KR20130138795A

KR20130138795A - 다층 조직 시스템 및 방법

Info

Publication number: KR20130138795A
Application number: KR1020137011148A
Authority: KR
Inventors: 아드리안 씨. 사마니고; 로스 엠. 윌킨스
Original assignee: 알로소스
Priority date: 2010-10-01
Filing date: 2011-08-12
Publication date: 2013-12-19
Anticipated expiration: 2031-08-12
Also published as: AU2011307512C1; CA2812676A1; US9616152B2; EP2621404A2; WO2012044401A2; WO2012044401A3; AU2011307512B2; KR101845260B1; CA2812676C; US20130247517A1; EP2621404A4; US20120083900A1; AU2011307512A1; US9358320B2

Abstract

본 발명의 실시양태는 인간 출산 조직에서 얻은 양막 조직으로 만들어진 패치를 포함하는 항-유착 상처 드레싱을 포괄한다. 예시적인 양막 패치는 접힌 패치의 바깥쪽에 상피층 및 접힌 패치의 안쪽에 섬유아세포층이 있게 양막 구간을 맞접어서 제작될 수 있다. 경우에 따라, 개별의 양막 조직 조각들을 함께 샌드위치시켜 다층 패치를 제공할 수 있다. 섬유아세포층의 대향하는 면 사이에 부착을 야기하기 위해 층을 이룬 양막에 충분한 압력을 가한다. 가압된 섬유아세포층은 양막 패치의 바깥쪽에 상피층이 있게 양막 패치가 함께 붙도록 유지시키는 기계적 강도를 제공한다.

Description

다층 조직 시스템 및 방법{MULTI-LAYER TISSUE SYSTEMS AND METHODS}

이 특허협력조약 출원은 2010년 10월 1일에 출원된 명칭 "BACK TO BACK AMNIOTIC PATCH"의 미국 예비특허출원 번호 61/388,986 및 2011년 7월 20일에 출원된 명칭 "MULTI-LAYER TISSUE SYSTEMS AND METHODS"의 미국 정규특허출원 번호 13/186,661의 권리를 청구한다. 이 출원은 또한 2008년 4월 25일 출원된 명칭 "ANTI-ADHESION BARRIER WOUND DRESSING COMPRISING PROCESSED AMNIOTIC TISSUE AND METHOD OF USE"의 미국 예비특허출원 번호 61/047,842 및 2009년 4월 23일 출원된 명칭 "ANTI-ADHESION BARRIER WOUND DRESSING COMPRISING PROCESSED AMNIOTIC TISSUE AND METHOD OF USE"의 미국 정규특허출원 번호 12/428,836에 관한 것이다. 본원에서 상기 출원들의 각각의 전체 내용은 참고문헌으로 포함된다.

본 발명의 실시양태는 전반적으로 의료용 드레싱 분야에 관한 것이고, 특히 다층 조직 조성물 및 이것의 사용 및 제작 방법에 관한 것이다.

인간 출산 조직은 양막낭(양막 및 융모막, 두 조직층을 포함), 태반, 제대 및 각각에 함유된 세포 및 체액으로 규정될 수 있다. 인간 양막은 안구 표면 장애 치료 및 피부 이식술을 포함한 다양한 외과적 절차에서 수년 동안 유착을 방지하기 위해 사용되었다. 이와 관련되어서, 확실히 알려진 의료 기술은 외과적 드레싱 형태로 환자에게 양막 조직의 사용을 수반한다. 예를 들면, 양막의 외과적 상처 드레싱은 WO 2009/132186에 기술되어 있으며, 그 내용은 본원에 참고문헌으로 포함된다. 양막 조성물 및 방법이 현재 이용 가능하고 그것이 필요한 환자에게 실질적인 혜택을 제공함에도 불구하고, 많은 발전이 향상된 드레싱 시스템 및 환자 치료 방법을 제공하기 위해 여전히 이루어질 수 있다. 본원에서 기술된 드레싱 시스템 및 치료 및 제작 방법은 이러한 중요한 요구에 대한 추가적인 해결책 및 해답을 제공한다.

본 발명의 실시양태는 백-투-백(back-to-back) 조직 패치 또는 드레싱 및 그들의 사용 및 제작 방법을 포괄한다. 일부 경우에, 실시양태는 드레싱의 두 개의 대향하는 면에 상피층 표면이 존재하는 다층 조직 조성물을 제공한다. 이러한 드레싱은 신경 랩, 건 랩, 골 결손 오버레이(overlay) 등으로 사용하기에 아주 적합하다. 이와 관련되어서, 이러한 드레싱은 족근골관증후군, 장경골인대 협착, 절단과 관련된 환지통, 손상된 반월판, 말초 신경 손상 또는 상해 등을 가진 환자의 치료에 사용될 수 있다. 추가로, 드레싱은 추궁절제술, 전방요추간유합술(ALIF) 절차, 추궁절개술을 포함하는 척추 치료에서 및 장무지신근건 수술에서 사용될 수 있다. 임의의 수술 또는 외상 후에 얼마 안되어, 섬유증의 침윤이 개시될 수 있고, 이로 인해 섬유소가 수술 또는 외상 부위에서 침착되고 섬유질의 유착으로 조직화되는 것을 야기한다. 본 발명의 실시양태에 따른 다층 양막 드레싱의 사용은 이러한 유착의 발생을 방지하거나 저해할 수 있다.

하나의 측면에서, 본 발명의 실시양태는 다층 양막 조직 패치 제작 방법을 포함한다. 예시적인 방법은 상피층, 기저막, 치밀층, 섬유아세포층을 가진 첫 번째 양막층을 얻는 것, 상피층, 기저막, 치밀층, 섬유아세포층을 가진 두 번째 양막층을 얻는 것, 첫 번째 및 두 번째 양막층을 접근시키는 것 및 첫 번째 양막층의 상피층과 두 번째 양막층의 상피층 사이에 배치되는 뒤얽히거나 접합된 섬유아세포 영역 형성하기 위하여, 첫 번째 양막층의 섬유아세포층의 적어도 일부가 두 번째 양막층의 섬유아세포층의 적어도 일부와 작동가능하게 결합되거나 부착되도록 첫 번째 및 두 번째 양막층을 가공하는 것을 포함할 수 있다. 이와 관련되어서, 예시적인 방법은 첫 번째 부분 및 두 번째 부분을 가진 양막 조직을 얻는 것 및 각각 상피층, 기저막, 치밀층 및 섬유아세포층을 가진 첫 번째 양막층 및 두 번째 양막층을 제공하기 위해 첫 번째 부분이 적어도 부분적으로 두 번째 부분과 겹치도록 양막 조직을 맞접는 것을 포함할 수 있다. 이러한 방법은 첫 번째 양막층의 상피층과 두 번째 양막층의 상피층 사이에 배치되어 있는 얽혀지거나 접합된 섬유아세포 영역을 형성하기 위하여, 첫 번째 양막층의 섬유아세포층의 적어도 일부가 두 번째 양막층의 섬유아세포층의 적어도 일부와 작동가능하게 결합되거나 부착되도록 접힌 양막 조직을 가공하는 것 또한 포함할 수 있다.

다른 측면에서, 본 발명의 실시양태는, 예를 들어 상피층 및 기저막을 가진 첫 번째 조직층 및 상피층 및 기저막을 가진 두 번째 조직층을 포함할 수 있는 다층 패치를 포괄한다. 첫 번째 및 두 번째 조직층의 상피층은 각각 패치의 첫 번째 및 두 번째 대향하는 외부 표면으로 규정할 수 있다. 일부 경우에, 첫 번째 및 두 번째 조직층의 각각은 양막 조직층을 구성한다. 일부 경우에, 첫 번째 조직층의 양막층은 섬유아세포층을 포함하고, 두 번째 조직층의 양막층은 섬유아세포층을 포함하고, 첫 번째 양막층의 섬유아세포층의 적어도 일부는 두 번째 양막층의 섬유아세포층의 적어도 일부와 연결된다. 일부 경우에, 첫 번째 양막층의 상피층과 두 번째 양막층의 상피층 사이에 배치된 경계면을 형성하기 위하여, 첫 번째 양막층의 섬유아세포층의 적어도 일부는 두 번째 양막층의 섬유아세포층의 적어도 일부와 결부된다. 일부 경우에, 첫 번째 양막층은 섬유아세포층과 기저막 사이에 배치된 치밀층 및 섬유아세포층을 포함하고, 두 번째 양막층은 섬유아세포층과 기저막 사이에 배치된 치밀층 및 섬유아세포층을 포함한다.

일부 실시양태에 따라, 첫 번째 및 두 번째 조직층의 각각은 양막 조직층, 장 조직층 또는 제대 조직층을 포함할 수 있다. 경우에 따라, 첫 번째 층은 접힌 부분을 통해 두 번째 층과 연결될 수 있다. 일부 경우에, 패치는 약 40 마이크로미터 내지 약 500 마이크로미터 범위 내의 두께를 갖는다. 일부 경우에, 패치는 약 70 마이크로미터 내지 약 200 마이크로미터 범위 내의 두께를 갖는다. 경우에 따라, 패치는 살균될 수 있다. 예시적인 패치는 또한 첫 번째 조직층, 두 번째 조직층 또는 둘 다에 위치된 배킹(backing) 재료를 포함할 수 있다. 일부 경우에, 패치는 약 3.3 MPa 내지 약 36.4 MPa 범위의 인장력을 갖는다. 일부 경우에, 패치는 약 6.6 MPa 내지 약 18.2 MPa 범위의 인장력을 갖는다. 일부 경우에, 패치는 약 0.40 N 내지 약 0.70 N 범위의 4.0 봉합사 인발력을 갖는다. 일부 실시양태에 따라, 첫 번째 조직층은 첫 번째 배향으로 배치되고, 두 번째 조직층은 첫 번째 배향에서 각지게 어긋난 두 번째 배향으로 배치된다. 경우에 따라, 첫 번째 배향은 두 번째 배향에서 약 90 도 각지게 어긋나 있을 수 있다. 일부 경우에, 패치는 약 9 MPa 내지 약 47.2 MPa 범위내의 인장력을 갖는다. 일부 경우에, 패치는 약 18 MPa 내지 약 23.6 MPa 범위내의 인장력을 갖는다. 일부 경우에, 첫 번째 및 두 번째 섬유아세포층의 접합되거나 압착된 부분은 패치가 염수 용액에 현탁될 때 계속 결부된 상태에 있다. 경우에 따라, 첫 번째 및 두 번째 조직층 둘 다 혹은 둘 중 하나는 글루타르알데히드로 처리될 수 있다.

다른 측면에서, 본 발명의 실시양태는 패치를 형성하기 위하여 상피층 및 기저막을 가진 두 번째 조직층과 상피층과 기저막을 가진 첫 번째 조직층을 접촉하는 것을 포함할 수 있는 다층 조직 패치의 제작 방법을 포괄하고, 첫 번째 및 두 번째 조직층의 상피층은 각각 패치의 첫 번째 및 두 번째 대향하는 외부 표면으로 규정한다. 일부 경우에, 첫 번째 조직층 및 두 번째 조직층은 조직 한 조각의 각 부분이고, 접촉 단계 또는 제작 방법은 첫 번째 조직층의 일부분이 적어도 부분적으로 두 번째 조직층의 일부분과 겹치도록 조직 한 조각을 맞접는 것을 포함할 수 있다. 일부 경우에, 첫 번째 조직층 및 두 번째 조직층은 조직의 각각 분리된 조각이고, 접촉 단계 또는 제작 방법은 첫 번째 조직층의 일부분이 적어도 부분적으로 두 번째 조직층의 일부분과 겹치도록 첫 번째 및 두 번째 층을 접근시키는 것을 포함할 수 있다. 일부 경우에, 접근할 때 첫 번째 조직층이 첫 번째 배향으로 배치되고 두 번째 조직층이 첫 번째 배향에서 각지게 어긋난 두 번째 배향으로 배치된다. 예를 들면, 첫 번째 배향은 두 번째 배향에서 약 90 도 각지게 어긋나 있을 수 있다.

일부 실시양태에 따라, 첫 번째 및 두 번째 조직층 각각은 섬유아세포층을 포함하고, 접촉 단계 또는 제작 방법은 첫 번째 조직층의 상피층 및 두 번째 조직층의 상피층 사이에 배치된 섬유아세포 영역을 형성하기 위하여, 첫 번째 조직층의 섬유아세포층의 적어도 일부가 두 번째 조직층의 섬유아세포층의 적어도 일부와 접합되도록 첫 번째 및 두 번째 조직층을 접근시키는 것을 포함한다. 경우에 따라, 첫 번째 및 두 번째 조직층의 각각은 양막 조직층을 포함한다. 일부 경우에, 첫 번째 및 두 번째 조직층 각각은 양막 조직층, 장 조직층 또는 제대 조직층일 수 있다. 경우에 따라, 제작 방법은 15분 이하의 기간 동안 1 % 글루타르알데히드 용액으로 첫 번째 및 두 번째 조직층을 처리하는 것을 포함할 수 있다. 일부 경우에, 제작 방법은 첫 번째 조직층과 두 번째 조직층을 서로 압축하는 것을 포함할 수 있다. 예를 들어, 첫 번째 조직층 및 두 번째 조직층은 압축 장치로 서로 압축될 수 있다. 일부 경우에, 첫 번째 조직층 및 두 번째 조직층은 약 10 psi 내지 약 400 psi 범위 내의 힘으로 서로 압축된다. 일부 경우에, 첫 번째 조직층 및 두 번째 조직층은 약 20 psi 내지 약 50 psi 범위 내의 힘으로 서로 압축된다. 일부 경우에, 첫 번째 조직층과 두 번째 조직층은 약 5초 내지 약 24시간 범위 내의 지속 기간 동안 서로 압축된다. 일부 경우에, 첫 번째 조직층 및 두 번째 조직층은 약 30초 내지 약 12시간 범위 내의 지속 기간 동안 서로 압축된다. 경우에 따라, 첫 번째 조직층 및 두 번째 조직층은 약 15분의 지속 기간 동안 약 40 psi의 힘으로 서로 압축될 수 있다.

또 다른 측면에서, 본 발명의 실시양태는 다층 조직 패치로 환자를 치료하는 방법을 포괄한다. 예시적인 방법은 상피층 및 기저막이 있는 첫 번째 조직층 및 상피층 및 기저막이 있는 두 번째 조직층을 가진 다층 조직 패치를 얻는 것을 포함할 수 있다. 첫 번째 및 두 번째 조직층의 상피층은 각각 패치의 첫 번째 및 두 번째 대향하는 외부 표면으로 규정할 수 있다. 방법은 환자에게 다층 조직 패치를 투여하는 것을 추가로 포함한다. 일부 경우에, 다층 조직 패치는 환자의 신체 위 또는 내의 수술 부위에 투여된다. 일부 경우에, 다층 조직 패치는 환자의 신체 위 또는 내의 외상 부위에 투여한다. 일부 경우에, 다층 조직 패치는 상해입은, 손상된, 분쇄된, 봉합된, 염증이 생긴 또는 결찰된 환자의 조직에 투여된다. 예시적인 방법은 환자 내부의 대향하는 해부학적 구조 사이에 다층 조직 패치를 배치하는 것 또한 포함할 수 있다. 일부 방법은 환자 내부의 하나 이상의 해부학적 구조 둘레에 다층 조직 패치를 배치하는 것을 수반할 수 있다. 일부 방법의 실시양태에 따라, 투여 단계는 환자에게 조직 패치를 결합하는 것을 수반할 수 있다. 일부 경우에, 투여 단계는 환자에게 조직 패치를 봉합하는 것을 포함할 수 있다. 일부 경우에, 투여 단계는 패치 부분을 함께 묶거나 결합시키기 위하여, 조직 패치에 하나 이상의 스테이플(staple), 봉합, 매듭, 핀 등을 위치시키는 것을 포함할 수 있다.

일부 실시양태에 따라, 투여 단계는 환자의 신경 둘레를 패치로 감싸는 것, 환자의 건 둘레를 패치로 감싸는 것, 환자의 골 결손 위에 패치를 온레이(onlay)하는 것, 환자의 족근골관 내에 패치를 위치시키는 것, 추궁절제술 절차 동안 환자의 척추에 패치를 적용하는 것, 전방요추간유합술 절차 동안 환자의 척추에 패치를 적용하는 것, 추궁절개술 절차 동안 환자의 척추에 패치를 적용하는 것, 환자의 말초 신경과 패치를 접촉시키는 것, 환자의 장경골인대와 패치를 접촉시키는 것, 환자의 반월판과 패치를 접촉시키는 것 또는 환자의 장무지신근건과 패치를 접촉시키는 것을 포함할 수 있다. 일부 경우에, 첫 번째 및 두 번째 층 중 하나 또는 둘 모두는 글루타르알데히드로 처리된다. 일부 경우에, 첫 번째와 두 번째 조직층의 각각은 양막 조직층을 포함한다. 일부 경우에, 첫 번째 조직층의 양막층은 섬유아세포층을 포함하고, 두 번째 조직층의 양막층은 섬유아세포층을 포함하고, 첫 번째 양막층의 섬유아세포층의 적어도 일부는 두 번째 양막층의 섬유아세포층의 적어도 일부와 결합된다. 일부 경우에, 첫 번째 양막층의 상피층 및 두 번째 양막층의 상피층 사이에 배치된 경계면을 형성하기 위하여, 첫 번째 양막층의 섬유아세포층의 적어도 일부는 두 번째 양막층의 섬유아세포층의 적어도 일부와 결합된다. 일부 경우에, 첫 번째 양막층은 섬유아세포층 및 기저막 사이에 배치된 치밀층 및 섬유아세포층을 포함하고, 두 번째 양막층은 섬유아세포층 및 기저막 사이에 배치된 치밀층 및 섬유아세포층을 포함한다. 일부 경우에, 첫 번째 및 두 번째 조직층의 각각은 양막 조직층, 장 조직층 또는 제대 조직층을 포함한다.

따라서, 본 발명의 실시양태는, 일부 측면에서, 인간 출산 조직에서 얻은 양막 조직으로 만들어진 패치를 포함하는 항-유착 상처 드레싱에 관한 것이다. 양막 패치는 접힌 패치의 바깥쪽에 상피층이 및 접힌 패치의 안쪽에 섬유아세포층이 있게 양막의 구간을 맞접어서 제작될 수 있다. 경우에 따라, 접힌 부분을 통해서 연결되지 않는 두개의 분리된 양막층 조각을 접근시키거나 서로 나란히 위치시킬 수 있다. 섬유아세포층의 대향면의 섬유가 부착하게 되는 것을 야기하기 위해 충분한 압력이 접힌 양막에 가해질 수 있다. 부착된 섬유아세포층은 양막 패치의 바깥쪽 상피층과 양막 패치를 함께 붙도록 유지하기 위한 기계적 강도를 제공한다.

일부 실시양태에서, 인접한 양막층은 각종 글루(glue), 접착제, 접합제 또는 시멘트로 접합될 수 있다. 예를 들어, 양막층은 메틸-2-시아노아크릴레이트, 에틸-2-시아노아크릴레이트, n-부틸 시아노아크릴레이트, 2-옥틸 시아노아크릴레이트 등과 같은 시아노아크릴레이트 기반 접착제를 사용하여 결합될 수 있다. 유사하게, 의료용 접착제, 피부 글루, 생물학적 글루 및 관련된 제품은 양막층을 함께 접합하는데 사용될 수 있다. 일부 경우에, 양막층은 티씰(Tisseel)과 같은 섬유소 글루를 사용하여 함께 결합될 수 있다. 일부 경우에, 양막층은 블루(blue) UV 빛으로 경화되는 수지 이오노머 시멘트와 같은 치과용 폴리머를 사용하여 합쳐질 수 있다. 일부 경우에, 젤라틴 용액 또는 콜라겐 용액은 다수의 양막층을 함께 부착하는데 사용될 수 있다.

환자 내에 위치될 때, 다층 양막 드레싱은 조직 치유 동안 대향하는 해부학적 구조 사이에서 장벽 제제로 작용할 수 있어, 유착의 형성을 방지하거나 저해한다. 예를 들어, 다층 양막 드레싱은 골반, 자궁 또는 난소 유착 등의 형성을 방지하거나 저해하기 위해 부인과 절차에서 사용될 수 있다. 다른 유착, 예를 들면 건 절제 둘레에서의 그것 또는 신경 랩 유착은 모두 염증 반응 및 세포 섬유 반응 및 피브리노겐/섬유소의 존재를 수반하는 점에서 다소 유사하다. 따라서, 다층 양막 드레싱은 이러한 증상에도 사용될 수 있다. 전형적인 건 경계면 유착은 대게 흉터 반응을 수반하여, 다층 드레싱은 건에의 이러한 유착을 방지하고 저해하는데 사용될 수 있다. 일반적으로, 유착은 복부 및 골반 수술을 포함하는 수술의 통상적인 예후이다. 그러므로, 외과의사 및 다른 의료인은 이러한 상황에서 다층 양막 드레싱의 용도를 발견할 것이다.

상기 기술된 것 및 본 발명의 실시양태의 많은 다른 특색 및 수반되는 장점은 다음의 상세한 설명을 참고로 하여 첨부된 도면과 관련해서 고려될 때 명백해지고 추가적인 이해가 될 것이다.

도 1은 본 발명의 실시양태에 따른 태낭 단편의 조직 구조 단면도를 보여준다.
도 2는 본 발명의 실시양태에 따라, 접힌 양막 부분의 단면도를 보여주고, 양막 패치에 압력을 가하는 방향을 보여준다.
도 3은 본 발명의 실시양태에 따라, 백-투-백 양막 패치의 단면도를 보여준다.
도 4A는 본 발명의 실시양태에 따라, 양막 단일 층의 단면을 보여주고, 도 4B는 백-투-백 양막 패치 단편의 단면을 보여준다.
도 5A 및 5B는 본 발명의 실시양태에 따른 백-투-백 양막 드레싱의 양상을 보여준다.
도 6, 6A, 6B, 6C 및 6D는 본 발명의 실시양태에 따른 백-투-백 양막 드레싱의 양상을 보여준다.
도 7, 7A 및 7B는 본 발명의 실시양태에 따라, 백-투-백 양막 패치 생산 기술의 양상을 도시한다.
도 8A, 8B, 8C 및 8D는 본 발명의 실시양태에 따른 백-투-백 양막 드레싱의 양상을 보여준다.
도 9는 본 발명의 실시양태에 따라, 백-투-백 양막 패치의 단면도를 묘사한다.
도 10A 및 10B는 본 발명의 실시양태에 따른 예시적인 백-투-백 조직 패치의 압착 특징을 도시한다.
도 11A 및 11B는 본 발명의 실시양태에 따른 예시적인 백-투-백 조직 패치의 압착 특징을 도시한다.
도 12A 및 12B는 본 발명의 실시양태에 따른 예시적인 백-투-백 조직 패치의 압착 특징을 도시한다.
도 13A 및 13B는 본 발명의 실시양태에 따른 예시적인 백-투-백 조직 패치의 압착 특징을 도시한다.

본 발명의 실시양태는 패치의 양쪽 면 위에 상피층을 가진 "백-투-백" 양막 패치를 형성하기 위해 양막 조직 부분을 맞접어서 형성된 양막 드레싱 또는 패치를 포괄한다. 일부 경우에, 양막 조직의 구간을 접어서 양막의 섬유아세포층이 패치를 함께 붙도록 유지시키게 하는 충분한 압력을 받게 하여, 이로 인해 패치의 기계적 강도를 향상시키고, 얇은 조직 크기를 유지하는 동시에 취급하기 쉬운 패치를 제공하며, 환자가 원하는 위치에서 패치를 제 위치에 유지시키는 봉합을 할 수 있게 하는 큰 강도를 가진 패치를 제공한다. 예시적인 백-투-백 양막 패치는 척추, 무릎, 어깨 또는 분만 수술, 외상과 관련된 상처 또는 상해, 심혈관 수술, 혈관형성 자극, 뇌 또는 신경 수술, 화상 및 상처 치료, 눈 수술, 신경 랩, 건 랩을 수반하는 다수의 증상에서 또는 항-유착 장벽이 바람직한 임의의 다른 수술에서 유착을 방지하는데 사용될 수 있다. 특정한 면역이 면제된 특성 및 유리한 치유 특징 때문에, 양막 조직은 드레싱 용도로 아주 적합하다. 장 및 제대 조직을 포함하여 다른 기증자 조직은 대향하는 상피 외층을 가진 백-투-백 드레싱의 제작에 사용될 수 있다.

예시적인 양막 가공 절차는 WO 2009/132186에 기술되어 있으며, 이 내용은 본원에서 참고문헌으로 포함된다. 단일 양막층을 생산하는 방법은 예를 들어, 인간 출산 조직(예를 들면 양막, 융모막, 제대 및 태반)을 얻는 것, 출산 조직에서 태반 및 제대를 제거하는 것, 융모막에서 양막을 분리하는 것, 멸균 염수 용액으로 양막을 헹구는 것, 15분 이하의 기간 동안 1 % 글루타르알데히드 용액에 양막을 담그는 것, 멸균 염수 용액에서 글루타르알데히드 처리된 양막을 헹구는 것을 포함할 수 있다. 제한된 글루타르알데히드 처리는 신체 내부 이식에 사용될 수 있는 약간 가교된 양막 패치를 제공한다. 제작된 단일층 양막은 상피 표면과 간질 표면을 갖는다. 본래의 출산 조직 양막에 관해서, 상피 표면은 안쪽 면(아기 쪽을 향한)에 있고 간질 표면은 바깥 면(어머니 쪽을 향한)에 있다. 단일 층 양막 조직이 준비되면, 이어서 양막층을 맞접어서 이중층 패치를 제공한다. 접을 때, 외부에 상피 표면이 배치되게, 간질 표면은 서로를 향하게 한다. 일부 실시양태에 따라, 접힌 부분은 포장하기 전에 접힌 가장자리의 약 2 mm 내지 3 mm 사이를 자르거나 제거하여 제거된다. 경우에 따라, 외부 표면에 상피 표면이 배치되게, 단일 양막층의 분리된 조각을 함께 붙도록 배치하여 이중층 드레싱을 제공할 수 있다. 간질층에 관해서, 이것은 섬유아세포층으로 또한 지칭될 수 있다.

따라서, 일부 측면에서, 항-유착 상처 드레싱은 인간 출산 조직에서 얻은 양막으로 만들어진 패치 하나 이상을 포함한다. 예시적인 양막 패치는 패치의 양쪽 면 위에 상피층을 제공하도록 제작될 수 있다. 다른 측면에서, 본 발명의 실시양태는 양쪽 면 위에 상피층을 가진 패치이면서, 양막 조직으로 만들어진 패치를 제조하기 위해 인간 출산 조직을 가공하는 방법에 관한 것이다. 또 다른 측면에서, 본 발명의 실시양태는 양막 패치를 사용하는 방법에 관한 것이다.

일부 실시양태에 따라, 용어 "양막"은 배아 및 태아의 둘레에 폐쇄 낭을 형성하고 양수를 함유하는 얇은 막을 지칭할 수 있다. 일부 경우에, 용어 "양막" 및 "양막낭"은 교체해서 사용될 수 있다. 용어 "간질" 또는 "간질 면"은 섬유상이고 4개의 층으로 만들어진 조직의 지지하는 면을 지칭할 수 있고 또한 "매끄러운 면"으로 지칭될 수 있다. 용어 "상피 면"은 상피(또는 상피세포)를 함유한 조직 면을 지칭할 수 있으며, 이는 자유 표면을 덮거나 관 또는 동물의 체강 안을 막처럼 싸고 신체의 다른 부분을 둘러싸고 보호하는 것으로 특히 사용하는 세포 조직 막일 수 있다. 일부 경우에, 용어 "상피 면", "거친 면" 및 "태아 면"은 교체해서 사용될 수 있다. 용어 "융모막"은 어머니 및 양막 사이에 존재하는 가장 바깥막을 지칭할 수 있다. 용어 "바르톤 젤리(Wharton's Jelly)"는 융모막 및 양막을 분리한 양막의 외부에 위치한 젤라틴상 물질을 지칭할 수 있다. 용어 "글루타르알데히드"는 두개의 알데히드기를 함유한 C₅H₈O₂ 화합물을 지칭할 수 있고 살균제로 및 생물학적 조직에서 가교하는데 사용될 수 있다. 용어 "태반"은 어머니의 자궁과 태아를 하나로 묶고 그것의 신진 대사 교환을 매개하는 혈관 기관을 지칭할 수 있다.

도면을 살피면, 도 1은 양막 A 및 융모막 C의 해부도를 포함하며, 인간 태낭 구조 (1)의 조직 특색을 도시한다. 여기서 도시된 바와 같이, 양막층은 수개의 세포층을 갖고 서로 다른 세포 성분의 양면을 갖는다. 이 묘사에 따라, 양막 (A)는 기저막 (AB)에 부착된 외배엽에서 유도된 원주형의 상피 세포 (AE)의 단일 층을 포함한다. 이어서, 기저막 (AB)는 콜라겐 Ⅰ, 콜라겐 Ⅲ, 콜라겐 Ⅳ, 라미닌, 글리코사미노글리칸 및 피브로넥틴을 포함하고, 결합조직 밑층에 부착된다. 결합조직은 망상 섬유의 무세포성 치밀층 (AC), 섬유아세포층 (AF) 및 점액에 둘러싸인 미세 원섬유의 망상구조를 형성하는 스펀지층 (AS)(바르톤 젤리로 지칭됨)를 포함한다. 양막 (A)가 융모막 (C)에서 분리될 때, 한 면에 상피 세포가 있는 상피층 (AE) 및 반대 면에 섬유아세포층 (AF)를 가진 양면의 비대칭 조직이 생산된다. 따라서, 분리된 양막 (A)는 한쪽면에 상피층 (AE) 및 대향하는 면에 섬유아세포층 (AF)를 포함한다. 상피 및 섬유아세포층 사이에는 기저막 (AB) 및 치밀층 (AC)가 있다. 섬유아세포층은 섬유아세포를 함유하는 세망의 성긴 망상구조를 포함하는 것으로 여겨질 수 있다. 섬유아세포층은 또한 전형적으로 콜라겐(예를 들어 Ⅰ, Ⅲ 및 Ⅵ형) 및 글리코단백질(예를 들어 니도겐, 라미닌 및 피브로넥틴)을 포함한다.

도 2에서 나타난 바와 같이, 드레싱 또는 패치를 양막 조직 구간을 접고 함께 붙도록 그것에 압력을 가하거나, 도 3에서 묘사된대로, 상피층 (10)이 양막 패치 (5)의 상하 외부 표면 모두에 있도록, 양막층 조직의 두개의 분리 조각을 함께 붙도록 위치하여 형성할 수 있다. 양막 패치 (5)의 양면은 또한 대향하는 기저막 (12), 치밀층 (14) 및 섬유아세포층 (16)을 갖는다. 두개의 섬유아세포층 (16)을 서로 근접하게 위치시키고, 양막 패치 (5)의 중심에서 서로에게 압력을 가하거나 부착시켜 결합된 섬유아세포 영역 (15)를 형성한다. 도 2를 참고하여, 양막이 접힌 후, 패치의 위쪽 절반 (7)(예를 들면 첫 번째 양막층)의 섬유아세포층 (16)은 패치의 대향하는 아래쪽 절반 (9)(예를 들면 두 번째 양막층)의 섬유아세포층 (16)과 서로 마주본다. 첫 번째 및 두 번째 양막층은 압력 또는 힘 화살표 (A) 및 (B)에 표시된대로 함께 붙도록 압력을 받는다. 패치를 함께 붙도록 유지하기 위하여 섬유아세포층 (16)은 서로에게 부착된다. 제작된 패치는 "백-투-백" 양막 패치 또는 드레싱으로 지칭될 수 있다.

놀랍게도 그리고 예상외로, 양막의 간질면 위의 섬유아세포층 (16)은 압력 처리 후에 서로 부착되고, 이로 인해 첫 번째와 두 번째 양막층 (7), (9)가 함께 붙도록 유지된다. 패치 (5)는 염수에 현탁될 때 같이 붙어있는다. 그러나 두개의 면 (7), (9)는 박리력과 같은 물리적 분리력의 인가시에 분리될 수 있다. 패치 제품은 포장될 수 있고, 감마선 조사, 에틸렌 옥사이드, 전자빔 등과 같이 당업자에게 알려진 표준 공정을 통해 마지막에 살균될 수 있으며, 실온에서 저장할 수 있다. 예시적인 백-투-백 양막 패치를 생산하는 공정의 자세한 실시예는 본원의 다른곳에서 추가로 기술된다.

도 4A는 단일 양막층 (40a)의 샘플을 보여준다(20X H & E 염색된 현미경 이미지). 도 4B는 두께 T를 가진 백-투-백 이중층 양막 패치 (40b)의 샘플을 보여준다(20X H & E 염색된 현미경 이미지). 여기서 도시된 바와 같이, 백-투-백 양막 패치는 일반적으로 조직 중간의 수평면에서 거울상이다. 상피층 (10)은 패치 외부 표면의 양면을 형성한다(예를 들면 첫 번째 표면 (11) 및 첫 번째 표면에 대향하는 두 번째 표면 (13)). 백-투-백 양막 패치 (40b)의 구조는 양막 (40a)의 본래 형태와 비교하여 인접한 섬유아세포층 섬유 및 양 상피면이 있는 것으로 변경되었다. 백-투-백 양막 패치는 보통 단일 양막층보다 더 두껍다. 예를 들어, 전형적인 단일 양막층은 약 50 마이크로미터의 두께를 가질 수 있고, 전형적인 백-투-백 양막 패치는 약 75 마이크로미터 내지 약 200 마이크로미터 범위 내의 두께를 가질 수 있다. 백-투-백 양막 패치는 일반적으로 단일 양막층과 비교하여 더 큰 기계적 강도 및/또는 견뢰도를 갖는 것이 관찰된다. 게다가 놀랍게도, 압력이 가해진 백-투-백 양막 패치는 일반적으로 함께 붙도록 압력이 가해지지 않은 인접한 두 개의 양막층과 비교하여 더 큰 기계적 강도 및/또는 견뢰도를 갖는 것이 관찰된다.

전형적인 백-투-백 양막 패치에서, 양쪽 대향하는 표면의 상피층은 계속 온전한 상태에 있고, 이로 인해 섬유증 잠식에 장벽을 제공한다. 의료 절차 동안, 유착을 방지하거나 저해하기 위하여, 백-투-백 양막 패치의 외부 표면(예를 들면 첫 번째 상피층 (10i) 또는 두 번째 상피층 (10ii))의 둘 중 하나는 환자의 경질막에 적용할 수 있다. 수술 동안 이러한 배치가 수행될 때, 외과의는 환자에게 적용하는 패치의 면 또는 패치의 배향에 중점을 두는 것으로 산만해 하지 않는다. 백-투-백 양막 패치는 패치가 부적절하게 또는 부적당하게 배향될 위험을 외과의에게 부과하지 않는데, 왜냐하면 각각의 면 모두 유착의 방지 또는 저해의 예상과 함께, 수술 구역에 적용될 수 있기 때문이다.

뇌 또는 척수 수술 동안의 수술용으로, 양막 조직 또는 드레싱은 외부 상피층들 중 하나는 경질막에서 떨어지게 배치되고 나머지 다른 대향하는 외부 상피층은 경질막 쪽으로 배치되게 배향시킬 수 있다. 이러한 방법으로 배향될 때, 양막은 유착을 방지하는 것으로 작용될 수 있다. 이러한 방식에서, 백-투-백 드레싱은 양막의 상피 표면에 채워진 섬유상의 유착을 방지하거나 저해할 수 있다. 각각의 배향에서, 상피층은 환자 경질막과 접촉하고 있다.

예를 들어, 도 5A 및 5B에 도시된 바와 같이, 백-투-백 양막 드레싱 (500)은 환자의 두개골 (510) 및 경질막 (520) 사이에 위치할 수 있다. 도 5A에 묘사된 형상에서, 드레싱 (500)은, 첫 번째 상피층 A가 환자의 두피 (530) 방향 쪽으로 향하고, 대향하는 두 번째 상피층 B가 환자의 대뇌 피질 (540) 방향 쪽을 향하도록 배향된다. 도 5B에서 묘사된 형상에서, 드레싱 (500)은, 첫 번째 상피층 A가 환자의 대뇌 피질 (540) 방향 쪽으로 향하고, 대향하는 두 번째 상피층 B가 환자의 대뇌 피질 (540) 방향 쪽을 향하도록 뒤집힌다. 본 발명의 실시양태는 환자의 척추 경질막에 백-투-백 양막 드레싱의 적용을 포함하는 수술을 또한 포괄한다. 이러한 방식에서, 단일-층 양막 제품의 경우에 도움이 될 수 있지만, 양막 조직에 섬유아세포층과 상피층을 구별하는 마커를 포함하는 것은 필요하지 않거나 바람직하지 않을 수 있다. 대향하는 외부 상피 표면은, 어떤 면이 경질막 쪽을 향하는지에 상관없이 환자 내에 위치할 때, 예를 들어 상처 치료하는데 양막 조직 드레싱이 적절히 배향되는 것의 보장을 도와줄 수 있다. 따라서, 부정확한 형상으로 상처에 패치를 위치시킬 오류의 잠재성이 제거된다.

백-투-백 패치의 대향하는 외부 상피 표면은 또한 유리하거나 편리한 취급 특징을 제공할 수 있다. 예를 들어, 일부 경우에는 단일 층 양막은 손쉽게 말리는 경향이 있을 수 있으나, 반면 백-투-백 패치는 평평한 조직으로 존재할 수 있다. 따라서, 외과의 또는 의료인은 백-투-백 패치를 취급하고 조작하며, 패치는 평평하거나 시트 같은 형상을 유지한다. 더욱이, 백-투-백 패치는 유리하거나 편리한 봉합 특징을 제공할 수 있다. 이것은 전형적인 단일 층 양막 조직과 비교하여, 전형적인 백-투-백 패치의 더 큰 두께 때문일 수 있다. 압축된 백-투-백 양막 패치의 증가된 밀도 및 압착된 성질은 또한 이러한 이점에 기여한다. 이러한 특색 때문에, 백-투-백 패치는 봉합을 더 적절하게 유지할 수 있다.

본 발명의 실시양태는 또한 양쪽 면에 상피층을 가진 패치이면서, 양막 조직으로 만들어진 패치를 제조하기 위한 인간 출산 조직 가공 방법을 포괄한다. 예를 들어, 인간 양막낭을 제왕절개 분만 후에 얻을 수 있다. 도 1을 참고하여 다시 보면, 태낭은 전형적으로 양막 및 융모막으로 지칭되는 조직으로 분류된 다수의 세포층을 포함한다. 드레싱 또는 패치를 제조하기 위해, 양막 조직은 인접한 융모막에서 분리 될 수 있다. 일부 경우에, 융모막에서 양막을 분리하기 위하여, 다수의 세포층의 가공은 가장자리절제술 단계를 수반한다. 양막은 희석된 글루타르알데히드 용액을 통해 소독될 수 있고 연속하여 소독 용액을 제거하기 위해 세척된다. 일부 경우에는 글루타르알데히드 헹구기는 양막층을 고정하도록 작용하며 상피 세포가 생존할 수 없게 만들고, 따라서 세포는 대사 활동 또는 증식을 할 수 없다. 일부 경우에, 양막층을 에탄올 용액, 과산화수소 용액 또는 둘 다에 담그고 연속하여 염수로 헹굴 수 있다. 추가로, 양막은 명시된 크기를 가진 구간으로 잘릴 수 있다.

각종 가교제 또는 오염 제거 제제가 양막 조직 처리에 사용될 수 있다. 글루타르알데히드 외에, 포름알데히드와 같은 다른 알데히드가 사용될 수 있다. 일부 경우에, 포르말린이 사용될 수 있다. 이러한 헹굼 및 소독 또는 살균 단계는 처리된 조직의 바이오버든(bioburden)을 향상하는데 작용할 수 있고, 원하는 인성도로 조직을 상태 조절하는데 사용할 수 있다. 일부 경우에, 가교는 1-에틸-3(3-디메틸아미노프로필) 카르보디이미드(EDC), 자외선(UV) 빛 또는 열로 달성될 수 있다. 그러나 양막 조직이 지나치게 가교된다면, 제작된 드레싱은 원하지 않는 높은 잔류 시간을 나타낼 수 있고, 이로 인해 의도된 것보다 더 긴 기간 동안 신체 내에 온전한 상태로 있을 수 있다. 더욱이, 지나친 가교는 드레싱의 특정의 바람직한 생물학적 특징을 경감시킬 수 있다. 일부 경우에, 양막층이 지나치게 가교된다면, 이어서 수술 후에 이식된 드레싱은, 신체가 드레싱과 연계하여 낭종을 형성하게 하는 피막형성 반응을 촉발시키거나 촉진시킬 수 있다. 반면에, 불충분하게 가교된 양막층은 이식 후에 환자의 염증 반응을 유발하거나 촉진시킬 수 있거나, 의도된 목적을 위한 지속기간으로 충분한 잔류 시간을 제공하지 못할 수 있다.

본원의 다른 곳에서 기술된대로, 특정 양막층 가공 단계는 시간의 제한된 양 동안 글루타르알데히드로 헹구기를 포함할 수 있다. 예를 들어, 방법은 15분 이하의 기간 동안 1 % 글루타르알데히드 용액으로 양막 조직 헹굼을 포함할 수 있다. 글루타르알데히드는 처리 공정 동안 소모되기 때문에, 훨씬 더 희석한 용액은 원하는 결과를 달성하기에 효과적이지 않을 수 있다. 예를 들면, 0.1 % 용액은 의도된 가교 또는 살균 목적을 얻기에는 충분하지 않게 농축된 것일 수 있다. 따라서, 더 낮은 농도가 사용되는 곳에서는, 용액의 부피를 증가시키는 것이 바람직할 수 있다. 반면에, 글루타르알데히드의 높은 농도를 함유한 용액은 제작 공정에 수반되는 그것에 대한 건강 및 안전 문제를 제공할 수 있다.

이러한 글루타르알데히드 헹구기 및 비슷한 처리에서 비롯된 가교는, 본원의 다른 곳에서 논의된 전자빔 살균 공정에 반응하여 육안 또는 거시적 수준에서 발생할 수 있는 가교보다 더 중요한 분자 수준에서 가교를 제공하는 것이 관찰된다.

헹구는 절차는 실온(예를 들면 22 ℃)이나 근처의 온도에서 수행될 수 있다. 체온(예를 들어 37 ℃)과 같은 더 높은 온도에서의 가공은 원하지 않는 세균 성장, 조직층에서의 조직 붕괴 또는 둘 모두를 초래할 수 있다.

예시적인 백-투-백 양막 패치를 제작하기 위해, 양막 구간은 상피면이 아래로 가게 배킹 패드 상에 위치될 수 있다. 이어서 양막은 상피면이 바깥에 있게 맞접힐 수 있다. 약간의 압력이, 대향하는 섬유아세포층이 부착되거나 맞물리도록 하는 시간의 충분한 기간 동안, 예를 들면 약 20 psi 내지 약 50 psi 범위내의 양으로, 접힌 패치에 가해질 수 있다. 일부 경우에, 압력은 약 20 psi 내지 약 40 psi 범위 내의 값에서 유지될 수 있다. 일부 경우에, 지나친 압력의 인가는 드레싱 조직에 손상을 가져올 수 있다.

어떤 구체적인 이론에 얽매이지는 않지만, 양막 간질면 위의 섬유아세포층이 함께 부착될 때, "벨크로(Velcro)"와 같이 행동하는 것이 가능하다. 융모막에서 둔전 분리의 결과로 양막 섬유아세포층이 손상될 수 있고, 그리하여 맞물리거나 부착된 두 섬유아세포층이 접힌 또는 백-투-백 양막 패치가 함께 붙어 유지되도록, 함께 붙도록 압착할 때, 얽히거나, 뒤얽히거나, 들어맞는 노출된 성긴 섬유를 섬유아세포층에 제공하는 것 또한 가능하다. 도 3을 참고하여, 두 양막층 (7), (9) 사이의 부착을 제공하는 것은 섬유아세포 영역 (15) 또는 두 섬유아세포층 (16) 사이의 압착된 경계면 또는 상호작용이다. 압착된 패치는 염수에 현탁될 때 같이 붙어있는 것이 관찰되고, 물리적 분리력의 인가시에 분리될 수 있다. 따라서, 양막 조직 구간이 접힐 때, 양막의 섬유아세포층 섬유는 결합되거나 뒤얽히게 될 수 있고, "벨크로"와 같은 효과로 패치를 함께 붙도록 유지한다. 그러한 생물학적 "벨크로" 효과를 수반할 수 있고 기계적 압력의 인가로 패치의 강도가 증가하게 향상될 수 있는 섬유아세포층 영역 (15)는 얇은 조직 크기를 유지하면서 취급하기 더 쉬운 패치를 제공하고, 봉합을 유지할 수 있도록 하는 더 큰 강도를 제공한다.

일부 경우에 양막층 사이의 배향이 한 층이 서로 다른 한 층에 부착하는 정도에 영항을 줄 수 있다. 예를 들어, 재료가 맞접히거나 기계적 압력없이 두 섬유아세포층이 접촉될 때, 재료는 용액에 위치될 때 분리되지 않는다. 유사하게, 재료가 잘리고 이 조각이 서로에 대해 회전되고 연속하여 섬유아세포층이 기계적 압력 없이 접촉될 때, 재료는 용액에 위치될 때 분리되지 않는다. 그러나, 각 층의 상피 표면이 함께 있게 하도록 양막층이 접촉될 때, 상피층은 용액에 위치될 때 분리된다. 일부 경우에, 상피층이 함께 있게 하도록 양막층이 접촉되고, 제작된 다층 조립체가 압력으로 압축되고 전자빔 살균을 받을 때, 이 층들은 용액에 위치될 때 계속 결합되어 있을 것이 관찰된다.

압착 후에 제작된 패치 (5)의 두께는, 예를 들면 그것을 만드는 양막층(7), (9)의 두께에 기초하여 달라질 수 있다. 일부 경우에, 패치는 약 70 마이크로미터 내지 약 200 마이크로미터 범위 내의 두께를 가질 수 있다. 일부 경우에, 패치는 약 40 마이크로미터 내지 약 500 마이크로미터 범위 내의 두께를 가질 수 있다. 다른 예시적인 패치 두께는 약 72 내지 약 197 마이크로미터 범위 내, 약 82 내지 약 186 마이크로미터 범위 내, 약 75 내지 약 200 마이크로미터 범위 내 등일 수 있다. 양막층의 두께는 기증자 변이성과 같은 특정 요인에 의존할 수 있다. 어린 기증자는 더 두꺼운 양막층을 포함하는 더 두꺼운 태반 조직을 가지는 것이 보통 관찰된다. 그에 반해서, 나이 든 기증자는 더 얇은 양막층을 포함하는 더 얇은 태반 조직을 가지는 것이 보통 관찰된다. 기증자의 생활방식 또는 건강 또한 조직 두께에 영향을 줄 수 있다.

압력 절차 후에, 제품은 포장될 수 있고 최종적으로 전자빔을 통해 살균될 수 있고, 실온에서 저장될 수 있다. 예를 들어, 드레싱 제품 또는 패치는 에탄올 또는 염수 용액으로 포장될 수 있다. 드레싱은 일부 경우에 포일 패킷에 포장되고 밀봉될 수 있다. 이어서 포장 및 내용물을 살균하기 위하여, 패킷 또는 패치는 방사선(예를 들면 감마선 또는 전자빔)을 받을 수 있다. 많은 경우에, 양막층은 가공 동안 또는 포장 전에, 건조시키지 않는다. 따라서, 가공되거나 포장된 드레싱은 전형적으로 적어도 부분적으로 수화된 양막층을 함유한다. 많은 경우에, 양막층은 가공 동안 또는 포장 전에 탈세포화 기술을 받지 않는다. 따라서, 가공되거나 포장된 드레싱은 비생존성 세포화되고 온전한 양막층을 함유한다. 예를 들면, 섬유증 내방성장에 생물학적 장벽으로 작용하는 것을 맡고 있는 상피 세포층은 이 가공 후에 완전히 온전하다. 백-투-백 양막 패치를 생산하는 추가적인 설명은 본원의 다른 곳에서 제공된다.

백-투-백 양막 패치는 척추, 무릎, 어깨 또는 분만 수술, 외상과 관련된 상처 또는 상해, 심혈관 수술, 혈관형성 자극, 뇌 또는 신경 수술, 화상 및 상처 치료, 눈 수술, 신경 랩, 건 랩을 수반하는 다수의 증상에서 또는 항-유착 장벽이 바람직한 임의의 다른 절차에서 유착을 방지하고 저해하는데 사용될 수 있다. 예시적인 백-투-백 드레싱은 양막 패치의 양면 위에 외부 상피층이 존재하기 때문에, 외과의 또는 의료인이 부적절한 배향으로 드레싱을 무심코 배치하는 것에 대한 예방책을 세울 필요없이, 드레싱은 환자 조직, 상처 또는 치료되는 구역에 위치될 수 있다.

백-투-백 양막 패치는 흉터 형성 방지를 원하는 실제로 임의의 수술 후의 수술 절차, 예를 들면: 이에 제한되지는 않지만, 척추, 무릎, 분만, 어깨 수술, 외상과 관련된 사례, 심혈관 수술, 뇌/신경 수술, 화상 및 상처 치료, 신경 랩, 건 랩에서 사용될 수 있다. 백-투-백 양막 패치는 상처 덮개 및 장벽으로 또한 사용될 수 있다. 그것은 조직에 상해가 있는 곳에서 상처 덮개로 사용될 수 있고 그것은 치유 및 어떤 형태로든 인접한 조직 내로의 혼입을 방지하기 위해 단리되고 보호될 필요가 있으며, 이로 인해 유착을 방지하거나 저해한다. 백-투-백 패치는, 한 개의 조직만이 상해를 입더라도 조직 또는 조직들이 서로에게서 격리되어 치유되는 것으로 간주되거나 이를 원하는 두 개의 유사하거나 유사하지 않은 조직을 가로질러 상해의 치유가 있는 곳에서, 장벽 또는 유착 방해물 또는 저해물로 사용될 수 있다. 백-투-백 양막 패치는 뇌 및 척추 수술에서 경질막 인열에 또한 사용될 수 있다. 백-투-백 양막 패치는 또한 공간을 유지하는 곳에서, 예를 들어 슬개골 구역 또는 두 개의 움직이는 부분이 자유롭게 움직이는 것이 필요한 어딘가에서 사용될 수 있다. 이러한 적용에서, 백-투-백 양막 패치는 임의의 치유 단계 후에 계속 분리되어 있도록 의도된 두 표면 사이에 위치될 수 있다. 단면이자, 극성 또는 비대칭 양막은 두 개의 다른 동물 모델, 양 및 개에 적어도 8-12주 동안 이식 부위에서 계속 온전한 상태로 있는 것을 보여줬다. 백-투-백 양막 패치는 더 긴 지속 기간 동안 계속 온전한 상태로 있을 것이 예상된다.

조직의 양면 위에 상피 표면을 가진 백-투-백 양막 패치는 그것이 인접한 임의의 조직에의 유착을 방지하거나 저해하는 장벽을 제공한다. 백-투-백 양막 패치는 패치의 양면에서 동일하거나 비슷한 특성을 또한 나타낸다. 게다가, 이중층 조직은, 원하는 수술 적용을 위해 충분히 얇게 하면서, 상당히 증가된 기계적 강도를 제공하고, 증가된 봉합 유지 능력을 보여준다. 백-투-백 양막 드레싱은, 드레싱의 어떤 면이 환자 조직 쪽으로 위치해야 하는지 또는 다르게는 환자의 해부학적 구조에 대해 배향되어야 하는지의 확인에 대해 외과의 또는 의료인에게 특별한 지시를 필요로 하지 않을 수 있다. 이러한 특색은 수술에서 성공률을 상당히 증가시킬 수 있는데, 왜냐하면 백-투-백 양막 드레싱이 효과적인 장벽을 제공하는 능력을 유지하면서 어느 방향에서든 수술 부위에 위치할 수 있기 때문이다.

본원의 다른 곳에서 논의된 대로, 백-투-백 양막 드레싱은, 유착 형성의 방지 또는 저해가 요구되는 임의의 상황, 예를 들면 그렇지 않을 경우에 자신의 목적 조직 또는 주위 조직의 치유 동안 일어날 수 있는 유착 형성을 제한 없이 포함하는 여러 가지의 수술 절차 및 적용에서 사용하기에 아주 적합하다. 백-투-백 양막 드레싱은 신경 랩으로, 건 랩으로, 골 결손 오버레이로, 족근골관증후군의 치료에, 그리고 추궁절제술, 추궁절개술, 전방요추간유합술 등과 같은 척추 수술 절차 동안 사용될 수 있다. 백-투-백 양막 드레싱은 장경골인대 협착, 절단과 관련된 환지통(예를 들면, 신경 랩으로 적용된다), 손상된 반월판, 장무지신근건의 치료에 또한 사용될 수 있다.

본 발명의 실시양태는 백-투-백 양막층 특색을 포함하는 각종 제작 구조물을 포괄한다. 예를 들어, 도 6에 도시된 바와 같이, 백-투-백 양막 드레싱 (600)은 상피층 (620) 및 섬유아세포층 (630)을 가진 첫 번째 양막층 (610) 및 상피층 (650) 및 섬유아세포층 (660)을 가진 두 번째 양막층 (640)을 포함할 수 있다. 첫 번째 섬유아세포층 (630)은 두 번째 섬유아세포층 (660)과 결합되거나 결부된 중심의 노출되지 않은 부분 (632)를 포함한다. 첫 번째 섬유아세포층 (630)은 두 번째 섬유아세포층 (660)과 맞물리지 않은 하나 이상의 주변의 노출된 부분 또는 탭(tab) (634a), (634b)를 또한 포함한다. 사용시에, 하나 이상의 섬유아세포층 탭은, 예를 들어 환자의 경질막 또는 뇌 조직에 있을 수 있는 환자 조직 (PT)에 접하게 또는 그 안의 상처 (W)에 접하게 배치될 수 있다. 이러한 방식으로, 백-투-백 드레싱은 "밴드(band-aid)"와 유사하게 작용될 수 있다. 예를 들면, 드레싱 (600)은 개두 절차 동안 환자의 두개골 및 뇌 사이에 위치할 수 있다.

본원의 다른 곳에서 기술된대로, 백-투-백 양막 조직 드레싱은 건 랩, 신경 랩 등을 포함하는 여러가지 외과적 적용에 사용될 수 있다. 예를 들어 도 6A 내지 6C에 도시된 바와 같이, 신경 또는 건과 같은 환자의 해부학상의 구조를 백-투-백 양막 드레싱으로 감쌀 수 있다. 도 6A에 도시된 바와 같이, 다층 양막 드레싱 (600a)로 환자의 건 또는 신경을 감쌀 수 있다. 백-투-백 드레싱 (600a)는 상피층 (620a) 및 섬유아세포층 (630a)를 가진 첫 번째 양막층 (610a) 및 상피층 (650a) 및 섬유아세포층 (660a)를 가진 두 번째 양막층 (640a)를 포함한다. 첫 번째 양막층 (610a)는 두 번째 양막층 (640a)의 탭 부분 (642a)와 결합되거나 결부된 탭 부분 (612a)를 포함한다. 탭 (612a) 및 (642a) 사이에 가해진 압력을 통해 생산된 결부 또는 자체-부착은 고리 모양 또는 원통형의 백-투-백 드레싱 구조를 제공할 수 있으며, 이것은 환자의 해부학적 구조 주위에 배치될 수 있다. 이와 관련하여, 도 6B에 도시된 바와 같이, 백-투-백 드레싱 (600b)는 환자의 해부학적 구조를 쌀 수 있고, 드레싱 겹침 부분 또는 말단에서 봉합 (650b)를 통해 단단히 고정될 수 있다. 유사하게, 도 6C에 도시된 바와 같이, 백-투-백 드레싱 (600c)는 환자의 해부학적 구조를 쌀 수 있고, 드레싱 말단 또는 부분이 같이 붙도록 하게 하는 봉합 (650c)를 통해 고정될 수 있다.

일부 경우에, 조직의 구역을 가로지르는 다수의 시트를 함유한 복합재 양막 드레싱을 제작하는 것이 가능할 수 있다. 예를 들어, 도 6D에 도시된 바와 같이, 백-투-백 양막 드레싱 (600d)는 그것들이 서로 인접하도록 결합될 수 있는 첫 번째 시트 (602d) 및 두 번째 시트 (604d)를 포함할 수 있다. 첫 번째 시트 (602d)는 상피층 (620d) 및 섬유아세포층 (630d)를 가진 첫 번째 양막층 (610d) 및 상피층 (650d) 및 섬유아세포층 (660d)를 가진 두 번째 양막층 (640d)를 포함한다. 첫 번째 및 두 번째 양막층 (610d), (640d)는 두 번째 양막층 (640d)의 탭 부분 (644d)가 첫 번째 양막층 (610d)의 끝 부분 (612d) 너머까지 연장되는 방식으로 결합된다. 이 방식에서, 첫 번째 시트 (602d)는 섬유아세포층 (660d)의 노출되지 않거나 결부가능한 구역 (662d)가 존재한다. 두 번째 시트 (604d)는 상피층 (672d) 및 섬유아세포층 (674d)를 가진 첫 번째 양막층 (670d) 및 상피층 (682d) 및 섬유아세포층 (684d)를 가진 두 번째 양막층 (680d)를 포함한다. 첫 번째 및 두 번째 양막층 (670d), (680d)는 첫 번째 양막층 (670d)의 탭 부분 (676d)가 두 번째 양막층 (680d)의 끝 부분 (686d) 너머까지 연장되는 방식으로 결합된다. 이 방식에서, 두 번째 시트 (604d)는 섬유아세포층 (674)d의 노출되지 않거나 결부가능한 구역 (675d)가 존재한다. 여기서 도시된 바와 같이, 노출되지 않거나 결부가능한 섬유아세포층 구역 (662d) 및 (676d)를 함께 붙게 하거나 접근시킬 수 있고, 압력의 인가를 통해서 부착시킬 수 있다.

실시예

하나의 실시양태에서, 백-투-백 양막 패치의 생산 방법은 제왕 절개의 완료시에 양막낭과 함께 태반을 수집하는 것을 포함한다. 수집된 재료를 가공을 위한 수취 장소로 젖은 얼음상에서 하룻밤 동안 실어나를 수 있다. 조직은 전형적으로 그것이 가공되기 전까지 냉장 보관된다. 무균조작법을 사용하여, 태반 및 태낭을 포함한 양막낭을 작업대에 위치시키고 양막을 둔전박리로 융모막에서 분리한다. 양막을 상피면이 아래로 가게 깨끗한 작업대에 위치시키고, 바르톤 젤리를 정교한 지압을 사용하고 조직의 간질면을 가로질러 미끄러뜨려 제거한다. 바르톤 젤리를 제거한 후, 양막을 0.9 % 염수의 500 ml 부피로 연속 3번 세척한다. 이어서 양막을 수평회전자 위에서 15분 동안 1 % 글루타르알데히드 용액에 담근다. 글루타르알데히드 담그기 후에, 양막을 0.9 % 염수의 500 ml 부피로 연속 3번 헹군다. 세척된 양막을 펼 수 있고 선정된 크기로 자를 수 있다. 예를 들어 양막을 접은(예를 들면 반으로 접음) 후에 백-투-백 양막 패치의 원하는 크기를 얻기 위해 양막을 임의의 원하는 크기 또는 모양(즉, 사각형 또는 횡방향)으로 자를 수 있다. 예를 들어, 양막을 가로 2 cm 세로 2 cm 내지 가로 11 cm 세로 11 cm만큼 큰 크기 범위의 정사각형으로 자를 수 있다. 그렇지 않으면, 양막을 (접을 때 가로 2 cm 세로 2 cm 정사각형 패치를 형성할 수 있는)가로 2 cm 세로 4 cm 내지 (11 cm 정사각형 패치를 형성할 수 있는)가로 11 cm 세로 22 cm 범위의 수평 크기로 자를 수 있다. 본 발명은 이와 관련하여 제한되지 않고, 임의의 원하는 크기 및 모양이 사용될 수 있다.

자른 양막을 양막의 상피층과 배킹 재료를 접촉하도록 배킹 재료 위에 위치시킬 수 있다. 델스타(Delstar) 부직포, 가장자리가 밀봉된 면 거즈 또는 친수성 웨빙(webbing)과 같은 재료를 포함하는, 배킹 재료는 양막 조직과 함께 사용하기 위한 임의의 적절한 재료일 수 있다. 배킹 재료 위에 양막이 있으므로, 양막을 양막이 배킹 재료에서 분리되지 않도록 확실하게 반으로 맞접을 수 있다. 접힐 때, 양막 구간의 대향하는 간질면은 서로 접촉하고 있다. 배킹 재료와 함께 접힌 양막을 배킹 재료 안에 접힌 양막을 유지하는데 주의하며 카팍(Kapak) 주머니에 위치시킬 수 있다. 카팍 주머니를 두 개의 단단한 플라스틱판 사이에 위치시킬 수 있고 손의 압력을 사용하여 부드럽게 짜서 남는 공기를 제거할 수 있다. 조직 수분을 유지하기 위해 배킹 재료에 간직된 수분을 짜내는 것을 피하는 주의를 기울일 수 있다. 열 밀봉기를 사용하여 주머니를 밀봉할 수 있다. 밀봉된 카팍 주머니를 셰브론(Chevron) 가방에 위치시킬 수 있고 다시 두 개의 단단한 플라스틱판 사이에 위치시킬 수 있고 손의 압력을 사용하여 부드럽게 짜서 남는 공기를 제거할 수 있다. 공기를 제거한 후, 가방을 열 밀봉할 수 있다. 이어서 가방에 있는 양막을 프레스(press)에 위치시킬 수 있고 4-8 ℃에서 유지시키면서 20-200 psi 사이의 압력을 줄 수 있다. 압력을 충분한 시간 동안 가방에 있는 양막에 유지하여 대향하는 섬유아세포층이 함께 부착되고 결부되게 한다. 하나의 실시양태에서, 압력을 하룻밤 동안(즉, 대략 12시간 동안) 유지한다. 가압 주기의 완료시에, 가방에 있는 양막을 프레스에서 제거하고 25 kGy의 전자빔 살균을 통해 살균한다.

실시예

백-투-백 양막 드레싱의 제조는 전형적으로 무균 영역에 기증자 재료를 무균상태로 위치시키는 것을 수반한다. 예를 들어, 기증자 조직을 무균 보드에 또는 무균 용기에 무균상태로 위치시킬 수 있다. 융모막/양막 낭을, 예를 들어 태반에 부착된 투명에서 불투명해지는(opaque-to-clear) 낭으로 식별할 수 있다. 융모막/양막을 둔전박리로 태반에서 분리할 수 있다. 태반을 버릴 수 있다. 융모막 및 바르톤 젤리를 둔전박리로 양막에서 제거할 수 있다. 무균 용기를 0.9 % 염수 용액 대략 400 mL로 채운다. 양막을 용액에 살짝 담그고 혈전, 잔류 융모막 및 바르톤 젤리를 제거한다.

추가로 양막 헹구기 단계에서, 새로운 무균 접시를 0.9 % 염수 용액 대략 400 mL로 채운다. 양막을 염수 용액 안에 위치시키고 접시를 오비탈(orbital) 진탕기 위에 위치시킨다. 진탕기의 RPM 세팅을 양막을 감싸며 용액의 부드러운 롤이 생성되도록 적절하게 조정한다. 교반을 2분 동안 수행한다. 임의의 남아있는 바르톤 젤리를 제거하기 위해, 이러한 단계를, 예를 들어 총 두 번의 헹구기에 대해 주기를 한 번 이상 반복적으로 수행할 수 있다.

그 뒤에, 양막의 글루타르알데히드 처리를 수행할 수 있고, 이는 오비탈 진탕기 위에 무균 스테인리스강 트레이(tray) 또는 팬(pan)을 위치시키는 것, 1 % 글루타르알데히드 용액 500 mL로 트레이를 채우는 것을 포함한다. 양막을 글루타르알데히드 용액에 위치시키고, 진탕기의 RPM 세팅을 양막을 감싸며 용액의 부드러운 롤이 생성되도록 적절하게 조정한다. 양막을 14 ± 1분 동안 용액에 놔둔다. 용액에서 조직이 회전함으로써, 조직이 계속 떨어져 있게 하는 것을 확실히 하는데 도움이 될 수 있다. 일부 실시양태에 따라, 조직이 15분보다 더 길게 이 글루타르알데히드에 남는다면, 조직을 버리는 것이 바람직할 수 있다. 지나친 가교 처리는 조직이 그것의 의도된 목적에 대해 더 이상 적합하지 않을 정도로 조직을 질기게 만들거나 무두질할 수 있다. 일부 경우에, 글루타르알데히드 처리를 약 22 ℃의 온도에서 수행할 수 있다. 전형적으로, 처리된 양막 조직은 치유 단계의 지속기간 동안 신체 내에서 지속된다.

조직은 추가적인 글루타르알데히드 처리를 받을 수 있다. 새로운 무균 스테인리스강 트레이 또는 팬을 0.9 % 염수 용액 1000 mL로 채우고, 양막을 염수 용액 안에 위치시키고, 트레이 또는 팬을 오비탈 진탕기 위에 위치시킨다. 진탕기의 RPM 세팅을 양막을 감싸며 용액의 부드러운 롤이 생성되도록 적절하게 조정한다. 교반을 3분 동안 수행한다. 용액에서 조직이 회전함으로써, 조직이 계속 떨어져 있게 하는 것을 확실히 하는데 도움이 될 수 있다. 이러한 추가적인 글루타르알데히드 처리를 반복적으로, 예를 들어 총 3번의 이러한 헹구기에 대해 주기를 두 번 이상 반복적으로 수행할 수 있다.

바르톤 젤리를 제거하는 것을 확실히 한 후, 양막을 상피면이 위를 향하고 간질면이 아래를 향하게 하여 커팅 보드에 위치시킬 수 있고, 이에 상응하는 적절한 크기를 갖는 배킹 재료를 선택하고 0.9 % 염수 용액에 담근다. 이어서 배킹 재료를 조직의 상피면 위에 위치시키고, 조직을 배킹 재료의 가장자리를 따라 자른다. 배킹 재료/조직을 들어올리고 이제 배킹 재료가 밑으로 가고 양막이 위에 있도록(즉, 간질면이 위쪽을 향한다) 커팅 보드 위로 뒤집는다.

접힌 또는 다층 양막 조직을 적절한 크기를 갖는 용기, 예를 들면 카팍 주머니에 위치시킨다. 0.9 % 염수 용액 1 cc를 카팍 주머니에 위치시킨다. 배킹 재료, 조직 및 용액를 함유한 카팍 주머니를 적절한 크기를 갖는 셰브론 주머니에 위치시킨다. 이는 예를 들면 열 밀봉 장치로, 셰브론 주머니의 거의 위쪽에 밀봉을 생성하기 전에 셰브론 주머니에서 남거나 원하지 않는 공기를 제거하는 것을 확실히 하는데 도움이 될 수 있다.

하나 이상의 셰브론 주머니를 도 7에 도시된 바와 같이 조직 프레스 기구 (700)에 위치시킨다. 프레스 기구 (700)은 받침판 (720)에 박힌 적하 셀 (710), 바닥판 (730), 수많은 압력 레벨링 판 (740a) 내지 (740g), 모판 (750) 및 프레셔 풋(pressure foot) (760)을 포함할 수 있다. 양막 조직 조성물을 함유한 셰브론 주머니을 프레스 기구에, 예를 들면 바닥판 (730) 및 레벨링 판 사이에, 각각의 레벨링 판 사이에(예를 들면 (740a) 및 (740b) 사이에) 또는 레벨링 판 및 모판 (750) 사이에 위치시킬 수 있다. 일부 경우에, 레벨링 판이 있는 곳에서, 조직 샘플을 바닥판 및 모판 사이에 위치시킬 수 있다. 여기서 도시된 바와 같이, 주머니 (1-8)을 프레스 기구에 위치시킨다.

작동시 인가되는 압력을 압력 셀로 확인할 수 있다. 임의의 원하는 압력의 양을 달성하기 위해 조직 프레스를 프레셔 풋을 눌러서 조절할 수 있다. 예를 들어, 프레스 기구 (700)을 셰브론 주머니에, 결과적으로 조직 샘플에 44 psi의 압력을 가하는데 사용할 수 있다. 시간의 표시된 양(예를 들면, 10-15분) 동안 가압한 후에, 밀봉된 셰브론 주머니를 프레스에서 제거할 수 있다. 이어서 카팍 주머니를 셰브론 주머니에서 제거할 수 있다. 밀봉된 포장을 약 1 ℃ 및 약 10 ℃ 사이의 온도에서 냉장고에 저장할 수 있다. 포장을 전자빔 살균 기구로 살균할 수 있다.

실시예

예시적인 백-투-백 양막 드레싱의 생체 역학적 특징을 평가하였다. 예시적인 드레싱의 인장력을 평가하였고, 백-투-백 드레싱 형상의 인장력에 대한 압력/시간 효과를 결정하고 단일 층 양막 형상과 이것을 비교하였다. 양막 조직의 회전된 층을 포함하는 드레싱을 포함하는 다양한 백-투-백 드레싱 형상을 평가하였다.

예를 들어, 백-투-백 양막 드레싱을 인스트론(Instron) 시스템을 사용하여 인장력에 대해 평가했다. 5 X 5 cm 크기를 가진 드레싱 샘플은 도 7에 도시된 바와 같은 조직 프레스 디자인을 사용하여 주위 조건 이하에서 18-24시간 동안 하룻밤에 ~20, 25, 40, 50 및 56 psi의 압력을 받았다. 5 X 5 cm 크기의 백-투-백 드레싱을 5 cm X 10 cm 직사각형 단일층 양막으로부터 제조할 수 있다. 여기서, 양막은 배킹 재료의 맨 위 층에 있고 양막을 간질면이 노출되고 상피면이 배킹 재료를 향하게 배향한다. 이어서 5 X 10 직사각형을 배킹 재료의 양 층 사이에 접힌 양막이 있게 접는다. 하나의 샘플에 대해, 5 X 10 cm 조각을 두 개의 5 X 5 cm 조각으로 잘랐고 이어서 한 개의 조각을 90 도 회전하였고 서로에게서 상피층이 멀어지게 다른 조각의 맨 위에 뒤집어 엎었다. 염수 용액을 조직이 계속 젖도록 포장에 첨가하였다. 각 샘플을 4" X 6" 카팍 주머니에 포장했고 열 밀봉하였으며 이어서 6" X 16" 셰브론 주머니에 위치시켜 열 밀봉하였다. 각 포장에서, 밀봉 전에 남은 공기를 제거하려는 주의를 기울였다. 이어서 포장은 정해진 압력을 받았다. 가압 후에 포장을 25 kGy의 전자빔(빔원(BeamOne), 커머스 시티, 콜로라도)을 사용하여 최종적으로 살균하였다.

가해진 압력을 조직 프레스의 바닥에 압력 셀을 위치시켜 확인할 수 있다. 일부 실시예에서, 샘플을 샘플 더미를 통해 가해지는 압력이 안정되게 분포되도록 각 샘플 및 3/8" 델린(delrin)판 아래 및 더미의 맨 위 사이에 1/8"의 단단한 플라스틱 압력 레벨링 판이 있게 적층하였다. 다수 기증자의 조직을 기증자 변이성에 대해 기증자의 이해를 얻기 위해 사용하였다.

샘플에 부여된 조직 프레스 각각의 압력을 표 1에 표로 나타내었다. 마지막 세로줄을 평가하였고 압력을 압력 범위에서 샘플을 구별하기 위해 분류하였다. 19 psi 및 24 psi 사이의 압력을 관찰하였던 샘플을 22 psi의 중간 압력으로 분류하였다. 27 psi 및 29 psi 사이의 압력을 겪었던 샘플을 28 psi의 중간 압력으로 분류하였다. 36 psi 및 54 psi 사이의 압력을 겪었던 샘플을 45 psi의 중간 압력으로 분류하였다. 45 psi 및 57 psi 사이의 압력을 겪었던 샘플의 최종 그룹을 52 psi의 중간 압력으로 분류하였다.

도 7A 및 7B는 시험 되었던 드레싱의 특정 양상을 도시한다. 도 7A에 도시된 바와 같이, 패치의 왼쪽 면을 따라 접은 부분을 가진 백-투-백 양막 드레싱 (720a)(양면 또는 DS)를 제공하기 위하여, 단일층 양막 드레싱 (700a)를 접는 선 (710a)를 따라 접을 수 있다. 일부 경우에, 접은 부분을 갖지 않는 백-투-백 양막 드레싱 (730a)(양면 또는 DS)를 제공하기 위하여, 접은 부분을 패치에서 제거하거나 떨어지게 잘라낼 수 있다. 도 7A의 아래쪽 줄에 도시된 바와 같이, 접은 부분은 잘라지거나 제거되는 과정을 겪는다. 예를 들면, 접은 부분을 포장에 패치를 위치시키기 전에 제거할 수 있다. 이와 관련하여, 도 7B에 도시된 바와 같이, 단일 층 양막 드레싱을 두 개의 별개의 단일 층 양막 드레싱 조각 (710b) 및 (720b)로 자르거나 분리할 수 있다. 단일 층 양막 조각 중 하나는 다른 것에 대하여 회전하거나 또는 다른 것에서 각지게 어긋나 있을 수 있다. 여기서 도시된 바와 같이, 양막 조각 (710b)를 90 도로 회전한다. 이어서, 백-투-백 양막 드레싱 (730b)(양면 또는 DS)를 제공하기 위하여, 양막 조각 (710b) 및 (720b)를 접근시키고 함께 붙도록 가압한다.

12개 샘플의 인장력을 측정하였다. 백-투-백 양막 드레싱 샘플에 대해, 각 샘플을 인장 시험 시스템의 클램프에 맞추기 위해 반으로 잘랐고 반쪽 두 개 모두 시험하였다. 단일 층 양막 드레싱에 대해, 총 4번의 시험을 완료하였다. 회전된 백-투-백 드레싱을 두 조각으로 잘랐고 반쪽 두 개 모두 시험하였다. 표 2는 요약된 결과를 제시한다.

시험된 실시양태에 따라, 백-투-백 접힌 드레싱을 18시간 동안 ~22 psi에서 압력을 가할 때, 인장력은 단일 층보다 2배 더 크게 관찰되고(17.7 N/mm² 대 7.7 N/mm²) 통계적으로 차이가 난다(P= 0.002). 18시간 동안 더 높은 압력을 가하는 것은 조직의 인장력에 부정적으로 영향을 미치는 것으로 보여진다. 가장 높은 인장력은 18시간 동안 제일 낮은 압력을 가해진 것에서 얻어졌다. 50 psi 초과의 압력이 가해진 샘플은 취급할 때 더 취약한 것으로 보여진다. 압력 모니터링이 없었던 이전 실험은 매우 높은 압력에서 샘플이 취약했고 봉합은 러닝 티어(running tear)를 야기했고 봉합사 자체가 쉽게 조직을 통해 잘렸던 것을 보여줬다. 어떤 구체적인 이론에 얽매이지는 않지만, 하나의 설명은 더 높은 압력에서는 조직 구조가 불리하게 바뀔 수 있다는 것이 될 수 있는 것으로 생각된다. 일부 경우에, 조직의 두께가 단일 기증자 내의 지리상의 위치에 의존하는 양막의 두께에 의해 자연스럽게 변할 수 있는 것을 관찰했었다. 예를 들면, 태반에 가까이 있는 조직은 태낭의 반대편 끝에 있는 양막보다 훨씬 더 두껍다. 도 8A(20X, 태반에 근접) 및 도 8B(20X, 태낭의 반대면)서 도시된 태반 조직의 두 개의 헤마톡실린(hematoxylin) 및 에오신(eosin)(H&E 염색) 조직학 광 현미경 사진은 이러한 특색을 도시한다.

도 8A는 맞접힌 양막 (800a)의 샘플을 보여준다. 이 이미지 왼쪽 면에의 상피층 (810a)는 태반에 더 가까운 조직의 것이나, 반면에 이 이미지 오른쪽 면의 상피층 (820a)는 태반에서 더 먼 조직의 것이다. 도 8B는 도 8A에서 묘사된 것과 동일한 기증자의 조직에서 제조된 또 다른 백-투-백 드레싱 (800b)의 이미지이나, 도 8B에 도시된 조직은 태반에서 더 멀리에 위치한 샘플에서 가져온 것이고, 도 8A에 도시된 조직은 태반에서 더 가깝게 위치한 샘플에서 가져온 것이다. 도 8B의 왼쪽 면에서의 조직 (810b)는 태반에서 더 가까운 위치에서 유래되고, 도 8B의 오른쪽 면에서 조직 (820b)는 태반에서 더 멀리 떨어진 위치에서 유래된다. 조직의 상대적 두께는 이 두 도면으로 명백하다. 도 8A의 가장 왼쪽에 있는 층 (810a)(태반에 더 가까운)는 도 8B의 가장 오른쪽 층(태반에서 더 먼) (820b)보다 약 6배 더 두껍다.

도 8C에 도시된 바와 같이, 예시적인 백-투-백 드레싱은 한 위치에서는 약 136.83 마이크로미터의 두께 및 또 다른 위치에서는 약 144.08 마이크로미터의 두께를 가질 수 있다. 이와 관련하여, 도 8D에 도시된 바와 같이, 예시적인 백-투-백 드레싱은 한 위치에서는 약 87.44 마이크로미터의 두께 및 또 다른 위치에서는 약 100.38 마이크로미터의 두께를 가질 수 있다. 여기서 묘사된 바와 같이, 첫 번째 양막층의 두께는 약 48.05 마이크로미터이고 두 번째 양막층의 두께는 약 47.74 마이크로미터이다.

서로에 대해 양막층을 회전시킨 것이 다층 양막 드레싱의 특정 특징을 향상시켰다는 것을 예상외로 그리고 놀랍게도 관찰하였다. 예를 들어, 서로에 대해 90 도로 양막의 두 층을 회전시킨 것이 조직의 인장력을 개선한 것으로 관찰된다. 시험된 예시적인 샘플은 20.8 +/- 2.8 N/mm²의 평균 인장력을 발생시켰다. 어떤 구체적인 이론에 얽매이지는 않지만, 두 층을 회전시킬 때 인장력의 증가는 지금까지 문헌에 공지되지 않았던 조직의 조직화되지 않은 배향이 있을 수 있는 것을 나타낸다.

실시예

두 개의 압력(80 lbs 및 150 lbs)에서 제작된 다층 양막 드레싱의 인장 및 봉합사 인발력을 증분 타임 랩스(time lapse)로 평가하였다. 다층 샘플을 본원에 기술된 제작 방법을 사용하여 제조하였다. 4 X 4 cm 크기의 샘플을 제조하였고, 4X6 카팍 주머니에 포장하였고, 열 밀봉하였고, 6X16 세브론 주머니에 위치시켰고, 열 밀봉하였다. 각 포장 단계에서, 밀봉 전에 남은 공기를 제거하려는 주의를 기울였다. 압력을 가한 후에, 포장을 25 kGy의 전자빔(빔원, 커머스 시티, 콜로라도)을 사용하여 최종적으로 살균하였다. 5 cm X 5 cm 크기의 다층 양막 드레싱은 본원의 다른 곳에서 기술된 조직 프레스 기술을 사용하여 주위 조건에서 0, 1, 15, 60, 120분 동안 20 psi 및 38 psi의 압력을 받았다. 샘플을, 각 시간에 3개의 샘플씩 조직 프레스 위에 부하하였고 압착하였다.

모든 샘플을 인장력 및 봉합사 인발력에 대해 평가하였다. 시험에 대한 준비로, 드레싱을 인산 완충된 염수로 헹구었고, 남은 수분을 제거하기 위해 가볍게 두드려 말렸고, 이어서 두(2) 개의 25x50 mm 스트립으로 단편을 만들었다. 각 드레싱에서 두 번째 스트립을 표지하였고 봉합사 시험에 대비해서 따로 챙겨 두었다. 맞는 크기로 자를 때, 작동기 높이를 각 그립 끝에 끼운 조직이 17.5 mm이면서 그립들 사이에서 15 mm의 유효길이를 유지하기 위해 조정하였다. 각 시편을 개선된 그립 및 적은 미끄럼 위험을 위해 그것의 끝에 사포 스트립과 함께, 상부 및 하부의 그립 고정구 사이 중앙에 오게 하였고, 시편을 단단히 고정시키기 위해 그립을 꽉 죄었다. 파손을 달성할 때까지, 10 mm/min의 속도로 서보(servo)-유압식 시험 기계를 사용하여 변위 조절 하에서 인장 부하를 각 시편에 적용하였다. 파손은 인장력의 빠른 손실 및/또는 조직이 기능을 하지 못하는 것으로 명시된다.

4.0 프로린(prolene) 봉합사 재료를 사용하여, 봉합사 인발에 대한 조직 저항을 결정하기 위해 정적 인장 절차에서 정합 양막 조직 쌍의 두 번째 반쪽으로 인발 시험을 수행하였다. 조직 이식면을 완충된 염수로 헹구었고, 남은 수분을 제거하기 위해 가볍게 두드려 말렸다. 봉합사를 모든 조직에서 윗모서리에서 아래로 1 cm 및 옆모서리에서 1.25 cm에서 구멍으로 빠져나가게 했고 봉합사의 끝은 시험 기계의 그립 고정구에 고정을 위해 자유롭게 하며, 조직에 봉합을 단단히 고정시키기 위해 감치기 봉합 방식을 사용하였다. 조직의 봉합되지 않은 모서리 1 cm를 붙잡고 묶이지 않은 봉합사의 끝을 상부 그립 고정구에 묶었다. 파손을 달성할 때까지, 10 mm/min의 속도로 서보-유압식 시험 기계를 사용하여 변위 조절 하에서 인장 부하를 각 시편에 적용하였다. 파손은 인장력의 빠른 손실 및/또는 조직이 기능을 하지 못하는 것으로 명시된다.

다층 양막 드레싱을 본원에 기술된대로 가공하였고 샘플은 눈금이 있는 압력 게이지를 사용하여 특정한 압력을 받았다. 이어서 각 샘플을 H & E 염색 절차를 통해 가공하였고 조직학 이미지를 생성하였다. 니콘 이미징 소프트웨어(Nikon Imaging Software)를 사용하여 횡단면 측정치를 얻었다. 5번의 측정을 하였고 이어서 가장 넓은, 가장 얇은 및 중간 두께 측정을 각 샘플마다 기록하였다. 이어서 이 측정을 데이터를 평가하기 위해 미니탭 통계 분석(Minitab Statistical Analysis) 도구를 사용하여 평가하였다. 백-투-백 양막 드레싱의 인장력은, 압력을 가하지 않았던 백-투-백 양막 드레싱과 비교하여, 단지 2분 동안 20 psi의 압력이 있을 때 힘의 두 배이고, 1분 동안 38 psi의 압력을 가할 때는 거의 3배인 것을 관찰하였다. 20 psi의 압력에 노출된 샘플의 경우, 인장력은 압력을 가한 시간이 60분을 초과할 때까지 초기 증가보다 많이 증가하지 않지만, 반면에 38 psi의 압력에 노출된 샘플은 더 높은 압력에서 증가된 시간과 함께 인장력의 감소를 보여준다.

표 3은 시간에 따라 20 psi 및 38 psi의 압력을 받은 백-투-백 양막 드레싱의 인장력을 보여준다.

표 4는 백-투-백 양막 드레싱에서 4.0 봉합사의 인발을 위해 요구되는 최대 부하를 보여준다.

표 5는 각 샘플의 조직학 H & E 이미지에서 기록된 데이터의 요약을 보여준다. 기증자 대 기증자의 변이성을 감소하고 양막에서의 압력 및 시간의 효과에 집중하기 위해 측정 실험에 한명의 기증자를 사용하였다. 양면 양막 조직의 두께를 니콘의 이미징 시스템 NIS-엘리먼츠(Elements) BR 3.1 프로그램을 사용하여 H & E 조직 이미지에서 측정하였다. 이미지에서 측정 위치는 임의로 하였고 값에서 제일 넓고 제일 얇은 구간을 포함하려는 시도를 하였다. 표 5는 또한 백-투-백 양막 드레싱의 두께 대 시간 및 압력의 통계적 데이터를 제공한다.

데이터의 분석은 백-투-백 양막 드레싱의 두께가 그것에 가해진 압력의 결과로 상당히 바뀔 수 있다는 것을 보여준다. 두께는 또한 얼마나 오래 압력을 샘플에 가하는지에 의존할 수 있다.

시간의 경과한 양 동안 가해진 압력은, 양막층 사이에 결합 표면을 형성하는 양막층의 간질면과 함께, 이중층 양막 조직 드레싱의 형성을 유도하는데 도움이 됨을 관찰하였다. 조직이 함께 붙도록 20 psi의 압력으로 가압된 경우에, 120분에서 압력 대 시간 곡선의 기울기가 여전히 양수이기 때문에, 최대 인장력을 확인할 수 없었다. 이와 대조적으로, 38 psi의 압력에서 압착된 조직에 대해서는, 정점이 15분 이내에서 관찰되었고 60분에서 아래로 기울었고 60 및 120분 사이에서는 평평했다. 짧은 시간의 양 동안 중간 정도로 더 높은 압력을 가한 것은 조직 가공에 효과적인 프로토콜을 제공하는 것으로 보여진다. 예를 들면, 15분 이하 동안 38 psi의 가압은 백-투-백 양막 드레싱의 생산에 대한 적합한 기술을 제공할 수 있다. 봉합사 인발력 시험에서 얻은 결과는 15분 이하 동안 38 psi의 적용이 가압이 없는 것보다 더 좋다는 것을 제시한다. 최종 제품의 두께는 이중층 양막의 가압 동안 변하는 것으로 나타났고 양막의 변화는 간질 섬유 재료의 치밀화인 것이 눈에 띄게 확실하다. 상피세포는 20분 동안 가장 높은 50 psi의 압력에서 조차 온전한 상태인 것으로 보여진다. 간질면의 두 층이 만나는 접힌 양막의 중앙에서 섬유의 밀도에 가시적인 증가가 있다.

도 10A-13B는 가압에 반응하여 간질 섬유 재료의 치밀화 수준 또는 두께에서의 예시적인 변화를 도시한다. 예를 들어, 도 10A는 가해진 압착 압력의 부재에서, 약 165 마이크로미터의 두께를 가진 예시적인 백-투-백 양막 드레싱 (10000)을 보여준다. 도 10B는 5분의 지속기간 동안 20 psi의 압착 압력 후의 드레싱 (10000)을 보여준다. 여기서 묘사된 바와 같이, 압축된 드레싱은 그 후에 약 105 마이크로미터의 두께를 가지는 것이 관찰되었다.

도 11A는 5분의 지속기간 동안 20 psi의 가해진 압착 압력에 반응하여, 약 155 마이크로미터의 두께를 가진 예시적인 백-투-백 양막 드레싱 (11000)을 보여준다. 도 11B는 20분의 지속기간 동안 20 psi lbs의 압착 압력 후의 드레싱 (11000)을 보여준다. 여기서 묘사된 바와 같이, 더 압축된 드레싱은 그 후에 약 130 마이크로미터의 두께를 가지는 것이 관찰되었다.

도 12A는 가해진 압착 압력의 부재에서, 약 185 마이크로미터의 두께를 가진 예시적인 백-투-백 양막 드레싱 (12000)을 보여준다. 도 12B는 5분의 지속기간 동안 38 psi의 압착 압력 후의 드레싱 (12000)을 보여준다. 여기서 묘사된 바와 같이, 압축된 드레싱은 그 후에 약 142 마이크로미터의 두께를 가지는 것이 관찰되었다.

도 13A는 5분의 지속기간 동안 38 psi의 가해진 압착 압력에 반응하여, 약 116 마이크로미터의 두께를 가진 예시적인 백-투-백 양막 드레싱 (13000)을 보여준다. 도 13B는 20분의 지속기간 동안 38 psi의 압착 압력 후의 드레싱 (13000)을 보여준다. 여기서 묘사된 바와 같이, 더 압축된 드레싱은 그 후에 약 89 마이크로미터의 두께를 가지는 것이 관찰되었다.

본 발명의 실시양태는 또한 드레싱의 대향하는 면 위에 외부 간질 표면이 존재하는 다층 양막 조직 구축물을 포괄한다. 예를 들어, 도 9에 도시된 바와 같이, 다층 양막 드레싱 (900)은 상피층 (912), 기저막 (914), 치밀층 (916) 및 섬유아세포층 (918)을 가진 첫 번째 양막층 (910)을 포함할 수 있다. 양막 드레싱 (900)은 상피층 (922), 기저막 (924), 치밀층 (926) 및 섬유아세포층 (928)을 가진 두 번째 양막층 (920)을 포함할 수 있다. 본원의 다른 곳에서 기술된대로 상피층 (912), (922)가 함께 붙도록 접착제 또는 조직 글루 (940)으로 부착될 수 있다. 이러한 형상에서, 신체 내의 한 기관 또는 조직에 한 면의 간질 또는 섬유아세포층(예를 들어 층 (918))이 부착하고 신체 내의 다른 기관 또는 조직에 대향하는 면의 간질 또는 섬유아세포층(예를 들어 층 (928))이 부착하는 곳에서, 다층 드레싱 (900)은 양면 테이프로 작용할 수 있다. 이러한 적용은, 예를 들면 외과 절차 후에 서로 근접하게 두 기관 또는 조직을 유지시키는 것이 바람직한 곳에서 유리할 수 있다.

다층 양막 드레싱은 전형적으로 단일 층 양막 드레싱보다 더 견고하고, 따라서 개선된 취급 특징을 제공할 수 있는 것이 관찰된다. 이와 관련하여, 일부 경우에 양막 드레싱을 "젤리 롤" 형상으로 말 수 있고 환자 내의 배치를 위해 원통형 관 또는 투관침 안에 삽입한다. 백-투-백 양막 드레싱은 일반적으로 평평하거나 시트 같은 형상의 양쪽 외부 면 위에 상피층이 존재하기 때문에, 드레싱은 어플리케이터를 통해 들어가기 전에 시계방향 또는 시계반대방향 젤리-롤 둘 중 하나로 쉽게 말릴 수 있다.

일부 적용에서, 다층 양막 드레싱을 환자의 근육 조직 및 뼈 조직 사이 또는 한 위치의 근육 조직 및 인접한 위치의 근육 조직 사이 내에 위치시킬 수 있다. 드레싱은 외과 증상의 임의의 유형에 대해 장벽을 제공하는 용도에 아주 적합하다. 예를 들면, 종양 제거 절차 후에, 환자에게 드레싱의 적용은 수술 부위에 장벽을 회복시키는 것을 도울 수 있다. 본 발명의 실시양태에 따른 드레싱은 또한 다단계 교정 수술 절차의 용도로 아주 적합하다. 적어도 부분적으로는 유리한 인장력 및 봉합능력 특징 때문에, 수술 후에 드레싱이 그것이 원하는 위치에 계속 있도록, 예시적인 드레싱을 수술 동안 부위에 봉합할 수 있다.

예시적인 실시양태가 어느 정도 상세하게 기술되었지만, 실시예로 그리고 이해의 명확성을 통해, 당업자들은 각종 변형물, 번안물, 변경품을 사용할 수 있는 것을 인지할 것이다. 따라서, 본 발명의 범위는 청구항에 의해 오로지 제한될 것이다.

Claims

상피층 및 기저막을 가진 첫 번째 조직층; 및
상피층 및 기저막을 가진 두 번째 조직층을 포함하며, 첫 번째 및 두 번째 조직층의 상피층은 각각 패치의 첫 번째 및 두 번째 대향하는 외부 표면으로 규정된 것인 다층 조직 패치.
제1항에 있어서, 첫 번째 및 두 번째 조직층이 양막 조직층을 포함하는 다층 조직 패치.
제2항에 있어서, 첫 번째 조직층의 양막층이 섬유아세포층을 포함하고, 두 번째 조직층의 양막층이 섬유아세포층을 포함하고, 첫 번째 양막층의 섬유아세포층의 적어도 일부가 두 번째 양막층의 섬유아세포층의 적어도 일부와 결부된 것인 다층 조직 패치.
제2항에 있어서, 첫 번째 양막층의 상피층 및 두 번째 양막층의 상피층 사이에 배치된 경계면을 형성하기 위하여 첫 번째 양막층의 섬유아세포층의 적어도 일부가 두 번째 양막층의 섬유아세포층의 적어도 일부와 결부된 것인 다층 조직 패치.
제1항에 있어서, 첫 번째 및 두 번째 조직층 각각이 양막 조직층, 장 조직층 및 제대 조직층으로 이루어진 군에서 선택된 요소를 포함하는 것인 다층 조직 패치.
제1항에 있어서, 패치가 약 40 마이크로미터 내지 약 500 마이크로미터 범위 내의 두께를 갖는 것인 다층 조직 패치.
제1항에 있어서, 패치가 약 3.3 MPa 내지 약 36.4 MPa 범위의 인장력을 갖는 것인 다층 조직 패치.
제1항에 있어서, 패치가 약 0.40 N 내지 약 0.70 N 범위의 4.0 봉합사 인발력을 갖는 것인 다층 조직 패치.
제1항에 있어서, 첫 번째 조직층이 첫 번째 배향으로 배치되고, 두 번째 조직층이 첫 번째 배향에서 각지게 어긋난 두 번째 배향으로 배치된 것인 다층 조직 패치.
제9항에 있어서, 첫 번째 배향이 두 번째 배향에서 약 90 도 각지게 어긋난 것인 다층 조직 패치.
제10항에 있어서, 패치가 약 9 MPa 내지 약 47.2 MPa 범위 내의 인장력을 갖는 것인 다층 조직 패치.
패치를 형성하기 위하여 상피층 및 기저막을 가진 첫 번째 조직층을 상피층 및 기저막을 가진 두 번째 조직층과, 첫 번째 및 두 번째 조직층의 상피층은 각각 패치의 첫 번째 및 두 번째 대향하는 외부 표면으로 규정되도록 접촉시키는 것을 포함하는 다층 조직 패치의 제작 방법.
제12항에 있어서, 첫 번째 조직층 및 두 번째 조직층이 조직의 단일 조각의 각 부분이고, 접촉 단계가 첫 번째 조직층의 일부분이 적어도 부분적으로 두 번째 조직층의 일부분과 겹치도록 조직의 단일 조각을 맞접는 것을 포함하는 것인 다층 조직 패치의 제작 방법.
제12항에 있어서, 첫 번째 조직층 및 두 번째 조직층은 조직의 각각 분리된 조각이고, 접촉 단계가 첫 번째 조직층의 일부분이 적어도 부분적으로 두 번째 조직층의 일부분과 겹치도록 첫 번째 및 두 번째 층을 접근시키는 것을 포함하는 것인 다층 조직 패치의 제작 방법.
제14항에 있어서, 접근시킬 때 첫 번째 조직층이 첫 번째 배향으로 배치되고, 두 번째 조직층이 첫 번째 배향에서 각지게 어긋난 두 번째 배향으로 배치되는 것인 다층 조직 패치의 제작 방법.
제15항에 있어서, 첫 번째 배향이 두 번째 배향에서 약 90 도 각지게 어긋난 것인 다층 조직 패치의 제작 방법.
제12항에 있어서, 첫 번째 및 두 번째 조직층 각각이 섬유아세포층을 포함하고, 접촉 단계가 첫 번째 조직층의 상피층 및 두 번째 조직층의 상피층 사이에 배치된 섬유아세포 영역을 형성하기 위하여, 첫 번째 조직층의 섬유아세포층의 적어도 일부가 두 번째 조직층의 섬유아세포층의 적어도 일부와 접합하도록 첫 번째 및 두 번째 조직층을 접근시키는 것을 포함하는 것인 다층 조직 패치의 제작 방법.
제12항에 있어서, 첫 번째 및 두 번째 조직층 각각이 양막 조직층을 포함하는 것인 다층 조직 패치의 제작 방법.
제12항에 있어서, 첫 번째 및 두 번째 조직층 각각이 양막 조직층, 장 조직층 및 제대 조직층으로 이루어진 군에서 선택된 요소를 포함하는 것인 다층 조직 패치의 제작 방법.
제12항에 있어서, 첫 번째 조직층 및 두 번째 조직층을 서로 가압하는 것을 추가로 포함하는 것인 다층 조직 패치의 제작 방법.
제20항에 있어서, 첫 번째 조직층 및 두 번째 조직층이 약 10 psi 내지 약 50 psi 범위 내의 힘으로 서로에 대해 가압되는 것인 다층 조직 패치의 제작 방법.
제20항에 있어서, 첫 번째 조직층 및 두 번째 조직층이 약 5초 내지 약 24시간 범위 내의 지속시간 동안 서로에 대해 가압되는 것인 다층 조직 패치의 제작 방법.
제20항에 있어서, 첫 번째 조직층 및 두 번째 조직층이 약 15분의 지속 기간 동안 약 38 psi의 힘으로 서로에 대해 가압되는 것인 다층 조직 패치의 제작 방법.
상피층 및 기저막을 가진 첫 번째 조직층 및 상피층 및 기저막을 가진 두 번째 조직층을 포함하고, 첫 번째 및 두 번째 조직층의 상피층은 각각 패치의 첫 번째 및 두 번째 대향하는 외부 표면으로 규정된 것인 다층 조직 패치를 얻는 것; 및
환자에게 다층 조직 패치를 투여하는 것을 포함하는,
다층 조직 패치로 환자를 치료하는 방법.
제24항에 있어서, 다층 조직 패치가 상해입은, 손상된, 분쇄된, 봉합된, 염증이 생긴 또는 결찰된 환자 조직에 투여되는 것인 다층 조직 패치로 환자를 치료하는 방법.
제24항에 있어서, 투여 단계가
환자의 신체 위 또는 내의 수술 부위에 패치를 위치시키는 것,
환자의 신체 위 또는 내의 외상 부위에 패치를 위치시키는 것,
환자에게 패치를 봉합하는 것,
환자 신경 둘레를 패치로 감싸는 것,
환자 건 둘레를 패치로 감싸는 것,
환자 골 결손 위에 패치를 온레이(onlay) 하는 것,
환자의 족근골관 내에 패치를 위치시키는 것,
추궁절제술 절차 동안 환자의 척추에 패치를 적용하는 것,
전방요추간유합술 절차 동안 환자의 척추에 패치를 적용하는 것,
추궁절개술 절차 동안 환자의 척추에 패치를 적용하는 것,
두 개의 유사한 조직 사이에 패치를 배치하는 것,
두 개의 유사하지 않은 조직 사이에 패치를 배치하는 것,
경질막 인열에 패치를 배치하는 것,
슬개골 구역에 공간을 유지하기 위하여 슬개골에 패치를 배치하는 것,
임의의 치유 단계 후에 계속 분리되어 있게 의도된 두 표면 사이에 패치를 배치하는 것,
환자의 말초 신경과 패치를 접촉시키는 것,
환자의 장경골인대와 패치를 접촉시키는 것,
환자의 반월판과 패치를 접촉시키는 것, 및
환자의 장무지신근건과 패치를 접촉시키는 것
으로 이루어진 군에서 선택된 요소를 포함하는 것인 다층 조직 패치로 환자를 치료하는 방법.
제24항에 있어서, 첫 번째 및 두 번째 조직층이 양막층을 포함하는 것인 다층 조직 패치로 환자를 치료하는 방법.
제27항에 있어서, 첫 번째 조직층의 양막층이 섬유아세포층을 포함하고, 두 번째 조직층의 양막층이 섬유아세포층을 포함하고, 첫 번째 양막층의 섬유아세포층의 적어도 일부가 두 번째 양막층의 섬유아세포층의 적어도 일부와 결부된 것인 다층 조직 패치로 환자를 치료하는 방법.
제27항에 있어서, 첫 번째 양막층의 상피층 및 두 번째 양막층의 상피층 사이에 배치된 경계면을 형성하기 위하여 첫 번째 양막층의 섬유아세포층의 적어도 일부가 두 번째 양막층의 섬유아세포층의 적어도 일부와 결부된 것인 다층 조직 패치로 환자를 치료하는 방법.
제24항에 있어서, 첫 번째 및 두 번째 조직층 각각이 양막 조직층, 장 조직층 및 제대 조직층으로 이루어진 군에서 선택된 요소를 포함하는 것인 다층 조직 패치로 환자를 치료하는 방법.