KR20130097960A - Gemcitabine- loaded polyester biodegradable polymer microparticles by using supercritical fluid and method thereof - Google Patents
Gemcitabine- loaded polyester biodegradable polymer microparticles by using supercritical fluid and method thereof Download PDFInfo
- Publication number
- KR20130097960A KR20130097960A KR1020120019670A KR20120019670A KR20130097960A KR 20130097960 A KR20130097960 A KR 20130097960A KR 1020120019670 A KR1020120019670 A KR 1020120019670A KR 20120019670 A KR20120019670 A KR 20120019670A KR 20130097960 A KR20130097960 A KR 20130097960A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- gemcitabine
- solvent
- supercritical fluid
- polymer
- poly
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Withdrawn
Links
- 239000012530 fluid Substances 0.000 title claims abstract description 68
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 title claims abstract description 39
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 title claims abstract description 32
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 title claims abstract description 31
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 title claims abstract description 31
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 30
- SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N gemcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1C(F)(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N 0.000 claims abstract description 103
- 229960005277 gemcitabine Drugs 0.000 claims abstract description 100
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 claims abstract description 45
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 18
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 65
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 50
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical group ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 48
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 43
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 21
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 11
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 11
- RKDVKSZUMVYZHH-UHFFFAOYSA-N 1,4-dioxane-2,5-dione Chemical compound O=C1COC(=O)CO1 RKDVKSZUMVYZHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Polymers OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 claims description 10
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 claims description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical group OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N lactide Chemical compound CC1OC(=O)C(C)OC1=O JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229920001432 poly(L-lactide) Polymers 0.000 claims description 8
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 5
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 claims description 4
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 claims description 4
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- -1 polyethylene Polymers 0.000 claims description 3
- 238000000194 supercritical-fluid extraction Methods 0.000 claims description 3
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 claims description 2
- XJRBAMWJDBPFIM-UHFFFAOYSA-N methyl vinyl ether Chemical group COC=C XJRBAMWJDBPFIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229920001610 polycaprolactone Polymers 0.000 claims description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 abstract description 20
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 abstract description 20
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 abstract description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 24
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 23
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 18
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 10
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 9
- 230000006837 decompression Effects 0.000 description 8
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 8
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 7
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 7
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 7
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 7
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LQZZUXJYWNFBMV-UHFFFAOYSA-N dodecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCO LQZZUXJYWNFBMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- JJTUDXZGHPGLLC-IMJSIDKUSA-N 4511-42-6 Chemical compound C[C@@H]1OC(=O)[C@H](C)OC1=O JJTUDXZGHPGLLC-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 4
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 4
- 238000001878 scanning electron micrograph Methods 0.000 description 4
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 4
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 4
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L di(octadecanoyloxy)lead Chemical compound [Pb+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- MGWGWNFMUOTEHG-UHFFFAOYSA-N 4-(3,5-dimethylphenyl)-1,3-thiazol-2-amine Chemical compound CC1=CC(C)=CC(C=2N=C(N)SC=2)=C1 MGWGWNFMUOTEHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010027406 Mesothelioma Diseases 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 229920000229 biodegradable polyester Polymers 0.000 description 1
- 239000004622 biodegradable polyester Substances 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 229940020967 gemzar Drugs 0.000 description 1
- 229930182478 glucoside Natural products 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- JCXJVPUVTGWSNB-UHFFFAOYSA-N nitrogen dioxide Inorganic materials O=[N]=O JCXJVPUVTGWSNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 125000005474 octanoate group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 229920001606 poly(lactic acid-co-glycolic acid) Polymers 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000005297 pyrex Substances 0.000 description 1
- VTGOHKSTWXHQJK-UHFFFAOYSA-N pyrimidin-2-ol Chemical compound OC1=NC=CC=N1 VTGOHKSTWXHQJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HNJBEVLQSNELDL-UHFFFAOYSA-N pyrrolidin-2-one Chemical compound O=C1CCCN1 HNJBEVLQSNELDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 238000007151 ring opening polymerisation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 238000009121 systemic therapy Methods 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
- A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
- A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
- A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
- A61K9/1641—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poloxamers
- A61K9/1647—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1682—Processes
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Processes Of Treating Macromolecular Substances (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
본 발명은 초임계 유체 공정을 이용하여 젬시타빈 함유 폴리에스터계 생분해성 고분자 미립자 및 이의 제조 방법에 관한 것이다.
본 발명의 방법을 이용하면 친수성 젬시타빈의 봉입효율, 안정성 및 지속적인 젬시타빈의 방출 특성이 월등히 향상된 미립자를 얻을 수 있다.
또한, 젬시타빈의 초기 방출을 감소시키고, 젬시타빈의 방출 양을 조절함으로써 서방성 타겟지향형 약물전달에 효과적으로 사용될 수 있다.The present invention relates to gemcitabine-containing polyester-based biodegradable polymer microparticles using a supercritical fluid process and a method for producing the same.
By using the method of the present invention, it is possible to obtain fine particles having improved encapsulation efficiency, stability and sustained release of gemcitabine of hydrophilic gemcitabine.
It can also be used effectively for sustained release targeted drug delivery by reducing the initial release of gemcitabine and controlling the amount of gemcitabine released.
Description
본 발명은 초임계 유체를 이용한 젬시타빈 함유 폴리에스터계 생분해성 고분자 미립자 및 이의 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to a gemcitabine-containing polyester-based biodegradable polymer microparticles using a supercritical fluid and a preparation method thereof.
일반적으로 암을 치료하는 방법으로는 수술요법, 방사선 치료 등의 국소적인 방법과 화학요법 등의 전신요법이 사용되고 있다. 특히, 화학요법에서 주로 사용하는 상표 Gemzar로 Eli Lilly사에서 시판하는 젬시타빈 HCl은 4-아미노-1-(2-데옥시-2,2-디플루오로-β-D-리보푸라노실)-피리미딘-2(1H)-온 또는 2'-데옥시-2', 2'-디플루오로시티딘(β 이성질체)으로 화학적으로 기술되는 시토신의 합성 글루코시드 유사체이며, 췌장, 비소형 세포 폐암, 난소암, 유방암, 중피종 등 다양한 고형종양 및 백혈병에 대하여 항암 작용을 가지는 피리미딘 대사길항물질로 알려져 있다. 그러나 일반적으로 상기 젬시타빈은 빠르게 대사되며 짧은 반감기를 가지고 있어 약물의 높은 투여량과 반복투여가 요구되는 등 낮은 생체이용률을 보인다. In general, as a method of treating cancer, local methods such as surgery, radiation therapy, and systemic therapy such as chemotherapy are used. In particular, gemcitabine HCl sold by Eli Lilly under the trademark Gemzar, which is mainly used in chemotherapy, is 4-amino-1- (2-deoxy-2,2-difluoro-β-D-ribofuranosyl)- Synthetic glucoside analogues of cytosine chemically described as pyrimidin-2 (1H) -one or 2'-deoxy-2 ', 2'-difluorocytidine (β isomer), and pancreatic, non-small cell lung cancer It is known as a pyrimidine metabolic antagonist that has anticancer activity against various solid tumors and leukemias such as ovarian cancer, breast cancer and mesothelioma. However, in general, the gemcitabine is rapidly metabolized and has a short half-life, and thus shows low bioavailability such as high dose and repeated administration of the drug.
따라서, 젬시타빈의 높은 투여량과 반복투여를 해결하여 젬시타빈의 안정성 향상과 서방형 방출특성을 제어하기 위한 제제를 개발하기 위해 많은 연구들이 진행되고 있다.Therefore, many studies have been conducted to solve the high dose and repeated administration of gemcitabine to improve the stability of gemcitabine and to develop a formulation for controlling the sustained release properties.
즉, 종래의 기술은 리포좀에 젬시타빈을 봉입하는 방법에 있어서, 제조 방법의 어려움 및 안정성 문제 등의 단점이 있으며, 소수성 젬시타빈 유도체의 나노입자 제조에 있어서, 상기 유도체는 신규물질로서 체내에서 추가적이 독성 등의 문제를 야기 시킬 수 있는 위험성이 있다. That is, the prior art has disadvantages in the method of encapsulating gemcitabine in liposomes, such as difficulty in the preparation method and stability problems, and in the preparation of nanoparticles of hydrophobic gemcitabine derivatives, the derivative is added to the body as a novel substance. There is a risk that can cause problems such as toxicity.
이에 본 발명자는 상기와 같은 문제점을 극복하기 위해서, 생분해성 고분자 내에 약물을 봉입하여 약물의 방출속도 제어를 위한 고분자 미립자 설계와 이러한 고분자 미립자의 제조에 있어 환경친화적 대체 기술로서 초임계 유체를 이용한 미립자의 제조방법을 완성하기에 이르렀다.In order to overcome the above problems, the present inventors enclosed a drug in a biodegradable polymer to design a polymer microparticle for controlling the release rate of the drug, and microparticles using a supercritical fluid as an environmentally friendly alternative technology in the preparation of the polymer microparticle. It has come to complete the manufacturing method of.
본 발명은 젬시타빈를 폴리에스터계 생분해성 고분자 내부에 봉입시켜 일정 시간 동안 지속적으로 젬시타빈이 방출될 수 있는 입자의 크기가 균일한 미립자를 제조하는 방법을 제공하는 것이다. The present invention is to provide a method for preparing a fine particle having a uniform size of the particles that can be released for a certain period of time by encapsulating gemcitabine inside the polyester-based biodegradable polymer.
또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 젬시타빈 함유 고분자 미립자 및 상기 젬시타빈이 함유된 약물 전달체 및 항암제에 관한 것이다.
In addition, the present invention relates to a gemcitabine-containing polymer microparticles prepared by the above method and a drug carrier and an anticancer agent containing the gemcitabine.
본 발명은 초임계 유체를 이용한 젬시타빈 함유 폴리에스터계 생분해성 고분자 미립자 및 이의 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to a gemcitabine-containing polyester-based biodegradable polymer microparticles using a supercritical fluid and a preparation method thereof.
본 발명을 통한 젬시타빈의 서방성 방출을 위한 고분자 미립자 제조방법은 용매의 사용량을 최소화할 수 있으며, 유화제를 사용하지 않으면서 일정한 크기의 미립자를 신속하게 제조할 수 있고, 젬시타빈의 방출속도를 다양하게 조절할 수 있는 효과가 있다. The method for preparing polymer microparticles for sustained release of gemcitabine according to the present invention can minimize the amount of solvent used, can rapidly prepare particles of a constant size without using an emulsifier, and increase the release rate of gemcitabine. There are various adjustable effects.
또한, 젬시타빈의 초기 방출을 감소시키고, 젬시타빈의 방출 양을 조절함으로써 서방성 타겟지향형 약물전달에 효과적으로 사용될 수 있다.It can also be used effectively for sustained release targeted drug delivery by reducing the initial release of gemcitabine and controlling the amount of gemcitabine released.
도 1은 본 발명에 따른 초임계 유체를 이용한 미립자 제조장치의 구성을 나타내는 것이다.
도 2는 본 발명에 따른 실시예 1에 의하여 합성된 고분자의 NMR 데이터이다.
도 3은 본 발명에 따른 실시예 2에 의하여 제조되는 젬시타빈의 서방성 방출을 위한 고분자 미립자의 주사전자현미경 사진이다.
도 4는 본 발명에 따른 실시예 3에 의하여 제조되는 젬시타빈의 서방성 방출을 위한 고분자 미립자의 주사전자현미경 사진이다.
도 5는 본 발명에 따른 실시예 4에 의하여 제조되는 젬시타빈의 서방성 방출을 위한 고분자 미립자의 주사전자현미경 사진이다.
도 6은 본 발명에 따른 실시예 5에 의하여 제조되는 젬시타빈의 서방성 방출을 위한 고분자 미립자의 주사전자현미경 사진이다.
도 7은 본 발명에 따른 젬시타빈의 서방성 방출을 위한 고분자 미립자의 봉입율을 측정한 실험결과를 나타내는 것이다.
도 8은 본 발명에 따른 폴리엘락티드와 폴리엘락티드-코-글라이콜리드(70:30)의 혼합비율에 따라 제조된 젬시타빈 함유 고분자 미립자 중 젬시타빈의 방출율을 측정한 실험결과를 나타내는 것이다.
도 9는 본 발명에 따른 폴리엘락티드-코-글라이콜리드를 구성하는 엘락티드와 글라이콜리드의 비율에 따라 제조된 젬시타빈 함유 고분자 미립자 중 젬시타빈의 방출율을 측정한 실험결과를 나타내는 도이다.Figure 1 shows the configuration of a particulate production apparatus using a supercritical fluid according to the present invention.
2 is NMR data of the polymer synthesized in Example 1 according to the present invention.
3 is a scanning electron micrograph of the polymer microparticles for the sustained release of gemcitabine prepared by Example 2 according to the present invention.
Figure 4 is a scanning electron micrograph of the polymer fine particles for the sustained release of gemcitabine prepared by Example 3 according to the present invention.
5 is a scanning electron micrograph of the polymer microparticles for the sustained release of gemcitabine prepared by Example 4 according to the present invention.
6 is a scanning electron micrograph of the polymer microparticles for the sustained release of gemcitabine prepared by Example 5 according to the present invention.
Figure 7 shows the experimental results of measuring the encapsulation rate of the polymer microparticles for the sustained release of gemcitabine according to the present invention.
Figure 8 shows the experimental results of measuring the release rate of gemcitabine in the gemcitabine-containing polymer microparticles prepared according to the mixing ratio of polyelactide and polyelactide-co-glycolide (70:30) according to the present invention will be.
Figure 9 shows the experimental results of measuring the release rate of gemcitabine in the gemcitabine-containing polymer microparticles prepared according to the ratio of the elactide and glycolide constituting the polyelactide-co-glycolide according to the present invention It is also.
본 발명은 초임계 유체를 이용한 젬시타빈 함유 폴리에스터계 생분해성 고분자 미립자의 제조방법에 관한 것이다. 보다 구체적으로,The present invention relates to a method for producing gemcitabine-containing polyester biodegradable polymer microparticles using a supercritical fluid. More specifically,
(a) 젬시타빈 및 폴리에스터계 생분해성 고분자 또는 이들의 혼합물을 각각 다른 용매에 용해 시킨 후, 이들을 혼합하여 혼합용액을 제조하는 단계;(a) dissolving gemcitabine and polyester-based biodegradable polymers or mixtures thereof in different solvents, and then mixing them to prepare a mixed solution;
(b) 상기 혼합용액을 초임계 유체와 분무 접촉시켜 젬시타빈이 봉입된 폴리에스터계 생분해성 고분자 미립자를 형성시키는 단계; 및(b) spray-contacting the mixed solution with a supercritical fluid to form polyester-based biodegradable polymer microparticles containing gemcitabine; And
(c) 상기 생성된 미립자 내에 잔존하는 용매를 추출제거하는 단계;(c) extracting and removing the solvent remaining in the produced fine particles;
를 포함하는 젬시타빈이 봉입된 고분자 미립자의 제조방법에 관한 것이다.It relates to a method for producing a polymer fine particle encapsulated gemcitabine.
상기 미립자 제조방법의 기본 원리는 젬시타빈 및 폴리에스터계 생분해성 고분자를 적정한 비율로 각기 다른 적량의 용매에 용해시켜 이를 혼합하여 혼합용액을 제조한 후 이를 초임계유체가 평형을 이룬 침전조에 노즐을 통해 분사하여 입자를 얻은 뒤 초임계 유체를 수차례 흘려보내 용매를 추출해낸 후 초임계 유체를 제거함으로써 젬시타빈 함유 고분자 미립자를 제조하는 것이다. The basic principle of the method for preparing the microparticles is to dissolve gemcitabine and polyester-based biodegradable polymers in appropriate amounts of different amounts of solvent and mix them to prepare a mixed solution, and then use a nozzle in a precipitation tank in which a supercritical fluid is equilibrated. After obtaining the particles by spraying through the supercritical fluid flows several times to extract the solvent and then remove the supercritical fluid to prepare the gemcitabine-containing polymer microparticles.
보다 구체적으로, 상기 (a) 단계는 젬시타빈 1중량부와 상기 젬시타빈 1중량부에 대하여 폴리에스터계 생분해성 고분자 또는 이들의 혼합물 0.5 내지 50중량부, 1 내지 30중량부를 각각 다른 용매 50 내지 5,000중량부에 용해시켜 혼합한 혼합용액을 제조하는 단계일 수 있다.More specifically, the step (a) is 0.5 to 50 parts by weight of the polyester-based biodegradable polymer or a mixture thereof, and 1 to 30 parts by weight of each
본 발명에 따른 폴리에스터계 생분해성 고분자는, 예컨데 폴리락티드(polylactide)와 폴리글라이콜리드(polyglycolide), 락티드(lactide)와 글라이콜리드(glycolide)의 공중합체일 수 있다. 상기 공중합체로서는 이에 제한되지 않으나, 폴리락티드-코-글라이콜리드(polylactide-co-glycolide), 폴리락티드-블록-폴리글라이콜리드(polylacticde-b-poly glycolide), 메톡시 폴리 에틸렌글라이콜-블록-폴리락티드(methoxy-polyethylene glycol-b-poly lacdide), 메톡시 에틸렌글라이콜-블록-폴리락티드-코-글라이콜라이드(methoxy-poly(ethylene glycol)-b- poly(lacdide-co-glycolide)), 폴리히드록시부틸레이트 (poly(hydroxybutylate)), 폴리발레로락톤 (poly(valerolactone)), 폴리입실론카프로락톤 (poly(E-caprolactone)) 또는 이들의 혼합물 등이라면 어느 것을 사용하여도 무방하다. 본 발명세서는 폴리엘락티드(poly(L-lactide))와 D,L-형의 디엘락티드(D,L-lactide)가 무작위로 섞여 있는 거울상 이성질체로부터 합성된 폴리디엘락티드-코-글라이콜리드(poly(D,L-lactide-co-glycolide)일 수 있으며, 순수한 L-형 거울상 이성질체, 즉 엘-락타이드(L-lactide)로부터 합성된 폴리엘락티드-코-글라이콜리드(poly(L-lactide-co-glycolide))일 수 있다. The polyester-based biodegradable polymer according to the present invention may be, for example, a copolymer of polylactide, polyglycolide, lactide, and glycol. Examples of the copolymer include, but are not limited to, polylactide- co- glycolide, polylactide- b -polyglycolide, methoxy poly ethylene glycol-block-polylactide (methoxy-polyethylene glycol- b -poly lacdide ), methoxy-ethylene glycol-block-poly-lactide-co-Glidden Nicholas Id (methoxy-poly (ethylene glycol) - b poly (lacdide- co- glycolide)), polyhydroxybutylate, polyvalerolactone, poly (epsiloncaprolactone) or mixtures thereof It may be used as long as it is. The present invention is a polydielactide-co-glycol synthesized from enantiomers in which randomly mixed poly (L-lactide) and D, L-type deelactide (D, L-lactide) Poly (D, L-lactide- co- glycolide), polyelastide- co -glycolide synthesized from pure L-type enantiomers, ie L-lactide (poly (L-lactide- co -glycolide)).
특히, 상기 폴리엘락티드(poly(L-lactide))와 폴리엘락티드-코-글라이콜리드(poly(L-lactide-co-glycolide)) 함량에 따라 제조된 젬시타빈 함유 고분자 입자의 특성이 달라질 수 있으며, 상기 폴리엘락티드-코-글라이콜리드(poly(L-lactide-co-glycolide)) 공중합체를 구성하는 엘락티드 및 글라이콜리드의 몰비는 95:5 내지 40:60 비율일 수 있고, 폴리엘락티드-코-글라이콜리드를 구성하는 폴리락티드 및 폴리글라이콜리드의 몰비는 95:5 내지 40:60 비율일 수 있으며, 상기 폴리락티드(polylactide)와 폴리글라이콜리드(polyglycolide) 또는 락티드(lactide)와 글라이콜리드(glycolide)의 공중합체 중 선택되는 어느 하나와 폴리엘락티드(poly(L-lactide))가 1:20 내지 20:1의 중량비로 혼합될 수 있다.In particular, the characteristics of the gemcitabine-containing polymer particles prepared according to the content of the poly (L-lactide) and poly-lactide- co -glycolide (poly (L-lactide- co -glycolide)) The molar ratio of the ellactide and glycolide constituting the poly (L-lactide- co- glycolide) copolymer may be 95: 5 to 40:60 ratio. The molar ratio of polylactide and polyglycolide constituting the polyelactide-co-glycolide may be 95: 5 to 40:60 ratio, and the polylactide and poly Glycolide (polyglycolide) or a copolymer of lactide (lactide) and glycol (glycolide) and poly (L-lactide) is 1: 20 to 20: 1 It can be mixed in a weight ratio.
본 발명의 일구체예에서는 폴리엘락티드와 폴리엘락티드-코-글라이콜리드의 혼합 중량비가 20:1 내지 1:20일 수 있다.In one embodiment of the present invention, the mixing weight ratio of polyelastide and polyelastide-co-glycolide may be 20: 1 to 1:20.
여기서, 상기 폴리에스터계열의 생분해성 고분자의 평균분자량은 2,000 내지 800,000 Da이며, 12,000~200,000 Da일 수 있으며, 그 사용량은 젬시타빈 1 중량부에 대하여 0.5 내지 50 중량부, 1 내지 30 중량부일 수 있다. Here, the average molecular weight of the biodegradable polymer of the polyester series is 2,000 to 800,000 Da, may be 12,000 to 200,000 Da, the amount of the use may be 0.5 to 50 parts by weight, 1 to 30 parts by weight based on 1 part by weight of gemcitabine. have.
한편, 본 발명에 따른 폴리에스터계열의 생분해성 고분자는 앞서 언급한 물질이라면 어떠한 것을 사용하여도 무방하지만, 약제학적으로 사용 가능한 물질을 사용할 수 있다.On the other hand, the biodegradable polymer of the polyester series according to the present invention may be used as long as any of the above-mentioned materials, it can be used a pharmaceutically usable material.
본 발명에 따른 "용매"라 함은 젬시타빈의 서방성 방출을 위한 고분자 미립자를 제조하기 위한 원료를 말하며, 유기용매일 수 있다. 예를 들면, 젬시타빈, 폴리에스터계 생분해성 고분자 등을 용해시키는 용매를 의미하며, 특히 상기 젬시타빈를 용해시킬 수 있는 용매를 제 1 용매, 폴리에스터계 생분해성 고분자를 용해시키는 용매를 제 2 용매라 한다. The term "solvent" according to the present invention refers to a raw material for preparing polymer fine particles for sustained release of gemcitabine, and may be an organic solvent. For example, it means a solvent for dissolving gemcitabine, a polyester-based biodegradable polymer, and the like, in particular, a solvent capable of dissolving the gemcitabine is a first solvent, and a solvent for dissolving a polyester-based biodegradable polymer is a second solvent. It is called.
상기 용매는 젬시타빈, 폴리에스터계 생분해성 고분자를 용해시킬 수 있는 것이라면 어떠한 것을 사용하여도 무방하지만, 상기 젬시타빈를 용해시키기 위해서는 메탄올, 디메틸설폭사이드, N-메틸-2-피롤리돈, N,N-디메틸 포름아미드, 디메틸아세트아미드 또는 이들의 혼합물을 사용할 수 있고, 폴리에스터계 생분해성 고분자를 용해시키기 위해서는 메틸렌클로라이드, 클로로포름, 아세톤, 디메틸설폭사이드 또는 이들의 혼합물 등을 사용할 수 있다. 그 사용량은 상기 젬시타빈 1중량부에 대하여 100 내지 5,000 중량부를 사용할 수 있다. The solvent may be used as long as it can dissolve gemcitabine and polyester-based biodegradable polymers, but in order to dissolve the gemcitabine, methanol, dimethyl sulfoxide, N -methyl-2-pyrrolidone, N, N -dimethyl formamide, dimethylacetamide or a mixture thereof can be used, and methylene chloride, chloroform, acetone, dimethyl sulfoxide or a mixture thereof can be used to dissolve the polyester biodegradable polymer. The amount used may be 100 to 5,000 parts by weight based on 1 part by weight of gemcitabine.
여기서, 상기 폴리에스터계 생분해성 고분자를 용해시키기 위한 용매인 메틸렌클로라이드, 클로르포름, 아세톤, 디메틸설폭하이드 또는 이들의 혼합물 등은 상기 젬시타빈이 용해되는 용매인 메탄올, 디메틸설폭사이드, N-메틸-2-피롤리돈, N,N-디메틸 포름아미드, 디메틸아세트아미드 또는 이들의 혼합물을 등과 혼합 될 수 있는 물질일 수 있다.Here, methylene chloride, chlorform, acetone, dimethyl sulfoxide, or a mixture thereof, which is a solvent for dissolving the polyester-based biodegradable polymer, is methanol, dimethyl sulfoxide, N -methyl-, which is a solvent in which gemcitabine is dissolved. 2-pyrrolidone, N, N -dimethyl formamide, dimethylacetamide, or a mixture thereof may be a material that can be mixed with and the like.
또한, 본 발명에 따른 젬시타빈를 용해시키는 제 1 용매와 폴리에스터계 생분해성 고분자를 용해시키기 위한 제 2 용매의 중량비는 10:1 내지 1:10의 비율로 혼합하여 사용할 수 있고, 1:0.5 내지 1:2의 혼합비로 혼합하여 사용할 수 있다.
In addition, the weight ratio of the first solvent for dissolving gemcitabine according to the present invention and the second solvent for dissolving the polyester-based biodegradable polymer may be used by mixing in a ratio of 10: 1 to 1:10, and 1: 0.5 to It can mix and use in the mixing ratio of 1: 2.
상기 (b) 단계는 상기 (a)단계의 혼합용액을 초임계 유체로 분무 접촉시켜 혼합물 미립자를 생성시키는 단계를 말한다. Step (b) refers to the step of spray-contacting the mixed solution of step (a) with a supercritical fluid to generate the mixture fine particles.
상기 초임계 유체란 임계점 이상의 온도 및 압력을 갖는 물질의 상태를 나타낸 용어로서, 초임계 유체의 밀도는 액체의 밀도와 비슷하지만 점도는 기체의 점도처럼 낮기 때문에 확산계수가 액체의 확산계수에 비하여 수백 또는 수천 배 크다. 그러므로, 초임계 유체는 점도가 기체처럼 작으므로 시료 침투력이 좋아 추출 효율이 향상되고, 확산계수가 크므로 물질의 평형상태에 빠르게 접근할 수 있는 특징을 지니고 있다. 따라서, 초임계 유체를 추출에 이용할 경우에는 기존의 용매추출과 비교하여 볼 때 압력 및 온도조작에 의해 고밀도 상태에서 저밀도 상태까지 어떠한 조건에서도 추출을 할 수 있다는 장점이 있으며, 비교적 저온에서 추출공정이 진행됨으로써 열로 인한 추출물의 손상이 감소되는 장점이 있다.The supercritical fluid is a term representing a state of a material having a temperature and pressure above a critical point. Since the density of the supercritical fluid is similar to that of the liquid, but the viscosity is as low as the viscosity of the gas, the diffusion coefficient is several hundreds of the liquid diffusion coefficient. Or thousands of times bigger. Therefore, the supercritical fluid is characterized by having a small viscosity as a gas, so that the sample penetration is good, the extraction efficiency is improved, and the diffusion coefficient is large, thereby allowing quick access to the equilibrium state of the material. Therefore, when the supercritical fluid is used for extraction, it can be extracted under any conditions from high density to low density by pressure and temperature operation, compared with conventional solvent extraction. By doing so, there is an advantage that the damage of the extract due to heat is reduced.
본 발명에 따른 초임계 유체를 이용한 미립자 제조방법에 사용되는 초임계 유체로는 이산화탄소일 수 있고, 이산화탄소는 비교적 낮은 임계 온도와 압력을 가지며, 인체에 무해하고 가격이 저렴하여 열에 민감한 물질의 미립자 제조공정에서 가장 주목 받고 있는 환경친화적 용매이다. 온도는 20 내지 95℃, 압력은 6 내지 70 MPa이며, 침전조내 초임계 이산화탄소의 선속도는 0.01 내지 50 cm/min이고 젬시타빈과 폴리에스터계 생분해성 고분자, 제 1 용매 및 제 2 용매 혼합용액의 유속은 0.1 내지 10 mL/min을 유지한다.The supercritical fluid used in the method for producing particulates using the supercritical fluid according to the present invention may be carbon dioxide, and carbon dioxide has a relatively low critical temperature and pressure, is harmless to the human body, and is inexpensive, thus producing particulates of heat sensitive materials. It is the most environmentally friendly solvent in the process. The temperature is 20 to 95 ℃, the pressure is 6 to 70 MPa, the linear velocity of supercritical carbon dioxide in the sedimentation tank is 0.01 to 50 cm / min, mixed solution of gemcitabine and polyester-based biodegradable polymer, the first solvent and the second solvent The flow rate of is maintained at 0.1 to 10 mL / min.
여기서, 상기 초임계 유체에 사용되는 화합물은 상온 상압에서 기상 또는 액상으로 존재하지만, 임계온도 이상의 온도에서 임계압력이상의 압력으로 압축함으로써 초임계 유체가 되며, 이러한 초임계 유체로 사용되는 화합물을 본 발명에서는 "초임계 유체용 화합물" 또는 "화합물"로 표현한다.
Herein, the compound used in the supercritical fluid is present in the gas phase or liquid phase at normal temperature and normal pressure, but becomes a supercritical fluid by compressing it to a pressure above the critical pressure at a temperature above the critical temperature, and the compound used as the supercritical fluid according to the present invention. In the following description, "compound for supercritical fluid" or "compound" is represented.
상기 (c) 단계는 상기 (b) 단계에서 생성된 혼합물 미립자에 초임계 유체를 연속적으로 공급하는 초임계 유체추출방법으로 상기 생성된 미립자에 잔존하는 용매를 추출 제거하는 단계를 말한다. 즉, 제 1 용매 및 제 2 용매의 혼합용액으로부터 상기 제 1 용매와 제 2 용매를 추출 제거하는 것을 의미한다. Step (c) refers to a step of extracting and removing the solvent remaining in the generated fine particles by a supercritical fluid extraction method of continuously supplying a supercritical fluid to the mixture fine particles produced in the step (b). That is, it means that the first solvent and the second solvent are extracted and removed from the mixed solution of the first solvent and the second solvent.
상기 (c) 단계가 종료된 후 미립자를 회수하는 단계를 더 포함할 수 있다. 상기 회수된 미립자는 젬시타빈의 서방성 방출을 위한 고분자 미립자로서, 그 내부에 젬시타빈이 포함되도록 봉입되어 있고, 상기 미립자에 봉입된 젬시타빈이 일정 시간 동안 지속적으로 방출되도록 구성된 고분자 미립자를 의미한다.
After the step (c) is completed may further comprise the step of recovering the fine particles. The recovered microparticles are polymer microparticles for sustained release of gemcitabine, and are encapsulated to contain gemcitabine therein, and mean the microparticles configured to continuously release gemcitabine encapsulated in the microparticles for a predetermined time. .
이하 본 발명에 대하여 첨부된 도면을 참조하여 상세히 설명하면 다음과 같다. 그러나, 하기의 설명은 오로지 본 발명을 구체적으로 설명하기 위한 것으로 하기 설명에 의해 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings. However, the following description is only for explaining this invention concretely, and does not limit the scope of the present invention by the following description.
도 1은 본 발명에 따른 초임계 유체를 이용한 미립자 제조장치의 구성을 나타내는 도로서 함께 설명한다. 도 1에 도시된 바와 같이, 본 발명에 따른 젬시타빈의 서방성 방출 및 고분자 미립자를 제조하기 위한 장치는 거시적인 관점에서 초임계 유체를 제공하는 초임계 유체 공급부(2), 젬시타빈의 서방성 방출을 위한 고분자 미립자를 제조하기 위한 원료물질인 혼합용액을 공급하기 위한 혼합용액 공급부(4), 혼합용액을 초임계 유체와 분무접촉시켜 미립자를 제조한 후 미립자로부터 용매를 초임계 추출방법으로 제거하는 미립자 생성부(6), 초임계 유체를 재순환시키는 초임계 순환수단(38) 및 용매를 재순환시키는 용매순환수단(40)으로 구성되어 있다.1 is a view showing the configuration of a fine particle production apparatus using a supercritical fluid according to the present invention. As shown in FIG. 1, the apparatus for preparing sustained release of gemcitabine and polymer fine particles according to the present invention is a supercritical
본 발명에 따른 초임계 유체 공급부(2)는 초임계 유체로 사용되는 초임계 유체용 화합물이 저장되어 있는 초임계 유체용 화합물 저장탱크(8), 상기 초임계 화합물 저장탱크(8)에 연결설치되어 화합물 저장탱크(8)로부터 배출되는 화합물이 유입되고 초임계 유체 순환수단(38)내의 압력을 일정하게 유지시키는 전방압력조절기(10), 상기 전방압력조절기(10)와 초임계 유체 순환수단(38)에 연결설치되어 전방압력조절기(10)와 초임계 유체 순환수단(38)으로부터 화합물이 유입되어 저온으로 냉각되는 냉각장치(12), 상기 냉각장치(12)에 연결설치되어 냉각장치(12)를 통과하며 냉각된 화합물을 여과하는 여과기(14), 상기 여과기(14)에 연결 설치되어 상기 여과기를 통과한 화합물을 압축하여 고압의 유체로 제조하는 고압액체펌프(16), 상기 고압액체펌프(16)에 연결 설치되어 상기 고압액체펌프(16)에 의하여 고압으로 압축된 유체를 가열시켜 초임계 유체가 되도록 하는 온도조절기(18)로 구성되어 있다.The supercritical
한편, 본 발명에 따른 혼합용액 공급부(4)는 젬시타빈의 서방성 방출을 위한 고분자 미립자를 제조하기 위한 원재료를 공급하기 위한 것으로서, 젬시타빈과 폴리에스터계 생분해성 고분자 또는 젬시타빈과 폴리에스터계 생분해성 고분자가 용매에 용해된 혼합용액이 저장되어 있는 혼합용액 저장수단(20), 상기 혼합용액 저장수단(20)에 연결설치되어 상기 혼합용액의 유량을 조절하는 고압액체펌프(22), 상기 고압액체펌프(22)와 연결설치되어 혼합용액의 온도를 조절하는 온도조절기(24)로 구성되어 있다.On the other hand, the mixed solution supply unit 4 according to the present invention is for supplying raw materials for preparing polymer microparticles for the sustained release of gemcitabine, gemcitabine and polyester-based biodegradable polymer or gemcitabine and polyester-based High-pressure liquid pump 22, which is connected to the mixed solution storage means 20, the mixed solution storage means 20, the mixed solution storage means 20 is stored in the biodegradable polymer dissolved in a solvent, the Is connected to the high pressure liquid pump 22 is composed of a temperature controller 24 for controlling the temperature of the mixed solution.
여기서, 상기 고압액체펌프(22)는 일정량의 혼합용액을 일정한 유량으로 이송시킬 수 있는 펌프라면 어떠한 펌프를 사용하여도 무방하다.Here, the high pressure liquid pump 22 may be any pump as long as it can transfer a predetermined amount of the mixed solution at a constant flow rate.
본 발명에 따른 미립자 생성부(6)는 젬시타빈의 서방성 방출을 위한 고분자 미립자를 제조하기 위한 장소를 제공하는 것으로서, 상기 초임계 유체 공급부(2)의 온도조절기(18) 및 혼합용액 공급부(4)의 온도조절기(24)에 연결설치되어 상기 혼합용액 공급부(4)의 온도조절기(24)로부터 유입되는 혼합용액을 초임계 유체 공급부(2)의 온도조절기(18)로부터 유입되는 초임계 유체와 분무접촉시켜 미립자를 형성시키는 동시에 용매를 추출하는 반응기(30), 상기 반응기(30)에 연결설치되어 상기 반응기(30)에서 형성된 미립자를 회수하는 미립자 회수수단(32), 상기 미립자 회수수단(32)에 연결설치되어 상기 미립자 회수수단(32)을 통과한 초임계 유체의 압력을 조절하는 후방압력조절기(42), 상기 후방압력조절기(42)를 통과한 초임계 유체를 감압하는 감압탱크(34)를 포함한다.Particle generating unit 6 according to the present invention is to provide a place for producing the polymer particles for the sustained release of gemcitabine, the temperature controller 18 and the mixed solution supply of the supercritical fluid supply (2) ( The supercritical fluid that is connected to the temperature controller 24 of 4) and flows from the temperature controller 18 of the supercritical
여기서, 상기 혼합용액 공급부(4)의 온도조절기(24)로부터 유입되는 혼합용액은 상기 반응기(30) 내부에 구비된 분무수단(28)에 연결설치되어 분무되며, 상기 반응기(30)의 내부에는 혼합용액의 분무에 의하여 생성된 미립자가 초임계 유체와 함께 반응기(30) 외부로 배출되지 않도록 별도의 수단 예를 들면, 필터(미도시) 등이 구비될 수 있다.Here, the mixed solution flowing from the temperature controller 24 of the mixed solution supply unit 4 is sprayed by being connected to the spray means 28 provided in the
한편, 상기 젬시타빈의 서방성 방출을 위한 고분자 미립자를 생성하는 미립자 생성부(6)의 반응기(30), 미립자 회수수단(32) 및 감압탱크(34)에는 온도조절기(미도시)를 각각 설치하여 내부 온도를 일정하게 유지시킬 수 있도록 한다.On the other hand, a temperature controller (not shown) is respectively installed in the
한편, 본 발명에 따른 미립자 생성부(6)의 감압탱크(34)를 통과하는 초임계 유체는 상기 감압탱크(34)에서 감압됨으로써 액상의 용매와 기화된 초임계 유체용 화합물로 분리되는데, 상기 감압탱크(34)의 하부에 용매 배출밸브(36)를 연결설치하여 용매를 일부 배출할 수 있다. On the other hand, the supercritical fluid passing through the
본 발명에 따른 초임계 유체 순환수단(38)은 미립자 제조에 사용된 초임계 유체로 사용된 용매를 재사용하기 위한 것으로서, 상기의 감압탱크(34) 및 전방 압력조절기(10)와 냉각장치(12)에 연결설치되어 상기 감압탱크(34)에서 분리된 초임계 유체로 사용된 용매를 냉각장치(12)로 유입시키는 경로를 제공한다. The supercritical fluid circulation means 38 according to the present invention is for reusing the solvent used as the supercritical fluid used in the production of the fine particles, and the
한편, 본 발명에 따른 용매 순환수단(38)은 미립자 제조에 사용된 액상의 용매를 재사용하기 위한 것으로서, 상기의 감압탱크(34)와 혼합용액 저장수단(20)에 연결설치되어 상기 감압탱크(34)에서 기화된 초임계 유체용 화합물과 기상의 용매와 분리된 액상의 용매를 혼합용액 저장수단(20)으로 유입시키는 경로를 제공한다. 이때, 상기 용매가 순환되는 경로를 제공하는 용매 순환수단(38)의 이동경로 일측에 여과기(26)를 연결설치하여 용매에 존재할 수 있는 불순물을 제거하도록 구성할 수 있다.On the other hand, the solvent circulation means 38 according to the present invention is for reuse of the liquid solvent used in the production of the fine particles, is connected to the
전술한 구성을 갖는 본 발명에 따른 젬시타빈의 서방성 방출을 위한 고분자 미립자 제조장치의 작동기작을 설명하면 다음과 같다.Referring to the operation of the polymer particle production apparatus for sustained release of gemcitabine according to the present invention having the above-described configuration is as follows.
먼저 소정량의 젬시타빈과 상기 젬시타빈 1중량부에 대하여 폴리에스터계 생분해성 고분자 또는 그들의 혼합물 0.5 내지 50중량부, 1 내지 30중량부를 용매 50 내지 5,000중량부에 용해시켜 혼합용액 공급부(4)의 혼합용액 저장수단(20)에 채워 넣는다.First, 0.5 to 50 parts by weight of polyester-based biodegradable polymers or mixtures thereof and 1 to 30 parts by weight of solvent are dissolved in 50 to 5,000 parts by weight based on a predetermined amount of gemcitabine and 1 part by weight of gemcitabine. It is filled in the mixed solution storage means 20.
여기서, 상기 용매는 젬시타빈을 용해시키는 제 1 용매와 폴리에스터계 생분해성 고분자 또는 그들의 혼합물을 용해시키기 위한 제 2 용매를 혼합하여 제조할 수 있는데, 상기 제1 용매와 제 2 용매의 중량비는 10:1 내지 1:10의 비율로 혼합하여 사용할 수 있고, 1:0.5 내지 1:2의 혼합비로 구성될 수 있다.Here, the solvent may be prepared by mixing a first solvent for dissolving gemcitabine and a second solvent for dissolving a polyester-based biodegradable polymer or a mixture thereof, and the weight ratio of the first solvent and the second solvent is 10 It may be used by mixing in a ratio of 1: 1 to 1:10, and may be composed of a mixing ratio of 1: 0.5 to 1: 2.
그 다음, 초임계 유체로 사용되는 이산화탄소 등의 용매가 저장되어 있는 초임계 유체용 화합물 저장탱크(8)를 개방하여 상기 초임계 유체용 화합물 저장탱크(8)에 저장된 화합물이 전방압력조절기(10)에 유입된 후 냉각장치(12)로 유입되어 0 내지 10℃의 온도로 냉각되도록 하며, 상기 냉각장치(12)를 통과한 화합물은 냉각장치(12)의 일측에 연결설치된 여과기(14)를 통과하여 고압액체펌프(16)로 유입되고, 상기 고압액체펌프(16)로 유입된 화합물은 6 내지 70 MPa의 압력으로 압축되고, 상기 고압액체펌프(16)에서 압축된 화합물은 상기 고압액체펌프(16)에 연결설치된 온도조절기(18)로 유입되어 20 내지 95℃로 가열됨으로써 초임계 유체로 제조된 후 상기 온도조절기(18)에 연결 설치된 반응기(30)로 유입된다.Next, the compound storage tank 8 for the supercritical fluid in which the solvent such as carbon dioxide used as the supercritical fluid is stored is opened, so that the compound stored in the compound storage tank 8 for the supercritical fluid is stored in the front pressure regulator 10. ) And then to the
그 다음, 상기 혼합용액 저장수단(20)에 채워져 있는 혼합용액을 고압액체펌프(22)를 이용하여 미립자 생성부(6)의 반응기(30) 내부에 구비된 분무수단(28)으로 공급하고, 상기 분무수단(28)으로 유입된 혼합용액은 상기 분무수단(28)에 의하여 반응기(30) 내부로 분무되어 초임계 유체와 접촉하며 미립자가 형성된다.Then, the mixed solution filled in the mixed solution storage means 20 is supplied to the spray means 28 provided in the
여기서, 상기 분무수단(28)에 의하여 반응기(30)로 유입된 혼합용액에 존재하는 용매는 상기 초임계 유체에 의하여 추출제거됨으로써 미립자가 형성되며, 상기 분무수단(28)으로 유입되는 혼합용액의 유량은 0.1 내지 10 mL/min으로 유입될 수 있고, 특정적으로 상기 분무수단(28)이 노즐인 경우 노즐의 내경이 25 내지 700 ㎛일 수 있으며, 127 ㎛일 수 있다.Here, the solvent present in the mixed solution introduced into the
그 다음, 상기 형성된 미립자에 고압액체펌프(16)로부터 유입된 초임계 유체가 지속적으로 공급되어 상기 미립자에 잔존하는 용매가 초임계 유체로 추출되도록 한다. Then, the supercritical fluid introduced from the high pressure liquid pump 16 is continuously supplied to the formed fine particles so that the solvent remaining in the fine particles is extracted as the supercritical fluid.
그 다음, 상기 미립자 형태로 제조된 젬시타빈의 서방성 방출을 위한 고분자 미립자는 상기 반응기(30)의 하부에 연결 설치된 미립자 회수수단(32)으로 회수되고, 용매가 용해된 초임계 유체는 상기 미립자 회수수단(32)을 통과한 후 감압탱크(34)로 유입되어 감압됨으로써 액상의 용매와 기상의 이산화탄소 등의 화합물로 분리된다.Then, the polymer fine particles for sustained release of gemcitabine prepared in the form of the fine particles are recovered by the fine particle recovery means 32 connected to the lower part of the
그 다음, 상기 분리된 초임계 유체용 화합물인 기상의 이산화탄소는 상기 감압탱크(34)의 일측에 연결설치된 초임계 유체 순환수단(38)을 통하여 상기 전방 압력조절기(10)와 냉각장치(12) 사이로 유입되어 재사용되고, 상기 분리된 용매는 상기 감압탱크(34)의 일측에 연결 설치된 배출밸브(36)를 통하여 일부 배출되고 여분의 용매는 여과기(36) 및 용매 순환수단(40)을 순차적으로 통과하여 상기의 혼합용액 저장수단(20)의 상부로 유입되어 재사용 된다.Next, the gaseous carbon dioxide, which is the separated supercritical fluid compound, is connected to the
여기서, 상기 젬시타빈의 서방성 방출을 위한 고분자 미립자를 생성하는 미립자 생성부(6)의 상기 반응기(30), 미립자 회수수단(32) 및 감압탱크(34)의 각각에 구비된 온도조절기(미도시)를 이용하여 상기 반응기(30), 미립자 회수수단(32) 및 감압탱크(34)의 온도를 20 내지 55℃, 압력은 50 내지 70 bar로 유지시켜 준다.Here, the temperature controller (not shown) provided in each of the
이때, 상기 미립자 생성부(6)의 온도를 일정하게 유지시켜 주는 것은 통상의 온도조절 방법 예를 들면, 히터를 이용하여 미립자 생성부(6) 주위의 온도를 일정하게 유지시키는 방법, 상기 미립자 생성부(6)를 구성하는 각각의 장치에 히터 등을 구비시켜 온도를 유지시키는 방법 등 어느 것을 사용하여도 무방하다.
At this time, keeping the temperature of the particulate generator 6 constant may include a method of maintaining a constant temperature around the particulate generator 6 by using a conventional temperature control method, for example, a heater. You may use any method, such as a method of maintaining a temperature by providing a heater etc. in each apparatus which comprises the part 6. As shown in FIG.
또한, 본 발명은 상기 제조방법으로 제조된 젬시타빈이 봉입된 고분자 미립자를 제공한다. 보다 구체적으로, 초임계 유체를 이용하여 친수성 젬시타빈의 방출 속도 제어가 가능한 미립자를 제조를 위한 고분자에 관한 것으로, 폴리에스터계 생분해성 고분자인 폴리엘락티드(poly(L-lactide))가, 락티드(lactide)와 글라이콜리드(glycolide) 또는 폴리락티드(polylactide)와 폴리글라이콜리드(polyglycolide)가 95:5 내지 40:60의 몰비로 합성된 폴리락티드-코-글라이콜리드(poly(lactide-co-glycolide)) 공중합체 중 선택되는 어느 하나와 20:1 내지 1:20의 중량비로 혼합되어 초임계 유체 공정을 통하여 제조된 젬시타빈 함유 고분자 미립자일 수 있다.
In addition, the present invention provides a polymer fine particle encapsulated gemcitabine prepared by the above method. More specifically, the present invention relates to a polymer for preparing microparticles capable of controlling the release rate of hydrophilic gemcitabine by using a supercritical fluid, and poly (L-lactide), a polyester-based biodegradable polymer, is a lock. Polylactide-co-glycol synthesized from lactide and glycolide or polylactide and polyglycolide in a molar ratio of 95: 5 to 40:60 It may be a gemcitabine-containing polymer microparticles prepared by mixing with any one selected from lead (poly (lactide-co-glycolide)) copolymer in a weight ratio of 20: 1 to 1:20 and manufactured through a supercritical fluid process.
또한, 본 상기 젬시타빈이 함유된 약물 전달체에 관한 것이다. 약물전달체계(DDS) 기술이란 기존 의약품의 부작용을 최소화하고 효능 및 효과를 극대화시켜 필요한 양의 약물을 효율적으로 전달할 수 있도록 하는 의약 기술을 말한다. The present invention also relates to a drug carrier containing gemcitabine. Drug delivery system (DDS) technology is a medicine technology that can efficiently deliver the required amount of drugs by minimizing the side effects of existing drugs, maximizing efficacy and effectiveness.
본 발명에 의한 약물 전달체는 약물의 초기 방출의 감소와 약물의 방출 속도를 개선할 수 있다. 즉, 젬시타빈의 초기 방출의 감소와 젬시타빈의 약물 방출 속도의 조절 및 개선을 할 수 있다(도 8 및 도 9).
The drug carrier according to the present invention can reduce the initial release of the drug and improve the release rate of the drug. That is, it is possible to reduce the initial release of gemcitabine and to control and improve the drug release rate of gemcitabine (FIGS. 8 and 9).
또한, 본 상기 젬시타빈이 함유된 항암제에 관한 것이다. 본 발명의 젬시타빈이 함유된 항암제는 특히, 췌장암에 효능이 있다.
The present invention also relates to an anticancer agent containing gemcitabine. The anticancer agent containing the gemcitabine of the present invention is particularly effective in pancreatic cancer.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 다만 하기의 실시예는 본 발명의 내용을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 실시예는 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.
BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to the following examples. However, the following examples are intended to illustrate the contents of the present invention, but the scope of the present invention is not limited to the following examples. Embodiments of the present invention are provided to more fully describe the present invention to those skilled in the art.
<< 실시예Example 1> 1>
도 2에 도시된 바와 같이, 본 발명에서 사용된 엘락티드(L-lactide)와 글라이콜라이드(glycolide)가 70:30의 몰비로 구성된 폴리엘락티드-코-글라이콜리드(70:30) [poly(L-lactide-co-glycolide), 70:30]는 개환중합을 통해 합성하였다. 이때, 엘락티드(L-lactide)는 에틸아세테이트를 이용하여 2번 재결정하여 사용하였으며, 고분자의 분자량을 조절하기 위해 개시제로서 1-도데카놀[1-dodecanol, Sigma, 미국]을 사용하였으며, 촉매로는 스테노우스옥토에이트[stanous octoate, Sigma, 미국]를 사용하였다.As shown in FIG. 2, polylactide-co-glycolide (L: lactide) and glycolide (glycolide) used in the present invention is composed of a molar ratio of 70:30 (70:30). [poly (L-lactide-co-glycolide), 70:30] was synthesized by ring-opening polymerization. At this time, ellactide (L-lactide) was recrystallized twice using ethyl acetate, 1-dodecanol [1-dodecanol, Sigma, USA] was used as an initiator to control the molecular weight of the polymer, as a catalyst Was used as stanous octoate (Sigma, USA).
먼저, 50 mL [pyrex, 미국]의 유리 반응기를 120oC의 온도에서 12시간동안 건조하여 수분을 제거한 후 재결정을 통해 정제된 엘락티드[L-lactide, TCI, 일본] 7 g과 글라이콜리드[Glycolide, Sigma, 미국] 3 g을 건조된 50 mL의 유리반응기에 넣는다. 여기에 건조된 톨루엔에 촉매와 1-도데카놀을 용해시켜 50 mL의 유리반응기에 넣고 3번 질소 퍼지한 후 50oC에서 2시간 동안 진공 건조하여 톨루엔과 수분을 제거하였다. 진공건조된 유리반응기는 100oC의 오일배스에서 반응물을 용해시킨 후 잘 혼합하였으며, 반응물이 완전히 용해된 후 140oC의 오일배스에서 24시간동안 개환중합하여 폴리엘락티드-코-글라이콜라이드(70:30)를 합성하였다. 그 결과를 도 2에 나타내었다.
First, a glass reactor of 50 mL [pyrex, USA] was dried at a temperature of 120 o C for 12 hours to remove moisture, and then recrystallized with 7 g of purified lactide [L-lactide, TCI, Japan]. 3 g of lead [Glycolide, Sigma, USA] are placed in a dry 50 mL glass reactor. The catalyst and 1-dodecanol were dissolved in the dried toluene, put into a 50 mL glass reactor, purged with nitrogen three times, and then vacuum-dried at 50 o C for 2 hours to remove toluene and water. The vacuum-dried glass reactor was mixed well after dissolving the reactants in an oil bath at 100 o C. After the reaction was completely dissolved, the ring-opened polymerization was carried out in a 140 o C oil bath for 24 hours to polypoly-co-glycolide. (70:30) was synthesized. The results are shown in Fig.
<< 실시예Example 2> 2>
도 1에 도시된 바와 같이, 이산화탄소가 채워져 있는 초임계 유체용 화합물 저장탱크에 냉각장치를 연결설치하고, 고압액체펌프[EL-1, Lewa, 미국]를 연결설치한 후 상기 고압액체펌프 이후에 후방압력조절기[26-1700, Tescom, 미국]를 연결설치하여 압력을 조절하였다. As shown in FIG. 1, after the cooling device is installed in the compound storage tank for carbon dioxide filled supercritical fluid, and the high pressure liquid pump [EL-1, Lewa, USA] is installed after the high pressure liquid pump Pressure was adjusted by connecting a rear pressure regulator [26-1700, Tescom, USA].
그 다음, 메틸렌클로라이드[methylene chloride, Aldrich, 미국] 10 mL에 폴리엘락티드[poly(L-lactide), Polysciences, 미국] 0.2 g을 첨가한 0.2% (w/v) 농도의 용액에 디메틸설폭사이드 10 mL에 젬시타빈[gemcitabine, 유한양행, 한국] 0.06 g을 첨가한 0.06% (w/v) 농도의 용액을 혼합한 후 약 1시간 동안 교반시켜 혼합용액을 제조하여 혼합용액 저장수단에 채워 넣고, 상기 혼합용액 저장수단을 고압액체펌프[260DX, ISCO, 미국]에 연결 설치하였다.Next, dimethyl sulfoxide was added to a 0.2% (w / v) solution in which 0.2 g of poly (L-lactide), Polysciences, USA was added to 10 mL of methylene chloride, Aldrich, USA. 10 mL of gemcitabine (gemcitabine, Yuhan Corporation, Korea) was added to a solution of 0.06% (w / v) concentration of 0.06 g, and then stirred for about 1 hour to prepare a mixed solution and filled into the mixed solution storage means. The mixed solution storage means was installed in a high pressure liquid pump [260DX, ISCO, USA].
그 다음, 상기 고압액체펌프 및 고압액체펌프를 분무수단으로서 내경이 127㎛이고 외경이 1/16인치인 스테인레스스틸 316 튜브로 된 노즐에 연결설치하고, 상기 분무수단을 300 mL 부피를 갖는 스테인레스스틸 304 재질의 반응기에 연결 설치하였다.Then, the high pressure liquid pump and the high pressure liquid pump were connected to a nozzle made of a stainless steel 316 tube having an inner diameter of 127 μm and an outer diameter of 1/16 inch as a spray means, and the spray means was connected to a stainless steel having a volume of 300 mL. It was connected to the reactor made of 304 material.
그 다음, 상기 반응기의 하단에 미립자 회수수단인 평균기공크기가 5 μm인 스테인레스스틸 필터[Supelco, 미국]를 연결설치하고, 상기 미립자 회수수단을 스테인레스스틸 304로 자체 제작한 300 mL 용량의 원통형 감압탱크에 연결 설치하였다.Next, a stainless steel filter [Supelco, USA] having an average pore size of 5 μm, which is a fine particle recovery means, was installed at the bottom of the reactor, and the fine particle recovery means was 300 mL, which was manufactured by stainless steel 304. Connected to the tank and installed.
여기서, 상기 반응기, 미립자 회수수단 및 감압탱크는 각각에 온도조절기[DX3, 한영탄전자, 대한민국]를 설치한 후 상기 온도를 35℃로 유지하였다.Here, the reactor, the particulate recovery means and the decompression tank were each installed a temperature controller [DX3, Han Young Co., Korea] and then maintained the temperature at 35 ℃.
이때, 상기 반응기로 유입되는 이산화소의 압력은 13 MPa, 유량은 10 L/min, 혼합용액의 유량은 0.5 mL/min였으며, 감압탱크의 압력은 6 MPa였다.At this time, the pressure of the nitrogen dioxide flowing into the reactor was 13 MPa, the flow rate was 10 L / min, the flow rate of the mixed solution was 0.5 mL / min, the pressure of the pressure reduction tank was 6 MPa.
그 다음, 제조된 미립자를 주사전자현미경 [JSM-5200, JEOL, 일본]을 이용하여 관찰하였다. 그 결과를 도 3 및 도 7에 나타냈다.
Then, the prepared fine particles were observed using a scanning electron microscope [JSM-5200, JEOL, Japan]. The results are shown in FIGS. 3 and 7.
<< 실시예Example 3> 3>
실시예 2와 동일한 방법으로 실시하되, 메틸렌클로라이드[methylene chloride, Aldrich, 미국] 10 mL에 폴리엘락티드[Poly(L-lactide), Polysciences, 미국] 0.2 g을 첨가한 0.2% (w/v) 농도의 용액 대신 메틸렌클로라이드 10 mL에 폴리디엘락티드-코-글라이콜라이드(75:25) [Poly(D,L-lacticde-co-glycolide) (75:25), Birmingham Polymer, 독일] 1중량부에 대하여 폴리엘락티드 3중량부를 0.2 g 첨가한 0.2% (w/v) 농도의 용액에 디메틸설폭사이드 10 mL에 젬시타빈 0.06 g을 첨가한 0.06% (w/v) 농도의 용액을 혼합한 후 약 1시간 동안 교반시킨 혼합용액을 사용하였다. 그 결과를 도 4 및 도 7에 나타냈다.
The same procedure as in Example 2, except that 0.2% (w / v) of 0.2 mL of poly (L-lactide), Polysciences, USA] was added to 10 mL of methylene chloride, Aldrich, USA. 1 weight of poly (D, L-lacticde-co-glycolide) (75:25), Birmingham Polymer, Germany in 10 mL of methylene chloride instead of solution of concentration To a solution of 0.2% (w / v) concentration in which 0.2 parts of 3 parts by weight of polyelactide was added, a solution of 0.06% (w / v) in which 0.06 g of gemcitabine was added to 10 mL of dimethyl sulfoxide was mixed. After using the mixed solution was stirred for about 1 hour. The results are shown in FIGS. 4 and 7.
<< 실시예Example 4> 4>
실시예 3과 동일한 방법으로 실시하되, 메틸렌클로라이드[methylene chloride, Aldrich, 미국] 10 mL에 폴리엘락티드[Poly(L-lactide), Polysciences, 미국] 0.2 g을 첨가한 0.2% (w/v) 농도의 용액 대신 메틸렌클로라이드 10 mL에 폴리엘락티드-코-글라이콜라이드(70:30) [Poly(L-lacticde-co-glycolide) (70:30), 합성] 1중량부에 대하여 폴리엘락티드 3중량부를 0.2 g 첨가한 0.2% (w/v) 농도의 용액에 디메틸설폭사이드 10 mL에 젬시타빈 0.06 g을 첨가한 0.06% (w/v) 농도의 용액을 혼합한 후 약 1시간 동안 교반시킨 혼합용액을 사용하였다. 그 결과를 도 5 및 도 7에 나타냈다.
The same procedure as in Example 3 was carried out, except that 0.2% (w / v) of 0.2 mL of poly (L-lactide), Polysciences, USA was added to 10 mL of methylene chloride (Aldrich, USA). Polyelactide (70:30) [Poly (L-lacticde-co-glycolide) (70:30), Synthesis] 1 part by weight of methylene chloride in 10 mL of solution instead of the concentration 3 parts by weight of 0.2% (w / v) of 0.2% (w / v) was added to 10 ml of dimethylsulfoxide in a solution of 0.06% (w / v) of 0.06 g of gemcitabine and then stirred for about 1 hour. The mixed solution was used. The results are shown in FIGS. 5 and 7.
<< 실시예Example 5> 5>
실시예 3과 동일한 방법으로 실시하되, 메틸렌클로라이드[methylene chloride, Aldrich, 미국] 10 mL에 폴리엘락티드 0.2 g을 첨가한 0.2% (w/v) 농도의 용액 대신 메틸렌클로라이드 10 mL에 폴리엘락티드-코-글라이콜라이드(70:30) [Poly(L-lacticde- co-glycolide) (70:30), 합성] 1 중량부에 대하여 폴리엘락티드 1 내지 9 중량부를 혼합한 고분자를 0.2 g을 첨가한 0.2% (w/v) 농도의 용액에 디메틸설폭사이드 10 mL에 젬시타빈 0.02 g을 첨가한 0.02% (w/v) 농도의 용액을 혼합한 후 약 1시간 동안 교반시킨 혼합용액을 사용하였다. 그 결과를 도 6 및 도 8에 나타냈다.
Performed in the same manner as in Example 3, except that 10 g of methylene chloride [methylene chloride, Aldrich, USA] was added to 10 mL of methylene chloride instead of 0.2% (w / v) solution of 0.2 g of polyelactide. 0.2 g of a polymer obtained by mixing 1 to 9 parts by weight of polyelactide with respect to 1 part by weight of poly (L-lacticde- co-glycolide) (70:30), synthetic To the solution of 0.2% (w / v) concentration added, a solution of 0.02% (w / v) concentration with 0.02 g of gemcitabine added to 10 mL of dimethyl sulfoxide was mixed and stirred for about 1 hour. It was. The results are shown in FIGS. 6 and 8.
<< 실시예Example 6> 6>
실시예 4과 동일한 방법으로 실시하되, 메틸렌클로라이드[methylene chloride, Aldrich, 미국] 10 mL에 엘락티드와 글라이콜라이드가 9대 1 내지 5대 5 몰비로 합성된 폴리엘락티드-코-글라이콜라이드 [Poly(L-lacticde-co-glycolide), 합성] 1 중량부에 대하여 폴리엘락티드 3 중량부를 혼합한 고분자를 0.2 g을 첨가한 0.2% (w/v) 농도의 용액에 디메틸설폭사이드 10 mL에 젬시타빈 0.02 g을 첨가한 0.02% (w/v) 농도의 용액을 혼합한 후 약 1시간 동안 교반시킨 혼합용액을 사용하였다. 그 결과를 도 9에 나타냈다.
Performed in the same manner as in Example 4, except that polylactide-co-glycolide synthesized in an amount of 9 to 1 to 5 to 5 molar ratios of elactide and glycolide in 10 mL of methylene chloride (Aldrich, USA) [Poly (L-lacticde-co-glycolide), Synthesis] 10 mL of dimethyl sulfoxide in a 0.2% (w / v) solution containing 0.2 g of a polymer containing 3 parts by weight of polyelactide per 1 part by weight To the solution of 0.02% (w / v) concentration of 0.02 g of gemcitabine was added to the mixed solution was stirred for about 1 hour. The results are shown in Fig.
실험예Experimental Example 1. One. 젬시타빈의Gemcitabine 봉입율Inclusion rate 측정 Measure
실시예 2 내지 실시예 5로 제조한 미립자를 각각 10 mg씩 채취하여 1 mL의 메틸렌클로라이드[methylene chloride, Aldrich, 미국]를 넣어 폴리에스터계 고분자를 용해시킨 후 0.05%의 트윈 20 (tween 20)이 포함된 0.01 M 농도의 인산염 완충용액[phosphate buffer solution with 0.05% tween 20: PBST, Sigma, 미국)] 9.0 mL를 혼합하여 30분 동안 100 rpm의 속도로 교반하고 4500 rpm에서 15분간 원심분리하여 메틸렌클로라이드와 0.05%의 트윈 20(tween 20)이 포함된 0.01 M 농도의 인산염 완충용액을 층분리한 후 상등액을 취하여 0.45 μm 폴리에스터계 고분자를 메틸렌클로라이드[Methylene chloride, Fisher, 미국]에 용해시켜 제거하여 젬시타빈 [gemcitabine, 유한양행, 한국]의 총 양을 측정하였다.10 mg of each of the fine particles prepared in Examples 2 to 5 was collected and 1 mL of methylene chloride (Methylene chloride, Aldrich, USA) was added to dissolve the polyester-based polymer, followed by 0.05% of
실시예 2 내지 실시예 5로 제조한 미립자를 각각 10 mg씩 채취하여 0.05%의 트윈 20 (tween 20)이 첨가된 0.01 M 농도의 인산염 완충용액[phosphate buffer solution with 0.05% tween 20: PBST, Sigma, 미국)] 10.0 mL에 혼합하여 1분 동안 100 rpm의 속도로 교반하여 봉입되지 않고 생분해성 폴리에스터계 고분자 표면에 존재하는 젬시타빈[gemcitabine, 유한양행, 한국]을 용해시켜 측정하였다.Phosphate buffer solution with 0.05% tween 20: PBST and Sigma, each containing 10 mg of the microparticles prepared in Examples 2 to 5, was added with 0.05 mg of
그 다음, 270 nm의 파장에서 액체크로마토그래피 [High performance liquid chromato graphy, Waters, 미국]를 이용하여 약물의 함량을 미리 작성된 표준곡선을 이용하여 관찰하였다. 여기서, 상기 표준곡선은 표준시약[Gemcitabine, 유한양행, 한국]을 이용하여 농도별로 용액을 제조하였으며 액체크로마토그래피를 이용하여 각각의 농도에 따른 흡광도 값을 측정하여 작성하였다. Then, the drug content was observed using a standard curve prepared in advance using high performance liquid chromatography (Waters, USA) at a wavelength of 270 nm. Here, the standard curve was prepared by concentration by using a standard reagent [Gemcitabine, Yuhan, Korea] and was prepared by measuring the absorbance value of each concentration using liquid chromatography.
그 결과를 도 7에 나타냈다. 도 7은 실시예 2 내지 4에서 제조된 미립자의 봉입율을 나타내며, 봉입율은 하기 수학식 1을 사용하여 계산하였다.The result is shown in FIG. Figure 7 shows the encapsulation rate of the microparticles prepared in Examples 2 to 4, the encapsulation rate was calculated using the following equation (1).
실험예Experimental Example 2. 2. 미립자내의In particulate 젬시타빈의Gemcitabine 방출 실험 Emission experiment
실시예 2 내지 실시예 5로 제조한 미립자를 각각 10 mg씩 채취하여 0.05%의 트윈 20(tween 20)이 포함된 0.01M 농도의 인산염 완충용액(PBST, pH 7.4) [phosphate buffer solution with 0.05% tween 20, Sigma, 미국] 10 mL에 첨가하여 37.0±0.5, 100 stroke/min으로 설정된 인큐베이터[SI-300R, Jeio Tech, 대한민국]에서 인 비트로(in vitro) 방출실험을 수행하였다.10 mg each of the microparticles prepared in Examples 2 to 5 was collected and 0.01 M concentration of phosphate buffer solution containing 0.05% of Tween 20 (PBST, pH 7.4) [phosphate buffer solution with 0.05
인산염 완충용액에 용해된 젬시타빈을 기공크기 0.45㎛, 직경 25mm의 주사필터를 이용하여 여과한 후 270 nm의 파장에서 액체크로마토그래피 [High performance liquid chromato graphy, Waters, 미국]를 이용하여 방출율을 미리 작성된 표준곡선을 이용하여 관찰하였다.Gemcitabine dissolved in phosphate buffer was filtered using a pore size 0.45㎛ scanning filter with a diameter of 25mm, and then the emission rate was measured in advance using high performance liquid chromatography (Waters, USA) at a wavelength of 270 nm. Observations were made using the prepared standard curve.
그 결과를 도 8 및 도 9에 나타냈다. 도 7 및 도 8는 인비트로(in vitro) 방출실험을 통하여 얻어진 방출율로 실시예 2 내지 실시예 6로 제조한 젬시타빈 함유 고분자 미립자내의 젬시타빈이 0.1M 농도의 인산염 완충용액내에서 측정기간에 미립자로부터 방출되어진 정도를 나타낸다.The results are shown in FIGS. 8 and 9. 7 and 8 show the gemcitabine in the gemcitabine-containing polymer microparticles prepared in Examples 2 to 6 at the release rate obtained through the in vitro release experiment. It indicates the degree released from the fine particles.
도 8 및 도 9에 나타낸 바와 같이, 실시예 2 내지 실시예 6에 따라 제조된 젬시타빈을 포함한 고분자 미립자는 시간에 따른 누적 방출율이 다양하게 나타났으며, 이는 사용 목적에 따라 원하는 시간에 따른 누적 방출율을 갖는 젬시타빈를 포함한 고분자 미립자를 선택하여 사용할 수 있도록 한다.As shown in FIGS. 8 and 9, the polymer microparticles including gemcitabine prepared according to Examples 2 to 6 showed various cumulative release rates over time, which is cumulative over a desired time depending on the purpose of use. Polymer particles containing gemcitabine having a release rate can be selected and used.
2: 초임계 유체 공급부, 4: 혼합용액 공급부,
6: 미립자 생성부, 8: 화합물 저장탱크,
10: 전방 압력조절기, 12: 냉각장치,
14: 여과기, 16: 고압액체펌프,
18: 온도조절기, 20: 혼합용액 저장수단,
22: 고압액체펌프, 24: 온도조절기,
26: 여과기, 28: 분무수단,
30: 반응기, 32: 미립자 회수수단,
34: 감압탱크, 36: 배출밸브,
38: 초임계 유체 순환수단, 40: 용매 순환수단,
42: 후방압력조절기2: supercritical fluid supply, 4: mixed solution supply,
6: particulate generator, 8: compound storage tank,
10: front pressure regulator, 12: chiller,
14: filter, 16: high pressure liquid pump,
18: thermostat, 20: mixed solution storage means,
22: high pressure liquid pump, 24: temperature controller,
26: filter, 28: spray means,
30: reactor, 32: particulate recovery means,
34: decompression tank, 36: discharge valve,
38: supercritical fluid circulation means, 40: solvent circulation means,
42: rear pressure regulator
Claims (13)
(b) 상기 혼합용액을 초임계 유체와 분무 접촉시켜 젬시타빈이 봉입된 폴리에스터계 생분해성 고분자 미립자를 형성시키는 단계; 및
(c) 상기 생성된 미립자 내에 잔존하는 용매를 추출제거하는 단계;
를 포함하는 젬시타빈이 봉입된 고분자 미립자의 제조방법.(a) dissolving gemcitabine and polyester-based biodegradable polymers or mixtures thereof in different solvents, and then mixing them to prepare a mixed solution;
(b) spray-contacting the mixed solution with a supercritical fluid to form polyester-based biodegradable polymer microparticles containing gemcitabine; And
(c) extracting and removing the solvent remaining in the produced fine particles;
Gemcitabine-containing polymer microparticles containing the manufacturing method.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020120019670A KR20130097960A (en) | 2012-02-27 | 2012-02-27 | Gemcitabine- loaded polyester biodegradable polymer microparticles by using supercritical fluid and method thereof |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020120019670A KR20130097960A (en) | 2012-02-27 | 2012-02-27 | Gemcitabine- loaded polyester biodegradable polymer microparticles by using supercritical fluid and method thereof |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20130097960A true KR20130097960A (en) | 2013-09-04 |
Family
ID=49450080
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020120019670A Withdrawn KR20130097960A (en) | 2012-02-27 | 2012-02-27 | Gemcitabine- loaded polyester biodegradable polymer microparticles by using supercritical fluid and method thereof |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR20130097960A (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20180131077A (en) * | 2017-05-31 | 2018-12-10 | 주식회사 대웅제약 | Method of preparing sustained release drug microparticles with ease of release control |
-
2012
- 2012-02-27 KR KR1020120019670A patent/KR20130097960A/en not_active Withdrawn
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20180131077A (en) * | 2017-05-31 | 2018-12-10 | 주식회사 대웅제약 | Method of preparing sustained release drug microparticles with ease of release control |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Kalani et al. | Application of supercritical antisolvent method in drug encapsulation: a review | |
| Liu et al. | A novel trans-lymphatic drug delivery system: implantable gelatin sponge impregnated with PLGA–paclitaxel microspheres | |
| Sheth et al. | Nanoparticles in the pharmaceutical industry and the use of supercritical fluid technologies for nanoparticle production | |
| US7147806B2 (en) | Polymer microspheres/nanospheres and encapsulating therapeutic proteins therein | |
| US7708915B2 (en) | Polymer microspheres/nanospheres and encapsulating therapeutic proteins therein | |
| ES2764971T3 (en) | Emulsion-based process for preparing microparticles and working head assembly for use with it | |
| Foster et al. | Processing pharmaceutical compounds using dense gas technology | |
| Loh et al. | Sustained delivery of paclitaxel using thermogelling poly (PEG/PPG/PCL urethane) s for enhanced toxicity against cancer cells | |
| Jin et al. | Preparation of hydroxypropyl methyl cellulose phthalate nanoparticles with mixed solvent using supercritical antisolvent process and its application in co-precipitation of insulin | |
| Xie et al. | Release modulation and cytotoxicity of hydroxycamptothecin-loaded electrospun fibers with 2-hydroxypropyl-β-cyclodextrin inoculations | |
| JP2015034172A (en) | Taxane-containing amphiphilic block copolymer micelle composition and production method thereof | |
| CN103073730B (en) | CA-(PLA-ran-PLC-b-PEC) periodic copolymer and preparation method and application thereof | |
| Feng et al. | Polymeric nanospheres fabricated with natural emulsifiers for clinical administration of an anticancer drug paclitaxel (Taxol®) | |
| Zhang et al. | Preparation and characterization of 5-fluorouracil-loaded PLLA–PEG/PEG nanoparticles by a novel supercritical CO2 technique | |
| Bain et al. | Solvent influence on spray-dried biodegradable microspheres | |
| Yu et al. | Antitumor activity of docetaxel-loaded polymeric nanoparticles fabricated by Shirasu porous glass membrane-emulsification technique | |
| Zhang et al. | Injectable gel self-assembled by paclitaxel itself for in situ inhibition of tumor growth | |
| JP5851518B2 (en) | MICROPARTICLES CONTAINING BIOACTIVE PEPTIDE, PROCESS FOR PRODUCING THE SAME, AND PHARMACEUTICAL COMPOSITION CONTAINING THE SAME | |
| Lee et al. | Paclitaxel release from micro-porous PLGA disks | |
| Surushe et al. | Nanosponges: a brief review | |
| Malathi et al. | Synthesis of biodegradable polymeric nanoparticles and their controlled drug delivery for tuberculosis | |
| CN103159959A (en) | M-PLGA-TPGS star type amphiphilic copolymer and preparation method and application | |
| KR20130097960A (en) | Gemcitabine- loaded polyester biodegradable polymer microparticles by using supercritical fluid and method thereof | |
| CN101333295A (en) | A kind of biodegradable polymer nanoparticle and its special polymer and their preparation method | |
| ES2439399B1 (en) | Method to encapsulate a solute in micelles in aqueous phase by supercritical extraction and system to carry it out |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PA0109 | Patent application |
Patent event code: PA01091R01D Comment text: Patent Application Patent event date: 20120227 |
|
| PG1501 | Laying open of application | ||
| N231 | Notification of change of applicant | ||
| PN2301 | Change of applicant |
Patent event date: 20160411 Comment text: Notification of Change of Applicant Patent event code: PN23011R01D |
|
| PC1203 | Withdrawal of no request for examination | ||
| WITN | Application deemed withdrawn, e.g. because no request for examination was filed or no examination fee was paid |