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KR960701099A - 다공성 지지체(p.e. 아즐락톤)내에 리간드를 커플링시키는 방법 및 그의 용도(method of coupling ligands within porous supports(p.e. azlactone) and uses thereof) - Google Patents

다공성 지지체(p.e. 아즐락톤)내에 리간드를 커플링시키는 방법 및 그의 용도(method of coupling ligands within porous supports(p.e. azlactone) and uses thereof) Download PDF

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KR960701099A
KR960701099A KR1019950704186A KR19950704186A KR960701099A KR 960701099 A KR960701099 A KR 960701099A KR 1019950704186 A KR1019950704186 A KR 1019950704186A KR 19950704186 A KR19950704186 A KR 19950704186A KR 960701099 A KR960701099 A KR 960701099A
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KR
South Korea
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porous support
ligand
coupling
coupled
condition
Prior art date
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Ceased
Application number
KR1019950704186A
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English (en)
Inventor
윌리암 에이치. 벨랜더
딘 에스. 밀브래쓰
Original Assignee
워렌 리차드 보비
미네소타 마이닝 앤드 매뉴팩츄어링 캄파니
레오나드 케이. 피터스
버지니아 테크 인텔렉츄얼 프로퍼티즈, 인코포레이티드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 워렌 리차드 보비, 미네소타 마이닝 앤드 매뉴팩츄어링 캄파니, 레오나드 케이. 피터스, 버지니아 테크 인텔렉츄얼 프로퍼티즈, 인코포레이티드 filed Critical 워렌 리차드 보비
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Abstract

본 발명은 당공성 지지체 내에 리간드를 커플링(Coupling)시키는 방법에 관한 것이다. 본 방법은 다공성 지지체로 및 지지체 내에서 리간드가 확산되는 속도는 반응 속도에 대하여 상대적으로 증가 시키면서 리간드가 다공성 지지체로 커플링되는 조건을 억제하기에 충분한 조건하에서 리간드와 다공성 지지체를 혼합하고, 이어서, 상기 다공성 지지체 내에서 리간드의 신속 커플링을 증가시키도록 조건을 변경하는 것을 포함한다. 확산 조건에서 커플링 조건으로의 변경은 반응 용액 중의 pH, 이온 강도, 온도 또는 결합 경쟁제를 변화시켜 확산조건 동안의 상대적으로 낮은 티엘 모듈러스를 커플링 조건에서의 비교적 높은 티엘 모듈러스로 변화시키는 것이다. 본 발명에 따라 제조된 유도된 다공성 지지체도 또한 개시되었다. 유도된 다공성 지지체는 증가된 작용 효율을 지닌다. 아즐락톤 작용성 다공성 지지체로부터 제조된 유도된 다공성 지지체도 또한 개시되었다.

Description

다공성 지지체(P.E. 아즐락톤)내에 리간드를 커플링시키는 방법 및 그의 용도(METHOD OF COUPLING LIGANDS WIDTHIN POROUS SUPPORTS(P.E.AZLACTONE) AND USERS THEREOF)
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 비교를 위해 종래 기술의 방법에 따라 제조된 유도된 다공성 지지체의 횡단면 형광 현미경 사건으로, 바람직하지 않은 "할로(HALO)효과"를 입증하는, 지지체의 외부 표면에 주로 커플링된 단백질 A리간드의 불균일한 분포를 보인다.
제2도는 본 발명에 따라 제조된 유도된 다공성 지지체의 횡단면 형광 현미경 사진으로, 작용 효율을 향상시키는 지지체의 모든 표면의 전체에 지지체의 모든 표면의 전체에 커플링된 단백질 A리간드의 보다 균일한 분포를 보인다.

Claims (14)

  1. (a)리간드를 다공성 지지체 내로 확산시키는 단계; 및 (b) 상기 리간드를 상기 다공성 지지체에 신속하게 공유 커플링(coupling)시키기 위하여 조건을 변경하는 단계를 포함하는, 리간드를 다공성 지지체에 커플링시키는 방법에 있어서, 단계(a)중의 리간드 커플링 속도가 단계(b)중의 리간드 커플링 속도보다 낮고, 단계 (a)에서 단계(b)로 변경된 조건이 pH증가, 이온 농도 증가,또는 온도 증가, 또는 이들의 조합을 포함하는 방법.
  2. 제1항에 있어서, 단계(a)의 확산 조건의 pH가 단계(b)의 커플링 조건의 pH보다 낮고, 단계(a)의 확산조건의 pH가 약 3 내지 약 7의 범위이며, 단계(b)의 커플링 조건의 pH가 약 7 내지 약 10의 범위인 방법.
  3. 제1항에 있어서, 단계(a)의 확산 조건의 이온 농도가 단계(b)의 커플링 조건의 이온 농도 보다 낮고, 단계(a)의 이온 농도에서 단계(b)의 이온 농도로 변화하는 양이 약 0.5M 내지 약 1.5M인 방법.
  4. 제3항에 있어서, 단계(a)의 온도가 단계(b)의 온도보다 낮고, 단계(a)의 온도에서 단계(b)의 온도로 변환하는 정도가 약 10℃내지 약 35℃인 방법.
  5. 제1항에 있어서, 다공성 지지체에 리간드를 커플링 시키는 공간 분포를 조절하는 수단을 제공하고, 리간드를 다공성 지지체의 내부 표면 및 외부 표면에 공유 커플링시키는 방법을 제공하는 방법.
  6. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 단계(b)의 커플링 조건이 0.1M 내지 10M 범위의 농도로 커플링 경쟁제를 사용하는 방법.
  7. 제1항에 있어서, 상기 다공성 지지체가 아즐락톤-작용성인 방법.
  8. 제1항에 있어서, 단계(a)가 단계(b)에소 보다 상대적으로 낮은 티엘 모듈러스(thiele modulus)를 갖는 방법.
  9. (1)지지체의 표면에 커플링된 리간드의 공간 분포를 제공하도록 제1항 내지 제8항의 방법의 단계(a) 및 (b)에 따라 다공성 지지체에 리간드를 커플링시키는 단계; 및 (2) 리게이트(ligate)를 공간적으로 분포된 리간드레 결합시키는 단계를 포함하는 다공성 지지체로의 제한된 확산 또는 다공성 지지체에 커플링된 리간드로의 결합의 입체 효과에 의해 영향받지 않도록 리게이트를 결합시키는 방법.
  10. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항의 방법에 따라 제조된 유도된 다공성 지지체.
  11. 커플링된 리드간의 30%이상이 다공성 지지체의 기하학적 중심의 70%이내인 내부 표면에 커플링되는 방식으로 반응성 다공성 지지체에 직접적으로 커플링되는 리간드를 포함하는 유도된 다공성 지지체.
  12. 80%이상의 커플링 효율로 반응성 다공성 지지체에 직접적으로 커플링되고 약 3.0결합 면역 글로블린/결합된 단백질 A 이상의 면역 글로블린에 대한 작용 효율을 갖는 단백질 A를 포함하는 유도된 다공성 지지체.
  13. 70%이상의 커플링 효율로 반응성 다공성 지지체에 직접적으로 커플링되고, 약 20%이상의 리게이트 단백질의 리게이트 단백질 대항체의 몰비가 2:1에서 결합하는 비율로 작용 효율을 갖는 항체를 포함하는 유도된 다공성 지지체.
  14. 제11항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 리간드라 아즐락톤-작용 반응성 부위를 통하여 다공성 지지체에 커플링하는 유도된 다공성 지지체
    ※참고사항: 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
KR1019950704186A 1993-03-29 1994-02-18 다공성 지지체(p.e. 아즐락톤)내에 리간드를 커플링시키는 방법 및 그의 용도(method of coupling ligands within porous supports(p.e. azlactone) and uses thereof) Ceased KR960701099A (ko)

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US3864593A 1993-03-29 1993-03-29
US08/038,645 1993-03-29
PCT/US1994/003927 WO1994022918A1 (en) 1993-03-29 1994-02-18 Method of coupling ligands within porous supports (p.e. azlactone) and uses thereof

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DE (1) DE69428891T2 (ko)
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