RS20060054A

RS20060054A - Supstituisana furohromenska jedinjenja protivupalnog delovanja

Info

Publication number: RS20060054A
Application number: YUP-2006/0054A
Authority: RS
Inventors: Milan Mesić; Mladen Merćep; Stribor Marković; Ivaylo Jivkov Elenkov; Ivica Malnar; Anita Filipović; Lidija Šimičić; Klonkay Andreja Čempuh; Boška Hrvačić
Original assignee: Pliva - Istraživački Institut D.O.O.,
Priority date: 2003-07-25
Filing date: 2004-07-22
Publication date: 2008-04-04
Also published as: IS8269A; US20060148890A1; CA2533584A1; CN1839138A; WO2005010006A1; HRP20030603A2; EP1648901A1; US7208518B2; JP2006528619A

Abstract

Pronalazak se odnosi na jedinjenja formule (I), uključujući sve njihove stereoizomere i tautomere, na njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvate, na postupke ireaktivne intermedijare za njihovo dobijanje te na njihovu primenu u profilaksi i lečenju astme i drugih upalnih obolenja i/ili stanja kod ljudi.

Description

SUPSTITUISANA FUROHROMENSKA JEDINJENJA PROTIVUPALNOG

DELOVANJA

Oblast tehnike

IPC: C07D 311/04; C07D 311/56; A61K 31/37

Ovaj pronalazak se odnosi na nova jedinjenja formule (I),

uključujući sve njihove stereoizomere i tautomere, na njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvate; na postupke i reaktivne intermedijare za njihovo dobijanje te na njihovo terapijsko delovanje i primenu u profilaksi i liječenju astme i drugih obolenja i/ili stanja koja su posledica poremećaja imunološkog sistema kod ljudi.

Stanje tehnike

Astma je hronično, upalno obolenje respiratornih puteva kod ljudi. Klinički, kod preosetljivih osoba upala prouzrokuje povremene napade kašlja, otežano disanje, piskanje, stezanje i bol u grudima. Upala čini respiratorne puteve osetljivima na iritacije izazvane alergenima, hemijskim iritantima, duvanskim dimom, hladnim vazduhom i naporom. Izloženi tim iritacijama, respiratorni putevi postaju edematozni,

suženi, ispunjeni sluzi i preosetljivi.

Patogeneza astme je složena i uključuje interakciju upalnih ćelija, medijatora te tkiva i ćelija respiratornih puteva. U astmatskom procesu razlikujemo ranu i kasnu fazu odgovora. Alergijska obolenja, kao i astma izazvana alergenima, okarakterisana je sintezom specifičnog tipa IgE antitela. Odmah nakon inhalacije alergena, kompleksi alergena i IgE specifičnih za alergen vežu se za visokoafinitetni IgE receptor (Fes receptor tip I) prisutan na bazofilima, mastocitima i eozinofilima. Vezivanjem za receptor dolazi do aktivacije kaskade prenosa signala koja rezultira:

1. de novosintezom proupalnih gena (npr. interleukin-4 i interleukin-5)

2. egzocitozom sadržaja citoplazmatskih granula - degranulacijom

Granule sadrže upalne medijatore poput histamina, serotonina, leukotriena C4, D4 i E4, te proteina poput glavnog osnovnog proteina te mijeloperoksidaze. Ti upalni medijatori učestvuju u procesima vazodilatacije, bronhokonstrikcije, pokretanja i kontrole upalnog procesa i aktivacije ćelija te oštećenja upaljenog tkiva. Ovi procesi oblikuju rani astmatični odgovor. Inhibicija degranulacije može sprečiti simptome i zaustaviti pokretanje upale, što je dokazano kliničkom primenom inhibitora degranulacije (natrij um hromoglikata, nedohromil natrij uma i ketotifena).

Kasni astmatični odgovor uključuje trajnu opstrukciju vazdušnih prohoda, hiperreaktivnost bronhije i razvoj upalnih promena koje uključuju nakupljanje neutrofila, eozinofila, limfocita i monocita/makrofaga u respiratornom sistemu. Do nakupljanja upalnih ćelija dolazi zbog usklađene interakcije limfokina (TNF-a, IL-4, 1L-5), adhezijskih molekula na površini leukocita (integrini) i endotelnih ćelija

(selektini), te hemokina (eotaksin, RANTES). Uloga i važnost T limfocita u astmi potvrđeni su nalazom povećanog broja aktiviranih CD4+ T ćelija u bronhoalveolarnom ispirku i bronhijalnim biopsatima pacijenata obolelih od astme. Dve subpopulacije CD4+ ćelija razlikuju se po profilu citokina koje luče. Th 1 ćelije luče IL-2, IL-3, GM-CSF, INF-y. Aktivacija Th 1 ćelija važna je u obrani domaćina protiv intracelularnih organizama, virusa i neoplazmi. Istraživanja su pokazala da Th 2 ćelijski odgovor prevladava u astmi, sa povećanom ekspresijom IL-5 koji je važan u nastanku eozinofilne infiltracije tipične za alergijsku upalu.

Morfološke promene koje se događaju u astmi uključuju infiltraciju bronhije upalnim ćelijama (mastociti, T limfociti i eozinofili su ključne izvršne ćelije), začepljenje respiratornih puteva sekretom, intersticijski edem i povećanu propustljivost mikrocirkulacije. Na osnovu patohistoloških nalaza došlo se do saznanja da je eozinofilna infiltracija specifična i da diferencira astmu od drugih tipova upale.

U kontroli astme postoje dva tipa lekova, simptomatski i osnovni. Simptomatski lekovi uključuju bronhodilatatore kratkog delovanja kao što su p2-agonisti, antiholinergici, teofilin, koji brzo relaksiraju kontrakovane respiratorne puteve i ublažuju akutne simptome. Osnovni lekovi uključuju protivupalne lekove i bronhodilatatore dugog delovanja. Protivupalni lekovi ublažuju i sprečavaju upalnu reakciju, u njih ubrajamo inhalacijske kortikosteroide, sistemske kortikosteroide, inhalacije natrij um hromoglikata i natrij um nedohromila.

Steroidna antiinflamatorna jedinjenja još uvijek se smatraju najefikasnijim u tretiranju upalnih obolenja i stanja kao što je astma. Uz dobru potentnost i efikasnost ove vrste lekova idu i brojni neželjeni učinci, kao što su poremećaj metabolizma ugljohidrata, resorpcija kalcijuma, lučenja endogenih kortikosteroida te fiziološke funkcije hipofize, kore nadbubrežne žlezde i timusa. U literaturi (WO 94/13690; 94/14834; 92/13872 i 92/13873) opisani su takozvani "soft" steroidi ili hidrolizabilni kortikosteroidi sa lokalnim delovanjem. Njihov je sistemski, neželjeni efekat, smanjen zbog nestabilnosti "soft" steroida u serumu, pri čemu se aktivni steroid brzo hidrolizuje do inaktivnog oblika. Ipak, još uvijek nije pronađen steroid bez loših popratnih pojava u dugotrajnoj primeni.

Neka jedinjenja kumarinskog reda (US patenti 4,200,577; 4,263,299; 4,731,375; 5,428,038) pokazuju antialergijsko delovanje u prevenciji i tretiranju različitih alergijskih oboljenja kao što su: alergijska astma, alergijski dermatitis, alergijski rinitis ili enteritis, alergijski konjuktivitis ili alergijski ekcem.

Poznati su takođe kompleksniji dimerni i tetramerni derivati hidroksikumarina asimetrično povezani sa centralnim alkilnim ili arilnim linkerom koji pokazuju anti-HIV delovanje (Zhao, H. et al.J. Med. Chem.1997,40,242-249). Slično anti-HIV delovanje je takođe pokazano sa nekoliko proizvoda kondenzacije hidroksikumarina koji posjeduju više od jedne hidroksi grupe po kumarinskoj jedinici sa aromatičnim ili alifatičnim mono- ili dialdehidima (U.S. patent 6,100,409 i WO 03/029237).

Tehničko rešenje

Najsličnija jedinjenjama koja su predmet ovog patenta su ona opisana u WO 03/029237, a odnose se na 3-(4,7-dihidroksi-2-okso-2//-hromen-3-il)-7-hidroksi-2,3-dihidro-furo[3,2-c]hromen-4-one, gde je C/2 položaj furanskog prstena supstituisan metoksi ili etoksi grupom. Spomenuta jedinjenja su dobijena kondenzacijom odgovarajućih hidroksikumarina i glioksala u alkoholno-vodenom medijumu na visokim temperaturama, kod čega tokom reakcije dolazi do istovremenog vezivanja alkohola te formiranja odgovarajućeg alkoksi supstituenta.

Izvođenjem reakcije kondenzacije hidroksikumarina i glioksala u reakcijskom medijumu bez prisustva alkohola onemogućeno je neželjeno formiranje alkoksi supstituenata na C/2 položaju furanskog prstena te se na tom položaju formira hidroksi supstituent kao bitni konstitutivni deo jedinjenja formule (I) koji su predmet ovog pronalaska.

Prema našim saznanjima i utvrđenom stanju tehnike, jedinjenja koja u furanskom prstenu na C/2 položaju imaju hidroksi grupu, a kumarinski su prsteni uz hidroksi grupe, ili umesto njih, supstituisani drugim supstituentima kao npr. alkilnim, alkoksilnim grupama ili halogenim atomima, a koji su predstavljeni formulom (I), njihove farmaceutski prihvatljive soli, te farmaceutski preparati koji ih uključuju u svoj sastav nisu do danas opisani. Posebno nisu opisana jedinjenja kod kojih su kumarinski prsteni kondenzovani drugim jednostavnim ili supstituisanim aromatičnim ili heterocikličnim prstenima koji su takođe predstavljeni formulom (I) i predmet su ovog pronalaska. Isto tako jedinjenja koja su predmet ovog pronalaska nisu opisana kao supstance snažnog protivupalnog delovanja, odnosno kao efikasna sredstva u profilaksi i lečenju astme i drugih upalnih obolenja i stanja.

Primenjeniin vitroiin vivomodeli dobro oslikavaju patofiziološka zbivanja prisutna u astmi te je za očekivati da će supstance ispitivane u ovim modelima biti takođe efikasne i u terapiji humanog obolenja.

Kratak opis pronalaska

Predmeti ovog pronalaska su:

a) jedinjenja formule (I); b) postupci i reaktivni intermedijari za njihovu dobijanje; c) smeše dobijenih jedinjenja u količinama dovoljnim za suzbijanje upalnih procesa ili stanja; d) metode primene pripremljenih jedinjenja u tretiranju poremećaja ili stanja izazvanih upalnim procesima.

Detaljan opis pronalaska

Navedeni pronalazak se prvenstveno odnosi na nova jedinjenja formule (I)

gde

A i B zajedno sa C-atomima za koji su vezani predstavljaju aromatični deo, koji može imati jedan, dva ili više identičnih ili različitih supstituenata, a koji mogu biti halogen, Ci-C4-alkil, C2-C4-alkenil, C2-C4-alkinil, halo-Ci-C4-alkil, hidroksi, Ci-C4-alkoksi, trifluorometoksi, Ci-C4-alkanoil, amino, amino-Ci-C4-alkil, vV-(Ci-C4-alkil)amino,7VjA^-di(Ci-C4-alkil)amino,sulfanil, Ci-C4-alkilsulfanil, sulfo, Ci-C4-alkilsulfo, sulfino, Ci-C4-alkilsulfino, karboksi, Ci-C4-alkoksikarbonil, cijano, nitro;

ili koji mogu biti dalje kondenzovani sa po potrebi supstituisanim heteroaromatičnim delovima ili heterociklima.

U kontekstu predstavljenog pronalaska, opšti izrazi koji se koriste uglavnom imaju sledeće značenje: Izraz "halogen" odnosi se na atom halogena koji može biti: fluor, hlor, brom ili jod. Izraz "alkil" odnosi se na alkil grupe koje imaju značenje alkana iz kojih su izvedeni radikali koji mogu biti ravnolančani, razgranati ili ciklički ili pak kombinacija ravnolančanih i cikličkih te razgranatih i cikličkih. Poželjni ravnolančani ili razgranati alkili su npr. metil, etil, propil, izopropil, butil, sec-butil i ferc-butil. Poželjni ciklički alkili su npr. ciklopentil ili cikloheksil. Alkil može biti po potrebi dodatno supstituisan sa jednim, dva, tri ili više supstituenata. Takvi supstituenti mogu biti atom halogena (prvenstveno fluor ili hlor), hidroksi, Ci-C4-alkoksi (prvenstveno metoksi ili etoksi), sulfanil, C]-C4-alkilsulfanil (prvenstveno metilsulfanil ili etilsulfanil), amino,7V-(Ci-C4)alkilamino (prvenstveno jV-metilamino ili iV-etilamino), A^,7V-di(Ci-C4-alkil)amino (prvenstveno dimetilamino ili dietilamino), sulfo, Ci-C4-alkilsulfo (prvenstveno metilsulfo ili etilsulfo), sulfino, Ci-C4-alkilsulfino (prvenstveno metilsulfino).

Izraz "alkenil" odnosi se na alkenil grupe koje imaju značenje ugljovodičnih radikala koji mogu biti ravnolančani, razgranati ili ciklički ili su pak kombinacija ravnolančanih i cikličkih ili razgranatih i cikličkih, a imaju najmanje jednu ugljenik-ugljenik dvostruku vezu. Najčešći alkenili su etenil, propenil, butenil ili cikloheksenil. Alkenil može biti po potrebi dodatno supstituisan sa jednim, dva ili tri atoma halogena. Takvi supstituenti mogu npr. biti 2-hloretenil, 1,2-dihloretenil ili 2-brompropen-1 -il.

Izraz "alkinil" odnosi se na alkinil grupe koje imaju značenje ugljovodičnih radikala koji su ravnolančani ili razgranati i sadrže najmanje jednu, a najviše dve trostruke ugljenik-ugljenik veze. Najčešći alkinili su npr. etinil, propinil ili butinil.

Izraz "alkoksi" odnosi se na ravnolančane ili razgranate lance alkoksi grupe. Primeri takvih grupa su metoksi, etoksi, propoksi, prop-2-oksi, butoksi, but-2-oksi ili metilprop-2-oksi.

Izraz "aromatični deo" odnosi se na radikale aromatičnog prstena npr. benzena, kao i na druge kondenzovane aromatične prstene. Aromatični deo sadrži jedan prsten sa najmanje 6 ugljenikovih atoma ili dva prstena sa ukupno 10 ugljenikovih atoma te sa naizmeničnim dvostrukim (rezonantnim) vezama između ugljenikovih atoma. Najčešće korišteni aromati su npr. benzenski ili naftalenski prsten. Aromatične grupe su vezane na A i B mesta ostatka molekule preko bilo koja dva susedna raspoloživa ugljenikova atoma. Pod izrazom aromatični deo se takođe podrazumeva benzenski prsten kondenzovan sa po potrebi supstituisanim cikloalkanima, najčešće cikloheksanom.

Izraz "heteroaromatični deo" odnosi se na grupe koje imaju značenje aromatičnih i delimično aromatičnih grupa monocikličkog ili bicikličkog prstena sa 4 do 12 atoma od kojih je najmanje jedan heteroatom kao što su O, S ili N pri čemu su dva susedna raspoloživa ugljenikova atoma mesto vezivanja grupe na A i B mesta ostatka molekula. Primeri ovog tipa su prsteni tiofena, pirola, imidazola, piridina, oksazola, tiazola, pirazola, tetrazola, pirimidina, pirazina, hinolina ili triazina.

Izraz "heterocikl" odnosi se na petočlane ili šestočlane potpuno zasićene ili delomično nezasićene heterocikličke grupe koje sadrže najmanje jedan heteroatom kao što su 0, S ili N pri čemu su dva susedna raspoloživa ugljenikova atoma mesto vezivanja grupe na A i B mesta ostatka molekula. Najčešći primeri su morfolinil, piperidinil, piperazinil, pirolidinil, pirazinil ili imidazolil.

Izraz "alkanoil" grupa odnosi sc na ravnolančane lance acil grupe kao što su npr. formil, acetil ili propanoil.

Izraz "aroil" grupa se odnosi na aromatične acil grupe kao što je npr. benzoil.

Heteroaromatični deo ili heterocikl može biti po potrebi dodatno supstituisani sa jednim, dva ili više supstituenta. Supstituenti mogu biti halogen (fluor, hlor, jod ili brom), Ci-C4-alkil (prvenstveno metil, etil ili izopropil), trifluorometil, cijano, nitro, hidroksi, Ci-C4-alkoksi (prvenstveno metoksi ili etoksi), Ci-C4-alkiloksikarbonil (prvenstveno metiloksikarbonil), sulfanil, Ci-C4-alkilsulfanil (prvenstveno metilsulfanil ili etilsulfanil), amino, N-(Ci-C4)alkilamino (prvenstveno A-metilamino ili iV-etilamino), A<r>,Ar-di(Ci-C4-alkil)amino (prvenstveno TV-dimetilamino iliN, N-dietilamino), sulfo, Ci-C4-alkilsulfo (prvenstveno metilsulfo ili etilsulfo), sulfino, Ci-C4-alkilsulfino (prvenstveno metilsulfino).

Dalji predmet ovog pronalaska se odnosi na farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja formule (I). Jedinjenja koji su predmet ovog pronalaska sadrže barem jednu kiselu hidroksilnu grupu na kumarinskom jezgri i zbog toga mogu obrazovati soli sa farmaceutski prihvatljivim bazama. Primeri takvih soli formiranih na hidroksilnom supstituentu su npr. aluminij umove soli, odgovarajuće soli alkalnih metala kao natrij um ili kalij um, zatim soli zemnoalkalnih metala, npr. kalcij uma ili magnezij um, farmaceutski prihvatljive soli prelaznih metala, kao što je, cink ili bakar, soli sa amonijakom ili nižim organskim aminima kao što su ciklički amini, mono-, di- ili trisupstituisani niži alkilamini, zatim niži hidroksialkilamini, kao npr. niži mono-, di-ili trihidroksialkilamini, niži (hidroksialkil)alkilamini ili niži polihidroksialkilamini te soli sa aminokiselinama. Primeri cikličnih amina su, morfolin, tiomorfolin, piperidin ili pirolidin. pogodni niži monoalkilamini su, npr., etilamin i te/r-butilamin, pogodni niži dialkilamini su, npr., dietilamin i diizopropilamin, a pogodni niži trialkilamini su, npr., trimetilamin i trietilamin. Odgovarajući niži hidroksialkilamini su, npr., mono-, di- i trietanolamin; niži (hidroksialkil)alkilamini su, npr., Af-dimetilaminoetanol i jV-dietilaminoetanol. Aminokiseline su, npr., lizin, arginin, metilglutamin, alanin ili serin. Ove je soli moguće dobitiin situza vreme finalne izolacije i prečišćavanja jedinjenja predstavljenih ovim pronalaskom ili odvojeno u reakciji sa odgovarajućom neorganskom ili organskom bazom načinima poznatim onima koji su vesti u toj oblasti.

Prefiks "niži" označava lanac do, uključujući, sedam, a osobito do, uključujući, četiri ugljenikova atoma. Niži alkili su tako, npr., «-propil, izopropil, «-butil, izobutil,sec-butil, terobutil, «-pentil, neopentil, «-heksil ili «-heptil, a najčešće etil ili metil.

Obzirom na usku povezanost između slobodnog oblika i oblika soli jedinjenja prikazanih formulom (I), u predstavljenom se pronalasku podrazumeva da su slobodni oblici jedinjenja prikazanih formulom (I) i njihove soli identični oblici i da je u odgovarajućem kontekstu umesno slobodnih oblika jedinjenja navedenih ovim pronalaskom i njihove odgovarajuće soli smatraju istoznačnima.

Ovaj pronalazak obuhvata takođe solvate (najčešće hidrati) koji se mogu dobiti jedinjenjima formule (I) ili njihovim solima.

Jedinjenja prikazana formulom (I) i njihove soli mogu postojati u različitim fizičkim oblicima (npr. u različitim kristalnim oblicima) i predstavljeni pronalazak obuhvata sve fizikalne oblike (npr. sve kristalne oblike) jedinjenja prikazanih formulom (I) i njihove smeše.

Ovaj pronalazak obuhvata sve prolek oblike jedinjenja formule (I), tj. jedinjenja koji nakonin vivoprimene na sisare u organizmu oslobađaju aktivnu lekovitu supstancu formule (I). Prolek oblici mogu se dobiti modifikovanjem bilo koje funkcionalne grupe prisutne ujedinjenju formule (I) na takav način da se modifikovana grupa može laganoin vivoraskinuti oslobađajući kod toga polazno aktivno jedinjenje. Hidroksilna

grupa je pogodno mesto za formiranje prolek oblika takvih jedinjenja.

Jedinjenja koja su predmet ovog pronalaska mogu postojati u različitim izomernim formama, što podrazumeva različite tautomerne forme, ali takođe mogu obrazovati i različite geometrijske izomere, odnosno stereoizomere. Izomeri koji se razlikuju samo po smeštaju atoma u prostoru oko asimetričnog centra (hiralni centar) nazvani su "stereoizomeri". Dva stereoizomera koji se ne odnose kao predmet i lik u ogledalu nazivaju se "dijastereomeri", dok se oni koji se odnose kao predmet i lik u ogledalu nazivaju "enantiomeri". Svaki enantiomer se može okarakterisati određivanjem apsolutne konfiguracije asimetričnog centra primenom Cahn-Ingold-Prelog pravila prioriteta te na taj način okarakterisati kao R- ili S- izomer. Drugi način identifikacije stereoizomera jeste merenje skretanja ravni polarizovane svetlosti koja prolazi kroz molekul i to kao desnorotirajući (+)-izomer ili levorotirajući(-)-izomer. Hiralna jedinjenja mogu postojati kao pojedinačni enantiomeri ili kao smeša enantiomera. Smeša koja sadrži jednake odnose enantiomera naziva se "racemska smeša". Ovaj pronalazak se odnosi na sve stereoizomere koji se mogu prikazati formulom (I) bili oni izolovani kao pojedinačni enantiomeri, bilo da se nalaze u racemskoj ili nekoj drugoj smeši. Metode određivanja stereohemijske konfiguracije i separacije stereoizomera su dobro poznate iz literature.

Jedinjenja formule (I) mogu takođe obrazovati dva ili više strukturnih izomera koji se nalaze u ravnotežnom stanju, a mogu biti formirani kao posledica tautomerije. Najčešći su lančani izomeri, ali su poznati i lanac-prsten izomeri. Takvi se izomeri (tautomeri) zbog dinamičke ravnoteže lagano mogu prevesti iz jedne izomerne forme u drugu. Koja od izomernih formi će prevladati u smeši zavisi od vrste jedinjenja, o tome da li se jedinjenje nalazi u slobodnom obliku ili u obliku nekih od njegovih soli, o vrsti soli, o rastvaraču u kojem je jedinjenje rastvoreno kao i o pH vrednosti rastvora. U ovom pronalasku pod izrazom jedinjenja formule (I) podrazumevaju se takođe sve tautomerne forme bile one lančane ili cikličke, izolovane pojedinačno ili u međusobnoj ravnotežnoj smeši različitih proporcija.

Dalji predmet ovog pronalaska odnosi se na postupak dobijanja jedinjenja formule (I) i njihovih soli, a sastoji se od kondenzacije jedinjenja formule (II): ili njihovih soli sa glioksalom formule (III)

u vodeno-organskom medijumu i/ili, po želji, prevođenjem nastalih slobodnih jedinjenja prikazanih formulom (I), a koji imaju takva svojstva da mogu postojati i u obliku soli i/ili, po želji, prevođenjem nastalih soli u slobodna jedinjenja ili u druge soli.

Reakcije se baziraju na izmenjenom postupku opisanom u EP 0906909, a prvenstveno se izvodi u prisustvu rastvarača inertnog na korišćenje hemijskih reagenasa. Medu takve rastvarača spadaju aromatični rastvarači kao npr. toluen, ksilen ili dipolarni aprotični rastvarači kao npr. alifatski ili cikloalifatski etri, dialkilamidi karboksilnih kiselina (npr. ^A^-dimetilformamid) ili dimetilsulfoksid. Posebno su pogodni rastvarači niske tačke ključanja koja se mešaju sa vodom kao npr. smeša acetonitrila i vode. U reakcijiama se koristi komercijalno dostupan glioksal u vidu 40 %-tnog vodenog rastvarača, a koristi se u ekvimolarnoj količini ili poželjno u znatnom višku u odnosu na hidroksikumarin (najpovoljniji odnos je 2 : 1). Umesto glioksala moguće je koristiti i njegove derivate kao što je 2,3-dihidroksi-l,4-dioksan. Reakcije se vrše na temperaturama od sobne do 90 °C (najbolje na temperaturi ključanja reakcijske smeše). Reakcije traju od 1 do 24 sata što zavisi od temperature reakcijske smeše (u slučaju smeše acetonitrila i vode dovoljno je 3-6 sati). Najčešće se hlađenjem reakcijske smeše istaloži proizvod, koji se zatim lagano može odvojiti odsisavanjem i prečistiti ispiranjem i sušenjem. Mogu se koristiti i druge metode izolacije i čišćenja, koje su uobičajene u preparativnoj organskoj herniji.

Neka jedinjenja formule (II) upotrebljenih u ovom pronalasku su komercijalni proizvodi ili su ranije sintetizovani i opisani proizvodi, dok su ostali dobijeni prema postupcima opisanim za analogna jedinjenja. Tako npr. jedinjenja formule (II) je moguće pripremiti iz odgovarajućeg enamina formule (IV)

na načine koji su sami po sebi razumljivi onima koji su vešti u preparativnoj organskoj herniji i poznati iz literature, kao na primer hidrolizom u jako kiselom medijumu kao što je 50 %-tni vodeni rastvor sumporne kiseline (Desai, N. J. et al.J.

Org. Chem.1957,22,388-390) ili u 25 %-tnom vodenom rastvoru hlorovodonične kiseline (Sonn, A.Ber. 1917, 50,1292-1305). Enamin formule (IV) se može dobiti na način koji je dobro opisan u literature kao na primer kondenzacijom komercijalno dostupnih fenola sa cijanoacetatom (Sonn, A.Ber.1917,50,1292-1305) u jednom slučaju ili sa njenim alkilnim estrom, kao što je etilni estar cijanoacetata u drugom slučaju (Desai, N. J. et al.J. Org. Chem. 1957, 22, 388-390).

Postoje i druge detaljno opisane metode dobijanja različitih derivata hidroksikumarina kao npr. direktna metoda delovanjem malonske kiseline na supstituisane fenole (Buckle, D. et al.J. Med. Chem.1975,,,18,391-394) ili nešto zaobilaznije metode koje polaze od supstituisanih o-hidroksiacetofenona (Boyd, J. et al.J. Chem. Soc.1948,174-176; Hermodson, M. et al.J. Med. Chem1971,14,167-169) ili hidroksibenzoeve kiseline (Appendino, G. et al.J. Nat. Prod.1999,62,1627-1631; EP 0694257A1).

Da bi se sprečilo neželjeno učestvovanje u hemijskim reakcijama često je potrebno pre reakcije zaštititi određene reaktivne grupe kao što su neke od hidroksi grupa koje mogu biti prisutne u hidroksikumarinima, ili jednu od dve aldehidne grupe glioksala. U tu svrhu može se koristiti velik broj zaštitnih grupa (Green, T. W.; Wuts, P. G. M, Protective Groups in Organic Svnthesis, John Wiley and Sons, 1999). Njihova selekcija, upotreba i uklanjanje nakon izvedene reakcije uobičajene su metode u hemijskoj sintezi.

Soli jedinjenja formule (I) mogu se dobiti opšte poznatim postupcima kao npr. reakcijom jedinjenja formule (I) sa odgovarajućom bazom u pogodnom rastvaraču ili smeši rastvarača npr. etrima (dietiletar) ili alkoholima (etanol, propanol ili izopropanol) ili mešanjem ekvivalentnih količina reaktanata te naknadnom liofilizacijom i čišćenjem reakcijske smeše.

Ovaj pronalazak se takođe odnosi na reaktivne intermedijare koji su dobijeni u fazi pripreme jedinjenja formule (I) i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli. Takvi intermedijari mogu biti izolovani i definisani ili bez izolacije upotrebljeni u sledećoj fazi hemijske sinteze.

Dalji predmet ovog pronalaska se odnosi na primenu jedinjenja formule (I) i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli u profilaksi i lečenju obolenja i/ili stanja koja su posledica poremećaja imunološkog sistema, u prvom redu upalnih obolenja i stanja kod ljudi (posebno astme) u terapijski efikasnim količinama.

Dalji predmet ovog pronalaska se odnosi na primenu jedinjenja formule (I) i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli kao protivupalnih, antianafilaktičkih i imunomodulirajućih agenasa koji mogu biti različito primenjeni zavisno od mesta obolenja, npr. peroralno, parenteralno, perkutano, bukalno, rektalno ili inhalatorno, ako se radi o lokalnoj primeni u respiratornom sistemu.

Dalji predmet ovog pronalaska odnosi se na pripremu farmaceutskih oblika navedenih jedinjenja, koji su tako osmišljeni da se postigne optimalna bioraspoloživost aktivnih jedinjenja formule (I). Za perkutanu primenu, jedinjenja formule (I) mogu biti formulisani u obliku masti, kreme, gela ili losiona. Masti, kreme i gelovi mogu biti formulisani sa vodenom ili uljanom bazom uz dodatak odgovarajućeg emulgatora ili sredstva za želiranje ako se formulira gel. Formulacija je naročito značajna za primenu inhalacijom pri čemu jedinjenja formule (I) mogu biti u obliku aerosola pod pritiskom. Za sve oblike aerosolnih formulacija preporučuje se mikronizacija jedinjenja formule (I) koji su prethodno homogenizovani u laktozi, glukozi, višim masnim kiselinama, natrijumovoj soli dioktilsulfosukcinske kiseline ili najpoželjnije u karboksimetil celulozi, tako da najveći broj čestica bude veličine 5 um.

Za inhalacijsku formulaciju aerosol može biti pomešan sa propelentom koji služi za raspršivanje aktivne supstance.

Jedinjenja formule (I) mogu za inhalacijsku primenu biti primenjeni i u obliku suvog praha sa mikronizovanim česticama.

Odgovarajući preparati jedinjenja koji su predmet ovog pronalaska moguće je primenjivati u profilaksi i tretmanu raznih upalnih obolenja i patoloških alergijskih stanja. Primeri takvih stanja i obolenja jesu, bez ograničenja: astma, hronično opstruktivno obolenje pluća, upalna obolenja nosa kao što su alergijski rinitis, nosni polipi, dermatološke upale kao što su ekcemi, psorijaza, alergijski dermatitis, neurodermatitis, pruritis, konjuktivitis, reumatoidni artritis, obolenja creva kao što su Krohn-ova bolest, kolitis i ulcerozni kolitis, zatim insulin-ovisni dijabetes, autoimuni tiroiditis, lupus erithematosus, multipla skleroza, Ravnaudova bolest, reumatoidni spondilitis, septički artritis, poliartritis, retinitis, upalna obolenja mozga kao što su meningitis i encefalitis, stanja uzrokovana akutnom traumom kao što su ozlede mozga, miokarda i pluća, upale koje prate infekcije kao što su sepsa, glomerulonefriti s.

Jedinjenja formule (I) mogu se koristiti pojedinačno ili pak u kombinaciji sa nekim drugim komercijalnim proizvodom pogodnim za lečenje spomenutih obolenja i/ili stanja.

Jedinjenja prikazani formulom (I) imaju korisna farmakološka svojstva, potkrepljenain vitroiin vivoispitivanjima koja su navedena u nastavku predstavljenog pronalaska.

Metoda analize inhibicije degranulacije RBL-2H3 ćelija

RBL-2H3 ćelijska linija pacovske bazofilne leukemije (ATCC) koristi se za ispitivanje inhibicije degranulacije izazvane aktivacijom Fce receptora tip I, ili kalcijumskim jonoforima. RBL-2H3 ćelijska linija uzgaja se u DMEM medijumu (Invitrogen Corporation) sa 10 % fetalnog telećeg seruma (Invitrogen Corporation) pri 37 °C, 5 % CO2, 90 % relativne vlažnosti. Ćelije su zasejane u istom medijumu u 24 bunarčića, 50000 po bunarčiću i ostavljene da dostignu 80-90 % konfluentnosti.

Razblažena jedinjenja su dobijena u DMEM medijumu bez fenol crvenog (Invitrogen Corporation) u koncentracijama od 200 uM do 1 uM. Medijum je uklonjen iz ćelija i dodata su razblažena jedinjenja, osim u pozitivnu i negativnu kontrolu gde je dodat čist DMEM medijum. Nakon toga na sve bunarčiće su dodata:1. za IgE izazvanu degranulaciju putem Fes receptor a tip I,rastvor SPE-1 (dinitrofenil spefičnih IgE) antitela (Sigma) i dinitrofenil-albumina (Sigma) oba u finalnoj koncentraciji 0.5 ug/mL,2. za Ca<2+>izazvanu degranulaciju pomoću kalcijumskog jonoforarastvor A23187 (Calbiochem) finalne koncentracije 250 ng/mL,

osim u bunarčiće negativne kontrole gde je dodat čist DMEM medijum. Ćelije su inkubirane sat vremena na 37 °C, 5 % CO2, 90 % relativne vlažnosti. Svako razblaženje kao i pozitivna i negativna kontrola izvode se u triplikatu.

Supernatant (50 ixL) je prenet u duplikatu na 96 bunarčića. Na njih je dodato 100 uL 50 mM pufera natrijum citrata sa 1 mg/mL para-nitrofenil-vV-acetil-p-D-glukozaminida (Calbiochem) i inkubiran 1 sat na 37 °C. Reakcija je prekinuta sa 100 uL zasićenog rastvora natrijum karbonata. Apsorbancija je izmerena pri 405 nm. Procenat inhibicije je izražen formulom: %inh = (l-(OD405Uzorka-OD405negativne kontrole)/(OD405pozitivne kontrole-OD4o5negativne kontrole))* 100. ;Većina jedinjenja inhibira degranulaciju RBL-2H3 ćelija, a najaktivniji su se pokazali jedinjenja 6, 7, 12, 15, 17, 34, 36, 38, 40 koji pokazuju aktivnost u dozama od 100-3 uM. Ketotifen kao standard inhibira degranulaciju u koncentracijama od 200-50 uM. ;Hiperreaktivnost bronhije;Hiperreaktivnosti bronhije je izmerena metodom pletizmometrije (Buxco pletizmometar) baziranoj na razlici u pritiscima, i izvedena je na svesnim i nesputanim životinjama. Delovanje supstance na hiperreaktivnost bronhije izazvane metaholinom (Sigma) u obliku aerosola, u različitim koncentracijama, izražena je proncetima povećanja vrednosti produžene pauze (PENH, engl. enhanced pause) iznad bazne linije, koja je očitana bez holinergičnog stimulansa. ;Jedinjenje 6 je primenjenolp.na miševima, u dozi od 10 mg/kg dva dana pre provokativnog testa do kraja ispitivanja, ukupno 4 dana. Merenje hiperreaktivnosti bronhije metodom pletizmometrije je izvodeno 24 sata nakon provokativnog testa. Jedinjenje 6 statistički znatno (t-test, p<0,05) smanjuje hiperreaktivnost respiratornih puteva u odnosu na pozitivnu kontrolnu grupu pri koncentraciji metaholina od 25 mg/mL. ;Jedinjenje 36 je primenjenolp.na pacovima, u dozi od 10 mg/kg dva dana pre provokativnog testa do kraja ispitivanja, ukupno 4 dana. Merenje hiperreaktivnosti bronhije metodom pletizmometrije je izvedeno 24 sata nakon provokativnog testa. Jedinjenje statistički znatno (t-test, p<0.01) smanjuje hiperreaktivnost respiratornih puteva u odnosu na pozitivnu kontrolnu grupu pri koncentraciji metaholina od 50 mg/ml. ;POSTUPCI DOBIJANJA SA PRIMERIMA ;Navedeni pronalazak je ilustrovan sledećim primerima, koji su dati samo kao ogledni primeri i koji ni u čemu ne ograničavaju obim pronalaska. Postupci dobijanja se uglavnom vrše pri atmosferskom pritisku i pri sobnoj temperaturi. Konačni proizvod u svakom primeru okarakterisan je pomoću jedne ili više navedenih metoda: tečnom hromatografijom visokog učinka (HPLC) i/ili tečnom hromatografijom visokog učinka vezanom na maseni spektrometar (HPLC-MS) i spektroskopijom nuklearne magnetne razonance (NMR). Temperature su izražene u stepenima Celzijusa, a vreme reakcije u satima: DMSO = dimetilsulfoksid, THF = tetrahidrofuran, LDA = litijum diizopropilamid, DMF = A^A^-dimetilformamid. ;Jedinjenje 1:2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 2- okso- 2//- hrornen- 3- il")- 2, 3- dihidro- 4//furo [ 3, 2- c] hromen- 4- on ; ;Primer 1;4-Hidroksikumarin (Aldrich) (810 mg, 5.0 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (Aldrich) (575 uL; 5.0 mmol). Dodat je acetonitril (10 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 6 sati. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 670 mg (73,6 %) jedinjenja 1 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz,DMSO-^)ć/ppm: 4.84 (s, IH); 6.29 (bs, IH); 7.28-7.58 (m, 4H); 7.63-7.80 (m, 3H); 8.04( d, J=7.6 Hz, IH), 12.02 (bs, IH); ;MSm/ z:ES" (acetonitril:voda) [M-H]': 363.2. ;Jedinjenje 2: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 5- metil- 2- okso- 2/ f- hromen- 3- il)- 9- metil- 2, 3- ;dihidro- 4//- furo [ 3, 2- c1hromen- 4- on ; ;Primer 2 4-Hidroksi-5-metilkumarin (100 mg; 0.57 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (130 uL; 1.1 mmol). Dodat je acetonitril (6 raL) i reakcijska smeša je refluksovana 9 sati. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 33.5 mg (29 %) jedinjenja 2 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-</6) ć/ppm: 2.71 (s, 3H); 2.76 (s, 3H); 4.83 (d,J=3.8 Hz, IH); 6.29 (d,J=3.5 Hz, IH); 7.15-7.20 (m, 2H); 7.26(d, J=8.4 Hz, IH); 7.47 (dd, J = 8.0 Hz,J=8,0 Hz, IH); 7.53 (dd,J=8.0 Hz,J=8.0 Hz, IH); 8.26 (bs, IH); 11.7 (bs, IH); ;13C-NMR(75.4 MHz,DMSO-</6)J/ppm: 20.7; 23.4; 42.8; 101.5; 102.0; 108.6; 111.4; 114.5; 114.5; 115.0; 126.4; 127.6; 131.3; 131.9; 135.7; 137.3; 153.4; 155.3; 158.2; 160.7; 164.7; 166.2; ;MSmlz:ES<+>(acetonitrikvoda) [MH]<+>392.8. ;Jedinjenje 3: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 6- metil- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 8- metil- 2, 3- ;dihidro- 4//- furo [ 3, 2- c| hromen- 4- on ; ;Primer 3 4-Hidroksi-6-metilkumarin (88 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (3 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 3 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 84 mg (86 %) jedinjenja 3 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz,ĐMSO- d6) S/ ppm:2.38 (s, 3H); 2.41 (s, 3H); 4.78 (s, IH); 6.26 (s, IH); 7.28 (d,J =8.5 Hz, IH); 7.35 (d,J=8.2 Hz, IH); 7.45-7.52 (m, 2H); 7.55 (bs, IH); 7.82 (bs, IH); 8.20 (bs, IH); 11.90 (bs, IH); ;MSm/ z:ES" (acetonitril:voda) [M-H]": 391.1. ;Jedinjenje 4: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 7- metil- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 7- metil- 2, 3- ;dihidro- 4//- furo [ 3, 2- c"| hromen- 4- on ; ;Primer 4;4-Hidroksi-7-metilkumarin (88 mg, 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (10 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 3 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 46 mg (47 %) jedinjenja 4 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-cfe) č/ppm: 2.41 (s, 3H); 2.44 (s, 3H); 4.76 (bs, IH); 6.25 (bs, IH); 7.11-7.29 (m, 4H); 7.64 (d,J= 1. 1Hz, IH); 7.91 (d,J=1. 1 Hz, IH); 8.20 (bs, IH); 11.80 (bs, IH); ;<13>C-NMR (75.4 MHz, DMSO-^)#ppm: 21.0; 21.2; 43.7; 100.7; 100.9; 109.4; 109.6; 113.3; 116.3; 116.6; 122.3; 123.1; 125.0; 125.3; 143.1; 143.5; 152.2; 154.6; 158.5; 161.6; 162.0; 165.0; ;MSm/ z:ES" (acetonitril:voda) [M-H]": 391.0. ;Jedinjenje 5: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 8- metil- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 6- metil- 2, 3- ;dihidro- 4//- furo[ 3, 2- clhromen- 4- on ; ;Primer 5;4-Hidroksi-8-metilkumarin (88 mg, 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (3 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 3 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 80 mg (81 %) jedinjenja 5 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO- d6) ć/ppm: 2.34 (s, 3H); 2.37 (s, 3H); 4.80 (bs, IH); 6.28 (bs, IH); 7.26-7.35 (m, 2H); 7.51-7.62 (m, 3H); 7.86 (d,J =7.7 Hz, IH); 8.28 (bs, IH); 11.99(bs, IH); ;MSm/ z:ES" (acetonitrihvoda) [M-H]": 391.1. ;Jedinjenje 6: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 5 J- dimetil- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 7. 9- ;dimetil- 2. 3- dihidro- 4//- furo[ 3. 2- c] hromen- 4- on ; ;Primer 6;4-Hidroksi-5,7-dimetilkumarin (190 mg; 1.0 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (10 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 2.5 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je talog bež boje koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 150 mg (71 %) jedinjenja 6 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-fik) ć>7ppm: 2.28 (s, 3H); 2.33 (s, 3 H); 2.65 (s, 3H); 2.71 (s, 3H); 4.78 (d,J =3.8 Hz, IH); 6.25( d, J=3.6 Hz, IH); 7.01 (s, IH); 7.03 (s, IH); 7.09 (s, IH); 7.16 (s, IH); ;MSm/ z:ES<+>(acetonitrihvoda) [MH]<+>: 420.8. ;Jedinjenje 7: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 5, 8- dimetil- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 6, 9- ;dimetil- 2, 3- dihidro- 4//- furo[ 3, 2- c] hromen- 4- on ; ;Primer 7;4-Hidroksi-5,8-dimetilkumarin (190 mg; 1.0 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 2.5 sata. Reakcijska smeša je uparena i dobijeni sirov proizvod je prekristalisan iz smeše acetomvoda (1:1) pri čemu je dobijeno 132 mg (63 %) belog kristalinog jedinjenja 7. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-<4) J/ppm: 2.26 (s, 3H); 2.31 (s, 3H); 2.66 (s, 3H); 2.72 (s, 3H); 4.84 (d, J=3.5 Hz, IH); 6.28(d,J=3.1Hz, IH); 7.05(d,J=7.8Hz,IH); 7.9 (d,J=7.9 Hz, IH); 7.35 (d,J=7.6 Hz, IH); 7.42 (d,J=7.6 Hz, IH); 8.24 (bs, IH); 12.00 (bs, IH); ;MSm/z:ES<+>(acetonitril:voda) [MH]<+>: 420.8. ;Jedinjenje 8: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 6, 7- dimetil- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 7, 8- ;dimetil- 2, 3- dihidro- 4//- furo[ 3, 2- c1hromen- 4- on ; ;Primer 8 4-Hidroksi-6,7-dimetilkumarin (Aldrich) (190 mg; 1.0 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (10 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 4 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 182 mg (86 %) jedinjenja 8 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-rftf) ć/ppm: 2.28 (s, 3H); 2.32 (s, 6H); 2.34 (s, 3H); 4.75 (d,J=3.3 Hz, IH); 6.23 (d, IH); 7.20 (s, IH); 7.27 (s, IH); 7.51 (s, IH); 7.77 (s, IH); 8.97 (bs, IH); 11.87 (bs, IH); ;<l3>C-NMR (75.4 MHz,DMSO-rftf) #ppm:18.6; 18.9; 19.5; 19.8; 43.7; 100.7; 100.9; 109.3; 109.6; 113.3; 116.6; 116.9; 122.3; 123.2; 132.3; 132.9; 142.0; 142.4; 150.5; 153.0; 158.6; 161.6; 161.9; 164.9; ;MSm/ z:ES" (acetonitrikvoda) [M-H]": 419.4. ;Jedinjenje 9: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 7, 8- dimetil- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 6, 7- ;dimetil- 2, 3- dihidro- 4//- furo[ 3, 2- c1hromen- 4- on ; ;Primer 9;4-Hidroksi-7,8-dimetilkumarin (95 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (144 uL; 1.25 mmol). Dodat je acetonitril (10 mL) i reakcijska ;smeša je refluksovana 3 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 85 mg (80 %) jedinjenja 9 kojeg nije potrebno dodatno preočišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-J5) J/ppm: 2.25 (s, 3H); 2.28 (s, 3H); 2.35 (s, 3H); 2.39 (s, 3H); 4.77(d, 7=3.1Hz, IH); 6.26 (d,J=3.5 Hz, IH); 7.19 (d, 7= 8.3 Hz, IH); 7.22( d, J=8.2 Hz, IH); 7.50 (d,J=8.0 Hz, IH); 7.75( d, J=8.1 Hz, IH); ;MSm/ z:ES<+>(acetonitril:voda) [MH]<+>: 421.2. ;Jedinjenje 10: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 6, 8- dimetil- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 6, 8- ;dimetil- 2, 3- dihidro- 4//- furo[ 3, 2- g] hromen- 4- on ; ;Primer 10;4-Hidroksi-6,8-dimetilkumarin (190 mg; 1.0 mmol) je izmešan s 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 2 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 156 mg (74 %) jedinjenja 10 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-^) č/ppm: 2.30 (s, 3H); 2.32 (s, 3H); 2.34 (s, 3H); 2.37 (s, 3H); 4.79 (d,J=3.5 Hz, IH); 6.26 (d,J=3.6 Hz, IH); 7.34 (s, IH); 7.39 (s, 2H); 7.65 (s, IH); 11.85 (bs, IH); ;MSm/ z:ES<+>(acetonitril:voda) [MH]<+>: 420.8. ;Jedinjenje 11: 8- Etil- 3-( 6- etil- 4- hidroksi- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 2- hidroksi- 2, 3- ;dihidro- 4i7- furo|" 3, 2- c| hromen- 4- on ; ;Primer 11;6-Etil-4-hidroksikumarin (95 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (2 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 3 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 57 mg (54.2 %) jedinjenja 11 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. 1 H-NMR (300 MHz, DMSO-J6) ć/ppm: 1.22 (m, 6H); 2.71 (m, 4H); 4.80 (d,J=3.4 Hz, IH); 6.28 (d,J=3.5 Hz, IH); 7.31 (d,J=8.4 Hz, IH); 7.38 (d, J= 8.3 Hz, IH); 7.50 (d,J=8.0 Hz, IH); 7.55( d, J=8.0 Hz, IH); 7.57 (s, IH); 7.87 (s, IH);<13>C-NMR (75.4 MHz,DMSO-J6) S/ ppm:15.5; 15.6; 27.3; 27.6; 43.9; 101.4; 101.8; 109.4; 111.9; 115.5; 116.2; 116.5; 120.9; 121.9; 132.1; 132.5; 139.5; 140.0; 150.4; 152.8; 158.5; 161.5; 161.9; 164.9; ;MSm/ z:ES<+>(acetonitril:voda) [MH]<+>: 420.9. ;Jedinjenje 12: 6- Etil- 3-( 8- etil- 4- hidroksi- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 2- hidroksi- 2, 3- ;dihidro- 4//- furo|" 3, 2- c"| hromen- 4- on ; ;Primer 12;8-Etil-4-hidroksikumarin (95 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (2 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 3 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 64 mg (61 %) jedinjenja 12 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz,DMSO-</6) ć/ppm:1.21 (m, 6H); 2.78 (m, 4H); 4.82 (d,J=3.2 Hz, IH); 6.30(d, J=3.5 Hz, IH); 7.32 (t,J=7.8 Hz, IH); 7.36 (t,J=7.6 Hz, IH); 7.53 (d,J=7.3 Hz, IH); 7.58(d,J=7.8, IH); 7.62 (d,J=7.8 Hz, IH); 7.87 (d,J= 7.8 Hz, IH); 11.80 (bs, IH); ;<13>C-NMR (75,4 MHz, DMSO-d6) ć/ppm: 14.0 (2C); 22.0; 22.3; 43.8; 101.3; 101.7; 109.4; 111.9; 115.7; 120.4; 121.1; 123.5; 124.0; 131.0; 131.4; 131.8; 132.1; 149.9; 152.3; 158.3; 161.3; 162.2; 165.3; ;MSm/ z:ES<+>(acetonitrikvoda) [MH]<+>: 420.8. ;Jedinienie 13: 2- Hidroksi- 3-( 4- mdroksi- 6- izopropil- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 8- ;izopropil- 2, 3- dihidro- 4//- furo[ 3, 2- clhromen- 4- on ; ;Primer 13;4-Hidroksi-6-izopropilkumarin (102 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (230 uL; 2.0 mmol). Dodat je acetonitril (1 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 5 sati. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltrira i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 34 mg (30 %) jedinjenja 13 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-<4) S/ ppm: 1.23 (d,J = 1. 2Hz, 6H); 1.26 (d,J=7.4 Hz, 6H); 3.00 (m, 2H); 4.79 (d,J=2,4 Hz, IH); 6.28 (d,J=3.3 Hz, IH); 7.31 (d,J=8.4 Hz, IH); 7.38 (d,J=8.5 Hz, IH); 7.57 (m, 3H); 7.92 (s, IH); 12.00 (bs, ;IH); ;<13>C-NMR (75.4 MHz,DM$ >0- d6) ć/ppm:23.8 (4C); 32.7; 33.0; 43.9; 101.5; 101.8; 109.4; 111.8; 115.5; 116.2; 116.6; 119.4; 120.4; 130.9; 131.2; 144.2; 144.5; 150.4; 152.8; 158.5; 161.6; 162.0; 164.9; ;MSm/ z:ES" (acetonitril:voda) [M-H]": 447.0. ;Jedinjenje 14: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 8- izopropil- 2- okso- 2#- hromen- 3- il)- 6- ;izopropil- 2, 3- dihidro- 4//- furo[ 3, 2- c] hromen- 4- on ; ;Primer 14;4-Hidroksi-8-izopropilkumarin (102 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (1.5 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 5 sati. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 18 mg (16 %) jedinjenja 14 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-ć4) S/ ppm: 1.25 (m, 12H); 3.44 (m, 2H); 4.82 (d,J=3.0 Hz, IH); 6.30 (d,J=3.4 Hz, IH); 7.35 (dd,7 =7.9 Hz,J=7.8 Hz, IH); 7.39(dd,J=7.8Hz,J=7.5Hz, IH);7.61 (m, 3H); 12.00 (bs, IH); ;<13>C-NMR (75.4 MHz, DMSO-d6) #ppm: 22.3 (2C); 22.4 (2C); 26.2; 26.4; 43.8; 101.3; 101.6; 109.4; 111.9; 115.7; 120.3; 121.0; 123.7 124.1; 129.2; 129.5; 135.6; 135.8; 149.3; 151.7; 158.2; 159.4; 162.2; 165.4; ;MSm/ z:ES<+>(acetonitrikvoda) [MH]<+>: 448.9. ;Jedinjenje 15: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 5- izopropil- 8- metil- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)-9- izopropil- 6- metil- 2, 3- dihidro- 4i:/- furo[ 3, 2- £, 1hromen- 4- on ;Primer 15;4-Hidroksi-5-izopropil-8-metilkumarin (109 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (2 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 3 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltrira i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 22 mg (18,5 %) jedinjenja 15 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-d«$) J/ppm: 1.25 (d,J= 6.9 Hz, 6H); 1.28 (d,J=6.8 Hz, 6H); 2.27 (s, 3H); 2.32 (s, 3H); 4.08 (sept,J =6.8 Hz, IH); 4.39 (sept,J=6.7 Hz, IH), 4.86 (d,J=3.4 Hz, IH); 6.30 (d,J=3.2 Hz, IH); 7.25 (d,J=7,9 Hz, 2H); 7.43 (d,J=7.9 Hz, IH); 7.49 (d,J=7.9 Hz, IH); ;<13>C-NMR (75.4 MHz, DMSO-40 ć/ppm: 15.3; 15.6; 23.4; 24.3; 28.8; 29.1; 42.6; 100.8; 102.2; 108.2; 110.2; 113.6; 120.5; 121.4; 122.6; 123.1; 132.5; 133.1; 144.4; 146.0; 151.3; 153.4; 158.1; 160.4; 164.8; 166.3; ;MSm/ z:ES<+>(acetonitrikvoda) [MH]<+>: 476.9. ;Jedinjenje 16: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 6, 8- diizopropil- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 6, 8- ;diizopropil- 2, 3- dihidro- 4/ f- furo[ 3, 2- c1hromen- 4- on ; ;Primer 16;4-Hidroksi-6,8-diizopropilkumarin (86 mg; 0.35 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (200 p.L; 1.05 mmol). Dodat je acetonitril (3 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 3 sata. Reakcijska smeša je razblažena sa etil-acetatom i ekstrahovana sa vodom. Organski sloj je osušen natrijum sulfatom i uparen pod sniženim pritiskom. Dobijeni žuti uljasti ostatak nakon prečišćavanja na koloni silika gela (12 g) u sistemu rastvarača: hloroform:aceton:sirćetna kiselina (60:20:1) daje 35 mg (38 %) belog praškastog jedinjenja 16. ;MSm/ z:ES<+>(acetonitril:voda) [MH]<+>: 533.1. ;Jedinienje 17: 2- 1 Iidroksi- 3-( 4- hidroksi- 8- izopropil- 5- mctil- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)-6- izopropil- 9- metil- 2, 3- dihidro- 4//- furo[ 3, 2- cjhromen- 4- on ;Primer 17;4-Hidroksi-8-izopropil-5-metilkumarin (109 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (230 uL; 2.0 mmol). Dodat je acetonitril (2 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 6 sati. Dobijeno je jedinjenje 17 (10.5 mg; 8.8 %) iz reakcijske smeše ekstrakcijom na čvrstom nosaču (Supelco, Supelclean LC-18. 1 g): 'H-NMR (300 MHz, DMSO-rftf) $ ppm: 1.22 (m, 12H); 2.67 (s, 3H); 2.73 (s, 3H); 3.39 (m, 2H); 4.83( d, J=3.6 Hz, IH); 6.28 (bs, IH); 7.12 (d,J=7. 7 Hz, IH); 7.16 (d, J= 7.9 Hz, IH); 7.40 (d,J=7.8 Hz, IH); 7.47( d, J=7. 9 Hz, IH); oko 12.0 (bs, ;IH); ;MSm/ z:ES<+>(acetonitril:voda) [MH]<+>: 477.1. ;Jedinjenje 18: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 5- metoksi- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 9- ;metoksi- 2, 3- dihidro- 4#- furo[ 3, 2- c] hromen- 4- on ; ;Primer 18;4-Hidroksi-5-metoksikumarin (96 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 1 sat. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je ;beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 63 mg (59 %) jedinjenja18kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-rftf) J/ppm: 3.92 (s, 3H); 4.01 (s, 3H); 4.59 (d,J=4.0 Hz, IH); 6.18 (bs, IH); 6.97-7.04 (m, 4H); 7.60 (m, 2H); 8.18 (d,J=7.3 Hz, IH)); 10.36 (bs, IH); ;<13>C-NMR (75.4 MHz, DMSO-J6) J/ppm: 42.0; 56.2; 56.9; 100.5; 101.0; 102.8; 104.0; 106.3; 106.5; 108.7; 108.9; 109.5; 133.0; 153.0; 155.9; 156,1; 156.2; 158.1; 162.2; 165.1; ;MSm/ z:ES" (acetonitril:voda) [M-H]": 423.0 ;Jedinienje 19: 2- 1 Iidroksi- 3-( 4- hidroksi- 6- metoksi- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 8- ;metoksi- 2, 3- dihidro- 4//- furo|" 3, 2- c"| hromen- 4- on ; ;Primer 19;4-Hidroksi-6-metoksikumarin (96 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 4 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 74 mg (70 %) jedinjenja 19 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-rftf) č/ppm: 3.86 (3H, s); 3.81 (3H, s); 4.49 (IH, bs); 6.27 (IH, m); 7.15-7.54 (6H, m); 11.80 (bs, IH); ;<13>C-NMR (75.4 MHz,ĐMSO- d6)ć/ppm: 44,0; 55,6 (2H); 101,8; 102,2; 104,1; 105,7; 109.4; 112.4; 116.2; 117.5; 118.0: 119.9; 120.7; 146.4; 148.9; 155.3; 155.4; 158.4; 161.6; 161.7; 164.6; ;MSm/ z:ES" (acetonitril:voda) [M-H]": 423.0. ;Jedinienje 20: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 7- metoksi- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 7- ;metoksi- 2, 3- dihidro- 4//- furor3, 2- c1hromen- 4- on ; ;Primer 20;4-Hidroksi-7-metoksikumarin (96 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 2 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 80 mg (75 %) jedinjenja 20 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-rftf)S/ ppm:3.86 (s, 6H); 4.71 (bs, IH); 6.22 (bs, IH); 6.87-7.05 (m, 4H); 7.67(d, .7=8.6Hz,IH); 7.92 (d,J=8.8Hz,IH); 11.89 (bs, IH); MSm/ z:ES" (acetonitril:voda) [M-H]": 423.0. ;Jedinjenje 21: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 8- metoksi- 2- okso- 2/ f- hromen- 3- il)- 6- ;metoksi- 2, 3- dihidro- 4/^- furo[ 3, 2- c] hromen- 4- on ; ;Primer 21;4-Hidroksi-8-metoksikumarin (96 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 45 minuta. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 95 mg (90 %) jedinjenja 21 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-£/6) J/ppm: 3.84 (s, 3H); 3.87 (s, 3H); 4.71 (d,J=3.2 Hz, IH); 6.22(d, J=3.2 Hz, IH); 6.86-7.05 (m, 4H); 7.66( d, J=8.7 Hz, IH); 7.92(d, .7=9.9Hz, IH); 11.89 (bs, IH); ;<13>C-NMR (75.4 MHz, DMSO-rf«$) č/ppm: 43.5; 55.8 (2C); 99.0; 100.4; 100.8; 105.3; 109.0; 109.4; 111.9; 112.3; 123.7; 124.6; 154.0; 156.4; 158,6; 161.7; 162.2; 162.5; 162.9; 165.2; ;MSm/ z:ES" (acetonitril:voda) [M-H]": 423.3. ;Jedinjenje 22: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 5, 7- dimetoksi- 2- okso- 2/-/- hromen- 3- il)- 7, 9- ;dimetoksi- 2, 3- dihidro- 4//- furo[ 3, 2- c] hromen- 4- on ; ;Primer 22;4-Hidroksi-5,7-dimetoksikumarin (111 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 2 sata. Nakon što je reakcijska smeša ohlađena do sobne temperature, rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom, a sirovi ostatak je prekristalisan iz smeše rastvarača acetomvoda pri čemu je dobijeno 90 mg (74 %) jedinjenja 22. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-cfe) ć/ppm: 3.85 (s, 3H); 3.85 (s, 3H); 3.88 (s, 3H); 3.97 (s, 3H); 4.51 (d,J=4.0 Hz, IH); 6.12 (m, IH); 6.52 (d,J=2.2 Hz, IH); 6.57( d, J =2,2 Hz, IH); 6.61 (d,J=2.2 Hz, IH); 6.63 (d,J=2.2 Hz, IH); 8.08 (d,J= 2. 2Hz, IH); 10.2 (bs, IH); ;<13>C-NMR (75.4 MHz,DMSO-^) S/ ppm:42.1; 55.9; 56.0; 56.2; 56.9; 93.4; 93.8; 95.0; 95.3; 96.8; 97.8; 98.2; 98.2; 108.7; 154.8; 157.2; 157.3; 157.6; 158.2; 162.4; 163.1; 163.4; 165.4; ;MSm/ z:ES+" (acetonitril: voda) [MH]<+>: 484.7. ;Jedinjenje 23: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 6, 7- dimetoksi- 2- okso- 2/ f- hromen- 3- il)- 7, 8- ;dimetoksi- 2, 3- dihidro- 4/ f- furo[ 3, 2- c] hromen- 4- on ; ;Primer 23;4-Hidroksi-6,7-dimetoksikumarin (111 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 |oL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 2 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 60 mg (50 %) jedinjenja 23 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-flfc)S/ ppm:3.81 (s, 3H); 3.86 (s, 3H); 3.87 (s, 6H); 4.72( d, J=3.0 Hz, IH); 6.22(d, J=3.3 Hz, IH); 6.96 (s, IH); 7.05 (s, IH); 7.10 (s, IH); 7.52 (s, IH); 11.7 (bs, IH); ;<13>C-NMR (75.4 MHz,DMSO-J6)ć/ppm: 42.6; 54.6; 54.8; 55.0; 98.3; 98.8; 95.0; 99.3; 101.6; 102.8; 103.1; 106.5; 108.3; 144.5; 144.8; 146.9; 149.5; 151.5; 152.0; 157.7; 161.1; 164.1; ;MSm/ z:ES+" (acetonitril: voda) [MH]<+>: 484.8. ;Jedinjenje 24: 3-( 4. 5- Dihidroksi- 2- okso- 2/ :/- hromen- 3- il)- 2, 9- dihidroksi- 2, 3- dihidro-4#- furo[ 3, 2- c] hromen- 4- on ;Primer 24;4,5-Dihidroksikumarin (100 mg; 0.56 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (299 uL; 2.8 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Nastali beli talog je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 40 mg (36 %) jedinjenja 24 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-ć/6) ć/ppm: 4.55 (bs, IH); 6.15 (bs, IH); 6.75-6.82 (m, 4H): 7.38-7.43 (m, 2H); 10.89 (bs, IH); ;<13>C-NMR (75.4 MHz, DMSO-^) č/ppm: 42.8; 98.6; 101.1; 102.3; 104.0; 106.8; 107.3; 109.1; 109.4; 110.1; 132.5 (2C); 153.1; 154.9; 155.3; 155.9; 158.3; 160.3; 164.7; 165.5; ;MSm/ z:ES<+>(acetonitril:voda) [MH]<+>: 396.8. ;Jedinjenje 25: 3-( 416- Dihidroksi- 2- okso- 2/^- hromen- 3- il)- 2, 8- dihidroksi- 2, 3- dihidro-4//- furo[ 3, 2- c] hromen- 4- on ; ;Primer 25;4,6-Dihidroksikumarin (178 m;g 1.0 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (10 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 3 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 154 mg (78 %) jedinjenja 25 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz,DMSO-ifc)ć/ppm: 4.76 (bs, IH); 6.23(d, J=3.0 Hz, IH); 7.01-7.33 (m, 6H); 9.90 (bs, IH); 11.85 (bs, 2H); 12.39 (bs, IH); ;MSm/ z:ES<+>(acetonitrikvoda) [MH]<+>: 396.7. ;Jedinjenje 26: 3-( 4. 7- Dihidroksi- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 2, 7- dihidroksi- 2, 3- dihidro-4/ f- furo [ 3, 2- c"| hromen- 4- on ; 4,7-Dihidroksikumarin (178 mg; 1.0 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (10 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 1 sat. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltrira i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 170 mg (86 %) jedinjenja 26 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati: 'H-NMR (300 MHz,DMSO-<4)ć/ppm: 4.67 (d,J=3.2 Hz, IH); 6.18 (d,J=2. 9Hz, IH); 6.68 (s, IH); 6.75 (s, IH); 6.81-6.91 (m, 2H); 7.58 (d,J=8.6 Hz, IH); 7.83 (d,J= 8.7 Hz, IH); 10.58 (bs, IH); 10.64 (bs, IH); 11.73 (bs, IH); ;MSm/ z:ES" (acetonitril:voda) [M-II]': 395. ;Jedinjenje 27: 3-( 4, 7- Dihidroksi- 8- metil- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 2, 7- dihidroksi- 6- ;metil- 2, 3- dihidro- 4//- furo[ 3, 2- clhromen- 4- on ; ;Primer 27;4,7-Dihidroksi-8-metilkumarin (96 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 3 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je ;beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 58 mg (50 %) jedinjenja 27 kojeg nije potrebno dodatno pročišćavati. 1 H-NMR (300 MHz,ĐMSO- d6)S/ ppm: 2.13 (s, 3H); 2.15 (s, 3H); 4.70 (d,J=3.5 Hz, IH); 6.19 (d, J=3.6 Hz, IH); 6.87 (d,J=8.8 Hz, IH); 6.91 (d,J=8.5 Hz, IH); 7.44 (d, J= 8.6 Hz, IH); 7.69 (d,J=8.8 Hz, IH); 10.40 (bs, IH); 10.51 (bs, IH); 11.59 (bs, IH); ;<13>C-NMR (75.4 MHz, DMSO-J6) J/ppm: 7.94; 8.17; 43.5; 98.1; 98.2; 104.1; 107.8; 109.3; 110.4; 111.0; 111.4; 111.8; 120.5; 121.3; 151.9; 154.4; 158.8; 158.9; 159.3; 162.0; 162.6; 165.7; ;MS m/z: ES<+>(acetonitril: voda) [MH]<+>: 424.8. ;Jedinjenje 28: 3-( 4, 7- Dihidroksi- 5- metil- 2- okso- 2/ f- hromen- 3- il)- 2, 7- dihidroksi- 9- ;metil- 2, 3- dihidro- 47jr- furo[ 3, 2- c] hromen- 4- on ; ;Primer 28;4,7-Dihidroksi-5-metilkumarin (200 mg; 1.04 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (597 uL; 13 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 8 sati. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 175 mg (79 %) jedinjenja 28 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-</6) #ppm: 2.61 (s, 3H); 2.156 (s, 3H); 4.69 (d,J=3.9 Hz, IH); 6.20 (d, .7=3.8 Hz, IH); 6.49 (d,J=2.2 Hz, IH); 6.58 (m, 2H); 6.63 (s, IH); 8.00 (bs, IH); 10.41 (bs, IH); 11.50 (bs, IH); ;<13>C-NMR (75.4 MHz, DMSO-J6) ć/ppm: 19.8; 22.5; 41.4; 96.4; 97.4; 98.9; 99.3; 102.6; 106.2; 107.4; 113.9; 115.0; 136.1; 137.8; 154.3; 156.4; 157.5; 158.8; 159.6; 160.0; 164.0; 165.7; ;MSm/ z:ES<+>(acetonitril: voda) [MH]<+>: 424.8. ;Jedinjenje 29: 2, 6, 7- Trihidroksi- 3-( 4, 7, 8- trihidroksi- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 2, 3- ;dihidro- 4/ f- furo [ 3, 2- c| hromen- 4- on ; ;Primer 29;4,7,8-Trihidroksikumarin (97 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (10 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 3 sata. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom, a dobijeni uljasti talog je trituriran hladnom vodom. Izdvojeni talog je profiltriran i ispran vodom pri čemu je dobijeno 50 mg (46 %) žutog jedinjenja 29. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-^)S/ ppm:4.89 (d,J=3.7 Hz, IH); 6.18 (d, .7=3.4 Hz, IH); 6.80(d, J=8.7 Hz, IH); 6.85( d, J=8.6 Hz, IH); 7.07(d, J=8.6 Hz, IH); 7.35(d, .7=8.7Hz, IH); 9.32 (bs, 2H); 10.10 (bs, 2H); 11.59 (bs, IH); ;MSm/ z:ES<+>(acetonitrlkvoda) [MH]<+>: 428.9. ;Jedinienje 30: 9- Fluoro- 3-( 5- fluoro- 4- hidroksi- 2- okso- 2/ f- hromen- 3- il)- 2- hidroksi-2, 3- dihidro- 47/- furo[ 3, 2- c| hromen- 4- on ; ;Primer 30;5-Fluoro-4-hidroksikumarin (53 mg; 0.3 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (173 uL; 1.5 mmol). Dodat je acetonitril (2.5 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 4 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 23 mg (38 %) jedinjenja 30 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-afe)Slppm:4.80 (bs, IH); 5.25 (bs, IH, aldehidni oblik); 6.30( d, J=2.3 Hz, IH); 6.96-7.34 (m, 4H); 7.56-7.75 (m, 2H); 8.30 (bs, IH); 9.15 (bs, IH, aldehidni oblik); ;MSm/ z:ES<+>(acetonitril: voda) [MH]<+>: 400.8. ;Jedinjenje 31: 8- Fluoro- 3-( 6- fluoro- 4- hidroksi- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 2- hidroksi-2, 3- dihidro- 4//- furo[ 3, 2- clhromen- 4- on ; ;Primer 31;6-Fluoro-4-hidroksikumarin (180 mg; 1.0 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (574 uL; 5.0 mmol). Dodat je acetonitril (8 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 6 sati. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 62 mg (31 %) jedinjenja 31 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-J6) ć/ppm: 4.85 (bs, IH); 6.35 (bs, IH); 7.40-7.84 (m, 6H); 9.36 (bs, IH); ;<13>C-NMR (75.4 MHz, DMSO-c/6) J/ppm: 42.8; 101.0; 101.6; 107.1 (d,J=24.8 I Iz); 108.1 (d,J=25.7 Hz); 108.6; 111.9 (d); 115.9 (d); 117.4 (d); 117.8 (d); 118.7 (d, .7=23.0 Hz); 119.0 (d, 7= 20 Hz); 147.4; 149.7; 156.7(d, 241 Hz); 158.1 (d, 236 Hz); 160.2; 162.2; 163.1; 165.4; ;MSm/ z:ES" (acetonitril: voda) [M-H]": 399.0. ;Jedinjenje 32: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 6- hloro- 2- okso- 277- hromcn- 3- il)- 8- hloro- 2, 3- ;dihidro- 477- furo[ 3, 2- c] hromen- 4- on ; ;Primer 32;4-Hidroksi-6-hlorokumarin (98 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 4 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltrira i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 31.8 mg (29 %) jedinjenja 32 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati: 'H-NMR (300 MHz, DMSO-<4)S/ ppm:4.81 (bs, IH); 6.31 (bs, III); 7.33-7.77 (m, 5H);8.06 (s, IH), 9.31 (bs, IH); ;MSm/ z:ES" (acetonitril:voda) [M-H]": 431.2; 433.2; 435.2. ;Jedinjenje 33: 8- Bromo- 3-( 6- bromo- 4- hidroksi- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 2- hidroksi-2, 3- dihidro- 4//- furo[ 3, 2- c] hromen- 4- on ; ;Primer 33;6-Bromo-4-hidroksikumarin (120 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska ;smeša je refluksovana 4 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 20 mg (24%) jedinjenja 33 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-dć) č/ppm: 4.82 (bs, IH); 5.34 (bs, IH, aldehidni oblik); 6.33 (bs, IH); 7.25-7.40 (m, 2H); 7.72-7.88 (m, 3H); 8.19 (bs, IH); 9.26 (bs, IH, aldehidni oblik); ;<13>C-NMR (75.4 MHz,DMSO-ć/đ) ć/ppm:42.7; 101.1; 101.6; 108.6; 112.7; 114.7; 115.0; 116.7; 117.6; 117.9; 122.9; 124.2; 133.8; 134.2; 149.7; 152.3; 156.7; 160.0; 162.6; 164.9; ;MSm/ z:ES" (acetonitril: voda) [M-H]": 518.6, 520.6; 522.6. ;Jedinjenje 34: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 6- iodo- 2- okso- 2/ f- hromen- 3- il)- 8- jodo- 2, 3- ;dihidro- 4//- furo[ 3, 2- c] hromen- 4- on ; ;Primer 34;4-Hidroksi-6-jodokumarin (200 mg; 0.7 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (401 uL; 3.5 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 3 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 70 mg (32 %) jedinjenja 34 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-Jfi) S/ ppm: 4.78 (bs, IH); 6.28 (bs, IH); 6.91-7.31 (m, 2H); 7.70-8.16 (m, 4H), 9.33 (bs, IH); ;MSm/ z:ES<+>(acetonitril:voda) [MH]<+>: 617.2. ;Jedinjenje 35: 7- Fluoro- 3-( 7- fluoro- 4- hidroksi- 2- okso- 2/ j'- hromen- 3- il)- 2- hidroksi-2, 3 - dihidro- 4/ f- furo [ 3, 2- c] hromen- 4- on ; ;Primer 35;7-Fluoro-4-hidroksikumarin (140 mg; 0.77 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (442 uL; 3,85 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 5 sati. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 66 mg (42 %) jedinjenja 35 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-J6) S/ ppm: 4.57 (bs, IH); 6.69 (bs, IH); 7.15-7.17 (m, 6H); 8.20 (bs, IH); ;MSm/ z:ES" (acetonitril: voda) [M-H]": 399.3. ;Jedinjenje 36: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 7- hloro- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 7- hloro- 2, 3- ;dihidro- 4/ f- furo[ 3, 2- c] hromen- 4- on ; ;Primer 36;4-Hidroksi-7-hlorokumarin (196 mg; 1.0 mmol) je izmešano sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (574 uL; 5.0 mmol). Dodat je acetonitril (8 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 4 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 145 mg (67 %) jedinjenja 36 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-rf5) tfppm: 4.79 (bs, IH); 6.30 (bs, IH); 7.32-8.13 (m, 6H), 9.30 (bs, IH); ;MSm/ z:ES" (acetonitikvoda) [M-H]": 430.8; 432.8; 434.7. ;Jedinjenje 37: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 8- hloro- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 6- hloro- 2, 3- ;dihidro- 4/ 7- furo [ 3, 2- c] hromen- 4- on ; ;Primer 374-Hidroksi-8-hlorokumarin (98 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 5 sati. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 53 mg (49 %) jedinjenja 37 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz,DMSO-c4)J/ppm: 4.85 (bs, IH); 5.34 (bs, IH, aldehidni oblik); 6.42 (bs, IH); 7.28-7.48 (m, 2H); 7.72-7.89 (m, 3H); 7.99 (d,J =7.9 Hz, IH); 9.25 (bs, IH, aldehidni oblik):<13>C-NMR (75.4 MHz,DMSO-J6) J/ppm:43.8; 101.7; 102.2; 109.8; 113.6; 117.6; 119.9; 120.2; 121.8; 122.6; 124.4; 125.5; 132.3; 132.8; 147.6; 149.8; 157.2; 160.5; 161.8; 164.7 ;MSm/ z:ES" (acetonitril:voda) [M-H]": 430.9; 432.8; 435.1. ;Jedinjenje 38: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 6- hloro- 7- metil- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 8- ;hloro- 7- metil- 2, 3- dihidro- 4i/- furo[ 3, 2- c] hromen- 4- on ; ;Primer 38;4-Hidroksi-6-hloro-7-metilkumarin (210 mg; 1.0 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 [ iL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (4 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 3 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je ;31.8 mg (29 %) jedinjenja 38 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-ć/đ) ć/ppm: 4.79 (bs, IH); 6.29 (bs, IH); 7.45 (s, IH); 7.53 (s, IH); 7.74 (s, IH); 8.05 (s, IH), 8.98 (bs, IH); ;13C-NMR (75.4 MHz, DMSO-<4) S/ ppm: 19.7; 20.1; 43.8; 101.4; 101.9; 109.6; 111.2; 115.2; 118.6; 119,0; 121.8; 123.0; 128.6; 128.9; 140.5; 140.9; 150.9; 152.9; 158.0; 161.0; 163.9; ;MSm/ z:ES<+>(acetonitrikvoda) [MH]<+>: 460.7, 462.7, 464.6. ;Jedinjenje 39: 2- Hidroksi- 3-( l- hidroksi- 3- okso- 3//- benzo[/ lhromen- 2- il)- 2, 3- dihidro-4/ f- benzo [ f \ furo [ 3, 2- c] hromen- 4- on; ;Primer 39;l-Hidroksi-3//-benzo[/Jhromen-3-on (150 mg; 0.7 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (401 uL; 3.5 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 4.5 sati. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji se profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 135 mg (82 %) jedinjenja 39 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati: 'H-NMR (300 MHz, DMSO-c4) ć/ppm: 5.06 (bs, IH); 6.52 (bs, IH); 7.51-7.80 (m, 6H), 8.06-8.28 (m, 4H); 9.03 (d,J=8.5 Hz, IH); 9.44 (d,J=8.4 Hz), IH); ;MSm/ z:ES<+>(acetonitril:voda) [MH]<+>: 465.4. ;Jedinjenje 40: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 2- okso- 2//- benzo[ glhromen- 3- il)- 2, 3- dihidro-4/ f- benzo | gj furo [ 3, 2- cj hromen- 4- on ; ;Primer 40;4-Hidroksi-2#-benzo[g]hromen-2-on (150 mg; 0.7 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (401 uL; 3.5 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 4.5 sati. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 130 mg (79 %) jedinjenja 40 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-J6) J/ppm: 4.94 (bs, IH); 6.40 (bs, IH); 7.56-7.67 (m, 4H); 7.78 (s, IH); 7.90-8.09 (m, 4H); 8.20 (d,J=7.4 Hz, IH); 8.47 (s, IH); 8.67 (s, IH); 12.2 (bs, IH); ;MSm/ z:ES<+>(acetonitril:voda) [MH]<+>: 465.2. ;Jedinjenje 41: 2- Hidroksi- l-( 4- hidroksi- 2- okso- 2/ i- benzo[/ z1hromen- 3- il)- l, 2- dihidro-1 l/ 7- benzo[/ ;1furo[ 3, 2- clhromen- l 1- on ;Primer 41;4-Hidroksi-2//-benzo[^]hromen-2-on (42,4 mg; 0.2 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (115 uL; 1.0 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 2 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 39 mg (84 %) jedinjenja 41 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-J6) J/ppm: 4.94 (bs, IH); 6.43 (bs, IH); 7.45-7.81 (m, 4H); 7.91-7.96 (m, 2H); 8.04-8.11 (m, 3H); 8.36 (m, 3H); ;MSm/ z:ES" (acetonitril:voda) [M-H]": 463. ;Jedinienje 42: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 7- metoksi- 2- okso- 2//- benzo[ g] hromen- 2- il)-9- metoksi- 2, 3- dihidro- 4//- benzo[ g1furo[ 3, 2- c] hromen- 4- on ;Primer 42;4-Hidroksi-7-metoksi-2//-benzo[/j]hromen-2-on (121 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 4 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je žuti talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 95 mg (72 %) jedinjenja 42 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-Jđ) ć/ppm: 3.91 (s, 6H); 4.91 (bs, IH); 6.37 (bs, IH); 7.03-8.62 (10H, m, Ar); ;MSm/ z:ES<+>(acetonitril) [MH]<+>525.3. ;Jedinjenje 43: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 9- metoksi- 2- okso- 2/ i- benzo[ g] hromen- 2- il)-7- metoksi- 2, 3- dihidro- 4//- benzo[ g] furo[ 3, 2- c] hromen- 4- on ; ;Primer 43;4-Hidroksi-9-metoksi-2/-/-benzo[g]hromen-2-on (121 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 2 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je žuti talog koji je profđtriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je ;108 mg (82 %) jedinjenja 43 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;1 H-NMR (300 MHz, DMSO-J6) J/ppm: 4.00 (s, 6H); 4.93 (bs, IH); 6.39 (bs, IH); 7.10 (m, 2H); 7.47 (m, 2H); 7.62(d,J=7.7 Hz, IH); 7.75 (d,J=5. 5 Hz, IH) 7.89 (s, IH); 7.99 (s, IH); 8.42 (s, IH), 8.61 (s, IH); ;MSm/ z:ES<+>(voda:acetonitril) [MH]+ 525.1. ;Jedinjenje 44: 3-( 4, 9- Dihidroksi- 2- okso- 2/ f- benzo[ g] hromen- 2- iiy2, 7- dihidroksi- 2, 3- ;dihidro- 4/ 7- benzo[ g] furo[ 3, 2- c] hromen- 4- on ; ;Primer 44;4,9-Dihidroksi-2//-benzo[g]hromen-2-on (114 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 loL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (3 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 2 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je žuti talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 78 mg (63 %) jedinjenja 44 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati: 'H-NMR (300 MHz, DMSO-J6) č/ppm: 4.92 (IH, bs); 6.39 (IH, bs); 6.91-8.57 (10H, m); 10.45 (3H, bs); ;MSm/ z:ES" (voda:acetonitril) [M-H]" 495.1. ;Jedinjenje 45: 3-( 4J- Dihidroksi- 2- okso- 2/ f- benzo[ glhromen- 2- il)- 2, 9- dihidroksi- 2, 3- ;dihidro- 4//- benzo \ g ] furo [ 3, 2- c] hromen- 4- on; ;Primer 45;4,7-Dihidroksi-2//-benzo[g]hromen-2-on (114 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 6 sati. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je žuti talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 84 mg (68 %) jedinjenja 45 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-<4) ć/ppm: 4.89 (bs, IH); 6.34 (bs, IH); 6.91-8.57 (m, 10H); 9.98 (bs, 2H), 12.19 (bs, IH); ;MSm/ z:ES<+>(voda:acetonitril) [MH]<+>497.2. ;Jedinienje 46: 2- Hidroksi- 3-( 5- hidroksi- 4, 9- dimetoksi- 7- okso- 7i/- furo[ 3, 2- g] hromen-6- il)- 6, 10- dimetoksi- 2, 3- dihidro- 4//- bisfuro[ 3, 2- c;3, 2- ie] hromen- 4- on ;Primer 46;5-Hidroksi-4,9-dimetoksi-7-okso-77f-furo[3,2-g]hromen (131 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (230 \ iL; 2.0 mmol). Dodat je acetonitril (2 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 3 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je žuti talog koji je profiltriran i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 73 mg (52 %) jedinjenja 46 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-J5) ć/ppm: 4.04 (s, 6H); 4.11 (s, 3H); 4.31 (s, 3H); 4.66 (d,J=3.9 Hz, IH); 6.24 (bs, IH); 7.36 (d,J=2.3 Hz, IH); 7.44 (d, .7= 2.3 Hz, IH); 8.12 (d,J=2.3 Hz, IH); 8.13 (d,J=2.3 Hz, IH); 8.21 (d,J=6.4 Hz, IH); 10.67 (bs, ;IH); ;<13>C-NMR (125 MHz,DMSO-J6) ć/ppm:42.0; 60.1; 60.1; 60.5; 60.6; 97.9; 98.7; 100.7; 100.9; 104.4; 104.7; 107.7; 113.0; 115.2; 126.6; 127.1; 140.7; 143.2; 143.3; 143.3; 145.4; 145.4; 147.8; 147.8; 156.8; 161.7; 164.3; ;MSm/ z:ES<+>(voda:acetonitril) [MH]<+>564.8. ;Jedinjenje 47: 7- Etil- 3-( 7- etil- 4- hidroksi- 2- okso- 277- hromcn- 3- il)- 2- hidroksi- 2. 3- ;dihidro- 477- furo[ 3, 2- c] hromen- 4- on ; ;I ;Primer 47;7-Etil-4-hidroksikumarin (100 mg; 0.53 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (302 uL; 2.6 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska smeša je mešana na sobnoj temperaturi 9 dana. Izdvojeni beli talog je profiltriran i isperan acetonitrilom. Dobijeno je 24 mg (11 %) jedinjenja 47 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) J/ppm: 1.18-1.25 (m, 6H); 2.67-2.77 (m, 4H); 4.77 (d,J=2.9 Hz, IH); 6.25 (d,J=3.3 Hz, IH); 7.14-7.31 (m, 4H); 7.67 (d,J=7.8 Hz, IH); 7.93(d, J=8.6, IH); ;MSm/ z:ES<+>(acetonitril:voda) [MH]<+>: 421.0. ;Jedinjenje 48: 6, 8- Dibromo- 3-( 6, 8- dibromo- 4- hidroksi- 2- okso- 2//- hromen- 3- il)- 2- ;hidroksi- 2, 3- dihidro- 4//- furo[" 3, 2- clhromen- 4- on ; ;Primer 48 6,8-Dibromo-4-hidroksikumarin (200 mg; 0.62 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (358 uL; 3.12 mmol). Dodat je acetonitril (5 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 24 sata. Hlađenjem rastvora do sobne temperature istaložen je beli talog koji je profiltrira i ispran acetonitrilom. Dobijeno je 10 mg (4.5%) jedinjenja 48 kojeg nije potrebno dodatno prečišćavati. ;'H-NMR (300 MHz,DMSO-<4)<?/ppm: 5.69 (s, IH); 7.67 (s, IH); 7.67 (d,J =2.3 Hz, 2H); 7.85-7.88 (m, 3H); 8.19 (bs, IH); 9.26 (bs, IH); ;MSm/z:ES" (acetonitril: voda) [M-H]": 618.8. ;Jedinjenje 49: 2- Hidroksi- 3-( 4- hidroksi- 6, 8- dihloro- 2- okso- 2i/- hromen- 3- il)- 6, 8- ;dihloro- 2, 3- dihidro- 4/^- furo[ 3, 2- c] hromen- 4- on ; ;Primer 49;4-Hidroksi-6,8-dihlorokumarin (115.5 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (15 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 12 sata. Rastvarač je uparen do minimalne zapremine a potom je reakcijska smeša razblažena sa istom zapreminom vode. Hlađenjem preko noći na + 4° C izdvojen je talog bež boje koji je profiltriran i ispran sa vodom. Dobijeno je 24 mg (19 %) jedinjenja 49 kojeg nije potrebno dodatno ;'H-NMR (300 MHz, aceton-^) J/ppm: 4.93 (d,J=3.6 Hz, IH); 6.57 (d,J=3.3 Hz, IH); 7.70(d, J=2.3 Hz, IH); 7.84(d, J=2.3 Hz, IH); 7.86(d, J=2.4 Hz, IH); 8.01 (d, .7=2.3 Hz, IH); ;MSm/ z:ES" (acetonitrikvoda) [M-H]": 500.9; 502.9; 504.9; 506.4. ;Jedinjenje 50: 8- Hidroksi- 7-( 4- hidroksi- 8, 8- dimetil- 2- okso- 27f, 7//- pirano[ 2, 3- ;/ z] hromen- 3- il)- 2, 2- dimetil- 7, 8- dihidro- 2//, 67/- pirano[ 2, 3-/ 2] furo[ 3, 2- c] hromen- 6- on ; ;Primer 50;4-Hidroksi-8,8-dimetil-27/,67/-pirano[2,3-/z]hromen-2-on (122 mg; 0.5 mmol) je izmešan sa 40 %-tnim vodenim rastvorom glioksala (288 uL; 2.5 mmol). Dodat je acetonitril (3 mL) i reakcijska smeša je refluksovana 4 sata. Reakcijska smeša je razblažena sa vodom i ekstrahovana sa elil-acetatom. Organski slojevi su osušeni sa nartijum sulfatom i upareni do suva. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela (10 g) sa eluentom hloroform:t-butanol (8:1). Dobijeno je 96 mg (73 %) jedinjenja 50. ;'H-NMR (300 MHz, CDC13) S/ ppm: 1.47 (bs, 12H); 5.01 (bs, IH); 5.71 (d,J =8.9 Hz, 2H); 6.83 (m, 4H); 7.75 (d,J=8.9 Hz, 2H); 9.72 (s,IH); 11.10 (bs, 2H); ;MSm/ z:ES" (acetonitrihvoda) [M-H]": 529.1. ;DOBIJANJE POLAZNIH JEDINJENJA ;Metod A;8- Etil- 4- hidroksikumarin ;Smeša 2-etilfenola (Aldrich) (6.1 g; 50 mmol), malonske kiseline (Aldrich) (5.2 g; 50 mmol), cink hlorida (20.4 g, 150 mmol) i fosfornog oksihlorida (Merck) (14 mL; 150 mmol) je uz mešanje zagrevana 24 sata na 70-75 °C nakon čega je reakcija prekinuta i dodata je smeša leda i vode. Reakcijska smeša je mešana još 2 sata na sobnoj temperaturi, odfiltriranom smeđem talogu je uz mešanje dodat 10 %-tni natrijum karbonat (150 mL). Nerastvorljivi deo je profiltriran, a filtrat je zakiseljen koncentrovanom hlorovodoničnom kiselinom, pri čemu je istaložen smeđi talog koji je odfiltriran i ispran hladnom vodom. Prekristalizacijom iz 50 %-tnog etanola dobijeno je 2.29 g (24 %) smeđeg praškastog 8-etil-4-hidroksikumarina. ;'H-NMR (300 MHz, DMSO-J6) ć/ppm: 1.22 (t,J= 7.5 Hz, 3H); 2.78 (q,J=7.5 Hz, 2H); 5.62 (s, IH); 7.27 (dd,J= 1. 1Hz,J=1. 1 Hz, IH); 7.52 (dd,J= 1. 5 Hz, J= 1.6 Hz, IH); 7.68 (dd, J= 7.9 Hz, J=1.6 Hz, IH); 12.00 (bs, IH); 13C-NMR (75.4 MHz, DMSO-t/6) ć/ppm: 14.0; 22.0; 90.6; 115.5; 120.8; 123.4; 130.9; 132.0; 151.3; 161.7; 165.9. ;4- Hidroksi- 8- izopropilkumarin ;Polazeći od 2-izopropilfenola (Aldrich) i prekristalizacijom nastalog taloga iz 50 %-tnog etanola dobijeno je 1.75 g (17.1 %) žućkastog praškastog 4-hidroksi-8-izopropilkumarina. 1 H-NMR (300 MHz, DMSO-flfc) S/ ppm: 1.24 (d,J =7.2 Hz, 6H); 3.45 (sept,J=6.9 Hz, IH); 5.64 (s, IH); 7.31 (dd,J= 7.7Hz,J=7.7 Hz, IH); 7.57 (dd,J= 7.6Hz, 7= 1.6 Hz, IH); 7.69(dd, J=7.8Hz, J=1.6 Hz, IH); ;<l3>C-NMR (75,4 MHz, DMSO-rf*) S/ ppm: 22.3; 26.2; 90.6; 115.5; 120.7; 123.5; 129.3; 135.3; 150.7; 161.7; 168.0.

4- Hidroksi- 5- izopropil- 8- metilkumarin

Polazeći od 5-izopropil-2-metilfenola (Aldrich) i trituriranjem nastalog ulja smešom metanola i vode dobijeno je 853 mg (7,8 %) smeđeg praškastog 4-hidroksi-5-izopropil-8-metilkumarina: 1 H-NMR (300 MHz, DMSO-af6) S/ ppm: 1.22 (d,J=6.8 Hz, 6H); 2.31 (s, 3H); 4.26 (sept,J=6.8 Hz, IH); 5.61 (s, IH); 7.20 (d,J=7.9 Hz, IH); 7.43(d, J=7.9 Hz, IH); 12.00 (bs, IH);

<13>C-NMR (75.4 MHz, DMSO-cfc) S/ ppm: 15.1; 24.1; 28.7; 91.5; 112.7; 120.8; 122.9; 132.9; 145.8; 153.0; 161.1; 168.7.

4- Hidroksi- 8- hloro- 5- metilkumarin

Polazeći od 2-hloro-5-metilfenola (Aldrich) i prekristalizacijom nastalog taloga iz acetonitrila dobijeno je 1.33 g (12.6 %) smeđeg praškastog proizvoda 4-hidroksi-8-hloro-5-metilkumarina.

'H-NMR (300 MHz, DMSO-c4) J/ppm: 2.65 (s, 3H); 5.65 (s, IH); 7.10 (d,J=8.2 Hz, IH); 7.62 (d,J=8.2 Hz, IH); 12.60 (bs, IH);

<13>C-NMR (75.4 MHz,DMSO-<4) S/ ppm:22.5; 91.3; 115.8; 117.9; 127.3; 131.5; 136.3; 149.9; 160.3; 168.3.

5- Fluoro- 4- hidroksikumarin

U trogrlu tikvicu (inertna atmosfera) stavljena je katalitička količina iV-benzil-benzamida (Aldrich) i suvi THF (Aldrich) (20 mL). Ohlađenom rastvoru (-60 °C) je dodat 2.0 M rastvor LDA (Aldrich) (10 mmol) u heptanu (5 mL). U reakcijsku smešu je zatim polako dokapavan rastvorterc-butilacetata (Aldrich) (1.3 mL, 10 mmol) rastvorenog u suvom THF-u (4 mL) i mešanje je nastavljeno 50 minuta na temperaturi od -60 °C pri čemu je boja rastvora promenjena od crveno-smeđe u žutu. Rastvor, dobijen rastvaranjem metil 6-fluorosalicilata (474 mg; 2.4 mmol) u suvom THF-u (10 mL), je polako dodat u rastvor karbaniona i mešanje je nastavljeno preko noći pri čemu temperatura reakcijske smeše dostigne sobnu temperaturu. Smeši je dodat etil acetat (50 mL) i zasićen rastvor amonijum hlorida (50 mL), slojevi su odvojeni, a organski sloj je zatim ispran zasićenim rastvorom natrijum hlorida (2 x 50 mL) i osušen natrijum sulfatom. Rastvarač je uklonjen uparavanjem pod sniženim pritiskom. Zaostali smeđi uljasti proizvod je izmešan sa trifluoroacetatom (3 mL), a dobijena smeša je mešana 4 sata na sobnoj temperaturi i razrblažena smešom rastvarača heksan : eter (2:1) (30 mL). Istaložen je svetlo-smeđi talog, koji prečišćen na koloni silika gela (12 g) u sistemu rastvarača: hloroform : metanol : sirćetna kiselina (60:10:1) daje 54 mg (12.5 %) svetlo-smeđeg amorfnog 5-fluoro-4-hidroksikumarina.

'H-NMR (300 MHz, DMSO-flfc) ć/ppm: 5.,66 (s, IH); 7.09 (ddd,J= 1.0 Hz;

J =8.4 Hz,J=11.2 Hz, IH); 7.17 (m, IH); 7.64 (dt,J=6.7 Hz,J=8.4 Hz, IH); 11.00 (bs, IH);

<13>C-NMR (75.4 MHz, DMSO-J6) č/ppm: 93.2; 106.7 (d,J =12.7 Hz); 112.0 (d,J =11.5 Hz); 130.6(d, J=3.5 Hz); 133.7(d, J=10.6 Hz); 156.2(d, J= 4.5Hz); 159.9 (d,J= 263.0 Hz); 161.6; 165.7.

4- Hidroksi- 7- metoksibenzo[ g] kumarin

Natrijum 3-hidroksi-7-metoksi-2-naftoat (Fluka) (4.36 g; 20 mmol) je suspendovan u metanolu (50 ml). Dodata je koncentrovana sumporna kiselina (3 mL) i reakcijska smeša je nastavljena sa zagrijavanjem uz refluks od 5 sati, zatim je ohlađena do sobne temperature. Smeši je dodat etil acetat (100 mL) i zasićena je rastvorom natrijum bikarbonata (100 mL). Nakon mešanja slojevi su odvojeni, a organski sloj je ponovo ispran zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (100 mL). Nakon sušenja sa natrijm sulfatom rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom. U tikvici je zaostao kristalni proizvod (3.1 g, 67 %) koji prema postupku opisanom pod Metodom BI i prekristalizacijom iz metanola daje 1.4 g (58 %) svetlo-smeđeg kristalnog 4-hidroksi-7-metoksibenzo[g]kumarina.

'H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) S/ ppm: 3.89 (s, 3H); 5.65 (s, IH); 7.30 (dd, J = 2.5Hz; J= 9.0 Hz,IH); 7.54(d, .7=2.4Hz, IH); 7.81 (s, IH); 7.91 (d, J=9.0 Hz, IH); 8.35 (s, IH); 12.59 (bs, IH);

MSm/ z:ES" (acetonitrikvoda); [M-H]" 241.1.

Metod B3

4- Hidroksi- 9- metoksibenzo[ g] kumarin

Metil 3,5-dihidroksi-2-naftoat (3.27 g; 15 mmol) je izmešan sa kalijum karbonatom (3 g; 22 mmol), dodat je aceton (50 mL), a zatim je polako dokapavan dimetilsulfat (Merck) (1.56 mL; 16.5 mmol). Reakcijska smeša je refluksovana 2 sata, ohlađena do sobne temperate i dodata je voda (100 mL) pri čemu je sav kalijum karbonat rastvoren. Rastvoru je dodat dihlorometan (100 mL) i slojevi su odvojeni. Organski sloj je osušen nad bezvodnim natrijum sulfatom i rastvarač je uparen do suva. Čvrsti ostatak je prekristalisan iz metanola i dobijeno je 2.4 g (70 %) metil 3-hidroksi-5-metoksi-2-naftoata.

'H-NMR (300 MHz, DMSO-t/e) S/ ppm: 3.93 (s, 3H); 3.95 (s, 3H); 7.00 (d,J=7.5 Hz, IH); 7.28 (t,J=8.0 Hz, IH); 7.51 (s, IH); 7.53 (d,J=9.0 Hz, IH); 8.41 (s, IH).

Obradom metil 3-hidroksi-5-metoksi-2-naftoata prema postupku opisanom pod Metodom 2B dobijeno je 1.0 g (84 %) 4-hidroksi-9-metoksi-benzo[g]kumarina.

'H-NMR (300 MHz, DMSO-t/6) S/ ppm: 3.99 (s, 3H); 5.66 (s, IH); 7.06 (d,J=7.6 Hz, IH); 7.44 (t, J = 7.9 Hz, IH); 7.67 (d, = 8.3 Hz, IH); 7.87 (s, IH); 8.41 (s, IH); 12.67 (bs, IH);

MSm/ z:ES" (acetonitril:voda); [M-H]" 241.1.

Metoda B4

4, 7- Dihidroksi- benzo[ g] kumarin

Suspenzija metil 3,7-dihidroksi-2-naftoata (2.2 g; 10 mmol), benzilhlorida (Merck)

(1.26 mL; 11.0 mmol), kalijum jodida (1.8 g; 11.0 mmol) i kalijum karbonata (2.0 g;

15 mmol) u acetonu (30 mL) je refluksovana 7 sati, a zatim je ohlađena do sobne temperature. Neorganski talog je odfiltriran, ispran acetonom, a filtrat uparen do suva. Čvrsti ostatak je rastvoren u etil acetatu, a dobijeni rastvor je ispran IM hlorovodoničnom kiselinom. Nakon sušenja natrijum sulfatom organski sloj je uparen i suvi ostatak je prekristalisan iz metanolapri čemu je dobijeno 1.2 g (39 %) metil 7-benziloksi-3-hidroksi-2-naftoata.

'H-NMR (300 MHz, DMSO-Jć)S/ ppm:3.95 (s, 3H); 5.20 (s, 2H); 7.29-7.45 (m, 5H); 7.51-7.56 (m, 3H); 7.73 (d,J=9.3 Hz, IH); 8.37 (s, IH); 10.08 (bs, IH);

MSm/ z:ES<+>(acetonitrikvoda); [MH]<+>309.2.

Dobijeni metil 7-benziloksi-3-hidroksi-2-naftoat je tretiran prema postupku opisanim pod Metodom BI i dobijeno je 1.1 g (91 %) 7-benziloksi-4-hidroksibenzo [ g] kumarina.

'H-NMR (300 MHz, DMSO-^6)S/ ppm:5.23 (s, 2H); 5.65 (s, IH); 7.36-7.45 (m, 6H); 7.53 (d,J=6,8 Hz, 3H); 7.81 (s, IH); 7.93 (d,J=6.7 Hz, IH); 8.33 (s, IH); 12.61 (bs, IH).

7-Benziloksi-4-hidroksibenzo[g]kumarin (1 g; 3.14 mmol) je rastvoren u etanolu (100 mL), dodat je cikloheksen (Merck) (1.54 mL) i 10 %-tni paladijum na aktivnom ugljenu (150 mg). Reakcijska smeša je refluksovana 5 sati. Katalizator je odfiltriran i ispran etanolom, a filtrat je uparen do suvog ostatka. Čvrsti ostatak je prekristalisan iz etil acetata kod čega je dobijeno 263 mg (33 %) 4,7-dihidroksi-benzo[g]kumarina.

'H-NMR (300 MHz, DMSO-d6)S/ ppm:5.63 (s, IH); 7.22 (dd,J =2.4 Hz,J=8.9 Hz, IH); 7.30 (d,J=2.1 Hz, IH); 7.74 (s, IH); 7.85 (d,J=9.0 Hz, IH); 8.21 (s, IH); 9.88 (bs, IH); 12.53 (bs, IH);

MS m/z: ES<+>(acetonitrikvoda); [MH]<+>229.2.

4, 9- Dihidroksi- benzo| g1kumarin

Polazeći od metil 3,5-dihidroksi-2-naftoata prema postupku opisanom pod Metodom B4 dobijeno je 267 mg (8%) metil 5-benzoksi-3-hidroksi-2-naftoata.

'H-NMR (300 MHz, DMSO-</6) J/ppm: 3.87 (s, 3H); 5.31 (s, 2H); 7.12 (d,J=7.2 Hz, IH); 7.27-7.56 (m, 8H); 7.74 (s, IH); 10.25 (bs, IH),

čijom ciklizacijom je dobijeno 1.28 g (82 %) 9-benziloksi-4-hidroksibenzo [ejkumarina,

MSm/ z:ES" (acetonitrikvoda); [M-H]" 317.2.

Debenziliovanjem 9-benziloksi-4-hidroksibenzo[g]kumarina dobijeno je 275 mg (74 %) 4,9-dihidroksibenzo[g]kumarina.

'H-NMR (300 MHz, DMSO-rftf) S/ ppm: 5.66 (s, IH); 6,96 (dd,J=2.4 Hz,

J=9.0 Hz, IH); 7.33 (t,J=7.6 Hz, IH); 7.56 (d,J=8.5 Hz, IH); 7.88 (s, IH); 8.38 (s, IH); 10.37 (bs, IH); 12.62 (bs, IH).

Metoda C

4- Hidroksi- 6. 8- diizopropilkumarin

U rastvor 3,5-diizopropilsalicilne kiseline (Aldrich) (10 mmol, 2.2 g) i dihlormetana (20 mL) dodat je oksalil-hlorid (Merck) (11.0 mmol, 1.03 mL) i DMF (Aldrich) (80 uL). Reakcijska smeša je refluksovana 1 sat nakon čega je rastvarač i višak oksalil-hlorida uklonjen pod sniženim pritiskom. Dobijeni uljasti proizvod je rastvoren u dihlormetanu (50 mL) i u reakcijsku smešu je uveden uz hlađenje gasoviti amonijak. Rastvor je razblažen vodom i organski sloj nakon sušenja sa natrijum sulfatom je uparen pod sniženim pritiskom. Žuti ostatak je prekristalisan iz n-heksana pri čemu je dobijeno 876 mg (40 %) 3,5-diizopropil salicilamida u obliku belog kristalnog proizvoda.

'H-NMR (300 MHz,CDCl3)5/ppm: 1.22 (d,J =6.9 Hz, 6H); 1.23 (d,J= 6.9 Hz, 6H); 2.83 (sept,J=6. 9 Hz, IH); 3.38 (sept,J=6. 9 Hz, IH); 5.80 (bs, 2H); 7.00 (d,J= 2.1 Hz, IH); 7.22 (d,J=2.1 Hz, IH); 12.00 (bs, IH).

U rastvor fosfornog oksihlorida (1.35 g, 8.8 mmol) i suvog piridina (12 mL) ohlađenog na 0 °C polako je dokapavan rastvor 3,5-diizopropil salicilamida (1.10 g, 5 mmol) i suvog piridina (5 mL). Reakcijska smeša je mešana na sobnoj temperaturi pri čemu se boja menjala od bezbojne preko ljubičaste u crvenu. Nakon ekstrakcije etil-acetatom i pranja zasićenim rastvorom natrijum hlorida i 2N hlorovodoničnom kiselinom, organski sloj je osušen i uparen pod sniženim pritiskom. Dobijeni čvrsti ostatak je prekristalisan iz acetonitrila pri čemu je dobijeno 610 mg (60 %) 2-hidroksi-3,5-diizopropil benzonitrila.

'H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) (5/ppm: 1.15 (d,J =6.9 Hz, 6H); 1.19 (d,J =6.9 Hz, 6H); 2.90 (sept,J= 6.9 Hz, IH); 3.52 (sept,J =6. 9 Hz, IH); 7.48 (d,J=2.2 Hz, IH); 7.50 (d,J=2.2 Hz, IH);

IR (KBr): 2234 cm"1.

U suvi THF (10 mL) dodat je 3.0 M rastvor metilmagnezijum bromida u dietiletru (Aldrich) (10.9 mL; 32.8 mmol), a zatim je dodat ranije pripremljen rastvor 2-hidroksi-3,5-diizopropil benzonitrila (2.78 g 13.7 mmol) i suvog THF (70 mL). Nakon 7 sati refluksa reakcijska smeša je izmešana sa vodom (100 mL), zakiseljena koncentrovanom hlorovodoničnom kiselinom (50 mL) i refluksovana još 1 sat. Nakon hlađenja i ekstrakcije etil-acetatom dobijen je uljasti proizvod, koji je prečišćen na koloni silika gela pri čemu je dobijeno 380 mg (12.5 %) 2'-hidroksi-3'5'-diizopropilacetofenona: 'H-NMR (300 MHz,CDCl3)S/ ppm: 1.23 (d,J =6.9 Hz, 6H); 1.25 (d,J =6.9 Hz, 6H); 2.64 (s, 3H); 2.87 (sept,J=6. 9 Hz, IH); 3.36 (sept,J=6.9 Hz, IH); 7.29 (d,J =2.2 Hz, IH); 7.40 (d,J=2.2 Hz, IH), 12.55 (s, IH).

2'-Hidroksi-3'5'-diizopropilacetofenon (380 mg, 1,7 mmol) je rastvoren u dietilkarbonatu (Aldrich) (5 mL) i reakcijska smeša je ohlađena na 0 °C. Zatim je u malim porcijama dodata 60 %-tna suspenzija natrijum hidrida u mineralnom ulju (Aldrich) (165 mg, 4.1 mmol). Nakon 1 sata refluksa reakcijska smeša je ohlađena i izmešana sa vodom (40 mL) te ekstrahovana dietiletrom (2 x 20 mL). Vodeni ekstrakt je zakiseljen i ekstrahovan etil-acetatom. Organski ekstrakt je osušen natrijum sulfatom i rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom, pri čemu je dobijeno 305 mg žutog praha koji je prečišćen na koloni silika gela i pri čemu je dobijeno 240 mg (57 %) belog kristalnog 4-hidroksi-6,8-diizopropilkumarina.

'H-NMR (300 MHz, DMSO-</6)S/ ppm:1.23 (d,J= 6.9 Hz, 6H); 1.26 (d,J=6.9 Hz, 6H); 2.98 (sept,J= 6. 9Hz, IH); 3.41 (sept,J= 6. 9Hz, IH); 5.59 (s, IH); 7.44(d, J=2.2Hz, IH); 7.51(d, J=2.2Hz, IH), 12.3 (bs, IH).

Claims

1. Nova j edinj enj a formule (I) naznačena time,što A i B zajedno sa C-atomima za koji su vezani predstavljaju aromatični deo, koji može imati jedan, dva ili više identičnih ili različitih supstituenata, koji mogu biti atomi halogena, Ci-C4-alkil, C2-C4-alkenil, C2-C4-alkinil, halo-Ci-C4-alkil, hidroksi, C1-C4-alkoksi, trifluorometoksi, C]-C4-alkanoil, amino, amino-Ci-C4-alkil, A<L>(Ci-C4-alkil)amino, jV,./v-di(Ci-C4-alkil)amino, sulfanil, Ci-C4-alkilsulfanil, sulfo, C1-C4-alkilsulfo, sulfino, Ci-C4-alkilsulfino, karboksi, Ci-C4-alkoksikarbonil, cijano, nitro; ili koji može biti dalje kondenzovan sa po potrebi supstituisanim heteroaromatičnim delovima ili heterociklima, uključujući sve njihove stereoizomere i tautomere, te njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvate.

2. Jedinjenja prema zahtevu 1,naznačena time,što simboli A i B zajedno sa pripadajućim C-atomima imaju značenje dva identična kondenzovana aromatična ili heteroaromatična prstena.

3. Jedinjenja prema zahtevu 2,naznačena time,što su aromatični prsteni benzenski ili naftalenski prsteni.

4. Jedinjenja prema zahtevu 2,naznačena time,što su heteroaromatični prsteni benzofuranski ili benzopiranski prsteni.

5. Jedinjenja prema zahtevima od 2 do 4,naznačena time,što je svaki aromatični ili heteroaromatični prsten supstituisan sa jednim ili dva identična ili različita supstituenta, izabranih između alkil, hidroksi ili metoksi grupe i/ili atoma fluora, hlora, broma ili joda.

6. Jedinjenja prema zahtevu 5,naznačena time,što se na identičnim pozicijama svakog kondenzovanog aromatičnog ili heteroaromatičnog prstena nalaze isti supstituenti.

7. Jedinjenja prema zahtevu 5,naznačena time,što je alkil grupa nezavisno izabrana između metila, etila ili izopropila.

8. Selektovana jedinjenja prema zahtevu 1: 2-Hidroksi-3 -(4-hidroksi-2-okso-2//-hromen-3 -il)-2,3 -dihidro-4/f- furo [3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-5-metil-2-okso-2//-hromen-3-il)-9-metil-2,3-dihidro-4//furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-6-metil-2-okso-2//-hromen-3-il)-8-metil-2,3-dihidro-4/f-furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3 -(4-hidroksi-7-metil-2-okso-2//-hromen-3 -il)-7-metil-2,3 -dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-8-metil-2-okso-2//-hromen-3-il)-6-metil-2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-5,7-dimetil-2-okso-2//-hromen-3-il)-7,9-dimetil-2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-5,8-dimetil-2-okso-2//-hromen-3-il)-6,9-dimetil-2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-6J-dm dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-7,8-dimetil-2-okso-2/^-hromen-3-il)-6,7-dimetil-2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-6,8-dimetil-2-okso-2//-hromen-3-il)-6,8-dimetil-2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 8-Etil-3-(6-etil-4-hidroksi-2-okso-2//-hromen-3-il)-2-hidroksi-2,3-dihidro-4//- furo [3,2-c]hromen-4-on; 6-Etil-3-(8-etil-4-hidroksi-2-okso-2/f-hromen-3-il)-2-hidroksi-2,3-dihidro-4//- furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-6-izopropil-2-okso-2//-hromen-3-il)-8-izopropil-2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-8-izopropil-2-okso-2//-hromen-3-il)-6-izopropil-2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-6,8-diizopropil-2-okso-2//-m-omen-3-il)-6,8-diizopropil-2,3-dihidro-4/^-furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-5-izopropil-8-metil-2-okso-2//-hromen-3-il)-9-izopropil-6-metil-2,3 -dihidro-4//-furo [3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-8-izopropil-5-metil-2-okso-2//-hromen-3-il)-6-izopropil-9-metil-2,3 -dihidro-4//-furo [3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-5-metoksi-2-okso-2/^-hromen-3-il)-9-metoksi-2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-6-metoksi-2-okso-2//-hromen-3-il)-8-metoksi-2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-7-metoksi-2-okso-2/^-hromen-3-il)-7-metoksi-2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-8-metoksi-2-okso-2//-hromen-3-il)-6-metoksi-2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-5,7-dimetoksi-2-okso-2//-hromen-3-il)-7,9-dimetoksi-2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 2- Hidroksi-3-(4-hidroksi-6J-dimetoksi-2-okso-2/f-hromen-3-il)-7,8-dim 2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 3- (4,5-Dihidroksi-2-okso-2//-hromen-3-il)-2,9-dihidroksi-2,3-dihidro-4i7-furo[3,2-c]hromen-4-on; 3-(4,6-Dihidroksi-2-okso-2^-hromen-3-il)-2,8-dihidroksi-2,3-dihidro-4//- furo[3,2-c]hrornen-4-on; 3-(4J-Dihidroksi-2-okso-2//-hromen-3-il)-2,7-dihidroksi-2,3-dihidro-4i/- furo[3,2-c]hromen-4-on; 3-(4,7-Dihidroksi-8-metil-2-okso-2/7-hromen-3-il)-2J-dihidroksi-6-metil-2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 3-(4J-Dihidroksi-5-metil-2-okso-2/f-hromen-3-il)-2,7-dihidroksi-9-metil-2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 2,6J-Trihidroksi-3-(4J,84rihidroksi-2-okso-2^-hromen-3-il)-2,3-dihidro-4i7-furo[3,2-c]hromen-4-on; 9-Fluoro-3-(5-fluoro-4-hidroksi-2-okso-2//-hromen-3-il)-2-hidroksi-2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 8-Fluoro-3-(6-fluoro-4-hidroksi-2-okso-2//-hromen-3-il)-2-hidroksi-2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-6-hloro-2-okso-2/^-hromen-3-il)-8-hloro-2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 8-Bromo-3 -(6-bromo-4-hidroksi-2-okso-2//-hromen-3 -il)-2-hidroksi-2,3 - dihidro-4/f-furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-6-jodo-2-okso-2//-hromen-3-il)-8-jodo-2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 7-Fluoro-3-(7-fluoro-4-hidroksi-2-okso-2//-hromen-3-il)-2-hidroksi-2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-7-hloro-2-okso-2//-hromen-3-il)-7-hloro-2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-8-hloro-2-okso-2//-bjomen-3-il)-6-hloro-2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-6-hloro-7-metil-2-okso-2/7-hrom metil-23-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(l-hidroksi-3-okso-3//-benzo|/]hromen-2-il)-2,3-dihidro-4//- benzo[/]furo [3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-2-okso-2//-benzo[g]hromen-3-il)-2,3-dihidro-4/7-benzo[g]furo[3,2-c]hromen-4-on;2-Hidroksi-1 -(4-hidroksi-2-okso-2//-benzo[/z]hromen-3 -il)-1,2-dihidro-11 H-benzo [ h J furo [3, 2- c] hromen-11 -on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-7-metoksi-2-okso-2//-benzo[g]hromen-2-il)-9-metoksi-2,3 -dihidro-4//-benzo [g] furo [3,2-c]hromen-4-on; 2- Hidroksi-3 -(4-hidroksi-9-metoksi-2-okso-2/f-benzo [ g] hromen-2-il)-7-metoksi-2,3-dihidro-4/f-benzo[g]furo[3,2-c]hromen-4-on; 3- (4,9-Dihidroksi-2-okso-2//-benzo[g]hromen-2-il)-2,7-dihidroksi-2,3-dihidro-4//-benzo[g]furo[3,2-c]hromen-4-on; 3-(4,7-Dihidroksi-2-okso-2//-benzo[g]hromen-2-il)-2,9-dihidroksi-2,3-dihidro-4//-benzo[g]furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(5-hidroksi-4,9-dimetoksi-7-okso-7/f-furo[3,2-g]hromen-6-il)-6,10-dimetoksi-2,3-dihidro-4//-bisfuro[3,2-c;3,2-g]hromen-4-on. 7- Etil-3-(7-etil-4-hidroksi-2-okso-2//-hromen-3-il)-2-hidroksi-2,3-dihidro-4//- furo[3,2-c]hromen-4-on; 6,8-Dibromo-3-(6,8-dibromo-4-hidroksi-2-okso-2//-hromen-3-il)-2-hidroksi-2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 2-Hidroksi-3-(4-hidroksi-6,8-dihloro-2-okso-2/7-hromen-3-il)-6,8-dihloro-2,3-dihidro-4//-furo[3,2-c]hromen-4-on; 8- Hidroksi-7-(4-hidroksi-8,8-dimetil-2-okso-2//, 7/7-pirano[2,3-/z]hromen-3-il)-2,2-dimetil-7,8-dihidro-2//,6/f-pirano[2,3-/z]furo[3,2-c]hromen-6-on

9. Postupci za dobijanje jedinjenja formule (I), uključujući sve njihove stereoizomere i tautomere, gde A i B zajedno sa C-atomima za koji su vezani predstavljaju aromatični deo, koji može imati jedan, dva ili više identičnih ili različitih supstituenata, koji mogu biti atomi halogena, Ci-C4-alkil, C2-C4-alkenil, C2-C4-alkinil, halo-Ci-C4-alkil, hidroksi, C]-C4-alkoksi, trifluorometoksi, Ci-C4-alkanoil, amino, amino-Ci-C4-alkil,N-( C\- C4-alkil)amino, A/;A/^-di(Ci-C4-alkil)amino, sulfanil, Ci-C4-alkilsulfanil, sulfo, C1-C4-alkilsulfo, sulfino, Ci-C4-alkilsulfino, karboksi, Ci-C4-alkoksikarbonil, cijano, nitro; ili koji može biti dalje kondenzovan sa po potrebi supstituisanim heteroaromatičnim delovima ili heterociklima, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i solvata, naznačeni time,što se postupci sastoje od kondenzacije jedinjenja formule (II) ili njihovih soli: sa glioksalom formule (III) u vodeno-organskom medijumu; i/ili prevođenjem nastalih slobodnih jedinjenja prikazanih formulom (I) u odgovarajuće soli, i/ili prevođenjem nastalih soli u slobodna jedinjenja ili u druge soli.

10. Postupci prema zahtevu 9,naznačeni time,što je organski rastvarač acetonitril.

11. Postupci prema zahtevu 9,naznačeni time,što je temperatura reakcijske smeše temperatura ključanja acetonitrila.

12. Farmaceutski sastav koji sadrži jedan ili više jedinjenja formule (I) navedenih u zahtevu 1,naznačen time,što se u smeši koriste aktivna supstanca, njezine farmaceutski prihvatljive soli ili solvati kao i farmaceutski prihvatljivi razređivači i nosači.

13. Primena jedinjenja formule (I) prema zahtevu 1, u profilaksi i terapiji kod pacijenata sa upalnim stanjima i obolenjima.

14. Primena jedinjenja formule (I) prema zahtevu 13, u profilaksi i terapiji kod pacijenata sa astmom, alergijskim rinitisom, nosnim polipima, ekcemima, psorijazom, dermatitisom, neurodermatitisom, pruritisom, konjunktivitisom, reumatoidnim artritisom, upalnim obolenjama creva, autoimunim obolenjima i upalama izazvanim akutnim traumama.

15. Metode primene jedinjenja formule (I) prema zahtevu 1, u profilaksi i lečenju upalnih stanja i obolenja gde se pogodni farmaceutski preparati mogu primeniti lokalno, parenteralno ili peroralno.