KR20090130187A

KR20090130187A - 점막염 및 체중 감소의 예방 및 치료를 위한 조성물 및 방법

Info

Publication number: KR20090130187A
Application number: KR1020097021238A
Authority: KR
Inventors: 패트릭 티. 프렌더게스트
Original assignee: 패트릭 티. 프렌더게스트
Priority date: 2007-03-12
Filing date: 2008-03-12
Publication date: 2009-12-18
Also published as: GB0704718D0; CA2718152C; US20100092547A1; CN101264083A; US20150031701A1; WO2008110585A2; ZA200907084B; US20180311237A1; CN102600200A; CA2718152A1; WO2008110585A3; TW200938196A; KR20120101153A; US20130259930A1; EP2134347A2

Abstract

점막염의 예방 및/또는 치료 방법으로서, (1) 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 또는 그의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매화물 또는 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물, 또는 (2) 사이토키닌을 포함하는, 조성물을 치료학적 유효량으로 제공하는 단계; 및 상기 치료를 필요로 하는 대상체에게 상기 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 방법이 제공된다. 또한, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 및/또는 사이토키닌 화합물을 포함하는 약학적 조성물 및, 점막염의 치료 및/또는 예방용 의약을 제조하기 위한 상기 조성물의 용도도 제공된다. 사이토키닌 화합물은 N⁶-이소펜테닐 아데노신 및 N⁶-벤질 아데노신으로부터 선택될 수 있으며, 이들로만 제한되는 것은 아니다. 상기 조성물은 또한 시스플라틴과 같은 화학요법제를 더 포함할 수 있다. 암 치료 중인 환자의 체중 감소를 예방 및/또는 경감하기 위한 방법과 조성물도 제공된다.

점막염, 체중 감소, 악액질, 화학요법, 면역요법, 올티프라즈(5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온), 사이토키닌

Description

점막염 및 체중 감소의 예방 및 치료를 위한 조성물 및 방법{COMPOSITIONS AND METHODS FOR PREVENTING AND TREATING MUCOSITIS AND WEIGHT LOSS}

본 발명은 점막염(mucositis)의 예방 및/또는 치료를 위한 방법 및 조성물을 제공한다. 보다 상세하게는, 본 발명은 올티프라즈(oltipraz: 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온) 또는 그의 유사체(analogue) 또는 유도체(derivative)를 포함하는 조성물 및/또는 N⁶-이소펜테닐 아데노신 또는 그의 유사체 또는 유도체를 포함하는 조성물, 및 점막염을 예방하고 치료하기 위한 그들의 용도를 제공한다. 또한, 본 발명은 방사선 요법으로 인한 대상체(subject)의 체중 감소를 방지하고 악액질(cachexia)의 예방 및 치료를 위한 조성물 및 방법을 제공한다.

점막염은 점막 또는 소화관을 덮고 있는 점막내층(mucosa lining)에 염증이 발생한 상태를 의미한다. 이러한 상태는 점막의 손상에 의해 야기되며 궤양성 병변(ulcerative lesions)의 형성을 초래할 수 있다. 이러한 병변은 극히 고통스러우며, 식도(oesophagus), 위, 소장, 대장 및 직장을 포함하여, 구강에서부터 항문까지의 소화관(alimentary tract)내의 임의의 부위에서 발생할 수 있다.

점막염은 화학 요법 또는 방사선 요법의 일반적인 부작용이다. 입 및 소화 관의 점막은 화학 요법 및 방사선 요법 모두에 대하여 민감하다. 암의 상태를 치료하는 데 사용되는 화학 요법 치료제는 구강 상피 조직의 세포와 같은 특히, 높은 전환율(turnover rates)을 갖는 정상 세포에 악영향을 미친다. 이러한 방사선 요법 치료는 세포치사를 유발하며, 이로 인해 점막내층이 얇아지고, 벗겨져, 붉어지고 염증이 생겨 궤양이 발생한다. 화학 요법을 받는 환자들을 치료 시작 후, 일반적으로 4일 내지 5일 이내에 이러한 증상을 보인다.

방사선 요법과 연관된 점막염은 일반적으로 치료 14일 이내에 나타나며, 이 증상은 6 내지 8 주간 지속된다.

점막염의 병태 생리(pathophysiology)는 개시 단계, 메세지 발생 단계(message generation stage), 신호화 및 증폭 단계(signalling and amplification stage), 궤양화 단계(ulceration stage) 및 치료 단계를 포함하여 5 단계로 나뉘어 진다. 서로 다른 단계는 상이한 사이토킨(cytokines)에 의해 야기된다. 개시 단계는 화학 요법 또는 방사선 요법 후 개시되며, DNA 손상을 유발하는 자유 라디칼(free radical)을 생성한다. 그 후, NF-kB와 같은 전사 인자가 생성되어 염증성 사이토킨 생성을 상향 조절(up regulation)한다. IL-1 및 TNF-알파와 같은 사이토킨에 의하여 매개되는 이러한 염증은 궤양화 단계를 유발한다.

점막염의 주된 임상학적 증상은 식도염(식도의 염증), 연하곤란(dysphagia:삼키는 것이 곤란함), 연하통(odynophagia: 삼킬때의 통증), (방사선에 의해 유도된 점막염에 있어서) 흉골 하의 가슴 통증 및 (화합 요법에 의한) 흉골 후방의 가슴 통증을 포함한다.

점막염의 효과적인 치료 방법은 존재하지 않는다. 현재의 치료 방법은 증상을 개선시키는 것이며, 높은 수준의 구강 위생을 유지하고, 리도카인(lidocaine)과 같은 국소 진통제 및 클로로헥시딘 글루코네이트와 같은 구강 세척제를 사용하는 것을 포함한다. 또 다른 치료 요법은 화학 요법 약물의 점막 흡수를 감소시키는 약제를 사용하는 것을 포함하며, 예를 들면 한랭 요법(cryotherapy) 또는 알로퓨리놀(allopurinol)을 들 수 있다. 글루타민 또는 베타-카로틴과 같은 기타 치료제는 상피 세포 증식에 있어서의 변화를 감소시킨다. 또 다른 치료법으로는 인간 케라티노사이트(keratinocyte) 성장 인자(KGF)인 팔리페르민(상품명: Kepivance, Amgen)과 같은 사이토킨계 치료 요법 및 기타 염증 조절제의 사용뿐 아니라 레이저 치료 및 항생제를 포함한다.

현재 사용되고 있는 치료학적 접근 방법 중, 점막염을 예방하고 치료하는데 있어 완전한 효과를 가지는 것으로 입증된 접근 방법은 없다. 따라서, 점막염의 효과적인 예방 및 치료에 사용될 수 있는 치료 요법을 개발하기 위하여, 아직 미해결 과제로서 남아 있는 실질적 임상 연구가 필요하다. 상기 치료 요법은 화학 요법 및/또는 방사선 요법과 같은 암의 치료 요법을 받을 예정이거나 받고 있는, 암의 상태를 보이는 환자들에 있어서 특히 유용하다.

악액질은 체중 감소를 능동적으로 시도하고 있지 않은 사람에 있어서, 체중의 감소, 근육 위축, 피로, 쇠약, 및 심각한 식용 감퇴를 의미한다. 악액질은 암, 감염성 질환(예: 결핵, AIDS) 및 일부 자가 면역 질환, 또는 암페타민 또는 코카인과 같은 약물에 대한 중독과 같은 다양한 질환에서 나타나는 증후이다.

본 발명자들은 놀랍게도 방사선 치료 요법을 받고 있는 대상체에 있어서 점막염을 예방하고 치료하는 신규 화합물 및 방법을 규명하였다. 특히, 본 발명자들은 다수의 비-스테로이드 화합물들이 예상치 못하게 점막염을 예방하고 치료하는데 사용될 수 있음을 밝혔다. 본 발명자들은 또한 악액질을 예방하고 치료하며, 방사성 요법의 암 치료를 받고 있는 대상체의 체중 감소를 방지하는데 사용될 수 있는 조성물들을 동정하였다.

도 1은 10 Gy 감마 방사선에 노출시키기 전, 상이한 투여량으로 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온을 구강 투여한 경우, 쥐의 생존율에 대한 카플란 마이어의 수치(Kaplan Meier's estimate)를 보여준다.

도 2는 ⁶⁰CO 감마 방사선 공급원으로부터 분 당 1.33 Gy 세기로 10 Gy 감마 방사선에 노출된 쥐의 생존에 대해 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온의 여러가지 투여량이 미치는 효과를 상세하게 보여주는 바 차트이다.

도 3은 10 Gy 감마 방사선에 노출시키기 전, 여러가지 투여량으로 N⁶-이소펜테닐 아데노신을 구강 투여한 경우, 쥐의 생존율에 대한 카플란 마이어의 수치를 보여준다.

도 4는 ⁶⁰CO 감마 방사선 공급원으로부터 분 당 1.33 Gy 세기로 10 Gy 감마 방사선에 노출된 쥐의 생존에 대해, N⁶-이소펜테닐 아데노신(6-감마-디메틸 알릴 아 미노 퓨린 리보오스(DAPR))의 여러가지 투여량이 미치는 효과를 상세하게 보여주는 막대그래프이다.

도 5는 여러가지 투여량의 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온을 미리 투여하고 8 Gy 감마 방사선에 노출시킨 경우에, 쥐의 30일 생존율을 나타내는 그래프이다.

도 6은 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온에 의한 치료가 있는 경우 또는 없는 경우, 및/또는 감마 방사선에 대한 노출이 있는 경우 또는 없는 경우에 대하여, 스위스 알비노 쥐의 체중(치료 첫째날의 평균 체중에 대한 퍼센트로서)의 변화를 나타내는 그래프이다.

도 7은 여러가지 조사량으로 감마 방사선에 노출된 후, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온을 사용한 치료를 받은 쥐 또는 받지 않은 쥐의 30일 생존율을 나타내는 그래프이다.

도 8은 쥐의 골수 세포 내의 방사선-유도성 미소핵을 나타내며, 소핵다염성적혈구(micro nucleated polychromatic erythrocyte)가 화살표로 표시되어 있다.

도 9는 방사선이 쥐의 골수 세포 내에서 염색체 이상을 유발한 것을 나타내며, (a)는 40개의 염색체를 보여주는 정상적인 중기(normal metaphase), (b)는 방사선 에 의해 유발된 크로마티드 절단, 교환, 및 고리, (c)는 분말화, (d)는 배수체를 야기하였음을 각각 나타낸다.

도 10은 각 동물의 일일 체중 변화 퍼센트 및 단일 치료 요법을 받은 (A)군 및 방사선과 함께 혼합 치료 요법을 받은 (B)군의 각각 치료군에 대한 평균을 나타 낸다.

도 11은 곡선하면적(AUC: area under curve)으로서 평균 체중 변화를 나타낸다. AUC는 본 연구에 있어서 각 동물에서 나타난 체중 변화 퍼센트에 대해 계산된 것이다. 이 계산은 사다리꼴방식 변환(trapezoidal rule transformation)을 사용하여 이루어졌다. 군 평균을 계산하였으며, 에러 바(error bar)는 각 군의 SEM을 나타낸다. 원웨이 분산분석 방식(One-Way ANOVA)을 이용하여 군들을 비교하였다. 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온을 사용한 치료를 받은 군과 비히클(Vehicle) 처리된 대조군 간에 통계학적으로 유의적인 차이는 관찰되지 않았다.

도 12는 길이 및 너비 측정에 의해 계산된 종양의 평균 부피를 나타낸다. 에러 바는 SEM을 나타낸다. (A)는 단일 치료 요법만을 받는 군에 대한 결과를 나타낸낸다. (B)는 방사선과 함께 혼합 요법을 받은 군에 대한 결과를 나타낸다.

도 13은 곡선하면적(AUC)으로서 평균 체중 변화를 나타낸다. 본 연구에 있어서 각 동물에 대해 측정된 종양의 부피에 대해 AUC를 계산하였다. 이 계산은 사다리꼴방식 변환을 사용하여 계산하였다. 군 평균을 계산하였으며, 에러 바는 각 군의 SEM을 나타낸다.

본 발명의 요약

본 발명의 첫 번째 측면에 따르면, 점막염의 예방 및/또는 치료 방법으로서, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 (올티프라즈) 또는 그의 유사체, 유도체, 대사물(metabolite), 프로드러그(prodrug), 용매화물(solvate) 또는 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물을 포함하는, 치료학적 유효량의 조성물을 제공하는 단계; 및 상기 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 방법이 제공된다.

본 발명의 두 번째 측면에 따르면, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 (올티프라즈) 또는 그의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매화물 또는 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물을 포함하는 조성물이 제공된다.

본 발명의 세 번째 측면에 따르면, 점막염의 예방 및/또는 치료를 위한 의약의 제조에 있어서, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 (올티프라즈) 또는 그의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매화물 또는 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물을 포함하는 조성물의 용도가 제공된다.

본 발명의 네 번째 측면에 따르면, 점막염의 예방 및/또는 치료를 위한 조성물이 제공되며, 상기 조성물은 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 (올티프라즈) 또는 그의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매화물 또는 약학적으로 허용가능한 염을 포함한다.

본 발명의 다섯 번째 측면은 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 (올티프라즈) 또는 그의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매화물 또는 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물과 함께 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.

전술한 본 발명의 측면의 실시예에 있어서, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온의 대사물은 피롤로피라진 유도체 대사물 3 (M3라고도 알려짐)이다.

실시예에 있어서, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온의 유사체는 1,2-디티올-3-티온 계열의 화합물이며, 예를 들면 아네톨 트리티온 ((5-(p-메톡시페닐)-3H-1,2-디티올-3-티오) (아네톨 트리티오나 또는 SONICUR^TM이라고도 알려짐)이다.

실시예에 있어서, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 화합물은 1,2 디티올-3-티온(D3T) 또는 그의 유사체이다. 전형적으로 1,2 디티올-3-티온 유사체는 하기 화학식을 갖는다:

상기 식에서, 5-치환된 유사체인 경우,

R₁은 H이고, R₂는 페닐이며 X는 S; 또는

R₁은 H이고, R₂는 4-메톡시닐이고, X는 S; 또는

R₁은 H이고, R₂는 2-피라지닐이며, X는 0; 또는

R₁은 H이고, R₂는 2-(5,6-디메틸)피라지닐이고 X는 S; 또는

5-치환된-4-메틸 유사체인 경우,

R₁은 CH₃이고, R₂는 2-피리딜이며 X는 S; 또는

R₁은 CH₃이고, R₂는 3-피리딜이며 X는 S; 또는

R₁은 CH₃이고, R₂는 4-피리딜이며 X는 S; 또는

R₁은 CH₃이고, R₂는 3-피리다지닐이며 X는 S; 또는

R₁은 CH₃이고, R₂는 2-티오퓨라닐이며 X는 S; 또는

R₁은 CH₃이고, R₂는 2-(2-피라지닐)에틸렌이며 X는 S이다.

4-치환된-5-(2-피라지닐) 유사체인 경우,

R₁은 CH₃이고, R₂는 2-피라지닐이며 X는 S; 또는

R₁은 CH₃이고, R₂는 2-피라지닐이며 X는 0; 또는

R₁은 CH₂0H, R₂는 2-피라지닐이며 X는 S; 또는

R₁은 CH₂CH₃, R₂는 2-피라지닐이며 X는 S; 또는

R₁은(CH₂)₃CH₃, R₂는 2-피라지닐이며 X는 S이다.

기타 유사체인 경우,

R₁은 CO₂C₂H₅이고, R₂는 2-피리딜이며 X는 S; 또는

R₁은 CO₂C₂H₅이고, R₂는 4-피리딜이며 X는 S; 또는

R₁은 CI이고, R₂는 [4-(2-프로필)페닐]아미노이며 X는 S; 또는

R₁은 CI이고, R₂는 [4-(2-프로필)페닐]아미노이며 X는 0; 또는

R₁은 CH₂CO₂C₂H₅이고, R₂는 5-피리미딜이며 X는 S; 또는

R₁은 CH₂CON[CH(CH₃)₂H]₂이고, R₂는 5-피리미딜이며 X는 S; 또는

R₁은 페네틸이고, R₂는 3-피리다지닐이며 X는 S; 또는

R₁은 H, R2는 4-피리딜이며, X는 N-O-(CH₂)₃N(CH₃)₂; 또는

R₁은 (CH₂)₃CH₃이고, R₂는 3-(6-디메틸아미노)피리다지닐)이며 X는 S이다.

또 다른 실시예에 있어서, R₁은 불소 또는 브롬이고, R₂ 및 X는 상기 열거된 치환기로부터 선택된다.

실시예에 있어서, 본 발명의 화합물은 카르복시메틸 셀룰로오스(CMC)와 함께 조제되거나 이와 함께 병용투여된다.

본 발명자는 놀랍게도 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온을 카르복시메틸 셀룰로오스와 함께 병용 투여하는 경우 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 투여와 관련된 독성이 현저하게 감소하는 것을 발견하였다. 특히, 본 발명자들은 CMC와 함께 조제되는 경우, 심각한 독성을 유발하지 않고, 최대 2000 mg/kg의 양으로 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온을 대상체에게 투여할 수 있음을 확인하였다. 이론에 얽매이고자 함이 없이, 카르복시메틸 셀루로오스와 함께 조제된 경우, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온은 혈류에 흡수되지 않고, 소화관의 외벽과 결합함으로써 위장관 손상과 같은 손상으로부터 보호 역할을 하는, 소화관의 효과적인 내층(lining)을 형성하는 것으로 생각된다.

실시예에 있어서, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 화합물은 황을 함유하는 아미노산, 예를 들면 시스테인 또는 그의 유사체, 유도체, 염 또는 용매화물과 병용 투여되거나 함께 조제된다.

5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온과 함께 시스테인을 구강 투여한 경우, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온의 생체이용 정도 및 생체이용율 모두에 있어서 현저한 증가를 보였다(Hassan M. Ali et aI., 1984; Chemotherapy 30: 255-261).

실시예에 있어서, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온화합물은, 시스플라틴 (cisplatin), 덱사메타손(dexamethasone) 및 5-플루오로우라실로 이루어지지만, 이에 제한되지 않는 군으로부터 선택될 수 있는, 화학 치료제와 함께 병용투여되거나 이와 함께 조제될 수 있다.

본 발명자는 또한 놀랍게도 사이토키닌 화합물이 점막염의 예방 및/또는 치료및/또는 개선에 사용될 수 있음을 밝혔내었다. 따라서, 본 발명은 추가로 점막염의 치료, 개선 및/또는 예방을 위한 방법, 조성물 및 사이토키닌 화합물의 용도를 포함한다.

따라서, 본 발명의 또 다른 측면에 있어서, 점막염의 예방 및/또는 치료방법이 제공되며, 상기 방법은 하나 이상의 사이토키닌 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물을 포함하는, 치료학적 유효량의 조성물을 제공하는 단계, 및 상기 치료가 필요한 대상체에게 상기 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.

또 다른 측면에 있어서, 본 발명은 하나 이상의 사이토키닌 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물을 포함하는 조성물을 제공한다.

또 다른 측면에 있어서, 본 발명은 점막염의 치료 및/또는 예방을 위한 의약의 제조시, 하나 이상의 사이토키닌 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물을 포함하는 조성물의 용도를 제공한다.

또 다른 측면에 있어서, 본 발명은 점막염의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한, 하나 이상의 사이토키닌 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매 화합물을 포함하는 조성물을 제공한다.

또 다른 측면에 있어서, 본 발명은 하나 이상의 사이토키닌 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매 화합물을 약학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제와 함께 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.

실시예에 있어서, 사이토키닌 화합물은 N⁶-이소펜테닐 아데노신(IPA) 또는 그의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매 화합물 또는 염이다.

또 다른 실시예에 있어서, 사이토키닌 화합물은 N⁶-벤질 아데노신(IPA) 또는 그의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매 화합물 또는 염이다.

또 다른 실시예에 있어서, 사이토키닌 화합물은 키네틴(kinetin), 제아틴(zeatin) 및 벤질 아데닌을 포함하지만, 이에 제한되지 않는 군으로부터 선택된다. 특히, 사이토키닌 화합물은 6-(치환된 아미노) 퓨린, 예를 들면 키네틴 (6-(푸르푸릴)아미노퓨린), 제아틴 (6-(3-하이드록시메틸, 3-메틸알릴), 아미노퓨린, 6-(3,3-디메틸알릴)아미노퓨린, 6-(벤질)아미노퓨린, 6-(페닐)아미노퓨린, 6-(n-알킬) 아미노퓨린(여기서, 알킬기는 4, 5 또는 6개의 탄소원자를 가진다) 및 6-(사이클로헥실)메틸아미노퓨린을 포함한다. 실시예에 있어서, 6-(치환된 아미노)퓨린 사이토키닌은 약 0.01 % (w/v) 내지 약 0.5 % (w/v), 바람직하게는 약 0.1 % (w/v)의 농도로 생리학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제와 결합될 수 있다.

실시예에 있어서, 사이토키닌 화합물은 시스플라틴(cisplatin), 덱사메타손(dexamethasone) 및 5-플루오로우라실과 같은 화학 치료제와 함께 병용투여되거나 이와 함께 조제될 수 있다.

실시예에 있어서, 사이토키닌 화합물은 카르복시메틸 셀룰로오스(CMC)와 병용투여되거나 이와 함께 조제된다.

본 발병자들은 놀랍게도 전형적인 사이토키닌 화합물인 N⁶-이소펜테닐 아데노신을 카르복시메틸 셀룰로오스와 함께 투여함으로써 독성을 현저히 감소시킬 수 있는 것을 발견하였다. 구체적으로는, 발명자들은 CMC 없이 사이토키닌 화합물을 50 내지 100 mg/kg 투여하게 되면 간에서 독성이 야기되는 반면, CMC와 함께 조제한 경우, 대상체에게 사이토키닌 화합물을 2000 mg/kg까지 투여하여도 안전하다는 것을 발견하였다. 이론에 얽매이고자 함이 없이, 카르복시메틸 셀룰로오스와 함께 투여되는 경우, 사이토키닌 화합물은 혈류에 흡수되지 않고 소화관에 막을 형성함으로써 위장 손상과 같은 손상으로부터 보호하는 역할을 하는 것으로 생각된다.

또 다른 측면에 있어서, 본 발명은 하나 이상의 사이토키닌 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 및 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 또는 그의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매 화합물 또는 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 조합 의약(combined medicament)을 제공한다.

또한 본 발명은 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체 또는 희석제와 함께 상기 조합 의약을 포함하는, 점막염의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 약학적 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 점막염의 예방 및/또는 치료 방법의 실시에 있어서, 상기 조합 의약 또는 이를 포함하는 약학적 조성물의 용도를 제공한다.

본 발명의 또 다른 측면에 따라면, 점막염의 예방 및/또는 치료 방법이 제공되며, 상기 방법은, 3H-1,2-디티올-3-티온, 아네톨 트리티온 (5-(4-메톡시페닐)-3H-1,2-디티올-3-티온), ADT, ADO, 1,2- 디티올-3-티온, 1,2-디티올란, 1,3-디티올-2-티온, 말로틸레이트, 4-(3,5-디이소 프로필-4-하이드록시페닐)-1,2-디티올-3-티온; 4-(3,5-디-t-부틸-4-하이드록시페닐)-1,2-디티올-3-티온; 4-[3,5-비스(1,1-디메틸프로필)-4-하이드록시페닐]-1,2-디티올-3-티온; 4-[3,5-비스(1,1-디메틸부틸)-4-하이드록시페닐]-1,2-디티올-3-티온; 4-[3,5-비스(1,1,3,3-테트라메틸부틸)-4-하이드록시페닐]-1,2-디티올-3-티온; 4-[3,5-비스(1-메틸사이클로헥실)-4-하이드록시페닐]-1,2-디티올-3-티온; 4-[3,5-비스(1,1-디메틸벤질)-4-하이드록시페닐]-1,2-디티올-3-티온; 4-(3t-부틸-4-하이드록시-S-이소프로필페닐)-1,2-디티올-3-티온; 4-(3t-부틸-4-하이드록시-5-메틸페닐)-1,2-디티올-3-티온; 4-[3(1,1-디메틸프로필)-4-하이드록시-5-이소프로필페닐]-1,2-디티올-3-티온; 4-[3(1,1-디메틸벤질)-4-하이드록시-5-이소프로필페닐]-1,2-디티올-3-티온; 5-벤질티오-4-(3,5-디-t-부틸-4-하이드록시페닐)-1,2-디티올-3-티온; 5-벤질티오-4-[3,5-비스(1,1-디메틸프로필)-4-하이드록시-페닐]-1,2-디티올-3-티온; 5-헥실티오-4-(3,5-디-t-부틸-4-하이드록시페닐)-1,2-디티올-3-티온; 5-헥실티오-4-[3,5-비스(1,1-디메틸부틸)-4-하이드록시-페닐]-1,2-디-티올-3-티온; 5-옥타데실티오-4-(3,5-디-t-부틸-4-하이드록시페닐)-1,2-디티올-3-티온; 5-옥타데실티오-4-[3,5-비스(1,1-디메틸벤질)-4-하이드록시페닐]-1,2-디티올-3-티온; 5-알릴티오-4-(3,5-디-t-부틸-4-하이드록시페닐)-1,2-디티올-3-티온; 5-사이클로헥실티오-4-(3,5-디-t-부틸-4-하이드록시페닐)-1,2-디티올-3-티온; 및 4-(3,5-디-sec-부틸-4-하이드록시페닐)-1,2-디-티올-3-티온으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 화합물을 포함하는, 조성물을 치료학적 유효량으로 제공하는 단계, 및 상기 치료를 필요로 하는 대상체에게 상기 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.

본 발명의 또 다른 측면은, 3H-1,2-디티올-3-티온, 아네톨 트리티온 (5-(4-메톡시페닐)-3H-1,2-디티올-3-티온), ADT, ADO, 1,2-디티올-3-티온, 1,2-디티올란, 1,3-디티올-2-티온, 말로틸레이트, 4-(3,5-디이소프로필-4-하이드록시페닐)-1,2-디티올-3-티온; 4-(3,5-디-t-부틸-4-하이드록시페닐)-1,2-디티올-3-티온; 4-[3,5-비스(1,1-디메틸프로필)-4-하이드록시페닐]-1,2-디티올-3-티온; 4-[3,5-비스(1,1-디메틸부틸)-4-하이드록시페닐]-1,2-디티올-3-티온; 4-[3,5-비스(1,1,3,3-테트라메틸부틸)-4-하이드록시페닐]-1,2-디티올-3-티온; 4-[3,5-비스(1-메틸사이클로헥실)-4-하이드록시페닐]-1,2-디티올-3-티온; 4-[3,5-비스(1,1-디메틸벤질)-4-하이드록시페닐]-1,2-디티올-3-티온; 4-(3t-부틸-4-하이드록시-S-이소프로필페닐)-1,2-디티올-3-티온; 4-(3t-부틸-4-하이드록시-5-메틸페닐)-1,2-디티올-3-티온; 4-[3(1,1-디메틸프로필)-4-하이드록시-5-이소프로필페닐]-1,2-디티올-3-티온; 4-(3(1,1-디메틸벤질)-4-하이드록시-5-이소프로필페닐]-1,2-디티올-3-티온; 5-벤질티오-4-(3,5-디-t-부틸-4-하이드록시페닐)-1,2-디티올-3-티온; 5-벤질티오-4-[3,5-비스(1,1-디메틸프로필)-4-하이드록시-페닐]-1,2-디티올-3-티온; 5-헥실티오-4-(3,5-디-t-부틸-4-하이드록시페닐)-1,2-디티올-3--티온; 5-헥실티오-4-[3,5-비스(1,1-디메틸부틸)-4-하이드록시-페닐]-1,2-디티올-3-티온; 5-옥타데실티오-4-(3,5-디-t-부틸-4-하이드록시페닐)-1,2-디티올-3-티온; 5-옥타데실티오-4-[3,5-비스(1,1-디메틸벤질)-4-하이드록시페닐]-1,2-디티올-3-티온; 5-알릴티오-4-(3,5-디-t-부틸-4-하이드록시페닐)-1,2-디티올-3-티온; 5-사이클로헥실티오-4-(3,5-디-t-부틸-4-하이드록시페닐)-1,2-디티올-3-티온; 및 4-(3,5-디-sec-부틸-4-하이드록시페닐)-1,2-디티올-3-티온으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물과 함께 약학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.

또 다른 측면에 있어서, 본 발명은 암 치료를 받고 있는 대상체의 체중 감소를 방지 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 또는 그의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매 화합물 또는 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물을 포함하는 조성물을, 치료학적 유효량으로 제공하는 단계, 및 대상체에게 상기 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.

또 다른 측면에 있어서, 본 발명은 암 치료를 받고 있는 대상체의 체중 감소를 방지 및/또는 예방하기 위한 의약 제조시, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 또는 그의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매 화합물 또는 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물을 포함하는 조성물의 용도를 제공한다.

또 다른 측면에 있어서, 본 발명은 암 치료를 받고 있는 대상체의 체중 감소를 방지 및/또는 예방하기 위해, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 또는 그의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매 화합물 또는 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 조성물을 제공한다.

실시예에 있어서, 암 치료는 화학 치료 요법, 방사선 치료 요법 또는 이들의 혼합 요법이다.

본 발명의 또 다른 측면에 있어서, 본 발명은 악액질의 예방 및/또는 치료방법을 제공하며, 상기 방법은, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 또는 그의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매 화합물 또는 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물을 포함하는 조성물을 치료학적 유효량으로 제공하는 단계 및 상기 치료가 필요한 대상체에게 상기 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.

본 발명의 또 다른 측면에 있어서, 본 발명은 악액질 예방 및/또는 치료를 위한 의약 제조시, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 또는 그의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매 화합물 또는 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물을 포함하는 조성물의 용도를 제공한다.

본 발명의 또 다른 측면에 있어서, 본 발명은 악액질 예방 및/또는 치료에 사용하기 위한, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 또는 그의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매 화합물 또는 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 조성물을 제공한다.

전술한 본 발명의 측면의 실시예에 있어서, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온의 대사물은 피롤로피라진 유도체 대사물 3(M3라고도 알려짐)이다.

실시예에 있어서, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온은 아네톨 트리티온(아네톨 트리티오나 또는 SONICUR^TM라고도 알려짐).

실시예에 있어서, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 화합물은 시스테인 또는 그의 유사체, 유도체 염 또는 용매 화합물과 병용투여되거나 이들과 함께 조제된다.

실시예에 있어서, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 화합물은 시스플라틴, 덱사메타손 및 5-플루오로우라실로 이루어지지만, 이에 제한되지 않는 그룹으로부터 선택될 수 있는 화학 치료제와 병용투여되거나 이들과 함께 조제된다.

실시예에 있어서, 대상체는 화학 치료 요법, 방사선 치료 요법 또는 이들의 혼합 요법에 의해 암 치료를 받았다.

실시예에 있어서, 악액질은 암 악액질이다.

이론에 얽매이고자 함이 없이, 본 발명은, 부분적으로는, 본 발명의 조성물로 대상체를 치료한 경우 대상체의 소화관(GI)의 점막의 박막화와 궤양화가 방지된다는 발명자들의 예상치 못한 발견에 기초한다.

본원에 사용된 용어 "점막염"은 소화기 점막염(alimentary mucositis)을 포함하는 것으로 의도된다. 실시예에 있어서, 소화기 점막염은 구강 점막염 및/또는 장염(장의 염증, 특히 소장의 염증)을 포함한다.

실시예에 있어서, 소화관 점막염은 식도염(식도의 염증), 인두 점막염, 구내염(위의 염증) 및/또는 직장염(직장의 염증)을 포함한다.

실시예에 있어서, 본 발명의 방법 및 용도는 점막염을 보유하거나 점막염이 발생할 위험이 있는 대상체에 대해, 하나 이상의 본 발명의 화합물을 치료학적 유효량으로 하나 이상의 소화관 영역에 투여하는 것을 포함한다. 실시예에 있어서, 하나 이상의 소화관 영역에 하나 이상의 화합물이 투여될 수 있다.

본원에 사용되는 용어 "악액질"은 체중 감소를 위해 능동적으로 노력하지 않는 사람에 있어서, 원치 않는 체중 감소를 의미한다. 본원에서 사용되는 "체중 감소의 방지 및/또는 예방"이라는 표현 및 이와 유사한 표현은 체중의 변화가 없는 경우 및/또는 체중의 증가가 없는 경우를 포함한다.

실시예에 있어서, 상기 조성물, 방법 및 용도는 방사선 요법 및/또는 화학 요법을 받을 대상체의 점막염 및/또는 체중 감소 예방까지 확장된다. 실시예에 있어서, 자가조직 또는 이종의 조혈 줄기 세포 이식을 위한 준비시, 골수파괴성(myeloablative) 방사선 치료 요법 및/또는 화학 치료 요법을 위한 조건형성(conditioning) 전에 하나 이상의 본 발명의 화합물을 대상체에게 투여할 수 있다.

실시예에 있어서, 본 발명은 점막염-유도제와 함께 점막독성 화학 치료 요법을 받았거나 받을 예정인 대상체에 있어서 점막염 예방 및/또는 치료 및/또는 체중 감소를 위한 조성물 및 방법을 제공한다.

실시예에 있어서, 본 발명은 보조적 화학 치료 요법과 함께 또는 없이, 방사선 치료를 받았거나 받을 예정이며, 머리 및/또는 목에 암을 보유한 대상체에 있어서, 점막염을 예방 및/또는 치료하기 위한 방법 및 조성물을 제공한다.

실시예에 있어서, 점막염 및/또는 체중 감소는 화학적 손상, 생물학적 손상, 방사선 또는 이들의 혼합에 노출된 대상체에서 발생한다. 방사선 노출은 방사선 치료 요법, 예를 들면 화학 치료 요법, 방사선 요법 등으로부터 발생할 수 있고, 또는 우연한 방사선 노출 또는 테러리스트 공격에 의한 방사선 노출에 의해서 발생할 수도 있다. 본 발명의 조성물, 방법 및 용도는 우주 여행 전 또는 후, 점막염 및/또는 체중 감소를 예방, 치료 또는 개선하기 위하여 대상체에게 투여하는 것과 관련한여 추가적 용도를 갖는다.

실시예에 있어서, 본 발명의 방법 또는 용도는, 대상체가 점막염 및/또는 체중의 감소의 진행을 유발 또는 야기할 수 있는 손상을 입기 전에, 실시될 수 있다.

또 다른 실시예에 있어서, 본 발명의 방법 또는 용도는, 대상체가 손상을 입은 후, 점막염 및/또는 대상체의 체중 감소의 개시 및 발생 전에 실시될 수 있다.

또 다른 태양에 있어서, 본 발명의 방법 또는 용도는, 대상체 내 점막염 및/또는 대상체의 체중 감소가 발생한 후, 상기 대상체에 대하여 실시될 수 있다.

본 발명의 조성물 및 방법은, 점막염 및/또는 체중 감소를 예방 및/또는 치료하기 위하여, 다른 치료 요법과 혼합되어 사용될 수 있다. 예를 들면, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 및/또는 N⁶-이소펜테닐 아데노신을 포함하는 조성물과 임의의 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체는, 점막염의 발생 또는 진행에 대하여 예방적 및/또는 치료적 효과를 갖거나 점막염 또는 체중 감소를 줄이는 것과 관련하여 하나 이상의 증상을 개선시키는, 하나 이상의 추가적 치료제와 함께 혼합되어 투여될 수 있다. 상기 추가적 치료제의 비제한적인 예는 레이저 치료 요법, 냉동 요법, 항생제, 인간 케라티노사이트(keratinocyte) 성장 인자(KGF)인 팔리페르민(상품명: Kepivance, Amgen)과 같은 사이토킨계 치료 요법 및 IL-11, TGF 및 GM-CSF와 같은 기타 사이토킨 염증 조절제를 포함한다.

또한, 본 발명의 조성물은 화학 치료제와 함께 본 발명의 화합물을 하나 이상 포함하는 조합 의약의 제조시에 사용될 수 있다.

본 발명의 조성물과 함께 사용하기 적절한 화학 치료제는, 예를 들면 빈블라스틴(vinblastine)과 같은 유사분열 억제제; 시스플라틴, 카르보플라틴(carboplatin) 및 사이클로포스파미드(cyclophosphamide)와 같은 알킬화제; 파클리탁셀(paclitaxel) 또는 기타 탁산(taxanes)과 같은 미세소관 어셈블리 억제제; 5-플루오로우라실, 카페시타빈(capecitabine), 사이토신 아라비노사이드(cytosine arabinoside) 및 하이드록시우레아와 같은 대사 길항제; 아드리아마이신(adriamycin) 및 블레오마이신(bleomycin)과 같은 인터컬레이팅(intercalating) 항생제; 트라스투주맙(trastuzumab)과 같은 면역자극제; 젬시타빈(gemcitabine)과 같은 DNA 합성 억제제; 아스파라기나아제(asparaginase)와 같은 효소; 에토포사이드(etoposide)와 같은 토포이소머라아제(topoisomerase) 억제제; 인터페론과 같은 생체 반응 조절물질; 및 항호르몬제, 예를 들면 타모시펜과 같은 안티오에스트로젠(antioestrogen), 또는 (4'-시아노-3-(4-플루오로페닐설포닐)-2-하이드록시-2-메틸-3'-(트리플루오로메틸)-프로피온아닐라이드와 같은 안티안드로겐(antiandrogens) 및 기타 치료제 및 예를 들면 [DeVita, V. T., Jr., Hellmann, S., Rosenberg, S. A.; in: Cancer: Principles & Practice of Oncology, 5th ed., Lippincott-Raven Publishers (1997)]에 기재되어 있는 주요 성분물질로부터 선택되는 하나 이상의 기타 항암 물질을 포함한다.

또한, 본 발명은 상기 조합 의약의 투여 방법을 제공한다. 실시예에 있어서, 본 발명의 화합물 및 화학 치료제를 연속적으로, 동시에 또는 상이한 투여 루트를 통하여 각각 제공된다. 또한, 상기 화합물 및 화학 치료제는 예를 들면 고체 및 액체 형태와 같이 동일하거나 상이한 형태일 수 있다. 상기 방법은 본 발명의 화합물을 화학 치료제와 함께 동시에 투여하는 것을 포함할 수 있다. 실시예에 있어서, 본 발명의 화합물은 화학 치료제와 연속적으로 대상체에 투여될 수 있다. 동시에 투여되는 경우, 일 실시예에 있어서, 본 발명의 화합물은 화학 치료제보다 먼저 투여될 수 있다. 또 다른 실시예에 있어서, 본 발명의 화합물은 화학 치료제보다 나중에 투여될 수 있다. 일 실시예에 있어서, 화학 치료제는 본 발명의 화합물과 분리되어 제공된다.

실시예에 있어서, 화학 치료제 및 본 발명의 화합물은 병용 투여된다. 병용투여는 이들 성분이 조성물로서 또는 동일한 단일 투여분의 일부로서 함께 투여되는 것을 의미한다. 본원에서 사용되는 용어 "병용 투여"는 또한, 상기 성분이 분리되어 투여되지만 치료 요법 또는 치료 프로그램의 일부로서 투여되는 것도 의미한다. 일실시예에 있어서, 상기 성분들은 동시에 대상체에게 투여된다. 그러나, 성분들은 분리된 투약 또는 투약 제형으로서 분리되어 투여될 수도 있다. 성분이 분리되어 투여되는 경우, 성분의 병용 투여가 시간, 빈도, 투약, 또는 성분의 투여 순서에 제한을 가하지 않는다.

5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온(올티프라즈, 4-메틸-5(2-피라지닐)-3H-1,2-디티올-3-티온 또는 5-(2-피라지닐)-4-메틸-1,2-디티올-3-티온이라고도 알려져 있음)의 구조는 하기 일반식 1과 같다.

실시예에 있어서, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온은, 하나 이상의 2가 또는 3가 방사성 금속 이온과 킬레이트를 형성하거나 또는 복합체(complex)를 형성함으로써, 대상체 세포 또는 조직 내에서 상기 2가 또는 3가 방사성 이온이 재분배되거나 또는 봉쇄(sequestering)되어, 원치 않는 조직 파괴에 참여하는 상기 이온들의 능력(capacity)이 제한된다. 2가 또는 3가 금속 이온은 철, 구리, 니켈, 칼슘, 마그네슘, 망간, 카드뮴, 납, 알루미늄, 은, 코발트, 요오드, 아연, 수은, 세슘, 우라늄, 셀레늄, 프로탁티늄, 토륨, 로듐 및 세륨 이온 또는 라디칼로 이루어진 군으로부터 선택되지만, 이에 제한되지 않는다.

이론에 얽매이고자 함이 없이, 본 발명자는 점막염의 예방 또는 치료와 관련하여 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온의 치료학적 및/또는 예방적 효과가, 글루타티온(GSH), 글루타티온 환원효소 및/또는 글루타티온-S-전이효소의 발현의 증가 때문임을 밝혔다.

사이토키닌은 세포 분열, 세포 성장 및 분화 및 기타 생리학적 과정에서 활성을 갖는, 공지된 식물 성장 호르몬류이다. 사이토키닌은, 비타민, 미네랄 염 및 당뿐 아니라 옥신(또 다른 종류의 식물 호르몬)을 함유하는, 표준 배지에서 배양시 식물 조직의 이식체(explant)의 성장 및 세포 분열의 증진에 관여한다. 특히, 사이토키닌은 식물에 있어서 질병 저항성, 스트레스 내성, 가뭄 내성, 하중(lodging) 저항성, 노화 지연, 정단 우성(apical dominance) 및 동화에 의한 분배(assimilating partitioning)을 조절하는 과정에서 활성을 나타낸다(Werner et aI., Proc. Natl. Acad. Sci, 98(18)10487 10492 (2001), Haberer et al., Plant Physiol., 128, pp.354 362 (2002).

본원에서 정의된 용어 "사이토키닌"은 세포 성장 및 분화뿐 아니라 기타 과정에도 관여하는 식물 성장 물질(식물 호르몬)인 화합물을 의미한다. 특히, 상기 용어는 "아데닌 사이토키닌"으로도 불리며, 키네틴, 제아틴 및 벤질 아데닌을 포함하는 사이토키닌류를 포함한다. 상기 용어는 N,N'-디페닐우레아와 같이 상이한 화학적 조성을 갖지만, 아데닌 사이토키닌과 유사한 생물학적 활성을 갖는, "페닐우레아 사이토키닌"을 추가로 포함한다.

전술한 본 발명의 측면에서 사용되기에 적합한 사이토키닌 화합물은 하기 화학식 2로서 정의된다.

상기 식에서,

R₁ = H, R₂ = CH₃, R₃ = CH₃ 및 R₄= H, 또는

R₁ = H 또는 CH₃S이고, R₄는 하기와 같다:

및

R₅ = CH₃, CI, OH 또는 모노포스페이트기,

R₆= CH₃, CH₂OH 또는 Cl,

R₇= H 또는 Br, 또는

R₁ = H 이고, R₄는 하기와 같다:

X₁및 X₂는 H, 메틸기, 에틸기, 하이드록실시기, 할로겐 및 카르복실기로부터 독립적으로 선택된다; 또는

R₄ 는 하기 식 중 어느 하나이다:

,또는

또는

여기서 R₈은 하기와 같다:

또는 (CH₂)₇CH_3, 이고,

R₂ = OH이고 R₃ = OH, 모노포스페이트기, 디포스페이트기 또는 트리포스페이트기이거나, 또는

R₂ 및 R₃는 서로 결합되어, 3',5'-사이클릭 모노포스페이트 유도체 또는 임 의의 이러한 화합물의 생리학적으로 허용가능한 염을 형성한다.

화학식 2는, " 폴리 N⁶-이소펜테닐 아데노신"으로 규명되고, 바람직하게는 2 내지 3개의 단량체를 포함하는 IPA의 고분자뿐 아니라 그러한 모든 화합물 및 염을 의미하는 것으로 사용된다.

하기 열거된 식은 화학식 2의 바람직한 화합물 la 내지 lu의 R₁ 내지 R₄의 화학기를 나타낸다.

[화학식 la]:

상기 화학식 2에서, R₁ = H, R₂ = OH, R₃ = OH이며, R₄는 하기와 같다:

상기 화합물은 N⁶-(△²-이소펜테닐) 아데노신으로 알려져 있다.

[화학식 lb]:

상기 화학식 2에서, R₁ = H, R₂ = OH, R₃ = 모노포스페이트이며, R₄는 하기와 같다:

상기 화합물은 N⁶-(△²-이소펜테닐) 아데노신-5'-모노포스페이트로 알려져 있다.

[화학식 lc]:

상기 화학식 2에서, R₁ = H이고, R₂ 및 R₃은 결합하여 3',5'-사이클릭 모노포스페이트 유도체를 형성하며, R₄는 하기와 같다:

상기 화합물은 N⁶-(△²-이소펜테닐) 아데노신-5'-사이클릭 모노포스페이트로 알려져 있다.

[화학식 ld]:

상기 화학식 2에서, R₁= H, R₂= OH, R₃= OH이고, R₄= CH₂C₆H₆이다.

이 화합물은 N⁶-벤질아데노신으로 알려져 있다.

[화학식 le]:

상기 화학식 2에서, R₁ = H, R₂ = OH, R₃ = 모노포스페에트이고, R₄ = CH₂C₆H₆이다.

이 화합물은 N⁶-벤질아데노신-5'-모노포스페이트로 알려져 있다.

[화학식 lf]:

상기 화학식 2에서, R₁ = H이고, , R₂ 및 R₃ 은 결합하여 3',5'-사이클릭 모노포스페이트 유도체를 형성하고, R₄ = CH₂C₆H₆이다.

이 화합물은 N⁶-벤질아데노신-3',5'-사이클릭모노포스페이트로 알려져 있다.

[화학식 lg]:

상기 화학식 2에서,R₁ = H, R₂ = OH, R₃ = OH이고, R₄는 하기와 같다:

이 화합물은 푸르푸릴아데노신으로 알려져 있다.

[화학식 lh]:

상기 화학식 2에서, R₁ = H, R₂ = OH, R₃ = 모노포스페이트이고, R₄는 하기와 같다:

이 화합물은 N⁶-푸프루릴아데노신-5'모노포스페이트로 알려져 있다.

[화학식 li]:

상기 화학식 2에서, R₁ = H, R₂ 및 R₃ 은 결합하여 3',5'-사이클릭 모노포스 페이트 유도체를 형성하고, R₄는 하기와 같다:

상기 화합물은 N⁶-푸르푸릴아데노신-3',5'-사이클릭 모노포스페이트로 알려져 있다.

[화학식 lj]:

상기 화학식 2에서, R₁ = H, R₂ = OH, R₃ = OH이고, R₄는 하기와 같다:

상기 화합물은 N-(퓨린-6-일카르바모일)-O-클로로아닐린 리보뉴클레오시드로 알려져 있다.

[화학식 lk]:

상기 화합물은 N-(퓨린-6-일카르바모일)-O-클로로아닐린 리보뉴클레오시드-5'-모노포스페이트로 알려져 있다.

[화학식 ll]:

상기 화합물은 N⁶-아다만틸아데노신으로 알려져 있다.

[화학식 lm]:

상기 화합물은 N⁶-아다만틸아데노신-5'-모노포스페이트로로 알려져 있다.

[화학식 ln]:

상기 화합물은 N-(퓨린-6-일카르바모일)-n-옥틸아민 리보큐클레오시드로 알려져 있다.

[화학식 lo]

상기 화합물은 N-(퓨린-6-일카르바모일)-n-옥틸아민 리보큐클레오시드-5'-모노포스페이트로 알려져 있다.

[화학식 lp]

상기 화학식 2에서, R₁ = H, R₂ 및 R₃ 은 결합하여 3',5'-사이클릭 모노포스페이트 유도체를 형성하고, R₄는 하기와 같다:

상기 화합물은 N-(퓨린-6-일카르바모일)-n-옥틸아민 리보뉴클레오시드-3',5'-모노포스페이트로 알려져 있다.

[화학식 lq]

상기 화학식 2에서, R₁ = CH₃S, R₂=OH, R₃=OH이고, R₄는 하기와 같다:

상기 화합물은 N⁶-(△²-이소펜틸)-2-메틸티오아데노신으로 알려져 있다.

[화학식 lr]

상기 화합물은 N⁶-(4-하이드록시-3-메틸-트랜스-2-부테닐)-아데노신으로 알려져 있다.

[화학식 ls]

상기 화합물은 N⁶-(3-클로로-트랜스-2-부테닐) 아데노신으로 알려져 있다.

[화학식 lt]

상기 화합물은 N⁶-(3-클로로-시스-2-부테닐) 아데노신으로 알려져 있다.

[화학식 lu]

상기 화학식 2에서, R₁= H, R₂= CH₃, R₃= CH₃이고, R₄= H이다.

본 발명은 화학식 2의 화합물의 하나 이상의 대사물에까지 확장된다. 예를 들어, 바람직한 대사물로는 N⁶-(Δ²-이소펜테닐)아데닌, 6-N-(3-메틸-3-하이드록시부틸아미노) 퓨린, 아데닌, 하이포크산틴, 유린산(uric acid) 및 메틸화된 크산틴을 들 수 있다.

이론에 의해 얽매이고자 함이 없이, 화학식 2의 사이토키닌 화합물은 방사선 노출에 의한 페이스 II 탈독소화 효소(phase II detoxification enzyme)의 고갈 후 이 세포에 의한 이 효소의 생산을 증진시키는 것으로 생각된다. 페이스 II 탈독소화 효소는 글루타티온-S 트랜스퍼라제, 감마-글루타밀시스테인 신테타제, 글루타티온 디덕타제, 글루타티온 퍼옥시다제, 에폭사이드 하이드라제, AFB-1 알데히드 리덕타제, 글루쿠로닐 리덕타제, 글루코스-6-포스페이트 디하이드로게나제, UDP-글루쿠로닐 트랜스퍼라제 및 AND(P)H:퀴논 옥시도리덕타제로 구성된 군으로부터 선택될 수 있다.

일 측면에 있어서, 본 발명은 하기 화합물 및 약학적으로 허용가능한 염을 하나 이상 포함하는 조성물, 방법 및 용도에까지 확장된다:

하기 구조식을 가진 ADT:

하기 구조식을 가진 ADO:

하기 구조식을 가진 1,2-디티올 3-티온:

하기 구조식을 가진 리포아미드 (1,2-디티올란):

하기 구조식을 가진 1,3-디티올 2-티온:

하기 구조식을 가진 [1,2]디티올[4,3-c]-1,2-디티올-3,6-디티온:

일 측면에 있어서, 본 발명은 하기 화합물을 하나 이상 포함하는 조성물, 방법 및 용도에까지 확장된다:

하기 일반식을 가진 1,2-디티올란 클래스 1 화합물:

하기 일반식을 가진 1,2-디티올란 클래스 2 화합물:

하기 일반식을 가진 1,2-디티올란 클래스 3 화합물:

하기 일반식을 가진 1,2-디티올란 클래스 4 화합물:

상기 식에서, Z = S, O, NR, R₂, CR₂ 이고, Z는 상기 모든 클래스에 대해 임의적으로 및 독립적으로 선택된다. 이 경우에, R은 H, 알킬(C1-C5), 알콕시(C1-C5), 알콕시카르보닐(C1-C5)을 포함한다. R₂는 고리의 탄소 원자를 중심으로 스피로 링(spiro ring)을 형성할 수 있다.

티올란 클래스들에 대해서, 고리의 탄소 원자들이 이중으로 치환될 수 있다.

R₁-R₄는 모든 클래스에 대해 주된 고리 치환체이며, 광범위한 치환체를 포함하기 위하여, 선택적으로 및 독립적으로 H, 알킬, 아릴, 헤테로사이클릭, 할로겐, 알콕시카르보닐(C1-C5) 또는 카르복실을 포함해야 한다.

R₁, R₂, R₃, 및 R₄는 이들이 부착된 탄소 원자를 중심으로 스피로 링을 형성하고나 또는 인접한 탄소 원자에 결합되거나 또는 브릿지된 링을 형성할 수 있다.

하기 정의들은 본 명세서에 기재된 대부분의 화합물에 대한 것이다.

알킬은 본 명세서에서 C1-C10 포화 또는 불포화된 직쇄 또는 분지쇄이며, 선택적으로 하기 치환체에 의해 단일 또는 다중 치환될 수 있다: 할로겐, 알킬 (C1-C5), 하이드록실, 알콕시 (C1-C5), 알콕시카르보닐 (C1-C5), 카르복실, 아미도, 알킬아미도 (C1-C5), 아미노, 모노 및 디알킬 아미노 (C1-C5), 알킬 카르바모일 (C1-C5), 티올, 알킬티오 (C1-C5) 또는 벤제노이드 아릴.

아릴은 본 명세서에서 임의의 선택적으로 단일 또는 다중 치환된 벤제노이드 기 (C6-C14)로서 정의된다. 그 치환체들은 아래에 정의되어 있다.

헤테로사이클릭 라디칼은 임의의 4, 5, 또는 6-원의 임의적으로 치환된 헤테 로사이클릭 링으로서, 치환되거나 또는 비치환되어 있으며, 고리는 1-3개의 N, O 또는 S 원자와 나머지 수의 탄소 원자를 포함한다.

아릴 또는 헤테로사이클릭 라디칼의 치환체로는, 할로겐, 알킬 (C1-C5), 하이드록실, 알콕시 (C1-C5), 알콕시카르보닐 (C1-C5), 카르복실, 아미도, 알킬아미도 (C1-C5), 아미노, 모노 및 디알킬 아미노 (C1-C5), 알킬 카르바모일 (C1-C5), 티올, 알킬티오 (C1-C5) 또는 벤제노이드 아릴 시아노, 니트로, 할로 알킬류, 알킬설포닐 (C1-C5), 설포네이트를 포함한다. 이러한 치환체들 중의 2개가 결합된 링의 일부일 수 있으며, 이 링은 치환 또는 비치환된 헤테로사이클릭 또는 카르보 사이클릭 링일 수 있다.

상기 식에서,

X는

(R5는 C1-C6 알킬 또는 아릴기임)

Z 및 Z'는 에스테르 또는 시아노기와 같은 전자 유인기(electron-attracting 기) 이다.

A는 ＞C=N-OH 기 또는 ＞C=N-OR₃기 (R₃는 하이드록실, 아미노, 클로로 및 C1-C4 알콕시기, 아릴 (C1-C6 알킬)기, (C1-C6 알킬) 카르보닐기 및 아릴 (C1-C6 알킬) 카르보닐기로부터 선택됨)로부터 선택된다.

A는 ＞C=O 기, ＞C=N-R₄ (R₄는 C1-C6 알킬기 또는 아릴기임), 및 CHOH 기로부터 선택될 수도 있다.

R₁ 및 R₂는 수소, 할로겐, 니트로기, 니트로기, 티오시아노기, C1-C6 알킬 기, C2-C6 알케닐기, 아릴기, 아릴 (C1-C6 알킬)기, 아릴 (C2-C6 알케닐)기, 카르복실기, (C1-C6 알킬) 카르보닐기, 아릴카르보닐기, (C1-C6 알콕시) 카르보닐기, (C1-C6) 알콕시) 카르보닐(C1-C6 알킬)기, C1-C6 알콕시기, 트리플루오로메틸기, 아미노기, 디(C1-C6 알킬)아미노(C1-C6 알킬)기, 아실아미노기 (식: - NHCOC_nH2_n+1, n은 0 내지 6), -NH-CSC_nH_2n+l 기(n은 0 내지 6), 테르페닐기, 시아노기, C2-C6 알키닐기, C2-C6 알키닐기(C1-C6 알킬 또는 아릴기로 치환됨), 하이드록시(C1-C6 알킬)기, (C1-C6 아실)옥시(C1-C6 알킬)기, (C1-C6 알킬) 티오기 및 아릴티오로부터 서로 독립적으로 선택되거나; 또는 R₁ 과 R₂ 는 함께 모노- 또는 폴리사이클릭 C2-C20 알킬렌기(2,2 대메틸트리메틸렌기를 제외하고는 선택적으로 하나 이상의 헤테로 원자를 포함함) 또는 C3--C12 사이클로알킬렌기를 형성한다.

R은 C1-C6 알킬기로부터 선택된다.

상기 정의에 있어서, 아릴기 또는 아릴알킬기의 아릴 부분은 페닐 또는 나프틸기와 같은 방향족 탄소계 기 또는 퓨릴기의 티에닐과 같은 방향족 헤테로사이클릭 기를 의미하며, 이들 작용기는 하기 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환체를 가지고 있을 수 있다: 할로겐 원자, C1-C4 알킬기, C1-C4 알콕시기, 트리플루오로메틸기, 니트로기 및 하이드록실기,

하기 식으로 표시되는 것과 같은 1,2-디티올-3-티온 유도체의 옥심:

추가적으로 하기 식으로 표시되는 것과 같은 전술한 화합물의 알데히드 또는 케톤:

하기 식으로 표시되는 하나 이상의 화합물 (A는 C=N=OR'₃이고, R'₃는 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬기(특히 하이드록실, 아미노, 클로로, 브로모, 플루오로, 아이오도로부터 선택된 하나 이상의 작용기로 치환됨) 및 C1-C4 알콕시기 또는 아릴(C1-C6 알킬)기임):

R₃는 상기 정의와 동일한 의미를 가진다.

하기 식으로 표시되는 하나 이상의 화합물 (A는 C=N-O-CO-R''₃ 이고, R''₃는 t수소 원자, 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬기, 아릴기 및 아릴(C1-C6 알킬)기임):

R''₃는 수소 원자, 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬기 및 아릴기임.

A가 CH-OH 기인 또 다른 부류의 화합물이 형성되는데, 즉 하기 식으로 표시되는 화합물이다:

A가 C=N-R을 포함하는 작용기이며, Rdl C1-C6 알킬 또는 아릴기인, 하기 식으로 표시되는 또 다른 부류의 화합물이 형성된다:

또 다른 부류의 화합물로는 A가 C=O 기이고, X가 산소 원자인, 하기 식으로 표시되는 화합물을 포함한다:

상기 식에서,

R₁은 수소, 할로겐, 니트로기, 니트로기, 티오시아노기, C1-C6 알킬기, C2-C6 알케닐기, 아릴기, 아릴 (C1-C6 알킬)기, 아릴 (C2-C6 알케닐)기, 카르복실기, (C1-C6 알킬) 카르보닐기, 아릴카르보닐기, (C1-C6 알콕시) 카르보닐기, (C1-C6) 알콕시) 카르보닐(C1-C6 알킬)기, C1-C6 알콕시기, 트리플루오로메틸기, 아미노기, 디(C1-C6 알킬)아미노(C1-C6 알킬)기, 아실아미노기 (식: - NHCOC_nH2_n+1, n은 0 내지 6), -NH-CSC_nH_2n+l 기(n은 0 내지 6), 테르페닐기, 시아노기, C1-C6 알키닐기, C2-C6 알키닐기, C2-C6 알키닐기(C1-C6 알킬 또는 아릴기로 치환됨), 하이드록시(C1-C6 알킬)기, (C1-C6 아실)옥시(C1-C6 알킬)기, (C1-C6 알킬) 티오기 및 아릴티오기로부터 선택되고;

R₂는 니트로기, 니트로기, 티오시아노기, C1-C6 알킬기, C2-C6 알케닐기, 아릴기, 아릴 (C1-C6 알킬)기, 아릴 (C2-C6 알케닐)기, 카르복실기, (C1-C6 알킬) 카르보닐기, 아릴카르보닐기, (C1-C6 알콕시) 카르보닐기, (C1-C6) 알콕시) 카르보닐(C1-C6 알킬)기, C1-C6 알콕시기, 트리플루오로메틸기, 아미노기, 디(C1-C6 알킬)아미노(C1-C6 알킬)기, 아실아미노기 (식: - NHCOC_nH2_n+1, n은 0 내지 6), -NH-CSC_nH_2n+l 기(n은 0 내지 6), 테르페닐기, 시아노기, C2-C6 알키닐기, C2-C6 알키닐기(C1-C6 알킬 또는 아릴기로 치환됨), 하이드록시(C1-C6 알킬)기, (C1-C6 아실)옥시(C1-C6 알킬)기, (C1-C6 알킬) 티오기 및 아릴티오기로부터 선택되거나; 또는

R₁ 과 R₂ 는 함께 모노- 또는 폴리사이클릭 C2-C20 알킬렌기를 형성하며, 선 택적으로 하나 이상의 헤테로 원자를 포함할 수 있다.

또 다른 부류의 화합물은 하나 이상의 하기 화합물 및약학적으로 허용가능한 그 염을 포함한다:

R₁ 및 R₂는 수소, 할로겐, 니트로기, 니트로기, 티오시아노기, C1-C6 알킬기, C2-C6 알케닐기, 아릴기, 아릴 (C1-C6 알킬)기, 아릴 (C2-C6 알케닐)기, 카르복실기, (C1-C6 알킬) 카르보닐기, 아릴카르보닐기, (C1-C6 알콕시) 카르보닐기, (C1-C6) 알콕시) 카르보닐(C1-C6 알킬)기, C1-C6 알콕시기, 트리플루오로메틸기, 디(C1-C6 알킬)아미노(C1-C6 알킬)기, 아실아미노기 (식: - NHCOC_nH2_n+1, n은 0 내지 6), -NH-CSC_nH_2n+l 기(n은 0 내지 6), 테르페닐기, 시아노기, C2-C6 알키닐기, C2-C6 알키닐기(C1-C6 알킬 또는 아릴기로 치환됨), 하이드록시(C1-C6 알킬)기, (C1-C6 아실)옥시(C1-C6 알킬)기, (C1-C6 알킬) 티오기 및 아릴티오기로부터 서로 독립적으로 선택되거나; 또는 R₁ 과 R₂ 는 함께 모노- 또는 폴리사이클릭 C2-C20 알킬렌기(2,2 대메틸트리메틸렌기를 제외하고는 선택적으로 하나 이상의 헤테로 원자를 포함함) 또는 C3--C12 사이클로알킬렌기를 형성한다.

상기 정의에 있어서, 아릴기 또는 아릴알킬기의 아릴 부분은 페닐 또는 나프틸기와 같은 방향족 탄소계 기 또는 퓨릴기의 티에닐과 같은 방향족 헤테로사이클릭 기를 의미하며, 이들 작용기는 하기 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환체를 가지고 있을 수 있다: 할로겐 원자, C1-C4 알킬기, C1-C4 알콕시기, 트리플루오로메틸기, 니트로기 및 하이드록실기. 하나 이상의 하기 구조식으로 표시되는 이소벤조티아졸론 유도체:

상기 구조식에서, R¹ 및 R² 중 적어도 하나는 바람직하기로는, 니트로, 아릴아조, 치환된 아릴아조, 벤질리덴아미노 또는 치환된 벤질리덴아미노이다. R¹ 및 R²중 하나만이 치환된 경우에는, R¹ 및 R² 중 하나는 수소이다. R³ 치환체가 약 7개 미만의 탄소 원자를 가진 알킬기, 아미노, 하이드록실, 알콕실 및 아릴기 (및 그것의 작용화된 형태)로부터 선택된다.

본 발명의 이소벤조티아졸 유도체의 바람직한 종(species)으로는 예를 들어 R¹이 아릴아조이고 R²가 수소인 유도체를 포함한다. 예시적인 화합물로는, R²가 수 소이고, R¹이 페닐아조; 4-하이드록시페닐아조와 같은 치환된 페닐아조; 4 니트로-2-메틸페닐아조; 4 니트로-2-메틸페닐아조; 2-하이드록시-1-나프틸아조; 2-하이드록시-5-메틸페닐아조; 2-하이드록시-4-메틸-5-니트로페닐아조; 4-하이드록시-1-나프틸아조; 4-하이드록시-3-메틸-1-나프틸아조; 4-하이드록시-5-아자-1-나프틸아조; 2 아미노-1-나프틸아조; 1-하이드록시-2-나프틸아조; 3-N,N 디메틸아미노프로필카르복시아미도-1-하이드록시-4-나프틸아조: 1-하이드록시-4-메톡시-2-나프틸아조, 2-하이드록시-3-카르복시-1-나프틸아조; 1-하이드록시-3,6-디설포네이트-2-나프틸아조: 2,3-디하이드록시-1-나프틸아조; 또는 2-하이드록시-3,5-디메틸-1-페닐아조인 화합물을 포함한다. 일실시예에 있어서, R¹은 치환된 벤질리덴아미노, 2,4-디니트로벤질리덴아미노이고, R²는 수소이다. 또한, R¹은 수소이고,R²는 2-하이드록시-1-나프틸아조 또는 4-하이드록시-1-페닐아조이다.

일 측면에 있어서, 충분한 극성을 가진 R³ 치환체는 화합물에 수용해성을 부여할 수 있다. 예를 들어, R³는 - (CH₂)nR⁴R⁵이며, 여기서 n은 2 내지6이고, R⁴및 R⁵는 간단한 알킬류 또는 수소이다. 그밖에 가능한 수용해성 측쇄로는 3-카르복시프로필, 설포네이토에틸 및 -CH₂(CH₂OCH₂)CH₃ 유형의 폴리에틸에테르(n은 10 미만임)를 포함한다. 바람직한 화합물의 예로는 R³측쇄로서 아미노알킬, 카르복시알킬, 오메가 아미노 폴리에틸에테르 및 N-할로아세틸 유도체가 있다. 더 넓은 의미에서 는 다양한 용도를 위해, R³가 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 알콕시, 하이드록실 또는 아미노기일 수 있다, 용해성 또는 반응성 목적으로 치환체를 포함하는 경우에는 R³가 아미노알킬, 카르복시알킬, 하이드록시알킬 또는 할로알킬일 수 있다. R³부분의 아릴 또는 헤테로아릴은 예를 들어 아미노아릴, 카르복시아릴 또는 하이드록시아릴로서 치환될 수 있다.

하기 구조식을 가진 하나 이상의 이소벤조티아졸론도 역시 포함된다:

상기 식에서, R¹ 및 R² 중 적어도 하나는 니트로, 아릴아조, 치환된 아릴아조, 벤질리덴아미노 또는 치환된 벤질리덴아미노이고, R¹ 및 R²중 하나만 수소이고, R³ 는 아미노알라일, 아미노아릴 및 아미노헤테로아릴, 카르복시알킬, 카르복시아릴, 또는 아미노기 또는 하이드록시기를 포함하는 폴리머에 공유결합을 통해 연결된 카르복시헤테로아릴이다. 스페이서 아암 R³는 올리고머 또는 폴리에틸렌 글리콜 및 그 유도체를 포함할 수 있다. 일 측면에 있어서, R³ 는 17-클로르아세트아미 도-3,6,9,12,15-펜타옥시헵타데실이고, 헥사에틸렌글리콜은 클로르아세트아미드화되어 있다. 폴리머기 Y¹ 과 R³ 가 카르복시기를 포함하는 경우에는 공유결합이 에스테르 결합을 통해 이루어지는 것이 바람직하다. 폴리머가 아미노기를 포함하는 경우에는 유사체 공유결합이 아미드 결합을 통해 이루어지는 것이 바람직하다. 아민을 가진 폴리머는 R³ 에 커플링되는 경우 키토산, 폴리알킬아민, 아미노덱스트란, 폴리에틸렌아민, 폴리리신 또는 아미트리렌과 같은 폴리머일 수 있다.

본 발명의 R³ 치환체는, 알파-할로알킬 또는 알파-할로알킬카르복시아미도 R³ 전구체에서 할로겐을 아민으로 치환함으로써 아민을 가진 폴리머에 연결된 알킬을 포함할 수 있다. 아미노알킬 또는 아미노아릴기의 경우에는 R³ 치환체가 폴리에피클로로히드린, 클로로메틸폴리스티렌, 폴리비닐알콜 또는 폴리비닐피리딘과 같은 폴리머에 공유결합을 통해 연결될 수도 있다. 본 발명의 R³ 치환체는 일반적으로 아미드 또는 에스테르 결합을 통해 카르복실기를 포함하는 폴리머에 연결된 아미노알킬, 하이드록시알킬, 아미노아일 또는 하이드록시아릴기일 수 있다.

폴리머가 R³ 구조에 관여하는 경우에, 그 폴리머는 폴리아크릴산, 폴리메타크릴산, 폴리이타콘산, 산화된 폴리에틸렌 옥사이드, 폴리(메틸메타크릴레이트/메타크릴산), 카르복실메틸 셀룰로오스, 카르복시메틸 아가로스 또는 카르복시메틸 덱스트란과 같은 것일 수 있다. 이러한 카르복실 폴리머가 관여하는 경우에, R³ 는 아미드 또는 에스테르 결합을 통해 폴리머에 연결된 아미노알킬 (예: 8 아미노헥실), 하이드록시알킬, 아미노아릴 또는 하이드록시아릴일 수 있다. 그러한 경우에, R³ 전구체 기능은 산무수물을 가진 폴리머와의 반응에 의해, 또는 카르보디이미드-유도성 결합형성을 통해 카르복실레이트를 가진 폴리머와의 커를링에 의해, 폴리머에 공유결합으로 연결되는 아민기 또는 하이드록실기를 제공할 수 있다.

본 발명의 화합물에 있어서 R³ 치환체 또는 그에 대한 전구체는 클로르아세트아미도와 같은 할로알킬 또는 카르복시할로알킬 부분일 수 있다. 그러한 치환체는 할로겐을 아민으로 치환함으로써 아민을 가진 폴리머에 용이하게 결합될 수 있다.

본 명세서에서, 아릴은 방향족 탄화수소 또는 방향족 헤테로사이클릭 링 시스템으로부터 유래된 유기 잔기를 포함하는 의도로 사용된다. 따라서, 아릴기는 페닐 및 나프틸과 같은 비치환된 고리 잔기 및 그것의 치환된 형태를 포함한다. 헤테로사이클릭 또는 헤테로아릴 잔기는 피리딜, 옥사졸릴, 퀴놀릴, 티아졸릴과 같은 링 시스템에 하나 이상의 헤테로원자(예: N, O, S)를 포함하는 것 및 그것의 치환된 형태일 수 있다.

본 명세서에서, 알킬은 부착 위치에 탄소를 가진 지방족 및 사이클릭 유기 잔기를 포함하는 의도로 사용된다. 따라서, 알킬기는 식 C_nH_2n+1로 표시되는 비치환된 탄화수소 잔기 및 그것의 치환된 형태와 사이클릭 형태를 포함한다. 그러한 탄화수소는 일반적으로 탄소가 6개 미만인 저급 알킬류이다. 이보다 큰 알킬기도 사 용될 수 있는 것으로 이해된다. 알킬은 하나 이상의 동일 또는 상이한 후술하는 작용기를 가진 탄화수소 잔기를 포함하는 치환된 잔기를 포함한다.

전술한 알킬기 및 아릴기는 작용기로 치환될 수 있다. 그러한 작용기로는 합성방법에 의해 도입되어 안정한 화합물 만들어낼 수 있는 모든 화학기를 포함한다. 이러한 작용기의 예로는 하이드록실, 할로겐(플루오로, 클로로, 브로모), 아미노(알킬아미노 및 디알킬아미노를 포함함), 시아노, 니트로, 카르복시(카르브알콕시를 포함함), 카르바모일(N 알킬 및 N,N 알킬을 포함함), 설포, 알콜시, 알킬, 아릴, 아릴아조 및 하나 이상의 하기 화합물이 있다:

R₁ 및 R₂는 독립적으로 (=O) 또는 -OR 이고, R은 H 또는 (C1-C4)알킬이고, R₃ 는 H 또는 (C1-C4) 알킬이다. 바람직하기로는 R₃는 H 이다. 바람직하기로는, R₁ 및 R₂는 (=O) 또는 -OR 이다.

하나 이상의 하기 화합물 역시 포함된다.

X는 H 또는 두개의 X'가 두개의 황 원자와의 직접 결합을 나타내며; R₁ 은 (=O) 또는 -OH 이고, R₂는 H, Na, K 또는 (C1-C4)알킬이다. 특히, 이 화합물은 3-케토 리포익산, 3-하이드록시 리포익산, 3-케토 디하이드로리포익산 또는 3-하이드록시 디하이드로리포익산 일 수 있다.

하기 식으로 표시되는 1,2-디티올-3-티온 유도체:

R은 수소, 할로겐, 저급 알콕시기, 저급 알킬기, 아미노기, 저급 알킬치환된 아미노기 또는 저급 알콕시카르보닐기를 나타낸다. 저급이라는 용어는 본 명세서에서 메틸, 에틸, 프로필, 및 부틸 및 이들의 구조 이성체로서 이소프로필, 이소부틸 및 tert-부틸을 의미하는 것으로 사용된다,

상기 식으로 표시되는 화합물 중에서 바람직한 화합물로는 하기 화합물이 있 다:

5-(4-페닐-1,3-부타디에닐)-1,2-디티올-3-티온,

5-4(4-클로로페닐)-1,3-부타디에닐-1,2-디티올-3-티온,

5-{4(4-메톡시페닐)-1,3-부타디에닐}-1,2-디티올-3- 티온,

5-{4-(p-톨루일)-1,3-부타디에닐}-1,2-디티올-3-티온,

5-{4-(o-클로로페닐)-1,3- 부타디에닐}-1,2-디티올-3-티온, 및

5-{4-(m-(메틸페닐)-1,3-부타디에닐}-1,2-디티올-3-티온.

하기 화합물도 또한 포함된다:

및 하기 식으로 표시되는 1,2-디티올:

Het는 피리미딘-2-일, 피리미딘-2-일, 피리미딘-4-일, or 피리미딘-5-일, 또는 할로겐, C1-C4 알킬, C1-C4 알콕시, 머캅토, C1-C4 알킬티오, 각각의 알킬이 C1-C4인 디알킬아미노에 의해 치환된 상기 피리미딘-2-일, 피리미딘-2-일, 피리미딘-4-일, 또는 피리미딘-5-일을 나타내고, R은 할로겐, C1-C4 알킬, 알콕시가 C1-C4인 알콕시카르보닐에 의해 치환된 C1-C4 알킬, 카르복시, 알콕시가 C1-C4인 알콕시카르보닐, 카르바모일, 알킬이 C1-C4인 N-알킬카르바모일, 또는 R-CH(OH)이고, 여기서 R은 수소 또는 C1-C3의 알킬을 나타낸다.

N⁶벤질 아데노신 또는 그것의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그 또는 약학적으로 허용가능한 염의 예는 후술하기로 한다.

또 다른 실시예에 있어서, N⁶벤질 아데노신은 N⁶벤질 아데노신-5'-모노프스페이트이고, 이것은 화학식 3으로 표시되는 화합물로서 기재되어 있다. 이 화합물은 분자량이 437.215이고, 분자식이 C₁₇H₂₀N₅O₇P이다.

또 다른 실시예에서, N⁶벤질 아데노신은 (N⁶-벤질)아데닐-p-(N⁶-벤질)아데닐-p-( N⁶-벤질)아데노신이며, 이것은 하기 화학식 4로 표시되는 화합물이다. 이 화합물은 분자량이 1373.39이다.

카르복시메틸셀룰로스(CMC)는 셀룰로스 골격(backbone)을 구성하는 글루코피 라노스의 하이드록실기의 일부에 결합된 카르복시메틸기를 가진 셀룰로스 유도체이다.

본 명세서에 개시된 활성 화합물은 상기 부분에서 확인할 수 있듯이 이들의 약학적으로 허용가능한 염의 형태로 제조될 수 있다. 약학적으로 허용가능한 염은 모 화합물(parent compound)의 바람직한 생물학적 활성을 유지하면서 바람직하지 않은 독성 효과는 부여하지 않는 염이다. 약학적으로 허용가능한 염의 예가 문헌에 기재되어 있다(Berge et al., 1977, "Pharmaceutically Acceptable Salts," J. Pharm. Scl, Vol. 66, pp. 1-19).

본 명세서에 기재된 활성 화합물들은 용매화물의 형태로 제조될 수도 있다. "용매화물"이라는 용어는 본 명세서에서 통상적인 의미로서 용질(예: 활성 화합물 또는 활성 화합물의 염)과 용매의 복합체를 의미하는 것으로 사용된다. 용매가 물인 경우에는 용매화물을 편의상 수화물(hydrate), 예를 들어 헤미하이드레이트, 모노하이드레이트, 디하이드레이트, 트리하이드레이트, 테트라하이드레이트 등으로 칭할 수도 있다.

본 발명은 또한 대사작용이나 가수분해에 의해 생물학적 활성 화합물로 전환될 수 있는, 본 발명의 화합물의 프로드러그도 포함한다. 임의의 화합물의 프로드러그는 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자들에게 알려진 약리학적 기법을 이용하여 만들어질 수 있다.

대사물은 본 발명의 화합물을 대상체에게 투여한 후 예를 들어 이 화합물의 분자재배치 또는 가수분해에 의한 대사작용을 통해 만들어질 수 있다.

본 발명은 또한 전술한 화합물의 요도 이외에도 그러한 화합물의 동족체(homologue) 및 유사체의 용도도 포함한다. 본 명세서에서, 동족체는 전술한 화합물에 대해 실질적인 구조적 유사성을 가진 분자이고, 유사체는 구조적 유사성에 관계 없이 실질적인 생물학적 유사성을 가진 분자이다.

본 발명은 또한 본 발명의 치료 요법을 수행하기 위한 키트를 제공한다. 이러한 키트는 하나 이상의 용기에 치료학적 유효량의 본 발명의 조성물을 약학적으로 허용가능한 형태로 포함할 수 있다. 이러한 키트는 또한 본 발명의 조성물의 이용방법 또는 본 발명의 방법의 효능에 대한 설명서를 더 포함할 수 있으며, 점막염을 칠하는데 적절한 정보를 의사에게 제공하기 위한 정보지를 더 포함할 수 있다.

본 명세서에서, "대상체"란 용어는 동물, 바람직하기로는 포유동물, 특히 인간을 의미한다. 실시예에 있어서, 대상체는 포유동물, 특히 인간으로서 예를 들어 화학요법 또는 방사선요법과 같은 방사선요법을 위해 방사선에 노출되었거나 노출될 예정인 인간을 의미한다.

본 발명의 조성물은 비경구 방식으로 투여되는 것이 적절하다. 비경구 투여는 정맥내투여 또는 피하투여일 수 있다. 또 다른 실시예에서, 투여 경로는 좌약, 경피 또는 경점막 투여를 이용한 직장일 수 있다.

실시예에 있어서, 점막염, 체중 감소 및/또는 악액질의 치료 및/또는 예방을 위한 조성물은 구강 및 설하 투여를 포함하여 국소 적용에 의해 투여될 수 있으며, 이로만 제한되는 것은 아니다. 국소 투여용으로 적합한 제형은 크림, 젤, 젤리, 고무풀(mucliage), 페이스트 및 연고를 포함한다. 실시예에 있어서, 상기 조성물은 예를 들어 경피 패치의 형태로 경피투여용으로 제형화될 수 있다.

점막염, 및/또는 체중 감소의 치료 및/또는 예방을 위한 조성물의 유효량은 단일 투여량(dosage) 요법 또는 다중 투여량 요법으로 제공될 수 있다.

실시예에 있어서, 상기 조성물은 예를 들어 구강 린스의 형태로 경구투여될 수 있으며, 또는 구강 또는 비강 흡입을 통한 에어로졸로서 허파에 투여될 수 있다. 구강 또는 비강 흡입 경로를 통한 투여의 경우에는, 활성 성분이 적절한 약학적 제형으로 되어 있어서, 예를 들어 흡입기 또는 의료용 분무기와 같은 기계적인 형태의 기구를 이용하여 전달될 수 있다.

정맥내 주사의 경우, 활성 성분은, 발열원을 가지지 않으며, 적정 pH, 등장성 및 안정성을 가지는, 비경구로 허용가능한 수용액 형태로 되어 있을 것이다. 예컨대 소듐 클로라이드 주사액, 링거 주사액 및 락테이트화된 링거액과 같은 등장성 비히클을 이용하여 적절한 용액을 제조하는 방법은 당해 기술분야의 통상의 지식을 가진 자들에게 공지되어 있다. 필요에 따라, 보존제, 안정화제, 완충제, 항산화제 및/또는 그외 첨가제를 포함시킬 수 있다.

경구 투여용 약학적 조성물은 정제, 캡슐, 분말 또는 액체 형태일 수 있다. 정제는 젤라틴 또는 보강제와 같은 고형 담체(carrier)를 포함할 수 있다. 액체상 약학적 조성물은 일반적으로 물, 페트롤륨, 동물성 오일, 식물성 오일, 미네랄 오일 또는 합성 오일 등의 액체 담체를 포함한다. 생리 식염수, 덱스트로스, 또는 그외 당 용액 또는 에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜 또는 폴리에틸렌 글리콜과 같 은 글리콜이 포함될 수도 있다.

여러가지 전달 시스템이 공지되어 있어서 본 발명의 조성물을 투여하는데 이용될 수 있다. 특히, 상기 조성물은 혈액 등의 특정 조직에 위치시키는 미세구, 리포좀 또는 그외 미세미립자 전달 시스템 또는 서방형 제형을 통해 투여될 수 있다. 서방형 담체의 적절한 예로는 예를 들어 좌약 또는 마이크로캡슐 등의 조제물(shared article) 형태의 반투과성 폴리머 매트릭스를 포함한다 폴리액티드와 같은 주입형 또는 마이크로캡슐형의 서방성 매트릭스도 제공된다.

본 발명에 따라 사용될 수 있는 전술한 기법 및 프로토콜 및 그외 기법과 프로토콜에 언급된 기법과 프로토콜의 예들은 문헌에서 확인할 수 있다(Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th edition, Gennaro, A.R., Lippincott Williams & Wilkins; 20th edition (December 15, 2000) ISBN 0-912734-04-3 및 Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems; Ansel, H.C. et al. 7th Edition ISBN 0-683305-72-7). 상기 문헌에 기술된 전체 내용은 원용에 의해 본 명세서에 포함된다.

바람직하기로는, 본 발명의 조성물은 후술하는 부분에 정의되어 있는 "치료학적 유효량"으로 개체에게 투여된다. 이러한 효과를 얻기 위해 개체에게 투여되는 실제량과 투여 속도 및 타임-코스(time course)는, 치료중인 병태의 특성 및 중증도 및 치료할 환자의 연령, 성별, 체중과 같은 인자 및 투여 경로에 따라 결정될 것이다. 상기 조성물의 독성 및 효능은 표준 약학적 방법에 의해 결정될 수 있다.

달리 정의되어 있지 않은 한, 본 명세서에 사용된 모든 기술적인 용어와 과 학적인 용어는 본 발명의 기술분야에서 통상의 지식을 지닌 자들에게 통상적으로 이해되는 의미를 가진다.

본 명세서에 기재된 화합물은 "다른 형태"의 상기 화합물도 포함하며, 이러한 다른 형태로는 이온성, 염, 용매화물 및 치환기가 보호된 형태를 포함한다. 예를 들어, 카르복시산(-COOH)은 음이온성(카르복실레이트) 형태(-COO), 그것의 염 또는 용매화물 및 통상적인 보호된 형태도 포함한다. 마찬가지로, 아미노기는 아미노기의 통상적인 보호된 형태를 포함한다. 마찬가지로 하이드록실기는 음이온성 형태(-O-), 그것의 염 또는 용매화물 및 통상의 보호된 형태도 포함한다.

어떤 화합물들은 하나 이상의 특정 기하학적, 광학적, 에난쇼머성, 디아스테레오머성, 에피머성, 아트로피성(atropic), 스테레오아이소머, 토토머, 입체구조적 또는 아노머 형태로 존재할 수 있으며, 그 예는 cis- 및 trans-형태, E- 및 Z-형태, c-, t- and r-형태, 엔도 및 엑소-형태, R-, S- 및 메조 형태, 0- 및 L-형태, d- 및 1- 형태, (+) 및 (-) 형태, 케노-, 에놀- 및 에놀레이트-형태, syn 및 anti-형태, 향사(synclinal) 및 배사(anticlinal) 형태, 알파 및 베타 형태, 엑시알 및 축방향(axial) 및 수평방향(equatorial) 형태, 보트-, 체어-, 트위스트-, 엔빌롭-, 및 ㅎ하프체어-형태, 및 이들의 조합을 포함하며, 여기서는 총칭하여 아이소머 또는 아이소머 형태라고 한다.

달리 기재되어 있지 않은 한, 특정 화합물이란 의미는 (완전한 또는 부분적인) 라세미 혼합물 또는 그외 그들의 혼합물을 포함하여 상기 모든 아이소머 형태를 ㅍg함한다. 그러한 아이소머 형태들의 제조방법(예: 비대칭 합성) 및 분리방 법(예: 분별 결정화 및 크로마토그라피)은 당해 기술분야에서 공지되어 있거나 또는 용이하게 이용될 수 있다. 달리 기재되어 있지 않은 한, 특정 화합물이란 의미는 그 화합물의 이온성 형태, 염 형태, 용매화물 형태, 보호된 형태도 포함하는 것이다.

"치환된" 또는 "선택적으로 치환된" 이라는 용어는 본 명세서에서 비치환 또는 치환가능한 패런트기(parent grou)을 의미한다. 달리 기재되어 있지 않은 한, 본 명세서에서 "치환된"이란 용어는 하나 이상의 치환체를 가진 패런트기와 관련하여 사용된다. "치환체"란 용어는 통상적인 의미로 사용되며 패런트기에 부착된, 또는 적절하다면 패런트기에 결합된 화학적 모이어티를 의미한다. 광범위한 치환체가 공지되어 있으며, 이들의 형성방법 및 다양한 패런트기로의 도입방법도 당해 기술분야의 통상의 지식을 가진 자들에게 공지되어 있다.

명세서 전체에서, 문맥상 달리 요구되지 않는 한, 용어 '포함한다('comprise' 또는 'include')' 또는 '포함한다(comprises)', '포함하는(comprising)', '포함한다(includes)' 또는 '포함하는(including)'과 같은 변형어는 명시된 정수, 정수들의 그룹을 포함하는 것으로 이해되며, 그외 정수 또는 정수의 그룹을 제외하는 것은 아닌 것으로 이해될 것이다.

본 명세서에서, "하나(a, an)" 및 "그것(the)"은 문맥상 명확하게 언급되지 않은 한 단수형과 복수형을 모두 포함한다. 따라서, 예를 들어, "활성 물질" 또는 "약학적으로 활성인 물질"은 단일의 활성 물질 뿐만 아니라 2종 이상의 여러가지 활성 물질의 조합을 포함하며, 담체는 단일의 담체 뿐만 아니라 2종 이상의 담체들 의 혼합을 포함한다.

본 명세서에서 "치료학적 유효량"이란 용어는 대상체에게 유익한 효과를 나타내는데 충분한 조성물의 양을 의미한다. 특히, 유익한 효과는 점막염과 관련된 한가지 이상의 증상의 치료, 일부 치료 또는 개선일 수 있다. 점막염의 예방의 경우에, "치료학적 유효량"은 점막염 또는 그것의 적어도 한 가지 이상의 증상의 초기 발생, 진행 또는 재발을 방지 또는 억제하는데 필요한 조성물의 양을 의미한다.

본 명세서에서, "치료"라는 용어와 "치료하다" 및 "치료하는"과 같은 관련 용어는 점막염의 진행, 중증도 및/또는 지속기간을 감소시키고 점막염의 적어도 한 가지 이상의 증상을 개선하거나 또는 체중 감소/악액질을 경감시키거나 또는 예방하는 것을 의미한다. 따라서, "치료"라는 용어는 대상체에게 유익한 효과를 줄 수 있는 모든 요법을 의미한다. 치료는 현재 존재하는 병태에 대한 것일 수 있거나 또는 예방(예방적 치료)일 수 있다. 치료는 치료 효과, 개선 효과 또는 예방 효과를 포함할 수 있다. 본 명세서에서 "치료적" 및 "예방적" 치료는, 가장 넓은 의미로 고려되어야 한다. "치료적"이라는 용어는 반드시 대상체가 완전히 회복될 때까지 또는 체중 감소나 악액질이 발생되지 않을 때까지 대상체를 치료하는 것을 의미하는 것은 아니다. 마찬가지로, "예방적"은 반드시 대상체가 궁극적으로 점막염 또는 악액질에 걸리지 않을 것이라든가 또는 체중 감소를 겪지 않을 것이라는 것을 의미하는 것은 아니다. 따라서, 치료적 및 예방적 치료는 점막염의 증상을 개선하고, 점막염, 악액질 및/또는 체중 감소의 위험성을 방지하거나 경감시키는 것을 포함한다. "예방적"이라는 용어는 점막염, 악액질 및/또는 체중 감소의 중증도 또는 발생을 경감시키는 것이고, "치료적"이라는 용어는 현재 존재하는 점막염, 악액질 및/또는 체중 감소의 중증도를 경감시키는 것으로 간주될 수 있다.

이하, 본 발명은 예시의 목적으로 제공될 뿐 본 발명을 한정하는 것으로 해석될 의도로 제공되는 것이 아닌 하기 실시예들과, 또한 도면을 참조하여 설명될 것이다.

실시예 1: 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온(올티프라즈)의 방사선 방호 효능에 대한 평가

이 실시예에서는, 방사선 방호제로서 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온(올티프라즈)의 효능 및 안전성에 대해 평가했다.

급성 독성 연구

동물들을 18시간 동안 굶긴 다음 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온(올티프라즈)를 0, 100, 200, 400, 500, 600, 700, 800, 1000, 1250, 1500, 1750 및 2000 mg/kg의 양으로 투여한 후 14일 동안 관찰했다.

치료 그룹 1- CMC 및 방사선 조사

그룹 1의 동물들에게 10 Gy의 감마 방사선에 노출시키기 전에 0.5% 카르복시메틸셀룰로스(CMC)를 경구투여했다.

치료 그룹 2 - 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 및 방사선 조사

그룹 2의 동물들에게 10 Gy의 감마 방사선에 노출시키기 전에 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온을 5, 10, 25, 50, 100, 150, 200 또는 250 mg/kg의 양으로 회l 경구투여하였다.

방사선 조사

CMC 또는 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온을 투여하고 나서 1시간 후, 특수설계된 통풍이 잘되는 아크릴 박스 내에서 구속장치(restrainer)에 코튼플러그를 삽입하여 동물을 눕혀 고정시킨 상태에서 전신을 ⁶⁰Co 감마 방사선 (Theratro, Atomic Energy Agency, 캐나다)에 노출시켰다. 매회 1.33 Gy/min의 조사량으로 10 마리의 동물에 방사선 처리를 실시하였다.

결과

급성 독성 연구

상이한 투여량의 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온을 투여한 동물에 있어서, 2 g/kg 까지 어떠한 독성효과의 흔적도 나타나지 않았았으며, 14일 경과시점까지 사망하는 동물은 한 마리도 없었다. 그러므로, 2 g까지의 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온은 투여용으로 완전히 안전한 것으로 나타났다. 약물의 용해 문제로 인해 그 이상의 투여량에 대해서는 평가할 수 없었다.

5-[2-피라지닐]-4-메틸의 방사선 방호 효능에 대해서는, 10 Gy 감마 방사선에 전신 노출시키기 전에 쥐에게 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온을 5, 10, 25, 50, 100, 150, 200 및 250 mg/kg(체중)의 양으로 투여함으로써 평가하였다. 방사선 조사 후, 방사선으로 인한 질병의 증상과 사망의 발생에 대해 30일 동안 매일 동물들을 모니터링 하였다.

CMC와 10 Gy 방사선 노출 그룹에서는 음식물 및 물의 섭취 감소, 과민성, 졸음, 체중 감소, 설사, 눈물흘림, 안면 부종, 쇠약, 탈모와 같은 심각한 방사선 질병의 증상들이 유도되었다. CMC 및 방사선 조사 그룹에서 첫번째 사망은 4일째에 관찰되었으며, 방사선 조사로부터 18일 경과시점까지 방사선 처리된 모든 동물이 사망하였다.

다양한 투여량의 5-[2-피라지닐]-4-메틸로 쥐를 미리 처리한 경우에는 방사선 질병의 증상의 심각성이 지연되거나 경감되었다. 방사선에 의해 유발된 사망의 발생 도CMC 및 방사선 조사 그룹과 비교해 볼 때 5-[2-피라지닐]-4-메틸 및 방사선 조사 그룹에서는 지연되었다. 100 mg/kg의 5-[2-피라지닐]-4-메틸을 처리한 그룹에서 가장 장기간의 지연이 관찰되었는데, 이 경우 방사선 조사 후 11일째 되는 날에 첫번째 사망이 관찰되었으며(도 1 참조), 이는 위장관 증후가 완전히 예방된 것을 의미한다. 반면, 가장 단기간의 지연은 5 mg/kg의 5-[2-피라지닐]-4-메틸을 처리한 그룹에서 관찰되었는데, 이 경우 방사선 조사 후 7일째 되는 날에 첫번째 사망이 관찰되었다(도 1 참조). 이러한 사망 발생의 지연은 다른 투여량의 5-[2-피라지닐]-4-메틸 그룹에서도 관찰되었다.

다양한 투여량의 5-[2-피라지닐]-4-메틸로 쥐를 처리한 경우에, 방사선에 의해 유발되는 위장관의 손상이 방지되었는데, 이는 실험한 모든 투여량의 5-[2-피라지닐]-4-메틸 처리 그룹에서 10일 생존율이 증가한 것에 의해 증명된다 (도 2 참조). 150 mg/kg 및 200 mg/kg의 5-[2-피라지닐]-4-메틸를 투여한 경우에는 방사선 조사 후 10일 이내에는 사망이 전혀 발생하지 않았다 (도 2 참조). 30일-생존율을 분석해 보면 방사선 조사된 동물의 생존율이 100 mg/kg의 투여량까지는 5-[2-피라지닐]-4-메틸 투여량 의존적으로 증가했는데, 생존한 쥐가 없었던 CMC 및 방사선 조사 그룹과 비교하여 최고 60%의 생존율이 관찰되었다 (도 2 참조). 100 mg/kg의 5-[2-피라지닐]-4-메틸 및 방사선 조사 그룹과 비교할 때, 약물 투여량이 150 mg 및 200 mg으로 증가하면 동물 생존율은 20% 감소되는 반면, 250 mg/kg으로 증가되면 생존율 감소는 30% 인 것으로 나타났다 (도 2 참조). 가장 낮은 투여량인 10, 25 및 50 mg/kg의 5-[2-피라지닐]-4-메틸 치료그룹에서도, 생존한 쥐가 없었던 CMC 및 방사선 조사 그룹과 비교할 때, 생존율이 각각 20, 30 및 40% 증가되었다. 10 Gy에 노출되기 이전에 50, 100, 150 및 200 mg의 5-[2-피라지닐]-4-메틸를 투여한 동물에서만 생존율의 유의적인 증가가 관찰되었다 (p＞0.05).

본 실시예는 경구투여된 5-[2-피라지닐]-4-메틸가 방사선 유도성 질병과 사망으로부터 쥐를 방호한 것을 나타낸다. 100 mg/kg 투여 그룹에서 5-[2-피라지닐]-4-메틸이 투여되지 않은 방사선 조사 그룹(대조군)과 비교할 때, 60%의 생존율 증가를 초래했기 때문에 다른 투여량과 비교하여 100 mg/kg이 최적의 투여량인 것으로 밝혀졌다.

실시예 2: N ⁶ -이소펜테닐 아데노신의 방사선 방호 효능에 대한 평가

이 실시예에서는, 방사선 방호제로서 N⁶-이소펜테닐 아데노신(6-감마-디메틸 알릴 아미노 퓨린 리보스(DAPR)로도 알려져 있음)의 효능 및 안전성에 대해 평가했다.

급성 독성 연구

동물들을 18시간 동안 굶긴 다음 DAPR을 0, 100, 200, 400, 500, 600, 700, 800, 1000, 1250, 1500, 1750 및 2000 mg/kg의 양으로 투여한 후 14일 동안 관찰했다.

치료 그룹 1- CMC 및 방사선 조사

치료 그룹 2 - DAPR 및 방사선 조사

그룹 2의 동물들에게 10 Gy의 감마 방사선에 노출시키기 전에 DAPR을 5, 10, 25, 50, 100, 150, 200 또는 250 mg/kg(체중)의 양으로 1회 경구투여하였다.

방사선 조사

CMC 또는 DAPR을 투여하고 나서 1시간 후, 특수설계된 통풍이 잘되는 아크릴 박스 내에서 구속장치(restrainer)에 코튼플러그를 삽입하여 동물을 눕혀 고정시킨 상태에서 전신을 ⁶⁰Co 감마 방사선 (Theratro, Atomic Energy Agency, 캐나다)에 노출시켰다. 매회 1.33 Gy/min의 조사량으로 10 마리의 동물에 방사선 처리를 실시하였다.

결과

급성 독성 연구

상이한 투여량의 DAPR을 투여한 동물에 있어서, 2 g/kg 까지 어떠한 독성효 과의 흔적도 나타나지 않았았으며, 14일 경과시점까지 사망하는 동물은 한 마리도 없었다. 그러므로, 2 g까지의 DAPR은 투여용으로 완전히 안전한 것으로 나타났다. 약물의 용해 문제로 인해 그 이상의 투여량에 대해서는 평가할 수 없었다.

처음에는 1, 5 및 10 mg/kg DAPR에 대해서도 평가하였다. 그러나, 방사선 조사 후 생존율의 변화는 없었다. 그러므로, 후속 평가 실험에서는 이러한 투여량에 대해서는 실험을 실시하지 않았다. DAPR의 방사선 방호 효능에 대해서는, 10 Gy 감마 방사선에 전신 노출시키기 전에 쥐에게 DAPR을 0, 25, 50, 100, 150, 200 및 250 mg/kg(체중)의 양으로 투여함으로써 평가하였다.

방사선 조사 후, 방사선으로 인한 질병의 증상과 사망의 발생에 대해 30일 동안 매일 동물들을 모니터링 하였다. CMC와 10 Gy 방사선 노출 그룹에서는 음식물 및 물의 섭취 감소, 과민성, 졸음, 체중 감소, 설사, 눈물흘림, 안면 부종, 쇠약, 탈모와 같은 심각한 방사선 질병의 증상들이 유도되었다. CMC 및 방사선 조사 그룹에서 첫번째 사망은 4일째에 관찰되었으며, 방사선 조사로부터 18일 경과시점까지 방사선 처리된 모든 동물이 사망하였다 (도 3 참조).

다양한 투여량의 DAPR로 쥐를 미리 처리한 경우에는 방사선 질병의 증상의 심각성이 지연되거나 경감되었다. 방사선에 의해 유발된 사망의 발생 도CMC 및 방사선 조사 그룹과 비교해 볼 때 DAPR 및 방사선 조사 그룹에서는 지연되었다. 150 mg/kg의 DAPR을 처리한 그룹에서 가장 장기간의 지연이 관찰되었는데, 이 경우 방사선 조사 후 11일째 되는 날에 첫번째 사망이 관찰되었으며(도 3 참조), 이는 위장관 증후가 완전히 예방된 것을 의미한다. 반면, 가장 단기간의 지연은 25 mg/kg 의 DAPR을 처리한 그룹에서 관찰되었는데, 이 경우 방사선 조사 후 7일째 되는 날에 첫번째 사망이 관찰되었다(도 3 참조). 이러한 사망 발생의 지연은 다른 투여량의 DAPR 그룹에서도 관찰되었다.

다양한 투여량의 DAPR로 쥐를 처리한 경우에, 방사선에 의해 유발되는 위장관의 손상이 방지되었는데, 이는 실험한 모든 투여량의 DAPR 처리 그룹에서 10일 생존율이 증가한 것에 의해 증명된다 (도 4 참조). 150 mg/kg DAPR을 투여한 경우에는 방사선 조사 후 10일 이내에는 사망이 전혀 발생하지 않았다 (도 4 참조). 30일-생존율을 분석해 보면 방사선 조사된 동물의 생존율이 150 mg/kg의 투여량까지는 DAPR 투여량 의존적으로 증가했는데, 생존한 쥐가 없었던 CMC 및 방사선 조사 그룹과 비교하여 최고 60%의 생존율이 관찰되었다 (도 4 참조). 150 mg/kg의 DAPR 및 방사선 조사 그룹과 비교할 때, 약물 투여량이 200 mg 및 250 mg으로 증가하면 동물 생존율은 20% 및 30% 감소되는 것으로 나타났다 (도 4 참조). 가장 낮은 투여량인 25 mg/kg의 DAPR 치료그룹에서도, 생존한 쥐가 없었던 CMC 및 방사선 조사 그룹과 비교할 때, 생존율이 30% 증가되었다. 10 Gy에 노출되기 이전에 50, 100, 150 및 200 mg/kg의 DAPR을 투여한 동물에서만 생존율의 유의적인 증가가 관찰되었다 (p＞0.05).

본 실시예는, 2 g/kg까지는 독성 부작용이 관찰되지 않았기 때문에 이 투여량까지는 DAPR이 완전히 안전하며, 모든 실험된 투여량으로 경구투여된 DAPR에서 방사선 유도성 질병과 사망으로부터 쥐가 방호된 것을 나타낸다. 그러나, 다른 투여량과 비교하여 150 mg/kg이 생존율을 60% 증가시킨 점에서 최적의 투여량인 것으 로 밝혀졌다.

실시예 3: 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온(올티프라즈)의 방사선방호 효과

동물

이 실험에서는, 선천적인 콜로니(inbred colony)(델리의 Hamadard University로부터 입수함)로부터 체중이 25±3 g인 6-8주령의 수컷 스위스 알비노 주(Mus musculus)를 사용했다. 동물 수용소에서 온도와 빛이 제어된 조건하에 동물을 유지하여 표준 쥐 사료(Hindustan Lever's Ltd., 델리, 인디아)와 물을 임의로 공급했다.

방사선 조사

방사선 조사를 위해, 암치료센터(방사선요법부, SMS MEdical College & Hospital, 자이푸르, 인디아)에서 코발트 텔레테라피 유닛(ATC-C9)을 이용했다. 통풍이 잘되는 퍼스펙스(perspex) 박스에 마취되지 않은 동물을 가두고, 1.33 Gy/min의 조사량을 공급하도록 방사선 소스로부터 77.5 cm의 거리(SSD)에서 전신을 감마 방사선에 노출시켰다.

급성 약물 독성

올티프라즈(5-[2-피라지닐]-4-메틸)의 급성 독성을 측정하기 위해, 동물들을 10마리씩 4개의 그룹으로 나누고 올티프라즈(5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3- 티온)를 50, 100, 200, 또는 400 mg/kg(체중)/day의 양으로 2일 동안 경구투여하였다. 사망율 및 기타 다른 형태로 올티프라즈(5-[2-피라지닐]-4-메틸)의 독성효과를 측정하기 위해 30일 동안 계속 동물들을 관찰했다.

방사선 방호를 위한 올티프라즈(5-[2-피라지닐]-4-메틸)의 최적 투여량의 결정

방사선 방호를 위한 올티프라즈(5-[2-피라지닐]-4-메틸)의 최적 투여량을 선택하기 위해, 동물들에게 올티프라즈(5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온)를 50, 100, 200, 또는 400 mg/kg(체중)/day의 양으로 2일 동안 투여하였다. 마지막 투여시점으로부터 30분 후, 동물들을 8 Gy 감마 방사선에 노출시켰다. 방사선 조사 후 30일 동안 동물의 생존에 대해 기록하였다. 방사선에 노출시키고 30분 후에, 간 및 혈액 중의 환원된 글루타티온(GSH) 및 지질 과산화(LPO) 수준을 평가하였다.

환원된 글루타티온(GSH) 분석

환원된 글루타티온(GSH)의 간수치(hepatic level)를 표준 방법에 따라 측정하였다. 혈액 중의 GSH는 발색제로서 엘망시약(Ellman's reagent: DTNB)을 이용하여 스펙트로포토미터로 측정했다. UV-VIS Systronics 스펙트로미터를 사용하여 412 nm에서의 흡광도를 기록했다.

지질 과산화(LPO) 분석

간과 혈청 중의 지질 과산화 수준을 티오바비튜르산 반응성 물질(Thiobarbituric Acid Reactive Substances: TABRS)을 이용하여 측정했다. 532 nm에서의 흡광도를 기록했다.

투여량 감소 인자 (Dose Reduction Factor: DRF)

임의의 제제(화학제제 또는 식물 추출물)의 방호 성능은 투여량 감소 인자(DRF)로서 표현된다. 실험 동물그룹의 LD_50/30을 대조 동물그룹의 LD_50/30로 나눔으로써 DRF가 계산될 수 있다.

대조 동물그룹 (방사선만 처리함)

6, 8, 및 10 Gy 감마 방사선에 노출시킨 다음 30일 동안 관찰하여 사망율과 방사선 질병의 증상에 대해 기록하였다.

실험 동물그룹 (올티프라즈(5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온)) 및 방사선 조사

이 그룹의 동물들에게 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온을 100 mg/kg(체중)/day의 양으로 2일동안 투여하고, 마지막 투여 후 6, 8 및 10 Gy의 감마 방사선에 노출시켰다. 대조 동물그룹의 경우와 마찬가지 방법으로 이 그룹의 동물에 대해 30일 동안 관찰하여 사망율과 방사선 질병의 증상에 대해 기록하였다.

체중

모든 동물그룹에 대해 일반적인 상태와 체중을 매일 관찰하였다. 각각의 쥐 그룹에 대해서, 치료 첫째 날의 쥐의 체중의 평균값으로 나눔으로써 체중의 변화율(백분율)을 매일 기록하였다.

내인성 비장 콜로니 분석

표준 방법(Till and McCulloch)에 따라 내인성 비장 콜로니 분석을 실시하였다. 방사선 조사 후 10일째 되는 날에 내인성 비장 콜로니 형성 유닛(CFU-S)을 측정했다. 경부 탈구에 의해 동물을 사망시켰다. 비장을 분리해 내어 무게를 달고 고정액(Bouin's fixative)으로 고정시켰다. 비장의 표면상에서 육안으로 관찰가능한 혹(nodule)을 육안으로 계수하였다. .

생존율 분석

6, 8, 및 10 Gy 감마 방사선에 노출된 양쪽 그룹(대조그룹 및 실험그룹)에 대해서, 30일 동안 매일 조사하여, 각각의 방사선 투여량에 대한 노출 후 30일 생존하는 동물의 백분율을 이용하여 생존율-투여량 반응 곡선을 작성했다.

비장에 있어서의 양적 변화

비장의 양적 변화를 연구하기 위해, 각각의 생검 간격(방사선 조사 후, 1, 3, 7, 10, 14일 및 30일째 되는 날)으로 비장의 무게를 측정했다.

통계학적 분석

실험에서 얻은 결과달은 평균 ±SE로 표현되어 있다. 그룹간의 통계학적 비교를 위해 "t" 테스트(Student's t test)를 이용했다. 유의수준은 P ＜ 0.01 및 P ＜ 0.001로 했다. LD_50/30 수치와 투여량 감소 인자(DRF)를구하기 위해 회귀분석을 실시했다.

염색체 이상에 대한 분석

실험의 마무리 시점에서 염색체 이상에 대한 분석을 통해 골수 세포에서의 세포유전학적 손상에 대해 연구했다. 모든 동물에 대해 0.026% 콜히친을 복막내 주사(i.p.)하여 2 시간 후 경부 탈구에 의해 사망시켰다. 양쪽 대퇴골을 절개하여 분리하였다. 공기 건조 방식으로 메타페이스 플레이트를 준비하였다. 대퇴골의 골수를 흡입해 내어 생리 식염수로 세척하고 저장액(0.6% 시트르산 나트륨)으로 처리하여 3:1 메탄올:아세트산으로 고정한 다음 건조시켜 4% 김자(Giemsa: Sigma, 미국)으로 로 염색하였다. 광현미경하에서 염색체 이상을 계수하였다. 동물당 총 400 개의 메타페이스 플레이트에 대해 계수하였다. 크로마티드 절단, 염색체 절단, 단편화, 고리화, 교환 및 동원체가 2개인 것 등의 다양한 염색체 이상을 계수했다. 양쪽 크로마티드에 절단이 있는 경우에는 염색체형 이상으로 칭하고, 크로마티드형 이상은 하나의 크로마티드에만 이상이 있는 경우로 하였다. 결절된 부분이 특정 염색체와 뚜렷한 관계가 없는 경우에는 단편으로 칭하였다.

결과

방사선에 의해 유발된 질병, 체중의 변화, 비장 콜로니 및 동물 생존율에 대한 올티프라즈(5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온)의 방사선 방호 효능을 스위스 알비노 쥐를 이용하여 연구하였다. 2일 동안 연속하여 올티프라즈(5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온)를 처리한 쥐에서는 어떠한 독성 효과도 발생하지 않았다. 오히려, 이들 쥐에서는 모조 방사선 처리된(sham irradiated) (정상) 동물과 비교하여 30일 시점에서 체중의 증가가 나타났다.

최대 방사선 방호 효과를 나타내는 올티프라즈(5-[2-피라지닐]-4-메틸)의 최 적 투여량은 방사선 조사 전 2일 동안 연속으로 투여하는 경우 100 mg/kg(체중)/day인 것으로 나타났다 (도 5 참조).

정상 동물 및 올리프라즈(5-[2-피라지닐]-4-메틸) 처리 동물에서는 간 및 혈액 중의 GSH 농도에 있어서 유의적인 변화가 관찰되지 않았다 (표 2). 그러나, 대조 동물그룹(방사선 처리만 실시함)에서는 GSH 농도에 있어서 유의적인 감소가 관찰된 반면, 실험 동물그룹에서는 대조 동물그룹과 비교하여 여러가지 올리프라즈(5-[2-피라지닐]-4-메틸) 농도에서 GSH 농도(간 및 혈액 중 농도)의 유의적인 증가가 나타났다 (표 2). GSH 농도의 최대 증가는 100 mg/kg(체중)/day의 양의 올리프라즈(5-[2-피라지닐]-4-메틸)로 미리 처리된 동물그룹에서 관찰되었다.

간 및 혈청 중의 TBARS 수준의 증가는 정상 동물들과 비교하여 대조 동물그룹에서 분명히 나타났으며, 정상 동물과 올티프라즈(5-[2-피라지닐]-4-메틸) 처리된 동물그룹 간에 이러한 수준에 ㅇ있어서 유의적인 차이는 관찰되지 않았다. 올티프라즈(5-[2-피라지닐]-4-메틸)를 미리 처리하고 방사선 조사된 동물그룹에서 유의적인 투여량 의존적 감소가 관찰되었다. 그러나, LPO 수준에 있어서의 최대 감소는 100 mg/kg(체중)/day의 양의 올리프라즈(5-[2-피라지닐]-4-메틸)로 미리 처리된 동물그룹에서 측정되었다.

본 연구에서, 올티프라즈(5-[2-피라지닐]-4-메틸)로 미리 처리한 경우에는 다양한 조사량의 감마 방사선에 노출된 쥐의 생존율이 개선되는 것으로 관찰되었다 (도 5 참조). 졸음, 설사, 체중 감소, 헝클어진 털, 탈모, 안면 부종 및 식욕 감퇴와 같은 방사선 질병의 징후가 여러가지 조사량의 감마 방사선에 노출된 동물(대 조 동물그룹)에서 관찰되었다. 방사선 질병의 중증도는 조사량 의존적이며, 6 Gy로 조사한 경우에는 30일 이내에 38%의 동물이 사망하고, 8 Gy와 10 Gy에 노출시킨 경우에는 대조 동물그룹에서 각각 14일째와 10일째 되는 날에 사망율이100%인 것으로 관찰되었다 (도 7 참조). 6 Gy에 노출되기 전에 100 mg/kg(체중)/day의 양의 올리프라즈(5-[2-피라지닐]-4-메틸)로 처리된 동물그룹에서는 방사선 질명이 관찰되지 않았다. 그러나, 8 Gy 및 10 Gy 방사선에 노출된 후에는 각각의 대조군과 비교하여 방사선 질명의 중증도는 훨씬 덜했다. 6 Gy 실험그룹에서의 생존율은 100% 였으나, 8 Gy 및 10 Gy 실험그룹에서는 각각 61%와 20%로 생존율이 감소되었다 (도 7 참조).

생존율 데이터에 대한 회귀분석 결과는 대조동물그룹과 실험동몰그룹에 대해 LD_50/30이 각각 6.24 Gy와 8.82 Gy인 것으로 나타났다. LD_50/30수치를 토대로 DRF는 1.25로 계산되었다.

대조그룹에서는 최대 체중 감소가 24%, 최소 체중 감소가 13.5% 인데 반해, 각각의 실험그룹에서는 22.5%와 1.7% 였다. 이뿐만 아니라, 실험동물군은 방사선 조사시점으로부터 30일째 되는 날의 체중이 첫째 날의 체중에 비해 17%(6 Gy), 9.5%(8 Gy) 및 13.7%(10Gy)의 체중 증가를 보여주었다.

내인성 비장 콜로니 분석과 비장 무게 변화 분석을 통해 간 조직의 방사선에 의한 손상에 대한 올티프라즈(5-[2-피라지닐]-4-메틸)의 방호 효과에 대해서 평가하였다. 올티프라즈(5-[2-피라지닐]-4-메틸)로 미리 처리된 쥐의 경우에는 방사선 만 처리된 쥐에 비해 비장 콜로니의 수가 유의적으로 증가하였다 (표 3). 비장 무게 변화의 패턴은 모든 대조 동물그룹(방사선만 처리됨)에서 방사선 조사 후 7일째 되는 날까지 유사하였으나, 비장 무게의 감소가 조사량 의존적인 것으로 나타났는데, 즉 방사선 조사량이 높아질수록 무게 감소가 증가하였다. 최대 체중 감소는 조직 무게의 증가가 기록된 후 7일째 되는 날에 관찰되었다. 또한, 비장의 무게 증가가 관찰되었는데, 이는 14일째 되는 날에 정상의 것보다 더 컸으며, 6 Gy로 방사선 처리된 동물에서는 30일째 되는 날에 정상 수치에 도달했다. 방사선에 노출된 동물그룹에서는 14일(8 Gy), 및 10일(10 Gy)을 초과하여 동물이 생존할 수 없었다 (도 7 참조). 올티프라즈(5-[2-피라지닐]-4-메틸) 처리되고 방사선 처리된 동물(실험동물그룹)에서는 비장 무게가 7일째 되는 날까지는 감소하였으나 이러한 감소는 각각의 생검 간격으로 대조동물그룹과 비교했을 때 유의적으로 더작았다. 7일 후, 점진적인 증가가 관찰되고 30일까지는 거의 정상 수준에 도달하였다.

염색체 연구

감마 방사선에 노출되기 전에 5-[2-피라지닐]-4-메틸 (100 mg/kg(체중)/day)을 경구투여한 경우에는 스위스 알비노 쥐에서 염색체 손상이 효과적으로 방지되는 것으로 나타났다 (도 9, 표 5 및 표 6). 8 Gy 감마 방사선에 노출된 동물들은 크로마티드 절단, 염색체 절단, 동원체 고리, 2개의 동원체, 교환 및 동원체가 없는 단편 등의 형태로 염색체 손상을 나타내었다. 방사선 조사 후 6시간이 경과했을 때 이상 세포의 빈도가 유의적으로 증가하였다. 최대 이상 세포는 방사선 조사 후 12시간 생검 시점에서 관찰되었다. 또한, 이상 세포의 빈도는 방사선 조사 후 늦 은 생검 시건에서 감소되는 것으로 나타났다. 그러나, 5-[2-피라지닐]-4-메틸으로 미리 처리된 동물들의 경우에는 방사선 처리된 대조동물그룹과 비교하여 이상 세포의 빈도가 유의적으로 감소했다. 8 Gy 방사선 처리된 쥐에서는 마이크로핵의 수가 유의적으로 증가하였다. 그러나, 5-[2-피라지닐]-4-메틸으로 미리 처리된 동물그룹에서는 마이크로핵의 수가 유의적으로 감소하였다 (표 4 및 도 8 참조).

표 1: 스위스 알비노 쥐의 30일-생존율에 대한 5-[2-피라지닐]-4-메틸의 방사선 조절 효과

표 2: 스위스 알비노 쥐의 간 및 혈액 중의 GSH 및 LPO 수준에 대한 5-[2-피라지닐]-4-메틸의 방사선 조절 효과

유의 수준: ^a p＜0.05, ^b p＜0.005, ^c p＜0.001

표 3: 스위스 알비노 쥐에서 5-[2-피라지닐]-4-메틸 처리시 또는 미처리시 방사선 조사 후 10일째 되는 날의 비장 반응

유의 수준: ^a p＜0.05, ^b p＜0.005, ^c p＜0.001. ns = 생존자 없음

표 4: 8 Gy 감마 방사선 조사 후, 5-[2-피라지닐]-4-메틸 처리시 또는 미처리의 스위스 알비노 쥐의 골수 세포의 마이크로 핵의 빈도

각각의 수치는 평균 ±SE

대조군 = 8.0 Gy 감마선

실험군 = 5-[2-피라지닐]-4-메틸 + 8.0 Gy 감마선

Normal = 처리하지 않음

유의 수준: ^a p＜0.05, ^b p＜0.005, ^c p＜0.001.

표 5: 표 4: 8 Gy 감마 방사선 조사 후, 5-[2-피라지닐]-4-메틸 처리시 또는 미처리의 스위스 알비노 쥐의 염색체 이상의 빈도

각각의 수치는 평균 ±SE. 동물당 총 400개의 메타페이스를 측정함.

유의 수준: ^a p＜0.05, ^b p＜0.005, ^c p＜0.001.

표 6: 8 Gy 감마 방사선 조사 후, 5-[2-피라지닐]-4-메틸 처리시 또는 미처리의 스위스 알비노 쥐의 염색체 이상의 빈도

유의 수준: ^a p＜0.05, ^b p＜0.005, ^c p＜0.001.

실시예 4: 방사선 치료와 병행시 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온(올티프라즈)의 체중 감소의 예방 및 종양 성장의 감소 효능에 대한 평가

이 연구의 목적은 종양 성장을 저해하고 체중 감소를 예방하는데 있어서 5-[2-피라지닐]-4-메틸(올티프라즈)의 효능을 평가하기 위한 것으로, 누드 쥐(nude mice)의 NCI H146 소세포 폐암 모델(small cee lung cancer model)을 이용하였으며, 단일 요법 및 방사선 요법과 병행하여 실시하였다.

연구 설계

96마리의 암컷 누드 쥐(nu ⁺/nu ⁺)를 무작위로 8개의 치료그룹으로 나누었다. 각각의 쥐의 하부 좌측 옆구리에 1x10⁶NCI-H146 소세포 폐암 세포를 마트리젤(matrigel)과 함께 0.05 mL 접종하였다. 종양이 75-125 mm³의 부피에 도달하면 치료를 시작했다. 각각의 그룹에 대해 운반체(vehicle), 방사선, 5-[2-피라지닐]-4-메틸을 표 7에 상세하게 나타나 있는 바와 같이 처리했다.

표 7: 연구 설계

약물 치료 개시일을 데이 1(day 1)으로 지정했다. 그룹 1 및 5의 쥐들에 대해 day 1과 day 3일에 하루에 한 번씩 운반체를 구강투여했다. 그룹 2, 3, 6 및 7의 쥐들에 대해서는 day 1과 day 3일에 하루에 한 번씩 5-[2-피라지닐]-4-메틸 (50 mg/kg 또는 100 mg/kg)을 운반체와 함께 구강을 통해 위관에 투여했다. 그룹 4 및 8의 쥐들에 대해서는 day 1에서 day 20일까지 하루에 한 번씩 5-[2-피라지닐]-4-메틸 (50 mg/kg)을 운반체와 함께 구강을 통해 위관에 투여했다. 그룹 5내지 8의 쥐들에 대해서는 방사선 처리를 실시했다. 방사선 조사는 day 2 및 day 4일에 2 Gy/도우즈로 2회 실시하였다. 이러한 실험은 이들 그룹의 쥐들을 케타민(100 mg/kg)과 크실라진(5 mg/kg)으로 마취시킨 다음 옆구리의 종양 부분이 방사선에 노출되도록 방사선 차폐막(lead shield) 하에 위치시켰다. 약 40 cm의 촛점거리에서 약 1.0 Gy/min의 선량율(dose rate)로 Philips 160 kV 소스를 사용하여 방사선을 조사하였다. 연구기간 중 하루 걸러 종양을 측정했다. day 21일에 모든 쥐를 사망케 하여 잔류하는 종양을 절제하여 조사하고 무게를 측정하고 사진을 촬영한 다음 후속 분석연구를 위해 포르말린액에 고정시켰다.

체중 측정 및 생존율

상기 처리로 인해 나타날 수 있는 가능한 독성의 표지로서 처리 그룹의 동물의 체중의 차이를 분석하기 위하여, 모든 동물에 대해 매일 체중을 측정하고 생존율을 기록했다. 연구 기간 중에 실험 개시시의 체중에 비해 20% 이상의 체중 감소를 보이는 동물들을 안락사시켰다.

조직 배양

H146 인간 폐암 세포를 ATCC로부터 입수하였다. 이들 세포를 10% 송아지태아 혈청(FCS), 페니실린, 스트렙토마이신 및 2 mM L-글루타민을 보충한 DMEM에서 배양하였다. 배지를 제거하고 칼슘 및 멸균된 마그네슘-비함유 인산완충생리식염(PBS)로 2회 세척하고 1 내지 2 ml의 0.25% 트립신과 0.03% EDTA 용액을 첨가하 여 세포를 계대배양하였다. 세포가 탈착될 때까지 37℃에서 플라스크를 방치하였다. 그런 다음, 1:3의 비율로 세포를 계대배양하였다.

연구 수행 장소

이 연구는 매사추세츠의 워터타운의 Biomodels 5-[2-피라지닐]-4-메틸LAC 공인시설에서 실시하여였다. Biomodels IACUC로부터 이 연구에 대한 IACUC 허가를 얻었다.

동물

실험 동물로서는, 주령이 5-6주이고, 처리전 평균 체중이 23.8 g이며, nu 유전자에 대해 동종형(nu ⁺/nu ⁺)인 암컷 누드 쥐 (Charles River Labs, strain code 088; Crl-NUFoxn1^nu)를 사용했다. 귀에 구멍을 내어 동물마다 개별적으로 번호를 부여하고 수용케이지당 5-6 마리를 한 그룹으로 하여 수용하였다. 연구를 시작하기에 앞서 동물을 적응시켰다. 적어도 2일간의 이러한 기간동안 상태가 불량한 동물들을 제거하기 위해 매일 동물들을 관찰했다. Charles River Labs의 누드 마우스 콜로니는 가슴샘 상피의 완전한 결여와 체모와 수염의 유의적인 감소를 초래하는 자연발생적인 돌연변이로부터 유래된, NIH로부터 입수한 쥐를 이용하여 확립되었다. 가슴샘 상피의 결여는 T-세포의의 성숙을 방지함으로써, 세포 매개형 면역반응의 유의적인 결핍을 초래한다. 이러한 동물들은 일반적으로 면역결핍성 동물로 간주되며 동종(syngenic)이 아닌 종양에 대해 민감하다.

하우징

본 연구는 70℉ ± 5℉의 온도와 50% ± 20%의 상대습도에서 여과된 공기가 제공되는 동물실에서 실시하였다. 이 동물실은 시간당 최소 12 내지 15 에어 변화를 유지하도록 설정되었다. 트윗라이트 없이 12시간의 "온"과 12시간의 "오프"로 되어 있는 라이트/다크 사이클을 위해 동물실에 자동 타이머를 설치했다.

멸균된 Bed-O-Cobs(등록상표) 베딩(bedding)을 사용했다. 이 베딩은 적어도 일주일에 한 번 교체해 주었다.

동물케이지, 상판, 병 등을 상업적으로 입수가능한 세제로 제정하고 공기중에서 건조시켰다. 사용에 앞서서 이들을 싸서 자동멸균하였다. 후드 내로 유입된 물질과 표면들을 살균하기 위해 상업적으로 입수가능한 살균제를 사용했다. 마루바닥을 매일 쓸고 적어도 일주일에 2회 이상 상업적으로 입수가능한 세제로 닦아주었다. 벽과 케이지의 선반은 희석한 표백용액으로 적어도 1달에 1회 이상 닦아주었다. 연구과제명, 투여량, 동물 번호 및 처리 그룹을 확인하기 위해 필요한 적절한 정보가 기재된 케이지 카드 또는 라벨을 모든 케이지에 표시했다. 연구기간 중에 온도 및 상대 습도를 기록하고 기록을 보관했다.

다이어트

동물에게 멸균된 사료 (Labdiet(등록상표) 5053(pre-sterilized) 로던트 쵸우)를 공급하고 멸균수를 임의로 공급했다.

동물의 무작위 분류 및 할당

처리를 개시하기에 앞서서 동물을 임의적으로 8개의 처리 그룹으로 나누었다. 각각의 동물에 대해 개인 번호에 따라 귀에 펀칭을 하여 확인작업을 하였다. 각각의 케이지를 확인하기 위해 케이지 카드를 이용하여 연구 번호 (CAN-01), 처리 그룹 번호 및 동물 번호를 표시했다.

결과에 대한 평가

처리 그룹들 간의 통계학적 차이는 임계값(critical value)을 0.05로 하여 하기 분석을 통해 측정했다: Student's t-test, Mann-Whitney U test, 및 chi-square 분석.

실험 방법

마이크로 칼리퍼스를 이용하여 2일 간격으로 종양 크기를 측정하고 종양 부피는 (길이 x 너비)³Π/3으로서 계산하였다. 종양성장지수(tumor growth index:TGI)는 식 (100-(Vc^*100/Vt): Vc는 대조그룹의 종양의 평균 부피이고 Vt는 실험그룹의 종양의 평균 부피를 나타냄)을 이용하여 계산하였다.

결과

이 연구에서 모두 4마리가 사망한 것으로 관찰되었다. 3마리는 방사선 처리를 위해 동물을 고정시키기 위해 사용한 마취와관련하여 발생했다 (2마리는 그룹 6과 7에서 day 2일에 발생하고, 1마리는 그룹 7에서 day 4일에 발생함). 4번째 사망은 방사선 처리 + day 1 및 day 3일에 100 mg/kg 5-[2-피라지닐]-4-메틸 처리 그룹에서 day 15일에 발생했다.

체중 감소 (도 10 및 도 11)

각각의 처리 그룹에 대한 평균 일일 체중변화율이 도 10에 나타나 있다. 운 반체 대조그룹의 주들은 Day 21까지 실험 개시시의 체중에 비해 평균 1.8%의 체중 증가를 보였다. Day 1 및 Day 3일에 5-[2-피라지닐]-4-메틸 50 mg/kg으로 처리된 쥐들은 Day 21까지 실험 개시시의 체중에 비해 평균 0.1%의 체중 감소를 보였다. Day 1 및 Day 3일에 5-[2-피라지닐]-4-메틸 100 mg/kg으로 처리된 쥐들은 Day 21까지 실험 개시시의 체중에 비해 평균 4.8%의 체중 증가를 보였다. Day 1 에서 Day 20일가지 5-[2-피라지닐]-4-메틸 50 mg/kg으로 처리된 쥐들은 Day 21까지 실험 개시시의 체중에 비해 평균 0.8%의 체중 증가를 보였다. 방사선 처리와 운반체 처리 처리된 쥐들은 Day 21까지 실험 개시시의 체중에 비해 평균 2.6%의 체중 증가를 보였다. 방사선 처리와 Day 1 및 Day 3일에 5-[2-피라지닐]-4-메틸 50 mg/kg으로 처리된 쥐들은 Day 21까지 실험 개시시의 체중에 비해 평균 0.8%의 체중 증가를 보였다. 방사선 처리와 Day 1 및 Day 3일에 5-[2-피라지닐]-4-메틸 100 mg/kg으로 처리된 쥐들은 Day 21까지 실험 개시시의 체중에 비해 평균 5.1%의 체중 증가를 보였다. 방사선 처리와 Day 1에서 Day 20일까지 5-[2-피라지닐]-4-메틸 50 mg/kg으로 처리된 쥐들은 Day 21까지 실험 개시시의 체중에 비해 평균 1.4%의 체중 증가를 보였다.

이러한 차이의 유의성은 각각의 동물에 대한 평균 체중 변화에 대한 평균 곡선하면적(AUC)을 계산한 다음 One-Way ANOVA 테스트를 이용하여 그룹들을 비교함으로써 평가하였다. 5-[2-피라지닐]-4-메틸 처리 그룹과 운반체(vehicle) 대조그룹사이에는 유의적인 차이가 없었다 (P= 0.153). 방사선 처리 + Day 1 및 Day 3일에 5-[2-피라지닐]-4-메틸 100 mg/kg으로 처리된 그룹과, 방서선 처리 + Day 1에 서 Day 20일까지 5-[2-피라지닐]-4-메틸 100 mg/kg으로 처리된 그룹 간에는 유의적인 차이가 있었다 (P= 0.003). AUC 데이터는 도 11에 나타나 있다.

종양 부피 (도 12)

격일로 측정한 길이 및 너비의 측정치로부터, 길이와 너비의 합을 4로 나눈 값인 평균 반경(r)을 계산하고, 식 4/3 Πr³을 이용하여 종양의 부피를 계산하였다. 평균 종양 부피에 대한 데이터는 도 12에 나타나 있다. 운반체(vehicle) 대조그룹에 대한 평균 종양 부피는 Day 1일에 109 mm³로부터 Day 21일에 1374 mm³로 증가하였다. Day 1과 Day 3일에 5-[2-피라지닐]-4-메틸 100 mg/kg으로 처리된 그룹에 대한 평균 종양 부피는 Day 1일에 110 mm³로부터 Day 21일에 1341 mm³로 증가하였다. Day 1일에서 Day 20일까지 5-[2-피라지닐]-4-메틸 50 mg/kg으로 처리된 그룹에 대한 평균 종양 부피는 Day 1일에 76 mm³로부터 Day 21일에 1130 mm³로 증가하였다. 방사선 처리 + 운반체 대조 그룹에 대한 평균 종양 부피는 Day 1일에 92 mm³로부터 Day 21일에 339 mm³로 증가하였다. 방사선 처리 + Day 1과 Day 3일에 5-[2-피라지닐]-4-메틸 50 mg/kg으로 처리된 그룹에 대한 평균 종양 부피는 Day 1일에 93 mm³로부터 Day 21일에 971 mm³로 증가하였다. 방사선 처리 + Day 1과 Day 3일에 5-[2-피라지닐]-4-메틸 100 mg/kg으로 처리된 그룹에 대한 평균 종양 부피는 Day 1일에 63 mm³로부터 Day 21일에 769 mm³로 증가하였다. 방사선 처리 + Day 1일에서 Day 20일까지 5-[2-피라지닐]-4-메틸 50 mg/kg으로 처리된 그룹에 대한 평균 종양 부피는 Day 1일에 140 mm³로부터 Day 21일에 1380 mm³로 증가하였다.

각각의 동물에 대한 종양 부피에 대한 평균 곡선하면적(AUC)을 계산하고 One-Way ANOVA (ranks test)를 이용하여 그룹들간의 데이터를 비교함으로써 실험 데이터에 대한 추가 분석을 실시하였다. 전체적인 분석 결과는 5-[2-피라지닐]-4-메틸 처리 그룹과 운반체 대조그룹 간에 유의적인 차이를 보여주지 않았다 (P= 0.052). 그러나, Mann-Whitney Rank sum test를 이용하여 개별 그룹간에 비교한 결과 방사선 처리 + 운반체 그룹과 운반체만 처리된 그룹간에는 유의적인 차이가 있었다 (P=0.004). 또한, 운반체만 처리된 그룹과 Day 1일과 3일에 5-[2-피라지닐]-4-메틸 50 mg/kg으로 처리된 그룹간에도 유의적인 차이가 있었다 (P=0.030). 적어도 본 연구에서 사용된 투여량 및 투여 스케쥴에 있어서는 5-[2-피라지닐]-4-메틸이 방사선 요법과 병행하여 처리되는 경우에 추가적인 효과를 가지지 않는 것은 명백하지만, 5-[2-피라지닐]-4-메틸이 단독 제제(single agent)로서 효과적일 수도 있는 것으로 보인다. 방사선 요법에 대한 5-[2-피라지닐]-4-메틸의 영향을 평가하기 위해서 방사선 처리된 그룹들에 대해 ANOVA(rank analysis)를 이용하여 비교하였다. 방사선 처리만 실시된 그룹과 방사선 처리 + 5-[2-피라지닐]-4-메틸 처리된 그룹간에는 유의적인 차이가 관찰되지 않았다 (P=0.177). Mann-Whitney rank sum test를 이용하여 분석한 결과, 그룹들간에 통계학적으로 유의적인 차이가 없었다 (Day 1일과 3일에 5-[2-피라지닐]-4-메틸 50 mg/kg으로 처리된 그룹의 경우, P=0.012; Day 1일과 3일에 5-[2-피라지닐]-4-메틸 100 mg/kg으로 처리된 그룹의 경우, P=0.977; Day 1일에서 Day 20일까지 5-[2-피라지닐]-4-메틸 50 mg/kg으로 처리된 그룹의 경우, P=0.012). 종양 부피 AUC 데이터는 도 13에 나타나 있다.

논의사항

본 연구에서는 쥐의 NCI-H146 소세포 폐암 모델을 이용하여 방사선 요법을 실시하는 동안 종양 성장을 저해하고 체중 감소를 줄이는데 있어서 5-[2-피라지닐]-4-메틸의 효능을 테스트하였다. 종양을 가지고 있는 쥐에 대해 운반체 (0.5% CMC 수용액), 방사선 단독 처리 (Day 2 및 Day 4일에 2 Gy의 선량으로 2회), 단일제제로서 Day 1일과 Day 3일, 또는 Day 1일에서 20일까지 5-[2-피라지닐]-4-메틸 50 mg/kg 또는 100 mg/kg, 또는 방사선 처리 + 5-[2-피라지닐]-4-메틸 처리의 조합으로 다양한 처리를 실시하였다. 5-[2-피라지닐]-4-메틸은 본 연구에서 생존율과 체중변화 데이터로부터 판단할 때 독성을 나타내는 증거를 보여주지 않았다. 단일제제로서 5-[2-피라지닐]-4-메틸은 종양 성장을 감소시키는ㄴ데 효과적이었으며, Day 1일과 Day 3일에 하루에 한 번씩 50 mg/kg의 5-[2-피라지닐]-4-메틸을 투여한 경우 Day 21일의 운반체 대조 그룹에 비해 종양 부피에 있어서 유의적인 감소가 나타났다, 예상한바와 같이, 방사선만 단독으로 처리한 경우에는 H146 종양의 성장을 감소시키는데 효과적이었다 (P=0.004). 방사선 요법만을 실시한 그룹과 방사선 처리 + 5-[2-피라지닐]-4-메틸 처리를 실시한 그룹 간에는 통계학적으로 유의적인 차이가 없었다 (P=0.177).

본 명세서에서 인용된 모든 문헌은 원용에 의해 본 명세서에 포함된다. 전술한 본 발명의 실시예에 대한 다양한 변형 및 변경이 본 발명의 범주를 벗어나지 않는 범위에서 당업자에게 명백할 것이다. 본 발명은 구체적인 바람직한 실시예를 들어 설명되어 있지만, 청구되는 본 발명은 이러한 구체적인 구현예들로 지나치게 한정되어서는 안된다. 실제로, 당업자에게 명백한, 전술한 본 발명의 수행 방법에 대한 다양한 수정은 본 발명에 포함되는 것으로 의도된다. 본 명세서에서 종래기술 문헌에 대한 인용이 이러한 종래기술 문헌이 임의의 어느 국가에서든 통상적인 일반 지식의 일부를 형성한다고 인정하거나 시사하는 형태로 간주되어서는 아니된다.

본 발명은 방사선 요법 또는 화학요법 등과 관련하여 나타나는, 점막염, 체중 감소, 악액질 등의 증상을 예방 및/또는 치료하는데 이용될 수 있다.

Claims

점막염의 예방 및/또는 치료 방법으로서,

상기 방법은, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 (올티프라즈) 또는 그의 유사체, 유도체, 대사물(metabolite), 프로드러그(prodrug), 용매화물(solvate) 또는 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물을 포함하는, 치료학적 유효량의 조성물을 제공하는 단계; 및

상기 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제1항에 있어서,

상기 조성물은 대상체가 화학요법제, 방사선 요법 또는 이들의 조합 중 하나 이상의 요법을 포함하는 치료를 받은 후에 대상체에게 투여되는 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제1항에 있어서,

상기 조성물은 대상체가 화학요법제, 방사선 요법 또는 이들의 조합 중 하나 이상의 요법을 포함하는 치료를 받기 이전에 대상체에게 투여되는 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제2항에 있어서,

상기 조성물은 대상체가 화학요법제, 방사선 요법 또는 이들의 조합 중 하나 이상의 요법을 포함하는 치료를 받은 후에 대상체에게 투여되지만, 점막염을 나타내는 한 가지 이상의 징후가 대상체에게 나타나는 지를 결정하기 이전에 투여되는 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제2항에 있어서,

상기 조성물은 대상체가 점막염을 나타내는 한 가지 이상의 징후를 가진 것으로 진단된 후에 대상체에게 투여되는 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제1항에 있어서,

상기 조성물은 화학요법제, 방사선 요법 또는 이들의 조합과 병행하여 대상체에게 투여되는 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제6항에 있어서,

상기 조성물과 화학요법제, 방사선 요법 또는 이들의 조합은 대상체에게 순차적으로 적용되는 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제6항에 있어서,

상기 조성물과 화학요법제, 방사선 요법 또는 이들의 조합은 대상체에게 서로 별개로 적용되는 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제6항에 있어서,

상기 조성물과 화학요법제, 방사선 요법 또는 이들의 조합은 대상체에게 동시에 적용되는 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제1항 내지 9항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 점막염의 형태는 장염, 인두염, 구내염, 직장염으로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제1항 내지 10항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 점막염은 상기 대상체가 화학적 손상, 생물학적 손상, 방사선에 의한 손상 또는 이들의 조합 중의 적어도 한 가지에 노출됨으로써 야기되며, 상기 손상에 의해 점막염이 발병하는 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제1항 내지 11항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 5-[2-피라지닐]-4-메틸의 대사물이 피롤로피라진 유도체 대사물 3인 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제1항 내지 11항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 5-[2-피라지닐]-4-메틸의 유도체가 아네톨 트리티온인 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제1항 내지 13항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 카르복시메틸셀룰로스를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제1항 내지 14항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 황-함유 아미노산을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제15항에 있어서,

상기 황-함유 아미노산이 시스테인 또는 그 유사체, 염 또는 용매화물인 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제1항 내지 16항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 상기 대상체에게 구강 린스, 액체형, 캡슐형, 정제형, 주사제 또는 좌약 형태로 투여되는 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제17항에 있어서,

상기 조성물이 구강 린스 형태로 투여되는 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
점막염의 예방 및/또는 치료용 의약을 제조하기 위한, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 또는 그의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매화물 또는 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물을 포함하는 조성물의 용도.
제19항에 있어서,

상기 조성물이 화학요법제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 용도.
제19항 또는 20항에 있어서,

상기 5-[2-피라지닐]-4-메틸의 대사물이 피롤로피라진 유도체 대사물 3인 것을 특징으로 하는 용도.
제19항 또는 20항에 있어서,

상기 5-[2-피라지닐]-4-메틸의 유도체가 아네톨 트리티온인 것을 특징으로 하는 용도.
제19항 내지 22항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 카르복시메틸셀룰로스를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 용도.
제19항 내지 23항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 황-함유 아미노산을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 용도.
제24항에 있어서,

상기 황-함유 아미노산이 시스테인 또는 그 유사체, 염 또는 용매화물인 것을 특징으로 하는 용도.
점막염의 예방 및/또는 치료를 위해 화학요법제, 방사선 요법 또는 이들의 조합에 의한 치료를 받기 이전에 대상체에게 투여하기 위해 경구 린스 형태의 의약을 제조하기 위한, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 또는 그의 유사체, 유도체, 욤매화물 또는 대사물을 포함하는 조성물의 용도.
점막염의 예방 및/또는 치료를 위해 화학요법제, 방사선 요법 또는 이들의 조합에 의한 치료를 받은 대상체에게 투여하기 위해 경구 린스 형태의 의약을 제조하기 위한, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 또는 그의 유사체, 유도체, 욤매화물 또는 대사물을 포함하는 조성물의 용도.
5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 또는 그의 유사체, 유도체, 대사물(metabolite), 프로드러그(prodrug), 용매화물(solvate) 또는 약학적으로 허용가능한 염과 함께 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제 중 한 가지 이상을 포함하는 약학적 조성물.
제28항에 있어서,

상기 조성물이 화학적 치료제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
제28항 또는 29항에 있어서,

상기 5-[2-피라지닐]-4-메틸의 대사물이 피롤로피라진 유도체 대사물 3인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
제28항 또는 29항에 있어서,

상기 5-[2-피라지닐]-4-메틸의 유도체가 아네톨 트리티온인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
제28항 내지 31항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 카르복시메틸셀룰로스를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 약 학적 조성물.
제28항 내지 32항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 황-함유 아미노산을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
제33항에 있어서,

상기 황-함유 아미노산이 시스테인 또는 그 유사체, 염 또는 용매화물인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
제28항 내지 34항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 점막염의 치료 및/또는 예방용인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
점막염의 예방 및/또는 치료 방법으로서,

상기 방법은, 사이토키닌 화합물 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물을 포함하는, 치료학적 유효량의 조성물을 제공하는 단계; 및

상기 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제36항에 있어서,

상기 사이토키닌 화합물은 N⁶-이소펜테닐 아데노신 또는 그것의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매화물 또는 염인 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제36항에 있어서,

상기 사이토키닌 화합물은 N⁶-벤질 아데노신 또는 그것의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매화물 또는 염인 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제36항 내지 38항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물은 대상체가 화학요법제, 방사선 요법 또는 이들의 조합 중 하나 이상의 요법을 포함하는 치료를 받은 대상체에게 투여되는 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제36항 내지 38항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물은 대상체가 화학요법제, 방사선 요법 또는 이들의 조합 중 하나 이상의 요법을 포함하는 치료를 받기 이전에 대상체에게 투여되는 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제39항에 있어서,

상기 조성물은 대상체가 화학요법, 방사선 요법 또는 이들의 조합 중 하나 이상의 요법을 포함하는 치료를 받은 후에 대상체에게 투여되지만, 점막염을 나타내는 한 가지 이상의 징후가 대상체에게 나타나는 지를 진단하기 이전에 투여되는 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제39항에 있어서,

상기 조성물은 대상체가 점막염을 나타내는 한 가지 이상의 징후를 가진 것으로 진단된 후에 대상체에게 투여되는 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제36항 내지 38항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물은 화학요법제, 방사선 요법 또는 이들의 조합과 병행하여 대상체에게 투여되는 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제43항에 있어서,

상기 조성물과 화학요법제, 방사선 요법 또는 이들의 조합은 대상체에게 순차적으로 적용되는 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제43항에 있어서,

상기 조성물과 화학요법제, 방사선 요법 또는 이들의 조합은 대상체에게 서로 별개로 적용되는 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제43항에 있어서,

상기 조성물과 화학요법제, 방사선 요법 또는 이들의 조합은 대상체에게 동시에 적용되는 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제36항 내지 46항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 점막염의 형태는 장염, 인두염, 구내염, 직장염으로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제36항 내지 47항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 점막염은 상기 대상체가 화학적 손상, 생물학적 손상, 방사선에 의한 손상 또는 이들의 조합 중의 적어도 한 가지에 노출됨으로써 야기되며, 상기 손상에 의해 점막염이 발병하는 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제36항 내지 48항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 카르복시메틸셀룰로스를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 점 막염의 예방 및/또는 치료 방법.
제36항 내지 49항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 상기 대상체에게 구강 린스, 액체형, 캡슐형, 정제형, 주사제 또는 좌약 형태로 투여되는 것을 특징으로 하는 점막염의 예방 및/또는 치료 방법.
점막염의 예방 및/또는 치료용 의약을 제조하기 위한, 사이토키닌 화합물 또는 약학적으로 허용가능한 그 염 또는 용매화물으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물을 포함하는 조성물의 용도.
제51항에 있어서,

상기 사이토키닌 화합물이 N⁶-이소펜테닐 아데노신 또는 그것의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매화물 또는 염인 것을 특징으로 하는 용도.
제51항에 있어서,

상기 사이토키닌 화합물은 N⁶-벤질 아데노신 또는 그것의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매화물 또는 염인 것을 특징으로 하는 용도.
제51항 내지 53항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 화학요법제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 용도.
제51항 내지 54항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 카르복시메틸셀룰로스를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 용도.
사이토키닌 화합물 또는 약학적으로 허용가능한 그 염 또는 용매화물으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물과 함께 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물.
제56항에 있어서,

상기 사이토키닌 화합물이 N⁶-이소펜테닐 아데노신 또는 그것의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매화물 또는 염인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
제56항에 있어서,

상기 사이토키닌 화합물은 N⁶-벤질 아데노신 또는 그것의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매화물 또는 염인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
제56항 내지 58항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 화학요법제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
제56항 내지 59항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 카르복시메틸셀룰로스를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
제56항 내지 60항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 점막염의 치료 및/또는 예방용인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
사이토키닌 화합물 또는 약학적으로 허용가능한 그 염 또는 용매화물으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물과, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 또는 그의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매화물 또는 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 조합 의약(combined medicament).
암 치료 중인 대상체의 체중 감소를 예방 및/또는 경감시키는 방법으로서,

상기 방법은, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 또는 그의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매화물 또는 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어 진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물을 포함하는, 치료학적 유효량의 조성물을 제공하는 단계; 및

상기 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
제63항에 있어서,

상기 대상체가 화학요법제, 방사선 요법 또는 이들의 조합 중 하나 이상의 요법을 포함하는 치료를 받은 것을 특징으로 하는 방법.
제63항에 있어서,

상기 조성물은 대상체가 화학요법제, 방사선 요법 또는 이들의 조합 중 하나 이상의 요법을 포함하는 치료를 받기 이전에 대상체에게 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
제64항에 있어서,

상기 조성물은 대상체가 화학요법제, 방사선 요법 또는 이들의 조합 중 하나 이상의 요법을 포함하는 치료를 받은 후에 대상체에게 투여되지만, 체중 감소가 나타나기 이전에 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
제64항에 있어서,

상기 조성물은 대상체가 체중 감소를 보인 후에 대상체에게 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
제63항에 있어서,

상기 조성물은 화학요법제, 방사선 요법 또는 이들의 조합과 병행하여 대상체에게 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
제68항에 있어서,

상기 조성물과 화학요법제, 방사선 요법 또는 이들의 조합은 대상체에게 순차적으로 적용되는 것을 특징으로 하는 방법.
제68항에 있어서,

상기 조성물과 화학요법제, 방사선 요법 또는 이들의 조합은 대상체에게 서로 별개로 적용되는 것을 특징으로 하는 방법.
제68에 있어서,

상기 조성물과 화학요법제, 방사선 요법 또는 이들의 조합은 대상체에게 동시에 적용되는 것을 특징으로 하는 방법.
제63항 내지 71항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 체중 감소는 상기 대상체가 화학적 손상, 생물학적 손상, 방사선에 의 한 손상 또는 이들의 조합 중의 적어도 한 가지에 노출됨으로써 야기되는 것을 특징으로 하는 방법.
제63항 내지 72항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 5-[2-피라지닐]-4-메틸의 대사물이 피롤로피라진 유도체 대사물 3인 것을 특징으로 하는 방법.
제63항 내지 72항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 5-[2-피라지닐]-4-메틸의 유도체가 아네톨 트리티온인 것을 특징으로 하는 방법.
제63항 내지 74항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 카르복시메틸셀룰로스를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제63항 내지 75항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 황-함유 아미노산을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제76항에 있어서,

상기 황-함유 아미노산이 시스테인 또는 그 유사체, 염 또는 용매화물인 것 을 특징으로 하는 방법.
제63항 내지 77항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 상기 대상체에게 구강 린스, 액체형, 캡슐형, 정제형, 주사제 또는 좌약 형태로 투여되는 것을 특징으로 하는 치료 방법.
암 치료 중인 대상체의 체중 감소를 예방 및/또는 경감시키기 위한 의약의 제조를 위한, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 또는 그의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매화물 또는 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물을 포함하는 조성물의 용도.
제79항에 있어서,

상기 조성물이 화학요법제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 용도.
제79항 또는 80항에 있어서,

상기 5-[2-피라지닐]-4-메틸의 대사물이 피롤로피라진 유도체 대사물 3인 것을 특징으로 하는 용도.
제79항 또는 80항에 있어서,

상기 5-[2-피라지닐]-4-메틸의 유도체가 아네톨 트리티온인 것을 특징으로 하는 용도.
제79항 내지 82항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 카르복시메틸셀룰로스를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 용도.
제79항 내지 83항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 황-함유 아미노산을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 용도.
제84항에 있어서,

상기 황-함유 아미노산이 시스테인 또는 그 유사체, 염 또는 용매화물인 것을 특징으로 하는 용도.
악액질의 예방 및/또는 치료 방법으로서,

상기 방법은, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 또는 그의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매화물 또는 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물을 포함하는, 치료학적 유효량의 조성물을 제공하는 단계; 및

상기 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 악액질의 예방 및/또는 치료 방법.
제86항에 있어서,

상기 악액질은 화학적 손상, 생물학적 손상, 방사선에 의한 손상 또는 이들의 조합 중의 적어도 한 가지에 의해 야기되는 것을 특징으로 하는 악액질의 예방 및/또는 치료 방법.
제86항 또는 87항에 있어서,

상기 5-[2-피라지닐]-4-메틸의 대사물이 피롤로피라진 유도체 대사물 3인 것을 특징으로 하는 악액질의 예방 및/또는 치료 방법.
제86항 또는 87항에 있어서,

상기 5-[2-피라지닐]-4-메틸의 유도체가 아네톨 트리티온인 것을 특징으로 하는 악액질의 예방 및/또는 치료 방법.
제86항 내지 89항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 카르복시메틸셀룰로스를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 악액질의 예방 및/또는 치료 방법.
제86항 내지 90항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 황-함유 아미노산을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 악액질 의 예방 및/또는 치료 방법.
제91항에 있어서,

상기 황-함유 아미노산이 시스테인 또는 그 유사체, 염 또는 용매화물인 것을 특징으로 하는 악액질의 예방 및/또는 치료 방법.
제86항 내지 92항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 상기 대상체에게 구강 린스, 액체형, 캡슐형, 정제형, 주사제 또는 좌약 형태로 투여되는 것을 특징으로 하는 악액질의 예방 및/또는 치료 방법.
악액질의 예방 및/또는 치료용 의약을 제조하기 위한, 5-[2-피라지닐]-4-메틸-1,2-디티올-3-티온 또는 그의 유사체, 유도체, 대사물, 프로드러그, 용매화물 또는 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물을 포함하는 조성물의 용도.
제94항에 있어서,

상기 5-[2-피라지닐]-4-메틸의 대사물이 피롤로피라진 유도체 대사물 3인 것을 특징으로 하는 용도.
제94항에 있어서,

상기 5-[2-피라지닐]-4-메틸의 유도체가 아네톨 트리티온인 것을 특징으로 하는 용도.
제94항 내지 96항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 카르복시메틸셀룰로스를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 용도.
제94항 내지 97항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 조성물이 황-함유 아미노산을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 용도.
제98항에 있어서,

상기 황-함유 아미노산이 시스테인 또는 그 유사체, 염 또는 용매화물인 것을 특징으로 하는 용도.
제94항 내지 99항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 악액질은 화학적 손상, 생물학적 손상, 방사선에 의한 손상 또는 이들의 조합 중의 적어도 한 가지에 의해 야기되며, 상기 손상에 의해 악액질이 유발되는 것을 특징으로 하는 용도.
제28항 내지 34항 중 어느 한 항에 있어서, 체중 감소 및/또는 악액질의 치 료 및/또는 예방용인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.