PT92732A - Processo para a preparacao de inibidores de renina - Google Patents

Description

Sumário do Invento

Lste invento refere-se a novos derivados de dipeptideo e tripeptídeo de fórmula de estrutura í. R 1

6 H-Z em que R1 é hidrogénio, 0 0 0 u u alouxl (C C„)~C—, slquil (0.-0,-.)-00-¾ fenil—(CH„> ~QC~, i 55 ' lo ' Π " 0 0 Π :! naf ti 1-CCi-u,} -00- ou fenil-C- onde n é um inteiro que varia de n 1 até 4 ou as porçSess Rj—L-prolilo, R.j-L-tioprolilo, R^-L-seri-1d, R.g-L-metioniio, R., -L-a 1 ani 1 o„ R1 -L-fenilalanilos R, -L-CS-ben-sil )cisteinilo5 Rt-L-histidilo ou R1~gliciIop R.y é fenilmstilo, (2—tienil)— OH.-,-, (3—indolil )CH_j— ou — CH.-j-naf tilop R._ é hidrogénio ou metilos á alquiloCC^ -CR), ~í CH7 (4-imidazoli 1 )0Ηο-Ρ fenilmetilo, fenilo, ciclD-hexilo, -CH^CH^W-Calquil (C1-C^> ].7 ou ^CH-2>n“X-alquilo(Ci~C^) s R,~ è hidrogénio ou. meti 1 og R^ á alqui-loCC^C^), fenilmetilo» ciclo-bexilmetilo, <Cli?)n~A-alquilo(C..--CT) ou Μ,

Na fórmula i us tísteriscus indicam átomos de carbοη o DESCRICÃO DETALHADA DO IMVEMTQ Dentro do gr u.po tís compostos definidos pela fórmula de estrutura IΡ são pr eferidos certos subgrupos de compostos„ Largamente preferidos são os compostos onde os s—aminc jàcidos t.'§m a configuração natural L= Desta maneir b. o ous‘ ma i s ss prefere são as compostos onde a un idade dipeptideo PU *εΓΐρ0μ*Ρ^.ΟΒθ na fórmula

unidades terminais C são os compostos onde as unidades terminais C são escolhidas de entre as de fórmula de estrutura II Κ _· “NH~CH--CH“A CS) 1 í

OH

i-órmula II com um rsxac ionatsnto sntiíi; sntrs o arixpo amxno e o qrupo πi.droxx i.o , 0'-- cnai-· g-referidos dos >_oshμυοtos 1“38ΐιπο-fórmula !.I sSo os diastereómeros com a configuração "I iiUí OH . U'n- ooíiipos-Lxjs ííisis prsieridus ds grupo terminal C é representado pela fórmul em que R1 é óruíUia i; em que α li, são DS n 0 f**·» Vi p (3 S O ~· u u 53 -Q—fenilo ou fsnilmstiloç (-5-indo 1 i 1 )i é hidrogénio? R., è -•Π.- ϊπχ i ) —UH.-,-' ou -CH^-nat Lilo? R-,.

IquiloíC^ -U,--.) „ í4-imidazol il )CH,.,”.= ou X 0 / · "-CH.-jCH.-sti·" l a 1 qui 1 í C1 -C~^ > 3.-, \ ciclo-hsHilraetilo ou /3 uí . | ^ ' f 8 —í 5 Z é —CH(0H)-A onde As R~ mesmo modo que soteriormentes s Hê !\]H_„ ? is d ou NH—a l q u i 1 o í C .= —C ã) „ hidrogénio? R, é alauiloCC,---Um) * - f-\ . i ΠΜ X siο definidos do —0—a 1 q u. i 1 o (C ., — C „) podem

Os produtos de fórmula 1 e os subgrupos preferidos preparados por vários processos sintéticos.

Por exemplo5 os produtos podem ser oreoarados por rsacçáo ds ura dxpeptidso N— protegi d o ds fórmula de estrutura III s

R,

C-OH

R R2 0 XO , -isSH-CH-C-IM-CH- ' 1 í1 Fórmula 111

ou é um equivalente químico com um composto l-amino-2-hidroKi de fórmula IV r6 oh

NHo-CH-CH-R * *

Eormula TV

Desta maneira o dipeptídeo de fórmula III reage com um reagente de acoplamento de peptídeo para converter o grupo carboxilo para um derivado activado que reage· em seguida com um composta de fórmula IV? ou um seu equivalente químico para dar os produtos deste invento»

Os reagentes de acoplamento de peptídeo preferidos são os que não causam racemissçSo nos carbonos assinalados com asteriscos» Por exemplo9 são reagentes de acoplamento de peptídeo apropriados? M?M/ -Diciclo—hexilcarbodiimida mais 1-hidroxiben-zotriazole 1 2) Hexafluorofo-sfato de benzotriazol-i~iiQKitris<di--metilamino)fosfénio íreagente BOP) 3) Clorato de N3{\r-bisC2-o?;o“3~OKazoIidiniI3 fosfo- diamíd ico <BOB-C1) 4) Cloreto de difenilfosfinilo (DPP--C1) 5) Cianeto de dietosíifosforilo 6) lodeto de 2—cloro-1—metiIpiridinio 7) Fenildiclorofosfato maia- imidazoíe

Mos compostos de fórmula III5 onde RA é 4~imidazal i Ime-tilQp o azoto de imidazoíe ê bloqueado com usa grupo apropriado tal como tosilo* 2;i4-tíinitroíeniIo, benzilo ou bsnz i 1 ο κ imeti 1 o = -antes do acoplamento com compostos de fórmula IV= Um grupo de bloqusamento apropriado é escolhido de maneira a que as condições para a sua remoção sejam compatíveis com outras características no produto de fórmula 1=

Alternativamente5 um peptídeo ds fórmula III é activado com um reagente de acoplamento de peptídeo apropriado e em seguida reage com um composto de fórmula ds estrutura V em que d grupo hitíroKilo é protegido com um grupa de bloqusamento removível Y= Os grupos de bloqusamento adequados são representados por t r i me t i 1 s i 1 i 1 o 3 t-bu t i 1 d i me t. i 1 s i 1 i 1 o 3 t a t r a—h 1 d ro p i rsn i 1 o,,

acetilOj benzoilo e semelhantes» A remoção do grupo de bloqusa-mento de bidroxilo dá em seguida os compostas ds fórmula I onde Z é —CHCOHIA

R.-MH íL 0 xo* L f

~OH NH,

III

R, OY -Dh-A * t V R.

Rl-NH ;2 “ * 9 -a w ~CH-C“W“C!H“C “NH-CH—CH * í s %

R -s O

R, OY

“A « $ I (bloqueada) CZ = CH(OY)A3

AIternativamente, os aldeídos tripeptideos N-blaqueados de fórmula de estrutura VI são preparados e reagem com um composto de fórmula de estrutura VII onde ri* é um metal tal como sódio, potássio, lltio e semelhantes para dar compostos de fórmula I ande 1 é -CHCOH)A

R

R, 0 XO Rà 0

R t ~NH 4h -C-N-Íh-C-N-Íh-CHl* L f f

A M

VI r9 0 X 0 J tf

R, OH

Γ I

Rt-NH-CH“C“H-CH“C“NH-CH“CH“A * ! * f * *

Preferivelmente* as aldeídos tripepiideos de fórmula de estrutura VI reagem comderivados de trimeiiísililo de fórmula de estrutura VIII na presença ou ausência de fluoreto de tefcrabutil-amóniOj fluoreto de césio ou uma fonte equivalente de anião fluoreto dando os derivados O-trimstilsililo de fórmula de estrutura IX ou os derivados dessilados de fórmula de estrutura IX. I4 0 XO Rc 0 I !! ‘ 52 | ^ 51

(CH·^ ί-5-Si A v III

R^íviU _ n U —Γ·—Κ!„ ?“* f_í 5n ^ Kl 5"”· U^PU j í\n 1·Π υ i^rLil L"!V L-rrUn ‘ * k' k * * R- 0 R,ío 1~NH—CH—C—N—ÒH—C—NH -Ll' ‘ l* JL * ·

R .· OSi íCH-,). α , ·.: . H~A

$ IX A remoção do grupo trimetilsililo sob condições padrão tal comq tratamento com ácido diluído ou fluoreto da tetrabutil-amónio dá os compostos de fórmula 3 onde Z é -CHíDHIA*

Os intermediários de fórmulas de estrutura XI ou XII são preparados por reacçSo de um aldeído M—bloqueado—a—asnino de fórmula X em que Rq é t-butilo>íicarhonilo3 benziloKicarbonilo, trifenilmetilo e semelhantes com compostos de fórmulas de estrutura VII ou VI11=

li - R 0 Ia 5Í ·>· A li" *':* p —r»>H· ” Q ' ' ‘ Ά Ã VII (CH-,)TSi-A > . X- R.-.~NH“CH' / VIII Os compostos iil £ X S pro "f B Γ X d O'· configuração L (S) gue tí ao ui» par cl Ο *«.*£!» O d OíB ρ Ο Ή *€1Q V I I OU. VIU a 0 B-5 Í~ R, OH v τ § V Τ τ

K Ο ϊ’"ϊ } ·;·.·0O U01 ee- LfUe tdlTà -5 separatiD por cromatograíis. sobre gel de silie-a e acoplado a uma porçáo psptideo de fórmula I j. í como previam-sn te tox dsscnto 3 uomo e-KSfflpíos representativos dos processos anteriores (Esquema A), 2—triínetilsililtiasole i_ reage com L-~t-butOK.ícarho~· nilfenilalanal 2 ou L-t—butoKicarbonil-leucinal 3 em diclorometa-no para dar, respectivamente, os diastersómeros 4, 3 e 6, 7« A remoção do grupo trimetiIsi1i1 com aniao fluoreto protius os compostos de hitíroKilo livre 4b, 5b e 6b, 7b, respecti-vaments. A separação dos diastersómeros é levada a cabo por -butoKicarbonil )amino-3-fenil~(R) 1 í2—tiazolil) prapars—i-ai 4b e (8)2--( terc-butoKicarbonil laatl no-4—meti 1 ·-(K) 1C2—tiasolil)oropan-1 - 1 Ab:

bSGUgn;.5 A CHj t-BOCNH-CH-CH+ <CH3)3Si-L ^ “Ν'

ii «=Si(CH3)3 Jtp M=H

N=Si(CH3)-5b M=H

ch2ch<ch3>2 < T /

t-BOCNH-CH-CH+ (CH3>3Si-nN 3 0 1 CH2CHCCH3)2 t

t-BOCNH <S) = -CH-CH-C^.

OM

6a N=<CH3)3Si 6b H=H

t-BOCNH

ch2ch<ch3>2t A

<S)A CS)' OH

7a M=(CH3)3Si 7b f1=H * :om hiõrsto

«r?T?LlI Cl I K CHI de i ^ —l *MQ ScíO =toxiamidas5 H fZz f órosuls 08 i-- .. U X " 1 R, y | *=* Si | r~i u x .*L» | —4 í hl |K* I ’i_- 1*4 orr ~L·*' "N*~LrrÍ~"L 1 H | l hL- 0 ΪΤΤΪ 'QCI- hidrstos tais como boro-hidret dreta de lítio OU. d e potássio s XVI corno um par de d x as te reórne 3 de sódio, tri-sec--butilfaoro~hi-trietilsilano dá o intermediáric

Os intermediários de fórmula XVI podem por reacç 30 ds Li A c or^ds A έ uma porção coma anier. icirmente 03 def in .ida 5 CG ΓΠ r-í~iBS'C Í l-N-ms :'COK Ísns 1 daS , Q0 fórmula de S 3 *C Γ Li "C Li 1 Γ3. Λ IV O ck P cl -4 *.« 4-5 cl 3 OS cefcoderi vados XV= A redução do cetodei rivado X' v’ c Cj iTí rsòíTií-ro na mistur S repi resentada peJ.a τ-òrmu.Ia dí~ i estrutura XVI depende da estrotu ra do agente d e redução hidreto e d ss c opi d i c c=ss de rsacç-So = Em qer 'CF. 1 = Q- S trx—3SC —butilboro-hidretos de litxo s ds

potássio dão seisctivsssento o diastereórnero XVII (6 Ο Τ II Λ r,nhch-cn: + Lifi ‘OCH, χιν Τ r9nhchch-r

-*> R,NHCHC-R

XV hT r9nhchch-r

I

I

I

OH

XVI

OH

XVII

Us comdostos qs Tòrmula são inibidores sctivos de í í"I i JhI ícá n A renina è Ufíis ©ndop^ptidase que tem um importa.: 1 no controlo da. p rSSS-ÉQ *:=5c*.nCj Ll 2. nss = u sis testa res iina- ang ina. é uma cascata prQtIS?QÍ i tiCS CBUltil rregulada e m que a ren substrato de proteína para -dar ânuioterr separa a a.nq 10tsnsin; s i n a I * A enzima que converte angiotensina CAL-h) c a t s. 1 i sa a remoção do dipeptidsa terminal do dsca.peρtideo ang iotensina I para foi rmar angiotensina II que exibe uma actividade de pressão h renma e unta aspartii—protease com especιτiciaaoe oe substrato elevada e é o primeira passa proteol£ tico no sistema renins-anqiotensina a qual & envolvida, no controlo da. pressão 'BSTlQU. iRSS n

Os inibidores ds renina t@m revelado ser diminuidores da pressão sanguínea nos prifflatas5 íã * Hypertension5 _1? 399 <1983)5 J« Hypsrtension 1_ Csuppl 25s 189 <1983)3 e no homem CLanest 115 1486 <1983) 9 Trans» Assoe» Am» Physicians» 96? 365 <1983)5 J = Hypertension5 3? 653 < 1985 5 3 es por conseguinte3 são de utilização potencial no controlo da hipertensão»

Os novos compostos ds fórmula I são novos peptádeos inibidores de renina e são úteis no tratamento da hipertensão em animais de sangue quente5 como está estabelecida no seguinte teste» .....Para......Inibidores.....de.....Renina 0 método in. vitro para o rastreio de compostos anti—re— nina envolvs? em primeiro lugar.; a geração de angiotsnsina I e? em segundo lugar=, a quantificação da angiotensins I produzida; por radioimunosnsaio»

Mlg.......óg......Angiotsnsina......I Q meio ds incubação consistiu ds 2® μΐ de angiotensino-géneo de plasma humano purificado C1 > 5 1© μΐ ds renina de rim humano (2) s 5 μΐ de ΐ1uorsto de fenilmetilsulfonilo; 1©μϊ de EDTA de dissódio (1® mM)| 1 © μΐ cie composto anti—renina — a _ii <5 κ 1® ~3 5 >; 1® % ο κ 1® ") em dimetilformamida^ ou efcanol e í i) 0 angiotensinogêneo de plasma humano de uma mulher que toma pílulas contraceptivas orais foi purificado por cromatografia numa coluna de pepstatina—Sfnino—hexil—agarose» (2) A renina humana foi preparada a partir de riffi humano» uma quantidade adequada de tampão maleato í /7 mn=, ρΗ 6?Θ> atá psrfacer um volume finai de 5©θ μΐs A mistura de reacção foi incubada durante 1 hora a 37 °C e a reacção ensimática foi parada colocando o tubo em banho de água gelada = A angiotensina I gerada durante a incubação foi medida por um dispositivo de radioimunoensaio de actividade de renins de plasma (Clinicai Assays? Inc»>«

Processo, de Radigimunoensais 0 meio de incubação consistiu quer de alíquatas de 1©0 μΐ da mistura de reacção anterior quer de uma quantidade estandardizada de angiotensina Iρ i®#0 μΐ de tampão fosfato 105 i iwP mhL pH 7?6) e 1ΘΘ μΐ de angiotensina (“"‘"D num revestimento gama em forma de tubo* Após tr'§'s horas de incubação â temperatura ambientev os tubos foram decantados? e a radioaciividade de cada. tuba foi determinada num contador gama» Foram realitadas determinações duplicadas para cada incubação»

Os resultados foram expressos em ng de angiotensina I gerada por ml de meio de geração por hora de incubação (ng/Aí/ml/h),, e a percentagem de inibição foi obtida pelo seguinte processe»?

Actividade de renina na presença do composto de teste % de inibição = 1ΘΘ - ç---------------χ )

Actividade de renina sem o composto de teste a ds

Os resultados deste teste em compostos i vento -ίΡ·-;Γκ·;.Μίί na ! aos ia enpressc

i_ UtíiO USÍI-S apresen ts. t x vos T í-í

?

1ABELA

Concen— Ί. de Concen- tração inibição tração Composta Molar de Renina Molar IC^ N~LC Fen i1metox i 3 earbon i Ί 3 — -L-f en i1a1ani1-L-2-<2-meti1- propoxi )glicil l-< 18.,23)-2- lxl0-Í ixl® “ lxi®~° 85,® 84,6 76,2 4,7χ1θ_/ -amino-3-feni1-1-<2-tiazo— 1iI)-propan-I-ol

Ixl® ** 74,6 1x1®”^ 69,2 -6 1x1® ^ 41,® N-C (Fenilmetoxi Jcarbonil3--L-feni1a1an i1-D-2-(2-meii1-propoxi Jglicil3-(iRs2S}-2-- am i. n 0-3- f en i 1 - í - C 2-1 i az o-III)-propan-í ~a1 W-C(Fenilrnstoxi)carbGnil- 8,5xí®' -L-fen i1a1an i1-L-2-(π i c1d- ~hexilaxi)gI.iciI3-( 18,28)- -2-amino-4-metxl-l-(2-tiazo- 1i1)-pentan-i-ol íFenilffistaxiJcarbonil- 258χ1Θ i -L~feni1a1an i1-L-2-(1-metiI-etoxi>glicil3-íS>2~amino-4“ -meti 3. - C R) —1 - (2—tiazoli 1) -· -pentan-l-ol

iAyy=ft—j___ί£3ΏΐΛ

Concen- % de Concen- tração Inibição tração Composta Molar de Renina Molar IC^ N-l (Fenilmetoxi Jcarbonil 3-·· fsnilalanil -L-2- (2-met i 1 - S 5 7k propox i3 g 1 ici 13- (1R 5 2S) -2- am i n o—3—cici o— he x i 1 — 1 — í 2— -tiaaolil)~propan-l”ol . N-C(Fsni1metoKi5carbonil3--L-fen iIa1aniI-D-2—í 2—met iI — prapOííi)glicil3-í lR?2S3-2-am i η ο-·3—ο i c I o- he ;·; i I ™ i - (2— ~tia2alil3—prapan-l-ol 1 p i ; j. íy N- l N- {Ben 2i1 o x i c a r bon í 1 —L— —fsn x1a1an i1-L-2-(2-me t i1-propoxi Jglicil 3-(S)-2-amino·--4-msfcil—ÍR) —1 —< i-meti1-iH~ —1. y 2 Η 4 -1 rias o 1 -5— i 1 / — -pentan-í-ol ÍKÍ0~4 "Τ' ; N-C (Fsn i 1 íbs tox i 3 carbon i 1 - 10“4 66 -L-fenilaíaniI-W-L(S)-(1-- f o r m i I--2--- f en i 1 s t i 13 -L-2--2- < 2-me ti 1 propox i 3 --•~gl icinamida 1Θ”5 59

TABEL&—1_<£201=1

Coffiposto Concen tração Molar 7. da Inibição da Renina Concentração Molar IO-A N—L(Fenilmetoxilcarbonil3-~L~fen i1a1an i1~N~C(S> ~ 1 ~ -formil—3-metilbutiI 3-L-2---2-(2-fnetQKÍpropaxi )~ gl icinafiíida 10“4 10-5 70 50 N— t (FenilínstQKi )carboni I 3--L-fenilalanil-N-C (8)-(1--forfflil-2-ínsti lbut.il 3-L-2--2-íi-metiletoKií--glicinamida I X1 &*’ N-lN-< terc-ButoKicarboni1)-“L-fenilaianil-L-lsucil3--(S)-2-afflino”4-meti1-C R)-1-^ - (2-1. i en i 1) -pen t an -1 -o 1 4?5κ1Θ~6 N-C N-iBenzi1οκic arbon i1—L— -fen i1a1an i1-L-2-í1-me t i1-etoκ i)g1ic i1i-(S)-2-a®ino--4—meti1-<R)-l-<2-txazo— 1i1)-pentan-1-ol 2?8κ1θ~7

Os novos compostos do presente» invento tem-se revelado ser altamente úteis para o abaixamento da pressão sanguínea elevada nos mamíferos quando administrados em quantidades que iss situam na gama desde cerca de 5 mg até cerca de 5© mg/kg de peso corporal por dia»

Os compostos deste invento são prsfsrivslmente administrados por uma via parentérica tal como a intravenosa, intramuscular ou subcutânea, mas podem ser administrados oralmente, se desejado»

As cDíiiposiçSes de acordo com o presente invento, que t®m limpidez, estabilidade a atíaptabilidade para utilização parentérica, são obtidas por dissolução de Φ,ϊΦ % até 1Θ % numa base ponderai de composto activo num veiculo que consiste de um álcool allfático poii-hídrico ou misturas destes álcoois» SSo especialmente satisfatórios a glicerina, o propileno-glicol e os polietileno-glicóis» Mao obstante poderem ser utilizadas várias misturas de polietiieno-glicóis, prefere-se utilizar uma mistura que tenha um peso molecular médio desde cerca de 2Φ© até cerca de 40©» hm adiçSo ao composto activo, as soluções parentericas podem conter também conservantes para prevenir a contaminação por fungos e bactérias assim como antioxidantes para melhorar a estabilidade»

Para injecção intramuscular, a concentração preferida do composto activo ê «3,25 até @,5Θ mg/ml das composições acabadas »

Os novos compostos deste invento estão igualmente adaptados para administração intravenosa quando diluídos com água . d i 1 usn tss eisiprexgues em terapia intravenosa tal tzutno glicos o tónica» Para utiliza· ç. So intravenosa, são satisfatórias concen ações iniciais dirriinu idas até cerca de €ísô5 a Θ ;12S mg ι/ml d imposto activo*

Os seguintes eMetispiDs de referfncia ilustram a prepara •Mo de compostos 1 ηtsr=nsd:Lá.rios úteis no nosso invento»

b- vamnl cempio oe reirerancia í NJ'“-l CFeni 1 ítietoKi )carboni 1 3~-L—fenilalanina<nida

Uma porcSo d® Í8 o, de NÍÍ“L (fsnilfflstoKi) carboni13—L"”fe~· nilalanina s 6,6 ml de N-metilmorfolina foi dissolvida em 15Θ ml de tetra-hidrofurano s agitada a --1Θ °C enquanto se adicionou 8=,Θ4 ml de cloroforosato de isobutilos Hpós 1 minuto, foi burbu— Inano oas d® amónia atravs*® da. mxstura ate ssxa Bstar saturada= á mistura foi apitada durante mais 3@ minutos e em sequida foi vertxda em aqus pslads·

Foi recolhido o sólido branco que deu 16,/6 g dc 164-165 °C. : ompasta dsssj adο, ρ»f = óKemDío os reTerdncia v N—L < 1-sn i 1 metox i) carbon 113 -L-fen i 1 a 1 an i 1 —D ,= L- “7-::FI3Tõ>TIqlTcInã

Uma sd 1 s. .açMd de i 6 ninamida e Ò « *^Cí Q acetona foi refluxada durante 6 horas, am seguida q m 1 w. ο ϊλ e aqx t a o a« s H*jS—C {eni 1 Ristox i) carbon. i 1 j vertida em àqua ϋ sólido branco resultante foi arrefecido e seco- dando iópS g do composta desejado, p = f.-= Í37--141 *C,,

N-C (Fenilmetoxi )carbonil 3---^fsnilslanil-D5L;- zZzJ^zs^ÃlmimMAlaÀlMhM^......g€mc3iI55il£nkE^.ils

Uma mistura de 9=,-2 g de N—C ( fsnilmetoxi >csrhonil J-L-fa-nilalanil"D?L~2-hidroKigIicina em 12® ml de isobutanol contenda €>?5 ml de ácida sulfúrico concentrada fax agitada durante 3® minutos5 em seguida aquecida num banho de vapor durante 4 horas, arrefecida e vertida em solução saturada fria de bicarbonato de sódio. Esta .mistura foi sxtractsda por tr'ê's vezes com acetato de etilo*

Os sxtractos foram combinados , secos 5 filtrados s evaporados*! dando um sólido que foi recristalizado de etanol =, dando 7,3 g do composto desejado* Após recristalizaçlo do etanol aquoso o sólido fundiu a 12Φ-123 °C=

Exemplo de refergncia 4 (Fenilmetoxi >carbonil 3-L-fenilalanil"-D5L“ ^I^SlSIiEigoxi 1 icínã

Uma solução que compreende 7 = 3 g de N-l í fsniImstoKi)-carbonil3-L-fenilalanil-DsL~2-í2-metilpropoxiIglicina» éster de 2-metilpropiloϊ 15 ml de hidróxido de sódio IN e 15® ml de metanol foi agitada durante 15 horas5 em seguida acidificada com ácido clorídrico 3M e evaporada até um óleo» A adiçlo de água produziu um sólido que foi recaihiáo5 dando 6,1 g do composto desejado, p«f» 99-1@9 °C= feneroglQ.....de_refe.rfric.ia. 5 N—Meto ;< i “M—me t i I-L·- fen i1aIan inami da 5 ΙΕΙΞΗΙαΙΙΙΙΙΙΗ A 21=,75 g ds N-"metoKÍ~W"metiI-L~t-butDKinarboniI“fenil-alanirsamida., arrefecida num banho de metanol gelado*, foi adicionado com agitação 50 ml de ácido trifluoroacético» Após tr'is horas o solvente foi removido in vacuo,, Foi adicionado éter por duas ve?.85 e o solvente foi removido** em seguida foi adicionado 1Θ0 ml de éter e a mistura foi arrefecida» 0 sólido resultante foi recolhido5 lavado com éter e ar seco, dando 19 g do composto desejado na forma de cristais*, p„f» 123-124 *C» N—£ (FenilmetoKi) carbonil 3~L—f enilalani 1—L—2—í 2-meti 1 — propoxi )'g 1 íctbKx-W^Sieti 1 -L-1er7TI^rãn"Inãmx’3a e RF-ΤΎF 'irTrTmsrÕKTTcar Dòn iT T-C- f eh i 1 a I sn ri^]p^r112r5ii:€’xl';::' prõFpõIHTgTícii-N-s^etcoíi-W^Síèti I~L~f eàilaíãfTiriãHi^â A uma solução de 3 g de |F"£ífenilmetoKÍ)carboriilj"L-fe-nilalanil'-DsL-2-í2-metilpropoKÍ)glicinas 1 573 q de ácido 2-etoxi--•1 \2H)-quinDlinocarboKíIico5 éster de etilo e 7® ml as diclorome-tano? foi adicionada uma solução de 2s2õ g de N-meto>;i-N-mstil-~L~ -fenxlalaninamidas trifluoroacsiato e 1**2 ml ds trietilasnina em 35 ml de dicioromstano» Esta mistura foi agitada durante 2Θ horas b em seguida foi evaporada»

Foi adicionado clorofórmio ao óleo residual e esta solução foi en seguida lavada ir'§'s vezes com ácido clorídrico 3 H? trils vezes com solução saturada de bicarbonato ds sódio e três vezes com solução saturada de cloreto de sódio, em seguida foi seca, filtrada b evaporada dando 4,8 g de um óleo» Este óleo foi combinado com 5,7 g de óleo preparado da mesma maneira, colocado numa coluna de gel de silica com as dimensSes 3Θ >i 2 cm e eluido com acetato de etilo s hexano (ísl)» A segunda fracçSo deu 1,16 g de W-C<fenilmetoxi)csrbo-n i 1 3 --L-f en i 1 a 1 ani 1 -L-2- < 2-met i 1 propox Dgiicil -N-me tox i -N-meii 1 --L-fenilalaninamida como um sólido amorfo, Rf - Θ,55 Cacstato tís atilo s hexano (1s1> 3 s Ε·α3“°^ = -11 ± 3 ° íc, 0,35, metanol)»

Depois da eliminação das frscçSss de intermediário foi recolhido i,25 g do segundo composto N—Cífenilmetoxi)carbonil3~L— -f enilal anil-” Dç-2-(2-met ilproooxi )glicil-W;-metoxi-W-ffletil-L-f snil-alaninamida na forma de um sólido amorfo, Rf = Θ,33 Cacstato de etilo 5 hexano (is 1)3 § = Θ ° Cc, 0,3, metanol)»

EmSííIBISLJ^^ N-Metoxi-N—metil-L-leucinamida, trifluoroacetato

Uma mistura de N-metoxi-N-meti1-t-butoxicarboni1-L-leu-cinamida e 2Φ ml de ácido trifluoroacético s água (9sí) foi agitada a & °C durante 4 horas» 0 solvente foi removido in vácuo e o resíduo oleoso foi triturado com éter» 0 sólido resultante foi recolhido e seco ao ar, dando 1,7 g do composto desejado como um sólido branco, p»f= 96-98 °C»

fexemplo dg referencia ti N-~l (Fenilmetoxi >carbanil 3-L-fersilalanil-2-L-~i 2-meti í -propox I7q 1 'ici'l -^ffléto^rHS-mêÇIT3 —L—1eucinamloa e.......... N- l TFeni 1 mètoxITcarboni 1 3-L-feni 1 ai ani 1 -2-D-^2^mt3txl-propoKTfWíxETí~^í^^ÕHl:::W:::ã^JT::: -C-l êuciriamicRi ~ ' A uma solução de 3 ç de M-Γ C fsniImetoxi IcsrboniI J-L-fe-· niIalaniI-D5L~2~{2“-nietilpropoKÍ)glicina? 1,73 g de ácido 2-etoKi-— i (2H)—auinolinocarboKílico, éster de etilo e 7Θ ml de- d i cl arome— tano5 foi adicionada uma solução de 2?Θ8 g ds N-metoxi-N-metil-L--Isueinsmida? trifluoroacetato e 1,2 ml de tristilamina em 35 ml de diclorametano. Esta mistura foi agitada durante 17 horas e em seguida foi evaporada.

Foi adicionado clorofórmio ao óleo residual e a solução resultante foi lavada por trfs veses cada uma com ácido clorídrico 3 Ns solução saturada de bicarbonato de sódio s com solução saturada de cloreto de sedio, em seguida foi seca, filtrada s evaporada, 0 óleo residual foi colocado numa coluna de gel de sílica C30 κ 2 cm) e eluído com acetato de etilo s hexano C1 § 1 > ,, recolhendo-se fracçSes de 25 ml»

As fracçSes 8-17 foram combinadas e evaporadas» dando 0,76 g de N-C(feniimetoxi}carbanil3-L-fenilalan.iI-L-2-í2-metil-propoxi >gIicil-N-metoxi-N-metil-L-leucinamida como um óleo, Rf - Θ,c© Cacetato ds etilo s hexano (1 s 1) ] : [β]^. = -29 ± 3 ,:·· (c ? ®3 37, metano1)»

As fracçSes 12—17 foram combinadas e evaporadas·. dando 1»16 g de N-C C fenilmetoxi Icarbonil 3-L-fenilalanil-0-2--(2-mstiX-propQKi1g1ic i1—N—matoxi—N—met11—L—1euc inamida como um ó1so«

Rf = 0,43 Cacetato de etilo s hexano < I s I > 3 s = -/ ± 2 ° í c, 0 3 635 3 metano1) »

Exemplo de.....referfncia y H~í Chenilmetoxi >carbonil 3-L-f snilalan.il™ ciπãT ê s6§r~lJeH7IFQ 1 d

Uma solução de 0,4 g ds N-EífenilmetoxiJcarbonil1-L—fe— ni lalsní l~y.,L--2~hidroxig 1 icina. o® ml de metanol e 0,3 ml de ácido sulfõrico concentrado foi agitada durante 2 dias s em seguida foi vertida em solução saturada fria de bicarbonato ds sódio» A suspens'lo resultante foi sxtractada com acetato de eiilo» 0 extracto foi seco, filtrado e evaporado» 0 resíduo foi recristalizado de metanol aquoso, dando 0,25 g do composto desejado, p.f, 128-132 °C»

Exemplo......ds referencia 10 N-C(Fenilmetoxi)carbonil3-L-fsnilalanil- -D, L-2-me€oK3.g 1 Icinã

Uma solução de 6,47 g de D,L-2-metoxi-N-£N-E(fenilmeio-xiJcarbonil3-L-fenilalanil3glicina, éster de metilo em 15 mi de metanol e 1,2 ml de hidróxido de sódio 1 N foi agitada durante 1 hora, em seguida acidificada e evaporada» Fai adicionada áqua ao resíduo» 0 sólido resultante foi recristaliçado de metanol aquoso, dando 0,2 g do composto desejado como um sólido, p.f, 75---90 °C» fcKgflipip ds referência 11 N-IIC F sn i 1 me to κ i) c a r bon i I j ~L~ f en i 1 a 1 an i 1 --EF'i"g I ic ina , ísflr '3W~WETT5

Uma solução de 3,7 g de jM-flífenilmetoKi>carbonil3-L-fe— niIalanil-D5L-2-hidroKigliciriâ em 50 ml. ds etanoi s β,3 ml ds ácido sulfúrico concentrado foi agitada durante 10 horas e em seguida refluxada durante 48 horas» A solução límpida foi vertida em solução saturada fria de bicarbonato de sódio e em seguida foi e^tractada três vezes com acetato de etilo»

Os s-Ktractos foram combinados;i lavados com água, secos, filtrados e evaporados» 0 resíduo oleoso solidificou e foi recristalizado de clorofócmio/heKario, dando 1,7 ç do composto desejado, p.f. 99-110 °C <dec>»

Esamplo de referência 12 N-L (Fsni imeto>;i >carbonil3—L-fenilalanil-^r2~etoxig ílcini

Uma solução de 1,5 g de t±-C ( fenilmetoKi )carbonil 3-L-fe-· niialanil-D,L;~2-siaííiglleina, éster de etilo, 5Φ ml de metanol e 3,5 ml de hidróMido ds sódio 1 N foi agitada durante a noite, sm seguida acidificada com ácido clorídrico 6 N e evaporada até dar um óleo» Foi adicionada água e a mistura foi agitada até o óleo solidificar.

Uma recristalização de clorofórmio/hexano deu i g do composto desejado como um sólido branco, p„f, 138-143 °C ídec). hxenfPlgae referência lá

Ur-í (F sn i 1 metox i) c ar bon i 1 3 —L- f sn i 1 a I ar? i 1 - DL“ :.»x — - · — - — » — ^ . —------------

IlC.iQ*j· -Éster.., jie Iz^jExTskilS.

Uma mistura de 3,/ g de N—ε<fenilmatoxi)carbonil3-L-fe- nilal&nil-D,L-2-hicirQxiglicina, 5® ml de isopropanol e θ,3 ml de -ácido su.1 fúrico concentrado fax agitada â temperatura ambiente durante 17 horas, aquecida num banho de vapor durante 1/2 hora e em seguida agitada à temperatura ambiente durante 48 horas» A mistura foi filtrada e o filtrado foi evaporado até dar um óleo que solidificou depois de lavagem com solução de bicarbonato de sódio e água.

Este sólido foi cromatografado numa coluna de gel de silica de -i© x 2 cm, eluindo com acetato de etiio s hexano < 1 s 1 > ? recolhendo-se fracçSes de 25 ml»

As primeiras duas fracçSes foram combinadas e evapora- das, dando ©,ò g do composto desejado, p»f» 103-11í °C? Rf = β,87 Cacetato de etiio s hexano (1x1)3? = 4-5 ° ± I ° < ο, 1,1, metanol).

Exemplo de referencia 14

C < j-enilmetaxi )carbonil 3 fenilalanll-D,L--

Uma solução de 1,4 g de N—L(feníImetoxi>csrhonii3—L—fe- nilalanil~DsL”2-í I—metiletoxi }g1icina, éster de i-metiletilo, 45 ml de metanol e 3 ml de hidróxido de sódio 1 N foi agitada durante 2© horas, em seguida acidificada com ácido clorídrico ó N a evaporada» Foi adicionada água ao resíduo e a mistura foi foi agitada até se separar um sólido branco»

Este sólido foi recristalisado de clorofórmiG/hexano, dando 0P7 g do composto desejado como um sólido branco, p„f„ 122-128 *0 (dec). felgmgl2.A-rií.g£l£ÍgÍa 1.5 N-C í Fenilrasto;·;i )carbonil 3—L~fsni 1 a 1 ani 1 -L~2- ~ΤΪ“:ί^ΐΧΤ¥€ΰ;·; i )g 1 ic i ί-Ι|-ι5§ tox ί-§-1®ΈΓ1 -Lp —riuõTnãffliBã

Uma solução de iP37 g de N-mstoKi-^-mstil-L-leucinasni-da. trifluoroacetato, «3?7 ml de trietilamina a 10 ml da diclorome-tana, foi adicionada a uma soluçSo de 1,9 g de N-LCfenilmetoxi}~ carbonil 3-L~feniIalanil~D,L-2-í l~raetilefcoxi Iglicina s 1,14 g de ácido 2-stoxi-l(2H)“quinDlinDcarbQKiliCDp éster de stilo, em 25 ml de diclorometano. Esta mistura foi agitada durante 18 horas e em seguida foi evaporada até dar um óleo. 0 óleo foi lavado por três veses, cada uma cora ácido clorídrico 3 Ns soluçSo de bicarbonato de sódio e soluçSxs de cloreto de sódio., s em seguida foi seco,, filtrado e evaporado. 0 resíduo oleoso foi cromatografado numa coluna de gel de sílica (40 κ 3 era) eluindo cora acetato de etilo s hexano, recolhendo-se fraeçSes de 5Θ ml.

As fraeçSes 4-6 foram combinadas e evaporadas, dando 0,9 g do composto desejado como um sólido amorfo, Rf - 0,5 εacetato de etilo ?. hsxano (1 a 1 > 3 s Cal= -45 ° ± 2 ° \c, Θ5645? metanol). >S33B»Í

Exemplo de referencia., 16

Ν--Γ (Fenilmetoxi Jcarhonil J-L-fení lalani ^-(f snilmsioxi jgí icínsj éster.....d¥~TinxiiietriO

Urna suspensão de 37 g de N-l ( f enilmetoxi Icarbonil 3-L--fsni].alanil-D,L-2~hldroxilina em 25© tal ds álcool hsnsílico foi tratada com 3 ml de ácido sulfúrico concentrado, aquecida nu® banho ds vapor durante 1 .,5 horas, diluída com bexano e arrefecida:, 0 sólido foi recolhido, lavado com éter s recristalisa-do de acetato de etilo / éter, dando 27,5 g do composto desejado» p.f. 13Ô-140 °C» uxemplo de referencia 1/ N---E(Fenilmetoxi)carbonilj-L-feni1515011-1),10---2-(fenilmetoxiygTxciná A uma suspensão ds 29,9 g ds N-E(fenilmetoxiIcarbonil3— -L-fenilalani1-D,L-2-< fenilmetoxi)gIicina, éster de fsniImetilo, em 5@θ ml de metanol foram adicionados com agitação é© ml de hidróxido de sódio 1 N= A agitação foi continuada durante 1,5 horas, e® seguida a mistura foi aquecida até à ebulição para se produzir uma solução, foi filtrada e o filtrado foi acidificado até pH 1,5 com ácido clorídrico 1 N, seguindo—se a adição de água atá obscurecimento„ A suspensão resultante foi arrefecida e o sólido foi recolhido s seco dando 22,34 g do composto desejado,p„f„ 139--142 °C»

Exemplo de refergneia 18 (-)N-C(Fenilmeioxi icarbonii3-L~fenil“ il anxí^TR^ Íolí £>}'J~2~í fení 1ίη§ΈοκΤ>οΤϊΕΐ I -—jSl-me to x i -N-ius tlTrC~f ênTrãTãHTnãmlBã ê~" (+) N-- ΠΤετΓΓΤΐϊΓ© tõ;·; x) carbcuTiTj^^fsnXr-áTarnir^rS^^ í liié tÒKTTgITEi 1 - ::|pmir£í^ 1 - L - f en i 1 ^larflnamloa A uma suspensão de N~l (feni lmeto;-;i > carhoni1J-L-feni i~ aIaniI-D5L~2-C fenilrastoxi )gl icina em 14© ml de dicloromatano foi adicionado 7,4 g de ácido 2-etoKi~l <2H>-quinoIinocarhoKí lico, éster de etilo. A mistura foi agitada durante 5 minutos, era seguida foi adicionada uma solução de 8,7 g de N-metoKi-N-metil---L-faniislaninaiuida, trifluoroacetato e 3,8 rol de trietilamina em 5Θ ml de dicloromatano s a agitação foi mantida durante a noite» A solução foi concentrada até um óleo que foi dissolvido em 10® ml de acetato de etilo, lavada com ácido clorídrico 2 hi5 solução tíe bicarbonato de sódio e -água salgada, seca, filtrada e concentrada até um óleo»

Este óleo, em duas levas, foi cromatografado por HPLC numa coluna (gel de sílica) Watecs Prep 52® com acetato de etilo s diclorosnetano <ls4) como elusnte» Após 1.® volumes de retenção, o componente menos polar foi eluído com acetato de etilo = diclororaetano {1 s 1)» Estas fracçSes foram concentradas in vácuo e o resíduo foi cristalizado em primeiro lugar a partir de diclorometano / éter diisopropllico e em seguida a partir da acetato de etilo / éter diisopropl 1 ico, dando 4,® g de < +>-N--r < fenilmetoMilcarbonil l-L-fenilalanil-Lg-íou S> 3--2--( fenilmeto-kí )glicil”N-meto>íi—N—metil—L—fenilalaninamida5 p,f, 135-14© °C; Εα32ώ0 - +17 ° ± ©,5 o (c, ©s12, clorofórmio)»

As fracçSes que continham o componente menos polar foram concentradas in vácuo e o resíduo foi cristalizado a partir de éter diisopropilico / diclorometano, dando 5,73 g de <-)-M~ •T ( fenilmetoxi ícarbonil3~L~fenila!anil-tR-(ou S) 2-2-i fenilmeto- mí )g 1 icil-N-mefcoxi—N—metil-L-fenilalaninamitía, p« f. 138—139 °C 5 íí;ú^o = -30 ° ± i * íc, 1 ,385, metanol >.

Exemplo,.de xefergnçia 19 N-C (Fenilmetoxi )carhonil 3-L-f enilal-anil-^^pS-TTenxTmétox í'5 g FícilH^I—ms^õ>TI—R—me tf1 — ^ÇpIêGclhãmídã e Η-Γ11^γΠΓΓο1Τ:ομ Fícarbon 113 -L~ f en i 1 a 1 an i 1 -:^ζ^^-~ΤΐΈπΤΐΈθΈί^Ι) q 1 icil HW-metoxi-N~-metí 1 --C-TiãEinimitíã " A uma suspensão de 13,9 g W-EífenilmetoxiÍcarbonil3-L--fenilalanil-D,L-2“<fenilmetoxi>glicina em 6® ml ds diclorometano foi adicionado 7,4 g de ácido 2-etoKÍ-lC2H)-quino1inocarboxí1ico, éster de etilo» Depois de se completar a solução, foi adicionada uma solução de 8,8 g de N-metoxi-N-metil-L-leucinamida, trifluo-roacetato, e 4,1 ml de tristi.lamina em 58 ml de diclorometano» Esta solução foi agitada durante a noite, em seguida foi lavada por trás vezes, cada uma com porções de è® ml ds ácido clorídrico 2 N, solução de bicarbonato de sódio e cloreto de sódio 1 M» A camada orgânica foi seca, filtrada através de uma fina almofada de diclorometano lavado em silicato de magnésio hidratado e concentrado in. vácuo» dando 16,1 g ds um óleo» Este óleo foi cromatografado por HPLC numa coluna <gel de sílica) Waters Prep 52® com acetato de etilo s diclorometano <ls4> como solvente» Foram isolados dois componentes A & B) que formam os dois picos principais» r—\

As fracções que continham o componente A foram combinadas e concentradas in vácuoa dando um óleo que foi cristalizado de éter5 dando 4,46 g de W-C < fenilmetoxí Icaroonil i-L-fenilalanil--L-2-< fenilmetoxí Jglicil—^-metoxi-N-metil-L-leucinamida, na forma de cristais brancos, p„f» 8S-B9 °Cp C«1^ = -39 ° ± 1 ° (c, 6,9é, met anα 1} »

As fracções que continham d componente B foram combinadas e o solvente foi removido in. vacuo,, dando 7,1 de N-lCfenilms-toxi >carboni1D-L-fenilalanil-D-2-(f sni iinstoxi >g 1ici1-N-metoKÍ-W--metil-L-leucinamida, na forma de um óleo»

Exemplo de referencia 20 N-E <Fenilmetoxí) carboni 1f sni lalan.il-~ΤΣ^ΐΓ~ 2 ~ f c í cTo - hs x i ím e tb x i íg 1 ic i n a, i^cer“"5e cic ! cFTiexTl metilo" uma mistura de 36 g de W~L(fenilmetoxí)carboni13-L-fe-niIalanil-D-L-2-hidroxiglicina, Í66 g de ciclo-hexilmetanol e 2,4 ml de ácido sulfúricc concentrado foi agitada e aquecida a 96-100 °C durante 4 horas» A mistura foi em seguida arrefecida e agitada durante a noite à temperatura ambiente.» Foi adicionado hexano e o sólido foi recolhido, lavado com hexano, água fria, solução saturada de bicarbonato de sódio e de novo com água»

Este sólido foi cromatografado numa coluna de gel de sílica, eluindo com diciorometano § acetato de atilo <93s2)» As fracções do produto foram combinadas, evaporadas e o resíduo foi triturado com hexano» A filtração deu. '19,1 g do composto desejado na forma de cristais brancos, p»f» 122-125 °Cs Εαΐί'^4^ = --8 ° ± 1 ° (c, 1,14, acetona)» fcxemgip ds referencia 21 N-C(Fenilmetoxi)carbonil3-L-fsnilalanil-dTElo-hsKÍ loxí^glTcinaj ést s"r ds......c IcTõ”Hek ΓΓδ

Uma mistura de 3,7 g ds N-ECfenilmetoxi>carhoniIj-L-fe-nila].aniXHD-t-2~hidro>íiglicina, 5Θ ml ds cielo-bsxanol s Θ,3 ml ds ácido sulfúrico concentrado foi aquecida num banho de vapor durante 2 horas s em seguida arrefecida durante a noite= Foi adicionada uma porção ds 5Θ ml ds acstato ds stilo, a mistura foi lavada com solução ds bicarbonato de sódio e com água salgada s depois foi seca» h solução foi filtrada através de uma fina almofada ds silicato ds magnésio hidratada e concentrado in vacuo até um óleo» 0 óleo foi cristal içado de metanol» dando 2,2 g do composto desejado na forma ds cristais brancos, p» f« iôé-i18 °C» EKSgmig-. de rsferfncia 22 N~C {Fenilmetoxi )carbonil l-L-fsnilalanil- ";^ίο::;^::ΓΓοΤ0'Γδ-;Βεχ,ϊ Ioki/"g ricxrTi A uma solução ds 4,5 g ds Ν---Ϊ(Fenilmetoxi/carbonil3-L-—fenilalanil~D—L—2~{ciclo--hexiloxi íglicina, éster de ciclo-hexi-lo, em 4© ml ds metanol quente foi adicionado 9,2 ml ds hidróxido de sódio 1 M» Esta mistura foi agitada durante 2 horas, em seguida acidificada com 5 ml de ácido clorídrico 2 N s diluída com água até turvação» A mistura foi diluída de novo com água, agitada, arrefecida e o sólido foi recolhido» 0 sólido foi recristaliçado de clorofórmio / hexano5 dando -528 g do composto desejado3 p« f , 119-121 *C§ íal2hn = -3 ° ± 2 * (c, @?539, metanol), Ácido 5-C (S)2~terc-butDKicarbonilaiainP" ~TR7BT'l-hi’drÒKi-4-<neti 1 pen t'i 1j-2- ”ΠΓ5 τ e n o ca r b o >; TTTco

Uma solução de 3?9 ml de diisopropilamina5 destilada e seca., em i® ml de tetra-hidrofurano seco sob -árgon foi arrefecida até -7Θ °C s á solução foi adicionado 1i 581 ml de n—butil-litío 2?3è M em tstra-bidrofurano via seringa, A solução foi agitada durante 2® minutos e em seguida foi adicionada (via seringa) uma solução de 1?7 g de ácido 2-tiofenocarboxílico em ίθ ml de tetra-hidrofurano» Após agitação durante 4® minutos a -7® *C? foi adicionada uma solução de 1=,5 g de N-terc-butoxicarbonil-L-leuci-nal em 1® ml de tetra-hidrofurano, A mistura foi agitada a —7® °C durante uma hora e extinta com solução de cloreto de amónio a 1® %, A mistura foi deixada a aquecer até á temperatura ambiente e o solvente sob vácuo, Q resíduo foi sxtractado com éter.

Os extractos de éter combinados foram lavados .com ácido clorídrico í Nr, solução saturada de bicarbonato de sódio e cora solução saturada de cloreto de sódio e seca, 0 solvente foi removido sob vácuo e d resíduo foi cromatografada numa coluna de gel de sílica com hexano - acetato de stilo - ácido acético (1 s 1 㮄®®2) como eluente. As fracçBes que contêm o produto foram combinadas e o solvente foi removido para dar ®S2B g de gomas Rf @,3ó em TLC <gel de sílica) com hexano - acetato da stilo -~ ácido acético C1s1s®,®®2> como solvente.

Exaropio de referência 24

<S)2"tgrc~&utoKÍcarbpnilamino~4-iiistil~ •^Τΐϊ'ϊ'Βrí™T2":“‘tu.rãniΊ )-péntari—T-oT A 0,,545 ml da furano em 1® ml ds tetra-hidrofurano saco sob ârqon arrsfecido a -2Θ '-C foi adicionado 3,35 rol da n-but.il--lítio 2,,3é SI aro hexano. A solução foi agitada deixada a squBcsr atè 1® °C e agitada durante 2 horas. A solução foi arrefecida até -70 °C (neve carbónica-acetona) foi-lhe adicionado ls7ô g de N-t-butoxicarboníl-L-leucinal em 1Θ ml de tstra-hidrofurana„

Após uma hora a -7® °C5 foi adicionado 1Θ ml ds cloreto de amónio a 1Θ %„ A mistura foi concentrada sob vácuo? diluída coro água e extractada com éter»

Os sxtractos de éter combinados foram secos s concentrados» 0 resíduo foi purificado duas vezes por cromatografia de camada fina sobre placas de gel de sílica para dar 0,2® q ds produto na forma de uma gomas Rf €3=,22 em croroatografia de camada, fina (gel de sílica) com hexano - acetato de elilo C 41 > como solvente.

Exemplo,, de refertncia Z5

< S 5 2-terc-Butox ic arboni i aroino-4~meti1 --TRTSf )17-72-Έ 2. en i 1) —pen tan -1 -ο I A uma solução de 1., 4 ml de tiofeno em 2® ml de tetra— -hidrofurano seco sob árçon foi adicionado 7?Θ5 ml ds n-butil-Ií-tio 2r.36 M em tetra-hidrofurano. A solução foi agitada è. temperatura ambiente durante 4-5 minutos s em seguida foi foi arrefecida até -7€i °C (banho de neve carbónica—acetona)„ Foi adicionada íyia seringa) uma solução ds lr,79 g ds

hl-terc-butoxicarbonil-L-leucinal em 1Θ mi de tetra-hidrofurano seco» A mistura foi agitada (-68 °C) durante uma hora e extinta com solução ds cloreto de amónio a 10 7» Após aqueci mento até à temperatura ambiente», o solvente íietra-hidroftirano} foi removido sob vácuo» A mistura aquosa residual foi sxtractada com éter»

Os exirsctos de- éter combinados foram lavados com 5Θ ml de ácido clorídrico 1 W5 solução saturada de bicarbonato ds sódio e com solução saturada de cloreto de sódio e foi seca» 0 solvente foi removido s o resíduo foi cromatografado numa coluna de gel ds sílica com hexano - acetato de etilo Celuição gradiente) como solvente» 0 produto foi eluido com hexano - acetato de etilo (4si)» As fracçSss que contêm o produto foram combinadas e o solvente foi removido sob vácuo para dar I515 g de gomas Rf ®;i34 em TLC (gel de sílica) com hexano-acetato de etilo (4sl).

EjjgffiaiQ—fe£tQçia.. 26

Acido 5-L CS)2-Benz i1ox i csrboni1amino~ - (!Tr^T::::?ri'd'roxi“4-msti 1 pent i TT^2~ •^ΓοΤεποε: ar bo'xTTTcõ ~

Uma solução de 3..74 ml de dilsopropilaminsr, destilada e seca, em 1® ml de tetra-hidrofurano seco a ~7® °C sob árgon foi adicionado íi.,33 ml de n-butil-litio 2?3ò i-1 em tetra-hidrofurano via uma seringa» Após agitação durante 2® minutos5 foi adicionada via uma seringa uma solução ds 1.,71 g de ácido 2-tiofenocarboxi-lico em ml de tetra—hidrofurano» A mistura foi agitada a --7Φ °C durante 4® minutos e em seguida foi-lhe adicionada lF.feéó g de N-terc-butoxicarbonil-L-leucinal em í® ml ds tetra-hidrofurano» A mistura foi agitada a -7® °C durante uma hora e extinta coíií solução de cloreto de amónio a 1® %» A mistura foi deixada a aquecer até à temperatura ambiente e o tetra-hidrofurano foi removido sob vácuo»

1¾ =’7j 7^ ra aquosa residual foi ex Λ.- tU B. c ta da com ét p | ~ os axtrac tos de éter combinados foram lavado S C DiTí ácido cl oridr ico í N s r om solucSo saturada de cloreto de sódio 0 extra cto foi seco e o s o 1 vsn t© tox removido* u resíduo íul c Γ orna t og r a ΐ ado n uma coluna de q^l ds sílica com hsxano—aceta to de O X. X 1 Í X 5 1 ) QUS contém S.tz i do acét íco a ΰ P5 X» As fracçSes H LIS confim o prod uto f ΟΓ-Slís conib dnadas para dar Θ23 g de cristã iss p. fo 113—ii 7 °r. 3

Espsc * Messe-a íFAtí baxxci re=J d/8 iM+H > An á 1 i s-s cale * para C H^NSO^s : C-è®35p H--6s1s ΐΜ""·5 ? / X .· ·_ *—· E n c on t rados Γ*2=· = !4~.Χι cr e Lí ? ·-*i ri fe 3 ·_« 5 N-4,0 h x &n ρ 1 d d a rsfsra π cia 27 (S) 2—Amino—4—ffieci 1 — (H) i — (2-tiazol i I) — 0 2-trimetilsililtiazole EA« Mediei st si», CheflK- Coma -;.í=;cr t ::*:0’ 0-_·0 \ iVcSi } 3 lOi pi ρ a r ado 3... u ui o *6= )QUB S LlíH t rase o de t Γ'6ί s tubuladuras de um 1 X t fQ ·. 0C|U. X D-5. d o c om dois ssptos de bo rr acha. 5 LtiTí termómetro de baixa 110:7¾ pg r .£ tti í~-3. (— 10Θ “if"· i W í e um agx . tador magnét ico s seco com uma pist o is do calor o uma corr ente de azoto seco. foi adicionada via ssri noa i30 ml os éter diefc i1ico de ; um r"*íSi~ x p X © n te aberto recsn tsenen te * Foi adiei on a d a uma porçao de 32 ? S g de uutros UjW ml ϋθ é Le nusíura fox a r re f ec i d -a a té -65 *C num barnio QS uevfcf carbónica- X S D p (" D DS. Π O L O foi-lha muito 1 entamen te adicionado 87 m 1 de n-buti X 1 2. "t. X O .U r. ri em hexano utili zas «.do uma ; seringa de 50 ib 1 pqu i, pad a com uma agulha comprida MS iSs enquanto se mantinha sob agitação a a uma temos ratura inferior a —5® °C. A solução castanha SBCura, resultante foi agitada a ~65 °C durante 1 hora e em seguida foi tratada com 25,= 4 ml de cloreto de trimeiilsililo via uma seringa» A mistura foi lavada com 2Θ0 ml de bicarbonato de sódio 0,5 π, em seguida com água salgada, foi seca, tratada com carvão vegetal, filtrada numa cama de silicato de magnésio hidratado s concentrada até um óleo» 0 óleo foi vagarosa e cuidadosamente fraccionads numa coluna Vigreux de 10 era, dando 18 g de 2-trimetilsisil-tiazaie como um óleo incolor, p»f. 55-60 0C= A uma solução de 10,8 g de t-butoxicarbonii-L-Ieucinal em 40 ml de diclorometano foi adicionado 9,4 g de 2~trimetilsi~ sil-tiasole em 1# ml de diclorometano» A mistura de reacçlo foi deixada em repouso durante 48 horas, em seguida foi arrefecida num banho da gelo e tratada cuidadosamente com 3Θ ml de fluorsto de tetra-n-butilamónio 1 M em tetra-hidrofurano. Esta mistura foi rsfluxada durante 1,5 horas e em seguida concentrada até dar um ó 1 eo = 0 óleo foi dissolvido em 100 ml de acetato de etilo, lavado com porçSes de 50 ml de ácido cítrico 2 N» bicarbonato de sódio 1 N e água salgada e em seguiria seco» A solução foi tratada com carbono activado, filtrada através de uma almofada de silica-to de magnésio hidratado e concentrada até dar um óleo» Este óleo foi dissolvido em 50 ml de acetato de etilo a 16 % em diclorome-tano e cromatografado em duas colunas no mesmo solvente» 0 índice de refracção foi registado em S 2Θ» 25Θ ml/minuto» Q principal pico nos volumes de retenção 6~10 foi dividido em porçSes de 1 litro que foram evaporadas separadamente» As primeiras trfs de todas estas porçSes cristal içaram e os sólidos foram recristali— cados a partir de éter isopropílico e hexano, dando 0,7' g de (S)2-(t-butoxicarboniI>amina~4~mstil-CS>i-C2~tiacolil>~pentan-i— ol na forma de cristais, p„f» 121-122 *C=

Dos líquidos mies das três primeiras porções e das últimas porções foi obtido 5.7 g de C8>2~Ct-butoxicarbonlllamino--4~meti 1 -CR) 1 -<2-tiacolil > —pentsn-í-o 1 na forma de um ó 1 et* A 5,2 g deste óleo foi adicionado 1Θ® ml de ácido clorídrico 2 N anidro em acetato de atilo com agitação. Após agitação durante 1 hora a mistura foi diluída com 1@© ml de hexano, arrefecida num banho de metanol gelado a -1© °C e o sólido foi recolhido, dando 4,4 g de (S)2-aminD-4-metil-CR)1-C2--tisroli 1)-pentan-l-ol, na forma de cristais.; p.f. 134-144 °C. A uma solução de 3.5 g deste hidrocloreto em 12 ml de água foi adicionado gota a gota i,8 ml de hidróxido de amónio 15 H» Arrefecimento e filtração deram 1,55 g de sólido. Uma recrisiaiiaaçlo a partir de isopropanol deu o composto desejado na forma de cristais, p.f. 81-82 °C§ - -12 ° ± 1 ° íe, Ί,β, metanol).

Exemplo de referência 28 t-ButoxicarhiniI-L-ciclo-hexilalanina1

Um-a porção de 5,13 g de L-cic lo-hexi lalanina foi dissolvida numa mistura de ó@ ml de p-dioxano, 3Θ ml de água e 3€í ml de hidróxido de sódio í N - A esta solução, agitada e arrefecida num banho de gelo, foi adicionada 7,19 g de diearbons-to de di-t-butilo. Depois- de alguns minutos formou-se uma suspensão e a mistura foi agitada a €> °C durante 1. hora, em seguida concentrada in vacuo até cerca de 4Θ ml. Uma porção de 15Θ ml de acetato, de eiilo foi adicionada e a mistura foi agitada e arrefecida num banho de gelo enquanto o pH foi ajustado até 2 com hidrogenossulfato de potássio. duas A camada aquosa foi separada e sKtraciada com porções de 75 mi de acetato de atilo* A camada orgânica e os estractos foram combinados., lavados com duas porções de 1β© ml ds água salgada5 secos e evaporados in. vaçuo5 dando 8=,© g de N^-t~ -butonicarbonil-L-ciclo-hexilaianina na forma de uma goma inco-lorp [ai"·' Γ; “ -2 ° ± 1 ° Ccs 1==0=, clorofórmio)» A uma solução de 9r,5 g ds imidacol em 80 ml de dicloro-metano sob érgon=, foi adicionada uma solução ds 6=,22 g de fen.il-diclorofosfato em 2© ml ds diclorometano* Após agitação durante 1 horãj a mistura foi arrefecida até © °C e foi adicionada uma solução de 7r,6bg ds N^-t-butoKicarbonil-L-ciclo-heKilalanina em 2Θ ml de diclorometano durante i© minutos*

Esta mistura foi agitada durante 15S horas a © °C até 5 C'C e em seguida foi adicionado 3=,2-8 g de hidrocloreto de NsQ-dimetil-hidroMilamína == Esta mistura foi agitada durante 19 horas a © °C até 5 °C=, em seguida diluída com 1Θ© ml de diclorometano e lavada com 1Φ© ml de ácido clorídrico 1 M== 8© ml ds ácido clorídrico ©=,5 N? duas porções de 8© ml de solução saturada a 50 % de carbonato de potássio e 30 ml de água salgada* A camada orgânica foi seca e evaporada., dando 8=,38 g de W-mstoM i-N-me t i 1 —N"*—t—but dk i carbon i 1 -L-cic 1 q-osk i 1 a 1 an inami da na forma de uma goma incolorf = -10 ° ± 1 * Cc* 1==0=. cloro fórmio) == A uma suspensão de 1=,25 g de hidreto de alumínio e lítio em 100 ml ds éter dietílico sob érgons arrefecida até Θ °C„ foi adicionada uma solução de 7s 85 g de N-metoKi-N-metil-Na-t-bu-toííicarbonil—L-ciclo—hexilalaninamida em 2© ml de éter dietílico» Esta mistura foi agitada a 0 °C até 5 °C? em seguida foi adicionada muito vagarosamente uma solução de 19 g de hidrogenossulfato

a ds potássio ea ίθβ isl ds água. Uuando a adição ficou completa, agitação continuou durante Θ,5 noras seu? arrefecimento. A c afiiada aquosa foi separada s extractada coo tris PQi-çSas de 5Φ ml de éter- díetiíico= A camada orgânica e os extracfcos foram combinados, lavados com duas porçSss de 5Θ ml de ácido clorídrico 1 N, 5® ml de água salgada, secos e o solvente foi removido in. vácuo, dando 6,5 g do composto desejado forma de

Oi uma goma incolor? Cal ·- Ηϊ ° ± 1 ° (c, 1,135, clorofórmio) » Exemplo... de..referfncia ,29 (S)2--AiTíinG"'3-ciclo-heKÍl — <R) l-<2-tiasolil )-^irdpán-T-Oi e rST2-^mTni5"3-cTc 1 o- he κ 11--(8)1-( 2-tiaso 1 i 1) ~ ~propan—1—o1 A uma solução de 6,35 g de 1, i-dimetileiiI~(S)-í2--ci-clo-hexil-i-formilstil/carbamato em 15 ml ds diclorometano sob árgon, foi adicionado 5,89 g de 2-irimetiisiIiJ-tiasoIe com agitaçSo s arrefecimento num banho de água gelada,· A solução foi a seguir -agitada sob árgon à temperatura ambiente durante 2,5 dias» em seguida arrefecida num banho de gelo foi-lhe adicionado 38 ml de fiuoreto de tetra~n—butilamónio 1 M em tetra-hidrofura-no. Após 15 minutos â temperatura ambiente os voláteis foram removidos in vácuo. 0 resíduo foi repartido entre 15* ml ds acetato de etilo e 5Θ ml de água. A camada orgânica foi separada, lavada com porçSss de 50 ml ds água e 5® ml ds água salgada, foi seca e o solvente foi removido in. v-acuo, dando 8,1.9 g de uma goma amarela clara. Uma porção ds 7,48 g desta goma foi dissolvida numa mistura ds 24 ml de diclorometano e 8,5 ml ds ácido trifluoroacé-tico s foi agitada durante 2 dias. A mistura foi vertida em Í2Φ ml de hidróxido da sódio i N, A camada orgânica foi separada s a camada aquosa foi extractada com duas porções de 75 ml de dic1aramatano„ A camada orgânica s os sxtractos foram combinados, lavados com ó® ml de água salgada, secos e o solvente foi removido in vácuo,

Ds 5,69 g de resíduo sólido resultante foram cromato— grafadas por cromatagrafia flash sobre 22® g de gel de sílica Γ23Θ-60Θ mesh). A eluição com metanol a 4 % em acetato de etilo deu, na primeira fracç-lo principal5 2,63 g de (S)2-amino-3-ciclo-•-•heKil-(R) l-(2~tiasolil )-~propan-l-ol na forma de um sólido branco, = -18 ° ± 1 ° (c. 0,743, metanol). A eluiçtío com metanol a 6 % em acetato de etilo deu 0Pé5 g ds <S)2-amino-3-cicIo-bexil—{S>l~í2—tiazalil>-prapan-i-ol na forma de uma goma incolor. EKsmplo^ie^ej^r^f^iaJSt í S) 2-terc-ButoKicarboni Iatnino-3-f eni 1“

-X Pi,B)"F^TIF^Iásb 10 >' -prbpáfFT^õI A uma soluçSo de 8,28 g de 2-bromotiasole em 1Θ® ml de éter a -78 °C, scb árgon, fai adicionado 21,7 ml de n-butil-lítio em hexano. A mistura foi agitada a -7B °C durante 45 minutos e em seguida foi adicionada 6r,8 ml de cloreto ds trimetilsililo. Esta mistura foi agitada a —78 °C durante 1 hora, aquecida até -3® °C durante 1/2 hora e mantida a Φ *C durante i hora, A reacçSo foi extinta com 5Θ ml de bicarbonato de sódio saturada a 5€; % s em seguida diluída cora 5Θ ml de éter, A solução de éter foi lavada com 5@ ml de água salgada, seca, filtrada e

evaporada., dando 1θ5υί g de 2-~irimetilsilil tiszole na fornia ds um óleo ds cor âmbar-

Uma solução de IΘ,55 g de fenildiclorofosfato ecn 50 ml ds diclorometano foi adicionada gota a gota a uma solução ds 17.,0 g de imiriazole em 150 ml de diclorometano- A suspensão resultante foi agitada sob ârgon durante 2® minutos, em seguida foi adicionado em pequenas porções 13,,27 g de N^-terc-butoxicar-^οηϋ--ί_-ίθη11β1βηχη& s a agitação foi continuada durante 1 hora-Foi adicionada uma porção de 5,85 g de hid roei ore to de N,Q---dims-· ti1-hidrDKi1amina- a agitação continuou durante 21 horas- em seguida a mistura foi diluída com 1©Θ ml de diclorametsno s lavada com tr£s porções de í©© ml de ácido clorídrico 1 N5 1©© ml de âgua? duas porções de 10® ml de solução saturada a 5Θ % ds bicarbonato de sódio e 1Φ& ml de água salgada- A mistura foi em seguida seca e evaporada- dando 15,87 g de N-metoxi-N-metil-N^-t-- bu to κ i c a r bon i 1 --8-- fen í 1 a i an inam id a -

Foi preparada e agitada uma suspensão de 2,30 g de hidreto ds alumínio e litio em 36© ml de éter a 0 °C sob árgon- A esta suspensão foi adicionada vagarosamente uma solução de N;--fflstDKÍ~N~mBtil-M"-t~hutDxicarhQnil“L”feniiaianinamida em 8© ml ds tetra-hidrofurano. Esta mistura foi agitada a © °C durante 2 horas e em seguida foi vagarosamente adicionada uma solução de 37 g de bifosfato de potássio em 200 ml de água- Quando a adição ficou completa., a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutas- A fase orgânica foi separada- A fase aquosa foi extractada com duas porções de 2©© ml de éter-

Os extractos e a fase orgânica combinados foram lavadas com porções de 200 ml de ácido clorídrico 1 ΝΡ 2©© ml de solução ds bicarbonato de sódio e 200 ml de água salgada- foram· secos e r

evaporados, 0 resíduo foi lavado com éter de petróleo ίοΘ-ό0 °C> dando i@,,l g de sólido branco,, A uma solução de 3974 g deste sólido em 2Θ ml de diclorometsno foi adicionado 5,5 g de 2-trimetilsililtiazols» Após agitação durante 1,5 horas,, outros 1-.,57 g de 2“trimetilsi~ Xiltiasole foram adicionados e a agitação continuou durante 2®?5 horas» Foi adicionada uma solução de fluoreto tís tetrabutilamónio í N em tetra-hidrofurano, a mistura foi agitada durante 1Θ minutos e em seguida o solvente foi evaporado» 0 resíduo foi recebido em 1ΘΘ ml de acetato de etilo,, lavado com duas porções de 5Φ ml de água, em seguida com 5Θ ml de água salgada f. seco e evaporado, dando 5,83 g do composto desejado na forma de uma goma de cor âmbar»

Exemplq.....de......refejrfnçiÃ, 31 (S)2-Amino-4~metil-(S)l-( 1-aietil-lH-l ,2,4- -tFTi.zõT—5—1.1. )-psntan~l-ol e Τ8Τ2^,2Μηϊϊίο~4~πίΒΪ:ϊ^'~"Γκ3> l-t í~Ssti 1 -1H--1,,2,4--'-ΈγχΈζοΪ -S-i 1') -pen tan- í ~c5"l A uma suspensão de 15,2 g de hidreto de sódio (6Θ % em óleo) (lavado com hexano) em 1&Θ ml de tetra-hidrofurano sob árgon foi vagarosamente adicionado a Φ °C até 1Θ °C uma solução de 25 g de 1,2,4—triasole em 1©Θ ml de metanol» A esta solução foi adicionado gota a gota 25 ml de iodeto de metilo durante 5 horas» A mistura foi agitada a Θ °C durante 1 hora e em seguida foi ref luxada durante 15 .minutos, A solução foi concentrada sob pressão reduzida até começar a precipitar iodeto de sódio,, A mistura foi diluída com porções de 1ΘΘ ml de éter e de dicloroms-tana, filtrada e o filtrado foi concentrado até à secura»

ο — Ο sólido residual foi triturado corn diclorometano ií®Θ ml) e filtrado. 0 filtrado foi seco sobre crivos moleculares <3ft> e passado através de fina almofada de silicato de magnésio hidratado. 0 solvente foi removido sob vácuo e o resíduo foi sublimado até dar 7?72 g de 1—metil-i32?4-triasole5 p.f. 18--2® °C. A uma solução de 1 -meti 1-1 ?2s4--trIãzols em 1Θ® ml de tetra-hidrofurano sob azoto a -75 °C foi adicionado via seringa 25,6 ml de n-butil-lítio. A solução foi agitada durante ls5 horas -75 °C e em seguida foi adicionado é-;i9 g de N-terc-butoxicarbo-niI-L-leucinal sm 25 ml de tetra-hidrofurano. A mistura foi agitada durante 1/2 hora de cada vez a -75 °C e a -23 °C. A mistura foi tratada com i® ml de cloreto de amónio saturado s concentrada. 0 resíduo sm 1ΘΘ ml de acetato de etilo foi lavado com porções de 5Φ ml cada de água. ácido cítrico 2 M. bicarbonato tís sódio 1 Si e água salgada e foi seco. A solução foi filtrada e concentrada para dar 8?4i g <88 λ5 de um óleo incolor que cristalizou parcialmente. Duas recristalizaçSes a partir de acetato de iso-prooilo produziu 1?S5 g de (5)2-( terc-butoxicarbonil)-amino-4-msti1-<R)l-(l-metil--1Η-1.234~triazol-5-il)-pentan-l-ol5 p.f. 144-Í45 °Cs [«]i0n = --26 o + 1 o (c; 1=1? MeOH). A fracçSo de liquido mãe combinada (5,47 g> foi croma-tografada sobre gel de sílica com acetato de etilo / diclorometa-no (2s3> como solvente num instrumento Waters Prep 5As fracçSes que contêm o diastereómero menos polar foram combinadas e recristalizadas de éter / hexano para dar ©,567 g (rendimento de 7 %) de (S)2-(terc-butoxicarbonil)-amino-4-metil-(S)1~(1-metil--1H-15254-triazol-5-il )-pentan-l-ol na forma de cristais,, p.f. 114-116 *C? [a]26D * -38 * ± 1 - <c? 1.2. MeOH).

A uma suspensão de 2,34 g de (8)2-(terc--fautoxlcarbo-nil )"-amino“4”*mstii-(R) 1~( l-mstil-lH-l 5254-tria2ol-5-il >-pentan~l--ol em 3 = 5 ml de acetato de etilo foi adicionado 25 ml de cloreto de hidrogénio anidro 2 M em acetato de etilo. A solução foi agitada durante Ϊ hora à temperatura ambiente e o solvente foi removido sob vácuo. 0 resíduo foi dissolvido em 3 ml de água e foi adicionado 1 mi de hidróxido de amónia concentrada. A mistura foi extractada com porções três de 12 ml de diclorometano. 0 extracto foi seco e o solvente foi removido sob vácuo para dar í,7õ g da íS)2“amino“4~metil —ÍR)1-Ci—meti1-lH-í? 2 s 4-1 r i a ξ o i-5-í1)-pentan—1 — -ol na forma de um óleo.

Exemplo de_.rgfgrfn.cia.....32 <S)2--Amino-4-instil-\R) l-(2-tienil )-“pãrTEan-i—ol

Uma porção de Θ.81 g de (fc>)2-(tsrc-butoxicarbonil)-am1-ηο-4-ssetil-(Rs8)—1-í2—tienil)—psntan—1—ol (Exemplo de Refgrfncia 25) foi dissolvida em 5 ml de diclorometano e foi-lhe adicionada 2st ml de ácido trif1uoroacético„ ' Esta mistura foi agitada durante 3 horas e em seguida foi vertida, com agitaçao5 em 15 ml de hidróxido de sódio 2 H arrefecido em gelo. Esta mistura foi diluída com 25 ml de diclorometanoj a camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extractada com 2Θ ml de diclorometano. A camada orgânica e o extracto foram combinados? lavados com solução saturada de cloreto de sódio? secos e o solvente foi removido in vácuo. 0 resíduo foi cromatografado numa coluna de -gel de sílica, aluindo com acetato de etilo / hexano <ls4)g dando Θ572 g

7 A de sólido branco, Ea3"~ n - -141 ° ± 2 ° Cc, ©,57®, metanol) que foi identificado (espectro de RMN) como sendo <4-5-trans)-4-(2--meiilpropil )-5-C2-tisnil }-2-oxscalidinana= uma porção ds ©,23 g da. cexa2o 1 idinona anterior foi dissolvida em 5 ml ds stanol s foi-lhe adicionado 5 ml de hidróxido de sódio 1 N= Esta solução foi refluxada durante lê horas e em seguida foi concentrada in vácuoc O resíduo foi extractado com duas porçSes de 1® ml de diclorometano* Os extractos foram combinados e secos e o solvente foi removido in vacyo, dando ®?2 g do composto desejado% Rf Θ,Θ45 tplaca de gel de sílica - acetato de etilo / hexano (Ís2)3=

Exemplo de refsrincia 55 <S>2-Amino~3~ciclo-hexii-(B)l-<2-tisnil)- “propán-i-Qi, 1 A uma solução de 1,57 g de jM-metoxi-N-metil-N^-t-buto-xicarbonil-L-ciclo-hexilalaninamida (ver Exemplo de Refer@nc.ia 23) em íΘ ml de éter dietílico arrefecido até -70 °C foi adicionado 2,1 ml de n—huti 1 —1 ítio 235 M em hexano = Depois de agitação durante 1 hora a mistura foi deixada a aquecer até ® A esta solução foi adicionada uma solução de 2-1ítiotiofeno em éter (preparada a partir de 5 ml de éter e 3,2 ml de n-butil—lítio 2,35 M em hexano, agitado a Θ °C durante 1 hora), Esta mistura foi agitada a Θ °C durante 2 horas, s® seguida extinta com 15 ml ds ácido clorídrico 1 N e diluída com 25 ml de éter = A camada orgânica foi separada, lavada sucessivamente com 15 ml ds ácido clorídrico 1 N, 1Φ ml de água e 15 ml de bicarbonato ds sódio aquoso saturado, foi seca e filtrada através ds uma fina almofada de siIicato de magnésio hidratado» A almofada de filtro foi lavada com éter e o filtrado e a lavagem foram combinados» 0 solvente foi removido in vácuo a o resíduo foi lavado com hexano dando l,,38 q de sólido cor de bronze»

Este sólido foi croroatografado sobre 5Θ g de gel de sílica eluindo com acetato de etilo / hexano CIs2©}? dando 1,2 ç de sólido» Este sólido foi cristalizado a partir de hexano contendo um traço de éter, dando íS> — 1,í-dimetiletil-E1-íciclo--hexilmetii }~2~oxo~2---tIsniletil jcarbamatof = +24 ° ± 1 ° <c, 1,1®» metanol)»

Uma solução de ®,51 g do carbamato anterior em 8 ml de tetra-hidrofurano foi arrefecida até ~78°C sob árgon e foi adicionado gota a gota 3 ml de K—Selectride 1,0 n em tetra-hidro— furano. Esta mistura foi agitada a -78 °C durante 4 horas e em seguida foi extinta com 5 ml de solução aquosa saturada de cloreto de amónio» Após aquecimento até à temperatura ambiente5 o tetra-hidrofurano foi removido in_ vácuo» 0 resíduo aquoso foi diluído com 5 ml de âqua e foi-lhe adicionado 2® ml de acetato de etilo» A camada orgânica foi separada, lavada sucessivamente com duas porções de 5 ml de cloreto de amónio aquoso saturado,. 5 ml de bicarbonato de sódio aquoso saturado e 5 ml de solução saturada da cloreto de sódio, foi seca e o solvente foi removido in vácuo» dando <S)2~tterc-bu-to x i carhoniIami nο-3-c i1o-hexi 1-(8)--1-(2-1isni1> —pentan-1-α1 na forma de uma goma»

Esta goma é agitada com ácido trifluoroacético em diciorometano, como se descreveu no Exemplo de Referância 32, para dar o desejado produto como um sólido»

Os exemplos seguintes ilustram a preparação de compostos do nosso invento» fexemfilo___l N---L CFenilffistQxi/carhonii 3—L-fsnilalani 1 — ------- -L-':2"Tk~nsOTp?DpoHxY—çfí xcínámida

Uma solução de 1,16 ç de N-E<fenilmetoxi}carbQniI3-L-~fenilalanil~L-2-í2~metilpropoxi > -gl icil-M~mstaxi-N-~metil~L~f ε·~ nilalaninamida em 2® ml de éter e tetra—hidrofurano suficiente para facultar a solução foi adicionada gota a gota a uma mistura de 03i g de hidrefcc de alumínio e iítio em 2® ml de éter, com agitação sob uma atmosfera de árgon.

Quando a adição ficou completa, a agitação continuou por mais 4 horas, e em seguida a mistura foi arrefecida s tratada com uma solução de @,48 g de bissulfato de potássio em 2® ml de água» Foram adicionados mais éter e mais água, as camadas foram separadas e a camada aquosa foi extractada três vezes com éter» A camada s os extractos de éter foram combinados, lavadas por três vezes cada uma com ácido clorídrico 3 N, solução de bicarbonato de sódio e solução saturada de cloreto de sódio, foram secos, filtrados e evaporados, dando 0,53 g do composto desejado na forma de um vidro, £α3Λ°π = -19 * ± 3 ° (c, 0,32, metanol). όχοορίο 2 Ν~·II (?··en i 1 <netoxi)carboni11 -L~fenilalani 1 - -1' ”f5rm'=:2=TênIIe:£2'Il~-------- -0--2-- i 2f-meti I propoK iT~ql"i c"I n ãm i d a

Uma porção de i,,2 g de H--í ífenilmsfoxiIcarbonil3-L-fe- n i 1 a I an i I —D-2— í2—me ti 1 propox i ) ~gl ici 1 -N-metax i-H—me ti 1 --L- f en i 3. - alaninamida foi tratada com hirfreto os alumínio e lítio em tetra-hidrofurano como se descreveu no Exemplo 1, dando ©,,76 do composto desejado na forma de um vidro? que se tornou um sólido

A amorfo depois de ser triturado com hexano2 = 0° (cs 0,= 3,, metanol).

Exemplo_3 N-C (Fenilíiistoxx >carbonil j-L-fenilalanil-::^ΓΓ5Τ:::Τ^ογ^“ϊ^“Οθ£χ IButí 13-^^-r^SetxI propoxi 3 -g I ícinãiSTti a

Uma solução de ©?74 g de N-Cífenilmstoxi>carbonil1-L-~fenilalanil~L~2~í2-meiilpropoxi >-glicil-W-metoxi-N—meti1-L-leu-cinamida em 1© ml de éter e 1Φ ml de tetra-hidrofurano foi adicionada gota a -gota a uma mistura em agitação de hidreto de alumínio e lítio em 2Θ ml de éter sob uma atmosfera de árgon»

Quando a adição ficou completa, a agitação continuou por ma is 4 horas,, e em seguida a mistura foi arrefecida e tratada com uma solução de 0.,3-i g de bissulfato de potássio em 15 ml de água, A camada aquosa foi separada5 extractads com éter e os extractos de éter foram combinados com a camada de éter» A soluçSo de éter foi lavada por ires vezes com ácido clorídrico és solução de bicarbonato de sódio e solução saturada de cloreto de sódio, foi seca, filtrada e evaporada» 0 vidro resultante foi triturado com hexano, dando Θ,2η g do composto __ _ desejado na forma de um sólido amorfo, tal r, = -2:1= v ± / '··' ú::? Φ5ί3, metanol). N - C < sn i 1 me to x i)car bon i 1 3 -L - f sn i 1 a 1 an i 1 -~0"""2'“ ("2-met'Fí propox í > -g lic xnamxda lima porção de 1,16 g de W-l C f snilmetoxi >carbani Π-L-fe-nilalanil~D-2- <2~meti 1 propoxx )-g 1 ici 1 -Svl-metox i-N-me t i1-L-1 euci I a~ mida reagiu com hidrato de alumínio e litio em éter como se descreveu no Exemplo i, dando Θ ,75 do composto desejado na forma de? um sólido amorfo5 = Θ° ít, Θ, 1, metanol)»

Exempla__5 N-C(Fenilmetoxi Jcarboní1j-L-fsnilaianil-

-N~ Π. S 7F;“to F HFS-CiFmiOT^^ a a A í ?2 g de N-E<fenilmetoxi)carbonil3-L-fenilalanil—L-2-- < 2-~me tiIpropox i >-g Ϊ ic i i-N-me tox i-N-ms ti1-L-fan i1a1an i nam ida em 20 ml de éter, arrefecida até Θ °C sob árgon, foi adicionado β,18 g de hidreto de alumínio e lítio» Após 15 minutos foi adicionado acetato de etilo e a mistura foi trabalhada como se descreveu no Exemplo 1» O vidro resultante foi cristalizado a partir de hexano contendo uma pequena quantidade de acetato de atilo,, dando €>,47 g do composto desejado na forma de um sólido cristalino, p,f. 164-168 °C„ Uma amostra recristaliçada de acetato de etilo / he-xano deu cristais, = -58 ° ± í ° íc? 0,1, metanol)»

fe>ÍMaEl£L_jL N---E (Fenilmetoxi >esrhonil I!—L-fen.1.1 aiani I -~ -Μ"-Ε tSí-r^Tõrmil-S-metilfautí ll-rÇ-'2- < 2-meii 1 stox IT-gTicTnamTaa'

Uma solução tís Θ,7 q de N-CífenilmetQxiícarfoonill-L-fe-· niIalanil-L-2-(2-metileto>;i í-glicil-N-metOKi-N-metii—L-lsucinami-da em 10 ml de éter e 10 sal de tetra-nidrofurano foi adicionada a uma mistura em agitação de ®,6 g ds hidreto de alumínio e lítio esn 20 ml de éter sob uma atmosfera de árgon»

Esta mistura foi agitada durante 4 horas, e em seguida a mistura foi arrefecida e tratada com uma solução de 0,31 g de bissulfato de potássio em 25 ml de água. As camadas foram separadas, a camada aquosa foi eKtractada uma vez com éter e este SKtracio foi combinado com a camada de éter» A solução de éter foi lavada por tr@s vezes com ácido clorídrico 3 N, solução de bicarbonato de sódio e solução saturada da cloreto de sódio, foi seca, filtrada e evaporada» 0 vidro residual foi passado por várias vezes por hsxsno e em seguida foi completamente seco dando *” Z. o composto desejada na forma de um sólido amorfo. Cal^ ~ p = ---24 ° ±4 ° <c? 0,26, metanol)»

ÊliÊffiElS_I N~C (Ferii1me tox i > carbcni13-L-feni 1 a 1 ani 1 --íf-TTS 5 -1 -formíl ~-5-ten χΤΕϊϊΡΓΤϊ-- f sn iTme^dxO-g l'ic ílTãmxHa

Uma porção de 8 g de N-ι C feniImstoxi > carboniI j-L--f eni 1 --al ani l-D-2- <2-f eni Imetoxi ) -g 1 ici 1 -N-metoxi-M—metiI-L-leucinamida em 50 ml de éter anidro» A 25 ml desta solução, sob azoto, foi adicionado ®,38 g de hidreto de alumínio s lítio» A mistura foi agitada durante í hora* em seguida foi extinta em acetato de etilo*. tratada com 37 ml os bissu.iíato de potássio θ,35 M* filtrada através de terra de diatomàcsas e lavada com éter* As soluções de éter combinadas foram em seguida lavadas por tr'ê's veies com ácido clorídrico 3 N, duas vezes com bicarbonato de sódio i N e uma vez com solução de cloreto de sódio* A solução etérea foi seca, filtrada e evaporada* 0 sólido foi cristalizado a partir de éter» dando Φ,9 -g do composto desejado, p.f. 107-114 *0? Laj2~n = *β*5 * ± i ° <c* 1,Θ5? metanol)„ iiíMaals_t N-C(Fen i1me toxi)c arbon i13-L-í sni1a1an i1-—-f ormil-S-mé t i i fauETTIP -E-2^T2~“TenTlmetoxi ) -g I íclhámlcia A uma suspensão de 3,3 g de N-Eífenilmetoxi)carbonil3™ —L—fsn11aIan i1—L—2-(fsn11metox i > -g I i c i 1—N—meto x i—N—mst i1—L—1euci— amida em 5Θ ml de éter a 3 °C sob azoto, foi adicionado 0,32 g de hidrsto de alumínio e lítio* A mistura foi mantida a Θ-ó °C e após 2Θ minutos foi adicionado 6,26 g de hidreto de alumínio e 1itio* A mistura foi mantida a ô °C durante 15 minutos, em seguida foi adicionada acetato de etilo e diclorometano, seguido por trfs porções de 20 ml de ácido clorídrico 3 N„ A camada orgânica foi separada, lavada com tri's porções de 2Θ ml de bicarbonato de sódio 1 N e água salgada, foi seca, diluída com acetato de etilo e filtrada através de uma pequena cama de gel de sílica de 20Θ-3ΘΘ mesh, O gel de sílica foi lavado com acetato de atilo e o filtrado e lavagem combinados foram concentrados até à secura in vácuo* 0 resídua foi cristalizado a partir de acetato de etilo / éter dilsopropilicog dando is35 g do composto desejado coma cristais, p.f. 134-137 °Cs Ια12*Ώ = -44 * ± 1 * 1,25, metano1).

Exemplo..... 9 N-í N~ (terc-Butoκicarboni Ϊ)-L-fen i1a1an i1 -“Fleutí 1 "3- tSTz^aõiWD^-mé χΤΙ’-ΓΚΤϊϊΤ-“Ρ^^Τΰτβπ'Ι'ϊΤ pént an- i -ol

Uma amostra de í mmol de (S)2-tsrc~butoxic5rboniI )~ami~ no-4-metil-(R,S)-l-(2-furanil)pentan”l-Ql é agitada com 5 equivalentes de ácido trifluoroacético durante 16 horasB A mistura é vertida em 6 ml de hidróxido ds sédio i N e a mistura foi extrac-tada com diclorometano» O extracto é seco s o solvente é removido. 0 ÍS)2-amino-4-metil-ÍR,S)-í“<2-furanil)pentan-i-ol é utilizada sem purificação e acoplado a terc-butoxicarbonil)-L-fenil— alanil-L-leucina como se descreveu previamante. 0 produto é purificado por cromatografia em coluna sobre gel de sílica <acetato de etilo - hexano como solvente) para dar um sólido.

Exemplo___10 W,N-D ieti1—N-CN-< terc-buto xic arbon i1)-L-fen i1a1ani1- -tTêucxrr^^^ -------------- - met i 1 pén t i ϊ' 1 loten oc ar eso κ am f3ã

Uma amostra de 1 mfijol de N.M-diatil-5-L(8)2-terc-buto-xicarbonilamino-C R,S)-1-hidroxi-4-meti1penti 13-2-tiofenocarboxa-mida é agitada com 5 equivalentes da ácido trifluoroacético durante? 24 horas. A mistura é vertida em 6 ml de hidróxido de sádio 1 N e a mistura foi extractada com dicloroffistano« 0 extrac-to é seco e d solvente é removido. A N?W-dietil~5-CíS>2-amino~ -ÍR,S>-1-hitíroxi—4-metiIpentil3-2-tiofenocarboxamida crua é utilizada sem purificação e ê acoplada a terc-butoxicarbonll)-L-“fenilalanil-L-leucina como se descreveu previa/riente. 0 produto cru á purificado por cromatografia sobre gel da sílica (acetato de atilo -· hexsno como solvente) para dar um sólido. !m~ L N-“ < Ben z iI o x i c a r bon i 1) - L- fenilal an i 1 ~ (S-^Tietií prbpcxxi )glicTTT^(BT^~affiTno~4-Hieti 1 —

Trí(1 -me t i I -1H-í~2F~" 4~1 r 1Γ1 ξοΓ~ —o 1 e N~L N-C BenzlTõinioãFbQh 1 álahi 1 - “|p-2--T2~oetxTp ro po xiTg li cíTT— ΓΒ72·~=ιΐΓΪϊη o- 4-me t i 1 — ~jprfcrpri i-ítietiΙ-ΊΗ·-'Γ72?4— triazo 1 -S-f 11 páotan-l-ol A uma suspensão em agitação ds 2.34 q de N—íbenziloxi— carbonil)snilalani 1-(D»L)~2~ C2~meti 1 propoxi )g 1 Icina em & ml ds diclorometano foi adicionado &,,7Q ml ds trietilamina e 2S42 g de hexafluorofosfato de benzotriazol-l-iloxi-tris-fdimstilamino)---fosfónia» Após tris minutos,, foi adicionado i504 g ds (S)2—ami-ηο-4-meti 1 - (R) -1 -(1-metil »2,4-triazol-5—i 1 > ~pentan--1-o 1 em 6 ml ds diclorometano.

Depois ds -agitada durante a noite» a solução foi rsfluxada durante 3Θ minutos e foi concentrada. 0 resíduo, dissolvido em 50 ml de acetato de etilo. foi lavado com porções de 25 ml cada de ácido clorídrica 1 Ns bicarbonato de sódio 1 M s água salgada» A camada orgânica foi seca e concentrada para dar 4 g de uma mistura oleosa de diastsrsémeros.

Uma cromatografia liquida de alta pressão preparativa em gel tie sílica com- hexano s acetato de et.ilo 4sl deu uma fracção menos polar, 6,66 g, 76-74 *C, Eal^- = -34 ° ± l - <c, 1,2, metanol), identificada como sendo N-Cy-(benziloxicardonil)--L-i:enilalanil-L-2-<2-metilpropoKÍ)glicil 3-íS)2-amino“4-s-netil-(R>--i-i 1-mstiI-iH-l ?2?4-triazol-5-il )pentan-l-ol » 0 isâmero snais polar, Θ, / g, p»f» 130—139 °C, E*:3~ n = --4 ° ± 1 ° (c, í, metanol), foi identificado como sendo N-CN-íbenzi 1 oh icarbonil )-L“fenilalaníl-D-2~(2-HiStilpropoxí)glicilj-(S)2--aoiinG-4-íDstil~(R)-l-( 1-meii1-iH-í ,2,4—triazol~5~il) pentan-i-ol »

Exemplo 12 N--W--í Benziloxicarbonil /-L-fenilalanil-rL-2“ t2-msirripropoxi }g feni 1 - -(R) ~ 1 - (2-1 lazolTiT^p^pan-T^oI W RpLW-TBeri z i 1 o x i c'ar t sn iXãrztn i 1— -D-2-72:::?BêcripropoKÍ >g 1 lc.£Tj^TET2~ãmIrm-Z-f eni 1 --líT7~T- ("5·”· txizol íTT - ρ r opa η - ϊ'-αΊ

Uma solução de 6,5i g de N—(benziloxicarbonil)-L-fenil-alanil-(D,L)-2-<2~ínetilpropGMi)glicina em 2 ml de diclorometano foi adicionada a uma solução preparada de ©,2è g de fenildic1crome tano e 6,46 g de imidazole em 4 ml de diclorometano» A esta solução foi adicionado 6,24 g de (S>-2~amino~3-feni1-(R)-i-(2--tiazoli1)-propan-l-ol e a mistura foi agitada durante 24 horas à temperatura ambiente» a mistura foi adicionado 26 ml de ácido clorídrico 6,5 N e 36 ml de acetato de stilo» A camada orgânica foi separada s lavada com 15 ml de ácido clorídrico 6,5 N, 36 ml de solução saturada de carbonato de potássio e 15 ml de água salgada» A camada orgânica foi seca e o solvente foi removido para dar 1,64 g da sélido»

Este sólido foi cromatografado par cromatografia flash sobre gel de sílica (230-240 mesh) com acetato de etilo / heKano i í y 1) como solvente para dar 0,28 g do isómero L, L (primeira

VA rracçaols Icíj~ d = —z-à v ± i v (c, isy4r, clorotòrmio) e 0, g do isómero L, D (segunda fracçso) s Ca 1''"“,., = "43 ° ± 2 ° íc, €>,57, clorofórmio)= iisamis_li N—C W—(Bensiloxicarboni1)-L—fenilaianil-;"ΙΓ;:;Τ2"·;-me cTIp r o pò κ í Tg ΓΪ'Ε I o-TS'·- f en i 1 -

~(Pí) -í- (2’~:^xasol.xIT:-prbpáh—T-oT A uma suspensão agitada de 18 q de N-E(fenilmetoKi)-cartaonil 3-L-fsni lalanil-N-C <S)-Í-farmil-2~feniletil~L-2-<2-metil~ propoKi)glicinamida em Θ.5 ml de diclorometano foi adicionado 5í mg de 2-trimetilsililtiazole e. Φ,5 ml de diclorometano. Após três horas, a suspensão leitosa foi diluída com 2 ml de diclorometano e agitada durante a noite. A mistura foi refluxada durante 15 minutos e em seguida foi arrefecida num banho de gelo.

Foi adicionado fluoreto de tetra-n-hutilamónio C®,5 ml de 2,5 M em tetra-hidrofurano) e a solução foi refluKada durante 1,5 horas. A solução foi concentrada e o resíduo. em 5 ml de acetato de etilo, foi lavado com porções de 5 ml cada uma de ácido cítrico 2 N, bicarbonato de sódio 1 M s água salgada. A solução foi seca, filtrada através de uma fina camada de silicato da magnésio hidratado e concentrada para dar Θ.13 g de uma goma.

Esta goma foi cromatografatia sobre três placas de gel de sílica preparativas de 20>;2Θκ©?2 cm com hexano / acetato de etilo < ;l s 1 > para desenvolvimento e acetato de etilo para eluição» A evaporação do solvente de eluição (acetato de etilo) deu 25 mg do produto na forma de uma goma que foi idêntica ao isómero L, L do Exemplo 12 (espectro rpm). A comparação por crornatografia de camada fina sobre gel de sílica com acetato de atilo / he>;ano <isl> mostrou idênticos RF's= feumsls_14 !Í~^Ú“'* Benzi loxicarbonil ) —L—f anilai anil --17-2- CcicrE^h^iT5^T}^TIExr~S~ESn^-~4~ms t i 1 -“ΤΙΓΓ-Τ-Τ^- tiasolil) - pen t an —' I —d i i " Ρ-ΓΡΡΈΡη z ΤΙ οκ’ίΊΕar ΕοηΓΓΤ^- f sn STãTan 11 — -0.--2- (c iclõ^Reκ i 1 ox i ) g 1 ic i 11i 1 ·-·" CR )-1-( 2—tiazoiTIT-pén tan-1 -o 1 ™ A tuna suspensão da 2,3 g de p-liM-í benzi loxicarboníl )-L-· -fsnilalanil J-íD?L)-2-(cicla-heKÍlo>ii)glicina em 6 ml de d icl aro-metano foi adicionado Θ,3i ml de trietilamina = A esta solução foi adicionado 2=25 g tis hexafiuorofosfato de henzotriazol-l-iloxi-“tris-ídimetilamino)fosfónio seguido dois minutos mais tarde pela adição de 1 g de <S)-2-amino-4-metil-{R)-i-(2—tiazolil)-pentan-l-—ol =

Após agitação durante a noiteP a solução foi refluxada durante 1 hora e concentrada sob vácuo» 0 resíduo foi dissolvido em 50 ml de acetato de etilo s sucessivamente lavado com ácido clorídrico 1 N- bicarbonato de sódio 1 M e água salgada» A solução incolor foi seca.» filtrada através de um-a fina almofada de silicato de magnésio hidratado e concentrada até um óleo <4,55 g)„ 0 óleo precedenteç em 3@ ml de heK-ano / acetato de etilo (Isl) foi filtrada e cromatagrafado, com acetato de etilo -/ heKano í 1 s 3. J como solvente, em duas colunas- de gel de sílica prsp 5Θ0 em séries a alta pressão» Os volumes de retenção 4-7 (fracção A) e 9-12 (fracção B) continham os produtos»

As soluções foram concentradas separadamente para dar, a partir da fracção A» 1,1 g de W-lN-íbenziIοχicarbonil >~L--feniIaIânil”-L~2-(cIclo~'hsxilo;<i }gli-cll 3-(S>2~amino-4—metil-\R)—1-Í2—tiazoiil>—penian-1—ol na forma de um vidros Ea.1 ~~T) = —54 ° ± 1.3 ° Cc? ϊ?®4. metanol) 5 Rf @P39 sobre placas de gel de sílica com acetato de stilo / hsxano Cisi) como so1vente= A concentração da fracção B deu lsli g de W-ÍH—íbenzi— loxicarbonil )-Lr-fsnilalanil-Dp-2“(ciclo“hexilOKÍIqlicil 3-<S)2-ami~

na-4—metil-ÍRí-l—(2—tiasolil>—pentan—1—ol na forma de um vidros ‘7 A = -3 0 ± 1 0 Cc5 1545 metanol) 5 Rf ®5lv sobre placas de gel de sílica com acetato de stilo / hexano C1 s 1) como solvente.

Ex&rnlQ............15 N~ C N-í Benz i 1ox icarboni1>—L-feni1a1ani1--L-2- (l-rneti Γέΐοχx ) g 1 ící Ί J- \ S > ^-êãiurio^-iTiiBti 1 --"TiTT- ;í-~ (2~tiázõrrrTT--pentan“ 1”θΓ~~Ί5 í%F m- CBen'sTTÕKlcãrbon i I F-l^-f^TTãTan i 1 - {Ί -metíTstox i) g 1 i c t i 1 - “fi-D -1 - (2-“tiacol ITT-pen tan^i-ol A uma suspensão de 1s7 g de M-lN—Ibenziloxicarboníl>-L~ -fenilalanil3-<DsL5-2— í í~meiilatoxi)qIicina sm 4 ml de diclorome-tano foi adicionado &556 ml ds trietilamina. A solução resultante foi adicionado ls8 g ds hexafluorofosfato de benzotriazal~l-.il-oxi”tris~Cdimstilamino)fosfónio seguido dois minutos mais tarde pela adição de Θ58 g de (S>-2-amina-4-metil-{R)~l---(2~tiazQlil >--pentan-1—o1 sm 1 ml de diclorometano.

Após agitação durante a noite, a solução foi refluxada durante 3Θ minutos s diluída com 5Φ ml de acetato as etílo. Após lavagem com porções de 1Θ ml cada uma de ácido clorídrico 1 N? bicarbonato de sódio 1 M e égua salgada? esta solução foi seca e filtrada com carvão vegetal através de uma fina almofada de si lies. to de magnésio hidratado» 0 filtrada foi concentrado sota vácuo para dar 2»5 g de uma -goma» A cromatografia líquida de alta pressão (duas. colunas de gel de sílica prep 5ΘΘ) em hsxano / acetato de etilo Clsil) deu dois picos (dstecção da índice de refracçSo) bem separados» A concentração dos volumes de retenção á-9 (fracçSo A) deu ©»76 g de N-CN-ÍbenziloxicarbonilJ-L—fenilalanil-L—2-í1—metiletoxi)gli-cilj-(S)2-amino~4-iBetil~CR)-l-(2-tiasolil)-pentan—i-ol na forma de uma espuma vidrsdap = -56 ° ± 1 ° íc» ls5» metanol);; Rf HP0»32 sobre placas de -gel de sílica com acetato de etilo / hssano < í s i) como solvente» A concentração dos volumes de retenção 12-15 Cfracçao B) deu um sólido que foi cristalizado de acetato de isopropilo para dar ®»83 g de N-EN-(benziloxicarbonil)-L—fenilalanil—D—2-(1--meti 1 etoxi ) g 1 ici 1 J- C S) 2-amino--4—meti 1 — < R > ~i - (2-tiazol .11) -pen tan--i-ol como cristais.» p»f» 16-3-164 °Cρ = -8 * ± 2 * <?::» 0»5» metanol)p Rf Θ»2Θ sobre placas de gel de sílica com acetato de etilo / hexano C1s1) como solvente»

Exemplo 16 terç-Butoxicarbonil>—L-fenilalanil--Ç- reucTfl^TBTS-anu. n ------- ... C'2-iTenil ? pentan-^P-oi

Ucna mistura de Θ»16 g de fenildiclorofosfato s €>»26* g de imidacole em 2 ml de dicloromets.no foi agitada durante €>»5 horas» em seguida arrefecida até Θ °C e foi-lhe- adicionado ©»28 g de N--C terc—butoxicarbonil )-L~fenilalanil-L—leucina em 2 ml de diclorometano» Esta mistura foi agitada a -15 °C durante 1 nora» Foi adicionada uma porção de Θ»! g de í S) 2~amino--4-msti l- (R) -1 --(2-tienil)-pentan-l-ol» esta mistura foi agitada -15 °C durante 2® horas e SsTa seguida foi diluída com 1® mi ds água e 2® «i 1 as acetato de etilo*

Após aquecimento até á temperatura ambiente, a camada orgânica foi separada, lavada com duas porções ds 1® ml de ácido clorídrico 1 N, 1® ml de hidróxido de sédio 1 N e 1® ml de solução saturada de cloreto de sódio, foi seca s o solvente foi removido in vácuo.·. 0 resíduo ds ®,3i g foi dissolvido em 2 ml ds metanol e foi-lhe adicionado 1 ml de hidróxido ds sódios; esta mistura foi agitada durante 1 hora e em seguida diluída com 2 ml de água» 0 metanol foi removido e a suspensão aquosa foi extrac-tada com 15 ml de acetato de etilo» 0 extracto foi lavado com solução saturada de cloreto ds sódio, foi seco e filtrado através ds uma fina almofada ds sillesto de magnésio hidratado» A almofada foi lavada com acetato ds etilo» 0 filtrado e a lavagem foram combinados e concentrados in vácuo» 0 resíduo sólido foi lavado com hexano, dando ®,27 g do produto desejado na forma de um sólidos Rf ®,2® Cplaca ds gel de sílicas acetato de etilo / hexano íisl)j| Csjís\ - -34 ° ± 2 ° (c, ®,48, me tan o1)»

Íiíêffijsl£L__jZ N—EN- (terc-Bu t ox i c a r bon i 1} -L- f en i 1 a I an i 1 --~L~ I suc i n^^TS-amino-S-e i c 1 o-HexTT-'''-Τ'δ-ΤΰΓΗηΙ 15 própan-i-ol A„ (S>~Ei-(ciclo-hexiImsti1>~2~ífuranil}-2~oxQetilD- carbamsto ds í?l~dimetiletilo

Uma soluçlo ds 1 ?57 g ds |^msti],-^-metil“híJi---fc-hutoxi·-carhonil-L-cíclo-hexilalaninamida em 15 ml de teira-hidrofurano foi arrefecida até -78 °C sob árgon» ã solução foi adicionado gota a gota 5rv? ml de butil-lítio secundário (0^85 M em hsxanoK A mistura viscosa foi agitada a -78 °C durante 1=5 horas s em seguida aquecida até Θ ClC e agitada durante 5 minutos = (Solução A) uma solução de Θ*73 ml de furano sm 5 ml de tetra-hi-drofurano seco foi arrefecida até Θ °C s foi-lhe adicionado 3=38 ml de n-butil-lítio C2335 π em hexano) „ A suspensão amarela foi agitada a £ °C durante 1=7 horas s em seguida deixada a aquecer até á temperatura ambiente durante Í5 minutos= (Solução amarela 8)= A solução amarela B foi adicionada à solução A e mistura foi agitada, a Θ °C durante 15S horas = A mistura foi extinta com 5 ml de cloreto ds amónio aquoso saturado e d tetra--hidrofursno foi removido in vácuo, 0 resíduo foi diluído com 5® ml ds acetato de etilo s 2Θ ml de ácido clorídrico i M = A fase orgânica foi separada e sucessivamente lavada com 2Θ ml cada uma de ácido clorídrico 1 W5 2® ml de água? 2.Θ ml ds bicarbonato de sódio saturado e 2® ml de

água salgada -e foi seco sobre sulfata de sódio, 0 solvente foi removido in vácuo para dar i,63 g de uma goma castanha clara.

Esta goma foi dissolvida sm èter / hexano íls5) e a solução foi filtrada através de uma fina almofada de silieato ds magnésio hidratado, A almofada foi lavada com éter / hexano Íls5) e o filtrado foi concentrado, 0 resíduo foi triturado com hexano 2é> para dar i,23 g de cristais amarelo clarof Lai"-1--, = v4i « ± 1 * <c5 1,14, metanol), B, CS)"2-C N-terc-Butox icarboni1)ami nc-3-c i c1o—hex i1— -(R 5 S)~1-(2-furan i1)propan-1-o1

Uma solução de 1,16 g de CS>-ti-<ciclo-hsKÍImetiI>-2~ ·”{ furanil )-2-oxostil Icarbamato de i,1—dimetiletilo em 2 ml de tstra-hidrofurano seco e Θ2 ml de metanol foi arrefecida até 0 °C sob ârqon a foi-lhe adicionado 23 mg boro-hidreto de sódio, A solução foi agitada a Θ °C durante i hora e foi extinta com 2 ml da cloreto de amónio aquoso saturado, O solvente orgânico foi removido sob vácuo e o resíduo foi diluído com 5 ml de égua e extractado com 1® ml de acetato de etilo, A camada orgânica foi separada5 sucessivamente lavada com 5 ml de ácido clorídrico Θ,5 N, 2Θ ml de água, 5 ml fls bicarbonato de sódio saturado, 5 ml de água salgada e foi seco sobre sulfata de sódio, 0 solvente foi removido in vácuo para dar 0,19 g de um sólido gomoso, C, (4-S-trans) 4-<Ciclo—hexilmetil )-í5-<2-furanil )--2-oxaxolidiona A uma solução da 0,23 g de <S)-2-(N-terc--fautoKÍcarbp-nii)aminp~3“CÍclo-hexil“(R,S)-l~(2-furanil)propan— i —o1 em 3 ml de Λ

dlcloromstano foi adicionado €>,€>6 ml de ácido trifluoroacático» A U J. u.;.,. et 5. oi aqitada durante hora» à tempera Lura asubiente,. lavada com hidróxido de sódio 1 N s seca sobre sulfato de sódio e ;ar Θ = 17 g de sólido» ic lo—hex ’? — í ) — 1 — ( ’*£*— furas, i g de í4~ó~trans) 4- (ciclo- ona foi dissolvida sín uma . d róκ xdo Π 0 5nfi X Π J, |s| L A so O .1 VS?n*CH{ Í*OÍ F*eSROVX€ÍiJ DSTi jropan-i-oi til)-5-(2-furani1)-2—oxasaX: de 3 ml de etanol e 3 ml de morôxitío de sódio l N» h soiucao tca refluxada durante 17 horas, diluída com 3 ml de água e concentra-da sob vácuo para remover o etanol, U resídua aquoso foi extractado com duas porçSes de 5 ml de diclorometano e os extractos foram secos sobre sulfato de sódio» 0 solvente foi removido para dar ®,13 q de sólido brancos n =- C j, 'Ο κ wv) / nie !. : L.= jcna .stura de q oe tenildiciorotostaxo e 0,12 q de imidaz GiS 0£|| V _ ml de diclor ornecano foi ag i tada è. tem per· ature, ambis % 1 durante 1 hora e em ggpy -í H0 arr* ST BCÍ oa sxs "15 °C sob árgon„ F Q 2 , adicionad a em s ?M- (te butox icarbo™ n i 1) —L- -fenilalani 1—L~ i ei.iL. jl F«a i ví »| g) e a mistur a fui agitada durante 1 hora. onado de (S >-2—am ino— ropan- I {•mfa 1 0 Sm © 5 5 m 1 de a uiiscura antsrior fox ao: "3-ciclo-hexiImeti1 — CR}—i — (2—furani1)Drooan—1 Π r·"5 ti oiueLanu, A mi»tura foi uCf i •.soa a io °C durante 23 ha sras rf£ 1 LÍ £ tí a com 15 ml de acetato de e t i 1 o e i © ml de acido cl ar ideie @ ? 5 N „ A camada Drganxcs to i su oessivament e 1 a v a d a c om 5 ml d ác ido c1or í d rico ΰ?5 M? 5 ml de hidróxido fi w- sódio 1 N, a ml d água salgada e foi seca sobre sulfata de sódio* U solvente foi removido in vácuo para dar €>,,24 g de um sói ido« Este sólido*

Este sólido foi dissolvido em 2 ml de metanol e 1 ml de hidróxido de sódio 1 N e a mistura foi agitada durante 1 hora* A mistura foi diluída com 4 ml de água e concentrada para remover o metanol* 0 resíduo foi extractado com 1® ml de acetato de etilo e os exiractos foram secos sobre sulfato de sódio* 0 extrato foi filtrado através de uma fina almofada de silicato de magnésio hidratado s a almofada foi lavada com acetato de etilo,, 0 filtrado foi filtrado sob vácuo para dar @sló g de sólido* A lavagem do sólido com hexano deu ©?i5 g do produto do Exemplo na forma de um sólido brancos Cal'~~'r. = -ói ° ± 2 * Cc* ®, 58 ... metano 1) *

Exemplo 18 N-(Fen i1metox icarboni1>~L~feni1a1ani1- propoxxTgTIci'l'J-'('lR7^^ 2-~am i n o-

::v3"EΤΈΙcFvtexTI~i-<2—tiazòiil > —propan-i-~ol s RFTFenTImsÍQxTc a r bon i 1) -Lpr sn í '1 a 1 án i IF propox i Tg 1 i c ΓΓΤ^ΊΠΕΤ vFTEFs m i. n o-^“CicTó ~hexil™l~í2~tia sol' 11) - p rd pá n ~ i ~õl A uma solução de ®*1.9 g de N-N-ca r bon iId i i mItí a x o1s em 3 ml de diclDrometano sob árgonP foi adicionado g de N—ífe— nilmetoxicarbonil)-L”fenilalanil“DsL~2-(2~metilpropoxi)glicina. A solução foi agitada durante 1 hora e em seguida foi adicionado ®?24 g de (S)--2™amino~3~cic 1 o-hsxi 1 — <R> — i — í2—tiaxc 1 i 1 )—propan—1— -ο I *

Após agitação durante I dia* foi adicionada uma solução de ®526 g de N-C ( fenilmetoxi )carfaonil 3-L-fenilalanil"*D3L-2“<2-iiie-tilpropoxi)glicina activada com ®?ίβ g de N~N—carboniIdiimidaso— Ia* Após agitação durante 21 horas esta adição foi repetida* A solução foi agitada durante a noite., em seguida foi diluída com 4Θ ml de acetato de etilo e lavada com 2x2® ml de ácido clorídrico ©s5 N5 2k2© ml de solução saturada a 5© % de carbonato de potássio e 2Θ ml de -água salgada, A camada orgânica foi seca e evaporada in. vácuo , 0 resíduo foi cromatografado sobre gel de sílica, eluindo com acetato de etilo s hexano <2s3)5 dando ®:i2í g de N-ifeni1metox icarbon i I >-L-feni1a1ani1-L-2-<2-met i1propoxi)qlicí-13 —< tR,23)2-affiino-3-ciclo-hs}íil-l-<2-tiasalil)-propan-l-ol na forma de um sólida branco? Cαj- -40 ° ± 3 ° (c, Θ,365, metanol) e ô5í4 g de N~<feniiffi£ÍQXicarboniI>-L-fsnilalaniI-D-2-•-•<2-mstilpropoxi )glicil 3-í íR?2S>2~amino-3-ciclo-he5íiI~i“(2-tiazo-lil)-propan-l-ol na forma tíe uin sólido branco?; Cccj^p = --19 '· ± 3 ° (c;i @5366s metanol).

Exemplo 19 N-CN-C (Fsnilmetoxi )carbonil j-L-f enilalani, 1--υ7Ε-2- <isopropi 1 tio í gTTc 1T" j^TST2r “^"ΕϊΕΙο^Τ^ΤΓΙ'-Γκ) 1- i"T-1ϊ'ΙΤαΤΓΓΤ-ρΤορΛΓτΡ 1 -o 1 A uma solução ds 4P1 g de M-Cfenilmetoxi>carboniI-3-L--fenilalanil-DsL-2-hidroxiglicina em 5® ml de metanol (arrefecida num banho de gelo) foi adicionado ®?3 ml de ácido sulfúrico concentrado, A mistura foi refrescada a ® °C até 5 °C5 filtrada e o sólida foi lavado com éter para dar 2?67 g de N-CN-C<fenilmeto-xí)carbonilj~L~fenilalanil-2“hidroKiglícina, éster de meti lo? na forma de cristais brancos, p.f. 117-127 CíC§ - 4 ° ± 2 ° (c ? 0,32, metano1)„

Uma solução de ®„3Φ g do composto precedentes de 0,722 ml de isopropiImercaptano e de 16 mg de ácido 1-naftilenos-sulfónico em 6 ml de diclorometano foi refiuxada durante a noite sob árgon» Foi adicionada um adicional ds Θ./25 ml de isopropil™ mercapts.no e a mistura foi reflunada durante 24 horas» 0 solvente foi removido e o resíduo foi dissolvido em clorofórmio» A solução foi lavada com carbonato as sódio a 1Φ % (emulsão) (metanol adicionado)» A casada orgânica foi separada s a camada aquosa foi extractada com clorofórmio» Os exiractos e a camada orgânica combinados foram lavados com solução saturada de cloreto de sódio» secos (HqSO*) e o solvente foi removido sob vácuo» 0 resíduo <©53ó g) foi cromatografsdo por cromatografia flash sobre gel de sílica com clorofórmio como eluents para dar 0S13 g ds N-L <fsnilmetoxi )carbonil 3-Lr-fenilalÃnil~“DsL”2~í isopro-piltio>glicinas éster de- instilo, na forma de cristais brancos, p„f„ 1ΘΘ-1Θ3 *C» 0 composto precedente em metanol com 1 mole equivalente de hidróxido de sódio 1 N deu N-C ( feni Imetoxi ) carboni 1 3-L-f eni. 1-alanil-D,L-2-<isopropiltio)glicina na forma de um vidro» 0 composta precedente foi também preparado da seguinte maneira» A uma solução de €5,5 g de W-< feniImetoxi >carbonil-3-1.-~-f sni lalani 1-DPL-2-hidroKig 1 icina s ©5ó24 g de isopropilmercapta— no em 5 ml de ácido acético sob árgon foi adicionado Θ,i5 g de ácida sulfúrico» A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante dois dias (todos os sólidos dissolvidos) e vertida em água gelada» A mistura foi extractada com acetato de et.ilo (várias vsses)» us exiractos combinados foram lavados com água» A camada orgânica foi seca CligSO^} e o solvente foi removido para dar Θ?48 g de N~nfenilmetoxi>carbQnil3-L-fenílaIaRiI--D?L-2-íisoprG-piltio>alicina na forma ds um vidro límpido» 0 composto precedente é activado com N~N—carbonildiimi-dasole em dicloromeiano e reagiu com CS)-2-amino-“3~cic 1 o-heκi 1 ~ -(Fi> l-<2~tiazol il >-propan-l-al como se descreveu para o Exemplo Í8 para dar N-L(fenilmetoKÍ)carboniI3-L-fenilaIanil-D5L-2-(iso-propiltio)gIicil3-<S>—2-aniino-3—cicla-hex il — <R)l-<2-tiazoli i)~ -propan~-r--ol na forma de um vidro, iL-SUBie_2Θ N-EN-CÍFenilmetoxi)carboniI3-L-fenilalani1—

“Ds L-2-ί 2-ntstil propoxi IglTcTi1 - fTRϊπo-•~?-F-Tfseti 1 1 — i2~írnlcJazo 1 i 1 / ~perrEãrFT-õI

Uma solução de 18,4 g de l-CE2--(trimetilsilil Jirsetoxi 3-mstil 3-IH-imidazcIe em 8€? ml de tetra-hidrofurano sob árgon foi arrefecida até -75 °C e foi adicionado à solução 37,2 ml de n-butil-Iítio em hexano í2?5 n) „ Após agitação a -78 C‘C durante í hora foi adicionada uma solução de 10 ?0 g de M-t-butoxicsrbonil— -L-leucinal e?n 265 ml de tetra-hidrofurano. A mistura foi agitada a -78 °C durante 1,5 noras, o banho de arrefecimento foi removido por 5 minutos e a mistura reaccional foi extinta com 30 ml de solução saturada de cloreto de amónia. 0 tetra—hidrofurano foi removida sob vácuo e o resíduo aquoso foi diluído com 3Θ ml de água e em seguida foi extractado com 3Θ0 ml de acetato de etilo, A camada orgânica foi lavada com bicarbonato de sódio saturado C5Θ ml), solução saturada de cloreto de sódio e seca <Na.-jSQ^>„ 0 solvente foi removido sob vácuo para dar 29,65 g de um óleo cor de âmbar., A cromatografia sobre gel de sílica com acetato de etilo s hexano <2s3> deu 8,2 g de sólido, Este sólido foi croma-tografado sobre gel de sílica, eluindo com acetato de etilo s he~ xanc? (2s3) para dar 4,,14 g de CS)2-í t-hutoxicarfaonii )amino-4-metil-iR) 1-C2CN-C2-Í trifnstilsilil-)stDHi)mstil3iffiidasDlil3psntan-l~oI na forma de um sélido brancos = 4-6 ° ± 2 ° íc5 05583? metanol >» A 0P21 g do composto precedente em 3 ml de diclorometa-no foi adicionado «3 = 39 ml de ácido trifluoroacético e a solução foi agitada durante 2 horas à temperatura ambiente sob árgon* A mistura foi diluída com 1© ml de diclorometano e vertida em hidróxido ds sódio x rí arrefecido por gelo» A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi eKtractada com diclorometano» A camada orgânica e os entrados foram combinados^ secos (IMa^SO^) e o solvente foi removido para dar 8515 g de íS)2-afflino-4-(netil--íR)i-12-ϋ 2-(trimetilsi1i1)stoxi JmetiIJimitiasoli1jpentan-í-oi na forma ds um sólido branco»

Como se descreveu para o Exemplo 183 N—E C feniImetoxi > — carbonil1-L-fenilalanil-D5L~2~<2-metilpropGXi)glicina é activada com N-”N~carbcjniItíiimidacole e a esta solução e adicionado ®515 g de <S)2“amino-4-metil-<R)1-C1—C2-CN-C2—ítrimetilsilil)etoxi3me- tilIlimidacolilHpentan—l-ol= Após agitação durante a noite a mistura é diluída com acetato de atilo» é sucessivamente lavada com ácido clorídrico 0S5 solução saturada de carbonato de potássio e solução saturada de cloreto ds sódio» A camada orgânica é seca, o solvente é removido e o resíduo é dissolvido em tstra-hidrofurano» A esta solução é adicionado 3 ml de fluoreto de tetra--π-butilamónio em tetra-hidrofurano <15θ M)? Θ?4 ml de trietil-amina e Θ?4 ml de água» A mistura è refluxada durante 24 horas e é concentrada sob vácuo» 0 resíduo aquoso â extractado com acetato de etilo? o extracto ê seco e o solvente é removido para dar * *

/ *τ * Ν-Ε ί fsniimetoxi >carbonil 3-L-fenilalanil-D5j_-2~{2-íBetilprapa>íi )gl-~ icilj-ClR32B)2“âmino-4~mstil-Í-(2-ímidaEoliI>--psntan~l-ol na forma ds um vidra branca. N-EN-C<FsnilmstoKÍ ícarhonilj-L-feniXalanil--^t-^-êío^íi ) g Ficil 3-í S) 2-imxrí5-:4“meErr~ =1Ή7ϊ:::Τ5-ρ'χ?Ι153ΗϊΤ í -pèn^irFT—õl A 2-foromopiridina (3,16 g) em 2Θ mi de tetra-hidrofura·-no seco arrefecida até -78 °C sob árgon foi vagarosamente adicionada 1i 32 ml ds n-butil-Iitio em tsfcra-bidrofurano (2 Μ), A solução foi agitada durante 5 minutos e em seguida foi adicionado 2,í g ds N -1 - b u ΐ o x i c -a r bo η i 1 - L -1 e u c i n a 1 em 1Θ ml de tetra-hidrofu-rano. A mistura foi agitada durante 35 minutos, em seguida foi extinta com 10 ml de solução saturada de sulfato de sódio, aquecida até à temperatura ambiente e vertida em 5® ml de água, A mistura fai extractada com acetato de etilo, Os extractos foram secos (Na.-,SO^> e o solvente foi removido sob vácuo, 0 resíduo foi cromatografado sobre gel de sílica, com acetato da stilo s hexano C3s7) como eluente e em seguida com acetato de etilo s hsxano <isi) como eluente para dar ®,62 g de (S)-2-tert-butox icarban i1-amino-4-meti 1 -· < R, S) 1 - C2-pirid ini1)-psn-tan-l-ol na forma ds um óleo amarelos La] ^ = -21 ° ± -5 ° (c, 0,329, dicloromstano),

Uma amostra de 4,12 g do composto precedente numa mistura ds 15 ml de diclorossetano s 5 ml ds anidrida acética fai agitada à temperatura ambiente durante 22 horas, A mistura foi concentrada sob vácuo, 0 resíduo foi dissolvido em diclorometano a a solução foi lavada com solução aquosa saturada de carbonato de sódio, foi seco CNa.JSO^} e o solvente foi removido, 0 resíduo foi cromatografado sobre gel de sílica, com acetato de etilo a 3® °Á em hsxano para dar 1,55 g de a-acetato de (S)-2-tert-bu to x ic ar boni1-ami ηο-4-me111-(5)1-(2-pi ridinil)-pen ta- yi. n-:l'-ol como cristais, p,f = «õ-BS °Us = -62 ° ± 1 ° Cc, 15 ® 1, diclorometano) s o-acetato de <S)—2-tert-butoxicarbonilami-no~-4-met.il-·-(R> i-(2-piridini 1 >-pentan-l~ol na forma de um óleo cor de âmbar;: ia3"" n = 4-3 ± i ° \c =, χ,Θόό, metanol

Usia amostra de 3,32 g de o—acetato de C B) --2-tsrt—buto— xicarbonil-amino-4-metil-(R}1-í2-piridinil)-pentan-l-ol foi dissolvida numa mistura de 3 ml de metanol e 8 ird de hidróxido de sódio 5 N, A solução foi agitada a 1€J °C durante 2 horas e em seguida foi extractada com diclorometano» 0 extracto foi seco (Na„SOa> e o solvente foi removido sob vácuo para dar 2,69 g de (S)-2-"tgrt-butoKÍcarbonilamino-4-metil-(R) 1-C 2-pi ridinil >~pentan~ -l-ol na forma de um óleo.

Ao composto precedente (2,ó9 g) foi adicionado 15 ml de ácido hidroclórico anidra 2 IM sm acetato de etilo. Após agitação à temperatura ambiente, o solvente foi removido sob vácuo para dar 2,4ó g ds di-hidrocloreta de (S)-2-amino-4~metil-(R) l"-<2~pi~ ridinil)-pentan-I-ol na. forma ds cristais cor de bronze, p*f. 152-154 *C. h uma solução de N-C{fenilmetoxi)carbonil3-L-fenilala-nil-D5L-2-etaxiglicína <2,® gp 5 mmol > (Exemplo ds Referência 12) e Smmol de éster de etilo do ácido 2-etoxi-Í(2H)~quinolinocarbo-xilico em 5® ml de diclorometano é adicionado 5 mmol de di—hidro— cloreto de (S)—2-a.mino—4—fiietil —(R) 1 —<2—piridinil)— pentan— 1— ol e 4 ml ds tristilamina em 25 ml de diclorometano» A mistura é

V

agitada à temperatura ambiente durante 2Φ horas s trabalhada como se descreveu para o Exemplo de Referencia 8 parai dar N-CN-E ífenil-ms tox i) car bon i 1 ] -L-fen i 1 al an i 1 -D 5 L-2-etox ig I ic i 13 - í S) 2-amina·--4-metil-ÍR) í-<2~piridinil X-pentan-i-oI na forma de um sólido*

ExgíSSlfi_22 Ν;··ΐ:Ν·"ΐ (FenilmetoKi )carbonil j-L-feni lalanil- ~D'., D-2-"?'2r:meOTprbpoxi> g-Tic i 13- Γ512-ami'nD-“' :z'ó~cJxr[õ:~f^Wrr~TH) í—i2-pírícfinlll-ρεΗΈ1τ?:^--ο 1 A uma solução de 3,= 16 g de 2-hromopiridina em 2ô ml de tetra-hidrofurano seco arrefecida até -78 *C sob árgon foi adicionado ii„é ml de n-butil-lítio em tetra-hidrofurano <2Τ,Φ M> = Após agitação durante 5 minutos* foi adicionado 3 ? 14 g de NJ-t~ bu to x i. c a r bon i 1 -L-c ϊ 1 o—he κ i 1 a 1 an i nasi i d a de N—me to κ i ~U~~ me tilo em 2& ml de tetra-hidrofurano seco* A soluçlo escura foi agitada durante 1 hora a -78 °C e em seguida foi extinta com 2® mi de soluçlo saturada ds sulfato de sódio* A mistura foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e foi vertida em 5Θ ml de água» A mistura foi extractada com acetato ds etilo e os extractos foram secos CiMs^SO^)« 0 solvente foi removido sob vácuo e o resíduo foi cromatografado numa coluna de gel de sílica», com acetato de etilo s hexano Cisi) como solvente para dar 2»θί g de CS>~E í—íci-clo-hexíImetil)-2—οχο-2-ί2—piridinil)etilIcarbonato de 151—dime— tiletilo na forma de um óleop Zal~°Ti - *35 ° ±<c5 Φ58125 metanol )

Uma solução de l,,35 g do composto precedente em 30 ml ds tetra-hidrofurano seco sob árgon foi arrefecida até -78 °C s foi-lhe adicionado 735 ml de tri-sec-butilboro-hidreto de lítio

em tetra-hidrofurano (ί,β· H)» A mistura foi agitada durante 5 horas a -78 °C e durante 12 horas à temperatura ambiente» A mistura arrefecida <banho de gelo) foi extinta em água Í8 ml) e em seguida foi-lhe adicionado gota a gota 8 ml de peréxidc de hidrogénio a 3§ L A mistura foi extractada com acetato de etilo, os extractos foram secos CNa„80„> e o solvente foi removido sob .i. H· vácuo» 0 resíduo foi cromatografado numa coluna de gel de sílica com acetato de etilo s hexano (2x3) como solvente para dar ©,27 g de í S > —2 -1srt~fau tox icarboni1amina—3—c ic1o-hex i1 — (R >1 — (2—pirid i~ nill-propan-l-ol na forma de um sólido branco»

Uma amostra de 3,12 g foi recristalizada a partir de hexano para dar 1,52 g tíe cristais brancos., p..f» 68-69 °Cg C«:í2ôd - 4-9 * ± 1 o íc, 15®7, metanol)» A 2..26 g do composto precedente foi adicionado 3Ξ ml tíe ácido clorídrico 2 N em acetato de etilo» Após agitação durante a noite, foi adicionado 10 ml de ácido clorídrico 6 W= A solução doi agitada è temperatura ambiente durante 3 horas, concentrada, tornada básica com hidróxido de amónio concentrado s extractada com diclorometano» 0 extracto foi seca sobre carbonato de potássio e o solvente foi removido para dar 1,39 g de um óleo» Q óleo foi cristalizado a partir de éter diisopropí.lico para dar cristais que foram sublimados sob pressão reduzida para dar \S)--2-amino~3-ciclo-hexil-(R) l-í2-piridinil)-propan-I-ol na forma de cristais brancos, p = f. 57-59 °Cu = +ê ° ± 1 ° (c, 1,Θ45, metano1)» A uma solução de 1,® g de N—C (fenilmetoxi )carbon.il 3-L— -feni 1 a 1 an i 1 —D, L—2- (2~mst.i 1 propoxi ) g 1 icina C Exemp 1 o da Reisrfnc ia· 4) e 05o8 g de éster de etilo de àcidc 2-stoxi-l(2H>--quinolinQ~ carboxi1ico (EEDQ) em 25 ml de dielorometano é adicionado 2„33 -fflíisol ds CS)~2-amino-3~ciclo--hsxil~(R} l-C2~piridin±I)~propan--í-~Ql em 15 ml de diclorometano, A mistura é agitada durante 15 horas s o solvente é removido, 0 resíduo é trabalhado como se descreveu para o Exemplo de Refsrfncia 8 para dar o produto na forma de um sólido. Eírnsmls_23 W--l N~ L CFsni Imatoxi) carbon i 13 —L -f en .11 a 1 an i 1 -

1) yllc i 1 j -1S

~::X~cTcTo-frs;<í 1 -í K) í- (2-EierTITT-propàn-1 -~oT A activaçao ds N-C ( fenilmstoxi )carbonil 3-L-fenilalani 1--•-DL~2“ (2—meti 1 propox i) o 1 ic ina com N-N-c ar bon i 1 d i ímidazole como se descreveu no Exemplo Í8 s a reacçSo de <S) —2-aínino—3-ciclo-he-xil~íR}”l~í2”tiSRÍl >“propan-~l-ol em lugar de (S)2~amino—3—ciclo— •-hexil-(R) l-(2-tiazolil )-prapan-l-ol do Exemplo 18 deu o produto do Exemplo na forma de um sólido.

Exemplo 24 N-IIN-II (FsniImetoxi )carboni 1 3-L—fenilalanil-;r5Tt~2- (2-metirpropòxi JgTicxí J—CSD2-amTn •:’-3-c iclo-hêrn^TR) i- (2-f uráhlTT^rcIpan~Trõl A aetivação ds N-L<fenilmetaxi>carbonil3-L—feniIalanil— "B.?L“2-“(2-fnetilpropoxi iglicina com N-N-carbonildiimidazole como se descreveu no Exemplo 18 e a reacçSo ds C8)-2~aminο-3-cic 1 o-·hs-xil-(R}“l"(2-“furanil )-propan-l-ol em lugar ds íS)2-amincr-3-ci.c 1 o-· -hexil~(R>1—(2-tiazolil>—propan-l-oi do Exemplo 18 deu o produto do Exemplo na forma de um sólido-.

Exemplo 2a N—C(Fenilmetoxiksrbonil3 —L-fenilalanil— -D.. L~2“"i isoprõpTnfr^^

“3~cTETo^¥>:TT::TI?Tl^r2”TIerOriT~prc^ãrf-T-oI A aciivaçao de N~E<feniImetoxi>carboniI3-L-fenilÃlanil--D5L-2"í i-sapropil tloígl icina com N“N---carboniIdiimida2ols e a reacçso com < S)-2-amino-3—cic !ο-Ηβκϋ-(κ)~1- C2-tienil )-propan~i--ol da mesma mana ira que se descreveu para o Exemples 18 deu o produto do Exemplo na forma de um sólido» iM-lIN-C (Fenilmeioxi >carbonil 3-L-fenilalaniI--.0 5 L~2-Tísbprõpxl tio > g liei O^^STS^mirírF Fy-c ícTõ-Rix"II - CF: > í-^^fXtráfnTF^ropã^ 1 A activação de N-LÍfenilmetDS^Dcarbonilj-L-fsnilalanil--D5Lp-2-(iSQprQpiltio)gIicina com f^-Np-carboniltíiimidasols e a rsacçSo com (S)—2—amino~3—cic1o-hexi1 — <R> — i — C2-furani1>—propan-1-~ol da mesma maneira que se descreveu para o Exemples 18 deu o produto do Exemplo na forma de um sólido» N-- Γ. N- Γ. (Fen i 1 me t o x i) c a r bon 113 -LL—2— ···· Cisopropi 1 tio ) gl 'i c í i J^CWTT^iETnõ-'" -'4"-flíet.TT-· < R5 i-T2-tiaiοΓΓΓΡφθγΓΟΡγ- 1 ~o 1 A uma solução de ©3lo g de W-£(fenilmetoKi)carbonil3-L--fenilalanil-Dst.-2”-< isopropil tioíglicina em 5 snl ds diclorometano sota árgon foi adicionado 86,3 mg de éster de etilo de ácido 2-etoxi-l<2H)-quino!inocarboxílico íEEDQJ» Após agitação durante

15 minutos foi adicionada uma solução de <S>--2~amino-4-0!eti 1-~(R) i-<2-tiazoliI >~penfcan~Í~ol em 2 ml de diclorometano» A solução foi agitada durante a noite à temperatura ambiente e em seguida foi lavada com ácido clorídrico 3 N = bicarbonato de sódio a 16 %s água salgada e foi seca (sulfato de magnésio)» 0 solvente foi removido sob vácuo para dar g de uma espuma límpida» h cromatoqrsfia de camada fina sobre placas de gel de sílica com acetato de etilo ?. hexano < 1 s 1 > separou os dois diastereoisómeros N-l < fenilmetoxi )carbonil 3-L—fen i1a1an z1-D-2-- < isopropi I tio) g 1 ici 1- (S) -2-amino-4-meti 1 -- i ri) 1 - í 2-tíaso 1 i 1) -pen-tan-l-ol na forma de cristais, p=f = 163-164 °C e N-Cífenilmeto-x i} carboni 11-L-f eni lalani 1-L-2- ( isopropi 1 tio) g 1 ic i 1 - (S) -2-aínino--4--metil-(R) l-(2-tiazolil >-pentan-l-ol na forma de uma espuma límpida» N-CN-l(Fen i1metoxi)carbon i13-L-feni1a1an i1-2 -N'"íi~'d i me € i 1 am 1 n císcITt i o )g ll/cITT117-^γ^τ2:^&ϊηο-4::::;οθΈΙΙ—T’R) Í-í2-^Tazol iT' T-psfrEan-1 -o 1

Uma mistura de ®,5 g de N-t C fenilmetoxi Jcarbonil3-L—fe-n x 1 a I an i i - ii, L ~ 2- h i d r d x i g 1 i c ± n a e θ,.212 g de hidrocloreto de 2-dimetilaminoetanotiol em 6 ml de ácido acético seco sob ârqon foi agitada (vagarosamente)» A mistura foi adicionado 1 ml de ácido acético saturado com ácido clorídrico gasoso seco» A mistura espessa foi agitada à temperatura ambiente durante 2® horas (após 3 horas, os sólidos tinham-se dissolvido)» A mistura foi concentrada sob vácuo» Ao resíduo foi adicionado ácido acético seco e a mistura foi concentrada sob vácuo» Foram adicionados tolueno e etanol so resíduo e em seguida ateneu

Li U.(t? «J :::-0 i. Vtc-n I.S TOX I^^íHwVXÍÍQ b í“U.!. âdlLluHâdO 3 Leu iOi CjLUt? cdííl *:r0'GLiXOa TOX removido e o resíduo foi bombeado sob vácuo durante tres dias para dar β375 g de hid rociara ta de M~CífenilmstoMilcarhonilj-L-- f en i 1 a 1 sn i 1 —D, L—2— í 2—M » N—d i meti 1 am i noet i 11 í o) q 1 icina = c orno um òiao viscoso.

Uma amostra, de 1,,38 g do composto precedente foi purificada por cromatografia sobre uma coluna da gel da sílica com clorofórmio como eluente e em seguida com metanol / clorofórmio (is4) como eluenta» As fraeções que continham o produto foram combinadas e o solvente foi removido para dar @,57 g de sólido branca»

Uma amostra de @,4/ o do composto precedente foi dissolvida em 25 ml de M5N-dimetilformamída sob árgon, Â saluçlo foi adicionado @?154 g de N?N—carboniItíiimidasole e depois de agitação durante 2 horas foi adicionado ¢¢,19 q de <S}2~amino~4~ -metil-ÍK) 1—{2-tiazol il)-pentan -l-ola A iBXSture foi agi duran ts a noite e os so1vsntes t Ο rSIB I*“0ÍBOV 'ides sob alto vácuo 0 resíduo foi dissolvido em clorofórmio e a solução foi xavaoa luíTí uxudí oonaco de Souíq sacuraoo \ adicionada água de emu 1 sito e filtração da mistura para quebrar a stnulsSo) s em tilda lavada com água salgada (emulsão), A camada oi rglnics foi S55 O 'íàí:"3Q3 .5 seca sobi fj* f i j* <! τ* n O fcí cnaonssxo 0 o so1vsnte foi removi- dO para dar @?ó"o g d o p r od ix to do ir. κ ©mp 1 ο π a forma de um óleo de :or de bronze» 82

Exempla 29 iNr-íFenilnietDKicarbonAl )-L—f enilalanil-L-2'- C 5.-Ssií ‘1 étoκí )g' 1 ici I2-XWTI-SmxríS-“3-·: c i c .1 o” RS kí1~(R) 1 — í 2-· pi ;^Γ311τΓϊΤ-Ίρr õpan - i —o i e Kí-(FèniTmetoKicarBoniΪ >-L—fsní lalaníI— ^D-^TT-· 'm s"tTTs t o k"i)qlici I1 ηΈ-"’

“3“-c Ac íq-Rski X—"C1¾)' í:-(^r pTrI3TnTT7-propao-1 -ο I A uma lama de Θ53© g de M-HN--E CfsnilmeioKilcarbonil 3-L-“fenilalanil“D5L“2-< l-metiletoxi iqlicina em ίθ ml de diclarometa™ no foi adicionado ©=179 g de éster de stilo de ácido 2~stoKi“ -1Í2H) --quino linocarboKil ico (EEDQ) => Após agitação durante 3Θ minutos o sólido foi dissolvido e foi adicionado ©?169 g de CS}2~amincí~3~cielo~lieKil--íR) l-C2--piridinil)-propan-i-ol em 2 ml de diclorometano» A solução foi agitada durante 16 horas e em seguida foi lavada com bicarbonato de sódio a 1Θ % e água salgada e foi seca sobre sulfato de magnésio» 0 solvente foi removido para dar @ 5 52 g de uma espuma cor de bronce=

Orna amostra de 15Φ2 g da espuma precedente foi cromato— grafada sobre gel de sílica com acetato de stilo / diclarometano (4αώ) como solvente num instrumento Watera Prep 50Θ. As fracçSes que continham o diastereómera menos polar foram combinadas parai dar © :i 18 g tíe espuma branca.» As fracçSes que continham o d ias te— rsómero mais polar foram combinadas para dar ©„17 g de espuma branca»

Claims (1)

1. RbIVIMDICACQhSs lã»- Processo para a prspai fórmula (!) íd de um composto da Bo 0 l u Rc Rj-NH· h-Ah-c-n-Ah-c-n-Ah- i * i * Fórmul h“*t 3 sír que Kj é hidrogén 0 Lauil ‘ i 8 0 il i qui 0 enii~Cí 'H„ ’« —0C— „ .·· n naTtxl-<CrU> -UU~ uti íbííxí~L-~ unde n ê uír inteiro qu a n · até 4 ou as porçõess R..—L—prol i Io =:. R1-L—tioprol R.j~L~~mstionilo5 R.;-L-alaniIoP R1-L—fenilalanilo5 R., fSHS ri» ’s ‘1 -c. x 51 e i π x i. o j ti 1 L-histidilo ou R1-glicilo| 3-mdol i 2 )ou -CH.~,-nat í x__,.,τ ... n l Ιϋϋ etilo? R., á alquilo (U,~U-J * ^ 1 Q • < CH~) e / n ,·- * • t XteSi f X 1 ) 5 ou metzlc i sniinssLi lo ? (CH2)n“X“ cá J. Cj f n \ wC — ' ' 1 '-aJ 5 1 SSTs i fsnilo, i v/arii L-íS-bensil)- K.-5 ê fenxImstxiO;: iIo§ R^ é hidrogénio -imxdazol x I)5 lil-f C„-C-> Ί - osí * *** * 5 DU IFiSítl lo t R, é R1 0\ i i 1 D *' ô * * CCH^j)„“X-alquiIo (C1~C-5:) i· ã w >n r i . L.Z 4 4“ iclo-heKÍlo? -CH^CH^M-talí Ir í U .> ~C-.-í s R.-· i o> - d é hidn tí 1„ _ ^ -l __ _ Í>«S< i. U It L. J. Lm À L.’ “Hs? κ x 1 iTíí X i I π

   -ch2 X é “O- ou -S-s s Z ê —CH(OH)A onde A ê ou

   7 s 0 caracterizado por compreenders a aetivaçSo ds um composto ds fórmula Ko 0 XO i , ,, R1-NH-Íh-C-N-CH-C-OH com um reagente de acoplamento peptidso nLrT-~diciclo-heKi.lcarbo-diimida? N^N'-diciclo-hsxilcarbodiimida mais Wp-hidroxi-succini-midas N5jM'-diciclo-hexilcarbodiimida mais l-hidroxibenso-triaso-le? fosfato ds l-bsnsotriazolil™distilo5 l-cloro-N,.iN,2-trimstil— ~l-"propsn-Í--amina3 difsnilíosforiiazida5 dietilf osf oclcridato,, fc#sfocloridratos ds di-alquilo inferior(C.| -CQ) 3 fosfocloridato de difenilOj fosfocloridrato de f sni lo,, hexaf luorof os fato de benzo-· triazol ~l-"ilDKitr is Cdimeti lamino) fpsfónio5 M—etoKicarbonil-2—eto-xi~i j'2-di-hidroqLiinoIina. 3 cloreto de N_ajl' - b i. s l 2 - ο x α -- 3 -- o x a s o 1 i. d i - niljfosfodiamida» cloreto de difenilfosfiniloP cianeto de dieto— xifosforilo ou NqN-carbonildiimidacolei; cloroformato de isobutilo mais M~metiImorfolina* iodeto de 2~cloro-l-metilpiridíniD para dar um intermediário da fórmula K2 0 í 0 E -NH-Íh-C-N-Íh-C-E 1 * I * 3 (em que E é uma porção de actlvaçSo)5 a rsacçlo do intermediário a -1@°C até 25°C em tetra~h.idrofu.rano dioxano? rficlorometano., acetato de etilo ou Mjy-dimstilformamida5 com um composto l-amino-2-hidroxi da fórmula

   e?n que Y é hidrogénio ou um grupo de bloqueamento removível de triffietx Isi 1 i 1 o 3 t—buti Idimeti Isi 1 ilo s tetra—hidropirarsi Io 5 acetxlo ou fo-enzoi1o5 e quando Y é um grupo de proteeçSo a remoçSo do grupo de protecçlo hidroxilo» 2È-r.- Processo de acordo com a. reivindicação 1., carscte-rizatío por se preparar um composto da fórmulas

   R, . 4 e H-Z ,H2 ? * 0 K Γ “3 Hj-NH-CH-c-N-ili-n-H-i L* síh ous R_. ê hidroqénÍQ = n n u !! alquil (C , ~-u_) — L-— n slqui 1 íC-.. —L'_. 5—QC— = fsni I — {CH^l ϊ 8 1 fcs z 0 O D Qtie vsna oe Io5 R a-L-ser -Ui l 73 ! ,r CS—bens * i 1 naf til-ÍOL,) ~UL-~ ou fenil-C- onde π até 4 ou. as porçõess FL·; prol i lo, R. cisteinilo, K,-L~histidilo ou R.~glicilo| K-, é fersilmetilQ? * i. Λη tienil í3-indo1í1}CH„— uu -CH.-,-η metiIo§ Hã è alquiloíCj-Cg), — (CR-.) NH. i 1 :iio? R-, é hidroqénio N-ialquil- C C j ~c. ^)3,, ou — ou metiloj R;_ é alqui— CCH^) “X- Í i alqui lotCj-C-j CC1-L·) -X-alquiloCC.,~C_) ou

   R: 7 óu s · então X nas formulas também pode ser uma ligação simples? R-, ê hidrogénio., alquiloíC^C^Í e C0Rop R„ é F#i-,. 0H5 -O-alquilo- (C, -~C^} r. -NH-alquí loCC^ -0Λ) 5 -Nialquí lo(C1-CT) 3^ ou -nhch2 N

   e os asteriscos indicam átomos de carbono assimétrico. 3ãn~ Processo de acordo com a reivindicação 1 s 2 caracterisado por os «-aminoácidos terem a configuração L natural 4s„- Processo de acordo com a reivindicação i e 2 caractarisado por a unidade dipeptideo ou tripeptidso ter a configuração L, L ou L? L,, L= Processa de acorda com a reivindicação 1 e caractsríssdo por o grupo terminal C ser 2

   R.j é —C—0—alquilo(C^—Cp5 s — C—0—fenila ου — C—0—OH.™.,—nsf tilop R.._, é fenilmetilOj <3~indolII )CH0-“S (2-tisniI ou -CH^-naf tilop R-, é hidrogénios ê alquila (4-iinidazolil )CH^-5 ou -CH,CH,?!\|“Calquil í C1-C-^) Re- é hidrogénio § é alquilo (C^-Cp);, ciclo-hexilmetilo ou

   6ã«— Processo de acordo com a reivindicação 5s carscts-ricado por se preparar N-CM-Ctsrc-butoxiearbonil)-L-fenilalanil--•L- leuc i 13~ (B) 2~amino~3-c ic lo-hexi I - í R) i - í 2-f uran i 1) pen ts.n-1 -ol 7ên- Processa da acordo com a reivindicação 5? caracts-rizsdo por se preparar N—EN-C (fenilmetoxi ícarbonil 3-Lfen.ilala.nil~ “L-2-C 1-ffisfcilstoxi )glicil 3-íS)2-afnino-3-cicla~hsKil~(R) l~í2-piri-dinil) propan-l-ol Sâ»- Processo de acordo com a reivindicação 59 caracte-rlsado por se preparar f sni Imetoxi)carbonil sni lalani 1- -L-2-(isapropiltio)glicil3-(Sí2-aminD-3“CÍcla-hexil-<R) dasolil)propan—1—ol„ 9ã. - Processo de acordo com a reivindicação 4;; csracte-r:L zado por se preparar N-EN-l í2-metilpropil )carbonil j-L-fenilala-n iI-L-histidi 1 3 - í S >2-amino-3-c iclo~hexiI-(R)1-<2-tieni1)-propan— -1-01. i@i =,- Processo de acordo coís a reivindicação 4S carac-terisado por se preparar N-EN-C í2~i«etilpropil )carbonil3~L-tripto-f i1—L—histidilj — CB)2—amino—3—ciclo—hexi1— CR)1— C2~tienil>—propan--l-ol. Lisboa? v7 de Dezembro de 19BV

   i. PEREIRA DA CRUZ AgsfiíG Oficia! -fe Industriei BUA VICTGÍi CCÍÍD®N, 10-A, 1/ 1200 LISBOA