PT1913946E

PT1913946E - Agente terapêutico e método de tratamento para melhorar a uremia

Info

Publication number: PT1913946E
Application number: PT67679829T
Authority: PT
Inventors: Masahiko Takenaka; Yoshihisa Yamane; Nobutaka Ida; Hajimu Kurumatani
Original assignee: Toray Industries
Priority date: 2005-07-08
Filing date: 2006-07-07
Publication date: 2014-04-28
Also published as: US9913825B2; US20170224652A1; WO2007007668A1; CA2618708A1; EP1913946A1; AU2006267613B2; EP1913946A4; CA2618708C; CN101217960B; KR20080024203A; US9783518B2; ES2451627T3; JPWO2007007668A1; PL1913946T3; CN101217960A; EP1913946B1; US20090143463A1; KR101300003B1; JP5018478B2; AU2006267613A1

Description

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DESCRIÇÃO

"AGENTE TERAPÊUTICO E MÉTODO DE TRATAMENTO PARA MELHORAR A UREMIA"

Campo Técnico A presente invenção diz respeito a uma substância para utilização no tratamento de uremia num paciente que sofre de insuficiência renal crónica.

Antecedentes da Invenção

A uremia é uma sindrome que mostra vários sintomas clínicos que resultam de disfunções de vários órgãos e tecidos, causadas pelos componentes tóxicos na urina acumulada no sangue. A uremia ocorre quando a urina não pode ser excretada do corpo devido a uma falha da função renal, independentemente da doença primária. A uremia tem uma grande variedade de sintomas clínicos, incluindo anormalidades gastrointestinais tais como anorexia, náusea, vómitos, estomatite e enterite; anormalidades do sistema nervoso, tais como apatia, indiferença, deterioração da memória, estado deprimido e coma; anormalidades circulatórias tais como anemia, perturbações eritropoiéti-cas, hipertensão, doenças isquémicas do coração, pericardite e miocardite; pigmentação; prurido; anormalidades da pele tais como hemorragia subcutânea e assim por diante. A 2 ΡΕ1913946 uremia é causada por substâncias urémicas acumuladas no sangue. Pensa-se que existem várias dezenas ou mais de substâncias urémicas no presente, incluindo, por exemplo, metilguanidina, compostos de índole, malonodialdeído, creatinina, ácido β-aminoisobutírico, inibidores de trans-cetolase, poliaminas, inibidores lipoliticos, ureia e fenóis (ver, por exemplo, Literatura Não de Patente 1).

Contudo, ainda não foi esclarecido que substância, entre estas substâncias urémicas, essencialmente participa no aparecimento de sintomas urémicos. Além disso, ainda que não tenha sido esclarecido se a uremia é causada por uma única substância ou por efeito composto de uma pluralidade de tais substâncias, pensa-se que a probabilidade do último é mais elevada. Estes factos indicam claramente a dificuldade na terapia da uremia por fármacos. De qualquer forma, a menos que as substâncias urémicas sejam excretadas a partir do corpo, ou a menos que os níveis no sangue das substâncias urémicas sejam reduzidos por um meio apropriado, o paciente com uremia morrerá. Os métodos terapêuticos ditos como eficazes para o tratamento de uremia são transplante renal, diálise e tratamento de preparação de carbono ativo. A vantagem dos métodos terapêuticos comuns aos dois últimos métodos é que uma pluralidade de substâncias urémicas incluindo substâncias desconhecidas pode ser removida ou diluída de forma não específica por um meio físico. No entanto, os métodos têm desvantagens descritas abaixo. 3 ΡΕ1913946 A preparação de carbono ativo é administrada por via oral. 0 mecanismo de ação da preparação de carbono ativo baseia-se na adsorção de várias substâncias urémicas geradas em órgãos digestivos e na excreção dos mesmos a partir do corpo. Assim, ainda gue a preparação de carbono ativo seja chamada de fármaco oral, a terapia pode ser considerada como um método terapêutico físico semelhante ao tratamento de diálise descrito abaixo. Uma vez gue a preparação de carbono ativo tem inconvenientes na medida em que a toma não é fácil, ela tem uma forte tendência para induzir obstipação, e assim por diante, para além do efeito terapêutico limitado, o método terapêutico não é de todo satisfatório. A diálise é referida como sendo o método terapêutico mais eficaz para a uremia. Na verdade, excretando substâncias urémicas por tratamento de diálise, a morte do paciente devido às substâncias urémicas pode ser evitada, mesmo que a função renal tenha sido anulada. Contudo, as complicações do tratamento de diálise têm sido reconhecidas como novos problemas. Por exemplo, complicações da diálise a longo prazo incluem anemia, osteodistrofia renal, cancro do estômago, pericardite, osteodistrofia por alumínio, amiloidose, artrite cristalina, rim poliquístico múltiplo e assim por diante. Há também problemas de má qualidade de vida dos pacientes na vida social devido à necessidade de ir com frequência para centros de diálise, e ao alto custo que é um problema na economia médica. 4 ΡΕ1913946

Um método chamado "diálise interna" tem sido relatado, em que azoto não proteico é medicinalmente transferido para o trato intestinal sem meios fisicos (Literatura de Patente 1) . Isto é um fenómeno que na administração de uma 15-ceto-l6-halogeno-prostaglandina E2, creatinina sérica (Cre) e azoto de ureia no sangue (BUN) no sangue são transferidos para o trato intestinal, em conjunto com água por ação de «enteropooling» (uma ação para acumular água no trato intestinal). Contudo, uma vez que «enteropooling» é uma ação para acumular água no trato intestinal, ela necessariamente acompanha diarreia, e o repórter também se refere a este ponto. Não importa o quanto o valor Cre no soro e valor BUN no sangue estão diminuídos, para executar esta terapia que acompanha a exaustão física e o risco de desidratação devido a diarreia impõe um fardo muito pesado nos pacientes com insuficiência renal crónica, de modo que não é de todo aceitável.

De acordo com isto, é exigida a criação de um método terapêutico e um agente terapêutico para a uremia livre dos problemas acima descritos.

Embora a uremia ocorra com o progresso da insuficiência renal, ambas são síndromes que são definidas separadamente conforme descrito abaixo. A Literatura Não de Patente 3 estabelece que "uma ampla, e às vezes confusa, variedade de termos é usada para expressar a função renal e a sua deterioração", e define termos relacionados para distinguir claramente ambas. Mais particularmente, ela 5 ΡΕ1913946 chama a atenção sobre a diferença entre as duas afirmando que "A insuficiência renal é o estado no qual a função renal é diminuída e as anormalidades (azotemia e diminuição na capacidade de concentrar a urina) são mantidas, e significa o nivel de função do órgão e não uma doença especifica" e "Uremia indica o facto de que existe urina no sangue" (ver Literatura Não de Patente 2). Outros livros técnicos de nefrologia também definem e descrevem uremia e insuficiência renal como "síndromes" diferentes e não "nomes de doenças". A insuficiência renal é classificada em duas sindromes diferentes, insuficiência renal aguda e insuficiência renal crónica. A insuficiência renal aguda ocorre subitamente, mas na maioria dos casos, o comprometimento da função renal é reversível. De facto, fármacos e métodos terapêuticos eficazes já existiam, e, em muitos casos, a função renal dos pacientes pode ser restaurada para o estado normal por simples remoção da causa. Por outro lado, como para a insuficiência renal crónica, é difícil determinar claramente o momento do seu início, e ele ocorre lentamente ao longo de vários meses a vários anos. Além disso, o dano renal ocorrido é irreversível (ver, por exemplo, Literatura Não de Patente 4) e refratária a vários fármacos e métodos terapêuticos. Por conseguinte, a terapia da uremia que ocorre com o progresso da insuficiência renal crónica é especialmente importante.

Como resultados dos estudos até agora utilizando ΡΕ1913946 modelos animais de nefrite ou modelos animais de insuficiência renal, vários fármacos profiláticos e terapêuticos para a insuficiência renal crónica ou a sua doença primária foram encontrados. Vários fármacos são agora utilizados clinicamente, por exemplo, fármacos antiplaquetários, tais como dipiridamole, hidrocloreto de dilazep, trapidil e aspirina; e anticoagulantes tais como heparina e varfarina são usados para a glomerulonefrite; e diuréticos de tiazida, diuréticos de ansa, inibidores da enzima de conversão da angiotensina (ECA), e antagonistas de cálcio tais como diltiazem e verapamil são utilizados para os casos em que a doença primária é hipertensão essencial. Contudo, qualquer um destes não é nada mais do que uma contramedida que atrasa o progresso do estado da insuficiência renal, tal como a deterioração da função renal, e semelhantes, e a melhoria ou o desaparecimento de uremia por essas fármacos não foi descrita de todo.

Entre os compostos de Fórmula Geral (I) no presente pedido, beraprost sódico divulgado na Literatura de Patente 2 foi relatado como sendo eficaz para as doenças primárias de insuficiência renal crónica. Por exemplo, num sistema de modelo de glomerulonefrite, Utsunomiya et al. mostrou que o inicio da glomerulonefrite pode ser inibida pela administração de beraprost sódico, antes do inicio, a rato NZB/WFl com glomerulonefrite induzida por complexo imunitário que desenvolve espontaneamente glomerulonefrite induzida pelo complexo imunitário, utilizando como indice o efeito para diminuir a excreção urinária de albumina (Lite- 7 ΡΕ1913946 ratura Não de Patente 5) . De modo semelhante, Kushiri et al. mostraram, utilizando modelos de glomerulonefrite de ratos, que o inicio da nefrite foi prevenida pela administração profilática de beraprost sódico aos ratos antes da administração da substância indutora de nefrite, em termos do efeito de diminuição da excreção urinária de albumina (Literatura Não de Patente 6) . Stier et al. mostraram que através da administração de beraprost sódico em conjunto com o fornecimento de solução salina usada como estimulação para a indução de hipertensão e com a alimentação de uma dieta especial para os ratos que desenvolvem espontaneamente a hipertensão, o inicio da glomerulonefrite foi impedido, com base na excreção de proteína urinária e uma imagem do tecido do glomérulo (Literatura Não de Patente 7) . Além disso, foi relatado que a microalbumina urinária em pacientes com nefropatia diabética foi diminuída pela administração de beraprost sódico (Literatura Não de Patente 8).

Além disso, há relatórios acerca de derivados de prostaglandina 12 (daqui em diante também referidos como "derivados de PGI2" para abreviar) diferentes dos compostos representados pela Fórmula Geral (I) . Por exemplo, sabe-se que cicaprost tem uma atividade para reduzir o comprometimento da função renal em ratos com nefropatia diabética induzido por estreptozotocina (Literatura não de patente 9) ou o comprometimento da função renal induzido por unine-frectomia, elevada carga de sódio e carga de proteína (Literatura não de patente 10) . De forma semelhante, em modelos de nefrite induzidos por Thy-1, a proteína urinária ΡΕ1913946 é diminuída administrando profilaticamente iloprost que é um derivado de PGI2 antes da indução da nefrite (Literatura não de patente 11). A proteinúria é causada pela deterioração da função de barreira para macromoléculas no rim. Por conseguinte, embora a proteinúria seja um bom indicador para o exame da função glomerular que é um aspeto da função renal, a proteinúria não determina diretamente a gravidade da uremia. Além disso, embora a proteinúria seja um bom indicador na fase precoce da glomerulonefrite, nefropatia diabética e semelhantes, ela já não é um bom indicador de insuficiência renal crónica, porque a função de filtração de substâncias de baixa massa molecular está diminuída na insuficiência renal crónica. Além disso, todos os relatórios acima descritos mostram os efeitos profiláticos de derivados de PGI2 porque os derivados de PGI2 foram administrados antes do início da nefrite, e não mostram o efeito terapêutico. Mais ainda, ainda que os relatórios se refiram à função renal, eles em caso algum se referem ou sugerem a melhoria da uremia.

Tal como para os efeitos dos compostos representados pela Fórmula Geral (I), existe um relatório em que foram utilizados modelos de insuficiência renal no rato cuja doença primária foi a nefrite, preparados por administração de um anticorpo à membrana basal glomerular (Literatura Patente 3). No relatório, foi mostrado que através da administração de um composto da Fórmula Geral (I), descrito no presente pedido, após observação de insuficiência renal, definida pelo aumento de creatinina e 9 ΡΕ1913946 BUN, o aumento nos marcadores de insuficiência renal tais como a quantidade de excreção urinária de proteínas, do valor Cre e do valor BUN no soro foi reduzido quando em comparação com um qrupo de controlo. Além disso, foi relatado que a administração clínica de beraprost sódico reduziu a diminuição da função renal na insuficiência renal em fase conservadora, a qual é indicada por uma diminuição da depuração da creatinina ou no recíproco de creatinina no soro em pacientes com insuficiência renal (Literatura não de patente 12). Contudo, estes relatórios não contêm qualquer referência ou sugestão sobre a uremia ou sintomas urémicos.

As doenças renais incluem a síndrome hemolítico-urémica (SHU) causada por microangiopatia trombótica. SHU mostra literalmente a uremia como o seu sintoma clínico. Series et al. relataram que, num caso de SHU, a administração de iloprost, que é um dos derivados de PGI2 eficazes para a melhoria do valor de Cre no soro, o qual é um marcador de insuficiência renal (Literatura não de patente 13). Contudo, a SHU é uma síndrome resultante da insuficiência renal aguda facilmente recuperável acima descrita, a qual é uma condição patológica completamente diferente da uremia em pacientes com insuficiência renal crónica cuja homeostase corporal está drasticamente prejudicada na resistência a fármacos e métodos terapêuticos. Assim, este relatório também é totalmente silencioso sobre a aplicabilidade à terapia da uremia em pacientes com insuficiência renal crónica, que é uma síndrome mais grave. 10 ΡΕ1913946

Por outro lado, Siegler et al. relataram que PGI2 não tem uma atividade para inibir o progresso de SHU (Literatura não de patente 14). Mesmo sobre estudos in vitro, existe um relatório que refere que a capacidade das células endoteliais vasculares para produzirem PGI2 ditas como estando relacionadas com o inicio da SHU está diminuída (Literatura não de patente 15) , e um relatório que informa que nenhuma mudança foi observada na capacidade de produzir PGI2 (Literatura não de patente 16). Quer dizer, o efeito farmacológico de derivados de PGI2 sobre SHU é ainda muito pouco claro, e o acima mencionado Series et al. descreveram que o caso acima mencionado foi um caso muito raro, a relação entre a SHU e PGI2 foi ainda contraditória, e concluíram francamente que um estudo mais aprofundado era necessário. De qualquer forma, mesmo na SHU que tem uma melhor capacidade para recuperar a homeostase corporal, o envolvimento da PGI2 não está ainda esclarecido, e a eficácia da PGI2 para a uremia de pacientes com insuficiência renal crónica, cuja capacidade de recuperar a homeostase corporal é muito mais pobre ou que não têm uma tal capacidade, não é de todo esperada.

Conforme acima descrito, a deterioração ou melhoria dos sintomas urémicos nos pacientes com insuficiência renal crónica pelos compostos representados pela Fórmula Geral (1) , ou mesmo por derivados de PGI2 incluindo os que não sejam os compostos representados pela Fórmula Geral (I), não foi de todo descrita. 11 ΡΕ1913946

Por outro lado, nos últimos anos, o aumento do número de pacientes com insuficiência renal crónica tornou--se um grande problema, não só na medicina humana mas também na medicina veterinária. Os animais de companhia, tais como cães e gatos, podem agora receber dietas altamente nutritivas e altos serviços veterinários. Como resultado, os animais de companhia passaram a ter uma vida longa semelhante aos seres humanos, e o número de pacientes gue sofrem de uma doença associada com o envelhecimento ou doença crónica que é difícil de curar está agora a ser drasticamente aumentado. A insuficiência renal crónica é observada em muitos tipos de animais de estimação. Tomando o gato como exemplo, as comparações entre a insuficiência renal crónica de gatos e seres humanos são como se segue:

Nos gatos, a insuficiência renal crónica ocorre numa taxa especialmente elevada (ver, por exemplo, Literatura não de patente 17) . Em gatos de não menos de 15 anos de idade, números de insuficiência renal crónica até tanto quanto 30% do total de doenças, e é uma das principais causas de morte de gatos (ver, por exemplo, Literatura não de patente 18). Além disso, em muitos casos, quando um gato paciente é levado a um hospital de animais, o gato está num estado consideravelmente progressivo de insuficiência renal crónica, e acompanha uremia.

Em geral, a insuficiência renal crónica dos gatos é diagnosticada através da deteção de elevados valores de 12 ΡΕ1913946 creatinina sérica (Cre) e de azoto da ureia no sangue (BUN), que são marcadores clínicos da função renal, em adição ao história antecedente obtida pela audição e observações clínicas. Valores de Cre e BUN anormais não são detetados a menos que 75% de nefrónios em ambos os rins percam a sua função, e existe uma correlação entre a magnitude dos valores anormais dos marcadores da função renal e a razão da função renal restante, como no caso de seres humanos.

Os sintomas urémicos dos gatos são expressos por náuseas, vómitos, diarreia, anorexia, perda de peso, diminuição da atividade, polidipsia e diurese, úlcera intraoral e assim por diante. Anorexia e falta de ingestão de água devido à úlcera intraoral também causam desidratação e obstipação. Depois de um progresso adicional do estado de doença, para além de anemia, são observadas perturbações eritropoiéticas, perda de apetite e estado deprimido, encefalopatia e neuropatia devido a toxina de urina.

Conforme acima descrito, o progresso do estado de doença da insuficiência renal crónica e a diversidade dos sintomas urémicos acompanhados são os mesmos que em seres humanos.

Uma vez que os gatos que têm uremia em progresso tendem a desenvolver desidratação, como tratamentos sintomáticos, também são realizadas a hidratação e substituição de fluido por infusão gota a gota por via intravenosa ou subcutânea, com a finalidade de diluição das substâncias urémicas (ver, por exemplo, a Literatura não de patentes 13 ΡΕ1913946 3). Para anemia em gatos com uremia, também é administrada eritropoietina tendo atividade hematopoiética. Uma vez que o apetite é frequentemente reduzido também por anemia, um tratamento estimulante do apetite é também realizado em paralelo. Para a melhoria de sintomas tais como vómitos, diarreia e estomatite, fármacos de tratamento sintomático correspondente aos sintomas também são frequentemente utilizados. Os tratamentos sintomáticos individuais selecionados para estes sintomas urémicos também são os mesmas que no caso dos pacientes humanos com uremia. Há uma diferença no metabolismo do fármaco entre gatos e seres humanos. Por exemplo, acetoaminofeno que pode ser usado com segurança nos seres humanos induz um efeito secundário grave (envenenamento por acetoaminofeno) em gatos. Em adição a isto, um certo número de antibióticos e agentes anti-inflamatórios são listados como fármacos que requerem cuidado. Além disso, uma vez que as funções homeostáticas nos gatos que apresentam sintomas urémicos estão deterioradas, são necessários muito cuidado e atenção para a utilização e dosagem dos fármacos.

Do mesmo modo que para os seres humanos, é usada a preparação de carbono ativo para a terapia da uremia em gatos e cães. 0 nome do fármaco para seres humanos é Kremezin e o nome do fármaco para animais é Covalzin. Nesta terapia, a preparação é administrada diariamente oralmente, e as substâncias que causam uremia são obrigadas a ser adsorvidas no trato digestivo e são excretadas em conjunto com as fezes. Contudo, como nos seres humanos, a toma não é 14 ΡΕ1913946 fácil e a redução do apetite e obstipação são também induzidas. Além disso, existe uma preocupação de que substâncias úteis podem ser removidas pela adsorção não especifica de substâncias.

Do mesmo modo que para os seres humanos, a diálise é uma terapia muito eficaz da uremia nos gatos. Contudo, uma vez que é dispendiosa, a terapia não tem prevalecido como uma terapia geral. Ainda que o transplante renal também possa ser realizado em gatos como tratamento curativo para insuficiência renal crónica e uremia, este também se tem expandido muito pouco porque é caro.

Conforme acima descrito, a uremia de animais e seres humanos são semelhantes em vários aspetos incluindo o estado de doença de insuficiência renal crónica, sintomas clínicos de uremia que acompanhante, métodos terapêuticos, tratamentos sintomáticos e assim por diante. Além disso, uma vez que existem problemas nos métodos terapêuticos como nos seres humanos, a criação de um método terapêutico excelente e de um fármaco terapêutico para a uremia são pedidos pelos clientes (donos) dos animais pacientes e veterinários.

Literatura não de patente 1: R. Vanholder et ai., Kidney International, 63 (2003) 1934-1943

Literatura não de patente 2: G. F. Grauer, "Urologic Diseases, Parte 5, Capítulo 44, p 622", in R. W. Nelson, C. G. Couto eds., Small Animal Internai Medicine (Japanese 15 ΡΕ1913946 version), tradução supervisionada por Atsuhiko HASEGAWA e Haj imu TSUJIMOTO, Inter Zoo Tokyo, 2002

Literatura não de patente 3: Yasushi ASANO, VII Chronic Renal Failure, Nephrology, Kiyoshi KUROKAWA eds., p 345, Nankodo, Tóquio, 2001

Literatura não de patente 4: Keizo KOIDE, "1: What é Chronic Renal Failure", Chemotherapies of Chronic Renal Failure, Keizo KOIDE e Susumu TAKAHASHI eds., pl, TOKYOIGAKUSHA, Tóquio, 2000

Literatura não de patente 5: Y. Utsunomiya, et ai., Clin. Exp. Immunol., 99 (1995) 454-460

Literatura não de patente 6: M. Kushiro et al., Kidney International, 53 (1998) 1314-1320

Literatura não de patente 7: C. T. Stier et al., J. Cardiovascular Pharmacology, 30 (1997) 285-293

Literatura não de patente 8: A. Owada et ai., Nephron, 92(4) (2002) 788-796

Literatura não de patente 9: R. G. Robles et al., J. Hypertens. Suppl., 11, Supl 5 (1993) S208-S209

Literatura não de patente 10: E. Villa et al., Am. J. Hypertens., 6 (1993) 253-257

Literatura não de patente 11: K. Poelstra et al., Am. J. Pathol., 142 (1993) 441-450

Literatura não de patente 12: T. Fujita et al., Pros-taglandins Leukot. Essent. Fatty Acids, 65(4) (Out 2001) 223-227

Literatura não de patente 13: C. Series et al., Rev. Med. Interne., 17 (1996) 76-78

Literatura não de patente 14: R. L. Siegler et al., Nephron, 92 (2002) 363-368 16 ΡΕ1913946

Literatura não de patente 15: D. Mitra et ai., Blood, 89 (1997) 1224-1234

Literatura não de patente 16: S. Adler e R. Bollu, Kidney & Blood Pressure Research, 21 (1998) 13-21

Literatura não de patente 17: S. P. Dibartola et ai., J. Am. Vet. Assoe., 190 (1987) 1196-1202

Literatura não de patente 18: J. Lulich et ai., The Compendium Continuing Education, 14 (1992) 127-152 Literatura de Patente 1: JP 3-163023 B Literatura de Patente 2: JP 1-053672 B Literatura de Patente 3: WO 00/067748

Problemas Que a Invenção Tenta Resolver O problema que a presente invenção tenta resolver é proporcionar uma substância para utilização no tratamento de uremia de seres humanos e animais, substância essa que pode ser tomada facilmente, tem efeitos secundários mais baixos e que não é dispendiosa à luz da economia médica, pela qual os problemas acima descritos na técnica anterior são resolvidos, para além da adsorção física de substâncias urémicas e sua excreção.

Meios para a Resolução dos Problemas

Uma das razões pela qual a criação de agente terapêutico e método terapêutico de uremia não foi conseguida apesar da forte procura é que não foi estabelecido um modelo experimental apropriado de uremia. Após uma série de investigações e estudos, os presentes inventores focaram a 17 ΡΕ1913946 atenção no facto de que os pacientes gatos que sofrem de insuficiência renal crónica que acompanha a uremia numa alta razão vêm a hospitais de animais, e numerosos gatos pacientes morrem porque eles não podem receber tratamento de diálise por causa de razões económicas ou técnicas. Tendo isto em vista, depois de estudos intensivos sobre gatos pacientes, os presentes inventores descobriram que a melhoria na função renal não está diretamente ligada à melhoria da uremia, e os fármacos compreendendo como ingrediente ativo um composto representado pela Fórmula Geral (I) descrita abaixo são eficazes para a terapia da uremia, com base na descoberta de que a uremia pode ser melhorada ou desaparecer mesmo sob a circunstância de que os marcadores de insuficiência renal são continuamente aumentados, completando por isso a presente invenção.

Isto é, a presente invenção proporciona: 1. Uma substância para utilização no tratamento de uremia em pacientes que sofrem de insuficiência renal crónica, em que a substância compreende como ingrediente ativo um composto da Fórmula Geral (I): R A /

B

E (I) 18 ΡΕ1913946 [em que R1 é (A) COOR2, em que R2 é 1) hidrogénio ou um catião farmaceuticamente aceitável, 2) alquilo C1-C12 linear ou alquilo C3-C14 ramificado, 3) -Z-R3, em que Z é ligação covalente, ou alquileno linear ou ramificado representado por CtH2t em que t é um inteiro de 1 até 6, R3 é cicloalquilo C3-C12 ou cicloalquilo C3-C12 substituído com 1 a 3 R4(s) em que R4 é hidrogénio ou alquilo C1-C5, 4) - (CH2CH20) nCH3, em que n é um inteiro de 1 até 5, 5) -Z-Ar1, em que Z representa os mesmos significados con forme acima descrito, Ar1 é fenilo, a-naftilo, β-naftilo, 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, a-furilo, β-furilo, a-tienilo, β-tienilo ou fenilo substituído (em que o(s) subs-tituinte(s) é(são) pelo menos um de cloro, bromo, flúor, iodo, trifluorometilo, alquilo C1-C4, nitro, ciano, metoxi, fenilo, fenoxi, p-acetamidobenzamida, -CH=N-NH-C(=0)-NH2, -NH-C(=0)-Ph, -NH-C(=0)-CH3 e -NH-C(=0)-NH2) , 6) -CtH2tCOOR4, em que CtH2t e R4 representam os mesmos significados conforme acima descrito, 7) -CtH2tN (R4) 2, em que CtH2t e R4 representam os mesmos significados conforme acima descrito, 8) -CH (R5) -C- (=0) -R6, em que R5 é hidrogénio ou benzoílo, e R6 é fenilo, p-bromofenilo, p-clorofenilo, p-bifenilo, p-nitrofenilo, p-benzamidofenilo ou 2-naftilo, 9) -CpH2P-W-R7, em que W é -CH=CH-, -CH=CR7- ou -C^c-, em que R7 é hidrogénio, alquilo C1-C30 linear ou ramificado ou aralquilo C7-C30, p é um inteiro de 1 até 5, ou 19 ΡΕ1913946 10) -CH (CH2OR8) 2/ em que R8 é alquilo C1-C30 ou acilo, (B) -CH2OH, (C) -C(=0)N(R9)2, em que R9 é hidrogénio, alquilo linear C1-C12, alquilo C3-C12 ramificado, cicloalquilo C3-C12, cicloalquilalquileno C4-C13, fenilo, fenilo substituído (em que a ou as definições do(s) substituinte(s) é(são) as mesmas que as descritas em (A) 5) acima mencionado) , aralquilo C7-C12 ou -S02R1Q em que R10 é alquilo C1-C10, cicloalquilo C3-C12, fenilo, fenilo substituído (em que a ou as definições do(s) substituinte (s) é(são) as mesmas que as descritas em (A) 5) acima mencionado) , ou aralquilo C7-C12, em que os dois R9s pode ser o mesmo ou diferentes, com a condição de que quando um deles é -S02R10, o outro R9 não é -S02R10, ou (D) -CH2OTHP (em que THP é tetra-hidropiranilo), A é 1) -(CH2)m-, 2) -CH=CH-CH2-, 3) -CH2-CH=CH-, 4) -CH2-0-CH2-, 5) -CH=CH-, 6) -0-CH2- ou 7) —C=C—, em que m é um inteiro de 1 até 3, Y é hidrogénio, alquilo C1-C4, cloro, bromo, flúor, formilo, metoxi ou nitro, B é -x-C (R11) (R12)OR13, em que R11 é hidrogénio ou alquilo C1-C4, R13 é hidrogénio, acilo C1-C14, aroílo C6-Ci5, tetra- -hidropiranilo, tetra-hidrofuranilo, 1-etoxietilo ou t-bu- 20 ΡΕ1913946 X é D -ch2-ch2- 2) -CH=CH- ou 3) -C=C-, R12 é 1) alquilo Ci~Ci2 linear, alquilo C3-C14 ramificado, 2) -Z-Ar2, em que Z representa os mesmos significados conforme acima descrito, Ar2 é fenilo, a-naftilo, β-nafti-lo, ou fenilo substituído com pelo menos um substituinte selecionado a partir do grupo constituído por cloro, bromo, flúor, iodo, trifluorometilo, alquilo C1-C4, nitro, ciano, metoxi, fenilo e fenoxi, 3) -CtH2tOR14, em que CtH2t representa os mesmos significados conforme acima descrito, R14 é alquilo C1-C6 linear, alquilo C3-C6 ramificado, fenilo, fenilo substituído com pelo menos um substituinte selecionado a partir do grupo constituído por cloro, bromo, flúor, iodo, trifluorometilo, alquilo C1-C4, nitro, ciano, metoxi, fenilo e fenoxi, ciclopentilo, ciclo-hexilo, ciclopentilo substituído com 1 a 4 alquilo C1-C4 linear ou ciclo-hexilo substituído com 1 a 4 alquilo C1-C4 linear, 4) -Z-R3, em que Z e R3 representam os mesmos significados conforme acima mencionado, 5) -CtH2t-CH=C (R15) R16, em que CtH2t representa os mesmos significados conforme acima mencionado, R15 e R16 representam hidrogénio, metilo, etilo, propilo ou butilo, ou 6) -CuH2u-C=C-R17, em que u é um inteiro de 1 até 7, CuH2u é alquileno linear ou ramificado, e R e alquilo C1-C6 linear, 21 ΡΕ1913946 E é hidrogénio ou -0R18, em que R18 é acilo Ci-Ci2, aroilo C7-C15 ou R2 (em que R2 representa os mesmos significados conforme acima descrito), a fórmula inclui isómeros d, isómeros 1 e compostos racémi-cos] . 2. A substância de acordo com o item 1, em que na Fórmula Geral (I), R1 é COOR2, em que R2 é hidrogénio ou um catião farmaceuti-camente aceitável, A é -(CH2)m-, em que m é um inteiro de 1 até 3, Y é hidrogénio, B é -X-C (R1 2 3 4 5 6 7 8 9) (R10)OR13, em que R9 e R13 são hidrogénio, X é -CH=CH-, R12 é -CuH2u-C=C-R17 em que u é um inteiro de 1 até 7, CuH2u é alquileno linear ou ramificado, e R e alquilo C1-C6 linear, e E é hidrogénio ou -0R2 (em que R2 representa os mesmos significados conforme acima descrito). 1 A substância de acordo com o item 1, em que 2 na Fórmula Geral (I), 3 R1 é COOR2, em que R2 é hidrogénio ou ião sódio, 4 A é - (CH2) m-, em que m é 3, 5 Y é hidrogénio, 6 B é -X-C(Rn) (R10) OR13, em que R9 e R13 são hidrogénio, 7 X é -CH=CH-, 8 R10 é -CuH2u-C=c-R17 em que u é 3, CuH2u é alquileno rami 9 ficado, e R17 é metilo, e 10 E é -OH. 22 ΡΕ1913946

Efeitos da Invenção A substância para utilização no tratamento de uremia em doentes com insuficiência renal crónica, que compreende um composto representado pela Fórmula Geral (I), de acordo com a presente invenção, melhora a uremia ocorrida ao mesmo tempo em pacientes com insuficiência renal crónica sem um efeito secundário, e são alcançados a recuperação do apetite reduzido, melhoramento da atividade, aumento de peso e assim por diante. Além disso, uma vez que a terapia não é por meio de adsorção fisica de substâncias urémicas e sua excreção, a presente invenção proporciona uma substância e um método de tratamento, que pode ser facilmente tomada, e que não são caros, tendo em vista a economia médica. 0 efeito da presente invenção é o alivio claro ou o desaparecimento de sintomas de uremia compreendidos como sintomas clínicos, observados no estado de insuficiência renal, especialmente mesmo apesar do estado em que a diminuição da função renal progrediu. Os efeitos proeminentes observados em gatos que são um modelo adequado para avaliação de uremia são comparáveis aos efeitos terapêuticos obtidos por tratamento de diálise em pacientes humanos com uremia.

Breve Descrição dos Desenhos

Fig. 1 - mostra a ação de beraprost sódico sobre a frequência cardíaca de gatos saudáveis. Beraprost sódico foi administrado oralmente na dose indicada na figura. 0 23 ΡΕ1913946 teste significativo foi realizado pelo teste de t (emparelhado). * p < 0,05, ** p < 0,01. (a) A ordenada na figura indica o ritmo cardíaco medido. A abcissa na figura indica o tempo após a administração de beraprost sódico. (b) A ordenada na figura indica o valor relativo que tem o ritmo cardíaco antes da administração de beraprost sódico como 100% após a adição a isso da % de mudança após a administração de beraprost sódico. A abcissa na figura indica o tempo após a administração de beraprost sódico.

Fig. 2 - mostra a ação de beraprost sódico sobre a tensão arterial (valor medido) de gatos saudáveis. O beraprost sódico foi administrado oralmente na dose indicada na figura, (a) É mostrada a ação de beraprost sódico sobre a tensão sistólica. (b) É mostrada a ação de beraprost sódico sobre a tensão diastólica. (c) É mostrada a ação de beraprost sódico sobre a tensão de pulso.

Fig. 3 - mostra os resultados da administração de beraprost sódico a um gato com insuficiência renal crónica (Caso-A, administração de beraprost sódico isolado) . Em (a) , a barra aberta indica o período de doseamento ao longo do qual o beraprost sódico isolado foi administrado. Após o termo da administração, nenhum tratamento foi realizado. No 6o mês após o termo da administração do beraprost sódico foram realizados testes. Como resultado, não foram observados de todo sintomas urémicos, e os marcadores da função renal mantiveram-se dentro dos limites normais, de modo que a insuficiência renal crónica foi 24 ΡΕ1913946 curada pela administração de beraprost sódico isolado, (a) São mostrados efeitos da melhoria dos sintomas urémicos (sintomas clínicos) pela administração de beraprost sódico isolado ao gato (Caso-A) com insuficiência renal crónica. A abcissa indica o número de meses após a administração de beraprost sódico. (b) É mostrada a alteração no valor de BUN, que é um marcador da função renal, pela administração de beraprost sódico. (c) É mostrada a alteração no valor de Cre no soro, que é um marcador da função renal, pela administração de beraprost sódico.

Fig. 4 - mostra os resultados da administração de beraprost sódico a um gato com insuficiência renal crónica (Caso-B, administração de beraprost sódico isolado). (a) São mostrados efeitos de melhoria dos sintomas urémicos (sintomas clínicos) pela administração de beraprost sódico isolado ao gato (Caso-B) com insuficiência renal crónica. A abcissa indica o número de meses após a administração de beraprost sódico. Em (a), a barra aberta indica o período de doseamento no qual foi administrado beraprost sódico isolado, (b) É mostrada a alteração no valor de BUN, que é um marcador da função renal, pela administração de beraprost sódico. (c) É mostrada a alteração no valor de Cre no soro, que é um marcador da função renal, pela administração de beraprost sódico.

Fig. 5 - mostra os resultados da administração de beraprost sódico a um gato com insuficiência renal crónica (Caso-C, administração de beraprost sódico isolado). 25 ΡΕ1913946 (a) São mostrados efeitos de melhoria dos sintomas urémicos (sintomas clínicos) pela administração de beraprost sódico isolado ao gato (Caso-C) com insuficiência renal crónica. A abcissa indica o número de meses após a administração de beraprost sódico. (b) É mostrado a alteração no valor de BUN, que é um marcador da função renal, pela administração de beraprost sódico. (c) É mostrada a alteração no valor de Cre no soro, que é um marcador da função renal, pela administração de beraprost sódico.

Fig. 6 - mostra os resultados da administração de beraprost sódico a um gato com insuficiência renal crónica (Caso-D, administração de beraprost sódico isolado). Em (a) , a barra aberta indica o período de doseamento no qual foi administrado beraprost sódico isolado. (a) São mostrados efeitos de melhoria de sintomas urémicos (sintomas clínicos) pela administração de beraprost sódico isolado ao gato (Caso-D) com insuficiência renal crónica. A abcissa indica o número de meses após a administração de beraprost sódico. (b) É mostrada a alteração no valor de BUN, que é um marcador da função renal, pela administração de beraprost sódico. (c) É mostrada a alteração no valor de Cre no soro, que é um marcador da função renal, pela administração de beraprost sódico.

Fig. 7 - mostra os resultados da administração de beraprost sódico a um gato com insuficiência renal crónica (Caso E, terapia de combinação). Em (a), a barra cheia indica o período em que os tratamentos com uma preparação 26 ΡΕ1913946 de carbono ativo, preparação de carbonato de cálcio e alimentação k/d foram combinados com o tratamento de beraprost sódico. A barra aberta indica o periodo no qual a administração da preparação de carbono ativo não foi realizada porque a obstipação se tornou mais grave, (a) São mostrados efeitos de melhoria de sintomas urémicos (sintomas clinicos) pela administração de beraprost sódico isolado ao gato (Caso E) com insuficiência renal crónica. A abcissa indica o número de meses após a administração de beraprost sódico. Neste caso, além da refeição com alimentação da fórmula, os tratamentos com a preparação de carbono ativo e a preparação de carbonato de cálcio foram combinados até um instante intermédio e, posteriormente (a partir do 4o mês), apenas a administração da preparação de carbono ativo foi parada por causa da obstipação grave, (b) É mostrada a alteração no valor de BUN, que é um marcador da função renal, pela administração de beraprost sódico. (c) É mostrada a alteração no valor de Cre no soro, que é um marcador da função renal, pela administração de beraprost sódico.

Fig. 8 - mostra os resultados da administração de beraprost sódico a um gato com insuficiência renal crónica (Caso-F, terapia de combinação) . Em (a) , a barra ponteada indica o período no qual os tratamentos com insulina, uma preparação de carbono ativo e uma preparação de carbonato de cálcio foram combinados, e a barra a cheio indica o período no qual o tratamento com beraprost sódico foi adicionalmente combinado. Durante os dois meses ante- 27 ΡΕ1913946 riores ao início da administração de beraprost sódico, a melhoria dos sintomas urémicos não foi observada, mas após o início da administração de beraprost sódico, a uremia foi rapidamente melhorada, e a condição melhorada foi continuada. Durante este período, a Cre, que é um marcador de insuficiência renal, aumentou continuamente. (a) São mostrados efeitos da melhoria de sintomas urémicos (sintomas clínicos) pela administração de beraprost sódico isolado para o gato (Caso-F) com insuficiência renal crónica. A abcissa indica o número de meses após a administração de beraprost sódico. (b) É mostrada a alteração no valor de BUN, que é um marcador da função renal, pela administração de beraprost sódico. (c) É mostrada a alteração no valor de Cre no soro, que é um marcador da função renal, pela administração de beraprost sódico.

Fig. 9 - mostra os resultados da administração de beraprost sódico a um cão com insuficiência renal crónica (Caso-H, administração de beraprost sódico isolado). Na figura, a barra a ponteado indica o período de tratamento no qual uma preparação de carbono ativo (Covalzin) isolado foi administrada, e a barra aberta indica o período de tratamento após a mudança para a administração de beraprost sódico isolado. A melhoria de sintomas urémicos durante os dois meses nos quais o Covalzin isolado foi administrado não foi praticamente observada, mas após o início da administração de beraprost sódico, os sintomas urémicos foram rapidamente remetidos e melhorados, e a pontuação clínica alcançou o pleno. Contu- 28 ΡΕ1913946 do, durante este período, a Cre, que é um marcador de insuficiência renal, aumentou continuamente. Durante o período de administração do beraprost sódico, não foi observada nenhuma ação adversa causando diarreia, vómitos ou semelhante. (a) São mostrados efeitos da melhoria de sintomas urémicos (sintomas clínicos) pela administração de beraprost sódico isolado ao cão (Caso-H) com insuficiência renal crónica. A abcissa indica o período de observação (número de meses). (b) É mostrada a alteração no valor de BUN, que é um marcador da função renal, pela administração de beraprost sódico. (c) É mostrada a alteração no valor de Cre no soro, que é um marcador da função renal, pela administração de beraprost sódico.

Melhor Modo de Realização da Invenção

Na Fórmula Geral (I), representando os compostos utilizados como ingrediente eficaz do agente terapêutico de acordo com a presente invenção,

Rl é, preferivelmente COOH, COONa ou COOMe, especialmente preferivelmente COONa; A é preferivelmente -(CH2)2-, -(CH2)3-, -CH=CH- ou -0-CH2-, especialmente preferivelmente, -(CH2)3-; Y é especialmente preferivelmente hidrogénio; B é representado por-XC(Rll)(R12)0R13, em que Rll e R13 são especialmente preferivelmente hidrogénio, X é preferivelmente -CH=CH-, especialmente preferivelmente trans-CH=CH-, R12 é preferivelmente hexilo, pentilo, 1-me-tilpropilo, 2-clorofenilo, propiloximetilo, ciclo-hexilo, 29 ΡΕ1913946 4-hexin-2-ilo, 2-metil-4-hexin-2-ilo e especialmente preferivelmente de 4-hexin-2-ilo; e E é especialmente preferencialmente-OH.

Exemplos específicos dos compostos preferidos representados pela Fórmula Geral (I) incluem 16-metil--18,18,19,19-tetra-hidro-5,6,7-trinor-4,8-inter-m-fenileno PGI2 (Nome genérico: beraprost), 16-metil-18,18,19,19- -tetra-hidro-5,6,7-trinor-4,8-inter-m-fenileno PGI2 sal de sódio (rac-(IR,2R,3aS,8bS)-2,3,3a,8b-tetra-hidro-2-hidroxi--1-[ (E)- (3S,4RS)-3-hidroxi-4-metiloct-l-en-6-inil]-lH-ciclo-penta[b] [ 1]benzofuran-5-butanoato de sódio: nome genérico: beraprost sódico) e outros semelhantes, e entre estes, beraprost sódico é o preferido. No entanto, estes não são nada mais do que exemplos específicos, e os compostos não estão restringidos aos mesmos.

Na presente invenção, os compostos representados pela Fórmula Geral (I), especialmente beraprost sódico, são estáveis durante um longo período de tempo, e a sua biodis-ponibilidade, quando administrados por via oral, é alta. Por conseguinte, eles podem ser especialmente preferivelmente utilizados porque uma toma de longo prazo é necessária para os pacientes com doença renal, especialmente em doentes com insuficiência renal crónica.

Os compostos de per si representados pela Fórmula Geral (I) acima descrita usados na presente invenção são conhecidos e podem ser produzidos por métodos conhecidos 30 ΡΕ1913946 descritos em, por exemplo, JP 1-53672 B, JP 7-5582 B, JP 3-7275 A, JP 6-62599 B e assim por diante.

Os compostos representados pela Fórmula Geral (I) de acordo com a presente invenção podem ser usados individualmente ou dois ou mais destes podem ser utilizados em combinação. 0 termo "insuficiência renal crónica" na presente invenção significa que o estado anormal da função renal, em que o número de nefrónios funcionais está diminuído de tal modo que a excreção de metabolitos de azoto é insuficiente e a homeostase do ambiente interno do corpo não pode ser mantida, é continuado durante um longo período de tempo. Especif icamente, ele pode ser definido como o estado ou síndrome na qual o azoto de ureia no sangue (BUN) e/ou o valor da creatinina sérica (Cre) está (estão) continuamente elevados. Esta definição é essencialmente a mesma que a definição descrita nos livros de texto mencionadas na secção Antecedentes da Técnica. Mais especificamente, se o valor de creatinina no soro medido pelo método da enzima (Tomoko OHARA, Tadashi KAWAI, Kidney and Dialysis, 39 (1995) 10) não é inferior a 1,4 mg/dL, o caso pode ser julgado como insuficiência renal crónica. No entanto, nos casos em que uma vez o valor elevado da Cre seja diminuído por uma terapia existente tal como o tratamento de diálise ou semelhante, o caso pode ser considerado como insuficiência renal crónica, mesmo se o valor de Cre é mais baixo do que o valor acima mencionado. ΡΕ1913946

Exemplos das doenças primárias da insuficiência renal crónica incluem cálculos renais, obstrução urinária, nefropatia diabética, glomerulonefrite aguda, glomerulo-nefrite crónica, sindrome nefrótica, rim poliquístico, nefropatia devida a infeção, nefrite lúpica, nefrite intersticial, nefrite túbulo-intersticial aguda, nefrite túbulo-intersticial crónica, cirrose hepática, edema hepático e insuficiência cardíaca congestiva. A presente invenção também é eficaz para a uremia cuja doença primária é nefrite de alteração glomerular menor, glomerulonefrite focal e segmentar, glomerulonefrite difusa, glomerulonefrite proliferativa mesangial, nefrite produtiva intra-canalicular difusa, nefrite crescêntica, glomerulonefrite esclerótica difusa ou nefropatia por IgA. 0 termo "uremia" na presente invenção significa o estado ou sindrome que mostra pelo menos um de entre náuseas, vómitos, anorexia, perda de apetite, perda de peso, diminuição da atividade, diarreia, polidipsia e diurese, úlcera intraoral, distúrbio gastrointestinal, retenção urinária, neuropatia craniana, anormalidades circulatórias, anemia, distúrbios da eritropoiese, manifestações cutâneas e manifestações oculares, causados pelo facto de que os resíduos não podem ser removidos do sangue devido ao progresso da insuficiência renal. Alguns livros de texto mais simplesmente definir uremia como "a condição na qual a urina existe no sangue", e um nome diferente "síndromes urémicas" é aplicado aos vários sintomas acima mencionados, 32 ΡΕ1913946 e o termo "uremia" na presente invenção inclui os vários sintomas definidos pelas sindromes urémicas. Exemplos das sindromes especificas de uremia incluem encefalopatia e neuropatia devidas a toxinas da urina, além de náuseas, vómitos, anorexia, perda de peso, diminuição da atividade, polidipsia e diurese, úlcera intraoral, anemia, distúrbios eritropoiéticos, perda de apetite e estado depressivo, e uremia podem ser compreendidos por uma ou mais destas sindromes. Por conseguinte, o agente terapêutico de acordo com a presente invenção proporciona um agente terapêutico para a uremia nos pacientes com insuficiência renal crónica, conforme acima definido.

Na avaliação do efeito do agente terapêutico de acordo com a presente invenção, o ponto no qual deverá ser tomada a maior atenção não deve ser colado à alteração do valor de Cre e valor de BUN no soro. Estes valores não são nada mais do que marcadores de insuficiência renal, especialmente os marcadores da função de filtração do rim para substâncias de baixa massa molecular, e eles não refletem a gravidade da uremia. Na verdade, de acordo com a presente invenção, por administração de um composto da Fórmula Geral (I), os sintomas urémicos desaparecem de per si ou são melhoradas, mesmo sob a condição em que a função renal é continuamente diminuída. Esta resposta é especialmente claramente observada nos indivíduos que têm um valor de Cre no soro de não menos do que 2 mg/dL na primeira visita. Por outro lado, pela desintoxicação ou remoção das substâncias urémicas pelo composto da Fórmula Geral (I), 33 ΡΕ1913946 embora o mecanismo não seja claro, a regeneração orgânica do rim ocorre e o paciente pode ser libertado da insuficiência renal de per si. Portanto, a monitorização do valor Cre no soro e valor BUN durante o período de tratamento é, deste ponto de vista, significativa. 0 paciente para o qual o agente terapêutico de acordo com a presente invenção é eficaz não é restrito, e qualquer indivíduo pode ser tratado, contanto que o paciente seja tido como sofrendo de uremia devida a insuficiência renal crónica. 0 paciente é preferivelmente um mamífero, mais preferivelmente um gato, cão ou ser humano. Entre estes, o agente terapêutico da presente invenção apresenta efeitos proeminentes em gatos, tendo em vista o facto de que quando o beraprost sódico incluído na Fórmula Geral (I) da presente invenção foi administrado como agente terapêutico, a uremia foi melhorada e os efeitos secundários, tais como diarreia e vómitos, não foram de todo observados durante o longo período de dosagem, e que para um gato com insuficiência renal crónica leve num grau de uremia, escusado será dizer que a melhoria dos sintomas clínicos de uremia, o valor de Cre no soro e o valor BUN que são marcadores de insuficiência renal drasticamente diminuíram e normalizaram, e o estado normalizado foi continuado durante um longo período de tempo, de modo que foi observado o efeito de restituição da insuficiência renal crónica de per si. Esta descoberta é muito surpreendente tendo em vista o facto de que a insuficiência renal crónica é uma síndrome irreversível e 34 ΡΕ1913946 os efeitos dos fármacos terapêuticos existentes não são mais do que atrasar a progressão da insuf iciência renal crónica. Na verdade, neste caso particular, de acordo com a presente invenção, mesmo depois de um longo período de tempo a partir do final do período de 6 meses durante o qual foi administrado o composto de teste, a função renal recuperada continuou a manter os valores normais, e o gato também era muito saudável quando avaliado a partir de condições gerais. 0 significado do fato de que estes resultados foram obtidos não em animais modelos de insuficiência renal, mas em casos reais de uremia em gatos pacientes que espontaneamente desenvolveram insuficiência renal crónica é muito grande. A dose por administração do composto representado pela Fórmula Geral (I), que é um ingrediente eficaz do agente terapêutico de acordo com a presente invenção, é usualmente de 0,01 yg/kg a 600 mg/kg, preferivelmente de 0,01 yg/kg a 60 mg/kg, ainda mais preferivelmente de 0,01 yg/kg a 10 mg/kg, ainda mais preferivelmente de 0,03 yg/kg a 3 mg/kg, de todo mais preferivelmente de 0,1 yg/kg e 1 mg/kg. Esta dose é administrada preferível- mente uma a quatro vezes por dia, cronicamente, durante não menos de 7 dias, preferivelmente não menos de 30 dias, mas o modo de administração não está restringido a isso. A composição farmacêutica de acordo com a presente invenção pode ter várias formas de dosagem. Mais especificamente, no caso da administração oral, a composi- 35 ΡΕ1913946 ção pode estar na forma de comprimidos, pós, grânulos finos, grânulos, comprimidos, líquidos, xaropes, cápsulas, bolas e sprays. Além disso, os produtos com forma podem ser revestidos com uma película, revestidos com açúcar ou enchidos em cápsulas. Os exemplos preferidos incluem comprimidos, pós, grânulos finos, grânulos, comprimidos, líquidos, xaropes e cápsulas. A composição pode estar na forma de solução esterilizada ou semelhante, e pode ser administrado por via parentérica. Outro ou outros solutos, tais como cloreto de sódio e glucose, numa quantidade suficiente para tornar o líquido isotónico, também podem ser usados.

Além das preparações orais acima mencionadas, o agente terapêutico e profilático de acordo com a presente invenção pode ser utilizado na forma de várias soluções injetáveis e supositórios. Dependendo das caraterísticas dos respetivos fármacos, controlos de libertação tais como aqueles que conseguem libertação controlada ou libertação retardada podem ser aplicados. Por exemplo, a função de libertação sustentada pode ser conferida ao fármaco através de um método conhecido, e uma bomba para a libertação sustentada (por exemplo, minibomba Alzet) também pode ser empregue, de modo que uma ampla variedade de métodos de administração também pode ser empregue para administração parenteral. Além disso, uma vez que as doenças renais são doenças crónicas requerem uma terapia de longo prazo, o agente terapêutico de acordo com a presente invenção pode ser preliminarmente adicionado às refeições de fórmula para 36 ΡΕ1913946 os pacientes com uma doença renal, sob a orientação de um médico ou de um veterinário. 0 agente terapêutico pode ser administrado oralmente subsequentemente, ou simultaneamente, ou após um intervalo de tempo a partir da administração de uma preparação de carbono ativo, que é um agente terapêutico existente para a uremia. Nos casos em que a preparação de carbono ativo é administrada subsequentemente ao agente terapêutico de acordo com a presente invenção, e onde o agente terapêutico de acordo com a presente invenção é administrado durante um período de tempo prescrito antes da administração da preparação de carbono ativo, podendo a mudança do agente terapêutico da presente invenção para a preparação de carbono ativo ser atingida quase instantaneamente. Por outro lado, nos casos em que a preparação de carbono ativo é comutada para o agente terapêutico da presente invenção, um período de eliminação adequado da preparação de carbono ativo é preferivelmente dado porque há uma possibilidade de que o composto representado pela Fórmula Geral (I) pode ser adsorvido por o carbono ativo e o seu efeito farmacológico pode ser influenciado. 0 fármaco da presente invenção que tem o efeito de melhorar a uremia pode ser administrado em conjunto com várias fármacos acima descritos utilizados para a melhoria da insuficiência renal, incluindo inibidores da enzima de conversão da angiotensina e bloqueadores de recetores de ATII, assim como fármacos anti-hipertensivos tais como os bloqueadores e β-bloqueadores de cálcio, ou uma mistura do agente terapêutico com este ou estes fármacos pode ser preparada e administrada. 37 ΡΕ1913946 A presente invenção também revela um método de tratamento para a uremia nos pacientes com insuficiência renal crónica. Nos seres humanos, quem pode ser tratado pelo método da presente invenção são pacientes com insuficiência renal crónica nos quais a uremia é complicada. 0 método pode ser aplicado não apenas, escusado será dizer, aos pacientes com uremia antes de receberem tratamento de diálise, mas também aos pacientes com uremia que estão a receber tratamento de diálise. Além disso, o método pode ser aplicado aos pacientes que desenvolveram uma complicação devida ao tratamento de diálise, e aos pacientes que desenvolveram efeitos secundários pela preparação de carbono ativo. Ainda mais, o método pode ser empregue em conjunto com um ou mais fármacos para o tratamento sintomático de complicações devidas a diálise, tais como eritropoietina para a anemia ou desordens eritropoiéticas. De modo semelhante, a presente invenção pode ser aplicada aos pacientes com uremia causada por insuficiência renal crónica, que estejam a receber terapia com preparação de carbono ativo. Deve ser entendido, contudo, que o carbono ativo tem uma capacidade para adsorver substâncias de forma não especifica, e o tratamento é preferivelmente realizado, tomando o horário de administração de ambos os fármacos em consideração. Nos casos em que foram desenvolvidos efeitos secundários pela preparação de carbono ativo, a terapia com a preparação de carbono ativo pode ser parada e a terapia pode ser mudada para o método da presente invenção. A uremia de animais de estimação diferentes de gatos e cães 38 ΡΕ1913946 também pode ser tratada pela presente invenção da mesma maneira. Os animais de estimação não estão restringidos, e quaisquer dos animais que são sujeitos da medicina veterinária para os quais o diagnóstico e a terapêutica são exigidos pelos clientes (donos), e que são julgados como tendo uremia causada por insuficiência renal crónica por veterinários, podem ser tratados, e os mamíferos são preferivelmente empregues. Os animais são classificados em famílias, géneros e espécies em taxonomia, e a presente invenção pode igualmente ser aplicada a qualquer um deles. Por exemplo, como para os gatos, ainda que os gatos domésticos (Felis catus) sejam habituais, outros animais pertencentes à família Falidae, género Felis, podem também ser preferivelmente utilizados. Além disso, os animais pertencentes a outros géneros na família Felidae, tais como dos géneros Panthera, Acinonyx, Neofelis e Lynx podem também ser empregues. Escusado será dizer que o método da presente invenção também pode ser preferivelmente aplicado aos animais que pertencem à família Canidae, que são animais de companhia diferentes de gatos e que desenvolvem uremia causada por insuficiência renal crónica. Além disso, é desnecessário dizer, a uremia causada por insuficiência renal crónica de todos os mamíferos diferentes dos pertencentes às famílias Felidae e Canidae também pode ser tratada pelo método da presente invenção. Escusado será dizer que, entre os animais de companhia, o método pode ser aplicado não só aos pacientes com uremia antes de receberem tratamento de diálise, mas também aos pacientes com uremia que já receberam tratamento de diálise. Além disso, o 39 ΡΕ1913946 método da presente invenção pode ser aplicado aos pacientes que já desenvolveram uma complicação devida a um tratamento de diálise. Mais ainda, o método da presente invenção pode ser aplicado aos pacientes que já desenvolveram efeitos secundários pela preparação de carbono ativo. Deverá ser entendido, contudo, que o carbono ativo tem uma capacidade para adsorver substâncias de forma não específica, e o tratamento é preferivelmente realizado tendo em consideração o horário e via de administração de ambos os fármacos.

EXEMPLOS A presente invenção irá agora ser descrita mais concretamente por meio dos seus exemplos. No entanto, a presente invenção não está restringida aos Exemplos seguintes.

Exemplo 1

Preparação de Comprimidos Contendo Beraprost Sódico

Influência do Volume e da Viscosidade da Solução de Granulação na Uniformidade do Conteúdo em Grânulos e Comprimidos

Como fármaco a ser administrado, foi usado o beraprost sódico (rac-(IR, 2R,3aS, 8bS)-2,3,3a,8b-tetra-hi-dro-2-hidroxi-l-[(E)-(3S,4RS)-3-hidroxi-4-metiloct-l-en-6--inil]-lH-ciclopenta[b][1]benzofuran-5-butanoato de sódio) (BPS). Beraprost sódico, 77,5 partes de pó de base (lactose (Pharmatose 200M, OMV Japão)) e celulose cristalina (Avicel PH-101, Asahi Chemicals) 20,0 partes) foram alimentados numa máquina de granulação com alta velocidade de mistura, 40 ΡΕ1913946 e a mistura foi agitada durante 1 minuto. Em seguida, uma solução aquosa preparada preliminarmente para granulação contendo beraprost sódico e hidroxipropilcelulose (HPC-M, Shin-Etsu Chemical) como ligante até um conteúdo final de 2 partes foi adicionada numa quantidade prescrita, e a mistura da granulação foi realizada. Os grânulos obtidos foram fornecidos a um pulverizador e o produto resultante foi seco a 60 °C durante 10 horas em ar quente. O tamanho de partícula do resultante foi regulado com um granulador de malha 20 para se obterem grânulos secos. Estearato de magnésio foi adicionado numa quantidade de 0,5% com base na massa seca dos grânulos, e o resultante foi misturado num misturador em V, seguindo-se a compressão com uma máquina de fazer comprimidos contínua rotativa utilizando um punção e almofariz de 6 mm, 8R para se obterem comprimidos não revestidos com uma massa de 80 mg/comprimido. Os comprimidos não revestidos obtidos foram colocados numa máquina de revestimento e o revestimento foi realizado pulverizando uma solução de revestimento (Opadry™ (Opadry OYS-9607, Colorcon Japão) a 80 °C para se obterem comprimidos revestidos com uma película. A quantidade de revestimento foi de 3 mg/comprimido e o conteúdo de beraprost sódico foi de 40 yg/comprimido ou 150 yg/comprimido.

Exemplo 2 Cápsulas Contendo Beraprost Sódico

Os grânulos secos obtidos pelo método descrito no Exemplo 1 foram enchidas em cápsulas Qualicaps, Tamanho 5, 41 ΡΕ1913946 LOK-CAPS, SHIONOGI) para preparar cápsulas que contêm grânulos. As cápsulas contendo líquido foram preparadas por diluição de beraprost sódico em polietilenoglicol (Wako Pure Chemicals) para atingir uma dose de 10, 30, 70 ou 100 pg/28 pL/kg, e enchimento da solução em cápsulas Qualicaps. Cápsulas contendo beraprost sódico foram preparadas utilizando uma micropipeta. De forma semelhante, como placebo, foram preparadas cápsulas cheias com polietilenoglicol isolado numa quantidade de 28 pL/kg.

Exemplo 3

Estudo da Dose de Beraprost Sódico em Gatos Saudáveis

Neste estudo, foram utilizados três gatos machos e 2 gatos fêmeas, no total 5 gatos japoneses, com idades de 3 a 6 anos, que foram criados num hospital de animais e para os quais não foram observadas clinicamente anormalidades e por exame de sangue. Os gatos sujeitos foram colocados individualmente em gaiolas individuais em que cada gato foi autorizado a tomar água ad libitum, e cada gato foi alimentado duas vezes por dia depois da medição dos itens necessários. Para o propósito de aclimatização, os gatos foram sujeitos a medidas da tensão arterial duas vezes por dia, de forma não invasiva, durante 2 semanas.

As observações de sintomas clínicos gerais causados pela administração de beraprost sódico a gatos saudáveis foram realizadas como segue: se eventos adversos tais como ataxia, sedação, acamamento, sufusão de mucosa 42 ΡΕ1913946 visível, lacrimação, hipersalivação, vómitos, diarreia, incontinência e mudança nas condições respiratórias foram expressos ou não foram observados. A observação foi realizada antes da administração, e 30 minutos, 1 hora, 2 horas e 3 horas depois de cada administração durante os sete dias contínuos em que o fármaco foi administrado diariamente. Cada avaliação foi realizada por classificação em quatro patamares, como segue: As condições respiratórias foram classificados em: nenhuma anormalidade observada (Grau 0), respiração acelerada (Grau 1), hipopneia (Grau 2) e dispneia (Grau 3). Ataxia foi classificada em: sem anormalidade observada (Grau 0), leve (Grau 1), moderada (Grau 2) e abasia (Grau 3) . Sedação (resposta a contacto verbal) e acamamento (resposta ao contato verbal) foram classificadas em: nenhuma anormalidade observada (Grau 0), leve (Grau 1), moderado (Grau 2) e nenhuma resposta (Grau 3) . As avaliações de lacrimação, hipersalivação, vómitos, diarreia e incontinência foram classificadas em: nenhuma anormalidade observada (Grau 0), leve (Grau 1), moderada (Grau 2) e grave (Grau 3). A tensão arterial e a frequência cardíaca foram medidas como segue: Estas foram medidas de forma não invasiva oscilometricamente usando Life Scope 9 produzido por NIHON KOHDEN. A tensão sistólica, tensão diastólica e frequência cardíaca foram medidas 5 vezes cada antes da administração de beraprost sódico e 30 minutos, 1 hora, 2 horas e 3 horas após a administração de beraprost sódico na perna dianteira direita de cada gato. A partir dos 5 43 ΡΕ1913946 valores medidos, os valores máximo e mínimo foram excluídos, e a média dos restantes 3 valores medidos foi adotada como o valor medido do indivíduo no momento. As medições foram realizadas de cada vez, durante 7 dias, e as respostas dadas pelas respetivas administrações tinham aproximadamente o mesmo padrão. No Exemplo, os resultados (Figs. 1 e 2) na primeira administração de beraprost sódico sao mostrados como um representativo.

Análise de sangue e análise química do sangue foram realizadas como se segue: Foi recolhido sangue antes da administração de beraprost sódico e no dia seguinte ao termo da administração contínua durante 7 dias em cada dose (a administração contínua de um composto de teste durante 7 dias é a seguir referida como "1 série") em jejum, e analisados. Os itens de inspeção no exame de sangue foram RBC, WBC, PCV, Hb e Plat, e os da análise química do sangue foram AST, ALT, T.P, BUN, Cre, Na, K e Cl. 0 método de administração foi como segue: A cada um dos 5 gatos saudáveis, 4 séries de administração de beraprost sódico em doses de 10, 30, 70 e 100 yg/kg (administração contínua durante 1 semana entre cada dose), respetivamente, e 1 série de placebo que não continha beraprost sódico foram administradas sequencialmente. Em cada série administração, o mesmo gato foi usado em cada série de administração como o gato sujeito para a correção da avaliação do fármaco em teste. Para eliminar a influência do fármaco de teste da série anterior, um período de 44 ΡΕ1913946 eliminação de 2 semanas foi dado após o termo da série respetiva. Na série de administração de beraprost sódico e na série de administração de placebo, foram usadas as cápsulas contendo solução preparadas no Exemplo 2. A administração foi realizada por via oral em jejum duas vezes por dia em intervalos de 12 horas durante 7 dias seguidos. A análise estatística foi realizada usando um software estatístico Stat Ver J-4.5 (Abacus Concepts). Uma vez que os valores dos parâmetros, antes e após a administração ao mesmo indivíduo são comparados, foi realizado um teste de signif icância pelo teste de t emparelhado. Em qualquer dos casos, quando o nível de significância é inferior a 5%, foi considerado como significativo. Os resultados são os seguintes:

Como um resultado da observação de sintomas clínicos, não foram observadas de todo eventos adversos nas séries 10 yg/kg/BID e 30 yg/kg/BID. Por outro lado, 2/5 casos em 70 mg/kg/BID, eventos adversos tais como diarreia, vómitos e sedação de Grau 1 foram esporadicamente observados durante 2 a 6 dias após a administração. Mais particularmente, diarreia de Grau 1 foi observada no gato N° 1 no Dia 6 da administração contínua e no gato N° 2 nos Dias 2 e 5 da administração contínua. Na série 100 yg/kg/BID série 100, em todos os gatos, a partir do Dia 2 do início da administração, vómitos, diarreia e sedação de Grau 2 ocorreram frequentemente. Mais particularmente, o gato N° 1 mostrou diarreia nos dias 2 e 3 de administração 45 ΡΕ1913946 contínua; o gato N° 2 mostrou diarreia nos dias 2 e 3 e mostrou diarreia e vómitos no Dia 5; o gato N° 3 mostrou diarreia e vómitos no Dia 2, e diarreia nos Dias 3, 4 e 5; o gato N° 4 mostrou diarreia e vómitos no dia 2, diarreia no Dia 3, vómitos e fezes soltas no Dia 5, e diarreia no Dia 6; e o gato N° 5 mostrou diarreia e sedação no Dia 2, diarreia e vómitos no Dia 3, e diarreia no Dia 4; dentro de 2 horas a partir da administração dos respetivos dias em cada caso. Quanto a outros sintomas clínicos adversos, o gato N° 5 na série 100 mg/kg/BID mostrou sedação no Dia 2 de administração. Contudo, estes eventos adversos desapareceram no dia seguinte à administração final.

Exceto para a série 10 mg/kg/BID, foi observado aumento dependente da dose significativo (p<0,05) da frequência cardíaca devido a beraprost sódico de 30 mg/kg/BID, durante 30 minutos a 1 hora após a administração de beraprost sódico (a Fig. 1(a) mostra os valores medidos atuais, a Fig. 1 (b) mostra a velocidade de variação tomando o valor antes da administração como 100%). A variação máxima foi cerca de 25% de aumento após 30 minutos da administração de 100 mg/kg. Contudo, com qualquer dose, a frequência cardíaca foi restaurada para o nível antes da administração dentro de 2 horas a partir da administração. Este padrão transiente e de tempo curto de aumento da frequência cardíaca foi o mesmo, quer após a primeira administração, quer após a administração diária contínua de beraprost sódico. 46 ΡΕ1913946 A influência sobre a tensão arterial pela primeira administração na série de administrações nas doses respetivas é mostrada na Fig. 2. Nenhuma mudança significativa foi observada em qualquer das tensão sistólica, tensão diastólica e tensão de pulso. Quanto ao hemograma, eletró-litos, função renal e função hepática, nenhuma mudança adversa foi observada. Métodos de testagem para os pacientes que mostram uremia causada por insuficiência renal crónica, empregados no Exemplo 4 ou mais tarde, serão agora descritos. Os critérios e itens de avaliação para os cães e gatos com insuficiência renal crónica são os seguintes: Os diagnósticos da uremia e insuficiência renal crónica foram realizados totalmente levando em consideração verificações clinicas (incluindo verificações de uremia) e os resultados do exame de sangue, análise bioquímica do sangue e análise de urina. Como as verificações clínicas de uremia, foram observados existência e grau de polidipsia e diurese, desidratação, anorexia, perda de peso, sintomas de vómitos e estado de desidratação. A existência de insuficiência renal crónica foi julgada com base no valor de Cre no soro, como geralmente empregue. Como dados de referência para compreender o grau de progresso da insuficiência renal crónica, o valor BUN também foi monitorizada.

No exame de sangue, foram medidos RBC, WBC, PCV, Hg e PLT. Na análise bioquímica do sangue, foram medidos TP, Tcho, AST, ALT, ALP, Tbil, BUN, creatinina, cálcio, 47 ΡΕ1913946 fósforo inorgânico, glucose, ião sódio, ião potássio e ião cloreto. No exame de urina, foram medidas a quantidade de proteina, pH, sangue oculto, bilirrubina e glucose. Para eliminar o ritmo circadiano e a influência por refeições nos valores dos marcadores bioquímicos do sangue, toda a colheita de sangue foi realizada na parte da manhã antes da alimentação (em jejum).

Como critério mais específico para a insuficiência renal crónica em cães e gatos nos Exemplos presentes, foi empregue um valor de Cre no soro de 1,4 mg/mL no teste de sangue. 0 valor de Cre no soro foi medido pelo método da creatinina-desaminase-amido-hidrolase, e o valor de BUN como dado de referência para compreender o grau de progresso da insuficiência renal crónica foi medido pelo método urease-GLDH.

Este teste clínico piloto foi realizado após a obtenção do consentimento informado dos donos dos gatos (clientes) antes do início do teste, em que os clientes receberam explicações sobre o fato de que o beraprost sódico já havia sido aprovado como fármaco para a obstrução arterial crónica humana e já tinha sido comercializado, e sobre a sua segurança. Além disso, dando primeira prioridade ao benefício dos pacientes e clientes, os métodos terapêuticos convencionais também foram combinados de modo apropriado para os indivíduos com insuficiência renal em progresso. Exemplos de fármacos concomitantes empregues incluem carbonos ativos de síntese tais como ΡΕ1913946

Covalzin, Kremezin e Nefguard; preparações de cálcio, tais como carbonato de cálcio; refeições de fórmula tais como dietas k/d e pobres em proteínas; e soluções para infusão. Contudo, nos casos em que existiu uma razão racional e o consentimento do dono foi obtido, o beraprost sódico isolado foi administrado mesmo ao indivíduo com insuficiência renal em progresso. Por outro lado, os fármacos pensados para influenciar a ação do beraprost sódico, tais como vasodilatadores (por exemplo, enalapril), diuréticos (por exemplo, furosemida) , fármacos que influenciam o fluxo sanguíneo renal (por exemplo, dopamina) e esteroides (por exemplo, prednisolona) não foram utilizados. A administração de beraprost sódico foi realizada através da administração oral do comprimido com um conteúdo de 150 yg/comprimido (Exemplo 1) duas vezes por dia (300 yg/cabeça/dia). A administração foi realizada em cada dia e continuada basicamente durante 6 meses, e em casos em que o dono desejou, a administração foi continuada mesmo após o período de teste. Os exemplos da presente invenção incluem ambos os casos em que o período de administração foi de menos de 6 meses e mais de 6 meses. A avaliação do grau de melhoria dos sintomas urémicos foi realizada como segue: Dos sintomas clínicos relacionados com uremia, foram selecionados a atividade e o apetite, que não são suscetíveis de ser negligenciados e que podem ser observados universalmente antes e depois do período de teste. A atividade foi classificada em: 49 ΡΕ1913946 desaparecida (pontuação 0); diminuída (pontuação 1) e

normal (pontuação 2), e o apetite foi classificado em: perdido (pontuação 0), diminuído (pontuação 1); diminuído ligeiramente (pontuação 2) ; e normal (pontuação 3). A avaliação foi realizada com base nos pontos totais (a totalidade de pontos era de 5 pontos). Assim, um ponto mais alto indica mais melhorias nos sintomas clínicos.

Exemplo 4:

Administração de Beraprost Sódico a Gato com Insuficiência Renal Crónica (Caso-A, Administração de Beraprost Sódico

Isolado, Fig. 3) 0 Caso A foi um gato macho de 5 anos de idade, gue foi diagnosticado com insuficiência renal crónica como resultado de julgamento global. Após a obtenção do consentimento do proprietário (cliente), a terapia através da administração de beraprost sódico isolado foi iniciada. Como resultado, a pontuação chegou a 4 no primeiro mês da administração do beraprost sódico, e chegou a 5, a pontuação máxima, no segundo mês, e esta pontuação foi mantida durante 6 meses, gue foi o período de dosagem de beraprost sódico. Por outro lado, tanto os valores de BUN como de Cre diminuíram em simultâneo com o início da administração de beraprost sódico e BUN atingiu o valor mínimo no segundo mês desde o início, e Cre no soro atingiu o valor mínimo no guinto mês desde o início. No final do período de dosagem de 6 meses, não foram observadas diferenças entre o indivíduo sujeito e os gatos normais em 50 ΡΕ1913946 termos de observações clínicas e marcadores bioquímicos. Surpreendentemente, o acompanhamento aos 6 meses após o termo da administração de beraprost sódico, ou seja, aos 12 meses após o início da administração, revelou que não só as condições clínicas foram muito boas, mas também os valores de BUN e de Cre no soro foram mantidos em níveis normais. Por conseguinte, neste caso, não apenas a uremia mas também a própria insuficiência renal foram completamente curadas. Ainda que o facto do beraprost sódico restaurar a função renal uma vez diminuída durante a sua administração de modo que permite "aliviar" ou "restituir" o indivíduo da insuficiência renal também seja uma nova descoberta, o facto de o estado recuperado ser mantido durante um longo período de tempo após o termo da administração do beraprost sódico, isto é, "o efeito de que a insuficiência renal de per si é completamente curada e o estado é mantido", foi totalmente recentemente descoberto pelos presentes inventores com base neste caso. Durante a administração de beraprost sódico, nenhum evento adverso tal como diarreia, vómitos ou semelhantes foi de todo observado.

Exemplo 5:

Administração de Beraprost sódio ao Gato com Insuficiência Renal Crónica (Caso-B, Administração de Beraprost Sódico

Isolado, Fig. 4) O paciente sujeito a quem o beraprost sódico era para ser administrado era um gato Japonês macho de 4 anos de idade com uma massa corporal de 4,0 kg. A verificação na 51 ΡΕ1913946 primeira visita foi de retenção urinária devida a sindromes do trato urinário inferior do felino (FUS). Apesar dos tratamentos com um diurético e antibióticos, apenas foi obtida uma calmaria temporária e a pontuação clínica foi mantida em cerca de 3 pontos durante cerca de 1 ano. Depois disso, como resultado de testes globais, o gato foi diagnosticado como tendo insuficiência renal crónica. Como resultado da administração de beraprost sódico, a pontuação total dos sintomas clínicos a 1 mês após o início da administração foi aumentada de 3 pontos antes da administração para 5 pontos, a pontuação completa, de modo que a melhoria foi observada. No presente caso, durante o primeiro a segundo mês a partir do início da administração de beraprost sódico, foi observada uma ligeira melhoria dos sintomas clínicos, mas houve uma tendência do valor de BUN e valor de Cre no soro aumentarem. No entanto, surpreendentemente, a partir do quarto mês desde o início da administração de beraprost sódico, o valor BUN e o valor Cre no soro diminuíram acentuadamente para os valores normais, e a pontuação clínica alcançou os 5 pontos, a pontuação máxima. No caso presente, foi observada uma correlação aparente entre a melhoria dos sintomas clínicos e a diminuição dos valores dos marcadores da função renal. Com a melhoria dos sintomas urémicos, a massa corporal foi aumentada. Em resposta à forte procura pelo dono (cliente) , a administração diária de beraprost sódico continuou por um ano e meio, mas nenhuns eventos adversos foram de todo observados, e Cre e BUN são mantidos em níveis normais. Por conseguinte, foi provado que o beraprost sódico pode ser administrada de 52 ΡΕ1913946 forma segura durante um longo período de tempo. Além disso, o beraprost sódico não só tem um efeito excelente para melhorar a uremia, mas também tem um efeito que é claramente diferente do conceito convencional de melhoria de insuficiência renal crónica, conceito convencional esse que é o de suprimir ou parar o progresso do agravamento da função renal. Quer dizer, o efeito totalmente novo de beraprost sódico que restaura a uma vez diminuída função renal durante a sua administração de modo que permite "aliviar" ou "restituir" o indivíduo da insuficiência renal, também foi descoberto neste caso também. Também neste caso, durante a administração de beraprost sódico, nenhum evento adverso tal como diarreia, vómitos ou semelhante foi de todo observado.

Exemplo 6:

Administração de Beraprost Sódico ao Gato com Insuficiência Renal Crónica (Caso-C, Administração de Beraprost Sódio

Isolado, Fig. 5)

Este caso foi de uma gata de 16 anos de idade que foi diagnosticada com insuficiência renal crónica. Ocorreu ao mesmo tempo uremia progressiva de modo que era um caso para o qual outros fármacos eram para ser usados concomitantemente se uma terapia convencional estivesse a ser aplicada. No entanto, após uma extensa explicação e consentimento do dono (cliente), o beraprost sódico foi administrado sozinho. Na segunda semana a partir do inicio da administração de beraprost sódico, a pontuação clinica 53 ΡΕ1913946 foi largamente melhorada a partir de dois pontos para 4 pontos. Embora a pontuação clinica tenha de novo diminuído para 2 pontos na sexta semana, depois disso o pontuação clínica foi de 4 pontos, e após 2,5 meses, a pontuação clínica alcançou os 5 pontos, a pontuação completa. Durante este período, o valor de Cre no soro não mudou ou aumentou ligeiramente, mas o valor de BUN aumentou continuamente. Por este Exemplo, foi provado que o beraprost sódico tem um efeito de melhorar a uremia, mesmo sob a condição de que a insuficiência renal não tenha melhorado em termos de valores. Também neste caso, durante a administração de beraprost sódico, nenhum evento adverso tal como diarreia, vómitos ou semelhantes foi de todo observado.

Exemplo 7:

Administração de Beraprost Sódico ao Gato com Insuficiência Renal Crónica (Caso-D, Administração de Beraprost Sódico

Isolado, Fig. 6) 0 paciente sujeito a quem beraprost sódico era para ser administrado era um gato siamês macho de 17 anos de idade com uma massa corporal de 4,5 kg. Ainda que fosse um caso em progressão, com base na avaliação global, o beraprost sódico isolado foi administrado sem qualquer terapia convencional tal como a utilização de um fármaco ou a solução de infusão concomitante. Num mês antes do início da administração de beraprost sódico, não só o apetite mas também a resistência eram instáveis e a pontuação era de 2 pontos. Contudo, como resultado da administração de 54 ΡΕ1913946 beraprost sódico, a pontuação clinica total após um mês foi drasticamente melhorada desde os 2 pontos antes da administração para 5 pontos, e a massa corporal foi também aumentada. Também neste caso, durante a administração de beraprost sódico, nenhuma ação adversa causando diarreia, vómitos ou semelhantes foi de todo observada. Por outro lado, o valor de BUN refletindo a função renal foi conti-nuamente aumentado, mesmo após a administração de beraprost sódico. 0 valor de Cre no soro também manteve um valor alto. Também neste caso, o efeito de beraprost sódico para melhorar a uremia por beraprost sódico de per si foi claramente observado, apesar dos marcadores da função renal não terem melhorado. Também neste caso, durante a administração de beraprost sódico, nenhum evento adverso tal como diarreia, vómitos ou semelhante foi de todo observado.

Exemplo 8:

Administração de Beraprost Sódico ao Gato com Insuficiência Renal Crónica (Caso-E, Terapia de Combinação, Fig. 7) 0 paciente sujeito a quem o beraprost sódico era para ser administrado era um gato Japonês macho de 14 anos de idade com uma massa corporal de 3,5 kg. Desde cerca dos 10 anos de idade, retenção urinária e cistite devido a sindromes do trato urinário inferior (FUS) ocorreram repetidamente. Desde há vários meses, anorexia e emagrecimento tornaram-se proeminentes, e o gato foi diagnosticado com insuficiência renal complicada com uremia grave. Desde há vários meses, o gato foi tratado com 200 mg/BID de 55 ΡΕ1913946

Kremezin, diurético, solução de infusão, preparação de carbonato de cálcio e refeição de fórmula (refeição k/d), mas a uremia mostrada por vómitos, anorexia e perda de atividade não foi de todo melhorada, e a obstipação devida à preparação de carbono ativo também foi induzida. Em resposta a isso, Primperan Syrup (Fujisawa Pharmaceutical, nome genérico: metoclopramida) foi administrado, mas a pontuação clinica tornou-se 0. Em vista disto, após a obtenção do consentimento do dono, a administração de beraprost sódico foi iniciada para além das terapias convencionais que eram tratamentos com 200 mg/BID de Covalzin, 200 mg/BID de uma preparação de cálcio, refeição de formulação e solução de infusão. A pontuação clinica total depois de um mês a partir do inicio da administração d beraprost sódico foi amplamente aumentada para 4 pontos desde os 0 pontos antes da administração. Depois disso, ainda que tenha havido uma diminuição temporária na pontuação, a pontuação foi de 5 pontos, a pontuação completa, durante cerca de 3 meses, e os sintomas urémicos foram amplamente melhorados. No entanto, de acordo com a avaliação da função renal durante este período, o valor de Cre no soro permaneceu elevado, e o valor de BUN aumentou ainda de forma contínua, de modo que foram observadas condições opostas à melhoria drástica nos sintomas urémicos. Uma vez que a desidratação desapareceu completamente, a infusão deixou de ser necessária durante este período. Uma vez que a obstipação, que é um efeito secundário de Covalzin se tornou outra vez grave três meses após o inicio do tratamento, apenas a administração da 56 ΡΕ1913946

Covalzin foi eliminada nos quatro meses a partir da terapia de combinação. A partir deste momento, uma baixa pontuação clinica de 3 pontos continuou por cerca de 2 meses, mas pela terapia de combinação incluindo beraprost sódico, a pontuação clinica foi restaurada para 5 pontos que foram os pontos completos do 7o mês para o 8o mês, de modo que os sintomas urémicos foram drasticamente melhorados. Surpreendentemente, neste momento em que os sintomas urémicos tinham sido melhorados, o valor de Cre foi mantido elevado, e o valor BUN foi mesmo largamente aumentado. Depois da paragem da administração de Covalzin, a obstipação desapareceu completamente. Por outro lado, embora a administração de beraprost sódico tenha continuado, nenhuns efeitos adversos no trato digestivo, tais como vómitos e diarreia foram de todo observados a seguir. Por isso, o efeito excelente do beraprost sódico para melhorar sintomas urémicos foi adicionalmente confirmado claramente, apesar do facto de que Cre e BUN que são os marcadores da função renal mostrando insuficiência renal, terem ainda continua-mente aumentado. Também neste caso, durante a administração de beraprost sódico, nenhum evento adverso tal como diarreia, vómitos ou semelhantes foi de todo observado.

Exemplo 9:

Administração de Beraprost Sódico ao Gato com Insuficiência Renal (Caso-F, Nefropatia Diabética, Fig. 8) 0 paciente era um gato macho de 11 anos de idade, foi diagnosticado com insuficiência renal crónica derivada 57 ΡΕ1913946 de nefropatia diabética, dada a história do passado e os valores obtidos pela análise bioquímica do sangue, e apresentava sintomas urémicos. Em primeiro lugar, durante 2 meses, a insulina (insulina protamina de zinco, 2 unidades-/BID) para o tratamento de diabetes, e uma preparação de carbonato de cálcio e uma preparação de carbono ativo para uremia foram administrados. Como resultado, como para a diabetes, a glucose no sangue em jejum tornou-se 100 mg/mL, e o açúcar na urina foi ± estabilizado. No entanto, como para a condição de insuficiência renal, o valor BUN era invariavelmente alto, e os sintomas urémicos não foram melhorados e a pontuação clínica continuou a ser de 2 a 3 pontos. Em vista disto, a administração diária de beraprost sódico foi iniciada para além da terapia de insulina e a terapia de combinação com outros fármacos. Tão cedo quanto no primeiro mês após o início da administração do beraprost sódico, os sintomas clínicos foram drasticamente melhorados para a pontuação de 5 pontos, que era a pontuação máxima, e os sintomas urémicos desapareceram. Durante os 10 meses seguintes, esta condição continua. Por outro lado, o valor de BUN que é um marcador de insuficiência renal foi mantido elevado, mesmo após o início da administração de beraprost sódico, e o valor de Cre no soro aumentou continuamente ao longo de todo o período. Por este caso, ficou provado que o beraprost sódico pode ser de modo seguro e eficaz utilizado com para a terapia de uremia em pacientes com insuficiência renal crónica cuja doença principal é a diabetes. Além disso, foi adicionalmente confirmado atualmente que o beraprost sódico tem o efeito de melhorar sintomas urémicos ΡΕ1913946 mesmo se a insuficiência renal em si não é melhorada. Também neste caso, durante a administração de beraprost sódico, nenhum evento adverso tal como diarreia, vómitos ou semelhantes foi observado.

Exemplo 10:

Melhoria de Sintomas Urémicos por Comprimidos com Baixo Conteúdo de Beraprost Sódico (Caso-G, Administração de Comprimidos de Beraprost Sódico Isolado) 0 gato com insuficiência renal crónica usado neste Exemplo foi um gato mantido e criado como um doador de transfusão para cirurgias. Em virtude da vacinação em calendários apropriados, o gato estava livre de uma história passa de doenças infeciosas, e a condição de saúde foi periodicamente acompanhada por vários exames de sangue. Contudo, por julgamento global, o gato foi diagnosticado como tendo transferido insuficiência renal crónica, e a administração de beraprost sódico foi iniciada. Uma vez que a eficácia (efeito antiuremia) da administração de beraprost sódico na dose de 150 yg/cabeça/BID havia sido confirmada pelas informações sobre os casos clínicos pre-viamente estudados, uma dose mais baixa de 40 mg/cabeça/BID (Exemplo 1) foi administrada para este caso (caso-G), e os testes foram realizados a cada 2 semanas. Antes da administração de beraprost sódico, o valor BUN foi de 52,2 mg/mL, e o valor Cre no soro foi de 2,56 mg/mL. Depois de iniciar a administração de beraprost sódico na dose de 40 yg/cabeça/BID, o valor BUN quase foi mantida constante, 59 ΡΕ1913946 e a Cre aumentou continuamente até 2,79 mg/mL no Dia 28 e para 3,02 mg/mL no Dia 56. Por outro lado, o aumento da massa corporal foi observado a partir de uma fase inicial após o inicio da administração de beraprost sódico, e a massa corporal foi aumentada de 3,2 kg antes da administração de beraprost sódico para 3,83 kg no dia 14 e 3,95 kg no dia 56. A restituição dos sintomas urémicos também foi observada desde uma fase inicio, e a pontuação alcançou 5 pontos, que era a pontuação máxima, logo no Dia 14 a partir dos 3 pontos antes da administração de beraprost sódico, e os pontos máximos são mantidos dai em diante até ao Dia 56. Deste modo, por este Exemplo também, o efeito de melhoria dos sintomas urémicos de per si acompanhado por insuficiência renal crónica pela administração de beraprost sódico numa dose mais baixa foi também confirmada na condição de que o valor de Cre soro foi continuamente piorado. Também neste caso, durante a administração de beraprost sódico, nenhum evento adverso tal como diarreia, vómitos ou semelhantes foi de todo observado.

Exemplo 11:

Aumento da Massa Corporal pela Administração de Beraprost Sódico A administração de beraprost sódico melhorou claramente o apetite e desejo de água e aumento a massa corporal. Os casos são mostrados na Fig. 2. Como é evidente a partir da tabela, pela administração de beraprost sódico, a melhoria e o desaparecimento de sintomas urémicos 60 ΡΕ1913946 mostrados pela restauração da massa corporal expressa por um valor objetivo, em adição aos resultados das observações visuais tais como a melhoria da atividade e o aumento do apetite, deram uma grande satisfação ao dono, para não mencionar o gato paciente.

Tabela 1

Alterações na Massa Corporal de Gatos com Insuficiência Renal durante a Administração de Beraprost Sódico

Caso Idade Alterações na Massa Corporal durante a Administração de Beraprost Sódico (kg, mês) -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 Caso-A 5 5,2 5,5 5,5 5,5 5,7 5,7 6 Caso-B 4 3,5 3, 6 3,6 3,7 3,9 4,0 4,0 Caso-C 16 2,8 2,7 2,8 2,9 2,9 2,9 3,0 3,0 Caso-D 17 4,5 4,5 4,5 4,9 4, 9 4,9 4,9 Caso-E 14 3,5 3,8 3,7 3, 6 3,7 3,7 3,6 Caso-F 11 4,7 5 5 5,5 5,5 5,7 5,8

Exemplo 12:

Administração de Beraprost Sódico a Cão com Insuficiência

Renal (Caso-H, Fig. 9) O paciente sujeito a quem o beraprost sódico era para ser administrado era um cão fêmea (híbrido) de 14 anos de idade com uma massa corporal de 6,4 kg. O paciente visitou o hospital com queixas principais de anorexia e diminuição drástica na atividade. Com base na história 61 ΡΕ1913946 passada, observações clínicas e resultados de testes clínicos, o cão foi diagnosticado como tendo insuficiência renal crónica. A pontuação clínica na primeira visita foi tão baixa como 2 pontos, e o tratamento com Covalzin numa dose de 200 mg/BID foi iniciado. Como resultado, ainda que a pontuação clínica tenha melhorado um pouco para os 3 pontos em 2 semanas, depois disso, o valor baixo de 3 pontos continuou durante 2 meses, e nenhuma melhoria foi observada. Em vista disto, após a obtenção do consentimento por parte do cliente, o tratamento com Covalzin foi interrompido, e alterado para a administração de beraprost sódico isolado. Beraprost sódico foi diluído com polietile-noglicol (Wako) até atingir uma dose de 150 yg/cápsula, e foi dividido em cápsulas (Shionogi Qualicaps tamanho 5) . Beraprost sódico foi administrado oralmente duas vezes por dia em jejum. Como resultado, conforme mostrado na Fig. 9, a pontuação clínica foi aumentada para 4 pontos no primeiro mês a partir do início da administração, e alcançou os 5 pontos que eram a pontuação máxima no segundo mês. Por outro lado, BUN, que é um marcador de insuficiência renal, quase não muda, e o valor de Cre no soro aumentou apesar do facto de que as melhorias nos sintomas clínicos foram drásticas após o início da administração de beraprost sódico. Este fenómeno de que as melhorias nos sintomas clínicos e os valores de marcadores de insuficiência renal não se correlacionam necessariamente é a mesma que nos gatos com insuficiência renal. Na série de terapia acima descrita, a alimentação de uma refeição de fórmula e infusão não foram de todo realizadas. Também neste caso, 62 ΡΕ1913946 durante a administração de beraprost sódico, nenhum evento adverso tal como diarreia, vómitos ou semelhantes foi de todo observado. Com base no exposto acima, foi primeiro descoberto que na insuficiência renal crónica de cães, além de gatos, o efeito de beraprost sódico para melhorar sintomas urémicos é claramente mostrado, apesar do facto de que o valor de Cre no soro e o valor de BUN, que são marcadores da função renal indicativos de insuficiência renal são continuamente piores.

Lisboa, 15 de abril de 2014

Claims

ΡΕ1913946 1 REIVINDICAÇÕES 1. Uma substância para utilização no tratamento de uremia em pacientes que sofrem de insuficiência renal crónica, em que a referida substância compreende como ingrediente ativo um composto da Fórmula Geral (I):

[em que R1 é (A) COOR2, em que R2 é 1) hidrogénio ou um catião farmaceuticamente aceitável, 2) alquilo C1-C12 linear ou alquilo C3-C14 ramificado, 3) -Z-R3, em que Z é ligação covalente, ou alquileno linear ou ramificado representado por CtH2t em que t é um inteiro de 1 até 6, R3 é cicloalquilo C3-C12 ou cicloalquilo C3-C12 substituído com 1 a 3 R4(s) em que R4 é hidrogénio ou alquilo C1-C5, 4) - (CH2CH20) nCH3, em que n é um inteiro de 1 até 5, 5) -Z-Ar1, em que Z representa os mesmos significados conforme acima descrito, Ar1 é fenilo, a-naftilo, β-nafti-lo, 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, a-furilo, β-furilo, a-tienilo, β-tienilo ou fenilo substituído (em que o(s) substituinte(s) é(são) pelo menos um de cloro, bromo, 2 ΡΕ1913946 flúor, iodo, trifluorometilo, alquilo C1-C4, nitro, ciano, metoxi, fenilo, fenoxi, p-acetamidobenzamida, -CH=N-NH-C-(=0)-NH2, -NH-C (=0)-Ph, -NH-C (=0)-CH3 e -NH-C (=0)-NH2) ,
6) -CtH2tCOOR4, em que CtH2t e R4 representam os mesmos significados conforme acima descrito,
7) -CtH2tN (R4) 2, em que CtH2t e R4 representam os mesmos significados conforme acima descrito,
8) -CH (R5)-C-(=0)-R6, em que R5 é hidrogénio ou benzoílo, e R6 é fenilo, p-bromofenilo, p-clorofenilo, p-bifenilo, p-nitrofenilo, p-benzamidofenilo ou 2-naftilo,
9) -CpH2P-W-R7, em que W é -CH=CH-, -CH=CR7- ou -C=C-, em que R7 é hidrogénio, alquilo C1-C30 linear ou ramificado ou aralquilo C7-C30, p é um inteiro de 1 até 5, ou
10) -CH (CH2OR8) 2, em que R8 é alquilo C1-C30 ou acilo, (B) -CH2OH, (C) -C(=0)N(R9)2, em que R9 é hidrogénio, alquilo linear Ci-Ci2, alquilo C3-C12 ramificado, cicloalquilo C3-C12, cicloalquilalquileno C4-C13, fenilo, fenilo substituído (em que a ou as definições do(s) substituinte(s) é(são) as mesmas que as descritas em (A) 5) acima mencionado) , aralquilo C7-C12 ou -S02R1Q em que R10 é alquilo Ci Cio, cicloalquilo C3-C12, fenilo, fenilo substi- tuído tem que a ou as definições do(s) substituinte(s) é(são) as mesmas que as descritas em (A) 5) acima mencionado) , ou aralquilo C7~Ci2, em que os dois R9s pode ser o mesmo ou diferentes, com a condição de que quando um deles é -S02R10, o outro R9 não é -S02R10, ou (D) -CH20THP (em que THP é tetra-hidropiranilo), A é 3 ΡΕ1913946 1) - (CH2) m-, 2) -CH=CH-CH2-, 3) -CH2-CH=CH-, 4) -CH2-0-CH2-, 5) -CH=CH-, 6) -0-CH2- ou 7) -C=C-, em que m é um inteiro de 1 até 3, Y é hidrogénio, alquilo Ci-C4, cloro, bromo, flúor, formi-lo, metoxi ou nitro, B é -X-C (R11) (R12) OR13, em que R11 é hidrogénio ou alquilo Ci-C4, R13 é hidrogénio, acilo C1-C14, aroilo C6-Ci5, tetra--hidropiranilo, tetra-hidrofuranilo, 1-etoxietilo ou t-bu-tilo, X é 1) -ch2-ch2- 2) -CH=CH- ou 3) -C=C-, R12 é 1) alquilo C1-C12 linear, alquilo C3-C14 ramificado, 2) -Z-Ar2, em que Z representa os mesmos significados conforme acima descrito, Ar2 é fenilo, a-naftilo, β-nafti-lo, ou fenilo substituído com pelo menos um substituinte selecionado a partir do grupo constituído por cloro, bromo, flúor, iodo, trifluorometilo, alquilo C1-C4, nitro, ciano, metoxi, fenilo e fenoxi, 3) -CtH2tOR14, em que CtH2t representa os mesmos significados conforme acima descrito, R14 é alquilo C1-C6 linear, alquilo C3-C6 ramificado, fenilo, fenilo substituído com pelo menos um substituinte selecionado a partir do grupo constituído 4 ΡΕ1913946 por cloro, bromo, flúor, iodo, trifluorometilo, alquilo C1-C4, nitro, ciano, metoxi, fenilo e fenoxi, ciclopentilo, ciclo-hexilo, ciclopentilo substituído com 1 a 4 alquilo C1-C4 linear ou ciclo-hexilo substituído com 1 a 4 alquilo C1-C4 linear, 4) -Z-R3, em que Z e R3 representam os mesmos significados conforme acima mencionado, 5) -CtH2t-CH=C (R15) R16, em que CtH2t representa os mesmos significados conforme acima mencionado, R15 e R16 representam hidrogénio, metilo, etilo, propilo ou butilo, ou
6) -CuH2u-C=C-R17, em que u é um inteiro de 1 até 7, CuH2u é alquileno linear ou ramificado, e R e alquilo C1-C6 linear, E é hidrogénio ou -0R18, em que R18 é acilo Ci-Ci2, aroílo C7-C15 ou R1 (em que R1 representa os mesmos significados conforme acima descrito), a referida fórmula inclui isómeros d, isómeros 1 e compostos racémicos]. 1 A substância de acordo com a reivindicação 1 para utilização de acordo com a reivindicação 1, em que na referida Fórmula Geral (I): R1 é COOR1, em que R1 é hidrogénio ou um catião farmaceuti-camente aceitável, A é —(CH2)m-/ em que m é um inteiro de 1 até 3, Y é hidrogénio, B é -X-C (R11) (R12) OR13, em que R11 e R13 são hidrogénio, X é -CH=CH-, R12 é -CuH2u-C=C-R17 em que u é um inteiro de 1 até 7, CuH2u é 5 ΡΕ1913946 alquileno linear ou ramificado, e R17 é alquilo C1-C6 linear, e E é hidrogénio ou -0R2 (em que R2 representa os mesmos significados conforme acima descrito). 3. A substância de acordo com a reivindicação 1 para utilização de acordo com a reivindicação 1, em que na referida Fórmula Geral (I): R1 é COOR2, em que R2 é hidrogénio ou ião sódio, A é — (CH2) m—, em que m é 3, Y é hidrogénio, B é -X-C (R11) (R12) OR13, em que R11 e R13 são hidrogénio, X é -CH=CH-, R12 é -CuH2u-C=C-R17 em que u é 3, CuH2u é alquileno ramificado, e R17 é metilo, e E é -OH. Lisboa, 15 de abril de 2014