RO136022A0 - Compoziţie fitoterapeutică pe bază de extract gemoterapic de corylus avellana îmbogăţit cu nanocomplexe de crisină/ciclodextrine destinat fibrozei hepatice în diabetul zaharat şi metodă de obţinere aacesteia - Google Patents
Compoziţie fitoterapeutică pe bază de extract gemoterapic de corylus avellana îmbogăţit cu nanocomplexe de crisină/ciclodextrine destinat fibrozei hepatice în diabetul zaharat şi metodă de obţinere aacesteia Download PDFInfo
- Publication number
- RO136022A0 RO136022A0 ROA202200328A RO202200328A RO136022A0 RO 136022 A0 RO136022 A0 RO 136022A0 RO A202200328 A ROA202200328 A RO A202200328A RO 202200328 A RO202200328 A RO 202200328A RO 136022 A0 RO136022 A0 RO 136022A0
- Authority
- RO
- Romania
- Prior art keywords
- chrysin
- extract
- cyclodextrin
- nanocomplexes
- corylus avellana
- Prior art date
Links
- RTIXKCRFFJGDFG-UHFFFAOYSA-N chrysin Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2)=O)C=1OC=2C1=CC=CC=C1 RTIXKCRFFJGDFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 103
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 title claims abstract description 52
- 229940043370 chrysin Drugs 0.000 title claims abstract description 50
- NYCXYKOXLNBYID-UHFFFAOYSA-N 5,7-Dihydroxychromone Natural products O1C=CC(=O)C=2C1=CC(O)=CC=2O NYCXYKOXLNBYID-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 49
- 235000015838 chrysin Nutrition 0.000 title claims abstract description 49
- 235000007466 Corylus avellana Nutrition 0.000 title claims abstract description 38
- 240000007582 Corylus avellana Species 0.000 title claims abstract description 35
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 31
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 26
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 25
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 title claims abstract description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 title abstract description 19
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 230000003510 anti-fibrotic effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 8
- 235000001543 Corylus americana Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 6
- 241000723382 Corylus Species 0.000 claims abstract description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims abstract description 4
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 claims abstract description 4
- 238000002803 maceration Methods 0.000 claims abstract description 3
- ODLHGICHYURWBS-LKONHMLTSA-N trappsol cyclo Chemical compound CC(O)COC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)COCC(O)C)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1COCC(C)O ODLHGICHYURWBS-LKONHMLTSA-N 0.000 claims description 14
- 210000004024 hepatic stellate cell Anatomy 0.000 claims description 13
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 12
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 11
- 229910001868 water Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 claims description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 8
- 229940097362 cyclodextrins Drugs 0.000 claims description 8
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 7
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 7
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 claims description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 6
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 claims description 6
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 claims description 5
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 claims description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 5
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 claims description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 4
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 claims description 3
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 claims description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 3
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 claims description 2
- 235000017807 phytochemicals Nutrition 0.000 claims description 2
- 229930000223 plant secondary metabolite Natural products 0.000 claims description 2
- 230000002206 pro-fibrotic effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 3
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 abstract description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 abstract 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 abstract 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 14
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 8
- REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N Quercetin Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2O)=O)C=1OC=2C1=CC=C(O)C(O)=C1 REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 6
- LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N gallic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 5
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 5
- PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N Caffeoylquinic acid Natural products CC(CCC(=O)C(C)C1C(=O)CC2C3CC(O)C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(=O)O PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000002274 Matrix Metalloproteinases Human genes 0.000 description 4
- 108010000684 Matrix Metalloproteinases Proteins 0.000 description 4
- CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N chlorogenic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 230000003176 fibrotic effect Effects 0.000 description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 4
- MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N kaempferol Natural products OC1=C(C(=O)c2cc(O)cc(O)c2O1)c3ccc(O)cc3 MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 4
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N (+)-catechin Chemical compound C1([C@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@@H]2O)=CC=C(O)C(O)=C1 PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N 0.000 description 3
- FTVWIRXFELQLPI-ZDUSSCGKSA-N (S)-naringenin Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1[C@H]1OC2=CC(O)=CC(O)=C2C(=O)C1 FTVWIRXFELQLPI-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 3
- CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 3-O-Caffeoylquinic acid Natural products O[C@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 0.000 description 3
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 3
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 3
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 3
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N Neochlorogenin-saeure Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N 0.000 description 3
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 3
- ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N Quercetagetin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C(O)=C(O)C=C2O1 ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N Rhynchosin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=CC(O)=C(O)C=C2O1 HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- KZNIFHPLKGYRTM-UHFFFAOYSA-N apigenin Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=CC(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2O1 KZNIFHPLKGYRTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XADJWCRESPGUTB-UHFFFAOYSA-N apigenin Natural products C1=CC(O)=CC=C1C1=CC(=O)C2=CC(O)=C(O)C=C2O1 XADJWCRESPGUTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000008714 apigenin Nutrition 0.000 description 3
- 229940117893 apigenin Drugs 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 3
- ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N catechin Natural products OC1Cc2cc(O)cc(O)c2OC1c3ccc(O)c(O)c3 ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000005487 catechin Nutrition 0.000 description 3
- 229940074393 chlorogenic acid Drugs 0.000 description 3
- FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N chlorogenic acid Natural products O[C@@H]1C[C@](O)(C[C@@H](CC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N 0.000 description 3
- 235000001368 chlorogenic acid Nutrition 0.000 description 3
- 229950001002 cianidanol Drugs 0.000 description 3
- BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N cis-3-O-p-coumaroylquinic acid Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)cc2)[C@@H]1O)C(=O)O BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N 0.000 description 3
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 3
- 229940074391 gallic acid Drugs 0.000 description 3
- 235000004515 gallic acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 3
- 238000002552 multiple reaction monitoring Methods 0.000 description 3
- WGEYAGZBLYNDFV-UHFFFAOYSA-N naringenin Natural products C1(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2OC(C1)C1=CC=C(CC1)O WGEYAGZBLYNDFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940117954 naringenin Drugs 0.000 description 3
- 235000007625 naringenin Nutrition 0.000 description 3
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 3
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 229960001285 quercetin Drugs 0.000 description 3
- 235000005875 quercetin Nutrition 0.000 description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 3
- 238000004626 scanning electron microscopy Methods 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N streptozocin Chemical compound O=NN(C)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N 0.000 description 3
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 3
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IVCZEZUJCMWBBR-UHFFFAOYSA-N 7-O-beta-D-glucopyranosyl-7,3',4'-trihydroxyflavone Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=C2C(=O)C=C(C=3C=C(O)C(O)=CC=3)OC2=C1 IVCZEZUJCMWBBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OVSQVDMCBVZWGM-SJWGPRHPSA-N Hyperin Natural products O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C(C=2C=C(O)C(O)=CC=2)OC2=CC(O)=CC(O)=C2C1=O OVSQVDMCBVZWGM-SJWGPRHPSA-N 0.000 description 2
- FVQOMEDMFUMIMO-UHFFFAOYSA-N Hyperosid Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2OC1C1=CC=C(O)C(O)=C1 FVQOMEDMFUMIMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100039364 Metalloproteinase inhibitor 1 Human genes 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 2
- WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N beta-cyclodextrin Chemical class OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N 0.000 description 2
- 235000011175 beta-cyclodextrine Nutrition 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 2
- NQYPTLKGQJDGTI-FCVRJVSHSA-N hyperoside Natural products OC[C@H]1O[C@@H](OC2=C(Oc3cc(O)cc(O)c3[C@H]2O)c4ccc(O)c(O)c4)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O NQYPTLKGQJDGTI-FCVRJVSHSA-N 0.000 description 2
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- IYRMWMYZSQPJKC-UHFFFAOYSA-N kaempferol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2O1 IYRMWMYZSQPJKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PEFNSGRTCBGNAN-QNDFHXLGSA-N luteolin 7-O-beta-D-glucoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=C2C(=O)C=C(C=3C=C(O)C(O)=CC=3)OC2=C1 PEFNSGRTCBGNAN-QNDFHXLGSA-N 0.000 description 2
- QZOVLVSTWSTHQN-UHFFFAOYSA-N luteolin 7-O-glucoside Natural products OCC1OC(Oc2cc(O)c3C(=O)C=C(C(=O)c3c2)c4ccc(O)c(O)c4)C(O)C(O)C1O QZOVLVSTWSTHQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KBGKQZVCLWKUDQ-UHFFFAOYSA-N luteolin-glucoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC(O)=CC2=C1C(=O)C=C(C=1C=C(O)C(O)=CC=1)O2 KBGKQZVCLWKUDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 2
- SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N phylloquinone Natural products CC(C)CCCCC(C)CCC(C)CCCC(=CCC1=C(C)C(=O)c2ccccc2C1=O)C SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- OVSQVDMCBVZWGM-DTGCRPNFSA-N quercetin 3-O-beta-D-galactopyranoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C(C=2C=C(O)C(O)=CC=2)OC2=CC(O)=CC(O)=C2C1=O OVSQVDMCBVZWGM-DTGCRPNFSA-N 0.000 description 2
- BBFYUPYFXSSMNV-UHFFFAOYSA-N quercetin-7-o-galactoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC(O)=C2C(=O)C(O)=C(C=3C=C(O)C(O)=CC=3)OC2=C1 BBFYUPYFXSSMNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 238000010591 solubility diagram Methods 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N tetrachloromethane Chemical compound ClC(Cl)(Cl)Cl VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N thiamine Chemical compound CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 2
- CWVRJTMFETXNAD-GMZLATJGSA-N 5-Caffeoyl quinic acid Natural products O[C@H]1C[C@](O)(C[C@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O CWVRJTMFETXNAD-GMZLATJGSA-N 0.000 description 1
- ZKRFOXLVOKTUTA-KQYNXXCUSA-N 9-(5-phosphoribofuranosyl)-6-mercaptopurine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(NC=NC2=S)=C2N=C1 ZKRFOXLVOKTUTA-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 229930192334 Auxin Natural products 0.000 description 1
- SWGKAHCIOQPKFW-JTNORFRNSA-N Caftaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@H](C(O)=O)OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 SWGKAHCIOQPKFW-JTNORFRNSA-N 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000006154 Chronic hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 235000007516 Chrysanthemum Nutrition 0.000 description 1
- 244000189548 Chrysanthemum x morifolium Species 0.000 description 1
- 241001441396 Chrysina Species 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N D-Lyxoflavin Natural products OCC(O)C(O)C(O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UBSCDKPKWHYZNX-UHFFFAOYSA-N Demethoxycapillarisin Natural products C1=CC(O)=CC=C1OC1=CC(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2O1 UBSCDKPKWHYZNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241001506775 Epicoccum nigrum Species 0.000 description 1
- 229930191978 Gibberellin Natural products 0.000 description 1
- 208000002705 Glucose Intolerance Diseases 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 206010019708 Hepatic steatosis Diseases 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 101000669513 Homo sapiens Metalloproteinase inhibitor 1 Proteins 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 1
- 241001610351 Ipsa Species 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 1
- ABSPRNADVQNDOU-UHFFFAOYSA-N Menaquinone 1 Natural products C1=CC=C2C(=O)C(CC=C(C)C)=C(C)C(=O)C2=C1 ABSPRNADVQNDOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IKMDFBPHZNJCSN-UHFFFAOYSA-N Myricetin Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2O)=O)C=1OC=2C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 IKMDFBPHZNJCSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000241413 Propolis Species 0.000 description 1
- ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N Streptozotocin Natural products O=NN(C)C(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010031374 Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-1 Proteins 0.000 description 1
- 229930003448 Vitamin K Natural products 0.000 description 1
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000002363 auxin Substances 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- SWGKAHCIOQPKFW-GHMZBOCLSA-N caffeoyltartaric acid Natural products OC(=O)[C@H](O)[C@H](C(O)=O)OC(=O)C=CC1=CC=C(O)C(O)=C1 SWGKAHCIOQPKFW-GHMZBOCLSA-N 0.000 description 1
- 230000003293 cardioprotective effect Effects 0.000 description 1
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 102000013373 fibrillar collagen Human genes 0.000 description 1
- 108060002894 fibrillar collagen Proteins 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 210000000630 fibrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 229940014144 folate Drugs 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 238000003304 gavage Methods 0.000 description 1
- 239000003448 gibberellin Substances 0.000 description 1
- IXORZMNAPKEEDV-OBDJNFEBSA-N gibberellin A3 Chemical class C([C@@]1(O)C(=C)C[C@@]2(C1)[C@H]1C(O)=O)C[C@H]2[C@]2(C=C[C@@H]3O)[C@H]1[C@]3(C)C(=O)O2 IXORZMNAPKEEDV-OBDJNFEBSA-N 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 1
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000753 hepatic injury Toxicity 0.000 description 1
- 208000010710 hepatitis C virus infection Diseases 0.000 description 1
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 1
- -1 hydroxypropyl cyclodextrin Chemical compound 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 235000008777 kaempferol Nutrition 0.000 description 1
- 210000001865 kupffer cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000005772 leucine Nutrition 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 230000004784 molecular pathogenesis Effects 0.000 description 1
- UXOUKMQIEVGVLY-UHFFFAOYSA-N morin Natural products OC1=CC(O)=CC(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)=C1 UXOUKMQIEVGVLY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940116852 myricetin Drugs 0.000 description 1
- PCOBUQBNVYZTBU-UHFFFAOYSA-N myricetin Natural products OC1=C(O)C(O)=CC(C=2OC3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C(=O)C=2)=C1 PCOBUQBNVYZTBU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000007743 myricetin Nutrition 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000024121 nodulation Effects 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid group Chemical group C(CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)(=O)O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 235000019175 phylloquinone Nutrition 0.000 description 1
- 239000011772 phylloquinone Substances 0.000 description 1
- MBWXNTAXLNYFJB-NKFFZRIASA-N phylloquinone Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(C/C=C(C)/CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)=C(C)C(=O)C2=C1 MBWXNTAXLNYFJB-NKFFZRIASA-N 0.000 description 1
- 229960001898 phytomenadione Drugs 0.000 description 1
- 229940068065 phytosterols Drugs 0.000 description 1
- 238000009160 phytotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 1
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 201000009104 prediabetes syndrome Diseases 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 229940069949 propolis Drugs 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 1
- 239000002151 riboflavin Substances 0.000 description 1
- 235000019192 riboflavin Nutrition 0.000 description 1
- 229960002477 riboflavin Drugs 0.000 description 1
- 150000004671 saturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000003441 saturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000036573 scar formation Effects 0.000 description 1
- 230000037390 scarring Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 239000012798 spherical particle Substances 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000007863 steatosis Effects 0.000 description 1
- 231100000240 steatosis hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 229960001052 streptozocin Drugs 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000011721 thiamine Substances 0.000 description 1
- 235000019157 thiamine Nutrition 0.000 description 1
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 description 1
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- SWGKAHCIOQPKFW-UHFFFAOYSA-N trans-caffeoyl-tartaric acid Natural products OC(=O)C(O)C(C(O)=O)OC(=O)C=CC1=CC=C(O)C(O)=C1 SWGKAHCIOQPKFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000001195 ultra high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 1
- 239000005418 vegetable material Substances 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 235000019168 vitamin K Nutrition 0.000 description 1
- 239000011712 vitamin K Substances 0.000 description 1
- 150000003721 vitamin K derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940046010 vitamin k Drugs 0.000 description 1
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 1
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 description 1
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Invenţia se referă la un procedeu de obţinere a unei compoziţii farmaceutice pe bază de extract gemoterapic de Corylus avellana îmbogăţit cu nanocomplexe de crisină/ciclodextrine destinat fibrozei hepatice în diabetul zaharat. Procedeul, conform invenţiei, constă în etapele de: obţinere a extractului gemoterapic de Corylus avellana din muguri de alun în stare proaspătă în solvent amestec de glicerină-alcool etilic 96% vol (1:1), prin extracţia la rece, prin macerare, timp de 20 zile, la un raport 1:20 plantă-solvent, formularea complexelor de incluziune crisină-ciclodextrină, amestecarea extractului gemoterapic de alun cu nanocomplexe de crisină/ciclodextrine şi liofilizarea amestecului, rezultând o compoziţie fitoterapeutică având proprietăţi anti-fibrotice hepatice.
Description
RO 136022 AO
OFICIUL de stat pentru invenții Șl MĂRCI Cerere de_brevet de Invenție
DESCRIEREA INVENȚIEI
Titlul invenției: Compoziție fitoterapeutică pe bază de extract gemoterapic de Corylus avellana îmbogățit cu nanocomplexe de crisină/ciclodextrine destinat fibrozei hepatice în diabetul zaharat si metodă de obținere a acesteia
Domeniul tehnic la care se referă invenția:
Prezența invenție se referă la o nouă compoziție fitoterapeutică pe bază de extract gemoterapic de Corylus avellana îmbogățit cu nanocomplexe de crisină/ciclodextrine destinat fibrozei hepatice în diabetul zaharat si metoda de obținere a acesteia
Stadiul tehnicii:
Ciroza hepatică și diabetul zaharat (DZ) sunt două boli cronice cu impact semnificativ asupra calității vieții. DZ are o prevalență globală estimată de aproximativ 9%, iar până în 2030, la nivel global 300-400 de milioane de oameni vor fi afectați [1], rezultând o încărcătură economică și socială semnificativă [2, 3]. Scăderea toleranței la glucoză este observată la aproximativ 80% dintre pacienții cu ciroză, în timp ce 30-60% dintre pacienții cu ciroză avansată dezvoltă diabet [4], Dovezile cumulate ale rezultatelor cercetărilor efectuate până în prezent sugerează că diabetul [5], rezistența la insulină [6, 7] și nivelul de glucoză din sânge [8] sunt asociate cu progresia fibrozei hepatice la pacienții cu boli hepatice cronice. Puține studii au evidențiat impactul DZ de tip 2 asupra rezultatelor clinice ale cirozei. în mai multe analize retrospective transversale ale pacienților cu ciroză, DZ a conferit un risc mai mare de complicații [9, 10]. Mai mult, studiul Verona, care a înrolat > 7000 de indivizi cu DZ de tip 2, a generat un risc de mortalitate pe 5 ani de 2,52 ori (IC 95%: 1,96-3,2) mai mare raportat la riscul general populațional [11].
Fibroza hepatică este un răspuns cicatricial reversibil la leziunile hepatice și, în cele din urmă, duce la ciroză, asociată cu formarea de noduli și contracție de organ[12]. Formarea cicatricilor fibroase este caracterizată prin acumularea progresivă a unei matrici extracelulare modificate calitativ (ECM) care este îmbogățită excesiv în colagen fibrilar de tip I și III și este ascociată cu scăderea remodelării matricei [13], Acesta modificare a matricii este însoțită de o angiogeneza alterată, ducând în cele din urmă la modificări structurale severe caracteristice cirozei hepatice.
Procesul de fibrogeneză este condus de o populație celulară heterogenă (celule asemănătoare miofibroblastelor) care sunt implicate în patogeneza fibrozei hepatice: celule hepatice stelate, fibroblaste portale, celule stern mezenchimale derivate din măduva osoasă, hepatocite și celule epiteliale biliare, fibrocite. în timpul progresului fibrogenezei, celulele stelate hepatice (HSC), care în stare normală sunt în repaus și stochează vit. A, se activează, urmată de eliberarea de citokine și chemokine, care induce transdiferențierea lor în celule asemănătoare miofibroblastelor [13]. Acest pas este marcat de expresia crescută α-SMA și procolagen-I, ducând în final la o producție crescută și acumulare de componente ale matricei extracelulare, inclusiv colagen. Factorul de creștere transformator-βΐ (TGF-βΙ) produs de celulele Kupffer, celulele endoteliale și hepatocite a fost recunoscut ca un activator cheie al HSC în patogeneza fibrozei hepatice și acționează prin activarea căii de semnalizare Smad [14], în stare normală, matricea poate fi degradată de o varietate de enzime, dar în primul rând de metaloproteinaze de degradare a matricei (MMP). MMP-urile activate sunt inhibarea^de-Qătre inhibitorii extracelulari cheie, inhibitorii tisulari ai metido^^îna^CT^ (TliVn^îhÎij^âÂif sănătos raportul TIMP-MMP este echilibrat, matricea ^xtmcel degiadafă-șiLastfel^hu se acumulează cplagehprovocâhdfibroză. în schimbi ^dup^ hepatică, echilibrul TIMP-MMP este perturbat, iar TIMP-urile sunt supraexprimate, contribuind la depunerea ECM și la dezvoltarea fibrozei [14]. Expresia și secreția TIMP-1 este strâns legată de activarea HSC, în ceea ce privește numărul de celule activate și fibrogeneza, și rămâne la niveluri ridicate în timpul progresiei fibrozei. Expresia TIMP este, de asemenea, reglată de citokine și factori de creștere. Legarea TIMP-urilor de MMP-urile active pare să provoace depunerea ireversibilă a ECM, ceea ce duce la fibroză. Mormone și colab. [15] a rezumat schematic conceptele cheie implicate în patogenia moleculară a fibrozei hepatice (Fig. OVnuMt.
Stelknv cea
TIMPI
MMPVia
IM RamoțMng
Fibrosis
Figura 1: Concepte cheie implicate în activarea celulelor stelate hepatice și patogeneza fibrozei hepatice [15]
Prin urmare, strategiile terapeutice pentru a furniza agenți anti-fibrotici puternici care să aibă ca țintă citokine specifice sau alte biomolecule implicate în progresia fibrozei, capabile să prevină, să întârzie sau să inverseze progresia fibrozei hepatice înainte de stadiul final al cirozei, sunt o provocare.
Gemoterapia este o ramură a fitoterapiei care folosește țesuturile biologice găsite în muguri, îmbogățite în vitamine, oligoelemente, minerale, acizi nucleici și hormoni de creștere comparativ alte țesuturi vegetale [2216]. în plus, gemoterapia conține și alte substanțe active (cum ar fi giberelinele și auxinele) care se pierd dacă o plantă este lăsată să ajungă la o etapă ulterioară a ciclului său de creștere înainte de recoltare [2317]. Țesutul embrionar proaspăt este prelevat primăvara, în cea mai activă fază a ciclului de creștere, pentru a asigura cea mai mare concentrație de substanțe biologic active. Preparatele gemoterapice sunt produse sub formă de amestec glicero-alcoolice pentru a asigura întregul profil al tuturor ingredientelor bichimice extrase și concentrate. Alcoolul extrage toate principiile active ca alcaloizi, heterocite și glicozide. Glicerina extrage toate uleiurile esențiale, fenolii și flavonoidele.
Corylus avellana (alun comun) este cunoscut a fi bogat în minerale și vitamine, inclusiv alfatocoferol, acid ascorbic, folați, niacină, riboflavină, tiamină și vitamina K sub formă de filochinonă; acizii grași și aminoacizii includ alanina, arginina, acidul aspartic, acidul glutamic și leucina [18, 19]. Uleiul conține acizi grași saturați (7%), acizi grași mono- (78%) și polinesaturați (10%) și fitosteroli (0,1%) [20]. în ulei se găsesc acizi grași oleic, linoleic, linolenic, palmitoleic și steric [18]. Acidul Caffeoylquinic, acidul caffeoyltartaric, acidul coumaroyltartaric, miricetina, quercetina și fenolii kaempferol se găsesc în frunzele de alun [21], Cercetări recente au arătat că Corylus avellana este capabil să producă paclitaxel [21] și taxol [22] și exercită activitate antioxidantă și de captare a radicalilor [23-25]. Rezultatele unui studiu clinic au arătat că suplimentarea dietei cu alune de pădure 1 g/kg greutate corporală/zi a redus lipoproteinele cu densitate mică și colesterolul total și a crescut lipoproteinele cu densitate mare și trigliceridele [26]. Până în prezent, nici un articol științific sau un brevet de invenție era
en xpe nu a raportat vreo activitate biologică a extractului gemoterapic Coryl & Nicoletti [16], în monografia gemoterapia, au menționat beneficiul ge ^ȚȘ^bejile hepatice, cu accent în fibroza hepatică, evidențiată dițf e edjefloțȚÎ w^e, dar trebuie argumentâtă în âonritta rezultate
RO 136022 AO ev
Crisina (5,7-dihidroxiflavona) este componenta activă majoră a mierii, propolisului și multor extracte din plante. Valoarea medicinală a crisinei a fost recunoscută. Prezintă activități antiinflamatorii [27], anticancerigene [28], cardioprotectoare [29] și antioxidante [30],
Expunerea detaliată a invenției:
1. Obținerea extractului gemoterapic de Corylus avellana
1.1. Recoltarea materialului vegetal’. Mugurii de Alun, Corylus avellana L. se recoltează în lunile februarie-martie, când mugurele încă nu s-a deschis, dar este în stadiul de dezvoltare maximă înainte de a se deschide.
1.2. Conservarea materialului vegetal: Masa vegetală se conservă în amestec glicerină - alcool etilic 96 % voi. (1:1). 1 parte de material vegetal mărunții se amestecă cu 1 parte amestec glicerină - alcool etilic 96 % voi. (1:1). Se omogenizează amestecul astfel ca materialul vegetal să fie în contact cât mai bun cu solventul. Acest amestec de material vegetal și solvent se poate păstra la temperatura camerei maxim 6 luni de zile.
1.3. Obținerea maceratului glicerinic.
Extractul din muguri de Alun se obține conform Farmacopeei Franceze respectiv Farmacopeei Europene, monografia 2.1.3, folosind ca și solvent amestec de glicerină - alcool etilic 96 % voi. (1:1). Planta se prelucrează în stare proaspătă, conservată în amestec de solvent. Din planta mărunțită la o consistenă de pastă se prelevează probă pentru determinarea umidității. în funcție de umiditate se calculează raportul de extracție, care este 1:20 partea uscată din plantă - solvent. Extracția se realizează la rece, prin macerare, timp de 20 zile, cu agitări zilnice 2x10 minute. După 20 zile de agitare lichidul se decantează de pe masa de material vegetal, care ulterior se supune presării la 350-400 atm, iar lichidul presat este amestecat cu lichidul decantat. Soluția extractivă astfel obținută este extractul gemoterapic din muguri de Alun (CAG).
2. Obținerea si caracterizarea nanocomplexelor de crisina/ciclodextrine
2.1. Prepararea complexelor crisină-ciclodextrine. Crisina a fost formulată cu două βciclodextrine diferite pentru a forma complexe de incluziune cu hidroxipropil- (HPBCD) și ramdomly metilat (RAMEB) β-ciclodextrine la raporturi molare 1:1.
2.2. Testul de solubilitate. Complexele au fost testate pentru solubilizare în apă. Complexele au fost dizolvate în apă timp de 24 de ore și spectrele de absorbție au fost înregistrate cu spectrofotometru UV.
Tabelul 1. Valorile concentrației și creșterea solubilității crisinei în apă prin complexarea ciclodextrinei (n.d. — nedeterminat) (n = 3). CD: -ciclodextrină, HPBCD: hidroxipropil ciclodextrină, RAMEB: - ciclodextrină metilată aleator (ramdomly)
| Crisina in H2O | Crisina:RAMEB | Crisina:HPBCD | |
| Raport molar complexe | - | 1:1 | 1:1 |
| Concentrația de crisina (ug/ml) | 1,01 | 7,48 0,15 | 5,72 0,28 |
| Creșterea solubilității | 1 | 7,41 | 5,22 |
2.3. Testul de solubilitate de fază a fost efectuat prin adăugarea unei cantjtăț cunoscute d^putbdreȚdc crisină. Au fost realizate concentrații crescâtoar ciclodextroie
*BCD (5-80 mM).,Tubtțr^ timp
pentru a obține dispersii bine amestecate (temeratura camerei, întuneric). După 72 de ore, fiecare probă a fost centrifugată la 15.000 rpm timp de 10 minute.
Probele au fost preluate din supematantul clar, iar conținutul de crisină al probelor a fost analizat prin spectrofotometrie (Shimadzu UV-1900). Profilurile de solubilitate de fază ale crisinei au fost realizate de trasând solubilitatea crisinei față de concentrația ciclodextrinelor. Constanta de stabilitate (Ks) ale complexelor crisină-CD au fost calculate din diagrame de solubilitate de fază conform următoarei ecuații:
slope %(l-slope)
S0 — Solubilitatea crisinei în apă
Eficiența complexării (CE) și raportul molar medicament:ciclodextrina (D: CD) au fost calculate după cum urmează:
< r -ȘL, 11 slope i
D:CD 1 : (U
Figura 1. prezintă profilurile de solubilitate ale crisinei în prezența RAMEB și HPBCD. Datorită solubilității limitate în apă a CD, cea mai mare concentrație aplicată a fost de 8 mM. Fiecare derivat de ciclodextrină a reușit să îmbunătățească solubilitatea în apă a crisinei în complexe de ciclodextrină, în mod dependent de concentrație.
CD concentrabon (mM)
Figura 1. Diagramele de solubilitate de fază ale crisinei cu (A) RAMEB, (B) HPBCD Constantele de stabilitate (Ks) ale complexelor crisină-ciclodextrină au fost calculate din datele de solubilitate de fază (tabelul 2).
Tabelul 2. Eficiența complexării (CE), constantele de stabilitate (Ks) și raportul molar medicament: ciclodextrină (D: CD) a complexelor crisină - ciclodextrină (n = 3).
| Cyclodextrins | Ks (M-1) CE D:CD |
| RAMEB | 1200 0.0048 ± 6.9 x 105 1:209 ±3 |
| HPBCD | 760 0.003 ± 7 x 10-5 1:332 ±2 |
2.4. Microscopie electronică scanning (SEM)
Morfologia particulelor solide de ciclodextrine, crisină și complexe crisină-ciclodextrină a fost investigată prin SEM (Hitachi S-4300 CFE).
Morfologia crisinei pure si a complexelor de crisină-ciclodextrine au fost examinate prin SEM (Figura 23). Crisină brută a prezentat particule agregate cu diferite forme și cu un spectru larg al dimensiunii particulelor. Particulele HPBCD au prezentat o formă sferică, în timp ce imaginili crisinaQ' de cqffirf (JVțEB au arătat că majoritatea particulelor sferice au fost sparte. Co ^D^u^isină-RAMEB au prezentat o morfologie complet diferită. Dugă'pț^^Î ^oăraailele originale de ciclodextriii^ și crisțnă au fost neidentificab/ to&țg gatew’care conțin particule ^niorfe njaî 'duceau dezvăluit interacțiunea
d. C
crisină și ciclodextrine. Noua structură formată contribuie la o solubilitate mai mare și la biodisponibilitatea îmbunătățită a crisinei (vezi Anexa Desene si Planșe - Planșa 1).
3. Obținerea compoziției fitoterapeutice pe bază de extract gemoterapic de Corylus avellana îmbogățit cu nanocomplexe de crisină/ciclodextrine și evaluarea profilului fitochimic al acestuia
3.1. Metodă de obținere si de analiză pentru evaluarea conținutului de polifenoli
Extractul de gemmoterapic de Coryllus avelana a fost amestecat atât cu complexe RAMEB-, cât și cu HPBCD-crisină și a fost supus liofilizării. S-au testat diferite rapoarte de extractcomplex pentru stabilizarea amestecului prin liofilizare. Cantitatea exces de ciclodextrină a fost, de asemenea, testată pentru stabilizare.
Analiza LC/MS se realizează cu un sistem cromatografic Shimadzu Nexera I LC/MS - 8045 (Kyoto, Japan), care este un system UHPLC echipat cu pompă cuatemară și un spectrometru de masa cu cvadrupoli și ionizare prin pulverizare electronica (ESI).
Seprarea se realizează pe o coloană Luna CI 8 cu fază inversă (150 mm x 4.6 mm x 3 fm, 100 Â), de la Phenomenex (Torrance, CA, USA). Temperatura de operare a coloanei trebuie să fie de 40°C.
Pentru separarea a cât mai mulți polifenoli se folosește un gradient de fază mobilă (tabel 1), folosind methanol (Merck, Darmstadt, Germania), apă ultrapurificată preparată cu un sistem Simplicity Ultra Pure Water Purification System (Merck Millipore, Billerica, MA, USA) și acid formic, ca și modificator organic (Merck, Darmstadt, Germania). Solvenții folosiți au fost de puritate LC/MS. Faza mobilă trebuie să fie trecută prin coloana cromatografică cu o viteză de 0,5 ml/min, iar timpul total de analiză a fost de 35 minute.
Tabel 3
| Timp, min | Metanol | Apă ultrapurificată | acid formic 2 % în apă ultrapurificată |
| 0.00 | 5 | 90 | 5 |
| 3.00 | 15 | 70 | 15 |
| 6.00 | 15 | 70 | 15 |
| 9.00 | 21 | 58 | 21 |
| 13.00 | 21 | 58 | 21 |
| 18.00 | 30 | 41 | 29 |
| 22.00 | 30 | 41 | 29 |
| 26.00 | 50 | 0 | 50 |
| 29.00 | 50 | 0 | 50 |
| 29.01 | 5 | 90 | 5 |
| 35.00 | 5 | 90 | 5 |
Detecția componentelor se realizează cu un spectrometru de masă cu cvadrupoli având sursa de ioni cu electrospray (ESI). Pentru monitorizarea reacțiilor multiple (MRM), pentru detectarea cu sensibilitate maximă, se folosește atât modul negativ cât și modul pozitiv de detectare. Temperatura interfeței a fost de 300°C, gazul de uscare a fost azotul la 35 psi, 10 1/min, iar potențialul de capilar a fost setat la +3000 V.
Ca și standarde se folosesc polifenolii din tabelul 5. în cazul fiecărui standard, la fiecare concentrație s-au injectat câte 1 Π1. Identificarea s-a realizat prin compararea timpilor de retenție, a spectrelor de masa respectiv a tranzițiilor principale din aceste spectre a substa
standard cu cele ale compușilor separați din probele/analizate. Determinările cantiț realizat curbelor de calibrare a fiecărei substanțe standard, la nivel princj de
it șens pentru fiecare standard s-a detprtt^ de detecție re ^|^abelul 3 sunt date detaliile din spectrele de'smasă.
Extractele de Corylus avellana MG și cele îmbogățite cu crizină pe ciclodextrină s-au diluat cu metanol, identic cu cel folosit la analiza LC/MS, în raport 1 la 10. Soluțiile diluate s-au trecut prin microfilter de 0,45 Dm (Merck Millipore, Billerica, MA, USA).
Tabel 4
| Standardul și originea sa | Intervalul de concentrații mg/ml | Ecuația curbei de calibrare | Factorul de corelație | Limita de detecție, □ g/ml | Limita de cuantificare, □ g/ml |
| Acid clorogenic (Phytolab, V estenbergsgreuth, Germania) | 0.13- 1.30 | Are a = 2*108*conc[mg/ml] 269699 | 0.9997 | 5.00 | 8.00 |
| Acid galic (Phytolab, Vestenbergsgreuth, Germania) | 0.107-1.070 | Area = 8 * 106*conc[mg/ml] -37131 | 0.9999 | 1.90 | 2.80 |
| Acid salicilic (Merck, Darmstadt, Germania) | 0.16-1.60 | Area = 4* 107*conc[mg/ml] + 44120 | 0.9997 | 1.50 | 2.00 |
| Apigenină (Phytolab, Vestenbergsgreuth, Germania) | 0.10-0.98 | Area = 2 * 108 * conc [mg/ml] + 15916 | 0.9999 | 0.20 | 0.30 |
| Catechinâ (Merck, Darmstadt, Germania) | 0.101 - 1.010 | Area = 5 * 106* conc [mg/ml] - 1706 | 0.9984 | 1.00 | 2.00 |
| Crizină (Merck, Darmstadt, Germania) | 0.10-1.00 | Area = 1 * 108*conc[mg/ml] - 82818 | 0.9997 | 3.00 | 5.00 |
| Cvercetină (Phytolab, Vestenbergsgreuth, Germania) | 0.09-0.91 | Area = 5*107*conc[mg/ml] -9556 | 0.9964 | 0.80 | 1.10 |
| Hiperozidă (Phytolab, V estenbergsgreuth, Germania) | 0.012-0.107 | Area = 4*108*conc[mg/ml] -567182 | 0.9986 | 0.60 | 0.90 |
| Luteolin-7-Οglucozidă (Phytolab, V estenbergsgreuth, Germania) | 0.07 - 0.70 | Area = 1 * 109*conc[mg/ml] -700317 | 0.9990 | 3.00 | 4.00 |
| Naringenină (Phytolab, Vestenbergsgreuth, Germania) | 0.16-1.60 | Area = 3 * 108* conc [mg/ml] -43443 | 0.9999 | 0.60 | 0.90 |
| Rutozidă (Phytolab, Vestenbergsgreuth, Germania) | 0.17-1.70 | Area = 2* 108*conc[mg/ml] - 191937 | 0.9996 | 4.00 | 6.00 |
Tabel 5
| Standardul | Timp de retenție, min | m/z, și tranziția principală | MRM | Alte tranziții |
| Acid clorogenic | 12.0 | 3530191.0 | Negativ | |
| Acid galic | 7.0 | 168.9>125.0 | Negativ | |
| Acid salicilic | 23.5 | 137093.0 | Negativ | 137075.0 137065.0 |
| Apigenină | 28.2 | 269.0>l 17.0 | Negativ | |
| Catechină | 10.3 | 2890202.9 | Negativ | |
| Crizină | 29.7 | 2530143.0 | Negativ | 2530119.0X1' 253O107/0.xl |
| CvercetinăX'f; a . | 25.7 | 3000151.0 | \ Negativ | 3000121() |
| Hiperozj4ă+/X- .. | 20.3 | ; 463.1 >300.0 . | ) Negativ | 463.1>3fbl< |
| Luteolin- 7-O-glucozidă | 19.9 | 447.0>284.9 | Negativ | |
| Naringenină | 26.3 | 271.0>l 19.0 | Negativ | 271.0>107.0 |
| Rutozidă | 20.3 | 609.0>300.0 | Negativ | 609.0>301.0 609.0>271.0 |
Codificarea probelor:
EGMA_02.2019 = Corylus avellana MG seria din februarie 2019
EGMA_03.2019 = Corylus avellana MG seria din martie 2019
EGMA_01.2020 = Corylus avellana MG seria din ianuarie 2020
EGMA 02.2020 = Corylus avellana MG seria din februarie 2020
CARAMEBCHRPEG = Corylus avellana MG + RAMEB + CHR-RAMEB complex + Polietilen-glicol
CA_HPBCD_CHR_PEG = Corylus avellana MG + HPBCD + CHR-HPBCD complex + Polietilen-glicol
CA_RAMEB_CHR = Corylus avellana MG + RAMEB + CHR-RAMEB complex
CA_HPBCD_CHR = Corylus avellana MG + HPBCD + CHR-HPBCD complex în Planșele 2, 3 și 4a si 4b sunt prezentate cromatogramele LC/MS, spectrele de masă și curbele de calibrare obținute pentru standarde (vezi Anexa Desene si Planșe - Planșa 2-4).
în Planșele 5-12 sunt prezentate cromatogramele LC/MS ale probelor studiate (vezi Anexa
Desene si Planșe - Planșa 5-12).
In Planșele 13 - 20 spectrele de masa ale polifenolilor identificați și cuantificați (vezi Anexa Desene si Planșe - Planșa 13-20).
Rezultatele datelor determinărilor cantitative sunt prezentate în Tabelul 6.___________________
| Standard | Proba (mg/ml) | |||||||
| EGMA 02.2019 | EGMA 03.2019 | EGMA 01.2020 | EGMA_02.2020 | CARĂMEB CHRPEG | CAHPBCDCHRPEG | CARAMEBCHR | CAHPBCDCHR | |
| Acid clorogenic | 0,360 ±0,0111 | 0,360 ±0,0178 | 0,430 ±0,0354 | 0,340 ±0,0327 | 0,041 ±0,0041 | 0,021 ±0,0042 | 0,064 ±0,0045 | 0,016 ±0,0041 |
| Acid galic | 0,080 ±0,0054 | 0,070 ±0,0082 | 0,070 ±0,0082 | 0,080 ±0,0082 | ||||
| Acid salicilic | 0,040 ±0,0111 | 0,070 ±0,0082 | 0,060 ±0,0082 | 0,011 ±0,0026 | ||||
| Apigenină | 0,003 ±0,0005 | 0,002 ±0,0005 | ||||||
| Catechină | 0,160 ±0,0227 | 0,100 ±0,0041 | 0,190 ±0,0327 | 0,130 ±0,0205 | 0,016 ±0,0033 | 0,014 ±0,0041 | 0,025 ±0,0073 | |
| Crizină | 0,100 ±0,0041 | 0,090 ±0,0041 | 0,090 ±0,0041 | 0,090 ±0,0041 | 5,775 ±0,1310 | 5,273 ±0,1219 | 5,830 ±0,0942 | 5,948 ±0,2796 |
| Cvercetină | 0,020 ±0,0037 | 0,080 ±0,0094 | 0,110 ±0,0178 | 0,070 ±0,0082 | ||||
| Hiperozidă | 2,000 ±0,0653 | 2,000 ±0,0653 | 2,270 ±0,0425 | 2,030 ±0,0525 | 0,295 ±0,0525 | 0,145 ±0,0262 | 0,505 ±0,0374 | |
| Luteolin-7O-glucozidă | 0,070 ±0,0056 | 0,070 ±0,0082 | 0,070 ±0,0082 | 0,070 ^0,0082 | 0,007 ±0,0005 | 0,007 ±0,0008 . | 0,007 | |
| Naringenină | 0,020 | 0,020 >H>,0041 | 0,020 ±0,0041 | 0,030 . ±-0,0047 | 0,002 ±0,0005 | 0,001Z' ±0,0p05/< | <1MO3 ^,0Q05 |
| Rutozidă | 0,580 ±0,0535 | 0,600 ±0,0455 | 0,570 ±0,0785 | 0,580 ±0,0838 | 0,082 ±0,0049 | 0,044 ±0,0056 | 0,145 ±0,0241 |
4. Testarea in vitro a proprietăților antifibrotice ale compoziției fitoterapeutice pe bază de extract gemoterapic de Corylus avellana îmbogățit cu nanocomplexe de crisină/ciclodextrine
Evaluarea in vitro a activității anti-fibrotice a complexelor extract gemoterapic de alun crisină/RAMEB și extract gemoterapic de alun -crisină/HPBCD, prin analiza expresiei markerului pro-fibrotic TGF-βΙ, atât la nivel genic, cât și proteic. A fost analizată expresia markerului fibrotic TGF-βΙ in celule hepatice stelate (HSC) din linia celulară LX2. în HSC latente, expresia TGF-βΙ a fost redusă la nivel proteic (Fig la) și genic (Fig 1b), însă în urma activării prin stimulare cu TGF-βΙ, expresia acestui marker a fost crescută (Fig 1B). Tratamentul cu ambele complexele investigate, CAG-CHR/Cyclo, a redus semnificativ expresia TGF-βΙ față de controlul activat, ceea ce indică eficiența complexelor de a inhiba calea de semnalizare ΤΟΕ-βΙ/ΞΜΑϋ și implicit, activarea HSC. Complexul CAG-CHR/RAMEB sa dovedit a fi mai eficient decât CAG-CHR/HPBCD în a induce reversia celulelor HSC activate către o stare de latență. Rezultatele au fost confirmate și la nivelul expresiei genice TGF-βΙ. în urma administrării celor două tipuri de complexe, nivelul expresiei a fost statistic semnificativ redusă față de controlul activat, cu un nivel de semnificație statistică mai mare în cazul complexului cu RAMEB (p<0.01) față de HPBCD (p<0.05). {Planșa 21).
5. Testarea in vivo a proprietăților antifibrotice ale compoziției fitoterapeutice pe bază de extract gemoterapic de Corylus avellana îmbogățit cu nanocomplexe de crisină/ciclodextrine un conținut de crisină
Protocolul experimental a fost aprobat de Comitetul de Etică a Cercetării din Universitatea de Vest Vasile Goldis (152/02.10.2019).
Pentru experiment au fost utilizați șoareci masculi CD 1 din biobaza Universității de Vest Vasile Goldiș din Arad. Șoarecii au fost injectați, ip, cu o singură doză de streptozotocină (STZ; 65 mg kg-1 greutate corporală), solubilizată în tampon citrat (50 mM, pH 4,5) pentru a induce diabetul zaharat. Nivelurile de glucoză din sânge au fost măsurate după 4 ore de inaniție, folosind un glucometru. După administrarea STZ, șoarecii cu un nivel de glucoză din sânge mai mare de 2,5 gl-1 timp de două săptămâni consecutive au fost considerați șoareci cu diabet de tip 2 și incluși în studiu. Animalele cu diabet confirmat au fost tratați intraperitoneal (ip) cu CCI4 dizolvat în ulei de măsline (20% v/v, 2 ml/kg), de două ori pe săptămână, timp de 7 săptămâni, și sacrificați la șaptezeci și două de ore după ultima injecție pentru confirmarea fibrozei hepatice (Lotul 2). Rezoluția spontană a fibrozei hepatice a fost investigată la animalele diabetice tratate cu CCI4 după două săptămâni de recuperare (Lotul 3). Pentru a evalua efectul antifibrotic al produsului combinat extract gemmoterapic Coryllus ave/ana-nanocomplex CHR/cyclo, tratamentul a început la sfârșitul celor 7 săptămâni de tratament cu CCI4, utilizând administrarea prin gavaj zilnic timp de 14 zile consecutive a următoarelor: extract gemoterapic Coryllus ave/ana-crisina/ciclodextrine (CAG-CHR/Cyclo - Lotul 4), extract gemmoterapic Coryllus avelana (CAG - Lotul 5), nanocomplex de crisină/ciclodextrină (CHR/Cyclo - Lotul 6) și crisină pură (CHR - Lotul 7). Toate produsele conțin 100 mg/kg de crisină. Șoarecii aparținând lotului 1 (martor -a.sanatos, b.diabetic), 2 (șoareci fibrotici) și 3 (rezoluția de novo a fibrozei) li s-au administrat vehiculele grupelor tratate. Animalele au fost sacrificate la 24 de ore sub anestezie după ultima doză administrată (loturile 1, 3, 4, 5, 6, 7).
Analiza histologică a ficatului lotului martor a indicat o arhitectură lobulară normală cu vena centrolobulară și cordoane de hepatocite radiare, fără o proliferare a țesutului intralobular (Plansa22-Vla) si o ușoară dilatare a capilarelor sinusoide (Planxa^ÎVÎb^ \ Probele de ficat din lotul CCI4 au prezentat modificări severe ale morfologiei, evide^iie^^^î \ de colșgeny-ftyrnarea de pseudolobuli și infiltrarea fie celule inflamatorii în zonele i hepafjc^^&^fehrenea, se observă numeroase hepatocitecu steatoză micro- și Ϊ j itu \U\TsrlZ / 8·^^ /— ϋ\' și congestia capilarelor sinusoide (Planșa 22-V2). Se remarcă prezența „hepatocitelor spumoase” (foamy) perivenulare hipertrofiate cu acumulare masivă de grăsime microveziculară. După două săptămâni de recuperare de novo, în lipsa unui tratament de recuperare, se observă prezența semnificativă a țesutului fibros și a pseudo-lobulilor, acompaniate de infiltrate de celule inflamatorii, comparativ cu grupul CCk (Fig.8-V3). Hepatocitele hipertrofiate cu citoplasmă spumoasă sunt prezente. In cazul grupului de șoareci tratați timp de 2 săptămâni cu extract gemmoterapie Coryllus avelana (Planșa 22-V5), nanocomplex de crisină/ciclodextrină (Planșa 22-V6), după instalarea fibrozei, ariile fibrotice au fost reduse (insulare), comparativ cu cele înregistrate în cazul grupului CCI4. Infiltrate inflamatorii în ariile perivasculare se păstrează si de asemenea si congestia sinusoidelor. Microsteatoza hepatică este prezentă la aceste loturi. Șoarecii cărora li s-a administrat extract gemoterapic Coryllus ave/awa-crisina/ciclodextrine au prezentat o histo-arhitectură apropiată de cea a martorului si peste grupul VIb - control diabetic (Planșa 22-V4). Cea mai slaba recuperare structurală s-a înregistrat pentru șoarecii cărora li s-a administrat doar crisină pură (Planșa 22-V7). Formarea septelor fibrotice perilobulare si pseudolobulilor a fost confirmată în colorație tricromică pentru lotul V2 (Planșa 23-V2) și în egală măsură la lotul de reversie de novo a fibrozei (Fig.9-V3). Colagen insular se mai evidențiază la administrarea CHR pur (fig.9V7), mai puțin la CHR/Cyclo (Planșa 23-V4), a CAG (Planșa 23-V5) unde septele sunt întrerupte iar colagenul apare mai mult pericentrolobular, si sporadic la grupul tratat cu CAGCHR/Cyclo, comparabil cu martorii sănătos si diabetic (Plansa-V6).
BIBLIOGRAFIE
[1] Sudharsanan N. et al., 1990-2008. PopulationHealthMetrics, 2015,13(1 ):33; [2] GBD2015 The lancet, 2016, 388:1459-1544; [3] NCD Risk Factor Collaboration (NCD-RisC). The Lancet, 2016, 387(10027): 1513-1530; [4] Garcia-Compeăn D. et al. Ann Hepatol, 2012, 11:240-248; [5] Musso G. et al. JAMA Internai Medicine, 2017, 177(5):633-640; [6] Petta S. et al. Am J Gastroenterol, 2008, 103(5):1136-1144; [7] D’Souza R. et al. Insulin resistance plays a significant role in liver fibrosis in chronic hepatitis C and in the response to antiviral therapy. Am J Gastroenterol, 2005, 100(7): 1509-1515; [8] Ratziu V. et al. J Hepatol, 2003, 39(6): 1049-55; [9] Harrison S. A. J Clin Gastroenterol, 2006, 40(1 ):68-76; [10] Li X. et al. BioMed Res Int, 2019:5308308; [11] Trombetta M. et al. Alimentary Pharmacology and Therapeutics, 2005, 22(2):24-27; [12] Friedman S.L. Toxicology, 2008, 254(3): 120-129; [13] Mallat A., Lotersztajn S. Am JPhysiol Cell Physiol, 2013, 305:C789-C799; [14] Iredale J.P. et al. Biochim. Biophys. Acta, 2013, 1832(7):876-883; [15] Mormone E. et al. Chemicobiological interactions, 2011, 193(3):225-231; [16] Pitera Di Clima F.P., Nicoletti M., Gemmoterapia - Fondamenti scientifici della moderna meristemoterapia, Ed. Nova Ipsa, Ed.2, 2016-2018, ISBN 978-88-7676-693-0; [17] D. Surcel, S. Soescu, N. Olah, M. Ciumașu-Rimbu, Acta gemmotherapeutica, voi. 1, Editura Napoca Star, Cluj-Napoca, 2012, ISBN: 978-973-647880-2, 16/286 pg; [18] Crews C. etal. JAgric Food Chem, 2005, 53:4843-4852; [19] Alasalvar C. et al. J Agric Food Chem, 2003, 51:3790-3796; [20] Amarai J.S. et al. J Agric Food Chem, 2006, 54:449-456; [21] Salehi M. et al. New synergistic co-culture of Corylus avellana cells and Epicoccum nigrum for paclitaxel production. Journal of Industrial microbiology & Biotechnology, 2019, 46(5):613-623; [22] Bemani E. et al. Journal of Natural Medicine, 2013, 67(3):446-451; [23] Alberti A. et al. Natural Product Communications, 2016, 11(4):469-474; [24] Oliveira I. et al. Food Chemistry, 2007, 105(3): 1018-1025; [25] Reithmuller E.et al. Nat Prod Commun, 2016, 11 (5):641 -644; [26] Durak I. et al. Clin Chim Acta, 1999, 284:113-115^ [27] Shin E.K. et al. Biochem. Biophys. Res. Commun., 2009, 381:502-507; [28] Khan al. Tox^plfj'AțțpI Pharmacol., 2011, 251:85—94; [29] Anghel N. et al. Histology HistDpal/p^ , 30(12): 1465-1475; DOJTushțjavălli G. et al. Eur. J. Pharmacol/,
Claims (6)
- REVENDICĂRI1. Procedeu de obținere a unei noi compoziții fitoterapeutice pe bază de extract gemoterapic de Corylus avellana îmbogățit cu nanocomplexe de crisină/ciclodextrine, caracterizat prin aceea că este constitutit din următoarele faze:a. Obținerea extractului gemoterapic de Corylus avellana include recoltarea și conservarea materialului vegetal, obținerea maceratului glicerinicb. Obținerea și caracterizarea nanocomplexelor de crisină/ciclodextrine include prepararea compexelor crisină/ciclodextrine și testul de solubilitatec. Obținerea compoziției fitoterapeutice pe bază de extract gemoterapic de Corylus avellana îmbogățit cu nanocomplexe de crisină/ciclodextrine și evaluarea profilului fitochimic al acestuia prin analiză LC/MS pentru determinarea profilului polifenolic
- 2. Procedeu, conform revendicării nr.l, caracterizat prin aceea că solubilitatea crisinei în apă prin complexarea cu ciclodextrine, la un raport molar de 1:1, a crescut de 7,41 ori în cazul complexelor crisină/RAMEB, respectiv de 5,22 în cazul complexelor crisină/HPBCD
- 3. Procedeu, conform revendicării nr.l, caracterizat prin aceea că preparatul gemoterapic de Corylus avellana se obține folosind ca și solvent amestec de glicerină alcool etilic 96 % voi. (1:1) din muguri de alun în stare proaspătă. Extracția se realizează la rece, prin macerare, timp de 20 zile, la un raport de 1:20 planta-solvent.
- 4. Procedeu, conform revendicării nr.l, caracterizat prin aceea că noua compoziție fitoterapeutică pe bază de extract gemoterapic de Corylus avellana îmbogățit cu nanocomplexe de crisină/ciclodextrine obținut prin liofilizare se analizează în ceea ce privește conținutul chimic cantitativ de polifenoli prin analiză LC/MS, rezultând un conținut de crisină de 5,830 ±0,0942 pentru compoziția cu crisină/RAMEB, respectiv 5,948 ±0,2796 pentru compoziția cu crisină/HPBCD, comparativ cu 0,100 ±0,004 în extractul gemoterapic de Corylus avellana
- 5. Procedeu de testare in vitro a activității anti-fibrotice a noii compoziții fitoterapeutice pe bază de extract gemoterapic de Corylus avellana îmbogățit cu nanocomplexe de crisină/ciclodextrine pe celule hepatice stelate (HSC) din linia celulară LX2, caracterizat prin aceea că expresia genică și proteică a markerului pro-fibrotic TGFβΐ a fost statistic semnificativ redusă față de controlul activat, cu un nivel de semnificație statistică mai mare în cazul complexului cu RAMEB (p<0.01) față de HPBCD (p<0.05).
- 6. Procedeu de testare in vitro a activității anti-fibrotice a noii compoziții fitoterapeutice pe bază de extract gemoterapic de Corylus avellana îmbogățit cu nanocomplexe de crisină/ciclodextrine, caracterizat prin aceea că aspectul histologic al ficatului la șoarecii cu fibroză hepatică indusă experimental (septe fibroas si pseudolobuli, „hepatocitelor spumoase” foamy perivenulare hipertrofiate cu acumulare masivă de grăsime microveziculară), a fost semnificativ îmbunătățit după tratamentul oral cu compoziții fitoterapeutice pe bază de extract gemoterapic de Corylus avellana îmbogățit cu nanocomplexe de crisină/ciclodextrine
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ROA202200328A RO136022A0 (ro) | 2022-06-14 | 2022-06-14 | Compoziţie fitoterapeutică pe bază de extract gemoterapic de corylus avellana îmbogăţit cu nanocomplexe de crisină/ciclodextrine destinat fibrozei hepatice în diabetul zaharat şi metodă de obţinere aacesteia |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ROA202200328A RO136022A0 (ro) | 2022-06-14 | 2022-06-14 | Compoziţie fitoterapeutică pe bază de extract gemoterapic de corylus avellana îmbogăţit cu nanocomplexe de crisină/ciclodextrine destinat fibrozei hepatice în diabetul zaharat şi metodă de obţinere aacesteia |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RO136022A0 true RO136022A0 (ro) | 2022-10-28 |
Family
ID=83804290
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ROA202200328A RO136022A0 (ro) | 2022-06-14 | 2022-06-14 | Compoziţie fitoterapeutică pe bază de extract gemoterapic de corylus avellana îmbogăţit cu nanocomplexe de crisină/ciclodextrine destinat fibrozei hepatice în diabetul zaharat şi metodă de obţinere aacesteia |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RO (1) | RO136022A0 (ro) |
-
2022
- 2022-06-14 RO ROA202200328A patent/RO136022A0/ro unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Sun et al. | The phytochemical composition, metabolites, bioavailability and in vivo antioxidant activity of Tetrastigma hemsleyanum leaves in rats | |
| EP0925068B1 (en) | Use of a pharmaceutical composition containing polyphenols from grapes or from wine, in particular resveratrol, and yeast extracts | |
| KR101915952B1 (ko) | 어성초 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화, 항염증용 및 피부 재생용 조성물 | |
| EP1446135B1 (en) | Standardized extracts of scutellaria lateriflora | |
| Manconi et al. | Chemical characterization of Citrus limon var. pompia and incorporation in phospholipid vesicles for skin delivery | |
| Kenny et al. | Antioxidant properties and quantitative UPLC-MS/MS analysis of phenolic compounds in dandelion (Taraxacum officinale) root extracts | |
| JP7490557B2 (ja) | ベルベリンを含む組成物 | |
| TW201601711A (zh) | 羥基酪醇、其衍生物的體內吸收促進劑及其利用 | |
| Bonacci et al. | Peracetylation as a strategy to improve oleuropein stability and its affinity to fatty foods | |
| Rodríguez‐González et al. | Improvement of physico‐chemical properties and phenolic compounds bioavailability by concentrating dietary fiber of peach (Prunus persica) juice by‐product | |
| Habbu et al. | Preparation and evaluation of antidiabetic activity of Allium cepa-phospholipid complex (phytosome) in streptozotocin induced diabetic rats | |
| Li et al. | Formation of Amadori compounds in LIGAO (concentrated pear juice) processing and the effects of Fru-Asp on cough relief and lung moisturization in mice | |
| RO136022A0 (ro) | Compoziţie fitoterapeutică pe bază de extract gemoterapic de corylus avellana îmbogăţit cu nanocomplexe de crisină/ciclodextrine destinat fibrozei hepatice în diabetul zaharat şi metodă de obţinere aacesteia | |
| KR101831981B1 (ko) | 상동나무 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 암의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 | |
| KR101927404B1 (ko) | 고농도의 컴파운드 k를 함유하는 액제 조성물 및 이의 제조방법 | |
| Ninfali et al. | Improvement in botanical standardization of commercial freeze-dried herbal extracts by using the combination of antioxidant capacity and constituent marker concentrations | |
| KR101616853B1 (ko) | 유비데카레논에 기반한 조성물 | |
| Gao et al. | Differential metabolome landscape of Kadsura coccinea fruit tissues and potential valorization of the peel and seed tissues | |
| US11541093B2 (en) | Pharmacological use of Cimicifuga extract | |
| Suman et al. | Evaluation of antidiabetic efficacy of Murraya koenigii on Streptozotocin induced diabetes in experimental rats | |
| EP3551170B1 (en) | Powder solid compositions comprising flavonoids, process for their preparation, formulations and use thereof | |
| Shen et al. | Analysis of chemical constituents in different parts of Ribes diacanthum pall using molecular network assistance and their bioactive properties | |
| US20250288629A1 (en) | Labisia pumila extract composition and its pharmaceutical formulation | |
| Benedé Pérez et al. | Allium porrum Extract Decreases Effector Cell Degranulation and Modulates Airway Epithelial Cell Function | |
| Safer | Emerging possibilities of green tea as a potential treatment regimen for hepatic fibrosis |