PT2523950T

PT2523950T - Inibidores dos vírus flaviridae

Info

Publication number: PT2523950T
Application number: PT117009886T
Authority: PT
Inventors: j watkins William; Canales Eda; O'neil Hanrahan Clarke Michael; E Lazerwith Scott; Lew Willard; Anthony Morganelli Philip
Original assignee: Gilead Sciences Inc
Priority date: 2010-01-15
Filing date: 2011-01-14
Publication date: 2017-06-01
Also published as: TW201134822A; JP5868872B2; SI2523950T1; TWI491609B; ZA201205248B; EA201290576A1; ES2626150T3; MX2012008211A; JP2013517291A; PE20130281A1; NZ600817A; AU2011205744A1; CR20120417A; CA2785567A1; EP2523950A1; EA021196B1; US20110178129A1; CA2785567C; SG10201500298PA; EP3219713A1

Description

DESCRIÇÃO "INIBIDORES DOS VÍRUS FLAVIRIDAE"

CAMPO DA INVENÇÃO O presente pedido inclui novos inibidores dos vírus Flaviviridae, composições contendo os ditos compostos e divulga compostos para utilização em métodos terapêuticos que incluem a administração de tais compostos.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO Vírus que compreendem a família Flavivii'idae incluem pelo menos três géneros distinguíveis incluindo pestívírus, flavivírus e hepacivírus (Calisher, et al., J. Gen. Virol., 1993, 70, 37-43) . Embora os pestivírus causem muitas doenças em animais economicamente importantes tais como o vírus da diarreia bovina viral (BVDV), vírus da febre suína clássica (CSFV, cólera suína) e doença da fronteira de ovelhas (BDV), sua importância em doenças humanas é menos caracterizada (Moennig, V., et al. , Adv. Vir. Res. 1992, 48, 53-98). Os Flavivírus são responsáveis por importantes doenças humanas tais como a dengue e a febre amarela enquanto os hepacivírus causam infeções por vírus da hepatite C em seres humanos. Outras infeções virais importantes causadas por Flaviviridae incluem vírus West Nile (WNV), vírus da encefalite japonesa (JEV), vírus da encefalite originada em carraça, vírus Junjin, encefalite de Murray Valley, encefalite de St Louis, vírus da febre hemorrágica Omsk e vírus Zika. 0 vírus da hepatite C (HCV) é a causa principal de doença hepática crónica em todo o mundo (Boyer, N. et al. J Hepatol. 32:98-112, 2000) deste modo um significativo foco da investigação antiviral atual é dirigido para o desenvolvimento de métodos melhorados tratamento de infeções por HCV crónicas em seres humanos (Di Besceglie, A.M. e Bacon, B. M., Scientific American, Oct.: 80-85, (1999); Gordon, C. P., etial., J. Med. Chem. 2005, 48, 1- 20; Maradpour, D.; etial., Nat. Rev. Micro. 2 007, 5(6), 453-463). Um número de tratamentos de HCV são revistos por Bymock etial. em Antiviral Chemistry & Chemotherapy, 11:2; 79-95 (2000). Curas virológicas de pacientes com infeção crónica por HCV são difíceis de conseguir devido à quantidade enorme de produção diária de vírus em pacientes infetados cronicamente e à alta mutabilidade espontânea do vírus HCV (Neumann, etí al., Science 1998, 282, 103-7;

Fukimoto, etial., Hepatology, 1996, 24, 1351-4; Domingo, etí al., Gene, 1985, 40, 1-8; Martell, etial., J. Virol. 1992, 66, 3225-9.

Atualmente, existem essencialmente dois compostos antivirais, ribavirina, um análogo de nucleósido, e interferão-alfa (a) (IFN), que são utilizados para o tratamento de infeções de HCV crónicas em seres humanos. A ribavirina sozinha não é eficaz em reduzir os níveis de ARN virai, tem toxicidade significativa, e é conhecida por induzir anemia. A combinação de IFN e ribavirina foi relatada como sendo eficaz na gestão da hepatite C crónica (Scott, L. J., etial. Drugs 2002, 62, 507-556), porém menos da metade dos pacientes que tomam este tratamento mostram um benefício persistente.

Combinadas, as infeções da família do vírus Flaviviridae causam mortalidade significativa, morbidade e perdas económicas em todo o mundo. Tiofenos substituídos com alquinilo com atividade anti-vírus Flaviviridae foram divulgados por Chan, etí al. , documento WO 2008058393; Wunberg, etial., documento WO 2006072347; e Chan, etial., documento WO 2002100851 (por exemplo, documento WO 2008058393 divulga o composto ácido 5-(3,3-dimetil-l-butin-1-il)-3-[(trans-4-metoxiciclohexil)[trans-4-metilciclohexilcarbonil]amino]-2-tiofenocarboxílico) ; mas nenhum destes estão atualmente clinicamente aprovados para terapêutica antiviral. Como tal, permanece uma necessidade de desenvolver tratamentos eficazes para infeções por vírus Flaviviridae.

SUMARIO DA INVENÇÃO São proporcionados compostos de Fórmula I:

Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em

Het é um heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído ou heteroarilo de 3-14 membros opcionalmente substituído; em que, cada Het substituído é substituído com um ou mais Q4; cada Q4, independentemente, é selecionado a partir do grupo que consiste em halogéneo, oxo, óxido, -N02, N(™0), -SR40, -S (0) R40, -S(0)2R40, -S (0) 2NR40R41, NR40C (0) R41, -NR40C(O)NR41R42, -NR40S (0) R41, -NR40S (0) 2r41, - 0P (0) R41R42 , -P(0)R41R42, -P (0) 0R41R42, -P (0) (OR41) OR42, C (0) NR41R42, Ci-6 alquilo opcionalmente substituído, C2_6 alquenilo opcionalmente substituído, C2-5 alquinilo opcionalmente substituído, C3_6 cicloalquilo opcionalmente substituído, C6-12 arilalquilo opcionalmente substituído, C6_i2 arilo opcionalmente substituído, heteroarilo de 3 -14 membros opcionalmente substituído, Ci_6 alquiloxi opcionalmente substituído, C2-e alqueniloxi opcionalmente substituído, C2 - 6 alquiniloxi opcionalmente substituído, C3_6 cicloalquiloxi opcionalmente substituído, C6_i2 ariloxi opcionalmente substituído, heteroariloxi de 3 -14 membros opcionalmente substituído, heterocicliloxi de 4-12 membros opcionalmente substituído, -C(0)Ci_6 alquilo opcionalmente substituído, -C(0)C2-s alquenilo opcionalmente substituído, -C(0)C2-5 alquinilo opcionalmente substituído, -C(0)C3_5 cicloalquilo opcionalmente substituído, -C(0)C6-i2 arilo opcionalmente substituído, -C(0)- heteroarilo de 3 -14 membros opcionalmente substituído, -C(0)C6_i2 arilaquilo opcionalmente substituído, heterociclilo de 3-10 membros opcionalmente substituído, -OH, -NR41R42, -C(0)0R40, -CN, -N3, -C(™NR43)NR41R42, -c (™NR43) OR40, -NR40C(™NR43)NR41R42, -NR41C (0) OR40 e -0C (0) NR41R42; cada R40, R41 e R42, é independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em H, Ci_i2 alquilo opcionalmente substituído, C2_ i2 alquenilo opcionalmente substituído, C2-i2 alquinilo opcionalmente substituído, C3-12 cicloalquilo opcionalmente substituído, C6-i4 arilo opcionalmente substituído, heteroarilo de 3 - 14 membros opcionalmente substituído, heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído, heteroarilalquilo de 3-18 membros opcionalmente substituído e C6-i8 arilalquilo opcionalmente substituído; ou R41 e R42 tomados juntamente com os átomos ao quais estão unidos formam um heterociclilo de 3 a 10 membros; cada R43, independentemente, é selecionado a partir do grupo que consiste em H, Ci-i2 alquilo opcionalmente substituído, C2- 12 alquenilo opcionalmente substituído, C2-i2 alquinilo opcionalmente substituído, C:3_I2 cicloalquilo opcionalmente substituído, C6-14 arilo opcionalmente substituído, heteroarilo de 3 - 14 membros opcionalmente substituído, heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído, heteroarilalquilo de 3-18 membros opcionalmente substituído, C6-i8 arilalquilo opcionalmente substituído, -CN, -C (0) R44, -CH0 e -S(0)2R44; cada R44 individualmente é Ci_i2 alquilo opcionalmente su.fo b t i tui do} em que, cada Q4 substituído, R40 substituído, R41 substituído, R42 substituído, R43 substituído ou R44 substituído é independentemente substituído com um ou mais Q5; cada Q5, individualmente, é selecionado a partir do grupo que consiste em halogéneo, oxo, óxido, -N02, -N(™0), SR50, -S (0) R50, -S(0)2R50, -S (0) 2NR50R51, -NR50C (0) R51, NR50C(O)NR51R52, -NR50S (0) R51, -MR50S (0) 2R51, -0P (0) r51r52, - P(0)R51R52, -P (0) 0R51R52, -P(0) (0R51)0R52, -C (0) NR51R52, Ci-6 alquilo opcionalmente substituído, C2_5 alquenilo opcionalmente substituído, C2.6 alquinilo opcionalmente substituído, C3_6 cicloalquilo opcionalmente substituído, C8 -12 arilalquilo opcionalmente substituído, C6-i2 arilo opcionalmente substituído, heteroarilo de 3 - 14 membros opcionalmente substituído, Ci-6 alquiloxi opcionalmente substituído, C2-6 alqueniloxi opcionalmente substituído, C2-s alquiniloxi opcionalmente substituído, C3_6 cicloalquiloxi opcionalmente substituído, C6-i2 ariloxi opcionalmente substituído, heteroariloxi de 3 - 14 membros opcionalmente substituído, heterocicliloxi de 4-12 membros opcionalmente substituído, -C(0)Ci-6 alquilo opcionalmente substituído, -C(0)C2_5 alquenilo opcionalmente substituído, -C(0)C2_6 alquinilo opcionalmente substituído, -C(0)C3..6 cicloalquilo opcionalmente substituído, -C(0)CS-i2 arilo opcionalmente substituído, -C(0) - heteroarilo de 3 -14 membros opcionalmente substituído, -C(0)Cs_;L2 arilaquilo opcionalmente substituído, heterociclilo de 3-10 membros opcionalmente substituído, -OH, -NR51R52, -C(0)0R50, -CN, -N3, -C(™NR53)NR51R52, -C (™NR53) OR50, -NR50C(™NR53)NR51R52, NR51C(0)0R5° e -0C(0)NR51R52; cada Rb0, R51 e R°2, é independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em H, Ci_i2 alquilo opcionalmente substituído, C2-i2 alquenilo opcionalmente substituído, C2-i2 alquinilo opcionalmente substituído, C3_ 12 cicloalquilo opcionalmente substituído, C6„i4 arilo opcionalmente substituído, heteroarilo de 3 - 14 membros opcionalmente substituído, heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído, heteroarilalquilo de 3-18 membros opcionalmente substituído e C6„i8 arilalquilo opcionalmente substituído; ou R51 e R52 tomados juntamente com os átomos ao quais estão unidos formam um heterociclilo de 3 a 10 membros; cada Rb3, independentemente, é selecionado a partir do grupo que consiste em H, Ci_i2 alquilo opcionalmente substituído, C2_ i2 alquenilo opcionalmente substituído, C2_i2 alquinilo opcionalmente substituído, C3-12 cicloalquilo opcionalmente substituído, C5-i4 arilo opcionalmente substituído, heteroarilo de 3 - 14 membros opcionalmente substituído, heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído, heteroarilalquilo de 3-18 membros opcionalmente substituído, C6-i8 arilalquilo opcionalmente substituído, -CN, -C (0) R54, -CHO e -S(0)2R54; cada Rb4, independentemente, é Ci-i2 alquilo opcionalmente substituído; em que, cada Q5 substituído, R50 substituído, R51 substituído, R52 substituído, R53 substituído ou R54 substituído é independentemente substituído com um ou ma is Qb ; cada QD, independentemente, é selecionado a partir do grupo que consiste em halogéneo, oxo, óxido, -N02, M (™0) , -SR60, -S (0) R60, -S(0)2Rso, -S (O)2NR60R61, NRS0C(O)R61, -NR60C(O)NR61R62, -NR60S (0) R61, NR60S (0) 2r61, 0P (0) r61r62, -P (0) r61r62, -P (0) ORs1R62, -P(0) (ORsl)OR62, C (0) NR51Rb2, Ci-s alquilo, C2_6 alquenilo, C2_6 alquinilo, C3_ g cic 1 oa 1 qui 1 o, Cg_]2 arilalquilo, Cg_-[2 arilo, heteroarilo de 3 - 14 membros, Ci-6 alquiloxi, C2_6 alqueniloxi, C2..6 alquiniloxi, C3_6 cicloalquiloxi, C6_i2 ariloxi, heteroariloxi de 3 - 14 membros, heterocicliloxi de 4-12 membros, -C(0)C;L_s alquilo, -C(0)C2_6 alquenilo, -C(0)C2_6 alquinilo, -C(0)C3..s cicloalquilo, -C(0)Ci_6 haloalquilo, -C(0)C6_12 arilo, -C(0)- heteroarilo de 3-14 membros, C(0)C6_12 arilalquilo, heterociclilo de 3-10 membros, -0H, -NR61R62, -C(0)0R60, -CN, -N3, -C(tmNR53)NR61R52, C (™NR63) OR60, -NR60C(™NRS3)NR61R62, -NRS1C (0) or60 e 0C(0)NRslR62; cada R60, R61 e R62, independentemente, é selecionado a partir do grupo que consiste em H, Ci_;L2 alquilo, C2_:12 alquenilo, C2-i2 alquinilo, C3-i2 cicloalquilo, Ci-i2 haloalquilo, C6-i4 arilo, heteroarilo de 3 - 14 membros, heterociclilo de 3-12 membros, heteroarilalquilo de 3-18 membros e C6-is arilalquilo; ou R61 e R62 tomados juntamente com os átomos ao quais estão unidos formam um heterociclilo de 3 a 10 membros; cada R63 é independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em H, Ci_i2 alquilo, C2-i2 alquenilo, C2_ i2 alquinilo, C3-i2 cicloalquilo, CS-i4 arilo, heteroarilo de 3 - 14 membros, heterociclilo de 3-12 membros, heteroarilalquilo de 3-18 membros, C6-i8 arilalquilo, -CN, -C (0) R64, -CH0 e -S (0) 2R64 ; e cada R64 independentemente é Ci_i2 alquilo.

No presente documento é divulgado um composto para utilização num método para o tratamento de infeções virais Flaviviridae é proporcionado que compreende administrar uma quantidade eficaz de um composto de fórmula I a uma paciente em necessidade do mesmo, 0 composto de Fórmula I é administrado a um ser humano em necessidade do mesmo, tal como um ser humano que está infetado com vírus da família Flaviviridae, por exemplo, um ser humano que está infetado com um vírus de HCV. Num exemplo, o tratamento resulta 11a redução de uma ou mais das cargas virais ou eliminação de ARN no paciente.

Noutro exemplo, no presente documento é divulgado um composto para utilização num método de tratamento eÁou prevenção de um doença causada por uma infeção virai em que a infeção virai é causada por um vírus selecionado a partir do grupo que consiste em vírus da dengue, vírus da febre amarela, vírus West Nile, vírus da encefalite japonesa, vírus da encefalite originada em carraça, vírus Junjin, vírus da encefalite Murray Valley , vírus daencefalite St Louis , vírus da febre hemorrágica Omsk, vírus da diarreia bovina virai, vírus Zika e vírus da hepatite C; que compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

Numa forma de realização, é proporcionado um composto da Fórmula I para utilização no tratamento de uma infeção virai por Flaviviridae. Num outro aspeto desta forma de realização, a infeção virai por Flaviviridae é uma infeção por HCV crónica ou aguda. Num outro aspeto desta forma de realização, o tratamento resulta na redução de uma ou mais das cargas virais ou eliminação de ARN no paciente. Num outro aspeto desta forma de realização, o tratamento resulta na redução da carga virai de HCV ou eliminação de ARN virai de HCV num paciente.

Noutra forma de realização, é proporcionada uma composição farmacêutica que compreende um composto de Fórmula I e um ou mais excipientes ou veículos farmaceuticamente aceitáveis. A composição farmacêutica de Fórmula I pode compreender ainda um ou mais agentes terapêuticos adicionais. Os um ou mais agentes terapêuticos adicionais podem ser, sem limitação, selecionados a partir de: interferões, ribavirina ou seus análogos, inibidores de HCV NS3 protease, inibidores de alfa-glicosidase 1, hepatoprotetores, inibidores de nucleósido ou nucleótido de HCV NS5B polimerase, inibidores não nucleósido de HCV NS5B polimerase, inibidores de HCV NS5A, agonistas de TLR-7, inibidores de ciclofilina, inibidores de HCV IRES, potenciadores farmacocinéticos e outros fãrmacos para o tratamento de HCV, ou misturas dos mesmos.

Noutro exemplo, no presente documento é divulgado um composto para utilização num método para o tratamento ou a prevenção dos sintomas ou efeitos de uma infeção por HCV num animal infetado que compreende administrar a, isto é, tratar, o dito animal com uma composição de combinação farmacêutica ou formulação que compreende uma quantidade eficaz de um composto de fórmula I e um segundo composto tendo propriedades anti-HCV.

Noutra forma de realização, são fornecidos compostos de fórmula I e sais farmaceuticamente aceitável dos mesmos e todos os racematos, enantiómeros, diastereómeros, tautómeros, polimorfos, pseudopolimorfos e formas amorfas dos mesmos.

Processos e novos intermediários são divulgados no presente documento que são úteis para a preparação dos compostos de Fórmula I.

Novos métodos para a síntese, análise, separação, isolamento, purificação, caracterização e testagem dos compostos de Fórmula I são divulgados no presente documento. A presente invenção inclui combinações de aspetos e formas de realização, bem como preferências, conforme é descrito no presente documento por toda a presente memória descritiva.

DESCRIÇÃO DETALHADA

Referência será feita agora em detalhe a certas formas de realização da invenção, cujos exemplos são ilustrados nas estruturas e fórmulas acompanhantes. Embora a invenção seja descrita juntamente com as formas de realização enumeradas, sera entendido que nao sao destinadas a limitar a invenção a essas formas de realização. Pelo contrário, a invenção é destinada a cobrir todas as alternativas, modificações e equivalentes, que podem estar incluídos no âmbito da presente invenção como descrito no presente documento. Numa forma de realização preferida, R“ é

Noutra forma de realização preferida, R2 é

Noutra forma de realização, Het. é um heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído ou heteroarilo de 3-14 membros opcionalmente substituído em que o dito heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído ou heteroarilo de 3-14 membros opcionalmente substituído compreende de um a quatro heteroãtomos selecionados a partir de 0, S ou Noutra forma de realização, Het é um heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído que compreende um ou dois heteroâtomos selecionados a partir de 0, S ou Noutra forma de realização, Het é um heteroarilo de 5-10 membros opcionalmente substituído que compreende de um a quatro heteroâtomos selecionados a partir de 0, S ou Noutra forma de realização, Het é tetrahidrofuranilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é tetrahidrofuran-3-ilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é piridinilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é piridazinilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é tetrahidro-2H-piranilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é piperidinilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é pirrolidinilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é tetrahidrotiofenilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é pirazinilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é lH-tetrazolilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é azetidinilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é tetrahidrofuranilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é tetrahidrofuran-3(S)-ilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é tetrahidrofuran-3(R)-ilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é tetrahidro-2H-furo[2,3-b]-furanilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é tiazoilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é 1H- imidazolilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é 4Η -1,2,4-triazolilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é 1H-pirazolilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é 1,3,4-tiadiazolilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é quinolinilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é [1,2,4]triazolo[4,3-a]piridinilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é tiofenilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é 1,2,4 -tiadiazolilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het e pirimidinilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é 1H -1,2,3-triazolilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é 1,3,4-oxadiazolilo opcionalmente substituído. Noutra forma de realização, Het é [1,2-b]piridazinilo opcionalmente substituído.

Noutra forma de realização, compostos de Fórmula I são representados pela Fórmula

Fórmula III em que R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que as variáveis restantes são definidas como para a Fórmula I.

Numa outra forma de realização de formula III, Het é um heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído ou heteroarilo de 3-14 membros opcionalmente substituído em que o dito heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído ou heteroarilo de 3-14 membros opcionalmente substituído compreende de um a quatro heteroátomos selecionados a partir de 0, S ou N. Noutro aspeto desta forma de realização, Het é um heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído ou heteroarilo de 3-14 membros opcionalmente substituído em que o dito heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído ou heteroarilo de 3-14 membros opcionalmente substituído compreende de um a quatro heteroátomos selecionados a partir de 0 ou N. Noutro aspeto desta forma de realização, Het é um heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído que compreende um ou dois heteroátomos selecionados a partir de 0, S ou N. Noutro aspeto desta forma de realização, Het é um heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído que compreende um ou dois heteroátomos selecionados a partir de 0 ou N. Noutro aspeto desta forma de realização, Het é um heteroarilo de 5-10 membros opcionalmente substituído que compreende de um a quatro heteroátomos selecionados a partir de 0, S ou N. Noutro aspeto desta forma de realização, Het é piridinilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é piridazinilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é tetrahidro-2H-piranilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é piperidinilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é pirrolidinilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é tetrahidrotiofenilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é pirazinilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é 1H-tetrazolilo opcionalmente substituído.

Num outro aspeto desta forma de realização, Het é azetidinilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é tetrahidrofuranilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é tetrahidrofuran-3-ilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é tetrahidrofuran-3(S)-ilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é tetrahidrofuran-3 (J?)-ilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é tetrahidro-2H-furo[2,3-b]-furanilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é tiazoilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realizaçao, Het e líf-imidazolilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é 4H - 1,2,4-triazolilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é lH-pirazolilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é 1,3,4 -tiadiazolilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização,

Het é quinolinilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é [1,2,4] triazolo[4,3-a]piridinilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é tiofenilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é 1,2,4-tiadiazolilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização,

Het é pirimidinilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é 1H -1,2,3- triazolilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é 1,3,4-oxadiazolilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é [1,2-b]piridazinilo opcionalmente substituído.

Numa outra forma de realização de fórmula III, R2 é

Num outro aspeto desta forma de realização, Het é um heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído ou heteroarilo de 3-14 membros opcionalmente substituído em que o dito heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído ou heteroarilo de 3-14 membros opcionalmente substituído compreende de um a quatro heteroátomos selecionados a partir de 0, S ou N. Noutro aspeto desta forma de realização, Het é um heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído ou heteroarilo de 3-14 membros opcionalmente substituído em que o dito heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído ou heteroarilo de 3-14 membros opcionalmente substituído compreende de um a quatro heteroátomos selecionados a partir de 0 ou N. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é um heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído que compreende um ou dois heteroátomos selecionados a partir de 0, S ou N. Noutro aspeto desta forma de realização, Het é um heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído que compreende um ou dois heteroátomos selecionados a partir de 0 ou N. Noutro aspeto desta forma de realização, Het é um heteroarilo de 5-10 membros opcionalmente substituído que compreende de um a quatro heteroátomos selecionados a partir de 0, S ou N. Noutro aspeto desta forma de realização, Het é piridinilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é piridazinilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é tetrahidro-2H-piranilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é piperidinilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é pirrolidinilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é tetrahidrotiofenilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é pirazinilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é Iff-tetrazolilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é azetidinilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é tetrahidrofuranilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é tetrahidrofuran-3-ilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é tetrahidrofuran-3(S)-ilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é tetrahidrofuran-3(R)-ilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é tetrah.idro-2.ff-furo [2,3-b] -furanilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é tiazoilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é Iff-imidazolilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é 4ff -1,2,4-triazolilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é Iff-pirazolilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é 1,3,4-tiadiazolilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realizaçao, Het e c[uinolinilo opcionalmente substiturdo. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é [1,2,4]triazolo[4,3-a]piridinilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é tiofenilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é 1,2,4-tiadiazolilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é pirimidinilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é Iff -1,2,3-triazolilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é 1,3,4-oxadiazolilo opcionalmente substituído. Num outro aspeto desta forma de realização, Het é [1,2-b]piridazinilo opcionalmente substituído.

Noutra forma de realização, o composto de fórmula I ou 111 e

ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

Definições A menos que seja indicado de outro modo, os seguintes termos e frases tal como são utilizados no presente documento são destinados a ter os seguintes significados. 0 facto de que um termo ou frase particular não seja especificamente definido não deve ser correlacionado a indefinição ou falta de clareza, mas sim que os termos no presente documento são utilizados no seu significado comum. Quando os nomes comerciais são utilizados no presente documento, os requerentes pretendem incluir de forma independente o produto de nome comercial, e o(s) ingrediente(s) farmacêutico(s) ativo(s) do produto de nome comercial, 0 termo "tratar", equivalentes gramaticais do mesmo, quando utilizado no contexto do tratamento de uma doença, significa abrandar ou interromper a progressão de uma doença ou melhorar pelo menos um sintoma de uma doença, mais preferentemente melhorar mais do que um sintoma de uma doença. Por exemplo, o tratamento de uma infeção pelo vírus da hepatite C pode incluir reduzir a carga viral de HCV num ser humano infetado com HCV, eÁou reduzir a gravidade da icterícia presente num ser humano infetado com HCV. "Alquilo" é um hidrocarboneto que contém átomos de carbono normais, secundários, terciários ou cíclicos. Por exemplo, um grupo alquilo pode ter de 1 a 2 0 átomos de carbono (isto é, Ci-C2o alquilo), de 1 a 10 átomos de carbono (isto é, Ci-Ci0 alquilo,) ou de 1 a 6 átomos de carbono (isto é, Ci-C6 alquilo). Exemplos de grupos alquilo adequados incluem, mas não estão limitados, metilo (Me, CH3) , etilo (Et, -CH2CH3) , 1-propilo (n-Pr, n-propilo, CH2CH2CH3) , 2-propilo (i_-Pr, í-propilo, -CH(CH3)2), 1-butilo (n-Bu, n-butilo, -CH2CH2CH2CH3) , 2-metil-1-propilo (í_-Bu, i-butilo, -CH2CH (CH3) 2) , 2-butilo (js-Bu, js-butilo, CH(CH3) CH2CH3), 2-metil-2-propilo (t-Bu, t-butilo, C(CH3)3), 1-pentilo (n-pentilo, -CH2CH2CH2CH2CH3) , 2-pentilo (-CH (CH3) CH2CH2CH3) , 3-pentilo (-CH (CH2CH3) 2) , 2-metil-2- butilo (-C (CH3) 2CH2CH3) , 3-metil-2-butilo (-CH (CH3) CH (CH3) 2) , 3-metil-2-butilo (-CH2CH2CH (CH3) 2) , 2-metil-1-butilo (- CH2CH (CH3) CH2CH3) , 1-hexilo (-CH2CH2CH2CH2CH2CH3) , 2-hexilo (-CH (CH3) CH2CH2CH2CH3) , 3-hexilo (-CH (CH2CH3) (CH2CH2CH3) ) , 2- metil-2-pentilo (-C (CH3) 2CH2CH2CH3) , 3-metil-2-pentilo (-CH (CH3) CH (CH3) CH2CH3) , 4-metil-2-pentilo (- CH (CH3) CH2CH (CH3) 2) , 3 - metil -3 - pentilo (-C (CH3) (CH2CH3) 2) , 2- metil-3-pentilo (-CH (CH2CH3) CH (CH3) 2) , 2,3-dimetil-2-butilo (-C (CH3) 2CH (CH3) 2) , 3,3-dimetil-2-butilo (-CH (CH3) C (CH3) 3, e octilo ( - (CH2) 7CH3) . !!Alcoxi" significa um grupo que tem a fórmula -0-alquilo, em que um grupo alquilo, conforme definido acima, está unido à molécula parental via um átomo de oxigénio. A porção alquilo de um grupo alcoxi pode ter de 1 a 20 átomos de carbono (isto é, Ci-C20 alcoxi) , de 1 a 12 átomos de carbono (isto é, C1-C12 alcoxi) ou de 1 a 6 átomos de carbono (isto é, Ci-C6 alcoxi). Exemplos de grupos alcoxi adequados incluem, mas não são limitados a, metoxi (-0-CH3 ou -OMe) , etoxi (-OCH2CH3 ou -OEt) , t-butoxi (-0-C(CH3)3 ou -OtBu) e semelhantes. "Haloalquilo" é um grupo alquilo, conforme definido acima, em que um ou mais átomos de hidrogénio do grupo alquilo é substituído com um átomo de halogéneo. A porção alquilo de um grupo haloalquilo pode ter de 1 a 20 átomos de carbono (isto é, Ci-C2o haloalquilo), de 1 a 12 átomos de carbono (isto é, Ci-Ci2 haloalquilo) ou de 1 a 6 átomos de carbono (isto é, Ci-C6 alquilo). Exemplos de grupos haloalquilo adequados incluem, mas não são limitados a, CF3, -CHF2, -CFH2, -CH2CF3 e semelhantes. "Alquenilo" é a um hidrocarboneto contendo átomos de carbono normais, secundários terciários ou cíclicos com pelo menos um sítio de insaturação, isto é, uma ligação dupla sp2, de carbono-carbono. Por exemplo, um grupo alquenilo pode ter de 2 a 20 átomos de carbono (isto é, C2-C20 alquenilo) , de 2 a 12 átomos de carbono (isto é, C2-Ci2 alquenilo) ou de 2 a 6 átomos de carbono (isto é, C2-C6 alquenilo). Exemplos de grupos alquenilo adequados incluem, mas não são limitados a, vinilo (-CH™CH2), alilo (-CH2CH™CH2) , ciclopentenilo (-C5H7) e 5-hexenilo (- ΓΙΤΤ ΓΙΤΤ ^(TJTM/-ITT \ L»il2 ) * "Alquinilo" é a um hidrocarboneto contendo átomos de carbono normais, secundários terciários ou cíclicos com pelo menos um sítio de insaturação, isto é, uma ligação tripla sp, de carbono-carbono. Por exemplo, um grupo alquinilo pode ter de 2 a 20 átomos de carbono (isto é, C2- C20 alquinilo) , de 2 a 12 átomos de carbono (isto é, C2-Ci2 alcino) ou de 2 a 6 átomos de carbono (isto é, C2-C6 alquinilo). Exemplos de grupos alquinilo adequados incluem, mas não são limitados a, acetilênico (-C=CH), propargilo (-CH2C=CH), e semelhantes. "Alquileno" refere-se a um radical hidrocarboneto saturado, de cadeia ramificada ou linear ou radical cíclico que tem dois centros de radicais monovalentes derivados pela remoção de dois átomos de hidrogénio do mesmo ou dois átomos de carbono diferentes de um alcano parental. Por exemplo, um grupo alquileno pode ter de 1 a 20 átomos de carbono, de 1 a 10 átomos de carbono ou de 1 a 6 átomos de carbono. Radicais alquileno típicos incluem, mas não são limitados a, metileno (-CH2-), 1,1-etileno (-CH(CH3)-), 1,2-etileno (-CH2CH2-), 1,1-propileno (-CH (CH2CH3) - ) , 1,2- propileno ( -CH2CH (CH3) - ) , 1,3-propileno (-CH2CH2CH2-) , 1,4- butileno (-CH2CH2CH2CH2-) e semelhantes. "Alquenileno" refere-se a um radical hidrocarboneto insaturado, de cadeia ramificada ou linear ou cíclica que tem dois centros de radicais monovalentes derivados pela remoção de dois átomos de hidrogénio do mesmo ou dois diferentes átomos de carbono de um alceno parental. Por exemplo, um grupo alquenileno pode ter de 1 a 20 átomos de carbono, de 1 a 10 átomos de carbono ou de 1 a 6 átomos de carbono. Radicais alquenileno típicos incluem, mas não estão limitados a, 1,2-etileno (-CH™CH-). "Alquinileno" refere-se a um radical hidrocarboneto insaturado, de cadeia ramificada ou linear ou cíclica que tem dois centros de radicais monovalentes derivados pela remoção de dois átomos de hidrogénio do mesmo ou dois diferentes átomos de carbono de um alcino parental. Por exemplo, um grupo alquinileno pode ter de 1 a 20 átomos de carbono, de 1 a 10 átomos de carbono ou de 1 a 6 átomos de carbono. Radicais alquinileno típicos incluem, mas não estão limitados a, acetileno (-C=C~), propargilo (-CH2C=C~) e 4-pentinilo (-CH2CH2CH2C-C-) . "Alquilino” refere-se a urn radical saturado, de cadeia ramificada ou linear ou cíclico que tem dois centros de radicais derivados pela remoção de três átomos de hidrogénio de dois átomos de carbono de um alcano parental. Por exemplo, um grupo alquinilino pode ter de 2 a 20 átomos de carbono, de 2 a 10 átomos de carbono ou de 2 a 6 átomos de carbono. Radicais alquilino típicos incluem, mas não estão limitados a, 1,2-etilino (-CH2CH™), 1,2-propilino (-CH2C(CH3)™), 1,3-propilino (-CH2CH2CH™) , 1,4-but.ilino (-CH2CH2CH2CH™) e semelhantes. "Arilo” significa um radical hidrocarboneto aromático monovalente derivado pela remoção de um átomo de hidrogénio de um átomo de carbono individual de um sistema de anel aromático parental. Por exemplo, um grupo arilo pode ter de 6 a 20 átomos de carbono, de 6 a 14 átomos de carbono ou de 6 a 12 átomos de carbono. Grupos arilo típicos incluem, mas não são limitados a, radicais derivados de benzeno (por exemplo, fenilo), benzeno substituído, naftaleno, antraceno, bifenilo e semelhantes. "Arileno" refere-se a um arilo como foi definido acima que tem dois centros de radicais monovalentes derivados pela remoção de dois átomos de hidrogénio de dois iguais ou diferentes átomos de carbono de um arilo parental. Radicais arileno típicos incluem, mas não estão limitados a, fenileno. "Arilalquilo," refere-se a um radical alquilo acíclico em que um dos átomos de hidrogénio ligado a um átomo de carbono, tipicamente um átomo de carbono terminal ou sp3, é substituído com um radical arilo. Grupos arilalquilo típicos incluem, mas não são limitados a, benzilo, 2-feniletan-l-ilo, naftilmetilo, 2-naftiletan-l-ilo, naftobenzilo, 2-naftofeniletan-1-ilo e semelhantes. O grupo arilalquilo pode compreender de 6 a 20 átomos de carbono, por exemplo, a fração alquilo é de 1 a 6 átomos de carbono e a fração arilo é de 6 a 14 átomos de carbono. "Cicloalquilo" refere-se a um anel saturado ou parcialmente insaturado que tem de 3 a 7 átomos de carbono como um monociclo, de 7 a 12 átomos de carbono como um biciclo e até cerca de 2 0 átomos de carbono como um policilo. Grupos cicloalquilo monocíclicos têm de 3 a 6 átomos de anel, ainda mais tipicamente 5 ou 6 átomos de anel. Grupos cicloalquilo bicíclicos têm de 7 a 12 átomos de anel, por exemplo, dispostos como um sistema abiciclo (4,5), (5,5), (5,6) ou (6,6), ou 9 ou 10 átomos de anel dispostos como um sistema biciclo (5,6) ou (6,6) . Grupos cicloalquilo incluem sistemas de anel mono, bi e policíclicos, fundidos, em ponte ou espiro. Exemplos não limitativos de carbociclos monocíclicos incluem ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, 1-ciclopent-l-enilo, 1-ciclopent-2-enilo, l-ciclopent-3-enilo, cicloexilo, 1-ciclohex-l-enilo, l-ciclohex-2-enilo, 1-ciclohex-3-enilo, biciclo[3.1.0]hex-6-ilo e semelhantes. "Cicloalquileno" refere-se a um cicloalquilo como foi definido acima que tem dois centros de radicais monovalentes derivados pela remoção de dois átomos de hidrogénio do mesmo ou dois diferentes átomos de carbono de um cicloalquilo parental. Radicais cicloalquileno típicos incluem, mas não estão limitados a, ciclopropileno, ciclobutileno, ciclopentileno e ciclohexileno. "Cicloalquilalquilo" refere-se a um radical alquilo acíclico em que um dos átomos de hidrogénio ligado a um átomo de carbono, tipicamente um átomo de carbono terminal ou sp3, é substituído com um radical cicloalquilo conforme definido acima. Grupos cicloalquilalquilo típicos incluem, mas não estão limitados a, ciclopropilmetilo, ciclobutilmetilo, ciclopentilmetilo, ciclohexilmetilo, ciclohexenilmetilo, 2-ciclohexiletan-l-ilo, 2-ciclohexeniletan-l-ilo, 2-ciclopropilet.an-l-ilo, 2-ciclopentiletan-1-ilo e semelhantes. 0 grupo cicloalquialquilo pode compreender de 4 a 26 átomos de carbono, por exemplo, a fração alquilo é de 1 a 6 átomos de carbono e a fração cicloalquilo é como definido anteriormente. "Cicloalquilalquileno" refere-se a um cicloalquilalquilo como definido anteriormente tendo dois centros de radicais monovalentes derivados pela remoção de um átomo de hidrogénio a partir da porção alquilo do cicloalquilalquilo e o outro átomo de hidrogénio removido a partir do cicloalquilo do cicloalquilalquilo. Exemplos não limitantes de radicais Cicloalquilalquileno são:

"Halogéneo!! refere-se a F, Cl, Br ou I.

Conforme é utilizado no presente documento o termo "haloalquilo" refere-se a um grupo alquilo, conforme é definido no presente documento, que é substituído com pelo menos um halogéneo. Exemplo de grupos "haloalquilo" de cadeia linear ramificada conforme é utilizado no presente documento incluem, mas não estão limitados a, metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo e t-butilo independentemente substituídos com um ou mais halogéneos, por exemplo, flúor, cloro, bromo e iodo. 0 termo "haloalquilo" deve ser interpretado para incluir tais substituintes como grupos perfluoroalquilo tal como -CF3.

Conforme é utilizado no presente documento, o termo "haloalcoxi" refere-se a um grupo -0Ra, onde R01 é um grupo haloalquilo conforme definido no presente documento. Como exemplos não limitativos, os grupos haloalcoxi incluem -0(CH2)F, -0(CH)F2 e -ocf3. !!Heterociclo!! e "heterociclilo" referem-se a um grupo cíclico saturado ou parcialmente insaturado tendo desde 1 até 14 átomos de carbono e desde 1 até 6 heteroãtomos selecionados a partir de N, S, P ou 0, e inclui um anel individual e sistemas de anéis múltiplos incluindo, sistemas de anéis fusionados, em ponte e espiro. "Heterociclo" ou "heterociclil,! como utilizado no presente documento inclui como modo de exemplo e não limitação aqueles heterociclos descritos em Paquette, Leo A. ; Principles of Modern Heterocyclic Chemistry (W.A. Benjamin, Nova Iorque, 1968), particularmente os Capítulos 1, 3, 4, 6, 7 e 9; The Chemistry of Heterocyclic Compounds, A Series of Monographs” (John Wiley & Sons, Nova Iorque, 1950 até ο presente), em particular Volumes 13, 14, 16, 19 e 28; e J. Am. Chem. Soc. (1960) 82:5566. Numa forma de realização, o(s) átomo(s) de carbono, azoto, fósforo ou enxofre do grupo heterocíclico pode(m) ser oxidado(s) para proporcionar C(™0), N-óxido, óxido de fosfinano, frações sulfinilo ou sulfonilo.

Como um exemplo, heterociclilos substituídos incluem, por exemplo, anéis heterocíclicos substituídos com qualquer dos substituintes divulgados no presente documento incluindo grupos oxo. Um exemplo não limitativo de um heterociclilo substituído com carbonilo é:

Exemplos de heterociclos incluem por meio de exemplo e não limitação dihidropiridilo, tetrahidropiridilo (piperidil), tetrahidrotiofenilo, tetrahidrotiofenilo oxidado com enxofre, piperidinilo, 4-piperidonilo, pirrolidinilo, azetidinilo, 2-pirrolidonilo, tetraidrofuranilo, decahidroquinolinilo, octahidroisoquinolinilo, piranilo, morfolinilo e bis-tetrahidrofuranilo:

"Heterocicleno" ou "heterociclileno" refere-se a um "heterociclo" ou "heterociclilo" como foi definido acima que tem dois centros de radicais monovalentes derivados pela remoção de dois átomos de hidrogénio do mesmo ou dois diferentes átomos de carbono de um heterociclo parental, a remoção de dois átomos de hidrogénio de dois átomos de azoto de um heterociclo parental ou a remoção de um átomo de hidrogénio de um átomo de carbono de um heterociclo parental. Exemplos não limitantes de radicais heterociclilenos são:

"Heteroarilo" refere-se a um heterociclilo aromático monovalente que tem pelo menos um heteroátomo no anel. Consequentemente, "heteroarilo" refere-se a um grupo aromático de desde 1 até 14 átomos de carbono e de 1 a 6 heteroátomos selecionados a partir de oxigénio, azoto, enxofre e fósforo. Para sistemas de anéis múltiplos, por meio de exemplo, o termo "heteroarilo" inclui sistemas de anéis fusionados, em ponte e espiro que têm anéis não aromáticos e aromáticos. Numa forma de realização, o(s) átomo (s) de anel de carbono, azoto ou enxofre do grupo heteroarilo pode(m) ser oxidado(s) para proporcionar C(™0), N-óxido, frações sulfinilo ou sulfonilo.

Exemplos de heteroarilos incluem por meio de exemplo e não limitação piridilo, tiazolilo, pirimidinilo, furanilo, tienilo, pirrolilo, pirazolilo, imidazolilo, tetrazolilo, benzofuranilo, tianaftalenilo, indolilo, quinolinilo, isoquinolinilo, benzimidazolilo, tetrahidroquinolinilo, tetrahidroisoquinolinilo, 6H-1,2,5-tiadiazinilo, 2H,6H-1,5,2-ditiazinilo, tienilo, tiantrenilo, isobenzofuranilo, cromenilo, xantenilo, f enoxatinilo, 2il-pírrolilo, isotiazolilo, isoxazolilo, pirazinilo, piridazinilo, indolizinilo, isoindolilo, Síf-indolilo, líí-indazolilo, purinilo, 4H-quinolizinilo, naftiridinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, cinolinilo, pteridinilo, 4ail-carbazolilo, carbazolilo, β-carbolinilo, fenantridinilo, acridinilo, pirimidinilo, fenantrolinilo, fenazinilo, fenotiazinilo, furazanilo, fenoxazinilo, isocromanilo, cromanilo, imidazolidinilo, imidazolinilo, pirazolidinilo, pirazolinilo, piperazinilo, indolinilo, isoindolinilo, quinuclidinilo, morfolinilo, oxazolidinilo, benzotriazolilo, benzisoxazolilo, oxindolilo, benzoxazolinilo e isatinoilo. "Heterociclileno" refere-se a um heterociclilo, conforme é definido no presente documento, derivados por substituição de um átomo de hidrogénio a partir de um átomo de carbono ou heteroátomo de um heterociclilo, com uma valência aberta. De forma semelhante, "heteroarileno" refere-se a um heterociclileno aromático. !!Heterociclilalquil", refere-se a um radical alquilo acíclico em que um dos átomos de hidrogénio ligado a um átomo de carbono, tipicamente um átomo de carbono terminal ou sp3, é substituído com um radical heterociclilo (isto é, uma fração heterociclil-alquileno). Grupos heterociclilo alquilo típicos incluem, mas não são limitados a heterociclil-CH2-, 2 -(heterociclil)etan-l-ilo e semelhantes, em que a porção "heterociclil" inclui qualquer dos grupos heterociclilo descritos acima, incluindo aqueles descritos em Principles of Modern Heterocyclic Chemistry, Um perito na especialidade também entenderá que o grupo heterociclilo pode ser unido à porção alquilo do alquilo heterociclilo por meio de uma ligação carbono-carbono ou uma ligação carbono-heteroãtomo, com a condição de que o grupo resultante seja quimicamente estável. 0 grupo heterociclilalquilo compreende de 2 a 20 átomos de carbono e 1-6 heteroátomos, por exemplo, a porção alquilo do grupo heterociclilalquilo compreende de 1 a 6 átomos de carbono e a fração heterociclilo compreende de 1 a 14 átomos de carbono. Exemplos de heterociclilalquiloo incluem por meio de exemplo e não limitação heterociclos contendo azoto, fósforo, oxigénio eÁou enxofre de 5 membros tais como pirrolidiilmetilo, 2-tetrahidrofuranililetan-l-ilo e semelhantes, heterociclos contendo azoto, oxigénio eÁou enxofre de 6 membros tais como piperidinilmetilo, morfolinilmetilo, piperidinyletilo, teterahidropiraniletilo e semelhantes. "Heteroarilalquilo" refere-se a um grupo alquilo, conforme é definido no presente documento, em que um átomo de hidrogénio foi substituído com um grupo heteroarilo como definido no presente documento. Exemplos não limitativos de heteroarilo alquilo incluem -CH2-piridinilo, -CH2-pirrolilo, -CH2-oxazolilo, -CH2-indolilo, -CH2-isoindolilo, -CH2-purinilo, -CH2-furanilo, -CH2-tienilo, -CH2-benzofuranilo, -CH2-benzotiofenilo, -CH2-carbazolilo, -CH2- imidazolilo, -CH2-tiazolilo, -CH2-isoxazolilo, -CH2-pirazolilo, —CH2—isotiazolilo, —CH2—quinolilo, — CH2 — isoquinolilo, -CH2-piridazilo, -CH2-pirimidilo, -CH2- pirazilo, -CH(CH3)-piridinilo, -CH(CH3) -pirrolilo, -CH(CH3)-oxazolilo, -CH (CH3)-indolilo, -CH(CH3)-isoindolilo, -CH(CH3) -purinilo, -CH(CH3)-furanilo, -CH(CH3)-tienilo, -CH(CH3) -benzofuranilo, -CH(CH3) -benzotiofenilo, -CH(CH3) -carbazolilo, -CH (CH3)-imidazolilo, -CH (CH3) -taiazolilo, -CH(CH3)- isoxazolilo, —CH (CH3) —pirazolilo, —CH (CH3) —isotiazolilo, -CH (CH3)-quinolilo, -CH (CH3)-isoquinolilo, -CH(CH3)~ piridazilo, -CH(CH3) -pirimidilo, -CH(CH3) -pirazilo e semelhantes . 0 termo "heterocicliloxi" representa um grupo heterociclilo unido ao átomo adjacente por um oxigénio.

Quando existe um átomo de enxofre presente, o átomo de enxofre pode estar a níveis de oxidação diferentes, nomeadamente, S, SO, S02 ou S03. A totalidade de tais níveis de oxidação estão dentro do âmbito da presente invenção.

Quando existe um átomo de fósforo presente, o átomo de fósforo pode estar a níveis de oxidação diferentes, nomeadamente, PORaR°Rc, P02RaRb ou P03RaRb, onde Ra, Rb e Rc cada um independentemente é escolhido a partir de H, Ci_i2 alquilo, C2_i2alquenilo, C2-12 alquinilo, C6-i4 arilo, heterociclo de 3-12 membros, heteroarilalquilo de 3-18 membros, Cs-i8 arilalquilo; ou dois tomados juntamente (com ou sem oxigénios) formam um heterociclo de 5 a 10 membros. A totalidade de tais níveis de oxidação estão dentro do âmbito da presente invenção 0 termo "opcionalmente substituído" em referência a uma fração particular do composto das Fórmulas da invenção, por exemplo, um "grupo arilo opcionalmente substituído", refere-se a uma fração tendo nenhum, um ou mais substituintes. 0 termo "substituído" em referência a alquilo, alquileno, arilo, arilalquilo, alcoxi, heterociclilo, heteroarilo, carbociclilo, etc., por exemplo, "alquilo substituído", "alquileno substituído", "arilo substituído", "arilalquilo substituído", "heterociclilo substituído" e "carbociclilo substituído" significa alquilo, alquileno, arilo, arilalquilo, heterociclilo, carbociclilo respetivamente, em que um ou mais átomos hidrogénio são cada um independentemente substituído com um substituinte não hidrogénio. Grupos divalentes podem também ser substituídos de modo semelhante. A menos que seja indicado de outro modo, substituintes típicos incluem, mas não estão limitados a, -X, -Rb, -0", ™0, -0Rb, -SRb, -S", -NRb2, -N+Rb3, ™NRb, -CX3, -CN, -0CN, -SCN, -N™C™0, -NCS, -NO, -N02, ™N2, -N3, -NEC (™0) Rb, -0C (™0) Rb, -NEC (™0) NRb2 , -S(™0)2-, -S(™0)20H, -S (™0) 2Rb, -OS (™0) 20Rb, -S (™0) 2NRb2 , -S(™0)Rb, -0P (™0) (0Rb) 2 , -P(™0) (0Rb)2, -P(™0) (0')2, -P(™ 0) (0H)2, -P (0) (0Rb) (0") , - C (™0) Rb, -C(™0)X, -C (S) Rb, -C (0) 0Rb, -0(0)0", -C(S)0Rb , - C (0) SRb, -C (S) SRb, -C(0)NRb2, -C(S)NRb2, -C (™NRb) NRb2 , onde cada X é independentemente um halogéneo: F, Cl, Br ou I; e cada Rb é independentemente E, alquilo, arilo, arilalquilo, um heterociclo ou um grupo protetor ou fração de profãrmaco. Os grupos alquileno, alquenileno e alquinileno podem também ser substituídos de forma semelhante. A menos que seja indicado de outro modo, quando o termo "substituído" é utilizado juntamente com grupos tal como arilalquilo, que têm duas ou mais frações capazes de substituição, os substituintes podem ser unidos à fração arilo, à fração alquilo ou a ambas.

Os peritos na especialidade reconhecerão que quando frações tais como "alquilo", "arilo", "heterociclilo", etc. são substituídos com um ou mais substituintes, podem alternativamente ser referidos como frações "alquileno", "arileno", "heterociclileno", etc. (isto é, indicando que pelo menos um dos átomos de hidrogénio das frações "alquilo", "arilo", "heterociclilo" foram substituídos com o(s) substituinte(s) indicado(s)). Quando as frações tais como "alquilo", "arilo", "heterociclilo", etc. são referidas no presente documento como "substituídas" ou são mostradas diagramaticamente que são substituídas (ou opcionalmente substituídas, por exemplo, quando o número de substituintes varia desde zero até um número inteiro positivo), então os termos "alquilo", "arilo", "heterociclilo", etc. são entendidos que são intercambiáveis com "alquileno", "arileno", "heterociclileno", etc.

Como será apreciado pelos peritos na especialidade, os compostos da presente invenção podem existir em forma solvatada ou hidratada. 0 âmbito da presente invenção inclui tais formas. Mais uma vez, como será apreciado pelos peritos na especialidade, os compostos podem ser capazes de esterificação. Os ésteres ou outros derivados fisiologicamente funcionais de formas de profármacos do composto são descritos no presente documento. "Éster" significa qualquer éster de um composto no qual qualquer das funções-COOH da molécula é substituída por uma função -C(0)0R, ou no qual qualquer das funções -OH da molécula é substituída com uma função -0C(0)R, na qual a fração R do éster é qualquer grupo contendo carbono que forma uma fração éster estável, incluindo mas não limitado a alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, arilo, arilalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo e derivados substituídos dos mesmos. 0 termo "profármaco" como utilizado no presente documento refere-se a qualquer composto que quando administrado a um sistema biológico gera a substância de fãrmaco, isto é, o ingrediente ativo, como um resultado de reações químicas espontâneas, reações químicas catalisadas por enzima, fotõlise eÃou reações químicas metabólicas. Um profármaco é assim um análogo covalentemente modificado ou forma latente de um composto terapeuticamente ativo. Exemplo de profármaco incluem frações de éster, frações de amónio quaternário, frações de glicol e semelhantes.

Um perito na especialidade reconhecerá que substituintes e outras frações dos compostos de Fórmula I ou II deveriam ser selecionadas com a finalidade de proporcionar um composto que é suficientemente estável para proporcionar um composto farmaceuticamente útil que pode ser formulado numa composição farmacêutica aceitavelmente estável. Os compostos de Fórmula I que têm tal estabilidade são contemplados como estando dentro do âmbito da presente invenção.

Como será apreciado pelos peritos na especialidade, os compostos da presente invenção podem conter um ou mais centros quirais. 0 âmbito da presente invenção inclui tais formas.

Um composto de Fórmula I ou III e seus sais farmaceuticamente aceitáveis podem existir como diferentes polimorfos ou pseudopolimorfos. Conforme é utilizado no presente documento, polimorfismo cristalino significa a capacidade de um composto cristalino existir em diferentes estruturas cristalinas. 0 polimorfismo em geral pode ocorrer como uma resposta a mudanças em temperatura, pressão ou ambos. 0 polimorfismo também pode resultar de variações no processo de cristalização. Os polimorfos podem ser distinguidos por várias características físicas bem conhecidas na técnica tais como padrões de difração de raios X, solubilidade e ponto de fusão. 0 polimorfismo cristalino pode resultar de diferenças em empacotamento de cristal (polimorfismo de empacotamento) ou diferenças em empacotamento entre diferentes confôrmeros da mesma molécula (polimorfismo conformacional). Conforme é utilizado no presente documento, pseudopolimorfismo cristalino significa a capacidade de um hidrato ou solvato de um composto existir em diferentes estruturas cristalinas. Os pseudopolimorfos da presente invenção podem existir devido a diferenças em empacotamento de cristal (polimorfismo de empacotamento) ou devido a diferenças em empacotamento entre diferentes confôrmeros da mesma molécula (polimorfismo conformacional). A presente invenção compreende todos os polimorfos e pseudopolimorfos dos compostos de Fórmula I-II e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

Um composto de Fórmula I ou III e seus sais farmaceuticamente aceitáveis podem também existir como um sólido amorfo. Conforme é utilizado no presente documento, um sólido amorfo é um sólido em que não existem ordem de longo alcance das posições dos átomos no sólido. Esta definição se aplica também quando o tamanho do cristal é de dois nanometres ou menos. Aditivos, incluindo solventes, podem ser utilizado para criar as formas amorfas da presente invenção. A presente invenção compreende todas as formas amorfas dos compostos de Fórmula I e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

Certos compostos descritos no presente documento contêm um ou mais centros quirais, ou podem de outro modo ser capazes de existir como estereoisómeros múltiplos. 0 âmbito da presente invenção inclui misturas de estereoisómeros bem como enantiómeros purificados ou misturas enantiomericamenteÁdiastereomericamente enriquecida. Também estão incluídos no âmbito da presente invenção os isõmeros individuais dos compostos representados pelas fórmulas da presente invenção, bem como quaisquer misturas completa ou parcialmente equilibrada dos mesmos. A presente invenção também inclui os isómeros individuais dos centros quirais presentes pelas fórmulas acima como misturas com isómeros dos mesmos em que um ou mais centros quirais são invertidos. 0 termo "quiral" refere-se a moléculas que têm a propriedade de não superponibilidade do seu parceiro de imagem de espelho , enquanto o termo "aquiral" refere-se a moléculas que são superponíveis no seu parceiro de imagem de espelho. 0 termo "estereoisómeros" refere-se a compostos que têm uma constituição química idêntica, mas diferem em relação à disposição dos átomos ou grupos no espaço. "Diastereómero" refere-se a um estereoisõmero com dois ou mais centros de quiralidade e cujas moléculas não são imagens no espelho uma da outra. Os diastereómeros têm propriedades físicas diferentes, por exemplo, os pontos de fusão, os pontos de ebulição, propriedades espectrais e reatividades. As misturas de diastereómeros podem separar-se sob procedimentos analíticos de alta resolução, tais como a eletroforese e a cromatografia. "Enantiómeros" referem-se a estereoisómeros de um composto que são imagens no espelho não sobreponíveis uma da outra. "Atropisómeros" referem-se a estereoisómeros de um composto que resulta da rotação impedida ao redor de ligações simples onde a barreira de tensão estérica para a rotação é suficientemente alta para o isolamento do confôrmero individual. Os atropisómeros mostram quiralidade axial. Os atropisómeros podem ser equilibrados termicamente e a barreira de interconversão pode ser medida cineticamente. 0 atropisomerismo pode ocorrer independente da presença de outras formas de isomerismo quiral.

As definições estereoquímicas e as convenções utilizadas no presente documento geralmente seguem S. P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, Mova Iorque; e Eliel, E. e Wilen, S., Stereochemistry of Organic Compounds (1994) John Wiley & Sons, Inc., Nova Iorque.

Muitos compostos orgânicos existem em formas opticamente ativas, isto é, têm capacidade de girar o plano da luz polarizada no plano. Ao descrever um composto opticamente ativo, os prefixos D e L ou R e S são utilizados para denotar a configuração absoluta da molécula ao redor do(s) seu(s) centro(s) quiral(is). Os prefixos d e 1 ou ( + ) e (-) são empregues para designar o sinal de rotação da luz polarizada no plano pelo composto, com (-) ou 1 significando que o composto é levógiro. Um composto com o prefixo (+) ou d é dextrógiro.

Um estereoisómero específico pode também ser referido como um enantiómero, e uma mistura de tais isómeros é, frequentemente, denominada uma mistura enantiomérica. Uma mistura de enantiómeros 50:50 é referida como uma mistura racémica ou um racemato, que pode ocorrer onde não existe estereosseleção ou estereo-especificidade numa reação ou processo químico. Os termos "mistura racémica" e "racemato" referem-se a uma mistura equimolar de duas espécies enantioméricas, desprovidas de atividade ótica. A presente invenção inclui um sal ou solvato dos compostos descritos no presente documento, incluindo combinações dos mesmos tais como um solvato de um sal. Os compostos da presente invenção podem existir como formas solvatadas, por exemplo hidratadas, bem como não solvatadas, e a presente invenção abrange todas as tais formas.

Tipicamente, mas não absolutamente, os sais da presente invenção são sais farmaceuticamente aceitáveis. Sais abrangidos no termo "sais farmaceuticamente aceitáveis" referem-se a sais não tóxicos dos compostos desta invenção.

Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis adequados incluem sais de adição de ácido inorgânico tais como cloreto, brometo, sulfato, fosfato e nitrato; sais de adição de ácido orgânico tais como acetato, galactarato, propionato, succinato, lactato, glicolato, malato, tartarato, citrato, maleato, fumarato, metanossulfonato, p-toluenossulfonato e ascorbato; sais com aminoácidos ácidos tais como aspartato e glutamato; sais de metal alcalino tais como um sal de sódio ou um sal de potássio; sais de metal alcalinoterroso tais como um sal de magnésio ou um sal de cálcio; sal de amónio; sais básicos orgânicos tais como sal de trimetilamina, sal de trietilamina, sal de piridina, sal de picolina, sal de diciclohexilamina e sal de N,N-dibenziletilenodiamina; e sais com aminoãcidos básicos tais como sal de lisina e sal de arginina. Os sais podem ser, em alguns casos, hidratos ou solvatos de etanol. 0 modificador "cerca de" utilizado em conexão com uma quantidade é inclusivo do valor indicado e tem o significado ditado pelo contexto (por exemplo, inclui o grau de erro associado com a medição da quantidade particular) ,

Sempre que um composto descrito no presente documento é substituído com mais de um do mesmo grupo designado, então será entendido que os grupos podem ser iguais ou diferentes, isto é, cada grupo é independentemente selecionado. Linhas onduladas,

indicam o local de uniões de ligação covalente às subestruturas, grupos, frações, ou átomos adjacentes.

Os compostos da invenção podem também existir como isómeros tautoméricos em certos casos. Embora apenas uma estrutura de ressonância deslocalizada possa ser representada, todas tais formas são contempladas no âmbito da invenção. Por exemplo, tautómeros ene-amina podem existir para purina, pirimidina, imidazol, guanidina, amidina e sistemas tetrazol e todas as suas possíveis formas tautoméricas estão dentro do âmbito da invenção.

Substituint.es selecionados que compreendem os compostos de fórmula I ou II podem estar presentes a um grau recursivo. Neste contexto, "substituinte recursivo" significa que um substituinte pode recitar um outro caso de si mesmo. As múltiplas recitações podem ser diretas ou indiretas através de uma sequência de outros substituintes. Devido à natureza recursiva de tais substituintes, teoricamente, um grande número de compostos pode estar presente em qualquer forma de realização dada. Um perito comum na especialidade de química médica entende que o número total de tais substituintes é razoavelmente limitado pelas propriedades desejadas do composto pretendido. Tais propriedades incluem, por meio de exemplo e não de limitação, propriedades físicas tais como massa molecular, solubilidade ou log P, propriedades de aplicação, tais como atividade contra o alvo pretendido, e propriedades práticas, tais como facilidade de síntese. Os substituintes recursivos podem ser um aspeto pretendido da invenção. Um perito comum na especialidade de química médica entende a versatilidade de tais substituintes. Na medida em que os substituintes recursivos estão presentes numa forma de realização da invenção, podem recitar outro exemplo de si mesmos, 0, 1, 2, 3 ou 4 vezes.

Os compostos de Fórmula I ou III também incluem moléculas que incorporam isótopos dos átomos especificados nas moléculas particulares. Exemplos não limitantes destes isótopos incluem D, T, 14C, 13C, 180 e 15N.

Grupos de proteção

No contexto da presente invenção, grupos de proteção incluem frações de profármaco e grupos químicos de proteção.

Os grupos de proteção estão disponíveis, são comumente conhecidos e utilizados, e são opcionalmente utilizados para evitar reações colaterais com o grupo protegido durante procedimentos sintéticos, isto é, rotas ou métodos para preparar os compostos da invenção. Para a maior parte a decisão de qual grupos proteger, quando fazê-lo, e a natureza do grupo de proteção químico "PG" será dependente da química da reação a ser protegida contra (por exemplo, condições ácidas, básicas, oxidativas ou outras) e a direção pretendida da síntese. Os grupos PG não precisam ser, e em geral não são, os mesmos se o composto é substituído com PG múltiplos. No geral, os PG será utilizados para proteger grupos funcionais tais como carboxilo, hidroxilo, tio ou grupos amino e assim prevenir reações secundárias ou de outro modo facilitar a eficiência sintética. A ordem da desproteção para render grupos desprotegidos livres é dependente da direção pretendida da síntese e das condições de reação a ser encontradas e pode ocorrer em qualquer ordem conforme determinado pelo perito. Vários grupos funcionais dos compostos da invenção podem ser protegidos. Por exemplo, grupos de proteção para grupos -OH (seja hidroxilo, ácido carboxílico, ácido fosfónico ou outras funções) incluem "grupos de formação de éter ou éster". Os grupos de formação de éter ou éster são capazes de funcionar como os grupos de proteção químicos nos esquemas sintéticos indicados no presente documento. No entanto, alguns grupos de proteção hidroxilo e tio não são grupos de formação nem de éter nem de éster, como será entendido pelos peritos na especialidade, e são incluídos com amidas, discutidos abaixo.

Um número muito grande de grupos de proteção de hidroxilo e grupos de formação de amida e as correspondentes reações de clivagem química são descritos em Protective Groups in Organic Synthesis, Theodora W. Greene e Peter G. M. Wuts (John Wiley & Sons, Inc., Nova Iorque, 1999, ISBN 0-471-16019-9) ("Greene"). Veja-se também Kocienski, Philip J.; Protecting Groups (Georg Thieme Verlag Stuttgart, Nova Iorque, 1994), que é incorporado no presente documento como referência na sua totalidade. Em particular o Capítulo 1, Protecting Groups: An Overview, páginas 1-20, capítulo 2, Hydroxyl Protecting Groups, páginas 21-94, capítulo 3, Diol Protecting Groups, páginas 95-117, capítulo 4, Carboxyl Protecting Groups, páginas 118-154, capítulo 5, Carbonyl Protecting Groups, páginas 155-184. Para grupos de proteção para ácido carboxílico, ácido fosfónico, fosfonato, ácido sulfónico e outros grupos de proteção para ácidos veja-se Greene conforme indicado abaixo. Tais grupos incluem a título de exemplo, e não de limitação, ésteres, amidas, hidrazidas e semelhantes.

Grupos de proteção de formação de Éter e Éster

Os grupos de formação de éster incluem: (1) grupos de formação de éster de fosfonato, tais como ésteres de fosfonamidato, ésteres de fosforotioato, ésteres de fosfonato e fosfon-bis-amidatos; (2) grupos de formação de éster de carboxilo, e (3) grupos de formação de éster de enxofre, tais como sulfonato, sulfato e sulfinato. Metabolitos dos compostos da invenção

Os produtos metabólicos in vivo dos compostos descritos no presente documento podem resultar da oxidação, redução, hidrólise, amidação, esterificação e semelhantes do composto administrado, principalmente devido a processos enzimáticos. Tais produtos tipicamente são identificados pela preparação de um composto radiomarcado (por exemplo, C14 ou H3) da invenção, administração dos mesmos parentericamente numa dose detetável (por exemplo, superior a cerca de 0,5 mgÁkg) a um animal tal como rato, ratinho, porquinho da índia, macaco ou a um homem, deixando suficiente tempo para que ocorra o metabolismo (tipicamente de cerca de 30 segundos a 30 horas) e isolamento dos seus produtos de conversão da urina, sangue ou outras amostras biológicas. Estes produtos são facilmente isolados uma vez que são marcados (outros são isolados pela utilização de anticorpos capazes de ligar epítopos que sobrevivem no metabolito). As estruturas de metabolito são determinadas de maneira convencional, por exemplo, por meio de análise de MS ou RMN. No geral, a análise de metabolitos é feita da mesma maneira como estudos de metabolismo de fãrmaco convencionais bem conhecidos pelos peritos na especialidade. Os produtos conversão, contanto que não sejam de outro modo encontrados in vivo, são úteis em ensaios de diagnóstico para dosagem terapêutica dos compostos da invenção mesmo se os próprios não possuem atividade anti-infetiva por si mesmos.

As definições e substituintes para diversos gêneros e subgêneros dos presentes compostos são descritos e ilustrados no presente documento. Deve ser entendido por um perito na especialidade que qualquer combinação das definições e substituintes descrita acima não deve resultar numa espécie ou composto inoperável. "Espécie ou composto inoperável" significa estruturas de composto que viola princípios científicos relevante (tal como, por exemplo, um átomo de carbono conectando mais que quatro ligações covalente) ou compostos instáveis demais para permitir o isolamento e formulação em formas farmacêuticas farmaceuticamente aceitável.

Formulações farmacêuticas

Os compostos desta invenção são formulados com veículos e excipientes convencionais, que serão selecionados de acordo com a prática ordinária. Comprimidos conterão excipientes, deslizantes, cargas, aglutinantes e semelhantes. Formulações aquosas são preparadas em forma estéril, e quando são destinadas para administração diferente de administração oral geralmente serão isotõnicas. Todas as formulações opcionalmente conterão excipientes tais como aqueles indicados no Handbook of Pharmaceutical Excipients (1986), incorporado no presente documento como referência na sua totalidade. Excipientes incluem ácido ascórbico e outros antioxidantes, agentes quelantes tais como EDTA, hidratos de carbono tais como dextrina, hidroxialquilcelulose, hidroxialquilmetilcelulose, ácido esteárico e semelhantes. 0 pH das formulações varia desde cerca de 3 a té cerca de 11, mas é ordinariamente de cerca de 7 a 10.

Embora seja possível para os ingredientes ativos serem administrados sozinho pode ser preferível apresentá-los como formulações farmacêuticas. As formulações da invenção, tanto para utilização veterinária e como para humana, compreendem pelo menos um ingrediente ativo, juntamente com um ou mais veículos aceitáveis, e opcionalmente outros ingredientes terapêuticos. Os veículos têm que ser "aceitáveis" no sentido de ser compatíveis com os outros ingredientes da formulação e fisiologicamente inócuos ao recebedor dos mesmos.

As formulações incluem aquelas adequadas para as vias de administração anteriores. As formulações podem de forma conveniente ser apresentadas em forma farmacêutica unitária e podem ser preparadas por meio de qualquer dos métodos bem conhecidos na especialidade de farmácia. As técnicas e formulações geralmente são encontradas em Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Co., Easton, Pa.), incorporado no presente documento como referência na sua totalidade. Tais métodos incluem a etapa de por em associação o ingrediente ativo com o veículo que constitui um ou mais ingredientes acessórios. Em geral as formulações são preparadas por uniformemente e intimamente por em associação o ingrediente ativo com veículos líquidos ou veículos sólidos finamente divididos ou ambos, e depois, se for necessário, dar forma ao produto.

Formulações da presente invenção adequadas para administração oral podem ser apresentadas como unidades diferenciadas tais como cápsulas, cachets ou comprimidos cada um dos quais contendo uma quantidade predeterminada do ingrediente ativo; como um pó ou grânulos; como uma solução ou uma suspensão num líquido aquoso ou não aquoso; ou como uma emulsão líquida de óleo-em-água ou uma emulsão líquida de água-em-óleo. 0 ingrediente ativo pode também ser administrado como um bolus, electuário ou pasta.

Um comprimido é preparado compressão ou moldagem, opcionalmente com um ou mais ingredientes acessórios. Comprimidos comprimidos podem ser preparados ao comprimir numa máquina adequada o ingrediente ativo numa forma de fluxo livre tal como um pó ou grânulos, opcionalmente misturado com um aglutinante, lubrificante, diluente inerte, conservante, tensioativo ou agente de dispersão. Comprimidos moldados podem ser feitos por meio de moldagem numa máquina adequada de uma mistura do ingrediente ativo em pó humedecido com um diluente líquido inerte. Os comprimidos podem opcionalmente ser revestidos ou marcados e opcionalmente são formulados de modo a fornecer libertação lenta ou controlada do ingrediente ativo.

Para administração ao olho ou outros tecidos externos, por exemplo, boca e pele, as formulações são preferentemente aplicadas como uma pomada tópica ou creme que contém os ingredientes ativos numa quantidade de, por exemplo, de 0,075 a 20ê pÁp (incluindo o(s) ingrediente(s) ativo(s) num intervalo entre Q,lê e 2Qê em incrementos de 0,lê pÁp tal como 0,6ê pÁp, 0,7ê pÁp, etc.), preferentemente de 0,2 a 15 ê pÁp e o mais preferentemente de 0,5 a 10 ê pÁp. Quando formulados numa pomada, os ingredientes ativos podem ser utilizados com uma base de pomada parafínica ou uma miscível água. Alternativamente, os ingredientes ativos podem ser formulados num creme com uma base de creme de óleo-em-água.

Se for desejado, a fase aquosa da base de creme pode incluir, por exemplo, pelo menos 3 0ê pÁp de um álcool polihídrico, isto é, um álcool que tem dois ou mais grupos hidroxilo tais como propileno glicol, butano 1,3-diol, manitol, sorbitol, glicerol ou polietilenoglicol (incluindo PEG 400) e misturas dos mesmos. As formulações tópicas podem desejavelmente incluir um composto que melhora a absorção ou penetração do ingrediente ativo através da pele ou outras áreas afectadas. Exemplos de tais melhoradores de penetração dérmica incluem sulfóxido de dimetilo e análogos relacionados. A fase de óleo das emulsões desta invenção pode ser constituída de ingredientes conhecidos numa maneira conhecida. Embora a fase possa compreender meramente um emulsionante (de outro modo conhecido como um emulgente), desejavelmente compreende uma mistura de pelo menos um emulsionante com uma gordura ou um óleo ou com tanto uma gordura como um óleo. Preferentemente, um emulsionante hidrofílico é incluído juntamente com um emulsionante lipofílico que age como um estabilizante. É também preferido incluir tanto um óleo como uma gordura. Juntamente, os emulsionant.es com ou sem estabilizantes compõem a denominada cera de emulsificação, e a cera juntamente com o óleo e a gordura compõem a denominada base de pomada de emulsificação que forma a fase dispersa oleosa das formulações de creme.

Emulgentes e estabilizantes de emulsão adequados para a utilização na formulação da invenção incluem Tween® 60, Span® 80, álcool cetoestearílico, álcool benzilico, álcool miristílico, mono-estearato de glicerilo e lauril sulfato de sódio. A escolha dos óleos ou gorduras adequadas para a formulação baseia-se em conseguir as propriedades cosméticas desejadas. 0 creme deve preferentemente ser um produto não gorduroso, que não mancha e lavável com consistência adequada para evitar o vazamento de tubos ou outros recipientes. Ésteres alquílicos de cadeia linear ou ramificada mono- ou dibásicos tais como di-isoadipato, estearato de isocetilo, propileno glicol diéster de ácidos gordos de coco, miristato de isopropilo, oleato de decilo, palmitato de isopropilo, estearato de butilo, palmitato de 2-etilhexilo ou uma mistura de ésteres de cadeia ramificada conhecidos como Crodamol GAP podem ser utilizados, os últimos três sendo ésteres preferidos. Estes podem ser utilizados em separado ou em combinação dependendo das propriedades requeridas. Alternativamente, lípidos com alto ponto de fusão tais como parafina branca macia eÁou parafina líquida ou outros óleos minerais são utilizados.

Formulações farmacêuticas de acordo com a presente invenção compreendem um ou mais compostos da invenção juntamente com um ou mais veículos farmaceuticamente aceitáveis ou excipientes e opcionalmente outros agentes terapêuticos. As formulações farmacêuticas que contêm o ingrediente ativo podem estar em qualquer forma adequada para o método pretendido de administração. Quando utilizadas para a utilização oral, por exemplo, comprimidos, trociscos, pastilhas para chupar, suspensões aquosas ou oleosas, põs ou grânulos dispersáveis, emulsões, cápsulas duras ou moles, xaropes ou elixires podem ser preparados. As composições destinadas para utilização oral podem ser preparadas de acordo com qualquer método conhecido na especialidade para o fabrico de composições farmacêuticas e tais composições podem conter um ou mais agentes que incluem agentes edulcorantes, agentes aromatizantes, agentes corantes e agentes conservantes, com a finalidade de proporcionar uma preparação palatável. Comprimidos que contêm os ingredientes ativos em mistura com um excipientes farmaceuticamente aceitáveis não tóxicos que são adequados para o fabrico de comprimidos são aceitáveis. Estes excipientes podem ser, por exemplo, diluentes inertes, tais como carbonato de cálcio ou de sódio, lactose, lactose monohidrato, croscarmelose de sódio, povidona, fosfato de cálcio ou sódio; agentes de granulação e de desintegração, tais como amido de milho ou ácido algínico; agentes de ligação, tal como celulose, celulose microcristalina, amido, gelatina ou acácia; e agentes lubrificantes, tais como estereato de magnésio, ácido esteárico ou talco. Os comprimidos podem ser não revestidos ou podem ser revestidos através de técnicas conhecidas incluindo microencapsulação para atrasar a desintegração e adsorção no trato gastrointestinal e proporcionar assim uma ação contínua durante um período mais longo. Por exemplo, um material retardador tal como o monoestearato de glicerilo ou diestearato de glicerilo sozinho ou com cera pode ser empregue.

As formulações para utilização oral podem também ser apresentadas como cápsulas de gelatina duras, em que o ingrediente ativo está misturado com um diluente sólido inerte, por exemplo fosfato de cálcio ou caulino, ou como cápsulas de gelatina moles em que o ingrediente ativo está misturado com água ou um meio oleoso, tal como óleo de amendoim, parafina líquida ou óleo de oliva.

Suspensões aquosas da invenção contêm os materiais ativos em mistura com excipientes adequados para o fabrico de suspensões aquosas. Tais excipientes incluem um agente de suspensão, como carboximetilcelulose de sódio, metilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose, alginato de sódio, polivinilpirrolidona, goma tragacanto e goma acácia, e agentes dispersantes ou humectantes tais como um fosfatídeo que ocorre naturalmente (por exemplo, lecitina), um produto da condensação de um óxido de alquileno com um ácido gordo (por exemplo, estearato de polioxietileno) , um produto da condensação de óxido de etileno com um álcool alifãtico de cadeia longa (por exemplo, heptadecaetilenooxicetanol), um produto da condensação de óxido de etileno com um éster parcial derivado a partir de um ácido gordo e anidrido de hexitol (por exemplo, monooleato de polioxietileno sorbitano). A suspensão aquosa pode também conter um ou mais conservantes tais como p-hidroxi-benzoato de etilo ou n-propilo, um ou mais agentes corantes, um ou mais agentes aromatizantes e um ou mais agentes adoçantes, como sacarose ou sacarina.

Suspensões oleosas podem ser formuladas por meio da suspensão do ingrediente ativo num óleo vegetal, tal como óleo de amendoim, óleo de oliva, óleo de gergelim ou óleo de coco, ou num óleo mineral tal como parafina líquida. As suspensões orais podem conter um agente espessante, tal como cera de abelha, parafina sólida ou álcool cetílico. Agentes adoçantes, tais como aqueles indicados no presente documento, e agentes aromatizantes podem ser adicionados para proporcionar uma preparação oral palatãvel. Estas composições podem ser conservadas pela adição de um antioxidante tal como ácido ascórbico. Põs e grânulos dispersíveis da invenção adequados para a preparação de uma suspensão aquosa pela adição de água fornecem o ingrediente ativo em mistura com um agente dispersante ou humetante, um agente de suspensão e um ou mais conservantes. Agentes dispersantes ou humectantes e agentes de suspensão adequados são exemplificados por aqueles divulgados acima. Excipientes adicionais, por exemplo agentes edulcorantes, aromatizantes e corantes, podem também estar presentes.

As composições farmacêuticas da invenção podem também estar na forma de emulsões de óleo-em-água. A fase oleosa podem ser um óleo vegetal, tal como óleo de oliva ou óleo de amendoim, um óleo mineral, tal como parafina líquida ou uma mistura dos mesmos. Agentes emulsificantes adequados incluem gomas que ocorrem naturalmente, tais como goma acácia ou goma tragacanto, fosfatídeos que ocorrem naturalmente, tais como lecitina de soja, ésteres ou ésteres parciais derivados de ácidos gordos e anidridos de hexitol, tais como monooleato de sorbitano, e produtos da condensação destes ésteres parciais com óxido de etileno, tais como monooleato de polioxietileno sorbitano. A emulsão pode conter também agentes edulcorantes e aromatizantes. Xaropes e elixires podem ser formulados com agentes edulcorantes, tais como glicerol, sorbitol ou sacarose. Tais formulações podem conter também um demulcente, um conservante, um agente aromatizante ou corante.

As composições farmacêuticas da invenção podem estar sob a forma de uma preparação injetável estéril, tal como uma suspensão aquosa ou oleaginosa injetável estéril. Esta suspensão pode ser formulada de acordo com o estado da técnica utilizando aqueles agentes dispersantes ou humectantes e agentes de suspensão adequados que foram mencionados no presente documento. A preparação injetável estéril pode também ser uma solução ou suspensão injetável estéril num diluent, e ou solvente não tóxico parentericamente aceitável, tal como uma solução em 1,3-butano-diol ou preparado como um pó liofilizado. Entre os veículos e solventes aceitáveis que podem ser empregues estão água, solução de Ringer e solução de cloreto de sódio isotónica. Adicionalmente, óleos fixos estéreis podem ser convencionalmente empregues como um solvente ou meio de suspensão. Para este propósito, qualquer óleo fixo suave pode ser empregue, incluindo mono- ou diglicéridos sintéticos. Adicionalmente, ácidos gordos tais como ácido oleico podem igualmente ser utilizados na preparação de inj etãveis. A quantidade de ingrediente ativo que pode ser combinada com o material de veículo para produzir uma forma farmacêutica individual variará dependendo do hospedeiro tratado e o modo particular de administração. Por exemplo, uma formulação de libertação no tempo pretendida para administração oral a seres humanos podem conter de aproximadamente 1 a 1000 mg de material ativo composto com uma quantidade apropriada e conveniente de material de veículo que pode variar desde cerca de 5 até cerca de 950 das composições totais (peso:peso). A composição farmacêutica pode ser preparada para fornecer quantidades facilmente mensuráveis para administração. Por exemplo, uma solução aquosa destinada a infusão intravenosa pode conter desde cerca de 3 até 500 pg do ingrediente ativo por mililitro de solução com a finalidade de que infusão de um volume adequado numa taxa de cerca de 3 0 mlÁh possa ocorrer.

Formulações adequadas para administração ao olho incluem gotas oculares em que o ingrediente ativo é dissolvido ou suspenso num veículo adequado, especialmente um solvente aquoso para o ingrediente ativo. 0 ingrediente ativo está preferentemente presente em tais formulações numa concentração de 0,5 a 2 0ê, vantajosamente de 0,5 a lOê, particularmente cerca de l,5ê pÁp.

As formulações adequadas para administração tópica na boca incluem pastilhas que compreendem o ingrediente ativo numa base aromatizada, normalmente sacarose e acácia ou tragacanto; pastilhas que compreendem o ingrediente ativo numa base inerte tal como gelatina e glicerina ou sacarose e acácia; e colutórios que compreendem o ingrediente ativo num veículo líquido adequado.

Formulações para administração retal podem estar presentes como um supositório com uma base adequada que compreende, por exemplo, manteiga de cacau ou um salicilato.

Formulações adequadas para administração intrapulmonar ou nasal tS m um tamanho de partícula, por exemplo, no intervalo de 0,1 a 500 pm (que inclui tamanhos de partícula num intervalo entre 0,1 e 500 pm em incrementos tais como 0,5 pm, 1 pm, 30 pm, 35 pm, etc.), que é administrada por meio de inalação rápida através da passagem nasal ou por meio de inalação através da boca de modo a alcançar os sacos alveolares. Formulações adequadas incluem soluções aquosas ou oleosas do ingrediente ativo. Formulações adequadas para administração em aerossol ou pó seco podem ser preparadas de acordo com métodos convencionais e podem ser administradas com outros agentes terapS uticos áis como compostos até agora utilizados no tratamento ou profilaxia de infeções por HVC como descrito no presente documento.

As formulações adequadas para administração vaginal podem ser apresentadas como pessários, tampões, cremes, géis, pastas, espumas ou formulações em pulverização contendo para além do ingrediente ativo tais veículos como são conhecidos na técnica como sendo apropriados.

Formulações adequadas para administração parentérica incluem soluções de injeção aquosas e não aquosas estéreis que podem conter antioxidantes, tampões, bacteriostãticos e solutos que tornam a formulação isotónica com o sangue do recetor pretendido; e suspensões estéreis aquosas e não aquosas que podem incluir agentes de suspensão e agentes espessantes.

As formulações são apresentadas em recipientes de dose unitária ou multi-dose, por exemplo, frascos e ampolas vedadas, e podem ser armazenadas numa condição seca por congelamento (liofilizado) que requer somente a adição do veículo líquido estéril, por exemplo, água para injeção, imediatamente antes da utilização. Soluções e suspensões de injeção extemporâneas são preparadas a partir de põs, grânulos e comprimidos estéreis do tipo previamente descrito. Formulações farmacêuticas unitárias preferidas são aquelas que contêm uma dose diária ou sub-dose diária unitária, conforme recitado acima no presente documento, ou uma fração apropriada das mesmas, do ingrediente ativo.

Deve ser entendido que para além dos ingredientes particularmente mencionados acima, as formulações desta invenção podem incluir outros agentes convencionais na especialidade que tem relação com o tipo de formulação em questão, por exemplo, aqueles adequados para administração oral podem incluir agentes aromatizantes.

Os compostos da invenção podem também ser formulados para fornecer libertação controlada do ingrediente ativo para permitir dosagem menos frequente ou melhorar a farmacocinética ou perfil de toxicidade do ingrediente ativo. Consequentemente, a invenção também proporciona composições que compreendem um ou mais compostos da invenção formulados para libertação sustentada ou controlada. A dose eficaz de um ingrediente ativo depende pelo menos da natureza da condição patológica a ser tratada, toxicidade, se o composto está a ser utilizado profilaticamente (doses menores) ou contra uma infeção virai ativa, o método de administração e a formulação farmacêutica, e será determinada pelo clínico utilizando estudos de escalonamento de dose convencionais. A dose eficaz pode ser esperada que seja desde cerca de 0,0001 até cerca de 100 mgÁkg de peso corporal por dia; tipicamente, desde cerca de 0,01 até cerca de 10 mgÁkg de peso corporal por dia; mais tipicamente, desde cerca de 0,01 até cerca de 5 mgÁkg de peso corporal por dia; o mais tipicamente, desde cerca de 0,05 até cerca de 0,5 mgÁkg de peso corporal por dia. Por exemplo, a dose diária candidata para um ser humano adulto de aproximadamente 70 kg de peso corporal variará desde 1 mg até 1000 mg, preferentemente entre 5 mg e 500 mg, e pode tomar a forma de doses individuais ou múltiplas.

Ainda noutra forma de realização, o presente pedido divulga composições farmacêuticas que compreendem um composto de Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um excipiente ou veículo farmaceuticamente aceitável.

Vias de Administração

Um ou mais compostos da invenção (no presente documento referido como o ingredientes ativos) são administrados por qualquer via apropriada para a condição patológica a ser tratada. As vias adequadas incluem oral, retal, nasal, tópica (incluindo bucal e sublingual), vaginal e parentérica (incluindo subcutânea, intramuscular, intravenosa, intradérmica, intratecal e epidural), e semelhantes. Será apreciado que a via preferida pode variar

com, por exemplo, a condição patológica do recetor. Uma vantagem dos compostos desta invenção é que são oralmente biodisponíveis e podem ser dosifiçados oralmente. Terapêutica de Combinação, incluindo terapêutica de combinação de HCV

Noutra forma de realização, os compostos da presente invenção podem ser combinados com um ou mais agentes ativos. Exemplos não limitantes de combinações adequadas incluem combinações de um ou mais compostos da presente invenção com um ou mais interferões, ribavirina ou seus análogos, inibidores de HCV NS3 protease, inibidores de NS5a, inibidores de alfa-glicosidase 1, hepatoprotetores, antagonistas de mevalonato decarboxilase, antagonistas do sistema renina-angiotensina, outros agentes anti-fibróticos, inibidores de nucleõsido ou nucleótido de HCV NS5B polimerase, inibidores não nucleõsido de HCV NS5B polimerase, inibidores de HCV NS5A, agonistas de TLR-7, inibidores de ciclofilina, inibidores de HCV IRES, potenciadores farmacocinéticos e outros fármacos para o tratamento de HCV.

Mais especificamente, um ou mais compostos da presente invenção podem ser combinados com um ou mais compostos selecionados a partir do grupo que consiste em 1) inteferões, por exemplo, rIFN-alfa 2b pegilado, (PEG-

Intron), rIFN-alfa 2a pegilado, (Pegasys), rIFN-alfa 2b (Intron A) , rIFN-alfa 2a (Roferon-A) , inteferão alfa (MOR-22, OPC-18, Alfaferona, Alfanativa, Multiferon, subalin), interferão alfacon-1 (Infergen), inteferão alfa-nl (Wellferon), inteferão alfa-n3 (Alferon), inteferão -beta (Avonex, DL-8234), inteferão -ómega (omega DUROS, Biomed 510) , albinteferão alfa-2b (Albuferon), IFN alfa XL, BLX-883 (Locteron), DA-3021, inteferão glicosilado alfa-2b (AVI-005), PEG-Infergen, inteferão pegilado lambda (PEGylated IL-29) e belerofon, 2) ribavirina e seus análogos, por exemplo, ribavirina (Rebetol, Copegus) e taribavirina (Viramidina), 3) inibidores de HCV NS3 protease, por exemplo, boceprevir (SCH-503034, SCH-7), telaprevir (VX-950), VX- 813, TMC-435 (TMC435350), ABT-450, BI-201335, BI-1230, MK-7009, SCH-900518, VBY-376, VX-500, GS-9256, GS-9451, BMS-790052, BMS-605339, PHX-1766, AS-101, YH-5258, YH5530, YH5531 e ITMN-191 (R-7227), 4) inibidores de alfa-glucosidase 1, por exemplo, celgosivir (MX-3253), Miglitol e UT-231 B, 5) hepatoprotetores, por exemplo, emericasan (IDN-6556), ME-3738, GS-9450 (LB-84451), silibilin e MitoQ,

6) inibidores nucleósido ou nucleótido de HCV NS5B polimerase, por exemplo, R1626, R7128 (R4048), IDX184, IDX-102, PSI-7851, BCX-4678, valopicitabina (NM-283) e MK-0608, 7) inibidores não nucleósido de HCV NS5B polimerase, por exemplo, filibuvir (PF-868554), ABT-333, ABT-072, BI- 207127, VCH-759, VCH-916, JTK-652, MK-3281, VBY-708, VCH-222, A848837, ANA-598, GL60667, GL59728, A-63890, A- 48773, A-4S547, BC-2329, VCH-796 (nesbuvir), GSK625433, BILN-1941, XTL-2125 e GS-9190, 8) inibidores de HCV NS5A, por exemplo, AZD-2836 (A-831), AZD-7295 (A-689) e BMS-790052, 9) agonistas de TLR-7,, por exemplo, imiquimod, 852A, GS- 9524, ANA-773, ANA-975, AZD-8848 (DSP-3025), PF-04878691 e SM-3 6 0 3 2 0, 10) inibidores de ciclofilina, por exemplo, DEBIO-025, SCY-635 e NIM811, 11) inibidores de HCV IRES, por exemplo, MCI-067, 12) melhoradores farmacocinéticos, por exemplo, BAS-100, SPI-452, PF-4194477, TMC-41629, GS-9350, GS-9585 e roxitromicina, 13) outros fãrmacos para o tratamento de HCV, por exemplo, timosina alfa 1 (Zadaxin), nitazoxanida (alinea), NTZ), BIVN-401 (virostat), PYN-17 (altirex), KPE02 003 002, actilon (CPG-10101) , GS-9525, KRN-7000, civacir, GI- 5005, XTL-6 86 5, BIT225, PTX-111, ITX2865, TT-033i, ANA 971, NOV-205, tarvacin, EHC-18, VGX-410C, EMZ-702, AVI 4065, BMS-65QQ32, BMS-791325, Bavituximab, MDX- 1106 (ONO-4538), Oglufanide, FK-788 e VX-497 (merimepodib). 14) antagonistas de mevalonato decarboxilase, por exemplo, estatinas, inibidores de HMGCoA sintase (por exemplo, himeglusina), inibidores de síntese de esqualeno (por exemplo, ácido zaragózico); 15) antagonistas do recetor de angiotensina II, por exemplo, losartan, irbesartan, olmesartan, candesartan, valsartan, telmisartan, eprosartan; 16) inibidores da enzima de conversão de angiotensina, por exemplo, captopril, zofenopril, enalapril, ramipril, quinapril, perindopril, lisinopril, benazepril, fosinopril; 17) outros agentes anti-fibróticos, por exemplo, amilorida e 18) antagonistas de endotelina, por exemplo, bosentan e ambrisentan.

Ainda noutra forma de realização, o presente pedido divulga composições farmacêuticas que compreendem um composto da presente invenção ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com pelo menos um agente ativo adicional, e um excipiente ou veículo farmaceuticamente aceitável. Ainda noutra forma de realização, o presente pedido fornece um agente farmacêutico de combinação com dois ou mais agentes terapêuticos numa forma farmacêutica unitária. Consequentemente, é também possível combinar qualquer composto da invenção com um ou mais outros agentes ativos numa forma farmacêutica unitária. A terapêutica de combinação pode ser administrada como um regime simultâneo ou sequencial. Quando é administrada sequencialmente, a combinação pode ser administrada em duas ou mais administrações. A co-administração de um composto da invenção com um ou mais outros agentes ativos geralmente se refere à administração simultânea ou sequencial de um composto da invenção e um ou mais outros agentes ativos, tal que as quantidades terapeuticamente eficazes do composto da invenção e um ou mais outros agentes ativos estão ambas presentes no corpo do paciente. A co-administração inclui a administração de dosagens unitárias dos compostos da invenção antes de ou após a administração de dosagens unitárias de um ou mais outros agentes ativos, por exemplo, por exemplo, a administração dos compostos da invenção dentro de segundos, minutos ou horas da administração de um ou mais outros agentes ativos. Por exemplo, uma dose unitária de um composto da invenção pode ser administrada em primeiro lugar, seguida dentro de segundos ou minutos pela administração de uma dose unitária de um ou mais outros agentes ativos. Alternativamente, uma dose unitária de um ou mais outros agentes ativos pode ser administrada em primeiro lugar, seguido pela administração de uma dose unitária de um composto da invenção dentro de segundos ou minutos. Nalguns casos, pode ser desejável administrar uma dose unitária de um composto da invenção em primeiro lugar, seguido, após um período de horas (por exemplo, 1-12 horas), pela administração de uma dose unitária de um ou mais outros agentes ativos. Em outros casos, pode ser desejável administrar uma dose unitária de um ou mais outros agentes ativos em primeiro lugar, seguido, após um período de horas (por exemplo, 1-12 horas) , pela administração de uma dose unitária de um composto da invenção. A terapêutica de combinação pode fornecer '’sinergia" e "efeito sinérgico", isto é, o efeito alcançado quando os ingredientes ativos utilizados juntamente é superior à soma dos efeitos que resultam da utilização dos compostos separadamente. Um efeito sinérgico pode ser conseguido quando os ingredientes ativos são: (1) co-formulados e administrados ou distribuídos simultaneamente numa formulação combinada; (2) distribuídos por alternância ou em paralelo como formulações separadas; ou (3) por algum outro regime. Quando são distribuídos em terapêutica de alternância, um efeito sinérgico pode ser conseguido quando os compostos são administrados ou distribuídos sequencialmente, por exemplo, em comprimidos separados, pílulas ou cápsulas, ou através de injeções diferentes em seringas separadas. No geral, durante a terapêutica de alternância, uma dosagem eficaz de cada ingrediente ativo é administrada sequencialmente, ou seja em série, enquanto na terapêutica de combinação, as dosagens eficazes de dois ou mais ingredientes ativos são administradas em conjunto. A presente invenção divulga compostos para utilização em métodos de tratamento de HCV num paciente, que compreende: administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I ou III, ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato eÁou éster do mesmo. Num aspeto preferido, o composto de fórmula I ou III é, pelo menos, 70% um diastereómero individual, 80% um diastereómero individual, 90% um diastereómero individual ou o mais preferentemente 95% um diastereómero individual. A presente invenção também divulga compostos para utilização em métodos de tratamento de HCV num paciente, que compreende: administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I ou III, ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato eÁou éster do mesmo, e pelo menos um agente terapêutico ativo adicional. Num aspeto preferido, o composto de fórmula I ou III é, pelo menos, 70% um diastereómero individual, 80% um diastereómero individual, 90% um diastereómero individual ou o mais preferentemente 95% um diastereómero individual. A presente invenção também divulga compostos para utilização em métodos de tratamento de HCV num paciente, que compreende: administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I ou III, ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato eÁou éster do mesmo, e pelo menos um agente terapêutico adicional selecionado a partir do grupo que consiste em um ou mais compostos da presente invenção com um ou mais interferões, ribavirina ou seus análogos, inibidores de HCV NS3 protease, inibidores de NS5a, inibidores de alfa-glicosidase 1, hepatoprotetores, antagonistas de mevalonato decarboxilase, antagonistas do sistema renina-angiotensina, outros agentes anti-fibróticos, inibidores de nucleósido ou nucleótido de HCV NS5B polimerase, inibidores não nucleósido de HCV NS5B polimerase, inibidores de HCV NS5A, agonistas de TLR-7, inibidores de ciclofilina, inibidores de HCV IRES, potenciadores farmacocinéticos e outros fãrmacos para o tratamento de HCV. Num aspeto preferido, o composto de fórmula I ou III é, pelo menos, 7 0ê um diastereómero individual, 80ê um diastereómero individual, 90ê um diastereómero individual ou o mais preferentemente 95ê um diastereómero individual.

Em ainda uma outra forma de realização, o presente pedido proporciona a utilização de um composto da Fórmula I ou III, ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato eÁou éster do mesmo, para a preparação de um medicamento para tratar uma infeção por HCV num paciente. Num aspeto preferido desta forma de realização, o composto de fórmula I ou III é, pelo menos, 7 0ê um diastereómero individual, 80ê um diastereómero individual, 90ê um diastereómero individual ou o mais preferentemente 95ê um diastereómero individual.

Em ainda uma outra forma de realização, o presente pedido proporciona a utilização de um composto da Fórmula I ou III, ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato eÁou éster do mesmo, para o tratamento de uma infeção por HCV. Num aspeto preferido desta forma de realização, o composto de fórmula I ou III é, pelo menos, 70ê um diastereómero individual, 80ê um diastereómero individual, 90ê um diastereómero individual ou o mais preferentemente 95ê um diastereómero individual.

Como será apreciado pelos peritos na especialidade, quando se trata uma infeção virai tal como HCV, tal tratamento pode ser caracterizado de uma variedade de formas e medido por uma variedade de critérios de avaliação. Pretende-se que o âmbito da presente invenção abranja a totalidade de tais caracterizações.

Exemplos sintéticos

Certas abreviaturas e acrónimos são utilizados na descrição de detalhes experimentais. Embora a maioria destes seria entendido por um perito na especialidade, o Quadro 1 contém uma lista de muitas destas abreviaturas e acrónimos.

Quadro 1. Lista de abreviaturas e acrónimos.

Esquemas gerais

Os compostos desta invenção podem ser sintetizados por meio de diversas rotas com etapa de formação de ligação chave conforme indicado nos esquemas A-C, em que o substituinte carboxilato R indica um grupo de proteção tal como um éster alquílico (onde for necessário) ou o próprio ácido livre. Os grupos de proteção de éster alquílico são removidos convenientemente por meio de saponificação com um hidróxidos de metal alcalino num solvente prótico tal como água ou um álcool e pode ser facilitado pela utilização de misturas de solventes etéreos eÁou aquecimento.

Alternativamente podem ser removidos pela desalquilação através de aquecimento com um haleto de metal alcalino num solvente aprótico. Conforme será apreciado, todos os substituintes em HET podem ser modificados subsequentes a outras etapa de formação de ligação por meio de, por exemplo, N-oxidação com um oxidante típico tal como ácido metacloroperbenzoico num solvente tal como diclorometano, O-desalquilação através de tratamento com um reagente al como tribrometo de boro num solvente tal como diclorometano ou hidrólise.

Esquema A

A ligação entre L e Het pode ser formada por deslocamento de X em Het, onde X é um grupo abandonante tais como haleto, sulfinato, sulfonato ou fração fosfato. A reação é convenientemente realizada pela desprotonação de L-H com uma base tal como hidreto de sódio ou hexametildisililazida de potássio, ou é facilitada pela presença de uma amina terciária; pode ser levada a cabo numa variedade de solventes tais como THF, dioxano, diclorometano, NMP, DMF ou DMSO e pode ser acelerada por meio de aquecimento.

Esquema B

A ligação entre R3 e L pode ser formada por meio de deslocamento nucleofílico de um grupo abandonante X em R3. 0 grupo abandonante pode variar amplamente e inclui, mas não está limitado a, haleto, carboxilato, sulfinato, sulfonato ou frações fosfato, e pode ser gerado a partir do álcool correspondente in situ através do tratamento com reagentes tais como azodicarboxilatos de dialquilo. A reação também pode ser facilitada pela desprotonação de Het-L-H com uma base tal como hidreto de sódio ou hexametildisililazida de potássio, ou é facilitada pela presença de uma amina terciária; pode ser levada a cabo numa variedade de solventes tais como THF, dioxano, diclorometano, NMP, DMF ou DMSO e pode ser acelerada por meio de aquecimento.

Esquema C

0 material de partida no Esquema A pode ser sintetizado conforme representado no Esquema C. 3-aminotiofenos substituídos II podem ser gerados pela aminação redutora de Y-RÍ-L-R (onde Y indica um aldeído ou cetona e R e Ra representam grupos de proteção opcionais), pu pela alquilação direta (onde Y indica um grupo abandonante tal como haleto, sulfinato, sulfonato ou fração fosfato) do 3-aminotiofeno I (veja-se o pedido de patente WO2008Á5S393) . No último caso a alquilação pode ser facilitada pela desprotonação da amina com uma base tal como hidreto de sódio ou hexametildissililazida de potássio, e pode ser levada a cabo numa variedade de solventes tais como THF, dioxano, diclorometano, NMP, DMF ou DMSO e pode ser acelerada por meio de aquecimento. Nos casos em que RJ é aromático, a reação pode ser catalisada por Pd (J. Org. Chem., 2000, 65, 1158-1174). Alternativamente II pode ser gerado pelo acoplamento de uma amina com um 3-iodotiofeno IV catalisado por Pd (J. Org. Chem., 2000, 65, 1158-1174) . A amina II é convertida à amida III pela acilação com um derivados de ácido carboxílico tal como um cloreto de acilo ou anidrido na presença de uma base tal como piridina ou uma amina terciária num solvente inerte tal como diclorometano. Alternativamente IV pode ser convertido a III diretamente pela amidação catalisada por Cu (J. Am. Chem. Soc. , 2002, 124, 7421-7428). 0 material de partida para o Esquema B pode ser gerado de uma maneira análoga, com o grupo abandonante X sendo gerado numa etapa final por meio de métodos padrão a partir do álcool precursor. A síntese do iodotiofeno IV é ilustrada abaixo para o caso onde R1 ™ tBu, e outras variantes podem ser sintetizadas de uma maneira análoga:

Esquema D

A uma solução de ácido 5-(3,3-Dimetil-but-l-inil)-tiofeno-2-carboxílico (6,2 g, 30 mmol; veja-se o pedido de patente US5861421) em THF (100 ml) foi adicionado uma solução de nBuLi (2,0 M em pentano, 33 ml, 66 mmol) via um funil de adição a -78 °C. Após a adição, a reação foi agitada a -78 °C durante 1 h. Uma solução de I2 (7,7 g, 30 mmol) em THF (100 ml) foi adicionado lentamente (ca. 15 min) ao balão. Após mais 10 minutos, a reação foi extinta com HC1 a 1 N (50 ml) e aquecida até temperatura ambiente. Os voláteis foram removidos a vácuo e o resíduo dissolvido em éter (500 ml). A solução orgânica foi lavada com Na2S203 a 1 M (100 ml x 2), salmoura (100 ml) e seca em Na2S04. Após ser concentrado a vácuo, o resíduo foi purificado por meio de cromatografia em gel de sílica (EtOAcÁhexanos) para dar ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3-iodo-tiofeno-2-carboxílico (5,9 g, 65ê) como um sólido branco.

Esquema E

A uma solução de ácido 5-(3,3-Dimetil-but-l-inil)-3-iodo-tiofeno-2-carboxílico (1,0 g, 3,0 mmol) e DMF (20 μΐ) em diclorometano seco (10 ml) foi adicionado cloreto de oxalilo (508 μΐ, 6,0 mmol) à temperatura ambiente. Depois de ser agitada à temperatura ambiente durante 90 min, a reação foi concentrada a vácuo para remover os voláteis. 0 resíduo foi dissolvido em piridina (5 ml) e metanol (5 ml) e agitado durante 2 h. Os voláteis foram removidos a vácuo e o resíduo foi dividido entre éter (150 ml) e solução saturada de NH4C1 (50 ml) . A camada orgânica foi lavada com solução saturada de NH4C1 (50 ml) e seca em Na2S04. Após concentração a vácuo, o resíduo foi purificado por meio de cromatografia em gel de sílica (EtOAcÁhexanos) para dar o produto desejado (835 mg, 80ê). Síntese de éster etílico do ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil) -3-iodo-tiofeno-2-carboxílico

Esauema 8

Uma mistura de éster etílico do ácido 5-bromo-tiofeno-2-carboxílico (7g, 30 mmol) , iodeto de cobre (1,2 g, 6 mmol) , trietilamina (20 ml) em DMF (100 ml) foi desgaseifiçado numa garrafa de pressão de 350 ml. Depois tris(dibenzilidenoacetona)dipalãdio(0) (2,1 g, 3 mmol) e 3,3-dimetil-but-l-ino (18,3 ml, 150 mmol) foram adicionados e aquecidos a 80 graus durante 3 horas. A mistura de reação foi filtrada em celite e lavada com acetato de etilo. A solução foi diluída com água e extraída duas vezes com acetato de etilo. As fases orgânicas foram combinadas e lavadas com água. Após secagem e concentração, o resíduo bruto foi purificado por meio de cromatografia flash para render 6,9 g (95%) de éster etílico do ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-tiofeno-2-carboxílico como um óleo amarelo.

Uma solução de éster etílico do ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-tiofeno-2-carboxílico (6,9 g) em THF (100 ml) foi adicionado LiOH (1,5 N, 100 ml) . A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. A reação foi acidificada com HC1 até pH ™ 2, depois remover os voláteis sob vácuo. 0 sólido de cor bege resultante foi recolhido através de filtração, lavado com água depois seco durante a noite para dar 6,2 g do produto que foi utilizado sem purificação adicional. A uma solução de ácido 5-(3,3-Dimetil-but-l-inil)- tiofeno-2-carboxílico {6,2 g, 30 mmol; veja-se o pedido de patente US5861421) em THF (100 ml) foi adicionado uma solução de nBuLi (2,0 M em pentano, 33 ml, 66 mmol) via um funil de adição a -78 °C. Após a adição, a reação foi agitada a -78 °C durante 1 h. Uma solução de I2 (7,7 g, 30 mmol) em THF (100 ml) foi adicionado lentamente (ca. 15 min) ao balão. Após mais 10 minutos, a reação foi extinta com HC1 a 1 N (50 ml) e aquecida até temperatura ambiente. Os voláteis foram removidos a vácuo e o resíduo dissolvido em éter (500 ml). A solução orgânica foi lavada com Na2S203 a 1 M (100 ml x 2), salmoura (100 ml) e seca em Na2S04. Após ser concentrado a vácuo, o resíduo foi purificado por meio de cromatografia em gel de sílica (EtOAcÁhexanos) para dar ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3-iodo-tiofeno-2-carboxílico (5,9 g, 65ê) como um sólido branco. A uma solução de ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3-iodo-tiof eno-2-carboxí lico (1,0 g, 3,0 mmol) e DMF (20 μΐ) em diclorometano seco (10 ml) foi adicionado cloreto de oxalilo (508 μΐ, 6,0 mmol) à temperatura ambiente. Depois de ser agitada à temperatura ambiente durante 90 min, a reação foi concentrada a vácuo para remover os voláteis. 0 resíduo foi dissolvido em piridina (5 ml) e metanol (5 ml) e agitado durante 2 h. Os voláteis foram removidos a vácuo e o resíduo foi dividido entre éter (150 ml) e solução saturada de NH4C1 (50 ml) . A camada orgânica foi lavada com solução saturada de NH4C1 (50 ml) e seca em Na2S04. Após concentração a vácuo, o resíduo foi purificado por meio de cromatografia em gel de sílica (EtOAcÁhexanos) para dar o produto desejado (835 mg, 80ê).

Composto 1 - IE1 eido 5-(3,3-dimetilbut-l-inil)-3-(N-4- hidroxy-4-((piridin-3-iloxi)metil)ciclohexil)-4-metilciclohexanocarboxamido)tiofeno-2-carboxílico.

NaH (36 mg de uma dispersão em óleo a 60ê, 0,90 mmol) foi adicionado em porções a uma solução de cloreto de trimetilsulfoxónio (116 mg, 0,90 mmol) em DMSO (2,0 ml) à temperatura ambiente· Após 15 min, uma solução de éster metílico do ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3-[(4-metil-ciclohexanicarbonil)-(4-oxo-ciclohexil)-amino]-tiofeno-2-carboxílico (343 mg, 0,75 mmol) (documento WO 2008Á058393) em THF (2,0 ml) foi adicionada gota a gota. Após 3 h, salmoura foi adicionada e a reação foi extraída com acetato de etilo. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, salmoura, secas em Na2S04 e concentradas para dar uma espuma pálida. A purificação por meio de cromatografia de coluna flash com metanol a 5ê em diclorometano proporcionou o produto (216 mg, 61ê) como um sólido branco pérola.

NaH (20 mg de uma dispersão em óleo a 6 0ê, 0,50 mmol) foi adicionado a uma solução de 3-hidroxi piridina (48 mg, 0,50 mmol) em DMF (2,0 ml) à temperatura ambiente. Depois de se agitar durante 10 min, uma solução do epóxido da etapa anterior (216 mg, 0,4 6 mmol) em DMF (2,0 ml) foi adicionada. A reação foi aquecida a 100 °C durante 6 h, arrefecida e dividida entre acetato de etilo e NH4C1 sat. A camada orgânica foi separada, lavada com LiCl aquoso a 5ê, salmoura, seca em Na2S04 e concentrada para dar um resíduo laranja escuro. A purificação por meio de cromatografia de coluna flash com metanol a 5ê em diclorometano proporcionou o produto (87 mg) que foi contaminado com uma impureza não identificada. Este material foi levado à etapa seguinte sem qualquer purificação adicional.

Uma solução de NaOH a 1,0 N (0,50 ml) foi adicionada a uma solução do éster metílico da etapa anterior (87 mg, presumir 0,15 mmol) em THF (0,75 ml) e metanol (0,75 ml) a 0 °C. Após 1 h, a reação foi concentrada até a secura para dar uma goma laranja que foi purificada por meio de HPLC prep para proporcionar o produto desejado (4 mg, l,3ê para duas etapas) como o sal de ácido trif luoroacético. MS (mÁz) : 553,0 [M+H] ; HPLC Tempo de retenção: 3,36 min (2-98ê de acetonitrilo:água com Q,05ê de ácido trifluoroacético). Exemplo 15 - Composto 2: E eido 5-(3,3-dimetil-but-linil)-3- [ [4-hidroxi-4- (tetrahidrofuran-3-R-iloximetil) -ciclohexill-(4-metil-ciclohexanocarbonil)-aminol-tiofeno-2-carboxílico Síntese de éster metílico do ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3 -(1,4-dioxa-espiro[4.5]dec-8 -ilamino)-tiofeno-2 -carboxílico

Uma mistura de éster metílico do ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3-iodo-tiofeno-2-carboxílico(0,5 g, 1,5 mmol), acetato de paládio (0,033 g, 0,15 mmol), BINAP (0,093 g, 0,15 mmol), carbonato de césio (0,733 g, 2,25 mmol) e 1,4-dioxa-espiro[4.5]dec-8-ilamina (0,706 g, 4.5 mmol) em

tolueno (8 ml) foi desgaseificada com N2 depois aquecida até 110 °C durante 8 h. A reação foi diluída com acetato de etilo filtrado através de uma almofada de Celite e purificada por meio de cromatografia em gel de sílica (0-40ê de hexanoÁacetato de etilo) para dar o composto do título em 50ê de rendimento. MS (mÁz) : 378,1 [M+H] ; HPLC

Tempo de retenção: 5,12 min (2-98ê de acetonitrilo:água com 0,Q5ê de ácido trifluoroacético). Síntese de éster metilo do ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil) - (4- oxo-cicloíiexi lamino) -tiofeno-2-carboxílico

Uma mistura de éster metílico do ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3-(4 -oxo-ciclohexilamino)-tiofeno-2-carboxílico (0,5 g, 1,5 mmol) e HC1 (24 mmol, HC1 a 4 M) em THFÁH20 (6 ml) foi aquecida até 45 °C durante 2 h. A reação foi diluída com acetato de etilo (20 ml) e a fase orgânica foi lavada com H20 (3X100 ml), NaHC03 sat. (1X100 ml) e seca em

Na2S04. A solução foi filtrada e concentrada para dar o composto do título em 96ê de rendimento. MS (mÁz) : 334,1 [M+H]; HPLC Tempo de retenção: 4,530 min (2-98ê de acetonitrilo:água com 0,05ê de ácido trifluoroacético).

Esquema 7

NaH (140 mg de uma dispersão em óleo a 6 00 , 3,50 mol) foi adicionado em porções a uma solução de cloreto de trimetilsulfoxónio (452 mg, 3,51 mirto 1) em DMSO (8,0 ml) à temperatura ambiente. Após 15 min, uma solução de éster metílico do ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3-[(4-metil-ciclohexanicarbonil)-(4-oxo-ciclohexil)-amino]-tiofeno-2-carboxílico (1,34 g, 2,93 mmol) em THF (8,0 ml) foi adicionada gota a gota. Após 3 h, salmoura foi adicionada e a reação foi extraída com acetato de etilo. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, salmoura, secas em Na2S04 e concentradas para dar um óleo amarelo viscoso. Trituração com éter etílico e hexanos proporcionou éster metílico do ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3-[(4-metil-ciclohexanocarbonil)-(1-oxa-espiro[2.5]oct-6-il)-amino]-tiofeno-2-carboxílico (509 mg, 370 ) como umsólido incolor .

NaH (55 mg de uma dispersão em óleo a 60ê, 1,37 mmol) foi adicionado a uma solução de (R)-(-)-3-hidroxitetrahidrof urano (12 0 mg, 1,3 6 mmol) em THF seco (4,0 ml) a 0 °C. Após 5 min, éster metílico do ácido 5- (3,3-dimetil-but-l-inil)-3-[(4-metil-ciclohexanocarbonil)-(1-oxa-espiro[2.5]oct-6-il)-amino]-tiofeno-2-carboxílico sólido (125 mg, 0,265 mmol) foi adicionado e a reação foi aquecida num banho de óleo a 75 °C durante 2,5 dias. A reação foi arrefecida e evaporada até a secura para dar um resíduo castanho que foi purificado por meio de cromatografia de coluna em gel de sílica C18 de fase reversa (lOOê de água para lOê de acetonitriloÁágua) . Frações contendo produto foram agrupadas e evaporadas para proporcionar ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3-[[4-hidroxi-4- (tetrahidrofuran-3i?-iloximetil) -ciclohexil] - (4-metil-ciclohexanocarbonil)-amino]-tiofeno-2-carboxílico(30 mg, 20ê) como um sólido incolor. MS (mÁz) : 546,0 [M+H]+; HPLC Tempo de retenção 4,32 min (2-98ê de acetonitrilo:água com Q,05ê de ácido trifluoroacético).

Exemplo 16 - Composto 3: Ei eido 5-(3,3-dimetil-but-linil)-3- [ [4-hidroxi-4- (tetrahidrofuran-3-R-iloximetil) -ciclohexill-(4-metil-ciclohexanocarbonil)-aminol-tiofeno-2-carboxílico

Composto 3 0 composto 3 (32 mg, 21ê) foi sintetizado de uma maneira análoga ao Exemplo 15, utilizando (S)-(+)-3- hidroxitetrahidrofurano em lugar de (i?)-(-)-3-hidroxitetrahidrofurano: MS (mÁz): 546,0 [M+H]+; HPLC Tempo de retenção 4,32 min (2-98ê de acetonitrilo:água com 0,05ê de ácido trifluoroacético).

Exemplo 20 - Composto 4: Síntese de ácido 5 -(3,3-Dimetil-but-l-inil)-3-f(4-meti!-ciclohexanocarbonil)-[4-metilclohexanocarboniloxi)-4 -tetrahidro-furan-3-iloximetil)-ciclohexill-amino}-tiofeno-2-carboxílico

Esquema 11

Composto 4

NaH (370 mg de uma dispersão em óleo a 60ê, 9,25 mmol) foi adicionado em porções a uma solução de iodeto de trimetilsulfónio (1,88 g, 9,25 mmol) em DMSO (16,0 ml) à temperatura ambiente. Após 15 min, uma solução de éster metílico do ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3-[(4-oxo- ciclohexilamino)-tiofeno-2-carboxilico (1,10 g, 3,30 mmol) em THF (16,0 ml) foi adicionada gota a gota. Após 3 h, salmoura foi adicionada e a reação foi extraída com acetato de etilo. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, salmoura, secas em Na2S04 e concentradas para dar um óleo amarelo viscoso. A purificação por meio de cromatografia de coluna em gel de sílica (Teledyne Isco Redisep Rf Gold™) com diclorometano deu dos dois isómeros epóxido, o primeiro dos quais para eluir foi isolado como o éster metílico do ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3-(1-oxa-espiro[2.5]oct-6-ilamino]-tiofeno-2-carboxílico desejado (400 mg, 35ê) como um sólido incolor.

Uma solução de (S) -( + )-3-hidroxitetrahidrofurano (259 mg, 2,94 mmol) em NMP seco (1 mL) foi adicionado a uma solução de KOtBu (2 71 mg, 2,4 2mmol)em NMP seco (ImL) . A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 15 min, depois uma solução de éster metílico do ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3-(1-oxa-espiro[2.5]dec-6-ilamino]-tiofeno-2-carboxílico (200 mg, 0,576 mmol) em NMP seco (4,0 ml) foi adicionado e a reação foi aquecida num banho de óleo a 40 °C durante 24 h. A solução de reação foi deitada em água gelada, arrefecida até 0 °C, neutralizada com ácido ccítrico a 5ê a pH 0 5-6 e extraída com acetato deetilo. A camada orgânica foi lavada com LiCl a 5ê, salmoura, seca e concentrada para dar um óleo castanho que foi absorvido em diclorometanoÁMeOH (5,0 mlÁl,0 ml) e tomada com a adição gota a gota de TMSCH2N2 (0,35 mL, 0,692 mmol, 2 M em hexana). Após 20 min, os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo bruto foi purificado por meio de cromatografia de coluna em gel de sílica (Teledyne Isco Redisep Rf Gold™) eluindo com lOOê de diclorometano a 20ê de acetato de etiloÁdiclorometano para dar éster metílico de ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3-[4-hidroxi-4 -(tetrahidro-furan-3-iloximeti)-ciclohexilamino]-tiofeno-2-carboxílico (120 mg, 48ê) como um sólido incolor.

Trietilamina (1,02 ml, 7,34 mmol) foi adicionada a uma solução de éster metilico do ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3-[4-hidroxi-4 -(tetrahidro-furan-3- iloximeti)ciclohexilamino]-tiofeno-2-carboxilico (200 mg, 0,459 mmol) em diclorometano (12,0 ml) . Após 10 min, a solução foi arrefecida até -78 °C e TESOTf (0,87 ml, 3,85 mmol) foi adicionado gota a gota. A reação foi agitada durante 30 min a -78 °C, extinta com a adição de gelo, diluída com NaHC03 sat. e extraída com diclorometano. A camada orgânica foi separada, seca em Na2S04, concentrada e purificada por meio de cromatografia de coluna com de 0 a 20% de acetato de etiloÃhexano para dar éster metilico do ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3-[4-hidroxi-4 - (tetrahidro-furan-3-iloximeti)-4 -trietilsilaniloxi-ciclohexilamino]-tiofeno-2-carboxílico (200 mg, 79%) como um óleo amarelo. Éster metilico do ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3-[4-hidroxi-4 -(tetrahidro-furan-3-iloximeti)-4-trietilsilaniloxi-ciclohexilamino]-tiofeno-2-carboxílico (200 mg, 0,36 mmol) foi dissolvida piridina (2 ml). Após 10 min, cloreto de 4-metil-ciclohexanocarbonilo puro (233 mg, l,44mmol) foi adicionado gota a gota. A solução de reação foi aquecida a 110 °C durante a noite e depois concentrada para dar um resíduo foi purificado por meio de cromatografia de coluna com acetato de etiloÁ hexano (de 0 a 20ê) para dar éster metilico do ácido 5-(3,3-Dimetil-but- 1-inil)-3-{(4-metil-ciclohexanocarbonil)-[4-(4-metil-ciclohexanocarboniloxi)-4-tetrahidro-furan-3-iloximetil)-ciclohexil]-amino}-tiofeno-2-carboxílico (80 mg, 32ê) como um sólido incolor.

NaOH (1,17 ml de uma solução aquosa a 1,0 N) foi adicionado gota a gota a uma solução de éster metilico do ácido 5-(3,3-Dimetil-but-l-inil)-3-{(4-metil- ciclohexanocarbonil)-[4-(4-metil-ciclohexanocarboniloxi)-4-tetrahidro-furan-3-iloximetil)-ciclohexil]-amino}-tiofeno- 2-carboxílico {80 mg, 0,117m mol) em metanol (2 mL)ÁTHF {2 mL)Ã H20 (2 mL) à temperatura ambiente. A solução foi agitada a 70 °C durante a noite e depois arrefecida até a temperatura ambiente. Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo resultante foi purificado por meio de HPLC com CH3CN (0,lê de TFA)ÁH20 (0,lê de TFA) para proporcionar o Composto 4 (23,3 mg, 36ê) como um sólido incolor. MS (mÁz): 54 6,0 [M+H]+; HPLC Tempo de retenção 4,16 9min (2-98ê de acetonitrilo:água com 0,05ê de ácido trifluoroacético). Síntese_de_ácido_(15, 6S) -4,6-dimetil-ciclohex-3- enocarboxílico e cloreto de ácido

Esquema 2

4S-benzil-3-(4,6S-dimetil-ciclohex-3-eno-l S- carbonil)-oxazolidin-2-ona, preparada num método semelhante a aquele descrito em J. Am. Chem. Soc. 110(4), 1988, 1238-

1256, foi dissolvida em THF (1000 mL) e H20 (350 mL) . A solução foi arrefecida num banho de gelo e 30ê de H202 (36 mL, 354 mmol) foi lentamente adicionado seguido de Lí0H*H20(s) (9,90 g, 263mmol) numa porção. A reação foi deixada a aquecer lentamente até ta e foi agitada durante 16 h. Depois a reação foi arrefecida num banho de gelo. Na2S03 (60 g, 472 mmol) foi dissolvido em H20 (400 mL) e foi muito lentamente adicionado à mistura de reação arrefecida. A solução foi agitada durante 1 h, depois as camadas foram separadas. Os orgânicos foram removidos sob pressão reduzida. 0 aquoso foi adicionado de volta ao concentrado de orgânicos e foi lavado com CH2C12 (2 X 500 mL) . Ajustar o pH a 2 com a lenta adição de HC1 conc. Extrair o aquoso com EtOAc (4 X 300mL) e secar em Na2S04. Remover os orgânicos sob pressão reduzida e co-evaporar com hexanos para dar ácido (IS,6S)-4,6-dimetil-ciclohex-3- enocarboxílico (14,14g, 78ê) como um sólido branco. Ácido 4,6-S-dimetil-ciclohex-3-eno-lS-carboxílico (944 mg, 6,17 mmol) foi dissolvido em CH2C12 (10 mL) e DMF (20pL) foi adicionado. A solução foi arrefecida até 0 °C e depois (C0C1)2 (700 pL, 7,38 mmol) foi lentamente adicionado à solução. A reação foi agitada no banho de gelo durante 1 hora e depois concentrada. 0 resíduo foi absorvido recolhido em hexanos e concentrado; esta co-evaporação foi repetida uma vez mais. 0 cloreto de ácido foi usado sem purificação adicional.

Exemplo 23 - Composto 5: Ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil-3-{4,6-R-dimetil-ciclohex-3 -enocarbonil) - [4-hidroxi-4 -(tetrahidro-furan-3-iloximetil)-ciclohexill-amino)-tiofeno- 2-carboxílico

Esquema 12

Composto 5 Éster metílico do ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3-(1-oxa-espiro[2,5]oct-6-ilamino)-tiofeno-2-carboxílico foi preparado de modo semelhante ao processo no Esquema 11 acma utilizando cloreto de trimetilsulfoxónio em vez de iodeto de trimetilsulfónio. Uma solução de éster metílico do ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3-(1-oxa-espiro[2.5] dec-6-ilamino)-tiofeno-2-carboxílico (362 mg, 0,575 mmol) em piridina (11 ml) foi tratada com 4,6J?-dimetil-ciclohex-3-enocarbonil-li?-cloreto (325 mg, 2,11 mmol, preparado de maneira análoga ao Esquema 2) e aquecida até 85 °C durante 22 h. Após arrefecimento a reação foi concentrada, diluída com acetato de etilo, lavada com HC1 a 1 M (100 ml) e seca em NaS04. A solução foi filtrada e purificada por meio de gel de sílica para dar éster metílico de ácido 3- [ [4-clorometil-4 -(4,6-dimetil-ciclohex-3-enocarboniloxi)-ciclohexil]-(4,6-dimetil-ciclohex-3-enocarbonol)-amino]-5-(3,3-dimetol-but-l-inil)-tiofeno-2-carboxílico (34 mg, 0,05 mmol). 0 óleo amarelo espesso foi absorvido em NMP (2 ml), tratado com (S)-( + )-3-hidroxitetrahidrofurano (36 μΐ, 0,5

mmol) e K-OtBu (45 mg, 0,4 mmol) depois aquecido até 75 °C durante 1 h. Após arrefecimento a reação foi neutralizada com HC1 a 1 M, diluída com acetato de etilo (100 ml) e a camada orgânica foi lavada com salmoura (100 ml) e seca em NaS04. A solução foi filtrada e os voláteis foram removidos sob vácuo. 0 resíduo resultante foi purificado por meio de HPLC com CH3CN (0,1 % de TFA)ÁH20 (0, lê de TFA) para proporcionar os produtos desejados como um sólido incolor. Isómero A (Composto 5A): MS (mÁz): 558,0 [M+H]+; HPLC Tempo de retenção 7,95 min (2-98ê de acetonitrilo:água com 0,05ê de ácido trifluoroacético) 30 min de execução. Isómero B (Composto 5B) ; MS (mÁz) : 558,2 [M+H]+; HPLC Tempo de retenção 8,02 min (2-98ê de acetonitrilo:água com Q,05ê de ácido trifluoroacético) 30 min de execução.

Exemplo 24 - Composto 6: § eido 5-(3,3-dimetil-but-1{ (4,6S-dimetil-ciclohex-3-enocarbonil-[4-hidroxi-4 -tetrahidrofuran-3(5)-iloximetil)-ciclohexill-amino}-tiofeno-2-carboxílico

Composto 6 0 Composto 6 foi sintetizado de uma maneira análoga ao Exemplo 23, acilando com cloreto de 4,65-dimetil-ciclohex- 3-enocarbonil. MS (mÁz): 558,3 [M+H].

Exemplo 27 - Composto 7: Ej eido 5-(3,3-dimetil-but-linil)-[[4-hidroxi-4-(tetrahidrofuran-3(R)-iloximetil)-ciclohexil]-(15)-4-metil-ciclohex-3-enocarbonil)-aminol-tiofeno-2-carboxílico

Éster (R) 4,4-dimetil-2-oxo-tetrahidro-furan-3 -ílico do ácido acrílico (2,92 g, 15,9 mmol) em diclorometano (20 ml) e hexanos (3 ml) foi arrefecido até -10 °C e tratado com tetracloreto de titânio (2,4 ml, 2,4 M em diclorometano, 2,4 mmol). A solução vermelha foi agitada durante 15 min e tratada com isopreno (2,4 ml, 2 3,8 mmol) gota a gota ao longo de 5 min. Após agitar durante 1,5 h, uma porção adicional de isopreno (2,4 ml, 23,8 mmol) foi adicionada e a mistura de reação foi agitada a -10 a 0 °C durante 2,5 h. Após arrefecimento até -10 °C, a mistura de reação foi extinta com cloreto de amónio (sat. aq.). Água e acetato de etilo:hexanos (1:1) foram adicionados. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída de novo com acetato de etilorhexano (1:1) . As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio, filtradas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash (10-40% de EtOAc:Hex, 80 g de coluna) para dar 3,3 5 g (84% de rendimento) de éster 4,4-dimetil-2-oxo-tetrahidro-furan-3-ílico do ácido 4-metil-ciclohex-3-(S)-enocarboxílico como um óleo transparente. Éster 4,4-dimetil-2-oxo-tetrahidro-furan-3 -ílico do ácido 4-metil-ciclohex-3-(S)-enocarboxílico (3,34 g, 13,2 mmol) em THF (25 ml), água (2,5 ml) e metanol (2,5 ml) foi tratado com hidróxido de lítio monohidrato (2,8 g, 66,2 mmol) e aquecido até 50 °C com agitação. Após 1 h, a mistura de reação tratada com HC1 a 1 M (cerca de 25 ml). A mistura foi extraída com hexanos:acetato de etilo (200 ml: 15 ml), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada para dar 2,4 g de um semi-sólido branco. 0 resíduo foi redissolvido em hexanos:diclorometano (100 ml, 95:5), lavado com água, seco em sulfato de sódio, filtrado e concentrado a 1,68 g (91ê de rendimento) de ácido (15)-4-metil-ciclohex-3-enocarboxílico como um pó branco.

Esquema 16

Ácido (15)-4-metil-ciclohex-3-enocarboxílico (209 mg, 1,5 mtnol) , seco azeotropicamente por meio de evaporação de tolueno, foi tratado com fosfato de potássio tribâsico (383 mg, 1,8 mmol) , suspenso em diclorometano (4 ml) e tratado com dimetilformamida (2 gotas). A mistura de reação foi arrefecida até 0 °C e tratada gota a gota com cloreto de oxalilo (0,3 ml), 3,2 mmol). A mistura de reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente enquanto era agitada durante 2 h. Após a filtração dos sólidos, a solução foi concentrada, tratada com hexanos e concentrada novamente para proporcionar cloreto (5) 4-metilciclohex-3- enocarbonilo como m óleo amarelo claro que foi utilizado imediatamente na seguinte etapa.

Cloreto de ácido (IS)-4-metil-ciclohex-3- cloretoenocarboxílico (1,5 mmol), Éster metílico do ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3 -(1,4-dioxaspiro[4.5]dec-8-ilamino)-tiofeno-2-carboxílico (159 mg, 0,42 mmol) e fosfato de potássio tribâsico (266 mg, 1,25 mmol) foi suspenso em dicloroetano (1 ml), vedado com uma tampa e aquecido até 90 °C. Após 16 h, a mistura de reação foi arrefecida e dividida entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi separada e a aquosa foi extraída novamente com acetato de etilo. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio, filtradas e concentradas. Cromatografia flash (15-60% de EtOAc:Hexanos) deu 128 mg (61% de rendimento) do éster metílico de ácido 5 -(3,3-dimetil-but-1-inil)-3 -[(1,4-dioxa-espiro[4.5]dec-8 -il)- ((IS)-4-metil-ciclohex-3-enocarbonil)-amino]-tiofeno-2-carboxílico desejado como uma espuma branca. Éster metílico de ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3-[(1,4-dioxa-espiro[4.5]dec-8-il)-((15)-4-metil-ciclohex-3-enocarbonil)-amino]-tiofeno-2-carboxílico (116 mg, 0,23

mmol) foi dissolvido em THF (1,8 ml) e tratado com HC1 a 4 M (0,9 ml) . A mistura de reação foi aquecida até 45 °C e agitada durante 4,5 h. Uma porção adicional de HC1 a 12 M {0,2 ml) e a solução foi agitada durante 2 h a 45 °C. Acetato de etilo foi adicionado e a camada orgânica foi separada, depois lavada com salmoura, bicarbonato de sódio (sat aq) e salmoura. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada a 98 mg do éster metílico de ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3-[(IS)-4-metil-ciclohex-3-enocarbonil)-(4-oxo-ciclohexil)-amino]-tiofeno-2-carboxílico desejado como uma espuma branca.

Cloreto de trimetilsulfoxónio (39 mg, 0,3 mmol) em DMSO (1,5 ml) foi tratado com hidreto de sódio (10 mg, dispersão de óleo a 60ê, 0,25 mmol) e agitado à temperatura ambiente durante 10 min. Éster (S) metílico de ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3-[(4-metilciclohex-3-enocarbonil)-(4-oxo-ciclohexil)-amino]-tiofeno-2-carboxílico em THF (1 ml + 0,5 ml) foi adicionado gota a gota e a mistura de reação foi agitada durante 1 h. A solução laranja foi tratado com ácido cítrico a 5ê até pH~4 e dividida entre água e acetato de etilo. A camada orgânica foi separada e a aquosa foi extraída novamente com acetato de etilo. Os orgânicos combinados foram lavados com água e salmoura e secos em sulfato de sódio. Depois da filtração e concentração, o resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash (25-75ê de EtOAc:hexanos) para proporcionar 99 mg do éster metílico de ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3-[(1S)-4-metil-ciclohex-3-enocarbonilo)-(1-oxaspiro[2.5]oct-6-il)-amino]-tiofeno-2-carboxílico como um sólido branco. (J?)-Tetrahidro-furan-3-ol (89 mg, 1,01 mmol) in 1-metil-pirrolidin-2-ona (1 ml) foi tratado com terc-butóxido de potássio (90,5 mg, 0,81 mmol) e agitado à temperatura ambiente durante 15 minutos. Esta solução ligeiramente turva foi adicionada a éster metílico do ácido 5-(3,3-dimetil-but-l-inil)-3-[(4-metil-ciclohex-3-enocarbonil)-(1-oxa-espiro[2.5]oct-6-il)-amino]-tiofeno-2-carboxílico (S) (34 mg, 0,073 mmol). A mistura de reação foi vedada e aquecida até 40 °C durante 16 h. Após arrefecimento a mistura foi tratada com HC1 a 2 M pH~3, dividida entre acetato de etilo e água e separada. A camada aquosa foi extraída novamente com acetato de etilo e os orgânicos combinados foram lavados com água, salmoura e seca em sulfato de sódio. Depois da filtração e concentração o resíduo foi purificado por meio de HPLC com CH3CN (0,lê de TFA) ÁH20 (0,lê de TFA) para proporcionar 22 mg (55ê de rendimento) do Composto 7 como um pó branco: MS (mÁz) : 544,0 [M+H]+; HPLC Tempo de retenção 4,20 min (2-98ê de acetonitrilo:água com 0,05ê de ácido trifluoroacético). Exemplo 28 - Composto 8: B eido 5-(3,3-dimetil-but-linil-3-[ [4-hidroxi-4- (tetrahidrofuran-3 (£?) -iloximetil) -ciclohexil]-(IS)-4-metil-ciclohex-3-enocarbonil)-arrtinol-tiofeno-2-carboxílico

Composto 8

0 Composto 8 foi sintetizado de uma maneira semelhante ao Exemplo 27 utilizando (S)-tetrahidro-furan-3-ol em vez de (R)-tetrahidro-furan-3-ol: MS (mÁz): 544,1 [M+H]+; HPLC

Tempo de retenção 4,20 min (2-98ê de acetonitrilo:água com 0,05ê de ácido trifluoroacético).

Exemplo 29 - Composto 9: M eido 5-(3,3-dimetil-but-linil)- 3-[[4-hidroxi-4 -(tetrahidrofuran-3(S)-iloximetil)-ciclohexill- (li?) -4- metil- ciclohex-3- enocarbonil) -amino] -tiofeno-2-carboxílico

Composto 9 Éster (i?) 4,4-dimetil-2-oxo-tetrahidro-furan-3 -ílico do ácido acrílico foi preparado da seguinte maneira: 3-(S)-Hidroxi-4,4-dimetil-dihidro-furan-2-ona (2,60 g, 20 mmol) e diisopropiletilamina (5,2 ml, 30 mmol) em diclorometano (25 ml) foram arrefecidos até -10 °C e tratados gota a gota com cloreto de acriloilo (2,03 ml, 25 mmol) e agitados durante 2 h. HC1 a 1 M (20 ml) foi adicionado e a camada orgânica foi lavada bicarbonato de sódio e água. A camada orgânica foi seca em sulfato de sódio, filtrada e concentrada. Cromatografia flash (10-40% de EtOAc, hexanos) prpoprcionou 2,09 g (57% de rendimento) do éster {R) 4,4-dimetil - 2-oxo- tetrahidro-furan-3-ílico do ácido acrílico desejado como um óleo transparente. Este substrato foi utilizado para preparar o cloreto de ácido de ácido (li?) -4-metil-ciclohex- 3- enocarboxílico análogo ao procedimento descrito no Esquema 15 e Esquema 16. 0 Composto 9 foi preparado de uma maneira semelhante ao Exemplo 27 utilizando o cloreto de ácido de ácido (li?) - 4- metil-ciclohex-3-enocarboxílico em vez do cloreto de ácido do ácido (IS)-4-metil-ciclohex-3-enocarboxílico e (S) -tetrahidrofuran-3-ol em vez do (i?)-tetrahidro-furan-3-ol: MS (mÁz): 544,0 [M+H]+; HPLC Tempo de retenção 4,22 min (2-98% de acetonitrilo:água com 0,05% de ácido trifluoroacético).

Exemplo 30 - Composto 10: Ácido 5-(3,3-Dimetil-but-l-inil)-3-[[4-hidroxi-4-tetradro-furan-3(R)-iloximetil)-ciclohexil] - (li?) -4-meticlohex-3-enocarbonil) -amino] -tiofeno-2-carboxílico

Composto 10

0 Composto 10 foi preparado de uma maneira semelhante ao Exemplo 29 utilizando (R)-tetrahidro-furan-3-ol em vez de (S)-tetrahidro-furan-3-ol: MS (mÁz) : 544,1 [M+H]*; HPLC

Tempo de retenção 4,20min (2-98ê de acetonitrilo:água com 0,05ê de ácido trifluoroacético).

Exemplo 31: Compostos 16, 17 (referência) e 18

11 2,4-dibromotiofeno (6 g, 24,8 mmol), PdCl2 (PPh3)2 (522 mg, 0,74 mmol) e Cul (2 83 mg, 1,4 9 mmol) foram adicionados a um balão de fundo redondo de 2 50 ml, que foi, então, vedado com um septo de borracha. 0 balão foi desgaseifiçado e reenchido com árgon três vezes, seguida pela adição de DMF (150 ml) e TEA (30 ml). 3,3-Dimetilbut-l-ino (2,87 ml, 23,56 mmol) foi adicionado. A mistura da reação foi aquecida a 4 5 °C durante duas horas, em cujo tempo 2,4-dibromotiofeno foi completamente consumido. 0 material insolúvel foi removido por meio de filtração e o filtrado foi concentrado a vácuo. 0 resíduo foi dividido entre EtOAc (150 ml) e hidróxido de amónio aquoso (2 ml de solução a 2S-30ê em peso, diluído em 100 ml de água). A fase orgânica foi separada, lavada com solução aquosa de LiCl a 5ê e salmoura, seca em Na2S04 e filtrada. 0 filtrado foi concentrado. 0 resíduo foi purificado por meio de cromatografia em gel de sílica eluindo com hexano para proporcionar 11 (5,1 g) como um líquido debilmente amarelo. HPLC Tempo de retenção: 5,169 min (5-95ê de acetonitrilo com 0,05ê de TFA: água com 0,05ê de TFA). N-(5 -(3,3-dimetilbut-1-inil)tiofen-3-il)-1,4-dioxaspiro[4.5]decan-8-amina: 12

12

Uma mistura de 11 (0,773 g, 3,18 mmol) , Cul (30 mg, 0,160 mmol), carbonato de césio (2,072 g, 6,36 mmol), 2-acetilciclohexanona (90 mg, 0,636 mmol) e 1,4-dioxa-espiro[4.5]dec-8-ilamina (1,0 g, 6,36 mmol) em DMF (1,6 ml) foi desgaseifiçada com N2 depois aquecida até 80 °C durante 16 h num tubo vedado. A reação foi diluída com EtOAc, filtrada através de uma almofada de terra de diatomáceas, lavada com solução aquosa de LiCl a 5ê, seca em sulfato de sódio, filtrada e concentrada. Cromatografia flash (EtOAc:hexanos) proporcoionou 12. MS (mAz): 320,20 [M+H].

13

Uma solução de 12 (4,16 g, 13,0 mmol) em 1,2-dicloroetano (40 ml) foi arrefecida até 0 °C e tratada com uma solução de cloreto de (IS,6S)-4,6-dimetilciclohex-3-enocarbonilo (3,88 g, 24 mmol, preparado de uma maneira análoga ao Esquema 2) em 2 0 ml de 1,2-dicloroetano. A mistura da reação foi deixada a aquecer gradualmente até a temperatura ambiente e agitada durante 17 horas, em cujo ponto foi diluída com DCM, lavada duas vezes com NH4Cl(aq) saturado, seca em MgS04, filtrada e concentrada. 0 resíduo foi purificado por meio de gel de sílica para dar uma mistura de (15,65)-N-(5-(3,3-dimetilbut-l-inil)tiofen-3-il)-4,6-dimetil-N-(1,4-dioxaspiro[4.5]decan-8 -il)ciclohex-3-enocarboxamida e o produto de hidrólise de cetal (5,60 g, 12,3 mmol) . Esta mistura foi absorvida em THF (70 ml), tratada com HCl(aq) a 4 N, e agitada a 45 °C durante 90 minutos. THF foi removido sob pressão reduzida, e a camada aquosa resultante foi extraída três vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com NaHC03(aq) saturado, água e salmoura, seca em MgS04, filtrada e concentrada para dar 5,05 g de produto de cetona 13.

Composto 16

Uma solução de cloreto de trimetilsulfoxónio (0,47 g, 3,64 mmol) em THF (8 ml)ÃDMS0 (8 ml) foi tratada com NaH (0,126 g, 3,16 mmol) à temperatura ambiente durante 20 minutos. Uma solução de 13 (1 g, 2,4 3 mmol) num THF (8 ml) foi adicionado gota a gota ao longo de um período de 7 min e a agitação foi continuada durante 0,5 h. A mistura de reação foi arrefecida até 0 °C e extinta com ácido cítrico a lOê (200 ml). A camada aquosa foi extraída com acetato de etilo (300 ml) e as fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (500 ml) e secas em Na2S04 e concentradas. 0 material bruto foi purificado por meio de gel de sílica para dar (IS,6S)-N-(5-(3,3-dimetilbut-l-inil)tiofen-3-il)-4,6-dimetil-N-((3R,6S)-1-oxaspiro[2.5]octan-6 -il)ciclohex-3-enocarboxamida (14) {0,25 g, 0,58 mmol).

Uma solução de 14 (0,25 g, 0,58 mmol) em THF (3 ml) foi arrefecida até -78 °C e tratada com LDA (2 M em THF, 2,35 mmol) . Após 2 h, C02 (g) foi borbulhado através da mistura de reação durante 15 min. A mistura da reação foi deixada a aquecer até a temperatura ambiente e extinta com NH3C1 (sat) . A camada aquosa foi extraída com acetato de etilo (50 ml) e as fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (100 ml) e secas em Na2S04 e concentradas para dar 15. 0 material bruto foi dissolvido em NMP (1 ml) e tratado com terc-butóxido de potássio (2,5 mmol) e (S)-tetrahidrofuran-3-ol (2,5 mmol). A mistura reação foi aquecida até 40 °C durante 16 h. A reação foi, então, arrefecida e neutralizada com HC1 aquoso (1 M) . 0 produto foi extraído com acetato de etilo, concentrado e purificado por meio de HPLC com CH3CN (0,1% de TFA) ÁH20 (0,1% de TFA) para proporcionar o Composto 16. MS (mÁz) : 558,1 [M-H] - ; HPLC Tempo de retenção 4,47 min (2-98% de acetonitrilo:água com 0,1% de ácido trifluoroacético) 6 min de execução. Composto 17 (referência)

Composto 17

Uma solução de 16 (0,02 5 g, 0,044 mmol) em DCMÁ MeOH (5 mlÁ 1 ml) foi tratado com trimetilsilildiazometano (2 M em hexanos, 0,22 ml) durante 30 min. A reação foi concentrada e purificada por meio de HPLC com CH3CN (0,1% de TFA)ÃH20 (0,1% de TFA) para proporcionar o composto do título como um sólido. MS (mÁz) : 572,1 [M-H]-; HPLC Tempo de retenção 5,08 min (2-98% de acetonitrilo:água com 0,1 % de ácido trifluoroacético) 6 min de execução.

Composto 18

18 0 Composto 18 foi sintetizado de uma maneira análoga ao Composto 18 utilizando o {R)-tetrahydrofuran-3-ol. MS (mÁz): 558,1 [M+H]+; HPLC Tempo de retenção 4,48 min (2-98ê de acetonitrilo:água com 0,lê de ácido trifluoroacético) 6 min de execução.

Exemplo 32

19 HATU (32,5 g, 85,5 mmol, 1,1 equiv.) e cloridrato de N,O-dimetilhidroxilamina (8,3 g, 85,5 mmol, 1,1 equiv) foram carregados num balão de fundo redondo contendo 300 ml diclorometano. DIEA (40 ml, 233 mmol, 3,0 equi\^) foi adicionado, seguido por uma solução de ácido d9-piválico (8,6 g, 77,7 mmol, 1,0 equiv) em DCM (25 ml). A reação foi agitada à temperatura ambiente até o consumo completo do ácido carboxílico. A solução foi concentrada a vácuo para remover os voláteis e o resíduo foi dividido entre DCM (200 ml) e NH4C1 saturado (100 ml) . A fase aquosa foi extraída com DCM (2 00 ml) e os orgânicos combinados foram secos em Na2S04 e depois concentrados. 0 resíduo foi purificado por meio de cromatografia de gel de sílica para dar o 19 (5,1 g, 33 mmol, 42ê de rendimento) como um óleo incolor.

20 3-amino-5-iodotiofeno-2-carboxilato de metilo (6,24 g, 22 mmol, 1,0 equiv.) e cetal (5,16 g, 33 mmol, 1,5 equiv) foram dissolvidos em 27 ml de ácido acético num balão de fundo redondo. Triacetoxiboroidreto de sódio (7,0 g, 33 mmol, 1,5 equiv) foi adicionado em porções à temperatura ambiente. Após a reação estar completa, água (30 ml) foi adicionada e a mistura foi deitada em EtOAc (200 ml) . As fases foram separadas e os orgânicos foram lavados com H20 e salmoura, e depois secos sobre Na2S04, Os voláteis foram removidos a vácuo e o resíduo foi purificado por meio de cromatografia de gel de sílica para dar o 20 (7,1 g, 17 mmol, rendimento de 76ê) como um sólido amarelo.

21 0 composto 20 (7,1 g, 17 mmol) K3P04 moído recentemente (7,12 g, 33 mmol) foram suspensos em DCE (40 ml) num balão de fundo redondo de 250 ml. A suspensão foi arrefecida até 0 °C num banho de gelo e água. Cloreto de (R)-4-Metilciclohex-3-enocarbonilo (7,9 g, 50 mmol) em DCE (25 ml) foi adicionado gota a gota via seringa. Após a adição, a reação foi agitada durante a noite a refluxo. A reação foi diluída com DCM (200 ml) , e os orgânicos foram lavados com NH4C1 saturado (2 x 100 ml) . Após secagem em Na2S04, a camada orgânica foi concentrada para dar o um sólido esmumoso amarelo. 0 resíduo foi purificado por meio de cromatografia de gel de sílica para dar o 21 (5,5 g, 10 mmol, rendimento de 60ê) como um sólido esbranquiçado.

22

Uma solução de 21 (1,0 g, 1,9 mmol, 1,0 equiv) em THF (12,0 ml) num balão de fundo redondo foi arrefecida até 0 °C. Cloreto de isopropilmagnésio (2,0 M em DCM, 2,1 mmol, 1,1 equiv) foi adicionado gota a gota e a mistura foi agitada durante 30 min. Uma solução da amida de Weinreb 19 (322 mg, 2,1 mmol, 1,1 equiv) em THF (1,0 ml) foi adicionado lentamente e a solução resultante foi gradualmente aquecida até a temperatura ambiente e agitada durante a noite. A reação foi deitada em NH4C1 saturado (50 ml) e extraída com DCM (2 x 100 ml). Os orgânicos combinados foram secos em Na2S04 e depois concentrados. 0 22 bruto foi levado até etapa seguinte sem purificação.

23 A uma solução de 22 (97 mg, 0,19 mmol, 1,0 equiv) e 1- diazo-2-oxopropilfosfonato de dimetilo (110 mg, 0,57 mmoles, 3,0 equiv) em MeOH (3,0 ml) foi adicionado K2C03 (105 mg, 0,758 mmol, 4,0 equiv), A solução resultante foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. A reação foi, então, dividida entre EtOAc (50 ml) e HC1 a 1 N (50 ml) . 0 orgânico foi seco em Na2S04 e depois concentrado. 0 bruto foi purificado por meio de cromatografia de coluna de gel de sílica para dar o 23 (70 mg, 0,138 mmol, rendimento de 73ê) como um sólido branco.

Composto 24

As transformações sintéticas subsequentes necessárias para a preparação do Composto 24 foram realizadas de uma maneira semelhante a aquelas descritas no Exemplo 27. MS (mÁz) : 553,1 [M+H]+; HPLC Tempo de retenção 4,46min (2-98ê de acetonitrilo:água com 0,05ê de ácido trifluoroacético ao longo de 6 min).

Exemplo 33: Composto 29

Composto 29

Etapa_lj_Síntese_de_5-iodQ-3- (4-metil-N- (4- oxociclohexil)ciclohex-3-enocarboxamido)tiofeno-2-carboxilato de (R)-metilo (25)

Uma mistura de 21 (2,0 g, 3,6 mmol) e HC1 (4 0 mmol, HC1 a 4 N) em THF (20 ml) foi aquecido a 45 °C durante 20 min. A reação foi diluída com acetato de etilo e a camada orgânica foi separada, depois lavada com bicarbonato de sódio (sat aq) e salmoura. A camada orgânica foi seca em sulfato de sódio, filtrada e concentrada para dar o 25. 0 bruto foi levado até etapa seguinte sem purificação adicional. MS (mÁz): 502,2 [M+H]; HPLC Tempo de retenção: 2,67 min (2- 98% de acetonitrilo:água com 0,05% de ácido fórmico ao longo de 3,5 min).

Etapa 2: Síntese de 5-iodo-3-((R-4-methyl-N-((35,65)-1-oxaspiro[2.5]octan-6-il)ciclohex-3-enocarboxamido)tiofeno-2-carboxilato de metilo (26)

Cloreto de trimetilsulfoxõnio (592 mg, 4,6 mmol) em DMSO (10 ml) foi tratado com hidreto de sódio (162 mg, dispersão de óleo a 60ê, 4,03 mmol) e a agitada à temperatura ambiente durante 30 min. 0 Composto 25 (resíduo da etapa anterior) em THF (10 ml) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada durante 30 min. A solução laranja foi tratado com ácido cítrico a lOê até pH~4 e dividida entre água e acetato de etilo. A camada orgânica foi separada e a aquosa foi extraída novamente com acetato de etilo. Os orgânicos combinados foram lavados com água e salmoura e secos em sulfato de sódio. Depois da filtração e concentração, o resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash (EtOAc:hexanos) para dar o 26 (1,3 g, 2,52 mmol, 69ê) como um sólido branco. MS (mÁz): 515,9 [M+H]; HPLC Tempo de retenção: 2,76 min (2-98ê de acetonitrilo:água com Q,05ê de ácido fórmico ao longo de 3,5 min).

Etapa 3: Síntese de 5-(4-hidroxi-3,3-dimetilbut-l-inil)-3-((R)-4-metil-N-((35,65)-1-oxaspiro[2.5]octanoil)ciclohex-3-enocarboxamido)tiofeno-2-carboxilato de metilo (27) 0 composto 26 (260 mg, 0,5 mmol), 2,2-dimetilbut-3-in-l-ol (150 mg, 1,5 mmol), dicloreto de bis(trifenilfosfina)paládio (II) (18 mg, 0,025 mmol), Cul (9,5 mg, 0,05 mmol) e trietilamina (1 ml) foram dissolvidos em DMF (5 ml) num tubo vedado. A mistura foi aquecida a 80 °C durante 5 h. A reação foi, então, deitada em EtOAc (200 ml) e lavada com NH4C1 (2 x 50 ml) e 5ê LiCl (2 x 50 ml). A camada orgânica foi separada e a aquosa foi extraída novamente com acetato de etilo. Os orgânicos combinados foram lavados com água e salmoura e secos em sulfato de sódio. Depois da filtração e concentração, o resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash (EtOAc:hexanos) para dar o 27 (203 mg, 0,42 mmol, 84ê) como um sólido branco. MS (mÁz): 486,1 [M+H]; HPLC Tempo de retenção: 2,60 min (2-9Sê de acetonitrilo:água com 0,05ê de ácido fórmico ao longo de 3,5 min).

Etapa 4: Síntese de ácido 5-(4-hidroxi-3,3-dimetilbut-l-inil)-3-((R-4-metil-N-(35,65)-1-oxaspiro[2.5]octan-6-il)clohex-3-enocarboxamido)tiofeno-2-carboxílico (28) 0 composto 27 (203 mg, 0,42 mmol) foi dissolvido em THF (5 ml) e água (3 ml). Li0H.H20 (176 mg) foi adicionado. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante um dia e depois extinta com solução aquosa de ácido cítrico a lOê (5 ml) . A mistura de reação foi extraída com acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca e concentrada para dar o 28 (186 mg).

Etapa 5: Síntese de ácido 5-(4-hidroxi-3,3-dimetilbut-l-inil) -3- ( (R) -N- ( (l.R,45) -4-hidroxi-4- ( ( (5) -tetrahidrofuran-3-iloxi)rnetil)ciclohexil)-4-metilciclohex-3-enocarboxamido)tiofeno-2-carboxílico (29) (5)-Tetrahidro-furan-3-ol (187 mg, 2,1 mmol) in 1-metil-pirrolidin-2-ona (4,0 ml) foi tratado com terc-butóxido de potássio (95 mg, 0,848 mmol) e agitado à temperatura ambiente durante 20 minutos. A esta mistura foi adicionado 28 (100 mg, 0,21 mmol) . A mistura de reação foi aquecida a 35 °C durante 16 h sob um atmosfera inerte. Após arrefecimento a mistura foi tratada com solução aquosa de ácido ccítrico a lOê até pH~3, dividida entre acetato de etilo e água e separada. A camada aquosa foi extraída novamente com acetato de etilo e os orgânicos combinados foram lavados com água, salmoura e seca em sulfato de sódio. Depois da filtração e concentração o resíduo foi purificado por meio de HPLC com CH3CN (0,lê de TFA)ÁH20 (0,lê de TFA) para proporcionar o Composto 29 (10 mg, 0,018 mmol, 9ê). MS (iTlÂz) : 560,1 [M+H] +

Exemplos Biológicos Atividade Antiviral

Um outro aspeto da invenção refere-se a compostos para utilização em métodos de inibição de infeções virais, que compreende a etapa de tratar um amostra ou indivíduo suspeito de necessitar tal inibição com uma composição da invenção.

Dentro do contexto da invenção amostras suspeitas de conter um vírus incluem materiais naturais ou artificiais tais como organismos vivos; culturas de tecido ou células; amostras biológicas tais como amostras de material biológico (sangue, soro, urina, fluido cerebrospinal, lágrimas, expetoração, saliva, amostras de tecidos e semelhantes); amostras de laboratório; alimento, água ou amostras de ar; amostras de bioprodutos tais como extratos de células, particularmente células recombinantes que sintetizam uma glicoproteína desejada; e semelhantes. Tipicamente a amostra será suspeita de conter um organismo que induz uma infeção virai, frequentemente um organismo patogénico tal como um vírus de tumor. As amostras podem estar contidas em qualquer meio incluindo água e misturas de solvente orgânico\ãgua. As amostras incluem organismos vivos tais como seres humanos, e materiais artificiais tais como cultivos celulares.

Se for desejado, a atividade anti-vírus de um composto da invenção após a aplicação da composição pode ser observada por meio de qualquer método incluindo métodos diretos e indiretos de deteção de tal atividade. Os métodos quantitativo, qualitativo, e semiquantitativo de determinar tal atividade de HCV polimerase são todos contemplados. Tipicamente um dos métodos de rastreio descritos acima são aplicados, no entanto, qualquer outro método tal como observação das propriedades fisiológicas de um organismo vivo são também aplicáveis. A atividade antiviral de um composto da invenção pode ser medida utilizando protocolos de rastreio padrão que são conhecidos. Por exemplo, a atividade antiviral de um composto pode ser medida utilizando os seguintes protocolos gerais.

Ensaio de imunodeteção de Flavivírus baseado em célula Células BHK21 ou A549 são tripsinizadas, contadas e diluídas até 2xl05 célulasÁml em meio Hams F-12 (células A549) ou meio RPMI-1640 (células BHK21) suplementado com 2ê de soro bovino fetal (FBS) e lê de penicilinaÁestreptomicina. 2xl04 células são dispensadas placas de cultura de tecido de 96 poços transparente por poço e colocadas a 37° C, 5ê de C02 durante a noite. No dia seguinte, as células são infetadas com vírus a multiplicidade de infeção (MOI) de 0,3 na presença de concentrações variadas de compostos de teste durante 1 hora a 37 °C e 5ê de C02 durante outras 48 horas. As células são lavadas uma vez com PBS e fixas com metanol frio durante 10 min. Após lavar duas vezes com PBS, as células fixadas são bloqueadas com PBS contendo lê de FBS e 0,05ê de Tween-20 durante 1 hora à temperatura ambiente. A solução de anticorpo primário (4G2) é então adicionada a uma concentração de 1:20 a 1:100 em PBS contendo lê de FBS e 0,Q5ê de Tween-20 durante 3 horas. As células são então lavadas trB s vezes com PBS seguido por uma hora inubação com peroxidase de rábano (HRP)-IgG anti-ratinho conjugado (Sigma, diluição 1:2000). Após lavar três vezes com PBS, 50 microlitros de solução de substrato de 3,3',5,5'-tetrametilbenzidina (TMB) (Sigma) é adicionado a cada poço durante dois minutos. A reação é detida pela adição de ácido sulfúrico a 0,5 M. As placas são lidas a 4 50 nm de abosorbância para a quantificação de carga virai. Após a medição, as células são lavadas três vezes com PBS seguido pela incubação com iodeto de propidio durante 5 min. A placa é lida num leitor Tecan Safire™ (excitação 537 nm, emissão 617 nm) para a quantificação do número de células. Curvas de resposta à dose são plotadas a partir da absorbância média versus o log da concentração de compostos de teste. A EC50 é calculada por meio de análise de regressão não linear. Um controlo positivo tal como N-nonil-deoxinojirimicina pode ser utilizado.

Ensaio de efeito citopático de Flavivírus baseado em células

Para testar contra o vírus West Nile ou vírus da encefalite japonesa, células BHK21 são tripsinizadas e diluídas a uma concentração de 4 x !05 célulasÁml em meio RPMI-164Q suplementado com 2ê de FBS e lê de penicilinaÁestreptomicina. Para testar contra vírus da dengue, células Huh7 são tripsinizadas e diluídas a uma concentração de 4 x 10° célulasÁml em meio DMEM suplementado com 5ê de FBS e lê de penicilinaÁestreptomicina. Um 50 microlitros de suspensão de células (2 x 104 células) é dispensada por poço em placas baseadas em polímero PIT de fundo óptico de 96 poços (Nunc). As células são crescidas durante a noite em meio de cultura a 37 °C, 5ê de C02, e depois infetadas com o vírus West Nile (por exemplo, estirpe B956) ou vírus da encefalite japonesa (por exemplo, estirpe Nakayama) a MOI ™ 0,3, ou com o vírus da dengue (por exemplo, estirpe DEN-2 NGC) a M01 ™ 1, na presença de diferentes concentrações de compostos de teste. As placas contendo os vírus e os compostos são ainda incubadas a 37 °C, 5ê de C02 durante 72 horas. No final da incubação, 100 microlitros de reagente CellTiter-GloE é adicionado em cada poço. Os contedos são misturados durante 2 minutos num agitador orbital para induzir a lise celular. As placas são incubadas a temperatura ambiente durante 10 minutos para estabilizar o sinal luminescente, A leitura de luminescS ncia é rgistada utilizando um leitor de placa. Um controlo positivo tal como N-nonil-deoxinojirimicina pode ser utilizado.

Atividade Antiviral num Modelo de Ratinho de Infeção da Dengue.

Os compostos são testados iní vivo num modelo de ratinho de infeção do vírus da dengue (Schul et al. J. Infectious Dis. 2007; 195:665-74). Ratinhos AG129 de seis a dez semanas de idade (B&K Universal Ltd, HII, RU) são alojados em gaiolas ventiladas individualmente. Os ratinhos são injetados intraperitonealmente com 0,4 mL de suspensão de vírus da dengue 2 TSV01. Amostras de sangue são tomadas por punção retro orbital sob anestesia de isoflurano. Amostras de sangue são recolhidas em tubos contendo citrato de sódio a uma concentração final de 0,4ê, e imediatamente centrifugadas durante 3 minutos a 6000 g para obter o plasma. 0 plasma (20 microlitros) é diluído em 780 microlitros de meio RPMI-1640 e rapidamente congelado em azoto líquido para análise de ensaio em placa. 0 plasma restante é reservado para determinação do nível de citocina e proteína NS1. Os ratinhos desenvolveram viremia da dengue crescendo durante vários dias, com pico no dia 3 após a infeção.

Para testar a atividade antiviral, um composto da invenção é dissolvido em veículo fluido, por exemplo, lOê de etanol, 30ê de 300 e 60ê de D5W (5ê de dextrose em água; ou HC1 a 6 N (1,5 eq):NaOH a 1 N (pH ajustado a 3,5): 100 mM de tampão citrato pH 3,5 (0,9ê vÁv:2,5ê vÁv: 96,6ê vÁv). Trinta e seis ratinhos AG129 de 6-10 semanas de idade são divididos em seis grupos de seis ratinhos cada. Todos os ratinhos são infetados com vírus da dengue como descrito acima (dia 0) . 0 grupo 1 é dosado por sonda oral de 200 mlÁratinho com 0,2 mgÁkg de um composto da invenção duas vezes ao dia (uma vez no início na manhã e uma vez no final da tarde) durante trlE3 s dias consecutivos começandono dia 0 (primeira dose logo antes da infeção por dengue). metais dos Grupos 2, 3 e 4 são dosados da mesma forma com 1 mgÁkg, 5 mgÁkg e 25 mgÁkg do composto, respetivamente. Um controlo positivo pode ser utilizado, tal como (2J?,3i?,4i?,5J?)-2-(2-amino-6-hidroxi-purin-9 -il)-5-hidroximetil-3 -metiltetrahidro-furan-3,4-diol, dosado por sonda oral de 200 microlitrosÁratinho do mesmo modo que os grupos anteriores. Um grupo adicional é tratado apenas com veículo fluido.

No dia 3 após a infeção amostras de sangue de aproximadamente 100 microlitros (anticoaguladas com citrato de sódio) são tomadas dos ratinhos por meio de punção retro-orbital sob anestesia com isoflurano. 0 plasma é obtido a partir de cada amostra de sangue por meio de centrifugação e congelamento rápido em azoto líquido para análise de ensaio em placa. As amostras de plasmas recolhidas são analisadas por meio do ensaio de placa conforme descrito por Schul etlal. As citocinas são também analisadas conforme descrito por Schul. Os níveis de proteína NS1 são analisados utilizando um kit Platelia™ (BioRad Laboratories). Um efeito anti-viral é indicado por uma redução nos níveis de citocina eÁou níveis de proteína NS1.

Tipicamente, reduções em viremia de cerca de 5-100 vezes, mais tipicamente 10-60 vezes, o mais tipicamente 20-30 vezes, são obtidas com dosagens de 5-50 mgÁkg bid dos compostos da invenção.

Protocolo Ensaio de HCV A atividade anti-HCV dos compostos desta invenção foi testada numa linha celular de hepatoma humano Huh-7 portando um replicão de HCV. 0 ensaio compreendia as seguintes etapas:

Etapa 1: preparação de composto e diluição em série. A diluição em série foi realizada em DMSO a 100% uma placa de 384 poços. Preparou-se uma solução contendo um composto com uma concentração de 225 vezes da concentração final de diluição em série em DMSO a 100% e adicionou-se-Ihes 15 ul aos poços pré-especifiçados na coluna 3 ou 13 de uma placa de 384 poços de polipropileno. 0 restante da placa de 384 poços foi preenchido com 10 ul de DMSO a lOOê, exceto para as colunas 23 e 24, onde 10 ul de um inibidor de protease de HCV a 50 uM (ITMN-191) em DMSO a lOOê foi adicionado. 0 inibidor de protease de HCV foi utilizado um controlo de lOOê de inibição da replicação de HCV. A placa foi então colocada numa Estação de Trabalho Biomek FX para iniciar a diluição em série. A diluição em série foi realizada durante dez ciclos de diluição 3 vezes da coluna 3 a 12 ou da coluna 13 a 22.

Etapa 2: preparação de placa de cultura celular e adição de composto A cada poço de uma placa de 384 poços de polipropileno preto, adicionaram-se 90 μΐ de meio celular contendo 1600 células de replicão de Huh-7 HCV suspensas com uma Estação de Trabalho Biotek uFlow. Transferiu-se um volume de 0,4 μΐ da solução do composto da placa de diluição em série para a placa de cultura de células numa Estação de Trabalho Biomek FX. A concentração de DMSO na condição de ensaio final foi de 0,44ê. As placas foram incubadas durante 3 dias a 37 °C com 5ê de C02 e 85ê de humidade.

Etapa 3: deteção de citotoxicidade e inibição de replicação virai a) Avaliação da citotoxicidade: Os meios na placa de cultura celular de 384 poços foram aspirados com uma lavadora de placas Biotek EL405. Um volume de 50 μΐ de uma solução contendo 400 nM de Calceína AM em lOOê de PBS foi adicionado a cada poço da placa com uma Estação de Trabalho Biotek uFlow. A placa foi incubada durante 30 minutos à temperatura ambiente antes do sinal de fluorescência (emissão 490 nm, excitação 520 nm) foi medido com um leitor de placas Perkin Elmer Envision. b) Avaliação da inibição de replicação viral: A solução de calceína-PBS na placa de cultura de células de 384 poços foi aspirada com uma lavadora de placas Biotek EL405, Um volume de 20 μΐ de tampão de luciferase Dual-Glo (Promega, Dual-Glo Luciferase Assay Reagent, cat, #E2 98B) foi adicionado a cada poço da placa com uma Estação de Trabalho Biotek uFlow. A placa foi incubada durante 10 minutos à temperatura ambiente, um volume de 20 μΐ de uma solução contendo uma mistura 1:100 de substrato Dual-Glo Stop & Glo (Promega, Dual-Glo Luciferase Assay Reagent, cat. #E313B) e tampão Dual-Glo Stop & Glo (Promega, Dual-Glo Luciferase Assay Reagent, cat. #E314B) foi então adicionado a cada poço da placa com uma Biotek uFlow Workstation. A placa foi incubada à temperatura ambiente durante 10 minutos antes de se medir o sinal de luminescência com um leitor de placas Perkin Elmer Envision.

Etapa 4: cálculo A percentagem de citotoxicidade foi determinada por conversão de calceína AM em produto fluorescente. 0 sinal fluorescente médio dos poços de controlo de DMSO foi definido como 10013 não tóxico. 0 sinal fluorescente individual do poó tratado com composto de teste foi dividido pelo sinal médio dos poços de controlo de DMSO e depois multiplicado por 1000 para obter a viabilidde percentual, percentagem de atividade de replicação anti-HCV foi determinada pelo sinal de luminescência do poço de teste em comparação com os poços de controlo de DMSO. 0 sinal de fundo foi determinado pelo sinal de luminescência médio dos poços tratados com o inibidor de protease de HCV e foi subtraído do sinal dos poços de teste assim como dos poços de controlo de DMSO. Após as diluições em série de 3 vezes, os valores de EC50 e CC50 foram calculados ajustano a 0 de inibição em cada concentração à seguinte equaço: 0 de inibição ™ 1000 Á[(E<Á[I])b + 1]

Onde b é o coeficiente de Hill. Veja-se, para referência, Hill, A. V., The Possible Effects of the Aggregation of the Molecules of Haemoglobin on its

Dissociation Curves, J. Physiol. 40: iv-vii. (1910).

Os valores de ê de inibição a uma concentração específica, por exemplo, 2 μΜ, também podem ser derivados da fórmula acima.

Quando testados, certos compostos desta invenção foram encontrados que inibem a replicação virai conforme no Quadro 1:

Quadro 1

As respostas farmacológicas específicas observadas podem variar de acordo com e depender do composto ativo particular selecionado ou se estão presentes veículos farmacêuticos, bem como o tipo de formulação e o modo de administração utilizado, e tais variações esperadas ou diferenças nos resultados são contemplados de acordo com a prática da presente invenção.

Embora formas de realização específicas da presente invenção sejam no presente documento ilustradas e descritas em detalhe, a invenção não é limitada às mesmas. As descrições detalhadas acima são fornecidas como exemplares da presente invenção e não devem ser interpretadas como constituindo qualquer limitação da invenção.

DOCUMENTOS REFERIDOS NA DESCRIÇÃO

Esta lista de documentos referidos pelo autor do presente pedido de patente foi elaborada apenas para informação do leitor. Não é parte integrante do documento de patente europeia. Não obstante o cuidado na sua elaboração, ο IEP não assume qualquer responsabilidade por eventuais erros ou omissões.

Documentos de patente referidos na descrição • WO 2008058393 A, Chan [0005] [0146] • WO 2006072347 A, Wunberg [0005] • WO 2002100851 A, Chan [0005] • WO 200858393 A [0135] • US 5861421 A [0138] [0143]

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Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Um composto da Fórmula I:

Formula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em

Het é um heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído ou heteroarilo de 3-14 membros opcionalmente substituído; em que, cada Het substituído é substituído com um ou mais Q4 ; cada G4, independentemente, é selecionado a partir do grupo que consiste em halogéneo, oxo, óxido, -N02, N(™0), -SR40, -S (0) R40, -S(0)2R40, -S (O)2NR40R41, NR4CC(0)R41, -NR40C (0) nr41r42, -NR4CS (0) R41, -NR40S (0) 2R41, - 0P(0)R41R42, -P(0)R41R42, -P(0)0R41R42, -P(0) (0R41)0R42, C (0) NR41R42, Ci_6 alquilo opcionalmente substituído, C2_6 alquenilo opcionalmente substituído, C2-5 alquinilo opcionalmente substituído, C3_6 cicloalquilo opcionalmente substituído, C6-12 arilalquilo opcionalmente substituído, C6_i2 arilo opcionalmente substituído, heteroarilo de 3 -14 membros opcionalmente substituído, Ci_6 alquiloxi opcionalmente substituído, C2-e alqueniloxi opcionalmente substituído, C2 - 6 alquiniloxi opcionalmente substituído, C3_6 cicloalquiloxi opcionalmente substituído, C6_i2 ariloxi opcionalmente substituído, heteroariloxi de 3 -14 membros opcionalmente substituído, heterocicliloxi de 4-12 membros opcionalmente substituído, -C(0)Ci_6 alquilo opcionalmente substituído, -C(0)C2-s alquenilo opcionalmente substituído, -C(0)C2-5 alquinilo opcionalmente substituído, -C(0)C3_5 cicloalquilo opcionalmente substituído, -C(0)C6-i2 arilo opcionalmente substituído, -C(0)- heteroarilo de 3-14 membros opcionalmente substituído, -C(0)C6_i2 arilaquilo opcionalmente substituído, heterociclilo de 3-10 membros opcionalmente substituído, -OH, -NR41R42, -C(0)0R40, -CN, -N3, -C(™NR43)NR41R42, -c (™NR43) OR40, -NR40C(™NR43)NR41R42, - NR41C (0) OR40 e -0C (0) NR41R42 ; cada R40, R4i e R42, é independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em H, Ci_i2 alquilo opcionalmente substituído, C2-i2 alquenilo opcionalmente substituído, C2-12 alquinilo opcionalmente substituído, C3_ 12 cicloalquilo opcionalmente substituído, C6-i4 arilo opcionalmente substituído, heteroarilo de 3 - 14 membros opcionalmente substituído, heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído, heteroarilalquilo de 3-18 membros opcionalmente substituído e C6-i8 arilalquilo opcionalmente substituído; ou R41 e R42 tomados juntamente com os átomos ao quais estão unidos formam um heterociclilo de 3 a 10 membros; cada R43, independentemente, é selecionado a partir do grupo que consiste em H, C1-12 alquilo opcionalmente substituído, C2-i2 alquenilo opcionalmente substituído, C2_ :L2 alquinilo opcionalmente substituído, C3_12 cicloalquilo opcionalmente substituído, C6-i4 arilo opcionalmente substituído, heteroarilo de 3 - 14 membros opcionalmente substituído, heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído, heteroarilalquilo de 3-18 membros opcionalmente substituído, C6-i8 arilalquilo opcionalmente substituído, -CN, -C (0) R44, -CH0 e -S(0)2R44; cada R44 individualmente é Ci_i2 alquilo opcionalmente su.fo b t i tui do} em que, cada Q4 substituído, R40 substituído, R41 substituído, R42 substituído, R4j substituído, ou R44 substituído é independentemente substituído com um ou mais Q5; cada Q5, individualmente, é selecionado a partir do grupo que consiste em halogéneo, oxo, óxido, -N02, -N(™0), SR50, -S (0) R50, -S(0)2R50, -S (0) 2NR50R51, -NR50C (0) R51, NR50C(O)NR5:lR52, -NR50S (0) R51, -MR50S (0) 2R51, -0P (0) r51r52, - P(0)R51R52, -P (0) 0R51R52, -P(0) (0R51)0R52, -C (0) NR51R52, C1-6 alquilo opcionalmente substituído, C2_5 alquenilo opcionalmente substituído, C2-6 alquinilo opcionalmente substituído, C3-6 cicloalquilo opcionalmente substituído, C6-i2 arilalquilo opcionalmente substituído, C6-i2 arilo opcionalmente substituído, heteroarilo de 3 - 14 membros opcionalmente substituído, Ci-6 alquiloxi opcionalmente substituído, C2-6 alqueniloxi opcionalmente substituído, C2-6 alquiniloxi opcionalmente substituído, C3_6 cicloalquiloxi opcionalmente substituído, C6-i2 ariloxi opcionalmente substituído, heteroariloxi de 3 - 14 membros opcionalmente substituído, heterocicliloxi de 4-12 membros opcionalmente substituído, -C(0)Ci-6 alquilo opcionalmente substituído, -C(0)C2-6 alquenilo opcionalmente substituído, -C(0)C2_6 alquinilo opcionalmente substituído, -C(0)C3.-6 cicloalquilo opcionalmente substituído, -C(0)CS-i2 arilo opcionalmente substituído, -C(0) - heteroarilo de 3 -14 membros opcionalmente substituído, -C(0)Cs_;L2 arilaquilo opcionalmente substituído, heterociclilo de 3-10 membros opcionalmente substituído, -OH, -NR51R52, -C(0)0R50, -CN, -N3, -C(™NR53)NR51R52, -C (™NR53) OR50, -NR50C(™NR53)NR51R52, NR50C(O)OR50 e -0C(0)NR51R52; cada Rb0, R51 e R°2, é independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em H, Ci_i2 alquilo opcionalmente substituído, C2-i2 alquenilo opcionalmente substituído, C2-i2 alquinilo opcionalmente substituído, C3_ 12 cicloalquilo opcionalmente substituído, C6„i4 arilo opcionalmente substituído, heteroarilo de 3 - 14 membros opcionalmente substituído, heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído, heteroarilalquilo de 3-18 membros opcionalmente substituído e C6„i8 arilalquilo opcionalmente substituído; ou Rbi e R3"" tomados juntamente com os átomos ao quais estão unidos formam um heterociclilo de 3 a 10 membros; cada R53, independentemente, é selecionado a partir do grupo que consiste em H, Ci_i2 alquilo opcionalmente substituído, C2-12 alquenilo opcionalmente substituído, C2_ i2 alquinilo opcionalmente substituído, C3-12 cicloalquilo opcionalmente substituído, C5-i4 arilo opcionalmente substituído, heteroarilo de 3 - 14 membros opcionalmente substituído, heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído, heteroarilalquilo de 3-18 membros opcionalmente substituído, C6-i8 arilalquilo opcionalmente substituído, -CN, -C (0) R54, -CHO e -S(0)2R54; cada Rb4, independentemente, é Ci-i2 alquilo opcionalmente substituído; em que, cada Q5 substituído, R50 substituído, R51 substituído, Rb2 substituído, R53 substituído, ou R54 substituído é independentemente substituído com um ou ma is Qb ; cada QD, independentemente, é selecionado a partir do grupo que consiste em halogéneo, oxo, óxido, -N02, M (™0) , -SR60, -S (0) R60, -S(0)2Rso, -S (O)2NR60R61, nr60c(o)r61, -nr60c (o) nr61r62, -nr60s (o) r61, -nr60s (o) 2R61, - 0P (0) RS1R62, -P (0) RS1R62, -P (0) 0RS1R62, -P(0) (ORsl)OR62, C (0) NR51Rb2, Ci-s alquilo, C2_6 alquenilo, C2_6 alquinilo, C3_ 6 cic 1 oa 1 qui 1 o, Cg_22 arilalquilo, arilo Cg_[2, heteroarilo de 3 - 14 membros, Ci-6 alquiloxi, C2_6 alqueniloxi, C2..6 alquiniloxi, C3_6 cicloalquiloxi, C6_i2 ariloxi, heteroariloxi de 3 - 14 membros, heterocicliloxi de 4-12 membros, -C(0)C;L_s alquilo, -C(0)C2_6 alquenilo, -C(0)C2_6 alquinilo, -C(0)C3_6 cicloalquilo, -C(0)Ci_6 haloalquilo, -C(0)C6_12 arilo, -C(0)- heteroarilo de 3-14 membros, C(0)C6_12 arilalquilo, heterociclilo de 3-10 membros, -0H, -NR61R62, -C(0)0R60, -CN, -M3í -C(™NR63)NR5:lRS2, C (™NR63) OR60, -NR60C(™NRS3)NR61R62, -NRS1C (0) ORso e 0C(0)NRS1R62; cada R60, R61 e R62, independentemente, é selecionado a partir do grupo que consiste em H, Ci_;L2 alquilo, C2_:12 alquenilo, C2-i2 alquinilo, C3-i2 cicloalquilo, Ci-i2 haloalquilo, C6-i4 arilo, heteroarilo de 3 - 14 membros, heterociclilo de 3-12 membros, heteroarilalquilo de 3-18 membros e C6-is arilalquilo; ou R61 e R62 tomados juntamente com os átomos ao quais estão unidos formam um heterociclilo de 3 a 10 membros; cada R63 é independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em H, Ci_i2 alquilo, C2-i2 alquenilo, C2_ i2 alquinilo, C3_i2 cicloalquilo, CS-i4 arilo, heteroarilo de 3 - 14 membros, heterociclilo de 3-12 membros, heteroarilalquilo de 3-18 membros, C6-i8 arilalquilo, -CN, -C (0) R64, -CH0 e -S (0) 2R64 ; e cada R64 independentemente é Ci_i2 alquilo.

3. 0 composto ou sal farmaceuticamente aceitável de acordo com a reivindicação 1 ou 2, em que Het é um heterociclilo de 3-12 membros opcionalmente substituído que compreende um ou dois heteroãtomos selecionados a partir de 0, S ou N. 4. 0 composto de acordo com a reivindicação 1 representado pela Fórmula III:

Fórmula III em que Ri é selecionado a partir do grupo que consiste em

ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos. 5. 0 composto ou sal farmaceuticamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-4 em que Het é piridinilo opcionalmente substituído, piridazinilo opcionalmente substituído, tetrahidro-2íf-piranilo opcionalmente substituído, piperidinilo opcionalmente substituído, pirrolidinilo opcionalmente substituído, tetrahidrotiofenilo opcionalmente substituído, pirazinilo opcionalmente substituído, azetidinilo opcionalmente substituído, tetrahidrofuranilo opcionalmente substituído, tetrahidro-2H-furo[2,3-b]-furanilo opcionalmente substituído, tiazolilo opcionalmente substituído, 1H- imidazolilo opcionalmente substituído, lH-pirazolilo opcionalmente substituído, quinolinilo opcionalmente substituído, tiofenilo opcionalmente substituído, pirimidinilo opcionalmente substituído. 6. 0 composto ou sal farmaceuticamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-5 em que R2 é

7. 0 composto ou sal farmaceuticamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-6 em que Het é tetrahidrofuran-3-ilo opcionalmente substituído. 8. 0 composto ou sal farmaceuticamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-6 em que Het é tetrahidrofuran-3-ilo. 9. 0 composto de acordo com a reivindicação 1 selecionado a partir de

ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos. 10. 0 composto de acordo com a reivindicação 1 que é:

ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.
11. Uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto ou sal farmaceuticamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-10 e um excipiente ou veículo farmaceuticamente aceitável.
12. A composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 11 que compreende ainda pelo menos um agente terapêutico adicional selecionado a partir do grupo que consiste em interferão, ribavirina ou um análogo da mesma, um inibidor de HCV NS3 protease, um inibidor de NS5a, um inibidor de alfa-glicosidase 1, um hepatoprotetor, um antagonista de mevalonato decarboxilase, um antagonista do sistema renina-angiotensina, outros agentes anti-fibróticos, um inibidor de nucleósido ou nucleótido de HCV NS5B polimerase, um inibidor não nucleósido de HCV NS5B polimerase, um inibidor de HCV NS5A, um agonista de TLR-7, um inibidor de ciclofilina, um inibidor de HCV IRES, um potenciador farmacocinético e outros fãrmacos para o tratamento de HCV; ou uma mistura dos mesmos.
13. Um composto ou sal farmaceuticamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-10 para utilização no tratamento de uma infeção virai causada por um vírus selecionado a partir do grupo que consiste em vírus da dengue, vírus da febre amarela, vírus West Nile, vírus da encefalite japonesa, vírus da encefalite originada em carraça, vírus Kunjin, vírus da encefalite Murray Valley , vírus da encefalite de St. Louis, vírus da febre hemorrágica Omsk, vírus da diarreia bovina virai, vírus Zika e vírus da hepatite C.
14. Um composto ou sal farmaceuticamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-10 para utilização no tratamento de uma infeção virai causada por um vírus Flaviviridae ou vírus da Hepatite C. 15. 0 composto ou sal farmaceuticamente aceitável para utilização de acordo com a reivindicação 13 ou 14 em que o composto é para utilização com pelo menos um agente terapêutico adicional selecionado a partir do grupo que consiste em um interferão, ribavirina ou um análogo da mesma, um inibidor de HCV NS3 protease, um inibidor de NS5a, um inibidor de alfa-glicosidase 1, um hepatoprotetor, um antagonista de mevalonato decarboxilase, um antagonista do sistema renina-angiotensina, outros agentes antifibróticos, um inibidor de nucleósido ou nucleótido de HCV NS5B polimerase, um inibidor não nucleósido de HCV NS5B polimerase, um inibidor de HCV NS5A, um agonista de TLR-7, um inibidor de ciclof ilina, um inibidor de HCV IRES, um potenciador farmacocinético e outros fãrmacos para o tratamento de HCV; ou uma mistura dos mesmos.