PT98143A

PT98143A - Processo de preparacao de histidinas substituidas e de composicoes farmaceuticas

Info

Publication number: PT98143A
Application number: PT98143A
Authority: PT
Inventors: Joseph Weinstock; David Taylor Hill; Judith Hempel; John Gerald Gleason; James Samanen
Original assignee: Smithkline Beecham Corp
Priority date: 1990-06-28
Filing date: 1991-06-28
Publication date: 1992-04-30
Also published as: NZ238688A; WO1992000068A1; EP0536262A4; IE912248A1; KR930701411A; AU8105991A; CA2084776A1; ZA914960B; MX9100018A; US5565480A; US5444081A; JPH05508642A; AU650890B2; EP0536262A1

Description

72 817 SBC CASE 14513-1 -5-

MEMÓRIA DESCRITIVA 0 presente invento refere-se a novas histidinas substituídas, as quais são antagonistas do receptor da angiotensina II, e são úteis na regulação da hipertensão induzida ou exacerbada pela angiotensina II e no tratamento da insuficiência cardíaca congestiva, da insuficiência renal, e do glaucoma. Este invento refere--se também a composições farmacêuticas contendo histidinas substituídas e a processos para usar estes compostos como antagonistas da angiotensina II, como agentes anti-hipertensivos e como agentes para o tratamento da insuficiência cardíaca congestiva, da insuficiência renal e do glaucoma.

ANTECEDENTES DQ INVENTO A classe da hormona vasopressora péptida conhecida por angiotensina, é responsável por uma acção vasopressora que está implicada na etiologia da hipertensão no Homem. A actividade ina-propriada do sistema renina-angiotensina, parece ser um elemento chave na hipertensão primária, na insuficiência cardíaca congestiva e nalgumas formas de doença renal. Em adição a uma acção di-recta sobre as artérias e arteríolas, a angiotensina II (AII), sendo um dos mais potentes vasoconstritores endógenos, conhecidos, estimula a libertação de aldosterona a partir do córtex supra-renal. Portanto, o sistema renina-angiotensina, em virtude da sua participação no controlo da regulação do sódio renal, tem um papel importante na hemostase cardiovascular. A interrupção do sistema renina-angiotensina com inibidores da enzima da conversão, tal como o captopril, provou ser clinica-mente útil no tratamento da hipertensão e da insuficiência cardíaca congestiva (Abrams, W.B., e col., (1984), Federation Proc.. 43. 1314). A abordagem mais directa em relação à inibição do sistema renina-angiotensina seria bloquear a acção da AII no receptor. Uma evidência compulsiva sugere que a AII contribui também para a vasoconstrição renal e retenção de sódio que é ca-racterística de diversas doenças tais como a insuficiência cardíaca, a cirrose e as complicações da gravidez (Hollenberg, N.K. (1984), J- Cardiovas. Pharmacol.. 6, S176). Em adição, estu- 72 817 SBC CASE 14513-1 -6-dos em animais, recentes, sugerem que a inibição do sistema reni-na-angiotensina pode ser benéfico para parar ou atrasar a progressão da insuficiência renal crónica (Anderson, s. e col., (1985), J. Clin. Invest.. 76. 612). Além disso, um pedido de patente recente (Pedido de Patente da África do Sul Número 87/01.653) reivindica que os antagonistas da AII são úteis como agentes para reduzir e controlar a pressão intraocular elevada, especialmente o glaucoma, em mamíferos.

Os compostos deste invento inibem, bloqueiam e antagonizam a acção da hormona AII, e são, portanto, úteis na regulação e moderação da hipertensão induzida pela angiotensina, na insuficiência cardíaca congestiva, na insuficiência renal, no glaucoma, e noutras doenças atribuídas às acções da AII. Quando os compostos deste invento são administrados a mamíferos, reduz-se a pressão sanguínea elevada devido à AII, e outras manifestações baseadas na mediação da AII são minimizadas e controladas. Pensa--se, também, que os compostos deste invento têm actividade diurética.

O reconhecimento da importância do bloqueamento e inibição das acções da AII têm estimulado outros esforços no sentido de sintetizar antagonistas da AII. As referências que se seguem revelam derivados de imidazol que estão descritos como possuindo actividade bloqueadora da AII e são úteis como agentes hipotensores. A Patente dos Estados Unidos Número 4 340 598 descreve ácidos imidazol-5-ilalcanóicos substituídos, e seus derivados amido e éster de alquilo inferior, com a seguinte fórmula: R3 R2

R* na qual R1 é alquilo inferior ou alquil 0χ_2 fenilo, opcionalmente substituído por halogéneo ou nitro; R2 é alquilo inferior, ci-cloalquilo, ou fenilo opcionalmente substituído; um de R3 e R^ é

ΤΙ 817 SBC CASE 14513-1 -(CH2)nC0R5, na qual R5 é amíno, alcoxi inferior ou hidroxi e n é 0-2, e o outro de R3 e R4 é hidrogénio ou halogéneo. Exemplos incluem l-benzil-2-n-butil-4-cloro-imidazol-5-acetamida e ácido 1--benzil-2-n-butil-5-cloro-imidazol-4-acético. A Patente dos Estados Unidos número 4 355 040 descreve derivados substituídos do ácido l-benzilimidazol-5-ilo acético possuindo a fórmula:

Y

na qual R1 é alquilo inferior, cicloalquilo, ou fenilo opcionalmente substituído; X1, X2 e X5 são, cada um, hidrogénio, halogéneo, nitro, amino, alquilo inferior, alcoxi inferior, benziloxi ou hidroxi; Y é halogéneo e R2 é hidrogénio ou alquilo inferior. Descreve-se especificamente um composto, o ácido l-(2-cloroben-zil)-2-n-butil-4-cloro-imidazol-5-acético. 0 Pedido de Patente Europeia 103 647 descreve derivados substituídos do ácido l-benzil-2-fenil-4-cloro-imidazol-5-Ilo--acètico de fórmula: α

ch2co2h ch2

R

OH na qual R é alquilo inferior. Especificamente, a descrição inclui

72 817 SBC CASE 14513-1 o ácido 4-cloro-l-(4-metoxi-3-metilbenzíl)-2-feníl-imidazol-5--acètico. 0 Pedido de Patente Europeia 245 637 descreve derivados substituídos da 4,5,6,7-tetra-hidro-lH-imidazo[4,5-c]piridina da fórmula:

R R’ na qual----é uma ligação simples ou dupla; um de R1 está pre sente e inclui grupos tais como (CH2)]__6 naftilo, (CH2)]__6 hete-roarilo ou (0Η2)^_6Ρή opcionalmente substituído; R2 incluí grupos tais como hidrogénio, alquilo inferior e (CH2)i_5Ph; R3 inclui grupos tais como COalquilo ou (CH2)1_6Ph opcionalmente substituído; R4 inclui CQ2R9, na qual R9 é hidrogénio, alquilo inferior ou benzilo; e n é 0-3. Um composto especificamente descrito é o ácido 5-[(4-nítrofenil)acetíl]-l-(fenilmetil)~4,5,6,7--tetra-hidro-lH-imidazo[4,5-c]pirídina-ó-carboxílicc. 0 Pedido de Patente Europeia 253 310 descreve 1-aralquilimi-dazóis substituídos possuindo a fórmula geral:

na qual R1 inclui grupos tais como fenilo opcionalmente substituído ou adamantilmetilo; R2 inclui grupos tais como hidrogénio, halo, N02, alquilo ou alcoxi Ci-4; R3 é hidrogénio, halo, alquilo C^_4 ou alcoxi 0^_4; R6 inclui grupos tais como alquilo 72 817

SBC CASE 14513-1 -9- C2_io» alcenilo C3-.10’ cicloalquilo C3_8, benzilo opcíonalmente substituído ou Z(CH2)i_5~R^, na qual Z é 0 ou S e R5 é hidrogénio, alquilo C1_6, cicloalquilo C2_6 ou alcenilo; R7 é hidrogénio, halo, N02, CF3, ou CN, e R8 inclui grupos tais como ácidos alcanoicos ésteres e amidas e N-alquil carbamatos de alquilo. Exemplos incluem o ácido 2-n-butil-5-cloro-l-(4-nitroben-zil)imidazol-4-acético e 1-[(2’-carboxifenil-4-il)metil]-2-n-bu-til-4-cloro-5-(dimetilcarbamoilo)imidazol. A Patente do Reino Unido 1 341 375 descreve uma série de ímidazóis substituídos que são úteis devido à sua actividade nos receptores H-l, H-2 e/ou noutros receptores da histamina. Os compostos aminoalquilimidazol substituídos aí descritos têm a fórmula: A-NR^ío

HN na qual A é alquilo C1_6, opcionalmente substituído por alquilo ou aralquilo; R é um grupo alquilo, arilo ou aralquilo substituído ou nao-substituído; é hidrogénio, alquilo, fenilo, fenilalquilo ou imidazolilalquilo; R20 é hidrogénio, alquilo opcionalmente substituído por halo, OH, CN, C02H, NH2 ou CQNH2; ou COY na qual Y é Rj^O ou R^NH e R^ é um grupo alquilo, arilo, aralquilo ou amidino substituído ou nao-substituído; e X é 0-3. Exemplos incluem N-(2-(4(5)-imidazolil)etil)glicina e l-benzil-5--(2-aminoetil)imidazol.

Woolley, e col., Biochemistrv. 48. 709 (1962) refere-se à 2--benzil-histidina e seus derivados, como guias para a síntese de péptidos concebida para ter actividade enzimática específica. Os compostos exemplificados neste artigo incluem 1,2-dibenzil-histi-dina e N-carbobenzoxi-1,2-dibenzil-histidina.

DESCRICAO DO INVENTO

Os compostos do presente invento que são bloqueadores dos receptores da angiotensina II, são representados pela seguinte

72 817 SBC CASE 14513-1 Fórmula (I):

I ‘ , (D

cem. -ÇH -”YR R2)K I R4 r* N-^r3 na qual: R1 é adamantilo, ou fenilo, bifenilo ou naftilo, estando cada grupo arilo não-substituído ou substituído por um a três subs-tituintes seleccionados de entre Cl, Br, F, I, alquilo C-^-C^, nitro, C02R7, tetrazol-5-ilo, alcoxi hidroxi, S-alquil

Cl-C6, S02NR7R7, NHS02R7, SO3H, CQNR7R7, CN, S02-alquilo Cx-C6 ou

CnF2n+l; R2 é alquilo C2-C10 não substituído ou substituído por C02H, OH, ou NR7R7, alcenílo Cg-C^Q, alcinilo C^-C^q, cicloalquilo C3--C6, ou (CH2)o_8fenilo não substituído ou substituído por um a três substituintes seleccionados de entre alquilo C^-C^, nitro, Cl, Br, F, I, hidroxi, alcoxi C1~C6, NR7R7, C02R7, CN ou C0NR7R7; X é uma ligação simples, S, ou 0; R3 é hidrogénio, Cl, Br, F, I, CHO, hidroximetilo, COOR7, C0NR7R7, N02, ou CnF2n+1; cada n é 1-3; m é 0-4; R^ é C02R7, C0NR7R7 ou tetrazol-5-ilo; Y é uma ligação simples ou um grupo carbonilo; R5 é hidrogénio, alquilo C^-C0, cicloalquilo C3-c6, (CH2)q_4 fenilo ou (CH2)Q_3CH-difenilo em que cada grupo fenilo está independentemente um do outro não substituído ou substituído por um a três substituintes seleccionados de entre alquilo C^-C^, nitro, Cl, Br, F, I, hidroxi, NR7R7, C02R7 ou C0NR7R7; R6 é hidrogénio ou alquilo e cada R7 é, independentemente do outro, hidrogénio, alquilo ou (CH2)Q_4-f enilo; ou de um seu sal f armaceuticamente aceitável.

Como aqui usados, os termos alquilo, alcenilo, alcoxi, e alcinilo significam cadeias de carbono que são ramificadas ou não

72 817 SBC CASE 14513-1 ramificadas sendo o comprimento da cadeia determinada pela raiz precedendo o termo.

Os compostos preferidos do invento são representados pela Fórmula (I) quando: R* é fenilo não substituído ou substituído por um a três substituintes seleccionados de entre cloro, fluoro, trifluorometilo, nitro, metilo, metoxi, hidroxi, sulfonamido, ciano, carboxi, carbo(alcoxi C^-C4), carbamoílo ou tetrazol-5-ilo; X é uma ligação simples ou S; R2 é alquilo C^-Cg; R3 é hidrogénio, cloro, fluoro ou trifluorometilo; m é 0-2; R4 é C02R7; e cada R7 é, independentemente do outro, hidrogénio ou alquilo cl^c4» ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Constituem compostos particulares do invento, mas não estão limitados a eles, os seguintes: 3-[(2-clorofenil)metil]-2-n-butil-N-butiri1-histidina, 3-[(2-clorofenil)metil]-2-n-butil-N-propionil-histidina; 3-[(2-clorofenil)metil]-2-propiltio-histidina, 3-[(2-clorofeni1)metil]-2-n-butil-N-difenilaceti1-histidina; 3-[(2-clorofenil)metil]-2-propiltio-N-[(ciclopentil)carbo-nil]-histidina; 3-[(2-clorofenil)metil]-2--propiltio-N-acetil-histidina; 3-[(2-clorofenil)metil]-2-propiltio-N-isovaleril-histidina; 3-[(2-clorofenil)meti1]-2-propiltio-N-benzoíl-histidina; e 3-[(2-clorofenil)metil]-2-propiltio-histidina; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. O invento refere-se também a composições farmacêuticas compreendendo um transportador farmacêutico e uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula (I).

Estão também incluídos no presente invento processos para 72 817 SBC CASE 14513-1

IX" -12- s7· antagonizar os receptores da angiotensina II, os quais compreendem administrar a um indivíduo necessitando dela, uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula (I)- Estão também incluídos neste invento processos para o tratamento da hipertensão, da insuficiência cardíaca congestiva, de insuficiência renal e do glauco-ma, pela administração destes compostos.

Os compostos e as composições farmacêuticas e os processos deste invento, seguem os processos aqui descritos e ilustrados pelos Exemplos. Os reagentes, os grupos protectores e a funcionalidade sobre o imidazol e sobre outros fragmentos da molécula, têm de ser compatíveis com as transformações químicas propostas. As etapas da síntese têm de ser compatíveis com os grupos funcionais e com os grupos protectores do imidazol e de outras partes da molécula.

Os processos que se seguem são úteis para a preparação dos compostos de Fórmula (I), particularmente quando R1 é 2--clorofenilo ou 4-carboxifenilo, m é um, R2 é n-propilo ou n-butilo, X é S ou uma ligação simples, R'3 é hidrogénio, cloro, fluoro, ou trifluorometilo, R4 é C02H, R6 é hidrogénio, Y é um grupo carbonilo ou uma ligação simples, e R5 é hidrogénio, ^CH2^0-2“^en^^O!' ou CH-difenilo. (segue Esquema I) 72 817 SBC CASE 14513-1 -13-

Esquema I

aCH2NHCH2C02 alquiloC1_4 — (2)

(1) CHONa

2NCH2C02alqailoC-| I CHO - (3) -4 ___ CH2NCC02alquiloC1 AU CH0 — (4)

C02 alquiloC^ _4 (5) (6)

ch2ci ch2chco2h NCOR5 I R6 (10) 0)

'•v*' 72 817 SBC CASE 14513-1 -14- 0 Esquema I resume a síntese dos compostos de Fórmula (I) nos quais o substituinte na posição 2 é R2S. As benzilaminas (1), não substituídas ou substituídas por um a três substituintes Z, seleccionados de entre halo, alquilo S02~alquílo C1-6, al-coxi 01-6, CN, N02, C02-alquilo C1-4, S-alquilo C1„6, ou CnF2n+1, na qual n é 1-3, são alquilados com cloroacetato de alquilo 0Α_6, por exemplo, cloroacetato de metilo, na presença de uma base, tal como trietilamina, num solvente adequado, tal como dimetilforma-mida. Os compostos (2) de éster de alquilaminoalquilo resultantes são N-formilados com ácido fórmico, na presença de um solvente adequado, tal como xileno, para dar compostos de fórmula (3). Os compostos de fórmula (4) são formados pela C-formilação do carbono alfa, para ambos os grupos amino e éster dos compostos da fórmula (3) numa reacção com formato de alquilo, tal como formato de metilo, na presença de um haleto metálico alcalino, tal como hidreto de sódio, num solvente adequado, tal como tetra-hidrofu-rano. A reacção deste intermediário com tiocianato ácido, de preferência tiocianato de potássio, num solvente orgânico inerte, tal como alcanol C·^, produz éster imidazóis de l-R1CH2-2-mer-capto-5-alcanoatos de fórmula (5). 0 grupo tio livre dos compostos de fórmula (5) é reagido cóm um composto halo-R8, no qual R8 é alquilo C2_10, alcenilo C3_10, cicloalquilo C3_6, ou (CH2)q_8 fenilo opcionalmente substituído, de preferência brometo de propilo, na presença de uma base adequada, tal como carbonato de sódio, num solvente apropriado, tal como acetato de etilo, para dar l-R1CH2~2-R2S-5-alcanoato éster imidazóis (6). Os hidroximetil-imidazóis de fórmula (7) são preparados a partir dos compostos de fórmula (6) por redução com um reagente apropriado, tal como hidreto de diisobutilalumínio, num solvente adequado, tal como tetra-hidrofurano, a uma temperatura de cerca de -78*0 a cerca de 25*0, de preferência a cerca de -10*0. Os compostos clorometilo de fórmula (8) são preparados reagindo os compostos hidroximetilo de fórmula (7) com um agente halogenante, tal como submetendo a refluxo cloreto de tionilo. A reacção dos compostos de fórmula (8) com um dialquil 01-2 R5-amidomalonato, no qual R5 é como definido para os compostos de fórmula (I), que haviam sido 72 817 SBC CASE 14513-1 -15

pré-tratados com um agente de desprotonação, por exemplo hidreto de sódio, deu compostos de fórmula (a). Os compostos de fórmula (9) , em que R6 é H, são, opcionalmente, alquilados com um haleto de alquilo C^_^, tal como iodeto de metilo para dar os compostos de fórmula (9), em que R^ é alquilo C1-6, Os compostos de fórmula (10) que são compostos da fórmula (I), são preparados a partir dos compostos éster de fórmula (9), usando uma base aquosa, tal como solução aquosa de carbonato de sódio, num solvente orgânico adequado, tal como metanol ou etanol. (segue Esquema II) 72 817 SBC CASE 14513-1 -16-

Esauema II

(8)

N^xCH2CHC02 alquiloC^_4 R2SHj N=C(Ph}2

(11)

ch2

ch2chco2h I nh2

(15) (17) 72 817 SBC CASE 14513-1 -17-

0 Esquema II descreve uma via alternativa para os compostos de Fórmula (I). De acordo com o Esquema II, os clorometil-imidazóis de fórmula (8), são convertidos em compostos de fórmula Çll) numa reacção com um éster de alquilo Cj__4 e N-difenilmetile-noglicina na presença de uma base, tal como diisopropilamida de lítio, num solvente adequado, tal como tetra-hidrofurano, a uma temperatura de cerca de -78°C a cerca de 25°C, de preferência a cerca de -10eC. Os compostos éster de alquilamina de fórmula (12) são preparados a partir de compostos de fórmula (11) por hidrólise com uma solução aquosa de ácido adequada, tal como uma solução aquosa de ácido clorídrico.

Os compostos de fórmula (12), que são compostos de Fórmula (I), são também intermediários úteis na preparação de outros compostos de Fórmula (I). De acordo com o Esquema II, os compostos amida de fórmula (14) são preparados reagindo compostos amina de fórmula (12) com um agente acilante R^CO-halo, na presença de uma base, tal como trietilamina. Alternativamente, as aminas de fórmula (12) são monoalquiladas por reacção das ditas aminas com um aldeído adequadamente substituído, tal como benzaldeído, na presença de cianoboro-hidreto de sódio. Opcionalmente, os compostos de fórmulas (14) e (16), nos quais R6 é H, são alquilados com um alquilo Cj__6, tal como iodeto de metilo, para dar os compostos de fórmulas (14) e (16), nos quais R^ é alquilo C1_6. Os compostos éster das fórmulas (12), (14) e (16) são hidrolisados nos compostos de fórmulas (13), (15) e (17) , usando, por exemplo, uma base, tal como hidróxido de potássio, hidróxido de lítio, ou hidróxido de sódio, num sistema solvente adequado, tal como metanol ou etanol em solução aquosa. 0 Esquema II, e as fórmulas (12), (13), (14), (15), (16) e (17), são compostos da Fórmula (segue Esquema III) (I) 72 817 SBC CASE 14513-1

-18- Esauema III

H I R2X-il (18) r2x-4 jl Ν' (19) Í^-R1 n ch2oh R2X—4 Jf (20)

(CH2)m-Rl I N^'CH2CI r2x—4 I

Como no Esquema II (CH2)m-Rt R6 CH,CHNYR5I _ co2r7 N-^· r2x—4 ll (22) (21)

Os compostos de Fórmula (I) são também preparados pelos processos do Esquema III, Os 2-R2X-imidazóis de partida de fórmula (18) são já conhecidos na arte (J, Org. Chem, 45:4038, 1980) ou são sintetisados por processos conhecidos. 0 imidazol é convertido, por exemplo, em 2-n-butilimidazol, reagindo o imidazol com trietilortoformato e ácido p-toluenossulfónico para dar 1-dieto-xiortoamida-imidazol e tratando-o depois com n-butil-lítio para dar o derivado 2-lítio da ortoamida e alquilando com iodeto de n-butilo, num solvente adequado, tal como tetra-hidrofurano. O grupo l-R^(CH2)m é incorporado no 2-R2X-imídazol de fórmula (18) através de processos conhecidos, por exemplo por reacção com um haleto, mesilato ou acetato de Ri-(CH2)m, tal como brometo de 2-clorobenzilo, num solvente adequado, tal como dime-tilformamida, na presença de um aceitador de ácido adequado, tal como alquilato de sódio, carbonato de sódio ou de potássio, ou um hidreto metálico, de preferência hidreto de sódio, a uma temperatura reaccional de cerca de 25*C a cerca de 100*0, de preferência a cerca de 50*C, 0 imidazol da fórmula (19) resultante é hidroxi-metilado na posição 5, por exemplo, reagindo-o com formaldeído na presença de acetato de sódio em ácido acético, para dar os intei— mediários l-R1(CH2)tn-2-R2X-5-hidroximetilimidazol de fórmula -19 £ SBC CASE 14513-1 (20). Os compostos clorometilo de fórmula (21) são preparados a partir de hidroximetilimidazóis de fórmula (20) numa reacção com um agente de halogenação, refluxando, por exemplo cloreto de tio-nilo. Os compostos de Fórmula (I) sao preparados a partir de clorometilimidazóis pelos métodos descritos no Esquema II.

Alternativamente, preparam-se os intermediários l-Ri(CH2)m--2-R2X-5-hidroxímetilimidazóis de fórmula (20), reagindo um imi-do-éter R2X-C(=NH)-0-alquilo, tal como éter metílico de valerami-dina, ou uma amidina, tal como valeramidina, com di-hidroxiaceto-na em amoníaco líquido sob pressão para dar 2-R2X-5-hidroximeti-limidazol. Este intermediário é reagido com anidrido acético para dar l-acetil-5-acetoximetil-2-R2X-imidazol. 0 intermediário dia-cetato é N-alquilado, usando, por exemplo, triflato de 2-cloro-benzilo e o l-R1(CHÍ2)tn-2-R2X-5-acetoximetilimidazol resultante é tratado com uma base aquosa, tal como uma solução a 10% de hidróxido de sódio, para dar o intermediário l-R^(CH2)m~2-R2X-5-hidro-ximetilimidazol de fórmula (20). Os compostos de fórmula (I) são preparados a partir de hidroximetilimidazóis pelos processos acima descritos.

Os compostos de fórmula (I), nos quais a ponte alquileno na posição 5 do anel imidazol é definida como n igual a 2 ou 3, são preparados a partir dos ésteres alcanóicos correspondentes, que estão descritos na Patente EUA Número 4 340 598, usando os métodos atrás descritos.

Os compostos de fórmula (I), nos quais o substituinte R1 é substituído por hidroxi, são formados a partir dos compostos de fórmula (I) nos quais o grupo R* é substituído por alcoxi C^-C^ usando um reagente de clivagem do éter, tal como tribrometo de boro ou ácido bromídrico.

Os compostos de fórmula (I), nos quais o substituinte R* é substituído por carboxi, são formados a partir de compostos de fórmula (I) nos quais o grupo R1 é substituído por C02 alquilo cl~c4 usanc*° hidrólise básica, tal como solução aquosa de hidróxido de sódio ou de potássio em metanol ou etanol, ou usando 72 817 SBC CASE 14513-1 -20- mf ,r*'" t i

hidrólise ácida, tal como uma solução aquosa de ácido clorídrico.

Os compostos de Fórmula (I) nos quais o substituinte R1 é substituído por um grupo tetrazol-5-ilo, são preparados pelos processos descritos na Patente EUA Número 4 820 843.

Formam-se os sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis dos compostos de fórmula (I), com ácidos orgânicos ou inorgânicos apropriados, através de processos conhecidos na arte, Por exemplo, a base é reagida com um ácido orgânico ou inorgânico adequado, num solvente miscível aquoso, tal como etanol, com isolamento do sal removendo o solvente, ou num solvente imiscível, aquoso, quando o ácido é solúvel nele, tal como éter etílico ou clorofórmio, separando-se directamente o sal desejado ou isolando-se por remoção do solvente, Exemplos representativos de ácidos adequados são os ácidos maleíco, fumárico, benzóico, ascórbico, pamoico, succínico, bismetilenossalicílico, metanossulfónico, etanodissulfónico, acético, propiónico, tartárico, salicílico, cítrico, glucónico, aspártico, esteárico, palmítico, itacónico, glicólico, p-aminobenzóico, glutâmico, benzenossulfónico, clorídrico, bromídrico, sulfúrico, ciclo-hexilsulfâmico, fosfórico e nítrico,

Os sais de adição de base farmaceuticamente aceitáveis de compostos de fórmula (I) que possuem um grupo ácido são preparados, por processos conhecidos, a partir de bases orgânicas e inorgânicas, incluindo bases de metais alcalinos e alcalino-tei— rosos não tóxicos, por exemplo hidróxido de cálcio, lítio, sódio, e potássio; hidróxido de amónio, e bases orgânicas não tóxicas, tal como trietilamina, butilamina, píperazina, meglumina, colina, dietanolamina e trometamina. A actividade antagonista da angiotensina II dos compostos de fórmula (I) é avaliada por processos in vitro e in vivo. A actividade antagonista in vitro é determinada pela capacidade dos compostos de competir com ^^I-angiotensina II para se ligar aos receptores vasculares da angiotensina II, e pela sua capacidade para antagonizar a resposta contráctil à angiotensina II na aorta 72 817 SBC CASE 14513-1 -21- isolada de coelho. A actividade in vivo é avaliada pela eficácia dos compostos em inibir a resposta tensional à angiotensina II exógena em ratazanas conscientes e em baixar a pressão arterial numa ratazana com hipertensão dependente da renina.

Ligação

0 ensaio de ligação com radioligante é uma modificação de um processo já detalhadamente descrito (Gunther e col., Circ. Res. 47:278, 1980). Uma fracção determinada de artérias mesentéricas de ratazana é incubada em tampão Tris com 80 pM de 125I-angioten-sina II com ou sem antagonistas da angiotensina II durante 1 hora a 25°C. A incubação é interrompida por filtração rápida, e a 125I-angiotensina II, ligada ao receptor, recolhida no filtro é quantificada com um contador de raios gama. A potência dos antagonistas da angiotensina II é expressa como a IC50, que é a concentração do antagonista necessária para deslocar 50% do total da angiotensina II especificamente ligada. A IC50 exemplar dos compostos do invento é de cerca de 1,0 a cerca de 70 Mm.

Aorta

â

Examinou-se a capacidade dos compostos de antagonizar a va-soconstrição induzida pela angiotensina II na aorta do coelho. Cortam-se segmentos em anel da aorta torácica de coelho e suspendem-se em banhos para órgãos contendo solução fisiológica, salina. Os segmentos em anel são montados em suportes de metal e ligados a transductores de deslocação-força que estão ligados a um registador. As curvas de resposta à concentração cumulativa para a angiotensina II são efectuadas na ausência de antagonista ou após uma incubação durante 30 minutos com antagonista. As constantes de dissociação de antagonistas (K8) dos compostos do invento são de cerca de 0,05 a cerca de 50 Mm.

Inibição da resposta tensional à angiotensina II em ratazanas conscientes

Preparam-se ratazanas com cateterizaçao da artéria e veia femoral e com intubação gástrica (Gellai e col., Kidney Int. 15:419, 1979). Dois a três dias após a cirurgia as ratazanas foram colocadas numa gaiola e monitorizou-se continuamente e

72 817 SBC CASE 14513-1 '22- 22 , Xi.+ pressão arterial a partir do catéter arterial com um transductor de pressão, e registou-se num polígrafo- Comparou-se a variação da pressão arterial média em resposta a injecções endovenosas de 250 mg/kg de angiotensina II, em diversas alturas, antes e depois da administração endovenosa ou oral dos compostos em doses de 3 a 300 mg/kg. A dose de composto necessária para produzir uma inibição de 50% da resposta de controlo da angiotensina II (IC50), é usada para avaliar a potência dos compostos. A IC^q da 3-[(2-clorofenil)metil]~2~n~butil~N~butiril~histidina é de 10 mg/ /kg e»v..

Actividade Anti-hipertensiva A actividade anti-hipertensiva dos compostas é medida pela sua capacidade de reduzir a pressão arterial média em ratazanas conscientes, com hipertensão dependente da renina, por laqueação da artéria renal esquerda (Cangiano e col., J. Pharmacol. Exp. Ther. 208:310, 1979). As ratazanas com laqueação da artéria renal são preparadas com catéteres como acima descrito. Sete a oito dias após a laqueação da artéria renal, altura em que os níveis plasmáticos de renina são mais elevados, as ratazanas conscientes são colocadas em gaiolas e regista-se continuamerite a pressão arterial média, antes e após a administração endovenosa ou oral dos compostos.

Podem-se medir os efeitos sobre o abaixamento da pressão in~ traocular dos compostos usados neste invento, pelo processo descrito por Watkins, e col., .1. Ocular,.....Pharmaco,1,..,, 1 ¢2):161-168 (1985).

Os compostos de fórmula (I) são Incorporados em formas de dosagem convenientes, tais como preparações ínjectáveis, ou para compostos oralmente activos, como cápsulas ou comprimidos. Utilizam-se transportadores farmacêuticos sólidos ou .líquidos. Os transportadores sólidos incluem amido, lactose, sulfato de cálcio di-hidratado, terra alba, sacarose, talco, gelatina, ágar, pecti-na, goma-arábica, estearato de magnésio, e ácido esteárico. Os transportadores líquidos incluem xarope, oleo de amendoim, azeite, solução salina e água. Oe igual modo, o transportador ou di-

72 817 SBC CASE 14513-1 luente pode incluir qualquer material de libertação prolongada, tal como monoestearato de glicerilo ou diestearato de glicerilo, isolado ou com uma cera. A quantidade de transportador sólido varia, mas será, de preferência, de cerca de 25 mg a cerca de 1 g por unidade de dosagem. Quando se utiliza um transportador líquido, a preparação estará sob a forma de um xarope, elixir, emulsão, cápsula de gelatina mole, líquido estéril injectável, tal como uma ampola, ou uma suspensão líquida aquosa ou não aquosa.

Para administração oftálmica tópica, as composições farmacêuticas adaptadas incluem soluções, suspensões, unguentos, e inserções sólidas. Sao transportadores típicos farmaceutícamente aceitáveis, por exemplo, água, misturas de água e solventes miscíveis com água tais como alcanóis inferiores ou óleos vegetais, e polímeros não tóxicos oftalmologicamente aceitáveis, solúveis em água, por exemplo derivados da celulose tal como metil-celulose. A preparação farmacêutica pode conter também substâncias auxiliares não tóxicas tais como agentes emulsionantes, conservantes, humectantes e espessantes, como por exemplo polietili-no glicóis; componentes anti-bacterianos, tais como compostos de amónio quaternário, ingredientes tampão, tais como cloreto de metal alcalino; anti-oxidantes tal como metabissulfito de sódio; e outros ingredientes convencionais, tal como monolaurato de sorbi-tano.

Adicionalmente, os veículos oftálmicos adequados podem ser usados como meio transportador para a finalidade actual, incluindo sistemas de transporte de tampão fosfato convencionais. A preparação farmacêutica pode estar também sob a forma de um sólido inerte. Por exemplo, pode-se usar um polímero sólido, solúvel em água, como transportador para o medicamento. Podem-se também utilizar inserções sólidas insolúveis em água, tais como as preparadas a partir de copolímero de etileno-acetato de vini-lo.

As preparações farmacêuticas são feitas seguindo técnicas

72 817 SBC CASE 14513-1 -24-convencionais de um químico farmacêutico, envolvendo mistura, granulação e compressão, quando necessária, para formas de comprimidos, ou misturando, enchendo e dissolvendo os ingredientes, como apropriado, para dar os produtos orais, parentéricos ou tópicos desejados.

As doses dos compostos de fórmula (I) numa unidade de dosagem farmacêutica, como acima descrito, será uma quantidade eficaz, não-tóxica, seleccionada de entre a gama de 0,01 - 200 mg/kg de composto activo de preferência de 1 - 100 mg/kg. A dose seleccionada é administrada a um paciente humano, necessitando de antagonismo do receptor da angiotensina II, 1-6 vezes por dia, oralmente, por via rectal, tópica, por injecção ou por infusão contínua. As unidades de dosagem oral para administração humana, contêm, de preferência de 1 a 500 mg de composto activo. Usam-se, geralmente dosagens inferiores para administração parentérica. A administração oral é usada quando é segura, eficaz e conveniente para o paciente. As formulações tópicas contêm o composto activo numa quantidade seleccionada de 0,0001 a 0,1 (% p/v) de preferência de 0,0001 a 0,01. Como forma de unidade de dosagem tópica, aplica-se no olho do paciente uma quantidade de composto activo de entre 50 ng a 0,05 mg, de preferência de 50 ng a 5 mg. 0 processo deste invento de antagonizar os receptores da angiotensina II em mamíferos, incluindo humanos, compreende administrar a um indivíduo, necessitando de tal antagonismo, uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I). 0 processo deste invento, de produção de actividade anti-hipertensiva, e o processo de tratamento da insuficiência cardíaca congestiva, do glauco-ma e da insuficiência renal, compreende administrar um composto de fórmula (I), a um indivíduo que dele necessita, numa quantidade eficaz para produzir a dita actividade.

Os exemplos seguintes ilustram a preparação de compostos e de composições farmacêuticas deste invento. Os exemplos não se destinam a limitar o alcance deste invento como acima definido e como reivindicado abaixo. 72 817

SBC CASE 14513-1 -25- «*

Exemplo 1 3-r(2-clorofenil)metil1-2-propiltio-N-acetil-histidina (i) 5-carboximetil-l-(2-clorofenil)metil-2-tio-iH-imidazol

Tratou-se uma solução de 2-clorobenzilamina (14,2 g, 0,1 mole) e trietilamina (13,9 ml, 0,1 mole) em dimetilformamida (100 ml), com cloroacetato de metilo (10,9 g, 0,1 mole). A mistura foi aquecida a 50°C durante 3,5 horas. A mistura reaccional arrefecida foi diluída com éter dietílico, os sólidos foram filtrados e o filtrado concentrado foi submetido a cromatografia flash sobre sílica gel com hexano em acetato de etilo 6:4, para proporcionar 15,3 g (71%) de 2-[N-(2-clorofenil)metil]aminoacetato de metilo homogéneo. Este produto (15,2 g, 0,071 mole) em xileno (100 ml) foi tratado com ácido fórmico a 98% (2,74 ml, 0,0711 mole) e a mistura foi submetida a refluxo por 2,5 horas com um separador de água Dean-Stark. A evaporação deu 17,1 g (99%) de 2-[N-(2-cloro-fenil)metíl-N-formíl]aminoacetato de metilo. Este produto formi-lado (17,0g, 0,071 mole) foi dissolvido em formato de metilo (13,3 ml, 0,216 mol) e foi adicionado, gota a gota, a uma mistura de metóxido de sódio, preparada adicionando sódio metálico (1,79 g, 0,0778 g - átomo) a tetra-hidrofurano (325 ml) seguida da adição lenta de metanol (3,15 ml, 0,0778 mole). A mistura combinada foi agitada à temperatura ambiente durante 18 horas, e depois evaporada até ficar seca. Este produto em bruto foi dissolvido em metanol aquoso a 50% (200 ml), tratado com carvão, filtrado, e a solução foi arrefecida em gelo. Adicionou-se lentamente a esta solução, ácido clorídrico concentrado (14,3 ml, a 12 N, 0,171 mol), seguido de uma solução de tiocianato de potássio (8,6 g, 0,0885 mol) em água (20 ml). A mistura foi aquecida num banho de óleo, mantida a 90eC durante 2,5 horas, depois arrefecida para —10°C. 0 sólido precipitado foi filtrado, lavado com etanol-água frio, e seco a 60°C para dar 14,7 g (74%) de 5-carboximetil-l-(2--clorofenil)metil-2-tio-lH-imidazol, p.f. 72-74eC. (ii) l-(2-clorofenil)metil-5-hidroximetil-2-propiltio-lH-imidazol

Aqueceu-se a 60oC durante 18 horas uma mistura de 5- carboximetil-l-(2-clorofenil)-metil-2-tio-lH-imidazol (2 g, 7,08 mmole), acetato de etilo (20 ml), solução de carbonato de sódio a 5% (40 ml) e brometo de propilo (4 ml, 44 mmole). A camada orgâ-

72 817 SBC CASE 14513-1 -26- nica foi separada, seca sobre sulfato de magnésio e concentrada para dar 2,23 g de produto em bruto. A trituração com éter dietílico deu 1,63 g (71%) de 5-carboximetil-l-(2-clorofenil)me-til)-2-tiopropil-lH-imidazol; p.f. 68-71°C (a partir de hexano). 0 éster foi hidrolisado com solução aquosa de hidróxido de sódio para dar o ácido l-(2-clorofenil)metil-2-tio-propil-iH-imidazol-5-carboxílico; p.f. 158-159,5°C (a partir de etanol).

Arrefeceu-se uma solução de 5-carboximetíl-l-(2-cloro-fe-nil)-metil-2-propiltio-lH-imidazol (3,74 g, 11,5 mmole) em tetra-hidrofurano seco (50 ml), a -78°C sob árgon, e adicionou-se, gota a gota, uma solução de hidreto de di-isobutilo-alumínio em tolue-no (30 rnl a 1 Μ). A mistura foi agitada a -78°C durante 1,5 horas, e foi deixada aquecer lentamente para a temperatura ambiente. A reacção foi interrompida, vertendo-a sobre ácido acético diluído gelado, o produto foi extractado com cloreto de metileno e os extractos orgânicos foram lavados com água, solução de carbonato de sódio a 5% e salmoura. 0 produto seco, concentrado, era um sólido de tonalidade clara (3,32 g). A cristalização em etanol/água deu l-(2-clorofenil)-metil-5-hidroximetil-2-pro-piltio-lH-imidazol; p.f. 98-101eC, (iii) 3-(2-clorobenzenometil)-2-propiltio-N-acetil-histidina

Uma mistura de 1-(2-clorofenil)metil-5-hidroximetil-2-propiltio-lH-imidazol (0,117 g, 0,393 mmole) em cloreto de tioni-lo (1 ml), foi submetida a refluxo durante 2 horas, evaporada em vácuo para dar um sólido amorfo, e foi triturada com éter para proporcionar cloridrato de l-(2-clorofenil)metil-5-cloro-metil-2--tiopropil-lH-imidazol (0,13 g, 94%).

Adicionou-se cloridrato de l-(2-clorofenil)metil-5-clorome-til-2-propiltio-lH-imidazol em bruto (0,3 g, 0,853 mmole) em di-metilformamida (2 ml), a acetamidomalonato de dietilo e sódio (preparado introduzindo hidreto de sódio (2,84 mmole) numa solução de acetamidomalonato de dietilo (0,415 g, 1,91 mmole) em dimetilformamida (3 ml)). A mistura foi agitada sob árgon a 25°C durante 18 horas, vertida para dentro de água, e o produto foi

72 317 SBC CASE 14513-1 -27- extractado com cloreto de metileno. Os extractos orgânicos lavados com água foram secos e concentrados em vácuo para dar um produto laranja claro. Este produto em bruto foi purificado sobre sílica gel com hexano/acetato de etilo 1:1 para dar 0,27 g do produto de adição de malonato. Este produto foi hidrolisado em etanol aquoso a 50% (20 ml) e carbonato de sódio (0,85 g) em água (20 ml), num banho de vapor durante 3 horas. A mistura reaccional foi vertida para dentro de água e extractada com cloreto de metileno. 0 produto lavado, seco e concentrado (0,23 g) foi purificado por TLC prep. em sílica gel com um sistema de metanol a 15% em clorofórmio contendo 0,5% de ácido fórmico, para dar 0,13 g de 3-[(2-clorofenil)metil]-2-propiltio-N-acetil-histidina, como um sólido amorfo; p.f. 182-184°C.

Exemplo 2 3-Γ(2-clorofenil)metin-2-propiltio-N-butiril-histidina (i) éster de etilo de 3-[(2-clorofenil)metil]-2-propiltio-histi-dina

Arrefeceu-se uma solução de diisopropilamina (8,4 ml) em te-tra-hidrofurano (100 ml) a -78°C sob árgon, e adicionou-se uma solução de n-butil-lítio (30 ml a 2,5 M, em hexano). A mistura foi agitada a -78°C durante 30 minutos a 0°C durante 10 minutos. Após ser arrefecida a -78°C, adicionou-se uma solução de éster de etilo de N-(difenilmetileno)-glicina (Tetra. Lett., (1978), 2541, 4625) (15,4 g) em tetra-hidrofurano (50 ml), agitou-se a mistura durante 1 hora a -78°C e adicionou-se uma solução de cloridrato de l-(2-clorofenil)metil-5-elorometil-2-propiltio-lH-imidazol (Exemplo I (iii)) (9,4 g) em dimetilformamida seca (20 ml). A mistura foi então agitada à temperatura ambiente durante 18 horas, vertida numa solução saturada de cloreto de amónio, e a camada aquosa foi extractada com cloreto de metileno. Os extractos orgânicos foram lavados com água, secos com sulfato de magnésio, concentrados e cromatografados sobre sílica gel com metanol a 1%, em cloreto de metileno, para dar 6,88 g de éster de etilo de 3--[(2-clorofenil)metil]-2-propiltio-N-(difenilmetileno)histidina. Este produto (2,59 g) foi dissolvido em cloreto de metileno (52 ml), adicionou-se uma solução aquosa 1 N de ácido clorídrico (52 ml), e a mistura foi agitada a 25°C durante 18 horas. A camada

& 72 817 SBC CASE 14513-1 -28-aquosa foi separada, neutralizada para pH 10,5 com carbonato de sódio, e o produto foi extractado com cloreto de metileno. 0 ex-tracto orgânico foi seco com sulfato de magnésio e concentrado para dar 1,29 g (71%) de éster de etilo de 3-[(2-clorofenil)--metil-2-propiltio-histidina como um óleo. (ii) éster de etilo da 3-[(2-clorofenil)metil]-2-propiltio-N-bu-tiril-histidina

Tratou-se uma solução de éster de etilo de 3-(2-clorofe-nil)metil-2-propiltio-histidina (0,4 g, 1,05 mmole) em cloreto de metileno (20 ml), com trietilamina (0,17 ml) e cloreto de butiri-lo (0,12 ml). A mistura foi agitada a 25°C durante 18 horas. A reacçao foi submetida a partição entre acetato de etilo e água, e a camada orgânica foi lavada com água, seca, concentrada e cromatografada sobre sílica gel com 1 a 3% de metanol em cloreto de metileno para dar 0,367 g (77%) de éster de etilo de 3-[(2-clorofenil)-metil]-2-propiltio-N-butiril-histidina como um óleo. (iii) 3-(2-clorobenzenometil)-2-propiltio-N-butiril-histidina

Agitou-se a 25°C durante 1 hora uma mistura de éster de etilo de 3-[(2-clorofenil)metil]-2-propiltio-N-butiril-histidina (0,37 g, 0,819 mmole), etanol (4 ml), água (4 ml) e pelotas de hidróxido de potássio (0,098 g, 1,75 mmole). A reacção foi então diluída com água e o pH foi ajustado a 4 com uma solução aquosa 1 N de ácido clorídrico. 0 produto foi extractado com cloreto de metileno, lavado com água, seco e concentrado para dar um sólido laranja. Duas cristalizações a partir de clorofórmio deram 0,22 g de 3-[(2-clorofenil)metil]-2-propiltio-N-buti ril-histidina; p.f. 178-181°C.

Exemplo 3 3-r(2-clorofenil)metill-2-propiltio-N-isovaleril-histidina Seguiu-se o processo do Exemplo 2 (ii - iii) usando cloreto de isovalerilo em vez de cloreto de butirilo, para dar 3-[(2-clo-rofenil)metil]-2-propiltio-histidina, 0 composto do título é um sólido branco que se obteve com um rendimento global de 58%; p.f. 151-154°C.

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Exemplo 4 3-Γ(2-clorofenil)metil]-2-propiltio-N-benzoil-histidina

Seguiu-se o processo do Exemplo 2 (ii - iii) usando cloreto de benzoilo em vez de cloreto de butirilo. 0 composto do título é um sólido branco; p.f. 210-212eC (a partir de metanol).

Exemplo 5 3-Γ( 2-clorof eniDme ti ΙΊ-2-propiltio-N-r(ciclopentil)carbonil-his-tidina

Seguiu-se o processo do Exemplo 2 (ii - iii) usando cloreto de ciclopentanocarbonilo em vez de cloreto de butirilo. 0 composto do título é um sólido branco; p.f. 173°-175°C (a partir de etanol).

Exemplo 6 3- ΓC2-clorofenil')metin-2-Dropiltio-N-hexanoil-histidina Seguiu-se o processo do Exemplo 2 (ii - iii) usando cloreto de hexanoilo em vez de cloreto de butirilo. 0 composto do título é um sólido branco; p.f. 118^-121^0 (a partir de acetato de eti-lo).

Exemplo 7 3- [ (2-clorof eniDmetill -2-propiltio-histidina Agitou-se, a 25*0 durante 1 hora, uma solução de éster de etilo de 3-[(2-clorofenil)metil]-2-propiltio-histidina (Exemplo 2 (i)) (0,48 g, 1,26 mmole), etanol (4 ml), água (4 ml) e hidróxido de potássio (0,111 g, 1,97 mmole). A mistura foi tratada com ácido clorídrico concentrado para a levar a pH a 4,0, e arrefecida. 0 precipitado resultante foi recolhido e triturado com etanol para dar 0,34 g (77%) de 3-[(2-clorofenil)metil]-2-propiltio-his-tidina; p.f. 227*~228*C.

Exemplo 8 3- [( 2-clorof eniDmetill-2- n-butil-N-bu ti ril-histidina (i) 2-n-butil-l-(2-clorofenil)metil-lH-imidazol

Converteu-se imidazol no derivado 1-dietoxiorto-amida pelo processo de Curtis e Brown, J. Orct. Chem.. (1980)), 45, 20. Rea- β

72 817 SBC CASE 14513-1 -30-giu-se o imidazol (12,8 g, 0,19 mole) e 118,4 g (0,8 mole) de trietilortoformato, na presença de 1 g de ácido p-toluenossul-fónico para dar 20,6 g (61%), p.e. 65-70°C (0,1 mm) de i-dietoxi-ortoamida imidazol, Este produto (20,0 g, 0,14 mole) foi dissolvido em tetra-hidrofurano seco (250 ml), arrefecido a -40eC e adicionou-se n-butil-lítio (0,14 mole, 56,4 ml a 2,5 M em hexano), de -40°C a -35°C. Após 15 minutos adicionou-se iodeto de n-butilo (31,1 g, 0,169 mole) a -40°C, e a reacção foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. A reacção foi submetida a partição entre éter e ácido clorídrico 0,3 N, e a camada orgânica foi repetidamente extractada com ácido clorídrico diluído. Os extractos aquosos combinados foram neutralizados com uma solução de bicarbonato de sódio, extractada com cloreto de metileno, secos sobre sulfato de magnésio e concentrados. A destilação flash num dispositivo Kugelrohr deu 14,8 g (85%) de 2-n-butilimidazol,

Dissolveu-se 2-n-butilimidazol (9,7 g, 0,078 mol) em metanol (50 ml) e adicionou-se, gota a gota, a uma solução de metóxido de sódio (a partir de hidreto de sódio (2,31 g, 0,0934 mole) em metanol (250 ml)). Após uma hora, a solução foi evaporada até ficar seca, e o sal de sódio foi recuperado em dimetilformamida seca (150 ml) e adicionou-se brometo de 2-clorobenzílo (16,3 g, 0,079 mole). A mistura foi aquecida a 50°C durante 17 horas sob árgon, vertida sobre água gelada e o produto foi extractado com acetato de etilo. 0 extracto foi lavado, seco e concentrado para dar 18,5 g de produto em bruto, o qual foi cromatografado sobre sílica gel com acetato de etilo/hexano 2:1 para dar 11,9 g (61%) de 2-n--butil-l-(2-cloro-fenil)metil-lH-imidazol como um óleo. A croma-tografia em camada fina em sílica gel com acetato de etilo/hexano 4:1 deu um valor Rf de 0,59 (ii) 2-n-butil-l-(2-clorofenil)-metil-5-hidroximetil-lH-imidazol Processo 1

Aqueceu-se sob refluxo durante 40 horas sob árgon, uma mistura de 2-n-butil-l-(2-clorofenil)metil-lH-imidazol (95,5 g, 0,384 mole), formaldeído a 37% (500 ml), acetato de sódio (80 g) e ácido acético (60 ml). A reacção foi concentrada em vácuo e o

* 72 817 SBC CASE 14513-1 -31 resíduo foi agitado com 500 ml de solução a 20% de hidróxido de sódio durante 4 horas, diluído com água e extractada com cloreto de metileno. 0 extracto foi lavado, seco e concentrado. 0 produto em bruto (117 g) foi submetido a cromatografia flash sobre 600 g de sílica gel com um gradiente de acetato de etilo até 10% de metanol em acetato de etilo para dar 8,3 g de material de partida, 24,5 g de uma mistura de material de partida e produto, e 44 g (41%) de 2-n-butil-l-(2-clorofenil)metil-5-hidroximetil-lH-imidazol; p.f. 86-S8°C (a partir de acetato de etilo). Uma outra eluição proporcionou o derivado bis(4,5-hidroximetil) ; p.f. 138-140^0 (a partir de acetato de etilo).

Processo 2

Deixou-se repousar uma mistura de cloridrato de éter metílico de valeramidina (250 g, 1,66 mole) e di-hidroxiacetona (150 g, 0,83 mol) dissolvida em amoníaco líquido, durante a noite à temperatura ambiente, num frasco pressurizado, e aqueceu-se depois a 65*0, durante 4 horas a 375 psi. Deixou-se evaporar o amoníaco, e o resíduo foi dissolvido em metanol (3 1). A pasta resultante foi submetida a refluxo com a adição de acetonitrilo (1 1). Decantou-se a solução de cloreto de amónio enquanto quente. Repetiu-se o processo, e os extractos de acetonitrilo combinados foram tratados com carvão, filtrados a quente, e o filtrado foi concentrado em vácuo para dar o óleo escuro, 2-n-butil-5-hi-droximetilimidazol (253 g, 1,63 mol, 98%).

Este álcool em bruto (253 g) foi tratado com anidrido acético (400 ml) a -15eC e foi deixado aquecer à temperatura ambiente com agitação, e depois agitado durante mais 19 horas. 0 anidrido acético foi evaporado a pressão reduzida, o resíduo foi recuperado em cloreto de metileno, e a fase orgânica foi lavada com solução de bicarbonato de sódio a 5% e água. 0 extracto foi seco sobre sulfato de sódio e concentrado para dar 323 g (83%) de l-acetil-4-acetoximetil-2-n-butilimidazol.

Este diacetato foi N-alquilado pelo seguinte processo. A uma solução de anidrido triflico (120 ml, 0,71 mole) em cloreto de metileno (200 ml) a -78°C sob árgon, adicionou-se uma solução de 72 817 SBC CASE 14513-1

32 diisopropiletilamina (128 ml, 0,73 mole) e álcool 2-clorobenzí-lico (104 g, 0,72 mole) em cloreto de metileno (350 ml) por um período de 20 minutos. Após ser agitada durante mais 20 minutos, a -78°C, esta solução foi tratada, então com l-acetil-4-acetoxi-metil-2-n-butilimidazol (146 g, 0,61 mole), dissolvida em cloreto de metileno (300 ml) durante um intervalo de 20 minutos. A mistura foi então agitada à temperatura ambiente durante 18 horas e os solventes foram evaporados. 0 2-n-butil-5-acetoximetil-l-(2-clo-rofenil)metíl-lH-imidazol residual foi usado sem purificação na hidrólise do grupo acetato.

Tratou-se uma solução de 2-n-butil-5-acetoximetil-l-(2-clo-rofenil)metil-lH-imidazol em bruto (250 g) em metanol (200 ml), com uma solução de hidróxido de sódio a 10% (700 ml), e a mistura foi aquecida num banho de vapor durante 4 horas. Após arrefecimento, adicionou-se cloreto de metileno, separou-se a fase orgânica, e lavou-se com água, secou-se e concentrou-se. 0 resíduo foi dissolvido em éter, arrefecido e semeado para dar o produto em bruto. A recristalização em acetato de etílo deu 176 g de 2-n-butil-1-(2-clorofenil)metil-5-hidroximetil-lH-imidazol; p.f. 86-88°C. Este material era idêntico em todos os aspectos ao produto preparado pelo Processo 1. (iii) éster de etilo de 3-[(2-clorofeníl)metil]-2-n-butil-histi-dina

Submeteu-se a refluxo com cloreto de tionilo (20 ml) durante 2 horas uma mistura de 2-n-butil-l-(2-clorofenil)metil-5-hidroxi-metil-lH-imidazol (1 g). A mistura reaccional foi evaporada em vácuo e o resíduo foi triturado com éter dietílico para dar 1,08 g de cloridrato de 2-n-butil-l-(2-clorofenil)metil-5-clorometil--lH-imidazol. (iv) 3-[(2-clorofenil)metil]-2~n-butil-N-butiril-histidina

Seguiu-se o processo do Exemplo 2 (ii - iii) usando éster de etilo de 2-n-butil-3-(2-clorofenil)metíl-histidina em vez de 3--[(2-clorofenil)metil]-2-propiltio-histidina. 0 composto do título é um sólido branco obtido com um rendimento global de 74%; p.f. 199-201°C (a partir de acetato de etilo).

72 817 SBC CASE 14513-1 -33

Exemplo 9 3- r(2-clorofenil)metil1-2-n-butil-N-propionil-histidína Seguiu-se o processo do Exemplo 8 usando cloreto de propio-nilo em vez de cloreto de butirilo para dar éster de etilo de 2-n-butil-3-(2-clorofenil)metil-histidina. 0 composto do título é um sólido branco; p.f. 203-205°C (a partir de acetato de etilo/hexano).

Exemplo 10 3-Γ (2-clorofenil)metin-2-n-butil-N-difenilacetil-histidina Seguiu-se o processo do Exemplo 8 usando cloreto de difeni-lacetilo em vez de cloreto de butirilo para dar 2-n-butil-3-(2--clorofenil)metil-histidina. 0 composto do título era um pó branco; p.f. 222-225eC (a partir de metanol).

Exemplo 11 3-1~( 2-clorof enil')metil1-2-n-butil-N-3-fenilpropionil-histídina Seguiu-se o processo do Exemplo 8 usando cloreto de 3-fenil-propionilo em vez de cloreto de butirilo para dar 2-n-butil-3-(2-clorofenil)metil-hístidina. Após trituração com ciclo-hexano, o composto do título (como o sal clorídrato) era um sólido branco; p.f. 194-196°C.

Exemplo 12 3-r(2-clorofenil)metin-2-n-butil-N-(fenilacetil)histidina Preparou-se o composto do título de acordo com o Exemplo 8, usando cloreto de fenilacetilo em vez de cloreto de butilo.

Exemplo 13 3-r(2-clorofenil)metil1-2-n-butil-N-benzil-histidina Preparou-se o composto do título por alquilaçao redutora de éster de etilo de 2-n-butil-3-(2-clorofenil)metil-histidina com benzaldeído, na presença de cianoboro-hídreto de sódio, para dar éster de etilo de 3-[(2-clorofenil)metil]-2-n-butil-N-benzil-histidina. A hidrólise do grupo éster é conseguida de acordo com o Exemplo 2 (iii) para proporcionar o composto do título. 0 -34- 72 817 SBC CASE 14513-1

Exemplo 14 3-rí2-clorofenil)metin-2-n-butil-N-benzil-N-metil-histidina Reage-se 3-[(2-clorofenil)metil]-2-n-butil-N-benzil-histidi-na (preparada no Exemplo 13), com iodeto de metilo, para dar o composto do título.

Exemplo 15

Prepararam-se os seguintes compostos pelos processos acima descritos: 3-[(4-carboxifenil)metil]-2-n-butil-N-butiril-histidina, 3-[(4-carboxi-2-clorofenil)metil]-2-n-butil-N-butiril-histi- dina, 3-[(4-carboxi-3-clorofenil)metil]-2-n-butil-N-butiril-histi- dina, 3-[(4-carboxi-2,3-diclorofenil)metil]-2-n-butil-N-butiril--histidina, 3-[(4-carboxifenil)metil]-2-(l-butenil)-N-butiril-histidina, 3-[(4-carboxifenil-3-trifluorometilfenil)metil]-2-n-butil)--N-butiril-histidina, 3-[(4-carboxifenil)metil]-2-n-propil-N-butiril-histidina, 3-[(4-carboxifenil)meti1]-2-n-hexil-N-butiril-histídína, 3-[(4-carboxi-2-nitrofenil)metil]-2-n-butil-N-butiril-histi- dina, 3-[(4-nitrofenil)metil]-2-n-butil-N-butiril-histidina, e 3-[(4-[lH-tetrazol-5-il]fenil)metil]-2-n-butil-N-butiril--histidina.

Exemplo 16

Produziu-se uma forma de dosagem oral para administrar oralmente os compostos de Fórmula (I) activos, seleccionando, misturando e enchendo em cápsulas de gelatina dura, os ingredientes em proporções, por exemplo como apresentado abaixo.

Quantidades 100 mg 10 mg 100 mg

Ingredientes 3-[(2-clorofenil)metil]-2-n-butil- -N-butiril-histidina

Estearato de magnésio

Lactose

72 817 SBC CASE 14513-1 -35-

Exemplo 17 0 di-hidrato de sulfato de cálcio e a sacarose e os compostos de fórmula (I), oralmente activos, são misturados e granulados com uma solução de gelatina a 10%, Os grânulos molhados são seleccionados, secos, misturados com amido, talco e ácido esteárico, seleccionados e comprimidos sob a forma de comprimidos.

Ingredientes Quantidades 3-[(2-clorofenil)metil]-2-n-butil- 75 mg -N-propionil-histidina di-hidrato de sulfato de cálcio 100 mg sacarose 15 mg amido 8 mg talco 4 mg ácido esteárico 2 mg

Exemplo 18

Dispersa-se 3-[(2-clorofenil)metil]-2-n-butil-N-butiril-his-tidina, 50 mg, em 25 ml de solução salina normal para preparar uma preparação injectável.

Exemplo 19

Produz-se uma solução oftalmológica tópica para administrar os compostos de fórmula (I), misturando sob condições estéreis os ingredientes em proporções, por exemplo, como abaixo indicado.

Quantidades 1.0 mg 10,4 mg 2,4 mg 5.0 mg 5.0 mg q.s. ad 1,0 ml q.s. ad pH 7,4

Ingredientes 3-[(2-clorofenil)metil]-2-propiltio -N-butiril-histidina fosfato de sódio dibásico fosfato de sódio monobásieo clorobutanol hidroxipropanol metilcelulose água estéril

hidróxido de sódio 1,0 N 72 817 S8C CASE 14513-1 -36-

Deve-se entender que o invento não está limitado às concretizações ilustradas acima, e está reservado o direito para as concretizações ilustradas e todas as modificações abrangidas pelo alcance das reivindicações que se se seguem.

Claims

*0?

72 817 S8C CASE 14513-1 -37- REIVINDICACÕES 1 - Processo de preparação de um composto de fórmula (I): N-S, íCHaV, —ÇH — NYR* R3 J. na qual: R1 é adamantilo, ou fenilo, bifenilo ou naftilo, estando cada grupo arilo não substituído ou substituído por um ou três substituintes seleccionados de entre Cl, Br, F, I, alquilo C^-C^, nitro, C02R7, tetrazol-5-ilo, alcoxi C1-C6, hidroxi, S-alquil cl~c6, S02NR7R7, NHS02R7, S03H, CONR7R7, CN, S02-alquilo C1~C6 ou cnF2n+l; R2 é alquilo C2~Cnão substituído ou substituído por C02H, OH, ou NR7R7, alcenilo C3-C10, alcinilo C3-C10, cicloalquilo C3--C6, ou (CH2)Q_gfenilo n^° substituído ou substituído por um ou três substituintes seleccionados de entre alquilo C1-C6, nitro, Cl, Br, F, I, hidroxi, alcoxi C^-C^, NR7R7, C02R7, CN ou C0NR7R7; X é uma ligação simples, S, ou 0; R3 é hidrogénio, Cl, Br, F, I, CHO, hidroximetilo, C00R7, C0NR7R7, N02, ou CnF2n+l’ cada n é 1-3; m é 0-4; R^ é C02R7, C0NR7R7 ou tetrazol-5-ilo; Y é uma ligação simples ou um grupo carbonilo; R5 é hidrogénio, alquilo Cj^-Cg, cicloalquilo C3^C6, (CH2)q_4 fenilo ou (CH2)c>_3CH-difenilo em que cada grupo fenilo está não substituído ou substituído por um ou três substituintes seleccionados de entre alquilo C1-C6, nitro, Cl, Br, F, I, hidroxi, NR7R7, C02R7 ou C0NR7R7; R6 é hidrogénio ou alquilo C^_^; e cada R7 é, independentemente do outro, hidrogénio, alquilo C^-C4 ou (CH2)0_4-fenilo; ou de um seu sal f armaceuticamente

72 817 SBC CASE 14513-1 -38-aceitável, caracterizado por compreender: (a) a reacção de um composto de fórmula (II):

(II) na qual R2, R5 e R6 são definidos como para a fórmula (I) e R* é definido como para a fórmula (I), Z é halo, alquilo S02al- quilo C1_6, alcoxi Cj[_6, CN, N02, C02alquilo S-alquilo cl-6» ou εη^2η+1’ na n ® 1~3, e q é 0-3, com uma base; ou (b) para compostos de fórmula (I) em que Y é uma ligação simples, e R^ e R^ são, cada um, hidrogénio, a reacção de um composto de fórmula (III): I N^^CHjCHCOjjCmalquil *S-<y |!|=C(Ph)2 «« na qual R2, X, m e n são como definidos para a fórmula (I) e R1 é como definido para a fórmula (I), excepto que os substituintes do grupo R1 não incluem OH, CQ2H, CQNR7R7 ou tetrazol-5-ilo, com ácido; ou (c) para compostos de fórmula (I) em que Y é um grupo carbo-nilo, R6 é hidrogénio e R5 é como definido para a fórmula (I), a reacção de um composto de fórmula (IV): (segue fórmula)

(IV) 72 817 SBC CASE 14513-1 -39- (CHaU-Ri* ^ CHjCHCOjC,^ alquil R2S-4T NCOR5 N 1 na qual R2, X, m e n são como definidos para a fórmula (I) e R1 é como definido para a fórmula (I), excepto que os substituintes do grupo R·*· nao incluem OH, CO2H, C0NR7R7 ou tetrazol-5-ilo, com R5C0-halo, na presença de uma base; ou (d) para compostos de fórmula (I) em que Y é uma ligação simples, R6 é hidrogénio e R5 é como definido para a fórmula (I), a reacção de um composto de fórmula (IV) como anteriormente definido com um aldeído adequadamente substituído, na presença de ci-anoboro-hidreto de sódio; ou (e) para compostos de fórmula (I) em que R6 é alquilo C1-C6, a reacção de compostos de fórmula (I) em que R6 é hidrogénio com haleto de alquilo Cj^-C^; e em seguida (i) para compostos de fórmula (I) em que R4 é CO2H, a hidrólise de compostos de fórmula (I) em que R4 é C02alquilo ΰ1-4; ou (ii) para compostos de fórmula (I) em que R4 é C0NR7R7, em que R7 á hidrogénio, alquilo C^_4 ou (CH2)0_4fenilo, o tratamento de compostos de fórmula (I) em que R4 é C02H com um agente de halogenação, seguido por reacção com uma amina adequadamente substituída; ou (iii) para compostos de fórmula (I) em que R4 é tetrazol-5--ilo, o tratamento de compostos de fórmula (I) em que R4 é C0NH2 com cloreto de oxalilo/dimetilformamida, seguido por reacção com uma azida; ou (iv) para compostos de fórmula (I) em que o grupo R-*· está substituído com hidroxi, a desprotecção dos compostos de fórmula (I) em que o grupo R1 está substituído com alcoxi C1-6; ou (v) para compostos de fórmula (I) em que o grupo R^ está

A >' 72 817 SBC CASE 14513-1 -40-substituído com carboxi, a hidrólise dos compostos de fórmula (I) em que o grupo R1 está substituído com C02alquilo C1-6; ou (vi) para compostos de fórmula (I) em que o grupo R^- está substituído com C0NR7R7 em que R7 é hidrogénio, alquilo Cj^, ou (CH2)0_4fenilo, tratar os compostos de fórmula (I) em que o grupo R1 está substituído com C02H com um agente de halogenação, seguido por reacção com uma amina adequadamente substituída; ou (vii) para compostos de fórmula (I) em que o grupo R·1- está substituído com tetrazol-5-ilo, a reacção dos compostos de fórmula (I) em que o grupo R1 está substituído com ciano, com azida; e em seguida formação, opcional, de um seu sal farmaceuticamente aceitável.
2 - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se preparar um composto em que: R·1- fenilo não substituído ou substituído com um a três subs-tituintes seleccionados de entre cloro, fluoro, trifluorometílo, nitro, metilo, metoxi, hidroxi, sulfonamido, ciano, carboxi, cat— bo(alcoxi C^-C^), carbamoílo ou tetrazol-5-ilo; X é uma ligação simples ou S; R2 é alquilo C2-C8; R3 é hidrogénio, cloro, fluoro ou trifluorometílo; m é 0-2; R4 é C02R7; e cada R7 é independentemente do outro, hidrogénio ou alquilo C-^-C^, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
3 - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o composto preparado ser a 3-((2-clorofenil)metil]-2-n-butil--N-butiril-histidina ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
4 - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o composto preparado ser a 3-[(2-clorofenil)metil]-2-pro-piltio-N-butiril-histidina ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
5 Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado -41- 72 817 SBC CASE 14513-1 por o composto preparado ser: 3-[(2-clorofenil)metil]-2-n-butil-N-propionil-histidina; 3-[(2-clorofenil)metil]-2-n-butil-N-difenilacetil-histidina; 3-[(2-clorofenil)metil]-2-propiltio-N-[(ciclopentil)carbonil]- -histidina; 3-[(2-clorofenil)metil]-2-propiltio-N-acetil-histidina; 3-[(2-clorofenil)metil]-2-propiltio-N-isovaleril-histidina; 3-[(2-clorofeníl)metil]-2-propiltio-N-benzoil-histidina; ou 3-[(2-clorofenil)metil]-2-propiltio-histidina; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
6 - Processo de preparação de 3-[(2-clorofenil)metil]-2-n--butil-N-butiril-histidína, caracterizado por compreender a reac-ção de 3-(2-clorofenil)metil-2-n-butil-histidina com cloreto de butirilo na presença de trietilamina, seguida por hidrólise do éster.
7 - Processo de preparação de 3-[(2-clorofenil)metil]-2-pro-piltio-N-butiril-histidina, caracterizado por compreender a reac-ção de 3-(2-clorofenil)metil-2-propiltio-histidina com cloreto de butirilo na presença de trietilamina, seguida por hidrólise do éster.
8 - Processo de preparação de uma composição farmacêutica, caracterizado por compreender associar um composto de fórmula (I) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com a reivindicação 1, com um portador farmaceuticamente aceitável. Lisboa, 2Ε ϋ |99| Por SMITHKLINE BEECHAM CORPORATION =0 AGENTE 0FICIAL=