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PT94241A - Processo para a preparacao de factor calcificacao ossea e de composicoes farmaceuticas que os contem - Google Patents

Processo para a preparacao de factor calcificacao ossea e de composicoes farmaceuticas que os contem Download PDF

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PT94241A PT94241A PT9424190A PT94241A PT 94241 A PT94241 A PT 94241A PT 94241 A PT94241 A PT 94241A PT 9424190 A PT9424190 A PT 9424190A PT 94241 A PT94241 A PT 94241A
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Claims (2)

  1. 32 'Th REIVINDICAÇÕES: lã. - processo para a preparação de factor de calcificação óssea, caracterizado pelo facto de cpmpreender as operações que consistem em se construir um vector que inclui c l seguinte sequên cia de ADN humano. CAG TAT GGC GAT TAT GGA TAC CCA TAC humano CAG CAG TAT CAT GAC TAC AGC GAT GAT GGG TGG GTG AAT TTG AAC CGG CAA GGC TTC AGC TAC CAG TGT CCC CAG GGG CAG GTG ATA GTG GCC GTG humano AGG AGC ATC TTC AGC AAG AAG GAA GGT TCT GAC AGA CAA TGG AAC TAC GCC TGC ATG CCC ACG CCA CAG AGC CTC GGG GAA CCC ACG GAG TGC TGG humano TGG GAG GAG ATC AAC AGG GTC GGC ATG GCT GGC ATG GAA TGG TAC CAG ACG TGC TCC AAC AAT GGG CTG GTG GCA GGA TTC CAG AGC CGC TAC TTC GAG TCA GTG humano CTG GAT CGG GAG TGG CAG TTT TAC TGT TGT CGC TAC AGC AAG AGA TGC CCA TAT TCC TGC TGG CTA ACA ACA GAA TAT CCA GGT CAC TAT GGT GA humano GAG ATG GAC ATG ATT TCC TAC AAT TAT GAT TAC TAT ATC CGA GGA GCA ACA ACC ACT TTC TCT GCA GTG GAA AGG GAT CGC CAG TGG AAG TTC ATG humano ATG TGC CGG ATG ACT GAA TAC GAC TGT GAA TTT GCA AAT GTT TAG Fig. 1C ou um seu fragmento? b) se transformar uma célula hospedeira com o citado vector e; c) se cultivarem as células transformadas resultantes em condições em que se expressa o péptido codificado pela referida sequência de ADN ou pelo seu fragmento. 2-. - Processo para a preparaçao de factor de calcificação óssea, caracterizado pelo facto de compreender as operações que consistem em a) se construir um vector que inclui a seguinte sequência de ADN bovino CAG TAT GGT GAC TAT GGG TAC TCC TAT 33, -
    Bovino CAT CAG TAC CAT GAC TAC AGT GAC GAT GGG TGG GTG AAT CTG AAC CGG CAG GGC TTC AGC TAC CAG TGT CCC CAC GGG CAG GTG GTG GTG GCC GTG Bovino AGG AGC ATC TTC AAC AAG AAG GAA GGT TCC GAC AGA CAG TGG ACC TAC GCC TGC ATG CCC ACA CCC CAG AGC CTG GGG GAG CCT ACG GAG TGC TGG Bovino TGG GAG GAG ATC AAC AGG GCT GGA ATG GAA TGG TAC CAG ACA TGC TCC AAC AAT GGA CTG GTG GCA GGA TTC CAG AGC CGC TAC TTC GAG TCA GTG Bovino CTG GAT CGG GAG TGG CAA TTT TAC TGG TGT CGC TAC AGG AGG AGA TGC CCA TAT TCC TGC TGG CTG ACA ACA GAA TAT CCA GGC CAC TAT GGT GAG Bovino GAG ATG GAC ATG ATT TCC TAC AAT TAT GAT TAC TAT ATG CGA GGG GCA ACA ACC ACT TTC TCT GCA GTG GAA AGG GAT CGC CAG TGG AAA TTC AT Bovino ATG TGC CGG ATG ACT GAC TAT GAC TGT GAA TTT GAC AAT GTT TAG Fig. 1D ou um seu fragmento de iniciação de calcificação; b) se transformar uma célula hospedeira com o referido vector; e c) se cultivarem as células transformadas resultantes em condições em que se expressa o péptido codificado pela citada sequência de ADN ou por um seu fragmento. 3-. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de a mencionada sequência de ADN compreender ainda uma sequência 5 escolhida do grupo constithido_.pela sequência principal ATG, GAC, CTC AGT CTT CTC TGGGTA CTT CTG CCC CTA GTC ACC ATG GCC TGG GGC e qualquer sequência derivada por remoção de um ou de vários desoxi-nucleótidos a partir da extremidade 5' da mencionada sequência principal. 4¾. - Processo de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo facto de a mencionada sequência de nucleótidos de ADN compreender ainda uma sequência 5' escolhida do grupo formado pela sequência principal ATG GAC CTC AGT CTT CTC TGG GTG CTT CTG CCA CTG GTC ACC ATG GCC TGG GGA e qualquer sequência derivada por remoção de um ou de vá-
    rios desoxinucleótidos a partir da extremidade 5' da referida sequência principal. 5^. - Processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 4, caracterizado pelo facto de a citada célula hospedeira ser uma célula eucariótica. 6ã. - Processo de acordo com a reivindicação 5, caracteriza do pelo facto de a citada célula hospedeira compreender uma levedura. 7^. - Processo de acordo com a reivindicação 5, caracteriza do pelo facto de o mencionado vector compreender um promotor GAPDH que controla a expressão do citado pép-tido. J 8^. - Processo de acordo com a reivindicação 5, caracteriza do pelo facto de o^referido promotor ADH2/GAPDH que controla a expressão do referido péptido. 9^. -- Processo de acordo com qualquer das reivindicações anteriores, caracterizado pelo facto de se produzir ADN não cromossómico com a sequência humano CAG TAT GGC GAT TAT GGA TAC CCA TAC humano CAG CAG TAT CAT GAC TAC AGC GAT GAT GGG TGG GTG AAT TTG AAC CGG CAA GGC TTC AGC TAC CAG TGT CCC CAG GGG CAG GTG ATA GTG GCC GTG humano AGG AGC ATC TTC AGC AAG AAG GAA GGT TCT GAC AGA CAA TGG AAC TAC GCC TGC ATG CCC ACG CCA CAG AGC CTC GGG GAA CCC ACG GAG TGC TGG humano TGG GAG GAG ATC AAC AGG GCT GGC ATG GAA TGG TAC CAG ACG TGC TCC AAC AAT GGG CTG GTG GCA GGA TTC CAG AGC GGC TAC TTC GAG TCA GTG humano CTG GAT CGG GAG TGG CAG TTT TAC TGT TGT CGC TAC AGC AAG AGA TGC CCA TAT TCC TGC TGG CTA ACA ACA GAA TAT CCA GGT CAC TAT GGT GA humano GAG ATG GAC ATG ATT TCC TAC AAT TAT GAT TAC TAT ATC CGA GGA GCA ACA ACC ACT TTC TCT GCA GTG GAA AGG GAT CGC CAG TGG AAG TTC ATC humano ATG TGC CGG ATG ACT GAA TAC GAC TGT GAA TTT GCA AAT GTT TAG 1C Fig 35 -
    loa. - Processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 8 caracterizado pelo facto de se obter ARN complementai da sequência referida na reivindicação 9. J - Processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo facto de se produzir ADN nao cro mossómico com a sequência Bovino CAG TAT GGT GAC TAT GGG TAC TCC TAT Bovino CAT CAG TAC CAT GAC TAC AGT GAC GAT GGG TGG GTG ΔΑΤ CTG AAC CGG CAG GGC TTC AGC TAC CAG TGT CCC CAC GGG CAG GTG GTG GTG GCC GTG Bovino AGG AGC ATC TTC AAC AAG AAG GAA GGT TCC GAC AGA CAG AGG AGC TAC GCC TGC ATG CCC ACA CCC CAG AGC CTG GGG GAG CCT ACG GAG TGC TGG Bovino TGG GAG GAG ATC AAC AGG GCT GGA ATG GAA TGG TAC CAG ACA TGC TCC AAC AAT GGA CTG GTG GCA GGA TTC CAG AGC CGC TAC TTC GAG TCA GTG Bovino CTG GAT CGC GAG TGG CAA TTT TAC TGC TGT CGC TAC AGC AAG AGA TGC CCA TAT TCC TGC TGG CTG ACA ACA GAA TAT CCA GGC CAC TAT GGT GAG Bovino GAG ATG GAC ATG ATT TCC TAC AAT TAT GAT TAC TAT ATG CGA GGG GCA ACA ACC ACT TTC TCT GCA GTG GAA AGG GAT CGC CAG TGG AAA TTC AT Bovino ATG TGC CGG ATG ACT GAC TAT GAC TGT GAA TTT GCA AAT GTT TAG Fig. . 1D 12a. - Processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo facto de se obter ADN complementar da sequência referida na reivindicação 11. 13-. J - Processo de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo facto de se obter ADN não cromossómico que compreende ainda a sequência 5' escolhida do grupo constituído pela sequência principal ATG GAC CTC AGT CTT CTC TGG GTA CTT CTG CCC CTA GTC ACC ATG GCC TGG GGC e -Se-quências derivadas por remoção de um ou de vários deso-xinucleótidos a partir da extremidade 5' da mencionada sequência principal. - Processo de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo facto de se obter ADN não cromossómico que compreende ainda a sequência 5' escolhida do grupo formado pela sequência principal ATfíPGAC CTC ACT CTT CTG TGG GTG CTT CTG CCA CTG GTC ACC GTG GCT TGG GGA:e..sequêneias derivadas por remoção de-um ou vários desoxinucleótidos a. 14¾.
    partir da extremidade 5' da mencionada sequência principal . 15ã _ processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo facto de se obter um vector replicá-vel que compreende ADN de acordo com a reivindicação 9. 16â - Processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo facto de se obter um vector replicá-vel compreendendo ADN de acordo com a reivindicação 11. 175 _ Processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo facto de se obter um vector replicá-vel compreendendo ADN de acordo com a reivindicação 14. 18â - Processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo facto de se obter um vector replicá-vel compreendendo ADN de acordo com a reivindicação 14. 19^ - processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo facto de se obter células de um hospedeiro transformadas com um vector replicável de acorde com a reivindicação 15. 20¾ - Processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo facto de se obter células de um hospedeiro transformadas com um vector replicável de acordo com a reivindicação 16. 21¾ - Processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo facto de se obter células de um hospedeiro transformadas com um vector replicável de acordo com a reivindicação 17. 22¾ - Processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo facto de se obter células de um hospe deiro transformadas com um vector replicável de acordo com a reivindicação 18. 23a - Processo para a preparação de composições farmacêuticas caracterizado pelo facto fe se misturar um polipéptido - 37 - /1 - 37 - /1 // 24a. 25¾. 26a. /P,í escolhidos do grupo que consiste em factor de calcificação óssea (BCF) de mamíferos e seus análogos substar. cialmente isentos de outros factores osteoindutores.azs sociados, preparados de acordo com qulaquer das reivir. dicações anteriores, com as substâncias veiculares e auxiliares farmacêuticamente aceitáveis. Processo de acordo com a reivindicação 23, caracteri-zado pelo facto de o referido factortde calcificação óssea de mamíferos ser BCF humano. Processo de acordo com a reivindicação 23, caracteri-zado pelõ facto de o citado factor de calcificação óssea de mamíferos ser BCF bovino. Processo de acordo com a reivindicação 24, caracteris zado pelo facto de o mencionado polipeptido compreender uma sequência de aminoácidos como se segue humano GLN TYR GLY ASP TYR humano GLN GLN PIR HIS ASP VAL ASN LEU ASN ARG GYS PRO GLN GLY GLN humano ARS SER ILE PHE SER ARG GLY TRP ASN TYR GLN SER LEU GLY GLU humano TRP GLU GLU ILE ASN TYR SLN THR CYS SER GLY PHE GLN SER ARG humano LEU ASP ARG GLU TRP TYR SER LYS ARG CYS THR THR GLU TYR PRO humano GLU MET ASP MET ILE PYR ILE ARG GLY ALA VAL GLU ARG ASP ARG humano MET CYS ARG MET THR ALA ASN VAL Fig. IA GLY TYR PRO TYR TYR SER ASP ASP GLY TRP GLN GLY LEU SER TYR GLN VAL ILE VAL ALA VAL LYS LYS GLU GLY SER ASP ALA GYS TET PRO TAR PRO PRO THR GLU GYS TRP ARG ALA GLY MET GLU TRP ASN ASN ELY LEU VAL ALA TYR PHE GLU SER VAL GLN PHE TYR CYS CYS ARG PRO TYR SER CYS TRP LEU GLY HIS TYR GLY GL SER PYR ASN TYR ASP PYR THR THR THR PHE SER ALA GLN TRP LYS PHE ILE GLU TYR ASP CYS GLU PHE ou um seu fragmento. Processo de acordo com a reivindicação 25, caracteri-zado pelo facto de o mencionado polipeptido compreender a seguinte sequência de aminoácidos Bovino GLN TYR GLY ASP TIR GLY TYR SER TYR Bovino HIS GLN TYR HIS ASP TYR SER ASP ASP GLY TRP VAL ASN LEU ASN ARG GLN GLY LEU SER TYR GLN CYS PRO HIS GLY GLN VAL VAL VAL ALA VAL 27®.
    Bovino a g: SER ILE ASN LYS LYS GLU GLY SER ASP ARG ELN TRP ASN TYR ALA CYS MET PRO THR PRO GLN SER LEU GLY GLU PRO THR GLU CYS TRF Bovino TRP GLU GLU ILE ASN ARG ALA GLY MET GLU TRP TYR GLN THR CYS SER ASN ASN GLY LEU VAL ALA GLY PHE GLN SER ARG TYR PHE GLU SER VAL Bovino LEU ASP ARG GLU TRP GLN PHE TYR CYS CYS ARG TYR SER LYS ARG SYS PRO TYR SER CYS TRP LEU THR THR GLU TYR PRO GLY HIS TYR GLY GL Bovino GLU MET ASP MET ILE SER TYR ASN TYR ASP TYR TYR MET ARG GLY ALA THR THR THR PHE SER ALA VAL GLU ARG ASP ARG GLN TRP LYS PHE Bovino MET CYS ARG MET THR ASP TYR ASP CYS GLU THE ALA ASN VAL Fig. 1B J ou um seu fagmento. 28^. - Processo de acordo com a reivindicação 26, caracteri-zado pelo facto de o citado polipéptido compreender uma extremidade amino escolhida do grupo formado pela sequência de péptido de sinal met-asp-leu-ser-leu-leu-trp-val-leu-leu-pro-leu-val-thr-met-ala-trp-gly- e sequências da citada sequência de péptido de sinal derivadas por meio da anulação de um ou de vários amino-ácidos da extremidade amino da referida sequência de péptido de sinal. J 29â. - Processo de acordo com a reivindicação 27, caracteriza-do pelo facto de o mencionado polipéptido compreender uma extremidade amino escolhida do grupo formado pela sequência de péptido de sinal met-asp-leu-thr-leu-leu--trp- val-leu-leu-pro-leu-val-thr-val-ala-trp-gly e sequências da referida sequência de péptido de sinal, derivadas por remoção de um ou vários aminoácidos da extremidade amino da citada sequência de péptido de sinal. 30â. - Processo para a preparação de uma composição farmacêutica que provoca a calcificação, caracterizado pelo faç to de se misturar^uma quantidade de uma mistura de faç tor de calcificação óssea de mamíferos, ou um seu análogo com uma proteína Gla de matriz. . - Processo de acordo com a reivindicação 30, caracterizado pelo facto de o citado factor compreender o fac-tor de calcificação óssea humano. 31*
    u - 32a. 33^. J 34^. J - Processo de acordo com a reivindicação 30, caracteriza-do pelo facto^de o citado factor compreender o factor de calcificação óssea bovina. Processo de acordo com a reivindicação 31, caracteriza- do pelo facto de 0 citado factor possuir a seguinte sequência de amindacidos humano GUI TYR GLY ASP TYR GLY TYR PRO TYR humano GIN GLN TYR HIS ASP TYR SER ASP ASP GLY TRP VAL ASN LEU ASN ARG GLN GLY LEU SER TYR GLN CYS PRO GLN GLT GLN VAL ILE VAL ALA VAL humano ARS SER ILE PHE SER LYS LYS GLU GLY SER ASP ARG GLN TRP ASN TYR ALA CYS TET PRO THR PRO GLN SER LEU GLY GLU PRO THR GLU CYS TRP humano TRP GLU GLU ILE ASN ARG ALA GLY MET GLU TRP TYR SLN THR CYS SER ASN ASN GLY LEU VAL ALA GLY PHE GLN SER ARG TYR PHE GLU SER VAL humano LEU ASP ARG GLU TRP GLN PHE TYR CYS CYS ARG TYR SER LYS ARG CYS PRO TYR SER CYS TRP LEU THR THR GLU TYR PRO GLY HIS TYR GLY GL humano GLU MET ASP MET ILE SER TYR ASN TYR ASP TYR TYR ILE ARG GLY ALA THR THR THR PHE SER ALA VAL GLU ARG ASP ARG GLN TRP LYS PHE ILE humano MET CYS ARG MET THR GLU TYR ASP CYS GLU PHE ALA ASN VAL Pig. IA ou um seu fragmento Processo de acordo com a reivindicação 32, caracteri- zado pelo facto de 0 referido factor ter a seguinte sequencia aminoacido Bovino GLN TYR GLY ASP TYR GLY TYR SER TYR Bovino HIS GLN TYR HIS ASP TYR SER ASP ASP GLY TRP VAL ASN LEU ASN ARG GLN GLY LEU SER TYR GLN CYS PRO HIS GLY GLN VAL VAL VAL VAL VAL Bovino AAG SER ILE PHE ASN LYS LYS GLU GLY SER ASP ARG ELN TRP ASN TYR ALA CYS MET PRO THR PRO GLN SER LEU GLY GLU PRO THR GLU CYS TRP Bovino TRP GLU GLU ILE ASN ARG ALA GLY MET GLU TRP TYR GLN TYH CYS SER ASN ASN GLY LEU VAL ALA GLY PHE GLN SER ARG TYR PHE GLU SER VAL Bovino LEU ASP ARG GLU TRP GLN PHE TYR CYS CYS ARG TYR SER LYS ARG CYS PRO TYR SER CYS TRP LEU TRH TRH GLU TYR PRO GLY HIS TYR GLY GL Bovino GLU MET ASP MET ILE SER TYR ASN TYR ASP TYR TYR MET ARG GLY ALA THR THR THR PHE SER ALA VAL GLU
    40
    ti ARG ASP AFG GLN TRP LYS PHE Bovino MET CYS ARG MET THR ASP TYR ASP CYS GLU PHE ALA ASN VAL Fig, 1B ou um seu fragmento.
  2. 353 - Processo para a preparação de composições para reconhecer um único epítopo para o factor de calcificação óssea de mamíferos, caracterizado pelo facto des e misturarem an-ti-corpos que reconhecem o referido epítopo com as substâncias auxiliares e veiculares farmacêuticamente aceita veis. * ™ 36¾ - Processo para provocar a calcificação para a formação de tecido ósseo num vertebrado, caracterizado pelo facto de se administrar ao referido vertebrado, de uma maneira farmacêuticamente eficaz, uma quantidade^efectiva, para provocar a calcificação, de uma composição de acordo com qualquer das reivindicações 30 a 34, de preferência, com preendida entre cerca de 0,1 micrograma e cerca de 100 miligramas por kilograma de peso corporal. | 37a - Processo de diagnóstico, caracterizado pelo facto de com preender as operações que consistem em se obter uma amos tra de osso de um mamífero, e se medir a quantidade de | factor de calcificação óssea existente na mencionada amo£i tra mediante um ensaio quantitativo. jisboa, O Agente Oficial da Propriedade Industrial
    Agente Oficial de Prcpriadade Industria! R. Casííilio. 201-S. £.-1000 LISBOA Telefs. 65 13 39 - 65 46 13
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