PT103452A

PT103452A - Polipéptidos que se ligam especificamente ao domínio ed-b de fibronectina com sequências especiais

Info

Publication number: PT103452A
Application number: PT10345206A
Authority: PT
Inventors: Andreas Menrad; Armin Weidmann; Josef Prassler
Original assignee: Schering Ag; Morphosys Ag
Priority date: 2006-03-16
Filing date: 2006-03-16
Publication date: 2007-09-28

Abstract

A invenção refere-se a polipéptidos recombinantes, em particular anticorpos ou fragmentos de anticorpos que se ligam a isoformas ED-B de fibronectina e podem bloquear a sua função, bem como a ácidos nucleicos que os codificam. A invenção refere-se ainda aos processos de obtenção desses polipéptidos, a vectores para o direccionamento dos referidos ácidos nucleicos, a células e a organismos não humanos transformados com os referidos ácido nucleicos ou vectores, e a composições farmacêuticas ou de diagnóstico contendo esses polipéptidos. São também reveladas as utilizações dos referidos polipéptidos na prevenção, tratamento, diagnóstico ou diagnóstico de pré-disposição de doenças associadas a ED-B.

Description

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FimONSCTINA COM SI^PÉNCIAS SSFlGiAXr* A invenção refere-se a polipéptidos recombinantes, em particular anticorpos ou fragmentos de anticorpos que se ligam a isoforma ED-B da fibronectina e podem bloquear a sua função. Além disso, é revelada a aplicação diagnóstica e farmacêutica dos polipéptidos de acordo com a invenção.

Durante o desenvolvimento e progressão do tumor, a matriz extracelular (ECM), em que o tumor cresce, é modificada por degradação proteolítica da ECM pré-existente. Este processo gera uma matriz induzida por tumor, que é distinguida da ECM que ocorre no tecido normal. A ECM induzida por tumor parece ser o ambiente óptimo para o crescimento tumoral e angiogénese tumoral (1-4) .

Na angiogénese tumoral, são formados novos vasos sanguíneos a partir de vasos pré-existentes. Este processo requer a proteólise da ECM, o crescimento e diferenciação específicos de células endoteliais em novas estruturas vasculares, que são essenciais para o crescimento adicional do tumor (5). resultou na

As fibronectinas são uma classe importante de glicoproteínas de matriz. 0 seu principal papel consiste em facilitar a adesão celular a uma variedade de matrizes extracelulares diferentes. A presença de fibronectinas na superfície de células não transformadas em cultura, assim como a sua ausência no caso de células transformadas, resultou na identificação de fibronectinas como proteínas de adesão importantes. Elas interagem com muitas outras moléculas diferentes, e.g., colagénio, sulfato de heparano-proteoglicanos e fibrina, e regulam assim a forma da célula e a criação do citoesqueleto. Adicionalmente, são responsáveis pela migração celular e diferenciação celular durante a embriogénese. Além disso, são importantes para a cicatrização de feridas, em que tornam possível a migração de macrófagos e de outras células imunes no campo em questão e na formação de coágulos de sangue, tornando possível a adesão de plaquetas sanguíneas a regiões danificadas dos vasos sanguíneos.

As fibronectinas são dímeros de dois péptidos semelhantes, em que cada cadeia tem aproximadamente 60-70 nm de comprimento. Foram identificadas, pelo menos, 20 cadeias diferentes de fibronectina, das quais todas são produzidas por splicing alternativo do transcripto de ARN de um único gene de fibronectina.

As fibronectinas são glicoproteínas de elevado peso molecular, mediadoras de adesão, que desempenham um papel importante no desenvolvimento do sistema vascular. Além disso, as fibronectinas actuam de forma quimiotática em células endoteliais, modulam a acção de factores de crescimento e suportam o crescimento linear de células endoteliais durante a angiogénese (6-9) . Uma análise de produtos de clivagem proteolítica de fibronectina mostra que os polipéptidos consistem em seis domínios fortemente enrolados, dos quais, cada um por sua vez contém as denominadas sequências de repetição ("repetições") cujas semelhanças relativamente a sua sequência de aminoácidos permite uma classificação em três tipos (tipos I, II e III) . A região central de ambas as cadeias do dímero consiste numa secção de repetições denominadas de tipo-111, que em média têm 90 aminoácidos de comprimento (10). Os estudos 2 estruturais revelaram que cada repetição de tipo-Ill consiste em sete cadeias beta, que são enroladas em duas folhas pregueadas antiparalelas, em que curtas regiões em loop são expostas como potenciais sitios da interação proteina-proteina (11).

Estas repetições de tipo-Ill tornam possível as fibronectinas actuarem como moléculas de adesão que interactuam com moléculas da superfície celular, as denominadas "integrinas". 0 termo "integrina" foi utilizado pela primeira vez em 1987 em (12) para descrever um grupo relacionado de moléculas heterodiméricas da superfície celular que actuam como mediadoras entre a matriz extracelular e o citoesqueleto intracelular e induzem, deste modo, a migração e adesão celular. Estes receptores heterodiméricos "integram" ou medeiam sinais do ambiente extracelular com funções celulares específicas. Até a data, são conhecidas 17 subunidades beta que podem interactuar especificamente e não covalentemente com mais de 20 subunidades alfa, particularmente para formar 20 famílias diferentes (13) . A sequência RGDS, que é encontrada na décima repetição de tipo III da fibronectina (III—10), medeia em particular a interacção da fibronectina com, pelo menos, 8 integrinas diferentes. Além disso, foi mostrado que, pelo menos, quatro integrinas podem interactuar especificamente com fibronectina de um modo independente de RGDS (13). Para além das sequências III7, III8, III9 e III10, o grupo de sequências de repetição de tipo III compreende também as repetições de EIIIB e EIIIA (ED-B e ED-A). A ED-B-fibronectina não pode ser detectada no tecido normal de adultos (única excepção: endométrio proliferativo), enquanto que é expressa fortemente em tecido fetal e no crescimento tumoral, para além de uma expressão local estromal de ED-B. Além disso, a ED-B-fibronectina está localizada perivascularmente em torno de vasos sanguíneos que foram formados de novo durante a angiogénese. Para esta razão, a ED-B-fibronectina é uma proteína 3 marcadora específica para o processo de angiogénese (tumoral) (14) · 0 domínio ED-B é um componente de homologia completa de tipo-111, altamente conservado, que consiste em 91 aminoácidos. 0 grau de homologia entre seres humanos e ratos é 100%, entre seres humanos e galinhas 96%. Na literatura, muito pouco é conhecido sobre a função dos domínios ED-B. Algumas publicações (15-17) especulam sobre uma acção geral de mediação da adesão para várias células. Não foi ainda mostrada até a data uma acção específica em células endoteliais.

No documento WO 02/20563, foi mostrado que a ED-B recombinante apresenta uma acção pró-angiogénica específica in vitro: (i) a proliferação de células endoteliais microvasculares dérmicas humanas estimuladas por bFGF (HDMVEc) é intensificada através de ED-B recombinante, (ii) a proteína medeia a adesão de HDMVEC, e (iii) ED-B recombinante estimula a invasão e diferenciação (formação de tubo) de HDMVEc em géis de colagénio.

Além disso, estes efeitos mediados por ED-B podiam ser bloqueados especificamente através de péptidos sintéticos que eram derivados a partir de domínios ED-B. As sequências peptidicas representam assim a região de ligação para um receptor específico de ED-B na superfície celular endotelial que foi identificado por cromatografia de afinidade como a oí2βl-integrina. A interacção específica entre a a2pi-integrina e o domínio ED-B não foi previamente descrito na literatura.

Também são reveladas no documento WO 02/20563 proteínas que são reguladas especificamente através do domínio ED-B-fibronectina, que compreendem a c^l-integrina, a cinase de adesão focal, o ligando CD6 (ALCAM), a cadeia alfa do receptor de vitronectina, a subunidade alfa-8 integrada ou o precursor da proteína relacionada com folistatina. São expressos por células endoteliais uma variedade de receptores de integrina com propriedades parcialmente sobrepostas (lit.: D. G. Stupack e D. A. Cheresh, SciSTKE, 2002 Feb 12; 2002). Estes padrões de expressão mostram que integrinas diferentes (e.g., alfavbeta3 e alfa5betal) medeiam fenómenos biológicos semelhantes (adesão, migração e sobrevivência) e representam, deste modo, sistemas redundantes para as células endoteliais que protegem o seu comportamento e sobrevivência. Era previamente sabido que a alfa2betal interage com os seus ligandos naturais, os colagénios. O bloqueamento desta interacção pode resultar numa acção antiangiogénica (Y. Funahashi et al. Câncer Res. 62: 6116-6123,2002).

Um objectivo da presente invenção foi, deste modo, a preparação de moléculas de ligação para bloqueamento da função, tais como, e.g., anticorpos que bloqueiam especificamente sítios de ligação ao receptor dos domínios ED-B. Estas moléculas de ligação têm uma acção antiangiogénica em células endoteliais (tumorais). Em contraste com a α2β1-ίηίθςΓίη3 expressa de um modo relativamente amplo, o domínio ED-B representa uma molécula alvo específica e ideal para essas moléculas de ligação. A estrutura de ED-B torna difícil o desenvolvimento de anticorpos monoclonais e policlonais uma vez que se pode assim esperar que o ED-B tenha uma imunogenicidade baixa ín vivo. O anticorpo BC-1 (J. Cell Biol. 108 (1989), 1139-1148) reage assim com um epitopo críptico da fibronectina, que está presente apenas na presença de ED-B e deste modo não directamente com ED-B. O anticorpo L19 (Tarli et al. Blood 94 (1999), 192-198 e documento WO 01/62800), que foi produzido através da utilização de ED-B recombinante como um imunogénio, é por sua vez biologicamente inactivo, i.e., não pode reconhecer a adesão celular ao ED-B numa extensão significativa.

De um, modo surpreendente, foi agora observado que podem ser produzidas moléculas de ligação a ED-B de bloqueamento de função, tais como, por exemplo, o anticorpo M0R03255 de bloqueamento da função de ED-B, que inibem fortemente a adesão celular a ED-B e provocam uma redução significativa do crescimento tumoral in vivo. 0 bloqueamento de ED-B produzido através das moléculas de ligação de acordo com a invenção não pode obviamente ser compensado por mecanismos compensatórios de colagénio-integrina.

Através da biblioteca de anticorpos HuCAL®-GOLD -- uma biblioteca com, por exemplo, 1,6 x 10E10 anticorpos diferentes no formato de fragmento Fab, que foi gerada começando a partir das sequências de consenso HuCAL (documento WO 97/08320; Knappik, A.; Ge, L.; Honegger, A.; Pack, P.; Fischer, M.; Wellnhofer, G.; Hoess, A.; Wolle, J.; Plunckthun, A. e Virnekas, B. (2000) J. Mol. Biol. 296:57-86) por diversificação que corresponde a diversidade de anticorpos humanos em todas as seis áreas de CDR e é examinada rigorosamente através de CysDisplay (documento WO 01/05950) de uma variante do processo de apresentação de fagos -- foram identificados fragmentos de anticorpos Fab bloqueadores de função que se ligam selectivamente ao domínio ED-B, nos testes que conduzem à presente invenção. A eficácia destes fragmentos de anticorpos podia ser mostrada num teste de adesão in vitro que reflecte a interacção específica entre ED-B recombinante e HDMVEc isolado. A afinidade de ligação ao domínio ED-B podia ser melhorada consideravelmente através de uma alteração específica nas moléculas de ligação. Foi também possível mostrar in vivo que as moléculas de ligação num modelo animal inibem o crescimento de tumores.

Um primeiro aspecto da invenção é assim um polipéptido que (i) se liga especificamente ao dominio ED-B da fibronectina e (ii) inibe a interacção entre o dominio ED-B e o seu receptor. 0 polipéptido de acordo com a invenção é, de um modo preferido, um anticorpo ou fragmento de anticorpo. 0 termo "anticorpo", nos termos da presente invenção, compreende anticorpos policlonais, monoclonais, quiméricos, humanizados ou humanos, assim como anticorpos recombinantes, e.g.r anticorpos de cadeia simples, ou fragmentos de anticorpos de ligação a antigénio, e.g., fragmentos monovalentes de anticorpo, tal como, por exemplo, fragmentos Fab ou fragmentos scFv, ou fragmentos divalentes de anticorpo, tais como, por exemplo, fragmentos

Neste contexto, é essencial a invenção que os anticorpos contenham um ou mais sítios de ligação ao antigénio que satisfaçam as exigências acima mencionadas, i.e., ligação específica ao domínio ED-B e inibição da interacção entre o domínio ED-B e o seu receptor, especialmente o seu receptor em células endoteliais. Estas propriedades de ligação ao antigénio são conseguidas, de um modo preferido, através de combinação de uma região VH e VL, pelo que estas regiões são construídas a partir das regiões de estrutura assim mencionadas (FRl, FR2, FR3 e FR4) assim como as regiões CDR que medeiam a ligação do antigénio (H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3 para a região VH e L-CDRl, L-CDR2, L-CDR3 para a região VL). O polipéptido de acordo com a invenção tem, de um modo preferido, uma afinidade para o domínio ED-B que corresponde a um valor de KD 5, l ym, de um modo preferido ^ 100 nM, de um modo especialmente preferido & 10 nM, de um modo ainda mais preferido ^ 1 nM e de um modo muito preferido, S< 0,1 nM, em que a afinidade pode ser determinada como indicado nos exemplos através de um teste no sistema Blâcdr©", O polipéptido de acordo coma a invenção é distinguido na medida em que se liga especificamente ao domínio ED-B da fibronectina, e.g., liga-se com uma afinidade significativamente inferior a outros domínios da fibronectina, em particular ao domínio 6 da fibronectina (FN6) e/ou aos domínios 7-8-9 da fibronectina (7-8-9) . Numa forma de realização preferida, o polipéptido de acordo com a invenção e o domínio ED-B da fibronectina ligam-se com uma afinidade que é superior por, pelo menos, um factor de 2 — em particular por, pelo menos, um factor de 5 e, de um modo especialmente preferido, por pelo menos, um factor de 10 -- do que aquele de FN6 e/ou 7-8-9, como pode ser determinado, por exemplo, através do teste de ligação que é indicado nos exemplos.

Numa outra forma de realização preferida, o polipéptido de acordo com a invenção apresenta uma inibição da adesão de ED-B recombinante a células HDMVEc in vitro, de um modo preferido uma inibição de, pelo menos, 50% e de um modo especialmente preferido de, pelo menos, 75% numa concentração de 10 yg/mL em cada caso.

Além disso, é preferido que o polipéptido de acordo com a invenção apresente uma inibição do crescimento de um tumor in vivo que seja produzido através de implantação de células de F9-teratocarcinoma (ATCC CRL-1720) em animais de teste, por exemplo murganhos sem pelo. 0 polipéptido de acordo com a invenção é, de um modo preferido, seleccionado a partir de anticorpos e fragmentos de anticorpo que compreendem

(a) uma região VH (1} Codificada através de uma sequência de ácido nucleico SEQ ID NO. 1 (MOR 02610), SEQ ID NO. 5 (MOR 02611), SEQ ID NO. 9 (MOR 02613), SEQ ID NO. 13 (MOR 02614), SEQ ID NO. 17 (MOR 02616), SEQ ID NO. 21 (MOR 02618), SEQ ID NO. 25 (MOR 02619), SEQ ID NO. 29 (MOR 02622), SEQ ID NO. 33 (MOR 02715), SEQ ID NO. 37 (MOR 02718), SEQ ID NO. 41 (MOR 02721) , SEQ ID NO. 45 (MOR 02722) ou, pelo menos, uma região H-CDRl-, H-CDR-2- e/ou H-CDR3 de uma das regiões VH acima mencionadas, ou (ii) Derivada a partir de uma região VH de acordo com (i), através de uma alteração em, pelo menos, uma região H-CDR e/ou

(b) Uma região VL (i) Codificada através de uma sequência de ácido nucleico SEQ ID NO. 3 (MOR 02610), SEQ ID NO. 7 (MOR 02611), SEQ ID NO. 11 (MOR 02613), SEQ ID NO. 15 (MOR 02614), SEQ ID NO. 19 (MOR 02616), SEQ ID NO. 23 (MOR 02618), SEQ ID NO. 27 (MOR 02619), SEQ ID NO. 31 (MOR 02622), SEQ ID NO. 35 (MOR 02715), SEQ ID NO. 39 (MOR 02718), SEQ ID NO. 43 (MOR 02721), SEQ ID NO. 47 (MOR 02722) ou, pelo menos, uma região L-CDR1-, L-CDR2- e/ou L-CDR3- de uma das regiões VL acima mencionada ou (ii) Derivada a partir de uma região VL de acordo com (i), através de uma alteração em, pelo menos, uma região L-CDR. São preferidas alterações na região L-CDR3 na região VL e/ou alterações da região H-CDR2 na região VH.

Por exemplo, o polipéptido de acordo com a invenção apresenta uma região VL que é derivada a partir da região VL e que é codificada através da sequência de ácido nucleico SEQ ID NO. 27 (MOR 02619) ou SEQ ID NO. 35 (MOR 02715). É especialmente preferido um polipéptido que compreende uma região VH (i) Codificada através da sequência de ácido nucleico SEQ ID NO. 25 (MOR 02619) ou SEQ ID NO. 33 (MOR 02715) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR-2 e/ou H-CDR3 de uma das regiões VH acima mencionadas, ou (ii) Derivada a partir de uma região VH de acordo com (i), através de uma alteração em, pelo menos, uma região H-CDR. O polipéptido apresenta, de um modo preferido, uma região VH que é derivada através de uma alteração na região H-CDR2 e é codificada através de uma região VH a partir da sequência de ácido nucleico SEQ ID NO. 25 (MOR 02619) ou SEQ ID NO. 33 (MOR 02715). E especialmente preferido, neste caso, um polipéptido compreendendo

(a) Uma região VH (i) Codificada através da sequência de ácido nucleico SEQ ID NO. 63 (MOR 03243), SEQ ID NO. 67 (MOR 03245), SEQ ID NO. 71 (MOR 03246), SEQ ID NO. 75 10 (MOR 03251), SEQ ID NO. 79 (MOR 03252), SEQ ID NO. 81 (MOR 03253), SEQ ID NO. 83 (MOR 03255), SEQ ID NO. 85 (MOR 03257), SEQ ID NO. 87 (MOR 03258) ou, pelo menos, a região H-CDR2 de uma das regiões VH acima mencionadas ou (ii) Derivada a partir de uma região VH de acordo com (i), através de uma alteração em, pelo menos, uma região H-CDR e/ou

(b) uma região VL (i) Codificada através da sequência de ácido nucleico SEQ ID NO. 65 (MOR 03243), SEQ ID NO. 69 (MOR 03245), SEQ ID NO. 73 (MOR 03246), SEQ ID NO. 77 (MOR 03251, assim como MOR 03252, MOR 03253, MOR 03255 e MOR 03257), SEQ ID NO. 89 (MOR 03258) ou, pelo menos, a região L-CDR1, L-CDR2 ou L-CDR3 de uma das regiões VL acima mencionadas, ou (ii) Derivada a partir de uma região VL de acordo com (i), através de uma alteração em, pelo menos, uma região L-CDR.

Os exemplos específicos do polipéptido de acordo com a invenção são como se seguem:

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 1 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 3 (MOR 02610) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, HCDR3, L-CDR1, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 5 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 7 (MOR 02611) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDR1, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 9 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 11 (MOR 02613) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, HCDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 13 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 15 (MOR 02614) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 17 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 19 (MOR 02616) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, HCDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 21 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 23 (MOR 02618) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 25 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 27 (MOR 02619) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 29 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 31 (MOR 02622) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 33 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 35 (MOR 02715) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDR1, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 37 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 39 (MOR 02718) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 41 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 43 (MOR 02721) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 45 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 47 (MOR 02722) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 25 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 49 (MOR 03055) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 25 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 51 (MOR 03066) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 25 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 53 (MOR 03075) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma. 13

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 25 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 55 (MOR 03069) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 25 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 57 (MOR 03071) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 33 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 59 (MOR 03064) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 33 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 61 (MOR 03062) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 63 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 65 (MOR 03243) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 67 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 69 (MOR 03245) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 71 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 73 (MOR 03246) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDR1, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 75 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 77 (MOR 03251) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDR1, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 79 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 77 (MOR 03252) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDR1, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 81 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 77 (MOR 03253) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDR1, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 83 e a região VR que é codificada através da SEQ ID NO. 77 (MOR 03255) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 85 e a região VR que é codificada através da SEQ ID NO. 77 (MOR 03257) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.

Um polipéptido que compreende a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 87 e a região VR que é codificada através da SEQ. ID NO. 89 (MOR 03258) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma. A criação das cadeias VH e VR dos polipéptidos de acordo com a invenção é como se segue:

Cadeia VH: vs· A estrutura da região 1 estende-se a partir de nt 1-78 (isto é, 26 aa); o Último codão (aa) de FR1 é sempre: TCC (Cys). A "região CDR1" pode ser de dois comprimentos diferentes, 30 nt (10 aa) (possivel em famílias VH1A, VH1B, 3, 4 e 5), ou 36 nt (12 aa) (possível em famílias VH2, VH4 e VH6).

-> A estrutura da região 2 apresenta sempre 33 nt (isto é, 11 aa) ; o primeiro codão (aa) de FR2 é sempre: TGG (Trp); os dois últimos codões são sempre CTC.GAG (LeuGlu). -> A "região CDR2" pode ser de três comprimentos diferentes; 57 nt (19 aa) (possível em famílias VH2 e VH4), 60 nt (20 aa) (possível em famílias VH1A, VH1B, 3 e 5); ou 63 nt (21 aa) (possível na família VH6).

A estrutura da região 3 apresenta sempre 96 nt (isto é, 32 aa) ; o terceiro codão (aa) de FR3 é sempre: ACC (thr); os últimos cinco codões são sempre TAT.TAT.TGC.GCG.CGT (Tyr Tyr Cys Ala Arg). A "região CDR3" pode ser de diversos comprimentos diferentes: de 12-69 nt (4-23 aa) (em todas as famílias VH2 e VH4), 60 nt (20 aa) (possível em famílias VH1A, 16 VH1B, 3 e 5) , ou 63 nt (21 aa) (possível na família VH6) . -> A estrutura da região 4 apresenta sempre 33 nt (isto é, 11 aa) e é idêntica em todas as 7 famílias: ffpií? y Vytli·: fí x lílíL y ACiC y íf f P < STCs y. AUls y « AGG TCÂ

Cadeia kapa de VL: -> A estrutura da região 1 estende-se a partir de nt 1-69 (isto é, 23 aa); o último codão (aa) de FR1 é sempre: TGC (Cys). >4· A "região CDR1" pode ser de quatro comprimentos diferentes: 24 nt (8 aa) (possível em famílias Vkl e

Vk3), 27 nt (9 aa) (possível na família Vk3), 39 nt (13 aa) (possível na família Vk2), ou 42 nt (14 aa) (possível na família Vk4); o primeiro codão (aa) é sempre AGA (Arg); o penúltimo codão (aa) da região CDRl é sempre: CTG (Leu). Η* A estrutura da região 2 apresenta sempre 33 nt (isto é, 11 aa); os primeiros dois codões (aa) de FR2 são sempre: TGG.TAC (Trp Tyr); o penúltimo codão é sempre CCG (Pro). A "região CDR2" apresenta sempre 33 nt (isto é, 11 aa), em que os primeiros três codões (aa) são sempre CTA.TTA.ATT (LeuLeuIle). A estrutura da região 3 apresenta sempre 96 nt (isto é, 32 aa); os primeiros três codões (aa) de FR3 são sempre: GGG.GTC.CCG (Gly Vai Pro); os Últimos três codões são sempre TAT.TAT.TGC (Tyr Tyr Cys). -» A "região CDR3" apresenta sempre 24 nt (isto é, 8 aa), em que o segundo codão (aa) é sempre CAG (Gin). A estrutura da região 4 apresenta sempre 39 nt (isto é, 13 aa) e é idêntica em todas as quatro famílias: ACC.TTT.GGC.CAG.GGT.ACG.AAA.GTT.GAA.ATT.AAA.CGT.ACG.

Cadeia lambda de VL: -» A estrutura da região 1 estende-se a partir de nt 1-66 (isto é, 22 aa); o Último codão (aa) de FR1 é sempre: TGT (Cys). -» A "região CDR1" pode apresentar três comprimentos diferentes: 33 nt (11 aa) (possível na família V13) , 39 nt (13 aa) (possível na família Vil) ou 42 nt (14 aa) (possível em famílias Vil e V12). —> A estrutura da região 2 apresenta sempre 33 nt (isto é, 11 aa) ; os primeiros dois codões (aa) de FR2 são sempre: TGG.TAC (Trp Tyr); o terceiro Último codão é sempre GCG (Ala). -» A "região CDR2" apresenta sempre 33 nt (isto é, 11 aa), em que o terceiro codão (aa) é sempre ATT (Ile) e os últimos três codões são sempre CGT.CCC.TCA (Arg Pro Ser) . -> A estrutura da região 3 apresenta sempre 96 nt (isto é, 32 aa), em que o primeiro codão (aa) de FR3 é sempre: GGC (Gly), e os últimos quatro codões são sempre GAT.TAT.TAT.TGC (Asp Tyr Tyr Cys). -» A "região CDR3" pode apresentar três comprimentos diferentes: 24 nt (8 aa), 27 nt (9 aa) ou 30 nt (10 aa) . -» A estrutura da região 4 apresenta sempre 39 nt (isto é, 13 aa) e é idêntica e todas as 3 famílias: GTG.TTT.GGC.GGC.GGC.ACG.AAG.TTA.ACC.GTT.CTT.GGC.CAG.

Para objectivos terapêuticos ou diagnósticos, e.g., para um diagnóstico in vitro ou in vivo, pode ser utilizado o polipéptido de acordo com a invenção.

Para aplicações terapêuticas, o polipéptido de acordo com a invenção pode estar presente na forma de um conjugado com um ingrediente terapeuticamente activo, seleccionado, por exemplo, a partir de agentes de radioterapia ou agentes de quimioterapia, e.g., ingredientes activos de baixo peso molecular ou biologicamente citostáticos ou citotóxicos. A conjugação do ingrediente terapeuticamente activo no polipéptido pode ser realizada de acordo com métodos conhecidos, de um modo preferido através de uma ligação covalente a grupos reactivos amino, carboxilo, hidroxilo e/ou tiol da proteína, opcionalmente com a utilização de ligantes hetero-bifuncionais, de acordo com métodos conhecidos.

Além disso, o polipéptido também pode estar presente na forma de uma proteína de fusão que, para além do anticorpo, e.g., na forma de uma molécula de IgG ou um seu fragmento, e.g., contém uma citocina aí fundida, e.g., IL2, IL12 ou TNFa-polipéptido. Além disso, a proteína de fusão pode estar presente na forma de um anticorpo biespecífico, em que para além da ligação ao domínio ED-B, é preferida uma ligação a outro antigénio. Outras especificidades de anticorpo de anticorpos biespecíficos são domínios de ligação para agentes quelantes para radionuclidos diagnosticamente e terapeuticamente relevantes, e.g., emissores α, β ou y, tais como, por exemplo, corantes NIR (infravermelho próximo) para diagnósticos, corantes terapeuticamente eficazes, moléculas de superfície em células efectoras imunológicas (e.g., células NK, células T citotóxicas ou células NKT), integrinas relevantes na angiogénese, em particular domínios de ligação que bloqueiam a sua função (e.g., og, β3/ a#*, 9¾¾}, inactivando domínios de ligação anti-VEGF e inactivando domínios de ligação contra receptores 1, 2 e 3 de VEGF.

Para aplicações diagnósticas, 0 polipéptido pode estar presente na forma de um conjugado de um grupo marcador diagnosticamente detectável, e.g., um grupo marcador para um diagnóstico in vitro ou in vivo. Os exemplos de grupos marcadores são grupos marcadores radioactivos, grupos marcadores de RMN, corantes, enzimáticos e de fluorescência (e.g., fluorescência na gama de infravermelho próximo) .

Para aplicações terapêuticas, o polipéptido é formulado, de um modo preferido, como uma composição farmacêutica que contém como ingrediente activo, o polipéptido de acordo com a invenção, opcionalmente ingredientes activos adicionais, assim como veículos, adjuvantes e/ou diluentes farmacologicamente comuns. A composição farmacêutica contém o ingrediente activo numa dose terapeuticamente eficaz que pode ser determinada por um especialista na técnica, de um modo simples, através de testes in vitro, por exemplo, em culturas celulares adequadas ou em modelos animais. A administração da composição é realizada, de um modo preferido, através de injecção ou infusão, mas também são concebíveis outros tipos de administração. É realizada, de um modo preferido, uma administração intravenosa e/ou subcutânea. A dose do ingrediente activo administrado depende do tipo e da gravidade da doença, assim como do estado do doente a ser tratado. A composição terapêutica é administrada, de um modo preferido, diversas vezes durante um período prolongado de, por exemplo, pelo menos, 2-4 semanas. Neste contexto, é feita referência a processos conhecidos para a administração de anticorpos ou conjugados de anticorpos, como descrito em, por exemplo, Ferarra, N. et al., Nature Reviews Drug Discovery, Volume 3, Maio 2004, 391-400 e Salgaller, M.L., Current Opinion in Molecular Therapeutics 2003 5(6): 657-667, ou a procedimentos de administração existentes para anticorpos farmacêuticos, tais como Rituximab, CAMPATH, Remicade, etc.

Outro objectivo da invenção é uma composição diagnóstica que compreende um polipéptido de acordo com a invenção como um reagente de diagnóstico. Além disso, a composição diagnóstica pode ainda conter reagentes, veículos, adjuvantes e/ou diluentes diagnosticamente comuns adicionais. A composição para diagnóstico contém o polipéptido numa quantidade suficiente para tornar possível a detecção diagnóstica no respectivo formato, e.g., num formato diagnóstico in vivo ou in vitro. Neste contexto, é feita referência a processos conhecidos para diagnóstico in vivo e in vitro com a utilização de anticorpos marcados.

As composições farmacêuticas e diagnósticas podem ser utilizadas para terapia e diagnóstico de todas as doenças que são acompanhadas por uma expressão de ED-B, por exemplo uma expressão estromal e/ou perivascular de ED-B. Os exemplos dessas doenças são doenças hiperproliferativas, e.g., doenças que estão associadas a angiogénese, em particular cancro, doenças do foro ocular, cicatrizes hipertróficas, etc., doenças que estão associadas com um mau funcionamento do miofibroblasto, e.g., endometriose, placa aterosclerótica, etc., ou doenças inflamatórias, e.g., psoriase, doença de Crohn, artrite reumatóide ou esclerose múltipla. A composição farmacêutica ou diagnóstica de acordo com a invenção pode conter um ou mais polipéptidos activos, e.g., uma combinação de polipéptidos, que se ligam a áreas diferentes do domínio ED-B. As composições são adequadas para utilização em medicina humana e veterinária.

Outro objectivo da invenção é um ácido nucleico que codifica para um péptido ou polipéptido de fusão de acordo com a invenção. Este ácido nucleico pode ser um ADN de cadeia simples ou de cadeia dupla ou um ARN. 0 ácido nucleico está, de um modo preferido, em ligação operativa com uma sequência de monitorização da expressão, que torna possível uma expressão numa célula hospedeira adequada ou num organismo hospedeiro adequado. 0 ácido nucleico pode estar presente num vector que é adequado para introdução numa célula hospedeira ou organismo hospedeiro. 0 vector pode ser, por exemplo, um vector procariótico, adequado para introdução em células procarióticas, e.g., um plasmídeo ou bacteriófago. Em contraste, o vector pode também ser um vector eucariótico, adequado para a introdução em células hospedeiras ou organismos hospedeiros eucarióticos, e.g., um plasmídeo, um cromossoma artificial ou um vector virai. Os vectores adequados são conhecidos do especialista na técnica, por exemplo, a partir de Sambrook et al. (1989), Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory

Press, e Ausubel et al. (1989), Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley and Sons.

Ainda outro objectivo da invenção é uma célula, e.g., uma célula procariota ou uma célula eucariota, tal como, por exemplo, uma célula humana, que é transformada com um ácido nucleico de acordo com a invenção ou um vector de acordo com a invenção. Outro objectivo da invenção é um organismo não humano, e.g., um animal transgénico, que é transformado com um ácido nucleico de acordo com a invenção ou um vector de acordo com a invenção. Neste caso, o termo "transformação", no âmbito da presente invenção contém todas as possibilidades para introduzir ácidos nucleicos estranhos numa célula ou organismo, incluindo transfecção ou infecção. 0 polipéptido de acordo com a invenção pode ser produzido através do cultivo de uma célula de acordo com a invenção ou de um organismo não humano de acordo com a invenção sob condições em que é realizada uma expressão do polipéptido, e depois é obtido o polipéptido expresso, e.g., a partir da célula, do meio de cultura, do organismo ou produtos de excreção do organismo.

Além disso, a invenção é para ser explicada através das figuras e exemplos abaixo: A Figura 1 mostra a implementação esquemática de um teste de inibição para identificar anticorpos funcionalmente activos.

As células endoteliais humanas, que foram obtidas a partir de microvasos da pele (células endoteliais de microvaso dérmico humano, HDMVEc), foram incubadas conjuntamente com fragmentos Fab de anticorpo específicos de ED-B. 0 número de células ligadas é tornado visível através de coloração com violeta de cristal e medido num fotómetro. Uma elevada intensidade de cor significa muitas células aderentes e nenhuns anticorpos de bloqueamento de ligação. Uma baixa intensidade de cor significa pouca adesão e um anticorpo de bloqueamento de ligação. A Figura 2 mostra um diagrama de pesquisa para identificar anticorpos de bloqueamento da função de ED-B-fibronectina através de uma apresentação de fragmentos Fab.

Num primeiro passo, é realizado um procedimento de rastreio com ED-B recombinante. Os fragmentos de anticorpo que são obtidos deste modo são sujeitos a um teste de especificidade (ELISA), a um teste de adesão funcional, assim como um estudo imuno-histoquimico. Depois, é determinada a afinidade dos anticorpos que realizam estes testes. Depois, são realizadas alterações nos domínios CDR para melhorar a afinidade, em que maturação de afinidade 1 significa uma alteração no domínio L-CDR3 e maturação de afinidade 2 significa uma alteração no domínio H-CDR2.

Após os anticorpos, obtidos através de maturação de afinidade, passarem através dos testes mencionados acima, então é testada a eficácia in vivo. A Figura 3 mostra os resultados de um teste de especificidade em formato de ELISA com o anticorpo-fragmentos Fab que são produzidos por rastreio com ED-B recombinante.

ED-B significa a ligação a ED-B recombinante, 6-FN significa a ligação ao domínio 6 de fibronectina recombinante, domínio 7-8-9 significa a ligação a domínios 7-8-9 de fibronectina recombinante (sem ED-B), e domínio 7-EDB-8-9 significa a ligação aos domínios 7-8-9 de fibronectina recombinante com ED-B. A proporção de ED-B para 6-FN ou 7-8-9 produz a especificidade do anticorpo sob estudo. AP-39 significa um dimero covalente do anticorpo scFv L19 anti-ED-B biologicamente inactivo. A Figura 4 mostra o resultado de um teste de adesão com os anticorpos em estudo.

Foi examinada a inibição da adesão de células HDMVEc a placas revestidas com ED-B pelos fragmentos Fab indicados a concentrações de 25 pg/mL ou 0,4 pg/mL de Fab. Os valores indicados são o resultado de três determinações. A Figura 5 mostra o padrão de reacção imuno-histoguímica de fragmentos Fab anti-ED-B de bloqueamento de ligação no exemplo de MOR 02616. São mostrados nas Figuras 5A e 5C, os resultados com um controlo negativo (HuCAL-Fab negativo), e nas Figuras 5B e 5D, os resultados com o anticorpo MOR 02616 em xenotransplantes iRM-célula de neuroblastoma humano (Figuras 5A e 5B) assim como em células de F9-teratocarcinoma de murino (Figuras 5C e 5D).

Os criocortes de células (espessura: 10 pm) foram secos ao ar e depois mantidos em acetona gelada durante 10 minutos. Depois, os cortes foram lavados em PBS e incubados durante 60 minutos com 2 pg/mL de MOR 02616 ou controlos negativos a temperatura ambiente. Como um anticorpo secundário, foi utilizado um anti-soro policlonal humano de cabra marcado com peroxidase (1:100 diluído em PBS, Dianova) em combinação com diaminobenzidina (Sigma Chemicals) como um substrato cromogénico. A Figura 6 mostra os resultados de um teste de especificidade em formato de ELISA com os fragmentos Fab de anticorpo que são optimizados por maturação. A execução do teste foi como descrita na Figura 3. A Figura 7 mostra o padrão de reacção imuno-histoquímica dos fragmentos Fab de anticorpo MOR 03255, optimizados por maturação, em criocortes de células de F9-teratocarcinoma (Figura 7A) e em xenotransplantes de célula de melanoma humano SKMEL-28 em murganhos sem pelo (Figura 7B). A execução do teste foi como descrita na Figura 5. A Figura 8 mostra o resultado de um teste de adesão com os fragmentos Fab de anticorpo de acordo com a invenção relativamente aos anticorpos comparativos L19 e Ly6 0,3. A execução do teste foi essencialmente descrita na Figura 4. As concentrações de anticorpo foram 1 plí/mL, 10 pL/sL ou 20 pL/mL. A Figura 9 mostra a estabilidade dos fragmentos Fab de anticorpo de acordo com a invenção após incubação durante 4 horas em plasma humano ou PBS a 37 °C. A reactividade imune foi determinada no teste de ELISA com concentrações na gama de 0,039 a 5 pg/mL. O sinal com 0,62 pg/mL em plasma humano sem incubação foi definido como um valor de 100%. A Figura 10 mostra a eficácia terapêutica de fragmentos Fab de anticorpo anti-ED-B de bloqueamento de ligação no exemplo de MOR 03255. A Figura 11 mostra as sequências de nucleótidos que codificam para as regiões VH e VL dos anticorpos de acordo com a invenção.

Exemplo 1. Material e Métodos 1.1 Proteínas e Anticorpos 0 domínio ED-B(His)s de fibronectina, domínio 6 de fibronectina (6FN), domínio 7-8-9 de fibronectina e domínio 7-ED-B-8-9, recombinantes purificados foram produzidos de acordo com procedimentos convencionais (e.g., Sambrook et al., Molecular Cloning. A Laboratory Manual, Cold Spring Harbour Press) .

Os anticorpos de murganho contra receptores de ED-B purificados foram também produzidos de acordo com processos convencionais através da administração de 50 pg de receptor purificado em adjuvante completo de Freund a um murganho, 3 semanas mais tarde a administração de 25 pg de receptor purificado em adjuvante incompleto de Freund, e após mais 3 semanas todas as aplicações são administradas intraperitonealmente em adjuvante incompleto. O sangue foi depois removido por punção retro-orbital 14 dias após a imunização. A fibronectina plasmática foi encomendada a Sigma.

1.2 Selecção de Fagos Específicos de ED-B A selecção foi realizada de acordo com o protocolo de selecção HuCAL® Gold Phage. A biblioteca HuCAL® Gold foi subdividida em seis grupos específicos de estrutura. Os fagos específicos de ED-B foram concentrados em três voltas sucessivas de selecção de proteína recombinante imobilizada em placas de 96 poços (Maxisorb, Nunc, Rochester, NY, EUA). Para o rastreio A, a placa foi revestida com 1 pg/poço de ED-B(His5) (10 pg/mL em durante 2 horas a 37 "C. Para o rastreio B, a placa foi revestida com ED-B na mesma concentração em PBS (pH 7,2 com 1 mmol de 1 mmol de giOil de um dia para o outro a 4 °C. As placas foram bloqueadas com 5% de leite em pó magro em PBS, 0,05% de Tween20 (Sigma, St. Louis, MO, EUA) (tampão de bloqueamento) e incubadas com 1 x 1013 fagos HuCAL® Gold, que tinham sido pré-incubados com um volume de tampão de bloqueamento. Para o rastreio B, os fagos foram pré-incubados adicionalmente com 0,5 pg/mL de domínio 6 de fibronectina de modo a reduzir a selecção de moléculas de ligação que são específicas para a estrutura conservada de uma repetição de domínio de tipo 3 de fibronectina. Após uma incubação com os fagos durante 2 horas a temperatura ambiente, os poços foram lavados 5x com PBS, 0,05% de Tween20 e 5x com PBS. Os fagos restantes foram eluídos com 20 mmol de ditiotreitol (DTT) em 10 mmol de tris/HCl (pH 8,0) durante 10 minutos a temperatura ambiente. Depois foi realizada uma incubação com E. coli TG-1 (Stratagene, = 0,5) para infecção. Depois, os poços foram incubados com E. coli TG-1 como um passo adicional de eluição. 1.3 Recuperação de Fagemídeo, Amplificação Fágica e

Purificação

Os fagos HuCAL® Gold foram amplificados em meio 2x TY com 34 pg/mL de cloranfenicol e 1% de Glucose (2x TY-CG) . Após infecção com um fago auxiliar (VCSM13) a 37 °C e um 0¾½ de cerca de 0,5, centrifugação e ressuspensão em 2x TY-CG/50 pg/mL de canamicina, as células foram induzidas com 0,25 mmol de IPTG e cultivadas de um dia para o outro a 22 °C. Os fagos foram precipitados do sobrenadante com polietilenoglicol (Ausubel et al. (1998), Current Protocols of Microbiology), ressuspensos em PBS e utilizados para ciclos de selecção subsequentes. 1.4 Subclonagem de Fragmentos Fab Seleccionados e Expressão de Fragmentos Fab Solúveis

As inserções que codificam Fab dos fagos HuCAL® Gold

seleccionados foram subclonadas no vector de expressão pM0RPHx9-FS. A preparação de ADN plasmidico do clone HuCAL® GOLD seleccionado foi clivada com enzimas de restrição XbalI/EcoRI, pelo que a inserção que codifica Fab foi cortada (ompA-VL e phoA-Fd). As moléculas de Fab que são expressas neste vector contêm dois marcadores no terminal C e Strep-tagll) para detecção e para purificação. 1.5 Expressão e Purificação de Anticorpos &&&&&** Gold em E.coli A expressão das células TG-1 F em fragmentos Fab codificados por pMORPHx9-FS em E.coli foi realizada em culturas em frascos com agitação com 0,7 5 L de meio 2xTY e 34 pg/mL de

>N X- ·„> cloranf enicol. Após indução com 0,75 «sl de IPTG, as células foram cultivadas durante 16 horas a 30 "C. Como uma alternativa, os clones Fab, que tinham sido obtidos a partir do segundo grupo 2 de maturação, foram induzidos com 0,1 mmol de IPTG e depois cultivados a 22 "C. Foram produzidos extractos periplasmáticos a partir de precipitados de células através de choque osmótico, e os fragmentos Fab foram isolados através de cromatografia Strep-Taetiii® (IBA, Gottingen, Alemanha). Foram determinados os pesos moleculares aparentes através de cromatografia de exclusão de tamanho (SEC) com padrões de calibração. As concentrações foram determinadas através de espectrometria de UV. 1.6 Identificação de Fragmentos Fab de ligação a ED-B através de ELISA.

As placas de ELISA Maxisorb de 96 poços foram revestidas com 100 pL de solução ED-B (10 pg/mL em tampão de revestimento (PBS pH 7,4, 1 mmol de CáSlg, 1 mmol de MgCl2) de um dia para o outro a 4 °C. Foram adicionados lisados brutos ou moléculas Fab purificadas; as moléculas Fab que não se ligaram foram removidas por lavagem 5x com tampão de lavagem (PBS pH 7,4, 0,05% de

Tween20). Os fragmentos Fab foram detectados através de incubação com anticorpos anti-Fab humano conjugados com peroxidade (Dianova), seguida por revelação com um substrato solúvel da peroxidase (Roche) e determinação a 370 nm. Os clones que expressam moléculas Fab especificas de ED-B foram

identificados através de um sinal positivo de ELISA em ED-B imobilizado contra pouco ou nenhum sinal em 6FN.

1.7 Determinação da Estabilidade Plasmática sob Condições de Temperatura Fisiológica através de ELISA

0 revestimento com ED-B (2,5 pg/mL) foi realizado essencialmente como descrito acima. Os fragmentos Fab foram incubados durante 4 horas a 37 "C e a uma concentração de 50 pg/mL em plasma humano (Cruz Vermelha Alemã; lote 9985550). Após incubação, as moléculas Fab foram diluídas para o Teste de ELISA as concentrações de 5,0, 2,5, 1,25, 0,62, 0,31, 0,156, 0,078 e 0,039 pg/mL em PBS com 1% de albumina de soro bovino para determinar a área linear da intensidade do sinal. As moléculas Fab funcionais foram determinadas com o anticorpo anti-Flag M2 (Sigma F3165) e um anticorpo secundário anti-murganho conjugado com fase alcalina, seguido por revelação com Attophos (Roche) e por determinação a 535 nm. 1.8 Cultura de Células HDMVEc e Teste de Adesão Celular

As células endoteliais microvasculares dérmicas humanas (HDMVEc), isoladas a partir de prepúcio juvenil, foram cultivadas em meio EGM-MV (Clonetics, Inc.) com a adição de 10% de soro fetal de vitela, 2 mmol de glutamina, 20 pg/mL de heparina e 3 pg/mL de bFGF em recipientes, revestidos com 0,1% de gelatina (Sigma). Para os testes de adesão, foram utilizadas células que não tinham sido cultivadas por mais vezes do que a Ιδ passagem. Foi imobilizado ED-B (10 pg/mL) ou fibronectina plasmática (2,5 pg/mL) de um dia para o outro a 4 "C em PBS, pH 7,4, 0,9 mmol de CaCl2, 0,5 mmol de MgCl2 em placas de ELISA com 9 6 poços e bloqueadas com 1% de RSA em PBS, pH 7,4, 0,9 mmol de C&CX.íi> 0,5 mmol de MgCl2 durante 1 hora a 37 "C. As células foram marcadas com 0,15 pg/mL de calceína durante 30 minutos a 37 °C e lavadas uma vez em meio de adesão (MCDB 131,2 mmol de glutamina, 0,11 de RSA, 20 pg/mL de heparina). Foram incubadas 1 x 105 células durante 20 minutos a 37 °C com a concentração de anticorpo que é indicada em cada caso, diluída em meio de adesão 31 (volume final de 100 pL). A suspensão de células foi adicionada as placas revestidas com ED-B durante 2 horas a 37 °C. Depois das células serem lavadas 2x com PBS, pH 7,4, 0,9 mmol de CaCia, 0,5 mmol de as células aderentes foram detectadas num fluorimetro de placas (excitação a 485 nm; emissão a 530 nm) .

Como um controlo, (A) foi determinada a ligação das células as placas revestidas com ligando sem a adição de anticorpos específicos, e (B) foi determinada a adesão das células aos poços sem revestimento de ligando, em que o valor obtido no último controlo mencionado foi definido como um mínimo de adesão das células no teste. 1.9 Maturação de Afinidade de Moléculas Fab Seleccionadas através de Permuta de Cassetes CDR em Passos

Para aumentar a afinidade e a actividade biológica de fragmentos de anticorpo seleccionados, as regiões CDR foram optimizadas através de mutagénese de cassete com utilização de mutagénese dirigida de trinucleótido.

Para este fim, foram clonados fragmentos Fab a partir do vector de expressão pMORPHx9 no vector fagemídeo pMORPH-23 com utilização de sítios de restrição EcoRI/Xbal. Para optimizar a afinidade dos fragmentos Fab seleccionados, foram realizados dois passos sucessivos de maturação para cada grupo de maturação. No primeiro passo, foi produzida uma biblioteca de fragmento de anticorpo-fago em que a região L-CDR3 do clone inicial foi variado através de um repertório de 7 x 108 (Grupo 1) e 3,8 x 10θ (Grupo 2) sequências CDR de cadeia leve individual. Depois, os derivados melhorados na afinidade do primeiro passo de maturação foram expostos a uma segunda volta de maturação através da substituição da região H-CDR-2 através de uma biblioteca de elementos diversificados. Deste modo, foram produzidas duas bibliotecas fágicas com 1 x 108 clones individuais em cada caso.

As bibliotecas de maturação de afinidade foram produzidas através de transformação em E. coli TOPIOF. Os fagos foram produzidos como descrito acima. A selecção em fragmentos Fab com afinidade melhorada foi realizada sob condições severas durante três voltas na primeira maturação e durante duas voltas num segundo passo. 1.10 Determinação de A£inidade através de Ressonância de Plasmão Superficial

Para determinar os valores de KD, foram utilizadas fracções monoméricas (pelo menos, 80% de conteúdo monomérico, determinado através de SEC analítica; Superdex75, Amersham Pharmacia) de fragmentos Fab. Os Fl-Chips (Biacore, Suécia) foram revestidos com cerca de 200 RU de ED-B (30 pg/mL, 10 mmol de tampão de acetato, pH 4,0) e células de fluxo de referência com uma quantidade correspondente de albumina de soro humano (20 pg/mL, 10 mmol de tampão de acetato, pH 4,5) com a utilização de química de acoplamento de BDC-NHS-amina convencional. A densidade do antigénio foi reduzida para cerca de 100 RU para a caracterização de Fab da segunda maturação. A regeneração foi realizada com 10 mmol de HC1. Todas as medições cinéticas foram realizadas em tampão PBS (136 mmol de NaCl, 2,7 mmol de KC1, 10 mmol de i&bKIWí 1,7 6 mmol de pH 7,4) com um caudal de 2 0 pL/minuto com utilização de uma gama de concentração de Fab de 1,5-500 nmol. O período de injecção foi de 1 minuto em cada 33 caso. Todos os sensogramas foram avaliados com a utilização de software 3.1 de avaliação de BIA.

Abreviaturas: EDC: L-Etil-3-(3-dimetilaminopropil)- carbodiimida, NHS: N-Hidroxissuccinimida, RU: Unidades de

Ressonância 2. Resultados 2.1 Produção de Anticorpos Contra ED-B Humano

Foram implementados dois ensaios diferentes de rastreio. 0 revestimento com ED-B para o primeiro ensaio (rastreio A) foi realizado de acordo com as condições conhecidas do teste biológico para apresentar ED-B numa conformação que permite a adesão de células HDMVEc ao antigénio imobilizado. Com o segundo rastreio (B), os fagos foram adicionalmente bloqueados com excesso de 6FN para evitar uma selecção de moléculas de ligação que reagem de forma cruzada com o domínio 6 da fibronectina.

Em conjunto, foram encontradas 23 moléculas Fab-HuCAL diferentes a partir de 1315 candidatos primários que satisfazem os critérios de ligação a ED-B e não a 6FN. Além disso, os anticorpos foram testados para a sua capacidade de ligação a uma fibronectina expressa de forma recombinante, compreendendo os domínios 7, 8 e 9 com e sem os domínios ED-B introduzidos na sua disposição natural (ver Figura 3) . Todos os anticorpos testados apresentam um reconhecimento específico para a construção 7-ED-B-8-9 mas não reagiram com a construção correspondente sem o domínio ED-B.

2.2 Caracterização funcional da Molécula de Ligação Específica a ED-B

Os anticorpos como identificados especificamente em ELISA foram purificados e testados na sua capacidade para bloquear a adesão de células HDMVEc as placas revestidas com ED-B. Foi testada a adesão de células HDMVEc na presença de fragmentos Fab específicos de ED-B em duas concentrações, comparativamente a uma molécula Fab-HuCAL de controlo inespecífica e soros positivos de controlo de murganho.

Doze das 23 moléculas Fab descritas na Secção 2.1 apresentaram uma inibição de adesão celular em ED-B imobilizado. Uma selecção representativa das seis moléculas Fab mais eficazes é apresentada na Figura 4. A uma concentração de 25 pg/mL, a adesão celular foi inibida em 50% até quase 100%. A uma concentração de 0,4 pg/mL, apenas algumas moléculas Fab; e.g., MOR02610, MOR02616, MOR02715 e MOR02718, apresentaram uma inibição reprodutível da adesão celular.

Os fragmentos Fab de anticorpo de bloqueamento de função foram caracterizados através de imuno-histoquímica relativamente a sua localização em células de F9-teratocarcinoma de murganho e em criocortes de xenotransplante-neuroblastoma IRM30 humano. Todos os anticorpos testados apresentaram uma localização vascular em dois cortes de tecido, mas nenhuma coloração em vasos de tecido normal (e.g., fígado normal e esclerótico e pele). Nas Figuras 5B e 5D, é apresentada uma coloração abluminal perivascular de vasos, endotélio proliferativo e estroma tumoral por MOR02616. Pode ser detectada uma colecção de ED-B na vizinhança de estruturas neovasculares de tumores de crescimento exponencial, mas não em vasos normais. Com um anticorpo de controlo negativo contra a lisozima a mesma concentração, não foi visível qualquer coloração (Figuras 5A e 5C).

As propriedades de doze moléculas de ligação seleccionadas, foram determinadas através de análise de BIAcore (ver Tabela 1). As afinidades (Kon) foram na gama de 15 a 500 nmol. A afinidade do derivado de L19 bivalente AP39 (um anticorpo comparativo biologicamente inactivo contra ED-B) foi determinada com 2,4 nmol. A Tabela 1 mostra também as sequências de CDR (apenas L-CDR3 e H-CDR3) e as combinações de estrutura. Foram realizadas pelo menos, duas medições independentes com moléculas Fab de lotes diferentes para expressão de proteína e purificação de proteína. A velocidade de ligação (Kon) e a velocidade de dissociação (K0ff) da molécula Fab são indicadas em colunas separadas.

Tabela 1

3 a

Ciem® \ m j Vj& loft 1® | P/*teJ m®í xm AVW 33TSM—fX 3,

2.3 Maturações de Afinidade de Anticorpos ED-B de

Bloqueamento de Função através de Optimização de Regiões L-CDR3 e H-CDR2

As maturações de afinidade das moléculas Fab foram realizadas em duas secções. Primeiro, a sequência L-CDR3 foi diversificada, e depois a sequência H-CDR2 da molécula Fab melhorada, obtida no primeiro passo, foi permutada.

Foram produzidas duas bibliotecas de maturação de afinidade para cada passo. A optimização foi realizada em dois grupos separados. A biblioteca 1 de L-CDR3 com um grau de diversidade de 7 x 108 elementos continha as quatro moléculas Fab iniciais MOR0261O, MOR02616, M0R02619 e MOR02622. A biblioteca 2 de

Q L-CDR3 com um grau de diversidade de 3,8 x 10 elementos continha apenas derivados de M0R02715 e MOR02718. Aqui, as moléculas Fab foram combinadas em grupos, em cada caso de acordo com a sua afinidade e actividade biológica no teste de adesão.

As duas bibliotecas foram mantidas separadas durante o procedimento de selecção. Neste caso, foram realizadas duas estratégias de rastreio. O rastreio I foi realizado com ED-B imobilizado em placas maxisorb durante três voltas, como indicado previamente. Com o rastreio II, foi realizada uma selecção de ED-B biotinilado em solução. Neste caso, o complexo fago-antigénio foi recuperado através de partículas revestidas com estreptavidina na primeira volta e em placas de neutravidina nas duas voltas subsequentes. Foram utilizadas condições de restringência no âmbito do procedimento de selecção. A selecção em moléculas Fab optimizadas foi realizada através da determinação dos valores de K0fj no sistema BIAcore. Em conjunto, foram caracterizados 11 derivados da biblioteca I. Os 5 derivados com a afinidade mais elevada são indicados na Tabela 2. Neste caso, todos os clones melhorados são derivados de M0R02619 com um aumento na afinidade até 7x. No clone MOR03075, foi encontrada uma afinidade de 2,4 nmol. A partir da biblioteca 2, foram analisados em detalhe dois derivados de MOR02715. Para o clone MOR03062, foi encontrado um aumento de afinidade de 15 vezes, de modo que foi obtida uma afinidade monomérica de 2,4 nm. As alterações na sequência de aminoácidos da região L-CDR3 são apresentadas nas Tabelas 2a e 2b.

Tabela 2 a

Rastreio MORO Clone LCDR3 Kon Koff KD Aumento de x de Inicial £1/*] [nm] Vezes Grupo 1 Relativamente ao Clone Parental Kon Koff KD AP 39- Biotina QQTGRI—PP 6,6E+05 1,4 ΘΕΟ 03 2,4 ± 0,6 2619 QSWDGAS-TG 7,8E+05 1,2E-02 15,4 i 0,6 Sólido 3055 2619 QAWTRAHRYP 1,8E+06 5,1E- 03 3,0 ± 2,2 0,5 2,6 5,4 Dissolvido 3066 2619 SSYD-TQVTR 1,1E+06 4,7E- 03 4,2 ± 1,4 0,6 2,8 3,8 jDissolvido "“Ύ07Γ “1 26lT ”[QSWDP-RSFT [ 1 ,TÈ'+0 6j I7IF 72^4™ ttj 5To“T Υ,ΤΊ | 03 | 0,3 1 1 |Dissolvido '^3069” ^'P'26Í7' 'TwYGMT:s7HF|''fl2T+Ci6f ITTe^ Γ3 j 3 ± τ;'5""Γ 'ΪΙ'Γ'Ι $ | ^ | 03 \ 0,2 | | t ..... Ϊ -í _j í Dissolvido 3071 | 2619 fLAYIQS-KGH|1,9E+06j 5,7E- j3,l ± 2,3 \ 2,3 ( j 5 !>: ? 03 1 0,8 5 !;_______________________ , (|>|ίί L 11|tL L .1hh..íhhí[ihh, l ........... .V____ ___

Tabela 2b

Rastreio MORO Clone LCDR3 Kon Koff KD Aumento de x J de Parental El/*J [nm] \ Vezes ; Grupo 2 Relativamente ao; Clone Parental | Kon Koff KD | AP”39-" |qqtgri^W1T75^ I7T9"e"2' ftti 1................τ................τ.........'.....* Biotina LO 0 03 1 0,6 r.............4................j— '''""2715"“' T~” ^“IcliSNQGMYfXlÍE+ol T, 7E- |”"53","7"' 1 1 1 5 1 02 1 ± 1,7 ξ 5 : ·: ''''Sólido'''’ ''''TÕôT'' |'''''''27fr'''''|Q'SW^ ΤΓΤε- 1 10 i μ,7 | 3,5 : 5,3 jj | | 1 6 | 02 | 3.,S 5 * > J Sólido TòTf'" ΤΓϊεγ ]"3',T"i' i \ \ 6 ^ 02 | 0,8 l \ | i A especificidade para ED-B (determinada através de ELISA, imuno-histoquimica e teste de adesão celular) de todos os derivados da primeira volta de maturação foi inalterada. rnmnffmTffrrrrrrrrrrrrnmnmmfftin»nn>wmiiiiiiiii

As moléculas Fab apresentadas nas Tabelas 2a e 2b foram seleccionadas para uma maturação de H-CDR2 subsequente em dois grupos. No grupo 1, cinco moléculas Fab foram sujeitas a uma actividade semelhante, mas com regiões L-CDR3 diferentes de uma diversificação em H-CDR2 (tamanho da biblioteca de 7 x 107 elementos). Para o grupo 2 (tamanho da biblioteca de 8,5 x 107 elementos), foram seleccionadas duas moléculas Fab. As bibliotecas foram seleccionadas em separado como descrito acima. As moléculas de ligação com afinidade aumentada foram concentradas através de duas voltas de rastreio em solução sob condições restringentes.

Foram seleccionadas três moléculas Fab do grupo 1. Para os derivados M0R03243 e MOR03245, foram encontradas afinidades de cerca de 0,7 nmol. Para o derivado MOR03246, foi encontrada uma afinidade de 0,6 nmol.

As sequências de H-CDR2 dos clones correspondentes e os dados de afinidade são apresentados na Tabela 3a.

Tabela 3a

Os derivados com propriedades melhoradas também podiam ser seleccionados do grupo 2. Em comparação com os clones parentais, as afinidades dos derivados foram melhoradas por um factor de 26 40 até 250x. As afinidades dos clones M0R03255 e M0R03258 foram determinadas com 30 pM ou 40 pM.

Na Tabela 3b, são apresentadas as sequências de aminoácidos de H-CDR2 dos clones seleccionados do grupo 2, assim como os dados correspondentes de afinidade.

Tabela 3b

M0R03251 S 3062 IVISNMSYTIYYADSVKG j 3, 3E+06 [ 2,0E-04A 0,07 MORÕ3252 | 3062 f VISNYSWHIYYADSVKG f 3, lE+OlTffc, lE-'0'5 | 0,03 £ M0R03253*Í 3Ò6F77ut ΤΤΓβΕ+δΤΤΤ,ΙΙ^ΟΜ ΤΓ,ΎΪ M0R03255 M0R03257 ί M0R03258”f"" .........................i·· 3062 "3062" 3064 S VISNRSSYIYYADSVKG IVfSNRWYIYYÃDSVKG" TvisnqsnytyyãdsWg i 4,9E+06 8, 6E-05 ; C, Ò 3 c7'Ô8 ; 5,3E+06 I 3,0E-04 j tiTrrrrnnononnnrrr rrrm > 0,04 S'™'

0,04ÕToT 0'7Õ5"oTõToToT oToF 2.4 Caracterização de Anticorpos ED-B de Bloqueamento de Função de Elevada Afinidade

Para testar se os anticorpos que são obtidos através de maturação de afinidade são ainda sempre específicos para ED-B, foram realizados testes de especificidade no formato de ELISA (Figura 6), estudos imuno-histoquímicos (Figura 7) e testes de adesão (Figura 8) . Em todos os três testes, foi observado que a especificidade das moléculas Fab amadurecidas por afinidade para ED-B permaneceu inalterada. Além disso, é evidente a partir da Figura 8 que ambos os clones parentais, tal como MOR 02715, e os clones que são produzidos através de maturação de afinidade, tais como MOR 03062, MOR 03255, MOR 03064 e MOR 03259, têm uma actividade biológica significativamente superior (inibição de adesão) do que o conhecido anticorpo L19.

Além disso, foi testada a estabilidade térmica das moléculas Fab no plasma humano. Para este fim, as moléculas Fab foram incubadas com plasma de ser humano durante 4 horas a 37 °C, não se tendo observado uma perda significativa de reactividade imune determinada através de ELISA (Figura 9).

Todas as moléculas Fab seleccionadas são capazes de bloquear a interacção de um receptor com células endoteliais microvasculares humanas em ED-B de um modo dependente da dose, uma propriedade que o anticorpo ED-B L19 conhecido não tem. Uma vez que a adesão de HDMVEc a matriz extracelular é um dos primeiros passos de neoangiogénese, o bloqueamento deste processo através das moléculas de ligação de acordo com a invenção produz um agente terapêutico para inibir a formação de novos vasos e para inibir o crescimento tumoral. 2.5 Acção iπ vivo

As células F9-teratocarcinoma (106/murganho em Matrigel com/sem 100 pg de Fab MOR03255) foram implantadas s.c. nos flancos de murganhos pelados. Após 3 dias, os animais foram tratados durante 7 dias sucessivos com, em cada caso, 100 pg de MOR03255/murganho. Em comparação com o controlo de solvente, ambos os grupos de tratamento apresentam uma inibição no crescimento tumoral na gama de 42-64%. Um sumário dos resultados do teste é apresentado na Figura 10.

Sem mais elaboração, acredita-se que um especialista na técnica pode, utilizando a descrição precedente, utilizar a presente invenção na sua totalidade. As formas de realização especificas preferidas precedentes são, deste modo, para serem interpretadas como meramente ilustrativas, e não limitativas da restante revelação em qualquer que seja o caso.

No antecedente e nos exemplos, todas as temperaturas são apresentadas não corrigidas, em graus Celsius e todas as partes e percentagens são em peso, salvo indicação em contrário.

As revelações totais de todos os pedidos, patentes e publicações, aqui citadas e do pedido alemão correspondente NO. 102004050101.7, apresentado a 14 de Outubro de 2005 e o Pedido Provisório U.S. No. de Série 60/697565 apresentado a 11 de Julho de 2005, são aqui incorporados por referência.

Os exemplos precedentes podem ser repetidos com sucesso semelhante através de substituição dos reagentes genericamente ou especificamente descritos e/ou das condições de operação da presente invenção para aquelas utilizadas nos exemplos precedentes. A partir da descrição antecedente, um especialista na técnica pode facilmente verificar as caracteristicas essenciais da presente invenção e, sem se afastar do espirito e âmbito da mesma, pode fazer várias alterações e modificações da invenção para adaptá-la as várias utilizações e condições.

Literatura (1) Brown, L. F.; Guidi, A. J.; Schnitt, S. J.; Van De Water, L.; Iruela-Arispe, M. L.; Yeo, T.-K.; Tognazzi, K.; Dvorak, H. F. (1999) Clin. Câncer Res. 5: 1041-1056 (2) Folkman, J. (1995) Nature (Med.) 1: 27-31 (3) Risau, W. e Lemmon, V. (1988) Develop. Biol. 125: 441-450. (4) Van Den Hoff, A. (1988) Adv. Câncer Res. 50: 159-196 (5) Folkman, J. e Shing, Y. (1992) J. Biol. Chem. 267: 10931-10934 (6) George, E. L.; Baldwin, H. S.; Hynes, R. O. (1997) Blood 90: 3073-3081 (7) Bowersox, J. C. e Sorgente, N. (1982) Câncer Res. 42: 2547- (8) Madri, J. A.; Pratt, B. M.; Tucker, A. M. (1988) J. Cell Biol. 106: 1375-1384 (9) Nicosia, R. F.; Bonnano, E.; Smith, M. (1993) J. Cell. Physiol. 154: 654-661 (10) Kornblihtt, A. R.; Vibe-Pedersen, K.; e Baralle, F. E., 1983. Isolation and Characterization of cDNA Clones for Human and Bovine Fibronectins. Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 80; 3218-22 (11) Leahy, D. J.; Hendrickson, W. A.; Aukhil, I. e Erickson, H. P., 1992. Structure of Fibronectin Type III Domain from

Tenascin Phased by MAS Analysis of the Selenomethionyl 44

Protein. Science, 258, 987-91 (12) Hynes, R. 0., 1987, Cell 48, 549-550 (13) Plow, E. F. et al. 2000, J. Biol. Chem., 275, 21785-21788 (14) Castellani, P.; Viale, G.; Dorcaratto, A.; Nicolo, G.; Kaczmarek, L.; Querze, A.; Zardi, L. (1994) Int. J. Câncer 59: 612-618 (15) Hashimoto-Uoshima, M.; Yan, Y. Z.; Schneider, G.; Aukhil, I. (1997) i J. Cell Science 110: 227-2280 16) Chen, W. e Culp, L. A. (1996) Exp. Cell Res. 223: 9-19 17) Chen, W. e Culp, L. A. (1998) Clin, Exp. Metastasis 16: 30 42

PROTOCOLO DE SEQUÊNCIA <110> Schering Aktiengesellschaft <120> Identificação e Caracterização de Anticorpos Anti-ED-B-Fibronectina de Bloqueamento da Função <130> 33042P DE (WWHC) <14;D:> <170> Patentln Ver. 2.1

<210> 1 <211> 354 ADN <213> humano <2 2 0 > <221> CDS <222> (1)..(354) <223> Anticorpo-Região-VH; MORO2610 V ·. cag gtg caa ttg gtt cag age ggc gcg gaa gtg aaa aaa ccg ggc gcg 48 Gin Vai Gin Leu Vai Gin Ser Gly Ala Glu Vai Lys Lys Pro Gly Ala 5 10 45 age gtg aaa gtg age tgc aaa gee tcc gga tat acc ttt act ggt ttt 96 Ser Val Lys val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Phe 20 25 30 tat att aat tgg gtc ege caa gee cct ggg cag ggt etc gag tgg atg 144 Tyr Ile Asn Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 ggc tgg ate aat ccg tat tet ggc aat acg cgt tac gcg cag aag ttt 192 Gly Trp Ile Asn Pro Tyr Ser Gly Asn Thr Arg Tyr Ala Gin Lys Phe 50 55 60 cag ggc cgg gtg acc atg acc cgt gat acc age att age acc gcg tat 240 Gin Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 atg gaa ctg age age ctg cgt age gaa gat acg gee gtg tat tat tgc 288 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 gcg cgt tet cct gtt tat tat aag tat gat tat tgg ggc caa ggc acc 336

Ala Arg Ser Pro Vai Tyr Tyr Lys Tyr Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr 100 105 110 ctg gtg acg gtt age tea Leu Vai Thr Vai Ser Ser 115 <210> 2 <211> 118 PRT <213> humano <400> 2 Gin Vai Gin Leu Vai Gin Ser Gly Ala Glu Vai Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15

Ser Vai Lys Vai Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Phe 20 25 30 Tyr 11 e Asn Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Pro Tyr Ser Gly Asn Thr Arg Tyr Ala Gin Lys Phe 50 55 60 Gin Gly Arg Vai Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Pro Vai Tyr Tyr Lys Tyr Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr 100 105 110 Leu Vai Thr Vai Ser Ser Λ <210> 3 <211> 336 <212> ADN <213> humano <220> <221> CDS <222> (1) . . (336) <223> Anticorpo-Região-VL; MORO2610 < 4 0 0 > 3 gat ate gtg ctg acc cag ccg cct tea gtg agt ggc gea cca ggt cag Asp Ile Vai Leu Thr Gin Pro Pro Ser Vai Ser Gly Ala Pro Gly Gin 1 5 10 15 cgt gtg acc ate teg tgt age ggc age age ggc aac att ggt att aat Arg Vai Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Gly Asn Ile Gly Ile Asn 20 25 30 ttt gtg aat tgg tac cag cag ttg ccc ggg acg gcg ccg aaa ctt ctg Phe Vai Asn Trp Tyr Gin Gin Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 att tat aag aat aat aag cgt ccc tea ggc gtg ccg gat cgt ttt age Ile Tyr Lys Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Vai Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 gga tcc aaa age ggc acc age gcg age ctt gcg att acg ggc ctg caa Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gin 65 70 75 80 age gaa gac gaa gcg gat tat tat tgc cag tet tat gat aag act tet Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gin Ser Tyr Asp Lys Thr Ser 48 96 144 192 240 288 SS 9o 95 tct act tat gtg ttt ggc ggc ggc acg aag tta acc gtt ctt ggc cag 336

Ser Thr Tyr Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly Gin 100 105 lio <211> 112 <212> PRT <213> humano <400> 4

Asp Ile Vai Leu Thr Gin Pro Pro Ser Vai Ser Gly Ala Pro Gly Gin 15 10 15

Arg Vai Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Gly Asn Ile Gly Ile Asn 20 25 30

Phe Vai Asn Trp Tyr Gin Gin Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45

Ile Tyr Lys Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Vai Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gin 65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gin Ser Tyr Asp Lys Thr Ser 85 90 95

Ser Thr Tyr Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly Gin 100 105 110

<211> 351 <212> ADN <213> humano <22 0> <221> CDS <222> (1) ..(351) <223> Anticorpo-Região-VH; M0R02611 <400> 5 cag gtg caa ttg gtt cag age ggc gcg gaa gtg aaa aaa ccg ggc gcg 48 Gin Vai Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 age gtg aaa gtg age tgc aaa gee tcc gga tat acc ttt tet ggt tet 96 Ser Vai Lys Vai Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Gly Ser 20 25 30 tat atg cat tgg gtc ege caa gee cct ggg cag ggt etc gag tgg atg 144 Tyr Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 ggc att ate aat ccg gct tet ggc aag acg ctt tac gcg cag aag ttt 192 Gly ile iie Asn Pro Ala Ser Gly Lys Thr Leu Tyr Ala Gin Lys Phe 50 55 60 cag ggc cgg gtg acc atg acc cgt gat acc age att age acc gcg tat 240 Gin Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 atg gaa ctg age age ctg cgt age gaa gat acg gee gtg tat tat tgc 288 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 gcg cgt ggt ctt tat tat cgt ttt gct tet tgg ggc caa ggc acc ctg 3 33$.

Ala Arg Gly Leu Tyr Tyr Arg Phe Ala Ser Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 no gtg acg gtt age tea Vai Thr Vai Ser Ser 115 <210> 6 <211> 117 <212> PRT <213> humano

Gin Vai Gin Leu Vai Gin Ser Gly

Ser Vai Lys Vai Ser Cys Lys Ala 20

Tyr Met His Trp Vai Arg Gin Ala 35 40

Gly Ile Ile Asn Pro Ala Ser Gly 50 55

Gin Gly Arg Vai Thr Met Thr Arg 65 70

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser 85

Ala Arg Gly Leu Tyr Tyr Arg Phe 100

Ala Glu Vai Lys Lys Pro Gly Ala V, i ^

Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Gly Ser 25 30

Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 45

Lys Thr Leu Tyr Ala Gin Lys Phe 60

Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 75 80

Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 90 95

Ala Ser Trp Gly Gin Gly Thr Leu 105 110

Vai Thr Vai Ser Ser t 'Τ 'ϋ £ < 210 > 7 <211> 327 <212 > ADN <213> humano < 2 2 0 > cds <222> (1) .. (327) <223> Anticorpo-Região-VL; MOR02611 < 4 0 0 > 7 gat ate gea ctg acc cag cca gct tea gtg age ggc tea cca ggt cag 48 Asp Ile Ala Leu Thr Gin Pro Ala Ser Vai Ser Gly Ser Pro Gly Gin 1 5 10 15 age att acc ate teg tgt acg ggt act age age gat att ggt ggt tat 96 Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Ile Gly Gly Tyr 20 25 30 cat tet gtg tet tgg tac cag cag cat ccc ggg aag gcg ccg aaa ctt 144 His Ser Vai Ser Trp Tyr Gin Gin His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45 atg att tat cgt tet aat cgt ccc tea ggc gtg age aac cgt ttt age 192 Met Ile Tyr Arg Ser Asn Arg Pro Ser Gly Vai Ser Asn Arg Phe Ser 50 55 60 gga tcc aaa age ggc aac acc gcg age ctg acc att age ggc ctg caa 240 Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gin 65 70 75 80 gcg gaa gac gaa gcg gat tat tat tgc gct gct gct act ggt ggt tgg 288 Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Ala Thr Gly Gly Trp gtg ttt ggc ggc ggc acg aat tta acc gtt ctt ggc cag Vai Phe Gly Gly Gly Thr Asn Leu Thr Vai Leu Gly Gin 100 105 <210> 8 <2ll> 109 <212» PRT <213> humano <400> 8

Asp Ile Ala Leu Thr Gin Pro Ala Ser Vai Ser Gly Ser Pro Gly Gin 15 10 15

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Ile Gly Gly Tyr 20 25 30

His Ser Vai Ser Trp Tyr Gin Gin His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45

Met Ile Tyr Arg Ser Asn Arg Pro Ser Gly Vai Ser Asn Arg Phe Ser 50 55 50

Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gin 65 70 75 80

Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Ala Thr Gly Gly Trp 85 90 95

Vai Phe Gly Gly Gly Thr Asn Leu Thr Vai Leu Gly Gin 100 105 <211> 348 <212* ADN <213> humano <220>

<221> CDS <222> (1)..(348) <223> Anticorpo-Região-VH; M0R02613 cag gtg caa ttg gtg gaa age ggc ggc ggc ctg gtg caa ccg ggc ggc Gin Vai Gin Leu Vai Glu Ser Gly Gly Gly Kj Leu Vai Gin Pro Gly 1 ç Gly age ctg cgt ctg age tgc gcg gee tcc gga ttt acc ttt tet aat tat Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 act atg act tgg gtg ege caa gee cct ggg aag ggt etc gag tgg gtg Thr Met Thr Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Vai 35 40 45 48 96 144 age ttt ate att ggt tet ggt age aat acc tet tat gcg gat age gtg Ser Phe Ile Ile Gly Ser Gly Ser Asn Thr Ser Tyr Ala Asp Ser vai 50 55 60 aaa ggc cgt ttt acc att tea cgt gat aat teg aaa aac acc ctg tat Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 ctg caa atg aac age ctg cgt gcg gaa gat acg gee gtg tat tat tgc Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala vai Tyr Tyr Cys 85 90 95 gcg cgt tat gtt aat ggt ttt gat att tgg ggc caa ggc acc ctg gtg 192 240 288 336

Ala Arg Tyr Vai Asn Gly Phe Asp Ile Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai 100 105 110 acg g 11 age tea >\ $ Thr Vai Ser Ser 115 <210> 10 <211> 116 <£I:2> PRT <213> humano <400> 10

Gin Vai Gin Leu Vai Glu Ser Gly Gly Gly Leu Vai Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30

Thr Met Thr Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Vai 35 40 45

Ser Phe Ile lie Gly Ser Gly Ser Asn Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Vai 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Tyr Vai Asn Gly Phe Asp Ile Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai 100 105 lio

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Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gin Thr Tyr Ala Lys Lys 85 90 95 gat tat tct ctt gtg ttt ggc ggc ggc acg aag tta acc gtt ctt ggc 336

Asp Tyr Ser Leu Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly 100 105 110

Gin <210> 12 <211> 113

< 212 > PRT < 213 > humano < 4 0 0 > 12

Asp Ile Ala Leu Thr Gin Pro Ala Ser Vai Ser Gly Ser Pro Gly Gin 15 10 15

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Tyr Tyr Vai Ser Trp Tyr Gin Gin His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45

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Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gin Thr Tyr Ala Lys Lys 85 90 95

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Gin Vai Gin Leu Vai Glu Ser Gly Gly Gly Leu Vai Gin Pro Gly Gly 15 10 15

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<210> 16 <211> 109 <212> PRT < 213 > humano < 4 0 0 > 16

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Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala 65 70

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Ser Vai Ser Gly Ala Pro Gly Gin 10 15

Ser Ser Ser Asn Ile Gly Phe Asn 25 30

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Gin Vai Gin Leu Vai Glu Ser Gly Gly Gly Leu Vai Gin Pro Gly Gly 15 10 15

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CDS <222> (1) ..(327) <223> Anticorpo-Região-VL; M0R02616 <400> 19 gat ate gtg ctg acc cag age ccg gcg acc ctg age ctg tet ccg ggc 48 Asp Ile Vai Leu Thr Gin Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 gaa cgt gcg acc ctg age tgc aga gcg age cag aat gtt cgt tet aat 96 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Asn Vai Arg Ser Asn 20 25 30 ctg gct tgg tac cag cag cl cl gI cca ggt caa gea ccg cgt cta tta att 144 Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 tat ggt gct tct aat cgt gca act ggg gtc ccg gcg cgt ttt age ggc 192 Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Vai Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 tct gga tcc ggc acg gat ttt acc ctg acc att age age ctg gaa cct 240 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 gaa gac ttt gcg gtt tat tat tgc ctt cag aag tac tct att cct ttt 288 Glu Asp Phe Ala Vai Tyr Tyr Cys Leu Gin Lys Tyr Ser Ile Pro Phe 85 90 95 acc ttt ggc cag ggt acg ddd gtt gaa att ddd cgt acg Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Vai Glu Ile Lys Arg Thr 100 105 <210> 20 <211> 109 <212> PRT <213> humano <400> 20

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Gin Vai Gin Leu Vai Glu Ser Gly Gly Gly Leu Vai Gin Pro Gly Gly 15 10 15

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Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Trp Thr His Ser 85 90 95

Phe Thr Asp Tyr Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr vai Leu Gly 100 105 110

Gin <210> 33 <211> 348 < 212 > ADN <213> humano <220> <221> CDS <222> ( 1) ..(348) <223> Anticorpo-Região-VH; M0R02715 <400> 33 cag gtg caa ttg gtg gaa age ggc ggc ggc ctg gtg caa ccg ggc ggc 48 Gin Vai Gin Leu Vai Glu Ser Gly Gly Gly Leu Vai Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15 age ctg cgt ctg age tgc gcg gee tcc gga ttt acc ttt tet tet tat 96 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 ggt atg cat tgg gtg ege caa gee cct ggg aag ggt ctc gag tgg gtg 144

Gly Met His Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Vai 35 40 45 age gtt ate tet tet tet ggt age tat ate tat tat gcg gat age gtg 192 Ser Vai Ile Ser Ser Ser Gly Ser Tyr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Vai 50 55 60 aaa ggc cgt ttt acc att tea cgt gat aat teg aaa aac acc ctg tat 240 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 ctg caa atg aac age ctg cgt gcg gaa gat acg gee gtg tat tat tgc 288 Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 90 95 gcg cgt aat aag gtt ggt ttt gat gtt tgg ggc caa ggc acc ctg gtg 336 Ala Arg Asn Lys Vai Gly Phe Asp Vai Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai 100 105 110 acg gtt age tea <4!

Thr Vai Ser Ser 115 <210> 34 <211> 116 <212> PRT <213> humano <400> 34

Gin Vai Gin Leu Vai Glu Ser Gly Gly Gly Leu Vai Gin Pro Gly Gly is 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Gly Met His Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Vai 35 40 45

Ser Vai Ile Ser Ser Ser Gly Ser Tyr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Vai 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asn Lys Vai Gly Phe Asp Vai Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai 100 105 110

Thr Vai Ser Ser 115 <210> 35 <211> 339 <212 > ADN <213> humano <2 20 > <2 21> CDS <222> (1)..(339) <223> Anticorpo-Região-VL; M0R02715 gat ate gea ctg acc cag cca gct tea gtg age ggc tea cca ggt cag 48

Asp Ile Ala Leu Thr Gin Pro Ala Ser Vai Ser Gly Ser Pro Gly Gin age att acc ate teg tgt acg ggt act age age gat ggt ggt ggt tat 96

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Gly Gly Gly Tyr t:í|, 2¾ . aat act gtg tct tgg tac cag cag cat ccc ggg aag gcg ccg aaa ctt 144 Asn Thr Vai Ser Trp Tyr Gin Gin His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45 atg att tat tat gtt cat aag cgt ccc tca ggc gtg age aac cgt ttt 192 Met Ile Tyr Tyr Vai His Lys Arg Pro Ser Gly Vai Ser Asn Arg Phe 50 55 60 age gga tcc aaa age ggc aac acc gcg age ctg acc att age ggc ctg 240 Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu 65 70 75 80 caa gcg gaa gac gaa gcg gat tat tat tgc cag gct tgg gat aat cag 288 Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gin Ala Trp Asp Asn Gin 85 90 95 ggt atg aag tat gtg ttt ggc ggc ggc acg aag tta acc gtt ctt ggc 336 Gly Met Lys Tyr Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly 100 105 lio cag Gin <210 > 36 <211 > 113 PRT Λ ΓΟ 1-1 (N V humano <400> 36

Asp Ile Ala Leu Thr Gin Pro Ala Ser Vai Ser Gly Ser Pro Gly Gin 15 10 15

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Gly Gly Gly Tyr 20 25 30

Asn Thr Vai Ser Trp Tyr Gin Gin His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45

Met Ile Tyr Tyr Vai His Lys Arg Pro Ser Gly Vai Ser Asn Arg Phe 50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu 65 70 75 80

Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gin Ala Trp Asp Asn Gin 85 90 95

Gly Met Lys Tyr Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly 100 105 110

Gin <210> 37 <211> 345 ¢2:1¾ ADN <213> humano <220> <221> CDS <222> (1) ..(345) <223> Anticorpo-Região-VH; M0R02718 <400> 37 cag gtg caa ttg gtg gaa age ggc ggc ggc ctg gtg caa ccg ggc ggc 48

Gin Vai Gin Leu Vai Glu Ser Gly Gly Gly Leu Vai Gin Pro Gly Gly age ctg cgt ctg age tgc gcg gee tcc gga ttt acc ttt aat tet aat 96 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Ser Asn 20 25 30 gct atg cat tgg gtg ege caa gee cct ggg aag ggt etc gag tgg gtg 144 Ala Met Hís Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Vai 35 40 45 age ttt ate tet ggt tet ggt age tet acc tat tat gcg gat age gtg 192 Ser Phe Ile Ser Gly Ser Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Vai 50 55 60 aaa ggc cgt ttt acc att tea cgt gat aat teg aaa aac acc ctg tat 240 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 ctg caa atg aac age ctg cgt gcg gaa gat acg gee gtg tat tat tgc 288 Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 90 95 gcg cgt ggt tgg ttt ttt gct cat tgg ggc caa ggc acc ctg gtg acg 336 Ala Arg Gly Trp Phe Phe Ala His Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai Thr 100 105 110 gtt age tea 345 vai Ser Ser 115 <210> 38 <211> 115 <5 /> PRT <213> humano

Gin Vai Gin Leu Vai Glu Ser Gly Gly Gly Leu Vai Gin Pro Gly Gly i: S l

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Ser Asn 20 25 30

Ala Met His Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Vai 35 40 45

Ser Phe Ile Ser Gly Ser Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Vai 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Gly Trp Phe Phe Ala His Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai Thr 100 105 110

Vai Ser Ser 115 <210> 39 <211> 327 <212> ADN <213> humano <220>

CDS <222> (1 ) .. (327) <223> Anticorpo-Região-VL; M0R02718 <400> 39 gat ate gtg ctg acc cag age ccg gcg acc ctg age ctg tct ccg ggc 48 Asp Ile Val Leu Thr Gin Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 gaa cgt gcg acc ctg age tgc aga gcg age cag tct ggt cgt ggt aat 96 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Gly Arg Gly Asn 20 25 30 ctg gct tgg tac cag cag aaa cca ggt caa gea ccg cgt cta tta att 144 Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu ile 35 40 45 tat gat gct tct aat cgt gea act ggg gtc ccg gcg cgt ttt ggc 192 Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 tct gga tcc ggc acg gat ttt acc ctg acc att age age ctg gaa cct 240 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 gaa gac ttt gcg gtt tat tat tgc ttt cag tat tct tct gtt cct ctt 288 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Phe Gin Tyr Ser Ser Val Pro Leu 85 90 95 acc ttt ggc cag ggt acg aaa gtt gaa att aaa cgt acg 327 Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu ile Lys Arg Thr 100 105 <210> 40 <211> 109 <212> PRT <213> humano <·>ΐ .¾

Asp Ile Vai Leu Thr Gin Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Gly Arg Gly Asn 20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Vai Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Vai Tyr Tyr Cys Phe Gin Tyr Ser Ser Vai Pro Leu 85 90 95

Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Vai Glu Ile Lys Arg Thr 100 105 <210> 41 <211> 342 <211> ADN <213> humano <220> <221> CDS <222> (1)..(342) <223> Anticorpo-Região-VH; M0R02721 < 4 0 0 > 41 cag gtg caa ttg gtt cag age ggc gcg gaa gtg aaa aaa ccg ggc gaa 48

Gin Vai Gin Leu Vai Gin Ser Gly Ala Glu Vai Lys Lys Pro Gly Glu 1$ age ctg aaa att age tgc aaa ggt tcc gga tat tcc ttt act tet tat 96 Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 tat att aat tgg gtg ege cag atg cct ggg aag ggt ctc gag tgg atg 144 Tyr Ile Asn Trp Val Arg Gin Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 ggc att ate tat ccg tet act age cgt acc att tat tet ccg age ttt 192 Gly ile Ile Tyr Pro Ser Thr Ser Arg Thr Ile Tyr Ser Pro Ser Phe 50 55 60 cag ggc cag gtg acc att age gcg gat aaa age att age acc gcg tat 240 Gin Gly Gin Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 ctt caa tgg age age ctg aaa gcg age gat acg gee atg tat tat tgc 288 Leu Gin Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 gcg cgt tat cat ggt gct ttt tgg ggc caa ggc acc ctg gtg acg gtt 336 Ala Arg Tyr His Gly Ala Phe Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 100 105 110 age tea M3.

Ser Ser <210> 42 <211> 114 <212> PRT <213> humano <4C;-o> 42

Gin Vai Gin Leu Vai Gin Ser Gly Ala Glu Vai Lys Lys Pro Gly Glu 15 10 15

Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr 20 25 30

Tyr Ile Asn Trp Vai Arg Gin Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45

Gly Ile Ile Tyr Pro Ser Thr Ser Arg Thr Ile Tyr Ser Pro Ser Phe 50 55 60

Gin Gly Gin Vai Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Tyr His Gly Ala Phe Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai Thr Vai 100 105 110

Ser Ser <210> 43 <211> 342 <212> ADN <213> humano <220>

<221> CDS <222> (1 ) .. (342) <223> Anticorpo-Região-VL; M0R02721 < 4 Ο Ο > 43 cag gtg caa 11 g gtt cag age ggc gcg gaa gtg aaa aaa ccg ggc gaa 48 Gin Vai Gin Leu Vai Gin Ser Gly Ala Glu Vai Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 age ctg aaa a 11 age tgc aaa ggt tcc gga t a t tcc ttt act tet t a t 96 Ser Leu Lys 11 e Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 t a t a 11 aat tgg gtg ege cag atg c c t ggg aag ggt c t c gag tgg atg 144 Tyr 11 e Asn Trp Vai Arg Gin Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 ggc a 11 ate t a t ccg te t ac t age cgt acc a 11 t a t t c t ccg age ttt 192 Gly 11 e 11 e Tyr Pro Ser Thr Ser Arg Thr 11 e Tyr Ser Pro Ser Phe 50 55 60 cag ggc cag gtg acc a 11 age gcg gat aaa age a 11 age acc gcg t a t 240 Gin Gly Gin Vai Thr 11 e Ser Ala Asp Lys Ser 11 e Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 c 11 caa tgg age age ctg aaa gcg age gat acg gee atg t a t t a t tgc 288 Leu Gin Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 gcg cgt t a t c at ggt gct ttt tgg ggc caa ggc acc ctg gtg acg gtt 336 Ala Arg Tyr HÍS Gly Ala Phe Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai Thr Vai 100 105 110 age tea Ser Ser

<210> 44 <211> 114 <212> PRT <213> humano <400> 44

Gin Vai Gin Leu Vai Gin Ser Gly 1 5

Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly 20

Tyr Ile Asn Trp Vai Arg Gin Met 35 40

Gly Ile Ile Tyr Pro Ser Thr Ser 50 55

Gin Gly Gin Vai Thr Ile Ser Ala 65 70

Leu Gin Trp Ser Ser Leu Lys Ala 85

Ala Arg Tyr His Gly Ala Phe Trp 100

Ala Glu Vai Lys Lys Pro Gly Glu 10 15

Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr 25 30

Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 45

Arg Thr II e Tyr Ser Pro Ser Phe 60

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Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 90 95

Gly Gin Gly Thr Leu Vai Thr Vai 105 110

Ser Ser <210> 45 <211 > 339 <212> ADN <213 > humano <220> CDS <222> (1)..(339 ΗΡΗβΜΜΜ»! '·· <' <:·· * *;> £>· st.lví ‘rp*· Kíípi Aò~\ rtU 1 .· > <|iDí .> =v cag gtg caa ttg gtg gaa age ggc ggc ggc ctg gtg caa ccg ggc ggc 48 Gin V Vai Gin Leu Vai V Glu Ser Gly Gly Gly Leu vai Gin Pro Gly Gly age ctg cgt ctg age tgc gcg gee tcc gga ttt acc ttt tet tet aat 96 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Asn 20 25 30 gct att cat tgg gtg ege caa gee cct ggg aag ggt ctc gag tgg gtg 144 Ala Ile His Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Vai 35 40 45 age tet ate tet ggt tet ggt age aat acc tat tat gcg gat age gtg 192 Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Vai 50 55 60 aaa ggc cgt ttt acc att tca cgt gat aat teg aaa aac acc ctg tat 240 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 ctg caa atg aac age ctg cgt gcg gaa gat acg gee gtg tat tat tgc 288 Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 90 95 gcg cgt ttt att gct tet tgg ggc caa ggc acc ctg gtg acg gtt age 336 Ala Arg Phe Ile Ala Ser Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai Thr Vai Ser 100 105 110 tca Ser

<211> 113 <212> PRT <213> humano ' 400 > 4«

Gin Vai Gin Leu Vai Glu Ser Gly

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 20

Ala Ile His Trp Vai Arg Gin Ala 35 40

Ser Ser ile Ser Gly Ser Gly Ser 50 55

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 65 70

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Ala Arg Phe Ile Ala Ser Trp Gly 100

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Asp Ile Vai Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser Leu Pro Vai Thr Pro Gly

Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg 20

Asn Gly Tyr Thr Asp Leu Asn Trp 35 40

Pro Gin Leu Leu Ile Tyr Leu Gly 50 55

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser 65 70

Ser Arg Vai Glu Ala Glu Asp Vai 85

Ser Asn Phe Pro Phe Thr Phe Gly 100

Ser Ser Gin Ser Leu Vai His Ser 25 30

Tyr Leu Gin Lys Pro Gly Gin Ser 45

Ser Tyr Arg Ala Ser Gly Vai Pro 60

Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 75 80

Gly Vai Tyr Tyr Cys Gin Gin Tyr 90 95

Gin Gly Thr Lys Vai Glu Ile Lys 105 110

Arg Thr <210> 49 <211> 336 <212> ADN <213> humano <220> <221> CDS <222> (1) .. (336) <223> Anticorpo-Região-VL; MORO3055 <400> 49 gat ate gtg ctg acc cag ccg cct tea gtg agt ggc gea cca ggt cag 48 Asp Ile Vai Leu Thr Gin Pro Pro Ser Vai Ser Gly Ala Pro Gly Gin 1 5 10 15 cgt gtg acc ate teg tgt age ggc age age age aac att ggt tet aat 96 Arg Vai Thr He Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30 act gtg cgt tgg tac cag cag ttg ccc ggg acg gcg ccg aaa ctt ctg 144 Thr Vai Arg Trp Tyr Gin Gin Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 att tat tet aat aat aag cgt ccc tea ggc gtg ccg gat cgt ttt age 192 Ile Tyr Ser Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Vai Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 gga tcc aaa age ggc acc age gcg age ctt gcg att acg ggc ctg caa 240 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gin 65 70 75 80 age gaa gac gaa gcg gat tat tat tgc cag gct tgg act cgt gct cat 288 Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gin Ala Trp Thr Arg Ala His 85 90 95 cgt tat cct gtg ttt ggc ggc ggc acg aag tta acc gtt ctt ggc cag 336 Arg Tyr Pro Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly Gin 100 105 110 <210> 50 <211> 112 <212> PRT <213> humano <400> 50

Asp Ile Vai Leu Thr Gin Pro Pro Ser Vai Ser Gly Ala Pro Gly Gin 15 10 15

Arg Vai Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30

Thr Vai Arg Trp Tyr Gin Gin Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45

Ile Tyr Ser Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Vai Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gin 65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gin Ala Trp Thr Arg Ala His 85 90 95

Arg Tyr Pro Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly Gin 100 105 110 <210> 51 <211> 333 < 212 > ADN <213> humano

<220> <221> CDS €2Í> UK. |333> <223> MO&03DS3 < 4 Ο Ο > 51 gat ate gtg ctg acc cag ccg cct tc a gtg agt ggc gea cca ggt cag 48 Asp Ile Vai Leu Thr Gin Pro Pro Ser Vai Ser Gly Ala Pro Gly Gin 1 5 10 15 cgt gtg acc ate teg tgt age ggc age age age aac a 11 ggt tet aat 96 Arg Vai Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30 act gtg cgt tgg tac cag cag ttg ccc ggg acg gcg ccg aaa c 11 ctg 144 Thr Vai Arg Trp Tyr Gin Gin Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 a 11 t a t t c t aat aat aag cgt ccc tc a ggc gtg ccg gat cgt ttt age 192 Ile Tyr Ser Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Vai Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 gga tcc aaa age ggc acc age gcg age c 11 gcg a 11 acg ggc ctg caa 240 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gin 65 70 75 80 age gaa gac gaa gcg gat t a t t a t tgc tet t c t t a t gat act cag gtt 288 Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Asp Thr Gin Vai 85 90 95 act cgt gtg ttt ggc ggc ggc acg aag 11 a acc gtt ctt ggc cag 333 Thr Arg Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly Gin 100 105 110

<210> 52 <211> 111 <212> FRT < 213 > humano <400> 52

Asp Ile Vai Leu Thr Gin Pro Pro Ser Vai Ser Gly Ala Pro Gly Gin 15 10 15

Arg Vai Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30

Thr Vai Arg Trp Tyr Gin Gin Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45

Ile Tyr Ser Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Vai Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gin 65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Asp Thr Gin Vai 85 90 95

Thr Arg Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly Gin 100 105 110 <21Q> 53 < 211 > 333 <212> ADN <213> humano

<220> <221> CDS ·£%ΪΊ& Η.} . . ;323$

<223·· MOB23STS <400> 53 gat ate gtg ctg acc cag ccg cct tea gtg agt ggc gea cca ggt cag 48 Asp Ile Vai Leu Thr Gin Pro Pro Ser Vai Ser Gly Ala Pro Gly Gin 1 5 10 15 cgt gtg acc ate teg tgt age ggc age age age aac att ggt tet aat 96 Arg Vai Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30 act gtg cgt tgg tac cag cag ttg ccc ggg acg gcg ccg aaa ctt ctg 144 Thr Vai Arg Trp Tyr Gin Gin Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 att tat tet aat aat aag cgt ccc tea ggc gtg ccg gat cgt ttt age 192 Ile Tyr Ser Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Vai Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 gga tcc aaa age ggc acc age gcg age ctt gcg att acg ggc ctg caa 240 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gin 65 70 75 80 age gaa gac gaa gcg gat tat tat tgc cag tet tgg gat cct cgt tet 288 Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gin Ser Trp Asp Pro Arg Ser 85 90 95 ttt act gtg ttt ggc ggc ggc acg aag tta acc gtt ctt ggc cag 333 Phe Thr Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly Gin 100 105 110 <211> 111 <212> PRT <213 > humano < 4 0 0 > 54 Asp Ile Vai Leu Thr Gin Pro Pro 1 5

Arg Vai Thr Ile Ser Cys Ser Gly 20

Thr Vai Arg Trp Tyr Gin Gin Leu 35 40

Ile Tyr Ser Asn Asn Lys Arg Pro 50 55

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala 65 70

Ser Vai Ser Gly Ala Pro Gly Gin 10 15

Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 25 30

Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 45

Ser Gly Vai Pro Asp Arg Phe Ser 6 0

Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gin 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gin Ser Trp Asp Pro Arg Ser 85 90 95

Phe Thr Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly Gin 100 105 110 <210> 55 <211> 330 <212> ADN <213> humano <220> cds <222> (1)..(330) <223> Anticorpo-Região-VL; MORO3069 <4CKV- 55 gat ate gtg ctg acc cag ccg c c t tc a gtg agt ggc gea cca ggt cag 48 Asp 11 e Vai Leu Thr Gin Pro Pro Ser Vai Ser Gly Ala Pro Gly Gin 1 5 10 15 cgt gtg acc ate teg tgt age ggc age age age aac a 11 ggt t c t aat 96 Arg Vai Thr 11 e Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30 ac t gtg cgt tgg t ac cag cag ttg ccc ggg acg gcg ccg aaa c 11 ctg 144 Thr Vai Arg Trp Tyr Gin Gin Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 a 11 t a t t c t aat aat aag cgt ccc tc a ggc gtg ccg gat cgt ttt age 192 11 e Tyr Ser Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Vai Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 gga tc c â ci â age ggc acc age gcg age c 11 gcg a 11 acg ggc ctg caa 240 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gin 65 70 75 80 age gaa gac gaa gcg gat t a t t a t tgc tgg ac t ggt atg t c t t a t c at 288 Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Trp Thr Gly Met Ser Tyr His 85 90 95 ttt gtg ttt ggc ggc ggc acg aag 11 a acc gtt c 11 ggc cag ;·£ Phe Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly Gin 100 105 110

<210> 56 <211> 110 PRT <213> humano <400> 56

Asp Ile Vai Leu Thr Gin Pro Pro 1 5

Arg Vai Thr Ile Ser Cys Ser Gly 20

Thr Vai Arg Trp Tyr Gin Gin Leu 35 40

Ile Tyr Ser Asn Asn Lys Arg Pro 50 55

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala 65 70

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr 85

Phe Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys 100

Ser Vai Ser Gly Ala Pro Gly Gin 10 15

Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 25 30

Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 45

Ser Gly Vai Pro Asp Arg Phe Ser 60

Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gin 75 80

Cys Trp Thr Gly Met Ser Tyr His 90 95

Leu Thr Vai Leu Gly Gin 105 110 <210> 57 <211> 333 <212> ADN <213> humano <220> <221> CDS <222> (1) . . (333) <223> Anticorpo-Região-VL; MORO3071 <4Q0> 57 gat ate gtg ctg acc cag ccg cct tea gtg agt ggc gea cca ggt cag 48

Asp Ile Vai Leu Thr Gin Pro Pro Ser Vai Ser Gly Ala Pro Gly Gin 1 5 10 15 cgt gtg acc ate teg tgt age ggc age age age aac att ggt tet aat 96 Arg Vai Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30 act gtg cgt tgg tac cag cag ttg ccc ggg acg gcg ccg aaa ctt ctg 144 Thr Vai Arg Trp Tyr Gin Gin Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 att tat tet aat aat aag cgt ccc tea ggc gtg ccg gat cgt ttt age 192 Ile Tyr Ser Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Vai Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 gga tcc aaa age ggc acc age gcg age ctt gcg att acg ggc ctg caa 240 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gin 65 70 75 80 age gaa gac gaa gcg gat tat tat tgc ctt gct tat att cag tet aag 288 Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Leu Ala Tyr Ile Gin Ser Lys 85 90 95 ggt cat gtg ttt ggc ggc ggc acg aag tta acc gtt ctt ggc cag jS Gly His Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly Gin 100 105 110 <210> 58 <211> 111 <2 VI> PRT <213> humano <400> 58

Asp Ile Vai Leu Thr Gin Pro Pro Ser Vai Ser Gly Ala Pro Gly Gin 5 10 15 1 iMpttiiinnnmimniiTi

Arg Vai Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30

Thr Vai Arg Trp Tyr Gin Gin Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45

Ile Tyr Ser Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Vai Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gin 65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Leu Ala Tyr Ile Gin Ser Lys 85 90 95

Gly His Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly Gin 100 105 lio <210> 59 <211> 339 <212> ADN <21 :-i> humano <220> <221> CDS <222> (1)..(339) <223> Anticorpo-Região-VL; MORO3064

<40Q> 59 gat ate gea ctg acc cag cca gct tea gtg age ggc tea cca ggt cag 48 Asp Ile Ala Leu Thr Gin Pro Ala Ser Vai Ser Gly Ser Pro Gly Gin 1 5 10 15 age att acc ate teg tgt acg ggt act age age gat ggt ggt ggt tat 96

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Gly Gly Gly Tyr 20 25 30 aat act gtg tet tgg tac cag cag cat ccc ggg aag gcg ccg aaa ctt 144 Asn Thr Vai Ser Trp Tyr Gin Gin His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45 atg att tat tat gtt cat aag cgt ccc tea ggc gtg age aac cgt ttt 192 Met Ile Tyr Tyr Vai His Lys Arg Pro Ser Gly Vai Ser Asn Arg Phe 50 55 60 age gga tcc aaa age ggc aac acc gcg age ctg acc att age ggc ctg 240 Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu 65 70 75 80 caa gcg gaa gac gaa gcg gat tat tat tgc cag tet tgg gat ctt ctt 288 Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gin Ser Trp Asp Leu Leu 85 90 95 gct cct tet gtt gtg ttt ggc ggc ggc acg aag tta acc gtt ctt ggc 336 Ala Pro Ser Vai Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly 100 105 110 cag 33#

Gin <210> 60 <211> 113 <212> PRT <213> humano < 4 0 0 > 6 0

Asp Ile Ala Leu Thr Gin Pro Ala Ser Vai Ser Gly Ser Pro Gly Gin 5 10 15 1

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Gly Gly Gly Tyr 20 25 30

Asn Thr Vai Ser Trp Tyr Gin Gin His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45

Met Ile Tyr Tyr Vai His Lys Arg Pro Ser Gly Vai Ser Asn Arg Phe 50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu 65 70 75 80

Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gin Ser Trp Asp Leu Leu 85 90 95

Ala Pro Ser Vai Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly 100 105 110

Gin <210> 61 <211> 339 <212> ADN <213> humano <220> <221> CDS <222> (1) .. (339) <223> Anticorpo-Região-VL; MORO3062 <400> 61 gat ate gea ctg acc cag cca gct tea gtg age ggc tea cca ggt cag 48

Asp Ile Ala Leu Thr Gin Pro Ala Ser Vai Ser Gly Ser Pro Gly Gin 1 5 10 15 96 age att acc ate teg tgt acg ggt act age age gat ggt ggt ggt tat Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Gly Gly Gly Tyr 20 25 30 aat act gtg tet tgg tac cag cag cat ccc ggg aag gcg ccg aaa ctt Asn Thr Vai Ser Trp Tyr Gin Gin His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45 atg att tat tat gtt cat aag cgt ccc tea ggc gtg age aac cgt ttt Met Ile Tyr Tyr Vai His Lys Arg Pro Ser Gly Vai Ser Asn Arg Phe 50 55 60 age gga tcc aaa age ggc aac acc gcg age ctg acc att age ggc ctg Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu 65 70 75 80 caa gcg gaa gac gaa gcg gat tat tat tgc cag tet tgg gat ctt tet Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gin Ser Trp Asp Leu Ser 85 90 95 gtt cat cag gtt gtg ttt ggc ggc ggc acg aag tta acc gtt ctt ggc Vai His Gin Vai Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly 100 105 110 144 192 240 288 336 cag

Gin <210> 62 <211> 113 <215> PRT <213> humano <400 62

Asp Ile Ala Leu Thr Gin Pro Ala Ser Vai Ser Gly Ser Pro Gly Gin

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Gly Gly Gly Tyr 20 25 30

Asn Thr Vai Ser Trp Tyr Gin Gin His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45

Met Ile Tyr Tyr Vai His Lys Arg Pro Ser Gly Vai Ser Asn Arg Phe 50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu 65 70 75 80

Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gin Ser Trp Asp Leu Ser 85 90 95

Vai His Gin Vai Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly 100 105 110

Gin <210> 63 «ms 336 <212> ADN <213> humano <220> <221> CDS <222> (1).. (336) <223> Derivado de MOR03055: Anticorpo-Região-VH; M0R03243 :x .*·

It****t****iíl<<l**l<<<····· cag gtg caa ttg caa gaa agt ggt ccg ggc ctg gtg aaa ccg ggc gaa 48 Gin Vai Gin Leu Gin Glu Ser Gly Pro Gly Leu Vai Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 acc ctg age ctg acc tgc acc gtt tcc gga ggc age att tct tct tat 96 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Vai Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr 20 25 30 tat tgg tct tgg att ege cag gee cct ggg aag ggt ctc gag tgg att 144 Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 ggc gag att cat cgt ggt ggt tat act cag tat aat cct tct ctt aag 192 Gly Glu Ile His Arg Gly Gly Tyr Thr Gin Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60 tct cgg gtc acc att age gtt gat act teg aaa aac cag ttt age ctg 240 Ser Arg Vai Thr Ile Ser Vai Asp Thr Ser Lys Asn Gin Phe Ser Leu 65 70 75 80 aaa ctg age age gtg acg gcg gcg gat acg gee gtg tat tat tgc gcg 288 Lys Leu Ser Ser Vai Thr Ala Ala Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 cgt ttt ttt gat gtt tgg ggc caa ggc acc ctg gtg acg gtt age tea 336 Arg Phe Phe Asp Vai Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai Thr Vai Ser Ser 100 105 110 <210> 64 <211> 112 < 212 > PRT <213> humano <400> 64

Gin Vai Gin Leu Gin Glu Ser Gly Pro Gly Leu Vai Lys Pro Gly Glu

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Vai Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr 20 25 30

Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45

Gly Glu Ile His Arg Gly Gly Tyr Thr Gin Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60

Ser Arg Vai Thr Ile Ser Vai Asp Thr Ser Lys Asn Gin Phe Ser Leu 65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Vai Thr Ala Ala Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Phe Phe Asp Vai Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai Thr Vai Ser Ser 100 105 HO <2I8> 65 ¢2:1.1:5- 336 C:i2> ADN <213> humano <220> <221> CDS <222> (1)..(336) <223> Derivado de MOR03055: Anticorpo-Região-VL; M0R03243 gat ate gtg ctg acc cag ccg cct tea gtg agt ggc gea cca ggt cag 48

Asp Ile Vai Leu Thr Gin Pro Pro Ser Vai Ser Gly Ala Pro Gly Gin

96 cgt gtg acc ate teg tgt age ggc age Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser 20 25 act gtg cgt tgg tac cag cag ttg ccc Thr Val Arg Trp Tyr Gin Gin Leu Pro 35 40 att tat tet aat aat aag cgt ccc tea Ile Tyr Ser Asn Asn Lys Arg Pro Ser 50 55 gga tcc aaa age ggc acc age gcg age Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser 65 70 age gaa gac gaa gcg gat tat tat tgc Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys 85 cgt tat cct gtg ttt ggc ggc ggc acg Arg Tyr Pro Val Phe Gly Gly Gly Thr 100 105 age age aac att ggt tet aat Ser Ser Asn ile Gly Ser Asn 30 ggg acg gcg ccg aaa ctt ctg 144 Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 45 ggc gtg ccg gat cgt ttt age 192 Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 60 ctt gcg att acg ggc ctg caa 240 Leu Ala ile Thr Gly Leu Gin 75 80 cag gct tgg act cgt gct cat 288 Gin Ala Trp Thr Arg Ala His 90 95 aag tta acc gtt ctt ggc cag 336 Lys Leu Thr Val Leu Gly Gin 110 <210> 66 <211> 112 <212 > PRT <213> humano <400> 66

Asp Ile Vai Leu Thr Gin Pro Pro Ser Vai Ser Gly Ala Pro Gly Gin 15 10 15

Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn

Arg Vai Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser 11

Thr Vai Arg Trp Tyr Gin Gin Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45

Ile Tyr Ser Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Vai Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gin 65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gin Ala Trp Thr Arg Ala His 85 90 95

Arg Tyr Pro Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly Gin 100 105 110

<210> 67 <£11> 336 ADN <213> humano <220>

<221> CDS <222> (1) .. (336) <223> Derivado de MOR03069; Anticorpo-Região-VH; M0R03245 6 7 cag gtg caa ttg caa gaa agt ggt ccg ggc ctg gtg aaa ccg ggc gaa 48

Gin Vai Gin Leu Gin Glu Ser Gly Pro Gly Leu Vai Lys Pro Gly Glu 15 10 15 acc ctg age ctg acc tgc acc gtt tcc gga ggc age att tet tet tat 96

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Vai Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr 20 25 30 t a t tgg t c t tgg a 11 ege cag gee c c t ggg aag ggt c t c gag tgg att 144 Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 ggc gtt a 11 c at aag tgg ggt ttt ac t aat t a t aat cct tet c tt aag 192 Gly Vai 11 e His Lys Trp Gly Phe Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60 t c t cgg gtc acc a 11 age gtt gat a c t teg aaa aac cag ttt age ctg 240 Ser Arg Vai Thr Ile Ser Vai Asp Thr Ser Lys Asn Gin Phe Ser Leu 65 70 75 80 aaa ctg age age gtg acg gcg gcg gat acg gee gtg t a t t a t tgc gcg 288 Lys Leu Ser Ser Vai Thr Ala Ala Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 cgt ttt ttt gat gtt tgg ggc caa ggc acc ctg gtg acg gtt age tc a 336 Arg Phe Phe Asp Vai Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai Thr Vai Ser Ser 100 105 110 <210> 68 <211> 112 <212> FRT <213> humano <400> 68

Gin Vai Gin Leu Gin Glu Ser Gly Pro Gly Leu Vai Lys Pro Gly 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Vai Ser Gly Gly Ser 11 e Ser Ser 20 25 30 113

Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gin Ala 35 40

Gly Vai Ile His Lys Trp Gly Phe 50 55

Ser Arg Vai Thr Ile Ser Vai Asp 65 70

Lys Leu Ser Ser Vai Thr Ala Ala 85

Arg Phe Phe Asp Vai Trp Gly Gin 100

Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 45

Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 60

Thr Ser Lys Asn Gin Phe Ser Leu 75 80

Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys Ala 90 95

Gly Thr Leu Vai Thr Vai Ser Ser 105 110 <210> 69 <211> 330 •ΐ ;?;·:?> adn <213> humano <22 0> cds <222> (1)..(330) <223> Derivado de MOR03069; Anticorpo-Região-VL; MOR03245 ·-·. ··· (5 0> gat ate gtg ctg acc cag ccg cct tea

Asp Ile Vai Leu Thr Gin Pro Pro Ser 1 5 cgt gtg acc ate teg tgt age ggc age

Arg Vai Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser 20 gtg agt ggc gea cca ggt cag 48 Vai Ser Gly Ala Pro Gly Gin ' x. íí 1- v À 2^ age age aac att ggt tet aat 96

Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 30 25

act gtg cgt tgg t ac cag cag ttg ccc ggg acg gcg ccg aaa c 11 ctg 144 Thr Vai Arg Trp Tyr Gin Gin Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 a 11 t a t t c t aat aat aag cgt ccc tc a ggc gtg ccg gat cgt ttt age 192 Ile Tyr Ser Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Vai Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 gga tcc aaa age ggc acc age gcg age c 11 gcg a 11 acg ggc ctg caa 240 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gin 65 70 75 80 age gaa gac gaa gcg gat t a t t a t tgc tgg act ggt atg t c t t a t cat 288 Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Trp Thr Gly Met Ser Tyr His 85 90 95 ttt gtg ttt ggC ggc ggc acg aag 11 a acc gtt c 11 ggc cag Phe Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly Gin 100 105 110 <210> 70 <211> 110 <212> FRT <213> humano <400> 70

Asp 11 e Vai Leu Thr Gin Pro Pro Ser Vai Ser Gly Ala Pro Gly Gin 1 5 10 15 Arg Vai Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30 Thr Vai Arg Trp Tyr Gin Gin Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45

He Tyr Ser Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Vai Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gin 65 70 75 80 Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Trp Thr Gly Met Ser Tyr HÍS 85 90 95 Phe Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly Gin 100 105 110 <210> 71 <211> 354 adn <213> humano <220> <221> CDS <222> (1)..(354) <223> Derivado de MOR03075; Anticorpo-Região-VH; MOR03246 <4 00> 71 cag gtg caa ttg gtt cag age ggc gcg gaa gtg aaa aaa ccg ggc gcg 48 Gin Vai Gin Leu Vai Gin Ser Gly Ala Glu Vai Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 age gtg aaa gtg age tgc aaa gee tcc gga tat acc ttt act ggt ttt 96 Ser Vai Lys Vai Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Phe 20 25 30 tat att aat tgg gtc ege caa gee cct ggg cag ggt ctc gag tgg atg 144 Tyr Ile Asn Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met ggc tgg ate aat ccg tat tet ggc aat acg cgt tac gcg cag aag ttt 192 Gly Trp Ile Asn Pro Tyr Ser Gly Asn Thr Arg Tyr Ala Gin Lys Phe 50 55 60 cag ggc cgg gtg acc atg acc cgt gat acc age att age acc gcg tat 240 Gin Gly Arg Vai Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 atg gaa ctg age age ctg cgt age gaa gat acg gee gtg tat tat tgc 288 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 90 95 gcg cgt tet cct gtt tat tat aag tat gat tat tgg ggc caa ggc acc 336 Ala Arg Ser Pro Vai Tyr Tyr Lys Tyr Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr 100 105 110 ctg gtg acg gtt age tea 1-3:4 Leu Vai Thr Vai Ser Ser 115

<21Q> 72 < 211> 118 PRT <213> humano <400> 72

Gin Vai Gin Leu Vai Gin Ser Gly Ala Glu Vai Lys Lys Pro Gly Ala 15 10 15

Ser Vai Lys Vai Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Phe 20 25 30

Tyr Ile Asn Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45

Gly Trp Ile Asn Pro Tyr Ser Gly Asn Thr Arg Tyr Ala Gin Lys Phe 50 55 60

Gin Gly Arg Vai Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Ser Pro Vai Tyr Tyr Lys Tyr Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr 100 105 110

Leu Vai Thr Vai Ser Ser 115 <210> 73 <211> 333 <212> ADN <213> humano <220>

<221> CDS <222> (1)..(333) <223> Derivado de MOR03075; Anticorpo-Região-VL; M0R03246 <400> 73 gat ate gtg ctg acc cag ccg cct tea gtg agt ggc gea cca ggt cag 48

Asp Ile Vai Leu Thr Gin Pro Pro Ser Vai Ser Gly Ala Pro Gly Gin 15 10 15 cgt gtg acc ate teg tgt age ggc age age age aac att ggt tet aat 96 118 ΗΒΒΒ!ΜΒΒΒ|||ΒΒΒΒΒΒΒΒΒΗΜΜΜΙ11111«»Ι«ΙΙΙΙΙΒΐηΐΙΙΙ1111Ι111Ί1ΊΏ

Arg Vai Thr 11 e Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn 11 e Gly Ser Asn 20 25 30 ac t gtg cgt tgg t ac cag cag ttg ccc ggg acg gcg ccg aaa c 11 ctg 144 Thr Vai Arg Trp Tyr Gin Gin Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 a 11 t a t t c t aat aat aag cgt ccc tc a ggc gtg ccg gat cgt ttt age 192 11 e Tyr Ser Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Vai Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 gga tc c aaa age ggc acc age gcg age c 11 gcg a 11 acg ggc ctg caa 240 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala 11 e Thr Gly Leu Gin 65 70 75 80 age gaa gac gaa gcg gat t a t t a t tgc cag t c t tgg gat c c t cgt t c t 288 Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gin Ser Trp Asp Pro Arg Ser 85 90 95 ttt ac t gtg ttt ggc ggc ggc acg aag 11 a acc gtt c 11 ggc cag 313 Phe Thr Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly Gin 100 105 110 <210> 74 <211> 111 >'2:12> PRT <213> humano <400> 74

Asp 11 e Vai Leu Thr Gin Pro Pro Ser Vai Ser Gly Ala Pro Gly Gin 1 5 10 15 Arg Vai Thr 11 e Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn 11 e Gly Ser Asn 11

Thr Vai Arg Trp Tyr Gin Gin Leu 35 40

Ile Tyr Ser Asn Asn Lys Arg Pro 50 55

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala 65 70

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr 85

Phe Thr Vai Phe Gly Gly Gly Thr 100

Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 45

Ser Gly Vai Pro Asp Arg Phe Ser 60

Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gin 75 80

Cys Gin Ser Trp Asp Pro Arg Ser 90 95

Lys Leu Thr Vai Leu Gly Gin 105 110 <210> 75 <211> 348 <212> ADN <213> humano <220> <zn> CDS <222> (1) ..(348) <223> Derivado de MOR03062; Anticorpo-Região-VH; M0R03251 <400> 75 cag gtg caa ttg gtg gaa age ggc ggc ggc ctg gtg caa ccg ggc ggc 48

Gin Vai Gin Leu Vai Glu Ser Gly Gly Gly Leu Vai Gin Pro Gly Gly 15 10 15 age ctg cgt ctg age tgc gcg gee tcc gga ttt acc ttt tet tet tat 96

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr •ϊί’ί ggt atg cat tgg gtg cgc Gly Met His Trp Vai Arg 35 age gtt att tet aat atg Ser Vai Ile Ser Asn Met 50 aag ggt cgt ttt acc att Lys Gly Arg Phe Thr Ile 65 70 caa gee cct ggg aag ggt Gin Ala Pro Gly Lys Gly 40 tet tat act att tat tat Ser Tyr Thr Ile Tyr Tyr 55 60 tea cgt gat aat teg aaa Ser Arg Asp Asn Ser Lys 75 etc gag tgg gtg 144

Leu Glu Trp Vai 45 gct gat tet gtt 192

Ala Asp Ser Vai aac acc ctg tat 240

Asn Thr Leu Tyr 80 ctg caa atg aac age ctg cgt gcg gaa gat acg gee gtg tat tat tgc 288

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 90 95 gcg cgt aat aag gtt ggt ttt gat gtt tgg ggc caa ggc acc ctg gtg 336

Ala Arg Asn Lys Vai Gly Phe Asp Vai Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai 100 105 110 acg gtt age tea 141

Thr Vai Ser Ser 115 <210> 76 <211> 116 <2L2> PRT <213> humano <4m> 76

Gin Vai Gin Leu Vai Glu Ser Gly Gly Gly Leu Vai Gin Pro Gly Gly 1 5 io 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Gly Met His Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Vai 35 40 45

Ser Vai Ile Ser Asn Met Ser Tyr Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Vai 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asn Lys Vai Gly Phe Asp Vai Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai, 100 105 110

Thr Vai Ser Ser 115 <210> 77 <211> 339 <212> ADN <213> humano <220> <221> CDS <222> (1) ..(339) <223> Derivado de MOR03062; Anticorpo-Região-VL; M0R03251 <400> 77 gat ate gea ctg acc cag cca gct tea gtg age ggc tea cca ggt cag 48

Asp Ile Ala Leu Thr Gin Pro Ala Ser Vai Ser Gly Ser Pro Gly Gin 1 5 10 15 age att acc ate teg tgt acg ggt act age age gat ggt ggt ggt tat 96 Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Gly Gly Gly Tyr 20 25 30 aat act gtg tet tgg tac cag cag cat ccc ggg aag gcg ccg aaa ctt 144 Asn Thr Vai Ser Trp Tyr Gin Gin His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45 atg att tat tat gtt cat aag cgt ccc tea ggc gtg age aac cgt ttt 192 Met Ile Tyr Tyr Vai His Lys Arg Pro Ser Gly Vai Ser Asn Arg Phe 50 55 60 age gga tcc aaa age ggc aac acc gcg age ctg acc att age ggc ctg 240 Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu 65 70 75 80 caa gcg gaa gac gaa gcg gat tat tat tgc cag tet tgg gat ctt tet 288 Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gin Ser Trp Asp Leu Ser 85 90 95 gtt cat cag gtt gtg ttt ggc ggc ggc acg aag tta acc gtt ctt ggc 336 Vai His Gin Vai Vai Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly 100 105 110 cag

Gin

<210> 78 <211> 113 <21£> PRT <213> humano <400> 78

Asp Ile Ala Leu Thr Gin Pro Ala 1 5

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly 20

Asn Thr Vai Ser Trp Tyr Gin Gin 35 40

Met Ile Tyr Tyr Vai His Lys Arg 50 55

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr 65 70

Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr 85

Vai His Gin Vai Vai Phe Gly Gly 100

Ser Vai Ser Gly Ser Pro Gly Gin 10 15

Thr Ser Ser Asp Gly Gly Gly Tyr 25 30

His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 45

Pro Ser Gly Vai Ser Asn Arg Phe 60

Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu 75 80

Tyr Cys Gin Ser Trp Asp Leu Ser 90 95

Gly Thr Lys Leu Thr Vai Leu Gly 105 110

Gin

<210> 79 <211> 348 ADN <213> humano <22 0>

<221* CDS <222> (1) .. (348) < 4 Ο Ο > 79 cag gtg caa ttg Gin Vai Gin Leu 1 age ctg cgt ctg Ser Leu Arg Leu 20 ggt atg cat tgg Gly Met His Trp 35 age gtt att tet Ser Val Ile Ser 50 aag ggt cgt ttt Lys Gly Arg Phe 65 ctg caa atg aac Leu Gin Met Asn gcg cgt aat aag Ala Arg Asn Lys 100 :10-¾ Osíi; Í&E8- gtg gaa age ggc ggc Val Glu Ser Gly Gly 5 age tgc gcg gee tcc Ser Cys Ala Ala Ser 25 gtg ege caa gee cct Val Arg Gin Ala Pro 40 aat tat tet tgg cat Asn Tyr Ser Trp His 55 acc att tea cgt gat Thr Ile Ser Arg Asp 70 age ctg cgt gcg gaa Ser Leu Arg Ala Glu 85 gtt ggt ttt gat gtt Val Gly Phe Asp Val 105 ggc ctg gtg caa Gly Leu val Gin 10 gga ttt acc ttt Gly Phe Thr Phe ggg aag ggt etc Gly Lys Gly Leu 45 att tat tat gct Ile Tyr Tyr Ala 60 aat teg aaa aac Asn Ser Lys Asn 75 gat acg gee gtg Asp Thr Ala Val 90 tgg ggc caa ggc Trp Gly Gin Gly ccg ggc ggc 48 Pro Gly Gly 15 tet tet tat 96 Ser Ser Tyr 30 gag tgg gtg 144 Glu Trp Val gat tet gtt 192 Asp Ser Val acc ctg tat 240 Thr Leu Tyr 80 tat tat tgc 288 Tyr Tyr Cys 95 acc ctg gtg 336 Thr Leu Val 110 acg gtt age tea Thr Vai Ser Ser 115

<211> 116 <212> PRT <213> humano <400> 80

Gin Vai Gin Leu Vai Glu Ser Gly Gly Gly Leu Vai Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Gly Met His Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Vai 35 40 45

Ser Vai Ile Ser Asn Tyr Ser Trp His Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Vai 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asn Lys Vai Gly Phe Asp Vai Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai 100 105 110

Thr Vai Ser Ser 115 <210> 81 <211> 348 <212> ADN <213> humano <2 2 Ο >

<221> CDS <222> (1)..(348) <223> Anticorpo-Região-VH; M0R03253

<10δ> SI cag gtg caa ttg gtg gaa age ggc ggc ggc ctg gtg caa ccg ggc ggc 48 Gin Vai Gin Leu Vai £·. Glu Ser Gly Gly Gly :*· ÍU‘ Leu Val Gin Pro Gly X; Λ' Gly age ctg cgt ctg age tgc gcg gee tcc gga ttt acc ttt tet tet tat 96 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 ggt atg cat tgg gtg ege caa gee cct ggg aag ggt ctc gag tgg gtg 144 Gly Met His Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 age gtt att tet aat atg ggt ttt gag att tat tat gct gat tet gtt 192 Ser Vai Ile Ser Asn Met Gly Phe Glu Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 aag ggt cgt ttt acc att tea cgt gat aat teg aaa aac acc ctg tat 240 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 ctg caa atg aac age ctg cgt gcg gaa gat acg gee gtg tat tat tgc 288 Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 gcg cgt aat aag gtt ggt ttt gat gtt tgg ggc caa ggc acc ctg gtg 336 Ala Arg Asn Lys Vai Gly Phe Asp val Trp Gly Gin Gly Thr Leu val 100 105 110 acg gtt age tea Thr Vai Ser Ser <210> 82 <211> 116 €212> PRT <213> humano <400> 82

Gin Vai Gin Leu Vai Glu Ser Gly Gly Gly Leu Vai Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Gly Met His Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Vai 35 40 45

Ser Vai Ile Ser Asn Met Gly Phe Glu Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Vai 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asn Lys Vai Gly Phe Asp Vai Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai 100 105 110

Thr Vai Ser Ser 115

<211> 348 <212 > ADN > humano <2 2 0 > <221> CDS <222> (1) .. (348) <223> Anticorpo-Região-VH; M0R03255 <400> 83 cag gtg caa ttg gtg gaa age ggc ggc ggc ctg gtg caa ccg ggc ggc 48 Gin Vai Gin Leu Vai Glu Ser Gly Gly Gly Leu Vai Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15 age ctg cgt ctg age tgc gcg gee tcc gga ttt acc ttt tet tet tat 96 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 ggt atg cat tgg gtg ege caa gee cct ggg aag ggt etc gag tgg gtg 144 Gly Met His Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Vai 35 40 45 age gtt att tet aat cgt tet tet tat att tat tat gct gat tet gtt 192 Ser Val Ile Ser Asn Arg Ser Ser Tyr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 aag ggt cgt ttt acc att tea cgt gat aat teg aaa aac acc ctg tat 240 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 ctg caa atg aac age ctg cgt gcg gaa gat acg gee gtg tat tat tgc 288 Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 336 gcg cgt aat aag gtt ggt ttt gat gtt tgg ggc caa ggc acc ctg gtg

Ala Arg Asn Lys Vai Gly Phe Asp Vai Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai 100 105 110 acg gtt age tea Thr Vai Ser Ser 115 <210> 84 <211> 116 <212> PRT <213> humano <400> 84

Gin Vai Gin Leu Vai Glu Ser Gly Gly Gly Leu Vai Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Gly Met His Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Vai 35 40 45

Ser Vai Ile Ser Asn Arg Ser Ser Tyr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Vai 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asn Lys Vai Gly Phe Asp Vai Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai 100 105 110

Thr Vai Ser Ser 115 <210> 85 <211> 348 <212> ADN <213> humano <220> <221> CDS <222> (1)..(348) <223> Anticorpo-Região-VH; M0R03257 <400> 85 cag gtg caa ttg gtg gaa age ggc ggc ggc ctg gtg caa ccg ggc ggc 48 Gin Vai Gin Leu Vai Glu Ser Gly Gly Gly Leu Vai Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15 age ctg cgt ctg age tgc gcg gee tcc gga ttt acc ttt tet tet tat 96 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 ggt atg cat tgg gtg ege caa gee cct ggg aag ggt etc gag tgg gtg 144 Gly Met His Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Vai 35 40 45 age gtt att tet aat cgt ggt aat tat att tat tat gct gat tet gtt 192 Ser Vai Ile Ser Asn Arg Gly Asn Tyr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Vai 50 55 6 0 aag ggt cgt ttt acc att tea cgt gat aat teg aaa aac acc ctg tat 240 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 ctg caa atg aac age ctg cgt gcg gaa gat acg gee gtg tat tat tgc 288

13 X

Ala Arg Asn Lys Vai Gly Phe Asp Vai Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai

100 105 HO acg gtt age tea

Thr Vai Ser Ser <210> 86 <211> 116 <212> PRT <213> humano < 4 0 0 > 86

Gin Vai Gin Leu Vai Glu Ser Gly Gly Gly Leu Vai Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Gly Met His Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Vai 35 40 45

Ser Vai Ile Ser Asn Arg Gly Asn Tyr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Vai 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asn LyS Vai Gly Phe Asp Vai Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai 100 105 110

Thr Vai Ser Ser 115 <210> 87 <211> 348 <212> ADN <213> humano <220> <221> CDS <222> (1)..(348) <223> Derivado de MOR03075; Anticorpo-Região-VH; M0R03258 <4 00> 87 cag gtg caa ttg gtg gaa age ggc ggc ggc ctg gtg caa ccg ggc ggc 48 Gin Vai Gin Leu Vai Glu Ser Gly Gly Gly Leu Vai Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15 age ctg cgt ctg age tgc gcg gee tcc gga ttt acc ttt tet tet tat 96 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 ggt atg cat tgg gtg ege caa gee cct ggg aag ggt etc gag tgg gtg 144 Gly Met His Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Vai 35 40 45 age gtt att tet aat cag tet aat tat att tat tat gct gat tet gtt 192 Ser Vai Ile Ser Asn Gin Ser Asn Tyr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Vai 50 55 60 aag ggt cgt ttt acc att tea cgt gat aat teg aaa aac acc ctg tat 240

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 65 70 ctg caa atg aac age ctg cgt gcg Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala 85 gcg cgt aat aag gtt ggt ttt gat Ala Arg Asn Lys Vai Gly Phe Asp 100 acg gtt age tea Thr Vai Ser Ser 115 <210> 85 3 <211> 116 PRT ?: 'J1: humano <400> 85 3 Gin Vai Gin Leu Vai Glu Ser Gly 1 5 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 20 Gly Met His Trp Vai Arg Gin Ala 35 40 Ser Vai Ile Ser Asn Gin Ser Asn 50 55 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 65 70 80

Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 75 80 gat acg gcc gtg tat tat tgc 288

Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 90 95 tgg ggc caa ggc acc ctg gtg 336

Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai 110

Gly Leu Vai Gin Pro Gly Gly 10 15

Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 30

Gly Lys Gly Leu Glu Trp Vai 45

Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Vai 60

Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 75

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asn Lys Vai Gly Phe Asp Vai Trp Gly Gin Gly Thr Leu Vai 100 105 110

Thr Vai Ser Ser <210> 89 <211> 354 <212> ADN <213> humano <220>

<221> CDS <222> (1> . (354) <223> Derivado de MOR03075; Anticorpo-Região-VL; MOR03258 cag gtg caa ttg gtt cag age ggc gcg gaa gtg aaa aaa ccg ggc gcg 48

Gin Vai Gin Leu Vai Gin Ser Gly Ala Glu Vai Lys Lys Pro Gly Ala age gtg aaa gtg age tgc aaa gee tcc gga tat acc ttt act ggt ttt 96 Ser Vai Lys Vai Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Phe 20 25 30 tat att aat tgg gtc ege caa gee cct ggg cag ggt etc gag tgg atg 144 Tyr He Asn Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 ggc tgg ate aat ceg tat t c t ggc aat Gly Trp Ile Asn Pro Tyr Ser Gly Asn 50 55 cag ggc cgg gtg acc atg acc cgt gat Gin Gly Arg Vai Thr Met Thr Arg Asp 65 70 atg gaa ctg age age ctg cgt age gaa Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu 85 gcg cgt t c t cct gtt tat tat aag tat Ala Arg Ser Pro Vai Tyr Tyr Lys Tyr 100 105 ctg gtg acg gtt age tc a Leu Vai Thr Vai Ser Ser 115 ttt 192 acg cgt tac gcg cag aag Thr Arg Tyr Ala Gin Lys Phe 60 acc age att age acc gcg tat 240

Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 75 80 gat acg gee gtg tat tat tgc 288

Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 90 95 gat tat tgg ggc caa ggc acc 336

Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr 110 354 <21G> 90 <211> 118 <212> PRT <213> humano <400> 90

Gin Vai Gin Leu Vai Gin Ser Gly Ala Glu Vai Lys Lys Pro Gly Ala 15 10 15

Ser Vai Lys Vai Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Phe 20 25 30

Tyr Ile Asn Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met 35 45 40

Gly Trp Ile Asn Pro Tyr Ser Gly Asn Thr Arg Tyr Ala Gin Lys Phe 50 55 60

Gin Gly Arg Vai Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Glu Len Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Vai Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Ser Pro Vai Tyr Tyr Lys Tyr Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr 100 105 110

Leu Vai Thr Vai Ser Ser 115

Lisboa, 3 de Julho de 2006

Claims

Polipéptido, caracterizado por (i) se ligar especificamente ao domínio ED-B de fibronectina e (ii) inibir a interacção entre o domínio ED-B e o seu receptor, caracterizado por ser seleccionado a partir dos anticorpos ou fragmentos de anticorpo compreendendo: (a) Uma região VH til Codificada através de uma seguência de ácido nucleico SEQ ID NO. 1 (MOR 02610), NO. de SEQ ID. 5 (MOR 02611), SEQ ID NO. 9 (MOR 02613), SEQ ID NO. 13 (MOR 02614), SEQ ID NO. 17 (MOR 02616), SEQ ID NO. 21 (MOR 02618), SEQ ID NO. 25 (MOR 02619), SEQ ID NO. 29 (MOR 02622), SEQ ID NO. 33 (MOR 02715), SEQ ID NO. 37 (MOR 02718), SEQ ID NO. 41 (MOR 02721), SEQ ID NO. 45 (MOR 02722) ou, pelo menos, uma região H-CDR1-, H-CDR-2- e/ou H-CDR3-de uma das regiões VH acima mencionadas, ou (ii) Derivada a partir de uma região VH de acordo com (i) através de uma alteração em, pelo menos, uma região H-CDR e/ou (b) Uma região VL (i) Codificada através de uma sequência de ácido nucleico SEQ ID NO. 3 (MOR 02610), SEQ ID NO. 7 (MOR 02611), SEQ ID NO. 11 (MOR 02613), SEQ ID NO. 15 (MOR 02614), SEQ ID NO. 19 (MOR 02616), SEQ ID NO. 23 (MOR 02618), SEQ ID NO. 27 (MOR 02619), SEQ ID NO. 31 (MOR 02622), SEQ ID NO. 35 (MOR 02715), SEQ ID NO. 39 (MOR 02718), SEQ ID NO. 43 (MOR 02721), SEQ ID NO. 47 (MOR 02722) ou, pelo menos, uma região L-CDR1-, L-CDR2- e/ou L-CDR3- de uma das regiões VL acima mencionadas ou (ii) Derivada a partir de uma região VL de acordo com (i) através de uma alteração em, pelo menos, uma região L-CDR.
2. Polipéptido de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por apresentar uma região VL que é derivada a partir de uma região VL de acordo com (b) (i) através de uma alteração na região L-CDR3.
3. Polipéptido de acordo com a reivindicação 2, caracterizado por apresentar uma região VL que é derivada a partir de uma região VL que é codificada através da sequência de ácido nucleico SEQ ID NO. 27 (MOR 02619) ou SEQ ID NO. 35 (MOR 02715) .
4. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado por compreender (a) uma região VH (i) Codificada através da sequência de ácido nucleico SEQ ID NO. 25 (MOR 02619) ou SEQ ID NO. 33 (MOR 02715) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR-2 2 e/ou H-CDR3 de uma das regiões VH acima mencionadas, ou (ii) Derivada a partir de uma região VH de acordo com (i) através de uma alteração em, pelo menos, uma região H-CDR, e/ou (b) uma região VL (i) Codificada através da sequência de ácido nucleico SEQ ID NO. 49 (MOR 03055), SEQ ID NO. 51 (MOR 03066), SEQ ID NO. 53 (MOR03075), SEQ ID NO. 55 (MOR 03069), SEQ ID NO. 57 (MOR 03071), SEQ ID NO. 59 (MOR 03064), SEQ ID NO. 61 (MOR 03062), ou, pelo menos, a região L-CDR3 de uma das regiões VL acima mencionadas ou (ii) Derivada a partir de uma região VL de acordo com (i) através de uma alteração em, pelo menos, uma região L-CDR.
5. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado por apresentar uma região VH que é derivada de uma região VH de acordo com (a)(i), através de uma alteração na região H-CDR2.
6. Polipéptido de acordo com a reivindicação 5, caracterizado por apresentar uma região VH que é derivada a partir da região VH, codificada através da sequência de ácido nucleico SEQ ID NO. 25 (MOR 02619) ou SEQ ID NO. 33 (MOR 02715).
7. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender (a) Uma região VH (i) Codificada através da sequência de ácido nucleico SEQ ID NO. 63 (MOR 03243), SEQ ID NO. 67 (MOR 03245), SEQ ID NO. 71 (MOR 03246), SEQ ID NO. 75 (MOR 03251), SEQ ID NO. 79 (MOR 03252), SEQ ID NO. 81 (MOR 03253), SEQ ID NO. 83 (MOR 03255), SEQ ID NO. 85 (MOR 03257), SEQ ID NO. 87 (MOR 03258) ou, pelo menos, a sua região H-CDR2, ou (ii) Derivada a partir de uma região VH de acordo com (i) através de uma alteração em, pelo menos, uma região H-CDR e/ou (c) Uma região VL (i) Codificada através da sequência de ácido nucleico SEQ ID NO. 65 (MOR 03243), SEQ ID NO. 69 (MOR 03245), SEQ ID NO. 73 (MOR 03246), região SEQ ID NO. 77 (MOR 03251), SEQ ID NO. 89 (MOR 03258) ou, pelo menos, a região L-CDR1-, L-CDR2- ou L-CDR3-de uma das regiões VL acima mencionadas, ou (ii) Derivada a partir de uma região VL de acordo com (i) através de uma alteração em, pelo menos, uma região L-CDR.
8. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 1 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 3 (MOR 02610) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
9. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 5 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 7 (MOR 02611) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDR1, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
10. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 9 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 11 (MOR 02613) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDR1, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
11. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 13 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 15 (MOR 02614) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
12. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 17 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 19 (MOR 02616) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
13. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 21 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 23 (MOR 02618) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
14. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 25 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 27 (MOR 02619) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
15. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 29 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 31 (MOR 02622) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 OU L-CDR3 da mesma.
16. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 33 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 35 (MOR 02715) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
17. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 37 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 39 (MOR 02718) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
18. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 41 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 43 (MOR 02721) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
19. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 45 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 47 (MOR 02722) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
20. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 25 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 49 (MOR 03055) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
21. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 25 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 51 (MOR 03066) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
22. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 25 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 53 (MOR 03075) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
23. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 25 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 55 (MOR 03069) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
24. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 25 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 57 (MOR 03071) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
25. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 33 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 59 (MOR 03064) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
26. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 33 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 61 (MOR 03062) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
27. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 63 e a região VR que é codificada através da SEQ ID NO. 65 (MOR 03243) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
28. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada 8 através da SEQ ID NO. 67 e a região VR que é codificada através da SEQ ID NO. 69 (MOR 03245) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
29. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 71 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 73 (MOR 03246) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
30. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 75 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 77 (MOR 03251) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
31. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 79 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 77 (MOR 03252) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
32. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 81 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 77 (MOR 03253) ou, pelo menos, uma região H-CDRl, H-CDR2, H-CDR3, L-CDRl, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
33. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 83 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 77 (MOR 03255) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDR1, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
34. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 85 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 77 (MOR 03257) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDR1, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
35. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender a região VH que é codificada através da SEQ ID NO. 87 e a região VL que é codificada através da SEQ ID NO. 89 (MOR 03258) ou, pelo menos, uma região H-CDR1, H-CDR2, H-CDR3, L-CDR1, L-CDR2 ou L-CDR3 da mesma.
36. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 35 caracterizado por estar na forma de um conjugado com um ingrediente activo terapêutico.
37. Polipéptido de acordo com a reivindicação 36, caracterizado por o ingrediente activo terapêutico ser seleccionado a partir de agentes radio- e quimioterapêuticos.
38. Polipéptido, de acordo com uma das reivindicações 1 a 35 caracterizado por estar na forma de uma proteína de fusão.
39. Polipéptido de acordo com a reivindicação 38 caracterizado por ser uma proteína de fusão com uma citocina ou como um anticorpo bispecífico.
40. Polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 35 caracterizado por estar na forma de um conjugado com um grupo marcador diagnosticamente detectável.
41. Polipéptido de acordo com a reivindicação 38, caracterizado por ser seleccionado a partir de grupos marcadores radioactivos, de RMN, corantes, enzimáticos e fluorescentes.
42. Composição farmacêutica, caracterizado por compreender como ingrediente activo um polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 39, assim como veículos, adjuvantes e/ou diluentes farmacologicamente comuns.
43. Composição de acordo com a reivindicação 42, caracterizado por ser utilizada na prevenção ou tratamento de doenças hiperproliferativas.
44. Composição de acordo com a reivindicação 42 ou 43, caracterizada por ser utilizada na prevenção ou tratamento do cancro.
45. Composição diagnóstica, caracterizada por compreender como reagente diagnóstico um polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 35, 40 ou 41.
46. Composição de acordo com a reivindicação 45, caracterizada pp;í' ser utilizada no diagnóstico de doenças hiperproliferativas ou de uma pré-disposição para as mesmas.
47. Composição de acordo com a reivindicação 45 ou 46, caracterizada por ser utilizada no diagnóstico do cancro ou de uma pré-disposição para as mesmas.
48. Composição de acordo com uma das reivindicações 42 a 47, caracterizada por ser utilizada para utilização em medicina humana.
49. Ácido nucleico caracterizado por codificar para um polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 35 ou 38 a 47.
50. Ácido nucleico de acordo com a reivindicação 49, caracterizado por estar em ligação operativa com uma sequência de controlo de expressão.
51. Vector, caracterizado por conter um ácido nucleico de acordo com uma das reivindicações 49 a 50.
52. Célula, caracterizado por ser transformada com um ácido nucleico de acordo com uma das reivindicações 49 a 50 ou um vector de acordo com a reivindicação 51.
53. Organismo não humano, caracterizado por ser transformado com um ácido nucleico de acordo com uma das reivindicações 49 a 50 ou um vector de acordo com a reivindicação 51.
54. Processo para a produção de um polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 35, caracterizado por uma célula ser cultivada de acordo com a reivindicação 52 ou um organismo não humano de acordo com a reivindicação 53, a cultura ser desenvolvida sob condições em que é realizada uma expressão do polipéptido e é obtido o polipéptido expresso.
55. Utilização de um polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 39 para a produção de um agente farmacêutico, caracterizado por se destinar a prevenção ou tratamento de doenças associadas a ED-B.
56. Utilização de acordo com a reivindicação 54 para a produção de um agente farmacêutico, caracterizado por se destinar a prevenção ou tratamento do cancro.
57. Utilização de um polipéptido de acordo com uma das reivindicações 1 a 35, 40 ou 41 para a produção de um reagente de detecção, caracterizado por se destinar ao diagnóstico de doenças associadas a ED-B ou de uma pré-disposição para as mesmas.
58. Utilização de acordo com a reivindicação 57 para a produção de um reagente de detecção caracterizado por se destinar ao diagnóstico do cancro ou de uma pré-disposição para o mesmo. Lisboa, 3 de Julho de 2006