PT1749001E - 3-piperidinilisocroman-5-oles como agonistas da dopamina - Google Patents

Description

DESCRIÇÃO "3—PIPERIDINILISOCROMAN—5—OLES COMO AGONISTAS DA DOPAMINA"

CAMPO DA INVENÇÃO

Esta invenção refere-se a novos compostos que são agonistas selectivos da dopamina. Estes compostos são úteis para tratar distúrbios caracterizados por níveis anormais de dopamina.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO A dopamina é um neurotransmissor ubíquo, existente no sistema nervoso central (SNC), bem como no sistema nervoso periférico dos mamíferos. No SNC, está envolvido com a função motora, percepção, cognição, excitação, motivação e emoção. No sistema nervoso periférico, está envolvido, por exemplo, no controlo do sangue para os rins e na transmissão em gânglios autónomos É agora reconhecido que, de um modo geral, os receptores de dopamina no SNC existem como cinco receptores diferentes, designados como Dl a D5. Adicionalmente, são também classificados relativamente à forma com se assemelham à família do tipo Dl ou do tipo D2 de receptores, com base nas suas diferenças farmacológicas. Consequentemente, Dl e D5 são considerados parte da família Dl de receptores, enquanto D2, D3 e D4 são considerados parte da família D2. 1

Acredita-se que o desequilíbrio de dopamina desempenha uma função fundamental em vários distúrbios no SNC, tais como esquizofrenia, doença de Parkinson, abuso de drogas, distúrbios alimentares e depressão.

Os receptores Dl estão ligados, de um modo positivo, à adenilato ciclase e são encontardos em todas as áreas do cérebro humano, sendo o córtex frontal e a substantia nigra pars compacta particularmente ricas em receptores Dl. Os receptores Dl são encontrados também na periferia e foram identificados no tecido dos rins e coração. Como tal, os estados de doença atribuídos a aberrações da rede neuronal da dopamina podem, possivelmente, ser tratados com fármacos que são selectivos para o receptor Dl. De particular interesse, são uma classe de fármacos que podem actuar como agonistas selectivos dos receptores Dl.

Por exemplo, os agonistas Dl selectivos mostraram utilidade no tratamento da doença de Parkinson. A perda de dopamina estriatal na basal dos gânglios, a região do cérebro dos mamíferos que está envolvida com o controlo motor, foi estabelecida como o défice fundamental na doença de Parkinson e principal na etiologia desse estado de doença. A deficiência é resolvida via terapia de substituição de dopamina com L-DOPA (3,4-di-hidroxifenilalanina) que é convertida em dopamina no cérebro. Outros compostos que actuam como agonistas no receptor da dopamina, também foram utilizados para tratar a doença de Parkinson. A bromocriptina, o agonista da dopamina de acção directa mais amplamente utilizado no tratamento da doença de Parkinson, é, muitas vezes, administrado com L-DOPA, de modo a diminuir as suas dosagens, necessárias para alcançar a resposta terapêutica desejada. A bromocriptina isolada mostrou ser capaz 2 de aliviar os sintomas da doença de Parkinson em alguns doentes com doença de Parkinson em fase inicial, permitindo um atraso no inicio da terapia com L-DOPA. A utilização crónica de L-DOPA está associada com vários efeitos secundários graves e limitações, tais como o desenvolvimento de discinesia, flutuações de resposta graves (fenómeno on-off) e diminuição da eficácia durante o tratamento. É postulado que os fármacos anti-esquizofrénicos exercem os seus efeitos através do bloqueio dos receptores da dopamina (i. e., actuando como antagonistas do receptor) e, consequentemente, prevenindo o excesso de estimulação dos receptores (G.P Reynolds, TIPS, 13:116-121, 1992). No entanto, esses medicamentos antipsicóticos produzem, frequentemente, efeitos secundários indesejáveis, sendo o mais comum os efeitos extrapiramidais que incluem movimentos involuntários bizarros e estados semelhantes ao Parkinson, bem como sedação e hipotensão. Devido a estes efeitos secundários graves e frequentes e à elevada incidência de doentes que não responde a fármacos que bloqueiam a dopamina, continuam a ser investigadas terapias novas e melhoradas.

Um complemento aos antagonistas do receptor da dopamina para o tratamento de esquizofrenia, inclui a utilização de doses baixas de agonistas de dopamina, tais como apomorfina e bromocriptina, que mostraram produzir efeitos antipsicóticos, possivelmente devido à activação preferencial dos receptores pré-sinápticos da dopamina, resultando na diminuição da actividade dopaminérgica (M. Del Zompo et al., Progress in Brain Research, 65:41-48, 1986 e Η. Y. Meltzer, Drug Development Research, 9:23-40, 1986). Além disso, o agonista selectivo da dopamina Dl, SKF 38393, quando utilizado em conjunto com o 3 fármaco antipsicótico, haloperidol, um antagonista D2, mostrou melhorar os efeitos secundários indesejados do haloperidol (M. Davidson et al., Arch Gen. Psychiatry, 47:190-191, 1990).

Existem provas de que a dopamina desempenha uma função no sistema de recompensa do cérebro. Por exemplo, os animais treinados para auto-administrarem cocaína irão aumentar o seu consumo deste fármaco após tratamento com um antagonista do receptor Dl ou D2, presumivelmente de modo a manter os níveis elevados de dopamina responsáveis pelas propriedades euforigénicas e de reforço (D. R. Britton et al., Pharmacology Biochemistry & Behavior, 39:911-915, 1991). O agonista Dl, SKF 38393, mostrou também diminuir a ingestão de ração em ratos, presumivelmente por acção directa do fármaco nos mecanismos de alimentação neuronal. Devido a esta correlação entre a dopamina e recompensa, os agentes dopaminérgicos poderão ser úteis para o tratamento de abuso de substâncias e outros distúrbios de comportamento viciante, incluindo dependência da cocaína (A. L. Chausmer et al. Psychopharmacology, 159:145-153,2002) dependência da nicotina e distúrbios alimentares.

Os distúrbios afectivos, os distúrbios psiquiátricos mais comuns em adultos, são caracterizados por alterações no humor como a principal manifestação clínica e resultam de uma redução no sistema nervoso central de determinadas aminas biogénicas neurotransmissoras, tais como dopamina, noradrenalina e serotonina. Os antidepressivos actualmente disponíveis, funcionam principalmente pelo aumento dos níveis de aminas biogénicas neurotransmissoras, por inibição da sua absorção ou impedindo o seu metabolismo. No entanto, até agora, nenhum fármaco antidepressivo pode substituir a terapia de choque electroconvulsiva para o tratamento de depressão suicida grave. 4

Os fármacos actualmente disponíveis para o tratamento de distúrbios afectivos sofrem, infelizmente, de início atrasado de acção, fraca eficácia, efeitos anticolinérgicos a doses terapêuticas, cardiotoxicidade, convulsões e a possibilidade de sobredosagem. Um grande número de indivíduos clinicamente deprimidos, permanecem refractários às terapias actualmente disponíveis. Foi sugerida uma função para agonistas de dopamina de acção directa na terapia antidepressiva, baseada nos efeitos observados para vários agonistas da dopamina em vários modelos animais (R. Muscat et ai., Biological Psychiatry, 31:937-946, 1992) .

Foi também estabelecida uma função para a dopamina em mecanismos de cognição e atenção. Os estudos em animais suportam a função da dopamina em comportamentos relacionados com a atenção, envolvendo a actividade de procura e exploratória, capacidade de distracção, velocidade de resposta, capacidade de discriminação e perda de atenção. 0 tratamento de distúrbios de insuficiência cognitiva e defíce de atenção via terapia baseada em dopamina foi proposto e está sob investigação activa (A. Nieoullon, Progress in Neurobiology, 67:53-58 (2002) e T. Sawaguchi e P. S. Goldman-Rakic, Science, 252:947-940 (1991); e P. S. Goldman-Rakic et al., Science, 287:2020-2022 (2000)).

Além disso, a dopamina foi identificada com vários efeitos na periferia e foi utilizada no tratamento de choque, insuficiência cardíaca congestiva e insuficiência renal aguda. O estímulo dos receptores Dl periféricos provoca vasodilatação, particularmente nos leitos vasculares renais e mesentéricos onde existem um elevado número destes receptores. No entanto, a utilidade da dopamina tem sido limitada pela sua capacidade para provocar vasoconstrição a elevadas concentrações, 5 presumivelmente devido aos seus efeitos secundários nos receptores adrenérgicos e pelos seus efeitos eméticos, devido à estimulação dos D2 periféricos. Os agentes selectivos para os receptores Dl periféricos parecem oferecer vantagens significativas em relação aos tratamentos actualmente utilizados para estes e outros distúrbios relacionados (M. F. Lokhandwala, Drug Development Research, 113:123-124 (1987)).

Alguns compostos no âmbito da presente invenção são genericamente divulgados e reivindicados na Patente dos Estados Unidos da América N° 6004982, toda a sua descrição está aqui incorporada por referência. Por exemplo, nesse documento foram divulgados alguns (4-piperidinil)-ΙΗ-2-benzopiranos) como sendo úteis como antipsicóticos. A presente invenção representa enantiómeros individuais dos piperidinilisocromanos como agonistas da dopamina.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO Um composto da fórmula I

em que 6

I

Ri é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio, fenoxicarbonilo, alcoxiCi_6carbonilo, benziloxicarbonilo, naftiloxicarbonilo, fenilcarbamoilo, f enilcarbamoilalquiloCi-6, bif enilcarbamoilo, f enilalquilCi-6carbamoí lo, naf t ilcarbamoilalquiloCi_6, N-fenil-N-alquiCi_6lcarbamoí lo, alquiloCi_6 e dialquilCi-6carbamoilo, alceniloC2-6 e dialcenilC2-6carbamoílo, difenilcarbamoilo, heteroarilcarbamoilalquiloCi-6, fenilcarbonilo, bifenilcarbonilo, alquilCi-6carbonilo, morfolinilcarbonilo, piperidinilcarbonilo, pirrolidinilcarbonilo, fenotiazinilcarbonilo, fenilsulfonilo, dif enilsulf onilo, naf tilsulf onilo, alquilCi-ioSulf onilo, naf ti lalquilCi_6Sulf onilo, perf luoroalquilCi-6 sul f onilo, dif enilalquilCi-6Sulf onilo, benzenossulf onilo, dialquilCi-6aminossulf onilo, dif enilalquiloCi-6, benzilo, f enilalquiloC2-6, naf tilalquiloCi-6," cicloalquilC3-6alquiloCi-6, fenilalceniloCi-6, heteroarilalquiloCi-6, a-carboxibenzilo, f enilcarbonilalquiloCi-6, hidroxialquiloCi-6, bifenilalquiloCi-6, alquiloCi_6, f enoxifenilalquiloCi-6, fenilureiaalquiloCi-6, indanilo, em que benzilo e fenilo são opcionalmente substituídos com um ou dois substituintes, cada, seleccionado, independentemente, do grupo consistindo de alquiloCi-6, perf luoroalquiloCi_6, halogéneo, hidroxilo, alcoxioCi_6 e nitro, e em que o heteroarilo é tiofenilo, benzotiofenilo, furanilo, benzofuranilo, tetra-hidroquinolilo, tetra-hidroisoquinolilo, indolilo, imidazolilo, benzimidazolilo, piridinilo, isotiazolilo, benzisotiazolilo, isoxazolilo, benzisoxazolilo, isoquinolilo, ou quinolilo, em que o heteroarilo é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes, cada, seleccionado, independentemente, do grupo alquiloCi_6, halogéneo, hidroxilo, benzilo e alcoxiCi^, 7

em que R é hidrogénio ou benzilo Y é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio, alquiloCi-6, perf luoroalquiloCi-6f halogéneo, hidroxilo, alcoxioCi-6 e nitro; r2 e R3 são iguais ou diferentes e seleccionados, independentemente, do grupo consistindo de hidrogénio, alquiloCi-6, alquilCi_6carbonilo, formilo, alceniloC2-6r cicloalquilC3_6alquiloCi_6 e R2, R3 considerados em conjunto podem formar um anel com 2-5 átomos de carbono; R4 é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio, alquiloCi-4, e alquilCi_6Carbonilo; X é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio e alquiloCi-6,· e n é um número inteiro 1, 2 ou 3, um estereoisómero ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. 8 A presente invenção compreende, também, uma composição farmacêutica compreendendo o composto de fórmula I e um veículo farmaceuticamente aceitável, um método para preparar um medicamento para tratar um doente com níveis anormais de dopamina, em particular, Doença de Parkinson, compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto de fórmula I.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

Os termos, como aqui utilizados, têm os seguintes significados:

Como aqui utilizado, a expressão "alquiloCi-6", utilizado isolado ou em combinação com outros termos, significa um alquilo (ou alquileno, consoante apropriado) de cadeia linear ou ramificada e inclui grupos etilo e metilo e grupos propilo, butilo, pentilo e hexilo de cadeia linear ou ramificada. Os grupos alquilo particulares são metilo, etilo, n-propilo, isopropilo e terc-butilo. As expressões derivadas, tais como "alcoxioCi-6" , "alcoxiCi_6alquiloCi_6", "hidroxialquiloCi_g ", "alquilCi_6carbonilo", "alcoxiCi-6carbonilalquiloCi-6", "alcoxiCi_6carbonilo", "aminoalquiloCi_g", "alquilCi_6carbamoilalquiloCi_6", "dialquilCi_gcarbamoilalquiloCi_g" "mono- ou di-alquilCi-gaminoalquiloCi-g", aminoalquilCi-gcarbonilo", "dif enilalquiloCi-6n, "fenilalquiloCi-g", "f enilcarbonilalquiloCi_6" e "fenoxialquiloCi-g" são para ser entendidos em conformidade.

Como aqui utilizado, a expressão "alceniloC2-g" inclui etenilo e grupos propenilo, betenilo, pentenilo e hexenilo de cadeia linear ou ramificada. De um modo semelhante, a expressão 9 "alciniloC2-6n inclui etinilo e propinilo e grupos butinilo, pentinilo e hexinilo, de cadeia linear ou ramificada.

Como aqui utilizado, a expressão "perfluoroalquiloCi_6" significa que todos os átomos de hidrogénio no referido grupo alquilo são substituídos com átomos de flúor. Exemplos ilustrativos incluem trifluorometilo e pentafluoroetilo e grupos heptafluoropropilo, nonafluorobutilo, undecafluoropentilo e tridecafluoro-hexilo de cadeia linear ou ramificada. As expressões derivadas, "perfluoroalcoxioCi-6" devem ser entendidas em conformidade.

Como aqui utilizado, a expressão "cicloalquiloC3-8n significa ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo, ciclo-heptilo e ciclooctilo.

Como aqui utilizado, a expressão "cicloalquilC3-8alquiloCi-6n significa que o cicloalquiloC3_8, como aqui definido, está também ligado ao alquiloCi-6, como aqui definido. Os exemplos representativos incluem ciclopropilmetilo, 1-ciclobutiletilo, 2-ciclopentilpropilo, ciclo-hexilmetilo, 2-ciclo-heptiletilo e 2-ciclooctilbutilo e semelhantes.

Como aqui utilizado "halogéneo" ou "halo" significa cloro, fluoro, bromo e iodo.

Como aqui utilizado a expressão "carbamoílo" significa um grupo -NC(O)-, onde o radical está ligado a duas posições que ligam dois grupos separados adicionais. 10

Como aqui utilizado, "doente" significa um animal de sangue quente, tais como, por exemplo, rato, murganho, cães, gatos, cobaios e primatas, tal como humanos.

Uma "quantidade terapeuticamente eficaz" de um agente dopaminérgico significa uma quantidade suficiente do composto para tratar distúrbios relacionados com a dopamina com uma proporção beneficio/risco aplicável a qualquer tratamento médico. Será entendido, no entanto, que a utilização diária total dos compostos e composições da presente invenção será decidida pelo médico responsável no âmbito da decisão médica responsável. 0 nível de dose terapeuticamente eficaz específico para qualquer doente particular irá depender de vários factores, incluindo o distúrbio a ser tratado e a gravidade do distúrbio; actividade do composto específico empregue; a idade, peso corporal, saúde geral, género e dieta do doente; o tempo de administração, via de administração e taxa de excreção do composto específico empregue; a duração do tratamento; fármacos utilizados em combinação ou simultaneamente com o composto específico empregue; e factores semelhantes bem conhecidos nas técnicas médicas. 0 termo "distúrbio afectivo", como aqui utilizado, refere-se a distúrbios que são caracterizados por alterações no humor, como a principal manifestação clínica, por exemplo, depressão. 0 termo "agente antipsicótico", como aqui utilizado, refere-se a fármacos amplamente utilizados no controlo sintomático de todas as formas de esquizofrenia, psicose orgânica, a fase maníaca da doença maníaco-depressiva e outras doenças idiopáticas agudas e, ocasionalmente, utilizado no 11 tratamento de depressão ou na ansiedade grave. 0 termo "distúrbio de défice de atenção", como aqui utilizado, refere-se a um distúrbio neuropsiquiátrico caracterizado por falta de atenção, impulsividade, possibilidade de distracção e algumas vezes hiperactividade que substitui o diagnóstico menos formal da sindrome de hiperactividade, sindrome hipercinético, disfunção cerebral minima e incapacidade de aprendizagem especifica. 0 distúrbio é prevalente entre crianças pré-adolescentes e reflecte-se em fraco desempenho escolar e comportamento social e foi descrito em relatórios experimentais de insuficiência na função motora, cognitiva e perceptiva. 0 termo "insuficiência cognitiva" refere-se a uma deficiência em qualquer um dos aspectos das funções cognitivas (processamento de informação) de perceber, pensar e lembrar. 0 termo "distúrbios cardiovasculares relacionados com a dopamina", como aqui utilizado, refere-se a patologias que podem ser revertidas ou melhoradas por administração de dopamina ou um agente dopaminérgico, que isolado ou em terapia de combinação com outras classes de agentes cardiovasculares. A utilidade de agentes dopaminérgicos em doenças cardiovasculares, por exemplo, no tratamento de choque e insuficiência cardíaca congestiva, é baseada na função conhecida, mas não completamente entendida, da dopamina no sistema cardiovascular, especialmente os efeitos da dopamina no coração e a capacidade da dopamina para produzir vasoconstrição, enquanto mantém o fluxo de sangue através dos leitos renal e mesentérico. Estão também incluídas outras utilizações potenciais para os agentes dopaminérgicos que incluem, por exemplo, a utilização na insuficiência renal. 12 0 termo "distúrbios psicológicos e neurológicos relacionados com a dopamina", como aqui utilizados, refere-se a distúrbios comportamentais, tais como psicoses e distúrbios comportamentais de vicio; distúrbios afectivos, tal como depressão major; e distúrbios de movimento, tais como doença de Parkinson, doença de Huntington e sindrome de Gilles de la Tourette, que foram associados, farmacologicamente e/ou clinicamente, a actividade dopaminérgica funcional insuficiente ou excessiva no SNC. Estão também incluídas indicações miscelâneas para as quais os agentes dopaminérgicos mostraram ser clinicamente úteis. Exemplos de tais indicações incluem distúrbios caracterizados por vómitos, tais como uremia, gastroenterite, carcinomatose, enjoos provocados por radiação e emese provocada por vários fármacos, soluços intratáveis alucinações provocadas pelo álcool. Os "níveis normais de dopamina" são os níveis de dopamina que são observados nos cérebros de indivíduos de controlo e são, normalmente, determinados como níveis dos metabolitos de dopamina ácido homovanílico (ácido 3-metoxi-4-hidroxifenilacético) e ácido 3,4-di-hidroxifenilacético. Os níveis anormais de dopamina são os níveis que não estão dentro da gama de níveis de dopamina observados nos cérebros de indivíduos de controlo. 0 termo "abuso de substância", como aqui utilizado, refere-se à auto-administração, regular ou periódica, de substâncias psicoactivas na ausência de indicações médicas e apesar da presença de problemas físicos, psicológicos, sociais ou ocupacionais recorrentes ou persistentes que o doente sabe serem provocados ou exacerbados por utilização continua da substância. 13

Como aqui utilizado, a expressão "veiculo farmaceuticamente aceitável" significa uma solvente, dispersante, excipiente, adjuvante ou outro material não tóxico que é misturado com o composto da presente invenção de modo a permitir a formação de uma composição farmacêutica, i. e., uma forma de dosagem capaz de administração ao doente. Um exemplo de tal veiculo é um óleo farmaceuticamente aceitável, normalmente utilizado para administração parentérica. 0 termo "sais farmaceuticamente aceitáveis", como aqui utilizado, significa que os sais dos compostos da presente invenção podem ser utilizados em preparações médicas. No entanto, outros sais podem ser úteis na preparação dos compostos de acordo com a invenção ou dos seus sais f armaceuticamente aceitáveis. Os sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos desta invenção incluem sais de adição de ácido que podem, por exemplo, ser formados por mistura de uma solução de um ácido farmaceuticamente aceitável, tais como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido metanossulfónico, ácido 2-hidroxietanossulfónico, ácido p-toluenossulfónico, ácido fumárico, ácido maleico, ácido hidroximaleico, ácido málico, ácido ascórbico, ácido succínico, ácido glutárico, ácido acético, ácido salicílico, ácido cinâmico, ácido 2-fenoxibenzóico, ácido hidroxibenzóico, ácido fenilacético, ácido benzóico, ácido oxálico, ácido cítrico, ácido tartárico, ácido glicólico, ácido láctico, ácido pirúvico, ácido malónico, ácido carbónico ou ácido fosfórico. Podem também ser formados sais de metais ácidos, tais como mono-hidrogenortofosfato de sódio e hidrogenossulfato de potássio. Os sais assim formados, também, podem estar presentes como os sais de mono ou di-ácido e podem existir como hidratados ou podem ser substancialmente anidros. Além disso, quando os compostos da invenção apresentam 14 uma porção acídica, os seus sais farmaceuticamente aceitáveis podem incluir sais de metais alcalinos, e. g., sais de sódio ou potássio; sais de metais alcalino-terrosos, e. g.,sais de cálcio ou magnésio; e sais formados com ligandos orgânicos adequados, e. g.f sais de amónio quaternário. A expressão "estereoisómeros" é um termo geral utilizado para todos os isómeros das moléculas individuais que diferem apenas na orientação dos seus átomos no espaço. Tipicamente, incluem isómeros de imagem ao espelho que são, normalmente, formados devido a, pelo menos, um centro assimétrico (enantiómeros). Quando os compostos de acordo com a invenção possuem dois ou mais centros quirais, podem existir adicionalmente como diastereoisómeros, algumas moléculas individuais podem também existir como isómeros geométricos (cis/trans) . É para ser entendido que todos estes isómeros e as suas misturas em qualquer proporção estão englobados no âmbito da presente invenção. A "quantidade terapeuticamente eficaz" significa uma quantidade do composto que seja eficaz no tratamento do distúrbio ou patologia indicada.

Como utilizado nos exemplos e preparações que se seguem, os termos aqui utilizados deverão ter os significados indicados: "kg" refere-se a quilogramas, "g" refere- se a gramas, "mg refere-se a miligramas, "pg" refere-se a microgramas, "pg refere-se a picogramas, "mol" refere-se a moles, " mmol refere-se a milimoles, "nmole" refere-se a nanomoles, "L refere-se a litros, "mL" ou "ml " refere-se a mililitros, "pL refere-se a microlitros, "°C" refere-se a graus Célsius, "Rf refere-se a factor de retenção, "pf" ou "p.f." refere-se a ponto 15 de fusão, "dec" refere-se a decomposição, "pe" ou "p.e." refere-se a ponto de ebulição, "mm de Hg" refere-se a pressão em milímetros de mercúrio, "cm" refere-se a centímetros, "nm" refere-se a nanometros, " [a] D " refere-se a rotaçao específica da linha D do sódio a 20 °C obtida numa célula de 1 decímetro, "c" refere-se a concentração em g/mL, "THF" refere-se a tetra-hidrofurano, "DMF" refere-se a dimetilformamida, "NMP" refere-se a l-metil-2-pirrolidinona, "solução salina saturada" refere-se a uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, "M" refere-se a molar, "mM" refere-se a milimolar, "μΜ" refere-se a micromolar, "nM" refere-se a nanomolar, "TLC" refere-se a cromatografia em camada fina, "HPLC" refere-se a cromatografia líquida de elevado desempenho, "HRMS" refere-se a espectro de massa de elevada resolução, "CIMS" refere-se a espectrometria de massa com ionização química, "tRn refere-se a tempo de retenção, "lb" refere-se a libras, "gal" refere-se a galões, "L.O.D." refere-se a perda após secagem, "pCi" refere-se a microcuries, "i.p." refere-se a intraperitonealmente, "i.v." refere-se a intravenosamente.

Num aspecto desta invenção são divulgados novos compostos com a fórmula geral apresentada na fórmula I:

I em que 16

Ri é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio, fenoxicarbonilo, alcoxiCi_6carbonilo, benziloxicarbonilo, naftiloxicarbonilo, fenilcarbamoilo, f enilcarbamoilalquiloCi_6, bif enilcarbamoilo, f enilalquilCi-6carbamoí lo, naf t ilcarbamoilalquiloCi-6/· N-f enil-N-alquiCi_6lcarbamoí lo, alquiloCi_6 e dialquilCi_6carbamoí lo, alceniloC2-6 e dialcenilC2-6carbamoí lo, difenilcarbamoilo, heteroarilcarbamoilalquiloCi-6, fenilcarbonilo, bifenilcarbonilo, alquilCi-6carbonilo, morfolinilcarbonilo, piperidinilcarbonilo, pirrolidinilcarbonilo, fenotiazinilcarbonilo, fenilsulfonilo, dif enilsulf onilo, naf tilsulf onilo, alquilCi-ioSulf onilo, naftilalquilCi-6Sulfonilo, perfluoroalquilCi-6Sulfonilo, difenilalquilCi-6Sulfonilo, benzenossulfonilo, dialquilCi_6aminossulf onilo, dif enilalquiloCi-6, benzilo, f enilalquiloC2-6, naf tilalquiloCi-6; cicloalquilC3-6alquiloCi-6, f enilalceniloCi-6, heteroarilalquiloCi-6, a-carboxibenzilo, f enilcarbonilalquiloCi-6, hidroxialquiloCi-6, bif enilalquiloCi-6, alquiloCi_6, fenoxif enilalquiloCi-6, fenilureiaalquiloCi-6, indanilo, em que benzilo e fenilo são opcionalmente substituídos com um ou dois substituintes, cada, seleccionado, independentemente, do grupo consistindo de alquiloCi_6, perf luoroalquiloCi-6, halogéneo, hidroxilo, alcoxioCi_6 e nitro, e em que heteroarilo é tiofenilo, benzotiofenilo, furanilo, benzofuranilo, tetra-hidroquinolilo, tetra-hidroisoquinolilo, indolilo, imidazolilo, benzimidazolilo, piridinilo, isotiazolilo, benzisotiazolilo, isoxazolilo, benzisoxazolilo, isoquinolilo, ou quinolilo, em que heteroarilo é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes, cada, seleccionado, independentemente, do grupo alquiloCi-6f halogéneo, hidroxilo, benzilo e alcoxiloCi-6, 17

em que R é hidrogénio ou benzilo Y é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio, alquiloCi-6, perf luoroalquiloCi-6f halogéneo, hidroxilo, alcoxioCi-6 e nitro; R2 e R3 são iguais ou diferentes e seleccionados, independentemente, do grupo consistindo de hidrogénio, alquiloCi_6, alquilCi_6carbonilo, formilo, alceniloC2-6r cicloalquilC3^6alquiloCi_6 e R2, R3 considerados em conjunto podem formar um anel com 2-5 átomos de carbono; R4 é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio, alquiloCi-4, e alquilCi_6carbonilo; X é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio e alquiloCi_6; e n é um número inteiro 1, 2 ou 3, um estereoisómero ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. 18

Num outro aspecto desta forma de realização, é divulgado um composto em que R4 é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio e alquiloC4_4.

Num outro aspecto desta forma de realização, é divulgado um composto em que R2 e R3 são iguais ou diferentes e seleccionados, independentemente, do grupo consistindo de hidrogénio, alquiloCi-3, alceniloC2-4, cicloalquilC3-6alquiloCi-3 e R2, R3 considerados em conjunto podem formar um anel com 2-5 átomos de carbono, R4 é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio e alquiloCi-3, X é alquiloCi_4, e n é 1.

Num outro aspecto desta forma de realização, é divulgado um composto em que R2 e R3 são hidrogénio, R4 é hidrogénio; e X é alquiloCi-3.

Ainda noutro aspecto desta forma de realização, é divulgado um composto em que X é metilo.

Ainda noutro aspecto desta forma de realização, é divulgado um composto em que X é substituído na posição 6 do anel.

Num outro aspecto desta forma de realização, é divulgado um composto em que R4 é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio, dif enilalquiloC4^6, benzilo, f enilalquiloC2_6, naf tilalquiloCi-6; cicloalquilC3_6alquiloCi_6, f enilalceniloCi_6, heteroarilalquiloCi-6, α-carboxibenzilo, f enilcarbonilalquiloC4_6, hidroxialquiloCi_6»· bif enilalquiloCi_6, alquiloCi_6, f enoxif enilalquiloCi_6f f enilcarbamoilalquiloCi_6, naf tilcarbamoilalquiloCi-6 e f enilureiaalquiloCi_6; R2 e R3 são iguais ou diferentes e seleccionados, independentemente, do grupo consistindo de hidrogénio, alquiloC4-6, alceniloC2_6, 19 cicloalquilC3-6alquiloCi_6 e R2, R3 considerados em conjunto podem formar um anel com 2-5 átomos de carbono; R4 é seleccionado do e n de grupo consistindo de hidrogénio e alquiloC4_4; X é alquiloC4_6 é 1.

Os compostos específicos deste aspecto da forma realização são seleccionados do grupo consistindo de: (IR,3S)-6-Meti1-1-metilaminometi1-3-(1-metil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-(1-fenetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol (IR, 3S)-1-Aminometi1-3-{1-[2-(3-cloro-fenil)-etil]-piperidin-4 il}-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-{l-[4,4-bis-(4-fluoro-fenil)-butil]-piperidin-4-il}-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(3-fenil-butil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(2,2-difenil-etil)-piperidin-4-il]-6 metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-(l-benzil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol, Ácido [4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-i piperidin-l-il]-fenilacético, 20 (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(2-fenil-propil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(1-metil-2-fenil-etil) -piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(4-fluoro-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(2-fluoro-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[l-(3-fenil-alil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(3-metoxi-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-(l-indan-2-il-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-(1-butil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-(1-ciclo-hexilmetil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(2-cloro-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(3-cloro-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, 21 ΊΝΓ— { 2 — [ 4 — ( (1R,3S) -1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il) -piperidin-l-il]-etil}-benzamida, ΊΝΓ— { 2 — [ 4 — ( (1R,3S) -1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il) -piperidin-l-il]-etil}-4-fluoro-benzamida, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-{1-[3-(6-fluoro-benzo[d]isoxazol-3-il)-2-metilpropil]-piperidin-4-il}-6-metilisocroman-5-ol, N-{2-[4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-etil}-4-metil-benzamida, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-{1-[3-(6-fluoro-benzo[d]isoxazol-3-il)-butil]-piperidin-4-il}-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-(1-ciclopropilmetil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-6-Metil-l-metilaminometil-3-[1-(2-fenil-butil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, 1—{2—[4—((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-etil}-3-(4-fluoro-fenil)-ureia, 1—{2—[4—((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-etil}-3-fenil-ureia, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(3-fenil-propil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, 22 (IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-1-dimetilaminometil-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-1-dietilaminometil-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-6-meti1-1-metilaminometilisocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-1-etilaminometi1-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-1-[(etil-metil-amino)-metil]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-6-meti1-1-propilaminometilisocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-6-meti1-1-[(metil-propil-amino)-metil]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-[(Aiil-metil-amino)-metil]-3-(l-benzil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-1-ciclobutilaminometi1-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-6-metil-l-pirrolidin-l-ilmet ilisocroman-5-ol , 2 —[4 —((1R,3S)-1-Etilaminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-fenil-etanona, 23 2 —[4 —((1R,3S)-l-Dialilaminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-fenil-etanona, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(4-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-6-Meti1-1-metilaminometi1-3-[1-(4-trifluorometil-benzil) -piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Etilaminometi1-6-meti1-3-[1-(4-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Dimetilaminometi1-6-meti1-3-[1-(4-trmuorometil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-[(Etil-metil-amino)-metil]-6-meti1-3-[1—(4 — trifluorometilbenzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-6-Meti1-1-[(metil-propil-amino)-metil]—3—[1—(4— trifluorometilbenzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Dialilaminometi1-6-meti1-3-[1-(4-trifluorometilbenzil) -piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-AIilaminometi1-3-(l-benzil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-1-dialilaminometil-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-(1-naftalen-l-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol, 2 4 (IR,3S)-1-Aminometil-3-(1-isobutil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(3-metil-butil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(2,2-dimetil-propil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[l-(2-hidroxi-etil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-(l-isopropil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti)-3-(1-naftalen-2-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(4-fenoxi-benzil)-piperidin-4 il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-(1-tiofen-2-ilmeti1-piperidin-4-il)isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(4-isopropil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-(1-bifenil-4-ilmetil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(2,4-difluoro-benzil)-piperidin-4-il] 6-metilisocroman-5-ol, 25 (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[l-(l-fenil-etil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-(l-piridin-2-ilmetil-piperidin-4 il)-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-(1-piridin-3-ilmetil-piperidin-4 il)-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-(l-piridin-4-ilmetil-piperidin-4 il)-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-(1-quinolin-2-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-(l-quinolin-3-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-(l-quinolin-4-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(4-cloro-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(2,4-dicloro-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(3,4-dicloro-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, 26 (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(4-metoxi-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(4-hidroxi-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(3,4-difluoro-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(2-metil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(3-metil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(4-metil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-(1-tiofen-3-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(2-metoxi-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(3-fluoro-benzil)-piperdin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(2-fluoro-4-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-(1-furan-3-ilmetil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol, 27 (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(2-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(3-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(3,5-bis-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(2,5-bis-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(2-cloro-5-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(4-cloro-3-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(2-cloro-3-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(2-fluoro-3-trifluorometil-benzil) piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometil-benzil) piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3 S)-1-Aminometi1-3-[1-(3-fluoro-4-trifluorometi1-benz il) piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, 28 (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(4-fluoro-3-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(3-fluoro-5-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-(1-benzofuran-2-ilmetil-piperidin-4-il) 6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(3-metil-benzo[b]tiofen-2-ilmetil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-(1-benzo[b]tiofen-3-ilmetil-piperidin-4 il)-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(1-metil-lH-indol-2-ilmetil) piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(lH-indol-3-ilmetil)-piperidin-4-il] 6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(1-metil-lH-indol-3-ilmetil) piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(l-benzil-lH-indol-3-ilmetil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(1-metil-lH-benzoimidazol-2-ilmetil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-1-dipropilaminometil-6-metilisocroman-5-ol, 29 (IR,3S)-6-Metil-l-metiltaminometil-3-(1-fenetil-piperidin-4-il)- isocroman-5-ol, (lR,3S)-3-[l-(4-Fluoro-benzil)-piperidin-4-il]-6-metil-l-metilaminometilisocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(l-Ciclo-hexilmetil-piperidin-4-il)-6-metil-l-metilaminometilisocroman-5-ol, (lR,3S)-3-[l-(4-Isopropil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metil-l- metilaminometilisocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(1-Bifenil-4-ilmetil-piperidin-4-il)-6-metil-l-metilaminometilisocroman-5-ol, (IR,3S)-3-[1-(3,4-Difluoro-benzil)-piperidin-4-il]-6-metil-l-metilaminometilisocroman-5-ol, (lR,3S)-3-[l-(4-Metoxi-benzil)-piperidin-4-il]-6-metil-l-metilaminometilisocroman-5-ol, (IR,3S)-6-Metil-l-metilaminometil-3-[1-(4-metil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, ΊΝΓ— { 3 — [ 4 — ( (1R,3S) -1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il) -piperidin-l-il]-1-metil-propil}-4-cloro-benzamida, N-{3-[4-((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-eti1-2-meti1-propil}-4-metil-benzamida, N—{3 —[4 —((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-4-metil-benzamida, 30 ΊΝΓ— { 3 — [ 4 — ( (1R,3S) -1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il) -piperidin-l-il]-1-metil-propil}-4-trifluorometil-benzamida, N—{3 —[4 —((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-2,4-dicloro-benzamida, {3 —[4 —((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-amida do ácido bifenil-4 carboxílico, {3 —[4 —((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-amida do ácido benzo[b]tiofeno 2-carboxílico, N-{3-[4-((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-benzamida, ΊΝΓ— { 3 — [ 4 — ( (1R,3S) -1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il) -piperidin-l-il]-1-metil-propil}-4-fluoro-benzamida, ΊΝΓ— { 3 — [ 4 — ( (1R,3S) -1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il) -piperidin-l-il]-1-metil-propil}-4-bromo-benzamida, ΊΝΓ— { 3 — [ 4 — ( (1R,3S) -1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il) -piperidin-l-il]-1-metil-propil}-4-nitro-benzamida, N-((IR,3S)-5-isopropoxi-6-meti1-3-(4-piperidinil)-1-isocromanilmetil)formamida, N-((IR,3S)-5-metoxi-6-meti1-3-(4-piperidinil)-1-isocromanilmetil)formamida, 31

Dicloridrato de {3-[4-((IR,3S)-l-aminometil-5-hidroxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]1-metil-propil}-amida do ácido naftaleno-2-carboxílico, e {3-[4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-amida do ácido tiofeno-2-carboxilico.

Ainda noutro aspecto desta forma de realização, é proporcionado um composto de fórmula I, em que Ri é seleccionado do grupo consistindo de fenoxicarbonilo, alcoxiCi_6carbonilo, benziloxicarbonilo, naftiloxicarbonilo, fenilcarbonilo, bifenilcarbonilo, alquilCi_6carbonilo, fenilcarbamoilo, bifenilcarbamoilo, fenilalquilCi-6carbamoílo, N-fenil-N-alquilCi-6carbamoí lo, alquiloCi_60 e dialquilCi_6carbamoí lo, alceniloC2-6 e dialcenilC2-6carbamoí lo, dif enilcarbamoilo, heteroarilcarbamoilalquiloCi-6, fenilcarbonilo, bifenilcarbonilo, alquilCi-6carbonilo, morfolinilcarbonilo, piperidinilcarbonilo, pirrolidinilcarbonilo e fenotiazinilcarbonilo; R2 e R3 são iguais ou diferentes e seleccionados, independentemente, do grupo consistindo de hidrogénio, alquiloCi_6, alceniloC2-6»· cicloalquilC3_6alquiloCi-6 e R2, R3 considerados em conjunto podem formar um anel com 2-5 átomos de carbono; R4 é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio e alquiloCi_4, X é alquiloCi_6; e n é 1.

Exemplos deste aspecto da forma de realizaçao incluem: Éster isopropilico do ácido 4-((IR, 3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, 32 Éster metílico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxílico, Éster fenílico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, Éster p-tolilico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, Éster 4-cloro-fenilico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil- hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, Éster 2-cloro-fenilico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil- hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, Éster 4-bromo-fenilico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil- hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, Éster 4-fluoro-fenilico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, Éster 2-trifluorometil-fenilico do ácido 4-((lR,3S)-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, Éster 4-metoxi-fenilico do ácido 4-((IR, 3S)-1-aminometil-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, Éster 2-hidroxi-fenilico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, 33 Éster benzílico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6 metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxílico, Éster naftalen-2-ίlico ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi 6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, [4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-(4-fluoro-fenil)-metanona, [4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-(4-metoxi-fenil)-metanona, [4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-(2-hidroxi-fenil)-metanona, [4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-(4-cloro-fenil)-metanona, [4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-bifenil-4-il-metanona, [4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-fenil-metanona, [4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-(4-bromo-fenil)-metanona, 1—[4 —((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-2-fenil-etanona, 1—[4 —((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il) -piperidin-l-il]-etanona, 34 1—[4 —((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il) -piperidin-l-il]-3-metil-butan-l-ona, 1—[4 —((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-3-fenil-propan-l-ona, 1—[4 —((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-butan-l-ona, (2-Fluoro-5-trifluorometil-fenil)-amida do ácido 4-((lR,3S)-l aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, (3-Metoxi-fenil)-amida do ácido 4-((IR,3S)-1-Aminometil-5 hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, (3-Hidroxi-fenil)-amida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5 hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, (2-Hidroxi-fenil)-amida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5 hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, (4-Fluoro-fenil)-amida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5 hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, (2-Fluoro-fenil)-amida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5 hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico,

Difenilamida do ácido 4-((IR,3S)-l-aminometil-5-hidroxi-6 metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, 35

Metil-fenilamida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6 metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxílico,

Dimetilamida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6 metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico,

Diisopropilamida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6 metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, [4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-morfolin-4-il-metanona, [4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-pirrolidin-l-il-metanona,

Dietilamida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6 metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, [4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-fenotiazin-10-il-metanona, [4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-piperidin-l-il-metanona,

Dibutilamida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6 metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, e

Dialilamida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6 metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico. 36

Noutro aspecto desta forma de realização, são proporcionados compostos de fórmula I, em que Ri é seleccionado do grupo consistindo de fenilsulfonilo, difenilsulfonilo, naf t ilsulf onilo, alquilCi-ioSulf onilo, naf ti lalquilCi-6Sulf onilo, perf luoroalquilC i_6 sulf onilo, dif enilalquilCi-6sulf onilo, benzenossulfonilo, dialquilCi_6aminossulfonilo,

em que R é hidrogénio ou benzilo, Y é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio, alquiloCi-6, perf luoroalquiloCi-6, halogéneo, hidroxilo, alcoxioCi_6 e nitro, R2 e R3 são iguais ou diferentes e seleccionados, independentemente, do grupo consistindo de hidrogénio, alquiloCi-6, alceniloC2-6í cicloalquiloC3_6 e alquiloCi-6, R2, R3, considerados em conjunto, podem formar um anel com 2-5 átomos de carbono, R4 é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio e alquiloCi_4, X é alquiloCi_6; e n é 1.

Exemplos representativos incluídos no âmbito deste aspecto da forma de realização incluem: (IR,3S)-l-Aminometil-3-(1-benzenossulfonil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-(1-fenilmetanossulfonil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol, 37 (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(2-trifluorometil-benzenossulfonil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(3,4-dimetoxi-benzenossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(4-isopropil-benzenossulfonil) -piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(4-terc-butil-benzenossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[l-(naftaleno-2-sulfonil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(4-cloro-benzenossulfonil)-piperidin 4 — i1]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(2,4-dicloro-benzenossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(3,4-dicloro-benzenossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(2,5-dicloro-benzenossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[l-(bifenil-4-sulfonil)-piperidin-4-il] 6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-(1-etanossulfonil-pipeidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol, 38 (IR, 3S)-l-Aminometil-3-[1-(butano-1-sulfonil)-piperidin-4-il]-6 metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-lAminometi1-6-meti1-3-[l-(propano-2-sulfonil)-piperidin 4 — i1]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-6-metil-3-[1-(octano-l-sulfonil)-piperidin 4—i1]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-metil-3-[1-(2,2,2-trifluoro-etanossulfonil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR, 3S)-1-Aminometi1-6-metil-3-[l-(2-nitro-fenilmetanossulfonil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-l-Aminometil-6-metil-3-[1-(2-naftalen-l-il- etanossulfonil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-l-Aminometil-3-[1-(3,4-dicloro-fenilmetanossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3 S)-l-Aminometil-3-[1-(2,2-difenil-etanossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, 1(R)-[4-((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-sulfonilmetil]-7,7-dimetil-biciclo[2.2.1]heptan-2-ona, 1(S)—[4—((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-sulfonilmetil]-7,7-dimetil-biciclo[2.2.1]heptan-2-ona, 39

Dimetilamida do ácido 4-((IR,3S)-l-aminometil-5-hidroxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidina-l-sulfónico, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(piperidina-l-sulfonil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(4-benzil-piperidina-l-sulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, e (IR,3 S)-1-Aminometi1-3-[ 1-(3,4-di-hidro-lH-isoquinolina-2-sulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol.

Noutra forma de realização, a presente invenção é direccionada para uma composição farmacêutica para ligação selectiva a e activação de receptores dopaminérgicos compreendendo um veiculo farmaceuticamente aceitável e uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula I.

Ainda noutra forma de realização, a presente invenção também se refere a uma composição farmacêutica para o tratamento de distúrbios neurológicos relacionados com a dopamina seleccionados do grupo consistindo de distúrbios neurológicos, psicológicos, cardiovasculares, cognitivos ou de atenção, abuso de substâncias e comportamentos que causam dependência ou uma sua combinação, compreendendo um veiculo farmaceuticamente eficaz e uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula I. 40

Ainda noutra forma de realização, a presente invenção refere-se a um método para a preparação de um medicamento para o tratamento de distúrbios neurológicos relacionados com a dopamina seleccionados do grupo consistindo de distúrbios neurológicos, psicológicos, cardiovasculares, cognitivos ou de atenção ou abuso de substâncias e comportamentos que causam dependência ou uma sua combinação, compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula I.

Noutro aspecto desta forma de realização da invenção, o distúrbio neurológico é a doença de Parkinson.

Finalmente, noutra forma de realização desta invenção, é divulgado um método para a preparação de um medicamento para o tratamento dos efeitos secundários extrapiramidais associados com a utilização de agentes neurolépticos, compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula I.

Os compostos da invenção podem ser preparados através das vias sintéticas descritas abaixo nos Esquemas ou através de outros métodos que podem ser evidentes pelos especialistas na técnica. 41

Esquema A

7

No Esquema A, é representada a síntese do intermediário chave de fórmula 7. No passo Al, o Ν,Ρ-acetal de fórmula 1, a formação do qual é descrita por M. Journet, et al., Tetrahedron Letters, (1998), 39, 1717-1720, é feita reagir numa reacção do tipo Horner-Emmons com uma base na presença de um aldeído aromático, apropriadamente substituído, da fórmula 2, num solvente adequado, seguido por processamento ácido para produzir a cetona piridinilo de fórmula 3. A reacção é tipicamente efectuada em solventes alcoólicos ou misturas de álcoois e solventes etéreos. Os álcoois, tais como etanol, isopropanol ou 42 metanol, podem ser opcionalmente utilizados com solventes eterais, tais como tetra-hidrofurano ou éter dietilico. As bases adequadas, por exemplo, podem ser carbonatos de metais alcalinos, tais como Na2CC>3, K2CO3 e CS2CO3.

No Esquema A, passo A2, a redução estereosselectiva do composto da fórmula 3, para proporcionar o álcool quiral do composto da fórmula 4, é efectuada por reacção da cetona 3 com um reagente de redução quiral adequado. A redução estereosselectiva da cetona 3 no álcool de (S)piridilo desejado pode ser efectuada por métodos bem conhecidos pelos especialistas na técnica, por exemplo, agentes de redução opticamente activos, tais como diisopinocanfeilcloroborano, (DIP-Chloride™) , β-isopinocanfeil-9-borabiciclo[3.3.1]nonana, (Alpine-Borene™) e complexos de alumínio derivados de 1,1'-binaftil-2,2'-diol (BINAL-H), constitui uma classe. Outra abordagem utiliza um catalisador opticamente activo, tal como acetato de 2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1-binaftilruténio com hidrogénio ou oxazaborolidinas na presença de complexo de boranotetra-hidrofurano (THF) ou catecolborano. Uma discussão da redução enantiosselectiva de cetonas pode ser encontrada em Smith, M.B. e March, J., March's Advanced Organic Chemistry, John Wiley and Sons, Inc., 2001, pp. 1200-1201 . A redução pode ser efectuada em vários solventes orgânicos, com ou sem a adição de um ácido de Lewis, tal como SF3*Et20, que pode formar complexos com o azoto de piridina e, assim, necessita de menos agente de redução. Os solvente orgânicos adequados são solventes eterais, tais como éter ou THF, solventes hidrocarbonados, tais como pentano, hexano e semelhantes ou hidrocarbonados clorados, tais como diclorometano, clorofórmio ou 1,2-dicloroetano. A reacção pode ser efectuada à temperatura ambiente ou inferior, por exemplo, -60 °C a 25 °C. 43

No passo A3, o álcool de piridinilo quiral de fórmula 4 é reduzido no álcool piperidinilo do composto da fórmula 5 por hidrogenação catalítica, um método que é bem conhecido na técnica. Os catalisadores adequados são óxido de platina, paládio, ruténio, ródio e níquel. A reacção é, normalmente, efectuada num solvente alcoólico, tais como metanol, etanol, propanol e isopropanol com a adição opcional de um ácido mineral, tal como HC1, ou num ácido orgânico, tais como ácido acético ou propiónico ou as suas misturas. A reacção pode ser efectuada a uma temperatura entre a temperatura ambiente e 175 °C e a pressões entre 30-2000 p.s.i. de hidrogénio.

No passo A4, a reacção do álcool 19 com o acetal de formamida 6, resulta na formação do intermediário isocromano 7. A reacção é efectuada na presença de um ácido de Lewis como catalisador num solvente orgânico adequado a cerca de -10 °C até à temperatura de refluxo do solvente orgânico. Exemplos de ácidos de Lewis adequados são trifluoretoeterato de boro e triflato de trimetilsililo. Os solventes orgânicos adequados incluem solventes eterais, tais como éter e tetra-hidrofurano ou hidrocarbonetos cloratos, tais como diclorometano, clorofórmio e 1,2-dicloroetano. A reacção pode ser efectuada à temperatura ambiente ou inferior, por exemplo, -10 °C a 25 °C. Ver Patente dos Estados Unidos da América 6004982, concedida em 21 de Dezembro de 1999, aqui incorporada por referência. 44

Esquema B

Passo B2 , , Passo B5

Os compostos de fórmula I, em que Fq é difenilalquiloCi_6, benzilo, f enilalquiloC2-6, cicloalquilC3_6alquiloCi^6, f enilalquilenoCi-6,· heteroarilalquiloCi_6, fenilcarbonilalquiloCi-6, fenilcarbamoilalquiloCi_6, bifenilalquiloCi-6, alquiloCi_6 e indanilo, podem ser preparados de acordo com a sequência ilustrada no Esquema B. Consequentemente, no passo Bl, o composto de fórmula 7 é feito reagir com um aldeído na presença de um boro-hidreto adequado e um solvente adequado, para efectuar uma aminação redutora que resulta no composto de fórmula 8. Podem ser utilizados boro-hidretos adequados, por exemplo, boro-hidreto de sódio, 45 triacetoxiboro-hidreto de sódio, cianoboro-hidreto de sódio e boro-hidreto de sódio em combinação com isopropóxido de titânio. Os solventes adequados para a reacção são solventes contendo halogéneo, tais como diclorometano, clorofórmio e dicloroetano, solvente alcoólicos, tais como metanol, etanol e isopropanol, solventes eterais, tais como éter dietilico e tetra-hidrofurano e acetonitrilo. A temperatura reaccional não é critica mas, tipicamente, a reacção é efectuada desde 0 °C até à temperatura ambiente.

Como também ilustrado no Esquema B, o composto 8 pode sofrer reacções para proporcionar outros derivados desejados. No passo B2, o grupo formilo do composto 8 pode ser clivado para produzir a amina primária, o composto de fórmula 9. A clivagem pode ser efectuada por hidrólise ácida ou básica, métodos bem conhecidos pelos especialistas na técnica. Por exemplo, o grupo formilo pode ser removido por refluxo com ácido clorídrico diluido, um solvente orgânico miscível em água, ou hidrólise efectuada por aquecimento na presença de uma solução aquosa de hidróxido de metal alcalino com um co-solvente miscivel com água.

No passo B3, a clivagem do éter de fenol, composto 9, (onde R4 é alquiloCi-C4) no composto de fórmula 10, pode ser facilmente efectuada por reacção do composto 9 com um ácido de Lewis adequado, num solvente orgânico adequado. Os ácidos de Lewis adequados são tri-halogenetos de boro e tri-halogenetos de aluminio, por exemplo, tribrometo de boro, tricloreto de boro, tribrometo de aluminio e tricloreto de aluminio. Os solventes orgânicos adequados, são aquil-halogenetos, tais como diclorometano, clorofórmio e dicloroetano e solvente aromáticos, tais como benzeno, tolueno e xilenos. Tipicamente, a reacção 46 pode ser efectuada desde -10 °C até a temperatura de refluxo do solvente orgânico

Alternativamente, no passo B4, o composto 10 pode ser também directamente obtido a partir do composto 8 por clivagem simultânea do éter de arilalquilo e o grupo formilo pela reacção do composto 10 com um ácido mineral adequado, opcionalmente, com uma quantidade de um ácido orgânico adequado. Os ácidos orgânicos adequados são ácido cloridrico, ácido bromidrico e ácido iodidrico concentrado e os ácidos orgânicos adequados são ácido acético, trifluoroacético e propiónico. A temperatura reaccional pode variar entre a temperatura ambiente e a temperatura de refluxo do meio reaccional.

No passo B5, a preparação do composto metilamino de fórmula 11 pode ser efectuada, de um modo conveniente, por redução do grupo formamida do composto da fórmula 8. A redução pode ser facilmente efectuada por tratamento da formamida com um hidreto ou boro-hidreto de metal adequado num solvente orgânico adequado. Os hidretos de metal apropriados são hidreto de alumínio e lítio ou hidreto de bis(2-metoxietoxi)alumínio. Os boro-hidretos apropriados são, por exemplo, complexo de borano e metilsulfito de borano. Os solventes orgânicos adequados são éter dietílico, tetra-hidrofurano, diglima e etilenoglicol, éter dimetílico ou solventes aromáticos, tais como, por exemplo, benzeno ou tolueno. A redução pode ser efectuada a uma temperatura entre 0 °C e a temperatura de refluxo dos solventes orgânicos.

No passo B6, o composto de fórmula 11 pode ser convertido no metilaminofenol, o composto de fórmula 12, através dos mesmos métodos que foram descritos acima para a transformação do composto 9 no composto 10.

No passo B7, se for desejado, o grupo hidroxilo do composto da fórmula 12 pode ser acilado com R-C(=0)halogéneo ou (RC0)20, onde R é alquiloCi-C6, por processos bem conhecidos na técnica, para produzir um composto da fórmula 12a.

Esquema B'

Como outra alternativa, os compostos de fórmula I em que Ri é dif enilalquiloCi-6, benzilo, f enilalquiloC2-6, cicloalquiloC3-6alquiloCi-6f f enilalquilenoCi-6, heteroarilalquiloCi-6/· f enilcarboniloalquiloCi-6, bif enilalquiloCi-6 e alquiloCi_6 podem ser preparados de acordo com a sequência ilustrada no Esquema B'. Consequentemente, no passo BI', o composto de fórmula 7 é feito reagir com um halogeneto ou sulfonato de alquilo na presença de uma base adequada e um solvente adequado, para efectuar uma alquilação que resulta no composto de fórmula 8. Os halogenetos de alquilo adequados são, por exemplo, cloretos, brometos ou iodetos e os sulfonatos adequados são mesilatos ou tosilatos. As bases adequadas para a reacção são trietilamina, diisopropiletilamina e carbonato de potássio. Os solventes adequados para a reacção são solventes apróticos polares, tais como DMSO, DMF, tetra-hidrofurano e acetonitrilo. A temperatura reaccional não é 48 crítica mas, tipicamente, a reacção é efectuada à temperatura ambiente até 75 °C. Os compostos assim obtidos podem ser, depois, modificados como no passo B4', análogos do passo B4, para proporcionar os compostos de fórmula 10.

Esquema C

7 8

10a ( onde Ri é alquilCi-C6carbonilo)

onde Ri é ROCO, R'R"NS02, R'S02, R'NHC0 e R'R"NCO O Esquema C representa a síntese dos compostos em que R2 é fenoxicarbonilo, alcoxiCi_6carbonilo, benziloxicarbonilo, naftiloxicarbonilo, fenilcarbamoílo, bifenilcarbamoílo, f enilalquilCi_6carbamoilalquiloCi_6 e dialquilCi_6carbamoí lo, alceniloC2_6 e dialcenilC2_6carbamoí lo, dif enilcarbamoí lo, heteroarilcarbamoílo, 4-morfolinilcarbonilo, pirrolidinilcarbonilo, f enilcarbonilo, alquilCi_6carbonilo, 1-piperidinilcarbonilo, 10-fenotiazinilcarbonilo, fenilsulfonilo, 49 difenilsulf onilo, naf tilsulf onilo, alquilCi_i0sulf onilo, naf tilalquilCi_6Sulf onilo, perf luoroalquilCi_6 sul f onilo, dif enilalquilCi_6Sulf onilo, benzenossulf onilo, dialquilCi- 6aminossulfonilo. Assim, no passo Cl, o composto da fórmula 7 pode ser feito alquil-haloformatos, halogenetos de bifenilcarbamoilo, halogenetos de heteroarilcarbamoilo, reagir com haloformatos de fenilo, benzi1-haloformatos, nafti1-haloformatos, fenilcarbamoilo, halogenetos de halogenetos de fenilalquilcarbamoilo, bifenilcarbamoilo, halogenetos de halogenetos de fenilalquilcarbamoilo, halogenetos de alquilo e dialquilcarbamoílo, halogenetos de alcenilo e dialcenilcarbamoilo, difenilcarbamoilo, isocianatos de fenilo, bifenilisocianatos, isocianatos de alcenilo, halogenetos de fenilcarbonilo, halogenetos de alquilcarbonilo, halogenetos de 4-morfolinilcarbonilo, halogenetos de 1-piperidinilcarbonilo, halogenetos de pirrolidinilcarbonilo, halogenetos de 10-fenotiazinilcarbonilo, halogenetos de fenilsulfonilo, halogenetos de difenilsulfonilo, halogenetos de naftilsulfonilo, alquilsulfonilo, halogenetos de naftilalquilsulfonilo, halogenetos de perfluoroalquilsulfonilo, halogenetos de difenilalquilsulfonilo, halogenetos de benzenossulfonilo e halogenetos de dialquilaminossulfonilo na presença de uma base adequada num solvente orgânico adequado, para produzir o composto da fórmula 8. As bases adequadas são aminas terciárias, tais como diisopropiletilamina, trietilamina e triisopropilamina e os solventes adequados são halogenetos de alquilo, tais como diclorometano, clorofórmio e dicloroetano, solventes aromáticos, tais como benzeno, tolueno e xilenos e solventes eterais, tais como éter dietilico, tetra-hidrofurano, diglime e etilenoglicol e éter dimetilico. As reacções são tipicamente efectuadas a 0 °C até ao ponto de ebulição do solvente orgânico. 50

Nos passos C2 e C3, o composto 10 da amina primária pode, depois, ser obtido por hidrólise do composto 8 por métodos anteriormente descritos, para a transformação do composto 8 no composto 10, como apresentados no Esquema B, passo B2 e B3.

No passo C4, se for desejado, o grupo hidroxilo do composto da fórmula 10 pode ser acilado com R-C (=0) halogéneo ou (RC0)20, onde R é alquiloCi-C6, por processos bem conhecidos na técnica, para produzir um composto da fórmula 10a. 51

Esquema D o

Passo D6

0 Esquema D representa a utilização da metodologia de fase sólida para a preparação de compostos da presente invenção. 52 0 composto de fórmula 13, que é produzido a partir do composto 5 (ver Esquema A) , por reacção com cloroformato de benzilo sob condições bem conhecidas na técnica (ver T. W. Greene, et al. Protective Groups in Organic Chemistry, 2a Edição, John Wiley & Sons, Inc. Nova Iorque, 1991, p 335) e é preparado como um intermediário rapidamente purificado e facilmente armazenado a partir do composto 5. Como apresentado no passo Dl, o intermediário hidroxipiperidina de fórmula 5 pode ser produzido para posterior processamento a partir do composto 13 por hidrogenação de modo a clivar o grupo benziloxicarbonilo. 0 passo de hidrogenação pode ser efectuado num solvente orgânico adequado na presença de um catalisador adequado. Os solventes orgânicos adequados são álcoois e ácidos orgânicos, por exemplo, álcoois, tais como metanol, etanol, isopropanol e semelhantes ou ácidos orgânicos, tais como ácido fórmico, ácido acético, ácido propiónico e semelhantes. Os catalisadores adequados são paládio em carbono, hidróxido de paládio, cloreto de paládio, óxido de paládio, óxido de platina, platina em carbono e ruténio em carbono. A hidrogenação é, normalmente, efectuada a uma temperatura ambiente ou superior, mas inferior ao ponto de ebulição do solvente orgânico.

No passo D2, a formação da piperidina ligada a resina de fórmula 15 pode ser efectuada por reacção do composto de fórmula 8 com resina REM 14, num solvente orgânico adequado. Os solventes orgânicos adequados são solventes orgânicos polares apróticos, tais como dimetilformamida (DMF), N-metilpirrolidina (NMP) e dimetilsulfóxido (DMSO) e, tipicamente, a reacção pode ser efectuada a uma temperatura entre a temperatura ambiente e a temperatura de refluxo do solvente. 53

No passo D3, o reagente ligado a resina de fórmula 15 é, depois, feito reagir com um dimetilacetal de bromoalquilaldeído de fórmula 16, com um catalisador de ácido de Lewis adequado num solvente orgânico inerte adequado para efectuar a ciclização no bromoalquilisocromano ligado a resina de fórmula 17 (ver M.R. Michaelides, et al. J. Med. Chem., 1991, 34 2946-2953). Exemplos de catalisadores de ácido de Lewis adequados são o triflato de trimetilsililo, eterato de borotrifluoreto de dietilo, tetracloreto de titânio e triflato de zinco. Os solventes orgânicos inertes adequados são solventes de hidro-halcarboneto, tais como diclorometano, hidrocarbonetos aromáticos, tais como benzeno, tolueno e semelhantes e acetonitrilo. A reacção pode ser efectuada a uma temperatura adequada, tal como na gama de 0 °C à temperatura ambiente.

No passo D4, a substituição simultânea da resina e funcionalização do azoto da piperidina é efectuada para produzir o composto de fórmula 18. Num processo de dois passos, o isocromano ligado a resina de fórmula 17 é inicialmente feito reagir com um halogeneto de difenilalquilo, halogeneto de benzilo, halogeneto de fenilalquilo, halogeneto de alquilcicloalquilalquilo, halogeneto de fenilalquilenoalquilo, halogeneto de heteroarilalquilo, halogeneto de fenilcarbonilalquilo, halogeneto de hidroxialquilo, halogeneto de bifenilalquilo, halogeneto de alquilo, halogeneto de indanilo na presença de um solvente adequado, seguido por tratamento do sal quaternizado intermediário com uma base adequada num solvente adequado para produzir o intermediário 18 substituído em N. Os solventes reaccionais adequados para o primeiro passo são solventes polares apróticos, tais como NMP, DMF e DMSO. Para o segundo passo, os solventes adequados são halogenetos de alquilo, tais como diclorometano, clorofórmio e dicloroetano, 54 solventes aromáticos, tais como benzeno, tolueno e xilenos e solventes eterais, tais como éter dietílico e tetra-hidrofurano. As bases adequadas são aminas terciárias, tais como diisopropiloetilamina, trietilamina e triisopropilamina. As reacções podem ser efectuadas a uma temperatura adequada, tal como na gama de 0 °C à temperatura ambiente.

No passo D5, a reacção do intermediário bromo 18 com uma amina secundária produz o composto amina terciária de fórmula 19. A reacção é, normalmente, efectuada num solvente orgânico inerte adequado , tais como álcoois ou hidrocarbonetos aromáticos, com um excesso da amina secundária apropriada. A reacção pode ser efectuada num recipiente aberto ou fechado, a uma temperatura na gama da temperatura ambiente até à temperatura de refluxo do meio reaccional.

No passo D6, a clivagem do grupo O-alcoxio do composto 19 pode ser facilmente efectuada por métodos convencionais bem conhecidos na técnica e descritos acima no Esquema B, passo B3 e passo B4, para proporcionar o 5-hidroxisocromano de fórmula 20.

No passo D7, se for desejado, o grupo hidroxilo do composto da fórmula 20 pode ser acilado com R-C (=0) halogéneo ou (RC0)20, onde R é alquiloCl-C6, através de processos bem conhecidos na técnica, para produzir um composto da fórmula 20a. 55

Esquema E

Os composto de fórmula I, em que Ri é arilcarbonilaminoalquiloCi_6 ou arilcarbamoilaminoalquiloCi_6 podem ser preparados de acordo com a sequência ilustrada no Esquema E. Consequentemente, no passo Ei, o composto de fórmula 56 tal como 7 é feito reagir com o aminoaldeído protegido, N-(2-oxoetil)carbamato de t-butilo, na presença de um, boro-hidreto adequado e um solvente adequado para efectuar a aminação redutora, resultando no composto de fórmula 24. Podem ser utilizados boro-hidretos adequados são, por exemplo, boro-hidreto de sódio, triacetoxiboro-hidreto de sódio, cianoboro-hidreto de sódio e boro-hidreto de sódio em conjunto com isopropóxido de titânio. Os solventes adequados para a reacção são solventes contendo halogéneo, tais como diclorometano, clorofórmio e dicloroetano, solventes alcoólicos, tais como metanol, etanol e isopropanol, solventes eterais, tais como éter dietilico e tetra-hidrofurano e acetonitrilo. A temperatura reaccional não é critica mas, tipicamente, a reacção é efectuada entre 0 °C e a temperatura ambiente.

Como também ilustrado no Esquema E, passo E2, o grupo Boc do composto 24 pode ser facilmente clivado para produzir a amina primária, composto 25, que pode sofrer outras reacções para proporcionar outros derivados desejados. A clivagem pode ser efectuada sob condições acidicas e com métodos bem conhecidos pelos especialistas na técnica. Por exemplo, o grupo Boc pode ser removido por tratamento com cloreto de hidrogénio em acetato de etilo ou ácido trifluoracético em diclorometano.

No passo E3, o composto 25 pode ser feito reagir com cloretos de benzoilo do modo descrito no Esquema C, passo Cl, para proporcionar compostos de fórmula 26. A clivagem simultânea do éter de arilalquilo e do grupo formilo para proporcionar os compostos de fórmula 27 pode ser efectuada como descrito no Esquema B, passo B4. 57

Alternativamente, no passo E5, o composto 25 pode ser feito reagir com isocianatos do modo descrito no Esquema C, passo Cl, para proporcionar os compostos de fórmulas 28. 0 éter de arilalquilo e o grupo formilo de tais compostos podem, depois, ser clivados num processo com dois passos (passo E6 e E7), como descrito no Esquema B, passos B2 e B3, para proporcionar os compostos de fórmulas 29 e 30.

Esquema F

Os compostos de fórmula I, em que Ri é difenilalquiloCi-6, benzilo, f enilalquiloC2-6, cicloalquilC3-6alquiloCi-6 r heteroarilalquiloCi-6, bif enilalquiloCi-6 e alquiloCi-6 podem ser preparados de acordo com a sequência ilustrada no Esquema F. Consequentemente, no passo Fl, o composto de fórmula 7 é feito reagir com um agente de acilação na presença de uma base adequada, resultando no composto de fórmula 31. Os agentes de 58 acilação adequados são, por exemplo, halogenetos de ácido, anidridos ou anidridos mistos. As bases adequadas são trietilamina, diisopropiletilamina e piridina. Os solventes adequados para a reacção são solventes contendo halogéneo, tais como diclorometano, clorofórmio e dicloroetano, solventes eterais, tais como éter dietilico e tetra-hidrofurano, e acetonitrilo. A temperatura reaccional não é crítica mas, tipicamente, a reacção é efectuada entre 0°C e a temperatura ambiente.

Como também ilustrado no Esquema F, passo F2, o tratamento do composto 31 com um agente redutor reduz ambos os grupos carbonilo para proporcionar o composto de fórmula 32. Os agentes de redução adequados são hidreto de alumínio e lítio, hidreto de bis(2-metoxietoxi)alumínio e sódio e diborano. Os solventes adequados para a reacção são solventes eterais, tais como éter dietilico e tetra-hidrofurano e hidrocarbonetos aromáticos, tais como benzeno e tolueno. Tipicamente, a reacção é efectuada entre 0 °C e o ponto de ebulição do solvente. A clivagem do éter de arilalquilo para produzir compostos de fórmula 33 pode ser efectuada como descrito no Esquema B, passo B4. A invenção proporciona também composições farmacêuticas compreendendo um ou mais dos compostos de acordo com esta invenção, em associação com um veículo farmaceuticamente aceitável. De um modo preferido, estas composições estão em formas de dosagem unitárias, tais como comprimidos, pílulas, cápsulas, pós, grânulos, soluções ou suspensões parentéricas estéreis, aerossóis doseados ou vaporizadores líquidos, gotas, ampolas, dispositivos auto-injectores ou supositórios; para administração oral, parentérica, sublingual ou rectal ou para administração por inalação ou insuflação. Alternativamente, as 59 composições podem estar presentes numa forma adequada para administração uma vez por semana ou uma vez por mês; por exemplo, um sal insolúvel do composto activo, tal como o sal decanoato, pode ser adaptado para proporcionar uma preparação de depósito para injecção intramuscular. Pode ser contemplado um polímero passível de erosão contendo o ingrediente activo. Para preparar composições sólidas, tal como comprimidos, o ingrediente activo principal é misturado com um veículo farmacêutico, e. g., ingredientes de comprimidos convencionais, tais como amido de milho, lactose, sacarose, sorbitol, talco, ácido esteárico, estearato de magnésio, fosfato de dicálcio ou gomas e outros diluentes farmacêuticos, e. g., água, para formar uma composição de pré-formulação sólida contendo uma mistura homogénea de um composto da presente invenção ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. Quando se refere a estas composições de pré-formulação como homogéneas, isto significa que o ingrediente activo está disperso de modo homogéneo por toda a composição de modo a que a composição seja rapidamente subdividida em formas de dosagem unitária igualmente eficazes, tais como comprimidos, pílulas e cápsulas. Esta composição de pré-formulação é, depois, subdividida em formas de dosagem unitária do tipo acima descrito contendo desde 0,1 a cerca de 500 mg do ingrediente activo da presente invenção. As formas de dosagem unitárias aromatizadas contêm desde 1 a 100 mg, por exemplo, 1, 2, 5, 10, 25, 50 ou 100 mg do ingrediente activo. Os comprimidos ou pílulas da nova composição, podem ser revestidos, ou, de outro modo, compostos para proporcionar uma forma de dosagem que proporciona a vantagem de acção prolongada. Por exemplo, o comprimido ou pílula pode compreender uma componente de dosagem interna e de dosagem externa, estando a última na forma de um envelope sobre a primeira. As duas componentes podem ser separadas por uma camada entérica que serve para resistir à 60 degradação no estômago e permitir que a componente interna passe intacta para o duodeno ou tenha uma libertação retardada. Podem ser utilizados vários materiais para estes revestimentos ou camadas entéricas, tais materiais incluem vários ácidos poliméricos e misturas de ácidos poliméricos com materiais tais como goma-laca, álcool cetilico e acetato de celulose.

As formas liquidas nas quais as novas composições da presente invenção podem ser incorporadas para administração oral ou por injecção incluem soluções aquosas, xaropes adequadamente aromatizados, suspensões aquosas ou oleosas e emulsões aromatizadas com óleos comestíveis, tais como óleo de semente de algodão, óleo de sésamo, óleo de coco ou óleo de amendoim, bem como elixires e veículos farmacêuticos semelhantes. Os agentes de dispersão ou suspensão adequados para suspensões aquosas incluem gomas sintéticas e naturais, tais como tragacanto, acácia, alginato, dextrano, carboximetilcelulose de sódio, metilcelulose, polivinilpirrolidona ou gelatina.

No tratamento de vários estados de doença, como aqui descrito, um nível de dosagem adequado é de cerca de 0,01 a 250 mg/kg por dia, de um modo preferido, cerca de 0,05 a 100 mg/kg por dia e, especialmente, cerca de 0,05 a 20 mg/kg por dia. Os compostos podem ser administrados num regime de 1 a 4 vezes por dia.

Exemplos Biológicos:

Os seguintes protocolos de teste são utilizados para garantir as propriedades biológicas dos compostos desta invenção. 61

Ligaçao de [3H]-SCH-23390 aos Receptores da Dopamina Di

Humanos Clonados

Objectivo: A determinação da afinidade de ligação relativa de potenciais neuropsiquiátricos e outros agentes para o receptor Di da dopamina humano.

Processo: A. Clonagem 0 ADNc de Di humano foi obtido do laboratório do Dr. Marc Caron no vector pCMV5. Um fragmento Hind III a Xho I com 1,4 Kb foi subclonado no vector pMMLV. 0 plasmideo pHDl MMLV foi, depois, completamente sequenciado. As transfecções transientes nas células COS-7 foram efectuadas e foi obtida a ligação especifica a Di. A construção pHDl MMLV foi, depois, transf ectada, de um modo estável, para células CHO e foram isolados os clones resistentes 72 G418. Foram identificados expressores elevados por análise de dot blot de ARNm. Foram também caracterizados seis expressores elevados por ligação e, depois, foi escolhido o clone CH0-DiM#9 para caracterização farmacológica detalhada. Este clone foi, depois, crescido em cultura em suspensão com o objectivo de obter proteína suficiente para acomodar vários meses de rastreio. 62 Β. Condiçoes da Cultura Celular 1. Meio para culturas CHO aderentes:

Ham's F12 + 10% de soro bovino fetálico (FBS) + 400 pg/mL de geneticina (G418) + 10 mL/L de penicilina-estreptomicina (P/S). 2. As células são transferidas para a cultura em suspensão quanto estão disponíveis, pelo menos, 1,5 milhões de células (isto permite 300000 células/mL num frasco giratório de 50 mL; esta é a densidade de suspensão ideal). As células são removidas dos frascos com tripsina, sedimentadas a lOOOxG e o sedimento ressuspenso em meio fresco:

50% de CHO-SFM-II + 50% de Ham's F12 w/10% de FBS (concentração final de FBS de 5%) + 400 pg/mL de G418 + 1% de P/S. 3. Após a transferência para a cultura em suspensão, o crescimento é monitorizado e a viabilidade celular é avaliada utilizando a exclusão por azul de tripano. Foi registada a contagem de células viáveis e totais em 5 sectores do hemocitómetro. Quando a densidade de células viáveis atinge 600000 células/mL, o volume é aumentado para dobro. 4. Após 1 semana de crescimento no meio 50/50, as células são sedimentadas e transferidas para um novo frasco de sedimentação e substituído com 75% de CHO-SFM 11/25% de Ham's F12 + 10% de FBS mais pen-estrep e G418., depois, 63 disso, a cada 3 dias, o meio é substituído com novo meio contendo uma quantidade decrescente de FBS, como se segue:

Cone. final de FBS% 1,25 0,625 0,1 mL de CHO SFM: mL de Ham'S F12 87,50 : 12,5 93,75 : 6,25 99,00 : 1,00 5. O meio de cultura de manutenção final é constituído como se segue: A mistura de stock de 10 mL de pen-estrep, 0,5 mL de 400 pg/mL (activo; concentração final: 200 pg/mL) G418 e 1 mL de FBS são misturados e filtrados e refrigerados. Um volume (11,5 mL) desta mistura é adicionado a uma garrafa de 1 L aberta recentemente de CHO-SFM II. C. Preparação das Membranas

As células são recolhidas para tubos de centrífuga de 250 mL e sedimentadas a 1200 x G. O meio é removido e são adicionados 100 mL de PBS (solução salina tamponada com fosfatos) a cada tubo de centrífuga; as células são ressuspensas e novamente sedimentadas. O PBS é removido e o sedimento final é homogeneizado com um polytron em gelo num meio estabelecido. 64 D. Ensaio Lowry para Proteínas A suspensão de membranas é diluída em água e as amostras (10, 50 e 100 pL; q.s. para 100 pL com água) são diluídas com 100 pL de 1% de SDS. A amostra é agitada num vórtex e deixada a repousar durante 5 min. Duas alíquotas de cada amostra de proteína solubilizada são colocadas em tubos de ensaio limpos 13 x 100 para cada ensaio. As instruções são seguidas como descrito no kit de determinação de proteínas BioRad DC (Catalogo N° 500-0112). As leituras de OD que se encontram entre 0,1-0,5 (gama média da curva de padrão) deverão ser tipicamente utilizadas para os cálculos. As concentrações de proteína são calculadas a partir de uma curva padrão, utilizando albumina de soro bovino como padrão, por regressão linear e interpolação. E. Congelação/Armazenamento

Após recolha das células e determinação proteica, o homogenato é diluído com 10% de DMSO para corrigir o volume com base na Bmáx e dimensão relativa das experiências individuais a serem efectuadas. A proteína concentrada é armazenada em frascos criogénicos em alíquotas de 1-1,5 mL. As amostras podem ser armazenadas num congelador a -80 °C ou em azoto líquido. F. Reagentes de Ligação 1. a) Tampão Tris 0,5 M, pH 7,7 57.2 g de Tris HC1 16.2 g de Tris Base 65 q.s. para 1 L com água destilada b) Tampao Tris 0,05 M, pH 7,7 efectuar uma diluição 1:10 de (a) em água destilada 2. a) Tampão Tris Contendo Iões Fisiológicos

NaCl 7,014 g KC1 0,372 g CaCl2 0,222 g MgCl2 0,204 g q.s. para 1 L com tampão Tris 0,5 M, pH 7,7 b) Diluir o tampão (a) 1:10 em água destilada

Isto proporciona tampão Tris 0,05 M, pH 7,7 contendo NaCl 12 0 mM, KC1 5 mM, CaCl2 2 mM e MgCl2 1 mM. 3. a) stock de polietilenoimina a 3% em Tris 0,5 M (reagente 1 .a) b)

Diluir (a) 1:10 em Tris 0,05 M (reagente l.b) para a concentração final de polietilenoimina a 0,3%. O [N-metil-3H]-SCH-23390 (67-73 Ci/mmol) é obtido de

New England Nuclear (Catalogo N° Net-930).

Para as determinações de IC50 e K2: [3H]-SCH-23390 é constituído para uma concentração de 6,7 nM em tampão 66 4.

Tris 2b e são adicionados 150 pL a cada tubo. Esta adição proporciona uma concentração final de [3H]-SCH-23390 1 nM no ensaio de 1 mL. 5. O d-Butaclamol é obtido de Research Biochemicals, Inc. É preparado um stock 100 μΜ em água destilada e diluído 1:3,3 em tampão Tris 2b. 100 pL de stock diluído são adicionados a 3 tubos de ensaio para a determinação de ligação não específica. (Esta adição proporciona uma concentração final de d-butaclamol 3 μΜ no ensaio de 1 mL) . 6 . Compostos de Teste

Para a maioria dos ensaios, é preparada uma solução stock 1 mM num solvente adequado (normalmente <0,1% de ácido acético glacial) e diluída em série, para que a concentração final no ensaio varie entre 10~5 e 10~9 M. Dependendo da potência do fármaco, podem ser utilizadas concentrações inferiores ou superiores. G. Preparação do Tecido

As amostras de membranas células (anteriormente preparadas e congeladas) são removidas do congelador e deixadas a descongelar. As membranas são diluídas para a concentração apropriada (entre 50-500 pg de proteína/ponto de ensaio, dependendo nos níveis de expressão) em tampão Tris 2b e homogeneizadas com um polytron num meio estabelecido. 67 H. Ensaio 750 pL de suspensão de membranas celulares 150 pL de [3H]-SCH-23390 100 pL de veiculo (ligação total), butaclamol (NSB) ou concentração de fármaco apropriada. Método em 96-Poços:

As Packard Unifilters GF/B de 96 poços são incubadas durante >1 h a 25 °C em polietilamina a 0,1% (de 3,b) . O tecido frio é adicionado em último lugar e misturado num agitador orbital durante alguns segundos e é, depois, incubado a 37 °C durante 30 min num banho de água com agitação. O ensaio é interrompido por filtração rápida através de placas Packard Unifilter. As membranas de filtro são, depois, lavadas com 15 mL de tampão Tris 0,05 M gelado. Os filtros são, depois, secos (~15 min sob uma lâmpada de aquecimento ou incubados durante 15 min, num forno a 60 °C) e é aplicado uma tampa no fundo. São, depois, adicionados 40 pL de cocktail de cintilação Packard Microscint 20 e é aplicada uma tampa permanente no topo (Tipo P) e selada termicamente. As placas são, depois, agitadas num agitador orbital durante lhe colocadas num Packard Topcount e contadas durante, pelo menos, 0 5 minutos para cada ponto. 68 Método de Tubo de Ensaio:

Os tubos são incubados a 37 °C, durante 30 minutos, num banho de água com agitação. 0 ensaio é interrompido por filtração rápida através de filtros Whatman GF/B (pré-ensopados em polietilenoimina a 0,3%, reagente 3b) utilizando um Brandel Cell Harvester. As tiras de filtro são, depois, lavadas três vezes com 5 mL de tampão Tris 0,05 M gelado, pH 7,7, e contados em 5 mL de cocktail de cintilação Ecoscint. A ligação específica é definida como a diferença entre a ligação total e a ligação na presença de d-butaclamol 3 μΜ. Os cálculos de IC50 são efectuados utilizando o software GraphPad Prism; regressão linear, análise de competição por um local com limites superiores e inferiores mantidos constantes a 0% e 100% de inibição, respectivamente. A percentagem de inibição para cada concentração de fármaco é a média de determinações em duplicado. Os valores de K± são também calculados utilizando o software Prism ou através da seguinte fórmula:

Ki = IC50 1 + UKd , onde L = concentração de ligando na experiência e Kd = constante de dissociação do ligando A concentração de ligando experimental (L) é determinada pelo CAMS médio obtido a partir de duas amostras do stock de [3H]-SCH-23390 adicionado no ensaio. 69

Ligaçao de [N-metil-1 2 3H]Espiroperidol aos Receptores Longos D2 de Dopamina Humanos Clonados

Este ensaio determina a actividade in vitro de fármacos nos receptores Longos D2 (D2L) de dopamina humanos clonados e prevê as propriedades de substituição directa de dopamina de agentes neuropsiquiátricos, cardiovasculares e renais nos receptores D2 da dopamina humanos.

Clone P2L Humano: 0 gene D2L foi isolado a partir de uma biblioteca de ADNc de humano estriatal (caudato/putâmen). 0 gene foi sequenciado e sub-clonado num vector de expressão pRC/RSV (invitrogen). As células CHO (Ovário de Hamster Chinês) foram transfectadas, de um modo estável e foram isolados 72 clones que foram resistentes à geniticina (G418). Utilizando ARNm e dados de ligação foi identificado uma única linha celular com elevada expressão (N° 44) . Foi escolhido e farmacologicamente caracterizado um clone que expressa elevado niveis do receptor (como determinado por ARNm e dados de ligação ao receptor).

Cultura Celular: 70 1

As células CHO que expressam o receptor D2 da dopamina humano foram mantidas por divisão numa proporção de 1:10. 2

As células foram mantidas em meio Ham's F12 + 10% de Soro Bovino Fetálico + Penicilina/Estreptomicina (100 U/mL/100pg/mL) + G418 (400 pg/mL) e foram divididas 3 utilizando Tripsina-EDTA (1 mL/placa, temperatura ambiente, durante ~2 min. ou até as células começarem a sair para fora das placas). 2. As placas de stock foram subcultivadas em 90 placas grandes durante 2 semanas e 1,5 placas grandes foram divididas num frasco rotativo (90 mL de meio de cultura por frasco rotativo). 3. As placas são incubadas a 37 °C + 5% de CO2 durante ~3 dias ou até as células ficaram confluentes. As células foram sedimentadas a 30-40% de velocidade de motor numa incubadora Forma.

Armazenamento

As células são armazenadas por raspagem mecânica, lavadas utilizando PBS, recolhidas em tubos de centrífuga de polipropileno de 250 mL da Corning, sedimentadas e ressuspensas em dH20 (volume final por recolha de, aproximadamente, 60 mL) . A determinação de proteína é efectuada de acordo com o método de Lowry (Kit de Ensaio Biorad DC). Após a determinação da concentração de proteína, a proteína é diluída com água destilada com 10% de DMSO para o volume apropriado com base nos níveis de expressão (Bmáx)· A proteína concentrada é colocada em alíquotas de 1,5 mL em tubos eppendorf com tampa de rosca e colocados num congelador a -80 °C.

Requisitos do Ensaio: 1 frasco criogénico por duas placas de 96 poços 71 [1 2 3H]-Ligando: [N-metil-3H]-Espiroperidol

(60-90 Ci/mmol) a 0,4 nM (NEN-856) KD = 0,08 nM

Materiais: S(-)-Eticloprido (Research Biochemicals

Int. E-101), Cubestubes de 96 poços com 2,2 mL (BelArt), Placa Unifilter GF/B (Packard), Polietilonimina (Sigma N° P-3134), Colectores de Células TomTec, Contador de Cintilações Packard TopCount

Tampões: Reagentes do Ensaio de Ligação 72 1

Tampão de Lavagem Tris 0,5 M, pH 7,7 a) 44,4 g de Tris HC1 26,5 g de Tris Base q.s. para 1 Litro (Tampão Tris 0,5 M, pH 7,7 a 37 °C) b) efectuar uma diluição 1:10 em H20 destilada (tampão Tris 0,05 M, pH 7,7) 2

Tampão Tris contendo sais fisiológicos 3 a) Tampão de stock

NaCl 7,014 g KCI 0,372 g CaCl2 0, 222 g MgCl2 0,204 g q.s. para 100 mL com Tampão Tris 0,5 M. b) Diluir 1:10 em H20 destilada

Isto proporciona Tris HC1 0,05 M, pH 7,7, contendo NaCl (120 mM) , KC1 (5 mM) , CaCl2 (2 mM) e MgCl2 (1 mM) Opcional: adicionar 0,1% de ácido ascórbico e verificar o pH (em ensaios com compostos que podem oxidar. c) 1,0 % de stock polietilenoimina em Tris 0,5 (reagente l.a)

Diluir 1:10 em H20 destilada

Ensaio de Ligaçao

750 pL de Tecido 150 pL de [3H]NMSP 100 pL de veiculo (para ligação total) ou 30 pM (-) de eticloprido (para ligação não especifica) ou concentração de fármaco apropriada.

Os Packard Unifilters GF/B de 96 poços são incubados durante >1 h, a 25 °C, em polietilonimina a 0,1%. O tecido frio é adicionado em último lugar e misturado num agitador orbital durante alguns segundos e é, depois, incubado a 37 °C, durante 30 min num banho de água com agitação. 0 ensaio é interrompido por filtração rápida através de placas Packard Unifilter. As membranas de filtro são, depois, lavadas com 15 mL de tampão Tris 0,05 M gelado. Os filtros são, depois, secos (—15 min sob 73 uma lâmpada de aquecimento ou incubados, durante 15 min, num forno a 60 °C) e é aplicado uma tampa no fundo., depois, são adicionados 40 pL de um cocktail de cintilação Packard

Microscint 20 e é aplicada uma tampa permanente no topo (Tipo P) e selada termicamente. As placas são colocadas num Packard Topcount.

Análise dos Resultados: A ligação específica é definida como a diferença entre a ligação total e a ligação na presença de S-(-)-eticloprido 3 μΜ. A ligação total é de aproximadamente 10% do ligando total adicionado. A determinação de Cheng-Prusof f (Ki) é efectuada utilizando o software Prism utilizando uma análise da curva de competição por um local, onde a máximo e mínimo da regressão não linear são mantidos constantes a 0% e 100% de percentagem da inibição. A percentagem de inibição a cada concentração de fármaco é a média das determinações em duplicado.

Variantes: Ensaio Beckman 1000 Robotic (200 pL de volume de ensaio)

Condições do ensaio: 1 frasco criogénico por quatro placas de 96 poços [3 H]-Ligando: 856) [3H] [N-metil-3H]-Spiroperidol (60-90 Ci/mmol) a 1,5 nM (NEN-KD =0,6 nM)

Materiais: S (-)-Eticloprido (Research Biochemicals

Int. E-101), placa de poliestireno de 74 96 poços (Beckman) , Placa Unifilter GF/B (Packard), Polietilonimina (Sigma N° P-3134), Colectores de Células TomTec, Contador de Cintilações TopCount Packard

Ensaio de Ligação: 100 pL de Tecido

50 pL de [3H]NMSP 50 pL de veiculo (para ligação total) ou 50 pM (-)eticloprido (para ligação não especifica) ou concentração de fármaco apropriada.

As Packard Unifilters GF/B de 96 poços são incubadas durante >1 h, a 25 °C, em polietilamina a 0,1%. O tecido à temperatura ambiente é adicionado em último lugar e é, depois, incubado a 3 7 °C, durante 60 min numa incubadora Beckman SL. O ensaio é interrompido por filtração rápida através de placas Packard Unifilter. As membranas de filtro são, depois, lavadas com ~7 mL de tampão Tris 0,05 M gelado. Os filtros são, depois, secos ( — 15 min sob uma lâmpada de aquecimento ou incubados, durante 15 min, num forno a 60 °C) e é aplicado uma tampa no fundo., depois, são adicionados 40 pL de um cocktail de cintilação Packard Microscint 20 e é aplicada uma tampa permanente no topo (Tipo P) e selada termicamente. As placas são colocadas num Packard Topcount e contadas durante 2 mim para cada ponto. 75

Análise dos Resultados: A ligação específica é definida como a diferença entre a ligação total e a ligação na presença de S-(-)-eticloprido 5 μΜ. A ligação total é de aproximadamente 10% do ligando total adicionado. A determinação de Cheng-Prusof f (Ki) é efectuada utilizando o software Excel Fit, utilizando uma análise da curva de competição por um local, onde o máximo e mínimo da regressão não linear são mantidos constantes a 0% e 100% porcento da inibição. A percentagem de inibição a cada concentração de fármaco é a média das determinações em duplicado.

Os resultados para o ensaio de competição, indicados como valores de Ki, valores para o receptor Di e D2 são apresentados na Tabela 1. 76

Tabela 1. Ligaçao Competitiva para os Receptores Dl e D2

Exemplo RI R2 R3 Afinidade Dl Ki (nM) Afinidade D2 Ki (nM) 111 -(CO)OC(CH3)2 H H 165 794 112 -(CO)och3 H H 101 >100000 113 ^-O H H 30,5 >100000 114 fCb. H H 6 4,6 511 115 ro. H H 39 506 116 tò H H 32,6 >100000 117 τα. H H 59 404 118 τα. H H 40 10000 77 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Afinidade Dl Ki (nM) Afinidade D2 Ki (nM) 119 CF3 rà H H 54 649 120 Ύ°Υ^ H H 45 767 121 OH H H 31 613 122 k~o H H 92 751 123 H H 37 154 124 H YNy-YCF3 H H 486 10000 125 v H yN^^OMe H H 79 10000 126 H Vn\^.°h ° H H 21 328 78 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Afinidade Dl Ki (nM) Afinidade D2 Ki (nM) 127 H H H 105 10000 128 „ H Ν^Ν,χ^χ, H H 106 10000 129 H í yw 1 H H 113 10000 130 b H H 156 536 131 yP o ch3 H H 51 10000 132 \ CH, y< 0 ch3 H H 256 >100000 133 CH, ^vCHi ° /-chs ch3 H H 241 >100000 134 0 kr-\ N\_7° H H 240 >100000 79 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Afinidade Dl Ki (nM) Afinidade D2 Ki (nM) 135 yo H H 61,5 >100000 136 \ ^CH3 <tn^chs H H 162 >100000 137 Qr vt) 0 H H 412 163 138 H H 198 >100000 139 \ /(CH&CH, 0 X(CH2)3CH3 H H 137 204 140 0 \ H H 125 >100000 141 —1s°2_<C3 H H 193 >100000 142 -sCQ H H 18 >100000 143 CF, H H 167 777 80 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Afinidade Dl Ki (nM) Afinidade D2 Ki (nM) 144 H H 91 602 145 '""Op-, ch3 H H 146 288 146 CH, H H 89 531 147 H H 108 623 148 —«*0-« H H 183 >100000 149 -s.rfyc. c/ H H 213 589 150 —SOr^^-d H H 256 >100000 151 Ck Cl H H 82 >100000 152 H H 169 >100000 81 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Afinidade Dl Ki (nM) Afinidade D2 Ki (nM) 153 -80^ H H 250 >100000 154 H H 270 >100000 155 /CH, so2—< ch3 H H 217 >100000 156 h3c'^' H H 139 >100000 157 F H H 2,07 434 158 -2o H H 95,2 >100000 159 H H 64,5 >100000 160 -*~CC H H 264 >100000 161 /s°2^^ H H 3,6 1,85 82 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Afinidade Dl Ki (nM) Afinidade D2 Ki (nM) 162 $ /S02 ° H H 382 >100000 163 0 /o2 H H 320 >100000 164 /CH3 —so—ns ch3 H H 400 >100000 165 H H 227 10000 16 6 rr~0 /S02 H H 207 246 167 JCO —so2 H H 74 528 102 -ch3 -ch3 H 147 106 H H 45 278 107 Cl H H 926 10000 83 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Afinidade Dl Ki (nM) Afinidade D2 Ki (nM) 108 F H H 110 28 H H 82 180 29 ✓γΟ ch3 H H 64 10000 30 aud H H 55,2 10000 26 H H 33 10000 105 H H 108 212 31 /SQ OMe H H 12 575 32 <o HBr H H 22 127 33 -(CH2)3CH3 H H 70 10000 34 "-o H H 47 10000 84 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Afinidade Dl Ki (nM) Afinidade D2 Ki (nM) 35 cr H H 42 96 36 F H H 42, 8 749 37 P3 Cf H H 17, 9 356 105 CH3 H H 26 415 104 CH, H H 70 122 38 ΛΔ H H 53 10000 194 7Γ ch3 H 54 639 169 P> ch3 ch3 158 172 170 c2h5 c2h5 1670 377 171 ch3 H 98 317 85 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Afinidade Dl Ki (nM) Afinidade D2 Ki (nM) 172 'O c2h5 H 522 279 173 'O ch3 c2h5 425 241 174 (CH2)2 ch3 H 510 248 175 ^O (CH2)2 ch3 ch3 3070 10000 176 ch3 1700 124 177 C-C4H7 H 10000 305 178 - ( ch2 ) 4- 10000 181 179 c2h5 H 139 215 180 ~/'v^CH2 642 86 181 H H 57 655 182 ch3 H 21 183 KnQ^cf, ch2ch3 H 255 86 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Afinidade Dl Ki (nM) Afinidade D2 Ki (nM) 168 ch3 ch3 45 183 '/x^3~cf3 C2H5 ch3 123 184 /nQm*, (CH2)2CH3 ch3 110 185 /\^CH2 3100 186 /V^CH2 H 1910 187 /^^CH2 2640 39 H H 113 10000 40 ch3 H H 361 10000 41 ch3 H H 114 10000 42 rCH3 ch3 H H 398 10000 43 H H 86,1 10000 44 _^CH3 ^CHg H H 289 10000 87 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Afinidade Dl Ki (nM) Afinidade D2 Ki (nM) 45 /TD H H 96, 4 10000 46 /-{y-v-rs H H 49 215 47 H H 66,4 10000 48 H H 37,4 10000 49 H H 48,2 310 50 H H 47,3 367 51 CH, 'ND H H 156 5000 52 H H 113 10000 53 H H 60, 7 10000 54 H H 153 5000 55 H H 53,6 449 56 H H 30,5 10000 88 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Afinidade Dl Ki (nM) Afinidade D2 Ki (nM) 57 H H 59,6 10000 58 KnQ^-ci H H 52 5000 59 H H 46,2 443 60 H H 11, 8 364 61 —OMe H H 19,8 5000 62 y1—OH H H 46,1 5000 63 H H 6,8 5000 64 •4} H H 198 576 65 CH, H H 34 288 66 AQhcn, H H 75, 7 5000 67 "0 H H 62,6 5000 89 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Afinidade Dl Ki (nM) Afinidade D2 Ki (nM) 68 MeO O) H H 96, 7 232 69 H H 32,5 5000 70 F H H 19,4 5000 71 H H 94,2 5000 72 H H 159 266 73 ^cT H H 63,5 431 75 ^cf CF, H H 42 120 76 F,C CF, H H 92 41 77 CF, H H 36 40 90 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Afinidade Dl Ki (nM) Afinidade D2 Ki (nM) 78 H H 14 197 79 Cl cf3 H H 81 310 80 Wp, H H 48, 7 565 81 cf3 H H 28, 7 343 82 ^Q-"· F H H 15,6 10000 83 H H 15, 9 611 84 CF3 H H 33 450 85 H H 25,6 389 86 H3C H H 39,9 97,6 91 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Afinidade Dl Ki (nM) Afinidade D2 Ki (nM) 87 ΊΡ H H 23,9 23,8 88 ch3 H H 6 6,5 109 89 Ίο H H H 18,9 199 90 Ίο / ch3 H H 42,3 2,4 91 ^0 H H 40, 7 43,4 92 CH, H H 29,2 93,4 188 (CH2)2CH3 (CH2)2CH3 586 140 94 ch3 H 113 285 95 '~O~ ch3 H 121 456 92 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Afinidade Dl Ki (nM) Afinidade D2 Ki (nM) 96 ch3 H 265 552 97 ch3 H 53,1 357 98 ^0-0 ch3 H 60,3 239 99 ch3 H 53,1 307 100 ch3 H 43,1 >100000 101 ch3 H 92,2 322 191 ^γΟ -HBr β H H 276 415 189 λΧ -HBr 5 H H 312 61 190 /^\XX HBr ô H H 46 361 192 Η H HBr H H 77 477 93 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Afinidade Dl Ki (nM) Afinidade D2 Ki (nM) 193 wUO Η H -HBr H H 50 284 13 0 RníX H H 128 361 14 ÇÍCI, ch3 ch3 H H 274 >100000 15 0 H H 126 523 16 ^ifX, H H 149 379 17 0 Cl .oqcx H H 138 >100000 18 o H J! __^ ch3Q H H 244 389 19 H J CHj\_/ ^ H H 158 310 94 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Afinidade Dl Ki (ηΜ) Afinidade D2 Ki (nM) 20 o H Jl Η Η 52,4 265 21 Η Η 120 >100000 22 Η Η 114 564 23 ο /N/xCH3N/^Br Η Η 91,8 526 24 O N02 Η Η 240 638 25 CH3 Η Η 56,1 218 195 θγΟΗ Λο Η Η 1700 95

Ensaio da Adenililo Ciclase de Activação de Dl

Objectivo: Determinar compostos com actividade agonista de Dl utilizando um Ensaio de Placa Flash da Activação da Adenililo Ciclase da NEN.

Tampões: Os tampões de Activação e Detecção são proporcionados pela NEN: Catalogo N° SMP004A.

Processo:

Manutenção da linha celular CHO transfectada com Dl: 1. As células são crescidas num frasco de 150 cc numa incubadora a 37 °C com 5% de C02 durante 2-3 dias (4 no máximo) até confluência. 2. Remover por aspiração o meio antigo (As células aderem ao frasco de plástico), lavar 2x com PBS estéril. 3. Adicionar ~5 mL de Tripsina EDTA (suficiente para cobrir o fundo do frasco), durante 5 min à t.a. 4. Interromper a digestão com 15 mL de Meio (Ham F12 mais 10% de FBS, 1% de P/S, 400 yg/mL de G418) . Bater com o frasco na bancada para libertá-las do frasco. 5. Adicionar 2 mL disto a 30 mL de Meio num frasco fresco. Regressar à incubadora. 96

Preparaçao das Células para o Ensaio: 1. Soltar as células com 5 mL de Vercina (EDTA)/frasco durante 10 minutos, numa incubadora. 2. Adicionar 20 mL de meio Sem Soro/frasco. Transferir para tubo Falcon de 50 mL. 3. Sedimentar as células a 1000 RPM durante 5 minutos a 4o C. 4. Remover por aspiração o meio antigo e ressuspender em 5 mL de meio Sem Soro/frasco para concluir. 5. Diluir 10 pL 1/10 em 90 pL de solução de Azul de Tripano e contar com um hemocitómetro.

Contar (apenas células vivas) em todas as quatro áreas e calcular a média destas quatro áreas.

Contar X 105 células iguais/mL (tendo em consideração a diluição em Trypan). 6. Diluir para 50000 células/50 pL (1000000 células/mL) em meio Sem Soro. 7. Colocar 50 pL/poço nas Linhas 3-12 de uma FlashPlate de AMPc. 8. Colocar numa incubadora a 37 °C, durante 2-4 horas, para permitir que as células a serem recolhidas possam aderir. 97

Ensaio da Activação da Adenililo Ciclase: 1. Preparar os padrões de AMPc: • Adicionar 130 pL/poço de tampão de estimulação a cada linha de uma placa "padrão" de 96 poços separada, 2 colunas/placa. • Diluir o stock de padrão de AMPc 1/5 com tampão de estimulação (concentração final é de 1000 pmol/mL). • Adicionar 130 pL disto à linha A. • Preparar diluições em série 1/2 por adição de 130 pL de cada poço ao poço seguinte (A-G), mistura entre cada diluição. • As concentrações finais são: A: 500, B: 250, C: 125, D: 62,5, E: 31,25, F: 15,6, G: 7,8, H: 0 pmol/mL. • Colocar 100 pL de cada linha de 2 colinas da placa padrão nas colunas 1 e 2 de cada placa de "reacção". 2. Preparar o controlo negativo e positivo na placa de "reacção": • Coluna 3 , linhas A-D, adicionar 100 pL de tampão de estimulação (controlo negativo). • Coluna 3 , linhas E-H, adicionar 90 pL de tampão de estimulação mais 10 pL de 200 pM de APO (controlo positivo, 98 10 μΜ final) . (10 pL de APO 10 mM, mais 490 pL de tampão de estimulação = diluição 1/50). 3. Preparar as diluições de composto agonista na placa do "composto": • Adicionar 80 pL de tampão de estimulação à linha A (Uma coluna para cada composto) e 90 pL de tampão de estimulação às linhas B-H. • Adicionar 20 pL de 10 mM de cada composto à linha A apropriada. • Preparar diluições em série 1/10 por adição de 10 pL de cada poço ao poço seguinte (A-H), misturar entre cada diluição. 4. Adicionar os inibidores à placa de reacção em triplicado: • Adicionar 90 pL de tampão de estimulação a cada linha (colunas 4-12) . • Transferir 10 pL de cada inibidor na placa de "composto" à placa de "reacção", como se segue:

Placa 1: Composto 1, Colunas 4-6, Composto 2, Colunas 7-9, Composto 3, Colunas 10-12.

Placa 2: Composto 4, Colunas 4-6, Composto 5, Colunas 7-9, Composto 6, Colunas 10-12. 99

Placa 3: Composto 7, Colunas 4-6, Composto 8, Colunas 7-9, Composto 9, Colunas 10-12.

Placa 4: Composto 10, Colunas 4-6, Composto 11, Colunas 7- 9, Composto 12, Colunas 10-12.

Placa 5: Composto 13, Colunas 4-6, Composto 14, Colunas 7- 9, Composto 15, Colunas 10-12.

Placa 6: Composto 16, Colunas 4-6, Composto 17, Colunas 7- 9, Composto 18, Colunas 10-12.

As concentrações finais (uma vez adicionados às células) são: A: 100 μΜ, B:10 μΜ, C: 1 μΜ, D: 100 nM, E: 10 nM, F: 1 nM, G: 100 pM, H: 10 pM. 5. Preparar o tampão de Detecção/Interrupção por adição de 90 pL/placa de AMPc-125I a 10 mL/placa mais 6 mL (para volume morto) de tampão de detecção.

Os Passos 6-8 são efectuados com o Multi-Mek. 6. Adicionar 50 pL a cada poço da FlashPlate com células CHO preparadas anteriormente. 7. Incubar à t.a. durante 8 minutos. 8. Interromper a reacção por adição de 100 pL de tampão de

Detecção/Interrupção a cada poço. 100 9. Cobrir com película plástica e incubar à t.a. durante 16-24 horas (não esperar mais do que 24 horas). 10. Contar num Packard Top-Count. Cálculos: 1. Os sinais em bruto gerados pelos poços de AMPc padrão, sem células, são utilizados para o cálculo da média para cada concentração de AMPc e convertidos em %B/B0 por divisão do sinal em bruto para cada concentração de AMPc pelo sinal em bruto sem adição de AMPc. 2. Estes valores são utilizados para gerar uma curva padrão ao representar graficamente a concentração de AMPc versus %B/B0. 3. Os dados em bruto para cada composto são também convertidos em %B/B0 pelo mesmo método. 4. Estes valores são, depois, convertidos em pmol de AMPc/mL utilizando a curva de padrão. 5. Estes valores de AMPc são, depois, utilizados no cálculo da média dos três replicados para cada concentração de composto. 6. Este valor é, depois, considerado como a percentagem entre as células estimuladas basais (apenas células) e células estimuladas (células com uma quantidade saturante de um agonista conhecido de Dl). Isto proporciona uma percentagem de estimulação para cada composto para cada concentração. 101 7. Estes ciados sao representados graficamente como concentração de composto versus percentagem de estimulação e é ajustada uma linha aos pontos dos dados. 8. A concentração à gual ocorre metade da estimulação máxima é indicado como o EC5o. A percentagem de estimulação à qual o valor estável da curva é comparado com a estimulação máxima do agonista natural dopamina é indicado como a % de estimulação Máxima da Dopamina. A Tabela 2 descreve a actividade intrínseca no ensaio da adenilato ciclase, indicando os compostos que actuam como agonistas do receptor Di.

Tabela 2. Actividade Agonista no Receptor Di

Exemplo RI R2 R3 Di EC50 (nM) Di máx Ki (nM) 111 -(CO)OC(CH3) 2 H H 49 51 112 -(CO)och3 H H 0,6 42 113 o Ò H H 4,2 46 114 H H 0,85 30 102 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Di EC50 (nM) Di máx Ki (nM) 115 YQ. H H 48 63 116 Υιό H H 4,6 79 117 τα. H H 4,3 66 118 ΥΌ, H H LO 00 66 119 CF, Y~Ò H H 3,1 79 120 0 H H 36 93 121 OH YÒ H H 2,5 6 4 123 λο^ΟΟ H H 10 53 124 H YYvCF3 ° AY F H H 20 40 125 H \γ'Νν^ϊι/ΟΜ6 ° H H 60 42 103 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Di EC50 (nM) Di máx Ki (nM) 126 H ° KjJ H H 1, 7 19 128 H 0 N^C^n'F H H 6000 85 129 H f \JM H H 2000 66 131 yP 0 CHj H H 6, 4 18 135 yo H H 2,8 50 139 \ /(CH2)3CH3 v/ N\ 0 X(CH2)3CH3 H H 0, 11 23 140 Kl 0 \ H H 9 32 142 -sC0 H H 1,9 42 144 OMe χτ H H 3,6 76 146 ch3 H H 79 87 104 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Di ECso (nM) Di máx Ki (nM) 147 ~so H H 394 100 150 a — H H 256 151 clV^\ ~s°r\X C) H H 58 6 4 157 F H H 460 74 158 o2n H H 11 31 159 H H 35 44 161 H H 40 50 -ch3 -ch3 H 1500 40 167 150 —so2 H H 77 62 106 ^~n H H 29 45 105 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Di EC50 (nM) Di máx Ki (nM) 107 Cl H H 140 42 108 f H H 36 27 ch3 H H 280 49 28 H H 131 54 93 H H 45 34 29 s^yO ch3 H H 40 50 30 CH. Λ AjD H H 60 49 26 H H 11 56 105 H H 102 69 106 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 D3 ECso (nM) Di máx Ki (nM) 31 OMe H H 13 47 32 -00 H H 12 32 33 -(CH2)3CH3 H H 13 44 34 H H 66 33 35 cr H H 44 30 36 f H H 62 51 37 ^Q Cl H H 110 53 105 CH3 N-0 H H 100 63 104 CH, y~^ôrÇ)~e H H 116 84 38 /\Δ H H 10 31 194 ch3 H 34 56 107 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Di EC50 (nM) Di máx Ki (nM) 110 H H 6 58 177 C-C4H7 H 10000 305 178 - (CH2) 4- 10000 181 179 C2H5 H 810 60 181 /-Q-CP, H H 6 66 182 //x^3“cp3 ch3 H 220 50 183 ^C>crs CH2CH3 H 1300 60 168 ch3 ch3 31000 95 183 C2H5 ch3 7000 57 39 Só H H 750 39 41 \^s^CH3 ch3 H H 250 32 43 /-X/0H H H 110 45 108 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Di EC50 (nM) Di máx Ki (nM) 45 /OO H H 110 36 46 H H 100 74 47 H H 170 39 48 /NfV<CH3 CH3 H H 26 50 49 ^o-o H H 78 92 53 •'O H H 15 45 54 H H 45 49 55 H H 16 35 56 H H 12 60 57 H H 12 46 58 H H 10 46 109 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Di ECso (nM) Di máx Ki (nM) 59 H H 12 32 60 H H 160 77 61 OMe H H 47 45 62 OH H H 14 25 63 H H 9 58 65 CH, H H 19 43 66 /N0^ohs H H 6 44 67 H H 9 33 69 '-'tf H H 10 34 70 F //^^y~cF3 H H 77 62 110 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Di EC50 (nM) Di máx Ki (nM) 71 H H 420 88 73 H H 15 54 75 ^cf cf3 H H 220 70 76 F,C cf3 H H 580 77 77 CFa H H 80 62 78 aQ-c CF, H H 2 51 85 ^rO 0 H H 16 74 86 H3\ H H 77 50 87 Ip H H 27 37 111 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Di EC50 (nM) Di máx Ki (nM) 88 ^CO 1 CH3 H H 29 48 89 Ίο H H H 8 38 90 Ίο 1 ch3 H H 9 46 91 H H 12 63 92 ch3 H H 0,98 61 94 ch3 H 35 59 95 ^o- ch3 H 250 63 97 'ΌΚί ch3 H 66 30 98 ch3 H 15 29 112 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 D3 EC50 (nM) Di máx Ki (nM) 99 ch3 H 22 54 100 ch3 H 60 27 101 '""O**. ch3 H 33 62 191 ^oyo 0 H H 180 51 189 0 H H 270 26 190 0 H H 11 42 192 wUX Η H H H 11 193 ^xo Η H H H 43 42 13 H H 30 86 15 0 RQX H H 11 35 113 (continuação)

Exemplo RI R2 R3 Di EC50 (nM) Di máx Ki (nM) 16 mxSx. H H 56 41 17 0 Cl H H 18 36 19 o H H 6,1 35,6 20 o H J! N— H H 61 46 21 H H 14 50 22 o τΥχ H H 24 39 23 0 xOQX H H 59 47 25 -^o CH3 S-^/ H H 54 68 114

EXEMPLOS SINTÉTICOS

Processos Gerais

Para a Cromatografia Liquida de Elevado Desempenho (HPLC), utilizar as seguintes condições: coluna Synergi 2u Hydro-RP 20 x 4,0 mm, Gradiente: 5% de B até 90% de B em 3 min até 100% de B em 2 min. Fluxo de 1 mL/min; A = 0,1% de ácido fórmico em água, B = 0,1% de ácido fórmico em acetonitrilo.

Para as purificações em coluna SCX geral: Carregar a amostra numa coluna SCX pré-tratada com metanol e lavar com metanol. Eluir o produto com NH3 2 N em metanol.

Os aldeídos e cetonas utilizados nos métodos sintéticos descritos abaixo estavam disponíveis comercialmente a menos que indicado de outra forma. Os aldeídos para os Exemplos 14-25 foram sintetizados de acordo com o processo descrito em Marson C. e Fallah, H., Chem. Commun. 83-84 (1998). 115

Exemplo 1 O Me o H3C. y- 2-Metoxi-3-metilbenzaldeído

Esquema A, Material de partida

Dissolver 2-hidroxi-3-metilbenzaldeído (80 g, 0,588 mol) em 350 mL de DMF e aquecer a 50 °C. Adicionar carbonato de potássio (97,4 g, 0,705 mol), seguido por adição, gota a gota, de iodometano (125 g, 0,881 mol). Após uma hora a 50 °C, a mistura reaccional foi deixada a arrefecer até à temperatura ambiente e adicionados 700 mL de água. Ajustar o pH a 7 com HC1 3 N e, depois, extrair a mistura duas vezes com 350 mL de acetato de etilo. Lavar as camadas orgânicas combinadas com solução salina saturada e secar (Na2S04) . g (99,9%) de 10,25 (s, 1H), 3H) .

Remover o solvente para proporcionar 87,9 2-metoxi-3-metilbenzaldeido: RMN de 1H (DMSO-d6) δ 7,60 (m, 1H), 7,20 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 2,28 (s, 116

Exemplo 2

3-Meti1-2-isopropoxibenzaldeído

Esquema A, Material de partida

Agitar uma mistura de 3-metilsalicilaldeído (100 g, 0,73 mol), iodeto de isopropilo (187 g, 1,1 mol) e K2C03 (141 g, 1,0 mol) em DMF ( 400 mL), durante 20 h, à temperatura ambiente. TLC mostra reacção parcial; depois, adicionar mais iodeto de isopropilo (43 g, 0,25 mol) e aquecer a reacção até 45 °C com agitação durante mais 10 h. Diluir a mistura reaccional com H20 (1 L) e extrair a mistura resultante com EtOAc. Lavar a camada orgânica com NaOH aquoso 0,25 M e, depois, com H20. Secar sobre MgS04 e evaporar o solvente para proporcionar 3-metil-2-isopropoxibenzaldeído, 122 g (94%); RMN de ΤΗ (CDCI3) δ 7,7-7,1 (m, 3H), 4,2 (m, 1H), 2,3 (s, 3H), 1,4 (d, 6H). 117

Exemplo 3

Ester_difenílico_do_ácido_[ (fenilamino) -4- piridinilmetil]fosfónico

Esquema A, Material de partida

Tratar uma solução de 4-piridinacarboxialdeído (16,8 g, 0,16 mol) em TBME (225 mL) e IPA (75 mL) com anilina (17,6 g, 0,19 mol) e difenilfosfito (58,8 g, 0,25 mol). Agitar a solução, durante 3 h, à temperatura ambiente, durante as quais o produto cristaliza a partir da solução. Armazenar a mistura a 4 °C, durante 15 h e, depois, recolher o sólido que formou e lavar com IPA e heptano frio para proporcionar éster difenílico do ácido [(fenilamino)-4-piridinilmetil]fosfónico, 59 g (91%); RMN de ΤΗ (CDCls) δ 8,6-6,6 (m, 19H) , 5,1 (m, 1H) , 5,0 (m, 1H) . 118

Exemplo 4

2-(2-Isopropoxi-3-metilfenil)-1-(4-piridinil)etanona

Esquema A, Passo AI

Combinar éster difenílico do ácido [(fenilamino)-4-piridinilmetil]fosfónico (29,4 g, 0,071 mol), 3-metil-2-isopropoxibenzaldeído (13,0 g, 0, 073 mol) e CS2CO3 (29,9 g, 0, 092 mol) em THF (225 mL) e IPA (75 mL) . Agitar a mistura sob azoto, durante 48 h antes de adicionar HCL aquoso 3 M, sob azoto. Deixar a solução vermelha repousar durante 3 h durante as quais a cor vermelha muda para amarelo. Arrefecer a solução para 10 °C antes de neutralizar para pH 12 por adição lenta de NaOH aquoso a 50%. Extrair a mistura com EtOAc e, depois, lavar a camada orgânica com H20. Secar sobre MgS04 e evaporar o solvente para proporcionar um resíduo. Purificar o resíduo por cromatografia sob SÍO2 utilizando EtOAc:heptano (1:1). As fracções receptoras contendo o produto puro e algumas fracções contendo uma mistura de produto e a base de Schiff anilina do produto. Dissolver a última mistura em HC1 aquoso 3 M e permitir o repouso durante 6 h, após as quais surge a cor vermelha. Neutralizar a solução ácida com NaHC03 e extrair com EtOAc, lavar o extracto com H20 e secar sob MgS04. Evaporar o solvente para obter 4,6 g de 2-(2-isopropoxi-3-metilfenil)-1-(4-piridinil)etanona que foi, depois, misturada com o produto puro 119 total de (s, 2H), resultante da coluna para proporcionar um rendimento 16,9 g (89%); RMN de ΤΗ (CDC13) δ 8,8-6,9 (m, 7H) , 4,3 4,2 (m, 1H), 2,3 (s, 3H), 1,3 (d, 6H).

Exemplo 5

2-(2-Metoxi-3-metilfenil)-l-(4-piridinil)etanona

Esquema A, Passo AI

Preparar de modo análogo como acima, começando a 2-metoxi-3-metilbenzaldeído; RMN de ΤΗ (CDCI3) δ 8,8 (d, (d, 2H), 7,1-7,0 (m, 3H), 4,3 (s, 2H), 3,7 (s, 3H) , 2,3 partir de 2H), 7,8 (s, 3H). 120

Exemplo 6

(S)-2-(2-Isopropoxi-3-metilfenil)-1-(4-piridinil)etanol

Esquema A, Passo A2

Sob azoto, a -30 °C, adicionar lentamente BF3*DDEt20 (1,7 g, 12 mmol) a uma solução de (-)-B-clorodiisopinocamfilborano (6,1 g, 19 mmol) em THF (40 mL). Arrefecer a solução para -40 °C e adicionar 2-(2-isopropoxi-3-metilfenil)-1-(4-piridinil)etanona (3,2 g, 12 mmol). Permitir que a solução atinja lentamente a temperatura ambiente e agitar durante 15 h. Adicionar MeOH e HC1 aquoso 3 M a uma mistura reaccional e agitar durante mais 45 min. Evaporar o solvente e dissolver o resíduo em HCL aquoso 3 M e lavar com heptano. Neutralizar a fracção aquosa com NaOH aquoso a 50% para pH 12 e extrair com EtOAc. Lavar a fase orgânica com solução salina saturada e secar sob MgS04. Evaporar o solvente para proporcionar um óleo amarelo. Purificar o óleo por cromatografia sob SÍO2 utilizando EtOAc:heptano (1:1). Evaporar a fracção contendo produto para proporcionar (S)-2-(2-isopropoxi-3-metilfenil)-1-(4-piridinil)etanol como um óleo, 1,16g (36%); RMN de λΕ (CDC13) δ 8,5-6,8 (m, 7H) , 4,9 (m, 1H), 4,3 (m, 1H), 3,1-2,9 (m, 2H), 2,3 (s, 3H) , 1,3 (d, 6H) . 121

Exemplo 7

(S)-2-(2-Metoxi-3-metilfenil)-l-(4-piridinil)etanol

Esquema A, Passo A2

Preparar de modo análogo ao Exemplo anterior a partir de 2-(2-metoxi-3-metilfenil)-1-(4-piridinil)etanona; RMN de ΤΗ (DMSO-de) δ 8,5 (d, 2H), 7,3 (d, 2H) , 7,1-6,9 (m, 3H), 5,5 (d 1H), 4,9 (m, 1H), 3,7 (s, 3H), 3, 3 (s, 1H), 2,9 (d, 2H), 2,2 (s 3H) .

Exemplo 8

(S)-2-(2-1sopropoxi-3-metifenil)-1-(4-piperidinil)etanol

Esquema A, Passo A3

Agitar uma mistura de (S)-2-(2-isopropoxi-3-metilfenil)-1-(4-piridinil) etanol (21,1 g, 78 mmol), HOAc (400 mL) e PtCq 122 (3 7 0 mg) com H2 (50 psi), durante 15 h. Filtrar a mistura através de celite e evaporar o solvente para proporcionar (S)-2-(2-isopropoxi-3-metilfenil)-1-(4-piperidinil)etano1 como o sal de acetato; RMN de (CDC13) δ 7,1-6,9 (m, 2H), 4,2 (m, 1H) , 3,6 (m, 1H), 3,4 (m, 2H), 2,9-2,7 (m, 4H), 2,3 (s, 3H), 2,0 (s, 3H), 2,1-1,5 (m, 5H), 1,3 (d, 6H) .

Exemplo 9

(S)-2-(2-Metoxi-3-metilfenil)-1-(4-piperidinil)etanol

Esquema A, Passo A3

Preparar de um modo análogo a partir de (S)-2-(2-metoxi-3-metilfenil)-1-(4-piridinil)etanol, RMN de ΧΗ (DMSO-dg) δ 8,3 (largo s, 2H) , 7,1-6,9 (m, 3H) , 5,8 (s, 1H) , 3,7 (s, 3H) , 3,5 (m, 1H), 3,2 (m, 2H) , 2,7 (m, 2H) , 2,5 (m, 2H) , 22 (s, 3H) , 1,8 (s, 3H), 1,7-1,5 (m, 4H). 123

Exemplo 10

MeO.

MeO

1 ·,. ^s^NHCHO N-(2,2-dimetoxietil)formamida

Esquema A, Material de partida para o Passo A4

Aquecer até refluxo, durante 2,5 h, o aminoacetaldeído dimetilacetal (200g, 1,9 mol) e o formato de etilo (172 mL) . Arrefecer e remover o excesso de etanol e formato de etilo a 40-70 °C/7 torr. Destilar o resíduo num dispositivo de Kugelrohr para proporcionar 212,1 g (83,7%) de produto; RMN de ΤΗ (CDCI3) δ 8,2, 8,0 (s, d, 1H) , 6,1 (largo s, 1H) , 4,4, 4,3 (2 x m, 1H) , 3,4, 3,3 (2 x m, 2H), 3,4 (2 x s, 6H).

Exemplo 11

NHCHO N-((IR,3S)-5-Isopropoxi-6-metil-3-(4-piperidinil)-1 isocromanilmetil)formamida

Esquema A, Passo A4

Dissolver (S)-2-(2-Isopropoxi-3-metilfenil)-1- ( 4 piperidinil)etanol (21,5 78 mmo1), 124 Ν- (2,2, -dimetoxietil) formamida (15,5 g, 117 mmol) e BF3*Et20 (66,1 g, 466 mmol) em CH2C12 (350 mL) . Aquecer a solução até refluxo, durante 3 h e, depois, deixar repousar durante 15 h, à temperatura ambiente. Evaporar o solvente e dissolver o resíduo em CH2C12. Tratar a solução resultante com NaOH aquoso a 50% para obter um pH de 13. Separar as fases e extrair a fase aquosa com CH2C12. Combinar as fases orgânicas, lavar com solução salina saturada e secar sob MgSCp. Evaporar o solvente para proporcionar um resíduo. Purificar o resíduo por cromatografia sob Si02 utilizando CHCl3:NH3 2 M/MeOH (8:2). Evaporar as fracções contendo produto e triturar com Et20:heptano 1:1 para proporcionar um sólido cristalino; RMN de 1H (CDC13) δ 8,2, 7,9 (2s, 1H) , 7, 1 0 7 (m, 2H) , 6,2 (m, 00 V 1—1 (m, 1H), 4,2 (m 1H) , 4, 1 (m, 1H) , 3,3 (m, 2H), 3,2 (m, 2H), 2,9 (m, 1H), 2,7 (m, 2H) , 2,5 (m, 2 H), 2,2 (s, 3H), 2, 0-1,4 (m, 5H), 1,3-1,2 (2d 6H) .

Exemplo 12

N-((IR,3S)-5-metoxi-6-meti1-3-(4-piperidinil)-1-isocromanilmetil)formamida

Esquema A, Passo A4 de (S)-2-(2-Metoxi-3-ΤΗ (CDC13) δ 8,2, 8,0

Preparar de um modo análogo a partir metilfenil)-1-4-piperidinil)etanol, RMN de 125 (s e d, 1H), 7,0 (d, 1H), 6,9 (d, 1H), 4,8 (m, 1H), 4,2 (m, 1H) , 3,7, (s, 3H), 3,4 (m, 2H) , 3,1 (m, 2H) , 2,9 (m, 2H) , 2,7 (m, 1H), 2,5 (m, 1H), 2,2 (s, 3H), 2,2-1,8 (m, 5H).

Exemplo 13

Dicloridrato de N-{3-[4-((IR,3S)-l-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-4-cloro-benzamida

Esquema_B,_Passo_Bl_4-Cloro-N-{3 - [4- ( (IR, 3S) 1- formiloaminometil-5-metoxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il ] -1-metilpropil}-benzamida

Agitar uma suspensão de N-((IR,3S)-5-metoxi-6-metil-3-(4-piperidinil)-1-isocromanilmetil)formamida (1,0 mmol) com 4-Cloro-N-(l-metil-3-oxo-propil)-benzamida (3,0 mmol) e triacetoxiboro-hidreto de sódio (3,0 mmol) em diclorometano (5 mL) , à temperatura ambiente, de um dia para o outro. Aplicar a mistura reaccional directamente numa coluna SCX com 5 g e eluir e concentrar as fracções apropriadas para obter o composto do titulo. Utilizar directamente o composto no passo seguinte. 126

Esquema B, Passo B2 N-{3-[4-((IR,3S)-l-Aminometil-5-metoxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-4-cloro-benzamida

Agitar e aquecer a 70 °C, uma solução de 4-cloro-N-{3-[4-(1-formiloaminometil-5-metoxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il ]-1-metilpropil}-benzamida em CH3OH/THF (10 mL de solução 1:1) e de solução de NaOH a 15% (2 mL) , durante 4 horas. Concentrar a mistura reaccional e extrair três vezes com EtOAc (2 mL). Lavar, sequencialmente, a fase orgânica combinada com H20 (2 mL), solução salina saturada (2 mL) e, depois, seca sob MgS04. Concentrar e purificar o produto em bruto numa coluna a SCX de 2 g.

Esquema B, Passo B3, Dicloridrato de N-{3-[4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-4-cloro-benzamida

Arrefecer uma solução de N-{3-[4-((IR,3S)-l-aminometil-5-metoxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-4-cloro-benzamida em diclorometano anidro (4 mL) até -20 °C e adicionar lentamente 6 equivalentes de BCI3 (utilizando BCI3 1 M em diclorometano) à solução. Após concluída a adição, agitar a mistura reaccional, a -20 °C, durante 2 horas e 0 °C, durante 1 hora. Arrefecer novamente até -20 °C e atenuar com CH3OH anidro (0,5 mL) . Permitir que a solução resultante aqueça até à temperatura ambiente e concentrar. Purificar o produto em bruto numa coluna SCX de 2 g e, depois, submeter a cromatografia numa coluna de sílica com 1 g (eluída com NH3 7 N em metanol: acetato de etilo = 1:10) . Recolher as fracções apropriadas, concentrar e converter no composto do título com HC1 2 M em éter dietílico. CIMS 486,2, tR (min)= 2,30. 127

Os seguintes exemplos 14-25 foram sintetizados de um modo semelhante ao Exemplo 13, utilizando diferentes aldeídos como reagentes no primeiro passo para a aminação redutora.

Exemplo 14

Dicloridrato de N-{3-[4-((IR, 3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-eti1-2-meti1-propil}-4-metil-benzamida

128

Exemplo 15

Dicloridrato de N-{3-[4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-4-metil-benzamida

129

Exemplo 16

Dicloridrato de N- { 3-[ 4-( (IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-4-trifluorometil-benzamida

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto %£o, H 3 2,40 520,3 130

Exemplo 17

Dicloridrato de N-{3-[4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-2,4-dicloro-benzamida

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto H 3 2,30 520,2 131

Exemplo 18

Dicloridrato de {3-[4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-amida_do ácido bifenil-4-carboxílico

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto 0 H [II 2,54 528,3 132

Exemplo 19

Dicloridrato de {3-[4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-amida_do ácido naftaleno-2-carboxílico

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto o H CH3 2,24 502,3 133

Exemplo 20 Ο

Dicloridrato de {3-[4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-amida_do ácido benzo[b]tiofeno-2-carboxílico

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto O νΛ^ν H 2,39 508,3 134

Exemplo 21 ο

Dicloridrato de N-{3-[4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-benzamida

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto a!p H 3 2,15 452,4 135

Exemplo 22

Dicloridrato de N-{3-[4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-4-fluoro-benzamida

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto "dÒX H 3 2,19 470,3 136

Exemplo 23

Dicloridrato de N-{3-[4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-4-bromo-benzamida

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto vdix H 3 2,34 530,2 137

Exemplo 24

Dicloridrato de N-{3-[4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-4-nitro-benzamida

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto O sXfX, H 3 2,19 497,3 138

Exemplo 25

Dicloridrato de {3-[4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-amida_do ácido tiofeno-2-carboxílico

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto \£p H 2,10 458,2 139

Exemplo 26

Dibromidrato_de_(IR, 3S) -l-aminometil-3- [ 1- (4-fluoro- benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Esquema B, Passo BI: N-[3-[1-(4-fluoro-benzil)-piperidin-4-il]-5-isopropoxi-6-metilisocroman-l-ilmetil]-formamida

Agitar uma suspensão de N-((IR,3S)-5-Isopropoxi-6-metil-3-(4-piperidinil)-1-isocromanilmetil)formamida (1,0 mmol) com 4-fluorobenzaldeido (3,0 mmol) e triacetoxiboro-hidreto de sódio (3,0 mmol) em diclorometano (5 mL) à temperatura ambiente de um dia para o outro. Aplicar a mistura reaccional directamente numa coluna SCX de 5 g e eluir e concentrar as fracções apropriadas para obter N-[3-[1-(4-fluoro-benzil)-piperidin-4-il]-5-isopropoxi-6-metilisocroman-l-ilmetil]-formamida. Utilizar o composto directamente no passo seguinte.

Esquema B, passo B4: Dibromidrato de (IR,3S)-1-aminometil-3 - [ 1-(4-fluoro-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Ao composto N-[3-[1-(4-fluoro-benzil)-piperidin-4-il]-5- isopropoxi-6-metilisocroman-l-ilmetil)]-formamida do passo anterior num frasco de 8 mL, adicionar HBr a 48% (0,34 mL) e 140 ácido acético (0,34 mL). Aquecer e agitar a mistura reaccional a 85 °C de um dia para o outro. Concentrar a mistura reaccional e purificar o produto em bruto numa coluna SCX de 2 g e, depois, por uma coluna de sílica gel de 2 g (NH3 7 N em metanol: acetato de etilo = 1:10) . Concentrar as fracções apropriadas e converter ao dibromidrato do composto do título por tratamento com metanol saturado com HBr. CIMS 385,3 (MH+) .

Os seguintes exemplos 27-92 foram sintetizados de um modo semelhante ao Exemplo 26, utilizando diferentes aldeídos ou cetonas como reagentes no primeiro passo para a aminação redutora. Nos mesmos exemplos, os compostos foram convertidos nos sais cloridrato em vez dos bromidratos, utilizando HC1 saturado num solvente alcoólico ou eteral em vez de metanol saturado com HBr.

Exemplo 27

Di-bromidrato_de_(IR, 3S) -1-aminometi 1-6-meti 1-3- [ 1 — (3 — fenil-butil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

141

Exemplo 28

Di-bromidrato de (IR, 3S)-1-aminometil-3-[1-(2,2-difenil- etil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto 1, 19 457,3 142

Exemplo 29

Di-bromidrato_de_(IR, 3S) -1-aminomet il-3- [l-(2-fenil- propil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeído (min) do produto produto 9 dbi 1,20 409,3 hV^ ch3

Exemplo 30

Di-bromidrato_de_(IR, 3S) -1-aminometi 1-6-meti 1-3- [ 1-(1- metil-2-fenil-etil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

143

Exemplo 31

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometil-3- [ 1- (3-metoxi- benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Exemplo 32

Di-bromidrato_de_(IR, 3S) -1-aminometil-3 - (l-indan-2-il- piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol

144

Exemplo 33

Dicloridrato de (IR,3S)-1-aminometil-3-(1-butil-piperidin- 4-il)-6-metilisocroman-5-ol

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto 0 0,96 333,2 Λ H^(CH2)2CH3

Exemplo 34

Dicloridrato de (IR,3S)-l-aminometil-3-(1-ciclo-hexilmetil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeído (min) do produto produto ff 1,08 373,2 145

Exemplo 35

Di-bromidrato_de_(IR, 3S) -1-aminomet il-3- [l-(2-cloro- benzil)-piperdin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto cr 2,01 401,2

Exemplo 36

Di-bromidrato_de_(IR, 3S) -1-aminomet il-3 - [l-(2-fluoro- benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeído (min) do produto produto 0 1,32 385,2 h^O 146

Exemplo 37

Di-bromidrato_de_(IR, 3S) -1-aminomet il-3- [l-(3-cloro- benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Exemplo 38

Dicloridrato de (IR,3S)-l-aminometil-3-(1-ciclopropilmetil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) CIMS (MH+) do aldeído do produto produto O II 0,90 331,2 hXv 147

Exemplo 39

Dicloridrato de (IR, 3S)-l-aminometil-6-metil-3-(1-naftalen-1-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeído (min) do produto produto o 2,63 417, 1 HVp u

Exemplo 40

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometil-3- (1-isobutil- piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto O hÀ^CH3 ch3 2,24 333,2 148

Exemplo 41

ch3

Dicloridrato de (IR,3S)-1-aminometil-6-metil-3-[1-(3-metil-butil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeído (min) do produto produto CH, 2,39 347,2 H

Exemplo 42

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometil-3 - [ 1- (2,2-dimetil- propil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto o 2,30 347,2 ch3 149

Exemplo 43

Dicloridrato de (IR,3S)-l-aminometil-3-[1-(2-hidroxi-etil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) CIMS (MH+) do aldeído do produto produto 0 2,07 321,2 H

Exemplo 44

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometil-3- (1-isopropil- piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeído (min) do produto produto O 2,20 319,2 ΗΛγΟΗ 3 ch3 150

Exemplo 45

Dicloridrato de (IR, 3S)-l-aminometil-6-metil-3-(1-naftalen-2-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeído (min) do produto produto O 2,64 417,2 hJ^QQ

Exemplo 46

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometi 1-6-meti 1-3- [1- (4- fenoxi-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto ΤΌ-Ό 2,82 459,2 151

Exemplo 47

Dicloridrato de (IR,3S)-l-aminometil-6-metil-3-(1-tiofen-2-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol

Exemplo

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeído (min) do produto produto o 2,32 373,1 -H)

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometil-3- [ 1- ( 4-isopropil- benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto ηΚΟ"<0η· ch3 2,73 409,2 152

Exemplo 49

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometil-3- (l-bifenil-4- ilmetil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto 2, 73 443,2

Dicloridrato de (IR,3S)-1-aminometil-3-[1-(2, 4-difluoro- benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto ÍD-. F 2,45 403,1 153

Exemplo 51

Dicloridrato de (IR,3S)-1-aminometil-6-metil-3-[1-(1-fenil-etil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do cetona (min) do produto produto 9h3 _ 2, 42 381,3

Exemplo 52

Dicloridrato de (IR,3S)-l-aminometil-6-metil-3-(1-piridin-2-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeido (min) do produto produto O 11 2,20 368,3 154

Exemplo 53

Dicloridrato de (IR, 3S)-l-aminometil-6-metil-3-(1-piridin-3-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol

Exemplo 54

Dicloridrato de (IR,3S)-l-aminometil-6-metil-3-(1-piridin-4-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeído (min) do produto produto O 11 2,07 368,3 155

Exemplo 55

Dicloridrato de (IR,3S)-l-aminometil-6-metil-3-(1-quinolin-2-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeído (min) do produto produto 0 2, 47 418,3

Exemplo 56

Dicloridrato de (IR,3S)-l-aminometil-6-metil-3-(1-quinolin-3-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto O ^-N 2,29 418,3 156

Exemplo 57

Dicloridrato de (IR,3S)-l-aminometil-6-metil-3-(1-quinolin-4-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto O HV 2,20 418,3

Exemplo 58

Dicloridrato de (IR,3S)-l-aminometil-3-[1-(4-cloro-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeído (min) do produto produto 2,49 401,2 157

Exemplo 59

Cl

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminomet il-3- [ 1-(2, 4-dicloro- benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Exemplo 60

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminomet il-3 - [l-(3,4-dicloro- benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

158

Exemplo 61

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometil-3- [ 1- ( 4-metoxi- benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeído (min) do produto produto 0 II 2, 40 397,2 «Vi

Exemplo 62

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminomet il-3 - [l-(4-hidroxi- benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) CIMS (MH+) do aldeído do produto produto 2,22 383,3 159

Exemplo 63

Dicloridrato de (IR,3S)-1-aminometil-3-[1-(3,4-difluoro- benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeído (min) do produto produto o 2, 44 403,2 «v

Exemplo 64

Dicloridrato de (IR,3S)-1-aminometil-6-metil-3-[1-(2-metil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) CIMS (MH+) do aldeído do produto produto 0 CH, 2,40 381,2 hVS 160

Exemplo 65

Dicloridrato de (IR,3S)-1-aminometil-6-metil-3-[1-(3-metil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Reagente aldeido Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto 2, 44 381,2

Exemplo 66

Dicloridrato de (IR,3S)-1-aminometil-6-metil-3-[1-(4-metil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeido (min) do produto produto o π 2,46 381,2 «Vi ^ch3 161

Exemplo 67

Dicloridrato de (IR,3S)-l-aminometil-6-metil-3-(1-tiofen-3-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) CIMS (MH+) do aldeído do produto produto 0 II 2,30 373,2 </

Exemplo 68 OMe

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometil-3- [ 1- (2-metoxi- benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeído (min) do produto produto O OMe 11 1 2,35 397,2 hVS Kj 162

Exemplo 69

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminomet il-3- [l-(3-fluoro- benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Exemplo 70

Dicloridrato_de_(IR,3S)-1-aminometil-3-[l-(2-fluoro-4- trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeído (min) do produto produto O F 11 1 2,59 453,2 AS A^CF3 163

Exemplo 71

Dicloridrato de (IR,3S)-l-aminometil-3-(l-furan-3-ilmetil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol

Exemplo 72

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometi 1-6-meti 1-3- [1- (2- trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeído (min) do produto produto O CF, II 1 2, 05 435,2 λα Kj 164

Exemplo 73

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometi 1-6-meti 1-3- [ 1- (3- trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto Acr"' 2,13 435,2

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometi 1-6-meti 1-3- [ 1- ( 4- trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção CIMS (MH+) do aldeído tR (min) do produto produto O II 2,65 435,2 165

Exemplo 75

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminomet il-3- [1-(3,5-dis- trifluormetil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Exemplo 76

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminomet il-3 - [l-(2,5-bis- trifluormetil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeído (min) do produto produto O CF, II 1 2,22 503,2 bó I cf3 16 6

Exemplo 77

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminomet il-3- [l-(2-cloro-5- trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Exemplo 78

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometil-3 - [l-(4-cloro-3- trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

167

Exemplo 79

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminomet il-3- [l-(2-cloro-3- trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Exemplo 80

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminomet il-3 - [l-(2-fluoro-3- trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

168

Exemplo 81

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminomet il-3- [l-(2-fluoro-5- trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeído (min) do produto produto o 2,12 453,0 Λνρ·

Exemplo 82

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometil-3 - [l-(3-fluoro-4- trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

169

Exemplo 83

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminomet il-3- [l-(4-fluoro-3- trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Exemplo 84

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometil-3 - [l-(3-fluoro-5- trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeído (min) do produto produto o „\yCF· 2, 19 453,2 T F 170

Exemplo 85

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometil-3- (1-benzofuran-2- ilmetil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol

Exemplo 86

Dicloridrato de (IR,3S)-1-aminometil-6-metil-3-[1-(3-metil-benzo[b]tiofen-2-ilmetil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeído (min) do produto produto CH3 /==\ 2,97 437,5 °v 171

Exemplo 87

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometi 1-6-meti 1-3- (1- benzo[b]tiofen-3-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol

Exemplo 88

Dicloridrato de (IR,3S)-1-aminometil-6-metil-3-[1-(1-metil-lH-indol-2-ilmetil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

172

Exemplo 89

Dicloridrato_de_(IR,3S)-1-aminometil-3-[1-(1H-indo1-3- ilmetil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeído (min) do produto produto o 2,89 406, 4 h cO XN 1 H

Exemplo 90

Tricloridrato_de_(IR,3S)-1-aminometi1-6-meti1-3-[1-(1- metil-lH-indol-3-ilmetil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto ηΛγΟ N 1 ch3 2,84 420,2 173

Exemplo 91

Dicloridrato de (IR,3S)-1-aminometil-3-[1-(1-benzilo-lH-indol-3-ilmetil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do aldeído (min) do produto produto 3,32 4 9 6,6 N

Exemplo 92

Tricloridrato_de_(IR,3S)-1-aminometi1-6-meti1-3-[1-(1- metil-lH-benzoimidazol-2-ilmetil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Reagente aldeído Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto kP H nj ch3 2,67 421,2 174

Exemplo 93

Dibromidrato_de_(IR, 3S) -l-aminometil-3- [1- (benzil) - piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Esquema B, Passo Bl, (IR,3S)-N-[3-benzil-piperidin-4-il)-5-metoxi-6-metilisocroman-l-ilmetil]formamida

Agitar uma suspensão de N-((IR,3S)-5-metoxi-6-metil-3-(4-piperidinil)-1-isocromanilmetil)formamida (0,5 g, 1,6 mmol), benzaldeído (0,16 g, 1,5 mmol), ácido acético (0,9 g e dicloroetano (13 mL) durante 5 min. Adicionar triacetoxiboro-hidreto de sódio (0,5 g, 2,3 mmol) e agitar, à temperatura ambiente, durante 4 h. Arrefecer a mistura num banho de gelo e água (18 mL) e, depois, tornar a mistura básica por adição de NaOH aquoso a 50%. Extrair a mistura com diclorometano, filtrar a mistura bifásica através de Celite, separar as fases e extrair novamente a aquosa com diclorometano. Combinar os extractos, lavar com H2O, secar sob MgS04, filtrar e concentrar sob vácuo para obter 0,69 g de um óleo castanho. Purificar o óleo em bruto por HPLC preparativa num cartucho de sílica gel (35 g) e utilizar dietilamina (Et2NH) a 2%-EtOAc seguida por Et2NH a 10%-EtOAc. Combinar as fracções semelhantes e concentrar para obter 0,34 g do composto do título. 175

Esquema B, Passo B4, Dibromidrato de (IR,3S)-1-aminometil-3-[1-(benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Ao composto (lR,3S)-N-]3-(l-benzil-piperidin-4-il)-5-metoxi-6-metilisocroman-l-ilmetil]formamida do passo anterior (0,28 g, 0,67 mmol) adicionar HBr a 48% (3 mL). Aquecer e agitar a mistura reaccional sob árgon, a 100 °C, durante 1,5 h e, depois, à temperatura ambiente, durante 2 h. Concentrar a mistura reaccional para obter 0,47 g de óleo castanho. Diluir o óleo com H20 (20 mL) e basificar a mistura com NaOH 1 M. Após processamento de extracção com CH2CI2 obter um sólido bege, 0,22 g. Dissolver o sólido em IPA (3-4 mL) e adicionar HBr gasoso. Agitar a solução durante 1 h, à temperatura ambiente e, depois, concentrar sob vácuo para obter um óleo. O óleo foi recolhido em IPA e foi adicionado éter para precipitar 0,22 g do composto do titulo como um sólido branco, MS 367 (MH+) . Anal.

Calculado para C23H30N2O2 *2HBr *1,15H20: C, 50,31; H, 6,25; N, 5,10. Verificado: C, 49,77; H, 6,19; N, 4,71. 176

Exemplo 94

Dicloridrato de_(IR,3S)-6-metil-l-metilaminometil-3-(1- fenetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol

Esquema B, Passo BI;(IR,3S)-N-[5-lsopropoxi-6-metil-3-(1-fenetil-piperidin-4-il)-isocroman-l-ilmetil]-formamida

Seguir o processo do Exemplo (para B4) excepto utilizando fenilacetaldeido em vez de 4-fluorobenzaldeido para obter o composto do titulo. Utilizar directamente no passo seguinte.

Esquema B Passo, B5: (1R,3S) [5-Isopropoxi-6-metil-3-(1- fenetil-piperidin-4-il)-isocroman-l-ilmetil]-metil-amina A uma solução de LiAlH4 0,5 M em THF (3 mL) a 8 °C, adicionar A1C13 (35 mg) e (IR,3S)-N-[5-Isopropoxi-6-metil-3-(1-

fenetil-piperidin-4-il)-isocroman-l-ilmetil]-formamida em THF (2 mL) . Permitir que a mistura reaccional aqueça até 20 °C e agitar durante 4 horas. Arrefecer até 8 °C e atenuar através da adição lenta de NH4C1 aquoso saturado até pH 8. Adicionar EtOAc (8 mL) e, depois, filtrar a mistura para separar a camada orgânica e concentrar. Purificar o resíduo por cromatografia 177 numa coluna de sílica gel de 1 g (eluente: 10% de CH3OH/CH2CI2) . Recolher as fracções apropriadas e concentrar para obter o composto do título.

Esquema B, Passo B6: Dicloridrato de (IR,3S)-6-metil-l-metilaminometil-3-(1-fenetilpiperidin-4-il)-isocroman-5-ol

Arrefecer uma solução de (1R,3S) [ 5-Isopropoxi-6-metil-3- (1-fenetil-piperidin-4-il)-isocroman-l-ilmetil]-metilamina em diclorometano anidro (4 mL) até -20 °C e adicionar lentamente 6 equivalentes de BCI3 (utilizar BCI3 1 M em diclorometano) à solução. Após a conclusão da adição, agitar a mistura reaccional a -20 °C, durante 2 horas e 0 °C, durante 1 hora. Arrefecer novamente para -20 °C e atenuar com CH3OH anidro (0,5 mL) . Permitir que a solução resultante aqueça até à temperatura ambiente e concentrar. Purificar o produto em bruto numa coluna SCX de 2 g e, depois, por cromatografia numa coluna de sílica gel de 1 g (eluída por NH3 7 N em metanol: acetato de etilo = 1:10). Recolher e concentrar as fracções apropriadas e tratar com HC1 2 M em éter dietílico para obter o composto do titulo. CIMS 395, 4 (MH+) , tR (min)= 2,17.

Os seguintes exemplos 95-102 foram sintetizados de um modo semelhante ao Exemplo 94, com diferentes aldeídos ou cetonas utilizados como reagentes no primeiro passo para a aminação redutora. Em alguns exemplos, os compostos foram convertidos nos sais cloridrato em vez de bromidrato, utilizando HC1 saturado num solvente alcoólico ou eteral em vez de metanol saturado com HBr. 178

Exemplo 95

Dicloridrato de (IR, 3S)-3-[ 1-(4-Fluoro-benzil)-piperidin-4-il]-6-metil-l-metilaminometilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto 2, 12 399,4

Exemplo 96

Dicloridrato de (IR,3S)-3-(1-Ciclo-hexilmetil-piperidin-4-il)-6-metil-l-metilaminometilisocroman-5-ol

179

Exemplo 97

Dicloridrato_de_(lR,3S)-3-[l-( 4-isopropil-benzil) - piperidin-4-il]-6-metil-l-metilaminometilisocroman-5-ol

Exemplo 98

Dicloridrato de (IR,3S)-3-(1-bifenil-4-ilmetil-piperidin-4-il)-6-metil-l-metilaminometilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto 2, 44 457, 4 180

Exemplo 99

Dicloridrato de (IR,3S)-3-[1-(4-metoxi-benzil)-piperidin-4-il]-6-metil-l-metilaminometilisocroman-5-ol

Exemplo 100

Dicloridrato_de_(lR,3S)-3-[l-(3,4-dif luoro-benzil) - piperidin-4-il]-6-metil-l-metilaminometilisocroman-5-ol

181

Exemplo 101

Dicloridrato de (IR,3S)-6-metil-l-metilaminometil-3-[1-(4-metil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto V, 2,19 395, 4

Exemplo 102

Di-bromidrato de (IR,3S)-6-metil-l-metilaminometil-3-(1- metil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto HCHO 0,98 305,2 182

Exemplo 103

OMs

Intermediário: Ester 3-(6-fluoro-benzo[d]isoxazol-3-il)-2-metil-propílico do ácido metanossulfónico e éster 3-(6-fluoro-benzo[d]isoxazol-3-il)-butílico do ácido metanossulfónico ácido 4-(2,4-difluorofenil)-2-metil-4-oxobutírico e ácido 4-(2, 4-difluorofenil)-3-metil-4-oxobutírico

Adicionar anidrido metilsuccinico (5 g, 43,8 mmole) a uma suspensão agitada de 1,3-difluorobenzeno (25 g, 219,1 mmole) e cloreto de alumínio (11,7 g, 87,6 mmole), mantendo a temperatura abaixo de 50 °C. Agitar a recção, de um dia para o outro, a 50 °C e, depois, durante 3 dias a 78 °C. Arrefecer para a temperatura ambiente e adicionar lentamente a mistura reaccional a uma mistura de HC1 3 N (40 mL) e gelo (40 g) . Adicionar cloreto de metileno (80 mL) e separar a camada orgânica, depois, extrair a fase aquosa com mais cloreto de metileno (70 mL) . Lavar duas vezes a fase orgânica combinar com solução de NaOH 1 N (80 mL) e, depois, acidificar a lavagem básica combinada com HC1 6 N. Extrair duas vezes a fase aquosa acídica com cloreto de metileno (100 mL) , secar sob Na2S04 e concentrar para obter o produto. ESMS 229, tR (min) = 1,57. RMN de ΧΗ mostrou uma mistura 4:1 de produtos isoméricos. 183 ácido 3-(6-fluorobenzisoxazol-3-il)-2-metilpropiónico e ácido 3-(6-fluorobenzoisoxazol-3-il)butírico

Agitar a mistura anterior (5,16 g, 27 mmole) em álcool isopropilico (50 mL) contendo K2C03 (18,6 g, 135 mmole), a 45 °C. Adicionar lentamente cloridrato de hidroxilamina (4,7 g, 67,5 mmole) e aquecer a reacção para 80 °C. Após 2 horas arrefecer a reacção para 50 °C, adicionar mais cloridrato de hidroxilamina (2,34 g, 33,7 mmole) e aquecer para 80 °C, de um dia para outro. Remover o álcool isopropilico por evaporação e adicionar HCL 2 N (50 mL) e acetato de etilo (50 mL) . Separar a fase orgânica e extrair a fase aquosa mais duas vezes com acetato de etilo (50 mL). Combinar as camadas orgânicas, lavar com solução salina saturada, secar sob Na2SC>4 e concentrar para obter o produto. ESMS 224, tR (min) = 1,56. RMN de ΤΗ mostrou uma mistura 4:1 de produtos isoméricos. 3-(6-fluorobenzisoxazol-3-il)-2-metilpropan-l-ol e 3-(6-fluorobenzisoxazol-3-il)butan-l-ol

Dissolver a mistura anterior (6,0 g, 27 mmole) em THF (100 mL) e adicionar Borano-THF 1 M (34 mL, 34 mmole) . Após 1 hora, adicionar metanol (15 mL) e agitar de um dia para o outro. Remover o solvente por evaporação e adicionar acetato de etilo (50 mL) e HC1 1 N (40 mL) . Remover a fase orgânica, lavar com solução saturada de NaHCCR, secar sob Na2S04 e concentrar. Purificar o produto em bruto numa coluna de sílica de 30 g (eluída com acetato de etilotheptano 1:1). Recolher as fracções apropriadas e concentrar, para obter o composto do título. CIMS 210, tR (min) = 1,55. RMN de ΤΗ mostrou uma mistura 1,4:1 de produtos isoméricos. 184

Ester do 3-(6-fluorobenzisoxazol-3-il)-2-metilpropílico ácido metanossulfónico e éster 3-(6-fluorobenzisoxazol-3-il)butílico do ácido metanossulfónico

Dissolver a mistura anterior (448 mg, 2,14 mmole) em cloreto de metileno (2 mL) sob atmosfera de azoto e arrefecer para 0 °C. Agitar e adicionar trietilamina (388 pL, 2,78 mmole) seguida por cloreto de metanossulfonilo (200 pL, 2,57 mmole).

Após 1 hora, adicionar mais trietilamina (194 pL, 1,4 mmole) e cloreto de metanossulf onilo (100 pL, 1,3 mmole). Após 30 minutos, adicionar HC1 1 N (5 mL) e cloreto de metileno (5 mL) e separar a fase orgânica. Secar sobre Na2SC>4 e concentrar, para obter o produto que é utilizado no passo seguinte sem purificação posterior.

Exemplo 104 e Exemplo 105

Dicloridrato de_(IR,3S)-l-aminometil-3-{1-[3-(6-fluoro- benzo[d]isoxazol-3-il)butil]piperidin-4-il}-6-metilisocroman-5-ol (Exemplo 104) e Dicloridrato de (IR,3S)-l-aminometil-3-{1-[3-(6-fluoro-benzo[d]isoxazol-3-il)-2-metilpropil]piperidin-4-il}-6-metilisocroman-5-ol (Exemplo 105)

Esquema_B',_passo_BI'_N- ( (IR, 3S)-3-{l-[3-(6- fluorobenzisoxazol-3-il)-2-metilpropil]piperidin-4-il}-5-metoxi- 185 6-metilisocroman-l-ilmetil)formamida e N-((IR,3S)-3-{1-[3-(6-fluoro-benzisoxazol-3-il)-butil]piperidin-4-il}-5-metoxi-6-metilisocroman-l-ilmetil)formamida

Dissolver a mistura anterior de mesilatos (507 mg, 1,76 mmole) em THF (6 mL) com N-((lR,3S)-5-metoxi-6-metil-3-piperidin-4-il-isocroman-l-ilmetil)formamida (600 mg, 1,9 mmole) e K2CO3 (253 mg, 1,83 mmole) e agitar durante 72 horas, a 65 °C. Adicionar 10 mL de THF e 2 mL de metanol, filtrar através de celite, concentrar e utilizar no passo seguinte sem purificação posterior.

Esquema B', passo B2' Dicloridrato de (IR,3S)-1-aminometil-3{1-[3-(6-fluoro-benzo[d]isoxazol-3-il)butil]piperidin-4-il}-6-metilisocroman-5-ol e Dicloridrato de (IR,3S)-l-aminometil-3-{1-[3-(6-fluoro-benzo[d]isoxazol-3-il)-2-metilpropil]piperidin-4-il}-6-metilisocroman-5-ol

Dissolver a mistura anterior (338 mg, 0,66 mmole) em HBr a 48% (2,5 mL) e aquecer até 100 °C. Evaporar, adicionar NaOH a 15% (2 mL) , metanol (2 mL) e acetato de etilo (5 mL) e agitar durante 2 horas. Separar a camada orgânica e extrair a fase aquosa com acetato de etilo (3x5 mL) . Combinar as camadas orgânicas, secar (MgSCh) , concentrar e submeter a cromatografia a mistura sob uma coluna de silica gel (10 g) , eluida com amónia metanólica em cloreto de metileno (com concentração crescente de 1% a 10%) . As fracções apropriadas foram combinadas, correspondendo aos dois isómeros posicionais e convertidos nos dicloridratos com HC1 2 M em éter dietilico para proporcionar os compostos do titulo respectivos. CIMS 468,3, tR (min) = 1,14 e CIMS 468,3, tR (min) = 1,15. 186

Os seguintes exemplos 106-110 foram sintetizados de um modo semelhante ao Exemplo 104, sendo utilizados agentes alquilantes diferentes no primeiro passo.

Exemplo 106

Di-bromidrato de (IR,3S)-1-aminometil-6-metil-3-(1-fenetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol

Agente Tempo de retenção tR - CIMS (MH+) do Alquilante (min ) do produto produto 1,33 381,3 187

Exemplo 107

Di-bromidrato_de_(IR, 3S) -1-aminomet il-3- {l-[2-(3-cloro- fenil)-etil]-piperidin-4-il}-6-metilisocroman-5-ol

Agente Alquilante Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto 1,5 415,2

Exemplo 108

Di-bromidrato_de_(IR, 3S) -1-aminomet il-3 - {l-[4,4-bis-(4- fluoro-fenil)-butil]-piperidin-4-il}-6-metilisocroman-5-ol

Exemplo 109

Di-bromidrato_de_(IR, 3S) -1-aminometi 1-6-meti 1-3- [ 1- (3- fenil-alil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Agente Alquilante Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto O 1,17 393,2

Exemplo 110

Dicloridrato de (IR,3S)-1-aminometil-6-metil-3-[1-(3-fenil-propil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Agente Alquilante Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto 2,49 395, 2 189

Exemplo 111

Cloridrato do éster isopropílico do ácido 4-((lR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-1-carboxílico

Esquema C, Passo Cl: Ester isopropílico do ácido 4- ( (IR, 3S)-l-formilminometil-5-isopropoxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxílico A uma solução de N-((IR,3S)-5-isopropoxi-6-metil-3-(4-piperidinil)-1-isocromanilmetil)formamida (Exemplo 11, 0,58 mmol) em diclorometano (4 mL) , adicionar DIEA (0,58 mmol), seguido por cloroformato de isopropilo (0,64 mmol). Agitar a mistura reaccional, à temperatura ambiente, de um dia para o outro. Evaporar o solvente e purificar o resíduo resultante por cromatografia numa coluna de sílica gel de 2 g (eluída com metanol a 3% em diclorometano). Recolher as fracções apropriadas, concentrar e obter o composto do título. 190

Esquema C, Passos C2, C3: Cloridrato do éster isopropílico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxílico

Agitar uma solução do éster isopropílico do ácido 4 - ( (IR, 3S)-1-formiloaminometil-5-isopropoxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxílico directamente do passo anterior em ácido clorídrico metanólico a 5% (4 mL) à temperatura ambiente, durante 2 dias. Remover o solvente para proporcionar um óleo amarelo. Purificar o óleo numa coluna SCX de 2 g. 0 resíduo resultante foi novamente dissolvido em 4 mL de diclorometano anidro, arrefecido para -20 °C e foram lentamente adicionados 6 equivalentes de BCI3 (utilizando BCI3 1 M em diclorometano) à solução. Após a adição, a mistura reaccional foi agitada, a -20 °C, durante 2 horas e 0 °C, durante 1 hora. Foi, depois, arrefecida para -20 °C e atenuada com 0,5 mL de CH3OH anidro. A solução resultante foi aquecida para a temperatura ambiente e concentrada. O produto em bruto foi purificado através de uma coluna SCX de 2 g, seguido por uma coluna de sílica gel de 1 g (eluída com NH3 7 N em metanol: acetato de etilo = 1:10) e foi formado o cloridrato com HC1 2 M em éter dietílico. CIMS 363,2 (MH+) , tR (min)= 2,65.

Os seguintes exemplos 112-167 foram sintetizados de um modo semelhante ao Exemplo 111, utilizado como reagentes no primeiro passo os haloformatos, halogenetos de sulfonilo, halogenetos de sulfamoílo, halogenetos ácidos, halogenetos de carbamoílo e isocianatos. 191

Exemplo 112 ο

Cloridrato do éster metílico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-1-carboxílico

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto o Ϊ Cr 2,22 335,3

Exemplo 113

Cloridrato do éster fenílico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-1-carboxilico

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto 2,56 397,3 192

Exemplo 114 ο

Cloridrato do éster p-tolílico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-1-carboxílico

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto o ci^"°~^0~ch» 2,67 411,3

Exemplo 115

Cloridrato do éster 4-cloro-fenílico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-1-carboxilico

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto o 2,67 411,3 193

Exemplo 116

Cloridrato do éster 2-cloro-fenílico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-1-carboxílico

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do (min) do produto produto 0 C'\_ 2, 74 431,3

Exemplo 117

Cloridrato do éster 4-bromo-fenílico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-1-carboxílico

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto c,/^oHC)"Br 2, 77 475,2 194

Exemplo 118

Cloridrato do éster 4-fluoro-fenílico do ácido 4-((lR,3S)~ 1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-1-carboxílico

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto 2,60 415,3

Exemplo 119

Cloridrato do éster 2-trifluorometil-fenílico do ácido 4- ( (IR, 3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il) -piperidina-l-carboxílico

195

Exemplo 120

Cloridrato do éster 4-metoxi-fenílico do ácido 4-((lR,3S)~ 1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-1-carboxílico

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto o 2,55 427,3

Exemplo 121

Cloridrato do éster 2-hidroxi-fenílico do ácido 4-((lR,3S)~ 1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-1-carboxílico

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do produto (min ) do produto _ MeO 2,39 413,3 196

Exemplo 122

Cloridrato do éster benzílico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-1-carboxílico

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto o Vo o d 2,63 411,3 197

Exemplo 123

Cloridrato do éster naftalen-2-ίlico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-1-carboxílico

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto O a-^cy\ 2,80 447,3 198

Exemplo 124

Bromidrato de (2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-amida do ácido 4-((lR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxílico

Exemplo 125

(3-Metoxi-fenil)-amida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxílico

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto OCN— OMe 2,79 426,0 199

Exemplo 126

(3-Hidroxi-fenil)-amida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxílico

200

Exemplo 127

Cloridrato de (2-hidroxi-fenil)-amida do ácido 4-((lR,3S)~ 1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-1-carboxílico

201

Exemplo 128

Cloridrato de (4-fluoro-fenil)-amida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-1-carboxílico

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto oon^G^-f 2,80 414, 1 202

Exemplo 129

Cloridrato de (2-fluoro-fenil)-amida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-1-carboxílico

203

Exemplo 130

Cloridrato de difenilamida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-1-carboxílico

204

Exemplo 131

Cloridrato de metil-fenil-amida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-1-carboxílico

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto J,jO ch3 2,63 410,2

Exemplo 132

Cloridrato de dimetilamida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-1-carboxilico

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto X OH cr 1 ch3 2, 15 348,3 205

Exemplo 133

Cloridrato de diisopropilamida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-1-carboxílico

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto í? ch3 cAAch, Kh, ch3 2,62 404, 4 206

Exemplo 134

Cloridrato Ο

de [4-((IR,3S)-l-aminometil-5-hidroxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-morfolin-4-il-metanona

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto o 3== O 2,10 390,3 207

Exemplo 135

Cloridrato_de_[ 4 - ( (IR, 3S) -l-aminometil-5-hidroxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-pirrolidin-l-il-metanona

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto O A cr 2,27 374,3 208

Exemplo 136

Cloridrato de dietilamida do ácido 4-( (IR, 3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxílico

Reagente Tempo de retenção tR (min) do CIMS (MH+) do produto produto 0 X ci^n-^ch, \ 2,37 376,3 / ch3 209

Exemplo 137

Cloridrato_de_[ 4 - ( (IR, 3S) -l-aminometil-5-hidroxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-fenotiazin-10-il-metanona

210

Exemplo 138

Cloridrato_de_[ 4 - ( (IR, 3S) -l-aminometil-5-hidroxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-piperidin-l-il-metanona

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do (min) do produto produto n 2,40 388,3 o o 211

Exemplo 139

.(CH2)3CH3 (ch2)3ch3

Cloridrato de dibutilamida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-1-carboxílico

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto O N(CH2)3CH3 2,87 432,4 212

Exemplo 140

Cloridrato de dialilamida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxílico

Reagente Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do (min) do produto produto n 2,54 400,3 aA^ / *1 213

Exemplo 141

Cloridrato de (IR,3S)-l-aminometil-3-(1-benzenossulfonil- piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto o* 2,89 417,2 214

Exemplo 142

Cloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometi 1-6-meti 1-3- (1- fenilmetanossulfonil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto 2,62 431,5 215

Exemplo 143

Cloridrato

de (IR,3S)-1-aminometi1-6-meti1-3-[1—(2 — trifluorometil-benzenossulfonil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto CF, 2, 74 485,5 216

Exemplo 144

OMe OMe

Cloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometil-3- [ 1- (3,4-dimetoxi- benzenossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (mh+) do produto Me°—S02CI MeO 2,54 477,5 217

Exemplo 145 Ο

Cloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometil-3- [ 1- ( 4-isopropil- benzenossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto 2,90 459,5 218

Exemplo 146

Cloridrato_(IR, 3S) -1-aminometil-3- [ 1- ( 4-terc-butil- benzenossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto η,οΗγ^ 2,97 473,6 219

Exemplo 147

Cloridrato de (IR,3S)-1-aminometil-6-metil-3-[1-(naftaleno-2-sulfonil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Exemplo 148

Cloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminomet il-3 - [l-(4-cloro- benzenossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto Cl—so2ci 2, 74 451,3 220

Exemplo 149

Cloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminomet il-3- [l-(2, 4-dicloro- benzenossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto —S02CI Cl 2,84 485,3

Exemplo 150

Cloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminomet il-3 - [l-(3,4-dicloro- benzenossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto Cl—^ ^—S02CI Cl 2,88 485,3 221

Exemplo 151

Cl

Cloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometil-3- [1-(2,5-dicloro- benzenossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

222

Exemplo 152

Cloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometil-3- [l-(bifenil-4- sulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto 2,94 493,4 223

Exemplo 153

Cloridrato_de_(IR,35) -1-aminometil-3- (1-etanossulfonil- piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto S02CI H3C—' 2,35 369,2

Exemplo 154

(CH2)3CH3

Cloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometil-3 - [ 1- (butano-1- sulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto ch3(ch2)3- S02C1 2,66 397,2 224

Exemplo 155

Cloridrato de (IR,3S)-1-aminometil-6-metil-3-[1-(propano-2-sulfonil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto H,C ^—so2ci h3c 2,47 383,2

Exemplo 156

(CH2)7CH3

Cloridrato de (IR,3S)-1-aminometil-6-metil-3-[1-(octano-1-sulfonil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto CH3(CH2) 7-S02C1 3,29 453,3 225

Exemplo 157

Cloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometi 1-6-meti 1-3- [1-(2,2,2- trifluoro-etanossulfonil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto cf3ch2- S02C1 2,65 423,2

Exemplo 158

Cloridrato de (IR,3S)-l-aminometil-6-metil-3-[1-(2-nitro-fenilmetanossulfonil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

226

Exemplo 159

Cloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometi 1-6-meti 1-3- [ 1- (2- naftalen-l-il-etanossulfonil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Exemplo 160

Cloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometi 1-3- [l-(3,4-dicloro- fenilmetanossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

227

Exemplo 161

Cloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminomet il-3- [1-(2,2-difenil- etanossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

228

Exemplo 162

Cloridrato de 1(R)-[4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-sulfonilmetil]-7,7-dimetil-biciclo[2,2,1]heptan-2-ona

229

Exemplo 163

Cloridrato de 1(S)-[4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidina-l-sulfonilmetil]-7,7-dimetil-biciclo[2,2,1]heptan-2-ona

Reagente Tempo de retenção tR (min) CIMS (MH+) do do produto produto 2,81 491,3 / o2sx Cl 230

Exemplo 164

Cloridrato de dimetilamida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-1-sulfónico

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto (ch3)2n- S02C1 2,49 384,2

Exemplo 165

Cloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometi 1-6-meti 1-3- [ 1- (piperidina-l-sulfonil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto (Λ-sop 2,57 424,3 231

Exemplo 166

Cloridrato_de_(IR, 3S) -1-aminometil-3- [ 1- ( 4-benzil- piperidina-l-sulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

232

Exemplo 167

Cloridrato de (IR,3S)-1-aminometil-3-[1-(3,4-di-hidro-lH-isoguinolina-2-sulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto r=J N—SO,CI 2, 75 472,3 233

Exemplo 168

(IR,3S)-l-Dimetilaminometil-6-metil-i-3-[ 1-(4-trifluorometilbenzil)piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Esquema D, Passo Dl: Éster benzílico do ácido [l-hidroxi-2-(2-metoxi-3-metilfenil)etil]piperidina-l-carboxílico

Arrefecer (5 °C) e agitar uma massa espessa de (S)-2-(2-metoxi-3-metilfenil)-1-(4-piperidinil)etanol (19,8 g, 53.5 mmol) em THF (220 mL) e K2C03 aquoso saturado (220 mL) e adicionar, gota a gota, cloroformato de benzilo (7,87 mL, 53.5 mmol). Agitar a mistura reaccional no frio, durante 20 min e, depois, adicionar 200 mL de H2O e 400 mL de EtOAc. Separar a camada orgânica e extrair a camada aquosa com EtOAc (400 mL). Lavar a fase orgânica combinada com solução salina saturada, secar sob Na2S04 e concentrar. Purificar o produto em bruto resultante por cromatografia em Si02 utilizando EtOAc:CH2C12 (1:5). A concentração das fracções contendo o produto proporcionou 19 g (93%) de produto sólido; RMN de 1H (DMSO-d6) δ 7, . 3-7 ,4 (m, 5H) 1, 7,1- -6,9 (m, 3H) , 5,1 (s, 2H), 4,5 (d, 1H) , 4,1- -4,0 (m, 2H) , 3,6 (s , 3h; ), 3 , 5 (m, 1H) , 2, 8-2,7 (m, 3H) , . 2,5 (m, 1H) , 2,2 (s, 3H) , 1,8 (m, 1H) , 1,6 (m, 1H), 1,4 (m, 1H) , 1,4-1,2 (m, 2H). 234

Esquema D, Passo D2, (S)-2-(2-Metoxi-3-metilfenil)-1-(4

piperidinil)etanol Ligado a REM A uma solução de éster benzílico do ácido [l-hidroxi-2-(2-metoxi-3-metilfenil)etil]piperidina-l-carboxílico (3,43 g) em metanol anidro (64 mL) adicionar Pd em carbono a 10% (173 mg).

Hidrogenar a mistura reaccional a 55 psi de H2, durante 2 horas. Filtrar através de celite e lavar três vezes com metanol (30 mL). Combinar os filtrados e evaporar para proporcionar 2,2 g de óleo viscoso. Dissolver o óleo resultante em NMP (18 mL) e transferir para um recipiente de agitação. Adicionar resina REM (2,0 g, 1,05 mmol/g de carga) . Agitar a mistura reaccional, à temperatura ambiente, durante 4 dias, filtrar e lavar o bolo filtrado três vezes com diclorometano, metanol e novamente diclorometano. Secar a resina resultante sob vácuo elevado, de um dia para o outro.

Esquema D, Passo D3, (IR, 3S)-4-(l-Bromometil-5-metoxi-6-

metilisocroman-3-il)-piperidina Ligada a REM

Manter todos os reagentes no frigorífico, a -5 °C, antes de utilizar. Encher um frasco de 20 mL três vezes com árgon. A este frasco adicionar (S)-2-(2-Metoxi-3-metilfenil)-1-(4-piperidinil)etanol ligado a REM (300 mg), tolueno anidro (9 mL), dimetilacetal de bromoacetaldeído (89 pL) , eterato de borotrifluoreto de dietilo (144 pL) . Tapar o frasco e colocá-lo numa mesa de agitação, durante um dia. Transferir a mistura reaccional para um recipiente de agitação de 50 mL, filtrar e lavar a resina uma vez com tolueno e duas vezes com diclorometano, dioxano - NaOH aquoso 0,1 N (proporção 1:1), 235 dioxano, metanol e diclorometano. Secar a resina resultante sob vácuo elevado, de um dia para o outro.

Esquema D, Passo D4, (IR,3S)-1-(4-Trifluorometilbenzil)-4- (1-bromometil-5-metoxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina

Adicionar o brometo de 4-trifluorometilbenzilo (7,2 g) e NMP (20 mL) à (IR, 3S)-4-(l-bromometil-5-metoxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina ligada a REM (2,0 g 0,78 inmol/g de carga) num frasco de agitação de 50 mL. Agitar a mistura reaccional, à temperatura ambiente, de um dia para o outro, filtrar e lavar três vezes com NMP, diclorometano, metanol, e diclorometano. A esta resina adicionar diclorometano (18,6 mL) e DIEA (1,4 mL). Agitar a mistura resultante, à temperatura ambiente, de um dia para o outro, filtrar e levar a resina duas vezes com diclorometano, metanol, e diclorometano. Combinar os filtrados, concentrar e adicionar Amberlite IRA-67 (2,0 g) com diclorometano (20 mL) . Agitar a mistura resultante, à temperatura ambiente, durante 4 horas, filtrar e lavar duas vezes com diclorometano, metanol e diclorometano. Combinar os filtrados e concentrar para proporcionar o composto do título. CIMS 512,1 (MH+) , tR (min)= 3,52.

Esquema_D,_Passo_D5,_(IR, 3S) — [3-(1-(4-

Trifluorometilbenzil)piperidini1-4-i1)-5-metoxi-6-metilisocroman-l-ilmetil]-dimetilamina

Adicionar dimetilamina em metanol 2 N (3 mL) a (IR, 3S)-1 benzil-4-(1-bromometil-5-metoxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina (30 mg) a um frasco de 8 mL. Tapar o frasco e, 236 depois, agitar e aquecer a mistura reaccional, a 80 °C, durante 16 horas. Arrefecer a mistura resultante e concentrar. Purificar o produto em bruto numa coluna SCX de 1 g e utilizar directamente o composto do titulo no passo seguinte.

Esquema D, Passo D6 (IR,3S)-1-Dimetilaminometil-6-metil-)-3-[1-(4-trifluorometilbenzil)piperidin-4-il]-isocroman-5-ol A um frasco de 8 mL contendo (IR,3S)-[3-(1-enzil-piperidinil-4-il)-5-metoxi-6-metilisocroman-l-ilmetil]-dimetilamina do passo anterior, adicionar HBr a 48% (1 mL) .

Agitar e aquecer a mistura reaccional, a 100 °C, durante 3 horas. Arrefecer a mistura reaccional e concentrar o produto em bruto. Purificar o produto em bruto numa coluna SCX de 1 g. Concentrar as fracções apropriadas para obter o composto do titulo. CIMS 463,5 (MH+) , tR (min)= 2,75.

Os seguintes exemplos 169-188 foram sintetizados de um modo semelhante ao Exemplo 168, utilizando como reagentes diferentes agentes alquilantes (Passo D4) e aminas (Passo D5). 237

Exemplo 169

(IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-1-dimetilaminometil-6-metilisocroman-5-ol

Reagente: Reagente: Tempo de retenção CIMS (MH+) Passo D4 Passo D5 tR (min) do produto do produto ΒΓ·^γ% HN(CH3)2 2,50 395,3 u

Exemplo 170

(IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-1-dietilaminometil-6-metilisocroman-5-ol

Reagente: Reagente: Tempo de retenção tR CIMS (MH+) Passo D4 Passo D5 (min) do produto do produto HN(C2H5)2 2,65 423,3 u 238

Exemplo 171

(IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-6-meti1-1-metilaminometilisocroman-5-ol

Reagente: Reagente: Tempo de retenção CIMS (MH+) do Passo D4 Passo D5 tR (min) do produto produto ΒΓΎ*Ί H2NCH3 2,51 381,3 u

Exemplo 172

(IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-1-etilaminometil-6-metilisocroman-5-ol

Reagente: Reagente: Tempo de retenção CIMS (MH+) do Passo D4 Passo D5 tR (min) do produto produto H2NC2H5 2,55 395,3 u 239

Exemplo 173

(IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-1-[(etil-metil-amino)-metil]-6-metilisocroman-5-ol

Reagente: Passo D4 Reagente: Passo D5 Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto •PQ HN Uhl3 ch3 2,59 409,3

Exemplo 174

(IR, 3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-6-meti1-1-propilaminometilisocroman-5-ol

Reagente: Reagente: Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do Passo D4 Passo D5 (min) do produto produto ΒγΛΛι H2N(CH2)2CH3 2,59 409,3 u 240

Exemplo 175

(IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-6-meti1-1-[(metil-propil-amino)-metil]-isocroman-5-ol

Reagente: Reagente: Tempo de retenção tR CIMS (MH+) Passo D4 Passo D5 (min ) do produto do produto PO HN vch3 2,67 423,3

Exemplo 176

(IR,3S)-1-[(Alil-metil-amino)-metil]-3-(1-benzilo-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol

Reagente: Reagente: Tempo de retenção CIMS (MH+) Passo D4 Passo D5 tR (min) do produto do produto "PO HN^ ch3 2,65 421,3 241

Exemplo 177

(IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-1-ciclobutilaminometil-6-metilisocroman-5-ol

Reagente: Passo D4 Reagente: Passo D5 Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto -"Ό h2n^> 2,67 421,3

Exemplo 178

(IR, 3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-6-metil-l-pirrolidin-1-ilmetilisocroman-5-ol

Reagente: Passo D4 Reagente: Passo D5 Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto •dO 0 2,67 421,3 242

Exemplo 179

2-[4-((1R,3S)-1-Etilaminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-fenil-etanona

243

Exemplo 180

2-[4-((1R,3S)-1-Dialilaminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-fenil-etanona

Reagente: Reagente: Tempo de retenção CIMS (MH+) Passo D4 Passo D5 tR (min) do produto do produto hn^v^ch2 ^CHZ 2, 75 475, 4 244

Exemplo 181

Cloridrato de (IR,3S)-6-metil-l-metilaminometil-3-[1-(4- trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Reagente: Reagente: Tempo de retenção tR CIMS (MH+) Passo D4 Passo D5 (min) do produto do produto Br-Y^ H2NCH3 2,36 449,4 u.CFí

Exemplo 182

(IR,3S)-1-Etilaminometi1-6-meti1-3-[1-(4-trifluorometil-benzil) -piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Reagente: Reagente: Tempo de retenção tR CIMS (MH+) Passo D4 Passo D5 (min) do produto do produto H2NC2H5 2, 77 463,5 245

Exemplo 183

(IR,3S)-1-[(Etil-metil-amino)-metil]-6-meti1-3-[1-(4-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Reagente: Reagente: Tempo de retenção CIMS (MH+) Passo D4 Passo D5 tR (min) do produto do produto β,'"Ύ*Ί HN'^V"CH3 ch3 2,80 477,5

(IR,3S)-6-Metil-1-[(metil-propil-amino)-metil]-3-[1-(4-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Reagente: Passo D4 Reagente: Passo D5 Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto ^ ,CH, \ CH, 2,87 491,5 246

Exemplo 185

(IR,3S)-1-Dialilaminometil-6-metil-3-[1-(4-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol

Reagente: Reagente: Tempo de retenção CIMS (MH+) Passo D4 Passo D5 tR (min) do produto do produto HN-^H2 2,96 515,5

Exemplo 186

(IR,3S)-1-Alilaminometil-3-(l-benzilo-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol

Reagente: Passo D4 Reagente: Passo D5 Tempo de retenção tR (min) do produto CIMS (MH+) do produto "Ό h2n 2,57 407,5 247

Exemplo 187

(IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-1-dialilaminometil-6-metilisocroman-5-ol

Reagente: Reagente: Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do Passo D4 Passo D5 (min) do produto produto ΌΓΊ HN^CHa 2, 74 447,5 KJ vch2

Exemplo 188

Dicloridrato_de_(IR, 3S) -3- (l-benzil-piperidin-4-il ) -1- dipropilaminometil-6-metilisocroman-5-ol

Reagente: Reagente: Tempo de retenção tR CIMS (MH+) do Passo D4 Passo D5 (min) do produto produto το _ CH, K CH, 2, 42 451,5 248

Exemplo 189

Dibromidrato de N-{2-[4-((IR,3S)-l-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]etil}-4-fluorobenzamida

Esquema E, Passo El, Éster terc-butílico do ácido {2-[4-((IR,3S)-l-Formilaminometil-5-metoxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-etil}carbâmico

Agitar uma solução de N-((IR,3S)-5-metoxi-6-metil-3-(4-piperidinil)-1-isocromanil-metil)formamida (4,0 g, 12,5 mmole) em dicloroetano (110 mL) e adicionar triacetoxiboro-hidreto de sódio (4,0 g, 18,8 mmole). Dissolver N-(2-oxoetil)-carbamato de t-butilo (1,0 g, 6,3 mmole) em dicloroetano (20 mL) e adicioná-lo à mistura reaccional. Após 6 horas, adicionar mais 6,3 mmole de N-(2-oxoetil)-carbamato de t-butilo em dicloroetano. Após mais 42 horas, ajustar o pH da mistura reaccional para cerca de 14 com NaOH a 50% e extrair com diclorometano. Lavar os extractos combinados com água e secar sob MgSCd. Purificar o produto em bruto numa coluna de sílica gel de 33 g (eluída com hidróxido de amónio:metanol;acetato de etilo 1:1:98). Recolher as fracções apropriadas e concentrar para obter o composto do título. CIMS 462, ór (min) = 0,46. 249

Esquema E, Passo E2, Dicloridrato de (IR,3S)-N-{3-[1-(2-Amino-etil)-piperidin-4-il]-5-metoxi-6-metilisocroman-l-ilmetil}formamida

Agitar uma solução fria (5 °C) de éster terc-butilico do ácido {2 —[4 —((1R,3S)-l-formiloaminometil-5-metoxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-etil}carbâmico (1,8 g, 3,9 mmole) em acetato de etilo (525 mL) e borbulhar HC1 gasoso durante 5 min. Remover a fonte de HC1 e agitar, à temperatura ambiente, durante 3 horas. Concentrar a mistura reaccional para 200-300 mL, diluir com éter dietilico e recolher o sólido resultante. CIMS 362,3 tR (min) = 1,02.

Esquema E,_Passo E3,_4-Fluoro-N-{2 - [4- ( (IR, 3S)-1- formiloaminometil-5-metoxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l- il ] -etil}benzamida A (IR,3S)—N—{3-[1-(2-Amino-etil)-piperidin-4-il]-5-metoxi-6-metilisocroman-l-ilmetil}formamida foi obtida por distribuição do dicloridrato entre hidróxido de sódio e diclorometano e, depois, evaporar a fase orgânica. A uma mistura de IRA-67 (1,2 g) e (IR,3S)-N-{3-[1-(2-amino-etil)-piperidin-4-il]-5-metoxi-6-metilisocroman-l-ilmetil}formamida (0,3 g, 0,69 mmole) e adicionar clorofórmio (12 mL) e cloreto de 4-fluorobenzoilo (,310 g, 1,95 mmole) em clorofórmio (2 mL) . Após 24 horas, adicionar mais cloreto de 4-fluorobenzoilo (,3g, 1,89 mmole) e IRA-67 (2 g). Após 18 horas adicionais, adicionar PS-trisamina (1,0 g de 3,75 mmole/g) e agitar durante 6 horas. Filtrar e concentrar, depois, descarregar o produto sob um cartucho de sílica gel de 35 g (eluido com hidróxido de amónia:metanol:acetato de etilo 1:4:95). Recolher a fracção 250 apropriada e concentrar para obter o composto do título. CIMS 484, tR (min) = 0,46.

Esquema E. Passo E4, Dibromidrato de N-{2-[4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-1-il]etil}-4-fluorobenzamida

Agitar a (IR,3S)-N-[3-(1-{2-[3-(4-fluoro-fenil)- ureido]etil}piperidin-4-il)-5-metoxi-6-metilisocroman-1-ilmetil] formamida (0,125g, 0,26 mmol) e HBr a 48% (3 mL) , a 100 °C, durante 2 horas. Concentrar para um óleo, dissolver em álcool isopropílico e adicionar éter dietílico para precipitar o produto. CIMS 442, tR (min) = 0,58.

Os seguintes exemplos 190-191 foram sintetizados de um modo semelhante ao Exemplo 189, com cloretos ácidos diferentes no Passo F3 . 251

Exemplo 190

CH,

Dibromidrato de N-{2-[4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-etil}-4-metilbenzamida

Reagente cloreto ácido Tempo de retenção tR (min) do produto ESMS (MH+) do produto H3c-fV<0 X=/ Cl 1,97 438,3

Exemplo 191

Dibromidrato de N-{2-[4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-etil}benzamida

252

Exemplo 192

Dibromidrato de (IR,3S)-1-{2-[4-(1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]etil}-3-(4-fluoro-fenil)ureia

Esquema E. Passo E5, N-[3-((IR,3S)-l-{2-[3-(4-Fluoro-fenil)ureido]etil}piperidin-4-il)-5-metoxi-6-metilisocroman-l-ilmetil]formamida

Dissolver a (lR,3S)-N-{3-[l-(2-amino-etil)-piperidin-4-il]-5-metoxi-6-metilisocroman-l-ilmetil}formamida (0,395 g, 1,1 mmole) em clorofórmio (5 mL) e adicionar 4-fluorofenilisocianato (0,185 g, 1,3 mmole). Agitar durante 2 horas, adicionar PS-trisamina (0 , 425 g de 3,6 mmole/g) e agitar 20 horas. Filtrar, concentrar e purificar por cromatografia flash sob silica gel (eluida com 5% (aumentando para 15%) de metanol saturado com amónia em diclorometano).

Recolher as fracçoes apropriadas e concentrar para obter o composto do titulo. CIMS 499,3 tR (min) = 3,01. 253

Esquema E, Passo E6 e E7, Dibromidrato de 1-{2-[4-((IR,3S) 1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-1-il]etil}-3-(4-fluoro-fenil)ureia

Preparar de um modo análogo ao esquema B, passos B3 e B3 anteriores, começando a partir de (IR,3S)-N-[3-(1-{2-[3-(4-

Fluoro-fenil)ureido]etil}piperidin-4-il)-5-metoxi-6-metilisocroman-l-ilmetil]formamida. CIMS 457,4, tR (min) = 0,72. O seguinte exemplo foi sintetizado de um modo semelhante ao Exemplo 192, com um isocianato diferente no passo F5.

Exemplo 193

Dibromidrato de 1-{2-[4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)piperidin-l-il]-etil}-3-fenilureia

Reagente isocianato Tempo de retenção tR (min) do produto ESMS (MH+) do produto NCO 1, 95 439,3 254

Exemplo 194

Dicloridrato de (IR,3S)-6-metil-l-metilaminometil-3-[1-(2-fenilbutil)-piperidin-4-il]isocroman-5-ol

Esquema E, Passo EI N-{(IR,3S)-5-Isopropoxi-6-metil-3-[1-(2-fenil-butiril)-piperidin-4-il]-isocroman-l-ilmetil}formamida

Agitar uma solução de N-((IR,3S)-5-isopropoxi-6-metil-3-(4-piperidinil)-1-isocromanil-metil)formamida (200 mg, 0,58 mmole) em diclorometano (3 mL), arrefecer para 10 °C e adicionar cloreto de 2-fenilbutirilo (115 mg, 0,64 mmole) e trietilamina (88 mg, 0,87 mmole). Permitir que aqueça para a temperatura ambiente e verter em HC1 diluído. Separar as camadas e extrair a camada aquosa duas vezes com 4 mL de diclorometano. Lavar os extractos orgânicos combinados com água e secar sob Na2SC>4. Purificar o produto em bruto numa coluna de sílica gel de 10 g (eluída com acetato de etilo:heptano, 3:1). Recolher as fracções apropriadas e concentrar para obter o composto do título. Foi utilizado sem purificação posterior no passo seguinte. 255

Esquema F, Passo F2, {(IR,3S)-5-Isopropoxi-6-metil-3-[1-(2- fenil-butil)-piperidin-4-il]-isocroman-l-ilmetil}amina

Dissolver N-{(IR,3S)-5-isopropoxi-6-metil-3-[1-(2-fenil- butiril)-piperidin-4-il]-isocroman-l-ilmetil}formamida (0,10 g, 0,20 mmole) em hidreto de alumínio e lítio 1 M em éter dietílico (1,5 mL) e atingir o refluxo. Após 3,5 h, arrefecer para a temperatura ambiente, adicionar cloreto de metileno (2 mL) seguido por adição, gota a gota, de NaOH a 10% até não ser observada mais reacção. Adicionar 2 mL de cloreto de metileno e 4 mL de água e filtrar a mistura reaccional e lavar o bolo filtrado com mais cloreto de metileno e água. Combinar as fases orgânicas e secar sob Na2SC>4. Purificar o produto em bruto numa coluna de silica gel de 4 g (eluir com cloreto de metileno e, depois, cloreto de metileno:metanol:hidróxido de amónio, 89:10:1). Recolher as fracções apropriadas e concentrar para obter o composto do título. Foi utilizado sem purificação posterior no passo seguinte.

Dicloridrato de (IR,3S)-6-metil-l-metilaminometil-3-[1-(2-fenilbutil)-piperidin-4-il]isocroman-5-ol A {(IR,3S)-5-isopropoxi-6-metil-3-[1-(2-fenil-butil)- piperidin-4-il]-isocroman-l-ilmetil}metilamina (0,06 g, 0,13 mmole) foi tratada com HBr a 48% como no Esquema B, passo B4, para proporcionar o dicloridrato do composto do título após tratamento com cloreto de hidrogénio em éter dietílico. CIMS 423,2 (NH+) , tR (min) = 1,17. 256

Exemplo 195

Dibromidrato do ácido [4-((IR,3S)-l-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-fenilacético Éster etílico do ácido [4-((IR,3S)-1-formilaminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-fenil-acético

Agitar uma solução de N-((IR,3S)-5-metoxi-6-metil-3-(4-piperidinil)-1-isocromanil-metil)formamida (200 mg, 0,58mmole), 2-bromofenilacetato de etilo (229 mg, 0,94 mmole) e diisopropyiletilamina (243 mg, 1,88 mmole) em acetonitrilo, de um dia para o outro, à temperatura ambiente. Adicionar acetato de etilo e água (2 mL de cada), depois, separar a fase orgânica e secar sob Na2SC>4. Purificar o produto em bruto numa coluna de sílica gel de 4 g (eluida com acetato de etilo: heptano, 3:1) . Recolher as fracções apropriadas e concentrar para obter o composto do título. Foi utilizado sem purificação posterior no passo seguinte. 257

Dibromidrato do ácido [4-((IR,3S)-l-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-fenilacético 0 éster etílico do ácido [4-((IR,3S)-1-formilaminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-fenil-acético (26 mg, 0,054 mmole) foi dissolvido em 300 pL de HBr a 48% aquecido a 100 °C. Após 7 horas, a temperatura é reduzida para 60 °C e a reacção agitada, de um dia para o outro. Adicionar 3 gotas de água e recolher o produto dibromidrato precipitado. CIMS 411,2 (NH+), tR (min) = 1,13.

Sintetizar os Exemplos 196-207 de acordo com o processo descrito no Exemplo 111, excepto efectuar a hidrólise do grupo formilamino por tratamento com NaOH aquoso a 15% em metanol/THF a 70 °C, em vez de HC1 metanólico a 5%.

Exemplo 196

Cloridrato_de_[ 4 - ( (IR, 3S) -1-aminometil-5-hidroxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-(4-fluoro-fenil)-metanona

Reagente cloreto Tempo de retenção tR ESMS (MH+) do ácido (min) do produto produto /T~\ P 2,37 399,2 F \ / ( C1 258

Exemplo 197

OMe 3S)-l-aminometil-5-hidroxi-6--(4-metoxi-fenil)-metanona

Cloridrato_de_[ 4- ( (IR, metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il ]

Reagente cloreto Tempo de retenção tR ESMS (MH+) do ácido (min) do produto produto MeO™y— 2,34 411,3 \=/ Cl 3S)-l-aminometil-5-hidroxi-6--(2-hidroxi-fenil)-metanona

Cloridrato_de_[ 4- ( (IR, metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il ]

Reagente cloreto Tempo de retenção tR ESMS (MH+) do ácido (min) do produto produto 2,19 397,2 ^^ Cl OMe 259

Exemplo 199

Cloridrato_de_[ 4 - ( (IR, 3S) -l-aminometil-5-hidroxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-(4-cloro-fenil)-metanona

Reagente cloreto Tempo de retenção tR ESMS (MH+) do ácido (min) do produto produto /r~\ p 2, 47 415, 2 a\ / ( '—' Cl

Cloridrato_de_[ 4 - ( (IR, 3S) -l-aminometil-5-hidroxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-bifenil-4-il-metanona

260

Exemplo 201 Ο

Cloridrato_[4-( (IR, 3S) -1-aminometil-5-hidroxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-fenil-metanona

Exemplo 202

Cloridrato_de_[ 4 - ( (IR, 3S) - 1-aminometil-5-hidroxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-(4-bromo-fenil)-metanona

Reagente cloreto Tempo de retenção tR ESMS (MH+) do ácido (min) do produto produto 2,29 381,2 \=/ Cl 261

Exemplo 203

Cloridrato_de_1- [ 4 - ( (1R,3S) -1-aminometil-5-hidroxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-2-fenil-etanona

Exemplo 204

Cloridrato_de_1- [ 4 - ( (1R,3S) -1-aminometil-5-hidroxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-etanona

Reagente cloreto Tempo de retenção tR ESMS (MH+) do ácido (min) do produto produto O 1,97 319,2 K, H3C 262

Exemplo 205

Cloridrato_de_1- [ 4 - ( (1R,3S) -1-aminometil-5-hidroxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-3-metil-butan-l-ona

Reagente cloreto Tempo de retenção tR ESMS (MH +) do ácido (min) do produto produto O 2,27 361,2 h3c

Exemplo 206

Cloridrato_de_1- [ 4 - ( (1R,3S) -1-aminometil-5-hidroxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-3-fenil-propan-l-ona

Reagente cloreto Tempo de retenção tR ESMS (MH+) do ácido (min) do produto produto -TV 2, 47 409,2 263

Exemplo 207

Cloridrato_de_1- [ 4 - ( (1R,3S) -1-aminometil-5-hidroxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-butan-l-ona

Reagente cloreto Tempo de retenção tR ESMS (MH+) do ácido (min) do produto produto 0 2,17 347,2 h3c

Lisboa, 24 de Maio de 2010 264

Claims (16)

1. REIVINDICAÇÕES 1. Composto de acordo com a fórmula I

   I em que Ri é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio, fenoxicarbonilo, alcoxiCi_6carbonilo, benziloxicarbonilo, naftiloxicarbonilo, fenilcarbamoílo, fenilcarbamoilalquiloCi-6, bifenilcarbamoilo, f enilalquilCi_6carbamoí lo, naf tilcarbamoilalquiloCi_6, N-fenil-N—alquilC i_6carbamoí lo, alquiloCi_6 e dialquilCi_6carbamoí lo, alceniloC2-6 e difenilcarbamoílo, fenilearbonilo, alquilCi_6carbonilo, piperidinilearbonilo, fenotiazinilearbonilo, dialcenilC2-6carbamoilo, heteroarilcarbamoilalquiloCi_6, bifenilearbonilo, morfolinilearbonilo, pirrolidinilearbonilo, fenilsulfonilo, difenilsulfonilo, naftilsulfonilo, alquilCi-ioSulf onilo, naf ti lalquilCi_6Sulf onilo, perf luoroalquilC 1-6 sulf onilo, dif enilalquilCi-6Sulf onilo, benzenossulfonilo, dialquilCi-6aminos sulf onilo, difenilalquiloCi-6, benzilo, f enilalquiloC2-6, 1 naf tilalquiloCi-6; cicloalquilC3_6alquiloCi_6, fenilalceniloCi-6, heteroarilalquiloCi-6»· a-carboxibenzilo, hidroxialquiloCi-6, f enilcarbonilalquiloCi_6 bif enilalquiloCi-6f alquiloCi_6, f enoxifenilalquiloCi_6, fenilureiaalquiloCi-6, indanilo, em que benzilo e fenilo são opcionalmente substituídos com um ou dois substituintes , cada, seleccionado, independentemente, do qrupo consistindo de alquiloCi-6, perf luoroalquiloCi-6, halogéneo, hidroxilo, alcoxioCi-6 e nitro, e em que heteroarilo é tiofenilo, benzotiofenilo, furanilo, benzofuranilo, tetra-hidroquinolilo, tetra-hidroisoquinolilo, indolilo, imidazolilo, benzimidazolilo, piridinilo, isotiazolilo, benzisotiazolilo, isoxazolilo, benzisoxazolilo, isoquinolilo, ou quinolilo, em que heteroarilo é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes, cada, seleccionado, independentemente, do grupo alquiloCi-6, halogéneo, hidroxilo, benzilo e alcoxioCi-6,
2. 2. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que R4 é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio e alquiloCi-4, um estereoisómero ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

   '2' '2' \ \ em que R é hidrogénio ou benzilo 2 Y é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio, alquiloCi^r perf luoroalquiloCi-6, halogéneo, hidroxilo, alcoxioCi_6 e nitro; R2 e R3 são iguais ou diferentes e seleccionados, independentemente, do grupo consistindo de hidrogénio, alquiloCi-6, alquilCi_6carbonilo, formilo, alceniloC2-6, cicloalquilC3-6alquiloCi-6 e R2, R3, considerados em conjunto, podem formar um anel com 2-5 átomos de carbono; R4 é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio, alquiloCi-4 e alquilC4-6carbonilo; X é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio e alquiloCi-6; e N é um número inteiro 1, 2 ou 3, um estereoisómero ou um seu sal farmaceuticamente aceitável,
3. 3. Composto de acordo com a reivindicação 2, em que R2 e R3 são iguais ou diferentes e seleccionados, independentemente, do grupo consistindo de hidrogénio, alquiloC4_3, alceniloC2_4, cicloalquilC3_6alquiloCi_6 e R2, R3, considerados em conjunto podem formar um anel com 2-5 átomos de carbono; 3 R4 é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio, alquiloCi_3, X é alquiloCi_4,· e n é 1 um estereoisómero ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
4. 4. Composto de acordo com a reivindicação 3, em que R2 e R3 são hidrogénio, R4 é hidrogénio; e X é alquiloCi-3, um estereoisómero ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
5. 5. Composto de acordo com a reivindicação 4, em que X é metilo.
6. 6. Composto de acordo com a reivindicação 5, em que o referido grupo metilo está ligado na posição 6 do anel.
7. 7. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que Ri é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio, dif enilalquiloCi_6, benzilo, f enilalquiloC2-6/· naftilalquiloCi_6; cicloalquilC3_6alquiloCi_6, f enilalceniloCi-6, heteroarilalquiloCi-6f cx-carboxibenzilo, f enilcarbonilalquiloCi_6, hidroxialquiloCi^ bif enilalquiloCi-6, alquiloCi-6, f enoxif enilalquiloCi-6, 4 f enilcarbamoilalquiloCi-6, naf tilcarbamoilalquiloCi-6 e f eni lurei aalquil 0C1-6; R2 e R3 são iguais ou diferentes e seleccionados, independentemente, do grupo consistindo de hidrogénio, alquiloCi-6, alceniloC2_6, cicloalquilC3_6alquiloCi_6, formilo e R2, R3 considerados em conjunto podem formar um anel com 2-5 átomos de carbono; R4 é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio e alquiloCi-4; X é alquiloCi-6; e n é 1. um estereoisómero ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
8. 8. Composto de acordo com a reivindicação 7, o qual é seleccionado do grupo consistindo em: (IR,3 S)-6-Metil-l-metilaminometil-3-(1-metil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-(1-fenetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol (IR,3S)-1-Aminometi1-3-{1-[2-(3-cloro-fenil)-etil]-piperidin-4-il}-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-{l-[4,4-bis-(4-fluoro-fenil)-butil]-piperidin-4-il}-6-metilisocroman-5-ol, 5 (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(3-fenil-butil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(2,2-difenil-etil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-(l-benzil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol, Ácido [4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman- 3- il)-piperidin-l-il]-fenilacético, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(2-fenil-propil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(1-metil-2-fenil-etil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(4-fluoro-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(2-fluoro-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[l-(3-fenil-alil)-piperidin- 4— i1]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(3-metoxi-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, 6 (IR,3S)-l-Aminometil-3-(l-indan-2-il-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-l-Aminometil-3-(1-butil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-l-Aminometil-3-(l-ciclo-hexilmetil-piperidin-4-il) 6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-l-Aminometil-3-[1-(2-cloro-benzil)-piperidin-4-il] 6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-l-Aminometil-3-[1-(3-cloro-benzil)-piperidin-4-il] 6-metilisocroman-5-ol, N-{2-[4-((1R,3S)-l-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3 il)-piperidin-l-il]-etil}-benzamida, N-{2-[4-((1R,3S)-l-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3 il)-piperidin-l-il]-etil}-4-fluoro-benzamida, (IR,3S)-l-Aminometil-3-{1-[3-(6-fluoro-benzo[d]isoxazol-3-il)-2-metilpropil]-piperidin-4-il}-6-metilisocroman-5-ol, N-{2-[4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3 il)-piperidin-l-il]-etil}-4-metil-benzamida, (IR,3S)-l-Aminometil-3-{1-[3-(6-fluoro-benzo[d]isoxazol-3-il)-butil]-piperidin-4-il}-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-l-Aminometil-3-(1-ciclopropilmetil-piperidin-4-il) 6-metilisocroman-5-ol, 7 (IR,3S)-6-Meti1-1-metilaminometi1-3-[1-(2-fenil-butil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, 1—{2—[4—((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3 il)-piperidin-l-il]-etil}-3-(4-fluoro-fenil)-ureia, 1—{2—[4—((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3 il)-piperidin-l-il]-etil}-3-fenilureia, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(3-fenil-propil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-1-dimetilaminometi1-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-1-dietilaminometil-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-6-meti1-1-metilaminometilisocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-1-etilaminometi1-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-1-[(etil-metil-amino)-metil]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-6-meti1-1-propilaminometilisocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-6-meti1-1-[(metil-propil-amino)-metil]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-[(Alil-metil-amino)-metil]-3-(1-benzil-piperidin 4-il)-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-1-ciclobutilaminometil 6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-6-metil-l-pirrolidin-1 ilmetilisocroman-5-ol, 2 —[4 —((1R,3S)-1-Etilaminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-fenil-etanona, 2 —[4 —((1R,3S)-1-Dialilaminometil-5-hidroxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-fenil-etanona, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(4-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-6-Meti1-1-metilaminometi1-3-[1-(4-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Etilaminometi1-6-meti1-3-[1-(4-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Dimetilaminometi1-6-meti1-3-[1-(4-trifluorometil benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-[(Etil-metil-amino)-metil]-6-meti1-3-[1—(4 — trifluorometilbenzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol,
9. 9 (IR,3S)-6-Metil-1-[(metil-propil-amino)-metil]—3—[1—(4— trifluorometilbenzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Dialilaminometi1-6-metil-3-[1-(4-trifluorometilbenzil) -piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Alilaminometil-3-(l-benzil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-1-dia1ilaminometil-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-metil-3-(1-naftalen-l-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-(1-isobutil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-metil-3-[1-(3-metil-butil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(2,2-dimetil-propil)-piperidin-4 il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[l-(2-hidroxi-etil)-piperidin-4-il] 6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-(l-isopropil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol, 10 (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti)-3-(1-naftalen-2-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(4-fenoxi-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-(1-tiofen-2-ilmetil-piperidin-4-il)isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(4-isopropil-benzil)-piperidin-4 il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-(1-bifenil-4-ilmetil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(2,4-difluoro-benzil)-piperidin-4—i1]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[l-(l-fenil-etil)-piperidin 4—i1]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-(l-piridin-2-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-(l-piridin-3-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-(l-piridin-4-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-(l-quinolin-2-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol, 11 (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-(l-quinolin-3-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-(l-quinolin-4-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(4-cloro-benzil)-piperidin-4-il] 6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(2,4-dicloro-benzil)-piperidin-4 il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(3,4-dicloro-benzil)-piperidin-4 il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(4-metoxi-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(4-hidroxi-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(3,4-difluoro-benzil)-piperidin-4—i1]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(2-metil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3 S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(3-metil-benz il)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, 12 (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(4-metil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-(1-tiofen-3-ilmetil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(2-metoxi-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Amhometil-3-[1-(3-fluoro-benzil)-piperdin-4-il] 6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(2-fluoro-4-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-(1-furan-3-ilmetil-piperidin-4-il) 6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(2-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(3-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(3,5-bis-trifluorometil-benzil) piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(2,5-bis-trifluorometil-benzil) piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(2-cloro-5-trifluorometil-benzil) -piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, 13 (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(4-cloro-3-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(2-cloro-3-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(2-fluoro-3-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(2-fluoro-5-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(3-fluoro-4-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(4-fluoro-3-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(3-fluoro-5-trifluorometil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-(1-benzofuran-2-ilmetil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(3-metil-benzo[b]tiofen-2-ilmetil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-(1-benzo[b]tiofen-3-ilmetil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol, 14 (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(1-metil-lH-indol-2-ilmetil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(lH-indol-3-ilmetil)-piperidin-4 il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(1-metil-lH-indol-3-ilmetil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(l-benzil-lH-indol-3-ilmetil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(1-metil-lH-benzoimidazol-2-ilmetil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(l-Benzil-piperidin-4-il)-1-dipropilaminometil-6 metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-6-Meti1-1-metilaminometil-3-(1-fenetil-piperidin-4 il)-isocroman-5-ol, (lR,3S)-3-[l-(4-Fluoro-benzil)-piperidin-4-il]-6-metil-l-metilaminometilisocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(1-Ciclo-hexilmetil-piperidin-4-il)-6-meti1-1-metilaminometilisocroman-5-ol, (lR,3S)-3-[l-(4-isopropil-benzil)-piperidin-4-il]-6-metil-1-metilaminometilisocroman-5-ol, (IR,3S)-3-(1-Bifenil-4-ilmetil-piperidin-4-il)-6-metil-l-metilaminometilisocroman-5-ol, 15 (lR,3S)-3-[l-(3,4-Difluoro-benzil)-piperidin-4-il]-6-metil-1-metilaminometilisocroman-5-ol, (lR,3S)-3-[l-(4-Metoxi-benzil)-piperidin-4-il]-6-metil-l-metilaminometilisocroman-5-ol, (IR,3S)-6-Meti1-1-metilaminometi1-3-[1-(4-metil-benzil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, N-{3-[4-((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-4-cloro-benzamida, N-{3-[4-((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-eti1-2-metil-propil}-4-metil-benzamida, N-{3-[4-((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-4-metil-benzamida, N-{3-[4-((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-4-trifluorometil-benzamida, N-{3-[4-((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-2,4-dicloro-benzamida, {3 —[4 —((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-amida do ácido bifenil-4-carboxílico, 16 {3-[4-((IR,3S)-l-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-amida do ácido Benzo[b]tiofeno-2-carboxílico, N-{3-[4-((IR,3S)-l-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-benzamida, N-{3-[4-((IR,3S)-l-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-4-fluoro-benzamida, N-{3-[4-((IR,3S)-l-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-4-bromo-benzamida, N-{3-[4-((IR,3S)-l-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-4-nitro-benzamida, N-((IR,3S)-5-isopropoxi-6-meti1-3-(4-piperidinil)-1-isocromanilmetil)formamida, N-((IR,3S)-5-metoxi-6-metil-3-(4-piperidinil)-1-isocromanilmetil)formamida, Dicloridrato de {3-[4-((IR,3S)-l-aminometil-5-hidroxi-6- metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]1-metil-propil}-amida do ácido naftaleno-2-carboxilico, e {3-[4-((IR,3S)-l-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-1-metil-propil}-amida do ácido tiofeno-2-carboxílico. um estereoisómero ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. 17 9. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que Ri é seleccionado do grupo consistindo de fenoxicarbonilo, alcoxiCi_6carbonilo, benziloxicarbonilo, naftiloxicarbonilo, fenilcarbonilo, bifenilcarbonilo, alquilCi_6carbonilo, fenilcarbamoílo, bifenilcarbamoilo, f enilalquilCi-6carbamoí lo, N-f enil-N-alquilCi-6carbamoí lo, alquiloCi-6 e dialquilCi-6carbamoilo, alceniloC2-6 e dialcenilC2-6carbamoilo, dif enilcarbamoilo, heteroarilcarbamoilalquiloCi_6/· f enilcarbonilo, bifenilcarbonilo, alquilCi_6carbonilo, morfolinilcarbonilo, piperidinilcarbonilo, pirrolidinilcarbonilo e fenotiazinilcarbonilo; R2 e R3 são iguais ou diferentes e seleccionados, independentemente, do grupo consistindo de hidrogénio, alquiloCi-6, alceniloC2-6, cicloalquilC3-6alquiloCi-6 e R2, R3, considerados em conjunto, podem formar um anel com 2-5 átomos de carbono; R4 é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio e alquiloCi-4, X é alquiloCi_6; e n é 1. um estereoisómero ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
10. 10. Composto de acordo com a reivindicação 9, o qual é seleccionado do grupo consistindo em: 18 Éster isopropílico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxílico, Éster metílico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, Éster fenilico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, Éster p-tolilico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidrox 6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, Éster 4-cloro-fenilico do ácido 4-((IR, 3S)-1-aminometil-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, Éster 2-cloro-fenilico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, Éster 4-bromo-fenilico do ácido 4-((IR, 3S)-1-aminometil-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, Éster 4-fluoro-fenilico do ácido 4-((IR, 3S)-1-aminometil-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, Éster 2-trifluorometil-fenilico do ácido 4-((lR,3S)-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, Éster 4-metoxi-fenilico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, 19 Éster 2-hidroxi-fenílico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5 hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxílico, Éster benzilico do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi 6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, Éster naftalen-2-ίlico do ácido 4-((IR, 3S)-1-aminometil-5 hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, [4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-(4-fluoro-fenil)-metanona, [4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-(4-metoxi-fenil)-metanona, [4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-(2-hidroxi-fenil)-metanona, [4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-(4-cloro-fenil)-metanona, [4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-bifenil-4-il-metanona, [4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-fenil-metanona, [4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-(4-bromo-fenil)-metanona, 1—[4 —((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il) piperidin-l-il]-2-fenil-etanona, 20 1—[4 —((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il) piperidin-l-il]-etanona, 1—[4 —((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il) piperidin-l-il]-3-metil-butan-l-ona, 1—[4 —((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il) piperidin-l-il]-3-fenil-propan-l-ona, 1—[4 —((1R,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il) piperidin-l-il]-butan-l-ona, (2-Fluoro-5-trifluorometil-fenil)-amida do ácido 4-((lR,3S) 1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-1-carboxílico, (3-Metoxi-fenil)-amida do ácido 4-((IR,3S)-1-Aminometil-5 hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, (3-Hidroxi-fenil)-amida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5 hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, (2-Hidroxi-fenil)-amida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5 hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, (4-Fluoro-fenil)-amida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5 hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, (2-Fluoro-fenil)-amida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5 hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, 21 Difenilamida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6 metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxílico, Metilfenilamida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi 6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, Dimetilamida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6 metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, Diisopropilamida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi 6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, [4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-morfolin-4-il-metanona, [4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-pirrolidin-l-il-metanona, Dietilamida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6 metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, [4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-fenotiazin-10-il-metanona, [4-((IR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidin-l-il]-piperidin-l-il-metanona, Dibutilamida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6 metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico, e Dialilamida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6 metilisocroman-3-il)-piperidina-l-carboxilico. 22 um estereoisómero ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
11. 11. Composto de acordo com a reivindicação 11, em que Ri é seleccionado do grupo consistindo de fenilsulfonilo, dif enilsulf onilo, naftilsulf onilo, alquilCi-ioSulf onilo, naf til alquilC 1-6 sul f onilo, perfluoroalquilCi_6Sulfonilo, difenilalquilCi_6Sulfonilo, benzenossulfonilo, dialquilCi-6aminossulf onilo,

    em que R é hidrogénio ou benzilo, Y é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio, alquiloCi_6r perf luoroalquiloCi_6, halogéneo, hidroxilo, alcoxioCi_6 e nitro; e R2 e R3 são iguais ou diferentes e seleccionados, independentemente, do grupo consistindo de hidrogénio, alquiloCi_6f alceniloC2-6f cicloalquiloC3_6 e alquiloCi_6r e R2, R3, considerados em conjunto, podem formar um anel com 2-5 átomos de carbono; 23 R4 é seleccionado do grupo consistindo de hidrogénio e alquiloCi_4,· e X é alquiloCi_6; e n é 1, um estereoisómero ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
12. Composto de acordo com a reivindicação 11, o qual é seleccionado do grupo consistindo de: (IR,3S)-1-Aminometil-3-(1-benzenossulfonil-piperidin-4-il)-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-(1-fenilmetanossulfonil-piperidin-4-il)-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(2-trifluorometil-benzenossulfonil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-l-Aminometil-3-[1-(3,4-dimetoxi-benzenossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-l-Aminometil-3-[1-(4-isopropi1-benzenossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-l-Aminometil-3-[1-(4-terc-buti1-benzenossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-l-Aminometil-6-metil-3-[1-(naftaleno-2-sulfonil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(4-cloro-benzenossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(2,4-dicloro-benzenossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(3,4-dicloro-benzenossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(2,5-dicloro-benzenossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[l-(bifenil-4-sulfonil)-piperidin-4 il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-(1-etanossulfonil-piperidin-4-il)-6 metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometil-3-[1-(butano-1-sulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-metil-3-[l-(propano-2-sulfonil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-metil-3-[l-(octano-l-sulfonil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-metil-3-[1-(2,2,2-trifluoro-etanossulfonil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, 25 (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[l-(2-nitro-fenilmetanossulfonil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[l-(2-naftalen-l-il-etanossulfonil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1—(3,4-dicloro- fenilmetanossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(2,2-difenil-etanossulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, l(R)-[4-((lR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-sulfonilmetil]-7,7-dimetil-biciclo[2.2.1]heptan-2-ona, l(S)-[4-((lR,3S)-1-Aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-sulfonilmetil]-7,7-dimetil-biciclo[2.2.1]heptan-2-ona, Dimetilamida do ácido 4-((IR,3S)-1-aminometil-5-hidroxi-6-metilisocroman-3-il)-piperidina-l-sulfónico, (IR,3S)-1-Aminometi1-6-meti1-3-[1-(piperidina-l-sulfonil)-piperidin-4-il]-isocroman-5-ol, (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(4-benzil-piperidina-l-sulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, e (IR,3S)-1-Aminometi1-3-[1-(3,4-di-hidro-lH-isoquinolina-2-sulfonil)-piperidin-4-il]-6-metilisocroman-5-ol, 26 um estereoisómero ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
13. 13. Composição farmacêutica compreendendo um veículo farmaceuticamente aceitável e uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com a reivindicação 1.
14. 14. Utilização de um composto de acordo com a reivindicação 1, na preparação de um medicamento para o tratamento de distúrbios neurológicos relacionados com a dopamina, seleccionado do grupo consistindo de distúrbios neurológicos, psicológicos, cardiovasculares, cognitivos ou de atenção, abuso de substâncias e comportamentos que causam dependência ou uma sua combinação.
15. 15. Utilização de acordo com a reivindicação 14, em que o distúrbio neurológico é a doença de Parkinson.
16. 16. Utilização de um composto de acordo com a reivindicação 1, no fabrico de um medicamento para o tratamento dos efeitos secundários piramidais associados com a utilização de agentes neurolépticos. Lisboa, 24 de Maio de 2010 27