KR20160015705A - 탈염 용암해수 및 풍난 식물세포배양추출물을 유효성분으로 포함하는 모공 축소용 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 탈염 용암해수 및 풍난(Neofinetia falcata) 식물세포 배양추출물을 유효성분으로 포함하는 모공 축소용 화장료 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 조성물은 모공의 노폐물을 정돈하여 피부에 자극없이 모공 크기를 감소시켜 매끈한 피부결을 유지하는 효과가 있어, 모공 축소를 위한 기능성 화장품의 재료로써 유용하다.

Description

탈염 용암해수 및 풍난 식물세포배양추출물을 유효성분으로 포함하는 모공 축소용 화장료 조성물 {A cosmetic composition for reducing the skin pore with lava seawater and Neofinetia falcata culture extrac}

발명은 탈염 용암해수 및 풍난 식물세포배양추출물을 유효성분으로 포함하는 모공 축소용 화장료 조성물에 관한 것이다. 더욱 상세하게는 제주도 탈염 용암해수와 풍난 식물체로부터 유도된 식물 세포 배양물, 부정근 배양물 또는 그 추출물을 함께 함유한 모공 축소용 화장료 조성물 및 그 제조방법에 관한 것이다.

최근, 피부에 대한 관심이 날로 높아지면서, 특히 젊은 여성을 중심으로 모공에 대한 고민이 커지고 있다.

모공이란 피부의 보호를 위해 피지를 분출시키는 구멍으로, 보통 0.02mm 정도의 크기로 보통은 눈에 잘 띄지않는다. 이러한, 모공은 사춘기를 거치면서 왕성한 피지선의 활동으로 입구가 벌어져 그 크기가 커지기 시작한다. 특히, 피부가 지성인 경우, 건성 피부의 모공보다 무려 3배에서 5배가 커진다. 또한, 피지가 덩어리로 박혀 모공이 막혀 있거나, 화농성 여드름이 있어 짰던 경우는 피부가 스스로를 보호하기 위해 더 단단한 벽을 쌓기 때문에 외관상 보기 좋지 않게 더 두드러지게 된다. 또한, 피지의 분비가 지나친 경우에는 피부가 번들거리고, 피부에 염증이 잘 생겨 세균 감염에 의한 모낭염이 생기기도 한다.

한편, 사춘기가 지난 이후에도 여러가지 원인에 의해 모공 속 피지 분비가 과다하게 되고 모공이 확대될 수 있는데, 고온의 사우나에서 피부를 장시간 노출시키는 경우, 모공 속에 메이크업 잔여물과 노폐물이 쌓인 경우, 항상 뜨거운 물로 세안을 할 경우, 스트레스를 과다하게 받는 경우, 밤 늦게 자거나 수면부족의 경우, 여드름을 짜고 여드름 의약품을 바르지 않은 경우 등이 있다. 하지만, 모공 속 피지 분비는 그 원인을 밝혀내기가 어렵고, 모공이 두드러지는 메커니즘도 다양해 원인을 명확히 파악하기 어렵다.

또한, 단순히 나이가 드는 것도 모공 확대의 원인이 되기 한다. 피부는 나이가 들면서 각질형성세포(keratinocyte)와 섬유 아세포(fibroblast)의 활성이 감소하게 되고, 수분보유능력이 감소하면서 피부의 탄력이 떨어지고, 모공 벽을 지지하던 콜라겐과 탄력섬유가 점차 감소하여, 모공을 조여주는 힘이 떨어지기 때문에 모공이 늘어나게 된다.

상기에서 살펴본 바와 같이 다양한 원인에 의해 확대되는 모공을 축소시키기 위한 여러 방안이 제기되고 있는데, 수렴화장수나 각질전(keratin plug)의 제거에 의한 대응이 일반적이라 할 수 있다. 또한, 파운데이션에 의해 겉보기의 개선을 도모하는 일도 다른 하나의 대응 방안이다. 그러나, 수렴화장수는 피부를 단단히 죄는 것을 목적으로 하고 있고, 알코올에 의해 일시적으로 피부 표면온도를 낮추는 작용을 할 뿐, 모공의 두드러짐에 대한 근본적인 해결이 되고 있지 못하며, 그 효과도 충분하지는 않다. 따라서, 모공의 두드러짐 개선 및 모공 축소에 효능이 있는 유효성분을 포함하는 화장료 조성물의 개발이 요구되는 것이다. 용암 해수와 관한 종래 선행기술로는 하기 특허문헌 1 및 2가 있으나, 풍란 식물세포배양추출물에 관해서는 모공 축소에 관한 선행기술이 전무하다.

특허문헌 1 : 대한민국 공개특허 제10-2013-0063178호(발명의 명칭:탈염 용암해수를 이용한 화장료 조성물)에는, 탈염 용암해수의 여드름 개선 활성, 아토피성 피부염 개선 활성, 항히스타민 활성, 콜라겐 생성 촉진 활성 및 자외선 차단 활성에 관한 것이 기재되어 있다. 특허문헌 2: 대한민국 등록특허 제10-0955389호(발명의 명칭: 천연물을 함유한 모공 축소 및 피지 억제용 화장료 조성물)에는 감나무잎 추출물, 녹차 추출물과 같은 천연 추출물을 함유하는 모공 축소 및 피지 억제용 화장료 조성물에 관한 것이 기재되어 있다.

본 발명은 모공의 확대로 인한 피부 두드러짐을 개선하고, 모공을 축소하는 모공 축소용 화장료 조성물을 개발하여 제공하는 것을 목적으로 한다.

구체적으로, 본 발명의 목적은 탈염 용암해수 및 풍난 식물세포 또는 부정근 배양물 또는 그 추출물을 유효성분으로 하는 모공 축소용 화장료 조성물을 제공하는데 있다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 탈염 용암해수 및 풍난 식물세포 또는 부정근 배양물 또는 그 추출물을 유효성분으로 하는 모공 축소용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명에 있어서, 상기 탈염 용암해수 100중량부에 대하여 풍난 식물세포 또는 부정근 배양 추출물은 10~100 중량부로 혼합되는 것을 특징으로 할 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기 풍난 식물세포 또는 부정근 배양 추출물은 풍난 식물세포 또는 부정근 배양물의 냉수, 열수 또는 유기 용매 추출물인 것을 특징으로 할 수 있다.

본 발명에 있어서,

상기 탈염 용암해수는,

(i) 투석에 의하여 이온 교환막을 이용 1가 이온을 제거하는 탈염 단계;

(ii) 탈염 후, 탈염 용암해수 100중량부에 대하여, 부틸렌 글라이콜(butylene glycol) 4~6중량부, 1,2-헥산디올(1,2-hexanediol) 0.6~0.8중량부, 에칠헥실글리세린(ethylhexylglycerin) 0.01~0.2중량부를 첨가하는 단계; 및

(iii) 상기 단계(ii) 후, 0.1~0.3㎛ 필터로 여과하는 단계;를 포함하는 과정으로부터 제조되는 것을 특징으로 할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 탈염 용암해수는 바람직하게 투석을 통해 이온교환만을 이용 1가 이온을 제거하는 탈염 단계(a); 탈염 후, 탈염 용암해수 100중량부에 대하여, 부틸렌 글라이콜(butylene glycol) 4~6중량부, 1,2-헥산디올(1,2-hexanediol) 0.6~0.8중량부, 에칠헥실글리세린(ethylhexylglycerin) 0.01~0.2중량부를 첨가하는 단계(b); 및 상기 단계(b) 후, 0.1~0.3 로 여과하는 단계(c)를 포함하는 과정으로부터 제조되는 것이 좋다. 상기 범위를 만족할 시, 모공 축소에 뛰어난 효능을 나타낸다.

한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 재료 중 추출분말들은 본 발명의 기술분야에서 통상적으로 사용하는 열수 추출의 방법으로 추출한 것을 건조시켜 사용할 수 있다. 일 예로, 재료를 열수 추출하여 추출물 수득 후, 동결건조 또는 분무건조함으로써 제조될 수 있다.

한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 탈염 용암해수는 바닷물이 투수성이 좋은 화산암반층에 의해 자연 여과되면서 육지 지하로 흘러든 지하수 자원을 의미한다. 좀 더 구체적으로 탈염 용암해수는 수온, pH 및 염분 등이 연중 변동이 거의 없어 안정한 상태이며, 화산암반에 의해 자연 여과되어 청정하고, 칼슘, 마그네슘 등에서는 일반 지하수와 유사하지만, 바나듐, 셀레늄 등에서는 차이를 보인다.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 조성물의 제형은 본 발명이 속한 기술분야에 다양한 제형을 취할 수 있고, 예컨대, 화장수, 에센스, 로션, 크림, 팩, 젤, 연고, 패치, 분무제, 마스크 시트, 앰플, 파우더 또는 세정제일 수 있다.

본 발명의 조성물은 모공의 노폐물을 정돈하여 피부에 자극없이 모공 크기를 감소시켜 매끈한 피부결을 유지하는 효과가 있어, 모공 축소를 위한 기능성 화장품의 재료로써 유용하다.

도 1은 실험예 3에서 전안촬영시스템(DM-3)을 이용한 본 발명 모공 축소용 화장료 조성물 (실시예 2 조성물)의 사용 전후 촬영한 안면 사진이다.

이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.

본 발명은 탈염 용암해수 및 풍난 식물세포 또는 부정근 배양물 또는 그 추출물을 유효성분으로 하는 모공 축소용 화장료 조성물 및 그 제조방법에 관한 것이다.

본 발명에 있어서, 상기 탈염 용암해수 100중량부에 대하여 풍난 식물세포 또는 부정근 배양 추출물은 10~100 중량부, 구체적으로, 20~80중량부, 30~70중량부, 또는 40~60중량부로 혼합되는 것을 특징으로 할 수 있다.

본 발명에 있어서, 또 본 명세서에서, "용암해수"는 발명의 명칭이 "미네랄 조성물의 제조 방법 및 그 방법에 의하여 얻어진 미네랄 조성물"인 한국 특허 제0853244호(출원번호: 제10-2008-0027861호)에서 정의되고 설명된 바의 "제주도 동부지역에 부존하고 있는 염지하수"와 같은 의미이다. 구체적으로 "제주도 동부지역"은 행정구역상 제주도 구좌읍,성산읍 및 표선면을 의미하며, "염지하수"는 일정량 이상 염분이 함유된 지하수를 의미하는데, 구체적으로는 고기원 등의 논문(고기원 등, 제주도 동부지역의 수문지질에 관한 연구(), 2003, 경원대학교 본 명세서의 일부로서 간주된다)에서 사용한 염분 농도에 의거 제주도 지하수를 분류한 기준에 따라 저염지하수(전기전도도가 1,700/cm ~17,350/cm)와 염수지하수(전기전도도가 17,350/cm 이상)를 모두를 포함하는 의미로서 이해될 수 있지만, 바람직하게는 전기전도도가 17,350 /cm 이상 또는 염의 농도가 30(permilliage) 이상(통상 해수의 염분 농도가 32 내지 35임)인 염수지하수를 의미하는 것으로 이해될 수 있다.

본 발명에 따른 용암해수에 있어서,일 구체예로써,

제주도 동부지역 제주시 구좌읍 한동리에서 지하 150m를 굴착하여 지하(평균 해수면 기준), 44.35mm, 86.35m 및 126.35m에서 용암해수를 채수하고 한국화학시험연구원에 성분 분석을 의뢰하여 얻은 수심별 미네랄 함량은 아래의 표와 같다.

일 예시로, 제주도 구좌읍, 성산읍 및 표선면에 부존하고 있는 용암해수는 (a) 전기전도도가 48516.41/cm이고 염분 농도는 14.4(permilliage)이거나, (b) 전기전도도가 50618.4/cm이고 염분 농도는 34.1(permilliage)이거나, 또는 (c) 전기전도도가 50474.3/cm이고 염분 농도는 34.1(permilliage)일 수 있다.

또 본 명세서에서, "탈염 용암해수 미네랄" 또는 탈염 용암해수는 용암해수를 탈염시켜 얻어진 결과물로서, 이 결과물은 물과 혼합되어 희석되거나 증발에 의하여 수분이 일부 제거된 농축된 액상의 성상이거나 완전히 수분이 증발된 분말상의

성상일 수 있다. 이 탈염 용암해수 미네랄은 그 성상이 액상이든 분말상이든 미네랄 성분들의 조성물로도 이해될 수 있다. 용암해수 미네랄을 얻기 위해 용암해수를 탈염키는 방법은 당업계에 알려진 임의의 기술을 적용하여 수행될 수 있는데, 그러한 기술로서는 역삼투압법, 이온교환수지법, 전기투석법 등을 들 수 있다.

본 발명에 있어서, 구체적으로, 상기 탈염 용암해수는,

(i) 투석에 의하여 이온 교환막을 이용 1가 이온을 제거하는 탈염 단계;

(ii) 탈염 후, 탈염 용암해수 100중량부에 대하여, 부틸렌 글라이콜(butylene glycol) 4~6중량부, 1,2-헥산디올(1,2-hexanediol) 0.6~0.8중량부, 에칠헥실글리세린(ethylhexylglycerin) 0.01~0.2중량부를 첨가하는 단계; 및

(iii) 상기 단계(ii) 후, 0.1~0.3㎛ 필터로 여과하는 단계;를 포함하는 과정으로부터 제조될 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기 풍난 식물세포 또는 부정근 배양 추출물은 풍난 식물세포 또는 부정근 배양물의 냉수, 열수 또는 유기 용매 추출물인 것을 특징으로 할 수 있다.

본 발명에 있어서, "유효성분으로 함유하는" 의 의미는, 화장료 조성물로써 모공 축소의 효능을 나타낼 수 있는 정도의 유효량을 함유하는 것을 의미한다.

본 발명에 있어서, 풍난 식물세포배양추출물 식물 세포 배양물은 풍난 식물세포배양추출물 식물체의 일부, 예컨대, 줄기, 꽃잎, 뿌리, 잎, 전체 또는 일부를 잘라 유도 배지에서 배양을 통해 얻어지는 것이다.

이와 같은 배양 유도는 식물 조직 배양에 관한 것으로, 식물조직배양은 살아있는 작은 식물 조직을 기내(in vitro)에서 무균적으로 배양하여 배양 목적에 따라서 식물 세포, 기관 및 식물체를 증식 시키는 기술이다. 식물조직배양에는 식물이 지니는 기본적인 특성을 이용한다고 볼 수 있다. 식물조직배양 기술은 식물이 지니는 독특한 특징인 식물의 체세포로부터 식물체를 재생시킬 수 있는 분화전능성(totipotency)을 이용하는 것을 기반으로 하는 기술이다. 즉, 식물의 단세포(원형질체 포함), 잎 및 뿌리 절편을 특정 영양물질 및 생장 조절제가 첨가된 배지에 배양하면 이들 세포 및 조직으로부터 식물체가 재생될 수 있다. 이러한 식물이 분화전능성(totipotency)을 지니는 능력은 식물이 지니는 특성인 고착 생활과 장기간 생존을 위하여 열악한 환경 및 초식동물의 피해로부터 생존을 하기 위한 전략이다. 따라서 식물은 잃어버린 기관을 다시 재생시키기 위한 능력을 갖게 되었다고 볼 수 있다. 모식물체로부터 분리된 식물조직세포는 적정배양환경에서 배양하면 완전한 식물체로 재생될 수 있는 잠재력 즉, 전형성능을 가지고 있는 식물은 발생학 등의 학술적인 중요성은 물론이지만 화장품 원료 등의 실용화를 위해서도 활용가치가 크다.

"식물 세포 배양물"은 식물체에서 잘라낸 조직을 옥신을 함유한 배지에서 배양하거나, 어떤 종류의 식물에 상처를 내거나, 상구를 옥신으로 처리하거나 할 때에 생기는 특수한 조직 또는 세포덩어리를 말한다. 보통 캘러스는 정상적인 기관형성이나 조직분화를 일으키는 능력을 잃은 무정형의 조직 또는 세포덩어리로 대부분 유세포로 되어 있다. 넓은 의미로는 아그로박테리움(agrobacterium) 등의 감염에 의해서 생기는 식물종양조직도 포함시키기도 한다.

따라서, 본 발명에 따른 풍난 식물세포배양추출물의 줄기, 잎 등의 어느 부위로부터 유도된 것이든 모두 가능하나, 일 구체예로, 풍난 식물세포배양추출물의 줄기와 잎의 조직 일부, 또는 풍난 식물세포배양추출물 종자의 발아된 유묘로부터 자엽을 절취하여 유도시킨 식물세포일 수 있고, 풍난 식물세포배양추출물의 어느 조직이든지 일부 잘라내어 옥신 및 사이토키닌의 함량을 조절한 배지에 놓아두면 식물세포가 형성될 수 있다. 부정근 배양의 경우는 식물 세포 배양 과정과 동일하게 진행되나, 다만, 부정근이 유도될 수 있도록 식물 호르몬의 조합을 달리한다.

본 발명에 있어서, 상기 풍난 식물세포배양추출물의 식물 세포 또는 부정근 배양물 또는 그 추출물, 및 탈염 용암해수는 조성물의 총 중량에 대하여 0.1 내지 10 중량부로 함유할 수 있다.

이러한 비율은 단지 바람직한 범위일 뿐이며, 예컨대, 하기 실시예에서는 구체적인 수치로써 포함한 경우의 실험한 결과를 포함하고 있으나, 그 외의 수치 함량 범위 내에서도 우수한 모공축소능을 가짐은 당업자에게 자명하다.

본 발명에 있어서, 상기 풍난 식물세포배양추출물의 식물 세포 또는 부정근 배양물 (배양체) 자체를 사용하거나, 배양물을 여과하여 사용하거나, 배양물을 파쇄하여 사용하거나, 배양물을 건조시켜 분말화한 다음, 정제수에 녹여 사용할 수 있다.

본 발명에 있어서, "추출물"은 상기 풍난 식물세포배양추출물의 식물 세포 또는 부정근 배양물 추출물을 분말화하거나, 냉수추출법, 열수추출법, 유기용매, 예컨대, 알코올, 에탄올, 호호바오일 추출법 등 종래 알려진 다양한 추출법에 의해 수득한 추출물을 의미한다.

본 발명에서 추출 방법은 특별히 제한되지 않고, 예를 들어 냉침 추출, 초음파 추출, 환류 추출, 열수 추출, 호호바오일 추출 등이 있다. 여기서, 열수추출의 경우, 열탕증류기에서 8~ 48시간동안, 80~ 100℃ 로 가열하여 열수 추출물을 얻는다.

냉수 추출의 경우, 예컨대, 냉수 (15~25℃)에 상기 배양물 자체 또는 그것의 건조된 분말을 혼합하여 3일동안 추출하여 냉수추출물을 얻는다.

또는, 물, 유기 용매, 또는 이의 혼합 용매를 사용하여 추출하는 방법으로 제조될 수 있다. 추출한 액은 바로 사용하거나 또는 농축 및/또는 건조하여 사용할 수 있다. 유기용매를 사용하여 추출하는 경우, 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 부탄올, 에틸렌, 아세톤, 헥산, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, N, N-디메틸포름아미드(DMF), 디메틸설폭사이드(DMSO), 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 또는 이들의 혼합용매인 유기용매를 사용하며 생약의 유효 성분이 파괴되지 않거나 최소화된 조건에서 실온 또는 가온하여 추출할 수 있다. 추출하는 유기용매에 따라 약제의 유효성분의 추출정도와 손실정도가 차이가 날 수 있으므로, 알맞은 유기용매를 선택하여 사용하도록 한다. 특히, 본 발명에 있어서는 에탄올 추출물, 바람직하게는 20-50% 에탄올 추출물, 일 구체예로써 50% 에탄올 추출물이 바람직하며, 추출방법은 실시예에 기재된 바와 같이, 50% 에탄올에 섞은 후 3일동안 교반하여 얻는다.

본 발명에 있어서, 상기 추출물은 농축, 또는 희석하여 사용할 수 있고, 추출물의 증류액을 사용할 수도 있다.

본 발명은 다른 관점에서, 탈염 용암해수 및 풍난 식물세포배양추출물(Zostera marina.) 식물의 식물 세포 또는 부정근 배양물 또는 그 추출물을 함유한 모공 축소용 화장료 조성물의 제조방법을 제공한다:

(a) 풍난 식물세포배양추출물 식물의 잎, 줄기 조직을 분리하여 식물 세포 또는 부정근으로 배양하는 단계; 및/또는 (b) 상기 풍난 식물세포 배양물 또는 부정근 배양물 또는 그 추출물을 수득하는 단계; 및

(c) 탈염 용암해수를 수득하고, 상기 (a)단계의 풍난 식물세포 배양물 또는 부정근 배양물 또는 그 추출물과 혼합하여 화장료 조성물을 제조하는단계.

상기 (a)단계는 풍난 식물세포배양추출물 식물로부터 분리된 일부 조직을 가지고, 식물 조직배양물, 즉, 식물 세포 배양물, 또는 부정근 배양물을 얻는 과정이다.

본 발명에 있어서, 상기 분리한 조직으로부터 식물 세포 배양물, 부정근 배양물을 유도를 위해서 적절한 배지를 선택할 수 있다. 상기 (a)단계에서, 구체적으로는 풍난 식물세포배양추출물 식물 세포 또는 부정근 배양하기 위해 적절한 배지를 선택할 수 있다. 기술 분야에서 식물조직배양에 일반적으로 사용되고 있는 배지가 있다면, 제한 없이 사용가능하다. 식물에서는 일반적으로 MS배지, B5배지 등을 주로 사용하고, 일 예로, MS배지의 조성(1L기준시)은 NH₄NO₃ 1650 mg, KNO₃ 1900 mg, CaCl₂.2H₂O 440 mg, MgSO₄.7H₂O 370 mg, KH₂PO₄ 170 mg, KI 0.83 mg, H₃BO₃ 6.2 mg, MnSO₄.4H₂O 22.3 mg, ZnSO₄.7H2O 8.6 mg, Na₂MoO₄.2H₂O 0.25 mg, CuSO₄,5H₂O 0.025 mg, CoCl₂.6H₂O 0.025 mg, FeSO₄.7H₂O 27.8 mg, Na₂EDTA.2H₂O 37.3 mg, Myoinositol 100 mg, Nicotinic acid 0.5 mg, Pyridoxine-HCl 0.5 mg, Thiamine-HCl 0.5 mg, Glycine 2 mg, Sucrose 30000 mg 이다.

본 발명에 있어서, 상기 (a)단계에서 있어서, 배양을 통해 얻어진 식물 세포 또는 부정근 배양물 그대로를 포함하는 조성물을 적절한 형태의 화장료 조성물로 제조하거나, 또는 (b)단계에서, 상기 배양물을 공지된 추출 방법을 통해 추출물 형태로 수득하여 적절한 형태의 화장료 조성물로 제조할 수 있다.

예컨대, 상기 (b)단계는, (a)단계에서 얻어진 풍난 식물세포배양추출물의 식물 세포 또는 부정근 배양물을 건조하고, 분말화할 수 있다.

(b)단계에서는, 얻어진 풍난 식물세포배양추출물의 식물 세포 또는 부정근 배양물을 건조하고, 분말화하여 정제수에 혼합시킨 다음, 냉수 추출, 열수 추출, 호호바오일을 비롯한 식물성 오일을 이용한 추출, 무기용매를 이용한 추출 또는 에탄올을 비롯한 알코올 등의 유기용매로 추출하여 조성물을 제조하는 단계를 포함할 수 있다. 또 다른 예로, 상기 (a)단계에서 얻어진 배양물을 열풍 건조후 분말화하여 수분을 증발시켜 제조할 수 있다.

상기 (c)단계에 있어서, 탈염 용암해수를 수득하는 단계는 다음과 같다:

투석에 의하여 이온 교환막을 이용하여 용암 해수로부터 1가 이온을 제거하는 탈염 단계(i);

탈염 후, 탈염 용암해수 100중량부에 대하여, 부틸렌 글라이콜(butylene glycol) 4~6중량부, 1,2-헥산디올(1,2-hexanediol) 0.6~0.8중량부, 에칠헥실글리세린(ethylhexylglycerin) 0.01~0.2중량부를 첨가하는 단계(ii); 및

상기 단계(ii) 후, 0.1~0.3㎛ 필터로 여과하는 단계(iii);를 포함하는 과정으로부터 제조된다.

본 발명에 있어서, 상기 용암해수의 탈염 과정은, 당업계에 알려진 임의의 기술을 적용하여 수행될 수 있는데, 그러한 기술로서는 역삼투압법, 이온교환수지법, 전기투석법 등을 들 수 있다. 특히, 투석은 실시예에 제시된 바와 같이,

전기투석기를 이용할 수 있다.

본 발명에 따른 상기 탈염 과정에 있어서, 0.1~0.3㎛ 필터로 불순물을 걸러내고 전기투석기에 의해 탈염과정을 거칠 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기 단계(ii)에서, 탈염과정을 거친 후, 탈염 용암해수 100g 대하여 0.3~ 0.9㎛, 예를 들어, 0.85㎛, 0.45㎛ 필터를 통한 후 부틸렌 글라이콜 등을 첨가할 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기 조성물은 화장수, 에센스, 로션, 크림, 팩, 젤, 연고, 패치, 분무제, 마스크 시트, 앰플, 파우더 또는 세정제, 예컨대, 스킨 로션, 스킨 소프트너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 비누, 샴푸, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 프레스파우더, 루스파우더, 패치, 마스크 크림, 마스크 시트, 또는 앰플과 같은 제형을 취할 수 있다.

본 발명에 따른 화장료 조성물에 있어서는, 화장품 제제에 있어서 수용가능한 담체를 포함할 수 있다. 여기서, "화장품 제제에 있어서 수용가능한 담체"란 화장품 제제에 포함될 수 있는 이미 공지되어 사용되고 있는 화합물 또는 조성물이거나 앞으로 개발될 화합물 또는 조성물로서 피부와의 접촉시 인체가 적응 가능한 이상의 독성, 불안정성 또는 자극성이 없는 것을 말한다.

상기 담체는 본 발명의 조성물에 그것의 전체 중량에 대하여 약 1 중량 % 내지 약 99.99 중량 %, 바람직하게는 조성물의 중량의 약 90 중량부 내지 약 99.99 중량 %로 포함될 수 있다. 그러나 상기 비율은 본 발명의 화장료 조성물이 제조되는 후술한 바의 제형에 따라 또 그것의 구체적인 적용 부위(얼굴, 목 등)나 그것의 바람직한 적용량 등에 따라 달라지는 것이기 때문에, 상기 비율은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 이해되어서는 안 된다.

상기 담체로서는 알코올, 오일, 계면활성제, 지방산, 실리콘 오일, 습윤제, 보습제, 점성 변형제, 유제, 안정제, 자외선산란제, 자외선흡수제, 발색제, 향료 등이 예시될 수 있다. 상기 알코올, 오일, 계면활성제, 지방산, 실리콘 오일, 습윤제, 보습제, 점성 변형제, 유제, 안정제, 자외선산란제, 자외선흡수제, 발색제, 향료로 사용될 수 있는 화합물/조성물 등은 이미 당업계에 공지되어 있기 때문에 당업자라면 적절한 해당 물질/조성물을 선택하여 사용할 수 있다.

본 발명의 일 구현예로써, 본 발명에 따른 화장료 조성물은 상기 풍난 식물세포배양추출물 식물 세포, 부정근 배양물 또는 그 추출물 이외에 글리세린, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 폴리옥시에틸렌 경화피마자유, 에탄올, 트리에탄올아민 등을 포함할 수 있으며, 방부제, 항료, 착색료, 정제수 등을 필요에 따라 미량 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은, 다양한 형태로 제조될 수 있는데, 예컨대, 화장수, 에센스, 젤, 에멀젼, 로션, 크림(수중유적형, 유중수적형, 다중상), 용액, 현탁액(무수 및 수계), 무수 생성물(오일 및 글리콜계), 젤, 마스크, 팩, 분말, 또는 젤라틴 등의 피막이 있는 캅셀 (소프트 캅셀, 하드 캅셀) 제형 등의 형태로 제조될 수 있다.

본 발명에 있어서의 피부는 얼굴 뿐만 아니라, 두피, 전신도 포함되는 개념으로, 이러한 두피에 적용될 수 있는 화장료 조성물로써, 샴푸, 린스, 트리트먼트, 발모제 등이 있고, 전신에 적용될 수 있는 바디클렌져 등의 용도로써 다양한 형태로 제조될 수 있다.

본 발명에 따른 풍난 식물세포배양추출물 식물 세포, 부정근 배양물 또는 그 추출물을 함유 화장료 조성물의 제조방법은 전술한 제조방법에 한정되는 것은 아니며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 상기 제조방법을 일부 변형시킨 방법으로도 본 발명에 따른 풍난 식물세포배양추출물 식물 세포, 부정근 배양물 또는 그 추출물을 함유 화장료 조성물을 제조할 수 있다.

특히, 상기 화장료 조성물은 본 발명에 특별히 개시된 제조방법 이외에도, 통상적으로 알려진 제조방법을 이용하여, 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형의 형태로 제조될 수 있다.

화장료 조성물로 제조될 경우, 유화 제형의 화장품으로는 영양화장수, 크림, 에센스 등이 있으며, 가용화 제형의 화장품으로는 유연화장수가 있다. 또한, 피부과학적으로 허용가능한 매질 또는 기제를 함유함으로써 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 국소적용 또는 전신적용할 수 있는 보조제 형태로 제조될 수 있다.

또한, 적합한 화장품의 제형으로는, 예를 들면 용액, 겔, 고체 또는 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀), 비이온형의 소낭 분산제의 형태, 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한, 포말(foam)의 형태 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 제조될 수 있다.

또한, 본 발명의 화장료 조성물은 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일,염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 그리고, 상기의 성분들은 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

특히, 이하의 실시예에서는 탈염 용암해수와 풍난 식물세포배양추출물 식물 세포, 부정근 배양물 또는 그 추출물에 관한 효능을 확인하였으나, 추출물이 아닌 배양물 자체에 대해서도 이러한 효과가 있음은 당업자에게 자명할 것이다.

실시예 1-1: 탈염 용암해수의 제조

본 실시예는 탈염과정을 통해 화장료 조성물에 사용가능한 용암해수를 제조하고자 하였다. 제주도 동부지역에서 용암해수를 채수하고, 성분 분석 결과는 본 발명의 상세한 설명에 기재된 표와 같았다. 그리고 이렇게 얻은 해수를 0.2㎛ 필터로 불순물을 걸러내고, 전기투석기(ASTOM CO. LTD , 일본)에 의하여, 이온 교환막을 이용하여, 1가 이온을 제거함으로써 탈염 과정을 거쳤다. 탈염 과정을 거친 후, 탈염 용암해수 100g에 대하여 0.85㎛, 0.45㎛ 필터를 통한 후 부틸렌 글라이콜(butylene glycol) 5g, 1,2-헥산디올(1,2-hexanediol) 0.7g, 에칠헥실글리세린(ethylhexylglycerin) 0.1g를 첨가한 후, 0.2㎛ 필터로 여과하는 과정을 거쳐 화장료 조성물에 사용가능한 탈염 용암해수를 제조하였다.

실시예 1-2: 살균된 풍난으로부터 식물세포와 부정근 유도

살균된 풍난의 줄기와 잎을 NAA 0.1~1 mg/L, BA 0.01~0.1 mg/L의 생장조절물질과 수크로오스(Sucrose) 30g/L, 겔라이트(Gelite) 2.0g/L를 함유한 MS(Murashinge and Skoog, 1962) 기본배지에 접종한 후 23~27℃의 배양실에서 8주간 배양하여 식물세포를 유도하였다. 유도된 캘러스는 4주 간격으로 계대 배양하여 증식하였다.

얻어진 식물세포로부터 부정근을 유도하기 위하여 수크로오스(Sucrose) 30g/L, 겔라이트(Gelite) 2.0g/L를 함유한 MS 기본배지에 NAA(1-naphthaleneacetic acid) 0.5 mg/L 의 생장조절물질을 첨가하여 22±1℃의 암조건 배양실에서 8주간 배양하였다. 각각의 배지는 1N 수산화칼륨(KOH)을 이용하여 pH 5.8로 조정한 후, 121℃ 에서 20분간 고압멸균기를 이용하여 살균한 다음, 페트리디쉬에 분주하여 사용하였다.

유도한 부정근의 정단부를 약 1cm 정도 절단하여 수크로오스(Sucrose) 30g/L, 겔라이트(Gelite) 2.0g/L를 함유한 1/2 MS 기본배지에 생장조절물질 IBA(indole-3-butyric acid) 1mg/L 를 첨가한 배지에 접종하여, 22±1℃의 암조건 배양실에서 4 주간 배양하였다.

실시예 1-3: 본 발명에 따른 풍난 식물세포배양추출물과 부정근의 대량생산

풍난 식물체로부터 무균적으로 유도되어 배양된 풍난 식물세포 및 부정근을 대량생산하기 위하여, 상기와 같이, MS배지에 NAA(1-naphthaleneacetic acid) 0.5 mg/L가 함유된 배지에서 배양하였다. Sucrose 30 g/L가 함유된 배지에서 25±2℃의 배양실에서, 습도 70% 조건으로 20L 풍선형 생물반응기((주)삼성과학)에 공기공급량 0.1 vvm 정도로 5주간 배양하였다.

실시예 1-4: 본 발명에 따른 풍난 식물세포 및 부정근 배양 추출물 제조

실시예 1-3에서 배양하여 얻은 풍난 식물세포 및 부정근을 수확하여 깨끗한 티슈로 충분히 수분을 제거한 후 60℃로 2일 동안 건조기에서 건조하였다. 건조된 각각의 풍난 식물세포배양추출물 및 부정근 분말 50g을 용기에 담고, 1L의 정제수를 넣은 후 90 ~ 120℃ 에서 48시간 열수추출하였다. 추출 후, mesh로 여과하여 고형분을 제거하고, 여과하여 나온 풍난 식물세포 및 부정근 배양추출물을 본 발명에 사용하였다.

실시예 1-5: 본 발명에 따른 조성물의 제조

상기에서 제조된 탈염 용암해수 500~700 g, 각각의 풍난 식물세포배양추출물 및 부정근배양추출물 각각을 500~300 g 을 혼합할 수 있고, 여기서는 일 예시로써, 700g과 300g 씩을 혼합하여 1 L를 제조하였다.

본 발명에 따른 화장료 조성물의 제조

본 발명의 탈염 용암해수 및 풍난 식물 세포 또는, 부정근 배양 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장품으로 젤, 패치, 마스크, 앰플 제형의 화장품을 제조하였다.

제조예 2-1: 젤

다음 처방에 따라 통상의 젤 제조 방법에 따라 제조하였다.

원 료 명	중량 %(w/w)
글리세린	잔량
디프로필렌글리콜	5.0
폴리솔베이트60	1.0
부틸렌글라이콜	0.5
카올린	0.2
풍난식물세포추출물	0.1
탈염용암해수	0.1
에칠헥실글리세린	0.1
카프릴하이드록사믹애씨드	0.2
1,2-헥산디올	0.2
카프릴릴글라이콜	0.1
아크릴레이트/C10-30/알킬아크릴레이트크로스폴리머	0.04
부석	0.0001

제조예 2-2: 패치

다음 처방에 따라 통상의 패치 제조 방법에 따라 제조하였다.

원 료 명	중량 %(w/w)
정제수	잔량
폴리비닐피롤리돈	45.0
디메치콘코폴리올	3.0
프로필렌글라이콜	1.5
비닐피롤리돈/비닐아세테이트 코폴리머	1.0
카올린	1.0
풍난식물세포추출물	0.1
탈염용암해수	0.1

제조예 2-3: 마스크 (시트, 팩, 크림 등)

다음 처방에 따라 통상의 마스크 제조 방법에 따라 제조하였다.

원 료 명	중량 %(w/w)
정제수	잔량
풍난식물세포추출물	5.0
탈염용암해수	10.0
부틸렌글라이콜	5.0
글리세린	5.0
디프로필렌글라이콜	3.0
1,2-헥산디올	2.0
피이지-60 하이드로제네이티드 캐스터오일	0.5
알기닌	0.3
카보머	0.3
하이드록시에칠셀룰로오스	0.1
알란토인	0.05
디소듐이디티에이	0.05
잔탄검	0.05

제조예 2-4: 앰플

다음 처방에 따라 통상의 앰플 제조 방법에 따라 제조하였다.

원 료 명	중량 %(w/w)
탈염용암해수	잔량
풍난식물세포추출물	0.1
부틸렌글라이콜	6.5
글리세린	3.0
피이지-40 하이드로제네이티드 캐스터오일	0.4
알기닌	0.2
카보머	0.25
토코페릴아세테이트	0.1
카프릴하이드록사믹애씨드	0.15
1,2-헥산디올	0.1
카프릴릴글라이콜	0.1
잔탄검	0.03

실험예 1: 본 발명에 의한 조성물의 세포독성(Cytotoxicity)

실시예 1-5에서 제조한 조성물에 대한 피부 세포 생존율을 알아보기 위하여, 인간섬유아세포(Human Skin Fibroblast, CCD-986Sk)는 ATCC(American Type Culture Collection)에서 분주 받아서 배양하였다. 각 세포를 1×10⁴cells/ml의 농도로 하여 24 well 배양판에 접종하였다. 배지는 10 % FBS를 함유한 DMEM(Dubelcco'S Modified Eagle Medium, BRL,USA)을 사용하였다. 10% FBS를 함유하는 DMEM에서 48시간 배양하여 배양용기 표면적의 25 ~ 30%만큼 배양되면, 실시예 1-5에서 제조된 조성물이 함유된 FBS-free DMEM으로 교체하여 24시간 더 배양하였다. 배양 후 3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐 테트라졸리움 브롬화물 (MTT, Sigma M5655, USA) 용액 (2.5 mg/ml)을 50㎕ 첨가하고 3시간동안 추가로 배양한 후 상등액을 제거하고, 각 well 당 200㎕ 의 Dimethylsulfoxide (DMSO, Sigma D2650, USA)용액을 가한 후 20분간 교반하여 형성된 포르마잔(formazan) 결정을 녹인 다음, 100㎕ 씩을 96 well 로 취하여 Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA)로 570 nm 에서 흡광도를 측정하였다. 피부 세포의 생존율 정도는 순수한 물을 사용한 대조군의 흡광 강도를 기준으로 하기 수학식에 따라 계산하여 백분율로 표시하였고, 결과는 아래 표 5에 나타난 바와 같았다.

[수학식 1]

세포증식효과(%) = [(실험군 흡광도 - 대조군 흡광도)/대조군의 흡광도]×100

	처리농도(%)	세포 독성율 % (Cytotoxicity)
	대조군	98
본 발명에 의한 조성물	10	101
	30	105
	50	108
	70	106

상기 인간섬유아세포를 이용한 Cytotoxicity(세포독성)에 미치는 영향시험 결과, 표 5에 나타난 바와 같이, 본 발명에 의한 조성물을 농도별로 처리하였을 경우, 세포독성을 보이지 않았다. 즉, 세포생존율에 영향을 미치지 않았다.

실험예 2: 모공수축효과 인 비트로 시험 (In vitro Test)

본 발명에 의한 조성물의 모공 축소 효과를 측정하기 위해 상기 실시예에서 제조된 조성물을 대상으로 피부를 대신할 단백질로 헤모글로빈을 사용하여 모공수축효과를 시험하였다.

0.9% Phosphate Buffer Saline (0.1mM, pH 7.4)으로 헤모글로빈 용액(0.05g/50ml)을 제조하여 헤모글로빈 용액 2 ml에 실시예 1-5에서 제조한 조성물 2 ml을 가한 후, 30초 동안 진탕 혼합한 다음 3,500 rpm에서 10분 동안 원심분리하고, 그 상등액 1 ml에 정제수 2 ml을 가하여 407 nm에서 UV-Visible spectrum으로 측정하였다.

대조군으로는 PBS(Phosphate Buffer Saline) 2 ml을 가하였다.

	농 도 (%)	헤모글로빈의 침전 (%)
PBS (음성 대조군)	0	0.1
탄닌산 (양성 대조군)	1	35
본 발명에 의한 조성물	10	15
	30	32
	50	41
	70	50

본 발명에 의한 조성물을 농도별로 헤모글로빈의 침전량을 측정하여 수축효과를 평가하였고, 헤모글로빈의 침전(%)가 높을수록 모공수축 효과가 우수한 것으로 판별하였다. 즉, 본 발명에 의한 조성물이 모공수축효과가 뛰어남을 확인하였다.

실험예 3: 모공 축소 효과 피부 적용 시험

상기 실시예 1-5에서 제조한 조성물의 효능을 분석하기 위해, 실험 대상자 선정 기준에 부합하는 20명의 여성을 대상으로 상기 조성물의 피부 모공 축소에 대한 효능을 평가 하였다.

실험 대상자는 실험 12시간 전부터 기초제품 사용, 화장 및 바디제품 사용을 금지하고, 실험 시작 1주 전부터 평가결과에 영향을 미칠 수 있는 피부 개선을 목적으로 하는 치료제, 화장품 및 의약외품 등의 사용을 모두 금하였다. 또한, 의학적 처치, 마사지 등의 시술 또한 일체 금하도록 하였다. 실험은 세안 후 30분간 공기의 이동이 없고, 직사광선이 없는 항온항습(20~24℃, 40~60% RH) 조건에서 안정을 취한 상태에서 진행하였다. 실험 전, 전안촬영시스템(DM-3)을 이용하여 실험 대상자의 안면 전체를 촬영하였다(도 1).

상기 조건에서 안정을 취한 후, 젤 제형의 화장료 조성물 (실시예 2)을 적당량 취하여 물기가 없는 얼굴에 펴 바른 뒤, 3~5분 동안 부드럽게 마사지하고 미온수로 충분히 씻어내었다.

실험 후, 실험 전과 동일하게 전안촬영시스템(DM-3)을 이용하여 실험 대상자의 안면 전체를 촬영하였다(도 1). 도 1은 본 발명의 모공 축소용 화장료 조성물을 사용한 실험대상자 3명의 안면 촬영 사진이다.

한편, 하기 수학식 2을 이용하여 조성물의 모공 축소율을 계산하였고, 그 평균치를 표 7에 나타냈다. 또한, 모공 축소율은 표 8, 모공이 축소된 실험 대상자 비율은 표 9에 나타내었다.

표 7은 실시예 2의 화장료 조성물을 사용한 직후, 실험대상자 20명의 피부모공 측정 결과(mm²)의 평균값이고, 표 8는 실시예 2의 화장료 조성물을 사용한 직후의 피부모공 크기의 감소율(%) 및 통계분석 결과를 나타낸다. 또한, 표 9은 피부모공 크기가 감소된 실험 대상자의 비율을 나타낸다.

[수학식 2]

	사용 전	사용 직 후
평균(mm2)	32.62	26.29
표준편차	9.96	10.02

	사용 직 후
감소율(%)	9.41
유의확률(p-value)	0.000***(p<0.001)

	사용 직 후
감소된 실험 대상자 비율(%)	100

상기 표 7 내지 9와 도 1에 의할 경우, 본 발명의 조성물이 모공 축소에 우수한 효능을 보임을 확인할 수 있었다.

이상으로 본 발명의 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (5)

1. 탈염 용암해수 및 풍난(Neofinetia falcata) 식물세포 또는 부정근 배양물 또는 그 추출물을 유효성분으로 하는 피부 모공 축소용 화장료 조성물.
   
2. 제1항에 있어서,
   상기 탈염 용암해수는,
   (i) 투석에 의하여 이온 교환막을 이용 1가 이온을 제거하는 탈염 단계;
   (ii) 탈염 후, 탈염 용암해수 100중량부에 대하여, 부틸렌 글라이콜(butylene glycol) 4~6중량부, 1,2-헥산디올(1,2-hexanediol) 0.6~0.8중량부, 에칠헥실글리세린(ethylhexylglycerin) 0.01~0.2중량부를 첨가하는 단계; 및
   (iii) 상기 단계(ii) 후, 0.1~0.3㎛ 필터로 여과하는 단계;를 포함하는 과정으로부터 제조되는 것을 특징으로 하는 모공 축소용 화장료 조성물.
   
3. 제1항에 있어서, 상기 풍난 식물세포 또는 부정근 배양물의 추출물은 풍난 식물세포 또는 부정근 배양물의 냉수, 열수 또는 유기 용매 추출물인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
   
4. 제1항에 있어서, 상기 탈염 용암해수 100중량부에 대하여 풍난 식물세포 또는 부정근 배양물 또는 그 추출물은 10~100 중량부로 혼합되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
   
5. 제1항에 있어서,
   상기 조성물의 제형은 화장수, 에센스, 로션, 크림, 팩, 젤, 연고, 패치, 분무제, 마스크 시트, 앰플, 파우더 또는 세정제인 것을 특징으로 하는 모공 축소용 화장료 조성물.
   
   

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