Ovi specifični primeri komercijalno dostupnih inhalacionih uređaja imaju nameru da budu predstavnici specifičnih uređaja koji su pogodni za upotrebu pronalaska, i nema se namera da ograničavaju raspon pronalaska.
Odgovarajuće formulacije za nazalno davanje, gde je nosač čvrst, uključuje običan puder koji ima veličinu čestice, na primer, u rasponu od 20 do 500 mikrona koji se daju na način u kome je ušmrkavanje davanje, odnosno, putem brze inhalacije kroz nazalni put od kontejnera pudera koji se drži blizu nosa. Odgovarajuće formulacije, gde je nosač tečan, za davanje, kao primer, nazalni sprej ili nazalne kapi, uključuje tečne i uljane rastvore aktivnog sastojka.
Sprej koji sadrži farmaceutski sastav sadašnjeg pronalaska može biti proizveden teranjem suspenzije ili rastvora jedinjenja koje je ovde otkriveno kroz brizgaljku pod pritiskom. Veličina i konfiguracija brizgaljke, primenjeni pritisak, i brzina punjenja tečnosti može biti izabrana da postigne željeni ishod i veličinu čestice. Može biti proizveden elektrosprej, na primer, putem električnog polja u vezi sa kapilarima ili punjenjem brizgaljke. Ima prednosti kada čestice bar jednog isporučenog jedinjenja putem spreja imaju veličinu čestice u rasponu od oko manje od 1 fim do manje od oko 20 um.
Farmaceutski sastavi bar jednog od jedinjenja sadašnjeg pronalaska
odgovarajući za upotrebu sa sprejom tipično uključuju jedinjenje koje je ovde otkriveno u tečnom rastvor pri koncentraciji od oko 0,1 mg do oko 100 mg jedinjenja koje je ovde otkriveno po ml_ rastvora ili mg/gm ili bilo kog raspona ili vrednosti u okviru toga, ukljčuje, ali nije ograničeno na, 0.01, 0,02, 0,03, 0,04, 0,05, 0,06, 0,07, 0,08, 0,09, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90 ili 100 mg/mL ili mg/gm. Farmaceutski sastav može da uključi sredstva kao što su inertni punilac, pufer, izotonični agens, zaštitna sredstva, površinska sredstva, ili druga poznata sredstva farmaceutskih sastava.
Farmaceutski sastav sadašnjeg pronalaska može se davati putem raspršivača kao što je džet raspršivač il ultrasonični raspršivač. Tipično, u džet raspršivaču, izvor komprimovanog vazduha se upotrebljava da stvori veliku brzinu vazdušnog džeta kroz otvor. Kako se gas širi iza brizgaljke, stvara se oblast niskog pritiska, koja povlači rastvor proteinskog sastava kroz kapilarnu cev povezanu sa rezervoarom tečnosti. Struja tečnosti iz kapilarne cevi se širi u nestabilna vlakna i kapljice pošto napušta cev, stvarajući aerosol. Raspon konfiguracija, brzine protoka, i tipovi pregrada mogu biti uposleni da se postignu željene karakteristike rada od datog džet raspršivača. U ultrasoničnom raspršivaču, visoka frekventnost električne energije se upotrebljava da stvori vibracionu, mehaničku energiju, tipično upošljavajući piezoelektrični transduktor. Ova energija se prenosi do formulacije sastava proteina bilo direktno ili kroz fluid za sparivanje, stvarajući aerosol uključujući sastav proteina. Ima prednosti kada čestice farmaceutskog sastava koje se isporučuju raspršivačem imaju veličinu čestice od oko manje od 1 um do manje od oko 20 um.
Farmaceutski sastavi koji sadrže jedinjenje sadašnjeg pronalaska odgovarajuće za upotrebu sa raspršivačem, bilo džet ili ultrasoničnim, tipično uključuju koncentraciju od oko 0,1 mg do oko 100 mg jedinjenja koje je ovde otkriveno po ml_ rastvora ili mg/gm, ili bilo koji raspon ili vrednost u okviru toga uključujući, ali ne ograničavajući na, individualne količine otkrivene za sprej sastave. Farmaceutski sastav može da uključi druga farmaceutska sredstva kao što je inertni punilac, pufer, izotonični agens, zaštitno sredstvo, površinsko sredstvo, i ona poznata u nauci za upotrebu kod davanja raspršivačem.
U inhalatoru sa merenjem doze (MDI), reaktivno sredstvo, jedinjenje sadašnjeg pronalaska, i bilo koji inertni punioci ili drugi aditivi se sadrže u kanisteru kao smeša uključujući tečni, komprimovani gas. Pokretanje mernog ventila oslobađa smešu kao aerosol, pretpostavljeno sadržeći veličinu čestice u rasponu od oko manje od 1 um do manje od oko 20 um.
Željena veličina čestice aerosola može se dobiti upošljavanjem formulacije jedinjenja sadašnjeg pronalaska proizvedenog različitim postupcima poznatim stručnjacima iz ove oblasti nauke, ali ne ograničavajući na, džet-drobljenje, sušenje spreja, kritičnu tačku kondenzacije, i slično. Odovarajući inhalatori sa merenjem doze uključuju one proizvedene od strane 3M ili Glaxo i koriste hidrofluorougljenik kao reaktivno gorivo.
Farmaceutski sastavi za upotrebu sa inhalator uređajima sa merenjem doze će generalno uključivati konačno podeljeni puder koji sadrži jedinjenje koje je ovde otkriveno kao suspenziju u ne-tečnom medijumu, na primer, suspendovanom u reaktantu uz pomoć površinskog sredstva. Reaktant moće biti bilo koji konvencionalni materijal uposlen u ovu svrhu kao što je hlorofluorougljenik, hidrohlorofluorougljenik, hidrofluorougljenik, ugljovodonik uključujući trihlorofluorometan, dihlorodifluorometan, dihlorotetrafluoroetanol i 1,1,1,2-tetrafluoroetan, HFA-134a (hidrofluoroalkan-134a), HFA-227 (hidrofluoroalkan-227), i slično. U jednoj realizaciji, reaktant je hidrofluorougljenik. Površinsko sredstvo može biti odabrano da stabilizuje jedinjenje sadašnjeg pronalaska kao suspenziju u reaktantu, da zaštiti aktivno sredstvo protiv hemijske degradacije, i slično. Odgovarajuća površinska sredstva uključuju sorbitan trioleat, soja lecitin, oleinsku kiselinu, i slično. U nekim slučajevima rastvor aerosolova poželjno upotrebljava rastvarače kao što je etanol. Običan stručnjak iz ove oblasti nauke će prepoznati da postupci sadašnjeg pronalaska mogu biti postignuti pulmonalnim davanjem jedinjenja koje je ovde otkriveno putem uređaja koji nisu ovde opisani.
Za absorbciju kroz mukozalnu površinu, sastavi i postupci sadašnjeg pronalaska za davanje jedinjenja koje je ovde otkriveno uključuju emulziju koja sadrži mnoštvo submikronskih čestica, mukoadhezivne makromolekule, bioaktivne peptide, i tečnu kontinuiranu fazu, koja promoviše absorbciju kroz mukozalne površine postizanjem mukoadhezije čestica emulzije. Videti, n.pr., U.S. Patent br. 5,514,670. Mukozne površine odgovarajuće za nanošenje emulzije sadašnjeg pronalaska uklučuju rožnjačne, očne, usne, podjezične, nazalne, vaginalne, pulmonalne, abdominalne, intestinalne, i rektalne puteve davanja. Farmaceutski sastavi za vaginalno i rektalno davanje kao što su supozitorije, mogu da sadrže kao inertni punilac, na primer, polialkilenglikole, vazelin, kokosovo ulje, i slično. Farmaceutski sastav za intranazalno davanje može biti čvrst i sadržati inertne punioce, na primer, laktozu ili može biti tečni ili uljani rastvor nazalnih kapi. Za usno davanje, inertni punioci uključuju šećere, kalcijum stearat, magnezijum stearat, prethodno želatinizirani škrob, i slično. Videti, n.pr., U.S. Paten br. 5,849,695.
U sledećoj realizaciji, farmaceutski sastavi sadašnjeg pronalaska mogu biti davani transdermalnim putevima upotrebom oblika transdermalnih flastera za kožu dobro poznatim stručnjacima iz ove oblasti nauke. Za transdermalno davanje, jedinjenje sadašnjeg pronalaska je kapsulirano u uređaj za isporuku kao što su lipozom ili polimerne nanočestice, mikročestice, mikrokapsule, mikrosfere (kolektivno mikročestice ukoliko nije drugačije rečeno). Poznati su brojni odgovarajući uređaji, uključujući mikročestice sačinjene od sintetičkih polimera kao što su polihidroksi kiseline kao što su polimlečna kiselina, poliglikolna kiselina i njihovi kopolimeri, poliortoestri, polianhidridi, polifosfazeni, i prirodni polimeri kao što su kolagen, poliamino kiseline, albumin i drugi proteini, alginat i drugi polisaharidi, i njihova kombinacija. Videti, n.pr., U.S. Patent br. 5,814,599. Da bi se dali u obliku sistema transdermalne isporuke, doza davanja može biti, na primer, kontinuirana pre nego sa prekidima kroz režim doze.
Odgovarajuće formulacije za mesno davanje na kožu može biti prezentovano kao masti, kreme, gelovi i paste koje sadrže sastojak koji se ima dati u farmaceutski prihvatljivom nosaču. Pretpostavljeni sistem mesne isporuke je transdermalni flaster koji sadrži jedinjenj sadašnjeg pronalaska.
Mesni sastav koji sadrži jedinjenje sadašnjeg pronalaska može biti umešano sa različitim materijalima nosača dobro poznatim u nauci uključujući alkohole, aloa vere gel, alantoin, glicerin, ulja sa vitaminom A i E, mineralna ulja, PPG2 miristil propionat i slično da formiraju, na primer, alkoholne rastvore, mesne čistače, kreme za čišćenje, gelove za kožu, losione za kožu, i šampone u krem ili gel formulaciji. Primeri takvih nosača i postupaka formulacija mogu biti pronađeni u Remington's Pharmaceutical Sciences (1990). Farmaceutske formulacije mogu da sadrže od oko 0,005 mas % do oko 10 mas % od aktivnog sastojka. U jednoj realizaciji, farmaceutske formulacije sadrže od oko 0,01 mas % do 5 mas % jedinjenja sadašnjeg pronalaska.
Neki put može biti poželjno da se isporuče jedinjenja sadašnjeg pronalaska subjektu tokom produženih vremenskih perioda, na primer, za periode od jedne nedelje do jedne godine iz jednog davanja. Određeni medicinski uređaji mogu biti uposleni da obezbede kontinuirano, sa prekidima ili po zahtevu doziranje pacijenta. Uređaji mogu biti pumpa ili difuzioni aparat, ili drugi uređaji koji sadrže rezervoar sa lekom i opciono dijagnostičke i komponente za praćenje da se reguliše isporuka leka. Različitisa sporim oslobađanjem, deo ili implant oblici doze mogu biti iskorišteni. Na primer, oblik doze može da sadrži farmaceutski prihvatljivu ne-toksičnu so jedinjenja koje je ovde otkriveno koja ima nizak stepen rastvorljivosti u telesnim fluidima, na primer, (a) kisela adiciona so sa polibaznom kiselinom kao što su fosforna kiselina, sumporna kiselina, limunova kiselina, tartarna kiselina, štavna kiselina, pamoinska kiselina, alginska kiselina, poliglutaminska kiselina, naftalen mono- ili di-sulfokiseline, poligalakturana kiselina, i slično; (b) so sa polivalentnim metalnim katjonom kao što je cink, kalcijum, bizmut, barijum, magnezijum, aluminijum, bakar, kobalt, nikl, kadmijum i slično, ili sa organskim katjonom formiranim iz n.pr., N,N'-dibenzil-etilendiamina ili etilenediamina; ili (c) kombinacije (a) i (b) n.pr., cink tanat so. Dodatno, jedinjenja sadašnjeg pronalaska ili, pretpostavljeno, relativno nerastvorljiva so kao što su one koje su upravo opisane, mogu biti formulisana u gelu, na primer, aluminijum monostearat gel sa, na primer, sezamovim uljem, odgovarajućim za ubrizgavanje. Primeri soli uključuju, ali nisu ograničeni na, cink soli, cink tanat soli, pamoat soli, i slično. Sledeći tip formulacija depoa sa sporim oslobađanjem za ubrizgavanje sadrži jedinjenje ili so raspršenu ili kapsuliranu u slabom degradirajućem, ne-toksično, ne-antigenskom polimeru kao što se polimlenčna kiselina/poliglikolna kiselina polimer, na primer, kako je to opisano u U.S.Patentu br. 3,773,919. Jedinjenja ili njihove relativno nerastvorljive soli kao što su one koje su gore opisane mogu takođe da budu formulisane u holesterol mreži silastičnih granula, n.pr., lipozomi u gasovitom ili tečnom stanju su dobro poznati u literaturi. Videti, n.pr., U.S.Patent br. 5,770,222; Sustained and Controlled Release Drug Deliverv Svstems (1978).
Drugi primeri uključuju uslov jedinjenja sadašnjeg pronalaska da budu data putem sistema isporuke odloženog oslobađanja koji sadrži
biodegradacioni sastav. Biodegradacioni sastav može biti sastavljen od biodegradacionog, ne-toksičnog organskog rastvarača koji je mešljiv do disperzivan u tečnom medijumu. Sistem isporuke može biti implantiran na položaj implanta pri tome izazivajući da se rastvarač rasipa, disperguje ili izlužiti iz sastava u fluid tkiva koji ga okružuje kroz rezultirajuću mikroporoznu matricu.
Kako se to ovde koristi, pod pojmom "položaj implanta" se ima namera da se obuhvati položaj, u ili na koji se ne-polimerni sastav nanosi. Implantacija ili položaj implanta takođe mogu da uključe inkorporaciju farmaceutskog sastava koji sadrži bar jedno jedinjenje sadašnjeg pronalaska sa čvrstim uređajem. Na primer, farmaceutski sastav je inkorporisan u oblogu na stentu koji se implantira u subjekta. Dodatno, drugi čvrsti ili biodegradacioni materijali mogu biti upotrebljeni kao supstrat na koji se farmaceutski sastav nanosi. Obloženi materijal, koji sadrži farmaceutski sastav se potom implantira, umeće ili je susedan subjektu ili pacijentu. Pojam "biodegradacioni" znači da će ne-polimerni materijal i/ili matrica implanta degradirati tokom vremena dejstvom enzima, putem prostog ili enzimski katalizovanog hidrolitičkog dejstva i/ili ili putem drugih sličnih mehanizama u ljudskom telu. Pod pojmom "bioerodivan" se misli da će matrica implanat erodirati ii degradirati tokom vremena zbog, bar delimično, kontakta sa supstancama pronađenim u fluidima okružujućeg tkiva, ćelijskog dejstva, i slično. Pod "bioabsorbivan" se misli da će ne-polimema matrica biti razbijena i absorbovana u ljudskom telu, na primer, od strane ćelije, tkiva, i slično.
Ne-polimerni materijali koji se mogu upotrebiti u sastavu generalno su oni koji su biokompatibilni, suštinski nerastvorljivi u vodi i telesnim fluidima, i biodegradacioni i/ili bioerodivni. Ne-polimerni materijal je sposoban da bude bar delimično rastvoren u voda-rastvorljivom organskom rastvaraču. Ne-polimerni materijali su takođe sposobni da koaguliraju ili se učvrste da formiraju čvrstu matricu implanta. Ne-polimerni materijal se kombinuje sa kompatibilnim i odgovarajućim organskim rastvaračem da se formira sastav koji ima željenu konzistentnost koja je u rasponu od vodenog ka viskozno ka širljivom kitu ili pasti.
Odgovarajući organski rastvarači su oni koji su biokompatibilni, farmaceutski prihvatljivi, i koji će bar delimično rastvoriti ne-polimerni materijal..Organski rastvarač ima rastvorljivost u vodi u rasponu od mešljivog do disperzivnog. Opciono, sredstvo za formiranje pore može biti uključeno u sastav da generiše dodatne pore u matrici implanta. Sredstvo za formiranje pore može biti bilo koja organska ili neorganska, farmaceutski prihvatljiva supstanca koja je suštinski rastvorljiva u vodi ili fluidu tela, i koja će se rasejati od ne-polimernog koagulirajućeg materijala i/ili čvrste matrice implanta u okružujući vluid tela na položaju implanta.
Jedinjenja sadašnjeg pronalaska su sposobna da obezbede lokalno ili sistemsko biološko, fiziološko ili terapeutsko dejstvo u telu životinje. U formulisanju nekih farmaceutskih sastava koji su ovde opisani, jedinjenje je pretpostavljeno rastvorljivo i disperzivno u ne-polimernom sastavu da formira homogenu smešu, i po implantaciji, postane inkorporisano u matricu implanta. Kako čvrsta matrica degradira tokom vremena, jedinjenje je sposobno da bude oslobođeno iz matrice u susedni fluid tkiva, i podesna tkiva i organe tela, bilo susedne ili udaljene od položaja implanta, pretpostavljeno kontrolisanom brzinom. Oslobađanje jedinjenja iz matrice može biti različito, na primer, rastvorljivost jedinjenja u tečnom medijumu, distribucija jedinjenja u okviru matrice, veličina, oblik, poroznost, i rastvroljivost i biodegradativnost čvrste matrice. Videti, n.pr., U.S.Patent br. 5,888,533. Količine i koncentracije sastojaka u sastavu koji se daje pacijentu će generalno biti efikasne da se izvrši nameravan zadatak.
Jedinjenja sadašnjeg pronalaska mogu biti davana putem sistema isporuke bioaktivnog sredstva koji sadrži mikročestice suspendovane u polimer matricu. Mikročestice mogu biti mikrokapsule, mikrosfere i nanosfere koje su trenutno poznate u nauci. Mikročestice treba da budu sposobne da budu ukrcane netaknute u okviru polimera koji je ili postaje gel kada jednom uđe unutar biološkog okruženja. Mikročestice mogu biti biodegradacione ili ne-biodegradacione. Mnoge tehnike mikrokapsuliranja koje se koriste da inkorporišu bioaktivno sredstvo u nosač mikročestice su proučene u nauci. Videti n.pr., U.S. Patent brojevi 4,652,441; 5,100,669; 4,438,253; i 5,665,428.
Pretpostavljena polimerna matrica će biti biodegradaciona i prikazivati rastvorljivost u vodi pri niskoj temperaturi i biće podvrgnuta reverzibilnoj termalnom želatiniziranju na fiziološkim sisarskim telesnim temperaturama. Polimerna matrica je sposobna da otpušta supstancu ukrcanu u okviru matrice tokom vremena i na kontrolisani način. Polimeri postepeno degradiraju putem enzimske ili ne-enzimske hidrolize u tečnim ili fiziološkom okruženjima. Videti n.pr., U.S: Patent br. 6,287,588.
Jedinjenja sadašnjeg pronalaska mogu biti davana putem sastava za isporuku leka kji se sastoji od mikročestica koje sadrže bar jedno hemoterapeutsko sredstvo i bar jedan hemosenzibilizator suspendovane u matricu polimera. Mikročestice mogu biti mikrokapsule, mikrosfere ili nanosfere koje su trenutno poznate u nauci. Mikročestice treba da budu biodegradativne i stabilne u fiziološkim okruženjima. Mikročestice takođe dopuštaju difuziju hemoterapeutskog sredstva i hemosenzibilizatora oz jezgra kroz matricu pri prethodno određenoj brzini oslobađanja. Jonska hemoterapeutska sredstva su odgovarajuća za upotrebu u isporuci sastava pronalaska. Jonski hemosenzibilizatori su odgovarajući za upotrebu u isporuci sastava pronalaska. Sastavi za isporuku leka mogu biti isporučeni ciljanom položaju kroz različite poznate puteve davanja. Doze hemoterapeutskog sredstva i hemosenzibilizatora inkorporisanih u sastav za isporuku leka će zavisiti od individualnih potreba, željenog dejstva i od izabranog pute davanja. Videti n.pr., WO 98/50018.
Utvrđivanja doze
Uopšteno govoreći, jedinjenja koja su ovde otkrivena mogu biti upotrebljena sama ili zajedno sa drugim terapeutskim sredstvima pri odgovarajućim dozama definisanim rutinskim testiranjem da bi se dobila optimalna efikasnost dok se minimizuje bilo koja potencijalna toksičnost. Režim doze koji iskorištava jedinjenje sadašnjeg pronalaska moće biti odabran prema različitim faktorima uključujući tip, vrste, starost, težinu, pol, zdravstveno stanje pacijenta; ozbiljnost stanja koje se ima lečiti; put davanja; renalnu i hepatičnu funkciju pacijenta; i koje je jedinjenje uposleno. Običan doktor ili veterinar mogu lako da utvrde i propišu efikasnu količinu leka koji se zahteva da spreči, napadne ili zaustavi progres stanja.
Optimalna preciznost u postizanju koncentracija leka u okviru raspona koji prinosi maksimalnu efikasnost sa minimalnom toksičnošću može zahtevati režim zasnovan na kinetici dostupnosti jedinjenja jednom ili više ciljanih položaja. Distribucija, ravnoteža, i eliminacija leka može se razmatrati prilikom utvrđivanja optimalne koncentracije za režim lečenja. Doze jedinjenja koja su ovde otkrivena mogu biti podešene kada se kombinuju da se postignu željena dejstva. Na drugoj strani, doze ovih različitih terapeutskih sredstava mogu biti nezavisno optimizovane i kombinovane da se postigne sinergistički rezultat pri čemu se patologija više smanjuje nego što biti to bilo sa bilo kojim od sredstava da je korišteno samo.
Posebno, toksičnost i terapeutska efikasnost jedinjenja koja su ovde otkrivena mogu biti utvrđeni standardnim farmaceutskim postupcima u ćelijskim kulturama ili eksperimentalnim životinjama, n.pr., za utvrđivanje LD50(smrtonosne doze prema 50% populacije) i ED50(terapeutski efikasne doze u 50% populacije). Odnos doze između toksičnog i terapeutskog dejstva je terapeutski indeks i može biti izražen kao odnos LD5o/ED5o. Pretpostavljena su jedinjenja koja prikazuju velike terapeutske indekse osim kada je citotoksičnost jedidnjenja aktivnost ili terapeutski rezultat koji je željen, lako jedinjenja koja prikazuju toksične sporedne efekte mogu biti upotrebljena, sistem isporuke može ciljati takva jedinjenja na položaj tkiva na koje se utiče da bi se minimiziralo potencijalno oštećenje neinficiranih ćelija i, prema tome, smanjili sporedni efekti. Uopšteno govereći, jedinjenja sadašnjeg pronalaska mogu biti davanana način koji maksimizira efikasnost i minimizira toksičnost.
Podaci dobijeni iz ogleda ćelijske kulture i proučavanja životinja mogu biti upotrebljeni u formulisanju raspona doza za upotrebu kod ljudi. Doze takvih jedinjenja postavljene su pretpostavljeno u okviru raspona cirkulacije koncentracija koje uključuju ED50sa malo ili bez toksičnosti. Doza može biti različita u okviru ovog raspona u zavisnosti od oblika doze koji se upošljava i iskorištenog puta davanja. Za bilo koje upotrebljeno jedinjenje u postupcima pronalaska, terapeutski efikasna doza moće biti inicijalno procenjena iz ogleds ćelijske kulture. Doza može biti formulisana u životinjskim modelima da se postigne cirkulisanja koncentracije plazme u rasponu koji uključuju IC50(koncentracija probnog jedinjenja koja postiže polu-maksimalnu inhibiciju simptoma) kako je to utvrđeno u kulturi ćelije. Takva informacija može biti korisna da precizno odrede korisne doze u ljudima. Nivoi plazme mogu biti izmereni, na primer, putem tečne hromatografije visoke performance.
Šta više, davanje doze farmaceutskih sastava sadašnjeg pronalaska mougu biti optimizirana upotrebom farmakokinetičkog/ farmakodinamičkog sistema modeliranja. Na primer, jedan ili više režima doze mogu biti odabrani i farmakokinetički/farmakodinamički model može biti upotrebljen da se utvrdi farmakokinetički/ farmakodinamički profil jednog ili više režima doze. Sledeće, jedan od režima doze za davanje može biti odabran da ostvari željeni farmakokinetički/farmakodinamički odgovor zasnovan na određenom farmakokinetičkom/farmakodinamičkom profilu. Videti WO 00/67776, koji je u celini eksplicitno inkorporisan ovde putem reference.
Poznati su postupci u nauci za utvrđivanje efikasnih doza u terapeutske i profilaktičke svrhe za otkrivene farmaceutske sastave ili otkrivene kombinacije leka, bilo da su ili ne formulisani u istom sastavu. U terapeutske svrhe, pojam "zajednički efikasna količina", kako se to ovde koristi, znači daje količina svakog aktivnog jedinjenja ili farmaceutskog sredstva, samog ili u kombinaciji, koja izaziva biološki ili medicinski odgovor u sistemu tkiva, životinji ili čoveku tako viđena od strane istraživača, veterinara ili doktora ili drugog kliničara, koja uključuje smanjenje simptoma bolesti ili poremećaja koji se leći. U profilaktičke svrhe (n.pr., inhibiciju početka ili progresije bolesti), pojam "zajednička efikasna količina" se odnosi na količinu svakog aktivnog jedinjenja ili farmaceutskog sredstva, samog ili u kombinaciji, koja inhibira u subjektu početak ili progresiju poremećaja tako viđena od strane istraživača, veterinara, doktora ili drugog kliničara. Tako, sadašnji pronalazak obezbeđuje kombinacije dva ili više terapeutskih sredstava pri čemu se, na primer, (a) svako terapeutsko sredstvo daje u nezavisnoj i terapeutski i profilaktički efikasnoj količini; (b) bar jedno terapeutsko sredstvo u kombinaciji daje u količini koja je sub-terapeutska ili sub-profilaktička ukoliko se samo ona daje, ali je terapeutska i profilaktička kada se daje u kombinaciji sa drugim dodatnim terapeutskim sredstvom prema pronalasku; (c) oba terapeutska sredstva daju u količini koja je sub-terapeutska i sub-profilaktička ukoliko se daju sami, ali je terapeutska i profilaktička kada se daju zajedno. Kombinacije tri ili više terapeutskih sredstava su analogno moguće. Postupci kombinacione terapije uključuju zajedničko davanje jedne formulacije koja sadrži sva aktivna sredstva; u osnovi istovremeno davanje više od jedne formulacije; i davanje dva ili više aktivna sredstva odvojeno formulisanih.
Doze
Specifičnije, farmaceutski sastavi mogu biti davani u jednoj dnevnoj dozi, ili ukupna dnevna doza može biti davana u odvojenim dozama dva, tri, ili četiri puta na dan. U slučaju oralnog davanja, dnevna doza sastava može varirati u širokom rasponu od oko 0,0001 do oko 1,000 mg po pacijentu, na dan. Raspon može određenije biti od oko 0,001 mg/kg do 10 mg/kg telesne težine na dan, oko 0,1-100 mg, oko 1,0-50 mg ili oko 1,0-20 mg na dan za odrasle (sa oko 60 kg).
Dnevna doza farmaceutskih sastava može varirati u širokom rasponu od oko 0,001 do oko 1000 mg po odraslom čoveku dnevno. Za oralno davanje, farmaceutski sastavi se pretpostavljeno obezbeđuju u obliku tableta koje sadrže od oko 0,1 mg do oko 1000 mg jedinjenja ili 0,1, 0,2, 0,5, 1,0, 2,0, 5,0, 10,0, 15,0, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 800, 900, ili 1000 miligrama aktivnog jedinjenja za simptomatično podešavanje doze pacijentu koji se leči. Efikasna količina leka se uobičajeno snabdeva u nivou doze od oko 0,1 mg/kg do oko 20 mg/kg telesne težine na dan. U jednoj realizaciji, raspon je od oko 0,2 mg/kg do oko 10 mg/kg telesne težine na dan. U sledećoj realizaciji, raspon je od oko 0,5 mg/kg do oko 10 mg/kg telesne težine na dan. Jedinjenja mogu biti davana u režimu od oko 1 do oko 10 puta na dan.
U slučaju ubrizgavanja, uobičajeno je pogodno da se da intravenoznim putem u količini od oko 0,01-30 mg, oko 0,1-20 mg ili oko 0,1-10 mg po danu odrasloj osobi (na oko 60 kg). U slučaju drugih životinja, doza koja je izračunata na 60 kg može se takođe davati.
Doze jedinjenja sadašnjeg pronalaska može opciono uključiti 0,0001 do 1.000 mg/kg/davanje, ili 0,001 do 100,0 mg/kg/davanje, od 0,01 do 10 mg/kg/davanje, od 0,1 do 10 mg/kg/davanje, uključujući 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, i/ili 100-500 mg/kg/davanje ili bilo koji njegov raspon, vrednost ili frakcija, ili da se postigne koncentracija seruma od 0,1, 0,5, 0,9, 1,0, 1,1, 1,2, 1,5, 1,9, 2,0, 2,5, 2,9, 3,0, 3,5, 3,9, 4,0, 4,5, 4,9, 5,0, 5,5, 5,9, 6,0, 6,5, 6,9, 7,0, 7,5, 7,9, 8,0, 8,5, 8,9, 9,0, 9,5, 9,9, 10,010,5, 10,9, 11, 11,5, 11,9, 12,012,5, 12,9, 13,0, 13,5, 13,9, 14,0, 14,5, 15, 15,5, 15,9, 16, 16,5, 16,9, 17, 17,5, 17,9, 18, 18,5, 18,9, 19, 19,5, 19,9, 20, 20,5, 20,9, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 96, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1500, 2000, 2500, 3000, 3500, 4000, 4500, i/ili 5000 ug/mL koncentracije seruma po jednom ili višestrukom davanju ili od toga bilo kom rasponu, vrednosti ili frakciji.
Kao neograničavajući primer, lečenje ljudi ili životinja može biti obezbeđeno kao jedna ili periodična doza jedinjenja sadašnjeg pronalaska 0,1 do 100 mg/kg kao što je 0,5, 0,9, 1,0, 1,1, 1,5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19,20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90 ili 100 mg/kg na dan, bar na jedan dan 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, ili 40 ili alterantivno ili dodatno, bar jednom nedeljno 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 17, 18, 19, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, ili 52, ili alternativno ili dodatno, bar jedno 1, 2, 3, 4, 5, 6„ 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, ili 20 godina, ili od toga bilo koja kombinacija, upotrebom jedne, infuzije ili ponovljenih doza.
Specifično, farmaceutski sastavi sadašnjeg pronalaska mogu biti davani bar jednom nedeljno tokom nekoliko nedelja. U jednoj realizaciji, farmaceutski sastavi se daju bar jednom nedeljno tokom nekoliko nedelja do nekoliko meseci. U drugoj realizaciji, farmaceutski sastavi se daju jednom nedeljno tokom četiri do osam nedelja. U još jednoj realizaciji, farmaceutski sastavi se daju jednom nedeljno tokom četiri nedelje.
Specifičnije, farmaceutski sastavi mogu biti davani bar jednom dnevno tokom otprilike 2 dana, bar jednom tokom otprilike 3 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 4 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 5 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 6 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 7 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 8 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 9 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 10 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 11 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 12 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 13 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 14 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 15 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 16 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 17 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 18 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 19 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 20 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 21 dan, bar jednom dnevno tokom otprilike 22 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 23 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 24 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 25 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 26 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 27 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 28 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 29 dana, bar jednom dnevno tokom otprilike 30 dana, ili bar jednom dnevno tokom otprilike 31 dan.
Alternativno, farmaceutski sastavi mogu biti davani oko jedanput svaki dan, oko jedanput svaka 2 dana, oko jedanput svaka 3 dana, oko jedanput svaka 4 dana, oko jedanput svakih 5 dana, oko jedanput svakih 6 dana, oko jedanput svakih 7 dana, oko jedanput svakih 8 dana, oko jedanput svakih 9 dana, oko jedanput svakih 10 dana, oko jedanput svakih 11 dana, oko jedanput svakih 12 dana, oko jedanput svakih 13 dana, oko jedanput svakih 14 dana, oko jedanput svakih 15 dana, oko jedanput svakih 16 dana, oko jedanput svakih 17 dana, oko jedanput svakih 18 dana, oko jedanput svakih 19 dana, oko jedanput svakih 20 dana, oko jedanput svakih 21 dan, oko jedanput svaka 22 dana, oko jedanput svaka 23 dana, oko jedanput svaka 24 dana, oko jedanput svakih 25 dana, oko jedanput svakih 26 dana, oko jedanput svakih 27 dana, oko jedanput svakih 28 dana, oko jedanput svakih 29 dana, oko jedanput svakih 30 dana, ili oko jedanput svakih 31 dana.
Farmaceutski sastavi sadašnjeg pronalaska mogu alternativno biti davani oko jedanput svake nedelje, oko jedanput svake 2 nedelje, oko jedanput svake 3 nedelje, oko jedanput svake 4 nedelje, oko jedanput svakih 5 nedelja, oko jedanput svakih 6 nedelja, oko jedanput svakih 7 nedelja, oko jedanput svakih 8 nedelja, oko jedanput svakih 9 nedelja, oko jedanput svakih 10 nedelja, oko jedanput svakih 11 nedelja, oko jedanput svakih 12 nedelja, oko jedanput svakih 13 nedelja, oko jedanput svakih 14 nedelja, oko jedanput svakih 15 nedelja, oko jedanput svakih 16 nedelja, oko jedanput svakih 17 nedelja, oko jedanput svakih 18 nedelja, oko jedanput svakih 19 nedelja, oko jedanput svakih 20 nedelja.
Alternativno, farmaceutski sastavi sadašnjeg pronalaska mogu biti davani oko jedanput svaki mesec, oko jedanput svaka 2 meseca, oko jedanput svaka 3 meseca, oko jedanput svaka 4 meseca, oko jedanput svakih 5 meseci, oko jedanput svakih 6 meseci, oko jedanput svakih 7 meseci, oko jedanput svakih 8 meseci, oko jedanput svakih 9 meseci, oko jedanput svakih 10 meseci, oko jedanput svakih 11 meseci, oko jedanput svakih 12 meseci.
Alternativno, farmaceutski sastavi moug biti davani bar jedanput nedeljno tokom oko 2 nedelje, bar jedanput nedeljno tokom oko 3 nedelje, bar jedanput tokom oko 4 nedelje, barem jedanput tomom oko 5 nedelja, barem jedanput tomom oko 6 nedelja, barem jedanput tomom oko 7 nedelja, barem jedanput tomom oko 8 nedelja, barem jedanput tomom oko 9 nedelja, barem jedanput tomom oko 10 nedelja, barem jedanput tomom oko 11 nedelja, barem jedanput tomom oko 12 nedelja, barem jedanput tomom oko 13 nedelja, barem jedanput tomom oko 14 nedelja, barem jedanput tomom oko 15 nedelja, barem jedanput tomom oko 16 nedelja, barem jedanput tomom oko 17 nedelja, barem jedanput tomom oko 18 nedelja, barem jedanput tomom oko 19 nedelja, ili barem jedanput tomom oko 20 nedelja.
Alternativno farmaceutski sastavi mogu biti davani bar jedanput nedeljno tokom oko 1. meseca, bar jedanput nedeljno tokom oko 2 meseca, bar jedanput nedeljno tokom oko 3 meseca, bar jedanput nedeljno tokom oko 4 meseca, barem jedanput nedeljno tokom oko 5 meseci, barem jedanput nedeljno tokom oko 6 meseci, barem jedanput nedeljno tokom oko 7 meseci, barem jedanput nedeljno tokom oko 8 meseci, barem jedanput nedeljno tokom oko 9 meseci, barem jedanput nedeljno tokom oko 10 meseci, barem jedanput nedeljno tokom oko 11 meseci, ili barem jedanput nedeljno tokom oko 12 meseci.
Kombinovana terapija
Dodatno, istovremeno davanje ili sekvencijalno davanje jedinjenja sadašnjeg pronalaska i drugih terapeutskih sredstava može biti poželjno, kao što su hemoterapeutska sredstva, imunosupresivna sredstva, citokini, citotoksična sredstva, nukleolitična sredstva, radioaktivni izotopi, receptori, i enzimi za aktiviranje pro-leka, koji mogu prirodno nastati ili proizvedeni rekombinantnim postupcima. Kombinovano davanje uključuje istovremeno davanje, upotrebom jedne formulacije ili jedne farmaceutske formulacije, i jedno za drugim davanje jednim ili drugim redosledom, pri čemu pretpostavljeno postoji period u kom oba (ili sva) aktivna terapeutska sredstva simulatno ispoljavaju svoje biološke aktivnosti.
Jedinjenja ovog pronalaska mogu biti davana u kombinaciji sa bar jednim odabranim od grupe koja sadrži antireumatik (n.pr., metotreksat, auranofin, aurotioglukoza, azatioprin, etanercept, zlatni natrijum tiomalat, hidroksihlorokin sulfat, leflunomid, sulfasalzin), mišićni relaksant, narkotik, ne-steroidni antiinflamatorni lek, analgetik, anestetik, sedativ, lokalni antestetik, neuromuskularni blokator, anti-kancer, antimikrobsko sredstvo (n.pr., aminoglikozid, antigljivično, antiparastično, antiviralni, karbapenem, cefalosporin, fluorihinolon, makrolid, penicilin, sulfonamind, tetraciklin, druga antimikrobska), anti-psorijatik, kortikosteroid, anabolični steroid, sa dijabetisom povezano sredstvo, mineral, nutriciono sredstvo, tiroidno sredstvo, vitamin, hormon povezan sa kalcijumom, antidiarhealno sredstvo, protiv kašlja, anti-emetično, protiv čira, laksativ, antikoagulant, eritropietin (n.pr., epoetin alfa), filgrastim (n.pr., G-CSF, Neupogen), sargamostim (GM-CSF, Leukin), imunizacija, imunoglobulin, imunosupresivno sredstvo (n.pr., baziliksimab, ciklosporin, daklizumab), hormon rasta, hormon zamene leka, modulator estrogen receptora, midriatično sredstvo, cikloplegično sredstvo, sredstvo za alkilovanje, anti-metabolit, mitotični inhibitor, radioaktivno farmaceutsko sredstvo, anti-depresant, anti-manično sredstvo, anti-psihotik, anksiolitik, hipnotik, simpatomimetik, stimulant, donepezil, takrin, lek za astmu, beta agonist, steroid koji se inhalira, leukotrien inhibitor, metilksantin, kromolin, epinefrin ili njegov analog, dornaza alfa (Pulmozim), ili citokin.
Takva anti-kancer i antimikrobska jedinjenja mogu takođe da uključe moleukle koji su povezani, vezani, istovremeno formulisani, istovremeno dati ili jedan pa drugi dati, u jednom ili drugom redosledu, sa bar jednim od jedinjenja sadašnjeg pronalaska. Toksim može opciono da deluje kako bi selektivno ubio patološku ćeliju ili tkivo. Patološka ćelija može biti kancer ili druga ćelija. Takvi toksini mogu biti, ali nisu ograničeni na, prečišćeni ili rekombinantni toksin ili fragment toksina koji se sasoji od bar jednog funkcionalnog citotoksičnog domena toksina, n.pr., bar jedan odabran od ricina, toksina difterije, otrov toksina, bakterijskog toksina. Pojam toksin takođe uključuje i endotoksine i eksotoksine proizvedene putem bilo koje prirodno nastale, mutant ili rekombinantne bakterije ili virusa koji mogu da izazovu bilo koje patološko stanje kod ljudi i drugih sisara, uključujući toksični šok, koji može da rezultira sa smrću. Takvi toksini, mogu uključiti, ali nisu ograničeni na, eterotoksigensku E. Coli na dejstvo temperature labilni enterotoksin (LT), stabilan na temperaturi enterotoksin (ST), Shigella citotoksin, Aeromonas entetotoksini, sindrom toksičnog šoka toksin-1 (TSST-1), Stafilokokni enterotoksin A (SEA), B (SEB), ili C (SEC), Streptokokne enterotoksine i slično. Takva bakterija uključuje, ali nije ograničena na, nizove vrsta enterotoksične E. Coli (ETEC), enterohemoragičnu E. Coli (n.pr., nizove serotipa 0157:H7), Stafilokokne vrste (n.pr., Staphvlococcus aureus, Staphvlococcus pvogenes), Shigella vrste (n.pr., Shigella dvsenteriae, Shigella flexneri, Shigella bovdii, i Shigella sonnei), Salmonella vrste (n.pr., Salmonella typhi, Salmonella cholera-suis, Salmonella enteriditis), Clostridium vrste (n.pr., Clostridium perfringens, Clostridium dificile, Clostridium botulinum), Camphlobacter vrste (n.pr., Camphlobacter jejuni, Camphlobacter fetus), Heliobacter vrste (n.pr., Heliobacter pvlori), Aeromonas vrste (n.pr., Aeromonas sobria, Aeromonas hvdrophila, Aeromonas caviae), Pleisomonas shigelloides, Yersina enterocolitica, Vibrios vrste (n.pr., Vibrios cholerae, Vibrios parahemolvticus), Klebsiella vrste, Pseudomonas aeruginosa, i Streptococci. Videti, n.pr., Stein, ed., INTERNAL MEDICINE, 3rd ed., pp 1-13, Little, Brown and Co., Boston, (1990); Evans et al., eds., Bacterial Infections of Humans: Epidemiologv and Control, 2d. Ed., pp 239-254, Plenum Medical Book Co., New York (1991); Mandell et al, Principles and Practice of Infectious Diseases, 3d. Ed., Churchill Livingstone, New York (1990); Berkovv et al, eds., The Merck Manual, 16th edition, Merck and Co., Rahway, N.J., 1992; Wood et al, FEMS Microbiology lmmunology, 76:121-134 (1991); Marracketal, Science, 248:705-711 (1990), sadržaje za koje su reference inkoprorisane u celini putem reference.
Specifičnije, jedinjenje sadašnjeg pronalaska može biti dato u kombinaciji sa bar jednim imunosupresivnim sredstvom za upotrebu u, na primer, lečenju ili prevenciji vaskularno okulzivnih stanja kao što je vaskulopatija transplanta. Odgovarajuća imunosupresivna sredstva uključuju, ali nisu ograničena na, CellCept (Roche Labs.), Gengraf (Abbot Labs., Inc.), Micrhogam (Ortho-Clinical), Neoral (Novartis), Orthoclone OKT3 (Ortho-Biotech), Prograf (Fujisavva), Rapamune (Wyeth-Ayerst), Sandimmune (Novartis), Thymoglobulin (SangStat), Zenapax (Roche).
U jednoj realizaciji, terapeutsko sredstvo koje se daje simultano ili jedno za drugim, u jednom ili drugom redosledu i u različita vremena sa jedinjenjem sadašnjeg pronalaska, sadrži hemoterapeutsko sredstvo. "Hemoterapeutsko sredstvo" je jedinjenje korisno u lečenju cancera. Primeri hemoterapeutskoh sredstava uključuju, ali nisu ograničeni na, sredstva za alkilovanje kao što su tiotepa i ciklosfosfamid; alkil sulfonate kao što su busulfan, improsulfan i piposulfan; aziridine kao što su benzodopa, karbokion, meturedopa, i uredopa; etilenimini i metilamelamini uključujući altretamin, trietilenmelamin, trietilenfosforamid, trietilentiofosfoaoramid i trimetilolomelamin; senfovi azota kao što su hlorambucil, hlornafazin, holofosfamid, estramustin, ifosfamid, mekloretamin, mekloretamin oksid hidrohlorid, melfalan, novembiehin, fenesterin, prednimustin, trofosfamid, uracil senf; nitrouree kao što su kanustin, hlorozotocin, fotemustin, lomustin, nimustin, ranimustin; antibiotike kao što su aklacinomizini, aktinomicin, autramicin, azaserin, bleomicini, kaktinomicin, kalihemicin, karabicin, karminomicin, karzinofilin, hromoinicini, daktinomicin, daunorubicin, detorubicin, 6-diazo-5-okso-L-norleucin, doksorubicin, epirubicin, esorubicin, idambicin, marcelomicin, mitomicini, mikofenolna kiselina, nogalamicin, olivomicini, peplomicin, potfiromicin, puromicin, helamicin, rodorubicin, streptonigrin, streptozocin, tubercidin, ubenimeks, cinostatin, zorubicin; anti-metaboliti kao što su denopterin, metotreksat, pteropterin, trimetreksat; analozi purina kao što su fludarabin, 6-merkaptopurin, tiamiprin, tioguanin; analozi pirimidina kao što su ancitabin, azacitidin, 6-azauridin, karmofur, citarabin, dideoksiuridin, doksifluridin, enocitabi, floksuridin, 5-FU; androgeni kao što su kalusteron, dromostanolon propionat, epitiostanol, meptitiostan, testolakton; anti-adrenali kao što su aminoglutetimid, mitotan, trilostan; popunjivač folne kiselina kao što je frolinska kiselina; aceglaton; aldofosfamid glikozid; aminolevulinska kiselina; amsakrin; bestrabucil; bisantren; edatraksat; defofamin; demekolcin; diazikuon; elformitin; eliptinium acetat; etoglucid; galium nitrat; hidroksiurea; lentinan; londidamin; mitoguazon; mitoksantron; mopidamol; nitrakrin; pentostatin; fenamet; pirarubicin; podofilinksa kiselina; 2-etilhidrazid; prokarbazin; PSK®; razoksan; sizofran; spirogermanijum; tenuazonska kiselina; triazihinon; 2,2',2"-trihlorotrietilamin; uretan; vindesin; dakarbazin; manomustin; mitobronitol; mitolaktol; pipobroman; gakitozin; arabinozid ("Ara-C"); ciklofosfamid; tiotepa; taksoidi, n.pr., paklitaksel (TAXOL®, Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, NJ) i doksetaksel (TAXOTERE®, Rhone-Poulenc Rorer, Antony, Francuska); hlorambucil; gemcitabin; 6-tioguanin; merkaptopurin; metotreksat; analozi platine kao što su cisplatin i karboplatin; vinblastin; platina; etopozid (VP-16); ifosfamid; mitomicin C; mitoksantron; vinkristin; vinorelbine; navelbin; novantrop; tenipozid; daunomicin; aminopterin; kseloda; ibandronat; CPT-11; inhibitor topoizomeraze RFS 2000; difluorometilornitin (DMFO); retinojeva kiselina; esperamicini; kapecitabin; i farmaceutski prihvatljive soli, kiseline ili derivati bilo čega od gore pomenutog. Tako su uključeni u ovu definiciju anti-hormonska sredstva koja deluju da regulišu ili inhibiraju dejstvo hormona na tumore kao što su anti-estrogeni uključujući na primer tamoksifen, raloksifen, keoksifen, onapriston, i toremifen (Fareston); i anti-androgeni kao što su flutamid, nilutamid, bikalutamid, leuprolid, i goserelin; i farmaceutski prihvatljive soli, kiseline ili derivati bilo čega od gore pomenutog.
U sledećoj realilzaciji, terepeutsko sredstvo sadrži citokin. Pojam "citokin" je opšti termin za proteine oslobođene od strane jedne ćelijske populacije koji deluju na drugu ćeliju kao intercelularni medijatori. Primeri takvih citokina su limfokini, monokini, i tradicionalni polipeptid hormoni. Uključeni su među citokine su hormoni rasta kao što je humani hormon rasta, N-metionil humani hormon rasta, i volovski hormon rasta; paratiroidni hormon; tiroksin; insulin; proinsulin; relaksin; prorelaksin; glikoprotein hormoni kao što su hipofizni gonadotropni hormon (FSH), hormon koji stimuliše tiroidu (TSH), i luteinizirajući hormon (LG); hepatični faktor rasta; fibroblast faktor rasta; prolaktin; placentni laktogen; faktor-a i -B tumor nekroze; mulerian-inhibirajuća supstanca; mišji sa gonadotropinom povezani peptid; inhibin; aktivin; vaskularni endotelijalni faktor rasta; integrin; trombopoetin (TPO); nervni faktori rasta kao što su NGF-B; platelet faktor rasta; transformišući faktori rasta (TGF-ovi) kao što su TGF-a i TGF-B; insulinu sličan faktor-l i -II; eritropoetin (EPO); osteoindiktivni faktori; interferoni kao što su interferon-a, -p, i -y; faktori stimulisanja kolonije (CSFs) kao što su makrofage-CSF (GCSF); interleukini (IL-ovi) kao što su IL-1, IL-la, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-11, IL-12, IL-15; faktor nekroze tumora kao što su TNF-a ili TNF-P; i drugi polipeptid faktori uključujući LIF i kit ligand (KL). Kako se to ovde koristi, pojam citokin uključuje proteine iz prirodnih izvora ili iz rekombinantne ćelijske kulture i biološki aktivni ekvivalenti matične sekvence citokina.
U sledećoj realizaciji, jedinjenja sadašnjeg pronalaska mogu biti data u kombinaciji sa anti-inflamatomim sredstvom uključujući, ali ne ograničavajući na, adrenokortikalne steroide (kortizol, kortizon, fludrokortizon, prednizon, prednizolon, 6a-metilprednisolon, tiramkinolon, betametazon, i deksametazon), ne-steroidna sredstva (derivati salicilne kiseline, odnosno, aspirin; para-aminofenol derivati, odnosno, acetominofen, indol i inden sirćetne kiseline (indometacin, sulindak, etodalak), heteroaril sirćetne kiseline (tolmetin, diklofenak, i ketorolak), arilpropionske kiseline (ibuprofen i derivati), antranilne kiseline (mefenamska kiselina, i meklofenamska kiselina), enolne kiseline (piroksikam, tenoksikam, fenilbutazon, i oksifentatrezon), nabumeton, jedinjenja zlata (auranofin, aurotioglukoza, zlatni natrijum tiomalat). Komercijalno dostupni nesteroidni antiinflamatorni lekovi uključuju, ali nisu ograničeni na, Anaprox (Roche Labs.), Arthrotec (Searle), Cataflam (Novartis), Celebrex (Pfizer), Clinoril (Merck), Dolobid (Merck), Feldene (Pfizer), Indocin (Merck), Lodine (Wyeth-Averst), Mobic (Boehringer Ingelheim), Motrin (McNeil Consumer), Naprosyn (Roche Labs.), Orudis (Wyeth-Ayerst), Oruvail (Wyeth-Ayerst), Ponstel (First Horizon), Relafen (GlaxoSmithKline), Tolectin (Ortho-McNeil), Toradol (Roche Labs., Inc.), Vioxx (Merck), Voltaren (Novartis), Advair (GlaxoSmithKline), Flovent (GlaxoSmithKline), Pulmicort (AstranZaneca), i Vanceril (Schering), Asacol (Procter & Gamble), Colazal (Salix), Dipentum (Pharmacia & Upjohn), i Rowasa (Solvav).
U još jednoj realizaciji, jedinjenja sadašnjeg pronalaska mogu biti data u kombinaciji sa antireumatskim sredstvom. Komercijalno dostupna antireumatska sredstva uključuju, ali nisu ograničena na, Anaprox (Roche Labs.), Arava (Aventic), Arthotec (Searle), Azulfidine (Pharmacia & Upjohn), Cataflam (Novartis), Celebrex (Pfizer), Celestone (Schering), Cuprimine (Merck), Enbrel (lmmunex), Feldene (Pfizer), Gengraf (Abbott), Indocin (Merck), Lodine (Wyeth-Ayerst), Naprosyn (Roche Labs.), Neoral (Novartis), Pediapred (Celltech), Prednisone (Roxanne), Remicade (Centocor), Solu-Medrol (Pharmacia & Upjohn), Triliate (Purdue Frederick), i Voltaren (Novartis).
Šta više, jedinjenja sadašnjeg pronalaska mogu biti upotrebljena u kombinaciji sa bilo kojim kardiovaskularnim sredstvom uključujući, ali ne ograničavajući na, adrenergične blokatore kao što su Cardura (Pfizer), Dibenzvline (VVellSpring), Hvtrin (Abbott), Minipress (Pfizer), i Minizide (Pfizer); adrenergične stimulante kao što su Aldoclor (Merck), Aldomet (Merck), Aldoril (Merck), Catapres (Boehringer Ingelheim), Clorpres (Bertek), i Tenex (Robins); alfa/beta adrenergični blokatori kao što su Coreg (GlaxoSmithKline), i Normodvne (Schering); inhibitore angiotenzina koji konvertuje enzim kao što su Accupril (Parke-Davis), Aceon (Solvav), Altace (Monarch), Captopril (Mylan), Enalaprilat (Baxter Anesthesia), Lotensin (Novartis), Mavik (Abbott), Monopril (Bristol-Myers Squibb), Prinivil (Merck), Univasc (Schvvarz), Vaotec (Merck), i Zestril (AstraZeneca); inhibitore angiotenzina koji konvertuje enzim kao što je Lexxel (AstraZeneca), Lotrel (Novartis), Tarka (Abbott), Accuretic (Parke-Davis), Lotensin (Novartis), Prinzide (Merck), Uniretic (Schvvarz), Vaeretic (Merck), i Zestoretic (AstraZeneca); angiotenzin II receptor antagonisti kao što su Atacand (AstraZeneca), Avapro (Briston-Myers Squibb), Cozaar (Merck), Diovan (Novartis), Micardis (Boehringer Igelheim), i Teveten (Unimed); antiaritmici (Grupe l-IV), antilipemska sredstva kao što su sekvestranti žučne kiseline, derivati fibrinske kiseline, HMG-CoA inhibitori reduktaze, i nikotinska kiselina; inotropična sredstva; vazodilatori uključujući koronarne vazodilatore, natriuretičke peptide, i periferne vazodilatore; i vazopresore.
U sledećem aspektu sadašnjeg pronalaska, terapeutsko sredstvo se sastoji od malih molekula toksina, uključujući maitansin, kalihemicin, trihoten, i CC 1065. U specifičnoj realizaciji, terapeutsko sredstvo može sadržati jedan ili više kalihemicin molekule. Kalihemicin familija antibiotika je sposobna da proizvede double-stranded DNK prekide pri sub-pikomolarnim koncentracijama. Poznati su takođe strukturni analozi kalihemicina. Videti Hinman et al., 53 Cancer Research 3336-42 (1993); Lode et al., 58 Cancer Research 2925-28 (1998).
U još jednom aspektu sadašnjeg pronalaska, terapeutsko sredstvo može se sastojati od jednog ili više enzimski aktivnih toksina i njihovih fragmenata. Primeri takvih toksina uključuju nevezujuće aktivne fragmente difterija toksina, difterija A lanac, eksotoksin A lanac (od Pseudomonas aeruginosa), ricin A lanac, abrin A lanad, modecin A lanac, alfa-sarcin, diantin proteine, Phvtolaca americana proteine (PAPI, PAPAIII, i PAP-S), momordica charantia inhibitor, circin, crotin sapaonaria officinalis inhibitor, gelonin, mitogelin, restriktoein, fenomvicin, enomicin i trikotecene. Videti, n.pr., WO 93/21232.
Sadašnji pronalazak dalje razmatra terapeutska sredstva koji imaju nukleolitičku aktivnost kao što su ribonukleaze i deoksiribonukleaze. Dodatno, razlličiti radioaktivni izotopi su dostupni za proizvodnju radioaktivno konjugovanih partnera za vezivanje. Primeri uključuju Y<90>,At2<22>, Ref<36>, Re<186>, Sm<153>, Bi<212>, P<32>i radioaktivni izotopi Lu.
U još jednom aspektu sadašnjeg pronalaska, bar jedno jedinjenje može biti konjugovano za receptor, kao što je streptavidin, za iskorištavanje u prethodnom ciljanju tumora. Ukratko, jedinjenje-receptor konjugat se daje pacijentu i nevezani konjugat se uklanja iz cirkulacije sa sredstvom za čišćenje. Potom se daje ligand, kao što je biotin, koji je konjugovan na citotoksično sredstvo.
Vreme davanja
U nekoliko realizacija sadašnjeg pronalaska, jedinjenje koje je ovde opisano se daje pre ili posle davanja drugog terapeutskog sredstva. Davanje jedinjenja može se desiti bilo koda u nekoliko minuta do nekoliko sati pre davanja drugog terapeutskog sredstva. Jedinjenje može biti alternativno davano bilo kada od nekoliko sati do nekoliko dana, moguće nekoliko nedelja, pa sve do nekoliko meseci pre drugog terapeutskog sredstva.
Specifičnije, jedinjenje sadašnjeg pronalaska može biti dato bar oko 1 minut, bar oko 2 minuta, bar oko 3 minuta, bar oko 4 minuta, bar oko 5 minuta, bar oko 6 minuta, bar oko 7 minuta, bar oko 8 minuta, bar oko 9 minuta, bar oko 10 minuta, bar oko 11 minuta, bar oko 12 minuta, bar oko 13 minuta, bar oko 14 minuta, bar oko 15 minuta, bar oko 16 minuta, bar oko 17 minuta, bar oko 18 minuta, bar oko 19 minuta, bar oko 20 minuta, bar oko 21 minut, bar oko 22 minuta, bar oko 23 minuta, bar oko 24 minuta, bar oko 25 minuta, bar oko 26 minuta, bar oko 27 minuta, bar oko 28 minuta, bar oko 29 minuta, bar oko 30 minuta, bar oko 31 minut, bar oko 32 minuta, bar oko 33 minuta, bar oko 34 minuta, bar oko 35 minuta, bar oko 36 minuta, bar oko 37 minuta, bar oko 38 minuta, bar oko 39 minuta, bar oko 40 minuta, bar oko 41 minut, bar oko 42 minuta, bar oko 43 minuta, bar oko 44 minuta, bar oko 45 minuta, bar oko 46 minuta, bar oko 47 minuta, bar oko 48 minuta, bar oko 49 minuta, bar oko 50 minuta, bar oko 51 minut, bar oko 52 minuta, bar oko 53 minuta, bar oko 54 minuta, bar oko 55 minuta, bar oko 56 minuta, bar oko 57 minuta, bar oko 58 minuta, bar oko 59 minuta, ili bar oko 60 minuta pre ili posle drugog terapeutskog sredstva. Dalje, jedinjenje sadašnjeg pronalaska može biti dato bar oko 1 sat, bar oko 2 sata, bar oko 3 sata, bar oko 4 sata, bar oko 5 sati, bar oko 6 sati, bar oko 7 stai, bar oko 8 sati, bar oko 9 sati, bar oko 10 sati, bar oko 11 sati, bar oko 12 sati, bar oko 13 sati, bar oko 14 sati, bar oko 15 sati, bar oko 16 sati, bar oko 17 sati, bar oko 18 sati, bar oko 19 sati, bar oko 20 sati, bar oko 21 sat, bar oko 22 sata, bar oko 23 sata, ili bar oko 24 sata pre ili posle drugog terapeutskog sredstva.
Šta više, jedinjenje sadašnjeg pronalaska može biti dato bar oko 1 dan, bar oko 2 dana, bar oko 3 dana, bar oko 4 dana, bar oko 5 dana, bar oko 6 dana, bar oko 7 dana, bar oko 8 dana, bar oko 9 dana, bar oko 10 dana, bar oko 11 dana, bar oko 12 dana, bar oko 13 dana, bar oko 14 dana, bar oko 15 dana, bar oko 16 dana, bar oko 17 dana, bar oko 18 dana, bar oko 19 dana, bar oko 20 dana, bar oko 21 dan, bar oko 22 dana, bar oko 23 dana, bar oko 24 dana, bar oko 25 dana, bar oko 26 dana, bar oko 27 dana, bar oko 28 dana, bar oko 29 dana, bar oko 30 dana ili bar oko 31 dan pre ili posle davanjea drugog terapeutskog sredstva.
U još jednom aspektu sadašnjeg pronalaska, jedinjenje sadašnjeg pronalaska može biti dato bar oko 1 nedelju, bar oko 2 nedelje, bar oko 3 nedelje, bar oko 4 nedelje, bar oko 5 nedelja, bar oko 6 nedelja, bar oko 7 nedelja, bar oko 8 nedelja, bar oko 9 nedelja, bar oko 10 nedelja, bar oko 11 nedelja, bar oko 12 nedelja, bar oko 13 nedelja, bar oko 14 nedelja, bar oko 15 nedelja, bar oko 16 nedelja, bar oko 17 nedelja, bar oko 18 nedelja, bar oko 19 nedelja ili bar oko 20 nedelja pre ili posle drugog terapeutskog sredstva.
U daljem aspektu sadašnjeg pronalaska, jedinjenje sadašnjeg pronalaska može biti dato bar jedan mesec, bar dva meseca, bar tri meseca, bar četiri meseca, bar pet meseci, bar šest meseci, bar sedam meseci, bar osam meseci, bar devet meseci, bar deset meseci, bar jedanaest meseci ili bar dvanaest meseci pre ili posle drugog terapeutskog sredstva.
Iz praktičnih razloga, značenje određenih pojmova i fraza koje su upotrebljene u opisu, primerima, i zahtevima je dato u donjem tekstu.
DEFINICIJE
Kako se to ovde koristi, pojam "jedinjenje" uključuje i jedninu i množinu, i uključuje bilo koji pojedinačni entitet ili kombinovane entitete koji imaju bar aktivnost koja je ovde otkrivena i kombinacije, fragmente, analoge ili derivate takvih entiteta. Takvi entiteti uključuju, ali nisu ograničeni na, hemijske elemente, melekule, jedinjenja, smeše, emulzije, hemoterapeutska sredstva, farmakološka sredstva, hormone, antitela, faktore rasta, ćelijske faktore, nukleinske kiseline, proteine, peptide, peptidomimetike, nukleotide, ugljene hidrate, i kombinacije, fragment, analoge ili derivate takvih entiteta.
Pojam "fenilamin" se odnosi na primarni ili sekundarni benzenamin, uobičajeno poznat kao anilin. Amino grupa na anilinu može biti supstituisana sa vodonkom, alkilom (CrC12 lanac sa normalnim nizom ili račvasti), cikloalkil (C3-C10), ili aril supstituisanu aril grupu. Fenil prsten ovog anilin derivata može biti opciono supstituisan sa jednom ili više funkcionalnih grupa, ili kombinacijom funkcionalnih grupa kao što su alkil, alkenil, alkinil, fenil, benzil, halo, cijano, nitro, hidroksi, tioksi, alkoksi, ariloksi, haloalkiloksi, alkiltio, ariltio, amino, alkil amino, aril amino, acil, karboksil, amido, sulfonamido, sulfonil, sulfat, sulfokiselina, morfolino, piperazinil, piridil, fienil, furanil, piroil, pirazoil, fosfat, fosfonska kiselina, ili fosfonat. Ukoliko je to primenjljivo, ove grupe mogu biti predstavljene u zaštićenim ili nezaštićenim oblicima koje se upotrebljavaju u standardnoj organskoj sintezi.
Pojam "naftilamin" se odnosi na primarni ili sekundarni a- ili B-naftilamin. Podstruktura prstena u naftilaminu može biti opciono supstituisana sa jednom illi kombinacijom funkcionalnih grupa kao što su alkil, alkenil, alkinil, fenil, benzil, halo, cijano, nitro, hidroksi, tioksi, alkoksi, ariloksi, haloalkiloksi, alkiltio, ariltio, amino, alkil amino, aril amino, acil, karboksil, amido, sulfonamido, sulfonil, sulfat, sulfokiselina, morfolino, piperazinil, piridil, fienil, furanil, piroil, pirazoil, fosfat, fosfonska kiselina, fosfonat i slično. Ove grupe mogu biti predstavljene u zaštićenim ili nezaštićenim oblicima koji se upotrebljavaju u standardnoj organskoj sintezi.
Pojam "naftilalkil amin" se odnosi na primarni ili sekundarni a- ili B-naftilalkil amin (na primer, 2-oc-naftiletil amin). Pojam "benzalkil amin"
se odnosi na primarni ili sekundarni benzalkil amin (na primer, feniletil amin). Ove aril alkil podstrukture ili jedinjenja mogu biti optički aktine ili optički neaktivne. Podstrukture arila (prsten) naftilalkil i benzalkil amina mogu biti opciono supstituisane sa jednom ili kombinacijom funkcionalnih grupa, kao što su alkil, alkenil, alkinil, fenil, benzil, halo, cijano, nitro, hidroksi, tioksi, alkoksi, ariloksi, haloalkiloksi, alkiltio, ariltio, amino, alkil amino, aril amino, acil, karboksil, amido, sulfonamido, sulfonil, sulfat, sulfokiselina, morfolino, piperazinil, piridil, fienil, furanil, piroil, pirazoil, fosfat, fosfonska kiselina, fosfonat i slično. Ukoliko je to primenjljivo ove grupe mogu biti predstavljene u zaštićenim ili nezaštićenim oblicima koji se upotrebljavaju u standardnoj organskoj sintezi.
Pojam "hinolinil amin" se odnosi na primarne ili sekundarne hinolil amine. Ovi amini mogu biti u optički aktivnim ili neaktivnim oblicima. Podstruktura arila (prsten) hinolil amina može biti opciono supstituisana sa jednom ili kombinacijom funkcionalnih grupa kao što su alkil, alkenil, alkinil, fenil, benzil, halo, cijano, nitro, hidroksi, tioksi, alkoksi, ariloksi, haloalkiloksi, alkiltio, ariltio, amino, alkil amino, aril amino, acil, karboksil, amido, sulfonamido, sulfonil, sulfat, sulfokiselina, morfolino, piperazinil, piridil, fienil, furanil, piroil, pirazoil, fosfat, fosfonska kiselina, fosfonat i slično. Ove grupe mogu biti predstavljene u zaštićenim ili nezaštićenim oblicima koji se upotrebljavaju u standardnoj organskoj sintezi.
Pojam "heteroaril amini" se odnosi na pirole, pirazole, imidazole i indole. Podstruktura aril (prsten) heteroaril amina može biti opciono supstituisana sa jednom ili kombinacijom funkcionalnih grupa kao što su alkil, alkenil, alkinil, fenil, benzil, halo, cijano, nitro, hidroksi, tioksi, alkoksi, ariloksi, haloalkiloksi, alkiltio, ariltio, amino, alkil amino, aril amino, acil, karboksil, amido, sulfonamido, sulfonil, sulfat, sulfokiselina, morfolino, piperazinil, piridil, fienil, furanil, piroil, pirazoil, fosfat, fosfonska kiselina, ili fosfonat. Ove grupe mogu biti predstavljene u zaštićenim ili nezaštićenim oblicima koji se upotrebljavaju u standardnoj organskoj sintezi.
Pojam "giikovani proteini" kako se to ovde koristi, uključuje proteine povezane na glukozu, bilo enzimski ili ne-enzimski, primarno putem kondenzacije slobodnih ipsilon-amino grupa u proteinu sa glukozom, formirajući Amadori proizvodi pripajanja. Dalje, giikovani protein, kako se to ovde koristi, uključuje ne samo proteine koji sadrže ove inicijalne proizvode glikacije, već takođe proizvode glikacije koji rezultiraju iz daljih reakcija kao što su preraspoređivanje, dehidratacija, i kondenzacije iz ireverzibilne dodatne glikacije krajnjih proizvoda (AGE).
Pojam "polinukleotid" se odnosi generalno na polimerne oblike nukleotida bilo koje dužine, bilo ribonukleotida ili deoksinukleotida. Tako, ovaj pojam uključuje, ali nije ograničen na, sa jednim vlaknom, duplim vlaknom ili multi vlaknima DNK ili RNK. Polinukleotidi mogu dalje da se sastoje od genomskih DNK, cDNK, ili DNK-RNK hibrida. Šta više, polinukleotidi sadašnjeg pronalaska moug biti sintetički proizvedeni.
Polinukleotidi mogu sadržati hemijski modifikovane, biohemijski modifikovane, ili derivatizovane nukleotide. Na primer, polinukleotid može sa sastojati, u delu, od modifikovanih nukleotida kao što su metilovani nukleotidi il analozi nukleotida. U drugoj realizaciji, polinukleotidi mogu se sastojati od šećera, kapa, račvi nukleotida, i grupa za povezivanje kao što su fluororiboza i tioat. Dodatno, sekvenca nukleotida može biti prekinuta ne-nukleotidnim komponentama. Još dalje, polinukleotid može biti modifikovan posle polimerizacije da potpomogne svoje kačenje na druge polinukleotide, proteine, metalne jone, komponente za označavanje, ili čvrsti nosač.
Kičma polinukleotida moće sa sastojati od modifikovanog ili supstituisanog šećera i/ili fosfat grupa. Alternativno, kičma polinukleotida može se sastojati od polimera sintetičke podjedinice kao što su fosforamiditi i tako može biti oligodeoksinukleozid fosforamidat ili mešani fosforamidat-fosfodiester oligomer. Videti Pevrottes et al., Nucl. Acids Res. (1996) 24:1841-1848, i Chaturvedi et al., Nucl. Acids Res.
(1996)24:2318-2323.
Pojam "homologija", kako se to ovde koristi, se odnosi na stepen komplementarnosti. Može biti delimična homologija ili kompletna homologija (odnosno, identičnost). Delimično komplementarna sekvenca je ona koja bar delimično inhibira identičnu sekvencu od hibridizovanja na ciljani polinukleotid; odnosi se na upotrebu funkcionalnog pojma "suštinski homologi". Inhibicija hibridizacije potpuno komplementarne sekvence na ciljanu sekvencu može se ispitati upotrebom ogleda hibridizacije (Južna i Severna mrlja, rastvor hibridizacije i slično) pod uslovima niske strogosti. Suštinski homologa sekvenca ili proba će se takmičiti da inhibira vezivanje (odnosno, hibridizaciju) kompletne homologe sekvence ili probe na ciljanu sekvencu pod uslovima niske strogosti. Ovim se ne kaže da su uslovi niske strogosti takvi daje ne-specifično vezivanje dopušteno; uslovi niske strogosti zahtevaju da vezivanje dve sekvence jedne za drugu bude specifična (odnosno, selektivna) interakcija. Odstustvo ne-specifičnog vezivanja može biti testirano upotrebom druge ciljane sekvence kojoj nedostaje čak i delimičan stepen komplementarnosti (n.pr., manje od oko 30% identičnosti); u odstustvu ne-specifičnog vezivanje, proba neće hibridizovati na drugu ne-komplementamu ciljanu sekvencu.
Pojam "gen" se odnosi na polinukleotidnu sekvencu koja se sastoji od sekvence za kodiranje neophodne za proizvodnju polipeptida ili prekursora, i koja takođe može da uključi ekspresiju kontrolnih sekvenci ili drugih kontrolnih ili regulatornih sekvenci. Polipeptid može biti kodiran sekvencom kodiranja pune dužine ili delom sekvence kodiranja. Gen može biti izveden u celosti ili delimično iz bilo kog izvora poznatog običnim stručnjacima u nauci uljučujući, biljku, gljive, životinje, bakterijski genom ili epizom, eukarijot, nuklearni ili plazmid DNK, cDNK, viralnu DNK, ili hemijski sintetizovanu DNK. Gen može konstituisati neprekinutu sekvencu kodiranja ili može uključiti jedan ili više introna, vezanih putem odgovarajućeg spleta raskršća. Šta više, gen može sadržati jednu ili više modifikacija u bilo kodirajućim ili neprevedenim oblastima koji mogu da utiču na odrećene osobine polinukleotida ili polipeptida, kao što je biološka aktivnost ili hemijska struktura proizvoda ekspresije, brzina ekspresije, način kontrole ekspresije. Takve modifikacije uključuju, ali nisu ograničene na, mutacije, umetanja, uklanjanja, i supstitucije jedinog ili više nukleotida. U ovom pogledu, takvi modifikovani geni mogu se smatrati kao varijante matičnog gena.
"Ekspresija gena" se odnosi na postupak kojim je polinukleotidna sekvenca podvrgnuta uspešnoj transkripciji i prevoćenju tako da su nivoi koji se mogu detektovati kod nukleotidne sekvence espresovani kao proteini polinukleotidne sekvence koja je podvrgnuta transkripciji, ukoliko je RNK kopirana od DNK, ili replikaciji ukoliko je DNK kopirano od DNK, tako da je rezultujuće kopije nukleotida moguće detektovati.
Pojam "profil ekspresije gena" se odnosi na gurpu gena koji predstavljaju određenu ćeliju ili ćelijski tip (n.pr., neuron, endotelijum koronarne arterije, ili bolesno tkivo) u bilo kom stanju aktiviranja. U jednom aspektu, profil ekspresije gena je generisan iz ćelija izloženih jedinjenju sadašnjeg pronalaska. Ovaj profil se može uporediti sa profilom ekspresije gena iz istog tipa ćelije ili tkiva pr tretmana sa jedinjenjem sadašnjeg pronalaska. Šta više, serija profila ekspresije gena može biti generisana iz ćelija ili tkiva tretiranih sa jedinjenjem sadašnjeg pronalaska, specifično, pri različitim dozama ili vremenskim pravcem da se procene dejstva jedinjenja. Profil ekspresije gena je takođe poznat kao potpis ekspresije gena.
Pojema "diferencijalna ekspresija" se odnosi i na kvantitativne i na kvalitativne razlike u obrazcima temporalne i ekspresije tkiva gena. Na primer, različito ekspresovan gen može imati svoju ekspresiju aktiviranu ili potpune neaktiviranu u normalnom spram stanja bolesti. Tako kvalitativno regulisan gen može prikazati obrazac ekspresije u okviru datog tkiva ili ćelijskog tipa koji se može detektovati bilo u kontrolnim ili stanjima bolesti, ali nije ga moguće detektovati u oba slučaja. "Diferencijalno ekspresovani polinukleotid", kako se to ovde koristi, se odnosi na polinukleotidnu sekvencu koja jedinstveno identifikuje diferencijalno espresovane gene tako da detekcija diferencijalno ekspresovanog polinukleotida u uzorku bude u korelaciji sa prisustvom diferencijalno ekspresovanog gena u uzorku.
Slično, diferencijalno ekspresovani protein može imati svoju ekspresiju aktiviranu ili kompletno neaktiviranu u normalnim spram stanja bolesti. Tako kvalitativno regulisan protein može prikazati obrazac ekspresije u okviru datog tkiva ili ćelijskog tipa koji se može detektovati bilo u kontrolnim ili stanjima bolesti, ali nije ga moguće detektovati u oba slučaja. "Diferencijalno ekspresovani protein", kako se to ovde koristi, se odnosi na sekvencu amino kiseline koja jedinstveno identifikuje diferencijalno espresovani protein tako da detekcija diferencijalno ekspresovanog proteina u uzorku bude u korelaciji sa prisustvom diferencijalno ekspresovanog proteina u uzorku.
"Ćelijski tip", kako se to ovde koristi, se odnosi na ćeliiju iz datog izvora (n.pr., tkivo ili organ), ćeliju u datom stanju diferencijacije, ćeliju povezanu sa datom patologijom ili genetičkim oblikom.
Pojam "polipeptid" se odnosi na polimerni oblik amino kiselina bilo koje dužine, koja može uključiti prevedene, neprevedene, hemijski modifikovane, biohemijski modifikovane, i derivatizovane amino kiseline. Polipeptid može biti prirodno nastali, rekombinantni, sintetički, ili bilo koja kombinacija ovih. Šta više, pojam "polipeptid", kako se to ovde koristi, se odnosi na proteine, polipeptide, i peptide bilo koje veličine, strukture ili funkcije. Na primer, polipeptid se može sastojati od niza amino kiselina koje se drže zajedno peptidnim vezama. Polipeptid može alternativno da se sastoji od dugog lanca amino kiselina koje se drže zajedno putem peptidnih veza. Šta više, polipeptid se može takođe sastojati od fragmenta prirodno nastalog proteina ili peptida. Polipeptid moće biti jedan molekul ili može biti multi-molekulami kompleks. Dodatno, takvi polipeptidi mogu takođe imati modifikovane kičme peptida.
Pojam "polipeptid" dalje obuhvata imunološki označene proteine i fuzione proteine, uključujući, ali ne ograničavajući na, fuzione proteine sa heterologom sekvencom amino kiseline, fuzione proteine sa heterologom i homologom vodećom sekvencom, i fuzione proteine sa ili bez N-završnih metionin ostataka.
Pojam "ekspresija proteina" se odnosi na postupak kojim se polinukleotidna sekvenca podvrgava uspešnoj transkripciji i prevođenju tako da nivoi sekvence amino kiseline ili proteina koji se mogu detektovati budu ekspresovani.
Pojam "profil ekspresije proteina" se odnosi na grupu proteina koji predstavljaju određenu ćeliju ili tip tkiva (n.pr., neuron, endotelijum koronarne arterije, ili bolesno tkivo). U jednom aspektu, profil ekspresije proteina je generisan iz ćelija ili tkiva koja su izložena jedinjenju sadašnjeg pronalaska. Ovaj profil se može uporediti sa profilom ekspresije proteina generisanog od istog tipa ćelije ili tkiva pre tretmana sa jedinjenjem sadašnjeg pronalaska. Šta više, serija profila ekspresije proteina može biti generisana iz ćelija ili tkiva tretiranih sa jedinjenjem sadašnjeg pronalaska, specifično, pri različitim dozama ili vremenskim pravcem da se procene dejstva jedinjenja. Profil ekspresije proteina je takođe poznat kao potpis ekspresije proteina.
Kako se to ovde koristi, "biomolekul" uključuje polinukleotide i polipeptide. Šta više, "biomolekularna sekvenca", kako se to ovde koristi, je pojam koji se odnosi na sve ili deo polinukleotidne sekvence. Biomolekularna sekvenca može se takođe odnositi na sve ili deo polipeptidne sekvence. U kontekstu biomolekula, na primer, perlekana, pojam "funkcionalni ekvivalent" se odnosi na protein ili molekul polinukleotida koji poseduje funkcionalne i strukturalne karakteristike kojse su suštinski slične svim ili delu matičnog perlekan proteina ili matičnih perlekan-kodirajućih polinukleotida. Funkcionalni ekvivalent matičnog perlekan proteina može sadržati modifikacije u zavisnosti od neophodnosti takvih modifikacija za specifične strukture ili performance specifičnih funkcija. Pojam "funkcionalni ekvivalent" ima nameru da uključi "fragmente", "mutante", "derivate", "alele", "hibride", "varijante", "analoge", ili "hemijske derivate" matičnog perlekana.
"Ćellija domaćin", kako se to ovde koristi, se odnosi na mikroorganizam, prokariotsku ćeliju, eukariotsku ćeliju ili ćelijsku liniju kultivisanu kao unicelularni entitet koji se mogu upotrebiti kao primaoci za
rekombinantni vektor ili drugi transfer polinukleotida, i uključuje progene originalne ćelije koja je izmenjena infekcijom. Razume se da progeni jedne ćelije ne mora neophodno biti kompletno identična u morfologiji ili genomičnosti ili ukupnom DNK komplementu kao originalna matična zbog prirodne, slučajne ili namerne mutacije.
U kontekstu imunoglobulina, pojam "funkcionalni ekvivalent" se odnosi na molekule imunoglobulina koji prikazuju imunološko vezivanje osobina koje su suštinski sličen matičnom imunoglobulinu. Kako se to ovde koristi, pojam "imunološke vezivne osobine" se odnosi na ne-kovalentne interakcije tipa koji nastaje izmežu molekula imunoglobulina i antigena za koji je imunoglobulin specifičan. Svakako, funkcionalni ekvivalent monoklonalnog antitela imunoglobulina, na primer, može prikazati vezivanje matičnog monoklonalnog antitela na njegov antigen. Funkcionalni ekvivalent može se sastojati od F(ab')2fragmenata, F(ab) molekula, Fv fragmenata, jednog lanca fragmenta koji se različito prikazuje na fagu (scFv), jednog domena antitela, himeričnih antitela, ili slično sve dok imunoglobulin prikazuje karakteristike matičnog imunoglobulina.
Kako se to ovde koristi, pojam "izolovani" se odnosi na polinukleotid, polipeptid, antitelo, ili ćeliju domaćina koja je u različitom okruženju od onoka u kome je polinukleotid, polipeptid, antitelo, ili ćelija domaćina koja prirodno nastaje. Izolovani polinukleotid, polipeptid, antitelo, ili ćelija domaćin je generalno suštinski prečišćen.
Kako se to ovde koristi, pojam "suštinski prečišćen" se odnosi na jedinjenje koje je uklonjeno iz njegovog prirodnog okruženja i koje bar oko 60% do 99,9% bez drugih komponenti, ili bar oko 60% bez, bar oko 65% bez, bak oko 70% bez, bar oko 80% bez, bar oko 83% bez, bar oko 85% bez, bar oko 88% bez, bar oko 90% bez, bar oko 91 % bez, bar oko 92% bez, bar oko 93% bez, bar oko 94% bez, bar oko 95% bez, bar oko 96% bez, bar oko 97% bez, bar oko 98% bez, bar oko 99% bez, bar oko 99,9% bez, ili bar oko 99,99% bez drugih komponenti sa kojima je prirodno povezano. Na primer, sastav koji sadrži A je "suštinsko oslobođen od" B kada je bar oko 85 mas% ukupnog A+B u sastavu A. Alternativno, A obuhvata bar oko 90 mas% ukupnog A+B u sastavu, dalje čak, bar oko 95% ili čak 99 mas%.
"Dijagnoza", kako se to ovde koristi, generalno uključuje određenje subjektove podložnosti na bolesti ili poremećaj, određenje da li je subjekt trenutno pod uticajem bolesti ili poremećaja, prognozu uticaja poremećaja ili bolesti na subjekta (n.pr., identifikacija pre-metastatičnih ili metastatičnih kancerogenih stanja, faze kancera, ili odgovor kancera na terapiju), i terametriku (n.pr., praćenje subjektovog stanja da se obezbedi informacija u vezi efekata ili efikasnosti terapije).
Pojam "biološki uzorak" obuhvata različite tipove uzorka dobijenih ili ili koji imaju poreklo od organizma koji moće biti upotrebljen u dijagnostic, praćenju, ili drugim ogledima. Pojam obuhvata krv, serum, plazmu, ćelije, proteina, ugljene hidrate, nukleinske kiseline, urin, nazalne sekrecije, mukozalne sekrecije, ćelijski fluid, ćelijska izlučevina i drugi uzorci tečnosti biološkog porekla, uzorci čvrstog tkiva kao što je isečak biopsije, ili kulture tkiva ili ćelija izvedenih odatle i njihov progeni. Pojam specifično obuhvata klinički uzorak, a dalje uključuje ćelije i ćelijsku kulturu, ćelijski površinski sloj, ćelijske lizate, aminotički fluid, biološke fluide, i uzorke tkiva. Ovaj pojam takođe obuhvata uzorke kojima se rukuje na bilo koji način posle dobijanja takvog tretmana sa reagensima, rastvorljivošću, obogaćivanju komponenti. Biološki uzorak može biti izveden iz organizma direktno ili može biti sakupljen iz okruženja.
Pojmovi "individualno", "subjekt", "domaćin", i "pacijent" se odnose na bilo koji subjekt za koji se želi dijagnoza, lečenje ili terapija. U jednoj realizaciji, individualni, subjekt, domaćin ili pacijent je čovek. Drugi subjekti mogu da uključe, ali ne ograničavajući na, životinje uključujući ali ne ograničavajući na, stoku, ovce, konje, pse, mačke, zamorčiće, zečeve, pacove, primate, oposume i miševe. Drugi subjekti uključuju vrste bakterija, faga, ćelijskih kultura, virusa, biljki i drugih eukarijota, prokarijota i neklasifikovanih organizama.
Pojmovi "tretman", "tretiranje", "tretira", i slično se ovde upotrebljavaju da se odnose generalno na dobijanje željenog farmakološkog i/ili fiziološkog dejstva. Dejstvo može biti profilaktičko u pogledu kompletne ili delimične prevencije bolesti ili njenog simptoma i/ili moće biti terapeutsko u pogledu delimične ili potpune stabilizacije ili lečenja za bolest i/ili suprotne efekte koji se mogu pripisati bolesti. "Tretman" kako se to ovde koristi pokriva bilo koje lečenje bolesti u subjektu, posebno čoveku, i uključuje: (a) sprečavanje bolesti ili simptoma da se pojave u subjektu koji može biti predisponiran za bolest ili simptom, ali još nije dijagnostikovan da ih ima; (b) inhibiranje simptoma bolesti, odnosno, zaustavljanje njegovog razvoja; ili (c) olakšavanje od simptoma bolesti, odnosno, izazivanje regresije bolesti ili simptoma.
Izraz "terapeutski efikasna količina" se odnosi na količinu, na primer, jedinjenja koje je ovde otkriveno, koja je efikasna za prevenciju, poboljšanje, lečenje ili odlaganje početka bolesti ili stanja.
"Profilaktički efikasna količina" se odnosi na količinu, na primer, jedinjenja koje je ovde otkriveno, koja je efikasna u prevenciji bolesti ili stanja.
"Lipozom" je mali mehurić sastavljen od različitih tipova lipida, fosfolipida i/ili površinskog sredstva, koji je koristan za isporuku leka subjektu, kao što je sisar ili druga životinja. Jedinjenja sadašnjeg pronalaska mogu biti isporučena putem lipozoma. Komponente lipozoma su uobičajeno raspoređene u dvoslojnu formaciju, slično lipidnom raspoređivanju bioloških membrana. Formulacije lipozoma, punjenje lipozoma i davanje i isporuka lipozoma su poznati u nauci.
"Hibridizacija", široko definisana, se odnosi na bilo koji postupak kojim se polinukleotidna sekvenca vezuje za komplementarnu sekvencu preko baznog sparivanja. Uslovi hibridizacije mogu biti definisani putem, na primer, koncentracije soli ili formamida u rastvorima pre hibridizacije i hibridizacije, ili putem temperature hibridizacije, i dobo su poznati u nauci. Hibridizacija može da nastupi pod uslovima različite strogosti. Hibridizacija može takođe da se odnosi navezivanje sredstva
za zarobljavanje proteina na ciljani protein pod određenim uslovima, kao što su normalni fiziološki uslovi.
Kako se to ovde razume, pojam "aktivacija" se odnosi na alternaciju putanje za signaliziranje ili biološkog odgovora uključujući, na primer, povećanje gornjih baznih nivoa, povraćaj na bazne nivoe iz inhibiranog stanja, i stimulacija putanje preko baznih nivoa.
Pojam "biološka aktivnost" se odnosi na biološko ponašanje i dejstva proteina ili peptida. Na biološku aktivnost proteina može se uticati na ćelijskom nivou i molekularnom nivou. Na primer, antisens oligonukleotid može sprečiti prevođenje određene mRNK, pri čemu se inhibira biološka aktivnost proteina kodiranog od strane mRNK. Dodatno, antitelo se može vezati za određeni protein i inhibirati biološku aktivnost tog proteina.
Pojam "oligonukleotid" kako se to ovde koristi se odnosi na sekvence polinukleotida koji se sastoje od, na primer, od oko 4 nukleotida (nt) do oko 1000 nt. Oligonukleotidi za upotrebu u sadašnjem pronalasku su pretpostavljeno od oko 15 nt do oko 150 nt, poželjnije od oko 150 nt do oko 1000 nt u dužinu. Oligonukleotid može biti prirodno nastali oligonukleotid ili sintetički oligonukleotid. Oligonukleotidi mogu biti pripremljeni putem postupka fosforamidita (Beaucage and Carruteher, Tetrahedron Lett. (1981) 22:1859-1862), ili putem triestar postupka (Matteucci et al., J. Am. Chem. Soc. (1981) 103:3185), ili putem drugih hemijskih postupaka poznatih u nauci.
Pojam "mikroniz" se odnosi generalno na tip gena ili proteina predstavljenih na mikronizu putem oligonukleotida (polinukleotidne sekvence) ili sredstava za vezivanje proteina, i gde je tip gena ili proteina predstavljen na mikronizu zavistan od nameravane svrhe mikroniza (n.pr., da prati ekspresiju humanih gena ili proteina). Oligonukleotidi ili sredstva za vezivanje proteina na datom mikronizu mogu korespondirati sa istim tipom, kategorijom, ili grupom gena ili proteina. Geni ili proteini mogu se smatrati da su istog tipa ukoliko dele iste karakteristike kao što su vrste porekla (n.pr., humani, mišji, od pacova); stanje bolesti (n.pr., kancer); funkciju (n.pr., protein kinaze, supresori tumora); isti biološki postupak (n.pr., apoptoza, signalna transdukcija, regulacija ćelijskog ciklusa, proliferacija, diferencijacija). Na primer, jedan tip mikroniza može biti "mikroniz kancera" u kome svaki od mikronizova oligonukleotida ili sredstava za vezivanje proteina odgovara genu ili proteinu povezanom sa kancerom. "Epitelijalni mikroniz" može biti mikroniz oligonukleotida ili sredstava za vezivanje proteina koji odgovara jedinstvenim epitelijalnim genima ili proteinima. Slično, "mikroniz ćelijskog ciklusa" može biti tip mikroniza u kome oligonukleotidi ili sredstva za vezvanje proteina odgovaraju jedinstvenim genima ili proteinima povezanim sa ćelijskim ciklusom.
Pojam "može se detektovati", u jednom smislu, se odnosi na obrazac ekspresije polinukleotida koji se može detektovati putem standardnih tehnika reakcije lanca polimeraze (PCR), povratne transkriptaze (RT) - PCR (RT-PCR), diferencijalnog prikaza, i Norther analiza, koje su dobro poznate stručnjacima iz ove oblasti nauke. Slično, obrazci ekspresije polipeptida mogu biti "detektovani" putem standardnih tehnika uključujući imuno oglede kao što su Western mrlje. Uopšteno, pojam "može se detektovati" se koristi kada je rezultat dejstva, kao što je dodavanje jedinjenja u koraku ogleda, primetljiv, posebno putem fizičkih sredstava, kao što je promena boje.
"Ciljani gen" se odnosi na polinukleotide, ćesto izvedene iz biološkog uzorka, za koje je oligonukleotidna proba dizajnirana da specifično hibridizuje. To je bilo prisustvo ili odsustvo ciljanog polinukleotida koji se treba detektovati, ili količina ciljanog polinukleotida koji se ima kvantifikovati. Ciljani polinukleotid ima sekvencu koja je komplementarna sa polinukleotidnom sekvencom odgovarajuće probe usmerene ka cilju. Ciljani polinukleotid može se takođe odnositi na specifične podsekvence većeg polinukleotida na koji je proba usmerena ili na ukupnu sekvencu (n.pr., gen ili mRNK) čiji je nivo ekspresije željen da se detektuje.
"Ciljani protein" se odnosi na polipeptid, često izveden iz biološkog uzorka, na koji se sredstvo za zarobljavanje proteina specifično hibridizuje ili vezuje. To je bilo u prisustvu ili odsustvu ciljanog proteina koji se ima detektovati, ili količina ciljanog proteina koji se ima kvantifikovati. Ciljani protein ima strukturu koja je prepoznata od strane odgovarajućeg sredstva za zarobljavanje proteina usmerenog ka cilju. Ciljani protein ili amino kiselina mogu se takođe odnositi na specifične podstrukture većeg proteina na koji je sredstvo za zarobljavanje proteina usmeren ili ukupnu strukturu (n.pr., gen ili mRNK) čiji je nivo ekspresije željen da se detektuje.
Pojam "komplementaran" se odnosi na topološku kompatibilnost ili zajedničko poklapanje površina koje međusobno reaguju molekula probe i njegovog cilja. Cilj i njegova proba mogu biti opisani kao komplementarni, i još dalje, karakteristike kontaktne površine su komplementare jedna drugoj. Hibridizacija ili sparivanje baze između nukleotida ili nukleinskih kiselina, kao što su, na primer, između dva vlakna sa duplim vlaknom DNK molekula ili između oligonukleotidne probe i cilja su komplementarni.
Pojam "pozadina" se odnosi na ne-specifično vezivanje ili druge interakcije između, na primer, polinukleotida, polipeptida, malih molekula i polipeptida, ili malih molekula i polinukleotida. "Pozadina" se takođe može odnositi na ne-specifično vezivanje ili druge interakcije u kontekstu ogleda uključujući imuno ogled.
U kontekstu mikronizova, pojam "pozadina" se odnosi na signale hibridizacije koji rezultiraju iz ne-specifičnog vezivanja, ili druge interakcije, između označenih ciljanih polinukleotida i komponenti mikroniza oligonukleotida (n.pr., oligonukleotidne probe, kontrolne probe, nosač mikroniza) ili između ciljanih proteina i sredstava za vezivanje proteina mikroniza proteina. Signali pozadine mogu takođe biti proizvedeni putem unutrašnje fluorescencije samih komponenti mikroniza. Jedan signal pozadine moće biti izračunat za ceo mikroniz, ili različiti signal pozadine moće biti izračunat za svaki ciljani polinukleotid ili ciljani protein. Pozadina može biti izračunata kao prosečni intenzitet signala hibridizacije, ili gde je različita signal pozadine izračunava se za svaki ciljani gen ili ciljani protein. Alternativno, pozadina može biti izračunata kao šrosečan intenzitet signala hibridizacije proizveden hibridizacijom na probama koje nisu komplementarne bilo kojoj sekvenci pronađenoj u uzorku (n.pr., probe usmerene na polinukleotide suprotne orjentacije ili na gene koji nisu pronađeni u uzorku kao što su bakterijski geni gde je uzorak sisarski polinukleotidi). Pozadina može takođe biti izračunata kao prosečan intenzitet signala proizvedenog putem oblasti mikroniza kojima u potpunosti nedostaje bilo koja proba ili srestvo za vezivanje proteina.
"Mali molekul" obuhvata jedinjenje ili molekularni kompleks, bilo sintetički, prirodno izvedeni, ili delimično sintetički, sastavljen od ugljenika, vodonika, kiseonika, i azota, koji takođe može sadržati druge elemente, i koji može imati molekularnu težinu manju od oko 100 do oko 15.000 Daltona, ili menj od oko 15.000, manje od oko 14.000, manje od oko 13.000, manje od oko 12.000, manje od oko 11.000, manje od oko 10.000, manje od oko 9.000, manje od oko 8.000, manje od oko 7.000, manje od oko 6.000, manje od oko 5.000, manje od oko 4.000, manje od oko 3.000, manje od oko 2.000, manje od oko 1.000, manje od oko 900, manje od oko 800, manje od oko 700, manje od oko 600, manje od oko 500, manje od oko 400, manje od oko 300, manje od oko 200, ili manje od oko 100.
Pojam "fuzioni protein" se odnosi na protein sastavljen od dva ili više polipeptida koji, iako tipično ne pridruženi u njihovom prirodnom stanju, su prodruženi svojim pojedinačnim amino i karboksil završecima preko vezivanja peptida da se formira jedan kontinuirani polipeptid. Razume se da dve ili više komponenti polipeptida mogu biti bilo direktno pridruženi ili indirektno pridruženi preko peptid linker/distancerska grupa.
Pojam "normalni fiziološki uslovi" znači uslovi koji su tipični unutar živog organizma ili ćelije, lako neki organi ili organizmi daju ekstremne uslove, intra-organizamsko i intra-ćelijsko okruženje normalno varira oko pH 7 (odnosno, od pH 6,5 do pH 7,5), sadrži vodu kao predominantni rastvarač, i postoji na temperatui preko 0°C a ispod 50°C. Koncentracija različitih soli zavisi od organa, organizma, ćelije, ili ćelijskog odeljka upotrebljenog kao referenca.
Pojam "grozd" se odnosi na grupu klonova ili biomolekularnih sekvenci koje se odnose na drugu putem homologije sekvence. U jednom primeru, grozdovi se formiraju na osnovu specifičnog stepena homologije i/ili preklapanja (n.pr., strogost) "Pravljenje grozdova" moće biti izvedeno sa podacima sekvence. Na primer, biomolekularne sekvence za koje se misli da su povezane sa određenom molekularnom ili biološkom aktivnošću u jednom tkivu može biti upoređeno spram druge biblioteke ili baze podataka sekvenci. Ovaj tip pretraživanja je koristan da se pronađu homologe, i pretpostavljeno funkcionalno povezane, sekvence u drugim tkivima ili uzorcima, i mogu se koristiti u okviru jednog ili više banka podataka za grozd biomolekularnih sekvenci pre izvođenja postupka pronalaska. Sekvence koje pokazuju dovoljnu homologiju sa reprezentativnom sekvencom se smatraju delom "grozda". Takva "dovoljna" homologija može varirati u okviru potreba stručnjaka u ovoj oblasti nauke.
Kako se to ovde koristi, pojam "interna baza podataka" se odnosi na bazu podataka koju se održava u okviru lokalne kompjuterske mreže. Ona sadrži, na primer, biomolekularne sekvence povezane sa projektom. Ona može takođe sadržati informacije povezane sa sekvencama uključujući, ali ne ograničavajući na, biblioteku u kojoj je data sekvenca pronađena i opisne informacije o verovatnom genu povezanom sa sekvencom. Interna baza podataka može tipično biti održavana kao privatna baza podataka iza fajervola u okviru mreže preduzeća. Interna baza podataka može da uključi podatke o sekvenci generisane putem istog preduzeća koje održava bazu podataka, i može takođe da uključi podatke o sekvenci dobijene iz eksternih izvora.
Pojam "eksterna baza podataka" se ovde razume, da se odnosi na bazu podataka lociranu vaz svih internih baza podataka. Tipično, mreža preduzeća koja se razlikuje od mreže preduzeća koje održava internu bazu podataka će održavati eksternu bazu podataka. Eksterna baza podataka moće se iskoristiti, na primer, da obezbedi neke opisne informacije o biomolekularnim sekvencama sačuvanim u internoj bazi podataka. U jednoj realizaciji, eksterna baza podataka je GenBank i povezan sa bazama podataka koje se održavaju od strane National Centerfor Biotechnologv Information (NCBI), delom National Librarv of Medicine.
Kako se to ovde koristi i u zahtevima, oblici na engleskom jeziku za singular "a." "an," i "the" uključuaj reference za množinu osim ukoliko kontekst jasno ukazuje drugačije. Tako, na primer, referenca za "a compound" (jedinjenje) je referenca za jedno ili više takvih jedinjenja i uključuje njihove ekvivalente poznate stručnjacima u ovoj oblasti nauke, i tako dalje.
Ukoliko nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni termini koji se ovde koriste imaju isto značenje kako se uobičajeno razumeju od strane običnog stručnjaka u ovoj oblasti nauke kojim pronalazak pripada, lako bilo koji postupci, uređaji, i materijali slični ili ekvivalentni onima koji su ovde opisani mogu biti upotrebljeni u praksi ili testiranju pronalaska, pretpostavljeni postupci, uređaji i materijali su sada opisani.
Sve publikacije i patenti koji su ovde pomenuti su inkorporisani putem reference u svrhu opisivanja i otkrivanja, na primer, konstrukata i metodologija koje su opisane u tim publikacijama, koje mogu biti upotrebljene u vezi sa sada opisanim pronalaskom. Publikacije koje su gore razmatrane i kroz tekst su obezbeđene jedino za njihovo otkrivanje pre datuma podnošenja sadašnje prijave. Ništa što je ovde se ne treba smatrati kao priznanje da pronalazači nemaju pravo da navedu takvo prethodno otkriće zbog toga što je raniji pronalazak.
Treba da se razume da ovaj pronalazak nije ograničen na određenu metodologiju, protokole, ćelijske linije, konstrukte, i sredstva koja su ovde opisana i kao takvi mogu se razlikovati. Takođe treba razumeti da terminologija koja se ovde koristi je samo u svrhu opisivanje određenih realizacija, i nema nameru da limitira raspon sadašnjeg pronalaska koje će biti limitiran samo putem zahteva.
PRIMERI
Sadašnji pronalazak je dalje ilustrovan putem sledećih primera, koji se ni na koji način ne smatraju kao postavljanje ograničenja na obim ovog teksta, već samo kao ilustracija. Nasuprot tome, treba da se jasno razume da različite realizacije, modifikacije, i ekvivalenti ovoga, posle čitanja ovde datog opisa, mogu sugerisati stručnjacima iz ove oblasti nauke bez napuštanja duha sadašnjeg pronalaska ili obima zahteva kao pomoć u radu.
Sledeći akronimi, skraćenice, pojmovi i definicije se upotrebljavaju kroz ceo eksperimentalni deo. Akronimi i skraćenice: DIEA (N,N-diizopropiletilamin), THF (tetrahidrofuran), HPLC (tečna hromatografija visoke performance), TLC (hromatografija tankog sloja), mp (tačka topljenja), rt (sobna temperatura), aq (vodeni), min (minut), h (hr, sat), atm (atmosfera), konc. (koncentrovan), MS (masena spektroskopija/spektrometrija), NMR (nuklearna magnetska rezonanca), Rf (TLC faktor zadržavanja), i Rt(HPLC vreme zadržavanja). NMR skraćenice: br (široko), apt (očigledno), s (singlet), d (duplet), t (triplet), q (kvartet), dq (duplet kvarteta), dd (duplet dupleta), dt (duplet tripleta), m (multiplet).
PRIMER 1
Opšfe sintetički, spektroskopski i postupci prečišćavanja i
karakterizacije
Opšti sintetički postupak. Sobna temperatura se definiše kao raspon ambijentalne temperature, tipično 20-25°C. Temperatura ledenog kupatila (razbijeni led/voda) je definisana kao raspon, tipično -5°C do 0°C. Temperatura pri refluksu je definisana kao ±15°C od tačke klučanja primarnog rastvarača reakcije. Preko noći je definisano kao vreme u rasponu od 8-16 sati. Filtriranje vakuumom (vodeni aspirator) je definisano kao raspon od 5-15 mm Hg. Osušeno pod vakuumom se definiše kao upotreba pumpe visokog vakuuma kao raspon od 0,1-5 mm Hg. Neutralizacija se definiše kao tipični postupak kisele-bazne neutralizacije i meri u rasponu pH 6-8 upotrebom pH-naznačevajućeg papira. Slani rastvor se definiše kao zasićeni vodeni natrijum hlorid. Atmosfera azota se definiše kao pozitivni statički pritisak azota gasa koji se propušta kroz Drierite kolonu sa sistemom ključanja ulja. Koncentrovani amonijum hidroksid se definiše kao otprilike 15 M rastvor.
Eluenti za hromatografiju kolone ili tankog sloja se pripremaju i pominju kao zapremina:zapremina (v:v) rastvori, a odnosi HPLC eluenta su v:v odnosi. Vodeni natrijum hidroksid ili natrijum bikarbonat rastvori se pripremaju kao masa:zapremina (w:v) odnosi. Vodeni rastvori hlorovodonične kiseline se pripremaju kao v:v odnosi.
Količine rastvarača i/ili reagenasa koji se upotrebljavaju da se reakcija obavlja ili izolovanje proizvoda su one koje se tipično upotrebljavaju od strane izvežbanog lica u ovoj oblasti organske hemijske sinteze, a količina ovih rastvarača i/ili reagenasa koji se upotrebljavaju se utvrđuje na osnovu iskustva i da li je odgovarajuća za specifičnu reakciju. Na hromatografiji kolone zavisi od količine materijala, kompleksnosti smeše, i veličine kolone koja se upotrebljava u hromatografiji i u rasponu je od oko 5 - 1000 g, 3) zapremina rastvarača za ekstrakciju je u rasponu od oko 10 - 1000 ml_ u zavisnosti od veličine reakcije, 4) pranja koja se upotrebljavaju u izolovanju jedinjenja se u rasponu od 10 - 100 mL rastvarača u vodenom reagensu u zavisnosti od skale reakcije 5) reagenski za sušenje (kalijumkarbonat, natrijumkarbonat ili magnezijumsulfat) su u rasponu od oko 5 - 100 g u zavisnosti od količine rastvarača koji se ima osušiti i njegovog sadržaja vode.
Tačke topljenja se mere prema merkurijevom termometru i ne ispravaljaju se.
Za hromatografiju kolone koja upošljava koncentrisani amonijum hidroksid kao deo mobilne faze, frakcije koje se sakupljaju sa kolone se osuše preko natrij u msulfata, kalijumkarbonata ili smeše oba. Organski sloj se filtrira putem gravitacije ili vakuuma da se uklone sredstvo za sušenje pre koncentracije/isparavanja.
Hromatografija bleska: U Tabelama, "ISCO" naznačava prečišćavanje putem hromatografije bleska kako sledi: Instrument: ISCO CombiFlasha Si 10x. Kolona: ISCO RediSepa -Kolone izbacive posle uptrebe za Hromatografiju bleska (10 g silika gel - normalna faza
- 35-60 mikrona veličina čestice (230-400 meš). Mobilna faza A: CH2CI2; Mobilna faza B: 10% NH4OH u MeOH; Gradijent; 0-10% B u 22 min, držati 10% B 18 min; Frakcije: 30 frakcija se sakuplja po koloni, 1,5 min svaka. Brzina protoka: 8,93 mL/min. Glavne frakcije se
analiziraju putem MS i TLC (90:9:1 CH2Cl2:MeOH:NH4OH - Rf raspon 0,15 - 0,45) i kombinuju u posude obložene sa nalepnicama sa šiframa. Od rezultirajućih rastvora se prave uzorci za LC/MS analizu, koncentrisani in vacuo i njihove mase i prinosi se utvrđuju kako je to označeno u Tabelama.
Ukoliko se ne obavlja dodatno prečišćavanje posle završetka Paralelne sinteze, to se označava kao "Nema" u Tabeli 2.
Analitički HPLCpostupci. Analitički HPLC postupci se obavljaju prema jednom od dva specifična postupka, u zavisnosti od dostupnosti instrumenata i zahteva uzoraka, kako dalje sledi: HPLC Postupak A.Kolona:Thomson Inst. Co. 4,6 x 50 mm C18 5 um 60 A; Mobilna faza A: H20 sa 0,1% TFA; Mobilna faza B: CH3CN sa 0,1% TFA; Detekcija: UV254 nm.Gradijent 1:ELSD12MG; 10-90% B u 10 min, zadržavanje 90% B 5 min; Protok: 1,0 mL/min.Gradijent 2.ELSD5MG; 15-100% B u 5 min, zadržavanje 100% B 3 min; Protok - 2,0 mL/min.
HPLC Postupak B.Kolona:Thomson Inst. Co. 21 x 50 mm C18 5 um 60 A; Mobilna faza A: H20 sa 0,1% TFA; Mobilna faza B: CH3CN sa 0,1% TFA; Detekcija: UV 254 nm.Gradijent 1:MIC8MG; 0-100% B u 8 min, zadržavanje 100% B 2 min; Protok: 0,5 mL/min.Gradijent 2:MIC15MG; 10-90% B u 15 min, zadržavanje 90% B 3 min; Protok - 0,5 mL/min.
PripremniHPLC postupci: Pripremna HPLC se obavlja kako dalje sledi: Instrumetn: Gilson;Kolona:Thomson Inst. Co. 21,5 x 150 mm C18 5 u60 A; Mobilna faza A: H20; Mobilna faza B: CH3CN; Detekcija: UV 254 nm.Gradijent:15-100% B u 10 min, zadržavanje 100% B 5 min; Protok: 22 mL/min; Detekcija: UV254 nm. Frakcije koje sadrže željena jedinjenja se sakupljaju i oblažu oznakama sa šifrom u sudove, sa uzorcima za LC/MS analiz, koncentrisanain vacuoi njihove mase i prinosi se utvrđuju kako je to prikazano u Tabelama.
Spektroskopski i instrumentalni postupci.
NMR. Ovde opisani 1H i 13C NMR spektra se dobijaju upotrebom Vaian INOVA600 (600 MHz), Varian UNITY600 (600MHz), ili Varian 400
(400MHz) spektrometara. Snaga polja spektrometra i NMR rastvarača koji su upotrebljeni za određeni uzorak su naznačeni u Primerima, ili na bilo kom NMR spektra stvarno prikazanim kao Slike. Tipično,<1>H NMR hemijska pomeranja se prikazuju kao 5 vrednosti u česticam po milion (ppm) niz polje od tetrametilsilana (TMS) (5 = 0 ppm) kao interni standard, a 13C NMR hemijska pomeranja se prikazuju u ppm niz polje od TM S i izveštene su u pogledu CDCI3centralne signalne linije (5 = 77,0 ppm). Čvrsti ili tečni uzorci se rastvaraju u odgovarajućem NMR rastvaraču (CDCI3ili DMSO-d6), postavljenim na NMR cev uzorka, podaci su sakupljeni prema instrukcionim uputstvima za spektrometar. Najveći broj uzoraka se analizira u modu Varijabilne temperature, tipično na oko 55°C, iako su neki podaci za neke uzorke sakupljeni sa probom na ambijentalnoj temperaturi. NMR podaci se procesuiraju
upotrebom NUTS: NMR Softvera transformacije korisnosti (Lite Version-20011128) putem Acorn NMR. LC- MS. Instrumentacija za Tečnu hromatografiju - Masenu spektrometriju (LC-MS) koja se upotrebljava da se ispitaju jedinjenja sadašnjeg pronalaska je tipično kvadropolni/vreme letenja maseni spektrometar, sa jonizacijom elektrosprejom (ESI). Na primer tipična LC-MS instrumentacija koja se upotrebljava je Micromass Q-Tof upotrebom jonizacije elektrosprejom (ESI). Ovaj instrument je kvadropolni/vreme letenja maseni spektrometar sposoban za masenu rezoluciju do m/z od oko 7500. Uzorci se uvode načinom direktnog ubrizgavanja putem prvo rastvaranja i razblaživanja uzorka u metanolu ili acetonitrilu i ubrizgavanjem rastvora uzorka u ESI izvor putem 10uL kružni Rheodvne ventil za ubrizgavanje. Nosač rastvarač je tipično smeša 70% CH3CN ili MeOH i 30% H20 (v:v), koji sadrži oko 0,1% mravlje kiseline. Precizne masene analize se obavljaju na sličan način osim upotrebe masene kalibracije sa multi tačkama sa istim instrumentom pod krajnjim uslovima masene rezolucije. Uzorci se pričvrste sa odgovarajućim internim maseno referentnim jedinjenjem, kako je to već poznato stručnjaku iz ove oblasti nauke, i analiziraju se kako je to gore opisano.
PRIMER 2
Opšti postupci paralelne sinteze
Primeri 3-5 opisuju sintetičke postupke za pripremanje "biblioteke" N2, N4, N6-tris(amino)-1,3,5-triazina koji se pripremaju na osnovu strategije menjanja samo jedne pandan amino grupe po sintezi, i na osnovu matične strukture 95 koja je dole prikazana, gde svako jedinjenje u biblioteci sadrži dva od pandan grupa u 95.
Biblioteka je podeljena u tri podgrupe, i sve tri podgrupe su prikazana u Tabeli 2. Biblioteka I (jedinjenja 1-50) uključuje jedinjenja koja imaju nepromenjene cikloheptilamino i [(1-etil-2-pirolidinil)metil]amino supstituente, sa različitim grupama koje su permutovane na preostaloj triazin amino poziciji, pripremljena Postupkom A kako je prikazano u Primeru 3. Biblioteka II (jedinjenja 51-75) uključuju jedinjenja koja imaju nepromenjene [(1-etil-2-pirolidinil)metil]amino i (3-fluoro-4-metoksifenil)amino supstituente, sa različitim grupama koje su permutovane na preostaloj triazin amino poziciji, pripremljena Postupkom B kako je to prikazano u Primeru 4. Biblioteka III (jedinjenja 76-100) uključuje jedinjenja koja imaju nepromenjene (3-fluoro-4-metoksifenil)amino i cikloheptilamino supstituente, sa različitim grupama koje se permutuju na preostaloj triazin amino poziciji, pripremljena Postupkom C kako je opisno u Primeru 5. Tako, kombinacija specifičnih amina koji su uposleni proizvodi biblioteku jedinjenja novog sastava. Sekvenca u kojoj je svaki monomer dodat da se formiraju jedinjenja biblioteke je takođe prikazana u Tabeli 2, zato što se Monomer 1 amin dodaje prvi, Monomer 2 amin dodaje drugi, a Monomer 3 amin se dodaje treći.
PRIMER 3
Paralelni sintetički postupak A, za jedinjenja Biblioteke I
Sledeća reakciona šema prikazuje opšte reagense i stanja za paralelni sintetički postupak A koji se upotrebljava za jedinjenje iz Tabele 2 koji označavaju postupak A.
Reagensi i stanja: (a) ArNHR, DIEA, CH,CN/l,4-dioksan, -11C, lh
(b) cikloheptilamin, DIEA, CH3CN/1,4-dioksan, rt, preko noći (c) 2-(aminometil)-l-etilpirolidin, DIEA, CH3CN/l,4-dioksan, 80 C, 15
Zaliha rastvor hlorida cijanurske kiseline (0,542 M) u 1,4-dioksanu se priprema i 1 mL ovog rastvora (koji sadrži 100 mg ili 0,542 mmol) se razdeli u svaku od 50 posuda oznakama šifre od 40 mL. Ovi rastvori se ohlade do oko -11 °C (zamrzavanje) upotrebom J-KEM bloka povezanog za cirkulirajući hladnjak. U međuvremenu, pripremaju se individualni rastvori svakog aril amina ArNHR (specifikovanog kao Monomer 1 u Tabeli 2, 0,542 mmol) i diizopropiletilamina (DIEA) (77 mg/104uL, 0,596 mmol) u 1 mL CH3CN. (za HCI soli upotrebljava se 204uL DIEA (otprilike 2,1 ekvival.)). Za vreme od oko 1 sat, amin/DlEA rastvori se dodaju odgovarajućim rastvorima hlorida cijurinske kiseline, jedan po jedan, sa kovitlanjem. Rezultirajući rastvori se onda mućkaju na oko -11 °C oko 1 sat i reakcionom bloku se dopušta da se zagreje do sobne temperature tokom sledećeg sata. Rezultirajući 2-amino-4,6-dihlorotriazin rastvori se vode do sledećeg koraka bez prečišćavanja.
Zaliha rastvor cikloheptilamina (1,08 M) i DIEA (1,19 M) u CH3CN se priprema i 0,5 mL (koji sadrži 61 mg/69 uL, 0,542 mmol amina i 77 mg/104 uL, 0,596 mmol DIEA) se razdeli u svaku od posuda od 40 mL iz prvog koraka. Posude se mućkaju na J-KEM bloku preko noći na sobnoj temperaturi i postavljaju u zamrzivač (oko -14°C) bez prečišćavanja sve do sledeće reakcije.
Zaliha rastvora 2-(aminometil)-1-etilpirolidina (1,08 M) i DIEA (1,19 M) u CH3CN se priprema i 0,5 mL (koji sadrži 68 mg/79 uL, 0,542 mmol
amina i 77 mg/104 uL, 0,596 mmol DIEA) se razdeli u svaki od 40 mL iz drugog koraka. Posude se onda mućkaju na J-KEM bloku na oko 80°C oko 15h. Rastvor se ohadi do sobne temperature i vodi do suvog stanjain vacuo.Ostatci se ekstrakuju sa etilacetatom i ekstrakt se opere sa slanim rastvorom. Vodeni slojevi se ekstrakuju drugi put sa etilacetatom i kombinovani organski slojevi se osuše preko Na2S04i propuštaju kroz čep Celite™-a u sa šifriranim nalepnicama obložene posude. Posle koncentracije in vacuo, mase se utvrđuju i prinosi izračunavaju, i uzimaju se uzorci jedinjenja za LC/MS analizu.
PRIMER 4
Paralelni sintetički postupak B, za Biblioteku jedinjenja II
Sledeća reakciona šema predstavlja opšte reagense i stanja za paralelni sintetički postupak B, koji se upotrebljava za jedinjenja iz Tabele 2 koji označavaju postupak B.
Reagensi i stanja: (a) 3-fluor-p-anisidin, DIEA, CH3CN/1,4-dioksan, -20C, lh (b) R2NHR, DIEA, CH3CN/l,4-dioksan, rt, preko noći
(c) 2-(aminometil)-l-etiIpiroIidin, DIEA, CH3CN/l,4-dioksan, 80 C, 15
U osušenu u rerni bocu sa okruglim dnom, rastvor hlorida cijurinske kiseline (5,0 g, 27,1 mmol) u 1,4-dioksanu (40 mL) se ohladi do smrzavanja u CH3CN/suvi led kupatilu. Ovaj zamrznuti rastvor se dodaje u 40 mL CH3CN, praćeno sa DIEA (3,85 g/5,19 mL, 29,8 mmol). Rastvor 3-fluoro-p-anisidina (3,83 g, 27,1 mmol) u 10 mL CH3CN se onda polako dodaje brizgalicom. Reakciona smeša se meša na oko -20 °C oko 1 sat i dopušta joj se da se zagreje do sobne temperature tokom oko 1 sat. Rezultirajući 2-amino-4,6-dihlorotriazin rastvor se vodi do sledećeg koraka bez prečišćavanja.
Pedeset mL (13,5 mmol) pripremljenog (4,6-dihloro-[1,3,5]triazin-2-il)-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)amino rastvora se podeli na jednake delove (2 mL ili 0,54 mmol svaki) među 25 scintilacionih posuda od 40 mL sa nalepljenim šiframa. Individualni rastvori svakog R2NHR (gde R2amin naznačava Monomer 2 u Tabeli 2, 0,542 mmol) i DIEA (77 mg/104 uL, 0,596 mmol) u 0,5 mL CH3CN se priprema i dodaje odgovarajuće označenim posudama od 40 mL. Rezultirajući rastvori se mućkaju na J-KEM bloku preko noći na sobnoj temperaturi i onda postavljaju u zamrzivač (oko -14°C) bez prečišćavanja sve do sledeće reakcije.
Zaliha rastvora 2-(aminometil)-1-etilpirolidin (1,08 M) i DIEA (1,19 M) u CH3CN se priprema i 0,5 mL (koji sadrži 69 mg/79 uL, 0,542 mmol amina i 77 mg/104 uL, 0,596 DIEA) se razdeli u svaku od posuda od 40 mL iz drugog koraka. Posude se mućkaju na J-KEM bloku na okok 80°C oko 15 h. Rastvori se ohlade do sobne temperature i koncentrišuin vacuo.Ostatci se onda ekstrakuju sa etilacetatom i ekstrakt se pere sa slanim rastvorom. Vodeni slojevi se ekstrakuju drugi put sa etilacetatom i kombinovani organski slojevi se osuše preko Na2S04i propuštaju kroz čep Celite™-a u sa šifriranim nalepnicama obložene posude. Posle koncentracije in vacuo, mase se utvrđuju i prinosi izračunavaju, i uzimaju se uzorci jedinjenja za LC/MS analizu.
PRIMER 5
Paralelni sintetički postupak C, za Biblioteku jedinjenja III
Sledeća reakciona šema prikazuje opšte reagense i stanja za paralelni sintetički postupak C, koji se upotrebljava za jedinjenja iz Tabele 2 koji označavaju postupak C.
Reagensi i stanja: (a) 3-fluor-p-anisidin, DIEA, CH3CN/l,4-dioksan, -20C, lh (b) cikloheptilamin, DIEA, CH3CN/l,4-dioksan, rt, preko noći (c) R3NHR, DIEA, CH3CN/I,4-dioksan, 80 C, 15
U osušenu u rerni bocu sa okruglim dnom, rastvor hlorida cijurinske kiseline (5,0 g, 27,1 mmol) u 1,4-dioksanu (40 mL) se ohladi do smrzavanja u CH3CN/suvi led kupatilu. Ovaj zamrznuti rastvor se dodaje u 40 mL CH3CN, praćeno sa DIEA (3,85 g/5,19 mL, 29,8 mmol). Rastvor 3-fluoro-p-anisidina (3,83 g, 27,1 mmol) u 10 mL CH3CN se onda polako dodaje brizgalicom. Reakciona smeša se meša na oko -20 °C oko 1 sat i dopušta joj se da se zagreje do sobne temperature tokom oko 1 sat. Rezultirajući 2-amino-4,6-dihlorotriazin rastvor se vodi do sledećeg koraka bez prečišćavanja.
Pedeset mL (13,5 mmol) pripremljenog (4,6-dihloro-[1,3,5]triazin-2-il)-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)amino rastvora se tretira sa rastvorom cikloheptilamina (1,53 g/1,73 mL, 13,5 mmol) i DIEA (1,93 g/2,60 mL, 14,9 mmol) u CH3CN (8 mL). Rezultirajući rastvor se meša preko noći na sobnoj temperaturi i uvodi u sledeći korak bez prečišćavanja. Rezultirajući 6-hloro-N-cikloheptil-N'-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-[1,3,5]triazin-2,4-diamin rastvor (13,5 mmol) se razblaži do 62,5 mL sa CH3CN i podeli na jednake delove (2,5 mL ili 0,54 mmol svaki) među 25 scintilacionih posuda od 40 mL sa nalepljenim šiframa. Individualni rastvori svakog R3NHR (gde R3amin naznačava Monomer 3 u Tabeli 2, 0,542 mmol) i DIEA (77 mg/104 uL, 0,596 mmol) u 0,5 mL CH3CN se priprema i dodaje odgovarajuće označenim posudama od 40 mL. Rezultirajući rastvori se mućkaju na J-KEM bloku na oko 80°C oko 15
sati. Rastvori se ohlade do sobne temperature i koncentrišuin vacuo.Ostatci se ekstrakuju sa etilacetatom i ekstrakt se opere sa slanim rastvorom. Svaki organski sloj se osuši preko Na2S04i propuštaju se kroz čep Celite™-a u sa šifriranim nalepnicama obložene posude.
Posle koncentracije in vacuo, mase se utvrđuju i prinosi izračunavaju, i uzimaju se uzorci jedinjenja za LC/MS analizu.
PRIMER 6
Sinteza 6- Hloro- N-( 3- hloro- 4- metoksi- fenil)- N'- cikloheksilmetil-[ 1, 3, 5] triazin- 2, 4- diamina ( 102)
Uzorku101(0,3004 g, 1,0 mmol, pripremljenom kako je to ovde naznačeno) rastvorenom u acetonu (4 mL) se dodaje rastvor cikloheksanmetilamina (0,13 mL, 1,0 mmol) u acetonu (1 mL) prećeno dodavanjem NaOH rastvora (0,0448 g, 1,0 mmol rastvoren u 1 mL H20). Reakcionoj smeši se dopušta da se meša na refluksu oko 3 sata. Reakciona smeša se onda sipa preko izdrobljenog leda i neutrališe sa 10% HCI (vod) i 5% NaOH (vod.)- Rezultirajuće čvrsto telo se sakuplja vakuumskim filtriranjem, opere sa vodom i osuši preko noći pod vakuumom da se dobije jedinjenje102(0,29 g, 76% povraćaj).
PRIMER 7
Sinteza N-( 3-Hloro-4-metoksi- fe<ni>l)-N'-cikloheksi<lm>etil- N"- m^
metil- piperidin- 4- il)-[ 1, 3, 5] triazin- 2, 4, 6- triamina ( 103)
Uzorku102(0,286 g, 1,0 mmol) rastvorenom u 1,4-dioksanu (4 mL) se dodaje rastvor N-metil-4(metilamino)piperidina (0,15 mL, 1,0 mmol) u acetonu (1 mL) prećeno dodavanjem NaOH rastvora (0,0462 g, 1,0 mmol rastvorenog u 1 mL H20). Reakcionoj smeši se dopušta da se meša na oko 80 °C oko 2 sata. Reakciona smeša se sipa preko izdrobljenog leda i neutrališe sa 10% HCI (vod.). Rezultirajuće čvrsto telo se sakuplja vakuumskim filtriranjem, opere sa vodom i osuši pod vakuumom preko noći. Hromatografija kolone (silika gel, 96:3:1 dihlorometan:metanol:konc. amonijum hidroksid) daje prinos svetio Ijlubičastog čvrstog jedinjenja103(41 mg, 9%), tt. 84 °C; HPLC: YMC Pack Pro C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, R, 12,7 min, 97% čistoća); 1H NMR (600 mHz, CDCI3, 55 °C) 5 7,98 (s, 1H), 7,18 (S, 1H), 6,85 (d, J=9 Hz, 1H), 6,59 (s, 1H), 4,89 (s, 1H), 4,58-4,62 (m, 1H), 3,87 (s, 3H), 3,25 (t, J=6,6Hz, 2H), 3,05 (s, 3H), 2,94 (d, J=11,4 Hz, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,15 (S, 2H), 1,86 (dq, J=12, 4.2 Hz, 3H), 1,57-1,78 (m, 8H), 1,15-1,30 (m, 4H), 1,00 (dq, J = 11,4, 3 Hz, 2H), MS (ESI):m/ z 476(37,7), 474 (M+H, 100), 410 (1,4).
PRIMER 8
Sinteza 6- Hloro- N-( 3- hloro- 4- metoksi- fenil)- N'-( 1- propil- butil)-[ 1, 3, 5] thazin- 2, 4- diamina ( 104)
Uzorku 101 (0,3062 g, 1,0 mmol) rastvorenom u acetonu (4 mL) se dodaje rastvor 4-heptilamina (0,15 mL, 1,0 mmol) u acetonu (1 mL) prećeno dodavanjem NaOH rastvora (0,0410 g, 1,0 mmol rastvoren u 1 mL H20). Reakcionoj smeši se dopušta da se meša na 30-50 °C oko 3 sata. Reakciona smeša se onda sipa preko izdrobljenog leda i neutrališe sa 10% HCI (vod) i 5% NaOH (vod.). Rezultirajuće čvrsto telo se sakuplja vakuumskim filtriranjem, opere sa vodom i osuši preko noći pod vakuumom da se dobije jedinjenje104(0,363 g, 94% povraćaj).
PRIMER 9
Sinteza N-( 3- Hloro- 4- metoksi- fenil)- N'- metil- N'-( 1- metil- piperidin- 4- il)- N''-( 1- propil- butil)-[ 1, 3, 5] triazin- 2, 4, 6- triamina ( 105)
Uzorku 104 (0,363 g, 1,0 mmol) rastvorenom u 1,4-dioksanu (6 mL) se dodaje rastvor N-metil-4(metilamino)piperidina (0,15 mL, 1,0 mmol) u acetonu (1 mL) praćeno dodavanjem NaOH rastvora (0,0414 g, 1,0 mmol rastvoreno u 1 mL H20). Reakcionoj smeše se dopušta da se meša na oko 80°C oko 2 sata. Reakciona smeša se sipa preko izdrobljenog leda i neutrališe sa 10% NHI (vod.). Rezultirajuće čvrsto telo se sakuplja vakuumskim filtriranjem, opere sa vodom i osuši pod vakuumom preko noći. Hromatografija kolone (silika gel, 96:3:1 dihlorometan:metanol:konc. amonijum hidroksid) daje prinos svetio Ijlubičastog čvrstog jedinjenja105(97 mg, 20%), tt. 249°C; HPLC: YMC Pack Pro C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt14,4 min, 98% čistoća); MS (ESI): m/z 476 (M+H, 100), 412 (2,9), 366 (2,8), 239(1,9).
PRIMER 10
Sinteza N-( 3- Hloro- 4- metoksi- fenil)- N'- izopropil- N"- metil- N"-( 1- metilpiperidin- 4- il)-[ 1, 3, 5] triazin- 2, 4, 6- triamina ( 105)
Uzorku 101 (0,6157 g, 2,0 mmol) rastvorenom u anhidrovanom 1,4-dioksanu (15 mL) se dodaje rastvor izopropilamina (0,17 mL, 2,0 mmol) u anhidrovanom acetonitrilu (1 mL) praćeno dodavanjem N,N-diizopropiletilamina (DIEA) (0,38 mL, 2,2 mmol) u anhidrovanom acetonitirilu (1 mL). Reakcionoj smeši se dopušta da se meša na sobnoj temperaturi preko noći pod azotom. Ovoj smeši se dodaje DIEA (0,38 mL, 2,2 mmol) u anhidrovanom acetonitirilu (1 mL) praćeno dodavanjem N-metil-4(metilamino)piperidina (0,29 mL, 2,0 mmol) u anhidrovanom acetonitrilu (1 mL). Reakcionoj smeši se dopušta da se meša na refluksu preko noći pod azotom. Reakciona smeša se ekstrakuje 3 puta sa etilacetatom. Kombinovani organski slojevi se operu jedanput sa slanim rastvorom i osuši preko anhidrovanog kalijumkarbonata. Organski sloj se koncentriše na kružnom isparivaču i dopušta se da se osuši preko noći pod vakuumom. Hromatografija kolone (silika gel, 96:3:1 CH2Cl2:CH3OH:konc. NH4OH) daje prinos svetio mrkog čvrstog jedinjenja106(271 mg, 32%), TLC (silika gel, 96:3:1 CH2CI2:CH3OH:konc. NH4OH), Rf0,28; HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt4,4 min, 84,8% čistoća); MS (ESI):m/ z 422(26), 420 (M+H, 71,2), 378 (4,2), 231 (100), 211 (40,4), 118 (5,4).
PRIMER 11
Sinteza ^-( S- Hloro^- metoksi- fenilj- t^- izopropil-^- metil-^- piperidin-^
il- 1, 3, 5- triazin- 2, 4, 6- triamina ( 107)
Jedinjenje 107 se izoluje (0,159 g) kao nuz-proizvod putem hromatografije kolone (silika gel, 96:3:1 CH2CI2:CH3OH:konc. NH4OH); tt 129°C; TLC (silika gel, 96:3:1 CH2CI2:CH3OH:konc. NH4OH), Rf 0,14; HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt4,4 min, 93,5% čistoća); MS (ESI):m/ z408 (17,2), 406 (M+H, 46,6), 375 (18,5), 245 (11,9), 224 (100), 204 (13,4).
PRIMER 12
Sinteza 5- { 4-( 3- Hloro- 4- metoksi- fenilamino)- 6-[ metil-( 1- metil- piperidin-4- il)- amino]-[ 1, 3, 5] triazin- 2- ilamino}- pentan- 1- ola ( 108)
Uzorku101(1,5046 g, 5,0 mmol) rastvorenom u anhidrovanom 1,4-dioksanu (30 mL) se dodaje rastvor 5-amino-1-pentanola (0,5067 g, 5,0 mmol) u anhidrovanom acetonitrilu (12 mL) praćeno dodavanjem N,N-diizopropiletilamina (DIEA) (0,95 mL, 5,5 mmol) u anhidrovanom acetonitrilu (2 mL). Reakcionoj smeši se dopušta da se meša na sobnoj temperaturi preko noći pod azotom. Reakcionoj smeši se doda DIEA (0,95 mL, 5,5 mmol) u anhidrovanom acetonitrilu (1 mL) praćeno dodavanjem N-metil-4(metilamino)piperidina (0,73 mL, 5,0 mmol) u anhidrovanom acetonitrilu (1 mL). Reakcionoj smeši se dopušta da se meša na pri refluksu preko noći pod azotom. Reakciona smeša se ekstrakuje 3 puta sa etilacetatom. Kombinovani organski slojevi se operu jedanput sa slanim rastvorom i osuše preko anhidrovanog kalijumkarbonata. Organski sloje se koncentriše na rotacionom isparivaču i dopušta da se osuše preko noći pod vakuumom. Hromatografija kolone (silika gel, 90:9:1 CH2CI2:CH3OH:konc. NH4OH) daje prinos svetio mrkog čvrstog jedinjenja108(300 mg, 13%); TLC (silika gel, 90:9:1 CH2CI2:CH3OH:konc. NH4OH), Rf 0,22; HPLC: YMC Pack Pro C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, R, 3,5 min, 74,8% čistoća); MS (ESI):m/z 466(24,2), 464
(M+H, 71,5), 378 (5,2), 253 (4,5), 244 (20,5), 233 (100), 216 (33,3), 196 (14,6), 118(5,1).
PRIMER 13
Sinteza 5-[ 4-( 3- Hloro- 4- metoksi- fenilamino)- 6-( 1 - metil- piperidin- 4- il)-amino)-[ 1, 3, 5] triazin- 2- ilamino]- pentan- 1 - ola ( 109)
Jedinjenje 109 se izoluje kao nuz-proizvod (0,820 g) putem hromatografije kolone (silika gel, 90:9:1 CH2Cl2:CH3OH:konc. NH4OH), tt 101 °C; TLC (silika gel, 90:9:1 CH2CI2:CH3OH:konc. NH4OH), Rf0,08; HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt3,6 min, 95,3% čistoća); MS (ESI):m/ z452 (13), 450 (M+H, 35,6), 419 (3,9), 267 (5,1), 246 (100), 226 (21,3), 209 (23,6), 118 (1,1).
PRIMER 14
Sinteza N- Butil- 6- hloro- N'-( 3- hloro- 4- metoksi- fenil)- N- propil-[ 1, 3, 5] triazin- 2, 4- diamina ( 110)
Uzorku 101 (1,5334 g, 5,0 mmol) rastvorenom u acetonu (20 mL) se dodaje rastvor N-propil-butilamina (0,77 mL, 5,0 mmol) u acetonu (1 mL) praćeno dodavanjem NaOH (2,0 mL, 2,5 N, 5,0 mmol).
Reakcionoj smeši se dopušta da se meša na 30-35°C oko 3 sata pod azotom. Reakciona smeša se ekstrakuje 3 puta sa dimhlorometanom; kombinovani organski slojevi se operu sa slanim rastvorom i osuše preko kalijumkarbonata. Uzorak se koncentriše na rotacionom isparivaču i rezultirajuće ulje se osuši preko noći pod vakuumom. Hromatografija kolone (silika gel, 96:3:1 dihlorometan:metanol:konc. amonijum hidroksid) daje prinos svetio mrkog jedinjenja 110 u čvrstom obliku (1,4 g, 77% povraćaj).
PRIMER 15
Sinteza N- Butil- N'-( 3- hloro- 4- metoksi- fenil)- N'-( 1- metil- piperidin- 4- il)- N-propil-[ 1, 3, 5] triazin- 2, 4, 6- triamina ( 111)
Uzorku 110 (1,323 g, 3,4 mmol) rastvorenom u 1,4-dioksanu (25 mL) se dodaje rastvor N-metil-4(metilamino)piperidina (0,4 mL, 3,4 mmol) u 1,4-dioksanu (1 mL) praćeno dodavanjem NaOH (1,4 mL, 2,5 N, 3,4 mmol). Reakcionoj smeši se dopušta da se meša pri refluksu oko 2 sata pod azotom. Reakciona smeša se ekstrakuje 3 puta sa dihlorometanom; kombinovani organski slojevi se operu sa slanim rastvorom i osuše preko kalijumkarbonata. Uzorak se koncentriše na rotacionom isparivaču i rezultirajući čvrsti oblik se osuši preko noći pod vakuumom. Hromatografija kolone (silika gel, 90:9:1 dihlorometan:metanol:konc. amonijum hidroksid) daje prinos svetio mrkog čvrstog jedinjenja 111 (527 mg, 33%), tt 68 °C; TLC (silika gel, 90:9:1 CH2CI2:CH3OH:konc. NH4OH), Rf 0,46; HPLC: ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt41,6 min, 90,8% čistoća); MS (ESI):m/ z476 (M+H, 28,5), 261 (20,2), 260 (52,8), 259 (100), 239 (18,6), 239 (50,6).
PRIMER 16
Sinteza N^ Butil-^^- hloro^-metoksi-feniO- N^ metil- N^ piperidin^- il-N2- propil- 1, 3, 5- thazin- 2, 4, 6- triamina ( 112)
Jedinjenje 112 se izoluje kao nuz-proizvod putem hromatografije kolone, ulje (0,112 g); TLC (silika gel, 90:9:1 CH2CI2:CH3OH:konc. NH4OH), Rf0,46; HPLC: ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 266 nm, R,41,4 min, 97,8% čistoća); MS (ESI):m/ z 464(11,6), 462 (M+H, 28,9), 431 (15,6), 273 (12,7), 253 (58,8), 252
(100), 232 (25,8), 157 (14,5).
PRIMER 17
Sinteza 2, 4- Dihloro- 6- cikloheksilmetoksi-[ 1, 3, 5] triazina ( 113)
Hloridu cijurinske kiseline (3,76 g, 20,0 mmol) rastvorenom u toluenu (20 mL) se dodaje kalijumbikarbonatu (2,80 g, 20 mmol) i 18-kruna-6 (0,1614 g, 0,6 mmol) praćeno kapljičastim dodavanjem cikloheksilmetanola (2,5 mL, 20 mmol) u 15 mL toluena (15 mL). Reakcionoj smeši se dopušta da se meša pri refluksu oko 18 sati pod azotom. Reakciona smeša se propusti kroz čep Celita i koncentriše upotrebom rotacionog isparivača i osuši preko noći pod vakuumom da se dobije113kao ulje (5,212 g, 99% povraćaj).
PRIMER 18
Sinteza ( 4- Hloro- 6- cikloheksilmetoksi-[ 1, 3, 5] triazin- 2- il)-( 3- fluoro- 4-
metoksi- fenil)- amina ( 114)
Uzorku113(1,011 g, 3,8 mmol) rastvorenom u acetonu (20 mL) se dodaje rastvor 3-fluoro-anisidina (0,541 g, 3,8 mmol) u acetonu (10 mL) praćeno dodavanjem NaOH (1,52 mL, 2,5 N, 3,8 mmol) i vode (3 mL). Reakcionoj smeši se dopušta da se meša pri refluksu oko 3 sata pod azotom. Reakciona smeša se ekstrakuje 3 puta sa dihlorometonom; kombinovani organski slojevi se operu sa slanim rastvorom i osuše preko kalijumkarbonata. Uzorak se koncentriše na rotacionom isparivaču i rezultirajuće ulje se osuši preko noći pod vakuumom. Hromatografija kolone (silika gel, 70:30 heksanhetilacetat) daju prinos žutog čvrstog jedinjenja114(0,581 g, 42%), tt 98°C; TLC (silika gel, 30:70 etilacetatheksani), Rf 0,36; MS (ESI):m/ z 369(39,1), 368 (22,1), 367 (M+H, 100), 273 (3,2), 271 (10,7).
PRIMER 19
Sinteza 6- Cikloheksilmetoksi- N, N'- bis-( 3- fluoro- 4- metoksi- fenil)- 1, 3, 5-triazin- 2, 4- diamina ( 115)
Jedinjenje115se dobija kao nuz-proizvod (0,159 g) putem hromatografije kolone (silika gel, 70:30 heksani:etilacetat), tt 181°C; TLC (silika gel, 30:70 etilacetatheksani), R, 0,17; MS (ESI):m/ z 472(M+H, 100), 261 (1,5).
PRIMER 20
Sinteza 6- Cikloheksilmetoksi- N-( 1- etil- pirolidin- 2- ilmetil)- N'. ( 3- fluoro-4metoksi- fenil)-[ 1, 3, 5] triazin- 2, 4- diamina ( 116)
Uzorku114(0,3004 g, 0,82 mmol) rastvorenom u 1,4-dioksanu (15 mL) dodaje se rastvor 2-(aminometil)-1-etilpirolidina (0,12 mL, 0,82 mmol) u acetonu (1 mL) praćeno dodavanjem NaOH (0,33 mL, 2,5 N, 0,82 mmol) i vode (1 mL). Reakcionoj smeši se dopušta da se meša pri refluksu oko 2 sata pod azotom. Reakciona smeša se ekstrakuje 3 puta sa dihlorometanom; kombinovani organski slojevi se operu sa slanim rastvorom i osuše preko kalijumkarbonata. Uzorak se koncentriše na rotacionom isparivaču i rezultirajući čvrsti oblik se osuši preko noći pod vakuumom. Hromatografija kolone (silika gel, 96:3:1 dihlorometan:metanol:konc. amonijum hidroksid) daje prinos svetio žutog čvrstog jedinjenja116(226 mg, 60%); HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, R, 10,5 min, 100% čistoća); 1H NMR (600 MHz, CDCI3, 55°C) 5 7,65 (široka rezonanca, rotameri, 1H), 7,07 (brd, J=7,8 Hz, 1H), 6,90 (t, J=9 Hz, 1H), 6,84 (široka rezonanca, rotameri, 1H), 4,12 (s, 2H), 3,88 (S, 3H), 1,02 (s, 1H), 2,26 (apt sekstet, J=6,6 Hz, 1H), 2,19 (q, J=9 Hz, 1H), 1,16-1,92 (m, 10H), 1,57 (s, 2H), 1,17-1,32 (m, 3H), 1,05-1,11 (m, 4H); MS (ESI):m/ z 459(M+H, 100), 363 (40,7), 223 (16,1), 202 (4,4), 138 (1.2).
PRIMER 21
Sinteza ( 4- Hloro- 6- cikloheksilmetoksi-[ 1, 3, 5] triazin- 2- il)-( 3- hloro- 4-
metoksi- fenil)- amina ( 117)
Uzorku113(1,012 g, 3,8 mmol) rastvorenom u acetonu (20 mL) se dodaje rastvor 3-hloro-anisidina (0,605 g, 3,8 mmol) u acetonu (10 mL) praćeno dodavanjem NaOH (1,52 mL, 2,5 N, 3,8 mmol) i vode (3 mL). Reakcionoj smeši se dopušta da se meša pri refluksu oko 3 sata pod azotom. Reakciona smeša se ekstrakuje 3 puta sa dihlorometonom; kombinovani organski slojevi se operu sa slanim rastvorom i osuše preko kalijumkarbonata. Uzorak se koncentriše na rotacionom isparivaču i rezultirajuće ulje se osuši preko noći pod vakuumom. Hromatografija kolone (silika gel, 70:30 heksanketilacetat) daju prinos svetio boje breskve čvrstog jedinjenja117(0,547 g, 38%), tt 114°C; TLC (silika gel, 30:70 etilacetaLheksani), Rf 0,44; MS (ESI):m/ z385 (74,3), 384 (22,9), 383 (M+H, 100), 287 (8,3).
PRIMER 22
Sinteza N, N'- Bis-( 3- hloro- 4- metoksi- fenil)- 6- cikloheksilmetoksi- 1, 3, 5-triazin- 2, 4- diamina ( 118)
Jedinjenje 118 se dobija kao nuz-proizvod (0,178 g) putem hromatografije kolone (silika gel, 70:30 heksani.etilacetat), tt 188°C; TLC (silika gel, 30:70 etilacetatheksani), Rf0,22; MS (ESI):m/ z504 (M+H, 100), 379 (1), 338 (1,3).
PRIMER 23
Sinteza N -( 3- hloro- 4- metoksi- fenil)- 6- cikloheksilmetoksi- N'- metil- N'-( 1-
metil- piperidin- 4- il)-[ 1, 3, 5]- triazin- 2, 4- diamina ( 119)
Uzorku 117 (0,3007 g, 0,78 mmol) rastvorenom u 1,4-dioksanu (15 ml_9 se dodaje rastvor 2-(aminometil)-1-etilpirolidina (0,11 mL, 0,78 mmol) u acetonu (1 mL) praćeno dodavanje NaOH (0,31 mL, 2,5 N, 0,78 mmol) i vode (1 mL). Reakcionoj smeši se dopušta da se meša pri refluksu oko 2 sata pod azotom. Reakciona smeša se ekstrakuje 3 puta sa dihlorometanom; kombinovani organski slojevi se operu sa slanim rastvorom i osuše preko kalijumkarbonata. Uzorak se koncentriše na rotacionom isparivaču i rezultirajući čvrsti oblik se osuši preko noći pod vakuumom. Hromatografija kolone (silika gel, 96:3:1 dihlorometan:metanol:konc. amonijum hidroksid) daje prinos svetio žutog čvrstog jedinjenja 119 (159 mg, 43%), tt 140°C. HPLC: Inertsil ODS-3VC18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, R, 15,2 min, 99,7% čistoća); MS (ESI):m/ z 475(M+H, 64,1), 379 (49,5), 231 (48,6), 210 (100), 190 (3,2).
PRIMER 24
Sinteza 6- Hloro- N, N"- bis -( 3- hloro- 4- metoksi- fenil)- [ 1, 3, 5]- triazin- 2, 4-diamina ( 120)
Uzorku101(3,0556 g, 10,0 mmol) rastvorenom u acetonu (25 mL) dodaje se rastvor 3-hloro-anisidina (1,6050 g, 10,0 mmol) u acetonu (10 mL) praćeno dodavanjem NaOH (4,0 mL, 2,5 N, 10 mmol). Reakcionoj smeši se dopušta da se meša na sobnoj temperaturi oko 3 sata pod azotom. Reakciona smeša se sipa preko izdrobljenog leda. Rezultirajući čvrsti oblik se sakuplja putem vakuumskog filtriranja, opere sa vodom i osuši preko noći pod vakuumom da se dobije jedinjenje120(4,06 g, 95%), tt 213°C; HPLC: Inertsil ODS-3VC18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, R, 70,0 min, 97,1% čistoća); MS (ESI):m/ z 427(20,90), 426 (M+H, 99,6), 210 (100), 209 (22,2), 196 (55,3), 169 (25,4).
PRIMER 25
Sinteza N, N"- bis -( 3- hloro- 4- metoksi- fenil)- N"- metil- N"-( 4- metil-
cikloheksil)- [ 1, 3, 5]- triazin- 2, 4, 6- triamina ( 121)
Uzorku jedinjenja120(1,5004 g, 3,5 mmol) rastvorenom u 1,4-dioksanu (20 mL) dodaje se rastvor N-metil-4(metilamino)-piperidin (0,5 mL, 3,5 mmol) u 1,4-dioksanu (1 mL) praćeno dodavanjem NaOH (1,4 mL, 2,5 N, 3,5 mmol). Reakcionoj smeši se dopušta da se meša pri refluksu oko 2 sata pod azotom. Reakciona smeša se sipa preko izdrobljenog leda i neutrališe sa 10% HCI (vod). Rezultirajući čvrsti oblik se sakuplja vakuumskim filtriranjem, opere se sa vodom i osuši preko noći pod vakuumom. Hromatografija kolone (silika gel, 96:3:1 dihlorometan:metanol:konc. amonijum hidroksid) daje prinos ljubičastog čvrstog jedinjenja121(487 mg, 27%) tt 130°C; HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, R, 8,1 min, 96% čistoća; 1H NMR (600 MHz, CDCI3, 55°C) 5 7,81-7,92 (široka rezonanca, rotameri, 2H), 7,19-7,30 (široka rezonanca, 2H), 6,87 (d, J=9 Hz, 2H), 6,72 (s, 2H), 4,60-4,65 (m, 1H), 3,88 (s, 6H), 3,05 (s, 3H), 2,95 (d, J=12 Hz, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,19 (t, J=11,4 Hz, 2H), 1,89 (dq, J=12,6, 3,6 Hz, 2H), 1,71 (apt d, J=11,4 Hz, 2H), 1,65 (s, 1H); MS (ESI):m/ z 519(28,3), 518 (M+H, 42,1), 261 (71,9), 260 (100).
PRIMER 26
Sinteza N, N'- Bis -( 3- hloro- 4- metoksi- fenil)- N"- cikloheptil- [ 1, 3, 5]- triazin-2, 4, 6- triamina ( 122)
Uzorku jedinjenja120(1,5004 g, 3,5 mmol) rastvorenom u acetonu (20 mL) dodaje se rastvor cikloheptilamina (0,4 mL, 3,5 mmol) u acetonu (1 mL) praćeno dodavanjem NaOH (1,4 mL, 2,5 N, 3,5 mmol). Reakcionoj smeši se dopušta da se meša pri refluksu oko 2 sata pod azotom. Reakciona smeša se sipa preko izdrobljenog leda i neutrališe sa 10% HCI (vod). Rezultirajući čvrsti oblik se sakuplja vakuumskim filtriranjem, opere se sa vodom i osuši preko noći pod vakuumom da se dopije svetio Ijubučasto čvrsto jedinjenje 122 (1,5 g, 85%), tt 183°C; HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, R, 59 min, 96% čistoća; MS (ESI):m/ z 503(M+H, 29), 502 (100), 458 (24,2), 425(17,9), 225 (5,7), 155(11,3), 114 (27,.6).
PRIMER 27
Sinteza N-( 3- bromo- 4- metoksi- fenil)- N'- cikloheptil- N''- metil- N''-(
piperidin- 4- il)-[ 1, 3, 5]- triazin- 2, 4, 6- triamina ( 123)
Hloridu cijurinske kiseline (0,184g, 1 mmol) rastvorenom u acetonitrilu (3 mL) koji se meša na oko -10 °C, dodaje se rastvor 3-bromo-p-anisidina (0,2019 g, 1,0 mmol) u acetonitrilu praćeno dodavanjem N,N-diizopropiletilamina (DIEA) (0,17 mL, 1,0 mmol) u acetonitrilu. Reakcionoj smeši se dopušta da se meša na oko -10 °C 1 sat pod azotom. Reakciona smeša se onda zagreje do sobne temperature i dopušta joj se da se meša na sobnoj temperaturi još jedan sat pod azotom. Reakciona smeša se dodaje rastvoru cikloheptilamina (0,13 mL, 1,0 mmol) u acetonitrilu praćeno dodavanjem DIEA (0,17 mL, 1,0 mmol). Reakcionoj smeši se dopušta da semeša pri refluksu preko noći pod azotom. Reakcionoj smeši se doda N-metil-4(metilamino)piperidin (0,13 mL, 1,0 mmol) u acetonitrilu praćeno dodavanjem DIEA (0,17 mL, 1,0 mmol). Reakconoj smeši se dopušta da se meša pri refluksu preko noći pod azotom. Reakciona smeša se ekstrakuje 3 pute sa etilacetatom; kombinovani organski slojevi se operu sa slanim rastvorom i osuše preko kalijumkarbonata. Uzorak se koncentriše na rotacionom isparivaču i rezultirajući čvrsti oblik se osuši preko noći pod vakuumom. Hromatografija kolone (silika gel, 90:9:1 metilen hlorid:metanol:konc. amonijum hidroksid) daje prinos 0,029 g (6%) jedinjenja 123.<1>H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 7,97-8,19 (široka rezonanca, 1H), 7,12 (široka rezonanca, 1H), 6,78-6,80 (m, 2H), 4,82 (br s, 1H), 4,58 (br s, 1H), 3,92 (br s, 1H), 3,84 (s, 3H), 2,90-2,98 (m, 5H), 2,29 (s, 3H), 2,17 (široka rezonanca, 2H), 1,99-2,24 (široka rezonanca, 4H), 1,72-1,85 (m, 3H), 1,42-1,62 (m, 11H); MS (ESI): m/z 520 (100), 518 (93,9), 458 (10,4), 424 (20,8), 422 (21,1), 261 (67,5), 260 (63,4); 213 (13,9), 212 (13,6).
PRIMER 28
Sinteza 6- Hloro- N- cikloheksilmetil- N'~( 3- fluoro- 4- metoksi- fenil)- [ 1, 3, 5]-triazin- 2, 4- diamina ( 125)
Uzorku124(40,02 g, 138,4 mmol, pripremljenom kako je to ovde naznačeno) raztvorenom u acetonu (300 mL) dodaje se rastvor cikloheksanmetiolamina (18,0 mL, 138,4 mmol) u acetonu (30 mL) praćeno dodavanjem NaOH (55,4 mL, 2,5 N, 138,4 mmol) i 130 mL vode. Reakcionoj smeši se dopušta da se meša pri refluksu oko 3 sata. Reakciona smeša se onda sipa preko izdrobljenog leda i neutrališe sa 10%HCI (vod) i 10%NaOH (vod). Rezultirajući čvrsti oblik se sakuplja vakuumskim filtriranjem, opere se sa vodom i osuši preko noći pod vakuumom. Rekristalizacija iz etilacetata daje prinos svetio žutog čvrstog jedinjenja 125 (32,93 g, 65%), tt 156 °C; HPLC. Inertsil ODS-3V C18, 40:10:50 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt47,9 min, 92% čistoća; MS (ESI):m/z366 (M+H, 100).
PRIMER 29
Sinteza N- Cikloheksilmetil- N'-( 1- etil- pirolidin- 2- ilmetil)- N''-( 3- fluoro- 4-
metoksi- fenil)- [ 1, 3, 5]- triazin- 2, 4, 6- triamina ( 126)
Uzorku125(10,02 g, 27,3 mmol) rastvorenom u 1,4-dioksanu (150 mL) dodaje se rastvor 2-(aminometil)-1 -etilpirolidina (4,0 mL, 27,3 mmol) u acetonu (10 mL) praćeno dodavanjem NaOH (11 mL, 2,5 N, 27,3 mmol) i 27 mL vode. Reakcionoj smeši se dopušta da se meša pri refluksu oko 2 sata. Reakciona smeša se ekstrakuje 3 pute sa dihlorometanom; kombinovani organski slojevi se operu sa slanim rastvorom i osuše preko kalijumkarbonata. Uzorak se koncentriše na rotacionom isparivaču i rezultirajući čvrsti oblik se osuši preko noći pod vakuumom. Hromatografija kolone (silika gel, 96:3:1 dihlorometan:metanol:konc. amonijum hidroksid) daje prinos svetio žutog čvrstog jedinjenja126(7,014 g, 56%) tt 72°C; HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt8,5 min, 93,4% čistoća; MS (ESI): m/z458(M+H, 37,3), 362 (4), 250 (100), 230 (15,3), 229 (44,1).
PRIMER 30
Sinteza N- Cikloheptil- N'-( 3- fluoro- 4- metoksi- fenil)- 6- pirolidin- 1- il-[ 1, 3, 5]-triazin- 2, 4- diamina ( 128)
Uzorku jedinjenja127(13,24 g, 36,2 mmol, pripremljenom kakoje to ovde naznačeno) rastvorenom u THF (150 mL) dodaje se rastvor pirolidina (3,0 mL, 36,2 mmol) u THF (10 mL) praćeno dodavanjem NaOH (14,5 mL, 2,5 N, 36,2 mmol) i 36 mL vode. Reakcionoj smeši se dopušta da se meša pri refluksu oko 2,5 sata. Reakciona smeša se ekstrakuje 3 pute sa dihlorometanom; kombinovani organski slojevi se operu sa slanim rastvorom i osuše preko kalijumkarbonata. Uzorak se koncentriše na rotacionom isparivaču i rezultirajući čvrsti oblik se osuši preko noći pod vakuumom. Hromatografija kolone (silika gel, 98:2 dihlorometan:metanol) daje prinos svetio žutog čvrstog jedinjenja128(3,36 g, 23%) tt 79°C; HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:10:50 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, R, 24,5 min, 95,5% čistoća;<1>H NMR (600 MHz, CDCI3, 55°C) 5 7,77 (široka rezonanca, 1H), 7,01-7,03 (m, 1H), 6,86 (t, J=9 Hz, 1H), 6,62 (s, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,02-4,06
(m, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,54 (s, 4H), 1,99-2,03 (m, 2H), 1,91-1,93 (m, 3H), 1,47-1,66 (m,1H); MS (ESI): m/ z 402 (30,7), 401(M+H, 100).
PRIMER 31
Sinteza ( 4, 6- Dihloro-[ 1, 3, 5]- triazin- 2- il)-( 3- fluoro- 4- metoksi- fenil)- amina
( 124)
Hlorid cijurinske kiseline (28,84 g, 156,0 mmol) rastvoren u acetonu (200 mL) koji se meša na otprilike 0-5°C, dodaje se rastvor 3-fluoro-p-anisidina (22,16 g, 156,0 mmol) u acetonu (200 mL) praćeno dodavanjem NaOH (63 mL, 2,5 N, 156,0 mmol). Reakcionoj smeši se dopušta de se meša na otprilike 0-5°C oko 2 sata. Reakciona smeša se onda sipa preko izdrobljenog leda i neutrališe sa 10% HCI (vod) i 5% NaOH (vod). Rezultirajući čvrsti oblik se sakuplja putem vakuumskog filtriranja, opee se sa vodom i osuši preko noći pod vakuumom. Hromatografija kolone (silika gel, 70:30 heksan.etilacetat) daje prinos svetio žutog čvrstog jedinjenja124(29,6 g, 66%) tt 134°C; HPLC: Inertsil 0DS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt20,3 min, 97,7% čistoća.
PRIMER 32
Sinteza 6- Hloro- N- cikloheptil- N'-( 3- fluoro- 4- metoksi- fenil)- [ 1, 3, 5]-triazin- 2, 4- diamina ( 127)
Uzorku124(10,00 g, 34,6 mmol) rastvorenom u acetonu (150 mL) dodaje se rastvor cikloheptilamina (4,4 mL, 34,6 mmol) u acetonu (20 mL) praćeno dodavanjem NaOH (13,8 mL, 2,5 N, 34,6 mmol) i 35 mL vode. Reakcionoj smeši se dopušta da se meša pri refluksu oko 3 sata. Reakciona smeša se ekstrakuje 3 puta sa dihlorometanom; kombinovani organski slojevi se operu sa slanim rastvorom i osuše preko kalijumkarbonata. Uzorak se koncentriše na rotacionom isparivaču i rezultirajući čvrsti oblik se osuši preko noći pod vakuumom dajući jedinjenje 127 (12,4 g, 98% povraćaj), tt 145 °C; HPLC: Inertsil ODS-3VC18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt104,8 min, 97,3% čistoća;<1>H NMR (600 MHz, CDCI3, 55°C) 8 7,50-7,64 (m, 1H), 7,02-7,03 (br. rezonanca, 2H), 6,90 (t, J=8,9 Hz, 1H), 5,35-5,41 (br. rezonanca, 1H), 3,99 (br s, 1H), 4,12 (rotamer), 3,87 (s, 3H), 2,01 (br s, 2H), 1,42-1,67 (m, 11H).
PRIMER 33
Sinteza N- Cikloheptil- N'- etil- N"~( 3- fluoro- 4- metoksi- fenil)- [ 1, 3, 5]- thazin-2, 4- diamina ( 129)
Jedinjenju 127 (11,00 g, 30 mmol) rastvorenom u THF (150 mL) dodaje se rastvor etilamin hidrohlorida (2,43 mL, 30 mmol) u THF (20 mL) praćeno dodavanjem NaOH (24 mL, 60 mmol) i 30 mL vode. Reakcionoj smeši se dopušta da se meša pri refluksu oko 2 sata. Reakciona smeša se ekstrakuje 3 pute sa dihlorometanom; kombinovani organski slojevi se operu sa slanim rastvorom i osuše preko kalijumkarbonata. Uzorak se koncentriše na rotacionom isparivaču i rezultirajuć čvrsti oblik se osuši preko noći pod vakuumom. Hromatografija kolone (silika gel, 98:2 dihlorometan:metanol) daje prinos svetio žutog čvrstog jedinjenja 129 (4,81 g, 43%) tt 84°C; HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt30,7 min, 94,2% čistoća; 1H NMR (600 MHz, CDCI3, 55°C) 5 7,69 (s, 1H), 7,00 (br d, J=7,0 Hz, 1H), 6,86 (t, J=8,4 Hz, 1H), 6,64 (s, 1H), 4,79-4,83 (br rezonanca, 2H), 4,01-4,03 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,38-3,42 (m, 2H), 1,99-2,01 (m, 2H), 1,47-1,67 (m, 11H), 1,19 (t, J=7,2 Hz, 3H); MS (ESI):m/ z376 (29,5), 375 (M+H, 100).
PRIMER 34
Sinteza N- Cikloheptil- N'-( 1- etil- pirolidin- 2- ilmetil)- N''-( 3- fluoro- 4- metoksh
fenil)- [ 1, 3, 5]- triazin- 2, 4, 6- triamina ( 130)
Jedinjenju 127 (5,009 g, 13,7 mmol) rastvorenom u THF (80 mL) dodaje se rastvor 2-(aminometil)-1-etilpirolidina (2,0 mL, 13,7 mmol) u THF (10 mL) praćeno dodavanjem NaOH (5,5 mL, 2,5 N, 13,7 mmol) i 13 mL vode. Reakcionoj smeši se dopušta da se meša pri refluksu oko 2 sata pod N2atm. Reakciona smeša se ekstrakuje 3 pute sa dihlorometanom; kombinovani organski slojevi se operu sa slanim rastvorom i osuše preko kalijumkarbonata. Uzorak se koncentriše na rotacionom isparivaču i rezultirajuć čvrsti oblik se osuši preko noći pod vakuumom. Hromatografija kolone (silika gel, 90:9:1 metilen hlorid:metanol:konc. amonijum hidroksid) daje prinos svetio žutog čvrstog jedinjenja 130 (3,63 g, 58%), tt 76 °C; HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt7,1 min, 97,1% čistoća; MS (ESI):m/ z 459(16,5), 458 (M+H, 48,7), 362 (31,3), 250 (100), 230 (22,8), 229 (62,7), 222 (17,2), 202 (34).
PRIMER 35
Sinteza 2-[ 4- hloro- 6-( 3- hloro- 4- metoksi- fenilamino)-[ 1, 3, 5]- triazin- 2-
ilamino]- propan- 1, 3- diola ( 131)
Jedinjenju101(0,6114 g, 2 mmol) rastvorenom u acetonu (3 mL) dodaje se 2-amino-propan-1,3-diol (0,1818 g, 2 mmol) rastvoren u acetnou (1 mL) i voda (1 mL). Onda se dodaje voda (1 mL) reakcionoj smeši praćeno sa 2,5 N NaOH (vod) (0,8 mL, 2 mmol). Reakciona smeša se zagreje pri refluksu 3 sata pod N2atmosferom. Reakciona smeša se razblaži sa etilacetatom i opere 2 x slanim rastvorom. Organski sloj se odvaja, osuši preko anhidrovane K2C03, filtrira, i koncentriše pod redukovanim pritiskom dajući 0,643 g Ijubučastog čvrstog oblika. Sirovi materijal se prečisti putem hromatografije bleska kolone na silika gelu elutujući sa 100% etilacetatom dajući bezbojno ulje131(0,124 g, 18%); HPLC: Inertsil ODS-3VC18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt5,7 min, 83,3% čistoća; MS (ESI):m/ z360 (M+H, 100), 338 (10,7), 183 (10,3).
PRIMER 36
Sinteza 2- { 4-( 3- hloro- 4- metoksi- fenilamino)- 6-[ metil-( 1- metil- piperidin- 4-
il)- amino]-[ 1, 3, 5] triazin- 2- ilamino}- propan- 1, 3- diola ( 132)
Jedinjenju131(0,979 g, 0,271 mmol) rastovrenom u 3 mL 1,4-dioksana se ddaje metil-4-(metilamino)piperidina (0,05 mL, 0,34 mmol) rastvorenog u 2 mL 1,4-dioksana praćeno dodavanjem 2,5 N NaOH (vod)(0,11 mL, 0,275 mmol). Smeša se zagreje pri refluksu za 3 sata i 45 minuta, ohladi do oko sobne temperature, i onda koncentriše pod redukovanim pritiskom. Rezultirajući materijal se razblaži sa dihlorometanom i filtrira. Filtrat se onda koncentriše dajući 56,5 mg materijala. Sirovi materijal se prečišćava putem silika gel pipeta kolone elutujući sa 100% mteanola dajući čvrsto belo jedinjenje132(21,1 mg, 18%), tt 84°C; MS (ESI):m/ z454 (34,7), 452 (M+H, 100), 422 (11,3), 248 (25,3), 247 (51,3), 157 (60,3), 129 (27,5).
PRIMER 37
Sinteza N-( 1- benzil- piperidin- 4- il)- N'-( 3- hloro- 4- metoksi- fenil)- N"-
cikloneptil-[ 1, 3, 5]- 2, 4, 6- triamina ( 134)
Jedinjenju 133 (0,1252 g, 0,382 mmol, pripremljenom kako je to ovde naznačeno) rastvorenom u 3 mL acetonitrila dodaje se N,N-diizopropil etil amin (DIEA) (0,07 mL, 0,382 mmol) praćeno sa 4-amino-1-benzilaminom (0,07 mL, 0,382 mmol). Smeša se refluksuje preko noći pod N2atmosferom. Reakciona smeša se razblaži sa metilen hloridom i opere sa slanim rastvorom. Organski sloj se odvaja, osuši preko K2C03, filtrira i koncentriše pod redukovanim pritiskom da se dobije 0,159 g materijala. Sirovi materijal se prečišćava silika gel hromatografijom bleska kolone elutujući sa 96:3:1 metilen hlorid:metanol:konc. amonijum hidroksid i sakupljene frakcije se osuše preko kalijumkarbonata, filtriraju i potom koncentrišu pod redukovanim pritiskom da daju 77 mg proizvoda. Druga kolona pod sličnim uslovima sa obavlja da da dodatnih 30 mg materijala za kombinovani proizvod134(103 mg, 50%); HPLC: Inertsil ODS-3VC18, 40:30:30 [KH2P04
(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, R, 13,7 min, 97,73% čistoća; MS (ESI):m/z538 (15,4), 536 (38,2), 448 (19,3), 446 (49,3), 290 (41,4), 289 (84,6), 269 (100), 247 (4,4).
PRIMER 38
Sinteza N2-( 3- hloro- 4- metoksi- fenil)- r/- cikloheptil- N6- piperidin- 4- il- 1, 3, 5-triazin- 2, 4, 6- triamina ( 135)
Jedinjenju134(0,0485 g, 0,0867 mmol) u 2 mL metanola dodaje se 10% Pd/C (0,052 g) praćeno aminijum formatom (0,0646 g, 1,02 mmol). Smeša se zagreva pri refluksu oko 1,5 sat pod N2atmosferom. Ohlađena reakciona smeša se filtrira vakuumom kroz Celit sa ispiranjem metilen hloridom, i filtrat se koncentriše pod redukovanom pritiskom da se dobije 36 g materijala. Sirovi materijal se prečišćava silika gel hromatografijom bleska elutujući 90:9:1 metilen hlorid:metanol:konc. amonijum hidroksid i sakupljene frakcije se osuše preko kalijumkarbonata, filtriraju i potom koncentrišu pod redukovanim pritiskom da daju čvrsto jedinjenje135(20 mg, 51,8%), tt 167 °C; HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt4,6 min, 52,1% (sledeći glavni vrh na Rt7,3 min, 46,9%); MS (ESI): m/z 448 (4,4), 446 (12,5), 412 (22,7), 386
(2,3), 265 (32,9), 248 (42,6), 244 (56,2), 228 (37,1), 227 (100), 207 (6,9).
PRIMER 39
Sinteza ^-( S- hloro^- metoksi- fenilj- r^- cikloheptil- r^- fl- etil- pirolidin^-
ilmetil)- 1, 3, 5- triazin- 2,- 4, 6- triamina ( 136)
Jedinjenju 133 (0,1257 g, 0,382 mmol, pripremljenom kako je to ovde naznačeno) rastvorenom u 3 mL acetonitrila dodaje se DIEA (0,07 mL, 0,382 mL) praćeno sa 2-(aminometil)-1-etil pirolidinom (0,06 mL, 0,382 mmol). Smeša se refluksuje preko noći pod N2atmosferom. Reakciona smeša se razblaži sa metilen hloridom i opere sa slanim rastvorom, Organski sloj se odvaja, osuši preko K2C03, filtrira i koncentriše pod redukovanim pritiskom da se dobije 0,143 g materijala. Sirovi materijal se prečišćava putem silika gel hromatografije bleska kolone elutujući 96:3:1 metilen hlorid:metanol:konc. amonijum hidroksid i sakupljene frakcije se osuše preko otprilike 1:1 kalijumkarbonat:natrijumsulfat, filtriraju i potom koncentrišu pod redukovanim pritiskom da daju 77 mg proizvoda. Druga kolona pod sličnim uslovima se obavlja da se dobije dodatnih 30 mg materijala za kombinovanih 98 mg (54%) žuto obojenog čvrstog jedinjenja 136, tt 69-70 °C; HPLC: YMC Pack Pro C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt12,9 min, 96,5% čistoća; MS (ESI):m/ z 476(16,3), 474 (42,9), 260 (15), 259 (44,2), 258 (100), 238 (56), 216 (5,3), 210 (9,2).
PRIMER 40
Sinteza 2- hloro- 4- { 4- cikloheptilamino-[ metil-( 1 - metil- piperidin- 4- il)-amino3, 5- triazin- 2- ilamino}- fenola ( 138)
Pod anhidrovanim uslovima, jedinjenju 137 (0,1008 g, 0,21 mmol, pripremljeno kako je to ovde opisano) u suvoj boci sa kružnim dnom
rastvoreno u anhidrovanom metilen hloridu (3 mL) pod N2atmosferom oko 0°C (led/voda kupatilo) sporo se dodaje brizgalicom BBr3(2,1 mL, 2,1 mmol, 1 M u metilen hloridu). Smeša se meša oko 2 sata na 0°C i potom priguši sa vodom (5 mL). Posle stajanja preko noći na sobnoj temperaturi, smeša se razblažuje sa etilacetatom, vodom i 10% NaHC03(vod), i organski sloj se odvaja i potom opere sa slanim rastvorom. Organski sloje se onda osuši preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrira, i koncentriše pod redukovanim pritiskom da se dobije 0,648 g materijala. Sirovi materijal se prečisti upotrebom silika gel hromatografije bleska kolone elutujući 100% metanol da se dobije belo
čvrsto jedinjenje138(7 mg, 7%); HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt4,9 min, 90,3 % čistoća; 1H NMR (600 MHz, CDCI3, 55°C) (sve rezonance su široke) 5 7,93 (s, 1H), 7,13 (s, 1H), 6,91-6,92 (m, 1H), 6,55 (s, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,02 (s, 1H), 2,96-3,0 (m, 5H), 2,32 (s, 3H), 2,13 (s, 2H), 2,03 (s, 2H), 1,86-1,88 (m, 2H), 1,53-1,67 (m, 12H); MS (ESI):m/ z463 (12,4), 461 (27), 252 (59), 251 (100), 231 (32,3), 224 (1), 203 (9,8).
PRIMER 41
Sinteza N2- cikloheptil- N4—(( S)- 1 - etil- piro! idin- 2- ilmetil)- N6-( 3- fluor- 4-
metoksifenil)- 1, 3, 5- triazin- 2, 4, 6- triamina ( 139)
Smeši hlorida cijurinske kiseline (0,368 g, 2 mmol) u CH3CN na otprilike
-10 do -20 °C dodaje se 3-fluoro-p-anisidin (0,28 g, 2 mmol) u CH3CN praćeno dodavanjem N,N-diizopropiletilamina (DIEA) (0,35 mL, 2 mmol) i meša oko sat vremena. Reakcionoj smeši se onda dopušta da postigne sobnu temperaturu jedan sat. Drugi korak se nastavlja bez daljeg prečišćavanja. Cikloheptilamin (0,25 mL, 2 mmol) i DIEA (0,35 mL, 2 mmol) se dodaju i reakciona smeša se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Treći korak se takođe nastavlja bez bilo kakvog daljeg prečišćavanja. S-(-)-2-aminometil-N-etil pirolidin (0,29 mL, 2 mmol) i DIEA (0,35 mL, 2 mmol) se dodaje i reakciona smeša se
refluksuje preko noći. Reakciona smeša se razblaži sa etilacetatom i opere sa slanim rastvorom. Organski sloj se odvaja i osuši preko kalijumkarbonata, filtrira, i koncentriše pod redukovanim pritiskom dajući 0,920 g sirovi materijal. Sirovi materijal se prečisti putem hromatografije kolone da se dobije prinos belog čvrstog jedinjenja139(0,550 g, 60%), tt 75-77 °C; HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CNj, 264 nm, Rt7,9 min, 95,9% čistoća; MS (ESI):m/ z 458 (M+H,100).
PRIMER 42
Sinteza N^ cikloheptil-^-^- l- etii- pirol^
metoksifenil)- 1, 3, 5- triazin- 2, 4, 6- triamina ( 140)
Smeši hlorida cijurinske kiseline (0,368 g, 2 mmol) u CH3CN na otprilike
-10 do -20 °C dodaje se 3-fluoro-p-anisidin (0,28 g, 2 mmol) u CH3CN praćeno dodavanjem N,N-diizopropiletilamina (DIEA) (0,35 mL, 2 mmol) i meša oko sat vremena. Reakcionoj smeši se onda dopušta da postigne sobnu temperaturu jedan sat. Cikloheptilamin (0,25 mL, 2 mmol) i DIEA (0,35 mL, 2 mmol) se dodaju i reakciona smeša se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Ovoj smeši dodaje se R-(+)-2-aminometil-N-etil pirolidin (0,29 mL, 2 mmol) i DIEA (0,35 mL, 2 mmol) i
reakciona smeša se refluksuje preko noći. Reakciona smeša se razblaži sa etilacetatom i opere sa slanim rastvorom. Organski sloj se odvaja i osuši preko kalijumkarbonata, filtrira, i koncentriše pod redukovanim pritiskom dajući 0,920 g sirovog materijala. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom kolone da se dobije prinos belog čvrstog jedinjenja 140 (0,500 g, 54,7%), tt 77-79 °C; HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, R, 7,9 min, 95,9% čistoća; MS (ESI):m/ z 458(M+H, 100).
PRIMER 43
Sinteza N^ cikloheptil- N4-^)- 1 - etil- pirolidin- 2- ilmetil)- N6~( 3- fluoro- 4-
metoksifenil)- 1, 3, b- thazin- 2, 4, 6- triamina ( 141)
Smeši hlorida cijurinske kiseline (0,368 g, 2 mmol) u CH3CN na oko -20 °C dodaje se 3-fluoro-p-anisidin (0,28 g, 2 mmol) u CH3CN praćeno dodavanjem N,N-diizopropiletilamina (DIEA) (0,35 mL, 2 mmol) i meša oko sat vremena. Reakcionoj smeši se onda dopušta da postigne sobnu temperaturu za jedan sat. Onda se dodaju, cikloheptilamin (0,25 mL, 2 mmol) i DIEA (0,35 mL, 2 mmol) i reakciona smeša se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Onda se dodaju S-(-)-2-aminometil-N-etil pirolidin (0,29 mL, 2 mmol) i DIEA (0,35 mL, 2 mmol) i reakciona smeša se refluksuje preko noći. Reakciona smeša se razblaži sa etilacetatom i opere sa slanim rastvorom. Organski sloj se odvaja i osuši preko natrijum sulfata, filtrira, i koncentriše pod redukovanim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem hromatografije kolone elutujući sa 96:3:1 metilen hlorid:metanol:konc. amonijum hidroksid da se dobije prinos belog čvrstog jedinjenja141(0,400 g, 43,7 %), tt 68-69°C; HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt8,2 min, 97,1% čistoća; MS (ESI):m/ z458 (M+H, 100), 362 (2,8), 230 (85,4).
PRIMER 44
Sinteza N^ cikioheksilmetil-^-^ RJ- l- etil- p^'
4- metoksifenil)- 1, 3, 5- triazin- 2, 4, 6- triamina ( 142)
Smeši hlorida cijurinske kiseline (0,368 g, 2 mmol) u CH3CN na oko -20 °C dodaje se 3-fluoro-p-anisidin (0,28 g, 2 mmol) u CH3CN praćeno dodavanjem DIEA (0,35 mL, 2 mmol) i meša oko sat vremena. Reakciona smeša se onda meša na sobnoj temperaturi oko 1 sat. Onda se dodaju cikloheksilmetil amin (0,26 mL, 2 mmol) i DIEA (0,35 mL, 2 mmol) i reakciona smeša se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Onda se dodaju R-(+)-2-aminometil-N-etil pirolidin (0,29 mL, 2 mmol) i DIEA (0,35 mL, 2 mmol) i reakciona smeša se refluksuje preko noći. Reakciona smeša se razblaži sa etilacetatom i opere sa slanim rastvorom. Organski sloj se odvaja i osuši preko natrijum sulfata, filtrira, i koncentriše pod redukovanim pritiskom. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom kolone elutujući sa 96:3:1 metilen hlorid:metanol:konc. amonijum hlorid da se dobije jedinjenje142(0,100 g, 10,9%), tt 66-67°C; HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt8,2 min, 96,7% čistoća;<1>H NMR (600 MHz, CDCI3) 6 7,58-7,73 (široka rezonanca, 1H), 7,07-7,11 (široka rezonanca, 1H), 6,82 (t, J=9 Hz, 1H), 5,49-5,65 (široka rezonanca, 1H), 4,96-5,13 (široka rezonanca, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,54-3,70 (široka rezonanca, 1H), 3,13-3,20 (br m, 4H), 2,81 (široka rezonanca, 1H), 2,54 (široka rezonanca, 11H), 2,05-2,18 (m, 2H), 2,01 (s, 1H), 1,50-1,83 (brm, 9H), 1,05-1,22 (m, 5H), 0,91 (aptq, J=11,4 Hz, 2H);MS (ESI):m/ z 458(M+H, 100), 362 (3,8), 230 (99,8), 216 (1), 182 (1,1).
PRIMER 45
Sinteza ({ 4- cikloheptilamino- 6-[(( S)-( 1- etil- pirolidin- 2- itmetil)- amino]-1, 3, 5- triazin- 2- il}- fenil- amino)- acetonitril ( 143)
Smeši hlorida cijurinske kiseline (0,368 g, 2 mmol) u CH3CN na oko -20 °C dodaje se N-fenil glicinonitril (0,264 g, 2 mmol) u CH3CN praćeno dodavanjem DIEA (0,35 mL, 2 mmol) i meša oko sat vremena. Reakciona smeša se onda meša na sobnoj temperaturi oko 1 sat. Onda se dodaju cikloheptilamin (0,25 mL, 2 mmol) i DIEA (0,35 mL, 2 mmol) i reakciona smeša se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Onda se dodaju S-(-)-2-aminometil-N-etil pirolidin (0,29 mL, 2 mmol) i DIEA (0,35 mL, 2 mmol) i reakciona smeša se refluksuje preko noći. Reakciona smeša se razblaži sa etilacetatom i opere sa slanim rastvorom. Organski sloj se odvaja i osuši preko natrijum sulfata, filtrira, i koncentriše pod redukovanim pritiskom. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom kolone elutujući sa 96:3:1 metilen hlorid:metanol:konc. amonijum hlorid da se dobije prinos jedinjenja143(0,300 g, 33%), tt 53-55°C; HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt6,9 min, 94,1% čistoća; MS (ESI):m/z449 (M+H, 100), 381 (1,2), 353 (16,2), 226 (19,9), 225 (54,3), 212 (20,5), 177 (18,3), 164 (9,6).
PRIMER 46
Sinteza ({ 4- cikloheptilamino- 6-[(( R)-( 1- etil- pirolidin- 2- ilmetil)- amino]-1, 3, 5- triazin- 2- il}- fenil- amino)- acetonitril ( 144)
Smeši hlorida cijurinske kiseline (0,368 g, 2 mmol) u CH3CN na oko -20 °C dodaje se N-fenil glicinonitril (0,264 g, 2 mmol) u CH3CN praćeno dodavanjem DIEA (0,35 mL, 2 mmol) i meša oko sat vremena. Reakciona smeša se onda meša na sobnoj temperaturi oko 1 sat.. Onda se dodaju cikloheptilamin (0,25 mL, 2 mmol) i DIEA (0,35 mL, 2 mmol) i reakciona smeša se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Onda se dodaju R-(+)-2-aminometil-N-etil pirolidin (0,29 mL, 2 mmol) i DIEA (0,35 mL, 2 mmol) i reakciona smeša se refluksuje preko noći. Reakciona smeša se razblaži sa etilacetatom i opere sa slanim rastvorom. Organski sloj se odvaja i osuši preko natrijum sulfata, filtrira, i koncentriše pod redukovanim pritiskom. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom kolone elutujući sa 96:3:1 metilen hlorid:metanol:konc. amonijum hlorid da se dobije prinos jedinjenja 144 (0,300 g, 33%), tt 53-55°C; HPLC: Inertsil ODS-3VC18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, R, 6,8 min, 92,6% čistoća; MS (ESI):m/ z 449(M+H, 100), 381 (1,4), 353(11,8), 226 (13), 225 (33,1), 212 (15), 177 (13,5), 164 (7,8).
PRIMER 47
Sinteza N2- cikloheptil- l^[( 1- etil- pirolidinil]- r/-( 3- fluoro- 4- metoksifenil)- 6-[( S)- 2-( metoksimetil)- 1 - pirolidinil]- 1, 3, 5- triazin- 2, 4- diamina ( 145)
Hlorid cijurinske kiseline (11,07 g, 60 mmol) se rastvara u 40 mL CH3CN i ohladi se do oko -20 °C. Ovome se dodaje DIEA (11,5 mL, 60 mmol) praćeno sa 3-fluoro-4-metoksianinlinom (8,47 g, 60 mmol) u 20 mL CH3CN (reakcija se zamrzava). Reakciji se dopušta da se zagreje do sobne temperature posle oko 1 sat na -20 °C. TLC (2% CH3OH/CH2CI2) i masena spektrometrija ukazuju na prisustvo jedinjenja 124. Reakciona smeša se ohladi do oko 0 °C pre dodavanja DIEA (11,5 mL, 66 mmol). Dodaje se 2-Aminometil-1-etilpirolidin (7,77 g, 60 mmol) u CH3CN (10 mL). Reakciji se dopušta da se zagreje do sobne temperature i meša se preko noći. Onda se dodaju DIEA (11,5 mL, 66 mmol) i S-(+)-2-metoksietilpirolidin (6,91 g, 60 mmol) u 20 mL 1,4-dioksana. Reakcija se zagreva na oko 50 °C preko noći. Rastvarač se uklanja in vacuo, a rezultirajući ostatak se prečisti putem hromatografije bleska na silika gelu zapakovano u etilacetatu. Prve nečistoće se uklanjanju a potom se eluent pojačava u polarnosti do 10% CH3OH:etilacetat. Materijal koji se sakupi sa kolone se onda rastvori u vodi i ekstrakuje sa CH2CI2(4 puta), osuši preko MgS04, i koncentriše do suvog stanja da se dobije mrko čvrsto jedinjenje145(9,7 gm 27,6% prinos), 71-72 °C; HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, R, 5,37 min, 90,3% čistoća;<1>H NMR (600 MHz, CDCI3, 55°C) 5 7,69 (s, 1H), 7,08 (d, J=7,8 Hz, 1H), 6,86 (t, J=9 Hz, 1H), 4,29 (s, 1H), 3,90-3,96 (m, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,63-3,81 (m, 6H), 3,35 (s, 3H), 3,23-3,25 (m, 1H), 2,85 (široki s, 1H), 2,78 (široki s, 1H), 2,14 (široki s, 2H), 1,89-2,04 (m, 6H), 1,37 (očigledan t, J=7,2 Hz, 3H);<13>C NMR (150,8 mHz, CDCI3, 55 °C) 5 165,8, 163,8 (2C), 152,3 (d, Jc.f=243,5 Hz), 143,0 (142, rotamer ili diasetereomer), 133,7 (133,67, rotamer ili diastereomer), 115,0, 114,4, 109,1 (108,9, rotamer ili diastereomer), 72,8, 66,6, 59,0, 57,0, 56,6, 53,7, 51,0, 46,8, 42,2, 28,4 (28,2, rotamer ili diastereomer), 23,1 (23,0, rotamer ili diastereomer), 10,9;MS (ESI): m/ z460,2 (M+H, 44,7), 251,1 (47,7), 235,1 (27,5), 231,1 (37,4), 230,6 (100), 214,6 (36,5).
PRIMER 48
Sinteza ( 3- Hloro- 4- metoksi- fenil)-( 4, 6- dihloro-[ 1, 3, 5] triazin- 2- il)- amina
( 101)
Hloridu cijurinske kiseline (36,911 g, 200 mmol) rastvorenom u acetonu (250 mL) mešanjem na otprilike 0-5°C (led-voda kupatilo), dodaje se rastvor 3-hloro-p-anisidina (31,582 g, 200,0 mmol) u acetonu (150 mL) praćeno dodavanjem NaOH rastvora (80 mL, 2,5 N, 200,0 mmol). Reakcionoj smeši se dopušta da se meša na otprilike 0-5°C (led-voda kupatilo) oko 1 sat. Reakciona smeša se onda sipa preko izdrobljenog leda i neutrališe sa 10% NHI (vod). Rezultirajući čvrsti oblik se opere sa vodom i osuši preko noći pod vakuumom da se dobije jedinjenje 101 (58,3 g, 96%), tt 165°C; HPLC: YMC Pack Pro C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2). CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt24,3 min, 97,8% čistoća); MS (ESI):m/ z 305(M+H, 100), 283 (26,3), 271 (26,9), 269 (75,2), 139(16,2).
PRIMER 49
Sinteza 6- Hloro- N-( 3- hloro- 4- metoksi- fenil)- N'- cikloheptil-[ 1, 3, 5Jtriazin-2, 4- diamina ( 133)
Uzorku jedinjenja 101 (20,02 g, 65,6 mmol) u acetonu (200 mL) sporo se dodaje cikloheptilamin (8,3 mL, 65,5 mmol) u acetonu (55 mL) levkom za dodavanje na sobnoj temperaturi. Onda se dodaje voda (66 mL) praćeno vodenim natrijum hidroksidom (26,2 mL, 2,5 N, 65,5 mmol) putem levka za dodavanje. Reakciona smeša se zagreje pri refluksu pod atmosferom azota za otprilike oko 3 sata. Reakcija se ohladi, razblaži sa etilacetatom, opere jedanput sa vodom, i konačno jedanput sa slanim rastvorom. Organski sloje se odvaja i osuši preko kalijumkarbonat/natrijumsulfata. Organski sloj se filtrira i koncentriše in vacuo. Proizvod (24,13 g) se prečisti putem hromatografije bleska kolone (silika gel, 1:4 etilacetat/heksani). Frakcije se kombinuju i koncentrišu in vacuo da daju jedinjenje 133 kao bledo žuto jedinjenje u čvrstom obliku (17,66 g, 70,5%), tt 146°C; HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40.10:50 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, R, 58,8 min, 99,9% čistoća); MS (ESI):m/ z382 (M+H, 100), 241 (2,83), 226 (8,49), 139 (43,5), 116 (6).
PRIMER 50
Sinteza N-( 3- hloro- 4- metoksi- fenil)- N'- cikloheptil- N''- metil- N''-( 1- met^
piperidin- 4- il)-[ 1, 3, 5] triazin- 2, 4, 6- triamina ( 137)
Jedinjenju 133 (10,014 g, 26,2 mmol) u 1,4-dioksanu (80 mL) sporo se dodaje metii-(1-metil-piperidin-4-il)-amin (3,8 mL, 26,2 mmol) rastvoren u 1,4-dioksanu (15 mL) putem levka za dodavanje. Onda se dodaje vodeni natrijum hidroksid (10,5 mL, 2,5 N, 26,2 mmol) putem levka za dodavanje praćeno vodom (26 mL). Reakciona smeša se zagreje pri refluksu za oko 2,5 sata pod atmosferom azota. Reakcija se ohladi i razblaži sa metilen hloridom. Reakciona smeša se filtrira upotrebom vakuuma i uklanja se belo čvrsto jedinjenje 147. Filtrat se onda opere jedanput sa slanim rastvorom. Vodeni sloj se povratno ekstrakuje jedanput sa metilen hloridom. Organski slojevi se kombinuju i osuše preko kalijumkarbonata. Organski rastovor se filtrira i koncentriše in vacuo da se dobije sirovi proizvod (5,89 g). Sirovi proizvod reakcije se prečisti putem hromatografije bleska kolone (silika gel) elutujući sa 96:3:1 metilen hlorid:metanol:15 M amonijum hidroksida. Frakcije se kombinuju, osuše preko natrijumsulfat/kalijumkarbonata, filtriraju, i koncentrišu in vacuo da se dobije jedinjenje137u belom čvrstom obliku (3,84 g, 30,9%), tt 104-105 °C; HPLC: YMC Pack Pro C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, R, 13,8 min, 97 % čistoća); MS (ESI):m/ z 474(M+H, 41), 408 (2,3), 364 (2,8), 258 (13), 239 (14), 239 (47,5), 238 (100), 127 (5,3).
PRIMER 51
Sinteza N2-( 3- hloro- 4- metoksi4enil)- N4- cikloheptil- N6- metil- N6- piperidin-4- H- 1. 3, 5- triazin- 2, 4, 6- triamina ( 146)
Jedinjenje146se izoluje kao nuz-proizvod putem hromatografije kolone (silika gel, 96:3:1 metilen hlorid:metanol:konc. amonijum hidroksid, tt 114-116 °C; TLC (silika gel, 90:9:1 CH2CI2:CH3OH:konc. NH4OH), Rf146 0,15;HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt10,7 min, 91,18% čistoća); MS (ESI):m/ z 460(M+H, 25,4), 364 (17,9), 292 (2), 273 (17,1), 272 (37,9), 252 (44), 251 (100), 231 (2,2), 157 (10,54), 118 (2,8).
PRIMER 52
Sinteza 4-( 3- hloro- 4- metoksi- fenilamino)- 6- cikloheptilamino- 1, 3, 5-triazin- 2- ola ( 147)
Jedinjenje147se izoluje kao nuz-proizvod putem vakuumskog filtriranja pre izolovanja jedinjenja 137, beli čvrsti oblik, tt>310 °C; MS (ESI); m7z 727 ([2(363)+H], 1,2, 364 (M+H, 100).
PRIMER 53
Sinteza N-( 1- Aza- biciklo[ 2. 22] okt- 3- il)- N'-( 3- hloro^
etil- pirolidin- 2- ilmetil)-[ 1, 3, 5] triazin' 2, 4, 6- triamina ( 148)
Jedinjenju101(3,056 g, 10,0 mmol) rastvorenom u anhidrovanom acetonitrilu (30 mL) na oko 0 °C dodaje se rastvor 2-(aminometil)-1-etilpirolidina (1,5 mL, 10,0 mmol) u anhidrovanom acetonitrilu (5 mL) praćeno dodavanjem DIEA (1,9 mL, 11,0 mmol). Reakcionoj smeši se dopusti da se zagreje do sobne temperature i meša sa na sobnoj temperaturi preko noći pod azotom. Onda se dodaje DIEA (1,9 mL) što je praćeno dodavanjem 3-aminohinuklidin dihidrohlorida (1,962 g, 10 mmol) u 1,4-dioksanu (5 mL): Reakcionoj smeša se dopusti da se meša pri refluksu preko noći pod azotom. Reakciona smeša se ekstrakuje 2 puta sa dihlorometanom i jedanput sa etilacetatom. Kombinovani organski slojevi se operu jedanputa sa slanim rastvorom i osuše preko anhidrovanog kalijumkarbonata. Organski sloj je sa 20% HCI (vod). Vodeni sloj se neutrališe sa 2,5 N NaOH (vod) i onda ekstrakuje 3 puta sa etilacetatom. Kombinovani organski slojevi se operu jedanputa sa slanim rastvorom, osuše preko kalijumkarbonata, koncentrišu na rotacionom isparivaču i dopusti im se da se osuše preko noći pod vakuumom. Hromatografija kolone (silika gel, 85:14:1 dihlorometan:metanol:konc. amonijum hidroksid) daje prinos bledo belog čvrstog jedinjenja148(100 mg, 2%), tt 83 °C; HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, R,8,1 min, 71,2% čistoća); MS (ESI):m/ z 488(M+H, 18,7), 280 (100), 245 ([M+2H]++, 37,4), 236 (23,5).
PRIMER 54
Sinteza ^-( S- hloro^- metoksi- fenilj- t^- cikloheptil-^^ l- etil- pirolidin- ?-
ilmetil)- 1, 3, 5- triazin- 2, 4, 6- triamina ( 149)
Smeši hlorida cijurinske kiseline (1,8 g, 9,7 mmol) u CH3CN na oko-20 °C dodaje se 2-hloro-N,N-dietil fenilen-1,4-diamin hidrohlorid (2,35 g, 10 mmol) u CH3CN praćeno dodavanjem N,N-diizopropiletilamina (DIEA)
(1,75 mL, 10 mmol) i meša se jedan sat. Reakcionoj smeši se onda dopusti da dostigne sobnu temperaturu za oko 1 sat. Onda se dodaju cikloheptilamin (1,25 mL, 9,8 mmol) i DIEA (1,75 mL, 10 mmol) i reakciona smeša se refluksuje preko noći. Reakciona smeša se razblaži sa etilacetatom i opere slanim rastvorom. Organski sloj se odvaja i osuše preko natrijum sulfata, filtrira, i koncentriše pod redukovanim pritiskom. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom kolone (silika gel) elutujući sa 96:3:1 metilen hlorid:metanol:konc. amonijum hidroksid da se dobije prinos jedinjenja 149 (0,800 g, 15%) u belom čvrstom obliku, tt 84-85 °C; HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, R, 9,5 min, 96% čistoća); MS (ESI):m/ z515 (M+H, 9,4), 259 (16,8), 258 (55,1), 257 (100).
PRIMER 55
Sinteza N2- cikloheptil- N4-( 2- dimetilamino- etil)- N6-( 3- fluoro- 4- metoksi-
fenil)- 1, 3, 5- triazin- 2, 4, 6- triamina ( 150)
Hloridu cijurinske kiseline (1,84 g, 10 mmol) u CH3CN (20 mL) koji se ohladi do oko-10°C dodaje se 3-fluoro-p-anisidin (1,41 g, 10 mmol) praćeno sa DIEA (1,8 mL, 10 mmol). Reakcija se onda meša oko 45 minuta na sob noj temperaturi pod N2atmosferom. Dodaje se cikloheptilamin (1,26 mL, 10 mmol) praćeno sa DIEA (1,8 mL, 10 mmol) i reakcija se meša na sobonoj temperaturi preko noći. Dodaje se N,N-dimetiletilenediamin (1,1 mL, 10 mmol) praćeno sa DIEA (1,8 mL, 10 mmol) i smeša se zagreje preko noći pri refluksu pod N2. Reakcija se razblaži sa etilacetatom, opere sa slanim rastvorom, i osuši preko anhidrovanog K2C03. Materijal (1,178 g) se prečisti putem silika gel hromatografije kolone da se dobije čvrsto jedinjenje150(1,178 g, 28%), tt 73-76°C; HPLC: Inertsil ODS-3VC18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt10,8 min, 95,1% čistoća; MS (ESI):m/ z 418(M+H, 100), 373 (11,9), 322 (7,8), 277 (6,8), 162 (3,6).
PRIMER 56
Sinteza ({ 4- cikloheptilamino- 6-[ 1- etil- pirolidin- 2- ilmetil)- amino]- 1, 3, 5-triazin- 2- il}- fenil- amino)- acetonitril ( 151)
Hloridu cijurinske kiseline (1,84 g, 10 mmol) u CH3CN (20 mL) na oko - 10 do -20 °C se doda DIEA (1,75 mL, 10 mmol) i N-fenil glicinonitril (1,3 g, 10 mmol), i meša oko 1 sat. Reakcionoj smeši se onda dopušta da postigne sobnu temperaturu za jedan sat. Ovoj reakcionoj smeši dodaje sa DIEA (1,75 mL, 10 mmol) i cikloheptilamin (1,25 mLO, 10 mmol) i reakciona smeša se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Onda se dodaje DIEA (1,75 mL, 10 mmol) i 2-aminometil-N-etilpirolidin (1,45 mL, 10 mmol) i reakciona smeša se refluksuje preko noći. Reakciona smeša se radi, izoluje, i onda prečisti putem hromatografije kolone (silika gel) elutujući sa 96:3:1 metilan hlorid:metanol:konc-amonijum hidroksid da se dobije prinos jedinjenja151(3 g, 66%), tt 52-54 °C; MS (ESI):m/ z449 (M+H, 100), 225 [(M+2H)<2+>, 22,3].
PRIMER 57
Sinteza N- Azepan- 1 - il- 6- hloro- N'-( 3- hloro- 4- metoksi- fenil)-[ 1, 3, 5Jtriazin-2, 4- diamina ( 152)
Jedinjenju101(6,03 g, 20,0 mmol) rastvorenom u acetonu (75 mL) dodaje se rastvor 1-aminohomopiperidina (2,3 mL, 20,0 mmol) u acetonu (10 mL) praćeno dodavanjem NaOH (8,0 mL, 2,5 N NaOH rastvor, 20,0 mmol) i 20 mL vode. Reakcionoj smeši se dopusti da se meša pri refluksu preko noći pod azotom. Reakciona smeša se ekstrakuje 3 puta sa dihlorometanom; kombinovani organski slojevi se operu sa slanim rastvorom i osuše preko kalijumkarbonata. Uzorak se koncentriše na rotacionom isparivaču i rezultirajuće ulje se osuši preko noći pod vakuumom. Hromatografija kolone (96:3:1 dihlorometan:metanol:konc. amonijum hidroksid) daje prinos svetio ljubičastog čvrstog jedinjenja152(1,2 g, 16%), tt 139 °C; TLC (silika gel, 96:3:1, CH2CI2, CH3OH, konc. NH4OH), Rf 0,31; HPLC: Inertsil ODS-3VC18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt52,5 min, 94,9% čistoća); MS (ESI):m/ z383 (M+H, 100).
PRIMER 58
Sinteza N"- ( 3- hloro- 4- metoksi- fenil}- N, N'- bis- perhidro- azepin- 1 - il- 1, 3, 5-triazin- 2, 4, 6- triamina ( 153)
Jedinjenje153se izoluje kao nuz-proizvod (2,3 g) putem hromatografije kolone (silika gel, 96:3:1, CH2CI2, CH3OH, konc. NH4OH), tt 199°C; TLC (silika gel, 96:3:1, CH2CI2, CH3OH, konc. NH4OH), Rf 0,11; HPLC: Inertsil ODS 3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt15 min, 86% čistoća); MS (ESI):m/ z 461(M+H, 100), 366 (19,7), 365 (19,6), 232 (11), 231 (27,3).
PRIMER 59
Sinteza N- Azepan- 1 - il- N'-( 3- hloro- 4- metoksi- fenil)- N"-( 1 - metil- piperidin-4- il)-[ 1, 3, 5] triazin- 2, 4, 6- triamina ( 154)
Jedinjenju152(0,2007 g, 0,5 mmol) rastvorenom u THF (10 mL) dodaje se rastvor N-metil-4(metilamino)piperidina (0,07 mL, 0,5 mmol) u THF (1 mL) praćeno dodavanjem DIEA (1,0 mL, 0,55 mmol) u acetonitrilu (1 mL). Reakcionoj smeši se dopušta da se meša pri refluksu preko noći pod azotom. Reakciona smeša se ekstrakuje 3 puta sa dihlorometaonom; kombinovani organski slojevi se operu sa slanim rastvorom i osuše preko kalijumkarbonata. Uzorak se koncentriše na rotacionom isparivaču i rezultirajuće ulje se osuši preko noći pod vakuumom. Hromatografija kolone (90:9:1 dihlorometan:metanol:konc. amonijum hidroksid) daje prinos svetio žutog jedinjenja154u čvrstom obliku (65 mg, 27%), tt 100 °C; TLC (silika gel, 90:9:1, CH2CI2, CH3OH, konc. NH4OH), Rf0,36; MS (ESI):m/ z475 (M+H, 23,2), 378 (11,6), 258 (68,9), 239 (52,2), 238 (100).
PRIMER 60
Sinteza N4-( 3- hloro- 4- metoksi- fenil)- N6- metil- N2' perhidro- azepin- 1- il- i^-
piperidin- 4- il- 1, 3, 5- triazin- 2, 4, 6- triamina ( 155)
Jedinjenje155se dobija kao nuz-proizvod (50 mg) reakcije putem hromatografije kolone (90:9:1 dihlorometan:metanol:konc. amonijum hidroksid), tt 81 °C; TLC (silika gel, 90:9:1, CH2CI2, CH3OH, konc. NH4OH), Rf0,25; MS (ESI):m/ z 461(M+H, 20,3), 430 (2,8), 273 (11,8), 272 (25,5), 251 (100), 236 (4,6), 215 (4,7).
PRIMER 61
Sinteza N, N'- di- n- propil- N"-( 3- fluoro- 4- metoksi- fenil)- 1, 3, 5- triazin- 2, 4, 6-
triamina ( 156)
Hloridu cijurinske kiseline (0,368 g, 2 mmol) u CH3CN na oko -20°C dodaje se 3-fluoro-p-anisidin (0,28 g, 2 mmol) u CH3CN praćeno sa dodavanjem DIEA (0,39 mL, 2,2 mmol) i meša se oko 1 sat. Reakciona smeša se onda meša na sobnoj temperaturi oko 1 sat. Onda se dodaju n-propilamin (1,64 mL, 19,9 mmol) i DIEA (0,39 mL, 2,2 mmol) i reakciona smeša se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša se radi kako je to uobičajeno, razblažuje sa etilacetatom i opere sa slanim rastvorom. Organski sloj se odvaja i osuši preko natrijum sulfata, filtrira, koncentriše pod redukovanim pritiskom, i jedinjenje 156 se prečisti silika gel hromatografijom kolone, tt 53-55°C; HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt12,6 min, 93,7% čistoća); MS (ESI):m/ z 335 (M+H,100), 331 (1,5), 126 (1).
PRIMER 62
Sinteza N, N'- diciklopropil- N"-( 3- fluoro- 4- metoksi- fenil)- 1, 3, 5- triazin-2, 4, 6- triamina ( 157)
Hloridu cijurinske kiseline (0,368 g, 2 mmol) u CH3CN na oko -20°C dodaje se 3-fluoro-p-anisidin (0,28 g, 2 mmol) u CH3CN praćeno sa dodavanjem DIEA (0,39 mL, 2,2 mmol) i meša se oko 1 sat. Reakciona smeša se onda meša na sobnoj temperaturi oko 1 sat. Onda se dodaju ciklopropilamin (1,39 mL, 20 mmol) i DIEA (0,39 mL, 2,2 mmol) i reakciona smeša se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša se radi kako je to uobičajeno, razblažuje sa etilacetatom i opere sa slanim rastvorom. Organski sloj se odvaja i osuši preko natrijum sulfata, filtrira, koncentriše pod redukovanim pritiskom, i jedinjenje 157 se prečisti silika gel hromatografijom kolone (200 mg, 30%),tt 91-92°C; HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt8,6 min, 99,1% čistoća); MS (ESI):m/ z331 (M+H, 100), 305 (0,8), 151 (3).
PRIMER 63
Sinteza N^ Cikloheptil- fr- fi- fluoro-^ metoksi- feniO- N6^ 1 - metil- piperidin-4- il)- 1, 3, 5- triazin- 2, 4, 6- triamina ( 158)
Hloridu cijurinske kiseline (0,180 g, 1 mmol) u 1,4-dioksanu (1 mL) na oko -10 do -20 °C dodaje se N,N-diizopropiletilamin (DIEA) (0,19 mL, 1 mmol) u CH3CN (1 mL) i 3-fluoro-p-anisidin (0,14 g, 1 mmol) u CH3CN (1 mL) i meša se oko 1 sat. Reakciona smeša se onda meša na sobnoj temperaturi oko 1 sat. Onda se dodaje rastovor cikloheptilamina (0,13 mL, 1 mmol) i DIEA (0,19 mL, 1 mmol) u CH3CN (0,5 mL) i reakciona smeša se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Onda se dodaje N-metil-4(metilamino)piperidin (0,15 mL, 1 mmol) i DIEA (0,19 mL, 1 mmol) u CH3CN (0,5 mL) i reakciona smeša se refluksuje preko noći. Reakciona smeša se radi upotrebom zasićenog natrijum bikarbonata, i slanog rastvora. Organski sloje se odvaja i osuši preko natrijum sulfata, filtrira, i koncentriše pod redukovanim pritiskom. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom kolone (silika gel, 90:9:1 dihlorometan:metanol:konc. amonijum hidroksid) da se dobije jedinjenje158(0,130 g, 28%); TLC (silika gel, 90:9:1, CH2CI2, CH3OH, konc. NH4OH), Rf0,26);<1>H NMR (600 MHz, CDCI3, 55 °C) 6 7,74 (br s, 1H), 6,94 (br s, 1H), 6,81-6,84 (m, 2H), 4,83 (br rezonanca, 1H), 4,55 (s, 1H), 3,98 (s, 1H), 3,82 (s, 3H), 2,97 (s, 3H), 2,94 (br d, J=11,9 Hz, 2H), 2,29 (s, 3H), 2,06-2,10 (m, 2H), 1,93-1,97 (m, 2H), 1,84-1,90 (m, 2H), 1,44-1,66 (m, 12H).
PRIMER 64
Sinteza rf- cikloheptil- N4- ( 3- fiuoro- 4- metoksi- fenii)- N6- metil- N6-piperidin- 4- il- 1, 3, 5- triazin- 2, 4, 6- triamina ( 159)
Jedinjenje159se izoluje kao nuz-proizvod (55 mg) putem hromatografije kolone (silika gel 90:9:1 dihlorometan:metanol:konc. amonijum hidroksid); TLC (silika gel, 90:9:1, CH2CI2, CH3OH, konc. NH4OH), Rf 0,1); HPLC: Inertsil ODS-3VC18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt8,3 min, 93,5% čistoća); MS(ESI): m/ z 443 (M+H,100).
PRIMER 65
Sinteza N^ cikioheptil- N4 -( 3- fluoro- 4- metoksi- fenil)- N6- metil- N6-( 1- metilpiperidin- 4- il)- 1, 3, 5- thazin- 2, 4, 6- triamin, so hlorvodonika ( 160)
Jedinjenju 171 u suvom metanolu (1 mL, pripremljeno prema paralelnom postupku sinteze C upotrebom odgovarajućih monomera, kako je to ovde otkriveno) dodaje se HCI (0,3 mL, 0,3 mmol, 1 M u dietiletru) brizgalicom pod N2atmosferom. Smeša se meša 10 minuta na sobnoj temperaturi, koncentriše i suši in vacuo preko noći da se dobije belo jedinjenje 160 u čvrstom obliku (0,131 g) koje je rastvorljivo u vodi, tt 189-190 °C (na 160 °C uzorak prelazi u mrku boju); HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt7,3 min, 89,1% čistoća.
PRIMER 66
Sinteza [ N-( 3- Hloro- 4- metoksi- fenil)- N'- cikloheptil- N"- m^
piperidin- 4- il)-[ 1, 3, 5]- triazin- 2, 4, 6- triamina ( 161)
Jedinjenju 137 (0,473 g, 1,0 mmol) rastvorenom u metanolu (5 ml_9 dodaje se 1,0 M hlorovodonične kiseline u dietiletru (1,0 mL, 1 mmol). Reakcionoj smeši se dopušta da se meša oko 1 sat na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša se onda koncentriše na rotacionom isparivaču. Rezultirajući čvrsti oblik se rastvori u vodi, filtrira i koncentriše na rotacionom isparivaču. Uzorak se osuši na temperaturi ispod °C pod vakuumom i sakuplja se čvrsto jedinjenje 161 (359,1 mg, 70%), tt 173-176°C.
PRIMER 67
Sinteza ^-( S- hloro^- dietilamino- feniO- rS- cikloheptil- N6^ 1 - etil- pirolidin-2- ilmetil)- 1, 3, 5- triazin- 2, 4, 6- triamin, so hlorvodonika ( 163)
Jedinjenju162(1,0 g, 2 mmol, pripremljeno prema paralelnom postupku sinteze A sa odgovarajućim monomerima, kako je to ovde otkriveno) u metanolu (10 mL) dodaje se HCI (2,5 mL, 2,5 mmol, 1M) u dietiletru i meša se. Reaksona smeša isparava. Onda se rastvara u vodi, filtrira, isparava in vacuo, i osuši preko noći pod vakuumom da se dobije čvrsto jedinjenje163(1,1 g, 93%).
PRIMER 68
Sinteza N^ cikloheptil- N4 -( 1- etii- pirolidin- 2- ilmetil)- N6- metil- N6-( 3- fluoro-4- metoksifenil)- 1, 3, 5- triazin- 2, 4, 6- triamin, so hlorvodonika ( 164)
Jedinjenju130(2,285 g, 5 mmol) u suvom metanolu (10 ml_9 dodaje se HCI (5 mL, 5 mmol, 1 M u dietiletru) i meša se na sobnoj temperaturi oko 1 sat. Reakcija se isparava in vacuo, rastvori u vodi, filtrira, isparava i onda osuši pod vakuumom preko noći da se dobije čvrsto jedinjenje164(2,396 g, 97%), tt 131-133°C, HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, R, 7,9 min, 98,2% čistoća.
PRIMER 69
Sinteza N^ cikloheksilmetill- rf- tfl- etil^- pirom^
metoksifenil)- 1, 3, 5- triazin- 2, 4, 6- triamin, so hlorvodonika ( 165)
Jedinjenju 136 (0,457 g, 1 mmol) u suvom dietiletru dodaje se HCI (1 mL, 1 mmol, 1 M u dietiletru). Talog se formira trenutno. Smeša se meša na sobnoj temperaturi oko 1 sat, i onda koncentriše in vacuo. Rezultirajući materijal se rastvori u vodi, filtrira, isparava, i osuši preko noći in vacuo da se dobije čvrsto jedinjenje 165 (0,400 g, 81%), tt 85°C; HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt8,2 min, 89,6% čistoća.
PRIMER 70
Sinteza ({ 4- cikloheptilamino- 6-[ 1- etil- pirolidin- 2- ilmetil)- amino3, 5-triazin- 2' il}- fenil- amino)- acetonitril so hlorvodonika ( 166)
Jedinjenju 151 (0,448 g, 1 mmol) u suvom dietiletru (2 mL) dodaje se HCI (1 mL, 1 mmol, 1 M u dietiletru). Smeša se meša na sobnoj temperaturi oko 1 sat, i onda koncentriše in vacuo. Rezultrirajući materijal se rastvori u vodi (5-10 mL), filtrira, isparava, i suši preko noći pod vakuumom da se dobije čvrsto jedinjenje 166 (0,418 g, 86%), tt 125-127°C; HPLC: Inertsil ODS-3VC18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt6,9 min, 73,4% čistoća.
PRIMER 71
Sinteza N2- cikloheptil- r^-( 3- fluoro- 4- metoksi- fenil)- N6- metil- N^
piperidin- 4- il))- 1, 3, 5- triazin- 2, 4, 6- triamin, maleat so ( 167)
Jedinjenja158(100,3 mg, 0,219 mmol) i maleinska kiselina (25,4 mg, 0,219 mmol) se rastvaraju u CH3OH (2 mL) i mešaju na sobnoj temperaturi pod N2atmosferom oko 75 min. Reakciona smeša se filtrira kroz pamučni čep i koncentriše in vacuo da se dobije čvrsto jedinjenje 167, 0,1239 g, tt 99-100°C. Na kvalitativnom testu, ovaj materijal je rastvorljiv u vodi. HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt7,7 min, 87,9% čistoća.
PRIMER 72
Sinteza N2- cikloheptil- N4-( 3- fluoro- 4- metoksi- fen^^^
piperidin- 4- il))- 1! 3, 5- triazin- 2, 4, 6- thamin, citrat so ( 168)
Jedinjenja158(100 mg, 0,219 mmol) i limunova kiselina (42,1 mg, 0,219 mmol) se rastvaraju u CH3OH (2 mL) i mešaju na sobnoj temperaturi pod N2atmosferom oko 75 min. Reakciona smeša se filtrira kroz pamučni čep i koncentriše in vacuo da se dobije čvrsto jedinjenje168(0,1387 g), tt 125°C. Na kvalitativnom testu, ovaj materijal je nerastvorljiv u vodi. HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, Rt7,7 min, 90,1% čistoća.
PRIMER 73
Sinteza /V2-c/Wo/?epf/7-/V4-f3-//uora-4-mero/(s/-fen/7J-/V6-m
piperidin- 4- il))- 1, 3, 5- triazin- 2, 4, 6- triamin, sukcinat so ( 169)
Jedinjenja158(101,5 mg, 0,219 mmol) i ćilibarna kiselina (24,8 mg, 0,219 mmol) se rastvaraju u CH3OH (2 mL) i mešaju na sobnoj temperaturi pod N2atmosferom oko 75 min. Reakciona smeša se filtrira kroz pamučni čep i koncentriše in vacuo da se dobije čvrsto jedinjenje169(0,1248 g), tt 81°C. Na kvalitativnom testu, ovaj materijal je rastvorljiv u vodi. HPLC: Inertsil ODS-3V C18, 40:30:30 [KH2P04(0,01 M, pH 3,2): CH3OH: CH3CN], 264 nm, R, 7,6 min, 89,8% čistoća.
PRIMER 74
Sinteza N-( 3- Bromo- 4- metoksi- fenil)- N'- cikloheptil- N"- metil- N"-( 1- metilpiperidin- 4- il)-[ 1, 3, 5]- triazin- 2, 4, 6- triamin, so hlorvodonika ( 170)
Jedinjenju123(1,0 mmol) rastvorenom u metanolu (5 mL) dodaje se 1,0 M hlorovodonične kiseline u dietiletru (1,0 mL, 1 mmol). Reakcionoj smeši se dopušta da se meša oko 1 sat na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša se onda koncentriše na rotacionom isparivaču. Rezultrirajući čvrsti oblik se rastvara u vodi, filtrira i koncentriše na rotacionom isparivaču. Uzorak se osuši na temperaturi ispod 0°C pod vakuumom i sakuplja se čvrsto jedinjenje170(70%).
PRIMER 75
Alternativni sintetički put ka tris( amino) 1, 3, 5- triazin jedinjenjima
Sledeća reakciona šema predstavlja predložene i alternativne sintetičke puteve ka 1,3,5-triazinima.
Ova šema predstvalja modifikaciju opisanog sintetičkog puta u patentu da se pripreme tris-amino supstituisani 1,3,5-triazini. Alternativne napuštajuće grupe, X, mogu biti upotrebljene upoređeno sa hloridom cijurinske kiseline (X=CI) u SNAr reakciji sa sekvencijalnim dodavanjem nukleofilnog amina u prisustvu kiselog (proton) aditiva da se dobije tris-supstituisan 1,3,5-triazin sa željenom kombinacijom amino grupa.
PRIMER 76
Alternativni sintetički put ka tris( amino) 1, 3, 5- triazin jedinjenjima
Sledeća reakciona šema predstavlja predložene i alternativne sintetičke puteve ka 1,3,5-triazinima.
Ova šema predstavlja modifikaciju sintetičkog puta opisanog u tekstu patenta da se pripreme tris-amino supstituisani 1,3,5-triazini. Baze, uključujući višak amino reagensa R2NH, mogu se upotrebiti kao kiseli (proton) aditivi alternativno Hunig-ovoj bazi (iPr2Net) koja se rutinski upotrebljava u našem postupku. Ove baze mogu uključivati organske tercijarne amino baze ili jonske, neorganske baze. Može se upotrebiti jaka baza (NaH, KH, ili Rli) da se prvo deprotonizuje amino monomer prek dodavanje cijurinskom-X supstratu. Dodatno, moće se upotrebiti sa čvrstim nosačem baza (n.pr., smola-NR2, modifikovana Hunig-ova baza) kao proton aditiv. Ovo potencijalno omogućava lakši postupak izolovanja i čistije proizvode reakcije. Logično, upotrebljava se odgovarajući rastvarač ili kombinacija rastvarača koji su kompatibilni sa bazom koja je izabrana za ovaj postupak.
PRIMER 77
Alternativni sintetički put ka tris( amino) 1, 3, 5- triazin jedinjenjima
Sledeća reakciona šema predstavlja predložene i alternativne sintetičke puteve ka 1,3,5-triazinima.
Ova šema predstavlja modifikaciju sintetičkog puta opisanog u patentu da se pripreme tris-amino supstituisani 1,3,5-triazini. Upotrebom melamina kao početnog materijala, naznačeni postupak uvodi tri sekvencijalna reduktivna postupka aminacije. Kontrolom dodavanja, temperature, i pH, izbora aldehida ili ketona, mogu se pripremiti tris-amino supstituisani triazini sa željenom kombinacijom amino grupa.
PRIMER 78
Alternativni sintetički put ka tris( amino) 1, 3, 5- triazin jedinjenjima
Sledeća reakciona šema predstavlja predložene i alternativne sintetičke puteve ka 1,3,5-triazinima.
Ova šema predstavlja čvrstu fazu sintetičkog prilaska pripremanju simetrično ili asimetrično supstituisanih tris-amino supstituisanih 1,3,5-triazina. Smola treba da poseduje spremne capljive linker grupe (L) i napuštajuće grupe (G) za kačenje amino grupe. Šema podvlači sintezu inicijalnim kačenjem proste amino grupa, NH2, reagovanjem smole sa amonijakom. Upotrebom standardne, SNAr hernije za supstituciju perhalogenovanih 1,3,5-triazina, triazin se može zakačiti za aminovanu smolu. Sekvencijalne supstitucije halogena na triazin jezgru sa funkcionalizovanim aminima u prisustvu kiselog aditiva proizvodi željene di-amino supstituisane 1,3,5-triazine. Cepanje triazina od smole tetra daje tris-amino supstituisani triazin proizvod. Slobodan NH2ostatak triazina može biti dalje alkilovan ili funkcionalizovan upotrebom standardne hernije kao što je redukciona aminacija ili N-alkilovanje da se dobije kompletno funkcionalizvani tris-amino supstituisani 1,2,5-triazin.
PRIMER 79
Alternativni sintetički put ka tris( amino) 1, 3, 5- triazin jedinjenjima
Sledeća reakcione šeme (šeme A i B) predstavljaju predložene i alternativne sintetičke puteve ka 1,3,5-triazinima.
Ove šeme predstavljaju varijacije upotrebe Suzuki sparivanja da se sintetišu tris-amino supstituisani 1,3,5-triazini. Kako je to ilustrovano u Šemi A, mogu se sekvencijalno reagovati amino grupe melamina sa alkil ili aril derivatom borne kiseline u prisustvu odgovarajućeg paladijum katalizatora, aditiva i rastvarača da se dobiju simetrični ili asimetrični tris-amino supstituisani 1,3,5-triazini slično prethodno opisanim primerima. U Šemi B, tris-borna kiselina 1,3,5-triazin može biti pripremljen iz hlorida cijurinske kiseline ili bromida. Ovaj derivat moće onda biti sparen sa aril ili alkil aminom, kako je to ilustrovano u prethodnim opisima amin monomera, u prisustvu odgovarajućeg metalnog katalizatora (n.pr., Cu ili Pd katalizator), aditiva i rastvarača da se dobiju simetrični ili asimetrični tris-amino supstituisani 1,3,5-triazini.
PRIMER 80
Proteoglikan indukcija
Glatke mišićne ćelije postižu mirovanje tokom izgladnjavanja serumom rezultirajući u blokadi DNK sinteze. Da se demonstrira uloga perlekana (primer proteoglikana) u SMC mirovanju, ćelije se izgladnjuju uklanjanjem seruma iz medijuma. Ćelije koje se upotrebljavaju u ovom Primeru i drugim primerima koji su ovde dati su humanoe aortne SMC, koje se uzgajaju u baznom medijumu dodatno snabdevenom faktorima rasta, bFGF i epidermalnog faktrora rasta (EGF)(Clonetics, San Diego,
CA).
SMC sekrecija ukupnih PGs (proteoglikana) kao i perlekan se utvrđuju u prisustvu ili odsustvu jednog ili više jedinjenja sadašnjeg pronalaska. PGs su radioaktivno označeni sa (<35>S)sulfatom inkubacijom ćelija sa (<35>S)sulfatom 2 do 6 sati. Medijum PGs se sakuplja i prečisti putem DEAE-celuloza hromatografije. Ćelija povezane sa PGs se ocenjuju ekstrakovanjem ćelija sa 50 mM Tris puferom pH 7,4 koji sadrži 4 M uree, 1% Triton X-100, 0,1 mM EDTA i 1 mM PMSF. Vodeni rastvori (<35>S)sulfata i (<3>H)leucina se dobijene od Amersham-a. Kontrolne ćelije nemaju dodata jedinjenja dok tretirane ćelije imaju dodato jedno ili više jedinjenja sadašnjeg pronalaska.
Da se utvrde promene u PG nivoima, obavlja se DEAE-celuloza hromatografija. DEAE-celuloza kolona se uravnotežuje sa 50 mM Tris puferom pH 7,4 koji sadrži 4 M uree, 0,1 M NaCI, 0,1 mM EDTA, 1 mM PMSF i 1% 3[3-holamidopropil)dimetilamonio]-1-propansulfonat (CHAPS). Kolona se opere sa istim puferom i puferom koji sadrži 0,25 M NaCI i PG se elutuje sa istim puferom koji sadrži 0,5 M NaCI. Frakcije koje sadrže radioaktivnost (<35>S04) se stavljaju u bazen i podvrgavaju dijalizi spram MEM preko noći i broje.
Da se utvrdi relativna proporcija HSPG i hondroitinsulfat/dermatasulfat proteoglikana (CS/DS PG), alikvot frakcije u bazenu se inkubira u 50 mM natrijumacetat puferu pH 5,2 sa jednom jedinica/mL svake od heparanaza i hepartinaze ili sa 0,5 jedinica hondroitina ABC liaze 16 sati na 37 °C. Hondroitan ABC se odnosi na različite izomerne tipove hondroitina, n.pr. hondoritin A, hondroitin B i hondroitin C. Reakciona smeša se taloži bilo sa 0,5 zapreminama 1%cetil piridinijum hlorida ili sa 3 zapremine etanola da se natalože nesvareni glikozaminoglikani. Utvrđuje se radioaktivnost površinskog sloja i pelete.
Da se utvrde promene perlekan proteina u odgovoru na prisustvo jedinjenja, ćelije se uzgajaju u oslobođenom od seruma ili sa serumom medijumu u prisustvu (<3>H)leucina 24 sata (stabilno stanje). Ćelije se postavljaju na ploču pri niskoj gustini (8 x 10<4>/bazenčić na ploču sa 48 bazenčića, 30-40% slivanje) i kultivišu 24 sata. Bazenčići se onda ponovo pune sa svežim medijumom koji ne sadrži serum ili 10% fetusnog volovskog seruma (FBS). Posle sledećih 24 sata inkubacije, ćelije se označe sa (<3>H)timidinom 6 sati i utvrđuje se radioaktivnost inkorporisana u DNK putem taloženja trihlorosirćetne kiseline (TCA) ćelijskog lizata. (<3>H)timidin se iz NEN. Prečišćeni PG (0,5 M eluat) se imunotaloži inkubacijom sa anti-perlekan antitelom (100-puta razblaženo9 praćeno taloženjem sa protein A-sefarozom. Imunotaloži se analiziraju sa 5% SDS-PAGE. Perlekan (Mr>550 kDa) se identifikuje stum autoradiografije. Kontrolne ćelije nemaju dodata jedinjenja dok tretirane ćelije imaju dodato jedno ili više jedinjenja sadašnjeg pronalaska.
PRIMER 81
Inhibicija proliferacije glatke mišićne ćelije
Dobija se prečišćeni perlekan iz SMC medijuma sa DEAE-celuloza hromatografijom upotrebom postupaka u Primeru 1, i testira se na svoja antiproliferativna dejstva na SMC.
Dodavanje perlekana u medijum koji sadrži serum inhibira SMC rast za 70%. Sub-pritoka SMC (40-50% slivanje) se inkubira u od seruma oslobođeni medijum ili medijum koji 10% sadrži serum sa ili bez prečišćenog perlekana 24 sata. DNK sinteza se onda utvrđuje putem inkubiranih ćelija sledećih 5 sati u medijumu koji sadrži (<3>H)timidin. Broj taložljivih timidina TCA (DNK) se utvrđuje i ekspresuje kao procenat DNK sinteze u ćelijama uzgajanim u 10%FBS.
Ogled se može iskoristiti da pokaže dejstvo jedinjenja na perlekan prvo direktno inkubacijom jedinjenja u perlekanu, a onda obavljanjem ogleda. Alternativno, ćelije mogu biti prethodno tretirane sa bar jednim jedinjenjem sadašnjeg pronalaska da se pokaže indirektno dejstvo. Kontrolne ćelije nemaju dodata jedinjenja dok tretirane ćelije imaju dodato jedno ili više jedinjenja sadašnjeg pronalaska.
PRIMER 82
Triazin jedinjenja u ogledu proliferacije glatke mišićne ćelije
Upotrebljavaju se humane aortne glatke mišićne ćelije (Clonetics). Ćelije se uzgajaju u bazalnom medijumu koji sadrži 5% fetusnog volovskog seruma snabdevenog sa faktorima rasta, baznim faktorom rasta, epidermalnim faktorom rasta i insulinom. Da bi se utvrdila dejstva koja triazin jedinjenja sadašnjeg pronalaska imaju na SMC proliferaciju, ćelije se postave na ploču pri niskoj gustini (4000 ćelija po bazenčiću na ploči sa 96 bazenčića) i kultivišu 24 sata. Ćelije se onda izgladnjuju od seruma 24 sata da se izazove mirovanje. Sveži medijum rasta koji ne sadrži jedinjenje ili 10 uM jedinjenja se onda dodaje i dalje se inkubira 24 sata. Broj ćelija se utvrđuje upotrebom pribora za ogled ćelijske proliferacije (Celltiter96 AqUeousod Promega).
Dejstva različitih triazin jedinjenja na proliferaciju glatke mišićne ćelije su prikazana na Slici 53. Mnoga od triazin jedinjenja inhibiraju SMC proliferaciju više od 70%.
PRIMER 83
Indukcija i merenje endotelijalnog heparanaza proteina
Eksperimenti se obavljaju na humanom mikrovaskularnim endotelijalnim ćelijama (HMVEC) uzgajanim na pločama sa 48 bazenčića (-90% slivanje). Da se izazove aktivnost heparanaze, medijum kulture se zamenjuje sa 200 uL Dulbecco's Modified Eagle's medijumom (DMEM) dopunjen sa 1% volovskog seruma albumina (BSA) i sa ili bez stimulanata (5 ng/mL TGF-alfa, 1 ng/mL IL 1alfa, 200 ng/mL VEGF ili drugim stimulanti, citokini, ili izazivanči već kako se to zahteva). Sekretovani proteini se analiziraju sa SDS/PAGE i heparanaza protein se otkrivna sa imunomrljanjem upotrebom poliklonalnog anti-humanog heparanaza antitela. Indukcija i merenje endotelijalnog heparanaza proteina koji su ovde dati u Tabelama obavljaju se prema ovom Primeru.
PRIMER 84
Pripremanje biotinilizovanog HS
Heparan sulfat (HS) se biotinilizuje upotrebom biotina sa produženim distancerskim kracima upotrebom sukcinimidil-6-(biotinamido) heksanoata (NHS-LC-Biotin) dobijenog od Pierce-a. Oko 0,5 mL HS rastvora (2 mg/mL u NaHC03, pH 8,5) se meša sa 0,05 mL sveže pripremljenog rastvora NHS-LC-Biotina u dimetil sulfoksidu. Smeša se inkubira na sobnoj temperaturi 1 sat. Nekonjugovani biotin se uklanja centrifugiranjem (10.000 obrtaja u minuti) kroz Microcon-3 filter (Millipore) praćeno razblaživanjem sa fosfatom puferovanim slanim rastvorom (PBS). Ovaj postupak se ponavlja pet puta da se osigura potpuno uklanjanje slobnodnog biotina. Neželjeni aldehidi u reakciji se onda priguše inkubacijom sa jednim mililitrom Tris-glicin pufera (25 mM-183 mM, pH 8,3) na sobnoj temperaturi 20 minuta. Smeša se podvrgava sa tri kruga mikrofiltriranja kako je to gore opisano. Biotinilizovani HS (5 mg/mL u PBS) se postavlja kao alikvot i skladišti na -20°C- Da se dobije maksimalna Biotinilizacija, upotrebljava se 25 puta veći molarni višak biotina. Upotrebom HABA reagensa, utrvrđeno je da je odnos HS prema biotinu 1:2.
Kolika je biotinilizacija HS se utvrđuje upotrebom Avidin-HABA (Pierce Chemical Co). HABA ogled može se primeniti preko širokog raspona vrednosti pH i koncentracija soli. HABA (4-hidroksiazobenzen-2'-karbonska kiselina) je boja koja se vezuje za vaidin i može da služi kao indikator nezauzetih položaja vezivanja. Avidin se kombinuje stehiometrijski sa biotinom, čineći mogućim upotebu bilo koje fiziohemijske razlike između avidina i avidin-biotin kompleksa kao osnove postupka kvalitativnog i kvantitativnog ogleda za bilo koju komponentu.
Kada se HABA vezuje za avidin, postoji širok spektar promene u HABA boji. Novi sloj absorbcije se pojavljuje na 500 nm, što je karakteristika hinoidnog oblika boje. Avidin-biotin kompleks ne vezuje HABA i pošto je konstanta disocijacije kompleksa tako niska, boja se stehiometrijski premešta od strane biotina. Shodno tome, HABA ogled može biti osnova i za kolorometrijske i za titimetrijske oglede. Količina avidina može biti izračunata direktno iz povećane absorbance na 500 nm, ili boja može biti iskorištena kao indikator u spetrofotometrijskom titriranju sa biotinom.
Sloj absorbcije koji rezultira iz avidin-HABA kompleksa se umanjuje proporcionalno sa dodavanjem biotina. Pošto biotin ima takav visoki afinitet prema avidinu, on premešta HABA boju. Nepoznata količina biotina može se utvrditi pripremanjem standame krivine upotrebom poznatih količina biotina za premeštanje HABA koji se vezuje za avidin,
i nanošenjem spram absorbance na 500 nm.
HABA rastvor se priprema dodavanjem 24,2 mg HABA (Pierce) u 9,9 mL H20, i potom dodavanjem 0,1 mL 1 M NaOH. Avidin-HABA reagens se priperma dodavanjem 10 mg avidina i 600 gL HABA rastvora u 19,4 mL fosfatom puferovani slani rastvor. 1 mL Avidin-HABA reagensu u kuveti, dodaje se 100 uL biotinilizovanog HS, i optička gustina se meri na 500 nm u spektrofotometru. Standardna krivina se utvrđuje upotrebom poznatih količina HABA. Utvrđeno je umanjenje u optičkoj gustini HABA, praćenog dodavanjem biotinilizovanog HS.
PRIMER 85
Ogled heparanaze
Biotinom-označeni HS spravljen kako je gore objašnjeno sa heparanazom, pod i kontrolnim i uslovima tretiranja, i reakcija koja sadrži nedegradirani i degradirani HS se obavlja u ploči za vezivanje biotina. Streptavidin, konjugovan sa enzimom, se dodaje ploči za vezivanje. Kvantifikovanjem bojene reakcije se meri količina dostupnih položaja vezivanja biotina. Umanjenje u boji od poznate količine reflekture HS svarivanje od strane heparanaze. Kontrolni uslovi nemaju dodata jedinjenja sadašnjeg pronalaska, a tretirani uslovi imaju dodate jedinjenja sadašnjeg pronalaska.
Liofilisani puder heparanaze (heparanaza III dobijena od Seikagaku) koji sadrži 0,1 jedinicu enzimska aktivnosti se hidratuje u 100 uL Reakcionog pufera (3,33 mM kalcijumacetat pH 7,0, koji sadrži 0,1 mg/mL BSA). Ovaj rastvor se onda razblaži do radne koncentracije heparanaza rastvora (0,01 mikro-jedinica prema 1 mili-jedinica) u Reakcionom puferu. Enzimska aktivnost se definiše od strane proizvođača heparanaze (Seikagaku) kako dalje sledi: jedna jedinica aktivnosti enzima je definisana kao količina potrebna da generiše 1 mikromol askorbinske kiseline po minuti. Biotin-HS se razblaži do željene koncentracije u Reakcionom puferu.
Da se utvrdi aktivnost heparanaze, 10 ul_ rastvora heparanaze, sa ili bez bar jednog jedinjenje sadašnjeg pronalaska, se meša sa 200 uL biotin-HS supstrata na ploči sa 96 bazenčića. Reakcija se inkubira na 43°C 1 sat. Jedna stotina mikrolitara reakcione smeše se dodaje hidratovani biotin-vezivanje pločama (Chemicon) i inkubira se na 37°C 30 minuta. Ploče za vezivanje biotina se hidratuju sa 200 uL 1x Oglednim puferom (Chemicon). Bazenčići se operu pet puta sa 1x Oglednim puferom i inkubiraju sa 100 uL 1:3000 razblaženim Streptavidin-Enzim Konjugatom (Chemicon) 30 minuta na 37°C. Bazenčići se operu pet puta sa 1x Oglednim puferom i inkubiraju 20 minuta sa 100 uL Supstrat rastvora (Chemicon). Razvoj boje u bazenčićima se procenjuje merenjem optičke gustine na 450 nm na čitaču mikroploče (Labsvstems, Muliskan Ascent model). Rezlike između kontrole i tretiranih stanja ukazuju na modulirajuću aktivnost dodatog jedinjenja ili dodatih jedinjenja na heparanazu
PRIMER 86
AGE- izazvani inflamatorni odgovor sa IL- 6 ELISA
Humane aortne endotelijalne ćelije (HAEC, Clonetics) se kultivišu prema uputstvu proizvođača u medijumu rasta (Clonetics): bazalni medijum koji sadrži humani epidermalni faktor rasta, hidrokortizon, vaskuolarni endotelijalni faktor rasta, faktor-B rasta koji vezuje heparin, dugi R3-insulinu-slični faktor-1 rasta, askorbinsku kiselinu, gentamicin/amfotericin i 5% FBS. Ovim ćelijama se dopušta da postignu bar 90% slivanja pre podvrgavanja eksperimentalnim tretmanima. Giikovani humani serum albumin (G-HSA) je od US biologicals. Faktor nekroze tumora a je od R&D Svstems.
Endotelijalne ćelije se tretiraju sa kontrolnim medijumom ili medijumom koji sadrži 10 do 100 ng/mL TNF-a ili 300 ug/mL glikovanog-HAS (tretirane ćelije ili tretmani) 24 sata, u kontroli i duplikatima sa dodatim jedinjenjem, koji sadrži 10 uM jedinjenja. Svi tretmani, s dodatim jedinjenjem i kontrole se obavljaju u od seruma oslobođenom medijumu koji sadrži 0,2% albumina. Madijumi sa svih stanja se sakupljaju i upotrebljavaju za IL-6 ELISA. IL-6 ELISA se obavlja upotrebom humanog IL-6 DuoSet ELISA pribora za razvijanje kako je to opisano od strane proizvođača (R&D Svstems). Mišji anti-humani IL-6 se koristi kao zarobljeno antitelo (2ug/mL) i biotinilizovani kozji anti-humani IL-6 (200 ng/mL) se upotrebljava kao antitelo za otkrivanje. Medijumi kulture se inkubiraju sa zarobljenim antitelom (u 96 bazenčića) 2 sata na sobnoj temperaturi. Bazenčići se operu tri puta sa puferom za pranje (0,05% tween-20 u fosfat puferovanom slanom rastvoru (PBS) pH 7,4) praćeno inkubacijom sa antitelom za otkrivanje 2 sata na sobnoj temperaturi. Posle tri pranja bazenčići se inkubiraju sa Streptavidin-HRP 20 minuta. Razvoj boje se čita na 450 nm u Čitaču mikroploče.
Dejstva jedinjenja sadašnjeg pronalaska na G-HSA izazvani IL-6 su prikazani na Slici 54. G je G-HSA, a C je kontrola, nema tretmana sa jedinjenjima ili G-HSA. Endotelijalne ćelije pod bazalnim uslovima sekretuju oko 25 pg/mL IL-6. Inkubacija endotelijalnih ćelija sa G-HSA izaziva povećanje za 3 puta u sekreciji IL-6 od strane endotelijalnih ćelija. Dodavanje jedinjenja sadašnjeg pronalaska, kako je to naznačeno kod svakog broja jedinjenja, u medijum koji sadrži G-HSA značajno smanjuje endotelijalnu sekreciju IL-6. Ova inhibitorna dejstva variraju, najefikasnija jedinjenja pokazuju 80% umanjenje IL-6 sekrecije. Ovi podaci pokazuju da jedinjenja sadašnjeg pronalaska imaju anti-inflamatornu aktivnost.
PRIMER 87
Ogled citotoksičnost/ laktat dehidrogenaze
Odgovarajući broj ćelija se postavi na ploče sa 96 bazenčića, jedna ploča za "dan 0" i tri ploče za dane 1-3. Ćelije se tretiraju sa bar jednim jedinjenjem sadašnjeg pronalaska u različitim koncentracijama sa ili pez izazivača apoptoze cisplatina (2 uM)("+cis" ili "-cis"). Netretirane ćelije se takođe podvrgavaju ogledu sa ili bez cisplatina. Posle izmene infekcijom, ploče se inkubiraju na 37°C preko noći.
Odgovarajući broj ćelija se postavi na ploče sa 96 bazenčića, jedna ploča za "dan 0" i tri ploče za dane 1-3. Ćelije se tretiraju sa bar jednim jedinjenjem sadašnjeg pronalaska u različitim koncentracijama. Negativne kontrolne ćelije imaju normalne uslove medijuma, duplikat set bazenčića se tretira sa sastavom u kojem je obezbeđeno jedinjenje, ali nije dodato jedinjenje i pozitivne kontrolne ćelije se tretiraju sa cisplatinom izazivačem apoptoze (2 uM). Sve ćelije su podvrgnute izmeni infekcijom sa vektorom koji ima promoter koji odgovara na stanja apoptoze. Kada se apoptoza dogodi, promoter se pokreće i gen laktične dehidrogenaze se aktivira i stvara se enzim protein koji je aktivan. Aktivnost se lako otkriva pramenom boje. Posle izmene infekcijom, ploče se inkubiraju na 37 °C preko noći.
Kombinuju se oko 8 mL zagrejanog alfa MEM LDH lizis pufera (2% Triton X100) i oko 8 mL medijum kulture (1/2 razblaživanja). Pripremaju se dve ploče sa 96 bazenčića sa v-dnom, jedna označena sa "lizis" i jedna označena sa "površinski sloj". Da bi se lizovale ćelije, oko 200uL Alfa MEM lizis pufera (razblaženVi)se dodaje jednoj test ploči iz koje se površinski sloj uklanja i dodaje se na ploču označenu sa površinski sloj. Posle mešanja, oko 200 uL lizovanih ćelija se premeste na lizis ploču. Obe ploče i lizis i površinsko sloj se centrifugiraju na oko 1600 obrtaja u minuti oko 10 minuta. Posle centrifugiranja, oko 100 uL oba i površinskog sloja i lizata se premesti na odgovarajuće ploče sa 96 bazenčića sa ravnim dnom.
Ogled citotoksičnosti upotrebljava Cytotoxicity Detection Kit (pribor za detekciju citotoksičnosti)(LDH) od Roche Diagnostics Corp.
(Indianapolis, IN). Upotrebom datih uputstava, bojeni rastvor se meša i dodaje svakom bazenčiću ploče lizata i površinskog sloja i inkubira do 20-25 minuta na 15-25 °C u mraku.
Razlika u količini oslobođenog laktat dehidrogenaze iz ćelija u netretiranim ćelijama uporećeno sa ćelijama tretiranim cisplatinom ili jedinjenjima sadašnjeg pronalaska koja imaju citotoksičnu aktivnost pokazuju citotoksičnu aktivnost testiranih jedinjenja.

Claims (8)

1. Jedinjenje formule Ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićeni derivat; njihov stereoizomer; ili njihovu so; naznačeno time, što:R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; alkila, cikloalkila, alkenila, cikloalkenila, cikloalkadienila, alkinila, aralkila, aralkenila, aralkinila, heteroalkila, alkoksija, alkiltio, alkilamino, ili dialkilamino, od kojih svaki ima do 12 atoma ugljenika i uključujući njihove linearne ili račvaste derivate, njihove ciklične derivate, njihove supstituisane derivate, njihove heteroatom derivate, ili njihove heterociklične derivate; arila; heteroarila; ariloksija; ariltio; halogena; ili amino; G je odabran od NR<1>iliO; E je odabran od CH ili N; z je ceo broj od 0 do 3; X<1>je odabranodR<1>, NR<1>3\CN, N02, C02R<1>, C(0)NR<1>2, CH=CR<1>2,C=CR<1>, C(0)R<1>, S02R<1>, S02OR<1>, ili NC(0)R<1>, ili suX<1>iX<2>zajedno spojeni aril, piridin, dioksan, pirol, pirolidin, furan, tiofen prsten; pod uslovom da R<1>ostatak od C(0)R<1>supstituenta u X<1>poziciji isključuje amino ili dialkilamino kada je X<1>C(0)R<1>; X<2>je odabran od R<1>; CXXH3_X, pri čemu je X halogen a x je ceo broj od 1 do 3;OR1;SR<1>; NR<1>2; CN; C(0)OR<1>;4-morfolinil; 4-metil-1-piperizinil;OR<2>, pri čemu je R<2>odabran od CH2OCH3, CH2OCH2OCH3, CH2OCH2CH2OCH3, ili C(0)R<1>;SR<3>, pri čemu je R<3>odabran od CH2OCH3, CH2OCH2CH2OCH3, CH2OCH2CH(CH3)2,CH2NHC(0)CH3, ili SR<1>; OM ili SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg, ili Ca; AY<1>je halogen, ili je A odabran od NR<1>ili 0,iY<1>je odabran od R<1>; CR<4>3;NR<4>2; OR<4>; ili SR<4>; pri čemu je n ceo broj od 0 do 8, m je ceo broj od 1 do 8, Z<1>je nezavisno odabran od CR<1>ili N, Z2 je nezavisno odabran od CR<1>2, NR<1>, O, ili S, pod uslovom da dva O ili S atoma nisu locirani susedno jedan prema drugom, i pod uslovom da su ne više od dva Z2 ostatka NR1; R<4>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od linearnog ili račvastog alkila, cikloalkila, cikloalkenila, cikloalkadienila, alkenila, alkinila, aralkila, aralkenila, aralkinila, heteroalkila, alkoksi, alkiltio, alkilamino, ili dialkilamino, od kojih svaki ima do 10 atoma ugljenika, -H, aril, heteroaril, ariloksi, ariltio, halogen, amino, njihove NR<1>2-supstituisane derivate, ili njihove halogen-supstituisane derivate; i DY<2>je halogen, ili je D odabrano od NR<1>pri čemu je R<1>definisan kao gore, i Y2 je odabran od R<1>, , ili , pri čemu jeZ<1>nezavisno odabran od N ili CR<4>aZ<2>jenezavisno odabran kako je to gore definisano, pod uslovom da dva O ili S atoma nisu locirani susedno jedan drugom, i pod uslovom da su ne više od dvaZ<2>ostatka NR<1>;i sa daljim uslovom da jedinjenje isključuje N-Cikloheptil-N'-metil-N'-(1-metil-piperidin-4-il)-N"-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; N-Cikloheptil-N'-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-N"-metil-N"-(1-metilpiperidin-4-il)-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; [4-(4-Benzil-piperazin-1-il)-6-morfolin-4-il-[1,3,5]triazin-2-il]-(4-metoksi-fenil)-amin; N-Cikloheptil-e-morfolin^-ili-N'-naftalen^-il-fl.S.Sltriazin^^-diamin; N-Cikloheptil-N'-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-6-morfolin-4-il-[1,3,5]triazin-2,4-diamin; N-Cikloheptil-6-morfolin-4-ili-N,-fenil-[1,3,5]triazin-2,4-diamin; N-Cikloheptil-N'-(4-metoksi-fenil)-6-morfolin-4-il-[1,3,5]triazin-2,4-diamin; N-Benzil-N'-cikloheptil-N<M->(4-metoksi-fenil)-N-metil-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; N-(2-[1,3lDioksolan-24l-etil)-N'-metil-N41-metil-pipendin-4-il)-N"-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; N-Ciklopropil-N'-metil-N'-(1-metil-piperidin-4-il)-N''-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin.
2. Jedinjenje prema Zahtevu 1,naznačeno time,što je to jedinjenje: N<2->(4-bromo-naftil)- N<4->cikloheptil- N<6>[(1-etil-2-piroiidinil)metil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->(4-hloro-1-naftil)- N<4->cikloheptil- N<6->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil- N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]- N<6->(3-hinolinil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil- N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]- N<6->(6-hinolinil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil- N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]- N<6->(8-hinolinil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil- N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]- N<6->[1-(2-naftil)etil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil- N<4->(3,4-dihlorofenil)- N<6->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil- N<4->(3,4-difluorofenil)-N<6->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-cikloheptil-N4--[(1-etil-2-pirolidinil)metil]- N6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-1.3.5- triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4>"-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]- N<6->(4-fluorofenil)- 1,3,5-triazin-2.4.6- triamin, 4-[(4-cikloheptilamino)-6-{[(1-etil-2-pirolidinil)metil]amino}-1,3,5-triazin-2-il)amino]benzonitril, N<2->(4-hlorofenil)-N<4->cikloheptil- N<6->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->(4-bromofenil)-N<4->cikloheptil- N<6->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, Etil 4-[(4-cikloheptilamino)-6-{[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]amino}-1,3,5-triazin-2-il)-amino]benzoat, N<2->(1,1'-bifenil-4il) N<4>"cikloheptil- N<6->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4>"-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]- N<6->(4-fluorofenil)- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->(3-hlorofenil)-N<4->cikloheptil- N<6->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-(3-brornofenil)-N4-cikloheptil-N6-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, Etil 3-[(4-cikloheptilamino)-6-{[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]amino}-1,3,5-triazin-2-il)-amino]benzoat, N<2->cikloheptil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->(2-fluorofenil) 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->(2-hlorofenil)-N<4->cikloheptil-N<6->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->(2-bromofenil)-N<4->cikloheptil- N<6->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->(1]3benzodioksol-5-il)-N<4->cikloheptil-N<6->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->(2,3dihidro-1,4-benzodioksin-6-il)-N<6->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->[4- (dimetilamino)fenil]-N6-[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-[3-hloro-4-(dietilamino)fenil]-N4- cikloheptil-N6-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-1.3.5- triazin-2,4,6-triamin, N2-cikloheptil-N4-[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]-N6-[4-(4-morfolinil)fenil]- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->[4-(4-metil-1-peperazinil)fenil]- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N-{4-[(4-(cikloheptilamino)-6^ 2-il)-amino]fenil}acetamid, N-{3-[(4-(cikloheptilamino)-6-{[(1-etil-2-pirolidinil)metil]amino}-1,3,5-triazin-2-il)-amino]fenil}acetamid, N2-cikloheptil-N4-[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]-N6-(3-metoksifenil)- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->(4-etoksifenil)-N<6->[(1-etil-2-pirolidinil)metii]-1,3,5-triazin-2.4.6- triamin, N2-cikloheptil-N4-[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]-N6- [4-(metiltio)fenil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)meti!]-N<6->(2-piridinil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->(2-metilfenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->(4-fenoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->(3-metilfenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->ciklohepti[-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->(4-metilfenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin,
2- [(4-(cikloheptilamino)-6-{[(1-etil-2-pirolidinil)metil]amino}-1,3,5-triazin-2-il)-amino]-4-rnetil-3-tiofenecarboksamid, N2-(4-hlorofenil)-N4-cikloheptil-N6-[(1-etil-2-pirolidinil)meti triazin-2,4,6-triamin,
3- [(4-(cikloheptilamino^ il)-(fenil)amino]propannitril, N2-cikloheptil-N4-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N6-(4-metoksifenil)-N6-m 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-cikloheptil-N4-(2,4-difIuorofenil)-N6-[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]- N<4->metil-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, [(4-(cikloheptilamino)-6-{[(1-etil-2-pirolidinil)metil]amino}-1,3,5-triazin-2-il)-(fenil)amino]acetonitril, N2-(3-hlorofenil)-N4-cikloheptil-N6-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N2-meti triazin-2,4,6-triamin,N<2->cikloheptil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->metil-N<6->[2-(trifluorometil)fenil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->[(1-etil-2-piro!idinil)metil]-N<6->metil-N<6->[4-(trifluorometoksi)fenil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-(3-hloro-4-metoksifenil)-N4-cikloheptil-N6-[(1-etil-2-pirolidinil)m 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N-benzoil-4-[(4-(ciklohep^ 1,3,54riazin-2-il)-amino]benzensulfonamid, N2-cikloheptil-N4-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N6-(2-naftil) ]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-etil-N4-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N6-(34luoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-(terc-butil)- N4-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N6-(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->benzil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloktil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->(3-f!uoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheksil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->ciklopentil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->[(1-etil-2-pirolidinil)meti!]-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)-6-(1-pirolidinil)-1,3,5-triazin-2,4-diamin, N<2->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)- N<6->heksahidro-1 H-azepin-1-il-1,3,5-triazin-2,4-diamin, N<2->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)- N<6->oktahidro-1 (2H-hinolinil-1,3,5-triazin-2,4-diamin, N2-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N4-(3-fluoro-4-metoksifenil)- N6-(4-metilcikloheksil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-[(1-etil-2-pirolidin-24lmetil]-N4-(3-fluoro-4-metoksifenil)-6-((S)-2-metoksimetil-pirolidin-1-il)-1,3,5-triazin-2,4-diamin, N2-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N4-(3-fluoro-4-metoksifenil)-6-(4-m piperazinil)-1,3,5-triazin-2,4-diamin, 6-(4-acetil-1-piperazinil)-N<2->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4-diamin, Etil 4-{4-{[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]amino}-N6-(3-fluoro-4-metoksifenil)amino]-1,3,5-triazin-2-il}-1-piperazinkarboksilat, N2-(cikloheksimetil)-N4-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N6-(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)- N<6->(2-furilmetil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N4-(3-fluoro-4-metoksifenil)- N6-(2,2,2-trifluoretil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-[2-(dimetilamino)etil]- N4-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N6-(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N4-(3-fluoro-4-metoksifenil)-N6-{4-[2-ok^ (1 -pirolidinil)etil]-1 -piperazinil}-1,3,5-triazin-2,4-diamin, N<2>,N<4->bis[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->(3-fluoro-4-metoksifenil)- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)-N<6->[2-(1-piperidinil)etil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<6->[4-(1,3-benzodiokso-5-ilmetil)-1-piperazinil]-N<2->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N4-(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4-diam N2-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N4-(3-fluoro-4-metoksifenil)- N6-[4-(2-piridinil)-1 -piperazinil]-1,3,5-triazin-2,4-diamin, 1-[3-({4-{[(1-etil-2-pirolidinil)metil]amino}-6[(3-fluoro-4-metoksifenil)am 1.3.5- triazin-2-il}amino)propil]-2-pirolidinon, N<2->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)- N<6->[3-(1H-imidazol-1-il)propil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-cikloheptil-N4-etil- N6-(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-(tert-butil)- N4-cikloheptil-N6-(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2.4.6- triamin, N<2>"benzil-N<4->cikloheptil-N<6->(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->cikloctil-N<6->(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->cikloheksil-N<6->(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->ciklopentil-N<6->(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-cikloheptil-N4-(3-fluoro-4-metoksifenil)-6-(1 -pirolidinil)- 1,3,5-triazin-2,4-diamin, N2-cikloheptil-N4-(3-fluoro-4-metoksifenil)-6-heksahidro-1 H-azepin-1-il-1 .S.S-triazin^^-diamin, N<2->cikloheptil-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)-6-oktahidro-1(2H)-hinolinil-1,3,5-triazin-2,4-diamin, N2-cikloheptil-N4-(3-fluoro-4-metoksifenil) -N6-(4-metilcikloheksil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-cikloheptil-N4-(3-fluoro-4-metoksifenil)-6-[(2S)-2-(metoksim pirolidinil]-1,3,5-triazin-2,4-diamin, N2-cikloheptil-N4-(3-fluoro-4-metoksifenil)-6-(4-metil-1 -piperazinil)- 1,3,5-triazin-2,4-diamin , 6-(4-acetil-1 -piperazinil)-N2-cikloheptil-N4-(3-fluoro-4-metoksifenil)- 1,3,5-triazin-2,4-diamin, Etil-4-{4-(cikloheptilamino)-6[(3-fluoro-4-metohifenil)amino]-1,3,5-triazin-2-il}-1 -piperazinkarboksilat, N<2->cikloheptil- N<4->(cikloheksimetil)-N<6->(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)-N<6->(furanilmetil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)-N<6->(2,2,2-trifluoroetil)- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->[2-(dimetilamino)etil]-N<6->(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)-6-{4-[2-okso-(1-pirolidinil)etil]-1-piperazinil}-1,3,5-triazin-2,4-diamin, N<2->cikloheptil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)- N<6->[2-(1-piperidinil)etil]- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, 6[4-(1,3-benzodioksol-5-ilmetil)1 -piperazinil]- N<2->cikloheptil-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4-diamin, N<2->cikloheptil-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)-6-[4-(2-piridinil)-1-piperazinil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, 1-[3-({4-(ciklohptilamino)-6-[(3-fluoro-4-metoksifenil)amino]-1,3,5-triazin-2-il}amino)propil]-2-pirolidinon, N2-cikloheptil-N4-(3-fluoro-4-metoksifenil)- N6-[3—(1 H-imidazol-1-il)propil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, (3-Hloro-4-metoksi-fenil)-(4,6-dihloro-[1,3,5]triazin-2-il)-arriin, 6-Hloro-N-(3- hloro-4-metoksi-fenil)-N'-cikloheksilmetil- [1,3,5] triazin-2,4-diamin, N-(3-Hloro-4-metoksi-fenil)-N'-cikloheksilmetil-N<M>metil-N<M->(1-metilpiperidin-4-il)-[1,3,5 ]triazin-2,4,6-triamin, 6-Hloro-N-(3- hloro-4-metoksi-fenil)-N'-(1-popil-butil)-[1,3,5] triazin-2,4-diamin, N-(3-Hloro-4-metoksi-fenil)-N'-N"metil-N'-(1 -metil-piperidin-4-il) N"-(1 - popil-butil)-[1,3,5] triazin-2,4,6-triamin, N-(3-Hloro-4-metoksi-fenil)-N'4zopropil-N"metil-N"-(1-metil-piperidin^ [1,3,5 ]triazin-2,4,6-triamin, N<2->(3- hloro-4-metoksi-fenil)-N<4->izopropil-N<6->metil- N<6->piperidin-4-il-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, 5-{4-(3-Hloro-4-metoksi-fenilamino)-6-[metil-(1-metil-piperidin-4 [1,3,5] triazin-2-ilamino}-pentan-1 -ol, 5-[4-(3-hloro-4-metoksi-fenilamino)-6-(metil-(1-metil-piperidin-4-il-amin 1,3,5- triazin-2-ilamino]- pentan-1-ol, N-Butil-6- hloro-N'-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N-propil-[1,3,5] triazin-2,4-diamin, N-Butil-N'-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N"-metil-N"-(1-metil-piperidin-4-il)-N-propil- [1,3,5] triazin-2,4,6-triamin, N<2->Butil-N<4->(3-hloro-4-metoksi-fenil)- N<6->metil-N<6>-piperidin-4-il- N<2->propil-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, 2,4-Dihloro-6-cikloheksilmetoksi-[1,3,5] triazin, (4-Hloro-6- cikloheksilmetoksi-[1,3,5] triazin-2-il)-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-amin, 6-Cikloheksilmetoksi-N-N'-bis-(3-fluoro-4-metoksi-fenil) )-1,3,5 triazin-2,4-diamin, 6-Cikloheksilmetoksi-N-(1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-N'-)-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-[1,3,5] triazin-2,4-diamin, (4-Hloro-6-Cikloheksilmetoksi--[1,3,5] triazin-2-il) -(3-hloro-4-metoksi-fenil)-amin, N,N'-Bis-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-6-cikloheksilmetoksi-1,3,5 triazin-2,4-diamin, N-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-6-cikloheksilmetoksi-N'-meti-N'-(1-metilpiperidin-4-il) -[1,3,5] triazin-2,4-diamin, 6-Hloro-N,N"bis-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-[1,3,5] triazin-2,4-diamin, N,N'-Bis-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N"-metil-N"-(1-metil-piperidin-4-il) - [1,3,5] triazin-2,4,6-triamin, N,N'-Bis-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N"-cikloheptil -[1,3,5] triazin-2,4,6-triamin, N-(3-Bromo-4-metoksi-fenil)-N'-cikloheptil-N"-metil-N"-(1-metil-piperidin-4-il) -[1,3,5] triazin-2,4,6-triamin, (4,6-Dihloro-[1,3,5] triazin-2-il)-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)-amin, 6-Hloro-N-cikloheksimetil-N'-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil) -[1,3,5] triazin-2,4-diamin, N-cikloheksimetil-N,-(1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-N"-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin, 6-Hloro-N-cikloheptil-N'-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil) -[1,3,5] triazin-2,4-diamin, N-Cikloheptil-N'-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)-6-pirolidini-1-il-[1,3,5] triazin-2,4-diamin, N-Cikloheptil-N'-etil-N" -( 3-fluoro-4-metoksi-fenil) -[1,3,5] triazin-2,4-diamin, N-Cikloheptil-N'-(1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-N"-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)-[1,3,5] triazin-2,4,6-triamin, 2-[4-hloro-6-(3-hloro-4-metoksi-fenilamino) -[1,3,5] triazin-2-ilamino]-propan-1,3-diol, 2-{4-(3-hloro-4-metoksi-fenilamino)-6-[metil-(1-metil-piperidin [1,3,5]triazin-2-ilamino}-propan-1,3-diol, 6-Hloro-N-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N'-cikloheptil-[1,3,5] triazin-2,4-diamin, N-(1-benzil-piperidin-44l)-N'-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N"-ciklohep^ triazin-2,4,6-triamin, N<2->(3-hloro-4-metoksi-fenil)- N<4->cikloheptil-N<6->piperidin-4-il-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, N2-(3-hloro-4-metoksi-fenil)- N4-cikloheptil-N6-(1-etil-pirolidini-2-ilmetil)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, N-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N'-cikloheptil-N"-metil-NM-(1-metil-piperidin -[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin, 2-hloro-4-{4-cikloheptilamino-6-[metil-(1 -metil-piperidin-4-il-amino] -[1,3,5] triazin-2-ilamino}-fenol, N2-cikloheptil-N4-((S)-1-etil-pirolidin-2-ilmetil)- N6-( 3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, N2-cikloheptil-N4-((R)-1 -etil-pirolidin-2-ilmetil)- N<6->( 3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, N2-cikloheksilmetill-N4-((S)-1 -etil-pirolidin-2-ilmetil)- N<6->( 3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, N2-cikloheksilmetill-N4-((R)-1-etil-pirolidin-2-ilmetil)- N6-( 3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, ({4-cikloheptilamino-6- [((S)-1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-amino ] -1,3,5-triazin-2-il}-fenil-amino)-acetonitril, ({4-cikloheptilamino-6- [((R)-1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-amino ] -1,3,5-triazin-2-il}-fenil-amino)-acetonitril, N2-[(1-etil-pirolidinil]- N4-(3-fluoro-4-metoksifenil)-6-[(S)-2-(metoksimetil)-1-pirolidinirj-1,3,5- triazin-2,4-diamin, N2-(3-hloro-4-metoksi-fenil)- N4-cikloheptil-N6-metil-N6-piperidin-4-il-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, 4-(3-hloro-4-metoksi-fenilamino)-6-cikloheptilamino-1,3,5-triazin-2-ol, N-(1-aza-biciklo[2.2.2]oct-3-il)-N'(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N"-(1-etil-pirolidini-2-ilmetil)-[1,3,5] triazin-2,4,6-triamin, N2-(3-hloro-4-dietilamino-fenil)-N4-cikloheptil-N6-(1-etil-pirolidin-2-ilm 1.3.5- triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->(2-dimetilamino-etil)- N<6->( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, ({4-cikloheptilamino-6-[1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-amino] -1,3,5- triazin-2-il}-fenil-amino)-acetonitril, N-Azepan-1-il-6-hloro-N'-(3-hloro-4-metoksi-fenil)- [1,3,5]triazin-2,4-diamin, N"-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N,N'-bis-pehidro-azepin-1-il-1,3,5- triazin-2.4.6- triamin, N-Azepan-1 -il-N'-( 3-hloro-4-metoksi-fenil)-N"-(1 -metil-piperidin-4-il)-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin, N<4->(3-hloro-4-metoksi-fenil)- N<6->metil-N<2>-perhidro-azepin-1-il-N<6->piperidin-4-H-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, N,N'-di-n-propil-N"-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, N,N'-diciklopropil-N"-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)- 1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, N2-Cikloheptil-N4-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)-N6-metil- N<6->(1-metil-piperidin-4-il)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, N2-Cikloheptil-N4-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)-N5-metil- N6-piperidin-4-il-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, N<2->Cikloheptil-N<4->( 3-fluoro-4-metoksifenil)-N<6->metil- N6-(1 -metil-piperidin-4-il)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, so hlorvodonika, [N-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N'-cikloheptil-N"-meti-N" -(1 -metil-piperidin-4-il)- [1,3,5]triazin-2,4,6-triamin, so hlorvodonika, N<2->(3-hloro-4-dietilamino-fenil)-N<4->cikloheptil-N<6->(1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, N<2->(3-hloro-4-dietilamino-fenil)-N<4->cikloheptil-N<6->(1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin so hlorvodonika, N2-Cikloheptil-N4-(1-etil-pirolidini-2-ilmetil)-N6-( 3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin so hlorvodonika, N<2->(cikloheksilmetil)-N<4->[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]- N<6->(4-fluoro-3-metoksifeni)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin so hlorvodonika, ({4-cikloheptilamino-6- [(1-etil-piroIidin-2-ilmetil)-amino] -[1,3,5] triazin-2-il}-fenil-amino)-acetonitril so hlorvodonika, N2-Cikloheptil-N4-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)-N6-meti-N6-(1-metil-piperidin-4-il)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin so maleinske kiseline, N2-Cikloheptil-N4-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)-N6-meti-N6-(1-metil-piperidin-4-il)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin so limunove kiseline, N2-Cikloheptil-N4-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)-N6-meti-N6-(1-metil-piperidin-4-il)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin so ćilibarne kiseline, ili N-(3-Bromo-4-metoksi-fe^ il,3,5]triazin-2,4,6-triamin so hlorvodonika,
3. Jedinjenje formule ili njiegov en, dien, trien, ili in derivat, njegov zasićeni derivat, njegov stereoizomer; ili njegova so; naznačeno time, što; R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvasti alkil sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkil sa do 10 atoma ugljenika; X<1>je odabran odm~ F, m- C\,m-Br, m-CN, m-N02,m-S02R<1>, ili m-S02OR<1>, ili su X<1>i X<2>zajedno spojeni benzen, piridin, ili dioksan prsten; X2 je odabran od p-OR<1>, p-SR<1>, p-NR<1>2, p-OM, ili p-SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg ili Ca; Y<1>je odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika; u normalnom nizu ili račvastog alkila sa do 10 atoma ugljenika; CH2R<2>, pri čemu je R<2>cikloalkil sa do 10 atoma ugljenika; ili pri čemu je n 1 ili 2; AY2 je odabran od halogena ili OR<1>, ili A je NR<1>i Y2je odabran od R1,
4. Jedinjenje formule ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićeni derivat; njihov stereoizomer; ili njihovu so; naznačeno time, što:R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvasti alkil sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkil sa do 10 atoma ugljenika; EjeCH ili N; n je ceo broj od 0 do 3; X<1>je odabran od -H,m- F, m- C\, m- Br, m- J,m-CN, m-N02, m-S02R<1>, ili/77-S02OR<1>, ili su X<1>i X<2>zajedno spojeni benzen ili piridin prsten; X<2>je odabran od -H, o-CI, o-Br, p-OR<1>, p-SR<1>, p-NR<1>2, p-Cl p-Br, p-CF3, p-C(0)OR<1>, p-OM, ili p-SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg ili Ca; A je odabran od NR<1>ili O, pri čemu je Y<1>odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika, s normalnim nizom ili račvastog alkila sa do 10 atoma ugljenika, ili kada je A NR<1>, i pri čemu jeY1odabran od R<1>ili CH2R<1>kada je A O; ili je AY<1>odabran od halogena, DY<2>je halogen, ili je DNR<1>a Y<2>je odabran od ili (CHR<1>)xNR<1>2, pri čemu je x ceo broj od 1 do 6.
5. Jedinjenje formule ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićen derivat; njihov stereoizomer; ili njihovu so; naznačeno time, što:R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvastog alkil sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika; arila; ili (CH2)XCN, pri čemu je x ceo broj od 0 do 6; E je CH ili N; n je ceo broj od 0 do 3; X<1>je odabran od -H,m- F, m- C\,m-Br, m-J, m-CN, m-N02, m-S02R<1>, ili m-S02OR<1>, m-NC(0)R<1>, ili o-F, ili su X<1>i X<2>zajedno spojeni benzen, piridin, ili dioksan prsten; X2 je odabran od -H, o-CI, o-Br, o-CF3, o-R<1>, p-OR<1>, p-SR<1>, p-NR<1>2, p-F, p-CI p-Br, p-CF3, p-CN, p-C(0)OR<1>, p-NC(0)R<1>, p-(4-morfolinil), ili p-(4-metil-1 -piperizinil); AY<1>je halogen, ili je A NR<1>ili O a Y<1>je odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika, cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika supstituisan sa R<1>, u normalnom nizu ili račvastog alkila sa do 10 atoma ugljenika, CH2R<1>, (CHR<1>)yOR<1>, pri čemu je y ceo broj od 1 do 6, ili su AY<1>zajedno pri čemu je x ceo broj od 3 do 5; i DY<2>je halogen, ili je D NR<1>a Y<2>je odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika, cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika supstituisan sa R<1>, u normalnom nizu ili račvastog alikla sa do 10 atoma ugljenika, CH2R<1>, pri čemu je x ceo broj od 3 do5, CH2CF3, (CHR<1>)ZZ<1>, pri čemu je z ceo broj od 1 do 6, i Z<1>je odabran od NR<1>2, pri čemu je x ceo broj od 3 do 5, ili je NY2R1 zajedno odabran od pri čemu jeZ2 odabran od R<1>, C(0)R<1>, C(0)OR<1>, piridinila, arila, li pri čemu je Y ceo broj od 0 do 6.
6. Jedinjenje formule: ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićen derivat; njihov stereoizomer; ili njihova so; naznačeno time, što:R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvastog alkil sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika; X<1>je odabran od H, m-F, m-CI, m-Br, m-J, m-CN, m-N02, m-S02R<1>, ili m-S02OR<1>; X2 je odabran od o-R<1>, p-OR<1>, p-SR<1>, p-NR<1>2,<p->OM, p-SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg, ili Ca; Y<1>je odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika ili Y<2>je odabran od u normalnom nizu ili račvastog alkila sa do 10 atoma ugljenika; cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika, ili i R<2>je -H; ili su NY<2>R<2>zajedno odabrani od gde je x ceo broj od 3 do 5, pri čemu je q ceo broj od 0 do 6, ili pri čemu jeZ2 odabran od R<1>ili
7. Jedinjenje formule ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićen derivat; njihov stereoizomer; ili njihovu so; naznačeno time, što:R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvastog alkila sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika; X<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H, m-F, m-CI, m-Br, m-J, m-CN, m-N02, m-S02R<1>, ili m-S02OR<1>; X2 je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od o-CH3, p-OR<1>, p-SR<1>, p-NR<1>2, ili p-OM, p-SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg, ili Ca; Y<1>je odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika; pri čemu je n 1 ili 2; ili Y2 je odabran od 8. Sastav koji sadrži jedinjenje formule Ili njegov en, dien, trien, ili in derivat; njegov zasićeni derivat; njegov stereoizomer; ili njegovu so; naznačen time, što:R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; alkila, cikloalkila, alkenila, cikloalkenila, cikloalkadienila, alkinila, aralkila, aralkenila, aralkinila, heteroalkila, alkoksija, alkiltio, alkilamino, ili dialkilamino, od kojih svaki ima do 12 atoma ugljenika i uključujući njihove linearne ili račvaste derivate, njihove ciklične derivate, njihove supstituisane derivate, njihove heteroatom derivate, ili njihove heterociklične derivate; arila; heteroarila; ariloksija; ariltio; halogena; ili amino; Gje odabran od NR<1>ili O; E je odabran od CH ili N; z je ceo broj od 0 do 3; X<1>je odabran od R<1>, NR<1>3<+>, CN, N02, C02R<1>, C(0)NR<1>2, CH=CR<1>2,C=CR<1>, C(0)R<1>, S02R<1>, S02OR<1>, ili NC(0)R<1>, ili su X<1>i X<2>zajedno spojeni aril, piridin, dioksan, pirol, pirolidin, furan, tiofen prsten; pod uslovom da R<1>ostatak od C(0)R<1>supstituenta u X<1>poziciji isključuje amino ili dialkilamino kada je X<1>C(0)R<1>; X<2>je odabran od R<1>; CXXH3.X, pri čemu je X halogen a x je ceo broj od 1 do 3;OR1;SR<1>; NR<1>2; CN; C(0)OR<1>; 4-morfolinil; 4-metil-1-piperizinil; OR<2>, pri čemu je R<2>odabran od CH2OCH3, CH2OCH2OCH3, CH2OCH2CH2OCH3, ili C(0)R<1>;SR<3>, pri čemu je R<3>odabran od CH2OCH3, CH2OCH2CH2OCH3, CH2OCH2CH(CH3)2,CH2NHC(0)CH3, ili SR<1>; OM ili SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg, ili Ca; AY<1>je halogen, ili je A odabran od NR<1>ili O, i Y<1>je odabran od R<1>;CR43;NR<4>2; OR<4>; ili SR<4>; pri čemu je n ceo broj od 0 do 8, m je ceo broj od 1 do 8, Z<1>je nezavisno odabran od CR<1>ili N, Z<2>je nezavisno odabran od CR<1>2, NR<1>, 0, ili S, pod uslovom da dva O ili S atoma nisu locirani susedno jedan prema drugom, i pod uslovom da su ne više od dva Z2 ostatka NR1; R<4>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od u normalnom nizu ili račvastog alkila, cikloalkila, cikloalkenila, cikloalkadienila, alkenila, alkinila, aralkila, aralkenila, aralkinila, heteroalkila, alkoksi, akliltio, alkilamino, ili dialkilamino, od kojih svaki sadrži do 10 atoma ugljenika, -H, aril, heteroaril, ariloksi, ariltio, halogen, amino, njihove NR<1>2-supstituisane derivate, njihove OR<1->supstituisane derivate; njihove SR<1->supstituisane derivate; ili njihove halogen-supstituisane derivate; i DY2 je halogen, ili je D odabran od NR<1>ili O gde je R<1>definisan kao gore, i Y2 je odabran od R<1>, , ili pri čemu je Z<1>nezavisno odabran od N ili CR<4>aZ<2>jenezavisno odabran kako je to gore definisano, pod uslovom da dva O ili S atoma nisu locirani susedno jedan drugom, i pod uslovom da su ne više od dvaZ<2>ostatka NR<1>.
9. Sastav prema Zahtevu 8,naznačen time,što je jedinjenje odabrano od: N<2->(4-bromo-naftil)- N<4->cikloheptil- N<6>[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->(4-hloro-1-naftil)- N<4->cikloheptil- N<6->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil- N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]- N<6->(3-hinolinil)- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil- N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]- N<6->(6-hinolinil)- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil- N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]- N<6->(8-hinolinil)- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil- N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]- N<6->[1-(2-naftil)etil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil- N<4->(3,4-dihlorofenil)- N<6->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil- N<4->(3,4-difluorofenil)-N<6->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-cikloheptil-N4"-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]- N6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-1.3.5- triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4>"-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]- N<6->(4-fluorofenil)- 1,3,5-triazin-2.4.6- triamin, 4-[(4-cikloheptilamino)-6-{[(1-etil-2-pirolidinil)metil]amino}-1,3,5-triazin-2-il)amino]benzonitril, N<2->(4-hlorofenil)-N<4->cikloheptil- N6-[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->(4-bromofenil)-N<4->cikloheptil- N<6->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, Etil 4-[(4-cikloheptilamino)-6-{[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]amino}-1,3,5-triazin-2-il)-amino]benzoat, N<2->(1,1'-bifenil-4il) N<4>cikloheptil- N<6->[(1-etii-2-pirolidinil)metil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4>"-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]- N<6->(4-fluorofenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->(3-hlorofenil)-N<4->cikloheptil- N6-[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->(3-bromofenil)-N<4->cikloheptil-N<6->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, Etil 3-[(4-cikloheptilamino)-6-{[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]amino}-1,3,5-triazin-2-il)-amino]benzoat, N2-cikloheptil-N4-[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]-N6-(2-fluorofenil) 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->(2-hlorofenil)-N<4->cikloheptil-N<6->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->(2-bromofenil)-N<4->cikloheptil- N6-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-(1,3benzodioksol-5-il)-N4-cikloheptil-N6-[(1-etil-2-pirolidinil)rnetil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->(2,3dihidro-1,4-benzodioksin-6-il)-N<6->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->[4- (dimetilamino)fenil]-N6-[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-[3-hloro-4-(dietilamino)fenil]-N4- cikloheptil-N6-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-1.3.5- triazin-2,4,6-triamin, N2-cikloheptil-N4-[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]-N6-[4-(4-morfolinil)fenil]- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin,N<2->cikloheptil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->[4-(4-metil-1-peperazinil)fenil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N-{4-[(4-(cikloheptilamino)-6-{[(1-etil-2-pirolidinil)metil]amino}-1,3,5-triazin-2-il)-amino]fenil}acetamid, N-{3-[(4-(cikloheptilamino)-6-{[(1-etil-2-pirolidinil)metil]amino}-1,3,5-triazin-2-il)-amino]fenil}acetamid, N2-cikloheptil-N4-[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]-N6-(3-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->(4-etoksifenil)-N<6->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-1,3,5-triazin-2.4.6- triamin, N2-cikloheptil-N4-[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]-N6- [4-(metiltio)fenil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->(2-piridinil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->(2-metilfenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-cikloheptil-N4-[(1-etil-2-pirolidinil)rnetil]-N6-(4-fenoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->(3-metilfenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->(4-metilfenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin,
2- [(4-(cikloheptilamino)-6-{[(1-etil-2-pirolidinil)metil]amino}-1,3,5-triazin-2-il)-amino]-4-metil-3-tiofenecarboksarriid, N<2->(4-hlorofenil)-N<4->cikloheptil-N<6->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<2->metil-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin,
3- [(4-(cikloheptilamino)-6-{[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]amino}-1,3,5-triazin-2-il)-(fenil)amino]propannitril, N<2->cikloheptil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->(4-metoksifenil)-N<6->metil-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-cikloheptil-N4-(2,4-difluorofenil)-N6-[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]- N<4->metil-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, [(4-(cikloheptilamino)-6-{[(1-etil-2-pirolidinil)metil]amino}-1,3,5-triazin-2-il)-(fenil)amino]acetonitril, N<2->(3-hlorofenil)-N<4->cikloheptil-N<6->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<2->metil-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin,N<2->cikloheptil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->metil-N<6->[2-(trifluorometil)fenil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->metil-N<6->[4-(trifluorometoksi)fenil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->(3-hloro-4-metoksifenil)-N<4->ciklohepti[-N<6->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N-benzoil-4-[(4-(cikloheptilamino)-6-{[(1-etil-2-pirolidinil)metil]am 1,3,54riazin-2-il)-amino]benzensulfonamid, N2-cikloheptil-N4-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N6-(2-naftil) ]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->etil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-(terc-butil)- N4-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N6-(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-benzil-N4-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N6-(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5 triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloktil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->(3-f1uoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheksil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->ciklopentil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)-6-(1-pirolidinil)-1,3,5-triazin-2,4-diamin, N2-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N4-(3-fluoro-4-metoksifenil)- N6-heksahidro-1 H-azepin-1-il-1,3,5-triazin-2,4-diamin, N<2->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)- N<6->oktahidro-1 (2H-hinolinil-1,3,5-triazin-2,4-diamin, N2-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N4-(3-fluoro-4-metoksifenil)- N6-(4-metilcikloheksil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->[(1-etil-2-pirolidin-2-ilmetil]-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)-6-((S)-2-metoksimetil-pirolidin-1 -il)-1,3,5-triazin-2,4-diamin, N<2->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)-6-(4-metil-1-piperazinil)-1,3,5-triazin-2,4-diamin, 6-(4-acetil-1-piperazinil)-N<2->[(1-eti!-2-pirolidinil)metil]-N<4->(3-fluoro-4-rnetoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4-diamin, Etil 4-{4-{[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]amino}-N6-(3-fluoro-4-metoksifenil)amino]-1,3,5-triazin-2-il}-1-piperazinkarboksilat, N<2->(cikloheksimetil)-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N4-(3-fluoro-4-metoksifenil)- N6-(2-furilmetil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N4-(3-fluoro-4-metoksifenil)- N6-(2,2,2-trifluoretil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-[2-(dimetilamino)etil]- N4-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N6-(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triarriin, N<2->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)-N<6->{4-[2-okso-2-(1-pirolidinil)etil]-1-piperazinil}-1,3,5-triazin-2,4-diamin, N2,N4-bis[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]-N6-(3-fluoro-4-metoksifenil)- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)-N<6->[2-(1-piperidinil)etil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N6-[4-(1,3-benzodiokso-5-ilmetil)-1 -piperazinil]-N2-[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]-N4-(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4-diam N2-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N4-(3-fluoro-4-metoksifenil)- N6-[4-(2-piridinil)-1 -piperazinil]-1,3,5-triazin-2,4-diamin, 1-[3-({4-{[(1-etil-2-pirolidinil)metil]amino}-6[(3-fluoro-4-metoksifenii)amirioj-1.3.5- triazin-2-il}amino)propil]-2-pirolidinon, N2-[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N4-(3-fluoro-4-metoksifenil)- N6-[3-(1H-imidazol-1 -il)propil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-cikloheptil-N4-etil- N6-(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-(tert-butil)- N4-cikloheptil-N6-(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2.4.6- triamin, N<2>"benzil-N<4->cikloheptil-N<6->(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-cikloheptil-N4-cikloctil-N6-(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->cikloheksil-N<6->(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->ciklopentil-N<6->(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N2-cikloheptil-N4-(3-fluoro-4-metoksifenil)-6-(1 -pirolidinil)- 1,3,5-triazin-2,4-diamin, N<2->cikloheptil-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)-6-heksahidro-1H-azepin-1-il-1,3,5-triazin-2,4-diamin, N<2->cikloheptil-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)-6-oktahidro-1(2H)-hinolinil-1,3,5-triazin-2,4-diamin, N<2->cikloheptil-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)-N<6->(4-metilcikloheksil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)-6-[(2S)-2-(metoksimetil)-1-pirolidinil]-1,3,5-triazin-2,4-diamin, N<2->cikloheptil-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenii)-6-(4-metil-1-piperazinil)-1,3,5-triazin-2,4-diamin , 6-(4-acetil-1 -piperazinil)-N2-cikloheptil-N4-(3-fluoro-4-metoksifenil)- 1,3,5-triazin-2,4-diamin, Etil-4-{4-(cikloheptilamino)-6[(3-fluoro-4-metohifenil)amin il}-1 -piperazinkarboksilat, N2-cikloheptil- N4-(cikloheksimetil)-N6-(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)-N<6->(furanilmetil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)-N<6->(2,2,2-trifluoroetil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->[2-(dimetilamino)etil]-N<6->(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)-6-{4-[2-okso-(1-pirolidinil)etil]-1-piperazinil}-1,3,5-triazin-2,4-diamin, N<2->cikloheptil-N<4->[(1-etil-2-pirolidinil)metil]-N<6->(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)- N<6->[2-(1-piperidinil)etil]- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, 6[4-(1,3-benzodioksol-5-ilmetil)1 -piperazinil]- N<2->cikloheptil-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5-triazin-2,4-diamin,N<2->cikloheptil-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)-6-[4-(2-piridinil)-1-piperazinil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, 1-[3-({4-(ciklohptilamino)-6-[(3-fluoro-4-metoksifenil)amino]-1,3,5-triazin-2-il}amino)propil]-2-pirolidinon, N<2->cikloheptil-N<4->(3-fluoro-4-metoksifenil)- N<6->[3—(1 H-imidazol-1 -il)propil]-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, (3-Hloro-4-metoksi-fenil)-(4,6-dihloro-[1,3,5]triazin-2-il)-amin, 6-Hloro-N-(3- hloro-4-metoksi-fenil)-N'-cikloheksilmetil- [1,3,5] triazin-2,4-diamin, N-(3-Hloro-4-metoksi-fenil)-N*-cikloheksilmetil-NMmetil-NM-(1-m piperidin-4-il)-[1,3,5 ]triazin-2,4,6-triamin, 6-Hloro-N-(3- hloro-4-metoksi-fenil)-N'-(1 -popil-butil)-[1,3,5] triazin-2,4-diamin, N-(3-Hloro-4-metoksi-fenil)-N,-N"metil-N,-(1 -metil-piperidin-4-il) N"-(1 - popil-butil)-[1,3,5] triazin-2,4,6-triamin, N-(3-Hloro-4-metoksi-fenil)-N'4zopropil-NMmetil-N"-(1-metil-piperidin-4-il)-[1,3,5 ]triazin-2,4,6-triamin, N<2->(3- hloro-4-metoksi-fenil)-N<4->izopropil-N<6->metil-N<6>-piperidin-4-il-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, 5-{4-(3-Hloro-4-metoksi-fenilamino)-6-[metil-(1-metil-piperidin-4-il)-am [1,3,5] triazin-2-ilamino}-pentan-1-ol, 5-[4-(3-hloro-4-metoksi-fenilamino)-6-(metil-(1-metil-piperidin-^ 1,3,5- triazin-2-ilamino]- pentan-1-ol, N-Butil-6- hloro-N'-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N-propil-[1,3,5] triazin-2,4-diamin, N-Butil-N'-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N"-metil-N"-(1-metil-piperidin-4-il)-N-propil- [1,3,5] triazin-2,4,6-triamin, N<2->Butil- N<4->(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N<6->metil-N<6>-piperidin-4-il- N<2->propil-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, 2,4-Dihloro-6-cikloheksilmetoksi-[1,3,5] triazin, (4-Hloro-6- cikloheksilmetoksi-[1,3,5] triazin-2-il)-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-amin, 6-Cikloheksilmetoksi-N-N'-bis-(3-fluoro-4-metoksi-fenil) )-1,3,5 triazin-2,4-diamin, 6-Cikloheksilmetoksi-N-(1-etil-pirolidin-24lmetil)-N'-)-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-[1,3,5] triazin-2,4-diamin, (4-Hloro-6-Cikloheksilmetoksi--[1,3,5] triazin-2-il) -(3-hloro-4-metoksi-fenil)-amin, N,N'-Bis-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-6-cikloheksilmetoksi-1,3,5 triazin-2,4-diamin, N-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-6-cikloheksilmetoksi-N'-meti-N'-(1-m piperidin-4-il) -[1,3,5] triazin-2,4-diamin, 6-Hloro-N,N"bis-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-[1,3,5] triazin-2,4-diamin, N,N'-Bis-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-NM-metil-NM-(1-metil-piperidin-4-il) - [1,3,5] triazin-2,4,6-triamin, N,N'-Bis-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N"-cikloheptil -[1,3,5] triazin-2,4,6-triamin, N-(3-Bromo-4-metoksi-fenil)-N'-cikloheptil-N<n->metil-N"-(1-meti!-piperidin-4-il) -[1,3,5] triazin-2,4,6-triamin, (4,6-Dihloro-[1,3,5] triazin-2-il)-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)-amin, 6-Hloro-N-cikloheksimetil-N'-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil) -[1,3,5] triazin-2,4-diamin, N-cikloheksimetil-N'-(1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-N"-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin, 6-Hloro-N-cikloheptil-N'-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil) -[1,3,5] triazin-2,4-diamin, N-Cikloheptil-N'-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)-6-pirolidini-1-il-[1,3,5] triazin-2,4-diamin, N-Cikloheptil-N'-etil-N" -( 3-fluoro-4-metoksi-fenil) -[1,3,5] triazin-2,4-diamin, N-Cikloheptil-N'-(1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-N"-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)-[1,3,5] triazin-2,4,6-triamin, 2-[4-hloro-6-(3-hloro-4-metoksi-fenilamino) -[1,3,5] triazin-2-ilamino]-propan-1,3-diol, 2-{4-(3-hloro-4-metoksi-fenilamino)-6-[metil-(1-metil-piperid [1,3,5]triazin-2-ilamino}-propan-1,3-diol, 6-Hloro-N-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N'-cikloheptil-[1,3,5] triazin-2,4-diamin, N-(1-benzil-piperidin-44l)-N'-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-NM-cikloheptil-[1,3,5] triazin-2,4,6-triamin, N<2->(3-hloro-4-metoksi-fenil)- N<4->cikloheptil-N<6->piperidin-4-il-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, N2-(3-hloro-4-metoksi-fenil)- N4-cikloheptil-N6-(1-etil-pirolidini-2-ilmetil)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, N-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N'-cikloheptil-N"-metil-N"-(1-metil-piperidin-4^ -[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin, 2-hloro-4-{4-cikloheptilamino-6-[metil-(1-metil-piperidin-4-il-am -[1,3,5] triazin-2-ilamino}-fenol, N2-cikloheptil-N4-((S)-1-etil-pirolidin-2-ilmetil)- N6-( 3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, N2-cikloheptil-N4-((R)-1 -etil-pirolidin-2-ilmetil)- N<6->( 3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, N2-cikloheksilmetill-N4-((S)-1 -etil-pirolidin-2-ilmetil)- N<6->( 3-fIuoro-4-metoksifenil)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, N2-cikloheksilmetill-N4-((R)-1 -etil-pirolidin-2-ilmetil)- N<6->( 3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, ({4-cikloheptilamino-6- [((S)-1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-amino ] -1,3,5-triazin-2-il}-fenil-amino)-acetonitril, ({4-cikloheptilamino-6- [((R)-1-etil-pirolidin-2-ilrnetil)-amino ] -1,3,5-triazin-2-il}-fenil-amino)-acetonitril, N2-[(1 -etil-pirolidinil]- N4-(3-f!uoro-4-metoksifenil)-6-[(S)-2-(metoksimetil)-1 - pirolidinil]-1,3,5- triazin-2,4-diamin, N2-(3-hloro-4-metoksi-fenil)- N4-cikioheptil-Ns-metil-N6-piperidin-4-il-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, 4-(3-hloro-4-metoksi-fenilam N-(1-aza-biciklo[2.2.2]oct-3-il)-N'(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N"-(1-etil-pirolidini-2-ilmetil)-[1,3,5] triazin-2,4,6-triamin, N<2->(3-hloro-4-dietilamino-fenil)-N<4->cikloheptil-N<6->(1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-1.3.5- triazin-2,4,6-triamin, N<2->cikloheptil-N<4->(2-dimetilamino-etil)- N<6->( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)- 1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, ({4-cikloheptilamino-6-[1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-amino] -1,3,5- triazin-2-il}-fenil-amino)-acetonitril, N-Azepan-1 -il-6-hloro-N'-(3-hloro-4-metoksi-fenil)- [1,3,5]triazin-2,4-diamin, N<n->(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N,N'-bis-pehidro-azepin-1-il-1,3,5- triazin-2.4.6- triamin, N-Azepan-1 -il-N'-( 3-hloro-4-metoksi-fenil)-N"-(1 -metil-piperidin-4-il)-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin, N<4->(3-hloro-4-metoksi-fenil)- N<6->metil-N<2->perhidro-azepin-1-il-N<6->piperidin-4-H-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, N,N'-di-n-propil-N"-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, N,N'-diciklopropil-N"-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)- 1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, N2-Cikloheptil-N4-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)-N6-metil- N6-(1-metil-piperidin-4-il)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, N2-Cikloheptil-N4-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)-N6-metil- N<6->piperidin-4-il-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, N<2->Cikloheptil-N<4->( 3-fluoro-4-metoksifenil)-N<6->metil- N6-(1 -metil-piperidin-4-il)-1,3,5-triazin-2,4,6-triamin, so hlorvodonika, [N-(3-hloro-4-metoksi-fenil)-N'-cikloheptil-N"-meti-N" -(1-metil-piperidin-4-il)- [1,3,5]triazin-2,4,6-triamin, so hlorvodonika, N<2->(3-hloro-4-dietilamino-fenil)-N<4->cikloheptil-N<6->(1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin, N<2->(3-hloro-4-dietilamino-fenil)-N<4->cikloheptil-N<6->(1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin so hlorvodonika, N2-Cikloheptil-N4-(1-etil-pirolidini-2-ilmetil)-N6-( 3-fluoro-4-metoksifenil)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin so hlorvodonika, N<2->(cikloheksilmetil)-N<4->[(1 -etil-2-pirolidinil)metil]- N<6->(4-fluoro-3-metoksifeni)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin so hlorvodonika, ({4-cikloheptilamino-6- [(1-etil-pirolidin-2-ilmetil)-amino] -[1,3,5] triazin-2-il}-fenil-amino)-acetonitril so hlorvodonika, N<2->Cikloheptil-N<4->( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)-N<6->meti-N<6->(1-metil-piperidin-4-il)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin so maleinske kiseline, N2-Cikloheptil-N4-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)-N6-meti-N6-(1-metil-piperidin-4-il)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin so limunove kiseline, N2-Cikloheptil-N4-( 3-fluoro-4-metoksi-fenil)-N6-meti-N6-(1-metil-piperidin-4-il)-1,3,5- triazin-2,4,6-triamin so ćilibarne kiseline, ili N-(3-Bromo-4-metoksi-fenil)-N'-cikloheptil-N''-^ il)-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin so hlorvodonika,;10. Sastav prema Zahtevu 8,naznačen time,što dalje sadrži: farmaceutski prihvatljivi nosač; opciono, farmaceutski prihvatljivo pomoćno sredstvo; opciono, farmaceutski prihvatljiv prezervativ; i opciono, farmaceutski prihvatljiv inertni punilac.;11. Sastav prema Zahtevu 8,naznačen time,što dalje sadrži sredstvo odabrano od hemoterapeutskog sredstva, imunosupresivnog sredstva, citokina, citotoksičnog sredstva, nukleolitičkog sredstva, radioaktivnog izotopa, receptora, enzima koji aktivira pro-lek, anti-inflamatornog sredstva, antireumatskog sredstva, kardiovaskularnog sredstva, toksina, ili bilo koju njihovu kombinaciju.;12. Sastav prema Zahtevu 8,naznačen time,što je sastav u obliku tablete, kapsule, žiga, pudera, granule, rastvora, suspenzije, emulzije, velike pilule, tablete oblika romba, materičnog čepa, tampona, kreme, gela, paste, pene, spreja, aerosola, mikrokapsule, lipozoma, trandermalnog flastera, pastile, paste ili sredstva za ispiranje usta.;13. Sastav koji sadrži jedinjenje formule ili njegov en, dien, trien, ili in derivat; njegov zasićen derivat; njegov stereoizomer; ili njegovu so; naznačen time,što; R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvastog alkil sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika; X<1>je odabran od m-F, m-CI, m-Br, m-J, m-CN, m-N02,m-S02R<1>, ili m-S02OR<1>, ili su X1 i X2 zajedno spojeni benzen, piridin, ili dioksan prsten; X2 je odabran od p-OR<1>, p-SR<1>, p-NR<1>2, p-OM, ili p-SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg, ili Ca; Y<1>je odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika; u normalnom nizu ili račvastog alkila sa do 10 atoma ugljenika; CH2R<2>, gde je R<2>cikloalkil sa do 10 atoma ugljenika; ili pri čemu je n 1 ili 2; AY2je odabran od OR1, ili je A NR1 i Y2 je odabran od R1, ;14. Sastav prema Zahtevu 13,naznačen time,što dalje sadrži: farmaceutski prihvatljivi nosač; opciono, farmaceutski prihvatljivo pomoćno sredstvo; opciono, farmaceutski prihvatljiv prezervativ; i opciono, farmaceutski prihvatljivinertnipunilac.;15. Sastav prema Zahtevu 13, naznačen time, što dalje sadrži sredstvo odabrano od hemoterapeutskog sredstva, imunosupresivnog sredstva, citokina, citotoksičnog sredstva, nukleolitičkog sredstva, radioaktivnog izotopa, receptora, enzima koji aktivira pro-lek, anti-inflamatornog sredstva, antireumatskog sredstva, kardiovaskularnog sredstva, toksina, ili bilo koju njihovu kombinaciju.;16. Sastav prema Zahtevu 13,naznačen time,što je sastav u obliku tablete, kapsule, žiga, pudera, granule, rastvora, suspenzije, emulzije, velike pilule, tablete oblika romba, materičnog čepa, tampona, kreme, gela, paste, pene, spreja, aerosola, mikrokapsule, lipozoma, trandermalnog flastera, pastile, paste ili sredstva za ispiranje usta.;17. Sastav koji sadrži jedinjenje formule: ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićeni derivat; njihov stereoizomer; ili njihovu so; pri čemu: R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvasti alkil sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkil sa do 10 atoma ugljenika; ili aril; E je CH ili N; n je ceo broj od 0 do 3; X<1>je odabran od -H, m-F, m-CI, m-Br, m-J, m-CN, m-N02, m-S02R<1>, ili m-S02OR<1>, ili su X<1>i X<2>zajedno spojeni benzen ili piridin prsten; X2 je odabran od -H, o-CI, o-Br, p-OR<1>, p-SR<1>, p-NR<1>2, p-Cl p-Br, p-CF3, p-C(0)OR<1>, p-OM, ili p-SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg ili Ca; A je odabran od NR<1>ili O, pri čemu jeY<1>odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika, s normalnim nizom ili račvastog alkila sa do 10 atoma ugljenika, ili <.>i kada je A NR<1>, i pri čemu je Y<1>odabran odR<1>ili CH2R<1>kada je A O; ili je AY<1>odabran od halogena, DY<2>je halogen, ili je D NR<1>a Y<2>je odabran od , ili (CHR<1>)XNR<1>2, pri čemu je x ceo broj od 1 do 6.;18. Sastav prema Zahtevu 17,naznačen time,što dalje sadrži: farmaceutski prihvatljivi nosač; opciono, farmaceutski prihvatljivo pomoćno sredstvo; opciono, farmaceutski prihvatljiv prezervativ; i opciono, farmaceutski prihvatljiv inertni punilac.;19. Sastav prema Zahtevu 17,naznačen time,što dalje sadrži sredstvo odabrano od hemoterapeutskog sredstva, imunosupresivnog sredstva, citokina, citotoksičnog sredstva, nukleolitičkog sredstva, radioaktivnog izotopa, receptora, enzima koji aktivira pro-lek, anti-inflamatornog sredstva, antireumatskog sredstva, kardiovaskularnog sredstva, toksina, ili bilo koju njihovu kombinaciju.;20. Sastav prema Zahtevu 17,naznačen time,što je sastav u obliku tablete, kapsule, žiga, pudera, granule, rastvora, suspenzije, emulzije, velike pilule, tablete oblika romba, materičnog čepa, tampona, kreme, gela, paste, pene, spreja, aerosola, mikrokapsule, lipozoma, trandermalnog flastera, pastile, paste ili sredstva za ispiranje usta.;21. Sastav koji sadrži jedinjenje formule: ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićen derivat; njihov stereoizomer; ili njihovu so; naznačen time,što: R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvastog alkil sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika; arila; ili (CH2)XCN, pri čemu je x ceo broj od 0 do 6; Eje CH ili N; n je ceo broj od 0 do 3; X<1>je odabran od -H, m-F, m-CI, m-Br, m-J, m-CN, m-N02, m-S02R<1>, ili m-S02OR<1>, m-NC(0)R<1>, ili o-F, ili su X<1>i X<2>zajedno spojeni benzen, piridin, ili dioksan prsten; X2 je odabran od -H, o-CI, o-Br, o-CF3, o-R1, p-OR<1>, p-SR<1>, p-NR<1>2,<p->F, p-CI p-Br, p-CF3, p-CN, p-C(0)OR<1>, p-NC(0)R<1>, p-(4-morfolinil), ili p-(4-metil-1 -piperizinil); AY<1>je halogen, ili je A NR<1>ili O a Y<1>je odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika, cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika supstituisan sa R<1>, u normalnom nizu ili račvastog alkila sa do 10 atoma ugljenika, CH2R<1>, (CHR<1>)yOR<1>, pri čemu je y ceo broj od 1 do 6, ili su AY<1>zajedno pri čemu je x ceo broj od 3 do 5; i DY<2>je halogen, ili je DNR<1>a Y<2>je odabran od , cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika, cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika supstituisan sa R<1>, u normalnom nizu ili račvastog alikla sa do 10 atoma ugljenika, CH2R<1>, ) x, pri čemu je x ceo broj od 3 do 5, CH2CF3, (CHR<1>)2Z<1>, pri čemu je z ceo broj od 1 do 6, i Z1 je odabran od NR<1>2, pri čemu je x ceo broj od 3 do 5, ili je NY2R1 zajedno odabran od pri čemu je Z<2>odabran od R<1>, C(0)R\ C(0)OR<1>, piridinila, arila, , ili pri čemu je q ceo broj od 0 do 6.;22. Sastav prema Zahtevu 21,naznačen time,što dalje sadrži: farmaceutski prihvatljivi nosač; opciono, farmaceutski prihvatljivo pomoćno sredstvo; opciono, farmaceutski prihvatljiv prezervativ; i opciono, farmaceutski prihvatljiv inertni punilac.;23. Sastav prema Zahtevu 21,naznačen time,što dalje sadrži sredstvo odabrano od hemoterapeutskog sredstva, imunosupresivnog sredstva, citokina, citotoksičnog sredstva, nukleolitičkog sredstva, radioaktivnog izotopa, receptora, enzima koji aktivira pro-lek, anti-inflamatornog sredstva, antireumatskog sredstva, kardiovaskularnog sredstva, toksina, ili bilo koju njihovu kombinaciju.;24. Sastav prema Zahtevu 21,naznačen time,što je sastav u obliku tablete, kapsule, žiga, pudera, granule, rastvora, suspenzije, emulzije, velike pilule, tablete oblika romba, materičnog čepa, tampona, kreme, gela, paste, pene, spreja, aerosola, mikrokapsule, lipozoma, trandermalnog flastera, pastile, paste ili sredstva za ispiranje usta.;25. Sastav koji sadrži jedinjenje formule ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićen derivat; njihov stereoizomer; ili njihovu so; naznačen time,što: R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvastog alkil sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika; X<1>je odabran od H, m-F, m-CI, m-Br, m-J, m-CN, m-N02, m-S02R<1>, ili m-S02OR1; X2 je odabran od o-R<1>, p-OR<1>, p-SR<1>, p-NR<1>2, p-OM, p-SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg, ili Ca; Y<1>je odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika ili Y2 je odabran od u normalnom nizu ili račvastog alkila sa do 10 atoma ugljenika; cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika, ili i R<2>je -H; ili su NY<2>R<2>zajedno odabrani od gde je x ceo broj od 3 do 5, pri čemu je q ceo broj od 0 do 6, ili pri čemu jeZ2 odabran odR<1>ili ;26. Sastav prema Zahtevu 25,naznačen time,što se dalje sadrži: farmaceutski prihvatljivi nosač; opciono, farmaceutski prihvatljivo pomoćno sredstvo; opciono, farmaceutski prihvatljiv prezervativ; i opciono, farmaceutski prihvatljiv inertni punilac.;27. Sastav prema Zahtevu 25, naznačen time, što dalje sadrži sredstvo odabrano od hemoterapeutskog sredstva, imunosupresivnog sredstva, citokina, citotoksičnog sredstva, nukleolitičkog sredstva, radioaktivnog izotopa, receptora, enzima koji aktivira pro-lek, anti-inflamatornog sredstva, antireumatskog sredstva, kardiovaskularnog sredstva, toksina, ili bilo koju njihovu kombinaciju.;28. Sastav prema Zahtevu 25, naznačen time, što je sastav u obliku tablete, kapsule, žiga, pudera, granule, rastvora, suspenzije, emulzije, velike pilule, tablete oblika romba, materičnog čepa, tampona, kreme, gela, paste, pene, spreja, aerosola, mikrokapsule, lipozoma, trandermalnog flastera, pastile, paste ili sredstva za ispiranje usta.;29. Sastav koji sadrži jedinjenje formule ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićen derivat; njihov stereoizomer; ili njihovu so; naznače time, što:R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvastog alkil sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika; X<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H,m-F, m- C\,m- Br,m-J, m-CN, m-N02, m-S02R1, ili m-S02OR<1>; X<2>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od o-CH3, p-OR<1>, p-SR<1>, p-NR12, ili p-OM, p-SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg, ili Ca; Y<1>je odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika; pri čemu je n 1 ili 2; ili i Y2 je odabran od ;30. Sastav prema Zahtevu 29,naznačen time,što dalje sadrži: farmaceutski prihvatljivi nosač; opciono, farmaceutski prihvatljivo pomoćno sredstvo; opciono, farmaceutski prihvatljiv prezervativ; i opciono, farmaceutski prihvatljiv inertni punilac.;31. Sastav prema Zahtevu 29,naznačen time,što dalje sadrži sredstvo odabrano od hemoterapeutskog sredstva, imunosupresivnog sredstva, citokina, citotoksičnog sredstva, nukleolitičkog sredstva, radioaktivnog izotopa, receptora, enzima koji aktivira pro-lek, anti-inflamatornog sredstva, antireumatskog sredstva, kardiovaskularnog sredstva, toksina, ili bilo koju njihovu kombinaciju.;32. Sastav prema Zahtevu 29,naznačen time,što je sastav u obliku tablete, kapsule, žiga, pudera, granule, rastvora, suspenzije, emulzije, velike pilule, tablete oblika romba, materičnog čepa, tampona, kreme, gela, paste, pene, spreja, aerosola, mikrokapsule, lipozoma, trandermalnog flastera, pastile, paste ili sredstva za ispiranje usta.;33. Sastav,naznačen time,što sadrži triazin jedinjenje odabrano od: N-Cikloheptil-N'-metil-N'-(1-metil-piperidin-4-il)-N"-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; N-Cikloheptil-N'-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-N"-metil-N"-(1-metilpiperidin-4-il)-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; [4-(4-Benzil-piperazin-1-il)-6-morfolin-4-il-[1,3,5]triazin-2-il]-(4-metoksi-fenil)-amin; N-Cikloheptil-6-morfolin-4-ili-N'-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4-diamin; N-Cikloheptil-N'-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-6-morfolin-4-il-[1,3,5]triazin-2,4-diamin; N-Cikloheptil-e-morfolin^-ili-N'-fenil-tl.S.SJtriazin^^-diamin; N-Cikloheptil-N'-(4-metoksi-fenil)-6-morfolin-4-il-[1,3,5]triazin-2,4-diamin; N-Benzil-N'-cikloheptil-N"-(4-metoksi-fenil)-N-metil-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; N-(2-[1 .SjDioksolan^-il-etiO-N'-metil-N'-CI-metil-piperidin^-iO-N"-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; N-Ciklopropil-N'-metil-N'-(1-metil-piperidin-4-il)-N''-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin.;34. Sastav prema Zahtevu 33,naznačen time,što dalje sadrži: farmaceutski prihvatljivi nosač; opciono, farmaceutski prihvatljivo pomoćno sredstvo; opciono, farmaceutski prihvatljiv prezervativ; i opciono, farmaceutski prihvatljiv inertni punilac.;35. Sastav prema Zahtevu 33,naznačen time,što dalje sadrži sredstvo odabrano od hemoterapeutskog sredstva, imunosupresivnog sredstva, citokina, citotoksičnog sredstva, nukleolitičkog sredstva, radioaktivnog izotopa, receptora, enzima koji aktivira pro-lek, anti-inflamatornog sredstva, antireumatskog sredstva, kardiovaskularnog sredstva, toksina, ili bilo koju njihovu kombinaciju.;36. Sastav prema Zahtevu 33,naznačen time,što je sastav u obliku tablete, kapsule, žiga, pudera, granule, rastvora, suspenzije, emulzije, velike pilule, tablete oblika romba, materičnog čepa, tampona, kreme, gela, paste, pene, spreja, aerosola, mikrokapsule, lipozoma, trandermalnog flastera, pastile, paste ili sredstva za ispiranje usta.;37. Postupak lečenja neželjene ćelijske proliferacije, bolesti posredovane inflamacijom, hiperproliferativne bolesti, ili moduliranja enzima glikozidaze kod čoveka ili životinja koji se sastoji od davanje čoveku ili životinji terapeutski efiksane količine sastava,naznačen time,što sadrži jedinjenje formule Ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićeni derivat; njihov stereoizomer; ili njihovu so; pri čemu: R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; alkila, cikloalkila, alkenila, cikloalkenila, cikloalkadienila, alkinila, aralkila, aralkenila, aralkinila, heteroalkila, alkoksija, alkiltio, alkilamino, ili dialkilamino, od kojih svaki ima do 12 atoma ugljenika i uključujući njihove linearne ili račvaste derivate, njihove ciklične derivate, njihove supstituisane derivate, njihove heteroatom derivate, ili njihove heterociklične derivate; arila; heteroarila; ariloksija; ariltio; halogena; ili amino; G je odabran od NR<1>ili O; E je odabran od CH ili N; z je ceo broj od 0 do 3; X<1>je odabran od R<1>, NR<1>3<+>, CN, N02, C02R<1>, C(0)NR12, CH=CR<1>2,C=CR<1>, C(0)R<1>, S02R<1>, S02OR<1>, ili NC(0)R<1>, ili su X<1>i X<2>zajedno spojeni aril, piridin, dioksan, pirol, pirolidin, furan, tiofen prsten; pod uslovom da R<1>ostatak od C(0)R<1>supstituenta u X<1>poziciji isključuje amino ili dialkilamino kada je X<1>C(0)R<1>; X<2>je odabran od R<1>; CXXH3.X,<p>ri čemu je X halogen a x je ceo broj od 1 do 3;OR<1>;SR<1>;NR<1>2; CN; C(0)OR<1>; 4-morfolinil; 4-metil-1-piperizinil; OR<2>, pri čemu je R<2>odabran od CH2OCH3, CH2OCH2OCH3, CH2OCH2CH2OCH3, ili C(0)R<1>; SR<3>, pri čemu je R<3>odabran od CH2OCH3, CH2OCH2CH2OCH3, CH2OCH2CH(CH3)2,CH2NHC(0)CH3, ili SR<1>; OM ili SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg, ili Ca; AY<1>je halogen, ili je A odabran od NR<1>ili O, i Y<1>je odabran od R<1>;CR<4>3; NR<4>2; OR<4>; ili SR<4>; pri čemu je n ceo broj od 0 do 8, m je ceo broj od 1 do 8, Z je nezavisno odabran od CR ili N, Z je nezavisno odabran od CR<1>2, NR<1>, O, ili S, pod uslovom da dva O ili S atoma nisu locirani susedno jedan prema drugom, i pod uslovom da su ne više od dva Z2 ostatka NR1; R4 je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od u normalnom nizu ili račvastog alkila, cikloalkila, cikloalkenila, cikloalkadienila, alkenila, alkinila, aralkila, aralkenila, aralkinila, heteroalkila, alkoksi, akliltio, alkilamino, ili dialkilamino, od kojih svaki sadrži do 10 atoma ugljenika, -H, aril, heteroaril, ariloksi, ariltio, halogen, amino, njihove NR<1>2-supstituisane derivate, njihove OR<1->supstituisane derivate; njihove SR<1->supstituisane derivate; ili njihove halogen-supstituisane derivate; i DY2 je halogen, ili je D odabran od NR<1>ili O gde je R<1>definisan kao gore, i Y2 je odabran od R<1>, ili pri čemu je Z<1>nezavisno odabran od N ili CR<4>aZ2je nezavisno odabran kako je to gore definisano, pod uslovom da dva O ili S atoma nisu locirani susedno jedan drugom, i pod uslovom da su ne više od dvaZ<2>ostatka NR<1>.;38. Postupak prema Zahtevu 37,naznačen time,što dalje sadrži triazin jedinjenja odabrana od; N-Cikloheptil-N'-metil-N'-(1-metil-piperidin-4-il)-N"-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; N-Cikloheptil-N'^S-fluoro^-metoksi-feniO-N'-metil-N'-CI-metilpiperidin-4-il)-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; [4-(4-Benzil-piperazin-1-il)-6-morfolin-4-il-[1,3,5]triazin-2-il]-(4-metoksi-fenil)-amin; N-Cikloheptil-6-morfolin-4-ili-N'-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4-diamin; N-Cikloheptil-N'-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-6-morfolin-4-il-[1,3,5]triazin-2,4-diamin; N-Cikloheptil-e-morfolin^-ili-N'-fenil-tl^.Sjtriazin^^-diamin; N-Cikloheptil-N'-(4-metoksi4enil)-6-morfolin-4-il-[1,3,5]triazin-2,^ diamin; N-Benzil-N'-cikloheptil-Nn-(4-metoksi-fenil)-N-metil41,3,5]triazin-2,4,6-triamin; N-(2-[1,3]Dioksolan-24l-etil)-N'-metil-N'-(1-metil-piperidin-4-il)-N naftalen-2-ii-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; N-Ciklopropil-N'-metil-N'-(1-metil-piperidin-4-il)-N,,-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin, ili bilo koju njihovu kombinaciju.;39. Postupak lečenja neželjene ćelijske proliferacije kod čoveka ili životinje koji se sastoji od davanja čoveku ili životinji terapeutski efikasne količine sastava,naznačen time,što sadrži jedinjenje formule ili njiegov en, dien, trien, ili in derivat, njegov zasićeni derivat, njegov stereoizomer; ili njegova so; pri čemu: R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvasti alkil sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkil sa do 10 atoma ugljenika; X<1>je odabran od m-F,m- C\,m-Br, m-CN, m-N02, m-S02R<1>, ili m-S02OR<1>, ili su X<1>i X<2>zajedno spojeni benzen, piridin, ili dioksan prsten; X<2>je odabran od p-OR<1>, p-SR<1>, p-NR<1>2, p-OM, ili p-SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg ili Ca; Y<1>je odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika; u normalnom nizu ili račvastog alkila sa do 10 atoma ugljenika; CH2R<2>, pri čemu je R<2>cikloalkil sa do 10 atoma ugljenika; ili pri čemu je n 1 ili 2; AY2 je odabran od halogena ili OR<1>, ili A je NR1 i Y2je odabran od R1, ;40. Postupak moduliranja enzima glikozidaze kod čoveka ili životinje koji se sastoji od davanja čoveku ili životinji terapeutski efikasne količine sastava,naznačen time,što sadrži jedinjenje formule: ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićen derivat; njihov stereoizomer; ili njihovu so; pri čemu: R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvastog alkil sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika; X<1>je odabran od H, m-F, m-CI, m-Br, m-J, m-CN, m-N02, m-S02R<1>, ili m-S02OR1; X2 je odabran od o-R1, p-OR1, p-SR1, p-NR12, p-OM, p-SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg, ili Ca; Y<1>je odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika ili Y2 je odabran od u normalnom nizu ili račvastog alkila sa do 10 atoma ugljenika; cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika, ili i R<2>je -H; ili su NY<2>R<2>zajedno odabrani od gde je x ceo broj od 3 do 5, Dri čemu je q ceo broj od 0 do 6, ili pri čemu jeZ2 odabran od R<1>ili ;41. Postupak lečenja inflamacijom posredovane bolesti kod čoveka ili životinje koji se sastoji od davanja čoveku ili životinji terapeutski efiksane količine sastava,naznačen time,što sadrži jedinjenje formule: ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićen derivat; njihov stereoizomer; ili njihovu so; pri čemu: R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvastog alkil sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika; arila; ili (CH2)XCN, pri čemu je x ceo broj od 0 do 6; Eje CH ili N; n je ceo broj od 0 do 3; X<1>je odabran od -H, m-F,m- C\,m-Br, m-J, m-CN, m-N02, m-S02R<1>, ili m-S02OR<1>, m-NC(0)R<1>, ili o-F, ili suX<1>i X<2>zajedno spojeni benzen, piridin, ili dioksan prsten; X2 je odabran od -H, o-CI, o-Br, o-CF3, o-R<1>, p-OR<1>, p-SR<1>, p-NR<1>2,<p->F, p-CI p-Br, p-CF3, p-CN, p-C(0)OR<1>, p-NC(0)R<1>, p-(4-morfolinil), ili p-(4-metil-1 -piperizinil); AY<1>je halogen, ili je A NR<1>ili O a Y<1>je odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika, cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika supstituisan sa R<1>, u normalnom nizu ili račvastog alkila sa do 10 atoma ugljenika, CH2R<1>, (CHR<1>)yOR<1>, pri čemu je y ceo broj od 1 do 6, ili su AY<1>zajedno pri čemu je x ceo broj od 3 do 5; i DY<2>je halogen, ili je D NR<1>a Y<2>je odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika, cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika supstituisan sa R<1>, u normalnom nizu ili račvastog N-Cikloheptil-N'-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-N<n->metil-N"-(1-metilpiperidin-4-il)-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; [4-(4-Benzil-piperazin-1-il)-6-morfolin-4-il-[1,3,5]triazin-2-il]-(4-metoksi-fenil)-amin; N-Cikloheptil-6-morfolin-44li-N'-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4-diamin; N-Cikloheptil-N'-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-6-morfolin-4-il-[1,3,5]triazin-2,4-diamin; N-Cikloheptil-6-morfolin-44li-N'-fenil-[1,3J5]triazin-2,4-diamin; N-Cikloheptil-N'-(4-metoksi-fenil)-6-morfolin-4-il-[1,3,5]triazin-2,4-diamin; N-Benzil-N'-cikloheptil-N<M->(4-metoksi-fenil)-N-metil-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; N-(2-[1,3]Dioksolan-24l-etil)-N'-metil-N^1-metil-piperidin-4-il)-NM-naftalen-24l-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; N-Ciklopropil-N'-metil-N'-(1-metil-piperidin-4-il)-N"-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin, ili bilo koju njihovu kombinaciju.;43. Postupak lečenja hiperproliferativne bolesti kod čoveka ili životinje koji se sastoji od davanja čoveku ili životinji terapeutski efikasne količine sastava,naznačen time,što sadrži jedinjenje formule: alikla sa do 10 atoma ugljenika, CH2R<1>, pri čemu je x ceo broj od 3 do5, CH2CF3, (CHR<1>)ZZ<1>, pri čemu je z ceo broj od 1 do 6, i Z1 je odabran od NR<1>2, pri čemu je x ceo broj od 3 do 5, ; ili je NY<2>R<1> zajedno odabran od Dri čemu jeZ2 odabran od R<1>, C(0)R<1>, C(0)OR<1>, piridinila, arila, , ili pri čemu je q ceo broj od 0 do 6.;42. Postupak prema Zahtevu 41,naznačen time,što dalje sadrži triazin jedinjenja odabrana od: N-Cikloheptil-N'-metil-N'-(1-metil-piperidin-4-il)-N"-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićeni derivat; njihov stereoizomer; ili njihovu so; pri čemu: R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; u normalnom nizu ili račvasti alkil sa do 10 atoma ugljenika; ili cikloalkil sa do 10 atoma ugljenika; Eje CH ili N; n je ceo broj od 0 do 3; X<1>je odabran od -H, m-F, m-CI, m-Br, m-J, m-CN, m-N02, m-S02R<1>, ili m-S02OR<1>, ili su X<1>i X<2>zajedno spojeni benzen ili piridin prsten; X2 je odabran od -H, o-CI, o-Br, p-OR<1>, p-SR<1>, p-NR<1>2, p-Cl p-Br, p-CF3, p-C(0)OR<1>, p-OM, ili p-SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg ili Ca; A je odabran odNR<1>ili O, pri čemu jeY1odabran od cikloalkila sa do 10 atoma ugljenika, s normalnim nizom ili račvastog alkila sa do 10 atoma ugljenika, ili kada je A NR<1>, i pri čemu je Y odabran od R' ili CH2R' kada je A O; ili je AY odabran od halogena, DY<2>je halogen, ili je DNR<1>a Y<2>je odabran od ili (CHR<1>)XNR<1>2, pri čemu je x ceo broj od 1 do 6.;44. Medicinski uređaj,naznačen time,što se sastoji od: člana za isporuku leka ili elutovanje; i sastava prema Zahtevu 8 izloženog na ili u okviru člana za isporuku leka ili elutovanje.;45. Medicinski uređaj,naznačen time,što se sastoji od: člana za isporuku leka ili elutovanje; i sastava prema Zahtevu 13 izloženog na ili u okviru člana za isporuku leka ili elutovanje.;46. Medicinski uređaj prema Zahtevu 45,naznačen time,što je stent član za isporuku leka ili elutovanje.;47. Medicinski uređaj prema Zahtevu 45,naznačen time,što je član za isporuku leka ili elutovanje odabran od odliva, uređaja za kačenje kesa kod kolostomije, cevi za drenažu uha, vodiča za pejsmejkere, vodiča za defibrilator koji se implantira, šava, drikera, uređaja za spajanje, vertebralnog diska, čiode za kost, šav lengera, hemostatičke barijere, štipaljke, šrafcigera, ploče, klipa, vaskularnog implanta, adhezivi za tkivo, zatvarač za tkivo, podizači tkiva, zamene za kost, intraluminalnog uređaja, stenta, ili vaskularnog nosača.;48. Medicinski uređaj,naznačen time,što se sastoji od: člana za isporuku leka ili elutovanje; i sastava prema Zahtevu 17 izloženog na ili u okviru člana za isporuku leka ili elutovanje.;49. Medicinski uređaj prema zahtevu 48,naznačen time,što je član za isporuku leka ili elutujući član stent.;50. Medicinski uređaj prema zahtevu 48,naznačen time,što je član za isporuku leka ili elutovanje odabran od odliva, uređaja za kačenje kesa kod kolostomije, cevi za drenažu uha, vodiča za pejsmejkere, vodiča za defibrilator koji se implantira, šava, drikera, uređaja za spajanje, vertebralnog diska, čiode za kost, šav lengera, hemostatičke barijere, štipaljke, šrafcigera, ploče, klipa, vaskularnog implanta, adhezivi za tkivo, zatvarač za tkivo, podizač tkiva, zamene za kost, intraluminalnog uređaja, stenta, ili vaskularnog nosača.;51. Medicinski uređaj,naznačen time,što se sastoji od: člana za isporuku leka ili elutovanje; i sastava prema Zahtevu 21 izloženog na ili u okviru člana za isporuku leka ili elutovanje.;52. Medicinski uređaj prema Zahtevu 51,naznačen time,što je član za isporuku leka ili elutujući član stent.;53. Medicinski uređaj prema Zahtevu 51,naznačen time,što je član za isporuku leka ili elutovanje odabran od odliva, uređaja za kačenje kesa kod kolostomije, cevi za drenažu uha, vodiča za pejsmejkere, vodiča za defibrilator koji se implantira, šava, drikera, uređaja za spajanje, vertebralnog diska, čiode za kost, šav lengera, hemostatičke barijere, štipaljke, šrafcigera, ploče, klipa, vaskularnog implanta, adheziva za tkivo, zatvarač za tkivo, podizač tkiva, zamene za kost, intraluminalnog uređaja, stenta, ili vaskularnog nosača.;54. Medicinski uređaj ,naznačen time,što se sastoji od: člana za isporuku leka ili elutovanje; i sastava prema Zahtevu 25 izloženog na ili u okviru člana za isporuku leka ili elutovanje.;55. Medicinski uređaj prema Zahtevu 54,naznačen time,što je član za isporuku leka ili elutujući član stent.;56. Medicinski uređaj prema Zahtevu 54,naznačen time,što je član za isporuku leka ili elutovanje odabran od odliva, uređaja za kačenje kesa kod kolostomije, cevi za drenažu uha, vodiča za pejsmejkere, vodiča za defibrilator koji se implantira, šava, drikera, uređaja za spajanje, vertebralnog diska, čiode za kost, šav lengera, hemostatičke barijere, štipaljke, šrafcigera, ploče, klipa, vaskularnog implanta, adheziva za tkivo, zatvarač za tkivo, podizač tkiva, zamene za kost, intraluminalnog uređaja, stenta, ili vaskularnog nosača.;57. Medicinski uređaj,naznačen time,što se sastoji od: člana za isporuku leka ili elutovanje; i sastava prema Zahtevu 29 izloženog na ili u okviru člana za isporuku leka ili elutovanje.;58. Medicinski uređaj prema Zahtevu 57,naznačen time,što je član za isporuku leka ili elutujući član stent.;59. Medicinski uređaj prema Zahtevu 57,naznačen time,što je n za isporuku leka ili elutovanje odabran od odliva, uređaja za kačenje kesa kod kolostomije, cevi za drenažu uha, vodiča za pejsmejkere, vodiča za defibrilator koji se implantira, šava, drikera, uređaja za spajanje, vertebralnog diska, čiode za kost, šav lengera, hemostatičke barijere, štipaljke, šrafcigera, ploče, klipa, vaskularnog implanta, adhezivaza tkivo, zatvarač za tkivo, podizač tkiva, zamene za kost, intraluminalnog uređaja, stenta, ili vaskularnog nosača.;60. Medicinski uređaj,naznačen time,što se sastoji od: člana za isporuku leka ili elutovanje; i astava prema Zahtevu 33 izloženog na ili u okviru člana za isporuku leka ili elutovanje.;61. Medicinski uređaj prema Zahtevu 60,naznačen time,što je član za isporuku leka ili elutujući član stent.;62. Medicinski uređaj prema Zahtevu 60,naznačen time,što je n za isporuku leka ili elutovanje odabran od odliva, uređaja za kačenje kesa kod kolostomije, cevi za drenažu uha, vodiča za pejsmejkere, vodiča za defibrilator koji se implantira, šava, drikera, uređaja za spajanje, vertebralnog diska, čiode za kost, šav lengera, hemostatičke barijere, štipaljke, šrafcigera, ploče, klipa, vaskularnog implanta, adhezivaza tkivo, zatvarač za tkivo, podizač tkiva, zamene za kost, intraluminalnog uređaja, stenta, ili vaskularnog nosača.;63. Mikroniz,naznačen time,što se sastoji od: profila ekspresije gena generisanog iz tipa ćelije koja se tretira sa jedinjenjem formule Ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićeni derivat; njihov stereoizomer; ili njihovu so; pri čemu: R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; alkila, cikloalkila, alkenila, cikloalkenila, cikloalkadienila, alkinila, aralkila, aralkenila, aralkinila, heteroalkila, alkoksija, alkiltio, alkilamino, ili dialkilamino, od kojih svaki ima do 12 atoma ugljenika i uključujući njihove linearne ili račvaste derivate, njihove ciklične derivate, njihove supstituisane derivate, njihove heteroatom derivate, ili njihove heterociklične derivate; arila; heteroarila; ariloksija; ariltio; halogena; ili amino; G je odabran od NR<1>ili O; E je odabran od CH ili N; z je ceo broj od 0 do 3; X<1>je odabranodR<1>, NR<1>3<+,>CN, N02, C02R<1>, C(0)NR<1>2, CH=CR<1>2,C^CR<1>, C(0)R<1>, S02R<1>, S02OR<1>, ili NC(0)R<1>, ili su X<1>iX<2>zajedno spojeni aril, piridin, dioksan, pirol, pirolidin, furan, tiofen prsten; pod uslovom da R<1>ostatak od C(0)R<1>supstituenta u X<1>poziciji isključuje amino ili dialkilamino kada je X<1>C(0)R<1>; X<2>je odabran od R<1>; CXXH3_X, pri čemu je X halogen a x je ceo broj od 1 do 3;OR1;SR<1>; NR<1>2; CN; C(0)OR<1>;4-morfolinil; 4-metil-1-piperizinil; OR<2>, pri čemu je R<2>odabran od CH2OCH3, CH2OCH2OCH3, CH2OCH2CH2OCH3, ili C(0)R<1>;SR<3>, pri čemu je R<3>odabran od CH2OCH3, CH2OCH2CH2OCH3, CH2OCH2CH(CH3)2,CH2NHC(0)CH3, ili SR<1>; OM ili SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg, ili Ca; AY<1>je halogen, ili je A odabran od NR<1>ili O, i Y<1>je odabran od R<1>;CR<4>3; NR<4>2; OR<4>; ili SR<4>; pri čemu je n ceo broj od 0 do 8, m je ceo broj od 1 do 8, Z je nezavisno odabran od CR ili N, Z je nezavisno odabran od CR<1>2, NR1, O, ili S, pod uslovom da dva O ili S atoma nisu locirani susedno jedan prema drugom, i pod uslovom da su ne više od dva Z2 ostatka NR<1>; R4 je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od u normalnom nizu ili račvastog alkila, cikloalkila, cikloalkenila, cikloalkadienila, alkenila, alkinila, aralkila, aralkenila, aralkinila, heteroalkila, alkoksi, akliltio, alkilamino, ili dialkilamino, od kojih svaki sadrži do 10 atoma ugljenika, -H, aril, heteroaril, ariloksi, ariltio, halogen, amino, njihove NR<1>2-supstituisane derivate, njihove OR<1->supstituisane derivate; njihove SR<1->supstituisane derivate; ili njihove halogen-supstituisane derivate; i DY2 je halogen, ili je D odabran od NR<1>ili O gde je R<1>definisan kao gore, i Y2 je odabran od R<1>, , ili pri čemu je Z<1>nezavisno odabran od N ili CR<4>a Z<2>je nezavisno odabran kako je to gore definisano, pod uslovom da dva O ili S atoma nisu locirani susedno jedan drugom, i pod uslovom da su ne više od dvaZ<2>ostatka NR<1>.;64. Mikroniz prema Zahtevu 63,naznačen time,što se jedinjenje dalje sastoji od triazin jedinjenja odabranog od: N-Cikloheptil-N'-metil-N,-(1-metil-piperidin-4-il)-N"-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; N-Cikloheptil-N'-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-N"-metil-N"-(1-metilpiperidin-4-il)-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; [4-(4-Benzil-piperazin-1-il)-6-morfolin-4-il-[1,3,5]triazin-2-il]-(4-metoksi-fenil)-amin; N-Cikloheptil-6-morfolin-4-ili-N'-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4-diamin; N-Cikloheptil-N'-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-6-morfolin-4-il-[1,3,5]triazin-2,4-diamin; N-Cikloheptil-6-morfolin-4-ili-N'-fenil-[1,3,5]triazin-2,4-diamin; N-Cikloheptil-N'-(4-metoksi-fenil)-6-morfolin-4-il-[1,3,5]triazin-2,4-diamin; N-Benzil-N'-cikloheptil-N"-(4-metoksi-fenil)-N-metil-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; N-(2-[1,3]Dioksolan-2-il-etil)-N'-metil-N,-(1-metil-piperidin-4-il)-N"-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; N-Ciklopropil-N'-metil-N'-(1-metil-piperidin-4-il)-N"-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin, ili bilo koju njihovu kombinaciju.;65. Mikroniz prema Zahtevu 63, naznačen time, što je tip ćelije odabran od grupe ćelija koje obuhvataju endotelijum korinarne arterije, endotelijum umbilikalne arterije, entodelijum umbilikalne vene, aortni endotelijum, mikrovaskularni endotelijum miometrijuma, epitelijum kerationocita, bronhijalni epitelijum, epitelijum dojke, epitelijum prostate, renalni kortikalni epitelijum, renalni proksimalni tubule epitelijum, epitelijum malog vazdušnog puta, renalni epitelijum, glatki mišič umbilikalne arterije, neonatalni dermalni fibroblast, glatki mišić pulmonalne arterije, dermalni fibroblast, neuronske progenitor ćelije, skeletni mišić, bronhijalni glatki mišić, materični glatki mišić, fibroblast pluća, osteoblaste ili stromalne ćelije prostate;66. Profil ekspresije baze podataka,naznačen time,što se sastoji od: reference koja identifikuje pacijenta; i profila ekspresije za pacijenta generisanog davanjem pacijentu jedinjenja formule Ili njihov en, dien, trien, ili in derivat; njihov zasićeni derivat; njihov stereoizomer; ili njihovu so; pri čemu: R<1>je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od -H; alkila, cikloalkila, alkenila, cikloalkenila, cikloalkadienila, alkinila, aralkila, aralkenila, aralkinila, heteroalkila, alkoksija, alkiltio, alkilamino, ili dialkilamino, od kojih svaki ima do 12 atoma ugljenika i uključujući njihove linearne ili račvaste derivate, njihove ciklične derivate, njihove supstituisane derivate, njihove heteroatom derivate, ili njihove heterociklične derivate; arila; heteroarila; ariloksija; ariltio; halogena; ili amino; G je odabran od NR<1>iliO; E je odabran od CH ili N; z je ceo broj od 0 do 3; X<1>je odabran od R<1>, NR<1>3<+>, CN, N02, C02R<1>, C(0)NR<1>2, CH=CR<1>2,C=CR<1>, C(0)R<1>, S02R<1>, S02OR<1>, ili NC(0)R<1>, ili su X<1>i X<2>zajedno spojeni aril, piridin, dioksan, pirol, pirolidin, furan, tiofen prsten; pod uslovom da R<1>ostatak od C(0)R<1>supstituenta u X<1>poziciji isključuje amino ili dialkilamino kada je X<1>C(0)R<1>; X<2>je odabran od R<1>; CXXH3_X,<p>ri čemu je X halogen a x je ceo broj od 1 do 3; OR<1>; SR<1>; NR<1>2; CN; C(0)OR<1>; 4-morfolinil; 4-metil-1-piperizinil; OR<2>, pri čemu je R<2>odabran od CH2OCH3, CH2OCH2OCH3, CH2OCH2CH2OCH3, ili C(0)R<1>;SR<3>, pri čemu je R<3>odabran od CH2OCH3, CH2OCH2CH2OCH3, CH2OCH2CH(CH3)2,CH2NHC(0)CH3, ili SR<1>; OM ili SM, pri čemu je M odabran od Li, Na, K, Mg, ili Ca; AY<1>je halogen, ili je A odabran od NR<1>ili O, i Y<1>je odabran odR<1>;CR<4>3; NR<4>2; OR<4>;ili SR<4>; pri čemu je n ceo broj od 0 do 8, m je ceo broj od 1 do
8, Z<1>je nezavisno odabran od CR<1>ili N, Z<2>je nezavisno odabran od CR<1>2, NR<1>, O, ili S, pod uslovom da dva O ili S atoma nisu locirani susedno jedan prema drugom, i pod uslovom da su ne više od dva Z2 ostatka NR1; R4 je u svakom pojavljivanju nezavisno odabran od u normalnom nizu ili račvastog alkila, cikloalkila, cikloalkenila, cikloalkadienila, alkenila, alkinila, aralkila, aralkenila, aralkinila, heteroalkila, alkoksi, akliltio, alkilamino, ili dialkilamino, od kojih svaki sadrži do 10 atoma ugljenika, -H, aril, heteroaril, ariloksi, ariltio, halogen, amino, njihove NR<1>2-supstituisane derivate, njihove OR<1->supstituisane derivate; njihove SR<1->supstituisane derivate; ili njihove halogen-supstituisane derivate; i DY2 je halogen, ili je D odabran od NR<1>ili O gde je R<1>definisan kao gore, i Y2 je odabran od R<1>, ili pri čemu jeZ<1>nezavisno odabran od N ili CR<4>aZ2je nezavisno odabran kako je to gore definisano, pod uslovom da dva O ili S atoma nisu locirani susedno jedan drugom, i pod uslovom da su ne više od dvaZ<2>ostatka NR<1>.;67. Profil ekspresije baze podataka prema Zahtevu 66,naznačen time,što dalje sadrži triazin jedinjenje odabrano od: N-Cikloheptil-N'-metil-N'-(1-metil-piperidin-4-il)-N"-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; N-Cikloheptil-N'-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-N"-metil-N"-(1-metilpiperidin-4-il)-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; [4-(4-Benzil-piperazin-1-il)-6-morfolin-4-il-[1,3,5]triazin-2-il]-(4-metoksi-fenil)-amin; N-Cikloheptil-6-morfolin-4-ili-N'-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4-diamin; N-Cikloheptil-N'-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-6-morfolin-4-il-[1,3,5]triazin-2,4-diamin; N-Cikloheptil-6-morfolin-4-ili-N'-fenil-[1,3,5]triazin-2,4-diamin; N-Cikloheptil-N'-(4-metoksi-fenil)-6-morfolin-4-il-[1,3,5]triazin-2,4-diamin; N-Benzil-N'-cikloheptil-N"-(4-metoksi-fenil)-N-metil-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; N-(2-[1,3]Dioksolan-2-il-etil)-N,-metil-N<*->(1-metil-piperidin-4-il)-N"-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; N-Ciklopropil-N'-metil-N'-(1-metil-piperidin-4-il)-N"-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin, ili bilo koju njihovu kombinaciju.
68. Postupak lečenja inflamacijom posredovanih bolesti kod čoveka ili životinje,naznačen time,što se sastoji od davanja čoveku ili životinji terapeutski efikasne količine sastava koji sadrži triazin jedinjenje odabrano od: N-Cikloheptil-N'-metil-N'-(1-metil-piperidin-4-il)-N"-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; N-Cikloheptil-N'-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-N"-metil-N"-(1-metilpiperidin-4-il)-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; [4-(4-Benzil-piperazin-1-il)-6-morfolin-4-il-[1,3,5]triazin-2-il]-(4-metoksi-fenil)-amin; N-Cikloheptil-6-morfolin-4-ili-N'-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4-diamin; N-Cikloheptil-N'-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-6-morfolin-4-il-[1,3,5]triazin-2,4-diamin; N-Cikloheptil-6-morfolin-4-ili-N'-fenil-[1,3,5]triazin-2,4-diamin; N-Cikloheptil-N'-(4-metoksi-fenil)-6-morfolin-4-il-[1,3,5]triazin-2,4-diamin; N-Benzil-N'-cikloheptil-N"-(4-metoksi-fenil)-N-metil-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; N-(2-[1,3]Dioksolan-2-il-etil)-N'-metil-N'-(1-metil-piperidin-4-il)-N"-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; N-Ciklopropil-N'-metil-N'-(1-metil-piperidin-4-il)-N"-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin, ili bilo koju njihovu kombinaciju.
69. Postupak prema Zahtevu 37,naznačen time,što je jedinjenje prisutno u sastavu u količini efikasnoj pošto je dato u dnevnoj dozi, dnevnoj pod-dozi, ili bilo kojoj njihovoj frakciji čoveku ili životinji da se umanje dejstva bolesti ili da se modulira glukozidaza enzim.
70. Postupak prema Zahtevu 39,naznačen time,što je jedinjenje prisutno u sastavu u količini efikasnoj pošto je dato u dnevnoj dozi, dnevnoj pod-dozi, ili bilo kojoj njihovoj frakciji čoveku ili životinji da se umanje dejstva neželjene ćelijske proliferacije.
71. Postupak prema Zahtevu 37,naznačen time,što je jedinjenje prisutno u sastavu u količini efikasnoj pošto je dato u dnevnoj dozi, dnevnoj pod-dozi, ili bilo kojoj njihovoj frakciji čoveku ili životinji da se modulira glikozidaza enzim.
72. Postupak prema Zahtevu 37,naznačen time,što je jedinjenje prisutno u sastavu u količini efikasnoj pošto je dato u dnevnoj dozi, dnevnoj pod-dozi, ili bilo kojoj njihovoj frakciji čoveku ili životinji da se umanje dejstva inflamacijom posredovanih bolesti.
73. Postupak prema Zahtevu 37,naznačen time,što je jedinjenje prisutno u sastavu u količini efikasnoj pošto je dato u dnevnoj dozi, dnevnoj pod-dozi, ili bilo kojoj njihovoj frakciji čoveku ili životinji da se umanje dejstva hiperproliferativne bolesti.
74. Postupak prema Zahtevu 39,naznačen time,što se jedinjenje dalje sadrži: N-Ciklohepti!-N,-metil-N'-(1-metil-piperidin-4-il)-N''-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; N-Cikloheptil-N'-(3-fluoro-4-metoksi-feni!)-N"-metil-N"-(1-metil-piperidin-4-il)-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; ili njihova kombinacija.
75. Postupak lečenja neželjene ćelijske proliferacije kod čoveka ili životinje,naznačen time,što se sastoji od davanje čoveku ili životinji terapeutski efikasne količine sastava koji sadrži triazin jedinjenje odabrano od: N-Cikloheptil-N'-metil-N'-(1-metil-piperidin-4-il)-N"-naftalen-2-il-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; N-Cikloheptil-N'-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)-N"-metil-N"-(1-metil-piperidin-4-il)-[1,3,5]triazin-2,4,6-triamin; ili njihova kombinacija.
YU34004A 2001-09-21 2002-09-23 Postupci i sastavi novih triazin jedinjenja RS34004A (sr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US32414701P 2001-09-21 2001-09-21
PCT/US2002/030177 WO2003024926A2 (en) 2001-09-21 2002-09-23 Methods and compositions of novel triazine compounds

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS34004A true RS34004A (sr) 2006-10-27

Family

ID=23262298

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
YU34004A RS34004A (sr) 2001-09-21 2002-09-23 Postupci i sastavi novih triazin jedinjenja

Country Status (16)

Country Link
EP (1) EP1436266A4 (sr)
JP (1) JP2005511509A (sr)
KR (1) KR20040088457A (sr)
CN (1) CN1578773A (sr)
BR (1) BR0212895A (sr)
CA (1) CA2461074A1 (sr)
EA (1) EA009728B1 (sr)
IL (1) IL160984A0 (sr)
IS (1) IS7190A (sr)
MX (1) MXPA04002680A (sr)
NO (1) NO20041187L (sr)
NZ (1) NZ532349A (sr)
PL (1) PL369600A1 (sr)
RS (1) RS34004A (sr)
WO (1) WO2003024926A2 (sr)
ZA (1) ZA200403009B (sr)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7163943B2 (en) 2001-09-21 2007-01-16 Reddy Us Therapeutics, Inc. Methods and compositions of novel triazine compounds
US7132423B2 (en) 2001-09-21 2006-11-07 Reddy Us Therapeutics, Inc. Methods and compositions of novel triazine compounds
US7173032B2 (en) 2001-09-21 2007-02-06 Reddy Us Therapeutics, Inc. Methods and compositions of novel triazine compounds
US7112587B2 (en) 2001-09-21 2006-09-26 Reddy Us Therapeutics, Inc. Methods and compositions of novel triazine compounds
US7169785B2 (en) 2001-09-21 2007-01-30 Reddy Us Therapeutics, Inc. Methods and compositions of novel triazine compounds
MXPA04007590A (es) 2002-02-05 2004-12-06 Yamanouchi Pharma Co Ltd Derivado de 2,4,6-triamino-1,3,5-triacina.
AU2003253735A1 (en) * 2002-06-25 2004-01-06 The Center For Blood Research, Inc. Vacuolins
JP2006528640A (ja) * 2003-07-22 2006-12-21 ニューロジェン・コーポレーション 置換ピリジン−２−イルアミン類縁体
CN1629157A (zh) * 2003-12-19 2005-06-22 中国科学院上海药物研究所 哌嗪三嗪类化合物、其制备方法及药物组合物
US7335770B2 (en) 2004-03-24 2008-02-26 Reddy U5 Therapeutics, Inc. Triazine compounds and their analogs, compositions, and methods
US20100256160A1 (en) * 2006-11-03 2010-10-07 Nerviano Medical Sciences S.R.L. Method of administering an antitumor compound
KR101314869B1 (ko) * 2010-07-29 2013-10-04 광주과학기술원 트리아진계 화합물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 예방 또는 치료용 약제학적 조성물
CA2819333A1 (en) * 2010-11-29 2012-06-07 Galleon Pharmaceuticals, Inc. Novel compounds as respiratory stimulants for treatment of breathing control disorders or diseases
US20120295911A1 (en) 2010-11-29 2012-11-22 Galleon Pharmaceuticals, Inc. Novel Compounds and Compositions for Treatment of Breathing Control Disorders or Diseases
AU2016379444B2 (en) * 2015-12-24 2021-04-29 The Regents Of The University Of California CFTR regulators and methods of use thereof
KR20200044873A (ko) 2017-08-24 2020-04-29 더 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아 안구 제약학적 조성물

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2083568C1 (ru) * 1994-05-05 1997-07-10 Кубанский государственный аграрный университет Соли триазинкарбоновых кислот и средство для предпосевной обработки семян сельскохозяйственных культур
DE19531084A1 (de) * 1995-08-24 1997-02-27 Hoechst Schering Agrevo Gmbh 2,4-Diamino-1,3,5-triazine, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung als Herbizide und Pflanzenwachstumsregulatoren
PT1037886E (pt) * 1997-12-12 2003-09-30 Abbott Lab Inibidores de angiogenese de triazina
EP0945447A1 (en) * 1998-03-27 1999-09-29 Janssen Pharmaceutica N.V. Trisubstituted 1,3,5-triazine derivatives for treatment of HIV infections
JP2003519143A (ja) * 1999-12-28 2003-06-17 ファーマコピーア，インコーポレーティッド ピリミジン及びトリアジン系キナーゼ阻害剤
AU2002216650A1 (en) * 2000-10-31 2002-05-15 Lynn Bonham Triazine derivatives as lpaat-b inhibitors and uses thereof

Also Published As

Publication number Publication date
EP1436266A4 (en) 2004-12-22
JP2005511509A (ja) 2005-04-28
WO2003024926A3 (en) 2003-12-11
IS7190A (is) 2004-03-19
IL160984A0 (en) 2004-08-31
EA009728B1 (ru) 2008-02-28
EA200400464A1 (ru) 2005-02-24
MXPA04002680A (es) 2004-06-18
NO20041187L (no) 2004-05-19
KR20040088457A (ko) 2004-10-16
PL369600A1 (en) 2005-05-02
WO2003024926A2 (en) 2003-03-27
EP1436266A2 (en) 2004-07-14
CA2461074A1 (en) 2003-03-27
NZ532349A (en) 2007-02-23
ZA200403009B (en) 2007-12-27
CN1578773A (zh) 2005-02-09
BR0212895A (pt) 2005-05-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US7173032B2 (en) Methods and compositions of novel triazine compounds
US7169784B2 (en) Medical devices employing triazine compounds and compositions thereof
US7268134B2 (en) Medical devices employing triazine compounds and compositions thereof
US7332488B2 (en) Methods and compositions of novel triazine compounds
US7335770B2 (en) Triazine compounds and their analogs, compositions, and methods
RS34004A (sr) Postupci i sastavi novih triazin jedinjenja
US7332490B2 (en) Methods and compositions of novel triazine compounds
AU2002362314A1 (en) Methods and compositions of novel triazine compounds