PT682030E

PT682030E - Derivados de 8-amino-10-(azabiciclo-alquil)-pirido¬1,2,3-d,e|-¬1,3,4|benzoxadiazina processo para a sua preparacao assim como agentes antibacterianos que contem estes compostos

Info

Publication number: PT682030E
Application number: PT95106400T
Authority: PT
Inventors: Thomas Schenke; Karl Georg Metzger; Rainer Endermann; Martin Scheer; Burkhard Mielke; Jaetsch Dr Thomas; Stegemann Dr Michael; Wetzstein Dr Heinz-Georg; Dieter Bremm Dr Klaus; Petersen Dr Uwe
Original assignee: Bayer Ag
Priority date: 1994-05-11
Filing date: 1995-04-28
Publication date: 2000-12-29
Also published as: RU95107150A; JPH0873468A; DE4416622A1; HUT71611A; AU689212B2; AU1633695A; IL113650A0; ES2148372T3; TW455589B; KR950032210A; NZ272081A; RU2138504C1; DE59508524D1; IL113650A; CN1042132C; HU219301B; US5679675A; EP0682030B1; ATE194351T1; CN1113243A

Description

DESCRIÇÃO

"DERIVADOS DE 8-AMINO-10-(AZABICICLOALQUIL)-PIRIDO(l,2,3-d,e|-[l,3,4]BENZOXADIAZINA, PROCESSO PARA A SUA PREPARAÇÃO, ASSIM COMO AGENTES ANTIBACTERIANOS QUE CONTÊM ESTES COMPOSTOS" A presente invenção refere-se a novos derivados de 8-amino-10-(azabicicloalquil)-pirido(l,2,3-d,e][l,3,4]benzoxadiazina, ao processo para a sua preparação, assim como a agentes antibacterianos que contêm estes compostos. Já se tinha conhecimento de que determinados ácidos pirido-benzoxadiazinocarboxílicos são eficazes como agentes antibacterianos. Encontram-se exemplos a este respeito nas Patentes EP-0 259 804, EP-O 343 524 e em European Journal of Medicinal Chemistry 26, 889 (1991). A presente invenção refere-se a: l.° Novos derivados de 8-amino-10-(azabicicloalquil)-pirido[l,2,3-d,e]-(l,3,4]benzoxadiazina, de fórmula geral (I)

2 2

na qual R1 representa hidrogénio ou Ci-C4-alquilo eventualmente substituído por hidroxi ou por halogéneo, R2 independentemente de R1 representa hidrogénio ou metilo, R3 representa hidrogénio ou Ci-C4-alquilo, R4 representa hidrogénio, alquilo com 1 a 4 átomos de carbono, eventualmente substituído por hidroxi, metoxi, amino, metilamino ou dimetilamino, ou representa (5-metil-2-oxo-l,3-dioxol-4-il)-metilo, X1 representa hidrogénio ou halogéneo, Z representa radicais com as estruturas

em que R7 representa hidrogénio, hidroxi, -NR10RU, hidroximetilo, -CH2--NR10Rn, carboxilo, metoxicarbonilo ou etoxicarbonilo, em que R10 representa hidrogénio, Ci-C3-alquilo eventualmente substituído por hidroxi, representa alcoxicarbonilo com 1 a 4 átomos de carbono na parte alcoxi, ou Ci-C3-acilo,

Ru representa hidrogénio ou metilo, R8 representa hidrogénio, Ci-C3-alquilo de cadeia linear ou ramificada, ou ciclopropilo, R9 representa hidrogénio ou metilo, R6 representa hidrogénio ou metilo, R5 representa hidrogénio, metiio, ou radicais de estruturas -CH^CH-C02R5', -CH2-CH2-CO2R5', -CH2-CO-CH3, -CH2-CH2-CN, R5' representa metiio ou etilo, B representa -CH2-, O ou uma ligação directa.

Os compostos de fórmula (I) podem ocorrer na forma de racematos ou como compostos enantiomericamente puros, assim como na forma dos seus hidratos e sais de adição de ácido farmaceuticamente utilizáveis, bem como na forma dos seus sais alcalinos, alcalinoterrosos, de prata ou de guanidínio.

Processo para a preparação de l.° novos derivados de 8-amino-10-(azabicicloalquil)-pirido(l,2,3-d,e]-[l,3,4]benzoxadiazina, de fórmula geral (I)

NH2 O

R1 representa hidrogénio ou Ci-C4-alquilo eventualmente substituído por hidroxi ou por halogéneo, R2 independentemente de R1 representa hidrogénio ou metiio, R3 representa hidrogénio ou Ci-C4-alquilo, R4 representa hidrogénio, alquilo com 1 a 4 átomos de carbono, eventualmente substituído por hidroxi, . metoxi, amino, metilamino ou dimetilamino, ou representa (5-metil-2-oxo-l,3-dioxoi-4 - il) - me tilo, X1 representa hidrogénio ou halogéneo, 4

em que R7 representa hidrogénio, hidroxi, -NR10Rn, hidroximetilo, -CH2--NR10RU, carboxilo, metoxicarbonilo ou etoxicarbonilo, em que R10 representa hidrogénio, Ci-C3-alquilo eventualmente substituído por hidroxi, representa alcoxicarbomlo com 1 a 4 átomos de carbono na parte alcoxi, ou Ci-C3~acilo,

Ru representa hidrogénio ou metilo, R8 representa hidrogénio, Ci-C3-alquilo de cadeia linear ou ramificada, ou ciclopropilo, R9 representa hidrogénio ou metilo, R6 representa hidrogénio ou metilo, R5 representa hidrogénio, metilo, ou radicais de estruturas -CH=CH-C02R5', -CH2-CH2-CO2R5', -CH2-CO-CH3, -CH2-CH2-CN, R5' representa metilo ou etilo, B representa -CH2-, O ou uma ligação directa, caracterizado pelo facto de se fazerem reagir compostos de fórmula

(II) (II). na qual R1, R2, R3, R4 e X1 têm os significados acima indicados, e X2 representa halogéneo, em especial flúor ou cloro, com compostos de fórmula (III)

Z-H (ΠΙ), na qual Z tem o significado acima indicado, eventualmente na presença de meios de fixação de ácidos. 3.° Compostos de fórmula (II)

(II). na qual R1, R2, R3, R4 e X1 têm os significados acima indicados, e X2 representa halogéneo. 4.° Processo para a preparação de compostos de fórmula (II), caracterizado pelo facto de se fazerem reagir compostos de fórmula (IV)

COOR4 (iv), 6

na qual R1, R2, R3, R4, X1 e X2 têm os significados indicados no ponto 3, com reagentes de nitriflcação, e em seguida se reduzirem os compostos de nitro obtidos.

Os compostos de acordo com a invenção, em comparação com representantes conhecidos deste tipo de estrutura, possuem uma acção antibacteriana mais pronunciada, em especial no campo gram-positivo. Prestam-se, por conseguinte, como substâncias activas para a medicina humana e veterinária. São preferidos os compostos de fórmula (I), na qual R1 representa hidrogénio ou Ci-C3-alquilo eventualmente substituído por hidroxi, R2 independentemente de R1 representa hidrogénio ou metilo, R3 representa hidrogénio, metilo ou etilo, R4 representa hidrogénio, alquilo com 1 a 4 átomos de carbono, eventualmente substituído por hidroxi, metoxi, amino, metilamino ou dimetilamino, ou representa (5-metil-2-oxo-l,3-dioxol-4-il)-metilo, X1 representa hidrogénio, flúor ou cloro, Z representa radicais com as estruturas

em que R7 representa hidrogénio, hidroxi, -NR10RU, hidroximetilo ou -CH2--NR10RU, em que R10 representa hidrogénio,

Ci-C2-alquilo eventualmente substituído por hidroxi, representa alcoxicarbonilo com 1 a 4 átomos de carbono na parte alcoxi, ou Ci-C3-acilo, R11 representa hidrogénio ou metilo,

R8 R9 R5 R6 B representa hidrogénio, Ci-C3-alquilo de cadeia linear ou ramificada, ou ciclopropilo, representa hidrogénio ou metilo, representa hidrogénio ou metilo, representa hidrogénio, representa -CH2-, O ou uma ligação directa e os seus hidratos e sais de adição de ácido farmaceuticamente utilizáveis, assim como os seus sais alcalinos, alcalinoterrosos, de prata e de guanidínio. São especialmente preferidos os compostos de fórmula (I), em que R1 representa hidrogénio ou metilo, R2 representa hidrogénio, R3 representa metilo ou etilo, R4 representa hidrogénio, metilo ou etilo, X1 representa flúor, Z representa radicais com as estruturas

R7 representa hidrogénio, hidroxi, -NR10RU, hidroximetilo ou -CH2--NR10RU, em que R10 representa hidrogénio, metilo, alcoxicarbonilo com 1 a 4 átomos de carbono na parte alcoxi, ou Ci-C3-acilo, R11 representa hidrogénio ou metilo, R8 representa hidrogénio, Çi-C3-alquilo de cadeia linear ou ramificada, ou ciclopropilo, R6 representa hidrogénio, R9 representa hidrogénio ou metilo, R5 representa hidrogénio ou metilo, B representa -CH2-, O ou uma ligação directa e os seus hidratos e sais de adição de ácido farmaceuticamente utilizáveis, assim como os seus sais alcalinos, alcalinoterrosos, de prata e de guanidínio. 9

Em particular citam-se os seguintes compostos de fórmula (I):

X NHL O

FT COOR4 (I).

R1 R3 R4 Z X H Me H ch3 1 De- F H Me H ch3 1 r/N\r^\ I N_ F H Me H çh3 CCn- F H Me Et ó> F

Continuação

(D,

R1 R3 R4 Ζ χ; Η Η etilo [Γ ΝΗ- Ν— 2 F Η Η Η' <1 σ> ζ: 1 F . Η Η Η 0 3Ν- jh2 F ch3 Η etilo ÇCN~ νη2 F Η Η -CH2-CH2-NH2 Q νη2 Cn- F

Continuação

R1 R3 R4 Z X H H -CH2-CH2-OCH3 1 NH. N— 1 F ch3 H H “Xc- nh2 F ch3 ch3 H f N— h2 F H ch3 etiio çc- nh2 F H ch3 -ch2-ch2-nh2 Q nh2 ^N— F (I). Continuação

(I).

Continuação

R1 R3 R4 Z X H Me H Me^ z: 1 F H Me H ( z SIH- k L 2 ^N— F H Me H ch2nh2 ò> F H Et H NHCH, Ó> F- Me Me H Nht Ó ^N- F

Continuação

(D, R1 R3 R4 Z X CH2OH Me H NH 1 F c N— H Me H . nh2 F C O H Me H nhch3 F CS N— H Me H NHC2H5 F 0 ^N— H Me H N(CH3)2 F 0 ^N— 16 (

S· continuação

(l).

R1 R3 R4 Z X H Me H CH2NH2 ôo F H Me H CH Ó 2NHCH3 Cn- F H Me H nh2 F H Me H nh2 φ> CH3 F H Me H NH «à c 2 ;h3 F

17

Continuação

(I).

18 continuação

(I).

19 r

Continuação

d).

R1 R3 R4 Z X H Et H NH ch3 N— F ’ H 'Me 'Et nh2 · ÔCN“ F H Me Et NH( Ó -h3 N— F 1' 20

Se se utilizarem, para a preparação dos compostos de fórmula (I), por exemplo, ácido 8-amino-9,10-difluor-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H- pirido-[l,2,3-d,e][l,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico e 2,8- diazabiciclo(4.3.0]-nonano, pode-se representar a marcha da reacção pela seguinte equação química:

COOH

H

NH

Os compostos de fórmula (II) utilizados como compostos de partida são novos. Podem ser preparados fazendo-se reagir compostos

COOR de fórmula (IV) (IV) R R‘ na qual R1, R2, R3, R4, X1 e X2 têm os significados indicados no ponto 3, com reagentes de nitrificação, como ácido azótico e nitratos, num dissolvente como por exemplo, água, ácido sulfúrico, ácido acético, acetanidrido ou as suas misturas, a -50°C até 200°C, de preferência a -20 até 100°C, e em seguida reduzindo-se os compostos de nitro obtidos.

Para a redução do grupo nitro podem ser utilizados hidretos metálicos, metais de transição e sais de metais de transição, sendo utilizado de preferência hidrogénio na presença de catalisadores, como por exemplo, paládio sobre carvão, níquel de Raney e platina. Como dissolventes podem ser utilizados, por exemplo, água, ácido clorídrico, álcoois, ácido acético ou também as suas misturas. 21

Os compostos de fórmula (II) podem também ser preparados de acordo com seguinte esquema reactivo, no qual R1, R1, R3, R4, X1 e X1 têm os significados indicados acima:

2) Base

H2/ cat ▼

COOH eventualmente I) activações (II) 1

R4-OH

Podem eventualmente ser utilizados como racematos, enantiómeros ou diastereómeros puros.

Como exemplos citam-se: ácido 8-amino-9,10-difluor-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido[ 1,2,3-d,e]-( 1,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico ácido 8-amino-9,10-difluor-2,3-dimetil-7-oxo-2,3-dihidro-7H- pirido[l,2,3-d,e][l,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico ácido 8-amino-9,10-difluor-2-(hidroximetil)-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro- 7H-pirido[l,2,3-d,e][l,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico ácido 8-amino-9,10-difluor-3-etil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido[l,2,3- d,e]-[l,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico 8-amino-9,10-difluor-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido[l,2,3-d,e][l,3,4]-benzoxadiazino-6-carboxilato de etilo.

As aminas de fórmula (III) utilizadas como compostos de partida são conhecidas. As aminas quirálicas podem ser utilizadas tanto como racematos, como também como compostos enantiomericamente ou diastereomericamente puros.

Como exemplos citam-se: 2.7- diazabiciclo[3.3.0]octano 2 -metil-2,7-diazabiciclo [3.3.0] octano 2.8- diazabiciclo[4.3.Ojnonano 2-metil-2,8-diazabiciclo[4.3. Ojnonano 2-oxa-5,8-diazabiciclo[4.3.0]nonano 5-metil-2-oxa-5,8-diazabiciclo[4.3. Ojnonano 2-amino-8-azabiciclo[4.3.0]nona-3-eno 2-metilamino-8-azabiciclo[4.3.0]nona-3-eno 4- metil-2-metilamino-8-azabiciclo[4.3.0]nona-3-eno 5- metil-2-metilamino-8-azabiciclo[4.3.0]nona-3-eno 2-dimetilamino-8-azabiciclo[4.3.0]nona-3-eno 2-etilamino-8-azabiciclo[4.3.0]nona-3-eno 2-metilaminometil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-3-eno 2 -hidroxi-8-azabiciclo [4.3.0]nona-3 -eno 5-isopropil-2-metilamino-8-azabiciclo[4.3.0]nona-3-eno 2-amino-5-isopropil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-3-eno 2-amino-5-metil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-3-eno 2-hidroximetil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-3-eno 2-amino-5-ciclopropil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-3-eno 8-azabiciclo[4.3.0]nona-2-eno 8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno-2-carboxilato de etilo 2-hidroximetil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 2-amino-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 2-etiloxicarbonilamino-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 2-t-butiloxicarbonilamino-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 2-benziloxicarbonilamino-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 2-aliloxicarbonilaminometil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 2-aminometil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 2-etiloxicarbonilaminometil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 2-t-butiloxicarbonilaminometil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 2-metilamino-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 2-etilamino-8-azabiciclo [4.3.0]nona-4-eno 2-ciclopropilamino-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 2-dimetilamino-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 2-[(2-hidroxietil)-amino]-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 2-amino-l-metil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 2-amino-2-metil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 24 • ! 2-amino-3-metil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 2-etiloxicarbonilamino-3-metil-8-azabiciclo(4.3.0]nona-4-eno 2-t-butiloxicarbonilamino-3-metil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 2-benziloxicarbonilamino-3-metil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 2-aliloxicarbomilamino-3-metil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 2-amino-4-metil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 2-amino-5-metil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 2-amino-6-metil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 2-amino-7-metil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 2-amino-9-metil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno.

Os 8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-enos e os 8-azabiciclo[4.3.0]nona-2-enos substituídos são objecto de um Pedido de Patente Alemã da Requerente, DE-P 4 230 804.6, que ainda não pertence ao estado da técnica.

Os compostos de fórmula geral (IV)

7 R

na qual R7, R8 e R9 têm os significados indicados acima, (IV) são obtidos fazendo-se reagir dienos apropriados com dienófilos apropriados numa reacção de Diels-Adler, que pode ser realizada por via intermolecular ou por via intramolecular, e eventualmente realizando-se em seguida outras reacções químicas para eventualmente se construir o anel pirrolidino e para se introduzirem os substituintes pretendidos para as acções biológicas, e como último passo dissociando-se o grupo de bloqueio no átomo de azoto do anel pirrolidino.

Na realização da reacção de Diels-Adler de forma intramolecular fazem-se reagir compostos de fórmula (1) ou (2)

nas quais R8 e R9 têm os significados indicados acima, e P representa um grupo de bloqueio (por exemplo, alilo, acilo, carbamoilo ou tritilo), Z representa hidrogénio, um grupo carboxilo, éster carboxílico ou carbonamida, CN ou NO2,

aos compostos de fórmula (3) [partindo-se de (1)] ou (4) [partindo-se de (2)] Z Z

nas quais R8, R9, P e Z têm os significados acima indicados. São parcialmente conhecidas reacções intramoleculares de Diels-Adler de natureza semelhante: J.M. Mellor, A.M. Wagland; J. Chem. Soc. Perkin I, 997-1005 (1989); W.R. Roush, S.E. Hall; J. Am. Chem. Soc. 103, 5200 (1980); E. Ciganek; Organic Reactions 32, 1-374 (1984). Nestes trabalhos faltam, no entanto, indicações sobre grupos de 26 bloqueio que, simultaneamente, sejam apropriados para a reacção e sejam em seguida dissociáveis sem problemas.

No caso da realização da reacção de Diels-Adler por via intermolecular fazem-se reagir dienos de fórmula (5) com dienófilos de fórmula (6) aos compostos de fórmula (7), e, eventualmente depois da modificação dos grupos Z1 e Z2, por exemplo, a transformação de um anidrido de um ácido carboxílico cíclico num diéster, com dissociação dos grupos de bloqueio P1 ou P1 e P2, faz-se reagir aos lactames de fórmula (8) mediante ciclização.

Nas fórmulas (5), (6), (7) e (8) R8 e R9 têm os significados citados acima, P1 representa um grupo de bloqueio acilo ou carbamoilo, se P2 representar hidrogénio, ou P1 em conjunto com P2 forma uma imida, Z1 e Z2 representam hidrogénio, grupos carboxilo, éster de ácido carboxílico ou carbonamida, CN ou NO2, em que pelo menos um dos dois grupos Z1 ou Z2 tem que ser um^grupo éster de ácido carboxílico ou um grupo carbonamida ou CN, ou Z1 e Z2 em conjunto formam uma ponte, de modo que se forme um anidrido de ácido carboxílico cíclico.

Os grupos de bloqueio P, P1, P2 preferidos são os grupos de bloqueio nos quais, nas condições que são empregues para a sua dissociação, tem lugar a ciclização ao lactame e eventualmente uma esterificação de uma segunda função carboxilo, ainda livre, com o álcool utilizado como dissolvente, de tal modo que todos os passos da reacção possam ser realizados numa reacção com todos os reagentes presentes, e não tenha lugar uma transformação descontrolada das substâncias de partida, eventualmente enantiomerica ou diastereomericamente puras, em misturas de isómeros não separáveis ou apenas dificilmente separáveis.

Como exemplos citam-se: lz. o grupo de bloqueio t-butiloxicarbonilo (dissociação com ácidos aquosos ou alcoólicos) 2z. o grupo de bloqueio ftalimido (aminólise com aminas primárias em álcoois aquosos ou anidros como dissolvente)

Xylol, 20 h refluxo CHCI3, 15 h temperatura ambiente

N CH, O Λ cis:trans «1:1 ho2ç h

28rac. f produto princp h5c2o2c j_j al

h5c2o2c h

H

N-P

29

/ t fcs.·.

15 h temperatura ambiente l

tolueno --—--► 2 d refluxo

ETOH 15 h temperatura ambiente A:B « 1:1

+

H5C202C

H rac.

H rac. 30

Para a reacção de Diels-Adler interessam como diluentes todós os dissolventes orgânicos inertes. A estes pertencem de preferência éteres, como o éter diisopropílico, éter di-n-butílico, dimetoxietano, tetrahidro-furano e anisol, hidrocarbonetos, como por exemplo, hexano, metilciclo-hexano, tolueno, xileno e mesitileno, e hidrocarbonetos halogenados, como por exemplo, clorofórmio, 1,2-dicloroetano. e clorobenzeno. A reacção de Diels-Adler pode, no entanto, ser também realizada sem dissolvente.

As temperaturas da reacção podem variar dentro de um grande intervalo. Em geral trabalha-se entre cerca de -20°C e +200°C, de preferência entre -20°C e +150°C. A reacção de Diels-Adler é normalmente realizada à pressão normal. No entanto, para aceleração da reacção podem também ser utilizadas pressões até 1,5 GPa. A reacção posterior dos compostos de fórmula (7) aos compostos de fórmula (8) é realizada tal como é descrita nos exemplos, ou de acordo com métodos conhecidos da química orgânica.

Para que, partindo-se dos compostos de fórmulas (3), (4) ou (8), se chegue aos compostos de fórmula (III), são necessárias outras reacções.

Citam-se, a título de exemplos, a hidrólise de um éster ao ácido carboxílico, a redução de grupos carbonilo, por exemplo, de ésteres, a aldeídos ou a álcoois, ou de grupos lactame às pirrolidinas, a transformação de uma função hidroxi numa função amino, a transformação de uma função carboxilo ou de um seu derivado, por degradação num átomo de carbono, numa função amina, a aminação por via redutiva de um aldeído com uma função amino existente na molécula, a aminação por via redutiva de uma função aldeído existente s na molécula com uma amina, a introdução de grupos de bloqueio,· a dissociação de grupos de bloqueio no átomo de azoto de pirrolidina, de tal modo que outros grupos de bloqueio eventual-mente existentes na molécula permaneçam inalterados.

Estas reacções são realizadas como será descrito nos exemplos, ou de acordo com métodos correntes na química orgânica.

As reacções posteriores dos compostos de fórmulas (3), (4) ou (8) aos compostos de fórmula (III) podem ser elucidadas, por exemplo, através das seguintes equações químicas:

ch3

KOH --ch3 -► ch3oh/h2o ch3

rac. 32 Ο h5c2o 1. C2H5OCOCI/NEt3 2. NaN3 .— -►

3. Δ, EtOH

Ο

NH rac.

rac. rac. -"V '· /.λ r^5HOH2C Ξ Η Ο ΗΟΗΧ ξ Η

Boc^O

Ν 0- Η CH, -CH, CH, rac. Ο

Ο Ν Ο CH, Χ Η, CH, rac. Ο Λ H5C20 ΝΗ-ΗΧ 1. NaN, Ο 2· PPh, (+) = Η

Ν Ο- Η CH, -CH, 3. Η20/Η 4. C2H5OCOCI/NEt3 rac. CH, ΟΛ.

HCI H5C2° NH-H,C= Η

As substâncias de partida de fórmulas (1), (2), (5) e (6) são conhecidas ou podem ser preparadas de harmonia com métodos conhecidos da química orgânica. A reacção de compostos de fórmula (II) com compostos de fórmula (III), na qual os compostos de fórmula (III) também podem ser utilizados na forma dos seus sais, como por exemplo, dos cloridratos, é realizada de preferência num diluente, como sulfóxido de dimetilo, N,N-dimetil- 34

formamida, N-metilpirrolidona, tris-amida de ácido hexametil-fosfórico, sulfolano, acetonitrilo, água, de um álcool como metanol, etanol, n-propanol, isopropanol, éter glicolmonometílico ou piridina. Podem ser igual-mente utilizadas misturas destes diluentes.

Como agentes de ligação de ácidos podem ser utilizados todos os agentes de fixação de ácidos, orgânicos e inorgânicos, correntes. A estes pertencem, de preferência, os hidróxidos alcalinos, carbonatos alcalinos, aminas orgânicas e amidinas. Citam-se em particular como especialmente apropriados: trietilamina, l,4-diazabiciclo[2.2.2]octano (DABCO), l,8-diaza-biciclo[5.4.0]undeca-7-eno (DBU) ou um excesso da amina (III).

As temperaturas da reacção podem oscilar dentro de um grande intervalo. Em geral trabalha-se entre cerca de 20 e 200°C, de preferência entre 80 e 180°C. A reacção pode ser realizada à pressão normal, mas também a uma pressão mais elevada. Em geral trabalha-se a pressões entre 1 bar e 100 bar, de preferência entre 1 e 10 bar.

Na realização do processo de acordo com a invenção utilizam-se, para 1 mol do composto (II), 1 a 15 moles, de preferência 1 a 6 moles, do composto (III).

Os grupos amino livres podem, durante a reacção, ser protegidos por um grupo de bloqueio de amino apropriado, por exemplo, pelo radical t-butoxicarbonilo, e depois do termo da reacção podem de novo ser postos na forma livre por tratamento com um ácido apropriado, como ácido clorídrico ou ácido trifluoracético (ver Houben-Weyl, 35 35

Methoden der Organischen Chemie, Vol. E4, página 144 (1983); J.F.W. Mc Omie, Protective Groups in Organic Chemistry (1973), página 43).

Os ésteres de acordo com a invenção são obtidos por reacção de um sal alcalino do ácido carboxílico de que derivam, que pode eventualmente estar protegido no átomo de azoto por um grupo de bloqueio, como o radical t-butoxicarbonilo, com derivados apropriados de halogenoalquilo num dissolvente como dimetilformamida, dimetilacetamida, N-metilpirrolidona, sulfóxido de dimetilo ou tetrametilureia, a temperaturas de cerca de 0 até 100°C, de preferência a 0 até 50°C. A preparação dos sais de adição de ácido dos compostos de acordo com a invenção é realizada de forma habitual, por exemplo, por dissolução da betaína numa quantidade suficiente de ácido aquoso e a precipitação do sal com um dissolvente orgânico miscível com água, como metanol, etanol, acetona, ou acetonitrilo. Pode-se também aquecer quantidades equivalentes da betaína e de ácido em água ou num álcool, como o éter glicolmonoetílico, e em seguida evaporar até à secura ou separar, por filtração, o sal precipitado. Como sais farmaceuticamente utilizáveis entendem-se, por exemplo, os sais dos ácidos clorídrico, sulfúrico, acético, glicólico, láctico, succínico, cítrico, tartárico, metanossulfónico, 4-toluenossulfónico, galacto-urónico, glucónico, embónico, glutamínico ou aspárgico. Além disso, os compostos de acordo com a invenção também podem ser fixados a permutadores de iões ácidos ou básicos.

Os sais dos metais alcalinos ou alcalino terrosos dos ácidos carboxílicos de acordo com a invenção são obtidos, por exemplo, por dissolução da betaína numa quantidade, por defeito, de hidróxidos de metais alcalinos ou alcalinoterrosos, filtração da betaína não dissolvida e evaporação do filtrado até à secura. São farmaceuticamente apropriados os sais de sódio, de potássio ou de cálcio. Por reacção de um sal alcalino ou alcalinoterroso apropriado com um sal de prata apropriado, como por exemplo, o nitrato de prata, são obtidos os correspondentes sais de prata.

Os compostos de acordo com a invenção possuem uma forte acção antibiótica e, a par de uma baixa toxicidade, exibem um amplo espectro antibacteriano contra gérmens gram-positivos e gram-negativos, em especial também contra aqueles que são resistentes a diversos antibióticos, como por exemplo, penicilina, cafalosporinas, aminoglicósidos, sulfona-midas, ou tetraciclina.

Estas importantes propriedades possibilitam a sua utilização como meios quimioterapêuticos na medicina humana e veterinária, assim como como substâncias para a conservação de materiais orgânicos e inorgânicos, em especial de materiais orgânicos de todos os tipos, por exemplo, polímeros, lubrificantes, tintas, fibras, couro, papel e madeira, de produtos alimentares e de água.

Os compostos de acordo com a invenção são eficazes contra um espectro muito vasto de microorganismos. Com o seu auxílio podem ser combatidas bactérias e microorganismos de tipo bacteriano, tanto gram-positivos como gram-negativos, bem como podem ser evitadas, melhoradas e/ou curadas as doenças causadas por estes bacilos.

Os compostos de acordo com a invenção distinguem-se por uma acção reforçada sobre gérmens passivos e resistentes. No caso de bactérias passivas, por conseguinte, de bactérias que não apresentam 37 qualquer crescimento apreciável, os compostos são eficazes com concentrações inferiores às de substâncias semelhantes. Isto refere-se não só à quantidade a utilizar, mas também à velocidade da exterminação. Estes resultados puderam ser observados no caso de bactérias gram-positivas e gram-negativas, em particular em Staphylococcus aureus, Acinetobacter, Micrococcus luteus e Enterococcus faecalis.

Os compostos de acordo com a invenção exibem igualmente um excelente reforço da acção contra bactérias que são consideradas como pouco sensíveis em relação a substâncias comparáveis, em especial Staphylococcus aureus e Enterococcus faecalis resistentes.

Os compostos de acordo com a invenção são especialmente eficazes contra bactérias e microorganismos de tipo bacteriano. Por conseguinte, são especialmente apropriados para a profilaxia e a quimioterapia de infecções locais e sistémicas, na medicina humana e veterinária, que sejam causadas por estes bacilos.

Os compostos prestam-se ainda para o combate de protozoonoses e de helmintoses.

As substâncias activas, com uma toxicidade favorável para os animais de sangue quente, prestam-se de preferência para o combate de doenças bacterianas que ocorrem na manutenção e na criação de animais, nos casos de animais de produção, animais de criação, animais de jardins zoológicos, animais de laboratório, animais para investigação e animais de companhia. São eficazes, nestas circunstâncias, contra todos ou alguns dos estádios de desenvolvimento, assim como contra estirpes resistentes e normalmente 38

sensíveis. Através do combate das doenças bacterianas deverão ser evitadas as doenças, os casos mortais e as perdas de rendimento (por exemplo, na produção de carne, leite, lã, peles, ovos, mel, etc.), de tal modo que, através da utilização das substâncias activas, seja possível uma manutenção mais económica e mais fácil dos animais.

Aos animais de produção e de criação pertencem mamíferos, como por exemplo, vacas, cavalos, ovelhas, porcos, cabras, camelos, búfalos, burros, coelhos, caça, renas, animais que fornecem peles, como por exemplo, marta, chinchila, coati, aves, como por exemplo, galinhas, gansos, perus, patos, pombos, aves para a criação doméstica e em jardim zoológico. Pertencem ainda a este grupo peixes de produção e ornamentais.

Aos animais de laboratório e investigação pertencem ratos, ratazanas, cobaias, hamster dourados, cães e gatos.

Aos animais de companhia pertencem cães e gatos.

Aos peixes pertencem peixes de produção, de criação, de aquário e ornamentais de todas as idades, que vivam em água doce e salgada. Entre os peixes de produção e criação contam-se, por exemplo, carpas, enguias, trutas,, alburnete, salmão, sargo, ruivo, linguado, solha, hipoglosso, "japanese yelloivtail' (Seriola quinqueradiata), enguia japonesa (Anguilla japonica), pargo vermelho (Pagurus major), perca do mar (Dicentrarchus labrax), tainha (Mugilus cephalus), pampo, dourada (Sparus auratus), Tilapia spp., espécies Chichlide, como por exemplo, Plagioscion, ou bagre. Os meios de acordo com a invenção são especialmente apropriados para o tratamento de peixe miúdo, por exemplo, de carpas com 2 a 4 cm de comprimento. Estes meios sao ainda bastante apropriados também na engorda da enguia. A utilização pode ser realizada tanto com fins profiláticos como também com fins terapêuticos. A utilização das substâncias activas é realizada directamente ou por via entérica, parentérica, cutânea ou nasal, na forma de composições apropriadas. A utilização entérica das substâncias activas é efectuada, por exemplo, oralmente, na forma de pôs, supositórios, comprimidos, cápsulas, pastas, bebidas, granulados, pastilhas, esférulas, alimentos medicádos ou água de beber. A aplicação cutânea é efectuada, por exemplo, na forma de imersão (mergulho), pulverização ("sprays"), banhos, lavagens, aplicação localizada ("pour-on" e "spot-on") e polvilhamento. A aplicação parentérica é efectuada, por exemplo, na forma de injecção (intramuscular, subcutânea, intravenosa, intraperitoneal) ou por implantes.

As composições apropriadas são: soluções, tais como soluções para injecções, soluções orais, concentrados para administração oral após diluição, soluções para aplicação sobre a pele ou nas cavidades corporais, formulações de infusão, ou geles; emulsões e suspensões para utilização oral ou cutânea, assim como para injecção; composições pastosas; formulações nas quais a substância activa é incorporada numa base de pomada ou numa base de emulsão óleo-em-água ou água-em-óleo;

composições sólidas, como pós, pré-misturas ou concentrados, granulados, grânulos, pastilhas, esférulas, cápsulas; aerossóis e inalados, e corpos moldados contendo substâncias activas.

As soluções para injecção são administradas por via intravenosa, intramuscular e subcutânea.

As soluções para injecção são preparadas dissolvendo-se a substância activa num dissolvente apropriado e adicionando-se eventualmente aditivos, tais como promotores de dissolução, ácidos, bases, sais tampão, antioxidantes, ou conservantes. As soluções são esterilizadas por filtração e embaladas.

Citam-se como dissolventes: dissolventes fisiologicamente aceitáveis, como água, álcoois como etanol, butanol, álcool benzílico, glicerina, hidrocarbonetos, propilenoglicol, polietilenoglicois, N-metil-pirrolidona, assim como misturas dos mesmos.

As substâncias activas podem eventualmente ser também dissolvidas em óleos vegetais ou sintéticos fisiologicamente aceitáveis, que sejam apropriados para injecção.

Como promotores de dissolução mencionam-se: dissolventes que promovem a dissolução da substância activa no dissolvente principal, ou que impedem a sua precipitação. Os exemplos são polivinilpirrolidona, óleo de rícino polioxietilado, ou éster de sorbitano polioxietilado.

Os conservantes são: álcool benzílico, triclorobutanol, p-hidroxi-benzoatos, ou n-butanol. 41

As soluções orais são empregues directamente. Os concentrados são empregues por via oral, após uma diluição prévia até à concentração de utilização. As soluções orais e os concentrados são preparados como foi descrito acima no caso das soluções para injecção, podendo prescindir-se de trabalhar em condições de esterilização.

As soluções para aplicação sobre a pele são aplicadas gota a gota, pinceladas, friccionadas, vertidas, pulverizadas, ou ainda aplicadas por imersão (mergulho), banho ou lavagem. Estas soluções são preparadas como foi descrito acima no caso das soluções para injecção.

Pode ser vantajoso, na preparação, adicionar espessantes. São espessantes: espessantes inorgânicos, como bentonite, sílica coloidal, monoestearato de alumínio, espessantes orgânicos como derivados de celulose, álcool polivinílico e os seus copolímeros, acrilatos e metacrilatos.

Os geles são aplicados sobre a pele ou friccionados, ou aplicados nas cavidades corporais. Os geles são preparados misturando-se soluções, que tenham sido preparadas como foi descrito no caso das soluções para injecção, com uma quantidade de espessante tal que se obtenha uma massa clara com a consistência de uma pomada. São utilizados como espessantes os espessantes já indicados acima.

As formulações para deitar sobre a pele são vertidas ou pulverizadas sobre áreas limitadas da pele, verificando-se que a substância activa ou atravessa a pele e actua sistemicamente, ou se espalha sobre a superfície do corpo. 42

As formulações para deitar sobre a pele são preparadas dissolvendo-se, pondo-se em suspensão ou emulsionando-se a substância activa em dissolventes ou misturas de dissolventes apropriados, inócuos para a pele. São eventualmente adicionadas outras substâncias auxiliares, como corantes, substâncias que promovem a ressorção, antioxidantes, agentes de protecção contra a luz, ou aglutinantes.

Como dissolventes citam-se: água, alcanois, glicois, polietilenoglicois, polipropilenoglicois, glicerina, álcoois aromáticos como álcool benzílico, feniletanol, fenoxietanol, ésteres como acetato de etilo, acetato de butilo, benzoato de benzilo, éteres como éteres alquilenoglicolalquílicos, como éter dipropilenoglicol-monometílico, éter dietilenoglicol-monobutílico, cetonas como acetona, metiletilcetona, hidrocarbonetos aromáticos e/ou alifáticos, óleos vegetais ou sintéticos, DMF, dimetilacetamida, N-metilpirrolidona, ou 2-dimetil-4-oxi-metileno-1,3-dioxolano.

Os corantes são todos os corantes autorizados para a utilização em animais, que possam ser dissolvidos ou postos em suspensão.

As substâncias que promovem a ressorção são, por exemplo, DMSO, óleos diluentes como miristato de isopropilo, pelargonato de dipropileno-glicol, óleos de silicone, ésteres de ácidos gordos, triglicéridos ou álcoois gordos.

Os antioxidantes são sulfitos ou metabissulfitos, como metabissulfito de potássio, ácido ascórbico, butilhidroxitolueno, butilhidroxianisol, ou tocoferol. 43

Os agentes de protecção contra a luz são, por exemplo, substâncias da classe das benzofenonas ou ácido novantisólico.

Os aglutinantes são, por exemplo, derivados de celulose, derivados de amidos, poliacrilatos, polímeros naturais como alginatos, ou gelatina.

As emulsões podem ser empregues oralmente, por via cutânea ou como injecções.

As emulsões são ou do tipo água em óleo, ou do tipo óleo em água. São preparadas dissolvendo-se a substância activa ou na fase hidrófoba, ou na fase hidrófila, e homogeneizando-se esta com o dissolvente da outra fase, com o auxílio de emulsionantes apropriados e eventualmente de outras substâncias auxiliares, como corantes, substâncias promotoras da ressorção, conservantes, antioxidantes, agentes de protecção contra a luz, ou substâncias que aumentam a viscosidade.

Como fase hidrófoba (óleo) citam-se: óleos de parafina, óleos de silicone, óleos vegetais naturais como óleo de sésamo, óleo de amêndoa, óleo de rícino, triglicéridos sintéticos como ácido caprílico/biglicérido de ácido cáprico, misturas de triglicéridos com ácidos gordos vegetais de comprimentos de cadeia C8-12 ou outros ácidos gordos naturais especialmente escolhidos, misturas de glicéridos parciais de ácidos gordos saturados ou insaturados e eventualmente contendo também grupos hidroxilo, e mono e diglicéridos de ácidos gordos em Cs/Cio;

ésteres de ácidos gordos, como estearato de etilo, adipato de di-n-butirilo, laurato de hexilo, pelargonato de dipropileno-glicol, ésteres de um ácido gordo de cadeia ramificada com um comprimento de cadeia médio com álcoois gordos saturados de comprimento de cadeia Ciõ-Cis, miristato de isopropilo, palmitato de isopropilo, ésteres de ácidos caprílico/cáprico de álcoois gordos saturados de comprimento de cadeia C16-C18, estearato de isopropilo, oleato de oleilo, oleato de decilo, oleato de etilo, lactato de etilo, ésteres de ácidos gordos de natureza cerosa, como ftalato de dibutilo, adipato de diisopropilo, misturas dos ésteres acabados de citar e outros álcoois gordos, como álcool isotridecílico, 2-octildodecanol, álcool cetil-estearílico, ou álcool oleílico; ácidos gordos como por exemplo, ácido oleico e as suas misturas.

Como fase hidrófila citam-se: água, álcoois como por exemplo, propilenoglicol, glicerina, sorbitol e as suas misturas. São indicados como emulsionantes: meios tensioactivos não ionógenos, por exemplo, óleo de rícino polioxietilado, monooleato de sorbitano polioxietilado, monoestearato de sorbitano, monoestearato de glicerina, estearato de polioxietilo, éter alquilfenolpoliglicólico; meios tensioactivos anfolíticos, como N-lauril^-iminodipropionato dissódico ou lecitina; meios tensioactivos de anião activo, como laurilsulfato de sódio, étersulfatos de álcool gordo, sal de monoetanoíamina de poliglicol-éter-ortofosfato de mono/dialquilo; meios tensioactivos de catião activo, como cloreto de cetiltrimetilamónio. 45

'Λ·

Como outras substâncias auxiliares citam-se: substâncias que aumentam a viscosidade e que estabilizam a emulsão, como: carboximetilcelulose, metilcelulose e outros derivados de celulose e amido, poliacrilatos, alginatos, gelatina, goma arábica, polivinilpirrolidona, álcool polivinílico, copolímeros de éter metilvinílico e anidrido de ácido maleico, polietilenoglicois, ceras, sílica coloidal ou misturas das substâncias mencionadas.

As suspensões podem ser aplicadas por via oral, cutânea ou como injecção. São preparadas pondo-se em suspensão a substância activa num líquido veicular, eventualmente mediante a adição de outras substâncias auxiliares, como humectantes, corantes, substâncias que promovem a ressorção, conservantes, antioxidantes, e agentes de protecção contra a luz.

Como líquidos veiculares citam-se todos os dissolventes e misturas de dissolventes homogéneos.

Citam-se como humectantes (dispersantes) os meios tensioactivos já indicados anteriormente.

Como outras substâncias auxiliares mencionam-se as que já foram referidas anteriormente.

As composições pastosas podem ser administradas por via oral ou cutânea. Distinguem-se das suspensões e emulsões acima descritas apenas pela sua viscosidade mais alta.

Para a preparação das composições sólidas a substância activa é misturada com substâncias de suporte apropriadas, eventualmente mediante a adição de substâncias auxiliares, e é levada à forma pretendida.

Como substâncias de suporte citam-se todas as substâncias inertes sólidas fisiologicamente aceitáveis. Para todas elas servem substâncias orgânicas e inorgânicas. As substâncias inorgânicas são por exemplo, cloreto de sódio, carbonatos como carbonato de cálcio, hidrogeno-carbonatos, óxido de alumínio, ácido silícico, argilas, sílica de precipitação ou coloidal, ou fosfatos.

As substâncias orgânicas são, por exemplo, açúcares, celulose, nutrientes e produtos alimentares, como leite em pó, farinhas animais, farinhas e farelos de cereais, e amidos.

As substâncias auxiliares são conservantes, antioxidantes, corantes, que já tinham sido referidos anteriormente.

Outras substâncias auxiliares apropriadas são lubrificantes líquidos e sólidos, como por exemplo, estearato de magnésio, ácido esteárico, talco, bentonite, substâncias que promovem a desagregação, como amidos ou polivinilpirrolidona reticulada, aglutinantes como por exemplo, amidos, gelatina ou polivinilpirrolidona de cadeia linear, bem como aglutinantes a seco, como celulose microcristalina.

As substâncias activas podem igualmente estar presentes nas composições em mistura com sinergistos ou com outras substâncias activas.

As composições prontas para utilização contêm a substância activa em concentrações desde 10 ppm até 20% em peso, de preferência de 0,1 até 10% em peso.

As composições que são diluídas antes da sua aplicação contém a substância activa em concentrações de 0,5 a 90% em peso, de preferência de 1 a 50% em peso.

Revelou-se em geral como sendo vantajoso administrar quantidades de cerca de 0,5 até cerca de 50 mg, de preferência de 1 a 20 mg de substância activa por cada kg de peso corporal e por dia, para se alcançarem resultados eficazes.

As substâncias activas também podem ser administradas aos animais em conjunto com a alimentação ou com a água de beber.

As rações e os nutrientes contêm de 0,01 até 100 ppm, de preferência de 0,5 até 50 ppm da substância activa em combinação com um material edível apropriado.

Uma ração e um nutriente desta natureza podem ser utilizados tanto para fins curativos como também para fins profiláticos. A preparação de uma ração ou de um nutriente desta natureza é realizada por mistura de um concentrado ou de uma pré-mistura que contém 0,5 a 30% em peso, de preferência de 1 a 20% em peso, de uma substância activa em mistura com um suporte orgânico ou inorgânico edível, com produtos alimentares correntes. Os suportes edíveis são, por exemplo, farinha de milho ou farinhas de soja e de milho, ou sais minerais, que contêm de preferência uma pequena quantidade de um 48 48

óleo edível para preservação do pó, por exemplo, óleo de milho ou óleo de soja. A pré-mistura obtida nestas condições pode ser então adicionada à ração pronta antes do fornecimento desta aos animais.

As concentrações mínimas de inibição (MHK) dos compostos de acordo com a invenção foram determinadas por processos de diluição em série em Iso-Sensitest Agar (Oxoid). Para cada substância de ensaio foi preparada uma série de placas de agar que continham, em cada caso, concentrações decrescentes da substância activa obtidas por diluição para o dobro. As placas de agar foram inoculadas com um inoculador Multipoint (Denley). Para a inoculação foram utilizadas culturas de uma noite do bacilo, que tinham sido previamente diluídas de modo que cada ponto de inoculação contivesse cerca de 104 partículas formadoras de colónias. As placas de agar inoculadas foram incubadas a 37°C e o crescimento dos gérmens foi avaliado depois de cerca de 20 horas. O valor MHK (pg/ml) indica a mais baixa concentração de substância activa à qual, a olho nu, não era visível qualquer crescimento.

No quadro a seguir são apresentados os valores MHK de alguns dos compostos de acordo com a invenção.

Quadro: valores MHK espécie estirpe exemplo n.° 4 5 7 11 E. coli Neumann 0,03 <0,015 <0,015 <0,015 ATCC 25922 0,03 <0,015 <0,015 <0,015 Klebsiella 8085 0,06 0,03 0,03 <0,015 pneumoniae 63 0,06 0,03 0,03 <0,015 Providencia sp. 12012 0,06 <0,015 0,03 <0,015 12052 4’ 2 2 16 Micrococcus 9341 <0,015 <0,015 <0,015 0,5 luteus Staphylococcus ICB 25701 0,5 0,125 0,25 0,5 aureus ATCC 29213 <0,015 <0,015 <0,015 <0,015 133 á0,015 <0,015 <0,015 <0,015 ICB 25768 1 0,25 0,5 16 Enterococcus 27101 0,06 0,03 <0,015 <0,015 faecalis 9790 0,06 0,03 0,03 <0,015 Acinetobacter 14068 <0,015 <0,015 <0,015 <0,015 50 ---------Ν

Preparação das substâncias activas

ácido 8-amino-9-flúor-3-metil-10-(2-oxa-5,8-diazabiciclof4.3.0]nonano-8-il)-7-oxo-2,3-dihidro-7H-piridof l,2,3-d,e][l,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico 100 mg (0,336 mmol) de ácido 8-amino-9,10~difluor-3-metil-7-oxo-2,3-di-hidro-7H-pirido[ 1,2,3-d,e]( 1,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico são aquecidos a 110°C durante 6 horas, sob atmosfera de árgon, com 86 mg (0,671 mmol) de 2-oxa-5,8-diazabiciclo[4.3.0]nonano em 3 ml de piridina. A mistura é concentrada em alto vácuo, o resíduo é recristalizado em etanol e seco.

Rendimento: 102 mg (72% do valor teórico) ponto de fusão: 295-296°C

ácido 8-amino-10-(2,8-diazabiciclof4.3.01nonano-8-il)-9-flúor-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-piridof 1,2,3-d,elf 1,3,41benzoxadiazino-6-carboxilico 100 mg (0,336 mmol) de ácido 8-amino-9,10-difluor-3-metil-7-oxó-2,3-di-hidro-7H-pirido[l,2,3-d,e][l,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico são aquecidos a 120°C durante 2 horas, sob atmosfera de árgon, com 127 mg (1,01 mmol) de 2,8-diazabiciclo(4.3.0]nonano em 3 ml de sulfóxido de dimetilo (DMSO). A mistura é concentrada em alto vácuo, o resíduo é recristalizado em etanol e seco.

Rendimento: 99 mg (73% do valor teórico) ponto de fusão: 284°C (com decomposição)

ácido 8-amino-10-((lS,6S'|-2,8-diazabiciclo[4.3.01nonano-8-il)-9-flúor-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-piridof l,2,3-d,e][l,3,41benzoxadiazino-6-carbo-xílico 100 mg (0,336 mmol) de ácido 8-amino-9,10-difluor-3-metil-7-oxo-2,3-di-hidro-7H-pirido[ 1,2,3-d,e][ 1,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico são aquecidos a 130°C durante 2 horas, sob atmosfera de árgon, com 85 mg (0,674 mmol) de (lS,6S)-2,8-diazabiciclo[4.3.0]nonano em 3 ml de sulfóxido de dimetilo (DMSO). A mistura é concentrada em alto vácuo, o resíduo é recristalizado em etanol e seco.

Rendimento: 101 mg (74% do valor teórico) ponto de fusão: >300°C (com decomposição) 52,

Exemplo 4 52,

COOH ácido_8-amino-9-flúor-3-metil-10-f2-metilamino-8-azabiciclof4.3.01- nona-3-eno-8-il)-7-oxo-2,3-dihidro-7H-piridoí 1,2,3-d,el[l ,3,41benzoxa-diazino-6-car-boxílico 200 mg (0,673 mmol) de ácido 8-amino-9,10-difluor-3-metil-7-oxo-2,3-di-hidro-7H-pirido[ 1,2,3-d,e][ 1,3,4]benzoxadiazino-6-carboxilico são aquecidos a 130°C durante 3 horas, sob atmosfera de árgon, com 200 mg (1,31 mmol) de 2-metilamino-8-azabiciclo[4.3.0]nona-3-eno em 6 ml de sulfóxido de dimetilo (DMSO). A mistura é concentrada em alto vácuo, o resíduo é recristalizado em etanol e seco.

Rendimento: 274 mg (95% do valor teórico) ponto de fusão: 256°C

ácido 8-amino-10-f2-amino-8-azabiciclo[4.3.01nona-3-eno-8-il)-9-flúor-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido( 1,2,3-d.elf 1,3,4]benzoxadiazino-6-carbo-xilico 200 mg (0,673 mmol) de ácido 8-amino-9,10-difluor-3-metil-7-o'xo-2,3-di-hidro-7H-pirido[l,2,3-d,e][l,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico são aquecidos a 120°C durante 2 horas, sob atmosfera de árgon, com 186 mg (1,35 mmol) de 2-amino-8-azabiciclo[4.3.0]nona-3-eno em 6 ml de sulfóxido de dimetilo (DMSO). A mistura é concentrada em alto vácuo, o resíduo é recristalizado em etanol e seco.

Rendimento: 193 mg (69% do valor teórico) ponto de fusão: 274-275°C

ácido 8-amino-10-í2-amino-5-isopropil-8-azabiciclo[4.3.01nona-3-eno-8-il)-9-flúor-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-piridof 1,2,3-d,elfl,3,41benzoxadiazino-6-carboxílico 100 mg (0,336 mmol) de ácido 8-amino-9,10-difluor-3-metil-7-oxo-2,3-di-hidro-7H-pirido[l,2,3-d,e][l,3,4]benzoxadiazino-6-carboxíIico são aquecidos a 130°C durante 2 horas, sob atmosfera de árgon, com 121 mg (6,671 mmol) de 2-amino-5-isopropil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-3-eno em 3 ml de sulfóxido de dimetilo (DMSO). A mistura é concentrada em alto vácuo, o resíduo é recristalizado em etanol e seco.

Rendimento: 69 mg (45% do valor teórico) ponto de fusão: 227°C.

( NH, O '2

COOH Me

Exemplo 7 ácido 8-amino-10-í2-amino-5-metil-8-azabiciclo[4.3.0|nona-3-eno-8-il)-9-flúor-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-piridof 1,2,3-d.elf 1,3,4lbenzoxadiazino-6-carboxílico 200 mg (0,673 mmol) de ácido 8-amino-9,10-difluor-3-metil-7-oxo-2,3- di-hidro-7H-pirido[ 1,2,3-d,e][ 1,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico são aquecidos a 100°C durante 5 horas, sob atmosfera de árgon, com 205 mg (1,35 mmol) de 2-amino-5-metil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-3-eno em 6 ml de piridina. A mistura é concentrada em alto vácuo, o resíduo é recristalizado em etanol e seco.

Rendimento: 233 mg (81% do valor teórico) ponto de fusão: 225°C

Exemplo 8

ácido 8-amino-10-f2-hidroximetil-8-azabiciclo[4.3.01nona-3-eno-8-il)-9-fLúor-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-piridof 1,2,3-d.elf 1,3,41benzoxadiazino-6-carboxílico 100 mg (0,336 mmol) de ácido 8-amino-9,10-difluor-3-metil-7-o^o-2,3-di-hidro-7H-pirido[l,2,3-d,e][l,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico são aquecidos a 130°C durante 3 horas, sob atmosfera de árgon, com 103 mg (0,672 mmol) de 2-hidroximetil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-3-eno em 3 ml de sulfóxido de dimetilo (DMSO). A mistura é concentrada em alto vácuo, o resíduo é recristalizado em etanol e seco.

Rendimento: 105 mg (73% do valor teórico) ponto de fusão: 278-280°C

ácido 8-amino-10-(2-metilaminometil-8-azabiciclof4.3.01nona-3-eno-8-il)-9-flúor-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-piridof 1,2,3-d,e]f 1,3,41benzoxadiazino-6-carboxílico 100 mg (0,336 mmol) de ácido 8-amino-9,10-difluor-3-metil-7-oxo-2,3-di-hidro-7H-pirido[l,2,3-d,e][l,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico são aquecidos a 110°C durante 14 horas, sob atmosfera de árgon, com 112 mg (0,673 mmol) de 2-metiIaminometil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-3-eno em 3 ml de piridina. A mistura é concentrada em alto vácuo, o resíduo é recristalizado em etanol e seco.

Rendimento: 136 mg (91% do valor teórico) ponto de fusão: 250°C

COOH

ácido 8-amino-10-í2-hidroxi-8-azabicicloí4.3.01nona-3-eno-8-il)-9-flúor-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-piridoí 1,2.3-d.elf 1,3,41ben2oxadia2Íno-6-carbo-xílico 100 mg (0,336 mmol) de ácido 8-amino-9,10-difluor-3-metil-7-oxo-2,3-di-hidro-7H-pirido[l,2,3-d,e](l,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico são aquecidos a 120°C durante 4 horas, sob atmosfera de árgon, com 94 mg (0,675 mmol) de 2~hidroxi-8-azabiciclo[4.3.0]nona-3-eno em 3 ml de DMSO. A mistura é concentrada em alto vácuo, o resíduo é recristalizado em etanol e seco.

Rendimento: 83 mg (59% do valor teórico) ponto de fusão: >300°C (com decomposição).

Exemplo 11

ácido 8-amino-10-íílSR,2RS.6RS)-2-amino-8-azabicicloí4.3.01nona-4- eno-8-il)-9-flúor-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-piridofl,2,3- d,e)f 1 ^^lbenzoxa-diazino-õ-carboxilico 90 mg (0,303 mmol) de ácido 8-amino-9,10-difluor-3-metil-7-oxo-2,3-di-hidro-7H-pirido[l,2,3-d,e][l,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico são aquecidos a 60°C durante 7 horas, sob atmosfera de azoto, com 54 mg (0,391 mmol) de (lSR,2RS,6RS)-2-amino-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno em 10 ml de piridina. A mistura é concentrada em alto vácuo, o resíduo é recristalizado em metanol e seco.

Rendimento: 120 mg (96% do valor teórico) ponto de fusão: >300°C

ácido 8-amino-9-flúor-3-metil-10-íflSR,2RS,6RS)-2-metilamino-8-aza-biciclo[4.3.01nona-4-eno-8-il)~7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido[l,213-d,el-[ 1,3.4l-benzoxadiazino-6-carboxilico 445 mg (1,5 mmol) de ácido 8-amino-9,10-dífluor-3-metil-7-oxo-2,3-di-hidro-7H-pirido[l,2,3-d,e][l,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico e 295 mg (1,95 mmol) de (lSR,2RS,6RS)-2-metilamino-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno (produto do exemplo N) são levados a reagir como foi descrito no exemplo 11.

Rendimento: 540 mg (84% do valor teórico) ponto de fusão: 292°C (com decomposição) 58 58

ácido 8-amino- 10-íí 1 SR,2SR,6RS)-2-amino-8-azabiciclof4.3.01nona-4-eno-8-il)-9-flúor-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido[ 1,2,3- d,elf 1,3,41benzoxadiazi-no-6-carboxílico 445 mg (1,5 mmol) de ácido 8-amino-9,10-difluor-3-metil-7-oxo-2,3-di-hidro-7H-pirido[l,2,3-d,e][l,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico e 270 mg (1,95 mmol) de (lSR,2SR,6RS)-2-amino-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno são levados a reagir como foi descrito no exemplo 11.

Rendimento: 490 mg (79% do valor teórico) ponto de fusão: 246°C (com decomposição)

Exemplo 14

ácido 8-amino-9-flúor-3-metil-7-oxo-10-íflSR.2SR,6SR)-2-ft-butiloxicar-bonil)-aminometil-8-azabiciclo[4.3.01nona-4-eno-8-il)-2.3-dihidro-7H-pirido-f 1,2,3-d,e]f 1,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico «2 1 59 «2 1 59

370 mg (1,25 mmol) de ácido 8-amino-9,10-difluor-3-metil-7-oxo-2,3-cÍi-hidro-7H-pirido[l,2,3-d,e][l,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico e 410 mg (1,6 mmol) de (lSR,2SR,6RS)-2-(t-butiloxicarbonil)-aminometil-8-azabiciclo-[4.3.0]nona-4-eno são levados a reagir como foi descrito no exemplo 11.

Rendimento: 470 mg (71% do valor teórico) ponto de fusão: 227°C (com decomposição).

Exemplo 15 nh, o

sal de ácido trifluoracético do ácido 8-amino-10-(ílSR'2SR,6SR)-2- aminometil-8-azabiciclof4.3.0]nona-4-eno-8-il)-9-flúor-3-metil-7-oxo- 2,3-di-hidro-7H-pirido[l,2'3-d,el[l,3,41benzoxadiazino-6-carboxílico 400 mg (0,75 mmol) do produto do exemplo 14 são postos em suspensão em 10 ml de ácido trifluoracético arrefecido por gelo. A mistura é aquecida até à temperatura ambiente no decurso de uma hora, formando-se uma solução límpida. Depois da adição de metanol o produto precipitado é isolado por filtração sob vácuo e é seco em estufa a 50°C.

Rendimento: 400 mg (quantitativo), ponto de fusão: 235°C (com decomposição). 60Exemplo 16

9

νη2 ο

COOH ácido 8-amino-2-(t-butiloxicarbonil)-amino-8-azabiciclo[4.3.Q]nona-4-eno-8-ill-9-flúor-3-metil-7-oxo-10-(( lSR,2SR,6SR)-2,3-dihidro-7H-piridoí 1,2,3-d,elf 1,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico 595 mg (2,0 mmol) de ácido 8-amino-9,l0-difluor-3-metil-7-oxo-2,3-di-hidro-7H-pirido[l,2,3-d,e][l,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico e 620 mg (2,6 mmol) de (lSR,2SR,6RS)-2-(t-butiloxicarbonil)-amino-8-azabiciclo[4.3.0]-nona-4-eno são levados a reagir como foi descrito no exemplo 11.

Rendimento: 850 mg (82% do valor teórico) ponto de fusão: 259°C (com decomposição).

Exemplo 17

sal de ácido trifluoracético do ácido 8-amino-10-((lSR.2SR,6SR)-2-amino-8-azabiciclo[4.3.01nona-4-eno-8-il)-9-flúor-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-piridof l,2,3-d,elf l,3,41benzoxadiazino-6-carboxílico

61 61

O produto do exemplo 16 (700 mg; 1,3 mmol) é levado a reagir com ácido trifluoracético como foi descrito no exemplo 16.

Rendimento: 600 mg (90% do valor teórico) ponto de fusão: 258°C (com decomposição).

Exemplo 18

ácido_8-amino-2-ÍN-t-butiloxicarbonil-N-met:il)-amino-8-azabiciclo- ί4.3.01-ηοηα-4-6ηο-8-ί1|-9-ί1ύθΓ-3-ιη6ύ1-7-οχο-10-((15Η,23Ε,65Κ1-2,3-άϊ-hidro-7H-piridof l,2,3-d,e][l,3.41benzoxadiazino-6-carboxilico 595 mg (2,3 mmol) de ácido 8-amino-9,10-difluor-3-metil-7-oxo-2,3-di-hidro-7H-pirido[l,2,3-d,e][l,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico e 755 mg (3,0 mmol) de (lSR,2SR,6RS)-2-(N-t-butiloxicarbonil-N-metil)-amino-8-aza-biciclo[4.3.0]nona-4-eno são levados a reagir como foi descrito no exemplo 11.

Rendimento: 1,05 g (66% do valor teórico) ponto de fusão: 255°C (com decomposição).

/ O sal de ácido trifluoracético do ácido e-amino-Q-flúor-S-metdl-lO-(ílSR,2SR,6SR)-2-metilamino-8-azabiciclof4.3.0]nona-4-eno-8-il)-7-oxo-2,3-dihidro-7H-piridof l,2,3-d,elf l,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico O produto do exemplo 18 (1,0 g; 1,9 mmol) é levado a reagir com ácido trifluoracético como foi descrito no exemplo 15.

Rendimento: 1,0 g (97% do valor teórico) ponto de fusão: 290°C (com decomposição).

Preparação dos produtos intermédios:

Exemplo A: 8-azabiciclof4.3.01nona-2-eno A. 1. ÍE1- l-bromo-2,4-pentadieno

Br

Introduzir inicíalmente 84 g (1,0 moí) de l,4-pentadieno-3-ol a 0°C. Adicionar gota a gota, mediante agitação, 150 ml (~ 1,3 mol) de ácido bromídrico aquoso a 48%, de tal modo que a temperatura interna não exceda 5°C. Depois da adição estar completa agitar ainda 1 hora à temperatura ambiente. A fase orgânica é separada e é submetida à reacção seguinte sem purificação.

Rendimento: 107-129 g (73-88% do valor teórico) A. 2. (EÍ-l-í2-propenilamino)-2,4-pentadieno

H

Introduzir inicialmente 228 g (4,0 mol) de l-amino-2-propeno. Adicionar gota a gota, mediante agitação, 58,8 g (0,4 mol) de (E)-l-bromo-2,4-pentadieno (composto de título do exemplo A.I.). Manter a temperatura interna, mediante arrefecimento, no intervalo de 20 a 30°C. Agitar 5 horas à temperatura ambiente. Concentrar o preparado reactivo a 150 mbar. Adicionar 20 g (0,5 mol) de hidróxido de sódio dissolvidos em 200 ml de água, extrair duas vezes com cloreto de metileno, com 100 ml de cada vez, secar com sulfato de sódio, adicionar 0,1 g de 4-hidroxianisol, concentrar, e destilar a 40 mbar. Para a estabilização são adicionados ao destilado 10 a 20 ppm de 4-hidroxianisol.

Rendimento: 33-35 g (67-72% do valor teórico)

Ponto de ebulição: 77-82°C a 40 mbar iH-RMN (CDC13): δ = 6,07-6,48 (m, 2H); 5,64-6,07 (m, 2H); 5,00-5,27 (m, 4H); 3,19-3,36 ppm (m, 4H). A. 3. N-[(El-2,4-pentadienill-N-(2-propenil)-acetamida

O

Introduzir inicialmente 24,6 g (0,2 mol) de (E)-l-(2-propenilamino)-2,4-pentadieno (composto de título do exemplo A.2.), adicionar gota a gota 22,4 g de anidrido acético e agitar uma noite à temperatura ambiente. Concentrar e submeter à reacção seguinte como produto bruto. 64 64

Α.4. 8-acetil-8-azabiciclo[4.3.01nona-2-eno ο

Dissolver 33,1 g (0,2 mol) de N-[(E)-2,4-pentadienil]-N-(2-propenil)-acetami-da (composto de título do exemplo A.3.) em 200 ml de xileno, fazer atravessar durante 15 minutos uma vigorosa corrente de azoto, adicionar 0,1 g de 4-hidroxianisol, em seguida aquecer ao refluxo durante uma noite. Concentrar, destilar em alto vácuo.

Rendimento: 23,1 g (70% do valor teórico, referido ao composto de título do exemplo A.2.) ponto de ebulição: 88-93°C a 0,05 mbar A. 5. 8-a2abiciclof4.3.Qlnona-2-eno

Aquecer ao refluxo durante 3 horas 16,5 g (0,1 mol) de 8-acetil-8-azabiciclo(4.3.0]nona-2-eno (composto de título do exemplo A.4.) numa mistura de 100 ml de soda cáustica a 45%, 50 ml de água e 100 ml de 1,2-etanodiol. Depois do arrefecimento extrair 4 vezes com éter dietílico, com 50 ml de cada vez. Secar com sulfato de sódio as fases orgânicas reunidas e destilar em alto vácuo. rendimento: 6,6 g (54% do valor teórico) ponto de ebulição: 36-44°C a 0,35 mbar 65 iH-RMN (CDCI3): δ = 5,79 (m, 1H); 5,74 (m, 1H); 3,02-3,17 (m, 2iH); 2,47-2,72 (m, 2H); 2,06-2,30 (m, 2H); 1,91-2,06 (m, 2H); 1,68 (m, 1H); 1,45 ppm (m, 1H).

Exemplo B: (lRS,2RS,6SR)-8-azábiciclof4.3.01nona-4-eno-2-carboxilato de etiio (diastereómero A) e ílRS,2RS.6RS)-8-azabiciclof4.3.01nona-4-eno-2-carboxilato de etilo ídiastereómero B) B. 1. N- f (E) -2, 4- pentadienill -ftalimida

Introduzir inicialmente 185 g (1,0 mol) de . ftalimida de potássio em 800 ml de DMF. Adicionar gota a gota, mediante agitação, 147 g (1,0 mol) de (E)-l-bromo-2,4-pentadieno (composto de título do exemplo A.I.), e neste caso manter a temperatura interna, mediante arrefecimento, abaixo de 30°C. Agitar uma noite à temperatura ambiente. Em seguida verter 0 preparado reactivo, mediante agitação, em 1,6 litros de água gelada, filtrar 0 sedimento, lavá-lo com água, secar à temperatura ambiente até se alcançar peso constante.

Rendimento: 177-200 g (83-94% do valor teórico) ponto de ebulição 118-121°C (amostra recristalizada em etanol) JH-RMN (CDCI3): δ = 7,85 e 7,72 (m, 4H, aril-H); 6,2-6,4 (m, 2H, H em C-3 e C-4); 5,75 (dt, 1H, H em C-2, J - 14 e 6 Hz); 5,20 (d, 1H, Ha em C- 66

5, J = 15 Hz); 5,10 (d, 1H, Hb em C-5, J = 8 Hz); 4,33 ppm (d, 2H, H em C-l, J = 6 Hz). B.2. ÍE1- l-amino-2.4-pentadieno

NHj

Num aparelho de destilação de 2 L com uma coluna de Vigreux de 10 cm são introduzidos 400 g de bis-(2-aminoetil)-amina e 213 g (1,0 mol) de N-[(E)-2,4-pentadienil]-ftalimida (composto de título do exemplo B.l.) e são aquecidos à ebulição a 60 mbar. O produto destila no intervalo de 45-60°C a 60 mbar. Para a estabilização são adicionados ao destilado 10 a 20 ppm de 4-hidroxianisol.

Rendimento: 71-80 g (86-96% do valor teórico) B.3. fE)-4-í(E)-2,4-pentadienilamino)-2-butenoato de etilo

H OCjHj

Introduzir inicialmente.,41,6 g (0,5 mol) de (E)-l-amino-2,4-pentadieno (composto de título do exemplo B.2.) e 50,6 g (0,5 mol) de trietilamina em 250 ml de THF a 0°C e adicionar gota a gota 96,5 g (0,5 mol) de (E)-4-bromo-2-butenoato de etilo dissolvidos em 250 ml de THF. Manter a temperatura interna abaixo de 5°C mediante arrefecimento por gelo. Agitar 5 horas a 0°C e em seguida à temperatura ambiente durante uma noite. Adicionar 500 ml de MTBE, depois 500 ml de soda cáustica 1 M, agitar, separar as fases, extrair a fase aquosa uma vez com 100 ml de MTBE, secar as fases orgânicas, depois de reunidas, com sulfato de sódio, adicionar 100 ml de tolueno e 0,1 g de 4-hidroxianisol,

concentrar (evitar, neste caso, temperaturas superiores a 40°C). Purificar o resíduo por cromatografia em coluna através de 1 kg de sílica-gel (63-200 pm) com ciclohexano/acetona 2:1. Antes da concentração adicionar de novo 0,1 g de 4-hidroxianisol e na concentração evitar temperaturas superiores a 40°C.

Rendimento: 52,7-58,6 g (54-60% do valor teórico) de um óleo amarelado

Rf = 0,24 iH-RMN (CDCls): δ = 6,99 (dt, 1H, J = 15 e 5,5 Hz); 6,1-6,45 (m, 2H); 5,98 (dt, 1H, J = 15 Hz); 5,75 (dt, 1H, J = 15 e 6,5 Hz); 5,18 (d, 1H, J = 15 Hz); 5,06 (d, 1H, J = 10 Hz); 4,19 (q, 2H); 3,42 (dd, 2H); 3,31 (d, 2H); 1,29 ppm (t, 3H). B.4. flRS,2RS,6SR)-8-t-butiloxicarbonil-8-azabiciclof4.3.01nona-4-eno-2-carboxilato de etilo ídiastereómero A) e (lRS,2RS16RSl-8-t-butiloxicarbonil-8-azabiciclof4.3.01nona-4-eno-2-carboxilato de etilo (diastereómero B) rac.

Introduzir inicialmente 97,5 g (0,5 mol) de (E)-4-[(E)-2,4-pentadienilamino]-2-butenoato de etilo (composto de título do exemplo B.3.) dissolvidos em 250 ml de tolueno. Adicionar gota a gota 114,5 g (0,525 mol) de dicarbonato de di-t-butilo dissolvidos em 250 ml de tolueno, e agitar durante a noite à temperatura ambiente. Em seguida fazer passar durante 15 minutos uma forte corrente de azoto, adicionar 0,1 g de 4-hidroxianisol, em seguida aquecer ao refluxo durante 6 horas. Concentrar, purificar o resíduo por cromatografia de coluna através de 1 kg de sílica-gel (63-200 pm) com ciclohexano/acetona 8:11

Rendimento: 109-134 g (74-91% do valor teórico) de um óleo amarelado; mistura de dois diastereómeros A e B na relação A:B = 4:1. Rf = 0,25. íH-RMN (CbDC-CDCb; 80°C): δ = 5,77 (m, 1H(A) e 1H(B)); 5,68 (m, 1H(A) e 1H(B)); 4,14 (m, 2H(A) e 2H(B)); 3,65 (m, 2H(A) e 1H(B)); 3,48 (dd, 1H(B)); 3,27 (dd, 1H(B)); 3,00 (m, 1H(A) e 1H(B)); 2,85 (dd, 1H(A)); 2,76 (m, 1H(B)); 2,60 (m, 1H(A)); 2,25-2,55 (m, 3H(A) e 4H(B)); 1,93 (m, IH(A)); 1,51 (s, 9H(B)); 1,44 (s, 9H(A)); 1,25 ppm (t, 3H(A) e 3H(B)). B.5. (lRS,2RS,6SR)-8-azabiciclof4.3.0]nona-4-eno-2-carboxilato de etilo (diastereómero A) e ílRS,2RS,6RS)-8-azabiciclof4.3-0]nona-4-eno-2-carboxilato de etilo ídiastereómero B)

Introduzir inicialmente 6,0 g (20 mmol) do composto de título do exemplo B.4. em 20 ml de dioxano. Adicionar gota a gota 20 ml de ácido clorídrico concentrado, mediante arrefecimento, de modo que a temperatura interna não ultrapasse 30°C. Depois da adição estar completa agitar durante 10 minutós. Adicionar gota a gota, mediante arrefecimento por gelo, 40 ml de cloreto de metileno e 40 ml de soda cáustica a 20% arrefecida por gelo. Separar a fase orgânica, extrair a

sódio as fases orgânicas reunidas, e concentrar. Purificar por cromatografia de coluna 3,0 g do produto bruto através de 100 g de sílica-gel (63-200 ,um) com ciclohexano/etanol/amónia aquosa a 17% (1:2:0,1).

Rendimento: 0,8 g do diastereómero A e 0,8 g do diastereómero B Rf = 0,79 composto de título do exemplo B.4.

0,21 diastereómero B 0,11 diastereómero A iH-RMN (CDCh):

Diastereómero A: δ = 5,83 (d, 1H); 5,69 (m, 1H); 4,15 (q, 2H); 3,21-3,38 (m, 2H); 2,52-2,89 (m, 3H); 2,21-2,52 (m, 3H); 1,95 (m, 1H); 1,28 ppm (t, 3H).

Diastereómero B: δ = 5,64-5,87 (m, 2H); 4,16 (q, 2.H); 3,14-3,33 (m, 2H); 2,82 (dd, 1H); 2,15-2,74 (m, 6H); 1,28 ppm (t, 3H).

Exemplo C: (lSR,2RS,6SR)-2-etiloxicarbonilamino-8-azabiciclof4.3.01nona-4-eno C. 1. ácido (lRS,2RS,6SR)-8-t-butiloxicarbonil-8-azabiciclof4.3.01nona-4-eno-2-carboxílico O CHj

rac. Λ ^-ch, ch3

Introduzir inicialmente 30,8 g (0,55 mol) de hidróxido de potássioϋ dissolvidos em 500 ml de água. Adicionar 147,7 g (0,5 mol) do composto de título do exemplo B.4. dissolvidos em 500 ml de metanol e agitar 8 horas a 60°C sob uma atmosfera de azoto. Depois do arrefecimento diluir a solução reactiva com 500 ml de água e verter lentamente, mediante agitação, 125 ml de ácido acético. Depois de completada a adição deixar em repouso durante 30 minutos em banho de gelo, filtrar o sedimento sob vácuo, lavar com água, secar a 50°C até peso constante.

Rendimento: 84-98 g (63-73% do valor teórico) ponto de fusão: 174-176°C (amostra recristalizada com isopropanol/água 1:1) iH-RMN (CbDC-CDCb; 80°C): δ = 5,83 (m, 1H, H em C-5); 5,74 (m, 1H, H em C-4); 3,65-3,80 (m, 2H, Ha em C-7 e Ha em C-9); 3,09 (dd, 1H, Hb em C-9); 2,92 (dd, 1H, Hb em C-7); 2,70 (m, 1H, H em C-2); 2,35-2,60 (m, 3H, Ha e Hb em C-3 e H em C-6); 2,01 (m, 1H, H em C-l); 1,5 ppm (s, 9H). C.2. (lSR,2RS,6SR)-8-t-butiloxicarbonil-2-etiloxicarbonilamino-8-aza- biciclo[4.3.01nona-4-eno 0 0 CH_j CHj

CjHs0 r ac.

A

Introduzir inicialmente 53,3 g (0,2 mol) do composto de título do exemplo C.l. e 22,2 g (0,22 mol) de trietilamina dissolvidos em 200 ml de THF anidro. Mediante o arrefecimento com uma mistura de gelo/sal adicionar gota a gota 22,8 g (0,21 mol) de cloroformiato de etilo

dissolvidos em 40 ml de THF de tal modo que a temperatura interna não ultrapasse -10°C. Depois de completada a adição agitar ainda 1 hora a baixa temperatura. Em seguida adicionar gota a gota uma solução, arrefecida com gelo, de 15,6 g (0,24 mol) de azida de sódio em 50 ml de água, mediante agitação vigorosa, de tal modo que a temperatura interna não ultrapasse -10°C. Depois de completada a adição agitar ainda 30 minutos a baixa temperatura. Em seguida adicionar sucessivamente 300 ml de água e 400 ml de tolueno.

Separar a fase orgânica, secar com sulfato de sódio, concentrar a 15 mbar até metade do volume inicial (temperatura do banho inferior a 25°C). Adição de 100 ml de etanol, aquecer lentamente agitando sempre (na medida em que permita a libertação de azoto), e depois de terminada a libertação do azoto ferver ainda ao refluxo durante 4 horas. Concentrar e recristalizar o produto bruto em metanol/água 85:15, secar a 50°C até peso constante.

Rendimento: 24,2-28,5 g (39-46% do valor teórico) do composto de título

ponto de fusão: 120-122°C íH-RMN (CDC13): δ = 5,78 e 5,73 (2d, 1H, H em C-5); 5,64 (m, 1H, H em C-4); 4,59 (br, s, 1H, NH); 4,12 (m, 2H, etoxi-CH2); 3,90 (m, 1H, H em C-2); 3,74 e 3,67 (2m, Ha em C-7); 3,67 e 3,56 (2m, 1H, Ha em C-9); 3,12 (m, 1H, Hb em C-9); 2,92 (m, 1H, Hb em C-7); 2,67 (m, 1H, Ha em C-3); 2,49 (m, 1H, H em C-6); 1,95 (m, 1H, Hb em C-3); 1,83 (m, 1H, H em C-1); 1,46 (s, 9H); 1,24 ppm (m, 3H, etoxi-CH3).

Ajustar a fase aquosa a um pH de 2-3 por adição de ácido clorídrico a 10%, deixar em repouso em banho de gelo durante 30

minutos, separar o sedimento por filtração a vácuo, lavar com água( secar a 50°C até peso constante.

Rendimento: 16,0-19,2 g (30-36% do composto de título do exemplo C.l.) (composto de partida recuperado) C.3. (lSR,2RS,6SR]-2-etiloxicarbonilamino-8-azabiciclo(4.3.01nona-4-eno o

Introduzir inicialmente 31,0 g (0,1 mol) do composto de. título do exemplo C.2. em 100 ml de uma mistura de metanol/água (1:1) (suspensão). Deixar correr rapidamente 100 ml de ácido clorídrico concentrado (reacção ligeiramente exotérmica até cerca de 40°C) (obtém-se uma solução homogénea), e agitar até ao termo da libertação gasosa (cerca de 10 minutos). Adicionar 200 ml de água gelada e adicionar gota a gota 70 ml de soda cáustica a 45%, mediante agitação e arrefecimento com gelo. Extrair quatro vezes com cloreto de metileno, com 50 ml de cada vez, secar com sulfato de sódio as fases orgânicas reunidas, concentrar, extrair os resíduos de dissolvente em alto vácuo. A substância torna-se sólida com a concentração.

Rendimento: 13,7-16,6 g (65-79% do valor teórico) de um sólido amorfo de cor castanho-rosada

Rf = 0,81 composto de título do exemplo C.2. 0,11 composto de título cloreto de metileno/metanol/amónia aquosa a 17% (15:4:0,5) 73 Λ

/ iH-RMN (CDCI3): δ = 5,78 (d, 1H, H em C-5); 5,63 (m, 1H, H em C-4); 4,94 (br.d, 1H, NH); 4,10 (m, 2H, etoxi-CI-te); 3,88 (m, 1H, H em C-2); 3,28 (m, 1H, Ha em C-7); 3,19 (m, 1H, Ha em C-9); 2,84 (m, 1H, Hb em C-9); 2,57-2,62 (m, 2H, Ha em C-3 e Hb em C-7); 2,43 (m, 1H, H em C-6); 1,95 (m, 1H, Hb em C-3); 1,79 (m, 1H, H em C-l); 1,23 ppm (m, 3H, etoxi-CH3).

Exemplo D: ’ (lSR,2RS,6SR)-2-metilamino-8-azabiciclo[4.3-01nona-4-eno

Introduzir inicialmente 1,9 g (50 mmol) de aluminohidreto de lítio em 25 ml de éter dietílico anidro, numa atmosfera de azoto. Adicionar gota a gota 5,25 g (25 mmol) do composto .de título do exemplo C.3. dissolvidos em 50 ml de tetrahidrofurano anidro e aquecer ao refluxo durante 3 horas. Adicionar mais 0,95 g (25 mmol) de aluminohidreto de lítio e aquecer de novo ao refluxo durante 3 horas. Adicionar água gota a gota e léntamente, mediante arrefecimento por gelo, até se ter formado um sedimento branco. Filtrar o sedimento sob vácuo e fervê-lo duas vezes com etanol, com 100 ml de cada vez. Juntar os extractos em etanol com as águas-mães da reacção, adicionar 50 ml de tolueno, concentrar, extrair os resíduos de dissolvente em alto vácuo.

Rendimento: 1,95 g (77% do valor teórico) de um sólido amorfo Rf = 0,11 cloreto de metileno/metanol/amónia aquosa a 17% (2:4:1) !H-RMN (CDCI3): 6 = 5,77 (d, 1H, H em C-5); 5,67 (m, 1H, H- em C-4); 3,33 (d, 1H, Ha em C-7); 3,26 (dd, 1H, Ha em C-9); 2,73-2,82 e 2,54-2,63 (2m, 4H, H em C-2, Ha em C-3, Hb em C-7 e Hb em C-9); 2,41 (s, 3H, CH3N); 2,34 (m, 1H, H em C-6); 1,90 (m, 1H, Hb em C-3); 1,70 ppm (m, 1H, H em C-l).

Exemplo E: ílRS,2RS,6SR)-2-hidroximetil-8-azabiciclo[4.3.01nona-4-eno E. 1. f lRS,2RS,6SR)-8-t-butiloxicarbonil-2-hidroximetil-8-azabiciclo-[4.3.0)-nona-4-eno (diastereómero A) e (1 RS ,2RS ,6RS) -8-t-butiloxicarbonil-2-hidroximetil-8-azabiciclo-[4.3.01-nona-4-eno ídiastereómero B)

Introduzir inicialmente 29,5 g (0,1 mol) do composto de título do exemplo B.4. em 200 ml de 1,2-dimetoxietano anidro, numa atmosfera de azoto. A uma temperatura interna < -65°C adicionar gota a gota 150 ml de uma solução 1,5 M de DIBAH em tolueno (0,225 mol). Depois de completada a adição eliminar o banho de gelo e deixar vir à temperatura ambiente. Agitar ainda 2 horas à temperatura ambiente.

Adicionar gota a gota, mediante agitação vigorosa, 60 ml de metanol (reacção exotérmica); manter a temperatura interna entre 35 e 45°C por arrefecimento com um banho de água fria. Em seguida adicionar gota a gota 20 ml de soda cáustica a 5%. Depois de

ί completada a adição agitar ainda durante 10 minutos. Filtrar b sedimento por vácuo, extrair à ebulição por duas vezes com etanol, com 150 ml de cada vez, sob agitação, juntar os extractos em etanol e a solução reactiva, concentrar, extrair os resíduos de dissolvente em alto vácuo, purificar o resíduo por cromatografia de coluna através de 250 g de sílica-gel (63-200 μιη) com ciclohexano/acetona (4:1).

Rendimento: 12,9-17,7 g (51-70% do valor teórico) de um óleo amarelado; mistura dos diastereómeros A e B na relação 4:1

Rf = 0,36 composto de título do exemplo B.4.

0,12 compostos de título A e B O produto bruto torna-se sólido depois de repouso prolongado. Por recristalização em éter/éter de petróleo pode ser obtida uma amostra diastereomericamente pura do diastereómero principal A. ^-RMN (CDCI3): (diastereómero A) δ = 5,67-5,82 (m, 2H, H em C-4 e C-5); 3,50-3,77 (m, 4H, Ha em C-7, Ha em C-9 e hidroximetil-CH2); 3,02 (dt, 1H, Hb em C-9); 2,85 (m, 1H, Hb em C-7); 2,2-2,4 (m, 3H); 1,87-2,00 (m, 3H); 1,62 (m, 1H, H em C-l); 1,46 ppm (s, 9H). E.2.' (lRS,2RS,6SR)-2-hidroximetil-8-az:abiciclof4.3.01nona-4-eno

roc.

Introduzir inicialmente 2,5 g (10 mmol) do composto de titulo A do exemplo E.l. em 10 ml de metanol. Verter rapidamente 10 ml de ácido clorídrico concentrado e agitar durante 30 minutos. Diluir com água até ao dobro do volume e em seguida adicionar gota a gota soda cáustica ψ 45%, mediante agitação e arrefecimento com gelo, até um valor de pH > 12. Concentrar, extrair o resíduo com etanol à ebulição duas vezes, sob agitação, concentrar os extractos em etanol, extrair os resíduos de dissolvente em alto vácuo.

Rendimento: 2,1 g (o produto contém resíduos de NaCl)

Rf = 0,20 cloreto de metileno/metanol/amónia aquosa a 17% (2:4:1) iH-RMN (dô-DMSO): δ = 5,76 (d, 1H); 5,62 (d, 1H); 3,47-3,56 (m, 2H, Ha em C-7 e Ha em C-9); 3,32-3,47 (m, 1H, Ha de hidroximetil-CIHh); 3,23-3,32 (m, 1H, Hb de hidroximetil-CHb); 2,77 (t, 1H, Hb em C-9); 2,64 (t, 1H, Hb em C-7); 2,10-2,24 (m, 2H, Ha em C-3 e H em C-6); 1,77-1,88 (m, 1H, Hb em C-3); 1,69 (m, 1H, H em C-2); 1,40 ppm (m, 1H, H em C-1).

Exemplo F: (lRS,2RS,6SR)-2-etiloxicarbonilaminometil-8-azabiciclo[4.3.01nona-4- eno F.l. (lRS,2RS,6SR)-8-t-butiloxicarbonil-2-(4-toluenossulfoniloximetil)-8-azabiciclo[4.3.01nona-4-eno (diastereómero A) e (lRS,2RS,6RS)-8-t-butiloxicarbonil-2-í4-toluenossulfoniloximetil)-8-azabiciclof4.3.01nona-4-eno (diastereómero B)

Introduzir inicialmente 12,7 g (0,05 mol) do composto de título do exemplo E. 1. (mistura bruta dos diastereómeros A e B) em 25 ml de piridina anidra e arrefecer até -15°C. Adicionar às porções 11,0 g (0,0575 mol) de cloreto de 4-toluenossulfonilo de tal modo que a temperatura interna não exceda -5°C. Depois de completada a adição agitar ainda duas horas a uma temperatura de -5 até -15°C, em seguida agitar 3 horas à temperatura ambiente. Adicionar 5 g de gelo, agitar 5 minutos, verter em 50 ml de água, isolar o sedimento por filtração por vácuo, lavar com água, secar a 50°C até peso constante.

Rendimento: 14,4-15,3 g (71-80% do valor teórico)

sólido de cor rosa baço mistura dos diastereómeros A e B

Por recristalização em metanol pode ser obtida uma amostra diastereomericamente pura do diastereómero principal A.

Ponto de fusão: 111-113°C ^-RMN (CDCI3): (diastereómero A) δ = 7,79 (m, 2H, aril-H); 7,36 (d, 2H, aril-H); 5,54 e 5,78 (2d, 1H, H em C-5); 5,64 (m, 1H, H em C-4); 3,87-3,97 (m, 2H, tosil-OCH2-); 3,59 e 3,67 (2dd, 1H, Ha em C-7); 3,48 (dd, 1H, Ha em C-9); 2,78-2,96 (m, 2H, Hb em C-7 e Hb em C-9); 2,47 (s, 3H, aril-CH3); 2,22-2,36 (m, 2H, Ha em C-3 e H em C-6); 2,06 (m, 1H, H em C-2); 1,80-1,98 (m, 1H, Hb em C-3); 1,59 (m, 1H, H em C-l); 1,45 e 1,47 ppm (2s, 9H). F.2. (lRS,2RS,6SR)-8-t-butiloxicarbonil-2-etiloxicarbonilaminometil-8-azabiciclo[4.3.01nona-4-eno (diastereómero A) e . (lRS,2RS,6RS)-8-t-butiloxicarbonil-2-etiloxicarbonilaminometil-8- azabiciclo[4.3.01nona-4-eno (diastereómero B)

A'

Aquecer ao refluxo a 70°C durante 4 horas 20,5 g (0,05 mol) do composto de título do exemplo F. 1. (mistura bruta dos diastereómeros A e B) e 6,5 g (0,1 mol) de azida de sódio em 100 ml de DMF. Verter a solução reactiva em 200 ml de água, extrair uma vez com 200 ml de éter de petróleo, lavar a fase em éter de petróleo uma vez com 50 ml de água, secar com sulfato de sódio e concentrar à temperatura ambiente.

Tomar o resíduo em 80 ml de THF e adicionar gota a gota 13,1 g (0,05 mol) de trifenilfosfina .dissolvidos em 80 ml de THF. Depois de completada a adição agitar 20 horas à temperatura ambiente, em seguida adicionar gota a gota e lentamente 150 ml de água e depois de completada a adição agitar ainda 15 minutos. Adicionar gota a gota, mediante arrefecimento, ácido clorídrico (HC1 conc./água 1:3) até se alcançar um valor de pH de 3-4, extrair o THF em vácuo à temperatura ambiente, arrefecer a solução reactiva até 0°C, separar por filtração por vácuo o óxido de trifenilfosfina precipitado (ou tomar com MTBE, se for oleoso).

Ajustar a fase aquosa, por adição de soda cáustica a 10%, até um valor de pH > 12, extrair duas vezes com 100 ml de cloreto de metileno de cada vez, secar os extractos reunidos com sulfato de sódio, em seguida adicionar 6,0 g (0,06 mol) de trietilamina, adicionar gota a gota, mediante agitação, 6,0 g (0,055 mol) de cloroformiato de etilo dissolvido em 20 ml de cloreto de metileno, agitar à temperatura ambiente uma ί noite, lavar a solução reactiva uma vez com 100 ml de água, secar com sulfato de sódio e concentrar.

Purificar 23 g do produto bruto por cromatografia de coluna através de 100 g de sílica-gel (63-200 pm) com ciclohexano/acetona (4:1).

Rendimento: 12,4 g (76% do valor teórico) de um óleo viscoso mistura dos diastereómeros A e B Valores de Rf (ciclohexano/acetona 2:1)

0,32 diastereómero A 0,29 diastereómero B

Os diastereómeros A e B são separados por cromatografia de coluna através de 250 g de sílica-gel (35-70 pm) com ciclohexano/acetona (8:1).

Rendimento: 4,3 g (26% do valor teórico) do diastereómero A (óleo viscoso)

2,4 g (15% do valor teórico) de uma fracção mista 0,6 g (4% do valor teórico) do diastereómero B !H-RMN (CI2DC-CDCI2; 80°C): diastereómero A: δ = 5,75 (d, 1H, H em C-5); 5,66 (m, 1H, H em C-4); 4,67 (br, 1H, NH); 4,08 (q, 2H, etoxi-CH2); 3,62 (br, 2H, Ha em C-7 e Ha em C-9); 3,19 (br, 1H, Ha em CH2-NH); 3,05 (br, Hb em CH2-NH); 2,96 (dd, 1H, Hb em C-9); 2,81 (dd, 1H, Hb em C-7); 2,24-2,34 (m, 2H, Ha em C-3 e H em C-6); 1,78-1,94 (m, 2H, H em C-2 e Hb em C-3); 1,54 (m, 1H, H em C-l); 1,43 (s, 9H); 1,22 ppm (t, 3H, etoxi-CH3). 80 diastereómero B: δ = 5,69 (m, 1H, H em C-4); 5,57 (m, 1H, H em C-5); 4,65 (br, 1H, NH); 4,08 (q, 2H, etoxi-CH2); 3,52 (dd, 1H, Ha em C-7); 3,41 (dd, 1H, Ha em C-9); 3,29 (dd, 1H, Hb em C-9); 3,24 (dd, 1H, Ha em CH2-NH); 3,03-3,12 (m, 2H, Hb em C-7 e Hb em CH2-NH); 2,68 (m, 1H, H em C-6); 2,12-2,22 (m, 2H, H em C-l e Ha em C-3); 1,74-1,87 (m, 2H, H em C-2 e Hb em C-3); 1,43 (s, 9H); 1,22 ppm (t, 3H, etoxi-CH3). F.3. f lRS,2RS,6SR)-2-etiloxicarbonilaminometil-8- azabicicloí4.3.0]nona-4-eno o

Introduzir inicialmente 1,6 g (5,7 mmol) do composto de título A do exemplo F.2. em 10 ml de metanol. Deixar verter rapidamente 8 ml de ácido clorídrico concentrado e agitar 30 minutos. Diluir com água até ao dobro do volume, em seguida adicionar gota a gota soda cáustica a 45%, mediante agitação e arrefecimento com gelo, até se alcançar um valor de pH > 12. Extrair quatro vezes com cloreto de metileno, secar as fases orgânicas reunidas com sulfato de sódio, concentrar, extrair os resíduos de dissolvente em alto vácuo.

Rendimento: 0,8 g (63% do valor teórico) de um óleo viscoso

Rf = 0,16 cloreto de metileno/metanol/amónia aquosa a 17% (15:4:0,5) !H-RMN (CDCI3): δ =-5,81 (d, 1H, H em C-5); 5,67 (m, 1H, H em C-4); 5,00 (br, 1H, NH); 4,10 (q, 2H, etoxi-CH3); 3,18-3,28 e 3,08 (m, 3H e m, 1H: Ha em C-7, Ha em C-9, Ha e Hb em CH2-NH-CO); 2,67 (dd, 1H, Hb em C-9); 2,53 (dd, 1H, Hb em C-7); 2,34 (m, 1H, Ha em C-3); 2,25 (m,

1Η, H emC-6); 1,79-1,96 (m, 2H, H em C-2 e Hb em C-3); 1,50 (m, 1H, H em C-l); 1,24 ppm (t, 3H, etoxi-CHs).

Exemplo G: (lRS,2SR,6RS)-2-hidroximetil-8-azabiciclof4.3.01nona-4-eno G. 1. (E)- l·-t-butiloxicarbonilamino-2,4-pentadieno

N

I

H

Introduzir inicialmente 8,3 g (0,1 mol) de (E)-l-amino-2,4-pentadieno (composto de título do exemplo B.2.) em 50 ml de MTBE e adicionar 20 mg de 4-hidroxianisol. Em seguida adicionar gota a gota, a uma temperatura interna de 20-30°C, 22,9 g.(0,105 mol) de dicarbonato de di-t-butilo dissolvidos em 50 ml de MTBE. Depois de completada a adição agitar 20 horas à temperatura ambiente. Concentrar, e extrair os resíduos de dicarbonato de di-t-butilo em alto vácuo, a 40°C.

Rendimento: 18,9 g (produto bruto) de um óleo incolor Rf = 0,25 ciclohexano/acetona (4:1) !H-RMN (CDCls): δ = 6,05-6,43 (m, 2H, H em C-3 e C-4); 5,68 (dd, 1H, H em C-2, J = 14 e 6 Hz); 5,17 (dd, 1H, Ha em C-5, J = 16 Hz); 5,07 (dd, 1H, Hb em C-5, J = 10 Hz); 4,75 (br, 1H, NH); 3,77 (t, 2H, H em C-l); 1,45 ppm (s, 9H).

Introduzir inicialmente 83,2 g (1,0 mol) de (E)-l-amino-2,4-pentadieno (composto de título do exemplo B.2.) em 250 ml de MTBE e adicionar 0,1 g de 4-hidroxianisol. Em seguida, a uma temperatura interna de 20-30°C, adicionar gota a gota 229,2 g (1,05 mol) de dicarbonato de di-t-butilo dissolvido em 250 ml de MTBE. Depois de completada a adição agitar 20 horas à temperatura ambiente. Concentrar a mistura reactiva e tomar em 1 L de tolueno. Adicionar 103,0 g (1,05 mol) de anidrido de ácido maleico e agitar 24 horas a uma temperatura interna de 60°C. Filtrar o sedimento por vácuo, lavar com tolueno e secar a 50°C até peso constante.

Rendimento: 208,2 g (74% do valor teórico)

sólido branco cristalino ponto de fusão: 157-159°C !H-RMN (de-DMSO): δ = 5,81 (m, 1H, H em C-4); 5,59 (d, 1H, H em C-3); 3,77 (dd, 1H, Ha em CH2-NH); 3,44 (m, 2H, H em C-l e Hb em CH2-NH); 2,94 (m, 1H, H em C-2); 2,66 (m, 1H, H em C-6); 2,16 (m, 1H, Ha em C-5); 2,06 (m, 1H, Hb em C-5); 1,43 ppm (s, 9H). G.3. f lRS,2SR,6RS)-9-oxo-8-azabiciclo[4.3.01nona-4-eno-2-carboxilato de metilo

Introduzir inicialmente 83,2 g (1,0 mol) de (E)-l-amino-2,4-pentadieno (composto de título do exemplo B.2.) em 250 ml de THF e adicionar 0,1 g de 4-hidroxianisol. Em seguida adicionar gota a gota, a uma temperatura interna de 20-30°C, 229,2 g (1,05 mol) de dicarbonato de di-t-butilo dissolvidos em 250 ml de THF. Depois de completada a adição agitar 20 horas à temperatura ambiente. Adicionar 103,0 g (1,05 mol) de anidrido de ácido maleico e aquecer ao refluxo 5 horas. Concentrar e tomar o resíduo em 500 ml de metanol, adicionar 30 ml de ácido p-toluenossulfónico, em seguida aquecer de novo ao refluxo 5 horas. Depois do arrefecimento por meio de gelo e de agitação adiciona-se gota a gota rapidamente uma solução de 20 g de carbonato de sódio dissolvidos em 500 ml de água, deixa-se o preparado reactivo em repouso no banho de gelo ainda durante 30 minutos, filtra-se o sedimento por vácuo, lava-se com um pouco de água, seca-se a 50°C até peso constante.

Rendimento: 125-148 g (64-76% do valor teórico)

sólido branco cristalino ponto de fusão: 190-193°C iH-RMN (de-DMSO): δ = 7,50 (s, 1H, NH); 5,77 (m, 1H, H em C-4); 5,56 (m, 1H, H em C-5); 3,60 (s, 3H, CHsO); 3,42 (dd, 1H, Ha em C-7); 3,16 (dd, 1Ή, H em C-l); 3,00 (m, 1H, H em C-6); 2,88 (dd, 1H, Hb em C-7); 2,67 (m, 1H, H em C-2); 2,02-2,18 ppm (m, 2H, Ha e Hb em C-3). G.4. (lRS,2SR,6RS)-2-hidroximetil-8-azabiciclof4.3.01nona-4-eno ———8/ I·' '

Introduzir inicialmente 19,6 g (0,1 mol) do composto de título do exemplo G.3. em 100 ml de THF sob uma atmosfera de gás inerte (suspensão). Adicionar gota a gota 100 ml (0,15 mol) de solução 1,5 M de DIBAH em tolueno a uma temperatura interna de 10-20°C. Adicionar gota a gota a solução homogénea límpida assim obtida a uma suspensão de 1,9 g de alanato de lítio em 50 ml de THF. Depois de completada a adição agitar 15 minutos à temperatura ambiente e em seguida 30 minutos à temperatura de refluxo. Depois do arrefecimento adicionar às porções 3,8 g (0,1 mol) de alanato de lítio, em seguida aquecer ao refluxo durante 24 horas. Depois do arrefecimento adicionar gota a gota sucessivamente 50 ml de água e 10 ml de soda cáustica 1M, filtrar o sedimento sob vácuo e extrair à ebulição três vezes com 150 ml de- etanol de cada vez. Juntar o filtrado e os extractos e concentrar.

Rendimento: 16,4 g (o produto contém hidróxidos de lítio e de alumínio)

Rf = 0,3 cloreto de metileno/metanol/amónia aquosa a 17% (2:4:1)

Exemplo H: (lRS,2SR,6RS)-2-etiloxicarbonilaminometil-8-azabiciclo[4.3.01nona-4- eno Η. 1. (lRS,2SR,6RS)-8-t-butiloxicarbonil-2-hidroximetil-8-azabiciclo[4.3.01-nona-4-eno - 85 rac.

Dissolver 16,4 g do produto bruto do exemplo G.4. (correspondentes a 0,1 mol do composto de título do exemplo G.4.) em 100 ml de THF. A uma temperatura interna de 0-5°C adicionar gota a gota 22,9 g (0,105 mol) de dicarbonato de di-t-butilo dissolvidos em 100 ml de THF, agitar 24 horas a 0°C e em seguida mais 24 horas à temperatura ambiente. Concentrar, purificar o produto bruto por cromatografia de coluna através de 250 g de sílica-gel (63-200 μιη) com ciclohexano/acetona (2:1).

Rendimento: 13,7 g (54% do valor teórico em dois passos); óleo viscoso Rf = 0,21 composto de título 0,08 composto de título do exemplo G.4. H.2. (lRS,2SR,6RS)-8-t-butiloxicarbonil-2-í4-toluenossulfoniloximetil)-8-azabiciclof4.3.01nona-4-eno

Analogamente ao exemplo F.I., obtém-se o composto de titulo a partir do composto de título do exemplo H.l.

Rendimento: 81-83% do valor teórico ponto de fusão: 160-162°C iH-RMN (CDCb): δ = 7,79 (m, 2H, aril-H); 7,37 (d, 2H, anl-H); 5,67 (m, 1H, H em C-4); 5,47 (m, 1H, H em C-5); 3,78-3,97 (m, 2H, tosil-OCH2-); 86

3,13-3,42 (m, 3H, CH2-N); 2,95 (t, 1H, CH2-N); 2,74 (m, 1H); 2,54 (m,S 1H); 2,47 (s, 3H, aril-H); 2,32 (m, 1H, H em C-2); 2,06 (m, 1H, Ha em C-3); 1,66-1,83 (m, 1H, Hb em C-3); 1,44 ppm (s, 9H). H.3. (lRS,2SR,6RS)-8-t-butiloxicarboniI-2-ei:iloxicarbonilaminometil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno 0 O CH3

Analogamente ao exemplo F.2., obtém-se o composto de título a partir do composto de título do exemplo H.2.

Purificar o produto bruto por cromatografia de coluna através de silica-gel (63-200 μτη) com ciclohexano/acetona (2:1).

Rendimento: 76% do valor teórico; óleo viscoso claro Rf = 0,35 (ciclohexano/acetona 2:1) íH-RMN (CI2DC-CDCI2; 80°C): δ = 5,69 (m, 1H, H em C-4); 5,47 (d, 1H, H em C-5); 4,59 (br, 1H, NH); 4,10 (q, 2H, etoxi-CH2); 3,38 (dd, 1H); 3,32 (m, 1H); 3,24 (m, 1H); 3,01-3,08 (m, 3H); 2,79 (m, 1H); 2,47 (m, 1H); 2,07 (m, 2H); 1,78 (m, 1H); 1,42 (s, 9H); 1,22 ppm (t, 3H, etoxi-CH3). H.4. (lRS,2SR,6RS)-2-etiloxicarbonilaminometil-8- azabicicloí4.3.01nona-4-eno 0

rac.

do composto de título do exemplo H.3.

Rendimento: 42% do valor teórico

Rf = 0,93 composto de título do exemplo H.3. 0,23 composto de título cloreto de metileno/metanol/amónia aquosa a 17% (15:4:0,5) Exemplo I: í lSR,2RS,3RS,6SR)-2-etiloxicarbonilamino-3-metil-8-axabicicloí4.3.01nona-4-eno 1.1. N-f(2E,4El-2,4-hexadienil1-ftalimida o

Analogamente ao exemplo B.I., obtém-se o composto de título a partir de (2E,4E)-l-bromo-2,4-hexadieno.

Rendimento: 77-79% do valor teórico ponto de fusão: 114-117°C (amostra recristalizada em etanol). iH-RMN (CDC13): δ = 7,85 (m, 2H); 7,72 (m, 2H); 5,25 (dd, 1H); 6,00 (ddd, 1H); 5,5-5,8 (m, 2H); 4,29 (d, 2H); 1,74 ppm (d, 3H). 1.2. (2E.4E)-1 -amino-2.4-hexadieno 88 88 \ s

do composto de título do exemplo 1.1; intervalo de ebulição: 40-70°C a 16-18 mbar.

Rendimento: 67-83% do valor teórico 1.3. ÍE}-4-f(2E,4E)-2,4-hexadienilaminol-2-butenoato de etilo

Analogamente ao exemplo B.3., obtém-se o composto de título a parar do composto de título do exemplo 1.2.

Rendimento: 46% do valor teórico iH-RMN (CDCls): δ = 6,98 (dt, 1H); 5,9-6,25 (m, 3H); 5,5-5,8 (m, 2H); 4,19 (q, 2H); 3,40 (dd, 2H); 3,27 (d, 2H); 1,76 (d, 3H); 1,29 ppm (t, 3H). 1.4. ílRS,2RS,3RS,6SR)-8-t-butiloxicarbonil-3-metil-8-azabi- ciclo[4.3.01-nona-4-eno-2-carboxilato de etilo (diastereómero A) e ílRS,2RS,3SR,6RSl-8-t-butiloxicarbonil-3-metil-8-azabi-ciclof4.3.01-nona-4-eno-2-carboxilato de etilo fdiastereómero B)

0 CHj C2HsOjC η ^“CHj VV j CHj 0 CH3 C2H502C H' /-n^o^CH; VKj A roc. H^C.....W\ B

Analogamente ao exemplo B.4., obtém-se o composto de título a partir do composto de título do exemplo 1.3.

89

Rendimento: 70% do valor teórico; mistura dos dois diastereómeros A ^ B na relação A:B = 4:1

Rf = 0,49 (ciclohexano/acetona 2:1) 1.4. ácido_ílRS^RS.ORS.eSRl-S-t-butiloxicarbonil-S-metil-S- azabiciclo-f4.3.01nona-4-eno-2-carboxilico

Introduzir inicialmente 1,17 g (21 mmol) de hidróxido de potássio dissolvidos em 20 ml de água. Adicionar 5,9 g (19 mmol) do composto de título do exemplo 1.4. dissolvidos em 20 ml de metanol e aquecer ao refluxo durante 48 horas sob uma atmosfera de azoto. Concentrar, tomar em água, extrair uma vez com cloreto de metileno, ajustar a fase aquosa a um pH de 3-4 com ácido acético, filtrar o sedimento por vácuo, lavar com água, secar à temperatura ambiente, recristalizar em ciclohexano/ acetona 6:1.

Rendimento: 2,25 g (42% do valor teórico) ponto de fusão: 189°C !H-RMN (de-DMSO): δ = 5,77 (d, 1H); 5,61 (m, 1H); 3,67 (m, 1H); 3,54 (m, 1H); 2,61-2,95 (m, 4H); 2,30 (m, 1H); 1,82 (m, 1H); 1,40 (s, 9H); 0,90 ppm (d, 3H). 1.6. (lSR,2RS,3RS,6SR1-8-t-butiloxicarbonil-2-etiloxicarbonilamino-3- metil-8-azabicicíof4.3.0]nona-4-eno 90

O CH, Μ*· ch3

Analogamente ao exemplo C.2., obtém-se o composto de título a partir de 2,25 g (8 mmol) do composto de título do exemplo 1.5. Modificação em relação ao exemplo C.2.: 8 horas ao refluxo em etanol em vez de 4 horas; purificação por cromatografia em coluna através de 100 g de sílica-gel (63-200 μπι) com tolueno/acetato de etilo (2:1).

Rendimento: 1,6 g (59% do valor teórico) de um óleo claro iH-RMN (CDCls): δ = 5,68 e 5,72 (2d, 1H); 5,61 (m, 1H); 4,81 (m, 1H); 4,0-4,2 (m, 3H); 3,53 (m); 3,62 (m) e 3,72 (dd) [2H]; 3,08 (t, 1H); 2,92 (t, 1H); 2,75 (m, 1H); 2,47 (m, 1H); 1,83 (m, 1H); 1,47 (m, 9H); 1,25 (1,25, 3H); 0,97 ppm (d, 3H). 1.7. (lSR,2RS,3RS,6SR)-2-etiloxicarbonilamino-3-metil-8-azabicicío- f4.3.01nona-4-eno

O

H

Analogamente ao exemplo C.3., obtém-se o composto de título a partir de 1,6 g (4,7 mmol) do composto de título do exemplo 1.6.

Rendimento: 0,7g (70% do valor teórico) de um óleo amarelado; Rf = 0,09 cloreto de metileno/metanol/amónia aquosa a 17% (15:4:0,5)

Exemplo K: f lRS,2RS,6RSl-2-etiloxicarbonilaminometil-8-azabiciclo[4.3.01nona-4-eno K. 1. 3-ftalimidometil-ciclohexa-4-eno-l,2-dicarboxilato de dietilo /\.COOEt

COOEt 10,67 g (50 mmol) de N-[(E)-2,4-pentadienil]-ftalimida (composto de título do exemplo B.l.) e 8,61 g de fumarato de dietilo são aquecidos ao refluxo durante 2 dias em 50 ml de tolueno. O preparado reactivo é concentrado e o resíduo é cromatografado através de silica-gel (eluente: ciclohexano/acetona 8:1).

Rendimento: 14,8 g (77% do valor teórico) ponto de fusão: 80-84°C K.2. (lRS,2RS,6RS)-9-oxo-8-azabiciclof4.3.0]nona-4-eno-2-carboxilato de etilo ÍA) e f lRS,2RS,6SR)-9-oxo-8-azabiciclo[4.3.01nona-4-eno-2-carboxilato de etilo (B)

H

H rac.

A rac.

B 92 •w 150,3 g (0,39 mo!) do composto de título do exemplo K.L s^o introduzidos em 720 ml de etanol e, mediante arrefecimento com gelo, adicionam-se gota a gota 173,3 g (2,9 mol) de etilenodiamina. Agita-se 20 horas à temperatura ambiente, concentra-se em vácuo, dilui-se com água (cerca de 700 ml), com ácido clorídrico concentrado ajusta-se a um valor de pH de 2-3 e extrai-se trés vezes com 500 ml de diclorometano de cada vez. A fase orgânica é seca (sulfato de sódio) e concentrada em vácuo. A separação dos diastereómeros é realizada por cromatografia (eluente: ciclohexano/acetona 1:1).

Rendimento: 35,7 g do produto A (45% do valor teórico)

Rf = 0,47 (ciclohexano/acetona 1:1) 27,0 g do produto B (45% do valor teórico)

Rf = 0,22 (ciclohexano/acetona 1:1) K.3. (lRS,2RS,.6RS)-2-hidroximetil-8-azabiciclof4.3.01nona-4-eno

rac. 5,2 g (25 mmol) de (lRS,2RS,6RS)-9-oxo-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno-2-carboxilato de etilo (produto A do exemplo K.2.) são dissolvidos em 50 ml de tetrahidrofurano, sob uma atmosfera de azoto, e em seguida adicionam-se gota a gota 130 ml de uma solução 1,5 molar de hidreto de di-(isobutil)-alumínio (195 mmol). A solução é aquecida ao refluxo 15 horas. Depois de completada a reacção são adicionados gota a gota sucessivamente 50 ml de metanol, 30 ml de éter t-butilmetílico e 10 ml de água e filtra-se por sucção depois da adição de Tonsil. O resíduo da filtração por sucção é agitado duas vezes com uma mistura de 93

etanol/amónia concentrada/água (10:1:1) e é de novofiltrado por sucção. Os filtrados reunidos são concentrados e o produto bruto é purificado cromatograficamente (eluente: diclorometano/- metanol/amónia concentrada 2:4:1).

Rendimento: 2,7 g (71% do valor teórico) iH-RMN (DMSO-de): δ = 5,69 (m, 1H, 4-H); 5,60 (m, 1H, 5-H); 3,39 (dd, 1H, 10a-H); 3,26 (dd, 1H, 10b-H); 2,97 (m, 2H, 7a-H, 9a-H); 2,63 (m, 1H, 9b-H); 2,38 (bs, 1H, 6-H)M; 2,32 (dd, 1H, 7b-H); 2,06 (m, 1H, 3a-H); 1,95 (m, 1H, 1-H); 1,77 (m, 1H, 3b-H); 1,44 ppm (m, 1H, 2-H). K.4. (lRS,2RS,6RS)-8-t-butiloxicarbonil-2-hidroximetil-8-azabiciclo[4.3.01-nona-4-eno

rac. O produto do exemplo K.3. (8,87 g; 58 mmol) é submetido a reacção como foi descrito no exemplo H.l.

Rendimento: 11,0 g (75% do valor teórico) Rf = 0,25 (ciclohexano/acetona 2:1) (lRS,2RS,6RS)-8-t-butiloxicarbonil-2-(4-toluenossulfoniloximetill- 8-azábiciclof4.3.01nona-4-eno

K.5. O composto de título é obtido a partir do produto do exemplo K.4'., em analogia com o exemplo F.l.

Rendimento: 97% do valor teórico Rf = 0,40 (ciclohexano/acetona 2:1) K.6. f lRS,2RS,6RS)-8-t-butiloxicarbonil-2-azidometil-8-azabiciclo[4.3.01-nona-4-eno

rac.

Uma solução de 33 g (0,08 mol) (lRS,2RS,6RS)-8-t-butiloxicarbonil-2-(4-toluenossulfoniloximetil)-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno (composto de título do exemplo K.5.) e 15,8 g (0,24 mol) de azida de sódio em 200 ml de Ν,Ν-dimetilformamida é agitada 4 horas a 70°C. A solução arrefecida é diluída com água (500 ml) e é extraída três vezes com 250 ml de éter de petróleo de cada vez. A fase orgânica reunida é lavada com solução a 5% de hidrogenocarbonato de sódio, seca (sulfato de sódio) e concentrada.

Rendimento: 21,5 g (97%) iH-RMN (CDC13): 6 = 5,71 (m, 1H, C=CH); 5,58 (m, 1H, C=CH); 3,61-3,22 (m, 2H); 3,10 (m, 1H); 2,70 (bs, 1H); 2,24 (m, 2H); 1,91 (m, 2H); 1,47 ppm (s, 9H, t-butilo). K.7. ílRS,2RS,6RS)-8-t-butiloxicarbonil-2-aminometil-8- azabiciclo[4.3.01-nona-4-eno

Ih2n-h2c ο

Tf

N^O

ch3 ch3

H ch3 rac.

Uma solução do composto de azido do exemplo K.6. (21,6 g; 78 mmol) em 150 ml de piridina/água (5:1) é saturada com sulfureto de hidrogénio, mediante arrefecimento com gelo, e em seguida é deixada em repouso 20 horas à temperatura ambiente. Depois de a reacção estar completada concentra-se em vácuo, destila-se várias vezes com tolueno e o resíduo é cromatografado (eluente: ciclohexano/acetona 1:1).

Rendimento: 11,0 g (66% do valor teórico)

Rf = 0,12 (ciclohexano/acetona 1:1) K.8. (lRS,2RS,6RS)-8-t-butiloxicarbonil-2-(etiloxicarbonilaminometil)- 8-azabiciclo[4.3.01nona-4-eno

O

ch3

H rac. 3,7 g (15 mmol) de (lRS,2RS,6RS)-8-t-butiloxicarbonil-2-aminometil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno são introduzidos em 40 ml de dioxano e 15 ml de água, adicionam-se 2,3 g (16 mmol) de carbonato de potássio, e adicionam-se ainda gota a gota, à temperatura ambiente, 1,75 g (16 mmol) de cloroformiato de etilo. Depois de agitação durante 2 horas concentra-se em vácuo, o resíduo é tomado em diclorometano (70 ml), é extraído duas vezes com 25 ml de água de cada vez, seca-se (sulfato de sódio) e concentra-se. O produto bruto é purificado por cromatografia (ciclohexano/acetona 2:1).

Rendimento: 2,8 g (59% do valor teórico)

Rf = 0,53 (ciclohexano/acetona 1:1) K.9. (lRS,2RS,6RS)-2-fetiloxicarbonilaminometil)-8-azabiciclof4.3.01nona-4-eno

O

C2HsO 7,6 g (23 mmol) do produto do exemplo K.8. são introduzidos em 100 ml de metanol/água (1:1) e vertem-se à temperatura ambiente 30 ml de ácido clorídrico semiconcentrado. Depois de a libertação gasosa ter terminado agita-se continuamente 30 minutos, dilui-se com água gelada (cerca de 100 ml) e ajusta-se ao pH 12 com soda cáustica concentrada. A fase aquosa é extraída quatro vezes com 100 ml de diclorometano de cada vez. Os extractos são reunidos, são secos com sulfato de sódio e concentrados em vácuo.

Rendimento: 3,9 g (76% do valor teórico)

Rf = 0,45 (diclorometano/metanol/amónia concentrada 2:4:0,1)

Exemplo L: bis-trifluormetanossulfonato de (lRS,2RS,6RS)-2-aminometil-8-azabiciclo-í4.3.01nona-4-eno ΝΗ

+ 2 CF;3COOH Η rac.

Uma solução de 2,0 g (8 mmol) de (lRS,2RS,6RS)-8-t-butiloxicarbonil-2-aminometil-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno (produto do exemplo K.7.) em 30 ml de diclorometano é misturada com 30 ml de ácido trifluoracético e deixa-se 30 minutos à temperatura ambiente. O dissolvente e o ácido são eliminados por destilação na presença de tolueno, e destila-se ainda várias vezes com tolueno. O produto é seco em exsicador de vácuo na presença de hidróxido de potássio/ pentóxido de fósforo (1:1).

Rendimento: 1,5 g de um óleo castanho Ή-RMN (DMSO-de): δ = 5,78 (m, 1H, C=CH); 5,60 (m, 1H, OCH); 3,34 (m, 2H); 3,03 (m, 1H); 2,87 (m, 2H); 2,73 (m, 1H); 2,45 (m, 1H); 2,34 (m, 1H); 2,22 (m, 1H); 1,94 ppm (m, 2H). FAB-MS: M+l = 153.

Exemplo M: f lRS,2RS,6RS)-2-etiloxicarbonilaminometil-8-azabiciclo-f4.3.01nona-4-eno (O produto é idêntico ao composto de título do exemplo F.) M.l. flRS,2RS,6SRl-2-hidroximetil-8-azabiciclof4.3.01nona-4-eno

Η rac. Ο (lRS,2RS,6RS)-9-oxo-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno-2-carboxilato de etilo (produto B do exemplo K.2.) é submetido a reacção analogamente ao exemplo K.3.

Rendimento: 75% do valor teórico

Rf = 0,22 (diclorometano/metanol/amónia concentrada (15:4:0,5)) (lRS,2RS.6SR)-8-t-butiIoxicarbonil-2-hidroximetil-8-azabiciclo- [4.3.01nona-4-eno

M.2. rac. O produto do exemplo M.l. é submetido a reacção analogamente ao exemplo K.4.

Rendimento: 64% do valor teórico Rf = 0,23 (ciclohexano/acetona 2:1) M.3. (lRS,2RS,6SR)-8-t-butiloxicarbonil-2-(4-toluenossulfoniloximetil)-8-azabiciclo[4.3.01nona-4-eno

/ r O composto de título é obtido a partir do produto do exemplo M.2. por analogia com o exemplo F. 1.

Rendimento: 91-98% do valor teórico Rf = 0,59 (ciclohexano/acetona 2:1) M.4. (lRS,2RS,6SR)-8-t-butiloxicarbonil-2-azidometil-8-azabiciclof4.3.01-nona-4-eno

O

H ch3 rac.

Uma solução de 13,0 g (32 mmol) do produto do exemplo M.3. em 80 ml de Ν,Ν-dimetilformamida é misturada com 4,15 g (64 mmol) de azida de sódio e é agitada 4 horas a 70°C. De seguida é de novo submetida a reacção com a mesma quantidade de azida de sódio e é agitada mais 6 horas a 100°C. Em seguida efectua-se o isolamento como.é descrito no exemplo K.6.

Rendimento: 7,0 g (79% do valor teórico)

Rf = 0,55 (ciclohexano/acetona 2:1) M.5. (lRS,2RS,6SR)-8-t-butiloxicarbonil-2-aminometil-8-azabicicloí4.3.01-nona-4-eno

O

H ch3 rac.

O composto de azido do exemplo M.4. é submetido a reacção como é descrito no exemplo K.7. A. cromatografia é realizada com metanol/diclorometano/ amónia concentrada (15:2:0,1).

Rendimento: 75% do valor teórico

Rf = 0,12 (metanol/diclorometano/amónia concentrada 15:2:0,1) M.6. (lRS.2RS,6SR)-8-t-butiloxicarbonil-2-(etiloxicarbonilmetil)-8-aza- bicicloí4.3-01nona-4-eno

O C2H50

ch3 ch3 rac. H CH3 4,3 g (17 mmol) do composto de amino do exemplo M.5. e 1,9 g (19 mmol) de trietilamina são introduzidos em 50 ml de diclorometano, adicionam-se-lhes gota a gota a 0°C 2,2 g (20 mmol) de cloroformiato de etilo dissolvidos em 10 ml de diclorometano e agita-se 24 horas à temperatura ambiente. A solução é misturada com água (50 mi) e separam-se as fases. A fase aquosa é ainda extraída três vezes com 40 ml de diclorometano de cada vez. As fases orgânicas são reunidas, secas (sulfato de sódio) e concentradas.

Rendimento: 5,3 g (96% do valor teórico) iH-RMN (CbDC-CDCb; 80°C): δ = 5,79 (ddd, 1H, C=CH); 5,58 (m, 1H, C=CH); 4,61 (bs, 1H, carbamato-NH); 4,23 (m, 1H); 4,12 (q, 2H, etil-

ΙΟΙ I

CH2); 3,99 (m, 1H); 3,20-3,08 (m, 2H); 2,82 (m, 2H); 2,25 (m, 2H); 2/09 (m, 1H); 1,84 (m, 2H); 1,42 (s, 9H, t-butilo); 1,37 ppm (t, 3H, etil-CH3). M.7. (lRS,2RS,6SR)-2-íetiloxicarbonilaminometil)-8-azabiciclo[4.3.01nona-4-eno O (lRS,2RS,6SR)-8-t-butiloxicarbonil-2-(etiloxicarbonilaminometil)-8- aza-biciclo[4.3.0]nona-4-eno é submetido a reacção como é descrito no exemplo K.9.

Rendimento: quantitativo

Rf = 0,55 (metanol/diclorometano/amónia concentrada 15:4:0,5) Exemplo N: í 1 SR, 2RS, 6RS) -2 -metilamino-8-azabiciclo[4.3. Olnoneno N.l. ácido (lRS,2RS,6RS)-9-oxo-azabiciclo[4.3-01nona-4-eno-2-

carboxílico rac. 8,36 g (40 mmol) de (lRS,2RS,6RS)-9-oxo-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno-2-carboxilato de etilo (produto A do exemplo K.2.) são agitados com 30 ml de água e 5 ml de ácido sulfúrico concentrado durante 40 horas a 60°C. Por arrefecimento o produto precipita, separando-se. O sedimento é lavado com um pouco de água fria e é seco em estufa de secagem, a vácuo, a 50°C.

Rendimento: 4,80 g (66% do valor teórico) 102 iH-RMN (DMSO-de): 6 = 12,35 (s, 1H, COOH); 7,60 (s, 1H, lactame-NH); 5,74 (m, 1H, C=CH); 5,59 (m, 1H, C=CH); 3,45 (dd, 1H, 7a-H); 2,95-2,85 (m, 4H, 1-H, 2-H, 6-H, 7b-H); 2,29 (m, 1H, 3a-H); 2,00 ppm (m, 1H, 3b-H). N.2. (lSR,2RS,6RS)-2-etoxicarbonilamino-9-oxo-8-a2abicicloí4.3.0]nona-4-eno

O

|_| O ácido (lRS,2RS,6RS)-9-oxo-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno-2-carboxílico (composto de título do exemplo N.l.) é submetido a reacção analogamente ao exemplo C.2.

Rendimento: 68% do valor teórico Rf = 0,06 (ciclohexano/acetona 1:1) N.3. (lSR,2RS,6RS)-2-metilamino-8-azabiciclof4-3.01nona-4-eno

HoC-

•NH

NH

H rac. O composto de título é obtido fazendo-se reagir o produto do exemplo N.2. com 10 equivalentes de hidreto de di-(isobutil)-aluminio, analogamente ao exemplo K.3., e isolando-se o produto.

Rendimento: 51% do valor teórico

/ iH-RMN (CDC13): δ = 5,72 (m, 1H, C=CH); 5,58 (m, 1H, C=CH); 3,19-3,10 (m, 2H); 2,88 (dd, 1H); 2,60 (dd, 1H); 2,50 (m, 1H); 2,44 (s, 3H, N-CH3); 2,33-2,28 (m, 2H); 2,19 (m, 1H); 1,89 ppm (m, 1H).

Exemplo O: (lSR,2SR,6RS)-2-metilamino-8-azabiciclof4.3.0]nona-4-eno 0.1. ácido_ carboxí-lico

ílRS,2SR.6RS)-9-oxo-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno-2-HOOC

rac. São introduzidos inicialmente a 50°C 0,2 g de ácido sulfúrico concentrado, 25 ml de água e 25 ml de ácido acético. São adicionados em pequenas porções 9,8 g (50 mmol) do produto do exemplo G.3. Agita-se 5 horas a 60°C. Para o isolamento é adicionada uma solução de 0,8 g de hidrogenocarbonato de sódio em 10 ml de água e concentra-se em vácuo. O resíduo é posto em suspensão em 40 ml de água e é dissolvido por adição de soda cáustica concentrada, mediante arrefecimento por gelo. Depois de se ter filtrado para a separação da fracção insolúvel acidifica-se com ácido clorídrico semi-concentrado e arrefece-se de novo a 0°C. O produto que precipita é lavado com um pouco de água fria e em seguida é seco em estufa de secagem, a vácuo, a 50°C.

Rendimento: 4,8 g (53% do valor teórico) ponto de fusão: 192-193°C 104

0.2. ílSR,2SR,6RS)-2-etoxicarbonilamino-9-oxo-8-azabiciclof4.3.0]nona-4-eno

O c2h5o rac.

O ácido (lRS,2SR,6RS)-9-oxo-8-azabiciclo[4.3.0]nona-4-eno-2-carboxílico (composto de título do exemplo 0.1.) é submetido a reacçáo como foi descrito no exemplo C.2.

Rendimento: 68% do valor teórico ponto de fusão: 160-164°C 0.3. (lSR,2SR,6RS)-2-metilamino-8-azablcicloí4.3.01nona-4-eno

O composto de título é obtido fazendo-se reagir o produto do exemplo 0.2. com 10 equivalentes de hidreto de di-(isobutil)-alumínio, analogamente ao exemplo K.3., e isolando-se o produto.

Rendimento: 81% do valor teórico iH-RMN (CDCh): δ = 5,72 (m, 1H, C=CH); 5,50 (m, 1H, C=CH); 3,04-2,77 (m, 6H); 2,60 (m, 1H); 2,49 (s, 3H, N-CH3); 2,31 (bs, 2H, 2*NH); 2,25 (m, 1H); 1,89 ppm (m, 1H).

Exemplo P: ácido 9'10-difluor-3-metil-8-nitro-7-oxo-2,3-dihidro-7H-piridofl,213-d,e]-f 1,3'41benzoxadiazino-6-carboxílico

A 7,0 g (24,8 mmol) de ácido 9,10-difluor-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido[l,2,3-d,e][l,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico dissolvidos em 90 ml de ácido sulfúrico concentrado adicionam-se ás porções 3,7 g (36,6 mmol) de nitrato de potássio e agita-se 1 hora à temperatura ambiente. A mistura reactiva é vertida em 270 ml de água gelada. O sedimento resultante é filtrado por aspiração, é lavado com água e seco. Rendimento: 6,9 g (85% do valor teórico) ponto de fusão: > 300°C

Exemplo Q: ácido 8-amino-9,10-difluor-3-metil-7-oxo-2,3-dihidro-7H-piridof 1,2,3-d,e]-[ 1,3,41benzoxadiazino-6-carboxílico 4,0 g (12,2 mmol) de ácido 9,10-difluor-3-metil-8-nitro-7-oxo-2,3-dihidro-7H-pirido[l,2,3-d,e][l,3,4]benzoxadiazino-6-carboxílico e 1,2 g de paládio sobre carvão activado (10% de paládio) são postos em suspensão em 280 ml de etanol e procede-se à sua hidrogenação dois dias à pressão normal e à temperatura ambiente. A mistura reactiva é misturada com 280 ml de água e em seguida ajusta-se a pH 10-11 com soda cáustica 2N. O catalisador de hidrogenação é separado por filtração e o filtrado é ajustado a pH 5-6 com ácido clorídrico 2N. O sedimento resultante é separado por filtração, lavado com metanol e seco (fracção A). O catalisador de hidrogenação separado por filtração é por três vezes aquecido ao refluxo durante uma hora com 100 ml de 106 106

dimetilformamida (DMF) de cada vez e em seguida é de novo isolado fpor filtração. As soluções em DMF reunidas são concentradas em vácuo e secas (fracção B).

Rendimento: 3,0 g (83% do valor teórico) ponto de fusão: > 300°C.

Lisboa, - 4 OUT. 2000

M)

Dra. Maria Silvina Ferreira Agente Oficie! de Propriedade Indldtial R, Castilho, 201-3.° E - 1070-051 LISBOA Telefs. 213 851 339 - 213 854613

Claims

I I

1. Derivados de 8-amino-10-(azabicicloalquil)-pirido[ 1,2,3-d,e]( 1,3,4]-benzoxadiazina, de fórmula geral (I) '

na qual R1 representa hidrogénio ou Ci-C4-alquilo eventualmente substituído por hidroxi ou por halogéneo, R2 independentemente de R1 representa hidrogénio ou metilo, R3 representa hidrogénio ou Ci-C4-alquilo, R4 representa hidrogénio, alquilo com 1 a 4 átomos de carbono, eventualmente substituído por hidroxi, metoxi, amino, metilamino ομ dimetilamino, ou representa (5-metil-2-oxo-l,3-dioxol-4-il)-metilo, X1 representa hidrogénio ou halogéneo, Z representa radicais com as estruturas

em que R7 representa hidrogénio, hidroxi, -NR10RU, hidroximetilo, -CH2--NR10RU, carboxilo, metoxicarbonilo ou etoxicarbonilo, em que 2 2

R10 representa hidrogénio, Ci-C3-alquilo eventualmenle substituído por hidroxi, representa alcoxicarbonilo com 1 a 4 átomos de carbono na parte alcoxi, ou Ci-C3-acilo, Ru representa hidrogénio ou metilo, R8 representa hidrogénio, Ci-C3-alquilo de cadeia linear ou ramificada, ou ciclopropilo, R9 representa hidrogénio ou metilo, R6 representa hidrogénio ou metilo, R5 representa hidrogénio, metilo, ou radicais de estruturas - CH=CH-C02R5', -CH2-CH2-CO2R5', -CH2-CO-CH3, -CH2-CH2-CN, R5' representa metilo ou etilo, B representa-CH2-, O ou uma ligação directa e os seus hidratos e sais de adição de ácido farmaceuticamente utilizáveis, assim como os seus sais alcalinos, alcalinoterrosos, de prata e de guanidínio.

2. Processo para a preparação dos derivados de 8-amino- 10-(azabicicloalquil)-pirido[ 1,2,3-d,e][ 1,3,4]-benzoxadiazina, de fórmula geral (I) nh2 o

(I), na qual R1 representa hidrogénio ou Ci-C4-alquilo eventualmente substituído por hidroxi ou por halogéneo, R2 independentemente de R1 representa hidrogénio ou metilo, R3 representa hidrogénio ou Ci-C4-alquilo, R4 representa hidrogénio, alquilo com 1 a 4 átomos de carbono; eventualmente substituído por hidroxi, metoxi, amino, metilamino ou dimetilamino, ou representa (5-metil-2-oxo-l,3-dioxol~4-il)-metilo, X1 representa hidrogénio ou halogéneo, Z representa radicais com as estruturas

em que R7 representa hidrogénio, hidroxi, -NR10RH, hidroximetilo, -CH2--NR10Rn, carboxilo, metoxicarbonilo ou etoxicarbonilo, em que R10 representa hidrogénio, Ci-C3-alquilo eventualmente substituído por hidroxi, representa alcoxicarbonilo com 1 a 4 átomos de carbono na parte alcoxi, ou Ci-C3-acilo, R11 representa hidrogénio ou metilo, R8 representa hidrogénio, Ci-C3-alquilo de cadeia linear, ou ramificada, ou ciclopropilo, R9 representa hidrogénio ou metilo, R6 representa hidrogénio ou metilo, R5 representa hidrogénio, metilo, ou radicais de estruturas -CH=CH-C02R5', -CH2-CH2-CO2R5', -CH2-CO-CH3, -CH2-CH2-CN, R5' representa metilo ou etilo, B representa -CH2-, O ou uma ligação directa, caracterizado por se fazerem reagir compostos de fórmula (II) 4 4

na qual R1, R2, R3, R4 e X1 têm os significados acima indicados, e X2 representa halogéneo, em especial flúor ou cloro, com compostos de fórmula (III) Z-H (III), na qual Z tem o significado acima indicado, eventualmente na presença de meios de fixação de ácidos.

3. Compostos de fórmula (II)

na qual R1, R2, R3, R4 e X1 têm os significados indicados na reivindicação 1, e X2 representa halogéneo.

4. Processo para a preparação dos compostos de fórmula (II) de acordo com a reivindicação 3, caracterizado por se fazerem reagir compostos de fórmula (IV)

(IV), na qual R1, R2, R3, R4, X1 e X2 têm os significados indicados na reivindicação 3, com reagentes de nitrificação, e em seguida se reduzirem os compostos de nitro obtidos.

5. Compostos de fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1, na qual R1 representa hidrogénio ou Ci-C3-alquilo eventualmente substituído por hidroxi, R2 independentemente de R1 representa hidrogénio ou metilo, R3 representa hidrogénio, metilo ou etilo, R4 representa hidrogénio, alquilo com 1 a 4 átomos de carbono, eventualmente substituído por hidroxi, metoxi, amino, metilamino ou dimetilamino, ou representa (5-metil-2-oxo-l,3-dioxol-4-il)-metilo, X1 representa hidrogénio, flúor ou cloro, Z representa radicais com as estruturas

em que R7 representa hidrogénio, hidroxi, -NR10RU, hidroximetilo ou -CH2—NR10Rn, 6 em que R10 representa hidrogénio, Ci-C2-alquilo eventualmente substituído por hidroxi, representa alcoxicarbonilo com 1 a 4 átomos de carbono na parte alcoxi, ou Ci-C3-acilo, R11 representa hidrogénio ou metilo, R8 representa hidrogénio, Ci-C3-alquilo de cadeia linear ou ramificada, ou ciclopropilo, R9 representa hidrogénio ou metilo, R5 representa hidrogénio ou metilo, R6 representa hidrogénio, B representa -CH2-, O ou uma ligação directa, e os seus hidratos e sais de adição de ácido farmaceuticamente utilizáveis, assim como os seus sais alcalinos, alcalinoterrosos, de prata e de guanidínio.

6. Compostos de fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1, na qual R1 representa hidrogénio ou metilo, R2 representa hidrogénio, R3 representa metilo ou etilo, R4 representa hidrogénio, metilo ou etilo, X1 representa flúor, Z representa radicais com as estruturas

em que R7 representa hidrogénio, hidroxi, -NR10RU, hidroximetilo ou -CH2-NR1°R11, 7

em que ' R10 representa hidrogénio, metilo, alcoxicarbonilo com 1 a 4 átomos de carbono na parte alcoxi, ou Ci-C3-acilo, R11 representa hidrogénio ou metilo, R8 representa hidrogénio, Ci-C3-alquilo de cadeia linear ou ramificada, ou ciclopropilo, R6 representa hidrogénio, R9 representa hidrogénio ou metilo, R5 representa hidrogénio ou metilo, B representa -CH2-, O ou uma ligação directa, e os seus hidratos e sais de adição de ácido farmaceuticamente utilizáveis, assim como os seus sais alcalinos, alcalinoterrosos, de prata e de guanidínio.

7. Medicamentos contendo compostos de fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1.

8. Utilização dos compostos de fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1 para a preparação de medicamentos.

9. Utilização dos compostos de fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1 para a preparação de agentes antibacterianos. Lisboa, h mu ?nnn

: ajd Dra. Maria Silvina Ferreira Agente Oficial de Propriedade Industrial R, Castilho, 201-3;° £ - 1070-051 LISBOA Telels. 213 851 339 - 213 854 613