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KR920703817A - 히루딘 및 히루딘-형 폴리펩타이드의 재조합적 제조방법 - Google Patents

히루딘 및 히루딘-형 폴리펩타이드의 재조합적 제조방법

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Publication number
KR920703817A
KR920703817A KR1019920700048A KR920700048A KR920703817A KR 920703817 A KR920703817 A KR 920703817A KR 1019920700048 A KR1019920700048 A KR 1019920700048A KR 920700048 A KR920700048 A KR 920700048A KR 920703817 A KR920703817 A KR 920703817A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
hirudin
type polypeptide
host
polypeptide
dna
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
KR1019920700048A
Other languages
English (en)
Inventor
베나티 루카
카르미나티 파올로
란센 자끌린
마주에 구이
론쿠치 로메오
사르미엔토스 파올로
사케리 엠마누엘라
드 탁시스 듀 포에 필리페
Original Assignee
비토리노 페라리오
팜이탈리아 카를로 에르바 에스. 알. 엘
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 비토리노 페라리오, 팜이탈리아 카를로 에르바 에스. 알. 엘 filed Critical 비토리노 페라리오
Publication of KR920703817A publication Critical patent/KR920703817A/ko
Withdrawn legal-status Critical Current

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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/81—Protease inhibitors
    • C07K14/815—Protease inhibitors from leeches, e.g. hirudin, eglin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

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Abstract

내용 없음

Description

히루딘 및 히루딘-형 폴리펩타이드의 재조합적 제조방법
[도면의 간단한 설명]
첨부된 제1도는 대부분의 히루딘 HV1쇄를 암호화하는 4개의 올리고뉴클레오타이드의 뉴클레오타이드 서열을 나타낸다.
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음

Claims (25)

  1. 히루딘 또는 히루딘-형 폴리펩타이드를 암호화하는 DNA서열을 포함함을 특징으로 하는 발현 벡터.
  2. 제1항에 있어서, 플라스미드인 벡터.
  3. 제2항에 있어서, Ptrp 및 P1pp/1ac 프로모터중에서 선택된 프로모터가 히루딘 또는 히루딘-형 폴리펩타이드를 암호화하는 DNA 서열에 작동적으로 결합된 벡터.
  4. 제1항에 있어서, 바일러스인 벡터.
  5. 제4항에 있어서, 바이러스가 재조합 배큘로바이러스 (여기에서 폴리헤드린 프로모터는 히루딘 또는 히루딘-형 폴리펩타이드를 암호화하는 DNA 서열에 작동적으로 결합된다)인 벡터.
  6. 제1항 내지 제5항중 어느 한 항에 있어서, 히루딘 또는 히루딘-형 폴리펩타이드를 암호화하는 DNA 서열이, 히루딘 또는 히루딘-형 폴리펩타이드가 발현되는 세포로부터 히루딘 또는 히루딘-형 폴리펩타이드의 분비를 지시할 수 있는 리더펩타이드를 추가로 암호화 하는 벡터.
  7. 제6항에 있어서, 리더 펩타이드가 OmpA 또는 VSV G 단백질 리더 펩타이드인 벡터.
  8. 제1항 내지 5항중 어느 한 항에 있어서, 히루딘 또는 히루딘-형 폴리펩타이드를 암호화하는 DNA서열이 상기 폴리펩타이드를 방출하도록 절단될 수 있는 융합 단백질을 암호화하는 벡터.
  9. 제8항에 있어서, 융합 단백질이 히루딘 또는 히루딘-형 폴리펩타이드 N-말단에 절단가능한 결합을 통해 융합된 폴리헤드린 단백질의 N-종결부를 포함하는 벡터.
  10. 제1항 내지 9항중 어느 한 항 있어서, 히루딘 또는 히루딘-형 폴리펩타이드가 하기 서열식의 HV1 또는 HV12인 발현벡터.
    HV1 :
    HV12 :
    상기서열식에서, 밑줄친 서열은 HV2의 부분이다.
  11. 제1항 내지 10항중 어느 한 항에 따른 적합한 발현 벡터로 형질전환된 숙주.
  12. 제11항에 있어서, 세균인 숙주.
  13. 제12항에 있어서, 이. 콜라이 타임 B의 균주인 숙주.
  14. 제11항에 있어서, 효모, 포유동물 세포주, 곤충세포주 및 동물중에서 선택된 진핵세포인 숙주.
  15. 제14항에 있어서, 스포도프테라 프루기폐르드(Spodoptera frugiperda)세포주인숙주.
  16. 히루딘 또는 히루딘-형 폴리펩타이드를 암호화 하는 합성 DNA.
  17. 제16항에 있어서, 히루딘 또는 히루딘-형 폴리펩타이드가 발현되는 세포로부터 히루딘 또는 히루딘-형 폴리펩타이드의 분비를 지시할 수 있는 리더 펩타이드를 추가로 암호화하는 DNA.
  18. 제17항에 있어서, 리더 펩타이드가 OmpA 또는 VSV G 단백질 리더 펩타이드인 DNA.
  19. 제16항에 있어서, DNA 서열이 히루딘 또는 히루딘-형 폴리펩타이드를 방출하도록 절단될 수 있는 융합 단백질을 암호화 하는 DNA.
  20. 제16항 내지 19항중 어느 한 항에 있어서, 히루딘 또는 히루딘-형 폴리펩다이드가 제10항에서 나타낸 HV1 또는 HV12인 DNA.
  21. 히루딘 또는 히루딘-형 폴리펩타이드가 제11항 내지 15항중 어느 한 항에 따른 숙주내에서 발현되는 조건하에서 상기 숙주를 제공함을 특징으로 하는 히루딘 또는 히루딘-형 폴리펩타이드의 제조방법.
  22. 숙주를 제1항 내지 10항중 어느 한 항에 따른 적합한 발현벡터로 형질전환시킴을 특징으로 하는, 히루딘 또는 히루딘-형 폴리펩타이드가 발현될 수 있는 숙주의 제조방법.
  23. 제22항에 있어서, 발현 벡터를 (a)히루딘 또는 히루딘-형 폴리펩타이드를 암호화하는 DNA를 화학적으로 합성하고, (b)상기 DNA를 발현 벡터내에 삽입시켜 제조하는 방법.
  24. 제10항에 나타낸 폴리펩타이드 HV12 또는 이의 유도체.
  25. 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제 및 활성 성분으로서 제21항의 방법으로 생성되는 히루딘 또는 히루딘-형 폴리펩타이드 또는 제24항에 따른 폴리펩타이드를 함유하는 약제학적 조성물.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
KR1019920700048A 1990-05-10 1991-04-05 히루딘 및 히루딘-형 폴리펩타이드의 재조합적 제조방법 Withdrawn KR920703817A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB9010552.9 1990-05-10
GB909010552A GB9010552D0 (en) 1990-05-10 1990-05-10 Method for the recombinant production of hirudins and novel hirudins
PCT/EP1991/000643 WO1991017250A1 (en) 1990-05-10 1991-04-05 Method for the recombinant production of hiridius and hirudin-like polypeptides

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KR1019920700048A Withdrawn KR920703817A (ko) 1990-05-10 1991-04-05 히루딘 및 히루딘-형 폴리펩타이드의 재조합적 제조방법

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JP (1) JPH05500615A (ko)
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CN (1) CN1057294A (ko)
AU (1) AU7652591A (ko)
CA (1) CA2063575A1 (ko)
CS (1) CS133191A3 (ko)
FI (1) FI920058A0 (ko)
GB (1) GB9010552D0 (ko)
HU (1) HUT59961A (ko)
IE (1) IE911578A1 (ko)
IL (1) IL98074A0 (ko)
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PT (1) PT97604A (ko)
WO (1) WO1991017250A1 (ko)
ZA (1) ZA913503B (ko)

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NO920116D0 (no) 1992-01-09
GB9010552D0 (en) 1990-07-04
FI920058A7 (fi) 1992-01-07
CA2063575A1 (en) 1991-11-11
IL98074A0 (en) 1992-06-21
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Patent event code: PA01091R01D

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Patent event date: 19920109

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PC1203 Withdrawal of no request for examination
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