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PT3013814T - Compostos de tetrahidrocarbazol e carbazol carboxamida substituídos úteis como inibidores de quinases - Google Patents

Compostos de tetrahidrocarbazol e carbazol carboxamida substituídos úteis como inibidores de quinases Download PDF

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PT3013814T
PT3013814T PT147400949T PT14740094T PT3013814T PT 3013814 T PT3013814 T PT 3013814T PT 147400949 T PT147400949 T PT 147400949T PT 14740094 T PT14740094 T PT 14740094T PT 3013814 T PT3013814 T PT 3013814T
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PT
Portugal
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carbazole
fluoro
methylphenyl
carboxamide
hydroxypropan
Prior art date
Application number
PT147400949T
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English (en)
Inventor
A Tino Joseph
S Srivastava Anurag
Sung Ko Soo
A Galella Michael
M Langevine Charles
V Delucca George
Liu Qingjie
G Batt Douglas
Hunter Watterson Scott
Shi Qing
Beaudoin Bertrand Myra
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
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Publication date
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
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Description

DESCRIÇÃO
COMPOSTOS DE TETRAHIDROCARBAZOL E CARBAZOL CARBOXAMIDA SUBSTITUÍDOS ÚTEIS COMO INIBIDORES DE QUINASES A presente invenção refere-se de uma forma geral aos compostos de tetrahidrocarbazol e carbazol carboxamida substituídos úteis como inibidores de quinases, incluindo a modulação da tirosina quinase de Bruton (Btk) e outras quinases da família Tec, tais como Itk. Os compostos de tetrahidrocarbazol e carbazol carboxamida substituídos, as composições compreendendo tais compostos, e os métodos da sua utilização são fornecidos no presente documento. A invenção refere-se ainda às composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto de acordo com a invenção que é útil para o tratamento das condições relacionadas com a modulação de quinases e métodos para inibir a atividade das quinases, incluindo Btk e outras quinases da família Tec, tais como Itk, num mamífero.
As proteínas quinases, a maior família de enzimas humanas, abrangem mais de 500 proteínas. A Btk é um membro da família Tec de tirosina quinases, e é um regulador do desenvolvimento precoce das células B, assim como da ativação, sinalização e sobrevivência das células B maduras. A sinalização de células B através do recetor de células B (BCR) conduz a uma grande variedade de resultados biológicos, as quais por sua vez dependem do estágio de desenvolvimento da célula B. A magnitude e a duração dos sinais do BCR devem ser reguladas de forma precisa. A sinalização mediada pelo BCR aberrante pode provocar a ativação desregulada das células B e/ou a formação de autoanticorpos patogénicos que conduzem a várias doenças autoimunes e/ou inflamatórias. A mutação de Btk nos seres humanos resulta em agamaglobulinemia ligada ao X (XLA).
Esta doença está associada com a maturação deficiente das células B, com a produção diminuída de imunoglobulinas, com as respostas imunitárias independentes da célula T comprometidas e com a atenuação marcada do sinal de cálcio sustentado após a estimulação do BCR. A evidência do papel de Btk nos distúrbios alérgicos e/ou doença autoimune e/ou doença inflamatória, foi estabelecida em modelos de ratinho deficientes em Btk. Por exemplo, nos modelos pré-clínicos de murino padrão de lúpus eritematoso sistémico (LES), foi mostrado que a deficiência de Btk resultou numa melhoria marcada da progressão da doença. Além disso, os ratinhos deficientes em Btk também são resistentes ao desenvolvimento de artrite induzida por colagénio e são menos suscetíveis à artrite induzida por Staphylococcus.
Um grande conjunto de evidências sustenta o papel das células B e do sistema imunitário humoral na patogénese das doenças autoimunes e/ou inflamatórias. As terapêuticas à base de proteína (tais como o RITUXAN®) desenvolvidas para esgotar as células B, representam uma abordagem importante para o tratamento de várias doenças autoimunes e/ou inflamatórias. Devido ao papel da Btk na ativação de células B, os inibidores da Btk podem ser úteis como inibidores da atividade patogénica mediada pelas células B (tais como a produção de autoanticorpos). A Btk também é expressa em mastócitos e monõcitos e demonstrou-se ser importante para a função destas células. Por exemplo, a deficiência de Btk em ratinhos está associada com a ativação deficiente de mastócitos mediada por IgE (diminuição marcada da liberação de TNF-alfa e de outras citocinas inflamatórias), e a deficiência de Btk em seres humanos está associada com uma produção de TNF-alfa muito reduzida pelos monócitos ativados.
Assim, a inibição da atividade da Btk pode ser útil para o tratamento de distúrbios alérgicos e/ou doenças autoimunes e/'ou inflamatórias incluindo, mas não limitadas a: LES, artrite reumatoide, múltiplas vasculites, púrpura trombocitopénica idiopática (ITP), miastenia gravis, rinite alérgica, esclerose múltipla (EM), rejeição de transplante, diabetes tipo I, nefrite membranosa, doença inflamatória do intestino, anemia hemolítica autoimune, tiroidite autoimune, doenças de aglutinina fria e quente, síndrome de Evans, síndrome urémica hemolítica/púrpura trombocitopénica trombótica (HUS/TTP), sarcoidose, síndrome de Sjôgren, neuropatias periféricas (por exemplo, síndrome de Guillain-Barré), pênfigo vulgar e asma.
Além disso, foi relatado que a Btk desempenha um papel no controlo da sobrevivência de células B em certos cancros de células B. Por exemplo, foi mostrado que a Btk é importante para a sobrevivência de células de leucemia linfoblãstica aguda de células B positivas a BCR-Abl. Assim a inibição da atividade de Btk pode ser útil para o tratamento de linfoma de células B e leucemia.
Tendo em conta as numerosas condições que são contempladas como beneficiando do tratamento que envolve a modulação das proteínas quinases, é imediatamente evidente que novos compostos capazes de modular as proteínas quinases tais como a Btk e métodos de utilização destes compostos devem fornecer benefícios terapêuticos substanciais a uma ampla variedade de pacientes. 0 documento de patente U.S. N.° 8.084.620 e o documento WO 2011/159857 divulgam compostos tricíclicos de carboxamida úteis como inibidores de quinases, incluindo a modulação de Btk e outras quinases da família Tec.
Permanece ainda uma necessidade de compostos úteis como inibidores da Btk e ainda tendo seletividade sobre a tirosina quinase Jak2. Além disso, permanece ainda uma necessidade de compostos úteis como inibidores da Btk que tenham seletividade em relação à tirosina quinase Jak2 e que também possuam potência melhorada no ensaio de expressão de CD69 estimulada por BCR do sangue total.
Os requerentes encontraram compostos potentes que têm atividade como inibidores de Btk. Além disso, os requerentes descobriram compostos que têm atividade como inibidores de Btk e são seletivos sobre a tirosina quinase Jak2. Ainda mais, os requerentes descobriram compostos que possuem atividade como inibidores de Btk, são seletivos em relação à tirosina quinase Jak2, e têm potência melhorada no ensaio de expressão de CD69 estimulada por BCR no sangue total. Estes compostos são fornecidos para serem úteis como produtos farmacêuticos com valores desejáveis de estabilidade, biodisponibilidade, índice terapêutico e toxicidade que são importantes para a sua capacidade medicamentosa.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO A presente invenção fornece compostos de tetrahidrocarbazol e carbazol substituídos, que são úteis como inibidores da Btk, e são úteis para o tratamento de doenças proliferativas, doenças alérgicas, doenças autoimunes e doenças inflamatórias. A presente invenção também fornece composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto de Fórmula (I) e um portador farmaceuticamente aceitável. A presente invenção também fornece um composto de Fórmula (I) para utilização na inibição da atividade da Btk. A presente invenção também fornece um composto de Fórmula (I) para utilização no tratamento de distúrbios alérgicos e/ou doenças autoimunes e/ou inflamatórias. A presente invenção também fornece um composto de Fórmula (I) para utilização no tratamento de doenças proliferativas, tais como o cancro. A presente invenção também fornece um composto de Fórmula (I) para utilização no tratamento de uma doença ou distúrbio associado com a atividade de Btk. A presente invenção também fornece processos e intermediários para a preparação dos compostos de Fórmula (I) - A presente invenção também fornece um composto de Fórmula (I) para utilização em terapêutica. A presente invenção também fornece a utilização dos compostos de Fórmula (I) para o fabrico de um medicamento para o tratamento ou profilaxia de condições relacionadas com a Btk, tais como doenças proliferativas, doenças alérgicas, doenças autoimunes e doenças inflamatórias. A presente invenção também fornece a utilização dos compostos de Fórmula (I) para o fabrico de um medicamento para o tratamento de cancro.
Os compostos de Fórmula (I) e as composições que compreendem os compostos de Fórmula (I) podem ser utilizados no tratamento, prevenção ou cura de várias condições relacionadas com a Btk. As composições farmacêuticas compreendendo estes compostos são úteis no tratamento, prevenção ou atraso da progressão de doenças ou distúrbios numa variedade de áreas terapêuticas, tais como as doenças proliferativas, doenças alérgicas, doenças autoimunes e doenças inflamatórias.
Estes e outros aspetos da invenção serão apresentados na forma expandida à medida que a divulgação continua.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS A invenção é ilustrada por referência aos desenhos anexos descritos abaixo. A FIG. 1 mostra a estereoquímica absoluta do solvato de ácido diacético do Intermediário 30. A FIG. 2 mostra a estereoquímica absoluta do
Intermediário 35. A FIG. 3 mostra a estereoquímica absoluta do metanolato do Exemplo 2, forma cristalina Μ-1. A FIG. 4 mostra a estereoquímica absoluta do metanolato do Exemplo 11, forma cristalina M-l. A FIG. 5 mostra a estereoquímica absoluta do dimetanolato do Exemplo 28, forma cristalina M2-1. A FIG. 6 mostra a estereoquímica absoluta do dimetanolato do Exemplo 33, forma cristalina M2-1. A FIG. 7 mostra os padrões experimentais e simulados de PXRD à temperatura ambiente (Radiação Cu Κα λ = 1,5418 Ã) do monohidrato do Exemplo 11, Forma cristalina H-l. A FIG.8 mostra o padrão PXRD simulado à temperatura ambiente (Radiação Cu Κα: λ = 1,5418 Ã) da Forma cristalina N-2 do Exemplo 11. A FIG. 9 mostra os padrões experimentais e simulados de PXRD à temperatura ambiente (Radiação Cu Κα λ = 1,5418 Ã) do metanolato do Exemplo 11, Forma cristalina M-l. A FIG.10 mostra o padrão de PXRD simulado a 173 K (Radiação Cu Κα λ = 1,5418 Â) do dimetanolato do Exemplo 28, Forma cristalina M2-1. A FIG.11 mostra o padrão de PXRD experimental à temperatura ambiente e o padrão de PXRD simulado a 173 K (Radiação Cu Κα: λ = 1,5418 Ã) do dimetanolato do Exemplo 33, Forma cristalina M2-1.
DESCRIÇÃO DETALHADA O primeiro aspeto da presente invenção fornece pelo menos um composto de Fórmula
(I): em que: as duas linhas tracejadas representam duas ligações individuais ou duas ligações duplas; Q ê:
Ri é F, Cl, -CN, OU -CH3 ; R2 é Cl OU -CH3; R3 é -C(CH3)2OH OU -CH2CH2OH;
Ra é H OU -CH3; cada Rb é independentemente F, Cl, -CH3, e/ou -OCH3; e n é zero, 1, ou 2.
Os atropisómeros são estereoisómeros que resultam da rotação impedida ao redor de um eixo de ligação individual onde a barreira rotacional é bastante elevada para levar em conta o isolamento dos isómeros rotacionais individuais. (LaPlante et al. , J. Med. Chem. , 54:7005-7022 (2011).)
Os compostos de Fórmula
(A): possuem dois eixos estereogénicos: ligação (a) entre o grupo de tetrahidrocarbazol/carbazol tricíclico e o grupo de fenilo; e ligação (b) entre o grupo de diona heterocíclico assimétrico Q e o grupo de fenilo. Devido à natureza não simétrica das substituições nos anéis conectados pelas ligações isoladas rotuladas a e b, e devido à rotação limitada ao redor destas ligações provocadas pelo impedimento estérico, os compostos de Fórmula (A) podem formar isómeros rotacionais. Se as barreiras de energia rotacionais forem suficientemente elevadas, as rotações impedidas ao redor da ligação (a) e/ou ligação (b) ocorrem em taxas que são bastante lentas para permitir o isolamento dos atropisómeros separados como compostos diferentes. Assim, os compostos de Fórmula (A) podem formar quatro isómeros rotacionais, que sob certas condições, tais como cromatografia numa fase estacionária quiral, podem ser separados em atropisómeros individuais. Em solução, os compostos de Fórmula (A) podem ser fornecidos como uma mistura de quatro diastereómeros, ou misturas de dois pares de diastereómeros, ou atropisómeros individuais.
Para os compostos de Fórmula (A) , o par de isómeros rotacionais formados pela rotação impedida ao redor do eixo estereogénico (a) pode ser representado pelos compostos de Fórmula (I) e Fórmula (B) tendo as estruturas:
Verificou-se que os compostos de Fórmula (I) e os compostos de Fórmula (B) são separáveis e estáveis em solução às temperaturas ambiente e fisiológica. Adicionalmente, os isómeros rotacionais são formados pela rotação impedida ao redor do eixo estereogénico (b) . Também se verificou que estes dois atropisómeros dos compostos de Fórmula (I) são separáveis e estáveis em solução às temperaturas ambiental e fisiológica.
Os compostos quirais, tais como os compostos de Fórmula (A), podem ser separados por várias técnicas incluindo a Cromatografia de Fluido Supercrítica (SFC). A SFC, que é uma forma de HPLC de fase normal, é uma técnica de separação que utiliza o C02 fluido super/subcrítico e modificadores orgânicos polares tais como álcoois como fases móveis. (White et al., J. Chromatography A, 1074:175-185 (2005).)
Os compostos de Fórmula (I) em que Q é
podem ser representados pela estrutura de Fórmula (II):
Os quatro isómeros rotacionais do composto de Fórmula (A) em que Q é
t podem ser representados pelos compostos de Fórmula (II) tendo as estruturas de Fórmula (II-11 e (II-2):
e os compostos de Fórmula (B) tendo as estruturas de Fórmula (B-l) e (B-2):
Os compostos de Fórmula (I) em que Q é
podem ser representados pela estrutura de Fórmula (III):
Os quatro isómeros rotacionais do composto de Fórmula (A) em que Q é
podem ser representados pelos compostos de Fórmula (III) tendo as estruturas de Fórmula (III-1) e (III-2) :
(111 - 2) e os compostos de Fórmula (B) tendo as estruturas de Fórmula (B-3) e (B-4) :
(B-4).
Os compostos de Fórmula (I) em que Q é
podem ser representados pela estrutura de Fórmula (IV):
IV) .
Os quatro isómeros rotacionais do composto de Fórmula (A) em que Q é
podem ser representados pelos compostos de Fórmula (IV) tendo as estruturas de Fórmula (IV-1) e (IV-2):
(IV-2) e os compostos de Fórmula (B) tendo as estruturas de Fórmula (B-5) e (B-6):
(B-6).
Os compostos de Fórmula (I) em que Q é
podem ser representados pela estrutura de Fórmula (V):
Os quatro isómeros rotacionais do composto de Fórmula (A) em que Q é
podem ser representados pelos compostos de Fórmula (V) , tendo as estruturas de Fórmula (V-l) e (V-2):
:v-2) e os compostos de Fórmula (B) tendo as estruturas de Fórmula (B-7) e (B-8):
:b-8) .
As configurações espaciais absolutas dos atropisõmeros podem ser determinadas pela cristalografia de raios x de cristal único.
Os compostos de Fórmula (I) podem ser fornecidos como atropisõmeros individuais ou como misturas compreendendo os dois atropisõmeros de Fórmula (I) em quaisquer proporções. A mistura dos dois atropisõmeros de Fórmula (I) pode opcionalmente conter um ou ambos atropisõmeros de Fórmula (B) em quaisquer proporções.
Os compostos de Fórmula (I) em que Ri é F, Cl, ou -CH3 correspondem ao (R)-atropisómero com respeito ao eixo estereogénico formado através da ligação (a) . Os compostos de Fórmula (B) em que Ri é F, Cl, ou -CH3 correspondem ao (S)-atropisómero com respeito ao eixo estereogénico formado através da ligação (a).
Os compostos de Fórmula (I) em que Rx é -CN correspondem ao (S)-atropisómero com respeito ao eixo estereogénico formado através da ligação (a). Os compostos de Fórmula (B) em que Ri é -CN correspondem ao (R) -atropisómero com respeito ao eixo estereogénico formado através da ligação (a).
Como aqui utilizado, a frase "as duas linhas tracejadas representam duas ligações individuais ou duas ligações duplas" refere-se aos compostos de Fórmula (A) , (B), (I), (II), (III), (IV) , e (V) em que as duas linhas tracejadas são simultaneamente ligações individuais ou as duas linhas tracejadas são simultaneamente ligações duplas.
Por exemplo, os compostos de Fórmula (I) em que as duas linhas tracejadas são simultaneamente ligações individuais são compostos de tetrahidrocarbazol tendo a estrutura de Fórmula (IA) e os compostos de Fórmula (I) em que as duas linhas tracejadas são simultaneamente ligações duplas são compostos de carbazol tendo a estrutura de Fórmula (IB):
Os compostos de tetrahidrocarbazol representados pela Fórmula (IA) também possuem um centro quiral no átomo de carbono ao qual o substituinte R3 está ligado, e assim pode existir como S- e R-isõmeros neste centro quiral.
Estes isómeros são separáveis e são estáveis. Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (IA) com o centro quiral de carbono ao qual o substituinte RJ está ligado, como o S-isómero. Uma forma de realização fornece os compostos de Fórmula (IA) com o centro quiral de carbono ao qual o substituinte R3 está ligado, como o R-isómero.
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (I) em que R3 é -C(CH3)2OH; e R1# R2, e Q são definidos no primeiro aspeto. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que Q é:
e Ra, Rb, e n são definidos no primeiro aspeto. Também incluídos nesta forma de realização estão os compostos de Fórmula (IA) . Outros compostos incluídos nesta forma de realização são os compostos de Fórmula (IB).
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (II) em que R3 é -C(CH3)2OH; e Rlf R2j Ra, Rb- e n são definidos no primeiro aspeto. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que Ra é -CH3 incluindo -CD3.
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (III) em que R3 é -C(CH3)2OH; e Ri, R2; Rb, e n são definidos no primeiro aspeto. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que cada Rb é independentemente F ou Cl.
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (IV) em que R3 é -C(CH3)2OH; e Ri e R2 são definidos no primeiro aspeto. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que Ri é F, Cl, ou -CH3.
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (V) em que R3 é -C(CH3)2OH; e Ri e R2 são definidos no primeiro aspeto. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que Ri é F, Cl, ou -CH3.
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (I) em que Ri é F. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos de Fórmula (IA). Outros compostos incluídos nesta forma de realização são os compostos de Fórmula (IB).
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (I) em que Ri é Cl. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos de Fórmula (IA). Outros compostos incluídos nesta forma de realização são os compostos de Fórmula (IB).
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (I) em que Ri é F ou Cl. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos de Fórmula (IA). Outros compostos incluídos nesta forma de realização são os compostos de Fórmula (IB).
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (I) em que Ri é -CH3. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos de Fórmula (IA). Outros compostos incluídos nesta forma de realização são os compostos de Fórmula (IB).
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (I) em que Ri é -CN. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos de Fórmula (IA). Outros compostos incluídos nesta forma de realização são os compostos de Fórmula (IB).
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (I) em que Ri é F, Cl, ou -CN. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos de Fórmula (IA). Outros compostos incluídos nesta forma de realização são os compostos de Fórmula (IB).
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (I) em que Ri é -CH3 ou -CN. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos de Fórmula (IA). Outros compostos incluídos nesta forma de realização são os compostos de Fórmula (IB).
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (I) em que R;L é F, Cl, ou -CH3. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos de Fórmula (IA). Outros compostos incluídos nesta forma de realização são os compostos de Fórmula (IB).
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (I) em que R2 é Cl. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos de Fórmula (IA). Outros compostos incluídos nesta forma de realização são os compostos de Fórmula (IB) . Também, incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R3 é -C(CH3)2OH.
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (I) em que R2 é -CH3. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos de Fórmula (IA), Outros compostos incluídos nesta forma de realização são os compostos de Fórmula (IB) . Também, incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R3 é -C(CH3)2OH.
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (I) em que R3 é -C(CH3)2OH. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos de Fórmula (IA). Outros compostos incluídos nesta forma de realização são os compostos de Fórmula (IB).
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (I) em que cada Rb é independentemente F e/ou Cl. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que n é 1 ou 2, Também incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que n é 2 e cada Rb é F.
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (I) em que n é 1 e Rb é -CH3 ou -OCH3.
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (I) em que n é zero. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos de Fórmula (IA). Outros compostos incluídos nesta forma de realização são os compostos de Fórmula (IB).
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (II) em que as duas linhas tracejadas são simultaneamente ligações individuais e R:L, R2, R3, Ra, Rb e n são definidos no primeiro aspeto. Os compostos desta forma de realização possuem a estrutura de Fórmula (IIA):
Os dois isómeros rotacionais do composto de Fórmula (IIA) são representados pelas estruturas de Fórmula (IIA-1) e (IIA-2):
Incluídos nesta forma de realização estão os compostos de Fórmula (IIA), (IIA-1), e (IIA-2) em que R3 é -C(CH3)2OH.
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (II) em que as duas linhas tracejadas são simultaneamente ligações duplas e Ri, R2, R3, Ra, Rb e n são definidos no primeiro aspeto. Os compostos desta forma de realização possuem a estrutura de Fórmula (IIB):
Os dois isómeros rotacionais do composto de Fórmula (IIB) são representados pelas estruturas de Fórmula (IIB-1) e (IIB-2):
(IIB-2).
Incluídos nesta forma de realização estão os compostos de Fórmula (IIB), (IIB-1) e (IIB-2) em que R3 é -C(CH3)2OH.
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (II) em que Ra é H. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos de Fórmula (IIA). Outros compostos incluídos nesta forma de realização são os compostos de Fórmula (IIB).
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (II) em que Ra é -CH3. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que Ra é -CD3. Também, incluídos nesta forma de realização estão os compostos de Fórmula (IIA). Outros compostos incluídos nesta forma de realização são os compostos de Fórmula (IIB),
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (III) em que as duas linhas tracejadas são simultaneamente ligações individuais e R:1, R2/ R3, Rb e n são definidos no primeiro aspeto. Os compostos desta forma de realização possuem a estrutura de Fórmula (IIIA):
Os dois isómeros rotacionais do composto de Fórmula (IIIA) são representados pelas estruturas de Fórmula (IIIA-1) e (IIIA-2):
Incluídos nesta forma de realização estão os compostos de Fórmula (IIIA), (IIIA-1) e (IIIA-2) em que R3 é C (CH3) 2oh.
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (III) em que as duas linhas tracejadas são simultaneamente ligações duplas e Ri, R2, R3, Rb e n são definidos no primeiro aspeto. Os compostos desta forma de realização possuem a estrutura de Fórmula (IIIB):
Os dois isómeros rotacionais do composto de Fórmula (IIIB) são representados pelas estruturas de Fórmula (IIIB-1) e (IIIB-2):
Incluídos nesta forma de realização estão os compostos de Fórmula (IIIB) , (IIIB-1) , e (IIIB-2) em que R3 é -C(CH3)2OH.
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (IV) em que as duas linhas tracejadas são simultaneamente ligações individuais e Ri, R2, e R3 são definidos no primeiro aspeto. Os compostos desta forma de realização possuem a estrutura de Fórmula (IVA):
Os dois isómeros rotacionais do composto de Fórmula (IVA) são representados pelas estruturas de Fórmula (IVA-1) e (IVA-2):
Incluídos nesta forma de realização estão os compostos de Fórmula (IVA), (IVA-1) e (IVA-2) em que R3 é -C(CH3)2OH.
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (IV) em que as duas linhas tracejadas são simultaneamente ligações duplas e Ri, R2 e R3 são definidos no primeiro aspeto. Os compostos desta forma de realização possuem a estrutura de Fórmula (IVB):
Os dois isómeros rotacionais do composto de Fórmula (IVB) são representados pelas estruturas de Fórmula (IVB-1) e (IVB-2):
Incluídos nesta forma de realização estão os compostos de Fórmula (IVB), (IVB-1), e (IVB-2) em que R3 é -C(CH3)2OH.
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (V) em que as duas linhas tracejadas são simultaneamente ligações individuais e Ri# R2 e R3 são definidos no primeiro aspeto. Os compostos desta forma de realização possuem a estrutura de Fórmula (VA):
Os dois isómeros rotacionais do composto de Fórmula (VA) são representados pelas estruturas de Fórmula (VA-1) e (VA-2):
Incluídos nesta forma de realização estão os compostos de Fórmula (VA), (VA-1) e (VA-2) em que R3 é -C(CH3)2OH.
Uma forma de realização fornece compostos de Fórmula (V) em que as duas linhas tracejadas são simultaneamente ligações duplas e Ri, R2 e R3 são definidos no primeiro aspeto. Os compostos desta forma de realização possuem a estrutura de Fórmula (VB):
Os dois isómeros rotacionais do composto de Fórmula (VB) são representados pelas estruturas de Fórmula (VB-1) e (VB-2) :
Incluídos nesta forma de realização estão os compostos de Fórmula (VB), (VB-1) e (VB-2) em que R3 é -C(CH3)2OH.
Uma forma de realização fornece um composto de Fórmula (I) tendo a estrutura:
em que Ri é Cl ou F; e Ra é -CH3 incluindo -CD3.
Uma forma de realização fornece um composto de Fórmula (I) tendo a estrutura:
em que Ri é Cl ou F; e Ra é -CH3 incluindo -CD3.
Uma forma de realização fornece um composto de Fórmula (I) tendo a estrutura:
em que Rx é Cl ou F; e Ra é -CH3 incluindo -CD3.
Uma forma de realização fornece um composto de Fórmula (I) tendo a estrutura:
Uma forma de realização fornece um composto de Fórmula (I) ou tendo a estrutura:
Uma forma de realização fornece um composto de Fórmula (I) tendo a estrutura:
Uma forma de realização fornece um composto selecionado dos exemplos exemplificados dentro do âmbito do primeiro aspeto.
Uma forma de realização fornece um composto selecionado de qualquer lista de subconjuntos de compostos dentro do âmbito do primeiro aspeto ou de qualquer uma das formas de realização acima.
Uma forma de realização fornece um composto de Fórmula (II) em que o composto é: 3-cloro-4-(R)-(3-(R)-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-l,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2 -metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (1); 3-cloro-4-(R)-(3-(S)-(8-fluoro-1-metil- 2.4- dioxo-l,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7- (2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (2); 3- cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4-(R)-(2-metil-3-(1-metil- 2.4- dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil)- 9H- carbazol-1-carboxamida (3); 3-cloro-4-(R)-(3 -(1,8-dimetil- 2.4- dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)- 7 - (2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (4); 3- cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4-(R)-(3-(R)-(7-metoxi-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2 -metilfenil)-9H-carbazol-l-carboxamida (5); 3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4-(R)-(3-(S)-(7-metoxi-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-9H-carbazol-1-carboxamida (6); 3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4-(R)-(3-(8-metoxi-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-9H-carbazol-l-carboxamida (7); 3-cloro-4-(R)-(3-(6-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil) -7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (8); 3-cloro- 4-(R)-(3-(7-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-l,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan- 2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (9); 3-cloro-4-(R)-(3 -(6,8-difluoro-2,4-dioxo-l,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il) - 2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (10); 3-cloro-4-(R)-(3-(S)-(8-fluoro-1- metil (d3) - 2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (11); 3-cloro-4-(R)-(3-(R)-(8-fluoro-1- metil (d3) - 2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (12); 3-cloro-4-(R)-(3 -(8-fluoro-2,4-dioxo-1,2- di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (13); 3- cloro-4 -(R)-(3 -(R)-(8-fluoro-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3 (4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan- 2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (14); 3-ciano-4-(S)-(3-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)- 2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (15 e 16); 3-fluoro-4-(R)-(3-(8-fluoro-1-metil- 2.4- dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil) -7- (2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (17); 3- fluoro-4-(R)-(3-(S)-(8 -fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (18); 3-fluoro-4-(R)-(3- (S)-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin- 3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (19); 3-fluoro-4-(R)-(3-(8-fluoro- 2.4- dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7- (2-hidroxipropan-2-il) -9H-carbazol-1-carboxamida (20); 3- fluoro-4-(R)-(3-(R)-(8 -fluoro-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (21); 3-fluoro-4-(R)-(3- (S)-(8-fluoro-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (22); 6-cloro-5-(R)-(3-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil) -2-(S)-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida (25); 6-cloro-5-(R)-(3-(S)-(8-fluoro-1-metil- 2.4- dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-2 - (S)-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida (26); 6-fluoro-5-(R)-(3-(S)-(8-fluoro-l-metil-2 ,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2 -metilfenil)-2-(R)-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida (27); 6-fluoro-5-(R)-(3- (S)-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin- 3(4H)-il)-2-metilfenil)-2-(S)-(2-hidroxipropan-2-il)- 2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida (28); 4-(R)- (3-(S)- (8-fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-3-metil-9H-carbazol-l-carboxamida (29); 3-cloro-4-(2-cloro-3-(1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil) -7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (42); 3- cloro-4-(R)-(2-cloro-3-(R)-(1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (43); 3-cloro-4-(2-cloro-3-(8- fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H) -il)fenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (44); 3-cloro-4-(R)-(2-cloro-3-(R)-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil) -7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (45); 4- (2-cloro-3- (8-fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil)-3-fluoro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (46); 3- cloro-4-(R)-(2-cloro-3- (8-fluoro-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (47);
Uma forma de realização fornece um composto de Fórmula (III) em que o composto é: 3-cloro-4-(R)-(3-(3-(4- fluorofenil)-2,6-dioxo-2,3-di-hidropirimidin-l(6H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (23); 4 -(R)-(3 -(5-cloro-1,3-dioxo-1H- pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-3-fluoro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (30 e 31); 3-cloro-4-(R)-(3-(R)- (5-cloro-1,3-dioxo-1H-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (32); 3-cloro-4-(R)-(3-(S)-(5-cloro-1,3-dioxo-1H-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (33); 3-cloro-4-(R)-(3-(5-fluoro-l,3-dioxo-lH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil) -7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (34); 3- cloro-4-(R)-(3-(5-fluoro-l,3-dioxo-lH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (35 e 36); 3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4-(R)-(3-(5-metoxi-l,3-dioxo-lH-pirido[l,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil) -9H-carbazol-1-carboxamida (37); 3-fluoro-4-(R)-(3-(5-fluoro-l,3-dioxo-1H-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (40 e 41);
Uma forma de realização fornece um composto de Fórmula (IV) em que o composto é: 3-cloro-4-(R)-(3-(5,7-dioxo-5H-tiazolo[3,2-c]pirimidin-6(7H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (38 e 39).
Uma forma de realização fornece um composto de Fórmula (V) em que o composto é: 3-cloro-4-(R)-(3-(3-(4- fluorofenil)-2,6-dioxo-2,3-di-hidropirimidin-1(6H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (24).
Numa fornia de realização, é fornecida uma composição compreendendo um composto de Fórmula (I) . Incluída nesta forma de realização está uma composição compreendendo uma mistura em qualquer proporção de (i) um composto de Fórmula (I) e (ii) um composto de Fórmula (B).
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo pelo menos 98 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (I), com base no peso equivalente total do composto de Fórmula (I) e o seu composto de atropisõmero de Fórmula (B) . Incluídas nesta forma de realização estão as composições compreendendo de 99 0 em peso equivalente, 9 9,5 0 em peso equivalente, 9 9,8 0 em peso equivalente, e 99,9 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (I) com base no peso equivalente total do composto de Fórmula (I) e seu composto de atropisõmero de Fórmula (B) . As composições desta forma de realização incluem as composições farmacêuticas.
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo um composto de Fórmula (II) . Incluída nesta forma de realização está uma composição compreendendo uma mistura em qualquer proporção de (i) um composto de Fórmula (II) e (ii) um ou ambos dos seus compostos atropisómeros de Fórmula (B-l) e (B-2).
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo pelo menos 98 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (II) , com base no peso equivalente total do composto de Fórmula (II) e os seus compostos atropisómeros de Fórmula (B-l) e (B-2). Incluídas nesta forma de realização estão as composições compreendendo 99 0 em peso equivalente, 99,5 0 em peso equivalente, 99,8 0 em peso equivalente e 99,9 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (II) com base no peso equivalente total do composto de Fórmula (II) e os seus compostos atropisómeros de Fórmula (B-l) e (B-2). As composições desta forma de realização incluem as composições farmacêuticas.
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo um composto de Fórmula (III). Incluída nesta forma de realização está uma composição compreendendo uma mistura em qualquer proporção de (i) um composto de Fórmula (III) e (ii) um ou ambos dos seus compostos atropisómeros de Fórmula (B-3) e (B-4).
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo pelo menos 98 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (III), com base no peso equivalente total do composto de Fórmula (III) e os seus compostos atropisómeros de Fórmula (B-3) e (B-4). Incluídas nesta forma de realização estão as composições compreendendo 99 0 em peso equivalente, 99,5 0 em peso equivalente, 99,8 0 em peso equivalente, e 99,9 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (III) com base no peso equivalente total do composto de Fórmula (III) e seus compostos atropisómeros de Fórmula (B-3) e (B-4). As composições desta forma de realização incluem as composições farmacêuticas.
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo um composto de Fórmula (IV) . Incluída nesta forma de realização está uma composição compreendendo uma mistura em qualquer proporção de (i) um composto de Fórmula (IV) e (ii) um ou ambos dos seus compostos atropisómeros de Fórmula (B-5) e (B-6).
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo pelo menos 98 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (IV) , com base no peso equivalente total do composto de Fórmula (IV) e seus compostos atropisómeros de Fórmula (B-5) e (B-6). Incluídas nesta forma de realização estão as composições compreendendo 99 0 em peso equivalente, 99,5 0 em peso equivalente, 99,8 0 em peso equivalente, e 99,9 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (IV) com base no peso equivalente total do composto de Fórmula (IV) e os seus compostos atropisómeros de Fórmula (B-5) e (B-6). As composições desta forma de realização incluem as composições farmacêuticas.
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo um composto de Fórmula (V) . Incluída nesta forma de realização está uma composição compreendendo uma mistura em qualquer proporção de (i) um composto de Fórmula (V) e (ii) um ou ambos dos seus compostos atropisómeros de Fórmula (B-7) e (B-8).
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo pelo menos 98 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (V), com base no peso equivalente total do composto de Fórmula (V) e os seus compostos atropisómeros de Fórmula (B-7) e (B-8). Incluídas nesta forma de realização estão as composições compreendendo em 99 0 em peso equivalente, 99,5 0 em peso equivalente, 99.8 0 em peso equivalente, e 99,9 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (V) com base no peso equivalente total do composto de Fórmula (V) e os seus compostos atropisómeros de Fórmula (B-7) e (B-8). As composições desta forma de realização incluem as composições farmacêuticas.
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo um composto de Fórmula (II-1) . Incluída nesta forma de realização está uma composição compreendendo uma mistura em qualquer proporção de (i) um composto de Fórmula (II-1) e (ii) um ou mais dos seus compostos atropisómeros de Fórmula (II-2), Fórmula (B-l) e (B-2).
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo pelo menos 98 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (II-1), com base no peso equivalente total dos compostos de Fórmula (II-l), (II-2), (B-l) e (B-2) . Incluídas nesta forma de realização estão as composições compreendendo em 99 0 em peso equivalente, 9 9,5 0 em peso equivalente, 9 9,8 0 em peso equivalente, e 99.9 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (II-l) com base no peso equivalente total dos compostos de Formula (II-l), (II-2), (B-l) e (B-2). As composições desta forma de realização incluem as composições farmacêuticas.
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo um composto de Fórmula (II-2) . Incluída nesta forma de realização está uma composição compreendendo uma mistura em qualquer proporção de (i) um composto de Fórmula (II-2) e (ii) um ou mais de seus compostos atropisómeros de Fórmula (II-l), Fórmula (B-l) e (B-2).
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo pelo menos 98 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (II-2), com base no peso equivalente total dos compostos de Fórmula (II-l), (II-2), (B-l) e (B-2) . Incluídas nesta forma de realização estão as composições compreendendo 99 0 em peso equivalente, 99,5 0 em peso equivalente, 99,8 0 em peso equivalente, e 99,9 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (II-2) com base no peso equivalente total dos compostos de Fórmula (II-1), (II-2), (B-l) e (B-2). As composições desta forma de realização incluem as composições farmacêuticas.
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo um composto de Fórmula (III-l) . Incluída nesta forma de realização está uma composição compreendendo uma mistura em qualquer proporção de (i) um composto de Fórmula (III-1) e (ii) um ou mais de seus compostos atropisómeros de Fórmula (III-2), Fórmula (B-3) e (B-4) .
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo pelo menos 98 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (III-l), com base no peso equivalente total dos compostos de Fórmula (III-l), (III-2) , (B-3) e (B-4) . Incluídas nesta forma de realização estão as composições compreendendo em 99 0 em peso equivalente, 9 9,5 0 em peso equivalente, 9 9,8 0 em peso equivalente, e 99,9 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (III-1) com base no peso equivalente total dos compostos de Fórmula (III-l) , (III-2) , (B-3) e (B-4) . As composições desta forma de realização incluem as composições farmacêuticas.
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo um composto de Fórmula (III-2) . Incluída nesta forma de realização está uma composição compreendendo uma mistura em qualquer proporção de (i) um composto de Fórmula (III-2) e (ii) um ou mais de seus compostos atropisómeros de Fórmula (III-l), Fórmula (B-3) e (B-4) .
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo pelo menos 98 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (III-2), com base no peso equivalente total dos compostos de Fórmula (III-l), (III-2) , (B-3) e (B-4) . Incluídas nesta forma de realização estão as composições compreendendo em 99 0 em peso equivalente, 9 9,5 0 em peso equivalente, 9 9,8 0 em peso equivalente, e 99.9 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (III- 2) com base no peso equivalente total dos compostos de Fórmula (III-l), (III-2), (B-3) e (B-4). As composições desta forma de realização incluem as composições farmacêuticas.
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo um composto de Fórmula (IV-1). Incluída nesta forma de realização está uma composição compreendendo uma mistura em qualquer proporção de (i) um composto de Fórmula (IV-1) e (ii) um ou mais de seus compostos atropisómeros de Fórmula (IV-2), Fórmula (B-5) e (B-6).
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo pelo menos 98 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (IV-1), com base no peso equivalente total dos compostos de Fórmula (IV-1), (IV-2), (B-5) e (B-6) . Incluídas nesta forma de realização estão as composições compreendendo em 99 0 em peso equivalente, 9 9,5 0 em peso equivalente, 9 9,8 0 em peso equivalente, e 99.9 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (IV-1) com base no peso equivalente total dos compostos de Formula (IV-1), (IV-2), (B-5) e (B-6). As composições desta forma de realização incluem as composições farmacêuticas.
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo um composto de Fórmula (IV-2). Incluída nesta forma de realização está uma composição compreendendo uma mistura em qualquer proporção de (i) um composto de Fórmula (IV-2) e (ii) um ou mais de seus compostos atropisómeros de Fórmula (IV-1), Fórmula (B-5) e (B-6).
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo pelo menos 98 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (IV-2), com base no peso equivalente total dos compostos de Fórmula (IV-1), (IV-2), (B-5) e (B-6) . Incluídas nesta forma de realização estão as composições compreendendo 99 0 em peso equivalente, 99,5 0 em peso equivalente, 99,8 0 em peso equivalente, e 99,9 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (IV-2) com base no peso equivalente total dos compostos de Fórmula (IV-1), (IV-2), (B-5) e (B-6). As composições desta forma de realização incluem as composições farmacêuticas.
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo um composto de Fórmula (V-l). Incluída nesta forma de realização está uma composição compreendendo uma mistura em qualquer proporção de (i) um composto de Fórmula (V-l) e (ii) um ou mais de seus compostos atropisómeros de Fórmula (V-2), Fórmula (B-7) e (B-8).
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo pelo menos 98 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (V-l) , com base no peso equivalente total dos compostos de Fórmula (V-l), (V-2), (B-7) e (B-8). Incluídas nesta forma de realização estão as composições compreendendo 99 0 em peso equivalente, 99,5 0 em peso equivalente, 9 9,8 0 em peso equivalente, e 9 9,9 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (V-l) com base no peso equivalente total dos compostos de Fórmula (V-l), (V- 2), (B-7) e (B-8). As composições desta forma de realização incluem as composições farmacêuticas.
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo um composto de Fórmula (V-2). Incluída nesta forma de realização está uma composição compreendendo uma mistura em qualquer proporção de (i) um composto de Fórmula (V-2) e (ii) um ou mais de seus compostos atropisómeros de Fórmula (V-l), Fórmula (B-7) e (B-8).
Numa forma de realização, é fornecida uma composição compreendendo pelo menos 98 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (V-2), com base no peso equivalente total dos compostos de Fórmula (V-l), (V-2), (B-7) e (B-8).
Incluídas nesta forma de realização estão as composições compreendendo 99 0 em peso equivalente, 99,5 0 em peso equivalente, 99,8 0 em peso equivalente, e 99,9 0 em peso equivalente de um composto de Fórmula (V-2) com base no peso equivalente total dos compostos de Fórmula (V-l), (V- 2), (B-7) e (B-8). As composições desta forma de realização incluem as composições farmacêuticas.
Formas cristalinas
Quadro 1
Numa forma de realização, o composto do Exemplo 2 é fornecido como um material cristalino compreendendo a Forma M-l. Esta forma cristalina do composto do Exemplo 2 compreende uma forma cristalina de solvato de metanol referida no presente documento como ®Forma M-l® ou ®M-1 Forma® do Exemplo 2. A M-l Forma do Exemplo 2 compreende uma molécula de metanol para cada molécula do Exemplo 2.
Numa forma de realização, a M-l Forma do composto do Exemplo 2 é caracterizada pelos parâmetros celulares unitários aproximadamente iguais aos que se seguem: Dimensões da célula: a = 9,75 Ã b = 14,21 À c = 21,26 A o: = 90,0° β = 90,0° Y = 90,0°
Grupo espacial: P212121
Moléculas do Exemplo 2/unidade assimétrica: 1 Volume/Número de moléculas na célula unitária = 736 Ã3 Densidade (calculada) = 1,391 g/cm3, em que os parâmetros da célula unitária de Forma M-l são medidos a uma temperatura de cerca de 203 K.
Ainda noutra forma de realização adicional, a M-l forma do Exemplo 2 é caracterizada pelas coordenadas atómicas fracionárias substancialmente como listadas no Quadro 2.
Quadro 2
Numa forma de realização, o composto do Exemplo 11 é fornecido como um material cristalino compreendendo a Forma Η-1. Esta forma cristalina do composto do Exemplo 11 compreende uma forma cristalina de monohidrato referida no presente documento como "Forma H-l" ou "H-l Forma" do Exemplo 11. A H-l Forma do Exemplo 11 compreende uma molécula de água por cada molécula do Exemplo 11.
Numa forma de realização, a H-l Forma do composto do Exemplo 11 é caracterizada pelos parâmetros celulares unitários aproximadamente iguais aos que se seguem: Dimensões da célula: a = 9,41 Ã b = 14,51 Â c = 21,12 À o: = 90,0° β = 90,0° Y = 90,0°
Grupo espacial: P212121
Moléculas do Exemplo 11/unidade assimétrica: 1 Volume/Número de moléculas na célula unitária = 721 Ã3 Densidade (calculada) = 1,396 g/cm3, em que os parâmetros da célula unitária de Forma H-l são medidos a uma temperatura próxima à temperatura ambiente.
Noutra forma de realização, H-l forma do Exemplo 11 é caracterizada por um padrão de difração de raios x em põ (PXRD) simulado substancialmente de acordo com o padrão mostrado na Figura 7 e/ou por um padrão de PXRD experimental substancialmente de acordo com o padrão mostrado na Figura 7.
Ainda noutra forma de realização adicional, a H-l Forma do Exemplo 11 é caracterizada pelas coordenadas atómicas fracionárias substancialmente como listadas no Quadro 3.
Numa forma de realização, o composto do Exemplo 11 é fornecido como um material cristalino compreendendo a Forma N-2. Esta forma cristalina do composto do Exemplo 11 compreende uma forma cristalina pura referida no presente documento como "Forma N-2" ou "N-2 Forma" do Exemplo 11.
Numa forma de realização, a N-2 Forma do composto do Exemplo 11 é caracterizada pelos parâmetros celulares unitários aproximadamente iguais aos que se seguem: Dimensões da célula: a = 10,89 À b = 9,47 Â c = 14,28 Ã α = 90,0° β - 105,5° γ = 90,0°
Grupo espacial: P2X
Moléculas do Exemplo 11/unidade assimétrica: 1 Volume/Número de moléculas na célula unitária = 710 Â3 Densidade (calculada) = 1,369 g/cm3, em que os parâmetros da célula unitária de Forma N-2 são medidos a uma temperatura próxima à temperatura ambiente.
Noutra forma de realização, a N-2 forma do Exemplo 11 é caracterizada por um padrão de difraçâo de raios x em pó (PXRD) simulado substancialmente de acordo com o padrão mostrado na Figura 8.
Ainda mais uma outra forma de realização, a N-2 Forma do Exemplo 11 é caracterizada pelas coordenadas atómicas fracionárias substancialmente como listadas no Quadro 4.
Numa forma de realização, o composto do Exemplo 11 é fornecido como um material cristalino compreendendo a Forma Μ-1. Esta forma cristalina do composto do Exemplo 11 compreende uma forma cristalina de solvato de metanol referida no presente documento como "Forma M-l" ou "M-l Forma" do Exemplo 11, A M-l Forma do Exemplo 11 compreende uma molécula de metanol para cada molécula do Exemplo 11.
Numa forma de realização, a M-l Forma do composto do Exemplo 11 é caracterizada pelos parâmetros celulares unitários aproximadamente iguais aos que se seguem: Dimensões da célula: a = 9,78 Ã b = 14,26 A c = 21,38 Â α = 90,0° β = 90,0° Y = 90,0°
Grupo espacial: Ρ2χ2ι2ι
Moléculas do Exemplo 11/unidade assimétrica: 1 Volume/Número de moléculas na célula unitária = 746 Ã3 Densidade (calculada) = 1,381 g/em3, em que os parâmetros da célula unitária de Forma M-l são medidos a uma temperatura próxima à temperatura ambiente.
Noutra forma de realização, a M-l forma do Exemplo 11 é caracterizada por um padrão de difração de raios x em pó (PXRD) simulado substancialmente de acordo com o padrão mostrado na Figura 9 e/ou por um padrão de PXRD experimental substancialmente de acordo com o padrão mostrado na Figura 9,
Ainda noutra forma de realização adicional, a M-l Forma do Exemplo 11 é caracterizada pelas coordenadas atómicas fracionárias substancialmente como listadas no Quadro 5. _Quadro 5_
Numa forma de realização, o composto do Exemplo 28 é fornecido como um material cristalino compreendendo a Forma M2-1. Esta forma cristalina do composto do Exemplo 28 compreende uma forma cristalina de solvato de metanol referida aqui como "Forma M2-1" ou "M2-1 Forma" do Exemplo 28. A M2-! Forma do Exemplo 28 compreende duas moléculas de metanol para cada molécula do Exemplo 28.
Numa forma de realização, a M2-1 Forma do composto do Exemplo 28 é caracterizada pelos parâmetros celulares unitários aproximadamente iguais ao que se segue:
Dimensões da célula: a = 9,24 A b = 7,97 Â c = 22,12 Á oí = 90,0° β = 94,1° Y = 90,0°
Grupo espacial: P2:.
Moléculas do Exemplo 28/unidade assimétrica: 1 Volume/Número de moléculas na célula unitária = 813 Â3 Densidade (calculada) = 1,301 g/cm3, em que os parâmetros da célula unitária de Forma M2-1 são medidos em uma temperatura de cerca de 173 K.
Noutra forma de realização, a M2-1 forma do Exemplo 28 é caracterizada por um padrão de difração de raios x em pó (PXRD) simulado substancialmente de acordo com o padrão mostrado na Figura 10.
Ainda noutra forma de realização adicional, a M2-1 Forma do Exemplo 28 é caracterizada pelas coordenadas atómicas fracionãrias substancialmente como listadas no Quadro 6.
Quadro 6
Numa forma de realização, o composto do Exemplo 33 é fornecido como um material cristalino compreendendo a Forma M2-1. Esta forma cristalina do composto do Exemplo 33 compreende uma forma cristalina de solvato de metanol referida aqui como "Forma M2-1" ou "M2-1 Forma" do Exemplo 33, A M2-1 Forma do Exemplo 33 compreende duas moléculas de metanol para cada molécula do Exemplo 33.
Numa forma de realização, a M2-1 Forma do composto do Exemplo 33 é caracterizada pelos parâmetros celulares unitários aproximadamente iguais ao que se segue:
Dimensões da célula: a = 7,41 Â b = 9,74 Â C = 44,55 A a = SO ,0° β = 90,0° γ = 90,0°
Grupo espacial: P2 2 2;
Moléculas do Exemplo 33/unidade assimétrica: 1 Volume/Número de moléculas na célula unitária = 3214 À3 Densidade (calculada) = 1,346 g/cmJ, em que os parâmetros da célula unitária de Forma M2-1 são medidos a uma temperatura de cerca de 173 K.
Em outra forma de realização, a M2-1 forma do Exemplo 33 é caracterizada por um padrão de difração de raios x em pó (PXRD) simulado substancialmente de acordo com o padrão mostrado na Figura 11 e/ou por um padrão de PXRD experimental substancialmente de acordo com o padrão mostrado na Figura 11.
Ainda noutra forma de realização adicional, a M2-1 Forma do Exemplo 33 é caracterizada pelas coordenadas atómicas fracionárias substancialmente como listadas no Quadro 7. _Quadro 7_
A presente invenção pode ser incorporada noutras formas específicas sem se afastar dos seus atributos essenciais. Esta invenção abrange todas as combinações de aspetos e/ou formas de realização da invenção mencionados no presente documento. Entende-se que qualquer uma e todas as formas de realização da presente invenção podem ser tomadas em conjunto com qualquer outra forma de realização ou formas de realização para descrever as formas de realização adicionais. Também deve ficar entendido que cada elemento individual das formas de realização destina-se a ser combinado com qualquer um e todos os outros elementos de qualquer forma de realização para descrever uma forma de realização adicional.
DEFINIÇÕES
As características e as vantagens da invenção podem ser mais facilmente compreendidas pelos peritos na especialidade após a leitura da seguinte descrição detalhada. Deve ser observado que certas características da invenção que são, por razões de clareza, descritas acima e abaixo no contexto das formas de realização separadas, também podem ser combinadas para formar uma única forma de realização. Inversamente, várias características da invenção que são, por razões de brevidade, descritas no contexto de uma única forma de realização, também podem ser combinadas de modo a formar subcombinações das mesmas. As formas de realização identificadas no presente documento como exemplares ou preferidas são destinadas a serem ilustrativas e não limitativas. A não ser que especif icamente mencionadas de outra maneira, as referências feitas no singular também pode incluir as no plural. Por exemplo, "um” e "uma" podem referir-se a cada um, ou um ou mais.
Como utilizada no presente documento, a fase "compostos" refere-se a pelo menos um composto. Por exemplo, um composto de Fórmula (I) inclui um composto de Fórmula (I) e dois ou mais compostos de Fórmula (I). A não ser que de outra maneira indicado, qualquer heteroátomo com valências não satisfeitas é assumido como tendo átomos de hidrogénio suficientes para satisfazer as valências. São listadas abaixo as definições de vários termos utilizados para descrever a presente invenção. Estas definições aplicam-se aos termos tal como são utilizados ao longo da memória descritiva (a não ser que sejam de outro modo limitados em casos específicos) individualmente ou como parte de um grupo maior.
Ao longo da memória descritiva, os grupos e seus substituintes podem ser selecionados por um perito na especialidade para fornecer frações e compostos estáveis.
De acordo com uma convenção utilizada na técnica,
é utilizado nas fórmulas estruturais do presente documento para representar a ligação que é o ponto de ligação da fração ou substituinte ao núcleo ou estrutura da cadeia principal. A frase "farmaceuticamente aceitável" é empregue no presente documento para se referir àqueles compostos, materiais, composições e/ou formas farmacêuticas que são, dentro do âmbito do correto julgamento médico, adequados para utilização em contacto com os tecidos de seres humanos e animais sem excessiva toxicidade, irritação, resposta alérgica, ou outro problema ou complicação, comensurados com uma relação de benefício/risco razoável.
Os compostos de Fórmula (I) podem ser fornecidos como sólidos amorfos ou sólidos cristalinos. A liofilização pode ser empregue para fornecer os compostos de Fórmula (I) como sólidos amorfos.
Deve ser ainda compreendido que os solvatos (por exemplo, hidratos) dos compostos de Fórmula (I) também estão dentro do âmbito da presente invenção. 0 termo "solvato" significa uma associação física de um composto de Fórmula (I) com uma ou mais moléculas de solvente, quer orgânicas quer inorgânicas. Esta associação física inclui a ligação de hidrogénio. Em certos casos, o solvato será capaz de isolamento, por exemplo, quando uma ou mais moléculas de solvente forem incorporadas na rede cristalina do sólido cristalino. ®Solvato® abrange os solvatos tanto em fase de solução como isoláveis. Os solvatos exemplares incluem hidratos, etanolatos, metanolatos, isopropanolatos, solvatos de acetonitrilo e solvatos de acetato de etilo. Os métodos de solvatação são conhecidos na técnica.
Além disso, os compostos de Fórmula (I), após a sua preparação, podem ser isolados e purificados para se obter uma composição contendo uma quantidade em peso igual ou maior do que 99 0 de um composto de Fórmula (I) (®substancialmente pura®), que é então utilizada ou formulada como descrito no presente documento. Tais compostos ®substancialmente puros® de Fórmula (I) também são contemplados no presente documento como parte da presente invenção. ®Composto estável® e ®estrutura estável® destinam-se a indicar um composto que é suficientemente robusto para sobreviver ao isolamento até um grau útil de pureza a partir de uma mistura de reação, e formulação num agente terapêutico eficaz. A presente invenção destina-se a incorporar compostos estáveis. ®Quantidade terapeuticamente eficaz® pretende incluir uma quantidade de um composto da presente invenção isoladamente ou uma quantidade da combinação de compostos reivindicados ou uma quantidade de um composto da presente invenção em combinação com outros ingredientes ativos eficazes para atuar como um inibidor da Btk, ou eficaz para tratar ou prevenir os estados de doença autoimunes e/ou inflamatórios, tais como a esclerose múltipla e a artrite reumatoide.
Como utilizado no presente documento, ®tratar® ou ®tratamento® cobrem o tratamento de um estado de doença num mamífero, particularmente num ser humano, e inclui: (a) a prevenção da ocorrência do estado de doença num mamífero, em particular, quando tal mamífero está predisposto ao estado de doença, mas ainda não foi diagnosticado como o tendo; (b) a inibição do estado de doença, isto é, interromper o seu desenvolvimento; e/ou (c) o alívio do estado de doença, isto é, provocando a regressão do estado de doença.
Os compostos da presente invenção destinam-se a incluir todos os isótopos de átomos que ocorrem nos presentes compostos. Os isótopos incluem aqueles átomos que têm o mesmo número atómico, mas números de massa diferentes. A título de exemplo geral e sem limitação, os isótopos de hidrogénio incluem deutério (D) e trítio (T) . Os isótopos de carbono incluem 13C e 14C. Os compostos isotopicamente marcados da invenção podem geralmente ser preparados por técnicas convencionais conhecidas pelos peritos na especialidade ou através de processos análogos àqueles descritos no presente documento, utilizando um reagente apropriado isotopicamente marcado em lugar do reagente não marcado de outra forma empregue. Por exemplo, metilo (~CH3) também inclui grupos de metilo deuterados tais como -CD?>.
Os compostos de acordo com a Fórmula (I) podem ser administrados por qualquer meio adequado para a condição ser tratada, a qual pode depender da necessidade de um tratamento específico do local ou quantidade do composto de Fórmula (I) a ser libertado.
Também englobada dentro desta invenção está uma classe de composições farmacêuticas compreendendo um composto de Fórmula (I) e um ou mais portadores e/ou diluentes e/ou adjuvantes não tóxicos farmaceuticamente aceitáveis (coletivamente referidos no presente documento como materiais "portadores") e, se desejável, outros ingredientes ativos. Os compostos de Fórmula (I) podem ser administrados por qualquer via adequada, de preferência na forma de uma composição farmacêutica adaptada a uma tal via, e numa dose eficaz para o tratamento planeado. Os compostos e as composições da presente invenção podem, por exemplo, ser administrados por via oral, mucosa ou parentérica, incluindo por via intravascular, intravenosa, intraperitoneal, subcutânea, intramuscular e intraesternal em formulações de unidade de dosagem contendo portadores, adjuvantes e veículos convencionais farmaceuticamente aceitáveis. Por exemplo, o portador farmacêutico pode conter uma mistura de manitol ou lactose e celulose microcristalina. A mistura pode conter componentes adicionais tais como um agente lubrificante, por exemplo, estearato de magnésio e um agente desintegrante tal como a crospovidona. A mistura de portador pode ser carregada numa cápsula de gelatina ou prensada como um comprimido. A composição farmacêutica pode ser administrada como uma forma farmacêutica oral ou uma infusão, por exemplo.
Para administração oral, a composição farmacêutica pode estar sob a forma, por exemplo, de um comprimido, cápsula, cápsula de líquidos, suspensão ou líquido. A composição farmacêutica é preferivelmente produzida na forma de uma unidade de dosagem contendo uma quantidade particular do ingrediente ativo. Por exemplo, a composição farmacêutica pode ser fornecida como um comprimido ou cápsula compreendendo uma quantidade de ingrediente ativo no intervalo de cerca de 0,1 a 1000 mg, de preferência de cerca de 0,25 a 250 mg, e mais preferivelmente de cerca de 0,5 a 100 mg. Uma dose diária adequada para um ser humano ou outro mamífero pode variar amplamente dependendo da condição do paciente e de outros fatores, mas, pode ser determinada utilizando métodos de rotina.
Qualquer composição farmacêutica contemplada no presente documento pode, por exemplo, ser libertada por via oral através de quaisquer preparações orais aceitáveis e adequadas. As preparações orais exemplares incluem, mas não são limitadas a, por exemplo, comprimidos, trociscos, pastilhas, suspensões aquosas e oleosas, pós ou grânulos dispersíveis, emulsões, cápsulas sólidas e moles, cápsulas de líquido, xaropes e elixires. As composições farmacêuticas destinadas para a administração oral podem ser preparadas de acordo com quaisquer métodos conhecidos na técnica para o fabrico de composições farmacêuticas destinadas à administração oral. A fim de fornecer preparações farmaceuticamente palatáveis, uma composição farmacêutica de acordo com a invenção pode conter pelo menos um agente selecionado a partir de agentes edulcorantes, agentes aromatizantes, agentes colorantes, emolientes, antioxidantes e agentes conservantes.
Um comprimido pode, por exemplo, ser preparado através da mistura de pelo menos um composto de Fórmula (I) com pelo menos um excipiente não tóxico farmaceuticamente aceitável adequado para o fabrico de comprimidos. Os excipientes exemplares incluem, mas não são limitados a, por exemplo, diluentes inertes, tais como, por exemplo, carbonato de cálcio, carbonato de sódio, lactose, fosfato de cálcio e fosfato de sódio; agentes de granulação e desintegração, tais como, por exemplo, celulose microcristalina, croscarmelose de sódio, amido de milho e ácido algínico; agentes aglutinantes, tais como, por exemplo, amido, gelatina, polivinilpirrolidona e goma acácia; e agentes lubrificantes, tais como, por exemplo, estearato de magnésio, ácido esteárico e talco. Adicionalmente, um comprimido pode ser não revestido ou revestido por técnicas conhecidas para mascarar o mau sabor de um medicamento de sabor desagradável, ou retardar a desintegração e absorção do ingrediente ativo no trato gastrointestinal, sustentando assim os efeitos do ingrediente ativo durante um período mais longo. Os materiais de mascaramento do sabor solúveis em água exemplares incluem, mas não são limitados a, hidroxipropil-metilcelulose e hidroxipropil-celulose. Materiais de atraso temporal exemplares incluem, mas não são limitados a, etil celulose e acetato butirato de celulose.
As cápsulas de gelatina sólida podem, por exemplo, ser preparadas através da mistura de pelo menos um composto de Fórmula (I) com pelo menos um diluente sólido inerte, tal como, por exemplo, carbonato de cálcio,· fosfato de cálcio,· e caulino.
As cápsulas de gelatina mole podem, por exemplo, ser preparadas através da mistura de pelo menos um composto de Fórmula (I) com pelo menos um portador solúvel em água, tal como, por exemplo, polietilenoglicol; e pelo menos um meio oleoso, tal como, por exemplo, óleo de amendoim, parafina líquida e azeite.
Uma suspensão aquosa pode ser preparada, por exemplo, através da mistura de pelo menos um composto de Fórmula (I) com pelo menos um excipiente adequado para o fabrico de uma suspensão aquosa. Excipientes exemplares adequados para o fabrico de uma suspensão aquosa incluem, mas não são limitados a, por exemplo, agentes de suspensão, tais como, por exemplo, carboximetilcelulose de sódio, metilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose, alginato de sódio, ácido algínico, polivinilpirrolidona, goma tragacanto e goma acácia; agentes dispersantes ou humectantes, tais como, por exemplo, fosfatídeos de ocorrência natural, por exemplo, lecitina; produtos da condensação de óxido de alquileno com ácidos gordos, tais como, por exemplo, estearato de polioxietileno; produtos da condensação de óxido de etileno com álcoois alifáticos de cadeia longa, tais como, por exemplo, heptadecaetileno-oxicetanol; produtos de condensação de óxido de etileno com ésteres parciais derivados de ácidos gordos e hexitol, tais como, por exemplo, monooleato de polioxietileno sorbitol; e produtos da condensação de óxido de etileno com ésteres parciais derivados de ácidos gordos e anidridos de hexitol, tais como, por exemplo, monooleato de polietileno sorbitano. Uma suspensão aquosa também pode conter pelo menos um conservante, tal como, por exemplo, p-hidroxibenzoato de etilo e n-propilo; pelo menos um agente corante; pelo menos um agente aromatizante; e/ou pelo menos um agente edulcorante, incluindo, mas não limitado a, por exemplo, sacarose, sacarina e aspartame.
As suspensões oleosas podem, por exemplo, ser preparadas mediante a suspensão de pelo menos um composto de Fórmula (I) num óleo vegetal, tal como, por exemplo, óleo de amendoim; azeite; óleo de gergelim e óleo de coco; ou em óleo mineral, tal como, por exemplo, parafina líquida. Uma suspensão oleosa também pode conter pelo menos um agente espessante, tal como, por exemplo, cera de abelha; parafina sólida e álcool cetílico. A fim de fornecer uma suspensão oleosa palatável, pelo menos um dos agentes edulcorantes já descritos anteriormente, e/ou pelo menos um agente aromatizante pode ser adicionado à suspensão oleosa. Uma suspensão oleosa pode conter ainda pelo menos um conservante, incluindo, mas não limitado a estes, por exemplo, um antioxidante, tal como, por exemplo, hidroxianisol butilado e alfa~tocoferol.
Os pós e grânulos dispersáveis podem, por exemplo, ser preparados através da mistura de pelo menos um composto de Fórmula (I) com pelo menos um agente dispersante e/ou humectante; pelo menos um agente de suspensão; e/ou pelo menos um conservante. Agentes dispersantes, agentes humectantes e agentes de suspensão adequados são como já descritos acima. Os conservantes exemplares incluem, mas não são limitados a, por exemplo, antioxidantes, por exemplo, ácido ascórbico. Além disso, os pós e grânulos dispersíveis também podem conter pelo menos um excipiente, incluindo, mas não limitado a, por exemplo, agentes edulcorantes; agentes aromatizantes e agentes corantes.
Uma emulsão de pelo menos um composto de Fórmula (I) pode, por exemplo, ser preparada como uma emulsão de óleo em água. A fase oleosa das emulsões compreendendo compostos de fórmula (I) pode ser constituída de ingredientes conhecidos de um modo conhecido. A fase oleosa pode ser fornecida, mas não é limitada a, por exemplo, através de um óleo vegetal, tal como, por exemplo, azeite e óleo de amendoim; um óleo mineral, tal como, por exemplo, parafina líquida; e suas misturas. Embora a fase possa compreender meramente um emulsionante, ela pode compreender uma mistura de pelo menos um emulsionante com uma gordura ou um óleo ou com ambos, uma gordura e um óleo. Os agentes emulsionantes adequados incluem, mas não são limitados a, por exemplo, fosfatídeos de ocorrência natural, por exemplo, lecitina de soja; ésteres ou ésteres parciais derivados de ácidos gordos e anidridos de hexitol, tais como, por exemplo, monooleato de sorbitano; e produtos da condensação de ésteres parciais com óxido de etileno, tais como, por exemplo, monooleato de polioxietileno sorbitano. Preferivelmente, um emulsionante hidrófilo é incluído em conjunto com um emulsionante lipofílico que atua como estabilizante. É também preferível incluir tanto um óleo quanto uma gordura. Juntos, os emulsionantes com ou sem estabilizantes constituem a assim chamada cera emulsionante, e a cera juntamente com o óleo e a gordura constituem a assim chamada base de pomada emulsionante que forma a fase oleosa dispersa das formulações de creme. Uma emulsão também pode conter um agente edulcorante, um agente aromatizante, um conservante e/ou um antioxidante. Os emulsionantes e estabilizantes de emulsão adequados para uso na formulação da presente invenção incluem Tween 60, Span 80, álcool cetoestearílico, álcool miristílico, monoestearato de glicerilo, lauril sulfato de sódio, diestearato de glicerilo isoladamente ou com uma cera, ou outros materiais bem conhecidos na técnica.
Os compostos de Fórmula (I) também podem, por exemplo, ser administrados por via intravenosa, por via subcutânea e/ou por via intramuscular através de qualquer forma injetável farmaceuticamente aceitável e adequada. As formas injetáveis exemplares incluem, mas não são limitados a, por exemplo, soluções aquosas estéreis compreendendo veículos e solventes aceitáveis, tais como, por exemplo, água, solução de Ringer e solução de cloreto de sódio isotõnica,· microemulsões estéreis de óleo em água; e suspensões aquosas ou oleaginosas.
As formulações para a administração parentérica podem estar sob a forma de soluções ou suspensões de injeção aquosas ou não-aquosas isotónicas estéreis. Estas soluções e suspensões podem ser preparadas a partir de pós ou grânulos estéreis, utilizando um ou mais dos portadores ou diluentes mencionados para utilização nas formulações para administração por via oral ou através da utilização de outros agentes dispersantes ou humectantes e agentes de suspensão adequados. Os compostos podem ser dissolvidos em agua, polietilenoglicol, propilenoglicol, etanol, oleo de milho, óleo de semente de algodão, óleo de amendoim, óleo de gergelim, álcool benzílico, cloreto de sódio, goma tragacanto e/ou vários tampões. Outros adjuvantes e modos de administração são bem e amplamente conhecidos na técnica farmacêutica. 0 ingrediente ativo também pode ser administrado por injeção como uma composição com portadores adequados incluindo solução salina, dextrose ou água, ou com ciclodextrina (isto é, CAPTISQL®), solubilização com cossolvente (por exemplo, propilenoglicol) ou solubilização micelar (isto é, Tween 80). A preparação injetável estéril também pode ser uma solução ou suspensão injetável estéril num diluente ou solvente parentericamente aceitável não tóxico, por exemplo, como uma solução em 1,3-butanodiol. Entre os veículos e solventes aceitáveis que podem ser empregues estão a água, solução de Ringer e solução de cloreto de sódio isotónica. Além disso, óleos estéreis, fixos são convencionalmente empregues como um solvente ou meio de suspensão. Para este propósito qualquer óleo fixo suave pode ser empregue, incluindo mono- ou diglicerídeos sintéticos. Além disso, os ácidos gordos tais como ácido oleico encontram uso na preparação de injetáveis.
Uma microemulsão de óleo em água injetável estéril pode, por exemplo, ser preparada através de 1) dissolução de pelo menos um composto de Fórmula (I) numa fase oleosa, tal como, por exemplo, uma mistura de óleo de soja e lecitina; 2) combinação da Fórmula (I) contendo a fase oleosa com uma mistura de água e glicerol e 3) processamento da combinação para formar uma microemulsão.
Uma suspensão aquosa ou oleaginosa estéril pode ser preparada de acordo com métodos já conhecidos na técnica. Por exemplo, uma solução ou suspensão aquosa estéril pode ser preparada com um diluente ou solvente parentericamente aceitável não tóxico, tal como, por exemplo, 1,3-butano diol; e uma suspensão oleaginosa estéril pode ser preparada com um solvente aceitável estéril não tóxico ou meio de suspensão, tal como, por exemplo, óleos fixos estéreis, por exemplo, mono- ou diglicéridos sintéticos; e ácidos gordos, tais como, por exemplo, ácido oleico.
Os portadores, adjuvantes e veículos farmaceuticamente aceitáveis que podem ser utilizados nas composições farmacêuticas da presente invenção incluem, mas não são limitados a, permutadores iõnicos, alumina, estearato de alumínio, lecitina, sistemas de libertação de medicamentos autoemulsionantes (SEDDS) tais como succinato de d-alfa-tocoferol polietilenoglicol 1000, tensioativos utilizados nas formas de dosagem farmacêuticas tais como Tweens, óleo de rícino polietoxilado tal como o tensioativo CREMOPHOR® (BASF), ou outras matrizes de libertação poliméricas semelhantes, proteínas do soro, tais como albumina do soro humano, substâncias tampão tais como fosfatos, glicina, ácido sórbico, sorbato de potássio, misturas de glicéridos parciais de ácidos gordos vegetais saturados, água, sais ou eletrólitos, tais como sulfato de protamina, fosfato de hidrogénio dissódico, fosfato de hidrogénio potássico, cloreto de sódio, sais de zinco, sílica coloidal, trissilicato de magnésio, polivinil pirrolidona, substâncias à base de celulose, polietilenoglicol, carboximetilcelulose de sódio, poliacrilatos, ceras, polímeros de bloco de polietileno-polioxipropileno, polietileno glicol e lanolina. Ciclodextrinas tais como alfa-, beta- e gama-ciclodextrina, ou derivados quimicamente modificados tais como hidroxialquilciclodextrinas, incluindo 2- e 3-hidroxipropil-ciclodextrinas, ou outros derivados solubilizados também podem ser vantajosamente utilizados para melhorar a libertação de compostos das fórmulas descritas no presente documento.
Os compostos farmaceuticamente ativos desta invenção podem ser processados de acordo com os métodos convencionais de farmácia para produzir agentes medicinais para administração a pacientes, incluindo seres humanos e outros mamíferos. As composições farmacêuticas podem ser sujeitas a operações farmacêuticas convencionais tais como esterilização e/ou podem conter adjuvantes convencionais, tais como conservantes, estabilizantes, agentes humectantes, emulsionantes, tampões, etc. Os comprimidos e pílulas podem adicionalmente ser preparados com revestimentos entéricos. Tais composições também podem compreender adjuvantes, tais como agentes humectantes, edulcorantes, aromatizantes e perfumantes.
As quantidades de compostos que são administrados e o regime de dosagem para tratar uma condição de doença com os compostos e/ou composições desta invenção dependem de uma variedade de fatores, incluindo a idade, peso, sexo, condição médica do indivíduo, o tipo de doença, a gravidade da doença, a via e frequência de administração, e o composto particular empregue. Assim, o regime de dosagem pode variar amplamente, mas pode ser determinado rotineiramente utilizando métodos padrão. Uma dose diária de cerca de 0,001 a 100 mg/kg de peso corporal, preferivelmente entre cerca de 0,0025 e cerca de 50 mg/kg de peso corporal e ainda mais preferivelmente entre cerca de 0,005 a 10 mg/kg de peso corporal, pode ser apropriada. A dose diária pode ser administrada numa a quatro doses por dia. Outros regimes de dosagem incluem uma dose por semana e uma dose por ciclo de dois dias.
Para os propósitos terapêuticos, os compostos ativos desta invenção são habitualmente combinados com um ou mais adjuvantes apropriados para a via de administração indicada. Se administrados por via oral, os compostos podem ser misturados com lactose, sacarose, amido em pó, ésteres de celulose de ácidos alcanoicos, ésteres alquílicos de celulose, talco, ácido esteárico, estearato de magnésio, óxido de magnésio, sais de sódio e cálcio de ácidos fosfóricos e sulfúricos, gelatina, goma de acácia, alginato de sódio, polivinilpirrolidona, e/ou álcool polivinílico, e depois comprimidos ou encapsulados para a administração conveniente. Tais cápsulas ou comprimidos podem conter uma formulação de libertação controlada como pode ser fornecida numa dispersão de composto ativo em hidroxipropilmetil celulose.
As composições farmacêuticas desta invenção compreendem pelo menos um composto de Fórmula (I) e opcionalmente um agente adicional selecionado de qualquer portador, adjuvante e veículo farmaceuticamente aceitável. As composições alternativas desta invenção compreendem um composto da Fórmula (I) aqui descrito, ou um profármaco deste, e um portador, adjuvante ou veículo farmaceuticamente aceitável.
UTILIDADE
Os compostos da invenção modulam a atividade de quinases, incluindo a modulação de Btk. Outros tipos de atividade de quinases que podem ser modulados pelos compostos da presente invenção incluem, mas não são limitados, à família Tec de compostos, tais como BMX, Btk, ITK, TXK e Tec, e seus mutantes.
Consequentemente, os compostos de Fórmula (I) possuem utilidade no tratamento de condições associadas com a modulação da atividade de quinases, e particularmente a inibição seletiva da atividade de Btk. Tais condições incluem doenças mediadas pelas células B em que os níveis de citocina são modulados como uma consequência da sinalização intracelular.
Como utilizado no presente documento, os termos "tratar” ou "tratamento" abrangem uma ou ambas as medidas responsivas e de profilaxia, por exemplo, medidas designadas para inibir ou retardar o início da doença ou distúrbio, alcançar uma redução completa ou parcial dos sintomas ou estado de doença, e/ou para aliviar, melhorar, diminuir ou curar a doença ou distúrbio e/ou os seus sintomas.
Em consideração da sua atividade como inibidores seletivos da Btk, os compostos de Fórmula (I) são úteis no tratamento de condições associadas com as citocinas incluindo, mas não limitadas a, doenças inflamatórias tais como doença de Crohn e colite ulcerativa, asma, doença do enxerto contra hospedeiro, doença pulmonar obstrutiva crónica; doenças autoimunes tais como a doença de Graves, artrite reumatoide, lúpus eritematoso sistémico, psoríase; distúrbios ósseos destrutivos tais como a doença de reabsorção óssea, osteoartrite, osteoporose, distúrbio ósseo relacionados com múltiplos mielomas; distúrbios proliferativas tais como leucemia mieloide aguda, leucemia mieloide crónica; distúrbios angiogénicos tais como os distúrbios angiogénicos incluindo tumores sólidos, neovascularização ocular, e hemangiomas infantis; doenças infeciosas tais como sépsis, choque séptico e shigelose; doenças neurodegenerativas tais como a doença de Alzheimer, doença de Parkinson, isquemias cerebrais ou doença neurodegenerativa provocada por lesão traumática, doenças oncológicas e virais tais como o melanoma metastático, sarcoma de Kaposi, mieloma múltiplo e a infeção por VIH e retinite por CMV, SIDA, respetivamente.
Mais particularmente, as condições específicas ou doenças que podem ser tratadas com os compostos da invenção incluem, sem limitação, pancreatite (aguda ou crónica), asma, alergias, síndrome da angustia respiratória do adulto, doença pulmonar obstrutiva crónica, glomerulonefrite, artrite reumatoide, lúpus eritematoso sistémico, escleroderma, tiroidite crónica, doença de Graves, gastrite autoimune, diabetes, anemia hemolítica autoimune, neutropenia autoimune, trombocitopenia, dermatite atópica, hepatite ativa crónica, miastenia gravis, esclerose múltipla, doença inflamatória do intestino, colite ulcerativa, doença de Crohn, psoríase, doença do enxerto contra hospedeiro, reação inflamatória induzida por endotoxina, tuberculose, aterosclerose, degeneração muscular, caquexia, artrite psoriática, síndrome de Reiter, gota, artrite traumática, artrite por rubéola, sinovite aguda, doença de células β pancreáticas; doenças caracterizadas pela infiltração maciça de neutrófilos; espondilite reumatoide, artrite gotosa e outras condições artríticas, doença de Kawasaki, polineuropatia desmielinizante inflamatória crónica (CIDP), dermatomiosite, uveíte, doença anti-Fator VII, espondilite anquilosante, miastenia gravis, doença de Goodpasture, síndrome antifosfolipídico, vasculite associada a ANCA, dermatomiosite/polimiosite, malária cerebral, doença inflamatória pulmonar crónica, silicose, sarcoidose pulmonar, doença de reabsorção óssea, rejeições de aloenxertos, febre e mialgias devido a infeção, caquexia secundária a infeção, formação de mieloide, formação de tecido cicatricial, colite ulcerativa, pirese, gripe, osteoporose, osteoartrite, leucemia mielogénica aguda, leucemia mielogénica crónica, melanoma metastãtico, sarcoma de Kaposi, mieloma múltiplo, sépsis, choque séptico e shigelose; doença de Alzheimer, doença de Parkinson, isquemias cerebrais ou doença neurodegenerativa provocada por lesão traumática; distúrbios angiogénicos incluindo tumores sólidos, neovascularização ocular, e hemangiomas infantis; doenças virais incluindo infeção por hepatite aguda (incluindo hepatite A, hepatite B e hepatite C) , infeção por VIH e retinite por CMV, SIDA, ARC ou neoplasias malignas, e herpes; acidente vascular cerebral, isquemia do miocãrdio, isquemia em ataques cardíacos por acidente vascular cerebral, hipoxia de órgãos, hiperplasia vascular, lesão por reperfusão cardíaca e renal, trombose, hipertrofia cardíaca, agregação de plaquetas induzida por trombina, endotoxemia e/ou síndrome do choque tóxico, condições associadas com prostaglandina endoperoxidase sindase-2 e pênfigo vulgar. Os métodos preferidos de tratamento são aqueles em que a condição é selecionada a partir de doença de Crohn e colite ulcerativa, rejeição de aloenxerto, artrite reumatoide, psoríase, espondilite anquilosante, artrite psoriática e pênfigo vulgar. Alternativamente os métodos preferidos de tratamento são aqueles em que a condição é selecionada a partir das lesões de isquemia por reperfusão, incluindo a lesão cerebral resultante de reperfusões isquémicas que surgem do acidente vascular cerebral e lesão por reperfusão isquémica cardíaca que surge do enfarte do miocárdio. Outro método de tratamento preferido é aquele em que a condição é o mieloma múltiplo.
Além disso, os inibidores de Btk da presente invenção inibem a expressão das proteínas pró-inflamatórias induzíveis tais como prostaglandina endoperóxido sintase-2 (PGHS-2), também referida como ciclooxigenase-2 (COX-2). Consequentemente, as condições associadas com a Btk adicionais incluem edema, analgesia, febre e dor, tal como dor neuromuscular, dor de cabeça, dor provocada por cancro, dor dentária e dor de artrite. Os compostos da invenção também podem ser utilizados para tratar infeções virais veterinárias, tais como infeções por lentivírus, incluindo, mas não limitado a, vírus da anemia infeciosa equina; ou infeções por retrovirus, incluindo o vírus da imunodeficiência felina, vírus da imunodeficiência bovina e vírus da imunodeficiência canina.
Quando os termos ®condição associada a Btk® ou ®doença ou distúrbio associado com a Btk® forem utilizados no presente documento, cada um se destina a abranger todas as condições acima identificadas como se repetidas na extensão, assim como qualquer outra condição que seja afetada pela atividade de Btk quinase. ®Quantidade terapeuticamente eficaz® pretende incluir uma quantidade de um composto da presente invenção que é eficaz quando administrada isoladamente ou em combinação para inibir a Btk.
Uma forma de realização fornece um composto de Fórmula (I) para utilização no tratamento de tais condições associadas com a Btk quinase. Uma quantidade terapeuticamente eficaz para o tratamento de tais condições pode ser utilizada. Os compostos da presente forma de realização podem ser utilizados no tratamento de condições associadas com a Btk quinase tais como o tratamento de distúrbios alérgicos e/ou doenças autoimunes e./ou inflamatórias incluindo, mas não limitadas a estas, LES, artrite reumatoide, múltiplas vasculites, púrpura trombocitopénica idiopática (ITP), miastenia gravis, rinite alérgica, esclerose múltipla (EM), rejeição de transplante, diabetes do Tipo I, nefrite membranosa, doença inflamatória do intestino, anemia hemolítica autoimune, tiroidite autoimune, doenças de aglutinina fria e quente, síndrome de Evans, síndrome urémica hemolítica/púrpura trombocitopénica trombõtica (HUS/TTP), sarcoidose, síndrome de Sjôgren, neuropatias periféricas (por exemplo, síndrome de Guillain-Barré), pênfigo vulgar e asma.
Pelo menos um composto de Fórmula (I) isoladamente ou em combinação entre si e/ou agentes terapêuticos adequados úteis no tratamento de tais condições podem ser úteis no tratamento de condições associadas à Btk quinase. As quantidades terapeuticamente eficazes de pelo menos um composto de Fórmula (I) e outros agentes terapêuticos adequados para o tratamento de tais condições podem ser administradas. Consequentemente, a ®quantidade terapeuticamente eficaz® destina-se também a incluir uma quantidade da combinação de compostos reivindicados que é eficaz para o tratamento de condições associadas com a Btk quinase. A combinação de compostos é de preferência uma combinação sinérgica. A sinergia, como descrita, por exemplo, por Chou et al. , Adv. Enzyme Regul., 22:27-55 (1984), ocorre quando o efeito (neste caso, a inibição da Btk) dos compostos quando administrados em combinação é maior do que o efeito aditivo dos compostos quando administrados isoladamente como um agente único. Em geral, um efeito sinérgico é demonstrado mais claramente em concentrações subideais dos compostos. A sinergia pode ser em termos de menor citotoxicidade, aumento do efeito anti-Btk, ou algum outro efeito benéfico da combinação em comparação com os componentes individuais.
Exemplos de tais outros agentes terapêuticos incluem corticosteroides, rolipram, calfostina, medicamentos anti-inflamatórios supressores das citocinas (CSAIDs), imidazo[1,2-a]quinoxalinas 4 - substituídas como divulgadas no documento de Patente U.S. N.° 4.200.750; Interleucina-10, glicocorticoides, salicilatos, óxido nítrico, e outros imunossupressores; inibidores da translocação nuclear, tais como desoxispergualina (DSG); medicamentos anti-inflamatórios não esteroides (ΑΙΝΕ) tais como ibuprofeno, celecoxib e rofeeoxib; esteroides tais como prednisona ou dexametasona; agentes antivirais tais como abacavir; agentes antiproliferativos tais como metotrexato, leflunomida, FK506 (tacrolimus, PROGRAF®); medicamentos citotóxicos tais como azatiprina e ciclofosfamida; inibidores da TNF-α tais como tenidap, anticorpos anti-TNF ou recetor de TNF solúvel e rapamicina (sirolimus ou RAPAMUNE®) ou seus derivados.
Os outros agentes terapêuticos acima, quando empregues em combinação com os compostos da presente invenção, podem ser utilizados, por exemplo, nessas quantidades indicadas na Physicians' Desk Reference (PDR) ou como de outro modo determinadas por um perito na especialidade. Nos métodos da presente invenção, tais outros agentes terapêuticos podem ser administrados antes, simultaneamente ou após a administração dos compostos da invenção. A presente invenção também fornece composições farmacêuticas capazes de tratar as condições associadas com a Btk quinase, incluindo as condições mediadas por IL-1, IL-6, IL-8, IFNy e TNF-α, como descrito acima.
As composições da invenção podem conter outros agentes terapêuticos como descrito acima e podem ser formuladas, por exemplo, através do emprego de veículos ou diluentes convencionais sólidos ou líquidos, assim como aditivos farmacêuticos de um tipo apropriado no modo de administração desejado (por exemplo, excipientes, aglutinantes, conservantes, estabilizantes, aromatizantes, etc.) de acordo com as técnicas tais como aquelas bem conhecidas na técnica da formulação farmacêutica.
Outra forma de realização fornece os compostos de Fórmula (I) para utilização em terapêutica. A presente invenção também fornece a utilização dos compostos de Fórmula (I) para o fabrico de um medicamento para o tratamento ou profilaxia de um distúrbio alérgico e/ou doença autoimune e/ou inflamatória. A presente invenção também fornece a utilização dos compostos de Fórmula (I) para o fabrico de um medicamento para o tratamento de cancro. Consequentemente, a presente invenção inclui ainda composições compreendendo um ou mais compostos de Fórmula (I) e um portador farmaceuticamente aceitável.
Um "portador farmaceuticamente aceitável" refere-se ao meio geralmente aceite na técnica para a administração dos agentes biologicamente ativos aos animais, em particular, mamíferos. Os portadores farmaceuticamente aceitáveis são formulados de acordo com vários fatores que se encontram bem dentro do campo de ação dos peritos na especialidade. Estes incluem, sem limitação, o tipo e a natureza do agente ativo a ser formulado; o indivíduo ao qual a composição contendo o agente deve ser administrada; a via de administração planeada da composição; e a indicação terapêutica a ser alvejada. Os portadores farmaceuticamente aceitáveis incluem os meios líquidos tanto aquosos quanto não aquosos, assim como uma variedade de formas farmacêuticas sólidas e semissólidas. Tais portadores podem incluir vários ingredientes e aditivos diferentes além do agente ativo, tais ingredientes adicionais a ser incluídos na formulação por uma variedade de razões, por exemplo, estabilização do agente ativo, aglutinantes, etc., bem conhecidos pelos peritos na especialidade. Descrições de portadores farmaceuticamente aceitáveis adequados, e fatores envolvidos na sua seleção, são encontrados numa variedade de fontes prontamente disponíveis tais como, por exemplo, Remington’s Pharmaceutical Sciences, 17a Edição (1985).
Os compostos de Fórmula (I) podem ser administrados por qualquer meio adequado para a condição a ser tratada, a qual pode depender da necessidade de tratamento específico do local ou da quantidade de medicamento a ser libertado. A administração tópica é geralmente preferida para as doenças relacionadas com a pele e para o tratamento sistemático preferido para as condições cancerosas ou pré-cancerosas, embora outros modos de libertação sejam contemplados. Por exemplo, os compostos podem ser libertados por via oral, tal como na forma de comprimidos, cápsulas, grânulos, pós ou formulações líquidas incluindo xaropes; topicamente, tal como na forma de soluções, suspensões, géis ou pomadas; sublingual; bucal; parentérico, tal como por injeção subcutânea, intravenosa, intramuscular ou intraesternal ou técnicas de infusão (por exemplo, como soluções ou suspensões aquosas ou não aquosas injetáveis estéreis); por via nasal tal como por pulverização de inalação; topicamente, tal como na forma de um creme ou pomada; por via retal tal como na forma de supositórios; ou em lipossomas. As formulações de unidade de dosagem contendo veículos ou diluentes farmaceuticamente aceitáveis não tóxicos podem ser administradas. Os compostos podem ser administrados numa forma adequada para a libertação imediata ou libertação prolongada. A libertação imediata ou a libertação prolongada pode ser obtida com as composições farmacêuticas adequadas ou, particularmente no caso de libertação prolongada, com dispositivos tais como implantes subcutâneos ou bombas osmóticas.
As composições exemplares para administração tópica incluem um portador tópico tal como Plastibase (óleo mineral gelificado com polietileno).
As composições exemplares para administração oral incluem suspensões que podem conter, por exemplo, celulose microcristalina para conferir volume, ácido algínico ou alginato de sódio como um agente de suspensão, metilcelulose como um intensificador da viscosidade, e edulcorantes ou agentes aromatizantes tais como aqueles conhecidos na técnica; e comprimidos de libertação imediata que podem conter, por exemplo, celulose microcristalina, fosfato dicãlcico, amido, estearato de magnésio e/ou lactose e/ou outros excipientes, aglutinantes, extensores, desintegrantes, diluentes e lubrificantes tais como aqueles conhecidos na técnica. Os compostos da invenção também podem ser libertados por via oral através da administração por via sublingual e/ou bucal, por exemplo, com comprimidos moldados, prensados ou liofilizados, As composições exemplares podem incluir diluentes de dissolução rápida tais como manitol, lactose, sacarose e/ou ciclodextrinas. Também incluídos em tais formulações podem estar os excipientes de elevada massa molecular tais como celuloses (AVICEL®) ou polietilenoglicõis (PEG); um excipiente para auxiliar a aderência da mucosa tal como hidroxipropilcelulose (HPC), hidroxipropilmetilcelulose (HPMC), carboximetilcelulose de sódio (SCMC) e/ou copolímero de anidrido maleico (por exemplo, Gantrez); e agentes para controlar a libertação tais como copolímero poliacrílico (por exemplo, Carbopol 934) . Lubrificantes, deslizantes, aromatizantes, agentes corantes e estabilizantes também podem ser adicionados para facilidade de fabricação e utilização.
As composições exemplares para aerossol nasal ou administração por inalação incluem soluções que podem conter, por exemplo, álcool benzílico ou outros conservantes adequados, promotores de absorção para aumentar a absorção e/ou biodisponibilidade, e/ou outros agentes solubilizantes ou dispersantes tais como aqueles conhecidos na técnica.
As composições exemplares para a administração parentérica incluem soluções ou suspensões injetáveis que podem conter, por exemplo, diluentes ou solventes adequados não tóxicos parentericamente aceitáveis, tais como manitol, 1,3-butanodiol, água, solução de Ringer, uma solução isotónica de cloreto de sódio, ou outros agentes dispersantes ou humectantes e de suspensão, incluindo mono-ou diglicéridos sintéticos e ácidos gordos, incluindo ácido oleico.
As composições exemplares para administração retal incluem supositórios que podem conter, por exemplo, excipientes não irritantes adequados, tais como manteiga de cacau, ésteres de glicérido sintéticos ou polietilenoglicóis, que são sólidos a temperaturas normais, mas se liquefazem e./ou dissolvem na cavidade retal para libertar o medicamento. A quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da presente invenção pode ser determinada por um perito na especialidade, e inclui quantidades de dosagem exemplares para um mamífero de cerca de 0,05 a 1000 mg/kg; 1 a 1000 mg/kg; 1 a 50 mg/kg; 5 a 2 50 mg/kg; 250 a 1000 mg/kg de peso corporal de composto ativo por dia, que pode ser administrado numa dose única ou na forma de doses divididas individuais, tais como de 1 a 4 vezes por dia. Entender-se-á que o nível de dose específico e a frequência de dosagem para qualquer indivíduo particular podem ser variadas e dependerão de uma variedade de fatores, incluindo a atividade do composto específico empregue, a estabilidade metabólica e duração da ação desse composto, a espécie, idade, peso corporal, saúde geral, sexo e dieta do indivíduo, o modo e tempo de administração, taxa de excreção, combinação de medicamentos, e a gravidade da condição particular. Os indivíduos preferidos para tratamento incluem animais, mais preferivelmente espécies de mamíferos tais como seres humanos, e animais domésticos tais como cães, gatos, cavalos e semelhantes. Assim, quando o termo "paciente" for utilizado no presente documento, este termo pretende incluir todos os indivíduos, mais preferivelmente espécies mamíferas, que são afetadas pela mediação dos níveis de enzimas Btk.
Exemplos de compostos de Fórmula (I) como especificados na secção ®Exemplos® abaixo, foram testados num ou mais dos ensaios descritos abaixo.
Numa forma de realização, os compostos de Fórmula (I) inibem as enzimas Btk com valores de CI5o de 6 11M ou menos, por exemplo, de 0,001 a 6 nM, como medido pelo ensaio de enzima Btk Humana Recombinante. De preferência, os compostos de Fórmula (I) inibem as enzimas Btk com valores de CI50 de 2 nM e menos, por exemplo, de 0,001 a 2 nM. Outros compostos preferidos inibem as enzimas Btk com valores de CI50 de 1,0 nM e menos, por exemplo, de 0,001 a 1,0 nM.
Numa forma de realização, os compostos de Fórmula (I) reduziram a inibição da quinase Jak2 caracterizados por valores de CIS0 acima de 50 nM, por exemplo, superiores a 250 nM, como medido pelo ensaio de tirosina quinase Jak2. De preferência, os compostos de Fórmula (I) inibem as enzimas JAK2 com valores de CI50 superiores a 400 nM, por exemplo, com valores de CI50 superiores a 700 nm.
Numa forma de realização, os compostos de Fórmula (I) possuem relações de seletividade de quinase da atividade de inibição de Btk sobre a atividade de inibição de Jak2, caracterizadas por relações de valores de inibição de CI50 de Jak2, como medido pelo ensaio de tirosina quinase Jak2, para valores de inibição CI50 de Btk, como medido pelo ensaio de enzima Btk humana recombinante, de 150 e mais, por exemplo, relações de 300 e mais. De preferência, os compostos de Fórmula (I) possuem relações de valores de inibição Ciso de Jak2 para os valores de inibição CI50 de Btk de 400 e mais, por exemplo, relações de 500 e mais.
Numa forma de realização, os compostos de Fórmula (I) têm potência melhorada no ensaio de expressão de CD69 estimulado por BCR sanguíneo com valores de CI50 de 250 nM ou menos, por exemplo, de 0,1 a 250 nM. Mais preferivelmente, os compostos de Fórmula (I) possuem uma potência no ensaio de expressão de CD69 estimulada por BCR sanguíneo com valores de CI50 de 160 nM ou menos, por exemplo, de 0,1 a 160 nM; e com valores de CI50 de 100 nM ou menos, por exemplo, de 0,1 a 100 nM.
MÉTODOS DE PREPARAÇÃO
Os compostos de Fórmula (I) podem ser preparados utilizando os métodos apresentados no Esquema 1.
Ésteres borónicos substituídos 1, em que Z representa um anel monocíclico ou bicíclico heterocíclico fundido substituído (substituinte Q em compostos de Fórmula (I)), podem ser reagidos com carbazolecarboxamidas ou tetrahidrocarbazolcarboxamidas substituídas 2 (em que Y é um grupo apropriado tal como Br, Cl ou trifluorometanossulfoniloxi) para fornecer compostos 3. Esta reação pode ser executada através do uso de uma base adequada tal como carbonato de potássio, carbonato de césio ou fosfato de tripotãssio, e um catalisador adequado tal como tetraquis(trifenilfosfina)paládio, cloreto de 1,1' -bis(difenilfosfino)ferroceno paládio(II), ou cloreto de 1,1'-bis(di-terc-butilfosfino)ferroceno paládio(II), num solvente adequado tal como dioxano ou tetrahidrofurano, opcionalmente com um cossolvente adequado tal como água. Tais reações de acoplamento são habitualmente conhecidas como reações de acoplamento de Suzuki-Miyaura, e são bem conhecidas na literatura química (veja-se, por exemplo, Heravi, M.M. et al. , Tetrahedron, 68:9145 (2012), e referências nele citadas).
Devido à natureza não simétrica dos anéis conectados pelas ligações simples marcadas a e b no Esquema 1, e devido à rotação limitada sobre estas ligações causadas por impedimento estérico, os compostos da invenção atual apresentam quiralidade, conhecida como atropisomerismo. Assim, sob determinadas condições, tais como a cromatografia numa fase estacionária quiral, os quatro atropisõmeros diastereoméricos (resultantes da rotação limitada sobre os dois eixos estereogénicos) podem ser observados como quatro picos distintos no cromatograma. Os compostos de Fórmula (I) podem ser isolados como misturas estáveis de dois a quatro atropisõmeros diastereoméricos, ou como atropisõmeros individuais estáveis.
Uma vez que 1 é racémico, os compostos 3 normalmente serão isolados como misturas de quatro atropisõmeros diastereoméricos. Alternativamente, os compostos racémicos 1 podem ser convertidos em atropisõmeros individuais la e lb, com as configurações absolutas mostradas, utilizando os métodos conhecidos na técnica, tais como cromatografia preparativa numa fase estacionária quiral. As reações de acoplamento de Suzuki-Miyaura como descritas acima podem então converter la em compostos 3a, ou 1b em 3b, tendo as configurações absolutas mostradas ao redor da ligação b, mas uma mistura de duas configurações ao redor da ligação A, contanto que as condições da reação de acoplamento de Suzuki-Miyaura sejam tais que a isomerização sobre a ligação b não ocorra. Os compostos 3a e 3b existirão assim como uma mistura de dois atropisómeros diastereoméricos.
Como mostrado no Esquema 2, os compostos 3, que são misturas de quatro atropisómeros diastereoméricos, podem ser separados em quatro atropisómeros diastereoméricos isolados 3c, 3d, 3e e 3f, utilizando métodos conhecidos na técnica, tais como a cromatografia numa fase estacionária quiral. Alternativamente, os compostos 3a (misturas de dois atropisómeros diastereoméricos) podem ser separados em atropisómeros estáveis isolados 3c e 3d, e os compostos 3b (misturas de dois atropisómeros diastereoméricos) podem, da mesma forma, ser separados em atropisómeros estáveis isolados 3e e 3f.
No caso onde 2 é uma tetrahidrocarbazol carboxamida substituída (onde as linhas tracejadas representam ligações únicas), 2 também contém um centro quiral, e assim pode existir como um racemato. Neste caso, os compostos 3 preparados a partir destes compostos 2 irão existir como uma mistura de oito diastereómeros, cada um de 3a e 3b irá existir como uma mistura de quatro diastereómeros, e cada um de 3c, 3d, 3e e 3f irã existir como uma mistura de dois diastereómeros. Qualquer uma destas misturas também pode ser separada em diastereómeros individuais estáveis utilizando métodos conhecidos na técnica, tais como cromatografia sobre uma fase estacionária quiral. Alternativamente, os compostos 2 podem ser convertidos em dois enantiómeros separados utilizando métodos conhecidos na técnica, tais como cromatografia sobre uma fase estacionária quiral.
Em alguns casos onde um dos intermediários de acoplamento 1 ou 2 no Esquema 1 é não racémico, a indução quiral pode ocorrer durante as reações de acoplamento de Suzuki-Miyaura apresentadas no Esquema 1. Nestes casos, as misturas de diastereómeros podem ser obtidas, as quais não são misturas equimolares; isto é, o produto 3 pode ser uma mistura de diastereómeros em que um ou mais dos diastereómeros, tendo uma ligação com uma configuração absoluta, estão presentes numa maior extensão do que um ou mais diastereómeros tendo uma ligação com a configuração absoluta oposta.
Um método alternativo para a síntese de certos compostos de Fórmula (I) é apresentado no Esquema 3. Uma 4-arilimino-lH-benzo[d][1,3]oxazin-2(4H)-ona 4 adequadamente substituída pode reagir com 2 sob condições da reação de acoplamento de Suzuki-Miyaura como descrito acima, para fornecer compostos de Fórmula (I) tendo a estrutura 5. No decurso da reação, a fração de 4-arilimino-lH-benzo[d] [1,3]oxazin-2(4H)-ona presente em 4 reagrupa a fração de 3-arilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona presente no produto de reação 5.
Os compostos 1 do Esquema 1, utilizados na preparação de compostos de Fórmula (I) , podem ser preparados por uma variedade de métodos. Alguns destes métodos são apresentados no Esquema 4. Um anidrido isatoico 6 pode reagir com uma anilina substituída 7 (em que Y' é um grupo apropriado tal como Br, Cl ou trifluorometanossulfoniloxi) para produzir uma amida 8. Tais reações podem ser realizadas sob uma variedade de condições, por exemplo, através do aquecimento num solvente adequado, ou por aquecimento na presença de um reagente auxiliar tal como trimetilalumínio. Um composto 8 pode ser convertido numa quinazolinadiona 9 substituída, por exemplo, através do tratamento com um solvente adequado com fosgénio ou trifosgénio. Opcionalmente, 9 pode ser convertido no éster de boronato correspondente 10 (que é um exemplo de um composto 1 do Esquema 1) utilizando os métodos bem conhecidos na literatura química (veja-se, por exemplo, Ishiyama, T. et al. , Tetrahedron, 57:9813 (2001), e referências nele citadas). Exemplos de tais métodos são a reação de 9 com um reagente de borilação tal como 4,4,4,,4f,5,5,5',5r-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) ou 5,5,5’,5r-tetrametil-2,2’-bi(1,3,2-dioxaborinano) na presença de uma base tal como acetato de potássio e um catalisador adequado tal como cloreto de 1,1'- bis(difenilfosfino)ferroceno paládio (II) num solvente adequado.
Alternativamente, um composto 9 pode ser opcionalmente convertido num composto 11 onde Ra é um grupo de alquilo, utilizando métodos bem conhecidos na literatura química, por exemplo, através do tratamento com um agente de alquilação tal como iodometano ou trideuteroiodometano na presença de uma base adequada tal como carbonato de césio. Um composto 11 pode então ser convertido no éster de boronato correspondente 12 (que é um exemplo do composto 1 do Esquema 1) utilizando os mesmos métodos acima descritos. Um composto 10 também pode ser opcionalmente convertido no composto correspondente 12 através de métodos semelhantes àqueles descritos para a conversão de 9 em 11.
Os compostos 10 e 12 apresentam quiralidade devido à rotação impedida em torno da ligação única que conecta o anel de fenilo substituído à fração de quinazolinadiona. Se desejável, estes compostos podem ser decididos nos atropisómeros enantioméricos separados, por exemplo, através da cromatografia sobre uma fase estacionária quiral. Os atropisómeros enantioméricos separados de 10 podem então ser opcionalmente convertidos em atropisómeros enantioméricos estáveis de 12 como descrito acima, para fornecer certos exemplos dos compostos la ou 1b do Esquema 1. Da mesma forma, as quinazolinodionas racémicas 12 também podem ser desenvolvidas nos atropisómeros enantioméricos separados.
Uma síntese alternativa de compostos intermediários 8 do Esquema 4 é mostrada no Esquema 5. Um ácido 2-nitrobenzoico substituído 13 pode ser convertido num composto 14 utilizando reações de formação de ligação amida bem conhecidas, por exemplo, através da conversão de 8 no cloreto de ácido carboxílico correspondente e reação com uma anilina substituída 7, ou através da reação direta de 13 e 7 na presença de um reagente de acoplamento adequado tal como 0-(7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3 -tetrametilurónio (HATU), ou uma mistura de cloridrato de 1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etil-carbodiimida (EDC) e hidrato de 1-hidroxibenzotriazol (HOBT), utilizando métodos bem conhecidos na literatura. 0 grupo nitro de 14 pode então ser reduzido, utilizando um de uma ampla variedade de métodos conhecidos na literatura, para fornecer um composto 8 do Esquema 4.
Os compostos 4 do Esquema 3 podem ser preparados utilizando o método apresentado no Esquema 6. Um anidrido isatoico N-substituído 15, em que Ra é um grupo alquilo, pode reagir com uma anilina substituída 7 para produzir uma amida 16. Tais reações podem ser realizadas sob uma variedade de condições como descrito acima, por exemplo, através do aquecimento num solvente adequado, ou através do aquecimento na presença de um reagente auxiliar tal como trimetilalumínio. Um composto 16 pode ser convertido numa ariliminobenzoxazinona substituída 17, por exemplo, através do tratamento num solvente adequado com fosgénio ou trifosgénio. Um composto 17 pode então ser convertido no éster de boronato correspondente 4 utilizando métodos semelhantes àqueles descritos acima para a conversão de um composto 10 ou um composto 11 num composto 12 (veja-se o Esquema 4).
Esquema 6
Alguns métodos adicionais que podem ser utilizados para preparar certos compostos 1, utilizados na preparação de compostos de Fórmula (I), são apresentados no Esquema 7. Um ácido piridil-2-acético substituído 18, ou um sal de um ácido piridil-2-acético substituído tal como um sal de sódio (que são comercialmente disponíveis ou podem ser preparados por métodos bem conhecidos na literatura química) , pode ser reagido com uma anilina 7 sob uma variedade de métodos bem conhecidos na literatura química para fornecer uma amida 19, Por exemplo, a reação pode ser executada na presença de um reagente de acoplamento tal como hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-l-il) - 1,1,3,3-tetrametilurónio (HATU), ou uma mistura de cloridrato de 1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etil- carbodiimida (EDC) e hidrato de 1-hidroxibenzotriazol (HOBT). Uma amida 19 pode ser convertida na IH-pirido[1,2 -c]pirimidina-1,3(2H)-diona substituída correspondente 20 através do aquecimento com um reagente tal como carbonildiimidazol num solvente apropriado tal como tolueno. Um composto 20 pode ser convertido no éster de boronato correspondente 21 (que é um exemplo de um intermediário 1 do Esquema 1) utilizando métodos anteriormente descritos (veja-se o Esquema 4) . Alternativamente, um composto 19 pode ser convertido no éster de boronato correspondente 22 utilizando métodos anteriormente descritos (veja-se o Esquema 4), seguido pela conversão de 22 em 21 através do aquecimento com um reagente tal como carbonildi-imidazol.
Esquema 7
No Esquema 7, o anel de piridilo nas estruturas apresentadas também pode ser substituído com outro heterociclo de azoto, tal como um tiazol. Neste caso, os compostos correspondentes 20 e 21 conterão uma fração de 5H-tiazolo[3,2-c]pirimidina-5,7(6H)-diona no lugar da fração de IH-pirido[1,2-c]pirimidino-1,3(2H)-diona apresentada.
Os compostos 21 apresentam quiralidade devido à rotação impedida ao redor da ligação simples que liga o anel de fenilo substituído com a fração de lH-pirido[1,2 -c]pirimidina-1,3(2H)-diona substituída. Se desejável, estes compostos racémicos podem ser determinados nos atropisõmeros enantioméricos separados, por exemplo, através da cromatografia sobre uma fase estacionária quiral, para fornecer certos exemplos dos intermediários la e lb do Esquema 1.
Esquema 8
27 28 29 A preparação de um composto 1 do Esquema 1, em que Z representa uma fração de pirimidina-1,3-diona substituída, pode ser alcançada utilizando o método ilustrado no Esquema 8, seguindo um procedimento geral relatado por Cao, J. et al. (Synthetic Commun., 39:205 (2009)). 0 composto 23 pode ser preparado através da reação de p-metoxibenzilamina, acrilato de metilo e hipoxbromoselenoite de fenilo. Este material pode ser submetido a reação com um isocianato de arilo apropriado 24 (que pode ser preparado a partir da anilina 7 mostrada no Esquema 4, utilizando métodos bem conhecidos na literatura química) para fornecer a di-hidropirimidino-1,3-diona substituída 25. 0 tratamento deste composto com um agente oxidante tal como peróxido de hidrogénio pode fornecer a pirimidina-1,3-diona substituída 26. A remoção do grupo de p-metoxibenzilo de 26 pode ser alcançada utilizando vários métodos relatados na literatura química, por exemplo, através do tratamento com uma mistura de ácido trifluorometanossulfónico e ácido trifluoroacético (como relatado por Wu, F. et al. , J. Org. Chem. , 69:93 07 (2004)). A pirimidina-1,3-diona 27 resultante pode ser reagida com um ácido aril borónico tal como o ácido 4-fluorobenzenoborónico, por exemplo, utilizando as condições descritas por Jacobsen, M.F. et al. (J. Org. Chem., 71:9183 (2006)) para fornecer 28 (em que Ar representa 4-fluorofenilo). Este pode então ser convertido no éster de boronato 29, que é um exemplo de um composto 1 do Esquema 1, utilizando métodos semelhantes àqueles descritos acima.
Os compostos 2 mostrados no Esquema 1, utilizados na preparação de compostos de Fórmula (I) , podem ser preparados utilizando os procedimentos apresentados no Esquema 9. Um ácido 2-aminobenzoico substituído 30 (conhecido na literatura, ou preparado utilizando procedimentos conhecidos na literatura) pode ser convertido no ácido 2-hidrazinilbenzoico correspondente 31 como o sal de ácido clorídrico utilizando métodos bem conhecidos na literatura, por exemplo, através da conversão no sal de diazónio correspondente através do tratamento com nitrito de sódio em ácido clorídrico aquoso, seguido pela redução com cloreto de estanho(II). A reação de 31 com 3-oxocicloexanocarboxilato de etilo 32 (que pode ser preparado a partir do 3-hidroxibenzoato de etilo; veja-se, por exemplo, Hirsch, J. et al. , J. Org. Chem., 51:2218 (1986)) num solvente adequado com um catalisador apropriado, por exemplo, etanol, com ácido clorídrico, tolueno com ácido p-toluenossulfónico ou ácido trifluoroacético, ou ácido acético (em cujo caso o solvente também pode servir como catalisador), pode fornecer o derivado de tetrahidrocarbazol correspondente 33. Esta reação é habitualmente conhecida como a síntese de indol de Fischer, e é bem conhecida na literatura química (por exemplo, veja-se Kamata, J. et al. , Chem. Pharm. Buli., 52:1071 (2004)) . Alternativamente, a síntese de indol de Fischer pode ser realizada em duas etapas consecutivas: 31 pode reagir com 32 sob condições adequadas (tal como num solvente apropriado tal como etanol ou tolueno, opcionalmente com um catalisador adequado tal como o ácido p-toluenossulfõnico) para formar uma hidrazona intermediária, que pode ser isolada e depois submetida a reação sob condições adequadas (por exemplo, etanol com ácido clorídrico, ácido acético com cloreto de zinco, ou tolueno com ácido trifluoroacético) para fornecer 33.
Esquema 9
Um ácido carboxílico 33 pode ser convertido na carboxamida correspondente 34 utilizando métodos bem conhecidos na literatura química, por exemplo, através da conversão de 33 no cloreto de ácido mediante o tratamento com cloreto de oxalilo ou cloreto de tionilo, seguido pelo tratamento com amónia; ou pelo tratamento de 33 com amónia na presença de um reagente de acoplamento tal como carbodiimida, ou uma mistura de cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N1-etilcarbodiimida e 1-hidroxibenzotriazol ou l-hidroxi-7-azabenzotriazol. A conversão de um tetrahidrocarbazol 34 no carbazol correspondente 35 pode ser executada utilizando métodos bem conhecidos na literatura química, por exemplo, através do tratamento de 34 com um agente de oxidação tal como 2,3-dicloro-5,6-dicianobenzoquinona num solvente adequado.
Alternativamente, a ordem das etapas de formação de amida e de oxidação pode ser revertida para converter 33 em 35. Assim, um composto 33 pode ser oxidado utilizando o procedimento descrito acima, ou um procedimento semelhante, para fornecer o composto correspondente 36. 0 ácido carboxílico deste composto pode então ser convertido na amida primária correspondente, novamente utilizando um procedimento descrito acima ou um processo semelhante, para fornecer o composto correspondente 35. A conversão de 35 na carbazolcarboxamida substituída por carbinol terciário correspondente 37 (que é um exemplo do composto 2 no Esquema 1) pode ser executada utilizando métodos bem conhecidos na literatura química, por exemplo, através do tratamento de 35 com um reagente tal como metil-lítio, brometo de metilmagnésio ou cloreto de metilmagnésio. Alternativamente, a conversão de 34 na tetrahidrocarbazol carboxamida substituída com carbinol terciário correspondente 38 (que é outro exemplo de composto 2 no Esquema 1) pode ser executada utilizando um procedimento semelhante.
Os compostos 33, 34 e 3 8 contêm um centro quiral, e existem assim como dois enantiómeros. A preparação de 33, 34 e 38 como mostrada no Esquema 9 fornece produtos racémicos, os quais podem ser utilizados para preparar compostos de Fórmula (I) como mostrado no Esquema 1. Alternativamente, 33, 34 e 38 podem ser determinados nos enantiómeros separados, utilizando os métodos bem conhecidos tais como cromatografia sobre uma fase estacionaria quiral.
Certos compostos 2 do Esquema 1, utilizados para preparar compostos de Fórmula (I), também podem ser preparados utilizando os procedimentos apresentados no Esquema 10. 0 composto 39, preparado a partir do ácido 2-hidrazinilbenzoico apropriado como mostrado no Esquema 9 (veja-se o documento de Patente U.S. N.° 8.084.620,
Intermediário 48-1), pode ser tratado com um reagente de halogenação apropriado para fornecer 40, onde Ri é um átomo de halogéneo. Por exemplo, o tratamento de 3 9 com um reagente de cloração tal como N-clorossuccinimida pode fornecer 40, onde Ri é Cl, e o tratamento de 3 9 com um reagente de fluoração tal como 1-(clorometil)-4-fluoro-l,4-diazoniabiciclo[2.2.2]octano-bis(tetrafluoroborato) [SELECTFLUOR®] pode fornecer 4 0 onde Ri é F. 0 tratamento de 40 com metil-lítio ou um halogeneto de metilmagnésio como descrito para o Esquema 9 pode então fornecer compostos 3 7 onde Rx é F ou Cl (que são exemplos de compostos 2 no Esquema 1) .
Esquema 10
0 Composto 3 7 onde Rj. é CN pode ser preparado por um procedimento alternativo, também apresentado no Esquema 10. 0 composto 41, que pode ser preparado a partir do composto 39 (veja-se o documento de patente U.S. N.° 8.084.620, Exemplo 73-2), pode ser tratado com um reagente de iodação tal como N-iodo-succinimida para fornecer 37, onde Rx é I. Este composto pode ser convertido em 3 7 onde Ri é CN (um exemplo do composto 2 no Esquema 1) , por exemplo, através do tratamento com cianeto de zinco na presença de um catalisador tal como tetraquis(trifenilfosfina)paládio.
Outro exemplo da preparação de um composto 2 do Esquema 1 é mostrado no Esquema 11. Utilizando os procedimentos descritos no Esquema 9 e procedimentos semelhantes, a cetona 42 (que pode ser preparada através da reação do malonato de dietilo com ciclo-hex-2-enona, utilizando vários métodos relatados na literatura) pode ser submetida a reação com um ácido hidrazinilbenzoico 31 para fornecer um composto 43, que pode então ser convertido num composto 44 e subsequentemente num composto 45 utilizando métodos descritos acima para o Esquema 9. Utilizando os métodos conhecidos na literatura, por exemplo, aquecimento com cloreto de sódio e água em um solvente adequado tal como dimetilsulfóxido, um composto 45 pode ser convertido num composto 46. A fração de éster de um composto 46 pode então ser reduzido no carbinol utilizando procedimentos conhecidos na literatura, por exemplo, através do tratamento com boroidreto de lítio, para fornecer um composto 47, que é um exemplo de composto 2 do Esquema 1.
Esquema 11
EXEMPLOS
Os compostos da presente invenção, e intermediários utilizados na preparação dos compostos da presente invenção, podem ser preparados utilizando os procedimentos mostrados nos seguintes exemplos e procedimentos relacionados. Os métodos e condições utilizados nestes exemplos, e os compostos reais preparados nestes exemplos, não se destinam a serem limitativos, mas destinam-se a demonstrar como os compostos da presente invenção podem ser preparados. Os materiais de partida e os reagentes utilizados nestes exemplos, quando não preparados por um processo descrito no presente documento, estão geralmente comercialmente disponíveis, ou são relatados na literatura química, ou podem ser preparados através da utilização de procedimentos descritos na literatura química. A invenção é ainda definida nos Exemplos que se seguem. Deve entender-se que os Exemplos são dados apenas a título de ilustração. A partir da discussão anterior e dos Exemplos, um perito na especialidade pode determinar as características essenciais da invenção, e sem se afastar do seu âmbito, pode fazer várias alterações e modificações para adaptar a invenção às várias utilizações e condições. Como um resultado, a invenção não é limitada pelos exemplos ilustrativos apresentados mais abaixo, mas sim definida pelas reivindicações anexas.
Nos exemplos dados, a frase "seco e concentrado" geralmente refere-se à secagem de uma solução num solvente orgânico sobre sulfato de sódio ou sulfato de magnésio, seguida de filtração e remoção do solvente do filtrado (geralmente sob pressão reduzida e a uma temperatura adequada para a estabilidade do material a ser preparado). A cromatografia em coluna foi geralmente executada utilizando a técnica de cromatografia flash (Still, W.C. et al. , J. Org. Cherrt. , 43:2923 (1978)), ou com cartuchos de sílica-gel pré-acondicionados utilizando um mecanismo de cromatografia de pressão média Isco (Teledyne Corporation), eluindo com o solvente ou mistura de solventes indicada. A cromatografia líquida de alto desempenho preparativa (HPLC) foi executada utilizando uma coluna de fase reversa (Waters SunFire Ci8, Waters XBridge Ci8, PHENOMENEX® Axia Ci8, YMC S5 ODS ou semelhante) de um tamanho apropriado para a quantidade de material a ser separado, em geral eluindo com um gradiente de concentração crescente de metanol ou acetonitrilo em água, contendo também ácido trifluoroacético a 0,05 % ou 0,1 % ou acetato de amónio a 10 mM, a uma taxa de eluição adequada ao tamanho da coluna e separação a ser alcançada. A separação cromatográfica de fluido supercrítico quiral dos enantiómeros ou atropisómeros foi executada utilizando as condições descritas para os casos individuais. Os dados de espectro de massa foram obtidos por cromatografia líquida-espectrometria de massa utilizando a ionização por eletropulverização.
Os dados de difração de raios X de cristal único foram recolhidos num sistema Bruker-AXS APEX2 CCD utilizando a radiação Cu Κα (λ = 1,5418 Ã). A indexação e processamento dos dados de intensidade medidos foram realizados com o pacote de software/conjunto de programas APEX2 (veja-se o APEX2 User Manual, vl.27; Bruker AXS, Inc., WI 53711 USA). Quando indicado, os cristais foram arrefecidos na corrente fria de um refrigerador de criocorrente Oxford Cryosystems (Cosier, J. et al., J. Appl. Cryst., 19:105 (1986)) durante a recolha de dados. As estruturas foram reveladas por métodos diretos e refinadas com base nas reflexões observadas utilizando o pacote cristalogrãfico SHELXTL (veja-se ο APEX2 User Manual, vl.27; Bruker AXS, Inc., WI 53711 USA). Os parâmetros atómicos derivados (coordenadas e fatores de temperatura) foram refinados através da matriz completa de quadrados mínimos. A função minimizada nos refinamentos foi Ew(jF0[-[Fcj)~. R é definido como í|jF0|- | Fc ! I /Σ ! Fol enquanto Rw = [Ew ( | F0 j - j Fc | ) 7½ j F0 | "Ί onde w é uma função de ponderação adequada, baseada em erros nas intensidades observadas. Mapas diferenciais foram examinados em todos os estágios de refinamento. Hidrogénios foram introduzidos nas posições idealizadas com fatores de temperatura isotrópicos, mas não se fizeram variar quaisquer parâmetros de hidrogénio. Os parâmetros de célula unitária foram obtidos de acordo com o procedimento descrito em Stout, et al. , X-Ray Structure Determination: A Practical Guide, MacMillan (1968).
Os nomes químicos foram determinados utilizando CHEMDRAW® Ultra, versão 9.0.5 (CambridgeSoft). As seguintes abreviaturas são utilizadas:
ABREVIATURAS GDI carbonildiimidazol DCM diclorometano DIEA di-isopropiletilamina DMF N,N-dimetilformamida DMSO dimetilsulfóxido dppf 1,1'-bis(difenilfosfino)ferrocene DSC calorimetria de varrimento diferencial DTT ditiotreitol EDC 1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etil-carbodiimida EDTA tetra-acetato de etilenodiamina
EtOAc acetato de etilo
EtOH etanol g grama(s) h hora(s) HATU hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-l- il) -1,1,3,3-tetrametilurónio HOBT hidrato de 1-hidroxibenzotriazol HPLC Cromatografia Líquida de Alta Pressão I PA isopropanol
MeCN acetonitrile
MeOH metanol min minuto(s) mmol milimol(s) NBS N-bromossuccinimida NCS N-clorossuccinimida NMP N-metilpirrolidinona t-butil butilo terciária TEA trietilamina TFA ácido trifluoroacético THF tetrahidrofurano
Intermediário 1 3-(3-Bromo-2-metilfen.il)-8- fluoroquinazolina-2,4(1H,3H)-diona
Intermediário 1A: 2-Amino-N-(3-bromo-2-metilfenil)-3- fluorobenzamida
Método 1: Uma solução de S-fluoro-lH- benzo[d][1,3]oxazina-2,4-diona (2,00 g, 11,04 mmol) e 3-bromo-2-metilanilina (4,11 g, 22,08 mmol) em dioxano (20 mL) em recipientes de reação vedados foi aquecida a 110 °C durante 4 dias. A mistura arrefecida foi tratada com K2C03 aquoso a 10 0 e agitada à temperatura ambiente durante 30 min. A mistura foi extraída com DCM 3 vezes, e as fases orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas. 0 resíduo foi triturado com éter para fornecer um sólido cinzento (2,50 g) . 0 licor-mãe foi concentrado e o resíduo foi novamente triturado com éter para fornecer um sólido cinzento (230 mg) . Os dois sólidos foram combinados para fornecer 2-amino-N-(3-bromo-2-metilfenil)-3-fluorobenzamida como um sólido cinzento (2,73 g, 78 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 323, 325 (M # H)#. Método 2. Uma suspensão de 8-fluoro-lH-benzo[d] [1,3]oxazina-2,4-diona (3,00 g, 16,6 mmol) em xilenos (50 ml) foi tratada com 3-bromo-2-metilanilina (3,08 g, 16,6 mmol) e aquecida em refluxo. Após 6 h a mistura foi deixada arrefecer para a temperatura ambiente durante a noite. A suspensão resultante foi diluída com hexanos e o precipitado foi recolhido por filtração, enxaguado com hexanos e seco com ar para fornecer 2-amino-N-(3-bromo-2-metilfenil)-3-fluorobenzamida como um sólido branco (4,50 g, 84 0 de rendimento) . 1H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,69 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,65 (s. 1., 1H), 7,50 - 7,46 (m, 1H), /,32 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,19 - 7,11 (m, 2H), 6,73 - 6,64 (m, 1H), 5,69 (s. 1., 2H) , 2,44 (s, 3H) .
Intermediário 1:
Uma solução de 2-amino-N- (3-bromo-2-metilfenil) -3-fluorobenzamida (5,70 g, 17,6 mmol) em THF (100 ml) foi tratada com carbonato de bis(triclorometilo) (trifosgénio) (6,28 g, 21,2 mmol) à temperatura ambiente e agitada durante 15 min. A mistura foi diluída com EtOAc, cuidadosamente tratada com NaHC03 aquoso saturado e agitada à temperatura ambiente até que a evolução de gás foi interrompida. A fase orgânica separada foi lavada sequencialmente com NaHC03 aquoso saturado, água e salmoura, e foi seca e concentrada. 0 resíduo foi triturado com éter para fornecer 3-(3-bromo-2-metilfenil)-8-fluoroquinazolina-2,4(1H,3H)-diona como um sólido esbranquiçado (6,00 g, 97 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 349, 351 (M # H)#. 1H RMN (400 MHz, clorofórmio- d) δ 8,59 (d, J = 17,6 Hz, 1H) , 7,99 (d, J = 8,1 Hz, 1H) , 7,70 (dd, J = 7,8, 1,2 Hz, 1H), 7,54 - 7,43 (m, 1H), 7,28 -7,21 (m, 2H), 7,21 - 7,1/ (m, 1H), 2,28 (s, 3H).
Intermediário 2_8-Fluoro-1-metil-3-(2-metil-3- (4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona
Intermediário 2A: 3-(3-Bromo-2-metilfenil)-8-fluoro-l- metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona
Uma solução de 3-(3-bromo-2-metilfenil)-8- fluoroquinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 1] (4,80 g, 13,8 mmol) em DMF (25 ml) foi tratada com Cs2C03 (13,4 g, 41,2 mmol). A suspensão foi agitada à temperatura ambiente e tratada gota a gota (mas rapidamente) com iodometano (4,30 ml, 68,7 mmol) e agitada rapidamente à temperatura ambiente durante 1 h. A mistura foi diluída com EtOAc e água (200 ml) . A fase orgânica foi separada e lavada sequencialmente com água e salmoura, depois foi seca e concentrada para fornecer 3-(3-bromo-2-metilfenil)-S-f luoro-i-metilquinazolina-2,4 (1H, 3H) --diona como uma espuma vítrea ocre (4,80 g, 96 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 363, 365 (M # H)#.
Intermediário 2:
Uma mistura de 3-(3-bromo-2-metilfenil)-8-fluoro-1-metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (4,80 g, 13,2 mmol), 4,4,4',4',5,5,5r,5'-octametil-2,2’-bi(1,3,2-dioxaborolano) (4,36 g, 17,2 mmol), acetato de potássio (3,89 g, 39,6 mmol) e aduto de PdCl2(dppf) DCM (0,540 g, 0,661 mmol) em dioxano (65 ml) foi aquecida em refluxo durante 2 h. Após arrefecimento para a temperatura ambiente, a mistura foi filtrada através de CELITE® e os sólidos foram enxaguados com EtOAc. 0 filtrado foi diluído com EtOAc, lavado com água, e seco e concentrado. 0 resíduo foi submetido à cromatografia de coluna em sílica-gel (80 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 20 a 50 %) , para fornecer 8-fluoro-1-metil-3 -(2-metil-3-(4,4,5,5 -tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil) quinazolina-2,4(1H,3H)-diona como um sólido branco (4,61 g, 85 % de rendimento). Espectro de massa m/z 411 (M # H)#. 1H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 8,14 - 8,08 (m, 1H) , 7,93 (dd, J = 7,5, 1,3 Hz, 1H) , 7,48 (ddd, J = 14,0, 8,0, 1,5 Hz, 1H), 7,34 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,27 - 7,20 (m, 2H) , 3,88 (d, J = 7,9 Hz, 3H) , 2,36 (s, 3H), 1,36 (s, 12H),
Intermediário 3 4-Bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida
Intermediário 3A: 5-bromo-8-carbamoil-6-cloro-9H-carbazol- 2-carboxilato de etilo
Uma mistura de 5-bromo-8-carbamoil-9H-carbazol-2-carboxilato de etilo [sintetizado de acordo com o procedimento descrito no documento de Patente U.S. N.°
8.084.620, Intermediário 48-1] (0,100 g, 0,277 mmol) e NCS (recristalizado a partir de tolueno; 0,037 g, 0,277 mmol) em CC14 (10 ml) e DMF (2 ml) foi agitado à temperatura ambiente durante 112 h. A mistura foi filtrada, e o precipitado recolhido foi lavado com CC14 e seco durante a noite sob vácuo. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (40 g), eluindo com hexanos, depois com EtOAc-hexanos (30 °, depois 50 °), para fornecer 5-bromo-8-carbamoil- 6-cloro-9H-carbazol-2-carboxilato de etilo como um sólido branco macio (0,071 g, 65 0 de
rendimento). Espectro de massa m/z 395, 397, (M # H)#. 1H RMN (400 MHz, DMSO - dg) δ 12,13 (s, 1H), 8,77 (d, J = 8,6
Hz, 1H) , 8,53 (d, J = 1,1 Hz, 1H) , 8,36 (s. 1., 1H) , 8,29 (S, 1H) , 7,89 (dd, J - 8,4, 1,5 Hz, 1H) , 7,74 (s. 1., 1H) , 4,38 (g, J = 7,0 Hz, 2H), 1,38 (t, J = /,0 Hz, 3H).
Preparação alternativa do Intermediário 3A: A uma mistura de 5-bromo-8-carbamoil-9H-carbazol-2-carboxilato de etilo (90 g, 249 mmol) , CC14 (2900 ml) , e NMP (600 ml) foi adicionado NCS (36,1 g, 271 mmol) . A mistura de reação foi agitada a 45 °C durante 2 h. Após arrefecimento até à temperatura ambiente, o sólido foi recolhido por filtração a vácuo. 0 sólido foi agitado em metanol (1 1) a 60 °C durante 2 h e depois arrefecido até à temperatura ambiente. 0 sólido foi recolhido e seco para fornecer 5-bromo-8-carbamoil- 6-choro-9H-carbazol-2 - carboxilato de etilo (69,5 g, 167 mmol, 67 0 de rendimento) (95 0 de pureza). 0 filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para remover CC14. Ao resíduo de NMP foi depois adicionada água (2 1) . 0 precipitado resultante foi recolhido e seco para fornecer 13,7 g adicionais de produto (25 0 de rendimento, 75 0 de pureza).
Intermediário 3:
Uma solução de 5-bromo-8-carbamoil-6-cloro-9H-carbazol-2-carboxilato de etilo (4,14 g, 10,5 mmol) em THF (200 ml) arrefecida num banho de gelo seco-acetona foi tratada aos poucos durante 30 min com metil-lítio a 1,6 M em hexanos (45,8 ml, 73,2 mmol). A mistura foi agitada a -78 °C durante 60 min, depois foi tratada em porções com NH4C1 aquoso saturado. Água foi adicionada e a mistura foi extraída duas vezes com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram lavadas duas vezes com água. Todas as fases aquosas foram combinadas e extraídas com DCM, e esta fase orgânica foi lavada com água. Todas as fases orgânicas foram combinadas, secas e concentradas. 0 resíduo foi cristalizado a partir de EtOAc para fornecer um sólido. 0 resíduo da concentração do licor-mãe foi purificado por cromatografia em gel de sílica (330 g), eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0 a 100 °), para fornecer sólido adicional. Os dois sólidos foram combinados para fornecer
4-bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida como um sólido amarelo claro (3,13 g, 78 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 363, 365, (M # H -H20)#. χΗ RMN (400 MHz, DMS0-ds) δ 11,71 (s, 1H) , 8,56 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,29 (s. 1., 1H), 8,17 (s, 1H), 7,97 (d, J = 1,3 Hz, 1H) , 7,66 (s. 1., 1H) , 7,42 (dd, J = 8,6, 1,8 Hz, 1H), 1,52 (s, 6H).
Preparação alternativa do intermediário 3:
Uma suspensão de 5-bromo-8-carbamoil-6-cloro-9H-carbazol-2-carboxilato de etilo (58,56 g, 148 mmol) em THF (700 ml) sob azoto foi arrefecida até -15 °C num banho de acetona-gelo seco. A mistura foi tratada gota a gota com cloreto de metilmagnésio a 3 M em THF (395 ml, 1,19 mol) a uma taxa que a temperatura interna permaneceu entre -15 °C e -10 °C. Após 5 h a mistura foi vertida em 3 recipientes, cada um contendo ca. de 1,5 1 de gelo triturado e 500 ml de NH4C1 aquoso saturado. As misturas resultantes foram extraídas com EtOAc, e as fases orgânicas combinadas foram secas e concentradas. 0 resíduo foi combinado com material a partir de dois lotes adicionais, um partindo de 146 mmol de 5-bromo-8-carbamoil-6-cloro-9H-carbazol-2-carboxilato de etilo e o outro partindo de 142 mmol de 5-bromo-8-carbamoil-6-cloro-9H-carbazol-2-carboxilato de etilo, e agitado durante 1 h em acetona (250 ml) . 0 precipitado foi recolhido por filtração, lavado com hexano e seco para fornecer 4-bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H- carbazol-l-carboxamida como um sólido (134,56 g) . 0 filtrado foi concentrado e o resíduo foi novamente agitado durante 1 h em acetona, formando um precipitado que foi recolhido por filtração, lavado com hexano e seco para fornecer 4-bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il) -9H- carbazol-1-carboxamida adicional como um sólido (7,36 g) até um total de 141,92 g (88 0 de rendimento) . 0 filtrado da segunda filtração foi combinado com material impuro a partir de outros lotes e submetido à cromatografia de coluna em gel de sílica (2 x 1,5 kg), eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 40 a 100 °), que fornece o produto adicional.
Intermediário 4 l-Metil-3-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2“dioxaborolan_2“il)fenil)quinazolina_2,4(1H,3H)~diona
Intermediário 4A: 2-Amino-N-
(3-bromo-2-metilfenil)benzamida Método 1. Uma solução de ácido 2-aminobenzoico (5,00 g, 36,5 mmol) e cloreto de tionilo (8,68 g, 72,9 mmol) em tolueno (50 ml) foi aquecida em refluxo durante 60 min. A mistura foi concentrada in vacuo, e o resíduo foi colocado em suspensão em THF (50 ml) , arrefecido num banho de água fria e tratado com 3-bromO”2-metilanilina (20,35 g, 109 mmol). A suspensão resultante foi aquecida em refluxo durante 2 h. A mistura arrefecida foi tratada com K2C03 aquoso a 10 0 (50 ml) , agitada vigorosamente durante 15 min e extraída com EtOAc. A fase orgânica foi seca e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica para fornecer 2-amino-N-(3-bromo-2-metilfenil) benzamida como um sólido amarelo claro (4,70 g, 42 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 305, 307 (M # H)#. ΧΗ RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,72 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,67 (s. 1., 1H) , 7,54 (dd, J = 8,3, 1,2 Hz, 1H) , 7,48 (dd, J = 7,9, 0,9 Hz, 1H), 7,36-7,31 (m, 1H), 7,15 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,81-6,73 (m, 2H), 5,59 (s. 1., 2H), 2,45 (s, 3H). Método 2. Uma suspensão de lH-benzo[d] [1,3]oxazina-2,4-diona (5,00 g, 30,7 mmol) e 3-bromo-2-metilanilina (5,70 g, 30,7 mmol) em xilenos (50 ml) foi aquecida em refluxo durante 8 h. 0 solvente foi removido por destilação e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (120 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0 a 50 °), para fornecer 2-amino-N- (3-bromo-2 -metilfenil)benzamida como um sólido esbranquiçado (2,30 g, 24 0 de rendimento). Método 3. Uma suspensão de lH-benzo[d] [1,3]oxazina-2,4-diona (10,00 g, 61,3 mmol) em DMF (150 ml) foi tratada com 3-bromo-2-metilanilina (13,69 g, 73,6 mmol) e aquecida em refluxo durante a noite. A mistura arrefecida foi diluída com água e extraída com EtOAc. A mistura inteira foi filtrada para remover os sólidos cinzentos e as camadas do filtrado foram separadas. A fase orgânica foi lavada com água, seca e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (330 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0 a 50 °), para fornecer 2-amino-N-(3-bromo-2- metilf enil) benzamida como sólido ocre (1,1 g, 6 o de rendimento). Um segundo eluente da coluna forneceu 3-(3-bromo-2-metilfenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 4B] como um sólido ocre (3,4 g, 17 0 de rendimento).
Intermediário 4B: 3-(3-Bromo-2-metilfenil)quinazolina- 2,4(1H,3H)-diona
Uma solução de 2-amino-N-(3-bromo-2- metilfenil)benzamida (2,00 g, 6,55 mmol) em THF (50 ml) foi tratada com bis(triclorometil)carbonato [trifosgénio] (2,92 g, 9,83 mmol) e aquecida em refluxo durante 60 min. A mistura arrefecida foi tratada com NaHC03 aquoso saturado, extraída com EtOAc, e as fases orgânicas combinadas foram lavadas duas vezes com NaHC03 saturado, depois com água, secas e concentradas. 0 resíduo foi triturado com DCM para fornecer um sólido branco que foi recolhido por filtração. 0 resíduo da concentração do filtrado foi triturado com DCM para fornecer sólido branco adicional que foi recolhido por filtração. Os dois sólidos foram combinados para fornecer 3- (3-bromo-2-metilfen.il) quinazolina-2,4 (1H, 3H) -diona como um sólido branco (2,10 g, 97 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 331, 333 (M # H)#. ΧΗ RMN (400 MHz, MeOH-d4) δ 8^07 (dd i d = 7,92, 1/32 HZ/ 1H) A 7/65 - 7/75 (m A 2H) / 7 A 21 - 7,32 (m, 4H) , 2,20 (s, 3H) . ΧΗ RMN (400 MHz, clorofórmio- d) δ 9,38 (s. 1., 1H) , 8,19 (dd, J = 7,9, 1,1 Hz, 1H) , 7,76 - 7,69 (m, 1H), 7,69 - 7,60 (m, 1H), 7,35 - 7,17 (m, 3H), 7.04 - 6,97 (m, 1H), 2,28 (s, 3H).
Intermediário 4C: 3-(3-Bromo-2-metilfenil)-1- metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona
Uma suspensão de 3-(3-bromo-2-metilfenil)quinazolina- 2.4 (1H, 3H)-diona (23,02 g, 69,5 mmol) e Cs2C03 (34,0 g, 104 mmol) em DMF (70 ml) arrefecida num banho de água fria foi tratada aos poucos com iodometano (5,22 ml, 83 mmol). A mistura foi aquecida até à temperatura ambiente e agitada durante 30 min. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado. 0 resíduo foi dividido entre EtOAc e água. Um precipitado que se formou foi recolhido por filtração. 0 sólido recolhido foi lavado com água e seco durante a noite sob vácuo para fornecer um sólido branco. A fase orgânica do filtrado foi separada, lavada 3 vezes com LiCl aquoso a 10 °, depois foi lavada duas vezes com água, seca e concentrada para fornecer sólido adicional. Os dois sólidos foram combinados para fornecer 3-(3-bromo-2-metilfenil)-l-metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona como um sólido branco (15,56 g, 92 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 345, 347 (M # H)#.
Intermediário 4 :
Uma mistura de 3-(3-bromo-2-metilfenil)-l- metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (36,39 g, 105 mmol), 4,4,4,,4f,5,5,5',5r-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (40,2 g, 158 mmol), aduto de PdCl2(dppf) DCM (4,30 g, 5,27 mmol) e acetato de potássio (31,0 g, 316 mmol) em dioxano (500 ml) e DMSO (50 ml) foi aquecida em refluxo durante 24 h. Aduto de PdCl2(dppf) DCM adicional (1,47 g) foi adicionado e a mistura foi aquecida em refluxo durante 6 h mais. A mistura arrefecida foi filtrada através de CELITE® e o filtrado foi concentrado. 0 resíduo foi diluído com EtOAc, agitado com água, e ambas as fases foram filtradas através de CELITE® para remover um precipitado preto. A fase orgânica do filtrado foi separada, lavada sequencialmente com água e salmoura, seca e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (duas colunas de 330 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 20 a 100 °). 0 sólido resultante foi triturado com EtOAc para fornecer um sólido que foi recolhido por filtração. 0 filtrado foi concentrado e cristalizado a partir de EtOAc para fornecer sólido adicional. 0 licor-mãe desta cristalização foi concentrado e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (330 g), eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 20 a 50 °), para fornecer sólido adicional. Os três sólidos foram combinados para fornecer l-metil-3-(2-metil-3 - i,4,4,5,5 -1 e t rame t. il-1,3,2 - dioxaborolan - 2- il) fenil) quinazolina-2,4(1H,3H)-diona como um sólido branco (21,2 g, 51 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 393 (M # H)#. 1H RMN (400 MHz, ) δ 8,35 (d, J = 7,9 Hz, 1H) , 7,64 (ddd, J = 8,5, 7,3, 1,5 Hz, 1H), 7,59 (dd, J = 7,4, 1,4 Hz, 1H), 7,33 - 7,27 (m, 1H) , 7,24 - 7,17 (m, 1H) , 7,12 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 3,55 (S, 3H), 1,59 (s, 3H), 1,39 (s, 12H).
Intermediário 5 8-Cloro-l-metil-3-(2-metil-3-(4,4,5,5-tet ramet il-1,3,2- dioxaborolan- 2 - i 1)f eni1)quinazolina -2,4(1H,3H)-diona
Intermediário 5Ά: 2-Amino-N-(3-bromo-2-metilfenil)-3- clorobenzamida
Uma suspensão de 8-cloro-lH-benzo[d][1,3]oxazina-2,4-diona (4,00 g, 20,3 mmol) e 3-bromo-2-metilanilina (5,65 g, 30,4 mmol) em xileno (20 ml) foi aquecida em refluxo durante 2,5 h. A mistura arrefecida formou um precipitado amarelo. A mistura foi diluída com hexanos e o precipitado foi recolhido por filtração, lavado com hexanos e seco para fornecer 2-amino-N- (3-bromo-2-metilfen.il) -3-clorobenzamida como um sólido amarelo (6,28 g, 91 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 339, 341 (M # H)#. "H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,68 (d, J = 8,1 Hz, 1H) , 7,61 (s. 1., 1H), 7,52-7,43 (m, 3H), 7,15 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,70 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,12 (s. 1., 2H), 2,44 (s, 3H). Intermediário 5B : 3-(3-Bromo-2-metilfen.il)-8- cloroquinazolina-2,4(1H,3H)-diona
Uma solução de 2-amino-N-(3-bromo-2-metilfenil)-3- clorobenzamida (7 80 mg, 2,3 0 mmol) em THF (20 ml) foi tratada com carbonato de bis (triclorometilo) (1,02 g, 3,45 mmol) e a solução agitada à temperatura ambiente durante 21 h. A mistura foi diluída com DCM e lavada sequencialmente com MaHC03 aquoso saturado, água e salmoura. A fase orgânica foi seca e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (80 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 25 a 50 %) , para fornecer 3-(3-bromo-2-metilfenil)-8-cloroquinazolina- 2,4 (1H, 3H) -diona como um sólido branco (800 mg, 95 % de rendimento). Espectro de massa m/z 365, 367 (M # H)#. Intermediário 5C: 3-(3-Bromo-2-metilfenil)-8-cloro-l- metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona
Uma solução de 3-(3-bromo-2-metilfenil)-8- cloroquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (1,45 g, 3,97 mmol) em DMF (15 ml) foi tratada com Cs2C03 (3,88 g, 11,9 mmol) e iodometano (2,48 ml, 39,7 mmol) e agitada à temperatura ambiente durante 1,5 h. A mistura foi diluída com água e uma mistura de EtOAc e hexanos. A fase orgânica foi lavada com água, seca e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (80 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 5 a 40 °), para fornecer 3-(3-bromo-2-metilfenil)-8-cloro-1-metilquinazolina- 2,4 (1H, 3H) -diona como um solido branco (1,3 g, 81 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 379, 391 (M # H)#. Intermediário 5:
Uma solução de 3-(3-bromo-2-metilfenil)-8-cloro-l-metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (1,14 g, 3,00 mmol) em dioxano (20 ml) foi tratada com 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2’-bi(1,3,2-dioxaborolano) (0,915 g, 3,60 mmol), acetato de potássio (0,884 g, 9,01 mmol), e aduto de PdCl2(dppf) DCM (0,123 g, 0,150 mmol). A mistura foi vedada num frasco de reação com pressão e aquecida a 110 °C durante 4 h. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc, filtrada através de CELITE®, e o filtrado foi lavado com água, seco e concentrado. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (80 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 20 a 50 °), para fornecer 8-cloro-1-metil-3 -(2-metil-3-(4,4,5,5 -tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona como um sólido branco (1,00 g, 78 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 427 (M # H)#. 1H RMN (400 MHz, clorof órmio-d) δ 8,23 (dd, J = 7,8, 1,7 Hz, 1H), 7,93 (dd, J = 7,5, 1,3 Hz, 1H) , 7,76 (dd, J = 7,9, 1,5 Hz, 1H) , 7,37-7,31 (m, 1H) , 7,27-7,20 (m, 2H) , 3,94 (s, 3H) , 2,36 (s, 3H) , 1,36 (s, 15H) .
Intermediários 6 e 7 S-Cloro-l-metil-3-(S)-(2-metil-3- i 4,4 ,5,5-1et ramet il-1,3,2-dioxaborolan-2 - il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona (1-6), e 8-Cloro-1-metil-3 -(R)-(2-metil-3 -(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona (1-7)
Uma amostra de 8-cloro-l-metil-3-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrameti 1 -1, 3,2 -dioxaborolan- 2 - i 1) fenil) quinazolina -2,4(1H,3H)-diona racémica [Intermediário 5] foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: Regis WHELK-O® R,R (3 x 2 5 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-Me0H (60:40) em 85 ml/min; preparação da amostra: 17 mg/ml em MeOH-MeCN (1:1) . 0 primeiro pico que elui a partir da coluna forneceu o enantiómero S, 8-cloro- 1-metil-3 -(S)-(2-metil-3 -(4,4,5,5 -tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 6] . 0 segundo pico que elui a partir da coluna forneceu o enantiómero R, 8-cloro-l-metil-3-(R)-(2-metil-3 -(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 7], 0 espectro de massa e ‘Ή RMN para cada atropisómero enantiomérico foram os mesmos como aqueles para o Intermediário 5.
Intermediário 8 8-Cloro-3-(2-metil-3 -(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona
Uma mistura de 3-(3-bromo-2-metilfenil)-8- cloroquinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 5B] (1,00 g, 2,74 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5r-octametil-2,2f-bi(1,3,2-dioxaborolano) (0,833 g, 3,28 mmol), acetato de potássio (0,805 g, 8,21 mmol) e aduto de PdCl2(dppf) DCM (0,112 g, 0,137 mmol) em dioxano (20 ml) foi aquecida a 90 °C durante 8 h. A mistura arrefecida foi filtrada, concentrada, e o resíduo foi dividido entre DCM e água. A fase orgânica foi seca e concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (120 g) , eluindo com EtOAc-DCM (gradiente de 0 a 10 °), para fornecer 8-cloro-3-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan- 2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona (782 mg, 58 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 413 (M # H)#. Intermediário 9 1,8-Dimetil-3-(2-metil-3-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona
Intermediário 9A: 2-Amino-N-(3-bromo-2-metilfenil)-3- metilbenzamida
Uma mistura de cloreto de tionilo (3,15 g, 26,5 mmol) e ácido 2-amino-3-metilbenzoico (2,00 g, 13,23 mmol) em THE (50 ml) foi aquecida em refluxo durante 2 h. A mistura arrefecida foi concentrada e o resíduo foi combinado com 3-bromo-2-metilanilina (4,92 g, 26,5 mmol) em THF (50 ml) e aquecido em refluxo durante 5 h. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente, tratada com 10 0 K2C03 aquoso e agitada à temperatura ambiente durante 30 min. A mistura resultante foi extraída 3 vezes com DCM, e as fases orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (330 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0-20 °), para fornecer 2-amino-N-(3-bromo-2-metilfenil)-3-metilbenzamida como um sólido amarelo (l,7ig, 40 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 319, 321 (M # H)#, 1H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,70 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,64 (s. 1., 1H), 7,50-7,40 (m, 2H), 7,24 (d, J = 7,3 Hz, 1H) , 7,14 (t, J = 8,0 Hz, 1H) , 6,70 (t, J = 7,6 Hz, 1H) , 5,67 (s. 1-, 2H) , 2,44 (s, 3H) , 2,23 (s, 3H) . Intermediário 9B: 3-(3-Bromo-2-metilfenil)-8- metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona
Uma solução de 2-amino-N-(3-bromo-2-metilfenil)-3-metilbenzamida (1,71 g, 5,36 mmol) e trifosgénio (2,07 g, 6,96 mmol) em THF (20 ml) foi aquecida em refluxo durante 1 h. A mistura foi arrefecida num banho de água fria e tratada com NaHC03 aquoso saturado. A agitação continuou até que a evolução de gás cessou. A mistura resultante foi extraída 3 vezes com DCM. As fases orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas. 0 resíduo foi triturado com éter para fornecer um sólido branco, recolhido por filtração. Uma segunda trituração do filtrado concentrado forneceu sólido adicional, recolhido por filtração. 0 filtrado deste foi concentrado e purificado por cromatograf ia de coluna em gel de sílica (40 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0 a 100 °), para fornecer sólido adicional. Os três sólidos foram combinados para fornecer 3-(3-bromo-2-metilfenil)-8-metilquinazolina- 2.4 (1H, 3H) -diona como um sólido branco (1,69 g, 91 0 de
rendimento) . Espectro de massa m/z 345, 347 (M # H)#. LU RMN (400 MHz, clorofórmio-d) : δ 8,07 (d, J = 7,9 Hz, 1H) , 7,70 (dd, J = 7,9, 1,3 Hz, 1H) , 7,54 (d, J = 7,3 Hz, 1H) , 7,27-7,17 (m, 3H), 2,41 (s, 3H), 2,28 (s, 3H).
Intermediário 9C: 3 -(3-Bromo-2-metilfenil)-1,8- dimetilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona
Uma mistura de 3-(3-bromo-2-metilfenil)-8-metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (470 mg, 1,36 mmol) e Cs2C03 (1,33 g, 4,08 mmol) em DMF (8 ml) foi tratada com iodometano (0,85 ml, 13,6 mmol) e agitada à temperatura ambiente durante 1,5 h. A mistura foi diluída com EtOAc, lavada sequencialmente com água e duas partes de LiCl aquoso a 10 °. As fases aquosas combinadas foram extraídas com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram lavadas sequencialmente com LiCl aquoso a 10 0 e água, secas e concentradas para fornecer 3-(3-bromo-2-metilfenil)-1,8-dimetilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona impura como um sólido branco (510 mg), utilizada sem purificação adicional. Espectro de massa m/z 359, 361 (M # H)#.
Intermediário 9:
Utilizando o mesmo procedimento descrito durante a preparação do Intermediário 2, 3-(3-bromo-2-metilfenil) - 1,8-dimetilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (489 mg, 1,36 mmol) foi convertida em 1,8-dimetil-3-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina- 2.4 (1H, 3H) -diona como um sólido branco (410 mg, 74 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 407 (M # H)#.
Intermediários 10 e 11 8-Fluoro-l-metil-3-(S)-(2-metil-3-(4,4,5,5 -tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona (1-10), e 8-Fluoro-l-metil-3-(R)-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2“dioxaborolan_2“il) fenil) quinazolina_2,4 (1H,3H) -diona (1-11)
Uma amostra de 8-fluoro-l-metil-3-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona racémica [Intermediário 2] foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: (R,R) -WHELK-0® 1 (3 x 25 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-Me0H (70:30) em 200 ml/min, 100 bar, 30 °C; preparação da amostra: 97,3 mg/ml em MeOH:DCM (1:1); injeção; 4 ml, 0 primeiro pico que elui a partir da coluna forneceu o (S) isómero, 8-fluoro-l-metil-3-(S)-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2 - il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 10] como um sólido branco. Espectro de massa m/z 411 (M # H)#. 1H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 8,14-8,08 (m, 1H) , 7,93 (dd, J = 7,5, 1,3 Hz, 1H) , 7,48 (ddd, J = 14,0, 8,0, 1,5 Hz, 1H) , 7,34 (t, J = 7,6 Hz, 1H) , 7,27-7,20 (m, 2H) , 3,88 (d, J = 7,9 Hz, 3H), 2,36 (s, 3H), 1,36 (s, 12H). 0 segundo pico que elui a partir da coluna forneceu o isómero (R) , 8-fluoro-l-metil-3-(R)-(2-metil-3-(4,4,5,5- te t ramet il-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil) quinaz olina - 2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 11] como um sólido branco. Espectro de massa m/z 411 (Μ # H)#. λΕ RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 8,13-8,08 (m, 1H), 7,93 (dd, J = 7,5, 1,3
Hz, 1H), 7,48 (ddd, J = 13,9, 8,1, 1,5 Hz, 1H), 7,37-7,31 (in, 1H), 7,27-7,20 (m, 2H), 3,88 (d, J = 7,9 Hz, 3H), 2,36 (s, 3H) , 1,36 (s, 12H) .
Preparação alternativa do Intermediário 10:
Uma solução de 8-fluoro-3-(2-metil-3-(S)-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 19] (40 g, 101 mmol) em tetrahidrofurano (400 ml) foi tratada com carbonato de césio (99 g, 3 03 mmol) e iodometano (12,6 ml, 2 02 mmol) . A solução turva resultante foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. Água (300 ml) foi adicionada e a mistura de reação foi extraída com EtOAc (3 x 150 ml) . As fases orgânicas combinadas foram lavadas sequencialmente com salmoura e água, e secas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por recristalização a partir de EtOAc para fornecer 8-fluoro-l-metil-3-(S)-(2-metil-3-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina- 2,4 (1H, 3H)-diona como um sólido branco (38 g, 92 % de rendimento).
Intermediário 12 3-(3-Bromo-2-metilfenil)-8-metoxi-l- metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona
Intermediário 12A: 2-Amino-N-(3-bromo-2-metilfenil)-3- metoxibenzamida
Uma mistura de 3-bromo-2-metilanilina (482 mg, 2,59 mmol) e 8-metoxi-lH-benzo[d][1,3]oxazina-2,4-diona (500 mg, 2,59 mmol) em tolueno (20 ml) foi tratada com trimetilaluminio a 2 M em tolueno (3,24 ml, 6,47 mmol) a 0 °C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 10 minutos, depois foi aquecida a 70 °C durante a noite. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente, tratada com HC1 aquoso a 1 N e extraída 3 vezes com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram lavadas sequencialmente com NaHC03 aquoso saturado e água, secas e concentradas. 0 resíduo foi submetido à cromatografia de coluna em gel de sílica (40 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0 a 100 °), para fornecer 2-amino-N-(3-bromo-2-metilfenil)-3-metoxibenzamida como um sólido branco (302 mg, 35 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 335, 337 (M # H)#. 1H RMN (400 MHz, clorof órmio-d) δ 7,72 (d, J = 7,3 Hz, 2H) , 7,46 (dd, J = 8,0, 0,8 Hz, 1H) , 7,17-7,10 (m, 2H) , 6,90 (dd, J = 7,9, 0,9 Hz, 1H) , 6,72-6,66 (m, 1H) , 5,88 (s, 1., 2H), 3,92 is, 3H), 2,43 (s, 3H).
Intermediário 12B: 3-(3-Bromo-2-metilfenil)-8-metoxiquinazolina-2,4(1H,3H)-diona
Uma solução de 2-amino-N-(3-bromo-2-metilfenil)-3-metoxibenzamida (302 mg, 0,901 mmol) e trifosgénio (321 mg, 1,081 mmol) em THF (20 ml) foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h. A mistura foi tratada cuidadosamente com NaHC03 aquoso saturado e agitada até que a evolução de gãs cessou. A mistura foi extraída duas vezes com DCM, e as fases orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas para fornecer 3-(3-bromo-2-metilfenil)-8-metoxiquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (339 mg) que foi utilizada sem purificação adicional. Espectro de massa m/z 361, 363 (Μ # Η)#.
Intermediário 12C: 3-(3-Bromo-2-metilfenil)-8-metoxi-l- metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona
(I-12C)
Uma mistura de 3-(3-bromo-2-metilfenil)-8-metoxiquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (535 mg, 1,48 mmol), iodometano (0,185 ml, 2,96 mmol) e Cs2C03 (96 5 mg, 2,96 mmol) em THF (20 ml) foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi filtrada e concentrada. 0 resíduo foi dissolvido em DCM, lavado sequencialmente com NaHC03 aquoso saturado e água, seco e concentrado. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (40 g silica), eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0 a 100 °), para fornecer 3-(3-bromo-2-metilfenil) -8-met.óxi-l-metilquinazolina-2,4 (1H, 3H) -diona (442 mg) . Espectro de massa m/z 375, 377 (M # H)#. *H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,90 (dd, J = 7,2, 2,3 Hz, 1H), 7,66 (dd, J = 8,0, 1,2 Hz, 1H), 7,31 - 7,22 (m, 2H), 7,22 - 7,19 (m, 1H), 7,17 - 7,13 (m, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,89 (s, 3H), 2,23 (s, 3H).
Intermediário 12 :
Uma mistura de 3-(3-bromo-2-metilfenil)-8-metoxi-l-metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (380 mg, 1,01 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5' -octametil-2,2 ’ -bi (1,3,2 -dioxaborolano) (309 mg, 1,22 mmol), acetato de potássio (298 mg, 3,04 mmol) e aduto de PdCl2(dppf) DCM (41,4 mg, 0,051 mmol) em dioxano (20 ml) foi aquecida a 90 °C durante a noite. A mistura arrefecida foi filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (24 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 20 a 55 °), para fornecer 8-metoxi-l-metil-3- (2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona em 75 0 de pureza, utilizada sem purificação adicional (486 mg, 85 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 423 (M # H)#. Intermediário 13 3-(3-Bromo-2-metilfenil)-6-fluoro-1- metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona
(1-13)
Intermediário 13A: 2-Amino-N-(3-bromo-2-metilfenil)-5-
fluorobenzamida (I-13A)
Uma mistura de 3-bromo-2-metilanilina (1,50 g, 8,06 mmol) e 6-fluoro-IH-benzo[d] [1,3]oxazina-2,4-diona (1,46 g, 8,06 mmol) em tolueno (40 ml) foi arrefecida num banho de água fria e tratada em porções com trimetilalumínio a 2 M em tolueno (10,1 ml, 20,2 mmol) . A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 min, depois foi aquecida a 70 °C durante a noite. A mistura foi arrefecida para 0 °C, cuidadosamente tratada com HC1 a 1M aquoso, e extraída 3 vezes com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram lavadas sequencialmente com NaHC03 aquoso saturado e água, secas e concentradas. 0 resíduo foi submetido à cromatografia de coluna em gel de sílica (120 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 5 a 40 °), para fornecer 2-amino-N-(3-bromo-2-metilfenil)-5-fluorobenzamida (0,893 g, 87 0 de pureza, 30 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 323, 325 (M # H)#. ΧΗ RMN (400 MHz, MeOH-d4) δ 7,54 (1 H, dd, J = 8,03, 0,99 Hz), 7,48 (1 H, dd, J - 9,68, 3,08 Hz), 7,33 (1 H, d, J = 7,26 Hz), 7,16 (1 H, t, J = 7,S2 Hz), 7,04 - 7,12 (1 H, m) , 6,83 (1 H, dd, J = 9,02, 4,62 Hz), 2,39 (3 H, s).
Intermediário 1333: 3-(3-Bromo-2-metilfen.il)-6- fluoroquinazolina-2,4(1H,3H)-diona
(I-13B)
Uma solução de 2-amino-N-(3-bromo-2-metilfenil)-5-fluorobenzamida (0,893 g, 2,76 mmol) e trifosgénio (0,984 g, 3,32 mmol) em THF (30 ml) foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h. A mistura foi cuidadosamente tratada com NaHC03 aquoso saturado e agitada até que a evolução de gás cessou. A mistura foi extraída duas vezes com DCM. As fases orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas. 0 resíduo foi triturado com DCM para fornecer um sólido branco, isolado por filtração. 0 filtrado foi concentrado e submetido à cromatografia de coluna em gel de sílica (40 g), eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0 a 80 °) , para fornecer sólido adicional. Os dois sólidos foram combinados para fornecer 3-(3-bromo-2-metilfenil)-6-fluoroquinazolina-2,4(1H,3H)-diona como um sólido branco (845 mg, 87 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 349, 351 (M # H)#.
Intermediário 13C: 3 -(3-Bromo-2-metilfenil)-6-fluoro-1- metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona
(I-13C)
Uma mistura de 3-(3-bromo-2-metilfenil)-6- fluoroquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (742 mg, 2,13 mmol), iodometano (0,159 ml, 2,55 mmol) e Cs2C03 (1,039 g, 3,19 mmol) em THF (20 ml) foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi filtrada e concentrada. 0 resíduo foi dissolvido em DCM e lavado sequencialmente com NaHC03 aquoso saturado e água, seco e concentrado para fornecer 3-(3-bromo-2-metilfenil)-6-fluoro-l- metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (742 mg, 96 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 363, 365 (M # H)#. Intermediário 13:
Uma mistura de 3-(3-bromo-2-metilfenil)-6-fluoro-l-metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (742 mg, 2,04 mmol), 4,4,4,,4f,5,5,5',5r-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (623 mg, 2,45 mmol), acetato de potássio (602 mg, 6,13 mmol) e aduto de PdCl2(dppf) DCM (83 mg, 0,102 mmol) em dioxano (20 ml) foi aquecida a 90 °C durante a noite. A mistura arrefecida foi filtrada e o filtrado foi concentrado. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (120 g), eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0 a 40 °), para fornecer 6-fluoro-l-metil-3-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona (866 mg), utilizada sem purificação adicional. Espectro de massa m/z 411 (M # H)#.
Intermediário 14 7-Metoxi-l-metil-3-(2-metil-3-(4,4,5,5-tet ramet il-1,3,2-dioxaborolan-2-il) fenil)quinaz olina-
2,4(1H,3H)-diona (1-14)
Intermediário 14A: 2-Amino-N-(3-bromo-2-metilfenil)-4- metoxibenzamida
(I-14A)
Uma mistura de 3-bromo-2-metilanilina (482 mg, 2,59 mmol) 7-metoxi-lH-benzo[d][1,3]oxazina-2,4-diona (500 mg, 2,5 9 mmol) em tolueno (20 ml) foi tratada com trimetilalumínio a 2 M em tolueno (3,24 ml, 6,48 mmol) a 0 °C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 10 min, depois aquecida a 70 °C durante a noite. A mistura arrefecida foi tratada com HC1 aquoso a 1 M, extraída 3 vezes com EtOAc, e as fases orgânicas combinadas foram lavadas sequencialmente com NaHC03 aquoso saturado e água, secas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (40 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0 a 100 °), para fornecer uma mistura 4:1 de 2-amino-N-(3-bromo-2-metilfenil)-4-metoxibenzamida e 3-(3-bromo-2-metilfenil)-7- metoxiquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (592 mg). Espectro de massa m/z 335, 337 (M # H)#.
Intermediário 14B: 3-(3-Bromo-2-metilfenil)-7- metoxiquinazolina-2,4(1H,3H)-diona
(I-14B)
Uma solução de 2-amino-N-(3-bromo-2-metilfenil)-4-metoxibenzamida (596 mg, 1,78 mmol) e trifosgénio (633 mg, 2,13 mmol) em THF (30 ml) foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h. A mistura foi tratada com NaHC03 aquoso saturado e agitada até que a evolução de gás cessou. A mistura resultante foi extraída duas vezes com DCM, e as fases orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (40 g) , eluindo com EtQAc-hexanos (gradiente de 0 a 100 °), para fornecer 3-(3-bromo-2-metilfenil)-7-metoxiquinazolina-2,4(1H,3H)-diona como um sólido branco (440 mg, 68 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 361, 363 (M # H)#.
Intermediário 14C: 3-(3-Bromo-2-metilfenil)-7-metoxi-l- metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona
(I-14C)
Uma solução de 3-(3-bromo-2-metilfenil)-7- metoxiquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (440 mg, 1,22 mmol) em THF (30 ml) foi tratada com iodometano (303 mg, 2,13 mmol) e Cs2C03 (86 9 mg, 2,6 7 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite, depois foi filtrada e concentrada. 0 resíduo foi dissolvido em D CM e lavado sequencialmente com NaHC03 aquoso saturado e água, seco e concentrado para fornecer 3-(3-bromo-2-metilfenil)-7-metoxi-l-metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (502 mg), utilizada sem purificação adicional. Espectro de massa m/z 375, 377 (M # H)#. "H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) ó 8,21 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,6/ (dd, J = 7,9, 1,3 Hz, 1H), 7,24-7,18 (m, 1H), 7,17-7,13 (m, 1H), 6,88 (dd, J = 8,8, 2,2 Hz, 1H) , 6,72 (d, J = 2,2 Hz, 1H) , 3,99 (s, 3H) , 3,64 (s, 3H), 2,24 (s, 3H).
Intermediário 14:
Uma mistura de 3-(3-bromo-2-metilfenil)-7-metoxi-l-metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (390 mg, 1,04 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2’-bi(1,3,2-dioxaborolano) (317 mg, 1,25 mmol), acetato de potássio (306 mg, 3,12 mmol) e aduto de PdCl2(dppf) DCM (42,4 mg, 0,052 mmol) em dioxano (20 ml) foi aquecida a 90 °C durante a noite. A mistura arrefecida foi filtrada e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (40 g), eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 10 a 55 °), para fornecer 7-metoxi-l-metil-3-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina- 2,4 (1H, 3H)-diona (504 mg, 76 0 de pureza, 87 0 de rendimento), utilizada sem purificação adicional. Espectro de massa m/z 423 (M # H)#,
Intermediário 15 7-Fluoro-1-metil-3 -(2-metil-3 -(4,4,5,5 -
tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona (1-15)
Intermediário 15A: 2-Amino-N-(3-bromo-2-metilfenil)-4-
fluorobenzamida (I-15A)
Uma mistura de 7-fluoro-lH-benzo[d] [1,3]oxazina-2,4-diona (5,00 g, 27,6 mmol) e 3-bromo-2-metilanilina (5,14 g, 27,6 mmol) em xileno (50 ml) foi aquecida em refluxo durante 8 h. A mistura arrefecida foi filtrada. 0 sólido recolhido foi lavado 3 vezes com DCM e os filtrados combinados foram concentrados. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (330 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0 a 45 °), para fornecer 2-amino-N-(3-bromo-2-metilfenil)-4-fluorobenzamida (3,65 g, 41 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 323, 325 (M # H)#. ΧΗ RMN (400 MHz, clorof órmio-d) δ 7,65 (1 H, d, J = 8,14 Hz), 7,45 - 7,57 (3 H, m), 7,14 (1 H, t, J = 8,03 Hz), 6,39 - 6,50 (2 H, m) , 5,80 (2 H, s. 1.), 2,43 (3 H, s). Intermediário 15B: 3-(3-Bromo-2-metilfen.il)-7- fluoroquinazolina-2,4(1H,3H)-diona
(I-15B)
Uma solução de 2-amino-N-(3-bromo-2-metilfenil)-4-f luorobenzamida (3,65 g, 11,3 mmol) em THF (50 ml) foi tratada com trifosgénio (3,69 g, 12,4 mmol) à temperatura ambiente. A solução foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h, depois foi tratada lentamente com NaHC03 aquoso saturado e agitada até que mais nenhuma evolução de gás foi observada. A mistura resultante foi extraída duas vezes com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram lavadas duas vezes com água, depois com salmoura, secas e concentradas para fornecer 3-(3-bromo-2-metilfen.il)-7-fluoroquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (4,20 g) , utilizada sem purificação adicional. Espectro de massa m/z 349, 351 (M # H)#.
Intermediário 15C: 3 -(3-Bromo-2-metilfenil)- 7-fluoro-1- metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona
(I-15C)
Uma mistura de 3-(3-bromo-2-metilfen.il)-7- fluoroquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (2,70 g, 7,73 mmol), iodometano (0,580 ml, 9,28 mmol) e Cs2C03 (3,78 g, 11,6 mmol) em THF (20 ml) foi agitada à temperatura ambiente durante 3 h. A mistura foi filtrada e o filtrado foi diluído com DCM e lavado com água. A fase aquosa foi extraída com DCM, e as fases orgânicas combinadas foram secas e concentradas para fornecer 3- (3-bromo-2-metilfenil)-7-fluoro-l-metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (2,85 g) , utilizada sem purificação adicional. Espectro de massa m/z 363, 365 (M # H)#, 385, 387 (M # Na)#. Intermediário 15:
Uma mistura de 3-(3-bromo-2-metilfenil)-7-fluoro-l-metilquinazolina-2 ,4(1H,3H)-diona (2,81 g, 7,74 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5' --octametil-2,2 ' -bi (1,3,2 -dioxaborolano) (2,36 g, 9,28 mmol), acetato de potássio (1,52 g, 15,5 mmol) e aduto de PdCl2(dppf) DCM (0,190 g, 0,232 mmol) em dioxano (20 ml) foi aquecida a 90 °C durante 8 h. Aduto de PdCl2(dppf) DCM adicional (0,190 g, 0,232 mmol) e acetato de potássio (0,80 g) foram adicionados e a mistura foi aquecida a 90 °C durante mais 7 h. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc e lavada sequencialmente com NaHC03 aquoso saturado e água. As fases aquosas combinadas foram extraídas com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram filtradas através de CELITE® e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (220 g), eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0 a 40 °), para fornecer 7-fluoro-l-metil-3-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona (1,76 g, 56 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 411 (M # H)#.
Intermediário 16 6,8-Difluoro-3-(2-metil-3-(4,4,5,5-
tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona (1-16)
Intermediário 16A: N-(3-Bromo-2-metilfenil)-3,5-difluoro-2-nitrobenzamida
(1-16A)
Uma solução de ácido 3,5-difluoro-2-nitrobenzoico (522 mg, 2,57 mmol) em DCM (10 ml) foi tratada com cloreto de oxalila (0,337 ml, 3,86 mmol), depois com DMF (3 gotas). A solução resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 60 min. A mistura foi concentrada e o resíduo foi reconcentrado duas vezes a partir de DCM seco. 0 resíduo foi dissolvido em DCM (10 ml) e tratado gota a gota com 3-bromo-2-metilanilina (478 mg, 2,57 mmol), seguido pela adição gota a gota de TEA (0,537 ml, 3,86 mmol). A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi tratada com NaHC03 aquoso saturado, formando um precipitado branco. A fase orgânica foi separada, e a fase aquosa e o sólido branco foram extraídos duas vezes com DCM, depois filtrados. 0 sólido recolhido foi lavado com água e seco. As fases orgânicas combinadas foram secas e concentradas, e o resíduo foi triturado com DCM para fornecer sólido adicional. Ambos os sólidos foram combinados com DCM e MeOH e concentrados para fornecer N-(3-bromo-2-metilfenil)-3,5-difluoro-2-nitrobenzamida (821 mg, 86 % de rendimento). Espectro de massa m/z 371, 373 (M # H)# 393, 395 (M # Na)#. XH RMN (400 MHz, DMS0-d5) δ 10,65 (s, 1H), 7,98-7,90 (m, 1H), 7,81 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,21 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 2,32 (s, 3H).
Intermediário 16B: 2-Amino-N-(3-bromo-2-metilfenil)-3,5- difluorobenzamida
(I-16B)
Uma mistura de N-(3-bromo-2-metilfenil)-3,5-difluoro-2-nitrobenzamida (821 mg, 2,21 mmol) , NH4C1 (1,18 g, 22,1 mmol) e zinco (1,45 g, 22,1 mmol) em MeOH (10 ml) foi agitada à temperatura ambiente durante 60 min. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrados. 0 resíduo foi colocado em suspensão em DCM e lavado com NaHC03 aquoso saturado. A fase orgânica, com um precipitado insolúvel, foi separada da fase aquosa e concentrada para fornecer 2-amino-N-(3-bromo-2-metilfenil)-3,5-difluorobenzamida (760 mg), utilizada sem purificação adicional. Espectro de massa m/z 341, 343 (M # H)#, 363, 365 (M # Na)#.
Intermediário 16C: 3-(3-Bromo-2-metilfenil)-6,8- difluoroquinazolina-2,4(1H,3H)-diona
(I-16C)
Uma solução de 2-amino-N-(3-bromo-2-metilfenil)-3,5-difluorobenzamida (760 mg, 2,23 mmol) em THF (10 ml) foi tratada aos poucos com trifosgénio (722 mg, 2,43 mmol) . A solução foi agitada à temperatura ambiente durante 60 min, depois foi tratada gota a gota com NaHC03 aquoso saturado e agitada até que mais nenhuma evolução de gãs foi observada. A fase orgânica foi separada, lavada com água, seca e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (40 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0 a 100 °), para fornecer 3-(3-bromo-2-metilfenil)-6,8-difluoroquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (820 mg), utilizada sem purificação adicional. Espectro de massa m/z 367, 369 (Μ # H)#, 389, 391 (Μ # Na)#.
Intermediário 16:
Uma mistura de 3-(3-bromo-2-metilfenil)-6,8-difluoroquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (1,43 g, 3,89 mmol), 4,4,4',4',5,5,5r,5'-octametil-2,2’-bi(1,3,2-dioxaborolano) (1,29 g, 5,06 mmol), acetato de potássio (0,956 g, 9,74 mmol) e aduto de PdCl2(dppf) DCM (0,159 g, 0,195 mmol) em dioxano (20 ml) foi aquecida a 100 °C durante 5 h. A mistura arrefecida foi filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (40 g # 12 g colunas empilhadas) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0 a 100 °), para fornecer 6,8-difluoro-3-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona (1,20 g, 74 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 415 (M # H)#.
Intermediário 17 8-Fluoro-3-(RS)-(2-metil-3-(4,4,5,5-te t ramet il-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina -2,4(1H,3H)-diona (1-17)
Uma mistura agitada de 3-(3-bromo-2-metilfenil)-8-fluoroquinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 1] (0,349 g, 1,00 mmol), 4,4,4',4’,5,5,5’,5’-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (0,305 g, 1,20 mmol), aduto de PdCl2(dppf) DCM (0,041 g, 0,050 mmol) e acetato de potássio (0,245 g, 2,50 mmol) em dioxano (20 ml) e DMSO (4 ml) foi borbulhada com azoto durante 5 min, depois aquecida a 90 °C durante a noite. A mistura arrefecida foi dividida entre EtOAc e água. A fase orgânica foi lavada sequencialmente com NaHC03 aquoso saturado, água e salmoura, seca e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos (20:80) para fornecer 8-fluoro-3-(RS)-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona como um sólido branco (0,326 g, 82 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 397 (M # H)#. XH RMN (500 MHz, DMS0-d6) δ 11,78 (s, 1H) , 7,80 (d, J = 7,2 Hz, 1H) , 7,72 (dd, J = 7,4, 1,5
Hz, 1H), 7,71-7,56 (m, 1H) , 7,45-7,35 (m, 1H), 7,35-7,29 (m, 1H), 7,29-7,16 (m, 1H), 2,22 (s, 3H), 1,33 (s, 12H). Intermediários 18 e 19 8-Fluoro-3-(R)-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona (18) e 8-Fluoro-3-(S)-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona (19)
(1-19)
Uma amostra de 8-fluoro-3-(RS)-(2-metil-3-(4,4,5,5-te t ramet il-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazoline-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 17] foi separada por cromatografia de fluido supercrítico como se segue: coluna: CHIRALCEL® OD-H (5 x 25 cm, 5 pm); Fase Móvel: C02-Me0H (70:30) em 300 ml/min, 100 bar, 40 °C; preparação da amostra: 103 mg/ml em DCM-MeOH (44:56); injeção: 5,0 ml. 0 primeiro pico que elui a partir da coluna forneceu o enantiómero R, 8-fluoro-3-(R)-(2-metil-3-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 18] como um sólido branco. 0 segundo pico que elui a partir da coluna forneceu o enantiómero S, 8-fluoro-3 -(S)-(2-metil-3 -(4,4,5,5 - 10t.iranis1.i 1 “ 1,3 f 2-dioxaboiTGlan- 2-11) f eni1) Cfuinazolins.- 2,4 (1H,3H)-diona [Intermediário 19] como um sólido branco. 0 espectro de massa e 1H RMN para cada atropisómero enantiomérico foram os mesmos como aqueles para o Intermediário 17.
Intermediário 20 8-Fluoro-l-metil (d3)-3-(RS)-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona
(1-20)
Intermediário 20A: 3-(3-Bromo-2-metilfenil)-8-fluoro-l- metil (d3)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona
(1-2 0A)
Uma mistura de 3-(3-bromo-2-metilfenil)-8- fluoroquinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 1] (3,00 g, 8,5 9 mmol) e Cs2C03 (5,60 g, 17,2 mmol) em DMF (45 ml) foi tratada com iodometano-d3 (0,80 ml, 12,9 mmol) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1,75 h. A mistura foi vertida dentro da água rapidamente agitada (400 ml) e agitada à temperatura ambiente, formando um sólido colocado em suspensão. 0 precipitado foi recolhido por filtração, lavado com água e seco sob vácuo para fornecer 3- (3-bromo-2-metilfenil)-8-fluoro-l-metil(d3) quinazolina-2,4(1H,3H)-diona como um sólido esbranquiçado (3,05 g, 97 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 366, 368 (Μ # Η)#. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,93 (dt, J = 7,9, 0,7 Hz, 1Η), 7,82-7,63 (rn, 2H), 7,45-7,18 (m, 3H), 2,12 (s, 3H) .
Intermediário 20:
Uma mistura de 3-(3-bromo-2-metilfenil)-8-fluoro-1-metil (d3) quinazolina-2,4 (1H, 3H)-diona (3,00 g, 8,19 mmol) , 4,4,4f,4r,5,5,5r,5r-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (2,70 g, 10,7 mmol) e acetato de potássio (2,41 g, 24,6 mmol) em dioxano (4 0 ml) foi borbulhada com ãrgon com sonicação durante ca. 2 min, depois foi tratada com aduto de PdCl2(dppf) DCM (0,335 g, 0,410 mmol) . A mistura foi aquecida a 90 °C durante 15,75 h. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc, filtrada através de CELITE®, e os sólidos foram enxaguados com EtOAc. Os filtrados combinados foram concentrados, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (330 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0 a 40 %), para fornecer 8-fluoro-1-metil (d3) - 3-(RS) -(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil- 1.3.2- dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona como um sólido esbranquiçado (3,23 g, 95 % de rendimento). Espectro de massa m/z 414 (M # H)#. LH RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 8,14-8,07 (m, 1H), 7,93 (dd, J = 7,4, 1,4
Hz, 1H), 7,48 (ddd, J = 13,9, 8,1, 1,5 Hz, 1H), 7,37-7,31 (m, 1H), 7,27-7,19 (m, 2H), 2,36 (s, 3H), 1,36 (s, 12H). Intermediários 21 e 22 8-Fluoro-l-metil (d3)-3-(S)-(2-metil-3 -(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona (21), e 8-Fluoro-l-metil (d3) - 3-(R)-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil- 1.3.2- dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona (22)
(1-22)
Uma amostra de 8-fluoro-1-metil(d3)-3-(RS) -(2-metil-3-i.4,4,5,5 -1 e t rame t i 1 -1, 3, 2 - dioxaborol an - 2 - il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 20] foi separada por cromatografia de fluido supercrítico como se segue: coluna: WHELK-0® R, R (3 x 25 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-MeQH (70:30) em 200 ml/min, 100 bar, 30 °C; preparação da amostra: 97,3 mg/ml em MeOH:DCM (1:1); injeção: 4 ml. 0 primeiro pico que elui a partir da coluna forneceu o enantiómero S, 8-fluoro-l-metil (d3)-3-(S)-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 21] como um sólido branco. 0 segundo pico que elui a partir da coluna forneceu o enantiómero R, 8-fluoro-l-metil(d3)-3-(R)-(2-metil-3 -(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 22] como um sólido branco. 0 espectro de massa e 1H RMN para cada atropisómero enantiomérico foram os mesmos como aqueles para o Intermediário 20. Síntese Alternativa de 8-Fluoro-l-metil(d3)-3-(S) -(2-metil-3 -(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 21]: Uma solução de 8-fluoro-3-(S)-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 19] (5,42 g, 13,7 mmol) em THF (100 ml) foi agitada num banho de água fria e tratada com Cs2C03 (6,24 g, 19,2 mmol), depois com i odome t ano-d3 (1,02 ml, 16,4 mmol) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 16,25 h. A mistura foi filtrada, o sólido foi enxaguado com EtOAc, e os filtrados combinados foram concentrados. 0 resíduo foi dissolvido em EtOAc e lavado sequencialmente com água e salmoura, seco e concentrado para fornecer 8-fluoro-l-metil (d3) - 3-(S)-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona como um sólido branco (5,538 g, 98 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 414 (M # H)#. 1H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 8,11 (dq, J = 7,8, 0,8 Hz, 1H), 7,93 (dd, J = 7,5, 1,3 Hz, 1H), 7,48 ^ ddd, J = 13,9, 8,1, 1,5 Hz, 1H), 7,38 7,30 (m, 1H), 7,27 - 7,20 (m, 2H), 2,36 (s, 3H), 1,36 (s, 12H).
Intermediário 23 3-4-Bromo-3-ciano-7-(2-hidroxipropan-2- il)-9H-carbazol-1-carboxamida
(1-23)
Intermediário 23A: 4-Bromo-7 -(2-hidroxipropan-2-il)-3-iodo-9H-carbazol-l-carboxamida
(I-23A)
Uma mistura de 4-bromo-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [sintetizado de acordo com o procedimento descrito no documento de Patente U.S. No. 8.084.620, Exemplo 73-2] (2,00 g, 5,76 mmol), N- iodosuccinimida (1,69 g, 7,49 mmol) e piridina (1,9 ml, 23,0 mmol) em DMF (20 ml) foi aquecida a 65 °C durante 2 dias. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc, lavada duas vezes com LiCl aquoso a 10 0 e depois com salmoura. As camadas aquosas foram extraídas com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 50 0 a 65 °), para fornecer 4-bromo-7-(2-hidroxipropan-2-il)-3-iodo-9H-carbazol-1-carboxamida como um sólido amarelo (0,609 g, 23 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 473, 475 (M # H - H20)#. xH RMN (500 MHz, DMS0-ds) δ 11,66 (s, 1H), 8,49 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,38 is, 1H), 8,26 (s. 1., 1H), 7,94 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 7,58 (s. 1., 1H), 7,40 (dd, J = 8,6, 1,4 Hz, 1H) , 5,09 (s, 1H) , e 1,51 (s, 6H) . Intermediário 23:
Uma mistura de 4-bromo-7-(2-hidroxipropan-2-il)-3- iodo-9H-carbazol-1-carboxamida (0,609 g, 1,29 mmol) e cianureto de zinco (0,076 g, 0,644 mmol) em DMF (7 ml) foi submetida a três ciclos de evacuação-preenchimento com azoto. A mistura foi tratada com tetraquis(trifenilfosfina)paládio (0,074 g, 0,064 mmol) e aquecida durante a noite a 95 °C. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc, lavada duas vezes com LiCl aquoso a 10 °, depois com salmoura. As camadas aquosas foram extraídas com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas. 0 resíduo foi triturado e submetido a sonicação com DCM e o precipitado foi recolhido por filtração para fornecer 4-bromo-3-ciano-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida como um sólido amarelo claro (0,400 g, 83 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 372, 374 (Μ # H - H20)#. XH RMN (500 MHz, DMS0-d6) δ 12,12 (s, 1H) , 8,55 (d, J = 8,6 Hz, 1H) , 8,38 (s, 1H) , 8,31 (s. 1., 1H), 8,03 (s, 1H), 7,74 (s. 1., 1H), 7,49 (dd, J = 8,6, 1,1 Hz, 1H) , e 1,52 (s, 6H) .
Intermediário 24 5-Bromo-6-fluoro-2-(2-hidroxipropan-2-il)- 2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida (racémica)
(1-24)
Intermediário 24Ά: ácido 4-bromo-2,5-difluorobenzoico
(I-24A)
Uma solução de 1,4-dibromo-2,5-difluorobenzeno (640 mg, 2,35 mmol) em éter dietílico seco (10 ml) arrefecida num banho de gelo seco-acetona foi tratada gota a gota com n-butillítio a 2,5 M em hexanos (1,04 ml, 2,59 mmol) . A solução foi agitada a -78 °C durante 30 min, depois foi tratada com um pedaço de gelo seco. 0 banho de arrefecimento foi removido após 5 min e a mistura foi agitada durante mais 30 min enquanto se aquece até à temperatura ambiente. A mistura foi diluída com EtOAc e água. A fase orgânica foi separada e lavada duas vezes com NaHC03 aquoso saturado. As fases aquosas combinadas foram acidificadas com HC1 a 1 M aquoso, extraídas duas vezes com DCM, e as fases orgânicas combinadas foram secas e concentradas para fornecer ácido 4-bromo-2,5-difluorobenzoico como um sólido branco (297 mg, 53 % de rendimento).
Intermediário 24B: cloridrato de ácido 4-bromo-5-fluoro-2-hidrazinilbenzoico (I-24B)
Uma mistura de ácido 4-bromo-2,5-difluorobenzoico (2,50 g, 10,6 mmol) e hidrazina (3,81 ml, 121 mmol) em N-metil-2-pirrolidinona (2 ml) foi aquecida a 95 °C durante 4 h. A mistura arrefecida foi vertida dentro de HC1 a 6 M aquoso vigorosamente agitado (400 ml) que foi arrefecida num banho de NaCl-gelo. 0 precipitado resultante foi recolhido por filtração, lavado com HC1 a 6 M aquoso (200 ml) e seco sob vácuo para fornecer cloridrato de ácido 4-bromo-5-fluoro-2-hidrazinilbenzoico como um sólido amarelo (1,88 g, 71 0 de pureza, 44 0 de rendimento), utilizado sem purificação adicional. Síntese Alternativa de cloridrato de ácido 4-bromo-5-fluoro-2-hidrazinilbenzoico:
Uma suspensão de ácido 2-amino-4-bromo-5-f luorobenzoico (10,0 g, 42,7 mmol) numa mistura de HC1 aquoso a 37 0 (42,7 ml) e água (14,3 ml), arrefecida com um banho de NaCl-gelo, foi tratada gota a gota com uma solução de nitrito de sódio (3,24 g, 47,0 mmol) em água (15,7 ml). Quando a adição estava completa, a mistura foi agitada durante mais 30 min. Uma solução de cloreto de estanho(II) di-hidratado (28,9 g, 128 mmol) em HC1 aquoso a 37 0 (27,5 ml) foi adicionada gota a gota. 0 banho de arrefecimento foi removido e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 45 min. A suspensão espessa foi filtrada e o precipitado recolhido foi lavado completamente com água e seco durante a noite sob pressão reduzida. 0 sólido foi triturado com MeOH com sonicação, e o precipitado foi recolhido por filtração, lavado com MeOH e seco. 0 filtrado foi concentrado, e o resíduo foi triturado com DCM. 0 sólido resultante foi recolhido por filtração, seco e combinado com o outro sólido para fornecer cloridrato de ácido 4-bromo-5-fluoro-2-hidrazinilbenzoico (5,37 g, 44 0 de rendimento) como um sólido branco. Espectro de massa m/z 249, 251 (M # H)#.
Intermediário 24C: ácido 5-bromo-2-(etoxicarbonil)-6- fluoro-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxílico
(I-24C)
Uma mistura de cloridrato de ácido 4-bromo-5-fluoro-2-hidrazinilbenzoico (5,37 g, 18,8 mmol), 3-oxociclo- hexanocarboxilato de etilo (3,52 g, 20,7 mmol) e ácido acético (3,23 ml, 56,4 mmol) em tolueno (90 ml) foi aquecida a 110 °C durante 20 h. 0 solvente foi removido sob pressão reduzida, e o resíduo foi diluído com tolueno (43 ml) e ácido trifluoroacético (11 ml). A mistura foi agitada em 90 a 94 °C durante a noite. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc, submetida a sonicação, e o precipitado foi recolhido por filtração. 0 filtrado foi concentrado e colocado novamente em suspensão em EtOAc com sonicação, o que resulta noutro precipitado que também foi recolhido por filtração e lavado com EtOAc. Os sólidos combinados foram triturados duas vezes com MeOH para fornecer um sólido. Os filtrados combinados foram concentrados e o resíduo foi triturado com MeOH para fornecer sólido adicional. Os sólidos foram combinados para fornecer o ácido 5-bromo-2-etoxicarbonil-6-fluoro-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxílico como um sólido amarelo pálido (3,38 g) . Espectro de massa m/z 384, 386 (M # H)#.
Intermediário 24D: 5-bromo-8-carbamoil- 6 -fluoro-2,3,4,9 - tetra-hidro-lH-carbazol-2-carboxilato de etilo
(I-24D)
Uma mistura de ácido 5-bromo-2-(etoxicarbonil)-6-fluoro-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxílico (0,513 g, 1,34 mmol), EDO (0,384 g, 2,00 mmol), e HOBT (0,307 g, 2,00 mmol) em THF (10 ml) e DCM (1,65 ml) foi agitada à temperatura ambiente durante 20 min. Hidróxido de amónio (0,078 ml, 2,00 mmol) foi adicionado, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 60 min. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada duas vezes com NaHC03 aquoso saturado, depois com salmoura. As camadas aquosas foram extraídas com EtOAc, e as camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas. 0 resíduo foi triturado em MeOH com sonicação para fornecer 5-bromo-8-carbamoil-6-fluoro- 2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-2-carboxilato de etilo como um sólido amarelo (0,432 g, 84 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 383, 385 (M#H)#.
Intermediário 24:
Uma solução de 5-bromo-8-carbamoil-6-fluoro-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-2-carboxilato de etilo (10,0 g, 26.1 mmol) em THF (200 ml) a -78 °C foi tratada gota a gota durante 30 min com metil-lítio a 1,6 M em éter (49 ml, 78 mmol) . A mistura foi agitada a -78 °C durante 4 5 min, depois foi tratada com uma solução de metil-lítio adicional (33 ml) durante 25 min. A mistura foi agitada a -78 °C durante 90 min adicionais, depois foi tratada com NH4C1 aquoso saturado e aquecida até à temperatura ambiente. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada sequencialmente com água e salmoura. As camadas aquosas foram extraídas com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas. 0 resíduo foi dissolvido em EtOAc (cerca de 100 ml) e filtrado através de um tampão de CELITE® coberto com um tampão de gel de sílica, lavando-se adicionalmente com EtOAc (cerca de 1000 ml) . A concentração do filtrado forneceu 5-bromo-6-fluoro-2-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida racémica como um sólido amarelo claro (9,24 g, 96 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 369, 371 (M # H)#, Síntese alternativa do Intermediário 24: A uma solução de 5-bromo-8-carbamoil-6-fluoro-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-2-carboxilato de etilo (10,0 g, 26.1 mmol) em tetrahidrof urano (200 ml) a -78 °C foi adicionado metil-lítio (1,6 M em éter) (3 equiv.; 49 ml, 78 mmol) gota a gota durante 3 0 min. A mistura de reação foi agitada a -78 °C durante 45 minutos. 2 equivalentes adicionais de metil-lítio (33 ml) foram adicionados durante 25 min., e a mistura de reação foi agitada a -78 °C durante 1,5 h adicionais. A reação foi extinta a -78 °C com uma solução aquosa saturada de cloreto de amónio e aquecida até à temperatura ambiente. A mistura foi diluída com acetato de etilo, lavada com água e lavada com salmoura. A camada orgânica foi recolhida, e as camadas aquosas foram sequencialmente extraídas com acetato de etilo. As camadas orgânicas combinadas foram secas por sulfato de sódio anidro e concentradas sob pressão reduzida. 0 resíduo foi dissolvido em -100 ml de acetato de etilo e filtrado através de um tampão de CELITE® coberto com um tampão de gel de sílica num funil calcinado de 600 ml utilizando acetato de etilo (-1 1). A concentração sob pressão reduzida proporcionou 5-bromo-6-fluoro-2-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-IH-carbazol-3-carboximida (9,24 g, 25,03 mmol, 96 0 de rendimento) como um sólido amarelo claro.
Intermediários 25 e 26 (R)-5-Bromo-6-fluoro-2-(2- hidroxipropan-2 -i1)-2,3,4,9-tetra-hidro-IH-carbazol- 8 -carboxamida (1-25), e (S)-5-Bromo-6-fluoro-2-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-IH-carbazol-8-carboxamida (1-26)
(1-26)
Uma amostra de 5-bromo-6-fluoro-2-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida racémica [Intermediário 24] foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® OD-H (3 x 25 cm, 5 um); Fase Móvel: C02-Me0H (70:30) em 150 ml/min, 40 °C. O primeiro pico que elui a partir da coluna forneceu (R)-5-bromo-6-fluoro-2-(2-hidroxipropan-2-il)- 2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida [Intermediário 25] . 0 segundo pico que elui a partir da coluna forneceu (S)-5-bromo-6-fluoro-2-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida [Intermediário 26] , 0 espectro de massa e o espectro de 1H RMN dos dois enantiómeros foram os mesmos. Espectro de massa m/z 369, 371 (M # H)#. ΧΗ RMN (500 MHz, DMSO-ds) δ 10,96 (s, 1H), 8,07 (s. 1., 1H), 7,55 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 7,50 (s. 1., 1H), 4,24 (s, 1H), 3,26 (dd, J = 15,8, 4,4 Hz, 1H), 2,93 (dd, J = 17,1, 4,6 Hz, 1H), 2,72 (t, J = 11,7 Hz, 1H), 2,48-2,40 (m, 1H), 2,12 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 1,70-1,62 (m, 1H) , e 1,32 (qd, J = 12,4, 5,3 Hz, 1H) .
Separação alternativa de SFC para fornecer o Intermediário 26 : CHIRALPAK® AD-H (3 x 25 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-MeOH (55:45) em 150 ml/min, 40 °C. 0 primeiro pico que elui a partir da coluna forneceu (S)-5-bromo-6-fluoro-2-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9 -tetra-hidro-lH-carbazol- 8 -carboxamida [Intermediário 26] . 0 segundo pico que elui a partir da coluna forneceu (R)-5-bromo-6-fluoro-2-(2- hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-IH-carbazol- 8 -carboxamida [Intermediário 25] .
Intermediário 27 4-Bromo-3-fluoro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida
(1-27)
Intermediário 27A: ácido 4-bromo-7-etoxicarbonil-3-fluoro- 9H-carbazol-1-carboxílico
(I-27A)
Uma solução de ácido 5-bromo-2-(etoxicarbonil)-6-fluoro-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxílico (2,87 g, 7,47 mmol) e 2,3-dicloro-5,6-dicianobenzoquinona (3,73 g, 16,4 mmol) em THF (4 5 ml) foi aquecida a 6 0 °C durante 90 min. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc (cerca de 50 ml) e agitada durante 60 min, 0 precipitado resultante foi recolhido por filtração, lavado com EtOAc e seco. 0 filtrado foi concentrado, e o resíduo foi triturado com MeOH com sonicação, filtrado, e o precipitado foi lavado com MeOH e seco. Os dois precipitados foram combinados para fornecer ácido 4-bromo-7-etoxicarbonil-3-fluoro-9H-carbazol-1-carboxílico como um sólido amarelo claro (2,39 g, 84 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 380, 382 (M # H)#.
Intermediário 26B: 5-bromo-8-carbamoil- 6 -fluoro-9H- carbazol-2-carboxilato de etilo
(I-27B)
Uma mistura de ácido 4-bromo-7-(etoxicarbonil)-3-fluoro-9H~carbazol-l-carboxílico (2,39 g, 6,29 mmol), EDC (1,81 g, 9,43 mmol) e HOBT (1,44 g, 9,43 mmol) em THF (30 ml) e DCM (5 ml) foi agitada à temperatura ambiente durante 2 0 min. Hidróxido de amónio (0,367 ml, 9,4 3 mmol) foi adicionado, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 4 h. A mistura foi diluída com EtOAc, lavada duas vezes com NaHC03 aquoso saturado, depois com salmoura. As camadas aquosas foram extraídas com EtOAc, e as camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas. 0 resíduo foi triturado com MeOH com sonicação para fornecer 5-bromo- 8-carbamoil-6-fluoro-9H-carbazol-2-carboxilato de etilo como um sólido amarelo claro (2,26 g, 95 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 379, 381 (M # H)#. XH RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ 12,02 (s, 1H) , 8,70 (d, J = 8,3 Hz, 1H) , 8,51 id, J" = 1,1 Hz, 1H), 8,29 iB. 1 . , 1H), 8,10 (d, J = 10,3
Hz, 1H), 7,87 (dd, J = 8,5, 1,5 Hz, 1H), 7,74 (s. 1., 1H), 4,37 (q, J = 6,9 Hz, 2H) , e 1,37 (t, J = 7,1 Hz, 3H) . ΧΗ RMN (500 MHz, MeOH-d4) δ 8,77 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,36 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 8,2 Hz, 1H) , 4,12 (q, J = 7,0 Hz, 2H) , 1,58-1,36 (m, 4H) , e 1,26 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Síntese alternativa de 5-bromo-8-carbamoil-6-fluoro-9H-carbazol-2-carboxilato de etilo:
Uma mistura de 5-bromo-8-carbamoil-9H-carbazol-2-carboxilato de etilo [sintetizado de acordo com o procedimento descrito no documento de patente U.S. No. 8.084.620, Intermediário 48-1] (0,100 g, 0,277 mmol) e 1- (clorometil)-4 -fluoro-1,4-diazoniabiciclo[2,2,2]octano bis(tetrafluoroborato) [SELECTFLUOR®] (0,100 g, 0,554 mmol) em THF (2 ml) e MeCN (2 ml) foi aquecida a 60 °C durante a noite. A mistura arrefecida foi filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado utilizando HPLC preparativa de fase reversa para fornecer 5-bromo-8-carbamoil-3-fluoro-9H-carbazol-2-carboxilato de etilo como um sólido ocre (0,035 g).
Intermediário 27:
Uma solução de 5-bromo-8-carbamoil- 6 -fluoro-9H- carbazol-2-carboxilato de etilo (0,500 g, 1,32 mmol) em THF (9,0 ml) a -78 °C foi tratada gota a gota durante 10 min com metil-lítio a 1,6 M em éter (2,47 ml, 3,96 mmol) . A mistura foi agitada a -78 °C durante 30 min, depois foi tratada com uma solução de metil-lítio adicional (1,65 ml, 2,64 mmol) e a mistura foi agitada a -78 °C durante mais 45 min. A mistura foi tratada com NH4C1 aquoso saturado e deixada aquecer até à temperatura ambiente. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada sequencialmente com água e salmoura. As camadas aquosas foram extraídas com EtOAc e as camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas para fornecer um sólido amarelo claro que foi purificado por HPLC preparativa de fase reversa. As frações apropriadas foram neutralizadas com NaHC03 aquoso saturado e concentradas. 0 resíduo foi dividido entre EtOAc e água, e a camada orgânica foi lavada com salmoura. As camadas aquosas foram extraídas com EtOAc, e as camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas para fornecer 4-bromo-3-fluoro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida como um sólido amarelo claro (0,240 g, 50 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 347, 349 (M # H - H20)#. ΧΗ RMN (500 MHz, DMS0-d6) δ 11,58 (s, 1H) , 8,50 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,22 (s. 1., 1H), /,96 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 7,94 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 7,65 (s. 1., 1H), 7,39 (dd, J = 8,5, 1,5 Hz, 1H), 5,09 (s, 1H), e 1,51 (s, 6H). Síntese alternativa de 4-Bromo-3-fluoro-7-(2-hidroxipropan-2 -il)-9H-carbazol-1-carboxamida:
Uma solução de 5-bromo-8-carbamoil-6-fluoro-9H-carbazol-2-carboxilato de etilo (10 g, 26,4 mmol) em THF (300 ml) foi arrefecida num banho de água fria e tratada gota a gota com cloreto de metilmagnésio a 3,0 M em THF (70,3 ml, 211 mmol) . A solução foi agitada a 0 °C durante 18 h. A mistura foi vertida dentro de 1000 ml de NH4C1 aquoso saturado bem agitado, arrefecida num banho de água fria. A mistura resultante foi diluída com água e extraída duas vezes com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram lavadas duas vezes com água, depois com salmoura, e secas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (330 g) , eluindo com EtOAc-DCM (gradiente de 20 a 100 °), para fornecer 4-bromo-3-fluoro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (6,36 g, 65 0 de rendimento).
Intermediário 28 4-Bromo-7-(2-hidroxipropan-2-il)-3-metil- 9H-carbazol-l-carboxamida
(1-28)
Intermediário 28A: 5-Bromo-2-iodo-4-metilanilina
(I-28A)
Uma solução de 3-bromo-4-metilanilina (5,00 g, 26,9 mmol), N-iodosuccinimida (4,53 g, 20,2 mmol) e tetrafluoroborato de bis(piridina)iodónio (2,70 g, 7,26 mmol) em DCM (100 ml) foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi diluída com DCM, lavada sequencialmente com NaHS03 aquoso saturado e água, e seca e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos (sequencialmente 1 %, 2 % e 3 %), para fornecer 5-bromo-2-iodo-4-metilanilina como um sólido amarelo (5,27 g, 63 % de rendimento) . Espectro de massa m/z 312, 314 (M # H)#. LH RMN (500 MHz, CDC13) δ 7,49 (d, J = 0,6 Hz, 1H) , 6,94 (s, 1H) , 4,17-3,91 (s. 1., 2H) , e 2,25 (s, 3H) .
Intermediário 28B: 2-Amino-4-bromo-5-metilbenzonitrilo
(I-28B)
Uma mistura de 5-bromo-2-iodo-4-metilanilina (5,25 g, 16,8 mmol) e cianureto de zinco (0,988 g, 8,41 mmol) em DMF (80 ml) foi submetida a três ciclos de evacuação-preenchimento com azoto. A mistura foi tratada com tetraquis(trifenilfosfina)paládio (0,972 g, 0,841 mmol) e aquecida a 90 °C durante a noite. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc e lavada sequencialmente com LiCl aquoso a 10 % (duas vezes) e salmoura. As camadas aquosas foram extraídas com EtOAc, e as camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com
EtOAc-hexanos (sequencialmente 1 °, 2,5 °, 5 o e 50 °) , para fornecer um sólido castanho. O resíduo foi ainda purificado por trituração com MeOH para fornecer três culturas de sólido. 0 filtrado foi novamente purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com
EtOAc-hexanos (5 °, depois 10 °). 0 sólido resultante foi combinado com as outras culturas para fornecer 2-amino-4-bromo-5-metilbenzonitrilo como um sólido ocre (2,95 g, 83 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 211, 213 (M # H)#. Intermediário 28C: ácido 2-amino-4-bromo-5-metilbenzoico
(I-28C)
Uma mistura de 2-amino-4-bromo-5-metilbenzonitrilo (2,95 g, 14,0 mmol) numa mistura de EtOH (21 ml) e NaOH aquoso a 2 M (34,9 ml, 69,9 mmol) foi aquecida em refluxo durante a noite. Após arrefecimento até à temperatura ambiente, o etanol foi removido sob pressão reduzida, e o resíduo aquoso foi diluído com água. Após ajuste do pH para cerca de 5 com HC1 concentrado aquoso, a mistura foi agitada durante 30 min e o precipitado foi recolhido por filtração e lavado com água. 0 sólido húmido resultante foi dissolvido em EtOAc, lavado com salmoura, seco e concentrado para fornecer ácido 2-amino-4-bromo-5-metilbenzoico como um sólido amarelo claro (2,92 g, 91 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 212, 214 (M # H)#. Intermediário 28D: cloridrato de ácido 4-bromo-2- hidrazinil- 5-metilbenzoico
(I-28D)
Uma suspensão de ácido 2-amino-4-bromo-5-metilbenzoico (2,92 g, 12,7 mmol) numa mistura de HC1 aquoso a 37 0 (12,7 ml) e água (4,3 ml), arrefecida num banho de NaCl-gelo, foi tratada lentamente gota a gota com uma solução de nitrito de sódio (0,963 g, 14,0 mmol) em água (4,5 ml). A mistura resultante foi agitada durante 45 min, depois foi tratada lentamente gota a gota com uma solução de cloreto de estanho(II) di-hidratado (8,59 g, 38,1 mmol) em HC1 aquoso a 37 0 (8,2 ml). 0 banho de arrefecimento foi removido, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 60 min. A mistura foi filtrada, e o precipitado recolhido foi lavado com água e seco. 0 sólido foi triturado e submetido à sonicação em MeOH e a mistura foi concentrada. 0 resíduo foi triturado e submetido a sonicação com DCM, e o precipitado foi recolhido por filtração e lavado com DCM para fornecer cloridrato de ácido 4-bromo-2-hidrazinil-5-metilbenzoico como um sólido branco (2,17 g, 61 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 245, 247 (M # H)#. Intermediário 28E: ácido 5-bromo-2-(etoxicarbonil)-6-metil- 2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxílico
(I-28E)
Uma mistura de cloridrato de ácido 4-bromo-2-hidrazinil-5-metilbenzoico (2,17 g, 7,71 mmol), 3-oxociclo-hexanocarboxilato de etilo (1,44 g, 8,48 mmol) e ácido acético (1,32 ml, 23,1 mmol) em tolueno (40 ml) foi aquecida num banho de óleo a 117 °C durante 5 h. A mistura foi concentrada e seca sob vácuo, e o resíduo foi diluído com tolueno (18 ml) e TFA (4,5 ml) . A mistura foi aquecida a 90 °C durante a noite. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc, submetida a sonicação, e o precipitado foi recolhido por filtração e lavado com EtOAc para fornecer um sólido amarelo. 0 filtrado foi concentrado e o resíduo foi colocado em suspensão em EtOAc com sonicação. 0 precipitado foi recolhido por filtração e combinado com o primeiro precipitado. O sólido foi triturado com MeOH para fornecer ácido 5-bromo-2-(etoxicarbonil)-6-metil-2,3,4,9-tetra- hidro-lH-carbazol- 8-carboxílico como um sólido amarelo claro (1,60 g, 55 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 380, 382 (M # H)#.
Intermediário 28F: ácido 4-bromo-7-(etoxicarbonil)-3-metil-9H-carbazol-1-carboxílico
(I-28F)
Uma solução de ácido 5-bromo-2-(etoxicarbonil)-6-metil-2,3,4,9-t.etra-hidro-lH-carbazol-8-carboxílico (1,60 g, 4,21 mmol) e 2,3-dicloro-5,6-dicianobenzoquinona (2,10 g, 9,2 6 mmol) em THF (4 5 ml) foi aquecida a 6 0 °C durante 60 min. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc (cerca de 70 ml) , agitada durante 15 min, e o precipitado foi recolhido por filtração, lavado com EtOAc e seco. 0 filtrado foi concentrado, e o resíduo foi triturado com MeOH, filtrado, e o precipitado recolhido foi lavado com MeOH. Os dois sólidos foram combinados para fornecer ácido 4-bromo-7-(etoxicarbonil)-3-metil-9H-carbazol-l-carboxílico como um sólido amarelo claro (1,40 g, 88 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 376, 378 (M # H)#.
Intermediário 28G: 5-bromo-8-carbamoil-6-metil-9H-carbazol-2-carboxilato de etilo
(I-28G)
Uma mistura de ácido 4-bromo-7-(etoxicarbonil)-3-metil-9H-carbazol-1-carboxílico (1,40 g, 3,72 mmol), EDC (1,070 g, 5,58 mmol) e HOBT (0,855 g, 5,58 mmol) numa mistura de THF (30 ml) e DCM (5 ml) foi agitada à temperatura ambiente durante 60 min. Hidróxido de amónio (0,217 ml, 5,58 mmol) foi adicionado, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com NaHC03 aquoso saturado. A separação de fase não pode ser obtida, de modo que a mistura foi filtrada, e o sólido recolhido foi lavado sequencialmente com água e EtOAc, triturado com MeOH e seco. 0 filtrado de EtOAc-água foi separado e a fase orgânica foi lavada com salmoura, seca e concentrada. 0 resíduo foi triturado com MeOH, e o sólido resultante foi combinado com o primeiro sólido para fornecer 5-bromo-8-carbamoil-6-metil-9H-carbazol-2-carboxilato de etilo como um sólido esbranquiçado (1,27 g, 91 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 375, 377 (Μ # H)#, ‘Ή RMN (400 MHz, DMSO- ds) 5 11,88 (s, 1H), 8,77 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,48 (d, J - 0,9 Hz, 1H) , 8,20 (s. 1., 1H) , 7,84 (dd, J = 8,5, 1,4 Hz, 1H) , 7,59 (s. 1., 1H) , 4,37 (q, J = 7,0 Hz, 2H) , 2,55 (s, 3H), e 1,37 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
Intermediário 28:
Uma solução de 5-bromo-8-carbamoil-6-metil-9H-carbazol-2-carboxilato de etilo (0,500 g, 1,33 mmol) em THF (12 ml) a -78 °C foi tratada gota a gota durante 10 min com metil-lítio a 1,6 M em éter (2,50 ml, 4,00 mmol). A mistura foi agitada a -78 °C durante 30 min, depois foi tratada com uma solução de metil-lítio adicional (1,67 ml, 2,67 mmol). Após 30 min mais, uma solução de metil-lítio adicional (1,67 ml, 2,67 mmol) foi adicionada e a agitação continuou durante 4 5 min. A mistura foi depois tratada com NH4C1 aquoso saturado e deixada aquecer até à temperatura ambiente. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada sequencialmente com água e salmoura. As camadas aquosas foram extraídas com EtOAc, e as camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas para fornecer um sólido esbranquiçado. 0 sólido foi triturado e submetido à sonicação com MeOH e recolhido por filtração. 0 filtrado foi purificado por HPLC preparativa de fase reversa. As frações apropriadas foram tratadas com NaHC03 aquoso saturado e concentradas. 0 resíduo foi dividido entre EtOAc e água. A fase orgânica foi lavada com salmoura, e as camadas aquosas foram extraídas com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas, e o resíduo foi combinado com o primeiro sólido para fornecer 4- bromo-7-(2-hidroxipropan-2-il)-3-metil-9H-carbazol-l- carboxamida como um sólido ocre (0,409 g, 85 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 343, 345 (M # H - H20)#. lH RMN (500 MHz, DMSO-de) δ 11,42 (s, 1H) , 8,56 (d, J" = 8,6 Hz, 1H), 8,12 (s. 1., 1H), 7,91-7,89 (m, 2H), 7,48 (s. 1., 1H) , 7,36 (dd, J = 8,3, 1,7 Hz, 1H) , 5,06 (s, 1H) , 2,53 (s, 3H), e 1,51 (s, 6H).
Intermediário 29 5- Bromo-6-cloro-2-(RS)-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9- tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida (mistura racémica)
(1-29)
Intermediário 29A: cloridrato de ácido 4-bromo-5-cloro-2-hidrazinilbenzoico (I-29A)
Uma solução de nitrito de sódio (3,03 g, 43,9 mmol) em água (14,8 ml) foi adicionada gota a gota a uma suspensão arrefecida (-10 °C, banho de NaCl-gelo) de ácido 2-amino-4- bromo-5-clorobenzoico (10,0 g, 39,9 mmol) em HC1 aquoso a 37 0 (39,9 ml) e água (13,3 ml), em tal taxa que a temperatura nâo excedeu 0 °C. A suspensão resultante foi agitada a 0 °C durante 15 min, depois foi tratada com uma solução de cloreto de estanho(II) hidratado (22,7 g, 120 mmol) em HC1 aquoso a 37 0 (17 ml) . A mistura resultante foi aquecida até à temperatura ambiente e agitada durante 60 min. 0 precipitado foi recolhido por filtração, lavado com água e seco com ar durante a noite para fornecer cloridrato de ácido 4-bromo-5-cloro-2-hidrazinilbenzoico como um sólido esbranquiçado (12,86 g, 96 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 365, 267 (M # H)#. *H RMN (400 MHz, DMS0-d6) δ 9,05 (s. 1., 1H), 7,95 (s, 1H), 7,55 (s, 1H).
Intermediário 29B: ácido 5-bromo-6-cloro-2-(etoxicarbonil)- 2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxílico
Uma suspensão de cloridrato de ácido 4-bromo-5-cloro-2-hidrazinilbenzoico (12,89 g, 37,6 mmol), 3-oxociclo-hexanocarboxilato de etilo (7,03 g, 41,3 mmol), e ácido acético (6,45 ml, 113 mmol) em tolueno (188 ml) foi aquecida a 105 °C durante a noite. Após 16 h, mais ácido
acético (6 ml) e 3-oxociclo-hexanocarboxilato de etilo (2,00 g) foram adicionados e a mistura foi aquecida a 110 °C durante 4,5 h. A mistura foi concentrada, e o resíduo foi combinado com tolueno (100 ml) e TFA (20 ml) . A suspensão foi aquecida a 90 °C durante a noite. A mistura arrefecida foi concentrada e o resíduo foi colocado em suspensão em EtOAc. 0 sólido resultante foi recolhido por filtração, lavado com EtOAc e seco com ar para fornecer ácido 5-bromo-6-cloro-2-(etoxicarbonil)-2,3,4,9-tetra- hidro-lH-carbazol- 8-carboxílico como um sólido amarelo (11,0 g, 73 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 400, 402 (Μ # Η)#. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 13,44 (s. 1., 1Η) , 11,24 (s, 1Η) , 7,69 (s, 1Η) , 4,12 (qd, J = 7,1, 2,3 Hz, 2Η) , 3,23-2,81 (m, 5Η) , 2,23-2,09 (m, 1Η) , 1,91-1,75 (m, 1Η) , 1,22 (t, J = 7,0 Hz, 3H) .
Intermediário 29C: 5-bromo-8-carbamoil-6-cloro-2,3,4,9- tetra-hidro-lH-carbazol-2-carboxilato de etilo
(I-2 9C)
Após o procedimento utilizado para preparar ο Intermediário 24D, ácido 5-bromo-6-cloro-2-(etoxicarbonil)- 2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxílico foi convertido dentro de 5-bromo-8-carbamoil-6-cloro-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-2-carboxilato de etilo como um sólido castanho claro (8,54 g, 78 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 399, 401 (Μ # H)#. 1H RMN (400 MHz, DMS0-d6) δ 13,44 (s. 1., 1H) , 11,24 (s, 1H) , 7,69 (s, 1H) , 4,12 (qd, J = 7,1, 2,3 Hz, 2H) , 3,23-2,81 (m, 5H) , 2,23- 2,09 (m, 1H), 1,91-1,75 (m, 1H), 1,22 (t, J = 7,0 Hz, 3H). Intermediário 29:
Uma solução de 5-bromo-8-carbamoil-6-cloro-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-2-carboxilato de etilo (7,03 g, 17,6 mmol) em THF (200 ml) foi arrefecida num banho de gelo seco-acetona e tratada em porções durante 40 min com metil-lítio a 1,6 M em THF (66,0 ml, 106 mmol) . Após 60 min, a mistura foi tratada lentamente a -78 °C com NH4C1 aquoso saturado e agitada durante 10 min enquanto se aquecia até à temperatura ambiente. A mistura foi extraída 3 vezes com DCM, e as fases orgânicas combinadas foram lavadas sequencialmente com água e salmoura, e secas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (120 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0 a 100 °), para fornecer 5-bromo-6-cloro-2-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8- carboxamida como um sólido amarelo (4,66 g) . Espectro de massa m/z 385, 387 (M # H)#. ‘'H RMN (400 MHz, DMSO-ds) δ 11,08 (s, 1H), 8,13 (s. 1., 1H), 7,76 (s, 1H), 7,50 (s. 1., 1H) , 3,28 (d, J = 5,5 Hz, 1H) , 2,94 (dd, J = 17,1, 4,7 Hz, 1H), 2,79-2,66 (m, 1H), 2,49-2,39 (m, 1H), 2,14 (d, J = 9,5 Hz, 1H) , 1,66 (td, J = 11,4, 4,1 Hz, 1H) , 1,33 (qd, J = 12,4, 5,2 Hz, 1H), 1,15 (s, 6H).
Intermediários 30 e 31 (R)-5-Bromo-6-cloro-2-(2- hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9 -tetra-hidro-IH-carbazol- 8 -carboxamida (1-30), e (S)- 5-Bromo-6-cloro-2 -(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-IH-carbazol-8-carboxamida (I-31)
(1-31)
Uma amostra de 5-bromo-6-cloro-2-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida racêmica [Intermediário 29] (2,35 g) foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® IA (3 x 25 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-Me0H (50:50) em 124 ml/min, 100 bar, 45 °C; preparação da amostra: 39 mg/ ml em MeOH-DMSO (4:1); injeção: 2,33 ml. 0 primeiro pico que elui a partir da coluna forneceu o isómero (R) , (R)-5-bromo-6-cloro-2-(2-hidroxipropan-2-il)- 2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-S-carboxamida [Intermediário 30] como um sólido amarelo (1,15 g) . Espectro de massa m/z 385, 387 (M # H)#. *H RMN (500 MHz, DMS0-d6) δ 11,07 (s, 1H) , 8,12 (s. 1., 1H) , 7,75 (s, 1H) , 7,57-7,45 (m, 1H), 4,23 (s, 1H), 3,27 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 2,93 i dd, J = 1 / , 2, 4,/ Hz, 1H), 2,78-2,67 (m, 1H), 2,48- 2,39 (m, 1H), 2,16-2,08 (m, 1H), 1,69-1,59 (m, 1H), 1,37-1,26 (m, 1H), 1,14 (s, 6H). 0 segundo pico que elui a partir da coluna forneceu o isómero (S) , (S)-5-bromo-6-cloro-2-(2-hidroxipropan-2-il)- 2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida [Intermediário 31] como um sólido esbranquiçado (0,92 g). Espectro de massa m/z 385, 387 (M # H)#. "H RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ 11,06 (s, 1H) , 8,12 (s. 1., 1H) , 7,74 (s, 1H) , 7,49 (s. 1., 1H) , 4,23 (s, 1H) , 3,27 (d, J = 5,0 Hz, 1H) , 2,93 (dd, J = 17,1, 4,6 Hz, 1H), 2,72 (t, J = 11,8 Hz, 1H), 2,48-2,37 (m, 1H), 2,12 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 1,69-1,59 (m, 1H), 1,38-1,24 (m, 1H), 1,14 (s, 6H). A configuração absoluta do Intermediário 30 foi confirmada pela análise de raios X de cristal único de cristais preparados pela dissolução do composto em excesso de 1,2-dicloroetano/EtOAc/ácido acético e evaporação lenta do solvente à temperatura ambiente para fornecer um solvato de ácido diacético. As dimensões da célula unitária: a = 11,690(2)À, b = 7,0901(9)Â, c = 14,427(3)Á, α = 90°, β = 110,607(5)°, γ = 90°; Volume = 1119,2(3) Ã3; Volume/Número de moléculas na célula unitária = 560 Â3; Grupo espacial: P21; Moléculas de Intermediário 30/unidade assimétrica (Zf): 1; Densidade, calc g-cm"3: 1,501. As coordenadas atómicas fracionárias à temperatura ambiente são dadas no Quadro 8, e uma descrição da estrutura é dada na Figura 1.
Quadro 8
Intermediário 32 5-metoxi-2-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-pirido[1,2-c]pirimidina-1,3(2H)-diona
(1-32)
Intermediário 32A: 2-(3-metoxipiridin-2-il)acetato de etilo
(I-32A)
Uma solução de di-isopropilamina agitada (0,385 ml, 2,70 mmol) em THF (2 ml) a 0 °C foi tratada lentamente com n-butillítio a 1,6 M em hexanos (1,69 ml, 2,70 mmol) . A mistura foi agitada durante 15 min, depois foi adicionada durante 5 min a uma solução agitada de 3-metoxi-2-picolino (0,133 g, 1,08 mmol) e carbonato de dietilo (0,262 ml, 2,16 mmol) em THF (5 ml) a -78 °C, Após agitação durante 45 min mais, o banho de arrefecimento foi removido e a agitação continuou durante a noite à temperatura ambiente. A mistura foi tratada com MH4C1 aquoso saturado e diluída com EtOAc. A fase orgânica foi separada, lavada sequencialmente com NaHC03 aquoso saturado e salmoura, e seca e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (12 g) , eluindo com 50 % EtOAc - hexanos, para fornecer 2-(3-metoxipiridin-2-il)acetato de etilo como um óleo (0,17 g, 81 % de rendimento) . Espectro de massa m/z 196 (M # H)#.
Intermediário 32B: 2-(3-metoxipiridin-2-il)acetato de sódio
(I-32B)
Uma solução agitada de 2-(3-metoxipiridin-2-il)acetato de etilo (0,17 g, 0,871 mmol) em THF (2,5 ml) à temperatura ambiente foi tratada com NaOH aquoso a 3 M (0,581 ml, 1,74 mmol) . Após 7 h, a mistura foi concentrada para remover o THF e o resíduo aquoso foi congelado em gelo seco e liofilizado para fornecer 2-(3-metoxipiridin-2-il)acetato de sódio como um sólido branco. Um rendimento quantitativo foi assumido e o material utilizado sem purificação adicional. Espectro de massa m/z 168 (M # H)#.
Intermediário 32C: N-(3-Bromo-2-metilfenil)-2-(3- metoxipiridin-2-il) acetamida
(I-32C)
Uma mistura de 2-(3-metoxipiridin-2-il)acetato de sódio (0,166 g, 0,871 mmol), 3-bromo-2-metilanilina (0,118 ml, 0,958 mmol), DIEA (0,608 ml, 3,48 mmol) e HATH (0,397 g, 1,05 mmol) em DMF (4,0 ml) foi agitada à temperatura ambiente. Após 1 h, a mistura foi diluída com EtOAc e lavada duas vezes com LiCl aquoso a 10 °, depois com salmoura, seca e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica para fornecer N-(3-bromo-2-metilfen.il) - 2- (3-metoxipiridin-2-il) acetamida como um sólido amarelo claro (0,213 g, 73 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 335, 337 (M # H)#.
Intermediário 32D: 2-(3-Metoxipiridin-2-il)-N-(2-metil-3- (4,4,5,5 -tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)acetamida
(I-32D)
Uma mistura de N-(3-bromo-2-metilfenil)-2-(3-metoxipiridin-2-il)acetamida (4,00 g, 11,9 mmol) e 4,4,4F,4,,5,5,5f,5f-octametil-2,2’-bi(1,3,2-dioxaborolano) (3,48 g, 13,7 mmol) em DMSO (7 ml) e dioxano (35 ml) foi borbulhada com árgon durante 5 min, depois foi tratada com acetato de potássio (2,93 g, 29,8 mmol). 0 borbulhamento continuou durante 2 min, depois a mistura foi tratada com aduto de PdCl2(dppf) DCM (0,487 g, 0,597 mmol). 0 recipiente de reação foi vedado e aquecido a 90 °C durante a noite. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc e lavada sequencialmente com água e salmoura. As camadas aquosas combinadas foram extraídas com EtOAc, e as camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas. 0 resíduo foi filtrado através de um tampão de gel de sílica com 60 % EtOAc-hexanos e o filtrado foi concentrado. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos, para fornecer 2-(3-metoxipiridin-2-il)-N-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)acetamida como um sólido ocre (5,1 g, 82 % de rendimento) . "Ή RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 9,65 (s. 1., 1H), 8,20 (dd, J = 4,3, 1,7 Hz, 1H), 8,14 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,24-7,17 (m, 3H) , 4,01 (s, 2H) , 3,88 (s, 3H) , 2,45 (s, 3H) , 1,35 (s, 12H) .
Intermediário 32 :
Uma mistura de 2-(3-metoxipiridin-2-il)-N-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)acetamida (1,45 g, 3,78 mmol) e CD1 (2,45 g, 15,1 mmol) em tolueno (19 ml) foi aquecida a 110 °C durante 3 h. A mistura arrefecida foi dividida entre EtOAc e água. A camada orgânica foi lavada sequencialmente com água e salmoura, seca e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos, para fornecer 5-metoxi-2-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-pirido[1,2-c] pirimidina-1,3(2H)-diona como um sólido amarelo (0,571 g, 37 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 409 (Μ # H)#. ΧΗ RMN (400 MHz, clorof õrmio-d) δ 7,96 id, J = 7,0 Hz, 1H), 7,91 (dd, J = 7,4, 1,2 Hz, 1H), 7,33 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,22 (dd, J = 7,8, 1,2 Hz, 1H), 6,39- 6,30 (m, 2H) , 6,24 (s, 1H) , 3,93 (s, 3H) , 2,34 (s, 3H) , 1,34 (s, 12H).
Intermediário 33 5-Cloro-2-(2-metil-3 -(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-pirido[1,2-c]pirimidina-1,3(2H)-diona (mistura racémica)
(1-33)
Intermediário 33A: 2-(3-cloropiridin-2-il)malonato de
di e t i1o (I-33A)
Uma mistura de 3-cloro-2-fluoropiridina (5,00 g, 38,0 mmol), malonato de dietilo (14,6 g, 91 mmol) e Cs2C03 (29,7 g, 91 mmol) em DMSO (42 ml) foi aquecida a 100 °C durante 7 h. Após agitação durante a noite à temperatura ambiente, a mistura foi diluída com EtOAc, lavada duas vezes com água, depois com salmoura. As camadas aquosas combinadas foram extraídas com EtQAc, e as fases orgânicas combinadas foram secas e concentradas para fornecer 2-(3-cloropiridin-2-il) malonato de dietilo bruto como um óleo transparente, utilizado sem purificação adicional. Espectro de massa m/z 272 (M # H)#.
Intermediário 33B: 2-(3-cloropiridin-2-il)acetato de etilo
(I-33B)
Uma mistura de 2-(3-cloropiridin-2-il) malonato de dietilo (10,32 g, 38 mmol), cloreto de sódio (5,55 g, 95 mmol) e água (3,42 ml, 190 mmol) em DMSO (40 ml) foi aquecida a 145 °C durante 8 h. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente, diluída com EtOAc e lavada duas vezes com água, depois com salmoura. A fase orgânica foi seca e concentrada para fornecer 2-(3-cloropiridin-2-il)acetato de etilo bruto, utilizado sem purificação adicional. Espectro de massa m/z 200 (M # H)#.
Intermediário 33C: 2-(3-cloropiridin-2-il)acetato de sódio
(I-33C)
Uma solução de 2-(3-cloropiridin-2-il)acetato de etilo (7,59 g, 38 mmol) em THF (76 ml) foi tratada à temperatura ambiente com NaOH aquoso a 3 M (25,3 ml, 76 mmol) . A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite e concentrada para remover o THF. 0 resíduo aquoso foi congelado em gelo seco e liofilizado para fornecer 2-(3-cloropiridin-2-il)acetato de sódio como um sólido esbranquiçado, utilizado sem purificação adicional. Espectro de massa m/z 172 (M # H)#.
Intermediário 33D: N-(3-Bromo-2-metilfenil)-2-(3- cloropiridin-2-il)acetamida
(I-33D)
Uma mistura de 2 -(3-cloropiridin-2-il)acetato de sódio (7,39 g, 38 mmol) , 3- bromo-2-metilanilina (4,7 ml, 38,4 mmol) , Dl EA (13,3 ml, 7 6 mmol) e HATU (14,6 g, 3 8,4 mmol) em DMF (127 ml) foi agitada à temperatura ambiente. Após 90 min a mistura foi diluída com EtOAc e lavada duas vezes com LiCl a 10 °, depois com salmoura. As camadas aquosas combinadas foram extraídas com EtOAc, e as fases orgânicas combinadas foram secas e concentradas num pequeno volume. A solução foi semeada com um cristal de um lote inicial e deixada repousar durante a noite para fornecer um precipitado que foi recolhido por filtração e lavado com 50 0 EtOAc-hexanos para fornecer um sólido branco. 0 filtrado foi concentrado e recristalizado de forma semelhante três vezes para fornecer sólido adicional. Os sólidos foram combinados para fornecer N-(3-bromo-2-metilfenil)-2-(3-cloropiridin-2-il)acetamida como um sólido branco (11,43 g, 89 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 339, 341 (Μ # H)#. ΧΗ RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 9,76 iB. 10/ 1H), 8,52 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 7,92 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,80 (dd, J = 8,1, 1,1 Hz, 1H), 7,36 (d, J — /,9 Hz, 1H), 7,32-7,23 (m, 1H), 7,06 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,16 (s, 2H), 2,39 (s, 3H).
Intermediário 33E: 2- (3-C!oropiridin-2--il) -N- (2-metil-3- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)acetamida
(I - 3 3 E)
Uma mistura de N-(3-bromo-2-metilfenil)-2-(3-cloropiridin-2-il)acetamida (4,0 g, 11,78 mmol) e 4,4,4f,4r,5,5,5F,5'-octametil-2,21-bi(1,3,2-dioxaborolano) (3,29 g, 12,96 mmol) em DMSO (5 ml) e dioxano (25 ml) foi borbulhada com ãrgon durante 7 min, seguido pela adição de acetato de potássio (2,89 g, 29,4 mmol). 0 borbulhamento de ãrgon continuou durante 7 min após o que aduto de
PdCl2(dppf) DCM (0,481 g, 0,589 mmol) foi adicionado. A mistura foi aquecida a 90 °C durante 7 h. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc e filtrada através de CELITE®. 0 filtrado foi lavado sequencialmente com água e salmoura. As camadas aquosas combinadas foram extraídas com EtOAc, e as fases orgânicas combinadas foram secas e concentradas. 0 resíduo foi recristalizado a partir de EtOAc para fornecer um sólido branco. 0 licor-mãe foi concentrado e o resíduo foi recristalizado a partir de EtOAc. Os dois sólidos foram combinados para fornecer 2-(3-cloropiridin-2-il)-N-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-l ,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)acetamida como um sólido branco (3,88 g, 85 % de rendimento). Espectro de massa m/z 387 (M + H) +.
Intermediário 33:
Uma mistura de 2-(3-cloropiridin-2-il)-N-(2-metil-3-(4,4,5,5 -tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)acetamida (0,192 g, 0,497 mmol) e GDI (0,322 g, 1,986 mmol) em tolueno (2 ml) foi aquecida a 110 °C. Após 5 h, a mistura arrefecida foi diluída com EtOAc e lavada sequencialmente com água e salmoura. As camadas aquosas combinadas foram extraídas com EtQAc, e as fases orgânicas combinadas foram secas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos, para fornecer 5-cloro-2-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-lH-pirido[l,2-c]pirimidina-1,3(2H)-diona racémica como um sólido amarelo brilhante (0,133 g, 65 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 413 (Μ # H)#. ‘Ή RMN (400 MHz, clorof órmio-d) δ 8,26 (dt, J = 7,6, 0,9 Hz, 1H), 7,94 (dd, J = 7,5, 1,3 Hz, 1H), 7,36 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,27-7,18 (m, 2H), 6,36 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 6,31 (s, 1H), 1,57 (s, 3H), 1,36 (s, 12H).
Intermediários 34 e 35 5-Cloro-2-(R)-(2-metil-3 -(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-IH-pirido[1,2 - c]pirimidina-1,3(2H)-diona (1-34), e 5- Cloro-2- (S) - (2-metil-3 - (4,4,5,5-tetramet.il-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-pirido[1,2-c]pirimidina- 1.3 (2H)-diona (1-35)
(1-35)
Uma amostra de 5-cloro-2-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-pirido[1,2-c]pirimidina-1,3(2H)-diona racémica [Intermediário 33] foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: WHELK-0® R,R (3 x 25 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-Me0H (55:45) em 200 ml/min, 100 bar, 35 °C; preparação da amostra: 96 mg/ ml em MeCN-DCM (1:4); injeção: 5 ml. 0 primeiro pico que elui a partir da coluna forneceu 5-cloro-2-(R)-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-pirido[1,2-c]pirimidina-1,3(2H)-diona [Intermediário 34]. 0 segundo pico que elui a partir da coluna forneceu 5-cloro-2-(S)-(2-metil-3-(4,4,5,5 -tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-pirido[1,2-c]pirimidina-1,3(2H)-diona [Intermediário 35]. 0 espectro de massa e Ή RMN para cada atropisómero enantiomérico foram os mesmos como aqueles para o Intermediário 33.
Alternativamente, uma amostra de 5-cloro-2-(2-metil-3-(4,4,5,5“tetramet.i 1 -1, 3,2 -dioxaborolan~2 - i 1) fenil) - 1H -pirido[1,2-c]pirimidina-1,3(2H)-diona racémica [Intermediário 33] foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: WHELK-O® R,R (3 x 25 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-CH3CN (55:45) em 200 ml/min, 100 bar, 35 °C; preparação da amostra: 96 mg/ ml em MeCN-DCM (1:4); injeção: 5 ml. 0 primeiro pico que elui a partir da coluna forneceu 5-cloro-2-(S)-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-pirido[1,2-c] pirimidina-1,3(2H)-diona [Intermediário 35]. 0 material pode ser ainda purificado através da dissolução em THF, diluição com hexanos e recolha do precipitado por filtração. A configuração absoluta do Intermediário 35 foi confirmada pela análise de raios X de cristal único de cristais preparados pela dissolução do composto com excesso de acetona e evaporação lenta do solvente à temperatura ambiente. Dimensões unitárias da célula: a = 19,6161(8) Ã, b = 9,1411(4) Á, c = 12,7541(6) Ã, α = 90°, β = 113,165(2)°, γ = 90°; Grupo espacial: C2; Moléculas de Intermediário 35/unidade assimétrica (Zr): 1; Densidade, calc g-cm"3: 1,304. As coordenadas atómicas fracionárias à temperatura ambiente são dadas no Quadro 9, e uma descrição da estrutura é dada na Figura 2.
Quadro 9
Intermediário 36 6 -(2-Metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2 -
dioxaborolan-2-il)fenil)-5H-tiazolo[3,2-c]pirimidina-5,7(6H)-diona (1-36)
Intermediário 36A: N-(3-Bromo-2-metilfenil)-2-(tiazol-2-
il)acetamida (I-36A)
Uma mistura de 3-bromo-2-metilanilina (0,764 ml, 6,20 mmol), ácido 1,3-tiazol-2-ilacético (0,74 g, 5,17 mmol) e Dl EA (1,63 ml, 9,30 mmol) em DMF (15 ml) foi tratada com HATU (2,36 g, 6,20 mmol). Após agitação durante a noite, a mistura foi diluída com EtOAc, lavada duas vezes com 10 % de LiCl aquoso seguido por salmoura, e as camadas aquosas combinadas foram extraídas com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos, para fornecer N-(3-bromo-2-metilfenil)-2-(tiazol-2-il)acetamida como um sólido branco (0,681 g, 42 % de rendimento) . LH RMN (4 00 MHz, clorofórmio-d) δ 9,84-9,65 (m, 1H) , 7,91 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,84 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 7,42-7,35 (m, 2H), 7,07 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,18 (s, 2H), 2,38 (s, 3H).
Intermediário 36B: N-(2-Metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-2-(tiazol-2-il)acetamida
(I-36B)
Uma mistura de N-(3-bromo-2-metilfenil)-2-(tiazol-2-il)acetamida (0,53 g, 1,70 mmol) 4,4,4^4^5,5,5^5^ octametil-2,21-bi(1,3,2-dioxaborolano) (0,476 g, 1,87 mmol) e acetato de potássio (0,418 g, 4,26 mmol) em DMSO (1,6 ml) e dioxano (8 ml) foi borbulhada com azoto durante 5 min, seguido pela adição de aduto de PdCl2(dppf) DCM (0,070 g, 0,085 mmol) . Após borbulhamento com azoto durante mais 5 min, a mistura foi aquecida a 90 °C durante 7 h. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc e filtrada através de CELITE®. 0 filtrado foi lavado sequencialmente com água e salmoura, e seco e concentrado. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (40 g) , eluindo com 50 % EtOAc-hexanos, para fornecer N-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-2 -(tiazol-2-il)acetamida como um sólido esbranquiçado (0,45 g, 74 % de rendimento). Espectro de massa m/z 359 (M # H)#. Intermediário 36:
Uma mistura de N-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) fenil)-2-(tiazol-2-il)acetamida (0,45 g, 1,26 mmol) e CDI (0,815 g, 5,02 mmol) em tolueno (6,5 ml) foi aquecida a 110 °C durante 2 h. A mistura arrefecida foi dividida entre EtOAc e água. A camada orgânica foi lavada com salmoura, e as camadas aquosas combinadas foram extraídas com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (40 g) , eluindo com 70 % EtOAc-hexanos, para fornecer 6-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-5H-tiazolo[3,2-c]pirimidina-5,7(6H)-diona ligeiramente impuro como um sólido ocre (34 0 de rendimento) . 0 material foi utilizado sem purificação adicional. Espectro de massa m/z 385 (M # H)#.
Intermediário 37 5-fluoro-2-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-pirido[1,2-c]pirimidina-1,3(2H)-diona racémica
(1-37)
Intermediário 37A: 2-(3-fluoropiridin-2-il)malonato de
dietilo (I-37A)
Uma mistura de 2,3-difluoropiridina (2,00 g, 17,4 mmol), Cs2C03 (13,59 g, 41,7 mmol) e dietil malonato (6,68 g, 41,7 mmol) em DMSO (19 ml) foi aquecida a 100 °C durante 4,5 h. A mistura foi vertida em gelo, diluída com EtOAc, e a fase orgânica foi separada, lavada sequencialmente com água e salmoura, seca e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (80 g), eluindo com EtOAc-hexanos (sequencialmente 10 °, 20 0 e 30 °), para fornecer 2-(3-fluoropiridin-2-il)malonato de dietilo como um óleo de cor clara (2,68 g, 60 0 de rendimento). 1H RMN (400 MHz, clorofõrmio-d) δ 8,42 (dt, J = 4,6, 1,3 Hz, 1H) , 7,43 (ddd, J - 9,4, 8,3, 1,4 Hz, 1H) , 7.30 (dt, J = 8,5, 4,3 Hz, 1H), 5,09 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 4.30 (q, J = 7,0 Hz, 4H), 1,33-1,26 (m, 6H).
Intermediário 37B: 2-(3-fluoropiridin-2-il)acetato de etilo
(I-37B)
Uma mistura de 2-(3-fluoropiridin-2-il)malonato de dietilo (2,68 g, 10,5 mmol), cloreto de sódio (0,675 g, 11,6 mmol) e água (0,378 ml, 21,0 mmol) em DMSO (15 ml) foi aquecida a 145 °C durante 4,5 h. A mistura foi arrefecida, diluída com EtOAc e lavada sequencialmente com água e salmoura. A fase orgânica foi seca e concentrada para fornecer 2-(3-fluoropiridin-2-il)acetato de etilo como um óleo de cor pálida (1,90 g, 99 0 de rendimento) que foi utilizado sem purificação adicional. Espectro de massa m/z 184 (M # H)#.
Intermediário 37C: 2-(3-fluoropiridin-2-il)acetato de sódio
(I-37C)
Uma solução agitada de 2-(3-fluoropiridin-2-il)acetato de etilo (1,90 g, 10,4 mmol) em THF (26 ml) foi tratada com NaOH aquoso a 3 M (6,9 ml, 20,7 mmol) e agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi concentrada para remover o THF, e a solução residual aquosa foi congelada e liofilizada para fornecer 2-(3- fluoropiridin-2-il)acetato de sódio como um sólido branco (assumido 100 0 de rendimento), que foi utilizado sem purificação adicional. Espectro de massa m/z 156 (M # H)#. Intermediário 37D: N-(3-Bromo-2-metilfenil)-2-(3- fluoropiridin-2-il)acetamida
(I-37D)
Uma mistura de 2-(3-fluoropiridin-2-il)acetato de sódio (1,847 g, 10,37 mmol), 3-bromo-2-metilanilina (1,41 ml, 11,4 mmol), Dl EA (5,4 ml, 31,1 mmol) e HATU (4,73 g, 12,4 mmol) em DMF (30 ml) foi agitada à temperatura ambiente durante 1,25 h. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada duas vezes com LiCl aquoso a 10 °, depois com salmoura. As camadas aquosas combinadas foram extraídas com EtOAc, e as fases orgânicas combinadas foram secas e concentradas. 0 resíduo foi dissolvido em EtOAc quente, deixado arrefecer, e o sólido branco resultante recolhido por filtração e lavado com 60 0 EtOAc-hexanos. Os filtrados combinados foram concentrados e o resíduo foi recristalizado duas vezes utilizando o mesmo procedimento. 0 resíduo da concentração do filtrado final foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos, para fornecer um sólido que foi combinado com as bateladas recristalizadas para fornecer N-(3-bromo-2-metilfenil)-2-(3-fluoropiridin-2-il)acetamida como um sólido branco (2,03 g, 61 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 323, 325 (M # H)#.
Intermediário 37E: 2-(3-Fluoropiridin-2-il)-N-(2-metil-3- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)acetamida
(I-37E)
Uma mistura de N-(3-bromo-2-metilfenil)-2-(3-fluoropiridin-2-il)acetamida (4,20 g, 13,6 mmol) e 4,4,4',4',5,5,5r,5'-octametil-2,2’-bi(1,3,2-dioxaborolano) (3,80 g, 14,9 mmol) em dioxano (40 ml) foi borbulhada com azoto durante 10 min. Acetato de potássio (3,33 g, 34,0 mmol) foi adicionado à mistura, o borbulhamento continuou durante mais 5 min, e aduto de PdCl2(dppf) DCM (0,555 g, 0,679 mmol) foi adicionado. A mistura foi aquecida a 100 °C durante a noite, A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc, lavada sequencialmente com água e salmoura, seca e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com éter DCM-met.il t-butílico, para fornecer 2-(3-fluoropiridin-2-il)-N-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) fenil) acetamida como um sólido branco (3,80 g, 76 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 371 (M # H)#. Intermediário 37:
Uma mistura de 2-(3-fluoropiridin-2-il)-N-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetramet.il-1,3,2-dioxaborolan-2 -il) fenil) acetamida (9,01 g, 24,3 mmol) e GDI (15,78 g, 97 mmol) em tolueno (97 ml) foi aquecida a 120 °C durante 7 h. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc e lavada sequencialmente com água e salmoura. As camadas aquosas combinadas foram extraídas com EtOAc, e as fases orgânicas combinadas foram secas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (220 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 20-100 °), para fornecer 5-fluoro-2-(2-metil-3 -(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)- 1H-pirido[1,2-c]pirimidina-1,3(2H)-diona como um sólido amarelo (6,26 g, 65 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 397 (M # H)#. ΧΗ RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 8,11 (dd, J = 7,6, 0,8 Hz, 1H) , 7,94 (dd, J = 7,5, 1,3 Hz, 1H) , 7,35 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,23 (dd, J = 7,8, 1,4 Hz, 1H), 6,85-6,76 (m, 1H), 6,35 (td, J = 7,4, 5,0 Hz, 1H), 6,09 (s, 1H), 2,36 (s, 3H), 1,36 (s, 12H).
Intermediários 38 e 39 5-Fluoro-2-(2-metil-3 -(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-pirido[1,2-c]pirimidina-1,3(2H)-diona (atropisómeros individuais)
(I 38, 1-39)
Uma amostra de 5-fluoro-2-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-lH-pirido[1,2 -c]pirimidina-1,3(2H)-diona racémica [Intermediário 37] (7,5 g) foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALCEL® OD-H (5 x 25 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-Me0H (76:24) em 280 ml/min, 100 bar, 40 °C; preparação da amostra: 62,5 mg/ml em DCM-MeOH (1:1); injeção: 0,83 ml. 0 primeiro pico que elui a partir da coluna forneceu um atropisómero de 5-fluoro-2-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-pirido[1,2-c]pirimidina-1,3(2H)-diona [Intermediário 38] como um sólido amarelo (3,2 g, pureza quiral 9 9,3 °) . 0 segundo pico que elui a partir da coluna forneceu o outro atropisómero de 5-fluoro-2-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil- 1.3.2- dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-pirido[1,2-c]pirimidina- 1,3(2H)-diona [Intermediário 39] como um sólido amarelo (2,98 g, pureza quiral 98,6 °). 0 espectro de massa e 1H RMN para ambos os enantiómeros foram os mesmos como aqueles para o Intermediário 37.
Intermediário 40 (Z)-4 -((2-Cloro-3-(4,4,5,5-tetrametil- 1.3.2- dioxaborolan-2-il) fenil) imino) -1-met.il-lH-benzo[d] [1,3]oxazin-2(4H)-ona
(1-40)
Intermediário 40A: N- (3-Bromo-2-clorofen.il)-2- (metilamino)benzamida
(I-40A)
Uma mistura de 3-bromo-2-cloroanilina [preparada de acordo com o procedimento descrito no documento de patente U.S. N.° 8.242.260] (240 mg, 1,162 mmol) e tolueno (10 ml) a 0 °C foi lentamente tratada com trimetilalumínio a 2 M em tolueno (0,99 ml, 1,98 mmol). A mistura foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante 15 min. Uma suspensão parcial de 1-metil-lH-benzo[d] [1,3]oxazina-2,4-diona (300 mg, 1,52 mmol) em tolueno (4 ml) foi adicionada lentamente. A mistura resultante foi aquecida a 50 °C durante 4 h, arrefecida para 0 °C, e tratada gota a gota com HC1 aquoso a 1 M até que mais nenhuma evolução de gás foi observada. A mistura foi agitada durante 2 h enquanto se aquece até à temperatura ambiente, depois foi extraída com EtOAc. A fase orgânica foi lavada sequencialmente com NaHC03 e salmoura, seca e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (80 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0-30 °), para fornecer N-(3-bromo-2-clorofenil)-2-(metilamino)benzamida como um sólido amarelo (110 mg, 28 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 339, 341 (M # H)#. 1H RMN (400 MHz, DMSO-ds) δ 10,00 (s, 1H) , 7,78 (dd, J = 7,9, 1,5 Hz, 1H) , 7,67 (dd, J = 8,1, 1,5 Hz, 1H), 7,57 (dd, J = 8,0, 1,4 Hz, 1H) , 7,53 (d, J = 1,3 Hz, 1H) , 7,38 (ddd, J = 8,4, 7,1, 1,4 Hz, 1H) , 7,32 (t, J = 8,0 Hz, 1H) , 6,70 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,68-6,61 (m, 1H), 2,79 (d, J = 5,1 Hz, 3H). Intermediário 40B: (Z)-4-((3-Bromo-2-clorofenil)imino)-1- metil-ΙΗ-benzo[d] [1,3] oxazin-2(4H)-ona
(I-4 OB)
Uma solução de N-(3-bromo-2-clorofen.il)-2-(metilamino) benzamida (150 mg, 0,442 mmol) em THF (15 ml) arrefecida para 0 °C e tratada com trifosgénio (197 mg, 0,663 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, depois foi arrefecida até 0 °C e tratada com água até que a evolução de gás cessou. A mistura foi concentrada, e o resíduo foi dissolvido em EtOAc e lavado sequencialmente com NaHC03 aquoso saturado, água e salmoura, seco e concentrado. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0 a 50 °), para fornecer (Z)-4-((3-bromo-2-clorofenil)imino)-1-metil-lH- benzo[d][1,3]oxazin-2(4H)-ona como um solido bege (130 mg, 81 0 de rendimento) . 'Ή RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 8,33 (dd, J = 7,8, 1,4 Hz, 1H), 7,72-7,61 (m, 1H), 7,41 (dd, J = 7,9, 1,5 Hz, 1H) , 7,36-7,28 (m, 1H) , 7,16-7,08 (m, 2H) , 7,07-7,01 (m, 1H), 3,55 (s, 3H).
Intermediário 40:
Uma mistura de (Z)-4-((3-bromo-2-clorofenil)imino)-1-metil-lH-benzo[d] [1,3]oxazin-2(4H)-ona (130 mg, 0,356 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2’-bi(1,3,2- dioxaborolano) (117 mg, 0,462 mmol) e acetato de potássio (87 mg, 0,889 mmol) em dioxano (4 ml) foi borbulhada com azoto durante 10 min. A mistura foi tratada com aduto de PdCl2(dppf) DCM (14,5 mg, 0,018 mmol), e aquecida a 90 °C durante a noite. A mistura arrefecida foi dividida entre EtOAc e água. A fase orgânica foi seca e concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0 a 50 °), para fornecer (Z)-4 -((2-cloro-3-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)imino)-1-metil-lH-benzo[d][1,3]oxazin-2(4H)-ona como um sólido amarelo (120 mg, 82 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 413 (M # H)#. ΧΗ RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 8,40-8,30 (m, 1H) , 7,67-7,58 (m, 1H) , 7,48-7,44 (m, 1H) , 7,27 (s, 4H) , 7,16- 7,07 (m, 2H), 3,55-3,47 (m, 3H), 1,40-1,37 (m, 12H) .
Intermediário 41 3 -(2-Cloro-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2 -
dioxaborolan-2-il)fenil)-8-fluoro-l-metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (1-41)
Intermediário 41A: 2-Amino-N- (3-bromo-2-clorofen.il)-3-
fluorobenzamida (I-41A)
Uma mistura de 3-bromo-2-cloroanilina [preparada de acordo com o procedimento descrito no documento de patente U.S. N.° 8,242.260] (600 mg, 2,91 mmol) e tolueno (10 ml) foi arrefecida até 0 °C e lentamente tratada com trimetilalumínio a 2 M em tolueno (2,47 ml, 4,94 mmol) . A mistura foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante 15 min. A mistura foi tratada com 8-fluoro-ΙΗ-benzo[d][1,3]oxazina-2,4-diona (684 mg, 3,78 mmol) e aquecida a 50 °C durante 16 h. A mistura foi arrefecida para 0 °C e tratada gota a gota com HC1 aquoso a 1M até que a evolução de gãs foi interrompida, e agitada durante 2 h enquanto se deixou aquecer até à temperatura ambiente. A mistura foi extraída três vezes com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram lavadas sequencialmente com NaHC03 aquoso saturado e salmoura, secas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (24 g), eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0 a 30 °), para fornecer 2-amino-N-(3-bromo-2-clorofenil)-3-fluorobenzamida como um sólido amarelo claro (350 mg, 35 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 343, 345 (M # H)#. 1H RMN (400 MHz, clorof órmio-d) δ 8,46 (dd, J = 8,4, 1,3 Hz, 1H), 8,42 (s. 1., 1H), 7,43 (dd, u = 8,0, 1,4 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,22 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 7,15 (ddd, J = 11,0, 8,0, 1,2 Hz, 1H), 6,69 (td, J = 8,0, 5,1 Hz, 1H), 5,72 (s. 1., 2H).
Intermediário 41B: 3-(3-Bromo-2-clorofenil)-8- fluoroquinazolina-2,4(1H, 3H)-diona
(I-41B)
Trifosgénio (453 mg, 1,53 mmol) foi adicionado de uma vez a uma solução de amino-N-(3-bromo-2-clorofenil)-3-fluorobenzamida (350 mg, 1,019 mmol) em THF (10 ml) a 0 °C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, depois foi arrefecida até 0 °C e tratada com água até que mais nenhuma evolução de gás foi observada. A mistura foi concentrada e o resíduo foi dissolvido em EtOAc, lavado sequencialmente com NaHC03 aquoso saturado, água e salmoura, e seco e concentrado. 0 resíduo foi purificado por cromatograf ia de coluna em gel de sílica (24 g) , eluindo com EtOAc -hexanos (gradiente de 0 a 50 °), para fornecer 3- (3-bromo-2-clorofen.il) -8-fluoroquinazolina- 2,4 (1H, 3H)-diona como um sólido amarelo (320 mg, 85 0 de
rendimento) . Espectro de massa m/z 369, 3 71 (M # H)#. LH RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 8,54 (s. 1., 1H), 7,97 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,77 (dd, J = 6,8, 2,6 Hz, 1H), 7,46 (ddd, J = 9,8, 8,3, 1,2 Hz, 1H) , 7,36-7,29 (m, 2H) , 7,24 (td, J = 8.0, 4,8 Hz, 1H).
Intermediário 41C: 3-(3-Bromo-2-clorofenil)-8-fluoro-1- metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona
(I-41C)
Iodometano (0,102 ml, 1,62 mmol) foi adicionado lentamente a uma mistura de 3-(3-bromo-2-clorofenil)-8-fluoroquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (300 mg, 0,812 mmol), DMF (5 ml) e Cs2C03 (529 mg, 1,62 mmol) . A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h, depois foi diluída com EtOAc, lavada sequencialmente com água e salmoura, e seca e concentrada, 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (24 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0 a 30 °), para fornecer 3-(3-bromo-2-clorofenil)-8-fluoro-l- metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona como um sólido amarelo (280 mg, 90 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 383, 385 (Μ # H)#. ΧΗ RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 8,09 (dq, J = 7,8, 0,8 Hz, 1H), 7,79-7,71 (m, 1H), 7,49 (ddd, J = 13,9, 8.1, 1,5 Hz, 1H) , 7,32-7,29 (m, 2H) , 7,29-7,22 (m, 2H) , 3,88 (s, 1,5 H), 3,86 (s, 1,5H).
Intermediário 41:
Uma mistura de 3-(3-bromo-2-clorofenil)-8-fluoro-l-metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (150 mg, 0,391 mmol), 4,4,4f,4r,5,5,5F,5'-octametil-2,21-bi(1,3,2-dioxaborolano) (129 mg, 0,508 mmol), acetato de potássio (96 mg, 0,978 mmol) e dioxano (8 ml) foi borbulhada com azoto durante 10 min e tratada com aduto de PdCl2(dppf) DCM (16 mg, 0,020 mmol) . A mistura foi aquecida a 90 °C durante 16 h, depois foi arrefecida e dividida entre EtOAc e água. A fase orgânica foi seca e concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (12 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0-50 °), para fornecer 3 -(2-cloro-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)fenil)-S-fluoro-l-metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona como um sólido vítreo branco (52 mg, 31 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 431 (M # H)#. 1H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 8,14-8,05 (m, 1H) , 7,90-7,82 (m, 1H), 7,51-7,35 (m, 3H), 7,26-7,19 (m, 1H), 3,86 (d, J" = 8,1
Hz, 3H), 1,36 (s, 12H).
Intermediário 42 3 -(2-Cloro-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2 -
dioxaborolan-2-il)fenil)-8-fluoroquinazolina-2,4(1H,3H)-diona (1-42)
Uma mistura de 3-(3-bromo-2-clorofenil)-8-fluoroquinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 41B] (990 mg, 2,68 mmol), 4,4,4',4',5,5,5F,5'-octametil-2,2'- bi (1,3,2-dioxaborolano) (884 mg, 3,48 mmol) e acetato de potássio (657 mg, 6,70 mmol) em dioxano (8 ml) foi borbulhada com azoto durante 10 min. Aduto de PdCl2(dppf) DCM (109 mg, 0,134 mmol) foi adicionado e a mistura foi aquecida a 90 °C durante a noite. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc, filtrada e o filtrado foi concentrado. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com MeOH-DCM (gradiente de 0-5 °), para fornecer 3 -(2-cloro-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)fenil)-8-fluoroquinazolina-2,4(1H,3H)- diona como um sólido castanho (710 mg, 64 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 416 (M # H)#. 1H RMN (400 MHz, clorofórmio~d) δ 8,55-8,38 (m, 1H) , 8,06-7,93 (m, 1H) , 7,90-7,75 (m, 1H) , 7,51-7,38 (m, 3H) , 7,26-7,13 (m, 1H) , 1,26 (s. 1., 12H)
Intermediário 43 7-Fluoro-3-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona
(1-43)
Utilizando o procedimento usado para preparar o Intermediário 8, 3-(3-bromo-2-metilfenil)-7- fluoroquinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 15B] foi convertida dentro de 7-fluoro-3-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona. Espectro de massa m/z 397 (M # H)#. Intermediário 44 1-(4-Fluorofenil)-3-(2-metil-3-(4,4,5,5-
tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)pirimidina-2,4(1H,3H)-diona (1-44)
Intermediário 44A: 3-(4-metoxibenzilamino)-2- (fenilselanil)propanoato de metilo
(I-44A)
Uma suspensão de hipobromosselenoíte de fenilo (5,54 g, 23,5 mmol) e cloreto de zinco(II) (1,27 g, 9,29 mmol) em D CM (116 ml) foi tratada com acrilato de metilo (2,09 ml, 23,2 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3 0 min, depois foi tratada com (4-metoxifenil)metanamina (6,4 ml, 48,8 mmol), formando uma suspensão espessa. Após agitação durante 16 h, a mistura foi filtrada, o precipitado recolhido foi lavado com EtOAc, e os filtrados combinados foram concentrados. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (120 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0-50 °), para fornecer 3-(4-metoxibenzilamino)-2-(fenilselanil) propanoato de metilo como um óleo castanho claro (3,68 g, 42 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 380 (M # H)#. LH RMN (400 MHz, DMS0-d6) δ 7,53-7,49 (m, 2H) , 7,39-7,28 (m, 3H), 7,18 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,88-6,82 (m, 2H), 3,89 (dd, J = 8,8, 5,9 Hz, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,61 (s, 2H), 3,55 (s, 3H) , 2,93-2,78 (m, 2H) .
Intermediário 44B: l-Bromo-3-isocianato-2-metilbenzeno
(I-44B)
Uma solução de trifosgénio (2,25 g, 7,58 mmol) em tolueno (27 ml) , arrefecido num banho de água fria, foi tratada lentamente com uma solução de 3-bromo-2- metilanilina (3,00 g, 16,1 mmol) e DIEA (5,6 ml, 32,2 mmol) em tolueno (5,4 ml) . A suspensão resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h. 0 precipitado foi removido por filtração e lavado com EtOAc. Os filtrados combinados foram diluídos com EtOAc, lavados com salmoura, secos e concentrados para fornecer l-bromo-3-isocianato-2-metilbenzeno como um óleo castanho (3,68 g, 98 0 de rendimento), utilizado sem purificação. 1H RMN (400 MHz, DMSO-ds) δ 7,49 (dd, J = 8,1, 0,9 Hz, 1H) , 7,31 (dd, J = 7,9, 0,7 Hz, 1H), 7,15 (td, J = 8,0, 0,7 Hz, 1H), 2,38 (s, 3H) .
Intermediário 44C: 3 -(3-Bromo-2-metilfenil)-1-(4 - metoxibenzil)-5-(fenilselanil)di-hidropirimidina-2,4(1H,3H)-diona
(I-44C)
Uma mistura de 3-((4-metoxibenzil) amino)-2- (fenilselanil)propanoato de metilo (3,68 g, 9,73 mmol), 1- bromo-3-isocianato-2-metilbenzeno (2,27 g, 10,7 mmol), e K2C03 (0,672 g, 4,86 mmol) em DMF (49 ml) foi aquecida a 65 °C durante 5 h. A mistura arrefecida foi dividida entre água e EtOAc. E a fase orgânica foi lavada com salmoura, seca e concentrada para fornecer 3-(3-bromo-2-metilfenil) - 1-(4-metoxibenzil)-5-(fenilselanil)di-hidropirimidina-2,4(1H,3H)-diona como um sólido castanho claro (5,43 g) , utilizado sem purificação adicional. Espectro de massa m/z 557, 559, 561 (M # H)#.
Intermediário 44D: 3-(3-Bromo-2-metilfenil)-1-(4- metoxibenzil)pirimidina-2,4(1H,3H)-diona
(I-44D)
Uma solução de 3-(3-bromo-2-metilfenil)-1-(4-metoxibenzil)- 5 -(fenilselanil)di-hidropirimidina- 2.4 (1H, 3H) -diona (5,43 g, 9,73 mmol) em THF (97 ml) foi tratada com perõxido de hidrogénio aquoso a 30 0 (5,0 ml, 48,6 mmol) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 min. Água foi adicionada e a mistura foi extraída com EtOAc. A fase orgânica foi lavada com salmoura, seca e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (220 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 25-70 °), para fornecer 3-(3-bromo-2-metilfenil)-1-(4-metoxibenzil)pirimidina- 2.4 (1H, 3H)-diona como um sólido branco (2,10 g, 54 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 4 01, 4 03 (M # H)#. 1H RMN (400 MHz, DMS0-d5) δ 7,95 (d, J = 7,9 Hz, 1H) , 7,70- 7,65 (m, 1H), 1,32-1,28 (m, 2H), 7,25-7,22 (m, 2H), 6,96- 6,91 (m, 2H) , 5,86 (d, J = 7,9 Hz, 1H) , 4,89 (d, J = 2,4
Hz, 2H), 3,74 (s, 3H), 2,02 (s, 3H).
Intermediário 44E: 3-(3-Bromo-2-metilfenil)pirimidina-
2,4(1H,3H)-diona (I-44E)
Uma solução de 3-(3-bromo-2-metilfenil)-1-(4-metoxibenzil)pirimidina-2,4(1H,3H)-diona (0,87 g, 2,17 mmol) em TFA (5,5 ml) foi tratada com ácido trifluorometanossulfónico (0,55 ml) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi lentamente vertida em gelo e agitada enquanto se aquecia até à temperatura ambiente. 0 precipitado foi recolhido por filtração, lavado com água e seco para fornecer 3-(3-bromo- 2-metilfenil)pirimidina-2,4(1H,3H)-diona como um sólido roxo (0,62 g, 96 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 281, 283 (M # H)#. XH RMN (400 MHz, DMS0-d6) δ 11,36 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7,67 (dd, J = 6,5, 2,8 Hz, 1H), 7,60 (dd, J = 7,7, 5,9 Hz, 1H), 7,27-7,21 (m, 2H), 5,72 (dd, u = 7,7, 1,3
Hz, 1H), 2,07 (s, 3H).
Intermediário 44F: 3 -(3-Bromo-2-metilfenil)-!-(4 - fluorofenil)pirimidina-2,4(1H,3H)-diona
(I-44F)
Uma suspensão agitada de acetato de cobre(II) (0,543 g, 2,99 mmol), 3-(3-bromo-2-metilfenil)pirimidina- 2,4(1H,3H)-diona (0,42 g, 1,49 mmol), ácido (4-fluorofenil) borõnico (0,418 g, 2,99 mmol), e peneiras moleculares ativadas (7 50 mg) em DCM seco (25 ml) foi tratada com piridina (0,363 ml, 4,48 mmol) e agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi diluída com DCM, filtrada através de CELITE®, e os sólidos foram lavados com DCM e THF. Os filtrados combinados foram lavados com água, secos e concentrados. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (40 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 20-40 %), para fornecer 3-(3-bromo-2-metilfen.il) -1- (4-fluorofenil)pirimidina-2,4(1H,3H)-diona como um solido vítreo amarelo (0,36 g, 43 % de rendimento) . Espectro de massa m/z 375, 377 (M # H)#. :lH RMN (400 MHz, DMS0-d6) δ 7,91 (d, J = 7,9 Hz, 1H) , 7,68 (dd, J = 7,9, 1,3 Hz, 1H), 7,60-7,51 (m, 2H), 7,40- 7,22 (m, 4H) , 5,95 (d, J = 7,9 Hz, 1H) , 2,21-2,12 (m, 3H) . Intermediário 44:
Uma mistura de 3-(3-bromo-2-metilfenil)-1-(4-fluorofenil)pirimidina-2,4(1H,3H)-diona (250 mg, 0,666 mmol), 4,4,4',4',5,5,5r,5r-octametil-2,2'-bi(1,3,2- dioxaborolano) (186 mg, 0,733 mmol), acetato de potássio (131 mg, 1,33 mmol), e aduto de PdCl2(dppf) DCM (16 mg, 0,020 mmol) em dioxano (4,4 ml) foi aquecida a 110 °C. Após 3 h, aduto de PdCl2(dppf) DCM adicional foi adicionado e a mistura foi aquecida a 110 °C durante mais 6 h. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc, filtrada através de CELITE® e os sólidos foram lavados com EtOAc. Os filtrados combinados foram lavados sequencialmente com NaHC03 aquoso saturado e salmoura, secos e concentrados. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (24 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 25 a 100 °) , para fornecer 1-(4-fluorofenil)-3-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)pirimidina-2,4(1H,3H)-diona impura como um sólido vítreo amarelo (217 mg), utilizada sem purificação adicional. Espectro de massa m/z 423 (Μ # H)#. λΉ. RMN (400 MHz, DMS0-ds) δ 7,90 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,69 (dd, J = 7,0, 1,8 Hz, 1H), 7,61-7,52 (m, 2H), 7,40-7,26 (m, 4H), 5,94 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 2,24 (s, 3H) , 1,32 (s, 12H) .
Intermediário 45 4-Bromo-3-fluoro-7-(2-hidroxietil)-9H-carbazol-1-carboxamida
(1-45)
Intermediário 45A: 2-(3-oxociclo-hexil)malonato de dietilo
(I-45A)
Uma solução de ciclo-hex-2-enona (3,05 ml, 30 mmol) e malonato de dietilo (4,58 ml, 30,0 mmol) em THF (30 ml) foi tratada com 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (4,52 ml, 3 0,0 mmol) e aquecida a 50 °C durante 16 h. A mistura arrefecida foi vertida dentro de EtOAc e lavada sequencialmente com HC1 aquoso a 1 M e salmoura. As camadas aquosas combinadas foram extraídas com EtOAc, e as fases orgânicas combinadas foram secas e concentradas para fornecer 2-(3-oxocicloexil)malonato de dietilo como um óleo (8,0 g) , utilizado sem purificação adicional. Espectro de massa m/z 257 (M # H)#.
Intermediário 45B: ácido 5-bromo-2-(1,3-dietoxi-l,3-
dioxopropan-2-il)-6-fluoro-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxílico (I-45B)
Uma solução de 2-(3-oxocicloexil)malonato de dietilo (15,26 g, 59,5 mmol) e cloridrato de ácido 4-bromo-5-fluoro-2-hidrazinilbenzoico [Intermediário 24B] (17,0 g, 59,5 mmol) em ácido acético (120 ml) foi aquecida em refluxo durante 2 h, depois foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. 0 precipitado que se formou foi recolhido por filtração para fornecer um sólido branco. 0 filtrado foi concentrado e purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (80 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0 a 100 %) . 0 produto oleoso resultante foi cristalizado a partir de uma mistura de EtOAc, éter e hexanos para fornecer sólido adicional, que foi combinado com o primeiro sólido para fornecer ácido 5-bromo-2-(1,3-dietóxi -1,3 -dioxopropan-2 - il) - 6 - f luoro-2,3,4,9 - tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxílico como um sólido branco (10,5 g, 49 % de rendimento) . Espectro de massa m/z 470, 472 (M # H) #.
Intermediário 45C: 2-(5-bromo-8-carbamoil-6-fluoro-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-2-il)malonato de dietilo
(I-45C)
Uma mistura de ácido 5-bromo-2-(1,3-dietoxi-l,3-dioxopropan-2-il)-6-fluoro-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxí lico (0,981 g, 2,09 mmol), EDC (0,600 g, 3,13 mmol) e HOBT (0,383 g, 2,50 mmol) em THF (5 ml) foi agitada à temperatura ambiente durante 60 min. A mistura foi tratada com NH40H (1,74 ml, 12,5 mmol) e agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi diluída com EtOAc, lavada sequencialmente com Na2C03 aquoso saturado e salmoura. As camadas aquosas combinadas foram extraídas com EtOAc, e as fases orgânicas combinadas foram secas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (40 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0-100 °), para fornecer 2-(5-bromo-8-carbamoil-6-fluoro-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-2-il)malonato de dietilo como um sólido levemente amarelo (440 mg, 45 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 469, 471 (M # H)#.
Intermediário 45D: 2 -(5-bromo-8-carbamoil-6-fluoro-9H- carbazol-2-il)malonato de dietilo
(I-45D)
Uma solução de 2-(5-bromo-8-carbamoil-6-fluoro- 2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-2-il)malonato de dietilo (2,26 g, 4,82 mmol) e 2,3-dicloro-5,6-dicianobenzoquinona (2,30 g, 10,1 mmol) em THF (30 ml) foi aquecida em refluxo durante 3 h. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc e lavada sequencialmente com Na2C03 aquoso saturado e salmoura. As camadas aquosas combinadas foram extraídas com EtOAc, e as fases orgânicas combinadas foram secas e parcialmente concentradas. Um sólido branco que se formou foi recolhido por filtração. 0 filtrado foi passado através de um tampão de gel de sílica, eluindo com EtOAc, e o efluente foi concentrado para fornecer sólido adicional. Os dois sólidos foram combinados para fornecer 2-(5-bromo-8-carbamoil-6-fluoro-9H-carbazol-2-il) malonato de dietilo como um sólido branco (1,86 g, 83 0 de rendimento).
Espectro de massa m/z 465, 467 (M # H)#.
Intermediário 45E: 2 -(5-bromo-8-carbamoil-6-fluoro-9H- carbazol-2-il)acetato de etilo
(I-45E)
Uma mistura de 2 -(5-bromo-8-carbamoil-6-fluoro-9H-carbazol-2-il) malonato de dietilo (1,30 g, 2,80 mmol), cloreto de sódio (0,28 g, 7,01 mmol) e água (0,25 ml, 14,01 mmol) em DMSO (6 ml) foi aquecida a 150 °C durante 2 0 h. A mistura arrefecida foi vertida dentro de água, formando um precipitado. O precipitado foi recolhido por filtração e seco, depois foi triturado com DCM. 0 sólido foi recolhido por filtração e seco para fornecer 2-(5-bromo-8-carbamoil- 6-fluoro-9H-carbazol-2-il)acetato de etilo como um sólido cinzento (930 mg, 84 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 393, 395 (M # H)#. UI RMN (400 MHz, DMS0-d6) δ 11,70 (s, 1H), 8,54 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,25 (s. 1., 1H), 8,00 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,69 (s. 1., 1H), 7,19 (dd, J = 8,4, 1,5 Hz, 1H), 4,11 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 3,82 (s, 2H), 1,21 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
Intermediário 45:
Uma solução de 2-(5-bromo-8-carbamoil-6-fluoro-9H-carbazol-2-il) acetato de etilo (500 mg, 1,27 mmol) em THF (10 ml) foi tratada com boroidreto de lítio (139 mg, 6,36 mmol) e agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi tratada com NH4C1 aquoso saturado e agitada durante 15 min. A mistura foi diluída com água e extraída duas vezes com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secas e concentradas, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (40 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 30-100 °), para fornecer 4-bromo-3-fluoro-7-(2-hidroxietil)-9H-carbazol-l-carboxamida como um sólido branco (310 mg, 69 0 de rendimento).
Espectro de massa m/z 351, 353 (Μ # H)#. ‘Ή RMN (400 MHz, DMSO-dg) δ 11,58 (s, 1H), 8,50 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,24 (s. 1., 1H), 7,98 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 7,72-7,63 (m, 2H), 7,15 (dd, J - 8,4, 1,3 Hz, 1H) , 4,68 (t, J = 5,3 Hz, 1H) , 3,73-3,64 (m, 2H), 2,90 (t, J = 7,0 Hz, 2H).
Exemplos 1 e 2 3-Cloro-4-(R)-(3-(R)-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)- 7 -(2 -hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (1), e 3-Cloro-4-(R)-(3-(S)-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-l,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (2)
(2)
Preparação 1Ά: 3-Cloro-4-(3-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo- 1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de quatro atropisõmeros)
Uma mistura de 4-bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 3] (100 mg, 0,262 mmol), 8-fluoro-l-metil-3-(RS)-(2-metil-3-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 2] (161 mg, 0,393 mmol), tetraquis(trifenilfosfina)paládio (15 mg, 0,013 mmol) e K3PO4 aquoso a 2 M (0,26 ml, 0,524 mmol) em THF (2 ml) num frasco de reação com pressão foi aquecida a 90 °C durante 2,5 h. A mistura arrefecida foi concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (40 g) , eluindo com DCM-MeOH-NH4OH (gradiente de 90:9:1-97:2,7:0,3). 0 produto impuro resultante foi novamente purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (40 g), eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 50-100 °), para fornecer 3-cloro-4-(3-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-l,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) como um sólido branco (110 mg, 68 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 567 (M # H - H20)#. 1H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 10,46 (s, 1H), 8,17-8,10 (m, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,69 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 7,59-7,53 (m, 1H), 7,48 (ddt, J = 13,9, 8,1, 1,8 Hz, 1H), 7,39 (dd, J = 12,4, 7,8 Hz, 2H), /,28-7,19 (m, 2H), 6,97 (t, J = 8,5 Hz, 1H), 3,87-3,93 (m, 3H), 1,87 (d, J = 1,8 Hz, 3H), 1,65 (s, 3H), 1,65 (s, 3H).
Exemplos 1 e 2:
Uma amostra da mistura de quatro atropisómeros de 3-cloro-4-(3-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-l, 2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (90 mg) foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® AD-H (3 x 25 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-IPA (55:45) em 120 ml/'min; preparação da amostra: 10 mg/ml ; injeção: 1 ml. 0 segundo pico que elui a partir da coluna forneceu 3-cloro-4-(R)-(3-(R)-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo- 1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil) -7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Exemplo 1] como um sólido branco. A pureza isomérica foi determinada como sendo 97,7 °. Espectro de massa m/z 567 (Μ # H -H20)#. 1H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 10,46 (s, 1H) , 8,15 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,69 (d, u = 1,1 Hz, 1H), 7,59-7,54 (m, 1H), 7,49 (ddd, J = 13,9, 8,0, 1,7 Hz, 1H), 7,43-7,36 (m, 2H), 7,28-7,19 (m, 2H), 6,97 (d, J = 8,4 Hz, 1H) , 3,89 (d, J = 7,9 Hz, 3H) , 1,88 (s, 3H) , 1,65 (s, 6H) . 0 quarto pico que elui a partir da coluna forneceu 3-cloro-4- (R) - (3 - (S)- (8-fluoro-1-metil-2,4-dioxo-l, 2-di- hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan- 2- il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Exemplo 2] como um sólido branco. A pureza isomérica foi determinada como sendo 99,5 0 . Espectro de massa m/z 567 (M # H - H20)#. 1H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 10,46 (s, 1H), 8,13 (d, J = 7,3
Hz, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,69 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 7,59-7,53
(m, 1H), 7,48 (ddd, J = 13,9, 8,0, 1,7 Hz, 1H), 7,39 (dd, J = 11,1, 7,8 Hz, 2H), /,27-7,21 (m, 2H), 6,99 (d, J = 8,4
Hz, 1H), 3,91 (d, J = 7,9 Hz, 3H), 1,88 (s, 3H), 1,66 (s, 6H) . A configuração absoluta do Exemplo 2 foi confirmada pela análise de raios X de cristal único de cristais preparados pela dissolução do composto com excesso de metanol e evaporação lenta do solvente à temperatura ambiente para fornecer um solvato de metanol (forma cristalina M-l). Dimensões unitárias da célula: a = 9,75 Â, b = 14,21 A, c = 21,26 A, α = 90,0°, β = 90,0°, γ = 90,0°; Grupo espacial: P2i2i2i; Moléculas do Exemplo 2,/unidade assimétrica: 1; Volume/Número de moléculas na célula unitária = 736 Â3; Densidade (calculada) = 1,391 g/cm3. As coordenadas atómicas fracionárias em 203 K são dadas no Quadro 2, e uma descrição da estrutura é dada na Figura 3. Exemplo 3 3-Cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4-(R)-(2-metil- 3- (l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)- il)fenil)-9H-carbazol-1-carboxamida (atropisómero
(3) Preparação 3A: 3-Cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4-(2-metil- individual) 3-(1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H) - il)fenil)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros)
Uma mistura de 4-bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 3] (100 mg, 0,262 mmol), l-metil-3-(RS)-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-
1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 4] (154 mg, 0,393 mmol), K3P04 aquoso a 2 M (0,26 ml, 0,524 mmol) e tetraquis(trifenilfosfina)paládio (15 mg, 0,013 mmol) em THF (2 ml) num frasco de reação com pressão foi aquecida a 90 °C durante 4 h. A mistura arrefecida foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (40 g) , eluindo com DCM:MeOH:NH40H (gradiente de 90:9:1-97:2,7:0,3). 0 produto impuro resultante foi novamente purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (40 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 50-100 °), para fornecer 3-cloro-7-(2 -hidroxipropan-2 -i1)-4-(2-metil-3-(l-metil-2,4 -dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) como um sólido branco (105 mg, 6 8 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 549 (M # H - H20)#. *H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 10,46 (s, 1H), 8,33 (ddd, J = 11,8, 7,9, 1,4 Hz, 1H), 7,80-7,74 (m, 2H), 7,69 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,58-7,52 (m, 1H), 7,41 id, J = 7,5 Hz, 1H), 7,38-7,30 (m, 3H), 7,24 (ddd, J = 13,9, 8,4, 1,7 Hz, 1H), 6,98 (dd, J = 12,8, 8,4
Hz, 1H), 3,67-3,76 (m, 3H), 1,88 (d, J = 1,8 Hz, 3H), 1,65 (s, 3H), 1,65 (s, 3H).
Exemplo 3:
Uma amostra da mistura de quatro atropisómeros de 3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4-(2-metil-3-(l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil)-9H-carbazol-1-carboxamida foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® IB (2 x 25 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-Me0H (65:35) em 55 ml/min. 0 terceiro pico que elui a partir da coluna forneceu um atropisómero individual de 3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4 -(R)-(2-metil-3 -(l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil)-9H-carbazol-1-carboxamida como um sólido branco. A pureza quiral foi determinada como sendo 97,7 °. Espectro de massa m/z 549 (Μ # H - H20)#. 1H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 10,45 (s, 1H), 8,32 (dd, J = 8,0, 1,7 Hz, 1H), 7,80-7,73 im, 2H), 7,69 (d, J = 1,1 Hz, 1H) , 7,59-7,53 (m, 1H) , 7,44-7,31 (m, 4H) , 7,26 (dd, J = 8,4, 1,5 Hz, 1H) , 7,01 (d, J = 8,4 Hz, 1H) , 3,72 (s, 3H) , 1,89 (s, 3H), 1,66 (s, 6H)
Exemplo 4 3-Cloro-4-(R)-(3 -(1,8-dimetil-2,4-dioxo-1,2-di- hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (atropisómero individual)
(4)
Preparação 4A: 3-Cloro-4-(3-(1,8-dimet.il-2,4-dioxo-l, 2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros)
Uma mistura de 4-bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 3] (100 mg, 0,262 mmol), 1,8-dimetil-3 -(2-metil-3 -(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 9] (138 mg, 0,341 mmol) , Cs2C03 (171 mg, 0,524 mmol) e aduto de PdCl2(dppf) DCM (10,7 mg, 0,013 mmol) em THF (2 ml) e água (500 μΐ) foi aquecida a 60 °C durante 18 h. A mistura arrefecida foi concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (40 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 30 a 100 °), para fornecer 3-cloro-4-(RS)-(3-(RS)- (1,8-dimetil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2 -metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) como um sólido amarelo claro (97 mg, 57 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 563 (M # H - H2Q)#. ΧΗ RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 10,45 (s, 1H), 8,21-8,15 (m, 1H), 7,75 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 7,59-7,51 (m, 2H) , 7,44-7,40 (m, 1H), 7,36 (dd, J = 7,7, 1,1 Hz, 1H), 7.26- 7,19 (m, 2H), 6,98 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 3,80 (d, J = 9,9 Hz, 3H), 2,70 (d, J = 5,7 Hz, 3H), 1,88 IS, 3H), 1,64- 1,66 (m, 6H).
Exemplo 4:
Uma amostra da mistura de quatro atropisómeros de 3-cloro-4-(3 -(1,8-dimetil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (90 mg) foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® AD-H (3 x 25 cm, 5 pm); Fase Móvel: C02-IPA (55:45) em 85 ml/min; preparação da amostra: 18 mg/ml em Me OH; injeção: 2,5 ml. 0 quarto pico que elui a partir da coluna forneceu um atropisómero individual de 3-cloro-4-(R)-(3 -(1,8-dimetil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida como um sólido branco (17 mg). A pureza quiral foi determinada como sendo superior a 99 0. Espectro de massa m/z 563 (Μ # H - H20)#. 1H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 10,45 (s, 1H) , 8,17 (dd, J = 7,8, 1,2 Hz, 1H) , 7,75 (s, 1H), 7,69 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 7,58-7,51 (m, 2H), 7,42 (dd, J = 7,9, 1,1 Hz, 1H), 7,36 (dd, J = 7,7, 1,1 Hz, 1H), 7.27- 7,19 (m, 2H), 6,99 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 3,81 (s, 3H), 2,71 (s, 3H), 1,87 (s, 3H), 1,65 (s, 6H).
Exemplos 5 e 6 3-Cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4-(R)-(3-(R)-(7-metoxi-l-metil-2,4-dioxo-l,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-9H-carbazol-l-carboxamida, e 3-Cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4-(R)-(3-(S)-(7-metoxi-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2 -metilfenil) -9H-carbazol-1-carboxamida (atropisómeros individuais)
(5, 6)
Uma mistura de 4-bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 3] (200 mg, 0,524 mmol) , 7-metoxi-l-metil-3-(2-metil-3-(4,4,5,5-te t ramet i 1 -1,3,2-dioxaborolan- 2 - i 1)f eni1)quinazolina -2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 14] (221 mg, 0,524 mmol),
Cs2C03 (512 mg, 1,57 mmol) e aduto de PdCl2(dppf) DCM (21,4 mg, 0,026 mmol) em THF (3 ml) e água (0,50 ml) foi aquecida a 6 0 °C durante a noite, depois a 90 °C durante 4 h. A mistura arrefecida foi concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (40 g), eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 50-100 °), para fornecer 3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4-(3-(7-metoxi-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2 -metilfenil)-9H-carbazol-l-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) (164 mg, 92 0 de rendimento) . Este material foi separado por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® AD-H (3 x 25 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-IPA (60:40) em 85 ml/min; preparação da amostra: 20,3 mg/ml em MeOH; injeção: 0,75 ml. 0 terceiro pico que elui a partir da coluna forneceu um atropisómero individual de 3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4-(R)-(3-(7-metoxi-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-9H-carbazol-1-carboxamida [Exemplo 5] (14 mg) . A pureza quiral foi determinada como sendo maior do que 99 °. Espectro de massa m/z 579 (Μ # Η - H20)#. RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 10,43 (s, 1H), 8,24 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,65 (d, J = 1,1 Hz, 1H) , 7,55-7,49 (m, 1H) , 7,44-7,34 (m, 1H) , 7.35- 7,31 (m, 1H), 7,19 (dd, J = 8,5, 1,7 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,85 (dd, J = 8,8, 2,2 Hz, 1H), 6,69 (d, J = 2,2 Hz, 1H) , 3,95 (s, 3H) , 3,63 (s, 3H) , 1,85 (s, 3H) , 1.62 (s, 6H), 0 quarto pico que elui a partir da coluna forneceu o outro atropisõmero individual 3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4-(R)-(3-(7-metoxi-l-metil-2,4-dioxo-1,2 - di -hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-9H-carbazol-1-carboxamida [Exemplo 6] (28 mg) . A pureza quiral foi determinada como sendo superior a 99 °. Espectro de massa m/z 579 (Μ # H - H20)#, LH RMN (400 MHz, clorof órmio-d) δ 10,41 (s, 1H), 8,21 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,66 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 7,55-7,49 (m, 1H), 7,41-7,36 (m, 1H), 7.35- 7,31 (m, 1H), 7,22 (dd, J = 8,4, 1,5 Hz, 1H), 6,97 (d, u = 8,4 Hz, 1H), 6,84 (dd, J = 9,0, 2,2 Hz, 1H), 6,70 (d, J - 2,2 Hz, 1H) , 3,95 (s, 3H) , 3,65 (s, 3H) , 1,85 (s, 3H) , 1.63 (s, 6H).
Exemplo 7 3-Cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4-(R)-(3-(8-metoxi-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-9H-carbazol-l-carboxamida (atropisómero
individual) (7)
Uma mistura de 4-bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 3] (200 mg, 0,524 mmol), 8-metoxi-1-metil-3-(2-metil-3-(4,4,5,5 - tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 12] (221 mg, 0,524 mmol),
Cs2C03 (512 mg, 1,57 mmol) aduto de PdCl2(dppf) DCM (21,4 mg, 0,02 6 mmol) em THF (3 ml) e água (0,50 ml) num frasco de reação com pressão foi aquecida a 60 °C durante a noite, depois a 90 °C durante 4 horas. A mistura arrefecida foi diluída com DCM e MeOH, e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (24 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 20-55 °), para fornecer uma mistura de quatro atropisómeros de 3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4-(3-(8-metoxi-1-metil-2,4-dioxo- 1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-9H-carbazol-1 -carboxamida (136 mg, 41 0 de rendimento) . Este material foi separado por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® AD-H (3 x 25 cm, 5 μιτι) ; Fase Móvel: C02-IPA (55:45) em 85 ml/min; preparação da amostra: 17 mg/ml em MeOH; injeção: 1,0 ml. 0 quarto pico que elui a partir da coluna forneceu um atropisómero individual de 3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4-(R)-(3-(8-metoxi-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-9H-carbazol-i-carboxamida (26 mg, 20 0 de rendimento). A pureza quiral foi determinada como sendo maior do que 99 °. Espectro de massa m/z 579 (Μ # H - H20)#. ]'H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 10,42 (s, 1H) , 7,90 (dd, J = 7,2, 2,3 Hz, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,66 (d, J = 1,1
Hz, 1H) , 7,55-7,49 (m, 1H) , 7,40-7,36 (m, 1H) , 7,35-7,31 (m, 1H) , 7,25-7,19 (m, 3H) , 6,97 (d, J = 8,4 Hz, 1H) , 3,94 (s, 3H), 3,91 (s, 3H), 1,85 (s, 3H), 1,63 (s, 6H).
Exemplo 8 3-Cloro-4-(R)-(3 -(6-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (atropisómero individual)
(8)
Uma mistura de 4-bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 3] (200 mg, 0,524 mmol), 6-fluoro-1-metil-3-(2-metil-3-(4,4,5,5 - tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 13] (215 mg, 0,524 mmol),
Cs2C03 (512 mg, 1,57 mmol) e aduto de PdCl2(dppf) DCM (21,4 mg, 0,026 mmol) em THF (3 ml) e água (1 ml) foi aquecida a 6 0 °C durante a noite, depois a 90 °C durante 4 h. A mistura arrefecida foi concentrada e o resíduo foi purificado duas vezes por cromatografia de coluna em gel de sílica (40 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 50-100 °) , para fornecer uma mistura de quatro atropisómeros de 3-cloro-4-(3-(6-fluoro-1-meti1-2,4-dioxo-l,2-di- hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (129 mg, 39 ° de rendimento). Este material foi separado por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® AD-H (3 x 25 cm, 5 μιτι) ; Fase Móvel: C02-Me0H-MeCN (65:17,5:17,5) em 85 ml/min; preparação da amostra: 15,4 mg/ml em MeOH; injeção: 0,5 ml. 0 terceiro pico que elui a partir da coluna forneceu um atropisómero individual de 3-cloro-4-(R)-(3-(6-fluoro-1-meti1-2,4-dioxo-l,2-di- hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (33 mg). A pureza isomérica foi determinada como sendo superior a 98 0. Espectro de massa m/z 567 (Μ # Η - H20)#. ‘Ή RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 10,44 (s. 1., 1H) , 8,29 (dd, J = 8,1, 6,4 Hz, 1H) , 7,73 (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,56-7,49 (m, 1H), 7,36 (dd, J = 15,2, 7,3 Hz, 2H), 7,22 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,04-6,92 (m, 3H), 3,65 (s, 3H), 1,84 (s, 3H), 1,63 (s, 6H).
Exemplo 9 3-Cloro-4-(R)-(3- (7-fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2 -i1) -9H-carbazol-1-carboxamida (atropi sómero individual) (9)
Uma mistura de 4-bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 3] (200 mg, 0,524 mmol), 7-fluoro-1-metil-3-(2-metil-3-(4,4,5,5 - tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 15] (215 mg, 0,524 mmol),
Cs2C03 (512 mg, 1,57 mmol) e aduto de PdCl2(dppf) DCM (21,4 mg, 0,026 mmol) em THE (3 ml) e água (0,50 ml) foi aquecida a 90 °C durante 4 h. A mistura arrefecida foi concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (220 g), eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0-40 °), para fornecer uma mistura de quatro atropisómeros de 3-cloro-4-(3-(7-fluoro-l-metil-2,4-dioxo- 1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)- 7 -(2 -hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (164 mg, 53 0 de rendimento). 0 material foi separado por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: Lux Cel2 (3 x 25 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-MeOH-MeCN (62:19:19) em 85 ml/min; preparação da amostra: 30 mg/ml em MeOH; injeção: 0,5 ml. 0 material isolado do terceiro pico que elui a partir da coluna foi novamente separado por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® COMO (3 x 25 cm, 5 pm); Fase Móvel: C02-MeOH-MeCN (68:16:16) em 85 ml/min; preparação da amostra: 11,4 mg/ml em MeOH; injeção: 3,5 ml. 0 primeiro pico que elui a partir da coluna forneceu um atropisómero individual de 3-cloro-4-(R)-(3-(7-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-l,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida como um sólido branco (25 mg, 15 0 de rendimento). A pureza isomérica foi determinada como sendo maior do que 98 °. Espectro de massa m/z 567 (M # H - H20)#. ''Ή RMN (4 00 MHz, clorofórmio-d) δ 10,46 (s, 1H), 8,31 (dd, J = 8,6, 6,2 Hz, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,68 (d, J = 1,1 Hz, 1H) , 7,58-7,52 (m, 1H) , 7,38 (ddd, J = 14,1, 7,8, 1,0 Hz, 2H), 7,24 (dd, J = 8,4, 1,5 Hz, 1H), 7,06-6,95 (m, 3H), 3,67 (s, 4H), 1,86 (s, 3H), 1,65 (s, 6H).
Exemplo 10 3-Cloro-4-(RS)-(3-(RS)-(6,8-difluoro-2,4-dioxo- 1.2- di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros)
(10)
Uma mistura de 4-bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 3] (10 mg, 0,026 mmol), 6,8-difluoro-3-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil- 1.3.2- dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 16] (14,1 mg, 0,034 mmol), cloreto de !,lf- bis(di-terc-butilfosfino)ferroceno paládio(II) (12,8 mg, 0,02 0 mmol) e THF (2 ml) num frasco de reação foi tratado com K3PO4 aquoso a 2 M (0,039 ml, 0,079 mmol). 0 frasco foi vedado e submetido a três ciclos de evacuação-preenchimento com azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. As fases da mistura foram separadas, a fase aquosa foi extraída duas vezes com EtOAc, e as fases orgânicas combinadas foram secas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (40 g), eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 80 a 100 °) . 0 material isolado foi triturado com MeOH para
fornecer um sólido após filtração. 0 filtrado foi concentrado e submetido à cromatografia de coluna em sílica (40 g) , eluindo com DCM-MeOH-NH4OH (gradiente de 90:9:1-97:2,7:0,3) para fornecer sólido adicional. Os dois sólidos foram combinados para fornecer 3-cloro-4-(3-(6,8-difluoro- 2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)- 7 -(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) como um sólido amarelo claro (164 mg, 71 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 571 (M # H -H20)#. :iH RMN (500 MHz, MeOH-d4) δ 8,04 (d, J = 2,0 Hz, 1H) , 7,70-7,68 (m, 1H), 7,65 (dd, J = 7,2, 3,2 Hz, 1H), 7,57-7,52 (m, 1H) , 7,43-7,34 (m, 3H) , 7,18-7,07 (m, 1H) , 6,90 (dd, J = 8,4, 3,0 Hz, 1H) , 1,84 (s, 3H) , 1,62-1,56 (tn, 6H) . Exemplo 11 3-Cloro-4-(R)-(3-(S)-(8-fluoro-l-metil (d3)-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)- 7 -(2 -hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (atropisómero individual) (11)
Uma solução de 4-bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 3] (3,08 g, 8,07 mmol) e 8-fluoro-l-metil (d3)-3-(S)-(2-metil-3- (4,4,5,5 -tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 21] (4,00 g, 9,68 mmol) em THF (33 ml) foi tratada com K:3P04 aquoso a 2 M (8,25 ml, 16,5 mmol). A mistura foi borbulhada com ãrgon durante ca. 4 min enquanto se agita num banho ultrassónico, depois foi tratada com cloreto de 1,1'-bis(di-terc-butilfosfino)ferroceno paládio(II) (447 mg, 0,686 mmol) . 0 recipiente de reação foi vedado e submetido a seis ciclos de evacuação-preenchimento com árgon. A mistura foi agitada a 50 °C durante 16,5 h, depois foi arrefecida até à temperatura ambiente. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com água. A fase aquosa foi extraída duas vezes com EtOAc e as fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (330 g), eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 40-100 %), para fornecer 3-cloro-4-(3-(S)-(8-fluoro-1-metil (d3)-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3 (4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (mistura de dois diastereómeros) como um sólido amarelo claro-castanho amarelado (3,877 g, 78 % de rendimento). 0 material preparado por este método (5,01 g) foi separado por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® AS-H (3 x 25 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-Me0H (70:30) em 160 ml/min, 40 °C; preparação da amostra: 22,75 mg/ml em 2:1 MeOH- diclorometano; injeção: 1,4 ml. As frações agrupadas contendo o primeiro pico que elui a partir da coluna foram concentradas, e o resíduo foi submetido a sonicação numa pequena quantidade de metanol. 0 precipitado foi recolhido por filtração, enxaguado com metanol e seco para fornecer 3-cloro-4-(R)-(3-(S)-(8-fluoro-1-metil (d3) - 2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2- hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida como um sólido branco (2,029 g). Espectro de massa m/z 570 (M # H -H20)#, 610 (M # Na)#. ΧΗ RMN (400 MHz, MeOH-d4) δ 8,12-8,03 (m, 2H), 7,74 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 7,67-7,53 (m, 2H), 7,46 (dd, J = 7,9, 1,1 Hz, 1H), 7,39-7,29 (m, 2H), 7,17 (dd, J = 8,5, 1,7 Hz, 1H), 6,96-6,87 (m, 1H), 1,81 (s, 3H), 1,61 (d, J = 1,3 Hz, 6H) . [a]D: #85,1° (c 2,38, CHC13) . Temperatura de início do ponto de fusão de DSC = 255,6 °C (taxa de aquecimento = 10 °C/min.). A configuração absoluta do Exemplo 11 foi confirmada pela análise de raios X de cristal único de cristais preparados pela dissolução do composto em 1:1:1 metanol/acetonitrilo/acetona e evaporação lenta do solvente à temperatura ambiente para fornecer um solvato de metanol (forma cristalina M-l) . Dimensões unitárias da célula: a = 9,78 À, b = 14,26 Â, c = 21,38 Â, α = 90,0°, β = 90,0°, γ = 90,0°; Grupo espacial: Moléculas do Exemplo 11/unidade assimétrica: 1; Volume/Número de moléculas na célula unitária = 746 Ã3; Densidade (calculada) = 1,381 g/'cm3. As coordenadas atómicas fracionárias à temperatura ambiente são dadas no Quadro 5, e uma descrição da estrutura é dada na Figura 4. A configuração absoluta foi ainda confirmada pela análise de raios X de cristal único de cristais preparados através da dissolução do Exemplo 11 com excesso de acetona aquosa e evaporação lenta do solvente à temperatura ambiente para fornecer um monohidrato (forma cristalina H-l) . Dimensões unitárias da célula: a = 9,41 Ã, b = 14,51 Ã, c = 21,12 Ã, a: = 90,0°, β = 90,0°, γ = 90,0°; Grupo espacial: P2i2i2i; Moléculas do
Exemplo 11/unidade assimétrica: 1; Volume/Número de moléculas na célula unitária = 721 Ã3; Densidade (calculada) = 1,396 g/cm3. As coordenadas atómicas fracionárias à temperatura ambiente são dadas no Quadro 3. Exemplo 12 3-Cloro-4-(R)-(3-(R)-(8-fluoro-1-metil (d3) -2,4- dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil) -7-(2- (12) hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (atropisómero individual)
Uma mistura de 4-bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida [Intermediário 3] (76 mg, 0,20 mmol) , 8-fluoro-l-metil (d3)-3-(R)-(2-metil-3-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 22] (75 mg, 0,18 mmol), e
Cs2C03 (118 mg, 0,363 mmol) em THF (1,6 ml) e água (0,40 ml) num frasco foi borbulhada com árgon durante 1 min com sonicação. A mistura foi tratada com aduto de PdCl2(dppf) DCM (7,4 mg, 0,009 mmol) e o frasco foi vedado e aquecido a 45 °C durante 19 h. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc e água. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída novamente com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas e concentradas. 0 resíduo foi submetido à cromatografia de coluna em gel de sílica (12 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 60 %-i00 %). 0 produto impuro resultante foi purificado por HPLC de fase reversa (Luna Axia 5 μ Ci8 30 x 100 mm), eluindo com MeCN-ãgua contendo TFA a 0,1 % (gradiente de 10-100 %, 30 ml/rnin). As frações apropriadas foram tratadas com NaHC03 aquoso saturado e concentradas numa suspensão aquosa. 0 precipitado foi recolhido por filtração, lavado com água e seco sob vácuo para fornecer uma mistura de dois atropisómeros de 3-cloro-4-(3-(R)-(8-fluoro-l-metil (d3) -2,4-dioxo-l,2-di-hidroquinazolin-3 (4H) -il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1- carboxamida como um sólido branco (60,9 mg, 57 0 de rendimento). Este material foi separado por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® AD-H (5 x 25 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-IPA (60:40) em 250 ml/min, 35 °C; preparação da amostra: 7,5 mg/ml em MeOH; injeção: 2,5 ml. 0 resíduo obtido a partir da concentração do segundo pico que elui a partir da coluna foi ainda purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (4 g), eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 40 °-100 °), para fornecer 3-cloro-4-(R)-(3-(R)-(8-fluoro-l-metil (d3)-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida como um sólido branco (19,7 mg, 68 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 570 (M # H - H20)#, 610 (M # Na)#. 1H RMN (400 MHz, MeOH-d4) δ 8,11-8,04 (m, 2H) , 7,74 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 7,66-7,53 (m, 2H), 7,46 (dd, J = 7,9, 1,1 Hz, 1H), 7,38-7,28 (m, 2H), 7,14 (dd, J = 8,5, 1,7
Hz, 1H), 6,90 (d, u = 8,6 Hz, 1H), 1,80 (s, 3H), 1,60 (d, J = 0,9 Hz, 6H).
Exemplo 13 3-Cloro-4-(3-(8-fluoro-2,4-dioxo-l,2-di- hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de quatro
atropisómeros) (13)
Uma mistura de 4-bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 3] (0,360 g, 0,943 mmol), 8-fluoro-3-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 17] (0,392 g, 0,990 mmol), aduto de
PdCl2(dppf) DCM (0,039 g, 0,047 mmol) e Cs2C03 (0,615 g, 1,89 mmol) em dioxano (10 ml) e água (2,5 ml) foi aquecida a 100 °C durante a noite. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc e lavada com água, seca e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 0 a 50 °, depois em 70 ° contendo MeOH a 1 °), para fornecer 3-cloro-4 -(3 -(8 -fluoro-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) como um sólido branco (0,361 g, 67 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 354 (M # H - H20)#, 394 (M # Na)#. ΧΗ RMN (500 MHz, MeOH-d4) δ 8,09 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 8,0
Hz, 1H), 7,81-7,69 (m, 1H), 7,64-7,54 im, 2H), 7,48 (dd, J = 7,8, 1,1 Hz, 1H), 7,43-7,29 (m, 1H), 7,31-7,24 (m, 1H), 7,18 (dd, J = 8,3, 1,7 Hz, 1H) , 7,16-7,07 (m, 1H) , 6,92 (dd, J = 8,6, 5,3 Hz, 1H), 1,94-1,71 (m, 3H), 1,65-1,50 (m, 6H) .
Exemplo 14 3-Cloro-4-(R)-(3-(R)-(8-fluoro-2,4-dioxo-l,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (atropisómero individual)
(14)
Uma amostra da mistura de quatro atropisómeros de 3-cloro-4-(3-(S-fluoro-2,4-dioxo-l,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Exemplo 13] (250 mg) foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® AD-H (5 x 25 cm, 5 μπι) ; Fase Móvel: C02 -1 PA (60:40) em 220 ml/min, 35 °C, 100 bar; preparação da amostra: 21 mg/ml em MeOH; injeção: 3,0 ml. 0 terceiro pico que elui a partir da coluna forneceu 3-cloro- 4-(R)-(3-(R)-(8 -fluoro-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (atropisómero individual) como um sólido branco (24 mg). A pureza quiral foi determinada como sendo superior a 95 0. Espectro de massa m/z 553 (M # H -H20)#, 5 93 (M # Na)#. XH RMN (4 00 MHz, MeOH-d4) δ 8,0 9 (s, 1H), 7,95 (d, J = /,9 Hz, 1H), 7,74 id, J = 1,1 Hz, 1H), 7,60-7,54 (m, 2H) , 7,54-7,43 (m, 1H) , 7,37 (d, J = 7,5 Hz, 1H) , 7,28 (d, J = 4,6 Hz, 1H) , 7,11 (dd, J = 8,6, 1,5 Hz, 1H) , 6,91 (d, J = 8,6 Hz, 1H) , 2,00-1,76 (m, 3H) , 1,69-1,52 (m, 6H) .
Exemplos 15 e 16 3-Ciano-4-(S)-(3-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (atropisõmeros individuais)
(15, 16)
Preparação 15A: 3-Ciano-4-(3 -(8-fluoro-1-metil-2,4-dioxo- 1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil) -7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de 4 atropisõmeros)
Uma mistura de 4-bromo-3-ciano-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 23] (0,400 g, 1,08 mmol), 8-fluoro-l-metil-3-(2-metil-3-(4,4,5,5- tet ramet il-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina- 2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 2] (0,573 g, 1,40 mmol),
Cs2C03 (0,700 g, 2,15 mmol) e dioxano (5 ml) foi submetida a 3 ciclos de evacuação-preenchimento com azoto. A mistura foi tratada com aduto de PdCl2(dppf) DCM (0,053 g, 0,064 mmol) e submetida a mais 2 ciclos de evacuação-preenchimento com azoto. A mistura foi aquecida a 88 °C durante 2 dias, A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc, lavada sequencialmente com água e salmoura, e seca e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos (sequencialmente 50 °, 75 °, 85 0 e 100 °). 0 produto impuro resultante foi purificado por HPLC preparativa de fase reversa para fornecer 3-ciano-4-(3-(8-fluoro-1-metil- 2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)- 7 -(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) como um sólido branco (0,200 g, 32 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 576 (M # H)#. 1H RMN (400 MHz, DMSO-dg) δ 11,96 (s, 1H), 8,45 (s, 1H) , 8,35 (s. 1., 1H), 8,00-7,94 (m, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,77-7,68 (m, 2H) , 7,60-7,52 (m, 2H) , 7,41 (dd, J - 6,6, 2,2 Hz, 1H) , 7,38-7,29 (m, 1H), 7,13 (t, J = 10,1 Hz, 1H), 6,85 (t, J = 8,1 Hz, 1H) , 5,05 (d, J = 2,0 Hz, 1H) , 3,74 (dd, J = 8,1, 2,6 Hz, 3H), 1,73 (s, 3H), e 1,48-1,43 (m, 6H).
Exemplos 15 e 16:
Uma amostra de 3-ciano-4-(3-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)- 7 -(2 -hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de 4 atropisómeros) foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® AD-H (3 x 25 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-IPA (65:35) em 150 ml/min, 45 °C. 0 segundo pico que elui a partir da coluna forneceu um atropisómero individual de 3-ciano-4-(S)-(3-(8-fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida [Exemplo 15] . A pureza quiral foi determinada como sendo superior a 94 0. 0 quarto pico que elui a partir da coluna forneceu o outro atropisómero individual de 3-ciano-4-(S)-(3 -(8 -fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Exemplo 16] . A pureza quiral foi determinada como sendo 99 °. 0 espectro de massa de cada atropisómero individual foi o mesmo como aquele da mistura de quatro atropisómeros,
Exemplo 17 3-Fluoro-4-(3 -(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2- di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil) -7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros)
(17)
Uma mistura de 4-bromo-3-fluoro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 27] (0,080 g, 0,219 mmol), 8-fluoro-l-metil-3-(S)-(2-metil-3-(4,4,5,5- te t ramet il-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina -2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 2] (0,094 g, 0,230 mmol), aduto de PdCl2(dppf) DCM (9,0 mg, 11,0 μηιοί) e Cs2C03 (0,143 g, 0,43 8 mmol) em dioxano (8,0 ml) e água (2,0 ml) foi aquecida a 100 °C durante a noite. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc e filtrada. 0 filtrado foi lavado com água, seco e concentrado. 0 resíduo foi purificado por HPLC preparativa de fase reversa, seguido pela purificação por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 50 °-100 °), para fornecer 3-fluoro-4-(3 -(8 -fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan- 2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) como um sólido esbranquiçado (0,018 g, 15 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 551 (M # H - H20)#. 1H RMN (500 MHz, MeOH-d4) δ 7,66 (d, J = 10,4 Hz, 1H) , 7,51 {S, 1H), 7,47-/,34 (m, 3H), 7,29 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 7,22-7,11 (m, 1H) , 7,09-6,97 (m, 1H) , 6,90 (t, J = 8,1 Hz, 1H) , 3,81-3,63 (m, 3H), 2,06 (s. 1., 3H), e 1,77-1,58 (m, 6H). Exemplo 18 3-Fluoro-4-(3-(S)-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo- 1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de dois atropisómeros)
(18)
Uma mistura de 4-bromo-3-fluoro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 27] (0,100 g, 0,274 mmol), 8-fluoro-l-metil-3-(S)-(2-metil-3-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 10] (0,146 g, 0,356 mmol), K3PO4 aquoso a 2 M (0,41 ml, 0,821 mmol), e THF (2,0 ml) foi submetida a 3 ciclos de evacuação-preenchimento com azoto. A mistura foi tratada com cloreto de l,l'-bis(di-terc-butilfosfino)ferroceno paládio(II) (8,9 mg, 0,014 mmol), e submetida a mais 2 ciclos de evacuação- preenchimento com azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi diluída com EtOAc, lavada sequencialmente com água e salmoura, e seca e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos (sequencialmente 50 °, 62 °, 75 0 e 85 °), para fornecer 3-fluoro-4-(3-(S)-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil) - 7 -(2 -hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de dois atropisómeros) como um sólido esbranquiçado (0,084 g, 53 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 551 (M # H -H20)#. λΕ RMN (500 MHz, DMS0-ds) δ 11,39 (s, 1H) , 8,21 (s. 1., 1H) , 7,99-7,92 (m, 3H) , 7,84 (s, 1H) , 7,73 (ddt, J = 14,4, 8,0, 1,4 Hz, 1H), 7,59 (s. 1., 1H), 7,54-7,47 (m, 3H), 7,40 (dd, J = 7,2, 1,7 Hz, 1H), 7,34 (tt, J = 7,9, 4,0 Hz, 1H) , 7,04 (ddd, J = 11,5, 8,6, 1,5 Hz, 1H) , 6,88 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,99 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 3,74 (dd, J = 8,2, 1,0 Hz, 3H), 1,77 (s, 3H), e 1,49-1,42 (m, 6H). Síntese Alternativa de 3-Fluoro-4-(3-(S)-(8-fluoro-l-metil- 2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)- 7 -(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de dois atropisómeros):
Uma mistura de 4-bromo-3-fluoro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 27] (0,050 g, 0,137 mmol), 8-fluoro-l-metil-3-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 10] (0,073 g, 0,178 mmol),
Cs2C03 (0,089 g, 0,274 mmol), e dioxano (0,8 ml) foi submetida a 3 ciclos de evacuação-preenchimento com azoto. A mistura foi tratada com aduto de PdCl2(dppf) DCM (6,7 mg, 8,21 pmol), submetida a mais 2 ciclos de evacuação-preenchimento com azoto, e aquecida a 52 °C durante a noite. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc, lavada sequencialmente com água e salmoura, e seca e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos (sequencialmente 50 °, 62 0 e 75 °), para fornecer 3-fluoro-4-(3-(S)-(8-fluoro-l-metil-2 ,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2 -metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (mistura de dois atropisómeros) como um sólido branco (0,034 g, 42 0 de rendimento).
Exemplo 19 3-Fluoro-4-(R)-(3-(S)-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)- 7 -(2 -hidroxipropan-2 -i1)-9H-carbazol-1-carboxamida (atropi sómero individual)
(19)
Uma amostra de 3-fluoro-4-(3-(S)-(8-fluoro-1-metil- 2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)- 7 -(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de dois atropisómeros) [Exemplo 18] foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® AS-H (3 x 25 cm, 5 pm); Fase Móvel: C02-MeOH (70:30) em 120 ml/min, 40 °C, 100 bar; preparação da amostra: 3,6 mg/rnl em MeOH; injeção: 2,0 ml. 0 primeiro pico que elui a partir da coluna forneceu 3-fluoro-4-(R)-(3 -(S)-(8 -fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida. A pureza quiral foi determinada como sendo superior a 99,4 %. Espectro de massa m/z 551 (M # H - H20)#. ’Ή RMN (500 MHz, DMS0-ds) δ 11,39 (s, 1H) , 8,21 (s. 1., 1H), 8,00-7,92 (m, 2H), 7,84 (s, 1H), 7,73 (ddd, J = 14,4, 8,0, 1,4 Hz, 1H), 7,59 (s. 1., 1H), 7,55-7,47 (m, 2H), 7,40 (dd, J = 7,2, 1,4 Hz, 1H), 7,33 (td, J = 8,0, 4,0 Hz, 1H) , 7,05 (dd, J = 8,3, 1,4 Hz, 1H) , 6,89 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 4,99 (s, 1H), 3,74 (d, J - 8,0 Hz, 3H), 3,17 (d, J = 5,3 Hz, 3H), 1,7/ (s, 3H), e 1,46 (d, J = 4,2 Hz, 6H).
Exemplo 20 3-Fluoro-4-(3-(8-fluoro-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de 4 (20) atropisómeros)
Uma mistura de 4-bromo-3-fluoro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 27] (0,104 g, 0,285 mmol), 8-fluoro-3-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2“dioxaborolan_2“il) feni1) quinazolina_2,4 (1H,3H) -diona [Intermediário 17] (0,147 g, 0,370 mmol), Cs2C03 (0,186 g, 0,570 mmol) e dioxano (1,6 ml) foi submetida a 3 ciclos de evacuação-preenchimento com azoto. A mistura foi tratada com aduto de PdCl2(dppf) DCM (14 mg, 0,017 mmol), e submetida a mais dois ciclos de evacuação-preenchimento com azoto. A mistura foi aquecida a 88 °C durante a noite. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc, lavada sequencialmente com água e salmoura, seca e concentrada. 0 resíduo foi purificado por HPLC preparativa de fase reversa. As frações apropriadas foram tratadas com NaHC03 aquoso saturado e concentradas num resíduo aquoso que foi extraído com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com salmoura. As camadas aquosas combinadas foram extraídas com EtOAc, e as camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos (sequencialmente 50 %, 65 % e 75 %), para fornecer 3- fluoro-4-(3 -(8 -fluoro-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) como um sólido branco (0,029 g, 18 % de rendimento). Espectro de massa m/z 537 (Μ # Η - H20)#. RMN (500 MHz, DMSO-ds) δ 11,81 (s. 1., 1H) , 11,39 (d, J - 1,4 Hz, 1H) , 8,21 (s. 1 . , 1H), 7,95 (dd, J = 10,7, 2,1 Hz, 1H), 7,8 6 ~ 7,80 (m, 2H) , 7,64 (t, J = 9,2 Hz, 1H), 7,59 (s. 1., 1H), 7,53-7,50 (m, 2H), 7,42-7,38 (m, 1H), 7,26-7,20 (in, 1H), 7,07-6,99 (m, 1H), 6,97-6,88 (m, 1H), 4,98 (d, J = 9,7 Hz, 1H) , 1,81-1,75 (m, 3H) , e 1,48-1,41 (m, 6H) .
Exemplos 21 e 22 3-Fluoro-4-(R)-(3-(R)-(8-fluoro-2,4-dioxo- 1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida, e 3-Fluoro-4-(R)-(3-(S)- (8-fluoro-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (atropisómeros individuais)
(22)
Uma amostra de 3-fluoro-4-(3-(8-fluoro-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de 4 atropisómeros) [Exemplo 20] foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® AD-H (3 x 25 cm, 5 μιη) ; Fase Móvel: C02-1PA (75:25) em 180 ml/min, 40 °C, 100 bar. 0 terceiro pico que elui a partir da coluna forneceu 3-fluoro-4-(R)-(3-(R)-(8-fluoro-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2 -metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida [Exemplo 21] . A pureza quiral foi determinada como sendo 98 %. Espectro de massa m/z 537 (Μ # H - H20)#. 1H RMN (500 MHz, DMS0-d6) δ 11,83 (s. 1., 1H), 11,38 (s, 1H) , 8,21 (s. 1., 1H) , 7,95 (d, J = 10,8 Hz, 1H) , 7,83 (d, J = 1,1 Hz, 1H) , 7,81 (d, J = 8,0 Hz, 1H) , 7,65-7,57 (m, 2H) , 7,54-/,47 (m, 2H), 7,39 (dd, u = 6,7, 1,9 Hz, 1H), 7,20 (s. 1., 1H) , 7,03-6,99 (m, 1H) , 6,99-6,94 (m, 1H) , 4,97 (s, 1H), 1,77 (s, 3H), e 1,44 (d, J = 5,3 Hz, 6H). 0 quarto pico que elui a partir da coluna forneceu 3-fluoro-4-(R)-(3-(S)-(8 -fluoro-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-Ί-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida [Exemplo 22], A pureza quiral foi determinada como sendo 95 0, Espectro de massa m/z 537 (Μ # Η - H20)#. ΧΗ RMN (500 MHz, DMS0-d6) δ 11,80 (s. 1., 1H) , 11,39 (s, 1H) , 8,21 (s. 1., 1H) , 7,95 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 7,85-7,78 (m, 2H), 7,59 (s. 1., 2H), 7,54- 7,45 (m, 2H) , 7,38 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 7,19 (s. 1., 1H), 7,05 (dd, J = 8,5, 1,5 Hz, 1H) , 6,90 (d, J = 8,3 Hz, 1H) , 4,99 (s, 1H), 1,77 (s, 3H), e 1,46 id, J = 4,/ Hz, 6H),
Procedimento alternativo para a preparação de 3-Fluoro-4-(R)-(3 -(R)-(8-fluoro-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Exemplo 21]:
Uma mistura de 4-bromo-3-fluoro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida [Intermediário 27] (0,118 g, 0,323 mmol), 8-fluoro-3-(R)-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 18] (0,166 g, 0,420 mmol), K3P04 aquoso a 2 M (0,485 ml, 0,969 mmol) e THF (2,0 ml) foi submetido a 3 ciclos de evacuação-preenchimento com azoto. A mistura foi tratada com cloreto de 1,1F-bis(di-terc- butilfosfino)ferroceno paládio(II) (11 mg, 0,016 mmol) e submetida a mais 2 ciclos de evacuação-preenchimento com azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite, diluída com EtOAc, lavada sequencialmente com água e salmoura, seca e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos (sequencialmente 50 °, 62 °, 75 0 e 85 °), para fornecer 3-fluoro-4-(3-(R)-(8-fluoro-2,4-dioxo-l,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de dois atropisómeros) como um sólido esbranquiçado (0,117 g, 65 0 de rendimento). Uma amostra deste material foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® AD-H (3 x 25 cm, 5 pm); Fase Móvel: C02-MeOH (70:30) em 180 ml/min, 45 °C; preparação da amostra: 30 mg/ml; injeção: 1,0 ml. 0 segundo pico que elui a partir da coluna forneceu 3-fluoro-4-(R)-(3-(R)-(8-fluoro-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil) -7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida, A pureza quiral foi determinada como sendo superior a 99,9 °. Espectro de massa m/z 537 (M # H - H20)#. 1H RMN (500 MHz, DMSO-ds) δ 11,83 (s. 1., 1H) , 11,38 (s, 1H) , 8,21 (s. 1., 1H), /,95 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,65-7,57 (m, 2H), 7,54-7,47 (m, 2H) , 7,39 (dd, J = 6,7, 1,9 Hz, 1H) , 7,20 (s. 1-, 1H) , 7,03-6,99 (m, 1H) , 6,99-6,94 (m, 1H) , 4,97 (s, 1H) , 1,77 (s, 3H) , e 1,44 (d, J = 5,3 Hz, 6H) .
Procedimento alternativo para a preparação de 3-Fluoro-4- (R) -(3-(S)-(S-fluoro-2,4-dioxo-l,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Exemplo 22] :
Seguindo o mesmo procedimento como aquele utilizado para a preparação alternativa do Exemplo 21, 4-bromo-3- fluoro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 27] (0,118 g, 0,323 mmol) e 8-fluoro-3-(S)- (2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 19] (0,166 g, 0,420 mmol) foram convertidas no 3-fluoro-4-(3- (S) -(8-fluoro-2,4-dioxo-l,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2- metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (mistura de dois atropisómeros) como um sólido esbranquiçado (0,119 g, 66 0 de rendimento). Uma amostra deste material foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® AS-H (3 x 25 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-Me0H (75:25) em 180 ml/min, 45 °C; preparação da amostra: 10 mg/ml; injeção: 1,0 ml. 0 segundo pico que elui a partir da coluna forneceu 3-fluoro-4-(R)-(3 -(S)-(8-fluoro-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamide . A pureza quiral foi determinada como sendo maior do que 99,9 °.
Exemplo 23 3-Cloro-4-(3-(3-(4-fluorofenil)-2,6-dioxo-2,3-di-hidropirimidin-1(6H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros)
(23)
Uma mistura de 4-bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2- il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 3] (135 mg, 0,354 mmol), 1-(4-fluorofenil)-3-(2-metil-3-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)pirimidina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 44] (164 mg, 0,389 mmol), e tetraquis(trifenilfosfina)paládio (20 mg, 0,018 mmol) em tolueno (5,3 ml) e etanol (1,8 ml) foi borbulhada com árgon durante vários min. A mistura foi tratada com Na2C03 aquoso a 2 M (354 μΐ, 0,707 mmol), borbulhada novamente com árgon, e aquecida a 90 °C durante 16 h. A mistura arrefecida foi dividida entre EtOAc e água. A fase orgânica foi seca e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (24 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 25-100 °), para fornecer 3-cloro-4-(3-(3-(4-fluorofenil)-2,6-dioxo-2,3-di-hidropirimidin-1(6H)-il) - 2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) como um sólido branco (103 mg, 49 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 579 (Μ # H - H20)#. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 11,52 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 8,29 (s. 1., 1H), 8,13 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,91 (dd, J = 7,9, 6,4 Hz, 1H), 7,85-7,80 (m, 1H) , 7,64-7,54 (m, 3H), 7,53-7,45 (m, 2H) , 7,36 (dt, J = 11,9, 8,7 Hz, 2H) , 7,25 (ddd, J = 7,3, 4,3, 1,2 Hz, 1H), 7.03- 6,83 (m, 1H) , 6,73-6,47 (m, 1H) , 5,97 (dd, J = 7,9, 3,5 Hz, 1H) , 5,04-4,92 (m, 1H) , 1,75 (d, J - 1,5 Hz, 3H) , 1,47-1,33 (in, 6H) .
Exemplo 24 3-Cloro-4-(R)-(3-(3-(4-fluorofenil)-2,6-dioxo-
2.3- di-hidropirimidin-1(6H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamide (atropisómero individual) (24)
Uma amostra de 3-cloro-4-(3-(3-(4-fluorofenil)-2,6-dioxo-2,3-di-hidropirimidin-1(6H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) [Exemplo 23] (103 mg) foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® AD-H (3 x 25 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-IPA (60:40) em 85 ml/min; preparação da amostra: 6,1 mg/ml em 1:1 MeCN-MeOH; injeção: 1,0 ml. 0 quarto pico que elui a partir da coluna foi ainda purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (4 g), eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 60-80 %), para fornecer um atropisómero individual de 3-cloro-4-(R)-(3- (3- (4- fluorofenil)-2,6-dioxo-2,3-di-hidropirimidin-1(6H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida como um sólido esbranquiçado (16 mg, 13 % de rendimento) . Espectro de massa m/z 579 (M # H - H20)#. ΧΗ RMN (400 MHz, MeOH-d4) δ 8,06 (s, 1H) , 7,78 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,73 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 7,57-7,50 (m, 3H), 7,47-7,43 (m, 1H) , 7,32 (dd, J = 7,5, 1,1 Hz, 1H) , 7,27 (t, J = 8,7
Hz, 2H) , 7,11 (dd, J = 8,5, 1,7 Hz, 1H) , 6,88 (d, J = 8,4
Hz, 1H), 6,01 (d, u = 7,9 Hz, 1H), 1,84 (s, 3H), 1,58 (d, J = 3,1 Hz, 6H).
Exemplo 25 6-Cloro-5-(3-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-l,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-2-(S)-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9 -tetra-hidro-IH-carbazol- 8 -carboxamida (mistura de quatro atropisómeros)
(25)
Uma mistura de (S)-5-bromo-6-cloro-2-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida [Intermediário 31] (100 mg, 0,259 mmol), 8-fluoro-l-metil- 3 -(2-metil-3 -(4,4,5,5 -tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 2] (112 mg, 0,272 mmol), Cs2C03 (169 mg, 0,519 mmol) e PdCl2(dppf) DCM aduto (16,9 mg, 0,021 mmol) em THF (4,3 ml) e água (1,1 ml) foi aquecida a 50 °C durante 17,5 h. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc, lavada sequencialmente com água e salmoura, seca e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (24g), eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 50-80 °) . O produto impuro foi ainda purificado por HPLC preparativa para fornecer 6-cloro-5-(3-(8-fluoro-l-metil- 2,4-dioxo-l,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metiIfenil)-2 -(S)-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) (76 mg, 50 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 589 (M # H)#. 1H RMN (500 MHz, DMS0-ds) δ 10,89 (s, 1H) , 8,13 (s. 1., 1H) , 7,94 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,76-7,68 (m, 2H), 7,46 (s. 1., 1H), 7,40-7,28 (m, 3H), 7,22-7,16 (m, 1H), 4,21-4,13 (m, 1H), 3,77-3,64 (m, 3H), 2,95-2,82 (m, 1H), 2,40 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 1,94-1,70 (m, 3H), 1,70-1,61 (m, 3H), 1,58- 1,48 (m, 1H), 1,16-1,02 (m, 7H).
Exemplo 26 6-Cloro-5-(R)-(3-(S)-(8-fluoro-l-metil-2,4- dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil) -2-(S)-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida (atropisomeroindividual)
(26)
Uma amostra de 6-cloro-5-(3-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil) -2-(S)-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) [Exemplo 25] (76 mg) foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® OD-H (3 x 25 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-Me0H (70:30) em 180 ml/min, 35 °C, 100 bar; preparação da amostra: 8,35 mg/ml em MeOH-DCM (4:1); injeção: 3,0 ml. 0 primeiro pico que elui a partir da coluna foi ainda purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (4 g), eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 50 a 80 °), para fornecer 6-cloro-5 -(R)-(3-(S)-(8 -fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-2-(S) -(2-hidroxipropan-2 -i1)-2,3,4,9 -tetra-hidro-IH-carbazol- 8 -carboxamida como um sólido branco (33,6 mg, 47 % de rendimento) . Espectro de massa m/z 589 (M # H)#. LH RMN (400 MHz, MeOH-d4) δ 8,06-7,99 (m, 1H) , 7,69 (s, 1H) , 7,60 (ddd, J = 14,3, 8,1, 1,4 Hz, 1H) , 7,40 (d, J = 7,5 Hz, 1H) , 7,34-7,27 (m, 2H), 7,24 (dd, J = 7,5, 1,1 Hz, 1H), 3,85 (d, J = 7,9 Hz, 3H), 2,90 (dd, J = 16,5, 5,1 Hz, 1H), 2,56 (dd, u = 16,4, 12,0 Hz, 1H), 2,10-2,02 (m, 1H), 2,00-1,84 (in, 2H), 1,77 (s, 3H), 1,75-1,68 (m, 1H), 1,28 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 1,22 (d, J = 2,2 Hz, 6H).
Exemplo 27 6-Fluoro-5-(R)-(3-(S)-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-2-(R)-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida (atropisómero individual)
(27)
Preparação 27A: 6-Fluoro-5-(3-(S)-(8-fluoro-l-metil-2,4- dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil) -2-(R)-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-S-carboxamida (mistura de 2 atropisómeros)
Uma mistura de (R)-5-bromo-6-fluoro-2-(2- hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9 -tetra-hidro-IH-carbazol- 8 -carboxamida (enantiõmero individual) [Intermediário 25] (5,00 g, 13,5 mmol), 8-fluoro-l-met.il-3-(S) - (2-metil-3-(4,4,5,5 -tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil) quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 10] (6,94 g, 16,9 mmol), K3P04 aquoso a 2 M (20,3 ml, 40,6 mmol) e THF (60 ml) foi submetida a três ciclos de evacuação-preenchimento com azoto. A mistura foi tratada com cloreto de 1,1'-bis(di-terc-butilfosfino) ferroceno paládio(II) (441 mg, 677 pmol) e submetida a mais dois ciclos de evacuação-preenchimento com azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi diluída com EtOAc, lavada sequencialmente com água e salmoura, e seca e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos (sequencialmente 50 °, 62 °, 75 0 e 85 °), para fornecer 6-fluoro-5-(3-(S)-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)- 2 -(R)-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida (mistura de dois atropisómeros) como um sólido esbranquiçado (6,77 g, 87 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 573 (Μ # H)#. ‘Ή RMN (500 MHz, DMS0-d6) δ 10,79- 10,74 (m, 1H), 8,05 (s. 1., 1H), 7,98-7,93 (m, 1H), 7,76- 7,69 (m, 1H) , 7,57-7,51 (m, 1H) , 7,43 (s. 1., 1H) , 7,40- 7,26 (m, 4H), 4,19-4,13 (m, 1H), 3,74-3,68 (m, 3H), 2,94- 2,84 (m, 1H), 2,49-2,35 (m, 2H), 1,92-1,80 (m, 3H), 1,76- I, 68 (m, 3H) , 1,62-1,52 (m, 1H) , e 1,12-1,06 (m, 6H) . Exemplo 27:
Uma amostra de 6-fluoro-5-(3-(S)-(8-fluoro-1-metil- 2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-2 -(R)-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida (mistura de dois atropisómeros) foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® AS-H (3 x 25 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-Me0H (70:30) em 120 ml/min, 35 °C, 100 bar; preparação da amostra: 9 mg/ml em MeOH; injeção: 1,7 ml. 0 primeiro pico que elui a partir da coluna forneceu 6-fluoro-5-(R)-(3-(S)-(8 -fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-2-(R)-(2-hidroxipropan-2 -i1)-2,3,4,9 -tetra-hidro-IH-carbazol- 8 -carboxamida. A pureza quiral foi determinada como sendo superior a 99,5 °. Espectro de massa m/z 573 (M # H)#. 1H RMN (500 MHz, DMSO - dg) δ 10,76 (s, 1H), 8,05 (s. 1., 1H), 7,96 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,72 (ddd, J = 14,3, 8,0, 1,2 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 7,44 (s. 1., 1H), 7,40-7,36 (m, 1H), 7,35-7,28 (m, 3H), 4,18 (s, 1H), 3,72 (d, J = 8,0
Hz, 3H) , 2,89 (dd, J = 16,9, 4,4 Hz, 1H) , 2,45-2,37 (m, 1H) , 2,02-1,93 (m, 1H) , 1,91-1,82 (m, 2H) , 1,57 (td, J = II, 7, 3,6 Hz, 1H), e 1,15-1,11 (m, 1H).
Exemplo 28 6-Fluoro-5-(R)-(3-(S)-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil) -2-(S) -(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida (atropisómeroindividual)
(28)
Seguindo o procedimento usado para preparar o Exemplo 27, (S)- 5-bromo-6-fluoro-2-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9- tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida (enantiõmero individual) [Intermediário 26] (0,045 g, 0,122 mmol) e 8- f luoro-1-metil - 3 - (S) - (2-metil-3 - (4,4,5,5-tet.rametil-l ,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 10] (0,065 g, 0,158 mmol) foram convertidas em 6-fluoro-5-(3-(S)-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil) -2-(S) -(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9 -tetra-hidro-IH-carbazol- 8 -carboxamida (mistura de dois atropisómeros) como um sólido amarelo (0,035 g, 49 0 de rendimento) . A separação de uma amostra deste material por cromatografia de fluido supercrítico quiral, utilizando as condições utilizadas para separar o Exemplo 27, forneceu (como o primeiro pico para eluir da coluna) 6-fluoro-5-(R)-(3-(S)-(8-fluoro-l-metil-2 ,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-2-(S)-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol- 8-carboxamida. A pureza quiral foi determinada como sendo superior a 99,5 °. As configurações relativas e absolutas foram determinadas por cristalografia de raios X. Espectro de massa m/z 573 (Μ # H)#. ]Ή RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ 10,77 (s, 1H) , 8,05 (s. 1., 1H) , 7,94 (dd, J = 7,9, 1,2 Hz, 1H), 7,56-7,52 (m, 1H), 7,43 (s. 1., 1H), 7,40-7,36 (m, 1H), 7,35-7,30 (in, 2H), 7,28 (dd, J = 7,5, 1,4 Hz, 1H), 4,15 (s, 1H), 3,75-3,70 (m, 3H), 2,90 (dd, J = 16,8, 4,6 Hz, 1H) , 2,47-2,39 (m, 1H) , 1,93-1,82 (m, 3H) , 1,74 (s, 3H) , 1,57 (td, J = 11,7, 4,2 Hz, 1H) , 1,16-1,11 (m, 1H) , e 1,10 (d, J = 1,9 Hz, 6H) . [a]D: #63,8° (c 2,1, CHC13) . Temperatura de início do ponto de fusão de DSC = 202,9 °C (taxa de aquecimento = 10 °C/min.). A configuração absoluta do Exemplo 28 foi confirmada pela análise de raios X de cristal único de cristais preparados pela dissolução do composto com excesso de metanol e evaporação lenta do solvente à temperatura ambiente para fornecer um solvato de dimetanol (forma cristalina M2-1). Dimensões unitárias da célula: a = 9,24 Ã, b = 7,97 Á, c = 22,12 Ã, a. = 90,0°, β = 94,1°, γ = 90,0°; Grupo espacial: P21;· Moléculas do Exemplo 2 8/unidade assimétrica: 1; Volume/Número de moléculas na célula unitária = 813 Â3; Densidade (calculada) = 1,301 g/cm3. As coordenadas atómicas fracionárias em 173 K são dadas no
Quadro 6, e uma descrição da estrutura é dada na Figura 5. Síntese alternativa do Exemplo 28:
Uma mistura de (S)-5-bromo-6-fluoro-2-(2- hidroxipropan-2 -i1)-2,3,4,9 -tetra-hidro-IH-carbazol- 8 -carboxamida [Intermediário 11] (5,00 g, 13,54 mmol), 8- fluoro-1-metil- 3 -(S)-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 10] (6,67 g, 16,25 mmol), fosfato de tripotássio (2 M em água) (20,31 ml, 40,6 mmol), e tetrahidrofurano (25 ml) foi submetida a 3 ciclos de evacuação-preenchimento com azoto. A mistura foi tratada com dicloreto de 1, l'-bis(di-terc-butilfosfino)ferroceno paládio (0,441 g, 0,677 mmol) e a mistura foi submetida a mais 2 ciclos de evacuação-preenchimento com azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite, depois foi diluída com EtOAc, lavada sequencialmente com água e salmoura, seca e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos (sequencialmente 50 °, 62 °, 75 0 e 85 °), para fornecer 6-fluoro-5-(3-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3-(S)-3(4H)-il)-2-metilfenil)-2-(S)-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida como um solido branco (6,58 g, 85 0 de rendimento). 0 material preparado por este método (40,03 g, 69,9 mmol) foi separado por cromatografia de fluido supercrítico quiral para fornecer (2S, 5R)-6-fluoro-5-(3-(8-fluoro-l- metil-2 ,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-2-(S)-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida. Outra purificação foi obtida através da suspensão deste material em metanol, sonicação durante 5 min, recolha do sólido por filtração, enxaguamento do sólido recolhido com metanol e secagem à temperatura ambiente sob pressão reduzida para fornecer um sólido branco (22,0 g, 90 0 de rendimento).
Exemplo 29 4-(R)-(3-(S)-(8-Fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2 -il)-3-metil-9H-carbazol-1-carboxamida (atropisómero individual)
(29)
Uma mistura de 4-bromo-7-(2-hidroxipropan-2-il)-3-metil-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 28] (0,091 g, 0,252 mmol), 8-fluoro-1-metil-3-(S)-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)quinazolina- 2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 10] (0,134 g, 0,327 mmol), K3PO4 aquoso a 2 M (0,378 ml, 0,756 mmol), e THF (2,0 ml) foi submetida a três ciclos de evacuação-preenchimento com azoto. A mistura foi tratada com cloreto de l,l'-bis(di-terc-butilfosfino)ferroceno paládio(II) (8,2 mg, 0,013 mmol) e submetida a dois ciclos adicionais de evacuação-preenchimento com azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite, depois foi diluída com EtOAc, lavada sequencialmente com água e salmoura, seca e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos (sequencialmente 50 °, 62 °, 75 0 e 85 °) para fornecer 4- (3 -(S)-(8 -fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-3-metil-9H-carbazol-l-carboxamida (mistura de dois atropisómeros) como sólido amarelo claro (0,087 g, 59 0 de rendimento).
Espectro de massa m/z 547 (M # H - H20)#. XH RMN (500 MHz, DMSO-ds) δ 11,20 (s, 1H) , 8,10 (s. 1., 1H) , 7,97 (ddd, J = 7,9, 7,2, 1,0 Hz, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,76- 7.68 (m, 1H), 7,53-7,48 (m, 1H), 7,44 (dd, J - 7,9, 1,2 Hz, 1H), 7,40 (s. 1., 1H), 7,36-7,30 (m, 1H), 7,23 (dd, J = 7,4, 1,2 Hz, 1H) , 6,98 (ddd, J = 12,0, 8,4, 1,5 Hz, 1H) , 6.68 (t, J = 7,9 Hz, 1H) , 4,94 (d, J = 3,1 Hz, 1H) , 3,73 (dd, J - 8,2, 3,5 Hz, 3H) , 2,17 (s, 3H) , 1,66 (s, 3H) , e 1,48-1,41 (m, 6H).
Uma amostra deste material foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® AD-H (3 x 25 cm, 5 pm); Fase Móvel: C02-MeOH (65:35) em 150 ml/min, 40 °C; preparação da amostra: 15 mg/ml em MeOH; injeção: 1,5 ml. 0 segundo pico que elui a partir da coluna forneceu 4-(R)-(3-(S)-(8-fluoro-l-metil- 2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)- 7 -(2-hidroxipropan-2-il)-3-metil-9H-carbazol-1-carboxamida. A pureza quiral foi determinada como sendo maior do que 99 °. Espectro de massa m/z 547 (Μ # H - H20)#. LH RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 11,19 (s, 1H), 8,10 (s. 1., 1H), 7,97 (dd, J = 7,9, 1,0 Hz, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,78 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 7,72 (ddd, J = 14,3, 8,0, 1,5 Hz, 1H), 7,53-7,48 (m, 1H), 7,44 (dd, J - 7,8, 1,1 Hz, 1H), 7,40 (s. 1., 1H), 7,33 (td, J = 8,0, 4,2 Hz, 1H), 7,23 ^ dd, J = 7,5, 1,1 Hz, 1H), 6,99 (dd, J = 8,5, 1,5 Hz, 1H) , 6,69 (d, J = 8,6 Hz, 1H) , 4,94 (s, 1H) , 2,20-2,14 (m, 3H) , 1,66 (s, 3H) , e 1,45 (d, J = 3,6 Hz, 6H) .
Exemplos 30 e 31 4-(R)-(3-(5-Cloro-l,3-dioxo-lH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-3-fluoro-7-(2-hidroxipropan-2-il) -9H-carbazol-1-carboxamida (atropisómeros individuais)
(30, 31)
Preparação 30A: 4-(3- (5-Cloro-1,3-dioxo-IH-pirido[1,2- c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-3-fluoro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros)
Uma mistura de 4-bromo-3-fluoro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 27] (0,098 g, 0,268 mmol) , 5-cloro-2-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-IH-pirido[1,2-c]pirimidina-1,3(2H)-diona [Intermediário 33] (0,144 g, 0,349 mmol),
Cs2C03 (0,175 g, 0,53 7 mmol), e dioxano (1,6 ml) foi submetida a três ciclos de evacuação-preenchimento com azoto. A mistura foi tratada com aduto de PdCl2(dppf) DCM (0,013 g, 0,016 mmol) e submetida a mais dois ciclos de evacuação-preenchimento com azoto. A mistura foi aquecida a 52 °C durante a noite. A mistura arrefecida foi diluída com
EtOAc, lavada sequencialmente com água e salmoura, seca e concentrada. 0 resíduo foi purificado por HPLC preparativa de fase reversa. As frações apropriadas foram tratadas com NaHC03 aquoso saturado e concentradas. 0 resíduo foi dividido entre EtOAc e água, e a camada orgânica foi lavada com salmoura. As camadas aquosas foram extraída com EtOAc, e as camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas. 0 resíduo foi purificado duas vezes por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos (sequencialmente 50°, 65° e 75°) para fornecer 4 -(3-(5-cloro-1,3-dioxo-IH-pirido[l,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-3-fluoro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) como um sólido amarelo (0,013 g, 8 0 de rendimento).
Espectro de massa m/z 571, 573 (Μ # H)#, ‘Ή RMN (500 MHz, DMS0-d6) δ 11,39 (d, J = 5,3 Hz, 1H) , 8,30-8,24 (m, 1H) , 8,21 (s. 1., 1H), 7,95 (dd, J = 10,5, 1,7 Hz, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,60 id, J = 7,2 Hz, 2H), 7,55-/,47 im, 2H), 7,42-7,39 (m, 1H), 7,04-6,99 (m, 1H), 6,93 (d, J = 8,6 Hz, 0,6H), 6,84 (d, J - 8,6 Hz, 0,4H), 6,57 (td, J - 7,3, 3,5 Hz, 1H), 6,00 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 4,98 IS, 1H), 1,78 (d, J = 1,9
Hz, 3H), e 1,45 (d, J = 3,9 Hz, 6H).
Exemplos 30 e 31:
Uma amostra de 4-(3-(5-cloro-l,3-dioxo-IH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-3-fluoro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de 4 atropisómeros) foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® AD-H (3 x 25 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-IPA (55:45) em 120 ml/min, 45 °C, 100 bar; preparação da amostra: 5,6 mg/rnl em MeOH; injeção: 1,7 ml. 0 segundo pico que elui a partir da coluna forneceu um atropisõmero individual de 4-(R)-(3-(5-cloro-1,3-dioxo-1H-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-3-fluoro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Exemplo 30]. A pureza quiral foi determinada como sendo superior a 97,5 °. Espectro de massa tn/z 571 (M # H)#. 0 quarto pico que elui a partir da coluna forneceu o outro atropisómero individual de 4-(R)-(3-(5-cloro-l,3-dioxo-lH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-3 -fluoro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Exemplo 31] . A pureza quiral foi determinada como sendo superior a 99,5 °. Espectro de massa m/z 553 (M # H -H20)#.
Exemplos 32 e 33 3-Cloro-4-(R)-(3-(R)-(5-cloro-l,3-dioxo-1H-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-7 -(2 -hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (32), e 3-Cloro-4-(R)-(3-(S)-(5-cloro-1,3-dioxo-lH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (33) (atropisómeros individuais)
(33)
Uma mistura de 4-bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 3] (1,11 g, 2,91 mmol), 5-cloro-2-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-pirido[1,2-c]pirimidina-1,3(2H)-diona [Intermediário 33] (1,00 g, 2,42 mmol) e
Cs2C03 (1,58 g, 4,85 mmol) em THF (8 ml) e água (2 ml) foi borbulhada com árgon durante três min. A mistura foi tratada com aduto de PdCl2(dppf) DCM (0,099 g, 0,121 mmol) e aquecida a 60 °C durante a noite. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc e lavada sequencialmente com água e salmoura. As camadas aquosas combinadas foram extraídas com DCM contendo uma pequena quantidade de MeOH. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas até que um precipitado ocre se formou, que foi removido por filtração. 0 filtrado foi concentrado e purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (120 g) , eluindo com EtOAc-DCM (sequencialmente 70 °, 80 °, e 100 °), para fornecer 3-cloro-4-(3-(5-cloro-l,3-dioxo-lH-pirido[1,2-c] pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) como um sólido amarelo (993 mg, 69 0 de rendimento) . 0 material foi separado por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® AD-H (3 x 25 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-IPA (50:50) em 150 ml/min, 45 °C, 100 bar; preparação da amostra: 5,6 mg/ml em MeOH-DCM (1:1); injeção: 3 ml. 0 segundo pico que elui a partir da coluna forneceu 3-cloro-4-(R)-(3-(R)-(5-cloro- I, 3-dioxo-1H-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2- metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida [Exemplo 32] . Espectro de massa m/z 587 (M # H)#. ΧΗ RMN (400 MHz, DMS0-ds) δ 11,50 (s, 1H) , 8,27 (s, 2H) , 8,14 (s, 1H) , 7,84 (d, J = 1,1 Hz, 1H) , 7,59 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,56-7,46 (m, 2H), 7,29 (dd, J = 7,4, 1,2 Hz, 1H), 7,01 (dd, J = 8,4, 1,5 Hz, 1H), 6,64 (d, J = 8,6 Hz, 1H) , 6,55 (t, J = 7,3 Hz, 1H) , 5,98 (s, 1H) , 5,75 (s, 1H) , 4.98 (s, 1H), 1,71 (s, 3H), 1,46-1,42 (m, 6H). 0 quarto pico que elui a partir da coluna forneceu 3-cloro-4- (R)-(3-(S)-(5-cloro-l,3-dioxo-1H-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida [Exemplo 33]. Espectro de massa m/z 569 (Μ # Η - H20)#. ΧΗ RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ II, 49 (s, 1H), 8,34-8,24 (m, 2H), 8,14 (s, 1H), 7,84 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 7,60 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,56-7,46 (m, 2H), 7,28 (dd, J = 7,4, 1,4 Hz, 1H), 6,99 (dd, J = 8,5, 1,7 Hz, 1H) , 6,72 (d, J = 8,4 Hz, 1H) , 6,57 (t, J = 7,3 Hz, 1H) , 5.99 (s, 1H) , 5,75 (s, 1H) , 4,98 (s, 1H) , 1,71 (s, 3H) , 1,45-1,42 (m, 6H) . [a]D: #332,34° (c 2,0, CHC13) .
Preparação alternativa do Exemplo 33:
Uma mistura de 4-bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 3] (50,5 g, 132 mmol), 5-cloro-2-(S)-(2-metil-3 -(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-pirido[1,2-c]pirimidina-1,3(2H)-diona [Intermediário 35] (60,1 g, 146 mmol) e
Cs2C03 (86 g, 265 mmol) em THF (34 2 ml) e água (85 ml) foi borbulhada com azoto durante 5 min, depois foi tratada com aduto de PdCl2(dppf) DCM (11,9 g, 14,57 mmol). 0 borbulhamento com azoto continuou durante mais 5 min, depois a mistura foi aquecida a 62 °C sob azoto durante 20 h. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente, MeOH (300 ml) foi adicionado com agitação seguindo 15 min mais tarde pela adição de água (2 1) para fornecer uma goma de cor castanha oxidada. 0 sobrenadante foi removido, o resíduo gomoso foi lavado duas vezes com água e depois colocado em suspensão em EtOAc (2 1) com agitação durante uma h. A mistura foi filtrada, o filtrado foi concentrado até cerca de 1 a 1,5 1 e tratado com heptano (3 1) . A mistura foi agitada durante dois dias, o precipitado foi recolhido por filtração, lavado com heptano e seco sob vácuo para fornecer um sólido amarelo (104 g). 0 sólido foi dissolvido em THF, absorvido em CELITE®, seco sob vácuo, colocado num tampão de gel de sílica e eluído com heptano/EtOAc (10:90) para fornecer um óleo amarelo alaranjado (74,87 g) . 0 material foi submetido à
cromatografia de coluna em gel de sílica (3 kg) , eluindo com EtOAc-hexanos (gradiente de 40-90 °), para fornecer 3-cloro-4- (3- (S)-(5-cloro-1,3-dioxo-IH-pirido[1,2-c] pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (mistura de dois atropisómeros) como uma espuma amarela (44 g, 51 0 de rendimento) . Para remover o paládio residual, o resíduo foi dissolvido em EtOAc (ac· redor de 300 ml) e agitado com uma solução aquosa de N-acetil-L-cisteína a 10 0 (500 ml) durante a noite. A camada orgânica foi tratada novamente com uma solução de N-acetil-L-cisteína a 10 0 (500 ml) durante seis h, depois foi lavada sequencialmente com 5 0 NH40H (duas vezes) e salmoura, seca e concentrada em uma espuma amarela (43 g) . 0 material foi separado por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® AS-H (2 x 50 cm, 10 μιτι) ; Fase Móvel: C02-Me0H (55:45) em 140 ml/min, 40 °C, 100 bar; preparação da amostra: 56 mg/ml em
MeOH-DCM (1:1); injeção: 3,33 ml. 0 primeiro pico que elui a partir da coluna forneceu 3-cloro-4-(R)-(3-(S)-(5-cloro- 1,3-dioxo-lH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida [Exemplo 33] como um sólido amarelo (18,3 g, 24 0 de rendimento). A configuração absoluta do Exemplo 33 foi confirmada pela análise de raios X de cristal único de cristais preparados pela dissolução do composto com excesso de metanol e evaporação lenta do solvente à temperatura ambiente para fornecer um solvato de dimetanol (forma cristalina M2-1). Dimensões unitárias da célula: a = 7,41 Ã, b = 9,74 Á, c = 44,55 Ã, a = 90,00 , β = 90,00 , γ = 90,00 ; Grupo espacial: Pg2121; Moléculas do Exemplo 33/unidade assimétrica: 1; Volume/Número de moléculas na célula unitária = 3214 Ã3; Densidade (calculada) = 1,346 g/cm3. As coordenadas atómicas fracionárias em 173 K são dadas no Quadro 7, e uma descrição da estrutura é dada na Figura 6.
Exemplo 34 3-Cloro-4-(3-(5-fluoro-1,3-dioxo-lH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros)
(34)
Uma mistura de 4-bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 3] (0,076 g, 0,200 mmol), 5-fluoro-2-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-pirido[1,2-c]pirimidina-1,3(2H)-diona [Intermediário 37] (0,072 g, 0,182 mmol) e
Cs2C03 (0,118 g, 0,363 mmol) em THF (3 ml) e água (0,75 ml) foi borbulhada com azoto durante 2 min, depois foi tratada com aduto de PdCl2(dppf) DCM (7,4 mg, 9,0 9 pmol) . 0 borbulhamento com azoto continuou durante 30 seg e o recipiente de reação foi vedado. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite, depois foi diluída com EtOAc e lavada sequencialmente com água e salmoura. As camadas aquosas combinadas foram extraídas com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos, para fornecer 3-cloro-4-(3-(5-fluoro-l,3-dioxo-lH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) como um solido amarelo (0,049 g, 43 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 571 (Μ # H)#. ]Ή RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,52-11,48 (m, 1H), 8,27 (s. 1., 1H), 8,15-8,09 (m, 2H) , 7,84 (s, 1H) , 7,59 (s. 1., 1H) , 7,56-7,46 (m, 2H) , 7,30-7,26 (m, 1H), 7,03-6,97 (m, 1H), 6,72 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,60-6,51 (m, 2H), 5,85 (s, 1H), 4,98 (s, 1H), 1,71 (s, 3H), 1,46-1,42 (m, 6H).
Exemplos 35 e 36 3-Cloro-4-(R)-(3 -(5-fluoro-1,3-dioxo-lH- pirido[l,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil) - 7 -(2 -hidroxipropan-2 -i1) -9H-carbazol-1-carboxamida (atropisómeros individuais)
(35, 36)
Uma amostra de 3-cloro-4-(3-(5-fluoro-l,3-dioxo-lH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)- 7 -(2 -hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) [Exemplo 34] (690 mg) foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® IB (2 x 25 cm, 5 pm); Fase Móvel: C02-Me0H (63:37) em 50 ml/min, 45 °C, 100 bar. 0 primeiro pico que elui a partir da coluna forneceu um atropisómero individual de 3-cloro-4-(R)-(3-(5-fluoro-l,3-dioxo-lH-pirido[l,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)- 7 -(2 -hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Exemplo 35]. Espectro de massa m/z 571 (Μ # H)#. ]Ή RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,50 (s, 1H) , 8,27 (s. 1., 1H) , 8,14 (s, 1H) , 8,11 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,84 (d, J - 1,1 Hz, 1H), 7,59 (s. 1., 1H) , 7,56-7,51 (m, 1H) , 7,49-7,46 (m, 1H) , 7,29 (dd, J = 7,5, 1,3 Hz, 1H), 7,23 (dd, J = 10,3, 7,5 Hz, 1H), 7,01 (dd, J = 8,4, 1,5 Hz, 1H) , 6,65 (d, J = 8,6 Hz, 1H) , 6,54 (td, J = 7,4, 5,2 Hz, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,98 (s, 1H), 1,71 (s, 3H), 1,48-1,41 (m, 6H).
0 terceiro pico que elui a partir da coluna forneceu o outro atropisómero individual de 3-cloro-4-(R)-(3-(5-fluoro-1,3-dioxo-IH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il) - 2 -metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida [Exemplo 36]. Espectro de massa m/z 553 (Μ # H - H2O) ^ . -lH RMN (400 MHz , DMSO-dg) δ 11,49 (s, 1H) , 8,27 (s . 1., 1H) , 8,14 (s, 1H) , 8,10 (d, J = 7,7 Hz, 1H) , 7,83 (s, 1H) , 7,59 (s. 1., 1H) , 7,56-7,45 (m, 2H) , 7,30-7,20 (m, 2H) , 6,99 (d, J = 8,6 Hz, 1H) , 6,72 (d, J = 8,6 Hz, 1H) , 6,56 (td, 1J = 7,5, 5,3 Hz, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,98 (s, 1H), 1,71 (s, 3H), 1,45-1,42 (m, 6H).
Exemplo 37 3-Cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4-(3-(5-metoxi- 1,3-dioxo-lH-pirido[1,2-c] pirimidin-2(3H)-il)-2 -
metilfenil)-9H-carbazol-l-carboxamida (mistura de quatro atropisõmeros) (37)
Uma mistura de 4-bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida [Intermediário 3] (0,051 g, 0,135 mmol), 5-metoxi-2 -(2-metil-3 -(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil) -lH-pirido[1,2-c]pirimidina-1,3(2H)-diona [Intermediário 32] (0,050 g, 0,122 mmol) e
Cs2C03 (0,080 g, 0,245 mmol) em THF (2 ml) e água (0,5 ml) foi borbulhada com azoto durante 2 min, depois foi tratada com aduto de PdCl2(dppf) DCM (5,0 mg, 6,12 pmol) . 0 borbulhamento com azoto continuou durante 30 seg e o recipiente de reação foi vedado. A mistura foi aquecida a 60 °C durante a noite. A mistura arrefecida foi diluída com DCM e MeOH, seca e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos, para fornecer 3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4 -(3 -(5-metoxi-1,3-dioxo-1H-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de quatro atropisõmeros) como um sólido amarelo (32,8 mg, 44 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 583 (M # H)#. iH RMN (400 MHz, DMSO - dg) δ 11,51-11,47 (tti, 1H), 8,27 (s. 1., 1H) , 8,14 (d, J = 1,5 Hz, 1H) , 7,93 (d, J = 7,5 Hz, 1H) , 7,83 (s, 1H) , 7,59 (s. 1., 1H) , 7,55-7,45 (m, 3H) , 7,30-7,25 (m, 1H), 7,03-6,97 (m, 1H), 6,71 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,56 (q, J = 7,6 Hz, 1H), 5,90 (s, 1H), 4,98 (s, 1H), 3,91 (s, 3H), 1,69 (s, 3H), 1,45-1,42 (m, 6H).
Exemplos 38 e 39 3-Cloro-4-(R)-(3 -(5,7-dioxo-5H- tiazolo[3,2-c]pirimidin-6(7H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (atropisómeros individuais)
(38, 39)
Uma mistura de 4-bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida [Intermediário 3] (0,139 g, 0,364 mmol), 6 -(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)fenil)-5H-tiazolo[3,2-c]pirimidina-5,7(6H)-diona [Intermediário 36] (0,127 g, 0,331 mmol) e
Cs2C03 (0,215 g, 0,661 mmol) em THF (3,0 ml) e água (0,75 ml) foi borbulhada com árgon durante 3 min, depois foi tratada com aduto de PdCl2(dppf) DCM (0,013 g, 0,017 mmol). A mistura foi borbulhada com árgon durante mais 30 seg e o recipiente de reação foi vedado. A mistura foi agitada a 50 °C durante 5 h. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc e lavada sequencialmente com água e salmoura. As camadas aquosas combinadas foram extraídas com EtOAc, e as camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (80 g) , eluindo com EtOAc-hexanos (90 °, depois 100 °), para fornecer 3-cloro-4-(3-(5,7-dioxo-5H-tiazolo[3,2- c]pirimidin-6(7H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) como um sólido ocre (62,7 mg, 32 0 de rendimento). Este material foi separado por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® AD-H (3 x 25 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-Me0H (60:40) em 85 ml/min; preparação da amostra: 9 mg/ml em MeOH-DMSO; injeção: 2 ml. 0 terceiro pico eluído da coluna forneceu um atropisómero individual de 3-cloro-4-(R)-(3-(5,7-dioxo-5H-tiazolo[3,2-c]pirimidin-6(7H)-il)-2 -metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida [Exemplo 38] . Espectro de massa m/z 559 (M # H)#. RMN (400 MHz, DMS0-d6) δ 11,50 (s, 1H), 8,27 (s. 1., 1H), 8,14 (s, 1H), 7,83 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 7,69 (dd, J = 4,6, 0,7 Hz, 1H), 7,59 (s. 1 . , 1H), 7,54-7,49 (m, 1H),
7,47-7,43 (m, 1H), 7,26 (dd, J = 7,4, 1,2 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 6,99 (dd, J = 8,6, 1,5 Hz, 1H), 6,62 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,28 (s, 1H), 4,98 (s, 1H), 1, /0 (s, 3H), 1,45-1,42 (m, 6H). 0 quarto pico eluído da coluna forneceu o outro atropisómero individual de 3-cloro-4-(R)-(3-(5,7-dioxo-5H-tiazolo[3,2-c]pirimidin-6(7H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Exemplo 39]. Espectro de massa m/z 541 (Μ # H - H20)#, 1H RMN (400 MHz, DMSO-dg) δ 11,49 (s, 1H) , 8,27 (s. 1., 1H) , 8,13 (s, 1H) , 7,83 (d, J = 0,9 Hz, 1H) , 7,73-7,65 (m, 2H) , 7,59 (s. 1., 1H) , 7,54-7,43 (m, 2H) , 7,26 (dd, J = 7,5, 1,3 Hz, 1H) , 7,05 (d, J = 4,6 Hz, 1H) , 6,98 (dd, J = 8,5, 1,7 Hz, 1H) , 6,71 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,28 (s, 1H), 1,70 (s, 3H), 1,43 (d, J = 2,9 Hz, 6H).
Exemplos 40 e 41 3-Fluoro-4-(R)-(3-(5-fluoro-l,3-dioxo-lH- pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)- 7 -(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (atropisómeros individuais)
(40, 41)
Preparação 40A: 3-Fluoro-4-(R)-(3-(5-fluoro-l,3-dioxo-lH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)- 7 -(2 -hidroxipropan-2-il)-9H~carbazol-1-carboxamida (mistura de dois atropisómeros)
Uma mistura de 4-bromo-3-fluoro-7-(2-hidroxipropan-2- il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 27] (0,200 g, 0,548 mmol), 5-fluoro-2-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-pirido[1,2-c]pirimidina-1,3(2H)-diona [Intermediário 37] (0,260 g, 0,657 mmol) e
Cs2C03 (0,357 g, 1,10 mmol) em dioxano (4 ml) e água (1 ml) foi borbulhada com azoto durante 2 min, depois foi tratada com aduto de PdCl2(dppf) DCM (0,022 g, 0,027 mmol) . 0 borbulhamento com azoto continuou durante 30 seg e o recipiente de reação foi vedado. A mistura foi aquecida a 60 °C durante a noite. A mistura arrefecida foi diluída com EtOAc e lavada sequencialmente com água e salmoura. As camadas aquosas combinadas foram extraídas com DCM, e as camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos, para fornecer 3-fluoro-4-(3 -(5-fluoro-l,3-dioxo-lH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) como um sólido amarelo (0,194 g, 63 0 de rendimento). Exemplos 40 e 41:
Uma amostra de 3-fluoro-4-(3-(5-fluoro-l,3-dioxo-lH-pirido[l,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)- 7 -(2 - hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (mistura de quatro atropisõmeros) foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® OD-H (5 x 25 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-IPA (55:45) em 120 ml/min, 50 °C, 100 bar; preparação da amostra: 6,8 mg/ml em MeOH-CHCl3 (1:1); injeção: 1 ml. 0 primeiro pico que elui a partir da coluna forneceu um atropisómero individual de 3-fluoro-4-(R)-(3-(5-fluoro-l,3-dioxo-lH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)- 7 -(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Exemplo 40] . Espectro de massa m/z 555 (M # H)#. 1H RMN (400 MHz, DMS0-ds) δ 11,40 (s, 1H) , 8,21 (s. 1., 1H) , 8,12 (d, J = 7,5 Hz, 1H) , 7,95 (d, J = 10,8 Hz, 1H) , 7,84 (d, J = 1,1
Hz, 1H), 7,60 (s. 1-, 1H), 7,56-7,46 (m, 2H), 7,41 (dd, J = 7.4, 1,4 Hz, 1H), 7,23 (dd, J = 10,2, 7,4 Hz, 1H), 7,02 (dd, J = 8,6, 1,5 Hz, 1H), 6,88-6,82 (m, 1H), 6,56 (td, J = 7.4, 5,2 Hz, 1H), 5,86 (s, 1H), 4,98 (s, 1H), 1,77 (s, 3H), 1,47-1,42 (m, 6H). 0 terceiro pico que elui a partir da coluna forneceu o outro atropisómero individual de 3-fluoro-4-(R)-(3-(5-fluoro-1,3-dioxo-IH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)- 2 -metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida [Exemplo 41]. Espectro de massa m/z 537 (Μ # H - H20)#. ^ RMN (400 MHz, DMS0-d6) δ 11,41 (s, 1H) , 8,29-8,17 (m, 1H), 8,13 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 7,85 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 7,65-7,57 (m, 1H), 7,57-7,47 (m, 2H), 7,43 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 7,28-7,21 (m, 1H), 7,02 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 6,90-6,83 (m, 1H), 6,64-6,53 (m, 1H), 5,87 (s, 1H), 4,99 (s, 1H), 1,78 (s, 3H), 1,48-1,44 (m, 6H) .
Preparação alternativa de 3-Fluoro-4-(R)-(3-(5-fluoro-l,3-dioxo-lH-pirido[1,2-c] pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (atropisómero individual) [Exemplo 41] :
Uma mistura de 4-bromo-3-fluoro-7-(2-hidroxipropan-2- il)-9H-carbazol-l-carboxamida [Intermediário 27] (6,00 g, 16,4 mmol), 5-fluoro-2-(2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil) -lH-pirido[1,2-c]pirimidina-1,3(2H)-diona (enantiomero individual) [Intermediário 38] (7,81 g, 19,7 mmol), K3P04 aquoso a 2 M (24,6 ml, 49,3 mmol) , e THF (70 ml) foi submetida a três ciclos de evacuação-preenchimento com azoto. A mistura foi tratada com cloreto de 1,1’-bis(di-tere-butilfosfino)ferroceno paládio(II) (0,535 g, 0,821 mmol), e submetida a mais dois ciclos de evacuação-preenchimento com azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi diluída com EtOAc, lavada sequencialmente com água e salmoura, e seca. A camada aquosa foi filtrada e o sólido recolhido foi adicionado à camada orgânica. A camada orgânica foi concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexanos (sequencialmente 50 %, 62 %, 75 %, 85 % e 100 %), para fornecer 3-fluoro-4-(3-(5-fluoro-1,3-dioxo-lH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)- 7 -(2 -hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (mistura de dois atropisómeros) como um sólido amarelo (8,55 g, 94 % de rendimento). Uma amostra deste material (combinado com outros lotes do mesmo material) foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALPAK® IC (3 x 25 cm, 5 pm) ; Fase Móvel: C02-MeOH (50:50) em 165 ml/min, 4 5 °C, 100 bar; preparação da amostra: 55 mg/ml em MeOH-THF-DMSO (2:1:1); injeção: 3 ml. 0 primeiro pico que elui a partir da coluna forneceu um atropisómero individual de 3-fluoro-4-(R)-(3-(5-fluoro-1,3-dioxo-lH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)- 7 -(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida [Exemplo 41] .
Exemplo 42 3-Cloro-4-(2-cloro-3-(l-metil-2,4-dioxo-l,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros)
(42)
Uma mistura de 4-bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida [Intermediário 3] (36 mg, 0,094 mmol), (Z)-4 -((2-cloro-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)fenil)imino)-1-metil-lH- benzo[d][1,3]oxazin-2(4H)-ona [Intermediário 40] (42,8 mg, 0,104 mmol) , EtOH (1 ml), tolueno (1 ml) e Na2C03 aquoso a 2 M (0,16 ml, 0,311 mmol) foi borbulhada com azoto durante 5 min. A mistura foi tratada com tetraquis(trifenilfosfina)paládio (8,7 mg, 7,55 pmol), e o recipiente de reação foi vedado e aquecido a 90 °C durante 16 h. A mistura arrefecida foi dividida entre EtOAc e água, e a fase orgânica foi seca e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (4 g), eluindo com MeOH-DCM contendo TEA a 1 0 (gradiente de 0 a 5o). 0 material resultante foi ainda purificado utilizando HPLC preparativa (PHENOMENEX® Axia Ci8 30 x 100 mm), eluindo com MeCN-água contendo TFA a 0,1 0 (gradiente de 20-100 °, 30 ml/min). As frações apropriadas foram tratadas com NaHC03 aquoso saturado e concentradas. 0 resíduo foi dividido entre EtOAc e água, e a fase orgânica foi lavada com salmoura, seca e concentrada para fornecer 3-cloro-4-(2-cloro-3-(l-metil-2,4-dioxo-l,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) como um sólido branco (2,5 mg, 4 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 569 (M # H - H20)#. LH RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 8,38-8,23 (m, 1H) , 7,73 (d, J = 1,5 Hz, 2H) , 7,70-7,66 (πΐ, 1Η), 7,64 (s, 1H), 7,60-7,55 (πΐ, 1H) , 7,51-7,45 (m, 1H), 7,37-7,28 (m, 2H), 7,26-7,20 (m, 1H), 7,10-6,78 (m, 1H) , 3,70 (s, 2H) , 3,67 (s, 1H) , 1,65 (s, 4H), 1,64 (s, 2H).
Exemplo 43 3-Cloro-4-(R)-(2-cloro-3-(l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il) fenil)-7-(2-hidroxipropan-2 - il)-9H-carbazol-l-carboxamide (atropisomero individual)
(43)
Uma amostra de 3-cloro-4-(2-cloro-3-(l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil) -7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) [Exemplo 42] (110 mg) foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: Lux Cel-4 (3 x 25 cm, 5 μπι) ; Fase Móvel: C02-Me0H (60:40) em 85 ml/min; preparação da amostra: 6,7 mg/ml em MeOH-acetona (9:1); injeção: 3,0 ml. 0 quarto pico que elui a partir da coluna forneceu um atropisómero individual de 3-cloro-4-(R)-(2-cloro-3-(l-metil-2,4-dioxo- 1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil)- 7 -(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida como um sólido amarelo (20 mg, 18 0 de rendimento). Espectro de massa m/z 569 (M # H -H20)#. χΗ RMN (400 MHz, clorof órmio-d) δ 10,44 (s, 1H) , 8,41-8,17 (m, 1H) , 7,78-7,72 (m, 2H) , 7,68 (s, 1H) , 7,65- 7,60 (m, 1H), 7,59-7,54 (m, 1H), 7,46 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,34-7,28 (m, 2H) , 7,25 (s, 1H) , 7,01 (d, J = 8,6 Hz, 1H) , 3,70 (s, 3H), 1,64 (s, 6H).
Exemplo 44 3-Cloro-4-(2-cloro-3-(8-fluoro-l-metil-2,4- dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil) -7-(2- hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros)
(44)
Uma mistura de 4-bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida [Intermediário 3] (30 mg, 0,079 mmol), 3 -(2-cloro-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2 - dioxaborolan-2-il)fenil)-8-fluoro-l-metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 41] (40,6 mg, 0,094 mmol),
EtOH (1 ml), tolueno (1 ml) e Na2C03 aquoso a 2 M (0,13 ml, 0,26 mmol) foi borbulhada com azoto durante 5 min. A mistura foi tratada com tetraquis(trifenilfosfina)paládio (7,3 mg, 6,29 μιτιοί) , e o recipiente de reação foi vedado e aquecido a 90 °C durante 16 h. A mistura arrefecida foi dividida entre EtOAc e água, e a fase orgânica foi seca e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica (12 g) , eluindo com MeOH-DCM contendo TEA a 1 % (gradiente de 0 a 5 %) . 0 material resultante foi ainda purificado utilizando HPLC preparativa (PHENOMENEX® Axia C18 3 0 x 100 mm) , eluindo com MeCN-ãgua contendo TEA a 0,1 % (gradiente de 20-100 %, 10 min, 30 ml/min). As frações apropriadas foram tratadas com NaHC03 aquoso saturado e concentradas. 0 resíduo foi dividido entre EtOAc e água, e a fase orgânica foi lavada com salmoura, seca e concentrada para fornecer 3-cloro-4-(2-cloro-3-(8 -fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) como um sólido branco (6 mg, 11 % de rendimento). Espectro de massa m/z 587 (Μ # Η - Η20)#. LH RMN (4 00 MHz, clorofórmio-d) □ δ 10,46 (s , 1H), 7,74 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,66-7,61 (rn, 1H) , 7,59-7,54 (m, 1H) , 7,51-7,46 (m, 2H) , 7,27-7,17 (m, 2H), 7,06-6,88 (m, 1H), 3,88 (dd, J = 11,6, 8,0 Hz, 3H),
1,64 (s, 6H) , l9F RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ -121,34, Exemplo 45 3-Cloro-4-(R)-(2-cloro-3-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamide (atropisomero individual) (45)
Uma amostra de 3-cloro-4-(2-cloro-3-(l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil) -7-(2 -hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) [Exemplo 44] (100 mg) foi separada por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: Lux Cel-4 (3 x 25 cm, 5 pm); Fase Móvel: C02-Me0H (60:40) em 85 ml/min, 50 °C, 100 bar; preparação da amostra: 6,7 mg/ml em MeOH-acetona (1:1); injeção: 3,0 ml. 0 quarto pico que elui a partir da coluna forneceu um atropisomero individual de 3-cloro-4-(R)-(2-cloro-3-(1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil) -7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamide como urn sólido amarelo (9,3 mg). Espectro de massa m/z 569 (M # H -H20)#. χΗ RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 10,45 (s, 1H), 8,11 id, J = 7,3 Hz, 1H) , 7,73 (s, 1H), 7,72 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 7,67-7,61 (πΐ, 1H), 7,56 (dd, J = 7,9, 1,8 Hz, 1H), 7,54-7,52 (m, 1H), 7,51-7,42 (m, 2H), 7,26-7,19 im, 2H), 7,00 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 3,90 (d, J = 8,1 Hz, 3H) , 1,64 (s, 6H) . i9F RMN (376 MHz, cloroformio-d) δ -121,33.
Exemplo 46 4-(2-Cloro-3-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-l,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil)-3-fluoro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros)
(46)
Uma mistura de 4-bromo-3-fluoro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 27] (40 mg, 0,110 mmol), 3 -(2-cloro-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)fenil)-8-fluoro-l-metilquinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 41] (47 mg, 0,110 mmol),
Cs2C03 (107 mg, 0,329 mmol), dioxano (8 ml) e água (2 ml) foi borbulhada com azoto durante 10 min. A mistura foi tratada com aduto de PdCl2(dppf) DCM (7,2 mg, 8,76 pmol) , e aquecida a 60 °C durante a noite. A mistura arrefecida foi dividida entre EtOAc e água. A fase orgânica foi seca e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com MeOH-DCM (gradiente de 0 a 5 °), para fornecer 4-(2-cloro-3-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil)-3 -fluoro-7 -(2 -hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-i-carboxamida (mistura de quatro atropisómeros) como um sólido branco (20 mg, 31 0 de rendimento) . Espectro de massa m/z 569 (M # H - H20)#. 1H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 10,46 (s, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,68 (s, 1H) , 7,66-7,61 (m, 1H) , 7,59-7,54 (m, 1H) , 7,51-7,46 (m, 2H) , 7,27-7,17 (m, 2H) , 7,06-6,88 (m, 1H) , 3,88 (dd, J = 11,6, 8,0 Hz, 3H) , 1,64 (s, 6H). 19 F RMN (400 MH z, clorofórmio-d) δ -121,34, -127,34.
Exemplo 47 3-Cloro-4-(R)-(2-cloro-3-(8-fluoro-2,4-dioxo- 1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil)- 7 -(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (atropisómero individual)
(47)
Uma mistura de 4-bromo-3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida [Intermediário 3] (103 mg, 0,269 mmol) , 3-(2-cloro-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2 - dioxaborolan-2-il)fenil)-8-fluoroquinazolina-2,4(1H,3H)-diona [Intermediário 42] (140 mg, 0,336 mmol) , THF (5 ml), K3PO4 aquoso a 2 M (0,504 ml, 1,01 mmol) foi borbulhada com azoto durante 15 min. A mistura foi tratada com cloreto de 1,1'-bis(di-terc-butilfosfino)ferroceno paládio(II) (17,5 mg, 0,027 mmol) e foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi concentrada, e o resíduo foi dividido entre EtOAc e água. A fase orgânica foi seca e concentrada. O resíduo foi purificado bi HPLC preparativa. As frações apropriadas foram tratadas com NaHC03 aquoso saturado e concentradas. 0 resíduo aquoso foi extraído com EtOAc. A fase orgânica foi lavada sequencialmente com água e salmoura, e seca e concentrada para fornecer 3-cloro-4-(2-cloro-3-(8-fluoro-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (mistura de quatro atropisõmeros) (30 mg, 15 % de rendimento). Este material foi separado por cromatografia de fluido supercrítico quiral como se segue: coluna: CHIRALCEL® OJ-H (3 x 25 cm, 5 pm); Fase Móvel: C02-MeOH-MeCN (65:17,5:17,5) em 85 ml/min; preparação da amostra: 6,8 mg/ml em MeOH-CHCl3 (1:1); injeção: 3,0 ml. 0 primeiro pico que elui a partir da coluna forneceu um atropisómero individual de 3-cloro-4-(R)-(2-cloro-3- (8-fluoro-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil)- 7 -(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida. Espectro de massa m/z 573 (M # H - H20)#. XH RMN (500 MHz, DMS0-ds) δ 11,63-11,48 (m, 1H), 8,39-8,25 (m, 1H), 8,17-8,12 (m, 1H), 7,99-7,92 (m, 1H), /,88-7,85 (m, 1H), 7,85-7,81 (m, 1H), 7,81-7,76 (m, 1H), 7,76-7,70 (m, 1H), 7,70-7,62 (m, 2H), 7,57-7,46 (m, 1H) , 7,32-7,20 (m, 1H) , 7,13-6,99 (m, 1H) , 6,77-6,63 (m, 1H), 5,10-4,98 (m, 1H), 1,47-1,45 (m, 6H) . 19F RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ -129,63.
Os compostos no Quadro 10 foram preparados por procedimentos análogos àqueles descritos acima, utilizando os Intermediários descritos ou preparados por métodos semelhantes àqueles descritos.
Quadro 10
Exemplo Comparativo 75 7-(2-Hidroxipropan-2-il)-4-(2-metil-3-(4-oxoquinazolin-3(4H)-il)fenil)-9H-carbazol-1-carboxamida
(75) 0 Exemplo Comparativo 75 foi divulgado no documento de patente U.S. N,° 8.084.620 como Exemplo 76-15 e foi preparado de acordo com o procedimento nele descrito. Exemplo comparativo 76 7-(2-Hidroxipropan-2-il)-3-metil-4-(2-metil-3-(4-oxoquinazolin-3(4H)-il)fenil)-9H-pirido[3,4-b]indol-1-carboxamida
(76) 0 Exemplo Comparativo 76 foi divulgado no documento WO 2011/159857 como Exemplo 38 e foi preparado de acordo com o procedimento nele descrito.
ENSAIOS BIOLÓGICOS
As propriedades farmacológicas dos compostos da presente invenção podem ser confirmadas por vários ensaios biológicos. Os ensaios biológicos exemplificados, que se seguem, foram realizados com os compostos da invenção. Ensaio da enzima Btk humana recombinante A placas de 384 poços de fundo em V foram adicionados os compostos de teste, Btk recombinante humana (1 nM,
Invitrogen Corporation), péptido com fluoresceina (1,5 μΜ), ATP (20 μΜ) , e tampão de ensaio (HEPES a 2 0 mM pH 7,4, MgCl2 a 10 mM, tensioativo Brij 35 a 0,015 0 e DTT a 4 mM em DMSO a 1,6 °), com urn volume final de 30 μΐ. Após a incubação à temperatura ambiente durante 60 min, a reação foi concluída pela adição de 4 5 μΐ de EDTA a 35 mM a cada amostra. A mistura de reação foi analisada no Caliper LABCHIP® 3000 (Caliper, Hopkinton, MA) através da separação eletroforética do substrato fluorescente e do produto fosforilado. Os dados de inibição foram calculados mediante a comparação sem reações de controlo de enzima para 100 0 de inibição e sem controlos de inibidor para 0 0 de inibição. As curvas de resposta à dose foram geradas para determinar a concentração necessária para inibir 50 0 da atividade de quinase (CI50) . Os compostos foram dissolvidos a 10 mM em DMSO e avaliados em onze concentrações.
Ensaio de FLIPR em Ramos Células Ramos RA1 B (ATCC CRL-1596) a uma densidade de 2 x 10fa células/ml em meio RPMI sem vermelho de fenol (Invitrogen 11835-030) e HEPES a 50 mM (Invitrogen 15630-130) contendo BSA a 0,1 0 (Sigma A8577) foram adicionadas a uma metade do volume de tampão de carga de cálcio (kit de carga BD para ensaios sensíveis a probenecid, #640177) e incubadas à temperatura ambiente no escuro durante 1 hora. As células carregadas de corante foram sedimentadas (Beckmann GS-CKR, 1200 rpm, temperatura ambiente, 5 min) e colocadas novamente em suspensão à temperatura ambiente em meio RPMI sem vermelho de fenol com HEPES a 50 mM e FBS a 10 0 até uma densidade de 1 x 106 células/ml. Alíquotas de 150 μΐ (150.000 células,/poço) foram colocadas em placas de ensaio revestidas com poli-D-lisina de 96 reservatórios (BD 35 4640) e brevemente centrifugadas (Beckmann GS-CKR 800 rpm, 5 min, sem travão) . Em seguida, 50 μΐ de diluições de composto em DMSO 0,4 °/RPMI sem vermelho de fenol + HEPES a 50 mM + FBS a 10 0 foram adicionados aos poços e a placa foi incubada à temperatura ambiente no escuro durante 1 hora. A placa de ensaio foi brevemente centrifugada como acima antes de se medirem os níveis de cálcio.
Utilizando o FLIPR1 (Molecular Devices), as células foram estimuladas pela adição de anticorpo de cabra anti IgM humana (Invitrogen AHI0601) a 2,5 pg/ml. Alterações nas concentrações intracelulares de cálcio foram medidas durante 180 segundos e a percentagem de inibição foi determinada em relação aos níveis de cálcio máximos na presença de estimulação isoladamente.
Ensaio de tirosina quinase i3ak2
Foi observado que os compostos com atividade contra a tirosina quinase Jak2 provocam trombocitopenia, anemia e neutropenia em pacientes humanos nos ensaios clínicos (veja-se, por exemplo, Pardanani A., Leukemia, 26:1449-1451 (2012)). A sinalização de Jak2 ocorre através de EPO e TPO, que controlam a proliferação de eritrócitos e plaquetas, respetivamente. Assim, a inibição da tirosina quinase Jak2 pode potencialmente levar a efeitos secundários na clínica. Os inibidores de Btk com uma seletividade melhorada em relação à tirosina quinase Jak2 são desejados a fim de minimizar efeitos secundários inespecíficos relacionados com a inibição da tirosina quinase Jak2.
Os ensaios foram executados em placas de 384 poços de fundo em V. 0 volume final do ensaio foi de 3 0 μΐ preparados a partir de adições de 15 μΐ de enzima e substratos (péptido com fluoresceína e ATP) e compostos de teste em tampão de ensaio (HEPES a 100 mM pH 7,4, MgCl2 a 10 mM, beta-glicerolfosfato a 25 mM, tensioativo Brij 35 a 0,015 % e DTT a 4 mM). A reação foi iniciada pela combinação de tirosina quinase Jak2 com substratos e compostos de teste. A mistura de reação foi incubada à temperatura ambiente durante 60 minutos e foi interrompida pela adição de 4 5 μΐ de EDTA a 35 mM a cada amostra. A mistura de reação foi analisada sobre o Caliper LABCHIP® 3000 através da separação eletroforética do substrato fluorescente e do produto fosforilado. Os dados de inibição foram calculados pela comparação sem as reações de controlo de enzima para 100 0 de inibição e reações apenas com veículo para 0 0 de inibição. A concentração final de reagentes nos ensaios é ATP, 30 μΜ; péptido fluorescente Jak2, 1,5 μΜ; Jak2, 1 nM e DMSO, 1,6 °. As curvas de resposta à dose foram geradas para determinar a concentração necessária que inibe 50 0 da atividade de quinase (CI5o) · Os compostos foram dissolvidos a 10 mM em DMSO e avaliados em onze concentrações, cada uma em duplicado. Os valores de CI50 foram derivados a partir da análise de regressão não linear.
Ensaio de sangue total da expressão de CD69 estimulada por BCR sobre as células B A eficácia dos compostos inibidores da Btk na supressão da expressão de CD69 nas células B humanas nos ensaios de sangue total é útil para prever as doses eficazes na clínica e minimizar os efeitos secundários potenciais. Espera-se que os compostos inibidores da Btk tendo maior atividade no ensaio de expressão de CD6 9 no sangue total necessitem doses mais baixas do que os compostos tendo atividade mais baixa, e espera-se que provoquem menos efeitos secundários indesejáveis. (Uetrecht, Chem, Res. Toxicol., 12:387-395 (1999);
Nakayama, Drug Metabolism and Disposition, 37(9):1970-1977 (2009); Sakatis, Chem. Res. Toxicol. (2012)).
Para medir as células B estimuladas com BCR, o sangue total humano ACD-A foi tratado com várias concentrações de composto de teste e estimulado com 30 pg/ml de fragmento F(ab')2 de cabra anti-IgM humana AffiniPure (Jackson 109- 006-1299 - sem endotoxinas) e 10 ng/ml de IL-4 humana (PeproTech 200-04) durante 18 h a 37 °C com agitação. As células foram bloqueadas com gama globulina humana (Jackson 009-000-002) e coradas com anticorpo de ratinho anto-CD20 humano conjugado com FITC (BD Pharmingen 555622) e anticorpo monoclonal de ratinho anti-CD69 humano conjugado com PE (BD Pharmingen 555531), submetidas a lise e fixadas, depois lavadas. A quantidade de expressão de CD69 foi quantificada pela intensidade de fluorescência média (MFI) após sincronização na população de células B positivas a CD20, conforme medido pela análise FACS.
No ensaio em sangue total da expressão de CD69 estimulada por BCR nas células B, a eficácia aumentada de um composto inibidor da Btk é indicada por um valor CI50 de CD69 mais baixo.
Quadro 11
Os compostos da presente invenção, como exemplificados pelos Exemplos de 1 a 74, foram comparados com os Exemplos Comparativos 75 e 76, divulgados no documento de patente U.S. N.° 8.084.620 e WO 2011/159857, respetivamente, e verificou-se que eram vantajosos. Os compostos da presente invenção possuem a vantagem surpreendente da combinação de atividade de inibição da Btk e de seletividade melhorada de quinases da atividade de inibição da Btk em relação à atividade de inibição da Jak2. Como mostrado no Quadro 11, nos testes relatados, os Exemplos 1 a 74 mostram a surpreendente vantagem da combinação da eficácia de atividade de inibição da Btk e melhor seletividade de quinases da atividade de inibição da Btk em relação à atividade de inibição da Jak2, como caracterizado pela relação dos valores de CI50 de Jak2/Btk. A seletividade aumentada para a quinase Btk em relação à quinase JAK2 é indicado por um maior valor para a relação dos valores de CI50 de Jak2/Btk. Os exemplos de 1 a 74 tiveram valores de CI50 da Btk de menos do que 5 nM e relações de valores de
Ciso de Jak2/Btk de 150 e superiores. Ao contrário, os
Exemplos Comparativos 75 e 76 tiveram valores de CI5o da Btk de 2,6 e 6,9 nM e relações de valores de CI50 de
Jak2/Btk de 92 e 29, respetivamente.
Adicionalmente, os compostos da presente invenção, como exemplificados pelos Exemplos de 1 a 74, também possuem potência melhorada no ensaio de expressão de CD69 estimulada por BCR no sangue total, em comparação com o Exemplo Comparativo 75. Como mostrado no Quadro 11, nos testes relatados, os Exemplos de 1 a 74 apresentam a vantagem surpreendente da combinação de eficácia da atividade de inibição da Btk, seletividade melhorada de quinases da atividade de inibição da Btk em relação à atividade de inibição da Jak2 e a potência melhorada no ensaio de expressão de CD6 9 estimulada por BCR no sangue total. Os Exemplos de 1 a 74 tiveram valores de CI50 da Btk inferiores a 5 nM, relações de valores de CI50 de Jak2/Btk de 150 e superiores, e valores de IC50 de CD69 de 260 nM e inferiores. Ao contrário, o Exemplo Comparativo 75 teve um valor de CI50 da Btk de 2,6 nM, uma relação de valor de CI50 de Jak2/'Btk de 92, e um valor de CI50 de CD6 9 de 6 50 nm.
DOCUMENTOS REFERIDOS NA DESCRIÇÃO
Esta lista de documentos referidos pelo autor do presente pedido de patente foi elaborada apenas para informação do leitor. Não é parte integrante do documento de patente europeia. Não obstante o cuidado 11a sua elaboração, o IEP não assume qualquer responsabilidade por eventuais erros ou omissões.
Documentos de patente referidos na descrição • US 8084620 B [0010] [0225] [0226] [0243] [0331] [0353] [0580] [0592] • WO 2011159857 A [0010] [0582] [0592]
Documentos de não patente citados na descrição • LAPLANTE et al. J. Med. Chem. , 2011, vol. 54, 7005-7022 [0027] • WHITE et al. J. Chromatography A, 2005, vol. 1074, 175 - 185 [0030] • CHOU et al. Adv. Enzyme Regul. , 1984, vol. 22, 27-55 [0182] • Remington's Pharmaceutical Sciences. 1985 [0190] • HERAVI, M.M. et al. Tetrahedron, 2012, vol. 68, 9145 [0204] • ISHIYAMA, T. et al. Tetrahedron, 2001, vol. 57, 9813 [0211] • CAO, J. et al. Synthetic Commun., 2009, vol. 39, 205 [0219] • WU, F. et al. J. Org. Chem., 2004, vol. 69, 9307 [0219] • JACOBSEN, M.F. et al. J. Org. Chem. , 2006, vol. 71, 9183 [0219] • HIRSCH, J. et al. J. Org. Chem. , 1986, vol. 51, 2218 [0220] • KAMATA et al. Chem. Pharm. Buli. , 2004, vol. 52, 1071 [0220] • STILL, W.C. et al. J. Org. Chem. , 1978, vol. 43, 2923 [0230] • COSIER, J. et al. J. Appl. Cryst. , 1986, vol. 19, 105 [0231] • APEX2 User Manual. Bruker AXS, Inc, [0231] • STOUT et al. X-Ray Structure Determination: A Practical Guide. MacMillan, 1968 [0231] • PARDANANI, A. Leukemia, 2012, vol. 26, 1449-1451 [0587] • UETRECHT. Chem. Res. Toxicol. , 1999, vol. 12, 387-395 [0589] • NAKAYAMA. Drug Metabolism and Disposition, 2009, vol. 3 7 (9), 1970-1977 [0589] • SAKATIS. Chem. Res. Toxicol., 2012 [0589]

Claims (15)

REIVINDICAÇÕES
1. Um composto de Fórmula(I):
(I) em que: as duas linhas tracejadas representam duas ligações individuais ou duas ligações duplas; Q é
Ri é F, Cl, -CN ou -CH3; R2 é Cl OU -CH3 ; R3 é -C(CH3)2OH OU -CH2CH2OH; Ra é H OU -CH3; cada Rb é independentemente F, Cl, -CH3, e/ou -OCH3; e n é zero, 1, ou 2.
2. 0 composto de acordo com a reivindicação 1 que tem a estrutura de Fórmula (IA):
3-cloro-4-(R)-(3-(S)-(8-fluoro-1-metil (d3) - 2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2- hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (11) na Forma Μ-1 cristalina como caracterizada pelas coordenadas atómicas fracionárias listadas abaixo, calculadas à temperatura ambiente; coordenadas atómicas (xlO4)
3-cloro-4-(R)-(3-(S)-(8-fluoro-1-metil (d3) - 2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida na Forma H-l cristalina como caracterizada pelas coordenadas atómicas fracionarias listadas abaixo, calculadas à temperatura ambiente;coordenadas atómicas (xlO4)
3. 0 composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-2, em que: Q é:
4. 0 composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-3 oue tem a estrutura de Fórmula (IIA-!):
(ΙΪΑ-Γ) em que R3 é -C(CH3)2OH.
5. 0 composto de acordo com a reivindicação 1, que tem a estrutura de Fórmula (IB):
6-fluoro-5-(R)-(3-(S)- (8-fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-2-(S)-(2-hidroxipropan-2-il) - 2,3,4,9 - tetra-hidro - IH-carbazol - 8 -carboxamida na Forma M2 -1 cristalina como caracterizada pelas coordenadas atómicas fracionárias listadas abaixo, calculadas a uma temperatura de cerca de 173 K; coordenadas atómicas (xlO4)
ou 3-cloro-4-(R)-(3-(S)-(5-cloro-1,3-dioxo-IH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (33) na Forma M2-1 cristalina como caracterlzada pelas coordenadas atómicas fracionárias listadas abaixo, calculadas a uma temperatura de cerca de 173 K; coordenadas atómicas (xlO4)
6. 0 composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 e 5, em que: Q é:
7. 0 composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 e 5-6, que tem a estrutura de Fórmula (IIB-1):
em que R3 é -C(CH3)2OH.
8. 0 composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 e 5-6, que tem a estrutura de Fórmula (IIIB-2):
em que R3 é -C(CH3)2OH.
9. 0 composto de acordo com a reivindicação 1, em que o dito composto é selecionado a partir de: 3-cloro-4-(R)-(3-(R)-(8 -fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin- 3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H- carbazol-l-carboxamida (1); 3-cloro-4-(R)-(3-(S)-(8-fluoro-1-me t i1-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2 -metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (2); 3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4-(R)-(2-metil-3- (1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H) -il)fenil)-9H-carbazol-l-carboxamida (3); 3-cloro-4-(R)-(3-(1,8-dimetil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2 -metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (4); 3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4-(R)-(3-(R)- (7-metoxi-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-9H-carbazol-1-carboxamida (5); 3- cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4-(R)-(3-(S)-(7-metoxi-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-9H-carbazol-l-carboxamida (6); 3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4-(R)-(3-(8-metoxi-1-metil-2,4-dioxo- 1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil) -9H-carbazol- 1- carboxamida (7); 3-cloro-4-(R)-(3-(6-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil) -7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (8); 3-cloro- 4-(R)-(3-(7-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan- 2- il)-9H-carbazol-1-carboxamida (9); 3-cloro-4-(R)-(3 -(6,8- difluoro-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (10); 3-cloro-4-(R)-(3-(S)-(8-fluoro-1- metil (d3) - 2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (11); 3-cloro-4-(R)-(3-(R)-(8-fluoro-1- metil (d3) - 2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (12); 3-cloro-4-(R)-(3-(8-fluoro-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (13); 3- cloro-4 -(R)-(3 -(R)-(8-fluoro-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3 (4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan- 2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (14); 3-ciano-4-(S)-(3-(8-fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il) -2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (15 e 16); 3-fluoro-4-(R)-(3-(8-fluoro-1-metil- 2.4- dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil) -7- (2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (17); 3- fluoro-4-(R)-(3-(S)- (8-fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (18); 3-fluoro-4-(R)-(3- (S)- (8-fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin- 3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (19); 3-fluoro-4-(R)-(3-(8-fluoro- 2.4- dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil) -7- (2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (20); 3- fluoro-4-(R)-(3-(R)-(8 -fluoro-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (21); 3-fluoro-4-(R)-(3- (S)-(8-fluoro-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (22); 3-cloro-4-(R)-(3-(3-(4-fluorofenil)-2,6- dioxo-2,3-di-hidropirimidin-1(6H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (23); 3- cloro-4-(R)-(3-(3-(4 -fluorofenil)-2,6-dioxo-2,3-di-hidropirimidin-1(6H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan- 2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (24); 6-cloro-5-(R)-(3-(8-fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il) -2-metilfenil)-2-(S)-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida (25); 6-cloro-5-(R)-(3-(S)-(8 -fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-2-(S)-(2-hidroxipropan-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-S-carboxamida (26); 6-fluoro-5-(R)-(3-(S)- (8-fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-2-(R)-(2-hidroxipropan-2-il)- 2,3,4,9-tetra-hidro-lH-carbazol-8-carboxamida (27); 6- fluoro-5 -(R)-(3-(S)-(8 -fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di- hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil)-2-(S)-(2-hidroxipropan-2 - il) -2,3,4,9 - tetra-hidro - lH-carbazol - 8 -carboxamida (28); 4-(R)-(3 -(S)-(8-fluoro-l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil) -7-(2 -hidroxipropan-2-il)-3-metil-9H-carbazol-l-carboxamida (29); 4-(R)-(3-(5-cloro-1,3-dioxo-IH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-3-fluoro-7-(2-hidroxipropan-2-il) -9H-carbazol-l-carboxamida (30 e 31); 3-cloro-4-(R)-(3 -(R)- (5-cloro-1,3-dioxo-1H-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2 -metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (32); 3-cloro-4-(R)-(3-(S)-(5-cloro-l,3-dioxo-lH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-7- (2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (33); 3- cloro-4-(R)-(3-(5-fluoro-l,3-dioxo-IH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (34); 3-cloro-4-(R)-(3- (5- fluoro-1,3-dioxo-IH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H) - il) - 2-metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (35 e 36); 3-cloro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-4-(R)-(3-(5-metoxi-l,3-dioxo-lH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil)-9H-carbazol-1-carboxamida (37); 3-cloro-4-(R)-(3-(5,7-dioxo-5H-tiazolo[3,2-c]pirimidin-6(7H)-il)-2 -metilfenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (38 e 39); 3-fluoro-4-(R)-(3-(5-fluoro-l,3-dioxo-IH-pirido[1,2-c]pirimidin-2(3H)-il)-2-metilfenil) -7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (40 e 41); 3-cloro-4-(R)-(2-cloro-3-(l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (42); 3-cloro-4-(R)-(2-cloro-3-(R)-(l-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida (43); 3-cloro-4-(R)-(2-cloro-3-(8-fluoro-l-metil-2 ,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil) -7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (44); 3- cloro-4-(R)-(2-cloro-3-(R)- (8-fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2- di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (45); 4-(R)-(2-cloro-3-(8- fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil)-3-fluoro-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (46); 3-cloro-4-(R)-(2-cloro-3-(8-fluoro-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)fenil)-7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-1-carboxamida (47);
10. O composto de acordo com a reivindicação 1 que tem a estrutura:
11. 0 composto de acordo com a reivindicação 1 que tem a estrutura:
12. 0 composto de acordo com a reivindicação 1, em que o dito composto é: 3-cloro-4 -(R)-(3 -(S)-(8-fluoro-1-metil-2,4-dioxo-1,2-di-hidroquinazolin-3(4H)-il)-2-metilfenil) -7-(2-hidroxipropan-2-il)-9H-carbazol-l-carboxamida na Forma ΜΙ cristalina como caracterizada pelas coordenadas atómicas fracionárias listadas abaixo, calculadas a uma temperatura de cerca de 203 K; coordenadas atómicas (xlO4)
13. Uma composição farmacêutica que compreende um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12 e um portador farmaceuticamente aceitável.
14, Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-12 para utilização em terapêutica.
15. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-12 para utilização em terapêutica no tratamento de doença autoimune ou doença inflamatória crónica.
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