PT2066628E

PT2066628E - 2-fenil-indoles como antagonistas do receptor da prostaglandina d2

Info

Publication number: PT2066628E
Application number: PT07799729T
Authority: PT
Inventors: Zhaoxia Yang; Stephan Reiling; Thaddeus R Nieduzak; Rose M Mathew; Sharon Jackson; Keith J Harris
Original assignee: Sanofi Aventis
Priority date: 2006-07-25
Filing date: 2007-07-20
Publication date: 2010-12-31
Also published as: DE602007010010D1; US20090176804A1; ECSP099087A; TNSN08515A1; IL196587A0; CR10577A; EP2066628A1; AU2007276885A1; BRPI0714554A2; EP2066628B1; WO2008014186A1; CO6190511A2; NO20090862L; PE20080549A1; ATE485270T1; MX2009000830A; JP2009544721A; CL2007002163A1; CA2659055A1; KR20090039735A

Description

DESCRIÇÃO

"2-FENIL-ÍNDOLES COMO ANTAGONISTAS DO RECEPTOR DA PROSTAGLANDINA D2"

CAMPO DA INVENÇÃO A presente invenção é dirigida a compostos 2-fenil-indole, sua preparação, composições farmacêuticas contendo esses compostos e à sua utilização farmacêutica no tratamento dos estados de doença capazes de serem modulados pela inibição do receptor da prostaglandina D2.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO 0 estimulo alergénico local nos doentes com rinite alérgica, asma brônquica, conjuntivite alérgica e dermatite atópica tem demonstrado resultar no rápido aumento dos níveis da prostaglandina D2 "(PGD2)" em fluidos de lavagem nasais e brônquicos, lágrimas e fluidos skin chamber. A PGD2 tem muitas acções inflamatórias, tais como o aumento da permeabilidade vascular na conjuntiva e pele, aumento da resistência das vias respiratórias nasais, estreitamento das vias respiratórias e infiltração por eosinófilos na conjuntiva e traqueia. A PGD2 é o produto principal da ciclooxigenase do ácido araquidónico, produzido pelos mastócitos após estimulo imunológico [Lewis, RA, Soter NA, Diamond PT, Austen KF, Oates JA, Roberts LJ II, prostaglandin D2 generation after activation 1 of rat and human mast cells with anti-IgE, J. Immunol. 129, 1627-1631, 1982] . Os mastócitos activados, uma fonte principal de PGD2, são um dos participantes chave na estimulação da resposta alérgica em condições tais como a asma, rinite alérgica, conjuntivite alérgica, dermatite alérgica e outras doenças [Brightling CE, Bradding P, Pavord ID, Wardlaw AJ, New

Insights into the role of the mast cell in asthma, Clin Exp

Allergy 33, 550-556, 2003] .

Muitas acções da PGD2 são mediadas através da sua acção no receptor da prostaglandina do tipo D ("DP"), um receptor ligado a proteína G expresso no epitélio e músculo liso.

Na asma, o epitélio respiratório foi reconhecido há muito como a fonte principal das citocinas inflamatórias e quimiocinas que conduzem a progressão da doença [Holgate S, Lackie P, Wilson S, Roche W, Davies D, Bronchial Epithelium as a Key Regulator of Airway Allergen Sensitzation and Remodeling in Asthma, Am J Respir Crit Care Med. 162, 113-117, 2000] . Num modelo experimental de asma em murinos, o receptor DP é drasticamente regulado positivamente no epitélio das vias respiratórias no estímulo por antigénio [Matsuoka T, Hirata M, Tanaka H, Takahashi Y, Murata T, Kabashima K, Sugimoto Y, Kobayashi T,

Ushikubi F, Aze Y, Eguchi N, Urade Y, Yoshida N, Kimura K,

Mizoguchi A, Honda Y, Nagai H, Narumiya S, Prostaglandin D2 as a mediator of allergic asthma, Science 287, 2013-2017, 2000]. Em murganhos knockout, na ausência do receptor DP, verifica-se uma redução acentuada na hiperactividade das vias respiratórias e inflamação crónica [Matsuoka T, Hirata M, Tanaka H, Takahashi Y, Murata T, Kabashima K, Sugimoto Y, Kobayashi T, Ushikubi F, Aze Y, Eguchi N, Urade Y, Yoshida N, Kimura K, Mizoguchi A, Honda Y, Nagai H, Narumiya S, Prostaglandin D2 as a mediator of allergic 2 asthma, Science 287, 2013-2017, 2000]; duas das características principais da asma humana.

Pensa-se também que o receptor DP está também envolvido na rinite alérgica humana, uma doença alérgica frequente que é caracterizada pelos sintomas de espirro, comichão, corrimento e congestão nasal. A administração local da PGD2 no nariz provoca um aumento dependente da dose na congestão nasal [Doyle WJ, Bochm S, Skoner DP, Physiologic responses to intranasal dose-response challenges with histamine, methacholine, bradykinin, and prostaglandin in adult volunteers with and without nasal allergy, J Allergy Clin Immunol. 86(6 Pt 1), 924-35, 1990] .

Os antagonistas do receptor DP têm demonstrado reduzir a inflamação das vias respiratórias num modelo experimental de asma em cobaios [Arimura A, Yasui K, Kishino J, Asanuma F, Hasegawa H, Kakudo S, Ohtani M, Arita H (2001), Prevention of allergic inflammation by a novel prostaglandin receptor antagonist, S-5751, J Pharmacol Exp Ther. 298(2), 411-9, 2001]. Deste modo, a PGD2, parece agir no receptor DP e tem um papel importante na estimulação de determinadas características da asma alérgica.

Os antagonistas de DP demonstraram ser eficazes no alivio dos sintomas da rinite alérgica em múltiplas espécies e, de um modo mais específico, demonstraram inibir a congestão nasal induzida por antigénio, o sintoma da rinite alérgica que mais se manifesta [Jones, T. R., Savoie, C., Robichaud, A., Sturino, C., Scheigetz, J., Lachance, N., Roy, B., Boyd, M., Abraham, W., Studies with a DP receptor antagonist in sheep and guinea pig models of allergic rhinitis, Am. J. Resp. Crit. Care Med. 167, 3 Α218, 2003; e Arimura A, Yasui K, Kishino J, Asanuma F, Hasegawa H, Kakudo S, Ohtani M, Arita H Prevention of allergic inflammation by a novel prostaglandin receptor antagonist, S-5751. J Pharmacol Exp Ther. 298(2), 411-9, 2001].

Os antagonistas de DP são também eficazes em modelos experimentais de conjuntivite alérgica e dermatite alérgica [Arimura A, Yasui K, Kishino J, Asanuma F, Hasegawa H, Kakudo S, Ohtani M, Arita H, Prevention of allergic inflammation by a novel prostaglandin receptor antagonist, S-5751. J Pharmacol Exp Ther. 298(2), 411-9, 2001; e Torisu K, Kobayashi K, Iwahashi M, Nakai Y, Onoda T, Nagase T, Sugimoto I, Okada Y, Matsumoto R, Nanbu F, Ohuchida S, Nakai H, Toda M, Discovery of a new class of potent, selective, and orally active prostaglandin D2 receptor antagonists, Bioorg. & Med Chem. 12, 5361-5378, 2004] . O documento W02006/081343 divulga derivados de 2-fenil-indole, a sua preparação, composições farmacêuticas contendo estes compostos e sua utilização farmacêutica no tratamento de estados de doença capazes de serem modulados pela inibição do receptor da prostaglandina D2.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO A presente invenção dirige-se a um composto de fórmula (A),

4 em que: R é r1ch2so2-, R2CH2S02NH- ou r3nhso2-, R1 é fenilo opcionalmente substituído com halo, R2 é fenilo substituído com halo, dicloro-4-metoxi-3-fenil- R3 é 2,6-dicloro-benzilo, 3,5-dicloro-benzilo, 2,4 feniletilo, 2-metoxi-feniletilo, 3-metoxi-feniletilo, feniletilo, 2-trifluorometil-feniletilo, feniletilo ou n-propilo, R4 é hidrogénio, R5 é cloro, R6 é hidrogénio e R8 é hidroxilo; ou R é ciclo-hexilaminossulfonilo, R4 é 4-cloro, 4-fluoro, 4-metilo ou 7-cloro, R5 é cloro ou etilo, R6 é hidrogénio ou metilo, e R8 é hidroxilo; ou 5 R é ciclo-hexilaminossulfonilo R4 é hidrogénio, R5 é cloro, R6 é hidrogénio, R8 é -NHR7, e R7 é metilo, metilsulfonilo, etilsulfonilo, haloalquilsulfonilo ou tetrazolilo; ou um seu sal hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável, um seu profármaco de éster farmaceuticamente aceitável, ou um sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável do profármaco de éster.

Outro aspecto da presente invenção é uma composição farmacêutica compreendendo uma quantidade farmaceuticamente eficaz de um ou mais compostos da invenção, ou um seu sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável, um seu profármaco de éster farmaceuticamente aceitável, ou um sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável do profármaco de éster, em mistura com um veiculo farmaceuticamente aceitável. 6

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

Definição dos Termos

Como utilizado acima e ao longo da descrição da invenção, os seguintes termos, a menos que indicado de outra forma, deverão ser entendidos como tendo os seguintes significados: "Compostos da presente invenção" e expressões equivalentes, pretendem englobar os compostos das Fórmulas (A), (I), (li) ou (III) como aqui descrito anteriormente, cuja expressão inclui os profármacos, os sais farmaceuticamente aceitáveis e os solvatos, e. g., hidratos, onde o contexto assim o permitir. De um modo semelhante, a referência aos intermediários, sejam ou não eles próprios reivindicados, pretende englobar os seus sais e solvatos, onde o contexto assim o permitir. "Haloalquilo" significa alquilo substituído com um a três grupos halo. Particularmente haloalquilo é alquilo inferior substituído com um a três halogéneos. De um modo muito particular, haloalquilo é alquilo inferior substituído com um halogéneo. "Haloalquilsulfonilo" significa haloalquil-S02-. Um exemplo inclui CF3-SO2-. "Doente" inclui humano e outros mamíferos. "Profármacos farmaceuticamente aceitáveis", como aqui utilizado refere-se a esses profármacos de compostos da presente invenção que são, dentro do âmbito da avaliação 7 clínica, adequados para utilização em contacto com os tecidos de doentes com toxicidade exagerada, irritação, resposta alérgica proporcional com uma proporção benefício/rico razoável e eficaz para a sua utilização pretendida dos compostos da invenção. 0 termo "profármaco" significa um composto que é transformado in vivo para proporcionar um composto da invenção ou um sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável do composto. A transformação pode ocorrer através de vários mecanismos, tal como através de hidrólise no sangue. Os compostos ligados a grupos metabolicamente cliváveis têm a vantagem de poderem exibir uma biodisponibilidade melhorada como um resultado de solubilidade melhorada e/ou taxa de absorção conferida pelo composto relacionado em virtude da presença do grupo metabolicamente clivável, assim, tais compostos actuam como profármacos. É proporcionada uma discussão completa em Design of Prodrugs, H. Bundgaard, ed., Elsevier (1985); Methods in Enzymology; K. Widder et al., Ed., Academic Press, 42, 309-396 (1985); A Textbook of Drug Design and

Development, Krogsgaard-Larsen and H. Bandgaard, ed., Chapter 5; "Design and Applications of Prodrugs" 113-191 (1991); Advanced Drug Delivery Reviews, H. Bundgaard, 8, 1-38, (1992); J. Pharm. Sei., 77, 285 (1988); Chem. Pharm.

Buli., N. Nakeya et al., 32, 692 (1984); Pro-drugs as Novel Delivery Systems, T. Higuchi e V. Stella, 14 A.C.S. Symposium Series, and Bioreversible Carriers in Drug Design, E.B. Roche, ed., American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987; J. Med. Chem., Vol. 47, N° 10, 1-12 (2004), que estão aqui incorporadas por referência.

Os profármacos de um composto da invenção são profármacos de éster. "Profármacos de éster" significa um composto que convertível in vivo através de meios metabólicos (e. g., por hidrólise) para um composto da invenção. Por exemplo, um profármaco de éster um composto da invenção contendo um grupo carboxilo pode ser convertível por hidrólise in vivo no composto correspondente da invenção, tais como profármaco de éter metilico, profármaco de éster etílico ou profármaco de éster 2-dimetilamino-etílico. "Sais farmaceuticamente aceitáveis" refere-se aos sais de adição de ácido orgânico e inorgânico não tóxicos e aos sais de adição de base, de compostos da presente invenção. Estes sais podem ser preparados in situ durante o isolamento final e purificação dos compostos. "Quantidade farmaceuticamente eficaz" significa uma quantidade de composto ou compostos eficazes, de acordo com a presente invenção, que produzem o efeito terapêutico desejado aqui descrito, tais como alivio da alergia ou efeito de alívio inflamatório. "Solvato" significa uma associação física de um composto desta invenção com uma ou mais moléculas de solvente. Esta associação física inclui ligações de hidrogénio. Em determinados casos o solvato será capaz de isolamento, por exemplo, quando uma ou mais moléculas de solvente são incorporadas na estrutura cristalina do sólido cristalino. "Solvato" engloba ambos os solvatos passíveis de isolamento e em fase de solução. Os solvatos representativos incluem hidratos, etanolatos e metanolatos. 9

Alguns dos compostos da presente invenção são básicos e tais compostos são úteis na forma da base livre ou na sua forma de um sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável.

Os sais de adição de ácido são uma forma mais conveniente para utilização; e, na prática, a utilização da forma salina equivale à utilização da forma da base livre. Os ácidos que podem ser utilizados para preparar os sais de adição de ácido incluem, de um modo preferido, aqueles que produzem, quando combinados com a base livre, sais farmaceuticamente aceitáveis, isto é, sais cujos aniões não são tóxicos para o doente em doses farmacêuticas dos sais, deste modo, os efeitos inibidores benéficos inerentes na base livre não são viciados pelos efeitos secundários atribuíveis aos aniões. Embora os sais farmaceuticamente aceitáveis dos referidos compostos básicos sejam preferidos, todos os sais de adição de ácido são úteis como fontes da forma de base livre mesmo se o sal particular, per se, é desejado apenas como um produto intermediário como, por exemplo, quando o sal é formado apenas para os objectivos de purificação e identificação, ou quando é utilizado como intermediário na preparação de um sal farmaceuticamente aceitável por processos de permuta iónica. Em particular, os sais de adição de ácido podem ser preparados por reacção em separado do composto purificado na sua forma de base livre com um ácido orgânico ou inorgânico adequado e isolando o sal assim formado. Os sais farmaceuticamente aceitáveis incluídos no âmbito da invenção incluem aqueles derivados de ácidos minerais e ácidos orgânicos. Exemplos de sais de adição de ácidos incluem o bromidrato, cloridrato, sulfato, bissulfato, fosfato, nitrato, acetato, oxalato, valerato, oleato, palmitato, quinatos, estearato, laurato, borato, benzoato, lactato, fosfato, tosilato, citrato, maleato, fumarato, succinato, tartarato, 10 naftilato, mesilato, gluco-heptonato, lactiobionato, sulfamatos malonatos, salicilatos, propionatos, metileno-bis-β-hidroxinaftoatos, gentisatos, isetionatos, di-para-toluoiltartaratos, etanossulfonatos, benzenossulfonatos, ciclo-hexilsulfamatos e laurilsulfonato. Ver, por exemplo, S.M. Berge, et al., "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sei., 66, 1-19 (1977) que está aqui incorporada por referência.

Quando o composto da invenção é substituído com uma porção acídica, os sais de adição de base podem ser formados e são, simplesmente, uma forma mais conveniente de utilização; e, na prática, a utilização das quantidades inerentes da forma de sal para utilização da forma de ácido livre. As bases que podem ser utilizadas para preparar os sais de adição de base incluem, de um modo preferido, aqueles que produzem, quando combinados com o ácido livre, sais farmaceuticamente aceitáveis, isto é, sais cujos catiões são não tóxicos para o doente em doses farmacêuticas dos sais, deste modo, os efeitos inibidores benéficos inerentes na base livre não são viciados pelos efeitos secundários conferidos pelos catiões. Os sais de adição de base podem, também, ser preparados por reacção em separado dos compostos purificados nestas formas de ácido com uma base orgânica e inorgânica adequada, derivada de sais de metais alcalinos e alcalinos-terrosos e isolando o sal assim formado. Os sais de adição de base incluem sais de metal e amina farmaceuticamente aceitáveis. Os sais de metal adequados incluem os sais de sódio, potássio, cálcio, bário, zinco, magnésio e alumínio. Os sais particulares são os sais de sódio e potássio. Os sais de adição de base inorgânicos adequados são preparados a partir de bases metálicas que incluem hidreto de sódio, hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, hidróxido de cálcio, hidróxido de alumínio, hidróxido de lítio, hidróxido de 11 magnésio, hidróxido de zinco e semelhantes. Os sais de adição de bases aminadas adequados são preparados a partir de aminas que têm uma função base suficiente para formar um sal estável e, de um modo preferido, incluem aquelas aminas que são frequentemente utilizadas na química clinica devido à sua toxicidade reduzida e aceitabilidade para utilização médica: amónia, etilenodiamina, N-metil-glucamina, lisina, arginina, ornitina, colina, N, N'-dibenziletilenodiamina, cloroprocaina, dietanolamina, procaina, N-benzilfenetilamina, dietilamina, piperazina, tris(hidroximetil)-aminometano, hidróxido de tetrametilamónio, trietilamina, dibenzilamina, efenamina, desidroabietilamina, N-etilpiperidina, benzilamina, tetrametilamónio, tetraetilamónio, metilamina, dimetilamina, trimetilamina, etilamina, aminoácidos básicos, e. g., lisina e arginina e diciclo-hexilamina.

Bem como sendo úteis por si só como compostos activos, os sais de compostos da invenção, são úteis para objectivos de purificação dos compostos, por exemplo, por aproveitamento das diferenças de solubilidade entre os sais e os compostos relacionados, os referidos produtos e/ou materiais de partida por técnicas bem conhecidas pelos especialistas na técnica.

Será evidente que os compostos da presente invenção poderão conter centros assimétricos. Estes centros assimétricos podem, independentemente, estar na configuração R ou S. Será evidente para os especialistas na técnica que determinados compostos da invenção podem também exibir isomerismo geométrico. É para ser entendido que a presente invenção inclui isómeros geométricos individuais e estereoisómeros e as suas misturas, incluindo misturas racémicas dos compostos da invenção Tais isómeros podem ser separados das suas misturas pela aplicação ou adaptação de 12 métodos conhecidos, por exemplo, técnicas cromatográficas e técnicas de recristalização ou são preparados em separado a partir dos isómeros apropriados dos seus intermediários. Adicionalmente, em situações onde os tautómeros dos compostos da invenção são possíveis, a presente invenção pretende incluir todas as formas tautoméricas dos compostos.

Uma forma de realização particular da presente invenção é um composto de formula (I),

em que: R é R1CH2S02-, R2CH2S02NH- ou R3NHS02-; R1 é fenilo opcionalmente substituído com halo; R2 é fenilo substituído com halo; e R3 é 2,6-dicloro-benzilo, 3,5-dicloro-benzilo, 2,4-dicloro-feniletilo, 2-metoxi-feniletilo, 3-metoxi-feniletilo, 4-metoxi-feniletilo, 2-trifluorometil- feniletilo, feniletilo ou 3-fenil-n-propilo; ou um seu sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável, um seu profármaco de éster farmaceuticamente aceitável, ou um 13 sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável do profármaco de éster.

Outra forma de realização particular da presente invenção é um composto de fórmula (I), em que R é R3NHS02-, um seu sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável, um seu profármaco de éster farmaceuticamente aceitável, ou um sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável do profármaco de éster.

Outra forma de realização particular da presente invenção é um composto de fórmula (II),

em que: R4 é 4-cloro, 4-fluoro, 4-metilo ou 7-cloro; R5 é cloro ou etilo; e R6 é hidrogénio ou metilo; ou um seu sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável, um seu profármaco de éster farmaceuticamente aceitável, ou um sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável, do profármaco de éster. 14

Outra forma de realização particular da presente invenção é um composto de fórmula (II), em que R5 é cloro e R6 é hidrogénio, ou um seu sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável, um seu profármaco de éster farmaceuticamente aceitável, ou um sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável do profármaco de éster.

Outra forma de realização particular da presente invenção é um composto de fórmula (III),

em que R7 é metilo, metilsulfonilo, etilsulfonilo, haloalquilsulfonilo ou tetrazolilo, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável , hidrato ou solvato, um seu profármaco de éster farmaceuticamente aceitável, ou um sal farmaceuticamente aceitável , hidrato ou solvato do profármaco de éster.

Outra forma de realização particular da presente invenção é um composto seleccionado de Ácido {2-[4-cloro-3-(2, 6-dicloro-benzilsulfamoil)-fenil]-1H- indol-3-il}-acético, Ácido {2-[4-cloro-3-(3,5-dicloro-benzilsulfamoil)-fenil]-1H- indol-3-il}-acético, 15 Ácido (2-{4-cloro-3-[2-(2,4-dicloro-fenil)-etilsulfamoil] fenil}-lH-indol-3-il)-acético, Ácido (2-{4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil} lH-indol-3-il)-acético, Ácido (2-{4-cloro-3-[2-(3-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil} lH-indol-3-il)-acético, Ácido (2-{4-cloro-3-[2-(4-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil} lH-indol-3-il)-acético, Ácido (2-{4-cloro-3-[2-(2-trifluorometoxi-fenil)-etilsulfamoil] fenil}-lH-indol-3-il)-acético, Ácido [2-(4-cloro-3-fenetilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il] acético, Ácido {2-[4-cloro-3-(3-fenil-propilsulfamoil)-fenil]-lH-indol-3 il}-acético, 2-[2-(4-Cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-N-metil-acetamida,

Ácido [4-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-1H indol-3-il]-acético, [4-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acetato de potássio,

Ácido [2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-4-fluoro-lH indol-3-il]-acético, 16 Ácido [2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-4-metil-lH- indol-3-il]-acético, Ácido [7-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil) -1H- indol-3-il]-acético, 2-Cloro-N-ciclo-hexil-5-[3-(2-metanossulfonilamino-2-oxo-etil)-lH-indol-2-il]-benzenossulfonamida, 2-Cloro-N-ciclo-hexil-5-[3-(2-etanossulfonilamino-2-oxo-etil)-lH-indol-2-il]-benzenossulfonamida, 2-Cloro-N-ciclo-hexil-5-[3-(2-oxo-2- trifluorometanossulfonilamino-etil)-lH-indol-2-il]- benzenossulfonamida, 2-[2-(4-Cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-N-(lH-tetrazol-5-il)-acetamida, Ácido [2-(3-ciclo-hexilsulfamoil-4-etil-fenil)-lH-indol-3-il]- acético, Ácido 2-[2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3- il]-propiónico, Ácido {2-[ 4-cloro-3-(3-cloro- fenilmetanossulfonil)-fenil]-lH-indol-3-il}-acético ou Ácido {2-[4-cloro-3-(3-cloro-fenilmetanossulfonilamino)-fenil]-1H-indol-3-il}-acético, ou um seu sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável, um seu profármaco de éster farmaceuticamente aceitável, ou um sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável do profármaco de éster. 17

Os compostos da invenção exibem actividade de antagonista do receptor da prostaglandina D2 e são úteis como agentes de acção farmacológica. Consequentemente, são incorporados em composições farmacêuticas e utilizados no tratamento de doentes que sofrem de determinados distúrbios médicos.

Os compostos incluídos no âmbito da presente invenção são antagonistas do receptor da prostaglandina D2, de acordo com os testes descritos na literatura e aqui descritos na seguinte secção de testes farmacológicos e acreditasse que estes resultados dos testes estão relacionados com a actividade farmacológica em humanos e outros mamíferos. Assim, noutra forma de realização, a presente invenção proporciona compostos da invenção e composições contendo os compostos da invenção para utilização no tratamento de um doente que sofre, ou está sujeito a patologias que podem ser melhoradas pela administração de um antagonista de PGD2. Por exemplo, os compostos da presente invenção poderão, deste modo, ser úteis no tratamento de vários distúrbios mediados por PGD2 incluindo, mas não limitado a, doença alérgica (tal como rinite alérgica, conjuntivite alérgica, dermatite atópica, asma brônquica e alergia aos alimentos), mastocitose sistémica, distúrbios acompanhados por activação dos mastócitos sistémica, choque anafilático, broncoconstricção, bronquite, urticária, eczema, doença acompanhada por comichão (tais como dermatite atópica e urticária), doenças (tais como cataratas, descolamento da retina, inflamação, infecção e distúrbios do sonos) que são produzidos secundariamente como um resultado de comportamento acompanhado pelo acto de coçar (tais como coceira e traumatismo), inflamação, doenças pulmonares obstrutivas crónicas, lesão de isquémia-reperfusão, acidente 18 vascularcerebral, artrite reumatóide crónica, pleurisia, colite ulcerosa e semelhantes.

Os compostos da presente invenção são também úteis em tratamentos envolvendo uma terapia de combinação com: (i) anti-histaminicos, tais como fexofenadina, loratadina e cetirizina, para o tratamento de rinite alérgica; (ii) antagonistas do leucotrieno, tais como montelucaste e zafirlucaste, para o tratamento de rinite alérgica, COPD, dermatite alérgica, conjuntivite alérgica, etc - por favor referir-se especificamente às reivindicações no documento WO 01/78697 A2; (iii) beta agonistas, tais como albuterol, salbuterol e terbutalina, para o tratamento de asma, COPD, dermatite alérgica, conjuntivite alérgica, etc; (iv) anti-histaminicos, tais como fexofenadina, loratadina, desloratadina e cetirizina, para o tratamento de asma, COPD, dermatite alérgica, conjuntivite alérgica, etc; (v) inibidores da PDE4 (Fosfodiesterase 4), tais como roflumilast e cilomilast, para o tratamento de asma, COPD, dermatite alérgica, conjuntivite alérgica, etc; ou (vi) com antagonistas do TP (receptor do Tromboxano A2) ou

CrTh2 (molécula homóloga ao receptor quimoatractivo expressa nas células Th2), tais como Ramatrobran (BAY-u3405), para o tratamento de COPD, dermatite alérgica, conjuntivite alérgica, etc. 19

Uma forma de realização especial dos métodos terapêuticos da presente invenção é o tratamento de rinite alérgica.

Outra forma de realização especial dos métodos terapêuticos da presente invenção é o tratamento da asma brônquica.

Aqui, as referências ao tratamento deverão ser entendidas como incluindo terapia profilática, bem como o tratamento de estados estabelecidos. A presente invenção inclui, também, no seu âmbito, composições farmacêuticas compreendendo, pelo menos, um dos compostos da invenção em mistura com um veiculo farmaceuticamente aceitável.

Na prática, o composto da presente invenção pode ser administrado na forma de dosagem farmaceuticamente aceitável a humanos e outros animais por administração tópica ou sistémica, incluindo oral, inalatória, rectal, nasal, bocal, sublingual, vaginal, colónica, parentérica (incluindo subcutânea, intramuscular, intravenosa, intradémica, intratraqueal e epidural), intracisternal e intraperitoneal. Será evidente que a via preferida pode variar com, por exemplo, o estado do recipiente. "Formas de dosagem farmaceuticamente aceitáveis" refere-se a formas de dosagem do composto da invenção e incluem, por exemplo, comprimidos, drageias, pós, elixires, xaropes, preparações liquidas, incluindo suspensões, vaporizadores, comprimidos inalantes, hóstias, emulsões, soluções, grânulos, cápsulas e supositórios, bem como preparações liquidas para injecção, incluindo preparações de lipossomas. As técnicas e 20 formulações podem ser encontradas, geralmente, em Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA, última edição.

Um aspecto particular da invenção proporciona um composto de acordo com a presente invenção para ser administrado na forma de uma composição farmacêutica. As composições farmacêuticas, de acordo com a presente invenção, compreendem compostos da presente invenção e veículos farmaceuticamente aceitáveis.

Os veículos farmaceuticamente aceitáveis incluem, pelo menos um componente seleccionado do grupo compreendendo veículos farmaceuticamente aceitáveis, diluentes, revestimentos, adjuvantes, excipientes ou veículos, tais como agentes conservantes, enchimentos, agentes desintegrantes, agentes de humidificação, agentes emulsionantes, agentes estabilizantes de emulsão, agentes de suspensão, agentes isotónicos, agentes adoçantes, agentes aromatizantes, agentes perfumantes, agentes corantes, agentes antibacterianos, agentes anti-fúngicos, outros agentes terapêuticos, agentes lubrificantes, agentes de retardamento ou promoção da absorção e agentes dispersantes, dependendo da natureza do modo de administração e formas de dosagem.

Exemplos de agentes de suspensão incluem álcoois isoestearílicos etoxilados, polioxietilenossorbitol e ésteres de sorbitano, celulose microcristalina, meta-hidróxido de alumínio, bentonite, ágar-ágar e tragacanto ou misturas destas substâncias.

Exemplos de agentes antibacterianos e anti-fúngicos para a prevenção da acção de microorganismos incluem parabenos, clorobutanol, fenol, ácido sórbico e semelhantes. 21

Exemplos de agentes isotónicos incluem açúcares, cloreto de sódio e semelhantes.

Exemplos de agentes de retardamento de absorção para prolongar a absorção incluem monoestearato de alumínio e gelatina.

Exemplos de agentes promotores da absorção para potenciar a absorção incluem sulfóxido de dimetilo e análogos relacionados.

Exemplos de diluentes, solventes, veículos, agentes solubilizantes, emulsionantes estabilizadores de emulsão, incluem água, clorofórmio, sacarose, etanol, álcool isopropílico, carbonato de etilo, acetato de etilo, álcool benzílico, álcool tetra-hidrofurfurilo, benzoato de benzilo, polióis, propilenoglicol, 1,3-butilenoglicol, glicerol, polietilenoglicois, dimetiloformamida, Tween® 60, Span® 60, álcool cetoestearílico, álcool miristílo, mono-estearato de glicerilo e laurilsulfato de sódio, ésteres de ácido gordo de sorbitano, óleos vegetais (tais como óleo de semente de algodão, óleo de nozes, óleo de gérmen de milho, azeite, óleo de rícino e óleo de sésamo) e ésteres orgânicos injectáveis, tais como oleato de etilo e semelhantes, ou misturas adequadas destas substâncias.

Exemplos de excipientes incluem lactose, açúcar de leite, citrato de sódio, carbonato de cálcio e fosfato de dicálcio.

Exemplos de agentes de desintegrantes incluem amido, ácidos algínicos e determinados silicatos complexos. 22

Exemplos de lubrificantes incluem estearato de magnésio, laurilsulfato de sódio, talco, bem como polietilenoglicóis de peso molecular elevado. A escolha dos veículos farmaceuticamente aceitáveis é, geralmente, determinada de acordo com as propriedades quimicas do composto activo, tais como solubilidade, o modo particular de administração e de abastecimento a ser observado na prática farmacêutica.

As composições farmacêuticas da presente invenção adequadas para administração oral podem ser apresentadas como unidades discretas, tais como uma forma de dosagem sólida, tal como cápsulas, pastilhas ou comprimidos, cada contendo uma quantidade predeterminada do ingrediente activo, ou como um pó ou grânulos; como uma forma de dosagem liquida, tais como uma solução ou suspensão num liquido aquoso ou um liquido não aquoso, ou como uma emulsão liquida óleo-em-água ou uma emulsão líquida água-em-óleo. 0 ingrediente activo pode também ser apresentado como um bolus, electuário ou pasta. "Forma de dosagem sólida" significa que a forma de dosagem do composto da invenção está na forma sólida, por exemplo cápsulas, comprimidos, pílulas, pós, drageias ou grânulos. Em tais formas de dosagem sólidas, o composto da invenção é misturado com, pelo menos, um excipiente convencional inerte (ou veículos), tais como citrato de sódio ou fosfato de dicálcio ou (a) enchimentos ou extensores, como por exemplo, amidos, lactose, sacarose, glucose, manitol e ácido silício, (b) ligandos, como por exemplo, carboximetilcelulose, alginatos, gelatina, polivinilpirrolidona, sacarose e acácia, (c) humidificantes, como por exemplo, glicerol, (d) agentes 23 desintegrantes, como por exemplo, ágar-ágar, carbonato de cálcio, amido de batata ou tapioca, ácido alginico, certos silicatos complexos e Na2CC>3, (e) retardantes de solução, como por exemplo parafina, (f) aceleradores de absorção, como por exemplo, compostos de amónio quaternário, (g) agentes humidificantes, como por exemplo, álcool cetilico e monoestearato de glicerol. (h) adsorventes, como por exemplo, caolina e bentonite, (i) lubrificantes, como por exemplo, talco, estearato de cálcio, estearato de magnésio, polietilenoglicóis sólidos, laurilsulfato de sódio, (j) agentes opacificantes, (k) agentes de tamponamento e agentes que libertam o(s) composto(s) da invenção numa certa parte do tracto intestinal de um modo retardado.

Um comprimido pode ser feito por compressão ou moldagem, opcionalmente com um ou mais ingredientes acessórios. Os comprimidos compressos podem ser preparados por compressão, numa máquina adequada, do ingrediente activo na forma de fluxo livre, tais como um pó ou grânulos, opcionalmente misturado com um ligando, lubrificante, diluente inerte, conservante, agente de dispersão ou activo de superfície. Podem ser utilizados excipientes, tais como lactose, citrato de sódio, carbonato de cálcio, fosfato de dicálcio e agentes desintegrantes, tais como amido, ácidos alginico e determinados silicatos complexos combinados com lubrificantes, tais como estearato de magnésio, laurilsulfato de sódio e talco. Uma mistura dos compostos em pó humidificados com um diluente líquido inerte pode ser moldada numa máquina adequada para preparar comprimidos moldados. Os comprimidos podem, opcionalmente, ser revestidos ou marcados e podem ser formulados de modo a proporcionar uma libertação lenta ou controlada do ingrediente activo. 24

As composições sólidas podem, também, ser empregues como enchimentos em cápsulas de gelatina de enchimento moles e duras, utilizando excipientes como lactose ou açúcar de leite, bem como polietilenoglicóis de peso molecular elevado e semelhantes.

Se desejado e para uma distribuição mais eficaz, os compostos podem ser microencapsulados em, ou ligados a sistemas de distribuição direccionados ou de libertação lenta, tais como matrizes biocompativeis, biodegradáveis e poliméricas, poli(d,1-lactido co-glicolido)), lipossomas e microesferas e injectados subcutaneamente ou intramuscularmente através de uma técnica chamada de depósito subcutâneo ou intramuscular, para proporcionar uma libertação lenta continua do(s) composto(s) durante um período de 2 semanas ou mais. Os compostos podem ser esterilizados, por exemplo, por filtração através de um filtro de retenção de bactérias ou por incorporação de agentes esterilizadores, na forma de composições sólidas estéreis que podem ser dissolvidas em água estéril ou alguns de outros meios injectáveis estéreis, imediatamente antes de utilizar. "Forma de dosagem líquida" significa que a dose do composto activo a ser administrada ao doente está na forma líquida, por exemplo, emulsões, soluções, suspensões, xaropes e elixires farmaceuticamente aceitáveis. Além dos compostos activos, as formas de dosagem líquidas podem conter diluentes inertes normalmente utilizados na técnica, esses solventes, agentes de solubilização e emulsionantes.

Quando as suspensões aquosas são utilizadas podem conter agentes emulsionantes ou agentes que facilitam a suspensão. 25

Composições farmacêuticas adequadas para administração tópica, significa formulações que estão numa forma adequada para serem administradas topicamente a um doente. A formulação pode ser apresentada como um unguento tópico, salvas, pós, sprays e inalantes, géis (com base em água ou álcool), cremes, como é geralmente conhecido na técnica ou incorporada numa base de matriz para aplicação num adesivo, que irá permitir uma libertação controlada do composto através da barreira transdérmica. Quando formulada num unguento, os ingredientes activos podem ser empregues com uma base de parafina ou miscivel em água. Alternativamente, os ingredientes activos podem ser formulados num creme com uma base de creme óleo-em-água. As formulações adequadas para administração tópica no olho incluem gotas oculares em que os ingredientes activos são dissolvidos ou suspensos num veiculo adequado, especialmente um solvente aquoso para o ingrediente activo. Formulações adequadas para administração tópica na boca, incluem pílulas compreendendo o ingrediente activo numa base aromatizada, normalmente sacarose e acácia ou tragacanto; pastilhas compreendendo o ingrediente activo numa base inerte, tais como gelatina e glicerina ou sacarose e acácia; e elixires bocais compreendendo o ingrediente activo num veículo líquido adequado. A fase oleosa da composição farmacêutica de emulsão pode ser constituída por ingredientes conhecidos de um modo também conhecido. Enquanto a fase pode compreender meramente um emulsionante (conhecido também como o emoliente), é desejável compreender uma mistura de, pelo menos, um emulsionante com uma gordura ou um óleo ou com ambos, uma gordura e um óleo. Numa forma de realização particular, um emulsionante hidrofílico é incluído em conjunto com um emulsionante lipofílico que actua como um estabilizador. Em conjunto, o(s) emulsionante (s) com ou 26 sem estabilizador(s) tornam a cera passível de emulsão e o percurso em conjunto com o óleo e a gordura, tornam a base de unguento passível de emulsão, que forma a fase passível de dispersão em óleo das formulações em creme.

Se desejado, a fase aquosa da base de creme pode incluir, por exemplo, pelo menos 30% p/p de um álcool poli-hídrico, i. e. um álcool com dois ou mais grupos hidroxilo, tais como propilenoglicol, butano 1,3-diol, manitol, sorbitol, glicerol e polietilenoglicol (incluindo peg 400) e misturas dos mesmos. As formulações tópicas podem incluir, de um modo desejável, um composto que potência a absorção ou penetração do ingrediente activo através da pele ou outras áreas afectadas. A escolha de óleos ou gorduras adequadas para uma composição baseia-se no alcançar das propriedades desejadas. Assim, um creme deverá, de um modo preferido, ser um produto não gorduroso, que não manche e lavável, com uma consistência adequada de modo a evitar derramar dos tubos ou outros recipientes. Podem ser utilizados os ésteres de aquilo mono ou dibásicos de cadeia linear ou ramificada, ésteres de alquilo mono- ou dibásico, tais como miritato de di-isopropílico, oleato de decilo, palmitato isopropílico, estearato de butilo, palmitato de 2-etil-hexilo ou uma mistura de ésteres de cadeia ramificada conhecidos Crodamol CAP., estes podem ser utilizados individualmente ou em combinação, dependendo das propriedades necessárias. Alternativamente, podem ser utilizados lípidos de elevado ponto de fusão, tais como parafina branca macia e/ou parafina líquida ou outros óleos minerais.

Composições farmacêuticas adequadas para administrações rectais ou vaginais, significa formulações que estão numa forma 27 adequada para serem administrados rectalmente ou vaginalmente a um doente e contendo, pelo menos, um composto da invenção. Os supositórios são uma forma particular para tais formulações que podem ser preparadas por mistura dos compostos desta invenção com excipientes ou veículos não irritante ou veículos tais como manteiga de cacau, polietilenoglicol ou uma cera de supositórios, que estão sólidos a temperaturas normais mas líquidos à temperatura corporal e, deste modo, derretem na cavidade rectal ou vaginal e libertam o componente activo.

Composição farmacêutica administrada por injecção pode ser injecção transmuscular, intravenosa, intraperitoneal e/ou subcutânea. As composições da presente invenção são formuladas em soluções líquidas, em particular em tampões fisiologicamente compatíveis, tais como solução de Hank ou solução de Ringer. Além disso, as composições podem ser formuladas na forma sólida e dissolvidas de novo ou suspensas imediatamente antes de utilizar. As formas liofilizadas estão também incluídas. As formulações são estéreis e incluem emulsões, suspensões, soluções de injecção aquosas e não aquosas que podem conter agentes de suspensão e agentes de espessura e anti-oxidantes, tampões, bacteriostáticos e solutos que tornam a formulação isotónica e tem um pH ajustado adequadamente, com o sangue do receptor pretendido.

Composição farmacêutica da presente invenção adequada para administração nasal por inalação, significa composições que estão numa forma adequada para serem administradas nasalmente ou por inalação a um doente. A composição pode conter um veículo, na forma de pó, com um tamanho de partícula, por exemplo, na gama de 1 a 500 mícrones (incluindo tamanhos de partícula numa gama entre 20 e 500 mícrones com incrementos de 5 mícrones, tais 28 como 30 mícrones, 35 mícrones, etc.). As composições adequadas em que o veículo é um líquido, para administração como, por exemplo, um spray nasal ou como gotas nasais, incluem soluções aquosas ou oleosas do ingrediente activo. Composições adequadas para administração de aerossóis podem ser preparadas de acordo com métodos convencionais e podem ser administradas com outros agentes terapêuticos. Os inaladores prédoseados são úteis para administrar composições, de acordo com a invenção, para uma terapia por inalação.

Os níveis de dosagem actuais de ingrediente(s) activo(s) nas composições da invenção podem ser variados de modo a obter uma quantidade de ingrediente(s) activo(s) que é(são) eficazes para obter uma resposta terapêutica desejada para uma composição em particular e método de administração para um doente. Deste modo, um nível de dosagem seleccionado para qualquer doente, em particular, depende da variedade de factores de efeito terapêutico desejado, na via de administração, na duração de tratamento desejado, na etiologia e gravidade da doença, estado do doente, peso, sexo, dieta e idade, o tipo e potência de cada ingrediente activo, taxas de absorção, metabolismo e/ou excreção e outros factores. A dose diária dos compostos desta invenção, administrados a um doente em doses individuais ou divididas, pode ser em quantidade, por exemplo, desde cerca de 0,001 a cerca de 100 mg/kg de peso corporal por dia e, de um modo preferido, 0,01 a 10 mg/kg/dia. Por exemplo, num adulto, as doses são, geralmente, desde cerca de 0,01 a cerca de 100, de um modo preferido, cerca de 0,01 a cerca de 10, mg/kg peso corporal por dia por inalação, desde cerca de 0,01 a cerca de 100, de um modo preferido, 0,1 a 70, de um modo mais especial, 0,5 a 10, mg/kg 29 de peso corporal por dia por administração oral e desde cerca de 0,01 a cerca de 50, de um modo preferido, 0,01 a 10, mg/kg de peso corporal por dia por administração intravenosa. A percentagem de ingrediente activo numa composição pode ser variada, embora deverá constituir uma proporção tal como uma dosagem adequada deverá ser obtida. As composições unitárias de dosagem podem conter tais quantidade de tais sub-múltipleos dos mesmos como podem ser utilizados para perfazer a dose diária. Obviamente, podem ser administradas várias formas de dosagem unitárias ao mesmo tempo. Uma dosagem pode ser administrada tão frequentemente quanto necessário, de modo a obter o efeito terapêutico desejado. Alguns doentes podem responder rapidamente a doses mais elevadas ou inferiores e podem encontrar doses de manutenção muito mais fracas adequadas. Para outros doentes, pode ser necessário ter um tratamento de longo termo a uma taxa de 1 a 4 doses por dia, de acordo com as necessidades fisiológicas de cada doente em particular. Escusado será dizer que para outros doentes, não será necessário prescrever mais do que duas doses por dia.

As formulações podem ser preparadas na forma de dosagem unitária através de qualquer dos métodos bem conhecidos na técnica da farmácia. Tais métodos incluem o passo de trazer em associação o ingrediente activo com o veiculo que constitui um ou mais ingredientes acessórios. Em geral, as formulações são preparadas por colocarem, uniformemente e intimamente, em associação o ingrediente activo com veículos líquidos ou veículos sólidos finamente divididos ou ambos e, depois, se necessário, moldar o produto.

As formulações podem estar presentes em recipientes de dose unitária ou dose múltipla, por exemplo, ampolas seladas e 30 frasquinhos com rolhas elastoméricas e podem ser armazenadas em condições de secagem por congelação (liofilizados), sendo necessária apenas a adição de veiculo liquido estéril, por exemplo, água para injecção, imediatamente antes de utilizar. As soluções e suspensões para injecção extemporâneas podem ser preparadas a partir de pós estéreis, grânulos e comprimidos do tipo previamente descrito.

Os compostos da invenção podem ser preparados pela aplicação ou adaptação de métodos conhecidos, pelos quais se entendem métodos anteriormente utilizados ou descritos na literatura, por exemplo, aqueles descritos por R.C. Larock in Comprehensive Organic Transformations, VCH publishers, 1989.

Um profármaco de éster dos compostos da invenção pode ser preparado por associação de compostos da invenção com um grupo carboxilo, com um álcool de Fórmula YOH (em que Y é alquilo ou alquilo substituído com amino, alquilamino ou dialquilamino), para proporcionar uma ligação éster utilizando processos de junção convencionais. Exemplos incluem a ligação na presença de HBTU e, opcionalmente, na presença de DIEA, em DCM, à temperatura ambiente.

De acordo com uma outra caracteristica da invenção, os sais de adição de ácido, dos compostos desta invenção, podem ser preparados por reacção da base livre com o ácido apropriado, por aplicação ou adaptação de métodos conhecidos. Por exemplo, os sais de adição de ácido dos compostos desta invenção podem ser preparados por dissolução da base livre em água ou solução de álcool aquosa ou outros solventes adequados contendo o ácido apropriado e isolando o sal por evaporação da solução ou por reacção da base livre e ácido num solvente orgânico, em cujo 31 caso, o sal se separa directamente ou pode ser obtido por concentração da solução.

Os sais de adição de ácido dos compostos desta invenção podem ser regenerados a partir dos sais, pela aplicação ou adaptação de métodos conhecidos. Por exemplo, compostos relacionados da invenção, podem ser regenerados a partir dos seus sais de adição de ácido, por tratamento com um alcali, e. g., solução de bicarbonato de sódio aquosa ou solução de amónia aquosa.

Os compostos desta invenção podem ser regenerados a partir dos seus sais de adição de base pela aplicação ou adaptação de métodos conhecidos. Por exemplo, os compostos relacionados desta invenção podem ser regenerados a partir dos seus sais de adição de base por tratamento com um ácido, e. g., ácido clorídrico.

Os compostos da presente invenção podem ser preparados convenientemente ou formados durante o processo da invenção, como solvatos (e. g., hidratos). Os hidratos dos compostos da presente invenção podem ser convenientemente preparados por recristalização a partir de uma mistura de solventes aquosos/orgânicos, utilizando solventes orgânicos, tais como o dioxano, THF ou MeOH.

De acordo com outra característica da invenção, os sais de adição de base dos compostos desta invenção, podem ser preparadas por reacção do ácido livre com a base apropriada, pela aplicação ou adaptação de métodos conhecidos. Por exemplo, os sais de adição de base dos compostos desta invenção, podem ser preparados por dissolução do ácido livre em água ou solução aquosa de álcool, ou outros solventes adequados contendo a base 32 apropriada e isolando o sal por evaporação da solução ou por reacção do ácido livre e base, num solvente orgânico, em cujo caso o sal se separa directamente ou pode ser obtido por concentração da solução. os materiais de partida e intermediários podem ser preparados através de métodos descritos no presente pedido ou adaptação de métodos conhecidos.

Os compostos da invenção, os seus métodos ou preparação e a sua actividade biológica irão parecer mais claros a partir da verificação dos seguintes exemplos.

Os compostos da invenção são identificados, por exemplo, através dos seguintes métodos analíticos. São efectuadas experiências de Cromatografia Líquida de Pressão Elevada - espectrofotometria de Massa (LCMS) para determinar os tempos de retenção (T.A.) e iões de massa associados utilizando dos seguintes métodos.

Os Espectros de Massa (MS) são registados, utilizando um espectofotómetro de massa Micromass LCT. 0 método é a ionização por electrovaporização positiva, varrimento de massa m/z a partir de 100 a 1000. A cromatografia liquida é efectuada num Hewlett Packard 1100 Série Binary Pump & Degasser; fase estacionária: Phenomenex Synergi 2 μ Hydro-RP coluna de 20 X 4,0 mm, fase móvel: A = 0,1% de ácido fórmico (FA) em água, B=0,1% de FA em acetonitrilo. Volume de injecção de 5 pL por CTC Analytical PAL System. O caudal é de 1 mL/minuto, o gradiente é 10% de B a 90% de B em 3 minutos e 90% de B a 100% de B em 2 minutos. Os detectores auxiliares são: Hewlett Packard 1100 33

Series detector de UV, comprimento de nm e detector de temperatura Sedere SEDEX 75 Evaporative Light Scattering (ELS) = 46 °C, pressão de N2=4 bar.

Os espectros de ressonância magnética nuclear de 300 MHz (RMN) são registados, à temperatura ambiente, utilizando um espectrofotómetro Varian Mercury (300 MHz) com uma sonda ASW de 5 mm. Os desvios químicos de RMN (δ) são indicados em partes por milhão (ppm) com referência ao tetrametilosilano (TMS) como o padrão interno.

Como aqui utilizado, nos exemplos e preparações que se seguem, bem como no resto da aplicação, os termos aqui utilizados deverão ter os significados indicados: "kg" refere-se a quilograma, "g" refere-se a gramas, "mg" refere-se a miligramas r "pg" refere-se a microgramas , "mol" refere- •se a moles, "mmol· " refere-se a milimoles, "M" refere-se a molar, "mM" refere-se a milimolar, "μΜ" refere-se a micromolar, "nM" refere-se a nanomolar, "L" refere-se a litros, "mL" ou 1—1 refere-se a mililitros, "μύ" refere-se a microlitros, JJ 0 cn refere-se a graus Célcius, "pf" ou "p.f." refere-se a ponto de fusão, "pe" ou "p.e." refere-se a ponto de ebulição, "mm de Hg" refere-se a pressão em mililitros de mercúrio, "cm" refere-se a centímetros, "nm" refere-se a nanometros, "abs." refere-se a absoluto, "conc." refere-se a concentrado, "c" refere-se a concentração em g/mL, "t.a." refere-se a temperatura ambiente, "TLC" refere-se a cromatografia em camada fina, "HPLC" refere-se a cromatografia líquida de elevado desempenho, "i.p." refere-se a intraperitonealmente, "i.v." refere-se a intravenosamente, "s"= singuleto, "d" = doubleto, "t" = tripleto; "q" = quarteto; "m" = multipleto, "dd" = dubleto de dubletos; "br" = ampla, "LC"' = cromatografia líquida, "MS" = espectrofotometria de 34 massa, "ESI/MS" = ionização por electrovaporização/espectroscopia de massa, "T.A." = tempo de retenção, "M" = ião molecular, "PSI" = polegdas por libra quadrada, "DMSO" = dimetilsulfóxido, "DMF" = N,N-dimetiloformamida. "CDI" = 1,1'-carbonildiimidazole, "DCM" ou "CH2CI2" = diclorometano. "HC1" = ácido clorídrico, "SPA" = Ensaio de Proximidade de Cintilação, "ATTC" = American Type Culture Collection, "FBS" = Soro Bovino Fetálico, "MEM" = Meio Essencial Minimo, "CPM" = Contagens por Minuto, "EtOAc" = acetato de etilo, "PBS"= Solução Salina Tamponada com Fosfato, "TMD" = domínio transmembranar, "IBMX" = 3-isobutil-l-metiloxantina, "cAMP" = monofosfato de adenosina cíclica, "IUPAC" = International Union of Pure and Applied Chemistry, "MHz" = megahertz, "PEG" = polietilenoglicol, "MeOH" = metanol, "N" = normalidade, "THF" = tetra-hidrofurano, "h" = horas, "min" = minuto(s), "MeNH2" = metilamina, "N2" = azoto gasoso, "iPrOH" = álcool isopropílico, "O.D." = diâmetro externo, "MeCN" ou "CH3CN" = acetonitrilo, "Et20" = éter etílico, "TFA" = TFA, "Prep LC" = cromatografia líquida "flash" preparatória, "SPE" = extracção de fase sólida, "LAH" = hidreto de alumínio e lítio, "pmol" = picomolar, "heptano" = n-heptano, "HMBA-AM" resina = 4-resina de metilamino do ácido hidroximetilobenzóico, "PdCl2 (dppf) 2" = complexo de dicloreto de 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno-paládio (II) e DCM, "HBTU" = hexafluoroffosfato de 2-(lH-benzotriazol-il)-1,1,3,3-tetrametilurónio, "DIEA" = diisopropiletilamina, "CsF" = fluoreto de césio, "LiOH" = hidróxido de litio, "~" = aproximadamente, "IC50" = a concentração do composto produtora de 50% de inibição nos ensaios de AMPc SPA em células T LS 174 humanas. 35

EXEMPLOS

Exemplo 1: (a) Ácido_{2-[4-cloro-3-(2,4-dicloro-benzilsulfamoil)- fenll]-lH-indol-3-il}-acético

Passo 1. 0 ácido nítrico fumegante (1,5 L) é arrefecido para cerca de -5 °C num banho de gelo/água. Durante um período de 30 minutos, é adicionado, em porções, ácido 4-(4-cloro-fenil)-4-oxo-butírico (150 g, 0,706 mol) à solução agitada mecanicamente e a mistura reaccional é agitada, a uma temperatura entre cerca de -5 °C e cerca de -7 °C, durante 3,5 horas. A mistura reaccional é vertida em gelo triturado/água (3 L) e agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente. O material sólido é filtrado, lavado com água até as lavagens serem neutras, secas ao ar e, finalmente, secas num forno a vácuo a cerca de 85 °C, para proporcionar o ácido 4-(4-cloro-3-nitro-fenil)-4-oxo-butírico como um sólido (159,1 g).

Passo 2. A uma suspensão agitada mecanicamente de ácido 4-(4-cloro-3-nitro-fenil)-4-oxo-butírico (150 g, 0,582 mol) em água (900 mL) e HC1 concentrado HC1 (12 mL), é adicionada uma solução de bissulfito de sódio (393 g, 2,07 mol, em 800 mL de água) durante um período de 40 minutos a 100-105 °C. Após a 36 adição, a mistura é submetida a refluxo durante 1 hora. 0 pH é ajustado para ~2 pela adição de HC1 4 N (100 mL) . A mistura é submetida a refluxo durante mais 30 minutos, arrefecida para a temperatura ambiente e filtrada para proporcionar o ácido 4-(3-amino-4-cloro-fenil)-4-oxo-butírico como um sólido (79,3 g). LCMS: RT = 2,39 minutos, MS: 228 (M+H); RMN de *H (300 MHz, DMSO-D6) δ 2,51 (t, J=6 Hz, 2H) 3,11 (t, J=6 Hz, 2H) 5,58 (s, 2H), 7,1 (dd, J=6,2 Hz, J=2 Hz, 1H) 7,29 (d, J=8 Hz, 1H) 7,36 (d, J=2 Hz, 1H) 12,08 (ampla s, 1 H).

Passo 3: O ácido 4-(3-amino-4-cloro-fenil)-4-oxo-butírico (16,2 g, 71,16 mmol) em DMF (20 mL) é adicionado a um mistura de HC1 concentrado (35 mL) e gelo (150 g) . É adicionada uma solução de nitrito de sódio (5,25 g, 76,1 mmol) em água (18 mL) via uma pipeta abaixo da superfície da solução, durante 5 minutos, a uma temperatura entre -5 °C e -10 °C. A mistura reaccional é aquecida para 0 °C e agitada, durante 15 min. Esta solução é lentamente adicionada, à temperatura ambiente, a uma mistura de di-hidrato de cloreto de cobre (5,58 g, 32,7 mmol) em ácido acético glaciar (175 mL) que foi saturada com dióxido sulfúrico gasoso. A solução resultante é agitada, durante 45 minutos, à temperatura ambiente, é adicionada água (500 mL) e a solução é agitada, durante 1 hora. O frasco é arrefecido para 10 °C e o sólido é filtrado e lavado com água para proporcionar o ácido 4-(4-cloro-3-clorossulfonil-fenil)-4-oxo-butírico como um sólido (12,94 g,) . LCMS: RT = 2,68 minutos, MS: 310 (M+H); RMN de 1h (300 MHz, DMSO-D6) δ ppm 2,56 (t, J=6 Hz, 2H) 3,19 (t, J=6 Hz, 2H) 7,51 (d, J=8 Hz, 1H) 7,87 (dd, J=6 Hz, J=2 Hz, 1H) 8,39 (d, j=2 Hz, 1H) 12,66 (ampla s, I H). 37

Passo 4: 0 ácido 4-(4-cloro-3-clorossulfonil-fenil)-4-oxo- butírico (2 g, 6,43 mmol) é adicionado a uma solução agitada de 2,4-diclorobenzilamina (2,82 g, 16 mmol) em mistura de DCM:MeOH (1:1, 50 mL) a 0 °C. A mistura reaccional é aquecida para a temperatura ambiente e agitada, durante 20 horas. A mistura reaccional é acidificada com HC1 aquoso 2 N (pH ~ 2) e extraída duas vezes com DCM. A camada orgânica combinada é lavada com água, solução salina concentrada, seca sob sulfato de sódio e evaporada in vacuo para proporcionar o ácido 4-[4-cloro-3-(2,4-dicloro-benzilsulfamoil)-fenil]-4-oxo-butírico como um semi-sólido (2,1 g) . LCMS: RT = 2,38 minutos, MS: 448 (M-H).

Passo 5: A uma mistura de ácido 4-[4-cloro-3-(2,4-dicloro-benzilsulfamoil)-fenil]-4-oxo-butírico (800 mg, 1,78 mmol), mono-hidrato de ácido p-toluenossulfónico (520 mg, 2,7 mmol) e cloreto de zinco (370 mg, 2,7 mmol) em ácido acético glacial (15 mL) num recipiente de microondas, é adicionada fenil-hidrazina (300 mg, 2,78 mmol). O recipiente tapado é aquecido num microondas, a 180 °C, durante 40 minutos. A mistura reaccional é diluída com EtOAc, transferida para um frasco cónico e é adicionado HC1 2 N aquoso (—50 mL). A camada orgânica é separada e a camada aquosa é extraída com EtOAc. A camada orgânica combinada é lavada com água, seca sob sulfato de sódio e concentrada. O resíduo é purificado por separação por HPLC preparativa (fase móvel: acetonitrilo-água com TFA a 0,1%; gradiente de 10-100% durante 10 minutos), para proporcionar o ácido_{2-[4-cloro-3-(2, 4-dicloro-benzilsulfamoil)-fenil]-1H- indol-3-il}-acético como um sólido (145 mg) . LCMS: RT = 2,78 minutos, MS: 523 (M+H). RMN de :H (300 MHz, DMSO-D6) δ 3,74 (s, 2H) 4,23 (d, J=6 Hz, 2H) 7,06 (t, J=7 Hz, 1H) 7,17 (t, J=7 Hz, 1H) 7,3-7,48 (m, 4H) , 7,56 (d, J=8 Hz, 1H) 7,75 (d, 38

J=8,3 Hz, 1H) 7,87 (d, J=8 Hz, 1H) 8,22 (d, J=2 Hz, 1H) 8,64 (t, J=6,9 Hz, 1H) 11,52 (s, 1H), 12,4 (ampla s, 1H). IC50 = 4 nM (b)_Ácido_{2- [4-cloro-3- (2,6-dicloro-benzilsulfamoil) - fenil]-lH-indol-3-il}-acético

Passo 1: Ao proceder de um modo semelhante ao Exemplo l(a), passo 4, mas substituindo a 2,6-diclorobenzilamina (2,82 g) por 2,4-diclorobenzilamina, é preparado o ácido 4-[4-cloro-3-(2,6-dicloro-benzilsulfamoil)-fenil]-4-oxo-butírico como um pó (2,12 g) . LCMS: RT = 2,1 minutos, MS: 448 (M-H) .

Passo 2: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo l(a), passo 5, mas substituindo o ácido 4-[4-cloro-3-(2,6-dicloro-benzilsulfamoil) -fenil]-4-oxo-butírico (0,8 g) por ácido 4-[4-cloro-3-(2, 4-dicloro-benzilsulfamoil)-fenil]-4-oxo-butírico, é preparado o ácido {2-[4-cloro-3-(2,4-dicloro-benzilsulf amoil) -fenil]-lH-indol-3-il}-acético como um sólido (80 mg). LCMS: RT = 2,72 minutos, MS: 523 (M+H); RMN de XH (300 MHz, DMSO- D6) δ 3,5 (s, 2H) 4,36 (d, 2H, J=5,2 Hz), 7,06 (t, J=7 Hz, 1H) 7,1-7,45 (m, 5H) 7,73 (d, J=8,5 Hz, 1H) 7,57 (d, J=8 Hz, 1H) 7,88 (dd, J=6 Hz, J=2,2 Hz, 1 H) 8,25 (d, J=2 Hz, 1H) 8,33 (t, J=5 Hz, 1H) 11,5 (s, 1H) , 12,4 (ampla s, 1H) .

IC50 = 3 nM 39 (C) Ácido {2-[4-cloro-3-(3,5-dicloro-benzilsulfamoil)- fenil]-lH-indol-3-il}-acético

Passo 1: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo l(a), passo 4, mas substituindo a 3,5-diclorobenzilamina (2,82 g) por 2,4-diclorobenzilamine, é preparado o ácido 4-[4-cloro-3-(3,5-dicloro-benzilsulfamoil)-fenil]-4-oxo-butírico como um sólido (2,12 g). LCMS: RT = 2,42 minutos, MS: 450 (M+H).

Passo 2: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo l(a) método A, passo 5, mas substituindo o ácido 4-[4-cloro-3-(3,5-dicloro-benzilsulfamoil)-fenil]-4-oxo-butirico (0,8 g) por ácido 4-[4-cloro-3-(2,4-dicloro-benzilsulfamoil)-fenil]-4-oxo-butirico, é preparado o ácido {2-[4-cloro-3-(3,5-dicloro-benzilsulfamoil ) -fenil]-lH-indol-3-il}-acético como um sólido (160 mg). LCMS: RT = 2,78 minutos, MS: 523 (M+H). RMN de XH (300 MHz, DMSO-D6) δ 3,72 (s, 2H) 4,19 (d, J=6,2 Hz, 2H) , 7,06 (t, J= = 7 Hz, 1H) 7,1-7,45 (m, 5H) 7, 57 (d, J=8 Hz, 1H) 7,71 (d, J=8,2 Hz, 1H) 7,85 (dd, J=6,2 Hz, J=2,2 Hz, 1 H) 8,19 (d, J=2,2 Hz, 1H) 8 ,65 (t, J=6,4 Hz, 1H) 11,5 (S, 1H), 12 ,4 (ampla

s, 1H) . IC50 = 12 nM 40 (d) Ácido (2-{4-cloro-3-[2-(2,4-dicloro-fenil)- etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-acético

Passo 1: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo l(a), passo 4, mas substituindo a 2,4-diclorofenetilamina (3,04 g) por 2,4-diclorobenzilamina, é preparado o ácido 4-{4-cloro-3-[2-(2,4-dicloro-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-4-oxo-butírico como um sólido (2,3 g) . LCMS: RT = 2,52 minutos, MS: 464 (M+H).

Passo 2: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo l(a) do método A, passo 5, mas substituindo o ácido 4-{4-cloro-3-[2-(2, 4-dicloro-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-4-oxo-butirico (0,83 g) por 4-[4-cloro-3-(2,4-dicloro-benzilsulfamoil)-fenil]-4-oxo-butirico, é preparado o ácido(2-{4-cloro-3-[2-(2,4-dicloro-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-acético (150 mg). LCMS: RT = 2,64 minutos, MS: 537 (M+H). RMN de :H (300 MHz, DMSO- D6) δ 2,81 (t, J=7 Hz, 2H) 3,2 (m, 2H) 3,75 (S, 2H), 7,06 (t, J=7,2 Hz, 1H) 7,16 (t, J=7,3 Hz, 1H) 7,29 (s, 2H) 7,43 (m, 2H) 7,56 (d, J=7,7 Hz, 1H) 7,74 (d, J = 8,2 Hz, 1H) 7,9 (dd, J=6,3 Hz, J=2,2 Hz, 1H) 8,13 (t, J=5,7 Hz, 1H) 8,23 (d,

J=2,2 Hz, 1H) 11,52 (s, 1H), 12,4 (ampla s, 1H). IC5o = 2 nM 41

Exemplo 2: (a) Ácido (2-{4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-acético

Passo 1. Uma mistura de 2-cloronitrobenzeno (53 g, 0,34 mol), ferro (1,5 g) e brometo (23 mL, 0,45 mol) é agitada, a refluxo, sob N2, durante 20 horas. A reacção é concentrada e o residuo é purificado por cromatografia flash em sílica gel eluída com 10% EtOAc-heptano. As fracções apropriadas são concentradas, filtradas e enxaguadas com etanol e secas. O sólido é recristalizado de etanol para proporcionar o 5-bromo-2-cloronitrobenzeno (37,9 g) . Após armazenamento das soluções mãe a 0 °C, de um dia para o outro, é isolado um segundo lote de produto e seco para proporcionar mais 5-bromo-2-cloronitrobenzeno (7 g) . MS: 235 (M+H); p.f. 65-67 °C. Passo 2. Uma solução de 5-bromo-2-cloronitrobenzeno (10,3 g, 43,6 mmol) em EtOAc (200 mL) é hidrogenada sobre níquel de Raney (6 g de 50% em H20) a 55 psi de H2 durante 5 horas. A mistura é filtrada através de uma almofada de Celite e enxaguada com EtOAc. O filtrado é tratado com HC1 etereal (60 mL, solução 1 M em Et20) sob N2. A suspensão resultante é agitada, durante 1 hora e é adicionado Et20 (100-200 mL) . A mistura é filtrada para proporcionar o cloridrato de 5-bromo-2-cloroanilina (4,85 g) como um sólido. MS: 205 (M+H); p.f. 152-155 °C. 42

Passo 3. Uma suspensão de cloridrato de 5-bromo-2-cloroanilina (41,4 g, 0,17 mol) em CH3CN (380 mL) é arrefecida para 5 °C e é adicionado HC1 concentrado (277 mL) durante 10 minutos. A suspensão é arrefecida para -5 °C e é adicionada, gota a gota, uma solução de NaN02 (14,2 g, 0,21 mol) em H20 (40 mL) durante 10-15 minutos. A mistura é agitada, durante mais 5 minutos e é adicionado S02 a 30% (p/p) em HOAc (435 mL) a 0 °C, seguida pela adição de uma solução de di-hidrato de cloreto de cobre (II) (15,3 g, 0,09 mol) em H20 (40 mL) . A reacção é agitada, à temperatura ambiente, durante 1,5 horas. A mistura reaccional é filtrada e o sólido é seco para proporcionar o cloreto de 5-bromo-2-clorobenzenossulfonilo (18,4 g) . O filtrado é armazenado a 0 °C, durante 18 horas. O precipitado é recolhido e seco para proporcionar mais cloreto de 5-bromo-2- clorobenzenossulfonilo (9,6 g). MS: 288 (M+H).

Passo 4. Foi adicionado lentamente cloreto de 5-bromo-2-clorobenzenossulfonilo (2 g, 6,9 mmol) a uma solução de 2-(2-metoxi-fenil)-etilamina (1,6 g, 10,74 mmol) e DIEA (2,3 g, 17,8 mmol) em DCM:MeOH (1:1, 50 mL) a 0 °C. A mistura resultante é aquecida para a temperatura ambiente e agitada, durante 20 horas. A mistura reaccional é acidificado com HC1 2 N aquoso (—25 mL) e extraida duas vezes com DCM ( — 50 mL) . A camada orgânica é lavada com água, solução salina concentrada, seca sob sulfato de sódio e evaporada in vacuo para proporcionar a 5-bromo-2-cloro-N-[2-(2-metoxi-fenil)-etil]-benzenossulfonamida (2,23 g) como um pó branco. LCMS: RT = 2,78 minutos, MS: 403 (M+H).

Passo 5. A uma solução de ácido 1-(terc-butoxicarbonil)-5-metoxi-lH-indol-2-ilborónico (2,2 g, 7,5 mmol), 5-bromo-2-cloro-N-[2-(2-metoxi-fenil)-etil]-benzenossulfonamida (2 g, 5 mmol) e 43

CsF (1,14 g, 7,5 mmol) em dioxano-H20 (100 mL, 9:1) é adicionado PdCl2(dppf)2 (400 mg), à temperatura ambiente, sob N2. A reacção é aquecida para 80 °C e agitada, durante 2 h. A mistura reaccional é concentrada in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e é filtrada através de uma coluna pequena de sílica. O filtrado é concentrado in vacuo e o resíduo é purificado por cromatografia flash em sílica gel eluída com 3% a 30% de EtOAc em heptano para proporcionar o éster terc-butílico do ácido 2-{4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-indole-l-carboxílico (1,9 g) . LCMS: RT = 3,4 minutos, MS: 541 (M+H).

Passo 6. Uma mistura de éster terc-butílico do ácido 2-{4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-indole-l-carboxílico (1,2 g, 2,2 mmol) e TFA:DCM (1:1, 20 mL) é agitada, à temperatura ambiente, durante 3 horas e concentrada in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e lavado com NaHC03 saturado e aquosa, água e solução salina concentrada. A camada orgânica é separada, seca sob Na2S04 e concentrada. O resíduo é purificado por cromatograf ia flash em sílica gel eluída com 5% a 40% de EtOAc em heptano, para proporcionar a 2-cloro-5-(lH-indol-2-il) -N- [2 (2-metoxi-fenil)-etil]-benzenossulfonamida como um pó (980 mg). LCMS: RT = 3 minutos, MS: 441 (M+H).

Passo 7. É lentamente adicionado cloreto de oxalilo (2 M em DCM, 2 mL) a uma solução de 2-cloro-5-(lH-indol-2-il)-N-[2-(2-metoxi-fenil)-etil]-benzenossulfonamida (600 mg, 1,36 mmol) em DCM (15 mL) a 0 °C. A mistura reaccional é deixada a aquecer para uma temperatura ambiente. Após agitação durante 3 horas. É adicionado MeOH (5 mL) e agitado durante mais 10 minutos. A mistura é concentrada. O resíduo é purificado por cromatografia flash em sílica gel eluída com 10% a 50% EtOAc em heptano, para proporcionar o éster metílico do ácido (2-{4-cloro-3-[2-(2- 44 metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-oxo-acético como um semi-sólido (540 mg). LCMS: RT = 2,72 minutos, MS: 527 (M+H).

Passo 8. O trietilsilano (0,5 mL) é lentamente adicionado a uma solução de éster metilico do ácido (2-{ 4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-oxo-acético (500 mg; 0,95 mmol) em TFA (5 mL), à temperatura ambiente. Após agitação, durante 16 h, a mistura reaccional é concentrada in vacuo. O residuo é purificado por cromatografia flash em sílica gel eluída com 10% a 40% de EtOAc em heptano, para proporcionar o éster metilico do ácido (2-{4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-acético como um semi-sólido (440 mg). LCMS: RT = 2,88 minutos, MS: 513 (M+H); RMN de XH (300 MHz, CDC13) δ 2,81 (t, J=6 ,8 Hz, 2H), 3, 23 (q, J=12 ,6 Hz, J= 6,6 Hz, 2H), 3,72 (s, 3H), 3, 73 (s, 3H), 3, 81 (s, 2H) , 5, 24 (t, J=5, 7 Hz, 1H), 6,82 (m, 2H) , 7,02 (d, J=7 ,3 Hz, 1H) , 7, 2 (m, 3H) , 7( r 4 (d, J = -1,9 Hz ;, 1H), 7, 5 3 (d, J=8 ,2 Hz, 1H), 7, 67 (d, J=7, 7 Hz, 1H), 7, 86 (dd, J= 6,1 Hz, 2, 2 Hz r 1H), 8,3 (d, J= 2, 2 Hz, 1H) , 8,5 (s, 1H) . Passo 9 . A uma mistura de és ter metilico do ácido (2-{4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-acético (400 mg, 0,8 mmol) em Me0H/H20 (2:1, 20 mL), é adicionado mono-hidrato de hidróxido de lítio (200 mg, 4,8 mmol). A mistura reaccional é agitada, a 80 °C, durante 3 h e é concentrada. O resíduo é acidificado com HC1 2 N aquoso (pH ~ 2) e extraído com acetato de etilo. A camada orgânica combinada é lavada com água, solução salina concentrada, seca sob sulfato de sódio e evaporada in vacuo. O resíduo é purificado por cromatografia flash em sílica gel eluída com 20% a 60% de EtOAc em heptano, para proporcionar o ácido 45 (2-{4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH- indol-3-il)-acético como um pó (310 mg). LCMS: RT = 2,57 minutos,

MS: 497 (M-H) ; RMN de :H (300 MHz, DMSO- -D6) δ 2,67 (t, J = 8 Hz 2H), 3,1 (m, 2H), 3,62 (s, 3H), 3, 75 (s, 2H) , 6,82 (m, 2H) 7,02 -7,2 (m, 4H), 7, 41 (d, , J=8,1 Hz, 1H), 7,56 (d, J=7, 9 Hz 1H) , 7, 78 (d, J=8, 2 Hz, 1H), 7, 91 (dd, J=| 5,3 Hz, 2,2 Hz, 1H) 8,01 (t, J=5, 7 Hz, 1H), 8, 25 (d, J =2,2 Hz, 1H), 11,55 (S, 1H) 12,42 (s, 1H), , IC50 = 3,8 nM (b) Ácido (2-{4-cloro-3-[2-(3-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-acético

Passo 1. Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 4, mas substituindo a 2-(3-metoxi-fenil)-etilamina por 2-(2-metoxi-fenil)-etilamina, é preparado o 5-bromo-2-cloro-N-[2-(3-metoxi-fenil)-etil]-benzenossulfonamida como um sólido (2,2 g). LCMS: RT = 2,71 minutos, MS: 402 (M-H).

Passo 2: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 5, mas substituindo a 5-bromo-2-cloro-N-[2-(3-metoxi-fenil) -etil] -benzenossulfonamida por 5-bromo-2-cloro-N-[2-(2-metoxi-fenil)-etil]-benzenossulfonamida, é preparado o éster terc-butílico do ácido 2-{4-cloro-3-[2-(3-metoxifenil)-etilsulfamoil]-fenil}-indole-l-carboxílico como um óleo (1,69 g). LCMS: RT = 3,34 minutos, MS: 541 (M+H).

Passo 3: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 6, mas substituindo o éster terc-butilico do ácido 2-{4-cloro-3-[2-(3-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-indole-1-carboxilico por éster terc-butilico do ácido 2-{4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-indole-l-carboxilico, é preparado a 2-cloro-5-(lH-indol-2-il)-N-[2-(3-metoxi-fenil)-etil]-benzenossulfonamida como um sólido (960 mg). LCMS: RT = 2,92 minutos, MS: 441 (M+H).

Passo 4: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 7, mas substituindo a 2-cloro-5-(lH-indol-2-il)-N-[2-(3-metoxi-fenil)-etil]-benzenossulfonamida por 2-cloro-5-(lH-indol- 2- il)-N-[2-(2-metoxi-fenil)-etil]-benzenossulfonamida, é preparado o éster metílico do ácido (2-{4-cloro-3-[2-(3-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-oxo-acético como um semi-sólido (551 mg). LCMS: RT = 2,66 minutos, MS: 527 (M+H).

Passo 5: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 8, mas substituindo o éster metilico do ácido (2-{4-cloro- 3- [2-(3-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-oxo- acético por éster metilico do ácido (2-{4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil) -etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-oxo-acético, é preparado o ácido_(2-{4-cloro-3 - [2 - (3-metoxi-fenil) - etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-acético (450 mg). LCMS: RT = 2,82 minutos, MS: 513 (M+H). RMN de 1R (300 MHz, CDC13) δ 2,78 (t, J = 6,8 Hz, 2H) , 3,27 (q, J=13 Hz, J=6,6 Hz, 2H), 3,73 (s, 3H), 3,75 (s, 3H), 3,81 (s, 2H), 5,07 (t, J=6 Hz, 1H), 6,7 (m, 3H), 7,2 (m, 3H), 7,4 (d, J=8,l Hz, 1H) , 7,55 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,68 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,86 (dd, J = 6,1 Hz, 2,2 Hz, 1H), 8,3 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 8,47 (s, 1H) . 47

Passo 6: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 9, mas substituindo o éster metilico do ácido (2-{4-cloro-3- [2-(3-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il) -acético por éster metilico do ácido (2—{4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-acético, é preparado o ácido (2-{4-cloro-3-[2-(3-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-acético como um sólido (320 mg) . LCMS: RT = 2,5 minutos, MS: 497 (M-H). RMN de XH (300 MHz, DMSO-

d6) ) δ 2,69 (t , J= 7,2 Hz, 2H), 3,18 (m, 2H), 3,67 (s, 3H), 3,75 (S, 2H), 6,7 ( t, J: =6,5 Hz , 3H), 7,12 (m , 3H), 7, 41 (d, J=8,1 Hz, 1H) , 7,57 (d, J=7, 9 Hz, 1H), 7,76 (d, J=8,2 Hz, 1H) , 7,9 (dd, J=6, 2 Hz, 2,1 Hz, 1H), 8 ,04 (ampla t, 1H), 8,25 (d, J=2,1 Hz, 1H), 11,55 (s, 1H), . 12,45 (ampla s, 1H). IC50 = = 3,3 nM (c) Ácido (2-{4-cloro-3-[2-(4-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-acético

COOH

Passo 1. Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 4, mas substituindo a 2-(4-metoxi-fenil)-etilamina por 2-(2-metoxi-fenil)-etilamina, é preparado a 5-bromo-2-cloro-N-[2-(4-metoxi-fenil)-etil]-benzenossulfonamida como um semi-sólido (2,3 g) . LCMS: RT = 2,71 minutos, MS: 402 (M-H).

Passo 2: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 5, mas substituindo a 5-bromo-2-cloro-N-[2-(4-metoxi- 48 fenil)-etil]-benzenossulfonamida por 5-bromo-2-cloro-N-[2-(2-metoxi-fenil)-etil]-benzenossulfonamida, é preparado o éster terc-butílico_do_ácido_2-{4-cloro-3- [2- (4-metoxifenil) - etilsulfamoil]-fenil}-indole-l-carboxílico como um óleo (1,87 g). LCMS: RT = 3,33 minutos, MS: 541 (M+H).

Passo 3: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 6, mas substituindo o éster terc-butílico do ácido 2-{4-cloro-3-[2-(4-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-indole-l-carboxílico por éster terc-butílico do ácido 2-{4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-indole-l-carboxílico, é preparado a 2-cloro-5-(lH-indol-2-il)-N-[2-(4-metoxi-fenil)-etil]-benzenossulfonamida como um sólido (950 mg). LCMS: RT = 2,91 minutos, MS: 441 (M+H).

Passo 4: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 7, mas substituindo a 2-cloro-5-(lH-indol-2-il)-N-[2-(4-metoxi-fenil)-etil]-benzenossulfonamida por 2-cloro-5-(lH-indol- 2- il)-N-[2-(2-metoxi-fenil)-etil]-benzenossulfonamida, é preparado o éster metílico do ácido (2-{4-cloro-3-[2-(4-metoxi-fenil) -etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-oxo-acético como um semi-sólido (552 mg). LCMS: RT = 2,66 minutos, MS: 527 (M+H).

Passo 5: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 8, mas substituindo o éster metílico do ácido (2-{4-cloro- 3- [2- (4-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-oxo- acético por éster metílico do ácido (2 — {4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-oxo-acético, é preparado o éster metílico do ácido (2-{4-cloro-3-[2-(4-metoxi-fenil) -etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-acético (445 mg). LCMS: RT = 2,81 minutos, MS: 513 (M+H); RMN de XH (300 MHz, CDC13) δ 2,76 (t, J=6,6 Hz, 2H) , 3,23 (m, 2H), 3,73 (s, 2H), 3,77 49 (S, 3H), 3,82 (s, 2H) , 5 ( t, J=6, 1 Hz , 1H), 6,78 (dd, J=5 Hz, 2 Hz , 2H), 7,02 (dd, J=6, , 6 Hz, 2 Hz, 2H,), 7 ,26 (m, 3H), 7,41 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,58 (d , J=8,3 Hz, 1H), 7 ,69 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,88 (dd, J=6,0 Hz, 2, 2 Hz, 1H), 8,3 (d, J = 2,2 Hz, 1H) , 8,33 (s, 1H).

Passo 6: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 9, mas substituindo o éster metilico do ácido (2-{4-cloro-3- [2-(4-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il) -acético por éster metilico do ácido (2—{4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-acético, é preparado o ácido (2-{4-cloro-3-[2-(4-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-acético como um sólido (295 mg) . LCMS: RT = 2,51 minutos, MS: 497 (M-H). RMN de XH (300 MHz, DMSO-D6) δ 2,64 (t, J = 7,4 Hz, 2H) , 3,11 (m, 2H) , 3, 6 7 (s, 3H), 3,75

(s, 2H), 6,75 (d, C-i II co > 6 Hz, 2H), 7,05 (m, 3H), 7,17 (t, J=7,3 Hz, 1H), 7,41 (d, J=8, 1 Hz, 1H), 7,58 (d, J=7, 9 Hz, 1H), 7,76 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,9 (dd, J=6,3 Hz, 2 Hz, 1H), 8,01 (ampla s, 1H), 8,23 (d, J=2 Hz, 1H), 11,54 (s, 1H), 12,42 (ampla s, 1H) . IC50 = 3 nM (d) Ácido_(2-{4-cloro-3- [2- (2-trif luorometoxi-fenil) - etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-acético

Passo passo 4, 1. Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), mas substituindo a 2-(2-trifluorometoxi-fenil)- 50 etilamina (2,2 g) por 2-(2-metoxi-fenil)-etilamina, é preparado a 5-bromo-2-cloro-N-[2-(2-trifluorometoxi-fenil)-etil]- benzenossulfonamida como um sólido (2,4 g). LCMS: RT = 2,96 minutos, MS: 455,9 (M-H).

Passo 2: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 5, mas substituindo a 5-bromo-2-cloro-N-[2-(2-trifluorometoxi-fenil)-etil]-benzenossulfonamida (2,3 g) por 5-bromo-2-cloro-N-[2-(2-metoxi-fenil)-etil]-benzenossulfonamida, é preparado o éster terc-butílico o ácido 2-{4-cloro-3-[2-(2-trifluorometoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-indole-l-carboxílico como um sólido (2,05 g) . LCMS: RT = 3,49 minutos, MS: 595 (M+H).

Passo 3: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 6, mas substituindo o éster terc-butílico do ácido 2-{4-cloro-3-[2-(2-trifluorometoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-indole-l-carboxílico por éster terc-butílico do ácido 2-{4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-indole-1-carboxílico, é preparado a 2-cloro-5-(lH-indol-2-il)-N-[2- (2-trifluorometoxi-fenil)-etil]-benzenossulfonamida como um pó (985 mg). LCMS: RT = 3,1 minutos, MS: 493 (M-H).

Passo 4: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 7, mas substituindo a 2-cloro-5-(lH-indol-2-il)-N-[2-(2-trifluorometoxi-fenil)-etil]-benzenossulfonamida por 2-cloro-5-(lH-indol-2-il)-N-[2-(2-metoxi-fenil)-etil]-benzenossulfonamida, é preparado o éster metílico do ácido (2-{4-cloro-3-[2-(2-trifluorometoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-oxo-acético como um sólido (575 mg). LCMS: RT = 2,84 minutos, MS: 581 (M+H). 51

Passo 5: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 8, mas substituindo o éster metílico do ácido (2-{4-cloro-3- [2- (2-trifluorometoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-oxo-acético por éster metilico do ácido (2-{4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-oxo-acético, é preparado o éster metílico do ácido (2 —{4-cloro-3-[2-(2-trifluorometoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il) -acético como um pó (470 mg). LCMS: RT = 3 minutos, MS: 567 (M+H). RMN de 1H (300 MHz, CDC13) δ 2,91 (t, J=7 Hz, 2H) , 3,27 (q, J=13,4 Hz, J=6,8 Hz, 2H), 3,73 (s, 3H) , 3,81 (s, 2H), 5,07 (t, J=6 Hz, 1H), 7,25 (m, 6H), 7,41 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,59 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,7 (d, J=7,59 Hz, 1H), 7,91 (dd, J=6,l, 2,2 Hz, 1H), 8,28 (s, 1H), 8,33 (d, J=2,2 Hz, 1H).

Passo 6: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 9, mas substituindo o éster metílico do ácido (2-{4-cloro-3-[2-(2-trifluorometoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-acético por (2-{4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil)- etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-acético, é preparado o Ácido (2-{4-cloro-3-[2-(2-trifluorometoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-acético como um pó (340 mg). LCMS: RT = 2,69 minutos, MS: 551 (M-H). RMN de XH (300 MHz, DMSO-D6) δ 2,8 (t, J=7 Hz, 2H), 3,17 (q, J=13,4 Hz, J=6,4 Hz, 2H) , 3,74 (s, 2H), 7,06 (t, J=7,5 Hz, 1H), 7,17 -7,35 (m, 5H), 7,41 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,57 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,79 (d, J=8,5 Hz,

2,1 Hz, 1H), 7,91 (dd J=6,2 Hz, 2,1 Hz, 1H), 8,17 (t, J=5,6 Hz, 1H), 8,24 (d, J=2 Hz, 1H), 11,57 (s, 1H), 12,42 (ampla s, 1H) . IC50 = 20 nM 52 (e) Ácido [2-(4-cloro-3-fenetilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3 -il]-acético

UC1VS „COOH h li 1 sr Ts ο/Λ0 N- H

Passo 1. Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 4, mas substituindo a fenetilamina (1,3 g) por 2-(2-metoxi-fenil)-etilamina, é preparado a 5-bromo-2-cloro-N-fenetil-benzenossulfonamida (2,1 g) como um sólido. LCMS: RT = 2,71 minutos, MS: 402 (M-H).

Passo 2: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 5, mas substituindo a 5-bromo-2-cloro-fenetil-benzenossulf onamida (1,9 g) por 5-bromo-2-cloro-N-[2-(2-metoxifenil)-etil]-benzenossulfonamida, é preparado o éster terc-butílico do ácido 2-(4-cloro-3-fenetilsulfamoil-fenil)-indole-l-carboxílico (1,69 g) . LCMS: RT = 3,38 minutos, MS: 511(M+H).

Passo 3: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 6, mas substituindo o éster terc-butílico do ácido 2-(4-cloro-3-fenetilsulfamoil-fenil)-indole-l-carboxílico por o éster terc-butilico do ácido 2-{4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-indole-l-carboxílico, é preparado o 2-cloro-5-(lH-indol-2-il)-N-fenetil-benzenossulfonamida como um sólido (900 mg). LCMS: RT = 2,96 minutos, MS: 411 (M+H). 53

Passo 4: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 7, mas substituindo a 2-cloro-5-(lH-indol-2-il)-N-fenetil- benzenossulfonamida por 2-cloro-5-(lH-indol-2-il)-N-[2-(2- metoxi-fenil)-etil]-benzenossulfonamida, é preparado o éster metílico do ácido [2-(4-cloro-3-fenetilsulfamoil-fenil)-1H-indol-3-il]-oxo-acético como um semi-sólido (542 mg). LCMS: RT = 2,68 minutos, MS: 497 (M+H).

Passo 5: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 8, mas substituindo o éster metílico do ácido [2-(4-cloro-3-fenetilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-oxo-acético por éster metílico do ácido (2-{4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil)- etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-oxo-acético, é preparado o éster metílico do ácido [2-(4-cloro-3-fenetilsulfamoil-fenil)- lH-indol-3-il] -acético_como um sólido (410 mg) . LCMS: RT = 2,84 minutos, MS: 483 (M+H); RMN de XH (300 MHz, DMSO- D6) δ 2, 72 (t, J=7, 5 Hz, 2H), 3,15 (q, J=13,4 Hz, J=6,5 Hz, 2H), 3,61 (S, 3H), 3,86 (s, 2H), 7,18 (m, 7H) , 7,41 (d, J=8,1 Hz, 1H) , 7, 55 (d, J=7, 9 Hz, 1H), 7, 77 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7, 87 (dd, J=6,2 Hz, 2 Hz , 1H), 8,08 (t, 5, 5 Hz, 1H), 8,2 ( d, J=2 Hz, 1H), 11, 6 (s, 1H) .

Passo 6: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 9, mas substituindo o éster metílico do ácido [2-(4-cloro-3-fenetilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético por éster metílico do ácido (2-{4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil)- etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-acético, é preparado o ácido_[2-(4-cloro-3-fenetilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]- acético ácido (280 mg). LCMS: RT = 2,53 minutos, MS: 467 (M-H) ; RMN de XH (300 MHz, DMSO-D6) δ 2,72 (t, J=7,4 Hz, 2H) , 3,15 (m, 2H), 3,75 (s, 2H), 7,15 (m, 7H) , 7,41 (d, J=7, 8 Hz, 1H) , 7,57 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,77 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,89 (dd, J=6,3 Hz, 2 54

Hz, 1H), 8,06 (t, 5,7 Hz, 1H) , 8,24 (d, J=2 Hz, 1H) , 11,55 (s, 1H), 12,45 (ampla s, 1H) . (f) Ácido (2-[4-cloro-3-(3—fenil-propilsulfamoil)-fenil]-1H-indol-3-il}acético

Passo 1. Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 1, passo 4, mas substituindo a 3-f enil-propilamina (1,4 g) por 2-(2-metoxi-fenil)-etilamina, é preparado a 5-bromo-2-cloro-N-(3-fenil-propil)-benzenossulfonamida (2 g) como um semi-solido. LCMS: RT = 2,86 minutos, MS: 386 (M-H).

Passo 2: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 5, mas substituindo a bromo-2-cloro-N-(3-fenil-propil)-benzenossulfonamida (1,9 g) por 5-bromo-2-cloro-N-[2-(2-metoxi-fenil)-etil]-benzenossulfonamida, é preparado o éster terc-butílico do ácido 2-[4-cloro-3-(3-fenil-propilsulfamoil)-fenil]-indole-l-carboxílico como um sólido (1,73 g) . LCMS: RT = 3,43 minutos, MS: 525 (M+H).

Passo 3: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 6, mas substituindo o éster terc-butílico do ácido 2- [4-cloro-3-(3-fenil-propilsulfamoil)-fenil] -indole-l-carboxílico por éster terc-butílico do ácido 2-{4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil]-indole-l-carboxílico, é preparado a 2-cloro-5-(lH-indol-2-il)-N-(3-fenil-propil)- 55 benzenossulfonamida como um pó (950 mg). LCMS: RT = 3,03 minutos, MS: 425 (M+H).

Passo 4: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 7, mas substituindo a 2-cloro-5-(lH-indol-2-il)-N-(3-fenil-propil)-benzenossulfonamida por 2-cloro-5-(lH-indol-2-il)-N-[2-(2-metoxi-fenil)-etil]-benzenossulfonamida, é preparado o éster metílico do ácido {2-[4-cloro-3-(3-fenil-propilsulfamoil)-fenil]-lH-indol-3-il}-oxo-acético como um semi-sólido (540 mg). LCMS: RT = 2,76 minutos, MS: 511 (M+H).

Passo 5: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 8, mas substituindo o éster metilico do ácido {2-[4-cloro-3-(3-fenil-propilsulfamoil)-fenil]-lH-indol-3-il}-oxo-acético por éster metilico do ácido (2 — {4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-oxo-acético, é preparado o éster metílico do ácido {2-[4-cloro-3-(3-fenil-propilsulfamoil)-fenil]-lH-indol-3-il}-acético (430 mg). LCMS: RT = 2,92 minutos, K GO 497 (M+H); RMN de XH (300 MHz, CDC13 ) δ 1,82 ( CM s 2,62 (t, J=7, 5 Hz, 2H), 3 (m, 2H), 3,72 (s, 3H), 3,8 ( s, 2H), 5,13 (t, J=6 Hz, 1H), 7,07 - 7,28 (m, 7H), 7 ,39 (d, J= :8,1 Hz, 1H) , 7,6 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7, 68 (d, J=7, 9 Hz, 1H) , 7,89 (dd, c-l II • 1 Hz , 2,2 Hz, 1H), 8 , 08 (t , 5,5 Hz, 1H), 8,31 (d, J=2 Hz, 1H) .

Passo 6: Procedendo de um modo semelhante ao Exemplo 2 (a), passo 9, mas substituindo o éster metílico do ácido {2-[4-cloro-3-(3-fenil-propilsulfamoil)-fenil]-lH-indol-3-il}-acético por éster metílico do ácido (2-{4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-acético, é preparado o ácido {2-[4-cloro-3-(3-fenil-propilsulfamoil)-fenil]-lH-indol-3-il]-acético como um pó (300 mg). LCMS: RT = 2,61 minutos, 56 MS: 481 (M-H); RMN de XH (300 MHz, DMSO-D6) δ 1,67 (m, 2H) , 2,5 (m, 2H, escondido sob o pico do DMSO), 2,93 (m, 2h), 3,73 (s, 2H), 7 - 7,3 (m, 7H), 7,41 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,57 (d, J=7,8 Hz,

1H), 7,83 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,93 (d, J=8,1 Hz, 1H), 8,04 (aparente s, 1H), 8,26 (s, 1H), 11,6 (s, 1H), 12,45 (ampla s, 1H) . IC50 = 7 nM

Exemplo 3: 2 - [2 - (4-Cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il] - N-metil-acetamida

Passo 1. O cloreto de 5-bromo-2-clorobenzenossulfonilo (4 g, 13,8 mmol) é lentamente adicionado a uma solução de ciclo-hexilamina (3,5 g, 35 mmol) em DCM: MeOH (1:1, 100 mL) a 0 °C. A mistura resultante é aquecida para a temperatura ambiente e agitada, durante 20 horas. A mistura reaccional é ácidificada com HC1 2 N aquoso (-100 mL) e extraida duas vezes com DCM (-150 mL) . A camada orgânica é lavada com água (-100 mL), solução salina concentrada (-50 mL), seca sob sulfato de sódio e evaporada in vacuo para proporcionar a 5-bromo-2-cloro-N-ciclo-hexil-benzenossulfonamida (4,2 g). LCMS: RT = 3 minutos, MS: 351 (M-H). 57

Passo 2. A uma solução de ácido 1-(terc-butoxicarbonil)-1H-indol-2-ilborónico (2,2 g), 5-bromo-2-cloro-N-ciclo-hexil-benzenossulfonamida (1,8 g) e CsF (1,4 g) em 1,4-dioxano-H20 (60 mL, 10:1) é adicionado PdCl2(dppf)2 (375 mg), à temperatura ambiente, sob azoto. A reacção é aquecida para 80 °C e agitada, durante 3 h. A mistura reaccional é concentrada in vacuo. O resíduo é dissolvido in EtOAc e filtrada através de uma coluna pequena de sílica. O filtrado é concentrado in vacuo e purificado por cromatografia flash em coluna de sílica gel, eluída com 5% a 50% de EtOAc em heptano, para proporcionar o éster terc-butílico do ácido 2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-indole-l-carboxílico (1,9 g) . LCMS: RT = 3,31 minutos, MS: 489 (M+H).

Passo 3. Uma mistura de ácido trif luoacético (10 mL) e diclorometano (10 mL) é adicionada ao éster terc-butílicdo do ácido 2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-indole-l-carboxílico (1,9 g). A mistura reaccional é agitada, à temperatura ambiente, durante 2 horas. A mistura é concentrada in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e lavado com NaHC03 aquoso saturado, água e solução salina concentrada. A camada orgânica é separada, seca sob sulfato de sódio e concentrada para proporcionar a 2-cloro-N-ciclo-hexil-5-(5-metoxi-lH-indol-2-il)-benzenossulfonamida (1,4 g) . LCMS: RT = 3,17 minutos, MS: 389 (M+H).

Passo 4: O cloreto de oxalilo (1,7 mL de uma solução 2 M em diclorometano) é lentamente adicionado a uma solução de 2-cloro-N-ciclo-hexil-5-(lH-indol-2-il)-benzenossulfonamida (300 mg, 0,77 mmol) em DCM (6 mL) a 0 °C. A mistura reaccional é deixada a aquecer para a temperatura ambiente e agitada, durante 3 h. É adicionada metilamina em THF (7 mL de uma solução 2 M) e 58

agitada, durante 15 minutos. A mistura é concentrada e o resíduo é submetido a cromatografia em sílica gel eluída com 30-70% de EtOAc/heptano, para proporcionar a 2-[2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-N-metil-2-oxo-acetamida como um pó (285 mg). LCMS: RT = 2,22 minutos, MS: 474 (M+H); RMN de (300 MHz , DMSO -D6) δ 0,9 - 1,7 (séries de m, 10 H), 2,36 (d, J = =4,7 Hz, 3H) , 3 ,02 (m, 1H), 7,3 (m, 2H) , V, 52 (d, J=8 Hz, 1H) r 7,76 (m, 2H), s c_i II 3 Hz, 1H), 8, 06 (dd, J=5 Hz, J=1 ,8 Hz, 1H), 8,15 (d, J=l, 8 Hz, 1H) , , 8,49 (d, J= =4,8 Hz, 1H), 12, 65 (S, 1H).

Passo 5. É adicionada lentamente trietilsilano (1 mL) a uma solução de 2-[2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3—i1]-N-metil-2-oxo-acetamida (150 mg; 0,32 mmol) em TFA (4 mL), à temperatura ambiente. Após agitação durante ~72 h, a mistura reaccional é concentrada in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e lavado com NaHC03 aquoso saturado, água, seco sob Na2S04 e concentrado. O resíduo é purificado por separação por HPLC preparativa (fase móvel: acetonitrilo-água com TFA a 0,1%; gradiente de 10-100% durante 10 minutos), para proporcionar 2-[2-(4-Cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-N-metilacetamida como um semi-sólido (110 mg). LCMS: RT = 2,6 minutos, MS: 460 (M+H); RMN de (300 MHz, DMSO-D6) δ 0,9-1,7 (m, 10 H), 2,6 (d, J=4,6 Hz, 3H), 3,04 (m, 1H), 3,6 (s, 2H), 7,03 (t, J=7,4 Hz, 1H) , 7,16 (t, J=7,4 Hz, 1H), 7,4 (d, J=8 Hz, 1H), 7,6 (d, J=7,9 Hz, 1H) , 7,76 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,89 (d, J=8,3 Hz, 1H) , 8,01 (d, J=4, 6 Hz, 1H), 8,14 (dd, J=6 Hz, J=2,2 Hz, 1H), 8,33 (d, J=2 Hz, 1H) , 11,5 (s, 1H) .

IC5o = 509 nM 59

Exemplo 4: Ácido [4-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsul£amoil-fenil)-1H-indol-3-il]-acético

Método A:

Passo 1. É adicionado dicarbonato de di-terc-butilo (39,6 g) a uma solução de 4-cloroindole (25 g) e 4-(dimetilamino)piridina (2 g) em DCM (800 mL) . A reacção é agitada, à temperatura ambiente, durante 18 h. A mistura reaccional é lavada com HC1 a 1 N (150 mL) e NaHCCt 1 N (150 mL). A camada orgânica é separada, seca sob MgS04 e concentrada. O produto em bruto é recristalizado a partir de heptano/éter para proporcionar o éster terc-butílico do_ácido_4-cloro-indole-l-carboxílico (41,9 g) . LCMS: RT = 3,34 minutos, MS: 251 (M+H).

Passo 2. A uma solução de éster terc-butilico do ácido 4-cloro-indole-l-carboxílico (10 g) em THF seco (50 mL) é adicionado borato de triisopropílico (13,7 mL) sob N2. A mistura é arrefecida para 0 °C num banho de gelo. É adicionado diisopropilamina de lítio (33,8 mL, 2 M), durante uma hora a 0 °C. A reacção é agitada, a 0 °C, durante 30 minutos. É adicionado HC1 2 N (80 mL) . A mistura resultante é extraída com 60

EtOAc. A camada orgânica é seca, filtrada e concentrada. 0 resíduo é recristalizado em acetonitrilo/H20 para proporcionar ácido 1-(terc-butoxicarbonil)-4-cloro-lH-indol-2-ilborónico como um sólido (4,5 g).

Passo 3. A uma solução de ácido 1-(terc-butoxicarbonil)-4-cloro-lH-indol-2-ilborónico (4,27 g, 14,45 mmol), 5-bromo-2-cloro-N-ciclo-hexil-benzenossulfonamida (3 g, 8,5 mmol) e CsF (2,58 g, 17 mmol) em dioxano-H20 (85 mL, 10:1) é adicionado PdCl2 (dppf)2 (694 mg, 0,85 mmol), à temperatura ambiente, sob N2. A reacção é aquecida para 80 °C e agitada, durante 2 h. A mistura reaccional é concentrada in vácuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e é filtrado através de uma coluna pequena de sílica. O filtrado é concentrado in vacuo e o resíduo é purificado por cromatografia flash em sílica gel eluída com 5% a 50% de EtOAc em heptano, para proporcionar o éster terc-butílico do_ácido_4-cloro-2- (4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil) - indole-l-carboxílico como um sólido (3,42 g) . LCMS: RT = 3,5 minutos, MS: 523 (M+H).

Passo 4. É adicionado TFA (20 mL) a uma solução de éster terc-butílico do ácido 4-cloro-2-(í-cloro-S-ciclo- hexilsulfamoil-fenil) -indole-l-carboxílico (3,42 g, 6,53 mmol) em DCM (40 mL) . A mistura reaccional é agitada, à temperatura ambiente, de um dia para o outro. A mistura é concentrada in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e lavado com NaHC03 1 N. A camada orgânica é separada, seca sob MgS04 e concentrada para proporcionar 2-cloro-5-(4-cloro-lH-indol-2-il)-N-ciclo-hexil-benzenossulfonamida como um sólido (2,8 g) . LCMS: RT = 3,04 minutos, MS: 423 (M+H). 61

Passo 5: É lentamente adicionado cloreto de oxalilo de etilo (2,42 g, 17,8 mmol) a uma suspensão de 2-cloro-N-ciclo-hexil-5-(lH-indol-2-il)-benzenossulfonamida (1,5 g, 3,54 mmol) em dicloroetano (150 mL), seguida por A1C13 (2,36 g, 17,8 mmol) a 0 °C. A solução castanho escura resultante é deixada a aquecer para a temperatura ambiente e agitada, durante 16 h. É adicionado MeOH (5 mL) a 0 °C a uma mistura reaccional e diluida com DCM. Os orgânicos são lavados com água, solução salina concentrada, secos sob Na2S04 e concentrados para proporcionar o éster_etílico_do_ácido_[4-cloro-2- (4-cloro-3-ciclo-

hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-oxo-acético como um sólido (1,8 g). LCMS: RT = 2,87 minutos, MS: 523 (M+H). RMN de XH (300 MHz, DMSO-D6) δ 0,8 -1,7 (séries de m, 13H) 3,04 (m, 1H), 4,07 (q, J=14,3 Hz, J= 7,2Hz, 2H) , 7,3 (m, 2H), 7,54 (dd, J=4,2

Hz, 2,4 Hz, 1H), 7,83 (m, 2H) , 8,04 (d, J=8,l Hz, 1H), 8,17 (d, J=2 Hz, 1H) , 12,95 (s, 1H) .

Passo 6. O éster etílico do ácido [4-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-oxo-acético (1,8 g, 3,45 mmol) é agitado com trietilsilano (6 mL) e TFA (24 mL), à temperatura ambiente. Após agitar durante ~72 h, a mistura reaccional é concentrada in vacuo. O resíduo é dissolvido em DCM (-150 mL) e lavado com água (-100 mL) duas vezes, solução salina concentrada (-50 mL), seca sob Na2S04 e concentrada in vacuo. O resíduo é purificado por cromatografia flash em sílica gel eluída com 5% a 50% EtOAc em heptano para proporcionar o éster etílico_do_ácido_[4-cloro-2- (4-cloro-3-ciclo- hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético como um pó (1,45 g) . LCMS: RT = 3,14 minutos, MS: 509 (M+H). RMN de 'H (300 MHz, DMSO-D6) δ O CG -1,7 (séries de m, 13H) 3,03 ( 1H) 3,96 (s, 2H), 4,14 (q, CM II •“D N nu CM \—1 II *~D Hz, 2H), 7, 07 (d, 62 J=7,5 Hz, 1H) 7,14 (t, J=7,8 Hz, 1H) 7,4 (d, J=8 Hz, 1H) 7,8 (m, 2H), 7,98 (d, J=8,l Hz, 1H) 8,14 (d, J=2 Hz, 1H) 11,95 (s, 1H).

Passo 7: Uma mistura de éster etílico do ácido [4-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético (1,45 g, 2,85 mmol) e mono-hidrato de hidróxido de lítio (600 mg, 14,3 mmol) em Me0H/H20 (2:1, 100 mL) é agitada, a 80 o0C durante 4 h. É adicionado KOH (800 mg; 14,3 mmol) à mistura e a agitação é mantida, a 80 °C, durante 16 h. A mistura reaccional é concentrada in vacuo. O resíduo é acidificado com HC1 2 N aquoso (pH ~ 2). Os sólidos brancos resultantes foram recolhidos por filtração, lavados com Et20, heptano e seca in vacuo durante ~72 h para proporcionar o ácido [4-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético como um sólido

cristalino (1,1 g) . LCMS: RT = 2,6 4 minutos, MS: 481 (M+H); RMN de XH (300 MHz, DMSO-D6) δ 0,9 - 1,7 (séries de m, 10H), 3,05 (m, 1H), 3,88 (s, 2H), 7,06 (d, J=7,4 Hz, 1H), 7,14 (t, J=7,8 Hz, n \—1 7, 40 (d, J=7, 9 Hz, 1H), 7,8 (m, 2H) , 7,97 (d, J=8,1 Hz, \—1 8,18 (d, J=l,8 Hz, 1H), 11,92 (s, 1H), 12,45 (ampla s, 1H) . IC50 = = 0,2 nM Método B:

Passo 1. É adicionado dicarbonato de di-terc-butilo (39,6 g) a uma solução de 4-cloroindole (25 g) e 4-(dimetiloamino)piridina (2 g) em DCM (800 mL) . A reacção é agitada, à temperatura ambiente, durante 18 h. A mistura reaccional é lavada com HC1 1 N (150 mL) e NaHC03 1 N (150 mL) . A camada orgânica é separada, seca sob MgSCh e concentrada. O produto em bruto é recristalizado de heptano/éter para 63 proporcionar éster terc-butílico do ácido 4-cloro-indole-l-carboxílico (41,9 g) .

Passo 2. A uma solução de éster terc-butílico do ácido 4-cloro-indole-l-carboxilico (10 g) em THF seco (50 mL) é adicionado trisopropilborato (13,7 mL) sob N2. A mistura é arrefecida para 0 °C num banho de gelo. É adicionada diisopropilamina de litio (33,8 mL, 2 M), durante uma hora, a 0 °C. A reacção é agitada, a 0 °C, durante 30 minutos. É adicionado HC1 2 N (80 mL) . A mistura resultante é extraída com EtOAc. A camada orgânica é seca, filtrada e concentrada. O resíduo é recristalizado em acetonitrilo/H20 para proporcionar ácido 1-(terc-butoxicarbonil)-4-cloro-lH-indol-2-ilborónico como um sólido (4,5 g).

Passo 3. A uma solução de ácido 1-(terc-butoxicarbonil)-4-cloro-lH-indol-2-ilborónico (1,04 g), 5-bromo-2-cloro-N-ciclo-hexil-benzenossulfonamida (1 g) e CsF (864 mg) em dioxano-H20 (29 mL, 10:1), é adicionado PdCl2(dppf)2 (232 mg), à temperatura ambiente sob azoto. A reacção é aquecida para 80 °C e agitada de um dia para o outro. A mistura reaccional é concentrada in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e filtrado através de uma coluna pequena de sílica. O filtrado é concentrado in vacuo e purificado por cromatografia flash em coluna de sílica gel eluída com 10% to 50% EtOAc em heptano, para proporcionar o éster terc-butílico do ácido 4-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-indole-l-carboxílico como um sólido (1,04 g) .

Passo 4. É adicionado ácido trif luoacético (5 mL) a uma solução de éster terc-butílico do ácido 4-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-indole-l-carboxílico (1,04 g) em DCM (10 mL). A mistura reaccional é agitada, à temperatura ambiente, durante 4 h. A mistura é concentrada in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e é lavado com NaHCC>3 1 N. A camada orgânica é separada, seca sob MgS04 e concentrada para proporcionar 2- cloro-5-(4-cloro-lH-indol-2-il)-N-ciclo-hexil- benzenossulfonamida como um sólido (860 mg). LCMS: RT= 3,06 minutos, MS: 423 (M+H).

Passo 5. O cloreto de oxalilo (0,26 mL) é lentamente adicionado a uma solução de 2-cloro-5-(4-cloro-lH-indol-2-il)-N-ciclo-hexil-benzenossulfonamida (860 mg) em diclorometano (20 mL), à temperatura ambiente. Após agitação durante 2 h, é adicionado MeOH (5 mL) e agitado durante 15 minutos. A mistura é concentrada. O resíduo é purificado por cromatografia flash em coluna de sílica gel eluída com 0% a 50% de EtOAc em heptano, para proporcionar o éster metílico do ácido [4-cloro-2-(4-cloro- 3- ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-oxo-acético como um sólido (140 mg).

Passo 6. É lentamente adicionada trietilosilano (0,086 mL) a uma solução de éster metílico do ácido [4-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-oxo-acético (140 mg) em ácido trifluoacético (1,4 mL), à temperatura ambiente. Após agitação de um dia para o outro, os voláteis são removidos in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e lavado com NaHC03 1 N. A camada orgânica é separada, seca sob MgS04 e concentrada. O resíduo é purificado por cromatografia flash em coluna de sílica gel, eluída com 10% a 50% de EtOAc em heptano, para proporcionar o éster metílico do ácido [4-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético como um sólido (93 mg). 65

Passo 7. A uma solução de éster metílico do ácido [4-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético (92 mg) em Me0H/H20 (1:1, 3,6 mL) é adicionado mono-hidrato de hidróxido de litio (16 mg). A mistura reaccional é agitada, a 80 °C, durante 18 h. É adicionado EtOAc (10 mL) e a solução é lavada com HC1 1 N (5 mL) . A camada orgânica é separada, seca sob MgSCg e concentrada para proporcionar o ácido [4-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético como um sólido (67 mg). LCMS: RT = 2,52 minutos, MS: 481 (M+H); RMN de 1H (300 MHz, CD3OD) δ 1, 09-1, 35 (m, 5H), 1,51-1,74 (m, 5H), 3,11 (m, 1H), 3,81 (brs, 2H) , 7,05 (m, 2H), 7,39 (m, 1H) , 7,65 (m, 2H), 8,32 (m, 1H), 11,17 (brs, 1H).

Exemplo 5: [4-Cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3—i1]-acetato de potássio

Uma mistura de ácido [4-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético (537 mg, 1,115 mmol) e 200 mL de etanol é agitada, a ~40 °C, durante 10 minutos. A solução resultante é deixada a arrefecer para a temperatura ambiente e é adicionado hidróxido de potássio (62 mg, 1,1 mmol). A agitação continuou, à temperatura ambiente 66 até o KOH estar dissolvido. A solução é concentrada in vacuo a ~40 °C. Os sólidos brancos resultantes são secos in vacuo durante ~20 h, para proporcionar o [4-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acetato de potássio como um sólido cristalino (575 mg). LCMS: RT = 2,64 minutos, MS: 481 (M+H do ácido relacionado). RMN de :H (300 MHz, dmso-d6) δ 0,9 - 1,7 (séries de m, 10H), 3,06 (m, 1H), 3,66 (s, 2H) , 6,93 (d N πϋ CN] II *~D , 1H), 7,01 ( t, J=7,8 Hz, 1H), 7,28 (d, J=7, 7 Hz, 1H) 7,6 6 (d, , J=8,3 , 1H), 8,1 (dd, J=6,4 Hz, 2 Hz, 2H), 8,32 (d J=2 Hz, 1H), 11 ,75 (S, 1H) .

Exemplo 6: Ácido [2- (4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-4-fluoro-lH-indol-3-il]-acético

Passo 1. É adicionado dicarbonato de Di-terc-butílico (8,88 g) a uma solução de 4-fluoroindole (5 g) e 4-(dimetilamino)piridina (0,45 g) em diclorometano (185 mL). A reacção é agitada, à temperatura ambiente, durante 4 h. A mistura reaccional é lavada com HC1 1 N (100 mL) e NHC03 1 N (100 mL) . A camada orgânica é separada, seca sob MgSC>4 e concentrada para proporcionar éster terc-butílico do ácido 4-fluoro-indole-l-carboxílico como um óleo (8,32 g) . LCMS: RT = 3,34 minutos, MS:236,09 (M+H). 67

Passo 2. A uma solução do éster terc-butílico do ácido 4-fluoro-indole-l-carboxílico (3 g) em THF seco (16 mL) é adicionado borato de triisopropilo (3,6 mL), sob azoto. A mistura é arrefecida para 0 °C num banho de gelo. É adicionada diisopropilamina de litio (12,8 mL, 2 M) durante uma hora a 0 °C. A reacção é agitada, a 0 °C, durante 30 minutos. É adicionado HC1 2 N (10 mL) para atenuar a reacção. A mistura resultante é extraída com EtOAc. O resíduo é purificado por cromatografia flash em coluna de sílica gel eluída com 5% a 50% de EtOAc em heptano, para proporcionar o ácido 1-(terc-butoxicarbonil)-4-fluoro-lH-indol-2-ilborónico como um sólido (1,65 g).

Passo 3. A uma solução de ácido 1-(terc-butoxicarbonil)-4-fluoro-lH-indol-2-ilborónico (1,19 g) , 5-bromo-2-cloro-N-ciclo-hexil-benzenossulfonamida (1 g) e CsF (863 mg) em dioxano-H20 (27,5 mL, 10:1) é adicionado PdCl2(dppf)2 (231 mg), à temperatura ambiente, sob azoto. A reacção é aquecida para 80 °C e agitada, durante 2 dias. A mistura reaccional é concentrada in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e filtrada através de uma pequena coluna de sílica. O filtrado é concentrado in vacuo e purificado por cromatografia flash em coluna de sílica gel eluída com 5% a 30% de EtOAc em heptano, para proporcionar 2-cloro-5-(4-fluoro-lH-indol-2-il)-N-ciclo-hexil-benzenossulfonamida como um sólido (516 mg). LCMS: RT= 4,46 minutos, MS: 407 (M+H).

Passo 4. É lentamente adicionado cloreto de oxalilo (0,16 mL) a uma solução de 2-cloro-5-(4-fluoro-lH-indol-2-il)-N-ciclo-hexil-benzenossulfonamida (496 mg) em diclorometano (12 mL), à temperatura ambiente. Após agitação durante 3 h, é adicionado MeOH (4 mL) e agitada, durante 15 minutos. A mistura é concentrada. O resíduo é purificado por cromatografia flash em 68 coluna de sílica gel eluída com 5% a 50% de EtOAc em heptano, para proporcionar éster metílico do ácido [4-fluoro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-oxo-acético como um sólido (470 mg).

Passo 5. É lentamente adicionada trietilsilano (0,3 mL) a uma solução de éster metílico do ácido [4-fluoro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-oxo-acético (570 mg) em ácido trifluoroacético (5 mL), à temperatura ambiente. Após agitação de um dia para o outro, os voláteis são removidos in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e lavado com NaHC03 1 N. A camada orgânica é separada, seca sob MgS04 e concentrada. O resíduo é purificado por cromatografia flash em coluna de sílica gel, eluída com 10% a 50% de EtOAc em heptano, para proporcionar o éster metílico do ácido [4—fluoro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético como um sólido branco (350 mg). LCMS: RT = 3,18 minutos, MS: 479,1 (M+H).

Passo 6. A uma solução do éster metílico do ácido [4-fluoro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético (250 mg) em Me0H/H20 (1:1, 7 mL), é adicionado mono-hidrato hidróxido de lítio (44 mg). A mistura reaccional é agitada, a 80 °C, de um dia para o outro. É adicionado EtOAc (15 mL) e a solução é lavada com HC1 1 N (10 mL) . A camada orgânica é separada, seca sob MgS04 e concentrada para proporcionar ácido [2 - (4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-4-fluoro-lH-indol-3-il]-acético como um sólido (2,19 mg). LCMS: RT = 2,83 minutos, MS: 465 (M+H); RMN de XH (300 MHz, DMSO) δ 1, 09-1,24 (m, 5H) , I, 49-1,61 (m, 5H), 3,07 (m, 1H), 3,81 (s, 2H), 6,8 (m, 1H), 7,15 (m, 1H), 7,26 (m, 1H), 7,84 (m, 2H), 7,98 (m, 1H), 8,23 (m, 1H),

II, 86 (brs, 1H) . IC50 = 0,7 nM 69

Exemplo 7: Ácido [2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-4-metil-lH-indol-3-il]-acético

OH

Passo 1. É adicionado dicarbonato de di-terc-butilo (9,15 g) a uma solução de 4-metilindole (5 g) e 4-(dimetilamino)piridina (0,46 g) em diclorometano (190 mL) . A reacção é agitada, à temperatura ambiente, durante 4 h. A mistura reaccional é lavada com HC1 1 N (100 mL) e NHC03 1 N (100 mL) . A camada orgânica é separada, seca sob MgSCh e concentrada para proporcionar o éster terc-butílico do ácido 4-metil-indole-l-carboxílico como um óleo (8, 75 g) .

Passo 2. A uma solução de éster terc-butilico do ácido 4-metil-indole-l-carboxílico (3 g) e THF seco (16 mL) é adicionado triisopropilborato (4,45 mL), sob azoto. A mistura é arrefecida para 0 °C num banho de gelo. É adicionada diisopropilamina de lítio (11,6 mL, 2 M) durante uma hora a 0 °C. A reacção é agitada, a 0 °C, durante 30 minutos. É adicionado HC1 2 N (10 mL) para atenuar a reacção. A mistura resultante é extraída com EtOAc. O resíduo é recristalizado em CH3CN/H20, para proporcionar o ácido 1-(terc-butoxicarbonil)-4-metil-lH-indol-2-ilborónico como um sólido (1,53 g). 70

Passo 3. A uma solução de ácido 1-(terc-butoxicarbonil)-4-metil-lH-indol-2-ilborónico (1,41 g), 5-bromo-2-cloro-N-ciclo-hexil-benzenossulfonamida (1 g) e CsF (863 mg) em dioxano-H20 (27,5 mL, 10:1) é adicionado PdCl2(dppf)2 (232 mg), à temperatura ambiente, sob azoto. A reacção é aquecida para 80 °C e agitada, de um dia para o outro. A mistura reaccional é concentrada in vacuo. O residuo é dissolvido em EtOAc e é filtrada através de uma coluna pequena de silica. O filtrado é concentrado in vacuo e purificado por cromatografia flash em coluna de silica gel eluida com 0% a 50% de EtOAc em heptano, para proporcionar o éster terc-butilico do ácido 2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-4-metilindole-l-carboxílico como um sólido (845 mg).

Passo 4. É adicionado ácido trifluoroacético (5 mL) a uma solução de éster terc-butilico do ácido 2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-4-metil-indole-l-carboxilico (845 mg) em diclorometano (10 mL) . A mistura reaccional é agitada, à temperatura ambiente, de um dia para o outro. A mistura é concentrada in vacuo. O residuo é dissolvido em EtOAc e lavado com NaHC03 1 N. A camada orgânica é separada, seca sob MgS04 e concentrada para proporcionar a 2-cloro-5-(4-metil-lH-indol-2-il)-N-ciclo-hexil-benzenossulfonamida como um sólido (652 mg) . LCMS: RT = 3,11 minutos, MS: 403 (M+H).

Passo 5. É lentamente adicionado cloreto de oxalilo (0,21 mL) a uma solução de 2-cloro-5-(4-metilo-lH-indol-2-il)-N-ciclo-hexil-benzenossulfonamida (650 mg) em diclorometano (16 mL), à temperatura ambiente. Após agitação de um dia para o outro, é adicionado MeOH (5 mL) e agitada, durante 15 minutos. A mistura é concentrada. O residuo é purificado por cromatografia flash em coluna de silica gel eluida com 0% a 50% de EtOAc em 71 heptano para proporcionar o éster metílico do ácido [2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-4-metil-lH-indol-3-il]-oxo-acético como um sólido amarelo (588 mg). LCMS: RT = 2,8 minutos, MS: 489 (M+H).

Passo 6. É lentamente adicionado trietilsilano (0,38 mL) a uma solução de éster metilico do ácido [2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-4-metil-lH-indol-3-il]-oxo-acético (588 mg) em ácido trifluoroacético (2 mL), à temperatura ambiente. Após agitação, de um dia para o outro, os voláteis são removidos in vacuo. O residuo é dissolvido em EtOAc e lavado com NaHC03 1 N. A camada orgânica é separada, seca sob MgS04 e concentrada. O residuo é purificado por cromatografia flash em coluna de sílica gel eluída com 0% a 40% de EtOAc em heptano para proporcionar o éster metílico do ácido [2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-4-metil-lH-indol-3-il]-acético como um sólido (338 mg). LCMS: RT = 2,95 minutos, MS: 475 (M+H).

Passo 7. A uma solução de éster metílico do ácido [2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-4-metil-lH-indol-3-il]-acético (330 mg) em Me0H/H20 (1:1, 7 mL) é adicionado mono-hidrato de hidróxido de lítio (58 mg) . A mistura reaccional é agitada, a 80 °C durante 18 h. É adicionado EtOAc (15 mL) e a solução é lavada com HC1 1 N (10 mL) . A camada orgânica é separada, seca sob MgS04 e concentrada para proporcionar o ácido [2- (4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-4-metil-lH-indol-3-il] -acético como um sólido branco (210 mg). LCMS: RT = 2,60 minutos, MS: 461,12 (M+H); RMN de 1tt (300 MHz, DMSO) δ 1, 02-1,28 (m, 5H), 1, 46-1, 64 (m, 5H), 3,07 (m, 1H), 2,63 (s, 3H), 3,95 (s, 2H), 6,79 (d, J=6,9 Hz, 1H) , 7,05 (t, J=8,l

Hz, 1H), 7,26 (d, J=8,l Hz, 1H), 7,80 (m, 2H), 7,96 (d, J=8,1 72 1,5

Hz, 1H), 8,21 (s, 1H), 11,53 (s, 1H), 12,54 (brs, 1H). IC50 nM.

Exemplo 8: Ácido [7-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-1H-indol-3-il]-acético

OH

Passo 1. É adicionado dicarbonato de Di-terc-butilo (7,92 g) a uma solução de 7-cloroindole (5 g) e 4-(dimetilamino)piridina (0,4 g) em DCM (165 mL) . A reacção é agitada, à temperatura ambiente, durante 18 h, A mistura reaccional é lavado com HC1 1 N (100 mL) e NHC03 1 N (100 mL). A camada orgânica é separada, seca sob MgS04 e concentrada para proporcionar éster terc-butílico do ácido 7-cloro-indole-l-carboxílico como um óleo (8.22 g).

Passo 2. A uma solução de éster terc-butilico do ácido 7-cloro-indole-l-carboxílico (3 g) em THF seco (15 mL) é adicionado borato de triisopropilo (4,11 mL) sob azoto. A mistura é arrefecida para 0 °C num banho de gelo. É adicionada diisopropilamina de lítio (8,94 mL, 2 M), durante uma hora a 0 °C. A reacção é agitada, a 0 °C, durante 30 minutos. É adicionado HC1 2 N (10 mL) para atenuar a reacção. A mistura resultante é extraída com EtOAc. O resíduo é purificado por 73 cromatografia flash em coluna de sílica gel eluída com 10% a 50% de EtOAc em heptano, para proporcionar o ácido l-(terc-butoxicarbonil)-7-cloro-lH-indol-2-ilborónico como um sólido (0,86 g) .

Passo 3. A uma solução de ácido 1-(terc-butoxicarbonil)-7-cloro-lH-indol-2-ilborónico (860 mg), 5-bromo-2-cloro-N-ciclo-hexil-benzenossulfonamida (733 mg) e CsF (632 mg) em dioxano-H20 (22 mL, 10:1) é adicionado PdCl2(dppf)2 (163 mg), à temperatura ambiente sob azoto. A reacção é aquecida para 80 °C e agitada, de um dia para o outro. A mistura reaccional é concentrada in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e filtrado através de uma coluna pequena de sílica. O filtrado é concentrado in vacuo e purificado por cromatografia flash em coluna de sílica gel eluída com 10% a 50% de EtOAc em heptano para proporcionar o éster terc-butílico do ácido 7-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-indole-l-carboxílico como um sólido (630 mg).

Passo 4. É adicionado ácido trifluoroacético (3 mL) a uma solução de éster terc-butílico do ácido 7-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-indole-l-carboxílico (630 mg) em diclorometano (7 mL) . A mistura reaccional é agitada, à temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura é concentrada in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e lavado com NaHC03 1 N. A camada orgânica é separada, seca sob MgS04 e concentrada in vacuo. O produto em bruto é purificado por cromatografia flash em coluna de sílica gel eluída com 10% a 40% de EtOAc em heptano, para proporcionar a 2-cloro-5-(7-cloro-lH-indol-2-il)-N-ciclo-hexil-benzenossulfonamida como um sólido (386 mg). 74

Passo 5. É lentamente adicionado Cloreto de oxalilo (0,12 mL) a uma solução de 2-cloro-5-(7-cloro-lH-indol-2-il)-N-ciclo-hexil-benzenossulfonamida (386 mg) em diclorometano (9 mL), à temperatura ambiente. Após agitação durante 18 h, é adicionado MeOH (3 mL) e agitado durante 15 minutos. A mistura é concentrada. O residuo é purificado por cromatografia flash em coluna de silica gel eluida com 5% a 45% de EtOAc em heptano, para proporcionar o éster metílico do ácido [7-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-oxo-acético como um sólido (239 mg).

Passo 6. É lentamente adicionado trietilsilano (0,15 mL) a uma solução de éster metílico do ácido [7-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-oxo-acético (239 mg) em ácido trifluoroacético (2,4 mL), à temperatura ambiente. Após agitação, de um dia para o outro, os voláteis são removidos in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e lavados com NaHC03 1 N. A camada orgânica é separada, seca sob MgS04 e concentrada. O resíduo é purificado por cromatografia flash em coluna de sílica gel eluida com 10% a 50% de EtOAc em heptano, para proporcionar o éster metílico do ácido [ 7-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético como um sólido (93 mg). LCMS: RT = 4,5 minutos, MS: 495 (M+H).

Passo 7. A uma solução de éster metílico do ácido [7-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético (93 mg) em Me0H/H20 (1:1, 4 mL), é adicionado mono-hidrato de hidróxido de lítio (16 mg). A mistura reaccional é agitada, a 80 °C, durante 18 h. É adicionado EtOAc (10 mL) e a solução é lavada com HC1 1 N (5 mL) . A camada orgânica é separada, seca sob MgS04 e concentrada para proporcionar o ácido [7-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético como 75 um sólido (85 mg). LCMS: RT = 2,6 minutos, MS: 481 (M+H) ; RMN de XH (300 MHz, DMSO) δ 1,09-1,35 (m, 5H), 1,59-1, 73 (m, 5H), 3,19 (m; 1H), 3,84 (brs, 2H), 7,21 (m, 1H), 7,38 (m, 1H), 7,67 (m,

1H), 7,95 (m, 1H), 8,02-8,05 (m, 2H), 8,40 (brs, 1H), 11,9 (brs, 1H) . IC50 = 3,7 nM

Exemplo 9: 2-Cloro-N-ciclo-hexil-5-[3-(2-metanossulfonilamino-2-oxo-etil)-lH-indol-2-il]-benzenossulfonamida Q o HN'S\

Passo 1. A uma solução de ácido 1-(terc-butoxicarbonil)-1H-indol-2-ilborónico (10 g), 5-bromo-2-cloro-N-ciclo-hexil-benzenossulfonamida (6,8 g) e CsF (5,8 g) em dioxano-H20 (220 mL, 10:1) é adicionado PdCl2(dppf)2 (1/57 g), à temperatura ambiente sob azoto. A reacção é aquecida para 80 °C e agitada, durante 6 horas. A mistura reaccional é concentrada in vacuo. 0 resíduo é dissolvido em EtOAc e é filtrada através de uma pequena coluna de sílica. O filtrado é concentrado in vacuo e purificado por cromatografia flash em coluna de sílica gel eluída com 10% a 50% de EtOAc em heptano, para proporcionar o éster terc-butílico do ácido_2- (4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil) -indole-1- carboxílico como um sólido (8,2 g). 76

Passo 2. É adicionado ácido trifluoroacético (65 mL) a uma solução de éster terc-butilico do ácido 2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-indole-l-carboxílico (13 g) em diclorometano (150 mL). A mistura reaccional é agitada, à temperatura ambiente, durante 2 h. A mistura é concentrada in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e lavado com NaHC03 1 N. A camada orgânica é separada, seca sob MgSCg e concentrada para proporcionar a 2-cloro-5-(lH-indol-2-il)-N-ciclo-hexil-benzenossulfonamida como um sólido (9,7 g). LCMS: RT= 3,17 minutos, MS: 389 (M+H).

Passo 3. É lentamente adicionado cloreto de oxalilo (0,33 mL) a uma solução de 2-cloro-5-(lH-indol-2-il)-N-ciclo-hexil-benzenossulfonamida (1 g) em diclorometano (25 mL), à temperatura ambiente. Após agitação durante 1,8 h, é adicionado MeOH (5 mL) e agitado durante 15 minutos. A mistura é concentrada. O resíduo é purificado por cromatografia flash em coluna de sílica gel eluída com 10% a 45% de EtOAc em heptano, para proporcionar o éster metílico do ácido [2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-oxo-acético como um sólido (1,2 g) .

Passo 4. É lentamente adicionado trietilsilano (0,59 mL) a uma solução de éster metílico do ácido [2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-oxo-acético (1,2 g) em ácido trifluoroacético (12 mL), à temperatura ambiente. Após agitação de um dia para o outro, os voláteis são removidos in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e lavado com NaHC03 1 N. A camada orgânica é separada, seca sob MgS04 e concentrada. O resíduo é purificado por cromatografia flash em coluna de sílica gel eluída com 10% a 50% de EtOAc em heptano, para proporcionar o éster metílico do ácido [2-(4-cloro-3-ciclo- 77 hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético como um sólido (818 mg).

Passo 5. A uma solução de éster metílico do ácido [2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético (818 mg) em Me0H/H20 (1:1, 18 mL) é adicionado mono-hidrato de hidróxido de litio (149 mg). A mistura reaccional é agitada, a 80 °C, durante 18 h. É adicionado EtOAc (15 mL) e a solução é lavada com HC1 1 N (10 mL) . A camada orgânica é separada, seca sob MgS04 e concentrada para proporcionar o ácido [2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético como um sólido (740 mg).

Passo 6. A uma solução de ácido [2-(4-cloro-3-ciclo- hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético (185 mg), cloridrato deN-(3-dimetilaminopropil)-Ν'-etilcarbodiimida (82 mg) e piridina de dimetilamino (50 mg) em diclorometano (4 mL) é adicionada metanossulfonamida (41 mg) a 0 °C. A mistura reaccional deixada a aquecer para a temperatura ambiente e agitada de um dia para o outro. A solução resultante é concentrada in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e lavado com HC1 1 N. A camada orgânica é separada, seca sob MgS04 e concentrada in vacuo. O produto em bruto é triturado com diclorometano e filtrado para proporcionar a 2-cloro-N-ciclo-hexil-5-[3-(2-metanossulfonilamino-2-oxo-etil)-lH-indol-2-il]-benzenossulfonamida como um sólido (115 mg). LCMS: Rt=

2,39 minutos, MS: 524 (M+H) ; RMN de (300 MHz, DMSO) δ 1,10 -1,28 (m, 5H), 1,61 -1,64 (m, 5H) , 3, 07 (m, 1H), 3,26 (s, 3H), 3,88 (s, 2H), 7,10 (m, 1H), 7,21 (m, 1H), 7, 44 (m, 1H), 7,61 (m, 1H), 7, 82 (m, 1H), 7,98 (m, , 2H), 8,25 (s, 1H), 11,65 (s, 1H), 12,12 (s, 1H) . IC50 = 2 nM 78

Exemplo 10: 2-Cloro-N-ciclo-hexil-5-[3-(2-etanossulfonilamino-2-oxo-etil)-lH-indol-2-il]-benzenossulfonamida

Passo 1. A uma solução de ácido [2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético (200 mg), cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida (90 mg) e dimetilaminopiridina (55 mg) em diclorometano (4,5 mL) é adicionada etanossulfonamida (51 mg) a 0 °C. A mistura reaccional é deixada a aquecer para a temperatura ambiente e agitada de um dia para o outro. A solução resultante é concentrada in vácuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e lavado com HC1 1 N. A camada orgânica é separada, seca sob MgS04 e concentrada in vacuo. O produto em bruto é triturado com diclorometano e filtrado para proporcionar a 2-cloro-N-ciclo-hexil-5-[3-(2-etanossulfonilamino-2-oxo-etil)-lH-indol-2-il]-benzenossulfonamida como um sólido (174 mg). LCMS: RT=

2, 44 minutos, MS: 538 (M+H) ; RMN de XH ( : 300 MHz , DMSO) δ 1,07 -1,33 (m, 8H), 1,51 -1,69 (m, 5H), 3,13 (m, 1H) , 3,34 (m, 2H) , 3,94 (s, 2H), 7,14 (t, J=7,2 Hz, 1H), 7,26 (t, J=7, 2 Hz, 1H), 7,50 (d, J=7, 2 Hz, 1H), 7, 67 (d, J=7, 2 Hz, 1H) , 7,87 (d, J=7, 2 Hz, 1H), 8,00 (m, 1H), 8,34 (m, 1H), 11,70 (s, 1H), 12,06 (5, 1H) . IC50 = = 2,7 nM 79

Exemplo 11: 2-Cloro-N-ciclo-hexil-5-[3-(2-oxo-2-trifluorometanossulfonilamino-etil)-lH-indol-2-il]-benzenossulfonamida

Passo 1. A uma solução de ácido [2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético (150 mg), cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)-Ν'-etilcarbodiimida (68 mg) e dimetilaminopiridina (40 mg) em diclorometano (4 mL) é adicionado trifluorometanossulfonamida (52 mg) a 0 °C. A mistura reaccional é deixada a aquecer para a temperatura ambiente e agitada de um dia para o outro. A solução resultante é concentrada in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e lavado com HC1 1 N. A camada orgânica é separada, seca sob MgS04 e concentrada in vacuo para proporcionar a 2-cloro-N-ciclo-hexil-5-[3-(2-trifluorometanossulfonilamino-2-oxo-etil)-lH-indol-2-il]-benzenossulfonamida como um sólido (206 mg) . LCMS: RT = 2,58 minutos, MS: 576 (M+H); RMN de (300 MHz,

CD3OD) δ 1,17-1,27 (m, 5H), 1,55-1, 75 (m, 5H), 3,12 (m, 1H), 4,01 (s, 2H), 7,11 (m, 1H), 7,42 (m, 1H), 7,50 (m, I H), 7,68 (m, 1H), 7,80 (m, 1H), 8,3 (m, I H) . IC50 = 14 nM 80

Exemplo 12: 2-[2- (4-Cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-N-(lH-tetrazol-5-il)-acetamida

Passo 1. A uma solução de ácido [2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético (200 mg), cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida (90 mg) e dimetilaminopiridina (55 mg) em diclorometano (4,5 mL) é adicionada lH-tetrazol-5-ilamina (48 mg) a 0 °C. A mistura reaccional é deixada a aquecer para a temperatura ambiente e agitada, durante 2 dias. A solução resultante é concentrada in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e lavado com HC1 1 N. A camada orgânica é separada, seca sob MgS04 e concentrada in vacuo. O produto em bruto é triturado com diclorometano e filtrado para proporcionar a 2-[2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-N-(lH-tetrazol-5-il)-

acetamida como um sólido (50 mg) . LCMS: : RT = 2,26 minutos, MS: 514 (M+H); RMN de 1ti (300 MHz, DMSO) δ 1,14- 1,3 (m, 5H) , 1,51-1,65 (m, 5H), 3,1 (m, 1H) , 4,1 (S, 2H), 7, 11 (m, 1H), 7,23 (m, 1H), 7,48 (m, 1H), 7,7 (m, 1H) , co r-- (m, 1H), 8,06 (m, 2H) , 8,34 (s, 1H), 11,69 (brs, 1H), 12, 46 (brs, , 1H) o LO O 1—1 = 15 nM 81

Exemplo 13: Ácido [2-(3-ciclo-hexilsulfamoil-4-etil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético

Passo 1. 0 l-bromo-4-etil-benzeno (3 g) é dissolvido em 30 mL de DCM e arrefecido para 0 °C num banho de gelo. É adicionado, gota a gota, ácido clorossulfónico (11,3 g), durante o periodo de 20 minutos e a solução é agitada, a 0 °C, durante 4 horas. A mistura reaccional é vertida cautelosamente em gelo e deixada a aquecer para a temperatura ambiente. A mistura é transferida para um funil de separação e as camadas separadas. A camada aquosa é lavada com mais DCM. As camadas orgânicas são combinadas, secas (MgSCg), filtradas e evaporadas para proporcionar o cloreto de 5-bromo-2-etil-benzenossulfonilo (1,78 g) como um óleo que é utilizado sem purificação posterior no passo 2.

Passo 2. A ciclo-hexilamina (0,9 g) e diisopropiletilamina (1,5 g) são dissolvidas em 20 mL de DCM e a solução é arrefecida para 0 °C. A esta é adicionado cloreto de 5-bromo-2-etil-benzenossulfonilo (1,7 g em 20 mL de DCM) em porções durante 5 minutos. A mistura é agitada, a 0 °C, durante 30 minutos e à temperatura ambiente, durante 1 hora. O solvente é removido sob pressão reduzida e ao resíduo é adicionado HC1 aquoso a 10% e DCM. As camadas são separadas e a camada aquosa é lavada com 82 mais DCM. As camadas de DCM combinadas são secas (MgS04), filtradas e evaporadas. 0 sólido resultante é recristalizado de DCM/heptano, para proporcionar a 5-bromo-N-ciclo-hexil-2-etilo-benzenossulfonamida (1,36 g) . LCMS: RT = 2,96 minutos, MS: 346 (M+H).

Passo 3. A 5-bromo-N-ciclo-hexil-2-etilbenzenossulfonamida (1,3 g), ácido l-Boc-indole-2-borónico (1,48 g) e fluoreto de césio (0,86 g) são misturados com 10:1 dioxano:H20 (44 mL) . A solução é desgaseifiçada com azoto e é adicionado PdCl2(dppf)2 (0,31 g) . A mistura é aquecida para 80 °C, durante 2,5 horas. A mistura reaccional é vertida em H20. É adicionado EtOAc e as camadas são separadas. A camada de EtOAc é concentrada. É adicionado heptano para proporcionar um precipitado que é removido por filtração. O filtrado de EtOAc é feito passar através de uma tampa de sílica, evaporado em sílica e purificado numa coluna de sílica de 80 g utilizando o sistema de purificação da ISCO Companion (gradiente de EtOAC/heptano), para proporcionar o éster terc-butílico do ácido 2-(3-Ciclo- hexilsulfamoil-4-etil-fenil) -índole-1-carboxílico_ácido (1,19 g). LCMS: RT = 3,54 minutos, MS: 483 (M+H).

Passo 4. O éster terc-butílico do ácido 2-(3-ciclo- hexilsulfamoil-4-etilo-fenil)-indole-l-carboxílico (1,18 g) é tratado com 10 mL de TFA durante 30 minutos, à temperatura ambiente. O TFA é removido sob pressão reduzida. O resíduo é particionado entre EtOAc e NaHC03 a 10% aquoso e as camadas são separadas. A camada orgânica é lavada com mais NaHC03 a 10% aquoso, água e solução salina concentrada. A camada orgânica é seca (MgS04), filtrada, evaporada em sílica e purificada numa coluna de sílica gel de 40 g utilizando um sistema de purificação da ISCO Companion (gradiente de EtOAC/heptano) para 83 proporcionar a N-ciclo-hexil-2-etil-5-(lH-indol-2-il)- benzenossulfonamida (0,65 g) . LCMS: RT = 3,07 minutos, MS: 383 (M+H).

Passo 5. A N-ciclo-hexil-2-etil-5-(lH-indol-2-il)-benzenossulf onamida (0,64 g) é suspensa emn 30 mL de éter dietilico. É adicionado, gota a gota, cloreto de oxalilo (0,32 g), à temperatura ambiente e a mistura é agitada, durante 6 horas. É adicionado metanol (2 mL), a solução é agitada, durante 10 minutos e o solvente é removido sob pressão reduzida. O material em bruto purificado numa coluna de sílica gel de 80 g, utilizando um sistema de purificação da ISCO Companion (gradiente de EtOAc/heptano) para proporcionar o éster metílico do ácido [2-(3-ciclo-hexilsulfamoil-4-etil-fenil)-4H-indol-3-il]oxo-acético (0,66 g) . LCMS: RT = 2,75 minutos, MS: 469 (M+H).

Passo 6. O Éster metílico do ácido [2-(3-Ciclo-hexilsulfamoil-4-etilo-fenil)-lH-indol-3-il]oxo-acético (0,63 g) é dissolvido em 10 mL de TFA. É adicionado, gota a gota, trietilsilano (0,31 g), à temperatura ambiente e a solução é agitada, durante 18 horas. A mistura reaccional é concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo é adicionado EtOAc e NaHC03 saturado e as camadas são separadas. A camada de EtOAc é evaporada em sílica gel e purificada numa coluna de sílica gel de 40 g utilizando um sistema de purificação da ISCO Companion (gradienet de EtOAc/heptano) para proporcionar o éster metílico do ácido [2-(3-ciclo-hexilsulfamoil-4-etilo-fenil)-lH-indol-3-il]-acético (0,53 g) . LCMS: RT = 2,95 minutos, MS: 455 (M+H); RMN de :H (300 MHz, CDC13) δ RMN de :H (300 MHz, CDCI3) δ 1,05-1,29 (m, 5H) , 1,37 (t, J=7, 5 Hz, 3H), cr» \—1 1 0 LO 1 1 (m, 5H), 3,14 (q, J=7,5 Hz, 2H) , 3,22 (m, 1H), 3, 73 (s, 3H), 3,84 (s, 2H), 4,55 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,16- 7,28 (m, 2H), 7,41 (d, J=8,1 Hz, 1H), 84 7,51 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,69 (d, J=7,7 Hz, 1H), 7,83 (dd, J=7,9, 1,8 Hz, 1H), 8,28 (d, J=l,9 Hz, 1H), 8,32 (s, 1H).

Passo 7. 0 éster metílico do ácido [2-(3-ciclo- hexilsulfamoil-4-etil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético (0,33 g) é dissolvido em 6 mL de MeOH:THF:H20 3:3:1. O mono-hidrato de LiOH (2 equiv.) é adicionado e a solução é aquecida para 80 °C de um dia para o outro. O solvente é evaporado sob pressão reduzida. É adicionado o EtOAc e HC1 a 10% aq. e as camadas são separadas. A camada de EtOAc é lavada com mais HC1 a 10% aq., água e solução salina concentrada. A camada orgânica é seca (MgS04), filtrada e evaporada e o resíduo é recristalizado de DCM/heptano para proporcionar o ácido [2-(3-ciclo-hexilsulfamoil-4-etil-fenil) -lH-indol-3-il]-acético como um sólido (193 mg). LCMS: RT = 2,6 minutos, MS: 441 (M+H); RMN de XH (300 MHz, DMSO-

De) δ 1,0 -1,24 (m, 5H), 1, 31 (t, J=7 ,5 Hz, 3H) , 1, 45- 1,62 (m, 5H), 3,05 (m, 1H), 3, 08 (q , J=7, 4 Hz , 2H), 3, 75 (s, 2H), 7,07 (t, J: = 7,8 Hz, 1H), 7,18 (t, J=7, 7 Hz, 1H), 7, 42 (d, J= =8 Hz, 1H), 7,59 (m, 2H), 7, 76 (d, J=7 ,9 Hz, 1H) , 7,87 (d, d = 7, 9 Hz, 1H) , 8,18 (s, 1H), 11, 46 (s, 1H), 12,37 (S, 1H) . IC50 = 0 ,5 nM 85

Exemplo 14: ácido 2-[2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3—i1]-propiónico

OH

Passo 1. A uma solução de ácido 1-(terc-butoxicarbonil)-indol-2-ilborónico (5,5 g), 5-bromo-2-cloro-N-ciclo-hexil-benzenossulfonamida (5 g) e CsF (4,3 g) em dioxano-H20 (143 mL, 10:1) é adicionado PdCl2(dppf)2 (1,16 g), à temperatura ambiente sob azoto. A reacção é aquecida para 80 °C e agitada, durante 18 horas. A mistura reaccional é concentrada in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e é filtrado através de uma coluna pequena de sílica. O filtrado é concentrado in vacuo e purificado por cromatografia flash em coluna de sílica gel eluída com 5% a 30% de EtOAc em heptano, para proporcionar o éster terc-butílico do ácido_2- (4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil) -indole-1- carboxílico como um sólido (6,2 g). LCMS: RT = 5,03 minutos, MS: 511 (M+Na).

Passo 2. É adicionado ácido trifluoroacético (10 mL) a uma solução de éster terc-butílico do ácido 2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-indole-l-carboxílico (6,2 mg) em diclorometano (20 mL) . A mistura reaccional é agitada, à temperatura ambiente, de um dia para o outro. A mistura é concentrada in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e lavado com NaHC03 1 N. A camada orgânica é separada, seca sob MgS04 e 86 concentrada para proporcionar a 2-cloro-N-ciclo-hexil-5-(1H-indol-2-il)-benzenossulfonamida como um sólido (5,3 g).

Passo 3. É lentamente adicionado o cloreto de oxalilo (1,59 mL) a uma solução de 2-cloro-N-ciclo-hexil-5-(lH-indol-2-il)-benzenossulfonamida (4,8 mg) em diclorometano (120 mL), à temperatura ambiente. Após agitação durante 3 h, é adicionado MeOH (10 mL) e agitado durante 15 minutos. A mistura é concentrada. O resíduo é purificado por cromatografia flash em coluna de sílica gel eluída com 5% a 50% de EtOAc em heptano, para proporcionar o éster metílico do ácido [2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-oxo-acético como um sólido (2, 5 g) .

Passo 4. É lentamente adicionado trietilsilano (1,7 mL) a uma solução de éster metílico do ácido [2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-oxo-acético (2,5 g) em ácido trifluoroacético (25 mL), à temperatura ambiente. Após agitação, de um dia para o outro, os voláteis foram removidos in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e lavados com NaHC03 1 N. A camada orgânica é separada, seca sob MgS04 e concentrada. O resíduo é purificado por cromatografia flash em coluna de sílica gel eluída com 10% a 50% de EtOAc em heptano, para proporcionar o éster metílico do ácido [2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético como um sólido (1,84 g). LCMS: RT=4,14 minutos, MS: 461 (M+H).

Passo 5. É adicionado o dicarbonato de Di-terc-butilo (807 mg) a uma solução de éster metílico do ácido [2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético (775 mg), trietilamina (0,52 mL) e 4-(dimetiloamino)piridina (42 mg) em DCM (17 mL) . A reacção é agitada, à temperatura ambiente, 87 durante 2 dias. A mistura reaccional é lavada com HC1 1 N (10 mL) e NHC03 1 N (10 mL) . A camada orgânica é separada, seca sob MgSCg e concentrada para proporcionar o éster terc-butílico do ácido_2- [4-cloro-3- (N-terc-butiloxicarbonil) -ciclo- hexilsulfamoil-fenil]-3-metoxicarbonilmetil-indole-l-carboxílico (1,03 g) .

Passo 6. A uma solução de éster terc-butilico do ácido 2-[4-cloro-3-(N-terc-butiloxicarbonil)-ciclo-hexilsulfamoil-fenil]-3-metoxicarbonilmetil-indole-l-carboxílico (864 mg) em DMF (13 mL), é adicionado, em porções, NaH (157 mg) a 0 °C. A mistura resultante é agitada, a 0 °C, durante 15 minutos e é adicionado Mel (0,82 mL) a 0 °C. A mistura reaccional é deixada a aquecer para a temperatura ambiente e é agitada, durante 3 h. A reacção é atenuada por adição de NH4CI saturado (10 mL). A mistura é extraida com EtOAc (20 mL) . A camada orgânica é lavada com água (10 mL) 3 vezes, separada, seca sob MgS04 e concentrada. 0 residuo é purificado por cromatografia flash em coluna de sílica gel eluída com 10% a 45% de EtOAc em heptano, para proporcionar éster terc-butílico do ácido 2-[4-cloro-3-(N-terc-butiloxicarbonil) -ciclo-hexilsulfamoil-fenil] -3-(1-metoxicarbonil-etil)-indole-l-carboxílico como um sólido branco (400 mg). LCMS: RT = 4,3 minutos, MS: 675 (M+H).

Passo 7. É adicionado ácido trifluoroacético (2 mL) a uma solução de éster terc-butílico do ácido 2-[4-cloro-3-(N-terc- butiloxicarbonil) -ciclo-hexilsulfamoil-fenil]-3-(1-metoxicarbonil-etil)-indole-l-carboxílico (165 mg) em diclorometano (4 mL) . A mistura reaccional é agitada, à temperatura ambiente, durante 4 horas. A mistura é concentrada in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e lavado com NaHC03 1 N. A camada orgânica é separada, seca sob MgS04 e concentrada. 88 0 resíduo é purificado por cromatografia flash em coluna de sílica gel, eluída com 10% a 50% de EtOAc em heptano, para proporcionar o éster metílico do ácido 2-[2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-propiónico como um sólido branco (94 mg). LCMS: RT = 3,2 minutos, MS: 475 (M+H).

Passo 8. A uma solução de éster metílico do ácido 2-[2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il] -propiónico (94 mg) em Me0H/H20 (1:1, 2 mL) é adicionado mono-hidrato de hidróxido de lítio (17 mg). A mistura reaccional é agitada, a 80 °C, durante 2 h. É adicionado EtOAc (10 mL) e a solução é lavada com HC1 1 N (5 mL) . A camada orgânica é separada, seca sob MgS04 e concentrada, para proporcionar o ácido 2-[2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il] -propiónico como um sólido (90 mg). LCMS: RT = 2,88 minutos, MS: 461 (M+H); RMN de XH (300 MHz, DMSO) δ 1,15-1,37 (m, 5H), 1,51-

1, 71 (m, 8H), 3,13 (m, 1H), 4, 06 (m, 1H), 7 ,02 (t, J=7,2 Hz, 1H) , 7,14 (t, J=6, 9 Hz, 1H), 7, 38 (d, J=8,1 Hz, 1H) , 7,67 (m, 2H) , 7,84 (d, J=8,1 Hz, 1H), 8 ,37 (s , 1H) . IC50 = 5, ,3 nM 89

Exemplo 15: Ácido {2-[4-cloro-3-(3-cloro-fenilmetanossulfonil)-fenil]-lH-indol-3-il}-acético

Passo 1. 0 sulfito de sódio (1,7 g) e fosfato de sódio dibásico (0,98 g) são dissolvidos em 20 mL de água e aquecidos para 30 °C até estarem todos numa solução. É adicionado cloreto de 5-bromo-2-cloro-benzenossulfonilo (2 g) e a mistura reaccional é aquecida para 60 °C, de um dia para o outro. A mistura reaccional é arrefecida e é adicionado, gota a gota, l-bromometil-3-clorobenzeno (1,4 g) é adicionado como uma solução em 20 mL de acetona. A mistura é aquecida para 60 °C, durante 2 horas e arrefecida para a temperatura ambiente. A mistura reaccional é particionada entre EtOAc e água e as camadas são separadas. A camada aquosa é lavada com mais EtOAc. As camadas orgânicas combinadas são lavadas com água e solução salina concentrada. A camada orgânica é seca (MgS04), filtrada e evaporada. O material em bruto é recristalizado de EtOAc/heptano, para proporcionar o 4-bromo-l-cloro-2-(3-cloro-fenilmetanossulfonil)-benzeno (1,47 g) . LCMS: RT = 2,8 minutos, MS: 379 (M+Na), RMN de XH (300 MHz, CDC13) δ 4,37 (s, 2H), 6,70 (brs, 1H), 7,15-7,35 (m, 6H), 7,73 (d, J=2 Hz, 1H). 90

Passo 2. A uma solução de 4-bromo-l-cloro-2-(3-cloro-fenilmetanossulfonil)-benzeno (1 g), ácido 1-(terc-butoxicarbonil)-indol-2-ilborónico (1 g), e fluoreto de césio (0,6 g) em 22 mL de 10:1 dioxano:água é adicionado PdCl2(dppf)2 (0,216 g), à temperatura ambiente, sob azoto. A reacção é aquecida para 80 °C, de um dia para o outro. Após arrefecimento, a mistura reaccional é vertida em água e extraída com EtOAc. A camada orgânica é concentrada e é adicionado heptano para proporcionar um precipitado que é filtrado. O filtrado é feito passar através de uma tampa de sílica e é, depois, evaporado em sílica gel. O material em bruto é purificado por cromatografia flash em sílica (EtOAc/heptano), para proporcionar o éster terc-butílico do ácido 2-[4-cloro-3-(3-cloro-fenilmetanossulfonil)-fenil]-indole-l-carboxílico (0,84 g). LCMS: RT = 3,42 minutos, MS: 516 (M+Na).

Passo 3. É adicionado ácido trifluoroacético (10 mL) ao éster terc-butílico do ácido 2-[4-cloro-3-(3-clorofenilmetanossulfonil)-fenil]-indole-l-carboxílico (0,79 g) e a solução resultante é misturada durante 35 minutos, à temperatura ambiente. A mistura é concentrada in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e lavado com NaHC03 a 10%. A camada orgânica é seca (MgS04), filtrada, evaporada em sílica gel e purificada por cromatografia flash em sílica gel (EtOAc/heptano) para proporcionar o 2-[4-cloro-3-(3-cloro-fenilmetanossulfonil)-fenil]-lH-indole (0,49 g) . LCMS: RT = 3 minutos, MS: 416 (M+Na).

Passo 4. A uma suspensão de 2-[4-cloro-3-(3-cloro-fenilmetanossulfonil) -fenil]-lH-indole (0,48 g) em 25 mL de Et20 é adicionado, gota a gota, cloreto de oxalilo (0,22 g), à temperatura ambiente. Após 7 horas, é adicionado mais cloreto de oxalilo (0,22 g) e a mistura é agitada de um dia para o outro. É 91 adicionado, gota a gota, metanol (2 mL) e a mistura é agitada, durante 10 minutos. A mistura reaccional é vertida em água e extraída com EtOAc. A camada orgânica é lavada com NaHCC>3 aquoso e solução salina concentrada. A camada orgânica é seca (Na2S04), filtrada e evaporada em silica gel. O material em bruto é purificado por cromatografia flash em sílica gel (EtOAc/heptano), para proporcionar o éster metílico do ácido {2-[4-cloro-3-(3-clorofenilmetanossulfonil)-fenil]-lH-indol-3-il}-oxo-acético (0,43 g) . LCMS: RT = 2,73 minutos, MS: 502 (M+Na).

Passo 5. O trietilosilano (0.23 g) é adicionado, gota a gota, a uma solução de éster metilico do ácido {2-[4-cloro-3-(3-clorofenilmetanossulfonil)-fenil]-lH-indol-3-il}-oxo-acético (0,5 g) em 10 mL de ácido trifluoroacético. Após agitação durante 5 horas a mistura reaccional é concentrada sob pressão reduzida: O resíduo é particionado entre EtOAc e NaHC03 sat. A camada orgânica é evaporada em sílica gel e purificada por cromatografia flash em sílica gel (EtOAc/heptano), para proporcionar o éster metílico do ácido {2-[4-cloro-3-(3-clorofenilmetanossulfonil) -fenil]-lH-indol-3-il}-acético (0,34 g). LCMS: RT = 2,86 minutos, MS: 488 (M+Na).

Passo 6. A uma solução de éster metílico do ácido (2-[4-Cloro-3-(3-cloro-fenilmetanossulfonil)-fenil]-lH-indol-3-il}-acético (0,3 g) em 14 mL de 3:3:1 THF:MeOH:H20, é adicionado hidróxido de lítio (0, 077 g) . A solução é agitada, a 80 °C, de um dia para o outro. O solvente e removido sob pressão reduzida e é adicionado HC1 a 10% aquoso ao resíduo. A camada aquosa é extraída duas vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas são secas (MgS04), filtrada e evaporada para proporcionar o ácido (2-[4-cloro-3-(3-cloro-fenilmetanossulfonil)-fenil]-lH-indol-3- 92

il}-acético (210 mg). LCMS: RT = 2,43 minutos, MS: 474,1 (M+Na). RMN de 1H (300 MHz, DMSO) δ 3,61(s, 2H), 4,97 (s, 2H), 7,08 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,21 (m, 2H), 7,34-7,44 (m, 4H), 7,57 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7, 95-8, 05 (m, 2H), 8,37 (d, J=2 Hz, 1H), 11,58 (s, 1H), 12,43 (s, 1H) . IC50 = 106 nM

Exemplo 16: Ácido_{2-[4-cloro-3-(3-cloro-fenilmetanossulfonilamino)- fenil]-lH-indol-3-il}-acético

Passo 1. Ao sal de cloridrato de 5-bromo-2-cloro-fenilamina (0,81 g) em 20 mL de DCM é adicionado Et3N (0,85 g) e a solução é arrefecida para 0 °C. O cloreto de 3-clorofenilmetanossulfonilo (0,75 g) é adicionado em porções como uma solução em 5 mL de DCM. A mistura é deixada a aquecer para a temperatura ambiente e é agitada de um dia para o outro. O solvente é removido sob pressão reduzida e o residuo é dissolvido de novo em EtOAc. O EtOAc é extraído com HC1 a 10% aquoso, Na2C03 saturado e solução salina concentrada. A camada orgânica é seca (MgS04), filtrada, evaporada em sílica gel e purificada por cromatografia flash em sílica gel (EtOAc/heptano), para proporcionar a N-(5-bromo-2-cloro-fenil)-C-(3-cloro-fenil)-metanossulfonamida (1,56 g). LCMS: RT = 2,77 minutos, MS: 394 (M+Na). 93

Passo 2. A uma solução de N-(5-bromo-2-cloro-fenil)-C-(3-cloro-fenil)-metanossulfonamida (0,6 g), ácido 1-(terc-butoxicarbonil)-indol-2-ilborónico (0,6 g) e fluoreto de césio (0,35 g) em dioxano:água 10:11 (11 mL), é adicionado PdCl2(dppf)2 (0,125 g) sob azoto. A mistura é aquecida para 80 °C, durante 3 horas. Após arrefecimento, a mistura reaccional é vertida em água e extraida com EtOAc. A camada orgânica é concentrada e é adicionado heptano para proporcionar um precipitado que é filtrado. O filtrado é feito passar através de uma tampa de silica e evaporada em silica gel. O material em bruto é purificado por cromatografia flash em sílica gel (EtOAc/heptano), para proporcionar o éster terc-butílico do ácido 2-[4-cloro-3-(3-cloro-fenilmetanossulfonilamino)-fenil]-indole-l-carboxílico (0,73 g) . LCMS: RT = 3,36 minutos, MS: 531 (M+Na).

Passo 3. É adicionado ácido trifluoroacético (10 mL) a éster terc-butílico do ácido 2-[4-cloro-3-(3-cloro-fenilmetanossulfonilamino)-fenil]-indole-l-carboxílico (0,70 g) e a solução resultante é agitada, à temperatura ambiente, durante 1 hora. A mistura é concentrada in vacuo. O resíduo é dissolvido em EtOAc e lavado com NaHC03 a 10%. A camada orgânica é seca (MgS04), evaporada em sílica gel e purificada por cromatografia flash em sílica gel (EtOAc/heptano), para proporcionar a N-[2-cloro-5-(lH-indol-2-il)-fenil]-C-(3-cloro-fenil)-metanossulfonamida (0,56 g) . LCMS: RT = 2,93 minutos, MS: 431 (M+Na).

Passo 4. A uma suspensão de N-[2-cloro-5-(lH-indol-2-il) -fenil]-C-(3-cloro-fenil)-metanossulfonamida (0,51 g) em 30 mL de DCM é adicionado, gota a gota, cloreto de oxalilo (0,23 g), à temperatura ambiente. Após agitação durante 2 horas, é 94 adicionado, gota a gota, metanol (2 mL) e a mistura é agitada, durante 10 minutos. A mistura reaccional é, depois, evaporada em sílica gel e purificada por cromatografia flash em sílica gel (EtOAc/heptano), para proporcionar o éster metílico do ácido {2-[4-cloro-3-(3-cloro-fenilmetanossulfonilamino)-fenil]-1H-indol-3-il}-oxo-acético (0,46 g) . LCMS: RT = 2,6 7 minutos, MS: 517 (M+Na).

Passo 5. É adicionado, gota a gota, trietilosilano (0,19 g) a uma solução de éster metílico do ácido {2-[4-cloro-3-(3-cloro-fenilmetanossulfonilamino)-fenil]-lH-indol-3-il}-oxo-acético (0,42 g) em 10 mL de ácido trifluoroacético. A mistura é agitada, durante 6 horas. É adicionado mais trietilsilano (0,1 g) e a solução é agitada de um dia para o outro, à temperatura ambiente. A mistura é, depois, concentrada sob pressão reduzida e o resíduo é particionado entre EtOAc e NaHC03 sat. A camada orgânica é evaporada em sílica gel e purificada por cromatografia flash em sílica gel (EtOAc/heptano), para proporcionar o éster metílico do ácido {2-[4-cloro-3-(3-cloro-fenilmetano-sulfonilamino)-fenil]-lH-indol-3-il}-acético (0,3 g). LCMS: RT = 2,86 minutos, MS: 503 (M+Na).

Passo 6. A uma solução de éster metílico do ácido {2-[4-cloro-3-(3-cloro-fenilmetanossulfonilamino)-fenil]-1H-indol-3-il]-acético (0,24 g) em 3:3:1 THF:MeOH:H20 (14 mL), é adicionado hidróxido de lítio (0,041 g) . A solução é agitada, a 80 °C, de um dia para o outro. São adicionados mais 2 equivalentes de hidróxido de lítio e o aquecimento mantêm-se durante 6 h até a reacção estar completa. O solvente é removido sob pressão reduzida e é adicionado HC1 a 10% aquoso ao resíduo. A mistura é extraída duas vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas são secas (MgS04), filtradas, evaporadas em sílica gel 95 e purificadas por cromatografia flash em silica gel (EtOAc/heptano), para proporcionar o ácido {2-[4-cloro-3-(3- cloro-fenilmetanossulfonilamino)-fenil}-lH-indol-3-il}-acético

(186 mg) . LCMS: RT = 2,53 minutos, MS: 489 (M+Na) . RMN de XH (300 MHz, DMSO) δ 3,78 (s, 2H), 4,67 (s, 2H), 7,07 (t, J=7,2 Hz, 1H) , 7,19 (t, J=7,3 Hz, 1H), 7,40-7,46 (m, 4H) , 7,51 (S, 1H), 7,57 (m, 2H), 7,70 (d, J=8,2 Hz, 1H) , 7, 83 (s, 1H), 9,75 (s, 1H), 11, 44 (s, 1H), 12,44 (s, 1H) . IC50 = 12 nM

TESTES FARMACOLÓGICOS

Os efeitos inibidores dos compostos de acordo com a invenção são avaliados num ensaio funcional do DP humano. É empregue um ensaio de AMPc, utilizando a linha celular LS174T humana que expressa o receptor da DP endógeno. 0 protocolo é semelhante ao descrito previamente (Wright DH, Ford-Hutchinson AW, Chadee K, Metters KM, The human prostanoid DP receptor stimulates mucin secretion in LS174T cells, Br J Pharmacol. 131(8):1537-45 (2000)).

Protocolo para o Ensaio de AMPc SPA em Células T LS174

Humanas

Materiais • PGD2 (Cayman Chemical N° Cat. 12010) • IBMX (Sigma N° Cat. 5879) 96 • Sistema de ensaio de varrimento directo de AMPc SPA (Amersham código RPA 559) • Placas de células de 96-poços (Wallac N° Cat. 1450-516) • contador de cintilação Wallac 1450 Microplate Trilux (PerkinElmer) • Selantes de placa • Tubos Eppendorf • Solução Salina Tamponada com Fosfatos de Dulbecco (PBS) (Invitrogen N° Cat. 14040-133) • Água destilada • Vortex • Agitador magnético e barras magnéticas

Preparação do Reagente:

Todos os reagentes deverão ser deixados em equilíbrio, à temperatura ambiente, antes da reconstituição.

Tampão de ensaio 1 X

Transferência de conteúdos da garrafa para um cilindro graduado de 500 mL por lavagem repetidas com água destilada. 97

Ajustar o volume final para 500 mL com água destilada e misturar completamente.

Reagente de lise 1 e 2

Dissolver cada um dos reagentes de lise 1 e 2 em 200 mL de tampão respectivamente. Deixar à temperatura ambiente, durante 20 minutos para dissolver.

Contas SPA anti-coelho

Adicional 30 mL de tampão de lise ao recipiente. Agitar ligeiramente o recipiente durante 5 minutos.

Antisoro

Adicionar 15 mL de tampão de lise 2 a cada frasquinho e misturar, delicadamente, até os conteúdos estarem completamente dissolvidos.

Marcador (I125-cAMP)

Adicionar 14 mL de tampão de lise 2 a cada frasquinho e misturar gentilmente até os conteúdos estarem completamente dissolvidos. 98

Preparação de imunorreagentes 1) Adicionar volumes iguais de marcador, antissoro e reagente SPA anti-coelho a um recipiente, garantindo que é preparado um volume suficiente desta mistura para o número desejado de poços (150 pL/poço). 2) Misturar completamente. 3) Esta solução de imunorreagente deverá ser preparada de fresco antes de cada ensaio e não deverá ser reutilizada.

Padrão 1) Adicionar 1 mL de tampão de lise 1 e misturar gentilmente até os conteúdos estarem completamente dissolvidos. 2) A solução final contém AMPc a uma concentração de 512 pmol/mL. 3) Marcar 7 tubos de polipropileno ou poliestireno, 0,2 pmol, 0,4 pmol, 0,8 pmol, 1,6 pmol, 3,2 pmol, 6,4 pmol e 12,8 pmol. 4) Pipetar 500 pL de tampão de lise 1 em todos os tubos. 5) No tubo de 12,8 pmol pipetar 500 pL de padrão stock (512 pmol/mL) e misturar completamente. Transferir 500 pL do tubo 12,8 pmol para o tubo 6,4 pmol e misturar 99 intensamente. Repetir esta dupla diluição sucessivamente com os restantes tubos. 6) 50 pL de aliquotas em duplicado de cada diluição em série e da solução padrão irá proporcionar 8 niveis de padrão de AMPc variando de 0,2-25,6 pmol de padrão.

Tampão de diluição do composto

Adicionar 50 pL de ibmx 1 mM a 100 mL de PBS, para perfazer uma concentração final de 100 μΜ e sonicar, a 30 °C, durante 20 minutos.

Preparação de PGD2

Dissolver 1 mg de PGD2 (FW, 352,5) em 284 pL de DMSO para perfazer a solução de stock de 10 mM e armazenar a 20 °C. Antes de cada ensaio, esta é preparada de fresco. Adicionar 3 pL de solução stock a 10 mM a 20 mL de DMSO, misturar completamente e transferir 10 mL para 40 mL de PBS.

Diluição do Composto A diluição do composto é efectuada num Biomex 2000 (Beckman), utilizando o Método 1-AMPc DP 11 pontos. São transferidos 5 pL de cada composto de placas de composto de stock a 10 mM para os poços de uma placa de 96 poços, respectivamente como apresentado abaixo. 100 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A 1 B 2 C 3 D 4 E 5 F 6 G 7 H referência

Encher a placa com 45 pL de DMSO, excepto a coluna 7 que é preenchida com 28 pL de DMSO. Pipetar a coluna 1 completamente e transferir 12 pL para a coluna 7 paralelamente. Efectuar uma diluição em série de 1:10 da coluna 1 para a coluna 6 e da coluna 7 para a coluna 11 por transferência de 5 pL para 45 pL de DMSO para preparar as seguintes concentrações:

Primeira Palc Concentração Final Coluna 12 0 Coluna 11 0,03 pM Coluna 10 0,3 pM Coluna 9 3 pM Coluna 8 0,03 mM Coluna 7 0,3 mM Coluna 6 0,01 pM Coluna 5 0, 1 pM Coluna 4 1 pM Coluna 3 0,01 mM Coluna 2 0,1 mM Coluna 1 1 mM 101

Encher uma nova placa de 96 poços com 247,5 pL de tampão de diluição de composto. Transferir 2,5 pL de compostos diluídos em série da placa anterior para a nova placa (diluições 1:100) como se segue:

Primeira placa Segunda placa Concentração Final Coluna 12 Coluna 1 0 Coluna 6 Coluna 2 0,1 nM Coluna 11 Coluna 3 0,3 nM Coluna 5 Coluna 4 1 nM Coluna 10 Coluna 5 3 nM Coluna 4 Coluna 6 0,01 pM Coluna 9 Coluna 7 0,03 pM Coluna 3 Coluna 8 0,1 pM Coluna 8 Coluna 9 0,3 pM Coluna 2 Coluna 10 1 pM Coluna 7 Coluna 11 3 pM Coluna 1 Coluna 12 10 pM

Crescimento das Células 1. As células T LS174 são sempre crescidas em MEM (ATCC N°

Cat. 30-2003), FBS a 10% (ATCC N° Cat. 30-2020) e L- glutamina adicional 2 mM, a 37 °C e C02 a 5% 2. Aquecer a Tripsina a 0,05% e Versina (Invitrogen N° Cat. 25300-054) a 37 °C em banho-maria.

3. Remover o meio de crescimento das células. As células em frascos T165 são lavadas duas vezes com Tripsina a 4 mL 102 seguidas por incubação a 37 °C e C02 a 5% durante 3 minutos. 4. Adicionar 10 mL de meio e pipetar completamente para separar as células e contar as células. 5. Preparar uma densidade celular 2,25 x 101 2 3 4 5 células/mL e semear 200 pL de células/poço (45000 células/poço) em placas de 96 poços 1 dia antes do ensaio.

Processo de Ensaio 103 1

Dia 1 Semear 45000 células/poço em 200 pL de meio em placas de 96 poços. Incubar as placas celulares a 37 °C, C02 a 5% e 95% de humidade, de um dia para o outro.

Dia 2 1. Efectuar a diluição do composto. 2

Preparar o tampão de ensaio, tampão de lise 1 e 2, PGD2 e padrão. 3

Aspirar o meio das células e adicionar 100 pL de solução de composto utilizando o protocolo de AMPc DP da Zymark Sciclone-ALH/FD. 4

Incubar as células a 37 °C, C02 A 5% e 95% de 5 humidade durante 15 minutos. 5. Adicionar 5 pL de PGD2 300 nM (concentração final de 20X 15 nM) a cada poço utilizando o protocolo de AMPc de DP da PGD2 da Zymark e incubar as células a 37 °C, C02 a 5% e 95% de humidade durante mais 15 minutos. 6. Aspirar o meio das células e adicionar 50 pL de tampão de lise , utilizando o protocolo de cAMP de DP de Zymark e incubar à temperatura ambiente com agitação durante 30 minutos. 7. Adicionar 150 pL de imunorreagente a todos os poços (um volume total de 200 pL/poço). 8. Selar as placas e agitar durante 2 minutos, colocar na câmara do contador de cintilação μ de placas de microtitulação da Wallac durante 16 horas.

Dia 3 Contar a quantidade de [125l]AMPc durante 2 minutos num contador de cintilação 1450 Trilux. 104

Processamento dos Dados

Programar a curva padrão do AMPc versus CPM.

Tabela 1. Ensaio típico para o padrão AMPc (pmol/mL) CPM CPM Médio 0, 2 5725 5769 5530 0,4 5367 5259 6317 0, 8 4695 4796 6507 1,6 4251 4178 6581 3,2 3434 3429 6601 6,4 2758 2716 6711 12,8 2094 2054 6680 25,6 1531 1573 6653

As concentrações de AMPc (pmol/mL) das amostras desconhecidas é calculado a partir de uma curva padrão de AMPc versus CPM. % de inibição é calculada utilizando a seguinte fórmula:

% de inibição = (pmol do controlo - pmol da amostra)xlOO pmoç do controlo (células + PGD2 individual) A presente invenção pode ser realizada noutras formas específicas.

Lisboa, 23 de Dezembro de 2010 105

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Composto de fórmula (A), em que: R é r1ch2so2-, r2ch2so2nh- OU r3nhso2-, R1 é fenilo opcionalmente substituído com halo, R2 é fenilo substituído com halo, R3 é 2,6-dicloro-benzilo, 3,5-dicloro-benzilo, 2,4-dicloro-feniletilo, 2-metoxi-feniletilo, 3-metoxi-feniletilo, 4-metoxi-feniletilo, 2-trifluorometil-feniletilo, feniletilo ou 3-fenil-n- propilo, R4 é hidrogénio, R5 é cloro, R6 é hidrogénio e R8 é hidroxilo; ou 1 R é ciclo-hexilaminossulfonilo R4 é 4-cloro, 4-fluoro, 4-metilo ou 7-cloro, R5 é cloro ou etilo, R6 é hidrogénio ou metilo, e R8 é hidroxilo; ou R é ciclo-hexilaminossulfonilo, R4 é hidrogénio, R5 é cloro, R6 é hidrogénio, R8 é -NHR7, e R7 é metilo, metilsulfonilo, etilsulfonilo, haloalquilsulfonilo ou tetrazolilo; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável , hidrato ou solvato, um seu profármaco de éster farmaceuticamente aceitável, ou um sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável do profármaco de éster.
2. Composto de acordo com a reivindicação 1, o qual é um composto de fórmula (I): 2

(I) em que: R é R1CH2S02-, R2CH2S02NH- ou R1NHS02-; R1 é fenilo opcionalmente substituído com halo; R2 é fenilo substituído com halo; e R1 é 2,6-dicloro-benzilo, 3,5-dicloro-benzilo, 2,4-dicloro-feniletilo, 2-metoxi-feniletilo, 3-metoxi-feniletilo, 4-metoxi-feniletilo, 2-trifluorometil-feniletilo, feniletilo ou 3-fenil-n-propilo; ou um seu sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável, um seu profármaco de éster farmaceuticamente aceitável, ou um sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável do profármaco de éster. 3 1 Composto de acordo com a reivindicação 2, em que R é R1NHS02-, ou um seu sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável, um seu profármaco de éster farmaceuticamente aceitável, ou um sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável do profármaco de éster.
4. Composto de acordo com a reivindicação 1, o qual é um composto de fórmula (II) :

em que: R4 é 4-cloro, 4-fluoro, 4-metilo ou 7-cloro; R5 é cloro ou etilo; e R1 é hidrogénio ou metilo; ou um seu sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável, um seu profármaco de éster farmaceuticamente aceitável, ou um sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável do profármaco de éster.
5. Composto de acordo com a reivindicação 4, em que R5 é cloro e R1 é hidrogénio, ou um seu sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável, um seu profármaco de éster farmaceuticamente aceitável, ou um sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável do profármaco de éster. 4 1 Composto de acordo com a reivindicação 1, o qual é um composto de fórmula (III):

em que: R7 é metilo, metilsulfonilo, etilsulfonilo, haloalquilsulfonilo ou tetrazolilo, ou um seu sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável, um seu profármaco de éster farmaceuticamente aceitável, ou um sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável do profármaco de éster.
7. Composto de acordo com a reivindicação 1, o qual é seleccionado de Ácido {2- [4-cloro-3-(2,6-dicloro-benzilsulfamoil)-fenil]-1H-indol-3-il}-acético, Ácido {2- [4-cloro-3-(3,5-dicloro-benzilsulfamoil)-fenil]-1H-indol-3-il}-acético, Ácido (2-{4-cloro-3-[2-(2,4-dicloro-fenil)-etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-acético, Ácido (2-{4-cloro-3-[2-(2-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]- fenil}-lH-indol-3-il)-acético, 5 Ácido (2-{4-cloro-3-[2-(3-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]- fenil} - lH-indol-3-il)-acético, Ácido (2-{4-cloro-3-[2-(4-metoxi-fenil)-etilsulfamoil]- fenil} - lH-indol-3-il)-acético, Ácido (2-{4-cloro-3-[2-(2-trifluorometoxi-fenil)- etilsulfamoil]-fenil}-lH-indol-3-il)-acético, Ácido [2-(4-cloro-3-fenetilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético, Ácido {2-[4-cloro-3-(3-fenil-propilsulfamoil)-fenil]-lH- indol-3-il}-acético, 2- [2- (4-Cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-N-metil-acetamida, Ácido [4-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-1H-indol-3-il]-acético, [4-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol- 3- il]-acetato de potássio, Ácido [2- (4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-4-fluoro-lH-indol-3-il]-acético, Ácido [2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-4-metil-lH-indol-3-il]-acético, Ácido [7-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-1H-indol-3-il]-acético, 6 2-Cloro-N-ciclo-hexil-5-[3-(2-metanossulfonilamino-2-oxo-etilo)-lH-indol-2-il]-benzenossulfonamida, 2-Cloro-N-ciclo-hexil-5-[3-(2-etanossulfonilamino-2-oxo-etil)-lH-indol-2-il]-benzenossulfonamida, 2-Cloro-N-ciclo-hexil-5-[3-(2-oxo-2- trifluorometanossulfonilamino-etil)-lH-indol-2-il]- benzenossulfonamida, 2- [2-(4-Cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-N-(lH-tetrazol-5-il)-acetamida, Ácido [2-(3-ciclo-hexilsulfamoil-4-etil-fenil)-lH-indol-3-il]-acético, Ácido 2- [2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol- 3- il]-propiónico, ácido {2-[4-cloro-3-(3-cloro- fenilmetanossulfonil)-fenil]-lH-indol-3-il}-acético ou ácido {2-[4-cloro-3-(3-cloro-fenilmetanossulfonilamino)-fenil]-1H-indol-3-il}-acético, ou um seu sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável, um seu profármaco de éster farmaceuticamente aceitável, ou um sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável do profármaco de éster.
8. Sal farmaceuticamente aceitável do composto de acordo com a reivindicação 1 é o [4-cloro-2-(4-cloro-3-ciclo-hexilsulfamoil-fenil)-lH-indol-3-il]-acetato de potássio. 7
9. Composição farmacêutica compreendendo uma quantidade farmaceuticamente eficaz do composto de acordo com a reivindicação 1, ou um seu sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável, um seu profármaco de éster farmaceuticamente aceitável, ou um sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável do profármaco de éster, em mistura com um veiculo farmaceuticamente aceitável.
10. Utilização do composto de acordo com a reivindicação 1, ou um seu sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável, um seu profármaco de éster farmaceuticamente aceitável, ou um sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável do profármaco de éster para a preparação de um medicamento para tratar uma doença alérgica, mastocitose sistémica, um distúrbio acompanhado por activação sistémica dos mastócitos, choque anafilático, broncoconstrição, bronquite, eczema, doenças acompanhadas por comichão, uma doença que é produzida secundariamente como resultado do comportamento acompanhado por acto de coçar, doenças pulmonares obtrutivas crónicas, lesão de isquémia- reperfusão, acidente vascular cerebral, artrite reumatóide crónica, pleurisia ou colite ulcerosa.
11. Utilização de acordo com a reivindicação 10, em que o comportamento acompanhado por acto de coçar é a coceira ou o traumatismo.
12. Utilização de acordo com a reivindicação 10, em que a doença a qual é produzida secundariamente como um resultado de comportamento acompanhado por acto de coçar, é a catarata, descolamento da retina, inflamação, infecção ou distúrbios de sono. 8
13. Utilização de acordo com a reivindicação 10, em que a doença alérgica é a rinite alérgica, conjuntivite alérgica, dermatite atópica, asma brônquica ou alergia aos alimentos.
14. Utilização de acordo com a reivindicação 10, em que a doença acompanhada por acto de coçar é a dermatite atópica ou urticária.
15. Composição farmacêutica compreendendo uma quantidade farmaceuticamente eficaz de um composto de acordo com a reivindicação 1, um composto seleccionado do grupo consistindo de um anti-histamínico, um antagonista do leucotrieno, um agonista beta, um inibidor do PDE4, um antagonista de TP e um antagonista de CrTh2, em mistura com um veiculo farmaceuticamente aceitável.
16. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 15, em que o anti-histaminico é a fexofenadina, loratadina, desloratadina ou cetirizina, o antagonsita do leucotrieno é o montelucaste ou zafirlucaste o agonista beta é o albuterol, skalbuterol ou terbutalina, o inibidor de PDE4 é o roflumilast ou cilomilast, o antagonista de TP é o Ramatroban e o antagonista de CrTh2 é o Ramatroban.
17. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou um seu sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável, um seu profármaco de éster farmaceuticamente aceitável, ou um sal, hidrato ou solvato farmaceuticamente aceitável do profármaco de éster, para utilização no tratamento de uma doença alérgica, em particular, rinite alérgica, conjuntivite alérgica, dermatite atópica, profármaco de éster ou alergia aos alimentos, mastocitose sistémica, um 9 distúrbio acompanhado por activação sistémica dos mastócitos, choque anafilático, broncoconstrição, bronquite, eczema, doenças acompanhadas por comichão, seleccionada de dermatite ou urticária, uma doença que é produzida secundariamente como resultado do comportamento acompanhado por acto de coçar, em particular cataratas, descolamento da retina, inflamação, infecção ou distúrbios de sono, em que o comportamento acompanhado por acto de coçar é a coceira ou traumatismo, doenças pulmonares obstrutivas crónicas, lesão de isquémia-reperfusão, acidente vascular cerebral, artrite reumatóide crónica, pleurisia ou colite ulcerosa. Lisboa, 23 de Dezembro de 2010 10